ES2247735T3

ES2247735T3 - Peptidos opiaceos afines a receptores kappa.

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Publication number: ES2247735T3
Application number: ES98964224T
Authority: ES
Inventors: Jean Louis Junien; Pierre J. M. Riviere; Claudio D. Schteingart; Javier Sueiras Diaz; Jerzy A. Trojnar; Todd W. Vanderah
Original assignee: Cara Therapeutics Inc
Current assignee: Cara Therapeutics Inc
Priority date: 1997-12-23
Filing date: 1998-12-22
Publication date: 2006-03-01
Anticipated expiration: 2018-12-22
Also published as: TR200001985T2; IL178471A0; NO20003245L; DE69831176T2; NO20003245D0; PT1042359E; KR20010033450A; MY117542A; PL341308A1; UY25327A1; RU2217437C2; HK1029349A1; AU1940299A; IL136742A0; HUP0100626A3; CA2315878A1; AU747806B2; HRP20000415A2; ZA9811801B; PL195842B1

Abstract

Una amida de péptido opiáceo sintético o una sal de la misma farmacéuticamente aceptable con una afinidad por el receptor opiáceo kappa que sea al menos 1.000 veces su afinidad por el receptor opiáceo mu y que presente larga duración de la acción cuando se administra in vivo, dicho péptido tiene la fórmula: H-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q o es un dímero del mismo enlazado mediante un enlazante de diamino tal como 1, 6-diamino-hexano, 1, 5-diamino-3- oxapentano y 1, 8-diamino-3, 6-dioxaoctano en la que Xaa1 es (A) D-Phe, (Ca)Me) D-Phe, D-Tyr, D-Tic o D-Ala (ciclopentilo o tienilo), siendo A, H, NO2, F, Cl o CH3; Xaa2 es (A¿) D-Phe, D-1Nal, D-2Nal, D-Tyr o D-Trp, siendo A¿, A o 3, 4Cl2, 4Br o 2, 4Cl2; Xaa3 es D-Nle, (B) D- Leu, D-Hle, D-Met, D-Val, D-Phe o D-Ala (ciclopentilo) siendo B, H o CaMe; Xaa4 es D-Arg, D-Har, D-nArg, D-Lys, D- Ily, D-Arg (Et2), D-Har (Et2), D-Amf, D-Gmf, D-Dbu, D-Orn, D-Ior, D-Lys (Bu) o D-Lys (Et2); y Q es NR1R2, morfolinilo, tiomorfolinilo, (C) piperidinilo, piperazinilo,4-mono- o 4, 4-di-piperazinilo sustituido, o -lisilo, siendo R1 alquilo C1 a C6, alquilo sustituido C1 a C6, bencilo, bencilo sustituido, aminociclohexilo, 2-tiazolilo, 2- picolilo, 3-picolilo, 4-picolilo, un grupo -(acilamino)- polimetileno o un poli (oxietileno), y siendo R2, H o alquilo C1 a C6; y siendo C, H, 4-hidroxilo o 4-oxo, en la que Tic es el ácido 1, 2, 3, 4-tetrahidroisoquinolina-3- carboxílico, Amf es (NH2CH2) Phe, Gmf es Amf (amidino) que representa Phe donde la posición 4 está sustituida con CH2NHC (NH) NH2, Dbu es ácido alfa, gamma-diamino butírico, e Ior es isopropilo Orn en el que el grupo amino de la cadena secundaria está alquilatado con isopropilo, o en el que el nitrógeno terminal del mencionado péptido está permetilado.

Description

Péptidos opiáceos afines a receptores kappa.

La presente invención se refiere de manera general a péptidos opiáceos sintéticos, de manera particular a péptidos opiáceos que son agonistas muy selectivos del receptor kappa, y de manera más particular a dichos agonistas que (a) no penetran en el cerebro y (b) presentan una actividad antinociceptiva in vivo de larga duración.

Antecedentes de la invención

Los receptores opiáceos kappa (KOR) están presentes en el cerebro, médula espinal, y en las terminales central y periférica y en las células corporales de los aferentes sensoriales primarios (somático y visceral), así como en las células inmunes. Las moléculas que activan los KOR se denominan comúnmente agonistas kappa.

Se ha demostrado que la activación de los KOR que se localizan en el cerebro produce un efecto analgésico. Este hallazgo conduce a intentos para desarrollar agonistas kappa no peptídicos que penetren en el cerebro para usar como analgésicos originales que carecerían de los efectos secundarios no deseados (estreñimiento, depresión respiratoria, dependencia y adicción) de los análogos morfínicos que actúan sobre los receptores opiáceos mu (MOR). Se ha establecido en animales y seres humanos la actividad analgésica, así como la ausencia de efectos secundarios similares a los de los opiáceos mu de esta clase de compuestos. Sin embargo, el desarrollo de los agonistas kappa sistémicos fue interrumpido debido a que se demostró que también inducían efectos secundarios específicos tales como diuresis, sedación y disforia, mediados a través de los receptores kappa localizados en el cerebro.

Además, de los KOR supraespinales, los KOR localizados tanto en la periferia como en la médula espinal pueden producir también analgesia. Sin embargo, ninguno de los KOR periféricos ni de los espinales se han asociado con los efectos secundarios de los agonistas kappa sistémicos. Por tanto, si fuera posible crear agonistas opiáceos del receptor kappa que no penetren en el cerebro (siguiendo tanto administración periférica como espinal), debería ser posible obtener analgésicos seguros y originales.

Los agonistas kappa producen antinocicepción periférica en modelos de hiperalgesia tanto intestinal como colónica inducida por inflamación leve y local, y el síndrome del intestino irritable (IBS), que incluye dolor visceral exagerado debido a una hipersensibilidad visceral ligada posiblemente a una inflamación local, es también un objetivo para un agonista kappa periférico. De manera adicional al tracto intestinal, se considera que otras vísceras que muestran una dolencia patológica que implica activación y/o sensibilización (es decir, inflamación local) de los aferentes sensoriales primarios representan objetivos apropiados para dicho receptor opiáceo kappa. Los agonistas kappa bloquean también la inflamación neurogénica en tejidos somáticos inhibiendo la liberación de la sustancia P procedente de los aferentes sensoriales primarios y son también conocidos por actuar sobre el sistema inmune y tener principalmente un papel inhibidor sobre las células inmunes.

Se desean de manera particular los péptidos que no penetran en el cerebro, que presentan afinidad alta por los KOR frente a los MOR, que tienen potencia y eficacia altas, y que presentan larga duración de la acción in vivo. La Patente de los Estados Unidos Nº 5.610.271 describe tetrapéptidos que contienen cuatro D-isómeros de los residuos de aminoácidos que enlazan con los KOR, pero dichos péptidos no presentan todas las características deseables descritas anteriormente.

Resumen de la invención

Se ha descubierto un género de péptidos que presenta selectividad alta por los KOR y larga duración de la acción in vivo y que no presenta ninguna penetración significativa en el cerebro. Estos péptidos comprenden una secuencia de cuatro D-isómeros de aminoácidos que tienen un carbono terminal que es una amida tanto mono como disustituida. Estos compuestos tienen la siguiente fórmula general:

Amida sustituida

\hskip1cm

H-Xaa_{1}-Xaa_{2}-Xaa_{3}-Xaa_{4}-

o son dímeros de la misma enlazados mediante un enlazante diamino tal como 1,6-diamino-hexano, 1,5-diamino-3-oxapentano y 1,8-diamino-3,6-dioxaoctano, en la que Xaa_{1} es (A) D-Phe, (C_{o}Me) D-Phe, D-Tyr, D-Tic ó D-Ala (ciclopentilo o tienilo), siendo A, H, NO_{2}, F, Cl ó CH_{3}; Xaa_{2} es (A') D-Phe, D-1Nal, D-2Nal, D-Tyr ó D-Trp, siendo A', A ó 3,4 Cl_{2}, 4 Br ó 2,4 Cl_{2}; Xaa_{3} es D-Nle, (B) D-Leu, D-Hle, D-Met, D-Val, D-Phe ó D-Ala (ciclopentilo) siendo B, H o C_{o}Me; Xaa_{4} es D-Arg, D-Har, D-nArg, D-Lys, D-Ily, D-Arg (Et_{2}), D-Har (Et_{2}), D-Amf, D-Gmf, D-Dbu, D-Orn, D-Ior, D-Lys(Bu) o D-Lys (Et_{2}), o en la que el nitrógeno terminal de dicho péptido está permetilado. Entre las amidas preferidas se incluyen etilamida, morfolida, tiomorfolida, 4-picoliamida, piperazida, propilamida, ciclopropilamida, dietilamida y bencilamida sustituida.

