CN101454017A - 提升哺乳动物催乳素的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了提升并稳定哺乳动物体内的催乳素水平的方法，所述方法包括治疗与血清催乳素水平下降相关的疾病和病症的方法。本发明还提供了使用作为外周选择性κ阿片样受体激动剂的某些合成四肽酰胺来提升或稳定血清催乳素水平的方法。

Description

提升哺乳动物催乳素的方法
相关申请的交叉引用
本申请要求于2006年5月26日递交的发明名称为“METHOD FORELEVATING PROLACTIN IN MAMMALS(提升哺乳动物催乳素的方法)”的系列号为60/808,677的美国临时申请的优先权，并在此将其以参考的方式引入。
技术领域
本发明涉及使用外周选择性κ阿片样受体激动剂来提升血清催乳素的水平以使对此提升有需求的哺乳动物受益。
背景技术
催乳素是合成于脑垂体泌乳细胞(pituitary lactotroph)的具有198个氨基酸的多肽，脑垂体泌乳细胞大概占腺垂体细胞的20％(对于综述，见Harrison’s Principles of Internal Medicine，第16版，第2084页；以及Freeman ME等，Prolactin：Structure，function，and regulation of secretion.Physiol.Rev.80：1523～1631，2000)。在本领域中，催乳素也被称为催乳激素、催乳剂、Lactoropin、LMTH、LTH、黄体生乳素、促黄体激素、泌乳素和激乳腺素，但这些名字现在已经不再使用。催乳素的研究最透彻的作用是对乳腺的作用，包括乳腺的生长和发育(乳腺生长发育，mammogenesis)、乳汁合成(乳汁分泌形成，lactogenesis)和乳汁分泌(生乳，galactopoiesis)的维持。泌乳的内分泌控制涉及到多个复杂的生理机制，这是由于乳腺发育、乳汁分泌形成、生乳和乳动力学(galatokinesis)对正常的泌乳都是必要的。催乳素是乳汁分泌最关键的激素，并且被认为是唯一最重要的产乳激素。催产素、5-羟色胺、阿片样肽、组胺、P物质和其他的生理物质在下丘脑水平通过自分泌和旁分泌的机制调节催乳素的释放，而雌激素和孕酮可以在下丘脑和腺垂体的水平发挥作用。人胎盘催乳素和生长因子在怀孕期间对成功的乳汁分泌起着至关重要的作用，其中催产素行使关键乳动力学(galatokinetic)激素的功能。
成人正常血清催乳素水平是10ng/ml～25ng/ml(女性)和10ng/ml～20ng/ml(男性)。催乳素在其独特的24小时模式中以阵发性方式分泌。循环中的催乳素水平在中午最低，在下午的时候会有适度的增加。催乳素水平在睡眠开始后不久开始升高，在凌晨的时候达到峰值。血清催乳素水平在怀孕期间显著上升(150ng/ml～200ng/ml)，并在分娩两周内迅速下降。母乳喂养通常会使催乳素水平保持高水平，这是因为吮吸会导致神经反射的激活从而引发催乳素的释放。然而，催乳素释放的不充分激活将会妨碍母乳喂养，并具有各种的有潜在危害的生理和心理后果，例如母婴关系契合(mother infant bonding)的失败以及不能把母亲具有保护性的抗体传递给婴儿(American Academy of Pediatrics，Section onBreastfeeding.Breastfeeding and the use of human milk.Pediatrics 115：496-506，2005)。美国儿科学会(American Academy of Pediatrics)目前最新的有关母乳喂养的指导中提到“使用改进的流行病学方法和现代实验室技术的大量研究证明，母乳喂养和使用人乳喂养婴儿对婴儿、母亲、家庭和社会具有多样且令人关注的优点。这些优点包括在健康、营养、免疫、发育、心理、社会、经济和环境方面的益处”。由于母乳喂养具有这些已得到充分证明的益处，泌乳不足现在被视为一个重要的医学问题。
很多危险因素会引起泌乳不足，这些因素包括：
(i)泌乳终止后重新开始泌乳，例如照顾生病的婴儿(Thompson N，Relactation in a newborn intensive care setting.J.Hum.Lact.12：233-235，1996)
(ii)乳房的物理畸形(Neifert MR等，Lactation failure due to insufficientglandular development of the breast.Pediatrics 76：823-828，1985)
(iii)怀孕期间未出现乳房增大(Moon J等，Breast engorgement：contributing variables and variables amenable to nursing intervention.J.Obstet.Gynecol.Neonatal Nurs.18：309-315，1989)
(iv)有过乳房手术的历史(Widdice L，The effects of breast reductionand breast augmentation surgery on lactation：An annotatedbibliography.J.Hum.Lact.9：161-163，1993)
(v)第一次分娩婴儿(Dewey KG等，Risk factors for suboptimal infantbreastfeeding behavior，delayed onset of lactation，and excess neonatal weightloss Pediatrics 112：607-619，2003)
(vi)婴儿早产(Ehrenkranz RA等，Metoclopramide effect on falteringmilk production by mothers of premature infants.Pediatrics；78：614-620，1986；Feher SDK等，Increasing breast milk production for premature infantswith a relaxation/imagery audiotape.Fediatrics 83：57-60，1989)
(vii)分娩多于一个的婴儿(Leonard，L.Breastfeeding higher ordermultiples：Enhancing support during the postpartum hospitalization period.J.Hum.Lact.18：386-392，2002)
(viii)收养婴儿(Cheales Siebenaler，N.Induced lactation in an adoptivemother.J.Hum.Lact.15：41-43，1999)
(ix)胎盘碎片残留(Neifert，MR等，Failure of lactogenesis associatedwith placental retention.Am.J.Obstet.Gynecol.140：477-478，1981)
(x)进行激素性节育(Tankeyoon M等，Effects of hormonalcontraceptives on milk volume and infant growth。世界卫生组织的特别研究项目，Development and Research Training in Human Reproduction Taskforce on oral contraceptives.Contraception 30：505-522，1984)
(xi)使用特定的OTC解充血剂(Aljazaf K等，Pseudoephedrine：effectson milk production in women and estimation of infant exposure viabreastmilk.Br.J.Clin.Pharmacol.56：18-24，2003)
(xii)吸烟(Andersen AN等，Suppressed prolactin but normalneurophysin levels in cigarette smoking breast feeding women.Clin.Endocrinol.(Oxf.)17：363-368，1982)
(xiii)孕前超重和肥胖(Hilson JA等，High prepregnant body mass indexis associated with poor lactation outcomes among white，rural womenindependent of psychosocial and demographic correlates.J.Hum.Lact.20：18-29，2004；Rasmussen KM等，Prepregnant overweight and obesitydiminish the prolactin response to suckling in the first week postpartum.Pediatrics 113：465-471，2004)
(xiv)剖腹产(Chapma DJ等，Identification of risk factors for delayedonset of lactation.J.Am.Diet.Assoc.99：450-454，1999)
(xv)母亲胰岛素依赖型糖尿病(Neubauer，SH等，Delayed lactogenesisin women with insulin dependent diabetes mellitus.Am.J.Clin.Nutr.58：54-60，1993)
(xvi)治疗产痛的药物(Riordan J等，The effect of labor pain reliefmedication on neonatal suckling and breastfeeding duration.J.Hum.Lact.16：7-12，2000；Ransjo Arvidson AB等，Maternal analgesia during labordisturbs newborn behavior：effects on breastfeeding，temperature，and crying.Birth 28：5-12；2001)
(xvii)紧张(Chen DC等，Stress during labor and delivery and earlylactation performance.Am.J.Clin.Nutr.68：335-344，1998；Dewey K.Maternal and fetal stress are associated with impaired lactogenesis in humans.J.Nutr.131：3012S-3015S，2001)
人类婴儿哺乳不足的表现包括：(1)只靠母乳喂养的婴儿的体重增加不足，即使婴儿看起来似乎已经吃饱；(2)婴儿较少含乳；(3)婴儿吮吸不协调；(4)减退反射不协调；(5)饥饿迹象，表现为喂后很快啼哭。
人类泌乳失败是一个具有严重情感后果的常见临床事件。泌乳失败被视为一个严重问题，占所有泌乳行为的5％到10％。在许多情况下，这导致提前使用补给品或彻底断奶。但这被认为是一种较差的育儿实践，而且对某些婴儿是不利的，其患上胃炎和其他疾病的风险会增加。许多受此影响的妇女因为感觉生理机能不足而变得异常的苦恼，也因此影响了父母与孩子之间的关系。如果母亲拒绝补给品，婴儿无法健康发育并不罕见。
因此，能促进人类泌乳的药物是人们长期以来所需要的，例如当婴儿出生后出现泌乳不足时。对于动物育种家来说，他们的牲畜，例如母马在下仔后不能产生和分泌乳汁可能会是一个严重问题。如果种畜不能正常泌乳，它们的后代就必须要使用奶瓶喂养，这不仅耗时、耗力而且代价高；因此需要一种可以安全有效地促进种畜泌乳的药物。对于像奶牛、山羊这些商业产奶动物，存在有效安全地使它们的奶产量增加至高于正常水平的经济需求。
以上提到了与泌乳不足相关的导致催乳素水平降低的许多因素。这些因素的某些因素(例如吸烟)也与非泌乳对象中催乳素水平降低有关(Fuxe K等，Neuroendocrine actions of nicotine and of exposure to cigarettesmoke：medical implications.psychoneuroendocrinology 14：19-41，1989)。其他导致低催乳素水平(低催乳素血症)的因素包括各种治疗剂(例如治疗偏头痛的L司来吉兰)的使用(Fanciullacci M等，Dopamine involvement inthe migraine attack.Funct Neurol.15 Suppl 3：171-181，2000)。原因不明的低催乳素血症也与成年男子精子活力差有关(Gonzales GF等，Hypoprolactinemia as related to seminal quality and serum testosterone.Arch.Androl.23：259-265，1989)，这一发现得到在年青男子体内用药物抑制催乳素的释放数周后会降低后来hCG刺激的睾酮分泌的观察结果的支持(Oseko F等，Effects of chronic bromocriptine induced hypoprolactinemia onplasma testosterone responses to human chorionic gonadotropin stimulationin normal men.Fertil.Steril.55：355-357，1991)。低催乳素血症也能促进与年龄相关的生理机能上的变化。血清催乳素浓度倾向于随着年龄的增加而降低，例如在老年男人和雌激素未被代替的绝经后妇女中(Maddox P等，Bioactive and immunoactive prolactin levels after TRH stimulation in thesera of normal women.Horm.Metab.Res.24：181-184，1992；Maddox P等，Basal prolactin and total lactogenic hormone levels by microbioassay andimmunoassay in normal human sera.Acta Endocrinol.(Copenh.)125：621-627，1991)。值得注意的是，在病危个体(Van den Berghe G等，Thyrotropin and prolactin release in prolonged critical illness-dynamics ofspontaneous secretion and effects of growth hormone secretagogues.Clin.Endocrinol.(Oxf.)47：599-612，1998)以及患有不易控制的I型糖尿的病人(Irannanesh A等，Attenuated pulsatile release of prolactin in men with insulindependent diabetes mellitus.J.Clin.Endocrinol.Metab.71：73-78，1990)中，催乳素分泌出现相当量的减少。据报道，在病危儿童的与医院败血症(nosocomial sepsis)相关的死亡中，低催乳素血症是造成与长期淋巴细胞减少症和与细胞凋亡有关的淋巴样器官衰竭的一个危险因子(Felmet KA等，Prolonged lymphopenia，lymphoid depletion，and hypoprolactinemia inchildren with nosocomial sepsis and multiple organ failure.J.Immunol.174：3765-3772，2005)。以上所述几项发现表明催乳素缺乏对睾酮依赖型生理功能、年龄相关变化以及对疾病的抵抗力都有影响。
除了上面所讨论的催乳素的明显作用以外，有证据表明催乳素对于保持对正常大脑功能所必需的快速眼动睡眠(REM睡眠)也是重要的。在观察到妊娠相关性睡眠增进与每天催乳素水平的激增有关后，研究者又发现对雌性大鼠施用催乳素大幅度地增加了快速眼动睡眠(Zhang SQ等，Effects of prolactin on sleep in cyclic rats.Pyschiatry Clin.Neurosci.53：101-3，1999)。与这些发现一致的是，发现诱导出试验性低催乳素血症的雄性大鼠的快速眼动睡眠减少(Obál Jr F等，Antiserum to prolactin decreases rapideye movement sleep(REM sleep)in the male rat.Physiol.Behav.52：1063-1068，1992)。这些发现表明经历快速眼动睡眠不足的受试对象可以从催乳素的提升中获益。
