JP2004505989A - 抗炎症剤としての６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボキシル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスト−１，４−ジエン−１７−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステル - Google Patents

Abstract

本発明の１つの態様によれば、式（Ｉ）の化合物およびその溶媒和物が提供される。また、その化合物を含む組成物、その調製方法、および治療におけるその使用も提供される。

Description

【０００１】
本発明は、アンドロスタン系の新規な抗炎症性および抗アレルギー性化合物、ならびにその調製方法に関する。また、本発明は、その化合物を含む医薬製剤、ならびに治療目的での、特に炎症性およびアレルギー性症状の治療のためのその使用に関する。
【０００２】
抗炎症特性を有するグルココルチコイドは公知であり、喘息および鼻炎などの炎症性の障害または疾患の治療に広く用いられている。例えば、米国特許第４３３５１２１号には、６α，９α−ジフルオロ−１７α−（１−オキソプロポキシ）−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステル（プロピオン酸フルチカゾンの一般名で知られている）およびその誘導体が開示されている。一般に、グルココルチコイドの使用、特に小児における使用は、副作用の可能性が懸念されるために、一部制限されている。グルココルチコイドで懸念される副作用としては、視床下部−下垂体−副腎（ＨＰＡ）系の抑制、小児期での骨発育および老年期での骨密度への影響、眼性の合併症（白内障形成および緑内障）、ならびに皮膚萎縮が挙げられる。また、ある特定のグルココルチコイド化合物は複雑な代謝経路を有しており、活性な代謝産物の産生によってそのような化合物の薬力学および薬物動態学は理解し難くなることがある。現代のステロイドは当初紹介されたものよりも安全性が非常に高いが、優れた抗炎症特性、ならびに予測可能な薬物動態学的および薬力学的特性、魅力的な副作用プロフィールおよび簡便な治療処方計画を有する新規な分子を生産するための探索は、今もなお求められている。
【０００３】
そこで、本発明者らは、これらの目的を実質的に満足する新規なグルココルチコイド化合物を同定した。
【０００４】
したがって、本発明の１つの態様によれば、式（Ｉ）：
【化２６】

の化合物およびその溶媒和物が提供される。
【０００５】
式（Ｉ）の化合物の化学名は、６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステルである。
【０００６】
以下において、本発明の化合物についての言及は、式（Ｉ）の化合物と、その溶媒和物（特に製薬上許容される溶媒和物）との双方を含むものとする。
【０００７】
式（Ｉ）の化合物は、特に局所投与した際には潜在的に有益な抗炎症性または抗アレルギー性の効果を示し、この効果は、例えば、グルココルチコイド受容体に結合してその受容体を介しての応答を遮断するその能力によって実証されている。したがって、式（Ｉ）の化合物は、炎症性および／またはアレルギー性障害の治療に有用である。
【０００８】
化合物（Ｉ）は、ラットおよびヒトのｉｎ ｖｉｔｒｏ系において、非常に効率的な肝代謝を受けて、単一の主要代謝産物として１７−βカルボン酸（Ｘ）を生じる。この代謝産物は合成されており、ｉｎ ｖｉｔｒｏ機能的グルココルチコイドアッセイでは、活性が親化合物の１／１０００未満であることが実証されている。
【０００９】
【化２７】