En un aspecto particular, la invención proporciona una amida peptídica opiácea sintética o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma con una afinidad por el receptor opiáceo kappa que tiene al menos 1.000 veces su afinidad por el receptor opiáceo mu y que presenta larga duración de acción cuando se administra in vivo, cuyo péptido tiene la fórmula:

H-Xaa_{1}-Xaa_{2}-Xaa_{3}-Xaa_{4}-Q

o son dímeros de la misma enlazados mediante un diamino enlazante tal como 1,6-diamino-hexano, 1,5-diamino-3-oxapentano y 1,8-diamino-3,6-dioxaoctano en la que Xaa_{1} es (A) D-Phe, (C_{o})Me) D-Phe, D-Tyr, D-Tic o D-Ala (ciclopentilo o tienilo), siendo A, H, NO_{2}, F, Cl o CH_{3}; Xaa_{2} es (A') D-Phe, D-1Nal, D-2Nal, D-Tyr o D-Trp, siendo A', A o 3,4Cl_{2}, 4Br o 2,4 Cl_{2}; Xaa_{3} es D-Nle, (B) D-Leu, D-Hle, D-Met, D-Val, D-Phe o D-Ala (ciclopentilo) siendo B, H o C_{o}Me; Xaa_{4} es D-Arg, D-Har, D-nArg, D-Lys, D-Ily, D-Arg (Et_{2}), D-Har (Et_{2}), D-Amf, D-Gmf, D-Dbu, D-Orn, D-Ior, D-Lys (Bu) o D-Lys (Et_{2}); y Q es NR_{1}R_{2}, morfolinilo, tiomorfolinilo, (C) piperidinilo, piperazinilo, 4-mono- o 4,4-di-piperazinilo sustituido, o e-lisilo, siendo R_{1} alquilo menor, alquilo menor sustituido, bencilo, bencilo sustituido, aminociclohexilo, 2-tiazolilo, 2-picolilo, 3-picolilo, 4-picolilo, un grupo \omega-(acilamino)-polimetileno o un poli (oxietileno), y siendo R_{2} H o alquilo menor; y siendo C H, 4-hidroxilo o 4-oxo, o en la que el nitrógeno terminal de dicho péptido está permetilado.

En un aspecto adicional, la invención describe el uso de estos compuestos en el tratamiento de pacientes humanos que padecen de dolor visceral y similar, inestabilidad de la vejiga o similar, o IBD o enfermedades autoinmunes, así como en el tratamiento similar de mamíferos no humanos.

Breve descripción de las formas de realización preferidas

La nomenclatura usada para definir los péptidos es la que especifican Schroder & Lubke, The Peptides, Academic Press, 1965, en la que, de acuerdo con la representación convencional, el nitrógeno terminal aparece a la izquierda y el carbono terminal a la derecha. Cuando un residuo de aminoácido tiene formas isómeras, es la forma isómera L la que está siendo representada en el presente documento a no ser que se indique de manera expresa otra cosa.

Como se ha indicado anteriormente, la invención proporciona péptidos que son selectivos para el KOR y presentan no solo una fuerte afinidad por el KOR sino que presentan larga duración de la bioactividad in vivo. Estos péptidos opiáceos selectivos kappa tienen afinidad enlazante al menos 1.000 veces mayor por el KOR que por el MOR, teniendo muchos compuestos al menos afinidad 10.000 veces mayor y exhibiendo algunos compuestos afinidad 20.000 veces mayor o más. Sin embargo, para muchas indicaciones es importante que, junto con dicha selectividad alta, los agonistas kappa deberían presentar tanto una ausencia de penetración significativa en el cerebro como una prolongada actividad antinociceptiva in vivo. Por tanto, de manera adicional a la selectividad anteriormente mencionada, los compuestos preferidos no presentan penetración significativa en el cerebro a la vez que conservan una actividad sustancial durante al menos aproximadamente una hora, permaneciendo los compuestos más preferidos significativamente activos durante al menos 2 horas, y presentando los compuestos que más se prefieren dicha actividad significativa durante tres horas o más.

Las abreviaciones que se muestran a continuación se usan desde el principio hasta el fin de este documento. Por D-Nle se entiende D-norleucina, y D-Hle representa D-homoleucina. D-Har representa D-homoarginina, y D-nArg representa D-norarginina que tiene un carbono menor que la D-Arg. Por D-Nal se entiende el isómero D de la alanina que está sustituido por naftilo en el carbono \beta. De manera preferible, se emplea D-2Nal, es decir, la unión con el naftaleno es en la posición 2 en la estructura del anillo; sin embargo, se puede usar también D-1Nal. D-Cpa y D-Fpa se usan para representar, de manera respectiva, cloro-D-Phe y fluoro-D-Phe, siendo preferidos D-4Cpa, D-2Fpa, D-3Fpa y D-4Fpa. D-Npa significa nitro-D-Phe, y D-Mpa se usa para representar metil-D-Phe. D-3, 4Cpa significa 3,4-dicloro-D-Phe. D-Acp representa D-Ala (ciclopentilo). D-Orn representa D-ornitina, y D-Dbu representa ácido alfa, gamma-diamino butírico. CML representa Cº metil Leu, y CMP representa C_{o}MePhe. Por D-4Amf se entiende D-4 (NH_{2}CH_{2}) Phe, y por D-Gmf se entiende D-Amf (amidino) que representa D-Phe donde la posición 4 está sustituida con CH_{2}NHC (NH) NH_{2}. Por D-Tic se entiende ácido D-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina-3-carboxílico. En Ala (Thi), Thi representa el grupo tienilo, que está enlazado de manera preferible en su posición 2 a la alanina, aunque 3-tienilo es un equivalente. Por Ily e Ior se entiende de manera respectiva isopropil Lys e isopropil Orn en los que el grupo amino de la cadena secundaria está alquilatado con isopropilo.

Por alquilo menor se entiende C_{1} a C_{6} e incluye cicloalquilo, y se prefiere que C_{1}-C_{4} incluya ciclopropilo y ciclobutilo. Me, Et, Pr, Ipr, Bu, Pn y Bzl se usan para representar metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, pentilo y bencilo. Por Cyp se entiende ciclopropilo, y por Cyb se entiende ciclobutilo. Aunque se prefiere el enlace en un extremo de una cadena de alquilo, el enlace puede estar en cualquier parte de la cadena, por ejemplo 3-pentilo que se puede denominar también como etilpropilo. Ahx representa 6-amino-hexilo, es decir, (CH_{2})_{6}-NH_{2}. 4Acx se usa para representar 4-aminociclohexilo, y hEt se usa para representar hidroxietilo, es decir, -CH_{2}CH_{2}OH. Bencilo sustituido incluye 4Nbz y 4Abz, que representa 4-nitrobencilo y 4-aminobencilo, y Aeb se usa para representar 4-(2-amino-2-carboxietil) bencilo, es decir

1

Por 2-, 3- y 4-picolilo (2Pic, 3Pic y 4Pic) se entienden grupos metilpiridina siendo la unión mediante un metileno en la posición 2-, 3- o 4-. Por Mor se entiende morfolinilo, es decir

2

Por Pip se entiende piperidinilo (piperidilo), y por 4-HyP y OxP se entienden 4-hidroxipiperidin-1-ilo y 4-oxo-piperidin-1-ilo- Por Ppz se entiende piperazinilo. Ecp representa 4-etilcarbamoil-piperazin-1-ilo; Pcp representa 4-fenilcarbamoilpiperazin-1-ilo. Se pueden usar también fracciones de amonio cuaternario, tales como 4,4-dimetil piperazin-1-ilo (Dmp) u otras sustituciones dialquilo menor

Por 2Tzl se entiende 2-tiazolilo, es decir 3

Por Ely se entiende \varepsilon-lisilo donde el grupo amino de la cadena secundaria de la L-lisina se conecta mediante un enlace de amida con el carbono terminal.

Tal como se ha indicado anteriormente, R_{1} puede ser un grupo \omega (acilamino) polimetileno o un grupo poli (oxietileno), tal como Aao, Aoo, Hoh, Ghx o Gao. Aao representa 8-(acetilamino)-3,6-dioxaoct-1-ilo, es decir CH_{2}CH_{2}-O-CH_{2}CH_{2}-O-CH_{2}CH_{2}-NH-Ac. Aoo representa 8-amino-3,6-dioxaoct-1-ilo, es decir, CH_{2}CH_{2}-O-CH_{2}CH_{2}-O-CH_{2}CH_{2}-NH_{2}. Hoh representa 6-(L-hidroorotilamino)-hex-1-ilo, es decir (CH_{2})_{6}-NH-(L-hidroorotilo); ácido L-hidroorótico es C_{4}N_{2}H_{5} (O)_{2}-COOH. Ghx representa 6-(D-gluconilamino)-hexilo, es decir, (CH_{2})_{6}-NH-CO-(CHOH)_{4}-CH_{2}OH. Gao representa 6-(D-gluconilamino)-3,6-dioxaoct-1-ilo, es decir CH_{2}CH_{2}-O-CH_{2}CH_{2}-O-CH_{2}CH_{2}-NH-CO(CHOH)_{4}- CH_{2}OH.

Se prefiere D-Phe o D-Phe sustituido en la posición 1. El anillo de fenilo se puede sustituir en las posiciones 2-, 3-, y/o 4, y se prefieren de manera habitual las sustituciones por cloro o flúor en la posición 2 ó 4. El átomo del carbono \alpha se puede también metilar. Se puede usar también otro residuo equivalente que parezca D-Phe, y entre estos se incluyen D-AL (tienilo), D-Ala (ciclopentilo), D-Tyr y D-Tic. Se prefiere también como residuo en la posición 2 D-Phe o D-Phe sustituido incluyendo dichas sustituciones de manera preferible un sustituyente en el carbono de la posición4 del anillo de fenilo o en las posiciones 3- y 4-. De manera alternativa, se puede usar D-alanina sustituida por naftilo, así como D-Trp y D-Tyr. La posición 3 está ocupada de manera preferible por un residuo tal como D-Nle, D-Leu, D-CML, D-Hle, D-Met o D-Val; sin embargo, se pueden usar también D-Ala (ciclopentilo) o D-Phe. Se prefiere generalmente para la posición 4 D-Arg (que puede sustituirse con dietilo) y D-Orn (que puede alquilatarse en su grupo delta-amino, como con isopropilo); sin embargo se pueden usar D-nArg y otros residuos equivalentes, tales como D-Lys (que se puede también alquilatar en su grupo epsilon-amino) y D-Har (que se puede sustituir con dietilo). Además, se pueden usar también D-Gmf, D-Dbu, D-4Amf, y D-His.

