CN112513104A - 用于治疗纤维性粘连的高度硫酸酯化的褐藻糖胶 - Google Patents

用于治疗纤维性粘连的高度硫酸酯化的褐藻糖胶 Download PDF

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Abstract

高度硫酸酯化的修饰的褐藻糖胶，其包括组合物中治疗有效的医学上可接受的褐藻糖胶，其所包括的硫酸酯与岩藻糖的摩尔比大于或等于约1.2、1.81或1.9，且/或硫酸酯与岩藻糖加半乳糖的摩尔比大于或等于约1.1、1.2或1.3。

Description

用于治疗纤维性粘连的高度硫酸酯化的褐藻糖胶
优先权声明
本申请要求于2018年7月27日提交的共同未决的美国临时专利申请第62,711,364号；2018年7月27日提交的美国临时专利申请第62,711,372号；2018年7月27日提交的美国临时专利申请第62/711,335号；2018年8月1日提交的美国临时专利申请序列第62/713,399号；2018年8月23日提交的美国临时专利申请第62/722,135号；2018年11月2日提交的美国临时专利申请第62/755,311号；2019年1月17日提交的美国临时专利申请第62/793,514号；2019年6月13日提交的美国临时专利申请第62/861,223号；2018年8月1日提交的共同未决的美国临时专利申请序列第62/713,392号；2018年8月1日提交的美国临时专利申请第62/713,413号；2018年8月23日提交的美国临时专利申请第62/722,137号；2018年11月2日提交的美国临时专利申请第62/755,318号；2019年6月13日提交的美国临时专利申请第62/861,228号；2018年11月2日提交的共同未决的美国临时专利申请序列第62/755,328号；2019年1月17日提交的美国临时专利申请第62/793,654号及2019年6月13日提交的美国临时专利申请第62/861,235号的权益，将所有申请均以其全文通过援引并入本文。
背景技术
褐藻糖胶(包括岩藻多糖)为硫酸酯化的多糖。一般而言，这意指其为由大量糖基团构成的分子，且还具有附接至糖基团上的硫原子。主要糖基团被称为“岩藻糖”，其为具有6个碳原子且具有化学式C6H12O5的糖。“岩藻多糖”(或墨角藻多糖)指示衍生自褐藻(海藻)的褐藻糖胶。褐藻糖胶可单独或以其他糖的混合物，例如以诸如木糖、半乳糖、葡萄糖、葡糖醛酸和/或甘露糖等糖的混合物存在。可从海藻或具有褐藻糖胶的其他来源提取这些其他糖。尽管褐藻糖胶当前衍生自天然来源，诸如本文中提及的褐藻(海藻)、海参等，但“褐藻糖胶”包括具有如本文所论述的褐藻糖胶的化学及结构基序的聚合物分子，而与褐藻糖胶的一种或多种最终来源无关。
岩藻多糖可获自多种褐藻物种，包括但不限于：小腺囊藻(Adenocystisutricularis)、泡叶藻(Ascophyllum nodosum)、绳藻(Chorda filum)、Cystoseirabiesmarina、南极公牛藻(Durvillaea antarctica)、褐藻门昆布(Ecklonia kurome)、极大昆布(Ecklonia maxima)、爱森藻(Eisenia bicyclis)、岩藻(Fucus evanescens)、墨角藻(Fucus vesiculosis)、羊栖菜(Hizikia fusiforme)、伸长海条藻(HimanthaliaElongata)、笼目海带(Kjellmaniella crassifolia)、Laminaria brasiliensis、拟菊苣海带(Laminaria cichorioides)、极北海带(Laminaria hyperborea)、日本真海带(Laminaria japonica)、糖海带(Laminaria saccharina)、Lessonia trabeculata、巨藻(Macrocystis pyrifera)、Pelvetia fastigiata、沟鹿角菜(Pelvetia Canaliculata)、Saccharina japonica、糖海带(Saccharina latissima)、Sargassum stenophylum、鼠尾藻(Sargassum thunbergii)、海嵩子(Sargassum confusum)、马尾藻科植物羊栖菜(Sargassum fusiforme)及裙带菜(Undaria pinnatifida)。这些示例性物种均来自分类纲褐藻纲(Phaeophyceae)且这些物种中的大部分属于以下科：墨角藻目(Fucales)及海带科(Laminariaceae)。
包括岩藻多糖的褐藻糖胶已示出有效用于抑制、预防、去除、减少或以其他方式治疗纤维性粘连的形成。还发现其用于治疗其他相关疾病及病症。
因此，未满足对具有所需硫酸酯化水平的褐藻糖胶的褐藻糖胶组合物的需求，包括在一些实施方式中，这样的褐藻糖胶被修饰以具有所需硫酸酯化水平和/或医学上可行的低内毒素水平。褐藻糖胶已知治疗纤维性粘连。包括具有低硫酸酯化水平的褐藻糖胶的组合物先前已证明治疗纤维性粘连。本发明组合物、系统及方法等提供这些和/或其他优点。
发明内容
提供了用于修饰的褐藻糖胶的组合物、方法、系统、材料等，所述褐藻糖胶例如高硫酸酯的褐藻糖胶，除了其他优点外其抑制纤维性粘连。本文的组合物包括高度硫酸酯化的褐藻糖胶，其中高的硫酸酯与岩藻糖的比率，以及高的硫酸酯与岩藻糖加半乳糖总和的比率。
本发明的组合物、方法、系统等提供了医学上可接受的组合物，其包括从起始或初始褐藻糖胶组合物中获得的所需的修饰的高度硫酸酯化的褐藻糖胶(即，所述修饰的褐藻糖胶可以衍生自的褐藻糖胶组合物；这样的起始褐藻糖胶组合物可以是或可以不是粗制的或已经预先加工或纯化的，诸如原料褐藻糖胶组合物)，以及获得这样的所需的修饰的褐藻糖胶的方法和使用这样的组合物的方法。
在一些方面，本文的组合物、系统、方法等涉及包括高硫酸酯的褐藻糖胶的医学上可接受的组合物。
在一些方面，本文的组合物、系统、方法等可以涉及医学上可接受的组合物，其包括医学上可接受的缓冲剂或稀释剂和治疗有效量的高硫酸酯的褐藻糖胶，所述褐藻糖胶具有的硫酸酯与岩藻糖的摩尔比大于或等于约1.2，和/或硫酸酯与岩藻糖加半乳糖的摩尔比大于或等于约1.1。所述硫酸酯与岩藻糖的摩尔比大于或等于约1.81，和/或所述硫酸酯与岩藻糖加半乳糖的摩尔比可以大于或等于约1.2；所述硫酸酯与岩藻糖的摩尔比可以大于或等于约1.9，和/或所述硫酸酯与岩藻糖加半乳糖的摩尔比可以大于或等于约1.3；所述硫酸酯与岩藻糖的摩尔比可以为在1.81与2.85之间；并且所述硫酸酯与岩藻糖加半乳糖的摩尔比可以为在1.30与2.20之间。
所述褐藻糖胶可具有以下分子量分布：其中当使用水性凝胶渗透色谱法设置来测量时，所述分布的至少60％w/w可大于100kDa，所述水性凝胶渗透色谱法设置基本上由以下组成：
具有7.8mm内径的一个300mm分析型凝胶渗透色谱柱，装填有基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶，具有在约50kDa与约5,000kDa之间的有效分子量范围；具有7.8mm内径的一个300mm分析型凝胶渗透色谱柱，装填有基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶，具有在约1kDa与约6,000kDa之间的有效分子量范围；以及具有6mm内径的一个40mm保护柱，装填有基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶，所述两个分析型凝胶渗透色谱柱及所述一个保护柱包含于约30℃下的柱室中；
折射率检测器，处于约30℃；
0.1M硝酸钠流动相，以0.6mL/min运行；以及
相对于峰分子量标准曲线进行量化，所述峰分子量标准曲线基本上由以下组成：第一右旋糖酐标准物，峰分子量为约2,200kDa；第二右旋糖酐标准物，峰分子量在约720kDa与约760kDa之间；第三右旋糖酐标准物，峰分子量在约470kDa与约510kDa之间；第四右旋糖酐标准物，峰分子量在约370kDa与约410kDa之间；第五右旋糖酐标准物，峰分子量在约180kDa与约220kDa之间；以及第六右旋糖酐标准物，峰分子量在约40kDa与55kDa之间。
所述褐藻糖胶可以具有大于100kDa的重均分子量；其中分子量分布的至少90％w/w可以大于100kDa的分子量分布；大于200kDa的重均分子量，或大于500kDa的重均分子量。所述褐藻糖胶可以具有以下分子量分布，其中所述分布的至少90％w/w可以大于500kDa；具有的硫酸酯化水平为在14％w/w与60％w/w之间、30％w/w与55％w/w之间、35％w/w与52％w/w之间、35％w/w与52％w/w之间、40％w/w与60％w/w之间、45％w/w与60％w/w之间、40％w/w与55％w/w之间或45％w/w与55％w/w之间。总碳水化合物含量可以为在27％w/w与80％w/w之间；作为总碳水化合物含量的百分比的总岩藻糖含量可以为至少约30％w/w；总碳水化合物含量可以为至少约50％w/w，并且作为总碳水化合物含量的百分比的总岩藻糖含量可以为至少约70％w/w、80％w/w、90％w/w或95％w/w。
所述褐藻糖胶可以具有的作为总碳水化合物含量的百分比的总半乳糖含量为低于约60％w/w、在约2％w/w与20％w/w之间或低于约10％w/w。作为总碳水化合物含量的百分比的葡糖醛酸、甘露糖、鼠李糖及木糖含量的总和可以低于约30％w/w。医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物可具有在约4cP与50cP之间、10cP与40cP之间或约15cP与30cP之间的粘度。医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物可以是透明无色的组合物。
在一些方面，所述组合物、系统、方法等，本文的方法包括治疗动物中的纤维性粘连，所述治疗包括：选择抑制所述纤维性粘连的本文中的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，以及向所述动物的伤口部位给药包括剂量范围在0.5mg/kg与50mg/kg之间的治疗有效量的所述高硫酸酯的褐藻糖胶。本文还提供了用于治疗动物中的纤维性粘连的药剂，所述药剂包括用于这样的治疗的本文的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物。还提供了用于治疗动物中的纤维性粘连的药剂，所述药剂包括本文的选定的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，所述组合物经配置和构成以抑制所述纤维性粘连并向所述动物的伤口部位给药治疗有效量(其剂量范围在0.5mg/kg与50mg/kg之间)的所述高硫酸酯的褐藻糖胶。本文进一步提供了本文中的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物用于制造用于纤维性粘连的补救剂的用途。
在另外的方面，所述组合物、系统、方法等包括治疗动物中的病症或疾病，所述治疗包括选择治疗所述病症或疾病的本文的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，以及向所述动物给药在约0.04mg/kg与25mg/kg之间的治疗有效量的所述组合物中的高硫酸酯的褐藻糖胶。所述治疗有效量可以为在约0.2mg/kg与10mg/kg之间、约1mg/kg与5mg/kg之间、约1.5mg/kg与3mg/kg之间或约5mg/kg与10mg/kg之间。所述病症或疾病可为所述动物的目标部位处的纤维性粘连，且所述给药可包括向所述目标部位给药所述治疗有效量。
在另外的方面，所述组合物、系统、方法等包括包含在约0.02mg/mL与100mg/mL之间的本文的高硫酸酯的褐藻糖胶的医疗组合物，其中所述医疗组合物经配置和构成以治疗动物中的疾病或病症。
所述医疗组合物可包括在约0.5mg/mL与5mg/mL之间的所述高硫酸酯的褐藻糖胶或约2.5mg/mL的所述高硫酸酯的褐藻糖胶。
本文的医疗组合物可为医疗器械，包括液体医疗器械。所述医疗组合物可为药物组合物，包括液体药物组合物。
本文的方法包括使用包括在约0.01mL/kg与15mL/kg之间、约0.03mL/kg与4mL/kg之间、约0.06mL/kg与2mL/kg之间或约2mL/kg与4mL/kg之间的剂量范围的本文的医疗组合物来治疗动物中的疾病或病症。
本文的方法还包括治疗患者中的纤维性粘连，其包括向患者中的目标部位给药本文的医疗组合物。对患者中选定疾病或病症的治疗可以包括在包括或相当易患有所述选定疾病或病症的患者中鉴定出选定目标部位，以及然后向所述患者的选定目标部位给药本文的医疗组合物。所述疾病或病症可为纤维性粘连，所述选定的目标部位可为外科手术部位且可在以下中的至少一种时执行所述给药：a)打开所述外科手术部位处的外科手术伤口后、b)在外科手术期间以及c)在关闭所述外科手术伤口后。所述给药可在外科手术后但关闭所述外科手术伤口前执行。所述给药花费小于3分钟、2分钟或1分钟。所述选定的目标部位可为病变、擦伤及损伤部位中的至少一种。所述选定的目标部位可以是以下中的至少一种：骨盆腔、腹腔、背腔、颅腔、脊髓腔、腹侧腔、胸腔、胸膜腔、心包腔、皮肤、关节、肌肉、肌腱及韧带。
在一些方面，本文还提供了用于降低起始岩褐藻糖胶或褐藻糖胶组合物的硫酸酯水平以获得修饰的褐藻糖胶的方法。这样的方法可包括：
向所述起始褐藻糖胶组合物中添加碱以产生反应混合物；以及
用猝灭剂处理所述反应混合物使所述碱失活，产生所述修饰的褐藻糖胶和脱硫酸酯化残余分子，其中所述修饰的褐藻糖胶的数均分子量、重均分子量和峰均分子量在所述起始褐藻糖胶组合物的各自数均分子量、重均分子量和峰均分子量的约5％内。
所述起始褐藻糖胶或褐藻糖胶组合物可以起始溶液提供。向所述起始褐藻糖胶组合物中添加所述碱进一步可以包括加热所述溶液。所述碱可包括碱金属、碱土金属和/或铵的氢氧化物和/或氧化物。所述猝灭剂可包括酸、盐和水中的至少一种。所述修饰的褐藻糖胶包括比所述起始岩藻酸盐组合物更少的硫酸酯。
所述方法可以进一步包括：
提供为固体的所述起始褐藻糖胶组合物；
将所述起始褐藻糖胶组合物溶解在合适的非水性溶剂中，以产生非水性溶液；
向所述非水性溶液中添加硫酸酯化剂，以产生反应混合物；以及
向所述反应混合物中添加猝灭剂，在溶液中产生修饰的褐藻糖胶和硫酸酯化残余分子。
所述方法进一步可以包括在将所述起始褐藻糖胶组合物溶解在合适的非水性溶剂中之前，使所述起始褐藻糖胶组合物中的硫酸酯基团质子化以产生酸化的褐藻糖胶组合物。所述质子化可以包括将所述起始褐藻糖胶组合物溶解在水溶液中，使所述起始褐藻糖胶组合物与酸性阳离子交换树脂接触，以及将所述酸化的褐藻糖胶组合物收集为固体。所述方法还可以包括将所述酸化的褐藻糖胶组合物收集为固体罐，其可以包括将所述水溶液中的固体酸化的褐藻糖胶组合物进行冻干、喷雾干燥和沉淀中的至少一种。所述硫酸酯化剂可以包括SO3-Me3N、SO3-Et3N、SO3-吡啶和SO3-DMF中的至少一种。所述非水性溶剂可包括甲酰胺、二甲基甲酰胺、二乙基甲酰胺、二甲基亚砜、二氯甲烷、氯仿、乙醇、甲醇、正丁醇、2-丁醇、异丙醇和1-丙醇中的至少一种。
