JP2011511753A5

JP2011511753A5 -

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Publication number: JP2011511753A5
Application number: JP2009549703A
Authority: JP
Filing date: 2008-02-13
Publication date: 2012-11-08
Anticipated expiration: 2028-02-13

Description

ＧＬＰ−１受容体に対する活性の強化はさらに、三つの介在アミノ酸によって隔てられる、二つのアミノ酸側鎖の間に分子内架橋を形成することによって、グルカゴンのＣ−末端部分（アミノ酸１２−２９周辺）のアルファヘリックス構造を安定化することによって実現される。例示の実施態様では、この架橋（リンカー）は、約８（または約７〜９）原子長で、位置１２および１６、または位置１６および２０、または位置２０および２４、または位置２４および２８におけるアミノ酸側鎖の間に形成される。これらのアミノ酸の側鎖同士は、水素結合、例えば塩架橋の形成のようなイオン相互作用、、または共有結合によって互いに連結することが可能である。一実施態様によれば、配列番号２０のグルカゴンペプチドを含むグルカゴンアゴニストが提供される。該配列番号では、位置１２、２０、または２８に配置されるリシン残基、および位置１６または２４に配置されるグルタミン酸残基の間にラクタム環が形成され、該グルカゴンペプチドにおける、その側鎖が該ラクタム環の形成に参加する二つのアミノ酸は、三つの介在アミノ酸によって互いに隔てられる。一実施態様によれば、このラクタム担持グルカゴン類縁体は、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、および配列番号１８から成る群から選ばれるアミノ酸配列を含む。一実施態様では、ラクタム担持ペプチドのカルボキシ末端アミノ酸は、末端カルボン酸の代わりに、アミド基またはエステル基を含む。一実施態様では、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、および配列番号１８のグルカゴンペプチドは、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、または配列番号１８のカルボキシ末端に共有結合する、さらに別のアミノ酸を含む。さらに別の実施態様では、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、および配列番号６９から成る群から選ばれる配列を含むグルカゴンペプチドが提供されるるが、該ペプチドはさらに、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、および配列番号６９のカルボキシ末端に共有結合する、さらに別のアミノ酸を含む。一実施態様では、位置２８におけるアミノ酸は、アスパラギンまたはリシンであり、位置２９におけるアミノ酸はトレオニンである。

ＧＬＰ−１受容体に対する活性の増大は、本明細書に記載される通り、３個の介在アミノ酸によって隔てられる、二つのアミノ酸、例えば、位置１２と１６、または１６と２０、または２０と２４のアミノ酸、の側鎖の間において分子内架橋の形成を可能とするような、修飾によって実現される。

さらに別の実施態様では、グルカゴン／ＧＬＰ−１受容体コアゴニスト活性を示す、グルカゴン類縁体が提供されるが、ここで、該ペプチドのカルボキシ末端の三次元構造を安定化するために、二つのアミノ酸側鎖の間に分子内架橋が形成される。さらに具体的には、アミノ酸ペア１２および１６、１６および２０、２０および２４、または、２４および２８の側鎖が、互いに連結されて、グルカゴンのアルファヘリックスを安定化する。この二つの側鎖は、水素結合、イオン相互作用、例えば、塩橋の形成など、または共有結合によって互いに連結することが可能である。ある実施態様では、リングまたはリンカーのサイズは、約８原子、または約７〜９原子である。

ラクタム環におけるアミド結合の順序は逆転してもよい（例えば、ラクタム環は、Ｌｙｓ１２およびＧｌｕ１６の側鎖の間に形成されてもよいし、あるいは別に、Ｇｌｕ１２とＬｙｓ１６の間に形成されてもよい）。一実施態様によれば、配列番号４５のグルカゴン類縁体が提供されるが、ここで、少なくとも一つのラクタム環が、アミノ酸ペア１２および１６、１６および２０、２０および２４、または２４および２８から成る群から選ばれるアミノ酸ペアの側鎖の間に形成される。一実施態様では、配列番号２０のグルカゴンペプチド類縁体を含むグルカゴン／ＧＬＰ−１コアゴニストが提供されるが、ここで、該ペプチドは、アミノ酸位置１２および１６間、またはアミノ酸位置１６および２０の間に形成される分子内ラクタム架橋を含む。一実施態様では、配列番号２０の配列を含むグルカゴン／ＧＬＰ−１コアゴニストが提供されるが、ここで、分子内ラクタム架橋が、アミノ酸位置１２および１６の間、アミノ酸位置１６および２０の間、またはアミノ酸位置２０および２４の間に形成され、また、位置２９のアミノ酸はグリシンであり、配列番号２０のＣ末端アミノ酸に対し配列番号２９の配列が連結される。さらに別の実施態様では、位置２８のアミノ酸は、アスパラギン酸である。