基于上述发现，在各种患有功能性低催乳素血症的受试对象中，尤其是包括经历泌乳不足的女性，还包括经历睾酮相关功能不足的男性、患有包括I型糖尿病在内的严重疾病的男性和女性，或者患有快速眼动睡眠不足(例如由于失眠)的受试对象中，都存在对可以安全且有效地提升催乳素水平的药物的需求。
本文所有参考文献的引用不应解释为承认这些参考文献可作为本申请的“现有技术”而获得。
发明内容
总体上说，本发明提供了治疗患有血清催乳素不足或不充分，例如功能性低催乳素血症和本文所公开的并在本领域中已知与血清催乳素不足或不充分相关的疾病的受试对象的方法，以及治疗需要提升的或稳定的催乳素水平的受试对象的方法。在一个实施方式中，一种方法采用外周选择性κ阿片样受体激动剂化合物，所述化合物可选择地包含在用于局部性、区域性或全身性施用的药用载体中，所述化合物具有催乳素提升、增加或稳定活性，可以选择性施用而不导致严重或临床显著的副作用(例如中枢神经系统(CNS)作用或者多尿作用)。
在另一个实施方式中，本发明的特征在于一种用外周选择性κ阿片样受体激动剂的制剂(可选地适合于装在可控药物输送装置中)治疗受试对象中的功能性低催乳素血症的方法。在一个特别方面，将可控药物释放装置应用在受试对象的皮肤上。在某些实施方式中，将可控药物释放装置应用在受试对象的皮肤上并可任选地进一步利用离子电渗疗法来增加药物的透皮输送。
在某些实施方式中，制剂是固体或液体或凝胶。
在某些实施方式中，制剂包括液体载体。
在某些实施方式中，选择治疗有效剂量的外周选择性κ阿片样受体激动剂来实现提升的、增加的或稳定的血液血清催乳素水平而不产生严重或者显著的多尿和/或中枢神经系统副作用。
在某些实施方式中，外周选择性κ阿片样受体激动剂在食用来自或产自接受所述激动剂治疗的受试对象的乳汁的婴儿的血浆中产生药理学上不显著或者在生理学上可耐受的水平的所述激动剂。
在某些实施方式中，选择所述外周选择性κ阿片样受体激动剂来避免在食用来自或产自接受所述激动剂治疗的受试对象的乳汁的婴儿中产生严重或者临床显著的副作用。
在某些方面，本发明的特征在于在需要提升的、增加的或稳定的催乳素的受试对象中提升、增加或者稳定催乳素血浆水平的方法。在一个实施方式中，一种方法包括向所述受试对象施用治疗有效剂量的外周选择性κ阿片样受体激动剂。在另一个实施方式中，一种方法包括向所述受试对象施用治疗有效剂量的外周选择性κ阿片样受体激动剂并联合施用具有催乳素提升、增加或者稳定剂量的选自D2多巴胺受体拮抗剂、μ阿片样受体激动剂或催乳素的第二化合物。
在各种实施方式中，受试对象是指：人，例如需要提升的催乳素水平的病人。例如，所述受试对象可以是：需要刺激泌乳或者稳定泌乳的人，例如母亲。
本发明的特征在于治疗和/或预防泌乳失败的方法，所述泌乳失败可以使用各种标准来诊断，这些标准包括：
a)婴儿在母乳喂养之后感到不满意和不安；
b)相对于年龄/身高，婴儿体重增加缓慢；
c)错过哺乳后未有乳房充血/乳汁渗漏；
d)婴儿对母乳喂养之后的补充品喂养感到满意；
e)乳汁分泌每天少于500ml。
这些方法包括含有一种或多种通过κ阿片样受体发挥催乳素提升、增加或稳定活性的化合物的组合物的全身性施用，但其有效量并不表现出严重或显著的副作用，例如中枢神经系统作用或多尿作用。
在各种实施方式中，多种方法使用了含有外周选择性κ阿片样受体激动剂的组合物，所述组合物在全身施用时没有引起本文所限定的严重或者临床上显著的多尿或中枢神经系统的作用，尤其是在提升催乳素的剂量施用时。也提供了一起含有外周选择性κ阿片样受体激动剂和其他催乳素提升化合物的组合物。
典型地，旨在用于本文所述的组合物和方法中的化合物具有催乳素提升、增加或稳定活性以及如本文所限定的降低的或可以耐受的中枢神经系统作用，这是因为(但不受任何理论约束)它们基本不穿过血脑屏障。相对没有或者完全没有实质性的对血脑屏障的穿透可以减少中枢神经系统全身作用的发生。可以很容易穿过血脑屏障的κ阿片样受体激动剂可和催乳素提升剂一样有效，但是血脑屏障穿透性会造成严重的或者不可耐受的副作用，例如焦虑和幻觉。
外周选择性κ阿片样受体激动剂包括本文所描述的或本领域中已知的经检测评估基本不穿过血脑屏障的κ阿片样受体激动剂。用在本文所提供的方法和组合物中的外周选择性κ阿片样受体激动剂也包括有效剂量的由于其直接或者间接地与外周κ阿片样受体相互作用而改善泌乳失败，或者提升、增加或者稳定血清催乳素水平而没有表现出医学上严重或显著的中枢神经系统作用(如焦虑和幻觉)的任何化合物。
如本文所使用的术语“外周选择性”，当针对“κ阿片样受体激动剂”而使用时，指的是一种在没有向中枢神经系统(大脑和脊椎)施用时，具有较低的穿过(跨过)血脑屏障的能力，或者几乎不表现出或者基本没有对血脑屏障的穿透的化学化合物。由于较低的或者没有穿过(跨过)血脑屏障的能力，外周选择性κ阿片样受体激动剂通常表现出较少的或严重性较轻的(轻微的或者可耐受的)中枢神经系统副作用，例如焦虑、幻觉或者镇静。
在本领域中，已知有测量化合物穿过(跨过)血脑屏障的能力的多种方法，并且这些方法可用于测量穿过(跨过)血脑屏障的量或速率(动力学)。一个非限制性实例是，在使用特定化合物(例如κ阿片样受体激动剂)治疗之后，比较所述化合物引发外周作用的能力与所述化合物引发中枢作用的能力。外周作用可以使用小鼠扭体测试(WT)来测量，由于κ阿片样受体作用处于大脑和脊椎，所以中枢作用可以使用小鼠甩尾试验(TF)来测量。
简而言之，小鼠扭体试验(在Bentley等，Br.J.Phamac.，73：325(1981)中有描述)使用的是清醒的雄性ICR小鼠(由Harlan提供)，体重大概在20克到30克。在测试前小鼠要禁食约12小时到16小时，并在腹膜内施用稀乙酸(10ml0.6％的乙酸水溶液/kg体重)来引发扭体。在稀乙酸施用后15分钟内，给扭体打分。化合物(例如κ阿片样受体激动剂)通常以3倍到4倍逐步增加的剂量，在特定的预处理时间(例如乙酸注射前5分钟)通过静脉内途径施用而进行测试。这一步用于确定效价(WT-ED50)和次最大有效剂量(submaximal effective dose，大约80％～90％的抗伤害感受作用)。在第二步，在施用乙酸前的不同的预处理时间(例如-5分钟、-60分钟、-120分钟和-180分钟)施用次最大有效剂量的每种化合物以确定作用的持续时间。在整个试验过程中，使用一组仅施用不含有所述化合物的载体的小鼠作为对照组。在从乙酸注射时开始的15分钟时段里对扭体的次数进行计数，生物活性即抗伤害感受作用以百分比表示并如下进行计算：
100×(对照组扭动次数-处理组扭动次数)/对照组扭动次数
因为每一个次最大有效剂量很可能有变化，因而不能直接比较，所以将结果用数学方式归一化以提供可以比较的数值。高于100％的数值表示比研究开始前具有更高的抗伤害感受作用。在1小时时有效地将扭体次数降低至少约25％的化合物被认为是有长期的体内作用。
除了采用扭体试验来确定抗伤害感受作用活性的持续时间外，它还可以用来检测所述肽的体内生物效价(短期)。这个数值表示为以毫克/千克体重计的WT-ED50，是在15分钟内降低被测小鼠扭体次数50％(与对照组小鼠相比)所需的剂量的量度。
甩尾试验(TF)是急性躯体性疼痛的检测方法，设计用于评价中枢作用镇痛剂的效价和作用持续时间(例如，在Vanderah等，J.Pharm.Exper.Therapeutics，262：190(1992)中有描述)。尾部浸入52℃热水中引起的伤害作用导致快速的缩尾或者“尾巴轻打”。预期有中枢作用的化合物以与剂量相关的方式来延长缩尾的反应时间。
“脑穿透指数”(brain penetration index，BPI)可以用于为一种化合物是起中枢作用还是起外周作用提供数字化的表示形式。BPI定义如下：BPI＝TF-ED50/WT-ED50；其中ED50值是在静脉内施用的情况下，分别在小鼠扭体试验(WT-ED50)和小鼠甩尾试验(TF-ED50)中产生半数最大效应的剂量。高BPI值反映了程度较低的脑穿透，因此这种化合物不大可能充分地穿过血脑屏障或产生严重的中枢神经系统副作用。BPl值低于5表明显著或大量的脑穿透，因此这种化合物很可能充分地穿过血脑屏障，从而当临床使用时能够导致严重的副作用(例如，焦虑、幻觉和镇静)。因此，可用于本发明的化合物的BPI值通常超过5以上，例如BPI值为10、15、20、25、30、40、45、50、60、75、100、125、150、175、200、225、250、275、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500或2000以上。
本发明的具体的非限制性化合物在US 5,965,701中公开，这些化合物是具有4个D-异构体氨基酸残基并且C-端是单取代或双取代酰胺的序列。对κ阿片样受体的亲合力至少是对μ阿片样受体的亲合力的1,000倍并且具有不高于0.5mg/kg的ED50值的代表性化合物包括H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHEt、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-吗啉基、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-4-吡啶甲基、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHPr、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-硫代吗啉基、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NEt2、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHMe、H-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Orn-吗啉基、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHhEt、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-环丙基、H-D-Ala(2Thi)-D-4Cpa-D-Leu-D-Arg-吗啉基、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-哌啶基、H-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Orn-NHEt、H-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-吗啉基和H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-哌嗪基。
本发明的外周选择性κ阿片样受体激动剂可以是肽，例如那些含有D-氨基酸而不是L-氨基酸的肽，这些肽可选地与已知的哺乳动物内源性阿片样肽(例如脑啡肽，内啡肽和强啡肽)有很少或者没有序列同源性。外周选择性κ阿片样受体激动剂可以包含四肽D-氨基酸序列。包含在本发明标准范围之内的肽是任何已知的哺乳动物内源性阿片样肽，例如Akil等(1984)所鉴定的如强啡肽A(1-17)，包括这些肽的天然形式或经过加工的形式，例如强啡肽A(1-13)和强啡肽A(1-8)。
除此之外，本发明还涉及单独的或与泌乳增强剂、提升剂或者稳定剂联合的外周选择性κ阿片样受体激动剂在治疗受试对象的泌乳失败、或者泌乳不足或不充分中的应用。
本发明还涉及单独的或与泌乳增强剂、提升剂或者稳定剂联合的外周选择性κ阿片样受体激动剂在制造用于治疗受试对象的泌乳失败、或者泌乳不足或不充分的药物中的应用。
泌乳增强剂、提升剂或者稳定剂可以例如选自D2多巴胺受体拮抗剂、μ阿片样受体激动剂、催乳素或催产素。
本发明进一步涉及用于治疗受试对象的泌乳失败、或者泌乳不足或不充分的方法，其特征在于，将外周选择性κ阿片样受体激动剂单独施用于或与乳汁分泌增强剂、提升剂或者稳定剂联合施用于雌性受试对象。非限制性的施用方法包括皮下、静脉内、肌内、鼻内、口服或者透皮施用。
本发明还涉及含有外周选择性κ阿片样受体激动剂以及泌乳增强剂、提升剂或者稳定剂并可选地包括药用载体的组合物。根据本发明，本文所阐述的这些和其他的组合物可用于治疗受试对象的泌乳失败、或者泌乳不足或不充分的方法，并且用于制造这些组合物的方法。
泌乳失败在这里是指当雌性没有乳汁或者乳汁量不足，或者面临没有乳汁或者乳汁量不足的风险的情形。
泌乳可以被促进，因此，对于受试对象的泌乳失败、或者泌乳不足或不充分，在以下情形中提供了多种方法：
i)使存在泌乳失败的妇女的泌乳量标准化
ii)维持或提高、增加其早产儿正在新生儿病房(neonatal unit)中接受照顾的女性的泌乳；
iii)提高有双胞胎和三胞胎的女性的泌乳能力；
iv)促进并且延长(频率或持续时间)女性的泌乳，这些女性的后代如果饮用配方奶可能会面临患上乳糖不耐症或者其他奶过敏症的风险；
v)在由于卫生条件差而不便使用配方奶时，促进或延长女性的泌乳；
vi)提高、增加或者稳定白天期间吮吸频率减少的女性(例如工作母亲)的泌乳；
vii)如果女性面临产乳不足或不充分的风险，对她们进行预防性治疗。
本发明的某些实施方式涉及肽，其可选地为含有四个D-异构体氨基酸残基的四肽，这些肽可以结合κ阿片样受体受体，基本上不会穿过血脑屏障并进入脑部，对κ阿片样受体具有高亲合力(与μ阿片样受体相比)，具有高的效价和效力，并且表现出相对较长的体内作用持续时间。
本文的一个目的是提供全身性应用的外周选择性κ阿片样受体激动剂，所述外周选择性κ阿片样受体激动剂在可以充分提升、增加或稳定催乳素的剂量具有可耐受的、最小量的或者很少的(如果有的话)中枢神经系统作用或多尿作用，并因此产生有益效果，例如在需要的受试对象中增加泌乳或预防明显的泌乳的减少或降低。
本文所限定的哺乳动物为所有的动物，包括人类、灵长类动物和有蹄类动物，这些种类的雌性动物具有乳腺并产奶。
如本文所使用的，“乳用动物”指的是产奶动物。在某些实施方式中，所述乳用动物产出大量的奶并具有长期的泌乳行为，例如奶牛或山羊。
术语“药用组合物”指的是含有治疗有效量的、与一种以上药用载体一起配制的外周选择性κ阿片样受体激动剂的组合物。
如本文所使用的术语“制剂”指的是例如粉末等固体形式或者液体形式的组合物，其包括外周选择性κ阿片样受体激动剂。这些制剂可以提供治疗益处。这些制剂可含有用以防止微生物生长的防腐剂。
“治疗有效”量指的是提供所希望的治疗效果的活性剂的可耐受(如不产生严重副作用，相对、基本或者彻底无毒的)量。
“透皮”药物输送指的是在个体的皮肤表面施用一种药物，使得所述药物透过皮肤组织并进入所述个体的血流中，从而提供了全身性效果。术语“透皮”意在包括“透粘膜”的药物施用，即在个体的粘膜表面(如舌下、口腔、阴道、直肠)施用一种药物，使得所述药物透过粘膜组织并进入所述个体的血流中。
术语“身体表面”用来指皮肤或粘膜组织。
皮肤或者粘膜组织的“预定区域”指的是皮肤或者粘膜组织的被输送的药物增强剂制剂所通过的区域，意指完整的没有破损的活体皮肤或粘膜组织的特定区域。这些区域的面积通常为约5cm2到约200cm2，更常见的是约5cm2到约100cm2，典型地为约20cm2到约60cm2。然而，药物输送领域的技术人员可以理解的是，施用药物所通过的皮肤或粘膜组织的面积可根据贴剂的构造和剂量等而有显著的变化。
如本文所使用的“穿透增强”或者“渗透增强”指对选定的药物活性剂而言皮肤或粘膜组织的透过性的提高，即，相对于在没有增强渗透的情况下所得到的速率而言，所述活性剂在该处穿透的速率(即所述活性剂通过身体表面的“通量”)增加。通过使用这种增强剂所实现的增强的渗透作用可以通过使用例如本领域内已知的并在本文的实施例中采用的Franz扩散仪来测量药物通过动物或人类皮肤扩散的速率而观察到。
渗透增强剂的“有效量”或者“有效渗透增强量”指的是无毒、无破坏性但足以提供所希望的皮肤渗透性的增加，并相应地提供所希望的渗透深度、施用速率和药物输送量的增强剂组合物的量。
已经发现了对κ阿片样受体表现出高选择性的一类肽，这类肽具有相对较长的体内作用持续时间，并能够表现出降低的或基本上很少的显著的脑渗透(如果有的话)。这些肽包括具有四个D-异构体氨基酸并且C端是单取代或双取代酰胺的序列。这些化合物具有以下的通式：
H-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-具有取代基的酰胺
其中Xaa1是(A)D-Phe、(CαMe)D-Phe、D-Tyr、D-Tic或D-Ala(环戊基或噻吩基)，其中A是H、NO2、F、Cl或CH3；Xaa2是(A’)D-Phe、D-1Nal、D-2Nal、D-Tyr或D-Trp，其中A’是A或3，4Cl2；Xaa3是D-Nle、(B)D-Leu、D-Hle、D-Met、D-Val、D-Phe或D-Ala(环戊基)，其中B是H或CαMe；Xaa4是D-Arg、D-Har、D-nArg、D-Lys、D-Lys(Ipr)、D-Arg(Et2)、D-Har(Et2)、D-Amf(G)、D-Dbu、(B)D-Orn或者D-Orn(Ipr)，其中G是H或脒基。非限制性的酰胺包括乙基酰胺、吗啉基酰胺、4-吡啶甲基酰胺、哌嗪酰胺、丙基酰胺、环丙基酰胺以及二乙基酰胺。
