JP2001072555A - 発毛、毛包及び毛茎の寸法、及び毛色素沈着の減少 - Google Patents
発毛、毛包及び毛茎の寸法、及び毛色素沈着の減少Info
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Abstract
る。 【解決手段】 この発明は、天然及び/又は合成セリン
プロテアーゼ阻害剤、又はセリンプロテアーゼ阻害活性
を有する植物抽出物を、1種類以上のイソフラボン及び
/又は1種類以上のイソフラボンを含む別の天然抽出物
と共に、又は該天然物無しで利用するとともに、それら
の哺乳動物の発毛、毛包及び毛茎の寸法、及び毛色素沈
着における変化に影響を及ぼす能力を利用する。
Description
方法及び組成物に関する。特に、本発明はセリンプロテ
アーゼ阻害活性を有する植物抽出物(特に豆乳等の大豆
抽出物)又はイソフラボン等の他の活性成分と組み合わ
せた該抽出物の混合物及び配合物のいずれかを局所的に
適用することによって、発毛率を変化させ、毛包及び毛
茎の寸法を減少させ、さらに毛茎の色素沈着を減少させ
る方法に関する。
動物の毛の主要な機能の一つは、環境的保護を提供する
ことである。しかし、ヒトではそのような機能がほとん
ど失われており、ヒトの毛は主に社会的目的及び美容目
的のために維持又は脱毛される。
レーザ及び光療法、及び抗アンドロゲン治療薬の注射
等、不要な毛を脱毛するために多くの方法が用いられて
いる。これらの従来の方法に短所がないわけではない。
例えば、シェービングは皮膚表面に擦り傷や切り傷を生
じたり、毛の再生率を高める知覚を残したり、さらに望
ましくない無精ひげを残してしまう可能性がある。電気
分解療法は長期間にわたってむだ毛のない領域を保つこ
とができるが、この方法はしばしば高価で苦痛を伴うも
のであり、さらに傷跡を残す場合もある。引き抜くこと
は、単に痛みや不快感が生ずるだけではなく、短い毛が
不十分にしか除去できないという結果に終わることが多
い。いくつかの不要な副作用、例えば筋肉に対する作用
は、しばしば抗アンドロゲン物質の使用を伴う。これら
の理由から、発毛を減少させる方法が求められている。
ごひげ部分で最も一般に見出される。毛尖が毛孔を通る
よりはむしろ皮膚を貫通する場合に、感染性毛嚢性丘疹
が結果として生ずる。このプロセスは黒人においてかな
り一般的である。なぜなら、黒人の毛はしばしば巻き毛
であり、鋭角で皮膚から出ている。密着したシェービン
グ、特に安全剃刀の刃によるシェービングによって偽鬚
髯毛嚢炎に罹りやすい。最も効果的で、かつ利用可能な
処置は、皮膚表面を越えて毛が十分に伸びることを可能
とさせることである。しかし、そのような処置が求めら
れない場合もしばしばある。
あり、女性の約4%が罹患している。顔面多毛症はしば
しば個人的及び作業的活動の妨げとなり、一時的な脱毛
が男性型多毛症患者の管理において主な構成要素であ
る。シェービングは、最も頻繁に使用されている顔面の
毛に対する一時的な方法であり、引き抜き、ワキシング
及び脱毛薬に関しては最も許容するのが困難であり、毛
包炎、色素沈着、及び傷跡が生ずるのを避けるためにケ
アを必要とする。化粧は切り傷及び無精ひげを隠すため
に一般に利用され、電気分解療法及び温熱療法が手頃に
利用可能な場合は、永久脱毛をするためにそれらを用い
る場合もある。
は補足的アプローチは、発毛を減少させ、毛包及び毛茎
の寸法を減少させ、さらに毛茎の色素沈着を減少させる
方法であろう。そのようなアプローチは、毛の存在の視
認性を減少させ、毛をより一層柔らかく、かつより一層
軽くする。脱毛を行う別の方法と組み合わせた場合、そ
のような方法は脱毛効果を高め、かつ長引かせ、脱毛の
必要性及び頻度を減らす可能性がある。そのようなアプ
ローチを長期にわたって使用すると、視認性が低く、減
衰し、柔らかく、色素が減少した発毛となる可能性があ
る。
臭剤及び制汗剤が使われる脇の下の領域(腋窩)におい
ても、発毛減少が求められる。発毛減少活性を持つとと
もに脱臭又は制汗活性を併せ持ち、かつ腋の下で使用す
る製品の提供が求められよう。
クであり、すなわち毛茎が縮れ、かつ毛茎の直径にばら
つきがある。この複雑な毛茎構造によって、アフリカ型
の毛が美容上望まれる性質を保つことができるようにす
るために特化したグルーミング製品及び方法の必要性が
生ずる。この複雑性を減少させ、かつアフリカ型の毛を
より一層管理しやすいものとして、その外観を改善する
製品を提供することが求められる。
なく、発毛、毛包及び毛茎の寸法、そし毛茎の色素沈着
に対して、化学的に、又は自然に影響を及ぼす方法を提
供することが求められている。
アーゼ阻害剤、植物抽出物、さらに特にマメ科植物抽出
物(限定されるものではないが例として豆乳が挙げられ
る)を含む局所活性組成物を、発毛、毛包及び毛茎の寸
法、さらに毛茎の色素沈着に影響を及ぼすのに十分な時
間にわたって、哺乳動物の皮膚に局所投与することによ
って、哺乳動物の発毛、毛包及び毛茎の寸法及び毛の色
素沈着に影響を及ぼすための組成物及び方法を見出し
た。そのような局所活性組成物は他の活性成分とさらに
化合して、発毛及び色素沈着に対する所望の効果を高め
るようにしてもよい。そのような他の活性成分の例とし
ては、限定されるものではないが、合成又は天然のイソ
フラボンが挙げられる。
アーゼ阻害剤、セリンプロテアーゼ阻害活性を有するマ
メ科植物由来の植物抽出物、特に限定されるものではな
いが豆乳、さらにそれらとイソフラボンとの化合物を用
いることによって、発毛を遅らせ、毛包及び毛茎の寸法
を減少させ、さらに毛茎の色素沈着を減少させるユニー
クかつ簡便な手段を提供する。
