JP4472866B2 - ナイセリア抗原 - Google Patents

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    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides

Description

本発明はNeisseria細菌由来の抗原に関する。
【0001】
(背景技術)
Neisseria meningitidisおよびNeisseria gonorrhoeaeは、ヒトにおいて病原性である非運動性のグラム陰性双球菌である。N.meningitidisは、咽頭にコロニー形成をし、髄膜炎(および、時折、髄膜炎のない敗血症)を引き起こす;N.gonorrhoeaeは、生殖管にコロニー形成しそして淋病を引き起こす。身体の異なる領域にコロニーを形成しそして全く異なる疾患を引き起こすが、この2つの病原は密接に関係しており、髄膜炎菌が淋病菌と明らかに異なる1つの特徴は、全ての病原性髄膜炎菌に存在する多糖類性被膜の存在である。
【0002】
N.gonorrhoeaeは、米国のみで1983年〜1990年の期間中に1年間あたりおおよそ800,000件も引き起こした(MeitznerおよびCohen,「Vaccines Against Gonococcal Infection」,New Generation Vaccines,第2版,Levine,Woodrow,KaperおよびCobon編,Marcel Dekker,New York,1997,817−842頁)。この疾患は、かなりの罹患率を生じるが死亡率は制限される。N.gonorrhoeaeに対するワクチン接種が、高く所望されたが、繰り返した試みは失敗している。このワクチンに対する主な候補抗原は、ピリ、ポーリンのような表面露出タンパク質、混濁付随タンパク質(Opas)および他の表面露出タンパク質(Lip,Laz,IgA1プロテアーゼおよびトランスフェリン結合タンパク質)である。リポオリゴ糖(LOS)もまた、ワクチンとして示唆されている(MeitznerおよびCohen,前出)。
【0003】
N.meningitidisは、風土病および伝染病を引き起こす。米国において、発病率は1年間に100,000人中0.6〜1人の割合であり、そして大発生によりずっと大きくなり得る(Liebermanら(1996)Safely and Immunogenicity of a Serogroups A/C Neisseria meningitidis Oligosaccharide−Protein Conjugate Vaccine in Young Children.JAMA 275(19):1499−1503;Schuchatら(1997)Bacterial Meningitis in the United States in 1995,N Engl J Med377(14):970−976)。発展途上国では、風土病の割合は、よりずっと大きくそして伝染病発生率は1年間あたり100,000人あたり500件に達し得る。死亡率は極めて高く、米国では10〜20%、そして発展途上国においてはよりずっと高い。Haemophilus influenzaeに対する共役ワクチンの導入の結果、N.meningitidisは、米国において全ての年齢における細菌性髄膜炎の主な原因である(Schuchat(1997)前出)。
【0004】
生物の被膜多糖類に基づいて、N.meningitidisの12血清群が同定されている。A群はサハラアフリカ周縁での伝染病において最も頻繁に関与している病原体である。血清型B群および血清型C群は、米国および大部分の先進国における症例の大部分の原因である。血清型W135およびYは、米国および先進国における症例の残りの原因である。現在使用される髄膜炎ワクチンは、血清型A、C、Y、およびW135で構成される4価の多糖類ワクチンである。これは、青年および成人には効果があるが、弱い免疫応答および短い保護持続期間を誘導し、そして胎児には使用され得ない(例えば、Morbidity and Mortality weekly report,Vol.46,No.PR−5(1997))。これは、多糖類が、繰り返し免疫処置により増強され得ない弱い免疫応答を誘導するT細胞独立性抗原であるからである。H.influenzaに対するワクチン接種の成功に続き、血清型Aおよび血清型Cに対する共役ワクチンが開発されており、そして臨床試験の最終段階である(Zollinger WD「New and Improved Vaccines Against Meningococcal Disease」New Generation Vaccines,上記,469−488頁;Liebermanら(1996)上記;Costantinoら(1992)Development and phease I clinical testing of a conjugate vaccine against meningococus AおよびC.Vaccine 10:691−698)。
