EA030863B1 - Композиции для усиления иммунного ответа на антиген, содержащие синтетические наноносители, и их применения - Google Patents

Композиции для усиления иммунного ответа на антиген, содержащие синтетические наноносители, и их применения Download PDF

Info

Publication number
EA030863B1
EA030863B1 EA201291156A EA201291156A EA030863B1 EA 030863 B1 EA030863 B1 EA 030863B1 EA 201291156 A EA201291156 A EA 201291156A EA 201291156 A EA201291156 A EA 201291156A EA 030863 B1 EA030863 B1 EA 030863B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
adjuvant
carriers
antigen
composition according
nano
Prior art date
Application number
EA201291156A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201291156A1 (ru
Inventor
Роберт Л. Братцлер
Ллойд Джонстон
Грэйсон Б. Липфорд
Чарльз Зепп
Original Assignee
Селекта Байосайенсиз, Инк
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Селекта Байосайенсиз, Инк filed Critical Селекта Байосайенсиз, Инк
Publication of EA201291156A1 publication Critical patent/EA201291156A1/ru
Publication of EA030863B1 publication Critical patent/EA030863B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/7115—Nucleic acids or oligonucleotides having modified bases, i.e. other than adenine, guanine, cytosine, uracil or thymine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/06—Aluminium, calcium or magnesium; Compounds thereof, e.g. clay
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0013—Therapeutic immunisation against small organic molecules, e.g. cocaine, nicotine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/35—Allergens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/385—Haptens or antigens, bound to carriers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/58—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. poly[meth]acrylate, polyacrylamide, polystyrene, polyvinylpyrrolidone, polyvinylalcohol or polystyrene sulfonic acid resin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/593—Polyesters, e.g. PLGA or polylactide-co-glycolide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/646—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent the entire peptide or protein drug conjugate elicits an immune response, e.g. conjugate vaccines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6921—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6921—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere
    • A61K47/6927—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores
    • A61K47/6929—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6921—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere
    • A61K47/6927—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores
    • A61K47/6929—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle
    • A61K47/6931—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
    • A61K9/5146—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyamines, polyanhydrides
    • A61K9/5153—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/08—Bronchodilators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A61P25/34—Tobacco-abuse
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A61P25/36—Opioid-abuse
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/02—Antidotes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A61K2039/541—Mucosal route
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A61K2039/541—Mucosal route
    • A61K2039/542—Mucosal route oral/gastrointestinal
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A61K2039/541—Mucosal route
    • A61K2039/543—Mucosal route intranasal
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55522—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55561—CpG containing adjuvants; Oligonucleotide containing adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6087—Polysaccharides; Lipopolysaccharides [LPS]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6093—Synthetic polymers, e.g. polyethyleneglycol [PEG], Polymers or copolymers of (D) glutamate and (D) lysine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
    • C12N2730/00011—Details
    • C12N2730/10011—Hepadnaviridae
    • C12N2730/10111—Orthohepadnavirus, e.g. hepatitis B virus
    • C12N2730/10134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Addiction (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)

Abstract

В изобретении представлены композиции, содержащие синтетические наноносители, для усиления иммунного ответа, а также применения композиций.