【００１０】
この効率的な肝代謝は、ラットにおけるｉｎ ｖｉｖｏデータによって反映されており、そこでは、肝血流に近い速度の血漿クリアランスおよび１％未満の経口バイオアベイラビリティが示されており、広範な初回通過代謝と一致する。
【００１１】
ヒト肝細胞におけるｉｎ ｖｉｔｒｏ代謝研究から、化合物（Ｉ）がプロピオン酸フルチカゾンと同一の様式で代謝されること、しかし、（Ｉ）から不活性の酸代謝産物への変換はプロピオン酸フルチカゾンの場合の約５倍速く起こることが実証されている。この非常に効率的な肝不活性化は、ヒトにおける全身暴露を最小限に抑えて、安全プロフィールを改善すると期待される。
【００１２】
吸入されたステロイドは肺を通じても吸収され、この吸収経路は全身暴露に有意に関与している。したがって、肺での吸収が低下すれば、安全プロフィールが改善されると思われる。式（Ｉ）の化合物を用いた研究から、麻酔をかけたブタの肺へ乾燥粉末を送達した後では、式（Ｉ）の化合物への暴露がプロピオン酸フルチカゾンの場合よりも有意に低下していることが示された。
【００１３】
安全プロフィールが改善されれば、式（Ｉ）の化合物は、１日１回投与した場合に所望の抗炎症性効果を示すことができると考えられる。１日１回の投薬は、１日２回の投薬処方計画（プロピオン酸フルチカゾンの場合に通常採用されている）よりも、患者にとって非常に都合が良いと考えられる。
【００１４】
本発明の化合物が利用される疾患状態の例としては、湿疹、乾癬、アレルギー性皮膚炎、神経皮膚炎、掻痒症（ｐｒｕｒｉｔｉｓ）および過敏性反応などの皮膚疾患；喘息（アレルゲン誘発性喘息反応を含む）、鼻炎（枯草熱を含む）、鼻ポリープ、慢性閉塞性肺疾患、間質性肺疾患および線維症などの鼻、咽喉または肺の炎症性症状；潰瘍性大腸炎およびクローン病などの炎症性腸症状；ならびに慢性関節リウマチなどの自己免疫疾患が挙げられる。
【００１５】
また本発明の化合物は、結膜および結膜炎の治療にも使用できる。
【００１６】
当業者であれば、本明細書における治療に関する言及が、予防ならびに確立されている症状の治療にも及ぶことが理解されよう。
【００１７】
上記で述べたように、式（Ｉ）の化合物は、ヒトの医学または獣医学において、特に抗炎症剤および抗アレルギー剤として有用である。
【００１８】
したがって、本発明の更なる態様として、ヒトの医学または獣医学、特に炎症性および／またはアレルギー性症状を有する患者の治療において、特には１日１回の治療に使用するための、式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容される溶媒和物が提供される。
【００１９】
本発明の別の態様によれば、炎症性および／またはアレルギー性症状を有する患者の治療、特に１日１回の治療のための薬剤を製造するための、式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容される溶媒和物の使用が提供される。
【００２０】
更なるもしくは別の態様によれば、特には１日１回の投与のための、炎症性および／またはアレルギー性症状を有するヒトまたは動物の被験体の治療方法であって、そのヒトまたは動物の被験体に、有効量の式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容される溶媒和物を投与することを含んでなる前記方法が提供される。
【００２１】
本発明の化合物は、あらゆる簡便な方法で投与用に製剤化でき、したがって、本発明はまたその範囲に、式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容される溶媒和物を、所望により１種以上の生理学的に許容される希釈剤または担体と混合して含んでなる、医薬組成物も包含する。１日１回の投与に好適な医薬組成物が特に関心が持たれる。
【００２２】
更に、上記の成分を混合することを含んでなる、そのような医薬組成物の調製方法が提供される。
【００２３】
本発明の化合物は、例えば、経口、頬側、舌下、非経口、局所または直腸投与用、特には局所投与用に製剤化できる。
【００２４】
本明細書で用いられる局所投与には、吹送および吸入による投与が含まれる。種々のタイプの局所投与用製剤の例としては、軟膏剤、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤、フォーム剤、経皮パッチによる送達のための製剤、粉剤、スプレー、エアロゾル、吸入器もしくは通気器に入れて使用するためのカプセルもしくはカートリッジ、または滴剤（例えば点眼剤もしくは点鼻剤）、噴霧のための溶液剤／懸濁剤、坐剤、ペッサリー剤、保持型浣腸剤、およびチュアブル（ｃｈｅｗａｂｌｅ）もしくは吸引可能な（ｓｕｃｋａｂｌｅ）錠剤またはペレット剤（例えばアフタ性潰瘍炎の治療用）、またはリポソーム製剤もしくはマイクロカプセル化製剤が挙げられる。
【００２５】
有利なことに、肺への局所投与用の組成物には、乾燥粉末組成物およびスプレー組成物が含まれる。
【００２６】
肺への局所送達用の乾燥粉末組成物は、例えば、吸入器または通気器に入れて使用するための例えばゼラチンのカプセルおよびカートリッジに入ったものとすることができる。製剤は通常、本発明の化合物の吸入のための粉末混合物および好適な粉末基剤（例えば乳糖またはデンプン）を含む。各カプセルまたはカートリッジは一般に、２０μｇ〜１０ｍｇの式（Ｉ）の化合物を含み得る。あるいはまた、本発明の化合物は、賦形剤を用いないものとすることもできる。この製剤のパッケージングは、単位用量または複数用量の送達に好適なものとすることができる。複数用量送達の場合、製剤は、前もって計量しておいてもよいし（例えばＤｉｓｋｕｓ（ＧＢ ２２４２１３４を参照）またはＤｉｓｋｈａｌｅｒ（ＧＢ ２１７８９６５、２１２９６９１および２１６９２６５を参照）に記載されているようなもの）、あるいは使用に際して計量して供給してもよい（例えばＴｕｒｂｕｈａｌｅｒ（ＥＰ ６９７１５を参照）に記載されているようなもの）。単位用量装置の一例はＲｏｔａｈａｌｅｒである（ＧＢ ２０６４３３６を参照）。Ｄｉｓｋｕｓの吸入装置は、その長さに沿って配置された複数の凹部を有するベースシートで形成される長いストリップと、複数の容器を規定するように密閉するようにしかし剥離可能なように該ストリップに密閉されている覆いシートとを含んでなり、各容器の中には、式（Ｉ）の化合物を（好ましくは乳糖と組み合わせて）含有する吸入可能な製剤が収容されている。好ましくは、このストリップは、ロールに巻き取れるのに十分な柔軟性を有する。覆いシートおよびベースシートは、好ましくは、互いに密閉されていない始端部を有し、この始端部の少なくとも一方は巻き取り手段に取り付けられるように構成される。また、好ましくは、ベースシートと覆いシートとの間の密閉シールは、それらの幅全体にわたる。覆いシートは、好ましくは、ベースシートから、ベースシートの第１端部から縦方向に剥離するものとすることができる。
【００２７】
非加圧式で、乾燥粉末として口腔を介して肺に局所投与されるように適合された医薬製剤（特に賦形剤を含まないものまたは乳糖もしくはデンプンなどの希釈剤もしくは担体（最も特には乳糖）と共に製剤化されているもの）が、特に関心が持たれる。
【００２８】
スプレー組成物は、例えば、水性溶液もしくは懸濁液、または好適な液化噴射剤を用いた加圧パック（例えば計量用量吸入器）から送り出されるエアロゾルとして製剤化できる。吸入に好適なエアロゾル組成物は、懸濁液または溶液とすることができ、通常は、式（Ｉ）の化合物と好適な噴射剤とを含むことができ、そうした噴射剤としては、例えばフルオロカーボンまたは水素含有クロロフルオロカーボンまたはそれらの混合物、特にはヒドロフルオロアルカン、特には１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパンまたはそれらの混合物が挙げられる。このエアロゾル組成物は、場合により、界面活性剤（例えば、オレイン酸またはレシチン）および共溶媒（例えば、エタノール）などの当業界で周知である追加の製剤用賦形剤を含むことも可能である。１つの製剤の例は、賦形剤を含有せず、（場合よっては別の治療活性成分と組み合わせた）式（Ｉ）の化合物（好ましくは例えば１型などの非溶媒和形態として）と、１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパンおよびそれらの混合物から選ばれる噴射剤とから本質的になる（例えば、それらのみからなる）ものである。もう１つの製剤の例は、粒子状の式（Ｉ）の化合物と、１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパンおよびそれらの混合物から選ばれる噴射剤と、その噴射剤に可溶性である懸濁剤（例えばＷＯ９４／２１２２９に記載されているようなオリゴ乳酸またはその誘導体）とを含んでなる。好ましい噴射剤は、１，１，１，２−テトラフルオロエタンである。本明細書の別の所で述べているように、式（Ｉ）の化合物は、１，１，１，２−テトラフルオロエタンとは溶媒和物を形成しないと考えられる。加圧製剤は通常、バルブ（例えば計量バルブ）で閉じられている缶（例えばアルミニウム缶）の中で保持され、マウスピースを備えたアクチュエーターに取り付けられる。
【００２９】
加圧エアロゾル製剤は、好ましくは、粒子状の薬剤と、噴射剤と、追加水（ｗａｔｅｒ ａｄｄｉｔｉｏｎ）（すなわち始めの製剤用の水に加えて添加される水）を含む安定化剤とを含んでなるものではない。加圧エアロゾル製剤はまた、好ましくは、粒子状の薬剤と、噴射剤と、アミノ酸、その誘導体またはそれらの混合物を含む安定化剤とを含んでなるものでもない。
【００３０】
吸入により投与される薬剤は、望ましくは、粒径が制御されているものである。気管支系への吸入の場合の最適な粒径は、一般に１〜１０μｍ、好ましくは２〜５μｍである。大きさが２０μｍを超える粒子は、吸入されて小気道（ｓｍａｌｌ ａｉｒｗａｙ）に到達するには概して大きすぎる。これらの粒径を達成するために、生産された式（Ｉ）の化合物の粒子は、例えば微粉状化（ｍｉｃｒｏｎｉｓａｔｉｏｎ）などの慣用の手段により粒径を小さくすることができる。所望の画分は、空気分級または篩によりにより分別できる。好ましくは、粒子は結晶性であり、例えば、超音波照射の存在下で、連続フローセル内で、薬剤としての式（Ｉ）の化合物の流動溶液（液体溶剤中）をその薬剤に対する流動液状抗溶剤と混合することを含んでなる方法（例えば国際特許出願ＰＣＴ／ＧＢ９９／０４３６８に記載されているような方法）、または、その物質の溶液（液状溶剤中）の細流およびその物質に対する液状抗溶剤の細流を、わずかに接触する程度に軸上排出口（ａｘｉａｌ ｏｕｔｌｅｔ ｐｏｒｔ）を有する円柱状混合チャンバーに通して、それによってそれらの細流がボルテックスの形成により最終的には混合されてその物質の結晶粒子の沈殿が起こるようにすることを含んでなる方法（例えば国際特許出願ＰＣＴ／ＧＢ００／０４３２７に記載されているような方法）により調製される。乳糖のような賦形剤が用いられる場合は、一般にその賦形剤の粒径は、本発明内にある吸入薬剤よりもずっと大きい。賦形剤が乳糖である場合、それは典型的には粉砕乳糖として存在させ、その場合、乳糖粒子の８５％以下が６０〜９０μｍのＭＭＤを有し、かつ１５％以上が１５μｍ未満のＭＭＤを有する。
【００３１】
鼻への局所投与用の製剤（例えば鼻炎の治療のため）としては、加圧エアロゾル製剤および加圧ポンプにより鼻へ投与される水性製剤が挙げられる。非加圧式で、鼻腔へ局所投与されるように適合された製剤は、特に関心が持たれる。この目的のために、製剤は、好ましくは希釈剤または担体として水を含む。肺または鼻への投与のための水性製剤は、緩衝化剤、張性改変剤などの慣用の賦形剤と共に提供することができる。水性製剤はまた、噴霧により鼻へ投与することもできる。
【００３２】
他の可能性のある提示としては、次のものが挙げられる：
軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤は、例えば、水性または油性の基剤を用い、好適な増粘剤および／またはゲル化剤および／または溶剤を添加して製剤化できる。したがって、そのような基剤としては、例えば、水および／または油（流動パラフィンまたは落花生油もしくはヒマシ油のような植物油など）または溶剤（ポリエチレングリコールなど）が挙げられうる。基剤の性質によって使用可能な増粘剤およびゲル化剤としては、ソフトパラフィン、ステアリン酸アルミニウム、セトステアリルアルコール、ポリエチレングリコール、羊毛脂、蜜ロウ、カルボキシポリメチレンおよびセルロース誘導体、ならびに／またはモノステアリン酸グリセリル、ならびに／または非イオン性乳化剤が挙げられる。
【００３３】
ローション剤は、水性または油性の基剤を用いて製剤化でき、通常は、１種以上の乳化剤、安定化剤、分散剤、懸濁剤または増粘剤も含む。
【００３４】
外部適用のための粉剤は、例えばタルク、乳糖またはデンプンなどの任意の好適な粉剤用基剤を利用して形成できる。滴剤は、水性または非水性の基剤を用いて製剤化でき、また１種以上の分散剤、可溶化剤、懸濁剤または防腐剤も含み得る。
【００３５】
適切である場合には、本発明の製剤は、好適な緩衝化剤の添加により緩衝化してもよい。
【００３６】
本発明の局所用組成物における式（Ｉ）の活性化合物の割合は、調製しようとする製剤のタイプそのものに応じて決まるが、通常は０．００１〜１０重量％の範囲内である。しかし、一般に、ほとんどのタイプの製剤では、有利なことに、用いられる割合は０．００５〜１％、好ましくは０．０１〜０．５％の範囲内である。しかし、吸入または吹送のための粉剤では、用いられる割合は通常、０．１〜５％の範囲内である。
【００３７】
エアロゾル製剤は、好ましくは、エアロゾルのそれぞれの計量された用量すなわち「ひと吹き」が１μｇ〜２０００μｇ、例えば２０μｇ〜２０００μｇ、好ましくは約２０μｇ〜５００μｇの式（Ｉ）の化合物を含むように前もって決められている。投与は、１日１回または１日数回（例えば２、３、４または８回）を、例えば各回１、２もしくは３用量で行うことができる。好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、１日１回または２回、より好ましくは１日１回送達される。エアロゾルでの総日用量は、典型的には１０μｇ〜１０ｍｇ、例えば１００μｇ〜１０ｍｇ、好ましくは２００μｇ〜２０００μｇの範囲内である。
【００３８】
局所用製剤は、罹患領域に１日当たり１回以上の適用により投与できる。皮膚領域には閉鎖包帯が有利に使用できる。連続的または長期にわたる送達は、粘着性リザバーシステム（ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ ｓｙｓｔｅｍ）により達成できる。
【００３９】
内部投与の場合、本発明の化合物は、例えば、慣用の方法で経口、非経口または直腸投与用に製剤化できる。経口投与用の製剤としては、典型的には結合剤、充填剤、滑沢剤、崩壊剤、湿潤剤、懸濁剤、乳化剤、防腐剤、緩衝塩、香味剤、着色剤および／または甘味剤などの慣用の賦形剤を適宜含むシロップ剤、エリキシル剤、粉剤、顆粒剤、錠剤およびカプセル剤が挙げられる。しかし、以下に記載するような単位剤形が好ましい。
【００４０】
内部投与のための製剤の好ましい形態は、単位剤形、すなわち錠剤およびカプセル剤である。そのような単位剤形は、０．１ｍｇ〜２０ｍｇ、好ましくは２．５〜１０ｍｇの本発明の化合物を含む。
【００４１】
本発明の化合物は、通常、全身副腎皮質治療が指示される場合には、内部投与により供与できる。
【００４２】
概して、製剤は、内部投与の場合、関わる製剤のタイプに応じて、０．０５〜１０％の活性成分を含み得る。日用量は、治療しようとする症状および所望の治療期間に応じて０．１ｍｇ〜６０ｍｇ、例えば５〜３０ｍｇで様々に変えることができる。
【００４３】
叙放性または腸溶性の製剤は、特に炎症性腸障害の治療に有利でありうる。
【００４４】
本発明の医薬組成物はまた、別の治療活性物質、例えばβ_２−アドレナリン受容体（ａｄｒｅｎｏｒｅｃｅｐｔｏｒ）アゴニスト、抗ヒスタミン剤または抗アレルギー剤と組み合わせても使用できる。したがって、本発明は、更なる態様において、式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容される溶媒和物と別の治療活性物質（例えばβ_２−アドレナリン受容体アゴニスト、抗ヒスタミン剤または抗アレルギー剤）とを含んでなる組合せを提供する。
【００４５】
β_２−アドレナリン受容体アゴニストの例としては、サルメテロール（例えばラセミ体またはＲ−エナンチオマーなどの単一エナンチオマーとして）、サルブタモール、フォルモテロール、サルメファモール（ｓａｌｍｅｆａｍｏｌ）、フェノテロールまたはテルブタリン、ならびにそれらの塩、例えばサルメテロールのキシナホ酸塩、サルブタモールの硫酸塩もしくは遊離塩基またはフォルモテロールのフマル酸塩が挙げられる。抗ヒスタミンの例としては、メタピリレンまたはロラタジンが挙げられる。
【００４６】
他の好適な組合せとしては、例えば、他の抗炎症剤、例えばＮＳＡＩＤ（例えばクロモグリク酸ナトリウム、ネドクロミルナトリウム、ＰＤＥ４インヒビター、ロイコトリエンアンタゴニスト、ｉＮＯＳインヒビター、トリプターゼおよびエラスターゼインヒビター、β−２インテグリンアンタゴニストならびにアデノシン２ａアゴニスト）または抗感染剤（例えば抗生物質、抗ウイルス剤）が挙げられる。
【００４７】
特に関心が持たれるのは、ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）インヒビターと組み合わせた式（Ｉ）の化合物の使用である。本発明のこの態様において有用なＰＤＥ４特異的インヒビターは、ＰＤＥ４酵素を抑制することが判っているか、またはＰＤＥ４インヒビターとして作用することが判明しており、かつＰＤＥ４のみに対するインヒビターである（ＰＤＥ４だけでなくＰＤＥファミリーの他のメンバーも抑制する化合物ではない）任意の化合物とすることができる。一般に、約０．１以上のＩＣ_５０比（高い親和性でロリプラムに結合するＰＤＥ４触媒形態についてのＩＣ_５０を、低い親和性でロリプラムに結合する形態についてのＩＣ_５０で除算したもの）を有するＰＤＥ４インヒビターを使用することが好ましい。この開示の目的のために、低い親和性でＲおよびＳロリプラムに結合するｃＡＭＰ触媒部位を「低親和性」結合部位（ＬＰＤＥ４）と呼び、高い親和性でロリプラムに結合するこの触媒部位の他の形態を「高親和性」結合部位（ＨＰＤＥ４）と名づける。この「ＨＰＤＥ４」という用語は、ヒトＰＤＥ４を示すのに用いられる「ｈＰＤＥ４」という用語とは混同してはならない。最初の実験は、［^３Ｈ］−ロリプラム結合アッセイを確立し確認するために行った。この作業の詳細は下記で詳細に記載されている結合アッセイに示されている。
【００４８】
本発明での使用に好ましいＰＤＥ４インヒビターは、有益な治療率を有する化合物、すなわち選択的にｃＡＭＰ触媒活性を抑制することにより（この場合、その酵素は低い親和性でロリプラムに結合する形態である）、高い親和性でロリプラムに結合する形態の抑制と明らかに関連する副作用を低減する化合物である。この状態を言い換えると、好ましい化合物とは、約０．１以上のＩＣ_５０比（高い親和性でロリプラムに結合するＰＤＥ４触媒形態についてのＩＣ_５０を低い親和性でロリプラムに結合する形態についてのＩＣ_５０で除算したもの）を有するものである、ということになる。
【００４９】
この基準を更に厳密にすると、ＰＤＥ４インヒビターは約０．１以上のＩＣ_５０比を有する。但し、この比は、高い親和性でロリプラムに結合するＰＤＥ４の形態への１ｎＭの［^３Ｈ］Ｒ−ロリプラムの結合との競合についてのＩＣ_５０値の、１μＭの［^３Ｈ］−ｃＡＭＰを基質として用いた場合に低い親和性でロリプラムに結合する形態のＰＤＥ４触媒活性の抑制についてのＩＣ_５０値に対する割合である、ということになる。
【００５０】
有用なＰＤＥ４インヒビターの例は次のとおりである：
（Ｒ）−（＋）−１−（４−ブロモベンジル）−４−［（３−シクロペンチルオキシ）−４−メトキシフェニル］−２−ピロリドン；
（Ｒ）−（＋）−１−（４−ブロモベンジル）−４−［（３−シクロペンチルオキシ）−４−メトキシフェニル］−２−ピロリドン；
３−（シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）−１−（４−Ｎ’−［Ｎ２−シアノ−Ｓ−メチル−イソチオウレイド］ベンジル）−２−ピロリドン；
ｃｉｓ ４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸；
ｃｉｓ−［４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシフェニル）シクロヘキサン−１−オール］；
（Ｒ）−（＋）−エチル［４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）ピロリドン−２−イリデン］アセテート；および
（Ｓ）−（−）−エチル［４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）ピロリドン−２−イリデン］アセテート。
【００５１】
最も好ましいものは、０．５を超えるＩＣ_５０比を有するＰＤＥ４インヒビターであり、特には１．０を超える比を有する化合物である。好ましい化合物は、ｃｉｓ ４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸、２−カルボメトキシ−４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシフェニル）シクロヘキサン−１−オンおよびｃｉｓ−［４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシフェニル）シクロヘキサン−１−オール］である。これらは、選択的に低親和性結合部位に結合し、かつ０．１以上のＩＣ_５０比を有する化合物の例である。
【００５２】
関心が持たれる他の化合物としては次のものが挙げられる：米国特許第５，５５２，４３８号（１９９６年９月３日発行）（この特許およびそれが開示する化合物は参照により完全に本明細書に組み入れられる）に述べられている化合物。米国特許第５，５５２，４３８号に開示されている特に関心が持たれる化合物は、ｃｉｓ−４−シアノ−４−［３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシフェニル］シクロヘキサン−１−カルボン酸［シロマラスト（ｃｉｌｏｍａｌａｓｔ）としても知られる］およびその塩、エステル、プロドラッグまたは物理的形態；ＡｓｔｒａのＡＷＤ−１２−２８１（Ｈｏｆｇｅｎ， Ｎら， １５ｔｈ ＥＦＭＣ Ｉｎｔ Ｓｙｍｐ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ （９月６〜１０日， Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈ） １９９８， Ａｂｓｔ． Ｐ．９８）；ＮＣＳ−６１３と命名された９−ベンジルアデニン誘導体（ＩＮＳＥＲＭ）；Ｃｈｉｒｏｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−ＰｌｏｕｇｈのＤ−４４１８；Ｃ１−１０１８として識別されているベンゾジアゼピンＰＤＥ４インヒビター（ＰＤ−１６８７８７；Ｐａｒｋｅ−Ｄａｖｉｓ／Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ）；ベンゾジオキソール誘導体（協和発酵， ＷＯ ９９１６７６６に開示されている）；ＮａｐｐのＶ−１１２９４Ａ（Ｌａｎｄｅｌｌｓ， Ｌ．Ｊ．ら， Ｅｕｒ Ｒｅｓｐ Ｊ ［Ａｎｎｕ Ｃｏｎｇ Ｅｕｒ Ｒｅｓｐ Ｓｏｃ （９月１９〜２３日， Ｇｅｎｅｖａ） １９９８］ １９９８， １２ （Ｓｕｐｐｌ． ２８）： Ａｂｓｔ Ｐ２３９３）；ロフルミラスト（ＣＡＳ参照Ｎｏ． １６２４０１−３２−３）；およびＢｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎのファラジノン（ｐｈａｌａｚｉｎｏｎｅ）（ＷＯ ９９４７５０５）：またはＴ−４４０として識別されている化合物（田辺製薬；Ｆｕｊｉ， Ｋ．ら， Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｅｘｐ Ｔｈｅｒ， １９９８， ２８４（１）： １６２）である。
【００５３】
ホスホジエステラーゼおよびロリプラム結合アッセイ
アッセイ方法 １Ａ
単離したヒト単球のＰＤＥ４およびｈｒＰＤＥ（ヒト組換え型ＰＤＥ４）は、主に低親和性形態として存在することが明らかになった。したがって、この低親和性形態のＰＤＥ４に対する試験化合物の活性は、１μＭ ［^３Ｈ］ｃＡＭＰを基質として用いるＰＤＥ４触媒活性についての標準的アッセイ（Ｔｏｒｐｈｙら， Ｊ． ｏｆ Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．， 第２６７巻， Ｎｏ．３ ｐｐ１７９８−１８０４， １９９２）を用いて評価できる。
【００５４】
ラット脳の高速上清（ｈｉｇｈ ｓｐｅｅｄ ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔ）をタンパク質供給源として用い、［^３Ｈ］−ロリプラムの２つのエナンチオマーを２５．６Ｃｉ／ｍｍｏｌの比活性となるように調製した。標準的アッセイの条件を公表されている手順に変更を加えて、ＰＤＥ４アッセイの条件と同一にしたが、但し、ｃＡＭＰの最後の部分は次のようにした：５０ｍＭ Ｔｒｉｓ ＨＣｌ（ｐＨ ７．５）、５ｍＭ ＭｇＣｌ_２， ５０μＭ ５’−ＡＭＰおよび１ｎＭの［^３Ｈ］−ロリプラム（Ｔｏｒｐｈｙら， Ｊ． ｏｆ Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．， 第２６７巻， Ｎｏ．３ ｐｐ１７９８−１８０４， １９９２）。アッセイは、３０℃で１時間行った。反応を停止させ、結合したリガンドをＢｒａｎｄｅｌセルハーベスター（ｃｅｌｌ ｈａｒｖｅｓｔｅｒ）を用いて遊離のリガンドから分離した。高親和性結合部位についての競合は、［^３Ｈ］−ｃＡＭＰを存在させない以外は低親和性ＰＤＥ活性の測定で用いたのと同じ条件下で評価した。
【００５５】
アッセイ方法 １Ｂ
ホスホジエステラーゼ活性の測定
ＰＤＥ活性は、供給元（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）により記載されているような［^３Ｈ］ｃＡＭＰ ＳＰＡまたは［^３Ｈ］ｃＧＭＰ ＳＰＡ酵素アッセイを用いてアッセイした。反応は、９６ウェルプレートで、室温にて、次のものを（最終濃度で）含有する０．１ｍｌの反応緩衝液中で行った：５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ ７．５、８．３ｍＭ ＭｇＣｌ_２、１．７ｍＭ ＥＧＴＡ、［^３Ｈ］ｃＡＭＰまたは［^３Ｈ］ｃＧＭＰ（約２０００ｄｐｍ／ｐｍｏｌ）、酵素および各種濃度のインヒビター。アッセイを１時間進行させ、硫酸亜鉛の存在下で５０μｌのＳＰＡケイ酸イットリウムビーズを添加することにより停止させた。プレートを振盪し、室温で２０分間静置した。放射性標識した生成物の形成を、シンチレーションスペクトロメトリーにより評価した。
【００５６】
［ ^３ Ｈ］Ｒ− ロリプラム結合アッセイ
［^３Ｈ］Ｒ−ロリプラム結合アッセイは、Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒおよび共同研究者らの方法に変更を加えた方法により行った（Ｎｉｃｈｏｌｓｏｎら， Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． Ｓｃｉ．， 第１２巻， ｐｐ．１９−２７（１９９１）およびＭｃＨａｌｅら， Ｍｏｌ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．， 第３９巻， １０９−１１３ （１９９１）を参照）。Ｒ−ロリプラムは、ＰＤＥ４の触媒部位に結合する（Ｔｏｒｐｈｙら， Ｍｏｌ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．， 第３９巻， ３７６−３８４ （１９９１）を参照）。したがって、［^３Ｈ］Ｒ−ロリプラム結合についての競合により、非標識競合物のＰＤＥ４インヒビターとしての強度の独立した確認が提供される。このアッセイは、次のものを（最終濃度で）含有する０．５μｌの緩衝液中で、３０℃で１時間行った：５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ ７．５、５ｍＭ ＭｇＣｌ_２、０．０５％のウシ血清アルブミン、２ｎＭ ［^３Ｈ］Ｒ−ロリプラム（５．７×１０４ｄｐｍ／ｐｍｏｌ）および各種濃度の非放射性標識インヒビター。反応を、２．５ｍｌの氷冷反応緩衝液（［^３Ｈ］−Ｒ−ロリプラムは含まず）の添加により停止させ、０．３％のポリエチレンイミンに浸漬しておいたＷｈａｔｍａｎ ＧＦ／Ｂ濾紙で迅速に減圧濾過した（Ｂｒａｎｄｅｌセルハーベスター）。この濾紙を更に７．５ｍｌの冷緩衝液で洗浄し、乾燥し、液体シンチレーションスペクトロメトリーによりカウントした。
【００５７】
したがって、本発明は、更なる態様において、式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容される溶媒和物とＰＤＥ４インヒビターとを含んでなる組合せを提供する。
【００５８】
上記で述べた組合せは、都合が良いことに、医薬製剤の形態で使用するためのものとすることができ、したがって、上記で規定したような組合せを生理学的に許容される希釈剤または担体と共に含んでなる医薬製剤が、本発明の更なる態様として提示される。
【００５９】
そのような組合せの個々の化合物は、別個のまたは合わせた医薬製剤で逐次または同時に投与できる。
【００６０】
既知の治療剤の適切な用量は、当業者であれば容易に理解される。
【００６１】
驚くべきことに、式（Ｉ）の化合物は、一般に用いられる有機溶剤との溶媒和物を形成するという、重要な性質を示した。そのような溶媒和物は、本質的に化学量論的（例えば式（Ｉ）の化合物と溶剤との比率が１：１に近い）であり、例えば本発明者らの分析によれば、０．９５〜１．０５：１の範囲であることが判明した。例えば、本発明者らは、アセトン、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡｃ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、イソプロパノールおよびメチルエチルケトンなどの溶剤との溶媒和物を調製した。しかし、式（Ｉ）の化合物の溶媒和は予測不可能である。何故ならば、本発明者らは、それはイソプロパノールとの溶媒和物は形成するが、エタノールまたはメタノールとの溶媒和物は形成しないと思われることを見出したからである。更に、それは１，１，１，２−テトラフルオロエタン、酢酸エチル、酢酸メチル、トルエン、メチルイソブチルケトン（ＭＩＢＫ）または水との溶媒和物も形成しないと思われる。しかし、多くの有機溶剤には毒性があるために、式（Ｉ）の化合物が非溶媒和形態で生産できるようにするためには、特別な最終段階の処理条件（後記で述べる）を開発することが必要であった。したがって、本発明の別の態様によれば、非溶媒和形態の式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００６２】
驚くべきことに、非溶媒和形態の式（Ｉ）の化合物は多数の多形形態で存在し得ることも見い出した。具体的に述べると、本発明者らは、Ｘ線粉末回析（ＸＲＰＤ）により区別できる多形形態を同定し、それらを１型、２型および３型と命名した。３型は、２型の不安定でマイナーな多形改変型であると思われる。広義では、これらの形態はそれらのＸＲＰＤプロフィールにおいて、次のように特徴付けられる：
１型：１８．９°２θ付近のピーク
２型：１８．４°および２１．５°２θ付近のピーク
３型：１８．６°および１９．２°２θ付近のピーク
【００６３】
２１〜２３°２θの範囲内で、３型は単一のピークを示し、一方２型は１対のピークを示す。７°２θのピークは全ての場合に存在するが、２型および３型では１型の場合よりもずっと高い強度で現れる。
【００６４】
これらの多形のＸＲＰＤパターンを図１に重ねて示す。周囲温度における水性スラリー中での経時的な２型から１型への変換を図２に示す。２型から１型への変換では、１８．４°２θ付近での２型のピーク特性の喪失（Ｂで示す）、７°２θ付近でのピーク強度の顕著な低下（Ａで示す）、および１８．９°２θ付近での１型のピーク特性の様相（Ｃで示す）が特に注目される。
【００６５】
３型の温度依存性を図４に示す。温度は図５に示すプロフィールに従って様々に変化させた。図４から、３型は、まず３０〜１７０℃の温度範囲にわたり２型へと変換され、次に１７０〜２３０℃の温度範囲にわたり１型へと変換されることが判る。３型から２型への変換では、２１〜２３°２θの範囲にある１つのピークが、同じ範囲内で２つのピークへと分かれること、および１８．６°２θ付近にあるピークが左側に向かって１８．４°２θ付近へとシフトすることが特に注目される。２型から１型への変換では、上記のパラグラフで述べたものと同様の変化が見られうる。
【００６６】
１型の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）および熱重量測定分析（ＴＧＡ）のプロフィールを図３に示す。これらのプロフィールは、ＤＳＣでの吸熱事象およびＴＧＡにおける化学分解に相当する２８０〜３００℃付近（典型的には２９８℃付近）での転移を特徴とする。２型および３型のＤＳＣプロフィールは、実施された実験条件下ではそれほど異なってはおらず、したがって、ＤＳＣは３種の形態の間での区別に好適な技法でない。図３において、約２９８℃以下でＴＧＡおよびＤＳＣプロフィールにおいて活性が見られないことは、その物質が通常の操作温度において良好な物理的および化学的安定性を示すことを意味する。
【００６７】
実施例に示すように、１型および３型の溶解エンタルピーを特定の有機溶剤中で測定したところ、３型から１型への転移エンタルピーは５．１〜６．７ＫＪ／ｍｏｌであると評価された。
【００６８】
したがって、本発明者らは式（Ｉ）の化合物の非溶媒和１型を好む。何故ならば、この形態は、周囲温度において熱力学的に最も安定であると考えられ、また、望ましくない吸湿を最も受けにくいと考えられるからである（実施例のセクションの結果を参照）。しかし、他の条件下では、２型（または３型）が好ましい場合もある。
【００６９】
式（Ｉ）の化合物を溶媒和形態で使用することは好ましくないが、それにもかかわらず驚くべきことに、本発明者らは、特定の溶媒和物の形態が特に魅力的な物理化学的特性を有しており、そのために、式（Ｉ）の化合物の非溶媒和形態の調製（例えば最終ステップとして溶剤を除去することによる）における中間体として有用なものになることを見出した。例えば、本発明者らは、特定の化学量論的な溶媒和物が、結晶性の高い形態の固体として単離できることを見出した。したがって、本発明者らは本発明の１つの態様として、次のものも提供する：
メチルエチルケトン溶媒和物としての式（Ｉ）の化合物；
イソプロパノール溶媒和物としての式（Ｉ）の化合物；
テトラヒドロフラン溶媒和物としての式（Ｉ）の化合物；
アセトン溶媒和物としての式（Ｉ）の化合物。
【００７０】
特に、本発明者らは上記の溶媒和物を結晶形態の固体として提供する。これらの溶媒和物の更なる特定の利点は、この溶媒和物を（例えば加熱により）脱溶媒和することにより、非溶媒和形態が好ましい１型として形成される、という事実にある。上記の溶媒和物は、比較的毒性が低く、工業的規模の製造における使用に好適である。ＤＭＦ溶媒和物としての式（Ｉ）の化合物（結晶形態の固体としても単離できる）はまた、非溶媒和１型への更なる処理に使用される、という点でも関心が持たれる。
【００７１】
式（Ｉ）の化合物およびその溶媒和物は、以下に記載する方法により調製でき、その方法も本発明の更なる態様を構成するものである。
【００７２】
本発明の式（Ｉ）の化合物またはその溶媒和物の調製方法は、式（ＩＩ）：
【化２８】