【0005】
しかし、髄膜炎菌Bは問題を残している。この血清型は現在、米国、欧州、および南アメリカにおける全髄膜炎のおおよそ50%の原因である。この多糖類アプローチは使用され得ない。なぜならばmenB被膜多糖類は、哺乳動物組織にもまた存在するα(2−8)−連結N−アセチルノイラミン酸のポリマーであるからである。これは抗原に対する寛容性を生ずる;実際、免疫応答が惹起された場合、それは抗−自己であり、それ故、所望されない。自己免疫の誘導を回避しそして保護的免疫応答を誘導するために、この被膜性多糖類は、例えば、N−アセチル基をN−プロピオニル基と置換するように化学的に改変されるが、特異的抗原性は不変のままである(RomeroおよびOutschoorn(1994)Current Status of Meningococcal group B vaccine candidates:capsular or non−capsular? Clin Microbiol Rev 7(4):559−575)。
【0006】
menBワクチンに対する代替のアプローチは、外膜タンパク質(OMP)の複合体混合物(OMPのみを含むかまたはポーリンに富むOMPのいずれかを含む)を使用するか、または細菌活性をブロックする抗体を誘導すると考えられるクラス4OMPを欠失した。このアプローチは、十分に特徴付けられていないワクチンを産生する。それらワクチンは、相同な菌株に対して保護し得えるが、外膜タンパク質の多くの抗原性改変体が多く存在する場合、全体として効果がない。抗原変異性を克服するために、9つまでの異なるポリンを含む多価ワクチンが構築されている(例えば、Poolman JT(1992)Development of a meningococcal vaccine.Infect.Agents Dis.4:13−28)。外膜ワクチンで使用されるさらなるタンパク質は、opaおよびopcタンパク質であるが、これらのアプローチは抗原変異性を克服し得ない(例えば、Ala’AldeenおよびBorriello(1996)The meningococcal tranferrin−binding proteins 1 and 2 are both surface exposed and generate bactericidal antibodies capable of killing homologous and heterologous strains.Vaccine 14(1):49−53)。
【0007】
特定の量の配列データは、髄膜炎菌および淋病菌の遺伝子およびタンパク質(例えば、EP−A−0467714,WO96/29412)について利用可能であるが、これは決して完全ではない。さらなる配列の供給は、免疫系に対する標的と推測され、そして抗原的に変異し得ることのない分泌タンパク質または表面露出タンパク質を同定するための機会を提供し得た。例えば、同定されたタンパク質のいくつかは、髄膜炎菌Bに対して効果のあるワクチンの成分であり、いくつかは全ての髄膜炎菌血清型に対するワクチンの成分であり、そして他は全ての病原性Neisseriaeに対するワクチンの成分であり得た。
【0008】
(本発明)
本発明は、本実施例で開示されたナイセリアアミノ酸配列を含むタンパク質を提供する。これらの配列はN.meningitidisまたはN.gonorrhoeaeに関連する。
【0009】
これはまた、本実施例で開示されるナイセリアアミノ酸配列と相同な(すなわち、配列同一性を有する)配列を含むタンパク質を提供する。この特定の配列に依存して、同一性の程度は、好ましくは50%よりも大きい(例えば、65%、80%、90%、またはこれ以上)。これらの相同なタンパク質は、本実施例で開示される配列の変異体および対立遺伝子の改変体を含む。代表的には、2つのタンパク質の間の50%の同一性またはそれ以上の同一性は、機能的に等価であることの表示であると考えられる。タンパク質間の同一性は、好ましくはパラメーターgap open penalty=12およびgap extention penalty=1を有するaffine変換ギャップ検索を使用して,MPSRCHプログラム(Oxford Molecular)において実行されるようなSmith−Waterman相同性検索アルゴリズムによって決定される。
【0010】
本発明はさらに、本実施例で開示されるナイセリアアミノ酸配列のフラグメントを含むタンパク質を提供する。このフラグメントは、その配列由来の少なくともn個の連続したアミノ酸を含み、そしてその特定の配列に依存して、nは7またはそれ以上(例えば8、10、12、14、16、18、20またはそれ以上)である。好ましくはこのフラグメントは、その配列に由来するエピトープを含む。