Aunque podía esperarse que podría aumentar la buena duración de la acción biológica a partir del empleo de una secuencia de 4 D-isómeros de aminoácidos, fue sorprendente encontrar que la duración de la acción fue de manera general bastante corta para la amida no sustituida, y que se obtuvo una larga duración de la acción únicamente a través de la incorporación de una amida sustituida en el carbono terminal. Las sustituciones únicas pueden estar en forma de etilo, metilo, propilo, ciclopropilo y picolilo, así como otros residuos equivalentes, tales como hidroxietilo, tiazolilo, aminociclohexilo, bencilo, y bencilo sustituido. De manera general se prefieren sustituyentes de alquilo menor o picolilo para las amidas sustituidas únicas. En lugar de una amida sustituida única, es una alternativa una sustitución de dialquilo, por ejemplo dietilamino; sin embargo, de manera preferible, dicho carbono terminal disustituido está ocupado por una fracción morfolinilo, tiomorfolinilo o piperidinilo, siendo la posterior no sustituida o sustituida por 4-hidroxilo o 4-oxo. Se pueden usar también una fracción piperazinilo o piperazinilo 4-mono- ó 4,4 disustituida, como puede ser \varepsilon-lisilo.

Se ha encontrado que el enlace es generalmente un atributo de la secuencia de aminoácidos del tetrapéptido, y de manera preferible los péptidos opiáceos selectivos del receptor kappa deberán presentar una afinidad de enlace con el receptor kappa tal que su k_{i} es igual a aproximadamente 2 nM o menor. Se cree que la larga duración de la acción es principalmente un atributo de la estructura de la amida enlazada con el carbono terminal y puede ensayarse efectivamente mediante el ensayo anticonceptivo descrito más adelante en el presente documento, y los péptidos que se prefieren más presentan una actividad biológica sustancial durante dos o tres horas y no tienen efectos significativos sobre el cerebro.

Un subgénero preferido del género de los péptidos opiáceos que se ha definido más arriba en el presente documento tiene la fórmula:

H-Xaa_{1}-Xaa_{2}-Xaa_{3}-Xaa_{4}-Q

en la que Xaa_{1} es D-Phe (no sustituido o sustituido por C_{o}Me, 2F, 4F o 4Cl) o D-Ala (ciclopentilo o tienilo); Xaa_{2} es (A') D-Phe, D-1Nal, D-2Nal o D-Trp, siendo A' H, 4F, 4Cl, 4NO_{2} o 3,4Cl_{2}; Xaa_{3} es D-Nle, D-Leu, D-CML, D-Met o D-Acp; Xaa_{4} es D-Arg, D-Arg (Et_{2}), D-Lys, D-Ily, D-Har, D-Har (Et_{2}), D-nArg, D-Orn, D-Ior, D-Dbu, D-Amf, y D-Gmf; y Q es NR_{1}R_{2}, Mor, Tmo, Pip, 4-Hyp, OxP p Ppz, siendo Me, Et, Pr, Bu, hEt, Cyp, Bzl o 4-picolilo, y siendo R_{2} H o Et.

Un subgénero preferido adicional de los péptidos opiáceos kappa tiene la fórmula:

H-Xaa_{1}-Xaa_{2}-Xaa_{3}-Xaa_{4}-Q

en la que Xaa_{1} es D-Phe, D-4Fpa, D-2Fpa, D-4Cpa, D-Acp o D (Ala) (Thi); Xaa_{2} es D-Phe, D-4Fpa, D-4Cpa, D-3, 4Cpa, D-1Nal, D-2Nal o D-Trp; Xxaa_{3} es D-Nle, D-Met, D-CML o D-Leu; Xaa4 es D-Arg, D-Lys, D-Har, D-nArg o D-Orn; y Q es NR_{1}R_{2}, Mor, Tmo, Pip, 4-Hyp o Ppz, siendo R_{1} Et, Pr, Bu, Cyp, hEt, Bzl o 4Pic, y siendo R_{2} H o Et.

H-Xaa_{1}-Xaa_{2}-Xaa_{3}-Xaa_{4}-Q

en la que Xaa_{1} es D-Phe, D-4Fpa, D-2Fpa, D-Acp o D-Ala (2Thi); Xaa_{2} es (A) D-Phe, D-1Nal, D-2Nal o D-Trp, siendo A 4F o 4Cl; Xaa_{3} es D-Nle, D-Met o D-Leu; Xaa_{4} es D-Arg, D-Har, D-nArg, D-Lys, D-Orn o D-Gmf; y Q es NHR_{1}, Mor, Tmo, Pip o Ppz, siendo R_{1} Et, Pr o 4 Pic.

Otro subgénero preferido de los péptidos opiáceos kappa tiene la fórmula:

H-Xaa_{1}-Xaa_{2}-Xaa_{3}-Xaa_{4}-Q

en la que Xaa_{1} es D-Phe, D-4Fpa, D-2Fpa o D-Ala (2Thia); Xaa_{2} es (A) D-Phe, D-1Nal, D-2Nal o D-Trp, siendo A 3,4Cl_{2} o 4Cl; Xaa_{3} es D-Nle o D-Leu; Xaa_{4} es D-Arg, D-Orn o D-Gmf; y Q es NHR_{1}, Mor, Tmo, Pcp, Ppz o N (Et)_{2}, siendo R_{1} Et, Pr, Cyp, 4Pic, Aeb o Hoh.

Se ha encontrado que los anteriores géneros y subgéneros de péptidos opiáceos tienen una duración extendida de la actividad antinoceciptiva in vivo como resultado de incorporar una amida sustituida en el carbono terminal de la posición 4 del residuo aminoácido. Este particular atributo inesperado vuelve dichos péptidos particularmente válidos asegurándose que permanecen activos in vivo durante períodos de tres horas y más. Algunos tetrapéptidos que tienen la secuencia anteriormente mencionada pero que tienen un átomo de carbono terminal simple de amida muestran también una selectividad alta por el KOR, en comparación con el MOR; sin embargo presentan de manera general solo una duración de la acción a corto plazo. Se espera completamente que dichos péptidos opiáceos presentarán un plazo de duración extendida cuando se sintetizan de forma que tengan una amida sustituida, tal como morfolida, en el carbono terminal. Se ha encontrado de manera consistente que, cuando una amida primaria de un tetrapéptido muestra una unión alta y selectiva con el KOR, las correspondientes amidas sustituidas, tales como, por ejemplo, la etilamida y la morfolida, presentarán, cuando se sintetice, presentar actividad antinociceptiva durante un período extendido medido en horas, es decir, durante al menos 1 hora, sin entrada significativa en el cerebro.

Aunque se definen en las fórmulas anteriores las secuencias de aminoácidos preferidas, deberá entenderse por aquellas personas normalmente expertas en la técnica de la química de los péptidos que uno o más de los residuos de aminoácido relacionados se podría sustituir mediante una sustitución conservativa del aminoácido, por ejemplo, un aminoácido básico por otro, o un aminoácido hidrófobo por otro, por ejemplo D-Ile por D-Leu. Igualmente, se pueden modificar diversos residuos como se conoce generalmente en esta técnica; por ejemplo, se puede modificar D-Phe (tal como se ha indicado al principio) incorporando un grupo halógeno o nitro normalmente en la posición 3- ó 4-, o en ambas, o se puede metilar el carbono alfa. Se considera que dichas modificaciones producen péptidos opiáceos del receptor kappa equivalentes.

Los péptidos se pueden sintetizar mediante cualquier procedimiento adecuado, tal como técnicas exclusivamente en fase sólida o técnicas clásicas de adición en solución, o de manera alternativa mediante técnicas parciales en fase sólida o mediante técnicas de condensación fragmentada. Por ejemplo, en el libro de texto de Stewart & Young, Solid-Phase Peptide Synthesis, 2ª Ed., Pierce Chemical Company, Rockford, Illinois, 1984, se definen las técnicas de síntesis de péptidos exclusivamente en fase sólida (SPPS), y se ejemplifican mediante la descripción de la Patente de los Estados Unidos Nº 4.105.603. En la patente de los Estados Unidos Nº 3.972.859 se ejemplifica el procedimiento de síntesis por condensación fragmentada y otras síntesis disponibles se ejemplifican mediante las Patentes de los Estados Unidos N^{os} 3.842.067 y 3.862.925. La síntesis clásica de adición en solución se describe con detalle en Bodanzsky y col., Peptide Synthesis, 2ª Ed., John Wiley & Sons, Nueva York, 1976.

Es común en la síntesis química de péptidos del tipo acoplamiento la protección de cualquier cadena secundaria lábil del amino ácido que se está acoplando, y normalmente también la protección del grupo amino en \alpha, de tal manera que la adición tiene lugar en el grupo carboxilo del aminoácido o dipéptido o tripéptido individual que se está añadiendo. Dichos grupos protectores son bien conocidos en la técnica, y se usan a menudo tert-butiloxicarbonilo (Boc), benziloxicarbonilo (Z) y 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc) como grupos \alpha-amino protectores en la SPPS o la síntesis en solución clásica, aunque existe una gran variedad de diferentes grupos \alpha-amino protectores que se pueden usar de manera alternativa.

