TW202019443A - 用於治療纖維化黏連及其他疾病和病狀之高分子量聚海藻糖 - Google Patents

用於治療纖維化黏連及其他疾病和病狀之高分子量聚海藻糖 Download PDF

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Abstract

高分子量聚海藻糖組成物，其包含含治療學上有效、醫療上可接受之聚海藻糖之組成物，其中該聚海藻糖例如具有一分子量分佈，其中該組成物之超過60% w/w具有高於100 kDa之分子量。

Description

用於治療纖維化黏連及其他疾病和病狀之高分子量聚海藻糖
本發明係關於用於治療纖維性黏連及其他疾病和病狀之高分子量聚海藻糖。 優先權主張
本申請案主張同在申請中之2018年7月27日申請的美國臨時專利申請案第62,711,364號；2018年7月27日申請的美國臨時專利申請案第62,711,372號；2018年7月27日申請的美國臨時專利申請案第62/711,335號；2018年8月1日申請的美國臨時專利申請案第62/713,399號；2018年8月23日申請的美國臨時專利申請案第62/722,135號；2018年11月2日申請的美國臨時專利申請案第62/755,311號；2019年1月17日申請的美國臨時專利申請案第62/793,514號；2019年6月13日申請的美國臨時專利申請案第62/861,223號；同在申請中之2018年8月1日申請的美國臨時專利申請案第62/713,392號；2018年8月1日申請的美國臨時專利申請案第62/713,413號；2018年8月23日申請的美國臨時專利申請案第62/722,137號；2018年11月2日申請的美國臨時專利申請案第62/755,318號；2019年6月13日申請的美國臨時專利申請案第62/861,228號；同在申請中之2018年11月2日申請的美國臨時專利申請案第62/755,328號；2019年1月17日申請的美國臨時專利申請案第62/793,654號及2019年6月13日申請的美國臨時專利申請案第62/861,235號的權益，以上所有申請案皆以全文引用之方式併入本文中。
聚海藻糖（包括褐藻糖膠）為經硫酸化多醣。一般而言，此意謂其為由大量糖類基團組成之分子，且亦具有連接至糖類基團之硫原子。主要糖類基團被稱為「岩藻糖（fucose）」，其為具有6個碳原子且具有化學式C6 H12 O5 之糖。「褐藻糖膠」（或岩藻多糖）表示衍生自褐藻（海藻）之聚海藻糖。聚海藻糖可單獨或以其他糖之混合物形式，例如以諸如木糖、半乳糖、葡萄糖：葡糖醛酸及/或甘露糖之糖的混合物形式存在。可自海藻或具有聚海藻糖之其他來源萃取此等其他糖。儘管聚海藻糖當前衍生自天然來源，諸如本文中提及之褐藻（海藻）、海參等，但無關於聚海藻糖之最終來源，「聚海藻糖」包括具有如本文所論述之聚海藻糖之化學及結構基元的聚合物分子。
褐藻糖膠可獲自多種褐藻物種，包括（但不限於）：橢圓囊藻（Adenocystis utricularis ）、泡葉藻（Ascophyllum nodosum ）、繩藻（Chorda filum ）、囊葉藻（Cystoseirabies marina ）、海茸（Durvillaea antarctica ）、鵝掌菜（Ecklonia kurome ）、極大昆布（Ecklonia maxima ）、愛森藻（Eisenia bicyclis ）、岩藻（Fucus evanescens ）、墨角藻（Fucus vesiculosis ）、羊棲菜（Hizikia fusiforme ）、伸長海條藻（Himanthalia Elongata ）、籠目海帶（Kjellmaniella crassifolia ）、巴西海帶（Laminaria brasiliensis ）、菊苣海帶（Laminaria cichorioides ）、希柏里爾海帶（Laminaria hyperborea ）、日本海帶（Laminaria japonica ）、糖海帶（Laminaria saccharina ）、小帶藻（Lessonia trabeculata ）、巨藻（Macrocystis pyrifera ）、塔形鹿角菜（Pelvetia fastigiata ）、細溝鹿角菜（Pelvetia Canaliculata ）、日本糖藻（Saccharina japonica ）、闊葉糖藻（Saccharina latissima ）、馬尾藻（Sargassum stenophylum ）、鼠尾藻（Sargassum thunbergii ）、海嵩子（Sargassum confusum ）、鹿尾菜（Sargassum fusiforme ）及裙帶菜（Undaria pinnatifida ）。此等例示性物種皆來自分類綱褐藻綱（Phaeophyceae ）且此等物種中之大部分屬於以下科：墨角藻目（Fucales ）及海帶目（Laminariaceae ）。
包括褐藻糖膠之聚海藻糖已展示有效用於抑制、預防、移除、減少或以其他方式治療纖維性黏連之形成。亦發現其用於治療其他相關疾病及病狀。
因此，未能滿足對包含具有所需高分子量之聚海藻糖之組成物之需求，在一些具體實例中，包括經修改以具有所需硫酸化水平及/或醫療上可存活的低內毒素水平之此類組成物。本發明組成物、系統及方法等提供此等及/或其他優點。
本發明組成物、系統、裝置、材料及方法等提供高分子量聚海藻糖。此類高分子量聚海藻糖可獲自原料聚海藻糖組成物或具有帶寬廣分子量分佈（包含所需高分子量區段/部分）之聚海藻糖之其他起始或初始聚海藻糖組成物（亦即，可衍生高分子量聚海藻糖之寬廣分子量聚海藻糖組成物；此類起始聚海藻糖組成物可為或可不為粗產物或先前已經處理或經純化）。所需高分子量聚海藻糖具有基本上由起始聚海藻糖寬廣分子量分佈之所需高分子量區段/部分組成的分子量分佈，其中低分子量端之寬廣分子量分佈的實質量已經消除、抑制或以其他方式減少，使得任何殘留量為不連貫的。
在一些態樣中，本文中之組成物、系統、方法等包含高分子量聚海藻糖，諸如褐藻糖膠可包含一分子量分佈、基本上由一分子量分佈組成或由一分子量分佈組成，其中當使用水性凝膠滲透層析法設置來量測時，該分佈之至少60% w/w可大於100 kDa，該水性凝膠滲透層析法設置基本上由以下組成： 一個具有7.8 mm內徑之300 mm分析型凝膠滲透層析管柱，裝填有基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，具有可在約50 kDa與約5,000 kDa之間的有效分子量範圍；一個具有7.8 mm內徑之300 mm分析型凝膠滲透層析管柱，裝填有基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，具有可在1 kDa與約6,000 kDa之間的有效分子量範圍；及一個具有6 mm內徑之40 mm保護管柱，裝填有基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，該兩個分析型凝膠滲透層析管柱及一個保護管柱包含於在約30℃下之管柱腔室中； 折射率檢測器，在約30℃下； 0.1M硝酸鈉流動相，以0.6 mL/min流動；及 相對於峰值分子量標準曲線進行定量，該峰值分子量標準曲線基本上由以下組成：第一聚葡萄糖標準品，峰值分子量為約2,200 kDa；第二聚葡萄糖標準品，峰值分子量可在約720 kDa與約760 kDa之間；第三聚葡萄糖標準品，峰值分子量可在約470 kDa與約510 kDa之間；第四聚葡萄糖標準品，峰值分子量可在約370 kDa與約410 kDa之間；第五聚葡萄糖標準品，峰值分子量可在約180 kDa與約220 kDa之間；及第六聚葡萄糖標準品，峰值分子量可在約40 kDa與55 kDa之間。
在一些具體實例中，該分佈之至少約70% w/w、80% w/w、90% w/w、93% w/w、94% w/w、95% w/w、97% w/w、98% w/w或99% w/w可大於100 kDa。重量平均分子量可在約100 kDa與10,000 kDa之間；在約140 kDa與8,100 kDa之間；在約370 kDa與8100 kDa之間；在約370 kDa與5300 kDa之間；在約370 kDa與8100 kDa之間；在約370 kDa與5300 kDa之間；在約370 kDa與1900 kDa之間；在約590 kDa與1600 kDa之間；在約590 kDa與1600 kDa之間；或在約860 kDa與1600 kDa之間。在一些具體實例中，重量平均分子量可為約1,100 kDa、約1,200 kDa或約1,300 kDa。數量平均分子量可在約50 kDa與3,000 kDa之間；在約60 kDa與2,000 kDa之間；在約140 kDa與2,000 kDa之間；在約140 kDa與520 kDa之間；或在約230 kDa與450 kDa之間。該分佈之至少55% w/w、71% w/w或91% w/w可大於約200 kDa。該分佈之至少22%、54% w/w或90% w/w可大於約500 kDa。
在一些具體實例中，高分子量聚海藻糖可基本上由一分子量分佈組成、包含一分子量分佈或由一分子量分佈組成，其中當使用如上文及本文中其他地方所闡述之水性凝膠滲透層析法設置來量測時，該分子量分佈可在該分佈之約61% w/w與80% w/w之間，可在約200 kDa與1600 kDa之間。高分子量聚海藻糖可基本上由一分子量分佈組成、包含一分子量分佈或由一分子量分佈組成，其中當使用如上文及本文中其他地方所闡述之水性凝膠滲透層析法來量測時，該分佈之至少60% w/w可大於約1600 kDa。
硫酸鹽含量可在約20% w/w與60% w/w、約30% w/w與55% w/w或約32% w/w與52% w/w之間。總碳水化合物含量可在27% w/w與80% w/w之間。總岩藻糖含量佔總碳水化合物含量之百分比可為至少約30% w/w、50% w/w、70% w/w、80% w/w、90% w/w或95% w/w。總半乳糖含量佔總碳水化合物含量之百分比可低於約60% w/w，或可在約2% w/w與20% w/w之間，或可低於約10% w/w。總葡糖醛酸、甘露糖、鼠李糖（rhamnose）及木糖含量佔總碳水化合物含量之百分比可能低於約30% w/w。
當以50 mg/mL濃度溶解於水中時，高分子量聚海藻糖可具有在約4 cP與50 cP之間、約10 cP與40 cP之間或約15 cP與30 cP之間的黏度。高分子量聚海藻糖可為白色固體且在以1 mg/mL至100 mg/mL之濃度溶解於水中時形成可為透明-無色中之一者的溶液。聚海藻糖可包含小於5% w/w或2% w/w乙醯基含量。當在70℃下藉由2D1 H-13 C異核間多重量子相干性（quantum coherence）量測時，該聚海藻糖包含實質上0% w/w之乙醯基含量，所述量測係利用配備有5mm冷探針之600 MHz光譜儀上之溶劑信號抑制下，在碳維度為10-30 ppm範圍內，以8次遞增之256-512次掃描進行每次量測。
本文中亦包括方法，包括可包含製造或使用本文中之高分子量聚海藻糖，包括用於治療纖維性黏連之方法。本文中進一步包括醫療上可接受之聚海藻糖組成物，其在醫療上可接受之緩衝劑或稀釋劑中可包含治療有效量之含高分子量聚海藻糖。方法亦包括治療動物之病狀或疾病，該等方法可包含選擇本文中之醫療上可接受之聚海藻糖組成物以治療病狀或疾病且投予包含在約0.5 mg/kg與50 mg/kg；0.04 mg/kg與25 mg/kg；0.2 mg/kg與10 mg/kg；1 mg/kg與5 mg/kg；1.5 mg/kg與3 mg/kg；5 mg/kg與10 mg/kg之間的治療有效量。
病狀或疾病可為動物之目標部位處之纖維性黏連，且投予可包含向目標部位投予治療有效量。
醫療組成物可為在約0.02 mg/mL與100 mg/mL之間的高分子量聚海藻糖，其中醫療組成物係以治療動物之疾病或病狀來設定及構成。醫療組成物亦可為在約0.5 mg/mL與5 mg/mL之間或約2.5 mg/mL之高分子量聚海藻糖。
醫療組成物可為醫療裝置，其包括液體醫療裝置。醫療組成物可為醫藥組成物，該醫藥組成物可為液體醫藥組成物。
本文中之方法亦包括使用包含在約0.01 mL/kg與15 mL/kg；約0.03 mL/kg與4 mL/kg；約0.06 mL/kg與2 mL/kg；或約2 mL/kg與4 mL/kg之間的劑量範圍之醫療組成物來治療動物之疾病或病狀。
用於治療患者之纖維性黏連之方法可包含向患者之目標部位投予醫療組成物。目標部位可為手術部位且可在以下中之至少一者時執行投予：a）在打開手術部位處之手術傷口後，b）在手術期間及c）在閉合手術傷口後。投予可在手術後且閉合手術傷口之前執行。投予可耗時小於3分鐘、2分鐘或1分鐘。目標部位可為病灶、擦傷及損傷部位中之至少一者。目標部位可為以下中之至少一者：骨盆腔、腹腔、背椎腔、顱腔、脊髓腔、腹腔、胸腔、胸膜腔、心包腔、皮膚、關節、肌肉、肌腱及韌帶。
在其他具體實例中，本文中之方法包括用於獲得高分子量聚海藻糖之方法。此類方法可包含： 將具有寬廣分子量分佈之聚海藻糖組成物提供於起始溶液中，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段； 使起始溶液在第一較高分子量截斷（cut-off）切向流過濾過濾器上經歷第一切向流過濾，以產生第一滲透聚海藻糖組成物；及 使第一滲透聚海藻糖組成物在第二較低分子量截斷切向流過濾過濾器上經歷第二切向流過濾，以產生基本上由所需高分子量聚海藻糖組成之第二滲餘（retentate）聚海藻糖組成物。
該等方法進一步可包含收集基本上由所需高分子量聚海藻糖組成之第二滲餘聚海藻糖組成物，且第一較高分子量截斷切向流過濾過濾器具有可在約50 kDa與約1000 kDa之間的高分子量截斷且第二較低分子量截斷切向流過濾過濾器具有可在約30 kDa與約100 kDa之間的低分子量截斷。高分子量截斷可為約300 kDa且低分子量截斷可為約100 kDa。
用於獲得高分子量聚海藻糖之方法可包含： 將具有寬廣分子量分佈之起始聚海藻糖組成物提供於起始溶液中，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段； 使起始溶液在第一較低分子量截斷切向流過濾過濾器上經歷切向流過濾，以產生第一滲餘聚海藻糖組成物；及 使第一滲餘聚海藻糖組成物在第二較高分子量截斷切向流過濾過濾器上經歷切向流過濾，以產生基本上由所需高分子量聚海藻糖組成之第二滲透聚海藻糖組成物。
該等方法進一步可包含收集基本上由所需高分子量聚海藻糖組成之第二滲透聚海藻糖組成物。第一切向流過濾可包含在第一較低分子量截斷切向流過濾過濾器上滲濾（diafiltering）起始溶液。第二切向流過濾可包含在第二較高分子量截斷切向流過濾過濾器上滲濾第一滲餘聚海藻糖組成物。第一較低分子量截斷切向流過濾過濾器具有可在約30 kDa與約100 kDa之間的低分子量截斷且第二較高分子量截斷切向流過濾過濾器具有可在約50 kDa與約1000 kDa之間的高分子量截斷。低分子量截斷可為約100 kDa且高分子量截斷可為約300 kDa。
用於獲得高分子量聚海藻糖之方法可包含： 將具有寬廣分子量分佈之起始聚海藻糖組成物提供於起始溶液中，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段，該起始聚海藻糖組成物可包含低原子量陽離子，該等低原子量陽離子以離子方式結合於組成物中之聚海藻糖上之硫酸根基團；及 使起始溶液相對於陽離子添加劑溶液經歷切向流過濾可包含具有比低原子量陽離子更大分子量之陽離子添加劑，以產生基本上由所需高分子量聚海藻糖組成之滲餘聚海藻糖組成物。
該等方法進一步可包含收集基本上由所需高分子量聚海藻糖組成之滲餘聚海藻糖組成物。低原子量陽離子包含以下中之至少一者：鹼金屬、鹼土金屬、鋁及銨。陽離子添加劑可包含以下中之至少一者：膽鹼、聚乙烯吡咯啶酮、牛磺酸、多元胺、聚葡萄胺糖（chitosan）、組蛋白及膠原蛋白。該等方法進一步可包含向起始溶液中添加陽離子添加劑，隨後使起始溶液經歷切向流過濾。切向流過濾可包含相對於陽離子添加劑溶液來滲濾起始溶液。方法又進一步可包含藉由在第二切向流過濾過濾器上相對於鹽溶液來滲濾滲餘聚海藻糖組成物來移除陽離子添加劑，該第二切向流過濾過濾器之分子量截斷可低於第一切向流過濾過濾器之分子量截斷。
鹽溶液可包含鹼金屬、鹼土金屬、鋁及/或銨之氯化物、溴化物、碘化物、氟化物、硫酸鹽、亞硫酸鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、亞硝酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、矽酸鹽及/或氰化物。方法亦可包含藉由相對於低離子強度溶液來滲濾滲餘聚海藻糖組成物來移除鹽。
用於獲得高分子量聚海藻糖之方法可包含： 提供離心容器，該離心容器可包含底端及頂端以及其間之可滲透障壁，該可滲透障壁可包含其間之梯度材料； 將具有寬廣分子量分佈之起始聚海藻糖組成物置放在離心容器中及在可滲透障壁上，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段；及 將離心容器離心持續足以產生沈澱物之時間段，該沈澱物基本上由所需高分子量聚海藻糖組成。
該等方法進一步可包含自離心容器中收集所需高分子量聚海藻糖。可滲透障壁可包含單一梯度材料區段。可滲透障壁可包含複數個梯度材料區段。梯度材料可包含以下中之至少一者：蔗糖、聚蔗糖、丙三醇、山梨糖醇、CsCl、Cs2 SO4 、KBr、泛影酸鹽（diatrizoate）、Nycodenz® 及碘克沙醇（iodixanol）。離心力可在約10,000重力至約1,000,000重力之間。離心力可在60,000重力至約500,000重力之間。
用於獲得高分子量聚海藻糖之方法可包含： 提供離心容器，該離心容器可包含底端及頂端； 將具有寬廣分子量分佈之含起始聚海藻糖組成物之起始溶液置放於離心容器中，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段；及 將離心容器離心持續足以產生沈澱物之時間段，該沈澱物基本上由所需高分子量聚海藻糖組成。
該等方法進一步可包含自離心容器中收集呈沈澱物狀之所需高分子量聚海藻糖。離心力可在約60,000重力至約1,000,000重力之間。離心力可在200,000重力至約500,000重力之間。
用於獲得高分子量聚海藻糖之方法可包含： 使具有寬廣分子量分佈之起始聚海藻糖組成物經歷凝膠電泳，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段，其中起始聚海藻糖組成物可根據電泳凝膠兩端之質荷比來位移； 選擇基本上由所需高分子量聚海藻糖組成之電泳凝膠之一部分；且 自電泳凝膠之選定部分中萃取所需高分子量聚海藻糖。
使起始聚海藻糖組成物經歷凝膠電泳可包含將電位差施加至電泳凝膠之兩端，該電位差可在約10伏特/公分與200伏特/公分之間。電泳凝膠可包含以下中之至少一者：瓊脂糖、聚丙烯醯胺、聚二甲基丙烯醯胺及澱粉。電泳凝膠進一步可包含以下中之至少一者：參乙酸鹽EDTA、參硼酸鹽EDTA及磷酸鹽緩衝鹽水。自電泳凝膠之選定部分中萃取所需高分子量聚海藻糖可包含在溶劑中攪拌電泳凝膠之選定部分。溶劑可包含以下中之至少一者：水、甲醇、乙醇及異丙醇。
用於獲得高分子量聚海藻糖之方法可包含： 提供具有寬廣分子量分佈之起始聚海藻糖組成物及離子交換大孔樹脂，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段；及 使起始聚海藻糖組成物與離子交換大孔樹脂經歷離子交換以獲得基本上由所需高分子量聚海藻糖組成之經離子交換處理的聚海藻糖組成物。
該等方法進一步可包含自經離子交換處理之聚海藻糖組成物中收集所需高分子量聚海藻糖。提供起始聚海藻糖組成物進一步可包含將起始聚海藻糖組成物去鹽，隨後使起始聚海藻糖組成物經歷離子交換。起始聚海藻糖組成物:離子交換大孔樹脂之質量比可在約1:100與約10:1之間。質量比可在約1:10與約5:1之間。起始聚海藻糖組成物可經歷離子交換持續可在約5分鐘與約100小時之間的時間段。離子交換大孔樹脂可包含陰離子交換大孔樹脂及混合電荷大孔樹脂中之至少一者。陰離子交換大孔樹脂可為強鹼大孔樹脂。強鹼大孔樹脂可包含四級胺基團。陰離子交換大孔樹脂可為弱鹼大孔樹脂。弱鹼大孔樹脂可包含一級、二級或三級胺基中之至少一者。離子交換大孔樹脂可包含以下中之至少一者：苯乙烯、瓊脂糖、聚葡萄糖、丙烯酸酯、甲基丙烯酸脂、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸丁酯、二乙烯基苯、纖維素、二氧化矽及陶瓷。離子交換大孔樹脂具有可在約5 nm與約1000 nm、約10 nm與約100 nm或約15 nm與約50 nm之間的孔徑。離子交換大孔樹脂可具有可在約50 kDa與約50,000 kDa、約1,000 kDa與約9,000 kDa或約100 kDa與約1,000 kDa之間的排出限制。起始聚海藻糖組成物可經歷陰離子交換持續可在約5分鐘與約100小時之間或在約1小時與約30小時之間的時間段。
用於獲得高分子量聚海藻糖之方法可包含： 提供含具有寬廣分子量分佈之起始聚海藻糖組成物的起始溶液及凝膠介質，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段； 使起始溶液經歷製備型凝膠滲透層析，其中起始聚海藻糖組成物可根據分子量而自凝膠介質中之第一輸入端位移至第二輸出端；且 自第二輸出端收集基本上由所需高分子量聚海藻糖區段組成之至少一個等分試樣。
該等方法進一步可包含收集多個等分試樣且將該等等分試樣組合。凝膠介質可包含於管柱中。凝膠介質可包含以下中之至少一者：聚羥甲基丙烯酸酯、磺化苯乙烯-二乙烯基苯、二氧化矽、親水性鍵結相或聚合物、聚苯乙烯、二乙烯基苯、甲基丙烯酸脂、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸丁酯、纖維素、陶瓷、瓊脂糖及聚葡萄糖。凝膠介質具有可在約3 nm與約3000 nm、3 nm與約3000 nm、約5 nm與約10,000 nm、約10 nm與約100 nm、約50 nm與約500、約200 nm與約2,000 nm或約500 nm與約5,000 nm之間的孔徑。凝膠介質具有可在約100 Da與約100,000 kDa、約100 kDa與約30,000 kDa、約1,000 kDa與約100,000 kDa、約1,000 kDa與約10,000 kDa或約5,000 kDa與約50,000 kDa之間的排出限制。
本申請案內闡述此等及其他態樣、特徵及具體實例，包括以下詳細描述及附圖。除非另外明確說明，否則所有具體實例、態樣、特徵等可以任何所要方式經混合及匹配、組合且排列。
本文中呈現之當前組成物、系統、方法等包含高分子量聚海藻糖。本發明組成物可對醫療治療、手術後治療、疾病抑制等有效。在一些具體實例中，聚海藻糖為褐藻糖膠。本發明高分子量聚海藻糖可自身為或可被包含於醫療裝置、醫療材料、組合產品之上或之中或可被包含於醫藥學上可接受之、治療學上及/或醫療上有效的組成物中。
以下段落轉向簡要論述可以用於經由各種方法利用起始聚海藻糖及組成物產生本文中之高分子量聚海藻糖及組成物的一些方法，可取決於所選方法使用任何適合之反應混合物，諸如溶液、懸浮液、固體、凝膠或其他模式執行該各種方法。組成物
在某些具體實例中，本文中呈現之當前組成物、系統等提供聚海藻糖及醫療上可接受之高分子量聚海藻糖以及包含治療有效量之高分子量聚海藻糖的組成物，以用於治療纖維性黏連（諸如手術黏連）、關節炎、牛皮癬或視需要之其他疾病。
本文中呈現之高分子量聚海藻糖可用於複數個應用，包括抑制、預防、移除、減少或其他治療纖維性黏連及其他目標以及其他疾病及/或病狀。治療包括高分子量聚海藻糖減少或預防出現目標疾病或其他病狀，諸如減少或預防目標部位處形成纖維性黏連，目標部位（其典型地為由外科醫生或其他從業者識別為包含或相當地易患纖維性黏連（或其他疾病或病狀）之選定目標部位）處形成纖維性黏連，且亦包括消除現有疾病或其他病狀，包括（例如）消除已存在纖維性黏連。對於此類抑制、預防、移除、減少或其他治療，通常以醫學上可接受之醫療裝置、組合產品或醫藥學上有效之組成物形式提供高分子量聚海藻糖，該醫藥學上有效之組成物含有額外組分，諸如黏結劑、佐劑、賦形劑等以及視需要額外的醫療上活性物質，諸如內含於該組成物中但不連接至聚海藻糖及/或可連接至聚海藻糖之輔助性藥物。
