CZ297281B6 - Syntetický amid opioidního peptidu a farmaceutický prostredek - Google Patents
Syntetický amid opioidního peptidu a farmaceutický prostredek Download PDFInfo
- Publication number
- CZ297281B6 CZ297281B6 CZ20002382A CZ20002382A CZ297281B6 CZ 297281 B6 CZ297281 B6 CZ 297281B6 CZ 20002382 A CZ20002382 A CZ 20002382A CZ 20002382 A CZ20002382 A CZ 20002382A CZ 297281 B6 CZ297281 B6 CZ 297281B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- phe
- xaa
- arg
- nle
- peptide
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1027—Tetrapeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/1016—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1024—Tetrapeptides with the first amino acid being heterocyclic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Postatu resení tvorí syntetický amid opiodního peptidu nebo jeho farmaceuticky prijatelná sul, který má afinitu pro kappa-opiátové receptory alespon 1000krát vyssí nez afinitu pro mu-opiátové receptory a který má dlouhé trvání úcinku pri podání in vivo, peptid má vzorec H-Xaa.sub.1.n.-Xaa.sub.2.n.-Xaa.sub.3.n.-Xaa.sub.4.n.-Q, kde jednotlivé symboly mají význam, uvedený u príslusného vzorce. Soucást resení tvorí rovnez farmaceutický prostredek, který tento amid obsahuje.
Description
Oblast techniky
Předkládaný vynález se obecně týká syntetických opioidních peptidů, přesněji opioidních peptidů, které jsou vysoce selektivními agonisty kappa-receptoru a které jsou - ještě přesněji agonisty, (a) nepronikajícími do mozku, a (b) majícími dlouhodobou antinocicepční aktivitu in vitro.
Dosavadní stav techniky
Kappa-opiátové receptory (KOR) jsou přítomné v mozku, míše a na centrálních a periferních zakončeních a tělech buněk primárních sensorických aferentních neuronů (somatických a viscerálních), stejně jako na buňkách imunitního systému. Molekuly, které aktivují KOR, jsou společně označovány jako kappa-agonisté.
Bylo dokázáno, že aktivace KOR, které jsou lokalizovány v mozku, má analgetický účinek. Toto zjištění vedlo k pokusům o vývoj nepeptidových kappa-agonistů pronikajících do mozku, které by mohly být použity jako analgetika nemající nežádoucí vedlejší účinky (zácpu, respirační depresi, závislost a návyk) morfinových analogů, které působí na opiátové receptory (MOR). Analgetická aktivita, stejně jako chybění „mu-opiátových“ nežádoucích účinků této třídy sloučenin byla potvrzena jak u zvířat, tak u lidí. Nicméně, vývoj kappa-agonistů byl přerušen, protože bylo prokázáno, že také indukující specifické nežádoucí účinky, jako je diuresa, sedace a dysforie, které jsou zprostředkované kappa-receptory umístěnými v mozku.
Kromě suprespinálních KOR mohou analgesii vyvolávat také KOR umístěné na periferii nebo v míše. Nicméně, ani periferní, ani míšní KOR nejsou spojeny s jakýmikoliv vedlejšími účinky systémových kappa-agonistů. Proto pokud by bylo možné vytvořit agonistu opiátových kappa receptorů, který by nepronikal do mozku (po periferním nebo spinálním podání), tak by bylo možno získat bezpečné a nové analgetikum.
Kappa-agonisté vyvolávají periferní antinocicepci v modelech hyperalgesie tenkého, stejně jako tlustého střeva, která je indukována mírným a lokálním zánětem, a v modelu syndromu dráždivého tračníku (IBS), při které je přítomná významná viscerální bolest způsobená viscerální hypersenzitivitou pravděpodobně spojenou s lokálním zánětem, je také léčitelný pomocí periferního kappa-agonisty. Kromě gastrointestinálního traktu jsou také jiné viscerální orgány postižené patologickým stavem, na kterém se účastní aktivace a/nebo desenzitizace (lokální zánět) primárních sensorických aferentních drah, vhodným cílem pro opiáty působící na kappa-receptory. Kappa-agonisté také blokují neurogenní zánět v somatických tkáních inhibici uvolňování substance P z primárních sensorických aferentních zakončení a také je známo, že působí na imunitní systém a mají inhibiční účinek na buňky imunitního systému.
Zejména vhodné jsou peptidy, které nepronikají do mozku, které mají vysokou afinitu ke KOR oproti MOR, které mají vysokou účinnost a které mají dlouhé trvání účinku in vivo. U.S. patent 5 610 271 popisuje tetrapeptidy obsahující čtyři D-izomerové aminokyselinové zbytky, které se váží na KOR, ale tyto peptidy nesplňují všechny charakteristiky uvedené výše.
Podstata vynálezu
Podstatu vynálezu tvoří:
- 1 CZ 297281 B6 syntetický amid opioidního peptidu nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl, který má afinitu pro kappa-opiátové receptory alespoň 1000-krát vyšší než afinitu pro mu-opiátové receptory a který má dlouhé trvání účinku při podání in vivo, kde tento peptid má vzorec:
H-Xaai-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q kde Xaai je (a)D-Phe, (C“Me)D-Phe, D-Tyr, D-Tic nebo D-Ala (cyklopentyl nebo thienyl), kde A je H, NO2, F, Cl nebo CH3; Xaa2 je (A') D-Phe, D-lNal, D-2Nal, D-Tyr nebo D-Trp, kde A'je A nebo 3,4CI2; Xaa3 je D-NIe, (B)D-Leu, D-Hle, D-Met, D-Val, D-Phe nebo D-ala (cyklopentyl), kde B je H nebo C“Me; Xaa4 je D-Arg, D-Har, D-nArg, D-Lys, D-Uy, D-Arg(Et2), D-Har(Et2), D-Amf, D-Gmf, D-Dbu, D-Orn nebo D-Ior; a Q je NR]R2, morfolinyl, thiomorfolinyl, (C) piperidinyl, piperazinyl, 4-mono- nebo 4,4-disubstituovaný piperazinyl, nebo ε-lysyl, kde R| je vybrán ze skupiny: C1-C6alkyl, substituovaný C|-C6alkyl, benzyl, substituovaný benzyl, aminocyklohexyl, 2-thiazolyl, 2-pikolyl, 3—pikolyl, 4—pikolyl, (0-(acylamino)-polymerhyl nebo poly(oxyethyl);
přičemž substituenty na C|-C6alkylové skupině, substituované benzylové skupině nebo substituované piperazinylové skupině se volí ze skupiny, zahrnující OH, Cl, F, Br, I, aminoskupinu, karbamoyl, fenyl, karboxy-C|-C4alkyl, acetylaminoskupinu, glukolaminoskupinu a C]-C4alkyl,
R2 znamená H nebo C|-C6alkyl a
C znamená H, 4-hydroxyskupinu nebo 4-oxoskupinu.
Součást podstaty vynálezu tvoří také farmaceutický prostředek, který svrchu popsaný syntetický amid obsahuje jako svou účinnou složku.
V dalším aspektu obsahuje vynález použití těchto sloučenin při léčbě lidí trpících viscerální bolestí a podobně, nestabilitou močového měchýře a podobně, nebo IDB nebo autoimunitním onemocněním, stejně jako podobnou léčbu jiných savců.
Názvosloví použité pro popis peptidů je názvosloví popsané v Schroder and Lubke, The peptides, Academie Press, 1965, kde - v souladu s běžnou praxí - je N-konec uveden vlevo a C-konec vpravo. Pokud má aminokyselinový zbytek izomery, tak se jedná o L-izomer aminokyseliny, pokud není výslovně uvedeno jinak.
Jak bylo uvedeno výše, vynález poskytuje peptidy, které jsou selektivní pro KOR a nemají pouze silnou afinitu pro KOR, ale mají také dlouhodobou bioaktivitu in vivo. Tyto kappaselektivní opioidní peptidy mají alespoň 1000-krát vyšší vazebnou afinitu pro KOR než pro MOR, a mnoho sloučenin má alespoň 10 000-krát vyšší afinitu a některé sloučeniny mají 20 000-krát vícekrát vyšší afinitu. Nicméně, pro mnoho indikací je významné to, aby kromě takové selektivity kappa-agonista nepronikal do mozku a aby měl dlouhodobou antinocicepční aktivitu in vivo. Proto výhodné sloučeniny mají kromě výše uvedené selektivity tu vlastnost, že nepronikají významným způsobem do mozku a mají významnou aktivitu po dobu nejméně jedné hodiny, lépe po dobu alespoň dvou hodin a nejlépe po dobu alespoň tří hodin nebo déle.
Následující zkratky jsou použity v celém dokumentu. D-NIe označuje D-norleucin a D-Hle označuje D-homoleucin. D-Har označuje D-homoarginin a D-nArg označuje D-norarginin, který je o jeden uhlík kratší než D-Arg. D-Nal označuje D-izomer alaninu, který je substituovaný nafitylem na β-uhlíku. Výhodně je použit D-2Nal, tj. naftalen je navázán na kru ve 2pozici; nicméně, může být použit také D-lNal. D-Cpa a D-Fpa označují, v příslušném pořadí, chlor-D-Phe a Fluor-D-Phe, a výhodnými sloučeninami jsou D-4Cpa, D-2Fpa, a D-3Fpa a D-4Fpa. D-Npa označuje nitro-D-Phe a D-Mpa označuje methyl-D-Phe. D-3,4Cpa označuje 3,4-dichlor-D-Phe. A-Acp označuje D-Ala(cyklopentyl). D-Om označuje D-Omithin a D-Dbu označuje kyselinu alfa, gamma-diaminomáselnou. CML označuje, C“methyl-Leu-a CMP ozna čuje CaMe Phe. D-4Amf označuje D-4(NH2CH2)Phe a D-Gmf označuje D-AMf (amidino), což je D-Phe, ve kterém je 4-pozice substituovaná CH2NHC(NH)NH2. D-Tic označuje kyselinu Dl,2,3,4-tetrahydroizochinolin-3-karboxylovou. V Ala(Thi)představuje Thi thienylovou skupinu, která je výhodně navázána svou 2-pozicí na alanin, ačkoliv 3-thienyl je ekvivalentní. Ily a Ior jsou, v příslušném pořadí, izopropyl Lys a izopropyl Orn, kde vedlejší řetězec amino-skupiny je alkylován izopropylem.
Termín „nižší alkyl“ označuje C!-C6alkyl a zahrnuje cykloalkyl, kde výhodné jsou C|-C4 alkyly, včetně cyklopropylu a cyklobutylu. Me, Et, Pr, Ipr, Bu, Pn a Bzl označuje methyl, ethyl, propyl, izopropyl, butyl, pentyl a benzyl. Cyp označuje cyklopropyl a Cyb označuje cyklobutyl. Ačkoliv je vazba výhodně přítomná na jednom konci alkylového řetězce, může být vazba kdekoliv na řetězci, například 3-pentyl může být také označován jako ethylpropyl. Ahx označuje 6-aminohexal, tj. (CH2)6-NH2. 4Acx označuje 4-aminocyklohexyl a hEt označuje hydroxyethyl, tj. CH2CH2OH. Termín „substituovaný benzyl“ zahrnuje 4Nbz a 4Abz, což jsou 4-nitrobenzyl a 4aminobenzyl, a Aeb označuje 4-(2-amino-2-karboxyethyl)benzyl, tj.
2-, 3- a 4—pikolyl (2Pic, 3Pic a 4Pic) označuje methylpyridinové skupiny, které jsou navázány prostřednictvím methylenové skupiny ve 2-, 3- a nebo 4-pozici. Mor označuje morfolinyl, tj.