Claims

配列番号５５の配列、または配列番号５５の類縁体の配列を含み、天然グルカゴンと比べて増強されたＧＬＰ−１受容体に対する活性を有する、非天然グルカゴンペプチドであって、ＧＬＰ−１受容体に対し天然ＧＬＰ−１活性の少なくとも２０％を示し、前記類縁体は、非天然産ペプチドであって、且つ、位置１、２、３、５、７、１０、１１、１３、１４、１７、１８、１９、２１、２４、２７、２８、および２９から選ばれる１乃至３個のアミノ酸修飾だけ配列番号５５とは異なり、
任意に、三つの介在アミノ酸によって隔てられる二つのアミノ酸側鎖の間の、前記ＧＬＰ−１受容体に対する増強された活性をもたらす、分子内架橋を有してもよい
ことを特徴とする、非天然グルカゴンペプチド。
前記二つのアミノ酸側鎖が、共有結合によって互いに連結されており、任意に、前記分子内架橋はラクタム架橋であってもよいことを特徴とする、請求項１に記載のグルカゴンペプチド。
前記二つのアミノ酸側鎖が、塩橋を介して互いに連結されていることを特徴とする、請求項１に記載のグルカゴンペプチド。
位置１６と２０のアミノ酸、位置１２と１６のアミノ酸、位置２０と２４のアミノ酸、および位置２４と２８のアミノ酸から成る群から選ばれる二つのアミノ酸の間の架橋を含むことを特徴とする、請求項２または３のいずれか１項に記載のグルカゴンペプチド。
位置１６と２０のアミノ酸の間の塩橋またはラクタム架橋を含むことを特徴とする、請求項４に記載のグルカゴンペプチド。
位置３のアミノ酸がグルタミン酸またはグルタミンであることを特徴とする、請求項１に記載のグルカゴンペプチド。
位置１６のアミノ酸がグルタミンであり、位置２０のアミノ酸がリシンであり、Ｃ末端カルボン酸基がアミドによって置換されていて、任意に、位置１６のグルタミン酸と位置２０のリシンの間のラクタム架橋を有してもよいことを特徴とする、請求項１〜６のいずれか１項に記載のグルカゴンペプチド。
位置１または２のアミノ酸が、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）による切断に対する感受性が低下した修飾を有し、
任意に、位置２のアミノ酸が、ｄ−セリン、アラニン、Ｄ−アラニン、バリン、グリシン、Ｎ−メチルセリン、Ｎ−メチルアラニン、およびアミノイソブチル酸から成る群から選ばれてもよく、
任意に、位置１のアミノ酸が、ｄ−ヒスチジン、デスアミノヒスチジン、ヒドロキシル−ヒスチジン、アセチル−ヒスチジン、ホモ−ヒスチジン、Ｎ−メチルヒスチジン、アルファ−メチルヒスチジン、イミダゾール酢酸、およびアルファ，アルファ−ジメチルイミダゾール酢酸（ＤＭＩＡ）から成る群から選ばれてもよい
ことを特徴とする、請求項１または７に記載のグルカゴンペプチド。
位置１７、２１、若しくは２４、または、Ｃ末端のアミノ酸に共有結合する、親水性成分をさらに含み、任意に、前記親水性成分はポリエチレングリコール鎖であってもよい
ことを特徴とする、請求項８に記載のグルカゴンペプチド。
Ｘ_１Ｘ_２ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＸ_５ＡＫＤＦＶＸ_３ＷＬＭＮＸ_４（配列番号６１）、またはＸ_１Ｘ_２ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＱＸ_５ＡＫＥＦＩＸ_３ＷＬＭＮＸ_４（配列番号６２）の配列を含み、ただし、Ｘ_３がＣｙｓ−ＰＥＧである場合、Ｘ_４はＣｙｓ−ＰＥＧではないか、またはＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＣ−ＰＥＧではなく、Ｘ_２がセリンである場合、Ｘ_１はヒスチジンではない、ことを特徴とする、請求項１に記載のグルカゴンペプチド。