Description

Настоящее изобретение относится к композициям синтетического наноносителя и отдельного адъюванта, а также связанным с ними способам, таким как лечение заболеваний, при которых желательна выработка иммунного ответа.
Предпосылки изобретения
Адъюванты, как правило, представляют собой важные компоненты для большинства из применяемых в настоящее время режимов вакцинации. Оптимальный подход для усиления иммунного ответа с помощью адъюванта, однако, в целом ряде случаев пока неизвестен. Следовательно, для обеспечения улучшенных терапий заболеваний, при которых желательны выработка иммунного ответа и/или его усиление, необходимы улучшенные композиции и терапевтические способы.
Краткое описание изобретения
В одном аспекте обеспечивается композиция, включающая лекарственную форму, которая содержит (1) популяцию синтетических наноносителей, (2) первый адъювант, который не присоединяют к каким-либо синтетическим наноносителям, и (3) фармацевтически приемлемый наполнитель. В другом аспекте обеспечивается способ, включающий введение композиции субъекту.
В одном варианте осуществления обеспеченные в данном документе композиции, включая таковые из обеспеченных способов, содержат системную дозу первого адъюванта. В другом варианте осуществления указанные композиции дополнительно содержат второй адъювант. В очередном варианте осуществления первый адъювант и второй адъювант отличаются. В еще одном варианте осуществления первый адъювант и второй адъювант одинаковые. В очередном варианте осуществления обеспеченные в данном документе композиции, включая таковые из обеспеченных способов, содержат системную дозу первого адъюванта и/или второй адъювант. В одном варианте осуществления системная доза приводит к системному высвобождению TNF-α, IL-6 и/или IL-12. В другом варианте осуществления системная доза приводит к системному высвобождению IFN-γ, IL-12 и/или IL-18.
В одном варианте осуществления второй адъювант обеспеченных композиций, включая таковые из обеспеченных способов, присоединяют к синтетическим наноносителям. В другом варианте осуществления второй адъювант не присоединяют к каким-либо синтетическим наноносителям. В еще одном варианте осуществления второй адъювант присоединяют к другой популяции синтетических наноносителей.
В другом варианте осуществления обеспеченные в данном документе композиции, включая таковые из обеспеченных способов, содержат один или несколько антигенов. В дополнительном варианте осуществления один или несколько антигенов присоединяют к синтетическим наноносителям. В еще дополнительном варианте осуществления один или несколько антигенов присоединяют к другой популяции синтетических наноносителей. В другом варианте осуществления один или несколько антигенов не присоединяют к каким-либо синтетическим наноносителям.
В одном варианте осуществления один или несколько антигенов из обеспеченных композиций, включая таковые из обеспеченных способов, включают антиген для В-клетки и/или антиген для Тклетки. В другом варианте осуществления антиген для Т-клетки является универсальным антигеном для Т-клетки или антигеном для Т-хелперной клетки. В дополнительном варианте осуществления один или несколько антигенов включают антиген для В-клетки и/или антиген для Т-клетки и универсальный антиген для Т-клетки или антиген для Т-хелперной клетки. В одном варианте осуществления антиген для Вклетки является никотином. В еще одном варианте осуществления обеспеченные композиции, включая таковые из обеспеченных способов, не содержат антиген.
В одном варианте осуществления обеспеченных композиций, включая таковые из обеспеченных способов, первый адъювант и/или второй адъювант включает минеральную соль, адъювант типа гель, микробный адъювант, масляно-эмульсионный адъювант или адъювант на основе эмульгатора, корпускулярный адъювант, синтетический адъювант, фосфатный адъювант, полимер, липосому, микроноситель, иммуностимулирующую нуклеиновую кислоту, квасцы, сапонин, интерлейкин, интерферон, цитокин, агонист toll-подобного рецептора (TLR), имидазохинолин, агонист цитокинового рецептора, агонист CD40, агонист Fc-рецептора, агонист рецептора комплемента, QS21, витамин Е, сквален, токоферол, Quil A, ISCOM, ISCOMATRIX, Ribi Detox, CRL-1005, L-121, тетрахлордекаоксид, квасцы, MF59, AS02, AS15, холерный токсин, монофосфориллипид А, неполный адъювант Фрейнда, полный адъювант Фрейнда, мурамилдипептид или монтанид. В одном варианте осуществления иммуностимулирующая нуклеиновая кислота включает CpG-содержащую нуклеиновую кислоту. В другом варианте осуществления имидазохинолин включает резиквимод или имиквимод. В очередном варианте осуществления первый и/или второй адъювант включают квасцы. В одном варианте осуществления, если первый адъювант включает CpG-содержащую нуклеиновую кислоту, второй адъювант включает имидазохинолин или квасцы. В
- 1 030863 другом варианте осуществления имидазохинолин является резиквимодом. В очередном варианте осуществления, если первый адъювант включает имидазохинолин, второй адъювант включает CpGсодержащую нуклеиновую кислоту или квасцы. В дополнительном варианте осуществления имидазохинолин является резиквимодом. В одном варианте осуществления, если первый адъювант включает квасцы, второй адъювант включает имидазохинолин или CpG-содержащую нуклеиновую кислоту. В другом варианте осуществления имидазохинолин является резиквимодом. В дополнительном варианте осуществления агонист TLR включает агонист TLR-1, TLR-2, TLR-3, TLR-4, TLR-5, TLR-6, TLR-7, TLR-8, TLR9, TLR-10, TLR-11 или их комбинацию. В другом варианте осуществления первый адъювант и/или второй адъювант не включают агонист TLR. В еще одном варианте осуществления первый адъювант и/или второй адъювант не включают агонист TLR-3, TLR-7, TLR-8 или TLR-9. В одном варианте осуществления второй адъювант присоединяют к синтетическим наноносителям, и он включает резиквимод.
В одном варианте осуществления синтетические наноносители из обеспеченных в данном документе композиции, включая таковые из обеспеченных способов, включают липидные наночастицы, полимерные наночастицы, металлические наночастицы, эмульсии на основе поверхностно-активного вещества, дендримеры, бакиболы, нанопроволоки, вирусоподобные частицы, пептидные или белковые частицы, наночастицы, которые содержат комбинацию из наноматериалов, сфероидальные наночастицы, кубоидальные наночастицы, пирамидальные наночастицы, продолговатые наночастицы, цилиндрические наночастицы или тороидальные наночастицы.
В одном варианте осуществления синтетические наноносители включают один или несколько полимеров. В другом варианте осуществления один или несколько полимеров включают сложный полиэфир. В еще одном варианте осуществления один или несколько полимеров включают или дополнительно включают сложный полиэфир, присоединенный к гидрофильному полимеру. В дополнительном варианте осуществления сложный полиэфир включает поли(молочную кислоту), поли(гликолевую кислоту), сополимер молочной и гликолевой кислоты или поликапролактон. В очередном дополнительном варианте осуществления гидрофильный полимер включает простой полиэфир. В другом варианте осуществления простой полиэфир включает полиэтиленгликоль.
В другом варианте осуществления один или несколько антигенов из обеспеченных в данном документе композиций, включая таковые из обеспеченных способов, включают никотин и универсальный антиген для Т-клетки или антиген для Т-хелперной клетки, каждый из которых присоединяют к синтетическим наноносителям.
В дополнительном варианте осуществления универсальный антиген для Т-клетки или антиген для Т-хелперной клетки из обеспеченных в данном документе композиций, включая таковые из обеспеченных способов, присоединяют посредством инкапсуляции. В очередном варианте осуществления антиген для Т-хелперной клетки включает пептид, который получен или происходит от овальбумина. В дополнительном варианте осуществления пептид, который получен или происходит от овальбумина, включает последовательность, установленную в SEQ ID NO: 1.
В другом аспекте обеспечивается способ, включающий введение любой из обеспеченных в данном документе композиций субъекту. В одном варианте осуществления субъект является человеком.
В дополнительном аспекте обеспечивается способ, включающий введение любой из обеспеченных композиций и второго адъюванта субъекту, где второй адъювант вводят во время, отличное от введения композиции. В одном варианте осуществления субъект является человеком. В другом варианте осуществления композицию и второй адъювант вводят совместно. В еще одном варианте осуществления композицию и второй адъювант не вводят совместно. В очередном варианте осуществления второй адъювант вводят до композиции.
В одном варианте осуществления любой из обеспеченных способов дополнительно включает введение одного или нескольких антигенов. В другом варианте осуществления любая из обеспеченных композиций, включая таковые из обеспеченных способов, дополнительно содержит один или несколько антигенов. В одном варианте осуществления один или несколько антигенов вводят совместно.
В одном варианте осуществления субъект любого из обеспеченных способов, или которому вводят любую из обеспеченных композиций, нуждается в воспалительном ответе. В другом варианте осуществления субъект нуждается в Th1-иммунном ответе. В еще одном варианте осуществления субъект нуждается в гуморальном иммунном ответе. В очередном варианте осуществления субъект нуждается в специфичном местном ответе с цитотоксическими Т-лимфоцитами. В дополнительном варианте осуществления у субъекта есть или он подвергается риску возникновения рака. В очередном дополнительном варианте осуществления у субъекта есть или он подвергается риску возникновения инфекции или инфекционного заболевания. В еще дополнительном варианте осуществления у субъекта есть или он подвергается риску возникновения атопического состояния, астмы, COPD или хронической инфекции.
В одном варианте осуществления любая из композиций может служить для применения в терапии или профилактике. В другом варианте осуществления любая из композиций может служить для применения в любом из обеспеченных методов. В еще одном варианте осуществления любая из композиций может служить для применения в способе индуцирования воспалительного ответа у субъекта. В очередном варианте осуществления любая из композиций может служить для применения в способе индуциро
- 2 030863 вания Thl-иммунного ответа у субъекта. В еще одном варианте осуществления любая из композиций может служить для применения в способе индуцирования гуморального иммунного ответа у субъекта. В дополнительном варианте осуществления любая из композиций может служить для применения в способе индуцирования специфичного местного ответа с цитотоксическими Т-лимфоцитами у субъекта. В очередном дополнительном варианте осуществления любая из композиций может служить для применения в способе лечения или предупреждения рака. В еще дополнительном варианте осуществления любая из композиций может служить для применения в способе лечения или предупреждения инфекции или инфекционного заболевания. В другом варианте осуществления любая из композиций может служить для применения в способе лечения или предупреждения атопического состояния, астмы, COPD или хронической инфекции.
В другом аспекте в данном документе обеспечивается применение любой из обеспеченных композиций для производства лекарства для применения в любом из обеспеченных методов.
Краткое описание фигур
На фиг. 1 показана системная продукция цитокинов у мышей после инокуляции наноносителя (NC). На фиг. 1А, 1В и 1С показана продукция TNF-α, IL-6 и IL-12 в экспериментальных группах соответственно. Сыворотки от групп из трех мышей объединяли и анализировали с помощью ELISA.
На фиг. 2 демонстрируется системная продукция IFN-γ у мышей после инокуляции NC. Сыворотки от групп из трех мышей объединяли и анализировали с помощью ELISA.
На фиг. 3 демонстрируется, что использование NC с захваченным внутри R848, вырабатывает иммунный ответ, который превосходит ответ, индуцированный NC без R848.
На фиг. 4 показаны титры антитела к никотину у мышей, иммунизированных NC, содержащим поверхностный никотин и произошедший от овальбумина пептид для Т-хелпера OP-II (NC-Nic) без адъюванта, или таким же NC-Nic, смешанным с 20 мкг свободного R848 (5 животных/группа; п.к., 100 мкг NC на инъекцию, 3 раза с 4-недельными интервалами). Показаны титры в дни 26 и 40 после первой иммунизации (ELISA к полилизин-никотину) (группа 1: иммунизированы NC [Nic, 0 (т.е. без адъюванта), OP-II] (2,2% OP-II); группа 2: иммунизированы NC [Nic, 0, OP-II], смешанным с 20 мкг свободного R848).
На фиг. 5 показаны титры антитела к никотину у мышей, иммунизированных NC, содержащим поверхностный никотин и произошедший от овальбумина пептид для Т-хелпера OP-II, (NC-Nic) с адъювантом R848 или таким же NC-Nic, смешанным с 80 мкг свободных квасцов или 25 мкг свободного CpG1826 (5 животных/группа; п.к., 100 мкг NC на инъекцию, 3 раза с 4-недельными интервалами) . Показаны титры в дни 26 и 40 после первой иммунизации (ELISA к полилизин-никотину) (все группы: иммунизированы NC [Nic, R848, OP-II]; группа 2: NC, смешанным с 80 мкг свободных квасцов; группа 3: смешанным с 25 мкг свободной CpG-1826).
На фиг. 6 показаны титры антитела к никотину у мышей, иммунизированных NC, содержащим поверхностный никотин, R848 и произошедший от овальбумина пептид для Т-хелпера OP-II, NC[Nic, R848, OP-II], или таким же NC-Nic, смешанным с 80 мкг свободных квасцов (5 животных/группа; п.к., 100 мкг NC на инъекцию, 3 раза с 4-недельными интервалами). Показаны титры в дни 40 и 70 после первой иммунизации (ELISA к полилизин-никотину) (группа 1: иммунизированы NC [Nic, R848, OP-II] (3,1% R848, 1,5% OP-II); группа 2: иммунизированы NC [Nic, R848, OP-II], смешанным с 80 мкг свободных квасцов).
На фиг. 7 показан специфичный местный CTL-ответ у мышей, иммунизированных NC, содержащим овальбумин, или свободным овальбумином. Мышей иммунизировали однократно (п.к., 100 мкг NC, содержащего 2,8% OVA, или 2,5 мкг OVA; оба иммуногена смешивали с 10 мкг свободного 1826-CpG).
На фиг. 8 показаны титры антитела к никотину у мышей, иммунизированных NC, содержащим поверхностный никотин и произошедший от овальбумина пептид для Т-хелпера OP-II (NC-Nic) (без адъюванта внутри NC) , смешанного с 20 мкг свободного CpG (PS) или 20 мкг свободного CpG (PO) (5 животных/группа; п.к., 100 мкг NC на инъекцию, 3 раза с 2-недельными интервалами). Контрольные мыши получали исключительно PBS. Показаны титры в дни 26 и 40 (ELISA к полилизин-никотину) (группа 1: иммунизированы NC-Nic (без адъюванта)+свободный CpG (PS); группа 2: иммунизированы NC-Nic (без адъюванта)+свободный CpG (РО); группа 3: иммунизированы только PBS).
На фиг. 9 показаны титры антитела к овальбумину (OVA) у мышей, иммунизированных NC, содержащим поверхностный OVA (NC-OVA) (без адъюванта внутри NC) , смешанным с 20 мкг свободного R848 или CpG (PS) (5 животных/группа; п. к., 100 мкг NC на инъекцию, 3 раза с 2-недельными интервалами). Контрольных мышей иммунизировали 2,5 мкг растворимого OVA, смешанного с 20 мкг CpG (PS). Показаны титры в дни 26 и 44 (ELISA к белку OVA) (группа 1: иммунизированы NC-OVA (без адъюванта)+свободный R848; группа 2: иммунизированы NC-OVA (без адъюванта)+свободный CpG (PS) ; группа 3: иммунизированы растворимым OVA+CpG (PS)).
На фиг. 10 показаны титры антитела к никотину у мышей, инъецированных CpG (20 мкг на инъекцию, 2 раза с 2-недельными интервалами), с последующей иммунизацией в день 35 NC, содержащим поверхностный никотин и произошедший от овальбумина пептид для Т-хелпера OP-II (NC-Nic) или с или без R848, содержащегося в NC (5 животных/группа; п.к., 100 мкг NC на инъекцию, 2 раза с 2недельными интервалами). Показаны титры в дни 12, 26 и 40 после иммунизации NC (ELISA к полили
- 3 030863 зин-никотину) (группа 1: иммунизированы CpG с последующим NC-Nic (R848+OP-II); группа 2: иммунизированы CpG с последующим NC-Nic (только OP-II)).
Подробное описание изобретения
Перед тем как описывать настоящее изобретение в деталях, следует понимать, что настоящее изобретение не ограничивается, в частности, иллюстрируемыми материалами или параметрами процесса, так как таковые могут, конечно, варьировать. Также подразумевается, что терминология, применяемая в данном документе, служит только для цели описания конкретных вариантов осуществления настоящего изобретения и не предназначается для ограничения применения альтернативной терминологии для описания настоящего изобретения.
Все публикации, патенты и патентные заявки, цитируемые в данном документе, как выше, так и ниже, настоящим включаются посредством ссылки в своем полном объеме для всех целей.
Используемые в настоящем описании и прилагаемой формуле изобретения формы единственного числа включают ссылки на множественное число, кроме тех случаев, когда содержание явно предписывает иное. Например, ссылка на полимер включает смесь из двух или более таких молекул, ссылка на растворитель включает смесь из двух или более таких растворителей, ссылка на адгезив включает смеси из двух или более таких материалов и т.п.
Введение.
Авторы изобретения непредвиденно и неожиданно обнаружили, что проблемы и ограничения, приведенные выше, можно преодолеть, применяя на практике настоящее изобретение, раскрытое в данном документе. Авторы изобретения непредвиденно и неожиданно обнаружили, что введение популяции синтетических наноносителей и адъюванта, который не присоединяют к какому-либо из синтетических наноносителей, обеспечивает более сильные и более быстрые иммунные ответы. В частности, авторы изобретения непредвиденно обнаружили, что возможно обеспечить композиции и способы, связанные с композициями, включающими лекарственную форму, которая содержит: (1) популяцию синтетических наноносителей, (2) первый адъювант, который не присоединен к каким-либо синтетическим наноносителям, и (3) фармацевтически приемлемый наполнитель.
В вариантах осуществления введение адъюванта отдельно от синтетических наноносителей приводит к быстрой и сильной системной индукции провоспалительных цитокинов, таких как TNF-α, IL-6 и/или IL-12. Доза адъюванта или адъювантов в композициях в некоторых вариантах осуществления, следовательно, представляет собой системную дозу. В вариантах осуществления системная доза приводит к высвобождению TNF-α, IL-6 или IL-12. В других вариантах осуществления системная доза приводит к системному высвобождению TNF-α, IL-6 и IL-12. Так как подобные цитокины являются провоспалительными, введение обеспеченных в данном документе композиций может иметь преимущество в отношении субъектов, когда желателен воспалительный ответ. В некоторых вариантах осуществления, следовательно, обеспеченные композиции вводят подобным субъектам. В вариантах осуществления у подобных субъектов есть или они подвергаются риску возникновения рака. В других вариантах осуществления у подобных субъектов есть или они подвергаются риску возникновения инфекции или инфекционного заболевания. Также обеспечиваются способы введения композиций подобным субъектам.
В других вариантах осуществления введение адъюванта отдельно от синтетических наноносителей приводит к быстрой и сильной системной индукции цитокинов, которые важны для Th1-иммунного ответа, таких как IFN-γ, IL-12 и/или IL-18. Следовательно, доза адъюванта или адъювантов в композициях в некоторых вариантах осуществления является системной дозой, которая приводит к системному высвобождению IFN-γ, IL-12 и/или IL-18. Так как подобные цитокины важны для Th1-иммунного ответа, введение обеспеченных в данном документе композиций может иметь преимущество в отношении субъектов, если желателен Thl-иммунный ответ. В некоторых вариантах осуществления обеспеченные композиции вводят подобным субъектам. В вариантах осуществления у подобных субъектов есть или они подвергаются риску возникновения атопического состояния, астмы, хронического обструктивного заболевания легких (COPD) или хронической инфекции. Также обеспечиваются способы введения композиций подобным субъектам.
Авторы изобретения также непредвиденно обнаружили, что возможно вводить второй адъювант с вышеуказанными композициями для обеспечения сильного гуморального ответа. Вышеуказанные композиции, следовательно, могут дополнительно содержать второй адъювант. В некоторых вариантах осуществления второй адъювант присоединяют к синтетическим наноносителям. В других вариантах осуществления второй адъювант не присоединяют к каким-либо синтетическим наноносителям. В очередных вариантах осуществления второй адъювант присоединяют к другой популяции синтетических наноносителей. В некоторых вариантах осуществления, однако, второй адъювант вводят субъекту во время, отличное от того, когда вводят композицию, которая содержит популяцию синтетических наноносителей и первый адъювант, который не присоединяют к каким-либо синтетическим наноносителям. В некоторых вариантах осуществления второй адъювант вводят в отличающееся время, но вводят совместно. В других вариантах осуществления второй адъювант не вводят совместно. В очередных вариантах осуществления второй адъювант вводят до или после введения композиции, которая содержит популяцию син
- 4 030863 тетических наноносителей и первый адъювант, который не присоединяют к каким-либо синтетическим наноносителям. В некоторых вариантах осуществления второй адъювант также не присоединяют к каким-либо синтетическим наноносителям. В других вариантах осуществления второй адъювант присоединяют к другой популяции синтетических наноносителей. Обеспеченные в данном документе композиции, следовательно, могут иметь преимущество в отношении субъектов, если желателен гуморальный иммунный ответ. В некоторых вариантах осуществления обеспеченные композиции вводят подобным субъектам. В вариантах осуществления у подобных субъектов есть или они подвергаются риску возникновения рака, инфекции или инфекционного заболевания. Также обеспечиваются способы введения композиций подобным субъектам.
В дополнительных вариантах осуществления демонстрируется, что введение одного или нескольких антигенов с обеспеченными выше композициями обеспечивает сильный специфичный местный ответ с цитотоксическими Т-лимфоцитами (CTL). В вариантах осуществления антиген(ы) вводят совместно с обеспеченными композициями. В некоторых вариантах осуществления антиген(ы) присоединяют к синтетическим наноносителям. В других вариантах осуществления антиген(ы) не присоединяют к этим синтетическим наноносителям, а к другой популяции синтетических наноносителей. Антиген(ы) могут включать антиген для В-клетки или антиген для Т-клетки. В некоторых вариантах осуществления антиген для Т-клетки является антигеном для Т-хелперной клетки. В других вариантах осуществления антиген(ы) включает антиген для В-клетки или антиген для Т-клетки, а также антиген для Т-хелперной клетки. Следовательно, обеспеченные композиции могут иметь преимущество в отношении субъектов, если желателен специфичный местный CTL-ответ. В некоторых вариантах осуществления обеспеченные композиции вводят подобным субъектам. Также обеспечиваются способы введения композиций подобным субъектам.
Настоящее изобретение теперь будет описываться более детально.
Определения.
Адъювант означает средство, которое не представляет собой специфичный антиген, но повышает силу и продолжительность иммунного ответа к сопутствующе введенному антигену. Такие адъюванты могут включать без ограничений стимуляторы образраспознающих рецепторов, таких как Toll-подобные рецепторы, RIG-1 и NOD-подобные рецепторы (NLR), минеральные соли, такие как квасцы, квасцы, комбинированные с монофосфориллипидом (MPL) А энтеробактерий, таких как Escherihia coli, Salmonella minnesota, Salmonella typhimurium или Shigella flexneri, или, в частности, с MPL® (AS04), MPL А вышеупомянутых бактерий отдельно, сапонины, такие как QS-21,Quil-A, ISCOM, ISCOMATRIX™, эмульсии, такие как MF59™, Montanide® ISA 51 и ISA 720, AS02 (QS21+сквален+MPL®), AS15, липосомы и липосомальные составы, такие как AS01, синтезированные или специфически полученные микрочастицы и микроносители, такие как пузырьки наружной мембраны бактериального происхождения (OMV) от N. gonorrheae, Chlamydia trachomatis и других, или частицы хитозана, депообразующие средства, такие как блок-сополимеры от Pluronic®, специфически модифицированные или полученные пептиды, такие как мурамилдипептид, аминоалкилглюкозаминид-4-фосфаты, такие как RC529, или белки, такие как бактериальные анатоксины или фрагменты токсинов.
В вариантах осуществления адъюванты включают агонисты образраспознающих рецепторов (PRR), в том числе без ограничения Toll-подобных рецепторов (TLR), а именно TLR 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9 и/или их комбинаций. В других вариантах осуществления адъюванты включают агонисты Toll-подобных рецепторов 3, агонисты Toll-подобных рецепторов 7 и 8 или агонисты Toll-подобного рецептора 9; предпочтительно перечисленные адъюванты включают имидазохинолины, такие как R848; производные аденина, такие как раскрытые в патенте США № 6329381 (Sumitomo Pharmaceutical Company), опубликованной патентной заявке США 2010/0075995, Biggadike et al. или WO 2010/018132, Campos et al.; иммуностимулирующую ДНК или иммуностимулирующую РНК. В особых вариантах осуществления синтетические наноносители включают в качестве адъювантов соединения, которые являются агонистами toll-подобных рецепторов (TLR) 7 и 8 (агонисты TLR 7/8). Среди общепринятых соединения-агонисты TLR 7/8, раскрытые в патенте США № 6696076, Tomai et al., в том числе без ограничений имидазохинолинамины, имидазопиридинамины, 6,7-конденсированные циклоалкилимидазопиридинамины и имидазохинолинамины с мостиковыми связями в положении 1 и 2. Предпочтительные адъюванты включают имиквимод и резиквимод (также известный как R848). В особых вариантах осуществления адъювант может являться агонистом поверхностной молекулы DC CD40. В определенных вариантах осуществления для стимулирования иммунитета, а не устойчивости, синтетический наноноситель включает адъювант, который содействует созреванию DC (необходимо для примирования наивных Т-клеток) и продукции цитокинов, таких как интерфероны I типа, которые содействуют иммунным ответам с антителами. В вариантах осуществления адъюванты также могут включать иммуностимулирующие молекулы РНК, такие как без ограничения дцРНК, поли ЕС или поли Еполи C12U (доступная как Ampligen®, либо поли ЕС, либо поли ЕполиС12И, известные как стимуляторы TLR3) и/или раскрытые в F. Heil et al. Species-Specific Recognition of Single-Stranded RNA via Toll-like receptor 7 and 8 Science 303(5663), 1526-1529 (2004); J. Vollmer et al. Иммунная модуляция с помощью химически модифицированных рибонуклеозидов и олигорибонук
- 5 030863 леотидов (Immune modulation by chemically modified ribonucleosides and oligoribonucleotides) WO 2008033432 A2; A. Forsbach et al. Иммуностимулирующие олигорибонуклеотиды, содержащие специфический мотив(ы) последовательности и нацеливающиеся на путь toll-подобного рецептора 8 (Immunostimulatory oligoribonucleotides containing specific sequence motif(s) and targeting the Toll-like receptor 8 pathway) WO 2007062107 A2; E. Uhlmann et al. Модифицированные олигорибонуклеотидные аналоги с усиленной иммуностимулирующей активностью (Modified oligoribonucleotide analogs with enhanced immunostimulatory activity) публикация патентной заявки США № 2006241076; G. Lipford et al. Иммуностимулирующие вирусные РНК-олигонуклеотиды и их применение для лечения рака и инфекций (Immunostimulatory viral RNA oligonucleotides and use for treating cancer and infections) WO 2005097993 A2; G. Lipford et al. Иммуностимулирующие G,U-содержащие олигорибонуклеотиды, композиции и способы скрининга (Immunostimulatory G,U-containing oligoribonucleotides, compositions, and screening methods) WO 2003086280 A2. В некоторых вариантах осуществления адъювант может представлять собой агонист TLR-4, такой как бактериальный липополисахарид (LPS), VSV-G и/или HMGB-1. В некоторых вариантах осуществления адъюванты могут включать агонисты TLR-5, такие как флагеллин, или его части или производные, в том числе без ограничения раскрытые в патентах США №№ 6130082, 6585980 и 7192725. В особых вариантах осуществления синтетические наноносители включают лиганд для toll-подобного рецептора (TLR)-9, такой как иммуностимулирующие молекулы ДНК, содержащие CpG, которые индуцируют секрецию интерферона I типа и стимулируют активацию Т- и В-клеток, приводящую к повышенной продукции антител и ответам с цитотоксическими Т-клетками (Krieg et al., CpG motifs in bacterial DNA trigger direct B-cell activation. Nature. 1995. 374:546-549; Chu et al. CpG oligodeoxynucleotides act as adjuvants that switch on T helper 1 (Thl) immunity. J. Exp. Med. 1997. 186:1623-1631; Lipford et al. CpGcontaining synthetic oligonucleotides promote В and cytotoxic T cell responses to protein antigen: a new class of vaccine adjuvants. Eur. J. Immunol. 1997. 27:2340-2344; Roman et al. Immunostimulatory DNA sequences function as T helper-1-promoting adjuvants. Nat. Med. 1997. 3:849-854; Davis et al. CpG DNA is a potent enhancer of specific immunity in mice immunized with recombinant hepatitis В surface antigen. J. Immunol. 1998. 160:870-876; Lipford et al., Bacterial DNA as immune cell activator. Trends Microbiol. 1998. 6:496-500; патент США № 6207646, Krieg et al.; патент США № 7223398, Tuck et al.; патент США № 7250403, Van Nest et al. или патент США № 7566703, Krieg et al.).
В некоторых вариантах осуществления адъюванты могут представлять собой провоспалительные стимулы, высвобожденные из некротических клеток (например, кристаллы уратов). В некоторых вариантах осуществления адъюванты могут быть активированными компонентами каскада реакций комплемента (например, CD21, CD35 и т.д.). В некоторых вариантах осуществления адъюванты могут быть активированными компонентами иммунных комплексов. Адъюванты также включают агонисты рецепторов комплемента, такие как молекулы, которые связываются с CD21 или CD35. В некоторых вариантах осуществления агонист рецепторов комплемента индуцирует эндогенную опсонизацию синтетического наноносителя с помощью комплемента. В некоторых вариантах осуществления адъюванты представляют собой цитокины, которые являются небольшими белками или биологическими факторами (в диапазоне 5 -20 кДа), которые высвобождаются клетками и специфично воздействуют на клеточно-клеточное взаимодействие, связь и поведение других клеток. В некоторых вариантах осуществления агонист цитокинового рецептора является малой молекулой, антителом, белком слияния или аптамером.
В вариантах осуществления по меньшей мере часть дозы адъюванта не присоединяют к каким-либо синтетическим наноносителям, предпочтительно всю дозу адъюванта не присоединяют к каким-либо синтетическим наноносителям. В вариантах осуществления доза адъюванта включает два или более типов адъювантов, и по меньшей мере часть по меньшей мере одного из типов адъюванта не присоединяют к каким-либо синтетическим наноносителям. Например, и без ограничения, можно комбинировать адъюванты, которые действуют на различные рецепторы, такие как различные рецепторы TLR. В качестве примера в варианте осуществления агонист TLR 7/8 можно комбинировать с агонистом TLR 9. В другом варианте осуществления агонист TLR 7/8 можно комбинировать с агонистом TLR 4. В еще одном варианте осуществления агонист TLR 9 можно комбинировать с агонистом TLR 3.
Вводить или введение означает предоставление вещества (например, лекарственного средства) субъекту способом, который является фармакологически применимым.
Аллергия, также называемая в данном документе аллергическим состоянием, представляет собой любое состояние, при котором имеется нежелательный иммунный ответ на аллерген (т.е. аллергическая реакция). Аллергии или аллергические состояния включают без ограничений аллергическую астму, сенную лихорадку, крапивницу, экзему, аллергии на растения, аллергии на пчелиный укус, аллергии на домашних животных, аллергии на латекс, аллергии на плесень, аллергии на косметику, пищевые аллергии, аллергический ринит или насморк, местные аллергические реакции, анафилаксию, атопический дерматит, реакции гиперчувствительности и другие аллергические состояния. Аллергическая реакция может являться результатом иммунной реакции в отношении какого-либо аллергена.
Эффективное количество представляет собой любое количество композиции, обеспеченной в данном документе, которое дает один или несколько желательных иммунных ответов. Это количество может быть для in vitro или in vivo назначений. Для in vivo назначений количество может быть таковым,
- 6 030863 которое, как будет полагать клиницист, может иметь клинический эффект для субъекта, нуждающегося в воспалительном, Th1-, гуморальном или специфичном местном CTL иммунном ответе. Такие субъекты включают тех, у которых есть или они подвергаются риску возникновения рака, инфекции или инфекционного заболевания, атопического состояния, астмы, хронического обструктивного заболевания легких (COPD) или хронической инфекции.
Эффективные количества включают таковые, включающие системное высвобождение одного или нескольких цитокинов. В вариантах осуществления эффективные количества включают таковые, включающие продукцию профиля системного высвобождения цитокинов. В некоторых вариантах осуществления один или несколько цитокинов или профиль высвобождения цитокинов включают системное высвобождение TNF-α, IL-6 и/или IL-12. В других вариантах осуществления один или несколько цитокинов или профиль высвобождения цитокинов включают системное высвобождение IFN-γ, IL-12 и/или IL-18. Это можно контролировать общепринятыми способами. Количество, которое является эффективным для выработки одного или нескольких требуемых иммунных ответов, может также представлять собой количество композиции, обеспеченной в данном документе, которое дает желательный терапевтический ожидаемый результат или желательный терапевтический результат.
Эффективные количества будут зависеть, конечно, от конкретного субъекта, подлежащего лечению; тяжести состояния, заболевания или расстройства; индивидуальных параметров пациента, включающих возраст, физическое состояние, размер и вес; продолжительности лечения; природы сопутствующей терапии (если таковая имеется); специфического пути введения и подобных факторов в пределах знания и практического опыта врача-терапевта. Эти факторы хорошо известны специалистам в данной области и могут предусматривать не более чем общепринятое проведение исследования. В целом предпочтительно, чтобы применялась максимальная доза, т.е. наивысшая безопасная доза, в соответствии с результатами тщательной медицинской оценки. Специалистам в данной области будет понятно, однако, что пациент может настаивать на более низкой дозе или переносимой дозе по медицинским причинам, психологическим причинам или, по существу, по любым другим причинам.
В большинстве случаев дозы композиций настоящего изобретения могут находиться в диапазоне от около 10 до около 100000 мкг/кг. В некоторых вариантах осуществления дозы могут находиться в диапазоне от около 0,1 до около 100 мг/кг. В очередных вариантах осуществления дозы могут находиться в диапазоне от около 0,1 до около 25 мг/кг, от около 25 до около 50 мг/кг, от около 50 до около 75 мг/кг или от около 75 до около 100 мг/кг. Альтернативно, дозу можно вводить на основе числа синтетических наноносителей. Например, применимые дозы включают больше 106, 107, 108, 109 или 1010 синтетических наноносителей на дозу. Другие примеры применимых доз включают от около 1х 106 до около 1х1010, от около 1х107 до около 1х109 или от около 1х108 до около 1х109 синтетических наноносителей на дозу. В некоторых вариантах осуществления дозы обеспеченных композиций являются системными дозами.
Антиген означает антиген для В-клетки или антиген для Т-клетки. В вариантах осуществления антигены присоединяют к синтетическим наноносителям. В других вариантах осуществления антигены не присоединяют к синтетическим наноносителям. В вариантах осуществления антигены вводят совместно с синтетическими наноносителями. В других вариантах осуществления антигены не вводят совместно с синтетическими наноносителями. Тип(ы) антигенов означает молекулы, которые имеют одинаковые или практически одинаковые антигенные характеристики. В вариантах осуществления антигены обеспеченных композиций ассоциируют с заболеванием или состоянием, которое подлежит лечению. Например, антиген может представлять собой аллерген (для лечения аллергии или аллергического состояния), ассоциированный с раком антиген (для лечения рака или опухоли), антиген инфекционного агента (для лечения инфекции, инфекционного заболевания или хронического инфекционного заболевания) и т.д.
По меньшей мере часть дозы означает по меньшей мере некую часть дозы, находящуюся в диапазоне до включающей всю дозу.
Субъект с риском является таковым, который, как полагает врач-терапевт, имеет шанс подвергнуться заболеванию или состоянию, представленному в данном документе.
Антиген для В-клетки означает любой антиген, который распознается В-клеткой и запускает иммунный ответ в В-клетке (например, антиген, который, в частности, распознается В-клеточным рецептором на В-клетке). В некоторых вариантах осуществления антиген, который является антигеном для Тклетки, также является антигеном для В-клетки. В других вариантах осуществления антиген для Тклетки не является также антигеном для В-клетки. Антигены для В-клетки включают без ограничений белки, пептиды, малые молекулы и углеводы. В некоторых вариантах осуществления антиген для Вклетки включает небелковый антиген (т.е. антиген не являющийся белком или пептидом). В некоторых вариантах осуществления антиген для В-клетки включает углевод, ассоциированный с инфекционным агентом. В некоторых вариантах осуществления антиген для В-клетки включает гликопротеин или гликопептид, ассоциированный с инфекционным агентом. Инфекционным агентом может быть бактерия, вирус, грибок, простейшее, паразит или прион. В некоторых вариантах осуществления антиген для Вклетки включает слабоиммуногенный антиген. В некоторых вариантах осуществления антиген для В
- 7 030863 клетки включает вещество, которым злоупотребляют, или его часть. В некоторых вариантах осуществления антиген для В-клетки включает вещество, вызывающее зависимость, или его часть. Вещества, вызывающие зависимость, включают без ограничений никотин, наркотическое средство, средство от кашля, транквилизатор и седативное средство. В некоторых вариантах осуществления антиген для В-клетки включает токсин, такой как токсин из химического оружия или естественного источника, или загрязнитель. Антиген для В-клетки может также включать вредное экзогенное средство. В других вариантах осуществления антиген для В-клетки включает аллоантиген, аллерген, контактный аллерген, антиген дегенеративного заболевания, гаптен, антиген инфекционного заболевания, антиген злокачественной опухоли, антиген атопического заболевания, антиген аутоиммунного заболевания, вещество, вызывающее зависимость, ксеноантиген или фермент метаболического заболевания или его ферментативный продукт.
Вводят совместно означает введение двух или более веществ субъекту способом, который согласовывают по времени, предпочтительно согласовывают по времени таким образом, чтобы обеспечить изменение в иммунном ответе. В вариантах осуществления совместное введение может иметь место вследствие введения двух или более веществ в одной и той же лекарственной форме. В других вариантах осуществления совместное введение может заключать введение двух или более веществ в различных лекарственных формах, но в пределах обозначенного периода времени, предпочтительно в пределах 1 месяца, более предпочтительно в пределах 1 недели, еще более предпочтительно в пределах 1 дня и даже еще более предпочтительно в пределах 1 ч.
Присоединять, или присоединяют, или присоединяет (и т.п.) относится к химическому ассоциированию одной структурной единицы (например, фрагмента) с другой. В некоторых вариантах осуществления присоединение является ковалентным, это означает, что присоединение имеет место в смысле присутствия ковалентной связи между двумя структурными единицами. В нековалентных вариантах осуществления нековалентное присоединение опосредуется нековалентными взаимодействиями, включающими без ограничения взаимодействия зарядов, аффинные взаимодействия, металлокоординацию, физическую адсорбцию, взаимодействия гость-хозяин, гидрофобные взаимодействия, ТТ-стэкинг взаимодействия, взаимодействия с водородными связями, ван-дер-ваальсовы взаимодействия, магнитные взаимодействия, электростатические взаимодействия, диполь-дипольные взаимодействия и/или их комбинации. В вариантах осуществления инкапсуляция представляет собой форму присоединения. В вариантах осуществления по меньшей мере часть дозы адъюванта(ов) не присоединяют к каким-либо синтетическим наноносителям, предпочтительно всю дозу адъюванта(ов) не присоединяют к каким-либо синтетическим наноносителям.
Происходит означает: взят из источника и подвергнут существенной модификации. Например, будет указываться пептид или нуклеиновая кислота с последовательностью с только 50% идентичностью с естественным пептидом или нуклеиновой кислотой, предпочтительно естественным консенсусным пептидом или нуклеиновой кислотой, которая происходит от естественного пептида или нуклеиновой кислоты. Существенная модификация представляет собой модификацию, которая в существенной степени влияет на химические или иммунологические свойства материала, о котором идет речь. Пептиды и нуклеиновые кислоты, которые происходят, могут также включать имеющие последовательность с более чем 50% идентичностью с естественным пептидом или последовательностью нуклеиновой кислоты, если указанные пептиды и нуклеиновые кислоты, которые происходят, имеют измененные химические или иммунологические свойства по сравнению с естественным пептидом или нуклеиновой кислотой. Такие химические или иммунологические свойства включают гидрофильность, стабильность, аффинность и способность присоединяться к носителю, такому как синтетический наноноситель.
Лекарственная форма означает фармакологически и/или иммунологически активный материал в среде, носителе, разбавителе или устройстве, пригодном для введения субъекту.
Инкапсулировать означает заключать внутрь синтетического наноносителя, предпочтительно заключать полностью внутрь синтетического наноносителя. Большая часть или все вещество, которое инкапсулируют, не доступно для местного окружения, внешнего по отношению к синтетическому наноносителю. Инкапсуляция отличается от абсорбции, при которой большая часть или все вещество помещается на поверхность синтетического наноносителя, и вещество остается доступным для местного окружения, внешнего по отношению к синтетическому наноносителю.
Гуморальный ответ означает любой иммунный ответ, который приводит к продукции или стимуляции В-клеток и/или к продукции антител. Предпочтительно гуморальный иммунный ответ является специфичным в отношении антигена, включенного в композицию по изобретению или вводимого во время применения на практике способа по изобретению. Способы для оценивания, индицируется ли гуморальный ответ, известны специалистам в данной области. Примеры таких способов представлены ниже в примерах.
Инфекция или инфекционное заболевание представляет собой любое состояние или заболевание, вызванное микроорганизмом, патогеном или другим агентом, таким как бактерия, грибок, прион или вирус. Примеры инфекционного заболевания включают без ограничений вирусные инфекционные заболевания, такие как СПИД, ветряная оспа (ветрянка), насморк, цитомегаловирусная инфекция, лихорадка
- 8 030863
Колорадо, лихорадка денге, геморрагическая лихорадка Эбола, везикулярный стоматит, гепатит, простой герпес, опоясывающий герпес, HPV, грипп (инфлюэнца), лихорадка Ласса, корь, геморрагическая марбург-вирусная лихорадка, инфекционный мононуклеоз, эпидемический паротит, норовирусная инфекция, полиомиелит, прогрессирующая мультифокальная лейкоэнцефалопатия, бешенство, краснуха, SARS, натуральная оспа (оспа животных), вирусный энцефалит, вирусный гастроэнтерит, вирусный менингит, вирусная пневмония, лихорадка Западного Нила и желтая лихорадка; бактериальные инфекционные заболевания, такие как сибирская язва, бактериальный менингит, ботулизм, бруцеллез, кампилобактериоз, болезнь кошачьих царапин, холера, дифтерия, сыпной тиф, гонорея, импетиго, легионеллез, лепра (болезнь Хансена), лептоспироз, листериоз, боррелиоз, мелиоидоз, ревматическая атака, MRSAинфекция, нокардиоз, коклюш (судорожный кашель), чума, пневмококковая пневмония, орнитоз, Qлихорадка, пятнистая лихорадка Скалистых гор (RMSF), сальмонеллез, скарлатина, шигеллез, сифилис, столбняк, трахома, туберкулез, туляремия, сальмонеллез, сыпной тиф и инфекции мочевых путей; паразитарные инфекционные заболевания, такие как африканский трипаносомоз, амебиаз, аскаридоз, бабезиоз, болезнь Шагаса, клонорхоз, криптоспоридиоз, цистицеркоз, дифиллоботриоз, дракункулез, эхинококкоз, энтеробиоз, фасциолез, фасциолопсидоз, филяриоз, инфекции, вызываемые свободноживущими амебами, лямблиоз, гнатостомоз, гименолепидоз, кокцидиоз, индийский висцеральный лейшманиоз, лейшманиоз, малярия, метагонимиаз, миаз, онхоцеркоз, педикулез, оксиуроз, чесотка, шистосомоз, тениоз, токсокароз, токсоплазмоз, трихинеллез, трихиноз, трихиуриаз, трихомоноз и трипаносомоз; грибковые инфекционные заболевания, такие как аспергиллез, бластомикоз, кандидоз, кокцидиоидомикоз, криптококкоз, гистоплазмоз, эпидермофития стопы (дерматофитоз) и паховая эпидермофития; прионные инфекционные заболевания, такие как синдром Альперса, злокачественная наследственная инсомния, синдром Герстманна-Штреусслера-Шейнкера, куру и вариант болезни Крейтцфельда-Якоба.
Воспалительный ответ означает любой иммунный ответ, в который вовлечена врожденная иммунная защитная система организма, который действует в ответ на, например, воздействие инфекционного агента, повреждение клетки и т.д. В вариантах осуществления воспалительный ответ включает системное высвобождение цитокинов, таких как TNF-α, IL-6 и/или IL-12. Способы для оценивания, индуцируется ли воспалительный ответ, такие как оценка продукции провоспалительных цитокинов, известны специалистам в данной области. Примеры таких способов обеспечиваются ниже в примерах.
Выделенная нуклеиновая кислота означает нуклеиновую кислоту, которая отделена от своего нативного окружения и присутствует в достаточном количестве, позволяющем ее идентификацию или применение. Выделенная нуклеиновая кислота представляет собой таковую, которая:
(i) амплифицирована in vitro посредством, например, полимеразной цепной реакции (PCR);
(ii) продуцирована рекомбинантно посредством клонирования;
(iii) очищена, как, например, расщеплением и гель-разделением; или (iv) синтезирована посредством, например, химического синтеза.
Выделенная нуклеиновая кислота представляет собой таковую, с которой легко манипулировать посредством техник рекомбинантной ДНК, хорошо известных в настоящем уровне техники. Таким образом, нуклеотидная последовательность, содержащаяся в векторе, в которой известны 5'- и 3'-сайты рестрикции или для которой были раскрыты последовательности праймеров полимеразной цепной реакции (PCR), считается выделенной, с другой стороны последовательность нуклеиновой кислоты, существующей в своем нативном состоянии в своем естественном хозяине, не считается. Выделенная нуклеиновая кислота может быть в значительной степени очищенной, но это не обязательно. Например, нуклеиновая кислота, которая является выделенной в пределах клонирующего вектора или вектора экспрессии, не является чистой в том смысле, что она может составлять только ничтожную долю материала в клетке, в которой она находится. Такая нуклеиновая кислота является выделенной, однако, с точки зрения используемого в данном документе выражения, поскольку с ней легко манипулировать с помощью стандартных техник, известных специалистам в данной области. Любая из обеспеченных в данном документе нуклеиновых кислот может быть выделенной. В некоторых вариантах осуществления антигены в композициях, обеспеченных в данном документе, присутствуют в форме выделенной нуклеиновой кислоты, такой как выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует антигенный пептид, полипептид или белок.
Выделенный пептид, полипептид или белок означает полипептид (или пептид, или белок), отделенный от своего нативного окружения и присутствующий в достаточном количестве, позволяющем его идентификацию или применение. Это означает, например, что полипептид (или пептид, или белок) может быть (i) селективно продуцирован посредством экспрессионного клонирования или (ii) очищен, как например, посредством хроматографии или электрофореза. Выделенные пептиды, белки или полипептиды могут быть, но не обязательно, в значительной степени чистыми. Поскольку выделенный пептид, полипептид или белок можно смешивать с фармацевтически приемлемым носителем в фармацевтическом препарате, полипептид (или пептид, или белок) может составлять лишь небольшую долю от веса препарата. Полипептид (или пептид, или белок) является все же выделенным, в том смысле, что его отделили от веществ, с которыми он мог быть ассоциирован в живых системах, т.е. выделен от других белков (или пептидов, или полипептидов). Любой из пептидов, полипептидов или белков, обеспеченных в данном документе, может быть выделенным. В некоторых вариантах осуществления антигены в композициях,
- 9 030863 обеспеченных в данном документе, находятся в форме выделенных пептидов, полипептидов или белков.
Максимальное измерение синтетического наноносителя означает наибольшее измерение наноносителя, измеренное вдоль любой оси синтетического наноносителя. Минимальное измерение синтетического наноносителя означает наименьшее измерение синтетического наноносителя, измеренное вдоль любой оси синтетического наноносителя. Например, для сфероидального синтетического наноносителя максимальное и минимальное измерение синтетического наноносителя будут практически идентичны и будут представлять собой размер его диаметра. Подобным образом, для кубоидального синтетического наноносителя минимальное измерение синтетического наноносителя будет представлять собой наименьшее из его высоты, ширины или длины, тогда как максимальное измерение синтетического наноносителя будет представлять собой наибольшее из его высоты, ширины или длины. В варианте осуществления минимальное измерение по меньшей мере 75%, предпочтительно по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 90% синтетических наноносителей в образце исходя из общего числа синтетических наноносителей в образце больше 100 нм. В варианте осуществления максимальное измерение по меньшей мере 75%, предпочтительно по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 90% синтетических наноносителей в образце исходя из общего числа синтетических наноносителей в образце равно или меньше 5 мкм. Предпочтительно минимальное измерение по меньшей мере 75%, предпочтительно по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 90%, синтетических наноносителей в образце исходя из общего числа синтетических наноносителей в образце больше 110 нм, более предпочтительно больше 120 нм, более предпочтительно больше 130 нм и еще более предпочтительно больше 150 нм. Аспектные отношения максимального и минимального измерений синтетических наноносителей по изобретению могут варьировать в зависимости от варианта осуществления. Например, аспектные отношения максимального к минимальному измерениям синтетических наноносителей может варьировать от 1:1 до 1000000:1, предпочтительно от 1:1 до 100000:1, более предпочтительно от 1:1 до 1000:1, еще предпочтительнее от 1:1 до 100:1 и даже более предпочтительно от 1:1 до 10:1. Предпочтительно максимальное измерение по меньшей мере 75%, предпочтительно по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 90% синтетических наноносителей в образце исходя из общего числа синтетических наноносителей в образце равно или меньше 3 мкм, более предпочтительно равно или меньше 2 мкм, более предпочтительно равно или меньше 1 мкм, более предпочтительно равно или меньше 800 нм, более предпочтительно равно или меньше 600 нм и еще более предпочтительно равно или меньше 500 нм. В предпочтительных вариантах осуществления максимальное измерение по меньшей мере 75%, предпочтительно по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 90% синтетических наноносителей в образце исходя из общего числа синтетических наноносителей в образце равно или больше 100 нм, более предпочтительно равно или больше 120 нм, более предпочтительно равно или больше 130 нм, более предпочтительно равно или больше 140 нм и еще более предпочтительно равно или больше 150 нм. Измерение размеров синтетического наноносителя получают при суспендировании синтетических наноносителей в жидкой (как правило, водной) среде, в также с использованием динамического рассеяния света (например, с использованием аппарата Brookhaven ZetaPALS).
Полученный означает взятый из источника без существенной модификации. Существенная модификация представляет собой модификацию, которая существенно влияет на химические или иммунологические свойства материала, о котором идет речь. Например, в качестве неограничивающего примера, пептид или нуклеиновая кислота, имеющие последовательность с более чем 90%, предпочтительно более чем 95%, предпочтительно более чем 97%, предпочтительно более чем 98%, предпочтительно более чем 99%, предпочтительно 100% идентичностью с естественной пептидной или нуклеотидной последовательностью, предпочтительно естественной консенсусной пептидной или нуклеотидной последовательностью и химическими и/или иммунологическими свойствами, которые не существенно отличаются от естественного пептида или нуклеиновой кислоты, будут указываться, как полученные из естественной пептидной или нуклеотидной последовательности. Такие химические или иммунологические свойства включают гидрофильность, стабильность, аффинность и способность соединяться с носителем, таким как синтетический наноноситель.
Фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель означает фармакологически неактивный материал, применяемый вместе с перечисленными синтетическими наноносителями для составления композиций по изобретению. Фармацевтически приемлемые носители или наполнители включают ряд материалов, известных в настоящем уровне техники, в том числе без ограничения сахариды (такие как глюкоза, лактоза и т.п.), консерванты, такие как противомикробные средства, восстанавливающие средства, окрашивающие средства, солевой раствор (такой как фосфатно-солевой буфер) и буферы. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемые носители или наполнители включают карбонат кальция, фосфат кальция, различные разбавители, различные сахара и типы крахмала, производные целлюлозы, желатин, растительные масла и полиэтиленгликоли.
Специфичный местный ответ с цитотоксическими Т-лимфоцитами (CTL) означает любую стимуляцию, индукцию или пролиферацию цитотоксических Т-клеток, предпочтительно цитотоксических Тклеток, которые являются специфичными в отношении антигена. В вариантах осуществления антиген ассоциирован с любым из заболеваний или состояний, обеспеченных в данном документе. В некоторых
- 10 030863 вариантах осуществления антиген включают внутрь композиции по изобретению или вводят в способе по изобретению, обеспеченном в данном документе. Способы оценивания CTL-ответа известны специалистам в данной области. Примеры таких способов представлены в примерах.
Субъект означает животных, в том числе теплокровных млекопитающих, таких как люди и приматы; птиц; домашних комнатных или сельскохозяйственных животных, таких как кошки, собаки, овцы, козы, крупный рогатый скот, лошади и свиньи; лабораторных животных, таких как мыши, крысы и морские свинки; рыб; рептилий; зоопарковых и диких животных и т.п.
Синтетический(е) наноноситель(и) означает дискретный объект, который не обнаруживается в природе и который обладает по меньшей мере одним измерением, которое меньше или равно размеру 5 мкм. Альбуминовые наночастицы обычно включают в состав синтетических наноносителей, однако в определенных вариантах осуществления синтетические наноносители не включают альбуминовые наночастицы. В вариантах осуществления синтетические наноносители по изобретению не включают хитозан.
Синтетический наноноситель может представлять собой без ограничений одну или множество наночастиц на основе липидов (например, липосомы) (также именуемые в данном документе липидными наночастицами, т.е. наночастицами, где большая часть материала, составляющая их структуру, представляет собой липиды), полимерные наночастицы, металлические наночастицы, эмульсии на основе поверхностно-активного вещества, дендримеры, бакиболы, нанопроволоки, вирусоподобные частицы (т.е. частицы, которые в основном составлены из вирусных структурных белков, но не являются инфекционными или имеют низкую инфекционность), пептидные частицы или частицы на основе белков (также именуемые в данном документе белковыми частицами, т.е. частицами, где большая часть материала, составляющая их структуру, представляет собой пептиды или белки) (такие как альбуминовые наночастицы) и/или наночастицы, которые разрабатывают с использованием комбинации наноматериалов, такие как липидно-полимерные наночастицы. Синтетические наноносители могут иметь множества разнообразных форм, включающих без ограничения сфероидальные, кубоидальные, пирамидальные, продолговатые, цилиндрические, тороидальные и т.п. Синтетические наноносители по настоящему изобретению включают одну или несколько поверхностей, в том числе без ограничений внутренние поверхности (поверхности, главным образом, обращенные к внутренней части синтетического наноносителя) и внешние поверхности (поверхности, главным образом, обращенные к внешнему окружению синтетического наноносителя). Иллюстративные синтетические наноносители, которые можно адаптировать для применения на практике настоящего изобретения включают: (1) биоразлагаемые наночастицы, раскрытые в патенте США № 5543158, Gref et al., (2) полимерные наночастицы из опубликованной патентной заявки США № 20060002852, Saltzman et al., (3) наночастицы, конструируемые литографическим способом, из опубликованной патентной заявки США № 20090028910, DeSimone et al., (4) раскрытие WO 2009051837, von Andrian et al., (5) наночастицы, раскрытые в опубликованной патентной заявке США № 20080145441, Penades et al., (6) белковые наночастицы, раскрытые в опубликованной патентной заявке США № 20090226525, de los Rios et al., (7) вирусоподобные частицы, раскрытые в опубликованной патентной заявке США № 20060222652, Sebbel et al., (8) присоединенные к нуклеиновой кислотой вирусоподобные частицы, раскрытые в опубликованной патентной заявке США № 20060251677, Bachmann et al., (9) вирусоподобные частицы, раскрытые в WO 2010047839 A1 или WO 2009106999 A2, или (10) нанопреципитированные наночастицы. раскрытые в P. Paolicelli et al., Surface-modified PLGA-based Nanoparticles that can Efficiently Associate and Deliver Virus-like Particles Nanomedicine. 5(6):843-853 (2010). В вариантах осуществления синтетические наноносители могут иметь аспектное отношение больше 1:1, 1:1.2, 1:1.5, 1:2, 1:3, 1:5, 1:7 или больше 1:10.
Синтетические наноносители по настоящему изобретению, которые обладают минимальным измерением, равным или меньше около 100 нм, предпочтительно равным или меньше 100 нм, не содержат поверхность с гидроксильными группами, которые активируют комплемент, или альтернативно содержат поверхность, которая состоит в основном из фрагментов, которые не являются гидроксильными группами, активирующими комплемент. В предпочтительном варианте осуществления синтетические наноносители по настоящему изобретению, обладающие минимальным измерением, равным или меньше около 100 нм, предпочтительно равным или меньше 100 нм, не содержат поверхность, существенно активирующую комплемент, или альтернативно содержат поверхность, которая состоит в основном из фрагментов, существенно не активирующих комплемент. В более предпочтительном варианте осуществления синтетические наноносители по настоящему изобретению, которые обладают минимальным измерением, равным или меньше около 100 нм, предпочтительно равным или меньше 100 нм, не содержат поверхность, активирующую комплемент, или альтернативно содержат поверхность, которая состоит в основном из фрагментов, не активирующих комплемент. В вариантах осуществления синтетические наноносители могут иметь аспектное отношение больше 1:1, 1:1.2, 1:1.5, 1:2, 1:3, 1:5, 1:7 или больше 1:10.