Tmo označuje thiomorfolinyl,
Pip označuje piperidinyl (piperidyl) a 4-Hyp a Oxp označují 4-hydroxypiperidin-l-yl a 4-oxo-piperidin-l-yl. Ppz označuje piperazinyl. Ecp označuje 4-fenylkarbamoylpiperazinyl1-yl. Kvartérní amoniové skupiny, jako je 4,4-dimethyl-piperazinyl-l-yl (Dmp) nebo jiné di—nižší alkylové substituce, mohou být také použity.
2-Tzl označuje 2-thiazolyl, tj.
S / \
-C CH
II II
N - CH.
Ely označuje ε-lysyl, kde amino-skupina vedlejšího řetězce L-lysinu je navázána amidovou vazbou na C-konec.
Jak bylo uvedeno výše, R| může být (£>-(acyiamino)-polymethylenová skupina nebo poly(oxyethylenová) skupina, jako je Aao, Aoo, Hoh, Ghx nebo Gao. Aao představuje 8-(acetylamino)~
3,6-dioxaokt-l-yl, tj. CH2CH2-O-CH2-CH2-O-CH2CH2-NH-Ac. Aoo představuje 8-amino3,6-dioxaokt-l-yl, tj. CH2CH2-O-CH2-CH2-O-CH2CH2-NH2. Hoh představuje 6-(L-hydroorotylamino)-hex-l-yl, tj. (CH2)6-NH-(L-hydroorotyl); kyselina L-hydroorotová je C4N2H5(O)2-COOh. Ghx představuje 6-(D-glukonylamino)-hexyl, tj. (CH2)ů-NH-CO(CHOH)4-CH2Oh. Gao představuje 6-(D-glukonylamino)-3,6-dioxaokt-l-yl, tj. CH2CH2-OCH2CH2-O-CH2CH2-NH-CO(CHOH)4CH2OH.
D-Phe nebo substituovaný D-Phe jsou výhodné v 1-pozici. Fenylový kruh může být substituovaný ve 2-, 3- a/nebo ve 4-pozici a výhodné jsou běžné substituce chlorem nebo fluorem ve 2nebo 4-pozici. α-uhlíkový atom může být také methylovaný. Mohou být také použity jiné ekvivalentní zbytky, které napodobují D-Phe, a mezi tyto zbytky patří D-Ala(thienyl), DAla(cyklopentyl), D-Ty a D-Tic. Zbytkem ve 2-pozici je také výhodně D-Phe nebo substituovaný D-Phe a takové substituce výhodně zahrnují substituent na uhlíku ve 4-pozici fenylového kruhu nebo na 3- a 4-pozici. Alternativně může být použit D-alanin substituovaný naftylem, stejně jako D-Trp a D-Tyr. 3-pozici je výhodně obsazena zbytkem jako je D-Nle, DLeu, D-CML, D-Hle, D-Met nebo D-Val; nicméně, také může být použit D-Ala(cyklopentyl) nebo D-Phe. D-Arg (který může být substituovaný diethylem) a D-Om (který může být alkylovaný na své delta-amino skupině, například izopropylem), jsou obecně výhodné pro 4pozici; nicméně, mohou být použity také D-nArg a jiné ekvivalentní zbytky, jako je D-Lys (který může být také alkylovaný na své ε-amino skupině) a D-Har (který má být substituovaný diethylem). Dále mohou být také použity D-Gmf, D-Dbu, D-4Amf a D-His.
Ačkoliv se předpokládalo, že dostatečné trvání biologického účinku bude dosaženo použitím sekvence 4 D-aminokyselin, bylo překvapivě zjištěno, že trvání účinkuje dosti krátké pro nesubstituované amidy a že dlouhodobý účinek je získán pouze při použití substituovaného amidu na C-konci. Jednotlivé substituce mohou být ve formě ethylu, methylu, propylu, cykloopropylu a pikolylu, stejně jako jiných ekvivalentních zbytků, jako je hydroxyethyl, thiazolyl, aminocyklohexyl, benzyl a substituovaný benzyl. Obecně jsou jako substituenty pro jednou substituované amidy vhodné nižší alkyl nebo pikolyl. Alternativou k jednou substituovanému amidu je dialkylová substituce, například diethylamino; nicméně, výhodně je takový disubstituovaný C-konec obsazen morfolinolovou, thiomorfolinylovou nebo piperidinylovou skupinou, kde piperidinylová skupina je nesubstituovaná nebo je substituovaná 4-hydroxy-skupinou nebo 4-oxo-skupinou. Piperazinylová nebo 4-mono- nebo 4,4-di-substituovaná piperazinylová skupina může být také použita, stejně jako ε-lysyl.
Bylo zjištěno, že vazba je určována aminokyselinou sekvencí tetrapeptidu a výhodně mají opioidní peptidy selektivní pro kappa receptor vazebnou afinitu ke kappa receptoru takovou, že jejich K, je rovna přibližně 2 nM nebo nižší. Dlouhé trvání účinku, které je patrně primárně určováno strukturou amidu navázaného na C-konec, může být účinně testováno zde popsaným testem na antinocicepční aktivitu, a nejvýhodnější peptidy mají významnou biologickou aktivitu pro dobu 2 až 3 hodin a nemají významné účinky v mozku.
Výhodná podtřída opioidních peptidů podle předkládaného vynálezu má vzorec:
X—X aa 1 —Xaa2—X aa3—X aa4—Q kde Xaai je D-Phe (nesubstituovaný nebo substituovaný CaMe, 2F, 4F nebo 4C1) nebo D-Ala (cyklopentyl nebo thienyl); Xaa2 je (A')D-Phe, D-lNal, D-2Nal, nebo D-Trp, kde A' je H, 4F, 4C1, 4NO2 nebo 3,4CI2; Xaa3 je D-Nle, D-Leu, D-CML, D-Met, nebo D-Acp; Xaa4je D-Arg, D-Arg(Et2), D-Lys, D-Ily, D-Har, D-Har(Et2), D-nArg, D-Om, D-Ior, D-Dbu, D-Amf, a D-Gmf; a Q je NRiR2, Nor, Tmo, Pip, 4HyP, OxP nebo Ppz, kde Ri je Me, Et, Pr, Bu, hEt, cyp, Bzl nebo 4—pikolyl, a R2 je H nebo Et.
Další výhodná podtřída opioidních peptidů podle předkládaného vynálezu má vzorec:
-4CZ 297281 B6
H-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q kde Xaa, je D-Phe, D-4Fpa, D-2Fpa, D-4Cpa, D-4cp nebo D-ala(Thi); Xaa2 je D-Phe, D-4Fpa, D-4Cpa, D-3,4Cpa, D-lNal, D-2Nal, nebo D-Trp; Xaa3 je D-Nle, D-CML, D-Met, nebo D-Leu; Xaa4 je D-Arg, D-Lys, D-Har, D-nArg, nebo D-Om, a Q je NR]R2, Mor, Tmo, Pip, 4-Hyp nebo Ppz, kde R| je Et, Pr, Bu, Cyp, hEt, Bzl nebo 4-Pic; a R2 je H nebo Et.
Další výhodná podtřída opioidních peptidů podle předkládaného vynálezu má vzorec:
H-Xaa,-Xaa2—Xaa3—Xaa4—Q kde Xaa, je D-Phe, D-4Fpa, D-2Fpa, D-Acp nebo D-Ala(2Thi); Xaa2 je (A)D-Phe, D-lNal, D-2Nal, nebo D-Trp, kde A je 4F nebo 4C1; Xaa3 je D-Nle, D-Met, nebo D-Leu, Xaa4 je D-Arg, D-Har, D-nArg, D-Lys, D-Om nebo D-Gmf; a Q je NHRj, Mor, Tmo, Pip nebo Ppz, kde R| je Et, Pr nebo 4-Pic.
Další výhodná podtřída opioidních peptidů podle předkládaného vynálezu má vzorec:
H-Xaa|-Xaa2-Xaa3-Xaa4—Q kde Xaai je D-Phe, D-4Fpa, D-2Fpa nebo D-Ala(2Thi); Xaa2 je (A)D-Phe, D-lNal, D-2Nal nebo D-Trp, kde A je 3,4CI2 nebo 4C1; Xaa3 je D-Nle nebo D-Leu; Xaa4 je D-Arg D-Om nebo D-Gmf; a Q je NHR|, Mor, Tmo, Pcp, Ppz nebo N(Et)2, kde R, je Et, Pr, Cyp, 4Pic, Aeb nebo Hoh.
Bylo zjištěno, že uvedené třídy a podtřídy opioidních peptidů mají prodloužené trvání antinocicepční aktivity in vivo v důsledku toho, že obsahují substituovaný amid na C-konci aminokyselinového zbytku v pozici 4. Tato neočekávaná vlastnost činí takové peptidy zejména hodnotnými, protože některé z nich zůstávají in vivo aktivní po dobu tří hodin a déle. Některé peptidy mající výše uvedenou sekvenci, ale mající prostý C-koncový amid, mají také vysokou selektivitu pro KOR oproti MOR; nicméně, mají pouze krátkodobý účinek. Předpokládá se, že takové opioidní peptidy budou mít dlouhodobý účinek tehdy, když budou syntetizovány tak, aby měly substituovaný amid, jako je například morfolid, na C-konci. V souladu s tím bylo zjištěno, že pokud má tetrapeptidový primární amid vysokou selektivitu vazby na KOR, tak bude mít příslušný substituovaný amid, například ethylamid a morfolid, antinocicepční aktivitu po delší dobu měřenou v hodinách, tj. alespoň po dobu 1 hodiny, bez významnějšího průniku do mozku.
Ačkoliv jsou výhodné aminokyselinové sekvence uvedeny v předešlých vzorcích, mělo by být odborníkům v oboru peptidové jasné, že jeden nebo více z uvedených aminokyselinových zbytků může být substituován konzervativními aminokyselinovými substitucemi, například substitucí jedné bazické aminokyseliny například D-Ile za D-Leu. Podobně, různé zbytky mohou být také modifikovány běžnými způsoby, například D-Phe může být modifikován obsažením halogenu nebo nitro-skupiny obvykle ve 3- nebo 4-pozici, nebo v obou pozicích, nebo může být cc-uhlík methylován. Takové modifikace vedou ke vzniku ekvivalentních opioidních peptidů aktivních na kappa-receptorech.
Peptidy mohou být syntetizovány jakoukoliv vhodnou metodou, jako je syntéza pouze na pevné fázi nebo klasická syntéza v roztoku, nebo alternativně technikou částečné syntézy na pevné fázi nebo technikou kondenzace fragmentů. Například, techniky syntézy pouze na pevné fázi (SPPS) jsou uvedeny v učebnici Stewart and Young, Solid Phase Peptide Synthesis, 2. vydání, Pierce Chemical Company, Rocford, Illinois, 1984, a dále jsou uvedeny v popisu U.S. patent 4 105 603. Technika syntézy pomocí kondenzace fragmentů je uvedena v U.S. patentu 3 9721 859 a další možné techniky syntézy jsou uvedeny v U.S. patentech 3 842 067 a 3 862 925. Klasická syntéza adicí v roztoku je podrobně popsána v Bodanzsky et al., Peptide Synthesis, 2. vydání, John Wiley and Sons, New York, 1976.