のチオ酸またはその塩のアルキル化を含んでなる。
【００７３】
この方法において、式（ＩＩ）の化合物は、標準的な条件下で、式ＦＣＨ_２Ｌ［式中、Ｌは脱離基（例えばハロゲン原子、メシルもしくはトシル基など）を表わす］の化合物、例えば適当なフルオロメチルハライドと反応させることができる。好ましくは、このフルオロメチルハライド試薬は、ブロモフルオロメタンである。
【００７４】
後記で述べるように、好ましくは、式（ＩＩ）の化合物は、塩として、特にジイソプロピルエチルアミンとの塩として用いられる。
【００７５】
１つの好ましい式（Ｉ）の化合物の調製方法では、式（ＩＩ）の化合物またはその塩を、ブロモフルオロメタンで、場合によっては相間移動触媒の存在下で処理する。好ましい溶媒は、（場合によっては水の存在下での）酢酸メチル、更に好ましくは酢酸エチルである。水を存在させると、出発物質および生成物の双方の可溶性が向上し、相間移動触媒を使用すると、反応速度が上がる。使用可能な相間移動触媒の例としては（限定するものではないが）、臭化テトラブチルアンモニウム、塩化テトラブチルアンモニウム、臭化ベンジルトリブチルアンモニウム、塩化ベンジルトリブチルアンモニウム、臭化ベンジルトリエチルアンモニウム、塩化メチルトリブチルアンモニウム、および塩化メチルトリオクチルアンモニウムが挙げられる。ＴＨＦもまた、この反応の溶剤として成功裏に用いられており、この場合もまた、相間移動触媒を存在させることにより有意により速い反応速度がもたらされる。好ましくは、有機相中に存在する生成物をまず水性酸（例えば希塩酸）で洗浄してアミン化合物（例えばトリエチルアミンおよびジイソプロピルエチルアミン）を除去し、次に水性塩基（例えば重炭酸ナトリウム）で洗浄して、未反応の式（ＩＩ）の前駆体化合物を除去する。後記で述べるように、こうして酢酸エチル溶液として生産された式（Ｉ）の化合物を希釈し、トルエンを添加すれば、非溶媒和１型が結晶化する。
【００７６】
式（ＩＩ）の化合物は、式（ＩＩＩ）：
【化２９】

の対応する１７α−ヒドロキシル誘導体から、例えばＧ．Ｈ． Ｐｈｉｌｌｉｐｐｓら， （１９９４） Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ３７， ３７１７−３７２９に記載されている方法を用いて調製できる。例えば、このステップは、典型的には、エステル化を行うのに好適な試薬の添加を含み、例えばその試薬としては、２−フロン酸の活性化誘導体、例えば活性化エステル、または好ましくは２−フロイルハライド（例えば２−フロイルクロリド）が挙げられる（トリエチルアミンなどの有機塩基の存在下で、式（ＩＩＩ）の化合物に対して少なくとも２倍モル量で用いられる）。もう１モルの２−フロイルクロリドを式（ＩＩＩ）の化合物内のチオ酸部分と反応させ、例えばアミン（ジエチルアミンなど）との反応により除去する必要がある。
【００７７】
しかし、この方法は、得られる式（ＩＩ）の化合物が、副生成物２−フロイルジエチルアミドの混入から容易に精製されない、という欠点を負う。したがって、本発明者らは、この変換を行うための幾つかの改良方法を発明した。
【００７８】
第１のそのような改良方法において、本発明者らはより極性の高いアミン（例えばジエタノールアミン）を使用すれば、それだけ水溶性が高い副生成物（この場合は２−フロイルジエタノールアミド）が得られ、この副生成物は水による洗浄で効率的に除去できるため、式（ＩＩ）の化合物またはその塩が高純度で生産できるようになることを見出した。
【００７９】
したがって、本発明のこの態様によれば、本発明者らは、式（ＩＩ）の化合物の調製方法であって、
（ａ）式（ＩＩＩ）の化合物と２−フロン酸の活性化誘導体とを、式（ＩＩＩ）の化合物１モル当たり少なくとも２モルの該活性化誘導体の量で反応させて、式（ＩＩＡ）：
【化３０】

の化合物を得て；そして
（ｂ）ステップ（ａ）の生成物を、水溶性２−フロイルアミドを形成できる有機性第一級または第二級アミン塩基と反応させることにより、式（ＩＩＡ）の化合物からイオウに結合している２−フロイル成分を除去する
ことを含んでなる、前記方法を提供する。
【００８０】
この方法の２つの特に都合のよい実施形態において、また本発明者らは、
（ｃ１）ステップ（ｂ）の生成物が実質的に水非混和性の有機溶剤に溶解する場合は、ステップ（ｂ）で得られるアミド副生成物を水性洗浄液で洗い出すことにより式（ＩＩ）の化合物を精製するか；または
（ｃ２）ステップ（ｂ）の生成物が水混和性溶剤に溶解する場合は、ステップ（ｂ）の生成物を水性媒体で処理して、純粋な式（ＩＩ）の化合物またはその塩を沈殿させるようにすることにより、式（ＩＩ）の化合物を精製する
ことのいずれかを含んでなる、効率的な最終生成物の精製方法を提供する。
【００８１】
ステップ（ａ）において、好ましくは、２−フロン酸の活性化誘導体は、２−フロン酸の活性化エステルであってよく、更に好ましくは２−フロイルハライドであり、特には２−フロイルクロリドである。この反応の好適な溶剤は、（ステップ（ｃ１）に従う場合は）酢酸エチルもしくは酢酸メチル（好ましくは酢酸メチル）、または（ステップ（ｃ２）に従う場合は）アセトンである。通常、トリエチルアミンなどの有機塩基を存在させる。ステップ（ｂ）において、好ましくは、この有機塩基はジエタノールアミンである。この塩基は、メタノールなどの溶剤に好適に溶解させてもよい。一般に、ステップ（ａ）および（ｂ）は、低温（例えば０〜５℃）で行われる。ステップ（ｃ１）において、水性洗浄液は水とすることができるが、ブラインを用いるとより高い収率が達成されるので好ましい。ステップ（ｃ）において、水性媒体は、例えば希水性酸（例えば希ＨＣｌ）である。
【００８２】
本発明の１つの関連する態様によれば、本発明者らは式（ＩＩ）の化合物のもう１つの調製方法であって、
（ａ）式（ＩＩＩ）の化合物と２−フロン酸の活性化誘導体とを、式（ＩＩＩ）の化合物１モル当たり少なくとも２モルの活性化誘導体の量で反応させて、式（ＩＩＡ）の化合物を得て；そして
（ｂ）ステップ（ａ）の生成物を、更にもう１モルの式（ＩＩＩ）の化合物と反応させることにより、式（ＩＩＡ）の化合物からイオウに結合している２−フロイル成分を除去して、２モルの式（ＩＩ）の化合物を得ること
を含んでなる前記方法を提供する。
【００８３】
ステップ（ａ）において、２−フロン酸の活性化誘導体は、２−フロン酸の活性化エステルとすることができるが、更に好ましくは２−フロイルハライドであり、特には２−フロイルクロリドである。このステップの好ましい溶剤はアセトンである。通常、トリエチルアミンなどの有機塩基を存在させる。ステップ（ｂ）において、好適な溶剤はＤＭＦまたはジメチルアセトアミドである。通常、トリエチルアミンなどの有機塩基を存在させる。一般に、ステップ（ａ）および（ｂ）は、低温（例えば０〜５℃）で行われる。生成物は、酸で処理して水で洗浄することにより単離できる。
【００８４】
この上記の方法は、過剰モルのフロイル成分が更に１モルの式（ＩＩ）の化合物との反応により取り込まれて更に１モルの式（ＩＩ）の化合物を形成するので、フロイルアミド副生成物を生産しない（つまり、特に環境上の利点を付与する）、という点で非常に有効である。
【００８５】
ここで記載した２つの方法における式（ＩＩＩ）の化合物から式（ＩＩ）の化合物への変換の更なる一般的条件は、当業者には周知である。
【００８６】
しかし、好ましい条件セットによれば、本発明者らは、式（ＩＩ）の化合物が有利にも、固体の結晶塩の形態で単離できることを見出した。この好ましい塩は、トリエチルアミン、２，４，６−トリメチルピリジン、ジイソプロピルエチルアミンまたはＮ−エチルピペリジンなどの塩基と形成された塩である。このような式（ＩＩ）の化合物の塩形態は、遊離のチオ酸よりも更に安定であり、更に容易に濾過および乾燥され、更に高純度で単離できる。最も好ましい塩は、ジイソプロピルエチルアミンと形成される塩である。トリエチルアミン塩もまた、関心が持たれる。
【００８７】
式（ＩＩＩ）の化合物は、ＧＢ ２０８８８７７Ｂに記載されている手順に従って調製できる。
【００８８】
また、式（ＩＩＩ）の化合物は、次のステップを含む方法によっても調製できる：
【化３１】