本发明还提供了通过增加需要提升的催乳素的哺乳动物的血清催乳素水平来治疗所述哺乳动物的方法，所述方法包括向所述哺乳动物施用一定量的能有效治疗所述哺乳动物的外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药。在某些实施方式中，所述方法增加或者稳定所述哺乳动物中的血清催乳素水平至大于25ng/ml血清、50ng/ml血清、75ng/ml血清、100ng/ml血清、125ng/ml血清、150ng/ml血清、175ng/ml血清、或200ng/ml血清。在其他一些实施方式中，所述方法中能有效治疗所述哺乳动物的外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药是肽、或者离子化或经代谢而形成的肽。所述肽可以包括五肽或四肽，其中包括具有四个D-异构体氨基酸并且C端是单取代或双取代酰胺的序列。在某些实施方式中，所述肽对κ阿片样受体的结合亲合力大于其对非κ阿片样受体的结合亲合力。在一些具体实施方式中，所述肽对κ阿片样受体的结合亲合力比其对μ阿片样受体的结合亲合力大至少1,000倍。在这些具体实施方式中的一些实施方式中，所述肽对κ阿片样受体的结合亲合力比其对μ阿片样受体的结合亲合力大至少1,000倍，而且对提升催乳素水平具有约0.5mg/kg以下的ED50。
可用在本发明的方法中的具体化合物包括具有下式的化合物：
Figure A200780019231D00201
H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-4-吡啶甲基，或其吡啶甲基-N-氧化物，其可选地不包含或者包含乙酸根反离子。
可用在本发明的方法中的另一具体化合物包括具有下式的化合物：
Figure A200780019231D00202
H-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Orn-吗啉基，其可选地不包含或者包含乙酸根反离子。
附图说明
图1是显示在男性受试对象中以不同剂量的CR665进行1小时的IV(静脉内)输注后血清催乳素浓度相对于基线(给药前)的算数平均变化值的曲线图(A部分)。
图2是显示在女性受试对象中进行1小时的CR665 IV输注后血清催乳素浓度相对于基线(给药前)的算数平均变化值的曲线图(A部分)。
图3是显示在男性受试对象中进行5分钟的CR665 IV输注后血清催乳素浓度相对于基线(给药前)的算数平均变化值的曲线图(B部分)。
图4是显示在男性受试对象中进行1小时的CR665 IV输注后CR665的几何平均血浆浓度的曲线图(A部分)(线性标度)。
图5是显示在男性受试对象中进行1小时的CR665 IV输注后CR665的几何平均血浆浓度的图(A部分)(半对数标度)。
图6是显示在男性受试对象中进行1小时的CR665 IV输注后CR665的几何平均AUC0-∞相对于剂量水平的曲线图(A部分)。
图7是显示在女性受试对象中进行1小时的0.24mg/kg CR665 IV输注之后CR665的几何平均血浆浓度的曲线图(A部分)(线性标度)。
图8是显示在女性受试对象中进行1小时的0.24mg/kg CR665 IV输注之后CR665的几何平均血浆浓度的曲线图(A部分)(半对数标度)。
图9是显示在男性和女性受试对象中进行1小时的0.24mg/kgCR665 IV输注之后CR665的算数平均(±SD)血浆浓度的曲线图(A部分)(线性标度)。
图10是显示在男性和女性受试对象中进行5分钟的CR665 IV输注之后CR665的几何平均血浆浓度的曲线图(B部分)(线性标度)。
图11是显示在男性和女性受试对象中进行5分钟的CR665 IV输注之后CR665的几何平均血浆浓度的曲线图(B部分)(半对数标度)。
图12是显示在男性受试对象中进行5分钟的CR665 IV输注之后CR665的几何平均AUC(0到无限)相对于剂量水平的曲线图(B部分)。
图13是显示在男性受试对象中在0.015mg/kg到0.36mg/kg剂量范围内血清催乳素相对于基线的AUC0-12h(小时)变化与CR665的AUC(0到无限)之间的关系的曲线图(A部分)。
图14是显示在男性受试对象中在0.015mg/kg到0.36mg/kg剂量范围内血清催乳素相对于基线的Cmax变化与CR665的Cmax之间的关系的曲线图(A部分)。
具体实施方式
用以定义所述肽的命名法在Schroder和Lubke的“The Peptides”(Academic Press，1965)中进行了详细说明，其中根据传统表示法，N端出现在左侧，而C端出现在右侧。除非另外说明，否则凡氨基酸残基有同分异构形式的，均为本文给出的氨基酸的L-异构体形式。
本发明提供多种方法、组合物或剂型，它们采用和/或包含诸如肽等化合物，所述化合物对κ阿片样受体具有选择性，其不仅对κ阿片样受体表现出强亲合力，而且还可选地表现出长期的体内催乳素提升活性而没有严重或者显著的副作用，如中枢神经系统作用或者多尿。示例性的κ选择性阿片样受体化合物(如激动剂)具有小于1000nM、小于100nM、小于10nM或小于1nM的抗哺乳动物κ阿片样受体(如人类κ阿片样受体)的Ki，可选地对κ阿片样受体具有选择性，对κ阿片样受体具有高于100倍，或者高于1,000倍或者高于10,000倍的较高的亲合力(相比于其他哺乳动物的阿片样受体亚型而言)，所述亲合力可分别通过相对于哺乳动物(如人类)μ和δ阿片样受体的IC50或Ki的比值来进行体外测量。κ阿片样受体激动剂可以同时表现出没有显著的脑穿透和延长的体内活性持续时间。因此，除了上面所提到的κ阿片样受体亲合力和选择性，多种化合物还包括未表现出显著的脑穿透而同时在一段时间内例如至少约1小时、至少约2小时、3小时或者更长(如4、5、6、12、24、48小时或数天，或者更长)保持可以被测量或被检测到的显著活性的那些化合物。
在某些实施方式中，本发明的方法可以使用外周选择性κ阿片样受体激动剂来实践，所述激动剂在外周施用时可以有效地增加或者稳定催乳素水平而基本不穿过受试对象的血脑屏障。在其他一些实施方式中，所施用的外周选择性κ阿片样受体激动剂的量是有效地增加或者稳定催乳素水平而没有在受试对象中导致严重副作用的量。作为选择，所施用的外周选择性κ阿片样受体激动剂的量是有效地增加或者稳定催乳素水平同时在受试对象中引起很小的或者可以耐受的副作用的量。副作用可以包括神经精神性副作用(例如但不局限于焦虑或幻觉)、多尿或者镇静。
在一些实施方式中，根据本发明的用于提升哺乳动物中的血清催乳素水平的方法，所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的施用剂量为每小时、每天、每周或每月约1mg/kg所述哺乳动物的体重到约100mg/kg所述哺乳动物的体重。催乳素水平可以被提升到比血清催乳素基线水平高超过10ng/ml、15ng/ml、20ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、75ng/ml、100ng/ml、125ng/ml、150ng/ml、175ng/ml或者200ng/ml血清。
在一些实施方式中，本发明的治疗哺乳动物的泌乳不足或者不充分的方法包括将一定量的外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药单独施用或者与一定量的催乳素联合施用，所述施用以可有效治疗哺乳动物中的泌乳不足或者不充分的量进行。在其他一些实施方式中，本发明提供了一种治疗泌乳不足或者不充分的方法。所述方法包括将外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药单独施用于，或者与(1)另一种催乳素提升剂、(2)催乳素或(3)非药物疗法联合施用于哺乳动物，所述方法有效治疗哺乳动物中的泌乳不足或者不充分。在另外一些实施方式中，本发明提供了用于一种治疗哺乳动物中的泌乳不足或者不充分的方法。所述方法包括将1)外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药，和2)另一种催乳素提升剂单独施用或者联合施用，所述施用以可以有效地治疗所述哺乳动物中的泌乳不足或者不充分的量进行。
在其他一些实施方式中，本发明提供了一种治疗表现出产奶不足或者不充分的哺乳动物或者有产奶不足或者不充分风险的哺乳动物的方法。所述方法包括向所述哺乳动物施用一定量的外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药，所述施用以有效治疗所述哺乳动物的量进行。所述外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药包括肽，或者离子化或经代谢而形成的肽。所述肽可以包括四肽或者五肽。
在一些具体实施方式中，可用在本发明的方法中的催乳素提升剂可以与μ阿片样受体激动剂一起施用，所述μ阿片样受体激动剂选自由(i)吗啡、(ii)氢吗啡酮、(iii)羟吗啡酮、(iv)左啡诺、(v)美沙酮、(vi)可待因、(vii)氢可酮、(viii)氧考酮、(ix)吗啡-6-葡糖苷酸、(X)曲马多、(xi)派替啶、(xii)地芬诺酯、(xiii)洛哌丁胺、(xiv)芬太尼、(xv)舒芬太尼、(xvi)阿芬太尼、(xvii)瑞芬太尼、(xviii)左醋美沙朵和(xviv)丙氧酚组成的组。
在本方法的某些实施方式中，催乳素提升剂可以是肽，其对外周κ阿片样受体的结合亲合力高于其对非外周κ阿片样受体的结合亲合力。可选择的是，所述肽对外周κ阿片样受体的结合亲合力可以比其对非外周κ阿片样受体的结合亲合力大10倍、100倍、1000倍或者更高。例如，所述肽对κ阿片样受体的结合亲合力可以比其对μ阿片样受体的结合亲合力大至少1000倍。在某些实施方式中，所述肽对κ阿片样受体的结合亲合力比其对μ阿片样受体的结合亲合力大至少1,000倍，并且对提升催乳素的ED50为约0.5mg/kg以下。
在一个具体实施方式中，本发明提供了一种治疗需要提升的或者稳定的催乳素水平的哺乳动物的方法，其中，所述方法包括向所述哺乳动物施用一定量的外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药，以及一定量的其他催乳素提升化合物，所述施用以有效地治疗所述哺乳动物的量进行。所述其他催乳素提升化合物可以包括D2多巴胺受体拮抗剂或者μ阿片样受体激动剂。
在一个实施方式中，D2多巴胺受体激动剂选自由(i)多潘立酮、(ii)甲氧氯普胺、(iii)左舒必利、(iv)舒必利、(v)硫乙拉嗪、(vi)齐拉西酮、(vii)佐替平、(viii)氯氮平、(ix)氯丙嗪、(x)醋奋乃静、(xi)丙酰奋乃静、(xii)氯普噻吨、(xiii)氟奋乃静、(xiv)洛沙平、(xv)美索达嗪、(xvi)吗茚酮、(xvii)奋乃静、(xviii)匹莫齐特、(xviv)哌西他嗪、(xx)丙氯拉嗪、(xxi)硫利达嗪、(xxii)替沃噻吨、(xxiii)三氟拉嗪、(xxiv)三氟丙嗪、(xxv)匹泮哌隆、(xxvi)安哌齐特、(xxvii)喹硫平、(xxviii)美哌隆、(xxix)瑞莫必利、(xxx)氟哌啶醇、(xxxi)利培酮、(xxxii)奥氮平、(xxxiii)舍吲哚、和(xxxiv)丙氯拉嗪组成的组。
在另一个实施方式中，所述μ阿片样受体激动剂选自由(i)吗啡、(ii)氢吗啡酮、(iii)羟吗啡酮、(iv)左啡诺、(v)美沙酮、(vi)可待因、(vii)氢可酮、(viii)氧考酮、(ix)吗啡-6-葡糖苷酸、(x)曲马多、(xi)哌替啶、(xii)地芬诺酯、(xiii)洛哌丁胺、(xiv)芬太尼、(xv)舒芬太尼、(xvi)阿芬太尼、(xvii)瑞芬太尼、(xviii)左醋美沙朵、和(xviv)丙氧芬组成的组。
如本文中所使用的“催乳素提升活性”指的是一种化合物的药理学活性，只要它引起受试对象的催乳素循环血浆或者血清水平的提升。“催乳素增加活性”指的是一种化合物在受试对象内引起的可测量到的或者可检测到的、短暂的或者长期的催乳素循环血浆或者血清水平的增加。“催乳素稳定活性”指的是一种化合物在受试对象内引起的可测量到的或者可检测到的、短暂的或者长期的催乳素循环血浆或者血清水平的稳定，例如，阻止或者抑制催乳素水平的减少，使催乳素特定水平维持一段可测量到的时间，阻止或者抑制催乳素水平减少至低于一定的量(如低于200ng/ml血清、175ng/ml血清、150ng/ml血清、125ng/ml血清、100ng/ml血清、75ng/ml血清、50ng/ml血清、25ng/ml血清)等。
如本文中所使用的“功能性低催乳血症”指的是其中受试对象不具有足够的或者充分的引发、维持或者增强一种生理功能(如泌乳)所需的循环催乳素水平的病症。如本领域中已知，指定的生理功能所需要的循环催乳素水平将随所述受试对象的机能、性别以及生理或者病理生理状态而变化。因此，例如，正常的孕前基线水平的循环催乳素在产后将不足以维持泌乳。在这些情况下，具有这种水平的催乳素的妇女怀孕后的泌乳失败将被鉴定为功能性低催乳素血症，即使所述催乳素的循环水平对非泌乳妇女而言是正常的。
如本文中所使用的“中枢神经系统副作用”指的是一种化合物在临床上的严重副作用，其症状是精神性的或者神经性的，例如视觉或者听觉幻觉、妄想症、智力功能受损、或者随意运动的控制受损。
如本文中所使用的术语“受试对象”意在包括人类或者非人类哺乳动物。受试对象包括人，例如需要提升的、增加的或者稳定的催乳素水平的病人，例如需要刺激泌乳的人如妇女(母亲)。术语“哺乳动物”包括人类和诸如非人类的灵长类动物、有蹄类动物和反刍类动物等所有的非人类哺乳动物。
如本文中所使用的“有效量”或者“充足量”指的是本文中所描述的化合物可以治疗有效地抑制、预防或者治疗特定疾病、机能紊乱、病症或者副作用的症状的量。这些疾病、机能紊乱、病症和副作用包括那些与不足或者不充分的催乳素循环水平相关的病症，其中所述治疗包括通过使细胞、组织或受体与本文中所述的化合物相接触而提升、增加或者稳定催乳素的循环水平。因此，例如，当结合泌乳不足或者不充分使用时，“有效量”指的是例如治疗和/或预防该病症所需要的化合物的量。当结合功能性低催乳素血症使用时，“有效量”指的是治疗和/或预防一种或多种与催乳素的循环水平低于所需水平相关的症状、疾病、机能紊乱和病症以例如最佳地保持生理功能。
如本文中所使用的“药用”指的是在可靠的医学判断范围内，适合于与人类和动物的组织相接触、具有相称的合理收益/风险比但没有严重毒性、刺激性、过敏反应或其他并发症的化合物、材料、组合物和/或剂型。
如本文中所使用的“联合”、“联合治疗”以及“联合产品”，在某些实施方式中，指的是向患者共同施用本发明的外周选择性κ阿片样受体激动剂和催乳素和/或具有催乳素提升、增加或者稳定活性但不具有外周选择性κ阿片样受体激动剂活性的化合物，例如D2多巴胺受体拮抗剂(如多潘立酮)。当联合施用时，各个组分可以同时施用或在不同的时间点以任何次序依次施用。因此，各个组分可分开施用但在时间上要足够接近以便提供所希望的治疗效果。
如本文中所使用的“D2多巴胺受体拮抗剂”指的是对哺乳动物D2多巴胺受体的结合亲合力(KD或Ki)小于10mM(而与对其他受体的结合亲合力无关)的化合物。当关于一种化合物对哺乳动物D2多巴胺受体的结合亲合力是否满足该定义的有用信息不清楚或者没有该信息时，可使用来自如本领域技术人员常用的体外或者体内功能性研究的数据来确定一种化合物是否是哺乳动物D2多巴胺受体的功能性拮抗剂。
如本文中所使用的“μ阿片样受体激动剂”指的是对哺乳动物μ阿片样受体的结合亲合力(KD或Ki)小于10mM(而与对其他受体的结合亲合力无关)的化合物。当关于一种化合物对哺乳动物μ阿片样受体的结合亲合力是否满足该定义的信息不清楚或者没有该信息时，可使用来自如本领域技术人员常用的体外或者体内功能性研究的数据来确定一种化合物是否是哺乳动物μ阿片样受体的功能性激动剂。
如本文中所使用的“剂量单元”指的是适于用作用于被治疗的特定个体或病症的单位剂量的物理上独立的单元。每个单元可含有计算得出的产生所希望的疗效的预定量的一种或多种活性化合物，其中可选地联合有药用载体。剂量单元形式的规格可由(a)一种或多种活性化合物的独特性质和将实现的具体疗效，和(b)在配制该一种或多种活性化合物的领域里的固有限制来决定。