-5CZ 297281 B6
Pro chemické syntézy peptidů kopulačního typu je běžné chránění jakéhokoliv labilního vedlejšího řetězce navazované aminokyseliny a obvykle také chránění α-amino skupiny tak, že adice probíhá na karboxylové skupině jednotlivé aminokyseliny nebo dipeptidu nebo tripeptidu, který je přidáván. Takové chránící skupiny jsou dobře známé v oboru a t-butyloxykarbonyl (Boc), benzyloxykarbonyl (Z) a 9-fluorenylmethoxykarbonyl (Fmoc) jsou často používány jako výhodné α-amino chránící skupiny při SPPS nebo klasické syntéze v roztoku, ačkoliv existuje značné množství α-amino chránících skupin, které mohou být alternativně použity.
Je-li použito SPPS, tak je C-koncový aminokyselinový zbytek navázán na pevný pryskyřicový nosič, jako je O-CH2-polystyrenový nosič, O-CH2-benzyl-polyamidový pryskyřicový nosič, -NH-benzhydrylaminový (BHA) pryskyřicový nosič nebo -NH-paramethylbenzhydrylaminový (MBHA) pryskyřicový nosič. Použití BHA nebo MBHA pryskyřice je často výhodné tehdy, je-li žádoucí zisk nesubstituovaného amidu, protože při štěpení přímo vzniká C-koncový amid. Pokud je žádoucí zisk N-methylamidu, tak může být tato sloučenina získána z N-methyl BHA pryskyřice. Jiné jednou substituované amidy mohou být syntetizovány postupem popsaným v W. Komreich et al., Int. J. Peptide protein Res., 25: 414-420, 1985, a také v u.S. patentu 4 701 499. Peptidy mající di-substituované amidy na C-konci, jako je N-morfolinyl nebo N-piperidinyl, jsou výhodně připraveny klasickou syntézou v roztoku nebo kondenzací fragmentů v roztoku.
Po syntéze jsou tyto tetrapeptidy snadno přečištěny za použití dobře známých technik pro přečištění krátkých peptidů, jako je například vysoce účinná kapalinová chromatografie s reversní fází (RP-HPLC) nebo jiné vhodné techniky. Takové přečištění je podrobně popsáno v J. Rivier et al., J. Chromatography, 288: 303-328, 1984, a C. Miller aj. Rivier, Peptide Science, Biopolymers, 40, 265-317 (1996), a konkrétní příklady takového přečištění po syntéze na pevné fázi a podobně jsou uvedeny v U.S. patentu 5 098 995.
Různé tedy mohou být použity pro testování toho, zda mají tyto tetrapeptidy vysokou selektivitu pro KOR, silnou antinocicepční aktivitu, dlouhé trvání biologické aktivity in vivo a toho, zda nepronikají hematoencephalickou barierou. Receptorové testy jsou dobře známé v oboru a myší, krysí, morčecí a lidské KOR bylo nedávno klonovány. S výjimkou gpKOR jsou všechny klonované KOR velmi podobné a všechny obsahují 380 aminokyselin. Aminokyselinová sekvence hKOR má 93,9% a 93,4% homologii s rKOR a mKOR, v příslušném pořadí. Naopak, hKOR se významně liší od hMOR a od lidských delta-opioidních receptorů (hDOR), které mají, v příslušném pořadí, pouze 60,2 % a 59,1% identitu aminokyselinové sekvence. KOR, jsou, stejně jak jiné opiátové receptory, klasickými, receptory spraženými s G-proteinem (Gi) překlenujícími membránu v sedmi pozicích. Tyto klonované receptory umožňují snadné testování vybraného peptidů; například, vyšetřování na účinu na KOR a MOR může být provedeno pro stanovení selektivity. Lidské KOR, MOR a DOR byly stabilně exprimovány v myší nádorové buněčné linii odvozené od hippokampálního neuroblastomu (HN.9.101) a jsou dostupné pro skríning in vitro. Existuje také mnoho všeobecně přijímaných testů in vivo, které se staly standardy pro stanovení antinocicepční aktivity opioidních sloučenin. Tyto testy obecně využívají myší a patří mezi ně test ocasní citlivosti, test tlaku na tlapku, test dráždění kyselinou octovou, test píchnutí do ocasu a test ponoření ocasu. Vonvoigtolander, P.F. et al., J. Pharm. Therapeutics, 224: 7-12 (1983), popisuje mnoho takových testů pro opioidní sloučeniny.
Vazebná afinita označuje sílu interakce mezi ligandem a receptorem. Pro demonstrování vazebné afinity pro opioidní receptory byly peptidy podle předkládaného vynálezu hodnoceny za použití testu kompetitivní vazby. Tyto testy byly provedeny za použití klonovaných lidských kappa (hKOR) a mu opioidních (hMOR) receptorů exprimovaných ve stabilně transfektovaných buněčných liniích (NH.9.10, odvozené od myšího hippokampálního neuroblastomu). V těchto testech jsou testované sloučeniny (neznačené nebo značené neradioaktivně) použity ve zvyšujících se koncentracích pro odstranění radioaktivně značeného ligandu s vysokou afinitou a selektivitou pro studované receptory z vazby. 3H-U-69,593 a 3H-DAMGO byly použity jako ligandy
-6CZ 297281 B6 v testech s hKOR a hMOR, v příslušném pořadí. Oba ligandy jsou komerčně dostupné (NENDuPont). DAMGo je akronym pro [D-Ala2, MePhe4, Gly-ol5]-enkephalin. Afinita radioaktivně značeného ligandu je definována koncentrací radioaktivně značeného ligandu, která vede k polovině maximální specifické vazby (KD) v saturačních testech. KD pro 3H-U-69593 na hKOR a pro 3H-DAMGO na hMOR jsou přibližně 0,3 nM a 3,0 nM, v příslušném pořadí. Afinita testované sloučeniny (neznačené nebo neradioaktivně značené) je stanovena v testech kompetitivní vazby výpočtem inhibiční konstanty (K.) za použiti následujícího vzorce:
IC50 =-----------1 +(F/KD) kde
IC5o ~ koncentrace neradioaktivně značeného ligandu, která inhibuje 50% specifické aktivity radioaktivně značeného ligandu;
F = koncentrace volného radioaktivně značeného ligandu;
KD = afinita radioaktivně značeného ligandu stanovena v saturačních testech.
Při provádění těchto testů za specifických podmínek s relativně nízkými koncentracemi receptorů je vypočítaná K, pro testovanou sloučeninu dobrým přiblížením její dissociační konstantě KD, která představuje koncentraci ligandu nezbytnou pro obsazení jedné poloviny (50%) vazebných míst. Nízká hodnota K, v řádu nanomolů a nižších se považuje v oblasti opiátů za charakteristickou pro vysoce afínitní ligandy. Výhodné analogy mají K, pro KOR přibližně 2 nM nebo nižší, zatímco výhodnější analogy mají K, přibližně 1 nM nebo nižší. Protože jsou KOR receptory distribuovány v různých místech těla, budou mít opioidní peptidy aktivní na kappa-receptorech významný efekt na modulování mnoha periferních účinků, a pokud jsou tyto peptidy vysoce KOR-selektivní, tak budou mít minimální nežádoucí účinky a budou dobrými fyziologicky působícími léčivy.
Tyto vazebné testy využívají KOR a MOR jsou snadno proveditelné a mohou být provedeny s nově identifikovanými nebo syntetizovanými peptidy pro stanovení toho, zda jsou takové peptidy KOR-selektivní a zda mají vysokou afitinu. Takové vazebné testy mohou být provedeny různými způsoby známými v oboru a jeden příklad takovéhoto testu je uveden v Perrin et al., Endocrinology, 118: 1171-1179, 1986.
Předkládaný vynález je dále popsán v následujících příkladech. Tyto příklady neomezují žádným způsobem rozsah předkládaného vynálezu, který je definován pouze připojenými patentovými nároky.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Peptid vzorce: H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHET je syntetizován způsobem dobře známým v oboru peptidové syntézy. Například, tripeptid: (α-amino skupinu chránící skupina)-DPhe-D-Phe-D-Nle (karboxylovou skupinu chránící skupina) je nejprve syntetizován klasickou syntézo v roztoku. Například může být tripeptid připraven rozpuštěním H-D-Nle-Ome v DMF a přidáním N-ethylmorfolinu (NEM) nebo podobného činidla pro úpravu pH. Tento roztok se potom smísí s roztokem Boc-chráněného D-Phe-OH v DMF obsahujícím NEM. Do této reakční směsi se potom přidá aktivační nebo kopulační činidlo, jako je benztriazol-l-yl-oxy-tris-7CZ 297281 B6 (dimethylamino)-fosfonium hexafluorfosfát (BOP) nebo směs N,N'-diizopropylkarbodiimidu (DIC) a N-hydroxybenztriazolu (HOBt). Po dokončení reakce se médium odpaří a získaný materiál se vhodným způsobem přečistí a rekrystalizuje se. Boc chránící skupina se potom odstraní pomocí kyseliny trifluoroctové (TFA) a dipeptid se rozpustí v DMF. Potom se přidá roztok Boc-chráněného D-Phe rozpuštěného DMF, s NEM. Reakce se opakuje za použití BOP, jak bylo popsáno výše, za vzniku tripeptidu, který se - po odpaření roztoku do sucha - přečistí a rekrystalizuje se. Získaným materiálem je Boc-D-Phe-D-Nle-OCH3. Methylester se potom vhodným způsobem přemění na volnou kyselinu, například rozpouštěním ve směsi dioxanu nebo DMSO a vody a přidáním hydroxidu sodného. Po dokončení reakce, separaci, přečištění a rekrystalizaci se získá tripeptid Boc-D-Phe-D-Phe-D-Nle-OH.
Tripeptid se rozpustí v DMF obsahujícím NEM a reaguje s D-Arg(Tos)-NHEt, opět za použití BOP jako kopulačního činidla. Alternativně může být tripeptid-methyl ester přeměněn na azid, pokud je to vhodné, reakcí s 80% roztokem hydrazinhydratu za vzniku hydrazidu, který se izoluje a potom reaguje s dusitanem sodným a anorganickou kyselinou v DMF. Azid ihned reaguje s D-Arg(Tos)-NHEt v roztoku DMF obsahujícím triethylamin. Po dokončení reakce se směs opaří do sucha, potom se vhodným způsobem přečistí a rekrystalizuje se. N-konec a vedlejší řetězec D-Arg se potom zbaví chránící skupiny a opět se provede přečištění a rekrystalizace, čímž se získá požadovaný ethylamid tetrapeptidu (peptid č. 1).
Homogenita peptidu se potvrdí HPLC s reversní fází za použití dvou různých mobilních fází: gradientu acetonitrilu ve vodě obsahující 0,1% kyselinu trifluoroctovou a gradientu acetonitrilu v triethylamin-fosfátovém pufru s pH 7, a také kapilární elektroforesou na oxidu křemičitém za použití fosfátového pufru s pH 2,5. Čistota peptidu je podle těchto metod > 98%. Analýza hmotnostní spektrometrií za použití elektrospray-ionizace a záchyty iontů ukázala přítomnosti pseudomolekulového iontu [MH]+ při m/z 609,4, což je v souladu s vypočítanou hmotností m/z 609,5 pro tento tetrapeptid. Fragmentační analýza pseudomolekulového iontu ukázala sérii iontů při m/z poměrech, které odpovídá sekvenci aminokyselin předpokládané pro připravenou sloučeninu.
