JP2002540075A - ワクチン - Google Patents

ワクチン

Info

Publication number
JP2002540075A
JP2002540075A JP2000606264A JP2000606264A JP2002540075A JP 2002540075 A JP2002540075 A JP 2002540075A JP 2000606264 A JP2000606264 A JP 2000606264A JP 2000606264 A JP2000606264 A JP 2000606264A JP 2002540075 A JP2002540075 A JP 2002540075A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
polysaccharide
protein
antigen
immunogenic composition
vaccine
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP2000606264A
Other languages
English (en)
Other versions
JP4846906B2 (ja
Inventor
カピョー，カリーヌ
デシャンプ，マルゲリト
ミシェル デスモン，ピエール
アントニー ジョセフ ラフェリール，クレ
ポールマン，ヤン
プリエール，ジャン−ポール
Original Assignee
スミスクライン ビーチャム バイオロジカルズ ソシエテ アノニム
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GBGB9906437.0A external-priority patent/GB9906437D0/en
Priority claimed from GBGB9909077.1A external-priority patent/GB9909077D0/en
Priority claimed from GBGB9909466.6A external-priority patent/GB9909466D0/en
Priority claimed from GBGB9916677.9A external-priority patent/GB9916677D0/en
Application filed by スミスクライン ビーチャム バイオロジカルズ ソシエテ アノニム filed Critical スミスクライン ビーチャム バイオロジカルズ ソシエテ アノニム
Publication of JP2002540075A publication Critical patent/JP2002540075A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP4846906B2 publication Critical patent/JP4846906B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/385—Haptens or antigens, bound to carriers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
    • A61K39/092—Streptococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/095—Neisseria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/102—Pasteurellales, e.g. Actinobacillus, Pasteurella; Haemophilus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/646—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent the entire peptide or protein drug conjugate elicits an immune response, e.g. conjugate vaccines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/16—Otologicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A61K2039/6037—Bacterial toxins, e.g. diphteria toxoid [DT], tetanus toxoid [TT]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A61K2039/6068—Other bacterial proteins, e.g. OMP
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A61K2039/6075—Viral proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/831—Drug, bio-affecting and body treating compositions involving capsular polysaccharide of bacterium, e.g. polyribosyl ribitol phosphate