向所述非水性溶剂中添加硫酸酯化剂以产生反应混合物进一步可以包括向所述溶剂中添加硫酸酯化助剂。所述硫酸酯化助剂可以为酸清除剂，并且所述酸清除剂可以为2-甲基-2-丁烯。向所述非水性溶剂中添加硫酸酯化剂进一步还可以包括将所述反应混合物温育约5分钟与约50小时之间或约1小时与约24小时之间，并且可以在约20℃与约60℃之间的温度下。所述猝灭剂可包括盐和缓冲剂中的至少一种；所述盐可以为碳酸氢盐。向所述反应混合物中添加猝灭剂进一步可以包括用酸、碱和缓冲剂中的至少一种控制所述反应混合物的pH。所述修饰的褐藻糖胶可包括比所述起始褐藻糖胶组合物更多的硫酸酯。
用于增加硫酸酯水平的方法还可包括：
提供为固体的起始褐藻糖胶组合物；
将所述起始褐藻糖胶组合物悬浮在溶剂中，所述溶剂不能溶解所述褐藻糖胶；
向包含所述悬浮的起始褐藻糖胶组合物的所述溶剂中添加硫酸酯化剂，产生包括所述修饰的褐藻糖胶和所述溶剂的反应混合物；
将所述固体修饰的褐藻糖胶与所述溶剂分离；以及
用猝灭剂猝灭所述固体修饰的褐藻糖胶。
所述硫酸酯化剂可以为氯磺酸。所述溶剂可以包括相对极性小于0.765的至少一种溶剂，诸如二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、异丙醇、1-丙醇、正丁醇、2-丁醇、二乙醚、己烷、庚烷、苯、十甲基环五硅氧烷、乙酸乙酯、庚醇、辛醇、癸醇和二噁烷中的至少一种。相对极性的值可以从吸收光谱的溶剂位移的测量值进行归一化。例如，参见Christian Reichardt,Solvents and Solvent Effects in Organic Chemistry,Wiley-VCH Publishers,3rded.,2003。添加硫酸酯化剂以产生反应混合物进一步可以包括将所述反应混合物温育约5分钟与约50小时之间，或约1小时与约24小时之间。所述反应混合物可以在约20℃与约60℃之间的温度下温育。所述猝灭剂可包括盐和缓冲剂中的至少一种。将所述固体修饰的褐藻糖胶猝灭进一步可以包括用酸、碱和缓冲剂中的至少一种控制所述反应混合物的pH；和/或用包括相对极性小于0.765的至少一种溶剂的有机溶剂洗涤所述固体修饰的褐藻糖胶。所述修饰的褐藻糖胶包括比所述起始褐藻糖胶组合物更多的硫酸酯。
在本申请中阐述了这些和其他方面、特征和实施方式，包括以下详细描述和附图。除非另有明确说明，否则所有实施方式、方面、特征等可以任何期望的方式混合和匹配，组合和排列。
附图说明
图1A描绘NMR结果，所述结果证明了根据本文的方法处理的某些褐藻糖胶经历褐藻糖胶的结构变化。
图1B描绘2-D NMR结果，所述结果证明了根据本文的方法处理的某些褐藻糖胶经历褐藻糖胶的结构变化。
图2提供了一系列凝胶渗透色谱图，描绘了从起始褐藻糖胶组合物中硫酸酯损失的程度不同，同时留下未降解的所得修饰的褐藻糖胶。
附图呈现本发明方法的示例性实施方式。本文的系统、方法等的实际实施方式可包括附图中未示出的另外的特征或步骤。本文陈述的范例以一种或多种形式说明了系统、方法等的实施方式，并且这样的范例不应被解释为以任何方式限制本公开的范围。本文的实施方式不是穷举的，并且不将本公开限制为例如在以下详细描述中公开的精确形式。
具体实施方式
本文呈现的当前组合物、系统、方法等包括修饰的褐藻糖胶，例如高硫酸酯的褐藻糖胶。本发明组合物可对医疗治疗、术后治疗、疾病抑制等有效。在一些实施方式中，褐藻糖胶为岩藻多糖。本发明修饰的褐藻糖胶可自身为医疗器械、医疗材料、组合产品，或可包括于医疗器械、医疗材料、组合产品上或中，或包括在药物学上可接受的、治疗上和/或医学上有效的组合物中。
组合物
在某些实施方式中，本文呈现的当前组合物、系统等提供褐藻糖胶及医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶以及包括治疗有效量的高硫酸酯的褐藻糖胶的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，以用于治疗纤维性粘连(诸如外科手术粘连)、关节炎、牛皮癣或视需要的其他疾病。
本文呈现的修饰的褐藻糖胶可用于多种应用，包括治疗纤维性粘连及其他目标，诸如其他疾病和/或病症。治疗包括修饰的褐藻糖胶减小或预防目标疾病或其他病症的发展，诸如减小或预防目标部位处形成纤维性粘连，该目标部位典型地为由外科医生或其他从业者识别为包括或相当易患纤维性粘连(或其他疾病或病症)的选定目标部位，且还包括消除现有疾病或其他病症，包括(例如)消除已存在的纤维性粘连。对于这样的治疗，修饰的褐藻糖胶典型地以医学上可接受的医疗器械、组合产品或药物学上有效的组合物提供，其包含附加组分，诸如粘结剂、佐剂、赋形剂等，以及(视需要)附加的医学上的活性物质，诸如包含于该组合物中但不附接至修饰的褐藻糖胶和/或可附接至修饰的褐藻糖胶的次要药品。
目前的讨论论述了在修饰的褐藻糖胶的总硫酸酯与总岩藻糖的摩尔比和总硫酸酯与岩藻糖加半乳糖总和的摩尔比与预防术后纤维性粘连之间的关系。在下文中，可以将修饰的褐藻糖胶的总硫酸酯与总岩藻糖的摩尔比和总硫酸酯与岩藻糖加半乳糖总和的摩尔比称为硫酸酯化比率。在一些实施方式中，修饰的褐藻糖胶可以为高硫酸酯的褐藻糖胶。本文的高硫酸酯的褐藻糖胶可具有以下至少一种：硫酸酯与岩藻糖的摩尔比大于或等于1.81或约1.9，和硫酸酯与岩藻糖加半乳糖总和的摩尔比大于或等于约1.10或约1.3。高硫酸酯的褐藻糖胶可以示出比硫酸酯与岩藻糖的摩尔比小于约1.81或约1.9和硫酸酯与岩藻糖加半乳糖总和的摩尔比小于约1.10或约1.3的至少一种的褐藻糖胶更大的在纤维性粘连的治疗中的功效。
在一些实施方式中，本文的褐藻糖胶被修饰从而使具有的硫酸酯与岩藻糖的摩尔比为1.81，或约1.85、1.9、2.0、2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4或3.5。硫酸酯与岩藻糖的摩尔比在分子量分布上的分散度可以随分子量增加而增加，或者随分子量的增加而降低。
在一些实施方式中，本文的褐藻糖胶被修饰从而使具有的硫酸酯与岩藻糖的摩尔比在给定的分子量分布内的下限和上限之间，例如在约1.81至1.9；1.9至3.5；1.8至3.0；2.0至2.5；1.9至2.3；或2.0至3.0之间，或本文比率水平的其他组合。硫酸酯与岩藻糖的摩尔比在分子量分布上的分散度可随分子量增加而增加，或随分子量增加而降低。
高硫酸酯的褐藻糖胶的分子量分布可使用任何所需、适当的测量系统来测量。不同系统当以不同方式测量时可由具有基本上相同构成的不同组合物或甚至由同一批料产生不同读数或结果。一种合适的测量系统为水性凝胶渗透色谱法设置，其基本上由以下组成：具有7.8mm内径的一个300mm分析型凝胶渗透色谱柱，装填有基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶，具有在约50kDa与约5,000kDa之间的有效分子量范围；具有7.8mm内径的一个300mm分析型凝胶渗透色谱柱，装填有基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶，具有在约1kDa与约6,000kDa之间的有效分子量范围；以及具有6mm内径的一个40mm保护柱，装填有基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶，两个分析型凝胶渗透色谱柱及一个保护柱包含于约30℃下的柱室中；折射率检测器，在约30℃下；0.1M硝酸钠流动相，以0.6mL/min运行；以及相对于峰分子量标准曲线进行量化，该峰分子量标准曲线基本上由以下组成：第一右旋糖酐标准物，峰分子量为约2,200kDa；第二右旋糖酐标准物，峰分子量在约720kDa与约760kDa之间；第三右旋糖酐标准物，峰分子量在约470kDa与约510kDa之间；第四右旋糖酐标准物，峰分子量在约370kDa与约410kDa之间；第五右旋糖酐标准物，峰分子量在约180kDa与约220kDa之间；以及第六右旋糖酐标准物，峰分子量在约40kDa与55kDa之间。峰分子量标准曲线可进一步包括峰分子量在3kDa与5kDa之间的右旋糖酐标准物。
本文的高硫酸酯的褐藻糖胶可以具有以下分子量分布：其中至少50％w/w的褐藻糖胶具有的分子量大于100kDa。高硫酸酯的褐藻糖胶可以具有以下分子量分布：其中至少40％、50％、60％、70％、80％、90％或95％w/w的褐藻糖胶具有的分子量大于100kDa。
本文的高硫酸酯的褐藻糖胶可以具有以下分子量分布：其中分布的至少约50％、60％、70％、80％或90％w/w大于200kDa。本文的高硫酸酯的褐藻糖胶可具有以下分子量分布，其中分布的至少约25％、30％、40％、50％、60％、70％或75％w/w大于500kDa。高硫酸酯的褐藻糖胶可具有以下分子量分布，其中分布的至少约5％、10％、20％、30％或40％w/w大于1600kDa。
本文的高硫酸酯的褐藻糖胶可具有的重均分子量大于100kDa，例如在约100kDa与约10,000kDa之间、约200kDa与约8,000kDa之间、约350kDa与约7,000kDa之间、约450kDa与约6,000kDa之间、约580kDa与约5,000kDa之间或约300kDa与约2,000kDa之间。
在又其他实施方式中，本文的高硫酸酯的褐藻糖胶可具有的峰分子量为在约70kDa与7,000kDa之间、约100kDa与6,000kDa之间、约200kDa与5,000kDa之间、约250kDa与4,000kDa之间、约350kDa与3,000kDa之间、约500kDa与2,000kDa之间或约300kDa与1,000kDa之间。
在又其他实施方式中，本文的高硫酸酯的褐藻糖胶可具有的数均分子量为在约50kDa与3,000kDa之间、约100kDa与2,000kDa之间、约200kDa与1,500kDa之间或约300kDa与1,000kDa之间或约100kDa与600kDa之间。
本文的高硫酸酯的褐藻糖胶可具有的硫酸酯化水平为在10％w/w与70％w/w之间、约20％w/w与60％w/w之间、约30％w/w与55％w/w之间或约35％w/w与52％w/w之间。
本文的高硫酸酯的褐藻糖胶可具有的总碳水化合物含量为在约27％w/w与70％w/w之间、约30％w/w与80％w/w之间、约40％w/w与90％w/w之间或约50％w/w与96％w/w之间。
本文的高硫酸酯的褐藻糖胶可具有的作为总碳水化合物的百分比的岩藻糖含量为在约30％w/w与100％w/w之间、约40％w/w与95％w/w之间或约50％w/w与90％w/w之间。
本文的高硫酸酯的褐藻糖胶可具有的作为总碳水化合物的百分比的半乳糖含量为在约0％w/w与60％w/w之间、约2％w/w与20％w/w之间或约5％w/w与10％w/w之间。
本文的高硫酸酯的褐藻糖胶可具有的作为总碳水化合物含量的百分比的葡糖醛酸含量为在约0％w/w与10％w/w之间，作为总碳水化合物含量的百分比的甘露糖含量为在约0％w/w与7％w/w之间，作为总碳水化合物含量的百分比的鼠李糖含量为在0％w/w与4％w/w之间，以及作为总碳水化合物含量的百分比的木糖含量为在0％w/w与20％w/w之间。
在一些实施方式中，当以50mg/mL浓度溶解于水中时，本文的高硫酸酯的褐藻糖胶具有以下粘度：在约4cP与约50cP之间、在约5cP与约40cP之间、在约10cP与约30cP之间、约15cP、约20cP及约25cP。在某些实施方式中，当以1mg/mL至100mg/mL溶解于水中时，本文的高硫酸酯的褐藻糖胶形成为透明且无色、透明且淡黄色或透明且浅棕色中的一种的溶液。
方法
提供了用于修饰起始褐藻糖胶组合物诸如原料褐藻糖胶组合物以增加或降低起始褐藻糖胶组合物中褐藻糖胶的硫酸酯化水平的方法、系统等。这些方法中的至少一种可用于制备修饰的褐藻糖胶，这些褐藻糖胶包括比起始褐藻糖胶组合物具有更高或更低硫酸酯化率的褐藻糖胶，例如硫酸酯与岩藻糖的摩尔比为约0.7、1.0、1.2、1.5、1.8、1.9、2.0、2.1、2.3、2.5或2.8和/或硫酸酯与岩藻糖加半乳糖的摩尔比为约0.7、1.0、1.2、1.5、1.8、1.9、2.0、2.1、2.3、2.5或2.8。在一些实施方式中，本公开呈现了适用于医疗和外科手术应用，例如预防纤维性粘连的修饰的褐藻糖胶。
以下段落转向可以用于产生本文的修饰的褐藻糖胶的方法中的一些的简要一般讨论。
从褐藻糖胶来源提取褐藻糖胶
从褐藻糖胶来源获得褐藻糖胶的方法是已知的。与来自其他来源的褐藻糖胶相比，可以发现来自一些来源的褐藻糖胶包括更高的硫酸酯含量，尽管其硫酸酯含量低于本文讨论的那些。可以通过从以下中的至少一种中提取褐藻糖胶来获得褐藻糖胶：小腺囊藻(Adenocystis utricularis)、泡叶藻(Ascophyllum nodosum)、绳藻(Chorda filum)、Cystoseirabies marina、南极公牛藻(Durvillaea antarctica)、褐藻门昆布(Eckloniakurome)、极大昆布(Ecklonia maxima)、爱森藻(Eisenia bicyclis)、岩藻(Fucusevanescens)、墨角藻(Fucus vesiculosis)、羊栖菜(Hizikia fusiforme)、伸长海条藻(Himanthalia Elongata)、笼目海带(Kjellmaniella crassifolia)、Laminariabrasiliensis、拟菊苣海带(Laminaria cichorioides)、极北海带(Laminariahyperborea)、日本真海带(Laminaria japonica)、糖海带(Laminaria saccharina)、Lessonia trabeculata、巨藻(Macrocystis pyrifera)、Pelvetia fastigiata、沟鹿角菜(Pelvetia Canaliculata)、Saccharina japonica、糖海带(Saccharina latissima)、Sargassum stenophylum、鼠尾藻(Sargassum thunbergii)、海嵩子(Sargassumconfusum)、马尾藻科植物羊栖菜(Sargassum fusiforme)及裙带菜(Undariapinnatifida)。这些示例性物种均来自分类纲褐藻纲(Phaeophyceae)且这些物种中的大部分属于以下科：墨角藻目(Fucales)及海带科(Laminariaceae)。特别地，高度硫酸酯化的褐藻糖胶可通过从以下中提取褐藻糖胶而获得：泡叶藻(Ascophyllum nodosum)、极大昆布(Ecklonia maxima)、爱森藻(Eisenia bicyclis)、墨角藻(Fucus vesiculosis)、极北海带(Laminaria hyperborea)、日本真海带(Laminaria japonica)、糖海带(Laminariasaccharina)、巨藻(Macrocystis pyrifera)、沟鹿角菜(Pelvetia Canaliculata)、Saccharina japonica、糖海带(Saccharina latissima)、马尾藻科植物羊栖菜(Sargassumfusiforme)及裙带菜(Undaria pinnatifida)。
溶剂离解脱硫酸酯化
用于降低包括褐藻糖胶的多糖的硫酸酯水平的示例性溶剂离解脱硫酸酯化方法可以在Vilela-Silva A.C et al,2002,DOI:)中发现。可以使用二甲基亚砜中的褐藻糖胶的溶剂离解来获得具有各种硫酸酯化率的褐藻糖胶。通过改变温度和在脱硫酸酯化反应期间添加甲醇，可以进一步控制溶剂离解。
切向流过滤