Vazebné testy s buňkami exprimujícími lidský KOR a MOR se provedly způsobem popsaným výše. Afinity testovaného peptidu je hKOR a hMOR stabilně exprimovaným na myších buňkách hippokampálního neuroblastomu (HN. 9.10) byly stanoveny kompeptidním vytěsněním 3H-U-69,593 pro hKOR a nebo 3H-DAMGO pro hMOR, jak byl popsáno výše. Data alespoň ze tří pokusů byla shrnuta a hodnoty inhibiční disociační konstanty (Kj) (95% interval spolehlivosti) byly vypočítány za použití vhodného programu, jako je LIGAND program od Mundson a Rodbard, Anal. Biochem. 107: 220-239, 1980. Klonované KOR váží peptid č. 1 s vysokou afinitou, jako bylo stanoveno kompetitivním vytěsněním navázaného radioaktivně značeného ligandů, a K, byla určena na přibližně 0,05 ± 0,02 nM. Rozdíl v afinitě je výrazný ve srovnání s podobně stabilně transfektovanými nádorovými buňkami exprimujícími lidské MOR, kde je K, 1890 ± 990 nM. Peptid č. 1 se tedy váže přibližně 38000-krát silněji na hKOR než na hMOR.
Testování peptidu na myších v testu podráždění kyselinou octovou (jak je popsán dále) určeno ED50 přibližně na 0,09 mg/kg a ukázalo, že peptid vykazuje více než 50% antinocicepční účinnost po 3 hodinách. Peptid č. 1. má tedy velmi dobré trvání účinku.
Příklad 2
Opioidní peptidy mající obecný vzorec: H-D-Phe-D-Phe-D-NIe-D-Arg-Q, jak jsou uvedeny v tabulce A, byly syntetizovány a testovány způsobem popsaným v příkladu 1.
-8CZ 297281 B6
Tabulka A
Tabulka | A | ||||||
Λ | Q | K KOR (nM> | K, MOR (nM) | poměr μ/κ | Hmotnostní spektroskopie | WT-EOj, mg/kg | |
vypočítáno | změřeno | ||||||
2 | NHMe | 0.06 | 3,620 | 60.000 | 595 4 | 595.5 | 0.14 |
-. | NHPr | 0.09 | 1.640 | 18.000 | 623.4 | 623.5 | 0.078 | |
4 | NHBu | 0.19 | 1J70 | 7100 | 637.4 | 637.5 | 0.30 |
< | XH(Cyp) | 0.18 | 3,520 | 20.000 | 621.4 | 621.5 | 0.04 |
6 | Mor | 0.06 | 2.510 | 42.000 | 651.4 | 651.4 | 0.014 |
7 | NOy | 0.11 | 1.900 | 17,000 | 637.4 | 637.5 | 0.02 |
8 | NH(4Pí.) | 0.14 | 3,640 | 26.000 | 672.4 | 672.4 | 0.0! |
9 | NHh£t | 0.40 | 1.010 | 2.500 | 625.4 | 625.5 | 0.03 |
10 | Tmo | 0.09 | 1260 | 25.000 | 667.4 | 667.3 | 0.067 |
11 | 4-HyP | 0.06 | 3.700 | 61000 | 665 4 | 665.4 | 0.073 |
! | Píp | 0.15 | 1.050 | 7.000 | 649 4 | 6495 | 0.07 |
! ’·3 | NHCTd) | 0.59 | 1.590 | 1700 | 664.3 | 664 4 | 0.44 |
!» | NHBť | 0.44 | 890 | 1000 | 671.4 | 671.4 | 0.J4 |
1’ | Ppz | 0.16 | 9,100 | 57.000 | 650.4 | 650.5 | 0.017 |
Peptidy 2 až 15 jsou považovány za peptidy s dlouhým trváním antinocicepční biologické akti5 vity.
-9CZ 297281 B6
Příklad 3
Opioidní peptidy mají obecný vzorec: H-Xaai-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q, jak jsou uvedeny v tabulce B, byly syntetizovány a testovány způsobem popsaným v příkladu 1.
č. | Tabulka B | ||||
Xxa. | X*^ | X**, | Xm4 | Q | |
16 | EMFpa | D-Phe | DNle | D-Ai-g | NHEt |
17 | D-Phe | DNle | D-Arg | NHEt | |
18 | D-Aln'2Thj i | D-Phe | DNle | D-Arg | NHEt |
19 | D-Tyr | D-Phe | DNle | D-ATg | Mor |
:o | D-Phe | D-Trp | D-Nle | D-Arg | Mor |
:i | D-Phe | D-4Npi | DNle | D-Arg | Mor |
22 | D-Phc | EMCpi | D-Nle | D-Arg | Mor |
23 | D-Phe | D-lNal | DNle | D-Arg | NH(4Pi«) |
24 | D-?he | D-2Nal | D-Nle | D-Arg | NH(4P:c) |
25 | D-Phe | D-7yr | D-NIe | D-Arg | NH(4P>c) |
26 | D-Phe | D-Phe | D-Leu | D-Arg | Mor |
27 | D-Phe | D-Phe | D-Vx| | D-Arg | Mor |
28 | D-Phe | D-Phe | D-Acp | D-Arg | Mor |
29 | D-Phe | D-Phe | DNle | D-Lys | Mor |
30 | D-?he | D-Phe | D-Nle | D-Hu- | NHE1 |
31 | DPhe | D-Phe | D-Nle | D-HaýEt;) | NHE: |
32 | D-Phe | D-?he | I>bue | D-0n> | NHEt |
33 | D-Phe | D-Phe | DNle | D-Amf | NH(4Pic) |
34 | D-?he | D-Phe | D-Nle | D-Dbu | NH(4Pic) |
35 | D-Phe | D-Phe | D-Leu | D-Orn | Ppz |
36 | D-Phe | D-Phe | D-Phc | D-Arg | NH(4Pic) |
37 | | D-Phe | D-Phe | DNle | D-Ily | NH(4Pic) |
38 | D-Phe | D-Phe | D-NIe | D-lor | NH(4Pic) |
39 | I D-Phe | D-4Mp* | D-Nle | D-nArg | Mor |
Peptidy 16 až 39 jsou považovány za peptidy s dlouhým trváním antinocicepční biologické aktivity.
- 10CZ 297281 B6
Příklad 4
Opioidní peptidy mající obecný vzorec: H-Xaa|-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q, jak jsou uvedeny v tabulce C, byly syntetizovány a testovány způsobem popsaným v příkladu 1.
Tabulka C Hmotnostní spektroskopie (pOmgr μ/κ
č. | Xaa. | Χ1Λ, | Q v | ypočitáno | změřeno | |||
40 | D-Phe | D-Phe | D-NIe | D-Arg | NH(4Nhz) | 716.4 | 716.3 | 3.800 |
41 | D-Phe | D-Phe | D-NIe | D-.Arg | NH(4Ata} | 616.4 | 686 4 | 1X000 |
42 | D-Phe | D-Phe | D-Nie | D-.Arg | Ecp | 721.4 | 721.3 | 27.000 |
43 | D-CMP | D-Phe | D-Nie | D-Arg | NH(4PiC) | 686.4 | 686.5 | xíoo |
44 | D-Phe | D-Phe | D-Acp | D-Arg | NH(4Pk) | 698.4 | 698.5 | 8.300 |
45 | D-Phe | D-?he | D-Hle | D-Arg | NH(4pis) | 686.4 | 686.5 | 11.000 |
46 | D-Phe | D-Phe | D-CML | D-On | Mor | 623.4 | 623.4 | 14.000 |
4? | D-Phe | D-Phe | D-Leu | D-Lys | NHÍ4P-X) | 644.4 | 644.3 | 30.000 |
48 | D-Phe | D-Phe | D-Leu | NHPr | 595 4 | 395.3 | 18.000 | |
49 | D-Phe | D-Phe | D-Leu | D-LV3 | Mor | 623.4 | 623.3 | 9X000 |
’0 | D-Phe | D-Phe | D-Nle | D-Har | NH(-P'C) | 686.4 | 686.5 | 9.300 |
51 | D-?he | D-Phe | D-Nle | D-Har | Mor | 663.4 | 665.5 | 12.000 |
5: | D-Phe | D-Phe | D-Leu | D-Dbu | NH(4Pic) | 616.4 | 616.3 | 92.000 |
53 | D-Phe | D-?he | D-LíU | D-Dbu | Mor | 595.4 | 595.3 | 83.000 |
Peptidy 40 až 53 jsou považovány za peptidy s dlouhým trváním antinocicepční biologické aktivity.
Příklad 5
Opioidní peptidy mají obecný vzorec: H-D-Phe-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q, jak jsou uvedeny v tabulce D, byly syntetizovány a testovány způsobem popsaným v příkladu 1.
Tabulka D | ||||||||||
č. | Xaa. | Xaa. | Xaa, | <2 | K, KOR (n-M) | K MOR (nM3 | poměr‘ μ/κ | Hmotnostní spektroskopie 1 rypočitáno změřeno | WT-EDM mg/kg | |
54 | D-Phe | D-Nle | D-Arg | NH(3Pie) | 0.39 | 1420 | 3.100 | 672.4 | 672.5 | |
ς < | D-Phe | D-Nle | D-Amf | NHEt | 0.14 | 1.750 | 1X300 | 629 4 | 629.3 | 0.083 |
56 | D-Phe | D-Leu | D-Om | NHE: | 0.31 | 4.150 | 13.000 | 367.4 | 56. 4 | 0.057 |
< *· | D-Phe | D-Leu | D-Orr: | Mor | 0.19 | 5.260 | 28.000 | 609.4 | 609.3 | 0.026 |
Peptidy 54 až 58 jsou považovány za peptidy s dlouhým trváním antinocicepční biologické aktivity.
Příklad 6
Opioidní peptidy mající obecný vzorec: H-Xaa|-Xaa2-Xaa3-Arg-Q, jak jsou uvedeny v tabulce E, byly syntetizovány a testovány způsobem popsaným v příkladu 1.
Tabulka E
č. | X**l | X^ | X»*, | Q | KOR (ιΛΠ | MOR (nM) | poměr μ/κ ,j | Hmotnostní spektroskopie | WT-ED„ | |
ypočitáno | změřeno | |||||||||
39 | D-AJ^IThi) | D->Cp* | IXLai | Mor | 0.2« | 3,360 | 13,000 | 691.3 | 691.! | o.o*: |
60 | D-AlaílThi) | D-3.4Cp» | NH(4Pic) | 0.4 | 769 | 1.900 | 746.3 | 746.3 | 0.083 | |
61 | D-AW2Thi) | D-3.4Cpi | D-Ls-j | Mot | 0.1' | U60 | 10.400 | 725.3 | 7*'.4 | 0.019 |
62 | D-Phe | D-Phe | D-Nle | OxP | C.1X | 2J70 | 27,000 | 663.4 | »= | 0.18 |
63 | D-AIejXThC | D-2N11 | D-Uu | Mor | 0.2 | 3,170 | 16.000 | 707 4 | 707.4 | 0.04 |
64 | D-Phe | D-Phe | CMsic | Dm? | 0.21 | 7,6X0 | 37,000 | 672.4 | 678.5 | 0.032 |
65 | D-4Fpa | D-4Cp* | IXLeu | Mor | 0.17 | 1.900 | 11.000 | 703.4 | 703.- | 0.13 |
Peptidy 59 až 65 jsou považovány za peptidy s dlouhým trváním antinocicepční biologické akti· vity.
- 12CZ 297281 B6
Příklad 7
Opioidní peptidy mající obecný vzorec: H-Xaa|-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q, jak jsou uvedeny v tabulce
F, byly syntetizovány a testovány způsobem popsaným v příkladu 1.
