JP2011503104A - 免疫調節化合物ならびに関連組成物および方法 - Google Patents

Abstract

【課題】ヘルパーＴ細胞プロファイル、特にＴｈ１、Ｔｈ２、Ｔｈ１７およびＴｒｅｇ細胞プロファイルを平衡化するための組成物および方法、ならびにヘルパーＴ細胞プロファイルの不均衡に関連する炎症状態を処置または予防するための関連する方法および組成物が本明細書に提供される。
【解決手段】本発明は、ヘルパーＴ細胞プロファイルを平衡化すること、特に個体におけるＴｈ１、Ｔｈ２、Ｔｈ１７およびＴｒｅｇ細胞のうちの少なくとも１つの細胞プロファイルを平衡化することに適切な免疫調節化合物ならびに関連方法および組成物に関する。より具体的には、本明細書に提供されるのは、ＰＳＡ多糖Ａ（ＰＳＡ）および他の両性イオン多糖（ＺＰ）の驚くほどの免疫調節特性に基づく方法および組成物であり、それらの多糖は、個体における炎症および炎症状態の処置、予防および制御に適切である。
【選択図】図１４

Description

（関連出願に対する相互参照）
本出願は、２００７年１１月９日に出願された米国仮特許出願第６１／００２，７０５号（代理人整理番号ＣＩＴ５０３１−Ｐ）の「Ｈｏｓｔ−Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｍｕｔｕａｌｉｓｍ ｂｙ ａ Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｓｙｍｂｉｏｓｉｓ Ｆａｃｔｏｒ Ｐｒｅｖｅｎｔｓ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｄｉｓｅａｓｅ」という発明の名称の米国仮特許出願、２００７年１２月２０日に出願された米国仮特許出願第６１／００８，４０７号（代理人整理番号ＣＩＴ５０３１−Ｐ２）の「Ｈｏｓｔ−Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｍｕｔｕａｌｉｓｍ ｂｙ ａ Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｓｙｍｂｉｏｓｉｓ Ｆａｃｔｏｒ Ｐｒｅｖｅｎｔｓ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｄｉｓｅａｓｅ」という発明の名称の米国仮特許出願、および２００８年１０月１３日に出願された米国仮特許出願第６１／１９６，０４６号（代理人整理番号ＣＩＴ５２５０−Ｐ）の「Ａ Ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｆｒｏｍ ａ Ｓｙｍｂｉｏｔｉｃ Ｇｕｔ Ｂａｃｔｅｒｉａ Ｃｏｎｔｒｏｌｓ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ」という発明の名称の米国仮特許出願に対する優先権を主張し、それらの各々の開示はその全体が参照により本明細書に援用される。

（政府の認可の声明）
アメリカ合衆国政府は、国立衛生研究所によって与えられた認可番号ＡＩ０３９５７６に従って本発明において一定の権利を有する。

（分野）
本開示は免疫系、特に、個体における免疫性反応に関連するＴ細胞分化および／またはサイトカイン産生を制御できる免疫調節化合物に関する。

Ｔ細胞は、リンパ球として公知である白血球細胞のグループに属し、細胞媒介性免疫において中心的役割を果たす。特に、ヘルパーＴ細胞（エフェクターＴ細胞またはＴｈ細胞としても公知である）は、免疫系の能力を確立し、最大化すること、および特に他の免疫細胞を活性化し、関連付けることに重要な役割を果たすリンパ球のサブグループ（白血球細胞（ｗｈｉｔｅ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌ）または白血球（ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ）の種類）である。より具体的には、Ｔｈ細胞は、細胞毒性Ｔ細胞の活性化および増殖におけるＢ細胞抗体クラススイッチを決定し、マクロファージなどの食細胞のバクテリア活性を最大化するのに重要である。

分化過程の結果に由来する異なる種類のＴｈ細胞が同定されており、特定の表現型と関連する。Ｔ細胞の発達後、成熟したナイーブ（Ｔ細胞が反応し得る抗原にまださらされていないことを意味する）なＴ細胞は胸腺から出て、身体全体に広がり始める。一旦、ナイーブなＴ細胞が身体を通る間に抗原と出くわすと、それらは、ヘルパーＴ１（Ｔｈ１）、ヘルパーＴ２（Ｔｈ２）、ヘルパーＴ１７（Ｔｈ１７）、または調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）表現型に分化し得る。

これらのＴｈ細胞種の各々は、Ｔ_ｈ細胞を含む他の白血球を模倣するか、またはそれらと相互作用するサイトカイン、タンパク質またはペプチドを分泌する。しかしながら、各々の細胞種は固有の表現型および他のものと干渉し、しばしば競合する活性を有する。

Ｔｈ１、Ｔｈ２、およびＴｈ１７（炎症性ヘルパーＴまたは炎症性Ｔｈ）は、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−ａ、ＩＬ−１７、ＩＬ２１、ＩＬ２３などの炎症性サイトカインの分泌による炎症反応、ならびに／あるいは他のＴｈ細胞を含む他のＴ細胞の活性化および／または阻害（例えばＴｈ１細胞はＴｈ２およびＴｈ１７を抑制し、Ｔｈ２はＴｈ１およびＴｈ１７を抑制する）による炎症反応を促進する。代わりに、Ｔｒｅｇは、免疫反応に関連する他の細胞の生物学的活性を抑制する免疫系の要素である。特に、Ｔｒｅｇは、免疫抑制サイトカインＴＧＦ−βおよびインターロイキン１０を分泌することができ、炎症を制限または抑制できることが知られている。

炎症性ヘルパーＴ細胞のいずれかのプロファイルの不均衡は、通常、個体の状態と関連している。例えば、Ｔｈ１またはＴｈ１７についての増大したプロファイルは自己免疫を導き、一方、増大したＴｈ２細胞プロファイルは、アレルギーおよび喘息を導く。特に、Ｔｈ１７細胞プロファイルの不均衡は、いくつかの自己免疫状態と関連している。Ｔｒｅｇ細胞は、全ての３つの他のＴ細胞系統によって誘発される炎症を抑制するので、疾患を導く制御されていない炎症を予防するのに重要である。従って、平衡化したヘルパーＴプロファイルは、個体の健康に重要である。

本明細書に提供されるのは、ヘルパーＴ細胞プロファイルを平衡化すること、特に個体におけるＴｈ１、Ｔｈ２、Ｔｈ１７およびＴｒｅｇ細胞のうちの少なくとも１つの細胞プロファイルを平衡化することに適切な免疫調節化合物ならびに関連方法および組成物である。より具体的には、本明細書に提供されるのは、ＰＳＡ多糖Ａ（ＰＳＡ）および他の両性イオン多糖（ＺＰ）の驚くほどの免疫調節特性に基づく方法および組成物であり、それらの多糖は、個体における炎症および炎症状態の処置、予防および制御に適切になる。

第１の態様によれば、個体におけるヘルパーＴ細胞プロファイルを平衡化する方法が開示される。その方法は、個体に有効量の両性イオン多糖を投与することを含む。

第２の態様によれば、個体におけるＴｈ１、Ｔｈ２、Ｔｈ１７およびＴｒｅｇからなる群より選択される少なくとも１つのＴｈ細胞の細胞プロファイルを平衡化する方法が開示される。その方法は、個体に有効量の両性イオン多糖を投与することを含む。

第３の態様によれば、個体におけるサイトカイン産生を制御する方法が開示され、そのサイトカインは、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−ａ、ＩＬ−１７、ＩＬ２１、ＩＬ２３のうちの少なくとも１つである。その方法は、個体に有効量の両性イオン多糖を投与することを含む。

第４の態様によれば、個体におけるＴｈ細胞プロファイル不均衡に関連する炎症を制御する方法が開示される。その方法は、個体に有効量の両性イオン多糖を投与することを含む。

第５の態様によれば、個体におけるＴｈ１、Ｔｈ２、Ｔｈ１７およびＴｒｅｇからなる群より選択される少なくとも１つのＴｈ細胞の不均衡な細胞プロファイルに関連する状態を処置または予防するための方法が開示される。その方法は、個体に有効量の両性イオン多糖を投与することを含む。

第６の態様によれば、個体におけるＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−ａ、ＩＬ−１７、ＩＬ２１、ＩＬ２３サイトカインのうちの少なくとも１つの産生に関連する状態を処置または予防するための方法が開示される。その方法は、個体に有効量の両性イオン多糖を投与することを含む。

第７の態様によれば、抗炎症性組成物が開示される。抗炎症性組成物は両性イオン多糖および適切なビヒクルを含み、その両性イオン多糖は約１μｇ〜約１００μｇの量で含まれる。

本明細書に開示される組成物および方法は、個体におけるＴｈ１、Ｔｈ２、Ｔｈ１７およびＴｒｅｇ細胞のプロファイルの制御および平衡化を同時にするいくつかの実施形態において使用され得るので、個体におけるそれらのサイトカインについての不均衡なプロファイルに関連する状態を予防または処置する。

本明細書に開示される組成物および方法は、医薬、薬学、獣医学の用途および基礎的生物学研究ならびに本開示を読んで、当業者によって認識され得る種々の用途と併せて使用され得、両性イオン多糖が所望される可能な役割が調査される。

本開示の１つ以上の実施形態の詳細は、添付の図面および以下の詳細に記載される。他の特徴、目的および利点は、詳細な説明および図面、ならびに特許請求の範囲から明らかであろう。