本文所论述的方法中的一些利用切向流过滤(TFF)。与切向流过滤(TFF)过滤器的典型识别一致，给定TFF过滤器的标称截留分子量(MWCO)值将在其渗余物侧上选择性地保留包含未穿过过滤器屏障的分子的溶液，且因此通常具有大于穿过/渗透屏障至渗透物侧的分子的分子量的分子量和/或大小。因此，TFF过滤器的截留分子量值典型地对于任何给定聚合物或标称截留值并不绝对：给定TFF过滤器将通过或保留高于及低于标称截留分子量两者的一些分子。用于具体聚合物的标称TFF过滤器的实际截留/选择性值及影响可针对具体聚合物来常规地决定。
大量因素可影响TFF过滤器的渗透行为。这些因素可取决于TFF过滤器自身或取决于目标聚合物的属性，例如目标聚合物的折叠行为及折叠结构可影响目标聚合物在穿过/不穿过TFF过滤器的MWCO屏障中的行为。如已知的，关于TFF过滤器自身，大量因素可影响TFF过滤器的渗透行为。例如，制造方法可导致特定TFF过滤器内的各种孔大小，其变体可包括大于及小于标称MWCO的两种孔。因此，具有标称截留分子量值的TFF过滤器将基本上通过/保留处于标称截留分子量值的分子，但还可通过/保留低于和/或高于这样的值的一些分子。
凝胶渗透色谱法
凝胶渗透色谱法用于评估实验实施例获得的分子量分布。存在大量用于凝胶渗透色谱法中可获得的不同参数、柱及标准物，导致多种仪器设置可用于分子量的分析。对于本文的分子量测定，使用以下参数进行GPC：流动相为以0.6mL/min运行的0.1M硝酸钠。柱室及检测器在30℃下。Waters 2414折射率检测器用于检测。
合适的GPC柱包括与水性溶剂兼容的GPC柱，例如装填有以下中的至少一种的柱：磺化苯乙烯-二乙烯基苯、NH官能化的丙烯酸酯共聚物网络、改性的二氧化硅及基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶。对于本文的分析，串联使用三个柱，包括具有6mm内径(ID)的一个40mm长的保护柱，装填有6μm粒度的基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶；接着是为具有7.8mm ID的第一300mm分析型GPC柱，装填有12μm粒度的基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶，其具有约7,000kDa的排除极限及在约50kDa与约5,000kDa之间的有效分子量范围；接着是具有7.8mm ID的第二300mm分析型GPC柱，装填有10μm粒度的基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶，其具有约7,000kDa的排除极限及在约1kDa与约6,000kDa之间的有效分子量范围。柱设置的总有效分子量范围在约1kDa与约6,000kDa之间。此柱设置的实例可为串联连接的
Figure BDA0002919841410000171
保护柱-
Figure BDA0002919841410000172
2000-
Figure BDA0002919841410000173
线性柱。
相对于包括来自American Polymer Standards Corporation的可追踪标准物的标准曲线来量化样品运行：DXT3755K(峰分子量＝2164kDa)、DXT820K(峰分子量＝745kDa)、DXT760K(峰分子量＝621kDa)、DXT670K(峰分子量＝401kDa)、DXT530K(峰分子量＝490kDa)、DXT500K(峰分子量＝390kDa)、DXT270K(峰分子量＝196kDa)、DXT225K(峰分子量＝213kDa)、DXT150K(峰分子量＝124kDa)、DXT55K(峰分子量＝50kDa)、DXT50K(峰分子量＝44kDa)和DXT5K(峰分子量＝4kDa)，这些标准物的峰分子量在约4kDa与约2,200kDa之间。所使用标准曲线可例如包括Dextran 3755kDa，Dextran 50kDa及Dextran 55kDa中的至少一种及在3至6个之间的本文所论述的附加可追踪标准物，校正点为所使用校正物的峰分子量。示例性校正曲线可由以下组成：DXT3755K、DXT 820K、DXT530K、DXT500K、DXT225K及DXT55K。本文中所使用的柱具有涵盖且延伸超出用于褐藻糖胶的量化的标准物的峰分子量范围的总有效分子量范围。
规定用于本文的褐藻糖胶/岩藻多糖聚合物的分子量为将始终存在更高及更低分子量的分子分布的大约分子量值，随着分子量远离指定分子量增大或减小而在数量或百分比上增大或减小。分布可(但并非必需)具有通常的高斯或失真(distorted)高斯形状。
本文的表中的结果包含用于分子量分布的某些特征的缩写。凝胶渗透色谱法由GPC表示，峰保留时间由PRT表示，峰分子量由PMW表示，重均分子量由WAMW表示，数均分子量由NAMW表示，分布百分比由％分布表示，分子量由MW表示，多分散性指数由PDI表示并且截留分子量由MWCO表示。
化学脱硫酸酯化
起始褐藻糖胶组合物诸如原料褐藻糖胶组合物的硫酸酯化水平可经由化学脱硫酸酯化来修饰。例如，方法可以包括：提供起始褐藻糖胶组合物；用碱将起始褐藻糖胶组合物中的褐藻糖胶脱硫酸酯化，以产生所需的修饰的褐藻糖胶；用猝灭剂处理所需的修饰的褐藻糖胶以终止脱硫酸酯化；以及将所需的修饰的褐藻糖胶与脱硫酸酯化残余分子分离。使起始褐藻糖胶组合物脱硫酸酯化可包括加热起始褐藻糖胶组合物。
合适的碱包括但不限于碱金属、碱土金属、锌和/或铵的氢氧化物和/或氧化物，例如氢氧化钠、氢氧化锂、氢氧化钾、氢氧化铵、氢氧化镁、氢氧化钙和氢氧化锌。合适的猝灭剂包括但不限于酸、盐和水，例如盐酸。提供起始褐藻糖胶组合物可包括提供以起始溶液的起始褐藻糖胶组合物。溶液中的起始褐藻糖胶组合物的示例性浓度为在0.01％w/v与30％w/v之间。碱的示例性浓度为在0.01M至10M之间。
将所需的修饰的褐藻糖胶与脱硫酸酯化残余分子分离可包括在合适的截留分子量(MWCO)TFF过滤器上对溶液中的所需的修饰的褐藻糖胶进行渗滤，该TFF过滤器具有的截留分子量大于最大的脱硫酸酯化残余分子，例如5kDa、10kDa、30kDa、50kDa、70kDa或100kDa截留分子量。
方法可以进一步包括在对褐藻糖胶进行脱硫酸酯化之前使起始褐藻糖胶组合物脱盐。脱盐可包括例如用蒸馏水将起始褐藻糖胶组合物在溶液中通过TFF过滤器渗滤。TFF过滤器可具有的截留分子量小于所需的修饰的褐藻糖胶的所需分子量分离点或目标，例如5kDa、30kDa、50kDa、70kDa、100kDa、200kDa、300kDa或500kDa截留分子量。方法可以进一步包括通过合适的预过滤器对起始褐藻糖胶组合物进行预过滤以去除不期望的颗粒物。
化学硫酸酯化
起始褐藻糖胶组合物诸如原料褐藻糖胶组合物的硫酸酯化水平可经由化学硫酸酯化来修饰。示例性方法可以包括：提供呈起始水溶液的起始褐藻糖胶组合物；使褐藻糖胶上的硫酸酯基团质子化以获得酸化的褐藻糖胶组合物；从酸化的褐藻糖胶组合物中获得为固体；在合适的溶剂(其可以是非水性溶剂)中重新溶解固体酸化的褐藻糖胶组合物，以提供用于硫酸酯化的重新溶解的溶液；向包含酸化的褐藻糖胶组合物的重新溶解的溶液中添加硫酸酯化剂；在期望的反应温度下将反应混合物温育合适量的时间；在预定量时间后将反应混合物猝灭；以及将修饰的褐藻糖胶与硫酸酯化反应残余分子分离。
方法可以进一步包括在对褐藻糖胶进行硫酸酯化之前使起始褐藻糖胶组合物脱盐。脱盐可包括例如用蒸馏水将起始褐藻糖胶组合物在溶液中通过TFF过滤器渗滤。TFF过滤器可具有的截留分子量小于所需的修饰的褐藻糖胶的所需分子量分离点或目标，例如5kDa、30kDa、50kDa、70kDa、100kDa、200kDa、300kDa或500kDa截留分子量。方法可以进一步包括通过合适的预过滤器对起始褐藻糖胶组合物进行预过滤以去除不期望的颗粒物。
根据其一般含义使用“硫酸酯化剂”，并且包括但不限于SO3-Me3N、SO3-Et3N、SO3-吡啶和SO3-DMF中的至少一种。硫酸酯化剂的合适量可以为在1:0.01的褐藻糖胶:硫酸酯化剂与1:100褐藻糖胶:硫酸酯化剂之间，例如1:0.1的褐藻糖胶:硫酸酯化剂、1:1的褐藻糖胶:硫酸酯化剂以及1:10的褐藻糖胶:硫酸酯化剂。
使褐藻糖胶上的硫酸酯基团质子化可以包括使褐藻糖胶与酸化的阳离子交换树脂和酸化的混合电荷树脂中的至少一种接触。接触可包括将包含起始褐藻糖胶的溶液与树脂一起搅拌。接触可包括在树脂上再循环包含起始岩藻糖聚糖的溶液。
获得固体酸化的褐藻糖胶组合物可以包括但不限于将溶液中的固体酸化的褐藻糖胶组合物进行冻干、喷雾干燥和沉淀。重新溶解固体酸化的褐藻糖胶可包括将固体酸化的褐藻糖胶组合物溶解在溶剂中，该溶剂包括甲酰胺、二甲基甲酰胺、二乙基甲酰胺、二氯甲烷、二甲基亚砜、氯仿、乙醇、甲醇、正丁醇、2-丁醇、异丙醇和1-丙醇中的至少一种。添加硫酸酯化剂可以进一步包括向重新溶解的溶液中添加硫酸酯化助剂。硫酸酯化助剂可以是酸清除剂。酸清除剂可以是例如2-甲基-2-丁烯。
将反应混合物温育期望的时间量(如果需要可以预定)可以包括将反应混合物温育5分钟与30分钟、1小时、4小时、10小时、24小时和50小时之间。用于温育反应混合物的合适温度可以在20℃与40、50和60℃之间，例如在约30、约35或约40℃下。温育可以包括但不限于搅拌、摇动、振动或以其他方式搅动反应混合物。
猝灭反应混合物可包括添加猝灭剂。合适的猝灭剂包括但不限于盐和/或缓冲剂，例如碳酸氢钠、碳酸氢铵和碳酸氢钾。猝灭反应混合物可以进一步包括用合适的酸、碱和/或缓冲剂控制反应混合物的pH。
将修饰的褐藻糖胶与硫酸酯化反应残余分子分离可能涉及过滤，例如，通过合适的截留分子量切向流过滤过滤器。将修饰的褐藻糖胶与硫酸酯化反应残余分子分离可能涉及从反应混合物中沉淀出褐藻糖胶或硫酸酯化反应残余分子。
化学硫酸酯化的另一个示例性实施方式包括：提供悬浮在用于硫酸酯化的合适的溶剂中的固体起始褐藻糖胶组合物，该溶剂不能溶解褐藻糖胶；添加硫酸酯化剂；在预定反应温度下将反应混合物温育预定量的时间；将固体修饰的褐藻糖胶与溶剂分离；洗涤固体修饰的褐藻糖胶以除去任何溶剂残余物；猝灭固体修饰的褐藻糖胶；以及将修饰的褐藻糖胶与硫酸酯化反应残余分子分离。
合适的硫酸酯化剂包括例如氯磺酸。合适的溶剂包括相对极性小于0.765的有机溶剂，例如二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、异丙醇、1-丙醇、正丁醇、2-丁醇、二乙醚、己烷、庚烷、苯、十甲基环五硅氧烷、乙酸乙酯、庚醇、辛醇、癸醇和二噁烷。
将反应混合物温育预定量的时间可以包括将反应混合物温育5分钟与30分钟、1小时、4小时、10小时、24小时和50小时之间。将反应混合物在一定温度温育可以包括在20℃与40℃、50℃和60℃之间下，例如在约30℃、约35℃或约40℃下温育反应混合物。温育可以包括但不限于搅拌、摇动、振动或以其他方式搅动反应混合物。
将固体修饰的褐藻糖胶与溶剂分离可以包括例如离心、过滤、沉降和流体动力流体分离中的一种或多种。洗涤固体修饰的褐藻糖胶可以包括用溶剂或由至少一种相对极性小于0.765的有机溶剂构成的溶剂混合物进行洗涤，例如，二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、异丙醇、1-丙醇、正丁醇、2-丁醇、二乙醚、己烷、庚烷、苯、十甲基环五硅氧烷、乙酸乙酯、庚醇、辛醇、癸醇和二噁烷。
猝灭反应混合物可包括用合适的猝灭剂将固体修饰的褐藻糖胶溶解在水性溶剂中。合适的猝灭剂包括但不限于盐和/或缓冲剂，例如碳酸氢钠、碳酸氢铵和碳酸氢钾。猝灭反应混合物可以进一步包括用合适的酸、碱和/或缓冲剂控制溶解的修饰的褐藻糖胶的pH。
将修饰的褐藻糖胶与硫酸酯化反应残余分子分离可能涉及过滤，例如，通过合适的截留分子量切向流过滤过滤器。将修饰的褐藻糖胶与硫酸酯化反应残余分子分离可能涉及从反应混合物中沉淀出褐藻糖胶或硫酸酯化反应残余分子。
化学结构修饰
本文讨论的方法、系统等可以包括对褐藻糖胶组合物，特别是褐藻糖胶组合物中的褐藻糖胶进行化学结构修饰。化学结构修饰可涉及从褐藻糖胶中除去官能团，例如，从褐藻糖胶结构中去除O-乙酰基、N-乙酰基、甲氧基、羟基、羧基和/或硫酸酯官能团。化学结构修饰可涉及多种化学试剂的使用，例如酸、碱、洗涤剂和/或氧化剂。
疾病和病症
纤维性粘连
纤维性粘连通常是在外科手术后在身体的两个部位之间形成的一种疤痕类型(外科手术粘连)。纤维性粘连可能导致严重问题。例如，涉及女性生殖器官(卵巢、输卵管)的纤维性粘连可能导致不育、性交困难及严重的骨盆疼痛。在肠中出现的纤维性粘连可能导致肠梗阻或阻塞，且纤维性粘连还可能在其他位置，诸如心脏周围、脊椎及手部形成。除外科手术之外，纤维性粘连可能例如由子宫内膜异位症、感染、化疗、放射、创伤及癌症引起。
在本文档中，论述了各种纤维性粘连。诸如外科手术粘连、外科手术后粘连(post-surgical adhesion)、术后粘连(postoperative adhesion)、因盆腔炎所致的粘连、因机械性损伤所致的粘连、因放射所致的粘连、因放射治疗所致的粘连、因创伤所致的粘连以及因外来材料的存在所致的粘连等术语均是指因类似机制所致的组织间彼此粘连并且均包括在术语纤维性粘连中。
纤维性粘连形成是复杂的过程，其中体内正常分离的组织生长至彼此中。外科手术粘连(也称为外科手术后粘连)是由组织对创伤的正常伤口愈合反应以外的反应发展而来的并且已被报导在超过三分的二的全部腹部外科手术患者中出现(Ellis,H.,Surg.Gynecol.Obstet.133:497(1971))。这些纤维性粘连的后果是变化的且取决于所涉及的外科手术部位或其他部位，诸如疾病部位。面临的问题可能包括慢性疼痛、肠梗阻及甚至心脏外科手术后的死亡风险增大(diZerega,G.S.,Prog.Clin.Biol.Res.381:1-18(1993)；diZerega,G.S.,Fertil.Steril.61:219-235(1994)；Dobell,A.R.,Jain,A.K.,Ann.Thorac.Surg.37:273-278(1984))。据估计，在生殖期女性中，涉及子宫、输卵管或卵巢的纤维性粘连占全部不育情况的大约20％(Holtz,G.,Fertil.Steril.41:497-507(1984)；Weibel,M.A.and Majno,G.Am.J.Surg.126:345-353(1973))。
纤维性粘连形成过程最初涉及建立纤维蛋白框架及正常组织修复。正常修复过程允许沿间皮修复的纤维蛋白溶解。然而，在纤维性粘连形成中，纤维蛋白基质随着成纤维细胞增殖成熟为网络且发生血管新生，使得在约3至5天内建立经组织化的纤维性粘连(Buckman,R.F.,et al.,J.Surg.Res.21:67-76(1976)；Raferty,A.T.,J.Anat.129:659-664(1979))。炎性过程包括创伤组织中的中性粒细胞活化、纤维蛋白沉淀及邻接组织结合、巨噬细胞侵袭、成纤维细胞增殖至区域中、胶原沉淀、血管新生及建立永久纤维性粘连组织。
已作出各种尝试以防止外科手术粘连。这些尝试涉及针对影响伴随外科手术创伤的生物化学及细胞事件的药理学方法以及用于分离受影响的组织的屏障方法。例如，使用腹腔灌洗、肝素化溶液、促凝剂、诸如使用显微术或腹腔术外科手术技术的修饰外科技术、消除来自外科手术用手套的滑石、使用更小的缝合线以及使用旨在最小化浆膜表面的并置的物理屏障(膜、凝胶或溶液)均已尝试。当前，预防性疗法还包括预防纤维蛋白沉淀、减少炎性(类固醇及非类固醇抗炎药)及去除纤维蛋白沉淀物。