Abstract

(57)【要約】 本発明は、細菌多糖抗原ワクチンの分野に関する。特に本発明は、インフルエンザ菌からのプロテインＤにコンジュゲートされた細菌多糖に関する。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】 産業上の利用分野 本発明は、細菌多糖抗原ワクチン、それらの製造および医療におけるこのよう
な多糖の使用に関する。
【０００２】 特に本発明は、以下の３つの相互関連局面に関する：Ａ−肺炎球菌多糖抗原、
典型的には肺炎連鎖球菌（Streptococcus pneumoniae）からのタンパク質抗原お
よび任意にＴｈ１誘導性アジュバントを用いて処方された肺炎球菌多糖複合体抗
原を含むワクチン；Ｂ−Ｔｈ１アジュバントで活性調節された特異的有益肺炎球
菌多糖複合体；ならびにＣ−概してインフルエンザ菌からのプロテインＤと連結
された細菌多糖複合体。
【０００３】 発明の背景 肺炎連鎖球菌は、少なからぬ罹患率および死亡率（特に若年および老齢者にお
ける）に関与するグラム陽性細菌であって、侵襲性疾患、例えば肺炎、菌血症お
よび髄膜炎、ならびに集落形成に関連した疾患、例えば急性中耳炎を引き起こす
。60歳より上の人々に関する米国での肺炎球菌性肺炎率は、100,000人に3〜8人
であると見積もられる。症例の20％において、これは菌血症およびその他の症状
発現、例えば髄膜炎を引き起こし、死亡率は、抗生物質治療を用いた場合でも30
％近くである。
【０００４】 肺炎球菌は、血清型特異性を付与する化学的結合多糖に被包されている。肺炎
球菌の90の既知の血清型が存在し、莢膜は、補体から細菌の内面を防御するだけ
でなく、それ自体免疫原性に乏しいので、肺炎球菌に関する素因ビルレンス決定
基である。多糖はＴ非依存性抗原であり、Ｔ細胞と相互作用するためにＭＨＣ分
子上で処理加工または提示され得ない。しかしながら、それらは、Ｂ細胞上の表
面受容体の架橋を包含する代替的メカニズムにより免疫系を刺激し得る。
【０００５】 侵襲性肺炎球菌性疾患は莢膜に特異的な抗体と最も強く相関し、防御は血清型
特異的である、ということがいくつかの実験で示された。
【０００６】 多糖抗原ベースのワクチンは、当業界で周知である。ヒト使用に関して登録さ
れている４つとしては、腸チフス菌のＶｉ多糖、インフルエンザ菌からのＰＲＰ
多糖、血清型Ａ、Ｃ、Ｗ１３５およびＹから成る四価髄膜炎菌ワクチン、ならび
に血清型１、２、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、
１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２０、２２Ｆ、２３
Ｆ、および３３に対応する多糖から成る23価肺炎球菌ワクチン（肺炎球菌血液単
離物の少なくとも９０％を占める）が挙げられる。
【０００７】 後者３つのワクチンは、呼吸器感染を引き起こして乳児における重度罹患率お
よび死亡率を生じる細菌に対する防御を付与するが、これらのワクチンは２歳未
満の小児における使用に関しては、この年齢群では免疫原性が不十分であるため
に、未だ認可されていない［Peltola et al.（1984）, N. Engl. J. Med. 310:1
561-1566］。肺炎連鎖球菌は、乳児および幼児における侵襲性細菌性疾患および
中耳炎の最も一般的な原因である。同様に、老齢者は肺炎球菌ワクチンに対して
不十分な応答を増し［Roghmann et al.（1987）, J. Gerontol.42:265-270］、
それゆえこの集団における細菌性肺炎の発生数が増大する［Verghese and Berk,
（1983）Medicine（Baltimore）62:271-285］。
【０００８】 乳児における免疫原性のこの欠如を克服するよう意図された戦略としては、大
型免疫原性タンパク質との多糖の連結が挙げられるが、これは、バイスタンダー
Ｔ細胞援助を提供し、それが連結される多糖抗原に対する免疫記憶を誘導する。
肺炎球菌糖タンパク質複合体ワクチンは、種々の年齢群における安全性、免疫原
性および効能に関して一般に評価されつつある。
【０００９】 Ａ）肺炎球菌多糖ワクチン 23価非複合肺炎球菌ワクチンは、0％から81％までの臨床的効能の広範な変異
を示している（Fedson et al.（1994）Arch Intern Med. 154:2531-2535）。効
能は、免疫感作されつつある危険群、例えば老齢者、ホジキン病、脾摘出、鎌状
赤血球症および無γグロブリン血症患者に（Fine et al.（1994）Arch Intern M
ed. 154:2666-2677）、そして疾患発現にも関連していると思われる。23価ワク
チンは、肺炎球菌性肺炎（いくつかの高危険群、例えば老齢者において）および
中耳炎に対する防御を実証しない。
【００１０】 したがって、改良型肺炎球菌ワクチン組成物、特に老齢者および幼児における
肺炎球菌性疾患（特に肺炎）の予防または改善により有効であるものが必要とさ
れている。
【００１１】 本発明は、このような改良型ワクチンを提供する。
【００１２】 Ｂ）選定肺炎球菌多糖複合体＋３Ｄ−ＭＰＬ組成物 商業化非複合肺炎球菌ワクチンの防御効力がワクチン接種時に誘導される抗体
の濃度に多少関連するということは、一般に容認される。実際、23の多糖が、専
ら各構成成分多糖の免疫原性に関して商業的許可を容認された（Ed. Williams e
t al. New York Academy of Sciences 1995 pp. 241-249）。したがって、肺炎
球菌多糖に対する抗体応答のさらなる強化は、多糖または多糖複合体の初回注射
に対する防御レベルの抗体を有して応答する乳児および老齢者のパーセンテージ
を増大し得たし、肺炎連鎖球菌により引き起こされる感染に対する防御免疫を誘
導するのに必要な注射の投与量および回数を低減し得た。
【００１３】 20世紀初頭以来、研究者達は、ワクチン組成物におけるそれらの免疫原性を改
善するために抗原に付加され得る厖大な数の化合物を用いて実験してきた［M.F.
Powell & M.J. Newman, Plenum Press, NY, "Vaccine Design-the Subunit and
Adjuvant Approach"（1995）Chapter 7"A Compendium of Vaccine Ajuvants an
d Excipients"で再検討された］。多くは非常に効率的であるが、しかしヒトワ
クチン組成物におけるそれらの使用を妨げる有意の局所性および全身性悪反応を
引き起こす。1926年に最初に記載されたアルミニウムベースのアジュバント（例
えばアルム、水酸化アルミニウムまたはリン酸アルミニウム）は、依然として米
国で認可されたヒトワクチン中に用いられる唯一の免疫アジュバントである。
【００１４】 アルミニウムベースのアジュバントは、それが誘導する「デポー製剤作用」を
介して働く担体類のアジュバントの例である。抗原はその表面に吸着され、組成
物が注入された場合、アジュバントおよび抗原は血流中に直ちに消散されない。
その代わりに、組成物は注入の局所環境中に存続し、より顕著な免疫応答が結果
として生じる。このような担体アジュバントは、例えばいくつかの多糖抗原を分
解する傾向がある抗原を安定化するのに適しているという付加的な既知の利点を
有する。
【００１５】 ３Ｄ−ＭＰＬは、非担体アジュバントの一例である。そのフルネームは３−Ｏ
−デアシル化モノホスホリル脂質Ａ（または３デ−Ｏ−アシル化ものホスホリル
脂質Ａまたは３−Ｏ−デスアシル−４’モノホスホリル脂質Ａ）であり、還元末
端グルコサミンの位置３がデ−Ｏ−アシル化されることを示すために３Ｄ−ＭＰ
Ｌと呼ばれる。その調製のためには、英国特許出願第2220211号を参照されたい
。化学的には、それは３−デアシル化モノホスホリル脂質Ａの４、５または６ア
シル化鎖との混合物である。それは最初は、脂質Ａの４’−モノホスホリル誘導
体（ＭＰＬ）を３−Ｏ−デアシル化するための方法が、免疫刺激活性の変化を伴
わずにさらなる弱毒化毒性を有する分子をもたらした1990年代初頭に製造された
。
【００１６】 ３Ｄ−ＭＰＬは、単独で、または優先的にはデポー製剤型担体アジュバント、
例えば水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウムまたは水中油型エマルションと
組合せて、アジュバントとして用いられてきた。この溶暗組成物中では、抗原お
よび３Ｄ−ＭＰＬは同一粒子構造中に含入されて、抗原性および免疫刺激性シグ
ナルのより効率的送達を可能にする。複数の研究が、３Ｄ−ＭＰＬはアルム吸着
化抗原の免疫原性をさらに増強し得る、ということを示している［Thoelen et a
l. Vaccine（1998）16:708-14; EP 689454-B1］。このような組合せも、吸着傾
向がある抗原に関しては当業界で選択される（例えば、細菌多糖複合体）が、こ
の場合、アルムへの吸着は、抗原を安定化する傾向がある。沈降アルミニウムベ
ースのアジュバントは、それらは認可ヒトワクチンに一般に用いられる唯一のア
ジュバントであるので、主として用いられる。したがって、アルミニウムベース
のアジュバントと組合せて３Ｄ−ＭＰＬを含有するワクチンは、それらの易開発
性およびマーカー上への導入速度のために、当業界で好まれる。
【００１７】 ＭＰＬ（非３−デアシル化）は、いくつかの一価多糖複合体ワクチン抗原に関
するアジュバントとして評価されてきた。生理食塩水中のＭＰＬの同時注入は、
４つの一価多糖複合体：肺炎球菌ＰＳ６Ｂ破傷風毒素、肺炎球菌ＰＳ １２−ジ
フテリア毒素、ならびに緑膿菌外毒素Ａに連結された５型黄色ブドウ球菌および
８型黄色ブドウ球菌に対する血清抗体応答を増強する［Schneerson et al. J. I
mmunology（1991）147:2136-2140］。応答増強は、抗原特異的であると教示され
た。水中油型エマルション中のＭＰＬ（担体型アジュバント）は、同一粒子構造
中のＭＰＬおよび抗原の存在のために、生理食塩水中のＭＰＬの作用を一貫して
増強し、そして他の多糖複合体ワクチンの最適供給のために選択さるべきアジュ
バント系であると考えられた。
【００１８】 Devi等［Infect. Immun.（1991）59:3700-7］は、クリプトコックス属のCrypt
ococcus neoformans莢膜多糖のＴＴ複合体に対するネズミ抗体応答に及ぼす生理
食塩水中のＭＰＬ（非３−デアシル化）のアジュバント作用を評価した。ＭＰＬ
が複合体と同時に用いられた場合、ＰＳに対するＩｇＭ−およびＩｇＧ−特異的
応答の両方において限界増大のみが認められた。しかしながら、ＭＰＬは、複合
体の２日後に投与された場合、非常に大きい効果を示した。特に乳児において、
抗原と比較してＭＰＬの投与の遅延をようする免疫感作計画を用いることの実用
性は疑問である。多糖および多糖−タンパク質複合体に関するＭＰＬのアジュバ
ント効果は、組成物依存性であると思われる。さらに、適切な徐放性送達系（例
えば、担体アジュバント使用）中のＭＰＬの混入は、より永続的なアジュバント
効果を提供し、調時および遅延投与の問題を免れる。
【００１９】 要するに、当業界の状態は、特に多糖または多糖複合体抗原に関しては、ＭＰ
Ｌまたは３Ｄ−ＭＰＬがアジュバントとして用いられる場合、その免疫刺激作用
を最大にするために、それは、担体アジュバント（例えば、アルミニウムベース
のアジュバント）とともに有益に用いられる、ということを教示している。
【００２０】 意外なことに、ある種の肺炎球菌多糖複合体に関しては、ワクチン組成物の免
疫原性は、担体アジュバント（例えばアルミニウムベースのアジュバント）とと
もに用いられる３Ｄ−ＭＰＬよりむしろ３Ｄ−ＭＰＬ単独を用いて抗原が処方さ
れる場合に有意に大きい、ということを本発明は見出した。さらに、観察された
改善は、用いた３Ｄ−ＭＰＬの濃度とは、そして特定の複合体が一価組成物中に
存在するか否か、あるいはそれらが併用されて多価組成物を形成するか否かとは
無関係である。
【００２１】 Ｃ）細菌多糖−プロテインＤ複合体 前記のように、多糖抗原ベースのワクチンは、当業界で周知である。前記の認
可多糖ワクチンは、異なる実証済み臨床効能を有する。Ｖｉ多糖ワクチンは、培
養確証腸チフスの防止に際して55％〜77％の効能を有すると概算されている（Pl
otkin and Cam,（1995）Arch Intern Med 155:2293-99）。髄膜炎菌Ｃ多糖ワク
チンは、流行条件下で79％の効能を有することが示された（De Wals P, et al.
（1996）Bull World Health Organ. 74:407-411）。23価肺炎球菌ワクチンは、0
％〜81％の臨床効能の広範な変動を示した（Fedson et al.（1994）Arch Intern
Med.154:2531-2535）。前記のように、肺炎球菌ワクチンの防御効能は、ワクチ
ン接種時に誘導される抗体の濃度に多少関連する、ということが容認される。
【００２２】 ワクチン接種への多糖アプローチに関連した問題の１つは、多糖それ自体が貧
免疫原性であるという事実である。免疫原性のこの欠如を克服するよう意図され
た戦略としては、大型高免疫原性タンパク質との多糖の連結が挙げられるが、こ
れは、バイスタンダーＴ細胞援助を提供する。
【００２３】 多糖免疫原の産生のために今日一般に用いられるこれらの高免疫原性担体の例
としては、ジフテリア毒素（ＣＴまたはＣＲＭ１９７突然変異体）、破傷風毒素
（ＴＴ）、カギアナカサガイヘモシアニン（ＫＬＨ）およびツベルクリンの精製
タンパク質誘導体（ＰＰＤ）が挙げられる。
【００２４】 一般的に用いられる担体に関連した問題 多数の問題が、例えばＧＭＰ複合体の産生におけるならびに複合体の免疫学的
特徴における、これらの一般的に用いられる担体の各々に関連している。
【００２５】 これらの担体の一般的使用および抗多糖抗体応答の誘導におけるそれらの成功
例にもかかわらず、それらはいくつかの欠点に関連する。例えば、抗原特異的免
疫応答は、担体（この場合、破傷風毒素）に対して向けられる先在する抗体の存
在により抑制され得る（エピトープ抑制）ということが知られている（Di John
et al;（1989）Lancet, 2:1415-8）。集団全般では、人々はこれらの抗原でルー
チンにワクチン接種されるので、非常に高パーセンテージの人々がＤＴおよびＴ
Ｔの両方に対する先在免疫を有する。英国では、例えば95％の小児がＤＴおよび
ＴＴの両方を含むＤＴＰワクチンを接種されている。他の著者等は、動物モデル
におけるペプチドワクチンに対するエピトープ抑制の問題を記載している（Sad
et al, Immunology, 1991; 74:223-227; Schutze et al, J. Immunol. 135:4, 1
985; 2319-2322）。
【００２６】 さらに、定期的追加免疫を要するワクチンに関しては、高免疫原性担体、例え
ばＴＴおよびＤＴの使用は、数回注射後の多糖抗体応答を抑制すると思われる。
これらの多数回予防接種は、遅延型過応答性（ＤＴＨ）のような望ましくない反
応によっても成し遂げられ得る。
【００２７】 ＫＬＨは、効力のある免疫原として既知であり、ヒト臨床試験におけるＩｇＥ
ペプチドのための担体としてすでに用いられている。しかしながら、いくつかの
悪反応（ＤＴＨ様反応またはＩｇＥ感作）ならびに抗体に対する抗体応答が観察
されている。
【００２８】 したがって、多糖ベースのワクチンのための担体タンパク質の選択は、すべて
の患者において作用する（広範なＭＨＣ認識）担体に対する必要性、高レベルの
抗多糖抗体応答の誘導および担体に対する低抗体応答の間の平衡を必要とする。
【００２９】 したがって、多糖ベースのワクチンのために予め用いられる担体は、多数の欠
点を有する。これは、種々の多糖抗原に関して同一担体が用いられる場合に、エ
ピトープ抑制が特に問題となる組合せワクチンにおいて特にそうである。WO 98/
51339では、組合せワクチン中の多担体は、この作用を乗り越えようとするため
に用いられた。
【００３０】 本発明は、前記の欠点を蒙らない多糖／多ペプチドベースの免疫原性複合体の
調製に際して用いるための新規の担体を提供する。
【００３１】 本発明は、ワクチンを含めた多糖ベースの免疫原性組成物のための担体として
、インフルエンザ菌からのプロテインＤ（EP 0 594 610 B1）またはその断片を
提供する。この担体の使用は、組合せワクチンにおいて特に有益である。
【００３２】 発明の要約 Ａ）肺炎球菌多糖ワクチン したがって、本発明は、少なくとも１つの肺炎連鎖球菌多糖抗原（好ましくは
複合化）および肺炎連鎖球菌タンパク質抗原またはその免疫学的機能等価物を、
任意にＴｈ１アジュバント（Ｔｈ１免疫応答を誘導するアジュバント）とともに
含むワクチンを提供する。好ましくは、肺炎球菌タンパク質およびＴｈ１アジュ
バントがともに含まれる。本発明の組成物は、老齢者肺炎の治療に特に適してい
る。
【００３３】 肺炎球菌多糖ワクチン（複合化または非複合化）は、この疾患の発生数が非常
に高い老齢者集団における肺炎に対して防御し得ない。肺炎球菌に対する重要な
防衛メカニズムはオプソニン食菌作用（肺炎球菌多糖に対する抗体の産生により
引き起こされるヒトＢ細胞／好中球媒介性事象。細菌は最終的には食菌されるよ
うになる）であるが、しかしながら、関与するオプソニン性メカニズムの一部、
即ちＰＭＮ（多形核球）によるスーパーオキシド産生、その他の反応性酸素種産
生、ＰＭＮの可動化、ＰＭＮのアポトーシス、ＰＭＮの変形能が、老齢者では損
傷される。
【００３４】 普通に容認された教義と反対に、正常レベルの抗莢膜多糖抗体は、肺炎球菌が
宿主細胞に侵襲して免疫系のこの部門を回避し得るので、細菌の完全クリアラン
スには有効でない可能性がある。
【００３５】 意外にも、免疫系の体液性部門（Ｂ細胞媒介性免疫）の他に、免疫系の細胞媒
介性部門（例えば、Ｔ細胞媒介性免疫）を同時刺激することにより、宿主からの
肺炎球菌のクリアランスを増強し得る相乗作用（または協同作用）を結果として
生じる、ということを本発明は見出した。これは、概して肺炎球菌感染の予防（
または治療）に役立つ発見であるが、しかし多糖ベースのワクチンが効能を示さ
ない老齢者における肺炎の予防（または治療）に特に重要である。
【００３６】 肺炎球菌多糖（好ましくは複合化）が肺炎球菌タンパク質（好ましくは肺炎球
菌の表面で発現され、あるいは分泌または放出されるタンパク質で、これは感染
哺乳類細胞の表面で暮らすＩＩおよびＭＨＣクラスＩの情況においてプロセッシ
ングされ、提示され得る）とともに投与される場合、免疫系の両部門はこのよう
に共働し得る、ということを本発明は見出した。肺炎球菌タンパク質はそれ自体
で細胞媒介性免疫の引き金となり得るが、しかし、ワクチン処方物中のＴｈ１誘
導性アジュバントの存在が免疫系のこの部門の役に立ち、そして意外にも、免疫
系の両部門間の相乗作用をさらに増強する、ということを本発明人等は見出した
。
【００３７】 Ｂ）選定肺炎球菌多糖複合体＋３Ｄ−ＭＰＬ組成物 したがって、本発明は、３Ｄ−ＭＰＬで活性調節され、実質的にアルミニウム
ベースのアジュバントを欠く１つ又はそれ以上の肺炎球菌多糖複合体を含む抗原
性組成物も提供するが、この場合、少なくとも１つの肺炎球菌多糖複合体は、ア
ルミニウムベースのアジュバントとともに３Ｄ−ＭＰＬを含む組成物と比較して
、３Ｄ−ＭＰＬを含む組成物中で有意により免疫原性である。
【００３８】 提供される好ましい実施態様は、１つ又はそれ以上の以下の肺炎球菌莢膜多糖
：血清型４、６Ｂ、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆの複合体を含む抗原性組成物で
ある。このような組成物中では、多糖は各々、意外にも、３Ｄ−ＭＰＬおよびア
ルミニウムベースのアジュバントを含む組成物と比較して、３Ｄ−ＭＰＬ単独を
含む組成物中でより免疫原性である。
【００３９】 したがって、本発明の一実施態様においては、免疫原性タンパク質および３Ｄ
−ＭＰＬアジュバントに連結された肺炎連鎖球菌莢膜多糖血清型４、６Ｂ、１８
Ｃ、１９Ｆまたは２３Ｆを含む抗原性組成物が提供され、この場合、組成物は実
質的にはアルミニウムベースのアジュバントを欠く。
【００４０】 第二の実施態様では、本発明は、アルミニウムベースのアジュバントを実質的
に欠き、そして血清型４、血清型６Ｂ、血清型１８Ｃ、血清型１９Ｆおよび血清
型２３Ｆから成る群から選択される３Ｄ−ＭＰＬおよび２つまたはそれ以上の肺
炎球菌多糖複合体を含む組合せ抗原性組成物を提供する。
【００４１】 Ｃ）細菌多糖−プロテインＤ複合体 したがって、本発明は、インフルエンザ菌からのプロテインＤまたはそのプロ
テインＤ断片に連結された病原性細菌から得られる多糖抗原を含む多糖複合体抗
原を提供する。さらに、本発明は、１つ又はそれ以上の多糖抗原がプロテインＤ
に連結される多価ワクチン組成物を提供する。
【００４２】 発明の詳細な説明 Ａ）肺炎球菌多糖ワクチン 本発明は、特に老齢者（および／または乳児および幼児）の肺炎球菌感染の予
防または改善のための改良型ワクチンを提供する。
【００４３】 本発明の情況では、患者は、年齢が55歳以上、典型的には60歳以上、さらに一
般的には65歳以上であれば、老齢者であると考えられる。
【００４４】 したがって、本発明の一実施態様では、少なくとも１つの肺炎連鎖球菌多糖抗
原および少なくとも１つの肺炎連鎖球菌タンパク質抗原を含む、老齢者（および
／または小児、乳児（Infants）および幼児）において用いるのに適したワクチ
ン組成物が提供される。
【００４５】 第二の好ましい実施態様では、本発明は、少なくとも１つの肺炎連鎖球菌多糖
抗原および少なくとも１つの肺炎連鎖球菌タンパク質抗原およびＴｈ１アジュバ
ントを含む（老齢者における肺炎の予防に適した）ワクチンを提供する。
【００４６】 このようなワクチンは、例えば乳児または幼児のような集団の他の高度危険群
における肺炎球菌感染（例えば中耳炎）を治療するのにも有用であることが意図
される。
【００４７】 第三の実施態様では、肺炎球菌多糖抗原およびＴｈ１アジュバントを含むワク
チン組成物が提供される。
【００４８】 本発明の肺炎連鎖球菌多糖抗原 典型的には、本発明の肺炎連鎖球菌ワクチンは、多糖抗原（好ましくは複合化
）を含み、この場合、多糖は少なくとも４つの血清型の肺炎球菌から得られる。
好ましくは、４つの血清型としては、６Ｂ、１４、１９Ｆおよび２３Ｆが挙げら
れる。さらに好ましくは少なくとも７つの血清型、例えば４、６Ｂ、９Ｖ、１４
、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆから得られるものが組成物中に含まれる。さらに
好ましくは、少なくとも１１の血清型が組成物に含まれ、例えば一実施態様にお
ける組成物は、血清型１、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９
Ｆおよび２３Ｆから得られる莢膜多糖（好ましくは複合化（conjugated））を含
む。本発明の好ましい実施態様では、少なくとも１３の多糖抗原（好ましくは複
合化）が含まれるが、しかしさらなる多糖抗原、例えば23価（例えば血清型１、
２、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４
、１５Ｂ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２０、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３
Ｆ）も本発明により意図される。
【００４９】 老齢者予防接種（例えば、肺炎予防のための）に関しては、血清型８および１
２Ｆ（そして最も好ましくはさらに１５および２２）を前記の11価抗原性組成物
に含入して、15価ワクチンを生成するのが有益であるが、一方、乳児または幼児
用（中耳炎がより問題である）には、血清型６Ａおよび１９Ａが含入されて、13
価ワクチンを生成するのが有益である。
【００５０】 老齢者（＋55歳）集団における肺炎ならびに乳児（18ヶ月まで）および幼児（
典型的には18ヶ月〜5歳）における中耳炎の予防／改善のためには、本明細書に
記載したような多価肺炎連鎖球菌多糖を肺炎連鎖球菌タンパク質またはその免疫
学的機能等価物と併用することが、本発明の好ましい実施態様である。
【００５１】 本発明の肺炎球菌タンパク質 本発明の目的のために、「免疫学的機能等価物」とは、本発明のタンパク質か
らの少なくとも１つの防御的エピトープを含むタンパク質のペプチドと定義され
る。このようなエピトープは、特徴的には、表面露呈され、高度保存され、そし
て宿主における殺細菌性抗体応答を引き出し、あるいは毒性作用を阻止し得る。
好ましくは、機能的等価物は、本発明のタンパク質からの少なくとも15、好まし
くは30またはそれ以上の連続アミノ酸を有する。最も好ましくは、タンパク質の
断片、欠失、例えばその膜貫通欠失変異体（即ち、タンパク質の細胞外ドメイン
の使用）、融合、化学的または遺伝的脱毒素化誘導体などが用いられ得るが、但
し、それらはネイティブタンパク質と同一免疫応答を実質的に生じ得る。
【００５２】 本発明の好ましいタンパク質は、肺炎球菌の外表面上に露呈される肺炎球菌タ
ンパク質（肺炎球菌の少なくとも一部のライフサイクル中に宿主の免疫系により
認識され得る）であるか、あるいは肺炎球菌により分泌または放出されるタンパ
ク質である。最も好ましくは、タンパク質は毒素、粘着素、２−成分シグナル変
換体または肺炎連鎖球菌のリポタンパク質、あるいはそれらの免疫学的機能等価
物である。
【００５３】 このような組合せワクチン中に含入される特に好ましいタンパク質としては以
下のものが挙げられるが、これらに限定されない：ニューモリジン（好ましくは
、化学処理または突然変異により脱毒素化）［Mitchell et al. Nucleic Acids
Res. 1990 Jul 11;18（3）:4010 "Comparison of pneumolysin genes and prote
ins from Steptococcus pneumoniae types 1 and 2.", Mitchell et al. Biochi
m Biophys Acta 1989 Jan 23; 1007（1）:67-72 "Expression of the pneumolys
in gene in Escherichia coli: rapid purification and biological propertie
s.", WO 96/05859（A. Cyanamid）, WO 90/06951（Paton et al）, WO 99/03884
（NAVA）］；ＰｓｐＡおよびその膜貫通欠失変異体（米国特許第5804193号−Bri
les等）；ＰｓｐＣおよびその膜貫通欠失変異体（WO 97/09994−Briles等）；Ｐ
ｓａＡおよびその膜貫通欠失変異体（Berry & Paton, Infect Immun 1996 Dec;
64（12）:5255-62 "Sequence heterogeneity of PsaA, a 37-kilodalton putati
ve adhesin essential for virulence of Streptococcus pneumoniae"）；肺炎
球菌コリン結合タンパク質およびその膜貫通欠失変異体；ＣｂｐＡおよびその膜
貫通欠失変異体（WO 97/41151; WO 99/51266）；グリセルアルデヒド−３−ホス
フェート−デヒドロゲナーゼ（Infect. Immun. 1996, 64:3544）；ＨＳＰ７０（
WO 96/40928）；ＰｃｐＡ（Sanchez-Beato et al. FEMS Microbiol Lett 1998,
164:207-14）；Ｍ様タンパク質（ＳＢ特許出願EP 0837130）；および粘着素1862
7（ＳＢ特許出願EP 0834568）。
【００５４】 本発明に用いられるタンパク質は、好ましくは、ニューモリジン群ＰｓａＡ、
ＰｓｐＡ、ＰｓｐＣ、ＣｂｐＡ、あるいは２またはそれ以上のこのようなタンパ
ク質の組合せから選択される。本発明は、このようなタンパク質の免疫学的機能
等価物も包含する（前記）。
【００５５】 組成物中では、タンパク質は、肺炎球菌性疾患に対するＴ細胞媒介性応答を誘
導するのに役立ち、特に肺炎に対する防御に必要とされ、これは肺炎球菌による
侵襲を阻止するために、そしてオプソニン食菌作用を刺激するために免疫系の体
液性部門と協同する。
【００５６】 タンパク質抗原を含入することのさらなる利点は、オプソニン食菌作用過程の
ためのさらなる抗原の提示、および細菌付着の抑制（粘着素（adhesin）が用い
られる場合）または毒素の中和（毒素が用いられる場合）である。
【００５７】 本発明の一実施態様によれば、少なくとも４つの血清型、好ましくは少なくと
も７つの血清型、さらに好ましくは少なくとも11の血清型から得られる多糖抗原
、ならびに少なくとも１つの、しかし好ましくは２つの肺炎連鎖球菌タンパク質
を含む肺炎球菌多糖複合体ワクチンを包含する肺炎連鎖球菌ワクチンが提供され
る。好ましくは、タンパク質の１つは、ニューモリジン（Pneumolysin）あるい
はＰｓａＡまたはＰｓｐＡまたはＣｂｐＡ（最も好ましくは脱毒素化ニューモリ
ジン）である。好ましい組合せは、少なくともニューモリジンまたはその誘導体
およびＰｓｐＡを含有する。
【００５８】 前記のように、予防接種への多糖アプローチに関連した問題は、多糖それ自体
が貧免疫原性であるという事実である。これを克服するために、多糖は、バイス
タンダーＴ細胞援助を提供するタンパク質担体に連結され得る。したがって、本
発明に利用される多糖はこのようなタンパク質担体に結合されるのが好ましい。
多糖免疫原の産生のために現在一般的に用いられるこのような担体の例としては
、ジフテリアおよび破傷風毒素（それぞれＤＴ、ＤＴ ＣＲＭ１９７およびＴＴ
）、カギアナカサガイヘモシアニン（ＫＬＨ）、髄膜炎菌からのＯＭＰＣ、なら
びにツベルクリンの精製タンパク質誘導体（ＰＰＤ）が挙げられる。
【００５９】 しかしながら多数の問題が、これらの一般的に用いられる担体の各々に関連し
ている（前記の「一般的に用いられる担体に関連した問題」の節参照）。
【００６０】 本発明は、好ましい実施態様において、これらの欠点を蒙らない多糖ベースの
免疫原構築物の調製に際して用いるための新規の担体を提供する。肺炎球菌多糖
ベースの免疫原性組成物（またはワクチン）のための好ましい担体は、インフル
エンザ菌からのプロテインＤ（EP 594610-B）またはその断片である。用いるの
に適した断片としては、Ｔ−ヘルパーエピトープを包含する断片が挙げられる。
特に、プロテインＤ断片は、好ましくはタンパク質のＮ末端1/3を含有する。
【００６１】 肺炎球菌多糖のためのさらに好ましい担体は、肺炎球菌タンパク質それ自体で
ある（「本発明の肺炎球菌タンパク質」の節に前記）。
【００６２】 本発明のワクチンは、好ましくは活性調節される。適切なアジュバントとして
は、水酸化アルミニウムゲル（アルム）またはリン酸アルミニウムのようなアル
ミニウム塩が挙げられるが、しかしカルシウム、鉄または亜鉛の塩でもあり得る
し、あるいはアシル化チロシンまたはアシル化糖、陽イオン的または陰イオン的
誘導化多糖またはポリホスファゼンの不溶性懸濁液であり得る。
【００６３】 アジュバントは、免疫応答の細胞媒介性部門を活性調節するためにＴＨ１型の
応答の優先的誘導物質であるよう選択されるのが好ましい。
【００６４】 本発明のＴＨ１アジュバント 高レベルのＴｈ１型サイトカインは、所定の抗原に対する細胞媒介性免疫応答
の誘導を援助する傾向があるが、一方、高レベルのＴｈ２型サイトカインは、抗
原に対する体液性免疫応答の誘導を援助する傾向がある。
【００６５】 Ｔｈ１およびＴｈ２型免疫応答の区別は絶対的であるというわけではない、と
いうことを思い起こすことは重要である。実際は、個体は主としてＴｈ１または
主としてＴｈ２であると説明される免疫応答を支持する。しかしながら、Mosman
nとCoffiman（Mosmann, T.R. and Coffiman, R.L.（1989）TH1 and TH2 cell: d
ifferent patterns of lymphokine secretion lead to different functional p
roperties. Annual Review of Immunology, 7, p145-173）によりネズミＣＤ４
＋ｖｅ Ｔ細胞クローンで説明されたことに関してサイトカイン族を考えるのが
しばしば便利である。伝統的に、Ｔｈ１型応答は、Ｔリンパ球によるＩＮＦ−γ
およびＩＬ−２サイトカインの産生に関連する。Ｔｈ１型免疫応答の誘導にしば
しば直接関連するその他のサイトカインは、ＩＬ−１２のように、Ｔ細胞により
産生されない。これに対比して、Ｔｈ２型応答は、Ｉｌ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−
６、ＩＬ−１０の分泌に関連する。主要Ｔｈ１応答を促す適切なアジュバント系
としては、モノホスホリル脂質Ａ、ならびにモノホスホリル脂質Ａ、好ましくは
３−デ−Ｏ−アシル化モノホスホリル脂質Ａ（３Ｄ−ＭＰＬ）とアルミニウム塩
の組合せが挙げられる。
【００６６】 増強系は、モノホスホリル脂質Ａおよびサポニン誘導体の組合せ、特にWO 94/
00153に開示されたようなＱＳ２１および３Ｄ−ＭＰＬの組合せ、またはWO 96/3
3739に開示されているようにＱＳ２１がコレステロールで抑制される低反応原性
組成物を包含する。
【００６７】 水中油型エマルション中にＱＳ２１、３Ｄ−ＭＰＬおよびトコフェロールを包
含する特に強力なアジュバント処方物は、WO 95/17210に記載されており、好ま
しい処方物である。
【００６８】 好ましくは、ワクチンは、サポニンを、さらに好ましくはＱＳ２１を付加的に
含む。処方物は、水中油型エマルションおよびトコフェロールも含み得る（WO 9
5/17210）。
【００６９】 本発明は、ワクチン処方物の製造方法であって、本発明のタンパク質を製薬上
許容可能な賦形剤、例えば３Ｄ−ＭＰＬと一緒に混合することを包含する方法も
提供する。
【００７０】 オリゴヌクレオチドを含有する非メチル化ＣｐＧ（WO 96/02555）もＴＨ応答
の選択的誘導物質であり、本発明に用いるのに適している。
【００７１】 本発明の特に好ましい組成物は、１つ又はそれ以上の複合肺炎球菌多糖、１つ
又はそれ以上の肺炎球菌タンパク質およびＴｈ１アジュバントを含む。肺炎球菌
タンパク質による細胞媒介性応答の誘導（前記）および免疫系の両部門の間の協
同は、このようなアジュバントを用いて活性調節されて、概して肺炎球菌性疾患
に対する、そして重要なのは老齢者における肺炎球菌性肺炎に対して特に有効な
ワクチンを生じる。
【００７２】 本発明のさらなる局面において、医療に用いるための本明細書中に記載したよ
うな免疫原またはワクチンが提供される。
【００７３】 本発明のさらに別の局面では、不応答者の集団内で多糖抗原に対する体液性抗
体応答を血清変換または誘導し得る、肺炎球菌多糖複合体およびＴｈ１アジュバ
ント（好ましくは３Ｄ−ＭＰＬ）を含む組成物が提供される。
【００７４】 集団の10〜30％は、多糖免疫感作に対する不応答者（ワクチン中の50％より多
い血清型に応答しない）であることが知られている（Konradsen et al., Scand.
J. Immun 40:251（1994）; Rodriguez et al., JID, 173:1347（1996））。こ
れも、複合化ワクチンに関する症例であり得る（Musher et al. Clin. Inf. Dis
. 27:1487（1998））。これは、高危険域の集団（乳児、幼児および老齢者）に
関しては特に重大である。
【００７５】 複合肺炎球菌多糖（これは特定の集団において低応答傾向がある）のＴｈ１ア
ジュバント（前記の「本発明のＴｈ１アジュバント」参照）との組合せは、意外
にもこの不応答性を克服し得る、ということを本発明は見出した。好ましくは３
Ｄ−ＭＰＬが用いられるべきであり、最も好ましくは３Ｄ−ＭＰＬはアルミニウ
ムベースのアジュバントを欠く（依然として良好な応答を提供する）。したがっ
て本発明はこのような組成物を提供し、さらにこのような組成物を投与すること
により肺炎球菌多糖に対する不応答者を治療する方法を提供し、そしてその上さ
らに、多糖抗原に不応答性である個体における肺炎球菌性疾患に対する治療（ま
たは防御）における複合肺炎球菌多糖抗原を含む薬剤の製造に際してのＴｈ１ア
ジュバントの使用を提供する。
【００７６】 一実施態様では、老齢者における肺炎の予防または改善方法であって、肺炎連
鎖球菌多糖抗原およびＴｈ１アジュバントまたは肺炎球菌タンパク質（好ましく
は両方）を含む本明細書に記載したような安全且つ有効量のワクチンを前記の老
齢患者に投与することを包含する方法がある。
【００７７】 さらに別の実施態様では、乳児または幼児における中耳炎の予防または改善方
法であって、肺炎連鎖球菌多糖抗原および肺炎連鎖球菌タンパク質抗原またはＴ
ｈ１アジュバント（好ましくは両方）を含む安全且つ有効量のワクチンを前記の
乳児または幼児に投与することを包含する方法が提供される。
【００７８】 好ましくは、前記のような本発明の方法においては、多糖抗原は多糖タンパク
質複合体として存在する。
【００７９】 本発明のワクチン製剤 本発明のワクチン製剤は、全身または粘膜経路により前記のワクチンを投与す
ることにより、感染に感受性の哺乳類を防御または治療するために用いられ得る
。これらの投与は、筋内、腹腔内、皮内または皮下経路による、あるいは口腔／
栄養管、気道、尿生殖路への粘膜性糖よによる注入を含み得る。肺炎または中耳
炎の治療のためのワクチンの鼻腔内投与は好ましい（肺炎球菌の鼻咽頭運搬はよ
り有効に予防され得るので、したがって、その最初期段階で感染を減衰し得る）
。
【００８０】 各ワクチン中の複合抗原の量は、典型的ワクチンにおいて有意の副作用を伴わ
ずに免疫防御応答を誘導する量として選択される。このような量は、どの特異的
免疫原が用いられるか、そしてそれがどのように存在するかによって変わる。一
般的に、各用量は、0.1〜100μg、好ましくは0.1〜50μg、好ましくは0.1〜10μ
gの多糖を含むと予測され、1〜5μgが最も好ましい範囲である。
【００８１】 ワクチン中のタンパク質抗原の含量は、典型的には1〜100μg、好ましくは5〜
50μg、最も典型的には5〜25μgの範囲である。
【００８２】 特定のワクチンに関する構成成分の最適量は、被験者における適切な免疫応答
の観察を含めた標準試験により確かめられ得る。初回予防接種後、適当な間隔で
１回または数回の追加免疫感作を被験者に施し得る。
【００８３】 ワクチン製剤は、Vaccine Design（"The subunit and adjuvant approach"）
（eds Powell M.F. & Newman M.J.（1995）Plenum Press New York）に一般的に
記載されている。リポソーム内封入は、米国特許第4,235,877号（Fullerton）に
記載されている。
【００８４】 Ｂ）選定肺炎球菌多糖複合体＋３Ｄ−ＭＰＬ組成物 本発明の目的のために、「本発明の肺炎球菌多糖複合体」という用語は、アル
ミニウムベースのアジュバントとともに３Ｄ−ＭＰＬを含む組成物と比較して、
３Ｄ−ＭＰＬを含む組成物中でより免疫原性である肺炎連鎖球菌莢膜多糖の複合
体（例えば、血清型４、血清型６Ｂ、血清型１８Ｃ、血清型１９Ｆおよび血清型
２３Ｆの複合体）を記述する。
【００８５】 本発明の目的のために、「アルミニウムベースのアジュバントを実質的に欠く
」という用語は、付加的アルミニウムベースのアジュバントを伴わずに３Ｄ−Ｍ
ＰＬを含む等価組成物と比較した場合の本発明の肺炎球菌多糖複合体の免疫原性
の任意の低減を引き起こスクリーニング十分なアルミニウムベースのアジュバン
ト（例えば水酸化アルミニウムおよび、特にリン酸アルミニウム）を含有しない
組成物を記述する。好ましくは、抗原性組成物は、本質的に３Ｄ−ＭＰＬから成
るアジュバントを含有すべきである。用量当たりで付加されるアルミニウムベー
スのアジュバントの量は、好ましくは50μg未満、さらに好ましくは30μg未満、
さらに好ましくは10μg未満であるべきであり、最も好ましくは本発明の抗原性
組成物に付加されるアルミニウムベースのアジュバントは存在しない。
【００８６】 本発明の目的のために、アルミニウムベースのアジュバントとともに３Ｄ−Ｍ
ＰＬを含む組成物と比較して、３Ｄ−ＭＰＬを含む組成物中で肺炎球菌多糖複合
体が十分により免疫原性であるか否かの決定は、実施例２に記載されているよう
に確定されるべきである。３Ｄ−ＭＰＬ単独を含む場合に組成物が有意により免
疫原性であるか否かの指標として、３Ｄ−ＭＰＬ単独を含む組成物対リン酸アル
ミニウムアジュバントとともに３Ｄ−ＭＰＬを含む等価組成物間のＧＭＣ Ｉｇ
Ｇ濃度（実施例２で確定されるような）の比は、２より大きい、好ましくは５よ
り大きい、さらに好ましくは７より大きい、さらに好ましくは９より大きい、最
も好ましくは14より大きい値であるべきである。
【００８７】 予防接種への多糖アプローチに関連した問題の１つは、多糖それ自体が貧免疫
原性であるという事実である。免疫原性のこの欠如を克服するよう意図された戦
略としては、大型免疫原性タンパク質担体との多糖の結合（連結（conjugating
））が挙げられるが、これは、バイスタンダーＴ細胞援助を提供する。本発明の
肺炎球菌多糖がバイスタンダーＴ細胞援助を提供するタンパク質担体に結合され
るのが好ましい。用いられ得るこのような担体の例としては、ジフテリア、ジフ
テリア突然変異体および破傷風毒素（それぞれＤＴ、ＤＴ ＣＲＭ１９７および
ＴＴ）、カギアナカサガイヘモシアニン（ＫＬＨ）、ツベルクリンの精製タンパ
ク質誘導体（ＰＰＤ）ならびに髄膜炎菌からのＯＭＰＣが挙げられる。
【００８８】 最も好ましくは、インフルエンザ菌からのプロテインＤ（EP 0 594 610-B）ま
たはその断片（節Ｃ参照）は、本発明の肺炎球菌多糖のための免疫原性タンパク