Cuando se usa la SPPS, el residuo de aminoácido del átomo de carbono terminal se acopla a un soporte de resina sólida tal como soporte de resina de O-CH_{2}-poliestireno, soporte de resina de O-CH_{2}-bencil-poliamida, soporte de resina de -NH-benzhidrilamina (BHA), o soporte de resina de -NH-parametilbenzidrilamina (MBHA). Se prefiere a menudo el uso de resinas de BHA o MBHA cuando se desea la amina no sustituida debido a que la rotura directa proporciona la amida del átomo de carbono terminal. Cuando se desea una N-metilamida se puede generar la misma a partir de una resina de N-metil BHA. Se pueden sintetizar otras amidas sustituidas únicas mediante el procedimiento que se muestra en W. Kornreich y col., Int. J. Peptide Protein Res., 25:414-420, 1985, y también en la Patente de los Estados Unidos Nº 4.701.499. Los péptidos que tienen amidas disustituidas en el carbono terminal, tales como N-morfolinilo o N-piperidinilo, se preparan de manera preferible mediante la síntesis en solución clásica o mediante condensación fragmentada en solución.

Una vez sintetizados, estos tetrapéptidos se purifican fácilmente usando procedimientos bien conocidos en la técnica de purificación de péptidos cortos, por ejemplo, cromatografía líquida de alta resolución en fase reversa (RP-HPLC), u otros procedimientos apropiados. Dicha purificación se describe con detalle en J. Rivier y col., J. Chromatography, 288:303-328, 1984, y C. Miller y J. Rivier, Peptide Science, Biopolymers, 40:265-317 (1996), y en la Patente de los Estados Unidos Nº 5.098.995 se muestran ejemplos específicos de dicha purificación siguiendo la síntesis en fase sólida o similar.

Se pueden emplear diferentes ensayos para ensayar si los tetrapéptidos presentan selectividad alta por el KOR, bioactividad antinociceptiva fuerte, larga duración de la bioactividad in vivo y ausencia de penetración en el cerebro. Los ensayos de receptores son bien conocidos en la técnica y se han clonado recientemente los KOR del ratón, rata, cobaya y ser humano. Con la excepción del gpKOR, los KOR clonados son muy similares, conteniendo todos aproximadamente 380 aminoácidos. La secuencia de aminoácidos del hKOR tiene una homología del 93,9% y el 93,4% con el kKOR y el mKOR, respectivamente. En contraste, el hKOR difiere de manera significativa del hMOR y del receptor opiáceo delta humano (hDOR), que tienen de manera respectiva una identidad de secuencia de solo el 60,2% y el 59,1%. Los receptores KOR así como otros receptores opiáceos son receptores clásicos, que abarcan siete transmembrana, acoplados a la proteína G (Gi). Estos receptores clonados permiten seleccionar fácilmente un péptido candidato particular; por ejemplo, se puede llevar a cabo la selección frente a KOR y MOR con el fin de determinar la selectividad. Se han expresado de manera estable los KOR, MOR y DOR en una línea celular de cáncer de ratón derivada de un neuroblastoma de hipocampo (HN. 9. 10) y están disponibles para uso en selección in vitro. Existe también un número de ensayos in vivo bien aceptados que se han convertido generalmente en estándares para determinar la actividad antinociceptiva de un compuesto opiáceo. Estos ensayos emplean generalmente ratones e incluyen el ensayo del movimiento rápido de la cola, el ensayo de la presión de la pata, el ensayo de contorsiones abdominales inducidas por ácido acético, el ensayo del pellizco de la cola y el ensayo de inmersión de la cola. Vonvoigtlander, P. F. y col., J. Pharm Exper. Therapeutics, 224:7-12 (1983) describen algunos de dichos ensayos para compuestos opiáceos.

La afinidad del enlace se refiere a la fortaleza de la interacción entre el ligando y el receptor. Para demostrar la afinidad del enlace para receptores opiáceos, los péptidos se evaluaron usando estudios de competencia de enlaces. Estos estudios se llevaron a cabo usando receptores kappa (hKOR) y opiáceos mu (hMOR) humanos expresados en líneas de células transfectadas estables (HN. 9.10), derivadas de un neuroblastoma de hipocampo de ratón). En estos estudios se usan compuestos de ensayo (ligandos no marcados o fríos) a concentraciones aumentadas para desplazar el enlace específico de un ligando radiomarcado que tiene una afinidad y selectividad alta por el receptor estudiado. Se usaron como ligandos ^{3}H-U-69, 593 y ^{3}H-DAMGO en los estudios con hKOR y hMOR, respectivamente. Ambos ligandos están comercialmente disponibles (NEN-Dupont). DAMGO es un acrónimo para [D-Ala^{2}, MePhe^{4}, Gly-ol^{5}]-encefalina. La afinidad de los radioligandos se define mediante la concentración de radioligando que resulta en un enlace específico que es la mitad del máximo (K_{D}) en estudios de saturación. El K_{D} para 3H-U-69, 593 a hKOR y para 3H-DAMGO a hMOR son aproximadamente 0,3 nm y 3,0 nM, respectivamente. La afinidad del compuesto de ensayo (ligando no marcado o frío) se determina en estudios de competencia de enlaces calculando la constante de inhibición (K_{1}) de acuerdo con la siguiente fórmula:

K_{1} = \frac{IC_{50}}{1 + (F/K_{D})}

en la que

: IC_{50} = Concentración del ligando frío que inhibe el 50% de la unión específica del radioligando

: F = Concentración de radioligando libre

: K_{D} = Afinidad del radioligando determinada en estudios de saturación.

Cuando se llevaron a cabo estos ensayos bajo condiciones específicas con concentraciones relativamente bajas de receptor, la K_{1} calculada para el compuesto de ensayo es una aproximación buena de su constante de disociación que representa la concentración necesaria de ligando para ocupar la mitad (50%) de los emplazamientos de enlace. Se considera que un valor de K_{1} bajo en el intervalo nanomolar y subnanomolar identifica un ligando de afinidad alta en el campo opiáceo. Los análogos preferidos tienen una K_{1} para el KOR de aproximadamente 2 nanomolar (nM) o menor, por cuanto los análogos más preferidos tienen una K_{1} de aproximadamente 1 nM o menor. Debido a que los receptores KOR se distribuyen ampliamente por todo el cuerpo, los péptidos opiáceos del receptor kappa tendrán un efecto sustancial en la modulación de muchas acciones periféricas, y si son muy selectivos por el KOR, tendrán mínimos efectos secundarios y deberán ser fisiológicamente buenos fármacos.

Estos ensayos de enlace que emplean KOR y MOR son sencillos de realizar y se pueden llevar a cabo fácilmente con péptidos sintetizados o identificados inicialmente para determinar si dichos péptidos son KOR selectivos y tienen afinidad alta. Dichos ensayos de enlace se pueden llevar a cabo por diversas rutas bien conocidas por una persona experta en la técnica, y un ejemplo detallado de un ensayo de este tipo general se muestra en Perrin, M., y col., Endocrinology, 118:1171-1179, 1986.

La presente invención se describe de manera adicional mediante los ejemplos que siguen.

Ejemplo 1

El péptido que tiene la fórmula:

H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHEt se sintetiza de manera apropiada según se conoce bien en la técnica de síntesis de péptidos. Por ejemplo, el tripéptido: (grupo protector \alpha-amino) D-Phe-D-Phe-D-Nle (grupo protector carboxilo), se sintetiza de manera inicial usando la química de solución clásica. Por ejemplo, se puede preparar el tripéptido disolviendo H-D-Nle-Ome en DMF y añadiendo N-etilmorfolino (NEM) o similar para ajustar el pH. Esta solución se combinó a continuación con una solución de D-Phe-OH protegido con BOC en DMF que contenía NEM. A esta mezcla de reacción se añadieron un agente activante o de acoplamiento, tal como hexafluoro fosfato de benzotriazol-1-il-oxi-tris-(dimetilamino)-fosfonio (BOP) o una mezcla de N,N'-diisopropilcarbodiimida (DIC) y N-hidroxibenzotriazol (HOBt). Tras la conclusión de la reacción, se evaporó el medio hasta sequedad, y a continuación el producto se purificó de manera apropiada y se recristalizó. Se eliminó a continuación el grupo protector Boc con ácido trifluoroacético (TFA), y se redisolvió el dipéptido en DMF. Se añadió una solución de D-Phe protegido con Boc disuelto en DMF, con NEM. Se repitió la reacción usando BOP, tal como se ha descrito anteriormente, para crear el tripéptido que, tras solución se evaporó hasta sequedad, se purificó y se recristalizó. El producto que resulta es Boc-D-Phe-D-Phe-D-Nle-OCH_{3}. A continuación el metil éster se convirtió de manera adecuada en el ácido libre, disolviendo en una mezcla de dioxano o DMSO y agua y añadiendo hidróxido de sodio. Tras la conclusión de la reacción, la separación, purificación y recristalización proporcionaron el tripéptido Boc-D-Phe-D-Phe-D-Nle-OH.

El tripéptido se disolvió en DMF que contenía NEM, y se hizo reaccionar con D-Arg (Tos)-NHEt, usando de nuevo BOP como agente de acoplamiento. De manera alternativa, el metil éster del tripéptido puede estar convertido en la azida, si se desea, mediante tratamiento con una solución al 80% de hidrato de hidrazina para producir la hidrazida, que se aisló y se trató a continuación con nitrito de sodio y ácido mineral en DMF. La azida se hizo reaccionar inmediatamente con D-Arg (Tos)-NHEt en solución de DMF que contenía trietilamina. Tras la conclusión de la reacción, la mezcla se evaporó hasta sequedad, a continuación se purificó y recristalizó de manera adecuada. A continuación se desprotegieron el nitrógeno terminal y la cadena secundaria de la D-Arg, y se llevaron a cabo de nuevo la purificación y recristalización, produciendo la etilamida del tetrapéptido deseado (Péptido Nº 1).