可使用任何所需、適合的量測系統來量測高分子量聚海藻糖之分子量分佈。不同系統可利用具有實質上相同構成之不同組成物或甚至在以不同方式量測時利用同一批料得到不同讀數或結果。一種適合的量測系統為水性凝膠滲透層析法設置，其基本上由以下組成：一個具有7.8 mm內徑之300 mm分析型凝膠滲透層析管柱，裝填有基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，具有在約50 kDa與約5,000 kDa之間的有效分子量範圍；一個具有7.8 mm內徑之300 mm分析型凝膠滲透層析管柱，裝填有基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，具有在約1 kDa與約6,000 kDa之間的有效分子量範圍；以及一個具有6 mm內徑之40 mm保護管柱，裝填有基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，該兩個分析型凝膠滲透層析管柱及一個保護管柱包含於約30℃之管柱腔室中；在約30℃下之折射率偵測器；以0.6 mL/min流動之0.1M硝酸鈉流動相，以及相對於基本上由以下組成之峰值分子量標準曲線進行定量：第一聚葡萄糖標準品，峰值分子量為約2,200 kDa；第二聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約720 kDa與約760 kDa之間；第三聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約470 kDa與約510 kDa之間；第四聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約370 kDa與約410 kDa之間；第五聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約180 kDa與約220 kDa之間；以及第六聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約40 kDa與55 kDa之間。峰值分子量標準曲線可進一步包含峰值分子量在約3 kDa與約5 kDa之間的聚葡萄糖標準。
本文中之高分子量聚海藻糖可具有超過100kDa之重量平均分子量且其分子量分佈之約50% w/w或更大高於100 kDa。在相同劑量下，相比於重量平均分子量低於100 kDa且其分子量分佈之小於約50%高於100 kDa之聚海藻糖，此類高分子量聚海藻糖顯示在抑制、預防、移除、減小及/或其他治療纖維性黏連中之更大功效。在相同劑量下，重量平均分子量高於300 kDa，其分子量分佈之約70%或更大高於100 kDa之高分子量聚海藻糖顯示在抑制、預防、移除、減小及/或其他治療纖維性黏連中之甚至更大功效。
在一些具體實例中，本文中之高分子量聚海藻糖係設定用於抑制、預防、移除、減小或其他治療纖維性黏連，該高分子量聚海藻糖產生大於約65%、70%、80%、90%、95%或99%有效預防、抑制或其他治療手術後黏連。此類高分子量聚海藻糖亦可經設定用於其他目標之此類治療。
本文中之高分子量聚海藻糖可包含一分子量分佈，其中超過約60%、70%、75%、80%、90%、95或99% w/w之聚海藻糖具有高於100 kDa之分子量。
在其他具體實例中，本文中之高分子量聚海藻糖可包含以下重量平均分子量：在約100 kDa與10,000 kDa之間、在約140 kDa或200 kDa與9,000 kDa之間、在約350 kDa或370 kDa與8,000 kDa之間、在約450 kDa與7,000 kDa之間、在約580 kDa與5,300 kDa或6,000 kDa之間、在約580 kDa或590 kDa與5,500 kDa之間、在約400 kDa與2,800 kDa之間或在約800 kDa或860 kDa與約2,000 kDa之間，例如約850 kDa、約930 kDa、約1,100 kDa、約1,200 kDa、約1,300 kDa、約1,600 kDa及約1,800 kDa。
在又其他具體實例中，本文中之高分子量聚海藻糖可包含以下峰值分子量：在約60 kDa或70 kDa與7,000 kDa之間、在約100 kDa或140 kDa與6000 kDa之間、在約200 kDa或230 kDa與5000 kDa之間、在約250 kDa與4000 kDa之間、在約350 kDa與3000 kDa之間、在約500 kDa與2000 kDa之間或在約400 kDa及約1000 kDa之間，例如約450 kDa、500 kDa、550 kDa、600 kDa、650 kDa、700 kDa及750 kDa。
在又其他具體實例中，本文中之高分子量聚海藻糖可包含以下數量平均分子量：在約50 kDa與3,000 kDa之間、在約100 kDa與2,000 kDa之間、在約200 kDa與1,500 kDa之間、在約300 kDa與2,000 kDa之間、在約400 kDa與1,000 kDa之間或在約250 kDa及約600 kDa之間，例如約300 kDa、350 kDa、400 kDa、450 kDa、500 kDa及550 kDa。
在又其他具體實例中，本文中之高分子量聚海藻糖可包含一分子量分佈，其中超過約55% w/w或60% w/w之聚海藻糖可具有高於200 kDa之分子量，或超過約70% w/w或71% w/w之聚海藻糖可具有高於200 kDa之分子量。在又其他具體實例中，本文中之高分子量聚海藻糖可包含一分子量分佈，其中超過22% w/w或30% w/w之聚海藻糖可具有高於500 kDa之分子量，或超過50% w/w或54% w/w之聚海藻糖可具有高於500 kDa之分子量。
在又其他具體實例中，本文中之高分子量聚海藻糖可包含一分子量分佈，其中小於約10% w/w之聚海藻糖具有低於50 kDa之分子量，或小於約5% w/w之聚海藻糖具有低於50 kDa之分子量，或小於約2% w/w之聚海藻糖具有低於50 kDa之分子量。
在又其他具體實例中，本文中之高分子量聚海藻糖可包含一分子量分佈，其中小於約5% w/w之聚海藻糖具有低於10 kDa之分子量，或小於約2% w/w之聚海藻糖具有低於10 kDa之分子量。
在又其他具體實例中，本文中之高分子量聚海藻糖可包含一分子量分佈，其中小於約5% w/w之聚海藻糖具有低於5 kDa之分子量，或小於約2% w/w之聚海藻糖具有低於5 kDa之分子量。
在又另一態樣中，本文中之高分子量聚海藻糖可包含一分子量分佈，其中61% w/w與80% w/w或85% w/w之間的聚海藻糖具有在200 kDa與1600 kDa之間的分子量。更特定言之，超過70% w/w之聚海藻糖可具有高於200 kDa之分子量，且超過30%之聚海藻糖可具有高於500 kDa之分子量。
在又另一態樣中，本文中之高分子量聚海藻糖可包含一分子量分佈，其中超過約20% w/w、40% w/w或60% w/w之聚海藻糖具有高於1600 kDa之分子量。更特定言之，超過約70% w/w之聚海藻糖可具有高於200 kDa之分子量，或超過約80% w/w之聚海藻糖可具有高於200 kDa之分子量。
本文中之高分子量聚海藻糖可具有以下硫酸化水平：在約14% w/w與70% w/w之間、在約20% w/w與60% w/w之間、在約30% w/w與55% w/w之間或在約32% w/w或35% w/w與52% w/w之間。
本文中之高分子量聚海藻糖可具有以下總岩藻糖:總硫酸鹽之莫耳比：在1:0.5與1:4之間、在約1:0.8與1:3.5之間、在約1:1與1:2.5之間、在約1:1.2與1:2.0之間或在約1:1.5與1:3之間。
本文中之高分子量聚海藻糖可具有以下總岩藻糖及半乳糖:總硫酸鹽之莫耳比：在約1:0.5與1:4之間、在約1:0.8與1:3.5之間、在約1:1與1:2.5之間、在約1:1.2與1:2.0之間或在約1:1.5與1:3之間。
本文中之高分子量聚海藻糖可具有以下總碳水化合物含量：在約27% w/w與80% w/w之間、在約30% w/w與70% w/w之間、在約40% w/w與90% w/w之間或在約50% w/w與96% w/w之間。
本文中之高分子量聚海藻糖可具有以下佔總碳水化合物之百分比的岩藻糖含量：在約30% w/w與100% w/w之間、在約40% w/w與95% w/w之間、在約50% w/w與90% w/w之間、在約80% w/w與100% w/w之間或在約90% w/w與100% w/w之間。
本文中之高分子量聚海藻糖可具有以下佔總碳水化合物之百分比的半乳糖含量：在約0% w/w與60% w/w之間、在約3% w/w與30% w/w之間、在約2% w/w與20% w/w之間或在約5% w/w與10% w/w之間。
本文中之高分子量聚海藻糖可具有：佔總碳水化合物含量之百分比為約0% w/w與10% w/w之間葡糖醛酸含量，佔總碳水化合物含量之百分比為約0% w/w與7% w/w之間的甘露糖含量，佔總碳水化合物含量之百分比為0% w/w與4% w/w之間的鼠李糖含量及佔總碳水化合物含量之百分比為0% w/w與20% w/w之間的木糖含量。本文中之高分子量聚海藻糖可具有佔總碳水化合物含量之百分比低於約30% w/w或低於約12% w/w的總葡糖醛酸、甘露糖、鼠李糖、葡萄糖及木糖含量。
在一些具體實例中，當以50 mg/mL濃度溶解於水中時，本文中之高分子量聚海藻糖具有以下黏度：在約4 cP與約50 cP之間、在約5 cP與約40 cP之間、在約10 cP與約30 cP之間、約15 cP、約20 cP及約25 cP。在某些具體實例中，當以1 mg/mL至100 mg/mL溶解於水中時，本文中之高分子量聚海藻糖形成為透明且無色、透明且淡黃色或透明且淡褐色中之一者的溶液。
在某些具體實例中，本文中之高分子量聚海藻糖可具有小於約5% w/w、小於約2% w/w及約0% w/w之乙醯基含量。在一些具體實例中，當在70℃下藉由2D1 H-13 C異核間多重量子相干性量測時，本文中之高分子量聚海藻糖包含實質上0% w/w之乙醯基含量，所述量測係利用配備有5mm冷探針之600 MHz光譜儀上之溶劑信號抑制下，在碳維度為10-30 ppm範圍內，以8次遞增之256-512次掃描進行每次量測。方法
提供用於獲得獲自起始聚海藻糖組成物（諸如原料聚海藻糖組成物）之高分子量聚海藻糖之方法、系統等，該起始聚海藻糖組成物具有寬廣分子量分佈（寬廣分子量分佈起始聚海藻糖），該寬廣分子量分佈涵蓋且延伸超出所需高分子量區段，所需高分子量區段為寬廣分子量分佈之一部分，其中已消除、抑制或以其他方式減少低分子量端之一定量的寬廣分子量分佈。此等方法中之至少一者可用於中製備高分子量聚海藻糖，例如其分子量分佈之超過約60%、70%、80%、90%、或95% w/w高於100 kDa。在一些具體實例中，本發明提供適用於醫療及手術應用，例如預防纖維性黏連的高分子量聚海藻糖。切向流過濾
本文中所論述的方法中之一些利用切向流過濾（TFF）。與切向流過濾（TFF）過濾器之典型識別相符，給定TFF過濾器之標稱分子量（nominal molecular weight）截斷（MWCO）值將在其滯留側上選擇性地保留含有不穿過過濾器障壁之分子的溶液，且因此通常具有大於穿過/滲透障壁達至滲透面之分子之分子量的分子量及/或大小。因此，TFF過濾器之分子量截斷值典型地對於任何給定聚合物或標稱截斷值並不絕對：給定TFF過濾器將通過或保留高於及低於標稱分子量截斷兩者之一些分子。用於特定聚合物之標稱TFF過濾器的實際截斷/選擇性值及影響可針對特定聚合物常規地判定。
許多因素可影響TFF過濾器之滲透行為。此等因素可取決於TFF過濾器自身或取決於目標聚合物之屬性，例如目標聚合物之摺疊行為及摺疊結構可影響目標聚合物在穿過/不穿過TFF過濾器之MWCO障壁中之行為。如吾人所知，關於TFF過濾器自身，大量因素可影響TFF過濾器之滲透行為。舉例而言，製造方法可在特定TFF過濾器中產生各種孔大小，其變體可包括大於及小於標稱MWCO兩者之孔。因此，具有標稱分子量截斷值之TFF過濾器將實質上通過/保留標稱分子量截斷值之分子，但亦可通過/保留低於及/或高於此類值之一些分子。凝膠滲透層析法
凝膠滲透層析法用於評估實驗實例獲得之分子量分佈。存在大量可用於凝膠滲透層析法中之不同參數、管柱及標準，使得各種儀器設置可用於分子量之分析。對於本文中之分子量測定，使用以下參數進行GPC：流動相為以0.6 mL/min流動之0.1M硝酸鈉。管柱腔室及偵測器處於30℃下。沃特斯（Waters） 2414折射率偵測器用於偵測。
適合的GPC管柱包括與水性溶劑兼容之GPC管柱，例如裝填有以下中之至少一者之管柱：磺化苯乙烯-二乙烯基苯、NH官能化丙烯酸酯共聚物網路、經修改二氧化矽及基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠。對於本文中之分析，串聯使用三個管柱，其包含一個具有6 mm內徑（ID）之40 mm長保護管柱，裝填有6 μm粒度之基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠；接著為具有7.8 mm ID之第一300 mm分析型GPC管柱，裝填有12 μm粒度之基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，其具有約7,000 kDa之排出限制及在約50 kDa與約5,000 kDa之間的有效分子量範圍；接著為具有7.8 mm ID之第二300 mm分析型GPC管柱，裝填有10 μm粒度之基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，其具有約7,000 kDa之排出限制及在約1 kDa與約6,000 kDa之間的有效分子量範圍。管柱設置之總有效分子量範圍在約1 kDa與約6,000 kDa之間。此管柱設置之實例可為串聯連接之Ultrahydrogel®保護-Ultrahydrogel® 2000-Ultrahydrogel®線性管柱。
相對於包含來自美國聚合物標準公司（American Polymer Standards Corporation）之可追蹤標準品的標準曲線來量化樣品流動：DXT3755K（峰值分子量=2164 kDa）、DXT820K（峰值分子量=745 kDa）、DXT760K（峰值分子量=621 kDa）、DXT670K（峰值分子量=401 kDa）、DXT530K（峰值分子量=490 kDa）、DXT500K（峰值分子量=390 kDa）、DXT270K（峰值分子量=196 kDa）、DXT225K（峰值分子量=213 kDa）、DXT150K（峰值分子量=124 kDa）、DXT55K（峰值分子量=50 kDa）、DXT50K（峰值分子量=44 kDa）及DXT5K（峰值分子量=4 kDa），此等標準之峰值分子量在約4 kDa與約2,200 kDa之間。所使用標準曲線可例如包括Dextran 3755 kDa，Dextran 50 kDa及Dextran 55 kDa中之至少一者及在3至6個之間的本文中所論述的額外可追蹤標準，校準點為所使用校準物之峰值分子量。實例校準曲線可由以下組成：DXT3755K、DXT 820K、DXT530K、DXT500K、DXT225K及DXT55K。本文中所使用的管柱具有涵蓋且延伸超出用於聚海藻糖之定量的標準之峰值分子量範圍的總有效分子量範圍。
規定用於本文中之聚海藻糖/褐藻糖膠聚合物之分子量為將始終存在更高及更低分子量之分子分佈的分子量值，該分子量隨著分子量與指定分子量之距離增大或減小而在量或百分比上增大或減小。該分佈可（但並非必需）具有通常高斯（Gaussian）或失真高斯形狀。
本文中之各表中的結果含有用於分子量分佈之某些特徵的縮寫。凝膠滲透層析法由GPC表示，峰值滯留時間由PRT表示，峰值分子量由PMW表示，重量平均分子量由WAMW表示，數量平均分子量由NAMW表示，分佈百分比由%分佈表示，分子量由MW表示，多分散性指數由PDI表示及分子量截斷由MWCO表示。
以下段落轉向簡要論述可用於產生本文中之高分子量聚海藻糖之一些方法。連續切向流過濾分段
可藉由連續TFF分段方法自寬廣分子量分佈起始聚海藻糖組成物中獲得高分子量聚海藻糖。方法可包含：提供包含所需分子量區段（例如高分子量區段）之起始聚海藻糖組成物，該起始聚海藻糖組成物具有起始寬廣分子量分佈；使起始聚海藻糖組成物在第一較高MWCO切向流過濾過濾器上經歷切向流過濾，該第一更高MWCO切向流過濾過濾器具有起始分子量分佈內之平均分子量截斷；自第一TFF過濾器中收集第一滲透聚海藻糖組成物，相較於起始聚海藻糖組成物，該第一滲透聚海藻糖組成物包含減小比例之高分子量聚海藻糖；使第一滲透聚海藻糖組成物在第二較低MWCO切向流過濾過濾器上經歷切向流過濾，相比於第一TFF過濾器，該第二較低MWCO切向流過濾過濾器具有起始分子量分佈內之較低的平均分子量截斷；及自第二TFF過濾器中收集含具有所需分子量區段之聚海藻糖的滲餘聚海藻糖組成物。
視需要，方法可包含其他步驟，例如經由能夠濾除大於所需大小之顆粒或部分或其他非所需材料之預過濾器來預過濾起始聚海藻糖組成物。使起始聚海藻糖組成物穿過第一TFF過濾器可包含使起始聚海藻糖組成物穿過TFF過濾器，同時將壓力施加至起始聚海藻糖組成物。使第一TFF過濾器之滲透聚海藻糖組成物穿過第二TFF過濾器可包含使第一TFF過濾器之滲透聚海藻糖組成物穿過第二TFF過濾器，同時將壓力施加至第一TFF過濾器之滲透聚海藻糖組成物。
使起始聚海藻糖組成物穿過第一TFF過濾器可包含在第一TFF過濾器上再循環第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物。在第一TFF過濾器上再循環第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物可包含在第一TFF過濾器上滲濾該滲餘聚海藻糖組成物。在第一TFF過濾器上再循環第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物可包含測定第一TFF過濾器之滲透聚海藻糖組成物之重量平均分子量。在第一TFF過濾器上再循環第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物可包含在第一TFF過濾器上再循環第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物直至第一TFF過濾器之滲透聚海藻糖組成物中之聚海藻糖之重量平均分子量具有預定所需值為止。
使來自第一TFF過濾器之滲透聚海藻糖組成物穿過第二TFF過濾器可包含在第二TFF過濾器上再循環該滲透聚海藻糖組成物。在第二TFF過濾器上再循環該滲透聚海藻糖組成物可包含在第二TFF過濾器上滲濾該滲透聚海藻糖組成物。在第二TFF過濾器上再循環該滲透聚海藻糖組成物可包含測定第二TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物之重量平均分子量。在第二TFF過濾器上再循環該滲透聚海藻糖組成物可包含在第二TFF過濾器上再循環聚海藻糖直至第二TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物之重量平均分子量具有預定所需值為止。
圖 1 示意性地展示包含兩個不同的較高及較低分子量截斷（MWCO） TFF過濾器之基於分子量之例示性分段系統（較高至較低）100 ，在所顯示之具體實例中，該等過濾器經提供為較高分子量截斷TFF過濾器110 及較低分子量截斷過濾器120 ；可以任何可接受之格式提供該等TFF過濾器，當前實例使用匣狀形式。較高分子量截斷TFF過濾器110 之MWCO大於較低分子量截斷TFF過濾器120 之MWCO。舉例而言，較高分子量截斷TFF過濾器110 之MWCO可為30千道爾頓（kiloDalton；kDa）、50 kDa、70 kDa、100 kDa、300 kDa及1000 kDa，而較低分子量截斷TFF過濾器120 之MWCO可為例如5 kDa、10 kDa、30 kDa、50 kDa及100 kDa。舉例而言，選擇較高分子量截斷TFF過濾器較低分子量截斷TFF過濾器之組合，基於分子量之分段系統（較高至較低）100 可用於獲得以下分子量截斷TFF過濾器之間的分子量區段：5-30 kDa、10-30 kDa、5-50 kDa、10-50 kDa、30-50 kDa、10-70 kDa、30-70 kDa、50-70 kDa、5-100 kDa、10-100 kDa、30-100 kDa、50-100 kDa、70-100 kDa、5-300 kDa、10-300 kDa、30-300 kDa、50-300 kDa、70-300 kDa及100-300 kDa。在一些具體實例中，分子量區段可為高分子量區段。
經由輸入供應管線102 將呈溶液狀態之起始聚海藻糖組成物供應至較高MWCO子系統聚海藻糖容器116 中。起始聚海藻糖可以0.1% w/v與30% w/v之間，諸如1% w/v與10% w/v之間（例如以5% w/v）的濃度存在於適合的溶劑中。可經由預過濾器104 預 過濾含起始聚海藻糖之適合溶劑以移除非所需顆粒物質。含有起始聚海藻糖組成物之溶液可（視需要）包含其他非聚海藻糖組分，諸如所需緩衝劑、稀釋劑等，例如用於其他聚海藻糖處理步驟或下游使用聚海藻糖。預過濾器之標準規格（有效孔大小）將典型地大於待藉助於基於分子量之分段系統（較高至更低）100 分離之最大聚合物分子。
較高MWCO子系統泵114 經由較高MWCO TFF過濾器供應管線112 將含有起始聚海藻糖組成物之溶液泵送至較高MWCO TFF子系統130 之較高分子量截斷TFF過濾器110 。較高分子量截斷TFF過濾器110 典型地以匣狀形式供應，其經設計以允許輸入流體在其滯留側上穿過其過濾器。分子量截斷過濾器之格式可為（但不限於）板框式系統；螺旋捲繞筒系統；中空纖維系統；流動槽系統；及離心過濾器系統。滲透物經由較高MWCO子系統滲透物輸出管線119 離開且經處理輸入流體（亦即，滲餘物流體）經由較高MWCO子系統滲餘物返回管線118 離開作為滲餘物。較高MWCO子系統泵114 在較高分子量截斷TFF過濾器110 上在其滲餘物與滲透物側之間提供壓力水平。在圖 1 中，來自較高分子量截斷TFF過濾器110 之滲餘物流體經由較高MWCO子系統滲餘物返回管線118 返回至較高MWCO子系統聚海藻糖容器116 中，同時經由較高MWCO子系統滲透物輸出管線119 產生滲透流體以供較高MWCO TFF子系統130 之外部使用。當較高MWCO子系統泵114 在較高分子量截斷TFF過濾器110 上再循環經預過濾聚海藻糖及滲餘物時，可經由較高MWCO子系統溶劑供應管線115 由較高MWCO子系統溶劑容器117 供應溶劑例如以備足經由滲透損耗的溶劑及/或以確保預定數量的滲濾體積（diavolume）之輸入起始聚海藻糖及溶劑在較高分子量截斷TFF過濾器110 上循環。
可在上述處理期間阻斷（shut off）（關閉（close））較高至較低MWCO子系統間閥113 ，且可將來自較高MWCO TFF子系統130 之較高分子量截斷TFF過濾器110 之滲透流體收集至容器（未顯示）中用於儲存或其他使用，隨後供應至較低MWCO TFF子系統140 之較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 。起始聚海藻糖組成物可經由較高MWCO TFF子系統130 視需要循環多次。
隨後可經由較高MWCO子系統滲透物輸出管線119 將來自較高MWCO TFF子系統130 之收集的滲透物供應至較低MWCO TFF子系統140 之較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 。在其他具體實例中，可以容器（未顯示）將收集的滲透物轉移至較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 中。在系統之又其他具體實例中，較高至較低MWCO子系統間閥113 可保持開啟且可經由較高MWCO子系統滲透物輸出管線119 將較高分子量截斷TFF過濾器110 之滲透物連續不斷地供應至較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 。相較於起始聚海藻糖組成物中之較高分子量分子之分佈，較高分子量截斷TFF過濾器110 之滲透物中之較高分子量分子之分佈經減少或經抑制。
如上文關於較高分子量截斷TFF過濾器110 所論述，以類似方式在較低分子量截斷TFF過濾器120 上過濾供應至較低MWCO TFF子系統140 之滲透物。亦即，在將來自較高MWCO TFF子系統130 之滲透物供應至較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 後，較低MWCO子系統泵124 經由較低MWCO TFF過濾器供應管線122 將該滲透物泵送至較低MWCO TFF子系統140 之較低分子量截斷TFF過濾器120 。較低MWCO子系統泵124 在較低分子量截斷TFF過濾器120 上在其滲餘物與滲透物側之間維持壓力水平。在圖 1 中，較低分子量截斷TFF過濾器120 之滲餘物經由較低MWCO子系統滲餘物返回管線128 返回至較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 ，同時經由較低MWCO子系統滲透物輸出管線129 產生滲透物以用於較低MWCO TFF子系統140 外部之其他使用或丟棄。若較低MWCO子系統泵124 再循環來自較高分子量截斷TFF過濾器110 之滲透物及來自較低分子量截斷TFF過濾器120 之滲餘物以再次穿過較低分子量截斷TFF過濾器120 （如同較高分子量截斷過濾過濾器，此再循環可視需要經常重複），則可經由較低MWCO子系統溶劑供應管線125 及較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 由較低MWCO子系統溶劑容器127 供應溶劑以備足經由較低MWCO子系統滲透物輸出管線129 損耗的溶劑及/或確保預定數量的滲濾體積之較低分子量截斷TFF過濾器120 之滲餘物及溶劑在較低分子量截斷TFF過濾器120 上循環。