本明細書の一部に組み込まれ、構成要素となる添付の図面は、本開示の１つ以上の実施形態を例示し、詳細な説明とともに、本開示の原理および実施を説明するのに役立つ。

図１は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、個体における実験的大腸炎からの例示的なＺＰ媒介性防御を示す。パネル（ａ）は、無菌マウスと、野生型Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓおよびＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＤＰＳＡとを単独で共生させた結果を要約する図を示す（３つの実験についての平均の割合±標準偏差（ＳＤ）：従来、３８．４％±２．２；無菌、２６．７％±１．３；Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ、４０．８％±３．１；Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＤＰＳＡ、２８．８％±２．６）。全ての細胞は、ＣＤ４^＋脾細胞でゲート設定される。パネル（ｂ）は、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓと、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓおよびＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＤＰＳＡでの共コロニー形成実験の結果を例示する図を示す（両側ｐ値、０．００４；マン・ホイットニーのＵ検定）。２つの独立した実験から合わせたデータを示す。エラーバーは、３連のサンプルについてのＳＤを示す。パネル（ｃ）は、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓおよび野生型Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓまたはＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＤＰＳＡで共コロニー形成した動物におけるＴＮＦａレベルを検出するための大腸組織培養物のＥＬＩＳＡ試験の結果を例示する図を示す。パネル（ｄ）は、Ｌ３２発現に正規化された脾細胞で実施されたＩＬ−２３ｐ１９についてのＱ−ＰＣＲの結果を例示する図を示す。エラーバーは、３連のサンプルについてのＳＤを示す。 図２は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、例示的なＺＰ媒介性サイトカイン制御を示す。特に、図２は、コントロール動物（Ｃ５７ＢＬ／６）におけるものに対するＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓおよび野生型Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓまたはＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＤＰＳＡで共コロニー形成した動物における炎症性サイトカインＩＬ−１２ｐ４０（左）およびＩＬ−１ｂ（右）を検出するためのＥＬＩＳＡ試験の結果を例示する図を示す。結果は２つの独立した実験の１回の試行からのものである。エラーバーは、１群あたり４匹の動物から回収した大腸の研究からのＳＤ値を示す。 図３は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、ＣＤ４^＋Ｔ細胞によるＴＮＦａ発現のＺＰ媒介性制御の例を示す。特に、図３において、ＣＤ４^＋細胞を、各群（１群あたり４匹のマウス）からプールした脾細胞から精製し、ブレフェルジンＡの存在下で４時間、ＰＭＡおよびイオノマイシンでインビトロにおいて再刺激した。細胞を、細胞内ＴＮＦαについて染色した。リンパ球ゲート設定内の細胞は分析物内に含まれ、数は、ＴＮＦαを産生する細胞の割合を示す。精製した細胞は、９０％より多いＣＤ４^＋であった。防御の間、ＰＳＡ産生Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓでコロニー形成した動物は、疾患動物より低いＴＮＦａレベルを示した。 図４は、本明細書に記載される種々の実施形態を支持するコントロール実験を示す。パネル（ａ）は、８週後、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓの野生型および種々の変異体での共コロニー形成後に実施したＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ特異的Ｑ−ＰＣＲのエチジウムブロマイド染色ゲル電気泳動を示す。Ｍ：マーカー。１：Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ単独でコロニー形成したＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞移入を有するＲａｇ２^−／−動物。２：Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓおよびＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ９３４３（ｗｔ）でコロニー形成したＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞移入を有するＲａｇ２^−／−動物。３：Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓおよびＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＤＰＳＡでコロニー形成したＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞移入を有するＲａｇ２^−／−動物。４：Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ単独でコロニー形成したＣ５７ＢＬ／６マウス。Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓは動物で容易にコロニー形成したが、疾患を誘発しなかったことは留意すべきである（図１）。Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ １６Ｓ ｒＤＮＡについてのプライマー：（ＨＢ−１５）５’−ＧＡＡＡＣＴＧＴＴＡＣＴＣＴＧ−３’（配列番号１）および（ＨＢ−１７）５’−ＴＣＡＡＧＣＴＣＣＣＣＧＡＡＧＧＧ−３’（配列番号２）。パネル（ｂ）は、８週後、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓの野生型および種々の変異体での共コロニー形成後に実施されたＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ特異的Ｑ−ＰＣＲのエチジウムブロマイド染色ゲル電気泳動を示す。Ａ：Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓおよびＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ９３４３（ｗｔ）でコロニー形成したＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞移入を有するＲａｇ２^−／−動物。Ｂ：Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓおよびＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＤＰＳＡとコロニー形成したＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞移入を有するＲａｇ２^−／−動物。Ｃ：Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ単独でコロニー形成したＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞移入を有するＲａｇ２^−／−動物。Ｄ：Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ単独でコロニー形成したＣ５７ＢＬ／６マウス。Ｅ：Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓゲノムＤＮＡ（陽性コントロール）。Ｍ：マーカー。Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ｓｓｒ３（ｆｉｎＢ）遺伝子についてのプライマー：（ｓｓｒ３−Ｆ）５’−ＴＡＴＴＴＧＣＧＡＧＡＡＧＧＴＧＡＴ−３’（配列番号３）および（ｓｓｒ３−ｒ）５’−ＴＡＡＡＣＧＣＴＴＴＧＣＴＧＣＴＡＴ−３’（配列番号４）。 図５は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、ＺＰ媒介性防御に関連する効果を示す。特に、図５は、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓおよび野生型Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓまたはＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＤＰＳＡで共コロニー形成した動物におけるＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓを定量化することに関連するＱ−ＰＣＲ実験の結果を例示する図を示す。この結果を、ｌｏｇ^１０数の既知の遺伝子（細胞致死性膨張性毒素）のコピーとしてＹｏｕｎｇら、２００４^１に従って評価した。動物は、実験の終わりに等しいレベルのＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓを含んだ。 図６は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、ＺＰ媒介性防御を示す。パネル（ａ）は、精製ＰＳＡの非存在下（第２の列）または存在下（第３の列）でのＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓでのコロニー形成の結果を例示する図を示す（全ての群のＫｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ比較：異なる結果についてｐ＞０．０５、同様の結果についてｐ＜０．０１；マン・ホイットニーのＵ検定：両側ｐ値、０．０００２）。パネル（ｂ）は、ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞の移入および示されるＰＳＡの存在または非存在下でのＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ（ＰＢＳ＋Ｈｈ）でのコロニー形成後、Ｒａｇ２^−／−動物における消耗性疾患を検出することに関連する実験の結果を例示する図を示す。ＡＮＯＶＡは、全ての示した群（アスタリスク）間の比較が統計的に有意であることを示す。パネル（ｃ）は、野生型動物由来の大腸部分の構造（左のパネル）；ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞のＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒがコロニー形成したＲａｇ２^−／−マウスへの移入後（中央のパネル）；Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒがコロニー形成した動物の経口ＰＳＡ処置（右のパネル）を示す。各列の画像は同じ倍率である。 図７は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、ＺＰ調節性免疫反応を示す。パネル（ａ）は、ＴＮＢＳ処置したＰＢＳコントロールと関連する経口ＰＳＡ投与と体重との相関関係を例示する図を示す。全ての示した群（アスタリスク）についてのＡＮＯＶＡ値は統計的に有意である。エラーバーは、１群あたり４匹の動物の間のＳＤを示す。パネル（ｂ）は、ＴＮＢＳ＋ＰＢＳ処置した群、ＴＮＢＳ＋ＰＳＡ処置した動物およびコントロール由来の大腸部分（２つの独立した実験における動物由来の代表的な部分）を示す。パネル（ｃ，ｄ）は、疾患の間のＰＳＡの存在または非存在下でのＩＬ−１７Ａ（パネルｃ）およびＴＮＦａ（パネルｄ）を含むＭＬＮから精製したＣＤ４^＋Ｔ細胞のＱ−ＰＣＲの結果を例示する図を示す。エラーバーは、３つの独立した実験の２連の試行からのものである。パネル（ｅ，ｆ）は、ＴＮＢＳ＋ＰＢＳ処置した群、ＴＮＢＳ＋ＰＳＡ処置した動物およびコントロール由来の均質化した大腸のＩＬ１７Ａ（パネルｅ）およびＴＮＦα（パネルｆ）の転写発現を例示する図を示す。エラーバーは、３つの独立した実験の２連の試行からのものである。 図８は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、サイトカイン発現のＺＰ媒介性制御を示す。パネル（ａ）は、エタノール（コントロール）、ＴＮＢＳ、またはＴＮＢＳとＰＳＡで処置した野生型マウスにおけるＩＬ−１０についての大腸のＱ−ＰＣＲアッセイの結果を例示する図を示す。エラーバーは、３連のサンプルについてのＳＤを示す。パネル（ｂ）は、ＴＮＢＳ処置した群のＭＬＮから精製したＣＤ４^＋Ｔ細胞におけるＩＬ−１０発現についてのＱ−ＰＣＲ結果を例示する図を示す。エラーバーは、３連のサンプルについてのＳＤを示す。パネル（ｃ）は、ＩＬ−１０産物に対するＢＭＤＣ／Ｔ細胞共培養物と、精製したＰＳＡ ＬＰＳおよびａ−ＣＤ３／ａ−ＣＤ２８とのインキュベーションの効果を例示する図を示す。エラーバーは、３連のサンプルについてのＳＤを示す。パネル（ｄ）は、ＰＳＡの存在下（真ん中の３つのバー）または非存在下（左の３つのバー）およびａＩＬ−１０Ｒの添加後（右の３つのバー）でのＴＮＦａ放出に対するＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ濃度を増加させていった状態（多数の感染：三角形によって示されるように０．１、１．０および１０）のＢＭＤＣ−Ｔ細胞共培養物の感染の結果を例示する図を示す。エラーバーは、３連の実験試行のＳＤ値を示す。 図９は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、サイトカイン発現のＺＰ媒介性制御を示す。特に、図９は、５の感染多重度における、４８時間、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ単独またはＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓおよびＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ（野生型またはΔＰＳＡ）とインキュベートした一次ＢＭＤＣ−Ｔ細胞共培養物の上清のＩＬ−１０ ＥＬＩＳＡについての結果を例示する図を示す。エラーバーは２連のサンプル試行についてのＳＤ値を示し、３つの独立した実験を表す。 図１０は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、サイトカイン発現のＺＰ媒介性制御を示す。特に、図１０は、ＰＳＡの存在下（真ん中の３つのバー）または非存在下（左の３つのバー）およびａＩＬ−１０Ｒの添加後（右の３つのバー）でのサイトカインＩＬ−１ｂの放出に対する生きているＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓの濃度を増加させていった状態（感染多重度：三角形によって示されるように０．１、１．０および１０）のＢＭＤＣ−Ｔ細胞共培養物の感染の結果を例示する図を示す。エラーバーは、３連の実験試行についてのＳＤ値を示す。 図１１は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、炎症からのＺＰ媒介性防御を示す。パネル（ａ，ｂ）は、コロニー形成していない（コントロール）か、または単独もしくはＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ（野生型またはΔＰＳＡ）との組み合わせのいずれかで（炎症を誘発するために）Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓでコロニー形成したＩＬ−１０^−／−マウスにおける炎症性サイトカインＴＮＦα（パネルａ）およびＩＬ−１７Ａ（パネルｂ）についてのＥＬＩＳＡ検出の結果を例示する図を示す。エラーバーは、３連のサンプルについてのＳＤを示す。パネル（ｃ）は、ＰＳＡを用いるか、用いず、そして、ＩＬ−１０ブロック（α−ＩＬ１０Ｒ）に対する中和抗体の存在下でＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓでコロニー形成したＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞移入を有するＲａｇ^−／−動物における大腸炎スコアを例示する図を示す。データは２つの独立した実験を表す。パネル（ｄ）は、ＰＳＡまたはＰＢＳを用いてＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓでコロニー形成したＩＬ−１０^−／−マウスから移入されたＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞を有するＲａｇ^−／−動物における大腸炎スコアを例示する図を示す。結果を、２つの独立した実験の１つの代表的な試行について示す。パネル（ｅ）は、ＰＳＡまたはＰＢＳを用いてＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓでコロニー形成したＩＬ−１０^−／−マウスから移入されたＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞を有するＲａｇ^−／−動物の組織学的大腸部分を示す。全ての画像は同じ倍率である。パネル（ｆ）は、ＰＳＡまたはＰＢＳを用いてＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓでコロニー形成したＩＬ−１０^−／−マウスから移入されたＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞を有するＲａｇ^−／−動物（ｎ＝４）の群についての平均体重を例示する図を示す。 図１２は、本明細書に開示される実施形態を支持するＺＰ投与の効果を示す。特に、図１２は、ＰＳＡ（またはＰＢＳ）で処置し、次いで、ＴＮＢＳまたはビヒクル（コントロール）の直腸投与に供した４ Ｃ５７ＢＬ／６マウスの群における体重の変化を例示する図を示す。平均体重（初期体重のパーセントとして示す）を各群について示す；ＳＤ値は、ＩＬ−１０の非存在下において、ＰＳＡがＴＮＢＳによって誘導される体重の減少を回復させることができないことを示す。ＡＮＯＶＡは、両方のＴＮＢＳ処置した群における体重の減少が、コントロール動物におけるものと統計的に異なることを示す。 図１３は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態を支持するＺＰ投与の効果を示す。特に、図１３は、ＰＳＡ（またはＰＢＳ）で処置し、次いで、ＴＮＢＳまたはビヒクル（コントロール）の直腸投与に供した４ Ｃ５７ＢＬ／６マウスの群の代表的な動物由来のＨ＆Ｅ染色部分の組織学的分析の結果を示す。結果は２つの独立した実験を表す。 図１４は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、ＺＰＳの経口投与後の腸管外免疫部分内の阻害または炎症を示す。特に、パネル（ａ）は、未処置のマウス（コントロール）およびＴＮＢＳまたはＴＮＢＳ／ＰＳＡで処置したマウスにおいて検出された大腸組織学的スコアを例示する図を示す。各ドットは個々のマウスを表し、直線は群の平均スコアを示す。パネル（ｂ）は、ＴＮＢＳ誘導性大腸炎を経験しているＢａｌｂ／ｃマウスの時間における生存率を例示する図を示す。各群においてｎ＝１６のマウスである。パネル（ｃ）は、未処置のマウス（コントロール）およびＴＮＢＳまたはＴＮＢＳ／ＰＳＡで処置したマウスの脾臓の画像を示す。パネル（ｄ）は、未処置のマウス（コントロール）およびＴＮＢＳまたはＴＮＢＳ／ＰＳＡで処置したマウスにおけるＣＤ４＋脾細胞内のＴＮＦ−α、ＩＬ−６、ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１０の相対的単位を例示する図を示す。これらのデータは代表的な３つの独立した実験である。 図１５は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、腸管外部位へのＺＰＳの投与後のＴＮＢＳ誘発性大腸炎からの防御を示す。特に、パネル（ａ）は、ＴＮＢＳ誘発性大腸炎を経験しているマウスの生存率を例示する図を示す。各群においてｎ＝１０のマウスである。パネル（ｂ）は、未処置のマウス（Ｅｔｏｈ）およびＴＮＢＳまたはＴＮＢＳ／ＰＳＡ全身投与で処置したマウスにおける脾臓重量の変化を例示する図を示す。脾臓の体重をサイズの指標として使用した。各ダイヤモンドは、個々の動物由来の脾臓の重量を表す。バーは、群の平均重量を示す。Ｐ値をスチューデントのＴ検定により決定した。 図１６は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、ＴＮＢＳ誘発性大腸炎の間のＺＰＳの全身投与後の腸および全身性免疫部分の両方における炎症性サイトカインの阻害を示す。パネル（ａ）は、未処置のマウス（コントロール）およびＴＮＢＳまたはＴＮＢＳ／ＰＳＡで処置したマウスの腸間膜リンパ節（ＭＬＮ）脾細胞内に存在しているＣＤ４＋Ｔリンパ球におけるＴＮＦ−α産生を例示する図を示す。細胞をＭＬＮから回収し、ＣＤ４またはＴＮＦ−ａを認識する抗体で染色した。四分割内の数は細胞の割合を表す。パネル（ｂ）は、未処置のマウス（コントロール）およびＴＮＢＳまたはＴＮＢＳ／ＰＳＡで処置したマウスの大腸におけるＩＬ−１２、ＩＬ−２３、およびＩＬ−１７の発現の分析を例示する図を示す。パネル（ｃ）は、未処置のマウス（コントロール）およびＴＮＢＳまたはＴＮＢＳ／ＰＳＡで処置したマウスの脾臓内に存在しているＣＤ４＋Ｔリンパ球におけるＴＮＦ−α産生を例示する図を示す。四分割内の数は細胞の割合を表す。パネル（ｄ）は、未処置のマウス（コントロール）およびＴＮＢＳまたはＴＮＢＳ／ＰＳＡで処置したマウスの脾臓におけるＩＬ−１２、ＩＬ−６、およびＩＬ−１７の発現の分析を例示する図である。 図１７は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、ＺＰＳの投与後の全身敗血性ショックに関連する炎症および死の阻害を示す。パネル（ａ）は、１００μｇのＬＰＳ単独の投与後、１時間および４時間でのマウスにおけるＴＮＦ−ａ血清レベルを例示する図を示す。マウスを、ＬＰＳ投与前に、１日おきに３回、ＰＢＳまたは５０μｇのＰＳＡのいずれかで前処置した。^＊は、スチューデントのｔ検定によって決定される統計的有意性を示す。ＳＤを個々のマウス血清から決定した。これらのデータは３つの独立した実験の代表的なものである。パネル（ｂ）は、１００μｇのＬＰＳの投与後、１時間および４時間でのマウスにおけるＩＬ−６血清レベルを例示する図を示す。パネルａの前処置と同じように、^＊は、スチューデントのｔ検定によって決定される統計的有意性を示す。ＳＤを個々のマウス血清から決定した。これらのデータは３つの独立した実験の代表的なものである。パネル（ｃ）は、未処置のマウス（ｃｏｎ）および腹腔内にＬＰＳを投与したマウス（ＬＰＳ）における脾臓の重量の変化を例示する図を示し、パネルａのようにＰＢＳまたはＰＳＡで前処置した。各ドットは個々のマウス由来の脾臓の体重を表す。Ｐ値をスチューデントのＴ検定によって決定した。パネル（ｄ）は、ＬＰＳの高用量（５００μｇ）投与によって誘発される敗血性ショックを経験している動物の生存率を例示する図を示し、ＰＳＡまたはＰＢＳで前処置した。各群においてＮ＝１２のマウスである。パネル（ｅ）は、５００μｇのＬＰＳ単独の投与後、またはＰＳＡもしくはＰＢＳで前処置したマウスにおけるＴＮＦ−ａの血清濃度を例示する図を示す。ｐ値をスチューデントのＴ検定によって決定した。各ドットは個々のマウスを表す。パネル（ｆ）は、５００μｇのＬＰＳ単独の投与後、かつＰＳＡまたはＰＢＳで前処置したマウスにおけるＩＬ−６の血清濃度を例示する図を示す。ｐ値をスチューデントのｔ検定によって決定した。各ドットは個々のマウスを表す。 図１８は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、ＺＰＳの投与後の全身敗血性ショックに関連する炎症および死の阻害を示す。パネル（ａ）は、ＰＢＳまたはＰＳＡで前処置して、ＬＰＳを投与したマウスにおけるＴＮＦ−ａ血清レベルを例示する図を示す。血清を、ＩＬ−１０^−／−マウスにおいてＬＰＳの投与後、１時間および４時間で回収した。^＊は、スチューデントのｔ検定によって決定される統計的有意性を示す。ＳＤを個々のマウスの血清から決定した。パネル（ｂ）は、ＰＳＡまたはＰＢＳで前処置したマウスにおけるＩＬ−６血清レベルを例示する図を示す。血清を、ＩＬ−１０^−／−マウスにおいてＬＰＳの投与後、１時間および４時間で回収した。^＊は、スチューデントのｔ検定によって決定される統計的有意性を示す。ＳＤを個々のマウスの血清から決定した。パネル（ｃ）は、ＩＬ−１０^−／−マウスにおいて、ＬＰＳ単独またはＰＳＡと併せた投与後のマウスにおける生存率を例示する図を示す。各群においてＮ＝８のマウスである。 図１９は、本明細書に開示されるいくつかの実施形態による、炎症組織に対するＺＰＳ投与のさらなる効果を例示する図を示す。

本明細書に開示される方法および組成物は、ＰＳＡまたは別の両性イオン多糖の使用に基づいて、個体におけるヘルパーＴ細胞プロファイルを平衡化することを可能にする。

細胞に関して本明細書で使用される場合、用語「ヘルパーＴ」は、当業者によって識別可能な異なる細胞種類を示すリンパ球のサブグループ（白血球細胞または白血球の種類）を指す。特に、本開示によるヘルパーＴ細胞としては、エフェクターＴ_ｈ細胞（例えば、Ｔｈ１、Ｔｈ２およびＴｈ１７）、すなわち、Ｔ_ｈ細胞を含む、他の白血球で刺激または相互作用するサイトカイン、タンパク質またはペプチドを分泌するＴ_ｈ細胞、およびサプレッサーＴｈ細胞（例えば、Ｔｒｅｇ）、すなわち、免疫系の活性を抑制し、それによって、免疫系ホメオスタシスおよび自己抗原に対する耐性を維持するＴｈ細胞が挙げられる。成熟Ｔ_ｈ細胞は、通常、表面タンパク質ＣＤ４を発現すると考えられる。ＣＤ４を発現するＴ細胞はまた、ＣＤ４^＋Ｔ細胞としても公知である。ＣＤ４^＋Ｔ細胞は一般に、免疫系内でヘルパーＴ細胞として予め規定された役割を有するように扱われるが、稀に例外も存在することが知られている。例えば、ＣＤ４を発現することが知られているサプレッサーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、および細胞毒性Ｔ細胞のサブグループが存在する（細胞毒性の例は特定の疾患状態において非常に少ない数で観測されているが、それらは、通常、存在しないとみなされている）。

本明細書で使用される場合、用語「細胞プロファイル」は、特徴付けられた細胞と別の細胞とを区別する細胞の特徴付けられた特性を表す検出可能なデータのセットを指す。特に、ヘルパーＴ細胞に関する場合、用語「細胞プロファイル」は、Ｔｈ細胞によって産生され、別のものに対してＴｈ細胞を特徴付けるサイトカインマーカーに関連する検出可能なデータのセットを指す。例えば、Ｔｈ１細胞についてのサイトカインマーカーはインターフェロン−ｇであり；Ｔｈ２についてのサイトカインマーカーはＩＬ−４であり、Ｔｈ７についてのサイトカインマーカーはＩｌ−１７であり、ＴｒｅｇについてのサイトカインマーカーはＩＬ−１０である。従って、本明細書に使用される場合、用語「Ｔｈ１７細胞プロファイル」は、Ｔｈ１細胞の存在および／または活性が調査される個体の特定の器官または組織におけるＩＬ−１７の産生に関連する存在および量などの検出可能なデータのセットを指す。同様の定義が他のＴｈ細胞種類に当てはまる。一方、用語「細胞プロファイル」が、１つより多いＴｈ細胞種類を含むＴｈ細胞のサブセットに関する場合、用語「ヘルパーＴ細胞プロファイル」は、ヘルパーＴ細胞のサブセットによって産生され、ヘルパーＴ細胞のサブセットの各々を特徴付ける各サイトカインマーカーに関連する検出可能なデータのセットを指す。

本明細書で使用される「Ｔｈ細胞プロファイル」に関して本明細書で使用される場合、用語「平衡化する」は、炎症反応の非存在と関連する状態まで細胞プロファイルをもたらす活性を指す。同様に、用語「平衡化されたＴｈプロファイル」は、炎症反応の非存在に関連するＴｈ細胞プロファイル状態を指し、特に、ヘルパーＴ細胞によって産生され、炎症反応の非存在下で、別のものに対してヘルパーＴ細胞を特徴付けるサイトカインマーカーに関連する検出可能なデータのセットを指す。用語「ヘルパーＴ細胞」プロファイルが、１つより多いＴｈ細胞種類を含むＴｈ細胞のサブセットを指す場合、用語「平衡化されたＴｈプロファイル」は代わりに、ヘルパーＴ細胞によって産生され、ヘルパーＴ細胞の各々を特徴付ける各サイトカインマーカーに関連する検出可能なデータのセットの間の相対的割合を指す。例えば、Ｔｈ１、Ｔｈ２およびＴｈ１７を含むＴｈ細胞サブセットに関して「平衡化されたＴｈ細胞プロファイル」は、炎症反応の非存在と関連するインターフェロン−γ、ＩＬ−４およびＩＬ１７に関連するデータの相対的割合を指す。