質担体として用いられる。
【００８９】 一実施態様では、本発明の抗原性組成物は、免疫原性タンパク質に連結され、
３Ｄ−ＭＰＬアジュバントを処方された肺炎球菌多糖血清型（ＰＳ）４を含むが
、この場合、組成物はアルミニウムベースのアジュバントを実質的に欠く。さら
なる実施態様では、抗原性組成物は、免疫原性タンパク質に連結され、３Ｄ−Ｍ
ＰＬアジュバントを処方されたそれぞれＰＳ６Ｂ、１８Ｃ、１９Ｆまたは２３Ｆ
を含むが、この場合、組成物はアルミニウムベースのアジュバントを実質的に欠
く。
【００９０】 本発明のさらに別の実施態様では、３Ｄ−ＭＰＬアジュバントを処方されたＰ
Ｓ４、ＰＳ６Ｂ、ＰＳ１８Ｃ、ＰＳ１９ＦおよびＰＳ２３Ｆ群からの２つまたは
それ以上の肺炎球菌多糖複合体を含む組合せ抗原性組成物が提供されるが、この
場合、組成物はアルミニウムベースのアジュバントを実質的に欠く。
【００９１】 本発明の肺炎球菌多糖複合体の免疫原性は、他の肺炎球菌多糖複合体との組合
せにより有意に影響されない（実施例３）。したがって、本発明の好ましい局面
は、本発明の１つ又はそれ以上の肺炎球菌多糖複合体を、１つ又はそれ以上のさ
らに別の肺炎球菌多糖複合体と組合せて含む組合せ抗原性組成物を提供するが、
この場合、組成物は３Ｄ−ＭＰＬアジュバントを処方されるが、しかしアルミニ
ウムベースのアジュバントを実質的に欠いている。
【００９２】 本発明のさらなる好ましい実施態様では、少なくとも１つの、好ましくは２、
３、４または５つすべてのＰＳ４、６Ｂ、１８Ｃ、１９Ｆまたは２３Ｆ肺炎球菌
多糖複合体を、さらに３Ｄ−ＭＰＬアジュバントを処方されるがしかしアルミニ
ウムベースのアジュバントを実質的に欠いているその他の肺炎球菌多糖複合体の
任意の組合せを含有する組合せ抗原性組成物が提供される。
【００９３】 典型的には、本発明の肺炎連鎖球菌組合せ抗原性組成物は多糖複合体抗原を含
むが、この場合、多糖は、少なくとも４つ、７つ、11、13、15または23の血清型
から得られる（治療される疾患による血清型の好ましい組合せに関する前記の「
本発明の肺炎連鎖球菌多糖抗原」参照）。
【００９４】 本発明の抗原性組成物は、好ましくは、特に老齢者および乳児および幼児にお
ける肺炎球菌感染を予防（または治療）するためのワクチン組成物として用いら
れる。
【００９５】 本発明のさらなる実施態様は、薬剤中に用いるための前記の抗原性組成物の提
供；肺炎連鎖球菌莢膜多糖複合体に対する免疫応答の誘導方法であって、安全且
つ有効量の前記の抗原性組成物の１つを患者に投与する過程を含む方法；ならび
に肺炎球菌性疾患の予防（または治療）のための薬剤の製造における前記の抗原
性組成物の１つの使用を包含する。
【００９６】 老齢者（＋55歳）集団における肺炎ならびに乳児（18ヶ月まで）および幼児（
典型的には18ヶ月〜5歳）における中耳炎の予防／改善のためには、本明細書に
記載したように処方される多価肺炎連鎖球菌多糖複合体を肺炎連鎖球菌タンパク
質またはその免疫学的機能等価物と併用することが、本発明のさらなる好ましい
実施態様である。好ましいタンパク質／タンパク質組合せに関しては、前節「本
発明の肺炎球菌タンパク質」を参照されたい。
【００９７】 好ましくは、本明細書中に前記した抗原性組成物（およびワクチン）は、それ
らが用いられるまで凍結乾燥され、使用時点で、それらは希釈剤を用いて即座に
再構築される。さらに好ましくは、それらは３Ｄ−ＭＰＬの存在下で凍結乾燥さ
れ、食塩溶液で即座に再構築される。
【００９８】 組成物を凍結乾燥すると、より安定な組成物が結果的に生じる（例えば、それ
は多糖抗原の分解を防止する）。その過程は、意外にも、肺炎球菌多糖に対する
より高い抗体力価にも関与する。これは、ＰＳ６Ｂ複合体に関して特に有意であ
ることが示されている。したがって、本発明の別の局面は、３Ｄ−ＭＰＬで活性
調節され、アルミニウムベースのアジュバントを実質的に欠くＰＳ６Ｂ複合体を
含む凍結乾燥抗原性組成物である。
【００９９】 ワクチンの調製に関しては、前記の「本発明のワクチン製剤」の節を参照され
たい。
【０１００】 Ｃ）細菌多糖−プロテインＤ複合体 組合せワクチンに対する傾向は、レシピエントへの不快を軽減し、予定を立て
易くし、レジメンの完了を保証するという利点を有するが、しかしワクチンの効
能を低減するという付随する危険性も存在する（担体タンパク質の過剰使用によ
るエピトープ抑制における考察に関する前記を参照）。したがって、ある集団の
要求を満たし、さらにそれらの構成成分間の免疫原性干渉を示さないワクチン組
合せを製造することは有益である。これらの利点は、乳児、幼児または老齢者の
ような高危険群への組合せワクチンの投与に対して特別な利点を有する本発明の
免疫原性組成物（またはワクチン）により実現され得る。
【０１０１】 本発明は、多糖ベースの免疫原性組成物、例えばワクチンのための担体として
、インフルエンザ菌からのプロテインＤまたはそのだＰＷを提供する。使用に適
した断片としては、Ｔヘルパーエピトープを包含する断片が挙げられる。特に、
プロテインＤ断片は、好ましくはタンパク質のＮ末端1/3を含有する。
【０１０２】 プロテインＤは、インフルエンザ菌からのＩｇＤ結合タンパク質であり（EP
0 594 610 B1）、潜在的免疫原である。
【０１０３】 本発明により意図されるプロテインＤに連結される多糖としては、腸チフス菌
Salmonella typhiに対するＶｉ多糖抗原、髄膜炎菌多糖（Ａ、Ｃ、Ｗ135および
Ｙ型、ならびにＢ群髄膜炎菌の多糖および修飾多糖を含む）、黄色ブドウ球菌か
らの多糖、連鎖球菌属のStreptococcus agalactiaeからの多糖、肺炎連鎖球菌か
らの多糖、ミコバクテリウム属、例えばヒト結核菌Mycobacterium tuberculosis
からの多糖（例えば、マンノホスホイニシチドトレハロース、ミコール酸、マン
ノース面冠アラビノマンナン、それからの莢膜およびアラビノガラクタンス）、
クリプトコックス属のCryptococcus neoformansからの多糖、非分類可能インフ
ルエンザ菌のリポ多糖、ｂ型インフルエンザ菌からの莢膜多糖、モラクセラ属の
Moraxella catharralisのリポ多糖、ゾンネ赤痢菌のリポ多糖、クルーズトリパ
ノソーマのリポペプチドホスホグリカン（ＬＰＰＧ）、癌関連ガングリオシドＧ
Ｄ３、ＧＤ２、腫瘍関連ムチン、特にＴ−Ｆ抗原およびシアリルＴ−Ｆ抗原、な
らびにＴ−Ｆ抗原に構造的に関連するＨＩＶ関連多糖が挙げられるが、これらに
限定されない。
【０１０４】 多糖は、既知の方法により、担体タンパク質に結合され得る（例えば、Likhit
e（米国特許第4,372,945号）およびArmor等（米国特許第4,474,757号）による）
。好ましくは、ＣＤＡＰ複合が実行される（WO 95/08348）。
【０１０５】 ＣＤＡＰでは、シアニル化試薬１−シアノ−ジメチルアミノピリジニウムテト
ラフルオロボレート（ＣＤＡＰ）は、好ましくは多糖−タンパク質複合体の合成
のために用いられる。シアニル化反応は、アルカリ性感受性多糖の加水分解を回
避する相対的に低刺激性条件下で実施され得る。この合成は、担体タンパク質と
の直接結合を可能にする。
【０１０６】 多糖は、水または食塩溶液中に可溶化される。ＣＤＡＰは、アセトニトリル中
に溶解されて、多糖溶液に直接付加される。ＣＤＡＰは多糖のヒドロキシル基と
反応して、シアネートエステルを生成する。活性化工程後、担体タンパク質が付
加される。しリンのアミノ基は、活性化多糖と反応して、イソウレア共有結合を
生成する。
【０１０７】 カップリング反応後、大余分量のグリシンが次に付加されて、残留活性化官能
基をクエンチングさせる。次に生成物をゲル浸透に通して見反応担体タンパク質
および残留試薬を除去する。したがって、本発明は、多糖プロテインＤ複合体の
製造方法であって、多糖を活性化し、多糖をプロテインＤと結合する工程を包含
する方法を提供する。
【０１０８】 本発明の好ましい実施態様では、肺炎連鎖球菌感染の予防のための免疫原性組
成物（またはワクチン）処方物が提供される。
【０１０９】 肺炎球菌が肺、脳脊髄液および血液に拡がるメカニズムは、十分には分かって
いない。正常肺胞に達する細菌の増殖は、それらの相対的乾燥により、そして肺
胞マクロファージの食菌活性により抑制される。これらの等位防衛のあらゆる解
剖学的または生理学的変化は、感染に対する肺の感受性を増大する傾向がある。
肺炎連鎖球菌の細胞壁は、肺の肺胞における炎症性応答の発生において重要な役
割を有する（Gillespie et al.（1997）, I&I 65:3936）。
【０１１０】 典型的には、本発明の肺炎連鎖球菌ワクチンはプロテインＤ多糖複合体を含む
が、この場合、多糖は少なくとも４、７、11、13、15または23の血清型から得ら
れる。治療される疾患による血清型の好ましい組合せに関する前記の「本発明の
肺炎連鎖球菌多糖抗原」を参照されたい。
【０１１１】 本発明のさらなる実施態様では、特に血清型Ａ、Ｃ、Ｗ-135およびＹから、髄
膜炎菌ワクチンが提供される。髄膜炎菌は、細菌性髄膜炎の最も重要な原因の１
つである。これらの生物の炭水化物莢膜は、ビルレンス決定基および防御抗体の
ための標的として作用する。それにもかかわらず、炭水化物は、低年齢小児にお
いて貧免疫原性であることが周知である。本発明は、これらの多糖に特に適した
タンパク質担体であるプロテインＤを提供するが、これは、多糖抗原特異的Ｂ細
胞増殖および成熟、ならびに免疫記憶の誘導を補佐するためにＴ細胞応答を活性
化し得るＴ細胞エピトープを提供する。
【０１１２】 本発明の代替的実施態様では、ｂ型インフルエンザ菌の莢膜多糖（ＰＲＰ）−
プロテインＤ複合体が提供される。
【０１１３】 本発明は、一連の異なる病原体に対する防御を提供する組合せワクチンも意図
する。プロテインＤ担体は、意外にも、多重多糖抗原が連結された組合せワクチ
ン中の担体として有用である。前記のように、エピトープ抑制は、各多糖に関し
て同一担体が用いられる場合に起こると思われる。WO 98/51339は、ＤＴに関す
る組成物中のある比率の多糖とＴＴに関する残りの比率のものを連結することに
よりこの妨害を最小限にしようとするための組成物を示した。
【０１１４】 意外なことに、組合せワクチンにおけるこのようなエピトープ抑制作用を最小
限にするのにプロテインＤは特に適していることを、本発明は見出した。組合せ
における１つ又はそれ以上の多糖は、プロテインＤと連結されるのが有益であり
、好ましくは、抗原はすべて、このような組合せワクチン内でプロテインＤに連
結される。
【０１１５】 好ましい組合せとしては、髄膜炎菌ＣおよびＹ（そして好ましくはＡ）に対す
る防御をもたらすワクチンが挙げられるが、この場合、１つ又はそれ以上の血清
型ＹおよびＣ（そして最も好ましくはＡ）からの多糖抗原はプロテインＤに結合
される。
【０１１６】 インフルエンザ菌多糖ベースのワクチン（好ましくはＴＴ、ＤＴまたはＣＲＭ
197と、あるいは最も好ましくはプロテインＤと連結されたＰＲＰ）は、前記の
組合せワクチンを用いて処方され得る。
【０１１７】 多数の小児科ワクチンは、目下、小児が受ける注射の回数を低減するために組
合せワクチンとして投与されている。したがって、小児科ワクチンに関しては、
他の抗原は、本発明のワクチンを用いて処方され得る。例えば本発明のワクチン
は、ジフテリア毒素（ＤＴ）、破傷風毒素（ＴＴ）および百日咳構成成分［典型
的には脱毒素価百日咳毒素（ＰＴ）、ならびに任意のペルタクチン（ＰＲＮ）お
よび／またはアグルチニン１＋２を有する糸状赤血球凝集素（ＦＨＡ）］を含む
周知の「三価」組合せワクチン、例えばＤＴ、ＴＴ、ＰＴ、ＦＨＡおよびＰＲＮ
抗原を含有する市販のワクチンINFANRIX-DTPa（SmithKlineBeecham Biologicals
）を用いて、あるいは、例えばTritanrixとしてこれもSmithKlineBeecham Biolo
gicalsにより市販されているような全細胞百日咳菌構成成分を用いて処方され、
あるいは別々に、しかし同時に投与され得る。組合せワクチンは、その他の抗原
、例えばＢ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、ポリオウイルス抗原（例えば、不活
性化三価ポリオウイルス−ＩＰＶ）、モラクセラ属のMoraxella catarrhalis外
膜タンパク質、非分類可能インフルエンザ菌タンパク質、Ｂ型髄膜炎菌外膜タン
パク質も含み得る。
【０１１８】 組合せワクチン（特に中耳炎の予防用）中に含入され得る好ましいMoraxella
catarrhalisタンパク質抗原の例を以下に示す：ＯＭＰ106［WO 97/41731（Antex
）およびWO 96/34960（ＰＭＣ）］；ＯＭＰ21；ＬｂｐＡおよびＬｂｐＢ［WO 98
/55606（ＰＭＣ）］；ＴｂｐＡおよびＴｂｐＢ［WO 97/13785およびWO 97/32980
（ＰＭＣ）］；ＣｏｐＢ［Helminen ME, et al.（1993）Infect. Immun. 61:200
3-2010］；ＵｓｐＡ１／２［WO 93/03761（テキサス大学）］；ならびにＯｍｐ
ＣＤ。組合せワクチン（特に中耳炎予防用）中に含入され得る非分類可能インフ
ルエンザ菌抗原の例としては以下のものが挙げられる：フィンブリンタンパク質
［（米国特許第5766608号-Ohio State Research Foundation）］およびそれから
のペプチドを含む融合物［例えば、ＬＢ１（ｆ）ペプチド融合物；米国特許第58
43464号（ＯＳＵ）またはWO 99/64067］；ＯＭＰ26［WO 97/01638（Cortecs）］
；Ｐ６［EP 281673（ニューヨーク州立大学）］；ＴｂｐＡおよびＴｂｐＢ；Ｈ
ｉａ；Ｈｍｗ１、２；Ｈａｐ；ならびにＤ15。
【０１１９】 本発明により意図される好ましい小児科ワクチンを以下に示す： ａ）Ｃ型髄膜炎菌多糖複合体およびｂ型インフルエンザ菌多糖複合体。任意に
Ａおよび／またはＹ型髄膜炎菌多糖複合体を有するが、但し、少なくとも１つの
、好ましくはすべての多糖抗原がプロテインＤに連結される。
【０１２０】 ｂ）ＤＴ、ＴＴ、百日咳構成成分（望ましいＰＴ、ＦＨＡおよびＰＲＮ）、Ｂ
型肝炎表面抗原およびＩＰＶ（不活性化三価ポリオウイルスワクチン）を有する
ａ）のワクチン。
【０１２１】 ｃ）プロテインＤに連結された肺炎連鎖球菌多糖抗原。
【０１２２】 ｄ）モラクセラ属のMoraxella catarrhalisおよび／または非分類可能インフ
ルエンザ菌からの１つ又はそれ以上の抗原を有するｃ）のワクチン。
【０１２３】 前記の組合せワクチンはすべて、担体としてのプロテインＤの含入により利益
を蒙り得る。明らかに、組合せワクチン（例えばエピトープ抑制を克服するため
に）中に包含される担体が多いほど、最終ワクチンはより高価で複雑になる。し
たがって、プロテインＤに連結される組合せワクチンの多糖抗原のすべてのまた
は大多数を有ると、かなりの利点を提供する。
【０１２４】 老齢者（＋55歳）集団における肺炎ならびに乳児または幼児における中耳炎の
予防のためには、本明細書に記載したような多価肺炎球菌多糖−プロテインＤ抗
原を肺炎連鎖球菌タンパク質またはその免疫学的機能等価物と併用することが、
本発明の好ましい実施態様である。このような組合せ中に含入され得る好ましい
タンパク質／タンパク質組合せに関しては、前記の「本発明の肺炎球菌タンパク
質」の節を参照されたい。
【０１２５】 したがって、本発明は、肺炎連鎖球菌多糖−プロテインＤ複合体および肺炎連
鎖球菌タンパク質抗原を含む免疫原性組成物を提供する。
【０１２６】 本発明の多糖−プロテインＤ複合体抗原は、好ましくは、本発明のワクチン処
方物中で活性調節される。適切なアジュバントとしては、水酸化アルミニウムゲ
ル（アルム）またはリン酸アルミニウムのようなアルミニウム塩が挙げられるが
、しかしカルシウム、鉄または亜鉛の塩でもあり得るし、あるいはアシル化チロ
シンまたはアシル化糖、陽イオン的または陰イオン的誘導化多糖またはポリホス
ファゼンの不溶性懸濁液であり得る。
【０１２７】 老齢者ワクチンに関しては、アジュバントはＴＨ１型の応答の望ましい誘導物
質であるよう選択されるのが好ましい。
【０１２８】 特定のＴｈ１アジュバントに関しては、前記の「本発明のＴｈ１アジュバント
」を参照されたい。
【０１２９】 本発明のさらなる局面では、医療に用いるための本明細書中に記載したような
免疫原またはワクチンが提供される。
【０１３０】 ワクチン製剤／複合体の投与に関しては、前記の「本発明のワクチン製剤」を
参照されたい。
【０１３１】 プロテインＤは、基本的には、非分類可能インフルエンザ菌（ｎｔＨｉ）に対
するＢ細胞媒介性防御を生じ得る免疫原であるので、中耳炎に対するワクチン中
にも有益に用いられる。ｎｔＨｉは、宿主細胞を侵襲し、タンパク質抗原により
誘導されるＢ細胞媒介性作用を回避する。中耳炎ワクチンのための抗原としての
プロテインＤの有効性（それ自体または多糖のための担体としての）を増大する
方法を、本発明は意外にも見出した。これは、免疫系の細胞媒介性部門がプロテ
インＤに対して最適化されるよう、強力なＴｈ１応答が被験者において誘発され
るようにプロテインＤを活性調節することによりなされる。これは、意外にも、
投与直前に再構築される、プロテインＤおよびＴｈ１アジュバント（好ましくは
３Ｄ−ＭＰＬ）を含む凍結乾燥化組成物を用いて成し遂げられる。したがって、
本発明は、このような組成物、このような組成物の製造方法（プロテインＤおよ
びＴｈ１アジュバントを含む混合物を凍結乾燥することによる）、ならびに中耳
炎の治療におけるこのような組成物の使用も提供する。
【０１３２】 広義では、本発明は、Ｔｈ１アジュバント（「本発明のＴｈ１アジュバント」
参照）、好ましくは３Ｄ−ＭＰＬの存在下での免疫原の凍結乾燥は、一般に、免
疫原に対するＴｈ１免疫応答を増大する、ということを意図する。したがって、
本発明は、より強力なＴｈ１免疫応答が必要とされるあらゆる免疫原に適用可能
である。このような免疫原は、細菌、ウイルスおよび腫瘍タンパク質抗原、なら
びに自己タンパク質およびペプチドを包含する。
【０１３３】 実施例 実施例で本発明を説明するが、本発明はそれらに限定されない。
【０１３４】 実施例１ 肺炎連鎖球菌莢膜多糖： 11価候補ワクチンとしては、本質的にはEP 72513に記載されたように作製され
た莢膜多糖血清型１、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆお
よび２３Ｆが挙げられる。各多糖は、ＣＤＡＰ化学作用を用いて活性化され、誘
導されて（WO 95/08348）、タンパク質担体と連結される。多糖はすべて、血清
型３（その粘度を減少させるためにサイズ低減される）以外は、それらのネイテ
ィブ形態で連結される。
【０１３５】 タンパク質担体： 選択されるタンパク質担体は、大腸菌中で発現された非分類可能インフルエン
ザ菌からの組換え体プロテインＤ（ＰＤ）である。
【０１３６】 プロテインＤの発現 インフルエンザ菌プロテインＤ プロテインＤ発現のための遺伝子構築 出発物質 プロテインＤコードＤＮＡ プロテインＤは、すべての血清型および非分類可能菌株のインフルエンザ菌の
間で高度に保存される。全プロテインＤ遺伝子をコードするＤＮＡ配列を含有す
るベクターｐＨＩＣ348は、A. Forsgren博士（Department of Medical Microbio
logy, University of Lund, Malmo General Hospital, Malmo, Sweden）から入
手した。プロテインＤのＤＮＡ配列は、Janson et al.（1991）Infect. Immun.
59:119-125により発表されている。
【０１３７】 発現ベクターｐＭＧ１ 発現ベクターｐＭＧ１は、外来挿入遺伝子の転写および翻訳のためのバクテリ
オファージλ由来対照素子が導入されたｐＢＲ322（Gross et al., 1985）の誘
導体である（Shatzman et al., 1983）。さらに、アンピシリン耐性遺伝子をカ
ナマイシン耐性遺伝子と交換した。
【０１３８】 大腸菌ＡＲ58菌株 ＳＡ500誘導体（ｇａｌＥ：：ＴＮ10, λＫｉｌ-ｃＩ857△Ｈ１）上で予め増
殖させたＰ１ファージストックを用いたＮ99の形質導入により、大腸菌ＡＲ58菌
株を生成した。Ｎ99およびＳＡ500は、Martin Rosenberg博士の実験室（Nationa
l Institute of Health）から得られた大腸菌Ｋ12菌株である。
【０１３９】 発現ベクターｐＭＧ１ プロテインＤの製造のために、そのタンパク質をコードするＤＮＡを発現ベク
ターｐＭＧ １中でクローン化した。このプラスミドは、λファージＤＮＡから
のシグナルを利用して挿入外来遺伝子の転写および翻訳を駆動する。ベクターは
、プロモーターＰＬ、オペレーターＯＬおよび２つの利用部位（ＮｕｔＬおよび
ＮｕｔＲ）を含有して、Ｎタンパク質が提供された場合の転写性極性作用を軽減
する（Gross et al., 1985）。ＰＬプロモーターを含有するベクターを大腸菌溶
原性宿主中に°にして、プラスミドＤＮＡを安定化する。溶原性宿主菌株は、ゲ
ノム中に組み込まれる複製欠陥λファージＤＮＡを含有する（Shatzman et al.,
1983）。染色体λファージＤＮＡは、ベクターのＯＬリプレッサーと結合し、
ＰＬプロモーターとのＲＮＡポリメラーゼの結合を阻止し、それにより挿入遺伝
子の転写を阻止するｃＩリプレッサータンパク質の合成を指図する。発現菌株Ａ
Ｒ58のｃＩ遺伝子は、ＰＬ特異的転写が温度シフトにより調節され得るように、
即ち、培養温度の増大がリプレッサーを不活性化し、外来タンパク質の合成が開
始されるように、温度感受性突然変異体を含有する。この発現系は、特に細胞に
対して毒性であり得るものの外来タンパク質の合成の制御を可能にする（Shimat
aka & Rosenberg, 1981 ）。
【０１４０】 大腸菌ＡＲ58菌株 プロテインＤ担体の産生に用いられるＡＲ58溶原性大腸菌株は、標準ＮＩＨ大
腸菌Ｋ12株Ｎ99の誘導体（Ｆ-ｓｕ-ｇａｌＫ２、ｌａｃＺ-ｔｈｒ-）である。そ
れは、欠陥溶原性λファージ（ｇａｌＥ：：ＴＮ10、λＫｉｌ-ｃＩ857△Ｈ１）
を含有する。Ｋｉｌ-表現型は、宿主高分子合成の遮断を阻止する。ｃＩ857突然
変異は、ｃＩリプレッサーに温度感受性損傷を付与する。△Ｈ１欠失は、λファ
ージ正当オペロンおよび宿主ｂｉｏ、ｕｖｒ３およびｃｈｌＡ遺伝子座を除去す
る。ＳＡ500誘導体（ｇａｌＥ：：ＴＮ10, λＫｉｌ-ｃＩ857△Ｈ１）上で予め
増殖させたＰ１ファージストックを用いたＮ99の形質導入により、大腸菌ＡＲ58
菌株を生成した。隣接ｇａｌＥ遺伝子中のエト等サイクリン耐性をコードするＴ
Ｎ10トランスポゾンの存在によりテトラサイクリンを用いて、欠陥リソゲンのＮ
99中への導入を選択した。
【０１４１】 ベクターｐＭＧＭＤＰＰｒＤの構築 インフルエンザウイルスの非構造Ｓ１タンパク質をコードする遺伝子を含有す
るｐＭＧ１ベクター（ｐＭＧＮＳＩ）を用いて、ｐＭＧＭＤＰＰｒＤを構築した
。それぞれ５‘および３’末端にＮｃｏＩおよびＸｂａＩ制限部位を含有するＰ
ＣＲプライマーを用いて、ｐＨＩＣ348ベクター（Janson et al. 1991）からの
ＰＣＲにより、プロテインＤ遺伝子を増幅した。次に、 ＮｃｏＩおよびＸｂａ
Ｉ間のｐＭＧＮＳ１中にＮｃｏＩ／ＸｂａＩ断片を導入し、したがってＮＳ１タ
ンパク質のＮ末端81アミノ酸を含有する融合タンパク質を、その後、ＰＤタンパ
ク質を作製した。このベクターを、ｐＭＧＮＳ１ＰｒＤと名付けた。
【０１４２】 前記の構築物に基づいて、プロテインＤ発現のための最終構築物を生成した。
ｐＭＧＮＳ１ＰｒＤからＢａｍＨＩ／ＢａｍＨＩ断片を除去した。このＤＮＡ加
水分解は、最初の３つのＮ末端残基以外のＮＳ１コード領域を除去する。ベクタ
ーの再結紮時に、その後のＮ末端アミノ酸配列を有する融合タンパク質をコード
する遺伝子が生成された。 ‐‐‐‐ＭＤＰ ＳＳＨＳＳＮＭＡＮＴ‐‐‐‐ ＮＳ１ プロテインＤ プロテインＤは、普通は脂質鎖が結合されるリーダーペプチドまたはＮ末端シ
ステインを含有しない。したがって、そのタンパク質は、ペリプラズムに排出さ
れないし、脂質化もされず、可溶性形態で細胞質中に残存する。
【０１４３】 37℃での熱ショックにより、ＡＲ58宿主菌株中に最終構築物ｐＭＧ−ＭＤＰＰ
ｒＤを導入した。カナマイシンの存在下で、プラスミド含有細菌を選択した。選
定エンドヌクレアーゼによる単離プラスミドＤＮＡの消化によって、プロテイン
ＤコードＤＮＡ挿入物の存在を実証した。組換え体大腸菌株をＥＣＤ４と呼ぶ。
【０１４４】 プロテインＤの発現は、λＰLプロモーター／ＯLオペレーターの制御下にある
。宿主菌株ＡＲ58は、ＯLとの結合により低温でλＰLからの発現を遮断するゲノ
ム内の温度感受性ｃＩ遺伝子を含有する。温度を上げると、ｃＩはＯLから放出
され、プロテインＤが発現される。発酵終了時に、細胞を濃縮し、凍結する。
【０１４５】 収穫細胞からの抽出およびプロテインＤの精製を、以下のように実施した。凍
結細胞培養ペレットを解氷し、細胞崩壊溶液（クエン酸塩緩衝液、ｐＨ6.0）中
に再懸濁して、最終ＯＤ650＝60とする。Ｐ=1000 barで高圧ホモジナイザーに懸
濁液を２回通す。遠心分離により細胞培養ホモジネートを清澄化し、濾過により
細胞破砕屑を除去する。一次精製過程において、濾過溶解物を陽イオン交換クロ
マトグラフィーカラム（SP Sepharose Fast Flow）に適用する。ＰＤはイオン相
互作用によりゲルマトリックスと結合するが、それを、溶離緩衝液のイオン強度
の段階的増大により溶離する。
【０１４６】 二次精製過程では、不純物を陰イオン交換マトリックス（Q Sepharose Fast F
low）上に保持する。ＰＤはゲル上に結合せず、フロースルーで収集され得る。
【０１４７】 両カラムクロマトグラフィー過程においては、ＯＤにより分画収集をモニタリ
ングする。精製プロテインＤを含有する陰イオン交換カラムクロマトグラフィー
のフロースルーを、限外濾過により濃縮する。
【０１４８】 プロテインＤ含有限外濾過保持物を最後に0.2μm膜に通す。
【０１４９】 化学的性質： 活性化およびカップリング化学作用： 活性化およびカップリング条件は、各多糖に特異的である。これらを表１に示
す。注射のために、ネイティブ多糖（ＰＳ３以外）を2 MのＮａＣｌ中または水
中に溶解した。すべての血清型に関して、最適多糖濃度を評価した。
【０１５０】 アセトニトリル中の100 mg/mlストック溶液から、ＣＤＡＰ（ＣＤＡＰ／ＰＳ
比0.75 mg/mg ＰＳ）を多糖溶液に付加した。1.5分後、0.2 Mのトリエチルアミ
ンを付加して、特異的活性化ｐＨを得た。25℃で2分間、このｐＨで多糖の活性
化を実施した。プロテインＤ（量は初期ＰＳ／ＰＤ比によっている）を活性化多
糖に付加し、特異的ｐＨで１時間、カップリング反応を実施した。次に、25℃で
30分間そして4℃で一夜、グリシンを用いて反応を止めた。
【０１５１】 0.2 MＮａＣｌで平衡させたセファクリル500ＨＲゲル濾過カラムを用いてゲル
濾過により、複合体を精製した。
【０１５２】 溶離分画の炭水化物およびタンパク質の含量を確定した。複合体をプールし、
0.22μm滅菌膜上で滅菌濾過した。複合体調製物中のＰＳ／タンパク質比を確定
した。
【０１５３】 特性化： 各複合体を特性化して、表２に記載した内訳に合した。レソルシノール検定に
より多糖含量（μg/ml）を、Lowry検定によりタンパク質含量（μg/ml）を測定
した。その濃度比により、最終ＰＳ／ＰＤ比（w/w）を確定する。
【０１５４】 残留ＤＭＡＰ含量（ng/μgＰＳ）： ＣＤＡＰによる多糖の活性化は、多糖中にシアネート基を導入し、ＤＭＡＰ（
４−ジメチルアミノ−ピリジン）を遊離する。SBで開発された特異的検定により
、残留ＤＭＡＰ含量を確定した。
【０１５５】 遊離多糖含量（％）： α−ＰＤ抗体および飽和硫酸アンモニウムを用いたインキュベーションおよび
その後の遠心分離後に得られた上清に関して、4℃に保持するかまたは37℃で7日
間貯蔵した複合体の遊離多糖含量を確定した。
【０１５６】 上清中の遊離多糖の定量のために、α−ＰＳ／α−ＰＳ ＥＬＩＳＡを用いた
。α−ＰＤ／αＰＳＥＬＩＳＡにより、複合体の非存在も制御した。遊離多糖の
量の低減は、改良型複合ワクチンをもたらした。
【０１５７】 抗原性： 同一複合体上の抗原性を、サンドイッチ型ＥＬＩＳＡで分析したが、この場合
、抗体の捕獲および検出は、それぞれα−ＰＳおよびα−ＰＤであった。
【０１５８】 遊離タンパク質含量（％）： 試料のＳＤＳ処理による方法を用いて、「遊離」残留プロテインＤのレベルを
確定した。0.1％ＳＤＳの存在下で100℃で10分間、複合体を加熱し、ＳＥＣ−Ｈ
ＰＬＣゲル濾過カラム（ＴＳＫ3000−ＰＷＸＬ）上に注入した。プロテインＤは
二量体であるので、ＳＤＳでの構造の解離により「遊離」プロテインＤのレベル
を過剰刺激する危険性がある。
【０１５９】 分子サイズ（Ｋav）： ＳＥＣ−ＨＰＬＣゲル濾過カラム（ＴＳＫ5000−ＰＷＸＬ）上で、分子サイズ
分類を実施した。
【０１６０】 安定性： 4℃に保持するかまたは37℃で7日間貯蔵した複合体に関して、 ＨＰＬＣ−Ｓ
ＥＣゲル濾過カラム（ＴＳＫ6000−ＰＷＸＬ）上で安定性を測定した。
【０１６１】 11価特性化を表２に示す。
【０１６２】 タンパク質複合体をリン酸アルミニウム上に吸着させて、プールし、最終ワク
チンを生成し得る。
【０１６３】 結論： 有望なワクチンの構成成分であることが示されている免疫原性複合体を生成し
た。最良品質最終複合肺炎球菌多糖生成物に関する最適ＣＤＡＰ条件を、11価物
の各々に関して発見した。前記の改良型（最適化）ＣＤＡＰ法により得られるこ
れらの肺炎球菌多糖の複合体は（担体タンパク質にかかわらず、しかし好ましく
はプロテインＤ）、したがって、本発明のさらなる局面である。
【０１６４】 実施例２−乳児ラットにおける11価肺炎球菌ＰＳ−ＰＤ複合体ワクチンの免疫
原性に及ぼす先進アジュバントの作用の研究 0.1μgの各多糖の用量の11価肺炎球菌ＰＳ−ＰＤ複合体ワクチン（実施例１の
方法にしたがって製造）で、以下のアジュバント処方物：なし、ＡｌＰＯ4、３
Ｄ−ＭＰＬ、ＡｌＰＯ4上の３Ｄ−ＭＰＬを用いて、乳児ラットを免疫感作した
。
【０１６５】 ３Ｄ−ＭＰＬのみを有する処方物は、11の抗原のうち５つに関して、他の処方
物より統計学的に（そして意外にも）より免疫原性（最大ＧＭＣ ＩｇＧ）であ
った。
【０１６６】 オプソニン食菌作用は、ＧＭＣ結果を確証した。
【０１６７】 材料と方法 免疫感作プロトコール 乳児ＯＦＡラットを異なる母親に対して無作為化し、それらが初回免疫感作を
施されたときは7日齢であった。それらには、14および28日後にさらに２回の免
疫感作を施した。56日目に（第３回免疫感作後28日目）、採血を実施した。ワク
チンを皮下注射した。ラットは、10匹／ワクチン群であった。
【０１６８】 プロテインＤ上に以下の多糖血清型：１、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１
４、１８Ｃ、１９Ｆ、２３Ｆを連結させたものを含む11価肺炎球菌複合ワクチン
で、ラットを免疫感作した。
【０１６９】 処方物 異なる先進アジュバントの作用を調べるために、複合体の用量を0.1μgの各多
糖に一定に保持し、アジュバントＡｌＰＯ4および３Ｄ−ＭＰＬを、アジュバン
トを全く含まないものを含めて、異なる用量および組合せで処方した。これらを
参考のために表３に数値で列挙する。
【０１７０】 ＡｌＰＯ4上の吸着 以下の手法により、濃縮吸着一価物を調製した。50μgのＡｌＰＯ4（ｐＨ5.1
）を5μgの複合多糖と2時間混合した。ｐＨをｐＨ5.1に調整し、混合物をさらに
16時間放置した。1500mMのＮａＣｌをふかして、塩濃度を150mMにした。5分後、
5 mg/mlの２−フェノキシエタノールを付加した。さらに30分後、ｐＨを6.1に調
整して、4℃で3日以上放置した。
【０１７１】 希釈剤の調製 ＮａＣｌ150mM／5 mg/mLフェノキシエタノール中で３つの希釈剤を調製した。
【０１７２】 Ａ：ＡｌＰＯ4、1mg/mlで。
【０１７３】 Ｂ：ＡｌＰＯ4上の３Ｄ−ＭＰＬ、それぞれ1000および250μg/ml。重量比は、
３Ｄ−ＭＰＬ／ＡｌＰＯ4＝5/20。
【０１７４】 Ｃ：ＡｌＰＯ4上の３Ｄ−ＭＰＬ、それぞれ1000および561μg/ml。重量比は、
３Ｄ−ＭＰＬ／ＡｌＰＯ4＝50/89。
【０１７５】 吸着11価物の調製 11の濃縮吸着ＰＳ−ＰＤ一価物を適切な比率で混合した。ＡｌＰＯ4の補体を
希釈剤Ａとして付加した。必要な場合、水性溶液（非吸着価。下記の方法１参照
）として、あるいは希釈剤ＢまたはＣ（ＡｌＰＯ4上に２用量で吸着された３Ｄ
−ＭＰＬ。下記参照）として、３Ｄ−ＭＰＬを付加した。
【０１７６】 方法１ ３Ｄ−ＭＰＬを、水性懸濁液として併合吸着複合体に付加した。それを室温で
10分間、11価物に混合して、投与まで4℃で貯蔵した。
【０１７７】 方法２ ３Ｄ−ＭＰＬをＡｌＰＯ4上に予備吸着させた後、併合吸着複合体に付加した
（希釈剤ＢおよびＣ）。1 mlの希釈剤を調製するために、３Ｄ−ＭＰＬ（250ま
たは561 μg）の水性懸濁液を、室温で5分間、150 mMのＮａＣｌ、ｐＨ6.3中の1
mgのＡｌＰＯ4と混合した。この溶液をＮａＣｌ、ｐＨ6.1／フェノキシ中に稀
釈し、4℃で一夜インキュベートした。
【０１７８】 非吸着化11価物の調製 11のＰＳ−ＰＤ複合体を混合し、正しい比率で150 mMのＮａＣｌ、ｐＨ6.1、
フェノキシ中に稀釈した。必要な場合には、３Ｄ−ＭＰＬを溶液（非吸着化）と
して付加した。
【０１７９】 すべての注射用の処方物は、初回投与の18日前に調製した。
【０１８０】 ＥＬＩＳＡ ヒト血清中の肺炎連鎖球菌莢膜多糖に対するＩｇＧ抗体の定量のためのＥＬＩ
ＳＡ手法に関してＷＨＯワークショップから得られたプロトコールを用いて、Ｅ
ＬＩＳＡを実施し、ラットＩｇＧを測定した。基本的に、精製莢膜多糖は微小滴
定プレート上に直接被覆される。血清試料を、すべての肺炎球菌に共通の、そし
て開示（EP 72513 B1）にしたがって精製される肺炎球菌多糖中に焼く0.5％で存
在する細胞壁多糖（物質Ｃ）とともに予備インキュベートする。Jackson Immuno
Laboratories Inc.試薬を用いて、結合ネズミＩｇＧを検出した。滴定曲線を、
数学論理的対数方程式によりモデル化された内部標準（モノクローナル抗体）に
参照した。SoftMax Proソフトウェアを用いて計算を実施した。これらの結果に
関する最大絶対誤差は、2の因数内であると予測した。相対誤差は30％未満であ
る。
【０１８１】 オプソニン食菌作用 精製ヒトＰＭＮおよび嬰児ウサギ補体を用いたＣＤＣプロトコール（分化ＨＬ
60細胞を用いた肺炎連鎖球菌オプソニン食菌作用。バージョン11）を用いて、血
清型３、６Ｂ、７Ｆ、１４、１９Ｆおよび２３Ｆに関してオプソニン力価を決定
した。修正は社内肺炎球菌株の使用を含み、食菌性ＨＬ60細胞を精製ヒト好中球
ＰＭＮに置き換えた（これらの食菌性細胞間には高度の相関が認められる）。さ
らに、3 mmガラスビーズを微小滴定ウエルに付加して、混合を増大し、これは、
400であるべきと推奨された食細胞：細菌比の低減を可能にした。
【０１８２】 結果 ＩｇＧ濃度 すべての血清型およびＰＤに関して確定されたゲノム平均ＩｇＧ濃度を表４〜
１０に示す。血清型６Ｂ、１４、１９Ｆおよび２３Ｆに関しては、４価処方物を
用いて得られた前の結果を比較のために含める。
【０１８３】 最高ＩｇＧ濃度を、表４〜１０で強調した。３Ｄ−ＭＰＬ組成物体３Ｄ−ＭＰ
Ｌ／ＡｌＰＯ4組成物に関する統計的ｐ値は、表１１に示してある。アジュバン
ト処方物４（高用量３Ｄ−ＭＰＬを有する非吸着化複合体）は、11例中9例で最
高ＧＭＣを示す。5/11例では、低用量のＭＰＬは、第二の最大免疫原性物である
。さらに、アジュバント活性化は、全血清型に関して用量の修正によるより高い
ＧＭＣを示し（データは示されていない）、これは血清型４、６Ｂ、７Ｆ、１８
Ｃおよび２３Ｆに関しては統計学的に有意である（p＜0.05。95％ＣＩから）。
【０１８４】 オプソニン食菌作用 プール化血清に関するオプソニン食菌作用結果を、血清型３、６Ｂ、７Ｆ、１
４、１９Ｆおよび２３Ｆに関して表４〜８に示す。ほとんどの部分に関して、こ
れらのオプソニン力価は、ＧＭＣ ＩｇＧを確証する。実際、ＩｇＧ濃度との相
関は、血清型６Ｂ、１９Ｆ、２３Ｆに関しては85％より大きい（データは示され
ていない）。血清型３に関しては、３Ｄ−ＭＰＬ群のみがオプソニン活性を閾値
より上に誘導した、ということに留意することは重要である。
【０１８５】 結論 この実験では、３Ｄ−ＭＰＬ単独の使用は最高ＩｇＧ濃度を誘導する、という
ことは予測されなかった。
【０１８６】 アジュバントを修正することにより得られた最大ＧＭＣを、ＰＳ用量を修正す
ることにより得られた最大ＧＭＣと比較し、３Ｄ−ＭＰＬが、5/11血清型で有意
に高い応答を誘導し得た、ということを見出した。
【０１８７】 表１１は、３Ｄ−ＭＰＬおよび３Ｄ−ＭＰＬ／ＡｌＰＯ4組成物を比較した場
合（処方過程および３Ｄ−ＭＰＬの用量を比較）、３Ｄ−ＭＰＬ＋ＡｌＰＯ4よ
りむしろ３Ｄ−ＭＰＬだけを用いて処方した場合、免疫原性に関して、多糖複合
体のうちの５つが有意に改良されるということを示す：ＰＳ４、ＰＳ６Ｂ、ＰＳ
１８Ｃ、ＰＳ１９ＦおよびＰＳ２３Ｆ。
【０１８８】 実施例３−成体ラットにおけるＰＳ４、ＰＳ６Ｂ、ＰＳ１８Ｃ、ＰＳ１９Ｆお
よびＰＳ２３Ｆ複合体の免疫原性に及ぼす組合せの作用の研究 別々に、または多価組成物（４−、５−、７−または10価物）中に併合した肺
炎球菌多糖−プロテインＤ複合体ワクチンを用いて、成体ラットを免疫感作した
。ラット10匹の群を28日置いて2回免疫感作して、28日目および42日目（２回目
投与の14日後）に被験血液を採取した。
【０１８９】 肺炎球菌多糖に対するＩｇＧ抗体に関して、ＥＬＩＳＡにより血清を検査した
。ＥＬＩＳＡにより測定した場合、複合体はすべて、特異的ＩｇＧ抗体を誘導し
た。表１２は、２回目投与後14日目にＩｇＧ濃度により測定した場合の、成体ラ
ットにおけるそれらの免疫原性に及ぼす１価ＰＳ６Ｂ、ＰＳ１８Ｃ、ＰＳ１９Ｆ
およびＰＳ２３Ｆの組合せの作用を示す。
【０１９０】 すべての試料に関して統計分析を実施して、組合せ時の抗体濃度の差が有意で
あるか否かを確定した。多価ワクチン中の血清型ＰＳ６Ｂ、ＰＳ１８Ｃ、ＰＳ１
９ＦおよびＰＳ２３ＦプロテインＤ複合体の組合せはいずれも、それらの免疫原
性を有意に変えなかった。
【０１９１】
【表１】
【０１９２】
【表２】
【０１９３】
【表３】
【０１９４】
【表４】
【０１９５】
【表５】
【０１９６】
【表６】
【０１９７】
【表７】
【０１９８】
【表８】
【０１９９】
【表９】
【０２００】
【表１０】
【０２０１】
【表１１】
【０２０２】
【表１２】
【０２０３】 実施例４−マウスにおける肺炎球菌肺コロニー形成に対するＰＤ−複合11価多
糖ワクチンの防御的有効性に及ぼすニューモリジンおよび３Ｄ−ＭＰＬの付加の
有益な影響 免疫学的解読 ニューモリジン特異的血清ＩｇＧのＥＬＩＳＡ投与 ＰＢＳ中に稀釈した100μl／ウエルの2μg/ml組換え体ネイティブニューモリ
ジン（ＰＬＹ）を用いて、37℃で2時間、Maxisorp Nuncイムノプレートを被覆し
た。プレートを0.9％ＮａＣｌ、0.05％トゥイーン20緩衝液で3回洗浄した。次に
、標準曲線として付加された（670 ng/mlＩｇＧで出発）抗ＰＬＹ血清参照の連
続２倍稀釈液（ＰＢＳ／0.05％トゥイーン20、100μl／ウエル）および血清試料
（1/10稀釈液で出発）を、撹拌しながら20℃で30分間インキュベートした。前記
と同様に洗浄後、 ＰＢＳ／0.05％トゥイーン20中に5000ｘ稀釈したペルオキシ
ダーゼ−複合ヤギ抗マウスＩｇＧ（Jackson）を、撹拌しながら20℃で30分間イ
ンキュベートした（100μl／ウエル）。洗浄後、100μl／ウエルの再ベール化緩
衝液（100mM、ｐＨ4.5クエン酸塩緩衝液中ＯＰＤＡ0.4 mg/mlおよびＨ2Ｏ20.05
％）とともに、室温で15分間、プレートをインキュベートした。50μl／ウエル
の1 NＨＣｌを付加することにより、再ベール化を停止した。Emaxイムノリーダ
ー（Molecular Devices）を用いて、490および620 nmで光学濃度を読み取った。
SoftMaxProソフトウェアを用いた４パラメーター数学法により、抗体力価を算定
した。
【０２０４】 溶血抑制 ニューモリジン（ＰＬＹ）溶血活性を抑制する血清抗体の能力を測定するため
に、この検定を実行した。コレステロール（ＰＬＹとの相互作用に感受性）を排
除するために、血清試料に以下の処置を２回施した：それらを１等容量のクロロ
ホルムと混合し、次に撹拌しながら45分間インキュベートした。1000 rpmで10分
間遠心分離後に上清を収集した。コレステロール消去血清を、96ウエル微小プレ
ート（Nunc）中で稀釈した（1 mMジチオトレイトール、0.01％ＢＳＡ、15 mMト
リス、150 mMＮａＣｌ、ｐＨ7.5中の連続２倍稀釈液）。4 HU（溶血単位）のＰ
ＬＹを含有する50μl溶液を各ウエル中に付加し、37℃で15分間インキュベート
した。次に、100μlのヒツジ赤血球（1％溶液）を、37℃で30分間、付加した。1
000 rpmで10分間遠心分離後、上清（150μl）を収集し、405 nmでの光学密度読
み取りのために別の96ウエル微小プレート中に入れた。結果は、中点稀釈力価と
して表した。
【０２０５】 ニューモリジン化学的脱毒素化 組換え体ネイティブニューモリジン（ＰＬＹ）を50 mMリン酸塩、500 mMＮａ
Ｃｌ、ｐＨ7.6緩衝液に対して透析した。時々撹拌しながら、39.5℃で以下の全
工程を実行した。１日目に、10％トゥイーン80（1/250 v/v）、57.4 mMのＮ−ア
セチルトリプトファン、ｐＨ7.6（3/100 v/v）、リン酸塩緩衝液中の2.2 Mグリ
シン（1/100 v/v）およびリン酸塩緩衝液中の10％ホルムアルデヒド（3/100 v/v
）をＰＬＹ溶液中に付加した。２および３日目に、10％ホルムアミドを、それぞ