在較低MWCO TFF子系統140 之切向流過濾操作期間，可關閉較低MWCO子系統滲餘物管線閥106 。當自較高MWCO TFF子系統130 供應至較低MWCO TFF子系統140 之滲透物已經過濾至所需程度時，打開較低MWCO子系統滲餘物管線閥106 且經由較低MWCO子系統滲餘物輸出管線108 供應較低分子量截斷TFF過濾器120 之滲餘物。此提供來自起始聚海藻糖組成物之具有所需分子量區段之聚海藻糖，例如高分子量聚海藻糖。
輸出聚海藻糖具有帶分子量分佈之所需分子量區段，該分子量分佈典型地主要在較高分子量截斷TFF過濾器110 之平均分子量截斷與較低分子量截斷TFF過濾器120 之平均分子量截斷之間。然而，考慮到起始聚海藻糖分子量分佈之寬度及複雜度以及聚合物行為及TFF過濾器之變化性，輸出聚合物分子量分佈可不在兩個TFF過濾器之平均分子量截斷值之間達到峰值。舉例而言，聚海藻糖之過度高或低摺疊可引起在所需分子量區段中選擇經恰當大小設定但異常稠密（或並不稠密）的聚海藻糖。因此，就本文中所論述的連續TFF後提供之聚海藻糖而言，輸出所需分子量區段基本上由衍生自原始起始聚海藻糖組成物之所需分子量區段組成，該原始起始聚海藻糖組成物經供應至基於分子量之分離系統（較高至較低）100 。
其他具體實例可包含：提供包含所需分子量區段（例如高分子量區段）之起始聚海藻糖組成物，該起始聚海藻糖組成物具有起始分子量分佈；使起始聚海藻糖組成物在第一切向流過濾過濾器上經歷切向流過濾，該第一切向流過濾過濾器具有在起始分子量分佈內之平均分子量截斷；自第一TFF過濾器中收集第一滲餘聚海藻糖組成物，相較於起始聚海藻糖組成物，該第一滲餘聚海藻糖組成物包含減小比例之低分子量聚海藻糖；使第一滲餘聚海藻糖組成物在第二切向流過濾過濾器上經歷切向流過濾，相比於第一TFF過濾器，該第二切向流過濾過濾器具有在起始分子量分佈內之較高平均分子量截斷；及自第二TFF過濾器中收集含具有所需分子量區段之聚海藻糖的滲透聚海藻糖組成物。
方法可進一步包含經由能夠濾除大於所需大小之部分的預過濾器來預過濾起始聚海藻糖組成物。使起始聚海藻糖組成物穿過第一TFF過濾器可包含在使起始聚海藻糖組成物穿過第一TFF過濾器，同時將壓力施加至起始聚海藻糖組成物。使第一MCWO過濾器之滲餘聚海藻糖組成物穿過第二TFF過濾器可包含使第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物穿過第二TFF過濾器，同時將壓力施加至第二TFF過濾器中之第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物。
使起始聚海藻糖組成物穿過第一TFF過濾器可包含在第一TFF過濾器上再循環第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物。在第一TFF過濾器上再循環第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物可包含在第一TFF過濾器上滲濾該滲餘聚海藻糖組成物。在第一TFF過濾器上再循環第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物可包含測定第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物之重量平均分子量。在第一TFF過濾器上再循環第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物可包含在第一TFF過濾器上再循環第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物直至第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物中之聚海藻糖之重量平均分子量具有預定所需值為止。
使來自第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物穿過第二TFF過濾器可包含在第二TFF過濾器上再循環滲餘聚海藻糖組成物。在第二TFF過濾器上再循環滲餘聚海藻糖組成物可包含在第二TFF過濾器上滲濾滲餘聚海藻糖組成物。在第二TFF過濾器上再循環滲餘聚海藻糖組成物可包含測定第二TFF過濾器之滲透聚海藻糖組成物之重量平均分子量。在第二TFF過濾器上再循環滲餘聚海藻糖組成物可包含在第二TFF過濾器上再循環滲餘聚海藻糖組成物直至第二TFF過濾器之滲透聚海藻糖組成物之重量平均分子量具有預定所需值為止。
圖 2 展示本文中之方法、系統等之另一具體實例。在圖 2 中，圖 1 之子系統130 及140 就過程順序而言經反轉以形成基於分子量之分段系統（較低至較高）100' 。如同圖 1 中所論述之方法，起始聚海藻糖經由輸入供應管線102 進入系統中且藉由預過濾器104 預過濾。然而，相比於圖 1 中之上述方法，經預過濾起始聚海藻糖首先在較低MWCO TFF子系統140 中經處理，隨後在較高MWCO TFF子系統130 中經處理。在較低MWCO TFF子系統140 中，起始聚海藻糖組成物穿過較低分子量截斷TFF過濾器120 ，該較低分子量截斷TFF過濾器為具有較低平均MWCO值之TFF過濾器。在此具體實例中，在較低MWCO子系統滲餘物輸出管線121 上離開較低MWCO TFF子系統140 的係較低分子量截斷TFF過濾器120 之滲餘物而非滲透物。此類滲餘物經由較低至較高MWCO子系統間閥123 離開以供應至較高MWCO TFF子系統130 之較高MWCO子系統聚海藻糖容器116 。隨後經由較高MWCO TFF過濾器供應管線112 藉由較高MWCO子系統泵114 泵抽滲餘物以穿過較高分子量截斷TFF過濾器110 ，該較高分子量截斷TFF過濾器為具有較高MWCO之TFF過濾器。
在較低MWCO TFF子系統140 內，較低MWCO子系統泵124 經由較低MWCO TFF過濾器供應管線122 將滲透物自較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 泵送至較低分子量截斷TFF過濾器120 。在圖 2 中，較低分子量截斷TFF過濾器120 之滲餘物經由較低MWCO子系統滲餘物返回管線128 返回至較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 ，同時經由較低MWCO子系統滲透物輸出管線129 產生滲透物以用於較低MWCO TFF子系統140 外部之其他使用或丟棄。若滲餘物經再循環以再次穿過較低分子量截斷TFF過濾器120 ，則可經由較低MWCO子系統溶劑供應管線125 及較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 由較低MWCO子系統溶劑容器127 供應溶劑以備足經由較低MWCO子系統滲透物輸出管線129 損耗的溶劑及/或確保預定數量的滲濾體積之較低分子量截斷TFF過濾器120 之滲餘物及溶劑在較低分子量截斷TFF過濾器120上循環。
可在上述處理期間關閉較低至較高MWCO子系統間閥123 ，且可將較低MWCO TFF子系統140 之較低分子量截斷TFF過濾器120 之滲餘物收集至容器（未顯示）中，隨後供應至較高MWCO TFF子系統130 之較高MWCO子系統聚海藻糖容器116 。經由物理較低MWCO子系統滲餘物輸出管線121 將收集的滲餘物供應至較高MWCO TFF子系統130 之較高MWCO子系統聚海藻糖容器116 。在其他具體實例中，可以容器（未顯示）將收集的滲餘物轉移至較高MWCO子系統聚海藻糖容器116 中。在又其他具體實例中，較低至較高MWCO子系統間閥123 可保持開啟且經由較低MWCO子系統滲餘物輸出管線121 將較低分子量截斷TFF過濾器120 之滲餘物連續不斷地供應至較高MWCO子系統聚海藻糖容器116 。相較於起始聚海藻糖中之較低分子量分子之分佈，來自較低分子量截斷TFF過濾器120 之滲餘物中之較低分子量分子之分佈經減少或經抑制。
當較高MWCO TFF子系統130 處理來自較低MWCO TFF子系統140 之較低分子量截斷TFF過濾器120 的滲餘物時，在較高MWCO子系統滲透物輸出管線119 上產生較高分子量截斷TFF過濾器110 之滲透物。當較高MWCO子系統泵114 在較高分子量截斷TFF過濾器110 上再循環較低MWCO TFF子系統140 之滲餘聚海藻糖時，可經由較高MWCO子系統溶劑供應管線115 由較高MWCO子系統溶劑容器117 供應溶劑以備足經由滲透損耗的溶劑及/或以確保預定數量的滲濾體積之較低MWCO TFF子系統140 之滲餘聚海藻糖及溶劑在較高分子量截斷TFF過濾器110 上循環。
在圖 2 中，來自較高分子量截斷TFF過濾器110 之滲餘物流體經由較高MWCO子系統滲餘物返回管線118 返回至較高MWCO子系統聚海藻糖容器116 中，同時經由較高MWCO子系統滲透物輸出管線119 產生滲透流體以供較高MWCO TFF子系統130之外部使用。在圖 2 中，經由較高MWCO子系統滲透物輸出管線119 產生之具有所需分子量區段之輸出聚海藻糖具有主要在第一較高分子量截斷TFF過濾器110 之平均分子量截斷與第二較低分子量截斷TFF過濾器120 之平均分子量截斷之間的分子量分佈。然而，考慮到起始聚海藻糖分子量分佈之寬度及複雜度以及聚合物行為及TFF過濾器之變化性，輸出聚合物分子量分佈可不在兩個TFF過濾器之平均分子量截斷值之間達到峰值。舉例而言，聚海藻糖之過度高或低摺疊可引起在所需分子量區段中選擇經恰當大小設定但異常稠密（或並不稠密）的聚海藻糖。因此，就本文中所論述的連續TFF後提供之聚海藻糖而言，輸出聚海藻糖基本上由衍生自原始起始聚海藻糖組成物之聚海藻糖之所需分子量區段由組成，該原始起始聚海藻糖組成物經供應至基於分子量之分段系統（較低至較高）100' 。具有所需分子量區段之此輸出聚海藻糖亦可衍生自經預過濾起始聚海藻糖組成物，該經預過濾起始聚海藻糖組成物在經預過濾器104 預過濾後形成且接著經供應至較低MWCO TFF子系統140 。陽離子強化切向流過濾
高分子量聚海藻糖可藉由陽離子強化TFF自寬廣分子量分佈起始聚海藻糖獲得，方法包含：提供具有低原子量陽離子及包含所需高分子量區段之分子量分佈的起始聚海藻糖組成物；用陽離子添加劑來陽離子處理起始聚海藻糖組成物以用添加劑陽離子替代低原子量陽離子，相比於低原子量陽離子，該陽離子添加劑具有更大分子量之陽離子；基於所需高分子量聚海藻糖區段之分子量分佈使經陽離子處理之聚海藻糖組成物在具有平均分子量截斷之第一切向流過濾過濾器上經歷切向流過濾以產生第一滲餘聚海藻糖組成物；基於陽離子添加劑之分子量分佈使第一滲餘聚海藻糖組成物在具有平均分子量截斷之第二較低MWCO切向流過濾過濾器上經歷切向流過濾以產生第二滲餘聚海藻糖組成物；藉由鹽溶液使第二滲餘聚海藻糖組成物經歷滲濾以產生第三滲餘聚海藻糖組成物；藉由低導電性滲濾溶液使第三聚海藻糖滲餘組成物在同一第二切向流過濾過濾器上經歷滲濾以產生第四滲餘聚海藻糖組成物；及收集包含所需高分子量聚海藻糖之第四滲餘溶液。
視需要，該等方法可包含其他步驟，例如經由能夠濾除大於所需大小之顆粒或部分或其他非所需材料之預過濾器來預過濾起始聚海藻糖組成物。使起始聚海藻糖組成物穿過第一TFF過濾器可包含使起始聚海藻糖組成物穿過TFF過濾器，同時將壓力施加至起始聚海藻糖組成物。使第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物穿過第二TFF過濾器可包含使第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物穿過第二TFF過濾器，同時將壓力施加至第一TFF過濾器之滲餘聚海藻糖組成物。
使第一滲餘聚海藻糖組成物在第二切向流過濾過濾器上經歷切向流過濾及藉由鹽溶液處理第二滲餘聚海藻糖組成物可同時進行。藉由鹽處理第二滲餘聚海藻糖組成物可包含藉由以下處理第二滲餘聚海藻糖組成物：鹼金屬、鹼土金屬、鋁及/或銨之氯化物、溴化物、碘化物、氟化物、硫酸鹽、亞硫酸鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、亞硝酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、矽酸鹽及/或氰化物。藉由鈉鹽處理第一滲餘聚海藻糖組成物可包含藉由氯化鈉處理第一滲餘物。
藉由陽離子添加劑來陽離子處理起始聚海藻糖組成物可包含藉由具有比起始聚海藻糖中之低原子量陽離子更大分子量之陽離子的陽離子添加劑處理起始聚海藻糖。陽離子添加劑可為聚陽離子添加劑。藉由陽離子添加劑來陽離子處理起始聚海藻糖組成物可包含藉由兩性離子添加劑處理起始聚海藻糖，相比於起始聚海藻糖中之低原子量陽離子，該兩性離子添加劑具有更大分子量之兩性離子。
使經陽離子處理之聚海藻糖組成物在第一切向流過濾過濾器上經歷切向流過濾可包含在第一TFF過濾器上再循環經陽離子處理之聚海藻糖組成物。在第一TFF過濾器上再循環經陽離子處理之聚海藻糖組成物可包含在第一TFF過濾器上藉由陽離子添加劑溶液滲濾經陽離子處理之聚海藻糖組成物。在第一TFF過濾器上再循環經陽離子處理之聚海藻糖組成物可包含測定經陽離子處理之聚海藻糖組成物中之聚海藻糖的重量平均分子量。在第一TFF過濾器上再循環經陽離子處理之聚海藻糖組成物可包含在第一TFF過濾器上再循環經陽離子處理之聚海藻糖組成物直至經陽離子處理之聚海藻糖組成物中之經陽離子處理之聚海藻糖的重量平均分子量具有預定所需值為止，進而產生第一滲餘聚海藻糖組成物。
使第一滲餘聚海藻糖組成物在第二較低MWCO切向流過濾過濾器上經歷切向流過濾可包含在第二TFF過濾器上再循環第一滲餘聚海藻糖組成物。在第二TFF過濾器上再循環第一滲餘聚海藻糖組成物可包含在第二TFF過濾器上藉由鹽溶液滲濾第一滲餘聚海藻糖組成物。在第二TFF過濾器上再循環第一滲餘聚海藻糖組成物可包含測定第一滲餘聚海藻糖組成物中之聚海藻糖的重量平均分子量。在第二TFF過濾器上再循環第一滲餘聚海藻糖組成物可包含在第二TFF過濾器上再循環第一滲餘聚海藻糖組成物直至來自第一滲餘聚海藻糖組成物之聚海藻糖之重量平均分子量具有預定所需值為止，進而產生第二滲餘聚海藻糖組成物。
使第二滲餘聚海藻糖組成物經歷鹽溶液滲濾可包含在第二TFF過濾器上再循環第二滲餘聚海藻糖組成物。在第二TFF過濾器上再循環第二滲餘聚海藻糖組成物可包含藉由鹽溶液滲濾第一TFF過濾器之第二滲餘聚海藻糖組成物，該鹽溶液包含以下中之至少一者：鹼金屬、鹼土金屬、鋁及銨之氯化物、溴化物、碘化物、氟化物、硫酸鹽、亞硫酸鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、磷酸鹽及硝酸鹽，例如氯化鈉。使第三滲餘聚海藻糖組成物在第二MWCO切向流過濾過濾器上經歷切向流過濾可包含在第二TFF過濾器上再循環第三滲餘聚海藻糖組成物。在第二TFF過濾器上再循環第三滲餘聚海藻糖組成物可包含藉由低導電性溶液滲濾第二TFF過濾器之第三滲餘聚海藻糖組成物。低導電性溶液可為去離子水。
藉由陽離子添加劑陽離子處理起始聚海藻糖組成物可包含藉由以下中之至少一者處理輸入聚海藻糖：膽鹼、聚乙烯吡咯啶酮、牛磺酸、多元胺、聚葡萄胺糖、組蛋白及膠原蛋白。
圖 3 展示用於基於分子量來分離聚海藻糖之陽離子強化TFF系統（CATS）100′′ 之示意圖。CATS100′′ 採用已在圖 1 及圖 2 方面所論述的大量元件。經由輸入供應管線102 將含有起始聚海藻糖組成物之溶液供應至較高MWCO子系統聚海藻糖容器116 中。可經由預過濾器104 預過濾含起始聚海藻糖之適合溶劑以移除非所需顆粒物質。含有起始聚海藻糖組成物之溶液可（視需要）包含其他非聚海藻糖組分，諸如所需緩衝劑、稀釋劑等，例如以用於其他聚海藻糖處理步驟或下游使用聚海藻糖。預過濾器之標準規格將典型地大於待藉助於CATS100′′ 分離之最大聚合物分子。
可將例如膽鹼、聚乙烯吡咯啶酮、聚苯胺之陽離子添加劑添加至含經預過濾起始聚海藻糖組成物之較高MWCO子系統聚海藻糖容器116 中。較高MWCO子系統泵114 經由較高MWCO TFF過濾器供應管線112 將聚海藻糖泵送至較高MWCO TFF子系統130′ 之較高MWCO TFF過濾器150 。 較高MWCOTFF過濾器150 典型地以匣狀形式供應，其經設計以允許供應至其之輸入流體穿過其滯留側上之其過濾器，同時允許滲透物經由一個輸出管線排出且經處理輸入流體作為滲餘物經由另一輸出管線離開。分子量截斷過濾器之格式可為（但不限於）板框式系統；螺旋捲繞筒系統；中空纖維系統；流動槽系統；及離心過濾器系統。對於此具體實例，較高MWCO TFF過濾器150 之切斷分子量經選擇以分離經陽離子處理之聚海藻糖之高分子量端的所需部分，該經陽離子處理之聚海藻糖係藉由用陽離子添加劑處理經預過濾起始聚海藻糖獲得的。
較高MWCO子系統泵114 在較高MWCO TFF過濾器150 上在其滲餘物與滲透物側之間提供壓力水平。在圖 3 中，較高MWCO TFF過濾器150 之滲餘物經由較高MWCO子系統滲餘物返回管線118 返回至較高MWCO子系統聚海藻糖容器116 中，同時經由較高MWCO子系統滲透物輸出管線119產生滲透物以供較高MWCO TFF子系統130′ 之外部使用或丟棄。當較高MWCO子系統泵114 在較高MWCO TFF過濾器150 上再循環經預過濾起始聚海藻糖組成物及滲餘物時，可經由陽離子添加劑沖洗溶液供應管線135 由陽離子添加劑沖洗溶液容器137 供應陽離子添加劑沖洗溶液例如以備足經由較高MWCO子系統滲透物輸出管線119 上之滲透物損耗的溶液及/或確保預定數量的滲濾體積之輸入起始聚海藻糖及陽離子添加劑沖洗溶液在較高MWCO TFF過濾器150 上循環。藉由控制陽離子添加劑沖洗溶液閥136 ，可在脈衝過程中添加陽離子添加劑沖洗溶液。在其他具體實例中，可以連續模式添加陽離子添加劑沖洗溶液。在其他具體實例中，可一次性添加陽離子添加劑沖洗溶液。若膽鹼已經選定為用於輸入起始聚海藻糖之陽離子添加劑，則所採用陽離子添加劑沖洗溶液為膽鹼溶液，例如氯化膽鹼溶液。可預定較高MWCO TFF過濾器150 上待處理之滲餘物及膽鹼沖洗溶液之滲濾體積數量，四個滲濾體積為大體合適數量。
可在上述處理期間關閉較高至較低MWCO子系統間閥113 ，且可將較高MWCO TFF子系統130′ 之較高MWCO TFF過濾器150 之滲餘物收集至容器（未顯示）中，隨後供應至較低MWCO TFF子系統140′ 之較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 。隨後可經由較高MWCO子系統滲餘物輸出管線111 將收集的滲餘物供應至較低MWCO TFF子系統140′ 之較低MWCO子系統聚海藻糖容器116 。在其他具體實例中，可以容器（未顯示）將收集的滲餘物轉移至較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 中。在系統之又其他具體實例中，較高至較低MWCO子系統間閥113 可保持開啟且可經由較高MWCO子系統滲餘物輸出管線111 將較高MWCO TFF過濾器150 之滲餘物連續不斷地供應至較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 。相較於起始聚海藻糖組成物中之較低分子量分子之分佈，較高MWCO TFF過濾器150 之滲餘物中之較低分子量分子之分佈經減少或經抑制。
較低MWCO TFF子系統140′ 自經陽離子處理之聚海藻糖中移除膽鹼陽離子且復原聚海藻糖之鈉陽離子，進而使經陽離子處理之聚海藻糖返回至約其原始離子組分，但具有不同的所需高分子量分佈。在藉由較低MWCO TFF子系統140′ 處理聚海藻糖溶液期間，可關閉控制較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 之 較低MWCO子系統滲餘物輸出管線108 的較低MWCO子系統輸出閥106′ 。當較低MWCO TFF子系統140′ 處理來自較高MWCO TFF子系統130′ 之較高MWCO TFF過濾器150 的滲餘物時，在較低MWCO子系統滲透物輸出管線129 上產生較低MWCO TFF過濾器160 之滲透物，該滲透物經由該輸出管線採用於其他地方或經丟棄。
當較低MWCO子系統泵114 在較低MWCO TFF過濾器160 上再循環較低MWCO TFF子系統140′ 之滲餘物時，可藉由適合控制鈉鹽溶液控制閥門144 經由鈉鹽溶液供應管線146 由鈉鹽溶液容器142 供應鈉鹽溶液，例如2M NaCl溶液。關於此方法，較低MWCO TFF過濾器160 之截斷分子量經選定以藉由鈉鹽處理來分離由聚海藻糖釋放之陽離子添加劑。當較低MWCO子系統140′ 之過程進行時，由藉由來自NaCl之鈉陽離子置換聚海藻糖上之膽鹼陽離子所產生的自由氯化膽鹼轉移至較低MWCO TFF過濾器160 之滲透物且經由較低MWCO子系統滲透物輸出管線129 離開CATS100′′ 。可使用鈉鹽溶液例如以備足經由較低MWCO子系統滲透物輸出管線129 上之滲透物損耗的溶液及/或確保預定數量的滲濾體積之鈉鹽溶液及來自較高MWCO TFF子系統130′ 之滲餘物在較低MWCO TFF過濾器160 上循環。藉由控制鈉鹽溶液控制閥144 ，可在脈衝過程中添加鈉鹽溶液。在其他具體實例中，可以連續模式添加鈉鹽溶液。當適合數量的滲濾體積之鈉鹽溶液及滲餘物已在較低MWCO TFF過濾器160 上循環時，可關閉鈉鹽溶液控制閥144 且打開低導電性滲濾溶液閥145 。可預定在較低MWCO TFF過濾器160 上處理之鈉鹽溶液之滲濾體積量。較低MWCO子系統泵124 在其保留與滲透側之間的較低MWCO TFF過濾器160 上提供壓力水平。在圖 3 中，較低MWCO TFF過濾器160 之滲餘物經由較低MWCO子系統滲餘物返回管線128 返回至較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 ，同時經由較低MWCO子系統滲透物輸出管線129 產生滲透物以用於較低MWCO TFF子系統140' 外部使用或丟棄。
可打開低導電性滲濾溶液閥145 以允許來自低導電性滲濾溶液容器143 之低導電性滲濾溶液經由低導電性滲濾溶液供應管線147 進入較低MWCO子系統聚海藻糖容器126 ，可在較低MWCO TFF過濾器160 上處理滲餘物及低導電性滲濾溶液以移除在較低MWCO TFF過濾器160 之滲餘物之鈉鹽處理期間產生的自由鈉鹽。低導電性滲濾溶液可為例如去離子水。為此目的，可量測較低MWCO子系統滲透物輸出管線129 上之滲透物之導電性以確保其下降至所需水平，此用於表示鈉鹽已經移除至適合的程度。可預定在較低MWCO TFF過濾器160 上處理之低導電性滲濾溶液之滲濾體積量。當已自較低MWCO TFF過濾器160 之滲餘物中適當移除鈉鹽時，可關閉低導電性滲濾溶液閥145 且打開較低MWCO子系統滲餘物輸出管線108 以在較低MWCO子系統滲餘物輸出管線108 上遞送CATS100′′ 之產物。離心沈澱
可藉由離心沈澱自寬廣分佈起始聚海藻糖中獲得高分子量聚海藻糖。
轉至圖 4 ，顯示用於自起始聚海藻糖組成物中離心沈澱高分子量聚海藻糖的離心沈澱系統600 。系統600 包含離心容器610 ，該離心容器包含分級可滲透障壁620 。可滲透障壁可為基於密度分級，其中密度自離心容器610 之第一底端630 朝著第二頂端640 減小。分級可滲透障壁620 可由不同密度之不同材料構成。分級可滲透障壁620 可由不同濃度之一種溶質溶解於適合溶劑中的溶液構成。適合的溶劑可為例如（但不限於）水及水醇溶液中之一者。溶質（亦稱為「梯度材料」）可為例如（但不限於）以下中之一或多者：丙三醇、山梨糖醇、CsCl、Cs2 SO4 、KBr、泛影酸鹽、Nycodenz® 、碘克沙醇及適合的醣類（包括(聚)蔗糖）。可滲透障壁620 可包含自離心容器610 之第一底端630 至第二頂端640 持續減小的梯度材料濃度之連續梯度。在其他具體實例中，分級可滲透障壁620 可包含複數個不同的密度分級，例如分級可滲透障壁區段620a 、620b 及620c ，如圖 4 中所顯示。經由預過濾器適當預過濾以移除顆粒物質之含有起始聚海藻糖組成物之溶液經安置作為接近於離心容器610 之第二頂端640 且接觸分級可滲透障壁620 之起始聚海藻糖組成物650 。預過濾器可為例如（但不限於）0.22 µm顆粒過濾器。
在操作中，離心容器經歷離心力，該離心力具有自容器之第二頂端640 導引至第一底端630 之力分量，如由圖 4 中之離心力箭頭660 所指出。此可在適合的離心中實現，其示意性地顯示為圖 4 中之離心箱670 且適用於容納離心容器610 。適合的離心機為技術領域中所熟知且將不在本文中進一步論述。離心力可在約1,000重力至約1,000,000重力之間，例如在約10,000重力至約200,000重力之間，在約60,000重力至約500,000重力之間及在約190,000重力至約800,000重力之間。