Системная доза означает дозу адъюванта, которая обеспечивает особое системное высвобождение цитокинов, предпочтительно особый профиль системного высвобождения цитокинов. В некоторых вариантах осуществления особое системное высвобождение цитокинов, предпочтительно особый профиль системного высвобождения цитокинов, происходит у человека. В вариантах осуществления обеспечен
- 11 030863 ные в данном документе композиции и способы (когда по меньшей мере часть дозы адъюванта не присоединяют к каким-либо наноносителям) приводят к особому профилю системного высвобождения цитокинов у субъекта. Выражение отдельно также применяют для обозначения адъюванта, который не присоединяют к каким-либо синтетическим наноносителям. Кроме того, профиль системного высвобождения цитокинов означает характер системного высвобождения цитокинов, где характер включает уровни цитокинов, измеренные для нескольких различных системных цитокинов. В некоторых вариантах осуществления особый профиль системного высвобождения цитокинов включает системное высвобождение TNF-α, IL-6 и/или IL-12. В других вариантах осуществления особый профиль системного высвобождения цитокинов включает системное высвобождение IFN-γ, IL12 и/или IL-18.
Антиген для Т-клетки означает любой антиген, который распознается и запускает иммунный ответ в Т-клетке (например, антиген, который, в частности, распознается Т-клеточным рецептором на Тклетке или NKT-клетке путем презентации антигена или его части, связанных с молекулой комплекса гистосовместимости (МНС) I класса или II класса, или связанных с CD1-комплексом). В некоторых вариантах осуществления антиген, который является антигеном для Т-клетки, также является антигеном для В-клетки. В других вариантах осуществления антиген для Т-клетки не является также антигеном для В-клетки. Антигены для Т-клетки, как правило, представляют собой белки, полипептиды или пептиды. Антигены для Т-клетки могут представлять собой антиген, стимулирующий CD8+ Т-клеточный ответ, CD4+ Т-клеточный ответ или оба. Наноносители, следовательно, в некоторых вариантах осуществления могут эффективно стимулировать оба типа ответов.
В некоторых вариантах осуществления антиген для Т-клетки является универсальным антигеном для Т-клетки или антигеном для Т-клетки памяти (т.е. таким, к которому субъект имеет предсуществующую память и который может использоваться, чтобы стимулировать Т-клеточную помощь в отношении неродственного антигена, например неродственного антигена для В-клетки). Универсальные антигены для Т-клетки включают столбнячный анатоксин, а также один или несколько пептидов, которые происходят от столбнячного анатоксина, вируса Эпштейна-Барра или вируса гриппа. Универсальные антигены для Т-клетки также включают компоненты вируса гриппа, такие как гемагглютинин, нейраминидаза или ядерный белок, или один или несколько пептидов, которые происходят от них. В некоторых вариантах осуществления универсальный антиген для Т-клеток не является тем, который презентируется в комплексе с молекулой МНС. В некоторых вариантах осуществления универсальный антиген для Т-клеток не входит в комплекс с молекулой МНС для презентации Т-хелперной клетке. Следовательно, в некоторых вариантах осуществления универсальный антиген для Т-клеток не является антигеном для Тхелперной клетки. Однако в других вариантах осуществления универсальный антиген для Т-клеток является антигеном для Т-хелперной клетки.
В вариантах осуществления антиген для Т-хелперной клетки может включать один или несколько пептидов, которые получают или происходят от столбнячного анатоксина, вируса Эпштейна-Барра, вируса гриппа, респираторно-синцитиального вируса, вируса кори, вируса свинки, вируса краснухи, цитомегаловируса, аденовируса, дифтерийного анатоксина или PADRE-пептида (известного из работы Sette et al., патент США № 7202351). В других вариантах осуществления антиген для Т-хелперной клетки может включать овальбумин или пептид, который получен или происходит от него. Предпочтительно овальбумин включает аминокислотную последовательность, установленную в № доступа ААВ59956, NP_990483.1, AAA48998 или САА2371. В других вариантах осуществления пептид, который получен или происходит от овальбумина, включает следующую аминокислотную последовательность: H-Ile-SerGln-Ala-Val-His-Ala-Ala-His-Ala-Glu-Ile-Asn-Glu-Ala-Gly-Arg-OH (SEQ ID NO: 1). В других вариантах осуществления антиген для Т-хелперной клетки может включать один или несколько липидов или гликолипидов, включающих без ограничения: α-галактозилцерамид (α-GalCer), гликосфинголипиды с αсвязью (из Sphingomonas spp.), галактозилдиацилглицерины (из Borrelia burgdorferi), липофосфогликан (из Leishmania donovani) и фосфатидилинозитолтетраманнозид (PIM4) (из Mycobacterium leprae). Для дополнительных липидов и/или гликолипидов, применимых в качестве антигена для Т-хелперной клетки см. V. Cerundolo et al. Harnessing invariant NKT-cells in vaccination strategies. Nature Rev Immun, 9:28-38 (2009).
В вариантах осуществления антигены для CD4+ Т-клетки могут быть производными антигенов для CD4+ Т-клетки, которые получены из источника, такого как естественный источник. В таких вариантах осуществления последовательности антигена для CD4+ Т-клетки, например, как пептиды, которые связываются с МНС II, могут иметь по меньшей мере 70, 80, 90 или 95% идентичность с антигеном, полученным из источника. В вариантах осуществления антиген для Т-клетки, предпочтительно универсальный антиген для Т-клетки или антиген для Т-хелперной клетки, может быть присоединен к или отсоединен от синтетического наноносителя. В некоторых вариантах осуществления универсальный антиген для Т-клетки или антиген для Т-хелперной клетки инкапсулируют в синтетические наноносители композиций по изобретению.
Th1-иммунный ответ означает любой иммунный ответ, который приводит к продукции Th1клеток и Th1-ассоциированных цитокинов, IFN-γ, IL-12 и/или IL-18 или который противодействует диф
- 12 030863 ференциации Th2-клеток и действию Th2-цитокинов. Способы оценивания, индуцируется ли Th1иммунный ответ, известны специалистам в данной области. Примеры таких способов обеспечиваются ниже в примерах.
Время, отличное от введения или время, отличное от времени, когда вводят композицию означает время больше около 30 с или перед или после введения, предпочтительно больше около 1 мин или перед или после введения, более предпочтительно больше 5 мин или перед или после введения, еще более предпочтительно больше 1 дня или перед или после введения, еще более предпочтительно больше 2 дней или перед или после введения, еще более предпочтительно больше 1 недели или перед или после введения, еще более предпочтительно больше 2 недель или перед или после введения, еще более предпочтительно больше 3 недель или перед или после введения, еще более предпочтительно больше 1 месяца или перед или после введения и еще более предпочтительно больше 2 месяцев или перед или после введения.
Вакцина означает композицию вещества, которое улучшает иммунный ответ в отношении конкретного патогена или заболевания. Вакцина типично содержит факторы, которые стимулируют иммунную систему субъекта к распознаванию специфичного антигена в качестве чужеродного и удалению его из организма субъекта. Вакцина также создает иммунологическую 'память', таким образом антиген будет быстро распознаваться и на него будет вырабатываться ответ, если человек подвергается повторной антигенной стимуляции. Вакцины могут быть профилактическими (например, для предотвращения будущего инфицирования каким-либо патогеном) или терапевтическими (например, вакцина против опухолеспецифичных антигенов для лечения рака или против антигена, произошедшего из инфекционного агента для лечения инфекции или инфекционного заболевания). В вариантах осуществления вакцина может включать лекарственные формы по настоящему изобретению. Предпочтительно в некоторых вариантах осуществления данные вакцины содержат адъювант, не присоединенный к каким-либо синтетическим наноносителям.
В особых вариантах осуществления композиции по изобретению включают адъюванты, которые включают агонисты для toll-подобных рецепторов (TLR) 7 & 8 (агонисты TLR 7/8). Среди общепринятых соединения-агонисты TLR 7/8, раскрытые в патенте США № 6696076, Tomai et al. , в том числе без ограничений имидазохинолинамины, имидазопиридинамины, 6,7-конденсированные циклоалкилимидазопиридинамины и имидазохинолинамины с мостиковыми связями в положении 1 и 2. Предпочтительные адъюванты включают имиквимод и R848.
В особых вариантах осуществления композиции по изобретению включают адъюванты, которые включают лиганд для toll-подобного рецептора (TLR)-9, такой как иммуностимулирующие молекулы ДНК, содержащие CpG, которые индуцируют секрецию интерферона I типа и стимулируют активацию Т- и В-клеток, приводящую к повышенной продукции антител и ответам с цитотоксическими Т-клетками (Krieg et al., CpG motifs in bacterial DNA trigger direct B-cell activation. Nature. 1995. 374:546-549; Chu et al. CpG oligodeoxynucleotides act as adjuvants that switch on T helper 1 (Th1) immunity. J. Exp. Med. 1997. 186:1623-1631; Lipford et al. CpG-containing synthetic oligonucleotides promote В and cytotoxic T cell responses to protein antigen: a new class of vaccine adjuvants. Eur. J. Immunol. 1997. 27:2340-2344; Roman et al. Immunostimulatory DNA sequences function as T helper-1-promoting adjuvants. Nat. Med. 1997. 3:849-854; Davis et al. CpG DNA is a potent enhancer of specific immunity in mice immunized with recombinant hepatitis В surface antigen. J. Immunol. 1998. 160:870-876; Lipford et al., Bacterial DNA as immune cell activator. Trends Microbiol. 1998. 6:496-500. В вариантах осуществления CpG могут включать модификации, предназначенные для усиления стабильности, такие как фосфотиоатные связи, или другие модификации, такие как модифицированные основания (см., например, патент США №№ 5663153, 6194388, 7262286 или 7276489). В определенных вариантах осуществления для стимулирования иммунитета, а не устойчивости, обеспеченная в данном документе композиция включает адъювант, который содействует созреванию DC (необходимо для примирования наивных Т-клеток) и продукции цитокинов, таких как интерфероны I типа, которые содействуют иммунным ответам с антителами и антивирусному иммунитету. В некоторых вариантах осуществления адъювант включает агонист TLR-4, такой как бактериальный липополисахарид (LPS), VSV-G и/или HMGB-1. В некоторых вариантах осуществления адъюванты включают цитокины, которые являются небольшими белками или биологическими факторами (в диапазоне 5 - 20 кДа), которые высвобождаются клетками и специфично воздействуют на клеточно-клеточное взаимодействие, связь и поведение других клеток. В некоторых вариантах осуществления адъюванты включают провоспалительные стимулы, высвобожденные из некротических клеток (например, кристаллы уратов). В некоторых вариантах осуществления адъюванты могут быть активированными компонентами каскада реакций комплемента (например, CD21, CD35 и т.д.). В некоторых вариантах осуществления адъюванты включают активированные компоненты иммунных комплексов. Адъюванты также включают таковые, которые включают агонисты рецепторов комплемента, такие как молекулы, которые связываются с CD21 или CD35. В некоторых вариантах осуществления агонист рецепторов комплемента индуцирует эндогенную опсонизацию синтетического наноносителя с помощью комплемента. Адъюванты также включают те, что включают агонисты цитокинового рецептора, такие как цитокин.
В некоторых вариантах осуществления агонист цитокинового рецептора является малой молекулой,
- 13 030863 антителом, белком слияния или аптамером. В вариантах осуществления адъюванты также могут включать иммуностимулирующие молекулы РНК, такие как без ограничения дцРНК или поли ГС (стимулятор TLR3) и/или раскрытые в F. Heil et al. Species-Specific Recognition of Single-Stranded RNA via Tolllike receptor 7 and 8 Science 303(5663), 1526-1529 (2004); J. Vollmer et al. Иммунная модуляция с помощью химически модифицированных рибонуклеозидов и олигорибонуклеотидов (Immune modulation by chemically modified ribonucleosides and oligoribonucleotides) WO 2008033432 A2; A. Forsbach et al. Иммуностимулирующие олигорибонуклеотиды, содержащие специфические мотив(ы) последовательности и нацеливающиеся на путь toll-подобного рецептора 8 (Immunostimulatory oligoribonucleotides containing specific sequence motif(s) and targeting the Toll-like receptor 8 pathway) WO 2007062107 A2; E. Uhlmann et al. Модифицированные олигорибонуклеотидные аналоги с усиленной иммуностимулирующей активностью (Modified oligoribonucleotide analogs with enhanced immunostimulatory activity) публикация патентной заявки США № 2006241076; G. Lipford et al. Иммуностимулирующие вирусные РНКолигонуклеотиды и их применение для лечения рака и инфекций (Immunostimulatory viral RNA oligonucleotides and use for treating cancer and infections) WO 2005097993 A2; G. Lipford et al. Иммуностимулирующие G,U-содержащие олигорибонуклеотиды, композиции и способы скрининга (Immunostimulatory G,U-containing oligoribonucleotides, compositions, and screening methods) WO 2003086280 A2.
В некоторых вариантах осуществления адъюванты включают адъюванты типа гель (например, гидроксид алюминия, фосфат алюминия, фосфат кальция и т.д.), микробные адъюванты (например, иммуномодулирующие последовательности ДНК, которые включают CpG-мотивы; иммуностимулирующие молекулы РНК; эндотоксины, такие как монофосфориллипид А; экзотоксины, такие как холерный токсин, термолабильный токсин Е. coli и коклюшный токсин; мурамилдипептид и т.д.); масляноэмульсионные адъюванты или адъюванты на основе эмульгатора (например, адъювант Фрейнда, MF59 [Novartis], SAF и т.д.); корпускулярные адъюванты (например, липосомы, биодеградируемые микросферы, сапонины и т.д.); синтетические адъюванты (например, неионные блок-сополимеры, аналоги мурамилпептидов, полифосфазен, синтетические полинуклеотиды и т.д.) и/или их комбинации.
Композиции синтетических наноносителей.
По настоящему изобретению можно применять большое разнообразие синтетических наноносителей. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители являются сферами или сфероидами. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители плоские или пластинчатой формы. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители являются кубами, кубоидальными или кубическими. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители являются овалами или эллипсами. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители являются цилиндрами, конусами или пирамидами.
В некоторых вариантах осуществления желательным является применение популяции синтетических наноносителей, которые относительно единообразны в отношении размера, формы и/или композиции, так что каждый синтетический наноноситель обладает похожими свойствами. Например, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 90% или по меньшей мере 95% синтетических наноносителей исходя из общего числа синтетических наноносителей может иметь минимальное измерение или максимальное измерение, находящиеся в пределах 5, 10 или 20% среднего диаметра или среднего измерения синтетических наноносителей. В некоторых вариантах осуществления популяция синтетических наноносителей может быть гетерогенной в отношение размера, формы и/или композиции.
Синтетические наноносители могут быть монолитными или полыми и могут включать один или несколько слоев. В некоторых вариантах осуществления каждый слой имеет уникальную композицию и уникальные свойства, относительно другого(их) слоя(ев). Всего лишь один пример: синтетические наноносители могут обладать структурой ядро/оболочка, где ядро представляет собой один слой (например, полимерное ядро), а оболочка представляет собой второй слой (например, липидный бислой или монослой). Синтетические наноносители могут содержать множество различных слоев.
В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители могут необязательно содержать один или несколько липидов. В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель может содержать липосому. В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель может содержать липидный бислой. В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель может содержать липидный монослой. В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель может включать мицеллу. В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель может содержать ядро, содержащее полимерную матрицу, окруженную липидным слоем (например, липидным бислоем, липидным монослоем и т.д.). В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель может содержать неполимерное ядро (например, металлическую частицу, квантовую точку, керамическую частицу, костную частицу, вирусную частицу, белки, нуклеиновые кислоты, углеводы и т.д.), окруженное липидным слоем (например, липидным бислоем, липидным монослоем и т.д.).
В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители могут включать один или несколько полимеров или полимерных матриц. В некоторых вариантах осуществления такой полимер или полимерная матрица может окружаться покрывающим слоем (например, липосомой, липидным монослоем, мицеллой и т.д.). В некоторых вариантах осуществления различные элементы синтетических на
- 14 030863 ноносителей можно соединять с полимером или полимерной матрицей.
В некоторых вариантах осуществления элемент, такой как нацеливающий фрагмент, олигонуклеотид, антиген, адъювант и т.д., можно ковалентно ассоциировать с полимерной матрицей. В некоторых вариантах осуществления ковалентная ассоциация опосредуется линкером. В некоторых вариантах осуществления элемент можно нековалентно ассоциировать с полимерной матрицей. Например, в некоторых вариантах осуществления элемент можно инкапсулировать внутрь, окружать и/или диспергировать по всей толщине полимерной матрицы. Альтернативно или дополнительно элемент можно ассоциировать с полимерной матрицей посредством гидрофобных взаимодействий, взаимодействия зарядов, вандер-ваальсовых сил и т.д.
Традиционно известно большое разнообразие полимеров и способов формирования из них полимерных матриц. В основном полимерная матрица включает один или несколько полимеров. Полимеры могут быть естественными или неестественными (синтетическими) полимерами. Полимеры могут быть гомополимерами или сополимерами, содержащими два или более мономеров. С точки зрения последовательности сополимеры могут быть случайными, блоковыми или могут содержать комбинацию из случайных и блоковых последовательностей. Типично, полимеры в соответствии с настоящим изобретением представляют собой органические полимеры.
Примеры полимеров, подходящих для применения в настоящем изобретении, включают без ограничений полиэтилены, поликарбонаты (например, поли(1,3-диоксан-2-он)), полиангидриды (например, поли(себациновый ангидрид)), полипропилфумараты, полиамиды (например, поликапролактам), полиацетали, простые полиэфиры, сложные полиэфиры (например, полилактид, полигликолид, сополимер лактида и гликолида, поликапролактон, полигидроксикислота (например, полиф-гидроксиалконоат))), поли(сложные ортоэфиры), полицианоакрилаты, поливиниловые спирты, полиуретаны, полифосфазены, полиакрилаты, полиметакрилаты, полимочевины, полистиролы, полиамины, полилизин, сополимеры полилизина и PEG, поли(этиленимин), сополимеры поли(этиленимина) и PEG.
В некоторых вариантах осуществления полимеры в соответствии с настоящим изобретением включают полимеры, которые были одобрены для применения на людях Управлением по контролю за продуктами и лекарствами США (FDA) на основании 21 C.F.R. § 177.2600, включающие без ограничения сложные полиэфиры (например, полимолочную кислоту, сополимер(молочной и гликолевой кислоты), поликапролактон, поливалеролактон, поли(1,3-диоксан-2-он)); полиангидриды (например, поли(себациновый ангидрид)); простые полиэфиры (например, полиэтиленгликоль); полиуретаны; полиметакрилаты; полиакрилаты и полицианоакрилаты.
В некоторых вариантах осуществления полимеры могут быть гидрофильными. Например, полимеры могут содержать анионные группы (например, фосфатную группу, сульфатную группу, карбоксилатную группу); катионные группы (например, группу четвертичного амина) или полярные группы (например, гидроксильную группу, тиоловую группу, аминную группу). В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель, содержащий гидрофильную полимерную матрицу, вырабатывает гидрофильное окружение в пределах синтетического наноносителя. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут быть гидрофобными. В некоторых вариантах осуществления синтетический наноноситель, содержащий гидрофобную полимерную матрицу, вырабатывает гидрофобное окружение в пределах синтетического наноносителя. Выбор гидрофильности или гидрофобности полимера может иметь влияние на природу материалов, которые включают (например, присоединяют) в синтетический наноноситель.
В некоторых вариантах осуществления полимеры можно модифицировать с помощью одного или нескольких фрагментов и/или функциональных групп. В соответствии с настоящим изобретением можно применять ряд фрагментов или функциональных групп. В некоторых вариантах осуществления полимеры можно модифицировать с помощью полиэтиленгликоля (PEG), с помощью углевода и/или с помощью ациклических полиацеталей, которые происходят от полисахаридов (Papisov, 2001, ACS Symposium Series, 786:301). Определенные варианты осуществления можно выполнять с использованием основных идей патента США № 5543158, Gref et al. или публикации международной заявки WO 2009051837, Von Andrian et al.
В некоторых вариантах осуществления полимеры можно модифицировать с помощью липидной или жирно-кислотной группы. В некоторых вариантах осуществления жирно-кислотная группа может представлять собой одну или несколько из масляной, капроновой, каприловой, каприновой, лауриновой, миристиновой, пальмитиновой, стеариновой, арахиновой, бегеновой или лигноцериновой кислоты. В некоторых вариантах осуществления жирно-кислотная группа может представлять собой одну или несколько из пальмитолеиновой, олеиновой, вакценовой, линолевой, альфа-линолевой, гамма-линолевой, арахидоновой, гадолеиновой, арахидоновой, эйкозапентаеновой, докозагексаеновой или эруковой кислоты.
В некоторых вариантах осуществления полимеры могут представлять собой сложные полиэфиры, в том числе сополимеры, содержащие единицы молочной кислоты и гликолевой кислоты, такие как сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты и сополимер лактида и гликолида, вместе указываемые в данном документе как PLGA; и гомополимеры, содержащие единицы гликолевой кислоты, указывае
- 15 030863 мые в данном документе как PGA, и единицы молочной кислоты, такие как поли-Ь-молочная кислота, поли-Э-молочная кислота, поли-Э^-молочная кислота, поли-В-лактид, поли-Э-лактид и поли-Э^лактид, вместе указываемые в данном документе как PLA. В некоторых вариантах осуществления иллюстративные сложные полиэфиры включают, например, полигидроксикислоты; сополимеры PEG и сополимеры лактида и гликолида (например, сополимеры PLA и PEG, сополимеры PGA и PEG, сополимеры PLGA и PEG и их производные). В некоторых вариантах осуществления сложные полиэфиры включают, например, поли(капролактон) , сополимеры поли(капролактон) и PEG, сополимеры L-лактида и Lлизина, поли(сериновый сложный эфир), поли(4-гидрокси-L-пролиновый сложный эфир), поли[а-(4аминобутил)-L-гликолевую кислоту] и их производные.
В некоторых вариантах осуществления полимер может представлять собой PLGA. PLGA является биосовместимым и биоразлагаемым сополимером молочной кислоты и гликолевой кислоты, и различные формы PLGA характеризуют по их соотношению молочная кислота:гликолевая кислота. Молочная кислота может представлять собой L-молочную кислоту, D-молочную кислоту или D.L-молочную кислоту. Скорость распадаемости PLGA можно регулировать путем изменения соотношения молочная кислота:гликолевая кислота. В некоторых вариантах осуществления применяемый в соответствии с настоящим изобретением PLGA характеризуется соотношением молочная кислота:гликолевая кислота приблизительно 85:15, приблизительно 75:25, приблизительно 60:40, приблизительно 50:50, приблизительно 40:60, приблизительно 25:75 или приблизительно 15:85.
В некоторых вариантах осуществления полимеры могут представлять собой один или несколько акриловых полимеров. В определенных вариантах осуществления акриловые полимеры включают, например, сополимеры акриловой кислоты и метакриловой кислоты, сополимеры метилметакрилата, этоксиэтилметакрилаты, цианоэтилметакрилат, сополимер аминоалкилметакрилата, поли(акриловую кислоту), поли(метакриловую кислоту), сополимер алкиламида метакриловой кислоты, поли(метилметакрилат), поли(метакриловой кислоты ангидрид), метилметакрилат, полиметакрилат, сополимер поли(метилметакрилата), полиакриламид, сополимер аминоалкилметакрилата, сополимеры глицидилметакрилата, полицианоакрилаты, а также комбинации, содержащие один или несколько из вышеуказанных полимеров. Акриловый полимер может содержать полностью полимеризованные сополимеры сложных эфиров акриловой и метакриловой кислот с низким содержанием групп четвертичного аммония.
В некоторых вариантах осуществления полимеры могут представлять собой катионные полимеры. В основном катионные полимеры способны конденсировать и/или защищать отрицательно заряженные цепи нуклеиновых кислот (например, ДНК или ее производных). Аминосодержащие полимеры, такие как поли(лизин) (Zauner et al., 1998, Adv. Drug Del. Rev., 30:97 и Kabanov et al., 1995, Bioconjugate Chem., 6:7), поли(этиленимин) (PEI; Boussif et al., 1995, Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 1995, 92:7297) и поли(амидоамин)-дендримеры (Kukowska-Latallo et al., 1996, Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 93:4897; Tang et al., 1996, Bioconjugate Chem., 7:703 и Haensler et al., 1993, Bioconjugate Chem., 4:372) положительно заряжены при физиологическом рН, формируют ионные пары с нуклеиновыми кислотами и опосредуют трансфекцию в ряде клеточных линий. В вариантах осуществления синтетические наноносители по изобретению могут не содержать (могут исключать) катионные полимеры.
В некоторых вариантах осуществления полимеры могут представлять собой разлагаемые сложные полиэфиры, несущие катионные боковые цепи (Putnam et al., 1999, Macromolecules, 32:3658; Barrera et al., 1993, J. Am. Chem. Soc, 115:11010; Kwon et al., 1989, Macromolecules, 22:3250; Lim et al., 1999, J. Am. Chem. Soc, 121:5633 and Zhou et al., 1990, Macromolecules, 23:3399). Примеры этих сложных полиэфиров включают сополимер L-лактида и L-лизина (Barrera et al., 1993, J. Am. Chem. Soc, 115:11010), поли(сериновый сложный эфир) (Zhou et al., 1990, Macromolecules, 23:3399), поли(4-гидрокси-Впролиновый сложный эфир) (Putnam et al., 1999, Macromolecules, 32:3658 and Lim et al. , 1999, J. Am. Chem. Soc, 121:5633) и поли(4-гидрокси-В-пролиновый сложный эфир) (Putnam et al. , 1999, Macromolecules, 32:3658 and Lim et al. , 1999, J. Am. Chem. Soc, 121:5633).
Свойства данных и других полимеров и способы их получения хорошо известны в настоящем уровне техники (см., например, патенты США №№ 6123727; 5804178; 5770417; 5736372; 5716404; 6095148; 5837752; 5902599; 5696175; 5514378; 5512600; 5399665; 5019379; 5010167; 4806621; 4638045 и 4946929; Wang et al., 2001, J. Am. Chem. Soc, 123:9480; Lim et al. , 2001, J. Am. Chem. Soc, 123:2460; Langer, 2000, Ace Chem. Res., 33:94; Langer, 1999, J. Control. Release, 62:7 и Uhrich et al., 1999, Chem. Rev., 99:3181). В целом, ряд способов для синтезирования определенных подходящих полимеров описывается в Concise Encyclopedia of Polymer Science and Polymeric Amines and Ammonium Salts, Ed. Goethals, Pergamon Press, 1980; Principles of Polymerization, Odian, John Wiley & Sons, Fourth Edition, 2004; Contemporary Polymer Chemistry, Allcock et al., Prentice-Hall, 1981; Deming et al., 1997, Nature, 390:386 и в патентах США №№ 6506577, 6632922, 6686446 и 6818732.
В некоторых вариантах осуществления полимеры могут представлять собой линейные или разветвленные полимеры. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут представлять собой дендримеры. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут быть в существенной степени поперечно сшиты друг с другом. В некоторых вариантах осуществления полимеры могут в существенной степени
- 16 030863 не содержать поперечных сшивок. В некоторых вариантах осуществления полимеры можно применять в соответствии с настоящим изобретением без прохождения этапа образования поперечных сшивок. В дальнейшем следует понимать, что синтетические наноносители по изобретению могут включать блоксополимеры, привитые сополимеры, комбинации, смеси и/или аддукты из любых из вышеупомянутых и других полимеров. Специалисты в данной области будут учитывать, что полимеры, перечисленные в данном документе, представляют иллюстративный не исчерпывающий список полимеров, которые можно применять в соответствии с настоящим изобретением.
В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители содержат один или несколько полимеров. Полимерные синтетические наноносители, следовательно, также могут включать, описываемые в публикации международной заявки WO 2009051837, Von Andrian et al. , в том числе без ограничения таковыми, с одним или несколькими гидрофильными компонентами. Предпочтительно один или несколько полимеров содержат сложный полиэфир, такой как поли(молочная кислота), поли(гликолевая кислота), сополимер молочной и гликолевой кислоты или поликапролактон. Более предпочтительно один или несколько полимеров содержат или дополнительно содержат сложный полиэфир, присоединенный к гидрофильному полимеру, такому как простой полиэфир. В вариантах осуществления простой полиэфир включает полиэтиленгликоль. Еще более предпочтительно один или несколько полимеров включают сложный полиэфир и сложный полиэфир, присоединенный к гидрофильному полимеру, такому как простой полиэфир. В других вариантах осуществления один или несколько полимеров присоединяют к одному или нескольким антигенам и/или одному или нескольким адъювантам. В вариантах осуществления, по меньшей мере, некоторые из полимеров присоединяют к антигену(ам) и/или, по меньшей мере, некоторые из полимеров присоединяют к адъюванту(ам). Предпочтительно, если присутствует более одного типа полимера, один из типов полимера присоединяют к антигену(ам). В вариантах осуществления один из других типов полимера присоединяют к адъюванту(ам). Например, в вариантах осуществления, когда наноносители включают сложный полиэфир и сложный полиэфир, присоединенный к гидрофильному полимеру, такому как простой полиэфир, сложный полиэфир присоединяют к адъюванту, тогда как сложный полиэфир, присоединенный к гидрофильному полимеру, такому как простой полиэфир, присоединяют к антигену(ам). В вариантах осуществления, где наноносители содержат антиген для Т-хелперной клетки, антиген для Т-хелперной клетки можно инкапсулировать в наноноситель.
В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители могут не включать полимерный компонент. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители могут включать металлические частицы, квантовые точки, керамические частицы и т.д. В некоторых вариантах осуществления неполимерный синтетический наноноситель представляет собой совокупность из неполимерных компонентов, такую как совокупность атомов металла (например, атомов золота).
В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители могут необязательно содержать одну или несколько амфифильных структурных единиц. В некоторых вариантах осуществления амфифильная структурная единица может содействовать получению синтетических наноносителей с повышенной стабильностью, усовершенствованной однородностью или повышенной вязкостью. В некоторых вариантах осуществления амфифильные структурные единицы можно ассоциировать с внутренней поверхностью липидной мембраны (например, липидным бислоем, липидным монослоем и т.д.). Многие амфифильные структурные единицы, известные в настоящем уровне техники, подходят для применения в получении синтетических наноносителей в соответствии с настоящим изобретением. Такие амфифильные структурные единицы включают без ограничений фосфоглицериды; фосфатидилхолины; дипальмитоилфосфатидилхолин (DPPC); диолеилилфосфатидилэтаноламин (DOPE); диолеилоксипропилтриэтиламмоний (DOTMA); диолеилфосфатидилхолин; холестерин; сложный эфир холестерина; диацилглицерин; диацилглицеринсукцинат; дифосфатидилглицерин (DPPG); гександеканол; жирные спирты, такие как полиэтиленгликоль (PEG); полиоксиэтилен-9-лауриловый эфир; поверхностноактивную жирную кислоту, такую как пальмитиновая кислота или олеиновая кислота; жирные кислоты; моноглицериды жирных кислот; диглицериды жирных кислот; амиды жирных кислот; сорбитантриолеат (Span®85) гликохолат; сорбитанмонолаурат (Span®20); полисорбат 20 (Tween®20); полисорбат 60 (Tween®60); полисорбат 65 (Tween®65); полисорбат 80 (Tween®80); полисорбат 8 5 (Tween®85); полиоксиэтиленмоностеарат; сурфактин; полоксамер; сложный эфир сорбитана и жирных кислот, такой как сорбитантриолеат; лецитин; лизолецитин; фосфатидилсерин; фосфатидилинозитол; сфингомиелин; фосфатидилэтаноламин (цефалин); кардиолипин; фосфатидная кислота; цереброзиды; дицетилфосфат; дипальмитоилфосфатидилглицерин; стеариламин; додециламин; гексадециламин; ацетилпальмитат; глицеринрицинолеат; гексадецилстеарат; изопропилмиристат; тилоксапол; поли(этиленгликоль)5000фосфатидилэтаноламин; поли(этиленгликоль)400-моностеарат; фосфолипиды; синтетические и/или естественные детергенты со свойствами высокоактивного поверхностно-активного вещества; дезоксихолаты; циклодекстрины; хаотропные соли; агенты для образования ионной пары и их комбинации. Компонент амфифильная структурная единица может представлять собой смесь из различных амфифильных структурных единиц. Специалисты в данной области будут учитывать, что это иллюстративный не исчерпывающий список веществ с активностью поверхностно-активного вещества. Любую амфифильную струк
- 17 030863 турную единицу можно применять в получении синтетических наноносителей, применяемых в соответствии с настоящим изобретением.
В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители могут необязательно содержать один или несколько углеводов. Углеводы могут быть естественными или синтетическими. Углевод может представлять собой дериватизированный естественный углевод. В определенных вариантах осуществления углевод включает моносахарид или дисахарид, в том числе без ограничения глюкозу, фруктозу, галактозу, рибозу, лактозу, сахарозу, мальтозу, трегалозу, целлобиозу, маннозу, ксилозу, арабинозу, глюкороновую кислоту, галактуроновую кислоту, маннуроновую кислоту, глюкозамин, галактозамин и нейраминовую кислоту. В определенных вариантах осуществления углевод представляет собой полисахарид, включающий без ограничения пуллулан, целлюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу (НРМС), гидроксицеллюлозу (НС), метилцеллюлозу (МС), декстран, циклодекстран, гликоген, крахмал, гидроксиэтилкрахмал, каррагинан, гликон, амилозу, хитозан, N,Oкарбоксилметилхитозан, альгин и альгиновую кислоту, крахмал, хитин, гепарин, инулин, конжак, глюкоманнан, пустулан, гепарин, гиалуроновую кислоту, курдлан и ксантан. В вариантах осуществления синтетические наноносители по изобретению не включают (или в частности исключают) углеводы, такие как полисахарид. В определенных вариантах осуществления углевод может включать производное углевода, такое как сахароспирт, в том числе без ограничения маннит, сорбит, ксилит, эритрит, мальтит и лактит.
Композиции по настоящему изобретению включают синтетические наноносители по изобретению в комбинации с фармацевтически приемлемыми наполнителями, такими как консерванты, буферы, солевой раствор или фосфатно-солевой буфер. Композиции можно получать с использованием традиционных техник фармацевтического производства и присоединения для достижения применимых лекарственных форм. В варианте осуществления синтетические наноносители по изобретению суспендируют в стерильном солевом растворе для инъекций вместе с консервантом.
В вариантах осуществления, когда получают синтетические наноносители как носители для средств (например, антигена или адъюванта) для применения в вакцинах, могут быть применимы способы присоединения средств к синтетическим наноносителям. Если средство представляет собой малую молекулу, преимущество может иметь прикрепление средства к полимеру до сборки синтетических наноносителей. В вариантах осуществления также преимущество может иметь получение синтетических наноносителей с поверхностными группами, которые применяются для присоединения средства к синтетическому наноносителю посредством использования этих поверхностных групп, а не прикрепления средства к полимеру, и затем с использованием этого полимерного конъюгата в конструировании синтетических наноносителей. С целью прикрепления средств к синтетическим наноносителям может применяться ряд реакций.
В определенных вариантах осуществления присоединение может представлять собой ковалентный линкер. В вариантах осуществления пептиды по настоящему изобретению можно ковалентно присоединять к внешней поверхности через 1,2,3-триазольный линкер, образованный реакцией 1,3-диполярного циклоприсоединения азидогрупп на поверхности наноносителя с антигеном и/или адъювантом, содержащим алкиновую группу, или реакцией 1,3-диполярного циклоприсоединения алкинов на поверхности наноносителя с антигеном или адъювантом, содержащим азидогруппу. Такие реакции циклоприсоединения предпочтительно осуществляют в присутствии Cu(I)-катализатора вместе с подходящим Cu(I)лигандом и восстанавливающим средством для восстановления Cu(II)-соединения до каталитически активного Cu(I)-соединения. Это Cu(I)-катализированное азид-алкиновое циклоприсоединение (CuAAC) можно также называть клик-реакцией.
Дополнительно, ковалентное присоединение может включать ковалентный линкер, который включает амидный линкер, дисульфидный линкер, тиоэфирный линкер, гидразоновый линкер, гидразидный линкер, иминовый или оксимовый линкер, мочевинный или тиомочевинный линкер, амидиновый линкер, аминовый линкер и сульфонамидный линкер.
Амидный линкер образуется через амидную связь между амином на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, с группой карбоновой кислоты второго компонента, такого как наноноситель. Амидную связь в линкере можно получать с использованием любой из традиционных реакций образования амидной связи с надлежаще защищенными аминокислотами или антигенами или адъювантами и активированными карбоновыми кислотами, как например, N-гидроксисукцинимид-активированным сложным эфиром.
Дисульфидный линкер образуется через образование дисульфидной (S-S) связи между двумя атомами серы в форме, например, R1-S-S-R2. Дисульфидная связь может образовываться посредством тиольного обмена антигена и/или адъюванта, содержащего тиольную/меркаптановую группу(^Н) с другой активированной тиольной группой на полимере или наноносителе, или наноносителя, содержащего тиольные/меркаптановые группы с антигеном и/или адъювантами, содержащими активированную тиольную группу.
- 18 030863
R, hl —Ν Ϋ
Триазольный линкер, в частности 1,2,3-триазол в форме , где R| и R2 могут представлять собой любые химические структурные единицы, образуется с помощью реакции 1,3-диполярного циклоприсоединения азида, прикрепленного к первому компоненту, такому как наноноситель, с концевым алкином, прикрепленным ко второму компоненту, такому как пептид. Реакция 1,3-диполярного циклоприсоединения осуществляется с или без катализатора, предпочтительно с Cu(I)-катализатором, который связывает два компонента через 1,2,3-триазольную функциональную группу. Данная химия детально описывается Sharpless et al., Angew. Chem. Int. Ed. 41(14), 2596, (2002) и Meldal et al, Chem. Rev., 2008, 108(8), 2952-3015 и часто упоминается как клик-реакция или CuAAC.
В вариантах осуществления получают полимер, содержащий азидную или алкиновую группу, концевую относительно полимерной цепи. Этот полимер затем применяют для получения синтетического наноносителя таким способом, что несколько алкиновых или азидных групп располагают на поверхности такого наноносителя. Альтернативно, синтетический наноноситель можно получать другим путем, и впоследствии функционализировать алкиновыми или азидными группами. Антиген или адъювант получают с присутствием или алкиновой (если полимер содержит азид) или азидной (если полимер содержит алкин) группы. Антигену или адъюванту затем предоставляют возможность реагировать с наноносителем через реакцию 1,3-диполярного циклоприсоединения с или без катализатора, который ковалентно присоединяет антиген или адъювант к частице через 1,4-дизамещенный 1,2,3-триазольный линкер.
Тиоэфирный линкер получается в результате образования сера-углеродной (тиоэфирной) связи в форме, например, Rj-S-R2. Тиоэфир можно получить или посредством алкилирования тиольной/меркаптановой (-SH) группы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, алкилирующей группой, такой как галогенид или эпоксид, на втором компоненте, таком как наноноситель. Тиоэфирные линкеры также могут образовываться посредством присоединения по Михаэлю тиольной/меркаптановой группы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, к электрон-дефицитной алкеновой группе на втором компоненте, таком как полимер, содержащий малеимидную группу или винилсульфоновую группу в качестве акцептора Михаэля. По-другому, тиоэфирные линкеры можно получить посредством радикальной тиол-еновой реакции тиольной/меркаптановой группы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, с алкеновой группой на втором компоненте, таком как полимер или наноноситель.
Гидразоновый линкер получают в результате реакции гидразидной группы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, с альдегидной/кетоновой группой на втором компоненте, таком как наноноситель.
Гидразидный линкер образуется в результате реакции гидразиновой группы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, с группой карбоновой кислоты на втором компоненте, таком как наноноситель. Такую реакцию, как правило, проводят с использованием химии, подобной образованию амидной связи, где карбоновая кислота активируется активирующим реагентом.
Иминовый или оксимовый линкер образуется в результате реакции аминогруппы или Nалкоксиаминогруппы (или аминооксигруппы) на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, с альдегидной или кетонной группой на втором компоненте, таком как наноноситель.
Мочевинный или тиомочевинный линкер получается в результате реакции аминогруппы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, с изоцианатной или тиоизоцианатной группой на втором компоненте, таком как наноноситель.
Амидиновый линкер получают в результате реакции аминовой группы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, со сложноэфирной группой имида на втором компоненте, таком как наноноситель.
Аминовый линкер получают с помощью реакции алкилирования аминовой группы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, алкилирующей группой, такой как галогенидная, эпоксидная или сульфонатсложноэфирная группа, на втором компоненте, таком как наноноситель. Альтернативно, аминовый линкер можно также получить посредством восстановительного аминирования аминовой группы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, альдегидной или кетоновой группой на втором компоненте, таком как наноноситель, подходящим восстанавливающим реагентом, таким как цианоборгидрид натрия или триацетоксиборгидрид натрия.
Сульфонамидный линкер получают в результате реакции аминовой группы на одном компоненте, таком как антиген или адъювант, с сульфонилгалогенидной (такой как сульфонилхлоридная) группой на втором компоненте, таком как наноноситель.
Сульфоновый линкер получают посредством присоединения по Михаэлю нуклеофила к винилсульфону. Либо винилсульфон, либо нуклеофил могут быть на поверхности наночастицы или присоединяться к антигену или адъюванту.
Антиген или адъювант можно также конъюгировать к наноносителю посредством способов нековалентной конъюгации. Например, отрицательно заряженный антиген или адъювант можно конъюгировать к положительно заряженному наноносителю посредством электростатической адсорбции. Антиген или адъювант, содержащий лиганд к металлу, можно также конъюгировать к наноносителю, содержащему
- 19 030863 металлокомплекс, через комплекс металл-лиганд.
В вариантах осуществления антиген или адъювант можно прикреплять к полимеру, например блокполимеру молочной кислоты-полиэтиленгликоля, до сборки синтетического наноносителя, или синтетический наноноситель можно формировать с реакционноспособными или способными к активации группами на его поверхности. В последнем случае антиген или адъювант получают с группой, которая совместима с химией присоединения к группе, которая представлена поверхностью синтетических наноносителей. В других вариантах осуществления средство, такое как пептидный антиген, можно прикрепить к VLP или липосомам с использованием подходящего линкера. Линкер представляет собой соединение или реагент, который способен соединить две молекулы вместе. В варианте осуществления линкер может представлять собой гомобифункциональный или гетеробифункциональный реагент, описываемый в Hermanson 2008. Например, VLP или липосомный синтетический наноноситель, содержащий карбоксильную группу на поверхности, можно обрабатывать гомобифункциональным линкером, дигидразидом адипиновой кислоты (ADH), в присутствии EDC для образования соответствующего синтетического наноносителя с ADH-линкером. Получающийся в результате ADH-связанный синтетический наноноситель затем конъюгируют со средством, содержащим кислотную группу, через другой конец ADH-линкера на NC для получения соответствующего конъюгата VLP или липосома-пептид.
Для подробных описаний доступных способов конъюгации см. Hermanson G.T. Bioconjugate Techniques, 2nd Edition, Academic Press, 2008. В дополнение к ковалентному присоединению антиген или адъювант можно присоединять с помощью адсорбции к предварительно сформированному синтетическому наноносителю или его можно присоединять с помощью инкапсуляции во время образования синтетического наноносителя.
Способы получения и применения композиций и связанные с ними способы.
Синтетические наноносители можно получать с использованием большого разнообразия способов, известных в настоящем уровне техники. Например, синтетические наноносители можно формировать с помощью способов, таких как нанопреципитация, фокусирование потока с использованием жидкостных каналов, распылительная сушка, выпаривание растворителя из одинарной и двойной эмульсии, экстракция растворителем, разделение фаз, размалывание, методики микроэмульсий, микрообработка, нанообработка, защитные слои, простая и сложная коацервация, и других способов, хорошо известных специалистам в данной области. Альтернативно или дополнительно были описаны синтезы водных и органических растворителей для монодисперсных полупроводниковых проводящих, магнитных, органических и других наноматериалов (Pellegrino et al., 2005, Small, 1:48; Murray et al., 2000, Ann. Rev. Mat. Sci., 30:545 и Trindade et al., 2001, Chem. Mat., 13:3843). В литературе были описаны дополнительные способы (см., например, Doubrow, Ed., Microcapsules and Nanoparticles in Medicine and Pharmacy, CRC Press, Boca Raton, 1992; Mathiowitz et al., 1987, J. Control. Release, 5:13; Mathiowitz et al., 1987, Reactive Polymers, 6:275; and Mathiowitz et al., 1988, J. Appl. Polymer Sci., 35:755, а также патенты США №№ 5578325 и 6007845; P. Paolicelli et al., Surface-modified PLGA-based Nanoparticles that can Efficiently Associate and Deliver Virus-like Particles Nanomedicine. 5(6) :843-853 (2010)).
Различные материалы можно инкапсулировать в синтетические наноносители, как желательные, с использованием ряда способов, включающих без ограничения С. Astete et al. Synthesis and characterization of PLGA nanoparticles J. Biomater. Sci. Polymer Edn, vol. 17, No. 3, pp. 247-289 (2006); K. Avgoustakis Pegylated Poly(Lactide) and Poly(Lactide-Co-Glycolide) Nanoparticles: Preparation, Properties and Possible Applications in Drug Delivery Current Drug Delivery 1:321-333 (2004); C. Reis et al. Nanoencapsulation I. Methods for preparation of drug-loaded polymeric nanoparticles Nanomedicine 2:8- 21 (2006); P. Paolicelli et al. Surface-modified PLGA-based Nanoparticles that can Efficiently Associate and Deliver Virus-like Particles Nanomedicine. 5(6) :843-853 (2010). Можно применять другие способы, подходящие для инкапсулирования материалов, таких как олигонуклеотиды, в синтетические наноносители, в том числе без ограничения способы, раскрытые в патенте Соединенных Штатов № 6632671, Unger, от 14 октября 2003 г.
В определенных вариантах осуществления синтетические наноносители получают с помощью процесса нанопреципитации или распылительной сушкой. Условия, применяемые при получении синтетических наноносителей, можно менять для выхода частиц желаемого размера или свойств (например, гидрофобность, гидрофильность, внешняя морфология, липкость, форма и т.д.). Способ получения синтетических наноносителей и применяемые условия (например, растворитель, температура, концентрация, скорость потока воздуха и т.д.) могут зависеть от материалов, которые необходимо присоединить к синтетическим наноносителям, и/или композиции из полимерной матрицы.
Если частицы, полученные с помощью любого из вышеупомянутых способов, имеют размер, варьирующий вне желаемого диапазона, частицы можно сортировать по размеру, например, с использованием сита.
Элементы синтетических наноносителей по изобретению (такие как нацеливающие фрагменты, полимерные матрицы, антигены, адъюванты и т.п.) можно присоединять к синтетическому наноносителю, например, посредством одной или нескольких ковалентных связей, или можно присоединять с помощью одного или нескольких линкеров. Дополнительные способы функциализирования синтетических наноносителей можно адаптировать из опубликованной патентной заявки США № 20060002852, Saltzman et
- 20 030863 al. , опубликованной патентной заявки США № 20090028910, DeSimone et al. или опубликованной международной патентной заявки WO 2008127532 Al, Murthy et al.
Альтернативно или дополнительно синтетические наноносители можно присоединять к элементу, такому как нацеливающие фрагменты, адъюванты, различные антигены и т.д., прямо или опосредованно путем нековалентных взаимодействий. В нековалентных вариантах осуществления нековалентное присоединение опосредуется нековалетными взаимодействиями, включающими без ограничения взаимодействия зарядов, аффинные взаимодействия, металлокоординацию, физическую адсорбцию, взаимодействия гость-хозяин, гидрофобные взаимодействия, ТТ-стэкинг взаимодействия, взаимодействия с водородными связями, ван-дер-ваальсовы взаимодействия, магнитные взаимодействия, электростатические взаимодействия, диполь-дипольные взаимодействия и/или их комбинации. Такие присоединения можно располагать, чтобы они были на внешней поверхности или внутренней поверхности синтетического наноносителя по изобретению. В вариантах осуществления инкапсуляция и/или адсорбция представляет собой форму присоединения.
В вариантах осуществления синтетические наноносители по изобретению можно комбинировать с другими адъювантами, смешивая в том же разбавителе или системе доставки. Такие адъюванты могут включать без ограничений минеральные соли, такие как квасцы, квасцы, комбинированные с монофосфориллипидом (MPL) А энтеробактерий, таких как Escherihia coli, Salmonella minnesota, Salmonella typhimurium или Shigella flexneri, или, в частности, с MPL® (AS04), MPL А вышеупомянутых бактерий отдельно, сапонины, такие как QS-21,Quil-A, ISCOM, ISCOMATRIX™, эмульсии, такие как MF59™, Montanide® ISA 51 и ISA 720, AS02 (QS21+сквален+MPL®), AS15, липосомы и липосомальные составы, такие как AS01, синтезированные или специфически полученные микрочастицы и микроносители, такие как пузырьки наружной мембраны бактериального происхождения (OMV) N. gonorrheae, Chlamydia trachomatis и других, или частицы хитозана, депообразующие средства, такие как блок-сополимеры от Pluronic®, специфически модифицированные или полученные пептиды, такие как мурамилдипептид, аминоалкилглюкозаминид-4-фосфаты, такие как RC529, или белки, такие как бактериальные анатоксины или фрагменты токсинов. Дополнительные применимые адъюванты можно найти в WO 2002/032450; патенте США № 7357936 Адъювантные системы и вакцины (Adjuvant Systems and Vaccines); патенте США № 7147862 Вакцинная композиция, содержащая адъюванты (Vaccine composition containing adjuvants); патенте США № 6544518 Вакцины (Vaccines); патенте США № 5750110 Вакцинная композиция, содержащая адъюванты (Vaccine composition containing adjuvants). Дозы таких иных адъювантов можно определить с использованием традиционных исследований с целью определения оптимальной дозы. В вариантах осуществления адъювант, который не присоединяют к перечисленным синтетическим наноносителям, может быть одинаковым или отличаться от адъюванта, который присоединяют к синтетическим наноносителям, если таковой присутствует. В других вариантах осуществления дозы такого адъюванта также могут быть одинаковыми или отличающимися.
В вариантах осуществления любой адъювант, присоединенный к синтетическим наноносителям по изобретению, может быть отличающимся, подобным или идентичным таковому, не присоединенному к каким-либо наноносителям. Адъюванты (присоединенные или не присоединенные) можно вводить отдельно в отличающийся момент времени и/или в отличающееся местоположение на теле и/или с помощью отличающегося пути иммунизации. Дополнительно отдельный адъювант или популяция наноносителей может вводиться отдельно в отличающийся момент времени и/или с помощью отличающегося пути иммунизации.
Популяции синтетических наноносителей можно комбинировать для образования фармацевтических лекарственных форм по настоящему изобретению с использованием традиционных фармацевтических способов смешивания. Таковые включают смешивание жидкость-жидкость, в котором две или более суспензии, каждая содержащая один или несколько поднаборов наноносителей, непосредственно комбинируют или объединяют при посредстве одного или нескольких сосудов, содержащих разбавитель. Так как синтетические наноносители можно также получать или хранить в форме порошка, можно производить сухое смешивание порошок-порошок, а также можно ресуспендировать два или более порошков в общей среде. В зависимости от свойств наноносителей и их потенциалов взаимодействия преимущество может отдаваться одному или другому пути смешивания.
Типичные композиции по изобретению, содержащие синтетические наноносители, могут содержать неорганические или органические буферы (например, натриевые или калиевые соли - фосфат, карбонат, ацетат или цитрат) и средства регулировки рН (например, соляная кислота, гидроксид натрия или гидроксид калия, соли - цитрат или ацетат, аминокислоты и их соли), антиоксиданты (например, аскорбиновая кислота, альфа-токоферол) , поверхностно-активные вещества (например, полисорбат 20, полисорбат 80, полиоксиэтилен 9-10-нонилфенол, дезоксихолат натрия), стабилизаторы раствора и/или крио/лиостабилизаторы (например, сахароза, лактоза, маннит, трегалоза), средства регулировки осмотического давления (например, соли или сахара), антибактериальные средства (например, бензойная кислота, фенол, гентамицин), противовспенивающие средства (например, полидиметилсилозон), консерванты (например, тимерозал, 2-феноксиэтанол, EDTA), полимерные стабилизаторы и средства, регулирующие
- 21 030863 вязкость (например, поливинилпирролидон, полоксамер 488, карбоксиметилцеллюлоза) и сорастворители (например, глицерин, полиэтиленгликоль, этанол).
Композиции по настоящему изобретению содержат синтетические наноносители по изобретению в комбинации с фармацевтически приемлемыми наполнителями. Композиции можно изготавливать с использованием традиционных техник фармацевтического производства и присоединения для достижения применимых лекарственных форм. Техники, подходящие для применения на практике настоящего изобретения, можно найти в Handbook of Industrial Mixing: Science and Practice, Edited by Edward L. Paul, Victor A. Atiemo-Obeng, и Suzanne M. Kresta, 2004 John Wiley & Sons, Inc.; и Pharmaceutics: The Science of Dosage Form Design, 2nd Ed., Ed. M. E. Auten, 2001, Churchill Livingstone. В варианте осуществления синтетические наноносители по изобретению суспендируют в стерильном солевом растворе для инъекций вместе с консервантом.
Следует понимать, что композиции настоящего изобретения можно изготавливать любым подходящим способом, и настоящее изобретение никоим образом не ограничивается композициями, которые можно получить с использованием способов, описанных в настоящем документе. Выбор приемлемого способа может требовать внимания к свойствам конкретных фрагментов, которые ассоциируют.
В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители по изобретению производят при стерильных условиях или стерилизуют в конце. Это может гарантировать, что образующаяся композиция является стерильной и неинфекционной, таким образом, повышая безопасность по сравнению с нестерильными композициями. Это обеспечивает ценную меру безопасности, в особенности, когда субъекты, получающие синтетические наноносители, имеют иммунные дефекты, страдают от инфекции и/или восприимчивы к инфекции. В некоторых вариантах осуществления синтетические наноносители по изобретению можно лиофилизировать и хранить в суспензии или в качестве лиофилизированного порошка в зависимости от методики составления в течение длительных периодов без потери активности.
Композиции по изобретению можно вводить посредством ряда путей введения, включающих без ограничения парентеральный (такой как подкожный, внутримышечный, внутривенный или внутрикожный); пероральный; трансназальный, интраназальный, трансмукозальный, сублингвальный, ректальный, глазной, трансдермальный, черескожный или с помощью комбинации из этих путей.
Дозы лекарственных форм содержат варьирующие количества популяций синтетических наноносителей и/или варьирующие количества адъювантов и/или антигенов по настоящему изобретению. Количество синтетических наноносителей, и/или адъювантов, и/или антигенов, присутствующих в лекарственных формах по изобретению, может варьировать в соответствии с природой адъювантов и/или антигенов, терапевтической полезностью, которую необходимо достигнуть, и другими такими параметрами. В некоторых вариантах осуществления дозы лекарственных формы являются системными дозами. В вариантах осуществления можно проводить исследования с целью определения оптимальной дозы для установления оптимального терапевтического количества популяции синтетических наноносителей и/или количества адъювантов и/или антигенов, которое должно присутствовать в лекарственной форме. В вариантах осуществления синтетические наноносители, и/или адъюванты, и/или антигены присутствуют в лекарственной форме в количестве, эффективном для выработки иммунного ответа при введении субъекту. Возможным является определение количеств адъювантов и/или антигенов, эффективных для выработки иммунного ответа, с использованием традиционных исследований и техник с целью определения оптимальной дозы на субъектах. Лекарственные формы по изобретению можно вводить с разной частотой. В предпочтительном варианте осуществления по меньшей мере одного введения лекарственной формы достаточно для выработки фармакологически значимого ответа. В более предпочтительном варианте осуществления для обеспечения фармакологически значимого ответа применяют по меньшей мере два введения, по меньшей мере три введения или по меньшей мере четыре введения лекарственной формы.
Композиции и способы, описанные в настоящем документе, можно применять для индуцирования, усиления, стимулирования, модулирования, направления или перенаправления иммунного ответа. Композиции и способы, описанные в настоящем документе, можно применять в диагностике, профилактике и/или лечении состояний, таких как виды рака, инфекционные заболевания, метаболические заболевания, дегенеративные заболевания, аутоиммунные заболевания, воспалительные заболевания, иммунологические заболевания или другие расстройства и/или состояния. Композиции и способы, описанные в настоящем документе, можно также применять для профилактики или лечения зависимости, такой как зависимость от никотина или наркотического средства. Композиции и способы, описанные в настоящем документе, можно также применять для профилактики и/или лечения состояния, происходящего от воздействия токсина, опасного вещества, экзогенного токсина или другого вредного агента.