【００８９】
ステップ（ａ）には、式（Ｖ）の化合物を含有する溶液の酸化が含まれる。好ましくは、ステップ（ａ）は、メタノール、水、テトラヒドロフラン、ジオキサン、またはジエチレングリコールジメチルエーテルを含む溶剤の存在下で行われる。収量およびスループットを増大させるには、好ましい溶剤はメタノール、水またはテトラヒドロフランであり、更に好ましくは水またはテトラヒドロフランであり、特には溶剤としては水およびテトラヒドロフランである。ジオキサンおよびジエチレングリコールジメチルエーテルもまた好ましい溶剤であり、これらは場合によっては（および好ましくは）水と共に用いることができる。好ましくは、溶剤は、出発物質の量（１重量部）に対して３〜１０倍容量、更に好ましくは４〜６倍容量、特には５倍容量の量で存在する。好ましくは、酸化剤は、出発物質の量に対して１〜９モル当量の量で存在する。例えば、５０％ｗ／ｗの過ヨウ素酸の水溶液が用いられる場合、酸化剤は、出発物質の量（１重量部）に対して１．１〜１０重量部、更に好ましくは１．１〜３重量部、特には１．３重量部の量で存在させることができる。好ましくは、この酸化ステップには、化学的酸化剤の使用が含まれる。更に好ましくは、その酸化剤は過ヨウ素酸もしくはヨウ素酸またはそれらの塩である。最も好ましくは、その酸化剤は過ヨウ素酸または過ヨウ素酸ナトリウムであり、特には過ヨウ素酸である。あるいはまた（または加えて）、酸化ステップには、任意の好適な酸化反応、例えば空気および／または酸素を利用する酸化反応が含まれ得ることも理解されよう。この酸化反応が空気および／または酸素を利用する場合、その反応に用いられる溶剤は好ましくはメタノールである。好ましくは、ステップ（ａ）には、試薬を室温またはそれより少し暖かい温度（すなわち約２５℃）で、例えば２時間インキュベートすることが含まれる。式（ＩＶ）の化合物は、抗溶剤の添加により反応混合物から再結晶化させることにより単離できる。式（ＩＶ）の化合物にとって好適な抗溶剤は水である。驚くべきことに、本発明者らは、抗溶剤（例えば水）の添加により式（ＩＶ）の化合物を沈殿させる条件を制御することが非常に望ましいことを見出した。再結晶化が冷水（例えば０〜５℃の温度の水／氷混合物）を用いて行われる場合は、より良好な抗溶剤特性が期待できると思われるが、本発明者らは、生じる結晶性生成物は非常に量が多く、軟質ゲルに似ており、非常に濾過しにくいことを見出した。理論に制約されるものではないが、本発明者らは、この低密度の生成物は結晶格子の中に多量の溶媒和した溶剤を含んでいると考える。これに対して約１０℃以上の条件（例えば約周囲温度）が用いられる場合には、非常に容易に濾過される砂のようなコンシステンシーの顆粒状生成物が生産される。これらの条件下で、結晶化は、典型的には約１時間後に開始し、典型的には数時間以内（例えば２時間）に完了させる。理論に制約されるものではないが、本発明者らは、この顆粒状生成物は溶媒和された溶剤を結晶格子内にほとんどまたは全く含んでいないと考える。
【００９０】
ステップ（ｂ）は、典型的には、例えば好適な溶剤（例えばジメチルホルムアミド）の存在下で好適なカップリング剤（例えばカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ））と共に硫化水素ガスを用いてカルボン酸をチオカルボン酸へと変換するのに好適な試薬を添加することを含む。
【００９１】
式（ＩＩ）の化合物のもう１つの調製方法は、例えば好適な溶剤（例えばＤＭＦ）の存在下で好適なカップリング剤（例えばＣＤＩ）と共に硫化水素ガスを用いてカルボン酸をチオカルボン酸に変換するのに好適な試薬で式（Ｘ）の化合物を処理することを含んでなる。式（Ｘ）の化合物は、本明細書中に記載されているのと同様の方法により調製できる。
【００９２】
式（Ｉ）の化合物またはその溶媒和物のもう１つの調製方法は、式（ＶＩ）：
【化３２】

の化合物をフッ素供給源と反応させることを含んでなる。
【００９３】
好適なフッ素の供給源の例としては、フッ素（例えばフッ化ナトリウム）が挙げられ、更に好ましくはＨＦである。好ましい試薬は水性ＨＦである。ＴＨＦまたはＤＭＦなどの溶剤が使用可能である。
【００９４】
式（ＶＩ）の化合物は、
（ａ）式（ＶＩＩ）：
【化３３】

の化合物またはその塩をアルキル化するか；
（ｂ）式（ＶＩＩＩ）：
【化３４】

の化合物をエポキシド形成試薬と反応させるか；あるいは
（ｃ）式（ＩＸ）：
【化３５】

の化合物をエステル化する
ことを含んでなる方法により調製できる。
【００９５】
（ａ）の方法では、式（ＩＩ）の化合物から式（Ｉ）の化合物への変換に関して上記で記載したものと同様の条件を用い得る。典型的には、標準的な条件下で、式（ＶＩＩ）の化合物を、式ＦＣＨ_２Ｌ［式中、Ｌは脱離基（例えばハロゲン原子、メシルもしくはトシル基など）を表わす］の化合物（例えば適当なフルオロメチルハライド）と反応させる。好ましくは、このフルオロメチルハライド試薬は、ブロモフルオロメタンである。
【００９６】
（ｂ）の方法は、好ましくは次の２ステップで行う：（ｉ）ハロヒドリン（特にブロモヒドリン）を（例えば、ブロモダン（ｂｒｏｍｏｄａｎ）またはそれと同等の試薬との反応により）形成し；その後、（ｉｉ）塩基（例えば水酸化ナトリウム）で処理して、閉環するようにする。ステップ（ｉ）の生成物は、新規な中間体である式（ＩＸＡ）：
【化３６】

［式中、Ｘはハロゲン、特にＢｒを表わす］
の化合物であり、これは所望により単離してもよい。
【００９７】
（ｃ）の方法において、好適な試薬は、有機塩基（例えばトリエチルアミン）の存在下での２−フロン酸の活性化誘導体、例えば活性化エステル、または好ましくは２−フロイルハライド（例えば２−フロイルクロリド）である。この反応は、アシル化触媒（例えばジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ））の存在下で、高温（例えば約６０℃）または周囲温度にて行うことができる。
【００９８】
式（ＶＩＩ）の化合物は、式（ＸＩ）：
【化３７】

の化合物のエステル化を含んでなる方法により調製できる。
【００９９】
式（ＩＩＩ）の化合物から式（ＩＩ）の化合物への変換に関して上記で記載したものと同様の条件を用い得る。例えば、好適な試薬は、有機塩基（例えばトリエチルアミン）の存在下での２−フロン酸の活性化誘導体、例えば活性化エステル、または好ましくは２−フロイルハライド（例えば２−フロイルクロリド）である。式（ＸＩ）の化合物は公知である（Ｊ Ｌａｂｅｌｌｅｄ Ｃｏｍｐｄ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ （１９９７） ３９（７） ５６７−５８４）。
【０１００】
式（ＶＩＩＩ）の化合物は、
（ａ）式（ＸＩＩ）：
【化３８】

の化合物またはその塩をアルキル化すること；または
（ｂ）式（ＸＩＩＩ）：
【化３９】

の化合物をエステル化すること
を含んでなる方法により調製できる。
【０１０１】
（ａ）の方法では、式（ＩＩ）の化合物から式（Ｉ）の化合物への変換に関して上記で記載したものと同様の条件を用い得る。典型的には、標準的な条件下で、式（ＸＩＩ）の化合物を、式ＦＣＨ_２Ｌ［式中、Ｌは脱離基（例えばハロゲン原子、メシルもしくはトシル基など）を表わす］の化合物（例えば適当なフルオロメチルハライド）と反応させる。好ましくは、このフルオロメチルハライド試薬は、ブロモフルオロメタンである。
【０１０２】
（ｂ）の方法では、式（ＩＸ）の化合物から式（ＶＩ）の化合物への変換に関して上記で用いたものと同様の条件を用い得る。例えば、好適な試薬は、有機塩基（例えばトリエチルアミン）の存在下での２−フロン酸の活性化誘導体、例えば活性化エステル、または好ましくは２−フロイルハライド（例えば２−フロイルクロリド）である。
【０１０３】
式（ＩＸ）および（ＸＩＩＩ）の化合物は、対応するチオ酸（ＸＩ）および（ＸＩＶ）（下記に規定されている）を、既に記載されているものと同様の方法を用いて（例えば、標準的な条件下で、式ＦＣＨ_２Ｌ［式中、Ｌは脱離基（例えばハロゲン原子、メシルもしくはトシル基など）を表わす］の化合物（例えば適当なフルオロメチルハライド）と反応させることによって）アルキル化することにより調製できる。好ましくは、このフルオロメチルハライド試薬はブロモフルオロメタンである。チオ酸（ＸＩ）は公知の化合物である（Ｊ Ｌａｂｅｌｌｅｄ Ｃｏｍｐｄ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ （１９９７） ３９（７） ５６７−５８４）。
【０１０４】
式（ＸＩＩ）の化合物は、式（ＸＩＶ）：
【化４０】

の化合物またはその塩をエステル化することを含んでなる方法により調製できる。
【０１０５】
この方法は、既に記載されているのと同様の方法を用いて行うことができる。例えば、好適な試薬は、有機塩基（例えばトリエチルアミン）の存在下での２−フロン酸の活性化誘導体、例えば活性化エステル、または好ましくは２−フロイルハライド（例えば２−フロイルクロリド）である。
【０１０６】
式（ＸＩＶ）の化合物は、対応するカルボン酸から、例えば式（ＩＶ）の化合物から式（ＩＩＩ）の化合物への変換に関して上記で記載したものと同様の方法により調製できる。上記の対応するカルボン酸は公知である（Ｕｐｊｏｈｎ， ＷＯ ９０／１５８１６）。
【０１０７】
式（Ｉ）の化合物またはその溶媒和物のさらにもう１つの調製方法は、１１−β−ヒドロキシ基が保護またはマスキングされている式（Ｉ）の化合物を脱保護またはアンマスキングすること（ｕｎｍａｓｋｉｎｇ）を含んでなる。このような方法の第１の形態は、式（ＸＶ）：
【化４１】

［式中、Ｐはヒドロキシ保護基を表わす］
の化合物を脱保護することを含んでなる。
【０１０８】
ヒドロキシ保護基Ｐの例は、Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ＪＦＷ ＭｃＯｍｉｅ編（Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ １９７３）の「保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ）」またはＴｈｅｏｄｏｒａ Ｗ ＧｒｅｅｎによるＯｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ （Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ， １９９１）の「保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ）」に記載されている。
【０１０９】
好適なヒドロキシ保護基Ｐの例としては、カーボネート、アルキル（例えばｔ−ブチルまたはメトキシメチル）、アラルキル（例えばベンジル、ｐ−ニトロベンジル、ジフェニルメチルまたはトリフェニルメチル）、複素環基（例えばテトラヒドロピラニル）、アシル（例えばアセチルまたはベンジル）、ならびにトリアルキルシリル（例えばｔ−ブチルジメチルシリル）などのシリル基から選ばれる基が挙げられる。ヒドロキシ保護基は慣用の技法により除去できる。したがって、例えば、カーボネートは、塩基で処理することにより除去でき、アルキル基、シリル基、アシル基および複素環基は、加溶媒分解、例えば酸性もしくは塩基性の条件下での加水分解により除去できる。トリフェニルメチルなどのアラルキル基は、同様に、加溶媒分解、例えば酸性条件下での加水分解により除去できる。ベンジルまたはｐ−ニトロベンジルなどのアラルキル基は、貴金属触媒（例えばパラジウム担持炭）の存在下での水素化分解により切断できる。ｐ−ニトロベンジルは、光分解によっても切断できる。
【０１１０】
１１−β−ヒドロキシ基は、カルボニル基としてマスキングできる。したがって、このような方法の第２の形態は、式（ＸＶＩ）：
【化４２】

の化合物の還元を含んでなる。
【０１１１】
式（Ｉ）の化合物の還元は、例えば、ボロヒドリド（例えば水素化ホウ素ナトリウム）のような水素化物還元剤による処理によって達成できる。
【０１１２】
１１−ケトン（ＸＶＩ）もまたマスキングできる。式（ＸＶＩ）の化合物のマスキングされた誘導体の例としては、（ｉ）例えば式（ＸＶＩ）の化合物をアルコール（例えばメタノール、エタノールもしくはエタン−１，２−ジオール）で処理することにより形成されるケタールなどのケタール誘導体、（ｉｉ）例えば式（ＸＶＩ）の化合物をチオール（例えばメタンチオール、エタンチオールまたはエタン−１，２−ジチオール）で処理することにより形成されるジチオケタールなどのジチオケタール誘導体、（ｉｉｉ）例えば式（ＸＶＩ）の化合物を例えば１−ヒドロキシ−エタン−２−チオールで処理することにより形成されるモノチオケタールなどのモノチオケタール誘導体、（ｉｖ）式（ＸＶＩ）の化合物をアルコールアミン（例えばエフェドリン）で処理することにより形成される誘導体、（ｖ）式（ＸＶＩ）の化合物をアミンで処理することにより形成されるイミン、（ｖｉ）式（ＸＶＩ）の化合物をヒドロキシルアミンで処理することにより形成されるオキシムが挙げられる。本発明者らは、本発明の１つの態様として、このような式（ＸＶＩ）の化合物の誘導体を権利請求するものである。
【０１１３】
これらのマスキングされた誘導体は、慣用の手段により変換してケトンに戻すことができる。例えば、ケタール、イミンおよびオキシムは、希酸で処理することによりカルボニルに変換でき、ジチオケタールは、Ｐ． Ｃ． Ｂｕｌｍａｎ Ｐａｇｅら， （１９８９）， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ， ４５， ７６４３−７６７７およびそこで引用されている参考文献に記載されているような種々の方法によりケトンに変換される。
【０１１４】
式（ＸＶ）の化合物は、
（ａ）式（ＸＶＩＩ）：
【化４３】

［式中、Ｐはヒドロキシ保護基を表わす］
の化合物もしくはその塩をアルキル化するか；または
（ｂ）式（ＸＶＩＩＩ）：
【化４４】

の化合物をエステル化すること
を含んでなる方法により調製できる。
【０１１５】
ステップ（ａ）では、式（ＩＩ）の化合物から式（Ｉ）の化合物への変換に関して上記で記載したものと同様の条件を用い得る。典型的には、標準的な条件下で、式（ＸＶＩＩ）の化合物を、式ＦＣＨ_２Ｌ［式中、Ｌは脱離基（例えばハロゲン原子、メシルもしくはトシル基など）を表わす］の化合物（例えば適当なフルオロメチルハライド）と反応させる。好ましくは、このフルオロメチルハライド試薬は、ブロモフルオロメタンである。
【０１１６】
ステップ（ｂ）では、式（ＩＸ）の化合物から式（ＶＩ）の化合物への変換に関して上記で用いたものと同様の条件を用い得る。例えば、好適な試薬は、有機塩基（例えばトリエチルアミン）の存在下での２−フロン酸の活性化誘導体、例えば活性化エステル、または好ましくは２−フロイルハライド（例えば２−フロイルクロリド）である。
【０１１７】
式（ＸＶＩＩＩ）の化合物は、既に記載されているのと同様の方法を用いて（例えば、標準的な条件下で式ＦＣＨ_２Ｌ［式中、Ｌは脱離基（例えばハロゲン原子、メシルもしくはトシル基など）を表わす］の化合物（例えば適当なフルオロメチルハライド）と反応させることにより）対応するチオ酸をアルキル化することにより調製できる。好ましくは、このフルオロメチルハライド試薬は、ブロモフルオロメタンである。その対応するチオ酸は公知の化合物であるか、または標準的な方法により調製してもよい。あるいはまた、式（ＸＶＩＩＩ）の化合物は、対応するヒドロキシ誘導体の保護により調製することも可能である。
【０１１８】
式（ＸＶＩＩ）の化合物は、式（ＸＩＸ）：
【化４５】