れ3/100および2/100 v/v比で再び付加した。時々撹拌しながら、７日目まで、39
.5℃でインキュベーションを持続した。最後に、50 mMリン酸塩、500 mMＮａＣ
ｌ、ｐＨ7.6緩衝液に対してＰＬＹを透析した。溶血検定において、ＰＬＹの完
全不活性化を実証した。
【０２０６】 ＯＦ１マウスにおける肺炎球菌鼻腔内チャレンジ 5.105 CFUのマウス適合化肺炎連鎖球菌血清型６Ｂを、麻酔下で7週齢ＯＦ１雌
マウスに鼻腔内接種した。接種後６時間目に肺を切除し、Todd Hewithブロス（
ＴＨＢ、Gibco）培地中で均質化した（Ultramax, 24000 rpm、4℃）。肺ホモジ
ネートの連続10倍稀釈液を、37℃で一夜、酵母菌抽出物補充ＴＨＢ寒天を含入す
るペトリ皿上にプレート化した。肺炎球菌肺感染をCFU数／マウスとして確定し
、対数計量平均として表した。検出限界は2.14 log CFU／マウスであった。
【０２０７】 実施例４Ａ．抗ニューモリジン免疫応答に及ぼす３Ｄ−ＭＰＬアジュバント作
用 本実施例では、ネイティブ組換え体ニューモリジン（ＰＬＹ、J. Paton, Chil
dren's Hospital, North Adelaide, Australiaにより提供された）およびその化
学的脱毒素化対応物（ＤＰＬＹ）に対する免疫応答に及ぼす３Ｄ−ＭＰＬアジュ
バント活性化の影響を、我々は評価した。前記と同様に化学的脱毒素化を実行し
た。
【０２０８】 0、14および21日目に、Ａ：100μgのＡｌＰＯ；またはＢ：100μgのＡｌＰＯ
＋5μgの３Ｄ−ＭＰＬ（３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリル脂質Ａ、供給元Ribi
Immunochem）中に含入された1μgのＰＬＹまたはＤＰＬＹを用いて、10匹の雌
６週齢Balb/cマウスの群を筋肉内免疫感作した。図１Ａおよび１Ｂは、第３回血
清後に測定したＥＬＩＳＡ ＩｇＧおよび溶血抑制力価（ＨＬＩ） どの抗原でも、３Ｄ−ＭＰＬ補充処方物を接種した動物において最良免疫応答
を誘導した。興味深いことに、ＤＰＬＹは、ＡｌＰＯ4＋３Ｄ−ＭＰＬとともに
投与した場合、ＰＬＹと同様に免疫原性であったが、一方、ＡＬＰＯ4処方物中
では免疫原であった。これは、脱毒素化ニューモリジンに対する抗体応答を改良
する３Ｄ−ＭＰＬの有益な能力を示した。
【０２０９】 ニューモリジンを含有する組成物では、突然変異的脱毒素化ニューモリジンよ
りむしろ化学的脱毒素化ニューモリジンを用いるのが望ましい。これは、今日ま
でに得られた脱毒素化突然変異体が依然として残留毒素活性を有するためであり
、化学的脱毒素化ニューモリジンは残留毒素活性を有さない。したがって、本発
明の別の局面では、概して、ワクチン中に用いるために化学的脱毒素化されたニ
ューモリジンを含む組成物は、Ｔｈ１アジュバント、好ましくは３Ｄ−ＭＰＬで
活性調節されるべきである、と考えられる。本発明は、このような組成物を提供
する。組成物にＴｈ１アジュバント（好ましくは３Ｄ−ＭＰＬ）を付加する過程
を包含する免疫原性組成物内の化学的脱毒素化ニューモリジンの免疫応答の増大
方法も意図される。
【０２１０】 実施例４Ｂ．血清型６Ｂを鼻腔内チャレンジさせたＯＦ１マウスにおける肺炎
球菌肺コロニー形成に対するＰＤ−複合11価多糖ワクチンの防御的有効性に及ぼ
すニューモリジンおよび３Ｄ−ＭＰＬアジュバントの弱毒化突然変異体の付加の
有益な影響 本実施例では、11価多糖−プロテインＤ複合体、弱毒化突然変異体ニューモリ
ジン抗原（ＰｄＢ、WO 90/06951）およびＡｌＰＯ4＋３Ｄ−ＭＰＬアジュバント
を含有するワクチンの予防的効能を、古典的ＡｌＰＯ4吸着11価多糖−プロテイ
ンＤ複合体処方物と比較して、我々は評価した。
【０２１１】 0および14日目に、Ａ：50μgのＡｌＰＯ；Ｂ：0.1μgＰＳ／血清型のＰＤ複合
11価多糖ワクチン＋50μgのＡｌＰＯ4；またはＣ：0.1μgＰＳ／血清型のＰＤ複
合11価多糖ワクチン＋10μgのＰｄＢ（J. Paton, Children's Hospital, North
Adelaide, Australia提供）＋50μgのＡｌＰＯ4＋5μgの３Ｄ−ＭＰＬ（供給元R
ibi Immunochem）を含有する処方物を用いて、12匹の雌4週齢ＯＦ１マウスの群
を皮下免疫感作した。21日目に、前記と同様にチャレンジを実行した。
【０２１２】 図１Ｃに示したように、ＰｄＢを補充し、ＡｌＰＯ4＋ＭＰＬで活性調節した1
1価多糖複合ワクチンにより、非常に有意の防御（p＜0.007）が付与された（黒
棒は算術平均を表す）。これに反して、11価多糖複合体／ＡｌＰＯ4処方物で免
疫感作した動物においては、有意の防御は観察されなかった。この結果は、ニュ
ーモリジン抗原（弱毒化されていても）および３Ｄ−ＭＰＬアジュバントの付加
が肺炎に対する11価多糖複合ワクチンの有効性を増大することを立証した。
【０２１３】 実施例４Ｃ．実施例４Ｂに示した防御の免疫相関物 弱毒価突然変異体ニューモリジン（ＰｄＢ）および３Ｄ−ＭＰＬを補充した11
価多糖複合体ワクチンにより、実施例４Ｂで付与された防御の免疫相関物を確立
するために、多糖６ＢおよびＰｄＢに対するプレチャレンジ血清学的抗体応答を
前記と同様に測定した。
【０２１４】 次に、抗体力価を、チャレンジ後６時間目に収集した対応する動物の肺で測定
された細菌コロニー数と比較した。Log/Log線状回帰に関してＲ2を算定した。
【０２１５】 算定Ｒ2は、抗ＰｄＢおよび抗６Ｂ抗体応答に関してそれぞれ0.18および0.02
であった。これは、体液性免疫応答と両抗原に対する防御との間の相関の非存在
を示した。抗６Ｂ抗体力価は、11価複合体ワクチン（ＧＭＴ＝0.318 ng/ml）で
免疫感作した群またはＰｄＤおよび３Ｄ−ＭＰＬを補充した同一ワクチン（ＧＭ
Ｔ＝0.458 ng/ml）で免疫感作した群において有意に異ならなかった。したがっ
て、処方物Ｃで観察された防御改善は、単に多糖６Ｂに対する高抗体応答による
ものではなかった。
【０２１６】 合わせて考えると、防御は体液性免疫応答単独により媒介されるだけでなく、
むしろ３Ｄ−ＭＰＬの存在下でＰｄＢにより誘導された細胞媒介性免疫によって
も媒介された、ということを結果は示唆する。これは、最適防御のための免疫系
の両部門を対等にするよう、肺炎球菌多糖複合体ワクチン中のタンパク質抗原（
単数または複数）および効力のあるアジュバント（単数または複数）の付加に対
してさらなる支持を与えた。
【０２１７】 実施例５−ニューモリジンで能動的免疫感作され、肺炎球菌ＰＳに対する抗体
で受動的免疫感作されたマウスにおける免疫系の両部門の共働 実施例５Ａ−肺炎に対して防御する受動的投与抗６Ｂ多糖（抗ＰＳ）抗体の濃
度を見出す 方法 ワクチン群：下記に詳述した群により（マウス計64匹）、マウス16匹の４群を
、−１日目に100μlの非稀釈ラット抗多糖抗血清で受動的免疫感作（腹腔内）さ
せた。
【０２１８】
【表１３】
【０２１９】 動物：Charles River, Canadaからの体重約35 gの64匹の雄ＣＤ−１マウス（
約10週齢）。
【０２２０】 麻酔：イソフルラン（3％）＋Ｏ2（1 L／分）でマウスを麻酔した。
【０２２１】 生物：肺炎連鎖球菌Ｎ1387（血清型６）を、5％ウマ血液を補充したトリプチ
カーゼ大豆寒天プレート（ＴＳＡ）から収穫し、ＰＢＳ6 ml中に懸濁した。感染
直前に、1 ml細菌懸濁液を9 mlの冷却溶融栄養寒天（ＢＢＬ）中に稀釈して、41
℃に保持した。マウスに容量50 ul中の約6.0 log10 cfu／マウスを投与した。
【０２２２】 感染：0日目に、前記のようにマウスを麻酔して、非外科的気管内挿管による
気管支内点滴注入により、肺炎連鎖球菌Ｎ1387（50μl冷却細菌懸濁液）を感染
させた。この方法は、WoodnutとBerry（Antimicrob. Ag. Chemotherap. 43:29（
1999））により記載された。
【０２２３】 試料：感染後3日目に、マウス8匹／群をＣＯ2過剰投与により屠殺して、肺を
切除し、1 mlＰＢＳ中で均質化した。10倍連続稀釈液をＰＢＳ中で調製して、生
育可能細菌数を数え上げた。5％ウマ血液を補充したＴＳＡプレート上に３通り
、試料を接種（20μl）し、評価前に37℃で一夜インキュベートした。さらに別
の組のマウスを7日目に屠殺して、前記と同様に試料採取した。
【０２２４】 結果：
【０２２５】
【表１４】
【０２２６】 結論：概して、あらゆる処置群から単離した細菌数に有意差は認められなかっ
た。これは、測定可能防御が5μg/ml以下の濃度の抗多糖によりもたらされたこ
とを示す。
【０２２７】 これは、いくつかのヒト臨床試験で観察されるものと同様であり、即ち、抗多
糖体はいくつかの集団においては肺炎球菌性肺炎に対して防御するのに不十分で
ある。
【０２２８】 実施例５Ｂ−アジュバントを用いた場合と用いない場合とのＰｌｙ（ニューモ
リジン）の能動的投与および亜最適抗ＰＳ抗体との共働作用によりもたらされる
肺炎からの防御を確定する 方法 動物：6週齢時体重約20 g、10週齢時約38 gの、Charles River, St. Quebec,
Constant, Canadaからの128匹の雄ＣＤ−１マウス（免疫感作時6週齢、感染時10
週齢）。
【０２２９】 免疫感作：マウス16匹の６群を、-22日目および-14日目に皮下注射により下記
に詳述するワクチン100 ulで免疫感作した（マウス計128匹）。ＰｄＢ（WO 90/0
6951）は、オーストラリアのJames Paton博士の御好意により入手した。３Ｄ−
ＭＰＬは、Ribi/Corixaから入手した。
【０２３０】 -1日目に、特定群（下記の表参照）を、濃度4.26μg/ml（4 mlの5μg/ml＋1.3
mlの2μg/ml）のマウス抗多糖抗体で受動的免疫感作（腹腔内100 μl）した。
【０２３１】
【表１５】
【０２３２】 感染：0日目に、マウスを麻酔した（3％イソフルラン＋1 L／分Ｏ2）。肺炎連
鎖球菌Ｎ1387（血清型６）の増殖物を、5％ウマ血液を補充したトリプチカーゼ
大豆寒天プレート（ＴＳＡ）から収穫し、ＰＢＳ6 ml中に懸濁することにより細
菌接種物を調製した。感染直前に、10倍稀釈液（1 ml＋9 ml）を冷却溶融栄養寒
天（41℃に保持）中に調製した。気管内挿管による気管支内点滴注入によりマウ
スを感染させて、容量50 ul中の約6.0 log10 cfu／マウスを投与した。この方法
は、WoodnutとBerry（Antimicrob. Ag. Chemotherap. 43:29（1999））により記
載されていた。
【０２３３】 試料：感染後72時間目に、マウス8匹／群をＣＯ2過剰投与により屠殺して、肺
を切除し、1 mlＰＢＳ中で均質化した。10倍連続稀釈液をＰＢＳ中で調製して、
生育可能細菌数を数え上げた。5％ウマ血液を補充したＴＳＡプレート上に３通
り、試料を接種（20μl）し、評価前に37℃で一夜インキュベートした。さらに
別の組のマウスを感染後8日目に屠殺して、前記と同様に試料採取した。
【０２３４】 データ分析 処置の比較のための結果測定値は、感染後3および7日目の肺中の細菌数であっ
た。結果は、群平均＋標準偏差として示される。スチューデントｔ検定を用いて
統計分析を実施したが、この場合、＜0.05のＰ値を、有意であるとみなした。
【０２３５】 結果： 感染後72時間 群１−４からの細菌数は、群１−３の場合よりも有意に低かった（ｐ＜0.05）
。
【０２３６】 群１−４からの細菌数は、群１−5の場合よりも有意に低かった（ｐ＜0.05）
。
【０２３７】 感染後168時間 全群の細菌数は、8日目では3日目より約2 log低かったが、これは感染が消散
したことを示す。
【０２３８】 群１−２からの細菌数は、群１−５の場合よりも有意に低かった（ｐ＜0.05）
。
【０２３９】
【表１６】
【０２４０】 前記で実証されたように、抗多糖抗体単独（群１−５）は、肺中の肺炎球菌の
増殖に対する防御をもたらさない。ＡｌＰＯ4で活性調節したＰｄＢはいずれも
防御を付与しないが、しかし8日目に、ＰｄＢを３Ｄ−ＭＰＬと組合せた場合（
群１−２）に、防御傾向が認められる。
【０２４１】 3日目に、群は最も有意に防御し、群１−４は３つの要素、即ちＰｄＢ、３Ｄ
−ＭＰＬおよび受動的投与抗多糖抗体をすべて有した。この結論は、死亡率によ
り支持される。群１−４は死亡は2/8だけであったが、これに比して群１−５お
よび１−３に関しては5/10であった。
【０２４２】 結論： 受動的免疫感作動物を用いて実験を実施したので、ニューモリジンおよびＭＰ
Ｌでの能動的免疫感作の共働作用も、多糖抗原に対する抗体レベルの増大による
とは言えない。
【０２４３】 肺炎球菌多糖に対して動物を受動的免疫感作しただけであったので、8日目ま
でに、このような抗体のレベルは宿主から大いに消散していた。
【０２４４】 そのような場合でも、肺炎球菌性肺炎に対する有意の防御は、ニューモリジン
＋３Ｄ−ＭＰＬで免疫感作した群において、特に濡森＋３Ｄ−ＭＰＬ＋受動的投
与抗多糖抗体で免疫感作した群において認められたが、これは、この組合せの共
働作用を示す。
【０２４５】 能動的（好ましくは、複合多糖を用いて）に抗多糖免疫感作を実行していた場
合、Ｂ細胞記憶の作用および一定レベルの抗ＰＳ抗体が免疫応答協同作用に寄与
していたので、作用はさらに顕著であったと思われる（例えば、図１Ｃ参照。こ
の場合、多糖およびタンパク質で能動的免疫感作された動物は、チャレンジ後の
肺中に細菌が認められなかったことが示された）。
【０２４６】 実施例６−３Ｄ−ＭＰＬで活性調節した11価肺炎球菌多糖プロテインＤ複合体
ワクチンの1年齢Balb/Cマウスにおける免疫原性 序論および対象（単数または複数）： 肺炎球菌感染に対する防御は、オプソニン食菌作用を介した血清型特異的抗体
により媒介される。抗体濃度の増大はより大きい防御を生じ、したがって体液性
応答を増大するための方法の発見に多大の努力が費やされてきた、と推測され得
る。前臨床試験においてワクチンを連結するために首尾よく適用されてきた一戦
略は、免疫刺激性アジュバントの使用である（Poolman et al. 1998, Carbohydr
ate-Based Bacterial Vaccines. In:Handbook of Experimental Pharmacology e
ds. P. Perlmann and H. Wigsell. Springer-Verlag, Heidelberg, Dで再検討さ
れている）。
【０２４７】 この節に提示したデータは、臨床試験を模倣するよう意図されたプロトコール
における臨床ロットを用いた最新実験結果を示す。
【０２４８】 プロトコール： 1/10回のヒト投与量の肺炎球菌多糖プロテインＤ複合体ワクチン、または23価
純多糖ワクチンで、1年齢Balb/Cマウスを免疫感作した。用いたワクチンは、そ
れぞれ1 mcg用量の血清型６Ｂおよび２３Ｆならびに5 mcgの11価複合ワクチンの
残りの血清型、0.1 mdg用量の11価複合ワクチン、または5 mcg３Ｄ−ＭＰＬで活
性調節した0.1 mcg用量の11価複合ワクチンに対応する臨床ロットＤＳＰ009、Ｄ
ＳＰ013またはＤＳＰ014であった。11価複合ワクチンはすべて、50μgのＡｌＰ
Ｏ4でも活性調節した。
【０２４９】 マウス20匹の群を筋内免疫感作した。下記の表に列挙した群の注射は、0およ
び21日目に実施した。35日目（第２回投与後14日目）に被験血液を採取した。
【０２５０】
【表１７】
【０２５１】 ＣＤＣ／ＷＨＯ合意プロトコール後、即ち細胞壁多糖による血清の中和後、肺
炎球菌多糖に対するＩｇＧ抗体に関してＥＬＩＳＡにより、血清を検査した。血
清型特異的ＩｇＧ１モノクローナル抗体を用いてＥＬＩＳＡを較正して、抗体濃
度をmcg/mlで得た。
【０２５２】 ＵＮＩＳＴＡＴバージョン5.0βを用いて、比較の統計分析を算定した。log形
質転換化ＩｇＧ濃度に関して、Tukey-HSD法によるＡＮＯＶＡを実施した。Fishe
rの精度検定を用いて、血清変換の対方式比較を実施した。
【０２５３】 結果： 第２回免疫感作（投与２）後14日で誘導された11の血清型およびプロテインＤ
に対するＧＭＣ ＩｇＧおよび95％信頼区間を、下記の表に示す。血清変換率を
示すが、この場合、95％信頼区間は算定され得なかった。
【０２５４】 群１は、普通は動物においてＩｇＭのみを誘導する純多糖による免疫感作の効
果を示す。ほとんどのＩｇＧレベルは検出の閾値より下であった。それにもかか
わらず、balb/cマウスは少数の肺炎球菌多糖、特に血清型３、１９Ｆおよび１４
に対してＩｇＧを作り得た。
【０２５５】 複合体ワクチンによる免疫感作は、２３Ｆ以外の全血清型に対して高血清変換
率でＩｇＧ抗体を誘導した。
【０２５６】 血清型７Ｆおよび１９Ｆに関してのみ用量依存性応答（群４対群２）を観察し
たが、しかしこれらの観察は統計学的に有意でなかった。血清型３、６Ｂ、７Ｆ
および１９ＦならびにＰＤに関して２回の投与後により大きい応答を観察し、こ
れらの観察は、３つの処方物すべてを有する多くの場合に、統計学的に有意であ
った。
【０２５７】 最も興味深いのは、３Ｄ−ＭＰＬの作用である。３Ｄ−ＭＰＬ処方ワクチン（
群３ｂ）の2回の投与は、特異的ＩｇＧの最高ＧＭＣを誘導し、これは、すべて
の血清型に関して統計的に有意であったが、但し、２３Ｆの場合は、有意に高い
血清変換率を示した（ｐ＝0.02，群３ｂ対２ｂ。Fisher精度）。
【０２５８】
【表１８】
【０２５９】 群の定義に関しては、前記の表を参照されたい。
【０２６０】 結論： ここに提示したデータは、11価肺炎球菌多糖プロテインＤ複合体ワクチンへの
３Ｄ−ＭＰＬの付加が、試験したすべての血清型に対する老齢balb/cマウスにお
ける免疫応答を増大した、ということを実証する。
【０２６１】 ほとんどの場合、ワクチンの２回投与は、1回投与より高い幾何学平均ＩｇＧ
濃度を誘導した。これは、ヒトにおいてさえ、純多糖ワクチンを用いて観察され
ないため、Ｔ細胞依存性免疫応答および免疫記憶の誘導の指標とみなされる。
【０２６２】 これらのデータは、アジュバント（好ましくは３Ｄ−ＭＰＬ）で活性調節した
複合肺炎球菌多糖を用いるワクチン投与計画を支持し、それにより、少なくとも
２回用量の活性調節化ワクチンが、好ましくは1〜12週おきに、最も好ましくは3
週間置きに投与される。このような投与計画は、本発明のさらなる局面とみなさ
れる。
【０２６３】 実験に用いたマウスは、ＰＳ２３（純または複合）に対して非応答性であった
。興味深いことに、用いたワクチン組成物にかかわらず多糖に対する抗体レベル
は低いままであったが、しかし３Ｄ−ＭＰＬをアジュバントとして用いた場合（
血清変換は有意に高い）には、より多数のマウスがＰＳ ２３に応答した。ワク
チン中の肺炎球菌多糖に対する非応答性を軽減するための複合肺炎球菌多糖を含
むワクチン組成物中のＴｈ１アジュバント、特に３Ｄ−ＭＰＬの使用は、本発明
のさらに別の局面である。前記の２回投与計画を用いた前記の組成物による非応
答性の軽減方法は、さらに別の局面である。
【０２６４】 実施例７−Ｃ型髄膜炎菌多糖−プロテインＤ複合体（ＰＳＣ−ＰＤ） Ａ：プロテインＤの発現 実施例１と同様。
【０２６５】 Ｂ：多糖Ｃの製造 Ｃ群多糖の供給源は、髄膜炎菌のＣ11菌株である。これを、古典的発酵技術（
EP 72513）を用いて発酵させる。複合過程に用いられる乾燥粉末多糖は、Mencev
ax（SB Biologicalsも参照）と同一である。
【０２６６】 Ｃ11菌株のアリコートを解氷し、0.1 mlの懸濁液を、酵母菌抽出透析物（10％
、v/v）を補充したMueller Hinton培地ペトリ皿上に画線し、水飽和空気インキ
ュベーター中で36℃で23〜25時間インキュベートする。
【０２６７】 次に、表面増殖物を滅菌発酵培地中に再懸濁して、この懸濁液を、酵母菌抽出
透析物（10％、v/v）を補充したMueller Hinton培地および滅菌ビーズガラスを
含入する１つのRouxボトル上に接種する。水飽和空気インキュベーター中で36℃
で23〜25時間のRouxボトルのインキュベーション後、表面増殖物を10 mlの滅菌
発酵培地中に再懸濁して、0.2〜0.3 mlのこの懸濁液を12の他のMueller Hinton
培地Rouxボトル上に接種する。
【０２６８】 水飽和空気インキュベーター中で36℃で23〜25時間のインキュベーション後、
表面増殖物を10 mlの滅菌発酵培地中に再懸濁する。細菌懸濁液を円錐フラスコ
中にプールする。
【０２６９】 次にこの懸濁液を、滅菌注射器を用いて無菌的に発酵器に移す。
【０２７０】 陰圧下で清浄室中に入れた発酵器中で髄膜炎菌の発酵を実施する。発酵は一般
に、約1010個の細菌／mlに対応して約10〜12時間後（即ち早期定常期）に完了さ
れ、ｐＨ増大により検出される。
【０２７１】 この段階で、全ブロスを熱不活性化（56℃で12分）した後、遠心分離する。不
活性化の前後に、ブロスの試料を採取し、Mueller Hinton培地ペトリ皿上に画線
する。
【０２７２】 Ｃ：ＰＳ精製 精製方法は、全発酵ブロス上で実施される多段階手法である。精製の第一段階
では、遠心分離により不活性培養を清澄化して、上清を回収する。
【０２７３】 多糖精製は、第四級アンモニウム塩（セチルトリメチルアンモニウムブロミド
／ＣＴＡＢ、CETAVLON R）による沈降に基づいている。ＣＴＡＢは、それらのｐ
Ｉによって、多糖、核酸およびタンパク質のような多陰イオンと不溶性複合体を
形成する。イオン制御条件後、この方法を用いて、不純物（低導電率）または多
糖（高導電率）を沈降させ得る。
【０２７４】 清澄化上清に含有される多糖を、マトリックスとして珪藻土（セライト（商標
）545）を用いて沈降させて、異なる沈降／精製中の不溶性不活性塊の形成を回
避する。
【０２７５】 髄膜炎菌多糖Ｃに関する精製計画： 工程１：セライト（商標）545上でのＰＳＣ−ＣＴＡＢ複合体固定および0.05
％ＣＴＡＢを用いた洗浄による細胞破砕屑、核酸およびタンパク質の除去。
【０２７６】 工程２：50％ＥｔＯＨによるＰＳの溶離。混濁した、そして不純物およびＬＰ
Ｓを含有する第一分画を廃棄する。以後の分画中のＰＳの存在を、凝集検定によ
り立証する。
【０２７７】 工程３：セライト（商標）545上でのＰＳＣ−ＣＴＡＢ複合体再固定および0.0
5％ＣＴＡＢ洗浄による小型核酸およびタンパク質の除去。
【０２７８】 工程４：50％ＥｔＯＨによるＰＳの溶離。第一混濁分画を廃棄する。以後の分
画中のＰＳの存在を、凝集検定により立証する。
【０２７９】 溶離液を濾過し、粗製多糖を含有する濾液を収集する。エタノールを付加して
最終濃度を80％とすることにより、多糖を濾液から沈降させる。次に、多糖を白
色粉末として回収し、真空乾燥して、-20℃で貯蔵する。
【０２８０】 Ｄ：ＣＤＡＰ複合化（conjugation） ＰＳＣおよびＰＤの複合化 ＰＳＣおよびＰＤの複合化のためには、古典的ＣＮＢｒ活性化およびスペーサ
ーを介した担体タンパク質との結合よりＣＤＡＰ複合技法が好まれる。１−シア
ノ−４−ジメチルアミノピリジニウムテトラフルオロボレート（ＣＤＡＰ）を用
いたシアニル化により、多糖を先ず活性化する。ＣＤＡＰは水溶性シアニル化試
薬であって、この場合、シアノ基の求電子性はＣＮＢｒの場合を上回って増大さ
れ、シアニル化反応を相対的に低刺激性条件下で実施させる。活性化後、多糖は
、いかなるスペーサー分子も導入せずに、そのアミノ基により担体タンパク質に
直接結合され得る。未反応エステルシアネート基は、グリシンとの広範な反応に
よりクエンチングされる。複合体ワクチンの調製に関与する工程の総数は低減さ
れ、最も重要なのは、免疫原性である可能性を有するスペーサー分子が最終生成
物中に存在しないことである。
【０２８１】 ＣＤＡＰによる多糖の活性化は、多糖中にシアネート基を導入し、ジメチルア
ミノピリジン（ＤＭＡＰ）が遊離される。シアネート基は、その後のカップリン
グ手法中にタンパク質中のＮＨ2基と反応して、カルバメートに転換される。
【０２８２】 ＰＳＣ活性化およびＰＳＣ−ＰＤカップリング 活性化およびカップリングは+25℃で実施する。
【０２８３】 120 mgのＰＳを、少なくとも4時間、ＷＦＩ中に溶解する。
【０２８４】 ＣＤＡＰ溶液（アセトニトリル中に新たに調製した100 mg/ml）を付加して、
ＣＤＡＰ／ＰＳ（w/w）比を0.75とする。
【０２８５】 1分30秒後、トリエチルアミンの付加によりｐＨを活性化ｐＨまで上げ、ＰＤ
付加まで安定化させる。
【０２８６】 3分30秒時点で、ＮａＣｌを付加して、最終濃度を2 Mとする。
【０２８７】 4分時点で、精製ＰＤを付加して、ＰＤ／ＰＳ比を1.5/1とする。ｐＨを直ちに
カップリングｐＨ（ｐＨ10）に調整する。溶液を、ｐＨ調節下で1時間放置する
。
【０２８８】 クエンチング 6 mlの2 Mグリシン溶液をＰＳ／ＰＤ／ＣＤＡＰ混合物に付加する。ｐＨをク
エンチングｐＨ（ｐＨ8.8）に調整する。溶液を作用温度で30分間撹拌した後、
連続的にゆっくり撹拌しながら、+2〜8℃で一夜置く。
【０２８９】 ＰＳ−ＰＤ精製 濾過（5μm）後、S400HR Sephacrylゲル上でのゲル浸透クロマトグラフィーに
より冷室中でＰＳ−ＰＤ複合体を精製して、小型分子（ＤＭＡＰを含む）を除去
し、ＰＤ：溶離−150 mMＮａＣｌ、ｐＨ6.5を再複合化して、ＵＶ280 nm、ｐＨ
および導電率をモニタリングする。
【０２９０】 異なる分子サイズの反応構成成分を基礎にして、ＰＳ−ＰＤ複合体を先ず溶離
し、その後遊離ＰＤを、そして最後にＤＭＡＰを溶離する。ＤＭＡＢ（ＰＳ）お
よびμＢＣＡ（タンパク質）により検出されるような複合体を含有する分画をプ
ールする。プール分画を滅菌濾過（0.2μm）する。
【０２９１】 Ｅ：ＰＳＣ−ＰＤ吸着複合体ワクチンの処方 ＡｌＰＯ4の洗浄 ＡｌＰＯ4上のＰＳＣ−ＰＤ複合体の吸着を最適化するために、ＡｌＰＯ4を洗
浄して、ＰＯ4 3-濃度を低減する。
【０２９２】 −ＡｌＰＯ4を150mMＮａＣｌで洗浄して、遠心分離（4ｘ）する。
【０２９３】 −次にペレットを150 mMのＮａＣｌ中に再懸濁した後、濾過（100μm）する。
そして 濾液を加熱滅菌する。
【０２９４】 この洗浄ＡｌＰＯ4は、ＷＡＰ（洗浄オートクレーブ処理リン酸塩）と呼ばれ
る。
【０２９５】 配合方法 ＰＳＣ−ＰＤ複合体本体をＡｌＰＯ4 ＷＡＰ上に吸着させた後、完成品を最
終処方する。ＡｌＰＯ4 ＷＡＰをＰＳＣ−ＰＤとともに室温で5分間撹拌する。
ｐＨを5.1に調整し、混合物を室温で18時間撹拌する。ＮａＣｌ溶液を付加して1
50 mMとし、混合物を室温で5分間撹拌する。２−フェノキシエタノールを付加し
て、5 mg/mlとし、混合物を室温で15分間撹拌した後、ｐＨ6.1に調整する。
【０２９６】 最終組成物／用量 ＰＳＣ−ＰＤ： 10μgＰＳ ＡｌＰＯ4 ＷＡＰ： 0.25 mgＡｌ3+ ＮａＣｌ： 150 mM ２−フェノキシエタノール： 2.5 mg 注射用水： 0.5 mlにする ｐＨ： 6.1 Ｆ：前臨床情報 マウスにおける他糖複合体の免疫原性 ＰＳＣ−ＰＤ複合体の免疫原性を、６〜８週齢Balb/cマウスで査定した。純（
非吸着）複合体またはＡｌＰＯ4上に吸着した複合体を、一価ワクチンとして注
入した。誘導された抗ＰＳＣ抗体をＥＬＩＳＡにより測定し、一方、殺細菌試験
により機能性抗体を分析した。両方法は、ＣＤＣ（Centers for Disease Contro
l and Prevention, Atlanta, USA）プロトコールを基礎にしている。応答対用量
およびアジュバント（ＡｌＰＯ4）作用を査定するために実施した２つの異なる
実験からの結果を示す。
【０２９７】 用量範囲実験 この実験では、Balb/CマウスにＰＳＣ−ＰＤを２回（2週間間隔）注射した。
４つの異なる用量：0.1；0.5；2.5および9.6μg／動物のＡｌＰＯ4上処方複合体
を用いた。14日目（第１回後14日目）、28日目（第２回目後14日目）および42日
目（第２回後28日目）に、マウス（10匹／群）を採血した。ＥＬＩＳＡにより測
定した多糖Ｃ特異的抗体の幾何学平均濃度（ＧＭＣ）を、参照としてＩｇＧを用
いて、μgＩｇＧ／mlで表した。殺細菌抗体をプール血清に関して測定し、嬰児
ウサギ補体の存在下で髄膜炎菌Ｃ11菌株を用いて、細菌の50％を殺害し得る稀釈
液の逆数として力価を表した。
【０２９８】 得られた用量−応答曲線は、2.5μgからプラトーを示す。結果は、第１回後14
日目と第2回後14日目の間に良好な追加免疫応答が認められるということを示す
。第２回後28日目の抗体レベルは、第２回後14日目のレベルと少なくとも同等で
ある。殺細菌抗体力価はＥＬＩＳＡ濃度と一致し、ＰＳＣ−ＰＤ複合体の免疫原
性を確証する。
【０２９９】 アジュバントの効果 この実験では、ＡｌＰＯ4上に処方された１ロットのＰＳＣ−ＰＤ複合体を査
定し、純（非吸着）複合体を比較のために注射した。2μgの複合体を用いて、皮
下経路により、2週間間隔で、マウス10匹／群に2回注射した。14日目（第１回後
14日目）、28日目（第２回目後14日目）および42日目（第２回後28日目）にマウ
スを採血し、そしてＥＬＩＳＡおよび機能性抗体力価を測定した（殺細菌検定に
関しては第２回後14日目および第２回後28日目のみ）。ＡｌＰＯ4処方物は、非
活性調節処方物と比較した場合、10倍までの抗体力価を誘導する。
【０３００】 結論： 前記の実験結果から、以下の全般的結論が得られた： −ＰＳＣ−ＰＤ複合体は、連結された場合に、ＰＳＣがＴ細胞依存性抗原にな
るということを実証する既往性応答を誘導する。
【０３０１】 −ＥＬＩＳＡにより測定された抗ＰＳＣ抗体濃度は殺細菌性抗体力価とよく相
関し、このことは、ＰＳＣ−ＰＤ複合体により誘導された抗体が髄膜炎菌血清型
Ｃに対して機能的であることを示す。
【０３０２】 −ＡｌＰＯ4上に吸着された複合体約2.5μgは、マウスにおいて最適抗体応答
を引き出すと思われる。
【０３０３】 −ＣＤＡＰ化学作用は、免疫原性ＰＳＣ−ＰＤ複合体を製造するための適切な
方法であると思われる。
【０３０４】 実施例８−髄膜炎菌血清型Ａ−ＰＤ複合体からの多糖の調製 多糖Ａ（ＰＳＡ）の乾燥粉末を0.2 MＮａＣｌ溶液中に1時間溶解して、最終濃
度を8 mg/mlとする。次に、ＨＣｌまたはＮａＯＨを用いてｐＨ値を6に固定し、
溶液を25℃に熱調節する。0.75 mgＣＤＡＰ／mgＰＳＡ（調製物を100 mg/mlアセ
トニトリルとする）をＰＳＡ溶液に付加する。ｐＨ調節せずに1.5分後、0.2 MＮ
ａＯＨを付加して、ｐＨを10とする。2.5分後、約1のＰＤ／ＰＳＡ比にしたがっ
て、プロテインＤ（5 mg/mlに濃縮）を付加する。１時間のカップリング反応時
間中は、ｐＨを10に保持する。次に、10 mgのグリシン（2 M、ｐＨ9.0）／mgＰ
ＳＡを付加し、25℃で30分間、ｐＨ値を9.0に調節する。次に混合物を4℃で一夜
保存した後、排除カラムクロマトグラフィー（Sephacryl S400HR, Pharmacia）
により精製する。先ず複合体が、その後未反応ＰＤおよび副産物（ＤＭＡＰ、グ
リシン、塩）が溶離する。複合体を収集し、Sartopore膜（Sartorius）上での0.
2μm濾過により滅菌する。
【０３０５】 実施例９−実施例７および８の生成物のin vitro特性化
【０３０６】
【表１９】
【０３０７】 in vivo結果 Balb/Cマウスを動物モデルとして用いて、複合体の免疫原性を調べた。複合体
をＡｌＰＯ4またはＡｌ（ＯＨ）3上に吸着させる（500μGのＡｌ3+上に10μgの
ＰＳ）か、あるいは吸着させなかった。マウスに以下のように注射した：２週間
間隔で２回注射（2μgＰＳ／注射）。
【０３０８】 これらの結果から、遊離ＰＳは免疫応答に大いに影響を及ぼす、と先ず結論し
得る。10％未満の遊離ＰＳを有する複合体を用いて、より良好な結果を得た。し
たがって、ＣＤＡＰ法に対する前記の改良は、本発明のさらなる局面である。
【０３０９】 処方物も重要である。ＡｌＰＯ4は、このモデルにおいて最も適切なアジュバ
ントであると思われる。複合体は、多糖を単独で注射した場合には観察されない
追加免疫作用を誘導する。
【０３１０】 結論 それぞれ1および0.6〜0.7（w/w）の最終ＰＳ／タンパク質比を有する髄膜炎菌
ＡおよびＣの複合体を得た。遊離ＰＳおよび遊離担体タンパク質は、それぞれ10
％および15％以下であった。多糖回収率は、70％より高い。前記の改良型（最適
化）ＣＤＡＰ法により得られるＰＳＡおよびＰＳＣの複合体（担体タンパク質に
かかわらず、しかし好ましくはプロテインＤ）は、したがって、本発明のさらな
る局面である。
【０３１１】 実施例１０−ｂ型インフルエンザ菌は、２歳以下の小児における髄膜炎の主因
の１つである。破傷風毒素上の複合体としてのインフルエンザ菌の莢膜多糖（Ｐ
ＲＰ）が周知である（J. Robbinsにより開発された化学作用により連結される）
。ＣＤＡＰは、改良型化学である。好ましくはＰＤにＰＲＰを連結するために見
出された最適ＣＤＡＰ条件について、以下に説明する。
【０３１２】 複合化の反応に影響を及ぼすパラメーターを以下に示す： ・多糖の初期濃度（遊離多糖の最終レベルにおよび滅菌濾過工程に二重の影響
を及ぼし得る） ・担体タンパク質の初期濃度 ・多糖対タンパク質の初期比（遊離多糖の最終レベルにおよび滅菌濾過工程に
二重の影響を及ぼし得る） ・用いられるＣＤＡＰの量（通常は大余分量で） ・反応温度（多糖の分解、反応の速度論、および反応性基の分解に影響を及ぼ
し得る） ・活性化およびカップリングのｐＨ ・クエンチングのｐＨ（残留ＤＭＡＰのレベルに影響を及ぼす） ・活性化、カップリングおよびクエンチングの時間 最終生成物の量を最適化するための３つの最も重要なパラメーターは、多糖／
タンパク質の初期比、多糖の初期濃度およびカップリングｐＨである、というこ
とを本発明人等は見出した。
【０３１３】 したがって、前記の３つの条件を３つの軸として用いて、反応立方体を設計し
た。これらの軸に関する中心点（および実験値範囲）は、ＰＳ／タンパク質比−
1/1（±0.3/1）；［ＰＳ］＝5 mg/ml（±2 mg/ml）；およびカップリングｐＨ＝
8.0（±1.0ｐＨ単位）であった。
【０３１４】 あまり必須でないパラメーターは以下のように固定した：30 mgの多糖を用い
た；温度25℃；［ＣＤＡＰ］＝0.75 mg/mgＰＳ；ｐＨは0.2 MＮａＯＨで滴定；
活性化ｐＨ＝9.5；活性化温度＝1.5分間；カップリング温度＝１時間；［タンパ
ク質］＝10 mg/ml；クエンチングｐＨ＝9.0；クエンチング温度＝1時間；溶媒中
にＰＳを溶解する温度＝2 MＮａＣｌ中で１時間；12 cm／時間で150 mMＮａＣｌ
で用利したSephacryl S-400HR上での精製；ならびに5ml／分でのSARTOLAB P20に
よるフィルター滅菌。
【０３１５】 前記の反応立方体内で製品を製造する場合の最適化条件を確立するために考察
されたデータを以下に示す：工程データ−濾過後の最大収率、今夕されるタンパ
ク質の最大レベル；ならびに生成物の品質データ−最終ＰＳ／タンパク質比、遊
離ＰＳレベル、遊離タンパク質レベル、残留ＤＭＡＰ（ＣＤＡＰの分解生成物）
の最小レベル。
【０３１６】 濾過からの結果 濾過後の結果を左右する因子は、初期［ＰＳ］およびカップリングｐＨおよび
初期ＰＳ／タンパク質比間の相互作用である。低［ＰＳ］では、後者２つの因子
との相互作用はほとんど認められず、良好な濾過可能性が常に結果的に生じる（
全生成物に関して約95％）。しかしながら、高濃度では、ｐＨおよび初期比が増
大すれば、濾過可能性は減少する（高［ＰＳ］、最低比、最低ｐＨ＝99％濾過；
しかし高［ＰＳ］、最高比およびｐＨ＝19％濾過）。
【０３１７】 タンパク質混入レベル 最終ＰＳ／タンパク質比の、初期比に関する比は、カップリングの効率の測定
値である。高［ＰＳ］では、ｐＨは両比の比に影響しない。しかしながら、初期
比は影響する（低初期比で1.75、高初期比で1.26）。低［ＰＳ］では、両比の比
は、ほとんどの部分に関しては、より低いが、しかしながら、ｐＨは、ここでは
より大きい影響を有する（低ｐＨ、低比＝0.96；低ｐＨ、高比＝0.8；高ｐＨ、
低比＝1.4；および高ｐＨ、高比＝0.92）。
【０３１８】 最終ＰＳ／タンパク質比 最終比は、初期比および［ＰＳ］によっている。大多数のかなり大きい最終比
は、組合せ高初期比および高［ＰＳ］を用いて得られる。最終比に及ぼすｐＨの
影響は、弱［ＰＳ］と同じくらい有意ではない。
【０３１９】 遊離プロテインＤのレベル 最小量の遊離プロテインＤは、高ｐＨおよび高［ＰＳ］で観察される（0.0に
近似のレベル）。高［ＰＳ］の作用は、ｐＨが低い場合に特に顕著になる。初期
比の上昇は、遊離プロテインＤの増大にわずかに寄与する。
【０３２０】 残留ＤＭＡＰ 初期比は、有意の作用を有さない。これに対比して、ＤＭＡＰのレベルは、［
ＰＳ］に伴って増大し、ｐＨが上昇すると低減する。
【０３２１】 結論 したがって、最も好ましい複合化条件は、以下の通りである：カップリングｐ
Ｈ＝9.0；［ＰＳ］＝3 mg/ml；および初期比＝1/1。このような条件を用いた場
合の、最終生成物の特徴を以下に示す：
【０３２２】
【表２０】
【０３２３】 前記の改良型（最適化）ＣＤＡＰ法により得られるＰＲＰの複合体は（担体タ
ンパク質にかかわらず、しかし好ましくはプロテインＤ）、したがって、本発明
のさらなる局面である。
【０３２４】 実施例１１：抗原としてのプロテインＤ−非分類可能インフルエンザ菌に対す
るその防御効力は３Ｄ−ＭＰＬを用いてそれを処方することにより以下に改善さ
れ得るか 11価肺炎球菌多糖−プロテインＤ複合体ワクチンを用いて、雌Balb/cマウス（
10匹／群）を、20週齢で初回（Ｄ0）の免疫感作（筋内）し、2週間後（14日目）
に２回目の免疫感作を施した。２回目免疫感作後７日目に、血液を収集した。Ｉ
ｇＧ１、ＩｇＧ２ａおよびＩｇＧ２ｂ型抗体の量に関して、プロテインＤに対す
る抗体力価を測定した。
【０３２５】 室温で15分間撹拌しながら複合体を15.75％のラクトースと併合し、ｐＨを6.1
±0.1に調整し、凍結乾燥することにより、凍結乾燥11価ワクチン（ＡｌＰＯ4を
含有しない）を調製した（当該サイクルは通常は、-69℃で出発し、漸次3時間に
亘って-24℃に調整し、次にこの温度を18時間保持した後、漸次１時間に亘って-
16℃に調整し、この温度を6時間保持して、その後漸次３時間に亘って+34℃に調
整し、最後にこの温度を9時間保持する）。
【０３２６】 凍結乾燥物のための処方物および再構築物の組成を表１３に示す。
【０３２７】 Ｔｈ１型細胞媒介性免疫応答が起きたか否かに関する大多数の特徴的測定値は
、ＩｇＧ２ａのレベルと相関することが知られている。データから分かるように
、ＩｇＧ２ａの意外にも大きい増大は、プロテインＤがＴｈ１アジュバント（こ
の場合は３Ｄ−ＭＰＬ）とともに凍結乾燥された場合に、結果的に生じる。
【０３２８】
【表２１】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 39/085 Ａ６１Ｋ 39/085 39/095 39/095 39/102 39/102 39/112 39/112 39/39 39/39 Ａ６１Ｐ 11/00 Ａ６１Ｐ 11/00 Ｃ０７Ｋ 14/285 Ｃ０７Ｋ 14/285 // Ｃ１２Ｎ 15/09 Ｃ１２Ｎ 15/00 Ａ (31)優先権主張番号 ９９０９４６６．６ (32)優先日 平成11年４月23日(1999．4．23) (33)優先権主張国 イギリス（ＧＢ） (31)優先権主張番号 ９９１６６７７．９ (32)優先日 平成11年７月15日(1999．7．15) (33)優先権主張国 イギリス（ＧＢ） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ， ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，Ｃ Ｎ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ， ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，Ｋ Ｐ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ， ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，Ｓ Ｇ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 デシャンプ，マルゲリト ベルギー国，ベー−1330 リクサンサー ル，リュ ドゥ ランスティテュ 89，ス ミスクライン ビーチャム バイオロジカ ルズ ソシエテ アノニム (72)発明者 デスモン，ピエール ミシェル ベルギー国，ベー−1330 リクサンサー ル，リュ ドゥ ランスティテュ 89，ス ミスクライン ビーチャム バイオロジカ ルズ ソシエテ アノニム (72)発明者 ラフェリール，クレ アントニー ジョセ フ ベルギー国，ベー−1330 リクサンサー ル，リュ ドゥ ランスティテュ 89，ス ミスクライン ビーチャム バイオロジカ ルズ ソシエテ アノニム (72)発明者 ポールマン，ヤン ベルギー国，ベー−1330 リクサンサー ル，リュ ドゥ ランスティテュ 89，ス ミスクライン ビーチャム バイオロジカ ルズ ソシエテ アノニム (72)発明者 プリエール，ジャン−ポール ベルギー国，ベー−1330 リクサンサー ル，リュ ドゥ ランスティテュ 89，ス ミスクライン ビーチャム バイオロジカ ルズ ソシエテ アノニム Ｆターム(参考） 4B024 AA01 BA31 CA02 DA06 EA04 GA01 HA03 4C085 AA03 BA03 BA07 BA09 BA13 BA14 BA16 BA18 BA24 CC07 EE01 EE06 FF01 FF11 FF24 4C087 AA02 BC01 BC11 BC29 BC35 BC38 BC44 BC50 BC61 BC71 NA05 NA14 ZA59 4H045 AA11 AA30 BA53 CA11 DA86 EA31 FA73 FA74