Se consideró si el péptido era homogéneo mediante HPLC en fase reversa usando dos fases móviles diferentes: un gradiente de acetonitrilo en agua que contenía ácido trifluoroacético al 0,1% y un gradiente de acetonitrilo en tampón de fosfato de trietilamina con pH 7, y también mediante electroforesis capilar en sílice fundida usando un tampón de fosfato de pH 2,5. Se estimó que la pureza del péptido mediante estos procedimientos era > 98%. La espectrometría de masas usando ionización por electroespray y el análisis de trampa de iones mostraron un ión pseudomolecular [MH]^{+} a con m/z 609,4 que es consistente con la masa calculada de m/z 609,5 para este tetrapéptido. El análisis de fragmentación del ión pseudomolecular mostró una serie de iones con relaciones m/z consistentes con la secuencia de aminoácidos esperada para la estructura preparada.

Se llevaron a cabo los ensayos de enlace con células que expresaban el KOR y el MOR humano como se ha mencionado anteriormente en el presente documento. Se determinaron las afinidades de los péptidos de ensayo para el hKOR y hMOR, expresados de manera estable en células del neuroblastoma del hipocampo del ratón (HN. 9. 10) mediante desplazamiento competitivo de ^{3}H-U-69,593 para hKOR o de ^{3}H-DAMGO para hMOR tal como se ha descrito. Se combinaron los datos de al menos tres experimentos, y se calcularon los valores (K_{1}) de la constante de inhibición de disociación (límites de confianza del 95%) usando un programa adecuado, tal como el programa LIGAND de Munson y Rodbard, Anal. Biochem, 107:220-239, 1980. El KOR clonado enlaza con el péptido Nº 1 con una afinidad alta como se determinó mediante el desplazamiento competitivo del radioligando enlazado, y se determinó que K era aproximadamente 0,05 \pm 0,02 nM. La diferencia en la afinidad es elevada en comparación con las células de cáncer transfectadas estables de manera similar que expresaban el MOR humano en las que K es 1890 \pm 990 nM. De esta manera, el Péptido Nº 1 enlaza más fuertemente con el hKOR que con el hMOR mediante un factor de aproximadamente 38.000.

El ensayo del péptido en el ensayo de las contorsiones abdominales inducidas por ácido acético de ratón (que se describe más adelante en el presente documento) muestra una ED_{50} de aproximadamente 0,09 mg/kg y que el péptido continua presentando una antinocicepción del 50% tras 3 horas. De esta manera, se considera que el péptido Nº 1 presenta una duración muy larga de acción.

Ejemplo 2

Se sintetizaron y ensayaron los péptidos opiáceos que tienen la fórmula general: H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-Q, tal como se indica en la Tabla A según se ha descrito en el Ejemplo 1.

TABLA A

Nº	Q	K_{1}	K_{1}	Relación	Espectroscopia	WT-ED50
		KOR (nM)	MOR (nM)	\mu/k	de masas	mg/kg
					Calculado	Medido
2	NHMe	0,06	3,620	60.000	595,4	595,5	0,14
3	NHPr	0,09	1,640	18.000	623,4	623,5	0,078
4	NHBu	0,19	1,370	7.200	637,4	637,5	0,30
5	NH(Cyp)	0,18	3,520	20.000	621,4	621,5	0,04
6	Mor	0,06	2,510	42.000	651,4	651,4	0,014
7	N(Et2)	0,11	1,900	17.000	637,4	637,5	0,02
8	NH(4Pic)	0,14	3,640	26.000	672,4	672,4	0,01
9	NhHeT	0,40	1,010	2.500	625,4	625,5	0,03
10	Tmo	0,09	2,260	25.000	667,4	667,3	0,067
11	4-HyP	0,06	3,700	62.00	665,4	665,4	0,073
12	Pip	0,15	1,050	7.000	649,4	649,5	0,07
13	NH(2Tzl)	0,59	1,590	2.700	664,3	664,4	0,44
14	NHBzl	0,44	890	2.000	671,4	671,4	0,14
15	Ppz	0,16	9,10	57.000	650,4	650,5	0,017

Se consideran los péptidos 2 a 15 por presentar larga duración de bioactividad antinociceptiva.

Ejemplo 3

Se sintetizaron y ensayaron los péptidos opiáceos que tienen la fórmula general: H-Xaa_{1}-Xaa_{2}-Xaa_{3}-Xaa_{4}-Q, tal como se indica en la Tabla B, según se ha descrito en el Ejemplo 1.

TABLA B

Nº	Xaa_{1}	Xaa_{2}	Xaa_{3}	Xaa_{4}	Q
16	D_4Fpa	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NHEt
17	D-Acp	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NHEt
18	D-Ala (2Thi)	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NHEt
19	D-Tyr	D-Phe	D-Nle	D-Arg	Mor
20	D-Phe	D-Trp	D-Nle	D-Arg	Mor
21	D-Phe	D-4Npa	D-Nle	D-Arg	Mor
22	D-Phe	D-4Cpa	D-Nle	D-Arg	Mor
23	D-Phe	D-1Nal	D-Nle	D-Arg	NH (4Pic)
24	D-Phe	D-2Nal	D-Nle	D-Erg	NH (4Pic)
25	D-Phe	D-Tyr	D-Nle	D-Arg	NH (4Pic)
26	D-Phe	D-Phe	D-Leu	D-Arg	Mor
27	D-Phe	D-Phe	D-Val	D-Arg	Mor
28	D-Phe	D-Phe	D-Acp	D-Arg	Mor
29	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Lys	Mor
30	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Har	NHEt
31	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Har (Et_{2})	NHEt
32	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Orn	NHEt
33	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Amf	NH(4Pic)
34	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Dbu	NH(4Pic)
35	D-Phe	D-Phe	D-Leu	D-Orn	Ppz
36	D-Phe	D-Phe	D-Phe	D-Arg	NH(4Pic)
37	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Ily	NH(4Pic)
38	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Ior	NH(4Pic)
39	D-Phe	D-4Mpa	D-Nle	D-nArg	Mor

Se consideran los péptidos 16 a 39 por presentar larga duración de la bioactividad antinoceciptiva.

Ejemplo 4

Se sintetizaron y ensayaron los péptidos opiáceos que tienen la fórmula general: H-Xaa_{1}-Xaa_{2}-Xaa_{3}-Xaa_{4}-Q, tal como se indica en la Tabla C según se ha descrito en el Ejemplo 1.

TABLA C

	Espectroscopia de	Enlace
	masa	(relación
		\mu/k)
Nº	Xaa_{1}	Xaa_{2}	Xaa_{3}	Xaa_{4}	Q	Calculado	Medido
40	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NH (4Nbz)	716,4	716,5	3.800
41	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NH (4Abz)	686,4	686,4	12.000
42	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Arg	Ecp	721,4	721,5	27.000
43	D-CMP	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NH (4Pic)	686,4	686,5	2.500
44	D-Phe	D-Phe	D-Acp	D-Arg	NH (4Pic)	698,4	698,5	8.300
45	D-Phe	D-Phe	D-Hle	D-Arg	NH (4Pic)	686,4	686,5	11.000
46	D-Phe	D-Phe	D-CML	D-Orn	Mor	623,4	623,4	14.000
47	D-Phe	D-Phe	D-Leu	D-Lys	NH (4Pic)	644,4	644,3	30.000
48	D-Phe	D-Phe	D-Leu	D-Lys	NHPr	595,4	595,3	18.000
49	D-Phe	D-Phe	D-Leu	D-Lys	Mor	623,4	623,3	92.000
50	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Har	NH (4Pic)	686,4	686,5	9.300
51	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Har	Mor	665,4	665,5	12.000
52	D-Phe	D-Phe	D-Leu	D-Dbu	NH (4Pic)	616,4	616,3	92.000
53	D-Phe	D-Phe	D-Leu	D-Dbu	Mor	595,4	595,3	85.000

Se consideran los péptidos 40 a 53 por presentar larga duración de la bioactividad antinociceptiva.

Ejemplo 5

Se sintetizaron y ensayaron los péptidos opiáceos que tienen la fórmula general: H-D-Phe-Xaa_{2}-Xaa_{3}-Xaa_{4}-Q, tal como se indica en la Tabla D, según se ha descrito en el Ejemplo 1.

TABLA D

Nº	Xaa2	Xaa3	Xaa4	Q	K1	K1	Relación	Espectroscopia de	WT-ED_{50}
					KOR	MOR	\mu/k	masas	mg/kg
					(nM)	(nM)
								Calculado	Medido
54	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NH (3Pic)	0,39	1.220	3.100	672,4	672,5
55	D-Phe	D-Nle	D-Amf	NHEt	0,14	1.750	12.500	629,4	629,3	0,083
56	D-Phe	D-Leu	D-Orn	NHEt	0,31	4.150	13.000	567.4	567,4	0,057
57	D-Phe	D-Leu	D-Orn	Mor	0,19	5.260	28.000	609,4	609,3	0,026
58	D-Phe	D-Nle	D-Gmf	Mor	0,46	3.010	6.500	713,4	713,5	0,040

Se consideran los péptidos 54 a 58 por presentar larga duración de la bioactividad antinoceciptiva.