防止形成外科手术后粘连的介入尝试已包括使用水浮选(hydroflotation)技术或屏障器械。水浮选涉及将较大体积的聚合物溶液，诸如右旋糖酐(Adhesion StudyGroup,Fertil.Steril.40:612-619(1983))或羧甲基纤维素(Elkins,T.E.,et al.,Fertil.Steril.41:926-928(1984))灌注至外科手术间隙中以尝试保持器官分开。由经氧化再生纤维素制成的合成屏障膜(例如，InterceedTM)、聚四氟乙烯(戈尔-特克斯手术膜)及由经修饰的透明质酸/羧甲基纤维素(HA/CMC)组合制成的可完全再吸收的膜(SeprafilmTM)也已用于减少动物及人类两者体内的外科手术后粘连形成(Burns,J.W.,et al.,Eur.J.Surg.Suppl.577:40-48(1997)；Burns,J.W.,et al.,Fertil.Steril.66:814-821(1996)；Becker,J.M.,et al.,J.Am.Coll.Surg.183:297-306(1996))。这些HA/CMC膜的成功可能源自其能够在纤维性粘连形成时在腹膜伤口修复过程期间提供组织分离。据观察，在应用后3-5天(与外科手术后粘连形成的时程兼容的时间段)，膜在受伤组织上形成清楚的粘性涂层(Ellis,H.,Br.J.Surg.50:10-16(1963))。不幸地，利用这些方法取得的成功有限。
腹膜炎涉及腹膜的炎症。腹膜炎可能导致严重的问题。例如，腹痛、腹部压痛及腹部防护。腹膜炎可能涉及自发性、解剖和/或腹膜透析相关的炎症。腹膜炎可能涉及感染，例如，空腔脏器穿孔、腹膜破裂、自发性细菌腹膜炎以及全身性感染可能引起感染及腹膜炎。腹膜炎还可能不涉及感染，例如，无菌体液渗漏至腹膜中，以及无菌腹部外科手术可能引起腹膜炎。已作出各种尝试以预防和/或治疗腹膜炎。例如，通用支持性测量诸如静脉内补液、抗生素及外科手术。未能满足对抑制或以其他方式治疗和/或预防腹膜炎，优选更有效的且副作用小的化合物、组合物和方法等(包括递送方法)的需求。
本文中所论述的高硫酸酯的褐藻糖胶可以用于治疗患者体内的纤维性粘连，且可以被包括作为经配置及构成以治疗纤维性粘连的高硫酸酯的褐藻糖胶医疗器械、组合或药物产品的组分，或为作为经配置及构成以治疗纤维性粘连的高硫酸酯的褐藻糖胶医疗器械、组合或药物产品。例如，包括溶解于生理盐溶液中医疗器械的约0.02mg/mL与约100mg/mL之间，例如0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.5mg/mL、0.9mg/mL、1mg/mL、2.5mg/mL、5mg/mL、7.5mg/mL的本文中的高硫酸酯的褐藻糖胶的高硫酸酯的褐藻糖胶。生理盐溶液可以是例如乳酸钠林格注射液USP(LRS)、生理盐水及生理学右旋糖酐溶液。
本文中可以为液体医疗器械的高硫酸酯的褐藻糖胶医疗器械，可以包括药学上可接受的赋形剂，诸如缓冲剂、稳定剂、防腐剂、佐剂等。所述高硫酸酯的褐藻糖胶医疗器械可用于通过给药约0.01mL/kg(根据患者或目标的公斤体重)至约10mL/kg或15mL/kg的先前段落中的褐藻糖胶医疗器械来治疗外科手术前、外科手术期间或外科手术后的纤维性粘连。剂量包括例如到达患者的手术部位的医疗器械中的约0.03mL/kg、0.1mL/kg、0.2mL/kg、0.4mL/kg、0.5mL/kg、0.6mL/kg、1mL/kg、1.2mL/kg、2mL/kg、3mL/kg、4mL/kg、5mL/kg、8mL/kg、10mL/kg及15mL/kg的高硫酸酯的褐藻糖胶。在进一步实施方式中，此类高硫酸酯的褐藻糖胶医疗器械可用于通过给药约0.04mg/kg或0.1mg/kg至约25mg/kg或50mg/kg之间来治疗任何所选目标部位，例如病变、擦伤、损伤部位、外科手术部位及外科手术后部位处的纤维性粘连。此类剂量的一些实例包括例如到达患者的外科手术部位的约0.04mg/kg、0.075mg/kg、0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、1.3mg/kg、2mg/kg、3mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、7.5mg/kg、8mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg及50mg/kg的本文中的褐藻糖胶，包括例如，本文中的高硫酸酯的褐藻糖胶)。
给药可例如通过以下完成：将液体医疗器械灌注在大致整个目标区域内；将液体医疗器械导引至目标区域内的特定位置处；将液体医疗器械喷涂在整个目标区域内或目标区域内的特定位置处；或经由施料器喷涂或以其他方式将液体医疗器械递送至已被外科医生或其他从业者识别为尤其疑似或担心发生纤维性粘连的特定位置上，该施料器可以是通过套管针、导管、内视镜或其他极小侵入性器械的喷涂施料器。在另一方面，可以在打开外科手术伤口后但在外科手术程序之前；在外科手术程序期间；或在外科手术程序后但在关闭手术伤口之前进行给药。若需要，液体医疗器械还可以在外科手术完成后(例如，经由注射器及针头)给药且还可以向非手术目标部位给药。患者的手术部位可以是例如以下中的至少一种：骨盆腔、腹腔、背腔、颅腔、脊髓腔、腹侧腔、胸腔、胸膜腔、心包腔、皮肤、关节或肌肉。将高硫酸酯的褐藻糖胶医疗器械给药至患者的手术部位中可以在小于约15分钟、10分钟、8分钟、6分钟、5分钟、4分钟、3分钟、2分钟、1分钟、45秒、30秒、20秒、15秒、10秒及5秒内完成。
在打开外科手术伤口后、在外科手术期间、在关闭手术伤口之前和/或关闭手术伤口之后，向手术部位给药高硫酸酯的褐藻糖胶的医疗器械的实例包括但不限于在以下外科手术程序的外科手术部位处给药高硫酸酯的褐藻糖胶的医疗器械：剖宫产外科手术程序、微血管游离皮瓣重建外科手术程序、全厚皮片外科手术程序、V-Y推进皮瓣外科手术程序、筋膜旋转皮瓣外科手术程序、关节成形术外科手术程序、乳房切除术外科手术程序、死骨摘除术(sequestrectomy)外科手术程序、碟形术(saucerization)外科手术程序、截骨术(osteotomy)外科手术程序、骨整形术(osteoplasty)外科手术程序、髌骨切除术(patellectomy)外科手术程序、滑膜切除术(synovectomy)外科手术程序、关节囊切除术(capsulectomy)外科手术程序、肌腱或韧带修复外科手术程序、肌腱松解术(tenolysis)外科手术程序、肌腱切断术外科手术、筋膜切开术(fasciotomy)外科手术程序、半月板修复外科手术程序、椎骨切除术(vertebrectomy)外科手术程序、筛窦切除术(ethmoidectomy)外科手术程序、柯一陆氏手术(Caldwell Luc's)外科手术程序、泪囊鼻腔吻合术(dacryocystorhinostomy)外科手术程序、溶菌鼻粘连分离术(lysis nasal synechia)外科手术程序、胸腺切除术(thymectomy)外科手术程序、肺松解术(pneumonolysis)外科手术程序、全肺切除术(pneumonectomy)外科手术程序、胸廓成形术(thoracoplasty)外科手术程序、双肺叶切除术(bilobectomy)外科手术程序、门静脉高血压外科手术(portalhypertension surgery)外科手术程序、脾切除术(splenectomy)外科手术程序、食管切除术(esophagectomy)外科手术程序、腹膜炎外科手术(peritonitis surgery)外科手术程序、胃切除术外科手术(gastrectomy surgery)外科手术程序、空肠空肠吻合术外科手术(jejunojejunostomy surgery)外科手术程序、腹腔镜胆囊切除术外科手术(laparoscopiccholecystectomy surgery)外科手术程序、腹腔镜胆管总探查(laparoscopic commonbile duct exploration)外科手术程序、胃肠吻合术(gastroenterostomy)外科手术程序、减重外科手术外科手术程序、肠切除及吻合术(bowel resection&anastomosis)外科手术程序、肝段切除术(segemental hepatectomy)外科手术程序、叶切除术(lobectomy)外科手术程序、胰切除术(pancreatomy)外科手术程序、胰十二指肠切除术(pancreaticoduodenectomy)外科手术程序、肿瘤切除术(tumor resection)外科手术程序、腹腔镜肾切除术(laparoscopic nephrectomy)外科手术程序、膀胱切除术(cystectomy)外科手术程序、腹部或骨盆粘连分离外科手术程序、子宫输卵管造口术(hysterosalpingostomy)外科手术程序、输卵管成形术(salpingoplasty)外科手术程序、子宫外孕腹腔镜外科手术(ectopic pregnancy surgery)外科手术程序、关节置换外科手术手术程序、骨折修复外科手术程序、子宫切除术(hysterectomy)外科手术程序、胆囊去除外科手术程序、心脏搭桥(heart bypass)外科手术程序、血管成形术(angioplasty)外科手术程序、粥样斑切除术(atherectomy)外科手术程序、乳房活组织检查外科手术程序、颈动脉内膜切除术(carotid endarterectomy)手术程序、白内障外科手术(cataract surgery)外科手术程序、冠状动脉旁路(coronary artery bypass)外科手术程序、刮宫术(dilationand curettage)外科手术程序、疝修复(hernia repair)外科手术程序、下背痛外科手术外科(lower back pain surgery)手术程序、部分结肠切除术(partial colectomy)外科手术程序、前列腺切除术(prostatectomy)外科手术程序及扁桃体切除术(tonsillectomy)手术程序。
一般癌症
癌症已成为美国死亡的第二主要原因且占全部死亡率的20％以上。癌症为增殖性疾病且其特征为某些细胞的不可控分裂，其可导致形成一种或多种肿瘤。大量方法用于治疗癌症，包括外科手术、放射、化疗及其组合。尽管外科手术是用于一些局部肿瘤的相对普遍的方法，但在肿瘤切除后仍存在明显肿瘤复发机率。
治疗癌症及其他增殖性疾病受对非癌性、健康组织的潜在损伤或毒性限制。在放射及外科手术治疗中，手术总体上受限于肿瘤部位且靠近肿瘤部位。然而，对于经历手术去除癌性组织的患者来说，可能存在明显的风险(例如，在去除前列腺或脑瘤中，可能存在对于周围重要组织的明显的不可修复损伤风险，例如经由潜在地减小对切除非肿瘤组织的需求。另外，在作为前列腺癌的一线治疗的集中放射治疗中，存在类似风险。在癌症的化学治疗性治疗中，药物全身性给药，使得整个身体暴露于药物。这些药物经设计对癌细胞是有毒的，但其对非癌细胞(通常)也是有毒的，使得患者在经历用于癌症的药物治疗时变得非常虚弱。经由试验，肿瘤学家能够给予对一些患者耐受的这些药物的剂量。然而，这些剂量通常不能成功治疗癌症。
任何治疗癌症的方法都存在的一个问题是疾病的局部复发。例如，每年大约700,000名美国人经诊断患有局部癌症(大约64％的全部癌症患者)且近似五十万患者使用外科手术方法进行治疗。不幸地，经手术治疗的32％患者在初始治疗后复发(大约21％在初始手术部位处复发及11％在远处转移性部位处复发)。每年接近100,000名患者死于癌症的局部复发。这在乳腺癌中更是如此，其中经历乳房肿瘤切除术的39％的患者将经受疾病的局部复发。
分期为判定患者体内的癌症(实体肿瘤)的进展的方法。简化方法基于癌症已进展程度将患者分成三组或三期：
1期：可以通过手术去除器官的部分来治疗癌症。这还称为可切除期。
2期：癌症已进展超过可切除点但仍受限于器官本身。
3期：肿瘤已扩散至其他器官。
许多癌症采用抗增殖剂，包括例如，5-氟尿嘧啶
Figure BDA0002919841410000291
长春花生物碱(vincaalkaloid)(例如，长春新碱(vincristine)
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)、蒽环素(anthracycline)(例如，阿霉素
Figure BDA0002919841410000293
)、顺铂
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盐酸吉西他滨(gemcitabinehydrochloride)
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甲胺喋呤及紫杉醇治疗。与抗增殖剂、甲胺喋呤及紫杉醇相关联的毒性的一些实例在本文中的其他地方论述。甲胺喋呤已用于治疗几种癌症，包括例如，膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、头部及颈部癌、肝癌、肺癌及睾丸癌。紫杉醇已用于治疗几种癌症，包括例如，卵巢癌、乳腺癌及非小细胞肺癌(Compendium of Pharmaceutical andSpecialties Thirty-fifth Edition,2000)。
因5-氟尿嘧啶所致的毒性可以包括心脏血管毒性，诸如心肌缺血；中枢神经系统毒性，诸如欣快症、急性小脑综合征及共济失调；皮肤病学毒性，诸如秃发症及皮炎；胃肠毒性，诸如恶心、呕吐及口腔或胃肠溃烂；血液毒性，诸如白细胞减少症、血小板减少及贫血症；超敏感性毒性，诸如全身性过敏反应及接触过敏；眼部毒性，诸如增加流泪、畏光及结膜炎；及其他毒性，诸如发热。5-氟尿嘧啶已用于治疗多种癌症，包括例如，乳腺癌、结肠直肠癌、胃癌、肝脏癌、膀胱癌、头部及颈部癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、胰腺癌及前列腺癌(Compendium of Pharmaceutical and Specialties Thirty-fifth Edition,2000)。
因长春新碱所致的毒性包括中枢神经系统毒性，诸如儿童癫痫及幻觉；皮肤病学毒性，诸如秃发症；外渗毒性，诸如水疱；胃肠毒性，诸如恶心、呕吐、便秘及口炎；血液毒性，诸如骨髓抑制；神经毒性，诸如周围神经病变及自主神经病；眼部毒性，诸如复视、瞬时目盲及视神经萎缩；肾/代谢毒性，诸如尿潴留、高尿酸血症及膀胱乏力；呼吸毒性，诸如呼吸短促；及其他毒性，诸如儿童发热。这种抗增殖剂已用于治疗几种癌症，包括例如，霍奇金病、小细胞肺癌、威尔姆肿瘤及睾丸癌(Compendium of Pharmaceutical and SpecialtiesThirty-fifth Edition,2000)。
因阿霉素所致的毒性包括心脏血管毒性，诸如心电图异常及心肌病；皮肤病学毒性，诸如秃发症及指甲变化；外渗危害毒性，诸如水疱；胃肠毒性，诸如恶心、呕吐及口炎；泌尿生殖系统毒性，诸如尿液红色；血液毒性，诸如骨髓抑制；超敏感性毒性，诸如过敏反应及皮疹；眼部毒性，诸如结膜炎；生殖毒性，诸如不孕症；及其他毒性，诸如高尿酸血症。这种抗增殖剂已用于治疗几种癌症，包括例如，乳腺癌、小细胞肺癌及卵巢癌(Compendium ofPharmaceutical and Specialties Thirty-fifth Edition,2000)。