如本文中所使用的“药用盐”指的是其中母体化合物通过形成其酸式或碱式盐而进行改性的化合物的衍生物。药用盐的例子包括但不限于碱性残基如胺的无机酸盐或者有机酸盐；以及酸性残基如羧酸的碱金属盐或有机盐等。药用盐包括传统的非毒性盐或例如由非毒性无机或有机酸形成的母体化合物的季铵盐。例如，这些传统的非毒性盐包括由诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸等无机酸衍生的那些盐；以及由诸如乙酸、丙酸、琥珀酸、羟基乙酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、双羟萘酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、磺胺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸和羟乙磺酸等有机酸制得的盐。这些生理可接受的盐是根据本领域内已知的方法制备的，所述已知的方法例如为通过在水性醇中使用过量的酸来溶解游离胺碱类物质，或者使用诸如氢氧化物等碱金属碱或者胺来中和游离羧酸来制备这些生理可接受的盐。
本文所描述的化合物可以以另外的形式使用或者制备。例如，许多包含氨基的化合物可以作为酸加成盐来使用或者制备。通常这些盐可以提高所述化合物的分离和处理特性。例如，根据试剂和反应条件等，本文描述的化合物可以例如作为它们的盐酸盐或者甲苯磺酸盐来使用或者制备。同构晶状形式、所有的手性的和消旋形式、N-氧化物、水合物、溶剂化物和酸式盐水合物也都在本发明的考虑范围之内。
本发明的某些酸性或者碱性化合物可以作为两性离子存在。所有形式的化合物，包括游离酸、游离碱和两性离子，都在本发明的考虑范围之内。本领域内众所周知的是，同时含有氨基和羧基的化合物通常处于它们的两性离子形式的平衡之中。因此，本文全文所描述的例如同时包含氨基和羧基的任何化合物也都包括它们相应的两性离子。
药物组合物
可将本发明的外周选择性κ阿片样受体激动剂加入到药物组合物中，以改善受试对象(例如表现出与催乳素血浆水平不足或不充分有关的泌乳缺乏、不足或者不充分的受试对象)的功能性低催乳素血症。所述组合物应当在药用载体中含有有效量的外周选择性κ阿片样受体激动剂。
所述药用载体可以是适用于向所述受试对象输送所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的任何相容的无毒物质。无菌水、醇、脂肪、蜡和惰性固体可用作所述载体。药用辅药、缓冲剂和分散剂等也可加入到所述药物组合物中。在所述药物组合物中的外周选择性κ阿片样受体激动剂或其他活性剂的浓度可以发生较大变化，即从少于约0.01重量％，通常为至少约1重量％到多达50重量％以上。
对于口服施用，有效成分可以以固体剂型(例如胶囊剂、片剂和粉剂)或者以液体剂型(例如酏剂、糖浆剂和悬浮剂)施用。可将一种或多种活性组分与非活性成分和粉状载体(如葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、淀粉、纤维素或者纤维素衍生物、硬脂酸镁、硬脂酸、糖精钠、滑石和碳酸镁等)一起包装入明胶胶囊中。可加入以提供所希望的颜色、味道、稳定性、缓冲能力、分散作用或者其他已知的所希望的特性的其他非活性成分的例子是三氧化二铁、硅胶、十二烷基硫酸钠、二氧化钛和食用白墨(ediblewhite ink)等。类似的稀释剂能被用来制造压制片剂。片剂和胶囊剂均可被制作成持续释放产品，以使药物在数小时的时段内连续释放。压缩片剂可以包有糖衣或膜衣，以掩蔽任何令人不愉快的味道，并保护片剂免受空气的影响，或者可以包有肠溶衣，以在胃肠道中选择性地崩解。口服施用的液体剂型可含有着色剂和调味剂，以提高患者的接受程度。为了提高药物稳定性和吸收性，本发明的肽可以在经过胃的严酷的蛋白水解性环境后从胶囊中释放出来。提高口服之后肽的稳定性和吸收性的各种方法在本领域中是众所周知的(例如，Mahato RI.Emerging trends inoral delivery of peptide and protein drugs.Critical Reviews in TherapeuticDrug Carrier Systems.20：153-214，2003)。另外，口服输送本发明的化合物可以通过使用远程控制的胶囊来优化，如Wilding和Prior在CriticalReviews in Therapeutic Drug Carrier Systems 20：405-431(2003)中所公开的方法。
对于鼻部施用，可将外周选择性κ阿片样受体激动剂配制成气雾剂。术语“气雾剂”包括本发明的化合物的任何可以被吸入细支气管或者鼻道的气载悬浮相。具体而言，气雾剂包括本发明化合物的气载悬浮小滴，如可以在计量剂量吸入器或雾化器中形成，或者在弥雾器中形成。气雾剂也包括悬浮在空气中或者其他载气中的本发明化合物的干粉组合物，例如，它们可以通过吸入装置而吹入。参见Ganderton和Jones，DrugDelivery to the Respiratory Tract，Ellis Horwood(1987)；Gonda(1990)Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems 6：273-313；和Raeburn等，(1992)J.Pharmacol.Toxicol.Methods 27：143-159。
本发明的制剂的肠胃外施用包括静脉内、皮下、肌内和透皮施用。
肠胃外施用制剂包括准备用于注射的无菌溶液、准备在刚要使用时与溶剂相混合的无菌干燥可溶性产品(包括皮下注射片)、准备用于注射的无菌悬浮液、准备在刚要使用时与赋形剂相混合的无菌干燥非溶性产品和无菌乳液。所述溶液可以是水性的或者非水性的，并借此配制成用于通过注射、输注或使用植入泵进行输送。对于静脉内施用、皮下施用和肌内施用，本发明的有用制剂包括具有控释性能的微胶囊制剂(R.Pwar等，Protein and peptide parenteral controlled delivery.Expert Opin Biol Ther.4(8)：1203-1212，2004)或者包封在脂质体中的制剂，所述脂质体的示例性形式是聚乙烯被覆的脂质体，在本领域中已知这样的制剂具有较长的在血管系统内循环的时间(例如Koppal，T.“Drug delivery technologies areright on target”，Drug Discov.Dev.6，49-50，2003)。
将用于透皮输送的制剂装入到适用于所述输送的装置中，所述装置采用例如离子电渗疗法(Kalia YN等，Iontophoretic drug delivery.Adv DrugDeliv Rev.56：619-658，2004)或者真皮穿透表面(Prausnitz MR.Microneedles for transdermal drug delivery.Adv Drug Deliv Rev.56：581-587，2004)，如本领域中所已知的能用于改善药物的透皮输送的方法。电转运装置及其操作方法在美国专利6,718,201中公开。使用离子电渗疗法来促进肽的透皮输送的方法在美国专利6,313,092和美国专利6,743,432中公开。本文的术语“电转运”、“离子电渗疗法”和“离子电渗疗法的”用于指通过将电动势施加到包含有试剂的储库的方式把一种或多种药学活性化合物通过身体表面(如皮肤或者粘膜)输送。所述化合物可通过电迁移、电穿孔、电渗透或其任意组合来输送。电渗透也可以指电水疗法(electrohydrokinesis)、电子对流和电力诱导渗透作用。通常，化合物电渗透进入组织源自于含有该化合物的溶剂的迁移，它是对治疗物种储库施加电动势的结果，即其他离子物种电迁移所诱导的溶剂流动的结果。在电转运的过程中，皮肤可能会出现一定的改变或者变化，例如在皮肤上形成暂时出现的小孔，也被称为“电穿孔”。任何通过身体表面上的改变或变化(例如，皮肤中小孔的形成)而增强物种的电助转运也包含在如本文中所使用的术语“电转运”中。因此，应用于本发明的化合物时，如本文中所使用的术语“电转运”、“离子电渗疗法”和“离子电渗疗法的”指的是(1)通过电迁移来输送带电的试剂，(2)通过电渗透方法来输送不带电的试剂，(3)通过电穿孔来输送带电或不带电的试剂，(4)通过结合电迁移和电渗透方法来输送带电试剂，和/或(5)通过结合电迁移和电渗透方法来输送带电的和不带电的试剂的混合物。电转运装置一般使用两个电极，这两个电极均放置成与身体皮肤的一些部分紧密地电接触。一个电极叫做有源电极或者供体电极，所述治疗试剂从这个电极被输送到体内。另外一个电极叫做对电极或者返回电极，用以闭合通过身体的电路。与病人皮肤结合在一起，通过把电极与电源(如电池)连接在一起而构成电路，并且该电路通常是能够控制通过所述装置的电流的电路。
根据要透皮输送的化合物的电荷，阳极或者阴极都可以是所述有源电极或供体电极。因此，如果待转运的化合物带正电，例如本文实施例1中所举例的化合物，则正极(阳极)将是有源电极，而负极(阴极)将用作对电极，从而构成电路。但是，如果待输送的化合物带负电，那么阴极将是有源电极，而阳极将是对电极。电迁移装置另外还需要待输送至体内的治疗剂储库或治疗剂源。这些药物储库与所述电转运装置的阴极或者阳极连接，以提供一种或多种所需物种或试剂的固定的或可更新的来源。每个电极组件包括电导电极，该电导电极与在使用时和患者皮肤相接触放置的离子导电液体储库具有离子传递关系。诸如在Webster(美国专利4,383,529)中描述的凝胶储库是一种储库形式，这是因为水合凝胶比充填有液体的容器更容易处理和制造。水是可用作所述储库的一种液体溶剂，部分是因为本发明的肽化合物的盐是水溶性的，还有部分是因为水对皮肤没有刺激作用，因此使得所述水凝胶储库可与皮肤长期接触。储库和来源的实例包括在美国专利4,250,878中所描述的囊袋、在美国专利4,382,529中所公开的预成型凝胶体、以及在美国专利4,722,726的附图中所公开的装有药物的液体溶液的玻璃或塑料容器。对于电转运，本发明的化合物(例如肽)可与通量增强剂(flux enhancer)如离子表面活性剂(例如美国专利4,722,726)或者除水之外的助溶剂(例如欧洲专利申请278,473)一起进行配制。作为选择，可以在电转运输送之前，将待进行该电转运的外层皮肤(即皮肤的角质层)进行机械性破坏(例如美国专利5,250,023)。
非常适合于电转运的外周选择性κ阿片样受体激动剂可通过测量其通过身体表面(例如皮肤或者粘膜)的电转运通量，例如与具有已知的电转运通量特性的标准化测试肽(如促甲状腺激素释放激素)(R.Burnette等，J.Pharm.Sci.(1986)75：738)或血管加压素(Nair等，Pharmacol Res.48：175-182，2003)相比较而进行选择。可以采用多种本领域内已知的体内或体外方法测定透皮电转运通量。体外方法包括在电转运通量单元的供体室和受体室之间夹持一片适当的哺乳动物的皮肤(例如人尸体皮肤)，使皮肤片的角质层侧面对供体室。含有待输送的药物的液体溶液或凝胶放置成与角质层相接触，并向电极施加电流，每个室中有一个电极。透皮通量是通过对受体室里药物的量进行采样而计算得到的。例如，用以优化透皮电转运药物输送的两个成功模型是分离的猪皮瓣模型(Heit MC等，Transdermal iontophoretic peptide delivery：in vitro and in vivo studieswith luteinizing hormone releasing hormone.J.Pharm.Sci.82：240-243，1993)和使用从无毛啮齿动物或者豚鼠中分离得到的无毛皮肤(例如参见Hadzija BW等，Effect of freezing on iontophoretic transport through hairlessrat skin.J.Pharm.Pharmacol.44：387-390，1992)。用于离子电渗疗法的本发明化合物可以具有一个(或者通常具有两个)带电的氮原子以促进它们的输送。
本发明的范围还包括治疗需要提升的催乳素的哺乳动物的方法，其中外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药是透皮施用的，非限制性的例子有通过电转运装置进行透皮施用。在一些实施方式中，所述电转运装置能够穿透过身体表面输送外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药。
其他有用的透皮输送装置采用了压力下高速输送从而实现皮肤穿透而无需使用针头。如本领域内已知的，可以通过使用化学增强剂来改善透皮输送，所述化学增强剂在本领域中有时候也称为“渗透增强剂”，即与所述药物同时施用(或者在一些情况下在药物施用之前用于预处理皮肤)以提高角质层的穿透性，从而增强药物通过皮肤的穿透性的化合物。化学穿透增强剂是无害的化合物并且只用来促进药物通过角质层，而无论是通过被动扩散方法还是通过诸如电转运等能量驱动方法(参见例如Meidan VM等，Enhanced iontophoretic delivery of buspirone hydrochlorideacross human skin using chemical enhancers.Int.J.Pharm.264：73-83，2003)。
用于肠胃外制剂中的药用载体包括水性赋形剂、非水性赋形剂、抗菌剂、等渗剂、缓冲剂、抗氧化剂、局部麻醉药、悬浮分散剂、乳化剂、螯化剂或螯合剂以及其他药用物质。
水性赋形剂的例子包括氯化钠注射液、林格氏注射液、等渗葡萄糖注射液、无菌水注射液、葡萄糖和乳酸盐化林格氏注射液。非水性肠胃外赋形剂包括植物来源的非挥发性油、棉籽油、玉米油、芝麻油和花生油。必须将抑细菌浓度或抑真菌浓度的抗菌剂添加到包装在多剂量容器内的肠胃外制剂中，所述抗菌剂包括酚或甲酚、汞剂、苯甲醇、氯丁醇、对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯、乙基汞硫代水杨酸钠、苯扎氯铵和苄索氯铵。等渗剂包括氯化钠和葡萄糖。缓冲剂包括磷酸盐和柠檬酸盐。抗氧化剂包括硫酸氢钠。局部麻醉剂包括盐酸普鲁卡因。悬浮分散剂包括带有钠离子的羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮。乳化剂包括聚山梨醇酯80(吐温80)。金属离子的螯化剂或螯合剂包括EDTA。药用载体还包括用作水混溶性赋形剂的乙醇、聚乙二醇和丙二醇以及用于pH调节的氢氧化钠、盐酸、柠檬酸或乳酸。
通常，外周选择性κ阿片样受体激动剂的治疗有效量为至少约0.01重量％至约50重量％以上，或者超过0.1重量％的活性化合物。活性成分可一次施用，或者可以分为许多更小剂量以一定的时间间隔进行施用，或者作为控释制剂施用。术语“控释制剂”包括能够在一段时间(例如几天至几周)向受试对象连续地输送外周选择性阿片样受体激动剂的制剂。这些制剂可以皮下施用或肌内施用，并随着时间的推移在受试对象中连续稳态释放预定量的化合物。外周选择性κ阿片样受体激动剂的控释制剂可以是例如在美国专利第4,677,191号和第4,728,721号(本文以参考的方式引入)中所描述的那些含有药物的高分子微胶囊的制剂。所述药学活性化合物的浓度经调节使得其施用提供了产生所需效果的有效量。正如本领域中已知的，确切的剂量取决于患者或动物的年龄、重量和病症。对于任何特定的受试对象，可以根据个体需要以及施用试剂或监督试剂施用的人员的专业判断而随着时间调整具体的用药方案。因此，本文所述的浓度范围仅是示例性的，而并非旨在限制本发明的范围或实践。
单位剂量的肠胃外制剂包括包装在安瓿瓶或者带有针头的注射器中。
正如本领域中已知和实践的，用于肠胃外施用的所有制剂通常都是无菌的。
举例来说，含有活性化合物的无菌缓冲水溶液的静脉内输注是施用的一种有效方式。另一实施方式是含有产生所需药效所必需的被注射活性物质的无菌水性或油性溶液或悬浮液。
本发明的组合物和方法可采用静脉内、透皮、鼻内、皮下、肌内或者口服输送或施用。可施用组合物以预防性治疗患有或者可能患上疾病或机能紊乱的个体，例如经受泌乳不足或不充分的女性。对于治疗性应用，药物组合物通常以足以抑制、预防或者改善疾病或机能紊乱的量施用于患有疾病或机能紊乱的受试对象，例如泌乳缺乏的受试对象。将足以实现这些目的的量定义为“治疗有效量”。
虽然不希望束缚于任何理论，但据认为，向受试对象所施用的外周选择性κ阿片样受体激动剂刺激垂体前叶催乳素激素的释放。通常以足以刺激催乳素的分泌，或者稳定、预防或抑制催乳素的减少或下降而不导致诸如中枢神经系统副作用或多尿等严重副作用的量施用所述化合物。外周选择性κ阿片样受体激动剂的有用剂量范围可由本领域技术人员通过常规检验来确定。本领域技术人员认识到剂量部分地取决于被治疗患者的身体特性(例如体重)以及施用途径(例如静脉内注射或透皮输送)，还取决于通过所述途径施用的化合物的生物利用度和血浆清除率以及所述化合物对κ阿片样受体的亲合力。估测有效剂量的一个方法是滴定所述药剂以达到药物的血浆浓度超出例如由本领域常规采用的传统放射性受体检测所确定的药物与κ阿片样受体的亲合力常数(Kd或Ki)。一种方法是滴定所述药剂以实现，例如，采用经发现能有效提升由催乳素选择性免疫测定所测量的催乳素水平的剂量。在这种情况下，虽然在药物施用前后，仅需要两个血液样品来比较基准催乳素水平和受刺激后的催乳素水平，但是通常以一定时间间隔测量受刺激后的激素水平，使得用药间隔可经过调整以保持持续较高的催乳素水平。血清催乳素浓度可以由本领域经确认的方法中的任意方法进行估测，所述方法例如为IMx催乳素测定法(Abbott Laboratories，Abbott Park，IL)、与Abbott IMx自动化免疫分析仪结合使用的微粒酶免疫测定法。当所希望的治疗效果是增加泌乳时，另一种剂量滴定法可采用能有效地增加乳汁量的催乳素提升剂量，所述乳汁量可为例如每位需要养育婴儿的母亲每天大约500毫升到1000毫升，乳汁分泌的水平根据养育婴儿的需要而进行选择。养育婴儿的需要可由本领域技术人员按已知的方法进行估测，所述方法包括充分泌乳的证据：(1)婴儿在母乳喂养以后是满意的，(2)婴儿的体重增加量与年龄/身高相符，(3)如果错过婴儿哺乳，出现乳房充血和/或乳汁渗漏，以及(4)乳汁分泌量每天超过500ml。婴儿摄取的乳汁量据估计通常为150毫升/千克/天。