少なくとも1枚含まれる。カラー図面を有するこの特許
の複写物は請求及び必要な手数料の納付を行うことで特
許商標局によって提供されよう。
を参照することで、本発明をより一層完全に理解するこ
とができよう。
動物」は、ウェブスター卓上医学辞書407(1986
年)に定義されたように「哺乳網を含む高等脊椎動物
の」任意の動物を意味するものとし、限定されるもので
はないが、ヒトも含まれる。ここで使用されるように、
「(%,w/v)」は100mlの全組成物に対する所
定成分のグラムを意味するものとする。
活性剤は、プロテアーゼ阻害剤とプロテアーゼ阻害活性
を有する天然の植物抽出物及びそれらの混合物とを含
む。好ましいプロテアーゼ阻害剤はセリンプロテアーゼ
阻害剤であり、特に大豆トリプシン阻害剤(STI)と
大豆由来ボーマン・バーク(Bowman Birk)阻害剤(B
BI)である。好ましい植物抽出物は、マメ科植物のも
のであり、特にマメ抽出物、例えば豆乳である。好まし
くは、プロテアーゼ阻害剤は本発明の組成物の全体積を
基準にして、約0.0001%(w/v)乃至約20%
(w/v)、より好ましくは約0.001%(w/v)
乃至約5%(w/v)の量で存在する。好ましくは、豆
乳等の植物性水抽出物は10%(v/v)乃至99%
(v/v)、より好ましくは50%(v/v)乃至99
%(v/v)で存在する。
又は豆乳含有配合物をイソフラボン、特に大豆由来イソ
フラボンを増強した場合、発毛、毛の寸法、及び毛の色
素沈着に対する阻害効果が高まることを予想外にも発見
した。好ましくは、イソフラボンは0.000005%
(v/v)乃至15%(v/v)、より好ましくは0.
00001%(v/v)乃至10%(v/v)の量で豆
乳等の植物性水抽出物に存在する。
必要とされる場合、本発明の局所活性組成物は、局所活
性剤を毛包及び皮膚に貫通させることを可能とする送達
系として機能することが可能な医薬用又は化粧用として
許容される担体をさらに含むものであってもよい。
分と任意に配合してもよい。他の成分としては、例えば
保湿剤、化粧品用アジュバント、抗酸化剤、脱色剤、抗
熟成剤、脱毛剤、整髪剤、サンスクリーン剤、界面活性
剤、発泡剤、コンディショニング剤、湿潤剤、芳香剤、
着色剤、粘性剤、緩衝剤、防腐剤等、及びそれらの混合
物が挙げられる。これらは発毛、毛の寸法、及び毛の色
素沈着を減少させることを目的として、限定されるもの
ではないが、例えばエッセンス、クリーム、ローショ
ン、ペースト、ゲル、粉末、パッチ又は注射剤等の化粧
品又は医薬品を生産するために、セリンプロテアーゼ活
性に影響を及ぼさない量で配合される。
めるために、他の成分又は組成物の添加に先だって、又
は添加と同時に、又は添加の後に適用される。例えば、
この発明の組成物は、脱毛を促進したり、実際に脱毛し
たり、毛の視認性を減少させたり、毛髪型を改善した
り、或いは体毛の管理を改善したりすることを目的とす
る1種類以上の製品と一緒に適用してもよい。この発明
の組成物は、脱毛に先立って、脱毛中に、又は脱毛に引
き続いて適用してもよい。それらは、脱毛剤、シャンプ
ー、ヘアコンディショナー、スタイリング用ジェル、ヘ
アケア製品、脱毛用ワックス製品、シェービング製品、
除毛用製品、アフタシェービング製品、消臭剤、抗発汗
剤、電気分解、レーザ脱毛、光誘導脱毛、マスク又は入
浴添加剤からなる群の一種類以上の添加剤と同時に局所
的に適用することができる。
果が認められるべき少なくとも4週間乃至8週間にわた
って毎日適用することができる。塗布は、毛の状態を維
持するのに必要な期間にわたって続けて行うことができ
る。顔へ毎日適用することで偽鬚髯毛嚢炎及び/又は男
性型多毛症の症状が緩和される可能性があり、腋窩領域
へ塗布することで腋の下の発毛が減少する可能性があ
り、また頭皮及び毛髪に対する適用はアフリカ型の毛髪
を管理及び整髪する手助けとなる。
組成物を、哺乳動物の発毛、毛包及び毛茎の寸法、及び
毛茎の色素沈着の変化を生じさせるのに有効な量で適用
すべきである。ここで使用されるように、「有効量」は
発毛及び毛の色素沈着の遅れと毛の寸法の減少とが求め
られる皮膚領域を覆うのに十分な量を意味するものとす
る。好ましくは、組成物は、発毛、毛の寸法、及び毛の
色素沈着における遅れが求められる場合に、皮膚表面の
平方cmを基準にして、約2μl/cm2乃至約500
μl/cm2の局所活性剤が存在するほどに、皮膚の表
面に適用される。
フラボン増強豆乳が動物の皮膚に局所的に適用される場
合、発毛、毛包及び毛茎の寸法、及び毛茎の色素沈着の
著しい遅れが達成されることを、予想外にも発見した。
さらに、我々はヒトの発毛周期がしばしばマウスの場合
よりも遅いことから、さらにヒトでの発毛の遅れもマウ
スの場合よりも著しく長くなる可能性があると考える。
示された本発明は、ここでは明確に開示されていない任
意の構成要素、成分、又は工程無しで実施されることが
あり得る。本発明の本質及びそれを実行する方法をさら
に説明するために、いくつかの実施例を以下に示す。し
かし、本発明がそれらの詳細に限定されるものと考える
べきではない。
(オス及びメス)をCharles River(Kingston, NY)から
入手し、またマウスは各々の毛周期の休止(telogen)期
にあった。Stenn 他“Glucocorticoid Effect on Hair
Growth Initiation: A Reconsideration,” 6 Skin Pha
rmacol.,第125頁乃至第134頁(1993年)に開
示された方法にもとづいて各々の動物の背中をワックス
脱毛(引き抜き)することによって発毛を誘導した。齢