［式中、Ｐはヒドロキシ保護基を表わす］
の化合物またはその塩をエステル化することを含んでなる方法により調製できる。
【０１１９】
この方法は、式（ＩＩＩ）の化合物から式（ＩＩ）の化合物への変換に関して既に記載したものと同様の方法を用いて行うことができる。例えば、好適な試薬は、有機塩基（例えばトリエチルアミン）の存在下での２−フロン酸の活性化誘導体、例えば活性化エステル、または好ましくは２−フロイルハライド（例えば２−フロイルクロリド）である。
【０１２０】
式（ＸＩＸ）の化合物は、対応するヒドロキシ誘導体（ＩＩＩ）を保護することにより調製でき、まず保護したチオ酸を、次に脱保護する。
【０１２１】
式（ＸＶＩ）の化合物は、
（ａ）式（ＸＸ）：
【化４６】

［式中、１１−カルボニル基はマスキングされている］
の化合物またはその塩もしくは誘導体をアルキル化するか；または
（ｂ）式（ＸＸＩ）：
【化４７】

［式中、１１−カルボニル基はマスキングされている］
の化合物もしくは誘導体をエステル化すること
を含んでなる方法により調製できる。
【０１２２】
ステップ（ａ）では、式（ＩＩＩ）の化合物から式（ＩＩ）の化合物への変換に関して上記で記載したものと同様の条件を用い得る。典型的には、標準的な条件下で、式（ＸＸ）の化合物を、式ＦＣＨ_２Ｌ［式中、Ｌは脱離基（例えばハロゲン原子、メシルもしくはトシル基など）を表わす］の化合物（例えば適当なフルオロメチルハライド）と反応させる。好ましくは、このフルオロメチルハライド試薬は、ブロモフルオロメタンである。
【０１２３】
ステップ（ｂ）では、式（ＩＸ）の化合物から式（ＶＩ）の化合物への変換に関して上記で用いたものと同様の条件を用い得る。例えば、好適な試薬は、有機塩基（例えばトリエチルアミン）の存在下での２−フロン酸の活性化誘導体、例えば活性化エステル、または好ましくは２−フロイルハライド（例えば２−フロイルクロリド）である。
【０１２４】
式（ＸＸＩ）の化合物またはその誘導体（但し、１１−ケトン基はマスキングされている）は、既に記載されているのと同様の方法を用いて（例えば標準的な条件下で式ＦＣＨ_２Ｌ［式中、Ｌは脱離基（例えばハロゲン原子、メシルもしくはトシル基など）を表わす］の化合物（例えば適当なフルオロメチルハライド）と反応させることにより）対応するチオ酸をアルキル化することにより調製できる。好ましくは、このフルオロメチルハライド試薬は、ブロモフルオロメタンである。対応するチオ酸は公知の化合物であるか、または先に記載されているのと同様の方法により対応するカルボン酸から調製できる。
【０１２５】
式（ＸＸ）の化合物は、式（ＸＸＩＩ）：
【化４８】

［式中、１１−ケトン基はマスキングされている］
の化合物もしくはその誘導体をエステル化することを含んでなる方法により調製できる。
【０１２６】
この方法は、既に記載されているのと同様の方法を用いて行うことができる。例えば、好適な試薬は、有機塩基（例えばトリエチルアミン）の存在下での２−フロン酸の活性化誘導体、例えば活性化エステル、または好ましくは２−フロイルハライド（例えば２−フロイルクロリド）である。
【０１２７】
式（ＸＸＩＩ）の化合物およびその誘導体（但し、１１−ケトンはマスキングされている）は、対応するヒドロキシ誘導体（ＩＶ）を酸化した後、そのケトンをマスキングし、続いてカルボン酸基をチオ酸へと変換すること（例えば式（ＩＶ）の化合物から式（ＩＩＩ）の化合物への変換を参照）により調製できる。
【０１２８】
式（Ｉ）の化合物またはその溶媒和物の更にもう１つの調製方法は、式（ＸＸＩＩＩ）：
【化４９】