與圖 4 之系統相關聯，用於自起始聚海藻糖組成物中離心地沈澱高分子量聚海藻糖之方法包含在離心容器610 內建立梯度材料之分級可滲透障壁620 ，該分級可滲透障壁具有與離心容器610 之第一底端630 接觸的第一底部分級可滲透障壁材料端622 ；將包含所需高分子量區段之起始聚海藻糖組成物與接近於離心容器610 之第二頂端640 的分級可滲透障壁620 之對置第二頂部分級可滲透障壁材料端624 接觸安置，使離心容器610 經歷自離心容器610 之第二頂端640 導引至第一底端630 的離心力660 ；及在離心容器610 之第一底端630 處收集經沈澱高分子量聚海藻糖。將起始聚海藻糖組成物650 與最低密度梯度材料接觸安置可包含經由適合的預過濾器來預過濾起始聚海藻糖組成物。
在離心容器610 內建立梯度材料之分級可滲透障壁620 可包含建立複數個梯度材料區段，該等梯度材料區段之密度自離心容器610 之第一底端630 朝著離心容器610 之第二頂端640 持續減小。在離心容器610 內建立梯度材料之分級可滲透障壁620 可包含在離心容器610 內建立醣類分級可滲透障壁620 。在離心容器610 內建立梯度材料之分級可滲透障壁620 可包含在離心容器610 內建立蔗糖分級可滲透障壁620 。在離心容器610 內建立梯度材料之分級可滲透障壁620 可包含在離心容器610 內建立以下中之至少一者之分級可滲透障壁620 ：丙三醇、山梨糖醇、CsCl、Cs2 SO4 、KBr、泛影酸鹽、Nycodenz® 及碘克沙醇。在離心容器610 內建立梯度材料之分級可滲透障壁620 可包含在離心容器610 內建立梯度材料溶解於溶劑中之分級可滲透障壁620 。在離心容器610 內建立梯度材料之分級可滲透障壁620 可包含在離心容器610 內建立梯度材料溶解於水及水-醇溶液中之一者的分級可滲透障壁620 。
圖 5 顯示用於自起始聚海藻糖組成物中離心沈澱高分子量聚海藻糖的離心沈澱系統600′ 之另一具體實例。採用與圖 4 類似的編號，此具體實例使用具有梯度材料之單一障壁區段620c′ 的可滲透障壁620′ ，其中第一底部可滲透障壁材料端622′ 接觸離心容器610 之第一底端630 。在此具體實例中，起始聚海藻糖組成物直接接觸可滲透障壁620' 之對置第二頂部可滲透障壁材料端624′ 。在此具體實例中，方法包括使離心容器610 經歷自離心容器610 之第二頂端640 導引至第一底端630 的離心力660 並且在離心容器610 之第一底端630 處收集沈澱的高分子量聚海藻糖。將起始聚海藻糖組成物650 與最低密度梯度材料接觸安置可包含經由適合的預過濾器來預過濾起始聚海藻糖組成物。
其他具體實例不需採用障壁且具有起始聚海藻糖組成物之容器經離心以使離心容器610 經歷自離心容器610 之第二頂端640 導引至第一底端630 的離心力660 並且在離心容器610 之第一底端630 處收集沈澱的高分子量聚海藻糖。凝膠電泳萃取
可藉由凝膠電泳萃取自寬廣分子量分佈起始聚海藻糖中獲得高分子量聚海藻糖。方法可包含：使包含所需高分子量區段之起始聚海藻糖組成物經歷凝膠電泳，其中起始聚海藻糖組成物藉由施加電位差值操作根據質荷比來位移；基於電位差及所需高分子量聚海藻糖來選擇一部分電泳凝膠；及自選定凝膠部分中萃取所需高分子量聚海藻糖。
使起始聚海藻糖組成物經歷凝膠電泳可包含經由預過濾器來首先預過濾呈溶液狀態之起始聚海藻糖組成物以移除非所需顆粒物質。使起始聚海藻糖組成物經歷凝膠電泳可包含以0.1% w/v與30% w/v之間的濃度製備含起始聚海藻糖組成物之溶液。萃取所需高分子量聚海藻糖可包含自凝膠部分中萃取所需高分子量聚海藻糖，該凝膠部分沿電位差之方向延伸0.1 mm與1000 mm之間的距離。萃取所需高分子量聚海藻糖可包含使用以下中之一者來萃取凝膠部分：水、甲醇、乙醇、異丙醇、水/醇混合物及鹽溶液。
使起始聚海藻糖組成物經歷凝膠電泳可包含位移呈溶液狀態之起始聚海藻糖組成物持續預定量的時間。使起始聚海藻糖組成物在電泳凝膠上經歷凝膠電泳可包含在電泳凝膠上位移起始聚海藻糖組成物同時凝膠經浸沒於緩衝溶液中。使起始聚海藻糖組成物在電泳凝膠上經歷凝膠電泳可包含利用凝膠材料及緩衝溶液來製備凝膠。利用凝膠材料及緩衝溶液來製備凝膠可包含利用緩衝液以及瓊脂糖、聚丙烯醯胺、聚二甲基丙烯醯胺及澱粉中之一者來製備凝膠。利用凝膠材料及緩衝溶液來製備凝膠可包含利用參乙酸鹽EDTA、參硼酸鹽EDTA及磷酸鹽緩衝鹽水中之一者以及凝膠材料來製備凝膠。在施加電位差之操作下轉移起始聚海藻糖組成物可包含在施加約1伏特/公分與約500 伏特/公分之間（例如約5伏特/公分至約50伏特/公分之間、約10伏特/公分至約200伏特/公分之間及約50伏特/公分至約300伏特/公分之間）的電場強度之操作下位移起始聚海藻糖組成物。
圖 6 中顯示用於自起始聚海藻糖組成物中獲得所需高分子量聚海藻糖之電泳萃取系統900 。電泳萃取系統900 包含電泳腔室910 ，該電泳腔室顯示為透明的且含有電泳凝膠916 及電泳緩衝液918 。電泳凝膠916 材料可為例如（但不限於）瓊脂糖、聚丙烯醯胺及澱粉中之一者。電泳緩衝也918 可為例如（但不限於）參乙酸鹽EDTA、參硼酸鹽EDTA及磷酸鹽緩衝鹽水中之一者。鄰近且平行於電泳凝膠916 之第一側的係在電泳凝膠916內形成槽（well）912 ，其中置放呈溶液狀態之起始聚海藻糖組成物。
直流電電源920 藉助於陰極922 及陽極924 將電位差施加在電泳腔室910 中之電泳緩衝液918 兩端。陰極922 與陽極924 之間的電位差誘發起始聚海藻糖組成物中之聚海藻糖陰離子沿凝膠遷移遠離陰極922 且沿由遷移方向箭頭926 給定之方向遷移朝向陽極924 ，使得若電位差保持給定時段，則起始聚海藻糖組成物之不同分子量分子將已自槽912 朝向陽極924 位移不同距離。藉由聚海藻糖分子之質荷比來測定位移速率。較低分子量聚海藻糖將更快速位移且在電位差之操作下一固定時間段後，將比較高分子量聚海藻糖位移更遠。理論位移距離914 指出不同分子量聚海藻糖分子之不同理論位移距離，在任何給予時間段，較低分子量聚海藻糖分子位移距陰極922 更遠。
為電泳後自起始聚海藻糖組成物獲得所需高分子量聚海藻糖，選定電泳凝膠916 之對應部分且自凝膠之彼部分中萃取高分子量聚海藻糖。進行上述操作之一個非限制性方法為將電泳凝膠916 之該部分浸沒於萃取溶液中並攪拌凝膠溶液混合物。在一個具體實例中，可藉由振盪實現攪拌。在另一具體實例中，可藉由高剪切混合實現攪拌。膜透析
可藉由膜透析自寬廣分子量分佈起始聚海藻糖中獲得高分子量聚海藻糖。與透析膜之典型識別相符，給定透析膜之標稱MWCO值將選擇性地允許傳遞含有分子之溶液，該等分子之分子量通常小於不會穿過/滲透透析膜之分子的分子量。透析膜之分子量截斷值對於任何給定聚合物或標稱截斷值典型地不為絕對的：給定透析膜將通過或保留高於及低於標稱分子量截斷之一些分子。用於特定聚合物之標稱MWCO透析膜的實際截斷/選擇性值及影響可針對特定聚合物常規地判定。
大量因素可影響透析膜之滲透行為。此等因素可取決於透析膜自身或取決於目標聚合物之屬性，例如目標聚合物之摺疊行為及摺疊結構可影響目標聚合物在穿過/不穿過透析膜之MWCO障壁中之行為。關於透析膜自身，例如製造方法可在特定透析膜內產生各種孔大小，其變化可包括大於及小於標稱MWCO截斷之孔兩者。因此，具有標稱分子量截斷值之透析膜將實質上允許傳遞低於標稱分子量截斷值之分子，但亦可通過/保留低於及/或高於該值之一些分子。
方法可包含：經由分子量截斷大於100kDa之膜使包含所需高分子量區段之起始聚海藻糖組成物經歷透析液透析，以產生包含高分子量聚海藻糖之經透析聚海藻糖組成物；及收集包含高分子量聚海藻糖之經透析聚海藻糖組成物。
轉至圖 7 ，顯示用於自起始聚海藻糖組成物中獲得高分子量聚海藻糖之膜透析系統800 。系統800包含具有透析膜825 之透析透析單元820 ，該透析膜允許低分子量聚海藻糖分子穿過其。含起始聚海藻糖組成物之適合溶劑進入膜透析系統800中且經由輸入供應管線801 及經由預過濾器802 傳遞至聚海藻糖容器810 中。預過濾器可為（例如）移除非所需顆粒物質之0.22 µm預過濾器。
經預過濾起始聚海藻糖組成物藉助於透析系統泵814 之 透析系統供應管線812 及經透析流體返回管線816 在透析膜825 之第一側上循環通過透析單元820 。透析液流體藉助於透析液泵834 之透析液供應管線832 及透析液流體返回管線836 在透析膜825 之第二側上自透析液容器830 循環通過透析單元820 。透析液流體經選定以自由地流動通過透析膜825 。適合的透析液流體包括（但不限於）去離子水及以下溶液：氯化鈉、磷酸鹽緩衝液、磷酸鈉、磷酸鹽緩衝鹽水、tris-HCl緩衝液、檸檬酸鈉、檸檬酸鹽緩衝液、抗壞血酸鈉、抗壞血酸、亞硫酸鈉及乙二胺-四乙酸（EDTA）。適合的透析膜具有經選定以優先終止傳遞分子量大於200 kDa之聚海藻糖分子的孔徑。其他適合的透析膜具有優先阻止傳遞分子量大於300 kDa、500 kDa及1000 kDa之分子的孔徑。此等膜中之每一者可用於自起始聚海藻糖組成物中獲得對應高分子量聚海藻糖，該起始聚海藻糖組成物包含分子量小於透析膜孔徑或相對於寬廣起始分子量分佈之截斷分子量的更少聚海藻糖分子。透析膜可為（但不限於）纖維素酯及再生纖維素膜中之一者。含有起始聚海藻糖組成物之溶液之濃度可在0.1% w/v與30% w/v之間。
當聚海藻糖分子穿過透析膜825 時，其濃度積聚於透析液流體中且此開始抵抗透析過程。在所需時間點，可打開透析液供應閥845 以允許新製透析液流體經由透析液供應管線842 自透析液供應容器840 進入透析液容器830 中。
在適合的透析時間段後，可打開經透析流體輸出閥815 以允許經由經透析流體輸出管線818 自透析系統800中抽吸經透析聚海藻糖組成物。可打開透析液流體輸出閥835 以允許在透析液流體輸出管線838 上抽吸含有低分子量聚海藻糖分子之透析流體。選擇性沈澱
可藉由選擇性沈澱自寬廣分子量分佈起始聚海藻糖中獲得高分子量聚海藻糖。方法可包含：提供呈起始聚海藻糖於水中之溶液形式之包含所需高分子量區段的起始聚海藻糖組成物；向含有起始聚海藻糖組成物之溶液中添加聚海藻糖沈澱劑以獲得過飽和聚海藻糖溶劑混合物；藉由向過飽和聚海藻糖溶劑混合物中添加離子沈澱觸發化合物來觸發一部分寬廣分子量分佈起始聚海藻糖沈澱以利用起始聚海藻糖組成物及含有殘留聚海藻糖之溶液產生經沈澱高分子量聚海藻糖；及自混合物中萃取經沈澱高分子量聚海藻糖。適合的沈澱劑包括相對極性小於0.765之溶劑，例如乙醇、異丙醇、丙醇、丙酮、甲醇、二甲亞碸、二甲基甲醯胺、乙二醇、四氫呋喃、乙腈、乙二醇二甲醚、二乙二醇二甲醚及二噁烷，聚海藻糖之溶解性隨著沈澱流體之極性減小而減小。可根據吸收光譜之溶劑位移量測來標準化相對極性值。參見例如Christian Reichardt, Solvents and Solvent Effects in Organic Chemistry, Wiley-VCH Publishers,第3版, 2003。適合的離子沈澱觸發化合物包括（但不限於）單價、二價及三價陽離子之鹽及鹼，例如鹼金屬、鹼土金屬、鋁及/或銨之氯化物、溴化物、碘化物、氟化物、硫酸鹽、亞硫酸鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、亞硝酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、矽酸鹽、氫氧化物、氧化物及/或氰化物。在一些具體實例中，離子沈澱觸發化合物包含以下中之至少一者：NaCl、KCl、NaOH、MgCl2 及CaCl2 。起始聚海藻糖組成物於水中之適合濃度在0.01% w/v與30% w/v之間。適合上述方法之特定聚海藻糖包括（但不限於）褐藻糖膠。
方法可進一步包含將起始聚海藻糖組成物去鹽，隨後添加聚海藻糖沈澱劑。去鹽可包含在分子量截斷過濾器上滲濾起始聚海藻糖。滲濾可包含藉由蒸餾水對起始聚海藻糖組成物進行滲濾。滲濾可包含在分子量截斷小於所需高分子量聚海藻糖中之所需分子量的分子量截斷過濾器上滲濾起始聚海藻糖組成物，該分子量截斷為例如5 kDa、10 kDa、30 kDa、50 kDa、70 kDa、100 kDa、200 kDa或300 kDa分子量截斷。方法可進一步包含經由適合的預過濾器來預過濾含有起始聚海藻糖組成物之溶液以移除非所需顆粒物質。
自混合物中萃取經沈澱高分子量聚海藻糖可包含以下中之至少一者：離心、沈降、過濾及流體動力流動分離。陰離子 吸附
可藉由陰離子吸附自寬廣分子量分佈起始聚海藻糖中獲得高分子量聚海藻糖。該等方法可包含：提供溶解於起始溶液中之具有寬廣起始分子量分佈（包含所需高分子量區段）之起始聚海藻糖組成物；基於起始聚海藻糖分子量分佈內之所需分離分子量而使含起始聚海藻糖組成物之起始溶液與具有孔徑之離子交換大孔樹脂經歷離子交換，以將起始聚海藻糖組成物轉換成第一經離子交換處理之聚海藻糖組成物；收集包含所需高分子量聚海藻糖之第一經離子交換處理的聚海藻糖組成物；在與起始聚海藻糖組成物離子交換後，使大孔樹脂經歷鹽溶液以自樹脂中萃取聚海藻糖分子至鹽溶液中，產生富含低分子量聚海藻糖之鹽溶液；將富含低分子量聚海藻糖之鹽溶液去鹽以形成第二經離子交換處理之聚海藻糖組成物；及收集包含低分子量聚海藻糖之第二經離子交換處理的聚海藻糖組成物。
方法可進一步包含將起始聚海藻糖組成物去鹽，隨後經歷離子交換。去鹽可包含在分子量截斷TFF過濾器上對起始聚海藻糖進行滲濾。滲濾可包含在分子量截斷小於高分子量聚海藻糖中之所需分子量的分子量截斷TFF過濾器上對起始聚海藻糖組成物進行滲濾，該分子量截斷TFF過濾器為例如5 kDa、10 kDa、30 kDa、50 kDa、70 kDa、100 kDa及/或300 kDa分子量截斷TFF過濾器。
在另一具體實例中，一種利用起始聚海藻糖組成物產生所需高分子量聚海藻糖組成物之方法可包含：提供溶解於起始溶液中之具有寬廣起始分子量分佈（包含所需高分子量區段）之起始聚海藻糖組成物；基於起始聚海藻糖分子量分佈中之所需分離分子量而使經溶解起始聚海藻糖組成物與具有孔徑之離子交換大孔樹脂經歷離子交換以將起始聚海藻糖組成物轉換成第一經離子交換處理的聚海藻糖組成物；及收集包含所需高分子量聚海藻糖之第一經離子交換處理的聚海藻糖組成物。其他具體實例可進一步包含將起始聚海藻糖組成物去鹽，隨後經歷離子交換。去鹽可包含在分子量截斷TFF過濾器上對起始聚海藻糖進行滲濾。滲濾可包含在分子量截斷小於所需高分子量聚海藻糖之分子量分佈中之所需分子量的分子量截斷TFF過濾器上對起始聚海藻糖組成物進行滲濾，該分子量截斷TFF過濾器為例如5 kDa、10 kDa、30 kDa、50 kDa、70 kDa、100 kDa及/或300 kDa分子量截斷TFF過濾器。
使大孔樹脂經歷鹽溶液可包含使大孔樹脂經歷鈉鹽溶液，例如包含以下中之至少一者的溶液：鹼金屬、鹼土金屬、鋁及/或銨之氯化物、溴化物、碘化物、氟化物、硫酸鹽、亞硫酸鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、亞硝酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、矽酸鹽及/或氰化物。使大孔樹脂經歷鈉鹽溶液可包含使大孔樹脂經歷氯化鈉溶液。將富含低分子量聚海藻糖之鹽溶液去鹽可包含在分子量截斷TFF過濾器上對富含低分子量聚海藻糖之鹽溶液進行滲濾。滲濾可包含在分子量截斷小於富含所需低分子量聚海藻糖之鹽溶液之分子量分佈中之所需分子量的分子量截斷TFF過濾器上對富含低分子量聚海藻糖之鹽溶液進行滲濾，該分子量截斷TFF過濾器為例如5 kDa、10 kDa、30 kDa、50 kDa、70 kDa及/或100 kDa分子量截斷TFF過濾器。
使經溶解起始聚海藻糖組成物與離子交換大孔樹脂經歷離子交換可包含將起始聚海藻糖:樹脂之比率調節至預定質量比。預定質量比可在約1:100聚海藻糖:樹脂與約10:1聚海藻糖:樹脂、5:1聚海藻糖:樹脂或2:1聚海藻糖:樹脂之間。在其他具體實例中，預定質量比可在約1:100聚海藻糖:樹脂與約1:1聚海藻糖:樹脂之間。在又其他具體實例中，預定質量比可在約1:100聚海藻糖:樹脂與約1:2聚海藻糖:樹脂之間。在又其他具體實例中，預定質量比可在約1:50聚海藻糖:樹脂與約1:5聚海藻糖:樹脂之間。在又其他具體實例中，預定質量比可在約1:20聚海藻糖:樹脂與約1:1聚海藻糖:樹脂之間，例如約1:2聚海藻糖:樹脂、1:4聚海藻糖:樹脂、1:6聚海藻糖:樹脂、1:8聚海藻糖:樹脂及1:10聚海藻糖:樹脂。
使經溶解起始聚海藻糖組成物與離子交換大孔樹脂經歷離子交換可包含使經溶解起始聚海藻糖組成物與樹脂經歷離子交換持續預定時間段。預定時間段可在零與300小時之間。在其他具體實例中，預定時間段可在零與100小時之間。在其他具體實例中，預定時間段可在5分鐘與30小時之間，例如在約8小時與約24小時之間。在又其他具體實例中，預定時間段可在1與10小時之間，例如在約4小時與約10小時之間。在又其他具體實例中，預定時間段可在約2與約5小時之間。
使經溶解起始聚海藻糖組成物與離子交換大孔樹脂經歷離子交換可包含使經溶解起始聚海藻糖組成物與陰離子交換大孔樹脂經歷離子交換。使經溶解起始聚海藻糖組成物與陰離子交換大孔樹脂經歷離子交換可包含使經溶解起始聚海藻糖組成物與強鹼陰離子交換大孔樹脂經歷離子交換。使經溶解起始聚海藻糖組成物與陰離子交換大孔樹脂經歷離子交換可包含使經溶解起始聚海藻糖組成物與弱鹼陰離子交換大孔樹脂經歷離子交換。「強鹼」及「弱鹼」係根據其一般含義使用，例如「強鹼」為在任何典型離子交換情形下不會失去電荷之樹脂，例如四級胺官能化樹脂，且弱鹼為在高pH情況下確實失去電荷之樹脂，例如一級、二級或三級胺官能化樹脂。使經溶解起始聚海藻糖組成物經歷離子交換可包含藉由混合電荷大孔樹脂使經溶解起始聚海藻糖組成物經歷離子交換。
使經溶解起始聚海藻糖組成物與陰離子交換大孔樹脂經歷離子交換可包含使經溶解起始聚海藻糖組成物與包含一級、二級、三級及四級胺基團中之至少一者之大孔樹脂經歷離子交換。一級胺基團可為NH2 基團。二級胺基團可為例如（但不限於）苯甲胺基團及二甲基胺基團中之至少一者。三級胺基團可為例如（但不限於）二乙胺基乙基及二甲胺基乙基中之至少一者。四級胺基團可為例如（但不限於）三甲基銨基團及三乙基銨基團。樹脂可包含（但不限於）以下中之一或多者：苯乙烯、瓊脂糖、聚葡萄糖、丙烯酸酯、甲基丙烯酸脂、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸丁酯、二乙烯基苯、纖維素、二氧化矽及陶瓷。
使經溶解起始聚海藻糖組成物與離子交換大孔樹脂經歷離子交換可包含使經溶解起始聚海藻糖組成物與具有以下孔徑之離子交換樹脂經歷離子交換：在5 nm與1000 nm之間，例如在5 nm與100 nm之間、在10 nm或15 nm與50 nm之間、在20 nm與80 nm之間、在5 nm與30 nm之間、在100 nm與500 nm之間、在300 nm與900 nm之間或在200 nm與400 nm之間。使經溶解起始聚海藻糖組成物與離子交換大孔樹脂經歷離子交換可包含使經溶解起始聚海藻糖組成物與具有以下排出限制之離子交換樹脂經歷離子交換：在50 kDa與50,000 kDa之間，例如在50 kDa與10,000 kDa之間、在100 kDa與5,000 kDa之間、在10,000 kDa與40,000 kDa之間、在1,000 kDa與9,000 kDa之間、在2,000 kDa與7,000 kDa之間或在500 kDa與2,000 kDa之間。排出限制可基於針對球形蛋白質之排出限制。
圖 8 顯示用於基於分子量來分段聚海藻糖之例示性離子吸附系統300 之示意圖。經由輸入供應管線301 及預過濾器306 將含有起始聚海藻糖組成物之溶液供應至TFF子系統聚海藻糖容器176 中。在去鹽過程中，切向流過濾（TFF）子系統泵174 經由TFF子系統過濾器供應管線172 將起始聚海藻糖組成物泵送至TFF子系統170 之TFF過濾器171 中。TFF過濾器171 之格式可為（但不限於）以下中之任一者：板框式系統；螺旋捲繞筒系統；中空纖維系統；流動槽系統；及離心過濾器系統。
在圖 8 之系統中，TFF子系統170 充當去鹽子系統。TFF過濾器171 典型地供應呈匣狀，其經設計以允許供應至其之輸入流體在其滯留側上穿過其過濾器，同時允許滲透物經由一個輸出管線排出且經處理輸入流體經由另一輸出管線作為滲餘物離開。對於本發明方法，TFF過濾器171 之切斷分子量經選定以允許鹽組分滲透於起始聚海藻糖溶液中同時使聚海藻糖保留在滲餘物中以用於離子交換子系統180 中之後續離子吸附處理。TFF子系統泵174 維持其保留與滲透側之間的TFF過濾器171 上的壓力水平。在圖 8 中，TFF過濾器171 之滲餘物經由TFF子系統滲餘物管線178 返回至TFF子系統聚海藻糖容器176 中，同時經由TFF子系統滲透物輸出管線179 產生含有非所需的非聚海藻糖鹽組分之滲透物以供TFF子系統170 外部使用或丟棄。
當TFF子系統泵174 在TFF過濾器171 上再循環起始聚海藻糖組成物及滲餘物時，可經由TFF子系統溶劑供應管線175 供應來自TFF子系統溶劑容器177 之水或低導電性沖洗溶液。沖洗溶液用於備足經由TFF子系統滲透物輸出管線179上之滲透物損耗的滲餘溶液及/或確保預定數量的滲濾體積之輸入起始聚海藻糖及溶劑在TFF過濾器171上循環。藉由控制TFF子系統溶劑供應閥173 ，可在脈衝過程中添加沖洗溶液。在其他具體實例中，可以連續模式添加溶劑。添加溶劑之連續模式具有效率益處。可預定在TFF過濾器171 上處理之溶劑之滲濾體積量。在一些具體實例中，溶劑可為去離子水。
可在上述處理期間關閉子系統間閥302 ，且TFF子系統170 之TFF過濾器171 之滲餘物經收集至容器（未顯示）中，隨後供應至離子交換子系統180 之離子交換子系統聚海藻糖容器186 中。隨後可經由TFF子系統滲餘物輸出管線303 將收集的滲餘物供應至離子交換子系統180 之離子交換子系統聚海藻糖容器186 中。在其他具體實例中，可以容器（未顯示）將收集的滲餘物轉移至離子交換子系統聚海藻糖容器186 中。在系統之其他具體實例中，子系統間閥302 可保持開啟且可經由TFF子系統滲餘物輸出管線303 將TFF過濾器171 之滲餘物連續地供應至離子交換子系統聚海藻糖容器186 中。供應至離子交換子系統180 之滲餘物可預期具有較低鹽含量殘留聚海藻糖且為經去鹽聚海藻糖組成物，所述鹽含量殘留可能干擾離子交換子系統180 中之聚海藻糖處理。
離子交換子系統180 之離子交換容器181 含有一定體積之大孔離子交換樹脂189 。在一些具體實例中，大孔離子交換樹脂為陰離子交換樹脂。在一些具體實例中，大孔離子交換樹脂為混合電荷樹脂。大孔離子交換樹脂189 之孔徑經選定以自含有寬廣分子量分佈起始聚海藻糖之溶液中優先吸附低於預定值之分子量之聚海藻糖分子，優先將具有比預定值更大的分子量之聚海藻糖分子留在溶液中。此類別之樹脂之一個形式係基於與二乙烯基苯交聯之苯乙烯之大體上球形顆粒且具有含四級銨基團之微孔。在一些具體實例中，孔徑可在10 nm與100 nm之間。基於聚海藻糖分子的流體動力大小，聚海藻糖分子可或可不優先被吸附至樹脂之微孔中。
在離子交換容器181 中處理來自TFF子系統170 之經去鹽聚海藻糖組成物期間，可關閉離子交換子系統輸出閥304 ，該離子交換子系統輸出閥控制離子交換子系統聚海藻糖容器186 之離子交換子系統輸出管線305 。離子交換子系統鹽溶液供應閥183b 及離子交換子系統鹽溶液返回閥183c 可類似地關閉而離子交換子系統聚海藻糖返回閥183a 打開。當離子交換子系統聚海藻糖泵184a 經由離子交換子系統聚海藻糖供應管線182a 及離子交換子系統聚海藻糖泵184a 使含有經脫鹽聚海藻糖組成物之溶液再循環通過離子交換容器181 時，大孔離子交換樹脂189 吸附較低分子量聚海藻糖分子，進而使得離子交換子系統聚海藻糖返回管線188a 中之溶液含有所需高分子量聚海藻糖。在流動通過離子交換容器181 後，含有所需高分子量聚海藻糖之溶液經由離子交換子系統聚海藻糖返回管線188a 返回至離子交換子系統聚海藻糖容器186 中。
可量測或監測離子交換子系統聚海藻糖容器186 中之聚海藻糖的平均分子量。當離子交換子系統聚海藻糖容器186 中之溶液已循環持續適合時間段時，或當溶液中之聚海藻糖已獲得預定所需平均分子量值時，可打開離子交換子系統輸出閥304 以產生第一經離子交換處理之聚海藻糖組成物作為離子吸附系統300之經由離子交換子系統輸出管線305 的第一輸出產物。此第一輸出產物包含（例如）具有分子量分佈之高分子量聚海藻糖，其中低分子量端之輸入起始聚海藻糖寬廣分子量分佈之量已經抑制或減少，使得所得分子量分佈朝向供應至輸入供應管線301 上之離子吸附系統300 的輸入起始聚海藻糖組成物之分子量分佈之較高端位移。