因顺铂所致的毒性包括心脏血管毒性，诸如心电图变化；皮肤病学毒性，诸如色素沉着；外渗危害毒性，诸如刺激性；胃肠毒性，诸如恶心及呕吐；血液毒性，诸如骨髓抑制及溶血性贫血；超敏感性毒性，诸如过敏反应；神经肌肉毒性，诸如周围神经病及急性脑病；眼部毒性，诸如球后神经炎；耳科毒性，诸如听觉损失及耳鸣；肾/代谢毒性，诸如中毒性肾病及低钾血症；及其他毒性，诸如不育。这种抗增殖剂已用于治疗几种癌症，包括例如，膀胱癌、小细胞肺癌、卵巢癌、睾丸癌、脑癌、乳腺癌、宫颈癌、头部及颈部癌、肝母细胞瘤癌及甲状腺癌(Compendium of Pharmaceutical and Specialties Thirty-fifth Edition,2000)。因盐酸吉西他滨所致的毒性包括例如血液毒性，诸如骨髓抑制；胃肠毒性，诸如恶心、呕吐及口炎；肝毒性，诸如血清转胺酶的瞬时升高；肾毒性，诸如蛋白尿、血尿、溶血性尿毒症综合征及肾衰竭；皮肤病学毒性，诸如皮疹及秃发症；水肿毒性，诸如水肿及周围水肿；及其他毒性，诸如发热。这种抗增殖剂已用于治疗胰腺癌及非小细胞肺癌(Compendium ofPharmaceutical and Specialties Thirty-fifth Edition,2000)。
本发明论述包括预防或治疗可治疗的局部癌症或实体肿瘤，包括前列腺、乳腺、胰腺、肝、肾、泌尿生殖系统、脑、胃肠系统、呼吸系统及头部及颈部的局部癌症或实体肿瘤。本文中的组合物等可以通过允许在距目标肿瘤远处的部位处控制释放高硫酸酯的褐藻糖胶，通过允许有效浓度的高硫酸酯的褐藻糖胶利用扩散或甚至全身性输送达至肿瘤和/或转移瘤来预防或治疗癌症，包括转移瘤。在以下段落中进一步论述这些癌症中的一些。
前列腺癌
前列腺癌为在衬在前列腺腺体的细胞中产生的恶性肿瘤。在美国，今年估计200,000名患者将罹患前列腺癌，且超过30,000名患者将死于该疾病。前列腺癌的新发病例死亡率为15％。癌症可能保持在前列腺内，或其可能扩散至周围组织或远部位(最经常淋巴结及骨骼)。通常前列腺癌无症状地扩散，仅在其已进展超出前列腺时才产生症状。在一些研究中，若前列腺癌已在早期期间经诊断且经治疗，患者的5年存活率为94％。
前列腺癌经常论述为超过50岁的男性疾病。实际上，患有前列腺癌的80％男性为60岁且更年长。男性在其寿命期间诊断患有前列腺癌的机率为约1/10，与女性患乳腺癌的机率大致相同。近年来，由于可以在疾病出现早期(经常在症状呈现的前很久)检测到疾病的改良测试，经报导的新病例的数目显著地上升。任一给定年份中罹患前列腺癌的可能性随着年龄增加，但在50岁后显著地上升。
用于前列腺癌的当前治疗选项取决于疾病进展程度、患者的年龄及总体健康状况。仅患有早期癌症或受额外更严重疾病影响的老年患者可以保守治疗，然而癌症为晚期的老年患者可能经历更具侵袭性的治疗。前列腺癌已通过各种方法治疗，包括放射疗法(外部辐射束放射或近距离放射疗法)、激素戒断或去势(外科手术或化学品)、抗增殖剂、外科手术及期望治疗(即，“观察等待”)。没有任何治疗保证绝对治愈，且一些具有相当大的副作用。
早期前列腺癌(即，肿瘤在前列腺局部)可以“观察等待”治疗。前列腺癌的外科手术经推荐用于总体健康状况在其他方面良好且肿瘤受限于前列腺腺体的患者。针对70岁以下的男性前列腺的局部癌症的普遍治疗为根治性前列腺切除术(即，外科手术去除前列腺)。
其癌症为前列腺区域局部的患者通常以外部辐射束放射(EBR)治疗。放射杀灭癌细胞且缩小肿瘤。EBR占局部前列腺癌治疗的小于20％，其中这些患者中大约50％经历放射后疾病复发。与早期前列腺癌检测及来自患者的增加的需求组合，近距离放射疗法(即，局部放射疗法)的使用预期将会增加。在1995年，仅2.5％的新诊断患者使用近距离放射疗法治疗。近距离放射疗法涉及将放射性金属“种”植入前列腺肿瘤中。
用于已扩散的前列腺癌的治疗涉及去除睾或激素疗法。两种皆用于抑制或终止驱动癌症生长的睾固酮的产生。大约20％的全部前列腺癌患者经历激素戒断疗法。激素疗法包括醋酸戈舍瑞林乙(goserelin acetate)
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或醋酸亮丙瑞林(leuprolideacetate)
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用于治疗前列腺癌的抗增殖剂包括5-氟尿嘧啶。
乳腺癌
在美国，乳腺癌已成为女性当中最常见的癌症，其中每年诊断约180,000个新病例(男性乳腺癌占全部经诊断乳腺癌的约5％)。乳腺癌已成为女性的仅次于肺癌的致死原因，且其已引起每年大约50,000起死亡。美国女人在其寿命期间具有1/8(或约13％)的罹患乳癌机率。在过去十年间，报导最多的乳腺癌为小、原发性(独立地产生；并非由转移瘤所引起)肿瘤。大致70％至80％的新诊断患者展现早期疾病(1期或2期)，且大部分尚未涉及腋下(手臂下方)淋巴结。
大部分乳腺癌为癌(即，从上皮组织中生长出的恶性肿瘤)。小于1％的乳腺癌为肉瘤或由结缔组织、骨骼、肌肉或脂肪产生的肿瘤。此外，大部分乳腺癌(约75％)为导管癌，在与乳导管并排的组织中产生。更小量的癌症(约7％)在乳小叶内发现且被称作小叶癌。佩吉特病(Paget's disease)(乳晕及乳头癌)及炎性瘤占几乎全部其他形式的乳癌。
乳腺癌治疗为复杂的且取决于多种因素。两个重要因素为肿瘤类型和进展阶段。尤其，肿瘤特征帮助将个体分为两个组：(1)处于癌症复发低风险的个体及(2)处于癌症复发高风险的个体。特定预后因素将患者置放在这些组中的任一者中。这些因素包括肿瘤大小；女性性激素雌激素及孕酮(ER/PR)受体的存在；细胞生长周期阶段(肿瘤细胞是否有效地分裂或处于“S阶段”)；被称为“her-2-neu”蛋白」的蛋白的存在；肿瘤级别、肿瘤细胞分化或改变的指示物；及肿瘤倍性，肿瘤细胞内的基因物质的集合数目。
已通过肿块切除术及放射疗法来治疗无明显淋巴结涉及的原发性疾病。更明显的淋巴结涉及可保证乳房切除术及去除辅助淋巴结。在此阶段，癌转移及局部复发的机率已经较高。涉及放射疗法及化疗的转移性疾病的治疗只是缓解性的，其为免疫抑止、细胞毒性及白血球减少。包括例如，5-氟尿嘧啶、阿霉素、甲胺喋呤及紫杉醇的抗增殖剂已被批准用于抗乳腺癌。
胰腺癌
胰腺为位于接近胃及小肠的消化系统的器官。其具有两个主要功能：产生酶和激素。胰腺癌可能出现在外分泌(即，酶)胰腺(例如，典型胰腺腺癌)中或可能出现在内分泌(即，激素)胰腺中。
外分泌胰腺癌是极严重的健康问题。在美国，大约28,000名患者经诊断患有胰腺癌，同时每年约相同数目死于该疾病。胰腺癌同等地出现在男性及女性中。由于诊断困难、胰腺癌的固有侵袭性本质及稀少的可用全身性治疗选项，在诊断后，仅大约4％的经诊断患有胰腺癌的患者存活5年。胰腺癌已成为继乳腺癌、肺癌、结肠癌及前列腺癌之后的第5个癌症死亡的主要原因。
对于胰腺癌的治疗选择很大程度上取决于肿瘤阶段。可能的治疗包括外科手术、抗增殖剂、放射及生物疗法。外科手术已通常保留用于其癌症视为可切除的1期患者。有时，在手术之前或之后给予疗法(诸如放射及抗增殖剂)的组合可以增大患者的存活机率。可以在临床试验中使用抗增殖剂治疗被视为不可切除的胰腺癌(通常II期或晚期)。诸如例如，吉西他滨或5-氟尿嘧啶的抗增殖剂对胰腺癌具有一些效果且吉西他滨已用作姑息性药剂。本文中其他地方论述因这些抗增殖剂所致的毒性。放射疗法在与化疗组合使用时对胰腺癌具有一些效果。仅放射疗法可以抑制症状。这种治疗形式也已经用于II期或晚期胰腺癌。
膀胱癌
在1998年，在美国估计将诊断出超过54,000个新的膀胱癌病例且约15,000例死亡将归因于该疾病。膀胱癌已成为美国男性中第四种最常见癌症且在美国女性中为第九种最常见癌症。膀胱癌在男性中出现的频率为女性的三倍。主要地，年长男性疾病中，膀胱癌已成为显著疾病及死亡原因。膀胱癌风险随着年龄增长而大幅度增加(80％病例在大于50岁的人群中出现)，其中超过二分的一的全部膀胱癌死亡在70岁后出现。在超过65岁的白人男性中，膀胱癌的年疾病率已为每1,000个人中有大约2个病例；这与65岁以下的每1,000个人中有0.1个病例的比率形成对比。在个人寿命期间，罹患膀胱癌的机率已大于3％；然而，膀胱癌的死亡机率较小(＜1％)。膀胱癌罕见地出现在小于40岁的人群中。
近期研究表明某些基因及遗传性代谢能力可能在膀胱癌中起作用。移行细胞癌(TCC)已为膀胱癌的最常见形式。TCC通常以浅表(表面)、乳头状(疣状)、茎状基底上的外生性(向外成长)块的形式出现。但在一些情况下，TCC可附接于宽广基底上或其可呈现溃疡(在凹痕式病变内)。乳头状TCC通常从增殖区域开始，随后去分化或失去个别细胞特征。仅约10％至30％的乳头状TCC发展成浸润性癌症。相比之下，非乳头状形式的TCC更可能变成浸润性的。如所述，此类TCC可能呈现溃疡或平整的。由退行性上皮组成的平整、非乳头状TCC已经被分类为原位癌(CIS或TIS)。CIS的组织包含大的具有明显核仁(细胞内的圆形体；涉及蛋白质合成)且缺少正常极性的细胞。
膀胱癌的治疗取决于多种因素。这些因素中最重要的是呈现的肿瘤类型及其阶段。普遍治疗包括经尿道切除术(TUR)、电外科手术、激光手术、膀胱内治疗、抗增殖剂、外科手术疗法、膀胱切除术及放射疗法。用于治疗膀胱癌的抗增殖剂的实例包括例如5-氟尿嘧啶、顺铂及甲胺喋呤。因抗增殖剂、5-氟尿嘧啶、顺铂及甲胺喋呤所致的毒性在本文中其他地方论述。
脑癌
脑瘤经常为不可手术的且多于80％的患者在诊断后12个月内死亡。在美国，每年诊断出大约18,000例原发性颅内(脑)癌新病例。这相当于全部成年人癌症的2％。多于50％的这些癌症为高度神经胶质瘤(即，多形性胶质母细胞瘤及间变性星形细胞瘤肿瘤)。患有这些肿瘤的患者通常遭受严重残疾，诸如运动障碍、癫痫及视觉异常。
在脑组织中开始的肿瘤被称为原发性脑瘤。原发性脑瘤通过其开始的组织类型进行分类。最常见脑瘤为开始于胶质(支持性)组织中的神经胶质瘤。其他的脑瘤包括星形细胞瘤、脑干神经胶质瘤、室管膜瘤及少突神经胶质瘤。
已针对大部分类型及大部分位置建议外科手术去除脑瘤且应尽可能在保留神经功能的限制内完成。此规则的例外为深部肿瘤，诸如桥脑胶质瘤，其根据临床证据诊断且大约有50％的时间无需进行初次外科手术即可接受治疗。然而，在许多情况下，执行活组织检查诊断。立体定向的活组织检查可用于难以到达及切除的病变。患有脑瘤的罕见地可治愈或不可切除的患者应被视为用于评估辐射增敏剂、热疗或间质性近距离放射治疗结合外部辐射束放射疗法使用以改善肿瘤的局部控制的临床试验或用于评估新药物及生物反应调节剂的研究的候选者。
放射疗法在治疗大部分肿瘤类型中具有主要作用且可增大治愈率或延长无病生存期。放射疗法还可以适用于治疗最初仅通过外科手术治疗的患者的复发。可以在外科手术及放射疗法之前、期间或之后使用化疗。还通过化疗来治疗复发性肿瘤。用于治疗脑癌的抗增殖剂包括顺铂。与这种抗增殖剂相关联的毒性的实例在本文中其他地方论述。
再狭窄
再狭窄为引起血管壁增厚和丧失由血管供应至组织的血流的慢性血管损伤形式。此炎性疾病可以响应于包括减轻血管梗阻的任何手术的血管重建手术而出现。因此，再狭窄已成为限制这些手术的有效性的主要限定性因素。
本发明论述包括例如通过向血管给药治疗有效量的寡核苷酸治疗剂与抗炎剂的组合来预防或治疗再狭窄。适合的组合物包括可以以外科手术方式植入再狭窄部位或潜在再狭窄部位处或可以以聚合性糊剂或凝胶形式经由导管注射的聚合性载体。适合的组合物可以包括本文中所论述的高硫酸酯的褐藻糖胶。
关节炎
类风湿性关节炎(RA)为衰弱的慢性炎性疾病，其特征为关节组织的疼痛、肿胀、滑膜细胞增殖(血管翳形成)及破坏。在晚期，该疾病经常损害关键器官且可致命。该疾病涉及免疫系统(巨噬细胞/单核细胞、中性粒细胞、B细胞及T细胞)复杂的细胞介素相互作用及滑膜细胞功能失常及增殖的多个成员。已推荐用疾病修饰抗风湿药物(DMARD)，诸如甲胺喋呤用于早期侵袭性治疗，该药物在本文中其他地方论述。
结晶诱发的关节炎的特征为关节中结晶诱发的巨噬细胞及中性粒细胞活化且之后许多天伴随剧烈疼痛。疾病进展使得发作间隔变得更短且患者的发病率增加。此疾病总体上已通过非类固醇抗炎药(NSAID)，诸如双氯芬酸钠
Figure BDA0002919841410000371
对症治疗。此抗炎剂具有毒性，包括中枢神经系统毒性，诸如眩晕及头痛；皮肤病学毒性，诸如皮疹及瘙痒；胃肠毒性，诸如加重的溃疡性结肠炎及克罗恩病；泌尿生殖毒性，诸如急性肾衰竭及肾乳头坏死；血液毒性，诸如粒细胞缺乏、白血球减少及血小板减少；肝毒性，诸如升高的肝转胺酶及肝炎；及其他毒性，诸如哮喘及过敏反应。
本发明论述包括例如经由向患者给药治疗有效量的寡核苷酸治疗剂及可选的抗炎剂来预防或治疗类风湿性关节炎。适合的组合物包括聚合性载体，其可以以抗炎剂及微颗粒的受控释放载体形式以寡核苷酸治疗剂的受控释放载体形式(其反过来已经并入于聚合性载体中)注射至关节中。适合的组合物可以包括本文中所论述的高硫酸酯的褐藻糖胶。所述聚合性载体可以采取聚合物微球体、糊剂或凝胶的形式。
炎性病症
本文中的组合物等可选地抑制或治疗涉及嗜中性白细胞的炎性病症，例如包含向患者给药包括寡核苷酸治疗剂及抗炎剂的组合物。所述病症的实例包括结晶诱发的关节炎；骨关节炎；非类风湿性炎性关节炎；混合结缔组织疾病；干燥综合征；强直性脊柱炎；贝赫切特综合征；结节病；银屑病；湿疹；炎性肠病；慢性炎性肺病；神经障碍及多发性硬化。在以下段落中进一步论述这些疾病中的一些。
慢性炎性皮肤病(包括银屑病及湿疹)
牛皮癣为常见的慢性炎性皮肤病，其特征为发痒、灼热、蜇伤且易于出血的突起的、增厚的及鳞片状病变。当这些疾病在疾病的晚期具有细胞增殖及血管生成组分时，患者通常具有伴随的关节炎病症。症状可以通过诸如泼尼松的类固醇抗炎剂或诸如甲胺喋呤的抗增殖剂来治疗，这些药剂在本文的其他地方论述。本文中的组合物还可以用于抑制或以其他方式治疗和/或预防慢性炎性皮肤病，例如银屑病和/或湿疹。
以下提供可以通过本文中所论述的组合物治疗的炎性疾病的一些额外代表性实例，包括例如动静脉畸形(血管畸形)的动脉栓塞；月经过多；急性出血；中枢神经系统障碍及脾功能亢进；炎性皮肤病，诸如银屑病；湿疹疾病(异位性皮炎、接触性皮炎、湿疹)；免疫大疱疾病；及包括各种病症的炎性关节炎，所述病症包括类风湿性关节炎、混合结缔组织疾病、干燥综合征、强直性脊柱炎、贝赫切特综合征、结节病、结晶诱发的关节炎及骨关节炎(以上所有特征以发炎的疼痛关节为重要症状)。
缺血
缺血或局部缺血涉及血液供应限制，可以包括恰当组织功能所需的氧、葡萄糖及其他组分供应不足，使得组织损坏和/或功能不全。缺血可能导致严重问题。例如，组织可能变得缺氧、坏死且可形成结块。已作出各种尝试以预防和/或治疗缺血。例如，复原血流或再灌注。然而，复原血液涉及再引入氧，其可能导致因产生自由基所致的额外损坏，进而导致再灌注损伤。再灌注损伤可能导致严重问题。本文的组合物可以用于抑制或以其他方式治疗和/或预防缺血和/或再灌注损伤。
内毒素血症
内毒素血症是在血液中存在内毒素。内毒素血症可能导致严重问题。例如，内毒素血症可能引起败血症休克。本文中的组合物可以用于抑制或以其他方式治疗和/或预防内毒素血症。
瘢痕疙瘩瘢痕
瘢痕疙瘩特质致使伤口通过突起的瘢痕愈合。瘢痕疙瘩特质的突起瘢痕涉及异常纤维性瘢痕。瘢痕疙瘩特质导致严重问题，例如疼痛及外形损伤。本文中的组合物可用于抑制或以其他方式治疗和/或预防瘢痕疙瘩特质及其引起的突起的瘢痕。
瘢痕疙瘩(瘢痕疙瘩瘢痕)是生长扩增超过正常皮肤的瘢痕类型。瘢痕疙瘩涉及异常胶原生长，包括I型及III型胶原异常生长。瘢痕疙瘩导致严重问题，例如疼痛、瘙痒，并且若经感染，则可能溃烂。已作出尝试以治疗或预防瘢痕疙瘩，包括使用外科手术、敷料、类固醇注射及激光疗法。本文中的组合物可以用于抑制或以其他方式治疗和/或预防瘢痕疙瘩。
皮炎
皮炎包括皮肤炎症，所属皮肤炎症包括特应性皮炎及接触性皮炎。例如，接触性皮炎涉及在皮肤与外来物质接触的后皮肤的局部皮疹和/或刺激。例如，特应性皮炎为长期复发性、瘙痒皮肤病。特应皮炎有时被称作贝尼埃氏痒疹(prurigo Besnier)、神经性皮炎、内源性湿疹、曲湿疹、婴儿湿疹、儿童湿疹及痒疹病(prurigo diathsique)。湿疹为呈皮炎形式的疾病。其他类型的皮炎包括海绵性皮炎、脂溢性皮炎(皮屑)、出汗障碍性皮炎(汗疱疹)、荨麻疹、泡状皮炎(大疱性皮炎)及流行性风疹。皮炎可能导致严重问题。例如，干燥皮肤、皮肤皮疹、皮肤水肿、皮肤发红、皮肤瘙痒、皮肤结痂、开裂、起泡、渗泌及出血。已作出尝试以治疗或预防皮炎，包括使用皮质类固醇及煤焦油。本文中的组合物可以用于抑制或以其他方式治疗和/或预防皮炎，包括特应性皮炎、湿疹、接触性皮炎、海绵性皮炎、脂溢性皮炎、出汗障碍性皮炎、荨麻疹、泡状皮炎及流行性荨麻疹。
