CN105732834A - 一种褐藻岩藻聚糖硫酸酯提取纯化方法 - Google Patents

Abstract

<b>本发明公开了一种褐藻岩藻聚糖硫酸酯提取纯化方法。</b><b>本发明分别通过制岩藻聚糖硫酸酯粗品和制岩藻聚糖硫酸酯纯品，将海带中的有效成分提取制出。</b><b>本发明快速有效的提取</b><b>岩藻聚糖硫酸酯纯品，增加提取效率，缩短工艺步骤，加快生产，卫生安全，适合工业化生产。本发明提取的岩藻聚糖硫酸酯纯品健康卫生，食用方便、安全，能有效的</b><b>调节人体免疫系统，调节人体健康。</b>

Description

一种褐藻岩藻聚糖硫酸酯提取纯化方法

技术领域：

本发明涉及岩藻聚糖硫酸酯提取技术领域，具体涉及一种褐藻岩藻聚糖硫酸酯提取纯化方法。

背景技术

褐藻是附着生活的海洋低等植物，可从潮间带一直分布到低潮线下约30米。褐藻含有褐藻胶、岩藻聚糖硫酸酯和褐藻淀粉等不同的多糖，其中褐藻胶因在藻体中含量高，且用途广泛，目前已规模化生产；而褐藻糖胶和海带淀粉在藻体中的含量最低，是食品工业生产褐藻胶的副产品,但其来源充足。

世界各国生产褐藻胶原藻一般都是大型褐藻，它们主要生长于寒带和温带领域，除了靠近热带的国家如印度利用马尾藻科原藻生产褐藻胶外，多数国家都利用海带目的原藻和部分墨角藻科原藻生产褐藻胶。因此，岩藻聚糖硫酸酯的原藻也多来自海带目和墨角藻目的褐藻，本发明采用从海带，裙带菜以及马尾藻中提取岩藻聚糖硫酸酯。

岩藻聚糖硫酸酯，又名岩藻多糖或褐藻糖胶，是一种水溶性的硫酸杂多糖，主要存在于各种褐藻的细胞壁基质中。岩藻聚糖硫酸酯具有调节免疫、抗血栓、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、调节血脂、抗辐射等多方面的活性。目前已有岩藻聚糖硫酸酯生产并作为滋补药进行销售，在日本、美国作为预防和治疗癌症及血栓疾病的药物已进入市场，我国学者对岩藻聚糖硫酸酯也进行了大量的研究，目前已利用其开发出防治心、脑、肾血管疾病的药物，并在临床上取得了满意的效果。同时岩藻聚糖硫酸酯作为新型药物转运载体，在缓释包衣、微球栓塞、纳米给药、基因治疗、外科修复和透皮给药等新型药物转运体系方面具有应用前景。而且岩藻聚糖硫酸酯具有一定保湿性，可作为保湿剂添加到化妆品、面包中，同时起到一定保健作用等。

发明内容：

本发明的目的提供一种可用于增强免疫力，抗血栓，抗肿瘤，保护肝损伤，改善胃肠道功能，改善睡眠的一种褐藻岩藻聚糖硫酸酯提取纯化方法。

本发明的目的是这样实现的。一种褐藻岩藻聚糖硫酸酯提取纯化的方法，其特征在于：主要工艺流程为：原料预处理、切碎研磨、酶解、出汁、均质、调配、二次均质、杀菌、灌装、检验、贮藏，具体操作方法依次按下列步骤：

1、制岩藻聚糖硫酸酯粗品：

a、制浆：将干海带用冷水浸泡24小时，取出打浆，制得海带浆，备用；

b、脱脂：将上述海带浆用85%的乙醇在室温下搅拌脱脂24h，抽滤，制得脱脂海带浆；

c、制粉：将上述脱脂海带浆除去杂质，在40℃干燥，制得脱脂藻粉；

d、提纯：将上述脱脂藻粉中加水，在超声波作用时间11min后，在100℃，提取2h，滤去残渣，收集滤液；

e、制粗品：将上述滤液减压浓缩，加入3%CaCl，在5℃放置18小时，使其沉淀完全，在4000r／min下，离心20min，提取上清液，将上清液中加入浓度70%乙醇，在5℃下放置过夜使其沉淀完全，在4000r／min下，离心20min，沉淀，溶于10L水，在截留分子量8-14KD下透析48h，经冷冻干燥，制得岩藻聚糖硫酸酯粗品；

2、制岩藻聚糖硫酸酯初纯化品：

将上述岩藻聚糖硫酸酯粗品溶于水，加入3%CaCl，在5℃下放置过夜使沉淀完全，在4000r／min下，离心20min，提取上清液，向上清液中加入乙醇，在5℃下放置过夜使沉淀完全，在4000r／min下，离心20min，用95％乙醇将沉淀洗涤数次，经冷冻干燥，制得岩藻聚糖硫酸酯初纯化品。

本发明的工艺流程：

褐藻（海带，裙带菜等），在给定条件下搅拌浸提，离心(4000r／min，20min)，得滤液，将上清液浓缩至一定体积，向浓缩液中加入3倍体积乙醇，5℃放置过夜使沉淀完全，离心(4000r／min，20min)，用少量95％乙醇将沉淀洗涤数次，冷冻干燥，得岩藻聚糖硫酸酯粗品（F）。