が8週乃至10週のC57Bl/6及びC3Hマウスで
は、脱毛の時に全ての毛包で同時に成長(anagen)期が
開始する。表1に示すように、以下の所見が誘導部位で
認められた。
の肌が黒ずみ始めたことから脱毛後数日で視認可能とな
った。このことは、毛茎での髪色素沈着によると思われ
る。なぜなら、C57Bl/6及びC3Hマウスは毛包
のみにメラノサイトを含んでおり、背側表皮には含まれ
ていないためである。同様の発毛様式は、本出願人の国
際特許出願第PCT/US97/11033号におい
て、市販の製品を用いて化学的脱毛を行った場合につい
て記録されている。
ではなく、個々の動物の間で変化するので、毛周期の状
態は研究中のそれぞれの動物で分析された。ハサミを用
いて各マウスから2cm×1cmの皮膚標本を単離し、
25℃でpH約6.9乃至7.1の10%ホルマリン緩
衝液(Stephens Scientific)を用いて固定し、次に既知
の方法にもとづいてパラフィンブロックに包埋した。こ
のブロックをミクロトームで薄く切断し、得られた切片
をH&E又はPontana−Mason染色法によっ
て染色して切片標本とした。毛周期の段階、毛包及び毛
茎の寸法、及び毛色素沈着の度合いを確認するために、
当業者に周知の方法を用いてこの切片標本を組織学的に
調べた。毛の長さは視覚的に、かつ低倍率(×8)の解
剖顕微鏡を用いて評価した。
PCT/US97/11033号に記述されたものと同
様で、C57Bl/6及びC3Hマウスの発毛周期が平
均して約25日間であったことを示しており、脱毛に用
いた方法にかかわらず、毛包及び毛茎の発生が同様のタ
イミングで生ずることを報告している。
数時間浸けておき、完全に含水した後に小量の水を加え
ながら大豆をすりつぶす(すりつぶす過程によって豆乳
が抽出される)。収集後、豆乳を濾過して一切の残存部
分を取り除くことができる。以下に記述する配合物で使
われる豆乳は、上記したように新鮮な豆乳であるか、又
は大豆粉末と水とから作ったものであってもよい。大豆
粉末は大豆を粉砕して得られ、また凍結乾燥、噴霧乾
燥、又はフリーズドライしたものであってもよく、さら
に結果として得られる豆乳を濾過しても濾過しなくても
よい。そのように調製された豆乳は約1重量%乃至約9
0重量%の乾燥大豆粉末が含まれる。別の例は、水を添
加し、濾過又は濾過しないで、又は均質化して仕上げら
れた凍結乾燥、噴霧乾燥、又はフリーズドライで作られ
た豆乳粉末の利用である。大豆抽出の別の方法は、以下
に説明する配合物の活性成分を作り出すことにも利用可
能である。例えば、活性成分は大豆のセリンプロテアー
ゼ阻害活性が保持されるように、また好ましくはタンパ
ク質STIが無障のまま残るように、粉砕した大豆から
エタノール/水混合物を用いて抽出し、それに続いて該
抽出物からエタノールを取り除く。
照条件、収穫期等にかかわりなく全ての大豆種から作る
ことが可能である。しかし、特定の株、原産地、又は栽
培条件が好ましいかもしれない。例えば、限定されるも
のではないが、大豆トリプシン阻害剤(STI)含有量
又はイソフラボン含有量が特に高い大豆株、又は豆にS
TI又はイソフラボンを富ませる栽培条件が好ましいと
思われる。留意して置くべきことは、この発明の組成物
に有用な大豆製品は特有の香りを有するということであ
る。この香りはいくつかの文化で許容されるものではあ
っても他の文化では好ましく思われない可能性がある。
必要に応じて、この発明の組成物の香りは、香りを緩和
することが知られている大豆の特定株由来の大豆製品を
用いることによって減少させることができよう。そのよ
うな特定の株の例としては、限定されるものではない
が、リポキシゲナーゼ−2−欠損豆及び修飾された糖の
特徴を持つもの等が挙げられる。配合物に含まれる酸素
濃度を減少させるプロセスもまたそのような香りを抑え
ると思われる。様々な隠蔽剤又は芳香剤も香りを隠すた
めに使用してもよい。
湿潤剤、保水剤、軟化剤、芳香剤、着色剤、保存剤、抗
酸化剤、脱色剤、脱毛剤、抗熟成剤、サンスクリーン
剤、発泡剤、化粧品用アジュバント、緩衝剤、又はそれ
らの混合物を含むものであってもよい。
に十分な期間にわたって皮膚に残して置いてもよい。例
えば、この発明の組成物は、少なくとも約4週間にわた
る日々の皮膚の処置に適用することが可能であり、より
好ましくは組成物は少なくとも8週間にわたって毎日適
用すべきである。
減するか、もしくは予防するための方法である。この発
明の組成物の日常的な適用によってこの状態を和らげる
か、もしくは予防することができよう。この発明の組成
物を、発毛を軽減させるために脇の下の領域に毎日適用
してもよい。さらに、この発明の組成物を日々頭皮に適
用してアフリカ型の毛の整髪及び管理を改善することが
できよう。
号JBP430:PCT/US98/09799)に示
すように、多数の豆乳を主成分とする配合物が色素沈着
の軽減に使用することができる。そのような配合物のす
べては、発毛の軽減に使用することができる。豆乳の配
合物及びイソフラボンを含有する豆乳の配合物に関する
特に好ましい例のいくつかを以下の表2に示す。この発
明で使用可能なイソフラボン調製物の例は、日本のIchi
maru製フラボステロンSEであり、約0.1%の純イソ
フラボンを含有する。これらすべての配合物で、豆乳を
適量の大豆粉末又は豆乳粉末と水とによって置き換える
ことが可能である。
含む局所活性成分の調製 Sigma-Aldrich Coporation製の大豆トリプシン阻害剤
(STI)及びBowman-Birk 阻害剤(BBI)を濃度が
1%(w/v)乃至0.001%(w/v)となるよう