本明細書に使用される場合、用語「両性イオン多糖」は、グリコシド結合によって結合された１つ以上の単糖を含む合成または天然ポリマーを指し、少なくとも１つの陽性に荷電した部分および少なくとも１つの陰性に荷電した部分を含む。両性イオン多糖としては、限定されないが、単糖または二糖ポリマー由来の任意の長さのポリマー、数百または数千の単糖を含むポリマーが挙げられる。いくつかの実施形態において、両性イオン多糖は繰り返し単位を含んでもよく、各々の繰り返し単位は２〜１０の単糖、陽性に荷電した部分（例えば、遊離の陽性に荷電したアミノ部分）および陰性に荷電した部分（例えば、スルホン酸塩、硫酸塩、リン酸塩およびホスホン酸塩）を含む。いくつかの実施形態において、ＺＰは５００Ｄａ〜２，０００，０００Ｄａからなる分子量を有してもよい。いくつかの実施形態において、ＺＰは２００〜２５００からなる分子量を有してもよい。例示的なＺＰとしては、限定されないが、ＰＳＡおよびＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ Ｆｒａｇｉｌｉｓ由来のＰＳＢ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ由来のＣＰ５／ＣＤ８、およびＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ由来のＳｐ１／ＣＰ１が挙げられる。両性イオン多糖は天然源、特に細菌源から、例えば精製により単離され得る。両性イオン多糖はまた、化学または生化学法、ならびに当業者によって全て識別可能な組換え微生物技術により産生されてもよい。従って、これらの方法および技術は、本明細書でさらに詳細に記載されない。

本明細書に使用される場合、用語「多糖Ａ」は、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ＦｒａｇｉｌｉｓのＰＳＡ遺伝子座およびその誘導体によって産生される分子を指し、限定されないが、繰り返し単位の｛→３）α−ｄ−ＡＡＴＧａｌｐ（１→４）［β−ｄ−Ｇａｌｆ（１→３）］−ｄ−ＧａｌｐＮＡｃ（１ ３）β−ｄ−Ｇａｌｐ（１→｝のポリマーを含み、ここで、ＡＡＴＧａｌはアセトアミド−アミノ−２，４，６−トリデオキシガラクトースであり、ガラクトピラノシル残基は、Ｏ−４およびＯ−６に及ぶピルビン酸塩置換基によって修飾される。第１の多糖（例えば、ＰＳＡ）に関して本明細書に使用される場合、用語「誘導体」は第１の多糖と構造的に関連する第２の多糖を指し、第１の多糖に存在しないが、第１の多糖の機能特性を保持する特性を導入する修飾によって第１の多糖から誘導可能である。従って、ＰＳＡの誘導体多糖は、通常、繰り返し単位の修飾、または元の多糖に存在しないさらなる機能と関連しても、しなくてもよい１つ以上の繰り返し単位の糖成分の繰り返し単位の修飾によって元の多糖と異なる。しかしながら、ＰＳＡの誘導体多糖は、ＰＳＡの抗炎症活性と関連するＰＳＡと併せて本明細書に記載される１つ以上の機能活性を保持する。

いくつかの実施形態において、両性イオン多糖はＰＳＡおよび／またはＰＳＢであり得る。いくつかの実施形態において、ＺＰ、特にＰＳＡおよび／またはＰＳＢの有効量は、体重の約１−１００μｇから約２５ｇであり、ヘルパーＴ細胞プロファイルは、Ｔｈ１、Ｔｈ２、Ｔｈ１７およびＴｒｅｇのうちの少なくとも１つ、特にＴｈ１、Ｔｈ２およびＴｒｅｇおよびＴｈ１７のうちの少なくとも１つを平衡化することにより平衡化される。より具体的には、いくつかの実施形態において、Ｔｈ細胞プロファイルの平衡化は、Ｔｈ１７細胞プロファイルを平衡化することにより実施され得る。

いくつかの実施形態において、ＺＰは、個体における炎症に関連するサイトカイン産生を制御するために使用され得る。特に、いくつかの実施形態において、ＺＰは、ＴＮＦ−ａ、ＩＬ１またはＩＬ−６、ＩＬ２１、ＩＬ２３およびＩＬ１７などの炎症性サイトカイン分子の産生を阻害するために投与され得る。

本明細書に使用される場合、用語「制御する」は、生物学的反応またはプロセスに影響を及ぼす、特に阻害する活性を指し、それは、限定されないが、生物（例えば、動物、植物、菌類または微生物）またはそのタンパク質（例えば、細胞、組織、器官、装置）などの生物学的システムにおいて生じる生物学的事象、特に生化学的事象を含む。

本明細書に使用される場合、用語「阻害」および「阻害する」は、生物学的反応またはプロセスを減少させる活性を指す。従って、生物学的反応またはプロセスを妨げることによりその生物学的反応またはプロセスを減少させることができる場合、ある物質は特定の生物学的反応またはプロセスを「阻害する」。例えば、ある物質は、例えば、（特にいくつかの場合において）その他の物質を結合することによって、生物学的反応またはプロセスと関連する別の物質（例えば酵素）の活性を減少または抑制することにより、特定の生物学的反応またはプロセスを阻害できる。生物学的反応またはプロセスの阻害は、生物学的反応またはプロセスと関連する検体の検出により検出され得る。本明細書に使用される場合、用語「検出する」または「検出」は、限定されないが、サンプル、反応混合物、分子複合体および基質を含む空間の限定された部分における検体または関連シグナルの実在、存在または事実の決定を指す。検出は、それに関する場合、「定量的」であり、検体または関連シグナルの量または総量の測定（定量化ともいわれる）と関連するか、またはそれらを含み、限定されないが、検体または関連シグナルの量または割合を決定するように設計された任意の検体を含む。検出は、それに関する場合、「定量的」であり、定量されない別の検体または関連シグナルに対する相対的存在についての検体または関連シグナルの量または種類の同定と関連するか、またはそれらを含む。

本明細書に使用される場合、用語「サイトカイン」は、広範囲の造血細胞および非造血細胞の種類によって産生され、自己分泌、傍分泌および内分泌効果を有し得、時々、他の化学物質の存在に強く依存する細胞伝達に広範に使用されるシグナル伝達タンパク質および糖タンパク質のカテゴリーを指す。サイトカインファミリーは主に、より小さく、水溶性のタンパク質および８〜３０ｋＤａの質量を有する糖タンパク質からなる。サイトカインは、自然免疫反応および適応免疫反応の両方の発達および機能化に重要である。それらは、多くの場合、病原体に出くわした免疫細胞によって分泌され、それにより、病原体に対するシステム反応を増加させるために、さらなる免疫細胞を活性化し、補充する。

サイトカイン産生の阻害の検出は、限定されないが、ＥＬＩＳＡ、Ｑ−ＰＣＲおよびＦＡＣによって検出される細胞内サイトカイン染色ならびに本開示を読んだ際に当業者によって識別可能な任意の他の方法を含む、当業者に公知の方法によって実施され得る。

いくつかの実施形態において、ＺＰは、ＴＮＦ−ａ、ＩＬ−６、ＩＬ−１７、ＩＬ−２１およびＩＬ−２３のうちの少なくとも１つの産生を阻害するために投与され得る。特に、これらの実施形態のうちのいくつかにおいて、ＺＰは、全身的、特に経口、皮下、腹腔内、および静脈内に投与され得る。いくつかの実施形態において、ＺＰは、約１〜約１００μｇ／２５ｇの体重の量で投与され得る。

本明細書に開示される方法および組成物は、不均衡なＴｈ細胞プロファイルと関連する炎症および／または個体における炎症性サイトカインＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−ａ、ＩＬ−１７、ＩＬ２１、ＩＬ２３およびＴＧＦ−βのうちの少なくとも１つの産生の制御を可能にする。

本明細書に使用される場合、用語「炎症」および「炎症反応」は、病原体、損傷した細胞、または刺激物などの有害な刺激に対する個体の血管組織の複合的な生物学的反応を指し、サイトカインおよびより特には炎症性サイトカイン（すなわち、ミクログリアなどの活性免疫細胞によって主に産生され、炎症反応の増幅に関与するサイトカイン）の分泌を含む。例示的な炎症性サイトカインとしては、限定されないが、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−ａ、ＩＬ−１７、ＩＬ２１、ＩＬ２３およびＴＧＦ−βが挙げられる。例示的な炎症には、急性炎症および慢性炎症が含まれる。本明細書に使用される場合、用語「急性炎症」は、血漿および白血球による組織の侵潤に起因する炎症の古典的な兆候（膨張、充血、疼痛、高熱、機能の損失）によって特徴付けられる短期のプロセスを指す。急性炎症は典型的に、有害な刺激が存在する限り生じ、一旦、刺激が取り除かれ、分解されるか、または瘢痕（線維化）により囲まれると、止まる。本明細書に使用される場合、用語「慢性炎症」は、同時に起こる活動性炎症、組織破壊、および修復時の試みによって特徴付けられる状態を指す。慢性炎症は、上記の急性炎症の古典的兆候によって特徴付けられない。代わりに、慢性的に炎症を起こした組織は、単核免疫細胞（単球、マクロファージ、リンパ球および形質細胞）の侵潤、組織破壊、および回復時の試みによって特徴付けられ、血管形成および線維症を含む。炎症は、個体の炎症に関連する複合的な生物学的反応を形成する事象のいずれかに影響を与えること、特に阻害することによって、本開示において制御され得る。特に、いくつかの実施形態において、炎症は、サイトカイン産生、より具体的には両性イオン多糖の投与後の炎症性サイトカインの産生に影響を与えること、特に阻害することによって制御され得る。

より具体的には、いくつかの実施形態において、ＺＰは、個体におけるＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−ａ、ＩＬ−１７、ＩＬ２１、ＩＬ２３および／またはＴＧＦ−β媒介性炎症に関連する炎症を制御するために使用されてもよい。本明細書に使用される場合、用語「サイトカイン媒介性炎症」は、有害な刺激に対する複合的な生物学的反応が、炎症性サイトカイン分子（例えば、ＴＮＦ−ａ、ＩＬ１および／またはＩＬ−６）および抗炎症性サイトカイン分子（例えば、ＩＬ−１０）などのサイトカイン分子によって制御される炎症を指す。例示的なサイトカイン媒介性炎症としては、限定されないが、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１２ｐ３５、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＦＮ−γおよび／またはＩＬ−２３ｐ１９によって媒介される状態が挙げられる。

いくつかの実施形態において、サイトカインは、ＴＮＦ−ａ、ＩＬ−１７、ＩＬ−２１およびＩＬ−２３のうちの少なくとも１つであり、サイトカイン媒介性炎症は、ＩＢＤ、喘息、１型糖尿病、多発性硬化症、肥満、２型糖尿病、花粉熱、食物アレルギー、皮膚アレルギーまたは関節リウマチである。参照はまた、Ｍａｚｍａｎｉａｎら、２００８^４３、特に本明細書にその全体が参照として援用されるその論文の図および関連部分にもなされる。

いくつかの実施形態において、炎症は全身性炎症である。全身性炎症としては、限定されないが、循環系における炎症反応、特定の組織に限定されない炎症反応、ならびに個体の複数（全てまで）の組織および器官にまで及ぶ炎症反応が挙げられる。

いくつかの実施形態において、ＺＰは、ヘルパーＴ細胞プロファイル、特にＴｈ１７細胞プロファイルの不均衡に関連する炎症（限定されないが、関節リウマチ、呼吸器系疾患、同種移植の拒絶反応、全身性エリテマトーデス、腫瘍形成（ｔｕｍｏｒｇｅｎｅｓｉｓ）、多発性硬化症、全身性硬化症および慢性炎症性腸疾患が挙げられる）を制御するために使用され得る。

いくつかの実施形態において、ＰＳＡは個体に全身的に投与され得る。本明細書に使用される場合、用語「全身性投与」は、ＰＳＡが個体の身体と接触し、それにより、所望の効果が全身的である（すなわち、炎症が生じる特定の組織に限定されない）投与経路を指す。全身性投与には、腸内および非経口投与が含まれる。腸内投与は、物質が消化管を介して得られる投与の全身経路であり、限定されないが、経口投与、経胃栄養管による投与、経十二指腸栄養管による投与、胃瘻造設、経腸栄養法、および直腸投与が含まれる。非経口投与は、物質が、消化管以外の経路によって得られる投与の全身経路であり、限定されないが、静脈内投与、動脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、皮内投与、腹腔内投与、および膀胱腔内注入が挙げられる。

いくつかの実施形態において、投与は、皮膚を介する末梢静脈内への投与を含む、当業者により識別可能な静脈内投与法を用いて個体の静脈内にＺＰを含む液剤を組み込むことにより静脈内で実施される。いくつかの実施形態において、ＺＰの投与は、個体、特に動物またはヒトの腹膜内にＺＰを注射することにより腹腔内で実施される。腹腔内投与は、一般に、多量の血液代用液が必要とされる場合、または低血圧もしくは他の問題が、静脈注射のために適切な血管の使用を防ぐ場合に好まれる。いくつかの実施形態において、投与は栄養管を介する投与を含む、胃内で実施される。いくつかの実施形態において、ＺＰの投与は頭蓋内で実施される。いくつかの実施形態において、ＺＰは、通常、その作用が望まれる適切な製剤に直接含まれるＺＰを適用することにより局所的に投与され得る。局所性投与としては、限定されないが、経皮投与、吸入投与（例えば、喘息の薬）、浣腸剤、点眼剤（例えば、結膜の上）、点耳薬、鼻腔内経路（例えば、鼻充血除去薬スプレー）および膣内投与が挙げられる。

いくつかの実施形態において、炎症は、組織、特に膵臓、肺、関節、皮膚、脳および中枢神経系、ならびに眼の炎症である。

いくつかの実施形態において、ＰＳＡは個体の炎症に関連する状態を処置または予防する方法に使用される。その方法は治療有効量のＰＳＡを個体に投与することを含む。本明細書に使用される場合、用語「個体」には、炎症が生じる可能性がある単一の生物有機体が含まれ、限定されないが、動物、特に高等動物、特に哺乳動物などの脊椎動物、特にヒトが含まれる。

本明細書に使用される場合、用語「状態」は、通常、全てまたは１つ以上の部分としての個体の身体の物理的状態を指し、全てまたは１つ以上の部分としての個体の物理的状態と一致しなくてもよく、完全な身体的、精神的および起こり得る場合、社会的健康の状態に関連する。本明細書に記載される状態としては、限定されないが、障害および疾患が含まれ、用語「障害」は、身体またはそのいずれかの部分の機能的異常に関連する生存している個体の状態を指し、用語「疾患」は、身体またはそのいずれかの部分の正常な機能を損なう生存している個体の状態を指し、典型的には、特徴的な兆候および症状によって示される。例示的な状態としては、限定されないが、損傷、身体障害、障害（精神的障害および身体的障害を含む）、症候群、感染、個体の逸脱行動ならびに個体の身体またはそのいずれかの部分の構造および機能の異常変化が挙げられる。

２つの項目に関して本明細書に使用される場合、用語「関連する」は、２つの項目間の関係を指し、第１の項目の発生が第２の項目の発生を生じ、限定されないが、因果関係および兆候／症状−疾患関係が含まれる。

炎症に関連する状態としては、限定されないが、クローン病および潰瘍性大腸炎、喘息、皮膚炎、関節炎、重症筋無力症、グレーブス病、硬化症、乾癬を含む、限定されないが、炎症性大腸炎が挙げられる。

本明細書に使用される場合、用語「処置」は、医薬的または外科的に状態を治療するか、または処置することの一部であるいずれかの作用を指す。

本明細書に使用される場合、用語「予防」は、個体の状態に起因する死亡率または罹患率の負担を減少させるいずれかの作用を指す。これは、一次、二次および三次予防レベルで起こり、ａ）一次予防は疾患の発生を回避し；ｂ）二次予防の作用は初期の疾患処置に狙いを定めることにより、疾患の進行および症状の出現を予防する介入のための機会を増加させ；ｃ）三次予防は、機能を回復させ、疾患関連合併症を減少させることにより、すでに発生した疾患の悪影響を減少させる。