Ejemplo 6

Se sintetizaron y ensayaron loe péptidos opiáceos que tienen la fórmula general: H-Xaa_{1}-Xaa_{2}-Xaa_{3}-D-Arg-Q, tal como se indica en la Tabla E, según se describe en el Ejemplo 1

TABLA E

Nº	Xaa_{2}	Xaa_{3}	Xaa_{4}	Q	K1	K1	Relación	Espectroscopia de	WT-ED_{50}
					KOR	MOR	\mu/k	masas	mg/kg
					(nM)	(nM)
								Calculado	Medido
59	D-Ala	D-4Cpa	D-Leu	Mor	0,25	3.360	13.000	691,3	691,1	0,052
	(2Thi)
60	D-Ala	D-3,4Cp	D-Leu	NH	0,4	769	1.900	746,3	746,3	0,083
	(2Thi)	a		(4Pic)
61	D-Ala	D-3,4Cp	D-Leu	Mor	0,15	1.560	10.400	725,3	725,4	0,019
	(2Thi)	a
62	D-Phe	D-Phe	D-Nle	OxP	0,11	2970	27.000	663,4	663,5	0,18
63	D-Ala	D-2Nal	D-Leu	Mor	0,2	3,170	16.000	707,4	707,4	0,04
	(2Thi)
64	D-Phe	D-Phe	D-Nle	Dmp	0,21	7.680	37.000	678,4	678,5	0,032
65	D-4Fpa	D-4Cpa	D-Leu	Mor	0,17	1.900	11.000	703,4	703,4	0,15

Se consideran los péptidos 59 a 65 por presentar larga duración de la bioactividad antinociceptiva.

Ejemplo 7

Se sintetizaron y ensayaron los péptidos opiáceos que tienen la fórmula general: H-Xaa_{1}-Xaa_{2}-Xaa_{3}-Xaa_{4}-Q tal como se indica en la tabla F, según se ha descrito en el Ejemplo 1.

TABLA F

Nº	Xaa_{1}	Xaa_{2}	Xaa_{3}	Xaa_{4}	Q
66	D-4Cpa	D-4Cpa	D-Leu	D-Lys	NHPr
67	D-4Fpa	D-2Nal	D-Met	D-Amf	NHBu
68	D-4Cpa	D-Trp	D-Acp	D-Amf	Pip
69	D-Phe	D-Phe	D-Val	D-Orn	Ecp
70	D-Ala (2Thi)	D-4Fpa	D-Nle	D-Dbu	NH (4Abz))
71	D-Acp	D-Phe	D-Leu	D-Har	4-Hyp
72	D-CMP	D-Trp	D-Phe	D-Arg (Et2)	NHBzl
73	D-4Cpa	D-3,4Cpa	D-Met	D-Orn	Tmo
74	D-Acp	D-1Nal	D-Nle	D-Har(Et2)	NH (3Pic)
75	D-4Fpa	D-4Cpa	D-Leu	D-Gmf	NhhEt

TABLA F (continuación)

Nº	Xaa_{1}	Xaa_{2}	Xaa_{3}	Xaa_{4}	Q
76	D-CMP	D-Tyr	D-Acp	D-Dbu	NHlpr
77	D-Phe	D-2Nal	D-Acp	D-Ily	NHPn
78	D-Tic	D-4Fpa	D-Phe	D-Lys	NH (aPic)
79	D-4Npa	D-Trp	D-CML	D-Ior	N (Et)2
80	D-CMP	D-Phe	D-Met	D-Ior	Mor
81	D-Ala (3Thi)	D-1Nal	D-Nle	D-Lys	NH (2Tzl)
82	D-Phe	D-4NPa	D-Nle	D-Arg	NHCyp
83	D-Acp	D-2Nal	D-Hle	D-Har	Nhcyb
84	D-Tyr	D-2Nal	D-Phe	D-Lys	Ppz
85	D-Phe	D-1Nal	D-Met	D-Ior	Oxp
86	D-Phe	D-Trp	D-Met	D-Arg	Dmp
87	D-Phe	D-Trp	D-Nle	D-Orn	Mor

Se considera que los péptidos opiáceos de la Tabla F muestra selectividad alta por el KOR, en comparación con el MOR, y presentan bioactividad antinoceciptiva in vivo.

Ejemplo 8

Se sintetizaron y ensayaron los péptidos opiáceos que tienen la fórmula general H-Xaa_{1}-Xaa_{2}-Xaa_{3}-Xaa_{4}-Q tal como se indica en la Tabla G, según se describe en el Ejemplo 1.

TABLA G

	Relación	WT-ED_{50}
	\mu/k	mg/kg
Nº	Xaa_{1}	Xaa_{2}	Xaa_{3}	Xaa_{4}	Q
88	D-4Fpa	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NH (4Pic)	16.000	0,04
89	D-3Fpa	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NH (4Pic)	24.000	0,11
90	D-2Fpa	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NH (4Pic)	38.000	0,14
91	D-4Fpa	D-Phe	D-Nle	D-Har	NH (4Pic)
92	D-4Cpa	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NH (4Pic)	2.900
93	D-4Fpa	D-4Npa	D-Nle	D-Arg	NH (4Pic)	1.200
94	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Arg	Ely	70.000	0,02
95	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-nArg	Nh (4Pic)	16.000	0,08
96	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Arg	Pcp	12.000	0,098
97	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NH (4Acx)	6.400
98	D-Phe	D-Phe	D-Leu	D-Orn	NH (Acb)	24.000	0,014

TABLA G (continuación)

	Relación	WT-ED_{50}
	\mu/k	mg/kg
Nº	Xaa_{1}	Xaa_{2}	Xaa_{3}	Xaa_{4}	Q
99	D-Ala (2Thi)	D-3,4Cpa	D-Leu	D-Orn	Mor	19.000	0.083
100	D-Ala (2Thi)	D-2Nal	D-Leu	D-Orn	Mor	31.000	0,079
101	D-Ala (2Thi)	D-4Cpa	D-Leu	D-Orn	Mor	38.000	0,112
102	D-Ala (2Thi)	D-4Cpa	D-Leu	D-Orn	NH (4Pic)	24.000	0,032
103	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NH (Aao)	140.000	0,101
104	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NH(Aoo)	6.300
105	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NH (Hoh)	66.000	0,015
106	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NH (Ahx)	10.000	0,055
107	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NH (Ghx)	22.000	0,032
108	D-Phe	D-Phe	D-Nle	D-Arg	NH (Gao)	67.000	0,034

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Se consideran los péptidos 88 a 108 por presentar larga duración de la actividad antinociceptiva.

Ejemplo 9

Los péptidos seleccionados que se identifican en las Tablas A-G se han sometido específicamente de manera adicional a los ensayos in vivo para la determinación de la duración de la acción de sus propiedades opiáceas, y se informa de los resultados en la Tabla H más adelante en el presente documento. Los números de péptidos corresponden a los indicados en las tablas anteriores, y las figuras con respecto a la relación \mu/k solo se incluyen a efectos de referencia. Se llevó a cabo el ensayo in vivo usando un ensayo de contorsiones abdominales en ratón (WT) que es adecuado para determinar la longitud de la duración de la actividad biológica antinociceptiva. Este ensayo se describe con detalle en un artículo de G. A. Bentley y col., Br. J. Pharmac., 73:352-332, 1981, y emplea machos conscientes de ratones ICR, que se adquieren de Harlan, y que pesan entre 20 y 30 gramos. Se hizo ayunar a los ratones durante 12 a 16 horas antes del comienzo del ensayo. El comportamiento nociceptivo, es decir, las contorsiones abdominales, que se va a monitorizar se induce mediante administración intraperitoneal (i.p.) de ácido acético diluido. Se usaron 10 mililitros de ácido acético acuoso al 0,6% por kg de peso corporal. Se puntuaron las contorsiones abdominales durante los 15 minutos siguientes a la administración de ácido acético. En una primera etapa, se ensayaron los compuestos con un incremento de 3 ó 4 en la dosis administrada por vía intravenosa, y a un único tiempo de pretratamiento (-5 minutos antes de la inyección de ácido acético). Se usó esta etapa para determinar la potencia (WT-ED_{50}) así como la dosis efectiva submáxima (aproximadamente 80-90% de antinocicepción). En una segunda etapa, se administró esta dosis efectiva submáxima de cada péptido específico a diversos tiempos de pretratamiento (es decir, -5 minutos, -60 minutos, -120 minutos y -180 minutos) antes de la administración del ácido acético con el fin de determinar la duración de la acción. Durante todo el ensayo se usó un grupo control de ratones al que se administró sólo el vehículo sin el péptido candidato. Se contaron el número de contorsiones abdominales durante un período de 15 minutos, comenzando a partir del tiempo de inyección del ácido acético, y la bioactividad, es decir, la antinocicepción, se expresó en forma de porcentaje, y se calculó como sigue:

100 \ x \ \frac{\text{(contorsiones en el grupo control} - \text{contorsiones en el grupo tratado})}{\text{contorsiones en el grupo control}}

Debido a que cada dosis submáxima muy posiblemente variará de forma que no se pueda comparar de manera directa, se normalizaron los resultados matemáticamente, como se conoce en esta técnica, para proporcionar los valores que se muestran en la Tabla H. En la Tabla H, la actividad antinociceptiva remanente tras 1, 2, y 3 h se expresó en forma de porcentaje de la actividad encontrada a -5 min. Valores mayores del 100% indican antinocicepción mayor que al comienzo del experimento. Se cree que el péptido opiáceo deberá ser efectivo en la reducción de las contorsiones abdominales en al menos aproximadamente un 25% para un tiempo de 1 hora para considerar que tiene una larga duración de la acción in vivo.