［式中、Ｌは脱離基（例えば塩素、ヨウ素などのフッ素以外のハライド、またはメシレート、トシレート、トリフレートなどのスルホン酸エステル）を表わす］の化合物をフッ素供給源と反応させることを含んでなる。
【０１２９】
好ましくは、このフッ素供給源は、ＫＦなどのフッ素イオンである。この変換についての更なる詳細は、Ｇ．Ｈ． Ｐｈｉｌｌｉｐｐｓら， （１９９４） Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ３７， ３７１７−３７２９またはＪ Ｌａｂｅｌｌｅｄ Ｃｏｍｐｄ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ （１９９７） ３９（７） ５６７−５８４を参照することにより入手できる。
【０１３０】
式（ＸＸＩＩＩ）の化合物は、本明細書中に記載されているのと同様の方法により調製できる。対応する式（ＶＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（ＩＸＡ）、（ＸＶ）および（ＸＶＩ）［式中、−ＣＨ２Ｆ部分は−ＣＨ２Ｌ部分（式中、Ｌはフッ素以外の脱離基を表わす）で置換されている］の新規な中間体は、本発明の１つの態様として権利請求される。
【０１３１】
式（Ｉ）の化合物またはその溶媒和物の更にもう１つの調製方法は、式（Ｉ）の化合物の誘導体（但し、３−カルボニル基は保護またはマスキングされている）の脱保護またはアンマスキングを含んでなる。
【０１３２】
この３−カルボニル基は、１１−カルボニル位のマスキングに関して上記で記載されれているのと同様にしてマスキングできる。したがって、この３−カルボニルは、例えばケタール、モノチオケタール、ジチオケタール、アルコールアミンとの誘導体、オキシムまたはイミンとしてマスキングできる。カルボニル基は、慣用の手段により回復できる。例えば、ケタールは、希酸で処理することによりカルボニルへと変換され、ジチオケタールは、Ｐ． Ｃ． Ｂｕｌｍａｎ Ｐａｇｅら， （１９８９）， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ， ４５， ７６４３−７６７７およびそこで引用されている参考文献に記載されているような種々の方法によりケトンへと変換される。
【０１３３】
ある特定の中間体化合物は新規であり、本発明者らは、これらを本発明の１つの態様として、適当である場合にはそれらの塩および溶媒和物と共に提供する。
【０１３４】
上記で述べたように、本発明者らは、本発明１つの特定の態様として、非溶媒和形態の式（Ｉ）の化合物の調製方法であって、
（ａ）エタノール、メタノール、水、酢酸エチル、トルエン、メチルイソブチルケトンもしくはそれらの混合物などの非溶媒和性溶剤の存在下で、式（Ｉ）の化合物を結晶化させるか；または
（ｂ）溶媒和形態の式（Ｉ）の化合物（例えば、アセトン、イソプロパノール、メチルエチルケトン、ＤＭＦまたはテトラヒドロフランとの溶媒和の形態で）を、例えば加熱により脱溶媒和する
ことを含んでなる前記方法を提供する。
【０１３５】
ステップ（ｂ）において、脱溶媒和は通常、５０℃を超える温度、好ましくは１００℃を超える温度にて行われる。一般に、加熱は減圧下で行われる。
【０１３６】
また、上記の方法により得ることができる非溶媒和形態の式（Ｉ）の化合物も提供される。
【０１３７】
また、本発明の１つの特定の態様として、非溶媒和１型多形としての式（Ｉ）の化合物の調製方法であって、式（Ｉ）の化合物をメチルイソブチルケトン、酢酸エチルまたは酢酸メチルに溶解させ、イソ−オクタンまたはトルエンなどの非溶媒和性抗溶剤の添加により式（Ｉ）の化合物を非溶媒和１型として生産することを含んでなる前記方法も提供される。
【０１３８】
この方法の第１の好ましい実施形態によれば、式（Ｉ）の化合物を、酢酸エチルに溶解させ、非溶媒和１型多形としての式（Ｉ）の化合物を、抗溶剤としてトルエンを添加することにより得ることができる。収量を向上させるために、好ましくは、酢酸エチル溶液を温め、トルエンを添加したら、その混合物を蒸留して酢酸エチルの含有量を低減させる。
【０１３９】
この方法の第２の好ましい実施形態によれば、式（Ｉ）の化合物をメチルイソブチルケトンに溶解させ、非溶媒和１型多形としての式（Ｉ）の化合物を、抗溶剤としてイソオクタンを添加することにより得ることができる。
【０１４０】
また、上記の方法により得ることができる、非溶媒和１型多形としての式（Ｉ）の化合物も提供される。
【０１４１】
非溶媒和２型多形としての式（Ｉ）の化合物の調製方法は、非溶媒和形態の式（Ｉ）の化合物をメタノールまたは無水ジクロロメタンに溶解させ、式（Ｉ）の化合物を非溶媒和２型多形として再結晶化させることを含んでなる。典型的には、式（Ｉ）の化合物を暖めたメタノールまたは無水ジクロロメタンに溶解し、放置冷却する。
【０１４２】
また、上記の方法により得ることができる非溶媒和２型多形としての式（Ｉ）の化合物も提供される。
【０１４３】
非溶媒和３型多形としての式（Ｉ）の化合物の調製方法は、水（典型的には１〜３容量％の水）の存在下で式（Ｉ）の化合物またはその溶媒和物（特にアセトン溶媒和物として）をジクロロメタンに溶解させ、式（Ｉ）の化合物を非溶媒和３型多形として再結晶化させることを含んでなる。
【０１４４】
また、上記の方法により得ることができる非溶媒和３型多形としての式（Ｉ）の化合物も提供される。
【０１４５】
式（Ｉ）の化合物および／またはその溶媒和物もしくは多形の利点としては、この物質が優れた抗炎症特性、ならびに予測可能な薬物動態的および薬力学的挙動、および魅力的な副作用プロフィールを示すと考えられ、ヒト患者における慣用の治療処方計画に適合する、という事実を挙げることができる。更なる利点としては、この物質が製造および保存を容易にする望ましい物理的および化学的特性を有する、という事実を挙げることができる。
【０１４６】
以下の非限定的な実施例により本発明を説明する：
実施例
概略
^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを４００ＭＨｚで記録した。化学シフトはテトラメチルシランに対するｐｐｍで表わす。次の略語を用いて、シグナルの多重度を記載する：ｓ（一重項）、ｄ（二重項）、ｔ（三重項）、ｑ（四重項）、ｍ（多重項）、ｄｄ（二重項の二重項）、ｄｄｄ（二重項の二重項の二重項）、ｄｔ（三重項の二重項）、およびｂ（ブロード（ｂｒｏａｄ））。Ｂｉｏｔａｇｅとは、フラッシュ１２ｉクロマトグラフィーモジュールで実施するＫＰ−Ｓｉｌを含む前もって充填されたシリカゲルカートリッジをいう。ＬＣＭＳはＳｕｐｅｒｃｏｓｉｌ ＬＣＡＢＺ＋ＰＬＵＳカラム（３．３ｃｍ×４．６ｍｍ内径）で実施し、０．１％のＨＣＯ_２Ｈと０．０１Ｍ 酢酸アンモニウムの水溶液（溶剤Ａ）および０．０５％のＨＣＯ_２Ｈと５％の水とのアセトニトリル中の溶液（溶剤Ｂ）で、次の溶出勾配を用い、３ｍｌ／分の流速で溶出させた：０〜０．７分は０％のＢ、０．７〜４．２分は１００％のＢ、４．２〜５．３分は０％のＢ、５．３〜５．５分は０％のＢ。質量スペクトルをＦｉｓｏｎｓ ＶＧ Ｐｌａｔｆｏｒｍスペクトロメーターで、エレクトロスプレー正／負モード（ＥＳ＋ｖｅおよびＥＳ−ｖｅ）を用いて記録した。
【０１４７】
ＤＳＣおよびＴＧＡプロフィールは、Ｎｅｔｚｓｃｈ ＳＴＡ４４９Ｃ同時熱分析計を使用し、非密封パンを用い、窒素ガス流下で１０℃／分の熱勾配で得た。
【０１４８】
吸湿特性は、Ｈｉｄｅｎ Ｉｇａｓｏｒｂ吸水微量天秤を用いて得た。このプログラムは、相対湿度（ＲＨ）を０〜９０％のＲＨまで段階的に増大させ、次に０％のＲＨまで１０％のＲＨずつ段階的に低下させるものである。
【０１４９】
図１および２に示すＸＲＰＤ分析は、Ｐｈｉｌｌｉｐｓ Ｘ’ｐｅｒｔ ＭＰＤ粉末回析計（シリアル番号ＤＹ６６７）で行った。この方法は、０．０２°２θずつ段階的に２〜４５°２θで、各ステップが１秒の収集時間で行った。図４に示すＸＲＰＤ分析は、Ａｎｔｏｎ Ｐａｒｒ ＴＴＫサーマルアクセサリーを備える同じ装置を用い、０．０４°２θずつ段階的に２〜３５°２θで１秒の収集時間で行う方法を用いた。
【０１５０】
中間体
中間体１： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸
６α，９α−ジフルオロ−１１β， １７α−ジヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸（ＧＢ ２０８８８７７Ｂに記載されている手順に従って調製したもの）（１８ｇ、４３．６４ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（２００ｍｌ）およびトリエチルアミン（１５．９４ｍｌ、１１４ｍｍｏｌ）中の溶液を、５℃未満にて、２−フロイルクロリド（１１．２４ｍｌ、１１４ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（１００ｍｌ）中の溶液で約４０分間かけて処理した。この溶液を５℃未満にて３０分間撹拌した。得られた固体を濾過により回収し、３．５％の炭酸水素ナトリウム水溶液、水、１Ｍ 塩酸および水で順次洗浄し、６０℃にて減圧乾燥して、クリーム色の固体を得た。ジクロロメタン濾液を、３．５％の炭酸水素ナトリウム溶液、水、１Ｍ 塩酸、水で順次洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発させて、クリーム色の固体を得て、これを上記で単離されたものと合わせた。合わせた固体（２６．９ｇ）をアセトン（４５０ｍｌ）に懸濁し、撹拌した。ジエチルアミン（１６．８ｍｌ、１６２ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で４．５時間撹拌した。この混合物を濃縮し、沈殿物を濾過により回収し、少量のアセトンで洗浄した。洗浄液および濾液を合わせ、濃縮し、シリカゲルＢｉｏｔａｇｅカラム上にローディングし（ｌｏａｄｅｄ）、これを２４：１のクロロホルム：メタノールで溶出させた。より極性の高い成分を含む画分を合わせ、蒸発させて、クリーム色の固体を得た。これを上記で単離した固体と合わせ、減圧乾燥して、淡ベージュ色の固体（１９．７ｇ）を得た。これを温水に溶解し、濃塩酸でｐＨを２に調整し、この混合物を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発させ、５０℃にて乾燥した後で、表題化合物をクリーム色の固体として得た（１８．０８１ｇ、８２％）：ＬＣＭＳ保持時間 ３．８８分、ｍ／ｚ ５０７ＭＨ^＋、ＮＭＲδ（ＣＤＣｌ_３）は７．６１（１Ｈ，ｍ）， ７．１８−７．１２（２Ｈ，ｍ）， ６．５２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ４，２Ｈｚ）， ６．４６（１Ｈ，ｓ）， ６．４１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１０，２Ｈｚ）， ５．４７および５．３５（１Ｈ，２ｍ）， ４．４７（１Ｈ，ｂｄ，Ｊ９Ｈｚ）， ３．３７（１Ｈ，ｍ）， １．５５（３Ｈ，ｓ）， １．２１（３Ｈ，ｓ）， １．０６（３Ｈ，ｄ，Ｊ７Ｈｚ）を含む。
【０１５１】
中間体１： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸（第１の別法）
６α，９α−ジフルオロ−１１β， １７α−ジヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸（ＧＢ ２０８８８７７Ｂに記載されている手順に従って調製したもの）（１重量部、４９．５ｇ）のアセトン（１０倍容量）中の撹拌懸濁液を０〜５℃に冷却し、トリエチルアミン（０．５１重量部、２．１当量）で処理し、その温度を５℃以下に維持し、０〜５℃で５分間撹拌する。次に、２−フロイルクロリド（０．６５重量部、２．０５当量）を２０分間かけて添加し、反応温度を０〜５℃に維持する。この反応物を０〜５℃で３０分間撹拌し、次にＨＰＬＣによる分析用としてサンプリングする。ジエタノールアミン（１．０２重量部、４当量）のメタノール（０．８倍容量）中の溶液を約１５分かけて添加した後、メタノール（０．２倍容量）でライン洗浄し、その反応物を０〜５℃で１時間撹拌する。この反応物を、ＨＰＬＣによる分析用に再度サンプリングし、次に約２０℃まで温め、水（１．１重量部）で処理する。次に、反応混合物を、反応温度を２５℃以下に維持しながら、ＨＣｌ（ＳＧ１．１８（１１．５Ｍ）、１倍容量）の水（１０倍容量）中の溶液で約２０分間にわたり処理する。この懸濁液を２０〜２３℃で少なくとも３０分間撹拌した後、濾過する。濾過ケーキを水で洗浄する（３回×２倍容量）。生成物を約６０℃で一夜減圧乾燥して、表題化合物を白色固体として得た（５８．７ｇ、９６．５％）。
【０１５２】
中間体１： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸（第２の別法）
６α，９α−ジフルオロ−１１β， １７α−ジヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸（ＧＢ ２０８８８７７Ｂに記載されている手順に従って調製したもの）（１重量部、４９．５ｇ）のアセトン（１０倍容量）中の撹拌懸濁液を０〜５℃に冷却し、トリエチルアミン（０．５１重量部、２．１当量）で処理し、その温度を５℃以下に維持し、０〜５℃で５分間撹拌する。次に、２−フロイルクロリド（０．６５重量部、２．０５当量）を２０分間かけて添加し、反応温度を０〜５℃に維持する。この反応混合物を少なくとも３０分間撹拌し、水（１０倍容量）で希釈し、反応温度を０〜５℃の範囲に維持する。得られた沈殿物を濾過により回収し、アセトン／水（５０／５０ ２倍容量）および水（２回×２倍容量）で順次洗浄する。生成物を約５５℃で一夜減圧乾燥することで、６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−イル Ｓ−（２−フラニルカルボニル）チオ無水物が白色固体として残る（７０．８ｇ、９８．２％）（ＮＭＲδ（ＣＤ_３ＣＮ） ０．９９（３Ｈ，ｄ）（Ｊ＝７．３Ｈｚ）， １．２４（３Ｈ，ｓ）， １．３８（１Ｈ，ｍ），（Ｊ＝３．９Ｈｚ）， １．５４（３Ｈ，ｓ）， １．６７（１Ｈ，ｍ）， １．８９（１Ｈ，ブロード ｄ）（Ｊ＝１５．２Ｈｚ）， １．９−２．０（１Ｈ，ｍ）， ２．２９−２．４５（３Ｈ，ｍ）， ３．３９（１Ｈ，ｍ）， ４．３３（１Ｈ，ｍ）， ４．９３（１Ｈ，ブロード ｓ）， ５．５３（１Ｈ，ｄｄｄ）（Ｊ＝６．９，１．９Ｈｚ； Ｊ_ＨＦ＝５０．９Ｈｚ）， ６．２４（１Ｈ，ｍ）， ６．２９（１Ｈ，ｄｄ）（Ｊ＝１０．３，２．０Ｈｚ）， ６．６３（２Ｈ，ｍ）， ７．２４−７．３１（３Ｈ，ｍ）， ７．７９（１Ｈ，ｄｄ）（Ｊ＝＜１Ｈｚ）， ７．８６（１Ｈ，ｄｄ）（Ｊ＝＜１Ｈｚ））。この生成物の一部（０．５６ｇ）を６α，９α−ジフルオロ−１１β，１７α−ジヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸（０．４１ｇ）と１：１のモル比でＤＭＦ中（総ステロイド投入物に関して１０倍容量）で混合する。この反応混合物をトリエチルアミン（約２．１当量）で処理し、この混合物を約２０℃で約６時間撹拌する。この反応混合物に過剰な濃ＨＣｌ（０．５倍容量）を含有する水（５０倍容量）を添加し、得られた沈殿物を濾過により回収する。ベッドを水（２回×５倍容量）で洗浄し、約５５℃で一夜減圧乾燥することで、表題化合物が白色固体として残る（０．９９ｇ、１０２％）。
【０１５３】
中間体 １Ａ ： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸ジイソプロピルエチルアミン塩
６α，９α−ジフルオロ−１１β， １７α−ジヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸（ＧＢ ２０８８８７７Ｂに記載されている手順に従って調製したもの）（４９．５ｇ）の酢酸メチル（５００ｍｌ）中の撹拌懸濁液をトリエチルアミン（３５ｍｌ）で処理し、反応温度を０〜５℃の範囲に維持する。２−フロイルクロリド（２５ｍｌ）を添加し、この混合物を０〜５℃で１時間撹拌する。ジエタノールアミン（５２．８ｇ）のメタノール（５０ｍｌ）中の溶液を添加し、この混合物を０〜５℃で少なくとも２時間撹拌する。希塩酸（約１Ｍ、５５０ｍｌ）を添加して、反応温度を１５℃以下に維持し、この混合物を１５℃で撹拌する。有機相を分離し、水相を酢酸メチル（２回×２５０ｍｌ）で逆抽出する。全ての有機相を合わせ、ブライン（５回×２５０ｍｌ）で順次洗浄し、ジ−イソプロピルエチルアミン（３０ｍｌ）で処理する。この反応混合物を大気圧での蒸留により約２５０ｍｌの容量まで濃縮し、２５〜３０℃まで冷却する（通常なら蒸留／その後の冷却の間に所望の生成物の結晶化が起こる）。第三級ブチルメチルエーテル（ＴＢＭＥ）（５００ｍｌ）を添加し、そのスラリーを更に冷却し、０〜５℃で少なくとも１０分間熟成させる。生成物を濾別し、冷ＴＢＭＥ（２回×２００ｍｌ）で洗浄し、約４０〜５０℃で減圧乾燥する（７５．３ｇ、９８．７％）。ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３） δ：７．５４−７．４６（１Ｈ，ｍ）， ７．２０−７．１２（１Ｈ，ｄｄ）， ７．０７−６．９９（１Ｈ，ｄｄ）， ６．４８−６．４１（２Ｈ，ｍ）， ６．４１−６．３２（１Ｈ，ｄｄ）， ５．５１−５．２８（１Ｈ，ｄｄｄｄ ^２Ｊ_Ｈ−Ｆ ５０Ｈｚ）， ４．４５−４．３３（１Ｈ，ｂｄ）， ３．９２−３．７３（３Ｈ，ｂｍ）， ３．２７−３．１４（２Ｈ，ｑ）， ２．６４−２．１２（５Ｈ，ｍ）， １．８８−１．７１（２Ｈ，ｍ）， １．５８−１．１５（３Ｈ，ｓ）， １．５０−１．３８（１５Ｈ，ｍ）， １．３２−１．２３（１Ｈ，ｍ）， １．２３−１．１５（３Ｈ，ｓ）， １．０９−０．９９（３Ｈ，ｄ）。
【０１５４】
中間体 １Ｂ ： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸トリエチルアミン塩
中間体１（３０ｇ）の酢酸エチル（９００ｍｌ）中の撹拌懸濁液を、トリエチルアミン（１．０５モル当量、８．６ｍｌ）で処理し、この混合物を約２０℃で１．５時間撹拌する。沈殿物を濾別し、酢酸エチル（２回×２倍容量）で洗浄し、４５℃で１８時間減圧乾燥して、表題化合物を白色固体として得る（２８．８ｇ、８０％）。ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３） δ：７．５９−７．４７（１Ｈ，ｍ）， ７．２３−７．１３（１Ｈ，ｄｄ）， ７．０８−６．９９（１Ｈ，ｄ）， ６．５４−６．４２（２Ｈ，ｍ）， ６．４２−６．３２（１Ｈ，ｄｄ）， ５．５５−５．２６（１Ｈ， ｄｄｄｄ ^２Ｊ_Ｈ−Ｆ ５０Ｈｚ）， ４．４７−４．３３（１Ｈ，ｂｄ）， ３．８８−３．７０（１Ｈ，ｂｍ）， ３．３１−３．０９（６Ｈ，ｑ）， ２．６６−２．１４（５Ｈ，ｍ）， １．９３−１．６９（２Ｈ，ｍ）， １．６１−１．４８（３Ｈ，ｓ）， １．４３−１．３３（９Ｈ，ｔ）， １．３３−１．２６（１Ｈ，ｍ）， １．２６−１．１５（３Ｈ，ｓ）， １．１１−０．９７（３Ｈ，ｄ）。
【０１５５】
実施例
実施例１： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルの非溶媒和１型
中間体１（２．５ｇ、４．９４ｍｍｏｌ）の懸濁液を無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２５ｍｌ）に溶解し、炭酸水素ナトリウム（４６５ｍｇ、５．５３ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を−２０℃で撹拌し、ブロモフルオロメタン（０．７７ｍｌ、６．３７ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を−２０℃で２時間撹拌した。ジエチルアミン（２．５７ｍｌ、２４．７ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を−２０℃で３０分間撹拌した。この混合物を２Ｍ 塩酸（９３ｍｌ）に添加し、３０分間撹拌した。水（３００ｍｌ）を添加し、沈殿物を濾過により回収し、水で洗浄し、５０℃で減圧乾燥して、白色固体を得て、これをアセトン／水から再結晶化させ（これにより６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステルのアセトン溶媒和物が得られる）、５０℃で減圧乾燥して、表題化合物を得た（２．３５１ｇ、８８％）：ＬＣＭＳ保持時間３．６６分、ｍ／ｚ ５３９ ＭＨ^＋、ＮＭＲ δ（ＣＤＣｌ_３）は７．６０（１Ｈ，ｍ）， ７．１８−７．１１（２Ｈ，ｍ）， ６．５２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ４．２Ｈｚ）， ６．４６（１Ｈ，ｓ）， ６．４１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１０，２Ｈｚ）， ５．９５および５．８２（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ５１，９Ｈｚ）， ５．４８および５．３５（１Ｈ，２ｍ）， ４．４８（１Ｈ，ｍ）， ３．４８（１Ｈ，ｍ）， １．５５（３Ｈ，ｓ）， １．１６（３Ｈ，ｓ）， １．０６（３Ｈ，ｄ，Ｊ７Ｈｚ）を含む。
【０１５６】
薬理学的活性
ｉｎ ｖｉｔｒｏ での薬理学的活性
薬理学的活性を、グルココルチコイドアゴニスト活性の機能的ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイで評価した。これは一般に、ｉｎ ｖｉｖｏでの抗炎症活性または抗アレルギー活性の予測である。
【０１５７】
このセクションでの実験では、式（Ｉ）の化合物を非溶媒和１型として用いた。
【０１５８】
機能的アッセイは、Ｋ．Ｐ． Ｒａｙら， Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ． （１９９７）， ３２８， ７０７−７１５に記載されているものに基づいた。ｓＰＡＰ（分泌型アルカリホスファターゼ）に連結させたＥＬＡＭ遺伝子プロモーターからのＮＦ−κＢ応答性エレメントを含むレポーター遺伝子で安定にトランスフェクトしたＡ５４９細胞を、適当な用量の試験化合物で３７℃にて１時間処理した。次に、この細胞を腫瘍壊死因子（ＴＮＦ、１０ｎｇ／ｍｌ）で１６時間刺激し、この時点にて、産生したアルカリホスファターゼの量を標準的な比色アッセイにより測定する。用量反応曲線を作成し、そこからＥＣ_５０値を評価した。
【０１５９】
この試験では、実施例１の化合物は１ｎＭ未満のＥＣ_５０値を示した。
【０１６０】
グルココルチコイド受容体（ＧＲ）は、少なくとも２つの異なる機構で、すなわち、遺伝子プロモーター内にある特定の配列へのＧＲの直接結合により遺伝子発現をアップレギュレートすること、および別の転写因子（例えばＮＦκＢもしくはＡＰ−１）によって駆動される遺伝子発現をそれら因子とＧＲとの直接的な相互作用によりダウンレギュレートすることにより機能し得る。
【０１６１】
上記の方法の変法では、これらの機能をモニターするために、２種のレポータープラスミドを作製して、トランスフェクションによりＡ５４９ヒト肺上皮細胞に別個に導入した。第１の細胞系は、ＴＮＦαで刺激されると転写因子ＮＦκＢの活性化に特異的に応答する合成プロモーターの制御下にホタル・ルシフェラーゼ・レポーター遺伝子を含む。第２の細胞系は、３コピーの共通グルココルチコイド応答エレメントを含んでグルココルチコイドによる直接刺激に応答する合成プロモーターの制御下にウミシイタケ・ルシフェラーゼ・レポーター遺伝子を含む。転写活性化および転写抑制の同時測定は、９６ウェルプレートでこれら２種の細胞系を１：１の割合で混合し（４０，０００個の細胞／ウェル）、３７℃で一夜増殖することにより行った。試験化合物をＤＭＳＯに溶解し、細胞に０．７％の最終ＤＭＳＯ濃度で添加した。１時間インキュベートした後、０．５ｎｇ／ｍｌのＴＮＦα（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を添加し、３７℃で更に１５時間後に、ホタルおよびウミシイタケ・ルシフェラーゼのレベルをＰａｃｋａｒｄ Ｆｉｒｅｌｉｔｅキットを用い、製造元の説明書に従って測定した。用量反応曲線を作成し、そこから、ＥＣ_５０値を求めた。
【０１６２】

【０１６３】
ｉｎ ｖｉｖｏ での薬理学的活性
ｉｎ ｖｉｖｏでの薬理学的活性は、オボアルブミン感作Ｂｒｏｗｎ Ｎｏｒｗａｙラットの好酸球増加症モデルにおいて評価した。このモデルは、アレルゲン誘導肺好酸球増加症（喘息における肺炎症の主な要素）によく似せるように設計されている。
【０１６４】
このセクションでの実験では、式（Ｉ）の化合物を非溶媒和１型として用いた。
【０１６５】
化合物（Ｉ）は、このモデルにおいて、生理食塩水中の気管内（ＩＴ）用懸濁液として投薬した後にオボアルブミンチャレンジを行った後で、肺好酸球増加症の用量依存的な抑制を生じた。３０μｇの化合物（Ｉ）を単回投与した後で有意な抑制が達成され、その応答は、同じ研究で同等用量のプロピオン酸フルチカゾンを用いて見られるよりも有意に（ｐ＝０．０１６）高いものであった（化合物（Ｉ）では６９％の抑制であるのに対し、プロピオン酸フルチカゾンでは４１％の抑制）。
【０１６６】
胸腺退縮のラットモデルでは、１００μｇの化合物（Ｉ）を１日３回ＩＴ投与すると、同じ研究で同等用量のプロピオン酸フルチカゾンを用いた場合よりも有意に小さな胸腺重量の減少を誘導した（ｐ＝０．００４）（化合物（Ｉ）では胸腺重量は６７％減少したのに対し、プロピオン酸フルチカゾンでは７８％減少した）。
【０１６７】
これらの結果を合わせて考えると、化合物（Ｉ）はプロピオン酸フルチカゾンと比較して優れた治療指数を示す。
【０１６８】
ラットおよびヒトの肝細胞における ｉｎ ｖｉｔｒｏ 代謝
化合物（Ｉ）をラットおよびヒトの肝細胞と共にインキュベートすると、この化合物がプロピオン酸フルチカゾンと同じ様式で代謝され、その場合に１７−βカボン酸（Ｘ）が産生する唯一の重要な代謝産物であることが示される。化合物（Ｉ）をヒトの肝細胞と共にインキュベート（３７℃、１０μＭの薬物濃度、３人の被験者からの肝細胞、２００，０００〜７００，０００個の細胞／ｍＬ）した際の、この代謝産物の出現速度を調べたところ、化合物（Ｉ）がプロピオン酸フルチカゾンよりも約５倍速く代謝されることが示される：