可再次關閉離子交換子系統輸出閥304 ，如可打開離子交換子系統聚海藻糖返回閥183a 及離子交換子系統鹽溶液供應閥183b 及離子交換子系統鹽溶液返回閥183c 以允許來自離子交換子系統鹽溶液容器187 之鹽溶液經由離子交換子系統鹽溶液供應管線182b 進入離子交換子系統180 中之循環。離子交換子系統鹽溶液泵184b 現經由離子交換子系統鹽溶液供應管線182b 使鹽溶液循環通過離子交換容器181 中之大孔離子交換樹脂189 且經由離子交換子系統鹽溶液返回管線188b 及離子交換子系統鹽溶液返回閥183c 返回至離子交換子系統鹽溶液容器187 中。在此過程中，鹽取代大孔離子交換樹脂之微孔內吸附之聚海藻糖且將自由的聚海藻糖釋放至離子交換子系統180 中之循環中的鹽溶液中。鹽溶液可循環持續預定時間。在其他具體實例中，可量測離子交換子系統180 中之鹽溶液中之聚海藻糖的平均分子量且當鹽溶液中之聚海藻糖的平均分子量達到預定所需值時終止鹽溶液之再循環。
在一些具體實例中，預定量之低離子含量溶液可用於洗滌樹脂，隨後引發來自離子交換子系統鹽溶液容器187 之鹽溶液之循環。在一些具體實例中，此低離子含量溶液可為去離子水。
此時，可再次打開離子交換子系統輸出閥304 ，且離子交換子系統180 之泵及閥經適當操作以允許自離子交換子系統輸出管線305 抽吸之離子吸附系統300 之第二產物呈富含低分子量聚海藻糖之鹽溶液形式。可例如（但不限於）在適合的離心過濾器或切向流過濾過濾器上之離心機中過濾第二產物，以將低分子量聚海藻糖與非所需鹽分離。此產生第二輸出低分子量聚海藻糖。相比於上文所述的第一輸出高分子量聚海藻糖，此第二輸出低分子量聚海藻糖具有一聚海藻糖分子量分佈，其中高分子量端之一部分輸入起始聚海藻糖寬廣分子量分佈已經抑制或減少，使得所得分子量分佈朝向供應至輸入供應管線301 上之離子吸附系統300 之輸入起始聚海藻糖組成物之分子量分佈之較低端位移。
鑒於起始聚海藻糖分子量分佈之寬度及複雜度及聚合物行為及離子交換樹脂之變化性，兩個輸出聚海藻糖分子量分佈可不達到考慮大孔離子交換樹脂之孔徑而預期的峰值。然而，若發生彼情況，則兩個輸出聚海藻糖分子量分佈將仍關於彼此位移，進而表示將起始聚海藻糖組成物分段成對應於第一產物之相對較高分子量聚海藻糖及對應於第二產物之相對較低分子量聚海藻糖。第一產物對應於不優先被樹脂吸附之較大且較重的聚海藻糖分子，而第二產物相反地對應於優先被樹脂吸附且比未被吸附之分子平均更小及更輕之聚海藻糖分子。製備型凝膠滲透層析法
可藉由製備型凝膠滲透層析法自寬廣分子量分佈起始聚海藻糖中獲得高分子量聚海藻糖。方法可包含：提供封裝於管柱格式中之指定用於含聚合物之水溶液之凝膠滲透層析法（GPC）之凝膠介質；提供包含所需高分子量區段之起始聚海藻糖組成物，其溶解於適用於凝膠介質上之凝膠滲透層析法的水溶劑中；使含有起始聚海藻糖組成物之溶液經歷製備型凝膠滲透層析法，其中聚海藻糖根據管柱中之整個凝膠介質中之分子量以預定流動速率在管柱之第一輸入端與管柱之第二輸出端之間位移；基於起始聚海藻糖組成物之所需分段以預定等分試樣形式自管柱之第二輸出端收集洗提液，各等分試樣包含多段聚海藻糖組成物；基於起始聚海藻糖組成物之所需分段合併所需等分試樣以獲得包含所需高分子量聚海藻糖之合併的GPC等分試樣組成物。
使含有起始聚海藻糖組成物之溶液經歷製備型凝膠滲透層析法可包含經由預過濾器來首先預過濾呈溶液狀態之起始聚海藻糖組成物以移除非所需顆粒物質。使含有起始聚海藻糖組成物之溶液經歷製備型凝膠滲透層析法可包含以0.1% w/v與20% w/v之間的濃度製備含起始聚海藻糖之溶液。使含有起始聚海藻糖組成物之溶液經歷製備型凝膠滲透層析法可包含使用蠕動泵、無梯度泵（isocratic pump）、二元泵、四元泵及梯度泵中之至少一者來實現在含有凝膠介質之管柱兩端之位移。使含有起始聚海藻糖組成物之溶液經歷製備型凝膠滲透層析法可包含使溶液以預定流動速率在含有凝膠介質之管柱兩端位移，該預定流動速率在0.0005毫升/分鐘/凝膠介質表面積（mL/min/cm2 ）至5 mL/min/cm2 之間、在0.005 mL/min/cm2 至0.5 mL/min/cm2 之間、在0.01 mL/min/cm2 至0.25 mL/min/cm2 之間、0.05 mL/min/cm2 、0.1 mL/min/cm2 、0.15 mL/min/cm2 及0.2 mL/min/cm2 。
自管柱之第二輸出端收集洗提液可包含收集在約0.1 mL與1000 mL之間、在約1 mL與100 mL之間、在約5 mL與50 mL之間、約10 mL、約20 mL、約30 mL及約40 mL的洗提液等分試樣。自管柱之第二輸出端中收集等分試樣可包含藉由分析型GPC量測等分試樣之分子量分佈。可同時進行藉由分析型GPC量測等分試樣以及收集管柱洗提液。
合併所需等分試樣可涉及藉由分析型GPC量測等分試樣之分子量分佈及僅合併具有所需分子量分佈之等分試樣。可同時進行合併所需等分試樣以及收集管柱洗提液。
所使用凝膠介質可包含以下中之至少一者：聚羥甲基丙烯酸酯、磺化苯乙烯-二乙烯基苯、二氧化矽、親水性鍵結相或聚合物、聚苯乙烯、二乙烯基苯、甲基丙烯酸脂、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸丁酯、纖維素、陶瓷、瓊脂糖及聚葡萄糖。所使用凝膠介質可具有直徑為以下中之至少一者的微孔：約3 nm、5 nm、10 nm、20 nm、50 nm、100 nm、200 nm、500 nm、1,000 nm、2,000 nm、3,000 nm、5,000 nm及10,000 nm。所使用凝膠介質可具有排出限制為以下中之至少一者的微孔：約100 Da、100 kDa、1,000 kDa、5,000 kDa、10,000 kDa、30,000 kDa、50,000 kDa及100,000 kDa。排出限制可基於針對球形蛋白質或多醣（例如聚葡萄糖及/或普魯蘭（pullulan））之排出限制。
用於溶解起始聚海藻糖組成物之溶劑可包含以下中之至少一者：水、硝酸鈉、硝酸鋰、磷酸一鈉、磷酸二鈉、磷酸三鈉、氯化鋰、溴化鋰、碘化鋰、氯化鈉、溴化鈉、碘化鈉、氯化鉀、溴化鉀、碘化鉀、氫氧化鈉、氫氧化鋰、氫氧化鉀、硫酸鈉、亞硫酸鈉、甲醇、乙醇及乙腈。化學結構性修改
本文中所論述的方法、系統等可包含對聚海藻糖，尤其含聚海藻糖之聚海藻糖組成物進行化學結構性修改。化學結構性修改可涉及自聚海藻糖中移除官能基，例如自聚海藻糖結構中移除O-乙醯基、N-乙醯基、甲氧基、羥基、羧酸及/或硫酸鹽官能基。化學結構性修改可涉及使用多種化學試劑，例如酸、鹼、清潔劑及/或氧化劑。疾病及病狀 纖維性黏連
纖維性黏連為在身體之兩個部位之間形成的一種疤痕類型，通常在手術後（手術黏連）。纖維性黏連可導致嚴重問題。舉例而言，涉及女性生殖器官（卵巢、輸卵管）之纖維性黏連可導致不育、性交困難及嚴重骨盆疼痛。腸中出現的纖維性黏連可導致腸堵塞（obstruction/blockage），且纖維性黏連亦可形成於其他位置中，諸如心臟周圍、脊椎及手部中。除手術之外，纖維性黏連可例如由子宮內膜異位、感染、化療、輻射、外傷及癌症造成。
本文檔中論述各種纖維性黏連。諸如手術黏連、手術後黏連（post-surgical adhesions/postoperative adhesions）、因骨盆發炎性疾病所致之黏連、因機械性損傷所致之黏連、因輻射所致之黏連、因輻射治療所致之黏連、因外傷所致之黏連及因外來材料存在所致之黏連的術語皆係指因類似機制所致之組織彼此黏連且皆包括於術語纖維性黏連中。
纖維性黏連形成為複雜的過程，其中體內正常分離之組織生長至彼此中。手術黏連（亦稱為手術後黏連）由組織對外傷之另外正常的創傷癒合反應發展而來且已報導在超過三分之二之所有腹部手術患者中出現（Ellis, H., Surg. Gynecol. Obstet. 133: 497 (1971)）。此等纖維性黏連之後果為變化的且取決於所涉及手術部位或其他部位，諸如疾病部位。問題可包括慢性疼痛、腸堵塞及甚至心肌手術後之增大死亡風險（diZerega, G. S., Prog. Clin. Biol. Res. 381: 1-18 (1993)；diZerega, G. S., Fertil. Steril. 61:219-235 (1994)；Dobell, A. R., Jain, A. K., Ann. Thorac. Surg. 37: 273-278 (1984)）。在生殖年齡之女性中，涉及子宮、輸卵管或卵巢之纖維性黏連經估計佔大約20%之全部不育情況（Holtz, G., Fertil. Steril. 41: 497-507 (1984)；Weibel, M.A.及Majno, G. Am. J. Surg. 126: 345-353 (1973)）。
纖維性黏連形成過程最初涉及建立纖維蛋白框架及正常組織修復。正常修復過程允許沿間皮修復之纖維蛋白溶解。然而，在纖維性黏連形成中，纖維蛋白基質隨著成纖維細胞增殖成網路而成熟且發生血管新生，使得在約3至5天內建立經組織化纖維性黏連（Buckman, R. F.等人，J. Surg. Res. 21: 67-76 (1976)；Raferty, A. T., J. Anat. 129: 659-664 (1979)）。發炎性過程包括創傷性組織中之嗜中性白血球活化、纖維蛋白沈積及鄰接組織結合、巨噬細胞侵入、成纖維細胞增殖至區域中、膠原蛋白沈積、血管新生及建立永久纖維性黏連組織。
已作出各種嘗試以防止手術黏連。此等涉及旨在影響伴隨手術創傷之生物化學及細胞事件的藥理學方法以及用於分離受影響組織之障壁方法。舉例而言，使用腹膜灌洗、肝素化溶液、促凝血劑、修改手術技術，諸如使用微觀或腹腔鏡手術技術、消除來自手術用手套之滑石、使用更小縫合線及使用旨在最小化漿膜表面之並置的物理障壁障壁（膜、凝膠或溶液）皆已嘗試。當前，預防性療法亦包括預防纖維蛋白沈積、減少發炎（類固醇及非類固醇抗炎藥）及移除纖維蛋白沈積物。
防止形成手術後黏連之干預嘗試已包括使用水浮選（hydroflotation）技術或障壁裝置。水浮選涉及將較大體積之聚合物溶液，諸如聚葡萄糖（黏連研究小組（Adhesion Study Group）, Fertil. Steril. 40:612-619 (1983)）或羧甲基纖維素（Elkins, T. E.等人，Fertil. Steril. 41:926928 (1984)）灌注至手術間隙中以試圖保持器官分開。由經氧化再生纖維素製成之合成障壁膜（例如，Interceed™）、聚四氟乙烯（Gore-tex手術膜）及由經修改玻糖醛酸/羧基甲基纖維素（HA/CMC）組合製成之可完全再吸收的膜（Seprafilm™）亦已用於減少動物及人類兩者之手術後黏連形成（Burns, J. W.等人，Eur. J. Surg. 增刊. 577: 40-48 (1997)；Burns, J. W.等人，Fertil. Steril. 66:814-821 (1996)）；Becker, J. M.等人，J. Am. Coll. Surg. 183:297-306 (1996)）。此等HA/CMC膜之成功可能源自其能夠在纖維性黏連形成時在腹膜傷口修復過程期間提供組織分離。觀測到在應用後3至5天（與手術後黏連形成之時程相容的時間段），膜在受傷組織上形成透明黏稠塗層（Ellis, H., Br. J. Surg. 50: 10-16 (1963)）。不幸地，利用此等方法已取得的成功有限。
腹膜炎涉及腹膜發炎。腹膜炎可導致嚴重問題。舉例而言，腹痛、腹部觸痛及腹部防護。腹膜炎可涉及自發、解剖及/或腹膜透析相關的發炎。腹膜炎可涉及感染，例如空腔臟器穿孔、腹膜破裂、自發性細菌腹膜炎，且全身性感染可引起感染及腹膜炎。腹膜炎亦可不涉及感染，例如無菌體液滲漏至腹膜中，且無菌腹部手術可能引起腹膜炎。已作出各種嘗試以預防及/或治療腹膜炎。舉例而言，通用支持性量測諸如靜脈內復水、抗生素及手術。未能滿足對抑制或以其他方式治療及/或預防（較佳地更有效地以及極低副作用）腹膜炎之化合物、組成物、方法及類似者（包括遞送方法）之需求。
本文中所論述之高分子量聚海藻糖可用於治療患者之纖維性黏連且可包括用以治療纖維性黏連之經設定及構成之高分子量聚海藻糖醫療裝置、組合或醫藥產品的組分。舉例而言，將包含約0.02 mg/mL至約100 mg/mL之間，例如0.1 mg/mL、0.2 mg/mL、0.3 mg/mL、0.5 mg/mL、0.9 mg/mL、1 mg/mL、2.5 mg/mL、5 mg/mL、7.5 mg/mL之本文中之高分子量聚海藻糖之高分子量聚海藻糖醫療裝置溶解於生理鹽溶液中。生理鹽溶液可為例如乳酸林格氏注射USP（LRS）、標準鹽水及生理學聚葡萄糖溶液。
本文中可為液體醫療裝置之高分子量聚海藻糖醫療裝置可含有醫藥學上可接受之賦形劑，諸如緩衝劑、穩定劑、防腐劑、佐劑等。此類高分子量聚海藻糖醫療裝置可用於藉由投予約0.01 mL/kg （根據患者或目標之公斤體重）至約10 mL/kg或15 mL/kg之先前段落中之聚海藻糖醫療裝置來治療手術前、手術期間或手術後之纖維性黏連。劑量包括例如約0.03 mL/kg、0.1 mL/kg、0.2 mL/kg、0.4 mL/kg、0.5 mL/kg、0.6 mL/kg、1 mL/kg、1.2 mL/kg、2 mL/kg、3 mL/kg、4 mL/kg、5 mL/kg、8 mL/kg、10 mL/kg及15 mL/kg之高分子量聚海藻糖醫療裝置達至患者之手術部位。在其他具體實例中，此類高分子量聚海藻糖醫療裝置可用於藉由投予約0.04 mg/kg或0.1 mg/kg至約25 mg/kg或50 mg/kg之間來治療任何選定目標部位，例如病變、擦傷、損傷部位、手術部位及手術後部位處之纖維性黏連。此類劑量之一些實例包括例如約0.04 mg/kg、0.075 mg/kg、0.1 mg/kg、0.2 mg/kg、0.5 mg/kg、1 mg/kg、1.3 mg/kg、2 mg/kg、3 mg/kg、4 mg/kg、5 mg/kg、7.5 mg/kg、8 mg/kg、10 mg/kg、15 mg/kg、20 mg/kg、25 mg/kg及50 mg/kg之本文中之聚海藻糖（包括（例如）本文中之高分子量聚海藻糖）達至患者之手術部位。投予可例如藉由以下實現：將液體醫療裝置灌注在大體上整個目標區域內；將液體醫療裝置導引至目標區域內之特定位置處；將液體醫療裝置噴塗在整個目標區域內或目標區域內之特定位置處；或經由施料器（可為穿過套管針、導管、內窺鏡或其他極小侵入性裝置之噴霧施料器）噴塗或以其他方式將液體醫療裝置遞送至外科醫生或其他從業者已識別為尤其易患或涉及發生纖維性黏連之特定位置上。在另一態樣中，可在打開手術傷口後但在手術程序之前；在手術程序期間；或在手術程序後但在閉合手術傷口之前進行投予。視需要，液體醫療裝置亦可在手術完成後（例如，經由注射器及針頭）投予且亦可投予至非手術目標部位。患者之手術部位可為例如以下中之至少一者：骨盆腔、腹腔、背椎腔、顱腔、脊髓腔、腹腔、胸腔、胸膜腔、心包腔、皮膚、關節或肌肉。將高分子量聚海藻糖醫療裝置投予至患者之手術部位中可以小於約15分鐘、10分鐘、8分鐘、6分鐘、5分鐘、4分鐘、3分鐘、2分鐘、1分鐘、45秒、30秒、20秒、15秒、10秒及5秒實現。
在打開手術傷口後、在手術期間、在閉合手術傷口之前及/或閉合手術傷口後，向手術部位投予高分子量聚海藻糖醫療裝置之實例包括（但不限於）在以下手術程序之手術部位處投予高分子量聚海藻糖醫療裝置：剖腹產手術程序、微血管自由皮瓣重建手術程序、全層皮膚移植手術程序、V-Y推進皮瓣手術程序、筋膜旋轉皮瓣手術程序、關節造形術手術程序、乳房切除術手術程序、死骨切除術（sequestrectomy）手術程序、碟形手術（saucerization）手術程序、切骨術（osteotomy）手術程序、骨整形術（osteoplasty）手術程序、髕骨切除術（patellectomy）手術程序、滑膜切除術（synovectomy）手術程序、囊切除術（capsulectomy）手術程序、肌腱或韌帶修復手術程序、腱鬆解術（tenolysis）手術程序、腱切斷術手術、筋膜切開術（fasciotomy）手術程序、半月板修復手術程序、椎骨切除術（vertebrectomy）手術程序、篩竇切除術（ethmoidectomy）手術程序、柯一陸氏手術（Caldwell Luc's operation）手術程序、淚囊鼻腔吻合術（dacryocystorhinostomy）手術程序、鼻黏連解除術（lysis nasal synechia）手術程序、胸腺切除術（thymectomy）手術程序、肺鬆解術（pneumonolysis）手術程序、肺切除術（pneumonectomy）手術程序、胸廓成形術（thoracoplasty）手術程序、雙肺葉切除術（bilobectomy）手術程序、門靜脈高血壓手術（portal hypertension surgery）手術程序、脾切除術（splenectomy）手術程序、食道切除術（esophagectomy）手術程序、腹膜炎手術（peritonitis surgery）手術程序、胃切除術手術（gastrectomy surgery）手術程序、空腸空腸吻合術手術（jejunojejunostomy surgery）手術程序、腹腔鏡膽囊切除術手術（laparoscopic cholecystectomy surgery）手術程序、腹腔鏡總膽管勘探（laparoscopic common bile duct exploration）手術程序、胃腸吻合術（gastroenterostomy）手術程序、減重手術（bariatric surgery）手術程序、腸割除及吻合術（bowel resection&anastomosis）手術程序、肝段切除術（segemental hepatectomy）手術程序、葉切除術（lobectomy）手術程序、胰切除術（pancreatomy）手術程序、胰十二指腸切除術（pancreaticoduodenectomy）手術程序、腫瘤切除術（tumor resection）手術程序、腹腔鏡腎切除術（laparoscopic nephrectomy）手術程序、膽囊切除術（cystectomy）手術程序、腹部或骨盆黏連裂解手術程序、子宮輸卵管造口術（hysterosalpingostomy）手術程序、輸卵管成形術（salpingoplasty）手術程序、子宮外孕腹腔鏡手術（ectopic pregnancy surgery）手術程序、關節置換手術手術程序、骨折修復手術程序、子宮切除術（hysterectomy）手術程序、膽囊移除手術程序、心臟搭橋（heart bypass）手術程序、血管成形術（angioplasty）手術程序、粥樣斑切除術（atherectomy）手術程序、乳房切片檢查手術程序、頸動脈內膜切除術（carotid endarterectomy）手術程序、白內障手術（cataract surgery）手術程序、冠狀動脈旁路（coronary artery bypass）手術程序、子宮內膜刮除術（dilation and curettage）手術程序、疝修補（hernia repair）手術程序、下背痛手術（lower back pain surgery）手術程序、部分結腸切除術（partial colectomy）手術程序、前列腺切除術（prostatectomy）手術程序及扁桃體切除術（tonsillectomy）手術程序。癌症概述
癌症已成為美國死亡之第二主要原因且佔超過20%之全部死亡率。癌症為增殖性疾病且其特徵為某些細胞之不可控分裂，其可導致形成一或多種腫瘤。大量方法用於治療癌症，包括手術、輻射、化療及其組合。儘管手術為用於一些局部腫瘤之相對普遍的方法，但在腫瘤切除後仍存在明顯腫瘤復發機率。
治療癌症及其他增殖性疾病已受對於非癌性、健康組織的潛在損傷或毒性的限制。在輻射及手術治療中，程序已大體受限於腫瘤部位且靠近腫瘤部位。然而，對於經歷手術移除癌性組織之患者可存在明顯風險（例如， 在移除前列腺或腦瘤中，可存在對於周圍重要組織之明顯的不可修復損傷風險，例如經由潛在減小對割除非腫瘤組織之需求。另外，在已給定作為前列腺癌之一線治療的集中輻射治療中，存在類似風險。在癌症之化學治療性治療中，藥物已經全身性投予，使得整個身體暴露於藥物。此等藥物經設計對癌細胞為有毒的，但其對非癌細胞（一般而言）亦為有毒的，使得患者在經歷用於癌症之藥物治療時變得非常虛弱。經由試驗，腫瘤學家能夠給予一些患者可耐受之此等藥物劑量。然而，此等劑量通常不能成功治療癌症。
任何治療癌症之方法之一個問題為疾病之局部復發舉例而言，每年大約700,000名美國人經診斷患有局部癌症（大約64%之全部癌症患者）且近似五十萬患者使用手術方法進行治療。不幸地，經手術治療之32%患者在初始治療後復發（大約21%在初始手術部位處復發及11%在遠端轉移性部位處復發）。每年接近100,000名患者死於癌症之局部復發。此在乳癌中尤其真實，其中經歷乳房腫瘤切除術之39%患者將經受疾病之局部復發。
分期為判定患者之癌症（實體腫瘤）之進程之方法。簡化方法基於癌症已進展程度將患者分成三組或期：
1 期： 可藉由以手術方式移除部分器官來治療癌症。此亦稱為可切除期。
2 期： 癌症已進展超過可切除點但仍受限於器官自身。
3 期：腫瘤已擴散至其他器官。
許多癌症係藉由抗增殖劑治療，包括（例如）5-氟尿嘧啶（Efudex® ）、長春花生物鹼（vinca alkaloids） （例如，長春新鹼（vincristine）（Oncovin® ））、蒽環黴素（anthracyclines） （例如，小紅莓（doxorubicin，Adriamycin® ））、順鉑（Platinol-AQ® ）、鹽酸吉西他濱（gemcitabine hydrochloride） （Gemzar® ）、甲胺喋呤（methotrexate）及太平洋紫杉醇。與抗增殖劑、甲胺喋呤及太平洋紫杉醇相關聯之毒性之一些實例論述於本文中之其他地方。甲胺喋呤已用於治療數種癌症，包括（例如）膀胱癌、乳癌、宮頸癌、頭部及頸部癌、肝臟癌、肺癌及睾丸癌。太平洋紫杉醇已用於治療數種癌症，包括（例如）卵巢癌、乳癌及非小細胞肺癌（Compendium of Pharmaceutical and Specialties第三十五版, 2000）。
因5-氟尿嘧啶所致之毒性可包括心臟血管毒性，諸如心肌缺血；中樞神經系統毒性，諸如欣快症（euphoria）、急性小腦症候群（acute cerebellarsyndrome）及共濟失調（ataxia）；皮膚病學毒性，諸如禿髮症及皮膚炎；胃腸毒性，諸如噁心、嘔吐及口腔或胃腸潰爛；血液毒性，諸如白血球減少症、血小板減少及貧血症；過敏毒性，諸如全身性過敏反應及接觸過敏；眼部毒性，諸如增加流淚、畏光及結膜炎；及其他毒性，諸如發熱。5-氟尿嘧啶已用於治療多種癌症，包括（例如）乳癌、結腸直腸癌、胃癌、肝臟癌、膀胱癌、頭部及頸部癌、非小細胞肺癌、卵巢癌、胰臟癌及前列腺癌（Compendium of Pharmaceutical and Specialties 第三十五版, 2000）。
因長春新鹼所致之毒性包括中樞神經系統毒性，諸如兒童癲癇及幻覺；皮膚病學毒性，諸如禿髮症；外滲毒性，諸如水皰；胃腸毒性，諸如噁心、嘔吐、便秘及口腔炎；血液毒性，諸如骨髓抑制；神經毒性，諸如周邊神經病變及自主神經性病變；眼部毒性，諸如複視、瞬時失明及眼萎縮；腎/代謝毒性，諸如尿瀦留（urinary retention）、高尿酸血症及膀胱乏力；呼吸毒性，諸如呼吸短促；及其他毒性，諸如兒童發熱。此抗增殖劑已用於治療數種癌症，包括（例如）霍奇金氏病（Hodgkin's disease）、小細胞肺癌、威爾姆氏腫瘤（Wilm's tumor）及睾丸癌（Compendium of Pharmaceutical and Specialties第三十五版, 2000）。
因小紅莓所致之毒性包括心臟血管毒性，諸如心電圖異常及心肌病；皮膚病學毒性，諸如禿髮症及指甲變化；外滲危害毒性，諸如水皰；胃腸毒性，諸如噁心、嘔吐及口腔炎；泌尿生殖毒性，諸如尿液紅色；血液毒性，諸如骨髓抑制；過敏毒性，諸如全身性過敏反應及皮疹；眼部毒性，諸如結膜炎；生殖毒性，諸如不育；及其他毒性，諸如高尿酸血症。此抗增殖劑已用於治療數種癌症，包括（例如）乳癌、小細胞肺癌及卵巢癌（Compendium of Pharmaceutical and Specialties第三十五版, 2000）。
因順鉑所致之毒性包括心臟血管毒性，諸如心電圖變化；皮膚病學毒性，諸如色素過多；外滲危害毒性，諸如刺激性；胃腸毒性，諸如噁心及嘔吐；血液毒性，諸如骨髓抑制及溶血性貧血；過敏毒性，諸如過敏性；肌神經毒性，諸如周邊神經病變及急性腦病；眼部毒性，諸如眼球後神經炎；耳科毒性，諸如聽覺損失及耳鳴；腎/代謝毒性，諸如有毒的腎病及低鉀血症；及其他毒性，諸如不育。此抗增殖劑已用於治療數種癌症，包括（例如）膀胱癌、小細胞肺癌、卵巢癌、睾丸癌、腦癌、乳癌、宮頸癌、頭部及頸部癌、肝母細胞瘤癌及甲狀腺癌（Compendium of Pharmaceutical and Specialties第三十五版, 2000）。因鹽酸吉西他濱所致之毒性包括例如血液毒性，諸如骨髓抑制；胃腸毒性，諸如噁心、嘔吐及口腔炎；肝臟毒性，諸如血清轉胺酶之瞬時升高；腎毒性，諸如蛋白尿、血尿、溶血尿毒症候群及腎衰竭；皮膚病學毒性，諸如皮疹及禿髮症；水腫毒性，諸如水腫及外周水腫；及其他毒性，諸如發熱。此抗增殖劑已用於治療胰臟癌及非小細胞肺癌（Compendium of Pharmaceutical and Specialties第三十五版, 2000）。