Además de usar este ensayo para determinar la duración de la actividad antinociceptiva, se usó también para medir la biopotencia (a corto plazo) in vivo del péptido. Se proporciona este valor en la tabla bajo el encabezamiento WT-ED_{50} en miligramos por kg de peso corporal. El valor es una medida de la dosificación necesaria para reducir en un 50% el número de contorsiones abdominales que está siendo ensayado (en comparación con un ratón control) durante un período de 15 minutos.

TABLA H

Péptido Nº	Relación \mu/k	WT-ED_{50}	% Antinocicepción
		mg/kg
			1h	2 h	3h
1	38.000	0,09	83,9	75,5	61,3
2	60.000	0,14	70,5	29,8
3	18.000	0,0078	48,6	39,8
4	7.200	0,3	49,3
5	20.000	0,04	66,0	34,5
6	42.000	0,014	105,7	52,7
7	17.000	0,02	67,5	36,8
8	26.000	0,01	66,9	45,1
9	2.500	0,03	72,5	39,5
10	25.000	0,07	81,6	47,5
11	62.000	0,07	61,8	36,9
12	7.000	0,07	60,5	53,6
13	2.700	0,44	30,7
14	2.000	0,14	36,0
15	57.000	0,017	60,0
42	27.000	0,06	45,3	29,4
43	2.500	0,2
44	8.300	0,2
46	14.000	0,083
47	30.000	0,09
48	18.000	0,065	53,7
49	92.000	0,02	65,5	69,2	38,3
50	9.300	0,077	35,6
51	12.000	0,018	32,5
52	92.000	0,019	30,6
53	85.000	0,026	47,7	32,6
56	13.000	0,057	77,4	59,3

TABLA H (continuación)

Péptido Nº	Relación \mu/k	WT-ED_{50}	% Antinocicepción
		mg/kg
			1h	2 h	3h
57	28.000	0,026	100	67,2	58,2
58	6.500	0,04	93,4	45,7
59	13.000	0,052	83,3	59,7
60	1.900	0,083	83,8	35,5
61	10.400	0,019	57,5	60,3
62	27.000	0,18	38
63	16.000	0,04	51,8	36,1
64	37.000	0,032	74,7
65	11.000	0,031	39,5
88	16.000	0,04	56,6	28,9
94	70.000	0,02	58,8
95	16.000	0,08	45,8
96	12.000	0,098	56,7
98	24.000	0,014	85,5	40,8
99	19.00	0,083	50,3	69,3
100	31.000	0,079	82,8	27,6
101	38.000	0,112	89,9
102	24.000	0,032	63,9
103	140.000	0,101	37,1
105	66.000	0,015
106	0,055	46,7
107	22.000	0,032	29,0
108	67.000	0,034	84,3	32,9

Los péptidos opiáceos son útiles como analgésicos y para otras aplicaciones farmacológicas para tratar patologías asociadas con el sistema KOR. Presentan ventajas sobre los calmantes del agonista \mu, por ejemplo, la morfina, que tiene efectos no deseables, tales como estreñimiento, depresión respiratoria y comezón. Es muy deseable que estos péptidos opiáceos no atraviesen de manera significativa la barrera hematoencefálica. Se evaluó la seguridad de estos compuestos con respecto a la penetración en el cerebro comparando con su potencia para obtener efectos periféricos frente a su potencia para obtener efectos centrales. Se midieron los efectos periféricos usando el ensayo de contorsiones abdominales en el ratón (WT) descrito anteriormente. Se midieron los efectos centrales debidos a la acción de los receptores kappa localizados en el cerebro usando el ensayo del movimiento rápido de la cola (TF).

El ensayo del movimiento rápido de la cola es un ensayo de dolor somático agudo, diseñado para evaluar la potencia y duración de la acción de los analgésicos que actúan de manera central. La nocicepción inducida por la inmersión de la cola en agua caliente (52ºC) da como resultado una retirada rápida de la cola, también conocida como movimiento rápido de la cola. Se espera que los compuestos analgésicos que actúan de manera central aumenten de manera relacionada con la dosis la latencia del movimiento rápido de la cola. El ensayo se describe en Vanderah, T. W. Y col., J. Pharm. Exper. Therapeutics, 262:190-197, 1992.

Se evaluó la seguridad mediante el uso del Índice de Penetración en el Cerebro (BPI), que se define como:

BPI = \frac{TF - ED_{50}}{WT - ED_{50}}

en el que los valores de ED_{50} son las dosis que producen la mitad del efecto máximo en el ensayo de las contorsiones abdominales del ratón (WT-ED_{50}) y en el ensayo del movimiento rápido de la cola (TF-ED_{50}), respectivamente, cuando se administran por vía intravenosa. Un valor de BPI alto señala una penetración baja en el cerebro e indica que el compuesto es adecuado por presentar un margen amplio de seguridad (ausencia de efectos secundarios en el cerebro) cuando se usó para los objetivos descritos en esta aplicación. Los péptidos opiáceos preferidos tienen valores de BPI iguales o mayores que 100 con péptidos opiáceos más preferidos que tienen un BPI mayor que 300. Los agonistas kappa no peptídicos sistémicos (por ejemplo, Enadolina y U-69,593) tienen valores de BPI menores de 5, que indican que se está produciendo una penetración significativa en el cerebro como se evidenció también por los efectos secundarios (diuresis, disforia, y sedación) que produjeron cuando se usaron clínicamente. En la Tabla I se muestran los valores de BPI para algunos péptidos opiáceos significativos que siguen:

TABLA I

Péptido Nº	WT-ED_{50} mg/kg	TF-ED_{50} mg/kg	BPI
1	0,09	9,7	108
3	0,078	13,82	177
5	0,04	4,4	110
6	0,014	6,4	457
7	0,020	3,1	155
8	0,01	9,84	984
15	0,017	2,86	168
49	0,020	1,62	81
53	0,026	2,1	81
57	0,026	5,6	215
58	0,034	4,34	128
61	0,019	> 10	> 526
88	0,040	12	300
96	0,098	> 10	> 102
98	0,014	3,5	250
99	0,083	16	193
102	0,032	> 10	> 313
105	0,015	12,6	840

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Debido a que estos péptidos enlazan fuertemente con el KOR, son útiles también en ensayos in vitro para los receptores de estudio y para determinar qué receptores pueden estar presentes en una muestra de tejido concreto. De esta manera, son útiles para la diagnosis a este respecto y también potencialmente para la diagnosis in vivo.

De manera general, se pueden usar estos péptidos opiáceos para conseguir la antinocicepción en el tratamiento del dolor visceral y también para tratar la artritis reumatoide. Son particularmente útiles en el tratamiento de los síntomas abdominales postquirúrgicos tales como trastornos digestivos y dolor. Se consideran también que son efectivos para tratar el IBS, inestabilidad de la vejiga, incontinencia, y otras indicaciones en las que las inflamaciones locales dan como resultado estados de dolor en el intestino y otras vísceras, por ejemplo, enfermedad inflamatoria del intestino (IBD) y dismenorrea. La capacidad de los péptidos opiáceos para disminuir la respuesta inmune puede ser ventajosa para combatir el IBD y otras indicaciones, tales como enfermedades autoinmunes. Se puede emplear la administración de péptidos para producir actividad analgésica local con respecto a las dolencias inflamatorias agudas y crónicas. Se pueden usar para tratar síntomas que tiene el íleon digestivo tales como hinchazón, náusea o inhibiciones del tránsito intestinal asociadas con dolor, por ejemplo, obstrucción del intestino producida por contracciones espásticas. Los péptidos opiáceos son también efectivos en la producción de analgesia periférica y pueden ser el objetivo para eliminar el dolor postoperatorio, así como el dolor crónico, tal que esté causado por inflamación de los tejidos gastrointestinal y visceral, y también para dar relieve durante la deshabituación por la adición a un fármaco.

Los compuestos de la invención se pueden administrar en forma de sales no tóxicas, farmacéuticamente aceptables, tales como sales de adición de ácido, así como se conoce en esta técnica. Ilustrativas de dichas sales de adición de ácido son clorhidrato, bromhidrato, sulfato, fosfato, nitrato, oxalato, fumarato, gluconato, tanato, pamoato, maleato, acetato, citrato, benzoato, succinato, alginato, malato, ascorbato, tartrato y similares. Si se va a administrar el ingrediente activo en forma de comprimido, el comprimido puede contener un diluyente no tóxico, farmacéuticamente aceptable que incluye un ligante, tal como tragacanto, almidón de maíz o gelatina. Se puede efectuar también la administración intravenosa en solución salina isotónica, tampón fosfato, y soluciones de manitol o glucosa.

La composiciones farmacéuticas contendrán de manera usual una cantidad de péptido en conjunción con un vehículo o diluyente convencional, farmacéuticamente aceptable. De manera general, la composición contendrá una cantidad de anticonceptivo, es decir, una cantidad que sea efectiva para bloquear el dolor Normalmente, la dosificación estará entre aproximadamente 1 microgramo y aproximadamente 10 miligramos del péptido por kilogramo de peso corporal del huésped cuando se administra por vía intravenosa. Las composiciones se pueden administrar tal como se necesiten; por ejemplo, se pueden administrar de manera repetida a intervalos de 3-6 horas. La naturaleza de estos compuestos puede permitir de manera posible una administración oral efectiva; sin embargo, las dosificaciones orales pueden ser mayores. Si se desea liberar el péptido opiáceo durante períodos prolongados de tiempo, por ejemplo, durante períodos de una semana o más a partir de una administración única, liberación lenta, se pueden utilizar formas de dosificación en depósito o implante. Por ejemplo, una formulación para inyección en depósito de liberación lenta, adecuada puede contener el péptido o una sal dispersada o encapsulada del mismo en un polímero no tóxico o no antigénico de degradación lenta, tal como un polímero de ácido poliláctico/ácido poliglicólico, tal como se describe en la Patente de los Estados Unidos Nº 3.773.919. se conoce también que la administración mediante liberación lenta se puede llevar a cabo mediante un implante silástico.