Tabulka F | | |||||
č. | Xex, | Xu, | Xu. | 0 | |
óó | EMCm | IMCpi | D-L« | D-Lyi | NHPr |
67 | D-4Fpa | D-2N»i | D-Me: | D-Amf | NHBu |
68 | D-4C:» | D-Trp | D-Ad | D-Amf | ΡΦ |
69 | D-Phe | D-Phe | D-Vei | D-Om | Eep |
70 | D-AJií2Thil | D-*Fpe | D-Nle | D-Dbu | NHMAbzi |
'1 | D-Acp | D-Phe | DLra | D-H*r | 4-HyP |
D-CMP | D-Trp | D-Phe | D-ArgfEix) | NHEzl | |
3 | U-4Cpa | D-3.4Cpl | D-Μώ | D-Om | Tmo |
74 | D-Aop | D-iNi. | D-Nle | DHertE-J | NHOPicl |
D-»Fps | D-4Cp4 | DLr. | D-Gmf | NHh-·. | |
76 | D-CMP | D-Tyr | D-Ak | D-Dbu | NHIcr | |
D-Phe | D-SNeí | D-.A« | Díly | říKh | | |
'8 | D-Tic | D-4Fp5 | D-Phe | DLys | NH(4p>c} |
79 | D-*Np» | D-Trp | D-CML | D-Ior | Ν(Ε:^ |
80 | D-CMP | D-Phe | D-Mei | Diář | Mor |
81 | d-aw3Hu> | D-IN»I | D-Nle | D-Lys | NH(2TiD |
82 | D-Phe | D-4Npa | D-Nle | DArg | NHCyp |
83 | D-Acp | D-2N*1 | D-HIe | D-H»r· | NHCyb |
84 | D-Tyr | D-Phe | D-Lys | Ppz | |
8J | D-Phe | D-INil | DMet | Dior | i OxP |
X6 | D-Phe | D-Trp | D-Mct | DArg | i Drne |
87 | D-?he | D-Trp | D-Nle | D-Om | | Mor |
Opioidní peptidy z tabulky F jsou považovány za peptidy vykazující vysokou selektivitu pro KOR oproti MOR a vykazují antinocicepční biologickou aktivitu in vivo.
Příklad 8
Opioidní peptidy mající obecný vzorec: H-Xaai-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q, jak jsou uvedeny v tabulce G, byly syntetizovány a testovány způsobem popsaným v příkladu 1.
Tabulka G | Doměř μ/Κ | WT-EDj, mgrtcg | |||||
Λ | Xm, | Xm, | Q | ||||
88 | D-4Fp» | D-Phe | D-Nle | D-Arg | NHÍ4PÍC) | 16.000 | 0.04 |
89 | »3 Fpa | D-Phe | D-Nle | D-Arj | NH(4Pic) | 24,000 | 0.11 |
90 | D-2Fpa | D-Phe | D-Nle | D-Arg | NH(4Pic) | 38.000 | 0.14 |
91 | D-JFpa | D-PSe | D-Nk | D-Hir | NHí«Pic) | ||
92 | D-*Cp* | D-Phe | D-Nle | D-Arg | NHMPic) | 2.900 | |
93 | D-4Fpa | D-4Npi | D-Nie | O-Arg | NHMPic) | 1.200 | |
9·« | D-Phe | D-Phe | D-Nle | D-Arg | Ely | 70.000 | 0.02 |
95 | D-Phe | D-Phe | D-Nle | D-oArg | NH(4Pic) | 16.000 | 0.08 |
96 | D-?he | D-Phe | D-Nle | D-.Arg | Pep | 12.000 | 0.098 |
97 | D-?he | D-Phe | D-Nle | D-Arg | NH(4Acxl | 6.400 | |
98 | D-Phe | D-Phe | D-Leu | D-Om | NH(Aeb) | 24.000 | 0.014 |
99 | D-Al^Thi) | D-3.4Cpa | D-Lcu | D-Ora | Mor | 19.000 | 0.083 |
100 | D-.Al*C2Thj) | D-2N»I | D-Leu | Mor | 31.000 | 9.079 | |
101 | D-Ali(2Thi) | D-4Cpa | D-Leu | D-Om | Mor | 38.000 | 0.112 |
ic: | D-.Ajíí ‘ rt i | EMCsa | D-Leu | D-Orn | NH(4Piei | 24.000 | 0.032 |
10' | 1 D-Phe | D-?he | D-Nle | D-.Arg | NH(A*o) | 140.000 | 0.101 |
104 | D-Ph< | D-Phe | D-Nle | D-Arg | NH(Aůo) | 6.300 | |
105 | D-Phe | D-Phe | D-Nle | D-Arg | NHfHoh) | 66.000 | 0.015 |
10Ó | D-Phe | D-Phe | D-Nle | D-Arg | NHíAhxi | 10.000 | 0.055 |
:o | D-?he | D-Phe | D-Nle | O-Arg | NHíGhx; | 22.000 | 0.032 |
10S | 1 D-Phe | D-Phe | D-Nle | D-Arg | NH(G*o', | 67.000 | 0.034 |
Peptidy 88 až 108 jsou považovány za peptidy s dlouhým trváním antinocicepční biologické aktivity.
Příklad 9
Vybrané peptidy, které jsou identifikovány v tabulkách A-G, byly dále testovány in vivo pro stanovení trvání účinku jejich opioidních vlastností, a výsledky těchto testů jsou uvedeny v tabulce H. Číslování peptidů odpovídá číslování v předešlých tabulkách a μ/κ poměry jsou uvedeny pro srovnání. Testování in vivo se provede pomocí dráždivého testu na myších, který je vhodný pro stanovení trvání antinocicepční biologické aktivity. Tento test je podrobně popsán v G.A. Bentley et al., Br. J. Pharmac., 73: 325-322, 1981, a využívá samců 1RC myší v bdělém stavu, kteří jsou získáni od Harlan a které mají hmotnost mezi 20 a 30 gramy. Před zahájením testu se myši ponechají 12 až 16 hodin na lačno. Nocicepční chování, tj. škubání, které je sledováno, se indukuje intraperitoneálním podáním (i.p.) ředěné kyseliny octové. Použije se 10 ml
- 14CZ 297281 B6
0,6% vodného roztoku kyseliny octové na kg tělesné hmotnosti. Škubání se hodnotí v průběhu 15 minut po podání kyseliny octové. V prvním kroku se sloučeniny testují ve 3 až 4 zvyšujících se dávkách, které jsou podány intravenózně, jednou před podáním kyseliny octové (přibližně 5 minut před podáním kyseliny octové). Tento krok se použije pro stavení účinnosti (WT-ED50), stejně jako submaximální účinné dávky (přibližně 80-90% antinocicepce). Ve druhém stupni se tato submaximální účinná dávka pro každý určitý peptid podá v různou dobu před aplikací kyseliny octové (tj. -5 minut, -60 minut, -120 minut a -180 minut) před podáním kyseliny octové, což umožní stanovení trvání účinku. V testu se použije kontrolní skupina myší, kterým je podáno pouze vehikulum bez testovaného peptidů. Počítá se počet záškubů během 15 minut, od podání kyseliny octové, a biologická aktivita, tj. antinocicepční aktivita, se vyjádří v procentech a vypočítá se následujícím způsobem:
(záškuby v kontrolní skupině - záškuby v léčené skupině)
100x -------------------------------------------záškuby v kontrolní skupině
Protože se bude každá submaximální dávka s velkou pravděpodobností lišit tak, že tyto hodnoty nebudou přímo srovnatelné, jsou výsledky normalizovány matematicky, jak je známo v oboru, za zisku srovnatelných hodnot, které jsou uvedeny v tabulce Η. V tabulce H je antinocicepční aktivita zůstávající po 1, 2 a 3 hodinách vyjádřena jako procento aktivity zjištěné v -5 minutách. Hodnoty vyšší než 100% ukazují na vyšší antinocicepční aktivitu než na začátku pokusu. Aby mohl být opioidní peptid považován za dlouhodobě účinné in vivo, měl by být účinný v redukci záškubů o alespoň 25% v čase 1 hodina.
kromě použití pro stanovení trvání antinocicepční aktivity je tento test také použit pro měření biologického potenciálu peptidů in vivo (krátkodobého). Tato hodnota je v tabulce uvedena ve sloupci WT-ED50 v miligramech na kg tělesné hmotnosti. Hodnota uvádí dávku nutnou pro redukci počtu záškubů u testované myši o 50% (ve srovnání s kontrolní myší) během 15 minutového období.
-15CZ 297281 B6
Tabulka H | |||||
Peptid č · | Poměr μ/κ | %Antinocicepce | |||
WT“EDj0 mg/kg | 1 h | 2 h | 3 hr | ||
1 | 38,000 | 0.09 | 83.9 | 75.5 | 61.3 |
2 | 60,000 | 0.14 | 70.5 | 29.8 | |
3 | 18,000 | 0.078 | 48.6 | 39.8 | |
4 | 7,200 | 0.3 | 49.3 | ||
5 | 20,000 | 0.04 | 66.0 | 34.5 | |
6 | 42,000 | 0.014 | | 105.7 | 52.7 | |
7 | 17,000 | 0.02 | 67.5 | 36.8 | |
8 | 26,000 | 0.01 | 66.9 | 45.1 | |
9 | 2,500 | 0.03 | 72.5 | 39.5 | |
10 | 25,000 | 0.07 | 81.6 | 47.5 | |
11 | 62,000 | 0.07 | 61.8 | 36.9 | |
12 | 7,000 | 0.07 | 60.5 | 53.6 | |
13 | 2,700 | 0.44 | 30.7 | ||
14 | 2,000 | 0.14 | 36.0 | ||
15 | 57,000 | 0.017 | 60.0 | ||
42 | 27,000 | 0.06 | 45.3 | 29.4 | |
43 | 2,500 | 0.2 | |||
44 | | 8,300 | 0.2 | |||
46 | 14,000 | 0.083 | |||
47 | 30,000 | 0.09 | |||
48 | 18,000 | 0.065 | 53.7 | ||
49 | 92,000 | 0.02 | 65.5 | 69.2 | 38.3 |
50 | 9,300 | 0.077 | 35.6 | ||
51 | 12,000 | 0.018 | 32.5 | ||
52 | 92,000 | 0.019 | 30.6 | ||
53 | 85,000 | 0.026 | 47.7 | 32.6 | |
56 | 13,000 | 0.057 | 77.4 | 59.3 | |
57 | 28,000 | 0.026 | 100 | 67.2 | 58.2 |
i 58 | 6,500 | 0.04 | 93.4 | 45.7 | |
! 59 | 13,000 | 0.052 | 83.3 | 59.7 | |
60 | 1,900 | 0.083 | 83.8 | 35.5 | |
! 61 | 10,400 | 0.019 | 57.5 | 60.3 |
- 16CZ 297281 B6
Tabulka H - pokračování
62 | 27,000 | 0.18 | 38 | ||
63 | 16,000 i | 0.04 | 51.8 | 36.1 | |
64 | 37,000 | 0.032 | 74.7 | ||
65 | 11,000 | 0.031 | 39.5 | ||
8 □ | 15,000 | 0.04 | 56.6 | 23.9 | |
94 | 70,000 | 0.02 | 58.8 | ||
95 | 16,000 | 0.08 | 45.8 | ||
96 | 12,000 | 0.098 | 56.7 | ||
98 | 24,000 | 0.014 | 85.5 | 40.8 | |
99 | 19,000 | 0.083 | 50.3 | 69.3 | |
100 | 31,000 | 0.079 | 82.8 | 27.6 | |
101 | 38,000 | 0.112 | 89.9 | 45.6 | |
102 | 24,000 | 0.032 | 63-9 | ||
103 | 140,000 | 0.101 | 37.1 | ||
105 | 66,000 | 0.015 | 48.2 | ||
106 | 0.055 | 46.7 | |||
107 | 22,000 | 0.032 | 29.0 | 1 | |
108 | j 67,000 | 0.034 | 84.3 | 32.9 |
Opioidní peptidy jsou použitelné jako analgetika a pro jiné farmaceutické účely pro léčbu stavů spojených s K.OR systémem. Mají určité výhody ve srovnání sanalgetiky agonistických na μ receptorech, jako je například morfin, které mají nežádoucí účinky, jako je zácpa, respirační deprese a svědění. Značně výhodné je to, že tyto peptidy nepřekonávají významným způsobem hematoencephalickou barieru, což přispívá k omezení nežádoucích účinků. Bezpečnost těchto sloučenin s ohledem na pronikání do mozku je hodnocena pomocí srovnání jejich schopnosti vyvolat periferní účinky a jejich schopnosti vyvolat centrální účinky. Periferní účinky jsou měřeny pomocí dráždivého testu na myších (WT), který byl popsán drive. Centrální účinky způsobené působením na kappa-receptory v mozku jsou měřeny za použití testu měřícího škubnutí ocasu na myších (TF).