美国儿科学会已强调增加美国的母乳喂养，并指出向需要喂养孩子的母亲开出的绝大多数处方药物对乳汁供给或者婴儿健康应该没有作用(American Academy of Pediatrics，Committee on Drugs.The Transfer ofDrugs and Other Chemicals Into Human Milk.Pediatrics 108：776-789，2001)。本发明的方法因此包括将本发明的一种或多种化合物转移到用以哺乳后代(例如婴儿)的母乳中的量降至最低的方法。最常见的是用乳汁与血浆(M/P)的浓度比对药物转移到母乳里进行定量表示。如果该值基于母亲的乳汁和血浆中的药物的浓度时间曲线下面积(AUC)，则该值的准确性可得以提高。
婴儿每日剂量可以用以下公式估算：
所估算的婴儿每日剂量(mg/kg/天)＝M/P×平均母亲血清浓度×150ml/kg/天。
在这种情况下，M/P(乳汁与血浆的比率)是AUC乳汁与AUC血浆的比率；平均母亲血清浓度指的是母亲摄取单剂量药物后的AUC或母亲持续用药期间在稳态时的AUC(Bennett 1988，1996)。当使用这种方法估算婴儿每日剂量时，所述AUC是在母亲摄取单剂量药物后从零时刻至无限时的AUC，或者是在母亲持续用药期间处于稳态时的用药间隔内的AUC。婴儿摄取的乳汁量据估计一般为150ml/kg/天。于是，婴儿剂量(mg/kg)可以表示为占母亲剂量(mg/kg)的百分比。本发明的化合物可导致的婴儿剂量占母亲剂量的少于10％，或者占母亲剂量的少于1％或者少于0.1％。因为本发明的化合物包括多种肽，它们可与高分子微球体一起配制以保护其在胃肠道中不被降解并促进吸收(例如，Mahato RI.Emergingtrends in oral delivery of peptide and protein drugs.Crit.Rev.Ther.DrugCarrier Syst.20：153-214，2003)。微球体包封肽例如通常不能安全存在于母亲胃肠道环境中并释放游离肽进入循环，由此肽将以显著量通过母乳而对后代具有口服生物利用度，这可很容易地通过检验婴儿血浆和/或尿中的药物来证实。
本发明的用途不限于促进、提升、增加或者稳定人和非人的哺乳动物的泌乳。虽然在哺乳动物中两个最有特征性的催乳素作用位点(即乳腺和卵巢)中的确发现了催乳素受体，但在血脑屏障外部的脑区域中也发现了所述受体，因此这样的受体可以接触到循环催乳素(Freeman ME等，Prolactin：Structure，function，and regulation of secretion.Physiol.Rev.80：1523-1631，2000)。特别是，在脉络丛、最后区和下丘脑内侧基底部中发现有催乳素受体(和/或编码催乳素受体的mRNA)。催乳素受体也存在于大范围外周组织中，包括脑垂体、心脏、肺、胸腺、脾脏、肝脏、胰腺、肾脏、肾上腺、子宫、骨骼肌和皮肤。因此，预期如本文所描述的外周选择性κ阿片样受体激动剂同样可用于预防、改善或者调节与这些大脑和外周区域相关的病症。因此，例如，由本发明的化合物所导致的提升的循环催乳素将进入下丘脑内侧基底部(其为血脑屏障外部的一个区域，包括前室周区域、室旁核和和弓状核)(例如Merchenthaler I.Neuronswith access to the general circulation in the central nervous system of the rat：a retrograde tracing study with fluoro gold.Neuroscience 44：655-662，1991)。这些下丘脑神经核对于神经内分泌调节至关重要，并且含有催乳素受体，因此，通过本发明的化合物所导致的循环催乳素的提升将在例如神经内分泌相关的机能紊乱中产生治疗性作用。
可以采用各类检测方法测试本发明的化合物是否对κ阿片样受体显示出高亲合力和选择性、是否显示长期的体内生物活性、是否无中枢神经系统副作用以及是否显示催乳素提升活性。受体检测方法在本发明中是已知的，并已克隆来自数个物种的κ阿片样受体，例如有μ阿片样受体和δ阿片样受体。κ阿片样受体以及μ阿片样受体和δ阿片样受体是典型的、七跨膜G蛋白偶联受体。虽然使用这些克隆受体可以很容易对特定候选化合物例如肽进行筛查，但是，如本领域中已知的，自然来源的哺乳动物阿片样受体同样可用于筛查(Dooley CT等，Selective ligands forthe mu、delta、and kappa opioid receptors identified from a single mixturebased tetrapeptide positional scanning combinatorial library.J.Biol.Chem.273：18848-18856，1998)。因此，无论κ阿片样受体和μ阿片样受体是重组来源的还是自然来源的，都可以针对它们进行筛查，以确定一种或多种化合物对κ阿片样受体的选择性(相对于μ阿片样受体)。一般使用哺乳动物形式的所述阿片样受体进行筛查；筛查时，这些受体的物种来源通常与用以评估本发明的化合物的物种相同，例如，如果所筛查的化合物的预期用途是用于治疗人类受试对象，则可以使用人类胎盘组织作为κ阿片样受体的一个来源(Porthe G等，Kappa opiate binding sites in humanplacenta.Biochem.Biophys.Res.Commun.101：1-6，1981)来进行筛查。
结合亲合力指的是配体和受体之间相互作用的强度。为了说明对阿片样受体的结合亲合力，可以使用竞争结合研究来评价本发明的化合物。可以使用在稳定转染的细胞系中表达的经克隆的κ阿片样受体和μ阿片样受体或者自然产生自如上所述的富含受体的组织源的阿片样受体来进行这些研究。在这些研究中，使用测试化合物(未被标记的配体或非放射性配体)以逐步增加的浓度来置换对所研究的受体具有高亲合力和选择性的放射性标记配体的特异性结合。经滴定的U-69,593和DAMGO可以分别用作κ阿片样和μ阿片样受体研究中的配体。两种配体都可以商购获得(NEN-Dupont)。DAMGO是[D-Ala2、MePhe4、Gly-ol5]-脑啡肽的首字母缩写。放射性配体的亲合力定义为放射性配体的导致饱和研究中的半数最大特异性结合(KD)的浓度。所述测试化合物(未被标记的配体或者非放射性配体)的亲合力在竞争结合研究中通过根据以下公式计算的抑制常数(Ki)来确定：
Ki＝IC50/[1+(F/KD)]
其中，IC50＝抑制50％的所述放射性配体的特异性结合的所述非放射性配体的浓度
F＝游离放射性配体浓度
KD＝放射性配体的在饱和研究中所确定的亲合力。
当采用相对较低浓度的受体在特定条件下进行这些检测时，针对测试化合物所算得的Ki是其解离常数KD的一个很好的近似值，它表示占据一半(50％)结合位点所需的配体浓度。在纳摩尔和亚纳摩尔范围内的低Ki值在阿片样领域内被认为是配体具有高亲合力的证明。示例性类似物对κ阿片样受体具有约10纳摩尔(nM)以下的Ki，而典型的类似物具有约1nM以下的Ki。高亲合力化合物：(1)能使用相对较低剂量的药物，从而将由于低亲合力相互作用而产生副作用的概率降至最低，以及(2)潜在地减少制造药剂的成本，这是由于，假设发生同等的吸收、分配、新陈代谢和排泄，亲合力较高的化合物产生所希望的治疗效果所需的量相应减少。
这些使用κ阿片样受体和μ阿片样受体的结合检验法简单易行，并可以容易地针对大量的化合物进行，以确定这些化合物是否对κ阿片样受体具有选择性以及是否具有高亲合力。这些结合检测可以用本领域技术人员已知的各种方法来进行，而该常见类型检测的一个具体例子在Young EA等的[3H]Dynorphin A binding and kappa selectivity ofprodynorphin peptides in rat，guinea pig and monkey brain.Eur.J.Pharmacol.121：355-365，1986中有描述。
本文中用到的各种缩略词如下：
D-Nle是指D-正亮氨酸、D-Hle表示D-高亮氨酸。D-Har表示D-高精氨酸，而D-nArg代表D-正精氨酸(D-norarginine)，它比D-Arg少一个碳原子。D-Nal是指丙氨酸的D-异构体，其在β-碳上被萘基取代。典型地，采用D-2Nal，即与萘连接的位置在环结构的2位；但是，也可以采用D-1Nal。缩略词D-Cpa和D-Fpa分别用以表示氯-D-Phe和氟-D-Phe，其中典型的是D-4Cpa、D-2Fpa、D-3Fpa和D-4Fpa。D-Npa指硝基-D-Phe，而D-Mpa用以表示甲基-D-Phe。D-3，4Cpa指3，4-二氯-D-Phe。D-Acp表示D-Ala(环戊基)。D-Orn表示D-鸟氨酸，D-Dbu表示α，γ-二氨基丁酸。CML表示Cα甲基Leu，而CMP和CMO表示CαMe Phe和CαMe Orn。D-4Amf指D-4(NH2CH2)Phe，而D-Gmf指的是Amf(咪基)，它表示其中4位被CH2NHC(NH)NH2取代的D-Phe。Amd表示咪基，也可以使用符号D-Amf(Amd)。D-Tic指D-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸。Ala(Thi)中的Thi表示噻吩基，该噻吩基通常在其2位与丙氨酸连接，虽然3-噻吩基是等效的。Ily和Ior分别指异丙基Lys和异丙基Orn，其中侧链氨基被异丙基烷基化。
低等烷基指的是C1到C6，例如C1到C4，但包括环丙基和环丁基。Me、Et、Pr、Ipr、Bu、Pn和Bzl用以表示甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、戊基和苄基。Cyp指的是环丙基，Cyb指的是环丁基。尽管连接键通常连接至烷基链的一侧，但所述连接键也可位于所述链的其他位置，例如3-戊基也可以指乙基丙基。4Nbz和4Abz表示4-硝基苄基和4-氨基苄基。2-、3-和4-吡啶甲基(Pic)指在2-、3-、4-位置上通过亚甲基连接的甲基吡啶基。
Mor指吗啉基
Figure A200780019231D00391
而Tmo指硫代吗啉基
Figure A200780019231D00392
Ahx用以表示4-氨基环己基，并且hEt用以表示羟基乙基，即-CH2CH2OH。
Aeb用以表示4-(2-氨基-2-羧乙基)苄基，即
Figure A200780019231D00393
Pip指哌啶基，而4-HyP和OxP指的是4-羟基哌啶基和4-氧-哌啶基。Ppz指哌嗪基。Ecp指4-乙基氨基甲酰基哌嗪基；也可以使用季铵部分，例如4-二甲基哌嗪基(Dmp)或其他二-低级烷基取代。被取代的苄基典型的是4-氨基苄基，即
而2-Tzl指的是2-噻唑基，
即
Dor指δ-鸟氨酸基(ornithinyl)，其中L-鸟氨酸的侧链氨基通过酰胺键与C端相连。
D-Phe或具有取代基的D-Phe是在1位上的例子。苯环可在2-、3-和/或4-位上具有取代基，在2位或4位被氯或氟取代是常见取代的具体例子。α-碳原子还可以被甲基化。也可以使用类似于D-Phe的其他等价残基，这些残基包括D-Ala(环戊基)、D-Ala(噻吩基)、D-Tyr和D-Tic。2位残基也可以是D-Phe或者具有取代基的D-Phe，这样的取代包括苯环4位碳上的取代，或者3位和4位上的取代。作为选择，可以使用被萘基取代的D-丙氨酸，以及D-Trp和D-Tyr。3位可以被诸如D-Nle、D-Leu、D-CML、D-Hle、D-Met或D-Val等残基占据；然而，也可以使用D-Ala(环戊基)或者D-Phe。可被二甲基取代的D-Arg和D-Har是4位的例子；然而，也可以使用D-nArg和其他等价残基，如D-Lys或者D-Orn(其中任一个可用异丙基烷基化其ω-氨基，或者使其α-碳基团甲基化)。此外，也可以使用D-Dbu、D-4Amf(通常取代有咪基)和D-His。
其他缩略式的列表
 
缩略词 定义
D-Phe D-苯丙氨酸
D-Tyr D-酪氨酸
D-Tic D-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸
D-Ala D-丙氨酸
D-1Nal 在β-碳上取代有萘基的D-丙氨酸，连接位置在萘环结构的1位上
D-2Nal 在β-碳上取代有萘基的D-丙氨酸，连接位置在萘环结构的2位上
D-Trp D-色氨酸
D-Nle D-正亮氨酸
D-Leu D-亮氨酸
D-Hle D-高亮氨酸
D-Met D-甲硫氨酸
D-Val D-缬氨酸
 
缩略词 定义
D-Arg D-精氨酸
D-Har D-高精氨酸
D-nArg D-正精氨酸
D-Lys D-赖氨酸
D-Ily 异丙基-D-赖氨酸
D-Arg(Et2) 二乙基-D-精氨酸
D-Har(Et2) 二乙基-D-高精氨酸
D-Amf D-(NH2CH2)-苯丙氨酸
D-Gmf D-(CH2NHC(NH)NH2)-苯丙氨酸
D-Dbu α、γ-二氨基丁酸
D-Orn D-鸟氨酸
D-Ior 异丙基-D-鸟氨酸
Aeb 4-(2-氨基-2-羧乙基)苄基
Ppz 哌嗪基
Pcp 4-苯基氨基甲酰基哌嗪-1-基
Aao 8-(乙酰氨基)-3，6-二氧辛-1-基
Aoo 8-氨基-3，6-二氧辛-1-基
Hoh 6-(L-氢乳清基氨基)-己-1-基；L-氢乳清酸为C4N2H5(O)2-COOH
Ghx 6-(D-葡萄糖基氨基)-己基
Gao 6-(D-葡萄糖基氨基)-3，6-二氧辛-1-基
D-4Fpa 4-氟-D-苯丙氨酸
D-4Cpa 4-氯-D-苯丙氨酸
D-3，4Cpa 3，4-二氯-D-苯丙氨酸
D-CML Cα甲基-D-亮氨酸
D-Acp D-Ala(环戊基)
Mor 吗啉基
Tmo 硫代吗啉基
Pip 哌啶基
4-HyP 4-羟基哌啶-1-基
OxP 4-氧-哌啶-1-基
Me 甲基
Et 乙基
Pr 丙基
Bu 丁基
HEt 羟乙基(即，-CH2CH2OH)
Cyp 环丙基
Bzl 苄基
D-2Fpa 2-氟-D-苯丙氨酸
D-Ala(2Thi) 2-噻吩基-D-丙氨酸
4Pic 4-吡啶甲基
Cαmethyl 与氨基酸的α-碳相连的甲基
在一个实施方式中，本发明提供了治疗表现出产乳不足或者不充分的哺乳动物或者有产乳不足或者不充分风险的哺乳动物的方法；其中所述方法包括向所述哺乳动物施用一定量的外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药，所述施用以有效治疗所述哺乳动物的量进行，所述外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药可以是具有下式的肽，或离子化或经代谢而形成的肽：
H-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q；并且
其中Xaa1是(A)D-Phe、(CαMe)D-Phe、D-Tyr、D-Tic或D-Ala(环戊基或噻吩基)，而A是H、NO2、F、Cl或CH3；Xaa2是(A’)D-Phe、D-1Nal、D-2Nal、D-Tyr或D-Trp，而A’是A或3，4Cl2；Xaa3是D-Nle、(B)D-Leu、D-Hle、D-Met、D-Val、D-Phe或D-Ala(环戊基)，而B是H或CαMe；Xaa4是D-Arg、D-Har、D-nArg、D-Lys、D-Lys(Ipr)、D-Arg(Et2)、D-Har(Et2)、D-Amf(G)、D-Dbu、(B)D-Orn或D-Orn(Ipr)，而G是H或咪基；以及Q是NR1R2、吗啉基或硫代吗啉基、(C)哌啶基、哌嗪基、4-单-或4，4-二-取代哌嗪基或δ-鸟氨酸基，而R1是低级烷基、具有取代基的低级烷基、苄基、具有取代基的苄基、氨基环己基、2-噻唑基、2-吡啶甲基、3-吡啶甲基、或4-吡啶甲基，R2为H或低级烷基；并且C为H、4-羟基或4-氧。在另一个具体的实施方式中，Xaa2是D-Phe，Xaa3是D-Nle且Xaa4是D-Arg。在另一个实施方式中，Q是NHR1并且R1是乙基、丙基、丁基、环丙基或环丁基。在另外一个可选的实施方式中，Q是吗啉基或硫代吗啉基；或者Q是NHR1，并且R1是4-吡啶甲基。在另一个实施方式中，Xaa1是D-Ala(2-噻吩基)；作为选择，Xaa1是D-4FPhe，并且Xaa2是D-4ClPhe。在再一个实施方式中，Xaa3是D-Nle或D-Leu，并且Xaa4是D-Orn或D-Amf(Amd)。在另一个实施方式中，Xaa2是D-Phe，Xaa3是D-Leu或D-CML，并且Xaa4是D-Orn。