有効量、特に治療有効量のＰＳＡは、例えば、体重０．０２５ｋｇあたり約１μｇ〜約１００μｇのＰＳＡの範囲である。いくつかの実施形態において、有効量は、体重２５ｇあたり約０．０１〜約１，０００μｇの範囲である。

いくつかの実施形態において、ＰＳＡは適切なビヒクルとともに組成物に含まれる。本明細書に使用される場合、用語「ビヒクル」は、通常、活性成分として組成物に含まれるＰＳＡのための溶媒、担体、結合剤または希釈剤として作用する種々の媒体のいずれかを指す。

いくつかの実施形態において、組成物が個体に投与される場合、その組成物は薬学的抗炎症性組成物であり得、ＰＳＡおよび薬学的に許容可能なビヒクルを含む。

いくつかの実施形態において、ＰＳＡは、賦形剤または希釈剤とともに医薬組成物に含まれてもよい。特に、いくつかの実施形態において、１つ以上の適合可能かつ薬学的に許容可能なビヒクル、特に薬学的に許容可能な希釈剤または賦形剤と合わせてＰＳＡを含む医薬組成物が開示される。

本明細書に使用される場合、用語「賦形剤」は、医薬の活性成分のための担体として使用される不活性物質を指す。本明細書に開示される医薬組成物のための適切な賦形剤には、ＰＳＡを吸収する個体の身体の能力を高める任意の物質が含まれる。適切な賦形剤には、簡便かつ正確な用量を可能にするために、ＰＳＡを含む製剤が増大するまで使用され得る任意の物質も含まれる。単一用量でのそれらの使用に加えて、賦形剤は、ＰＳＡの扱いに役立つように製造プロセスに使用されてもよい。投与経路、および医薬形態に依存して、異なる賦形剤が使用されてもよい。例示的な賦形剤としては、限定されないが、抗粘着剤、結合剤、被覆崩壊剤、充填剤、香味料（甘味料など）および着色剤、流動促進剤、滑剤、防腐剤、吸着剤が挙げられる。

本明細書に使用される場合、用語「希釈剤」は、組成物の活性成分を希釈または運搬するのに与えられる希釈する剤を指す。適切な希釈剤としては、医薬調製物の粘度を減少させ得る任意の物質が挙げられる。

特定の実施形態において、組成物、特に医薬組成物は、全身性投与に処方されてもよく、腸内および非経口投与を含む。

非経口投与のための例示的な組成物としては、限定されないが、ＰＳＡを含む滅菌水溶液、注射剤または懸濁剤が挙げられる。いくつかの実施形態において、非経口投与のための組成物は、凍結乾燥形態、生物学的に適合性のある水性液体（希釈水、生理溶液または他の水溶液）で以前に調製された粉末組成物を溶解することにより使用時に調製されてもよい。

腸内投与のための例示的な組成物としては、限定されないが、錠剤、カプセル剤、ドロップ剤および坐薬が挙げられる。

本開示の実施例の段落は、本明細書に開示される組成物および方法の例ならびにＰＳＡの機能および物理的相互作用を調べるために出願人によって実施される研究を示す。

本開示のさらなる利点および特徴は、実験の段落に関してのみ例示される実施例における以下の詳細な開示からより明らかになるだろう。

本明細書に開示される方法およびシステムは、以下の実施例においてさらに示され、例示の目的により提供され、限定することを意図しない。

特に、以下の実施例、以下の物質および方法を使用した。

（細菌の菌株および動物）
Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＮＣＴＣ９３４３およびＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ ＡＴＣＣ５１１４９をアメリカンタイプカルチャーコレクションから得た。従来のように飼育されたＳＰＦマウスの系統、Ｃ５７ＢＬ／６ＮＴａｃ、Ｃ５７ＢＬ／６ＮＴａｃ ＩＬ−１０^−／−、およびＢ６．１２９Ｓ６−Ｒａｇ２^{ｔｍ１Ｆｗａ}Ｎ１２（Ｒａｇ２^−／−）を、Ｔａｃｏｎｉｃ Ｆａｒｍｓ（Ｇｅｒｍａｎｔｏｗｎ，ＮＹ）から購入し、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓおよびＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓについての陰性をスクリーニングした。Ｓｗｉｓｓ−Ｗｅｂｓｔｅｒ無菌（ＳＷＧＦ）マウスを、Ｔａｃｏｎｉｃ Ｆａｒｍｓから購入した。無菌運送用コンテナでの送達時に、マウスを、本発明者らの動物施設における無菌アイソレーター（Ｃｌａｓｓ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ Ｃｌｅａｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）に移した。動物を、以前に記載^４０されるように、週に１度、細菌、ウイルスおよび菌類のコンタミネーションについてスクリーニングした。全ての動物を、確立されたプロトコルならびにＨａｒｖａｒｄ Ｍｅｄｉｃａｌ ＳｃｈｏｏｌおよびＣａｌｉｆｏｒｎｉａ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙのＩＡＣＵＣガイドラインの下で世話をした。

（炎症のモデル）
腸炎の３つのモデルを使用した：１）ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞を、野生型またはＩＬ−１０^−／−ドナーマウスの脾臓からフローサイトメトリーにより精製して、記載されるＲａｇ^−／−（Ｃ５７Ｂｌ／６）レシピエントに移した。２）ＴＮＢＳ大腸炎を、ＴＮＢＳ／アセトン混合物を用いて皮膚への野生型（Ｃ５７Ｂｌ／６）マウスの前感作により誘発した。感作の７日後、エタノール中の２．５％ＴＮＢＳを直腸内に投与し；マウスを３〜６日後に屠殺した。３）ＩＬ１０^−／−マウスに、（経口胃内投与（ｏｒａｌ ｇａｖａｇｅ）により）Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓを単独あるいは野生型Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓまたはＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓΔＰＳＡと合わせてコロニー形成させた。

（アッセイおよびスコアシステム）
膵臓、大腸またはＭＬＮ由来のサイトカインを、ＥＬＩＳＡ、Ｑ−ＰＣＲまたはフローサイトメトリーによりアッセイした。大腸炎を、組織断片（固定して、パラフィンで包埋して、スライド上に断片化して、ヘマトキシリンおよびエオシンで染色した）で評価し、標準的なスコアシステム：０、大腸組織の肥大なしおよび炎症なし（リンパ球の侵潤）；１、組織の少しの肥大があるが、炎症なし；２、組織の少しの肥大および少しの炎症；３、激しい肥大および激しい炎症、に従って盲目にした病理学者（Ｄｒ．Ｒ．Ｔ．Ｂｒｏｎｓｏｎ，Ｈａｒｖａｒｄ ＭｅｄｉｃａｌＳｃｈｏｏｌ）によりスコア付けした。ＢＭＤＣを、抽出後、マウスの大腿骨から精製し、ＰＢＳで洗浄した。細胞を、ＧＭ−ＣＳＦ（２０ｎｇ／ｍＬ；Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ，Ｃａｍａｒｉｌｌｏ，ＣＡ）の存在下でＣ−ＲＰＭＩ−１０中で８日間培養した。ＣＤ４^＋Ｔ細胞を、磁性カラム上で陰性選択により精製した（ＭｉｌｔｅｎｙｉまたはＲ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）。

（フローサイトメトリー、蛍光活性化細胞分類（ＦＡＣＳ）および染色）
リンパ球を、単一細胞の調製物中で機械的に破壊したマウスの脾臓から単離した。赤血球を溶解し、脾細胞（１×１０^６）を、４℃で３０分間、２ｍｇ／ｍＬにて抗体（ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）の種々の組み合わせとともにインキュベートした。次いで、細胞を洗浄し、固定するか、または直接使用した。細胞内サイトカインフローサイトメトリーのために、サンプルを、ＦＣ５００モデル血球計算器（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ，ＣＡ）またはＦａｃｓＣａｌｉｂｕｒ（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｓｏｎ）で分析し、データをＲＸＰ分析ソフトウェア（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）またはＦｌｏｗＪＯを用いて分析した。ＦＡＣＳをＢＤ ＦＡＣＳＡｒｉａで実施し、細胞純度は常に９９％より高かった。

（インビトロでのサイトカインアッセイ）
大腸の臓器培養に関して、手順は以前に報告^４１されるとおりに従った。共培養のために、ＣＤ４^＋Ｔ細胞を、製造者によって指示されるように使用したＣＤ４^＋Ｔ細胞サブセットキット（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）を用いて脾臓リンパ球（上記で調製した）から精製した。細胞純度は、常に９５％より高かった。ＢＭＤＣを抽出後にマウスの大腿骨から精製して、ＰＢＳ中で洗浄した。細胞を、ＧＭ−ＣＳＦ（２０ｎｇ／ｍＬ；Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ，Ｃａｍａｒｉｌｌｏ，ＣＡ）の存在下でＣ−ＲＰＭＩ−１０中で８日間培養した。培地を４日後に交換し、付着細胞をさらに４日間培養し、その時点で非付着細胞を回収し、洗浄し、直接使用した。細胞は、使用の時点で９５％より多くのＣＤ１１ｃ^＋であった。精製したＣＤ４^＋Ｔ細胞（１×１０^６）を、４８ウェルプレート中で精製したＣＤ１１ｃ^＋ＢＭＤＣ（１×１０^６）と混合し、５％ＣＯ_２を含有する雰囲気下で３７℃にてインキュベートした。結果に記載するように、種々の刺激物を使用した。ＥＬＩＳＡを、製造業者のガイドラインに従って、プレコーティングしたプレートキット（ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）で実施した。いくつかのアッセイにおいて、野生型Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓまたはＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓΔＰＳＡを含むか、含まないＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓを、種々の濃度に加えた。

（実験的大腸炎の誘発）
ＰＣＲにより評価すると、Ｒａｇ２^−／−およびコントロールＣ５７Ｂｌ／６マウスは、送達時においてＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓコロニー形成について陰性であった。脾臓のリンパ球を野生型ドナーマウスから収集し、ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈ細胞を、上記のＦＡＣＳによりリンパ球集団から精製した。細胞をＰＢＳで洗浄し、３×１０^５細胞を、０．２ｍＬの体積で、レシピエントのＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓがコロニー形成したＲａｇ２^−／−動物に腹腔内投与した。コロニー形成実験に関して、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ（１×１０^８生物）およびＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ（１×１０^８生物）の両方を、細胞移入時に導入した。ＰＳＡ処置研究全体にわたって、動物に、１週間に３回、経管栄養により５０μｇのＰＳＡを与えた。動物を、８週で屠殺するまで実験の間、秤量した。

（腸炎−ＴＮＢＳ大腸炎の誘発）
野生型（Ｃ５７ＢＬ／６）雄性マウスの背骨を削り、前感作溶液（１５０μＬ；４：１の比の５％ＴＮＢＳと混合した４：１の比のアセトンとオリーブ油）をゆっくりと加えた。感作の７日後、マウスを、３．５Ｆカテーテル（Ｉｎｓｔｅｃｈ Ｓｏｌｏｍｏｎ；ＳＩＬ−Ｃ３５）により直腸内に投与したイソフルオレンおよびＴＮＢＳ溶液（１００μＬ；１：１の５％ＴＮＢＳと無水エタノール）で麻酔した。マウスを、ＴＮＢＳ投与の４〜６日後、分析した。

（組織学的組織分析）
ブアン固定液（Ｂｏｕｉｎ’ｓ ｆｉｘａｔｉｖｅ）（ＶＷＲ，Ｗｅｓｔ Ｃｈｅｓｔｅｒ，ＰＡ）中のマウス組織をパラフィンで包埋し、切片化（６μｍスライス）し、スライド上に載せ、ヘマトキシリンおよびエオシンで染色した。その切片を、一人の病理学者（Ｄｒ．Ｒ．Ｔ．Ｂｒｏｎｓｏｎ，Ｈａｒｖａｒｄ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｈｏｏｌ）により盲目の形式で評価した。

（定量的リアルタイムＰＣＲ）
ＲＮＡを、製造業者の指示書（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）によってトリゾールで抽出した。ＲＮＡ（１μｇ）を、ｉＳｃｒｉｐｔ ｃＤＮＡ合成キット（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）を用いてｃＤＮＡに逆転写した。ｃＤＮＡを、６０μＬの水を加えることにより希釈し、この溶液の２μＬ体積をＱ−ＰＣＲに使用した。Ｑ−ＰＣＲを、ＩＱ ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎスーパーミックス（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）を用いて実施し、プライマーを０．２μｍで使用した。Ｑ−ＰＣＲを、Ｂｉｏ−Ｒａｄ ｉＣｙｃｌｅｒ ＩＱ５で実施した。Ｑ−ＰＣＲプライマーの配列は以下のようにした。５’−３’：ＩＬ−２３（ｐ１９）Ｆ：ＡＧＣ ＴＡＴ ＧＡＡ ＴＣＴ ＡＣＴ ＡＡＧ ＡＧＡ ＧＧＧ ＡＣＡ（配列番号５） Ｒ：ＧＴＣ ＣＴＡ ＧＴＡ ＧＧＧ ＡＧＧ ＴＧＴ ＧＡＡ ＧＴＴ Ｇ（配列番号６）。ＩＬ−１７Ａ Ｆ：ＴＴＡ ＡＧＧ ＴＴＣ ＴＣＴ ＣＣＴ ＣＴＧ ＡＡ（配列番号７） Ｒ：ＴＡＧ ＧＧＡ ＧＣＴ ＡＡＡ ＴＴＡ ＴＣＣ ＡＡ（配列番号８） ＴＮＦαＦ：ＡＣＧ ＧＣＡ ＴＧＧ ＡＴＣ ＴＣＡ ＡＡＧ ＡＣ（配列番号９） Ｒ：ＧＴＧ ＧＧＴ ＧＡＧ ＧＡＧ ＣＡＣ ＧＴＡ ＧＴ（配列番号１０）。ＩＬ−１０ Ｆ：ＣＴＧ ＧＡＣ ＡＡＣ ＡＴＡ ＣＴＧ ＣＴＡ ＡＣＣ Ｇ（配列番号１１） Ｒ：ＧＧＧ ＣＡＴ ＣＡＣ ＴＴＣ ＴＡＣ ＣＡＧ ＧＴＡ Ａ（配列番号１２） ＲＯＲｙＴ Ｆ：ＣＣＧ ＣＴＧ ＡＧＡ ＧＧＧ ＣＴＴ ＣＡＣ（配列番号１３） Ｒ：ＴＧＣ ＡＧＧ ＡＧＴ ＡＧＧ ＣＣＡ ＣＡＴ ＴＡＣ Ａ（配列番号１４） ＩＬ−２１ Ｆ：ＡＴＣ ＣＴＧ ＡＡＣ ＴＴＣ ＴＡＴ ＣＡＧ ＣＴＣ ＣＡＣ（配列番号１５） Ｒ：ＧＣＡ ＴＴＴ ＡＧＣ ＴＡＴ ＧＴＧ ＣＴＴ ＣＴＧ ＴＴＴ Ｃ（配列番号１６） ＩＬ−２７ Ｆ：ＣＴＧ ＴＴＧ ＣＴＧ ＣＴＡ ＣＣＣ ＴＴＧ ＣＴＴ（配列番号１７） Ｒ：ＣＡＣ ＴＣＣ ＴＧＧ ＣＡＡ ＴＣＧ ＡＧＡ ＴＴＣ（配列番号１８）。

（実施例１：ＰＳＡは、哺乳動物の免疫系のＴｈ１／Ｔｈ２プロファイルを平衡化する）
エフェクターＣＤ４^＋Ｔ細胞の２つのサブタイプ、Ｔ_Ｈ１およびＴ_Ｈ２は、それぞれ、サイトカインインターフェロンｇ（ＩＦＮｇ）およびインターロイキン４（ＩＬ−４）の発現によって規定される（Ｊａｎｅｗａｙら，２００１）。上記のように、ＰＳＡは、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓがコロニー形成したマウスで、かつインビトロにおいてＣＤ４^＋Ｔ細胞増殖を誘発する。ＰＳＡ媒介性Ｔ細胞活性化の効果をさらに特徴付けるために、本発明者らは、精製した細胞成分を用いてサイトカインプロファイルを評価した。ＰＳＡの存在下でＤＣおよびＣＤ４^＋Ｔ細胞の共培養物は、Ｔ_Ｈ１サイトカインＩＦＮｇの用量依存性の増大した発現（ｕｐ−ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ）を生じる。ＰＳＡと関連するＩＦＮｇ産生のレベルは、いくつかの既知の強力なＩＦＮｇ誘導因子（ａ−ＣＤ３、ＬＰＳおよびブドウ球菌エンテロトキシンＡ［ＳＥＡ］）に関連するものに匹敵し、ＤＣおよびＴ細胞の両方を必要とする。特異性は、ＮＡｃ−ＰＳＡ処置後、Ｔ_Ｈ１サイトカイン産生の欠如により証明される。