Claims (23)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 インフルエンザ菌（Haemophilus influenzae）からのプロテ
    インＤまたはそのプロテインＤ断片にコンジュゲートされた病原性細菌由来の多
    糖抗原を含む多糖複合体抗原。
  2. 【請求項２】 前記多糖抗原が、腸チフス菌（Salmonella typhi）からのＶ
    ｉ多糖、髄膜炎菌多糖、Ｂ群髄膜炎菌の多糖および修飾多糖、黄色ブドウ球菌か
    らの多糖、連鎖球菌属（Streptococcus agalactiae）からの多糖、肺炎連鎖球菌
    からの多糖、ミコバクテリウム属からの多糖、クリプトコックス属（Cryptococc
    us neoformans）からの多糖、分類不可インフルエンザ菌のリポ多糖、ｂ型イン
    フルエンザ菌からの莢膜多糖、モラクセラ属（Moraxella catharralis）のリポ
    多糖、ゾンネ赤痢菌のリポ多糖、およびクルーズトリパノソーマのリポペプチド
    ホスホグリカン（ＬＰＰＧ）から成る群から選択される、請求項１記載の多糖複
    合体。
  3. 【請求項３】 請求項１または２に記載の複数の多糖複合体抗原を含む免疫
    原性組成物。
  4. 【請求項４】 少なくとも４つの肺炎連鎖球菌血清型からの肺炎連鎖球菌多
    糖抗原を含む、請求項３記載の免疫原性組成物。
  5. 【請求項５】 少なくとも１つの肺炎連鎖球菌タンパク質抗原を付加的に含
    む、請求項３または４記載の免疫原性組成物。
  6. 【請求項６】 前記タンパク質抗原が肺炎連鎖球菌の外表面タンパク質また
    は分泌タンパク質あるいはその免疫学的機能等価物である、請求項５の免疫原性
    組成物。
  7. 【請求項７】 前記タンパク質抗原が肺炎連鎖球菌の毒素、粘着素（adhesi
    n）またはリポタンパク質、あるいはその免疫学的機能等価物である、請求項５
    または６の免疫原性組成物。
  8. 【請求項８】 前記タンパク質抗原またはその免疫学的機能等価物が、ニュ
    ーモリジン、ＰｓｐＡまたはその膜貫通欠失変異体、ＰｓｐＣまたはその膜貫通
    欠失変異体、ＰｓａＡまたはその膜貫通欠失変異体、グリセルアルデヒド−３−
    ホスフェートデヒドロゲナーゼならびにＣｂｐＡまたはその膜貫通欠失変異体か
    ら成る群から選択される、請求項５〜７の免疫原性組成物。
  9. 【請求項９】 髄膜炎菌−プロテインＤ多糖複合体抗原を含む免疫原性組成
    物。
  10. 【請求項１０】 多糖抗原が髄膜炎菌血清型Ａ、ＣまたはＹあるいはそれら
    の組合せから得られる、請求項９記載の免疫原性組成物。
  11. 【請求項１１】 ｂ型インフルエンザ菌−プロテインＤ多糖複合体抗原を含
    む免疫原性組成物。
  12. 【請求項１２】 ｂ型インフルエンザ菌、Ｃ型髄膜炎菌およびＹ型髄膜炎菌
    の複合化莢膜多糖を含む免疫原性組成物であって、少なくとも１つの多糖に関す
    る担体タンパク質がインフルエンザ菌からのプロテインＤである組成物。
  13. 【請求項１３】 肺炎連鎖球菌、ｂ型インフルエンザ菌、Ｃ型髄膜炎菌およ
    びＹ型髄膜炎菌の複合化莢膜多糖を含む免疫原性組成物であって、少なくとも１
    つの多糖に関する担体タンパク質がインフルエンザ菌からのプロテインＤである
    組成物。
  14. 【請求項１４】 前記多糖抗原のすべてがプロテインＤであるが、但しｂ型
    インフルエンザ菌からの多糖は破傷風毒素とコンジュゲートされる、請求項１２
    および１３の免疫原性組成物。
  15. 【請求項１５】 前記多糖抗原のすべてがプロテインＤとコンジュゲートさ
    れる、請求項１２および１３の免疫原性組成物。
  16. 【請求項１６】 アジュバントを付加的に含む先の請求項に記載の免疫原性
    組成物。
  17. 【請求項１７】 前記多糖−プロテインＤ複合体抗原がリン酸アルミニウム
    上に吸着される、請求項１６記載の免疫原性組成物。
  18. 【請求項１８】 前記アジュバントがＴＨ１受容体の優先的誘導物質である
    、請求項１６記載の免疫原性組成物。
  19. 【請求項１９】 前記アジュバントが以下の：３Ｄ−ＭＰＬ、サポニン免疫
    刺激剤または免疫刺激性ＣｐＧオリゴヌクレオチドのうちの少なくとも１つを含
    む、請求項１８記載の免疫原性組成物。
  20. 【請求項２０】 薬剤として用いるための先の請求項に記載の免疫原性組成
    物。
  21. 【請求項２１】 請求項３〜１９に記載の免疫原性組成物を含むワクチン。
  22. 【請求項２２】 病原性細菌に対する免疫原性組成物の製造方法であって、
    以下のステップ： 前記病原性細菌からの多糖抗原の単離、 前記多糖の活性化、および 前記多糖のタンパク質Ｄへのコンジュゲーション を含む前記方法。
  23. 【請求項２３】 病原性細菌からの感染に罹患しているかまたはそれに感受
    性の患者の治療方法であって、先の請求項に記載の有効量の免疫原性組成物を投
    与することを包含する方法。
JP2000606264A 1999-03-19 2000-03-17 ワクチン Expired - Lifetime JP4846906B2 (ja)