本发明进一步提供了一种治疗表现出产乳不足或者不充分的哺乳动物或者有产乳不足或者不充分风险的哺乳动物的方法；其中所述方法包括向所述哺乳动物施用一定量的外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药，所述施用以有效治疗所述哺乳动物的量进行，所述外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药可以是具有下式的肽，或离子化或经代谢而形成的肽：
H-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q；并且
其中Xaa1是D-Phe(不具有取代基的或者由Cα、Me、2F、4F或4Cl取代的)或D-Ala(环戊基或噻吩基)；Xaa2是(A′)D-Phe、D-1Nal、D-2Nal或D-Trp，而A′为H、4F、4Cl、4NO2或3，4Cl2；Xaa3是D-Nle、D-Leu、D-CML、D-Met或D-Acp；Xaa4是D-Arg、D-Arg(Et2)、D-Lys、D-Ily、D-Har、D-Har(Et2)、D-nArg、D-Orn、D-Ior、D-Dbu、D-Amf、或D-Amf(Amd)；并且Q是NR1R2、Mor、Tmo、Pip、4-Hyp、OxP或Ppz，而R1为Me、Et、Pr、Bu、hEt、Cyp、Bzl或4-吡啶甲基，并且R2为H或Et。在一个实施方式中，Xaa2是D-Phe，Xaa3是D-Nle，并且Xaa4是D-Arg。在另一个实施方式中，Q是NHR1且R1是乙基、丙基、丁基、环丙基或环丁基。作为选择，Q可以是吗啉基或硫代吗啉基。在另一个实施方式中，Q是NHR1且R1是4-吡啶甲基。作为选择，Q是NR1R2，而R1是乙基且R2是乙基。在另一个实施方式中，Xaa1是D-Phe或D-Ala(2-噻吩基)且Xaa2是D-4ClPhe。在另一个实施方式中，Xaa3是D-Nle或D-Leu并且Q是吗啉基。
在一个具体的实施方式中，Xaa1是D-Phe、D-4Fpa、D-2Fpa、D-Acp或D-Ala(2Thi)；Xaa2是(A)D-Phe、D-1Nal、D-2Nal或D-Trp，而A是4F或4Cl；Xaa3是D-Nle、D-Met或D-Leu；Xaa4是D-Arg、D-Har、D-nArg、D-Lys、D-Orn或D-Amf(Amd)；并且Q是NHR1、Mor、Tmo、Pip或Ppz，而R1是Et、Pr或4Pic。
在另一个实施方式中，所述肽具有下式：
H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHEt、
H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-吗啉基、
H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-4-吡啶甲基、
H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHPr、
H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-硫代吗啉基、
H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-Net2、
H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHMe、
H-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Orn-吗啉基、
H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHhEt、
H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-环丙基、
H-D-Ala(2Thi)-D-4Cpa-D-Leu-D-Arg-吗啉基、
H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-哌啶基、
H-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Orn-NHEt、
H-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-吗啉基、或
H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-哌嗪基。
表现出产奶不足或者不充分的哺乳动物或者有产奶不足或者不充分风险的哺乳动物可用本发明的方法进行治疗；所述方法包括向所述哺乳动物施用一定量的外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药，所述施用以有效治疗所述哺乳动物的量进行，其中所述施用包括静脉内、皮下、肌内、鼻内、口服或者透皮施用，例如通过电转运装置施用。所述方法的一个实施方式中，所述电转运装置通过身体表面输送所述外周选择性κ阿片样受体激动剂。
在一个具体方面，所述方法包括：(a)提供第一电极；(b)提供第二电极；(c)提供与所述第一电极和所述第二电极电连接的电源；(d)提供至少一个具有所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的供体储库，其中所述供体储库与所述第一电极或第二电极相关联；和(e)通过所述身体表面输送治疗有效量的所述外周选择性κ阿片样受体激动剂。
所述外周选择性κ阿片样受体激动剂可以以每小时、每天、每周或每月约1mg/kg所述哺乳动物的体重到约100mg/kg所述哺乳动物的体重通过这些方法中的任何方法进行施用。本发明的输送所施用的外周选择性κ阿片样受体激动剂的这些方法可将催乳素增加至比血清催乳素基线水平高超过10ng/ml血清、15ng/ml血清、20ng/ml血清、25ng/ml血清、50ng/ml血清、75ng/ml血清、100ng/ml血清、125ng/ml血清、150ng/ml血清、175ng/ml血清或者200ng/ml血清的水平。这些方法对治疗雌性动物受试对象(尤其是哺乳动物，例如灵长类动物、有蹄类动物、犬科动物或者猫科动物)或者人类患者，尤其是怀孕妇女或者生下孩子后1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、12～24、24～26、36～48小时、数天、数周或数月的妇女特别有利。合适的灵长类动物包括猿、大猩猩、猴子、猕猴、黑猩猩、狐猴或者猩猩。合适的有蹄类动物包括奶牛、猪、绵羊、山羊或者马。
本发明进一步提供了治疗表现出奶产量不足或者不充分或者有表现出奶产量不足或者不充分风险的哺乳动物的方法，其中所述方法包括在分娩前后向所述受试对象联合施用一定量的外周选择性κ阿片样受体激动剂和诸如催产素等泌乳增强剂或者稳定剂，所述施用以有效治疗所述哺乳动物的量进行。催产素可以在分娩后一小时或数小时内、一天或数天、或者一周或数周内进行施用。在一个具体实施方式中，所述泌乳增强剂或者稳定剂在分娩后的一个或数个小时、一天或数天、或者一周或数周后施用。
本发明进一步通过以下实施例进行阐述，这些例子并不解释为进行进一步的限制。在本申请全文中所引用的所有参考文献的内容(包括参考文献、已授权的专利、已公开的专利申请和待审的专利申请)在这里明确以参考的方式引入。
实施例
在1小时或5分钟的输注后，评估了健康男性和经手术失去生育能力的女性人类受试对象中，本文命名为CR665的作为本发明化合物之一的D-苯丙氨酰基-D-苯丙氨酰基-D-正亮氨酰基-N-(4-吡啶基甲基)-D-精氨酰胺(乙酸盐)的逐步增加的静脉内(IV)单剂量的安全性、耐受性、药物代谢动力学和催乳素提升活性。在参考文献中也将CR665称为FE200665，其是一种外周选择性κ阿片样受体激动剂；参见美国专利第5,965,701号和Riviere P.J.-M.等，Novel D-amino aicd tetrapeptides demonstrateunprecedented k-opioid receptor selectivity and antinociception.30th Int.Narcotics Res.Conf.(INRC)1999，萨拉托加泉(Saratoga Springs)，纽约，1999年7月10～12日；Wisniewski K等，Long acting，selective，peripheralkappaagonists.第26届欧洲肽会议(26th European Peptide Symposium)，蒙彼利埃(Montpilier)，法国，2000年9月11～15日；Binder W等，Analgesicand antiinflammatory effects of two novel kappa-opioid peptides.Anesthesiology.94：1034-1044，2001；Riviere PJ.Peripheral kappa-opioidreceptor agonists for visceral pain.Br J Pharmacol.141：1331-4，2004。
研究设计和程序
该临床研究以双盲法、安慰剂对照、逐步增加的静脉内(IV)单剂量、序贯组研究进行。本文中所报道的结果得自如下表X中所示的15组中的54名男性和女性人类受试对象。这份研究采用双盲和安慰剂对照方式进行，以避免在该研究过程中数据收集和评价出现偏差。选择安慰剂作为对照治疗以评估所观察到的任何效果是否与治疗相关或者仅仅反映了研究状况。在每一组中，各受试对象接受CR665或安慰剂。在第一天的早上，用1小时(A部分)或5分钟(B部分)以单一恒定速率IV输注施用药剂。在得到低剂量水平的安全数据和药物代谢动力学数据的令人满意的评述之后，以逐渐增加的方式施用药剂。在各次剂量增加之间的时间间隔为至少6天，以有足够时间进行充分安全性评述。
剂量水平如表1所示：
表1：治疗
Figure A200780019231D00461
根据药品生产质量管理规范(GMP)标准制备CR665并在2mL玻璃小瓶中作为整体提供，每一个玻璃小瓶装有CR665溶液(1.1mL，等渗0.04M乙酸盐缓冲液中的10mg/mL的浓度[游离碱]乙酸，pH4.5)。也制备了具有相同外观，即澄清无色溶液的用于IV施用的安慰剂溶液(等渗0.04M乙酸盐缓冲液，pH4.5)。所述IV剂量溶液保存在2℃到8℃。
每位受试对象的单次静脉剂量由整体供应品(装有1.1mL的CR665或安慰剂溶液的2mL小瓶)进行制备。对于每一次给药准备，用注射器从一个或多个小瓶中吸取适当体积的CR665溶液(10mg/mL)或安慰剂溶液，并注入到装有适当体积的无菌NaCl缓冲液的60mL Plastipak聚丙烯注射器中(Beckton Dickinson S.A.，西班牙)中。
对于1小时输注，准备的最终体积是40mL，其中30mL用于输注。剂量计算如下：
所需的10mg/mL CR665的体积(mL)＝剂量水平(mg/kg)×体重(kg)×([40/30]/10)
缓冲液体积＝40mL-所需的CR665的体积(mL)
表2提供一些稀释液的实例(基于70kg的体重)
表2
Figure A200780019231D00471
a浓度10mg/mL
通过插入受试对象非优势臂前臂的合适静脉中的插管施用药剂。采用以0.5mL/min(30mL/h)的恒定速率工作的IMED Gemini PC 1输注泵在早上7:00-10:30间对所述药剂进行1小时的输注。施用总共30mL的计量溶液(来自于注射器中的40mL)，受试对象在整个输注过程中保持仰卧。
从输注开始后24小时起，在每天的适宜时间提供饮食。除了第一天的液体限制后，在其它所有时间可自由提供水。从输注开始直至输注开始后24小时，记录所消耗的液体作为液体平衡评估的一部分。从第一天的22:00开始，直到第二天取完临床试验样品，以及在随访之前的至少6小时，受试对象禁止食用食物和饮料(水除外)。
在到达临床研究中心的第一天，进行了给药前的评估，包括检测尿样中违禁药品的存在，进行酒精呼吸测试和体重记录(穿内衣)。然后开始受试对象的24小时尿液收集，以用于肌酸酐清除率和液体平衡的评估。还评估生命体征和12导联心电图(12 lead ECG)，并且所有受试对象均接受身体检查。
在整个研究中，每个受试对象的状态都受到监测。另外，在研究的每个部分的下列时刻：给药前、输注开始后0.5小时、1小时、3小时、12小时、24小时、36小时和48小时(对于A1到A4组只到24小时)，以及随访评估时，观察任何征候或症状，并通过开放式问卷提问例如“自从上次询问之后，你感觉如何？”。
还鼓励受试对象自动报告在研究期间的任何其他时刻出现的不利事件。为每个受试对象记录任何不利事件和所需要的治疗行为。记录性质、发作时间、持续时间和严重性以及项目医师对与药物施用的关系的观点。
在以下时刻：给药前、输注开始后0.5小时、1小时、2小时和24小时，监测每个受试对象给药插管部位的状况：红斑，瘙痒和肿胀。还鼓励受试对象自动报告在研究期间的任何其他时刻出现与输注部位有关的不利事件。为每个受试对象记录与输注部位有关的任何不利事件、观察结果和所需要的治疗行为。记录性质、发作时间、持续时间和严重性以及项目医师对与药物施用的关系的观点。
在以下时刻：第1天，给药前、输注开始后15分钟(仅限于B部分)、30分钟、55分钟、1.5小时、2小时、2.5小时、3小时、4小时、8小时、12小时、24小时和48小时(A1到A4组只到24小时)，和随访时，测量仰卧和站立时的血压、仰卧脉率和口腔温度，重复两次。在输注期间，仅测量仰卧时的生命体征。以大约2分钟的间隔测量给药前血压和脉率，重复三次。中值用作数据分析的基线值。所有随后的测量均进行一次，但如果处于相关临床参考范围之外时，则重复两次。如果重复测量，采用三个值的中间值用于数据分析。使用自动Critikon DinamapTMPRO400监测器测量血压和脉率。在血压和脉率测量之前，要求受试对象仰卧至少5分钟。在受试对象坐大约1分钟然后站立大约2分钟之后，单次测量站立时的血压和脉率。使用Omron数字温度计单次测量口腔体温。为了评估药物对心血管功能的作用，在受试对象仰卧至少5分钟之后的以下时刻：第1天，给药前、输注开始后50分钟、2小时、4小时、8小时、24小时和48小时(A1到A4组只到24小时)，随访时，在MarquetteMAC5000 ECG机上记录具有10秒钟心律带(rhythm strip)的12导联静息心电图。ECG机算出了PR、QT和QTc间隔时间、QRS持续时间和心率。对于心率(QTc)，采用Bazett公式对QT间隔时间进行矫正。为进行连续的ECG(心电图)测量，从输注开始前1小时直至输注开始后4小时，使用Reynolds Tracker II Holter监测仪对每个受试对象进行连续的心电图测量(心脏Holter监测)。在禁食至少6个小时后，收集血液样品和尿液样品，以用于在研究期间的如下时刻的临床实验评价：给药前和输注开始后24小时，以及随访时。
如表3所示进行以下评价。
表3
 
血清生物化学： 单位 血液学： 单位
天冬氨酸氨基转移酶(AST)丙氨酸氨基转移酶(ALT)碱性磷酸酶γ-谷氨酰转移酶(GGT)钠钾氯化物钙无机磷酸盐葡萄糖尿素胆红素(全部a)肌酸酐总蛋白白蛋白                  IU/LIU/LIU/LIU/Lmmol/Lmmol/Lmmol/Lmmol/Lmmol/Lmmol/Lmmol/Lμmol/Lμmol/Lg/Lg/L    白细胞计数(WBC)红细胞计数(RBC)血红蛋白血细胞压积(PCV)平均细胞容积(MCV)平均细胞血红蛋白(MCH)平均细胞血红蛋白浓度血小板计数差异WBC 109/L1012/Lg/dL％fLpgg/dL109/L109/L和％
尿分析： 单位 血清学： 单位
显微镜检查比重pH蛋白质葡萄糖酮血液尿胆素原   +NANA+++++  乙型肝炎表面抗原(HBsAg)b丙型肝炎抗体b艾滋病毒(HIV)抗体b neg/posneg/posneg/pos
a仅当全部胆红素被提升时分析直接胆红素
b仅在筛查时分析
Neg＝阴性
Pos＝阳性
在以下时刻：给药前(重复三次，样品给药前的这三次重复的每一次之间的间隔至少为15分钟)、输注开始后15分钟、30分钟、45分钟、1小时(在输注即将结束前)、1小时5分钟、1小时10分钟、1小时15分钟、1.5小时、2小时、2.5小时、3小时、4小时、6小时、8小时和12小时，收集血液样品(2.5mL)以用于血清催乳素的评价。
通过固相萃取制备用于CR665和N-氧化物代谢物分析的血浆和尿样。使用串联有质谱检测的液相色谱(LC-MS/MS)对经离心的洗脱液进行定量。定量下限为1ng/mL。
收集尿样之后，取出用于药物分析和/或尿分析的等分试样，然后在以下时间间隔混合尿液：24小时到0小时和输注开始后0小时到24小时。从每个混合的收集尿样中取出10mL等分试样用于尿肌酸酐的测定。
在以下期间进行液体平衡的评估(通过比较消耗的液体体积和排泄的液体体积而得出)：24小时到0小时和输注开始后0小时到24小时。在此期间，记录消耗的液体体积和排尿体积。
在以下时间：排放(第2天或第3天)和随访时进行全面身体检查，包括神经学检查。
为进行药物代谢动力学评估，在以下时刻从对侧前臂静脉采取血液样品(1×3ml)：给药前、输注开始后15分钟、30分钟、45分钟、1小时(在输注即将结束前)、1小时5分钟、1小时10分钟、1小时15分钟、1.5小时、2小时、2.5小时、3小时、4小时、6小时、8小时、12小时、16小时、24小时、36小时和48小时。采用一根留置插管(
Figure A200780019231D0051133206QIETU
；BOC OhmedaAB，瑞典)进行给药前和输注开始后至少12小时内的所有血液收集。另外，使用静脉穿刺收集样品。血液样品收集在预冷的3mL K3EDTAVacutainerTM管(Becton Dickinson UK，Ltd.，牛津)之中，并且，在混合后，放置在装有碎冰/水的冷却盒中。样品在收集后30分钟内离心，该离心在约4℃以1500g进行10分钟。对于每个样品，将分离的血浆转移到2个经适当标记的5mL聚丙烯管中，然后立即保存在大约-20℃。使用串联有质谱检测的液相色谱分析血浆样品的CR665。
按以下时间间隔将尿液收集在标准重量的聚乙烯容器中：给药前(-24小时到0小时)、输注开始后0到4小时、4小时到8小时、8小时到12小时、12小时到24小时和24小时到48小时。在每次收集期间，将容器保存在2℃到8℃的冰箱中。在取出两个次级样品(每个约4mL)放入经适当标记的聚丙烯容器之前，记录每份收集样品的重量(g)，并在收集2小时内将上述样品保存在约-20℃。保存其它等分试样(每个收集期间1×100mL)以用于将来可能的分析。将来自于给药后收集时间间隔的任何其余尿样与在0小时到24小时收集期间收集的尿液混合，用于肌酸酐清除率的分析。使用1.018的标称比重值来计算尿量。
使用WinNonlin Enterprise Version 4.0.1进行药物代谢动力学分析。
采用非区划程序(non compartmental procedure)，由CR665和N-氧化物代谢物的血浆和尿液浓度确定药物代谢动力学参数。所确定的药物代谢动力学参数列在以下表4中。
表4.所确定的CR665和N-氧化物代谢物的药物代谢动力学参数
Figure A200780019231D00521
确定剂量和体重归一化值(norm)以用于AUC0-t、AUC0-∞、Cinf和Cmax。确定体重归一化值(norm)以用于Vz、Vss、CL和CLR。
根据接受CR665并具有可评价的血浆浓度-时间曲线的受试对象的CR665的血浆浓度，采用如在WinNonlin软件中进行的模型无关方法进行药物代谢动力学分析。
确定了如下的血浆药物代谢动力学参数以用于CR665：
Cmax：最大血浆浓度
tmax：最大血浆浓度时间
t1/2z：终末半衰期＝ln(2)/λz
AUC0-t：从零时刻到时间t(最后可计量的血浆浓度的时间)的血浆浓度-时间曲线下面积
AUCinf：从零时刻到无限大时刻的血浆浓度-时间曲线下面积，计算为[AUC0-t+(Clast/λz)]，其中Clast是在最后可计量浓度曲线的估算浓度。
λz：终末期速率常数，也称之为Kel
CL：身体总清除率＝剂量/AUCinf
Vz：根据终末期计算为Vz/F＝剂量/λz×AUCinf的分布容积
在药物代谢动力学分析中采用个体取样历时(elapsed sampling time)。由实验观测直接获得Cmax和tmax。为了计算AUC0-t，当在tmax之后遇到连续两个低于定量下限(LLOQ)的血浆浓度时，所有随后的数值均不再用于分析。终末期的指数速率常数λz通过对数(log)浓度-时间数据结合终末期的血浆浓度-时间曲线的线性回归进行估算。包括在所述回归中的数据点的数目由目视观察进行确定。除Cmax之外，需要在所述终末期中的最少3个数据点来估算λz。
还进行了CR665的药物代谢动力学的剂量比例性评估。导出对数转换的AUC0-t、AUCinf和Cmax并对以下形式的模型进行拟合：
Log(参数)＝截距+β×Log(剂量)+误差
其中，剂量是固定项，从而评估受试对象之间的斜率估计值以评估剂量比例性。斜率β的点估计值(置信区间为90％)提供了出现真实斜率的可信范围。所述斜率可解释为如果所述斜率的90％的置信区间(CI)包括数值1，则可得出CR665的AUC0-t、AUCinf和Cmax具有剂量比例性的结论。
使用WinNonlin Enterprise Version(企业版本)4.0.1(PharsightCorporation，芒廷维尤(Mountain View)，加利福尼亚州，美国)进行药效学分析。由催乳素血清浓度计算以下药效学参数：
在每个取样时间相对于基线(给药前的三次测量值的平均值)的变化值
观测到的相对于基线的最大变化值(Cmax)
0小时到12小时的相对于基线的变化值的时间曲线下面积(AUC0-12h)。
这一研究在MHRA临床试验授权(Clinical Trials Authorization，CTA)之下根据：(1)赫尔辛基宣言的相关法条(1964年在第18世界医学大会通过，并在东京(1975)、威尼斯(1983)、香港(1989)、南非(1996)和苏格兰(2000)进行修订)；和(2)ICH良好药物临床试验规范((Good Clinical Practices，GCP)，其合并在EU由CPMP于1996年7月通过的指南中，作为CPMP/ICH/135/95进行发行)进行。
药品安全性
完成所述治疗周期的所有54名受试对象均未观察到严峻或严重的不利事件。特别是，即使在最高的剂量水平，也没有与之前测试的κ阿片样受体激动剂的不可耐受的剂量水平相关的更为典型的中枢神经系统症状(幻觉或焦虑)的征候。对于12导联心电图评价，在12导联心电图的形态学中未有治疗相关的趋势(trend)、显著临床变化或者异常。类似地，对于临床试验评价，在血清生物化学、血液学或者尿分析参数中没有治疗相关的趋势或显著临床发现。受试对象的身体检查也没有显示出任何治疗相关的发现。
在所述研究的A部分和B部分，在平均仰卧和站立的心脏收缩和舒张血压、仰卧和站立脉率或者口内体温中没有治疗或剂量相关的趋势。在A部分和B部分中没有发现12导联心电图参数中有明显的治疗或剂量相关的趋势。此外，在每个CR665剂量水平的受试对象个体的12导联心电图的形态学中均没有临床上重要的发现。在男性和女性受试对象的每个CR665的剂量水平，没有QTc时间间隔延长(Bazett’s和Friedericia’s矫正的)的迹象。
对于A部分和B部分，在研究期间对于任何受试对象，在由血清肌酸酐所估算的肌酸酐清除率中均没有临床上重要的变化。对于CR665和安慰剂的每个剂量水平，在给药后24小时和给药前，平均肌酸酐清除率基本相似。在开始输注后0小时到24小时期间，在液体平衡(尿液排泄-液体消耗)中没有明显的治疗或剂量相关的趋势。然而，在本研究的A部分和B部分的男性和女性受试对象中，与安慰剂相比，CR665的每个剂量水平均观察到排尿量在输注开始后最初4小时出现增加。
药效学：CR665提升催乳素的时间进程
在所有剂量水平，CR665的IV单剂量施用导致所述男性和女性受试对象中的催乳素血清浓度的快速且明显的增加。在图1到3中显示了男性和女性受试对象中1小时和5分钟的安慰剂和CR665输注后，催乳素血清浓度相对于基线(给药前)的变化：
男性和女性受试对象中1小时和5分钟的安慰剂和CR665输注后血清催乳素的导出药效学参数总结在表5到7中：
表5：男性受试对象中1小时IV输注后血清催乳素的药效学参数(相对于基线的变化)的总结(A部分)
显示的是算数平均值(SD)数据
N＝所研究的受试对象的数量
表6：女性受试对象中1小时IV输注后血清催乳素的药效学参数(相对于基线的变化)的总结(A部分)
Figure A200780019231D00552
显示的是算数平均值(SD)数据
N＝所研究的受试对象的数量
表7：男性和女性受试对象中5分钟IV输注后血清催乳素的药效学参数(相对于基线的变化)的总结(B部分)
Figure A200780019231D00553
显示的是算数平均值(SD)数据
N＝所研究的受试对象的数量
在A部分中，在男性受试对象的0.015mg/kg到0.48mg/kg CR665的1小时输注后，血清催乳素浓度快速而显著地增加。在每个剂量水平，最大血清催乳素浓度一般出现在开始输注后1小时时，即在输注结束时。直至0.36mg/kg剂量水平，Cmax(血清催乳素相对于基线的最大变化值)的平均值出现明显的与剂量相关的增加。Cmax平均值在0.36mg/kg、0.42mg/kg和0.48mg/kg剂量水平时基本相似，在所有这些剂量水平中，最高血清催乳素水平比基线(给药前)高约5倍到6倍。直至0.36mg/kg，AUC0-12h(相对于基线的变化)的平均值都出现增加，此后在0.36mg/kg到0.48mg/kg剂量范围内基本相似。在催乳素的最大浓度之后，出现与剂量相关的降低(降低至基线水平)。在0.36mg/kg、0.42mg/kg和0.48mg/kg剂量水平，平均值在8小时内降至接近基线值。
在A部分，在女性受试对象的0.24mg/kg CR665的1小时输注后，最大血清催乳素浓度出现在输注开始后1小时。女性的Cmax平均值(相对于基线的变化)高于男性受试对象的Cmax平均值，女性中的最高血清催乳素水平比基线(给药前)高约12倍。
在B部分，在男性受试对象的0.03mg/kg到0.09mg/kg CR665的5分钟输注后，最大血清催乳素浓度出现在输注开始后30分钟，即输注结束后25分钟。在0.03mg/kg、0.06mg/kg和0.09mg/kg剂量水平，Cmax平均值基本相似，在所有这些剂量水平下，最大血清催乳素水平比基线(给药前)高约4倍到6倍。在女性受试对象中，最大血清催乳素浓度出现在0.06mg/kg CR665的5分钟输注开始后0.5小时到1小时。女性中的Cmax平均值与男性受试对象的相似，女性的最大血清催乳素水平比基线(给药前)高约4倍。
A部分：1小时静脉输注后CR665的药物代谢动力学
在男性受试对象中进行1小时输注后CR665的血浆浓度显示在图4和图5中。
在男性受试对象中进行1小时输注后CR665的药物代谢动力学参数总结在表8中。
表8：在男性受试对象中进行1小时IV输注后CR665的药物代谢动力学参数总结(A部分)
Figure A200780019231D00571
显示的是几何平均值(CV％)数据
a中值(最小-最大)
N＝所研究的受试对象的数量
(norm)＝针对剂量和体重进行过归一化(mg/kg)
在对男性受试对象进行0.015mg/kg到0.48mg/kg剂量水平的CR665IV输注期间，血浆浓度迅速增加，其最大浓度通常出现在1小时输注结束时。在每个剂量水平，对于受试对象个体而言，在输注开始后45分钟和1小时的CR665的血浆浓度基本相似。
IV输注结束后，CR665的血浆浓度主要以两阶段方式出现下降，消除阶段在输注开始后1.25小时到6.0小时开始出现。
平均表观消除半衰期在0.015mg/kg到0.06mg/kg剂量范围内相对恒定，为大约0.7小时，但在0.12mg/kg到0.48mg/kg剂量范围内变长，变化范围为1.4小时到1.9小时，在更高的剂量，则半衰期值有变长的趋势。对0.12mg/kg到0.48mg/kg剂量范围的受试对象个体，表观消除半衰期的范围是1.2小时到3.0小时。半衰期在更高剂量水平的明显增加与CR665血浆浓度在更高剂量水平具有更长的可计量时间相一致，揭示了更长的真实终末消除期。结果，统计分析显示CR665的消除半衰期在整个剂量范围内具有剂量依赖性。
AUC0-∞和Cmax通常在0.015mg/kg到0.48mg/kg的剂量范围内以与剂量成比例的方式增加。该观测结果由统计分析所证实，由AUC0-∞和Cmax的回归分析所得的斜率估计值(95％CI)为1.02(0.978到1.06)和1.02(0.984到1.05)。图6描述了在0.015mg/kg到0.48mg/kg的剂量范围CR665的AUC0-∞随剂量成比例增加。
已发现AUC随剂量成比例增加几乎是完全线性的，如图6所显示，R2值为0.98，这意味着对于该组数据，98％的CR665系统暴露量(systemicexposure)的变异归结于CR665施用剂量的变异。该观测结果的重要性在于，它使得医师可以以高准确度预测在指定的药物剂量将出现什么样的药物暴露量。事实上，本领域技术人员可利用该信息以及所算得的所述药物的药物代谢动力学参数(参见表6)，准确地估计由不同剂量的静脉输注将导致的药物血浆水平、何时将达到药物稳态浓度、以及如何设计个性化用药方案以实现针对具体患者的稳态药物浓度(Bauer，L.A.AppliedClinical Pharmacokinetics，第2章，“Clinical pharmacokinetic equations andcalculations”，第26～49页，2001)。由于控释制剂(例如微球体)和设备(即电转运)意在提供长时间的稳态药物浓度，因此熟练医师可以利用这些药物代谢动力学的信息来确定药物输送方式的有用工作特性。
统计分析显示，CR665的总血浆清除率(CL)是非剂量依赖性的；然而，已发现MRTint和分布容积(Vz和Vss)是剂量依赖性的。这可归结为所观察到的消除速率常数(λz)的变化，这很可能是由于以下事实，即在更高剂量水平，CR665在注射后的更长时间里可以进行量化，而并非CR665动力学的真实剂量依赖性。
在女性受试对象中进行1小时的0.24毫克CR665输注后，CR665的几何平均血浆浓度总结在图7和8中。
在男性和女性受试对象中进行1小时的0.24mg/kg CR665输注后，CR665的算数平均血浆浓度总结在图9中。
在男性和女性受试对象中进行1小时的0.24mg/kg CR665输注后，CR665的药物代谢动力学参数总结在表9中。
表9：在男性和女性受试对象中进行1小时的0.24mg/kg CR665 IV输注后，CR665的药物代谢动力学参数的总结(A部分)
Figure A200780019231D00591
显示的是几何平均值(CV％)数据
a中值(最小-最大)
N＝所研究的受试对象的数量
(norm)＝针对剂量和体重进行过归一化(mg/kg)
在向女性受试对象施用0.24mg/kg CR665后，获得最大血浆浓度的时间与男性中所观察到的相似，即接近IV输注结束时。尔后，CR665的处置动力学在男性和女性受试对象中是相似的，平均终末消除半衰期为大约1.2小时到1.4小时。在0.24mg/kg剂量水平，AUC0-∞、AUC0-∞(norm)、Cmax和Cmax(norm)的平均值在男性和女性受试对象中基本相似。在0.24mg/kg剂量水平，AUC0-∞和Cmax在受试对象之间的变异性在男性和女性受试对象中均较低且相似。这些研究发现是重要的，因为它们证实了CR665药物代谢动力学的可预测性，这有助于熟练的医师设计出意欲实现药物随时间的特定血浆水平的替代性用药方案。
在男性和女性受试对象中进行1小时的0.24mg/kg CR665输注后CR665的尿排量总结在表10中。
表10：在男性和女性受试对象进行1小时的0.24mg/kg CR665IV输注后的CR665的尿排量的总结(A部分)
Figure A200780019231D00601
显示的是几何平均值(CV％)数据
N＝所研究的受试对象的数量
在女性受试对象中，尿液中排泄出的作为未改变药物的剂量部分较低，并与在男性受试对象中所发现的相似。
B部分：外推A部分PK数据来设计简要的CR665 IV输注
对于B部分的研究，根据在所述1小时输注研究(A部分)中获得的结果，采用传统的药物代谢动力学计算(例如，Bauer，L.A.Applied ClinicalPharmacokinetics，第2章，“Clinical pharmacokinetic equations andcalculations”，第26～49页，2001)来设计5分钟输注的用药程序。计算出剂量以形成与在1小时输注研究中见到的相似的CR665系统暴露量。
在男性和女性受试对象中进行5分钟输注后CR665的血浆浓度显示在图10和11中
在男性和女性受试对象中进行5分钟输注后CR665的药物代谢动力学参数总结在表11中。
表11：在男性和女性受试对象中进行5分钟的IV输注后CR665的药物代谢动力学参数的总结(B部分)
显示的是几何平均值(CV％)数据
a中值(最小-最大)
N＝所研究的受试对象的数量
(norm)＝针对剂量和体重进行过归一化(mg/kg)
在男性受试对象以0.03mg/kg到0.09mg/kg的剂量水平进行CR665IV输注之后，血浆浓度迅速增加，最大浓度一般出现在5分钟输注结束时。相似的是，在向女性受试对象施用0.06mg/kg CR665之后，CR665最大浓度也在5分钟输注结束时获得。在男性和女性受试对象中，IV输注结束之后，CR665血浆浓度主要以两阶段方式出现下降，消除阶段的开始出现于输注开始后的1.0小时到2.0小时之间。
在男性受试对象中，在0.03mg/kg到0.09mg/kg整个剂量范围，平均表观消除半衰期(大约1.0小时到1.3小时)是相似的。统计分析证实，CR665的消除半衰期并不依赖于剂量。在男性和女性受试对象中，CR665的处置动力学是相似的，在0.06mg/kg剂量水平，女性中的CR665平均终末消除半衰期为大约0.8小时。
在男性受试对象中，在0.03mg/kg到0.09mg/kg的剂量范围，AUC0-∞和Cmax通常呈现以与剂量成比例的方式增加。这已由统计分析所证实，由AUC0-∞和Cmax的回归分析所得的斜率估计值(95％CI)为1.04(0.853到1.22)和1.12(0.800到1.44)。图12描述了在男性受试对象中，0.03mg/kg到0.09mg/kg剂量范围的CR665的AUC0-∞随剂量成比例地增加。
在0.06mg/kg剂量水平，在5分钟输注之后，男性和女性受试对象的AUC0-∞、AUC0-∞(norm)、Cmax和Cmax(norm)基本相似。
在男性受试对象中，0.03mg/kg到0.09mg/kg整个剂量范围的MRTint、CL、Vz和Vss的平均值是相似的，这已由统计分析所证实。在0.06mg/kg的剂量水平，男性和女性受试对象的每个参数的平均值也是相似的。
在男性受试对象中通常看到AUC0-∞和Cmax具有较低的受试对象之间的变异，CV％值范围分别为11.8％到16.4％和19.6％到32.2％。在男性受试对象的所有剂量中，AUC0-∞和Cmax的受试对象间合并(pooled)变异性分别为15.3％和24.1％。在0.24mg/kg的剂量水平，女性受试对象中AUC0-∞和Cmax的受试对象间变异性也较低，CV％值分别为8.8％和18.8％。
在男性和女性受试对象中进行5分钟输注之后，CR665的尿排量总结在表12中
表12：在男性和女性受试对象中进行5分钟的输注之后的CR665尿排量的总结(B部分)
Figure A200780019231D00631
显示的是几何平均值(CV％)数据
N＝所研究的受试对象的数量
在男性受试对象中，尿液中排泄出的作为未改变的药物的剂量部分对于所有剂量水平都较低，直至给药后24小时大约有3.5％被排出。在女性受试对象中尿液中排泄出的作为未改变的药物的部分也较低(3.8％)，并与男性受试对象中的相似。
在男性受试对象中所研究的剂量范围，尿液中排泄出的CR665的量以与剂量成比例的方式增加。这已由统计分析所证实，回归的斜率与总体并无显著差异。对于所有剂量水平，肾清除率通常都较低并且相似，并具有由统计分析所证实的非剂量依赖性。
用以评估在男性受试对象中输注时间对CR665的药物代谢动力学参数的影响的统计分析的结果显示在表13中。
表格13：男性受试对象中输注时间对CR665的药物代谢动力学参数的影响的统计分析(A部分和B部分)
Figure A200780019231D00632
Figure A200780019231D00641
(norm)＝针对剂量和体重进行过归一化(mg/kg)
在男性受试对象中，比较1小时的IV输注时间和5分钟的IV输注时间之后，CR665的以下药物代谢动力学参数是相似的：AUC0-∞、AUC0-t、t1/2、CL、Vz、Vss和fe0-24h，根据AUC和处置动力学，这表明CR665的总体系统暴露量并未受到不同输注时间的影响。然而，正如所预期的，统计分析证实具有显著性差异的唯一参数是Cmax，其在5分钟输注中比在1小时输注中高大约4.5倍。
在女性受试对象中输注时间对CR665的药物代谢动力学参数的影响的统计分析显示在表14中。
表14：在女性受试对象中输注时间对CR665的药物代谢动力学参数的影响的统计分析
Figure A200780019231D00642
Figure A200780019231D00651
(norm)＝针对剂量和体重进行过归一化(mg/kg)
在女性受试对象中，比较1小时的IV输注时间和5分钟的IV输注时间之后，CR665的以下药物代谢动力学参数是相似的：AUC0-∞、AUC0-t、t1/2、CL、Vz、Vss和fe0-24h，根据AUC和处置动力学，这表明CR665的总体系统暴露量并未受到不同输注时间的影响。然而，正如所预期的，与1小时输注相比，5分钟输注的Cmax明显较高(5.3倍)。这些结果加强了CR665药物代谢动力学的可预测性，这有助于熟练的医师设计药物施用程序以实现药物的特定水平的系统暴露量而无需过多的试验。
药效学-药物代谢动力学的关系
在男性受试对象中进行0.015mg/kg到0.36mg/kg的IV输注后，血清催乳素的药效学参数(相对于基线的变化)和CR665的药物代谢动力学参数之间的关系列如图13和14所示。
在A部分中，在男性受试对象中进行1小时的剂量范围为0.015mg/kg到0.36mg/kg的输注后，催乳素血清浓度(基于AUC0-12h和Cmax)和CR665血浆浓度(基于AUC0-∞和Cmax)之间存在直接线性关系，对于AUC和Cmax值的相关系数分别为0.667和0.565。在与0.36mg/kg到0.48mg/kg的剂量水平相关的较高的CR665的AUC0-∞和Cmax值，血清催乳素的AUC0-12h和Cmax值出现高水平稳定，这表明血清催乳素的最大增量已由以1小时输注进行施用的0.36mg/kg CR665实现。
在B部分中，在男性受试对象中进行5分钟的输注之后，血清催乳素浓度和血浆CR665浓度之间没有明显的相关性。缺少相关性的可能原因是在这些受试对象中药物代谢动力学和药效学的暂时分离：虽然血浆CR665浓度在5分钟输注结束时达到峰值并随后下降，但血清催乳素浓度在10分钟(输注结束后5分钟)时才开始明显上升，并在30分钟时持续上升，在60分钟测量到明显但正在下降的水平。在这些情况下，预计血浆CR665浓度和血清催乳素浓度之间不存在相关性。然而，进行更长时间的(例如1小时)的CR665输注，CR665血浆浓度可以更好地反映出在药效学相关隔间(pharmacodynamically relevant compartment)(即，高亲合力κ阿片样受体)中的CR665浓度，并因此形成如图13和14所示的显著线性关系。
在男性受试对象中以1小时的输注施用0.015mg/kg到0.48mg/kg的CR665之后，在整个剂量范围内AUC0-∞和Cmax都按与剂量成比例的方式增加。在男性受试对象中，CR665的药物代谢动力学的受试对象之间的变异性较低。
在女性受试对象中，CR665的最大血浆浓度出现在以0.24mg/kg剂量进行1小时的输注结束时，这与男性受试对象的相似。在男性和女性受试对象中，基于AUC0-∞和Cmax的CR665系统暴露量相似。性别之间的CR665的处置也相似，在女性受试对象中平均终末消除半衰期为1.2小时。此外，在男性和女性受试对象中观察到相似的受试对象间的变异性。
输注持续时间对CR665的总体系统暴露量没有影响，在男性和女性受试对象中进行1小时和5分钟输注之后的AUC0-∞是相似的。然而，5分钟输注后的CR665最大血浆浓度相比1小时输注的明显较高，对于男性受试对象为高约4.5倍，对女性受试对象为高约5.3倍。Cmax的差异是预料之中的，这是因为相比于1小时输注(30mL/小时)，5分钟输注的速率更高(360mL/小时)。1小时和5分钟输注的CR665处置动力学是相似的，对于两种输注时间，观测到较低的受试对象之间的变异性。
在0.12mg/kg到0.48mg/kg剂量范围，男性受试对象中的CR665稳态分布的表观容积(Vss)为19L到23L，这与细胞外液体的容积相似，并且与肽穿过含脂质膜的能力受限相一致。该观测结果反映了本发明的另一个方面：相对较低的分布容积。分布容积是药物在脉管系统外分布程度的定量指标；它是包含以与血液中存在的浓度相同的浓度存在于身体中的药物总量的表观容积。一般来说，具有低分布容积的化合物将具有阻碍跨生物膜运输的物理特性。因此，预计具有低表观分布容积的极性化合物(如CR665)不会像脂溶性化合物(通常具有较高表观分布容积并更倾向于穿过血脑屏障)那样穿过血脑屏障。
在此以参考的方式引入本文所引用的所有专利和其他参考文献。
在以下的权利要求中还有其他的实施方式。

Claims (22)

1.一种在需要提升的或稳定的血清催乳素水平的哺乳动物体内提升血清催乳素水平的方法，包括向所述哺乳动物施用有效地提升或稳定该哺乳动物体内的血清催乳素水平的一个量的一种外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药。
2.如权利要求1所述的方法，其中，所述外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药包含一种肽。
3.如权利要求2所述的方法，其中，所述肽对该κ阿片样受体所具有的结合亲合力比所述肽对非κ阿片样受体的结合亲合力大10倍、大100倍、大1,000倍、或者更多。
4.如权利要求2所述的方法，其中，所述肽具有下式：
H-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q；并且
其中Xaa1是(A)D-Phe、(CαMe)D-Phe、D-Tyr、D-Tic或者D-Ala(环戊基或者噻吩基)，A是H、NO2、F、Cl或者CH3；Xaa2是(A’)D-Phe、D-1Nal、D-2Nal、D-Tyr或者D-Trp，A’是A或者3，4Cl2；Xaa3是D-Nle、(B)D-Leu、D-Hle、D-Met、D-Val、D-Phe或者D-Ala(环戊基)，B是H或者CαMe；Xaa4是D-Arg、D-Har、D-nArg、D-Lys、D-Lys(Ipr)、D-Arg(Et2)、D-Har(Et2)、D-Amf(G)、D-Dbu、(B)D-Orn或者D-Orn(Ipr)，G是H或者脒基，并且Q是NR1R2、吗啉基、硫代吗啉基、(C)哌啶基、哌嗪基、4-单取代-或4，4-双取代-哌嗪基或者δ-鸟氨酸基，R1是低级烷基、具有取代基的低级烷基、苄基、具有取代基的苄基、氨基环己基、2-噻唑基、2-吡啶甲基、3-吡啶甲基或者4-吡啶甲基，R2是H或者低级烷基；并且C是H、4-羟基或者4-氧。
5.如权利要求4所述的方法，其中，Q是吗啉基或者硫代吗啉基。
6.如权利要求4所述的方法，其中，Q是NHR1，并且R1是4-吡啶甲基。
7.如权利要求2所述的方法，其中，所述肽具有下式：
H-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q；并且
其中Xaa1是D-Phe(未取代的或者由Cα、Me、2F、4F或4Cl取代的)或者D-Ala(环戊基或者噻吩基)；Xaa2是(A′)D-Phe、D-1Nal、D-2Nal或D-Trp，其中A′是H、4F、4Cl、4NO2或者3，4Cl2；Xaa3是D-Nle、D-Leu、D-CML、D-Met或D-Acp；Xaa4是D-Arg、D-Arg(Et2)、D-Lys、D-Ily、D-Har、D-Har(Et2)、D-nArg、D-Orn、D-Ior、D-Dbu、D-Amf和D-Amf(Amd)；Q是NR1R2、Mor、Tmo、Pip、4-Hyp、OxP或者Ppz，其中R1是Me、Et、Pr、Bu、hEt、Cyp、Bzl或者4-吡啶甲基，并且R2是H或者Et。
8.如权利要求7所述的方法，其中，Xaa2是D-Phe，Xaa3是D-Nle，并且Xaa4是D-Arg。
9.如权利要求7所述的方法，其中，Q是吗啉基或者硫代吗啉基。
10.如权利要求7所述的方法，其中，Q是NHR1，并且R1是4-吡啶甲基。
11.如权利要求7所述的方法，其中，Xaa3是D-Nle或者D-Leu，并且Q是吗啉基。
12.如权利要求7所述的方法，其中，Xaa1是D-Phe、D-4Fpa、D-2Fpa、D-Acp或者D-Ala(2Thi)；Xaa2是(A)D-Phe、D-1Nal、D-2Nal或者D-Trp，A是4F或者4Cl；Xaa3是D-Nle、D-Met或者D-Leu；Xaa4是D-Arg、D-Har、D-nArg、D-Lys、D-Orn或者D-Amf(Amd)；并且Q是NHR1、Mor、Tmo、Pip或者Ppz，R1是Et、Pr或4Pic。
13.如权利要求2所述的方法，其中，所述肽具有下式：H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHEt、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-吗啉基、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-4-吡啶甲基、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHPr、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-硫代吗啉基、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-Net2、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHMe、H-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Orn-吗啉基、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NHhEt、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-环丙基、H-D-Ala(2Thi)-D-4Cpa-D-Leu-D-Arg-吗啉基、H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-哌啶基、H-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Orn-NHEt、H-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-吗啉基或H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-哌嗪基。
14.如权利要求1所述的方法，其中，所述外周选择性κ阿片样受体激动剂在外周施用时基本不穿过血脑屏障。
15.如权利要求1所述的方法，其中，所述施用包括静脉内施用、皮下施用、肌内施用、鼻内施用、口服施用或者透皮施用。
16.如权利要求15所述的方法，其中，所述透皮施用是通过一个电转运装置来提供的。
17.如权利要求16所述的方法，其中，所述施用包括：
(a)提供一个第一电极；
(b)提供一个第二电极；
(c)提供与所述第一电极和所述第二电极电连接的一个电源；
(d)提供至少一个具有外周选择性κ阿片样受体激动剂的供体储库，其中所述供体储库与所述第一电极或第二电极相关联；和
(e)通过所述身体表面输送一个治疗有效量的所述外周选择性κ阿片样受体激动剂。
18.一种治疗需要提升的或者稳定的催乳素水平的哺乳动物的方法，所述方法包括向所述哺乳动物施用一定量的一种外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药，以及独立地或者与所述外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药联合地施用一定量的一种另外的催乳素提升化合物，所述施用以能够有效治疗所述哺乳动物的量进行。
19.如权利要求18所述的方法，其中，所述催乳素提升剂是一种D2多巴胺受体拮抗剂或者一种μ阿片样受体激动剂。
20.用于治疗哺乳动物中的精子活力降低、年龄相关病症、I型糖尿病、失眠症或者快速眼动睡眠不足症、泌乳不足或不充分、或者用于预防泌乳不足或不充分的一种方法，所述方法包括在所述哺乳动物体内施用有效治疗或预防泌乳不足或不充分、或者有效治疗精子活力降低、年龄相关疾病、I型糖尿病、失眠或者快速眼动睡眠不足症的量的一种外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药。
21.如权利要求20所述的方法，其中，在所述哺乳动物分娩前或者分娩后，将所述量的外周选择性κ阿片样受体激动剂、或者所述外周选择性κ阿片样受体激动剂的盐或前药与对于治疗所述哺乳动物有效的一种泌乳增强剂或者稳定剂联合施用于所述哺乳动物。
22.如权利要求21所述的方法，其中所述泌乳增强剂包含催产素。
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