Ｔ_Ｈ１サイトカイン産生はＴ_Ｈ２反応を抑制し；反対に、Ｔ_Ｈ２サイトカイン発現はＴ_Ｈ１反応を阻害する。正常な免疫反応は、それらの反対のシグナルの制御された平衡化を必要とする。ＰＳＡ処置に対する反応におけるＩＬ−４発現の検査は、精製されたＣＤ４^＋Ｔ細胞によるサイトカイン産生を示さない。ａ−ＣＤ３およびスーパー抗原ＳＥＡは、サイトカインの両方のクラスの強力な刺激因子である。Ｔ_Ｈ２サイトカイン産生は、多くのシステムにおいて「デフォルト経路」であり（Ｋｉｄｄ，２００３；Ａｍｓｅｎら，２００４）、Ｔ_Ｈ１サイトカイン産生はＴ_Ｈ２発現に拮抗するため、インビトロでのＰＳＡによるＩＦＮｇの特定の刺激は、Ｔ_Ｈ１／Ｔ_Ｈ２反応を平衡化することによって宿主免疫系の片利共生媒介性ホメオスタシスを確立するための機構を与えることができる。

（実施例２：ＰＳＡは、コロニー形成の間、適切なＣＤ４^＋ヘルパーＴサイトカイン産生を必要とする）
適切なＴ_Ｈ１／Ｔ_Ｈ２平衡化はヒトおよび動物の健康にとって重要であり；いずれかの反応の過剰産生または過少産生は、免疫学的疾患に関連する。本発明者らは、再度、無菌マウスを用いて、コロニー形成動物におけるＴ_Ｈ１／Ｔ_Ｈ２サイトカイン反応に対するＰＳＡの効果を調査した。マウスの膵臓由来のＣＤ４^＋Ｔ細胞を精製し、サイトカイン産生についてＥＬＩＳＡにより試験した。無菌マウスの脾臓におけるＴ_Ｈ２サイトカインＩＬ−４の過剰産生を、従来のマウスのレベルと比較した。この結果は、細菌のコンタミネーションのないマウスの検知できるほどのＴ_Ｈ２により歪曲されたプロファイルの以前の報告と一致し、ヒト新生児（プレコロニー形成）サイトカインプロファイルを反映する（ＫｉｒｊａｖａｉｎｅｎおよびＧｉｂｓｏｎ，１９９９；Ｐｒｅｓｃｏｔｔら，１９９８；Ａｄｋｉｎｓ，２０００；Ｋｉｄｄ，２００３）。細菌コロニー形成の非存在下でのこの「デフォルト」Ｔ_Ｈ２−偏向は、再度、免疫発達に対するミクロフローラの深い寄与を強め、適切な宿主サイトカイン産生の確立に対する共生細菌の効果を試験するためのモデルを提供する。

野生型Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ単独でコロニー形成したマウスは、複合的なミクロフローラを含む従来のマウスのものと同様のＩＬ−４産生のレベルを示し；この類似性は、生物が全身性免疫欠如を修復するのに十分であることを示す。さらに、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＤＰＳＡがコロニー形成したマウスは、無菌マウスのものと同様の高いレベルでＴ_Ｈ２サイトカインを産生する。従って、単一の細菌性抗原の発現は、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓが、コロニー形成されていない動物に見られるＩＬ−４サイトカインの不均衡を修復することを可能にする。

精製した脾臓のＣＤ４^＋Ｔ細胞によるＩＦＮｇ産生の試験は、従来のマウスと比較した場合、Ｔ_Ｈ２で歪曲された無菌マウスが、この原型的Ｔ_Ｈ１マーカーの産生を欠くことを示す。野生型Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ単独でのコロニー形成は、従来のマウスのものとほぼ同じ高いレベルで、無菌マウスにおけるＩＦＮｇ発現の欠損を修復するのに十分である。無菌マウスのコロニー形成の間、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ変異体によるＰＳＡ産生の欠損は、低レベルのＴ_Ｈ１サイトカインの産生を生じる。これらの結果は、各群からの脾臓リンパ細胞の細胞内サイトカイン染色によって確認され、ＩＦＮｇ産生はＣＤ４^＋Ｔ細胞に起因することを確認する。ノトバイオートマウスにおけるＣＤ４^＋Ｔ細胞によるＩＬ−２、別のＴ_Ｈ１サイトカインの産生もまた、ＰＳＡ産生を必要とする（データは示さず）。一緒に、これらの結果は、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ単独による無菌マウスの腸内のコロニー形成が、宿主内で適切な全身Ｔ_Ｈ１／Ｔ_Ｈ２平衡化（健康に必要な哺乳動物免疫反応の基礎的態様）を確立するのに十分である。

（実施例３：ＰＳＡはＴｈ−１７誘発性炎症を抑制する）
実験的大腸炎およびヒトＩＢＤは、制御されていない形態で進行する、抑制を欠く、初期の炎症反応を生じ、最終的に腸内の病理および疾患を導く。ＰＳＡがこれらの初期炎症反応にどのように影響を与えるかを解明するために、出願人は、化学的に誘発される大腸炎症の動物モデルを使用した。野生型マウスへのトリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）の直腸投与は、炎症性Ｔ細胞反応を引き起こすことにより大腸炎の開始を模倣する。疾患はＴＮＢＳ（または陰性コントロールとしてビヒクル）の投与により誘発し、ＰＳＡの経口処置を評価した。

図７に例示した結果は、腸内の免疫反応がＰＳＡにより有益に調節されることを示す。特に、図７ａに例示した結果は、ＴＮＢＳ処置した動物が、ビヒクル処置した動物およびＰＳＡ処置した動物についての図と比較して統計的に有意である体重の損失を表すことを示すが、部分的な体重の損失がＰＳＡ群で観測された（図７ａ）。組織学的分析により、大きな上皮過形成に対する大腸組織のＰＳＡ防御およびＴＮＢＳ処置後に見られる大腸細胞組織の損失を確認した（図７ｂ）。研究は、ＩＬ−１７を産生する病原性Ｔ_Ｈ１７細胞が実験的大腸炎の誘発を媒介することが示されている^３０。実際に、ＩＬ−１７レベルは、ＰＳＡ処置された動物のものからではないが、疾患動物の腸間膜リンパ節（ＭＬＮ；図７ｃ）由来の精製されたＣＤ４^＋Ｔ細胞の中で増加している。ＴＮＢＳ処置した動物のＭＬＮ由来のＣＤ４^＋Ｔ細胞の中のＴＮＦａの増加したレベルはまた、ＰＳＡ処置した群において減少している（図７ｄ）。ＴＮＢＳ処置した大腸の転写分析は、ＩＬ−１７およびＴＮＦａの両方の発現が、ＰＳＡ防御した動物においてではないが、疾患動物において非常に増加したことを示した（図７ｅおよび７ｆ）。

従って、上記の結果は、ＰＳＡが腸内病原体および実験的大腸炎の化学的に誘発されたモデルの炎症を阻害することを示す。

（実施例４：ＰＳＡは炎症を抑制するためのＩＬ−１０を産生するＴｒｅｇの分化を誘発する）
実験的大腸炎からの防御は、腸内微生物叢に対する望まれない反応を防ぐ抗炎症プロセスを介して生じる^２３。インターロイキン−１０−欠損（ＩＬ−１０^−／−）動物は大腸炎を発生する^３１。最も強力な抗炎症性サイトカインのうちの１つであるＩＬ−１０は、炎症の多くの動物モデルにおいて防御を必要とする^{２１、２７、３２}。

ＩＬ−１０産生に対するＰＳＡの効果を試験することに関する一連の実験の結果を図８に示し、これは、ＰＳＡが、ＴＮＢＳ処置された動物においてＩＬ−１０発現を誘導し、ＩＬ−１０産生により初期の培養された細胞において炎症性サイトカイン産生を阻害することを示す。特に、リアルタイムＰＣＲによってアッセイされるように、ＰＳＡ処置したマウスの大腸内のＩＬ−１０の転写レベルは、コントロールおよびＴＮＢＳ処置したマウスのものより著しく高い（図８ａ）。ＩＬ−１０は多くの細胞の種類によって産生される。しかしながら、ＩＬ−１０を発現するＣＤ４^＋Ｔ細胞は、実験的大腸炎の間の炎症を阻害する免疫抑制活性を示す^３３ため、出願人は、ＣＤ４^＋ＴにおけるＩＬ−１０産生を試験した。新鮮なＣＤ４^＋Ｔ細胞を、ＰＳＡ処置したマウス（炎症は低下する）のＭＬＮから精製した場合、非常に高いレベルのＩＬ−１０転写を観測した（図８ｂ）。次いで、出願人は、ＰＳＡがインビトロにおいてＩＬ−１０を誘発するのに十分であるか否かを評価し；骨髄由来の樹枝状細胞（ＢＭＤＣ）およびナイーブなＣＤ４^＋Ｔ細胞を精製したＰＳＡで処置した場合、ＩＬ−１０産生の特定の増加を観測した（図８ｃ）。

図９に例示したさらなる一連の実験は、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ由来のＰＳＡが、インビトロにおいてＩＬ−１０の発現を誘発することを示す。特に、ＢＭＤＣおよびナイーブなＣＤ４^＋Ｔ細胞に、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓと共培養したＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓを感染させ、培養上清からＩＬ−１０の特定の発現を観測し；Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＤＰＳＡとの共培養物は、著しく低いレベルのＩＬ−１０を誘発する（図９）。ＰＳＡはインビトロにおいてＩＬ−１０の発現を誘発するので、この分子がＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓに対する炎症反応の阻害に必要とされるか否かを試験するために、ＢＭＤＣ−Ｔ細胞共培養物に、生存しているＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓを感染させ、重要な炎症性サイトカインＴＮＦａの発現を測定した。病原因子の片利共生生物の高濃度の添加は、培養上清のＥＬＩＳＡによって測定されるＴＮＦａ産生の用量依存的な増加を引き起こす（図８ｄ；左の３つのバー）。精製したＰＳＡでの細胞の処置は、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓに対する反応におけるＴＮＦａ産生を顕著に減少させる（図８ｄ；真ん中の３つのバー）。最も重要なことに、中和ＩＬ−１０レセプター抗体（ａＩＬ−１０Ｒ）の存在下において、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓおよびＰＳＡでの細胞培養物の共インキュベーションはこの表現効果を完全に逆転し、ＴＮＦａの発現を増加させる（図８ｄ；右の３つのバー）。

結果は、図１０に例示した実験の結果に示されるように関連する炎症性サイトカインＩＬ−１ｂのものと同様である。特に、高濃度の生存Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓとのＢＭＤＣ−Ｔ細胞共培養物の感染（三角形によって示される感染の多重度：０．１、１．０および１０、図１０を参照のこと）は、サイトカインＩＬ−１ｂの放出をもたらす。ＰＳＡでの感染細胞の処置は、真ん中の３つのバーに示すようにＩＬ−１ｂレベルを減少させる。ＩＬ−１０レセプター抗体（ａＩＬ−１０Ｒ）の添加によるＩＬ−１０シグナル伝達の中和は、増加したレベルのＩＬ−１ｂをもたらす、インビトロにおける炎症反応の抑制を軽減する（図１０の左の３つのバー）。

従って、本実施例で例示した結果は、ＰＳＡに対する反応において産生されるＩＬ−１０が、細胞培養物における炎症性反応の阻害に必要とされるという結論を支持する。

（実施例５：ＰＳＡ投与は、Ｔｒｅｇの分化、ＴＮＦ−ａおよびＩＬ−１７サイトカイン産生の阻害ならびに大腸炎抑制をもたらす）
出願人は、腸炎の抑制におけるＩＬ−１０の必要性を調べた。最初に、ＩＬ−１０^−／−動物を、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ単独で、またはＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ（野生型またはＤＰＳＡ）と組み合わせてコロニー形成させた。その後、出願人はＭＬＮを収集し、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓに対する抗原特異的反応を測定するために以前に開発されたアッセイ^２７において可溶性Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ抗原を用いて培養物中で細胞を再刺激した。特に、ＩＬ−１０^−／−マウスはコロニー形成しないまま（コントロール）であったか、あるいは（炎症を誘発するために）Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ単独で、またはＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ（野生型またはΔＰＳＡ）でコロニー形成した。実験群由来のＭＬＮをプールして、可溶性Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ抗原（５μｇ／ｍｌ）で４８時間、再刺激した。炎症性サイトカインＴＮＦα（ａ）およびＩＬ−１７Ａ（ｂ）の分泌を、ＥＬＩＳＡにより分析した。

図１１ａ〜１１ｃに例示したこれらの実験の結果は、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒがコロニー形成した動物が、ＴＮＦａおよびＩＬ−１７の増加した産生を表すことを示すが、しかし、コロニー形成した動物においてＩＬ−１０の産生がない場合、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓのコロニー形成は、これらの炎症性分子のレベルを減少させない（それぞれ、図１１ａおよびｂ）。予想されるように、ＰＳＡの欠如は影響を与えない。大腸炎の細胞移入モデルを用いて（以下の実施例６〜８を参照のこと）、出願人は、ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞をＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒがコロニー形成したＲａｇ^−／−動物に移入した。ＰＳＡでの経口処置の間の（ＩＬ−１０シグナル伝達をブロックするための）マウスへのａＩＬ−１０Ｒの投与は、大腸炎からの防御を無効にする（図１１ｃ）。特に、大腸炎スコアは、ＰＳＡ防御が、ＩＬ−１０がＰＳＡの抑制活性をブロックする中和抗体としてａＩＬ−１０のシグナル伝達を必要とすることを示す。ＩＬ−１０Ｒでの処置は、ＰＳＡ媒介性防御を無効にする（図１１ｃ）。

さらに、ＩＬ−１０^−／−動物を、ＰＳＡの存在下または非存在下においてＴＮＢＳで処置した場合の体重および組織学データを図１２および図１３に示し、これは、ＩＬ−１０産生が、腸内免疫反応のＰＳＡにより引き起こされる減少に必要とされることを示した。特に、第１の一連の実験において、４匹のＣ５７ＢＬ／６マウスの群をＰＳＡ（またはＰＢＳ）で処置し、次いで、ＴＮＢＳまたはビヒクル（コントロール）の直腸投与を受けさせた。図１２に示したＳＤ値は、ＩＬ−１０の非存在下において、ＰＳＡがＴＮＢＳにより誘発される体重の減少を回復できないことを示す。ＡＮＯＶＡは、ＴＮＢＳで処置した群の両方における体重の減少が、コントロール動物のものと統計的に異なり、ＰＳＡがＴＮＢＳ処置されたＩＬ−１０^−／−動物における体重の減少を防がないことを示す。

第２の一連の実験において、４匹のＣ５７ＢＬ／６マウスの群をＰＳＡ（またはＰＢＳ）で処置し、次いで、ＴＮＢＳまたはビヒクル（コントロール）を直腸投与した。各群からの代表的な動物由来のＨ＆Ｅ染色断片の組織学的分析を図１３に示す。大腸および上皮過形成の厚化は、ＰＳＡ処置に関わらず、ＩＬ−１０^−／−動物のＴＮＢＳ処置群の両方において示される。従って、図１３に示す結果は、ＩＬ−１０の非存在下において、ＰＳＡが、ＴＮＢＳ処置したＩＬ−１０^−／−マウスにおいて腸管障害を減少させないことを示す。

上記のデータは、ＰＳＡ媒介性防御が、ＩＬ−１０を産生するＣＤ４^＋Ｔ細胞の発生および／または増殖を必要とすることを示唆する。ＣＤ４^＋Ｔ細胞によるＩＬ−１０の産生が防御を必要とするか否かを決定するために、出願人は、ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞を、ＩＬ−１０^−／−ドナーマウスからＲａｇ^−／−レシピエントに移し、次いで、レシピエントをＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓでコロニー形成させた。

図１１ｄ〜１１ｆに示した結果は、予想されるように、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓとともにＩＬ−１０^−／−Ｔ細胞を受け入れたマウスの群が、重症な大腸炎を発生し（図１１ｄ；左のバー）、ＰＳＡにより防御されないこと（図１１ｄ；真ん中のバー）を示す。大腸における組織学的所見によって支持されるこの結果は、ＰＳＡが、ＩＬ−１０依存性形態において「以前の病原因子」ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞からの防御を誘発することを示す（図１１ｅ）。屠殺時での体重分析は、ＩＬ−１０^−／−ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞（細胞が移入されていない異なるコントロール動物）を受け入れた大腸炎のＰＢＳおよびＰＳＡ処置した動物は、消耗性疾患を発生することを示す（図１１ｆ）。従って、ＣＤ４^＋Ｔ細胞によるＩＬ−１０の産生は、実験的大腸炎からのＰＳＡ媒介性防御に必要とされる。これらの結果は、哺乳動物の健康に必要とされる抗炎症反応を調整するために免疫系とネットワークする共生細菌分子の最初に報告された証拠の要素となる。