红斑痤疮
红斑痤疮为典型地特征化为面部红斑的慢性疾病或病症。红斑痤疮可能导致严重问题。例如，红斑痤疮通常从额头、鼻子或脸颊发红开始，还可能导致脖子、耳朵、头皮和胸部发红。红斑痤疮可能导致包括毛细管扩张、丘疹、脓包、疼痛感觉的额外症状，且在晚期病例中，可能产生肥大性酒渣鼻(红色分叶鼻)。红斑痤疮亚型包括红斑狼疮样红斑痤疮、脓包性丘疹样红斑痤疮、结块性红斑痤疮及眼部红斑痤疮。已作出尝试以治疗或预防红斑痤疮，包括使用非类固醇抗炎药及抗生素。本文中的组合物可以用于抑制或以其他方式治疗和/或预防红斑痤疮，包括其红斑狼疮、脓包性丘疹、红斑痤疮及眼部亚型。
医疗器械、医疗材料、组合及药物产品
本文的论述还提供医疗器械、医疗材料、组合及药物产品，其包括在医疗器械、医疗材料、组合产品或药学上可接受的容器中的如本文所论述的组合物。该产品还可包括与容器相关联的注意事项，典型地以由监察医疗器械、医疗材料、组合及药剂或生物药剂的制造、使用或销售的管理机构规定的形式，从而该注意事项反映该组合物经该机构批准，诸如高硫酸酯的褐藻糖胶已经批准作为例如用于人类或兽医给药以治疗增殖性疾病或炎性疾病(例如炎性关节炎、再狭窄、外科手术粘连、银屑病及腹膜炎)的抗增殖剂或抗炎剂的注意事项。还可以包括使用本文中的高硫酸酯的褐藻糖胶的说明书。所述说明书可以包括关于患者的给药及投药模式的信息。
本申请进一步针对制造本文中所论述的高硫酸酯的褐藻糖胶、系统等的各种组件，包括制造褐藻糖胶和组合物本身的方法及其使用方法，包括例如，治疗本文中的病症、疾病等。
本申请进一步包括用于治疗纤维性粘连、关节炎、银屑病或视需要的其他疾病的医疗器械、医疗材料、药物组合产品及药物产品，其包括本文中呈现的高硫酸酯的褐藻糖胶及高硫酸酯的褐藻糖胶组合物。所述材料等可以用于治疗纤维性粘连，诸如外科手术粘连、关节炎、银屑病或视需要的其他疾病的药物品中。还提供制造且使用能够减少与患者，包括人类患者体内的纤维性粘连、关节炎及银屑病中的至少一种相关联的症状的所述药物的方法，所述方法包括将药学上有效量的褐藻糖胶，诸如如本文所论述的岩藻多糖与药学上可接受的赋形剂或缓冲剂组合。
以下实施例提供了本文中的某些实施方式的示例性论述，但本公开和权利要求不限于此。
实施例1：化学结构修饰
渗出物-提取物获自极北海带(Laminaria Hyperborea)。渗出物-提取物通过切向流过滤(TFF)通过100kDa过滤器来过滤并去除小分子。将所得渗余物的样品冻干以获得以其他方式未修饰的样品A。通过添加10M NaOH溶液且在室温下静置16小时使所得渗余物达至0.25M NaOH。然后将所得样品通过50kDa过滤器离心过滤且收集所得渗余物并冻干以获得经碱处理的样品B。通过质子核磁共振光谱法(1H-NMR)分析未修饰的样品A及经碱处理的样品B两者且图1A中示出所得1H-NMR光谱。
图1A证明了已完成的褐藻糖胶的化学结构修饰：存在于未修饰的样品A中的具有约2.0ppm化学位移的较宽峰并不存在于经碱处理的样品B中。
通过2D1H-13C异核多量子相关谱(HMQC)进一步分析未修饰的样品A及经碱处理/修饰的样品B。在70℃下伴随溶剂信号抑制在配备有5-mm冷探针的600MHz光谱仪上获得图1B中示出的HMQC光谱。在碳尺寸10-30ppm范围内以256-512的8次增量的扫描每次获得HMQC光谱的大量扫描；这样的扫描经组合以产生图1B中的光谱。
未修饰的样品A的HMQC光谱具有对应于O-乙酰基的交叉峰，由图1B中的带圆圈信号指示。此交叉峰不存在于经碱处理的样品B的光谱中。这证明了从褐藻糖胶中去除乙酰基，且因此通过NaOH处理来对经碱处理的样品B中的褐藻糖胶进行化学结构修饰。
实施例2:化学脱硫酸酯化
将原料岩藻多糖组合物以100mg/mL溶解在蒸馏水中以获得起始溶液。将包含原料岩藻多糖组合物的起始溶液在热板上达到60℃。将10M NaOH添加到包含原料岩藻多糖组合物的起始溶液中，获得的最终NaOH浓度为0.25M NaOH，并开始脱硫酸酯化过程。在0.5小时、1小时和随后的每个小时取等分试样。立即用盐酸(HCl)中和每个等分试样以停止脱硫酸酯化过程。通过在pH纸上印迹约0.1mL的猝灭的等分试样来确认碱的猝灭。
使每个等分试样经受凝胶渗透色谱法(GPC)，以监测降解和脱硫酸酯化。在表1中示出了获得的结果的子集，其中，鉴定图2的曲线上的一些标记。所有用于分子量测定的凝胶渗透色谱分析均使用以下柱配置进行：2x
Figure BDA0002919841410000421
线性与
Figure BDA0002919841410000422
保护串联。流动相为0.1M硝酸钠，以0.6mL/min运行。柱和检测器保持在30℃下。借助于Waters2414折射率检测器进行检测。
相对于包括来自American Polymer Standards Corporation的可追踪标准物的标准曲线来量化样品运行：DXT3755K(峰分子量＝2164kDa)、DXT820K(峰分子量＝745kDa)、DXT760K(峰分子量＝621kDa)、DXT670K(峰分子量＝401kDa)、DXT530K(峰分子量＝490kDa)、DXT500K(峰分子量＝390kDa)、DXT270K(峰分子量＝196kDa)、DXT225K(峰分子量＝213kDa)、DXT150K(峰分子量＝124kDa)、DXT55K(峰分子量＝50kDa)、DXT50K(峰分子量＝44kDa)以及DXT5K(峰分子量＝4kDa)，这些标准物的峰分子量在约4kDa与约2,200kDa之间。所使用标准曲线可例如包括Dextran 3755kDa，Dextran 50kDa及Dextran 55kDa中的至少一种以及在3至6个之间的本文所讨论的附加可追踪标准物，校正点为所使用校正物的峰分子量。示例性校正曲线可由以下组成：DXT3755K、DXT 820K、DXT530K、DXT500K、DXT225K及DXT55K。本文所使用的柱具有涵盖且延伸超出用于褐藻糖胶的量化的标准物的峰分子量范围的总有效分子量范围。
将10mg/mL硫酸镁的样品溶解在0.1M硝酸钠中。某些硫酸根与钠形式的平衡产生硫酸钠。通过在约33.1分钟的保留时间处与硫酸钠相关的修饰的岩藻多糖色谱图中的峰的存在，定性鉴定了原料岩藻多糖组合物的脱硫酸酯化。硫酸钠的存在示出于表2中，其中鉴定了图2曲线上的一些标记。
下表中的结果包含用于分子量分布的某些特征的缩写。凝胶渗透色谱法由GPC表示，峰保留时间由PRT表示，峰分子量由PMW表示，重均分子量由WAMW表示，数均分子量由NAMW表示，分布百分比由％分布表示，分子量由MW表示，多分散性指数由PDI表示。
Figure BDA0002919841410000431
表1.使用NaOH的修饰的岩藻多糖的分子量
GPC PRT(Min)
h 硫酸钠峰 33.09
等分试样时间(h)
i 4 33.14
j 6 33.11
k 24 33.14
表2.使用NaOH的修饰的岩藻多糖中的硫酸钠峰的存在
表1、表2和图2示出，已经使用碱诸如氢氧化钠实现了原料岩藻多糖组合物的脱硫酸酯化。用氢氧化钠处理导致褐藻糖胶组合物的可控制的脱硫酸酯化，而不会显著降解岩藻多糖，也不会在所需的修饰的褐藻糖胶中引入不想要的添加剂。由于以上讨论的方法，原料岩藻多糖组合物的重均分子量变化不超过2％，这完全在GPC仪器的误差内。
实施例3:化学脱硫酸酯化
将原料岩藻多糖组合物以50mg/mL溶解于0.5M NaOH中以获得起始溶液。将包含原料岩藻多糖组合物的起始溶液在水浴中达到60℃，开始脱硫酸酯化过程。在1小时、4小时和24小时后取等分试样。立即用盐酸(HCl)中和每个等分试样以停止脱硫酸酯化过程。通过在pH纸上印迹约0.1mL的猝灭的等分试样来确认碱的猝灭。
每个中和的等分试样在10kDa离心过滤器上针对6体积的5mM NaCl进行渗滤。将所得等分试样-渗余物在20份蒸馏水中稀释3份。通过总固体含量确定每个稀释的等分试样-渗余物中修饰的岩藻多糖的浓度并且结果示出于下表3中。稀释的等分试样-渗余物通过电感耦合等离子体–发射光谱分析总硫含量，下表3中示出的。通过将硫含量乘以硫酸酯与硫的摩尔比，将硫含量转化为硫酸酯含量，以获得修饰的岩藻多糖中的硫酸酯含量％w/w。
Figure BDA0002919841410000451
表3.使用NaOH的修饰的岩藻多糖中的总硫酸酯
实施例4:化学硫酸酯化
将起始褐藻糖胶组合物以10mg/mL溶解于蒸馏水中，以获得约500mL的起始溶液。通过在酸化的Amberlite IR120树脂上再循环约30分钟，使包含起始褐藻糖胶的起始溶液质子化。将溶液中所得酸化的褐藻糖胶组合物冻干以获得固体酸化的褐藻糖胶组合物。将固体酸化的褐藻糖胶组合物溶解在40mL甲酰胺和160mL二甲基甲酰胺的溶剂混合物中，该溶剂混合物包含约15g SO3-DMF硫酸酯化剂复合物。将40mL的2-甲基-2-丁烯添加到反应混合物中。将反应混合物在搅拌下于30℃下温育2小时。2小时后，通过添加200mL 5％w/v的碳酸氢钠将反应猝灭。通过在5kDa TFF过滤器上进行切向流过滤，将所得修饰的褐藻糖胶与硫酸酯化残余分子分离。
实施例5:化学硫酸酯化
将约5g的起始褐藻糖胶组合物悬浮在约200mL的二氯甲烷中。向悬浮液中添加约1.6mL的氯磺酸，并将反应混合物在室温下搅拌2小时。将悬浮液通过纸滤器过滤，并将所得固体修饰的褐藻糖胶首先用约100mL的二氯甲烷洗涤，然后用约100mL的乙醇洗涤，接着是用100mL的二噁烷洗涤。将洗涤的固体修饰的褐藻糖胶溶解在5％w/v的碳酸氢钠溶液中，并且通过在5kDa的TFF过滤器上进行切向流过滤，将所得修饰的褐藻糖胶与硫酸酯化残余分子分离。
生产具有各种硫酸酯化率的修饰的褐藻糖胶
化学硫酸酯化、化学脱硫酸酯化或溶剂离解脱硫酸酯化方法可用于控制和/或修饰褐藻糖胶组合物中褐藻糖胶的硫酸酯化水平。
实施例6:修饰的褐藻糖胶的岩藻糖、半乳糖和硫酸酯水平的测量
从褐藻中提取了十一种不同的褐藻糖胶组合物，褐藻糖胶组合物基本上包括褐藻糖胶。本文呈现的十一种修饰的褐藻糖胶在下文中称为褐藻糖胶1至褐藻糖胶11。褐藻糖胶1至褐藻糖胶3、褐藻糖胶6和褐藻糖胶8为白色固体。褐藻糖胶4、褐藻糖胶5、褐藻糖胶7和褐藻糖胶9至褐藻糖胶11为浅棕色固体。将修饰的褐藻糖胶以40mg/mL溶解于72％w/w硫酸中且在45℃下在水浴中温育30分钟。然后在高压管中将酸水解产物稀释至4％w/w硫酸且在120℃下温育60分钟。用蒸馏水将所得第二酸水解产物稀释至1/333浓度且在具有脉冲安培滴定法检测的高效阴离子交换柱色谱法设置上运行。通过使用等度泵以1.0mL/分钟在
Figure BDA0002919841410000461
PA20分析柱上运行10mM NaOH洗脱液来实现分析物的分离。
通过在岩藻糖的标准曲线上进行插值来确定修饰的褐藻糖胶的岩藻糖含量。通过标准物添加的方法确定修饰的褐藻糖胶的半乳糖含量。
将修饰的褐藻糖胶溶解在去离子水中，在酸性条件下进行水解，并且通过电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)分析总硫含量％w/w，这由不列颠哥伦比亚省本拿比的ALS环境实验室进行。通过将硫含量乘以硫酸酯与硫的摩尔比，将硫含量转化为硫酸酯含量，以获得修饰的褐藻糖胶中的硫酸酯含量％w/w。
通过除以各自分析物的摩尔质量，将总岩藻糖、半乳糖和硫酸酯组分的％w/w结果转化为摩尔比。十一种不同的修饰的褐藻糖胶的总硫酸酯与总岩藻糖的摩尔比、总硫酸酯与岩藻糖加半乳糖总和的摩尔比和硫酸酯化水平在下表4中示出。
Figure BDA0002919841410000471
表4:十一种褐藻糖胶的硫酸酯化比率
表4说明了具有各种硫酸酯化比率的修饰的褐藻糖胶。修饰的褐藻糖胶具有的总硫酸酯与总岩藻糖的摩尔比为约0.6至约2.9，并且总硫酸酯与岩藻糖加半乳糖总和的摩尔比为约0.5至约2.0。
实施例7:修饰的褐藻糖胶的分子量分布、碳水化合物含量和单糖组分的测量
通过由乔治亚大学的复杂碳水化合物研究中心(complex carbohydrateresearch center)进行的气相色谱-质谱法(GC-MS)分析了修饰的褐藻糖胶褐藻糖胶1、褐藻糖胶9、褐藻糖胶10和褐藻糖胶11的总碳水化合物和单糖组成。通过酸性甲醇分解将修饰的褐藻糖胶组合物衍生化，以产生O-三甲基甲硅烷基(O-TMS)衍生物。衍生化后，使用Supelco Equity-1熔融二氧化硅毛细管柱(30m，内径0.25mm)，在与Agilent 5975C质谱检测器接口的Agilent 7890A气相色谱系统上分析修饰的褐藻糖胶组合物。下表5中示出了修饰的褐藻糖胶的总碳水化合物含量和单糖组成的结果。下表中的碳水化合物缩写为“carb.”。
Figure BDA0002919841410000481
表5–四种修饰的褐藻糖胶的总碳水化合物和单糖组成
凝胶渗透色谱法用于评估针对修饰的褐藻糖胶褐藻糖胶1、褐藻糖胶2、褐藻糖胶3、褐藻糖胶6、褐藻糖胶8、褐藻糖胶9、褐藻糖胶10和褐藻糖胶11获得的分子量分布。存在大量可用于凝胶渗透色谱法中的不同参数、柱及标准物，使得各种仪器设置可用于分子量的分析。对于本文的分子量测定，使用以下参数进行GPC：流动相为以0.6mL/min运行的0.1M硝酸钠。柱室及检测器处于30℃下。Waters 2414折射率检测器用于检测。
合适的GPC柱包括与水性溶剂兼容的GPC柱，例如装填有以下中的至少一种的柱：磺化苯乙烯-二乙烯基苯、NH官能化丙烯酸酯共聚物网络、改性的二氧化硅及基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶。对于本文中的分析，串联使用三个柱，包括具有6mm内径(ID)的一个40mm长保护柱，装填有6μm粒度的基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶；接着是具有7.8mm ID的第一300mm分析型GPC柱，装填有12μm粒度的基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶，其具有约7,000kDa的排除极限及在约50kDa与约5,000kDa之间的有效分子量范围；接着是具有7.8mm ID的第二300mm分析型GPC柱，装填有10μm粒度的基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶，其具有约7,000kDa的排除极限及在约1kDa与约6,000kDa之间的有效分子量范围。柱设置的总有效分子量范围在约1kDa与约6,000kDa之间。此柱设置的实例可为串联连接的
Figure BDA0002919841410000491
保护柱-
Figure BDA0002919841410000492
2000-
Figure BDA0002919841410000493
线性柱。