本發明論述包含預防或治療局部癌症或實體腫瘤，可治療之局部癌症或實體腫瘤包括前列腺、乳、胰、肝、腎臟、泌尿生殖系統、大腦、胃腸系統、呼吸系統及頭部及頸部之局部癌症或實體腫瘤。本文中之組成物等可藉由允許在距目標腫瘤略遠的部位處控制釋放高分子量聚海藻糖，藉由允許有效濃度之高分子量聚海藻糖利用擴散或甚至全身性輸送達至腫瘤及/或癌轉移來預防或治療癌症，包括癌轉移。在下文段落中進一步論述此等癌症中之一些。前列腺癌
前列腺癌為填塞前列腺腺體之細胞中產生的惡性腫瘤。在美國，今年估計200,000名患者將罹患前列腺癌，且超過30,000名患者將死於該疾病。前列腺癌之死亡比新病例比率為約15%。癌症可保持在前列腺內，或其可擴散至周圍組織或遠距離部位（最通常淋巴結及骨骼）。通常前列腺癌安靜地擴散，僅在其已進展超出前列腺時產生症狀。若前列腺癌已在早期階段期間經診斷且經治療，則在一些研究中，患者具有94%之5年存活率。
前列腺癌通常論述為超過50歲之男性疾病。實際上，患有前列腺癌之80%男性為60歲且更年長。男性在其壽命期間診斷患有前列腺癌之機率為約1/10，與女性患乳癌之機率大致相同。近年來，由於可在疾病出現早期（通常在症狀呈現之前很久）偵測到疾病之改良測試，經報導新病例之數量顯著地上升。任一給定年中罹患前列腺癌之可能性隨著年齡增加，但在50歲後顯著地上升。
用於前列腺癌之當前治療選項取決於疾病進展程度、患者之年齡及總體健康狀況。僅患有早期癌症或受額外更嚴重疾病影響之老年患者可經保守治療，然而癌症為晚期的老年患者可能經歷更具侵襲性的治療。前列腺癌已藉由各種方法治療，包括輻射治療（外部射束輻射或近距放射療法）、激素戒斷或去勢（手術或化學品）、抗增殖劑、手術及預期治療（亦即，「觀察等待」）。無治療保證絕對治癒，且一些具有大量的副作用。
初期前列腺癌（亦即，腫瘤在前列腺局部）可以「觀察等待」治療。前列腺癌手術經推薦用於總體健康狀況在其他方面良好且腫瘤受限於前列腺腺體之患者。針對70歲以下之男性前列腺之局部癌症的普遍治療已為根除性前列腺切除術（亦即，手術移除前列腺）。
其癌症為前列腺區域局部的患者通常以外部射束輻射（EBR）治療。輻射殺滅癌細胞且縮小腫瘤。EBR佔小於20%之局部前列腺癌治療，其中此等患者中大約50%經歷輻射後疾病復發。與初期前列腺癌偵測及來自患者之增大需求組合，近距放射療法（亦即，局部輻射療法）使用已預期將增長。在1995年，僅2.5%之新診斷患者使用近距放射療法治療。近距放射療法涉及將放射性金屬「種子（seed）」植入前列腺腫瘤中。
用於已擴散之前列腺癌之治療涉及移除睾丸或激素療法。兩種皆用於抑制或終止已驅動癌症生長之睾固酮之產生。大約20%之全部前列腺癌患者經歷激素戒斷治療。激素療法包括戈舍瑞林乙酸酯（goserelin acetate） （Zoladex® ）或亮丙立德乙酸酯（leuprolide acetate）（Lupron® ）。用於治療前列腺癌之抗增殖劑已包括5-氟尿嘧啶。乳癌
在美國，乳癌已成為女性當中最常見的癌症，其中每年診斷約180,000個新病例（男性乳癌佔約5%之全部經診斷乳腺癌）。其已成為女性之僅次於肺癌之致死原因，且其已引起每年大約50,000起死亡。美國女人在其壽命期間具有1/8（或約13%）罹患乳癌機率。在過去十年間，報導最多的乳腺癌為小型、原發性（獨立地產生；並非由癌轉移所引起）腫瘤。大致70%至80%之新診斷患者展現早期疾病（1期或2期），且大部分尚未涉及腋下（手臂下方）淋巴結。
大部分乳腺癌為癌瘤（亦即，從上皮組織中生長出的惡性腫瘤）。小於1%之乳腺癌為肉瘤或由結締組織、骨骼、肌肉或脂肪產生之腫瘤。此外，大部分乳腺癌（約75%）為乳腺管癌，在與乳管並排之組織中產生。更小量之癌症（約7%）在乳小葉內發現且被稱作小葉癌瘤。佩吉特氏病（Paget's disease） （乳暈及乳頭癌）及發炎性癌瘤佔幾乎全部其他形式之乳癌。
乳癌治療為複雜的且取決於多種因素。兩個重要因素為腫瘤類型且進展階段。特定言之，腫瘤特徵幫助將個體分為兩個組：（1）處於癌症復發低風險之個體及（2）處於癌症復發高風險之個體。特定預後因素將患者置放在此等組中之任一者中。此等因素包括腫瘤大小；女性性激素雌激素及孕酮（ER/PR）受體之存在；細胞生長週期階段（腫瘤細胞是否有效地分裂或處於「S階段」）；被稱為「her-2-neu蛋白質」之蛋白質的存在；腫瘤級別，腫瘤細胞分化或改變之指標；及腫瘤倍數性，腫瘤細胞內之基因物質之集合數。
已藉由乳房腫瘤切除術及放射線療法治療無明顯淋巴結涉及之原發性疾病。更明顯的淋巴結涉及可保證乳房切除術及移除輔助淋巴結。在此階段，癌轉移及局部復發之機率已較高。轉移性疾病之治療已為緩解性的，涉及輻射療法及化療，其為免疫抑止、細胞毒素及白血球減少症。包括（例如）5-氟尿嘧啶、小紅莓、甲胺喋呤及太平洋紫杉醇之抗增殖劑已批准用於抗乳癌。胰臟癌
胰臟為位於接近胃及小腸之消化系統之器官。其具有兩個主要功能：產生酶及激素。胰臟癌可出現在外分泌（亦即，酶）胰臟（例如，典型胰臟腺癌）中或可出現在內分泌（亦即，激素）胰臟中。
外分泌胰臟癌為極嚴重的健康問題。在美國，大約28,000名患者經診斷患有胰臟癌，同時每年約相同數量死於此疾病。胰臟癌同等地出現在男性及女性中。由於診斷困難，胰臟癌之固有侵襲性本質及稀少的可用全身性治療選項，在診斷後，僅大約4%之經診斷患有胰腺癌的患者存活5年。胰臟癌已成為繼乳癌、肺癌、結腸癌及前列腺癌後之第5個癌症死亡之主要原因。
對於胰臟癌之治療選擇很大程度上取決於腫瘤階段。可能性治療包括手術、抗增殖劑、輻射及生物療法。手術已通常保留用於其癌症視為可切除的1期患者。有時，在手術之前或之後給予療法（諸如輻射及抗增殖劑）之組合可增大患者之存活機率。可在臨床試驗中使用抗增殖劑治療經視為不可切除之胰臟癌（通常II期或晚期）。諸如（例如）吉西他濱或5-氟尿嘧啶之抗增殖劑已對胰臟癌具有一些效果且吉西他濱已用作緩解性藥劑。本文中其他地方論述因此等抗增殖劑所致之毒性。輻射療法在與化療組合使用時對胰臟癌具有一些效果。僅輻射療法可抑制症狀。此治療形式亦已用於II期或晚期胰臟癌。膀胱癌
在1998年，在美國估計將診斷出超過54,000個新的膀胱癌病例且約15,000例死亡將歸因於該疾病。膀胱癌已成為美國男性中第四種最常見癌症且在美國女性中為第九種最常見癌症。其在男性中出現的頻率為女性的三倍。主要為年長男性疾病之膀胱癌已成為顯著疾病及死亡原因。膀胱癌風險隨著年齡增長而大幅度增加（80%病例在大於50歲的人群中出現），其中超過二分之一之全部膀胱癌死亡在70歲後出現。在超過65歲的白人男性中，膀胱癌之年疾病率已為每1,000個人中有大約2個病例；此與65歲以下的每1,000個人中有0.1個病例之比率進行對比。在個人壽命期間，罹患膀胱癌之機率已大於3%；然而，膀胱癌之死亡機率已較小（＜1%）。膀胱癌罕見地出現在小於40歲的人群中。
近期研究表明某些基因及遺傳的代謝能力可在膀胱癌中起作用。移行細胞癌（TCC）已為膀胱癌之最常見形式。TCC通常出現呈淺表（表面）、乳頭狀（疣狀）、莖狀基底上之外生性（向外成長）塊形式。但在一些情況下，TCC可附接於寬廣基底上或其可呈現潰瘍（在凹痕式病灶內）。乳頭狀TCC通常自增殖區域開始，隨後去分化或失去個別細胞特徵。僅約10%至30%乳頭狀TCC發展成侵入性癌症。相比之下，非乳頭狀形式之TCC更可能變成侵入性的。如所述，此類TCC可能呈現潰瘍或平整的。由退行性上皮組成之平整、非乳頭狀TCC已經分類為原位癌（CIS或TIS）。CIS組織含有較大的具有明顯核仁（細胞內之圓形體；涉及蛋白質合成）且缺少正常極性之細胞。
治療膀胱癌取決於多種因素。此等因素中最重要的係呈現的腫瘤類型且其階段。普遍治療包括經尿道割除術（TUR）、電手術、雷射手術、膀胱內治療、抗增殖劑、手術療法、膽囊切除術（cystectomy）及輻射療法。用於治療膀胱癌之抗增殖劑之實例包括例如5-氟尿嘧啶、順鉑及甲胺喋呤。本文中其他地方論述因抗增殖劑、5-氟尿嘧啶、順鉑及甲胺喋呤所致之毒性。腦癌
腦瘤通常為不可手術的且超過80%患者在診斷後12個月內死亡。在美國，每年診斷出大約18,000例原發性顱內（大腦）癌新病例。此相當於約2%之全部成年人癌症。超過50%之此等癌症為高度神經膠質瘤（亦即， 膠質母細胞瘤多形性及退行性星形細胞瘤腫瘤）。患有此等腫瘤之患者通常遭受嚴重殘疾，諸如運動肌功能不全、癲癇及視覺異常。
在腦組織中開始之腫瘤被稱為原發性腦瘤。原發性腦瘤藉由其開始之組織類型進行分類。最常見腦瘤為神經膠質瘤，其開始於膠質（支援性）組織中。其他包括星形細胞瘤、腦幹神經膠質瘤、室管膜瘤及寡突神經膠質細胞瘤。
已針對大部分類型及大部分位置建議手術移除腦瘤且應儘可能在保留神經功能之限制內完成。此規則之例外為深部腫瘤，諸如橋腦神經膠質瘤（pontine gliomas），其在臨床跡象上經診斷且在無初始手術之情況下治療大約50%時間。然而，在許多情況下，執行活組織檢查診斷。立體定位的活組織檢查可用於難以到達及割除之病灶。患有腦瘤的罕見地可治癒或不可切除之患者應視為用於評估輻射敏化劑、高溫或間質近距放射療法結合外部射束輻射療法使用以改善腫瘤之局域控制之臨床試驗或用於評估新藥物及生物反應調節劑之研究的候選者。
輻射療法在治療大部分腫瘤類型中具有主要作用且可增大治癒率或延長無病存活期。輻射療法亦可適用於治療最初僅藉由手術治療之患者的復發。可在手術及輻射療法之前、期間或之後使用化療。亦藉由化療治療復發性腫瘤。用於治療腦癌之抗增殖劑包括順鉑。本文中其他地方論述與此抗增殖劑相關聯之毒性之實例。再狹窄
再狹窄為引起血管壁增厚且喪失由血管供應至組織的血流之慢性血管損傷形式。此發炎性疾病可回應於包括減輕血管堵塞之任何操作之血管再建造程序而出現。因此，再狹窄已成為限制此等程序之有效性的主要限定性因素。
本發明論述包含例如藉由向血管投予治療有效量之寡核苷酸治療劑及消炎劑之組合來預防或治療再狹窄。適合的組成物包括可以手術方式植入再狹窄部位或潛在再狹窄部位處或可以聚合性膏體或凝膠形式經由導管注射之聚合性載劑。適合的組成物可包含本文中所論述的高分子量聚海藻糖。關節炎
類風濕性關節炎（RA）為衰弱的慢性發炎疾病，其特徵為關節組織疼痛、腫脹、滑膜細胞增殖（血管翳形成）及損傷。在晚期階段，該疾病通常損害重要器官且可致命。該疾病涉及免疫系統（巨噬細胞/單核球、嗜中性白細胞、B細胞及T細胞）複雜的細胞介素相互作用及滑膜細胞功能失常及增殖之多個成員。已建議用疾病修改抗風濕藥物（DMARD），諸如甲胺喋呤用於早期侵襲性治療，該藥物經論述於本文中其他地方。
晶體誘發之關節炎之特徵為關節中晶體誘發之巨噬細胞及嗜中性白細胞活化且之後為持續數天的劇烈疼痛。疾病進展使得發作間隔變得更短且患者之發病率增大。此疾病已大體藉由非類固醇抗炎藥（NSAID），諸如雙氯芬酸鈉（Voltaren® ）對症治療。此消炎劑具有毒性，其包括中樞神經系統毒性，諸如眩暈及頭痛；皮膚病學毒性，諸如皮疹及搔癢病；胃腸毒性，諸如加重的潰瘍性結腸炎及克羅恩氏病（Crohn's disease）；泌尿生殖毒性，諸如急性腎衰竭及腎乳頭狀壞死；血液毒性，諸如顆粒性球缺乏、白血球減少及血小板減少；肝臟毒性，諸如升高的肝轉胺酶及肝炎；及其他毒性，諸如哮喘及全身性過敏反應。
本發明論述包含例如經由向患者投予治療有效量之寡核苷酸治療劑及視情況選用之消炎劑來預防或治療類風濕性關節炎。適合的組成物包括聚合性載劑，其可以消炎劑及微顆粒之受控釋放載劑形式以寡核苷酸治療劑之受控釋放載劑形式（其轉而已經併入於聚合性載劑中）注射至關節中。適合的組成物可包含本文中所論述的高分子量聚海藻糖。此類聚合性載劑可採取聚合性微球體、糊劑或凝膠的形式。發炎性病狀
本文中之組成物等可視情況例如包含向患者投予含有寡核苷酸治療劑及消炎劑之組成物來抑制或治療涉及嗜中性白細胞之發炎性病狀。此類病狀之實例包括晶體誘發之關節炎；骨關節炎；非類風濕性發炎性關節炎；混合結締組織疾病；修格蘭氏症候群（Sjögren's syndrome）；僵直性脊椎炎；貝赫切特症候群（Behçet's syndrome）；類肉瘤病；牛皮癬；濕疹；發炎性腸病；慢性發炎性肺病；神經病症及多發性硬化。在下文段落中進一步論述此等疾病中之一些。慢性發炎性皮膚病 （ 包括牛皮癬及濕疹 ）
牛皮癬為常見的慢性發炎性皮膚病，其特徵為發癢、灼熱、蜇傷且易於出血之突起、增厚及鱗片狀病灶。當此等疾病在疾病之晚期具有細胞增殖及血管生成組分時，患者通常具有伴隨的關節炎病狀。症狀可藉由諸如潑尼松（prednisone）之類固醇消炎劑或諸如甲胺喋呤之抗增殖劑來治療，該等藥劑經論述於本文中其他地方。本文中之組成物亦可用於抑制或以其他方式治療及/或預防慢性發炎性皮膚病，例如牛皮癬及/或濕疹。
以下提供可藉由本文中所論述的組成物治療之發炎疾病之一些額外代表性實例，包括例如動靜脈畸形（血管畸形）之動脈栓塞；月經過多；急性出血；中樞神經系統病症及脾功能亢進症；發炎性皮膚病，諸如牛皮癬；濕疹疾病（異位性皮膚炎、接觸性皮炎、濕疹）；免疫大皰性疾病（immunobullous disease）；及包括各種病狀之發炎性關節炎，該等病狀包括類風濕性關節炎、混合結締組織疾病、修格蘭氏症候群、僵直性脊椎炎、貝赫切特症候群、類肉瘤病、晶體誘發之關節炎及骨關節炎（以上所有特徵以發炎疼痛關節為重要症狀）。缺血
缺血或局部缺血涉及血液供應源之限制，其可包括恰當組織功能所需之氧、葡萄糖及其他組分供應不足，使得組織損傷及/或功能不全。缺血可導致嚴重問題。舉例而言，組織可變成缺氧、壞死且可形式結塊。已作出各種嘗試以預防及/或治療缺血。舉例而言，復原血流或再灌注。然而，復原血液涉及再引入氧，其可導致因產生自由基所致之額外損傷，進而導致再灌注損傷。再灌注損傷可導致嚴重問題。本文中之組成物可用於抑制或以其他方式治療及/或預防缺血及/或再灌注損傷。內毒素血症
內毒素血症為血液中存在內毒素。內毒素血症可導致嚴重問題。舉例而言，內毒素血症可引起敗血性休克。本文中之組成物可用於抑制或以其他方式治療及/或預防內毒素血症。瘢痕瘤結疤
瘢痕瘤特質致使傷口藉由突起疤痕癒合。瘢痕瘤特質之突起疤痕涉及異常纖維性結疤。瘢痕瘤特質導致嚴重問題，例如疼痛及外形損傷。本文中之組成物可用於抑制或以其他方式治療及/或預防瘢痕瘤特質及其引起之突起疤痕。
瘢痕瘤（瘢痕瘤疤）為生長擴增超過正常皮膚之疤類型。瘢痕瘤涉及異常膠原蛋白生長，包括I型及III型膠原蛋白異常生長。瘢痕瘤導致嚴重問題，例如疼痛、瘙癢，且若經感染，則可能潰爛。已作出嘗試以治療或預防瘢痕瘤，包括使用手術、敷料、類固醇注射及雷射療法。本文中之組成物可用於抑制或以其他方式治療及/或預防瘢痕瘤。皮炎
皮膚炎包括皮膚發炎，包括異位性皮膚炎及接觸性皮炎。舉例而言，接觸性皮炎涉及在皮膚與外來物質接觸之後皮膚之局部皮疹及/或刺激。舉例而言，異位性皮膚炎為長期復發性、瘙癢皮膚病。異位性皮膚炎有時被稱作貝尼埃氏癢疹（prurigo Besnier）、神經性皮炎、內源性濕疹、撓曲濕疹、嬰兒濕疹、兒童濕疹及癢疹（prurigo diathsique）。濕疹為呈皮膚炎形式的疾病。其他類型之皮膚炎包括海綿性皮炎（spongiotic dermatitis）、脂溢性皮炎（皮屑）、出汗障礙性皮炎（dyshidrotic dermatitis） （汗疱疹）、風疹、水泡性皮炎（大皰性皮炎）及流行性風疹。皮炎可導致嚴重問題。舉例而言，乾燥皮膚、皮膚皮疹、皮膚水腫、皮膚發紅、皮膚瘙癢、皮膚結痂、開裂、起泡、滲泌及出血。已作出嘗試以治療或預防皮炎，包括使用皮質類固醇及煤焦油。本文中之組成物可用於抑制或以其他方式治療及/或預防皮炎，包括異位性皮膚炎、濕疹、接觸性皮炎、海綿性皮炎、脂溢性皮炎、出汗障礙性皮炎、風疹、水泡性皮炎及流行性風疹。紅斑痤瘡
紅斑痤瘡為典型地特徵化為面部紅斑之慢性疾病或病狀。紅斑痤瘡可導致嚴重問題。舉例而言，紅斑痤瘡可導致額外症狀，包括毛細管擴張、丘疹、膿包、疼痛感覺，且在晚期病例中，可能產生鼻贅疣（rhinophyma）（紅色分葉鼻（red lobulated nose））。紅斑痤瘡次型包括紅斑狼瘡樣紅斑痤瘡、膿包性丘疹樣紅斑痤瘡、結塊性紅斑痤瘡及眼部紅斑痤瘡。已作出嘗試以治療或預防紅斑痤瘡，包括使用非類固醇抗炎藥及抗生素。本文中之組成物可用於抑制或以其他方式治療及/或預防紅斑痤瘡，包括其紅斑狼瘡、膿包性丘疹樣、紅斑痤瘡及眼部次型。醫療裝置、醫療材料、組合及醫藥產品
本文中之論述亦提供醫療裝置、醫療材料、組合及醫藥產品，其包含在醫療裝置、醫療材料、組合產品或醫藥學上可接受之容器中之如本文所論述的組成物。產品亦可包括與容器相關聯之公告，典型地呈由調節醫療裝置、醫療材料、組合及藥劑或生物藥劑之製造、使用或出售之控管機構規定的形式，從而該公告反映組成物經機構批准，諸如高分子量聚海藻糖已經審批通過作為例如用於人類或獸醫療投藥以治療增殖性疾病或發炎疾病（諸如（例如）發炎性關節炎、再狹窄、手術黏連、牛皮癬及腹膜炎）之抗增殖劑或消炎劑之公告。亦可包括使用本文中之高分子量聚海藻糖之說明書。此類說明書可包括關於患者之給藥及投藥模式之資訊。
本申請案進一步係關於涉及製造本文中所論述的高分子量聚海藻糖、系統等之各種元件，包括製造組成物自身之方法以及其使用方法，包括（例如）治療本文中之病狀、疾病等。
本申請案進一步包含用於治療纖維性黏連、關節炎、牛皮癬或視需要其他疾病之醫療裝置、醫療材料、醫療組合產品及醫藥產品，其包含本文中呈現之高分子量聚海藻糖。該等材料等可用於供治療纖維性黏連，諸如手術黏連、關節炎、牛皮癬或視需要其他疾病之醫藥品中。亦提供製造且使用此類醫藥品之方法，此類醫藥品能夠減少與患者（包括人類患者）之纖維性黏連、關節炎及牛皮癬中之至少一者相關聯的症狀，該等方法包含將醫藥學上有效量之聚海藻糖（諸如如本文所論述之褐藻糖膠）與醫藥學上可接受之賦形劑或緩衝劑組合。
以下實施例提供本文中之某些具體實例的例示性論述，但本發明及申請專利範圍不限於此。實施例 1 ：化學結構性修改
分泌物萃取物係獲自希柏里爾海帶（Laminaria Hyperborea ）。分泌物萃取物經過濾且在100 kDa過濾器上藉由切向流過濾（TFF）移除小分子。將所得滲餘物之樣品凍乾以獲得以其他方式未修改的樣品A。藉由添加10 M NaOH溶液且在室溫下靜置16小時使所得滲餘物達至0.25 M NaOH。隨後將所得樣品在50 kDa過濾器上離心過濾且收集所得滲餘物並凍乾以獲得經鹼處理之樣品B。藉由質子核磁共振光譜學（1 H-NMR）分析未經修改樣品A及經鹼處理之樣品B兩者且圖 9A 中顯示所得1 H-NMR光譜。
圖 9A 展現所實現的聚海藻糖之化學結構性修改：存在於未經修改樣品A中之具有約2.0 ppm化學位移之較寬峰值並不存在於經鹼處理之樣品B中。
藉由2D1 H-13 C異核間多重量子相干性（HMQC）進一步分析未經修改樣品A及經鹼處理/經修改樣品B。在70℃下藉由配備有5-mm冷探針之600 MHz光譜儀上之溶劑信號抑制獲得圖 9B 中所示之HMQC光譜。在碳維度10-30 ppm範圍內，以8次遞增之256-512掃描進行每次量測，獲得HMQC光譜之大量掃描；此類掃描經組合以產生圖 9B 中之光譜。
未經修改樣品A之HMQC光譜具有對應於O-乙醯基之交叉峰值，由圖 9B 中之帶圓圈信號指出。此交叉峰值不存在於經鹼處理之樣品B之光譜中。此展現自聚海藻糖中移除乙醯基，且因此藉由NaOH處理來對經鹼處理之樣品B中之聚海藻糖進行化學結構性修改。實施例 2 ：切向流過濾
可藉由切向流過濾獲得高分子量聚海藻糖。寬廣分佈起始聚海藻糖以50 mg/mL溶解於蒸餾水中。在此實施例中，在用於4滲濾體積之100kDa分子量截斷（MWCO）切向流動過濾器（TFF）匣上相對於蒸餾水滲濾寬廣分佈聚海藻糖，以移除非所需較低分子量組分且收集TFF過程之滲餘物，包含高分子量聚海藻糖。可藉由任何所需MWCO TFF過濾器，例如50kDa、70kDa、100kDa、300kDa、500kDa及1000kDa MWCO TFF匣來實現滲濾。相比於寬廣分子量分佈起始聚海藻糖，所得高分子量聚海藻糖具有更高平均分子量。實施例 3 ：連續切向流過濾分段
提供已經由0.22微米過濾器預過濾之輸入寬廣分子量分佈起始褐藻糖膠，其重量平均分子量為365.6 kDa且多分散性指數（PDI）=3.58。由華盛頓港之頗爾公司（Pall of Port of Washington）供應之100 kDa MWCO之TFF過濾匣用作較高MWCO TFF匣且由華盛頓港之頗爾公司供應之50 kDa TFF匣用作較低MWCO TFF匣。對以下TFF匣對重複該過程：由馬薩諸塞州之伯林頓密理博公司（Millipore of Burlington,MA）供應之MWCO 300 kDa TFF過濾器及由華盛頓港之頗爾公司供應之MWCO 100 kDa TFF過濾器、由華盛頓港之頗爾公司供應之MWCO 50 kDa TFF過濾器及由華盛頓港之頗爾公司供應之30 kDa過濾器、由華盛頓港之頗爾公司供應之30 kDa TFF過濾器及由華盛頓港之頗爾公司供應之10 kDa TFF過濾器。該等匣皆為聚醚碸（PES）類型。
在如上文所論述之連續切向低過濾後，使用凝膠滲透層析法（GPC）分析各種所獲得聚海藻糖，包括包含起始聚海藻糖分子量分佈之高分子量區段的高分子量聚海藻糖。下表1中顯示結果。
Figure 108126172-A0304-0001
 表1.褐藻糖膠之TFF分段實施例 4 ：陽離子強化切向流過濾
提供已經由0.22微米過濾器預過濾的含寬廣分子量分佈輸入起始褐藻糖膠組成物之起始溶液，其重量平均分子量為436.4 kDa且多分散性指數（PDI）為3.24。膽鹼（生物相容性水可溶四級銨鹽）經選定為化學添加劑。以1:2膽鹼:褐藻糖膠質量比將膽鹼添加至經預過濾起始溶液中且攪拌所得混合物直至膽鹼溶解為止。膽鹼可或可不結合於褐藻糖膠分子上之硫酸鹽位點。在第一TFF過程中，隨後使經膽鹼處理之褐藻糖膠溶液在300 kDa過濾器匣上經歷切向流過濾，以獲得包含膽鹼鍵結之高分子量褐藻糖膠之第一滲餘物，其為經膽鹼處理之滲餘物。在此第一膽鹼強化TFF過程期間，藉由四個滲濾體積之1% w/v膽鹼沖洗溶液滲濾經膽鹼處理之褐藻糖膠溶液。收集第一TFF過程之經膽鹼處理之滲餘物且使其經歷第二TFF過程以藉由鈉陽離子替代膽鹼陽離子。
第二TFF過程（去膽鹼TFF過程）包含在50 kDa過濾匣上滲濾第一TFF過程之經膽鹼處理之滲餘物，同時藉由NaCl處理滲餘物以藉由鈉陽離子替代膽鹼陽離子。在此實施例中，藉由4個體積之2 M NaCl滲濾經膽鹼處理之滲餘物，以自高分子量褐藻糖膠中移除膽鹼添加劑。隨後藉由去離子水滲濾此第二TFF過程之去膽鹼滲餘物直至滲透物之導電性已下降至低於5 mS/cm為止，來表示移除過量NaCl。在如上文所論述之陽離子強化TFF後，使用凝膠滲透層析法（GPC）分析該過程中之包含高分子量聚海藻糖之各種滲餘物之樣品。下表2中顯示結果。
Figure 108126172-A0304-0002
 表2.褐藻糖膠之陽離子強化TFF分段實施例 5 ： 離心沈澱
提供已經由0.22µm預過濾器預過濾之含有0.5% w/v起始褐藻糖膠組成物之起始溶液。在離心管中形成含20%、10%及5% w/v蔗糖於水中之階段梯度，其中5%層為離心管之最頂層且20%層為離心管之底部。隨後在5% w/v蔗糖層之頂部上層化含起始褐藻糖膠組成物之0.5%起始溶液。圖 10 中顯示所得層結構。隨後在190,000重力（g）下離心具有此等四個層之試管持續6小時。上清液溶液經傾析且保留在離心管中之含有所需高分子量聚海藻糖之沈澱物經再溶解於水中。隨後藉由凝膠滲透層析法（GPC）分析經再溶解高分子量聚海藻糖。下表3中顯示結果。
Figure 108126172-A0304-0003
 表3.使用5%-10%-20%蔗糖障壁離心沈澱褐藻糖膠實施例 6 ： 凝膠電泳 - 萃取
提供具有寬廣分子量分佈之起始褐藻糖膠組成物。起始褐藻糖膠組成物以50 mg/mL溶解，經由0.22微米過濾器預過濾且裝載至由380 mL瓊脂糖澆築之0.5%瓊脂糖凝膠上。將裝載的凝膠浸沒在40 mM參乙酸鹽1 mM EDTA之操作緩衝液（亦稱為TAE緩衝液）中。在緩衝液兩端施加90 V電壓保持50分鐘，其中陽極接近於起始褐藻糖膠組成物槽。此允許經由凝膠按質荷比來分離褐藻糖膠。為視覺化目的，凝膠經亞甲基藍染色，亞甲基藍為一種已知染色褐藻糖膠的染料。隨後平行於該槽，距該槽1 cm開始將瓊脂糖凝膠切成1 cm寬區段。將凝膠之各區段攪拌於蒸餾水中以藉由搖動混合物自凝膠中萃取褐藻糖膠區段。
藉由凝膠滲透層析法（GPC）分析經電泳萃取之褐藻糖膠區段，該等區段潛在地包含高分子量褐藻糖膠。下表4中顯示結果。
Figure 108126172-A0304-0004
 表4.藉由TAE緩衝液基於電泳分離瓊脂糖凝膠兩端之經預過濾起始褐藻糖膠之GPC結果。實施例 7 ： 膜透析
提供已經由0.22微米過濾器預過濾之含有起始褐藻糖膠組成物之5% w/v起始溶液。將起始溶液置放於標稱分子量截斷300kDa之乙酸纖維素透析試管中。將透析試管密封且置放於具有20公升去離子水之容器中。去離子水每12小時經新製去離子水置換以確保膜微孔兩端之連續擴散。使透析過程繼續約5天。
使用凝膠滲透層析法（GPC）分析透析試管中之經預過濾起始褐藻糖膠組成物及透析後之高分子量褐藻糖膠兩者。下表5中顯示結果。
Figure 108126172-A0304-0005
 表5.相對於300kDa膜兩端之去離子水透析褐藻糖膠之GPC結果。實施例 8 ： 選擇性沈澱
提供起始褐藻糖膠組成物，其已經由0.22µm預過濾器預過濾且經由100kDa TFF匣上之去離子水滲濾而去鹽以移除可能干擾沈澱過程之非所需低分子量鹽。製備經預過濾及去鹽之起始褐藻糖膠於蒸餾水中之一系列相同的起始溶液。將溶劑組成物引入至不同預定濃度之乙醇中。此製備用於自下表6中識別之溶液組成物中沈澱褐藻糖膠之不同溶劑環境。將最小量之呈NaCl形式之離子試劑添加至各溶液組成物中以引發自溶液中沈澱褐藻糖膠。在2300重力下離心沈澱物及溶液組成物之混合物持續10分鐘。在各情況下傾析液體上清液且收集固體褐藻糖膠。 使固體褐藻糖膠再溶解於蒸餾水中且藉由凝膠滲透層析法分析。下表6中顯示結果。
Figure 108126172-A0304-0006
 表6.使用乙醇作為沈澱溶劑以選擇性沈澱褐藻糖膠實施例 9 ： 陰離子 吸附
在約14 mL DEAE-Sepharose® 樹脂上再循環含有約500 mg寬廣分子量分佈經去鹽起始褐藻糖膠之起始溶液持續約16小時以使低分子量褐藻糖膠結合至樹脂上之活性位點。在約16小時後，收集經再循環溶液。此將高分子量褐藻糖膠與已鍵結至樹脂之低分子量褐藻糖膠分離。隨後在樹脂上再循環10% w/v NaCl持續4小時以使低分子量褐藻糖膠自樹脂位移。隨後，將富含褐藻糖膠之鹽溶液收集且在5 kDa離心過濾器上去鹽以將收集的低分子量褐藻糖膠與非所需鹽分離。對經去鹽起始褐藻糖膠執行GPC，在離子交換過程期間並不吸附高分子量褐藻糖膠，且自樹脂中萃取低分子量褐藻糖膠。下表7中顯示結果。
Figure 108126172-A0304-0007
 表7.陰離子交換分段褐藻糖膠：DEAE-瓊脂糖作為樹脂實施例 10 ： 陰離子吸附
將含有約1 g寬廣分子量分佈經去鹽褐藻糖膠之起始溶液與約10 g Amberlyst® A26樹脂混合持續約16小時以使低分子量褐藻糖膠結合至樹脂上之活性位點。隨後藉由傾析將含有高分子量褐藻糖膠之溶液與樹脂分離。隨後，將20% w/v NaCl與樹脂混合持續4小時以使低分子量褐藻糖膠自樹脂位移。隨後，將富含褐藻糖膠之鹽溶液與樹脂分離且在5 kDa離心過濾器上去鹽以將收集的低分子量褐藻糖膠與非所需鹽分離。對去鹽起始褐藻糖膠執行GPC，在離子交換過程期間並不吸附高分子量褐藻糖膠，且自樹脂中萃取低分子量褐藻糖膠。下表8中顯示結果。
Figure 108126172-A0304-0008
 表8.陰離子交換分離褐藻糖膠：Amberlyst™ A26 OH實施例 11 ： 陰離子吸附
在三個單獨容器中將含有約1 g寬廣分子量分佈經去鹽褐藻糖膠之起始溶液與約10 g三種不同樹脂（Amberlyst® A26 OH- 、Ambersep® 900 OH- 及Lewatit® VPOC 1065）混合。溶液樹脂混合物經培育約16 h以使低分子量褐藻糖膠結合至樹脂上之活性位點。隨後藉由傾析將含有高分子量褐藻糖膠之溶液與樹脂分離。Amberlyst® 及Ambersep® 產品之微孔具有四級胺基團而Lewatit產品之微孔具有一級苯甲胺基團。前兩種產品為強鹼性陰離子交換樹脂，而第三種為弱鹼性陰離子交換樹脂。隨後藉由GPC分析離子交換過程期間未被吸附之褐藻糖膠。下表9中顯示結果。
Figure 108126172-A0304-0009
 表9.陰離子交換分離褐藻糖膠：藉由在3種樹脂上再循環來比較經製備之褐藻糖膠。實施例 12 ： 陰離子吸附
將含有約1g寬廣分子量分佈經去鹽褐藻糖膠之起始溶液與約10g Ambersep® 900 OH- 混合至多53小時。隨後在陰離子吸附過程期間之各個時間點藉由GPC分析離子交換過程期間未被吸附之混合物中之褐藻糖膠。下表10中顯示結果。
Figure 108126172-A0304-0010
 表10.陰離子交換分離褐藻糖膠：比較陰離子交換時間實施例 13 ： 陰離子吸附
將含有約1 g寬廣分子量分佈經去鹽褐藻糖膠之起始溶液與各種量之Ambersep® 900- 樹脂混合約16小時以使低分子量褐藻糖膠結合至樹脂上之活性位點。隨後藉由傾析將含有高分子量褐藻糖膠之溶液與樹脂分離。隨後藉由GPC分析離子交換過程期間未被吸附之褐藻糖膠。下表11中顯示結果。
Figure 108126172-A0304-0011
 表11.陰離子交換分離褐藻糖膠：比較不同褐藻糖膠:樹脂比率實施例 14 ： 製備型凝膠滲透層析法
提供具有寬廣分子量分佈之起始褐藻糖膠組成物。起始褐藻糖膠組成物以10 mg/mL溶解於60 mL 0.1 M硝酸鈉中。經由分別含有Sepax® SRT-10/10C SEC-1000、Agilent® PL Aquagel® -OH MIXED-H及TSKGel® G4000SW之50 mm內徑、250 mm長管柱中之每一者以40 mL/min泵抽20 mL含起始褐藻糖膠組成物之起始溶液，以上所有含有經改質二氧化矽-親水性鍵結相凝膠介質。使用0.1 M硝酸鈉在相同流動速率下進行洗提。在5分鐘洗提後，收集40 mL等分試樣直至已收集總計1000 mL或25份等分試樣為止。藉由分析型GPC量測各等分試樣樣品之分子量分佈。將重量平均分子量在200 kDa與600 kDa之間的等分試樣合併。將重量平均分子量在600 kDa與1000 kDa之間的等分試樣合併。將重量平均分子量在1000 kDa與1400 kDa之間的等分試樣合併。將重量平均分子量在1400 kDa與1800 kDa之間的等分試樣合併。丟棄剩餘等分試樣。各經合併製備型GPC等分試樣組成物含有所需高分子量聚海藻糖。實施例 15 ： 製備型凝膠滲透層析法
提供具有寬廣分子量分佈之起始褐藻糖膠組成物。起始褐藻糖膠組成物以10 mg/mL溶解於60 mL 0.1M硝酸鈉中。經由分別含有Waters® HSPgel AQ MB-H、PSS® Suprema® Combination Ultrahigh及TSKGel® GMPWXL之50 mm內徑、250 mm長管柱中之每一者以40 mL/min泵抽20 mL含起始褐藻糖膠組成物之起始溶液，以上所有含有基於羥化聚甲基丙烯酸酯的凝膠介質。使用0.1 M硝酸鈉在相同流動速率下進行洗提。在5分鐘洗提後，收集40 mL等分試樣直至已收集總計1000 mL或25份等分試樣為止。藉由分析型GPC量測各等分試樣樣品之分子量分佈。將其分子量分佈之至少90%高於100 kDa、其分子量分佈之至少80%高於200 kDa及/或其分子量分佈之至少50%高於500 kDa之等分試樣合併。丟棄剩餘等分試樣。各經合併製備型GPC等分試樣組成物含有所需高分子量聚海藻糖。實施例 16 ： 製備低及高分子量聚海藻糖
可以任何方式使用、組合、修改及排列本文中所論述之方法以獲得高分子量聚海藻糖。
利用具有寬廣分子量分佈之原料/起始聚海藻糖組成物製備二十份聚海藻糖（一些具有高分子量且一些具有低分子量），以評估高及低分子量聚海藻糖在醫療及手術應用中之功效。二十份聚海藻糖在下文被稱作聚海藻糖1至聚海藻糖20。聚海藻糖1至聚海藻糖5為淡褐色固體。聚海藻糖6、聚海藻糖8至聚海藻糖15及聚海藻糖17為白色固體。製備低分子量聚海藻糖（聚海藻糖1至聚海藻糖6）涉及諸多不同方法。聚海藻糖3係自棕色海藻中萃取且發現為低分子量聚海藻糖。聚海藻糖2係自FMC BioPolymer® 獲得且發現為低分子量聚海藻糖。在100kDa下使用MWCO TFF過濾器，藉由實施例3中所論述之方法獲得聚海藻糖1及聚海藻糖5。藉由實施例10中所論述之方法獲得聚海藻糖4。藉由利用過氧化氫化學降解高分子量聚海藻糖來獲得聚海藻糖6。
製備高分子量聚海藻糖（聚海藻糖7至聚海藻糖20）涉及諸多不同方法，包括用氫氧化鈉處理，且在一些情況下，亦使用其他鹼。製備聚海藻糖7、聚海藻糖8、聚海藻糖11、聚海藻糖12至聚海藻糖17及聚海藻糖20涉及實施例12中所論述之方法及相對於低離子強度溶液進行切向流過濾之組合。製備聚海藻糖10涉及如上文所述的陽離子強化切向流過濾及連續切向流過濾方法之組合。聚海藻糖9、聚海藻糖18及聚海藻糖19係自棕色海藻中萃取，藉由相對於低離子強度溶液進行切向流過濾來進一步處理且經發現為高分子量聚海藻糖。實施例 17 ： 用於製造聚海藻糖 7 至聚海藻糖 14 之粗聚海藻糖之分子量測定
凝膠滲透層析法用於評估用於製造聚海藻糖7至14之粗聚海藻糖之分子量分佈。粗聚海藻糖1係指用於製造聚海藻糖7及聚海藻糖8之粗聚海藻糖。粗聚海藻糖2係指用於製造聚海藻糖9、聚海藻糖10、聚海藻糖11及聚海藻糖13之粗聚海藻糖。粗聚海藻糖3係指用於製造聚海藻糖12之粗聚海藻糖。粗聚海藻糖4係指用於製造聚海藻糖14之粗聚海藻糖。表12中顯示此類分析之結果。
下表中之結果含有用於分子量分佈之某些特徵之縮寫。凝膠滲透層析法由GPC表示，峰值分子量由PMW表示，重量平均分子量由WAMW表示，數量平均分子量由NAMW表示，百分比分佈由%分佈表示，分子量由MW表示及多分散性指數由PDI表示。
Figure 108126172-A0304-0012
 表12實施例 18 ： 低及高分子量聚海藻糖之分子量測定
凝膠滲透層析法用於評估關於聚海藻糖1至20所獲得的分子量分佈。
表13及表14列出關於二十份聚海藻糖獲得之分子量分佈概況。表14提供表13中顯示的相同二十份聚海藻糖之分子量分佈概況，以與表13中顯示的不同方式提供分子量分佈概況，進而提供關於各種聚海藻糖之分子量分佈的兩種不同檢視。如自結果可見，已實現聚海藻糖之大範圍不同分子量分佈。已藉由複數個分佈概況獲得重量平均分子量在28 kDa與8250 kDa之間的聚海藻糖。
下表中之結果含有用於分子量分佈之某些特徵之縮寫。凝膠滲透層析法由GPC表示，峰值分子量由PMW表示，重量平均分子量由WAMW表示，數量平均分子量由NAMW表示，百分比分佈由%分佈表示，分子量由MW表示及多分散性指數由PDI表示。
Figure 108126172-A0304-0013
 表13：關於20種聚海藻糖之分子量分佈之第一檢視
Figure 108126172-A0304-0014
 表14：關於20種聚海藻糖之分子量分佈之第二檢視實施例 19 ： 高分子量聚海藻糖之硫酸鹽、總碳水化合物及單醣含量
將高分子量聚海藻糖（聚海藻糖7至聚海藻糖18及聚海藻糖20）溶解於去離子水中，在酸性條件下水解並藉由感應耦合電漿質譜分析法（ICP-MS）分析% w/w總硫含量，藉由在大不列顛哥倫比亞省之本拿比（Burnaby, British Columbia）之ALS環境實驗室中執行。藉由將硫含量乘以硫酸鹽與硫之莫耳比以獲得聚海藻糖之% w/w硫酸鹽含量來將硫含量轉化為硫酸鹽含量。下表15中顯示聚海藻糖7至18及聚海藻糖20之硫酸鹽含量。
Figure 108126172-A0304-0015
 表15-聚海藻糖7至聚海藻糖18及聚海藻糖20之硫酸鹽含量
藉由由佐治亞大學（the University of Georgia）之複雜碳水化合物研究中心執行氣體光譜-質譜分析（GC-MS）來分析高分子量聚海藻糖（聚海藻糖7、聚海藻糖11、聚海藻糖16、聚海藻糖18及聚海藻糖20）之總碳水化合物及單醣組成物。高分子量聚海藻糖係由酸性甲醇分解衍生以產生O-三甲基矽烷基（O-TMS）衍生物。衍生化後，使用Supelco Equity-1熔融二氧化矽毛細管管柱（30 m，0.25 mm內徑）在介接至Agilent 5975C質譜分析偵測器之Agilent 7890A氣相層析系統上分析聚海藻糖。下表16中顯示高分子量聚海藻糖之總碳水化合物含量及單醣組成物的結果。下表中之碳水化合物簡稱為「carb.」。
Figure 108126172-A0304-0016
 表16-五份聚海藻糖之總碳水化合物及單醣組成物實施例 20 ： 大鼠硬膜外黏連治療
在乳酸林格氏注射USP（LRS）中製備使用實施例18中識別的二十種聚海藻糖之褐藻糖膠溶液。在LRS中以100 mg/mL製備聚海藻糖1至聚海藻糖16、聚海藻糖18及聚海藻糖20。在LRS中以50 mg/mL製備聚海藻糖19。在LRS中以500 mg/mL製備聚海藻糖17。對史泊格多利大白鼠（Sprague Dawley rat）執行椎板切除術（Laminectomy）手術，下表17中顯示大鼠之平均體重及以毫克/公斤為單位的劑量。藉由布比卡因（bupivacaine）溶液形成沿腰椎之線區塊。大鼠之背部經清潔且接著覆蓋無菌蓋布。經由正中皮膚切口打開腰筋膜，腰骶筋膜經切開且剝離腰椎旁肌肉以暴露下伏椎骨薄層。移除脊椎之中心之骨骼。在整個過程中，藉由用乳酸林格氏注射USP（LRS）沖洗及用棉花拭子按壓來保持止血。藉由15微公升LRS（對照）或褐藻糖膠溶液直接地處理暴露的硬腦膜。藉由縫合線閉合肌肉及表層且使大鼠恢復一週，隨後處死用於黏連定量。標記硬腦膜上的黏連的存在及大小。黏連及經暴露硬腦膜之尺寸經記錄且用於計算黏連覆蓋度百分比，其為黏連面積佔總暴露硬腦膜面積之百分比。等式 1 ：黏連覆蓋度（%）=100×硬膜外黏連面積÷總暴露硬腦膜面積
使用等式1測定接受LRS之對照組具有65%黏連覆蓋度。下表17中顯示表13至表16中揭示之二十種聚海藻糖之黏連覆蓋度，黏連覆蓋度相對於對照組減小。相對於對照組發現黏連覆蓋度增大處標示之負值。
Figure 108126172-A0304-0017
 表17：使用20種不同聚海藻糖之大鼠硬膜外黏連相對於對照LRS之減小
如藉由將表17之結果與表13及表14中給出之聚海藻糖之分子量進行比較可見，在相同劑量下，相比於重量平均分子量低於100 kDa，其分子量分佈之約60%或更低高於100 kDa之聚海藻糖，重量平均分子量高於130 kDa且其分子量分佈之約60%或更大高於100 kDa之聚海藻糖在抑制、預防、移除、減小或其他治療大鼠硬膜外黏連中展示更大功效。亦存在另一指標：在相同劑量下，重量平均分子量高於300 kDa，其分子量分佈之約70%或更大高於100 kDa之聚海藻糖在抑制、預防、移除、減小或其他處理大鼠硬膜外黏連中展示甚至更大的功效。實施例 21 ： 用聚海藻糖 1 及聚海藻糖 10 治療家兔子宮角黏連
對各家兔中之兩個子宮角執行子宮角手術。在手術之前，家兔經稱重且接著藉由術前用藥氯胺酮及甲苯噻
Figure 108126172-A0304-12-01
來準備手術。
在乳酸林格氏注射USP（LRS）中以0.07 mg/mL製備褐藻糖膠溶液，藉由過濾殺菌。所有儀器為無菌的且在整個手術中保持無菌現場。清潔腹部且經由正中腹部切口進入。子宮角經定位，由腹取出且刮擦以誘發損傷。亦刮擦接近於經刮擦子宮角之腹壁。將損傷子宮角及腹壁相互緊靠地置放且藉由縫合線穩定。將15 mL/kg褐藻糖膠溶液/家兔重量施加至腹腔，隨後閉合切口。在手術後兩週評估黏連。藉由直尺量測子宮角黏連之長度。子宮角黏連覆蓋度百分比（黏連長度佔總損傷子宮角長度之百分比）計算如下： 等式2 ： 黏連覆蓋度（%）=100×子宮角黏連長度÷總損傷子宮角長度
將相同手術方法應用於3隻新西蘭白色家兔，接受15 mL/kg對照乳酸林格氏注射USP（LRS）代替褐藻糖膠溶液。
使用等式2測定接受LRS之對照組具有41%黏連覆蓋度。表18展示針對聚海藻糖（聚海藻糖1及聚海藻糖10）使用上文所述的方法獲得的結果，該等聚海藻糖分別為其大部分分子量分佈低於100 kDa且甚至低於50 kDa之聚海藻糖及其大部分分子量分佈高於100 kDa且甚至高於200 kDa之聚海藻糖。下表中之結果顯示黏連覆蓋度相對於對照組的減小。
Figure 108126172-A0304-0018
 表18：使用兩種不同聚海藻糖之家兔子宮角黏連相對於對照LRS的減小
如自表18中之結果可見，在相同劑量下，相較於其大部分分佈在100 kDa下或甚至在50 kDa下之聚海藻糖，其大部分分佈高於100 kDa或甚至高於200 kDa之聚海藻糖在抑制、預防、移除、減小或其他治療家兔子宮角黏連中具有較高功效。實施例 22 ： 用聚海藻糖 17 治療家兔子宮角黏連
為測定高分子量聚海藻糖17在抑制手術黏連中之功效，對總共三隻新西蘭白色家兔之兩個角執行以下雙子宮角（DUH）手術。在手術之前，家兔經稱重且接著藉由術前用藥氯胺酮及甲苯噻
Figure 108126172-A0304-12-01
來準備手術。
在乳酸林格氏注射USP（LRS）中以5 mg/mL製備褐藻糖膠溶液，藉由過濾殺菌。所有儀器為無菌的且在整個手術中保持無菌現場。清潔腹部且經由正中腹部切口進入。子宮角經定位，由腹取出且刮擦以誘發損傷。亦刮擦接近於經刮擦子宮角之腹壁。將損傷子宮角及腹壁相互緊靠地置放且藉由縫合線穩定。將肌肉切口之上部三分之一及下部三分之一閉合且將5 mL/kg褐藻糖膠溶液/家兔重量施加至腹腔。將肌肉切口暫時閉合且使褐藻糖膠溶液留在腹腔中保持30分鐘。將肌肉切口再打開且用10 mL/kg LRS沖洗腹腔。抽吸出腹腔中之大部分流體，隨後閉合切口。在手術後兩週評估黏連形成。藉由直尺量測子宮角黏連之長度。子宮角黏連覆蓋度百分比（黏連長度佔總損傷子宮角長度之百分比）使用等式2來計算。
表19展示針對聚海藻糖17使用上文所述的方法獲得的結果，該聚海藻糖為高分子量聚海藻糖之代表性實施例。下表中之結果顯示總共評分之6個子宮角之平均黏連長度。
表19提供藉由聚海藻糖17治療六個子宮角之結果。
Figure 108126172-A0304-0019
 表19：使用聚海藻糖17之黏連長度
如可自表19之結果可見，高分子量聚海藻糖可用於成功地抑制、預防、移除、減小或以其他方式治療手術後子宮角黏連。實施例 23 ： 用高分子量聚海藻糖組成物治療之子宮角纖維性黏連
為判定數量平均分子量為約228 kDa、重量平均分子量為約1210 kDa、峰值分子量為約575 kDa且具有一分子量分佈（其中約89%之該分佈高於100 kDa且其中約30%之該分佈高於1000 kDa）之高分子量聚海藻糖組成物在抑制手術黏連中之功效，對總共二十隻新西蘭白色家兔之兩個角執行以下雙子宮角（DUH）手術。在手術之前，家兔經稱重且接著藉由術前用藥咪達唑侖（midazolam）及右美托咪啶（dexmeditomidine）來準備手術。
在乳酸林格氏注射USP（LRS）中以各濃度0.02 mg/mL、0.1 mg/mL、0.5 mg/mL或2.5 mg/mL製備褐藻糖膠溶液，藉由過濾殺菌。所有儀器為無菌的且在整個手術中保持無菌現場。清潔腹部且經由正中腹部切口進入。子宮角經定位，由腹取出且刮擦以誘發損傷。亦刮擦接近於經刮擦子宮角之腹壁。將損傷子宮角及腹壁相互緊靠地置放且藉由縫合線穩定。將2 mL/kg褐藻糖膠溶液/家兔重量施加至腹腔，隨後關閉切口。在手術後兩週評估黏連。五隻家兔經治療且針對製備的各褐藻糖膠濃度進行評估。藉由直尺量測子宮角黏連之長度。使用等式2計算子宮角黏連長度。
將相同手術方法應用於5隻額外新西蘭白色家兔用於對照，各自接受約2 mL/kg對照乳酸林格氏注射USP（LRS）代替褐藻糖膠溶液。使用等式2測定接受LRS之對照組具有100%黏連覆蓋度。表20展示針對不同濃度及劑量下之高分子量聚海藻糖組成物使用上文所述的方法獲得之結果（總計四十個子宮角經治療，各濃度之高分子量聚海藻糖組成物各10個）；結果顯示黏連覆蓋度相對於對照組之減小。
Figure 108126172-A0304-0020
 表20：使用高分子量聚海藻糖組成物之家兔子宮角黏連相對於對照LRS的減小
如可自表20之結果可見，高分子量聚海藻糖可用於成功地抑制、預防、移除、減小或以其他方式治療手術後子宮角黏連。
除非上下文或定義另外明確指出，否則本文中所使用所有術語係根據其一般含義使用。同樣，除非另外明確指出，否則在本發明中使用「或」包括「及」且反之亦然。除非另外明確規定或上下文清晰指出，否則非限制性術語並不應理解為限制性的（例如，「包括」、「具有」及「包含」典型地指出「包括（但不限於）」）。除非另外明確規定或上下文清晰指出，否則諸如「一（a/an）」及「該」之單數形式（包括申請專利範圍中）包括複數個所指事物。
除非另外指出，否則修改具體實例之一或多個特徵之條件或關係特性的本文中之形容詞（諸如「實質上」及「約」）指出條件或特性係限定在針對其意欲應用的具體實例之操作可接受之容許度內。
本發明方法、組成物、系統等之範疇包括手段加上功能及步驟加上功能的概念兩者。然而，除非用語「手段」在申請專利範圍中具體描述，否則申請專利範圍並不應解釋為表示「手段加功能」關係，且應在用語「手段」在申請專利範圍中具體描述時解釋為表示「手段加功能」關係。類似地，除非用語「步驟」在申請專利範圍中具體描述，否則申請專利範圍不應解釋為表示「步驟加功能」關係，且應在用語「步驟」在申請專利範圍中具體描述時解釋為「步驟加功能」關係。
自前述內容將瞭解，儘管本文中已出於說明之目的論述特定實施方式，但可在不偏離本文中論述之精神及範圍的情況下作出各種修改。因此，本案之系統及方法等包括此類修改以及本文所闡述之標的之所有排列及組合且不受限制，除由所附申請專利範圍或在本文中之論述及圖式中具有充分支持之其他主張限制者之外。
100:基於分子量之分段系統（較高至較低） 100′:基於分子量之分段系統（較低至較高） 100'':陽離子強化TFF系統（CATS）: 102:輸入供應管線 104:預過濾器 106:較低MWCO子系統滲餘物管線閥 106':較低MWCO子系統輸出閥 108:較低MWCO子系統滲餘物輸出管線 110:較高分子量截斷TFF過濾器 111:較高MWCO子系統滲餘物輸出管線 112:較高MWCO TFF過濾器供應管線 113:較高至較低MWCO子系統間閥 114:較高MWCO子系統泵 115:較高MWCO子系統溶劑供應管線 116:較高MWCO子系統聚海藻糖容器 117:較高MWCO子系統溶劑容器 118:較高MWCO子系統滲餘物返回管線 119:較高MWCO子系統滲透物輸出管線 120:較低分子量截斷TFF過濾器 121:較低MWCO子系統滲餘物輸出管線108 122:較低MWCO TFF過濾器供應管線 123:較低至較高MWCO子系統間閥 124:較低MWCO子系統泵 125:較低MWCO子系統溶劑供應管線 126:較低MWCO子系統聚海藻糖容器 127:較低MWCO子系統溶劑容器 128:較低MWCO子系統滲餘物返回管線 129:較低MWCO子系統滲透物輸出管線 130:較高MWCO TFF子系統 130':較高MWCO TFF子系統（圖3） 135:陽離子添加劑沖洗溶液供應管線 136:陽離子添加劑沖洗溶液閥 137:陽離子添加劑沖洗溶液容器 140:較低MWCO子系統 140':較低MWCO TFF子系統（圖3） 142:鈉鹽溶液容器 143:低導電性滲濾溶液容器 144:鈉鹽溶液控制閥 145:低導電性滲濾溶液閥 146:鈉鹽溶液供應管線 147:低導電性滲濾溶液供應管線 150:較高MWCO TFF過濾器 160:較低MWCO TFF過濾器 600:用於從起始聚海藻糖組成物中獲得高分子量聚海藻糖之離心沈澱系統 600′:用於從起始聚海藻糖組成物中獲得高分子量聚海藻糖之離心沈澱系統 610:離心容器 620:分級可滲透障壁 620′:可滲透障壁 620a:障壁區段（第一 - 最高密度） 620b:障壁區段（第二 - 中等密度） 620c:障壁區段（第三 - 最低密度） 620c′:單一障壁區段 622:第一-底部分級可滲透障壁材料端 622′:第一-底部可滲透障壁材料端 624:第二-頂部分級可滲透障壁材料端 624′:第二-頂部可滲透障壁材料端 630:離心容器610之第一-底端 640:離心容器610之第二-頂端 650:起始聚海藻糖組成物 660:指出容器610上的離心力的方向之箭頭 670:離心箱 900:電泳萃取系統 910:電泳腔室 912:槽 914:理論位移距離 916:電泳凝膠 918:電泳緩衝液 920:直流電電源 922:陰極 924:陽極 926:遷移方向箭頭（描繪陰離子之位移方向） 800:用於自起始聚海藻糖組成物中獲得高分子量聚海藻糖之膜透析系統 801:輸入供應管線 802:預過濾器 810:聚海藻糖容器 812:透析系統供應管線 814:透析系統泵 815:經透析流體輸出閥 816:經透析流體返回管線 818:經透析流體輸出管線 820:透析單元 825:透析膜 830:透析容器 832:透析液供應管線 834:透析液泵 835:透析液流體輸出閥 836:透析液流體返回管線 838:透析液流體輸出管線 840:透析液容器 842:透析液供應管線 845:透析液供應閥 170:切向流過濾（TFF）子系統 171:TFF過濾器 172:TFF子系統過濾器供應管線 173:TFF子系統溶劑供應閥 174:TFF子系統泵 175:TFF子系統溶劑供應管線 176:TFF子系統聚海藻糖容器 177:TFF子系統溶劑容器 178:TFF子系統滲餘物管線 179:TFF子系統滲透物輸出管線 180:離子交換子系統 181:離子交換容器 182a:離子交換子系統聚海藻糖供應管線 182b:離子交換子系統鹽溶液供應管線 183a:離子交換子系統聚海藻糖返回閥 183b:離子交換子系統鹽溶液供應閥 183c:離子交換子系統鹽溶液返回閥 184a:離子交換子系統聚海藻糖泵 184b:離子交換子系統鹽溶液泵 186:離子交換子系統聚海藻糖容器 187:離子交換子系統鹽溶液容器 188a:離子交換子系統聚海藻糖返回管線 188b:離子交換子系統鹽溶液返回管線 189:大孔離子交換樹脂 300:離子吸附系統 301:輸入供應管線 302:子系統間閥 303:TFF子系統滲餘物輸出管線 304:離子交換子系統輸出閥 305:離子交換子系統輸出管線 306:預過濾器
圖 1 示意性地描繪用於使用連續切向流過濾基於分子量來將起始聚海藻糖組成物分段之例示性雙過濾器系統，該起始聚海藻糖具有寬廣分子量分佈。
圖 2 示意性地描繪用於使用連續切向流過濾基於分子量來將起始聚海藻糖組成物分段之雙過濾器系統的另一例示性具體實例，該起始聚海藻糖具有寬廣分子量分佈。
圖 3 示意性地描繪用於使用陽離子強化切向流過濾自起始聚海藻糖組成物中獲得所需高分子量聚海藻糖的例示性系統，該起始聚海藻糖具有寬廣分子量分佈。
圖 4 示意性地描繪用於使用梯度材料之多段障壁自起始聚海藻糖組成物中離心地沈澱高分子量聚海藻糖的例示性系統，該起始聚海藻糖具有寬廣分子量分佈。
圖 5 示意性地描繪用於使用單段障壁自起始聚海藻糖組成物中離心地沈澱高分子量聚海藻糖的例示性系統，該起始聚海藻糖具有寬廣分子量分佈。
圖 6 示意性地描繪用於藉由凝膠電泳萃取自起始聚海藻糖組成物中獲得高分子量聚海藻糖的例示性系統，該起始聚海藻糖具有寬廣分子量分佈。
圖 7 示意性地描繪用於藉由透析自起始聚海藻糖組成物中獲得高分子量聚海藻糖的例示性系統，該起始聚海藻糖具有寬廣分子量分佈。
圖 8 示意性地描繪用於使用離子吸附自起始聚海藻糖組成物中獲得所需高分子量聚海藻糖的例示性系統，該起始聚海藻糖具有寬廣分子量分佈。
圖 9A 描繪NMR結果，該等結果展現根據本文中之方法處理的某些聚海藻糖經歷聚海藻糖之結構性變化。
圖 9B 描繪2-D NMR結果，該等結果展現根據本文中之方法處理的某些聚海藻糖經歷聚海藻糖之化學結構性改變。
圖 10 顯示用於使用多段蔗糖障壁自起始聚海藻糖組成物中離心沈澱高分子量聚海藻糖的例示性系統，該起始聚海藻糖具有寬廣分子量分佈。
圖式呈現本發明之例示性具體實例。圖式未必按比例且可以有助於說明及解釋本發明系統、方法等之方式擴大或額外呈現某些特徵。本文中之系統、方法等之實際具體實例可包括圖式中未顯示的其他特徵或步驟。本文中陳述之例證以一或多種形式說明系統、方法等之具體實例，且此類例證不應被理解為以任何方式限制本發明之範圍。本文具體實例並非徹底詳盡的且不會將本文揭示內容限制於所揭示的精確形式，例如下文中之詳細描述。
100:基於分子量之分段系統(較高至較低)
102:輸入供應管線
104:預過濾器
106:較低MWCO子系統滲餘物管線閥
108:較低MWCO子系統滲餘物輸出管線
110:較高分子量截斷TFF過濾器
112:較高MWCO TFF過濾器供應管線
113:較高至較低MWCO子系統間閥
114:較高MWCO子系統泵
115:較高MWCO子系統溶劑供應管線
116:較高MWCO子系統聚海藻糖容器
117:較高MWCO子系統溶劑容器
118:較高MWCO子系統滲餘物返回管線
119:較高MWCO子系統滲透物輸出管線
120:較低分子量截斷TFF過濾器
122:較低MWCO TFF過濾器供應管線
124:較低MWCO子系統泵
125:較低MWCO子系統溶劑供應管線
126:較低MWCO子系統聚海藻糖容器
127:較低MWCO子系統溶劑容器
128:較低MWCO子系統滲餘物返回管線
129:較低MWCO子系統滲透物輸出管線
130:較高MWCO TFF子系統
140:較低MWCO子系統

Claims (85)

  1. 一種高分子量聚海藻糖，其基本上由一分子量分佈組成，其中當使用水性凝膠滲透層析法設置來量測時，該分佈之至少92% w/w大於100 kDa，該水性凝膠滲透層析法設置主要由以下組成： 一個具有7.8 mm內徑之300 mm分析型凝膠滲透層析管柱，裝填有基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，具有在約50 kDa與約5,000 kDa之間的有效分子量範圍；一個具有7.8 mm內徑之300 mm分析型凝膠滲透層析管柱，裝填有基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，具有在約1 kDa與約6,000 kDa之間的有效分子量範圍；及一個具有6 mm內徑之40 mm保護管柱，裝填有基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，該兩個分析型凝膠滲透層析管柱及該一個保護管柱包含於在約30℃下之管柱腔室中； 折射率偵測器，在約30℃下； 0.1M硝酸鈉流動相，以0.6 mL/min流動；及 相對於峰值分子量標準曲線進行定量，該峰值分子量標準曲線基本上由以下組成：第一聚葡萄糖標準品，峰值分子量為約2,200 kDa；第二聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約720 kDa與約760 kDa之間；第三聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約470 kDa與約510 kDa之間；第四聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約370 kDa與約410 kDa之間；第五聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約180 kDa與約220 kDa之間；及第六聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約40 kDa與55 kDa之間。
  2. 如請求項1所述的高分子量聚海藻糖，其中該分佈之至少95% w/w大於100 kDa。
  3. 如請求項1所述的高分子量聚海藻糖，其中該分佈之至少97% w/w大於100 kDa。
  4. 如請求項1所述的高分子量聚海藻糖，其中該分佈之至少98% w/w大於100 kDa。
  5. 如請求項1所述的高分子量聚海藻糖，其中該分佈之至少99% w/w大於100 kDa。
  6. 如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖，其包含在約100 kDa與10,000 kDa之間的重量平均分子量。
  7. 如請求項6所述的高分子量聚海藻糖，其包含在約140 kDa與8,100 kDa之間的重量平均分子量。
  8. 如請求項6所述的高分子量聚海藻糖，其中該重量平均分子量在約370 kDa與1900 kDa之間。
  9. 如請求項6所述的高分子量聚海藻糖，其中該重量平均分子量在約860 kDa與1600 kDa之間。
  10. 如請求項6所述的高分子量聚海藻糖，其中該重量平均分子量為約1,100 kDa。
  11. 如請求項6所述的高分子量聚海藻糖，其中該重量平均分子量為約1,200 kDa。
  12. 如請求項6所述的高分子量聚海藻糖，其中該重量平均分子量為約1,300 kDa。
  13. 如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖，其中數量平均分子量在約60 kDa與2,000 kDa之間。
  14. 如請求項13所述的高分子量聚海藻糖，其中數量平均分子量在約140 kDa與2,000 kDa之間。
  15. 如請求項13所述的高分子量聚海藻糖，其中數量平均分子量在約140 kDa與520 kDa之間。
  16. 如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖，其中該分佈之至少71% w/w大於約200 kDa。
  17. 如請求項16所述的高分子量聚海藻糖，其中該分佈之至少91% w/w大於約200 kDa。
  18. 如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖，其中該分佈之至少54% w/w大於約500 kDa。
  19. 如請求項18所述的高分子量聚海藻糖，其中該分佈之至少90% w/w大於約500 kDa。
  20. 如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖，其中硫酸鹽含量在約32% w/w與60% w/w之間。
  21. 如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖，其中總碳水化合物含量在約27% w/w與80% w/w之間。
  22. 如請求項21所述的高分子量聚海藻糖，其中總岩藻糖（fucose）含量佔總碳水化合物含量之百分比為至少約30% w/w。
  23. 如請求項21所述的高分子量聚海藻糖，其中總岩藻糖含量佔總碳水化合物含量之百分比為至少約80% w/w。
  24. 如請求項21所述的高分子量聚海藻糖，其中總岩藻糖含量佔總碳水化合物含量之百分比為至少約95% w/w。
  25. 如請求項21所述的高分子量聚海藻糖，其中總半乳糖含量佔總碳水化合物含量之百分比低於約60% w/w。
  26. 如請求項21所述的高分子量聚海藻糖，其中總半乳糖含量佔總碳水化合物含量之百分比為約2% w/w與20% w/w之間。
  27. 如請求項21所述的高分子量聚海藻糖，其中該總葡糖醛酸、甘露糖、鼠李糖、葡萄糖及木糖含量佔總碳水化合物含量之百分比低於約12% w/w。
  28. 如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖，其中當該高分子量聚海藻糖以50 mg/mL濃度溶解於水中時具有在約4 cP與50 cP之間的黏度。
  29. 如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖，其中當該高分子量聚海藻糖以50 mg/mL濃度溶解於水中時具有在約15 cP與30 cP之間的黏度。
  30. 如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖，其中該聚海藻糖包含小於5% w/w乙醯基含量。
  31. 如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖，其中該聚海藻糖包含小於2% w/w乙醯基含量。
  32. 如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖，其中當在70℃下藉由2D1 H-13 C異核間多重量子相干性量測時，該聚海藻糖包含實質上0% w/w之乙醯基含量，所述量測係利用配備有5mm冷探針之600 MHz光譜儀上之溶劑信號抑制下，在碳維度為10-30 ppm範圍內，以8次遞增之256-512次掃描進行每次量測。
  33. 一種高分子量聚海藻糖，其基本上由一分子量分佈組成，其中當使用水性凝膠滲透層析法設置來量測時，該分佈之約61% w/w與80% w/w之間在約200 kDa與1600 kDa之間，該水性凝膠滲透層析法設置基本上由以下組成： 一個具有7.8 mm內徑之300 mm分析型凝膠滲透層析管柱，裝填有基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，具有在約50 kDa與約5,000 kDa之間的有效分子量範圍；一個具有7.8 mm內徑之300 mm分析型凝膠滲透層析管柱，裝填有基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，具有在約1 kDa與約6,000 kDa之間的有效分子量範圍；及一個具有6 mm內徑之40 mm保護管柱，裝填有基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，該兩個分析型凝膠滲透層析管柱及該一個保護管柱包含於在約30℃下之管柱腔室中； 折射率偵測器，在約30℃下； 0.1M硝酸鈉流動相，以0.6 mL/min流動；及 相對於峰值分子量標準曲線進行定量，其基本上由以下組成：第一聚葡萄糖標準品，峰值分子量為約2,200 kDa；第二聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約720 kDa與約760 kDa之間；第三聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約470 kDa與約510 kDa之間；第四聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約370 kDa與約410 kDa之間；第五聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約180 kDa與約220 kDa之間；及第六聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約40 kDa與55 kDa之間。
  34. 一種高分子量聚海藻糖，其基本上由一分子量分佈組成，其中當使用水性凝膠滲透層析法來量測時，該分佈之至少60% w/w大於約1600 kDa，該水性凝膠滲透層析法設置基本上由以下組成： 一個具有7.8 mm內徑之300 mm分析型凝膠滲透層析管柱，裝填有基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，具有在約50 kDa與約5,000 kDa之間的有效分子量範圍；一個具有7.8 mm內徑之300 mm分析型凝膠滲透層析管柱，裝填有基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，具有在約1 kDa與約6,000 kDa之間的有效分子量範圍；及一個具有6 mm內徑之40 mm保護管柱，裝填有基於羥基化聚甲基丙烯酸酯的凝膠，該兩個分析型凝膠滲透層析管柱及該一個保護管柱包含於在約30℃下之管柱腔室中； 折射率偵測器，在約30℃下； 0.1M硝酸鈉流動相，以0.6 mL/min流動；及 相對於峰值分子量標準曲線進行定量，其基本上由以下組成：第一聚葡萄糖標準品，峰值分子量為約2,200 kDa；第二聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約720 kDa與約760 kDa之間；第三聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約470 kDa與約510 kDa之間；第四聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約370 kDa與約410 kDa之間；第五聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約180 kDa與約220 kDa之間；及第六聚葡萄糖標準品，峰值分子量在約40 kDa與55 kDa之間。
  35. 一種包含製造高分子量聚海藻糖之方法，該高分子量聚海藻糖為如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖。
  36. 一種包含使用高分子量聚海藻糖之方法，該高分子量聚海藻糖為如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖。
  37. 一種如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖之用途，其用於製造供治療纖維性黏連之醫藥品。
  38. 一種醫療上可接受之聚海藻糖組成物，其在醫療上可接受之緩衝劑或稀釋劑中包含治療有效量之含如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖。
  39. 一種如請求項38所述的醫療上可接受之聚海藻糖組成物之用途，其用於製造供治療動物之病狀或疾病的醫藥品，其中該醫藥品以包含約0.5 mg/kg與50 mg/kg之間的該高分子量聚海藻糖的治療有效量投予該動物。
  40. 如請求項39所述的用途，其中該治療有效量在約1 mg/kg與5 mg/kg之間。
  41. 如請求項39所述的用途，其中該治療有效量在約1.5 mg/kg與3 mg/kg之間。
  42. 如請求項39所述的用途，其中該治療有效量在約5 mg/kg與10 mg/kg之間。
  43. 如請求項39所述的用途，其中該病狀或疾病為該動物之目標部位處的纖維性黏連，且其中該投予包含向該目標部位投予該治療有效量。
  44. 一種如請求項38所述的醫療上可接受之聚海藻糖組成物之用途，其用於製造供治療動物之病狀或疾病的醫藥品，其中該醫藥品以約0.04 mg/kg與25 mg/kg之間的該高分子量聚海藻糖之治療有效量投予該動物。
  45. 如請求項44所述的用途，其中該治療有效量在約0.2 mg/kg與10 mg/kg之間。
  46. 一種醫療組成物，其包含在約0.02 mg/mL與100 mg/mL之間的如請求項1至5中任一項所述的高分子量聚海藻糖，其中該醫療組成物經設定及構成以用於治療動物之疾病或病狀。
  47. 如請求項46所述的醫療組成物，其包含在約0.5 mg/mL與5 mg/mL之間的該高分子量聚海藻糖。
  48. 如請求項46之所述醫學組成物，其包含約2.5 mg/mL之該高分子量聚海藻糖。
  49. 如請求項46所述的醫療組成物，其中該醫療組成物為醫療裝置。
  50. 如請求項46所述的醫療組成物，其中該疾病或病狀為纖維性黏連。
  51. 一種如請求項46所述的醫療組成物之用途，其用於製造供治療患者之纖維性黏連的醫藥品，其中該醫藥品係被投予至該患者之目標部位，其中該目標部位為手術部位，且在以下中之至少一者時投予該藥物：a）在打開該手術部位處之手術傷口後，b）在手術期間及c）在關閉該手術傷口後。
  52. 如請求項51所述的用途，其中在手術後且在閉合該手術傷口之前投予該醫藥品。
  53. 如請求項51所述的用途，其中該投予耗時小於2分鐘。
  54. 一種用於獲得高分子量聚海藻糖之方法，其包含：  將具有寬廣分子量分佈之起始聚海藻糖組成物提供於起始溶液中，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段； 使該起始溶液在第一較高分子量截斷切向流過濾過濾器上經歷第一切向流過濾，以產生第一滲透聚海藻糖組成物；及 使該第一滲透聚海藻糖組成物在第二較低分子量截斷切向流過濾過濾器上經歷第二切向流過濾，以產生基本上由該所需高分子量聚海藻糖組成之第二滲餘聚海藻糖組成物。
  55. 如請求項54所述的方法，其中該第一較高分子量截斷切向流過濾過濾器具有在約50 kDa與約1000 kDa之間的較高分子量截斷且該第二較低分子量截斷切向流過濾過濾器具有在約30 kDa與約100 kDa之間的較低分子量截斷。
  56. 如請求項55所述的方法，其中該較高分子量截斷為約300 kDa且該較低分子量截斷為約100 kDa。
  57. 一種用於獲得高分子量聚海藻糖之方法，其包含： 將具有寬廣分子量分佈之起始聚海藻糖組成物提供於起始溶液中，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段； 使該起始溶液在第一較低分子量截斷切向流過濾過濾器上經歷切向流過濾，以產生第一滲餘聚海藻糖組成物；及 使該第一滲餘聚海藻糖組成物在第二較高分子量截斷切向流過濾過濾器上經歷切向流過濾，以產生基本上由該所需高分子量聚海藻糖組成之第二滲透聚海藻糖組成物。
  58. 如請求項57所述的方法，其中該第一較低分子量截斷切向流過濾過濾器具有在約30 kDa與約100 kDa之間的較低分子量截斷且該第二較高分子量截斷切向流過濾過濾器具有在約50 kDa與約1000 kDa之間的較高分子量截斷。
  59. 如請求項57所述的方法，其中該較低分子量截斷為約100 kDa且該較高分子量截斷為約300 kDa。
  60. 一種用於獲得高分子量聚海藻糖之方法，其包含： 將具有寬廣分子量分佈之起始聚海藻糖組成物提供於起始溶液中，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段，該起始聚海藻糖組成物包含低原子量陽離子，該等低原子量陽離子以離子方式結合於該組成物中之聚海藻糖上之硫酸根基團；及 使該起始溶液相對於包含陽離子添加劑之陽離子添加溶液經歷切向流過濾以產生基本上由該所需高分子量聚海藻糖組成之滲餘聚海藻糖組成物，該陽離子添加劑具有比該等低原子量陽離子更大的分子量。
  61. 如請求項60所述的方法，其中該等低原子量陽離子包含以下中之至少一者：鹼金屬、鹼土金屬、鋁及銨。
  62. 如請求項60所述的方法，其中該陽離子添加劑包含以下中之至少一者：膽鹼、聚乙烯吡咯啶酮、牛磺酸、多元胺、聚葡萄胺糖、組織蛋白及膠原蛋白。
  63. 如請求項60所述的方法，其進一步包含藉由在第二切向流過濾過濾器上相對於鹽溶液來滲濾（diafiltering）該滲餘聚海藻糖組成物來移除該陽離子添加劑，該第二切向流過濾過濾器之分子量截斷低於該第一切向流過濾過濾器之分子量截斷。
  64. 一種用於獲得高分子量聚海藻糖之方法，其包含：  提供離心容器，該離心容器包含底端及頂端以及其間之可滲透障壁，該可滲透障壁其間包含梯度材料； 將具有寬廣分子量分佈之起始聚海藻糖組成物置放在該離心容器中且在該可滲透障壁上方，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段；及 將該離心容器離心持續足以產生沈澱物之時間段，該沈澱物基本上由該所需高分子量聚海藻糖組成。
  65. 如請求項64所述的方法，其中該可滲透障壁包含複數個梯度材料區段。
  66. 如請求項64所述的方法，其中該離心力在約10,000重力至約1,000,000重力之間。
  67. 一種用於獲得高分子量聚海藻糖之方法，其包含： 提供包含底端及頂端之離心容器； 將具有寬廣分子量分佈之含起始聚海藻糖組成物之起始溶液置放於該離心容器中，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段；及 將該離心容器離心持續足以產生沈澱物之時間段，該沈澱物基本上由該所需高分子量聚海藻糖組成。
  68. 如請求項67所述的方法，其中該離心力在約200,000重力至約1,000,000重力之間。
  69. 一種用於獲得高分子量聚海藻糖之方法，其包含： 使具有寬廣分子量分佈之起始聚海藻糖組成物經歷凝膠電泳，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段，其中該起始聚海藻糖組成物根據電泳凝膠兩端之質荷比來位移； 選擇基本上由該所需高分子量聚海藻糖組成之該電泳凝膠之一部分；且 自該電泳凝膠之該選定部分中萃取該所需高分子量聚海藻糖。
  70. 如請求項69所述的方法，其中使該起始聚海藻糖組成物經歷凝膠電泳包含將約10伏特/公分與200伏特/公分之間的電位差施加在該電泳凝膠兩端。
  71. 如請求項69所述的方法，其中自該電泳凝膠之該選定部分中萃取該所需高分子量聚海藻糖可包含在溶劑中攪拌該電泳凝膠之該選定部分。
  72. 一種用於獲得高分子量聚海藻糖之方法，其包含： 提供具有寬廣分子量分佈之起始聚海藻糖組成物及離子交換大孔樹脂，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段；及 使該起始聚海藻糖組成物與該離子交換大孔樹脂經歷離子交換，以獲得基本上由該所需高分子量聚海藻糖組成之經離子交換處理的聚海藻糖組成物。
  73. 如請求項72所述的方法，其中該離子交換大孔樹脂包含陰離子交換大孔樹脂及混合電荷大孔樹脂中之至少一者。
  74. 如請求項73所述的方法，其中該陰離子交換大孔樹脂為強鹼大孔樹脂。
  75. 如請求項73所述的方法，其中該陰離子交換大孔樹脂為弱鹼大孔樹脂。
  76. 如請求項72所述的方法，其中該離子交換大孔樹脂具有在約5 nm與約1000 nm之間的孔徑。
  77. 如請求項76所述的方法，其中該孔徑在約10 nm與約100 nm之間。
  78. 如請求項72所述的方法，其中該離子交換大孔樹脂具有在約50 kDa與約50,000 kDa之間的排出限制。
  79. 如請求項78所述的方法，其中該排出限制在約1,000 kDa與約9,000 kDa之間。
  80. 一種用於獲得高分子量聚海藻糖之方法，其包含： 提供含具有寬廣分子量分佈之起始聚海藻糖組成物之起始溶液及凝膠介質，該寬廣分子量分佈包含所需高分子量聚海藻糖區段； 使該起始溶液經歷製備型凝膠滲透層析，其中該起始聚海藻糖組成物根據分子量在該凝膠介質中自第一輸入端位移至第二輸出端；及 自該第二輸出端收集基本上由該所需高分子量聚海藻糖區段組成之至少一個等分試樣。
  81. 如請求項80所述的方法，其中該凝膠介質包含於管柱中。
  82. 如請求項80所述的方法，其中該凝膠介質具有在約3 nm與約10,000 nm之間的孔徑。
  83. 如請求項80所述的方法，其中該孔徑在約3 nm與約3000 nm之間。
  84. 如請求項80所述的方法，其中該凝膠介質具有在約100 Da與約100,000 kDa之間的排出限制。
  85. 如請求項80所述的方法，其中該凝膠介質具有在約100 kDa與約30,000 kDa之間的排出限制。
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