（実施例６：ＰＳＡは、ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈ／ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｌｏｗＴ細胞の比を平衡化する）
哺乳動物の免疫系のＣＤ４^＋Ｔ細胞は、通常、ナイーブ（「処置されていない（ｕｎｅｄｕｃａｔｅｄ）」）なＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈ集団および抗原を受けた（「処置された」（ｅｄｕｃａｔｅｄ））ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｌｏｗ集団に分かれ得る^１６。

第１の一連の実験において、無菌マウスの野生型Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓでの単一の共生を、ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｌｏｗＴ細胞 対 ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈ集団に対する効果を分析するために行った。特に、脾臓中のＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｌｏｗＴ細胞集団の欠損を修復するＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓの能力。

図１ａに示す結果は、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓの共生が、ＰＳＡ依存性形態においてＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｌｏｗＴ細胞の割合を増大させることを示す。注目すべきことに、出願人は、無菌動物由来の脾臓細胞が、完全な細菌微生物叢を有する年齢を適合させた従来のマウス由来のものより少ない集団のＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｌｏｗＴ細胞を含むことを見出した。さらに、野生型Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ単独を含む無菌マウスの単一のコロニー形成は、完全な細菌微生物叢を有する動物におけるＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂプロファイルを修復するようである（図１ａ：左のパネル）。最も注目すべきことに、ＰＳＡ（Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＤＰＳＡ）を産生する能力を欠く変異株でのコロニー形成は、ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｌｏｗＴ細胞集団の増殖を生じない（図１ａ：下の右側）。後者の集団は強力な抗炎症特性を有し、炎症の動物モデルにおける防御を与えることを十分に確立する^１７。これらの結果により、ＰＳＡが炎症からの防御を媒介することが示唆される。

（実施例７：ＰＳＡは、炎症組織におけるＩＬ２３、ＩＬ１ｂおよびＴＮＦ−ａ産生を制御することで、Ｔｈ１７およびＴｈ１媒介性サイトカイン産生を制御する）
実験的大腸炎の十分に確立されたＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ移動モデル^１８を、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓコロニー形成が、炎症性疾患から動物を防御するか否かを調べるために使用した。このモデルにおいて、病原性ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞を、防御的ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｌｏｗ細胞から分離し、特定の病原体を含まない（ＳＰＦ）Ｒａｇ^−／−マウスに移した。細胞移入時に、マウスを、野生型動物において良性の片利共生物であるが、免疫不全マウスにおいて大腸炎を引き起こす日和見病原体である、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｈｅｐａｔｉｃｕｓ^８，１９でコロニー形成した。８週後、動物を屠殺し、大腸炎を標準的なスコア付けシステム^２０で評価する。

図１ｂに示した病理学的スコアは、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓがコロニー形成し、かつＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞の移入が、以前に報告^{１９、２１}されるように、Ｒａｇ−／−マウスにおいて重症の大腸炎を誘発するのに十分であることを示す（図１ｂ；第１の列）。野生型Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓでの共コロニー形成は、疾患からの有意な防御を生じる（図１ｂ；第２の列）が、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＤＰＳＡでの共コロニー形成は生じない（図１ｂ；第３の列）。

大腸炎における組織損傷は、広範に、片利共生細菌に対する炎症性サイトカインの産生から生じると考えられている^２２。炎症性サイトカイン腫瘍壊死因子（ＴＮＦａ、インターロイキン−１ｂ（ＩＬ−１ｂ）およびＩＬ−２３）は、大腸炎のこの実験モデルにおいて疾患発症および進行の中心となる^２３。さらに、これらのサイトカインのレベルはＩＢＤ^２４を罹患する患者で向上し、治療的中和ＴＮＦａは、クローン病^２５を罹患する患者における臨床試験において有望な結果を生じた。従って、出願人は、Ｔ細胞レシピエントのコロニー形成した動物の腸組織を直接培養することにより、疾患の間に炎症性サイトカインレベルを試験することを決定した^２６。図１ｃ、１ｄ、２および３に示す結果は、ＰＳＡが罹患組織においてサイトカインレベルを変化させることを示す。

特に、図１ｃに示した大腸組織培養物のＥＬＩＳＡ実験の結果は、罹患した大腸において炎症性サイトカインＴＮＦａの増加した発現を示し、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＤＰＳＡではなく野生型Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓで共コロニー形成した動物において著しく減少する。

図１ｄに示すＬ３２発現に正規化した、脾細胞で実施したＩＬ−２３ｐ１９についてのＱ−ＰＣＲの結果は、疾患誘発後の脾細胞によるＩＬ−２３産生の増加が、ＰＳＡを産生するＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓでの腸内コロニー形成により完全に抑制されることを示す。

図２に示す大腸および小腸における炎症性サイトカインＩＬ−１２ｐ４０およびＩＬ−１ｂについてのＥＬＩＳＡの結果は、小腸ではなく、罹患した大腸における炎症性サイトカインの特異的な増加を示す。この増加は、ＰＳＡを産生するＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓで共コロニー形成した動物において著しく減少する。反対に、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＤＰＳＡでコロニー形成した動物は、コントロール動物（Ｃ５７ＢＬ／６）のものより非常に増加した炎症性サイトカインレベルを発現する（図２）。

図３に示す実験の結果は、ＣＤ４^＋Ｔ細胞によるＴＮＦａの発現が、実験的大腸炎の間、野生型Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓコロニー形成により減少することを示す。ＣＤ４^＋細胞を、各群（１群あたり４匹のマウス）からプールした脾細胞から精製し、ブレフェルジンＡの存在下において、４時間、ＰＭＡおよびイオノマイシンを用いてインビトロで再刺激した。細胞を、細胞内ＴＮＦαについて染色した。リンパ球ゲート設定内の細胞を分析において含み、数は、ＴＮＦαを産生する細胞の割合を示す。精製された細胞は９０％より多いＣＤ４^＋であった。防御の間、ＰＳＡを産生するＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓでコロニー形成した動物は、罹患した動物より低いＴＮＦａレベルを示した。

全体のこれらの上記の結果は、罹患組織におけるサイトカインレベルを変化させることにより、ＰＳＡがその効果を果たすことを示す。特に、炎症性サイトカインＴＮＦａ（図１ｃ）、ＩＬ−１２ｐ４０、およびＩＬ−１ｂ（図２）のレベルは、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓでコロニー形成したＲａｇ^−／−レシピエントマウスの大腸において向上したが、小腸の断片においては向上しなかった（部位はこのモデルにおいて影響を与えない）。実験的大腸炎の病態生理学的分析によって観測された防御と一致して、これらの動物が野生型Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓで共コロニー形成する場合、ＴＮＦａレベルは向上しない。Ｔ細胞移入に加えてＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓおよびＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ＤＰＳＡでの共コロニー形成は、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ単独でコロニー形成したＲａｇ^−／−動物に見られるものと同様に増加した大腸のサイトカイン産生を生じる。さらに、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓがコロニー形成した動物から精製された脾臓ＣＤ４^＋Ｔ細胞は、増加したＴＮＦａ産生を示し、この状態は、ＰＳＡ欠損株ではないが、野生型Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓでのコロニー形成により修復される（図３）。ＩＬ−２３の発現は、実験的大腸炎を生じる事象のカスケードにおいて重要である^{２７、２８}。出願人は、疾患誘発後の脾細胞によるＩＬ−２３産生の増加が、ＰＳＡを産生するＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓでの腸内のコロニー形成により完全に抑制されることを見出した（図１ｄ）。

細菌排除を除外することに関する実験を、その実験の間にわたって、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓおよびＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓコロニー形成のレベルが群の間で異なるか否かを示すために行った。図４および図５に示す結果は、防御が細菌排除の結果ではないことを示す。

特に、図４に示す結果は、実験動物が、疾患の間にわたってＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓおよびＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓでコロニー形成したままであることを示す。より具体的には、図４ａのＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ特異的Ｑ−ＰＣＲのエチジウムブロマイド染色ゲル電気泳動は、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓでの共コロニー形成が、８週後に細菌排除を誘発しないことを示す。Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ １６Ｓ ｒＤＮＡについて使用したプライマーは、（ＨＢ−１５） ５’−ＧＡＡＡＣＴＧＴＴＡＣＴＣＴＧ−３’（配列番号１）および（ＨＢ−１７） ５’−ＴＣＡＡＧＣＴＣＣＣＣＧＡＡＧＧＧ−３’（配列番号２）であった。図４ｂのＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ特異的Ｑ−ＰＣＲのエチジウムブロマイド染色ゲル電気泳動は、８週後の安定な細菌コロニー形成を示し；Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ ｓｓｒ３（ｆｉｎＢ）遺伝子について使用したプライマーは、（ｓｓｒ３−Ｆ） ５’ＴＡＴＴＴＧＣＧＡＧＡＡＧＧＴＧＡＴ−３’（配列番号３）および（ｓｓｒ３−ｒ） ５’−ＴＡＡＡＣＧＣＴＴＴＧＣＴＧＣＴＡＴ−３’（配列番号４）であった。

さらなる一連の実験において、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓの定量を、ＰＳＡ投与が生物の存在に影響されるか否かを検証するために行った。図５のＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓコロニー形成の実験の定量の結果は、ＰＳＡ媒介性防御に関わらず、生物が等しい数で存在することを示す。特に、図５の実験において、糞便サンプルを各実験群から回収し、全ＤＮＡを抽出した（Ｑｉａｇｅｎ ＤＮＡｅａｓｙ ｔｉｓｓｕｅ ｋｉｔ）。等量のＤＮＡ（５０ｎｇ）を、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ特異的プライマーを用いてＱ−ＰＣＲ（Ｂｉｏ−ｒａｄ）において使用した。Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓコロニー形成についてのＱ−ＰＣＲを、ｌｏｇ^１０数のコピーの既知の遺伝子（細胞致死性膨張性毒素）として、Ｙｏｕｎｇら、２００４^１に従って評価した。動物は、実験の終わりに同等レベルのＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓを含んだ。

この実施例に示した結果は、ＰＳＡが、実験的大腸炎を発生することからＢ．Ｆｒａｇｉｌｉｓ宿主を防御するのに有益な免疫反応を組織化する特定の免疫調節分子であるという結果を支持する。

（実施例８：ＰＳＡは、ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞に関連する炎症を抑制する）
ＰＳＡが、インタクトなＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ生物の非存在下において防御に十分であるか否かを決定するために、出願人は、ＰＳＡを均質に精製し^２９、Ｒａｇ^−／−マウスに経管栄養（経口）によりそれを投与した。次いで、疾患の進行を、種々の病理学的基準および組織学的基準により測定した。

図６に示す関連実験の結果は、経口投与された精製されたＰＳＡが実験的大腸炎に対して防御することを示す。

特に、図６ａに示した第１の一連の実験において、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓコロニー形成の非存在下でのＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞移入後の大腸炎スコアは、動物のＳＰＦ微生物叢によって誘発される炎症に起因する非常に軽度の大腸炎の発生を示した（図６ａ；第１の列）。しかしながら、ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞移入を受けたＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒコロニー形成したＲａｇ^−／−動物は、重症の大腸炎を発生する（図６ａ；第２の列）。経口ＰＳＡ投与は、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ誘発性大腸炎に対して動物をほとんど完全に防御し（図６ａ；第３の列）、大腸炎を発生すると知られていないＴ細胞を移入していないコントロール動物のレベルまで疾患を減少させる（図６ａ；第４の列）。

次いで、第２のセットの実験を、この実験環境において大腸炎の特徴である、体重を増加できない能力を試験するために行った^４。特に、ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞の移入およびＲａｇ２^−／−動物におけるＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ（ＰＢＳ＋Ｈｈ）でのコロニー形成を実施し、その後、その動物を消耗性疾患について試験した。図６ｂに示した結果は、Ｒａｇ^−／−動物における消耗性疾患が、ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈ細胞の移入およびＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓでのコロニー形成の後に起こることを示す（図６ｂ：ＰＢＳ＋Ｈｈ）。これらの動物はまた、腸の病変を発生し、（上記のように）炎症性サイトカインを発現する。発生からのＰＳＡの経口投与は、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓ媒介性消耗性疾患（ＰＳＡ＋Ｈｈ）に対して動物を完全に防御する。Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓは、炎症誘発に必要な抗原を提供し；病状は、コロニー形成していない動物（ＰＢＳ−Ｈｈ）においても、または細胞を移入していない動物においても観測されない。従って、これらの実験は、ＰＳＡの経口投与が、消耗性に対して動物を防御することを示す（ＰＳＡ＋Ｈｈ）。

さらなるセットの実験において、野生型動物ならびにＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞の移入を受け、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓでコロニー形成した動物（ＰＢＳ＋Ｈｈ）を、実験的大腸炎を生じる炎症の存在を確認するために試験した。図６ｃに示す結果は、ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞のＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒコロニー形成したＲａｇ^−／−マウスの移入が、重度の上皮細胞過形成および腸壁の全体の厚化によって証明されるように、重症な大腸炎の発生を生じることを示す（図６ｃ；第２のパネル）。さらに、以前の研究と一致して、ＣＤ４^＋ＣＤ４５Ｒｂ^ｈｉｇｈＴ細胞移入とＨ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓコロニー形成との組み合わせは、炎症および疾患の特徴である、白血球による罹患組織の侵潤を生じる（図６ｃ第２のパネル、下）^{１９、２１}。さらに、Ｈ．ｈｅｐａｔｉｃｕｓがコロニー形成した細胞移入のレシピエントへのＰＳＡの経口投与は、実験的に誘発された大腸炎過形成に対する完全な防御を与え（図６ｃ；第３のパネル）；さらに、ＰＳＡ処置した動物は、大腸炎組織において白血球炎症を示さず（図６ｃ；第３のパネル、下）、結果は炎症に対する防御を示す。

総合すれば、これらの結果は、ＰＳＡの経口投与が大腸炎を予防し、マウスを、疾患動物において観測される体重減少および炎症細胞侵潤に関連する状態から防御することを示す。

（実施例９：ＰＳＡは、Ｔｈ１およびＴｈ１７細胞によってサイトカイン産生を抑制する全身性免疫部分において効果的である）
さらなる一連の実験において、マウスを、ＴＮＢＳまたはＴＮＢ／ＰＳＡのそれらのマウスへの経口投与により処置した。続いて、関連する大腸の部分を、組織学的スコアを提供された盲目にした病理学者によって分析した。図１４ａに示す結果は、経口ＰＳＡ投与が大腸炎を減少させるというさらなる証拠を提供する。

精製したＰＳＡでの経口処置は実験的大腸炎から防御するが（図１４ａ）、ＰＳＡを産生しないＢ．ｆｒａｇｉｌｉｓ変異体（Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓΔＰＳＡ）によるコロニー形成は防御できない。実施例１〜８に例示される実験の間、出願人は、全身性免疫部分におけるＰＳＡの強力な効果に気付いた。これらの全身性反応をさらに理解するために、出願人は、感染性Ｂａｌｂ／ｃマウス株においてＴＮＢＳ誘発性モデルを利用した。このモデルは、免疫適格性動物における疾患誘発を可能にするため、疾患誘発および防御の両方に関与する全ての免疫細胞の分析を可能にする。

Ｂａｌｂ／ｃマウスを、大腸炎の誘発前に、精製したＰＳＡに経口投与した。実際に、ＰＳＡの経口処置は、腸内の実験的大腸炎および炎症に関連する体重減少から防御した（図示せず）。

さらに、ＴＮＢＳ誘発性大腸炎を受けているＢａｌｂ／ｃマウスのＰＳＡでの前処置は、疾患を罹患する動物の生存を４０％から９０％に劇的に増加させ（図１４ｂを参照のこと）、さらに、ＰＳＡの強力な抗炎症性効果を証明する。脾腫は、通常、ＩＢＤのこのモデルに見られ、この疾患の体系的性質を示すため、出願人は、ＴＮＢＳおよびＴＮＢＳ／ＰＳＡで処置したマウスの脾臓を分析した。図１４ｃに示した結果は、ＺＰＳの経口投与が、脾腫から防御することを示す。さらに、サイトカイン発現の分析により、ＴＮＢＳ誘発性大腸炎を受けている動物は、図１４ｄに示されるように、脾臓内に存在しているＣＤ４＋Ｔリンパ球由来の炎症性サイトカインの発現が増加する重症な脾腫を有することが示された。経口投与したＰＳＡは、粘膜の疾患の間、脾腫ならびに脾臓由来のＣＤ４＋Ｔリンパ球におけるＴＮＦ−α、ＩＬ−１７およびＩＬ−２１の発現を著しく減少させる（図１４ｄ）。実施例５に概説した実験は、ＰＳＡが、腸部分内に存在しているＣＤ４＋Ｔ細胞からのＩＬ−１０の誘発の間、大腸炎から防御できることを示す。以前のデータと一致して、出願人は、ＩＬ−１０レベルが、脾臓におけるＣＤ４＋リンパ球内で向上したことを見出した（図１４ｄ）。まとめると、これらのデータは、腸内に存在しているＰＳＡが、全身性免疫に影響を与え得ることを示唆する。特に、これらの結果は、ＺＰＳの経口投与が、腸疾患から防御するだけでなく、脾臓などの腸以外の免疫部分内の炎症も抑制することを示す。