にして0.1Mのリン酸緩衝生理食塩水(PBS、Gibc
o-BRL, Gaithersburg, MA、pH7.4)に混合した。
局所活性組成物を生成するために、得られた溶液の4容
量に対して1容量のリポソーム担体(100mg/m
l)を添加した。リポソーム担体は、Niemiec 他に記載
された方法によって調製した。非イオン性リポソーム配
合物、例えば本明細書にその全体が援用されるNiemiec
他“Influence of Nonionic Liposomal Composition On
Topical Delivery of PeptideDrugs Into Pilosebaceo
us Units: An In Vivo Study Using the Hamster EarM
odel” ,12 Pharm. Res.第1184頁乃至第1188頁
(1995年)(“Niemiec”)に開示されたものが当業
者に周知であり、またそれらは本出願人の米国特許出願
(整理番号JBP430)に記載されている。GDLリ
ポソームは、以下の変更を除いてNiemiec 他の記載に従
って調製した。すなわち、非イオン性リポソーム配合物
はグリセロールジラウレート(Emulsynt GDL, ISP Van
Dyk)/コレステロール(Croda)ポリオキシエチレン−1
0−ステアリルエーテル(Brij76, ICI)/ポリオキシエ
チレン−9−ラウリルエーテルを37.5:12.5:
33.3:16.7の比率で含んだ。PBS又はHep
es緩衝液のいずれか、0.05M、pH7.4(Gait
hersburg, MDのGibco-BRL)はリポソーム調製の際の水
相として使用した。
茎の寸法、及び毛茎色素沈着の減少 C57Bl/6マウスに対して実施例1に記載したよう
にして新たな毛周期を誘導し、日々豆乳による処理を施
した。毎日、発毛のパターンに関して動物の観察を行
い、毛周期の重要な時点で皮膚生体組織検査を行った。
豆乳処理の結果、処理されたマウスの発毛が遅れ、また
目視的にも毛が薄くなり、さらに触り心地がより滑らか
になった。予想通りに、処理済みマウスでは毛周期の7
日目乃至8日目では皮膚が黒色化することが認められ
ず、また対照動物と同様に11日目乃至12日目では毛
茎を視認することはできなかった。平均して、豆乳処理
マウスの毛周期は3日乃至6日遅れた。図1はマウス毛
皮の写真であり、豆乳処理後の毛の外観、色、寸法、及
び太さの違いを示している写真である。
らの観察が確認された。フォンタナ・メーソン染色(F
&M)による図2に示されるように、毛周期の4日目で
は未処理の毛包が期待通りに完全に発育し、細胞層及び
色素沈着の全てが含まれていた。それとは反対に、豆乳
処理標本(同倍率で示す)は、色素沈着が無く、かつよ
り一層小さくて完全には分化していたない毛包が見られ
る。
染色組織学的切片を示す。これらの切片は、毛周期7日
目からのものである。上側のパネルは、未処理の対照と
比較して豆乳処理した皮膚が小さく、短く、かつ色素沈
着が少ない毛包を有することを示している。下側のパネ
ルは毛包をさらに拡大したもので、豆乳処理後の毛包、
毛茎の寸法、及び色素沈着の違いをさらに示している。
切片を低倍率で示したものである。この倍率では、豆乳
処理によって毛包の寸法が減少することが明らかであ
り、このことは毛茎の長さ及び太さの減少、さらに処理
した毛包内の全体的な組織沈着の減少を引き起こす。
りの倍率で示すものである。上側のパネルは毛包が退行
している場合に対照の動物が退行期にあることを示して
いる。一方、豆乳処理した毛包は、休止期にあることが
示されていることから、既に退行期を完了している。こ
のことは、豆乳処理後に毛周期が遅れただけではなく、
未熟な段階で毛周期が終了したことも示している。下側
のパネルは退行期の対照の毛包と、より短い休止期の豆
乳処理済み毛包を高倍率で示すものである。
毛、寸法、及び色素沈着に対する豆乳の効果 発毛に対する豆乳の効果はC57Bl/6マウスに対し
て特異的ではないことを確認するために、毛の色が茶色
(野鼠色)のC3Hマウスを用いて実施例4に記載した
実験を繰り返した。それらの実験の結果は、視覚的にも
組織学的にも類似していた。豆乳によってC3Hマウス
における発毛の遅れ、毛包及び毛茎の寸法、及び色素沈
着が遅れた。
が確認された。F&M染色を用いて図6の上側のパネル
に示すように、毛周期の7日目において、大豆処理毛包
は未処理の対照よりも色素が小さく、かつ色素の集積が
少なかった。図7の上側のパネル(F&M染色)は、同
一組織片を低倍率で示すものであり、豆乳処理によって
毛包が薄く、かつ色素沈着が少なくなったことが示され
ている。
皮膚切片を示す。C57Bl/6マウスに関して示した
ように、豆乳処理後に、毛周期が未成熟なまま終了す
る。豆乳処理した毛包は休止状態にある一方で、未処理
対照の毛包はいまだ退行期にある。
する豆乳及び大豆由来セリンプロテアーゼ阻害剤の効果 発毛に対する豆乳の効果を説明するメカニズムを調べる
ために、豆乳由来セリンプロテアーゼ阻害剤、STI及
びBBIの効果を試験した。以前に、PAR−2経路が
影響を受けることによってそれらのタンパク質が皮膚に
対して色素消失を引き起こすことを示した(米国特許出
願、整理番号JBP430)。
4に記載した実験を繰り返した。STI及びBBIは実
施例3に記載したようにPBS−リポソーム担体に含有
させて使用した。毛周期全体に対する目視観察によっ
て、豆乳と同様に、STI及びBBIの両方とも発毛を
遅らせたり、毛包の数及び毛茎の寸法を減少させたりす
ることが可能であることを確認した(図9に示した毛の