岩藻聚糖硫酸酯粗品，配成5％溶液，加入3%CaCl，使其终浓度为1%，静置6h后，离心沉淀（A），干燥称重；上清液加入3倍体积乙醇，5℃放置过夜使沉淀完全，离心(4000r／min，10min)，冷冻干燥，得岩藻聚糖硫酸酯初纯化品（Ff）。

本发明有益效果：本发明快速有效的提取岩藻聚糖硫酸酯纯品，增加提取效率，缩短工艺步骤，加快生产，卫生安全，适合工业化生产。本发明提取的岩藻聚糖硫酸酯纯品健康卫生，食用方便、安全，能有效的调节人体免疫系统，调节人体健康。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明

实施例1：

一种褐藻岩藻聚糖硫酸酯提取纯化的方法，其特征在于：主要工艺流程为：原料预处理、切碎研磨、酶解、出汁、均质、调配、二次均质、杀菌、灌装、检验、贮藏，具体操作方法依次按下列步骤：

1、制岩藻聚糖硫酸酯粗品：

a、制浆：将干海带用冷水浸泡24小时，取出打浆，制得海带浆，备用；

b、脱脂：将上述海带浆用85%的乙醇在室温下搅拌脱脂24h，抽滤，制得脱脂海带浆；

c、制粉：将上述脱脂海带浆除去杂质，在40℃干燥，制得脱脂藻粉；

d、提纯：将上述脱脂藻粉中加水，在超声波作用时间11min后，在100℃，提取2h，滤去残渣，收集滤液；

e、制粗品：将上述滤液减压浓缩，加入3%CaCl，在5℃放置18小时，使其沉淀完全，在4000r／min下，离心20min，提取上清液，将上清液中加入浓度70%乙醇，在5℃下放置过夜使其沉淀完全，在4000r／min下，离心20min，沉淀，溶于10L水，在截留分子量8-14KD下透析48h，经冷冻干燥，制得岩藻聚糖硫酸酯粗品；

2、制岩藻聚糖硫酸酯初纯化品：

将上述岩藻聚糖硫酸酯粗品溶于水，加入3%CaCl，在5℃下放置过夜使沉淀完全，在4000r／min下，离心20min，提取上清液，向上清液中加入乙醇，在5℃下放置过夜使沉淀完全，在4000r／min下，离心20min，用95％乙醇将沉淀洗涤数次，经冷冻干燥，制得岩藻聚糖硫酸酯初纯化品。

实施例2

干海带（2kg）冷水浸泡24小时，打浆，用5000ml85%的乙醇在室温下搅拌脱脂24h，抽滤，除去色素等杂质，40℃干燥，得脱脂藻粉。加入70L水，超声波作用时间11min后，100℃，提取时间2h，，滤去残渣，收集滤液，减压浓缩至10L，加入600ml（3%CaCl，质量百分比），5℃放置18小时，使沉淀完全，离心(4000r／min，20min)取上清液，加入30L乙醇（v/v,70%），5℃放置过夜使沉淀完全，离心(4000r／min，20min)，沉淀，溶于10L水，透析（截留分子量8-14KD）48h，冷冻干燥，得岩藻聚糖硫酸酯粗品364g。

岩藻聚糖硫酸酯粗品364g溶于水，加入500ml3%CaCl（质量百分比），5℃放置过夜使沉淀完全，离心(4000r／min，20min)，向上清液中加入3.5l乙醇，5℃放置过夜使沉淀完全，离心(4000r／min，20min)，用少量1l95％乙醇(v/v)将沉淀洗涤数次，冷冻干燥，得岩藻聚糖硫酸酯初纯化品210g。

Claims (1)

1.一种褐藻岩藻聚糖硫酸酯提取纯化的方法，其特征在于：主要工艺流程为：原料预处理、切碎研磨、酶解、出汁、均质、调配、二次均质、杀菌、灌装、检验、贮藏，具体操作方法依次按下列步骤：

1、制岩藻聚糖硫酸酯粗品：

a、制浆：将干海带用冷水浸泡24小时，取出打浆，制得海带浆，备用；

b、脱脂：将上述海带浆用85%的乙醇在室温下搅拌脱脂24h，抽滤，制得脱脂海带浆；

c、制粉：将上述脱脂海带浆除去杂质，在40℃干燥，制得脱脂藻粉；

d、提纯：将上述脱脂藻粉中加水，在超声波作用时间11min后，在100℃，提取2h，滤去残渣，收集滤液；

e、制粗品：将上述滤液减压浓缩，加入3%CaCl，在5℃放置18小时，使其沉淀完全，在4000r／min下，离心20min，提取上清液，将上清液中加入浓度70%乙醇，在5℃下放置过夜使其沉淀完全，在4000r／min下，离心20min，沉淀，溶于10L水，在截留分子量8-14KD下透析48h，经冷冻干燥，制得岩藻聚糖硫酸酯粗品；

2、制岩藻聚糖硫酸酯初纯化品：

将上述岩藻聚糖硫酸酯粗品溶于水，加入3%CaCl，在5℃下放置过夜使沉淀完全，在4000r／min下，离心20min，提取上清液，向上清液中加入乙醇，在5℃下放置过夜使沉淀完全，在4000r／min下，离心20min，用95％乙醇将沉淀洗涤数次，经冷冻干燥，制得岩藻聚糖硫酸酯初纯化品。