Estos compuestos se pueden administrar a mamíferos, incluyendo seres humanos, por vía intravenosa, subcutánea, intramuscular, percutánea, intranasal, intrapulmonar, oral, tópica, intrarectal, intravaginal e mediante dosificación espinal para conseguir la antinocicepción, tal como la inhibición del tránsito gastrointestinal inverso inducido mediante irritación peritoneal. Ellos se puede usar para aliviar el dolor postoperatorio. Las dosificaciones efectivas variarán con la forma de administración y las especies concretas de mamíferos que estén siendo tratadas. Un ejemplo de una forma de dosificación típica es una solución acuosa bacteriostática a un pH de aproximadamente 3 a 8, por ejemplo, aproximadamente 6, que contiene el péptido, cuya solución se administra de manera continua por vía parenteral para proporcionar una dosis en el intervalo de aproximadamente 0,3 \mug a 3 mg/kg de peso corporal por día. Se consideran estos compuestos por ser bien tolerados in vivo, y se consideran por ser particularmente muy adecuados para la administración mediante inyección subcutánea en una solución acuosa bacteriostática o similar.

Claims

1. Una amida de péptido opiáceo sintético o una sal de la misma farmacéuticamente aceptable con una afinidad por el receptor opiáceo kappa que sea al menos 1.000 veces su afinidad por el receptor opiáceo mu y que presente larga duración de la acción cuando se administra in vivo, dicho péptido tiene la fórmula:

H-Xaa_{1}-Xaa_{2}-Xaa_{3}-Xaa_{4}-Q

o es un dímero del mismo enlazado mediante un enlazante de diamino tal como 1,6-diamino-hexano, 1,5-diamino-3-oxapentano y 1,8-diamino-3,6-dioxaoctano

en la que Xaa_{1} es (A) D-Phe, (C^{\alpha})Me) D-Phe, D-Tyr, D-Tic o D-Ala (ciclopentilo o tienilo), siendo A, H, NO_{2}, F, Cl o CH_{3}; Xaa_{2} es (A') D-Phe, D-1Nal, D-2Nal, D-Tyr oD-Trp, siendo A', A o 3,4Cl_{2}, 4Br o 2,4Cl_{2}; Xaa_{3} es D-Nle, (B) D-Leu, D-Hle, D-Met, D-Val, D-Phe o D-Ala (ciclopentilo) siendo B, H o C^{\alpha}Me; Xaa_{4} es D-Arg, D-Har, D-nArg, D-Lys, D-Ily, D-Arg (Et_{2}), D-Har (Et_{2}), D-Amf, D-Gmf, D-Dbu, D-Orn, D-Ior, D-Lys (Bu) o D-Lys (Et_{2}); y Q es NR_{1}R_{2}, morfolinilo, tiomorfolinilo, (C) piperidinilo, piperazinilo, 4-mono- o 4,4-di-piperazinilo sustituido, o \varepsilon-lisilo, siendo R_{1} alquilo C_{1} a C_{6}, alquilo sustituido C_{1} a C_{6}, bencilo, bencilo sustituido, aminociclohexilo, 2-tiazolilo, 2-picolilo, 3-picolilo, 4-picolilo, un grupo \omega-(acilamino)-polimetileno o un poli (oxietileno), y siendo R_{2}, H o alquilo C_{1} a C_{6}; y siendo C, H, 4-hidroxilo o 4-oxo, en la que Tic es el ácido 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina-3-carboxílico, Amf es (NH_{2}CH_{2}) Phe, Gmf es Amf (amidino) que representa Phe donde la posición 4 está sustituida con CH_{2}NHC (NH) NH_{2}, Dbu es ácido alfa, gamma-diamino butírico, e Ior es isopropilo Orn en el que el grupo amino de la cadena secundaria está alquilatado con isopropilo, o en el que el nitrógeno terminal del mencionado péptido está permetilado.

2. El péptido sintético de acuerdo con la reivindicación 1 en el que Xaa_{2} es D-Phe, Xaa_{3} es D-Leu o D-Nle, Xaa_{4} es D-Arg o D-Orn, Q es NHR_{1} y R_{1} es etilo, propilo, butilo, ciclopropilo o ciclobutilo.

3. El péptido sintético de acuerdo con la reivindicación 1 en el que Q es morfolinilo o tiomorfolinilo o NH (4-picolilo).

4. El péptido sintético de acuerdo con la reivindicación 1 en el que Q es N (Et)_{2}, NH (Aeb), Ppz, Pcp o NHR_{1}, siendo R_{1} Aao, Aoo, Hoh, Ghx o Gao, por lo cual Aeb es 4-(2-amino-2-carboxietil) bencilo, Ppz es piperazinilo, Pcp es 4-fenilcarbamoilpiperazin-1-ilo, Aao es 8-(acetilamino)-3,6-dioxaoct-1-ilo, Aoo es 8-amino-3,6-dioxaoct-1-ilo, Hoh es 6-(L-hidrorotilamino)-hex-1-ilo, Ghx es 6-(D-gluconilamino)-hexilo, y Gao es 6-(D-gluconilamino)-3,6-dioxaoct-1-ilo.

5. El péptido sintético de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4 en el que Xaa_{1} es D-Phe, D-Ala (2-tienilo) o D-4FPa.

6. El péptido sintético de acuerdo con la reivindicación 1 en el que o bien Xaa_{2} es D-4Cpa, o D-3,4Cpa o Xaa_{4} es D-Gmf.

7. El péptido opiáceo sintético de acuerdo con la reivindicación 1 que tiene un WT-ED_{50} de aproximadamente 0,5 mg/kg o menor, cuyo péptido tiene la fórmula:

H-Xaa_{1}-Xaa_{2}-Xaa_{3}-Xaa_{4}-Q

en la que Xaa_{1} es D-Phe (no sustituido o sustituido por C^{\alpha}Me, 2F, 4F o 4Cl) o D-Ala (ciclopentilo o tienilo); Xaa_{2} es (A') D-Phe, D-1Nal, D-2Nal o D-Trp, siendo A', H, 4F, 4Cl, 4NO_{2} o 3,4Cl_{2}; Xaa_{3} es D-Nle, D-Leu, D-CML, D-Met o D-Acp; Xaa_{4} es D-Arg, D-Arg (Et_{2}), D-Lys, D-Ily, D-Har, D-Har (Et_{2}), D-nArg, D-Orn, D-Ior, D-Dbu, D-Amf, y

D-Gmf; y Q es NR_{1}R_{2}, Mor, Tmo, Pip, 4-Hyp, Oxp, Pcp o Ppz, siendo R_{1}, Me, Et, Pr, Bu, hEt, Aeb, Cyp, Bzl, Hoh o 4-picolilo, y siendo R_{2} H o Et.

8. El péptido opiáceo sintético de acuerdo con la reivindicación 1 que tiene una ED_{50} de aproximadamente 0,5 mg/kg o menor, cuyo péptido tiene la fórmula:

H-Xaa_{1}-Xaa_{2}-Xaa_{3}-Xaa_{4}-Q

en la que Xaa_{1} es D-Phe, D-4Fpa, D-2Fpa, D-Acp o D-Ala (2Thi); Xaa_{2} es (A) D-Phe, D-1Nal, D-2Nal o D-Trp, siendo A, 4F o 4Cl; Xaa_{3} es D-Nle, D-Met o D-Leu; Xaa_{4} es D-Arg, D-Har, D-nArg, D-Lys, D-Orn o D-Gmf; y Q es NHR_{1}, Mor, Tmo, Pip o Ppz, siendo R_{1}, Et, Pr o 4Pic.

9. El péptido opiáceo sintético de acuerdo con la reivindicación 1 que tiene una ED_{50} de aproximadamente 0,5 mg/kg o menor, cuyo péptido tiene la fórmula:

H-Xaa_{1}-Xaa_{2}-Xaa_{3}-Xaa_{4}-Q

en la que Xaa_{1} es D-Phe, D-4Fpa, D-2Fpa o D-Ala (2 Thi); Xaa_{2} es (A) D-Phe, D-1Nal, D-2Nal, o D-Trp, siendo A, 3,4Cl_{2} o 4Cl; Xaa_{3} es D-Nle o D-Leu; Xaa_{4} es D-Arg, D-Orn o D-Gmf; y Q es NHR_{1}, Mor, Tmo, Pcp, Ppz o N (Et)2, siendo R_{1} Et, Pr, Cyp, 4Pic, Aeb o Hoh.

10. El péptido sintético de acuerdo con la reivindicación 10 que tiene una de las siguientes fórmulas:

H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHEt,

H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-morfolinilo,

H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-4-picolilo,

H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHPr,

H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-tiomorfolinilo,

H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-Net_{2},

H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHMe,

H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Orn-morfolinilo,

H-D-4Fpa-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-4-picolilo,

H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-ciclopropilo,

H-D-Ala (2Thi)-D-3,4Cpa-D-Leu-D-Arg-morfolinilo,

H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Gmf-morfolinilo,

H-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Orn-NH (Aeb),

H-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-morfolinilo,

H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-piperazinilo, y

H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH (Hoh).

11. El péptido sintético de acuerdo con la reivindicación 10 que tiene la siguiente fórmula:

H-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Orn-morfolinilo.

12. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad antinociceptiva de un péptido sintético de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-10, y un vehículo líquido o sólido farmacéuticamente aceptable para la misma.