В вариантах осуществления обеспеченные композиции можно применять для индуцирования быстрой и сильной системной индукции провоспалительных цитокинов, таких как TNF-α, IL-6 и/или IL-12. Обеспеченные композиции, следовательно, можно вводить субъектам, нуждающимся в воспалительном ответе, предпочтительно системном воспалительном ответе. В других вариантах осуществления обеспеченные композиции можно применять для быстрой и сильной системной индукции цитокинов, которые
- 22 030863 важны для Th1-иммунного ответа, таких как IFN-γ, IL-12 и/или IL-18. Обеспеченные композиции, следовательно, можно вводить субъектам, нуждающимся в TM-ответе, предпочтительно системном Th1ответе. В очередных вариантах осуществления обеспеченные композиции можно применять для индуцирования сильного гуморального ответа. Обеспеченные композиции, следовательно, можно вводить субъектам, нуждающимся в гуморальном ответе. В еще дополнительных вариантах осуществления обеспеченные композиции можно применять для индуцирования сильного специфичного местного CTL-ответа. Обеспеченные композиции, следовательно, можно вводить субъектам, нуждающимся в специфичном местном CTL-ответе. Такой ответ может быть специфичным к любому из антигенов, обеспеченных в данном документе, предпочтительно к одному или нескольким антигенам в композиции по изобретению, или которую вводят по обеспеченному в данном документе и способу по изобретению.
У субъектов, предусматриваемых в данном документе, может быть или они подвергаются риску возникновения рака. Виды рака включают без ограничений рак молочной железы; рак желчных протоков; рак мочевого пузыря; рак головного мозга, включающий глиобластомы и медуллобластомы; рак шейки матки; хориокарциному; рак толстой кишки; рак эндометрия; рак пищевода; рак желудка; гематологические новообразования, включающие острый лимфобластный и миелоидный лейкоз, например Вклеточный CLL; Т-клеточный острый лимфобластный лейкоз/лимфому; гистиолимфоцитоз Бернарда; хронический миелоидный лейкоз, множественную миелому; СПИД-ассоциированные лейкозы и Тклеточный лейкоз/лимфому взрослых; внутриэпителиальные новообразования, включающие болезнь Боуэна и болезнь Педжета, рак печени; рак легкого; лимфомы, включающие болезнь Ходжкина и лимфобластные лимфомы; нейробластомы; рак полости рта, включающий плоскоклеточный рак; рак яичника, включающий возникающие из эпителиальных клеток, стромальных клеток, зародышевых клеток и мезенхимальных клеток; рак поджелудочной железы; рак предстательной железы; рак прямой кишки; саркомы, включающие лейомиосаркому, рабдомиосаркому, липосаркому, фибросаркому и остеосаркому; рак кожи, включающий меланому, карциному из клеток Меркеля, саркому Капоши, базалиому и плоскоклеточный рак; рак яичка, включающий эмбрионально-клеточную опухоль, такую как семинома, несеминома (тератомы, хориокарцинома), стромальные опухоли и герминогенные опухоли; рак щитовидной железы, включающий аденокарциному и медуллярную карциному щитовидной железы, а также рак почки, включающий аденокарциному и опухоль Вильмса.
У субъектов, предусматриваемых в данном документе, может быть или они подвергаются риску возникновения инфекции или инфекционного заболевания. Инфекции или инфекционные заболевания включают без ограничений вирусные инфекционные заболевания, такие как СПИД, ветряная оспа (ветрянка), насморк, цитомегаловирусная инфекция, лихорадка Колорадо, лихорадка денге, геморрагическая лихорадка Эбола, везикулярный стоматит, гепатит, простой герпес, опоясывающий герпес, HPV, грипп (инфлюэнца), лихорадка Ласса, корь, геморрагическая марбург-вирусная лихорадка, инфекционный мононуклеоз, эпидемический паротит, норовирусная инфекция, полиомиелит, прогрессирующая мультифокальная лейкоэнцефалопатия, бешенство, краснуха, SARS, натуральная оспа (оспа животных), вирусный энцефалит, вирусный гастроэнтерит, вирусный менингит, вирусная пневмония, лихорадка Западного Нила и желтая лихорадка; бактериальные инфекционные заболевания, такие как сибирская язва, бактериальный менингит, ботулизм, бруцеллез, кампилобактериоз, болезнь кошачьих царапин, холера, дифтерия, сыпной тиф, гонорея, импетиго, легионеллез, лепра (болезнь Хансена), лептоспироз, листериоз, боррелиоз, мелиоидоз, ревматическая атака, MRSA-инфекция, нокардиоз, коклюш (судорожный кашель), чума, пневмококковая пневмония, орнитоз, Q-лихорадка, пятнистая лихорадка Скалистых гор (RMSF), сальмонеллез, скарлатина, шигеллез, сифилис, столбняк, трахома, туберкулез, туляремия, сальмонеллез, сыпной тиф и инфекции мочевых путей; паразитарные инфекционные заболевания, такие как африканский трипаносомоз, амебиаз, аскаридоз, бабезиоз, болезнь Шагаса, клонорхоз, криптоспоридиоз, цистицеркоз, дифиллоботриоз, дракункулез, эхинококкоз, энтеробиоз, фасциолез, фасциолопсидоз, филяриоз, инфекции, вызываемые свободноживущими амебами, лямблиоз, гнатостомоз, гименолепидоз, кокцидиоз, индийский висцеральный лейшманиоз, лейшманиоз, малярия, метагонимиаз, миаз, онхоцеркоз, педикулез, оксиуроз, чесотка, шистосомоз, тениоз, токсокароз, токсоплазмоз, трихинеллез, трихиноз, трихиуриаз, трихомоноз и трипаносомоз; грибковые инфекционные заболевания, такие как аспергиллез, бластомикоз, кандидоз, кокцидиоидомикоз, криптококкоз, гистоплазмоз, эпидермофития стопы (дерматофитоз) и паховая эпидермофития; прионные инфекционные заболевания, такие как синдром Альперса, злокачественная наследственная инсомния, синдром Г ерстманна-Штреусслера-Шейнкера, куру и вариант болезни Крейтцфельда-Якоба.
Обеспеченный в данном документе субъект также включает таковых, у которых есть или которые подвергаются риску возникновения атопического состояния, такого как без ограничений аллергия, аллергическая астма или атопический дерматит; астмы; хронического обструктивного заболевания легких (COPD, например эмфизема или хронический бронхит) и хронических инфекций вследствие хронических инфекционных агентов, таких как хронический лейшманиоз, кандидоз или шистосомоз и инфекций, вызванных плазмодиями, Toxoplasma gondii, микобактериями, ВИЧ, HBV, HCV EBV или CMV, или любым из вышеизложенного, или любым поднабором из вышеизложенного. Другие показания, которые поддаются лечению при применении композиций по изобретению, включают без ограничений показа
- 23 030863 ния, при которых TM-ответ субъекта является субоптимальным и/или неэффективным. Применение настоящего изобретения может усиливать TM-иммунный ответ субъекта с адъювантом, который может стимулировать TM-иммунный ответ. Субъекты, следовательно, также включают тех, у которых есть или которые подвергаются риску возникновения рака, субъектов со скомпрометированным или субоптимальным иммунитетом, таких как грудные дети, пожилые люди, раковые пациенты, лиц, получающих подавляющие иммунитет лекарства или облучение, пациентов с гемодиализом и пациентов с генетической или идиопатический иммунной дисфункцией.
Примеры
Пример 1. Введение наноносителя и примешанного адъюванта R848 приводит к сильной системной продукции воспалительных цитокинов.
Материалы для составов с наноносителями NC-R848-1.
Уксуснокислую соль амида пептида овальбумина 323-339 закупали у Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505. № продукта 4065609). Синтезировали конъюгат PLGA-R848 из композиции мономеров лактида/гликолида 75/25 с молекулярным весом приблизительно 4100 Да с содержанием R848 5,2% вес./вес. Синтезировали PLA-PEG-никотин с PEG-блоком, приблизительно 3500 Да с концевым никотином, и DL-PLA-блоком, приблизительно 15000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=1100031000, 87-89% гидролизованный) закупали у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения наноносителя NC-R848-1.
Растворы готовили следующим образом:
раствор 1: пептид овальбумина 323-339 из расчета 70 мг/мл готовили в 0,13 н. соляной кислоте при комнатной температуре;
раствор 2: PLGA-R848 из расчета 75 мг/мл и PLA-PEG-никотин из расчета 25 мг/мл в дихлорметане готовили растворением PLGA-R848 при 100 мг/мл в дихлорметане и PLA-PEG-никотина при 100 мг/мл в дихлорметане, а затем объединением 3 частей раствора PLGA-R848 с 1 частью раствора PLA-PEG никотина;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ в 100 мМ фосфатном буфере, рН 8; раствор 4: 70 мМ фосфатный буфер, рН 8.
Вначале подготавливали первичную эмульсию (\М1/О) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,1 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяли в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формировали вторичную эмульсию (W1/O/W2), добавляя раствор 3 (2,0 мл) к первичной эмульсии и обрабатывая ультразвуком при 30% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию вливали в открытый 50 мл химический стакан, содержащий 70 мМ раствор фосфатного буфера (30 мл), и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, позволяя дихлорметану испариться, а наноносителям образовать суспензию. Часть суспендированных наноносителей отмывали с помощью перенесения суспензии наноносителей в центрифужную пробирку, центрифугирования при 13800 g в течение 60 мин, удаления супернатанта и ресуспендирования осадка в фосфатно-солевом буфере. Эту процедуру отмывки повторяли, и затем осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере для достижения суспензии наноносителей с номинальной концентрацией 10 мг/мл на основе полимера. Суспензию хранили замороженной при -20°С до применения.
Таблица 1
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
ID наноносителя Эффективный диаметр (нм) Агонист TLR, % вес./вес. Пептид для Тхелперной клетки, % вес./вес.
NC-R848-1
220
Материалы для составов NC-R848-2.
Уксуснокислую соль амида пептида овальбумина 323-339 закупали у Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505. № продукта 4065609). Синтезировали конъюгат PLGA-R848 из композиции мономеров лактида/гликолида 75/25 с молекулярным весом приблизительно 4100 Да и с содержанием R8485,2% вес./вес. Синтезировали PLA-PEG-никотин с PEG-блоком приблизительно 5000 Да с концевым никотином и DL-PLA-блоком приблизительно 17000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=1100031000, 87-89% гидролизованный) закупали у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения наноносителей NC-R848-2.
Растворы готовили следующим образом:
раствор 1: пептид овальбумина 323-339 из расчета 70 мг/мл готовили в 0,13 н. соляной кислоте при комнатной температуре;
раствор 2: PLGA-R848 из расчета 75 мг/мл и PLA-PEG-никотин из расчета 25 мг/мл в дихлорметане готовили растворением PLGA-R848 при 100 мг/мл в дихлорметане и PLA-PEG-никотина при 100 мг/мл в дихлорметане, а затем объединением 3 частей раствора PLGA-R848 с 1 частью раствора PLA-PEG
- 24 030863 никотина;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ в 100 мМ фосфатном буфере, рН 8; раствор 4: 70 мМ фосфатный буфер, рН 8.
Вначале подготавливали первичную эмульсию (\У1/О) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,1 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяли в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формировали вторичную эмульсию (W1/O/W2), добавляя раствор 3 (2,0 мл) к первичной эмульсии и обрабатывая ультразвуком при 30% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию вливали в открытый 50 мл химический стакан, содержащий 70 мМ раствор фосфатного буфера (30 мл), и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, позволяя дихлорметану испариться, а наноносителям образовать суспензию. Часть суспендированных наноносителей отмывали с помощью перенесения суспензии наноносителей в центрифужную пробирку, центрифугирования при 13800 g в течение 60 мин, удаления супернатанта и ресуспендирования осадка в фосфатно-солевом буфере. Эту процедуру отмывки повторяли, и затем осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере для достижения суспензии наноносителей с номинальной концентрацией 10 мг/мл на основе полимера. Суспензию хранили замороженной при -20°С до применения.
Таблица 2
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
ID наноносителя Эффективный диаметр (нм) Агонист TLR, % вес./вес. Пептид для Тхелперной клетки, з вес./вес.
NC-R848-2 229 R848, 3,3 Ova 323-339, 1,6
Материалы для составов только NC.
Уксуснокислую соль амида пептида овальбумина 323-339 закупали у Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505. № продукта 4065609). PLGA с содержанием лактида 73% и гликолида 27% и характеристической вязкостью 0,12 дл/г закупали у SurModics Pharmaceuticals (756 Tom Martin Drive, Birmingham, AL 35211. Код продукта 7525 DLG 1A) . Синтезировали PLA-PEG-никотин с PEGблоком приблизительно 3500 Да с концевым никотином и DL-PLA-блоком приблизительно 15000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=11000-31000, 87-89% гидролизованный) закупали у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения только NC.
Растворы готовили следующим образом:
раствор 1: пептид овальбумина 323-339 из расчета 70 мг/мл готовили в 0,13 н. соляной кислоте при комнатной температуре;
раствор 2: PLGA из расчета 75 мг/мл и PLA-PEG-никотин из расчета 25 мг/мл в дихлорметане готовили растворением PLGA при 100 мг/мл в дихлорметане и PLA-PEG-никотина при 100 мг/мл в дихлорметане, а затем объединением 3 частей раствора PLGA с 1 частью раствора PLA-PEG-никотина;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ в 100 мМ фосфатном буфере, рН 8; раствор 4: 70 мМ фосфатный буфер, рН 8.
Вначале подготавливали первичную эмульсию (\У1/О) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,1 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяли в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формировали вторичную эмульсию (W1/O/W2), добавляя раствор 3 (2,0 мл) к первичной эмульсии и обрабатывая ультразвуком при 30% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию вливали в открытый 50 мл химический стакан, содержащий 70 мМ раствор фосфатного буфера (30 мл), и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, позволяя дихлорметану испариться, а наноносителям образовать суспензию. Часть суспендированных наноносителей отмывали с помощью перенесения суспензии наноносителей в центрифужную пробирку, центрифугирования при 13800 g в течение 60 мин, удаления супернатанта и ресуспендирования осадка в фосфатно-солевом буфере. Эту процедуру отмывки повторяли, и затем осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере для достижения суспензии наноносителей с номинальной концентрацией 10 мг/мл на основе полимера. Суспензию хранили замороженной при -20°С до применения.
Таблица 3
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
Наноноситель Эффективный диаметр (нм) Агонист TLR, % вес./вес. Пептид для Тхелперной клетки, % вес./вес.
Только NC 176 нет 1,1
Результаты.
Группам мышей инъецировали подкожно в задние конечности 100 мкг наноносителей (NC), соеди
- 25 030863 ненных, несоединенных и смешанных с низкомолекулярным нуклеозидным аналогом и известным агонистом TLR7/8, а также адъювантом, R848. Количества R848 в наноносителе составляли 2-3%, что дает 2-3 мкг присоединенного R848 на инъекцию; количество свободного применяемого R848 составляло 20 мкг на инъекцию. Сыворотку мышей отбирали терминальным забором крови, и измеряли продукцию системных цитокинов в сыворотке в различные моменты времени с помощью ELISA (BD Biosciences). Как видно на фиг. 1А-1С, наблюдалась сильная системная продукция главных провоспалительных цитокинов TNF-α, IL-6 и IL-12 при применении примешанного R848 (NC+R848), в то время как экспрессия TNF-α, IL-6 и IL-12 не обнаруживалась при применении двух отдельных препаратов NC, соединенных с R848 (NC-R848-1 и NC-R848-2). Отличие в пиках уровней экспрессии цитокинов составило >100 раз для TNF-α и IL-6 и >50 раз для IL-12. NC, не соединенный с R848 (обозначенный как только NC) , не индуцировал какие-либо системные цитокины при его применении без примешанного R848.
Пример 2. Присоединение наноносителя к адгьюванту R848 не ингибирует системную продукцию иммунного цитокина IFN-γ.
Материалы для составов с наноносителями NC-R848.
Уксуснокислую соль амида пептида овальбумина 323-339 закупали у Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505. № продукта 4065609). Синтезировали конъюгат PLGA-R848 из композиции мономеров лактида/гликолида 75/25 с молекулярным весом приблизительно 4100 Да и с содержанием R8485,2% вес./вес. Синтезировали PLA-PEG-никотин с PEG-блоком приблизительно 3500 Да с концевым никотином и DL-PLA-блоком приблизительно 15000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=1100031000, 87-89% гидролизованный) закупали у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения наносителя NC-R848.
Растворы готовили следующим образом:
раствор 1: пептид овальбумина 323-339 из расчета 70 мг/мл готовили в 0,13 н. соляной кислоте при комнатной температуре;
раствор 2: PLGA-R848 из расчета 75 мг/мл и PLA-PEG-никотин из расчета 25 мг/мл в дихлорметане готовили растворением PLGA-R848 при 100 мг/мл в дихлорметане и PLA-PEG-никотина при 100 мг/мл в дихлорметане, а затем объединением 3 частей раствора PLGA-R848 с 1 частью раствора PLA-PEGникотина;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ в 100 мМ фосфатном буфере, рН 8; раствор 4: 70 мМ фосфатный буфер, рН 8.
Вначале подготавливали первичную эмульсию (W1/O) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,1 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяли в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формировали вторичную эмульсию (W1/O/W2), добавляя раствор 3 (2,0 мл) к первичной эмульсии и обрабатывая ультразвуком при 30% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию вливали в открытый 50 мл химический стакан, содержащий 70 мМ раствор фосфатного буфера (30 мл), и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, позволяя дихлорметану испариться, а наноносителям образовать суспензию. Часть суспендированных наноносителей отмывали с помощью перенесения суспензии наноносителей в центрифужную пробирку, центрифугирования при 13800 g в течение 60 мин, удаления супернатанта и ресуспендирования осадка в фосфатно-солевом буфере. Эту процедуру отмывки повторяли, и затем осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере для достижения суспензии наноносителей с номинальной концентрацией 10 мг/мл на основе полимера. Суспензию хранили замороженной при -20°С до применения.
Таблица 4
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
ID наноносителя Эффективный диаметр (нм) Агонист TLR, % вес./вес. Пептид для Тхелперной клетки, % вес./вес.
NC-R848 213 R848, 2,6 Ova 323-339, 0,9
Материалы для составов с наноносителями только NC.
Уксуснокислую соль амида пептида овальбумина 323-339 закупали у Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505. № продукта 4065609). PLGA с содержанием лактида 73% и гликолида 27% и характеристической вязкостью 0,12 дл/г закупали у SurModics Pharmaceuticals (756 Tom Martin Drive, Birmingham, AL 35211. Код продукта 7525 DLG 1A) . Синтезировали PLA-PEG-никотин с PEGблоком приблизительно 3500 Да с концевым никотином и DL-PLA-блоком приблизительно 15000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=11000-31000, 87-89% гидролизованный) закупали у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения наноносителей только NC.
Растворы готовили следующим образом:
раствор 1: пептид овальбумина 323-339 из расчета 70 мг/мл готовили в 0,13 н. соляной кислоте при
- 26 030863 комнатной температуре;
раствор 2: PLGA из расчета 75 мг/мл и PLA-PEG-никотин из расчета 25 мг/мл в дихлорметане готовили растворением PLGA при 100 мг/мл в дихлорметане и PLA-PEG-никотина при 100 мг/мл в дихлорметане, а затем объединением 3 частей раствора PLGA с 1 частью раствора PLA-PEG-никотина;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ в 100 мМ фосфатном буфере, рН 8; раствор 4: 70 мМ фосфатный буфер, рН 8.
Вначале подготавливали первичную эмульсию (W1/G) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,1 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяли в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формировали вторичную эмульсию (W1/O/W2), добавляя раствор 3 (2,0 мл) к первичной эмульсии и обрабатывая ультразвуком при 30% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию вливали в открытый 50 мл химический стакан, содержащий 70 мМ раствор фосфатного буфера (30 мл), и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, позволяя дихлорметану испариться, а наноносителям образовать суспензию. Часть суспендированных наноносителей отмывали с помощью перенесения суспензии наноносителей в центрифужную пробирку, центрифугирования при 13800 g в течение 60 мин, удаления супернатанта и ресуспендирования осадка в фосфатно-солевом буфере. Эту процедуру отмывки повторяли, и затем осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере для достижения суспензии наноносителей с номинальной концентрацией 10 мг/мл на основе полимера. Суспензию хранили замороженной при -20°С до применения.
Таблица 5
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
Наноноситель Эффективный диаметр (нм) Агонист TLR, % вес./вес. Пептид для Тхелперной клетки, % вес./вес.
Только NC 176 нет Ova 323-339, 1,1
Результаты.
В то время как ранние провоспалительные цитокины преимущественно ассоциированы с побочными действиями во время иммунизации, известно, что продукция других цитокинов, таких как иммунный IFN-γ, вовлекается в индукцию эффективного иммунного ответа. В силу вышесказанного измеряли системную продукцию иммунного цитокина IFN-γ после инъекции NC через 0-24 ч после инокулирования. Кратко, группам мышей инъецировали подкожно в задние конечности 100 мкг NC, соединенных или смешанных с низкомолекулярным нуклеозидным аналогом и известным агонистом TLR7/8, а также адъювантом, R848. Количества R848 в наноносителе составляли 2%, что дает 2 мкг присоединенного R848 на инъекцию; количество свободного применяемого R848 составляло 20 мкг на инъекцию. Сыворотку мышей отбирали терминальным забором крови, и измеряли продукцию системных цитокинов в сыворотке в различные моменты времени с помощью ELISA (BD Biosciences) . IFN-γ, который важен для Th1иммунного ответа, наблюдали как с NC-R848 (содержащими 2 мкг R848) и NC с примешанным R848 (20 мкг) (фиг. 2). К тому же, более высокие уровни IFN-γ при NC с примешанным R848 возникали раньше.
Пример 3. Добавление свободного адгьюванта усиливает иммунный ответ.
Материалы для составов с наноносителями NC-Nic без R848.
TFA соль амида пептида овальбумина 323-339 закупали у Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505. № продукта 4064565). PLA с характеристической вязкостью 0,19 дл/г закупали у Boehringer Ingelheim (Ingelheim Germany. Код продукта R202H). Синтезировали PLA-PEG-никотин с PEG-блоком приблизительно 3500 Да с концевым никотином и DL-PLA-блоком приблизительно 15000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=11000-31000, 87-89% гидролизованный) закупали у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения наноносителей NC-Nic без R848.
Растворы готовили следующим образом:
раствор 1: пептид овальбумина 323-339 из расчета 69 мг/мл готовили в 0,13 н. соляной кислоте при комнатной температуре;
раствор 2: PLA из расчета 75 мг/мл и PLA-PEG-никотин из расчета 25 мг/мл в дихлорметане готовили растворением PLA при 100 мг/мл в дихлорметане и PLA-PEG-никотина при 100 мг/мл в дихлорметане, а затем объединением 3 частей раствора PLA с 1 частью раствора PLA-PEG-никотина;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ в деионизированной воде; раствор 4: 70 мМ фосфатный буфер, рН 8.
Вначале подготавливали первичную эмульсию (W1/G) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,1 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяли в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формировали вторичную эмульсию (W1/O/W2), добавляя раствор 3 (2,0 мл) к первичной эмульсии и обрабатывая ультразвуком при 35% амплитуде в течение 40 с с использованием
- 27 030863
Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию вливали в химический стакан, содержащий 70 мМ раствор фосфатного буфера (30 мл) в открытом 50 мл химическом стакане, и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, позволяя дихлорметану испариться, а наноносителям образовать суспензию. Часть суспендированных наноносителей отмывали с помощью перенесения суспензии наноносителей в центрифужные пробирки, центрифугирования при 5300 g в течение 60 мин, удаления супернатанта и ресуспендирования осадка в фосфатно-солевом буфере. Эту процедуру отмывки повторяли, и затем осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере для достижения суспензии наноносителей с номинальной концентрацией 10 мг/мл на основе полимера. Суспензию хранили замороженной при -20°С до применения.
Таблица 6
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
Наноноситель Эффективный диаметр (нм) Агонист TLR, % вес./вес. Пептид для Тхелперной клетки, % вес./вес.
NC-Nic без R848 248 нет Ova 323-339, 2,2
Материалы для составов с наноносителями NC-Nic с захваченным R848.
TFA соль амида пептида овальбумина 323-339 закупали у Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505. № продукта 4064565). R848 (Резиквимод) приблизительно 98-99% чистоты синтезировали и очищали. PLA с характеристической вязкостью 0,19 дл/г закупали у Boehringer Ingelheim (Ingelheim Germany. Код продукта R202H). Синтезировали PLA-PEG-никотин с PEG-блоком приблизительно 3500 Да с концевым никотином и DL-PLA-блоком приблизительно 15000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=11000-31000, 87-89% гидролизованный) закупали у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения наноносителей NC-Nic с захваченным R848.
Растворы готовили следующим образом:
раствор 1: пептид овальбумина 323-339 из расчета 69 мг/мл готовили в 0,13 н. соляной кислоте при комнатной температуре;
раствор 2: PLA из расчета 75 мг/мл, R848 из расчета 7,5 мг/мл и PLA-PEG-никотин из расчета 25 мг/мл в дихлорметане готовили растворением PLA при 100 мг/мл в дихлорметане и добавлением R848 при 10 мг/мл, а также растворением PLA-PEG-никотина при 100 мг/мл в дихлорметане, а затем объединением 3 частей раствора PLA/R848 с 1 частью PLA-PEG-никотина;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ в деионизированной воде;
раствор 4: 70 мМ фосфатный буфер, рН 8.
Вначале подготавливали первичную эмульсию (W1/O) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,1 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяли в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формировали вторичную эмульсию (W1/O/W2), добавляя раствор 3 (2,0 мл) к первичной эмульсии и обрабатывая ультразвуком при 35% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию вливали в химический стакан, содержащий 70 мМ раствор фосфатного буфера (30 мл) в открытом 50 мл химическом стакане, и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, позволяя дихлорметану испариться, а наноносителям образовать суспензию. Часть суспендированных наноносителей отмывали перенесением суспензии наноносителей в центрифужные пробирки, центрифугированием при 5300 g в течение 60 мин, удалением супернатанта и ресуспендированием осадка в фосфатно-солевом буфере. Эту процедуру отмывки повторяли, и затем осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере для достижения суспензии наноносителей с номинальной концентрацией 10 мг/мл на основе полимера. Суспензию хранили замороженной при -20°С до примене ния.
Таблица 7
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
ID наноносителя Эффективный диаметр (нм) Агонист TLR, % вес./вес. Пептид для Тхелперной клетки, % вес./вес.
NC-Nic с захваченным R848 207 R848, 0,8 Ova 323-339, 1,6
Результаты.
Мышей иммунизировали NC-Nic (наноноситель, имеющий никотин на наружной поверхности), несущими захваченный (неконъюгированный) R848, с или без второго адъюванта. Группы из пяти мышей иммунизировали три раза (подкожно, задние конечности) с 2-недельными интервалами (дни 0, 14 и 28) 100 мкг NC-Nic. Затем сывороточные антитела к никотину измеряли в дни 26 и 40. ЕС50 для антител к
- 28 030863 никотину измеряли посредством стандартного ELISA к полилизин-никотину (фиг. 3) (группа 1: NC-Nic без захваченного R848; группа 2: NC-Nic с 1,5% захваченного R848; группа 3: NC-Nic с 1,5% захваченного R848+80 мкг квасцов; группа 4: NC-Nic с 1,5% захваченного R84+25 мкг CpG-1826) . Это показывает, что использование захваченного R848 (адъювант для Th1, агонист TLR7/8) внутри наноносителей (NC) вырабатывает иммунный ответ, который превосходит таковой, индуцированный NC без R848 (группа 2>группа 1) . Более того, добавление свободного адъюванта для Th2 (квасцы) к NC-Nic с R848 дополнительно усиливает гуморальный иммунный ответ (группа 3>группа 2). В то же самое время добавление другого свободного адъюванта для Th1 (CpG, агонист TLR9; группа 4) также усиливает иммунный ответ, но является менее эффективным в этой комбинации, чем квасцы (группа 4>группа 2 по сравнению с 4<группа 3).
Пример 4. Добавление свободного адгьюванта усиливает иммунный ответ к NC без адгьюванта.
Материалы для составов с наноносителями NC-Nic.
TFA соль амида пептида овальбумина 323-339 закупали у Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505. № продукта 4064565). PLA с характеристической вязкостью 0,19 дл/г закупали у Boehringer Ingelheim (Ingelheim Germany. Код продукта R202H). Синтезировали PLA-PEG-никотин с PEG-блоком приблизительно 3500 Да с концевым никотином и DL-PLA-блоком приблизительно 15000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=11000-31000, 87-89% гидролизованный) закупали у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения наноносителей NC-Nic.
Растворы готовили следующим образом:
раствор 1: пептид овальбумина 323-339 из расчета 69 мг/мл готовили в 0,13 н. соляной кислоте при комнатной температуре;
раствор 2: PLA из расчета 75 мг/мл и PLA-PEG-никотин из расчета 25 мг/мл в дихлорметане готовили растворением PLA при 100 мг/мл в дихлорметане и PLA-PEG-никотина при 100 мг/мл в дихлорметане, а затем объединением 3 частей раствора PLA с 1 частью раствора PLA-PEG-никотина;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ в деионизированной воде; раствор 4: 70 мМ фосфатный буфер, рН 8.
Вначале подготавливали первичную эмульсию (W1/G) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,1 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяли в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формировали вторичную эмульсию (W1/O/W2), добавляя раствор 3 (2,0 мл) к первичной эмульсии и обрабатывая ультразвуком при 35% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию вливали в химический стакан, содержащий 70 мМ раствор фосфатного буфера (30 мл) в открытом 50 мл химическом стакане, и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, позволяя дихлорметану испариться, а наноносителям образовать суспензию. Часть суспендированных наноносителей отмывали с помощью перенесения суспензии наноносителей в центрифужные пробирки, центрифугирования при 5300 g в течение 60 мин, удаления супернатанта и ресуспендирования осадка в фосфатно-солевом буфере. Эту процедуру отмывки повторяли, и затем осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере для достижения суспензии наноносителей с номинальной концентрацией 10 мг/мл на основе полимера. Суспензию хранили замороженной при -20 °С до применения.
Таблица 8
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
ID наноносителя Эффективный диаметр (нм) Агонист TLR, % вес./вес. Пептид для Тхелперной клетки, % вес./вес.
NC-Nic 248 нет Ova 323-339, 2,2
Материалы для составов с наноносителями NC-NJC-R848.
TFA соль амида пептида овальбумина 323-339 закупали у Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505. № продукта 4064565). R848 (Резиквимод) приблизительно 98-99% чистоты синтезировали и очищали. PLA с характеристической вязкостью 0,19 дл/г закупали у Boehringer Ingelheim (Ingelheim Germany. Код продукта R2 02H). Синтезировали PLA-PEG-никотин с PEG-блоком приблизительно 3500 Да с концевым никотином и DL-PLA-блоком приблизительно 15000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=11000-31000, 87-89% гидролизованный) закупали у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения наноносителей NC-NJC-R848.
Растворы готовили следующим образом:
раствор 1: пептид овальбумина 323-339 из расчета 69 мг/мл готовили в 0,13 н. соляной кислоте при комнатной температуре;
раствор 2: PLA из расчета 75 мг/мл, R848 из расчета 7,5 мг/мл и PLA-PEG-никотин из расчета 25 мг/мл в дихлорметане готовили растворением PLA при 100 мг/мл в дихлорметане и добавлением R848 при 10 мг/мл, также растворением PLA-PEG-никотина при 100 мг/мл в дихлорметане, а затем объедине
- 29 030863 нием 3 частей раствора PLA/R848 с 1 частью PLA-PEG-никотина;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ в деионизированной воде;
раствор 4: 70 мМ фосфатный буфер, рН 8.
Вначале подготавливали первичную эмульсию (\У1/О) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,1 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяли в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формировали вторичную эмульсию (W1/O/W2), добавляя раствор 3 (2,0 мл) к первичной эмульсии и обрабатывая ультразвуком при 35% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию вливали в химический стакан, содержащий 70 мМ раствор фосфатного буфера (30 мл) в открытом 50 мл химическом стакане, и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, позволяя дихлорметану испариться, а наноносителям образовать суспензию. Часть суспендированных наноносителей отмывали с помощью перенесения суспензии наноносителей в центрифужные пробирки, центрифугирования при 5300 g в течение 60 мин, удаления супернатанта и ресуспендирования осадка в фосфатно-солевом буфере. Эту процедуру отмывки повторяли, и затем осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере для достижения суспензии наноносителей с номинальной концентрацией 10 мг/мл на основе полимера. Суспензию хранили замороженной при -20°С до применения.
Таблица 9
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
ID наноносителя Эффективный диаметр (нм) Агонист TLR, % вес./вес. Пептид для Тхелперной клетки, % вес./вес.
NC-N1C-R848 207 R848, 0,8 Ova 323-339, 1,6
Результаты.
Мышей иммунизировали NC-Nic (наноноситель, имеющий никотин на наружной поверхности) , не содержащим адъювант в NC, с или без примешанного R848. Группы из пяти мышей иммунизировали три раза (подкожно, задние конечности) с 2-недельными интервалами (дни 0, 14 и 28) 100 мкг NC-Nic. Сывороточные антитела к никотину измеряли затем в дни 26 и 40. ЕС50 для антител к никотину измеряли посредством стандартного ELISA к полилизин-никотину (фиг. 4) (группа 1: NC-Nic без захваченного R848; группа 2: NC-Nic без захваченного R848+20 мкг свободного R848). Это показывает, что примешивание свободного R848 (адъювант для Th1, агонист TLR7/8) к несущим антиген NC вырабатывает иммунный ответ, который превышает таковой, индуцированный NC без примешанного R848 (группа 2>группа 1).
Подобным образом, усиливался иммунный ответ к антигену переносимому NC у мышей, иммунизированных NC-Nic, несущими инкапсулированный адъювант R848 (NC-Nic-R848), смешанными со свободным адъювантом для Th1, CpG-1826 (Enzo), или адъювантом для Th2, квасцами (Pierce). Группы из пяти мышей иммунизировали три раза (п.к., задние конечности) с 2-недельными интервалами (дни 0, 14 и 28) 100 мкг NC-Nic-R848. Сывороточные антитела к никотину измеряли затем в дни 26 и 40. ЕС50 для антител к никотину измеряли в стандартном ELISA к полилизин-никотину (фиг. 5) (группа 1: NC-Nic-R8 48; группа 2: NC-NicR848+80 мкг свободных квасцов; группа 3: NC-NicR848+25 мкг свободного CpG1826). Это показывает, что примешивание свободного адъюванта к несущим антиген/адъювант NC вырабатывает иммунный ответ, который превышает таковой, индуцированный тем же NC без примешанного адъюванта (группа 2>группа 1; группа 3>группа 1).
Пример 5. Добавление свободного адъюванта усиливает иммунный ответ к NC, содержащему инкапсулированный адгьювант.
Материалы для составов с наноносителями.
Уксуснокислую соль амида пептида овальбумина 323-339 закупали у Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505. № продукта 4065609). R848 (резиквимод) приблизительно 98-99% чистоты синтезировали и очищали. Конъюгат PLA-R848 с молекулярным весом приблизительно 1300 Да и содержанием R848 приблизительно 9 вес.% синтезировали с помощью процесса раскрытия кольца. Синтезировали PLA-PEG-никотин с PEG-блоком приблизительно 3500 Да с концевым никотином и DLPLA-блоком приблизительно 15000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=11000-31000, 87-89% гидролизованный) закупали у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения наноносителей.
Растворы готовили следующим образом:
раствор 1: пептид овальбумина 323-339 из расчета 70 мг/мл готовили в 0,13 н. соляной кислоте при комнатной температуре;
раствор 2: PLA-R848 из расчета 75 мг/мл, PLA-PEG-никотин из расчета 25 мг/мл и R848 из расчета 1,9 мг/мл в дихлорметане готовили растворением полимеров при 100 мг/мл, добавлением R848 раствору PLA-PEG-никотина и затем комбинированием 3 частей раствора PLA-R848 с 1 частью раствора PLAPEG-никотин/R848;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ в деионизированной воде;
- 30 030863 раствор 4: 70 мМ фосфатный буфер, рН 8.
Вначале подготавливали первичную эмульсию (W1/O) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,1 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяли в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формировали вторичную эмульсию (W1/O/W2), добавляя раствор 3 (2,0 мл) к первичной эмульсии и обрабатывая ультразвуком при 35% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию вливали в химический стакан, содержащий 70 мМ раствор фосфатного буфера (30 мл) в открытом 50 мл химическом стакане, и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, позволяя дихлорметану испариться, а наноносителям образовать суспензию. Часть суспендированных наноносителей отмывали с помощью перенесения суспензии наноносителей в центрифужную пробирку, центрифугирования при 13800 g в течение 60 мин, удаления супернатанта и ресуспендирования осадка в фосфатно-солевом буфере. Эту процедуру отмывки повторяли, и затем осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере для достижения суспензии наноносителей с номинальной концентрацией 10 мг/мл на основе полимера. Суспензию хранили замороженной при -20°С до применения.
Таблица 10
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
Наноноситель Эффективный диаметр (нм) Агонист TLR, ΐ вес./вес. Пептид для Тхелперной клетки, % вес./вес.
231 R848, 3,3 Ova 323-339, 1,5
Результаты.
Мышей иммунизировали наноносителями, NC-Nic (наноноситель, имеющий никотин на наружной поверхности), которые несли R848 и пептид для хелпера OP-II, с или без примешанных квасцов. Группы из пяти мышей иммунизировали три раза (подкожно, задние конечности) с 2-недельными интервалами (дни 0, 14 и 28) 100 мкг NC[Nic,R848,OP-II]+/-80 мкг примешанных квасцов (Pierce). Сывороточные антитела к никотину измеряли затем в дни 40 и 70. ЕС50 для антител к никотину измеряли посредством стандартного ELISA к полилизин-никотину (фиг. 6) (группа 1: NC[Nic,R848,OP-II]; группа 2: NC[Nic,R848,OP-II]+80 мкг примешанных квасцов). Это показывает, что примешивание свободных квасцов (адъюванта для Th2) к несущим антиген содержащим адъювант NC вырабатывает иммунный ответ, который превышает таковой, индуцированный тем же NC без примешанных квасцов (группа 2>группа 1).
Пример 6. Антиген инкапсулированный в NC вырабатывает более сильный клеточный иммунный ответ, чем свободный антиген (свободный адгьювант примешан).
Материалы для составов с наноносителями.
Белок овальбумина закупали у Worthington Biochemical Corporation (730 Vassar Avenue, Lakewood, NJ 08701. Код продукта 3048). PLA с характеристической вязкостью 0,21 дл/г закупали у SurModics Pharmaceuticals (756 Tom Martin Drive, Birmingham, AL 35211. Код продукта 100 DL 2A) . Синтезировали блок-сополимер PLA-PEG-ОМе с PEG-блоком приблизительно 2 000 Да с концевым метиловым эфиром и PLA-блоком приблизительно 19000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=11000-31000, 87-89% гидролизованный) закупали у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения наноносителей.
Растворы готовили следующим образом:
раствор 1: белок овальбумина из расчета 20 мг/мл готовили в фосфатно-солевом буфере при комнатной температуре;
раствор 2: PLA из расчета 75 мг/мл и PLA-PEG-OMe из расчета 25 мг/мл в дихлорметане готовили растворением PLA при 100 мг/мл в дихлорметане и PLA-PEG-OMe при 100 мг/мл в дихлорметане, а затем объединением 3 частей раствора PLA с 1 частью раствора PLA-PEG-Ome;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ в 100 мМ фосфатном буфере, рН 8; раствор 4: 70 мМ фосфатный буфер, рН 8.
Вначале подготавливали первичную эмульсию (W1/O) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,2 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяли в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формировали вторичную эмульсию (W1/O/W2) с помощью добавления раствора 3 (3,0 мл) к первичной эмульсии, перемешивания на вортексе для получения крупнозернистой дисперсии, и затем обработки ультразвуком при 30% амплитуде в течение 60 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию вливали в открытый 50 мл химический стакан, содержащий 70 мМ раствор фосфатного буфера (30 мл), и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, позволяя дихлорметану испариться, а наноносителям образовать суспензию. Часть суспендированных наноносителей отмывали с помощью перенесения суспензии наноносителей в центрифужную пробирку, центрифугирования при 21000 g в течение 45 мин, удаления супернатанта и ресуспендирования осадка в фос
- 31 030863 фатно-солевом буфере. Эту процедуру отмывки повторяли, и затем осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере для достижения суспензии наноносителей с номинальной концентрацией 10 мг/мл на основе полимера. Суспензию хранили замороженной при -20°С до применения.
Таблица 11
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
Наноноситель Эффективный диаметр (нм) Агонист TLR, % вес./вес. Антиген, % вес./вес.
228 нет Белок OVA, 2,8
Результаты.
Мышей иммунизировали либо наноносителями NC-OVA (наноноситель, несущий инкапсулированный белок овальбумина), либо свободным овальбумином (OVA) с примешанным свободным адъювантом. Группы из 3 мышей иммунизировали один раз (п.к., задние конечности) 100 мкг NC-OVA (2,8% OVA) или 2,5 мкг свободного OVA, смешанными с 10 мкг свободного 1826-CpG (агонист TLR9). Дренирующие подколенные лимфоузлы отбирали на день 4 после иммунизации, просеивали, инкубировали in vitro в течение 4 дней в полной среде RPMI, дополненной 10 единицами/мл IL-2, и определяли активность специфичных CTL (цитотоксическая Т-клетка) (как % лизиса овальбумин-экспрессирующей клеточной линии EG.7-OVA - % лизиса ее родительской клеточной линии EL-4) при различных соотношениях эффектор/мишень (Е:Т) (фиг. 7). Это показывает, что использование антигена, инкапсулированного в NC, приводит к выработке более сильного местного клеточного иммунного ответа, чем иммунизация со свободным антигеном.
Пример 7. Добавление свободного адгьюванта усиливает иммунный ответ к NC без адгьюванта.
Материалы для составов с наноносителями.
Уксуснокислую соль амида пептида овальбумина 323-339 закупали у Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505. Код продукта 4065609). PLA с характеристической вязкостью 0,19 дл/г закупали у Boehringer Ingelheim (Ingelheim Germany. Код продукта R202H). Синтезировали PLAPEG-никотин с PEG-блоком приблизительно 5000 Да с концевым никотином и DL-PLA-блоком приблизительно 17000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=11000-31000, 87-89% гидролизованный) закупали у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения наноносителей.
Растворы готовили следующим образом:
раствор 1: пептид овальбумина 323-339 из расчета 17,5 мг/мл в водном растворе разбавленной соляной кислоты. Раствор готовили растворением пептида овальбумина в 0,13 н. растворе соляной кислоты при комнатной температуре;
раствор 2: 0.19-IV PLA из расчета 75 мг/мл и PLA-PEG-никотин из расчета 25 мг/мл в дихлорметане. Раствор готовили с помощью отдельного растворения PLA из расчета 100 мг/мл в дихлорметане и PLA-PEG-никотина из расчета 100 мг/мл в дихлорметане, а затем смешиванием растворов, добавляя 3 части раствора PLA на каждую часть раствора PLA-PEG-никотина;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ фосфатном буфере, рН 8.
Вначале подготавливали первичную эмульсию (\У1/О) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,1 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяли в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формировали вторичную эмульсию (W1/O/W2), добавляя раствор 3 (2,0 мл) к первичной эмульсии, затем обрабатывая ультразвуком при 30% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию затем вливали в открытый 50 мл химический стакан, содержащий 70 мМ раствор фосфатного буфера рН 8 (30 мл), и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч для испарения дихлорметана и образования наноносителей в водной суспензии. Часть наноносителей отмывали с помощью перенесения суспензии в центрифужную пробирку и центрифугирования при 13800 g в течение одного часа, удаления супернатанта и ресуспендирования осадка в фосфатно-солевом буфере. Процедуру отмывки повторяли, и осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере для окончательной дисперсии наноносителей около 10 мг/мл. Количества олигонуклеотида и пептида в наноносителе определяли с помощью ВЭЖХ-анализа. Общую массу сухого наноносителя на мл суспензии определяли гравиметрическим способом и доводили до 5 мг/мл.
Таблица 12
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
Наноноситель Эффективный диаметр (нм) Агонист TLR, ΐ вес./вес. Пептид для Т— келперной клетки, % вес./вес.
211 нет Ova 323-339, 0,7
Результаты.
Мышей иммунизировали NC-Nic (наноноситель, имеющий никотин на наружной поверхности и со- 32 030863 держащий пепетид для хелпера OP-II, без адъюванта в NC) смешанными с CpG в форме либо сложного фосфодиэфира (РО) или фосфотиоата (PS). Форма РО разлагается нуклеазами и, следовательно, не стабильна при одноразовой инъекции у мышей. Форма PS является нуклеазорезистентной и, следовательно, стабильна при одноразовой инъекции у мышей. В качестве отрицательного контроля мышей иммунизировали только PBS. Группы из пяти мышей иммунизировали три раза (подкожно, задние конечности) с 2-недельными интервалами (дни 0, 14 и 28) 100 мкг NC-Nic+20 мкг CpG (PS или РО) или PBS. Сывороточные титры антитела к никотину измеряли в дни 26 и 40. Титры антитела к никотину (ЕС50) измеряли с помощью ELISA к полилизин-никотину (фиг. 8) (группа 1: NC-Nic (без адъюванта)+свободный CpG (PS); группа 2: NC-Nic (без адъюванта)+свободный CpG (РО); группа 3: только PBS). Это показывает, что примешивание свободного CpG (PS) (адъювант для Th1, агонист TLR9) к несущим антиген NC вырабатывает иммунный ответ, который превышает таковой, индуцированный NC с примешанным CpG (РО) или PBS (группа 1>группа 2>группа 3).
Пример 8. Добавление свободного адгьюванта усиливает иммунный ответ к NC без адгьюванта.
Материалы для составов с наноносителями.
Белок овальбумина закупали у Worthington Biochemical Corporation (730 Vassar Avenue, Lakewood, NJ 08701. Код продукта 3048). PLA с характеристической вязкостью 0,21 дл/г закупали у SurModics Pharmaceuticals (756 Tom Martin Drive, Birmingham, AL 35211. Код продукта 100 DL 2A). Синтезировали блок-сополимер PLA-PEG-ОМе с PEG-блоком приблизительно 2000 Да с концевым метиловым эфиром и PLA-блоком приблизительно 19000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=11000-31000, 87-89% гидролизованный) закупали у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения наноносителей.
Растворы готовили следующим образом:
раствор 1: белок овальбумина из расчета 20 мг/мл готовили в фосфатно-солевом буфере при комнатной температуре;
раствор 2: PLA из расчета 75 мг/мл и PLA-PEG-OMe из расчета 25 мг/мл в дихлорметане готовили растворением PLA при 100 мг/мл в дихлорметане и PLA-PEG-OMe при 100 мг/мл в дихлорметане, а затем объединением 3 частей раствора PLA с 1 частью раствора PLA-PEG-OMe;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ в 100 мМ фосфатном буфере, рН 8; раствор 4: 70 мМ фосфатный буфер, рН 8.
Вначале подготавливали первичную эмульсию (\У1/О) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,2 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяли в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формировали вторичную эмульсию (W1/O/W2) с помощью добавления раствора 3 (3,0 мл) к первичной эмульсии, перемешивания на вортексе для получения крупнозернистой дисперсии и затем обработки ультразвуком при 30% амплитуде в течение 60 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию вливали в открытый 50 мл химический стакан, содержащий 70 мМ раствор фосфатного буфера (30 мл), и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, позволяя дихлорметану испариться, а наноносителям образовать суспензию. Часть суспендированных наноносителей отмывали с помощью перенесения суспензии наноносителей в центрифужную пробирку, центрифугирования при 21000 g в течение 45 мин, удаления супернатанта и ресуспендирования осадка в фосфатно-солевом буфере. Эту процедуру отмывки повторяли, и затем осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере для достижения суспензии наноносителей с номинальной концентрацией 10 мг/мл на основе полимера. Суспензию хранили замороженной при -20°С до применения.
Таблица 13
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
Наноноситель Эффективный диаметр (нм! Агонист TLR, % вес./вес. Антиген, % вес./вес.
NC-OVA 228 нет Белок OVA, 2,8
Результаты.
Мышей иммунизировали NC-OVA (наноноситель, имеющий овальбумин (OVA) на наружной поверхности, без адъюванта в NC), смешанными с либо 20 мкг R848, либо CpG (PS; нуклеазо-устойчивая). Контрольные мыши получали 2,5 мкг растворимого антигена (OVA), смешанного с 20 мкг CpG (PS) . Группы из пяти мышей иммунизировали три раза (подкожно, задние конечности) с 2-недельными интервалами (дни 0, 14 и 28) 100 мкг NC-OVA+20 мкг R848 или CpG (PS) или 2,5 мкг растворимого OVA+20 мкг CpG (PS). Сывороточные титры антитела к OVA измеряли в дни 26 и 44. Титры (ЕС50) антитела к белку OVA измеряли с помощью ELISA (фиг. 9) (группа 1: NC-OVA (без адъюванта)+свободный R848; группа 2: NC-OVA (без адъюванта)+свободный CpG (PS); группа 3: растворимый OVA+CpG (PS)). Это показывает, что примешивание свободного R848 (адъювант для Th1, агонист TLR7/8) или CpG (PS) (адъювант для Th1, агонист TLR9) к несущим антиген NC вырабатывает иммунный ответ, который превышает таковой, индуцированный растворимым антигеном, смешанным с адъювантом (CpG (PS)) (группы 1 и 2>группа 3).
- 33 030863
Пример 9. Добавление свободного адгьюванта усиливает иммунный ответ к NC с адгьювантом.
Материалы для составов с наноносителями группы 1.
Уксуснокислую соль амида пептида овальбумина 323-339 закупали у Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505. № продукта 4065609). Синтезировали конъюгат PLGA-R848 из композиции мономеров лактида/гликолида 75/25 с молекулярным весом приблизительно 4100 Да и с содержанием R8485,2% вес./вес. Синтезировали PLA-PEG-никотин с PEG-блоком приблизительно 3500 Да с концевым никотином и DL-PLA-блоком приблизительно 15000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=1100031000, 87-89% гидролизованный) закупали у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения наноносителей группы 1.
Растворы готовили следующим образом:
раствор 1: пептид овальбумина 323-339 из расчета 70 мг/мл готовили в 0,13 н. соляной кислоте при комнатной температуре;
раствор 2: PLGA-R848 из расчета 75 мг/мл и PLA-PEG-никотин из расчета 25 мг/мл в дихлорметане готовили растворением PLGA-R848 при 100 мг/мл в дихлорметане и PLA-PEG-никотина при 100 мг/мл в дихлорметане, а затем объединением 3 частей раствора PLGA-R848 с 1 частью раствора PLA-PEGникотина;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ в 100 мМ фосфатном буфере, рН 8; раствор 4: 70 мМ фосфатный буфер, рН 8.
Вначале подготавливали первичную эмульсию (\У1/О) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,1 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяли в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формировали вторичную эмульсию (W1/O/W2), добавляя раствор 3 (2,0 мл) к первичной эмульсии и обрабатывая ультразвуком при 30% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию вливали в открытый 50 мл химический стакан, содержащий 7 0 мМ раствор фосфатного буфера (30 мл), и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, позволяя дихлорметану испариться, а наноносителям образовать суспензию. Часть суспендированных наноносителей отмывали с помощью перенесения суспензии наноносителей в центрифужную пробирку, центрифугирования при 13800 g в течение 60 мин, удаления супернатанта и ресуспендирования осадка в фосфатно-солевом буфере. Эту процедуру отмывки повторяли, и затем осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере для достижения суспензии наноносителей с номинальной концентрацией 10 мг/мл на основе полимера. Суспензию хранили замороженной при -20°С до применения.
Таблица 14
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
Наноноситель Эффективный диаметр (нм) Агонист TLR, % вес./вес. Пептид для Тхелперной клетки, вес./вес.
NC группы 1 213 R848, 2,6 Ova 323-339, 0,9
Материалы для составов с наноносителями группы 2.
Уксуснокислую соль амида пептида овальбумина 323-339 закупали у Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505. № продукта 4065609). PLGA с содержанием лактида 73% и гликолида 27% и характеристической вязкостью 0,12 дл/г закупали у SurModics Pharmaceuticals (756 Tom Martin Drive, Birmingham, AL 35211. Код продукта 7525 DLG 1A). Синтезировали PLA-PEG-никотин с PEGблоком приблизительно 3500 Да с концевым никотином и DL-PLA-блоком приблизительно 15000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=11000-31000, 87-89% гидролизованный) закупали у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения наноносителей группы 2.
Растворы готовили следующим образом:
раствор 1: пептид овальбумина 323-339 из расчета 70 мг/мл готовили в 0,13 н. соляной кислоте при комнатной температуре;
раствор 2: PLGA из расчета 75 мг/мл и PLA-PEG-никотин из расчета 25 мг/мл в дихлорметане готовили растворением PLGA при 100 мг/мл в дихлорметане и PLA-PEG-никотина при 100 мг/мл в дихлорметане, а затем объединением 3 частей раствора PLGA с 1 частью раствора PLA-PEG-никотина;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ в 100 мМ фосфатном буфере, рН 8; раствор 4: 70 мМ фосфатный буфер, рН 8.
Вначале подготавливали первичную эмульсию (\У1/О) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,1 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяли в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формировали вторичную эмульсию (W1/O/W2), добавляя раствор 3 (2,0 мл) к первичной эмульсии и обрабатывая ультразвуком при 30% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию вливали в открытый 50 мл химический стакан, содержащий 70 мМ раствор фосфатного буфера (30 мл), и перемешивали при комнатной температуре в тече
- 34 030863 ние 2 ч, позволяя дихлорметану испариться, а наноносителям образовать суспензию. Часть суспендированных наноносителей отмывали с помощью перенесения суспензии наноносителей в центрифужную пробирку, центрифугирования при 13800 g в течение 60 мин, удаления супернатанта и ресуспендирования осадка в фосфатно-солевом буфере. Эту процедуру отмывки повторяли, и затем осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере для достижения суспензии наноносителей с номинальной концентрацией 10 мг/мл на основе полимера. Суспензию хранили замороженной при -20°С до применения.
Таблица 15
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
Наноноситель Эффективный диаметр (нм) Агонист TLR, % вес./вес. Пептид для Тиелперной клетки, % вес./вес.
МС группы 2 176 нет Ova 323-339, 1,1
Мышей инъецировали 20 мкг CpG два раза (подкожно, задние конечности) с 2-недельными интервалами (дни 0 и 14). В дни 35 и 49 мышей иммунизировали 100 мкг NC-Nic (содержащим 2,6% R848 и 0,9% пептида OP-II) или 100 мкг NC-Nic (содержащим только 1,1% пептида OP-II). Сывороточные титры антитела к никотину измеряли в дни 12,26 и 40 после иммунизации NC. Титры (ЕС50) антитела к никотину измеряли с помощью ELISA к полилизин-никотину (фиг. 10 (группа 1: NC-Nic (R848 + OP-II); группа 2: NC-Nic (только OP-II)). Это показывает, что мыши, иммунизированные комбинацией CpG, за которым следует в более позднюю дату NC-Nic, содержащие R848, вырабатывают более высокие титры антител к никотину, чем мыши, иммунизированные CpG, за которым следует в более позднюю дату NC-Nic, не содержащие R848 (группа 1 > группа 2).
Пример 10. Добавление двух свободных адъювантов усиливает иммунный ответ к NC-Nic (возможный).
Материалы для составов с наноносителями NC-Nic.
Уксуснокислую соль амида пептида овальбумина 323-339 закупают у Bachem Americas Inc. (3132 Kashiwa Street, Torrance CA 90505. № продукта 4064565). PLA с характеристической вязкостью 0,19 дл/г закупают у SurModics Pharmaceuticals (756 Tom Martin Drive, Birmingham, AL 35211 (Код продукта 100 DL 2A) . Синтезируют PLA-PEG-никотин с PEG-блоком приблизительно 5000 Да с концевым никотином и DL-PLA-блоком приблизительно 20000 Да. Поливиниловый спирт (Мв=11000-31000, 87-89% гидролизованный) закупают у J.T. Baker (№ продукта U232-08).
Способы получения наноносителей NC-Nic.
Растворы готовят следующим образом:
раствор 1: пептид овальбумина 323-339 из расчета 20 мг/мл готовят в 0,13 н. соляной кислоте при комнатной температуре;
раствор 2: PLA из расчета 75 мг/мл и PLA-PEG-никотин из расчета 25 мг/мл в дихлорметане готовят растворением PLA при 100 мг/мл в дихлорметане и PLA-PEG-никотина при 100 мг/мл в дихлорметане, а затем объединением 3 частей раствора PLA с 1 частью раствора PLA-PEG-никотина;
раствор 3: поливиниловый спирт из расчета 50 мг/мл в 100 мМ в деионизированной воде; раствор 4: 70 мМ фосфатный буфер, рН 8.
Вначале подготавливают первичную эмульсию (W1/O) с использованием раствора 1 и раствора 2. Раствор 1 (0,2 мл) и раствор 2 (1,0 мл) объединяют в небольшой стеклянной пробирке для работы под давлением и обрабатывают ультразвуком при 50% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Затем формируют вторичную эмульсию (W1/O/W2), добавляя раствор 3 (2,0 мл) к первичной эмульсии и обрабатывая ультразвуком при 30% амплитуде в течение 40 с с использованием Branson Digital Sonifier 250. Вторичную эмульсию вливают в химический стакан, содержащий 70 мМ раствор фосфатного буфера (30 мл) в открытом 50 мл химическом стакане, и перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, позволяя дихлорметану испариться, а наноносителям образовать суспензию. Часть суспендированных наноносителей отмывают с помощью перенесения суспензии наноносителей в центрифужную пробирку, центрифугирования при 21000 g в течение 45 мин, удаления супернатанта и ресуспендирования осадка в фосфатно-солевом буфере. Эту процедуру отмывки повторяют, и затем осадок ресуспендируют в фосфатно-солевом буфере для достижения суспензии наноносителей с номинальной концентрацией 10 мг/мл на основе полимера. Суспензию хранят замороженной при -20°С до применения.
- 35 030863
Таблица 16
Описание характеристик наноносителей, полученных согласно вышеизложенному
Наноноситель Эффективный диаметр (нм) Агонист TLR, ϊ вес./вес. Пептид для Тхелперной клетки, % вес./вес.
200 Нет Ova 323-339, 1,5
Результаты.
Мышей иммунизируют NC-Nic (наноноситель, имеющий никотин на наружной поверхности), смешанным с первым (R848) и вторым адъювантом (квасцы). Группы из пяти мышей иммунизируют три раза (подкожно, задние конечности) с 2-недельными интервалами (дни 0, 14 и 28) 100 мкг NC-Nic. Сывороточные антитела к никотину измеряют затем в дни 26 и 40. ЕС50 для антител к никотину измеряют с помощью стандартной ELISA к полилизин-никотину.
Список последовательностей <110> Селекта Биосайенс, Инк.
<120> КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ УСИЛЕНИЯ ИММУННОГО ОТВЕТА НА АНТИГЕН, СОДЕРЖАЩИЕ
СИНТЕТИЧЕСКИЕ НАНОНОСИТЕЛИ, И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
<130> S1681.70011WO00
<150> <151> US 61/348,713 2010-05-26
<150> <151> US 61/348,717 2010-05-26
<150> <151> US 61/348,728 2010-05-26
<150> <151> из 61/358,635 2010-06-25
<160> 1
<170> Patentin версия 3.5
<210> <211> <212> <213> 1 17 БЕЛОК G. gallus
<400> 1
lie Ser Gln Ala Val His Ala Ala His Ala Glu Ile Asn Glu Ala Gly 15 10 15
Arg