【０１６９】
代謝産物産生中央値は、化合物（Ｉ）では１０２〜１１８ｐｍｏｌ／時間であり、プロピオン酸フルチカゾンでは１８．８〜２３．０ｐｍｏｌ／時間である。
【０１７０】
ラットにおける静脈内（ ＩＶ ）および経口投与後の薬物動態
化合物（Ｉ）を、雄性Ｗｉｓｔａｒ Ｈａｎラットに経口投与（０．１ｍｇ／ｋｇ）およびＩＶ投与（０．１ｍｇ／ｋｇ）し、薬物動態パラメーターを測定した。化合物（Ｉ）は、ごくわずかな経口バイオアベイラビリティ（０．９％）しか示さず、血漿クリアランスは４７．３ｍＬ／分／ｋｇであり、肝臓血流に近かった（プロピオン酸フルチカゾンの血漿クリアランス＝４５．２ ｍＬ／分／ｋｇ）。
【０１７１】
ブタにおける気管内乾燥粉末投与後の薬物動態
麻酔したブタ（２頭）に、化合物（Ｉ）（１ｍｇ）とプロピオン酸フルチカゾン（１ｍｇ）との均一な混合物を乳糖（１０％ｗ／ｗ）中の乾燥粉末ブレンドとして気管内投与した。投与後８時間まで、一連の血液サンプルを取った。ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法を用いる抽出および分析に従って、化合物（Ｉ）およびプロピオン酸フルチカゾンの血漿レベルを求めた（この方法の定量下限は、化合物（Ｉ）およびプロピオン酸フルチカゾンについてそれぞれ１０ｐｇ／ｍＬおよび２０ｐｇ／ｍＬであった）。これらの方法を用いた場合、化合物（Ｉ）は投与の２時間後まで定量可能であり、プロピオン酸フルチカゾンは投与の８時間後まで定量可能であった。最大血漿濃度は、双方の化合物とも投与後１５分以内に観察された。ＩＶ投与（０．１ｍｇ／ｋｇ）から得られた血漿半減期のデータを用いて、化合物（Ｉ）についてＡＵＣ（０〜無限大）値を算出した。これは、ＩＴ投与後２時間までにのみ規定される化合物（Ｉ）の血漿プロフィールを補い、化合物（Ｉ）とプロピオン酸フルチカゾンの間のデータ限界によるバイアスを取り除くものである。
【０１７２】
Ｃ_ｍａｘおよびＡＵＣ（０〜無限大）の値から、プロピオン酸フルチカゾンと比較して化合物（Ｉ）への全身暴露が著しく低下することが示される：

【０１７３】
化合物（Ｉ）およびプロピオン酸フルチカゾンの双方についての薬物動態パラメーターは、これら２種の化合物の混合物０．１ｍｇ／ｋｇを静脈内投与した後の麻酔したブタでは同じであった。これら２種のグルココルチコイドのクリアランスは、この実験ブタモデルでは類似である。
【０１７４】
実施例１： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルの非溶媒和１型（第１の別法）
中間体１Ａ（１２．６１ｇ、１９．８ｍｍｏｌ；１０ｇの中間体１と同等）の酢酸エチル（２３０ｍｌ）および水（５０ｍｌ）中の流動性懸濁液を相間移動触媒（塩化ベンジルトリブチルアンモニウム、１０ｍｏｌ％）で処理し、３℃まで冷却し、ブロモフルオロメタン（１．１０ｍｌ、１９．５ｍｍｏｌ、０．９８当量）で処理し、予め冷却しておいた（０℃）酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）（２０ｍｌ）で洗浄する。懸濁液を一夜撹拌し、放置して１７℃まで温かくする。水相を分離し、有機相を１Ｍ ＨＣｌ（５０ｍｌ）、１％ｗ／ｖのＮａＨＣＯ_３溶液（３回×５０ｍｌ）および水（２回×５０ｍｌ）で順次洗浄する。この酢酸エチル溶液を、蒸留物が約７３℃の温度に達するまで大気圧で蒸留し、その時点でトルエン（１５０ｍｌ）を添加する。蒸留は、全ての残留するＥｔＯＡｃが除去されるまで大気圧で継続する（およその蒸留温度は１０３℃）。得られた懸濁液を冷却し、１０℃未満で熟成し、濾過する。ベッドをトルエン（２回×３０ｍｌ）で洗浄し、生成物を減圧下で６０℃にて一定重量になるまでオーブン乾燥して、表題化合物を得る（８．７７ｇ、８２％）。
【０１７５】
実施例１： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルの非溶媒和１型（第２の別法）
６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステルのアセトン溶媒和物（例えば実施例１１に従って調製したもの）（５０．０ｇ）のアセトン（１５００ｍｌ）および水（７５ｍｌ）中の懸濁液を加熱還流した。得られた混合物を温式濾過（Ｗｈａｔｍａｎ ５４濾紙）により清澄にし、その間に、多少の固体が濾液中で結晶化した。追加のアセトン（２００ｍｌ）を濾液に添加して、還流下で明色の溶液を得た。この溶液を、濁りが認められるまで大気圧で還流中蒸留した（約７５０ｍｌの溶剤が回収された）。この暖かい溶液にトルエン（１０００ｍｌ）を添加し、蒸留を大気圧で継続して、約９８℃の温度で結晶化させた。溶剤の蒸留を、反応温度が１０５℃に達するまで継続した（約９４５ｍｌの溶剤が回収された）。この混合物を周囲温度まで冷却し、更に冷却して、１０℃未満で１０分間熟成した。生成物を濾別し、トルエン（１５０ｍｌ）で洗浄し、吸引乾燥した。生成物を約６０℃で１６時間減圧乾燥することで、表題化合物が濃白色固体として残った（３７．８ｇ、８３．７％）。
【０１７６】
実施例１の生成物のＸＲＰＤパターンを図１に示す。ＤＳＣおよびＴＧＡのプロフィールを図３に示す。
【０１７７】
実施例２： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルの非溶媒和２型
６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステル（例えば実施例１の第１の方法に従って調製したもの）（６．０ｇ）のジクロロメタン（１８０ｍｌ）中の懸濁液を加熱還流して、明色の溶液を得た。この溶液を温式濾過（Ｗｈａｔｍａｎ ５４濾紙）により清澄し、その溶液を大気圧で蒸留して（約１００ｍｌの溶剤が回収された）、還流下で結晶化させた。この混合物を還流下で約３０分間保持し、周囲温度までゆっくり冷却した。この混合物を更に冷却し、１０〜２０℃で２時間熟成した。このスラリーを１０℃以下に冷却し、生成物を濾別し、吸引乾燥し、約６０℃で一夜減圧乾燥することで、白色固体が残った（４．３４ｇ、７１％）。
【０１７８】
６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステルの非溶媒和２型のより純粋なサンプルは、６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステル（例えば実施例１の第１の方法に従って調製したもの）をメタノール（６０倍容量、大気圧で約３７．５倍容量にまで蒸留したもの）中で冷却結晶化することにより得られた。この生成物を濾過により単離し、減圧下で６０℃にて１６時間オーブン乾燥することで、白色の静電固体が残った（４．３４ｇ、７１％）。
【０１７９】
実施例２の生成物のＸＲＰＤパターンを図１に示す。
【０１８０】
実施例３： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルの非溶媒和３型
６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステルのアセトン溶媒和物（例えば実施例１１に従って調製したもの）（２０．０ｇ）のジクロロメタン（８００ｍｌ、４０倍容量）および水（１０ｍｌ、０．５倍容量）中の懸濁液を加熱還流して、明色の溶液を得た。この溶液を温式濾過（Ｗｈａｔｍａｎ ５４濾紙）により清澄にし、その間に、多少の固体が濾液中で結晶化し、これを加熱還流の際に十分に溶解させた。この溶液を大気圧で蒸留し（約４００ｍｌの溶剤が回収された）、周囲温度まで放置冷却した。この混合物を更に冷却し、１０℃未満で１０分間熟成した。生成物を濾別し、吸引乾燥し、約６０℃で一夜減圧乾燥することで、白色固体が残った（１２．７ｇ、７０％）。
【０１８１】
実施例３の生成物のＸＲＰＤパターンを図１および図４に示す。
【０１８２】
実施例４：１型、２型および３型の非溶媒和 ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルの相互変換
１型および２型の水中の混合物を周囲温度でスラリー化したところ、これらの成分が経時的に完全に１型へと変換されていくことが判明した。ＸＲＰＤの結果を図２に示す。１型および２型のエタノール中の混合物を周囲温度でスラリー化することにより、同様の結果が得られた。これらの結果から、１型が、これら２種の形態の中で、熱力学的により安定な多形形態であると判断することができる。
【０１８３】
３型の熱的ＸＲＰＤ研究を行ったところ、図４に示すようになった。温度および時間のプロフィールを図５に示し、図５に示す平衡点において図４に示す５つのトレースが得られた。これらの結果から、３型が、温度が上昇するにつれて、まず２型へと変換され、次に１型へと変換されることがことが示される。
【０１８４】
実施例５：１型、２型および３型の非溶媒和 ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルの吸湿
３種の形態の吸湿特性は、段階的に上昇させ次に低下させた湿度に暴露した際の固体の重量変化をモニターすることにより測定した。得られた結果は次のとおりであった：
１型：２５℃にて０〜９０％の相対湿度の範囲にわたり、０．１８％ｗ／ｗの水分を取り込む。
２型：２５℃にて０〜９０％の相対湿度の範囲にわたり、１．１〜２．４％ｗ／ｗの水分を取り込む。
３型：２５℃にて０〜９０％の相対湿度の範囲にわたり、１．２〜２．５％ｗ／ｗの水分を取り込む。
【０１８５】
実施例６：１型および３型の非溶媒和 ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカ ルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルの溶解エンタルピー
ＤＭＳＯおよびアセトニトリルへの溶解エンタルピーを２５℃にて測定した。結果は次のとおりであった：