Test měřící škubnutí ocasu je test na akutní somatickou bolest, který je určen pro hodnocení účinnosti a trvání účinku centrálně působících analgetik. Nocicepce indukovaná ponořením ocasu do horké vody (52 °C) vede k rychlému škubnutí ocasu. Předpokládá se, že centrálně působící analgetika budou v závislosti na dávce zvyšovat latenci škubnutí ocasu. Test je popsán ve Vanderah, T.W. et al., J. Pharm. Exper. Tehrapeucits, 262: 190-197, 1992.
Bezpečnost je měřena za použití indexu penetrace do mozku (BPI), který je definován jako:
TF-ED50
BPI =---------WT - ED50 kde ED50 jsou dávky, které vyvolávají poloviční maximální účinek v testu dráždění u myší (WT-ED50) a v testu měřícího škubnutí ocasem na myších (TF-ED50), v příslušném pořadí,
- 17CZ 297281 B6 jsou-li podány i.v. Vyšší hodnota BPI ukazuje na nízký průnik do mozku a ukazuje že sloučenina bude pravděpodobně mít široký bezpečnostní interval (chybění centrálních nežádoucích účinků), když bude použita pro účely popsané v předkládaném vynálezu. Výhodné opioidní peptidy mají BPI rovný nebo vyšší než 100 a nejvýhodnější opioidní peptidy mají BPI vyšší než 300. Systémový nepeptidový kappa agonisté (například Enadolin a U69593) mají BPI nižší než 5, což ukazuje na významné pronikání do mozku, které se také odráží v nežádoucích účincích (diuresa, dysforie a sedace, které vyvolávají při klinickém použití. BPI hodnoty pro některé reprezentativní peptidy jsou uvedeny v tabulce I:
Tabulka I | |||
peptid č. | WT-2Djo mg/kg | ag/kg | BPI |
1 | 0.09 | 9.7 | 108 |
3 | 0.078 | 13.82 | 177 |
5 | 0.04 | 4.4 | 110 |
6 | 0.014 | 6.4 | 457 |
7 | 0.020 | 3.1 | 155 |
8 | 0.01 | 9.84 | | 984 |
15 | 0.017 | 2.86 | 168 |
49 | 0.020 | 1.62 | 81 |
53 | 0.025 | 2.1 | 81 |
57 | 0.026 | 5.6 | 215 |
58 | 0.034 | 4.34 | 128 |
61 | 0.019 | >10 | >526 |
88 | 0.040 | 300 | |
96 | 0.098 | >10 | )102 |
98 | 0.014 | 3.5 | 250 |
99 | 0.083 | 16 | 193 |
102 | 0.032 | >10 | )313 |
1 105 | 0.015 | 12.6 | 840 |
Protože se tyto peptidy váží silně na KOR, jsou také použitelné v testech in vitro pro studium receptorů a pro stanovení toho, které receptory mohou být přítomny v určitém vzorku tkáně. Tak jsou tyto peptidy použitelné pro diagnostiku a potenciálně také pro diagnostiku in vivo.
Obecně mohou být tyto peptidy použity pro dosažení antinocicepce při léčbě viscerální bolesti a také pro léčbu revmatoidní artritidy. Jsou zejména vhodné pro léčbu břišních příznaků po chirurgických výkonech, jako jsou trávicí problémy a bolest. Jsou také považovány za účinné při léčbě IBS, nestability močového měchýře, inkontinence a jiných stavů, při kterých dochází v důsledku lokálního zánětu k bolesti střev nebo jiných orgánů, jak je tomu například při zánětlivých střevních onemocněních (IBD) a dysmenorhee. Schopnost opioidního peptidu snižovat imunitní odpověď může být výhodná při léčbě IBD a jiných stavů, jako jsou autoimunitní onemocnění. Podání těchto peptidů může být použito pro dosažení lokální analgesie jak při akutních,
-18CZ 297281 B6 tak při chronických zánětlivých onemocněních. Mohou být použity pro léčbu ileosního stavu s příznaky jako je vzedmuté břicho, nevolnost, nebo pro léčbu přechodné inhibice střeva spojené s bolestí, jak je tomu například při obstrukci střeva způsobené spastickými kontrakcemi. Opioidní peptidy jsou také účinné v dosažení periferní analgesie a mohou být podány pro zmírnění pooperační bolesti, stejně jako pro zmírnění chronické bolesti, která může být způsobena například zánětem gastrointestinální či viscerální tkáně, a také mohou být použity pro léčbu abstinenčních příznaků při návyku.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být podány ve formě farmaceuticky přijatelných netoxických solí, jako jsou adiční soli s kyvetami, které jsou dobře známé v oboru. Příklady takových adičních solí s kyselinami jsou hydrochlorid, hydrobromid, síran, fosforečnan, dusičnan, šťavelan, fumarát, glukonát, tannat, pamoát, maleinán, octan, citrát, benzoát, jantaran, alginát, jablečnan askorbat, vinan a podobně. Pokud je aktivní složka podána ve formě tablety, tak může tableta obsahovat farmaceuticky přijatelné, netoxické ředidlo, které obsahuje pojivo, jako je tragant, kukuřičný škrob nebo želatina. Také může být provedeno intravenózní podání izotonického salinického roztoku, fosfátového pufru, roztoku manitolu nebo glukózy.
Farmaceutické prostředky budou obvykle obsahovat účinné množství peptidu spolu s běžným, farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem. Obyčejně bude prostředek obsahovat antinocicepční množství, tj. množství, které je účinné pro blokování bolesti. Obvyklá dávka bude od přibližně 1 Mg do přibližně 10 mg peptidu na kilogram tělesné hmotnosti pacienta při intravenózním podání. Prostředek může být podáván podle potřeby; například může být podání opakováno v 3-6 hodinových intervalech. Charakter těchto sloučenin umožňuje účinné orální podání; nicméně, orální dávky jsou vyšší. Pokud je žádoucí podávání opioidního peptidu po delší dobu, například po dobu 1 týdne nebo déle, za použití jedné aplikace, tak je možno použít depotní nebo implantovatelné dávkové formy s pomalým uvolňováním. Například, vhodný depotní prostředek se zpomaleným uvolňováním pro injekční podání může obsahovat peptid nebo jeho sůl dispergovaný nebo obalený v pomalu degradovatelném, netoxickém nebo neantigenním polymeru, jako je polymer kyseliny polymléčné/kyseliny polyglykolové, jak je popsán v U.S. patentu 3 773 919. Je také známo, že pomalého uvolňování může být dosaženo pomocí silastických implantátů.
Tyto sloučeniny mohou být podány savcům, včetně lidí, intravenózně, subkutánně, intramuskulámě, perkutánně, intranasálně, intrapulmonálně, orálně, lokálně, rektálně, intravaginálně nebo intraspinálně pro dosažení antinocicepčního účinku, například při léčbě přechodné gastrointestinální inhibice indukované peritoneálním drážděním. Mohou být také použity pro zmírnění pooperační bolesti. Účinné dávky závisí na formě podání a na druhu léčeného savce. Příkladem jedné typické dávkové formy je bakteriostatický vodný roztok s pH mezi 3 a 8, například s pH přibližně 6, obsahující peptid, kde tento roztok je podáván kontinuálně parenterálně v dávce v rozmezí od přibližně 0,3 Mg až 3 mg/kg tělesné hmotnosti za den. Tyto sloučeniny jsou dobře tolerovány in vivo a jsou vhodné hlavně pro podání subkutánní injekcí v bakteriostatickém vodném roztoku nebo v podobném vehikulu.
Je třeba si uvědomit, že ačkoliv byl vynález popsán s ohledem na jeho výhodná provedení, existují různé jeho obměny a modifikace, které spadají do rozsahu vynálezu, jak je definován v připojených patentových nárocích. Například mohou být v peptidech podle předkládaného vynálezu přítomny jiné substituce známé v oboru, které nemění významně účinnost peptidů. Jiné substituované D-Phe zbytky, jako je (4Br)D-Phe nebo (2,4C12)-D-Phe, mohou být použity ve 2-pozici. D-Lys(Bu) a D-Lys(Et2) jsou považovány za ekvivalenty D-Ily a D-Arg (Et2). N-konec terapeptidu může být permethylován, jak je známo v oboru, pokud je to vhodné. Diaminové sloučeniny mohou být použity jako spojovací skupiny pro vytvoření dimerů 2-tetrapeptidových amidů. Mezi spojovací skupiny, které byly úspěšně použity, patří 1,6-diaminohexan, l,5-diamino-3-oxapentan a l,8-diamino-3,6-dioxaoktan. Výsledné dimery se považují za ekvivalenty příslušných monomerů.