Applications Claiming Priority (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB9906437.0A GB9906437D0 (en) 1999-03-19 1999-03-19 Vaccine
GB9906437.0 1999-03-19
GB9909077.1 1999-04-20
GBGB9909077.1A GB9909077D0 (en) 1999-04-20 1999-04-20 Novel compositions
GBGB9909466.6A GB9909466D0 (en) 1999-04-23 1999-04-23 Vaccines
GB9909466.6 1999-04-23
GBGB9916677.9A GB9916677D0 (en) 1999-07-15 1999-07-15 Vaccine
GB9916677.9 1999-07-15
PCT/EP2000/002468 WO2000056360A2 (en) 1999-03-19 2000-03-17 Vaccine against antigens from bacteriae

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2002540075A true JP2002540075A (ja) 2002-11-26
JP4846906B2 JP4846906B2 (ja) 2011-12-28

Family

ID=27451884

Family Applications (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2000606263A Withdrawn JP2002540074A (ja) 1999-03-19 2000-03-17 ワクチン
JP2000606262A Pending JP2002539273A (ja) 1999-03-19 2000-03-17 ワクチン
JP2000606264A Expired - Lifetime JP4846906B2 (ja) 1999-03-19 2000-03-17 ワクチン
JP2010288197A Expired - Fee Related JP5551579B2 (ja) 1999-03-19 2010-12-24 ワクチン

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2000606263A Withdrawn JP2002540074A (ja) 1999-03-19 2000-03-17 ワクチン
JP2000606262A Pending JP2002539273A (ja) 1999-03-19 2000-03-17 ワクチン

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2010288197A Expired - Fee Related JP5551579B2 (ja) 1999-03-19 2010-12-24 ワクチン

Country Status (32)

Country Link
US (8) US20030147922A1 (ja)
EP (6) EP1163000B1 (ja)
JP (4) JP2002540074A (ja)
KR (3) KR100642044B1 (ja)
CN (3) CN1191852C (ja)
AR (3) AR022965A1 (ja)
AT (3) ATE459373T1 (ja)
AU (3) AU750762B2 (ja)
BE (1) BE1025464I2 (ja)
BR (4) BRPI0009163B8 (ja)
CA (3) CA2365296A1 (ja)
CY (3) CY1107561T1 (ja)
CZ (3) CZ20013378A3 (ja)
DE (4) DE60032120T2 (ja)
DK (2) DK1163000T3 (ja)
ES (3) ES2300255T3 (ja)
FR (1) FR10C0008I2 (ja)
HK (3) HK1043728B (ja)
HU (4) HUP0200664A2 (ja)
IL (5) IL145045A0 (ja)
LU (1) LU91652I2 (ja)
MX (1) MXPA01009452A (ja)
MY (2) MY125202A (ja)
NL (1) NL300415I1 (ja)
NO (4) NO20014322L (ja)
NZ (3) NZ513840A (ja)
PL (3) PL355178A1 (ja)
PT (2) PT1162999E (ja)
SI (2) SI1163000T1 (ja)
TR (3) TR200102739T2 (ja)
TW (3) TWI281403B (ja)
WO (3) WO2000056359A2 (ja)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006516608A (ja) * 2003-01-30 2006-07-06 カイロン ソチエタ ア レスポンサビリタ リミタータ 複数の髄膜炎菌血清群に対する注射可能ワクチン
JP2009520761A (ja) * 2005-12-22 2009-05-28 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム ワクチン
JP2011256168A (ja) * 2010-06-04 2011-12-22 Wyeth Llc ワクチン製剤
JP2013006881A (ja) * 2005-04-08 2013-01-10 Wyeth Llc 多価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物
JP2013503623A (ja) * 2009-09-03 2013-02-04 ファイザー バクシーンズ エルエルシー Ｐｃｓｋ９ワクチン
JP2015534962A (ja) * 2012-10-17 2015-12-07 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム 免疫原性組成物

Families Citing this family (262)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6207646B1 (en) 1994-07-15 2001-03-27 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
US20030157129A1 (en) * 1995-06-23 2003-08-21 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Vaccine comprising a polysaccharide antigen - carrier protein conjugate and free carrier protein
US7078042B2 (en) * 1995-09-15 2006-07-18 Uab Research Foundation Pneumococcal surface protein C (PspC), epitopic regions and strain selection thereof, and uses therefor
ATE355375T1 (de) 1996-01-04 2006-03-15 Novartis Vaccines & Diagnostic Bakterioferritin aus helicobacter pylori
FR2763244B1 (fr) 1997-05-14 2003-08-01 Pasteur Merieux Serums Vacc Composition vaccinale multivalente a porteur mixte
US20010016200A1 (en) * 1998-04-23 2001-08-23 Briles David E. Pneumococcal surface protein C (PspC), epitopic regions and strain selection thereof, and uses therefor
WO1999061056A2 (en) 1998-05-22 1999-12-02 Loeb Health Research Institute At The Ottawa Hospital Methods and products for inducing mucosal immunity
US6797275B1 (en) * 1998-12-04 2004-09-28 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Method of immunizing humans against Salmonella typhi using a Vi-rEPA conjugate vaccine
DE60032120T2 (de) 1999-03-19 2007-09-20 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Impstoff gegen Streptococcus pneumoniae
GB9925559D0 (en) * 1999-10-28 1999-12-29 Smithkline Beecham Biolog Novel method
GB0108364D0 (en) * 2001-04-03 2001-05-23 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine composition
GB0022742D0 (en) * 2000-09-15 2000-11-01 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
EP2284181A1 (en) 2000-10-27 2011-02-16 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Nucleic acids and proteins from streptococcus groups A and B
GB2370770B (en) * 2001-01-03 2005-06-01 Simon Connolly Uses of Streptococcus Vaccines
US7082569B2 (en) 2001-01-17 2006-07-25 Outlooksoft Corporation Systems and methods providing dynamic spreadsheet functionality
ES2544979T3 (es) 2001-01-23 2015-09-07 Sanofi Pasteur Inc. Vacuna de conjugado de polisacárido-CRM197 meningocócica tri- o tetravalente
DK1361890T3 (da) 2001-02-23 2011-06-27 Glaxosmithkline Biolog Sa Influenzavaccineformuleringer til intradermal indgift
GB0107661D0 (en) 2001-03-27 2001-05-16 Chiron Spa Staphylococcus aureus
GB0107658D0 (en) 2001-03-27 2001-05-16 Chiron Spa Streptococcus pneumoniae
GB0109297D0 (en) * 2001-04-12 2001-05-30 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
GB0115176D0 (en) 2001-06-20 2001-08-15 Chiron Spa Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines
US8481043B2 (en) 2001-06-22 2013-07-09 Cpex Pharmaceuticals, Inc. Nasal immunization
GB0118249D0 (en) 2001-07-26 2001-09-19 Chiron Spa Histidine vaccines
GB0121591D0 (en) 2001-09-06 2001-10-24 Chiron Spa Hybrid and tandem expression of neisserial proteins
AR045702A1 (es) 2001-10-03 2005-11-09 Chiron Corp Composiciones de adyuvantes.
ES2312649T3 (es) 2001-12-12 2009-03-01 Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. Inmunizacion frente a chlamydia trachomatis.
GB0130215D0 (en) * 2001-12-18 2002-02-06 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
US7501134B2 (en) 2002-02-20 2009-03-10 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Microparticles with adsorbed polypeptide-containing molecules
GB0302218D0 (en) 2003-01-30 2003-03-05 Chiron Sri Vaccine formulation & Mucosal delivery
DE60328481D1 (de) * 2002-05-14 2009-09-03 Novartis Vaccines & Diagnostic Schleimhautapplizierter impfstoff, der das adjuvanz chitosan und menigokokkenantigene enthält
RU2378008C2 (ru) * 2002-05-14 2010-01-10 Новартис Вэксинес Энд Дайэгностикс С.Р.Л. Комбинированные вакцины против бактериального менингита для введения через слизистую оболочку
GB0220194D0 (en) 2002-08-30 2002-10-09 Chiron Spa Improved vesicles
EP2353608B1 (en) 2002-10-11 2019-12-18 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Polypeptide-vaccines for broad protection against hypervirulent meningococcal lineages
EP2314604A3 (en) * 2002-10-15 2011-05-25 Intercell AG Nucleic acids coding for adhesion factors of group B streptococcus, adhesion factors of group B streptococcus and further uses thereof
AR041881A1 (es) 2002-11-01 2005-06-01 Glaxosmithkline Biolog Sa Procedimiento de secado para la obtencion de un liquido altamente viscoso que conserva la antigenicidad o actividad de una agente activo y vacuna obtenida a partir de el
BRPI0316018B8 (pt) 2002-11-12 2021-05-25 Brigham & Womens Hospital Inc vacina polissacarídica para infecções estafilocócicas
ATE466875T1 (de) 2002-11-15 2010-05-15 Novartis Vaccines & Diagnostic Unerwartete oberflächenproteine in neisseria meningitidis
GB0227346D0 (en) 2002-11-22 2002-12-31 Chiron Spa 741
WO2004053104A2 (en) 2002-12-11 2004-06-24 Coley Pharmaceutical Group, Inc. 5’ cpg nucleic acids and methods of use
JP2006520746A (ja) 2002-12-27 2006-09-14 カイロン コーポレイション リン脂質を含む免疫原性組成物
FR2850106B1 (fr) * 2003-01-17 2005-02-25 Aventis Pasteur Conjugues obtenus par amination reductrice du polysaccharide capsulaire du pneumocoque de serotype 5
AU2004220590B2 (en) 2003-03-07 2010-02-18 Inhibitex, Inc. Polysaccharide - Staphylococcal surface adhesin carrier protein conjugates for immunization against nosocomial infections
NZ541969A (en) * 2003-03-13 2008-01-31 Glaxosmithkline Biolog Sa Purifying pneumolysin from Streptococcus pneumoniae in a single chromatographic step by binding it to a hydrophobic interaction column in the presence of detergent and high salt
ES2423800T3 (es) 2003-03-28 2013-09-24 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Uso de compuestos orgánicos para la inmunopotenciación
US9107831B2 (en) 2003-06-02 2015-08-18 Novartis Vaccines And Diagonstics, Inc. Immunogenic compositions containing microparticles comprising adsorbed toxoid and polysaccharide-containing antigens
EP2277538A1 (en) 2003-10-02 2011-01-26 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Combined meningitis vaccines
GB0323103D0 (en) 2003-10-02 2003-11-05 Chiron Srl De-acetylated saccharides
GB0406013D0 (en) 2004-03-17 2004-04-21 Chiron Srl Analysis of saccharide vaccines without interference
JP5718545B2 (ja) 2004-04-30 2015-05-13 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル 髄膜炎菌結合体ワクチン接種
GB0500787D0 (en) 2005-01-14 2005-02-23 Chiron Srl Integration of meningococcal conjugate vaccination
GB0409745D0 (en) 2004-04-30 2004-06-09 Chiron Srl Compositions including unconjugated carrier proteins
US7444197B2 (en) * 2004-05-06 2008-10-28 Smp Logic Systems Llc Methods, systems, and software program for validation and monitoring of pharmaceutical manufacturing processes
GB0410866D0 (en) 2004-05-14 2004-06-16 Chiron Srl Haemophilius influenzae
GB0411387D0 (en) 2004-05-21 2004-06-23 Chiron Srl Analysis of saccharide length
GB0413868D0 (en) 2004-06-21 2004-07-21 Chiron Srl Dimensional anlaysis of saccharide conjugates
CA2571710A1 (en) 2004-06-24 2006-11-02 Nicholas Valiante Small molecule immunopotentiators and assays for their detection
EP1765313A2 (en) 2004-06-24 2007-03-28 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Compounds for immunopotentiation
US20090317420A1 (en) 2004-07-29 2009-12-24 Chiron Corporation Immunogenic compositions for gram positive bacteria such as streptococcus agalactiae
GB0424092D0 (en) 2004-10-29 2004-12-01 Chiron Srl Immunogenic bacterial vesicles with outer membrane proteins
HUE033196T2 (en) 2005-01-27 2017-11-28 Children's Hospital & Res Center At Oakland GNA1870-based vesicle vaccines for broad-spectrum protection against diseases caused by Neisseria meningitidis
GB0502095D0 (en) 2005-02-01 2005-03-09 Chiron Srl Conjugation of streptococcal capsular saccharides
US8062644B2 (en) 2005-02-18 2011-11-22 Novartis Vaccines & Diagnostics Srl. Immunogens from uropathogenic Escherichia coli
DK2351772T3 (en) 2005-02-18 2016-09-05 Glaxosmithkline Biologicals Sa Proteins and nucleic acids from meningitis / sepsis-associated Escherichia coli
GB0505518D0 (en) 2005-03-17 2005-04-27 Chiron Srl Combination vaccines with whole cell pertussis antigen
US20070184072A1 (en) * 2005-04-08 2007-08-09 Wyeth Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition
US7955605B2 (en) 2005-04-08 2011-06-07 Wyeth Llc Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition
US7709001B2 (en) * 2005-04-08 2010-05-04 Wyeth Llc Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition
JP2008536515A (ja) 2005-04-18 2008-09-11 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス， インコーポレイテッド ワクチンの調製のためのｂ型肝炎ウイルス表面抗原の発現
EP2201961B1 (en) 2005-06-27 2018-01-24 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Immunogenic composition
JP5135220B2 (ja) 2005-09-01 2013-02-06 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス ゲーエムベーハー アンド カンパニー カーゲー 血清群ｃ髄膜炎菌を含む複数ワクチン接種
GB0522765D0 (en) 2005-11-08 2005-12-14 Chiron Srl Combination vaccine manufacture
CA2630220C (en) 2005-11-22 2020-10-13 Doris Coit Norovirus and sapovirus antigens
GB0524066D0 (en) 2005-11-25 2006-01-04 Chiron Srl 741 ii
TWI457133B (zh) 2005-12-13 2014-10-21 Glaxosmithkline Biolog Sa 新穎組合物
GB0607088D0 (en) 2006-04-07 2006-05-17 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
MY150105A (en) * 2006-01-17 2013-11-29 Forsgren Arne A novel surface exposed haemophilus influenzae protein (protein e; pe)
CN101024079B (zh) * 2006-02-17 2012-02-01 福州昌晖生物工程有限公司 肺炎链球菌多糖-外膜蛋白结合疫苗及制备方法
KR101411425B1 (ko) * 2006-03-17 2014-06-24 더 거버먼트 오브 더 유나이티드 스테이츠 오브 아메리카 에즈 레프리젠티드 바이 더 세크러테리 오브 더 디파트먼트 오브 헬스 앤드 휴먼 서비시즈 복합 다가 면역원성 콘쥬게이트의 제조 방법
US10828361B2 (en) 2006-03-22 2020-11-10 Glaxosmithkline Biologicals Sa Regimens for immunisation with meningococcal conjugates
GB0605757D0 (en) 2006-03-22 2006-05-03 Chiron Srl Separation of conjugated and unconjugated components
ES2383209T3 (es) 2006-03-22 2012-06-19 Novartis Ag Regímenes para la inmunización con conjugados meningococicos
CA2646539A1 (en) 2006-03-23 2007-09-27 Novartis Ag Imidazoquinoxaline compounds as immunomodulators
TWI494124B (zh) * 2006-03-30 2015-08-01 Glaxosmithkline Biolog Sa 免疫原組合物
MY148405A (en) * 2006-03-30 2013-04-30 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition
TW200806315A (en) 2006-04-26 2008-02-01 Wyeth Corp Novel formulations which stabilize and inhibit precipitation of immunogenic compositions
US8808707B1 (en) 2006-05-08 2014-08-19 Wyeth Llc Pneumococcal dosing regimen
WO2009030978A2 (en) * 2006-06-09 2009-03-12 Novartis Ag Conformers of bacterial adhesins
GB0612854D0 (en) 2006-06-28 2006-08-09 Novartis Ag Saccharide analysis
CA2659552A1 (en) 2006-08-16 2008-02-21 Novartis Ag Immunogens from uropathogenic escherichia coli
KR101467002B1 (ko) * 2006-10-10 2014-12-01 와이어쓰 엘엘씨 스트렙토코쿠스 뉴모니애 제3형 다당류의 정제 방법
GB0700136D0 (en) 2007-01-04 2007-02-14 Glaxosmithkline Biolog Sa Process for manufacturing vaccines
GB0700562D0 (en) 2007-01-11 2007-02-21 Novartis Vaccines & Diagnostic Modified Saccharides
DK2167121T3 (en) * 2007-06-26 2015-11-23 Glaxosmithkline Biolog Sa A vaccine comprising Streptococcus pneumoniae kapselpolysaccharidkonjugater
GB0713880D0 (en) 2007-07-17 2007-08-29 Novartis Ag Conjugate purification
GB0714963D0 (en) 2007-08-01 2007-09-12 Novartis Ag Compositions comprising antigens
CN101969992B (zh) 2007-09-12 2014-10-01 诺华股份有限公司 Gas57突变型抗原和gas57抗体
PL2200642T3 (pl) 2007-10-19 2012-09-28 Novartis Ag Preparaty szczepionek meningokokowych
JP2011503104A (ja) 2007-11-09 2011-01-27 カリフォルニア インスティテュート オブ テクノロジー 免疫調節化合物ならびに関連組成物および方法
US8815253B2 (en) 2007-12-07 2014-08-26 Novartis Ag Compositions for inducing immune responses
GB0818453D0 (en) 2008-10-08 2008-11-12 Novartis Ag Fermentation processes for cultivating streptococci and purification processes for obtaining cps therefrom
CA2709927C (en) 2007-12-21 2017-05-16 Novartis Ag Mutant forms of streptolysin o
WO2009094730A1 (en) * 2008-02-01 2009-08-06 Newcastle Innovation Limited Vaccine compositions
AU2009215364B2 (en) 2008-02-21 2014-09-18 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Meningococcal fHBP polypeptides
EP2265640B1 (en) 2008-03-10 2015-11-04 Children's Hospital & Research Center at Oakland Chimeric factor h binding proteins (fhbp) containing a heterologous b domain and methods of use
EP3312158A1 (en) 2008-07-21 2018-04-25 The Brigham and Women's Hospital, Inc. Methods and compositions relating to synthetic beta-1,6 glucosamine oligosaccharides
DK2349520T3 (en) 2008-10-27 2016-08-15 Glaxosmithkline Biologicals Sa Purification Procedure for Group A Streptococcus Carbohydrate
DK2376108T3 (en) 2008-12-09 2017-04-24 Pfizer Vaccines Llc IgE CH3 peptide vaccine
GB0822633D0 (en) 2008-12-11 2009-01-21 Novartis Ag Formulation
GB0822634D0 (en) 2008-12-11 2009-01-21 Novartis Ag Meningitis vaccines
WO2010070453A2 (en) 2008-12-17 2010-06-24 Novartis Ag Meningococcal vaccines including hemoglobin receptor
BRPI1005670A8 (pt) 2009-01-05 2017-12-26 Epitogenesis Inc composições adjuvantes e processos de uso.
MX2011007456A (es) 2009-01-12 2011-08-03 Novartis Ag Antigenos del dominio de proteina de superficie de union a colageno tipo b (can_b) en vacunas contra bacteria gram positiva.
RU2555757C2 (ru) 2009-03-24 2015-07-10 Новартис Аг Комбинации менингококкового фактор н-связывающего белка и пневмококковых сахаридных конъюгатов
EP2411048B1 (en) 2009-03-24 2020-05-06 GlaxoSmithKline Biologicals SA Adjuvanting meningococcal factor h binding protein
ES2565377T3 (es) 2009-04-14 2016-04-04 Glaxosmithkline Biologicals Sa Composiciones para inmunización contra Staphylococcus aureus
WO2010132833A1 (en) 2009-05-14 2010-11-18 The Regents Of The University Of Michigan Streptococcus vaccine compositions and methods of using the same
EP3461496B1 (en) 2009-06-22 2023-08-23 Wyeth LLC Compositions and methods for preparing staphylococcus aureus serotype 5 and 8 capsular polysaccharide conjugate immunogenic compositions
SG10201707084SA (en) 2009-06-22 2017-10-30 Wyeth Llc Immunogenic compositions of staphylococcus aureus antigens
WO2011017101A2 (en) * 2009-07-27 2011-02-10 Fina Biosolutions, Llc Method for producing protein-carbohydrate vaccines reduced in free carbohydrate
WO2011013034A1 (en) 2009-07-30 2011-02-03 Pfizer Vaccines Llc Antigenic tau peptides and uses thereof
CA2772104A1 (en) 2009-08-27 2011-03-03 Novartis Ag Hybrid polypeptides including meningococcal fhbp sequences
KR20120081587A (ko) 2009-09-10 2012-07-19 노파르티스 아게 기도 질병에 대한 조합 백신
JP5960055B2 (ja) 2009-10-27 2016-08-02 ノバルティス アーゲー 改変髄膜炎菌ｆＨＢＰポリペプチド
CN102971009A (zh) 2009-10-30 2013-03-13 诺华有限公司 金黄色葡萄球菌5型和8型荚膜多糖的纯化
GB0919690D0 (en) 2009-11-10 2009-12-23 Guy S And St Thomas S Nhs Foun compositions for immunising against staphylococcus aureus
KR101427862B1 (ko) 2009-12-17 2014-08-07 피나 바이오솔루션스, 엘엘씨 접합 백신 제조시 다당류를 활성화시키기 위한 화학 시약
JP6007105B2 (ja) 2009-12-22 2016-10-12 セルデックス・セラピューティクス・インコーポレイテッド ワクチン組成物
GB201003333D0 (en) 2010-02-26 2010-04-14 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
GB201003922D0 (en) 2010-03-09 2010-04-21 Glaxosmithkline Biolog Sa Conjugation process
TR201802933T4 (tr) 2010-03-30 2018-03-21 Childrens Hospital & Res Center At Oakland Özellikleri değiştirilmiş faktör h bağlama proteinleri (fhbp) ve bunların kullanım yöntemi.
GB201005625D0 (en) 2010-04-01 2010-05-19 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
WO2011127302A2 (en) 2010-04-07 2011-10-13 Yue Shen Vehicle for delivering a compound to a mucous membrane and related compositions, methods and systems
EP2571982A4 (en) * 2010-05-20 2014-01-01 California Inst Of Techn ANTIGEN-SPECIFIC TREGS AND CORRESPONDING COMPOSITIONS, METHODS AND SYSTEMS
KR20130121699A (ko) 2010-05-28 2013-11-06 테트리스 온라인, 인코포레이티드 상호작용 혼성 비동기 컴퓨터 게임 기반구조
CA2800774A1 (en) 2010-06-07 2011-12-15 Pfizer Vaccines Llc Ige ch3 peptide vaccine
EP2576613A1 (en) 2010-06-07 2013-04-10 Pfizer Inc. Her-2 peptides and vaccines
US10478483B2 (en) 2010-06-25 2019-11-19 Glaxosmithkline Biologicals Sa Combinations of meningococcal factor H binding proteins
GB201101665D0 (en) 2011-01-31 2011-03-16 Novartis Ag Immunogenic compositions
WO2012085668A2 (en) 2010-12-24 2012-06-28 Novartis Ag Compounds
EP2667852B1 (en) 2011-01-27 2016-11-09 GlaxoSmithKline Biologicals SA Adjuvant nanoemulsions with crystallisation inhibitors
AU2012222883A1 (en) 2011-03-02 2013-10-17 Novartis Ag Combination vaccines with lower doses of antigen and/or adjuvant
GB201103836D0 (en) 2011-03-07 2011-04-20 Glaxosmithkline Biolog Sa Conjugation process
ES2785108T3 (es) 2011-03-24 2020-10-05 Glaxosmithkline Biologicals Sa Nanoemulsiones adyuvantes con fosfolípidos
EP2511295A1 (en) 2011-04-15 2012-10-17 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale Compositions for preventing and/or treating an infection by an HIV-1 virus
US20130203980A1 (en) 2011-05-06 2013-08-08 Petr Gennadievich Aparin Exopolysaccharide of shigella sonnei bacteria, method for producing same, vaccine and pharmaceutical composition containing same
EP2723378A4 (en) 2011-06-24 2015-01-28 Epitogenesis Inc PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS COMPRISING A COMBINATION OF VECTORS, VITAMINS, TANNINS AND FLAVONOIDS SELECTED AS ANTIGEN-SPECIFIC IMMUNOMODULATORS
JP6088507B2 (ja) 2011-07-08 2017-03-01 ノバルティス アーゲー チロシンライゲーションの方法
GB201114923D0 (en) 2011-08-30 2011-10-12 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
ES2732708T3 (es) 2011-09-14 2019-11-25 Glaxosmithkline Biologicals Sa Procedimientos de fabricación de glucoconjugados de sacárido-proteína
WO2013043518A1 (en) 2011-09-22 2013-03-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Imidazopyridyl compounds as aldosterone synthase inhibitors
CA2854934A1 (en) 2011-11-07 2013-05-16 Novartis Ag Carrier molecule comprising a spr0096 and a spr2021 antigen
EP2592137A1 (en) 2011-11-11 2013-05-15 Novartis AG Fermentation media free of animal-derived components for production of diphtheria toxoids suitable for human vaccine use
DE102011122891B4 (de) 2011-11-11 2014-12-24 Novartis Ag Fermentationsmedium, das frei von tierischen Bestandteilen ist, zur Herstellung von Diphtherie-Toxoiden zur Verwendung bei der Impfung von Menschen
GB2495341B (en) 2011-11-11 2013-09-18 Novartis Ag Fermentation methods and their products
DE102011118371B4 (de) 2011-11-11 2014-02-13 Novartis Ag Zur Impfung von Menschen geeignete Zusammensetzung, die ein Diphtherie-Toxoid umfasst, sowie Verfahren zu deren Herstellung
BR112014013876A2 (pt) 2011-12-08 2019-09-24 Novartis Ag vacina à base de toxina de clostridium difficile
GB201121301D0 (en) 2011-12-12 2012-01-25 Novartis Ag Method
AU2011384634A1 (en) 2011-12-29 2014-06-19 Novartis Ag Adjuvanted combinations of meningococcal factor H binding proteins
WO2013124473A1 (en) 2012-02-24 2013-08-29 Novartis Ag Pilus proteins and compositions
US20150132339A1 (en) 2012-03-07 2015-05-14 Novartis Ag Adjuvanted formulations of streptococcus pneumoniae antigens
US20150125486A1 (en) 2012-03-08 2015-05-07 Novartis Ag Adjuvanted formulations of pediatric antigens
SA115360586B1 (ar) 2012-03-09 2017-04-12 فايزر انك تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها
US10279026B2 (en) 2012-04-26 2019-05-07 Glaxosmithkline Biologicals Sa Antigens and antigen combinations
EP3804749A3 (en) 2012-04-26 2021-07-28 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Antigens and antigen combinations
CN104284674A (zh) 2012-05-04 2015-01-14 辉瑞公司 前列腺相关抗原及基于疫苗的免疫治疗疗法
US10124051B2 (en) 2012-05-22 2018-11-13 Glaxosmithkline Biologicals Sa Meningococcus serogroup X conjugate
KR102057217B1 (ko) 2012-06-20 2020-01-22 에스케이바이오사이언스 주식회사 다가 폐렴구균 다당류-단백질 접합체 조성물
WO2014037472A1 (en) 2012-09-06 2014-03-13 Novartis Ag Combination vaccines with serogroup b meningococcus and d/t/p
AR092896A1 (es) 2012-10-03 2015-05-06 Novartis Ag Composiciones inmunogenicas
BR112015008040A2 (pt) 2012-10-12 2017-07-04 Glaxosmithkline Biologicals Sa composição de vacina, vacina de combinação, e, processos para preparar um componente ap e para a fabricação de uma composição de vacina
US20140193451A1 (en) * 2012-10-17 2014-07-10 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic composition
KR20140075196A (ko) 2012-12-11 2014-06-19 에스케이케미칼주식회사 다가 폐렴구균 다당류-단백질 접합체 조성물
KR20140075201A (ko) * 2012-12-11 2014-06-19 에스케이케미칼주식회사 다가 폐렴구균 다당류-단백질 접합체 조성물
BR112015018014A2 (pt) 2013-02-01 2017-07-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa liberação intradérmica de composições imunológicas compreendendo agonistas do receptor do tipo toll
EP2994161B1 (en) 2013-05-10 2020-10-28 California Institute of Technology Probiotic prevention and treatment of colon cancer
EP3689375A1 (en) 2013-05-15 2020-08-05 The Governors Of The University Of Alberta E1e2 hcv vaccines and methods of use
CN103386126B (zh) * 2013-06-25 2015-06-17 北京科兴生物制品有限公司 一种含肠道病毒抗原的多价免疫原性组合物
KR20180099912A (ko) 2013-09-08 2018-09-05 화이자 인코포레이티드 나이세리아 메닌지티디스 조성물 및 그의 방법
US11708411B2 (en) 2013-12-20 2023-07-25 Wake Forest University Health Sciences Methods and compositions for increasing protective antibody levels induced by pneumococcal polysaccharide vaccines
PT3096783T (pt) * 2014-01-21 2021-08-16 Pfizer Polissacáridos capsulares de streptococcus pneumoniae e conjugados dos mesmos
ES2820824T3 (es) 2014-01-21 2021-04-22 Pfizer Composiciones inmunogénicas que comprenden antígenos sacáridos capsulares conjugados y usos de las mismas
US11160855B2 (en) 2014-01-21 2021-11-02 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
EP3104877B1 (en) 2014-02-11 2020-01-22 The USA, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services Pcsk9 vaccine and methods of using the same
EA034954B1 (ru) 2014-02-28 2020-04-10 Глаксосмитклайн Байолоджикалс Са МОДИФИЦИРОВАННЫЕ МЕНИНГОКОККОВЫЕ ПОЛИПЕПТИДЫ fHbp
EP2921856B1 (en) * 2014-03-18 2016-09-14 Serum Institute Of India Private Limited A quantitative assay for 4-pyrrolidinopyridine (4-ppy) in polysaccharide-protein conjugate vaccines
CN104829711B (zh) * 2014-04-08 2018-04-03 北京天成新脉生物技术有限公司 脑膜炎球菌荚膜多糖单克隆抗体及其应用
NZ729206A (en) 2014-07-23 2022-07-01 Children’S Hospital & Res Center At Oakland Factor h binding protein variants and methods of use thereof
US9107906B1 (en) 2014-10-28 2015-08-18 Adma Biologics, Inc. Compositions and methods for the treatment of immunodeficiency
EP3034516A1 (en) 2014-12-19 2016-06-22 Novartis AG Purification of streptococcal capsular polysaccharide
US10653764B2 (en) 2015-01-15 2020-05-19 Pfizer Inc. Immunogenic compositions for use in pneumococcal vaccines
CN104548090B (zh) * 2015-01-27 2016-11-30 中国科学院过程工程研究所 一种β-葡聚糖修饰的脑膜炎多糖结合疫苗及其制备方法
WO2016184963A1 (en) 2015-05-19 2016-11-24 Innavirvax Treatment of hiv-infected individuals
US11331335B2 (en) 2015-06-10 2022-05-17 California Institute Of Technology Sepsis treatment and related compositions methods and systems
EP3109255A1 (en) 2015-06-26 2016-12-28 Institut National De La Recherche Agronomique Immunogenic composition
CN107849119A (zh) 2015-07-07 2018-03-27 阿费里斯股份公司 用于治疗和预防IgE介导的疾病的疫苗
MX2018000867A (es) 2015-07-21 2018-05-15 Pfizer Composiciones inmunogenas que comprenden antigenos de sacarido capsular conjugados, kits que las comprenden y sus usos.
GB201518684D0 (en) 2015-10-21 2015-12-02 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
JP6884145B2 (ja) 2015-11-20 2021-06-09 ファイザー・インク 肺炎連鎖球菌ワクチンにおいて用いるための免疫原性組成物
CU20210061A7 (es) 2015-12-04 2022-02-04 Dana Farber Cancer Inst Inc Composición vacunal que comprende el dominio alfa 3 de mica/b para el tratamiento del cáncer
RU2718663C2 (ru) 2016-01-19 2020-04-13 Пфайзер Инк. Противораковые вакцины
US11612664B2 (en) 2016-04-05 2023-03-28 Gsk Vaccines S.R.L. Immunogenic compositions
WO2017220753A1 (en) 2016-06-22 2017-12-28 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition
JP7001686B2 (ja) 2016-08-05 2022-02-04 サノフィ パスツール インコーポレイティッド 多価肺炎球菌多糖体－タンパク質コンジュゲート組成物
JP7001687B2 (ja) 2016-08-05 2022-02-04 サノフィ パスツール インコーポレイティッド 多価肺炎球菌多糖体－タンパク質コンジュゲート組成物
AU2017321039B2 (en) 2016-09-02 2021-03-18 Glaxosmithkline Biologicals Sa Vaccines for Neisseria gonorrhoeae
WO2018065625A2 (en) 2016-10-07 2018-04-12 Enterome Immunogenic compounds for cancer therapy
JP7116278B2 (ja) 2016-10-07 2022-08-10 エンテローム エスエー 癌治療のための免疫原性化合物
BE1025162B9 (fr) 2016-12-06 2019-01-07 Glaxosmithkline Biologicals Sa Procede de purification pour les polysaccharides capsulaires
EP3570879B1 (en) 2017-01-20 2022-03-30 Pfizer Inc. Immunogenic compositions for use in pneumococcal vaccines
AU2018215585B2 (en) 2017-01-31 2022-03-17 Pfizer Inc. Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
US10259865B2 (en) 2017-03-15 2019-04-16 Adma Biologics, Inc. Anti-pneumococcal hyperimmune globulin for the treatment and prevention of pneumococcal infection
CN110520154B (zh) * 2017-03-15 2023-08-04 株式会社Lg化学 多价肺炎链球菌疫苗组合物
BR112019020209A2 (pt) 2017-03-31 2020-06-02 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Composição imunogênica, uso de uma composição imunogênica, método de tratamento ou prevenção de uma recorrência de uma exacerbação aguda de doença pulmonar obstrutiva crônica, e, terapia de combinação.
WO2018178265A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Immunogenic composition, use and method of treatment
US10729763B2 (en) 2017-06-10 2020-08-04 Inventprise, Llc Mixtures of polysaccharide-protein pegylated compounds
AU2018280272C1 (en) 2017-06-10 2021-05-06 Inventprise, Inc. Multivalent conjugate vaccines with bivalent or multivalent conjugate polysaccharides that provide improved immunogenicity and avidity
BR112020001768A2 (pt) 2017-08-14 2020-09-29 Glaxosmithkline Biologicals S.A. método de reforçar uma resposta imune pré-existente contra haemophilus influenzae e moraxella catarrhalis não tipáveis em um indivíduo, e, protocolo de vacinação.
BR122021023687A8 (pt) 2017-12-06 2023-02-07 Merck Sharp & Dohme Usos de composições imunogênicas multivalentes compreendendo conjugados de proteína carreadora e polissacarídeo de s. pneumoniae
IL276230B2 (en) 2018-02-05 2024-01-01 Sanofi Pasteur Inc A multivalent pneumococcal protein-polysaccharide conjugate preparation
WO2019152921A1 (en) 2018-02-05 2019-08-08 Sanofi Pasteur Inc. Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition
WO2019173438A1 (en) 2018-03-06 2019-09-12 Stc. Unm Compositions and methods for reducing serum triglycerides
CN112118863A (zh) 2018-04-11 2020-12-22 恩特罗姆公司 用于预防和治疗癌症的抗原肽
US20210106652A1 (en) 2018-04-11 2021-04-15 Enterome S.A. Immunogenic Compounds For Treatment Of Fibrosis, Autoimmune Diseases And Inflammation
TW202011985A (zh) 2018-04-18 2020-04-01 韓商Ｓｋ生物科學股份有限公司 肺炎鏈球菌的莢膜多醣類以及其免疫原性接合體
MX2021000548A (es) 2018-07-19 2021-07-02 Glaxosmithkline Biologicals Sa Procesos para preparar polisacáridos en seco.
CA3107077A1 (en) 2018-08-07 2020-02-13 Glaxosmithkline Biologicals Sa Processes and vaccines
US11260119B2 (en) 2018-08-24 2022-03-01 Pfizer Inc. Escherichia coli compositions and methods thereof
CA3120922A1 (en) 2018-12-12 2020-06-18 Pfizer Inc. Immunogenic multiple hetero-antigen polysaccharide-protein conjugates and uses thereof
JP2022513458A (ja) 2018-12-12 2022-02-08 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム Ｏ－結合型グリコシル化のための修飾キャリアタンパク質
US20220296695A1 (en) 2018-12-19 2022-09-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Compositions comprising streptococcus pneumoniae polysaccharide-protein conjugates and methods of use thereof
CA3129425A1 (en) 2019-02-11 2020-08-20 Pfizer Inc. Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
JP7239509B6 (ja) 2019-02-22 2023-03-28 ファイザー・インク 細菌多糖類を精製するための方法
US20220184199A1 (en) 2019-04-10 2022-06-16 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens, kits comprising the same and uses thereof
US20220221455A1 (en) 2019-04-18 2022-07-14 Glaxosmithkline Biologicals Sa Antigen binding proteins and assays
MX2021013736A (es) 2019-05-10 2021-12-10 Glaxosmithkline Biologicals Sa Produccion de conjugados.
WO2021023692A1 (en) 2019-08-05 2021-02-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa Process for preparing a composition comprising a protein d polypeptide
JP2022543281A (ja) 2019-08-05 2022-10-11 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム 免疫原性組成物
EP4034157A1 (en) 2019-09-27 2022-08-03 Pfizer Inc. Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
WO2021074389A1 (en) 2019-10-16 2021-04-22 Enterome S.A. Immunogenic compounds for treatment of adrenal cancer
IL292494A (en) 2019-11-01 2022-06-01 Pfizer Preparations of Escherichia coli and their methods
FI4021487T3 (fi) 2019-11-15 2024-02-06 Enterome S A Antigeenisiä peptidejä b-solun pahanlaatuisuuden ehkäisyyn ja hoitoon
EP4061412A1 (en) 2019-11-22 2022-09-28 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Dosage and administration of a bacterial saccharide glycoconjugate vaccine
US20220409539A1 (en) * 2019-12-30 2022-12-29 Fraunhofer Usa Inc. Particles for multi-dose delivery
WO2021165847A1 (en) 2020-02-21 2021-08-26 Pfizer Inc. Purification of saccharides
CA3173729A1 (en) 2020-02-23 2021-08-26 Pfizer Inc. Escherichia coli compositions and methods thereof
CN111588847B (zh) * 2020-05-18 2023-05-26 广州中医药大学(广州中医药研究院) 一种含有单磷酸化的脂质a与糖抗原的缀合物及其制备方法和应用
EP4165064A2 (en) 2020-06-12 2023-04-19 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Dock tag system
PE20231934A1 (es) 2020-10-27 2023-12-01 Pfizer Composiciones de escherichia coli y metodos de las mismas
MX2023005221A (es) 2020-11-04 2023-05-16 Pfizer Composiciones inmunogenicas para uso en vacunas neumococicas.
EP4243863A2 (en) 2020-11-10 2023-09-20 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
US20220202923A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Pfizer Inc. E. coli fimh mutants and uses thereof
US20220265805A1 (en) 2021-02-19 2022-08-25 Sanofi Pasteur Inc. Meningococcal b recombinant vaccine
JP2024510717A (ja) 2021-02-22 2024-03-11 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム 免疫原性組成物、使用及び方法
EP4070814A1 (en) 2021-04-07 2022-10-12 Lama France Sars-cov-2 polypeptides and uses thereof
US20220387613A1 (en) 2021-05-28 2022-12-08 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
EP4346893A2 (en) 2021-05-28 2024-04-10 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2023092090A1 (en) 2021-11-18 2023-05-25 Matrivax, Inc. Immunogenic fusion protein compositions and methods of use thereof
WO2023135515A1 (en) 2022-01-13 2023-07-20 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
KR20230116601A (ko) 2022-01-28 2023-08-04 이동민 머신 좌표계와 영상 좌표계의 정합 방법 및 장치
WO2023161817A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Pfizer Inc. Methods for incorporating azido groups in bacterial capsular polysaccharides
WO2023187127A1 (en) 2022-03-31 2023-10-05 Enterome S.A. Antigenic peptides for prevention and treatment of cancer
WO2023218322A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Pfizer Inc. Process for producing of vaccine formulations with preservatives