【０１８６】
これらの結果から、３型から１型への転移エンタルピーが約５．１〜６．７ｋＪ／ｍｏｌであることが決定できる。転移エンタルピーが小さいと仮定すると、双方の形態は非溶媒和型であるので、転移エンタルピーは転移自由エネルギーと等しいとすることができる。したがって、これらのデータから、１型が２５℃において熱力学的に最も安定な形態であることが示唆される。
【０１８７】
実施例７： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルのメチルエチルケトン溶媒和物
６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステル（例えば実施例１に従って調製したもの）（４００ｍｇ）のメチルエチルケトン（３．２ｍｌ）中の懸濁液を加熱還流して、透明な溶液を得る。溶剤の一部を大気圧にて留去し（約１ｍｌ）、混合物を約２０℃まで冷却する。結晶化した生成物を濾別し、約２０℃で減圧乾燥することで、表題化合物が白色固体として残った（３１０ｍｇ、６８％）。ＮＭＲδ（ＣＤＣｌ_３）は、親化合物について実施例１で記載したピークならびに次の追加の溶剤ピークを含む：２．４５（２Ｈ，ｑ）， ２．１４（３Ｈ，ｓ）， １．０６（３Ｈ，ｔ）。
【０１８８】
実施例８： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒ ドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルのイソプロパノール溶媒和物
６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステル（例えば実施例１に従って調製したもの）（１５０ｍｇ）のイソプロパノール（１５ｍｌ）中の溶液を約８週間にわたり放置してゆっくりと結晶化させる。得られた塊の結晶を濾過により単離することで、表題化合物が白色固体として残る。ＮＭＲδ（ＣＤＣｌ_３）は、親化合物について実施例１で記載したピークならびに次の追加の溶剤ピークを含む：４．０３（１Ｈ，ｍ）， １．２０（６Ｈ，ｄ）。
【０１８９】
実施例９： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルのテトラヒドロフラン溶媒和物
６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステル（例えば実施例１に従って調製したもの）（１５０ｍｇ）のＴＨＦ（２０倍容量）中の懸濁液を温めて、透明な溶液を得る。溶剤を６日間にわたりゆっくり蒸発させることで、表題化合物が白色固体として残る。あるいはまた、このＴＨＦ溶液を、重炭酸カリウム（２％ｗ／ｗ）の水（５０倍容量）中の溶液に滴下し、沈殿した生成物を濾過により回収して、表題化合物を白色固体として得る。ＮＭＲδ（ＣＤＣｌ_３）は、親化合物について実施例１で記載したピークならびに次の追加の溶剤ピークを含む：３．７４（４Ｈ，ｍ）， １．８５（４Ｈ，ｍ）。
【０１９０】
実施例９： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルのテトラヒドロフラン溶媒和物（別法）
６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸トリエチルアミン塩（例えば中間体１Ｂに従って調製したもの）（１．２ｇ）のＴＨＦ（１０ｍｌ）中の流動性懸濁液を、相間移動触媒（臭化テトラブチルアンモニウム、典型的には８〜１４ｍｏｌ％）で処理し、約３℃まで冷却し、ブロモフルオロメタン（０．９８当量）で処理する。この懸濁液を２〜５時間撹拌し、放置して１７℃まで温かくする。この反応混合物を水（３０倍容量）に注ぎ、約１０℃で３０分間撹拌し、濾別する。回収した固体を水（４回×３倍容量）で洗浄し、生成物を減圧下で６０℃にて一夜オーブン乾燥して、表題化合物を白色固体として得る（０．８５ｇ、８７％）。
【０１９１】
実施例 １０ ： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルの ＤＭＦ 溶媒和物
中間体１（４．５ｇ、８．８８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３１ｍｌ）中の混合物を、重炭酸カリウム（０．８９ｇ、８．８８ｍｍｏｌ）で処理し、この混合物を−２０℃まで冷却する。ブロモフルオロメタン（０．９５ｇ、８．５０ｍｍｏｌ、０．９８当量）のＤＭＦ（４．８ｍｌ）中の溶液（０℃）を添加し、混合物を−２０℃で４時間撹拌する。次に、この混合物を−２０℃で更に３０分間撹拌し、２Ｍ 塩酸（１００ｍｌ）に添加し、０〜５℃で更に３０分間撹拌する。沈殿物を減圧濾過により回収し、水で洗浄し、５０℃で乾燥して、表題化合物を得る（４．４７ｇ、８２％）。ＮＭＲδ（ＣＤ_３ＯＤ）は、親化合物について実施例１で記載したピークならびに次の追加の溶剤ピークを含む：７．９８（１Ｈ，ｂｓ）， ２．９９（３Ｈ，ｓ）， ２．８６（３Ｈ，ｓ）。
【０１９２】
実施例 １１ ： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルのアセトン溶媒和物
中間体１（５３０．１ｇ、１重量部）のジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（８倍容量）中の溶液を炭酸水素カリウム（０．２０２重量部、１．０２当量）で処理し、この混合物を撹拌しながら−１７±３℃まで冷却する。次に、ブロモフルオロメタン（ＢＦＭ）（０．２２重量部、０．９９当量）を添加し、この反応物を−１７±３℃で少なくとも２時間撹拌する。次に、この反応混合物を水（１７倍容量）に５±３℃で約１０分かけて添加し、続いて水（１倍容量）でライン洗浄する。懸濁液を５〜１０℃で少なくとも３０分間撹拌し、次に濾過する。濾過ケーキ（６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステルのＤＭＦ溶媒和物）を水（４回×４倍容量）で洗浄し、生成物をフィルターで吸引濾過する。湿り気のあるケーキを容器に戻し、アセトン（５．７５倍容量）を添加し、２時間加熱還流する。この混合物を５２±３℃まで冷却し、水（５．７５倍容量）を添加し、温度を５２±３℃に維持する。次に、この混合物を２０±３℃まで冷却し、濾過し、６０±５℃で一夜減圧乾燥して、表題化合物を白色固体として得る（５５６．５ｇ、８９％）。ＮＭＲδ（ＣＤＣｌ_３）は、親化合物について実施例１で記載したピークならびに次の追加の溶剤ピークを含む：２．１７（６Ｈ，ｓ）。
【０１９３】
実施例 １２ ： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルの非溶媒和１型を含む乾燥粉末組成物
乾燥粉末製剤は次のようにして調製した：
６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステルの非溶媒和１型（実施例１、第１の別法に従って調製し、３μｍのＭＭＤに微粉状化したもの）：　　　　　　　　　　　　 ０．２０ｍｇ
粉砕乳糖（粒子の８５％以下が６０〜９０μｍのＭＭＤを有し、粒子の１５％以上が１５μｍ未満のＭＭＤを有するもの）：　　　　　　　　　　　１２ｍｇ
それぞれここで記載したような製剤で充填されている６０のブリスターを含む剥離可能なブリスターストリップを調製した。
【０１９４】
実施例 １３ ： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルの非溶媒和１型を含むエアロゾル製剤
アルミニウム缶に次の製剤：
６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステルの非溶媒和１型（実施例１、第１の別法に従って調製し、３μｍのＭＭＤに微粉状化したもの）：　　　　　　　　　　　　　２５０μｇ
１，１，１，２−テトラフルオロエタン：　　　　　　　　　　 ５０μｌまで
（１作動当たりの量）
を全量で１２０回の作動に好適な量で充填し、この缶に１作動当たり５０μｌ供給するように適合させた計量バルブを備えた。
【０１９５】
実施例 １４ ： ６ α ，９ α − ジフルオロ −１７ α −［（２− フラニルカルボニル ） オキシ ］−１１ β − ヒドロキシ −１６ α − メチル −３− オキソ − アンドロスタ −１，４− ジエン −１７ β − チオカルボン酸 Ｓ− フルオロメチルエステルの非溶媒和１型を含む経鼻製剤
鼻腔内送達用の製剤を次のように調製した：
６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−チオカルボン酸Ｓ−フルオロメチルエステルの非溶媒和１型（実施例１、第１の別法に従って調製し、微粉状化したもの）：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１０ｍｇ
ポリソルベート２０：　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．８ｍｇ
モノラウリル酸ソルビタン：　　　　　　　　　　　　　　０．０９ｍｇ
リン酸二水素ナトリウム二水和物：　　　　　　　　　　　９４ｍｇ
二塩基性リン酸ナトリウム無水物：　　　　　　　　　　　１７．５ｍｇ
塩化ナトリウム：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　４８ｍｇ
脱塩水：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１０ｍｌまで
この製剤を、複数の計量用量を送達可能なスプレーポンプ（Ｖａｌｏｉｓ）に入れた。
【０１９６】
本明細書および以下の特許請求の範囲全体を通して、文脈において特にことわらない限り、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という言葉、ならびに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含んでなること（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などのそのバリエーションは、記載されている整数もしくはステップまたは整数のグループを包含するものであり、それ以外の整数もしくはステップまたは整数もしくはステップのグループを除外しようとするものではないことは理解されよう。
【０１９７】
本出願に記載されている特許および特許出願は、参照により本明細書に組み入れられるものとする。
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１は、非溶媒和型の式（Ｉ）の化合物の１型、２型および３型多形のＸＲＰＤプロフィールを重ねて示したものである。
【図２】
図２は、非溶媒和型の式（Ｉ）の化合物の１型、２型、および１型と２型の多形との５０：５０混合物のＸＲＰＤプロフィールを１つに重ねて示したもの、ならびに１型と２型との５０：５０混合物のプロフィールの時間依存性を示す。
【図３】
図３は、非溶媒和型の式（Ｉ）の化合物の１型多形のＤＳＣおよびＴＧＡのプロフィールを示す。
【図４】
図４は、５箇所の時点で得られる、式（Ｉ）の化合物の非溶媒和３型のＸＲＰＤプロフィールの温度依存性を示す。
【図５】
図５は、図４のＸＲＰＤ実験についての温度および時間のプロフィールを示す。

Claims (63)

1. 式（Ｉ）：
   

   

   の化合物、およびその溶媒和物。
2. 非溶媒和形態である、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
3. １型多形の形態である、請求項２に記載の非溶媒和形態の式（Ｉ）の化合物。
4. ２型多形の形態である、請求項２に記載の非溶媒和形態の式（Ｉ）の化合物。
5. ３型多形の形態である、請求項２に記載の非溶媒和形態の式（Ｉ）の化合物。
6. 本質的にアセトンとの化学量論的な溶媒和物の形態の結晶固体としての、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
7. 本質的にテトラヒドロフランとの化学量論的な溶媒和物の形態の結晶固体としての、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
8. 本質的にイソプロパノールとの化学量論的な溶媒和物の形態の結晶固体としての、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
9. 本質的にメチルエチルケトンとの化学量論的な溶媒和物の形態の結晶固体としての、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
10. 本質的にジメチルホルムアミドとの化学量論的な溶媒和物の形態の結晶固体としての、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
11. 獣医またはヒトの医学において使用するための、請求項１〜５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容される溶媒和物。
12. 炎症性および／またはアレルギー性の症状の治療用の薬剤を製造するための、請求項１〜５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容される溶媒和物の使用。
13. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容される溶媒和物を、１種以上の生理学的に許容される希釈剤または担体と混合したものを含んでなる、医薬組成物。
14. 非加圧式であり、乾燥粉末として口腔を介して肺へ局所投与されるように適合された、請求項１３に記載の医薬製剤。
15. 希釈剤または担体として乳糖またはデンプンを含む、請求項１３または１４に記載の医薬製剤。
16. 非加圧式であり、鼻腔へ局所投与されるように適合された、請求項１３に記載の医薬製剤。
17. 希釈剤または担体として水を含む、請求項１６に記載の医薬製剤。
18. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容される溶媒和物と、噴射剤としてのフルオロカーボンまたは水素含有クロロフルオロカーボンとを、場合によっては界面活性剤および／または共溶媒と組み合わせて含んでなる、エアロゾル医薬製剤。
19. 粒子状の薬剤と、噴射剤と、追加水（すなわち始めの製剤用の水に加えて添加される水）を含む安定化剤とを含んでなるものではなく、粒子状の薬剤と、噴射剤と、アミノ酸、その誘導体もしくはその混合物を含む安定化剤とを含んでなるものでもない、請求項１８に記載のエアロゾル医薬製剤。
20. 請求項１〜３のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容される溶媒和物と、噴射剤としてのフルオロカーボンまたは水素含有クロロフルオロカーボンと、その噴射剤に可溶性である懸濁剤とを含んでなる、請求項１８または１９に記載のエアロゾル医薬製剤。
21. 懸濁剤がオリゴ乳酸またはその誘導体である、請求項２０に記載のエアロゾル医薬製剤。
22. 噴射剤が１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパンおよびそれらの混合物から選ばれる、請求項１８〜２１のいずれか１項に記載のエアロゾル医薬製剤。
23. 本質的に、場合によっては別の治療活性物質と組み合わせた請求項１〜３のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容される溶媒和物と、１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパンおよびそれらの混合物から選ばれる噴射剤とからなる、請求項１８または１９に記載のエアロゾル医薬製剤。
24. 更に、別の治療活性物質を含んでなる、請求項１３〜２２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
25. 別の治療活性物質がβ_２−アドレナリン受容体アゴニストである、請求項２４に記載の医薬組成物。
26. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容される溶媒和物とＰＤＥ４インヒビターとの組合せを、生理学的に許容される希釈剤または担体と共に含んでなる医薬組成物。
27. 抗炎症性および／またはアレルギー性の症状を有するヒトまたは動物の被験体の治療方法であって、そのヒトまたは動物の被験体に、有効量の請求項１〜５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容される溶媒和物を投与することを含んでなる前記治療方法。
28. 請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその溶媒和物の調製方法であって、式（ＩＩ）：
    

    

    の化合物またはその塩のアルキル化を含んでなる前記方法。
29. アルキル化が、式（ＩＩ）の化合物またはその塩をフルオロメチルハライドと反応させることにより行なわれる、請求項２８に記載の方法。
30. 請求項３に記載の非溶媒和１型多形としての式（Ｉ）の化合物の調製方法であって、
    （ａ）非溶媒和性溶剤の存在下で、式（Ｉ）の化合物を結晶化するか；または
    （ｂ）溶媒和形態の式（Ｉ）の化合物を脱溶媒和する
    ことを含んでなる前記方法。
31. 請求項３に記載の非溶媒和１型多形としての式（Ｉ）の化合物の調製方法であって、式（Ｉ）の化合物をメチルイソブチルケトン、酢酸エチルまたは酢酸メチルに溶解し、非溶媒和性抗溶剤の添加により式（Ｉ）の化合物を非溶媒和１型として生産することを含んでなる前記方法。
32. 式（ＩＩ）：
    

    

    の化合物またはその塩。
33. 固体の結晶性塩の形態である、請求項３２に記載の式（ＩＩ）の化合物。
34. ジイソプロピルエチルアミン塩の形態である、請求項３３に記載の式（ＩＩ）の化合物。
35. 請求項３２に記載の式（ＩＩ）の化合物の調製方法であって、
    （ａ）式（ＩＩＩ）の化合物と２−フロン酸の活性化誘導体とを、式（ＩＩＩ）の化合物１モル当たり少なくとも２モルの活性化誘導体の量で反応させて、式（ＩＩＡ）：
    

    

    の化合物を得て；そして
    （ｂ）ステップ（ａ）の生成物を、水溶性２−フロイルアミドを形成できる有機性第一級または第二級アミン塩基と反応させることにより、式（ＩＩＡ）の化合物からイオウに結合している２−フロイル成分を除去する
    ことを含んでなる、前記方法。
36. 更に、
    （ｃ１）ステップ（ｂ）の生成物が実質的に水非混和性の有機溶剤に溶解する場合は、ステップ（ｂ）で得られるアミド副生成物を水性洗浄液で洗い出すことにより式（ＩＩ）の化合物を精製するか；または
    （ｃ２）ステップ（ｂ）の生成物が水混和性溶剤に溶解する場合は、ステップ（ｂ）の生成物を水性媒体で処理して純粋な式（ＩＩ）の化合物またはその塩を沈殿させるようにすることにより式（ＩＩ）の化合物を精製する
    ステップを含んでなる、請求項３５に記載の式（ＩＩ）の化合物の調製方法。
37. 請求項３２に記載の式（ＩＩ）の化合物の調製方法であって、
    （ａ）式（ＩＩＩ）の化合物と２−フロン酸の活性化誘導体とを、式（ＩＩＩ）の化合物１モル当たり少なくとも２モルの活性化誘導体の量で反応させて、請求項３５に記載の式（ＩＩＡ）の化合物を得て；そして
    （ｂ）ステップ（ａ）の生成物を、更にもう１モルの式（ＩＩＩ）の化合物と反応させることにより、式（ＩＩＡ）の化合物からイオウに結合している２−フロイル成分を除去して、２モルの式（ＩＩ）の化合物を得る
    ことを含んでなる、前記方法。
38. 式（ＩＩＡ）：
    

    

    の化合物。
39. 式（ＶＩ）：
    

    

    の化合物。
40. 式（ＶＩＩ）：
    

    

    の化合物またはその塩。
41. 式（ＶＩＩＩ）：
    

    

    の化合物。
42. 式（ＩＸ）：
    

    

    の化合物。
43. 式（ＩＸＡ）：
    

    

    ［式中、Ｘはハロゲンを表わす］
    の化合物。
44. 式（ＸＩＩ）：
    

    

    の化合物またはその塩。
45. 式（ＸＶ）：
    

    

    ［式中、Ｐはヒドロキシ保護基を表わす］
    の化合物。
46. 式（ＸＶＩ）：
    

    

    の化合物。
47. 式（ＸＶＩＩ）：
    

    

    ［式中、Ｐはヒドロキシ保護基を表わす］
    の化合物またはその塩。
48. 式（ＸＸ）：
    

    

    ［式中、１１−カルボニル基はマスキングされている］
    の化合物またはその塩もしくは誘導体。
49. 式（ＸＸＩＩＩ）：
    

    

    ［式中、Ｌはフッ素以外の脱離基を表わす］
    の化合物。
50. 請求項４に記載の非溶媒和２型多形の式（Ｉ）の化合物の調製方法であって、非溶媒和形態の式（Ｉ）の化合物をメタノールまたは無水ジクロロメタンに溶解し、式（Ｉ）の化合物を非溶媒和２型多形として再結晶化させることを含んでなる前記方法。
51. 請求項５に記載の非溶媒和３型多形の式（Ｉ）の化合物の調製方法であって、式（Ｉ）の化合物またはその溶媒和物を水の存在下でジクロロメタンに溶解し、式（Ｉ）の化合物を非溶媒和３型多形として再結晶化させることを含んでなる前記方法。
52. 請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその溶媒和物の調製方法であって、式（ＶＩ）：
    

    

    の化合物をフッ素供給源と反応させることを含んでなる前記方法。
53. 請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその溶媒和物の調製方法であって、１１−β−ヒドロキシ基が保護またはマスキングされている式（Ｉ）の化合物を脱保護またはアンマスキングすることを含んでなる前記方法。
54. １１−β−ヒドロキシ基が保護されており、かつ、式（ＸＶ）：
    

    

    ［式中、Ｐはヒドロキシ保護基を表わす］
    の化合物を脱保護することを含んでなる、請求項５３に記載の方法。
55. １１−β−ヒドロキシ基がマスキングされており、かつ、式（ＸＶＩ）：
    

    

    ［式中、１１−カルボニル基はマスキングされている］
    の化合物または誘導体を還元することを含んでなる、請求項５３に記載の方法。
56. 請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその溶媒和物の調製方法であって、式（ＸＸＩＩＩ）：
    

    

    ［式中、Ｌは脱離基を表わす］
    の化合物をフッ素供給源と反応させることを含んでなる前記方法。
57. 式（ＸＩＩＩ）：
    

    

    の化合物。
58. 式（ＸＩＶ）：
    

    

    の化合物またはその塩。
59. 式（ＸＸＩ）：
    

    

    ［式中、１１−カルボニル基はマスキングされている］
    の化合物または誘導体。
60. 式（ＸＸＩＩ）：
    

    

    ［式中、１１−カルボニル基はマスキングされている］
    の化合物または誘導体。
61. 式（Ｘ）：
    

    

    の化合物。
62. 請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその溶媒和物の調製方法であって、３−カルボニル基が保護またはマスキングされている式（Ｉ）の化合物の誘導体を脱保護またはアンマスキングすることを含んでなる前記方法。
63. 請求項３０に記載の式（ＩＩ）の化合物の調製方法であって、請求項６２に記載の式（Ｘ）の化合物を、カルボン酸をチオカルボン酸に変換させるのに好適な試薬で処理することを含んでなる前記方法。

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