Claims (1)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Композиция для усиления иммунного ответа на антиген, включающая лекарственную форму, содержащую:
    (1) популяцию полимерных синтетических наноносителей, (2) первый адъювант, который не присоединен к каким-либо синтетическим наноносителям, (3) второй адъювант, присоединенный к полимерным синтетическим наноносителям в популяции, (4) фармацевтически приемлемый эксципиент и (5) один или более антигенов, причем указанная лекарственная форма обеспечивает системную индукцию провоспалительных цитокинов.
    2. Композиция по п.1, где первый адъювант и второй адъювант являются разными.
    3. Композиция по п.1, где лекарственная форма приводит к системному высвобождению (a) TNF-α, IL-6 и/или IL-12 или (b) IFN-γ, IL-12 и/или IL-18.
    4. Композиция по любому из пп.1-3, где один или несколько антигенов (а) присоединены к полимерным синтетическим наноносителям, присоединенным ко второму адъюванту; (b) присоединены к синтетическим наноносителям, не присоединенным ко второму адъюванту; или (с) не присоединены к каким-либо синтетическим наноносителям.
    5. Композиция по любому из пп.1-4, где один или несколько антигенов включают антиген для Вклетки и/или антиген для Т-клетки или включают антиген для В-клетки и/или антиген для Т-клетки, который не является антигеном для Т-хелперной клетки.
    6. Композиция по любому из пп.1-5, где один или несколько антигенов включают (i) антиген для Вклетки и/или антиген для Т-клетки; (ii) антиген для В-клетки и антиген для Т-хелперной клетки; (iii) по меньшей мере два антигена для Т-клетки, причем по меньшей мере один из антигенов для Т-клетки
    - 36 030863 представляет собой антиген для Т-хелперной клетки; или (iv) антиген для В-клетки и по меньшей мере два антигена для Т-клетки, причем по меньшей мере один из антигенов для Т-клетки представляет собой антиген для Т-хелперной клетки.
    7. Композиция по любому из пп.1-6, где первый адъювант и/или второй адъювант включают неорганическую соль, адъювант типа гель, микробный адъювант, масляно-эмульсионный адъювант или адъювант на основе эмульгатора, корпускулярный адъювант, синтетический адъювант, фосфатный адъювант, полимер, липосому, микроноситель, иммуностимулирующую нуклеиновую кислоту, квасцы, сапонин, интерлейкин, интерферон, цитокин, агонист toll-подобного рецептора (TLR), имидазохинолин, агонист цитокинового рецептора, агонист CD40, агонист Fc-рецептора, агонист рецептора комплемента, QS21, витамин Е, сквален, токоферол, Quil A, ISCOM, ISCOMATRIX, Ribi Detox, CRL-1005, L-121, тетрахлордекаоксид, квасцы, MF59, AS02, AS15, холерный токсин, монофосфориллипид А, неполный адъювант Фрейнда, полный адъювант Фрейнда, мурамилдипептид или монтанид.
    8. Композиция по п.7, где первый адъювант и/или второй адъювант включают иммуностимулирующую нуклеиновую кислоту, и иммуностимулирующая нуклеиновая кислота представляет собой CpG-содержащую нуклеиновую кислоту.
    9. Композиция по п.7, где первый адъювант и/или второй адъювант включают имидазохинолин, и имидазохинолин представляет собой резиквимод или имиквимод.
    10. Композиция по п.7, где первый адъювант и/или второй адъювант включают квасцы.
    11. Композиция по п.7, где первый адъювант и/или второй адъювант включают агонист TLR, и агонист TLR представляет собой агонист TLR-1, TLR-2, TLR-3, TLR-4, TLR-5, TLR-6, TLR-7, TLR-8, TLR-9, TLR-10, TLR-11 или их комбинацию.
    12. Композиция по п.7, где первый адъювант включает иммуностимулирующую нуклеиновую кислоту, иммуностимулирующая нуклеиновая кислота представляет собой CpG-содержащую нуклеиновую кислоту, и второй адъювант включает имидазохинолин.
    13. Композиция по п.7, где первый адъювант включает имидазохинолин, второй адъювант включает иммуностимулирующую нуклеиновую кислоту, и иммуностимулирующая нуклеиновая кислота представляет собой CpG-содержащую нуклеиновую кислоту.
    14. Композиция по п.7, где первый адъювант включает квасцы, второй адъювант включает иммуностимулирующую нуклеиновую кислоту, и иммуностимулирующая нуклеиновая кислота представляет собой CpG-содержащую нуклеиновую кислоту.
    15. Композиция по любому из пп.1-5, где первый адъювант и/или второй адъювант не включают агонист TLR.
    16. Композиция по любому из пп.1-5, где первый адъювант и/или второй адъювант не включают агонист TLR-3, TLR-7, TLR-8 или TLR-9.
    17. Композиция по любому из пп.1-16, где полимерные синтетические наноносители включают сфероидальные наночастицы, кубоидальные наночастицы, пирамидальные наночастицы, продолговатые наночастицы, цилиндрические наночастицы или тороидальные наночастицы.
    18. Композиция по п.17, где второй адъювант включает резиквимод.
    19. Композиция по п.1, где один или более антигенов присоединены к синтетическим наноносителям.
    20. Композиция по п.19, где один или более антигенов присоединены посредством инкапсуляции.
    21. Композиция по любому из пп.17-20, где полимерные синтетические наноносители включают один или более полимеров.
    22. Композиция по п.21, где один или более полимеров (а) включают сложный полиэфир или (b) включают сложный полиэфир, присоединенный к гидрофильному полимеру.
    23. Композиция по п.22, где сложный полиэфир включает поли(молочную кислоту), поли(гликолевую кислоту), сополимер молочной и гликолевой кислоты или поликапролактон.
    24. Композиция по п.22 или 23, где гидрофильный полимер включает простой полиэфир.
    25. Композиция по п.24, где простой полиэфир представляет собой полиэтиленгликоль.
    26. Композиция по любому из пп.1-25 для применения в (а) индукции воспалительного ответа у пациента; (b) индукции Th1-иммунного ответа у пациента; (с) индукции гуморального иммунного ответа у пациента или (d) индукции специфичного местного ответа с цитотоксическими Т-лимфоцитами у пациента.
    27. Способ индукции воспалительного ответа у пациента, включающий введение пациенту композиции по любому из пп.1-25.
    28. Способ индукции Th1-иммунного ответа у пациента, включающий введение пациенту композиции по любому из пп.1-25.
    29. Способ индукции гуморального иммунного ответа у пациента, включающий введение пациенту композиции по любому из пп.1-25.
    30. Способ индукции специфичного местного ответа с цитотоксическими Т-лимфоцитами у пациента, включающий введение пациенту композиции по любому из пп.1-25.
    31. Способ лечения или профилактики рака, включающий введение пациенту композиции по любо
    - 37 030863 му из пп.1-25.
    32. Способ лечения или профилактики инфекции или инфекционного заболевания, включающий введение пациенту композиции по любому из пп.1-25.
    33. Способ лечения или профилактики атопического состояния, астмы, COPD или хронической инфекции, включающий введение пациенту композиции по любому из пп.1-25.
    34. Способ по любому из пп.27-33, где пациент представляет собой человека.
    2500η
    2000-J
    Системная продукция TNF-α после инокуляции NC (3 мыши/группа) —NC-R848-1
    -▼—NC-R848-2
    •.....только NC только NC+R848
    Время после инъекции (чесы) Фиг. 1А с
    хО
    Системная продукция IL-6 после инокуляции NC (3 мыши/группа)
    Фиг. 1В
    - 38 030863
    Фиг. 2
    Вакцинация NC-Nic (± неконъюгированный R848, заключенный в NC ± второй адъювант) захвачен- захвачен- захвачен- захваченного R348 ного R848 ного R848, + ного R848, + квасцы CpG-1826
    Фиг. 3 (без адъюванта)
    Фиг. 4 (без адъюванта)+ свободный R848
    Фиг. 5
    - 39 030863
    1000000
    100000
    □День 40 аЦень 70 Τ τ • ilSlil |Й||8 '. Μ 1!И
    Фиг. 6
    Фиг. 7
    100000001
    100000U юооооФиг. 8 iOOOO- 40 030863
EA201291156A 2010-05-26 2011-05-26 Композиции для усиления иммунного ответа на антиген, содержащие синтетические наноносители, и их применения EA030863B1 (ru)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US34872810P 2010-05-26 2010-05-26
US34871710P 2010-05-26 2010-05-26
US34871310P 2010-05-26 2010-05-26
US35863510P 2010-06-25 2010-06-25
PCT/US2011/038190 WO2011150240A1 (en) 2010-05-26 2011-05-26 Nanocarrier compositions with uncoupled adjuvant