（実施例１０：ＰＳＡの非経口投与は炎症から防御し、腸および脾臓内のＴＮＦ−ａ、ＩＬ−１７およびＩＬ−２３産生を制御する）
細胞の異なるサブセットは、ＣＤ８ααＴ細胞、粘膜γδＴ細胞およびＣＤ１０３＋樹枝状細胞を含む、腸部分内に存在する。最近の研究は、これらの種々の細胞の種類が、それらの全身性免疫対応物とは異なる機能を有することを示している。ＰＳＡが腸内で特異的に作用するか否かを決定するために、精製したＰＳＡを静脈内に投与して、粘膜炎症を誘発させた。図１５に示した第１の一連の実験において、炎症を誘発する前にＰＳＡを投与した。図１６に示した第２の一連の実験において、炎症を誘発した後にＰＳＡを投与した。

図１５に示した結果は、ＺＰＳの腸外部位への送達が、誘発された大腸炎から防御できることを示す。特に、ＰＳＡの全身投与は疾患動物の生存を高め、脾腫から防御する（６０％生存 対 ９０％）（図１５ａおよび１５ｂ）。さらに、ＰＳＡで全身的に処置された動物の大腸は、著しく低い過形成および炎症性侵潤を有することが予想される。

図１６に示す結果は、疾患が誘発部位において炎症性サイトカインの増加した産生により悪化されるが、ＴＮＢＳ誘発性大腸炎の間のＰＳＡの全身投与が、腸部分および全身性免疫部分の両方において炎症性サイトカインを抑制することを示す。特に、腸間膜リンパ節（ＭＬＮ）ＣＤ４＋Ｔ細胞由来のＴＮＦ−αは、ＴＮＢＳ誘発性大腸炎の間の発現を増加するが、ＰＳＡ全身投与により減少する（図１６ａ）。さらに、炎症性サイトカインＩＬ１２ｐ３５ ＩＬ−２３ｐ１９およびＩＬ−１７は、ＴＮＢＳ誘発大腸炎を受けているマウスの大腸から抽出されたＲＮＡ由来の転写産物の分析によって示されるように、疾患マウスの大腸で増加するが、ＰＳＡの投与により減少する（図１６ｂ）。同様に脾臓において、ＺＰＳの全身投与は、図１６ｃに示す結果によって示されるように、脾臓内のＣＤ４＋Ｔリンパ球からのＴＮＦ−αの産生を減少させる。さらに、ＺＰＳの全身投与は、図１６ｄに示す結果によって示されるように、脾臓内の転写産物ＩＬ−１７およびＩＬ−６の発現を減少させる。

さらなる実験により、ＰＳＡが炎症性サイトカインの発現を減少させるが、ＰＳＡでの静脈内処置は、腸内のＩＬ−１０の産生の増加をもたらすことも示される（補足データ）。これらのデータは、全身投与されたＰＳＡが粘膜部位にまで広がり、炎症性腸疾患を予防できることを示す。

この実施例に示すデータはまた、ＴＮＢＳ誘発大腸炎の間のＰＳＡの全身投与が、腸免疫部分および全身性免疫部分の両方において炎症性サイトカインを抑制することを示す。

（実施例１１：ＰＳＡの非経口投与はサイトカイン発現を調節し、Ｔｈ１およびＴｈ１７細胞によって引き起こされる全身性炎症を予防する）
内毒素性ショックは重症のグラム陰性細菌感染の間に生じ、低血圧、多臓器不全および死の可能性によって特徴付けられる。この症候群は、グラム陰性細菌の細胞壁に見出されるリポ多糖（ＬＰＳ）に反応するＴＮＦ−ａおよびＩＬ−６を含む、多数の炎症性サイトカインの産生に起因する。ＩＬ−１０はＬＰＳに対する炎症性反応の中心的調節因子であることが示されており、実際に、単一用量のＩＬ−１０は、内毒素性ショックのマウスモデルにおける死を防止する^４２。全身性免疫部分内のＰＳＡの劇的な効果により、本発明者らは、ＰＳＡが全身性炎症を改善できる否かを調べた。

ＰＳＡが、内毒素性ショックに関連する炎症を抑制できるか否かを決定するために、出願人は、Ｂａｌｂ／ｃマウスに低用量（１００μｇ）のＬＰＳを注入し、サイトカインＴＮＦ−αおよびＩＬ−６の血清レベルをモニターした。特に、血清を、１００μｇまたは５００μｇのＬＰＳの投与の１時間後および４時間後にマウスから回収し、血清中のＴＮＦ−αおよびＩＬ−６タンパク質レベルをＥＬＩＳＡにより測定した。

図１７ａ〜ｃに示す結果は、未処置のマウスが、回収した両方の時点において検出できないレベルの血清ＴＮＦ−αおよびＩＬ−６を有したことを示す。特に、以前の研究と一致して、ＰＳＡ投与の非存在下において、ＬＰＳ処置したマウスは、注入の１時間後にピークになる血清ＴＮＦ−αレベルの３００倍以上高い増加を示し、注入の４時間後までに基礎レベルまで減少した（図１７ａ）。ＰＳＡ処置の非存在下において、ＬＰＳを注入したマウスの血清中のＩＬ−６レベルもまた、早ければ１時間ほどで検出可能であり、４時間、発現の増加が続く（図１７ｂ）。注目すべきことに、ＰＳＡで前処置したマウスは、両方の時点においてＴＮＦ−αおよびＩＬ−６の血清レベルが著しく減少し（図１７ａおよび１７ｄ）、ＰＳＡがＬＰＳに対する炎症性サイトカインの初期の誘発を予防できることを示す。さらに、ＰＳＡ処置の非存在下において、ＬＰＳ注入の３日以内に脾腫が生じ、炎症性細胞種類の動員を生じる。ＰＳＡで前処置した動物は脾臓が小さくなり、この部位においてより低いレベルの炎症性サイトカインを発現する（データは示さず、および図７Ｃ）。

このデータは、ＰＳＡが、ＬＰＳの低用量投与によって誘発される全身性炎症反応を抑制できることを示す。

（実施例１２：ＰＳＡの非経口投与はＴＮＦ−α調節を生じ、全身性炎症を処置する）
内毒素性ショックの間に生じる死は、ＬＰＳに対して数時間内に生じる増加したレベルの炎症性サイトカインの結果である。実際に、炎症性メディエータＴＮＦ−αの遮断は、動物をＬＰＳによる誘発性の死から完全に救う。このＰＳＡは、ＬＰＳの低用量投与の間に発現されたサイトカインのレベルに対してこのような劇的な効果を有し、ＰＳＡが、内毒素性ショックに関連する死を防止することができることを示唆する。従って、出願人は、２４〜９６時間で死を引き起こす高用量レベルのＬＰＳ（５００）を投与して、血清内の両方のサイトカインレベルを入手し、生存をモニターした。

図１７ｄおよび１７ｅに示した結果は、ＰＢＳを投与した動物はＬＰＳの投与の６０時間以内で全て死ぬが、ＰＳＡ処置を受けたそれらの動物は、著しく高い生存率を有することを示す（図１７ｄ）。注目すべきことに、ＬＰＳを投与した場合、ＰＢＳ動物は３０００倍以上のＴＮＦ−αの誘発を有するが、ＰＳＡを受けたそれらのマウスは、非常に低いＴＮＦ−ａ誘発を示す（図１７ｅ）。これらのデータは、ＰＳＡが、ＬＰＳに対して生じる全身性炎症反応を抑制でき、敗血性ショックを予防できることを示す。

実施例７の例示的な実験に示されるように、ＩＢＤからのＰＳＡ媒介性防御は、ＣＤ４＋Ｔリンパ球からのＩＬ−１０産生に頼る。ＩＬ−１０が、ＬＰＳにより誘発される死を予防するのに必要とされるか否かを決定するために、出願人は、ＩＬ１０欠損動物をＰＢＳまたは精製したＰＳＡで前処置して、敗血性ショックを生じるＬＰＳのレベルを管理した。サイトカインレベルおよび生存率をモニターした。

図１８に示した結果は、以前のデータと一致して、ＩＬ−１０欠損動物が低用量のＬＰＳに対して、より感受性があり、ＴＮＦαレベルが増加し続けることを示す（図１８ａ）。興味深いことに、ＰＳＡ処置した動物は、ＬＰＳ投与後、４時間でごくわずかなレベルまで低下するＬＰＳに対する血清ＴＮＦ−ａのレベルを劇的に減少させ（図１８ａ）、ＰＳＡによって減少したＴＮＦ−ａレベルは、ＩＬ−１０を誘発するＰＳＡの能力に依存しないことを示す。注目すべきことに、ＰＳＡによって減少したＩＬ−６産生は、レベルがＰＢＳ処置した動物と同様であるため、ＩＬ−１０依存性であり、複数の機構が、内毒素性ショックを軽減するためにＰＳＡにより利用されることを示す（図１８ｂ）。最終的に、ＰＳＡを受けているＩＬ１０欠損マウスは、ＬＰＳにより誘発される死を完全に予防する（図１８ｃ）。

さらなる実験を、マウスにおいて低用量のＬＰＳ投与と関連するＰＳＡ投与のさらなる効果を検出するために実施した。図１９に示した結果は、低用量のＬＰＳ投与の間のＺＰＳ投与の他の効果が、好中球の表面におけるＣＤｌｌｂおよびＧＲ１発現の低下ならびに血液中の好中球動員の減少を含むことを示す。

まとめると、この実施例のデータおよびこの実施例は、ＰＳＡが腸以外の疾患をブロックできることを示し、全身性炎症を減少させるための新規の治療剤であることが予想される。

要約すれば、いくつかの実施形態において、ヘルパーＴ細胞プロファイル、特にＴｈ１、Ｔｈ２、Ｔｈ１７およびＴｒｅｇ細胞プロファイルを平衡化するための化合物、組成物および方法、ならびにヘルパーＴ細胞プロファイルの不均衡に関連する炎症状態を処置または予防するための関連する方法および組成物が、本明細書に提供される。

上記の実施例は、当業者が、本開示の化合物、組性物および方法の実施形態をどのように行い、使用するかの完全な開示および詳細を得るように提供され、本発明者らの開示とみなされるものの範囲を限定することを意図するものではない。当業者に自明である開示を実施するための上記の方法の変更は、添付の特許請求の範囲の範囲内であると意図される。本明細書に言及される全ての特許および刊行物は、本開示に関する当業者のレベルの指標となる。本開示に引用される全ての参考文献は、各参考文献が個々にその全体を参照により援用される場合と同程度まで、参照により援用される。

背景技術、要約、詳細な説明および実施例に引用される各文書（特許、特許出願、論文、要約、実験マニュアル、書籍または他の開示を含む）の全開示は、本明細書に参照により援用される。

さらに、本明細書とともに提出した配列表のハードコピーおよび対応するコンピューター可読形態の両方は、それらの全体が本明細書に参照により援用される。

本開示は、特定の組成物または生物系に限定されず、それらはもちろん、変更可能であることは理解されるべきである。本明細書に使用される専門用語は、特定の実施形態のみを記載する目的であり、限定することを意図しないこともまた、理解されるべきである。本明細書および添付の特許請求の範囲に使用される場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」は、内容が明らかに他を示さない限り、複数の指示対象を含む。用語「複数」は、内容が明らかに他を示さない限り、２つ以上の指示対象を含む。他に定義されない限り、本明細書に使用される全ての技術用語および科学用語は、本開示に関係する当業者により一般に理解されるものと同様の意味を有する。

本明細書に記載されるものと同様または等価な任意の方法および物質が使用され得るが、実際に特定の例を試験するのに適切な物質および方法が本明細書に記載される。

本開示の多くの実施形態が記載されている。それにも関わらず、種々の変更が、本開示の趣旨および範囲から逸脱せずになされ得ることが理解されるだろう。従って、他の実施形態は添付の特許請求の範囲の範囲内である。

（参考文献）
１．Ｐｏｘｔｏｎ，Ｉ．Ｒ．，Ｂｒｏｗｎ，Ｒ．，Ｓａｗｙｅｒｒ，Ａ．＆Ｆｅｒｇｕｓｏｎ，Ａ．Ｍｕｃｏｓａ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｆｌｏｒａ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｃｏｌｏｎ．Ｊ Ｍｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ ４６，８５−９１（１９９７）．

２．Ｓｅｌｌｏｎ，Ｒ．Ｋ．ら，Ｒｅｓｉｄｅｎｔ ｅｎｔｅｒｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ ａｒｅ ｎｅｃｅｓｓａｒｙ ｆｏｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ ｃｏｌｉｔｉｓ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｎ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１０−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｍｉｃｅ．Ｉｎｆｅｃｔ Ｉｍｍｕｎ ６６，５２２４−３１（１９９８）．

３．Ｅｌｓｏｎ，Ｃ．Ｏ．Ｃｏｍｍｅｎｓａｌ ｂａｃｔｅｒｉａ ａｓ ｔａｒｇｅｔｓ ｉｎ Ｃｒｏｈｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １１９，２５４−７（２０００）．

４．Ｓａｒｔｏｒ，Ｒ．Ｂ．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ｄｉｓｅａｓｅ：ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ Ｃｒｏｈｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ ｃｏｌｉｔｉｓ．Ｎａｔ Ｃｌｉｎ Ｐｒａｃｔ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ Ｈｅｐａｔｏｌ ３，３９０−４０７ （２００６）．

５．Ｖｉｄｅｌａ，Ｓ．ら，Ｒｏｌｅ ｏｆ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｉｃｒｏｆｌｏｒａ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｕｌｃｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｔ ｃｏｌｏｎ．Ｇｕｔ ３５，１０９０−７（１９９４）．

６．Ｔａｕｒｏｇ，Ｊ．Ｄ．ら，Ｔｈｅ ｇｅｒｍｆｒｅｅ ｓｔａｔｅ ｐｒｅｖｅｎｔｓ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｇｕｔ ａｎｄ ｊｏｉｎｔ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ ＨＬＡ−Ｂ２７ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｒａｔｓ．Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １８０，２３５９−６４（１９９４）．

７．Ｋｕｌｌｂｅｒｇ，Ｍ．Ｃ．ら，Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｌｉｔｉｓ ｂｙ ａ ＣＤ４＋ Ｔ ｃｅｌｌ ｃｌｏｎｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｆｏｒ ａ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｐｉｔｏｐｅ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １００，１５８３０−５（２００３）．

８．Ｏ’Ｈａｒａ，Ａ．Ｍ．＆Ｓｈａｎａｈａｎ，Ｆ．Ｔｈｅ ｇｕｔ ｆｌｏｒａ ａｓ ａ ｆｏｒｇｏｔｔｅｎ ｏｒｇａｎ．ＥＭＢＯ Ｒｅｐ ７，６８８−９３（２００６）．

９．Ｆｒａｎｋ，Ｄ．Ｎ．ら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ−ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ ｉｍｂａｌａｎｃｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １０４，１３７８０−５（２００７）．

１０．Ｇｉｌｌ，Ｓ．Ｒ．ら，Ｍｅｔａｇｅｎｏｍｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｄｉｓｔａｌ ｇｕｔ ｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ３１２，１３５５−９（２００６）．

１１．Ｌｅｙ，Ｒ．Ｅ．，Ｐｅｔｅｒｓｏｎ，Ｄ．Ａ．＆Ｇｏｒｄｏｎ，Ｊ．Ｉ．Ｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ ｆｏｒｃｅｓ ｓｈａｐｉｎｇ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｉｎ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ．Ｃｅｌｌ １２４，８３７−４８（２００６）．

１２．Ｓｍｉｔｈ，Ｋ．，ＭｃＣｏｙ，Ｋ．Ｄ．＆Ｍａｃｐｈｅｒｓｏｎ，Ａ．Ｊ．Ｕｓｅ ｏｆ ａｘｅｎｉｃ ａｎｉｍａｌｓ ｉｎ ｓｔｕｄｙｉｎｇ ｔｈｅ ａｄａｐｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｍｍａｌｓ ｔｏ ｔｈｅｉｒ ｃｏｍｍｅｎｓａｌ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ．Ｓｅｍｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ（２００６）．