写真を参照)。高濃度のSTI又はBBIを用いること
で、発毛及び色素沈着に対する効果が十分に得られた。
けられた。図6に示すように、毛周期の7日目では1%
のSTI及び1%のBBIによってC3Hマウスの毛
包、毛茎寸法、及び毛茎色素沈着が減少する。図7は、
毛周期に入って同じ日数が経過した切片を低倍率で観た
もので、未処理の対照と比較して、豆乳、STI又はB
BI処理によるより小さな毛包及び毛茎と色素沈着の減
少とが示されている。図10は、C57Bl/6マウス
においてSTI及びBBIも同様の効果を有することを
示すもので、より小さく、かつより少ない色素沈着毛包
が示されている。これらを総合すると、この実施例は、
STI及びBBIが豆乳に見出される大豆由来セリンプ
ロテアーゼ阻害剤であり、発毛を遅らせ、毛包及び毛茎
の寸法を減少させ、さらに毛色素沈着を減少させること
が可能であることを示している。STI及びBBIは、
発毛に影響を及ぼす豆乳成分の一部に相当すると思われ
る。
対する上記の影響に関与しているという仮説を支持する
ために、我々はセリンプロテアーゼ阻害活性について豆
乳を試験した。酵素的アッセイは、Molecular Probes o
f Eugene, OR 製のプロテアーゼ消化蛍光試験システム
である“Enzchek ”を用いて実施した。100単位のト
リプシン(製造元:Sigma chemicals, St. Louis MO)を
用いた場合、この試験システムによる蛍光測定値は約1
100単位であった。既知のトリプシン阻害剤から予想
されるように、この反応はSTIの濃度が増加するに伴
って阻害された。このアッセイで豆乳の連続希釈を試験
したところ、トリプシン活性阻害が認められた。図11
に示すように、豆乳は約0.2%の純STIと同様のト
リプシン阻害活性を発揮する。このことは、STI及び
BBIによって豆乳が少なくとも部分的にそれ自身の発
毛効果を発揮すると示唆される。
RP−1タンパク質発現の変化の誘導 上記実施例で記述した豆乳処理皮膚標本の組織学的分析
は、毛包内での色素沈着の著しい減少を示している。豆
乳によって誘導される色素消失のメカニズムをさらに理
解するために、メラニン形成において鍵酵素であるチロ
シナーゼと、チロシナーゼを安定化させる酵素であるチ
ロシナーゼ関連タンパク質−1(TRP-1)とを検討し
た。C57Bl/6及びC3Hマウスを上記したように
処理し、タンパク質分析の始めから終わりに至るまで標
本の収集を実施した。タンパク質抽出及びウェスタンブ
ロット分析は、標準的な手順、例えばCurrent Protocol
s inCell Biology(Juan S. Bonifacino他編著、版権1
999年、John Wiley & Sons, Inc.)のChapter 6: Ele
ctrophoresis and Immunoblotting. (その全体を発明
の詳細な説明の一部として援用する)にもとづいて行っ
た。そのような研究の一例を図12に示す。
質を抗チロシナーゼ抗体「抗PEP1」、及び抗TRP
−1抗体「抗PEP7」によってプローブ化した。これ
らの抗体は、Jimenez, M., Kameyama, K., Maloy, WL,
Tomita Y., and Hearing, V.Mammalian tyrosinase: bi
osynthesis, processing and modulation by melanocyt
e stimulating hormone. Proc. Natl. Acad. Sci. USA
(1988年), 85: 第3830頁乃至第3834
頁、及びJimenez, M., K., Maloy, WL, and Hearing,
V. Specific identification of an authentic tyrosin
ase clone. J. Biol. Chem.(1989年)264:第33
97頁乃至第3403頁に記載されている。なお、これ
らの文献全体を発明の詳細な説明の一部として援用す
る。
RP−1タンパク質の発現は、豆乳処理によって著しく
影響を受ける。チロシナーゼ及びTRP−1濃度が減少
し、発現持続時間が短くなる。これら2つの要因は全体
的な毛色素沈着に作用し、色素形成の濃度が減少し、か
つその持続時間が短くなることで毛色素沈着が減少す
る。
及び太さの減少 毎日シェービングを行う黒々とした顔面の毛を持つ個々
の男性個人に対して、その顔面の右側を剃った後直ちに
豆乳で5週間処理した。第3週目で、より一層顕著には
第4週目で、処理した側の毛は視覚的に明るくなって、
触り心地もより一層滑らかになった。処理している期間
全体にわたり、ハイスコープ(Hi-Scope)を用いて異な
る倍率でデジタル写真を撮った。それらの写真は処理し
た側で毛茎の寸法及び太さが減少しているのを明確に示
している。そのような写真の一例として、処理4週目に
おける毛茎の太さ及び密度の違いを証明する写真を図1
3に示す。顔面の両側を同時に剃り、両方の側の写真を
同時に撮ったので、顔面の毛の長さの違いが処理した面
で成長速度が遅くなっていることを示している。
毛の長さ、太さ、及び全面積のコンピュータ画像分析を
示すものである。全ての画像は、Image Pro Plus 3.0
ソフトウェア(Media Cybernetics, Silver Spring, M
D)によって分析した。データは、顔面の各々の側につい
て標準偏差とともに180本の毛茎の平均として表示さ
れている(SigmaPlot(登録商標)5.0, SPSS Science,
Chicago, IL)。統計分析は、SigmaStat(登録商標) 2.