- 19CZ 297281 B6
Seznam zkratek
D-Phe D-Tyr DTic D-Ala D-lNal | D-fenylalanin D-tyrosin kyselina D-l ,2,3,4-tetrahydroizochinolin-3-karboxylová D-alanin D-alanin, substituovaný na β-uhlíkovém atomu naftylovým zbytkem, připojeným v poloze 1 naftylového kruhu |
D-2Nal | D-alanin, substituovaný na β-uhlíkovém atomu naftylovým zbytkem, připojeným v poloze 2 naftylového kruhu |
D-Trp D-NIe D-Leu D-Hle D-Met D-Val D-Arg D-Har D-nArg D-Lys D-Ily D-Arg (Et2) D-Har (Et2) D-Amf D-Gmf D-Dbu D-Om D-Ior Aeb Ppz Pep Aao Aoo Hoh | D-tryptofan D-norleucin D-leucin D-homoleucin D-methionin D-val in D-arginin D-homoarginin D-norarginin D-lysin izopropyl-D-lysin diethyl-D-arginin diethyl-D-homoarginin D-(NH2CH2)-Phe D-(CH2NHČ(NH)NH2)-Phe kyselina a,ydiaminomáselná D-omithin izopropyl-D-omithin 4-(2-amino-2-karboxyethyl)benzyl piperazinyl 4-fenylkarbamoylpiperazin-l-yl 8-(acety lamino)-3,6-dioxaokt-1 -yl 8-amino-3,6-dioxyokt-l-yl 6-(L-hydrooroty lamino)-hex-1 -y 1; kyselina orotová je C4N2H5(O)2-COOH |
Ghx Gao D-4Fpa D-4Cpa D-CML D-Acp Mor Tmo Pip 4-HyP Oxp Me Et Pr Bu HEt Cyp Bzl D-2Fpa | 6-(D-glukonylamino)hexyl 6-(D-glukonylamino)-3,6-dioxaokt-l-yl 4-fluor-D-fenylalanin 4-chlor-D-fenylalanin C“methyl-D-Leu D-Ala(cyklopentyl) Morfolinyl thiomorfolinyl piperidinyl 4-hydroxypiperidin-l-yl 4-oxopiperidinyl-l-yl methyl ethyl propyl butyl hydroxyethyl (-CH2CH2OH) cyklopropyl benzyl 2-fluor-D-fenylalanin |
-20CZ 297281 B6
D-Ala(2Thi) 2-thienyl-D-alanin
4Pic 4—pikolyl
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (11)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Syntetický amid opioidního peptidů nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl, který má afinitu pro kappa-opiátové receptory alespoň 1000-krát vyšší než afinitu pro mu-opiátové receptory a který má dlouhé trvání účinku při podání in vivo, kde tento peptid má vzorec:H-Xaa|-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q, kde Xaai je (A)D-Phe, (C“Me)D-Phe, D-Tyr, D-Tic nebo D-Ala (cyklopentyl nebo thienyl), kde A je H, NO2, F, Cl nebo CH3; Xaa2 je (A') D-Phe, D-lNal, D-2Nal, D-Tyr nebo D-Trp, kde A' je A nebo 3,4CI2; Xaa3 je D-NIe, (B)D-Leu, D-Hle, D-Met, D-Val, D-Phe nebo D-ala (cyklopentyl), kde B je H nebo C“Me; Xaa4 je D-Arg, D-Har, D-nArg, D-Lys, D-lly, D-Arg(Et2), D-Har(Et2), D-Amf, D-Gmf, D-Dbu, D-Om nebo D-Ior; a Q je NR|R2, morfolinyl, thiomorfolinyl, (C) piperidinyl, piperazinyl, 4-mono- nebo 4,4-disubstituovaný piperazinyl, nebo ε-lysyl, kde R, je vybrán ze skupiny: C|-C6alkyl, substituovaný Ci-C6alkyl, benzyl, substituovaný benzyl, aminocyklohexyl, 2-thiazolyl, 2—pikolyl, 3—pikolyl, 4—pikolyl, aHacylamino)-polymethylen nebo poly(oxyethylen);přičemž substituenty na C1-C6alkylové skupině, substituované benzylové skupině nebo substituované piperazinylové skupině se volí ze skupiny, zahrnující OH, Cl, F, Br, I, aminoskupinu, karbamoyl, fenyl, karboxy-C|-C4alkyl, acetylaminoskupinu, glukolaminoskupinu a C i-C4alkyl,R2 znamená H nebo C]-C6alkyl aC znamená H, 4-hydroxyskupinu nebo 4-oxoskupinu.
- 2. Syntetický peptid podle nároku 1, ve kterém Xaa2 je D-Phe, Xaa3 je D-Leu nebo D-Nle, Xaa4 je D-Arg nebo D-Om, Q je NHR] a R] je ethyl, propyl, butyl, cyklopropyl nebo cyklobutyl.
- 3. Syntetický peptid podle nároku 1, kde Q je morfolinyl nebo thiomorfolinyl nebo NH(4pikolyl).
- 4. Syntetický peptid podle nároku 1, kde Q je N(Et)2, NH(Aeb), Ppz, Pcp nebo NHRi, kdy Ri je Aoa, Aoo, Hoh, Ghx nebo Gao.
- 5. Syntetický peptid podle jakéhokoliv z nároků 1 až 4, kde Xaai je D-Phe, D-Ala(2-thienyl) nebo D-4Fpa.
- 6. Syntetický peptid podle jakéhokoliv z nároků 1, kde buď Xaa2 je D-4Cpa nebo D-3, 4-Cpa, nebo Xaa4 je D-Gmf.
- 7. Syntetický opioidní peptid podle nároku 1 mající WT-ED50 přibližně 0,5 mg/kg nebo nižší, který má vzorec:H Xaa3—Xaa2—Xaa3—Xaa4—Q,-21 CZ 297281 B6 kde Xaai je D-Phe (nesubstituovaný nebo substituovaný CaMe, 2F, 4F nebo 40) nebo D-Ala (cyklopentyl nebo thienyl); Xaa2 je (A')D-Phe, D-lNal, D-2Nal, nebo D-Trp, kde A' je H, 4F, 4C1, 4NO2 nebo 3,4C12; Xaa3 je D-Nle, D- Leu, D-CML, D-Met, nebo D-Acp; Xaa4 je D-Arg, D-Arg(Et2), D-Lys, D-Ily, D-Har, D-Har(Et2), D-nArg, D-Om, D lor, D-Dbu, D-Amf, a D-Gmf; a Q je NR|R2, Nor, Tmo, Pip, 4HyP, OxP nebo Ppz, kde R| je Me, Et, Pr, Bu, hEt, Cyp, Bzl nebo 4-pikolyl, a R2 je H nebo Et.
- 8. Syntetický opioidní peptid podle nároku 1 mající ED50 přibližně 0,5 mg/kg nebo nižší, který má vzorec:H-Xaa i -X aa2-Xaa3-Xaa4-Q, kde Xaat je D-Phe, D-4Fpa, D-2Fpa, D-Acp, nebo D-Ala(2Thi); Xaa2 je (A)D-Phe, D-lNal, D-2Nal, nebo D-Trp, kde A je 4F nebo 40; Xaa3 je D-Nle, D-Met, nebo D-Leu; Xaa4 je D-Arg, D-Har, D-nArg, D-Lys, D-Om nebo D-Gmf; a Q je NHR|, Mor, Tmo, Pip nebo Ppz, kde R| je Et, Pr nebo 4-Pic.
- 9. Syntetický opioidní peptid podle nároku 1 mající ED50 přibližně 0,5 mg/kg nebo nižší, který má vzorec:H—Xadj—Xaa2—Xaa3—Xaa4—Q kde Xaai je D-Phe, D-4Fpa, D-2Fpa, nebo D-Ala(2Thi); Xaa2 je (A)D-Phe, D-lNal, D-2Nal, nebo D-Trp, kde A 3,4C12 nebo 40; Xaa3 je D-Nle nebo D-Leu, Xaa4 ke D-Arg, D-Om nebo D-Gmf; a Q je NHRb Mor, Tmo, Pcp, Ppz nebo N(Et)2, kde Ri je Et, Pr, Cyp, 4Pic, Aeb nebo Hoh.
- 10. Syntetický opioidní peptid podle nároku 1 mající jeden z následujících vzorců:H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHEt; H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-morfolinyl;H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-4-pikolyl; H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHPr;H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-thiomorfolinyl; H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NEt2;H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHMe; H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-morfolinyl;H-D-4Fpa-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-4-pikolyl; H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-cyklopropyl;H-D-Ala(2Thi)-D-3,4Cpa-D-Leu-D-Arg-morfolinyl; H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Gmf-morfolilnyl;H-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Om-NH(Aeb); H-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-morfolinyl;H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-piperazinyl; a H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH(Hoh).
- 11. Farmaceutický prostředek, v y z n a č u j í c í se tím, že obsahuje antinocicepční množství syntetického peptidu podle jakéhokoliv z nároků 1 až 10 a farmaceuticky přijatelný kapalný nebo pevný nosič.Konec dokumentu
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US08/997,208 US5965701A (en) | 1997-12-23 | 1997-12-23 | Kappa receptor opioid peptides |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CZ20002382A3 CZ20002382A3 (cs) | 2000-12-13 |
CZ297281B6 true CZ297281B6 (cs) | 2006-10-11 |
Family
ID=25543752
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CZ20002382A CZ297281B6 (cs) | 1997-12-23 | 1998-12-22 | Syntetický amid opioidního peptidu a farmaceutický prostredek |
Country Status (33)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5965701A (cs) |
EP (1) | EP1042359B1 (cs) |
JP (1) | JP4275852B2 (cs) |
KR (1) | KR100629548B1 (cs) |
CN (1) | CN1154655C (cs) |
AR (1) | AR014167A1 (cs) |
AT (1) | ATE301670T1 (cs) |
AU (1) | AU747806B2 (cs) |
BR (2) | BRPI9814499B8 (cs) |
CA (1) | CA2315878C (cs) |
CR (1) | CR5936A (cs) |
CZ (1) | CZ297281B6 (cs) |
DE (1) | DE69831176T2 (cs) |
DK (1) | DK1042359T3 (cs) |
EE (1) | EE04440B1 (cs) |
ES (1) | ES2247735T3 (cs) |
HK (1) | HK1029349A1 (cs) |
HR (1) | HRP20000415B1 (cs) |
HU (1) | HU227640B1 (cs) |
IL (3) | IL136742A0 (cs) |
MY (1) | MY117542A (cs) |
NO (1) | NO327080B1 (cs) |
NZ (1) | NZ505183A (cs) |
PL (1) | PL195842B1 (cs) |
PT (1) | PT1042359E (cs) |
RU (1) | RU2217437C2 (cs) |
SK (1) | SK286135B6 (cs) |
TR (1) | TR200001985T2 (cs) |
TW (1) | TW580502B (cs) |
UA (1) | UA68366C2 (cs) |
UY (1) | UY25327A1 (cs) |
WO (1) | WO1999032510A1 (cs) |
ZA (1) | ZA9811801B (cs) |
Families Citing this family (48)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9006175B2 (en) | 1999-06-29 | 2015-04-14 | Mannkind Corporation | Potentiation of glucose elimination |
WO2001036006A1 (en) * | 1999-11-19 | 2001-05-25 | Palatin Technologies, Inc. | Opioid metallopeptide compositions and methods |
DE10116978A1 (de) * | 2001-04-05 | 2002-10-10 | Merck Patent Gmbh | Kappa-Opiatagonisten für die Behandlung von Erkrankungen der Blase |
WO2002089845A1 (en) * | 2001-05-08 | 2002-11-14 | Toray Industries, Inc. | Remedies for sepsis |
ATE385193T1 (de) | 2002-03-20 | 2008-02-15 | Mannkind Corp | Inhalationsgerät |
AU2005277208B2 (en) | 2004-08-20 | 2011-11-24 | Mannkind Corporation | Catalysis of diketopiperazine synthesis |
DK1791542T3 (en) | 2004-08-23 | 2015-06-15 | Mannkind Corp | Diketopiperazinsalte for pharmaceutical delivery |
BRPI0615819B8 (pt) | 2005-09-14 | 2021-05-25 | Mannkind Corp | processo para preparar uma composição de distribuição de fármaco compreendendo um agente ativo e uma micropartícula fumaril dicetopiperazina cristalina. |
CN101389348A (zh) | 2006-02-22 | 2009-03-18 | 曼金德公司 | 用于改善包含二酮哌嗪和活性剂的微粒的药物性质的方法 |
CN101454017A (zh) * | 2006-05-26 | 2009-06-10 | 卡拉治疗学股份有限公司 | 提升哺乳动物催乳素的方法 |
CN101454338A (zh) * | 2006-05-26 | 2009-06-10 | 卡拉治疗学股份有限公司 | κ阿片样受体肽的N-氧化物 |
US8236766B2 (en) * | 2006-11-10 | 2012-08-07 | Cara Therapeutics, Inc. | Uses of synthetic peptide amides |
MX2009005000A (es) | 2006-11-10 | 2009-10-12 | Cara Therapeutics Inc | Amidas de peptidos sinteticos. |