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201291156A1 EA201291156A1 (ru) 2013-04-30
EA030863B1 true EA030863B1 (ru) 2018-10-31

Family

ID=45004392

Family Applications (6)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201291158A EA023397B1 (ru) 2010-05-26 2011-05-26 Комбинированные вакцины с синтетическими наноносителями
EA201291156A EA030863B1 (ru) 2010-05-26 2011-05-26 Композиции для усиления иммунного ответа на антиген, содержащие синтетические наноносители, и их применения
EA201291157A EA030620B1 (ru) 2010-05-26 2011-05-26 Композиции для выработки иммунного ответа к наборам поверхностных антигенов, содержащие синтетические наноносители, и их применение
EA201291154A EA030813B1 (ru) 2010-05-26 2011-05-26 Способы генерации антительного иммунного ответа и увеличения местной индукции иммунных цитокинов при использовании синтетических наноносителей, соединенных с адъювантами
EA201500857A EA201500857A1 (ru) 2010-05-26 2011-05-26 Комбинированные вакцины с синтетическими наноносителями
EA201890942A EA201890942A1 (ru) 2010-05-26 2011-05-26 Мультивалентные вакцины с синтетическими наноносителями

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201291158A EA023397B1 (ru) 2010-05-26 2011-05-26 Комбинированные вакцины с синтетическими наноносителями

Family Applications After (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201291157A EA030620B1 (ru) 2010-05-26 2011-05-26 Композиции для выработки иммунного ответа к наборам поверхностных антигенов, содержащие синтетические наноносители, и их применение
EA201291154A EA030813B1 (ru) 2010-05-26 2011-05-26 Способы генерации антительного иммунного ответа и увеличения местной индукции иммунных цитокинов при использовании синтетических наноносителей, соединенных с адъювантами
EA201500857A EA201500857A1 (ru) 2010-05-26 2011-05-26 Комбинированные вакцины с синтетическими наноносителями
EA201890942A EA201890942A1 (ru) 2010-05-26 2011-05-26 Мультивалентные вакцины с синтетическими наноносителями

Country Status (17)

Country Link
US (6) US20110293723A1 (ru)
EP (5) EP2575876B1 (ru)
JP (12) JP6324068B2 (ru)
KR (5) KR20180099900A (ru)
CN (10) CN102905728B (ru)
AU (8) AU2011258156B2 (ru)
BR (3) BR112012029912A2 (ru)
CA (4) CA2798493A1 (ru)
DK (1) DK2575876T3 (ru)
EA (6) EA023397B1 (ru)
ES (1) ES2661978T3 (ru)
IL (6) IL222680B (ru)
MX (4) MX2012013715A (ru)
NO (1) NO2575876T3 (ru)
PL (1) PL2575876T3 (ru)
PT (1) PT2575876T (ru)
WO (4) WO2011150264A2 (ru)

Families Citing this family (136)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK2347775T3 (da) 2005-12-13 2020-07-13 Harvard College Skabeloner til celletransplantation
AU2007303608B2 (en) 2006-09-29 2013-05-02 Takeda Vaccines, Inc. Norovirus vaccine formulations
WO2009002401A2 (en) 2007-06-21 2008-12-31 President And Fellows Of Harvard College Scaffolds for cell collection or elimination
KR20100083150A (ko) 2007-09-18 2010-07-21 리고사이트 파머슈티컬즈 인코퍼레이티드 노로바이러스에 대한 보호면역반응을 제공하는 방법
US9370558B2 (en) 2008-02-13 2016-06-21 President And Fellows Of Harvard College Controlled delivery of TLR agonists in structural polymeric devices
CN102006891B (zh) 2008-02-13 2017-04-26 哈佛学院董事会 连续的细胞程序化装置
WO2009146456A1 (en) 2008-05-30 2009-12-03 President And Fellows Of Harvard College Controlled release of growth factors and signaling molecules for promoting angiogenesis
RU2532911C2 (ru) 2008-07-21 2014-11-20 Дзе Брихэм Энд Уимен'З Хоспитал, Инк. Способы и композиции, относящиеся к синтетическим бета-1,6-глюкозаминолигосахаридам
MY160201A (en) * 2008-12-09 2017-02-28 Coley Pharm Group Inc Immunostimulatory oligonucleotides
WO2010120749A2 (en) 2009-04-13 2010-10-21 President And Fellow Of Harvard College Harnessing cell dynamics to engineer materials
KR20120022984A (ko) * 2009-04-21 2012-03-12 셀렉타 바이오사이언시즈, 인크. Ｔｈ１ 편향 반응을 제공하는 면역나노치료법
JP6297776B2 (ja) 2009-05-27 2018-03-20 セレクタ バイオサイエンシーズ インコーポレーテッドＳｅｌｅｃｔａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ． 免疫調節薬−高分子化合物
US8728456B2 (en) 2009-07-31 2014-05-20 President And Fellows Of Harvard College Programming of cells for tolerogenic therapies
US20110110965A1 (en) * 2009-08-26 2011-05-12 Selecta Biosciences, Inc. Compositions that induce t cell help
US9610328B2 (en) 2010-03-05 2017-04-04 President And Fellows Of Harvard College Enhancement of skeletal muscle stem cell engraftment by dual delivery of VEGF and IGF-1
EP2575876B1 (en) 2010-05-26 2017-12-06 Selecta Biosciences, Inc. Multivalent synthetic nanocarrier vaccines
EP2585053A4 (en) 2010-06-25 2014-02-26 Harvard College COMMON RELEASE OF STIMULATING AND HEMMING FACTORS FOR THE PRODUCTION OF TEMPORARY STABILIZED AND SPATULARLY LIMITED ZONES
EP2624873B1 (en) 2010-10-06 2019-12-04 President and Fellows of Harvard College Injectable, pore-forming hydrogels for materials-based cell therapies
WO2012061717A1 (en) 2010-11-05 2012-05-10 Selecta Biosciences, Inc. Modified nicotinic compounds and related methods
WO2012064697A2 (en) 2010-11-08 2012-05-18 President And Fellows Of Harvard College Materials presenting notch signaling molecules to control cell behavior
US10647959B2 (en) 2011-04-27 2020-05-12 President And Fellows Of Harvard College Cell-friendly inverse opal hydrogels for cell encapsulation, drug and protein delivery, and functional nanoparticle encapsulation
US9675561B2 (en) 2011-04-28 2017-06-13 President And Fellows Of Harvard College Injectable cryogel vaccine devices and methods of use thereof
EP3417876B1 (en) 2011-04-28 2021-03-31 President and Fellows of Harvard College Injectable preformed macroscopic 3-dimensional scaffolds for minimally invasive administration
KR102112002B1 (ko) 2011-04-29 2020-05-18 셀렉타 바이오사이언시즈, 인크. 치료적 단백질에 대해 면역 반응을 감소시키는 관용원성 합성 나노운반체
ES2685333T3 (es) * 2011-06-02 2018-10-08 The Regents Of The University Of California Nanopartículas encapsuladas en membrana y método de utilización
US9486512B2 (en) 2011-06-03 2016-11-08 President And Fellows Of Harvard College In situ antigen-generating cancer vaccine
EA035442B1 (ru) 2011-07-11 2020-06-17 Такеда Вэксинс, Инк. Композиции, содержащие буфер, вакцины, которые содержат композиции, содержащие буфер, и пути их применения
MX2014001142A (es) 2011-07-29 2014-02-27 Selecta Biosciences Inc Nanoportadores sinteticos que generan respuestas inmunitarias humorales y de linfocitos t citotoxicos (ctl).
US20130122106A1 (en) * 2011-10-19 2013-05-16 Aphios Corporation Dosage form, and methods of making and using the same, to produce immunization in animals and humans
KR20140102759A (ko) 2011-12-16 2014-08-22 모더나 세라퓨틱스, 인코포레이티드 변형된 뉴클레오사이드, 뉴클레오타이드 및 핵산 조성물
WO2013106852A1 (en) * 2012-01-13 2013-07-18 President And Fellows Of Harvard College Controlled delivery of tlr agonists in structural polymeric devices
KR101822941B1 (ko) * 2012-02-06 2018-01-29 엘지전자 주식회사 공기정화필터 및 그 제조방법
EP2634179A1 (en) * 2012-02-28 2013-09-04 Sanofi Functional PLA-PEG copolymers, the nanoparticles thereof, their preparation and use for targeted drug delivery and imaging
WO2013151666A2 (en) 2012-04-02 2013-10-10 modeRNA Therapeutics Modified polynucleotides for the production of biologics and proteins associated with human disease
EP2833892A4 (en) 2012-04-02 2016-07-20 Moderna Therapeutics Inc MODIFIED POLYNUCLEOTIDES FOR THE PRODUCTION OF PROTEINS AND PEPTIDES ASSOCIATED WITH ONCOLOGY
LT2838515T (lt) 2012-04-16 2020-03-10 President And Fellows Of Harvard College Mezoporinės silico dioksido kompozicijos, skirtos imuninio atsako moduliavimui
WO2014018931A1 (en) * 2012-07-26 2014-01-30 The General Hospital Corporation Methods and compositions for treating autoimmune disease
US9388465B2 (en) 2013-02-08 2016-07-12 10X Genomics, Inc. Polynucleotide barcode generation
US10752949B2 (en) 2012-08-14 2020-08-25 10X Genomics, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
US10323279B2 (en) 2012-08-14 2019-06-18 10X Genomics, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
US9701998B2 (en) 2012-12-14 2017-07-11 10X Genomics, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
US20150376609A1 (en) 2014-06-26 2015-12-31 10X Genomics, Inc. Methods of Analyzing Nucleic Acids from Individual Cells or Cell Populations
US11591637B2 (en) 2012-08-14 2023-02-28 10X Genomics, Inc. Compositions and methods for sample processing
US10400280B2 (en) 2012-08-14 2019-09-03 10X Genomics, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
KR101953374B1 (ko) * 2012-09-27 2019-02-28 고려대학교 산학협력단 단백질 나노입자 기반의 복합백신
JP6144355B2 (ja) 2012-11-26 2017-06-07 モデルナティエックス インコーポレイテッドＭｏｄｅｒｎａＴＸ，Ｉｎｃ． 化学修飾ｍＲＮＡ
US10533221B2 (en) 2012-12-14 2020-01-14 10X Genomics, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
CN103083663B (zh) * 2013-02-04 2014-12-10 江苏省农业科学院 一种免疫增强剂、灭活疫苗及其制备方法
CN103961702B (zh) * 2013-02-05 2019-04-09 日东电工株式会社 粘膜给予用wt1肽癌症疫苗组合物
WO2014142653A1 (en) * 2013-03-11 2014-09-18 Cristal Delivery B.V. Vaccination composition
WO2014152211A1 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Moderna Therapeutics, Inc. Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions
CN105339012A (zh) * 2013-05-03 2016-02-17 西莱克塔生物科技公司 降低i型和iv型超敏反应的致耐受性合成纳米载体的局部伴随施用
CN105579582A (zh) 2013-07-25 2016-05-11 埃克西奎雷股份有限公司 用于预防和治疗用途的作为免疫刺激剂的基于球形核酸的构建体
CN105764524A (zh) * 2013-08-06 2016-07-13 约翰斯·霍普金斯大学 治疗hpv相关疾病的方法
CN104338126B (zh) * 2013-08-08 2018-05-04 中国科学院过程工程研究所 一种具有治疗或预防hpv病毒的疫苗组合物及其应用
US20160194368A1 (en) 2013-09-03 2016-07-07 Moderna Therapeutics, Inc. Circular polynucleotides
AU2014315287A1 (en) 2013-09-03 2015-03-12 Moderna Therapeutics, Inc. Chimeric polynucleotides
ES2640648T3 (es) 2013-09-16 2017-11-03 Astrazeneca Ab Nanopartículas poliméricas terapéuticas y métodos para su fabricación y uso
WO2015066715A1 (en) * 2013-11-04 2015-05-07 Viracell Advanced Products, Llc Virus-like particles and methods related thereto
AU2015205753A1 (en) 2014-01-10 2016-07-21 Birdie Biopharmaceuticals Inc. Compounds and compositions for treating HER2 positive tumors
DK3096741T3 (da) 2014-01-21 2020-09-28 Anjarium Biosciences Ag Fremgangsmåde til fremstillingen af hybridosomer
CN107073090A (zh) 2014-04-30 2017-08-18 哈佛学院董事会 结合的疫苗装置和杀死癌细胞的方法
EP3164113B1 (en) 2014-06-04 2019-03-27 Exicure, Inc. Multivalent delivery of immune modulators by liposomal spherical nucleic acids for prophylactic or therapeutic applications
AU2015280417B2 (en) 2014-06-24 2020-01-30 The Trustees Of Princeton University Process for encapsulating soluble biologics, therapeutics, and imaging agents
AU2015279738A1 (en) 2014-06-25 2016-12-22 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions for treatment with synthetic nanocarriers and immune checkpoint inhibitors
CA2954446A1 (en) 2014-07-09 2016-01-14 Shanghai Birdie Biotech, Inc. Anti-pd-l1 combinations for treating tumors
EP3189853A4 (en) * 2014-08-04 2018-07-11 Nitto Denko Corporation Immune-induction-promoting composition including nuclear receptor ligand, and vaccine pharmaceutical composition
CA2957800A1 (en) 2014-09-07 2016-03-10 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions for attenuating anti-viral transfer vector immune responses
GB201418004D0 (en) * 2014-10-10 2014-11-26 Isis Innovation Polymer adjuvant
GB2549861A (en) * 2014-11-03 2017-11-01 Albert Einstein College Medicine Inc Modified paramagnetic nanoparticles for targeted delivery of therapeutics and methods thereof
RU2600031C2 (ru) * 2014-11-11 2016-10-20 Публичное акционерное общество "Фармсинтез" Лекарственная форма специфического иммунобиологического лекарственного средства для лечения и профилактики вич инфекции и способ ее получения
JP2017537619A (ja) 2014-11-21 2017-12-21 ノースウェスタン ユニバーシティ 球状核酸ナノ粒子複合体の配列特異的細胞内取込
US10339559B2 (en) * 2014-12-04 2019-07-02 Adobe Inc. Associating social comments with individual assets used in a campaign
KR101586466B1 (ko) * 2014-12-31 2016-01-18 성균관대학교산학협력단 면역보조제 및 이를 포함하는 백신 조성물
CA3012602A1 (en) 2015-01-30 2016-08-04 President And Fellows Of Harvard College Peritumoral and intratumoral materials for cancer therapy
WO2016164705A1 (en) 2015-04-10 2016-10-13 Omar Abdel-Rahman Ali Immune cell trapping devices and methods for making and using the same
KR101595949B1 (ko) * 2015-05-27 2016-02-19 성균관대학교산학협력단 아주번트 조성물 및 백신 조성물의 제조 방법
CA2988654A1 (en) 2015-06-12 2016-12-15 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Adenovirus polynucleotides and polypeptides
EP3307311A4 (en) * 2015-06-15 2019-02-13 Emory University MULTIVALENT ENTEROVIRUS VACCINE COMPOSITIONS AND USES THEREOF
CN115927212A (zh) * 2015-07-02 2023-04-07 梅迪根股份有限公司 用牛免疫缺陷病毒Gag蛋白的重组病毒样颗粒
RU2018107930A (ru) * 2015-08-06 2019-09-06 Глэксосмитклайн Байолоджикалз Са Агонисты tlr4, их композиции и применение для лечения рака
MA47016A (fr) 2015-10-22 2018-08-29 Modernatx Inc Vaccins contre les virus respiratoires
JP2019504027A (ja) 2015-12-22 2019-02-14 ザ・トラスティーズ・オブ・プリンストン・ユニバーシティＴｈｅ Ｔｒｕｓｔｅｅｓ Ｏｆ Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ 可溶性の生物製剤、治療薬、および造影剤を封入するためのプロセス
CN106943596A (zh) 2016-01-07 2017-07-14 博笛生物科技（北京）有限公司 用于治疗肿瘤的抗-cd20组合
CN115252792A (zh) 2016-01-07 2022-11-01 博笛生物科技有限公司 用于治疗肿瘤的抗-egfr组合
WO2017120504A1 (en) 2016-01-08 2017-07-13 Durfee Paul N Osteotropic nanoparticles for prevention or treatment of bone metastases
CN105664152B (zh) * 2016-01-27 2019-01-18 苏文全 一种具有免疫调节作用的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸复合物及其制备使用方法
CN105535964B (zh) * 2016-01-27 2019-01-18 苏文全 一种具有免疫调节作用的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物及其制备使用方法
CN109072197A (zh) 2016-02-06 2018-12-21 哈佛学院校长同事会 重塑造血巢以重建免疫
CN109789092A (zh) 2016-07-13 2019-05-21 哈佛学院院长等 抗原呈递细胞模拟支架及其制备和使用方法
US11364304B2 (en) 2016-08-25 2022-06-21 Northwestern University Crosslinked micellar spherical nucleic acids
AU2017326253B2 (en) 2016-09-13 2021-10-21 Allergan, Inc. Stabilized non-protein clostridial toxin compositions
CN106496309A (zh) * 2016-11-24 2017-03-15 北京开景基因技术有限公司 微球抗原及其制备方法以及抗可替宁抗体的制备方法
KR101996538B1 (ko) * 2017-02-13 2019-07-04 단디바이오사이언스 주식회사 이미다조퀴놀린계열 물질을 포함하는 나노에멀젼 및 이의 용도
WO2018160865A1 (en) 2017-03-01 2018-09-07 Charles Jeffrey Brinker Active targeting of cells by monosized protocells
CN106943592A (zh) * 2017-03-02 2017-07-14 暨南大学 磷酸化壳聚糖作为免疫佐剂在疫苗治疗中的应用
WO2018169811A1 (en) 2017-03-11 2018-09-20 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions related to combined treatment with anti-inflammatories and synthetic nanocarriers comprising an immunosuppressant
SG10202108075YA (en) * 2017-04-25 2021-09-29 Adjuvance Technologies Inc Triterpene saponin analogues
CN108794467A (zh) 2017-04-27 2018-11-13 博笛生物科技有限公司 2-氨基-喹啉衍生物
US11696954B2 (en) 2017-04-28 2023-07-11 Exicure Operating Company Synthesis of spherical nucleic acids using lipophilic moieties
MX2019015744A (es) 2017-06-23 2020-02-20 Birdie Biopharmaceuticals Inc Composiciones farmaceuticas.
NL2019373B1 (en) * 2017-07-28 2019-02-19 Academisch Ziekenhuis Leiden Enhancement of pathogen immunogenicity
US20200375912A1 (en) * 2017-08-03 2020-12-03 Rita Elena Serda Liposomal coated nanoparticles for immunotherapy applications
WO2019035963A1 (en) * 2017-08-16 2019-02-21 Ohio State Innovation Foundation NANOPARTICLE COMPOSITIONS FOR VACCINES AGAINST SALMONELLA
WO2019055539A1 (en) 2017-09-12 2019-03-21 Prudhomme Robert K CELLULOSIC POLYMER NANOPARTICLES AND METHODS OF FORMING THE SAME
CN107582564A (zh) * 2017-09-14 2018-01-16 湖南晓林生物科技发展有限公司 一种靶向治疗甲状腺癌的药物及其制备方法
US10590244B2 (en) * 2017-10-04 2020-03-17 10X Genomics, Inc. Compositions, methods, and systems for bead formation using improved polymers
EP3691703A1 (en) * 2017-10-04 2020-08-12 10X Genomics, Inc. Compositions, methods, and systems for bead formation using improved polymers
US10837047B2 (en) 2017-10-04 2020-11-17 10X Genomics, Inc. Compositions, methods, and systems for bead formation using improved polymers
WO2019074842A1 (en) * 2017-10-09 2019-04-18 Keith Black ONCOLYTIC ANTICANCER IMMUNOTHERAPIES AND METHODS OF USE
SG11201913654QA (en) 2017-11-15 2020-01-30 10X Genomics Inc Functionalized gel beads
US10829815B2 (en) 2017-11-17 2020-11-10 10X Genomics, Inc. Methods and systems for associating physical and genetic properties of biological particles
WO2019108928A1 (en) * 2017-11-30 2019-06-06 Ohio State Innovation Foundation Mucoadhesive nanoparticle entrapped influenza virus vaccine delivery system
CN108379562B (zh) * 2018-03-20 2021-11-12 苏州杰纳生物科技有限公司 一种聚合物纳米佐剂及其制备方法和用途
US11394333B2 (en) 2018-05-10 2022-07-19 Nissan Motor Co., Ltd. Control method for a motor system and a control device for a motor system
EA038215B1 (ru) * 2018-06-09 2021-07-26 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный научный центр исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова РАН" Способ количественного определения антигена вируса желтой лихорадки иммуноферментным анализом с использованием специфических желточных антител и детекторных антител, меченных биотином
US11731099B2 (en) 2018-07-20 2023-08-22 The Trustees Of Princeton University Method for controlling encapsulation efficiency and burst release of water soluble molecules from nanoparticles and microparticles produced by inverse flash nanoprecipitation
CN109187982B (zh) * 2018-08-02 2021-06-04 浙江康佰裕生物科技有限公司 一种tlr类疫苗佐剂的筛选和鉴定方法
JP7449954B2 (ja) 2018-10-24 2024-03-14 アルプスアルパイン株式会社 アセット追跡装置、アセット及びアセット追跡装置が所定の種類の輸送手段により輸送されているかどうかを判定する方法
US20220117997A1 (en) * 2019-02-05 2022-04-21 The Brigham And Women's Hospital Inc. Polysaccharide compositions for use in treating filariasis
CN110559432B (zh) * 2019-10-11 2023-06-13 南京农业大学 一种堆型艾美耳球虫纳米亚单位疫苗及其制备方法和应用
JP2021127868A (ja) 2020-02-14 2021-09-02 株式会社デンソー 熱交換器
US11559578B2 (en) 2020-06-30 2023-01-24 International Business Machines Corporation Biodegradable cationic polycarbonates as adjuvants for vaccines
IL302065A (en) 2020-10-14 2023-06-01 Rnaimmune Inc Cancer vaccines based on pan-ras messenger RNA
KR20220055441A (ko) * 2020-10-26 2022-05-03 한국과학기술원 Bp26 및 항원 폴리펩타이드를 포함하는 융합 단백질
US20220160822A1 (en) * 2020-11-23 2022-05-26 Wisconsin Alumni Research Foundation Neutralizing vaccines against human coronavirus
CN112972673B (zh) * 2021-02-02 2023-04-11 兰州大学 PLGA-PEG-Poly I：C纳米颗粒的制备及其在结核亚单位疫苗中的应用
WO2022226035A1 (en) * 2021-04-21 2022-10-27 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Toll-like receptor agonist-nanoparticle vaccine adjuvant
CN117813112A (zh) * 2021-08-30 2024-04-02 东丽株式会社 免疫原性增强用组合物
WO2023107371A1 (en) * 2021-12-06 2023-06-15 SURGE Therapeutics, Inc. Solid forms of resiquimod and formulations thereof
WO2023161350A1 (en) 2022-02-24 2023-08-31 Io Biotech Aps Nucleotide delivery of cancer therapy
WO2023225503A2 (en) * 2022-05-16 2023-11-23 Dairy Management Inc. Protein particles including an active agent and methods of making and using the same
KR20230002334U (ko) 2022-06-02 2023-12-11 성기봉 일회용 얼음팩
CN115645523B (zh) * 2022-12-22 2023-03-21 深圳大学总医院 聚合物脂质杂化纳米粒作为免疫佐剂的应用以及一种免疫制剂
CN116478410B (zh) * 2023-06-20 2023-09-12 觅投克(北京)生物医学技术有限公司 一种菊糖修饰的聚乙烯亚胺衍生物及其制备方法和应用
CN117512031B (zh) * 2023-10-16 2024-06-25 江苏金迪克生物技术股份有限公司 一种肺炎球菌荚膜多糖的纯化方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004098509A2 (en) * 2003-04-30 2004-11-18 Chiron Corporation Compositions for inducing immune responses
WO2009051837A2 (en) * 2007-10-12 2009-04-23 Massachusetts Institute Of Technology Vaccine nanotechnology