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1996032963A1 (en) * 1995-04-17 1996-10-24 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine Induction and enhancement of the immune response to polysaccharides with bacterial lipoproteins
WO1996033739A1 (en) * 1995-04-25 1996-10-31 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Vaccines containing a saponin and a sterol

Family Cites Families (56)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4235877A (en) 1979-06-27 1980-11-25 Merck & Co., Inc. Liposome particle containing viral or bacterial antigenic subunit
US4372945A (en) 1979-11-13 1983-02-08 Likhite Vilas V Antigen compounds
IL61904A (en) 1981-01-13 1985-07-31 Yeda Res & Dev Synthetic vaccine against influenza virus infections comprising a synthetic peptide and process for producing same
BE889979A (fr) 1981-08-14 1982-02-15 Smith Kline Rit Procede de preparation de polysaccharides bacteriens capsulaires antigeniques purifies, produits obtenus et leur utilisation
US5360897A (en) * 1981-08-31 1994-11-01 The University Of Rochester Immunogenic conjugates of streptococcus pneumonial capsular polymer and toxin or in toxiad
US4761283A (en) * 1983-07-05 1988-08-02 The University Of Rochester Immunogenic conjugates
US4882317A (en) * 1984-05-10 1989-11-21 Merck & Co., Inc. Covalently-modified bacterial polysaccharides, stable covalent conjugates of such polysaccharides and immunogenic proteins with bigeneric spacers and methods of preparing such polysaccharides and conjugataes and of confirming covalency
US5173294A (en) 1986-11-18 1992-12-22 Research Foundation Of State University Of New York Dna probe for the identification of haemophilus influenzae
US4912094B1 (en) 1988-06-29 1994-02-15 Ribi Immunochem Research Inc. Modified lipopolysaccharides and process of preparation
WO1990006951A1 (en) * 1988-12-16 1990-06-28 De Staat Der Nederlanden Vertegenwoordigd Door De Minister Van Welzijn, Volksgezondheid En Cultuur Pneumolysin mutants and pneumococcal vaccines made therefrom
SE466259B (sv) 1990-05-31 1992-01-20 Arne Forsgren Protein d - ett igd-bindande protein fraan haemophilus influenzae, samt anvaendning av detta foer analys, vacciner och uppreningsaendamaal
NZ239643A (en) * 1990-09-17 1996-05-28 North American Vaccine Inc Vaccine containing bacterial polysaccharide protein conjugate and adjuvant (c-nd-che-a-co-b-r) with a long chain alkyl group.
CA2059692C (en) * 1991-01-28 2004-11-16 Peter J. Kniskern Pneumoccoccal polysaccharide conjugate vaccine
US5476929A (en) 1991-02-15 1995-12-19 Uab Research Foundation Structural gene of pneumococcal protein
US6592876B1 (en) 1993-04-20 2003-07-15 Uab Research Foundation Pneumococcal genes, portions thereof, expression products therefrom, and uses of such genes, portions and products
US5552146A (en) 1991-08-15 1996-09-03 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions relating to useful antigens of Moraxella catarrhalis
RU2118164C1 (ru) 1992-06-25 1998-08-27 Смитклайн Бичам Байолоджикалс, С.А. Вакцинная композиция, обладающая свойством вызывать цитолитический т-клеточный ответ у млекопитающих, способ получения цитолитического т-клеточного ответа in vivo, способ получения вакцины
ATE211654T1 (de) * 1992-09-16 2002-01-15 Univ Tennessee Res Corp Antigene des hybriden m-proteins und träger für gruppe a streptokokkenimpfstoff
AU685443B2 (en) 1993-03-23 1998-01-22 Smithkline Beecham Biologicals (Sa) Vaccine compositions containing 3-O deacylated monophosphoryl lipid A
EP0699076B1 (en) 1993-05-18 2002-10-30 The Ohio State University Research Foundation Otitis media vaccine
ES2210262T3 (es) 1993-09-22 2004-07-01 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine Procedimiento que permite activar un glucido soluble con la ayuda de nuevos reactivos cianilantes para producir estructuras inmunogenas.
GB9326253D0 (en) * 1993-12-23 1994-02-23 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
US5866135A (en) * 1994-04-21 1999-02-02 North American Vaccine, Inc. Group A streptococcal polysaccharide immunogenic compositions and methods
ES2366201T3 (es) 1994-07-15 2011-10-18 University Of Iowa Research Foundation Oligonucleótidos inmunmoduladores.
US5565204A (en) * 1994-08-24 1996-10-15 American Cyanamid Company Pneumococcal polysaccharide-recombinant pneumolysin conjugate vaccines for immunization against pneumococcal infections
US5681570A (en) * 1995-01-12 1997-10-28 Connaught Laboratories Limited Immunogenic conjugate molecules
US6440425B1 (en) 1995-05-01 2002-08-27 Aventis Pasteur Limited High molecular weight major outer membrane protein of moraxella
US5843464A (en) 1995-06-02 1998-12-01 The Ohio State University Synthetic chimeric fimbrin peptides
US5736533A (en) * 1995-06-07 1998-04-07 Neose Technologies, Inc. Bacterial inhibition with an oligosaccharide compound
DE69637597D1 (de) 1995-06-07 2008-08-21 Glaxosmithkline Biolog Sa Vakzine mit einem Polysaccharide Antigen-Trägerprotein Konjugat und freiem Trägerprotein
AP9701163A0 (en) 1995-06-07 1998-01-31 Biochem Vaccines Inc Streptococcal heat shock proteins members of the HSP70 family.
GB9513074D0 (en) 1995-06-27 1995-08-30 Cortecs Ltd Novel anigen
US6290970B1 (en) 1995-10-11 2001-09-18 Aventis Pasteur Limited Transferrin receptor protein of Moraxella
US6090576A (en) 1996-03-08 2000-07-18 Connaught Laboratories Limited DNA encoding a transferrin receptor of Moraxella
SE9601158D0 (sv) 1996-03-26 1996-03-26 Stefan Svenson Method of producing immunogenic products and vaccines
US6245335B1 (en) * 1996-05-01 2001-06-12 The Rockefeller University Choline binding proteins for anti-pneumococcal vaccines
JP2000511411A (ja) 1996-05-01 2000-09-05 ザ ロックフェラー ユニヴァーシティ 抗―肺炎球菌ワクチン用のコリン結合タンパク質
US7341727B1 (en) 1996-05-03 2008-03-11 Emergent Product Development Gaithersburg Inc. M. catarrhalis outer membrane protein-106 polypeptide, methods of eliciting an immune response comprising same
JPH102001A (ja) * 1996-06-15 1998-01-06 Okajima Kogyo Kk グレーチング
US5882871A (en) 1996-09-24 1999-03-16 Smithkline Beecham Corporation Saliva binding protein
US5882896A (en) 1996-09-24 1999-03-16 Smithkline Beecham Corporation M protein
FR2763244B1 (fr) * 1997-05-14 2003-08-01 Pasteur Merieux Serums Vacc Composition vaccinale multivalente a porteur mixte
ATE380867T1 (de) 1997-06-03 2007-12-15 Sanofi Pasteur Ltd Lactoferrinrezeptorgen von moraxella
WO1999003884A2 (en) 1997-07-21 1999-01-28 North American Vaccine, Inc. Modified immunogenic pneumolysin, compositions and their use as vaccines
US6224880B1 (en) * 1997-09-24 2001-05-01 Merck & Co., Inc. Immunization against Streptococcus pneumoniae using conjugated and unconjugated pneumoccocal polysaccharide vaccines
US20050031638A1 (en) * 1997-12-24 2005-02-10 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Vaccine
GB9727262D0 (en) * 1997-12-24 1998-02-25 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
US6709658B1 (en) * 1998-02-12 2004-03-23 Wyeth Holdings Corporation Pneumococcal vaccines formulated with interleukin-12
WO1999051266A2 (en) 1998-04-07 1999-10-14 Medimmune, Inc. Derivatives of pneumococcal choline binding proteins for vaccines
GB9812613D0 (en) 1998-06-11 1998-08-12 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
NZ509986A (en) 1998-08-19 2003-10-31 Baxter Healthcare S Immunogenic beta-propionamido-linked polysaccharide and oligosaccharide protein conjugates as vaccines
EP2050464B1 (en) * 1998-12-21 2019-08-07 Medimmune, Inc. Streptococcus pneumoniae proteins and immunogenic fragments for vaccines
DE60032120T2 (de) * 1999-03-19 2007-09-20 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Impstoff gegen Streptococcus pneumoniae
GB9909077D0 (en) * 1999-04-20 1999-06-16 Smithkline Beecham Biolog Novel compositions
GB0022742D0 (en) * 2000-09-15 2000-11-01 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
CN201252175Y (zh) * 2008-08-04 2009-06-03 富士康(昆山)电脑接插件有限公司 线缆连接器组件

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1996032963A1 (en) * 1995-04-17 1996-10-24 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine Induction and enhancement of the immune response to polysaccharides with bacterial lipoproteins
WO1996033739A1 (en) * 1995-04-25 1996-10-31 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Vaccines containing a saponin and a sterol

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JPN5002004426, ＡＡＫＯＹＵＮＬＵ ＭＵＳＴＡＦＡ, ＩＮＦＥＣＴＩＯＮＳ ＡＮＤ ＩＭＭＵＮＩＴＹ, 19971201, Ｖ６５ Ｎ１２, Ｐ５０１０−５０１６ *
JPN5002004427, ＬＥＥ， Ｃ．Ｊ．， ｅｔ ａｌ．, "Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ Ｅｐｉｔｏｐｅ， Ｇｅｎｅ， ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｉｔｙ Ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ Ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃａｌ Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ", ＣＲＩＴＩＣＡＬ ＲＥＶＩＥＷＳ ＩＮ ＭＩＣＲＯＢＩＯＬＯＧＹ, 1997, Ｖｏｌ．２３， Ｎｏ．２, ｐ．１２１−１４２ *
JPN5002004428, ＥＳＫＯＬＡ Ｊ, ＶＡＣＣＩＮＥ, 19900401, Ｖ８ Ｎ２, Ｐ１０７−１１０ *
JPN5002004429, ＤＥ ＶＥＬＡＳＣＯ Ｅ Ａ ＡＬＯＮＳＯ, ＩＮＦＥＣＴＩＯＮＳ ＡＮＤ ＩＭＭＵＮＩＴＹ, 1995, Ｖ６３ Ｎ３, Ｐ９６１−９６８ *
JPN5002004430, ＡＬＥＸＡＮＤＥＲ ＪＡＮＥＴ Ｅ, ＩＮＦＥＣＴＩＯＮＳ ＡＮＤ ＩＭＭＵＮＩＴＹ, 1994, Ｖ６２ Ｎ１２, Ｐ５６８３−５６８８ *
JPN6010031789, ＢＲＩＬＥＳ， Ｄ．Ｅ．， ｅｔ ａｌ．, ＣＬＩＮＩＣＡＬ ＭＩＣＲＯＢＩＯＬＯＧＹ ＲＥＶＩＥＷＳ, 199810, Ｖｏｌ．１１， Ｎｏ．４, ｐ．６４５−６５７ *

Cited By (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2013249314A (ja) * 2003-01-30 2013-12-12 Novartis Vaccines & Diagnostics Srl 複数の髄膜炎菌血清群に対する注射可能ワクチン
JP2010275328A (ja) * 2003-01-30 2010-12-09 Chiron Srl 複数の髄膜炎菌血清群に対する注射可能ワクチン
JP4827726B2 (ja) * 2003-01-30 2011-11-30 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル 複数の髄膜炎菌血清群に対する注射可能ワクチン
JP2016006112A (ja) * 2003-01-30 2016-01-14 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル 複数の髄膜炎菌血清群に対する注射可能ワクチン
JP2006516608A (ja) * 2003-01-30 2006-07-06 カイロン ソチエタ ア レスポンサビリタ リミタータ 複数の髄膜炎菌血清群に対する注射可能ワクチン
JP2013006881A (ja) * 2005-04-08 2013-01-10 Wyeth Llc 多価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物
JP2009520761A (ja) * 2005-12-22 2009-05-28 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム ワクチン
JP2013503623A (ja) * 2009-09-03 2013-02-04 ファイザー バクシーンズ エルエルシー Ｐｃｓｋ９ワクチン
JP2015131814A (ja) * 2009-09-03 2015-07-23 ファイザー バクシーンズ エルエルシー Ｐｃｓｋ９ワクチン
JP2016106089A (ja) * 2009-09-03 2016-06-16 ファイザー バクシーンズ エルエルシー Ｐｃｓｋ９ワクチン
JP2017039748A (ja) * 2009-09-03 2017-02-23 ファイザー バクシーンズ エルエルシー Ｐｃｓｋ９ワクチン
JP2015143252A (ja) * 2010-06-04 2015-08-06 ワイス・エルエルシー ワクチン製剤
JP2011256168A (ja) * 2010-06-04 2011-12-22 Wyeth Llc ワクチン製剤
JP2015534962A (ja) * 2012-10-17 2015-12-07 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム 免疫原性組成物

Also Published As

Publication number Publication date
NL300415I1 (nl) 2009-12-01
NO330532B1 (no) 2011-05-09
AU750762B2 (en) 2002-07-25
NO20014322D0 (no) 2001-09-05
CZ20013380A3 (cs) 2002-03-13
ES2275499T3 (es) 2007-06-16
EP1163000A2 (en) 2001-12-19
CY1107390T1 (el) 2010-07-28
EP1880735A3 (en) 2008-03-12
MY125387A (en) 2006-07-31
CY1107561T1 (el) 2013-03-13
WO2000056359A2 (en) 2000-09-28
JP2002539273A (ja) 2002-11-19
HU228499B1 (en) 2013-03-28
KR20020000785A (ko) 2002-01-05
PL355178A1 (en) 2004-04-05
CA2365296A1 (en) 2000-09-28
IL145045A0 (en) 2002-06-30
AU750913B2 (en) 2002-08-01
HUS1500040I1 (hu) 2018-05-28
CY2009014I2 (el) 2010-07-28
PL204890B1 (pl) 2010-02-26
PT1163000E (pt) 2008-03-20
US20100291138A1 (en) 2010-11-18
HK1043728B (zh) 2007-06-22
AR022963A1 (es) 2002-09-04
MY125202A (en) 2006-07-31
PL355264A1 (en) 2004-04-05
CN1391481A (zh) 2003-01-15
JP2002540074A (ja) 2002-11-26
ATE387214T1 (de) 2008-03-15
TWI235064B (en) 2005-07-01
TWI286938B (en) 2007-09-21
DE60038166T2 (de) 2009-03-12
CZ301445B6 (cs) 2010-03-03
AU750788B2 (en) 2002-07-25
US20100119544A1 (en) 2010-05-13
WO2000056360A3 (en) 2001-01-25
TR200102736T2 (tr) 2002-04-22
NO20014325D0 (no) 2001-09-05
HUP0200373A2 (en) 2002-06-29
HU229968B1 (hu) 2015-03-30
IL145044A (en) 2007-03-08
US8926985B2 (en) 2015-01-06
CY2009014I1 (el) 2010-07-28
PT1162999E (pt) 2007-02-28
US20060002961A1 (en) 2006-01-05
WO2000056360A2 (en) 2000-09-28
EP1776962A1 (en) 2007-04-25
AU3430700A (en) 2000-10-09
IL145043A (en) 2007-06-17
US20060093626A1 (en) 2006-05-04
BR0009163A (pt) 2001-12-26
CZ303653B6 (cs) 2013-01-30
EP1162998A2 (en) 2001-12-19
EP2277535A2 (en) 2011-01-26
CA2366152A1 (en) 2000-09-28
CN100339130C (zh) 2007-09-26
ATE459373T1 (de) 2010-03-15
PL203917B1 (pl) 2009-11-30
CA2366314C (en) 2012-01-10
US20050031646A1 (en) 2005-02-10
JP2011057713A (ja) 2011-03-24
DE60038166D1 (de) 2008-04-10
CN1351503A (zh) 2002-05-29
DE60043930D1 (de) 2010-04-15
US9168313B2 (en) 2015-10-27
NZ513841A (en) 2001-09-28
CA2366314A1 (en) 2000-09-28
AU3813600A (en) 2000-10-09
EP1880735A2 (en) 2008-01-23
NO20014322L (no) 2001-11-14
HK1043728A1 (en) 2002-09-27
NO20014323D0 (no) 2001-09-05
DE122009000054I1 (de) 2009-12-31
LU91652I2 (fr) 2010-10-13
HK1043731A1 (en) 2002-09-27
AR022964A1 (es) 2002-09-04
US20030147922A1 (en) 2003-08-07
CN1192798C (zh) 2005-03-16
TR200102739T2 (tr) 2001-12-21
NO2011014I2 (no) 2011-08-30
ATE346608T1 (de) 2006-12-15
SI1162999T1 (sl) 2007-04-30
US20110217329A1 (en) 2011-09-08
DK1162999T3 (da) 2007-03-26
EP1162998B1 (en) 2010-03-03
ES2300255T3 (es) 2008-06-16
BRPI0009163B8 (pt) 2021-05-25
JP5551579B2 (ja) 2014-07-16
WO2000056358A3 (en) 2001-01-04
NZ513842A (en) 2004-05-28
KR100642044B1 (ko) 2006-11-10
DE60032120T2 (de) 2007-09-20
WO2000056358A2 (en) 2000-09-28
DK1163000T3 (da) 2008-04-28
TWI281403B (en) 2007-05-21
BRPI0009163B1 (pt) 2019-04-09
AR022965A1 (es) 2002-09-04
NO2011014I1 (no) 2011-09-19
EP2277535A3 (en) 2011-03-09
NO330736B1 (no) 2011-06-27
SI1163000T1 (sl) 2008-06-30
IL145043A0 (en) 2002-06-30
EP1162999B1 (en) 2006-11-29
MXPA01009452A (es) 2002-08-06
CN1351501A (zh) 2002-05-29
NL300415I2 (ja) 2016-12-13
KR100798212B1 (ko) 2008-01-24
LU91652I9 (ja) 2019-01-03
BR0009166A (pt) 2001-12-26
WO2000056359A3 (en) 2001-02-01
TR200102735T2 (tr) 2002-04-22
KR20020000549A (ko) 2002-01-05
JP4846906B2 (ja) 2011-12-28
CZ20013378A3 (cs) 2002-03-13
NO20014325L (no) 2001-11-14
HK1043730A1 (zh) 2002-09-27
HK1043731B (zh) 2009-01-23
FR10C0008I2 (fr) 2012-10-26
EP1162999A2 (en) 2001-12-19
IL145044A0 (en) 2002-06-30
AU3291900A (en) 2000-10-09
FR10C0008I1 (fr) 2010-03-26
CZ20013379A3 (cs) 2002-03-13
CN1191852C (zh) 2005-03-09
HUP0200367A2 (en) 2002-05-29
PL355180A1 (en) 2004-04-05
NO20014323L (no) 2001-11-14
US20150079125A1 (en) 2015-03-19
NZ513840A (en) 2004-02-27
DE60032120D1 (de) 2007-01-11
ES2339737T3 (es) 2010-05-25
EP1163000B1 (en) 2008-02-27
BE1025464I2 (ja) 2019-03-06
BR0009154A (pt) 2001-12-26
KR20020001785A (ko) 2002-01-09
HUP0200664A2 (en) 2002-06-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP4846906B2 (ja) ワクチン
ZA200107640B (en) Vaccine.
US20150079129A1 (en) Vaccine
MXPA01009459A (es) Vacuna
MXPA01009455A (en) Vaccine

Legal Events

Date Code Title Description
A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20070228

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20100615

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20100914

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20100922

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20101215

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20110125

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20110422

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20110502

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20110722

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20110816

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20110822

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20110913

A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20111013

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20141021

Year of fee payment: 3

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 4846906

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R153 Grant of patent term extension

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R153

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

EXPY Cancellation because of completion of term