１３．Ｍａｚｍａｎｉａｎ，Ｓ．Ｋ．，Ｌｉｕ，Ｃ．Ｈ．，Ｔｚｉａｎａｂｏｓ，Ａ．Ｏ．＆Ｋａｓｐｅｒ，Ｄ．Ｌ．Ａｎ ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｏｆ ｓｙｍｂｉｏｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ ｄｉｒｅｃｔｓ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｈｏｓｔ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ．Ｃｅｌｌ １２２，１０７−１８（２００５）．

１４．Ｐａｍｅｒ，Ｅ．Ｇ． Ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｔｏ ｃｏｍｍｅｎｓａｌ ａｎｄ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ ｍｉｃｒｏｂｅｓ．Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ８，１１７３−８（２００７）．

１５．Ｄｅｔｈｌｅｆｓｅｎ，Ｌ．，ＭｃＦａｌｌ−Ｎｇａｉ，Ｍ．＆Ｒｅｌｍａｎ，Ｄ．Ａ． Ａｎ ｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ ｏｎ ｈｕｍａｎ−ｍｉｃｒｏｂｅ ｍｕｔｕａｌｉｓｍ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｎａｔｕｒｅ ４４９，８１１−８（２００７）．

１６．Ｂｅｌｌ，Ｅ．Ｂ．Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ４ Ｔ ｃｅｌｌ ｓｕｂｓｅｔｓ ｉｎ ｖｉｖｏ：ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＣＤ４５Ｒ ｉｓｏｆｏｒｍｓ．Ｓｅｍｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ ４，４３−５０（１９９２）．

１７．Ｉｚｃｕｅ，Ａ．，Ｃｏｏｍｂｅｓ，Ｊ．Ｌ．＆Ｐｏｗｒｉｅ，Ｆ．Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｓｕｐｐｒｅｓｓ ｓｙｓｔｅｍｉｃ ａｎｄ ｍｕｃｏｓａｌ ｉｍｍｕｎｅ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｔｏ ｃｏｎｔｒｏｌ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ ２１２， ２５６−７１ （２００６）．

１８．Ｍａｌｏｙ，Ｋ．Ｊ．ら，ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ Ｔ（Ｒ） ｃｅｌｌｓ ｓｕｐｐｒｅｓｓ ｉｎｎａｔｅ ｉｍｍｕｎｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ｔｈｒｏｕｇｈ ｃｙｔｏｋｉｎｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ． Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １９７，１１１−９（２００３）．

１９．Ｃａｈｉｌｌ，Ｒ．Ｊ．ら，Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａｓｅ：ａｎ ｉｍｍｕｎｉｔｙ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｔｒｉｇｇｅｒｅｄ ｂｙ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｈｅｐａｔｉｃｕｓ．Ｉｎｆｅｃｔ Ｉｍｍｕｎ ６５，３１２６−３１（１９９７）．

２０．Ｓｃｈｅｉｎｉｎ，Ｔ．，Ｂｕｔｌｅｒ，Ｄ．Ｍ．，Ｓａｌｗａｙ，Ｆ．，Ｓｃａｌｌｏｎ，Ｂ．＆Ｆｅｌｄｍａｎｎ，Ｍ．Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１０ ｋｎｏｃｋｏｕｔ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｃｏｌｉｔｉｓ：ａｎｔｉｔｕｍｏｕｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ−ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｓｕｐｐｒｅｓｓ ｔｈｅ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｏｌｉｔｉｓ．Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｉｍｍｕｎｏｌ １３３，３８−４３（２００３）．

２１．Ｋｕｌｌｂｅｒｇ，Ｍ．Ｃ．ら，Ｂａｃｔｅｒｉａ−ｔｒｉｇｇｅｒｅｄ ＣＤ４（＋） Ｔ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｃｅｌｌｓ ｓｕｐｐｒｅｓｓ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｈｅｐａｔｉｃｕｓ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｏｌｉｔｉｓ．Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １９６，５０５−１５（２００２）．

２２．Ｂｒｅｇｅｎｈｏｌｔ，Ｓ． Ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａｓｅ：ｎｅｗ ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｆｒｏｍ ｍｏｕｓｅ Ｔ ｃｅｌｌ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｍｏｄｅｌｓ．Ｅｘｐ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔ １７，１１５−２９（２０００）．

２３．Ｐｏｗｒｉｅ，Ｆ．＆Ｍａｌｏｙ，Ｋ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ２９９，１０３０−１（２００３）．

２４．Ｘａｖｉｅｒ，Ｒ．＆Ｐｏｄｏｌｓｋｙ，Ｄ．Ｋ．Ｃｏｍｍｅｎｓａｌ ｆｌｏｒａ：ｗｏｌｆ ｉｎ ｓｈｅｅｐ’ｓ ｃｌｏｔｈｉｎｇ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １２８，１１２２−６（２００５）．

２５．Ｒｕｔｇｅｅｒｔｓ，Ｐ．ら，Ｉｎｆｌｉｘｉｍａｂ ｆｏｒ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ ｃｏｌｉｔｉｓ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３５３，２４６２−７６（２００５）．

２６．Ｒａｋｏｆｆ−Ｎａｈｏｕｍ，Ｓ．，Ｐａｇｌｉｎｏ，Ｊ．，Ｅｓｌａｍｉ−Ｖａｒｚａｎｅｈ，Ｆ．，Ｅｄｂｅｒｇ，Ｓ．＆Ｍｅｄｚｈｉｔｏｖ，Ｒ．Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｍｍｅｎｓａｌ ｍｉｃｒｏｆｌｏｒａ ｂｙ ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓ．Ｃｅｌｌ １１８，２２９−４１（２００４）．

２７．Ｋｕｌｌｂｅｒｇ，Ｍ．Ｃ．ら，ＩＬ−２３ ｐｌａｙｓ ａ ｋｅｙ ｒｏｌｅ ｉｎ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｈｅｐａｔｉｃｕｓ−ｉｎｄｕｃｅｄ Ｔ ｃｅｌｌ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｃｏｌｉｔｉｓ．Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２０３，２４８５−９４（２００６）．

２８．Ｈｕｅ，Ｓ．ら，Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−２３ ｄｒｉｖｅｓ ｉｎｎａｔｅ ａｎｄ Ｔ ｃｅｌｌ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２０３，２４７３−８３（２００６）．

２９．Ｔｚｉａｎａｂｏｓ， Ａ．Ｏ．ら，Ｔｈｅ ｃａｐｓｕｌａｒ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｏｆ Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｓ ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ ｔｗｏ ｉｏｎｉｃａｌｌｙ ｌｉｎｋｅｄ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２６７，１８２３０−５（１９９２）．

３０．Ｅｌｓｏｎ，Ｃ．Ｏ．ら，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉ−ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ ２３ ｒｅｖｅｒｓｅｓ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｌｉｔｉｓ ｉｎ ａ Ｔ ｃｅｌｌ− ｍｅｄｉａｔｅｄ ｍｏｄｅｌ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １３２，２３５９−７０（２００７）．

３１．Ｋｕｈｎ，Ｒ．，Ｌｏｈｌｅｒ，Ｊ．，Ｒｅｎｎｉｃｋ，Ｄ．，Ｒａｊｅｗｓｋｙ，Ｋ．＆Ｍｕｌｌｅｒ，Ｗ．Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１０−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｍｉｃｅ ｄｅｖｅｌｏｐ ｃｈｒｏｎｉｃ ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｓ．Ｃｅｌｌ ７５，２６３−７４（１９９３）．

３２．Ａｓｓｅｍａｎ，Ｃ， Ｍａｕｚｅ，Ｓ．，Ｌｅａｃｈ，Ｍ．Ｗ．，Ｃｏｆｆｍａｎ，Ｒ．Ｌ．＆Ｐｏｗｒｉｅ，Ｆ．Ａｎ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ １０ ｉｎ ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｔｈａｔ ｉｎｈｉｂｉｔ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １９０，９９５−１００４（１９９９）．

３３．Ｇｒｏｕｘ，Ｈ．ら，Ａ ＣＤ４＋ Ｔ−ｃｅｌｌ ｓｕｂｓｅｔ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ａｎｔｉｇｅｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｔ−ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ａｎｄ ｐｒｅｖｅｎｔｓ ｃｏｌｉｔｉｓ．Ｎａｔｕｒｅ ３８９，７３７−４２（１９９７）．

３４．Ｓｔｒａｃｈａｎ，Ｄ．Ｐ．Ｈａｙ ｆｅｖｅｒ，ｈｙｇｉｅｎｅ，ａｎｄ ｈｏｕｓｅｈｏｌｄ ｓｉｚｅ．Ｂｍｊ ２９９，１２５９−６０（１９８９）．

３５．Ｂａｃｈ，Ｊ．Ｆ．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｏｎ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｔｏ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ａｎｄ ａｌｌｅｒｇｉｃ ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３４７，９１１−２０（２００２）．

３６．Ｌｉｕ，Ｃ．Ｈ．，Ｌｅｅ，Ｓ．Ｍ．，Ｖａｎｌａｒｅ，Ｊ．Ｍ．，Ｋａｓｐｅｒ，Ｄ．Ｌ．＆Ｍａｚｍａｎｉａｎ，Ｓ．Ｋ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｕｒｆａｃｅ ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ ｂｙ ｓｙｍｂｉｏｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｈｏｓｔ ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １０５，３９５１−６（２００８）．

３７．Ｔｕｒｎｂａｕｇｈ，Ｐ．Ｊ．ら，Ａｎ ｏｂｅｓｉｔｙ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｇｕｔ ｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅ ｗｉｔｈ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｃａｐａｃｉｔｙ ｆｏｒ ｅｎｅｒｇｙ ｈａｒｖｅｓｔ．Ｎａｔｕｒｅ ４４４，１０２７−３１（２００６）．

３８．Ｍａｚｍａｎｉａｎ，Ｓ．Ｋ．＆Ｋａｓｐｅｒ，Ｄ．Ｌ．Ｔｈｅ ｌｏｖｅ−ｈａｔｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｈｏｓｔ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ（２００６）．

３９．Ｙｏｕｎｇ，Ｖ．Ｂ．ら，Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｈｅｐａｔｉｃｕｓ ｃｙｔｏｌｅｔｈａｌ ｄｉｓｔｅｎｄｉｎｇ ｔｏｘｉｎ ｍｕｔａｎｔｓ．Ｉｎｆｅｃｔ Ｉｍｍｕｎ ７２，２５２１−７（２００４）．

４０．Ｍａｚｍａｎｉａｎ，Ｓ．Ｋ．，Ｌｉｕ，Ｃ．Ｈ．，Ｔｚｉａｎａｂｏｓ，Ａ．Ｏ．＆Ｋａｓｐｅｒ，Ｄ．Ｌ．Ａｎ ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｏｆ ｓｙｍｂｉｏｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ ｄｉｒｅｃｔｓ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｈｏｓｔ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ．Ｃｅｌｌ １２２，１０７−１８（２００５）．

４１．Ｒａｋｏｆｆ−Ｎａｈｏｕｍ，Ｓ．，Ｐａｇｌｉｎｏ，Ｊ．，Ｅｓｌａｍｉ−Ｖａｒｚａｎｅｈ，Ｆ．，Ｅｄｂｅｒｇ，Ｓ．＆Ｍｅｄｚｈｉｔｏｖ，Ｒ．Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｍｍｅｎｓａｌ ｍｉｃｒｏｆｌｏｒａ ｂｙ ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓ．Ｃｅｌｌ １１８，２２９−４１（２００４）．

４２．Ｃ Ｇｅｒａｒｄ，Ｃ Ｂｒｕｙｎｓ，Ａ Ｍａｒｃｈａｎｔ，Ｄ Ａｂｒａｍｏｗｉｃｚ，Ｐ Ｖａｎｄｅｎａｂｅｅｌｅ，Ａ Ｄｅｌｖａｕｘ，Ｗ Ｆｉｅｒｓ，Ｍ Ｇｏｌｄｍａｎ，ａｎｄ Ｔ ＶｅＩｕ Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ １０ ｒｅｄｕｃｅｓ ｔｈｅ ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｐｒｅｖｅｎｔｓ ｌｅｔｈａｌｉｔｙ ｉｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｅｍｉａ Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９９３ １７７：５４７−５５０．

４３．Ｓａｒｋｉｓ Ｋ．Ｍａｚｍａｎｉａｎ，Ｊｕｎｅ Ｌ．Ｒｏｕｎｄ＆Ｄｅｎｎｉｓ Ｌ．Ｋａｓｐｅｒ２，Ａ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｓｙｍｂｉｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ ｐｒｅｖｅｎｔｓ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｉｓｅａｓｅ Ｎａｔｕｒｅ Ｖｏｌ ４５３，２９ Ｍａｙ ２００８，６２０− ６２５．

Claims (21)

1. 個体におけるヘルパーＴ細胞プロファイルを平衡化するための方法であって、前記方法は、前記個体に有効量の両性イオン多糖を投与することを含む、方法。
2. 前記ヘルパーＴ細胞は、ヘルパーＴ細胞のサブセットであり、前記サブセットは、Ｔｈ１、Ｔｈ２、Ｔｈ１７およびＴｒｅｇのうちの少なくとも１つからなる、請求項１に記載の方法。
3. 前記ヘルパーＴ細胞は、ヘルパーＴ細胞のサブセットであり、前記サブセットは、Ｔｈ１７、ならびにＴｈ１、Ｔｈ２およびＴｒｅｇのうちの少なくとも１つからなる、請求項１に記載の方法。
4. 前記ヘルパーＴ細胞は、Ｔｈ１７である、請求項１に記載の方法。
5. 前記両性イオン多糖は、天然に存在する細菌莢膜多糖である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
6. 前記両性イオン多糖は、Ｂ ｆｒａｇｉｌｉｓ莢膜多糖Ａ（ＰＳＡ）または多糖Ｂ（ＰＳＢ）である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
7. 前記有効量は、体重０．０２５キログラムあたり、約１μｇ〜約１００μｇの範囲の両性イオン多糖である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
8. 前記有効量は、体重０．２５キログラムあたり、約０．００１μｇ〜約１，０００μｇの範囲である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
9. 個体におけるヘルパーＴ細胞プロファイルの不均衡に関連する炎症を制御するための方法であって、前記方法は、前記個体に有効量の両性イオン多糖を投与することを含む、方法。
10. 前記ヘルパーＴ細胞は、Ｔｈ１７である、請求項９に記載の方法。
11. 前記両性イオン多糖は、Ｂ ｆｒａｇｉｌｉｓ莢膜多糖Ａ（ＰＳＡ）または多糖Ｂ（ＰＳＢ）である、請求項９または１０に記載の方法。
12. 前記方法は、サイトカイン媒介性炎症を処置するための治療法であり、前記有効量のＰＳＡは、治療的に有効な量の両性イオン多糖である、請求項９〜１１のいずれか一項に記載の方法。
13. 個体におけるサイトカイン産生を制御するための方法であって、前記サイトカインはＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−ａ、ＩＬ−１７、ＩＬ２１、ＩＬ２３のうちの少なくとも１つであり、前記方法は、前記個体に有効量の両性イオン多糖を投与することを含む、方法。
14. 前記サイトカインは、Ｉｌ−１７である、請求項１３に記載の方法。
15. 前記両性イオン多糖は、Ｂ ｆｒａｇｉｌｉｓ莢膜多糖Ａ（ＰＳＡ）である、請求項１３または１４に記載の方法。
16. 個体におけるＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−ａ、ＩＬ−１７、ＩＬ２１、ＩＬ２３のうちの少なくとも１つの産生に関連する炎症を制御するための方法であって、前記方法は、前記個体に有効量の両性イオン多糖を投与することを含む、方法。
17. 前記方法は、前記炎症を処置するための治療法であり、前記有効量の両性イオン多糖は、治療的に有効な量の両性イオン多糖である、請求項１６に記載の方法。
18. 両性イオン多糖および適切なビヒクルを含む抗炎症性組成物であって、前記両性イオン多糖は、約１μｇ〜約１００μｇの量で含まれる、抗炎症性組成物。
19. 前記両性イオン多糖は、約０．０１μｇ〜約１，０００μｇの量で含まれる、請求項１８に記載の抗炎症性組成物。
20. 前記組成物は、医薬組成物であり、前記適切なビヒクルは、薬学的に許容可能なビヒクルである、請求項１８または１９に記載の抗炎症性組成物。
21. 前記両性イオン多糖は、Ｂ ｆｒａｇｉｌｉｓ莢膜多糖Ａ（ＰＳＡ）または多糖Ｂ（ＰＳＢ）である、請求項１８〜２０のいずれか一項に記載の抗炎症性組成物。