相对于包括来自American Polymer Standards Corporation的可追踪标准物的标准曲线来量化样品运行：DXT3755K(峰分子量＝2164kDa)、DXT820K(峰分子量＝745kDa)、DXT760K(峰分子量＝621kDa)、DXT670K(峰分子量＝401kDa)、DXT530K(峰分子量＝490kDa)、DXT500K(峰分子量＝390kDa)、DXT270K(峰分子量＝196kDa)、DXT225K(峰分子量＝213kDa)、DXT150K(峰分子量＝124kDa)、DXT55K(峰分子量＝50kDa)、DXT50K(峰分子量＝44kDa)及DXT5K(峰分子量＝4kDa)，这些标准物的峰分子量在约4kDa与约2,200kDa之间。所使用的标准曲线可例如包括Dextran 3755kDa，Dextran 50kDa及Dextran 55kDa中的至少一种以及在3至6个之间的本文讨论的附加可追踪标准物，校正点为所使用校正物的峰分子量。示例性校正曲线可由以下组成：DXT3755K、DXT 820K、DXT530K、DXT500K、DXT225K及DXT55K。本文使用的柱具有涵盖且延伸超出用于褐藻糖胶的量化的标准物的峰分子量范围的总有效分子量范围。
下表6中的结果包含用于分子量分布的某些特征的缩写。凝胶渗透色谱法由GPC表示，峰分子量由PMW表示，重均分子量由WAMW表示，数均分子量由NAMW表示，分布百分比由％分布表示且分子量由MW表示。
Figure BDA0002919841410000501
表6-四种修饰的褐藻糖胶的分子量分布特征
实施例8:硬膜外纤维性粘连治疗
在乳酸钠林格注射液USP(LRS)中，以褐藻糖胶1至褐藻糖胶4、褐藻糖胶7和褐藻糖胶9至褐藻糖胶11制备浓度为100mg/mL的岩藻多糖溶液。在乳酸钠林格注射液USP(LRS)中以褐藻糖胶8制备浓度为500mg/mL的岩藻多糖溶液。对Sprague Dawley大鼠进行了椎板切除术外科手术，大鼠的平均体重和以毫克每千克计的剂量示于下表7中。用布比卡因溶液沿着腰椎创建一个线段。对大鼠的背部进行清洁，然后盖上无菌帘。经由中线皮肤切口打开腰椎筋膜，切开腰骶筋膜并且直至解剖腰旁肌以暴露下面的椎板。去除椎骨中央的骨头。在整个过程中，通过使用乳酸钠林格注射液USP(LRS)冲洗和棉签加压来维持止血。暴露的硬膜直接用15微升LRS对照或岩藻多糖处理。肌肉和皮肤层用缝合线闭合，使大鼠恢复一周，然后处死以对粘连进行量化。记录硬膜上粘连的存在和大小。记录粘连的尺寸和暴露的硬膜，并且用于计算粘连覆盖率，即粘连面积占总暴露硬膜面积的百分比。
等式1:粘连覆盖率(％)＝100x硬膜粘连面积(mm2)÷总暴露硬膜面积(mm2)
使用等式1确定接受LRS的对照组具有65％的粘连覆盖率。表4中披露的10种修饰的褐藻糖胶的粘连覆盖率在下表7中示出为相对于对照组粘连覆盖率降低。
Figure BDA0002919841410000511
Figure BDA0002919841410000521
表7:相对于对照LRS利用10种不同褐藻糖胶的的大鼠硬膜外粘连降低
从表7的结果可以看出，与总硫酸酯与总岩藻糖的摩尔比小于约1.70且总硫酸酯与岩藻糖加半乳糖总和的摩尔比小于约1.30的褐藻糖胶相比，总硫酸酯与总岩藻糖的摩尔比大于约1.70且总硫酸酯与岩藻糖加半乳糖总和的摩尔比大于约1.30的的褐藻糖胶在纤维性粘连治疗中显示为更有效。
实施例9:用褐藻糖胶6和褐藻糖胶7治疗子宫角纤维性粘连
对总共两只新西兰白色兔的两个角执行以下双子宫角(DUH)外科手术。在手术之前，兔经称重且接着通过术前用药氯胺酮(ketamine)及甲苯噻嗪(xylazine)来准备外科手术。
在乳酸钠林格注射液USP(LRS)中制备0.07mg/mL的岩藻多糖溶液，通过过滤杀菌。所有仪器为无菌的且在整个手术中保持无菌现场。清洁腹部且经由正中腹部的切口进入。子宫角经定位，由腹取出且刮擦以诱发损坏。还刮擦经刮擦的子宫角附近的腹壁。将损坏的子宫角及腹壁相互紧靠地放置且通过缝合线稳定。在闭合切口之前将15mL/kg的岩藻多糖溶液/兔重量施加至腹腔。在手术后两周对粘连进行评估。通过尺子测量子宫角粘连的长度。子宫角粘连覆盖率百分比，即为粘连长度占总损坏的子宫角长度的百分比经计算为：
等式2：粘连覆盖率(％)＝100×子宫角粘连长度f÷总损坏的子宫角长度
将相同的外科手术方法应用于3只新西兰白色兔，接受15mL/kg乳酸钠林格注射液USP(LRS)代替岩藻多糖溶液作为对照组。使用等式2确定接受LRS的对照组具有41％粘连覆盖率。表8示出了针对褐藻糖胶6和褐藻糖胶7使用上文所述的方法获得的结果，藻聚糖6和褐藻糖胶7是具有较高硫酸酯化比率的褐藻糖胶与具有较低硫酸酯化比率的褐藻糖胶的代表性实例。下表中的结果示出为相对于对照组粘连覆盖率降低。
Figure BDA0002919841410000531
表8:利用褐藻糖胶6和褐藻糖胶7降低兔子宫角粘连
从表8结果可以看出，与总硫酸酯与总岩藻糖的摩尔比小于约1.90且总硫酸酯与岩藻糖加半乳糖总和的摩尔比小于约1.70的褐藻糖胶相比，总硫酸酯与总岩藻糖的摩尔比大于约1.90且总硫酸酯与岩藻糖加半乳糖总和的摩尔比大于约1.70的褐藻糖胶在纤维性粘连的治疗显示为更有效。
实施例10:用褐藻糖胶8治疗子宫角纤维性粘连
为测定高硫酸酯的褐藻糖胶8在抑制外科手术粘连中的功效，对总共3只新西兰白色兔的两个角执行以下双子宫角(DUH)外科手术。在手术之前，兔经称重且接着通过术前用药氯胺酮及甲苯噻嗪来准备手术。
在乳酸钠林格注射液USP(LRS)中制备5mg/mL的岩藻多糖溶液，通过过滤杀菌。所有仪器为无菌的且在整个手术中保持无菌现场。清洁腹部且经由正中腹部切口进入。子宫角经定位，由腹取出且刮擦以诱发损坏。还刮擦经刮擦的子宫角附近的腹壁。将损坏的子宫角及腹壁相互紧靠地置放且通过缝合线稳定。将肌肉切口的上三分之一及下三分之一闭合且将5mL/kg的岩藻多糖溶液/兔重量施加至腹腔。将肌肉切口暂时闭合且使岩藻多糖溶液留在腹腔中保持30分钟。将肌肉切口再打开且用10mL/kg的LRS冲洗腹腔。抽吸出腹腔中的大部分流体，随后闭合切口。在手术后两周对粘连形成进行评估。通过尺子测量子宫角粘连的长度。子宫角粘连覆盖率百分比，即为粘连的长度占总损坏的子宫角长度的百分比使用等式2来计算。
表9示出了针对褐藻糖胶8使用上文所述的方法获得的结果，其为高硫酸酯的褐藻糖胶的代表性实例。下表中的结果示出为跨经评分的6个子宫角的平均粘连长度。
表9提供用褐藻糖胶8治疗六个子宫角的结果。
Figure BDA0002919841410000541
表9：使用褐藻糖胶8的粘连长度
如自表9的结果可见，高硫酸酯的褐藻糖胶可以用于成功地抑制、预防、去除、减小或以其他方式治疗手术后子宫角粘连。
实施例11:用褐藻糖胶5治疗子宫角纤维性粘连
为了确定褐藻糖胶5抑制外科手术粘连的功效，对总共四只新西兰白色兔的两个角进行了以下双子宫角(DUH)外科手术。在手术之前，兔经称重且接着通过术前用药氯胺酮及甲苯噻嗪来准备手术。
在乳酸钠林格注射液USP(LRS)中制备0.33mg/mL的岩藻多糖溶液，通过过滤杀菌。所有仪器为无菌的且在整个手术中保持无菌现场。清洁腹部且经由正中腹部切口进入。子宫角经定位，由腹取出且刮擦以诱发损坏。还刮擦经刮擦的子宫角附近的腹壁。将损坏的子宫角及腹壁相互紧靠地放置且通过缝合线稳定。将约15mL/kg的岩藻多糖溶液/兔重量施加至腹腔，随后闭合切口。在手术后两周对粘连进行评估。在制备的每一个岩藻多糖浓度下评估三只兔。通过尺子测量子宫角粘连的长度。使用等式2计算子宫角粘连长度。
将相同的外科手术方法应用于4只新西兰白色兔，接受约15mL/kg的对照乳酸钠林格注射液USP(LRS)代替岩藻多糖溶液。使用等式2确定接受LRS的对照组具有76％的粘附覆盖率。表10示出了针对褐藻糖胶5使用以上所讨论的方法获得的结果。下表中的结果示出为相对于对照组的粘连覆盖率降低。
表10给出了用褐藻糖胶5治疗8个子宫角的结果。
Figure BDA0002919841410000551
表10：相对于对照LRS使用褐藻糖胶5的兔子宫角粘连降低
从表10的结果可以看出，褐藻糖胶5是总硫酸酯与总岩藻糖的摩尔比小于1.3且总硫酸酯与岩藻糖加半乳糖总和的摩尔比小于0.8的褐藻糖胶的实例，其不能有效治疗纤维性粘连，因为与对照相比纤维性粘连没有显著降低。
实施例12:以高硫酸酯的褐藻糖胶治疗子宫角纤维性粘连
为确定包括45％w/w的总硫酸酯的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物在抑制外科手术粘连中的功效，对总共20只新西兰白色兔的两个角执行以下双子宫角(DUH)手术，在手术之前，兔经称重且接着通过术前用药咪达唑仑(midazolam)及右美托咪啶(dexmeditomidine)来准备手术。
在乳酸钠林格注射液USP(LRS)中制备浓度为0.02mg/mL、0.1mg/mL、0.5mg/mL或2.5mg/mL的岩藻多糖溶液，通过过滤杀菌。所有仪器为无菌的且在整个手术中保持无菌现场。清洁腹部且经由正中腹部切口进入。子宫角经定位，由腹取出且刮擦以诱发损坏。还刮擦经刮擦的子宫角附近的腹壁。将损坏的子宫角及腹壁相互紧靠地放置且通过缝合线稳定。将约2mL/kg的岩藻多糖溶液/兔重量施加至腹腔，随后闭合切口。在手术后两周对粘连进行评估。五只兔经治疗且针对制备的各岩藻多糖浓度进行评估。通过尺子测量子宫角粘连的长度。使用等式2计算子宫角粘连长度。
将相同手术方法应用于5只额外的新西兰白色兔用于对照，各接受约2mL/kg对照乳酸钠林格注射液USP(LRS)代替岩藻多糖溶液。使用等式2确定接受LRS的对照组具有100％粘连覆盖率。表11示出了针对不同浓度及剂量下的高硫酸酯的褐藻糖胶的使用上文所论述的方法获得的结果(总共四十个子宫角经治疗，每个浓度的高硫酸酯的褐藻糖胶各10个)；结果示出为相对于对照组粘连覆盖率降低。
Figure BDA0002919841410000561
表11:：相对于对照LRS使用高硫酸酯的褐藻糖胶组合物的兔子宫角粘连降低
如自表11的结果可见，高硫酸酯的褐藻糖胶可以用于成功地抑制、预防、去除、减小或以其他方式治疗外科手术后子宫角粘连。
除非上下文或定义另有清楚地指出，否则本文中使用的所有术语均按照其普通含义使用。同样，除非另有明确指出，否则在公开中，“或”的使用包括“和”，并且反之亦然。除非另有明确说明，或者上下文另有清楚地指出，否则非限制性术语不应解释为限制性的(例如，“包括(including)”、“具有(having)”和“包括(comprising)”典型地指示“包括但不限于”)。除非另有明确说明，或者上下文另有清楚地指出，否则包括在权利要求中的单数形式，诸如“一个/种(a)”、“一个/种(an)”和“该/所述(the)”包括复数引用。
除非另有说明，否则修饰实施方式的一种或多种特征的条件或关系特征的本文中的形容词诸如“基本上”和“约”表示该条件或特征被定义为在实施方式的操作可接受的公差内用于预期的应用。
本发明方法、组合物、系统等的范围包括装置(means)加功能和步骤加功能概念两者。然而，除非在权利要求中特别叙述单词“装置”，否则权利要求不应被解释为指示“装置加功能”关系，而当在权利要求中特别叙述单词“装置”时，则权利要求应被解释为指示“装置加功能”关系。类似地，除非在权利要求中特别叙述单词“步骤”，否则权利要求不应被解释为指示“步骤加功能”关系，而当在权利要求中特别叙述单词“步骤”时，则权利要求应被解释为指示“步骤加功能”关系。
根据前述，将理解，尽管出于说明的目的，已经在本文中讨论了特定实施方式，但是可以在不脱离本文讨论的精神和范围的情况下进行各种修改。因此，系统和方法等包括本文阐述的主题的这样的修改以及所有排列和组合，并且除了受所附权利要求或在本文的讨论和附图中具有足够支持的其他权利要求限制外，不受限制。

Claims (98)

1.一种医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，所述组合物包括医学上可接受的缓冲剂或稀释剂和治疗有效量的高硫酸酯的褐藻糖胶，所述高硫酸酯的褐藻糖胶具有的硫酸酯与岩藻糖的摩尔比大于或等于约1.2和/或硫酸酯与岩藻糖加半乳糖的摩尔比大于或等于约1.1。
2.如权利要求1所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述硫酸酯与岩藻糖的摩尔比大于或等于约1.81，和/或所述硫酸酯与岩藻糖加半乳糖的摩尔比大于或等于约1.2。
3.如权利要求1所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述硫酸酯与岩藻糖的摩尔比大于或等于约1.9，和/或所述硫酸酯与岩藻糖加半乳糖的摩尔比大于或等于约1.3。
4.如权利要求1所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述硫酸酯与岩藻糖的摩尔比为在1.81与2.85之间。
5.如权利要求1所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述硫酸酯与岩藻糖加半乳糖的摩尔比为在1.30与2.20之间。
6.如权利要求1至5中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有以下分子量分布：其中当使用水性凝胶渗透色谱法设置来测量时，所述分布的至少60％w/w大于100kDa，所述水性凝胶渗透色谱法设置基本上由以下组成：
具有7.8mm内径的一个300mm分析型凝胶渗透色谱柱，装填有基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶，具有在约50kDa与约5,000kDa之间的有效分子量范围；具有7.8mm内径的一个300mm分析型凝胶渗透色谱柱，装填有基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶，具有在约1kDa与约6,000kDa之间的有效分子量范围；以及具有6mm内径的一个40mm保护柱，装填有基于羟基化聚甲基丙烯酸酯的凝胶，所述两个分析型凝胶渗透色谱柱及所述一个保护柱包含于约30℃下的柱室中；
折射率检测器，处于约30℃；
0.1M硝酸钠流动相，以0.6mL/min运行；以及
相对于峰分子量标准曲线进行量化，所述峰分子量标准曲线基本上由以下组成：第一右旋糖酐标准物，具有的峰分子量为约2,200kDa；第二右旋糖酐标准物，具有的峰分子量在约720kDa与约760kDa之间；第三右旋糖酐标准物，具有的峰分子量在约470kDa与约510kDa之间；第四右旋糖酐标准物，具有的峰分子量在约370kDa与约410kDa之间；第五右旋糖酐标准物，具有的峰分子量在约180kDa与约220kDa之间；以及第六右旋糖酐标准物，具有的峰分子量在约40kDa与55kDa之间。
7.如权利要求6所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有的重均分子量大于100kDa。
8.如权利要求6所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有以下分子量分布：其中所述分布的至少90％w/w大于100kDa。
9.如权利要求6中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有的重均分子量大于200kDa。
10.如权利要求6中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有的重均分子量大于500kDa。
11.如权利要求6所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有以下分子量分布：其中所述分布的至少90％w/w大于500kDa。
12.如权利要求1至5中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有的硫酸酯化水平为在14％w/w与60％w/w之间。