0 (SPPS Science)ソフトウェアを用いて実施したとこ
ろ、豆乳処理後、測定した全てのパラメータにおいて著
しい差が実証された。
及び太さの減少 一個人において、両足の膝下内側部分の2つの対称的領
域の毛をワックスによって脱毛した。一本の足は、4週
間にわたって毎日、豆乳で処理した。目視観察は、処理
した部位で発毛が遅くなったことを示している。図15
に示すように、毛茎は数が減少し、未処理のものよりも
短く、かつ薄くなった。これらの観察は、発毛に対する
豆乳の作用をさらに裏付けるものである。実施例8及び
実施例9は、ともにヒトの発毛に対する豆乳の作用が脱
毛方法又は処理している体の部位に関係ないことを裏付
けている。
る上で豆乳配合物よりも好ましいイソフラボン増強豆乳
配合物 実施例4に記載した実験を上記表2に記載した2種類の
配合物、すなわち豆乳を主成分とする配合物である豆乳
エッセンス23と、0.1%イソフラボン抽出物が5%
添加されていること以外は豆乳エッセンス23と同一の
豆乳エッセンス30とを用いて実施した。図16に示す
ように、豆乳エッセンス23を処理したマウスは発毛減
少とより一層さっぱりとした毛の外観を呈している。こ
のような効果は、豆乳エッセンス30を用いることによ
ってより一層顕著になり、イソフラボン増強豆乳配合物
が発毛減少において豆乳配合物よりも優れているを示し
ている。図17は、処理15日目における処理マウスの
組織学的皮膚切片を示す。それらの切片に記録された毛
茎は、豆乳エッセンス処理後の毛茎の寸法の減少、毛茎
内での色素沈着濃度の減少、及び毛茎の滑らかさの増大
をはっきりと示している。
効なイソフラボン配合物よりも好ましいイソフラボン増
強豆乳配合物 イソフラボン濃度の増加を伴う、又は伴わない大豆エッ
センスからなる上記の表2に記載された配合物を用い
て、実施例4に記述した実験を繰り返した。それらの大
豆エッセンス配合物を、豆乳成分のみが水と置換された
同様の配合物と比較した。発毛において観察された効果
にとってイソフラボンが十分である可能性を試験するた
めに、そのような配合物からなる3通りの組(大豆エッ
センス、イソフラボン、さらにイソフラボンが加えられ
た大豆エッセンス)を調製した。図18は、実施例4に
記載したように、3週間の局所処理後のC57Bl/6
マウスを示す。未処理対照のマウス及びプラセボ処理マ
ウスの両方とも、長くて「規則性(ordered)」がより少
なくなった毛を有する。豆乳エッセンス23は発毛を減
少させ、この出願で既に記述したように、より一層さっ
ぱりした外観をもたらす。0.1%イソフラボン(I
F)含有抽出物をそれぞれが1%、5%、及び10%含
む豆乳エッセンス配合物によって、発毛に対してより一
層優れた効果を及ぼす。しかし、イソフラボンを含有す
るが豆乳を含有しない配合物は、より一層緩やかであ
り、豆乳と組み合わせた場合ほど優れた効果を持たな
い。この例は、イソフラボンを含有する豆乳配合物が発
毛を減少させることができたことを示している。さらに
この例は、イソフラボンを含有する豆乳配合物がイソフ
ラボンを単独で含む配合物よりも一層高い度合いで発毛
を減少させることを示している。
豆エッセンス配合物 プラセボ配合物と比較した豆乳エッセンス23及び30
の有効性及び刺激性は、29歳から45歳までの閉経前
の女性参加者12名に対するプラセボ対照4週間盲検法
(blinded placebo-controlled four-week test)によっ
て調査し、研究者による評価、参加者による自己評価、
及びハイスコープによる画像分析によって検査した。参
加者は説明された承諾書に署名し、研究の手順及び予期
されることについての説明を受け、さらにその夜にシェ
ービングすることが求められた。基準線において、翌日
訪れると、各参加者に対して、プラセボ用ローション
と、豆乳エッセンス23又は30のいずれか一方のロー
ションと2種類のローションが手渡された(第1日
目)。ローションを右足又は左足のいずれか一方に対し
て無作為に割り当てた。試験用ローションとプラセボ用
ローションを、脛に対して他のローションを使用するこ
となしに研究期間中に各々の足に対して使用した。参加
者は、日に2回、朝と晩に、試験用ローションを塗布す
ることが指示され、また各週毎の評価が終わるまで脛の
毛を剃ること控えるように指示された。評価日におい
て、刺激の臨床徴候について参加者の足と、また発毛の
減衰について比較した足とが研究者によって視覚的に検
査される。各評価時点(1週目,2週目,3週目及び4
週目)で参加者は自己評価質問票を完了させる。さら
に、MX−MACROZレンズ(Hirox)を用いてハイス
コープ画像(各像について直径が2.5cm、KH−2
400R、Hirox)が各時点で得られた。
いなかった。刺激の徴候がいずれの時点においていずれ
の研究参加者にも見られず、また研究過程の任意の時点
で参加者による自己評価が行われた場合でも刺激はいっ
さい報告されなかった。
各参加者に対して所定の2.5cm領域内で「無精ひ
げ」を含む全ての毛を数えた。結果は、豆乳エッセンス
30の場合は5週目で、また豆乳エッセンス23の場合
は4週目で脛毛の数が減少することを示した。プラセボ
処理した足は、標準偏差が大きいが研究期間全体にわた
って足の毛の平均数の変化を示さなかった。発毛率は参
加者が最後に剃ってからの時間の長さ(日)を、各試験
部位で各参加者対してImage Pro Plus分析を利用してハ
イスコープ像から計算される参加者の足の毛の平均長に
よって割る。結果は表3に示されており、豆乳エッセン
ス23及び30による処理のいずれの場合も、プラセボ
と比べて発毛率が減少したことが明らかになった。
結果によれば、参加者は、プラセボ用ローションと比較
して試験用ローションが発毛を減衰させ、足毛の触感が
柔らかになったと感じたことを示した。参加者は毛の粗
さが少なくなり、無精的なものが少なくなったことを感
じた。参加者の大多数は、試験用ローションが足毛の発
毛を減衰させるか、又毛の手触りを変えてはより滑らか
に、かつ粗さが少なくなったことを感じさせるものと確
信した。ハイスコープ分析は、さらに豆乳エッセンス2
3又は30による処理後の毛の再生が同一方向へ成長す
るように見え、また形状、手触り、及び外観がより一層
均一である。それとは異なり、プラセボ処理した足で再
生した毛は異なる方向に成長し、長さ、成長の角度、及
び太さが異なる。
一層柔らかく、より一層粗さが少なく、またさらに整髪
が容易で、かつ所定の方向に配向した毛を可能とする豆
乳配合物の効果を明確に示すものである。
ある。 (1)抽出物が少なくとも一種類のセリンプロテアーゼ
阻害活性を有する請求項1に記載の方法。 (2)少なくとも一種類のセリンプロテアーゼ阻害活性
剤がセリンプロテアーゼ阻害剤である実施態様(1)に
記載の方法。 (3)少なくとも一種類のセリンプロテアーゼ阻害剤
は、局所活性組成物の全容量を基準にして、約0.00
01%(w/v)乃至20%(w/v)の量で存在する
実施態様(2)に記載の方法。 (4)少なくとも一種類のセリンプロテアーゼ阻害剤
は、局所活性組成物の全容量を基準にして、約0.00
1%(w/v)乃至約5%(w/v)の量で存在する実
施態様(3)に記載の方法。 (5)変化の一つが発毛の遅れ、毛包及び毛茎寸法の減
少、及び毛色素沈着の減少である請求項1に記載の方
法。
は化粧品用として許容される担体を含む請求項1に記載
の方法。 (7)局所活性組成物は、さらに1種類以上のイソフラ
ボンを含む請求項1に記載の方法。 (8)局所活性組成物は、さらに医薬用又は化粧品用と
して許容される担体を含む実施態様(7)に記載の方
法。 (9)局所活性組成物は、さらに1種類以上のイソフラ
ボンを含む天然抽出物を含む請求項1に記載の方法。 (10)組成物は、脱毛を促進又は実際に脱毛するか、
又は毛の視認性を減少させるか、又は毛髪型を改善する
か、又は毛の管理を改善するかのいずれかを目的とする
1種類以上の製品と共に局所的に適用される請求項1に
記載の方法。
毛後に局所的に適用される請求項1に記載の方法。 (12)組成物は脱毛中に局所的に適用される請求項1
に記載の方法。 (13)組成物は、脱毛剤、シャンプー、ヘアコンディ
ショナー、スタイリング用ジェル、ヘアケア製品、脱毛
用ワックス製品、シェービング製品、除毛用製品、アフ
タシェービング製品、消臭剤、抗発汗剤、電気分解、レ
ーザ脱毛、光誘導脱毛、マスク又は入浴添加剤からなる
群の一種類以上の添加剤と共に局所的に適用される請求
項1に記載の方法。 (14)さらに、変化をもたらすのに十分な時間にわた
って皮膚上の組成物をそのままにしておくことが含まれ
る請求項1に記載の方法。 (15)期間が少なくとも約4週間にわたって毎日処理
することである請求項1に記載の方法。
って毎日適用される実施態様(15)に記載の方法。 (17)偽鬚髯毛嚢炎を軽減又は予防するために、組成
物が毎日適用される請求項1に記載の方法。 (18)発毛を減少させるために、組成物が腋窩領域に
毎日適用される請求項1に記載の方法。 (19)アフリカ型の毛を整え、かつ該アフリカ型の毛
を管理するために、組成物が頭皮に毎日適用される請求
項1に記載の方法。 (20)組成物が浴槽に毎日加えられる請求項1に記載
の方法。
者において毛の視認性を減少させるために、顔面又は身
体部分に組成物を毎日使用する請求項1に記載の方法。 (22)抽出物が少なくとも1種類のセリンプロテアー
ゼ阻害活性を有する請求項2に記載の組成物。 (23)少なくとも一種類のセリンプロテアーゼ阻害剤
は、局所活性組成物の全容量を基準にして、約0.00
01%(w/v)乃至約20%(w/v)の量で存在す
る実施態様(22)に記載の組成物。 (24)少なくとも一種類のセリンプロテアーゼ阻害剤
は、局所活性組成物の全容量を基準にして、約0.00
1%(w/v)乃至約5%(w/v)の量で存在する実
施態様(23)に記載の組成物。 (25)組成物は、さらに1種類以上のイソフラボンを
含む請求項2に記載の組成物。
ソフラボンを含む1種類以上の天然抽出物を含む請求項
2に記載の組成物。 (27)組成物は、さらに界面活性剤、保湿剤、保水
剤、発泡剤、化粧品用アジュバンド、緩衝剤、防腐剤、
抗酸化剤、コンディショニング剤、脱色剤、脱毛剤、抗
熟成剤、サンスクリーン剤、芳香剤、着色剤、又はそれ
らの組み合わせを含む請求項2に記載の組成物。 (28)組成物は、液体、クリーム、ゲル、ペースト、
粉末、エッセンス、ムース、エマルジョン、フィルムパ
ッチ又はスプレイの形状をしている請求項2に記載の組
成物。 (29)組成物は、脱毛を促進又は実際に脱毛するか、
又は毛の視認性を減少させるか、又は毛髪型を改善する
か、又は毛の管理を改善するかのいずれかを目的とする