Family Cites Families (366)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR7461M (ru) 1968-06-19 1970-01-05
GB1355961A (en) 1970-02-27 1974-06-12 Wellcome Found Preparation of immunosuppressive antilymphocytic serum
CH594444A5 (ru) 1972-12-04 1978-01-13 Gerd Birrenbach
US3996355A (en) 1975-01-02 1976-12-07 American Home Products Corporation Permanent suspension pharmaceutical dosage form
DK143689C (da) 1975-03-20 1982-03-15 J Kreuter Fremgangsmaade til fremstilling af en adsorberet vaccine
US4756907A (en) 1978-10-17 1988-07-12 Stolle Research & Development Corp. Active/passive immunization of the internal female reproductive organs
US4946929A (en) 1983-03-22 1990-08-07 Massachusetts Institute Of Technology Bioerodible articles useful as implants and prostheses having predictable degradation rates
US6309669B1 (en) 1984-03-16 2001-10-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Therapeutic treatment and prevention of infections with a bioactive materials encapsulated within a biodegradable-biocompatible polymeric matrix
US4638045A (en) 1985-02-19 1987-01-20 Massachusetts Institute Of Technology Non-peptide polyamino acid bioerodible polymers
US4631211A (en) 1985-03-25 1986-12-23 Scripps Clinic & Research Foundation Means for sequential solid phase organic synthesis and methods using the same
US4806621A (en) 1986-01-21 1989-02-21 Massachusetts Institute Of Technology Biocompatible, bioerodible, hydrophobic, implantable polyimino carbonate article
JPS63122620A (ja) 1986-11-12 1988-05-26 Sanraku Inc ポリ乳酸マイクロスフエア及びその製造方法
US5736372A (en) 1986-11-20 1998-04-07 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable synthetic polymeric fibrous matrix containing chondrocyte for in vivo production of a cartilaginous structure
US5759830A (en) 1986-11-20 1998-06-02 Massachusetts Institute Of Technology Three-dimensional fibrous scaffold containing attached cells for producing vascularized tissue in vivo
CA1340581C (en) 1986-11-20 1999-06-08 Joseph P. Vacanti Chimeric neomorphogenesis of organs by controlled cellular implantation using artificial matrices
FR2608988B1 (fr) 1986-12-31 1991-01-11 Centre Nat Rech Scient Procede de preparation de systemes colloidaux dispersibles d'une substance, sous forme de nanoparticules
US5912017A (en) 1987-05-01 1999-06-15 Massachusetts Institute Of Technology Multiwall polymeric microspheres
US5229490A (en) 1987-05-06 1993-07-20 The Rockefeller University Multiple antigen peptide system
US5019379A (en) 1987-07-31 1991-05-28 Massachusetts Institute Of Technology Unsaturated polyanhydrides
US4950432A (en) 1987-10-16 1990-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Polyene microlide pre-liposomal powders
US6130082A (en) 1988-05-05 2000-10-10 American Cyanamid Company Recombinant flagellin vaccines
US4929624A (en) 1989-03-23 1990-05-29 Minnesota Mining And Manufacturing Company Olefinic 1H-imidazo(4,5-c)quinolin-4-amines
US5010167A (en) 1989-03-31 1991-04-23 Massachusetts Institute Of Technology Poly(amide-and imide-co-anhydride) for biological application
US5114703A (en) 1989-05-30 1992-05-19 Alliance Pharmaceutical Corp. Percutaneous lymphography using particulate fluorocarbon emulsions
US5733572A (en) 1989-12-22 1998-03-31 Imarx Pharmaceutical Corp. Gas and gaseous precursor filled microspheres as topical and subcutaneous delivery vehicles
US6399754B1 (en) 1991-12-24 2002-06-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Sugar modified oligonucleotides
US6005087A (en) 1995-06-06 1999-12-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2'-modified oligonucleotides
GB9016885D0 (en) 1990-08-01 1990-09-12 Scras Sustained release pharmaceutical compositions
US6699474B1 (en) 1990-08-20 2004-03-02 Erich Hugo Cerny Vaccine and immunserum against drugs of abuse
US5175296A (en) 1991-03-01 1992-12-29 Minnesota Mining And Manufacturing Company Imidazo[4,5-c]quinolin-4-amines and processes for their preparation
SG70625A1 (en) 1991-03-01 2000-02-22 Minnesota Mining & Mfg 1-Substituted 2-substituted 1H-imidazo(4, 5-c) quinolin-4-amines
US5389640A (en) 1991-03-01 1995-02-14 Minnesota Mining And Manufacturing Company 1-substituted, 2-substituted 1H-imidazo[4,5-c]quinolin-4-amines
DK0531497T3 (da) 1991-04-02 1998-03-23 Biotech Australia Pty Ltd Orale indgivelsessystemer til mikropartikler
US5811447A (en) 1993-01-28 1998-09-22 Neorx Corporation Therapeutic inhibitor of vascular smooth muscle cells
IL105325A (en) 1992-04-16 1996-11-14 Minnesota Mining & Mfg Immunogen/vaccine adjuvant composition
US6235313B1 (en) 1992-04-24 2001-05-22 Brown University Research Foundation Bioadhesive microspheres and their use as drug delivery and imaging systems
ATE188613T1 (de) 1992-06-25 2000-01-15 Smithkline Beecham Biolog Adjuvantien enthaltende impfstoffzusammensetzung
AU4778893A (en) 1992-07-21 1994-02-14 General Hospital Corporation, The System of drug delivery to the lymphatic tissues
GB9216082D0 (en) 1992-07-28 1992-09-09 Univ Nottingham Lymphatic delivery composition
US6608201B2 (en) 1992-08-28 2003-08-19 3M Innovative Properties Company Process for preparing 1-substituted, 2-substituted 1H-imidazo[4,5-c]quinolin-4-amines
FR2695563B1 (fr) 1992-09-11 1994-12-02 Pasteur Institut Microparticules portant des antigènes et leur utilisation pour l'induction de réponses humorales ou cellulaires.
AU4932493A (en) 1992-09-25 1994-04-26 Dynagen, Inc. An immunobooster for delayed release of immunogen
US5399665A (en) 1992-11-05 1995-03-21 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable polymers for cell transplantation
US5928647A (en) 1993-01-11 1999-07-27 Dana-Farber Cancer Institute Inducing cytotoxic T lymphocyte responses
US5512600A (en) 1993-01-15 1996-04-30 Massachusetts Institute Of Technology Preparation of bonded fiber structures for cell implantation
US5395937A (en) 1993-01-29 1995-03-07 Minnesota Mining And Manufacturing Company Process for preparing quinoline amines
US5514378A (en) 1993-02-01 1996-05-07 Massachusetts Institute Of Technology Biocompatible polymer membranes and methods of preparation of three dimensional membrane structures
DE69411154T2 (de) 1993-02-22 1998-10-22 Alza Corp Mittel zur oralen gabe von wirkstoffen
US5916539A (en) 1993-03-02 1999-06-29 Silica Gel Ges. M.B.H. Superparamagnetic particles, process for producing the same and their use
CH686761A5 (de) 1993-05-27 1996-06-28 Sandoz Ag Galenische Formulierungen.
WO1995003035A1 (en) 1993-07-23 1995-02-02 Massachusetts Institute Of Technology Polymerized liposomes with enhanced stability for oral delivery
US5565215A (en) 1993-07-23 1996-10-15 Massachusettes Institute Of Technology Biodegradable injectable particles for imaging
US5543158A (en) 1993-07-23 1996-08-06 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable injectable nanoparticles
ES2318848T3 (es) 1993-09-14 2009-05-01 Pharmexa Inc. Peptidos que se unen a pan dr para potenciar la respuesta inmunitaria.
US5798340A (en) 1993-09-17 1998-08-25 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analogs
US5500161A (en) 1993-09-21 1996-03-19 Massachusetts Institute Of Technology And Virus Research Institute Method for making hydrophobic polymeric microparticles
DE69529054T2 (de) 1994-02-28 2003-08-21 Nanopharm Ag System zur gezielten wirkstoffzufuhr, verfahren zu seiner herstellung und verwendung
US5596091A (en) 1994-03-18 1997-01-21 The Regents Of The University Of California Antisense oligonucleotides comprising 5-aminoalkyl pyrimidine nucleotides
WO1995026204A1 (en) 1994-03-25 1995-10-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Immune stimulation by phosphorothioate oligonucleotide analogs
GB9412273D0 (en) 1994-06-18 1994-08-10 Univ Nottingham Administration means
ATE420171T1 (de) 1994-07-15 2009-01-15 Univ Iowa Res Found Immunomodulatorische oligonukleotide
US6239116B1 (en) 1994-07-15 2001-05-29 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
US6207646B1 (en) 1994-07-15 2001-03-27 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
US6007845A (en) 1994-07-22 1999-12-28 Massachusetts Institute Of Technology Nanoparticles and microparticles of non-linear hydrophilic-hydrophobic multiblock copolymers
US5716404A (en) 1994-12-16 1998-02-10 Massachusetts Institute Of Technology Breast tissue engineering
WO1996020698A2 (en) 1995-01-05 1996-07-11 The Board Of Regents Acting For And On Behalf Of The University Of Michigan Surface-modified nanoparticles and method of making and using same
US5876727A (en) 1995-03-31 1999-03-02 Immulogic Pharmaceutical Corporation Hapten-carrier conjugates for use in drug-abuse therapy and methods for preparation of same
US6123727A (en) 1995-05-01 2000-09-26 Massachusetts Institute Of Technology Tissue engineered tendons and ligaments
US5866132A (en) 1995-06-07 1999-02-02 Alberta Research Council Immunogenic oligosaccharide compositions
WO1997004747A1 (en) 1995-07-27 1997-02-13 Dunn James M Drug delivery systems for macromolecular drugs
CA2230494A1 (en) 1995-08-31 1997-03-06 Alkermes Controlled Therapeutics Inc. Composition for sustained release of an agent
US6095148A (en) 1995-11-03 2000-08-01 Children's Medical Center Corporation Neuronal stimulation using electrically conducting polymers
US5902599A (en) 1996-02-20 1999-05-11 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable polymer networks for use in orthopedic and dental applications
US5874064A (en) 1996-05-24 1999-02-23 Massachusetts Institute Of Technology Aerodynamically light particles for pulmonary drug delivery
US5898031A (en) 1996-06-06 1999-04-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligoribonucleotides for cleaving RNA
WO1997047623A1 (en) 1996-06-10 1997-12-18 Cytos Pharmaceuticals Llc Imidazole derivatives as protective agents in reperfusion injury and severe inflammatory responses
US5922695A (en) 1996-07-26 1999-07-13 Gilead Sciences, Inc. Antiviral phosphonomethyoxy nucleotide analogs having increased oral bioavarilability
US6767702B2 (en) 1996-07-29 2004-07-27 Nanosphere, Inc. Nanoparticles having oligonucleotides attached thereto and uses therefor
WO1998008856A2 (de) 1996-08-30 1998-03-05 Fuerste Jens Peter Spiegelselektion und spiegelevolution von nucleinsäuren
WO1998009523A1 (en) 1996-09-05 1998-03-12 Massachusetts Institute Of Technology Compositions and methods for treatment of neurological disorders and neurodegenerative diseases
ES2290969T3 (es) 1996-10-25 2008-02-16 Minnesota Mining And Manufacturing Company Compuestos modificadores de la respuesta inmune para el tratamiento de enfermedades mediadas por th2 y relacionadas.
US6042820A (en) 1996-12-20 2000-03-28 Connaught Laboratories Limited Biodegradable copolymer containing α-hydroxy acid and α-amino acid units
US6127533A (en) 1997-02-14 2000-10-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2'-O-aminooxy-modified oligonucleotides
WO1998037919A1 (en) 1997-02-28 1998-09-03 University Of Iowa Research Foundation USE OF NUCLEIC ACIDS CONTAINING UNMETHYLATED CpG DINUCLEOTIDE IN THE TREATMENT OF LPS-ASSOCIATED DISORDERS
DK1005368T3 (da) 1997-03-10 2010-01-04 Ottawa Hospital Res Inst Anvendelse af nukleinsyrer, der indeholder ikke-metyleret CpG dinukleotid i kombination med alun som hjælpestoffer
US5989591A (en) 1997-03-14 1999-11-23 American Home Products Corporation Rapamycin formulations for oral administration
US6211159B1 (en) 1997-04-11 2001-04-03 University Of Toronto Flagellin gene, FlaC of campylobacter
US6060082A (en) 1997-04-18 2000-05-09 Massachusetts Institute Of Technology Polymerized liposomes targeted to M cells and useful for oral or mucosal drug delivery
EP1003531B1 (en) 1997-05-20 2007-08-22 Ottawa Health Research Institute Processes for preparing nucleic acid constructs
US5985325A (en) 1997-06-13 1999-11-16 American Home Products Corporation Rapamycin formulations for oral administration
US5837752A (en) 1997-07-17 1998-11-17 Massachusetts Institute Of Technology Semi-interpenetrating polymer networks
US6989435B2 (en) 1997-09-11 2006-01-24 Cambridge University Technical Services Ltd. Compounds and methods to inhibit or augment an inflammatory response
DE19745950A1 (de) 1997-10-17 1999-04-22 Dds Drug Delivery Service Ges Arzneistoffträgerpartikel für die gewebespezifische Arzneistoffapplikation
AU732361B2 (en) 1997-11-28 2001-04-26 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. Novel heterocyclic compounds
US6197229B1 (en) 1997-12-12 2001-03-06 Massachusetts Institute Of Technology Method for high supercoiled DNA content microspheres
US6254890B1 (en) 1997-12-12 2001-07-03 Massachusetts Institute Of Technology Sub-100nm biodegradable polymer spheres capable of transporting and releasing nucleic acids
US6506559B1 (en) 1997-12-23 2003-01-14 Carnegie Institute Of Washington Genetic inhibition by double-stranded RNA
FR2775435B1 (fr) 1998-02-27 2000-05-26 Bioalliance Pharma Nanoparticules comprenant au moins un polymere et au moins un compose apte a complexer un ou plusieurs principes actifs
DE69933200T2 (de) * 1998-03-09 2007-02-22 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Kombinierte impfstoffzusammensetzungen
US6232287B1 (en) 1998-03-13 2001-05-15 The Burnham Institute Molecules that home to various selected organs or tissues
US6506577B1 (en) 1998-03-19 2003-01-14 The Regents Of The University Of California Synthesis and crosslinking of catechol containing copolypeptides
US6686446B2 (en) 1998-03-19 2004-02-03 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for controlled polypeptide synthesis
US6632922B1 (en) 1998-03-19 2003-10-14 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for controlled polypeptide synthesis
AU760549B2 (en) 1998-04-03 2003-05-15 University Of Iowa Research Foundation, The Methods and products for stimulating the immune system using immunotherapeutic oligonucleotides and cytokines
CA2328602A1 (en) 1998-05-06 1999-11-11 University Of Iowa Research Foundation Methods for the prevention and treatment of parasitic infections and related diseases using cpg oligonucleotides
SE9801923D0 (sv) 1998-05-29 1998-05-29 Independent Pharmaceutical Ab Nicotine vaccine
US6693086B1 (en) 1998-06-25 2004-02-17 National Jewish Medical And Research Center Systemic immune activation method using nucleic acid-lipid complexes
US6242589B1 (en) 1998-07-14 2001-06-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Phosphorothioate oligonucleotides having modified internucleoside linkages
DE69930642T2 (de) 1998-07-29 2006-12-28 Chiron Corp., Emeryville Mikropartikel mit adsorbenten oberflächen, verfahren zu ihrer herstellung und ihrer verwendung
DE19839214C1 (de) 1998-08-28 2000-05-25 Aventis Res & Tech Gmbh & Co Verfahren zur Herstellung von sphärischen Mikropartikeln mit glatter Oberfläche, die ganz oder teilweise aus mindestens einem wasserunlöslichen linearen Polysaccharid bestehen, sowie mit diesem Verfahren erhältliche Mikropartikel und deren Verwendung
EA003634B1 (ru) 1998-10-05 2003-08-28 Фармэкса А/С Новые способы терапевтической вакцинации
US6306640B1 (en) 1998-10-05 2001-10-23 Genzyme Corporation Melanoma antigenic peptides
DE69935606T9 (de) 1998-10-16 2021-03-11 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Adjuvanzsysteme und impfstoffe
IL142896A0 (en) 1998-11-02 2002-04-21 Elan Corp Plc Multiparticulate modified release composition
US7521068B2 (en) 1998-11-12 2009-04-21 Elan Pharma International Ltd. Dry powder aerosols of nanoparticulate drugs
US6232082B1 (en) 1998-12-01 2001-05-15 Nabi Hapten-carrier conjugates for treating and preventing nicotine addiction
US6403779B1 (en) 1999-01-08 2002-06-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Regioselective synthesis of 2′-O-modified nucleosides
CZ20012446A3 (cs) 1999-01-08 2002-01-16 3M Innovative Properties Company Farmaceutický prostředek pro léčbu onemocnění sliznice
US6486168B1 (en) 1999-01-08 2002-11-26 3M Innovative Properties Company Formulations and methods for treatment of mucosal associated conditions with an immune response modifier
US7238711B1 (en) 1999-03-17 2007-07-03 Cambridge University Technical Services Ltd. Compounds and methods to inhibit or augment an inflammatory response
DE19956568A1 (de) 1999-01-30 2000-08-17 Roland Kreutzer Verfahren und Medikament zur Hemmung der Expression eines vorgegebenen Gens
US6444192B1 (en) 1999-02-05 2002-09-03 The Regents Of The University Of California Diagnostic imaging of lymph structures
US6558951B1 (en) 1999-02-11 2003-05-06 3M Innovative Properties Company Maturation of dendritic cells with immune response modifying compounds
US8221761B1 (en) 1999-02-26 2012-07-17 Novartis Ag Enhancement of bactericidal activity of neisseria antigens with oligonucleotides containing CG motifs
US6248363B1 (en) 1999-11-23 2001-06-19 Lipocine, Inc. Solid carriers for improved delivery of active ingredients in pharmaceutical compositions
US6110462A (en) 1999-03-03 2000-08-29 The Scripps Research Institute Enzymatic DNA molecules that contain modified nucleotides
WO2000062800A2 (en) 1999-04-19 2000-10-26 Smithkline Beecham Biologicals Sa Adjuvant composition comprising saponin and an immunostimulatory oligonucleotide
US6800296B1 (en) 1999-05-19 2004-10-05 Massachusetts Institute Of Technology Modification of surfaces using biological recognition events
US6331539B1 (en) 1999-06-10 2001-12-18 3M Innovative Properties Company Sulfonamide and sulfamide substituted imidazoquinolines
US6815170B1 (en) 1999-06-30 2004-11-09 John Wayne Cancer Institute Methods for lymph node identification
WO2001012071A1 (en) 1999-08-13 2001-02-22 Point Biomedical Corporation Microparticles useful as ultrasonic contrast agents and for lymphatic system
DE60022665T2 (de) 1999-09-25 2006-06-22 Coley Pharmaceutical Gmbh Immunstimulierende nukeinsäuren
WO2001026683A2 (en) 1999-10-12 2001-04-19 National Research Council Of Canada Archaeosomes as adjuvants and carriers for acellular vaccines to induce cytotoxic t lymphocyte (ctl) responses
US7223398B1 (en) 1999-11-15 2007-05-29 Dynavax Technologies Corporation Immunomodulatory compositions containing an immunostimulatory sequence linked to antigen and methods of use thereof
CA2391534A1 (en) 1999-11-15 2001-05-25 Drug Innovation & Design, Inc. Selective cellular targeting: multifunctional delivery vehicles
AT409085B (de) 2000-01-28 2002-05-27 Cistem Biotechnologies Gmbh Pharmazeutische zusammensetzung zur immunmodulation und herstellung von vakzinen
US20050032733A1 (en) 2001-05-18 2005-02-10 Sirna Therapeutics, Inc. RNA interference mediated inhibition of gene expression using chemically modified short interfering nucleic acid (SiNA)
US20050020525A1 (en) 2002-02-20 2005-01-27 Sirna Therapeutics, Inc. RNA interference mediated inhibition of gene expression using chemically modified short interfering nucleic acid (siNA)
US8202979B2 (en) 2002-02-20 2012-06-19 Sirna Therapeutics, Inc. RNA interference mediated inhibition of gene expression using chemically modified short interfering nucleic acid
EP1267946A4 (en) 2000-02-28 2008-07-02 Genesegues Inc SYSTEM AND METHOD FOR ENCAPSULATING NANOCAPSULES
US7129222B2 (en) 2000-03-10 2006-10-31 Dynavax Technologies Corporation Immunomodulatory formulations and methods for use thereof
US20030129251A1 (en) 2000-03-10 2003-07-10 Gary Van Nest Biodegradable immunomodulatory formulations and methods for use thereof
US7157437B2 (en) 2000-03-10 2007-01-02 Dynavax Technologies Corporation Methods of ameliorating symptoms of herpes infection using immunomodulatory polynucleotide sequences
SE0000933D0 (sv) 2000-03-21 2000-03-21 Independent Pharmaceutica Ab Method of producing 6-substituted (S)-nicotine derivatives and intermediate compounds
AU2001249622B2 (en) 2000-03-30 2007-06-07 Massachusetts Institute Of Technology RNA sequence-specific mediators of RNA interference
CA2407897A1 (en) 2000-05-05 2001-11-15 Cytos Biotechnology Ag Molecular antigen arrays and vaccines
US7192725B2 (en) 2000-05-19 2007-03-20 University Of Toronto Flagellin gene, flaC of Campylobacter
US6610713B2 (en) 2000-05-23 2003-08-26 North Shore - Long Island Jewish Research Institute Inhibition of inflammatory cytokine production by cholinergic agonists and vagus nerve stimulation
GB0108364D0 (en) * 2001-04-03 2001-05-23 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine composition
ES2298269T3 (es) 2000-09-26 2008-05-16 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulacion de la actividad inmunoestimulante de analogos oligonucleotidicos inmunoestimulantes mediante cambios quimicos posicionales.
AU2001297913A1 (en) * 2000-10-13 2002-12-23 Ligocyte Pharmaceuticals, Inc. Polyvalent nanoparticles
GB0025414D0 (en) 2000-10-16 2000-11-29 Consejo Superior Investigacion Nanoparticles
ES2295229T3 (es) 2000-10-18 2008-04-16 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Vacunas contra canceres.
EP1355965B1 (en) 2000-10-19 2012-09-19 Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL) Method of synthesizing block copolymers for multifunctional self-assembled systems
US7592008B2 (en) 2000-11-20 2009-09-22 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois, A Body Corporate And Politic Of The State Of Illinois Membrane scaffold proteins
HU230458B1 (hu) 2000-12-01 2016-07-28 Europäisches Laboratorium für Molekularbiologie (EMBL) Az RNS interferenciát közvetítő kis RNS molekulák
AU2006216669A1 (en) 2000-12-08 2006-08-31 3M Innovative Properties Company Compositions and methods for targeted delivery of immune response modifiers
CA2430691A1 (en) 2000-12-27 2002-07-04 Dynavax Technologies Corporation Immunomodulatory polynucleotides and methods of using the same
US7097837B2 (en) 2001-02-19 2006-08-29 Pharmexa A/S Synthetic vaccine agents
US20030175950A1 (en) 2001-05-29 2003-09-18 Mcswiggen James A. RNA interference mediated inhibition of HIV gene expression using short interfering RNA
EP2545937A1 (en) 2001-06-05 2013-01-16 The Regents Of The University Of Michigan Nanoemulsion vaccines
DE60140863D1 (de) 2001-06-10 2010-02-04 Noxxon Pharma Ag Verwendung von L-Polynukleotiden zur diagnostischen Bilderzeugung
NZ530315A (en) 2001-07-10 2007-01-26 Corixa Corp Compositions and methods for delivery of proteins and adjuvants encapsulated in microspheres
AU2002326561B2 (en) 2001-08-07 2008-04-03 Dynavax Technologies Corporation Immunomodulatory compositions, formulations, and methods for use thereof
US6818732B2 (en) 2001-08-30 2004-11-16 The Regents Of The University Of California Transition metal initiators for controlled poly (beta-peptide) synthesis from beta-lactam monomers
US20030054042A1 (en) 2001-09-14 2003-03-20 Elaine Liversidge Stabilization of chemical compounds using nanoparticulate formulations
US7276489B2 (en) 2002-10-24 2007-10-02 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by optimal presentation of 5′ ends
EP1443910A1 (en) 2001-11-02 2004-08-11 Wockhardt Limited Controlled release compositions for macrolide antimicrobial agents
US8088388B2 (en) 2002-02-14 2012-01-03 United Biomedical, Inc. Stabilized synthetic immunogen delivery system
US7501134B2 (en) 2002-02-20 2009-03-10 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Microparticles with adsorbed polypeptide-containing molecules
US20030232013A1 (en) 2002-02-22 2003-12-18 Gary Sieckman Therapeutic and diagnostic targeting of cancers cells with tumor homing peptides
CA2480775C (en) 2002-04-04 2016-05-31 Coley Pharmaceutical Gmbh Immunostimulatory g,u-containing oligoribonucleotides
US20040038303A1 (en) 2002-04-08 2004-02-26 Unger Gretchen M. Biologic modulations with nanoparticles
US20080233181A1 (en) 2002-04-12 2008-09-25 Nagy Jon O Nanoparticle adjuvants for sub-unit vaccines
US7285289B2 (en) 2002-04-12 2007-10-23 Nagy Jon O Nanoparticle vaccines
CN100419426C (zh) 2002-04-22 2008-09-17 佛罗里达州立大学 功能化纳米微粒及其使用方法
US6824338B2 (en) * 2002-05-28 2004-11-30 Satco, Inc. Air transport modular container system
US20040092470A1 (en) 2002-06-18 2004-05-13 Leonard Sherry A. Dry powder oligonucleotide formualtion, preparation and its uses
AU2003269904A1 (en) 2002-07-10 2004-01-23 The Ohio State University Research Foundation Antigen-polymer compositions
CA2487849A1 (en) 2002-07-18 2004-01-29 Cytos Biotechnology Ag Hapten-carrier conjugates comprising virus like particles and uses thereof
ATE488246T1 (de) 2002-08-15 2010-12-15 3M Innovative Properties Co Immunstimulatorische zusammensetzungen und verfahren zur stimulierung einer immunantwort
US20040091503A1 (en) * 2002-08-20 2004-05-13 Genitrix, Llc Lectin compositions and methods for modulating an immune response to an antigen
US7488792B2 (en) 2002-08-28 2009-02-10 Burnham Institute For Medical Research Collagen-binding molecules that selectively home to tumor vasculature and methods of using same
US20040152105A1 (en) 2002-09-06 2004-08-05 Cytos Biotechnology Ag. Immune modulatory compounds and methods
US20060189554A1 (en) 2002-09-24 2006-08-24 Russell Mumper Nanoparticle-Based vaccine delivery system containing adjuvant
US7008411B1 (en) 2002-09-30 2006-03-07 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Method and apparatus for treating vulnerable plaque
NO20024755D0 (no) 2002-10-03 2002-10-03 Amersham Health As Metode
US7670627B2 (en) 2002-12-09 2010-03-02 Salvona Ip Llc pH triggered targeted controlled release systems for the delivery of pharmaceutical active ingredients
AU2003300919A1 (en) 2002-12-11 2004-06-30 Coley Pharmaceutical Gmbh 5' cpg nucleic acids and methods of use
SE0203687D0 (sv) 2002-12-13 2002-12-13 Ian Harwigsson Med Adagit Fa Pharmaceutical Porous Particles
PT1992635E (pt) 2002-12-23 2012-03-20 Dynavax Tech Corp Oligonucleótidos de sequência imunoestimuladora e métodos de utilização dos mesmos
JP2006512391A (ja) 2002-12-30 2006-04-13 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー 組み合わせ免疫賦活薬
US20040156846A1 (en) 2003-02-06 2004-08-12 Triton Biosystems, Inc. Therapy via targeted delivery of nanoscale particles using L6 antibodies
EP1592302A4 (en) 2003-02-13 2007-04-25 3M Innovative Properties Co METHODS AND COMPOSITIONS ASSOCIATED WITH IMMUNE RESPONSE MODIFIER COMPOUNDS AND TOLL-LIKE RECEPTOR 8
DE602004008582T2 (de) 2003-02-17 2008-05-21 Peter Burkhard Peptidische nanoteilchen als arzneimittelabgabe- und antigen-display-systeme
ZA200507235B (en) * 2003-03-21 2007-03-28 Wyeth Corp Treating immunological disorders using agonists of interleukin-21/interleukin-21 receptor
US20040191215A1 (en) 2003-03-25 2004-09-30 Michael Froix Compositions for induction of a therapeutic response
CA2518223A1 (en) 2003-03-26 2004-10-07 Ltt Bio-Pharma Co., Ltd. Intravenous nanoparticles for targeting drug delivery and sustained drug release
KR20050115913A (ko) 2003-03-26 2005-12-08 사이토스 바이오테크놀로지 아게 Ｍｅｌａｎ―ａ 펩티드 유사체-바이러스-양-입자컨쥬게이트
CA2521682A1 (en) 2003-04-10 2004-12-16 3M Innovative Properties Company Delivery of immune response modifier compounds using metal-containing particulate support materials
PL1631264T5 (pl) * 2003-06-02 2018-09-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Kompozycje immunogenne oparte na biodegradowalnych mikrocząstkach zawierających toksoid błonicy i tężca
US7727969B2 (en) 2003-06-06 2010-06-01 Massachusetts Institute Of Technology Controlled release nanoparticle having bound oligonucleotide for targeted delivery
US7149574B2 (en) 2003-06-09 2006-12-12 Palo Alto Investors Treatment of conditions through electrical modulation of the autonomic nervous system
EP1646427A1 (en) 2003-07-22 2006-04-19 Cytos Biotechnology AG Cpg-packaged liposomes
US20050042298A1 (en) 2003-08-20 2005-02-24 Pardridge William M. Immunonanoparticles
AU2004281634B2 (en) 2003-09-03 2011-01-27 Dendritherapeutics, Inc. Multiplex vaccines
US7943179B2 (en) 2003-09-23 2011-05-17 Massachusetts Institute Of Technology pH triggerable polymeric particles
US7771726B2 (en) 2003-10-08 2010-08-10 New York University Use of synthetic glycolipids as universal adjuvants for vaccines against cancer and infectious diseases
US20080160089A1 (en) * 2003-10-14 2008-07-03 Medivas, Llc Vaccine delivery compositions and methods of use
CA2558916C (en) 2003-10-20 2009-09-22 William Marsh Rice University Method to fabricate microcapsules from polymers and charged nanoparticles
CN1608675A (zh) * 2003-10-22 2005-04-27 四川大学 一种新型高分子材料载药纳米粒及制法和用途
SG122973A1 (en) 2003-10-30 2006-06-29 Coley Pharm Gmbh C-class oligonucleotide analogs with enhanced immunostimulatory potency
EP1691780A2 (en) 2003-11-21 2006-08-23 Alza Corporation Gene delivery mediated by liposome-dna complex with cleavable peg surface modification
CN1544638A (zh) * 2003-11-28 2004-11-10 中国药科大学 可载荷多肽的病毒样颗粒
WO2005055949A2 (en) 2003-12-09 2005-06-23 The Children's Hospital Of Philadelphia Sustained release preparations composed of biocompatible complex microparticles
KR100581967B1 (ko) 2003-12-18 2006-05-22 한국유나이티드제약 주식회사 소화성 궤양 치료를 위한 프로톤펌프 저해제와클래리스로마이신을 함유하는 이중 펠렛 제제 및 그의제조방법
US9040090B2 (en) 2003-12-19 2015-05-26 The University Of North Carolina At Chapel Hill Isolated and fixed micro and nano structures and methods thereof
ES2625345T3 (es) 2003-12-19 2017-07-19 The University Of North Carolina At Chapel Hill Métodos para fabricar micro- y nanoestructuras usando litografía blanda o de impresión
FR2863890B1 (fr) * 2003-12-19 2006-03-24 Aventis Pasteur Composition immunostimulante
EP1550458A1 (en) * 2003-12-23 2005-07-06 Vectron Therapeutics AG Synergistic liposomal adjuvants
WO2005065418A2 (en) 2003-12-31 2005-07-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Compositions and methods of use of targeting peptides for diagnosis and therapy
US20070087986A1 (en) 2004-01-26 2007-04-19 Brett Premack Compositions and methods for enhancing immunity by chemoattractant adjuvants
EP2415481A3 (en) 2004-02-19 2012-04-18 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Immunostimulatory viral RNA oligonucleotides
EP1735010A4 (en) 2004-04-09 2008-08-27 3M Innovative Properties Co METHODS, COMPOSITIONS AND PREPARATIONS FOR ADMINISTRATION OF IMMUNE RESPONSE MODIFIERS (MRI)
JP4584986B2 (ja) 2004-04-27 2010-11-24 アルニラム ファーマスーティカルズ インコーポレイテッド ２−アリールプロピル部分を含む１本鎖及び２本鎖オリゴヌクレオチド
ES2246695B1 (es) 2004-04-29 2007-05-01 Instituto Cientifico Y Tecnologico De Navarra, S.A. Composicion estimuladora de la respuesta inmunitaria que comprende nanoparticulas a base de un copolimero de metil vinil eter y anhidrido maleico.
WO2005120574A1 (ja) 2004-06-11 2005-12-22 Riken 調節性細胞リガンドをリポソームに含有させてなる医薬
GB0413868D0 (en) * 2004-06-21 2004-07-21 Chiron Srl Dimensional anlaysis of saccharide conjugates
JP2008512350A (ja) 2004-07-01 2008-04-24 イェール ユニバーシティ 標的化され、そして高密度で薬物が負荷されるポリマー性物質
WO2006014579A2 (en) 2004-07-08 2006-02-09 The Regents Of California Enhancing class i antigen presentation with synthetic sequences
US8017151B2 (en) 2004-09-07 2011-09-13 Board Of Regents Of The University Of Nebraska By And Behalf Of The University Of Nebraska Medical Center Amphiphilic polymer-protein conjugates and methods of use thereof
CA2580343A1 (en) 2004-09-14 2006-03-23 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Imidazoquinoline compounds
CN1692943A (zh) 2004-09-17 2005-11-09 四川大学 CpG DNA分子抗感染免疫制剂的制备和应用
CA2582668C (en) 2004-10-01 2013-10-01 Midatech Ltd Nanoparticles comprising antigens and adjuvants, and immunogenic structures
EP1812864A2 (en) 2004-10-07 2007-08-01 Emory University Multifunctional nanoparticles conjugates and their use
MY159370A (en) 2004-10-20 2016-12-30 Coley Pharm Group Inc Semi-soft-class immunostimulatory oligonucleotides
US9492400B2 (en) 2004-11-04 2016-11-15 Massachusetts Institute Of Technology Coated controlled release polymer particles as efficient oral delivery vehicles for biopharmaceuticals
EP1814587A2 (en) 2004-11-05 2007-08-08 The General Hospital Corporation Purposeful movement of human migratory cells away from an agent source
US9107813B2 (en) 2004-11-15 2015-08-18 Derek T. O'Hagan Immunogenic compositions containing anthrax antigen, biodegradable polymer microparticles, and polynucleotide-containing immunological adjuvant
US20060111271A1 (en) 2004-11-24 2006-05-25 Cerny Erich H Active and passive immunization against pharmacologically active hapten molecules using a synthetic carrier compound composed of similar elements
US20070292386A9 (en) * 2004-12-02 2007-12-20 Campbell Robert L Vaccine formulations for intradermal delivery comprising adjuvants and antigenic agents
EP1824872B1 (en) 2004-12-14 2012-02-08 Alnylam Pharmaceuticals Inc. Rnai modulation of mll-af4 and uses thereof
US20060257359A1 (en) 2005-02-28 2006-11-16 Cedric Francois Modifying macrophage phenotype for treatment of disease
EP1866416A2 (en) 2005-03-22 2007-12-19 Medstar Health Inc. Delivery systems and methods for diagnosing and treating cardiovascular diseases
US7709001B2 (en) 2005-04-08 2010-05-04 Wyeth Llc Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition
US20080305161A1 (en) 2005-04-13 2008-12-11 Pfizer Inc Injectable depot formulations and methods for providing sustained release of nanoparticle compositions
WO2006116458A2 (en) 2005-04-26 2006-11-02 Coley Pharmaceutical Gmbh Modified oligoribonucleotide analogs with enhances immunostimulatory activity
CA2607185A1 (en) 2005-05-04 2006-11-09 Noxxon Pharma Ag Intracellular active agents
EP1893661B1 (en) 2005-05-10 2012-01-18 Emory University Strategies for delivery of active agents using micelles and particles
WO2007003054A1 (en) 2005-07-06 2007-01-11 Shoichet Molly S Method of biomolecule immobilization on polymers using click-type chemistry
CA2618807C (en) 2005-08-12 2015-01-06 University Health Network Methods and devices for lymphatic targeting
TWI382019B (zh) 2005-08-19 2013-01-11 Array Biopharma Inc 作為類鐸受體（ｔｏｌｌ-ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ）調節劑之胺基二氮雜呯
TW201402124A (zh) 2005-08-19 2014-01-16 Array Biopharma Inc 作為類鐸受體（ｔｏｌｌ-ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ）調節劑之８-經取代苯并氮雜呯
ES2577514T3 (es) 2005-08-22 2016-07-15 The Regents Of The University Of California Antagonistas de TLR
WO2007028341A1 (fr) 2005-09-09 2007-03-15 Beijing Diacrid Medical Technology Co., Ltd. Nanomicelles servant de medicaments anticancereux a polyethylene phospholipides glycolyles contenant des vinca alcaloides
CA2630738C (en) 2005-11-25 2013-09-03 Coley Pharmaceutical Gmbh Immunostimulatory oligoribonucleotides
WO2007064478A2 (en) 2005-11-28 2007-06-07 Nabi Biopharmaceuticals Method for making nicotine hapten
ES2564241T3 (es) 2005-12-02 2016-03-21 Glaxosmithkline Biologicals Sa Nanopartículas para su uso en composiciones inmunogénicas
JP5484732B2 (ja) 2005-12-14 2014-05-07 サイトス バイオテクノロジー アーゲー 過敏症の治療のための免疫賦活性核酸パッケージ粒子
US9267937B2 (en) 2005-12-15 2016-02-23 Massachusetts Institute Of Technology System for screening particles
US7842312B2 (en) 2005-12-29 2010-11-30 Cordis Corporation Polymeric compositions comprising therapeutic agents in crystalline phases, and methods of forming the same
EP2026771B1 (en) 2006-01-23 2009-10-21 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Microspheres comprising nanocapsules containing a lipophilic drug
EP1986685A4 (en) 2006-01-31 2009-02-25 Medivas Llc COMPOSITIONS FOR DISPENSING A VACCINATE AND METHOD FOR THE APPLICATION THEREOF
EP1986610B1 (en) 2006-02-10 2018-04-11 Biocompatibles UK Limited Loading of hydrophobic drugs into hydrophilic polymer delivery systems
US8021689B2 (en) 2006-02-21 2011-09-20 Ecole Polytechnique Federale de Lausanne (“EPFL”) Nanoparticles for immunotherapy
AU2007221154A1 (en) 2006-02-24 2007-09-07 Novartis Ag Microparticles containing biodegradable polymer and cationic polysaccharide for use in immunogenic compositions
EP2010530A2 (en) 2006-03-23 2009-01-07 Novartis AG Methods for the preparation of imidazole-containing compounds
ES2776100T3 (es) 2006-03-31 2020-07-29 Massachusetts Inst Technology Sistema para el suministro dirigido de agentes terapéuticos
CA2649149A1 (en) 2006-04-11 2007-10-25 Koko Kosmetikvertrieb Gmbh & Co. Kg Nanoparticle containing nicotine and/or cotinine, dispersions, and use thereof
CA2652280C (en) 2006-05-15 2014-01-28 Massachusetts Institute Of Technology Polymers for functional particles
US20110052697A1 (en) 2006-05-17 2011-03-03 Gwangju Institute Of Science & Technology Aptamer-Directed Drug Delivery
ES2427994T3 (es) 2006-06-12 2013-11-05 Cytos Biotechnology Ag Procesos para empaquetar oligonucleótidos en partículas de tipo viral de bacteriófagos de ARN
JP2010502766A (ja) 2006-06-16 2010-01-28 フロリダ アトランティック ユニヴァーシティ アジュバントとしてのキチン微粒子
US20100028381A1 (en) 2006-06-19 2010-02-04 3M Innovative Properties Company Formulation for delivery of immune response modifiers
US9381477B2 (en) 2006-06-23 2016-07-05 Massachusetts Institute Of Technology Microfluidic synthesis of organic nanoparticles
BRPI0713533A2 (pt) 2006-06-26 2012-04-17 Mutual Pharmaceutical Co formulações de agente ativo, métodos de fabricação, e métodos de uso
US20100144845A1 (en) 2006-08-04 2010-06-10 Massachusetts Institute Of Technology Oligonucleotide systems for targeted intracellular delivery
US20080171059A1 (en) 2006-08-07 2008-07-17 Shanshan Wu Howland Methods and compositions for increased priming of t-cells through cross-presentation of exogenous antigens
EP2054339A4 (en) 2006-08-11 2011-08-03 Panacea Biotec Ltd PARTICULARS FOR ACTIVE INHIBITION, MANUFACTURING METHOD AND COMPOSITIONS THEREOF
AU2007293673B2 (en) * 2006-09-07 2013-06-27 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Vaccine
WO2008033432A2 (en) 2006-09-12 2008-03-20 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Immune modulation by chemically modified ribonucleosides and oligoribonucleotides
US20100111973A1 (en) 2006-09-22 2010-05-06 Glenn Dranoff Methods for treating mica-related disorders
EP3590503A1 (en) 2006-10-12 2020-01-08 The University of Queensland Compositions and methods for modulating immune responses
US20100303723A1 (en) 2006-11-20 2010-12-02 Massachusetts Institute Of Technology Drug delivery systems using fc fragments
NZ577405A (en) * 2006-12-06 2012-08-31 Novartis Ag Vaccines including antigen from four strains of influenza virus
EP2099496A2 (en) 2006-12-08 2009-09-16 Massachusetts Institute of Technology Delivery of nanoparticles and/or agents to cells
EP1932516A1 (en) 2006-12-11 2008-06-18 Universiteit Utrecht Holding B.V. Anti-inflammatory compounds containing compositions for treatment of cancer
WO2008071774A1 (en) 2006-12-14 2008-06-19 Cytos Biotechnology Ag Purification process for coat protein of rna bacteriophages
US20080149123A1 (en) 2006-12-22 2008-06-26 Mckay William D Particulate material dispensing hairbrush with combination bristles
JP5389668B2 (ja) 2007-01-31 2014-01-15 チョンシー ユー 皮膚浸透率の非常に高い１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン及び関連化合物の正に荷電した水溶性プロドラッグ
CA2677733A1 (en) 2007-02-07 2008-09-25 The Regents Of The University Of California Conjugates of synthetic tlr agonists and uses therefor
US9217129B2 (en) 2007-02-09 2015-12-22 Massachusetts Institute Of Technology Oscillating cell culture bioreactor
US8889117B2 (en) 2007-02-15 2014-11-18 Yale University Modular nanoparticles for adaptable vaccines
CN101678090B (zh) 2007-03-07 2012-04-11 乌第有限合伙公司 用于预防和治疗自身免疫病的组合物和方法
WO2008118861A2 (en) 2007-03-23 2008-10-02 The University Of North Carolina At Chapel Hill Discrete size and shape specific organic nanoparticles designed to elicit an immune response
US11246831B2 (en) 2007-03-30 2022-02-15 Particle Sciences, Inc. Particle formulations and uses thereof
WO2008124632A1 (en) 2007-04-04 2008-10-16 Massachusetts Institute Of Technology Amphiphilic compound assisted nanoparticles for targeted delivery
WO2008124634A1 (en) 2007-04-04 2008-10-16 Massachusetts Institute Of Technology Polymer-encapsulated reverse micelles
WO2008124165A2 (en) 2007-04-09 2008-10-16 Chimeros, Inc. Self-assembling nanoparticle drug delivery system
WO2008127532A1 (en) 2007-04-12 2008-10-23 Emory University Novel strategies for delivery of active agents using micelles and particles
EP1982729A1 (en) 2007-04-20 2008-10-22 Cytos Biotechnology AG Vaccination Regimen for B-Cell Vaccines
US20080294089A1 (en) * 2007-06-06 2008-11-27 Biovaluation & Analysis, Inc. Dendritic Polymers for Use in Acoustically Mediated Intracellular Drug Delivery in vivo
US20090047318A1 (en) 2007-08-16 2009-02-19 Abbott Cardiovascular Systems Inc. Nanoparticle-coated medical devices and formulations for treating vascular disease
US8394914B2 (en) 2007-08-24 2013-03-12 Board Of Trustees Of Michigan State University Functional polyglycolide nanoparticles derived from unimolecular micelles
WO2009027971A2 (en) 2007-08-27 2009-03-05 H2Q Water Industries Ltd. Antimicrobial polymers
US20090130210A1 (en) 2007-09-11 2009-05-21 Raheja Praveen Pharmaceutical compositions of sirolimus
WO2009079066A2 (en) * 2007-09-26 2009-06-25 Aparna Biosciences Therapeutic and vaccine polyelectrolyte nanoparticle compositions
WO2009069448A1 (ja) 2007-11-28 2009-06-04 Toray Industries, Inc. 日本脳炎ワクチン用のアジュバント及び日本脳炎ワクチン
AU2008335457B2 (en) 2007-12-07 2015-04-16 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Compositions for inducing immune responses
WO2009078754A1 (en) 2007-12-19 2009-06-25 Ardenia Investments, Ltd. Drug delivery system for administration of poorly water soluble pharmaceutically active substances
AU2009221419B2 (en) * 2008-02-01 2013-09-26 Alpha-O Peptides Ag Self-assembling peptide nanoparticles useful as vaccines
WO2009106999A2 (en) 2008-02-28 2009-09-03 Deutsches Krebsforschungszentrum, Stiftung Des Öffentlichen Rechts Hollow nanoparticles and uses thereof
CN102014874A (zh) 2008-03-04 2011-04-13 流体科技公司 免疫调节剂颗粒和治疗方法
CN101983063A (zh) 2008-04-01 2011-03-02 伊耐特医疗技术有限公司 抗感染剂及其用途
US20090297621A1 (en) 2008-06-03 2009-12-03 Abbott Cardiovascular Systems Inc. Microparticles For The Treatment Of Disease
WO2010005726A2 (en) 2008-06-16 2010-01-14 Bind Biosciences Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles with mtor inhibitors and methods of making and using same
PT2774608T (pt) 2008-06-16 2020-01-17 Pfizer Nanopartículas poliméricas carregadas com fármaco e métodos de produção e utilização das mesmas
US20110212157A1 (en) 2008-06-26 2011-09-01 Anterios, Inc. Dermal delivery
AU2009266940A1 (en) 2008-07-01 2010-01-07 Emory University Synergistic induction of humoral and cellular immunity by combinatorial activation of toll-like receptors
US20110280949A1 (en) 2008-08-06 2011-11-17 Padma Malyala Microparticles for use in immunogenic compositions
UA103195C2 (ru) 2008-08-11 2013-09-25 Глаксосмитклайн Ллк Производные пурина для применения в лечении аллергий, воспалительных и инфекционных заболеваний
JP5519670B2 (ja) 2008-08-11 2014-06-11 グラクソスミスクライン エルエルシー アレルギー性、炎症性及び感染性疾患治療用のプリン誘導体
WO2010018132A1 (en) 2008-08-11 2010-02-18 Smithkline Beecham Corporation Compounds
WO2010018131A1 (en) 2008-08-11 2010-02-18 Smithkline Beecham Corporation Purine derivatives for use in the treatment of allergic, inflammatory and infectious diseases
US8323696B2 (en) 2008-08-29 2012-12-04 Ecole Polytechnique Federale De Lausanne Nanoparticles for immunotherapy
WO2010039861A2 (en) 2008-09-30 2010-04-08 The Regents Of The University Of Michigan Dendrimer conjugates
WO2010037402A1 (en) 2008-10-02 2010-04-08 Dako Denmark A/S Molecular vaccines for infectious disease
EP2172193A1 (en) 2008-10-02 2010-04-07 Capsulution Nanoscience AG Improved nanoparticulate compositions of poorly soluble compounds
US8591905B2 (en) * 2008-10-12 2013-11-26 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Nicotine immunonanotherapeutics
US8343497B2 (en) * 2008-10-12 2013-01-01 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Targeting of antigen presenting cells with immunonanotherapeutics
US8343498B2 (en) * 2008-10-12 2013-01-01 Massachusetts Institute Of Technology Adjuvant incorporation in immunonanotherapeutics
US8277812B2 (en) 2008-10-12 2012-10-02 Massachusetts Institute Of Technology Immunonanotherapeutics that provide IgG humoral response without T-cell antigen
US20100098770A1 (en) 2008-10-16 2010-04-22 Manikandan Ramalingam Sirolimus pharmaceutical formulations
WO2010047839A1 (en) 2008-10-25 2010-04-29 Aura Biosciences Modified plant virus particles and uses therefor
EP2940009B1 (en) 2008-11-06 2018-10-17 VentiRx Pharmaceuticals, Inc. Methods of synthesis of benzazepine derivatives
CN101822838B (zh) * 2009-03-05 2012-06-27 无锡纳奥生物医药有限公司 靶向识别肿瘤细胞的纳米药物载体材料及其制备和应用
US20100233231A1 (en) 2009-03-10 2010-09-16 Roger Labrecque Use of cryogenic processing to obtain a substantially-thickened formulation
US9764012B2 (en) 2009-04-01 2017-09-19 University Of Miami Vaccine compositions and methods of use thereof
KR20120022984A (ko) 2009-04-21 2012-03-12 셀렉타 바이오사이언시즈, 인크. Ｔｈ１ 편향 반응을 제공하는 면역나노치료법
GB0908129D0 (en) 2009-05-12 2009-06-24 Innovata Ltd Composition
JP6297776B2 (ja) 2009-05-27 2018-03-20 セレクタ バイオサイエンシーズ インコーポレーテッドＳｅｌｅｃｔａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ． 免疫調節薬−高分子化合物
KR20120050414A (ko) 2009-06-19 2012-05-18 썬 파마 어드밴스트 리서치 컴패니 리미티드 약물의 나노분산액 및 그의 제조 방법
US20120164189A1 (en) 2009-07-07 2012-06-28 Balu-Iyer Sathy V Lipidic Compositions for Induction of Immune Tolerance
US20110110965A1 (en) 2009-08-26 2011-05-12 Selecta Biosciences, Inc. Compositions that induce t cell help
JP5796909B2 (ja) * 2009-11-25 2015-10-21 サイトメティックス、インコーポレイテッド アラキドン酸類縁体、及びそれによる鎮痛治療
US9295649B2 (en) 2009-12-15 2016-03-29 Bind Therapeutics, Inc. Therapeutic polymeric nanoparticle compositions with high glass transition temperature or high molecular weight copolymers
WO2011085231A2 (en) 2010-01-08 2011-07-14 Selecta Biosciences, Inc. Synthetic virus-like particles conjugated to human papillomavirus capsid peptides for use as vaccines
US20110229556A1 (en) 2010-03-19 2011-09-22 Massachusetts Institute Of Technology Lipid-coated polymer particles for immune stimulation
US20110262491A1 (en) 2010-04-12 2011-10-27 Selecta Biosciences, Inc. Emulsions and methods of making nanocarriers
US20110272836A1 (en) 2010-04-12 2011-11-10 Selecta Biosciences, Inc. Eccentric vessels
EP2575876B1 (en) 2010-05-26 2017-12-06 Selecta Biosciences, Inc. Multivalent synthetic nanocarrier vaccines
US20120058154A1 (en) 2010-08-20 2012-03-08 Selecta Biosciences, Inc. Synthetic nanocarrier vaccines comprising peptides obtained or derived from human influenza a virus m2e
JP2013538211A (ja) 2010-08-23 2013-10-10 セレクタ バイオサイエンシーズ インコーポレーテッド 抗原に対する免疫反応を誘発する標的マルチエピトープ剤形
WO2012061717A1 (en) 2010-11-05 2012-05-10 Selecta Biosciences, Inc. Modified nicotinic compounds and related methods
US20120171229A1 (en) 2010-12-30 2012-07-05 Selecta Biosciences, Inc. Synthetic nanocarriers with reactive groups that release biologically active agents
KR20140022025A (ko) 2011-03-25 2014-02-21 셀렉타 바이오사이언시즈, 인크. 삼투적 매개 방출 합성 나노담체
KR102112002B1 (ko) 2011-04-29 2020-05-18 셀렉타 바이오사이언시즈, 인크. 치료적 단백질에 대해 면역 반응을 감소시키는 관용원성 합성 나노운반체
MX2014001142A (es) 2011-07-29 2014-02-27 Selecta Biosciences Inc Nanoportadores sinteticos que generan respuestas inmunitarias humorales y de linfocitos t citotoxicos (ctl).
US20130059009A1 (en) 2011-09-06 2013-03-07 Selecta Biosciences, Inc. Compositions and methods for producing antigen-specific induced tolerogenic dendritic cells with synthetic nanocarriers
CN105339012A (zh) 2013-05-03 2016-02-17 西莱克塔生物科技公司 降低i型和iv型超敏反应的致耐受性合成纳米载体的局部伴随施用
CN112933218A (zh) 2013-06-04 2021-06-11 西莱克塔生物科技公司 非免疫抑制性抗原特异性免疫治疗剂的重复施用
US20160220501A1 (en) 2015-02-03 2016-08-04 Selecta Biosciences, Inc. Tolerogenic synthetic nanocarriers to reduce immune responses to therapeutic proteins
US20150359865A1 (en) 2014-06-17 2015-12-17 Selecta Biosciences, Inc. Tolerogenic synthetic nanocarriers for t-cell-mediated autoimmune disease
AU2015279738A1 (en) 2014-06-25 2016-12-22 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions for treatment with synthetic nanocarriers and immune checkpoint inhibitors
CA2957800A1 (en) 2014-09-07 2016-03-10 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions for attenuating anti-viral transfer vector immune responses
ES2865375T3 (es) 2014-11-05 2021-10-15 Selecta Biosciences Inc Métodos y composiciones relacionadas con nanovehículos sintéticos con rapamicina en un estado sobresaturado estable