13.如权利要求1至5中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有的硫酸酯化水平为在30％w/w与60％w/w之间。
14.如权利要求1至5中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有的硫酸酯化水平为在35％w/w与60％w/w之间。
15.如权利要求1至5中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有的硫酸酯化水平为在40％w/w与60％w/w之间。
16.如权利要求1至5中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有的硫酸酯化水平为在45％w/w与60％w/w之间。
17.如权利要求1至5中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有的硫酸酯化水平为在40％w/w与55％w/w之间。
18.如权利要求1至5中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有的硫酸酯化水平为在45％w/w与55％w/w之间。
19.如权利要求1至5中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，总碳水化合物含量为在27％w/w与80％w/w之间。
20.如权利要求19所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，作为总碳水化合物含量的百分比的总岩藻糖含量为至少约30％w/w。
21.如权利要求19所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，作为总碳水化合物含量的百分比的总岩藻糖含量为至少约50％w/w。
22.如权利要求19所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，作为总碳水化合物含量的百分比的总岩藻糖含量为至少约70％w/w。
23.如权利要求19所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，作为总碳水化合物含量的百分比的总岩藻糖含量为至少约80％w/w。
24.如权利要求1915所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，作为总碳水化合物含量的百分比的总岩藻糖含量为至少约90％w/w。
25.如权利要求19所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，作为总碳水化合物含量的百分比的总岩藻糖含量为至少约95％w/w。
26.如权利要求1915所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有的作为总碳水化合物含量的百分比的总半乳糖含量低于约60％w/w。
27.如权利要求1915所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有的作为总碳水化合物含量的百分比的总半乳糖含量为在约2％w/w与20％w/w之间。
28.如权利要求1915所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述褐藻糖胶具有的作为总碳水化合物含量的百分比的总半乳糖含量低于约10％w/w。
29.如权利要求1915所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，作为总碳水化合物含量的百分比的葡糖醛酸、甘露糖、鼠李糖和木糖含量总和低于约30％w/w。
30.如权利要求1至29中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物具有的粘度为在约4cP与50cP之间。
31.如权利要求1至29中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物具有的粘度为在约10cP与40cP之间。
32.如权利要求1至29中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物具有的粘度为在约15cP与30cP之间。
33.如权利要求1至32中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，其中，所述医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物是透明无色的组合物。
34.一种治疗动物的纤维性粘连的方法，所述方法包括：选择抑制所述纤维性粘连的如权利要求1至33中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，以及向所述动物的伤口部位给药包括剂量范围在0.5mg/kg与50mg/kg之间的治疗有效量的所述高硫酸酯的褐藻糖胶。
35.一种用于治疗动物的纤维性粘连的药剂，所述治疗包括选择如权利要求1至33中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物。
36.一种用于治疗动物的纤维性粘连的药剂，所述治疗包括选择抑制所述纤维性粘连的如权利要求1至33中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，以及向所述动物的伤口部位给药包括剂量范围在0.5mg/kg与50mg/kg之间的治疗有效量的所述高硫酸酯的褐藻糖胶。
37.如权利要求1至33中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物用于制造用于纤维性粘连的补救剂的用途。
38.一种治疗动物的病症或疾病的方法，所述方法包括：选择治疗所述病症或疾病的如权利要求1至33中任一项所述的医学上可接受的高硫酸酯的褐藻糖胶组合物，以及向所述动物给药在约0.04mg/kg与25mg/kg之间的治疗有效量的所述高硫酸酯的褐藻糖胶。
39.如权利要求37或38所述的方法，其中，所述治疗有效量为在约0.2mg/kg与10mg/kg之间。
40.如权利要求37或38所述的方法，其中，所述治疗有效量为在约1mg/kg与5mg/kg之间。
41.如权利要求37或38所述的方法，其中，所述治疗有效量为在约1.5mg/kg与3mg/kg之间。
42.如权利要求37或38所述的方法，其中，所述治疗有效量为在约5mg/kg与10mg/kg之间。
43.如权利要求37或42所述的方法，其中，所述病症或疾病是所述动物中目标部位处的纤维性粘连，并且其中所述给药包括向所述目标部位给药所述治疗有效量。
44.一种医疗组合物，其包括在约0.02mg/mL与100mg/mL之间的如权利要求1至33中任一项所述的高硫酸酯的褐藻糖胶，其中所述医疗组合物经配置和构成以治疗动物的疾病或病症。
45.如权利要求44所述的医疗组合物，其包括在约0.5mg/mL与5mg/mL之间的所述高硫酸酯的褐藻糖胶。
46.如权利要求44所述的医疗组合物，其包括约2.5mg/mL的所述高硫酸酯的褐藻糖胶。
47.如权利要求44至46中任一项所述的医疗组合物，其中，所述医疗组合物是医疗器械。
48.如权利要求44至46中任一项所述的医疗组合物，其中，所述医疗组合物是液体医疗器械。
49.如权利要求44至46中任一项所述的医疗组合物，其中，所述医疗组合物是药物组合物。
50.如权利要求44至46中任一项所述的医疗组合物，其中，所述医疗组合物是液体药物组合物。
51.如权利要求44至50中任一项所述的医疗组合物，其中，所述疾病或病症是纤维性粘连。
52.包括在约0.01mL/kg与15mL/kg之间的剂量范围的如权利要求44至51中任一项所述的医疗组合物治疗动物的疾病或病症的用途。
53.包括在约0.03mL/kg与4mL/kg之间的剂量范围的如权利要求44至51中任一项所述的医疗组合物治疗动物的疾病或病症的用途。
54.包括在约0.06mL/kg与2mL/kg之间的剂量范围的如权利要求44至51中任一项所述的医疗组合物治疗动物的疾病或病症的用途。
55.包括在约2mL/kg与4mL/kg之间的如权利要求44至51中任一项所述的医疗组合物治疗动物的疾病或病症的用途。
56.一种用于治疗患者的纤维性粘连的方法，所述方法包括向所述患者的目标部位给药如权利要求44至51中任一项所述的医疗组合物。
57.一种用于治疗患者中选定疾病或病症的方法，所述方法包括：在包括或相当易患有所述选定疾病或病症的患者中鉴定出选定目标部位，并且随后向所述患者的选定目标部位给药如权利要求44至51中任一项所述的医疗组合物。
58.如权利要求57所述的方法，其中，所述疾病或病症是纤维性粘连。
59.如权利要求57或58所述的方法，其中，所述选定目标部位为外科手术部位且在以下中的至少一种时执行所述给药：a)打开所述外科手术部位处的外科手术伤口后、b)外科手术期间以及c)关闭所述外科手术伤口后。
60.如权利要求57或58所述的方法，其中，所述给药在外科手术后但关闭所述外科手术伤口前执行。
61.如权利要求57或58所述的方法，其中，所述给药花费少于3分钟。
62.如权利要求57或58所述的方法，其中，所述给药花费少于2分钟。
63.如权利要求57或58所述的方法，其中，所述给药花费少于1分钟。
64.如权利要求57或58所述的方法，其中，所述选定目标部位为病变、擦伤及损伤部位中的至少一种。
65.如权利要求57或58所述的方法，其中，所述选定目标部位为以下中的至少一种：骨盆腔、腹腔、背腔、颅腔、脊髓腔、腹侧腔、胸腔、胸膜腔、心包腔、皮肤、关节、肌肉、肌腱及韧带。
66.一种用于降低起始褐藻糖胶组合物的硫酸酯水平以获得修饰的褐藻糖胶的方法，所述方法包括：
向所述起始褐藻糖胶组合物中添加碱，以产生反应混合物；以及
用猝灭剂处理所述反应混合物以使所述碱失活，产生所述修饰的褐藻糖胶和脱硫酸酯化残余分子，其中所述修饰的褐藻糖胶的数均分子量、重均分子量和峰均分子量在所述起始褐藻糖胶组合物的各自数均分子量、重均分子量和峰均分子量的约5％内。
67.如权利要求66所述的方法，其中，所述起始褐藻糖胶组合物以起始溶液提供。
68.如权利要求66至67所述的方法，其中，向所述起始褐藻糖胶组合物中添加所述碱进一步包括加热所述溶液。
69.如权利要求66至67所述的方法，其中，所述碱包括碱金属、碱土金属和/或铵的氢氧化物和/或氧化物。
70.如权利要求66至67所述的方法，其中，所述猝灭剂包括酸、盐和水中的至少一种。
71.如权利要求66至67所述的方法，其中，所述修饰的褐藻糖胶包括比所述起始褐藻糖胶组合物少的硫酸酯。
72.一种用于增加起始褐藻糖胶组合物的硫酸酯水平以产生修饰的褐藻糖胶的方法，所述方法包括：
提供为固体的所述起始褐藻糖胶组合物；
将所述起始褐藻糖胶组合物溶解在合适的非水性溶剂中，以产生非水性溶液；
向所述非水性溶液中添加硫酸酯化剂，以产生反应混合物；以及
向所述反应混合物中添加猝灭剂，在溶液中产生修饰的褐藻糖胶和硫酸酯化残余分子。
73.如权利要求72所述的方法，其中，所述方法进一步包括在将所述起始褐藻糖胶组合物溶解在合适的非水性溶剂中之前，使所述起始褐藻糖胶组合物中的硫酸酯基团质子化以产生酸化的褐藻糖胶组合物。
74.如权利要求73所述的方法，其中，使所述硫酸酯基团质子化包括将所述起始褐藻糖胶组合物溶解在水溶液中，使所述起始褐藻糖胶组合物与酸性阳离子交换树脂接触，以及将所述酸化的褐藻糖胶组合物收集为固体。
75.如权利要求74所述的方法，其中，将所述酸化的褐藻糖胶组合物收集为固体包括将所述水溶液中的固体酸化的褐藻糖胶组合物进行冻干、喷雾干燥和沉淀中的至少一种。
76.如权利要求72所述的方法，其中，所述硫酸酯化剂包括SO3-Me3N、SO3-Et3N、SO3-吡啶和SO3-DMF中的至少一种。
77.如权利要求72所述的方法，其中，所述非水性溶剂包括甲酰胺、二甲基甲酰胺、二乙基甲酰胺、二甲基亚砜、二氯甲烷、氯仿、乙醇、甲醇、正丁醇、2-丁醇、异丙醇和1-丙醇中的至少一种。
78.如权利要求72所述的方法，其中，向所述非水性溶剂中添加硫酸酯化剂以产生反应混合物进一步包括向所述溶剂中添加硫酸酯化助剂。
79.如权利要求78所述的方法，其中，所述硫酸酯化助剂为酸清除剂。
80.如权利要求79所述的方法，其中，所述酸清除剂为2-甲基-2-丁烯。
81.如权利要求72所述的方法，其中，向所述非水性溶剂中添加硫酸酯化剂以产生反应混合物进一步包括将所述反应混合物温育约5分钟与约50小时之间。
82.如权利要求72所述的方法，其中，向所述非水性溶剂中添加硫酸酯化剂以产生反应混合物进一步包括将所述反应混合物温育约1小时与约24小时之间。
83.如权利要求72所述的方法，其中，向所述非水性溶剂中添加硫酸酯化剂以产生反应混合物进一步包括在约20℃与约60℃之间的温度下温育所述反应混合物。
84.如权利要求72所述的方法，其中，所述猝灭剂包括盐和缓冲剂中的至少一种。
85.如权利要求84所述的方法，其中，所述盐是碳酸氢盐。
86.如权利要求72所述的方法，其中，向所述反应混合物中添加猝灭剂进一步包括用酸、碱和缓冲剂中的至少一种控制所述反应混合物的pH。
87.如权利要求72所述的方法，其中，所述修饰的褐藻糖胶包括比所述起始褐藻糖胶组合物更多的硫酸酯。
88.一种用于增加起始褐藻糖胶组合物的硫酸酯水平以产生修饰的褐藻糖胶的方法，所述方法包括：
提供为固体的起始褐藻糖胶组合物；
将所述起始褐藻糖胶组合物悬浮在溶剂中，所述溶剂不能溶解所述褐藻糖胶；
向包含所述悬浮的起始褐藻糖胶组合物的所述溶剂中添加硫酸酯化剂，产生包括所述修饰的褐藻糖胶和所述溶剂的反应混合物；
将所述固体修饰的褐藻糖胶与所述溶剂分离；以及
用猝灭剂猝灭所述固体修饰的褐藻糖胶。
89.如权利要求88所述的方法，其中，所述硫酸酯化剂为氯磺酸。
90.如权利要求88所述的方法，其中，所述溶剂包括相对极性小于0.765的至少一种溶剂。
91.如权利要求90所述的方法，其中，所述溶剂包括二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、异丙醇、1-丙醇、正丁醇、2-丁醇、二乙醚、己烷、庚烷、苯、十甲基环五硅氧烷、乙酸乙酯、庚醇、辛醇、癸醇和二噁烷中的至少一种。
92.如权利要求88所述的方法，其中，向所述溶剂中添加硫酸酯化剂以产生反应混合物进一步包括将所述反应混合物温育约5分钟与约50小时之间。
93.如权利要求88所述的方法，其中，向所述溶剂中添加硫酸酯化剂以产生反应混合物进一步包括将所述反应混合物温育约1小时与约24小时之间。
94.如权利要求88所述的方法，其中，向所述溶剂中添加硫酸酯化剂以产生反应混合物进一步包括在约20℃与约60℃之间的温度下温育所述反应混合物。
95.如权利要求88所述的方法，其中，所述猝灭剂包括盐和缓冲剂中的至少一种。
96.如权利要求88所述的方法，其中，猝灭所述固体修饰的褐藻糖胶进一步包括用酸、碱和缓冲剂中的至少一种控制所述反应混合物的pH。
97.如权利要求88所述的方法，其中，猝灭所述固体修饰的褐藻糖胶进一步包括用包括相对极性小于0.765的至少一种溶剂的有机溶剂洗涤所述固体修饰的褐藻糖胶。
98.如权利要求88所述的方法，其中，所述修饰的褐藻糖胶包括比所述起始褐藻糖胶组合物更多的硫酸酯。
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