1種類以上の製品と共に局所的に適用される請求項2に
記載の組成物。 (30)組成物は、脱毛クリーム、シャンプー、ヘアコ
ンディショナー、スタイリング用ジェル、ヘアケア製
品、脱毛用ワックス製品、シェービング製品、除毛用製
品、アフタシェービング製品、消臭剤、抗発汗剤、電気
分解前又は後用製品、レーザ脱毛前又は後用製品、光誘
導脱毛前又は後用製品、マスク又は入浴添加剤からなる
群の一種類以上の添加剤をさらに含む請求項2に記載の
組成物。
ある請求項2に記載の組成物。 (32)化合物が大豆、アオマメ及び/又は黒豆由来で
ある実施態様(31)に記載の組成物。 (33)化合物は、豆乳、アオマメ乳、黒豆乳、大豆抽
出物、アオマメ抽出物、黒豆抽出物、大豆ペースト、ア
オマメペースト、黒豆ペースト、大豆粉末、黒豆粉末、
アオマメ粉末、豆乳粉末、黒豆乳粉末、及びアオマメ乳
粉末、及びそれらの混合物からなる群から選択される実
施態様(32)に記載の組成物。 (34)豆乳、大豆抽出物、大豆ペースト、アオマメ
乳、アオマメ抽出物、アオマメペースト、黒豆乳、黒豆
抽出物、黒豆ペースト、大豆粉末、黒豆粉末、アオマメ
粉末、豆乳粉末、黒豆乳粉末、アオマメ乳粉末、及びそ
れらの混合物の一分画である実施態様(33)に記載の
組成物。 (35)豆乳が約1重量%乃至約99重量%の量で含ま
れる実施態様(33)に記載の組成物。
混合物が約1重量%乃至約99重量%の量で含まれる実
施態様(33)に記載の組成物。 (37)大豆トリプシン阻害剤、アオマメトリプシン阻
害剤、又は黒豆トリプシン阻害剤が約0.0001重量
%乃至約20重量%の量で含まれる実施態様(34)に
記載の組成物。 (38)組成物が1種類以上のイソフラボンを含む実施
態様(31)に記載の組成物。 (39)組成物は、さらに1種類以上のイソフラボンを
含む1種類以上の天然抽出物を含む実施態様(31)に
記載の組成物。 (40)1種類以上のイソフラボンが約0.00001
重量%乃至約0.1重量%の量で組成物中に存在する実
施態様(38)に記載の組成物。
1種類以上の天然抽出物が約0.00001重量%乃至
約0.1重量%の量で組成物中に存在する実施態様(3
9)に記載の組成物。 (42)組成物が化粧品用として許容される担体をさら
に含む請求項2に記載 の化粧品組成物。 (43)組成物がさらにリポソームを含む請求項2に記
載の組成物。 (44)組成物は、グリセロールジラウレート、コレス
テロール、ポリオキシエチレン−10−ステアリルエー
テル、及びポリオキシエチレン−9−ラウリルエーテル
を含む実施態様(43)に記載の組成物。 (45)組成物は、約1%乃至約99%の豆乳と、約
0.1%乃至約20%の乳化剤と、有効量からなる防腐
剤とを含む請求項2に記載の組成物。
%の大豆粉末又は豆乳粉末と、約0.1%乃至約20%
の乳化剤と、有効量からなる防腐剤とを含む請求項2に
記載の組成物。 (47)組成物は、約0.00001%乃至約0.1%
の量で1種類以上のイソフラボンをさらに含む実施態様
(45)に記載の組成物。 (48)組成物は、約0.0001%乃至約0.1%の
量で1種類以上のイソフラボンが含まれる1種類以上の
天然抽出物をさらに含む実施態様(45)に記載の組成
物。 (49)組成物は、約0.0001%乃至約0.1%の
量で1種類以上のイソフラボンをさらに含む請求項2に
記載の組成物。 (50)組成物は、約0.0005%乃至約0.05%
の量で1種類以上のイソフラボンが含まれる1種類以上
の天然抽出物をさらに含む実施態様(46)に記載の組
成物。
毛の写真(高倍率)である。
l/6マウスの毛包の組織学的切片である。
l/6マウスの毛包の高倍率及び低倍率の組織学的切片
である。
Bl/6マウスの毛包の組織学的切片である。
Bl/6マウスの毛包の組織学的切片である。
パク質処理したC3Hマウスの毛包の組織学的切片(高
倍率)である。
パク質処理したC3Hマウスの毛包の組織学的切片(低
倍率)である。
マウスの毛包の組織学的切片である。
ウスの毛の写真(高倍率)である。
処理したC57Bl/6マウスの毛包の組織学的切片で
ある。
る。
膚のウェスタンブロットであり、豆乳処理後のチロシナ
ーゼ及びTRP−1タンパク質濃度が減少したことを示
している。
の豆乳処理側及び豆乳未処理側の写真である。
とにおける毛包寸法の定量分析である。
の足の毛の写真である。
理したC57Bl/6マウスの毛の写真(高倍率)であ
る。
ボン強化豆乳で処理したC57Bl/6マウスの皮膚の
組織学的切片であり、毛茎の太さ及び色が示されてい
る。
理を3週間行った後のC57Bl/6マウスの毛の写真
である。
Claims (2)
- 【請求項1】 哺乳動物の毛の外観、発毛、毛色素沈
着、及び毛包及び毛茎の寸法に変化を生じさせる方法で
あって、哺乳動物の皮膚に対して、植物のマメ科、ナス
科、イネ科、及びウリ科の1種類以上に由来する1種類
以上の化合物を含む有効量の局所活性組成物を局所適用
することを特徴とする方法。 - 【請求項2】 哺乳動物の発毛、毛色素沈着、及び毛包
及び毛茎の寸法の変化に影響を及ぼす組成物であって、
哺乳動物の皮膚に対して有効量が局所適用される、植物
のマメ科、ナス科、イネ科、及びウリ科の1種類以上に
由来する1種類以上の化合物を含む局所活性組成物。
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