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004098509A2 (en) * 2003-04-30 2004-11-18 Chiron Corporation Compositions for inducing immune responses
WO2009051837A2 (en) * 2007-10-12 2009-04-23 Massachusetts Institute Of Technology Vaccine nanotechnology

Also Published As

Publication number Publication date
JP2017014216A (ja) 2017-01-19
WO2011150264A3 (en) 2013-04-04
EP2575773A2 (en) 2013-04-10
CN102917731A (zh) 2013-02-06
MX2012013716A (es) 2013-01-28
DK2575876T3 (en) 2018-03-12
IL222722B (en) 2018-12-31
AU2011258165B2 (en) 2016-11-17
EP2575876B1 (en) 2017-12-06
KR20130108983A (ko) 2013-10-07
US20110293701A1 (en) 2011-12-01
EP2575773A4 (en) 2014-06-25
EA201291157A1 (ru) 2013-04-30
AU2011258156B2 (en) 2016-11-24
WO2011150258A1 (en) 2011-12-01
CN107029222A (zh) 2017-08-11
JP6367554B2 (ja) 2018-08-01
CN107096021A (zh) 2017-08-29
IL222722A0 (en) 2012-12-31
CN106177940A (zh) 2016-12-07
ES2661978T3 (es) 2018-04-04
EA030620B1 (ru) 2018-09-28
JP2018065813A (ja) 2018-04-26
US20120027806A1 (en) 2012-02-02
EA201500857A1 (ru) 2016-06-30
JP2017014217A (ja) 2017-01-19
JP2017008054A (ja) 2017-01-12
BR112012029823A2 (pt) 2020-09-01
JP2013530157A (ja) 2013-07-25
JP2017008055A (ja) 2017-01-12
AU2011258156A1 (en) 2012-11-08
PT2575876T (pt) 2018-03-26
CA2798994A1 (en) 2011-12-01
EA201291156A1 (ru) 2013-04-30
AU2017201145A1 (en) 2017-03-09
CA2798323A1 (en) 2011-12-01
EP2575876A1 (en) 2013-04-10
AU2017201080A1 (en) 2017-03-09
AU2011258147A1 (en) 2012-11-01
KR20130108988A (ko) 2013-10-07
AU2011258171B2 (en) 2016-11-24
BR112012029912A2 (pt) 2016-11-16
MX2012013715A (es) 2013-01-28
PL2575876T3 (pl) 2018-07-31
JP2013526617A (ja) 2013-06-24
EA201291154A1 (ru) 2013-04-30
CA2798493A1 (en) 2011-12-01
JP6324067B2 (ja) 2018-05-16
JP6324068B2 (ja) 2018-05-23
US20110293700A1 (en) 2011-12-01
JP2013528181A (ja) 2013-07-08
US9764031B2 (en) 2017-09-19
IL222680A0 (en) 2012-12-31
JP2018052937A (ja) 2018-04-05
AU2011258171A1 (en) 2012-11-08
MX355036B (es) 2018-04-02
KR20130108987A (ko) 2013-10-07
WO2011150249A1 (en) 2011-12-01
MX2012013714A (es) 2013-01-28
EP3388081A1 (en) 2018-10-17
CN102905729A (zh) 2013-01-30
US9066978B2 (en) 2015-06-30
MX2012013713A (es) 2013-01-28
EP2582393A4 (en) 2014-04-02
EA030813B1 (ru) 2018-10-31
EA201291158A1 (ru) 2013-05-30
CN107080839A (zh) 2017-08-22
JP2018052940A (ja) 2018-04-05
AU2017201082A1 (en) 2017-03-09
EP2575886A1 (en) 2013-04-10
IL222725B (en) 2018-06-28
US20180043023A1 (en) 2018-02-15
JP2020023492A (ja) 2020-02-13
NO2575876T3 (ru) 2018-05-05
IL222680B (en) 2020-03-31
AU2017201143A1 (en) 2017-03-09
CN103118700A (zh) 2013-05-22
CN102905728A (zh) 2013-01-30
BR112012029917A2 (pt) 2017-02-21
KR20180099900A (ko) 2018-09-05
AU2011258165A1 (en) 2012-11-08
EP2582393A1 (en) 2013-04-24
CA2798739A1 (en) 2011-12-01
US20110293723A1 (en) 2011-12-01
JP2013530158A (ja) 2013-07-25
US20150328309A1 (en) 2015-11-19
WO2011150240A1 (en) 2011-12-01
CN107029223A (zh) 2017-08-11
JP6407208B2 (ja) 2018-10-17
CN102905728B (zh) 2015-11-25
WO2011150264A2 (en) 2011-12-01
CN105194665A (zh) 2015-12-30
IL222724A0 (en) 2012-12-31
EP2575876A4 (en) 2014-03-26
MX352324B (es) 2017-11-17
IL260015A (en) 2018-07-31
IL269615A (en) 2019-11-28
JP6371058B2 (ja) 2018-08-15
EP2575886A4 (en) 2015-02-25
IL222725A0 (en) 2012-12-31
AU2011258147B2 (en) 2016-11-17
KR20130108984A (ko) 2013-10-07
EA023397B1 (ru) 2016-05-31
EA201890942A1 (ru) 2018-09-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20230139671A1 (en) Osmotic mediated release synthetic nanocarriers
EA030863B1 (ru) Композиции для усиления иммунного ответа на антиген, содержащие синтетические наноносители, и их применения

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU