NO344187B1 - Immunogen sammensetning, vaksine omfattende denne og fremgangsmåte for fremstilling av vaksinen. - Google Patents
Immunogen sammensetning, vaksine omfattende denne og fremgangsmåte for fremstilling av vaksinen. Download PDFInfo
- Publication number
- NO344187B1 NO344187B1 NO20082646A NO20082646A NO344187B1 NO 344187 B1 NO344187 B1 NO 344187B1 NO 20082646 A NO20082646 A NO 20082646A NO 20082646 A NO20082646 A NO 20082646A NO 344187 B1 NO344187 B1 NO 344187B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- protein
- saccharide
- vaccine
- immunogenic composition
- phtd
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 176
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims description 157
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 title claims description 75
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 48
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 163
- 229960003983 diphtheria toxoid Drugs 0.000 claims description 52
- 101710183389 Pneumolysin Proteins 0.000 claims description 30
- 108010071134 CRM197 (non-toxic variant of diphtheria toxin) Proteins 0.000 claims description 29
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 claims description 19
- -1 19A saccharide Chemical class 0.000 claims description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 17
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 17
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 claims description 15
- 206010033078 Otitis media Diseases 0.000 claims description 14
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 11
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 claims description 8
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 claims description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 7
- 208000035109 Pneumococcal Infections Diseases 0.000 claims description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 5
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 claims description 5
- 208000031729 Bacteremia Diseases 0.000 claims description 4
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 claims description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 4
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 claims description 4
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 claims description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 154
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 154
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 151
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 146
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 136
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 135
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 114
- 101710188053 Protein D Proteins 0.000 description 75
- 101710132893 Resolvase Proteins 0.000 description 75
- 102100037840 Dehydrogenase/reductase SDR family member 2, mitochondrial Human genes 0.000 description 74
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 63
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 60
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 60
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 43
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 42
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 40
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 40
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 37
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 36
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 34
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 30
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 29
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 27
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 27
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 26
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 25
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 25
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 25
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 25
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 25
- 241000606768 Haemophilus influenzae Species 0.000 description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 23
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 22
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 208000022760 infectious otitis media Diseases 0.000 description 21
- 230000004044 response Effects 0.000 description 21
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 20
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 20
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 20
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 20
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 20
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 18
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 17
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 17
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 17
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 17
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 17
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 16
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 16
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 16
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 16
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 16
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 16
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 15
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 15
- CTMZLDSMFCVUNX-VMIOUTBZSA-N cytidylyl-(3'->5')-guanosine Chemical class O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=C(C(N=C(N)N3)=O)N=C2)O)[C@@H](CO)O1 CTMZLDSMFCVUNX-VMIOUTBZSA-N 0.000 description 15
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 15
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 14
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 14
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 13
- 238000001994 activation Methods 0.000 description 13
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 13
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 13
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 13
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 13
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 12
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 12
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 12
- DFUSDJMZWQVQSF-XLGIIRLISA-N (2r)-2-methyl-2-[(4r,8r)-4,8,12-trimethyltridecyl]-3,4-dihydrochromen-6-ol Chemical class OC1=CC=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1 DFUSDJMZWQVQSF-XLGIIRLISA-N 0.000 description 11
- 108010060123 Conjugate Vaccines Proteins 0.000 description 11
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 11
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 11
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 11
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 11
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 229940031670 conjugate vaccine Drugs 0.000 description 11
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 description 11
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 11
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 11
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 11
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 10
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 10
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 10
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 10
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 10
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 10
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 10
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 10
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 10
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 10
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 10
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 10
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 10
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 10
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 9
- 101710099976 Photosystem I P700 chlorophyll a apoprotein A1 Proteins 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 9
- 239000004643 cyanate ester Substances 0.000 description 9
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 9
- 229940047650 haemophilus influenzae Drugs 0.000 description 9
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 210000001806 memory b lymphocyte Anatomy 0.000 description 9
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 9
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 9
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 9
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 9
- 101100420868 Anuroctonus phaiodactylus phtx gene Proteins 0.000 description 8
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 8
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 8
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 8
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 8
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 8
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 8
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 7
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N d-alpha-tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229960004279 formaldehyde Drugs 0.000 description 7
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 7
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 7
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 7
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 7
- 101710164918 Choline-binding protein Proteins 0.000 description 6
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 6
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 6
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 6
- 241000701959 Escherichia virus Lambda Species 0.000 description 6
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 6
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 6
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 108091016312 choline binding proteins Proteins 0.000 description 6
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 6
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 6
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108700039582 histidine triad Proteins 0.000 description 6
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 6
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 6
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 6
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 6
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 5
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 5
- 108010084884 GDP-mannose transporter Proteins 0.000 description 5
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 5
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 5
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 5
- 208000002352 blister Diseases 0.000 description 5
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 5
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 5
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 5
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 5
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 5
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 5
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 5
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 5
- 235000010384 tocopherol Nutrition 0.000 description 5
- 229960001295 tocopherol Drugs 0.000 description 5
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 5
- PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)butanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCN1C(=O)C=CC1=O PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hy Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)C)(C)CC(O)[C@]1(CCC(CC14)(C)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N 0.000 description 4
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 4
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 4
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 4
- 101150002054 galE gene Proteins 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 4
- 150000002632 lipids Chemical group 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 230000001320 lysogenic effect Effects 0.000 description 4
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 4
- 101150115254 phtD gene Proteins 0.000 description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 4
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 4
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 0.000 description 3
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 3
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 3
- 241000588655 Moraxella catarrhalis Species 0.000 description 3
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 3
- PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N Sorbitan trioleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N 0.000 description 3
- 201000005010 Streptococcus pneumonia Diseases 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 3
- XUGUHTGSMPZQIW-UHFFFAOYSA-N [[4-(4-diazonioiminocyclohexa-2,5-dien-1-ylidene)cyclohexa-2,5-dien-1-ylidene]hydrazinylidene]azanide Chemical group C1=CC(N=[N+]=[N-])=CC=C1C1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1 XUGUHTGSMPZQIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 3
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 229940024545 aluminum hydroxide Drugs 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 3
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 229940001442 combination vaccine Drugs 0.000 description 3
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 3
- 238000013461 design Methods 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 3
- 238000005243 fluidization Methods 0.000 description 3
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 3
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 3
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 3
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 238000000569 multi-angle light scattering Methods 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 229940031999 pneumococcal conjugate vaccine Drugs 0.000 description 3
- 229940124733 pneumococcal vaccine Drugs 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 229940044655 toll-like receptor 9 agonist Drugs 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108010034055 CRM45 fragment of diphtheria toxin Proteins 0.000 description 2
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- 206010014020 Ear pain Diseases 0.000 description 2
- 241001646716 Escherichia coli K-12 Species 0.000 description 2
- 206010061190 Haemophilus infection Diseases 0.000 description 2
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001092142 Molina Species 0.000 description 2
- 241000588650 Neisseria meningitidis Species 0.000 description 2
- 206010033101 Otorrhoea Diseases 0.000 description 2
- 201000005702 Pertussis Diseases 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 239000012564 Q sepharose fast flow resin Substances 0.000 description 2
- 241001454523 Quillaja saponaria Species 0.000 description 2
- 235000009001 Quillaja saponaria Nutrition 0.000 description 2
- 239000012506 Sephacryl® Substances 0.000 description 2
- 101100021843 Shigella flexneri lpxM1 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100021844 Shigella flexneri lpxM2 gene Proteins 0.000 description 2
- 229940124858 Streptococcus pneumoniae vaccine Drugs 0.000 description 2
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 2
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 2
- 108010060804 Toll-Like Receptor 4 Proteins 0.000 description 2
- 229940123560 Toll-like receptor 4 agonist Drugs 0.000 description 2
- 102100039390 Toll-like receptor 7 Human genes 0.000 description 2
- 102100033110 Toll-like receptor 8 Human genes 0.000 description 2
- 108010031133 Transferrin-Binding Protein A Proteins 0.000 description 2
- 108010031127 Transferrin-Binding Protein B Proteins 0.000 description 2
- FHICGHSMIPIAPL-HDYAAECPSA-N [2-[3-[6-[3-[(5R,6aS,6bR,12aR)-10-[6-[2-[2-[4,5-dihydroxy-3-(3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]ethoxy]ethyl]-3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl]oxy-5-hydroxy-2,2,6a,6b,9,9,12a-heptamethyl-1,3,4,5,6,6a,7,8,8a,10,11,12,13,14b-tetradecahydropicene-4a-carbonyl]peroxypropyl]-5-[[5-[8-[3,5-dihydroxy-4-(3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]octoxy]-3,4-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]methoxy]-3,4-dihydroxyoxan-2-yl]propoxymethyl]-5-hydroxy-3-[(6S)-6-hydroxy-2,6-dimethylocta-2,7-dienoyl]oxy-6-methyloxan-4-yl] (2E,6S)-6-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-methylocta-2,7-dienoate Chemical compound C=C[C@@](C)(O)CCC=C(C)C(=O)OC1C(OC(=O)C(\CO)=C\CC[C@](C)(O)C=C)C(O)C(C)OC1COCCCC1C(O)C(O)C(OCC2C(C(O)C(OCCCCCCCCC3C(C(OC4C(C(O)C(O)CO4)O)C(O)CO3)O)C(C)O2)O)C(CCCOOC(=O)C23C(CC(C)(C)CC2)C=2[C@@]([C@]4(C)CCC5C(C)(C)C(OC6C(C(O)C(O)C(CCOCCC7C(C(O)C(O)CO7)OC7C(C(O)C(O)CO7)O)O6)O)CC[C@]5(C)C4CC=2)(C)C[C@H]3O)O1 FHICGHSMIPIAPL-HDYAAECPSA-N 0.000 description 2
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 2
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 2
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 101150034144 ci gene Proteins 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- GCSHATLPTFNXOS-UHFFFAOYSA-N decane-1,10-diol Chemical compound OCCCCCCCCCCO.OCCCCCCCCCCO GCSHATLPTFNXOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K dioxido-sulfanylidene-sulfido-$l^{5}-phosphane Chemical group [O-]P([O-])([S-])=S NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 210000000959 ear middle Anatomy 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 150000008271 glucosaminides Chemical class 0.000 description 2
- SYECJBOWSGTPLU-UHFFFAOYSA-N hexane-1,1-diamine Chemical compound CCCCCC(N)N SYECJBOWSGTPLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 description 2
- 101150018810 lgtB gene Proteins 0.000 description 2
- 101150060640 lpxM gene Proteins 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000002923 metal particle Substances 0.000 description 2
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 2
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N octanoic acid Chemical compound CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 229960001973 pneumococcal vaccines Drugs 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 2
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 230000000601 reactogenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000006268 reductive amination reaction Methods 0.000 description 2
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N resorcinol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 239000012465 retentate Substances 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 210000000434 stratum corneum Anatomy 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 2
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 2
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 2
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 2
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000003970 toll like receptor agonist Substances 0.000 description 2
- 229940044616 toll-like receptor 7 agonist Drugs 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000033 toxigenic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001551 toxigenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 2
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N tributyl phosphate Chemical compound CCCCOP(=O)(OCCCC)OCCCC STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 210000003454 tympanic membrane Anatomy 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 2
- NKUZQMZWTZAPSN-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 2-bromoacetate Chemical compound BrCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O NKUZQMZWTZAPSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[(2-iodoacetyl)amino]benzoate Chemical compound C1=CC(NC(=O)CI)=CC=C1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- AWAFMFHOLVZLFG-UHFFFAOYSA-N 1-iodoaziridine-2,3-dione Chemical compound IN1C(=O)C1=O AWAFMFHOLVZLFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NJNWCIAPVGRBHO-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyethyl-dimethyl-[(oxo-$l^{5}-phosphanylidyne)methyl]azanium Chemical group OCC[N+](C)(C)C#P=O NJNWCIAPVGRBHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 2-nitrosoguanidine Chemical compound NC(N)=NN=O WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RHKWIGHJGOEUSM-UHFFFAOYSA-N 3h-imidazo[4,5-h]quinoline Chemical class C1=CN=C2C(N=CN3)=C3C=CC2=C1 RHKWIGHJGOEUSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OTLNPYWUJOZPPA-UHFFFAOYSA-N 4-nitrobenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 OTLNPYWUJOZPPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 229910017119 AlPO Inorganic materials 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 101100451792 Bacillus subtilis (strain 168) htrB gene Proteins 0.000 description 1
- 201000001178 Bacterial Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 1
- 101100453077 Botryococcus braunii HDR gene Proteins 0.000 description 1
- 229910001369 Brass Inorganic materials 0.000 description 1
- 102100021935 C-C motif chemokine 26 Human genes 0.000 description 1
- MTNGROIEEUCDSK-UHFFFAOYSA-N CC[IH]N1C(=O)C1=O Chemical compound CC[IH]N1C(=O)C1=O MTNGROIEEUCDSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010053406 CRM 107 Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005635 Caprylic acid (CAS 124-07-2) Substances 0.000 description 1
- 241000700112 Chinchilla Species 0.000 description 1
- 241000193163 Clostridioides difficile Species 0.000 description 1
- 101100243926 Comamonas testosteroni phtD gene Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 101150036540 Copb1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000186227 Corynebacterium diphtheriae Species 0.000 description 1
- 230000007064 DNA hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 206010011878 Deafness Diseases 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 238000011510 Elispot assay Methods 0.000 description 1
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 101000874355 Escherichia coli (strain K12) Outer membrane protein assembly factor BamA Proteins 0.000 description 1
- 101100402127 Escherichia coli (strain K12) moaA gene Proteins 0.000 description 1
- 238000000729 Fisher's exact test Methods 0.000 description 1
- 101000597577 Gluconacetobacter diazotrophicus (strain ATCC 49037 / DSM 5601 / CCUG 37298 / CIP 103539 / LMG 7603 / PAl5) Outer membrane protein Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100406392 Haemophilus influenzae (strain ATCC 51907 / DSM 11121 / KW20 / Rd) omp26 gene Proteins 0.000 description 1
- 229940124914 Havrix Drugs 0.000 description 1
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101000897493 Homo sapiens C-C motif chemokine 26 Proteins 0.000 description 1
- 101100005713 Homo sapiens CD4 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000873843 Homo sapiens Sorting and assembly machinery component 50 homolog Proteins 0.000 description 1
- 101000669402 Homo sapiens Toll-like receptor 7 Proteins 0.000 description 1
- 101000800483 Homo sapiens Toll-like receptor 8 Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 229920001612 Hydroxyethyl starch Polymers 0.000 description 1
- 101150081923 IL4 gene Proteins 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 206010022998 Irritability Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 206010024264 Lethargy Diseases 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 1
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N Muraminsaeure Natural products OC(=O)C(C)OC1C(N)C(O)OC(CO)C1O MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 241000588653 Neisseria Species 0.000 description 1
- 241000588677 Neisseria meningitidis serogroup B Species 0.000 description 1
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- 238000011795 OF1 mouse Methods 0.000 description 1
- 101001028244 Onchocerca volvulus Fatty-acid and retinol-binding protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 101710116435 Outer membrane protein Proteins 0.000 description 1
- 101150025437 PSAH gene Proteins 0.000 description 1
- 229940124908 Pediarix Drugs 0.000 description 1
- 108010013639 Peptidoglycan Proteins 0.000 description 1
- 102100035181 Plastin-1 Human genes 0.000 description 1
- 208000009362 Pneumococcal Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010035728 Pneumonia pneumococcal Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 230000004570 RNA-binding Effects 0.000 description 1
- 108010034634 Repressor Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000009661 Repressor Proteins Human genes 0.000 description 1
- 235000019774 Rice Bran oil Nutrition 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 1
- 101000832034 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) Inactive diphosphatase DCS2 Proteins 0.000 description 1
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 description 1
- 150000004753 Schiff bases Chemical class 0.000 description 1
- 101710084578 Short neurotoxin 1 Proteins 0.000 description 1
- 239000004147 Sorbitan trioleate Substances 0.000 description 1
- 102100035853 Sorting and assembly machinery component 50 homolog Human genes 0.000 description 1
- 208000035345 Spontaneous Perforation Diseases 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 1
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 1
- 108010060825 Toll-Like Receptor 7 Proteins 0.000 description 1
- 108010060752 Toll-Like Receptor 8 Proteins 0.000 description 1
- 102000008235 Toll-Like Receptor 9 Human genes 0.000 description 1
- 108010060818 Toll-Like Receptor 9 Proteins 0.000 description 1
- 229940123384 Toll-like receptor (TLR) agonist Drugs 0.000 description 1
- 102000008228 Toll-like receptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010060888 Toll-like receptor 2 Proteins 0.000 description 1
- 229940099412 Toll-like receptor 2 agonist Drugs 0.000 description 1
- 102000008230 Toll-like receptor 3 Human genes 0.000 description 1
- 108010060885 Toll-like receptor 3 Proteins 0.000 description 1
- 229940124122 Toll-like receptor 3 agonist Drugs 0.000 description 1
- 229940122089 Toll-like receptor 8 agonist Drugs 0.000 description 1
- 101710182223 Toxin B Proteins 0.000 description 1
- 101710182532 Toxin a Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710151579 Zinc metalloproteinase Proteins 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- IBVAQQYNSHJXBV-UHFFFAOYSA-N adipic acid dihydrazide Chemical compound NNC(=O)CCCCC(=O)NN IBVAQQYNSHJXBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- DIZPMCHEQGEION-UHFFFAOYSA-H aluminium sulfate (anhydrous) Chemical compound [Al+3].[Al+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O DIZPMCHEQGEION-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229940024546 aluminum hydroxide gel Drugs 0.000 description 1
- 229940009859 aluminum phosphate Drugs 0.000 description 1
- SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K aluminum;trihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical class N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003497 anti-pneumococcal effect Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000010951 brass Substances 0.000 description 1
- 125000001246 bromo group Chemical group Br* 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 210000004081 cilia Anatomy 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000013599 cloning vector Substances 0.000 description 1
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 1
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- OOTFVKOQINZBBF-UHFFFAOYSA-N cystamine Chemical compound CCSSCCN OOTFVKOQINZBBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940099500 cystamine Drugs 0.000 description 1
- UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N cysteamine Chemical compound NCCS UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical class NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 229940009976 deoxycholate Drugs 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N dihydromaleimide Natural products O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 1
- 208000007176 earache Diseases 0.000 description 1
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003114 enzyme-linked immunosorbent spot assay Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000009477 glass transition Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical class O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940045808 haemophilus influenzae type b Drugs 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000010370 hearing loss Effects 0.000 description 1
- 231100000888 hearing loss Toxicity 0.000 description 1
- 208000016354 hearing loss disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 description 1
- 125000000717 hydrazino group Chemical group [H]N([*])N([H])[H] 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229940050526 hydroxyethylstarch Drugs 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960002751 imiquimod Drugs 0.000 description 1
- DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N imiquimod Chemical compound C1=CC=CC2=C3N(CC(C)C)C=NC3=C(N)N=C21 DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 208000033447 immunodeficiency 67 Diseases 0.000 description 1
- 230000002480 immunoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 101150066555 lacZ gene Proteins 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 230000004446 light reflex Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000029226 lipidation Effects 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 101150011311 lpxL gene Proteins 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229960003151 mercaptamine Drugs 0.000 description 1
- 239000013528 metallic particle Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940031348 multivalent vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- RYRIMPODRHVEIW-UHFFFAOYSA-N n-(2-phenylethyl)nitramide Chemical compound [O-][N+](=O)NCCC1=CC=CC=C1 RYRIMPODRHVEIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N n-Triacontane Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 125000002868 norbornyl group Chemical group C12(CCC(CC1)C2)* 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229960002446 octanoic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000000625 opsonophagocytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002578 otoscopy Methods 0.000 description 1
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004976 peripheral blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001322 periplasm Anatomy 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 description 1
- 108010049148 plastin Proteins 0.000 description 1
- 229920002627 poly(phosphazenes) Polymers 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 229940031937 polysaccharide vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229950010550 resiquimod Drugs 0.000 description 1
- BXNMTOQRYBFHNZ-UHFFFAOYSA-N resiquimod Chemical compound C1=CC=CC2=C(N(C(COCC)=N3)CC(C)(C)O)C3=C(N)N=C21 BXNMTOQRYBFHNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001533 respiratory mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 239000008165 rice bran oil Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000010686 shark liver oil Substances 0.000 description 1
- 229940069764 shark liver oil Drugs 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 235000019337 sorbitan trioleate Nutrition 0.000 description 1
- 229960000391 sorbitan trioleate Drugs 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 229940032094 squalane Drugs 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 208000022218 streptococcal pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 210000004304 subcutaneous tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 229940093609 tricaprylin Drugs 0.000 description 1
- VLPFTAMPNXLGLX-UHFFFAOYSA-N trioctanoin Chemical compound CCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCC)COC(=O)CCCCCCC VLPFTAMPNXLGLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical class [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000002525 ultrasonication Methods 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000002569 water oil cream Substances 0.000 description 1
- 238000004271 weak anion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 239000010497 wheat germ oil Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
- A61K39/092—Streptococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/385—Haptens or antigens, bound to carriers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
- A61K47/6415—Toxins or lectins, e.g. clostridial toxins or Pseudomonas exotoxins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
- A61K47/646—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent the entire peptide or protein drug conjugate elicits an immune response, e.g. conjugate vaccines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
- A61P27/14—Decongestants or antiallergics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/16—Otologicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
- A61K2039/575—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2 humoral response
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
- A61K2039/6031—Proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
- A61K2039/6031—Proteins
- A61K2039/6037—Bacterial toxins, e.g. diphteria toxoid [DT], tetanus toxoid [TT]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
- A61K2039/6031—Proteins
- A61K2039/6068—Other bacterial proteins, e.g. OMP
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
- A61K2039/6087—Polysaccharides; Lipopolysaccharides [LPS]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/62—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the link between antigen and carrier
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/62—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the link between antigen and carrier
- A61K2039/627—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the link between antigen and carrier characterised by the linker
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Virology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
Oppfinnelsens område
Foreliggende oppfinnelse angår en forbedret Streptococcus pneumonia-vaksine. Foreliggende oppfinnelse angår mere spesielt en immunogen sammensetning, en vaksine som omfatter denne og en fremgangsmåte for fremstilling av vaksinen. Oppfinnelsen angår også den immunogene sammensetning samt vaksinen for anvendelse i behandling eller forebygging av sykdommer forårsaket av Streptococcus pneumonia infeksjon.
Bakgrunn for oppfinnelsen
Barn som er mindre enn 2 år gamle setter ikke i gang en immunrespons mot de fleste polysakkaridvaksiner, derfor har det vært nødvendig å gjøre polysakkaridene immunogene ved kjemisk konjugering til en proteinbærer. Kobling av polysakkaridet, et T-uavhengig antigen, til et protein, et T-avhengig antigen, gir polysakkaridet egenskapene av T-avhengighet omfattende isotype switching, affinitetsmodning og hukommelse induksjon.
Imidlertid kan det være problemer med gjentatt administrering av polysakkaridprotein-konjugater eller kombinasjon av polysakkarid-protein-konjugater for å danne multivalente vaksiner. For eksempel har det blitt angitt at en Haemophilus influenzae type b polysakkarid (PRP)-vaksine hvor tetanustoksoid (TT) anvendes som proteinbæreren ble testet i et doseområde med samtidig immunisering med (fritt) TT og en pneumokokk-polysakkarid-TT konjugat-vaksine etter en standard plan for barn. Ettersom dosen av pneumokk-vaksinen ble øket, ble immunresponsen mot PRP polysakkarid-delen av Hib konjugat-vaksinen redusert, hvilket indikerer immun interferens av polysakkaridet, muligens gjennom anvendelse av samme bærerprotein (Dagan et al., Infect Immun. (1998); 66: 2093-2098)
Effekten av dosen av bærerprotein på den humorale responsen på proteinet i seg selv har også vist seg å være mangefasettert. Hos barn ble det angitt at økning av dosen av et tetravalent tetanustoksoid-konjugat resulterte i en redusert respons på tetanus-bæreren (Dagan et al. supra). Klassisk analyse av disse effektene av kombinasjonsvaksiner har blitt beskrevet som bærerindusert epitop suppresjon, som ikke er fullstendig forstått, men er antatt å skyldes en overskuddsmengde av bærerprotein (Fattom, Vaccine 17: 126 (1999)). Dette synes å resultere i konkurranse om Th-cellene, ved B-cellene for bærerproteinet og B-cellene for polysakkaridet. Dersom B-cellene til bærerproteinet dominerer er det ikke nok Thceller tilgjengelig til å gi den nødvendige hjelpen for B-cellene spesifikke for polysakkaridet. Imidlertid har de observerte immunologiske effektene vært inkonsekvente, ved at den totale mengden av bærerprotein i noen tilfeller øker immunresponsen og i andre tilfeller reduserer immunresponsen.
Følgelig er det fortsatt tekniske vanskeligheter med hensyn til å kombinere multiple polysakkarid-konjugater til en enkel, effektiv, vaksineformulering.
Streptococcus pneumoniae er en Gram-positiv bakterie ansvarlig for atskillig sykdom og dødelighet (spesielt hos unge og eldre), den forårsaker invasive sykdommer slik som lungebetennelse, bakteriemi og meningitt og sykdommer forbundet med kolonisering, slik som akutt Otitis media. Hyppigheten av pneumokokklungebetennelse i USA for personer med en alder på mer enn 60 år blir beregnet å være 3 til 8 pr.100,000. I 20% av tilfellene fører dette til bakteriemi og andre manifestasjoner slik som meningitt, med en dødelighetsgrad nær 30% selv med antibiotikabehandling.
Pneumokokker er innkapslet med et kjemisk bundet polysakkarid som gir serotype spesifisitet. Det finnes 90 kjente serotyper av pneumokokker og kapselen er hoveddeterminanten for virulens for pneumokokker, ettersom kapselen ikke bare beskytter den indre overflaten av bakteriene fra komplement, men i seg selv er lite immunogen. Polysakkarider er T-uavhengige antigener og kan ikke prosesseres eller presenteres på MHC-molekyler for å interagere med T-celler. De kan imidlertid stimulere immunsystemet gjennom en alternativ mekanisme som omfatter kryssbinding av overflatereseptorer på B-celler.
Det ble vist i mange forsøk at beskyttelse mot invasiv pneumokokksykdom er sterkest korrelert med antistoff spesifikt for kapselen og beskyttelsen er serotypespesifikk.
Streptococcus pneumoniae er den mest vanlige årsaken til invasiv bakteriell sykdom og Otitis media hos spedbarn og små barn. De eldre setter likeledes i gang dårlige responser på pneumokokkvaksiner [Roghmann et al., (1987), J.
Gerontol. 42:265-270], herav den økte forekomsten av bakteriell lungebetennelse i denne populasjonen [Verghese og Berk, (1983) Medicine (Baltimore) 62:271-285].
WO 03/051392 omhandler en multippel serotype Streptococcus pneumonia vaksine.
Det er følgelig et formål ifølge foreliggende oppfinnelse å utvikle en forbedret formulering av en multippel serotype Streptococcus pneumoniae-polysakkarid konjugatvaksine.
Kort beskrivelse av figurene
Figur 1 Stolpediagram som viser 11-valent konjugat immunogenisitet hos eldre Rhesusaper. De lyseste stolpene representerer GMC etter to inokuleringer med 11-valent konjugat i aluminiumfosfatadjuvans. De mørkere stolpene representerer GMC etter to inokuleringer med 11-valent konjugat i adjuvans C.
Figur 2 Stolpediagram som viser hukommelses-B-celler for PS3 etter inokulering med det 11-valente konjugatet i adjuvans C eller aluminiumfosfatadjuvans.
Figur 3 Stolpediagram som viser anti-polysakkarid 19F immunogenisitet i Balb/C-mus for de 4-valente enkle (”plain”) polysakkaridene og de 4-valente dPlykonjugatene.
Figur 4 Stolpediagram som viser anti-polysakkarid 22F immunogenisitet i Balb/C-mus for de 4-valente enkle polysakkaridene og de 4-valente PhtD-konjugatene.
Figur 5 Stolpediagram som viser anti-22F IgG-respons i Balb/c-mus
Figur 6 Stolpediagram som viser anti-22F opsonofagocytose-titere i Balb/c-mus.
Figur 7 Stolpediagram for sammenligning av IgG-responser indusert i unge C57B1-mus etter immunisering med 13-valent konjugatvaksine formulert i forskjellige adjuvanser.
Figur 8 Stolpediagram som viser den beskyttende effektiviteten av forskjellige vaksinekombinasjoner i en ape lungebetennelse-modell.
Figur 9 Stolpediagram som viser anti PhtD IgG-respons i Balb/c-mus etter immunisering med 22F-PhtD eller 22F-AH-PhtD-konjugater.
Figur 10 Beskyttelse mot type 4 pneumokokk-provokasjon i mus etter immunisering med 22F-PhtD eller 22F-AH-PhtD.
Beskrivelse av oppfinnelsen
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en immunogen sammensetning omfattende Streptococcus pneumoniae kapsulært sakkarid-konjugater fra serotypene 19A og 19F hvor 19A er konjugert til et første bakterielt toksoid som er pneumolysin, difteri toksoid eller CRM197 og 19F er konjugert til et andre bakterielt toksoid som er difteri toksoid eller CRM197 og ytterligere omfattende konjugater av S. pneumoniae kapsulære sakkarider 4, 6B, 9V, 14, 18C, 23F, 1, 5 og 7F, hvor den gjennomsnittlige størrelsen på 19A sakkaridet er mellom 110 og 700 kDa.
Betegnelsen kapsulært sakkarid omfatter kapsulære polysakkarider og oligosakkarider som kan avledes fra det kapsulære polysakkaridet. Et oligosakkarid inneholder minst 4 sukkeresiduer. Betegnelsene konjugat og konjugert relaterer til et kapsulært sakkarid kovalent bundet til et bærerprotein.
For formålene ifølge foreliggende oppfinnelse refererer, “immunisere en human vert mot eksaserbasjoner av KOLS” eller “behandling eller forebygging av eksaserbasjoner av KOLS” eller “reduksjon i alvorlighetsgraden av KOLS eksaserbasjoner” til en reduksjon i forekomsten eller hyppigheten av KOLS eksaserbasjoner (for eksempel en reduksjon i hyppigheten på 0,1, 0,5, 1, 2, 5, 10, 20% eller mer), for eksempel innenfor en pasientgruppe immunisert med sammensetningene eller vaksinene ifølge oppfinnelsen.
Betegnelsen bakterielt toksoid omfatter bakterielle toksiner som er inaktivert enten ved genetisk mutasjon, ved kjemisk behandling eller ved konjugering. Egnede bakterielle toksoider omfatter tetanustoksoid, difteritoksoid, pertussistoksoid, bakterielle cytolysiner eller pneumolysin. Mutasjoner av pneumolysin (Ply) som reduserer toksisiteten til pneumolysin har blitt beskrevet (WO 90/06951, WO 99/03884). Tilsvarende er genetiske mutasjoner av difteritoksin som reduserer dets toksisitet kjent (se nedenfor). Genetisk detoksifiserte analoger av difteritoksin omfatter CRM197 og andre mutanter beskrevet i US 4,709,017, US 5,843,711, US 5,601,827 og US 5,917,017. CRM197 er en ikke-toksisk form av difteritoksinet men er immunologisk umulig å skjelne fra difteritoksinet. CRM197 blir produsert av C. diphtheriae infisert av den ikke toksigene phase β197tox- dannet ved nitrosoguanidin-mutagenese av den toksigene carynephage b (Uchida et al Nature New Biology (1971) 233; 8-11). CRM197-proteinet har samme molekylvekt som difteritoksinet men skiller seg fra det ved en enkelt base-endring i det strukturelle genet. Dette fører til en endring av glysin til glutamin av aminosyren ved posisjon 52 hvilket gjør fragment A ute av stand til å binde NAD og derfor ikke-toksisk (Pappenheimer 1977, Ann Rev, Biochem. 46; 69-94, Rappuoli Applied and Environmental Microbiology Sept 1983 s.560-564).
De første og andre bakterielle toksoidene kan være like eller forskjellige. Når de første og andre bakterielle toksoidene er forskjellige, betyr det at de har en ulik aminosyresekvens.
For eksempel kan 19A og 19F være konjugert til henholdsvis difteritoksoid og difteritoksoid; CRM197 og CRM197; difteritoksoid og CRM197, CRM197 og difteritoksoid; pneumolysin og difteritoksoid; eller pneumolysin og CRM197.
I en utførelsesform omfatter, i tillegg til S. pneumoniae sakkarid-konjugater av 19A og 19F, den immunogene sammensetningen videre konjugater av S. pneumoniae kapsulære sakkarider 1, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 22F og 23F.
I en utførelsesform omfatter, i tillegg til S. pneumoniae sakkarid-konjugater av 19A og 19F, den immunogene sammensetningen videre konjugater av S. pneumoniae kapsulære sakkarider 1, 3, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 22F og 23F.
I en utførelsesform omfatter, i tillegg til S. pneumoniae sakkarid-konjugater av 19A og 19F, den immunogene sammensetningen videre konjugater av S. pneumoniae kapsulære sakkarider 1, 3, 4, 5, 6A, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 22F og 23F.
Typisk vil Streptococcus pneumoniae-vaksinen ifølge foreliggende oppfinnelse omfatte kapsulære sakkarid-antigener (eventuelt konjugert), hvor sakkaridene er avledet fra minst ti serotyper av S. pneumoniae. Antallet kapsulære sakkarider fra S. pneumoniae kan være i området fra 10 forskjellige serotyper (eller “V”, valenser) til 23 forskjellige serotyper (23V). I én utførelsesform er det 11, 12, 13, 14 eller 15 forskjellige serotyper. I en annen utførelsesform ifølge oppfinnelsen kan vaksinen omfatte konjugerte S. pneumoniae-sakkarider og ukonjugerte S. pneumoniae-sakkarider. Eventuelt er det totale antallet av sakkarid serotyper mindre enn eller lik 23. Vaksinen kan omfatte henholdsvis 11, 12, 13, 14 eller 16 konjugerte sakkarider og 12, 11, 10, 9 eller 7 ukonjugerte sakkarider.
I én utførelsesform vil den multivalente pneumokokkvaksinen ifølge oppfinnelsen velges fra de følgende serotypene 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F og 33F, selv om det er forstått at én eller to andre serotyper kunne anvendes i stedet avhengig av alderen på mottageren som mottar vaksinen og den geografiske lokaliseringen hvor vaksinen vil administreres. For eksempel kan en 10-valent vaksine omfatte polysakkarider fra serotypene 1, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19F og 23F. En 11-valent vaksine kan også omfatte sakkarider fra serotype 3. En 12 eller 13-valent pediatrisk (barn) vaksine kan også omfatte den 11-valente formuleringen supplert med serotypene 6A og 19A eller 6A og 22F eller 19A og 22F eller 6A og 15B eller 19A og 15B eller 22F og 15B, mens en 13-valent vaksine for eldre kan omfatte den 10- eller 11-valente formuleringen supplert med serotypene 19A og 22F, 8 og 12F eller 8 og 15B eller 8 og 19A eller 8 og 22F eller 12F og 15B eller 12F og 19A eller 12F og 22F eller 15B og 19A eller 15B og 22F. En 14-valent pediatrisk vaksine kan omfatte den 10-valente formuleringen beskrevet ovenfor supplert med serotypene 3, 6A, 19A og 22F; serotypene 6A, 8, 19A og 22F; serotypene 6A, 12F, 19A og 22F; serotypene 6A, 15B, 19A og 22F; serotypene 3, 8, 19A og 22F; serotypene 3, 12F, 19A og 22F; serotypene 3, 15B, 19A og 22F; serotypene 3, 6A, 8 og 22F; serotypene 3, 6A, 12F og 22F; eller serotypene 3, 6A, 15B og 22F.
I en ytterligere utførelsesform ifølge oppfinnelsen er minst 12 eller 13 sakkaridantigener omfattet, for eksempel kan en vaksine omfatte kapsulære sakkarider avledet fra serotypene 1, 3, 4, 5, 6A, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F og 23F eller kapsulære sakkarider avledet fra serotypene 1, 3, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F og 23F, selv om ytterligere sakkarid-antigener, for eksempel 23-valent (slik som serotypene 1, 2, 3, 4, 5, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F og 33F), også er omfattet av oppfinnelsen.
Vaksinen ifølge foreliggende oppfinnelse kan omfatte protein D (PD) fra Haemophilus influenzae (se f.eks. EP 0594610). Haemophilus influenzae er en viktig forårsakende organisme for otitis media og foreliggende oppfinnere har vist at inkludering av dette proteinet i en Streptococcus pneumoniae-vaksine vil gi et nivå for beskyttelse mot Haemophilus influenzae-relatert otitis media (referanse POET publikasjon). I én utførelsesform omfatter vaksinesammensetningen protein D. I ett aspekt er PD til stede som et bærerprotein for ett eller flere av sakkaridene. I et annet aspekt kunne protein D kunne være til stede i vaksinesammensetningen som et fritt protein. I et ytterligere aspekt er protein D til stede både som et bærerprotein og som fritt protein. Protein D kan anvendes som et fullengde protein eller som et fragment (WO0056360). I et ytterligere aspekt er protein D til stede som et bærerprotein for de fleste av sakkaridene, for eksempel kan 6, 7, 8, 9 eller flere av sakkaridene være konjugert til protein D. I dette aspektet kan protein D også være til stede som fritt protein.
Vaksinen ifølge foreliggende oppfinnelse omfatter ett, to eller flere forskjellige typer av bærerprotein. Hver type av bærerprotein kan fungere som bærer for mer enn ett sakkarid, hvilke sakkarider kan være like eller forskjellige. For eksempel kan serotypene 3 og 4 være konjugert til samme bærerprotein, enten til samme molekyl av bærerproteinet eller til forskjellige molekyler av samme bærerprotein. I én utførelsesform kan to eller flere forskjellige sakkarider være konjugert til samme bærerprotein, enten til samme molekyl av bærerproteinet eller til forskjellige molekyler av samme bærerprotein.
Hvilke som helst Streptococcus pneumoniae kapsulære sakkarider til stede i den immunogene sammensetningen ifølge oppfinnelsen bortsett fra 19A og 19F kan være konjugert til et bærerprotein uavhengig valgt fra gruppen bestående av TT, DT, CRM197, fragment C av TT, PhtD, PhtBE eller PhtDE-fusjoner (spesielt de beskrevet i WO 01/98334 og WO 03/54007), detoksifisert pneumolysin og protein D. En mer fullstendig liste over proteinbærere som kan anvendes i konjugatene ifølge oppfinnelsen er presentert nedenfor.
Bærerproteinet konjugert til ett eller flere av S. pneumoniae kapsulære sakkarider i konjugatene til stede i den immunogene sammensetningen ifølge oppfinnelsen er eventuelt er et medlem av polyhistidin triade familien (Pht) proteiner, fragmenter eller fusjonsproteiner derav. PhtA, PhtB, PhtD eller PhtE-proteinene kan ha en aminosyresekvens som har 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% eller 100% felles identitet med en sekvens beskrevet i WO 00/37105 eller WO 00/39299 (f.eks. med aminosyresekvensen 1-838 eller 21-838 fra SEKV ID NR: 4 fra WO 00/37105 for PhtD). For eksempel er fusjonsproteiner sammensatt av fullengde eller fragmenter av 2, 3 eller 4 av PhtA, PhtB, PhtD, PhtE. Eksempler på fusjonsproteiner er PhtA/B, PhtA/D, PhtA/E, PhtB/A, PhtB/D, PhtB/E, PhtD/A, PhtD/B, PhtD/E, PhtE/A, PhtE/B og PhtE/D, hvor proteinene er forbundet med den først nevnte ved den N-terminale enden (se for eksempel WO01/98334).
Når fragmenter av Pht-proteiner blir anvendt (separat eller som del av et fusjonsprotein), inneholder hvert fragment eventuelt ett eller flere histidin triade motiver og/eller ”coiled coil”-regioner av slike polypeptider. Et histidin triade-motiv er den delen av polypeptid som har sekvensen HxxHxH hvor H er histidin og x er en aminosyre forskjellig fra histidin. En coiled coil-region er en region predikert ved “Coils”-algoritmen Lupus, A et al (1991) Science 252; 1162-1164. I en utførelsesform omfatter fragmentet eller hvert fragment ett eller flere histidin triademotiver så vel som minst én coiled coil-region. I en utførelsesform inneholder fragmentet eller hvert fragment nøyaktig eller minst 2, 3, 4 eller 5 histidin triade motiver (eventuelt, med nativ Pht-sekvens mellom de 2 eller flere triadene eller intra-triade sekvens som er mer enn 50, 60, 70, 80, 90 eller 100 % identisk med en nativ pneumokokk intra-triade Pht-sekvens – f.eks. intra-triade sekvensen vist i SEKV ID NR: 4 fra WO 00/37105 for PhtD). I en utførelsesform inneholder fragmentet eller hvert fragment nøyaktig eller minst 2, 3 eller 4 coiled coil-regioner. I en utførelsesform omfatter et Pht-protein beskrevet her fullengde-proteinet med signalsekvensen bundet, det modne fullengde proteinet hvor signalpeptidet (for eksempel 20 aminosyrer ved den N-terminale enden) er fjernet, naturlig forekommende varianter av Pht protein og immunogene fragmenter av Pht-protein (f.eks. fragmenter som beskrevet ovenfor eller polypeptider omfattende minst 15 eller 20 påfølgende aminosyrer fra en aminosyresekvens i WO00/37105 eller WO00/39299 hvor nevnte polypeptid er i stand til å fremkalle en immunrespons spesifikk for nevnte aminosyresekvens i WO00/37105 eller WO00/39299).
Spesielt omfatter betegnelsen “PhtD” som anvendt her fullengde-proteinet med signalsekvensen tilknyttet, det modne fullengde proteinet med signalpeptidet (for eksempel 20 aminosyrer ved den N-terminale enden) fjernet, naturlig forekommende varianter av PhtD og immunogene fragmenter av PhtD (f.eks. fragmenter som beskrevet ovenfor eller polypeptider omfattende minst 15 eller 20 påfølgende aminosyrer fra en PhtD aminosyresekvens i WO00/37105 eller WO00/39299 hvor nevnte polypeptid er i stand til å fremkalle en immunrespons spesifikk for nevnte PhtD aminosyresekvens i WO00/37105 eller WO00/39299 (f.eks. SEKV ID NR: 4 fra WO 00/37105 for PhtD).
Dersom proteinbæreren er lik for 2 eller flere sakkarider i sammensetningen, kunne sakkaridene være konjugert til samme molekyl av proteinbæreren (bærermolekyler som har 2 flere forskjellige sakkarider konjugert til seg) [se for eksempel WO 04/083251]. Alternativt kan hvert sakkarid være separat konjugert til forskjellige molekyler av proteinbæreren (hvor hvert molekyl av proteinbæreren kun har én type sakkarid konjugert til seg).
Eksempler på bærerproteiner som kan anvendes i foreliggende oppfinnelse er DT (Difteritoksoid), TT (tetanustoksiod) eller fragment C av TT, DT CRM197 (en DT-mutant) andre DT punkt mutanter, slik som CRM176, CRM228, CRM 45 (Uchida et al J. Biol. Chem.218; 3838-3844, 1973); CRM 9, CRM 45, CRM102, CRM 103 og CRM107 og andre mutasjoner beskrevet av Nicholls og Youle i Genetically Engineered Toxins, Ed: Frankel, Maecel Dekker Inc, 1992; delesjon eller mutasjon av Glu-148 til Asp, Gln eller Ser og/eller Ala 158 til Gly og andre mutasjoner beskrevet i US 4709017 eller US 4950740; mutasjon av minst én eller flere rester Lys 516, Lys 526, Phe 530 og/eller Lys 534 og andre mutasjoner beskrevet i US 5917017 eller US 6455673; eller fragment beskrevet i US 5843711, pneumokokkpneumolysin (Kuo et al (1995) Infect Immun 63; 2706-13) omfattende ply detoksifisert på en eller annen måte for eksempel dPLY-GMBS (WO 04081515, PCT/EP2005/010258) eller dPLY-formol, PhtX, omfattende PhtA, PhtB, PhtD, PhtE og fusjoner av Pht-proteiner for eksempel PhtDE-fusjoner, PhtBE-fusjoner (WO 01/98334 og WO 03/54007), (Pht A-E er beskrevet mer detaljert nedenfor) OMPC (meningokokk yttermembranprotein – vanligvis ekstrahert fra N. meningitidis serogruppe B – EP0372501), PorB (fra N. meningitidis), PD (Haemophilus influenzae protein D – se, f.eks. EP 0594610 B) eller immunologisk funksjonelle ekvivalenter derav, syntetiske peptider (EP0378881, EP0427347), varmesjokkproteiner (WO 93/17712, WO 94/03208), pertussisproteiner (WO 98/58668, EP0471177), cytokiner, lymfokiner, vekstfaktorer eller hormoner (WO 91/01146), kunstige proteiner omfattende multiple human CD4+ T-celle-epitoper fra forskjellige patogen-avledete antigener (Falugi et al (2001) Eur J Immunol 31; 3816-3824) slik som N19-protein (Baraldoi et al (2004) Infect Immun 72; 4884-7) pneumokokk overflateprotein PspA (WO 02/091998), jernopptak proteiner (WO 01/72337), toksin A eller B fra C. difficile (WO 00/61761).
Nurkka et al Pediatric Infectious Disease Journal.23(11):1008-14, 2004 Nov. beskrev en 11-valent pneumokokkvaksine med alle serotypene konjugert til PD. Imidlertid har foreliggende oppfinnere vist at opsonofagocytose aktivitet ble forbedret for antistoffer indusert med konjugater som har 19F konjugert til DT sammenlignet med 19F konjugert til PD. I tillegg har foreliggende oppfinnere vist at en større kryssreaktivitet til 19A er sett med 19F konjugert til DT. Det er derfor et trekk ved sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse at serotype 19F er konjugert til DT eller CRM 197. I ett aspekt er serotype 19F konjugert til DT. Det er også et trekk ifølge oppfinnelsen at serotype 19A er konjugert til pneumolysin, DT eller CRM 197. De resterende sakkarid serotypene av den immunogene sammensetningen kan alle være konjugert til ett eller flere bærerproteiner som ikke er DT (dvs. bare 19F er konjugert til DT) eller kan være delt mellom ett eller flere bærerproteiner som ikke er DT og DT i seg selv. I én utførelsesform er 19F konjugert til DT eller CRM 197 og alle de resterende serotypene er konjugert til PD. I en ytterligere utførelsesform er 19F konjugert til DT eller CRM 197 og de resterende serotypene er delt mellom PD og TT eller DT eller CRM 197. I en ytterligere utførelsesform er 19F konjugert til DT eller CRM 197 og ikke mer enn ett sakkarid er konjugert til TT. I ett aspekt av denne utførelsesformen er nevnte ett sakkarid 18C eller 12F. I en ytterligere utførelsesform er 19F konjugert til DT eller CRM 197 og ikke mer enn to sakkarider er konjugert til TT. I en ytterligere utførelsesform er 19F konjugert til DT eller CRM 197 og de resterende serotypene er delt mellom PD, TT og DT eller CRM 197. I en ytterligere utførelsesform er 19F konjugert til DT eller CRM 197 og de resterende serotypene er delt mellom PD, TT og pneumolysin. I en ytterligere utførelsesform er 19F konjugert til DT eller CRM 197 og de resterende serotypene er delt mellom PD, TT og CRM 197. I en ytterligere utførelsesform er 19F konjugert til DT eller CRM197 og de resterende serotypene er delt mellom PD, TT, pneumolysin og eventuelt PhtD eller PhtD/E fusjonsprotein. I en ytterligere utførelsesform er 19F konjugert til DT eller CRM197, 19A er konjugert til pneumolysin, ett ytterligere sakkarid er konjugert til TT, ett ytterligere sakkarid er konjugert til pneumolysin, 2 ytterligere sakkarider er konjugert til PhtD eller PhtD/E og alle ytterligere sakkarider er konjugert til PD.
I én utførelsesform omfatter den immunogene sammensetningen ifølge oppfinnelsen protein D fra Haemophilus influenzae. I denne utførelsesformen, dersom PD ikke er ett av bærerproteinene anvendt for å konjugere hvilke som helst sakkarider forskjellig fra 19F, for eksempel 19F er konjugert til DT mens de andre serotypene er konjugert til ett eller flere forskjellige bærerproteiner som ikke er PD, så vil PD være til stede i vaksine-sammensetningen som fritt protein.
Dersom PD er ett av bærerproteinene anvendt for å konjugere sakkarider forskjellig fra 19F, så kan PD eventuelt være til stede i vaksinesammensetningen som fritt protein.
Betegnelsen “sakkarid” kan gjennom hele foreliggende beskrivelse angi polysakkarid eller oligosakkarid og omfatter begge. Polysakkarider blir isolert fra bakterier og kan i en viss grad sorteres etter størrelse ved kjente metoder (se for eksempel EP497524 og EP497525) og eventuelt ved mikro fluidisering.
Polysakkarider kan lages i en viss størrelse for å redusere viskositet i polysakkaridprøver og/eller for å forbedre filtrerbarhet for konjugerte produkter. Oligosakkarider har et lavt antall av repeterte enheter (typisk 5-30 repeterte enheter) og er typisk hydrolyserte polysakkarider
Kapsulære polysakkarider fra Streptococcus pneumoniae omfatter repeterende oligosakkaridenheter som kan inneholde opptil 8 sukkerresiduer. For en oversikt over oligosakkarid-enhetene for de viktigste Streptococcus pneumoniaeserotypene se JONES, Christopher. Vaccines based on the cell surface carbohydrates of pathogenic bacteria. An. Acad. Bras. Ciênc., juni 2005, vol.
77, nr.2, s.293-324. ISSN 0001-3765. I én utførelsesform kan et kapsulært sakkarid-antigen være et fullengde polysakkarid, imidlertid kan det i andre være én oligosakkaridenhet eller en kortere enn nativ lengde sakkaridkjede av repeterende oligosakkaridenheter. I én utførelsesform er alle sakkaridene til stede i vaksinen polysakkarider. Fullengde polysakkarider kan “lages i en viss størrelse” dvs. deres størrelse kan reduseres ved forskjellige metoder slik som syrehydrolysebehandling, hydrogenperoksid-behandling, lages i en viss størrelse ved emulsiflex® fulgt av en hydrogenperoksid-behandling for å danne oligosakkaridfragmenter eller mikro fluidisering.
Oppfinnerne har også notert seg at fokus på området er å anvende oligosakkarider for enkel konjugatproduksjon. Oppfinnerne har funnet at ved anvendelse av polysakkaridkonjugater som er native eller sortert etter størrelse i en viss grad, kan én eller flere av de følgende fordelene realiseres: 1) et konjugat som har høy immunogenitet hvilket er filtrerbart, 2) forholdet av polysakkarid til protein i konjugatet kan endres slik at forholdet av polysakkarid til protein (vekt/vekt) i konjugatet kan økes (hvilket kan ha en effekt på bærer suppresjonseffekten), 3) immunogene konjugater med tendens til hydrolyse kan stabiliseres ved anvendelse av større sakkarider for konjugering. Anvendelse av større polysakkarider kan føre til mer kryssbinding med konjugat bæreren og kan redusere frigjøringen av fritt sakkarid fra konjugatet. Konjugatvaksinene beskrevet i tidligere teknikk har til hensikt å depolymerisere polysakkaridene før konjugering for å forbedre konjugering. Foreliggende oppfinnere har funnet at sakkarid konjugatvaksiner som beholder en større størrelse av sakkarid kan gi en god immunrespons mot pneumokokksykdom.
De immunogene sammensetningene ifølge oppfinnelsen kan følgelig omfatte ett eller flere sakkaridkonjugater hvor den gjennomsnittlige størrelsen (vektgjennomsnittlig molekylvekt; Mw) av hvert sakkarid før konjugering er over 80kDa, 100kDa, 200kDa, 300kDa, 400kDa, 500kDa eller 1000kDa. I én utførelsesform skulle konjugatet etter konjugering være lett filtrerbart gjennom et 0,2 mikron filter slik at et utbytte på mer enn 50, 60, 70, 80, 90 eller 95% blir oppnådd etter filtrering sammenlignet med prøven før filtrering.
For formålene ifølge oppfinnelsen refererer “nativt polysakkarid” til et sakkarid som ikke har blitt underlagt en prosess, for hvilken formålet er å redusere størrelsen av sakkaridet. Et polysakkarid kan bli litt redusert i størrelse under normale rensemetoder. Et slikt sakkarid er fortsatt nativt. Kun dersom polysakkaridet blir underlagt teknikker for fremstilling i en viss størrelse ville polysakkaridet ikke anses som nativt.
For formålene ifølge oppfinnelsen betyr “laget i en viss størrelse ved en faktor opptil x2” at sakkaridet blir underlagt en prosess tilsiktet å redusere størrelsen av sakkaridet men å beholde en størrelse mer enn halvparten av størrelsen av det native polysakkaridet. X3, x4 osv. skal tolkes på samme måte dvs. sakkaridet blir underlagt en prosess tilsiktet å redusere størrelsen av polysakkaridet men å beholde en størrelse mer enn en tredjedel, en fjerdedel osv. av størrelsen av det native polysakkaridet.
I ett aspekt ifølge oppfinnelsen omfatter den immunogene sammensetningen Streptococcus pneumoniae-sakkarider fra minst 10 serotyper konjugert til et bærerprotein, hvor minst 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 eller hvert S. pneumoniae-sakkarid er nativt polysakkarid.
I ett aspekt ifølge oppfinnelsen omfatter den immunogene sammensetningen Streptococcus pneumoniae-sakkarider fra minst 10 serotyper konjugert til et bærerprotein, hvor minst 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 eller hvert S. pneumoniae-sakkarid er laget i en viss størrelse ved en faktor opptil x2, x3, x4, x5, x6, x7, x8, x9 eller x10. I én utførelsesform av dette aspektet er de fleste av sakkaridene, for eksempel 6, 7, 8 eller flere av sakkaridene laget i en viss størrelse ved en faktor opptil x2, x3, x4, x5, x6, x7, x8, x9 eller x10.
Molekylvekten eller gjennomsnittlig molekylvekt av et sakkarid her refererer til vekt-gjennomsnittlig molekylvekt (Mw) av sakkaridet målt før konjugering og blir målt ved MALLS.
MALLS-teknikken er velkjent på området og blir typisk utført som beskrevet i eksempel 2. For MALLS-analyse av pneumokokk-sakkarider, kan to kolonner (TSKG6000 og 5000PWxl) anvendes i kombinasjon og sakkaridene blir eluert i vann. Sakkarider blir detektert ved anvendelse av en lysspredningsdetektor (for eksempel Wyatt Dawn DSP utstyrt med en 10mW argon laser ved 488nm) og et inferometric refraktometer (for eksempel Wyatt Otilab DSP utstyrt med en P100 celle og et rød filter ved 498nm).
I en utførelsesform er S. pneumonia-sakkaridene native polysakkarider eller native polysakkarider som har blitt redusert i størrelse under en normal ekstraksjonsprosess.
I en utførelsesform blir S. pneumoniae-sakkaridene laget i en viss størrelse ved mekanisk kløyving, for eksempel ved mikrofluidisering eller ultralydbehandling. Mikrofluidisering og ultralydbehandling har den fordelen at de reduserer størrelsen av de større native polysakkaridene tilstrekkelig til å gi et filtrerbart konjugat.
Sortering etter størrelse er ved en faktor på ikke mer enn x20, x10, x8, x6, x5, x4, x3 eller x2.
I en utførelsesform omfatter den immunogene sammensetningen S. pneumoniaekonjugater som er fremstilt fra en blanding av native polysakkarider og sakkarider som er sortert etter størrelse ved en faktor på ikke mer enn x20. I ett aspekt av denne utførelsesform er de fleste av sakkaridene, for eksempel 6, 7, 8 eller flere av sakkaridene sortert etter størrelse ved en faktor på opptil x2, x3, x4, x5 eller x6.
I en utførelsesform er Streptococcus pneumoniae-sakkaridet konjugert til bærerproteinet gjennom en linker, for eksempel en bifunksjonell linker. Linkeren er eventuelt heterobifunksjonell eller homobifunksjonell, den har for eksempel en reaktiv aminogruppe og en reaktiv karboksylsyregruppe, 2 reaktive aminogrupper eller to reaktive karboksylsyregrupper. Linkeren har for eksempel mellom 4 og 20, 4 og 12, 5 og 10 karbonatomer. En mulig linker er ADH. Andre linkere omfatter B-propionamido (WO 00/10599), nitrofenyl-etylamin (Gever et al (1979) Med.
Microbiol. Immunol.165; 171-288), halogenalkylhalogenider (US4057685), glykosidbindinger (US4673574, US4808700), heksandiamin og 6-aminokapronsyre (US4459286). I en utførelsesform blir ADH anvendt som en linker for konjugering av sakkarid fra serotype 18C.
Sakkarid-konjugatene til stede i de immunogene sammensetningene ifølge oppfinnelsen kan fremstilles ved hvilken som helst kjent koblingsteknikk. Metoden for konjugering kan være henvist til aktivering av sakkaridet med 1-cyano-4-dimetylamino pyridinium tetrafluorborat (CDAP) for å danne en cyanat ester. Det aktiverte sakkaridet kan følgelig være koblet direkte eller gjennom en spacer (linker)-gruppe til en aminogruppe på bærerproteinet. For eksempel kunne spaceren være cystamin eller cysteamin, hvilket gir et tiolert polysakkarid som kunne være koblet til bæreren gjennom en tioeter-binding oppnådd etter reaksjon med et maleimid-aktivert bærerprotein (for eksempel ved anvendelse av GMBS) eller et halogenacetylert bærerprotein (for eksempel ved anvendelse av jodacetimid [f.eks. etyl-jodacetimid HCl] eller N-succinimidyl-bromacetat eller SIAB eller SIA eller SBAP). Eventuelt blir cyanat-esteren (eventuelt fremstilt ved CDAP kjemi) koblet med heksan diamin eller ADH og det amino-derivatiserte sakkaridet blir konjugert til bærerproteinet ved anvendelse av karbodiimid (f.eks. EDAC eller EDC) kjemi gjennom en karboksylgruppe på proteinbæreren. Slike konjugater er beskrevet i PCT publisert søknad WO 93/15760 Uniformed Services University og WO 95/08348 og WO 96/29094
Andre egnede teknikker anvender karbodiimider, karbiinider, hydrazider, aktive estere, norboran, p-nitrobenzosyre, N-hydroksysuccinimid, S-NHS, EDC, TSTU. Mange er beskrevet i WO 98/42721. Konjugering kan involvere en karbonyl-linker som kan dannes ved omsetning av en fri hydroksylgruppe fra sakkaridet med CDI (Bethell et al J. Biol. Chem.1979, 254; 2572-4, Hearn et al J. Chromatogr. 1981.
218; 509-18) fulgt av omsetning med et protein for å danne en karbamat-binding. Dette kan omfatte reduksjon av den anomeriske terminus til en primær hydroksylgruppe, eventuell beskyttelse/avbeskyttelse av den primære hydroksylgruppen’ omsetning av den primære hydroksylgruppen med CDI for å danne et CDI karbamat intermediat og kobling av CDI karbamat intermediatet med en aminogruppe på et protein.
Konjugatene kan også fremstilles ved direkte reduktive aminerings-metoder som beskrevet i US 4365170 (Jennings) og US 4673574 (Anderson). Andre metoder er beskrevet i EP-0-161-188, EP-208375 og EP-0-477508.
En ytterligere metode involverer kobling av et cyanogenbromid (eller CDAP) aktivert sakkarid derivatisert med adipinsyre dihydrazid (ADH) til proteinbæreren ved karbodiimid kondensering (Chu C. et al Infect. Immunity, 1983245 256), for eksempel ved anvendelse av EDAC.
I en utførelsesform blir en hydroksylgruppe (eventuelt en aktivert hydroksylgruppe for eksempel en hydroksylgruppe aktivert for å oppnå en cyanat ester [f.eks. ved anvendelse av CDAP]) i et sakkarid bundet til en amino eller karboksylsyregruppe i et protein enten direkte eller indirekte (gjennom en linker). Når en linker er til stede blir en hydroksylgruppe i et sakkarid eventuelt bundet til en aminogruppe i en linker, for eksempel ved anvendelse av CDAP konjugering. En ytterligere aminogruppe i linkeren for eksempel ADH) kan konjugeres til en karboksylsyregruppe i et protein, for eksempel ved anvendelse av karbodiimid kjemi, for eksempel ved anvendelse av EDAC. I en utførelsesform blir pneumokokk kapsulært sakkarid(er) konjugert til linkeren først før linkeren blir konjugert til bærerproteinet. Alternativt kan linkeren konjugeres til bæreren før konjugering til sakkaridet.
En kombinasjon av teknikker kan også anvendes, hvor noen sakkarid-protein konjugater blir fremstilt ved CDAP og noen ved reduktiv aminering.
Generelt kan de følgende typene av kjemiske grupper på en proteinbærer anvendes for kobling / konjugering:
A) Karboksyl (for eksempel gjennom asparaginsyre eller glutaminsyre). I én utførelsesform blir denne gruppen bundet til aminogrupper i sakkarider direkte eller til en aminogruppe i en linker med karbodiimid kjemi f.eks. med EDAC.
B) Aminogruppe (for eksempel via lysin). I én utførelsesform blir denne gruppen bundet til karboksylgrupper i sakkarider direkte eller til en karboksylgruppe på en linker med karbodiimid kjemi f.eks. med EDAC. I en annen utførelsesform blir denne gruppen bundet til hydroksylgrupper aktivert med CDAP eller CNBr i sakkarider direkte eller til slike grupper i en linker; til sakkarider eller linkere som har en aldehydgruppe; til sakkarider eller linkere som har en succinimid estergruppe.
C) Sulfydryl (for eksempel via cystein). I én utførelsesform blir denne gruppen bundet til et brom eller klor acetylert sakkarid eller linker med maleimid kjemi. I én utførelsesform blir denne gruppen aktivert/modifisert med bis-diazobenzidin.
D) Hydroksylgruppe (for eksempel via tyrosin). I én utførelsesform blir denne gruppen aktivert/modifisert med bis-diazobenzidin.
E) Imidazolylgruppe (for eksempel via histidin). I én utførelsesform blir denne gruppen aktivert/modifisert med bis-diazobenzidin.
F) Guanidylgruppe (for eksempel via arginin).
G) Indolylgruppe (for eksempel via tryptofan).
I et sakkarid kan generelt de følgende gruppene anvendes til en kobling: OH, COOH eller NH2. Aldehydgrupper kan dannes etter forskjellige behandlinger kjent på området slik som: perjodat, syrehydrolyse, hydrogenperoksid, osv.
Metoder for direkte kobling:
Sakkarid-OH CNBr eller CDAP -----> cyanat ester NH2-Prot ----> konjugat Sakkarid-aldehyd NH2-Prot ----> Schiff base NaCNBH3 ----> konjugat Sakkarid-COOH NH2-Prot EDAC ----> konjugat
Sakkarid-NH2 COOH-Prot EDAC ----> konjugat
Metoder for indirekte kobling via spacer (linker):
Sakkarid-OH CNBr eller CDAP ---> cyanat ester NH2----NH2 ----> sakkarid----NH2 COOH-Prot EDAC ----> konjugat
Sakkarid-OH CNBr eller CDAP ----> cyanat ester NH2-----SH -----> sakkarid----SH SH-Prot (nativt Protein med et eksponert cystein eller oppnådd etter modifikasjon av aminogrupper av proteinet ved SPDP for eksempel) -----> sakkarid-S-S-Prot
Sakkarid-OH CNBr eller CDAP ---> cyanat ester NH2----SH -------> sakkarid----SH maleimid-Prot (modifikasjon av aminogrupper) ----> konjugat
Sakkarid-OH CNBr eller CDAP ---> cyanat ester NH2-----SH ---> Sakkarid-SH halogenacetylert-Prot ----> Konjugat
Sakkarid-COOH EDAC NH2-----NH2 ---> sakkarid------NH2 EDAC COOH-Prot ----> konjugat
Sakkarid-COOH EDAC+ NH2----SH -----> sakkarid----SH SH-Prot (nativt protein med et eksponert cystein eller oppnådd etter modifikasjon av aminogrupper av proteinet ved SPDP for eksempel) -----> sakkarid-S-S-Prot
Sakkarid-COOH EDAC+ NH2----SH -----> sakkarid----SH maleimid-Prot (modifikasjon av aminogrupper) ----> konjugat
Sakkarid-COOH EDAC NH2----SH ---> Sakkarid-SH halogenacetylert-Prot ----> Konjugat
Sakkarid-aldehyd NH2-----NH2 ----> sakkarid---NH2 EDAC COOH-Prot ----> konjugat
Bemerk: istedenfor EDAC ovenfor, kan hvilket som helst egnet karbodiimid anvendes.
I korthet, er typene av kjemisk gruppe på proteinbærer som generelt kan anvendes for kobling med et sakkarid aminogrupper (for eksempel på lysinrester), COOH-grupper (for eksempel i asparaginsyre og glutaminsyrerester) og SH-grupper (dersom tilgjengelig) (for eksempel på cysteinrester.
Eventuelt er forholdet melom bærerprotein og S. pneumoniae-sakkarid mellom 1:5 og 5:1; 1:2 og 2,5:1; 1:1 og 2:1 (vekt/vekt). I en utførelsesform har de fleste av konjugatene, for eksempel 6, 7, 8, 9 eller flere av konjugatene et forhold mellom bærerprotein og sakkarid som er høyere enn 1:1, for eksempel 1,1:1, 1,2:1, 1,3:1, 1,4:1, 1,5:1 eller 1,6:1.
I en utførelsesform blir minst ett S. pneumoniae-sakkarid konjugert til et bærerprotein via en linker ved anvendelse av CDAP og EDAC. For eksempel kan 18C konjugeres til et protein via en linker (for eksempel de med to hydrazinogrupper ved endene slik som ADH) ved anvendelse av CDAP og EDAC som beskrevet ovenfor. Når en linker blir anvendt kan CDAP anvendes for å konjugere sakkaridet til en linker og EDAC kan deretter anvendes for å konjugere linkeren til et protein eller, alternativt kan EDAC anvendes først for å konjugere linkeren til proteinet, hvoretter CDAP kan anvendes for å konjugere linkeren til sakkaridet.
Generelt kan den immunogene sammensetningen ifølge oppfinnelsen omfatte en dose av hvert sakkarid-konjugat på mellom 0,1 og 20 μg, 1 og 10 μg eller 1 og 3 μg sakkarid.
I en utførelsesform inneholder den immunogene sammensetningen ifølge oppfinnelsen hver S. pneumoniae kapsulært sakkarid i en dose på mellom 0,1-20 μg; 0,5-10 μg; 0,5- 5 μg eller 1-3 μg sakkarid. I en utførelsesform kan kapsulære sakkarider være til stede i forskjellige doser, for eksempel kan noen kapsulære sakkarider være til stede i en dose på nøyaktig 1 μg eller noen kapsulære sakkarider kan være til stede i en dose på nøyaktig 3 μg. I en utførelsesform er sakkarider fra serotypene 3, 18C og 19F (eller 4, 18C og 19F) til stede ved en høyere dose enn andre sakkarider. I ett aspekt av denne utførelsesformen er serotypene 3, 18C og 19F (eller 4, 18C og 19F) til stede i en dose på ca. eller nøyaktig 3 μg mens andre sakkarider i den immunogene sammensetningen er til stede i en dose på ca. eller nøyaktig 1 μg.
“Ca.” eller “omtrent” er definert som innenfor 10% mer eller mindre av det gitte tallet for formålene ifølge oppfinnelsen.
I en utførelsesform er minst én av de S. pneumoniae kapsulære sakkaridene direkte konjugert til et bærerprotein. Eventuelt er det minst ene av S. pneumoniae kapsulære sakkarider direkte konjugert ved CDAP. I en utførelsesform er de fleste av de kapsulære sakkaridene for eksempel 5, 6, 7, 8, 9 eller flere direkte bundet til bærerproteinet ved CDAP (se WO 95/08348 og WO 96/29094)
Den immunogene sammensetningen kan omfatte Streptococcus pneumoniaeproteiner, her betegnet Streptococcus pneumoniae-proteiner ifølge oppfinnelsen. Slike proteiner kan anvendes som bærerproteiner eller kan være til stede som frie proteiner eller kan være til stede både som bærerproteiner og som frie proteiner. Streptococcus pneumoniae-proteinene ifølge oppfinnelsen er enten overflateeksponert, i det minste under del av livssyklusen for pneumokokker eller er proteiner som blir utskilt eller frigjort av pneumokokker. Eventuelt er proteinene ifølge oppfinnelsen valgt fra de følgende kategoriene, slik som proteiner som har et Type II signalsekvens motiv av LXXC (hvor X er hvilken som helst aminosyre, f.eks. polyhistidin triade familien (PhtX)), cholinbindende proteiner (CbpX), proteiner som har et Type I signalsekvens-motiv (f.eks. Sp101), proteiner som har et LPXTG-motiv (hvor X er hvilken som helst aminosyre, f.eks. Sp128, Sp130) og toksiner (f.eks. Ply). Eksempler innenfor disse kategoriene (eller motiver) er de følgende proteinene eller immunologisk funksjonelle ekvivalenter derav.
I én utførelsesform omfatter den immunogene sammensetningen ifølge oppfinnelsen minst 1 protein valgt fra gruppen bestående av polyhistidin triadefamilien (PhtX), cholinbindende protein-familien (CbpX), trunkerte CbpX, LytX-familien, trunkerte LytX, trunkert CbpX-trunkert-LytX kimære proteiner (eller fusjoner), pneumolysin (Ply), PspA, PsaA, Sp128, Sp101, Sp130, Sp125 og Sp133. I en ytterligere utførelsesform omfatter den immunogene sammensetningen 2 eller flere proteiner valgt fra gruppen bestående av polyhistidin triade-familien (PhtX), cholinbindende protein-familien (CbpX), trunkerte CbpX, LytX-familien, trunkerte LytX, trunkert CbpX-trunkert LytX kimære proteiner (eller fusjoner), pneumolysin (Ply), PspA, PsaA og Sp128. I én ytterligere utførelsesform omfatter den immunogene sammensetningen 2 eller flere proteiner valgt fra gruppen bestående av polyhistidin triade-familien (PhtX), cholinbindende protein-familien (CbpX), trunkerte CbpX, LytX-familien, trunkerte LytX, trunkert CbpX- trunkert-LytX kimære proteiner (eller fusjoner), pneumolysin (Ply) og Sp128.
Pht (Poly Histidin Triade)-familien omfatter proteinene PhtA, PhtB, PhtD og PhtE. Familien er karakterisert ved en lipidering sekvens, to domener atskilt av en prolinrik region og mange histidin triader, muligens involvert i metall eller nukleosid-binding eller enzymatisk aktivitet, (3-5) coiled-coil regioner, en konservert N-terminal ende og en heterogen C-terminal ende. Den er til stede i alle stammer av pneumokokker testet. Homologe proteiner er også funnet i andre Streptokokker og Neisseria. I én utførelsesform ifølge oppfinnelsen er Pht-proteinet PhtD. Det er imidlertid forstått at betegnelsene Pht A, B, D og E refererer til proteiner som har sekvenser beskrevet i henvisningene nedenfor så vel som naturlig forekommende (og kunstige) varianter derav som har en sekvenshomologi som er minst 90% identisk med de refererte proteinene. Eventuelt er det minst 95% identisk og mest foretrukket er det 97% identisk.
Når det gjelder PhtX-proteinene er PhtA beskrevet i WO 98/18930 og er også referert til Sp36. Som angitt ovenfor er det et protein fra polyhistidin triade-familien og har type II signalmotiv av LXXC. PhtD er beskrevet i WO 00/37105 og er også referert til Sp036D. Som angitt ovenfor er det også et protein fra fra polyhistidin triade-familien og har type II LXXC signalmotiv. PhtB er beskrevet i WO 00/37105 og er også referert til Sp036B. Et annet medlem av PhtB-familien er C3 degraderende polypeptid, som beskrevet i WO 00/17370. Dette proteinet er også fra polyhistidin triad-familien og har type II LXXC signalmotivet. For eksempel er en immunologisk funksjonell ekvivalent proteinet Sp42 beskrevet i WO 98/18930. Et trunkert PhtB (omtrent 79kD) er beskrevet i WO99/15675 som også anses som et medlem av PhtX-familien. PhtE er beskrevet i WO00/30299 og er referert til som BVH-3. Når hvilket som helst Pht-protein blir referert til her, menes det at immunogene fragmenter eller fusjoner derav av Pht-proteinet kan anvendes. For eksempel omfatter en referanse til PhtX immunogene fragmenter eller fusjoner derav fra hvilket som helst Pht-protein. En referanse til PhtD eller PhtB er også en referanse til PhtDE eller PhtBE-fusjoner som funnet, for eksempel i WO0198334.
Pneumolysin er et multifunksjonelt toksin med distinkte cytolytiske (hemolytiske) og komplementaktiverings-aktiviteter (Rubins et al., Am . Respi. Cit Care Med, 153:1339-1346 (1996)). Toksinet blir ikke sekretert av pneumokokker, men det blir frigjort ved lysis av pneumokokker under påvirkning av autolysin. Dets effekter omfatter f.eks. stimulering av produksjon av inflammatoriske cytokiner ved humane monocytter, inhibering av bevegelse av flimmerhår i humant respiratorisk epitel og reduksjon av baktericid aktivitet og migrering av nøytrofiler. Den mest åpenbare effekten av pneumolysin er i lysis av røde blodceller, hvilket omfatter binding til kolesterol. Fordi det er et toksin er det nødvendig å detoksifisere det (dvs. ikke-toksisk for et menneske når det gis en dose egnet for beskyttelse) før det kan administreres in vivo. Ekspresjon og kloning av villtype eller nativt pneumolysin er kjent på området. Se for eksempel Walker et al. (Infect Immun, 55:1184-1189 (1987)), Mitchell et al. (Biochim Biophys Acta, 1007:67-72 (1989) og Mitchell et al (NAR, 18:4010 (1990)). Detoksifisering av ply kan utføres ved kjemiske midler, f.eks. underlegges formalin eller glutaraldehyd-behandling eller en kombinasjon av begge (WO 04081515, PCT/EP2005/010258). Slike metoder er velkjent på området for forskjellige toksiner. Alternativt kan ply være genetisk detoksifisert. Følgelig omfatter oppfinnelsen derivater av pneumokokk-proteiner som for eksempel kan være muterte proteiner. Betegnelsen “mutert” blir anvendt her for et molekyl som har gjennomgått delesjon, addisjon eller substitusjon av én eller flere aminosyrer ved anvendelse av velkjente teknikker for seterettet mutagenese eller hvilken som helst annen konvensjonell metode. For eksempel som beskrevet ovenfor kan et mutant ply-protein endres slik at det er biologisk inaktivt samtidig som det fortsatt opprettholder sine immunogene epitoper, se for eksempel WO90/06951, Berry et al. (Infect Immun, 67:981-985 (1999)) og WO99/03884.
Som anvendt her vil det forstås at betegnelsen “Ply” refererer til mutert eller detoksifisert pneumolysin egnet for medisinsk anvendelse (dvs. ikke toksisk).
Angående cholinbindende protein-familien (CbpX), ble medlemmer av denne familien opprinnelig identifisert som pneumokokk-proteiner som kunne renses ved cholin-affinitetskromatografi. Alle de cholinbindende proteinene er ikke-kovalent bundet til fosforylcholingrupper av cellevegg teikoinsyre og membran-assosiert lipoteikoinsyre. Strukturelt har de mange regioner felles gjennom hele familien, selv om den nøyaktige beskaffenheten av proteinene (aminosyresekvens, lengde, osv.) kan variere. Generelt omfatter cholinbindende proteiner en N-terminal region (N), konserverte repeterte regioner (R1 og/eller R2), en prolinrik region (P) og en konservert cholinbindende region (C), som utgjøres av multiple repetisjoner, som omfatter omtrent halvparten av proteinet. Som anvendt i foreliggende søknad er betegnelsen “Cholinbindende protein-familie (CbpX)” valgt fra gruppen bestående av cholinbindende proteiner som identifisert i WO 97/41151, PbcA, SpsA, PspC, CbpA, CbpD og CbpG. CbpA er beskrevet i WO 97/41151. CbpD og CbpG er beskrevet i WO 00/29434. PspC er beskrevet i WO 97/09994. PbcA er beskrevet i WO 98/21337. SpsA er et cholinbindende protein beskrevet i WO 98/39450. Eventuelt er de cholinbindende proteinene valgt fra gruppen bestående av CbpA, PbcA, SpsA og PspC.
En utførelsesform ifølge oppfinnelsen omfatter trunkerte CbpX hvor “CbpX” er definert ovenfor og “trunkert” angir CbpX-proteiner som mangler 50% eller mer av den cholinbindende regionen (C). Eventuelt mangler slike proteiner hele den cholinbindende regionen. Eventuelt mangler slike trunkerte proteiner (i) den cholinbindende regionen og (ii) en del av den N-terminale halvparten av proteinet også, men beholder minst én repetert region (R1 eller R2). Eventuelt har det trunkerte proteinet 2 repeterte regioner (R1 og R2). Eksempler på slike utførelsesformer er NR1xR2, R1xR2 som illustrert i WO99/51266 eller WO99/51188, imidlertid er andre cholinbindende proteiner som mangler en lignende cholinbindende region også omfattet innenfor omfanget av foreliggende oppfinnelse.
LytX-familien er membranassosierte proteiner forbundet med cellelysis. Det N-terminale domenet omfatter cholinbindende domene(r), imidlertid har ikke LytX-familien alle trekkene funnet i CbpA-familien notert ovenfor og følgelig blir, for foreliggende oppfinnelse, LytX-familien ansett som ulikt fra CbpX-familien. I kontrast til CbpX-familien, inneholder det C-terminale domenet det katalytiske domenet fra LytX-proteinfamilien. Familien omfatter LytA, B og C. Med hensyn til LytX-familien, er LytA beskrevet i Ronda et al., Eur J Biochem, 164:621-624 (1987). LytB er beskrevet i WO 98/18930 og er også referert til som Sp46. LytC er også beskrevet i WO 98/18930 og er også referert til som Sp91. En utførelsesform ifølge oppfinnelsen omfatter LytC.
En annen utførelsesform omfatter trunkerte LytX hvor “LytX” er definert ovenfor og “trunkert” angir LytX-proteiner som mangler 50% eller mer av den cholinbindende regionen. Eventuelt mangler slike proteiner hele den cholinbindende regionen. Enda en annen utførelsesform av oppfinnelsen omfatter trunkert CbpX-trunkert LytX kimære proteiner (eller fusjoner). Eventuelt omfatter dette NR1xR2 (eller R1xR2) fra CbpX og den C-terminale delen (Cterm, dvs. som mangler de cholinbindende domenene) av LytX (f.eks. LytCCterm eller Sp91Cterm). Eventuelt er CbpX valgt fra gruppen bestående av CbpA, PbcA, SpsA og PspC. Eventuelt er den CbpA. LytX er eventuelt LytC (også referert til som Sp91). En annen utførelsesform av oppfinnelsen er en trunkert PspA eller PsaA som mangler det cholinbindende domenet (C) og blir uttrykt som et fusjonsprotein med LytX. LytX er eventuelt LytC.
Når det gjelder PsaA og PspA er begge kjent på området. For eksempel er PsaA og transmembran delesjonsvarianter derav beskrevet av Berry & Paton, Infect Immun 1996 Des; 64(12):5255-62. PspA og transmembran delesjonsvarianter derav er beskrevet i, for eksempel US 5804193, WO 92/14488 og WO 99/53940.
Sp128 og Sp130 er beskrevet i WO00/76540. Sp125 er et eksempel på et pneumokokk-overflateprotein med det cellevegg forankrede motivet av LPXTG (hvor X er hvilken som helst aminosyre). Hvilket som helst protein innenfor denne klassen av pneumokokk overflateprotein med dette motivet er funnet å være anvendelig innenfor konteksten til foreliggende oppfinnelse og blir derfor ansett som et ytterligere protein ifølge oppfinnelsen. Sp125 i seg selv er beskrevet i WO 98/18930 og er også kjent som ZmpB – en sink metalloproteinase. Sp101 er beskrevet i WO 98/06734 (hvor det har referanse nr. y85993. Det er karakterisert ved en Type I signalsekvens. Sp133 er beskrevet i WO 98/06734 (hvor det har referanse nr. y85992. Det er også karakterisert ved en Type I signalsekvens.
Eksempler på Moraxella catarrhalis protein-antigener som kan omfattes i en kombinasjonsvaksine (spesielt for forebygging av otitis media) er: OMP106 [WO 97/41731 (Antex) & WO 96/34960 (PMC)]; OMP21 eller fragmenter derav (WO 0018910); LbpA &/eller LbpB [WO 98/55606 (PMC)]; TbpA &/eller TbpB [WO 97/13785 & WO 97/32980 (PMC)]; CopB [Helminen ME, et al. (1993) Infect. Immun. 61:2003-2010]; UspA1 og/eller UspA2 [WO 93/03761 (University of Texas)]; OmpCD; HasR (PCT/EP99/03824); PilQ (PCT/EP99/03823); OMP85 (PCT/EP00/01468); lipo06 (GB 9917977,2); lipo10 (GB 9918208,1); lipo11 (GB 9918302,2); lipo18 (GB 9918038,2); P6 (PCT/EP99/03038); D15 (PCT/EP99/03822); OmplA1 (PCT/EP99/06781); Hly3 (PCT/EP99/03257); og OmpE. Eksempler på non-typeable Haemophilus influenzae-antigener som kan omfattes i en kombinasjonsvaksine (spesielt for forebygging av otitis media) omfatter: Fimbrin-protein [(US 5766608 - Ohio State Research Foundation)] og fusjoner omfattende peptider derfra [f.eks. LB1(f) peptid fusjoner; US 5843464 (OSU) eller WO 99/64067]; OMP26 [WO 97/01638 (Cortecs)]; P6 [EP 281673 (State University of New York)]; TbpA og/eller TbpB; Hia; Hsf; Hin47; Hif; Hmw1; Hmw2; Hmw3; Hmw4; Hap; D15 (WO 94/12641); P2; og P5 (WO 94/26304).
Proteinene ifølge oppfinnelsen kan også fordelaktig kombineres. Med kombineres menes det at den immunogene sammensetningen omfatter alle proteinene fra de følgende kombinasjonene, enten som bærerproteiner eller som frie proteiner eller en blanding av de to. For eksempel kan, i en kombinasjon av to proteiner som angitt nedenfor, begge proteinene anvendes som bærerproteiner eller begge proteinene kan være til stede som frie proteiner eller begge kan være til stede som bærer og som fritt protein eller ett kan være til stede som et bærerprotein og et fritt protein mens det andre er til stede kun som et bærerprotein eller kun som et fritt protein eller ett kan være til stede som et bærerprotein og det andre som et fritt protein. Når en kombinasjon av tre proteiner er gitt finnes lignende muligheter. Kombinasjoner omfatter, men er ikke begrenset til, PhtD NR1xR2, PhtD NR1xR2-Sp91Cterm kimære eller fusjonsproteiner, PhtD Ply, PhtD Sp128, PhtD PsaA, PhtD PspA, PhtA NR1xR2, PhtA NR1xR2-Sp91Cterm kimære eller fusjonsproteiner, PhtA Ply, PhtA Sp128, PhtA PsaA, PhtA PspA, NR1xR2 LytC, NR1xR2 PspA, NR1xR2 PsaA, NR1xR2 Sp128, R1xR2 LytC, R1xR2 PspA, R1xR2 PsaA, R1xR2 Sp128, R1xR2 PhtD, R1xR2 PhtA. Eventuelt er NR1xR2 (eller R1xR2) fra CbpA eller PspC. Eventuelt er den fra CbpA. Andre kombinasjoner omfatter 3 proteinkombinasjoner slik som PhtD NR1xR2 Ply og PhtA NR1xR2 PhtD. I én utførelsesform omfatter vaksinesammensetningen detoksifisert pneumolysin og PhtD eller PhtDE som bærerproteiner. I en ytterligere utførelsesform omfatter vaksinesammensetningen detoksifisert pneumolysin og PhtD eller PhtDE som frie proteiner.
I et uavhengig aspekt tilveiebringer foreliggende oppfinnelse en immunogen sammensetning omfattende minst fire S. pneumoniae kapsulære sakkaridkonjugater inneholdende sakkarider fra forskjellige S. pneumoniae serotyper hvor minst ett sakkarid er konjugert til PhtD eller fusjonsprotein derav og den immunogene sammensetningen er i stand til å fremkalle en effektiv immunrespons mot PhtD.
En effektiv immunrespons mot PhtD eller fusjonsprotein derav blir målt for eksempel ved et beskyttelsesforsøk slik som det beskrevet i eksempel 15. En effektiv immunrespons tilveiebringer minst 40%, 50%, 60%, 70%, 80% eller 90% overlevelse 7 dager etter provokasjon med en heterolog stamme. Gitt at provokasjonsstammen er heterolog, skyldes beskyttelsen gitt immunresponsen mot PhtD eller fusjonsprotein derav.
Alternativt blir en effektiv immunrespons mot PhtD målt ved ELISA som beskrevet i eksempel 14. En effektiv immunrespons gir en anti-PhtD IgG respons på minst 250, 300, 350, 400, 500, 550 eller 600 μg/ml GMC.
For eksempel omfatter den immunogene sammensetningen minst 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 eller 10 S. pneumoniae kapsulære sakkarider fra forskjellige serotyper konjugert til PhtD eller fusjonsprotein derav. For eksempel er serotypene 22F og 1, 2, 3, 4, 5, 6 eller 7 videre valgt fra serotypene 1, 2, 3, 4, 5, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 23F og 33F konjugert til PhtD. I en utførelsesform er to eller tre av serotypene 3, 6A og 22F konjugert til PhtD eller fusjonsprotein derav.
I en utførelsesform omfatter den immunogene sammensetningen ifølge oppfinnelsen minst ett S. pneumoniae kapsulært sakkarid konjugert til PhtD eller fusjonsprotein derav gjennom en linker, for eksempel ADH. I en utførelsesform blir én av konjugerings kjemiene listet opp nedenfor anvendt.
I en utførelsesform omfatter den immunogene sammensetningen ifølge oppfinnelsen minst ett S. pneumoniae kapsulært sakkarid konjugert til PhtD eller fusjonsprotein derav, hvor forholdet av PhtD til sakkarid i konjugatet er mellom 6:1 og 1:5, 6:1 og 2:1, 6:1 og 2,5:1, 6:1 og 3:1, 6:1 og 3,5:1 (vekt/vekt) eller er større enn (dvs. inneholder en større proporsjon av PhtD) 2,0:1, 2,5:1, 3,0:1, 3,5:1 eller 4,0:1 (vekt/vekt).
I en utførelsesform omfatter den immunogene sammensetningen ifølge oppfinnelsen pneumolysin.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer videre en vaksine inneholdende de immunogene sammensetningene ifølge oppfinnelsen og et farmasøytisk akseptabelt tilsetningsmiddel.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer videre en fremgangsmåte for fremstilling av en vaksine som omfatter trinnet med å blande den immunogene sammensetningen ifølge oppfinnelsen med et farmasøytisk akseptabelt
tilsetningsmiddel.
Vaksinene ifølge foreliggende oppfinnelse kan være tilsatt adjuvans, spesielt når de er ment for anvendelse i en eldre populasjon men også for anvendelse i barnepopulasjoner. Egnede adjuvanser omfatter et aluminiumsalt slik som aluminiumhydroksid gel eller aluminiumfosfat eller alun, men kan også være andre metallsalter slik som de av kalsium, magnesium, jern eller sink eller kan være en uoppløselig suspensjon av acylert tyrosin eller acylerte sukkere, kationisk eller anionisk derivatiserte sakkarider eller polyfosfazener.
Adjuvansen blir eventuelt valgt til å være en preferensiell inducer av en TH1-type respons. Slike høye nivåer av Th1-type cytokiner er tilbøyelige til å favorisere induksjon av cellemedierte immunresponser til et gitt antigen, mens høye nivåer av Th2-type cytokiner er tilbøyelige til å understøtte induksjon av humorale immunresponser på antigenet.
Forskjellen mellom Th1 og Th2-type immunrespons er ikke absolutt. I realiteten vil et individ støtte en immunrespons som er angitt å være hovedsakelig Th1 eller hovedsakelig Th2. Det er imidlertid ofte hensiktsmessig å ta i betraktning familiene av cytokiner når det gjelder det beskrevet i murine CD4 ve T-celle kloner ved Mosmann og Coffman (Mosmann, T.R. og Coffman, R.L. (1989) TH1 and TH2 cells: different patterns of lymphokine secretion lead to different functional properties. (Annual Review of Immunology, 7, s.145-173). Tradisjonelt er Th1-type responser forbundet med produksjon av INF-J og IL-2 cytokiner ved T-lymfocytter. Andre cytokiner ofte direkte forbundet med induksjon av Th1-type immunresponser blir ikke produsert av T-celler, slik som IL-12. Derimot er Th2-type responser forbundet med sekresjon av Il-4, IL-5, IL-6, IL-10. Egnede adjuvans-systemer som fremmer en overveiende Th1-respons omfatter:
Monofosforyl lipid A eller et derivat derav (eller detoksifisert lipid A generelt – se for eksempel WO2005107798), spesielt 3-de-O-acylert monofosforyl lipid A (3D-MPL) (for fremstilling av den se GB 2220211 A); og en kombinasjon av monofosforyl lipid A, eventuelt 3-de-O-acylert monofosforyl lipid A, sammen med enten et aluminiumsalt (for eksempel aluminiumfosfat eller aluminiumhydroksid) eller en olje-i-vann emulsjon. I slike kombinasjoner er antigen og 3D-MPL inneholdt i samme partikulære strukturer, hvilket muliggjør mer effektiv levering av antigene og immunstimulerende signaler. Studier har vist at 3D-MPL er i stand til å ytterligere fremme immunogenisiteten av et alun-adsorbert antigen [Thoelen et al. Vaccine (1998) 16:708-14; EP 689454-B1].
Et forbedret system omfatter kombinasjonen av et monofosforyl lipid A og et saponin-derivat, spesielt kombinasjonen av QS21 og 3D-MPL som beskrevet i WO 94/00153 eller en mindre reaktogen sammensetning hvor QS21 er behandlet med kolesterol som beskrevet i WO 96/33739. En spesielt potent adjuvansformulering som omfatter QS21, 3D-MPL og tokoferol i en olje-i-vann emulsjon er beskrevet i WO 95/17210. I én utførelsesform omfatter den immunogene sammensetningen i tillegg et saponin, som kan være QS21. Formuleringen kan også omfatte en olje-ivann emulsjon og tokoferol (WO 95/17210). Umetylert CpG-inneholdende oligonukleotider (WO 96/02555) og andre immunmodulerende oligonukleotider (WO0226757 og WO03507822) er også preferensielle inducere av en TH1-respons og er egnet for anvendelse ved foreliggende oppfinnelse.
Spesielle adjuvanser er de valgt fra gruppen av metallsalter, olje-i-vann emulsjoner, Toll-lignende reseptor-agonister, (spesielt Toll-lignende reseptor 2-agonist, Toll-lignende reseptor 3-agonist, Toll-lignende reseptor 4-agonist, Tolllignende reseptor 7-agonist, Toll-lignende reseptor 8-agonist og Toll-lignende reseptor 9-agonist), saponiner eller kombinasjoner derav.
En adjuvans som kan anvendes med vaksinesammensetningene ifølge oppfinnelsen er ”bleb” eller yttermembran vesikkel-preparater fra Gram-negative bakteriestammer slik som de beskrevet av WO02/09746 – spesielt N. meningitidis blebs. Adjuvansegenskapene av blebs kan forbedres ved å bibeholde LOS (lipooligosakkarid) på dens overflate (f.eks. gjennom ekstraksjon med lave konsentrasjoner av detergent [for eksempel 0-0,1% deoksycholat]). LOS kan detoksifiseres gjennom msbB(-) eller htrB(-)-mutasjonene beskrevet i WO02/09746. Adjuvansegenskaper kan også forbedres ved å beholde PorB (og eventuelt fjerne PorA) fra meningokokk-blebs. Adjuvansegenskaper kan også forbedres ved trunkering av den ytre kjerne sakkaridstrukturen av LOS på meningokokk-blebs – for eksempel gjennom lgtB(-)-mutasjonen beskrevet i WO2004/014417. Alternativt kan ovennevnte LOS (f.eks. isolert fra en msbB(-) og/eller lgtB(-)-stamme) renses og anvendes som en adjuvans i sammensetningene ifølge oppfinnelsen.
En ytterligere adjuvans som kan anvendes med sammensetningene ifølge oppfinnelsen kan velges fra gruppen: et saponin, lipid A eller et derivat derav, et immunstimulerende oligonukleotid, et alkyl glukosaminid-fosfat, en olje-i-vann emulsjon eller kombinasjoner derav. En ytterligere adjuvans som kan anvendes med sammensetningene ifølge oppfinnelsen er et metallsalt i kombinasjon med en annen adjuvans. I en utførelsesform er adjuvansen en Toll-lignende reseptoragonist spesielt en agonist for en Toll-lignende reseptor 2, 3, 4, 7, 8 eller 9 eller et saponin, spesielt Qs21. I en utførelsesform omfatter adjuvans-systemet to eller flere adjuvanser fra listen ovenfor. Spesielt inneholder kombinasjonene eventuelt en saponin (spesielt Qs21)-adjuvans og/eller en Toll-lignende reseptor 9-agonist slik som et CpG inneholdende immunstimulerende oligonukleotid. Andre kombinasjoner omfatter et saponin (spesielt QS21) og en Toll-lignende reseptor 4-agonist slik som monofosforyl lipid A eller dens 3 deacylerte derivat, 3 D – MPL eller et saponin (spesielt QS21) og en Toll-lignende reseptor 4-ligand slik som et alkyl glukosaminid-fosfat.
I en utførelsesform er adjuvantia kombinasjoner av 3D-MPL og QS21 (EP 0671 948 B1), olje-i-vann emulsjoner omfattende 3D-MPL og QS21 (WO 95/17210, WO 98/56414) eller 3D-MPL formulert med andre bærere (EP 0689 454 B1). I en utførelsesform omfatter adjuvanssystemer en kombinasjon av 3 D MPL, QS21 og et CpG-oligonukleotid som beskrevet i US6558670, US6544518.
I en utførelsesform er adjuvansen en Toll-lignende reseptor (TLR) 4-ligand, eventuelt en agonist slik som et lipid A-derivat spesielt monofosforyl lipid A eller nærmere bestemt 3 Deacylert monofosforyl lipid A (3 D – MPL).
3 D –MPL er tilgjengelig fra GlaxoSmithKline Biologicals Nord-Amerika og fremmer primært CD4+ T-celle-responser med en IFN-g (Th1) fenotype. Den kan fremstilles i henhold til metodene beskrevet i GB 2220 211 A. Kjemisk er den en blanding av 3-deacylert monofosforyl lipid A med 3, 4, 5 eller 6 acylerte kjeder. I en utførelsesform blir små partikkel 3 D-MPL anvendt i sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse. Små partikkel 3 D -MPL har en partikkelstørrelse slik at den kan sterilfiltreres gjennom et 0,22Pm filter. Slike preparater er beskrevet i internasjonal patentsøknad nr. WO 94/21292. Syntetiske derivater av lipid A er kjent og antatt å være TLR 4-agonister omfattende, men ikke begrenset til:
OM174 (2-deoksy-6-o-[2-deoksy-2-[(R)-3-dodekanoyloksytetra-dekanoylamino]-4-o-fosfono-E-D-glukopyranosyl]-2-[(R)-3-hydroksytetradekanoylamino]-D-D-glukopyranosyldihydrogenfosfat), (WO 95/14026)
OM 294 DP (3S, 9 R)-3-[(R)-dodekanoyloksytetradekanoylamino]-4-okso-5-aza-9(R)-[(R)-3-hydroksytetradekanoylamino]dekan-1,10-diol,1,10-bis(dihydrogenofosfat) (WO99 /64301 og WO 00/0462 )
OM 197 MP-Ac DP (3S-, 9R) -3->(R) -dodekanoyloksytetradekanoylamino]-4-okso-5-aza-9-[(R)-3-hydroksytetradekanoylamino]dekan-1,10-diol,1-dihydrogenofosfat 10-(6-aminoheksanoat) (WO 01/46127)
Andre TLR4-ligander som kan anvendes er alkyl glukosaminid-fosfater (AGP’er) slik som de beskrevet i WO9850399 eller US6303347 (fremgangsmåter for fremstilling av AGP’er er også beskrevet) eller farmasøytisk akseptable salter av AGP’er som beskrevet i US6764840. Noen AGP’er er TLR4-agonister og noen er TLR4-antagonister. Begge er antatt å være anvendelige som adjuvanser.
En annen immunstimulant for anvendelse ved foreliggende oppfinnelse er Quil A og derivater derav. Quil A er et saponin-preparat isolert fra det søramerikanske treet Quillaja Saponaria Molina og ble først beskrevet å ha adjuvansaktivitet av Dalsgaard et al. i 1974 (“Saponin adjuvants”, Archiv. für die gesamte Virusforschung, Vol.44, Springer Verlag, Berlin, s.243-254). Rensede fragmenter av Quil A har blitt isolert ved HPLC hvilke beholder adjuvansaktivitet uten toksisiteten forbundet med Quil A (EP 0362 278), for eksempel QS7 og QS21 (også kjent som QA7 og QA21). QS-21 er et naturlig saponin avledet fra barken av Quillaja saponaria Molina, hvilket induserer CD8+ cytotoksiske T-celler (CTLs), Th1-celler og en dominerende IgG2a antistoffrespons og er et saponin i sammenheng med foreliggende oppfinnelse.
Spesielle formuleringer av QS21 har blitt beskrevet hvilke er en utførelsesform ifølge oppfinnelsen, disse formuleringene omfatter videre et sterol (WO96/33739). Saponinene som danner del av foreliggende oppfinnelse kan være separate i form av miceller, blandede miceller (eventuelt med gallesyresalter) eller kan være i form av ISCOM matrikser (EP 0109 942 B1), liposomer eller relaterte kolloidale strukturer slik som ormlignende eller ring-lignende multimere komplekser eller lipid/lagdelte strukturer og lamella når formulert med kolesterol og lipid, eller i form av en olje-i-vann emulsjon (for eksempel som i WO 95/17210). Saponinene kan være forbundet med et metallisk salt, slik som aluminiumhydroksid eller aluminiumfosfat (WO 98/15287).
Eventuelt blir saponinet presentert i form av et liposom, ISCOM eller en olje-i-vann emulsjon.
Et forbedret system omfatter kombinasjon av et monofosforyl lipid A (eller detoksifisert lipid A) og et saponinderivat, spesielt kombinasjonen av QS21 og 3D-MPL som beskrevet i WO 94/00153 eller en mindre reaktogen sammensetning hvor QS21 blir quenchet med kolesterol som beskrevet i WO 96/33739. En spesielt potent adjuvansformulering som omfatter tokoferol med eller uten QS21 og/eller 3D-MPL i en olje-i-vann emulsjon er beskrevet i WO 95/17210. I én utførelsesform omfatter den immunogene sammensetningen i tillegg et saponin, som kan være QS21.
Immunstimulerende oligonukleotider eller hvilken som helst annen Toll-lignende reseptor (TLR) 9-agonist kan også anvendes. Oligonukleotidene for anvendelse i adjuvanser eller vaksiner ifølge foreliggende oppfinnelse er eventuelt CpG-inneholdende oligonukleotider, eventuelt inneholdende to eller flere dinukleotid CpG-motiver atskilt av minst tre, eventuelt minst seks eller flere nukleotider. Et CpG-motiv er et cytosin-nukleotid fulgt av et guanin-nukleotid. CpG-oligonukleotidene ifølge foreliggende oppfinnelse er typisk deoksynukleotider. I en utførelsesform er inter nukleotidet i oligonukleotidet fosforditioat eller en fosfortioat-binding, selv om fosfodiester og andre internukleotid-bindinger er innenfor omfanget av oppfinnelsen. Også omfattet innenfor omfanget av oppfinnelsen er oligonukleotider med blandede internukleotid-bindinger. Metoder for fremstilling av fosfortioat oligonukleotider eller fosforditioat er beskrevet i US5,666,153, US5,278,302 og WO95/26204.
Eksempler på oligonukleotider har de følgende sekvensene. Sekvensene inneholder eventuelt fosfortioat-modifiserte internukleotid-bindinger.
OLIGO 1(SEKV ID NR:1): TCC ATG ACG TTC CTG ACG TT (CpG 1826) OLIGO 2 (SEKV ID NR:2): TCT CCC AGC GTG CGC CAT (CpG 1758) OLIGO 3(SEKV ID NR:3): ACC GAT GAC GTC GCC GGT GAC GGC ACC ACG OLIGO 4 (SEKV ID NR:4): TCG TCG TTT TGT CGT TTT GTC GTT (CpG 2006) OLIGO 5 (SEKV ID NR:5): TCC ATG ACG TTC CTG ATG CT (CpG 1668) OLIGO 6 (SEKV ID NR:6): TCG ACG TTT TCG GCG CGC GCC G (CpG 5456)
Alternative CpG-oligonukleotider kan omfatte sekvensene ovenfor ved at de har inkonsekvente delesjoner eller addisjoner dertil.
CpG-oligonukleotidene anvendt i foreliggende oppfinnelse kan syntetiseres ved hvilken som helst metode kjent på området (se for eksempel EP 468520).
Hensiktsmessig kan slike oligonukleotider syntetiseres ved å anvende en automatisert syntesemaskin.
Adjuvansen kan være en olje-i-vann emulsjon eller kan omfatte en olje-i-vann emulsjon i kombinasjon med andre adjuvanser. Oljefasen av emulsjonssystemet omfatter eventuelt en metaboliserbar (”metabolisable”) olje. Betydningen av betegnelsen metaboliserbar olje er velkjent på området. Metaboliserbar kan defineres som “å være i stand til å bli omsatt ved metabolisme” (Dorland’s Illustrated Medical Dictionary, W.B. Sanders Company, 25<th>utgave (1974)). Oljen kan være hvilken som helst vegetabilsk olje, fisk, olje, animalsk eller syntetisk olje, som ikke er toksisk for mottageren og kan omsettes ved metabolisme. Nøtter, frø og korn er vanlige kilder for vegetabilske oljer. Syntetiske oljer er også del av foreliggende oppfinnelse og kan omfatte kommersielt tilgjengelige oljer slik som NEOBEE® og andre. Squalen (2,6,10,15,19, 23-heksametyl-2,6,10,14,18,22-tetracosahexaen) er en umettet olje som er funnet i store mengder i hailever-olje og i lavere mengder i olivenolje, hvetekimolje, riskliolje og gjær og er en olje for anvendelse ved foreliggende oppfinnelse. Squalen er en metaboliserbar olje i kraft av det faktum at den er et intermediat i biosyntesen av kolesterol (Merck Index, 10<th>Utgave, oppføring nr.8619).
Tokoler (f.eks. vitamin E) blir også ofte anvendt i oljeemulsjon-adjuvanser (EP 0 382 271 B1; US5667784; WO 95/17210). Tokoler anvendt i olje-emulsjonene (eventuelt olje-i-vann emulsjoner) ifølge oppfinnelsen kan formuleres som beskrevet i EP 0382 271 B1, ved at tokoler kan være dispersjoner av små tokoldråper, eventuelt omfattende et emulgeringsmiddel, på eventuelt mindre enn 1 mikron i diameter. Alternativt kan tokol anvendes i kombinasjon med en annen olje, for å danne oljefasen av en oljeemulsjon. Eksempler på oljeemulsjoner som kan anvendes i kombinasjon med tokol er beskrevet her, slik som de metaboliserbare oljene beskrevet ovenfor.
Olje-i-vann emulsjon adjuvanser per se er foreslått å være anvendelige som adjuvanssammensetninger (EP 0399843B), likeså har kombinasjoner av olje-ivann emulsjoner og andre aktive midler blitt beskrevet som adjuvanser for vaksiner (WO 95/17210; WO 98/56414; WO 99/12565; WO 99/11241). Andre oljeemulsjon-adjuvanser er beskrevet, slik som vann-i-olje emulsjoner (US 5,422,109; EP 0480 982 B2) og vann-i-olje-i-vann emulsjoner (US 5,424,067; EP 0 480 981 B), som alle danner oljeemulsjons-systemer (spesielt når de omfatter tokoler) for å danne adjuvanser og sammensetninger ifølge foreliggende oppfinnelse.
I en utførelsesform omfatter oljeemulsjonen (for eksempel olje-i-vann emulsjoner) videre et emulgeringsmiddel slik som TWEEN 80 og/eller et sterol slik som kolesterol.
I en utførelsesform omfatter oljeemulsjonen (eventuelt olje-i-vann emulsjon) en metaboliserbar, ikke-toksisk olje, slik som squalan, squalen eller et tokoferol slik som alfa-tokoferol (og eventuelt både squalen og alfa-tokoferol) og eventuelt et emulgeringsmiddel (eller surfaktant) slik som Tween 80. Et sterol (f.eks. kolesterol) kan også være omfattet.
Metoden for fremstilling av olje-i-vann emulsjoner er velkjent for fagfolk på området. Vanligvis omfatter metoden å blande den tokol-inneholdende oljefasen med en surfaktant slik som en PBS/TWEEN80™-løsning, fulgt av homogenisering ved anvendelse av en homogenisator, det ville være kjent for fagfolk på området at en metode omfattende å passere blandingen to ganger gjennom en sprøytenål ville være egnet for homogenising av små volumer av væske. Likeledes kunne emulgeringsprosessen i mikro fluidiserer (M110S Mikrofluidics maskin, maksimalt 50 gjennomløp, i en periode på 2 minutter ved maksimalt trykk input på 6 bar (output trykk på ca.850 bar)) tilpasses av fagfolk på området for å fremstille mindre eller større volumer av emulsjon. Tilpasningen kunne oppnås ved rutinemessig eksperimentering omfattende måling av den resulterende emulsjonen inntil det ble oppnådd et preparat med små oljedråper med den nødvendige diameteren.
I en olje-i-vann emulsjon, skulle oljen og emulgeringsmiddel være i en vandig bærer. Den vandige bæreren kan for eksempel være fosfatbufret saltoppløsning.
Størrelsen av de små oljedråpene funnet i den stabile olje-i-vann emulsjonen er eventuelt mindre enn 1 mikron, kan være i området på hovedsakelig 30-600nm, eventuelt hovedsakelig rundt 30-500nm i diameter og eventuelt hovedsakelig 150-500nm i diameter og spesielt ca.150 nm i diameter som målt ved foton korrelasjonsspektroskopi. I dette henseende skulle 80% av de små oljedråpene med hensyn til mengde være innenfor områdene, eventuelt er mer enn 90% og eventuelt mer enn 95% av de små oljedråpene med hensyn til mengde innenfor de definerte størrelsesområdene. Mengdene av komponentene til stede i oljeemulsjonene ifølge foreliggende oppfinnelse er konvensjonelt i området fra 0,5-20% eller 2 til 10% olje (av det totale dosevolumet), slik som squalen; og når til stede, fra 2 til 10% alfa-tokoferol; og fra 0,3 til 3% surfaktant, slik som polyoksyetylen sorbitan-monooleat. Eventuelt er forholdet av olje (f.eks. squalen): tokol (f.eks. α-tokoferol) lik eller mindre enn 1 ettersom dette gir en mer stabil emulsjon. Et emulgeringsmiddel, slik som Tween80 eller Span 85 kan også være til stede i et nivå på ca.1%. I noen tilfeller kan det være fordelaktig at vaksinene ifølge foreliggende oppfinnelse videre vil inneholde et stabiliseringsmiddel.
Eksempler på emulsjonssystemer er beskrevet i WO 95/17210, WO 99/11241 og WO 99/12565 som beskriver emulsjons adjuvanser basert på squalen, α-tokoferol og TWEEN 80, eventuelt formulert med immunstimulantene QS21 og/eller 3DMPL. Følgelig kan, i en utførelsesform av oppfinnelsen, adjuvansen ifølge oppfinnelsen i tillegg omfatte ytterligere immunstimulanter, slik som LPS eller derivater derav og/eller saponiner. Eksempler på ytterligere immunstimulanter er beskrevet her og i “Vaccine Design – The Subunit and Adjuvant Approach” 1995, Pharmaceutical Biotechnology, Volum 6, Eds. Powell, M.F. og Newman, M.J., Plenum Press, New York og London, ISBN 0-306-44867-X.
I en utførelsesform omfatter adjuvans og immunogen sammensetningene ifølge oppfinnelsen et saponin (f.eks. QS21) og/eller et LPS-derivat (f.eks.3D-MPL) i en oljeemulsjon beskrevet ovenfor, eventuelt med et sterol (f.eks. kolesterol). I tillegg kan oljeemulsjonen (eventuelt olje-i-vann emulsjon) inneholde span 85 og/eller lecitin og/eller tricaprylin. Adjuvanser omfattende en olje-i-vann emulsjon, et sterol og et saponin er beskrevet i WO 99/12565.
Typisk for human administrering vil saponinet (f.eks. QS21) og/eller LPS-derivatet (f.eks. 3D-MPL) være til stede i en human dose av immunogen sammensetning i området 1μg – 200 μg, slik som 10-100 μg eller 10 μg - 50 μg pr. dose. Typisk vil oljeemulsjonen (eventuelt olje-i-vann emulsjon) omfatte fra 2 til 10% metaboliserbar olje. Eventuelt vil den omfatte fra 2 til 10% squalen, fra 2 til 10% alfa-tokoferol og fra 0,3 til 3% (eventuelt 0,4 – 2%) emulgeringsmiddel (eventuelt tween 80 [polyoksyetylen sorbitan-monooleat]). Når både squalen og alfa-tokoferol er til stede, er eventuelt forholdet av squalen:alfa-tokoferol lik eller mindre enn 1 ettersom dette gir en mer stabil emulsjon. Span 85 (Sorbitan trioleat) kan også være til stede i et nivå på 0,5 til 1% i emulsjonene anvendt i oppfinnelsen. I noen tilfeller kan det være fordelaktig at de immunogene sammensetningene og vaksinene ifølge foreliggende oppfinnelse vil ytterligere inneholde et stabiliseringsmiddel, for eksempel andre emulgeringsmidler/surfaktanter, omfattende kaprylsyre (Merck Index 10<th>Utgave, oppføring nr.1739), for eksempel Tricaprylin.
Når squalen og et saponin (eventuelt QS21) er omfattet, er det fordelaktig å også inkludere et sterol (eventuelt kolesterol) i formuleringen ettersom dette tillater en reduksjon i det totale nivået av olje i emulsjonen. Dette fører til en redusert kostnad for fremstilling, forbedring av den totale bekvemmeligheten av vaksinasjonen og også kvalitative og kvantitative forbedringer av de resulterende immunresponsene, slik som forbedret IFN-J produksjon. Følgelig omfatter adjuvanssystemet ifølge foreliggende oppfinnelse typisk et forhold av metaboliserbar olje:saponin (vekt/vekt) i området 200:1 til 300:1, dessuten kan foreliggende oppfinnelse anvendes i en “lav olje” form for hvilken det eventuelle området er 1:1 til 200:1, eventuelt 20:1 til 100:1 eller hovedsakelig 48:1, denne vaksinen beholder de fordelaktige adjuvansegenskapene til alle komponentene, med en svært redusert reaktogenisitet profil. Følgelig har noen utførelsesformer et forhold av squalen:QS21 (vekt/vekt) i området 1:1 til 250:1 eller 20:1 til 200:1 eller 20:1 til 100:1 eller hovedsakelig 48:1. Eventuelt er et sterol (f.eks. kolesterol) også omfattet til stede i et forhold av saponin:sterol som beskrevet her.
Emulsjonssystemene ifølge foreliggende oppfinnelse har eventuelt en liten olje dråpestørrelse i sub-mikron området. Eventuelt vil størrelsen av de små oljedråpene være i området 120 til 750 nm eller fra 120-600 nm i diameter.
En spesielt potent adjuvansformulering (for endelig kombinasjon med AlPO4 i de immunogene sammensetningene ifølge oppfinnelsen) omfatter et saponin (f.eks. QS21), et LPS-derivat (f.eks.3D-MPL) og en oljeemulsjon (f.eks. squalen og alfatokoferol i en olje-i-vann emulsjon) som beskrevet i WO 95/17210 eller i WO 99/12565 (spesielt adjuvansformulering 11 i Eksempel 2, Tabell 1).
Eksempler på en TLR 2-agonist omfatter peptidoglykan eller lipoprotein.
Imidazokinoliner, slik som Imiquimod og Resiquimod er kjente TLR7-agonister. Enkeltrådet RNA er også en kjent TLR-agonist (TLR8 hos mennesker og TLR7 hos mus), mens dobbeltrådet RNA og poly IC (polyinosin-polycytidylsyre - en kommersiell syntetisk etterligning av viralt RNA). er eksempler på TLR 3-agonister.
3D-MPL er et eksempel på en TLR4-agonist mens CPG er et eksempel på en TLR9-agonist.
Den immunogene sammensetningen kan omfatte et antigen og en immunstimulant adsorbert på et metallsalt. Aluminiumbaserte vaksineformuleringer hvor antigenet og immunstimulanten 3-de-O-acylert monofosforyl lipid A (3D-MPL), er adsorbert på samme partikkel er beskrevet i EP 0576 478 B1, EP 0689 454 B1 og EP 0 633 784 B1. I disse tilfellene så er antigen først adsorbert på aluminiumsaltet fulgt av adsorpsjon av immunstimulanten 3D-MPL på samme aluminiumsalt-partikler. Slike prosesser omfatter først suspensjon av 3D-MPL ved ultralydbehandling i et vannbad inntil partiklene når en størrelse på mellom 80 og 500 nm. Antigenet blir typisk adsorbert på aluminiumsalt i én time ved romtemperatur under risting.3D-MPL-suspensjonen blir deretter tilsatt til det adsorberte antigenet og formuleringen blir inkubert ved romtemperatur i 1 time og deretter holdt ved 4<o>C inntil anvendelse.
Ved en annen metode er immunstimulanten og antigenet på separate metallpartikler, som beskrevet i EP 1126876. Den forbedrede metoden omfatter adsorpsjon av immunstimulant, på en metallisk salt partikkel, fulgt av adsorpsjon av antigenet på en annen metallisk salt partikkel, fulgt av blanding av de adskilte metalliske partiklene for å danne en vaksine. Adjuvansen for anvendelse ved foreliggende oppfinnelse kan være en adjuvanssammensetning omfattende en immunstimulant, adsorbert på en metallisk salt partikkel, karakterisert ved at den metalliske salt partikkelen er hovedsakelig fri for annet antigen. Videre tilveiebringes vaksiner, ved foreliggende oppfinnelse, og er karakterisert ved at immunstimulanten er adsorbert på partikler av metallisk salt som er hovedsakelig fri fra annet antigen og ved at partiklene av metallisk salt som er adsorbert til antigenet er hovedsakelig fri for annen immunstimulant.
Følgelig tilveiebringer foreliggende oppfinnelse en adjuvansformulering omfattende immunstimulant som er adsorbert på en partikkel av et metallisk salt, karakterisert ved at sammensetningen er hovedsakelig fri for annet antigen. Videre kan denne adjuvansformuleringen være et intermediat som, dersom en slik adjuvans blir anvendt, er nødvendig for fremstilling av en vaksine. Følgelig tilveiebringes en fremgangsmåte for fremstilling av en vaksine omfattende å blande en adjuvanssammensetning som er én eller flere immunstimulanter adsorbert på en metallpartikkel med et antigen. Eventuelt er antigenet preadsorbert på et metallisk salt. Nevnte metalliske salt kan være identisk eller lik det metalliske saltet som er adsorbert på immunstimulanten. Eventuelt er metallsaltet et aluminiumsalt, for eksempel aluminiumfosfat eller aluminiumhydroksid.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer videre en vaksinesammensetning omfattende immunstimulant adsorbert på en første partikkel av et metallisk salt og antigen adsorbert på et metallisk salt, karakterisert ved at første og andre partikler av metallisk salt er separate partikler.
LPS eller LOS-derivater eller mutasjoner eller lipidderivater beskrevet her er utformet til å være mindre toksiske (f.eks.3D-MPL) enn native lipopolysakkarider og er utskiftbare ekvivalenter med hensyn til hvilke som helst anvendelser av disse gruppene beskrevet her.
I én utførelsesform omfatter adjuvansen anvendt for sammensetningene ifølge oppfinnelsen en liposombærer (fremstilt ved kjente teknikker fra fosfolipider (slik som dioleoylfosfatidyl cholin [DOPC]) og eventuelt et sterol [slik som kolesterol]). Slike liposom-bærere kan bringe med seg lipid A-derivatene [slik som 3D-MPL – se ovenfor] og/eller saponiner (slik som QS21 – se ovenfor). I én utførelsesform omfatter adjuvansen (pr.0,5 ml dose) 0,1-10 mg, 0,2-7, 0,3-5, 0,4-2 eller 0,5-1 mg (f.eks. 0,4-0,6, 0,9-1,1, 0,5 eller 1 mg) fosfolipid (for eksempel DOPC), 0,025-2,5, 0,05-1,5, 0,075-0,75, 0,1-0,3 eller 0,125-0,25 mg (f.eks.0,2-0,3, 0,1-0,15, 0,25 eller 0,125 mg) sterol (for eksempel kolesterol), 5-60, 10-50 eller 20-30 μg (f.eks.
5-15, 40-50, 10, 20, 30, 40 eller 50 μg) lipid A-derivat (for eksempel 3D-MPL) og 5-60, 10-50 eller 20-30 μg (f.eks.5-15, 40-50, 10, 20, 30, 40 eller 50 μg) saponin (for eksempel QS21).
Denne adjuvansen er spesielt egnet for vaksineformuleringer for eldre. I én utførelsesform omfatter vaksinesammensetningen omfattende denne adjuvansen sakkarid-konjugater avledet fra i det minste alle de følgende serotypene: 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F, 23F, 1, 5, 7F (og kan også omfatte én eller flere fra serotypene 3, 6A, 19A og 22F), hvor GMC antistofftitrene indusert mot én eller flere av (eller alle) vaksinekomponentene 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F og 23F ikke er betydelig lavere enn den indusert ved Prevnar®-vaksinen i humane vaksiner.
I én utførelsesform omfatter adjuvansen anvendt for sammensetningene ifølge oppfinnelsen en olje-i-vann emulsjon fremstilt fra en metaboliserbar olje (slik som squalen), et emulgeringsmiddel (slik som Tween 80) og eventuelt et tokol (slik som alfa-tokoferol). I én utførelsesform omfatter adjuvansen (pr.0,5 ml dose) 0,5-15, 1-13, 2-11, 4-8 eller 5-6 mg (f.eks.2-3, 5-6 eller 10-11 mg) metaboliserbar olje (slik som squalen), 0,1-10, 0,3-8, 0,6-6, 0,9-5, 1-4 eller 2-3 mg (f.eks.0,9-1,1, 2-3 eller 4-5 mg) emulgeringsmiddel (slik som Tween 80) og eventuelt 0,5-20, 1-15, 2-12, 4-10, 5-7 mg (f.eks.11-13, 5-6 eller 2-3 mg) tokol (slik som alfa-tokoferol).
Denne adjuvansen kan eventuelt ytterligere omfatte 5-60, 10-50 eller 20-30 μg (f.eks. 5-15, 40-50, 10, 20, 30, 40 eller 50 μg) lipid A-derivat (for eksempel 3D-MPL).
Disse adjuvansene er spesielt egnet for vaksineformuleringer for barn eller eldre. I én utførelsesform omfatter vaksinesammensetningen som omfatter denne adjuvansen, sakkarid konjugater-avledet fra i det minste alle de følgende serotypene: 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F, 23F, 1, 5, 7F (og kan også omfatte én eller flere fra serotypene 3, 6A, 19A og 22F), hvor GMC antistofftitrene indusert mot én eller flere av (eller alle) vaksinekomponentene 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F og 23F ikke er betydelig lavere enn den indusert ved Prevnar®-vaksinen i humane vaksiner
Denne adjuvansen kan eventuelt inneholde 0,025-2,5, 0,05-1,5, 0,075-0,75, 0,1-0,3 eller 0,125-0,25 mg (f.eks.0,2-0,3, 0,1-0,15, 0,25 eller 0,125 mg) sterol (for eksempel kolesterol), 5-60, 10-50 eller 20-30 μg (f.eks.5-15, 40-50, 10, 20, 30, 40 eller 50 μg) lipid A-derivat (for eksempel 3D-MPL) og 5-60, 10-50 eller 20-30 μg (f.eks. 5-15, 40-50, 10, 20, 30, 40 eller 50 μg) saponin (for eksempel QS21).
Denne adjuvansen er spesielt egnet for vaksineformuleringer for eldre personer. I én utførelsesform omfatter vaksinesammensetningen omfattende denne adjuvansen sakkarid konjugater-avledet fra i det minste alle de følgende serotypene: 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F, 23F, 1, 5, 7F (og kan også omfatte én eller flere fra serotypene 3, 6A, 19A og 22F), hvor GMC antistofftitrene indusert mot én eller flere av (eller alle) vaksinekomponentene 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F og 23F ikke er betydelig lavere enn den indusert ved Prevnar®-vaksinen i humane vaksiner
I én utførelsesform omfatter adjuvansen anvendt for sammensetningene ifølge oppfinnelsen aluminiumfosfat og et lipid A-derivat (slik som 3D-MPL). Denne adjuvansen kan omfatte (pr.0,5 ml dose) 100-750, 200-500 eller 300-400 μg Al som aluminiumfosfat og 5-60, 10-50 eller 20-30 μg (f.eks.5-15, 40-50, 10, 20, 30, 40 eller 50 μg) lipid A-derivat (for eksempel 3D-MPL).
Denne adjuvansen er spesielt egnet for vaksineformuleringer for barn eller eldre. I én utførelsesform omfatter vaksinesammensetningen omfattende denne adjuvansen sakkarid konjugater avledet fra i det minste alle de følgende serotypene: 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F, 23F, 1, 5, 7F (og kan også omfatte én eller flere fra serotypene 3, 6A, 19A og 22F), hvor GMC antistofftitrene indusert mot én eller flere av (eller alle) vaksinekomponentene 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F og 23F ikke er betydelig lavere enn den indusert ved Prevnar®-vaksinen i humane vaksiner
Vaksinepreparatene inneholdende immunogene sammensetninger ifølge foreliggende oppfinnelse kan anvendes for å beskytte eller behandle et pattedyr mottagelig for infeksjon, ved hjelp av administrering av nevnte vaksine via systemisk eller mukosal administreringsvei. Disse administreringene kan omfatte injeksjon via intramuskulær, intraperitoneal, intradermal eller subkutan administreringsvei; eller via mukosal administrering til munn/fordøyelseskanalen, luftveiene, urogenitaltrakten. Intranasal administrering av vaksiner for behandling av lungebetennelse eller otitis media er mulig (ettersom nasofaryngeal bæring av pneumokokker mer effektivt kan forhindres, for således å svekke infeksjon ved dens tidligste stadium). Selv om vaksinen ifølge oppfinnelsen kan administreres som en enkelt dose, kan komponenter derav også koadministreres sammen samtidig eller ved ulike tidspunkter (for eksempel kunne pneumokokk sakkaridkonjugater administreres separat, samtidig eller 1-2 uker etter administrering av den hvilken som helst bakterielle proteinkomponenten av vaksinen for optimal koordinering av immunresponsene med hensyn til hverandre). For koadministrering kan den eventuelle Th1-adjuvansen være til stede i hvilke som helst eller alle de forskjellige administreringene. I tillegg til en enkelt administreringsvei, kan 2 forskjellige administreringsmetoder anvendes. For eksempel kan sakkarider eller sakkaridkonjugater administreres IM (eller ID) og bakterielle proteiner kan administreres IN (eller ID). I tillegg kan vaksinene ifølge oppfinnelsen administreres IM for primingdoser og IN for boosterdoser.
Innholdet av protein antigener i vaksinen vil typisk være i området 1-100Pg, eventuelt 5-50Pg, mest typisk i området 5 - 25Pg. Etter en innledende vaksinasjon kan individer motta én eller flere booster immuniseringer med tilstrekkelig mellomrom.
Vaksinefremstilling er generelt beskrevet i Vaccine Design (“The subunit and adjuvant approach” (eds Powell M.F. & Newman M.J.) (1995) Plenum Press New York). Innkapsling i liposomer er beskrevet av Fullerton, US Patent 4,235,877.
Vaksinene eller de immunogene sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse kan lagres i løsning eller lyofilisert. I en utførelsesform blir løsningen lyofilisert i nærvær av et sukker som fungerer som en amorf lyoprotektant, slik som sukrose, trehalose, glukose, mannose, maltose eller laktose. I en utførelsesform blir løsningen lyofilisert i nærvær av et sukker som fungerer som en amorf lyoprotektant og et fyllmiddel som gir forbedret kake struktur slik som glysin eller mannitol. Tilstedeværelsen av et krystallinsk fyllmiddel tillater forkortelse av frysetørking sykluser, i nærvær av høy saltkonsentrasjon. Eksempler på slike blandinger for anvendelse ved lyofilisering av immunogene sammensetninger eller vaksiner ifølge oppfinnelsen omfatter sukrose/glysin, trehalose/glysin, glukose/glysin, mannose/glysin, maltose/glysin, sukrose/mannitol/ trehalose/mannitol, glukose/mannitol, mannose/mannitol og maltose/mannitol. Typisk er det molare forholdet av de to bestanddelene eventuelt 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5 eller 1:6. Immunogene sammensetninger ifølge oppfinnelsen omfatter eventuelt reagensene for lyofilisering beskrevet ovenfor.
De ovennevnte stabiliseringsmidlene og blandinger av stabiliseringsmidler kan videre omfatte en polymer som er i stand til å øke glassomvandlingstemperaturen (Tg’) for formuleringen, slik som poly(vinyl-pyrrolidon) (PVP), hydroksyetyl-stivelse eller dekstran eller en polymer som fungerer som et krystallinsk fyllmiddel slik som polyetylenglykol (PEG) for eksempel som har en molekylvekt på mellom 1500 og 6000 og dekstran.
De immunogene sammensetningene ifølge oppfinnelsen blir eventuelt lyofilisert og ekstemporært rekonstituert før anvendelse. Lyofilisering kan resultere i en mer stabil sammensetning (vaksine) og kan muligens føre til høyere antistofftitere i nærvær av 3D-MPL og i fravær av en aluminiumbasert adjuvans.
I ett aspekt ifølge oppfinnelsen tilveiebringes et vaksine kit, omfattende en ampulle inneholdende en immunogen sammensetning ifølge oppfinnelsen, eventuelt i lyofilisert form, og ytterligere omfattende en ampulle inneholdende en adjuvans som beskrevet her. Det er forutsett at i dette aspekt ifølge oppfinnelsen vil adjuvansen anvendes for å rekonstituere den lyofiliserte immunogene sammensetningen.
Selv om vaksinene ifølge foreliggende oppfinnelse kan administreres ved hvilken som helst administreringsvei, danner administrering av de beskrevne vaksinene inn i huden (ID) én utførelsesform av oppfinnelsen. Human hud omfatter en ytre “hornaktig” overhud, betegnet stratum corneum, som dekker epidermis. Under denne epidermis finnes et lag betegnet dermis, som i sin tur dekker det subkutane vevet. Forskere har vist at injeksjon av en vaksine inn i huden og spesielt dermis, stimulerer en immunrespons, som også kan være forbundet med flere ytterligere fordeler. Intradermal vaksinasjon med vaksinene beskrevet her danner et eventuelt karakteristisk trekk i forbindelse med den foreliggende oppfinnelse.
Den konvensjonelle teknikken for intradermal injeksjon, “mantoux-metoden”, omfatter trinn med rensing av huden og deretter utstrekking med én hand, og med skråkanten av en smal gauge nål (26-31 gauge) vendt oppover blir nålen satt inn ved en vinkel på mellom 10-15q. Straks skråkanten av nålen er satt inn, blir nålen senket og ytterligere presset fremover mens den gis et lett trykk for å heve den under huden. Væsken blir deretter injisert svært langsomt for derved å danne en liten boble eller kul på hudens overflate, fulgt av langsom uttrekking av nålen.
Mer nylig har anordninger som er spesifikt utformet for å administrere flytende midler inn i eller gjennom huden blitt beskrevet, for eksempel anordningene beskrevet i WO 99/34850 og EP 1092444, dessuten jet-injeksjon anordningene beskrevet for eksempel i WO 01/13977; US 5,480,381, US 5,599,302, US 5,334,144, US 5,993,412, US 5,649,912, US 5,569,189, US 5,704,911, US 5,383,851, US 5,893,397, US 5,466,220, US 5,339,163, US 5,312,335, US 5,503,627, US 5,064,413, US 5,520, 639, US 4,596,556, US 4,790,824, US 4,941,880, US 4,940,460, WO 97/37705 og WO 97/13537. Alternative fremgangsmåter for intradermal administrering av vaksinepreparatene kan omfatte konvensjonelle sprøyter og nåler eller anordninger utformet for ballistisk levering av faste vaksiner (WO 99/27961) eller transdermale plastere (WO 97/48440; WO 98/28037); eller påføring på overflaten av huden (transdermal eller transkutan levering WO 98/20734; WO 98/28037).
Når vaksinene ifølge foreliggende oppfinnelse skal administreres til huden eller nærmere bestemt inn i dermis, er vaksinen i et lite væskevolum, spesielt et volum på mellom ca.0,05 ml og 0,2 ml.
Innholdet av antigener i hud eller intradermale vaksiner ifølge foreliggende oppfinnelse kan være lik konvensjonelle doser som funnet i intramuskulære vaksiner (se ovenfor). Det er imidlertid et karakteristisk trekk ved hud eller intradermale vaksiner at formuleringene kan være “lavdose”. Følgelig er proteinantigenene i “lavdose” vaksiner eventuelt til stede i så lite som 0,1 til 10 Pg eller 0,1 til 5 Pg pr. dose; og sakkarid (eventuelt konjugert)-antigenene kan være til stede i området 0,01-1Pg eller mellom 0,01 til 0,5 Pg av sakkarid pr. dose.
Som anvendt her betyr betegnelsen “intradermal levering” levering av vaksinen til området for dermis i huden. Imidlertid vil vaksinen ikke nødvendigvis befinne seg utelukkende i dermis. Dermis er laget i huden lokalisert mellom ca.1,0 og ca.2,0 mm fra overflaten i human hud, men det er et visst omfang av variasjon mellom individer og i forskjellige deler av kroppen. Generelt kan det forventes å nå dermis ved å nå 1,5 mm under overflaten av huden. Dermis er lokalisert mellom stratum corneum og epidermis ved overflaten og det subkutane laget under. Avhengig av metoden for levering, kan vaksinen til slutt være lokalisert utelukkende eller primært innenfor dermis eller den kan til slutt være fordelt i epidermis og dermis.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer videre en forbedret vaksine for forebygging eller forbedring av otitis media forårsaket av Haemophilus influenzae ved tilsetning av Haemophilus influenzae proteiner, for eksempel protein D i fri eller konjugert form. I tillegg tilveiebringer foreliggende oppfinnelse videre en forbedret vaksine for forebygging eller forbedring av pneumokokkinfeksjon hos barn (f.eks. otitis media), avhengig av tilsetning av ett eller to pneumokokkproteiner som fritt eller konjugert protein til S. pneumoniae konjugat-sammensetningene ifølge oppfinnelsen. Nevnte frie pneumokokkproteiner kan være like eller forskjellige fra hvilke som helst S. pneumoniae-proteiner anvendt som bærerproteiner. Ett eller flere Moraxella catarrhalis protein-antigener kan også være omfattet i kombinasjonsvaksinen i en fri eller konjugert form. Følgelig er det oppnådd en forbedret fremgangsmåte for å fremkalle en (beskyttende) immunrespons mot otitis media hos barn.
I en annen utførelsesform er det beskrevet en forbedret fremgangsmåte for å fremkalle en (beskyttende) immunrespons hos barn (definert som 0-2 år gamle i sammenheng med foreliggende oppfinnelse) ved administrering av en sikker og effektiv mengde av vaksinen ifølge oppfinnelsen [en pediatrisk vaksine]. Ytterligere utførelsesformer av foreliggende oppfinnelse omfatter tilveiebringelse av antigene S. pneumoniae konjugat-sammensetninger ifølge oppfinnelsen for anvendelse i medisin og anvendelse av S. pneumoniae-konjugatene ifølge oppfinnelsen ved fremstilling av et medikament for forebygging (eller behandling) av pneumokokksykdom.
I enda en annen utførelsesform er det beskrevet en forbedret fremgangsmåte for å fremkalle en (beskyttende) immunrespons i den eldre populasjonen (i sammenheng med foreliggende oppfinnelse blir en pasient ansett som eldre hvis de har en alder på 50 år eller mer, typisk over 55 år og mer generelt over 60 år) ved administrering av en sikker og effektiv mengde av vaksinen ifølge oppfinnelsen, eventuelt sammen med ett eller to S. pneumoniae-proteiner til stede som fritt eller konjugert protein, hvor de frie S. pneumoniae-proteinene kan være like eller forskjellige fra hvilke som helst S. pneumoniae-proteiner anvendt som bærerproteiner.
Et ytterligere aspekt er beskrevet som omfatter en fremgangsmåte for immunisering av en human vert mot sykdom forårsaket av S. pneumoniae og eventuelt Haemophilus influenzae-infeksjon omfattende å administrere til verten en immunbeskyttende dose av den immunogene sammensetningen eller vaksinen eller kit ifølge oppfinnelsen.
Et ytterligere aspekt ifølge oppfinnelsen er en immunogen sammensetning eller vaksine ifølge oppfinnelsen for anvendelse for behandling eller forebygging av sykdom forårsaket av S.pneumoniae infeksjon, hvor sykdommen er hver eller begge av pneomoni eller invasiv pneumokokkinfeksjon (IPD) hos eldre personer, eksaserbasjoner av kronisk obstruktiv lungesykdom (KOLS) hos eldre personer, otitis media hos spedbarn og små barn, meningitt og/eller bakteriemi hos spedbarn og små barn eller pneumoni og/eller konjunktivitt hos spedbarn og små barn.
Et ytterligere aspekt som er beskrevet er anvendelse av den immunogene sammensetningen eller vaksinen ifølge oppfinnelsen ved fremstilling av et medikament for behandling eller forebygging av sykdommer forårsaket av S. pneumoniae og eventuelt Haemophilus influenzae-infeksjon.
Betegnelsene “omfattende”, “omfatte” og “omfatter” her er ment av oppfinnerne å eventuelt være alternativer til henholdsvis betegnelsene “bestående av”, “bestå av” og “består av”, i hvert tilfelle.
Utførelsesformer her som angår “vaksinesammensetninger” ifølge oppfinnelsen er også anvendbare for utførelsesformer som angår “immunogene sammensetninger” ifølge oppfinnelsen og omvendt.
For at foreliggende oppfinnelse bedre skal kunne forstås, er de følgende eksemplene angitt. Disse eksemplene er kun for illustrasjonsformål og skal ikke oppfattes som begrensende for omfanget av oppfinnelsen på noen som helst måte.
Eksempler
Eksempel 1: EKSPRESJON AV PROTEIN D
Haemophilus influenzae protein D
Genetisk konstruksjon for protein D-ekspresjon
Utgangsmaterialer
Protein D-kodende DNA
Protein D er høyst konservert mellom H. influenzae av alle serotyper og non-typeable stammer. Vektoren pHIC348 inneholdende DNA-sekvensen som koder for hele protein D-genet er oppnådd fra Dr. A. Forsgren, Department of Medical Microbiology, University of Lund, Malmö General Hospital, Malmö, Sverige. DNA-sekvensen av protein D er publisert av Janson et al. (1991) Infect. Immun. 59: 119-125.
Ekspresjonsvektoren pMG1
Ekspresjonsvektoren pMG1 er et derivat av pBR322 (Gross et al., 1985) hvor bakteriofag λ-avledede kontrollelementer for transkripsjon og translasjon av fremmede inserterte gener ble innført (Shatzman et al., 1983). I tillegg ble Ampicillin-resistensgenet skiftet ut med Kanamycin-resistensgenet.
E. coli-stammen AR58
E. coli-stammen AR58 ble fremstilt ved transduksjon av N99 med en P1 fag-stock tidligere dyrket i et SA500-derivat (galE::TN10, lambdaKil- cI857 ΔH1). N99 og SA500 er E. coli K12-stammer avledet ved Dr. Martin Rosenberg’s laboratorium ved National Institute of Health.
Ekspresjonsvektoren pMG 1
For fremstilling av protein D har DNA som koder for proteinet blitt klonet inn i ekspresjonsvektoren pMG 1. Dette plasmidet anvender signaler fra lambdafag DNA for å drive transkripsjon og translasjon av inserterte fremmede gener.
Vektoren inneholder promoteren PL, operator OL og to utnyttelses seter (NutL og NutR) for å minske transkripsjonelle polaritetseffekter når N-protein er gitt (Gross et al., 1985). Vektorer inneholdende PL-promoteren, blir innført i en E. coli lysogen vert for å stabilisere plasmid-DNA. Lysogene vertsstammer inneholder replikasjonsdefekt lambdafag-DNA integrert i genomet (Shatzman et al., 1983). Det kromosomale lambdafag DNA styrer syntesen av cI repressorproteinet som binder til OL-repressoren fra vektoren og forhindrer binding av RNA-polymerase til PL-promoteren og derved transkripsjon av det inserterte genet. cI-genet fra ekspresjonsstammen AR58 inneholder en temperaturfølsom mutant slik at PL-kontrollert transkripsjon kan reguleres ved temperaturendring, dvs. en økning i dyrkningstemperatur inaktiverer repressoren og syntese av det fremmede proteinet blir initiert. Dette ekspresjonssystemet tillater kontrollert syntese av fremmede proteiner spesielt av de som kan være toksiske for cellen (Shimataka & Rosenberg, 1981).
E. coli-stammen AR58
Den lysogene E. coli-stammen AR58 anvendt for fremstilling av protein D-bæreren er et derivat av den standard NIH E. coli K12-stammen N99 (F- su- galK2, lacZ<->thr<->). Den inneholder en defekt lysogen lambdafag (galE::TN10, lambdaKil-cI857 ΔH1). Kil- fenotypen forhindrer avstengning av vertens makromolekylære syntese. cI857-mutasjonen overbringer en temperatursensitiv lesjon til cI-repressoren. ΔH1-delesjonen fjerner lambdafag høyre operon og vertens bio, uvr3 og chlA-loci. AR58-stammen ble fremstilt ved transduksjon av N99 med en P1 fagstock tidligere dyrket på et SA500-derivat (galE::TN10, lambdaKil<->cI857 ΔH1). Innføring av den defekte lysogene inn i N99 ble selektert med tetracyklin i kraft av tilstedeværelsen av et TN10-transposon som koder for tetracyklinresistens i det tilliggende galE-genet.
Konstruksjon av vektor pMGMDPPrD
pMG 1-vektoren som inneholder genet som koder for det ikke-strukturelle S1-proteinet fra influensavirus (pMGNSI) ble anvendt for å konstruere pMGMDPPrD. Protein D-genet ble amplifisert ved PCR fra pHIC348-vektor (Janson et al.1991 Infect. Immun.59:119-125) med PCR-primere inneholdende NcoI og XbaI-restriksjonsseter ved 5’ og 3’-endene, henholdsvis. NcoI/XbaI-fragmentet ble deretter innført i pMGNS1 mellom NcoI og XbaI for derved å danne et fusjonsprotein inneholdende de N-terminale 81 aminosyrene av NS1-proteinet fulgt av PD-proteinet. Denne vektoren ble betegnet pMGNS1PrD.
Basert på konstruksjonen beskrevet ovenfor ble den endelige konstruksjonen for protein D-ekspresjon fremstilt. Et BamHI/BamHI-fragment ble fjernet fra pMGNS1PrD. Denne DNA-hydrolysen fjerner den NS1-kodende regionen, med unntak av de første tre N-terminale restene. Ved religering av vektoren har et gen som koder for et fusjonsprotein med den følgende N-terminale aminosyresekvensen blitt fremstilt:
-----MDP SSHSSNMANT-----NS1 Protein D
Protein D inneholder ikke et lederpeptid eller det N-terminale cysteinet til hvilket lipidkjeder normalt er tilknyttet. Proteinet blir derfor verken utskilt inn i periplasma eller lipidert og forblir i cytoplasma i en oppløselig form.
Den endelige konstruksjonen pMG-MDPPrD ble innført i AR58 vertsstammen ved varmesjokk ved 37 qC. Plasmid inneholdende bakterier ble selektert i nærvær av Kanamycin. Tilstedeværelse av det protein D-kodende DNA insertet ble vist ved kløyving av isolert plasmid-DNA med utvalgte endonukleaser. Den rekombinante E. coli-stammen blir referert til som ECD4.
Ekspresjon av protein D er under kontroll av lambda PL-promoter/ OLOperator. Vertsstammen AR58 inneholder et temperatursensitivt cI-gen i genomet som blokkerer ekspresjon fra lambda PLved lav temperatur ved å binde til OL. Straks temperaturen blir forhøyet blir cI frigjort fra OLog protein D blir uttrykt.
Småskala fremstilling
Ved slutten av fermenteringen blir cellene konsentrert og frosset.
Ekstraksjon fra høstede celler og rensing av protein D ble utført som følger. Den frosne cellekultur-pelleten blir tint og resuspendert i en celleoppbrytnings løsning (Citratbuffer pH 6,0) til en endelig OD650= 60. Suspensjonen blir passert to ganger gjennom en høytrykks homogenisator ved P = 1000 bar. Cellekulturhomogenatet blir renset ved sentrifugering og celledebris blir fjernet ved filtrering. I det første rensetrinnet blir det filtrerte lysatet applisert på en kationbytterkromatografi-kolonne (SP Sepharose Fast Flow). PD binder til gelmatriksen ved ionisk interaksjon og blir eluert ved en trinnvis økning av ionestyrken av elueringsbufferen.
I et andre rensetrinn blir urenheter beholdt på et anionbytter-matriks (Q Sepharose Fast Flow). PD binder ikke til gelen og kan oppsamles i gjennomstrømningen.
Ved begge kolonnekromatografi-trinnene blir fraksjonsoppsamling overvåket ved OD. Gjennomstrømningen fra anionbytterkolonne-kromatografi inneholdende det rensede protein D blir konsentrert ved ultrafiltrering.
Det protein D-inneholdende ultrafiltrerings retentatet blir til slutt ført gjennom en 0,2 μm membran.
Storskala fremstilling
Ekstraksjon fra høstede celler og rensing av protein D ble utført som følger. Det høstede mediet blir avkjølt og direkte passert to ganger gjennom en høytrykks homogenisator ved et trykk på ca.800 bar.
I det første rensetrinnet blir cellekultur homogenatet fortynnet og applisert på en kationbytterkromatografi-kolonne (SP Sepharose Big beads). PD binder til gel-matriksen ved ionisk interaksjon og blir eluert ved en trinnvis økning av ionestyrken av elueringsbufferen og filtrert.
I et andre rensetrinn blir urenheter beholdt på et anionbytter-matriks (Q Sepharose Fast Flow). PD binder ikke til gelen og kan oppsamles i gjennomstrømningen.
Ved begge kolonnekromatografi-trinnene blir fraksjonsoppsamling overvåket ved OD. Gjennomstrømningen fra anionbytterkolonne-kromatografi inneholdende det rensede protein D blir konsentrert ved ultrafiltrering.
Det protein D-inneholdende ultrafiltrerings retentatet blir til slutt ført gjennom en 0,2 μm membran.
Eksempel 1b: EKSPRESJON AV PhtD
PhtD-proteinet er et medlem av pneumokokk histidin-triade (Pht) protein-familien karakterisert ved tilstedeværelsen av histidin-triader (HXXHXH-motiv). PhtD er et molekyl på 838 aminosyrer og omfatter 5 histidin-triader (se MedImmune WO00/37105 SEKV ID NR: 4 for aminosyresekvens og SEKV ID NR: 5 for DNA-sekvens). PhtD inneholder også en prolin-rik region i midten (aminosyreposisjon 348-380). PhtD har en 20 aminosyres N-terminal signalsekvens med et LXXC-motiv.
Genetisk konstruksjon
Gensekvensen av det modne MedImmune PhtD-proteinet (fra aa 21 til aa 838) ble overført rekombinant til E. coli ved anvendelse av den interne pTCMP14-vektoren som rommer pλ-promoteren. E. coli-vertsstammen er AR58, som bærer den cI857 termosensitive repressoren, hvilket muliggjør varmeinduksjon av promotoren.
Polymerasekjedereaksjon ble gjennomført for å amplifisere phtD-genet fra et MedImmune plasmid (som bærer phtD-genet fra Streptococcus pneumoniaestamme Norway 4 (serotype 4) – SEKV ID NR: 5 som beskrevet i WO 00/37105). Primere, spesifikke for kun phtD-genet, ble anvendt for å amplifisere phtD-genet i to fragmenter. Primere bærer enten NdeI og KpnI eller KpnI og XbaI-restriksjonssetene. Disse primerene hybridiserer ikke med noe nukleotid fra vektoren men kun med phtD-spesifikke gensekvenser. Et kunstig ATG startkodon ble insertert ved anvendelse av den første primeren som omfatter NdeI-restriksjonssetet. De fremstilte PCR-produktene ble deretter insertert inn i kloningsvektoren pGEM-T (Promega) og DNA-sekvensen ble bekreftet.
Subkloning av fragmentene i ekspresjonsvektoren TCMP14 ble deretter gjennomført ved anvendelse av standardteknikker og vektoren ble transformert inn i AR58 E. coli.
PhtD-rensing
PhtD-rensing blir oppnådd som følger:
à Dyrking av E.coli-celler i nærvær av Kanamycin: dyrking 30 timer ved 30ºC deretter induksjon i 18 timer ved 39,5 ºC
à Oppbryting av E.coli-cellene fra hel kultur ved OD ±115 i nærvær av EDTA 5 mM og PMSF 2 mM som proteaseinhibitorer: Rannie, 2 passasjer, 1000 bar.
à Antigen-binding og fjerning av celledebris ved utvidet bed modus Streamline Q XL kromatografi ved romtemperatur (20°C); kolonnen blir vasket med NaCl 150 mM Empigen 0,25% pH 6,5 og eluert med NaCl 400 mM Empigen 0,25% i 25 mM kaliumfosfatbuffer pH 7,4.
à Filtrering på Sartobran 150 patron (0,45 0,2 μm)
à Antigenbinding på Zn<++>Chelaterende Sepharose FF IMAC-kromatografi ved pH 7,4 i nærvær av 5 mM imidazol ved 4°C; kolonnen blir vasket med Imidazol 5 mM og Empigen 1% og eluert med 50 mM imidazol, begge i 25 mM kaliumfosfatbuffer pH 8,0.
à Svak anionbytterkromatografi i positivt modus på Fractogel EMD DEAE ved pH 8,0 (25 mM kaliumfosfat) ved 4°C; kolonnen blir vasket med 140 mM NaCl og eluert ved 200 mM NaCl mens forurensninger (proteiner og DNA) forblir adsorbert på anionbytteren.
à Konsentrasjon og ultrafiltrering med 2 mM Na/K fosfat pH 7,15 på 50 kDa membran.
à Steriliserende filtrering av den rensede bulken i en Millipak-200,2 μm filter patron.
Eksempel 1c: EKSPRESJON AV PNEUMOLYSIN
Pneumokokk pneumolysin ble fremstilt og detoksifisert som beskrevet i WO2004/081515 og WO2006/032499.
Eksempel 2:
Fremstilling av konjugater
Fremgangsmåte for fremstilling av rensede pneumokokk-polysakkarider er velkjent på området. For formålene for disse eksemplene ble polysakkaridene fremstilt hovedsakelig som beskrevet i EP072513 eller ved nært beslektede metoder. Før konjugering kan polysakkaridene lages i en viss størrelse ved mikro fluidisering som beskrevet nedenfor.
Aktivering og koblingsbetingelsene er spesifikke for hvert polysakkarid.
Disse er gitt i Tabell 1. Størrelsessortert polysakkarid (bortsett fra for PS5, 6B og 23F) ble oppløst i NaCl 2M, NaCl 0,2M eller i vann for injeksjon (WFI). Den optimale polysakkaridkonsentrasjonen ble evaluert for alle serotypene. Alle serotypene bortsett fra serotype 18C ble konjugert direkte til bærerproteinet som detaljert beskrevet nedenfor. To alternative serotype 22F-konjugater ble fremstilt; ett konjugert direkte, ett gjennom en ADH-linker.
Fra en 100 mg/ml stock-løsning i acetonitril eller acetonitril/vann 50%/50% løsning, ble CDAP (CDAP/PS forhold 0,5-1,5 mg/mg PS) tilsatt til polysakkaridløsningen. 1,5 minutt senere ble 0,2M-0,3M NaOH tilsatt for å oppnå den spesifikke aktiverings pH. Aktivering av polysakkaridet ble utført ved denne pH i 3 minutter ved 25 °C. Renset protein (protein D, PhtD, pneumolysin eller DT) (mengden avhenger av det initielle PS/bærerprotein-forholdet) ble tilsatt til det aktiverte polysakkaridet og koblingsreaksjonen ble utført ved den spesifikke pH i opptil 2 timer (avhengig av serotype) under pH-justering. For å quenche ikke omsatte cyanat estergrupper, ble en 2M glysinløsning deretter tilsatt til blandingen. pH ble justert til pH for quenching (pH 9,0). Løsningen ble omrørt i 30 minutter ved 25 °C og deretter natten over ved 2-8 °C med kontinuerlig langsom omrøring.
Fremstilling av 18C:
18C ble bundet til bærerproteinet gjenom en linker – Adipinsyre dihydrazid (ADH)
Polysakkarid serotype 18C ble mikrofluidisert før konjugering.
Derivatisering av tetanustoksoid med EDAC
For derivatisering av tetanustoksoid, ble renset TT fortynnet ved 25 mg/ml i 0,2M NaCl og ADH-spaceren ble tilsatt for å nå en endelig konsentrasjon på 0,2M. Når oppløsningen av spaceren var fullstendig, ble pH justert til 6,2. EDAC (1-etyl-3-(3-dimetyl-aminopropyl) karbodiimid) ble deretter tilsatt for å nå en endelig konsentrasjon på 0,02M og blandingen ble omrørt i 1 time under pH-regulering. Reaksjonen for kondensering ble stanset ved å øke pH opptil 9,0 i minst 30 minutter ved 25°C.
Derivatisert TT ble deretter diafiltrert (10 kDa CO-membran) for å fjerne gjenværende ADH og EDAC-reagens.
TTAHbulk ble til slutt sterilfiltrert inntil koblingstrinn og lagret ved -70°C.
Kjemisk kobling av TTAHtil PS 18C
Detaljer for konjugerings parametere kan finnes i Tabell 1.
2 gram mikrofluidisert PS ble fortynnet ved den definerte konsentrasjonen i vann og regulert til 2M NaCl ved tilsetning av NaCl-pulver.
CDAP-løsning (100 mg/ml nyfremstilt i 50/50 volum/volum acetonitril/WFI) ble tilsatt for å nå det passende CDAP/PS-forholdet.
pH ble økt opptil aktiverings pH 9,0 ved tilsetning av 0,3M NaOH og ble stabilisert ved denne pH inntil tilsetning av TTAH.
Etter 3 minutter ble derivatisert TTAH(20 mg/ml i 0,2 M NaCl) tilsatt for å opnå et forhold TTAH/PS på 2; pH ble regulert til koblings pH 9,0. Løsningen fikk stå én time under pH-regulering.
For quenching ble en 2M glysinløsning tilsatt til blandingen PS/TTAH/CDAP. pH ble regulert til pH for quenching (pH 9,0).
Løsningen ble omrørt i 30 min ved 25 qC og fikk deretter stå natten over ved 2-8°C med kontinuerlig langsom omrøring.
PS22FAH-PhtD konjugat
I en andre konjugerings-metode for dette sakkaridet (den første er den direkte PS22-PhtD konjugerings-metoden vist i Tabell 1), ble 22F bundet til bærerproteinet gjennom en linker – Adipinsyre dihydrazid (ADH). Polysakkarid serotype 22F ble mikrofluidisert før konjugering.
PS 22F-derivatisering
Aktivering og kobling blir utført ved 25°C under kontinuerlig omrøring i et temperaturkontrollert vannbad.
Mikrofluidisert PS22F ble fortynnet for å oppnå en endelig PS-konsentrasjon på 6 mg/ml i 0,2M NaCl og løsningen ble regulert ved pH 6,05 ± 0,2 med 0,1N HCl. CDAP-løsning (100 mg/ml nyfremstilt i acetonitril/WFI, 50/50) ble tilsatt for å oppnå det passende CDAP/PS-forholdet (1,5/1 vekt vekt).
pH ble økt opptil aktiverings pH 9,00 ±0,05 ved tilsetning av 0,5M NaOH og ble stabilisert ved denne pH inntil tilsetning av ADH.
Etter 3 minutter ble ADH tilsatt for å oppnå det passende ADH/PS-forholdet (8,9/1 vekt/vekt); pH ble regulert til koblings pH 9,0. Løsningen ble hensatt i 1 time under pH-regulering.
PSAH-derivatet ble konsentrert og diafiltrert.
Kobling
PhtD ved 10 mg/ml i 0,2M NaCl ble tilsatt til PS22FAH-derivatet for å oppnå et PhtD/PS22FAH-forhold på 4/1 (vekt/vekt). pH ble regulert til 5,0 ± 0,05 med HCl. EDAC-løsningen (20 mg/ml i 0,1M Tris-HCl pH 7,5) ble tilsatt manuelt i 10 min (250 μl / min) for å oppnå 1 mg EDAC/mg PS22FAH. Den resulterende løsningen ble inkubert i 150 min (selv om 60 minutter også ble anvendt) ved 25°C under omrøring og pH-regulering. Løsningen ble nøytralisert ved tilsetning av 1M Tris-HCl pH 7,5 (1/10 av det endelige volumet) og hensatt 30 min ved 25°C.
Før eluering på Sephacryl S400HR, ble konjugatet renset ved anvendelse av et 5μm Minisart filter.
Det resulterende konjugatet har et endelig PhtD/PS-forhold på 4,1 (vekt/vekt), et fri PS-innhold under 1% og en antigenisitet (α-PS/ α-PS) på 36,3% og anti-PhtD antigenisitet på 7,4%.
Rensing av konjugatene:
Konjugatene ble renset ved gelfiltrering ved anvendelse av en Sephacryl S400HR gelfiltreringskolonne ekvilibrert med 0,15M NaCl (S500HR i 18C) for å fjerne små molekyler (omfattende DMAP) og ukonjugert PS og protein. Basert på de ulike molekylære størrelsene av reaksjons komponentene, blir PS-PD, PS-TT, PS-PhtD, PS-pneumolysin eller PS-DT konjugater eluert først, fulgt av fri PS, deretter av fri PD eller fri DT og til slutt DMAP og andre salter (NaCl, glysin).
Fraksjoner inneholdende konjugater blir detektert ved UV280 nm. Fraksjoner blir samlet i henhold til deres Kd, sterilfiltrert (0,22Pm) og lagret ved 2-8°C.
PS/Protein-forholdet i konjugat fremstillingene ble bestemt.
Spesifikke aktivering/kobling/quenching-betingelser for PS S. pneumoniae-Protein D/TT/DT/PhtD/Ply-konjugater
Når “μfluid” forekommer i en topptekst på en rad indikerer det at sakkaridet ble laget i en viss størrelse ved mikro fluidisering før konjugering. Størrelser av sakkarider etter mikrofluidisering er gitt i tabell 2.
Tabell 1 Spesifikke aktivering/kobling/quenching-betingelser for PS S.
pneumoniae-Protein D/TT/DT/PhtD/Ply-konjugater
Bemerk: pHa, c, q svarer til pH for henholdsvis aktivering, kobling og quenching.
Karakterisering:
Hvert konjugat ble karakterisert og svarte til spesifikasjonene beskrevet i Tabell 2. Polysakkarid-innholdwet (μg/ml) ble målt ved Resorcinol-testen og proteininnholdet (μg/ml) ved Lowry testen. Det endelige PS/PD-forholdet (vekt/vekt) blir bestemt ved forholdet av konsentrasjonene.
Innhold av fritt polysakkarid (%):
Innholdet av fritt polysakkarid i konjugatene holdt ved 4°C eller lagret 7 dager ved 37°C ble bestemt for supernatanten oppnådd etter inkubering med D-bærerprotein-antistoffer og mettet ammoniumsulfat, fulgt av en sentrifugering.
En D-PS/D-PS ELISA ble anvendt for kvantifisering av fritt polysakkarid i supernatanten. Fravær av konjugat ble også kontrollert ved en D-bærerprotein/D-PS-ELISA.
Antigenisitet:
Antigenisiteten av de samme konjugatene ble analysert i en sandwich-type ELISA hvor binding og deteksjon av antistoffer var D-PS og D-Protein henholdsvis.
Innhold av fritt protein (%):
Ukonjugert bærerprotein kan separeres fra konjugatet under rensetrinnet.
Innholdet av fritt gjenværende protein ble bestemt ved anvendelse av størrelseseksklusjonskromatografi (TSK 5000-PWXL) fulgt av UV-deteksjon (214 nm). Elueringsbetingelsene tillot separering ac det frie bærerproteinet og konjugatet. Fritt protein-innhold i konjugat bulker ble deretter bestemt versus en kalibreringskurve (fra 0 til 50 μg/ml bærerprotein). Fritt bærerprotein i % ble oppnådd som følger: % fri bærer = (fri bærer (μg/ml)/(Total konsentrasjon av tilsvarende bærerprotein målt ved Lowry (μg/ml) * 100%).
Stabilitet:
Molekylvektfordeling (Kav) og stabilitet ble målt ved en HPLC-SEC gelfiltrering (TSK 5000-PWXL) for konjugater holdt ved 4°C og lagret i 7 dager ved 37°C.
10/11/13/14-valent karakteriseringen er gitt i Tabell 2 (se kommentar derunder).
Protein-konjugatene kan adsorberes på aluminiumfosfat og samles for å danne den endelige vaksinen.
Konklusjon:
Immunogene konjugater har blitt fremstilt, som siden er vist å være komponenter av en lovende vaksine.
TABELL 2 – karakteristika for konjugatene
* PS størrelse etter mikrofluidisering av det native PS
En 10-valent vaksine ble fremstilt ved å blande serotype 1, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19F og 23F konjugater (f.eks. i en dose på 1, 3, 1, 1, 1, 1, 1, 3, 3, 1 μg sakkarid, henholdsvis pr. human dose). En 11-valent vaksine ble fremstilt ved ytterligere tilsetning av serotype 3-konjugatet fra Tabell 5 (f.eks. ved 1 μg sakkarid pr. human dose). En 13-valent vaksine ble fremstilt ved ytterligere tilsetning av serotype 19A og 22F konjugatene ovenfor (med 22F enten direkte bundet til PhtD eller alternativt gjennom en ADH-linker) [f.eks. i en dose på 3 μg hver av sakkarid pr. human dose]. En 14-valent vaksine kan fremstilles ved ytterligere tilsetning av serotype 6A-konjugatet ovenfor [f.eks. i en dose på 1 μg sakkarid pr. human dose.
Eksempel 3: Bevis for at inkludering av Haemphilus influenzae protein D i en immunogen sammensetning ifølge oppfinnelsen kan gi forbedret beskyttelse mot akutt otitis media (AOM).
Studiedesign.
Studiet anvendte en 11Pn-PD-vaksine – omfattende serotypene 1, 3, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19F og 23F hver konjugert til protein D fra H. influenzae (refererer til Tabell 5 i Eksempel 4). Individer ble randomisert inn i to grupper for å motta fire doser av enten 11Pn-PD-vaksinen eller Havrix ved omtrent 3, 4, 5 og 12-15 månedersalderen. Alle individer mottok GSK Biologicals Infanrix- hexa (DTPa-HBV-IPV/Hib)-vaksine samtidig ved 3, 4 og 5 månedersalderen. Infanrix- hexa er en kombinasjon av Pediarix og Hib blandet før administrering. Effektivitetsoppfølging for “According-to-Protocol”-analysen startet 2 uker etter administrering av den tredje vaksinedosen og fortsatte inntil 24-27 måneders alderen.
Nasofaryngeal bæring av S. pneumoniae og H. influenzae ble evaluert i en valgt underklasse av individer.
Foreldre ble tilrådet å konsultere forskeren dersom deres barn ble sykt, hadde øresmerte, spontan perforering av trommehinnen eller spontan øre utflod. Dersom forskeren mistenkte en episode av AOM, ble barnet umiddelbart henvist til en ørenese-hals (ØNH)-spesialist for bekreftelse av diagnosen.
En klinisk diagnose av AOM var basert på enten det visuelle utseende av trommehinnen (dvs. rødhet, utbulning, tap av lysrefleks) eller tilstedeværelse av mellomørevæske-utstrømning (som vist ved enkel eller pneumatisk otoskopi eller ved mikroskopi). I tillegg måtte minst to av de følgende tegn eller symptomer være til stede: øresmerte, øre utflod, hørselstap, feber, letargi, irritabilitet, anoreksi, oppkast eller diaré. Dersom en ØNH-spesialist bekreftet den kliniske diagnosen, ble en prøve av mellomørevæske oppsamlet ved tympanocentese for bakteriologisk testing.
For individer med gjentatte sykebesøk, ble en ny AOM-episode ansett å ha startet dersom det hadde gått mer enn 30 dager siden oppstart av forrige episode. I tillegg ble en AOM episode ansett å være en ny bakteriell episode dersom den isolerte bakterien/serotypen skilte seg fra det tidligere isolatet uansett intervallet mellom de to påfølgende episodene.
Forsøksresultater
Totalt 4968 barn ble innrullert, 2489 i 11Pn-PD-gruppen og 2479 i kontrollgruppen. Det var ingen større forskjeller i de demografiske karakteristika eller risikofaktorer mellom de to gruppene.
Kliniske episoder og definisjon av AOM tilfeller
Under oppfølgingsperioden ifølge protokolen ble totalt 333 episoder av klinisk AOM registrert i 11Pn-PD-gruppen og 499 i kontrollgruppen.
Tabell 3 presenterer den beskyttende effektivitet av 11Pn-PD-vaksinen og begge 7-valente vaksiner tidligere testet i Finland (Eskola et al N Engl J Med 2001; 344: 403 – 409 og Kilpi et al Clin Infect Dis 200337:1155-64) mot hvilken som helst episode av AOM og AOM forårsaket av forskjellige pneumokokk-serotyper, H. influenzae, NTHi og M. catarrhalis.
Statistisk signifikant og klinisk relevant reduksjon ved 33,6% av den totale AOM sykdomsbyrden ble oppnådd med 11Pn-PD, uavhengig av etiologien (tabell 3). Den totale effektiviteten mot AOM-episoder beroende på hvilke som helst av de 11 pneumokokk-serotypene inneholdt i 11Pn-PD-vaksinen var 57,6% (tabell 3).
Et annet viktig funn i det løpende studiet er beskyttelsen på 35,6% gitt av 11Pn-PD-vaksinen mot AOM forårsaket av H. influenzae (og spesifikt 35,3% beskyttelse gitt ved NTHi). Dette funnet er av stor klinisk betydning, gitt den økte betydningen av H. influenzae som en hovedårsak til AOM i pneumokokk konjugat-vaksinen era. På linje med beskyttelsen gitt mot AOM, reduserte 11Pn-PD-vaksinen også nasofaryngeal bæring av H. influenzae etter boosterdosen i det andre leveåret. Disse funn står i kontrast til tidligere observasjoner i Finland hvor, for begge 7-valente pneumokokk konjugat-vaksinene, en økning i AOM-episoder på grunn av H. influenzae ble observert, (Eskola et al og Kilpi et al) som bevis for etiologisk erstatning.
En tydelig sammenheng mellom beskyttelse mot AOM-episoder som skyldes Hi og antistoffnivåer mot bæreren protein D kunne ikke fastslås, ettersom postprimære anti-PD IgG antistoffkonsentrasjoner i 11Pn-PD vaksiner, som forble Hi AOM episode-fri, hovedsakelig var lik postprimære anti-PD IgG antistoffnivåer målt i 11Pn-PD-vaksiner som utviklet minst én Hi AOM-episode under effektivitet oppfølgingsperioden. Imidlertid, selv om ingen sammenheng kunne fastslås mellom den biologiske effekten av vaksinen og den postprimære IgG anti-PD immunogenisiteten, er det rimelig å anta at PD bærerproteinet, som er høyst konservert mellom H. influenzae-stammer, i stor grad har bidratt ved induksjon av beskyttelsen mot Hi.
Effekten på AOM sykdom ble ledsaget av en effekt på nasofaryngeal bæring som var av lignende størrelse for vaksine serotype pneumokokker og H. influenzae (Figur 1). Denne reduksjonen av nasofaryngeal bæring av H. influenzae i PD-konjugatvaksinene underbygger hypotesen om en direkte beskyttende effekt av PD-konjugatvaksinen mot H. influenzae, selv om den beskyttende effektiviteten ikke kunne korreleres med anti-PD IgG-immunresponsene som målt ved ELISA.
I et etterfølgende forsøk ble en chinchilla otitis media-modell anvendt med serumsamlinger fra barn immunisert med 11-valent formuleringen ifølge dette eksemplet eller med 10-valent vaksinen ifølge Eksempel 2 (se også Tabell 1 og 2 og kommentarer derunder). Begge samlingene induserte en signifikant reduksjon av prosentdelen av dyr med otitis media versus pre-immun serum samlingen. Det er ingen signifikant forskjell mellom 10 og 11-valent immun samlingene. Dette viser at begge vaksinene har et lignende potensiale til å indusere beskyttelse mot otitis media forårsaket av non typeable H. influenzae i denne modellen.
Eksempel 4:
Seleksjon av bærerprotein for serotype 19F
ELISA-analyse anvendt
22F inhiberings ELISA-metoden var hovedsakelig basert på et forsøk foreslått i 2001 ved Concepcion og Frasch og ble angitt av Henckaerts et al., 2006, Clinical and Vaccine Immunology 13:356-360. I korthet ble rensede pneumokokk-polysakkarider blandet med metylert humant serumalbumin og adsorbert på Nunc Maxisorp™ (Roskilde, DK) høy-binding mikrotiterplater natten over ved 4°C. Platene ble blokkert med 10% føtalt bovint serum (FBS) i PBS i 1 time ved romtemperatur med risting. Serumprøver ble fortynnet i PBS inneholdende 10% FBS, 10 μg/ml cellevegg polysakkarid (SSI) og 2 μg/ml pneumokokk-polysakkarid av serotype 22F (ATCC) og ytterligere fortynnet i mikrotiterplatene med samme buffer. En intern referanse kalibrert mot standard serumet 89-SF ved anvendelse av de serotype-spesifikke IgG-konsentrasjonene i 89-SF ble behandlet på samme måte og inkludert i hver plate. Etter vasking ble de bundne antistoffene detektert ved anvendelse av peroksidase-konjugert antihuman IgG monoklonalt antistoff (Stratech Scientific Ltd., Soham, UK) fortynnet i 10% FBS (i PBS) og inkubert i 1 time ved romtemperatur med risting. Fargen ble utviklet ved anvendelse av enkelt komponent tetrametylbenzidin-peroksidaseenzym immunoassay substrat kit som er klart til bruk (BioRad, Hercules, CA, US) i mørke ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset med H2SO40,18 M og den optiske tettheten ble avlest ved 450 nm. Serotypespesifikke IgG-konsentrasjoner (i μg/ml) i prøvene ble beregnet ved referanse til optisk tetthet punkter innenfor definerte grenser til den interne referanse serum-kurven, som ble modellert ved en 4-parameter logistisk log ligning beregnet med SoftMax Pro™ (Molecular Devices, Sunnyvale, CA) programvare. Cut-off for ELISA var 0,05 μg/ml IgG for alle serotyper ved å ta hensyn til grensen for deteksjon og grensen for kvantifisering.
Opsonofagocytose forsøk
Ved WHO samrådsmøtet i juni 2003, ble det anbefalt å anvende et OPA forsøk som angitt i Romero-Steiner et al Clin Diagn Lab Immunol 200310 (6): s.1019-1024. Denne fremgangsmåten ble anvendt for å undersøke OPA-aktiviteten av serotypene i de følgende testene.
Fremstilling av konjugater
I studiene 11Pn-PD&Di-001 og 11Pn-PD&Di-007, ble tre 11-valente vaksineformuleringer (Tabell 4) omfattet hvor 3μg av 19F polysakkaridet var konjugert til difteritoksoid (19F-DT) istedenfor 1μg polysakkarid konjugert til protein D (19F-PD). Konjugerings parametere for studiene 11Pn-PD, 11 Pn-PD&Di-001 og 11 Pn-PD&Di-007 er beskrevet i Tabellene 5, 6 og 7 henholdsvis.
Anti-pneumokokk antistoffresponser og OPA-aktivitet mot serotype 19F én måned etter primær vaksinasjon med disse 19F-DT formuleringene er vist i henholdsvis Tabell 8 og 9. Feil! Fant ikke referansekilden.
10 viser 22F-ELISA antistoffkonsentrasjoner og prosentdeler av individer som nådde 0,2 μg/ml terskelen før og etter 23-valent enkel (”plain”) polysakkarid boostervaksinasjon.
Opsonofagocytose-aktiviteten ble vist å være tydelig forbedret for antistoffer indusert med disse 19F-DT formuleringene som vist ved høyere seropositivitetsrater (opsonofagocytose titere t 1:8) og OPA GMT’er én måned etter primær vaksinasjon (Tabell 9). En måned etter 23-valent enkel polysakkarid boostervaksinasjon, var opsonofagocytose-aktivitet av 19F antistoffer fortsatt betydelig bedre for barn primet med 19F-DT formuleringer (Feil! Fant ikke referansekilden. 11).
Feil! Fant ikke referansekilden. 12 presenterer immunogenisitetsdata etter en 11Pn-PD boosterdose i småbarn tidligere primet med 19F-DT eller 19F-PD konjugater sammenlignet med en fjerde påfølgende dose av Prevnar®. Gitt gjennombruddstilfellene rapportert etter innføring av Prevnar® i USA, kan den forbedrede opsonofagocytose-aktiviteten mot serotype 19F når konjugert til DT bærerproteinet være en fordel for kandidat-vaksinen.
Feil! Fant ikke referansekilden. 13 tilveiebringer ELISA og OPA-data for 19F-DT-konjugatet med hensyn til den kryssreaktive serotypen 19A. Det ble funnet at 19F-DT induserer lav men signifikant OPA-aktivitet mot 19A.
Tabell 4 Pneumokokk konjugatvaksine-formuleringer anvendt i kliniske studier.
Tabell 5 Spesifikke aktivering/kobling/quenching-betingelser for PS S.pneumoniae-protein D/TT/DT-konjugater
Tabell 6 Spesifikke aktivering/kobling/quenching-betingelser for PS S.pneumoniae-Protein D/DT-konjugater for 11 Pn-PD&Di-001-studiet
Tabell 7 Spesifikke aktivering/kobling/quenching-betingelser for PS S.pneumoniae-Protein D/DT-konjugater for 11 Pn-PD&Di-007-studiet
Tabell 8 Prosentdel av individer med 19F antistoffkonsentrasjon
t 0,20 Pg/ml og 19F antistoff geometrisk gjennomsnittlige antistoffkonsentrasjoner (GMCs med 95% CI; μg/ml) én måned etter 1μg 19F-PD, 3μg 19F-DT eller Prevnar (2μg 19F-CRM) primær vaksinasjon (Total kohort)
<*>Sammensetningen av de forskjellige formuleringene er gitt i tabell 4.
Tabell 9 Prosentdel av individer med 19F OPA-titer t 1:8 og 19F OPA GMT’er én måned etter primær vaksinasjon med 1μg 19F-PD, 3μg 19F-DT eller Prevnar (2μg 19F-CRM) (Total kohort)
<*>Sammensetningen av de forskjellige formuleringene er gitt i Feil! Fant ikke referansekilden.4.
Tabell 10 Prosentdel av individer med 19F antistoffkonsentrasjon
t 0,20 Pg/ml og 19F antistoff GMC’er (μg/ml) før og én måned etter 23-valent enkel polysakkarid-booster hos barn primet med 1μg 19F-PD, 3μg 19F-DT eller Prevnar (2μg 19F-CRM) (Total kohort)
<*>Sammensetningen av de forskjellige formuleringene er gitt i Feil! Fant ikke referansekilden.4.
Tabell 11 Prosentdel av individer med 19F OPA-titer t 1:8 og 19F OPA GMT’er før og én måned etter 23-valent enkel polysakkaridbooster hos barn primet med 1μg 19F-PD, 3μg 19F-DT eller Prevnar (2μg 19F-CRM) (Total kohort)
<*>Sammensetningen av de forskjellige formuleringene er gitt i Feil! Fant ikke referansekilden.4.
Tabell 12 Prosentdel av individer med antistoffkonsentrasjoner t 0,2
μg/ml, OPA t 1:8 og GMCs/GMTs mot 19F pneumokokker én måned etter 11Pn-PD eller Prevnar-booster hos barn primet med 1μg 19F-PD, 3μg 19F-DT eller Prevnar (2μg 19F-CRM) (Total kohort)
<*>Sammensetningen av de forskjellige formuleringene er gitt i Feil! Fant ikke referansekilden.4.
Tabell 13 Prosentdel av individer med antistoff konsentrasjoner t 0,2 μg/ml, OPA t 1:8 og GMCs/GMTs mot 19A pneumokokker én måned etter primær vaksinasjon med 1μg 19F-PD, 3μg 19F-DT eller Prevnar (2μg 19F-CRM) (Total kohort)
<*>Sammensetningen av de forskjellige formuleringene er gitt i Feil! Fant ikke referansekilden.4
Eksempel 5: Adjuvans-forsøk i prekliniske modeller: effekt på immunogenisitet av pneumokokk 11-valente polysakkarid-konjugater i eldre Rhesusaper
For å optimalisere responsen fremkalt mot konjugat pneumokokkvaksiner i den eldre populasjonen, formulerte GSK en 11-valent polysakkarid (PS) konjugatvaksine med en ny adjuvans Adjuvans C – se nedenfor.
Grupper på 5 eldre Rhesusaper (14 til 28 år gamle) ble immunisert intramuskulært (IM) ved dagene 0 og 28 med 500 μl av enten 11-valente PS-konjugater adsorbert på 315 μg AlPO4 eller 11-valente PS-konjugater blandet med Adjuvans C.
I begge vaksineformuleringene var de 11-valente PS-konjugatene hver sammensatt av de følgende konjugatene PS1-PD, PS3-PD, PS4-PD, PS5-PD, PS7F-PD, PS9V-PD, PS14-PD, PS18C-PD, PS19F-PD, PS23F-DT og PS6B-DT. Vaksinen anvendt var 1/5 dose av den humane dosen av vaksinen (5 μg av hvert sakkarid pr. human dose bortsett fra i 6B [10 μg]) konjugert i henhold til betingelser i Tabell 6 (Eksempel 4), med unntak av at 19F ble fremstilt i henhold til de følgende CDAP prosessbetingelsene: sakkarid, laget i en viss størrelse, ved 9 mg/ml, PD ved 5 mg/ml, et initielt PD/PS-forhold på 1,2/1, en CDAP-konsentrasjon på 0,75 mg/mg PS, pHa=pHc=pHq 9,0/9,0/9,0 og en koblingstid på 60 min.
Anti-PS ELISA IgG-nivåer og opsonofagocytose titere ble dosert i sera oppsamlet ved dag 42. Anti-PS3 hukommelses B-celle frekvenser ble målt ved Elispot fra perifere blodceller oppsamlet ved dag 42.
I henhold til resultatene vist her nedenfor, forbedret Adjuvans C immunogenisiteten av 11-valente PS-konjugater betydelig versus konjugater med AlPO4 i eldre aper. Den nye adjuvansen forbedret IgG-responsene til PS (Figur 1) og opsonofagocytose antistofftiterene (Tabell 14). Det var også støttende bevis for at frekvensen av PS3-spesifikke hukommelses-B-celler blir økt ved anvendelse av Adjuvans C (Figur 2).
Tabell 14. Konjugat immunogenisitet i eldre Rhesusaper (post-II
opsonofagocytose titere)
B-celle Elispot
Prinsippet for forsøket er henvist til det faktum at hukommelses-B-celler modnes til plasmaceller in vitro etter dyrking med CpG i 5 dager. In vitro-fremstilte antigenspesifikke plasmaceller kan lett detekteres og derfor telles ved anvendelse av B-celle elispot-forsøket. Antall spesifikk plasmaceller gjenspeiler frekvensen av hukommelses-B-celler ved oppstart av dyrkingen.
I korthet blir in vitro-fremstilte plasmaceller inkubert i dyrkingsplater belagt med antigen. Antigenspesifikke plasmaceller danner antistoff/antigen spots, som blir detektert ved konvensjonell immun-enzymatisk metode og talt opp som hukommelses-B-celler.
I foreliggende studie har polysakkarider blitt anvendt for å belegge dyrkingsplater for å telle opp respektive hukommelses B-celler. Resultater er uttrykt som en frekvens av PS-spesifikke hukommelses B-celler innenfor en million av hukommelses B-celler.
Studiet viser at Adjuvans C kan være i stand til å lette det kjente problemet med PS3 ”boostability” (se 5th International Symposium on Pneumococci and Pneumococcal Disease, April 2-62006, Alice Springer, Sentralaustralia.
Specificities of immune responses against a serotype 3 pneumococcal conjugate. Schuerman L, Prymula R, Poolman J. Abstract book s 245, PO10,06).
Eksempel 6. Effektivitet av detoksifisert Pneumolysin (dPly) som en proteinbærer for å forbedre immunogenisiteten av PS 19F hos unge Balb/c mus
Grupper på 40 BALB/c hunnmus (4 uker gamle) ble immunisert IM ved dagene 0, 14 og 28 med 50 μl av enten 4-valent enkel PS eller 4-valent dPly-konjugert PS, begge blandet med Adjuvans C.
Begge vaksineformuleringene var sammensatt av 0,1 μg (mengde av sakkarid) av hver av de følgende PS: PS8, PS12F, PS19F og PS22F.
Anti-PS ELISA IgG-nivåer ble dosert i sera oppsamlet ved dag 42.
Anti-PS19F-responsen, vist som et eksempel i Figur 3, ble sterkt forbedret hos mus gitt 4-valente dPly-konjugater sammenlignet med mus immunisert med den enkle PS. Samme forbedring ble observert for anti-PS8, 12F og 22F IgG-responsene (data ikke vist).
Eksempel 7. Effektivitet av Pneumokokk Histidin Triad Protein D (PhtD) som en proteinbærer for å forbedre immunogenisiteten av PS 22F i unge Balb/cmus
Grupper på 40 BALB/c hunnmus (4 uker gamle) ble immunisert IM ved dagene 0, 14 og 28 med 50 μl av enten 4-valent enkel PS eller 4-valent PhtD-konjugert PS, begge blandet med Adjuvans C.
Begge vaksineformuleringene var sammensatt av 0,1 μg (mengde av sakkarid) av hver av de følgende PS: PS8, PS12F, PS19F og PS22F.
Anti-PS ELISA IgG-nivåer ble dosert i sera oppsamlet ved dag 42.
Anti-PS22F-responsen, vist som et eksempel i Figur 4, ble sterkt forbedret hos mus gitt 4-valente PhtD-konjugater sammenlignet med mus immunisert med enkel PS. Samme forbedring ble observert for anti-PS8, 12F og 19F IgG-responsene (data ikke vist).
Eksempel 8. Immunogenisitet i eldre C57Bl-mus av 13-valente PS-konjugater inneholdende 19A-dPly og 22F-PhtD
Grupper på 30 gamle C57Bl-mus (>69-uker gamle) ble immunisert IM ved dagene 0, 14 og 28 med 50 μl av enten 11-valente PS-konjugater eller 13-valente PS-konjugater, begge blandet med Adjuvans C (se nedenfor).
Den 11-valente vaksineformuleringen var sammensatt av 0,1 μg sakkarid av hvert av de følgende konjugatene: PS1-PD, PS3-PD, PS4-PD, PS5-PD, PS6B-PD, PS7F-PD, PS9V-PD, PS14-PD, PS18C-TT, PS19F-DT og PS23F-PD (se Tabell 1 og kommentar angående 11-valent vaksine beskrevet under Tabell 2). Den 13-valente vaksineformuleringen inneholdt i tillegg 0,1 μg av PS19A-dPly og PS22F-PhtD-konjugater (se Tabell 1 og kommentar angående 13-valent vaksine beskrevet under Tabell 2 [ved anvendelse av direkte-konjugert 22F]). I gruppe 2 og 4 var pneumolysin-bæreren detoksifisert med GMBS-behandling, i gruppe 3 og 5 ble det utført med formaldehyd. I gruppene 2 og 3 ble PhtD anvendt for å konjugere PS 22F, i Gruppene 4 og 5 ble en PhtD_E-fusjon (konstruksjonen VP147 fra WO 03/054007) anvendt. I gruppe 6 ble 19A konjugert til difteritoksoid og 22F til protein D.
Anti-PS19A og 22F ELISA IgG-nivåer ble dosert i individuelle sera oppsamlet ved dag 42. ELISA IgG-responsen generert til den andre PS ble målt i samlede sera.
19A-dPly og 22F-PhtD administrert innenfor den 13-valente konjugat vaksineformuleringen ble vist immunogen i gamle C57Bl-mus (Tabell 15).
Immunresponsen indusert mot den andre PS ble ikke negativt påvirket i mus gitt den 13-valente formuleringen sammenlignet med de immunisert med den 11-valente formuleringen.
Tabell 15. PS immunogenisitet i gamle C57Bl-mus (post-III IgG-nivåer)
Eksempel 9. Immunogenisitet hos unge Balb/c-mus av 13-valente PS-konjugater inneholdende 19A-dPly og 22F-PhtD
Grupper på 30 unge Balb/c-mus (4 uker gamle) ble immunisert IM ved dagene 0, 14 og 28 med 50 μl av enten 11-valente PS-konjugater eller 13-valente PS-konjugater, begge blandet med Adjuvans C (se nedenfor).
Den 11-valente vaksineformuleringen var sammensatt av 0,1 μg sakkarid av hvert av de følgende konjugatene: PS1-PD, PS3-PD, PS4-PD, PS5-PD, PS6B-PD, PS7F-PD, PS9V-PD, PS14-PD, PS18C-TT, PS19F-DT og PS23F-PD (se Tabell 1 og kommentar angående 11-valent vaksine beskrevet under Tabell 2). Den 13-valente vaksineformuleringen inneholdt i tillegg 0,1 μg av PS19A-dPly og PS22F-PhtD-konjugater (se Tabell 1 og kommentar angående 13-valent vaksine beskrevet under Tabell 2 [ved anvendelse av direkte-konjugert 22F]). I gruppe 2 og 4 var pneumolysin-bæreren detoksifisert med GMBS-behandling, i gruppe 3 og 5 var det utført med formaldehyd. I gruppene ble 2 og 3 PhtD anvendt for å konjugere PS 22F, i Gruppene 4 og 5 ble en PhtD_E-fusjon (konstruksjonen VP147 fra WO 03/054007) anvendt. I gruppe 6 var 19A konjugert til difteritoksoid og 22F til protein D.
Anti-PS19A og 22F ELISA IgG-nivåer ble dosert i individuelle sera oppsamlet ved dag 42. ELISA IgG-responsen dannet mot det andre PS ble målt i samlede sera.
19A-dPly og 22F-PhtD administrert innenfor den 13-valente konjugatvaksineformuleringen ble vist immunogen i unge Balb/c-mus (Tabell 16).
Immunresponsen indusert mot den andre PS ble ikke negativt påvirket hos mus gitt den 13-valente formuleringen sammenlignet med de immunisert med den 11-valente formuleringen.
Tabell 16. PS immunogenisitet hos unge Balb/c-mus (post-III IgG-nivåer)
Eksempel 10. Immunogenisitet i marsvin for 13-valente PS-konjugater inneholdende 19A-dPly og 22F-PhtD
Grupper på 20 unge marsvin (Hartley stamme; 5 uker gamle) ble immunisert IM ved dagene 0, 14 og 28 med 125 μl av enten 11-valente PS-konjugater eller 13-valente PS-konjugater, begge blandet med Adjuvans C (se nedenfor).
Den 11-valente vaksineformuleringen var sammensatt av 0,25 μg sakkarid av hvert av de følgende konjugatene: PS1-PD, PS3-PD, PS4-PD, PS5-PD, PS6B-PD, PS7F-PD, PS9V-PD, PS14-PD, PS18C-TT, PS19F-DT og PS23F-PD (se Tabell 1 og kommentar angående 11-valent vaksine beskrevet under Tabell 2). Den 13-valente vaksineformuleringen inneholdt i tillegg 0,1 μg av PS19A-dPly og PS22F-PhtD konjugater (se Tabell 1 og kommentar angående 13-valent vaksine beskrevet under Tabell 2 [ved anvendelse av direkte-konjugert 22F]). I gruppe 2 og 4 var pneumolysin-bæreren detoksifisert med GMBS-behandling, i gruppe 3 og 5 var det utført med formaldehyd. I gruppene 2 og 3 ble PhtD anvendt for å konjugere PS 22F, i Gruppene 4 og 5 ble en PhtD_E-fusjon (konstruksjonen VP147 fra WO 03/054007) anvendt. I gruppe 6 ble 19A konjugert til difteritoksoid og 22F til protein D.
Anti-PS19A og 22F ELISA IgG-nivåer ble dosert i individuelle sera oppsamlet ved dag 42. ELISA IgG-responsen dannet mot det andre PS ble målt i samlede sera.
Tabell 17. PS immunogenisitet i unge Balb/c-mus (post-III IgG-nivåer)
Eksempel 11: Formuleringer fremstilt og testet
a) De følgende formuleringene blir fremstilt (ved anvendelse av den 13-valente vaksinen fra tabell 1 og serotype 3 fra tabell 5 – se kommentar angående 14-valent vaksine beskrevet under Tabell 2 [ved anvendelse av direkte-konjugert 22F eller gjennom en ADH-linker]). Sakkaridene er formulert med aluminiumfosfat og 3D-MPL som vist nedenfor.
b) Samme sakkaridformulering er tilsatt adjuvans med hver av de følgende adjuvansene:
- I tabellen herunder er konsentrasjonen av emulsjons-komponentene pr.500μl dose vist.
Adjuvans A1 Adjuvans A2 Adjuvans A3 Bestand- 250μl o/w 125μl o/w 50μl o/w
deler emulsjon emulsjon emulsjon
alfa tokoferol 11,88 mg 5,94 mg 2,38 mg Squalen 10,7 mg 5,35 mg 2,14 mg
Tween 80 4,85 mg 2,43 mg 0,97 mg
Adjuvans A4 Adjuvans A5 Adjuvans A6 Adjuvans A7 Bestand- 250μl o/w 250μl o/w 125μl o/w 50μl o/w deler emulsjon emulsjon emulsjon emulsjon alfa 11,88 mg 11,88 mg 5,94 mg 2,38 mg Tokoferol
Squalen 10,7 mg 10,7 mg 5,35 mg 2,14 mg Tween 80 4,85 mg 4,85 mg 2,43 mg 0,97 mg 3D-MPL 50 μg 25 μg 25 μg 10 μg
c) Sakkaridene er også formulert med to liposombaserte adjuvanser:
Sammensetning av adjuvans B1
Kvalitativ kvantitativ (pr. 0,5 ml dose)
Liposomer:
- DOPC 1 mg
- kolesterol 0,25 mg
3DMPL 50 μg
QS21 50 μg
KH2PO41 3,124 mg Buffer
Na2HPO41 0,290 mg Buffer
NaCl 2,922 mg
(100 mM)
WFI q.s. ad 0,5 ml Løsningsmiddel
pH 6,1
1. Total PO4 konsentrasjon = 50 mM
Sammensetning av adjuvans B2
Kvalitativ Kvantitativ (pr. 0,5 ml dose)
Liposomer:
- DOPC 0,5 mg
- kolesterol 0,125 mg
3DMPL 25 μg
QS21 25 μg
KH2PO41 3,124 mg Buffer
Na2HPO41 0,290 mg Buffer
NaCl 2,922 mg
(100 mM)
WFI q.s. ad 0,5 ml Løsningsmiddel
pH 6,1
d) Sakkaridene er også formulert med Adjuvans C (se ovenfor for andre sammensetninger hvor denne adjuvansen har blitt anvendt):
Kvalitativ Kvantitativ (pr. 0,5 ml dose)
Olje-i-vann emulsjon: 50 μl
- squalen 2,136 mg
- α-tokoferol 2,372 mg
- Tween 800,97 mg
- kolesterol 0,1 mg
3DMPL 50 μg
QS21 50 μg
KH2PO41 0,470 mg Buffer
Na2HPO41 0,219 mg Buffer
NaCl 4,003 mg
(137 mM)
KCl 0,101 mg
(2,7 mM)
WFI q.s. ad 0,5 ml Løsningsmiddel
pH 6,8
Eksempel 12. Effekt av konjugerings kjemi på 22F-PhtD-konjugat immunogenisitet i Balb/c-mus
Grupper på 30 BALB/c hunnmus ble immunisert ved intramuskulær (IM) administreringsvei ved dagene 0, 14 og 28 med 13-valente PS-formuleringer inneholdende PS 1, 3, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F og 23F (dose: 0,3 μg sakkarid / konjugat for PS 4, 18C, 19A, 19F og 22F og 0,1 μg sakkarid / konjugat for det andre PS).
PS 18C ble konjugert til tetanustoksoid, 19F til difteritoksoid, 19A til formoldetoksifisert Ply, 22F til PhtD og det andre PS til PD.
To formuleringer, satt sammen av enten 22F-PhtD fremstilt ved direkte CDAP kjemi eller 22F-AH-PhtD (ADH-deratisert PS), ble sammenlignet. Se Eksempel 2, Tabell 1 og kommentar under Tabell 2 for karakteristika for 13-valent vaksine fremstilt enten med 22F direkte konjugert eller gjennom en ADH-spacer.
Vaksineformuleringene ble supplert med adjuvans C.
Anti-PS22F ELISA IgG-nivåer og opsonofagocytose titere ble målt i sera oppsamlet ved dag 42.
22F-AH-PhtD ble vist å være mye mer immunogen enn 22F-PhtD både3 når det gjelder IgG-nivåer (figur 5) og opsonofagocytiske titere (figur 6).
Eksempel 13. Effekt av nye adjuvanser på immunogenisiteten av Streptoccoccus pneumoniae kapsel PS-konjugater
Grupper på 40 BALB/c hunnmus ble immunisert ved IM administreringsveien ved dagene 0, 14 og 28 med 13-valente PS-formuleringer inneholdende PS 1, 3, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F og 23F (dose: 0,3 μg / konjugat for PS 4, 18C, 19A, 19F og 22F og 0,1 μg / konjugat for det andre PS).
PS 18C ble konjugert til tetanustoksoid, 19F til difteritoksoid, 19A til formoldetoksifisert Ply, 22F til PhtD og det andre PS til PD. Se Eksempel 2, Tabell 1 og kommentar under Tabell 2 for karakteristika for 13-valent vaksine fremstilt med 22F direkte konjugert.
Fire formuleringer, supplert med enten AlPO4, adjuvans A1, adjuvans A4 eller adjuvans A5, ble sammenlignet.
Anti-PS, Ply, PhtD og PD ELISA IgG-nivåer ble målt i sera oppsamlet ved dag 42 og samlet pr. gruppe. Det følgende forhold ble beregnet for hvert antigen: IgG-nivå indusert med den nye adjuvansen testet / IgG-nivå indusert med AlPO4.
Alle de nye adjuvansene testet forbedret immunresponsene til 13-valente konjugater minst 2 ganger sammenlignet med den klassiske AlPO4-formuleringen (figur 7).
Eksempel 14. Beskyttende effektivitet av en PhtD/detoksifisert Ply combo i en pneumokokk ape lungebetennelse-modell
Grupper på 6 Rhesusaper (3 til 8 år gamle), valgt som de som har de laveste preeksisterende anti-19F antistoffnivåene, ble immunisert intramuskulært ved dagene 0 og 28 med enten 11-valente PS-konjugater (dvs. 1 μg av PS 1, 3, 5, 6B, 7F, 9V, 14 og 23F og 3 μg av PS 4, 18C og 19F [av sakkarid]) eller PhtD (10 μg) formoldetoksifisert Ply (10 μg) eller adjuvansen alene.
PS 18C ble konjugert til tetanustoksoid, 19F til difteritoksoid og det andre PS til PD. Se Eksempel 2, Tabell 1 og kommentar under Tabell 2 for karakteristika for 11-valent vaksine. Alle formuleringene var supplert med adjuvans C.
Type 19F pneumokokker (5,10<8>cfu) ble inokulert i høyre lunge ved dag 42. Kolonier ble tellet i bronkoalveolær lavage oppsamlet ved dagene 1, 3 og 7 etter provokasjon. Resultatene ble uttrykt som antall dyr pr. gruppe enten døde, kolonisering i lunge eller utskilt ved dag 7 etter provokasjon.
Som vist i figur 8 ble en god beskyttelse nær statistisk signifikans (til tross for det lave antall dyr anvendt) oppnådd med 11-valente konjugater og PhtD+dPly combo (p < 0,12, Fisher Exact test) sammenlignet med adjuvans alene-gruppen.
Eksempel 15. Effekt av konjugerings kjemi på anti-PhtD-antistoffresponsen og den beskyttende effektiviteten mot en type 4-provokasjon indusert ved 22F-PhtD-konjugater
Grupper på 20 hunn OF1-mus ble immunisert ved intramuskulær administreringsvei ved dagene 0 og 14 med 3 μg av enten 22F-PhtD (fremstilt ved direkte CDAP kjemi) eller 22F-AH-PhtD (ADH-derivatiserte PS) eller adjuvansen alene. Begge monovalente 22F konjugater ble fremstilt ved fremgangsmåtene ifølge Eksempel 2 (se også Tabell 1 og Tabell 2). Hver formulering ble supplert med adjuvans C.
Anti-PhtD ELISA IgG-nivåer ble målt i sera oppsamlet ved dag 27.
Mus ble underlagt provokasjon intranasalt med 5,10<6>cfu av type 4 pneumokokker ved dag 28 (dvs. en pneumokokk serotype ikke potensielt dekket av PS til stede i vaksineformuleringen testet). Mortaliteten indusert ble overvåket inntil dag 8 etter provokasjon.
22F-AH-PhtD induserte en betydelig høyere anti-PhtD IgG-respons og bedre beskyttelse mot type 4 provokasjon enn 22F-PhtD.
Claims (13)
1. Immunogen sammensetning, k a r a k t e r i s e r t v e d at den omfatter S. pneumoniae kapsulært sakkarid-konjugater fra serotypene 19A og 19F hvor 19A er konjugert til et første bakterielt toksoid som er pneumolysin, difteri toksoid eller CRM197 og 19F er konjugert til et andre bakterielt toksoid som er difteri toksoid eller CRM197 og ytterligere omfattende konjugater av S. pneumoniae kapsulære sakkarider 4, 6B, 9V, 14, 18C, 23F, 1, 5 og 7F, hvor den gjennomsnittlige størrelsen på 19A sakkaridet er mellom 110 og 700 kDa.
2. Immunogen sammensetning ifølge kravene 1,
som ytterligere omfatter et konjugat av S. pneumoniae kapsulært sakkarid 22F.
3. Immunogen sammensetning ifølge hvilket som helst av de foregående krav, hvor den gjennomsnittlige størrelsen på 19A sakkaridet er mellom 110-300, 120-200, 130-180 eller 140-160 kDa.
4. Immunogen sammensetning ifølge hvilket som helst av de foregående krav, hvor 19A sakkaridet er blitt laget ved en faktor på opptil x5.
5. Immunogen sammensetning ifølge hvilket som helst av de foregående krav, hvor 19A sakkaridet er blitt laget ved mikrofluidisering.
6. Immunogen sammensetning ifølge hvilket som helst av de foregående krav, hvor den gjennomsnittlige størrelsen på sakkaridet er over 50 kDa.
7. Immunogen sammensetning ifølge krav 6, som omfatter serotype 1 som har en gjennomsnittlige sakkaridstørrelse på mellom 300 og 400 kDa.
8. Immunogen sammensetning ifølge krav 6 og 7, som omfatter serotype 5 som har en gjennomsnittlige sakkaridstørrelse på mellom 350 og 450 kDa.
9. Immunogen sammensetning ifølge krav 6 til 8, som omfatter serotype 7F som har en gjennomsnittlige sakkaridstørrelse på mellom 200 og 300 kDa.
10. Vaksine, k a r a k t e r i s e r t v e d at den omfatter den immunogene sammensetningen ifølge hvilke som helst av kravene 1 til 9 og et farmasøytisk akseptabelt tilsetningsmiddel.
11. Fremgangsmåte for fremstilling av vaksinen ifølge krav 10,
k a r a k t e r i s e r t v e d at den omfatter trinnet med å blande den immunogene sammensetningen ifølge hvilke som helst av kravene 1 til 9 med et farmasøytisk akseptabelt tilsetningsmiddel.
12. Immunogen sammensetning ifølge kravene 1-9 eller vaksine ifølge krav 10 for anvendelse i behandling eller forebygging av sykdom forårsaket av Streptococcus pneumoniae-infeksjon.
13. Immunogen sammensetning ifølge kravene 1-9 eller vaksine ifølge krav 10 for anvendelse i behandling eller forebygging av sykdom forårsaket av Streptococcus pneumoniae-infeksjon ifølge krav 12, hvor sykdommen er hver eller begge av pneomoni eller invasiv pneumokokkinfeksjon (IPD) hos eldre personer, eksaserbasjoner av kronisk obstruktiv lungesykdom (KOLS) hos eldre personer, otitis media hos spedbarn og små barn, meningitt og/eller bakteriemi hos spedbarn og små barn eller pneumoni og/eller konjunktivitt hos spedbarn og små barn.
Applications Claiming Priority (10)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GB0526232A GB0526232D0 (en) | 2005-12-22 | 2005-12-22 | Vaccine |
GBGB0607088.2A GB0607088D0 (en) | 2006-04-07 | 2006-04-07 | Vaccine |
GB0607087A GB0607087D0 (en) | 2006-04-07 | 2006-04-07 | Vaccine |
GB0609902A GB0609902D0 (en) | 2006-05-18 | 2006-05-18 | Novel composition |
GB0620337A GB0620337D0 (en) | 2006-10-12 | 2006-10-12 | Vaccine |
GBGB0620336.8A GB0620336D0 (en) | 2006-10-12 | 2006-10-12 | Vaccine |
GB0620815A GB0620815D0 (en) | 2006-10-19 | 2006-10-19 | Vaccine |
GB0620816A GB0620816D0 (en) | 2006-10-19 | 2006-10-19 | vaccine |
PCT/GB2006/004634 WO2007068907A2 (en) | 2005-12-13 | 2006-12-12 | Vaccine compositions comprising a saponin adjuvant |
PCT/EP2006/069977 WO2007071710A2 (en) | 2005-12-22 | 2006-12-20 | Vaccine comprising streptococcus pneumoniae capsular polysaccharide conjugates |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO20082646L NO20082646L (no) | 2008-09-16 |
NO344187B1 true NO344187B1 (no) | 2019-09-30 |
Family
ID=39133667
Family Applications (4)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO20082718A NO346529B1 (no) | 2005-12-22 | 2006-12-20 | Bruk av et immunogenpreparat for småbarn, omfattende 22F sakkaridkonjugat |
NO20190104A NO345368B1 (no) | 2005-12-22 | 2006-12-20 | Streptococcus pneumoniae immunogen sammensetning for anvendelse ved behandling eller forebygging av sykdommer forårsaket av Streptococcus pneumoniae infeksjon ved serotype 19A-stammer. |
NO20082647A NO343981B1 (no) | 2005-12-22 | 2008-06-05 | Streptococcus pneumoniae immunogen sammensetning, vaksine og fremgangsmåte for fremstilling av vaksinen. |
NO20082646A NO344187B1 (no) | 2005-12-22 | 2008-06-05 | Immunogen sammensetning, vaksine omfattende denne og fremgangsmåte for fremstilling av vaksinen. |
Family Applications Before (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO20082718A NO346529B1 (no) | 2005-12-22 | 2006-12-20 | Bruk av et immunogenpreparat for småbarn, omfattende 22F sakkaridkonjugat |
NO20190104A NO345368B1 (no) | 2005-12-22 | 2006-12-20 | Streptococcus pneumoniae immunogen sammensetning for anvendelse ved behandling eller forebygging av sykdommer forårsaket av Streptococcus pneumoniae infeksjon ved serotype 19A-stammer. |
NO20082647A NO343981B1 (no) | 2005-12-22 | 2008-06-05 | Streptococcus pneumoniae immunogen sammensetning, vaksine og fremgangsmåte for fremstilling av vaksinen. |
Country Status (37)
Country | Link |
---|---|
US (10) | US20090017072A1 (no) |
EP (10) | EP3470080A1 (no) |
JP (7) | JP5579387B2 (no) |
KR (5) | KR101367237B1 (no) |
CN (6) | CN101378779B (no) |
AR (3) | AR058706A1 (no) |
AT (1) | ATE520415T1 (no) |
AU (4) | AU2006327041B2 (no) |
BR (3) | BRPI0620163B8 (no) |
CA (5) | CA2634887C (no) |
CL (1) | CL2013002106A1 (no) |
CR (2) | CR10119A (no) |
CY (5) | CY1112677T1 (no) |
DK (5) | DK1968631T3 (no) |
EA (3) | EA014649B1 (no) |
ES (4) | ES2614938T3 (no) |
HK (1) | HK1120230A1 (no) |
HR (4) | HRP20110685T1 (no) |
HU (3) | HUE041979T2 (no) |
IL (5) | IL191911A (no) |
JO (1) | JO2813B1 (no) |
LT (3) | LT1973564T (no) |
MA (3) | MA30065B1 (no) |
MX (2) | MX2008008140A (no) |
MY (4) | MY148141A (no) |
NO (4) | NO346529B1 (no) |
NZ (4) | NZ569168A (no) |
PE (2) | PE20071305A1 (no) |
PH (1) | PH12014502544A1 (no) |
PL (5) | PL1973564T3 (no) |
PT (5) | PT3017827T (no) |
SG (1) | SG168517A1 (no) |
SI (5) | SI3017827T1 (no) |
TR (1) | TR201900418T4 (no) |
TW (4) | TWI465248B (no) |
UA (2) | UA96583C2 (no) |
WO (3) | WO2007071710A2 (no) |
Families Citing this family (116)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
HU227613B1 (en) * | 2000-06-29 | 2011-09-28 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine composition |
WO2002038175A1 (en) * | 2000-11-07 | 2002-05-16 | Immunovaccine Technologies Inc. | Vaccines with enhanced immune response and methods for their preparation |
US7955605B2 (en) | 2005-04-08 | 2011-06-07 | Wyeth Llc | Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition |
CN101180079B (zh) | 2005-04-08 | 2012-07-18 | 惠氏公司 | 多价肺炎球菌多糖-蛋白质缀合物组合物 |
PE20110072A1 (es) * | 2005-06-27 | 2011-02-04 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Composicion inmunogenica |
NZ569168A (en) | 2005-12-22 | 2012-02-24 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Streptococcus pneumoniae polysaccharide conjugate vaccine comprising 19F-DT conjugate |
WO2008022299A1 (en) * | 2006-08-17 | 2008-02-21 | The Uab Research Foundation | Diagnosing pneumococcal pneumonia |
EP2155244B1 (en) * | 2007-04-23 | 2017-03-22 | Serum Institute of India Private Limited | Antigenic polysaccharides and process for their preparation |
UY31064A1 (es) | 2007-05-02 | 2009-01-05 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vacuna |
KR101579947B1 (ko) * | 2007-06-26 | 2015-12-28 | 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. | 스트렙토코쿠스 뉴모니애 캡슐 다당류 컨쥬게이트를 포함하는 백신 |
GB0714963D0 (en) | 2007-08-01 | 2007-09-12 | Novartis Ag | Compositions comprising antigens |
CN106310293A (zh) | 2007-09-27 | 2017-01-11 | 免疫疫苗技术有限公司 | 在包括连续疏水相的载体中的脂质体在体内输送多核苷酸中的应用 |
CN101951949B (zh) | 2007-10-19 | 2013-10-02 | 诺华股份有限公司 | 脑膜炎球菌疫苗制剂 |
US8226959B2 (en) | 2008-02-01 | 2012-07-24 | Newcastle Innovation Pty Ltd | Vaccine compositions |
ES2678694T3 (es) * | 2008-04-16 | 2018-08-16 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Vacuna |
CA2720877A1 (en) * | 2008-04-16 | 2009-10-22 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Vaccine |
EP2293815A4 (en) * | 2008-05-22 | 2013-04-03 | Childrens Medical Center | SYNERGISTIC IMMUNOGENIC CONJUGATE FUSION-POLYSACCHARIDE PROTEIN |
EP2296696B1 (en) | 2008-06-05 | 2014-08-27 | ImmunoVaccine Technologies Inc. | Compositions comprising liposomes, an antigen, a polynucleotide and a carrier comprising a continuous phase of a hydrophobic substance |
GB0822633D0 (en) | 2008-12-11 | 2009-01-21 | Novartis Ag | Formulation |
GB0822634D0 (en) | 2008-12-11 | 2009-01-21 | Novartis Ag | Meningitis vaccines |
WO2010070453A2 (en) | 2008-12-17 | 2010-06-24 | Novartis Ag | Meningococcal vaccines including hemoglobin receptor |
WO2010109325A2 (en) * | 2009-03-24 | 2010-09-30 | Novartis Ag | Combinations including pneumococcal serotype 14 saccharide |
CN102438649A (zh) * | 2009-03-24 | 2012-05-02 | 诺华有限公司 | 脑膜炎球菌h因子结合蛋白和肺炎球菌结合糖的组合物 |
PT2411048T (pt) | 2009-03-24 | 2020-07-14 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Proteína de ligação ao fator h meningocócica com adjuvante |
US20120052088A1 (en) | 2009-04-30 | 2012-03-01 | Coley Pharmaceutical Group, Inc. | Pneumococcal vaccine and uses thereof |
WO2010141312A2 (en) | 2009-06-01 | 2010-12-09 | Wake Forest University Health Sciences | Flagellin fusion proteins and conjugates comprising pneumococcus antigens and methods of using the same |
CA2773637A1 (en) | 2009-09-10 | 2011-03-17 | Novartis Ag | Combination vaccines against respiratory tract diseases |
KR20110068831A (ko) * | 2009-12-16 | 2011-06-22 | 재단법인 전라남도생물산업진흥재단 | 리포좀 조성물, 그 제조방법, 및 폐렴 백신으로서의 그 용도 |
TW201136603A (en) * | 2010-02-09 | 2011-11-01 | Merck Sharp & Amp Dohme Corp | 15-valent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate vaccine composition |
GB201003924D0 (en) * | 2010-03-09 | 2010-04-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Immunogenic composition |
GB201003922D0 (en) * | 2010-03-09 | 2010-04-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Conjugation process |
EP2585106A1 (en) | 2010-06-25 | 2013-05-01 | Novartis AG | Combinations of meningococcal factor h binding proteins |
WO2012032498A2 (en) | 2010-09-10 | 2012-03-15 | Novartis Ag | Developments in meningococcal outer membrane vesicles |
WO2012072769A1 (en) | 2010-12-01 | 2012-06-07 | Novartis Ag | Pneumococcal rrgb epitopes and clade combinations |
JP6191082B2 (ja) | 2011-03-02 | 2017-09-06 | グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム | より低用量の抗原および/またはアジュバントを有する混合ワクチン |
GB201103836D0 (en) * | 2011-03-07 | 2011-04-20 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Conjugation process |
MX339058B (es) * | 2011-05-17 | 2016-05-09 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vacuna contra streptococcus pneumoniae. |
CN113876945A (zh) | 2011-10-06 | 2022-01-04 | 免疫疫苗技术有限公司 | 包括激活或增加tlr2活性的佐剂的脂质体组合物及其应用 |
EP2797624A1 (en) | 2011-12-29 | 2014-11-05 | Novartis AG | Adjuvanted combinations of meningococcal factor h binding proteins |
SG11201404447WA (en) * | 2012-01-30 | 2014-08-28 | Serum Inst India Ltd | Immunogenic composition |
AU2013214105A1 (en) | 2012-02-02 | 2014-07-24 | Novartis Ag | Promoters for increased protein expression in meningococcus |
US11510875B2 (en) * | 2012-02-07 | 2022-11-29 | Access To Advanced Health Institute | Adjuvant formulations comprising TLR4 agonists and methods of using the same |
JP2015510872A (ja) * | 2012-03-07 | 2015-04-13 | ノバルティス アーゲー | Streptococcuspneumoniae抗原の増強された製剤 |
CN104159603A (zh) | 2012-03-08 | 2014-11-19 | 诺华股份有限公司 | 带有tlr4激动剂的联合疫苗 |
KR102057217B1 (ko) | 2012-06-20 | 2020-01-22 | 에스케이바이오사이언스 주식회사 | 다가 폐렴구균 다당류-단백질 접합체 조성물 |
RU2510281C2 (ru) * | 2012-06-22 | 2014-03-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Эпитоп" (ООО "Эпитоп") | ВАКЦИНА ПРОТИВ ПНЕВМОНИИ, ВЫЗЫВАЕМОЙ Streptococcus pneumoniae, НА ОСНОВЕ ГИБРИДНОГО БЕЛКА |
CN104487086B (zh) * | 2012-07-07 | 2019-08-30 | 巴拉特生物技术国际有限公司 | 无动物源的不含酒精的疫苗组合物及其制备方法 |
PL3421051T3 (pl) | 2012-08-16 | 2020-10-05 | Pfizer Inc. | Sposoby glikokoniugacji i kompozycje |
US9526776B2 (en) | 2012-09-06 | 2016-12-27 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Combination vaccines with serogroup B meningococcus and D/T/P |
CN109289045A (zh) * | 2012-09-19 | 2019-02-01 | 国立大学法人大阪大学 | 含有肺炎球菌表面蛋白a的肺炎球菌疫苗 |
GB201218660D0 (en) | 2012-10-17 | 2012-11-28 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Immunogenic composition |
KR20140075201A (ko) * | 2012-12-11 | 2014-06-19 | 에스케이케미칼주식회사 | 다가 폐렴구균 다당류-단백질 접합체 조성물 |
KR20140075196A (ko) * | 2012-12-11 | 2014-06-19 | 에스케이케미칼주식회사 | 다가 폐렴구균 다당류-단백질 접합체 조성물 |
CA2894260A1 (en) | 2012-12-18 | 2014-06-26 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Conjugates for protecting against diphtheria and/or tetanus |
PL3363806T3 (pl) * | 2012-12-20 | 2022-12-19 | Pfizer Inc. | Sposób glikokoniugacji |
RU2544168C1 (ru) * | 2014-01-17 | 2015-03-10 | Андрей Дмитриевич Протасов | Способ формирования иммунологической памяти к антигенам streptococcus pneumoniae у пациентов с хронической обструктивной болезнью легких |
BR122023022294A2 (pt) * | 2014-01-21 | 2023-12-12 | Pfizer Inc. | Uso de uma composição imunogênica que compreende um conjugado imunogênico compreendendo um polissacarídeo capsular isolado de streptococcus pneumoniae do sorotipo 15b |
KR102099741B1 (ko) | 2014-01-21 | 2020-04-10 | 화이자 인코포레이티드 | 스트렙토코쿠스 뉴모니아에 피막 폴리사카라이드 및 그의 접합체 |
US9492559B2 (en) * | 2014-01-21 | 2016-11-15 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof |
US11160855B2 (en) | 2014-01-21 | 2021-11-02 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof |
JP2017505792A (ja) | 2014-02-14 | 2017-02-23 | ファイザー・インク | 免疫原性糖タンパク質コンジュゲート |
CN103893751B (zh) * | 2014-03-26 | 2016-04-20 | 天津康希诺生物技术有限公司 | 一种肺炎球菌多糖蛋白缀合疫苗及其制备方法 |
CN103936842B (zh) * | 2014-04-30 | 2016-03-23 | 重庆医科大学 | 肺炎链球菌溶血素突变体及其作为粘膜免疫佐剂的应用 |
US9107906B1 (en) | 2014-10-28 | 2015-08-18 | Adma Biologics, Inc. | Compositions and methods for the treatment of immunodeficiency |
MX2017006506A (es) * | 2014-11-20 | 2018-03-12 | Biological E Ltd | Polinucleotido optimizado en el codon para la expresion de alto nivel de crm197. |
ES2970824T3 (es) * | 2015-03-26 | 2024-05-30 | Gpn Vaccines Pty Ltd | Vacuna estreptocócica |
KR102045663B1 (ko) | 2015-05-04 | 2019-11-15 | 화이자 인코포레이티드 | B군 스트렙토코쿠스 폴리사카라이드-단백질 접합체, 접합체를 생산하는 방법, 접합체를 포함하는 면역원성 조성물, 및 그의 용도 |
RU2600838C1 (ru) * | 2015-06-08 | 2016-10-27 | Андрей Дмитриевич Протасов | Способ усиления активности факторов неспецифической защиты у пациентов с хронической обструктивной болезнью легких |
CN107847571A (zh) * | 2015-06-08 | 2018-03-27 | 印度血清研究所私人有限公司 | 用于改善多糖‑蛋白质缀合物及其获得的多价疫苗配制剂的吸附的方法 |
KR20160146240A (ko) | 2015-06-12 | 2016-12-21 | 전관구 | 염기성 계면활성제를 이용한 산화은나노 및 은나노 제조 방법 |
US11147863B2 (en) * | 2015-06-23 | 2021-10-19 | Biological E Limited | Multivalent pneumococcal conjugate vaccine |
SG10202005253TA (en) * | 2015-07-21 | 2020-07-29 | Pfizer | Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens, kits comprising the same and uses thereof |
GB201518684D0 (en) | 2015-10-21 | 2015-12-02 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine |
GB201522068D0 (en) * | 2015-12-15 | 2016-01-27 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Dried composition |
CN109890415B (zh) | 2016-08-05 | 2023-04-04 | 圣诺菲·帕斯图尔公司 | 多价肺炎球菌多糖-蛋白质缀合物组合物 |
EP3493837B1 (en) | 2016-08-05 | 2022-08-31 | Sanofi Pasteur, Inc. | Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition |
PT3506935T (pt) | 2016-09-02 | 2024-04-01 | Sanofi Pasteur Inc | Vacina contra neisseria meningitidis |
CA3038155A1 (en) | 2016-09-27 | 2018-04-05 | Immunovaccine Technologies Inc. | Methods of using low dose volume b-cell epitope compositions for inducing an antibody immune response in human subjects |
NZ752348A (en) | 2016-09-30 | 2022-11-25 | Biological E Ltd | Multivalent pneumococcal vaccine compositions comprising polysaccharide-protein conjugates |
US11027005B2 (en) | 2016-10-20 | 2021-06-08 | Km Biologics Co., Ltd. | Method for producing Hib conjugate vaccine using PRP with lowered molecular weight |
WO2018080213A1 (ko) * | 2016-10-28 | 2018-05-03 | 주식회사 엘지화학 | 향상된 IgG 역가를 갖는 다가면역원성 조성물 및 이의 용도 |
CN108144052A (zh) * | 2016-12-02 | 2018-06-12 | 武汉博沃生物科技有限公司 | 肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物及其制取方法和用途 |
WO2018124959A2 (en) | 2016-12-28 | 2018-07-05 | Henriques Normark Birgitta | Microparticles from streptococcus pneumoniae as vaccine antigens |
US11998599B2 (en) * | 2016-12-30 | 2024-06-04 | Vaxcyte, Inc. | Polypeptide-antigen conjugates with non-natural amino acids |
US11951165B2 (en) | 2016-12-30 | 2024-04-09 | Vaxcyte, Inc. | Conjugated vaccine carrier proteins |
BR112019014833A2 (pt) * | 2017-01-20 | 2020-04-14 | Pfizer | composições imunogênicas para uso em vacinas pneumococais |
KR102650073B1 (ko) * | 2017-01-31 | 2024-03-20 | 머크 샤프 앤드 돔 엘엘씨 | 스트렙토코커스 뉴모니아 혈청형 19f 유래의 협막 다당류 단백질 접합체의 제조 방법 |
US11246918B2 (en) | 2017-02-03 | 2022-02-15 | Eva Barbara Schadeck | Haemophilus influenzae saccharide-carrier conjugate compositions and uses thereof |
US11400162B2 (en) | 2017-02-24 | 2022-08-02 | Merck Sharp & Dohme Llc | Processes for the formulation of pneumococcal polysaccharides for conjugation to a carrier protein |
US10259865B2 (en) | 2017-03-15 | 2019-04-16 | Adma Biologics, Inc. | Anti-pneumococcal hyperimmune globulin for the treatment and prevention of pneumococcal infection |
CN107929728A (zh) * | 2017-04-19 | 2018-04-20 | 武汉博沃生物科技有限公司 | 一种肺炎球菌蛋白疫苗及其制备方法 |
KR102634811B1 (ko) | 2017-06-10 | 2024-02-06 | 인벤트프라이즈 인크. | 면역원성과 항원항체 결합성이 개선된 2가 또는 다가 접합체 다당류를 가진 다가 접합체 백신 |
US10729763B2 (en) * | 2017-06-10 | 2020-08-04 | Inventprise, Llc | Mixtures of polysaccharide-protein pegylated compounds |
WO2019043245A1 (en) * | 2017-09-04 | 2019-03-07 | London School Of Hygiene And Tropical Medicine | MICROBIAL CELLS EXPRESSING STREPTOCOCCAL SERROTYPES |
CN111065387B (zh) | 2017-09-07 | 2023-08-25 | 默沙东有限责任公司 | 肺炎球菌多糖及其在免疫原性多糖-载体蛋白缀合物中的用途 |
JP2020533299A (ja) * | 2017-09-07 | 2020-11-19 | メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーションMerck Sharp & Dohme Corp. | キャリアタンパク質へのコンジュゲーションのための肺炎球菌多糖の製剤方法 |
CN116898959A (zh) | 2017-09-07 | 2023-10-20 | 默沙东有限责任公司 | 肺炎球菌多糖及其在免疫原性多糖-载体蛋白缀合物中的用途 |
JP7369123B2 (ja) | 2017-12-06 | 2023-10-25 | メルク・シャープ・アンド・ドーム・エルエルシー | 肺炎球菌多糖類-タンパク質コンジュゲートを含む組成物およびその使用方法 |
CA3087572A1 (en) | 2018-02-05 | 2019-08-08 | Sanofi Pasteur Inc. | Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition |
MX2020008198A (es) | 2018-02-05 | 2020-09-22 | Sanofi Pasteur Inc | Composicion del conjugado proteina-polisacarido multivalente neumococica. |
BR112020021296A2 (pt) | 2018-04-18 | 2021-01-26 | Sk Bioscience Co., Ltd. | polissacarídeo capsular de streptococcus pneumoniae e conjugado imunogênico do mesmo |
EP3788143B1 (en) | 2018-04-30 | 2023-06-28 | Merck Sharp & Dohme LLC | Methods for providing a homogenous solution of lyophilized mutant diptheria toxin in dimethylsulfoxide |
US20210236646A1 (en) * | 2018-04-30 | 2021-08-05 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Methods for producing streptococcus pneumoniae capsular polysaccharide carrier protein conjugates from lyospheres |
EP3787673A4 (en) | 2018-04-30 | 2022-04-27 | Merck Sharp & Dohme Corp. | METHODS FOR PRODUCING CAPSULAR CARRIER PROTEIN-POLYSACCHARIDE CONJUGATES OF STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE |
CN108524926B (zh) * | 2018-06-29 | 2021-06-29 | 康希诺生物股份公司 | 一种多价肺炎球菌结合疫苗的制剂组合及其应用 |
KR20210042904A (ko) * | 2018-07-04 | 2021-04-20 | 박사이트, 인코포레이티드 | 면역원성 접합체의 개선 |
SG11202102007UA (en) * | 2018-09-12 | 2021-03-30 | Affinivax Inc | Multivalent pneumococcal vaccines |
EA202191638A1 (ru) * | 2018-10-12 | 2021-12-27 | Байолоджикал И Лимитед | Мультивалентная вакцина на основе конъюгата пневмококковый полисахарид-белок |
MA54533A (fr) | 2018-12-19 | 2022-03-30 | Merck Sharp & Dohme | Compositions comprenant des conjugués polysaccharide-protéine de streptococcus pneumoniae et leurs méthodes d'utilisation |
CN114364397B (zh) * | 2019-07-18 | 2024-03-29 | 赛特瑞恩股份有限公司 | 含多价肺炎链球菌多糖-蛋白偶联物的免疫原性组合物、药物组合物及其用途 |
US20210070890A1 (en) | 2019-09-06 | 2021-03-11 | Serum Institute Of India Private Limited | Method for obtaining purified bacterial polysaccharides |
MX2022003324A (es) | 2019-09-18 | 2022-04-18 | Alcon Inc | Insertos oculares de hidrogel blando envasados en humedo. |
AU2021207701A1 (en) * | 2020-01-17 | 2022-09-15 | Bill & Melinda Gates Foundation | Multivalent Streptococcus vaccines |
KR20210117663A (ko) | 2020-03-20 | 2021-09-29 | 주식회사 보고 | 수직형 침지식 dpf 세척장치 |
CN113293115B (zh) * | 2021-07-08 | 2022-08-26 | 成都生物制品研究所有限责任公司 | 肺炎链球菌无动物源冻干保护剂 |
KR20240055283A (ko) | 2022-10-20 | 2024-04-29 | 우남철 | Dpf용 순환펌프 연결구 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003051392A2 (en) * | 2001-12-18 | 2003-06-26 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Streptococcus pneumoniae vaccine |
Family Cites Families (179)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4057685A (en) | 1972-02-02 | 1977-11-08 | Abbott Laboratories | Chemically modified endotoxin immunizing agent |
US4235877A (en) | 1979-06-27 | 1980-11-25 | Merck & Co., Inc. | Liposome particle containing viral or bacterial antigenic subunit |
EP0027888B1 (en) | 1979-09-21 | 1986-04-16 | Hitachi, Ltd. | Semiconductor switch |
BE889979A (fr) | 1981-08-14 | 1982-02-15 | Smith Kline Rit | Procede de preparation de polysaccharides bacteriens capsulaires antigeniques purifies, produits obtenus et leur utilisation |
US4673574A (en) | 1981-08-31 | 1987-06-16 | Anderson Porter W | Immunogenic conjugates |
US4619828A (en) | 1982-07-06 | 1986-10-28 | Connaught Laboratories, Inc. | Polysaccharide exotoxoid conjugate vaccines |
SE8205892D0 (sv) | 1982-10-18 | 1982-10-18 | Bror Morein | Immunogent membranproteinkomplex, sett for framstellning och anvendning derav som immunstimulerande medel och sasom vaccin |
US4459286A (en) | 1983-01-31 | 1984-07-10 | Merck & Co., Inc. | Coupled H. influenzae type B vaccine |
US4695624A (en) | 1984-05-10 | 1987-09-22 | Merck & Co., Inc. | Covalently-modified polyanionic bacterial polysaccharides, stable covalent conjugates of such polysaccharides and immunogenic proteins with bigeneric spacers, and methods of preparing such polysaccharides and conjugates and of confirming covalency |
US4808700A (en) | 1984-07-09 | 1989-02-28 | Praxis Biologics, Inc. | Immunogenic conjugates of non-toxic E. coli LT-B enterotoxin subunit and capsular polymers |
US4596556A (en) | 1985-03-25 | 1986-06-24 | Bioject, Inc. | Hypodermic injection apparatus |
US4709017A (en) | 1985-06-07 | 1987-11-24 | President And Fellows Of Harvard College | Modified toxic vaccines |
IT1187753B (it) | 1985-07-05 | 1987-12-23 | Sclavo Spa | Coniugati glicoproteici ad attivita' immunogenica trivalente |
US5173294A (en) | 1986-11-18 | 1992-12-22 | Research Foundation Of State University Of New York | Dna probe for the identification of haemophilus influenzae |
US4950740A (en) | 1987-03-17 | 1990-08-21 | Cetus Corporation | Recombinant diphtheria vaccines |
WO1988009797A1 (en) | 1987-06-05 | 1988-12-15 | The United States Of America, As Represented By Th | Autocrine motility factors in cancer diagnosis and management |
US4941880A (en) | 1987-06-19 | 1990-07-17 | Bioject, Inc. | Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly |
US4790824A (en) | 1987-06-19 | 1988-12-13 | Bioject, Inc. | Non-invasive hypodermic injection device |
US4940460A (en) | 1987-06-19 | 1990-07-10 | Bioject, Inc. | Patient-fillable and non-invasive hypodermic injection device assembly |
US5785973A (en) * | 1988-02-01 | 1998-07-28 | Praxis Biologics, Inc. | Synthetic peptides representing a T-cell epitope as a carrier molecule for conjugate vaccines |
US5339163A (en) | 1988-03-16 | 1994-08-16 | Canon Kabushiki Kaisha | Automatic exposure control device using plural image plane detection areas |
US5278302A (en) | 1988-05-26 | 1994-01-11 | University Patents, Inc. | Polynucleotide phosphorodithioates |
US4912094B1 (en) | 1988-06-29 | 1994-02-15 | Ribi Immunochem Research Inc. | Modified lipopolysaccharides and process of preparation |
DE3841091A1 (de) | 1988-12-07 | 1990-06-13 | Behringwerke Ag | Synthetische antigene, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
EP0449856B1 (en) | 1988-12-16 | 2001-09-12 | De Staat Der Nederlanden Vertegenwoordigd Door De Minister Van Welzijn, Volksgezondheid En Cultuur | Pneumolysin mutants and pneumococcal vaccines made therefrom |
ES2055785T3 (es) | 1989-01-17 | 1994-09-01 | Eniricerche Spa | Peptidos sinteticos y su uso como vehiculos universales para la preparacion de conjugados inmunogenos aptos para el desarrollo de vacunas sinteticas. |
ES2068989T3 (es) | 1989-02-04 | 1995-05-01 | Akzo Nobel Nv | Tocoles como adyuvante en vacunas. |
JPH0832638B2 (ja) | 1989-05-25 | 1996-03-29 | カイロン コーポレイション | サブミクロン油滴乳剤を含んで成るアジュバント製剤 |
FR2649012B1 (fr) | 1989-07-03 | 1991-10-25 | Seppic Sa | Emulsions multiphasiques injectables |
FR2649013B1 (fr) | 1989-07-03 | 1991-10-25 | Seppic Sa | Vaccins et vecteurs de principes actifs fluides contenant une huile metabolisable |
WO1991001146A1 (en) | 1989-07-14 | 1991-02-07 | Praxis Biologics, Inc. | Cytokine and hormone carriers for conjugate vaccines |
US5312335A (en) | 1989-11-09 | 1994-05-17 | Bioject Inc. | Needleless hypodermic injection device |
US5064413A (en) | 1989-11-09 | 1991-11-12 | Bioject, Inc. | Needleless hypodermic injection device |
IT1237764B (it) | 1989-11-10 | 1993-06-17 | Eniricerche Spa | Peptidi sintetici utili come carriers universali per la preparazione di coniugati immunogenici e loro impiego per lo sviluppo di vaccini sintetici. |
SE466259B (sv) | 1990-05-31 | 1992-01-20 | Arne Forsgren | Protein d - ett igd-bindande protein fraan haemophilus influenzae, samt anvaendning av detta foer analys, vacciner och uppreningsaendamaal |
EP0468520A3 (en) | 1990-07-27 | 1992-07-01 | Mitsui Toatsu Chemicals, Inc. | Immunostimulatory remedies containing palindromic dna sequences |
EP0471177B1 (en) | 1990-08-13 | 1995-10-04 | American Cyanamid Company | Filamentous hemagglutinin of bordetella pertussis as a carrier molecule for conjugate vaccines |
US5153312A (en) | 1990-09-28 | 1992-10-06 | American Cyanamid Company | Oligosaccharide conjugate vaccines |
CA2059693C (en) | 1991-01-28 | 2003-08-19 | Peter J. Kniskern | Polysaccharide antigens from streptococcus pneumoniae |
CA2059692C (en) | 1991-01-28 | 2004-11-16 | Peter J. Kniskern | Pneumoccoccal polysaccharide conjugate vaccine |
US5476929A (en) | 1991-02-15 | 1995-12-19 | Uab Research Foundation | Structural gene of pneumococcal protein |
US6592876B1 (en) | 1993-04-20 | 2003-07-15 | Uab Research Foundation | Pneumococcal genes, portions thereof, expression products therefrom, and uses of such genes, portions and products |
ATE168132T1 (de) | 1991-02-15 | 1998-07-15 | Uab Research Foundation | Strukturgen von pneumokokken-protein |
GB9105992D0 (en) | 1991-03-21 | 1991-05-08 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
US5552146A (en) | 1991-08-15 | 1996-09-03 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions relating to useful antigens of Moraxella catarrhalis |
GB9118204D0 (en) | 1991-08-23 | 1991-10-09 | Weston Terence E | Needle-less injector |
EP0625910B1 (en) | 1992-02-11 | 2003-07-23 | Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine | Dual carrier immunogenic construct |
IT1262896B (it) | 1992-03-06 | 1996-07-22 | Composti coniugati formati da proteine heat shock (hsp) e oligo-poli- saccaridi, loro uso per la produzione di vaccini. | |
MA22842A1 (fr) | 1992-03-27 | 1993-10-01 | Smithkline Beecham Biolog | Procede de preparation de compositions de vaccin. |
WO1993021769A1 (en) | 1992-05-06 | 1993-11-11 | President And Fellows Of Harvard College | Diphtheria toxin receptor-binding region |
DK0652758T3 (da) | 1992-06-18 | 2000-05-08 | Harvard College | Diferitoxin-vacciner |
ES2108278T3 (es) | 1992-06-25 | 1997-12-16 | Smithkline Beecham Biolog | Composicion de vacuna con coadyuvantes. |
US5383851A (en) | 1992-07-24 | 1995-01-24 | Bioject Inc. | Needleless hypodermic injection device |
IL102687A (en) | 1992-07-30 | 1997-06-10 | Yeda Res & Dev | Conjugates of poorly immunogenic antigens and synthetic pepide carriers and vaccines comprising them |
US5569189A (en) | 1992-09-28 | 1996-10-29 | Equidyne Systems, Inc. | hypodermic jet injector |
US5334144A (en) | 1992-10-30 | 1994-08-02 | Becton, Dickinson And Company | Single use disposable needleless injector |
GB9224584D0 (en) | 1992-11-23 | 1993-01-13 | Connaught Lab | Use of outer membrane protein d15 and its peptides as vaccine against haempohilus influenzae diseases |
WO1994021292A1 (en) | 1993-03-23 | 1994-09-29 | Smithkline Beecham Biologicals (S.A.) | Vaccine compositions containing 3-o deacylated monophosphoryl lipid a |
ES2185658T3 (es) | 1993-05-18 | 2003-05-01 | Univ Ohio State Res Found | Vacuna para la otitis media. |
EP0720485B1 (en) | 1993-09-22 | 2003-11-19 | Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine | Method of activating soluble carbohydrate using novel cyanylating reagents for the production of immunogenic constructs |
PT729473E (pt) | 1993-11-17 | 2001-02-28 | Deutsche Om Arzneimittel Gmbh | Dissacaridos de glucosamina metodo para a sua preparacao composicao farmaceutica contendo os mesmos e sua utilizacao |
GB9326253D0 (en) | 1993-12-23 | 1994-02-23 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccines |
WO1995024176A1 (en) | 1994-03-07 | 1995-09-14 | Bioject, Inc. | Ampule filling device |
US5466220A (en) | 1994-03-08 | 1995-11-14 | Bioject, Inc. | Drug vial mixing and transfer device |
WO1995026204A1 (en) | 1994-03-25 | 1995-10-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Immune stimulation by phosphorothioate oligonucleotide analogs |
US5917017A (en) | 1994-06-08 | 1999-06-29 | President And Fellows Of Harvard College | Diphtheria toxin vaccines bearing a mutated R domain |
US6455673B1 (en) | 1994-06-08 | 2002-09-24 | President And Fellows Of Harvard College | Multi-mutant diphtheria toxin vaccines |
ATE328890T1 (de) | 1994-07-15 | 2006-06-15 | Univ Iowa Res Found | Immunomodulatorische oligonukleotide |
US5565204A (en) | 1994-08-24 | 1996-10-15 | American Cyanamid Company | Pneumococcal polysaccharide-recombinant pneumolysin conjugate vaccines for immunization against pneumococcal infections |
US5599302A (en) | 1995-01-09 | 1997-02-04 | Medi-Ject Corporation | Medical injection system and method, gas spring thereof and launching device using gas spring |
CA2215933C (en) | 1995-03-22 | 2009-10-13 | Andrew Lees | Producing immunogenic constructs using soluble carbohydrates activated via organic cyanylating reagents |
GB9620795D0 (en) | 1996-10-05 | 1996-11-20 | Smithkline Beecham Plc | Vaccines |
UA56132C2 (uk) | 1995-04-25 | 2003-05-15 | Смітклайн Бічем Байолоджікалс С.А. | Композиція вакцини (варіанти), спосіб стабілізації qs21 відносно гідролізу (варіанти), спосіб приготування композиції вакцини |
US6440425B1 (en) | 1995-05-01 | 2002-08-27 | Aventis Pasteur Limited | High molecular weight major outer membrane protein of moraxella |
US5730723A (en) | 1995-10-10 | 1998-03-24 | Visionary Medical Products Corporation, Inc. | Gas pressured needle-less injection device and method |
US5843464A (en) | 1995-06-02 | 1998-12-01 | The Ohio State University | Synthetic chimeric fimbrin peptides |
US5695768A (en) * | 1995-06-07 | 1997-12-09 | Alberta Research Council | Immunostimulating activity of Streptococcus pneumoniae serotype 8 oligosaccharides |
GB9513074D0 (en) | 1995-06-27 | 1995-08-30 | Cortecs Ltd | Novel anigen |
US5666153A (en) | 1995-10-03 | 1997-09-09 | Virtual Shopping, Inc. | Retractable teleconferencing apparatus |
US6290970B1 (en) | 1995-10-11 | 2001-09-18 | Aventis Pasteur Limited | Transferrin receptor protein of Moraxella |
US5893397A (en) | 1996-01-12 | 1999-04-13 | Bioject Inc. | Medication vial/syringe liquid-transfer apparatus |
US6090576A (en) | 1996-03-08 | 2000-07-18 | Connaught Laboratories Limited | DNA encoding a transferrin receptor of Moraxella |
GB9607549D0 (en) | 1996-04-11 | 1996-06-12 | Weston Medical Ltd | Spring-powered dispensing device |
DE69735715T2 (de) | 1996-05-01 | 2007-03-29 | The Rockefeller University | Cholin-bindendes Protein, welches als gegen Pneumokokken gerichtetes Vakzin verwendet wird |
US7341727B1 (en) | 1996-05-03 | 2008-03-11 | Emergent Product Development Gaithersburg Inc. | M. catarrhalis outer membrane protein-106 polypeptide, methods of eliciting an immune response comprising same |
CA2253549C (en) | 1996-06-18 | 2005-10-25 | Alza Corporation | Device for enhancing transdermal agent delivery or sampling |
JP2000514308A (ja) | 1996-08-16 | 2000-10-31 | スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション | 新規原核生物ポリヌクレオチド、ポリペプチドおよびそれらの使用 |
EP0942983B2 (en) | 1996-10-31 | 2014-09-10 | Human Genome Sciences, Inc. | Streptococcus pneumoniae antigens and vaccines |
CA2269636A1 (en) | 1996-11-12 | 1998-05-22 | The Regents Of The University Of Minnesota | C3 binding protein of streptococcus pneumoniae |
US5980898A (en) | 1996-11-14 | 1999-11-09 | The United States Of America As Represented By The U.S. Army Medical Research & Material Command | Adjuvant for transcutaneous immunization |
KR100453132B1 (ko) | 1996-12-20 | 2004-10-15 | 앨자 코포레이션 | 경피 약제 플럭스를 향상시키기 위한 장치 및 방법 |
DE19708537A1 (de) | 1997-03-03 | 1998-09-10 | Biotechnolog Forschung Gmbh | Neues Oberflächenprotein (SpsA-Protein) von Streptococcus pneumoniae etc. |
US6299881B1 (en) | 1997-03-24 | 2001-10-09 | Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine | Uronium salts for activating hydroxyls, carboxyls, and polysaccharides, and conjugate vaccines, immunogens, and other useful immunological reagents produced using uronium salts |
US6113918A (en) | 1997-05-08 | 2000-09-05 | Ribi Immunochem Research, Inc. | Aminoalkyl glucosamine phosphate compounds and their use as adjuvants and immunoeffectors |
US6303347B1 (en) | 1997-05-08 | 2001-10-16 | Corixa Corporation | Aminoalkyl glucosaminide phosphate compounds and their use as adjuvants and immunoeffectors |
US6764840B2 (en) | 1997-05-08 | 2004-07-20 | Corixa Corporation | Aminoalkyl glucosaminide phosphate compounds and their use as adjuvants and immunoeffectors |
FR2763244B1 (fr) * | 1997-05-14 | 2003-08-01 | Pasteur Merieux Serums Vacc | Composition vaccinale multivalente a porteur mixte |
US5993412A (en) | 1997-05-19 | 1999-11-30 | Bioject, Inc. | Injection apparatus |
ATE380867T1 (de) | 1997-06-03 | 2007-12-15 | Sanofi Pasteur Ltd | Lactoferrinrezeptorgen von moraxella |
GB9711990D0 (en) | 1997-06-11 | 1997-08-06 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
GB9713156D0 (en) | 1997-06-20 | 1997-08-27 | Microbiological Res Authority | Vaccines |
KR100619350B1 (ko) | 1997-07-21 | 2006-09-05 | 박스터 헬쓰케어 에스.에이. | 변형 면역성 뉴멀리신 백신조성물 |
GB9718901D0 (en) | 1997-09-05 | 1997-11-12 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
EP1009382B1 (en) | 1997-09-05 | 2003-06-18 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Oil in water emulsions containing saponins |
US6224880B1 (en) * | 1997-09-24 | 2001-05-01 | Merck & Co., Inc. | Immunization against Streptococcus pneumoniae using conjugated and unconjugated pneumoccocal polysaccharide vaccines |
CN1291233A (zh) | 1997-09-24 | 2001-04-11 | 美国明尼苏达州大学 | 来自肺炎链球菌之人类补体c3降解蛋白酶 |
US5965714A (en) * | 1997-10-02 | 1999-10-12 | Connaught Laboratories, Inc. | Method for the covalent attachment of polysaccharides to protein molecules |
WO1999027961A1 (en) | 1997-12-02 | 1999-06-10 | Powderject Vaccines, Inc. | Transdermal delivery of particulate vaccine compositions |
IT1298087B1 (it) | 1998-01-08 | 1999-12-20 | Fiderm S R L | Dispositivo per il controllo della profondita' di penetrazione di un ago, in particolare applicabile ad una siringa per iniezioni |
US7018637B2 (en) * | 1998-02-23 | 2006-03-28 | Aventis Pasteur, Inc | Multi-oligosaccharide glycoconjugate bacterial meningitis vaccines |
ATE461709T1 (de) | 1998-04-07 | 2010-04-15 | Medimmune Llc | Choline-bindende proteine derivate aus pneumokoken als impfstoff |
WO1999051188A2 (en) | 1998-04-07 | 1999-10-14 | St. Jude Children's Research Hospital | A polypeptide comprising the amino acid of an n-terminal choline binding protein a truncate, vaccine derived therefrom and uses thereof |
JP2002516251A (ja) | 1998-04-23 | 2002-06-04 | ユーエイビー リサーチ ファンデーション | 肺炎球菌表面プロテインC(PspC)のエピトープ領域およびその菌株選択、ならびにそのための使用法 |
EP1089913A1 (fr) | 1998-06-08 | 2001-04-11 | SCA Emballage France | Emballage a remise a plat rapide |
GB9812613D0 (en) | 1998-06-11 | 1998-08-12 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
CA2337807C (fr) | 1998-06-30 | 2012-08-21 | Om Pharma | Nouveaux pseudodipeptides acyles, leur mode de preparation et les compositions pharmaceutiques en renfermant |
HUP0103100A3 (en) | 1998-08-19 | 2005-11-28 | Baxter Healthcare Sa | Immunogenic betha-propionamido-linked polysaccharide protein conjugate useful as a vaccine produced using an n-acryloylated polysaccharide |
GB9818548D0 (en) | 1998-08-25 | 1998-10-21 | Microbiological Res Authority | Treatment of mucas hypersecretion |
IL142017A0 (en) | 1998-09-24 | 2002-03-10 | Univ Minnesota | Human complement c3-degrading polypeptide from streptococcus pneumoniae |
US6541616B1 (en) | 1998-10-01 | 2003-04-01 | Antex Biologics Inc. | Moraxella catarrhalis protein, gene sequence and uses thereof |
EP2266604A3 (en) | 1998-10-16 | 2011-05-11 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Adjuvant systems and vaccines |
GB2359228A (en) | 1998-11-17 | 2001-08-15 | Schlumberger Technology Corp | Transmitting information over a communication link |
AU2027400A (en) | 1998-11-19 | 2000-06-05 | St. Jude Children's Research Hospital | Identification and characterization of novel pneumococcal choline binding proteins, cbpg and cbpd, and diagnostic and therapeutic uses thereof |
AU776828B2 (en) | 1998-12-21 | 2004-09-23 | Medimmune, Llc | Streptococcus pneumoniae proteins and immunogenic fragments for vaccines |
BR9916477A (pt) | 1998-12-23 | 2004-06-22 | Shire Biochem Inc | Polinucleotìdeo isolado, polinucleotìdeo quimérico, composição de vacina e uso desta composição compreendendo os polinucleotìdeos |
EP1034792A1 (en) | 1999-03-11 | 2000-09-13 | Pasteur Merieux Serums Et Vaccins | Intranasal delivery of pneumococcal polysaccharide vaccines |
DE60038166T2 (de) * | 1999-03-19 | 2009-03-12 | Glaxosmithkline Biologicals S.A., Rixensart | Impfstoff gegen bakterielle antigene |
EP1165796A2 (en) | 1999-04-09 | 2002-01-02 | Techlab, Inc. | Recombinant clostridium toxin a protein carrier for polysaccharide conjugate vaccines |
DK1187629T3 (da) | 1999-04-19 | 2005-01-17 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Adjuvanssammensætning omfattende saponin og et immunostimulerende oligonucleotid |
US6558670B1 (en) | 1999-04-19 | 2003-05-06 | Smithkline Beechman Biologicals S.A. | Vaccine adjuvants |
ATE325620T1 (de) | 1999-06-10 | 2006-06-15 | Medimmune Inc | Streptococcus pneumoniae proteine und impfstoffe |
US6319224B1 (en) | 1999-08-20 | 2001-11-20 | Bioject Medical Technologies Inc. | Intradermal injection system for injecting DNA-based injectables into humans |
US6494865B1 (en) | 1999-10-14 | 2002-12-17 | Becton Dickinson And Company | Intradermal delivery device including a needle assembly |
US20040191834A1 (en) * | 1999-10-28 | 2004-09-30 | Laferriere Craig Antony Joseph | Novel method |
WO2001046127A1 (fr) | 1999-12-22 | 2001-06-28 | Om Pharma | Pseudodipeptides acyles porteurs d'un bras auxiliaire fonctionnalise |
FR2806304B1 (fr) * | 2000-03-17 | 2002-05-10 | Aventis Pasteur | Conjugues polysaccharidiques du pneumocoque a usage vaccinal contre le tetanos et la diphterie |
GB0007432D0 (en) | 2000-03-27 | 2000-05-17 | Microbiological Res Authority | Proteins for use as carriers in conjugate vaccines |
NZ553554A (en) | 2000-06-20 | 2008-11-28 | Id Biomedical Corp | Streptococcus antigens |
HU227613B1 (en) * | 2000-06-29 | 2011-09-28 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine composition |
GB0108364D0 (en) * | 2001-04-03 | 2001-05-23 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine composition |
GB0103170D0 (en) | 2001-02-08 | 2001-03-28 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine composition |
ATE321063T1 (de) | 2000-08-04 | 2006-04-15 | Corixa Corp | Neue immunoeffectorverbindungen |
GB0022742D0 (en) * | 2000-09-15 | 2000-11-01 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
ATE384072T1 (de) | 2000-09-26 | 2008-02-15 | Idera Pharmaceuticals Inc | Modulation der immunostimulatorischen aktivität von immunostimulierenden oligonukleotidanaloga durch positionelle chemische veränderungen |
WO2002078673A1 (fr) | 2001-03-29 | 2002-10-10 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Procede de production d'un medicament sous forme de granules fins |
US20030031684A1 (en) | 2001-03-30 | 2003-02-13 | Corixa Corporation | Methods for the production of 3-O-deactivated-4'-monophosphoryl lipid a (3D-MLA) |
WO2002091998A2 (en) | 2001-05-11 | 2002-11-21 | Aventis Pasteur, Inc. | Novel meningitis conjugate vaccine |
FR2827199B1 (fr) | 2001-07-10 | 2004-07-09 | Centre Nat Rech Scient | Procede et machine de fabrication ex situ de reseaux de biopuces basse et moyennes integration |
GB0123580D0 (en) | 2001-10-01 | 2001-11-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine |
WO2003035836A2 (en) | 2001-10-24 | 2003-05-01 | Hybridon Inc. | Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by optimal presentation of 5' ends |
US7262024B2 (en) | 2001-12-20 | 2007-08-28 | Id Biomedical Corporation | Streptococcus antigens |
KR100885008B1 (ko) | 2002-02-04 | 2009-02-20 | 코릭사 코포레이션 | 신규 면역효과기 화합물 |
GB0213622D0 (en) * | 2002-06-13 | 2002-07-24 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine Corporation |
AU2003257003A1 (en) | 2002-07-30 | 2004-02-16 | Baxter Healthcare S.A. | Chimeric multivalent polysaccharide conjugate vaccines |
EP2255826B1 (en) | 2002-08-02 | 2016-04-13 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Neisserial vaccine compositions comprising a combination of antigens |
GB0220198D0 (en) | 2002-08-30 | 2002-10-09 | Chiron Spa | Modified saccharides,conjugates thereof and their manufacture |
JP3754420B2 (ja) | 2003-02-04 | 2006-03-15 | 三洋電機株式会社 | 二次電池用電極板及びその製造方法並びにこの電極板を用いた二次電池 |
EP1601689B1 (en) | 2003-03-13 | 2007-11-28 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Purification process for bacterial cytolysin |
US20060251675A1 (en) | 2003-03-17 | 2006-11-09 | Michael Hagen | Mutant cholera holotoxin as an adjuvant and an antigen carrier protein |
BRPI0411815A (pt) | 2003-06-23 | 2006-08-08 | Baxter Int | vacinas contra neisseria meningitidis do tipo y e suas combinações meningocócicas |
US8048432B2 (en) * | 2003-08-06 | 2011-11-01 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Polysaccharide-protein conjugate vaccines |
GB0323103D0 (en) * | 2003-10-02 | 2003-11-05 | Chiron Srl | De-acetylated saccharides |
GB0408977D0 (en) * | 2004-04-22 | 2004-05-26 | Chiron Srl | Immunising against meningococcal serogroup Y using proteins |
MXPA06011994A (es) | 2004-04-30 | 2007-01-25 | Chiron Srl | Vacunacion con conjugado de meningococos. |
PT1748791E (pt) | 2004-05-11 | 2010-07-15 | Staat Der Nederlanden Vert Doo | Los de neisseria meningitidis lgtb utlizados como adjuvantes |
GB0421083D0 (en) | 2004-09-22 | 2004-10-27 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Purification process |
GB0502096D0 (en) | 2005-02-01 | 2005-03-09 | Chiron Srl | Purification of streptococcal capsular polysaccharide |
CN101180079B (zh) * | 2005-04-08 | 2012-07-18 | 惠氏公司 | 多价肺炎球菌多糖-蛋白质缀合物组合物 |
US7955605B2 (en) * | 2005-04-08 | 2011-06-07 | Wyeth Llc | Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition |
US20070184072A1 (en) | 2005-04-08 | 2007-08-09 | Wyeth | Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition |
PE20110072A1 (es) | 2005-06-27 | 2011-02-04 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Composicion inmunogenica |
RU2457858C2 (ru) | 2005-09-01 | 2012-08-10 | Новартис Вэксинес Энд Дайэгностикс Гмбх Унд Ко Кг | Множественная вакцинация, включающая менингококки серогруппы с |
WO2007053781A2 (en) | 2005-11-01 | 2007-05-10 | Novartis Ag | Compositions with antigens adsorbed to calcium phosphate |
TWI457133B (zh) * | 2005-12-13 | 2014-10-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | 新穎組合物 |
NZ569168A (en) | 2005-12-22 | 2012-02-24 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Streptococcus pneumoniae polysaccharide conjugate vaccine comprising 19F-DT conjugate |
GB0607088D0 (en) * | 2006-04-07 | 2006-05-17 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine |
PL2019657T3 (pl) | 2006-04-26 | 2015-10-30 | Micell Technologies Inc | Powłoki zawierające wiele leków |
KR101579947B1 (ko) | 2007-06-26 | 2015-12-28 | 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. | 스트렙토코쿠스 뉴모니애 캡슐 다당류 컨쥬게이트를 포함하는 백신 |
MX346071B (es) | 2008-12-18 | 2017-03-02 | Wyeth Llc | Método para controlar el peso molecular del polisacárido de streptococcus pneumoniae utilizando dióxido de carbono. |
-
2006
- 2006-12-20 NZ NZ569168A patent/NZ569168A/en not_active IP Right Cessation
- 2006-12-20 NO NO20082718A patent/NO346529B1/no unknown
- 2006-12-20 MY MYPI20082272A patent/MY148141A/en unknown
- 2006-12-20 KR KR1020087017937A patent/KR101367237B1/ko active IP Right Grant
- 2006-12-20 SI SI200632305T patent/SI3017827T1/sl unknown
- 2006-12-20 TW TW095148076A patent/TWI465248B/zh not_active IP Right Cessation
- 2006-12-20 US US12/097,611 patent/US20090017072A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-20 MX MX2008008140A patent/MX2008008140A/es active IP Right Grant
- 2006-12-20 SG SG201009538-8A patent/SG168517A1/en unknown
- 2006-12-20 EP EP18200237.8A patent/EP3470080A1/en active Pending
- 2006-12-20 MY MYPI2012004550A patent/MY160199A/en unknown
- 2006-12-20 NZ NZ569077A patent/NZ569077A/en not_active IP Right Cessation
- 2006-12-20 CA CA2634887A patent/CA2634887C/en active Active
- 2006-12-20 LT LTEP06830744.6T patent/LT1973564T/lt unknown
- 2006-12-20 TR TR2019/00418T patent/TR201900418T4/tr unknown
- 2006-12-20 WO PCT/EP2006/069977 patent/WO2007071710A2/en active Application Filing
- 2006-12-20 PT PT15195398T patent/PT3017827T/pt unknown
- 2006-12-20 PL PL06830744T patent/PL1973564T3/pl unknown
- 2006-12-20 ES ES10192663.2T patent/ES2614938T3/es active Active
- 2006-12-20 CA CA2633772A patent/CA2633772C/en active Active
- 2006-12-20 DK DK06841492.9T patent/DK1968631T3/da active
- 2006-12-20 NZ NZ59650006A patent/NZ596500A/xx not_active IP Right Cessation
- 2006-12-20 KR KR1020147005234A patent/KR101515078B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2006-12-20 PL PL10192663T patent/PL2384765T3/pl unknown
- 2006-12-20 LT LTEP15195398.1T patent/LT3017827T/lt unknown
- 2006-12-20 KR KR1020087018023A patent/KR101418240B1/ko active IP Right Grant
- 2006-12-20 CN CN200680053139.6A patent/CN101378779B/zh active Active
- 2006-12-20 AR ARP060105675A patent/AR058706A1/es not_active Application Discontinuation
- 2006-12-20 SI SI200632143A patent/SI2384765T1/sl unknown
- 2006-12-20 WO PCT/EP2006/069974 patent/WO2007071707A2/en active Application Filing
- 2006-12-20 EP EP10192663.2A patent/EP2384765B1/en active Active
- 2006-12-20 PL PL06841492T patent/PL1968631T3/pl unknown
- 2006-12-20 ES ES15195398T patent/ES2707499T3/es active Active
- 2006-12-20 BR BRPI0620163A patent/BRPI0620163B8/pt active IP Right Grant
- 2006-12-20 JP JP2008546441A patent/JP5579387B2/ja active Active
- 2006-12-20 PT PT101926632T patent/PT2384765T/pt unknown
- 2006-12-20 AU AU2006327041A patent/AU2006327041B2/en not_active Ceased
- 2006-12-20 NO NO20190104A patent/NO345368B1/no unknown
- 2006-12-20 DK DK06830744.6T patent/DK1973564T3/da active
- 2006-12-20 MY MYPI20082271A patent/MY150719A/en unknown
- 2006-12-20 PL PL06830743T patent/PL1962899T3/pl unknown
- 2006-12-20 CA CA2634885A patent/CA2634885C/en active Active
- 2006-12-20 EP EP15195398.1A patent/EP3017827B1/en active Active
- 2006-12-20 CA CA2808919A patent/CA2808919C/en active Active
- 2006-12-20 LT LTEP10192663.2T patent/LT2384765T/lt unknown
- 2006-12-20 PT PT68307446T patent/PT1973564T/pt unknown
- 2006-12-20 DK DK15195398.1T patent/DK3017827T3/en active
- 2006-12-20 KR KR1020087017942A patent/KR101365001B1/ko active IP Right Grant
- 2006-12-20 US US12/097,631 patent/US20090017059A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-20 SI SI200632134T patent/SI1973564T1/sl unknown
- 2006-12-20 AU AU2006327036A patent/AU2006327036B2/en active Active
- 2006-12-20 EP EP06830744.6A patent/EP1973564B1/en active Active
- 2006-12-20 AR ARP060105674A patent/AR058592A1/es not_active Application Discontinuation
- 2006-12-20 CN CN201310103804.XA patent/CN103585623B/zh active Active
- 2006-12-20 EP EP06841492.9A patent/EP1968631B1/en active Active
- 2006-12-20 MY MYPI20082270A patent/MY147495A/en unknown
- 2006-12-20 EP EP16183732.3A patent/EP3130348A1/en not_active Withdrawn
- 2006-12-20 US US12/097,303 patent/US20090010959A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-20 EA EA200801374A patent/EA014649B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2006-12-20 WO PCT/EP2006/069979 patent/WO2007071711A2/en active Application Filing
- 2006-12-20 AT AT06830743T patent/ATE520415T1/de active
- 2006-12-20 CN CN2006800531112A patent/CN101378778B/zh active Active
- 2006-12-20 CN CN2013100364450A patent/CN103251940A/zh active Pending
- 2006-12-20 HU HUE15195398A patent/HUE041979T2/hu unknown
- 2006-12-20 EA EA200801344A patent/EA014165B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2006-12-20 UA UAA200807750A patent/UA96583C2/uk unknown
- 2006-12-20 HU HUE10192663A patent/HUE033081T2/hu unknown
- 2006-12-20 PT PT68414929T patent/PT1968631E/pt unknown
- 2006-12-20 PE PE2006001669A patent/PE20071305A1/es not_active Application Discontinuation
- 2006-12-20 EP EP20110165377 patent/EP2402025A3/en not_active Ceased
- 2006-12-20 KR KR1020137023760A patent/KR101441368B1/ko active IP Right Grant
- 2006-12-20 CN CN201910504933.7A patent/CN110179974B/zh active Active
- 2006-12-20 AR ARP060105676A patent/AR058707A1/es unknown
- 2006-12-20 EP EP20100194592 patent/EP2382986A3/en not_active Withdrawn
- 2006-12-20 AU AU2006327040A patent/AU2006327040B2/en active Active
- 2006-12-20 CA CA2816182A patent/CA2816182C/en active Active
- 2006-12-20 MX MX2012005031A patent/MX354843B/es unknown
- 2006-12-20 EA EA200801367A patent/EA014107B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2006-12-20 TW TW102129217A patent/TW201350129A/zh unknown
- 2006-12-20 JP JP2008546439A patent/JP5461838B2/ja active Active
- 2006-12-20 SI SI200631145T patent/SI1962899T1/sl unknown
- 2006-12-20 SI SI200631931T patent/SI1968631T1/sl unknown
- 2006-12-20 PT PT06830743T patent/PT1962899E/pt unknown
- 2006-12-20 PL PL15195398T patent/PL3017827T3/pl unknown
- 2006-12-20 BR BRPI0620460A patent/BRPI0620460B8/pt active IP Right Grant
- 2006-12-20 TW TW095148075A patent/TWI415622B/zh not_active IP Right Cessation
- 2006-12-20 EP EP06830743A patent/EP1962899B1/en active Active
- 2006-12-20 DK DK10192663.2T patent/DK2384765T3/en active
- 2006-12-20 UA UAA200807749A patent/UA96934C2/uk unknown
- 2006-12-20 NZ NZ569076A patent/NZ569076A/en not_active IP Right Cessation
- 2006-12-20 ES ES06830744.6T patent/ES2630759T3/es active Active
- 2006-12-20 JO JO2006484A patent/JO2813B1/en active
- 2006-12-20 ES ES06841492.9T patent/ES2539795T3/es active Active
- 2006-12-20 JP JP2008546442A patent/JP5792920B2/ja active Active
- 2006-12-20 EP EP15195408.8A patent/EP3020411A1/en active Pending
- 2006-12-20 BR BRPI0620193A patent/BRPI0620193B8/pt active IP Right Grant
- 2006-12-20 CN CN2006800529540A patent/CN101374548B/zh active Active
- 2006-12-20 HU HUE06830744A patent/HUE032903T2/hu unknown
- 2006-12-20 TW TW095148073A patent/TWI487534B/zh not_active IP Right Cessation
- 2006-12-20 PE PE2006001671A patent/PE20071058A1/es not_active Application Discontinuation
- 2006-12-20 DK DK06830743.8T patent/DK1962899T3/da active
-
2008
- 2008-06-03 IL IL191911A patent/IL191911A/en active IP Right Grant
- 2008-06-03 IL IL191913A patent/IL191913A/en active IP Right Grant
- 2008-06-05 NO NO20082647A patent/NO343981B1/no unknown
- 2008-06-05 NO NO20082646A patent/NO344187B1/no unknown
- 2008-06-12 IL IL192084A patent/IL192084A/en not_active IP Right Cessation
- 2008-06-18 MA MA31049A patent/MA30065B1/fr unknown
- 2008-06-18 MA MA31046A patent/MA30062B1/fr unknown
- 2008-06-18 MA MA31050A patent/MA30066B1/fr unknown
- 2008-06-26 CR CR10119A patent/CR10119A/es not_active Application Discontinuation
- 2008-06-27 CR CR10122A patent/CR10122A/es unknown
-
2009
- 2009-02-04 HK HK09101006.1A patent/HK1120230A1/xx not_active IP Right Cessation
- 2009-09-30 US US12/570,266 patent/US9107872B2/en active Active
-
2010
- 2010-11-05 AU AU2010241281A patent/AU2010241281B2/en not_active Ceased
-
2011
- 2011-03-10 IL IL211664A patent/IL211664A0/en unknown
- 2011-09-23 HR HR20110685T patent/HRP20110685T1/hr unknown
- 2011-10-19 CY CY20111100993T patent/CY1112677T1/el unknown
-
2012
- 2012-05-08 IL IL219641A patent/IL219641A/en active IP Right Grant
- 2012-06-21 JP JP2012139558A patent/JP5600337B2/ja active Active
- 2012-06-21 JP JP2012139824A patent/JP5615323B2/ja active Active
- 2012-06-21 JP JP2012139738A patent/JP5749689B2/ja active Active
-
2013
- 2013-07-23 CL CL2013002106A patent/CL2013002106A1/es unknown
-
2014
- 2014-05-14 JP JP2014100598A patent/JP5849125B2/ja active Active
- 2014-08-14 US US14/459,312 patent/US20150190521A1/en not_active Abandoned
- 2014-11-14 PH PH12014502544A patent/PH12014502544A1/en unknown
-
2015
- 2015-06-03 US US14/729,408 patent/US9884113B2/en active Active
- 2015-06-19 CY CY20151100528T patent/CY1116407T1/el unknown
-
2016
- 2016-01-05 US US14/987,770 patent/US10279033B2/en active Active
- 2016-12-08 HR HRP20161681TT patent/HRP20161681T1/hr unknown
- 2016-12-08 HR HRP20161682TT patent/HRP20161682T1/hr unknown
- 2016-12-16 CY CY20161101312T patent/CY1118345T1/el unknown
-
2017
- 2017-01-18 CY CY20171100077T patent/CY1118535T1/el unknown
-
2018
- 2018-01-12 US US15/869,742 patent/US11400147B2/en active Active
-
2019
- 2019-01-04 HR HRP20190037TT patent/HRP20190037T1/hr unknown
- 2019-01-21 CY CY20191100081T patent/CY1121376T1/el unknown
- 2019-02-21 US US16/281,567 patent/US10646564B2/en active Active
-
2022
- 2022-06-30 US US17/854,377 patent/US20220354941A1/en active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003051392A2 (en) * | 2001-12-18 | 2003-06-26 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Streptococcus pneumoniae vaccine |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
DAGAN R. ET AL. Tolerability and immunogenicity of an eleven valent mixed carrier Streptococcus pneumoniae capsular polysaccharide-diphtheria toxoid or tetanus protein conjugate vaccine in Finnish and Israeli infants. J.Pediatr Infect Dis J. 2004, Vol. 23, No. 2, side 91-98., Dated: 01.01.0001 * |
SIGURDARDOTTIR S. ET AL. Immune response to octavalent diphtheria- and tetanus-conjugated pneumococcal vaccines is serotype- and carrier-specific: the choice for a mixed carrier vaccine. Pediatr Infect Dis J. 2002, Vol. 21, No. 6, side 548-554., Dated: 01.01.0001 * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US10646564B2 (en) | Vaccine | |
JP5848790B2 (ja) | 肺炎連鎖球菌莢膜多糖コンジュゲートを含むワクチン | |
MX2008008139A (en) | Pneumococcal polysaccharide conjugate vaccine |