US7842662B2 (en) * | 2006-11-10 | 2010-11-30 | Cara Therapeutics, Inc. | Synthetic peptide amide dimers |
US7713937B2 (en) * | 2006-11-10 | 2010-05-11 | Cara Therapeutics, Inc. | Synthetic peptide amides and dimeric forms thereof |
US8906859B2 (en) * | 2006-11-10 | 2014-12-09 | Cera Therapeutics, Inc. | Uses of kappa opioid synthetic peptide amides |
WO2008077194A1 (en) * | 2006-12-22 | 2008-07-03 | Xenome Ltd | Receptor agonists |
US8485180B2 (en) | 2008-06-13 | 2013-07-16 | Mannkind Corporation | Dry powder drug delivery system |
CA3086027C (en) | 2008-06-13 | 2022-05-17 | Mannkind Corporation | A dry powder inhaler and system for drug delivery |
MX2010014240A (es) | 2008-06-20 | 2011-03-25 | Mankind Corp | Un metodo y aparato interactivo para perfilar en tiempo real esfuerzos de inhalacion. |
TWI532497B (zh) | 2008-08-11 | 2016-05-11 | 曼凱公司 | 超快起作用胰島素之用途 |
US8314106B2 (en) | 2008-12-29 | 2012-11-20 | Mannkind Corporation | Substituted diketopiperazine analogs for use as drug delivery agents |
DK2405963T3 (da) | 2009-03-11 | 2013-12-16 | Mannkind Corp | Apparat, system og fremgangsmåde til at måle modstand i en inhalator |
WO2010144789A2 (en) | 2009-06-12 | 2010-12-16 | Mannkind Corporation | Diketopiperazine microparticles with defined specific surface areas |
WO2011056889A1 (en) | 2009-11-03 | 2011-05-12 | Mannkind Corporation | An apparatus and method for simulating inhalation efforts |
KR20130117755A (ko) | 2010-06-21 | 2013-10-28 | 맨카인드 코포레이션 | 건조 분말 약물 운반 시스템 및 방법 |
WO2012135765A2 (en) | 2011-04-01 | 2012-10-04 | Mannkind Corporation | Blister package for pharmaceutical cartridges |
WO2012174472A1 (en) | 2011-06-17 | 2012-12-20 | Mannkind Corporation | High capacity diketopiperazine microparticles |
MX2014004983A (es) * | 2011-10-24 | 2014-09-22 | Mannkid Corp | Metodos y composiciones para tratar dolor. |
CN104619369B (zh) | 2012-07-12 | 2018-01-30 | 曼金德公司 | 干粉药物输送系统和方法 |
EP2911690A1 (en) | 2012-10-26 | 2015-09-02 | MannKind Corporation | Inhalable influenza vaccine compositions and methods |
WO2014144895A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Mannkind Corporation | Microcrystalline diketopiperazine compositions and methods |
JP6491658B2 (ja) | 2013-07-18 | 2019-03-27 | マンカインド コーポレイション | 熱安定性乾燥粉末医薬組成物及び方法 |
US11446127B2 (en) | 2013-08-05 | 2022-09-20 | Mannkind Corporation | Insufflation apparatus and methods |
WO2015148905A1 (en) | 2014-03-28 | 2015-10-01 | Mannkind Corporation | Use of ultrarapid acting insulin |
EP3162810B1 (en) * | 2014-06-26 | 2019-02-13 | Maruishi Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for producing synthetic pentapeptide |
US10561806B2 (en) | 2014-10-02 | 2020-02-18 | Mannkind Corporation | Mouthpiece cover for an inhaler |
EP3294315A2 (en) | 2015-05-11 | 2018-03-21 | Cadila Healthcare Limited | Novel short-chain peptides as kappa opioid receptors (kor) agonist |
CN107098876B (zh) * | 2016-02-23 | 2021-04-06 | 江苏恒瑞医药股份有限公司 | 苯基丙酰胺类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用 |
EP3521301B1 (en) * | 2016-09-27 | 2024-03-06 | Sichuan Kelun-Biotech Biopharmaceutical Co., Ltd. | Polyamide compound and use thereof |
KR102375543B1 (ko) * | 2017-07-21 | 2022-03-16 | 스촨 하이스코 파마수티컬 씨오., 엘티디 | 펩티드 아미드류 화합물 및 이의 제조 방법과 의약에서의 용도 |
TWI717664B (zh) | 2017-12-06 | 2021-02-01 | 大陸商江蘇恒瑞醫藥股份有限公司 | 一種苯基丙醯胺類衍生物的鹽及其製備方法 |
BR112020023038A2 (pt) | 2018-05-16 | 2021-02-02 | Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. | composição farmacêutica de agonista receptor kor |
WO2021013085A1 (zh) * | 2019-07-25 | 2021-01-28 | 四川海思科制药有限公司 | 一种肽酰胺盐及其制备方法和在医药上的用途 |
CN114127086B (zh) * | 2019-07-25 | 2023-10-20 | 四川海思科制药有限公司 | 氘代肽酰胺类化合物及其制备方法和在医药上的用途 |
CN114615976A (zh) * | 2019-08-07 | 2022-06-10 | 人福医药美国公司 | κ阿片受体肽酰胺激动剂 |
US11492374B2 (en) | 2020-06-25 | 2022-11-08 | Humanwell Pharmaceutical US | Peptides for treatment of medical disorders |
TW202317533A (zh) | 2021-07-02 | 2023-05-01 | 美商雅斯治療公司 | 奧沙奈坦(osanetant)之固體形式 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB2013689A (en) * | 1977-12-15 | 1979-08-15 | Reckitt & Colmann Prod Ltd | Enkephalin analogues |
WO1996040206A1 (en) * | 1995-06-07 | 1996-12-19 | Torrey Pines Institute For Molecular Studies | Novel kappa receptor selective opioid peptides |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB8801304D0 (en) * | 1988-01-21 | 1988-02-17 | Ici Plc | Diamine compounds |
US5367053A (en) * | 1993-05-19 | 1994-11-22 | Houghten Pharmaceuticals, Inc. | Opioid peptide inhibitors |
-
1997
- 1997-12-23 US US08/997,208 patent/US5965701A/en not_active Expired - Lifetime
-
1998
- 1998-12-22 ES ES98964224T patent/ES2247735T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-12-22 MY MYPI98005818A patent/MY117542A/en unknown
- 1998-12-22 DK DK98964224T patent/DK1042359T3/da active
- 1998-12-22 KR KR1020007006936A patent/KR100629548B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1998-12-22 PT PT98964224T patent/PT1042359E/pt unknown
- 1998-12-22 CR CR5936A patent/CR5936A/es unknown
- 1998-12-22 NZ NZ505183A patent/NZ505183A/en not_active IP Right Cessation
- 1998-12-22 DE DE69831176T patent/DE69831176T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-12-22 UA UA2000063810A patent/UA68366C2/uk unknown
- 1998-12-22 SK SK960-2000A patent/SK286135B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1998-12-22 TR TR2000/01985T patent/TR200001985T2/xx unknown
- 1998-12-22 CZ CZ20002382A patent/CZ297281B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1998-12-22 AU AU19402/99A patent/AU747806B2/en not_active Ceased
- 1998-12-22 IL IL13674298A patent/IL136742A0/xx active IP Right Grant
- 1998-12-22 BR BRPI9814499A patent/BRPI9814499B8/pt unknown
- 1998-12-22 HU HU0100626A patent/HU227640B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1998-12-22 EE EEP200000370A patent/EE04440B1/xx not_active IP Right Cessation
- 1998-12-22 EP EP98964224A patent/EP1042359B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-12-22 AT AT98964224T patent/ATE301670T1/de active
- 1998-12-22 JP JP2000525447A patent/JP4275852B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1998-12-22 BR BRPI9814499-5A patent/BR9814499B1/pt not_active IP Right Cessation
- 1998-12-22 ZA ZA9811801A patent/ZA9811801B/xx unknown
- 1998-12-22 RU RU2000119773/04A patent/RU2217437C2/ru active
- 1998-12-22 WO PCT/US1998/027282 patent/WO1999032510A1/en active IP Right Grant
- 1998-12-22 PL PL98341308A patent/PL195842B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1998-12-22 CA CA2315878A patent/CA2315878C/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-12-22 CN CNB98812582XA patent/CN1154655C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1998-12-23 UY UY25327A patent/UY25327A1/es unknown
- 1998-12-23 AR ARP980106652A patent/AR014167A1/es active IP Right Grant
-
1999
- 1999-02-10 TW TW087121390A patent/TW580502B/zh not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-06-12 IL IL136742A patent/IL136742A/en not_active IP Right Cessation
- 2000-06-20 HR HR20000415A patent/HRP20000415B1/xx not_active IP Right Cessation
- 2000-06-21 NO NO20003245A patent/NO327080B1/no not_active IP Right Cessation
- 2000-11-28 HK HK00107625A patent/HK1029349A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2006
- 2006-10-05 IL IL178471A patent/IL178471A0/en unknown
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB2013689A (en) * | 1977-12-15 | 1979-08-15 | Reckitt & Colmann Prod Ltd | Enkephalin analogues |
WO1996040206A1 (en) * | 1995-06-07 | 1996-12-19 | Torrey Pines Institute For Molecular Studies | Novel kappa receptor selective opioid peptides |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Colette, T. et al.: "Selective Ligands for the Á, delta and kappa Opioid Receptors Identified from a Single Mixture Based Tetrapeptide Positional Scanning Combinatorial Library", J. Biol. Chem. 273(30), 18848-18856, 1998 * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CZ297281B6 (cs) | Syntetický amid opioidního peptidu a farmaceutický prostredek | |
US5843901A (en) | LHRH antagonist peptides | |
US6235718B1 (en) | Compounds for control of appetite, blood pressure, cardiovascular response, libido, and circadian rhythm | |
KR101513737B1 (ko) | 합성 펩타이드 아마이드와 그의 다이머 | |
US7071168B2 (en) | Anti-cancer compounds and methods related thereto | |
JP4191259B2 (ja) | GnRH拮抗物質 | |
HANSEN et al. | Structure–activity relationships in enkephalin peptides | |
SK283800B6 (sk) | Heptapeptidový analóg, farmaceutická kompozícia obsahujúca tento analóg, spôsob prípravy heptapeptidového analógu a jeho použitie pri príprave liečiva na redukciu alebo blokovanie kontrakcie maternicového svalu | |
US20100029575A1 (en) | N-Oxides of Kappa Receptor Peptides | |
SK287880B6 (sk) | Peptide LHRH-antagonists with improved solubility, pharmaceutical composition containing the peptides, method for the preparation of the peptides and their use and method for producing medicaments | |
US5422341A (en) | Motilin-like polypeptides with gastrointestinal motor stimulating activity | |
JPH1160598A (ja) | オピオイド様ペプチド | |
MXPA00006270A (en) | Kappa receptor opioid peptides | |
BG64386B1 (bg) | Нови lн-rн-антагонисти с подобрено действие | |
PL226256B1 (pl) | N-podstawione amidy cyklicznych ureidowych analogów dermorfiny, sposoby ich wytwarzania, zastosowanie i środek farmaceutyczny do leczenia i/lub łagodzenia stanów bólowych | |
AU3130100A (en) | LHRH antagonist peptides |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20121222 |