Ｘ_３がＣｙｓ−ＰＥＧであることを特徴とする、請求項１０に記載のグルカゴンペプチド。
位置１６と２０のアミノ酸の間のラクタム架橋をさらに含むことを特徴とする、請求項１０または１１に記載のグルカゴンペプチド。
カルボン酸基の代わりに荷電中性基を有するＣ末端アミノ酸を含み、任意に、前記電荷中性基がアミドであってもよいことを特徴とする、請求項１に記載のグルカゴンペプチド。
位置１６、１７、２１、若しくは２４から成る群から選ばれる位置において、天然アミノ酸を、リシン、システイン、オルニチン、ホモシステイン、およびアセチルフェニルアラニンから成る群から選ばれるアミノ酸によって置換するアミノ置換を含み、前記置換アミノ酸の側鎖に共有結合するポリエチレングリコール（ＰＥＧ）鎖をさらに含むことを特徴とする、請求項１３に記載のグルカゴンペプチド。
配列番号７０乃至配列番号５１４からなる群から選ばれるアミノ酸配列を含むことを特徴とする、請求項１に記載のグルカゴンペプチド。
下記（ｉ）〜（ｉｉｉ）から選ばれるアミノ酸配列を含むことを特徴とする、請求項１５に記載のグルカゴンペプチド：
（ｉ）配列番号２４０乃至配列番号２５６からなる群から選ばれるアミノ酸配列；
（ｉｉ）配列番号３０８乃至配列番号３２４からなる群から選ばれるアミノ酸配列；、
（ｉｉｉ）配列番号５０５乃至配列番号５１３からなる群から選ばれるアミノ酸配列
〔上記配列において、任意に、Ｃ＊は約２０ｋＤの平均重量を持つポリエチレングリコールに付着するＣｙｓであってもよく、また、Ｃ＊は約４０ｋＤの平均重量を持つポリエチレングリコールに付着するＣｙｓであってもよい〕。
配列番号２５１のアミノ酸配列を含むことを特徴とする、請求項１に記載のグルカゴンペプチド、またはその薬学的に受容可能な塩。
位置２４のＣｙｓ残基がマレイミドメトキシＰＥＧ部分を含み、前記ＰＥＧが約４０ｋＤの平均重量を持つことを特徴とする、請求項１７に記載のグルカゴンペプチド、またはその薬学的に受容可能な塩。
配列番号３１９のアミノ酸配列を含むことを特徴とする、請求項１に記載のグルカゴンペプチド、またはその薬学的に受容可能な塩。
配列番号５１０のアミノ酸配列を含むことを特徴とする、請求項１に記載のグルカゴンペプチド、またはその薬学的に受容可能な塩。
グルカゴン／ＧＬＰ−１活性の比が、約１：１、１．５：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、または１０：１、または約１：１０、１：９、１：８、１：７、１：６、１：５、１：４、１：３、１：２、または１：１．５であることを特徴とする、請求項１〜２０のいずれか１項に記載のグルカゴンペプチド。
請求項１〜のいずれか１項に記載のグルカゴンアゴニスト、またはその薬学的に受容可能な塩と、薬学的に受容可能な担体とを含み、任意に、滅菌されていてもよい、ヒトの治療に使用するための、製薬組成物。
糖尿病を治療するための薬の製造における、請求項２３に記載の製薬組成物の使用方法。
体重増加を抑えるため、または減量を誘導するための薬の製造における、請求項２２に記載の製薬組成物の使用方法。