【0011】
本発明のタンパク質は、もちろん、種々の手段(例えば、組換えの発現、細胞培養物からの精製、化学合成など)によっておよび種々の型で(例えば、天然型、融合型など)調製され得る。これらは、好ましくは実質的に純粋または単離された型で調製される(すなわち、他のナイセリアタンパク質または宿主細胞タンパク質を実質的に含まない)。
【0012】
さらなる局面に従って、本発明は、これらのタンパク質に結合する抗体を提供する。これらは、ポリクローナルまたはモノクローナルであり、そして任意の適切な手段により産生され得る。
【0013】
さらなる局面に従って、本発明は、本実施例で開示されるナイセリアヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。さらに、本発明は、本実施例で開示されるナイセリアヌクレオチド配列と相同な(すなわち、配列同一性を有する)配列を含む核酸を提供する。
【0014】
さらに、本発明は、本実施例で開示されるナイセリア核酸に、好ましくは「高ストリンジェンシー」な条件下で(例えば、0.1×SSC、0.5%SDS溶液中65℃)ハイブリダイズし得る核酸を提供する。
【0015】
これらの配列のフラグメントを含む核酸もまた、提供される。これらは、ナイセリア配列由来の少なくともn個の連続するヌクレオチドを含有すべきであり、そして特定の配列に依存して、nは10またはそれ以上(例えば、12、14、15、18、20、25、30、35、40またはそれ以上)である。
【0016】
さらなる局面に従って、本発明は、本発明のタンパク質およびタンパク質フラグメントをコードする核酸を提供する。
【0017】
本発明が上記に記載される配列と相補的な配列を含む核酸を提供することもまた、認識されるべきである(例えば、アンチセンス目的またはプローブの目的において)。
【0018】
本発明に従う核酸は、もちろん、多くの様式(例えば、化学合成により、ゲノムライブラリーまたはcDNAライブラリーから、生物体自体から)で調製され得、そして種々の型(例えば、一本鎖、二本鎖、ベクター、プローブなど)をとり得る。
【0019】
さらに、用語「核酸」は、DNAおよびRNA、そしてまた改変された骨格を含むDNAおよびRNAのようなそれらの類似物、そしてまたペプチド核酸(PNA)などを含む。
【0020】
さらなる局面に従って、本発明は、本発明のヌクレオチド配列を含むベクター(例えば、発現ベクター)およびそのようなベクターで形質転換された宿主細胞を提供する。
【0021】
さらなる局面に従って、本発明は、本発明に従うタンパク質、抗体および/または核酸を含む組成物を提供する、これらの組成物は、例えばワクチンとして、または診断用試薬として、または免疫原性組成物として適切であり得る。
【0022】
本発明はまた、医薬品として(例えばワクチンとして)または治療用試薬として使用するための、本発明に従う核酸、タンパク質、または抗体を提供する。また、以下の製造における、本発明に従う核酸、タンパク質、または抗体の使用を提供する:(i)ナイセリア細菌に起因する感染の処置または予防のための医薬品;(ii)ナイセリア細菌またはナイセリア細菌に対して惹起された抗体の存在を検出するための診断用試薬;および/または(iii)ナイセリア細菌に対する抗体を惹起し得る試薬。上記のナイセリア細菌は任意の種または菌株であり得る(例えば、N.gonorrhoeae、またはN.meningitidisの任意の菌株(例えば、菌株A、菌株Bまたは菌株C))。
【0023】
本発明はまた、治療的有効量の、本発明に従う核酸、タンパク質、および/または抗体を患者に投与する工程を含む、患者の処置の方法を提供する。
【0024】
さらなる局面に従って、本発明は、種々のプロセスを提供する。
【0025】
本発明のタンパク質を産生するためのプロセスであって、タンパク質の発現を誘導する条件下において、本発明に従う宿主細胞を培養する工程を包含する、プロセスが提供される。
【0026】
本発明のタンパク質または核酸を産生するためのプロセスであって、ここでそのタンパク質または核酸は、化学的手段を使用して、一部または全体が合成されるプロセスが提供される。
【0027】
本発明のポリヌクレオチドを検出するためのプロセスであって、(a)本発明に従う核プローブを、二重鎖を形成させるハイブリダイズの条件下で生物学的サンプルと接触させる工程;および(b)上記の二重鎖を検出する工程を包含する、プロセスが提供される。
【0028】
本発明のタンパク質を検出するためのプロセスであって、(a)本発明に従う抗体を、抗体−抗原複合体の形成に適した条件下で生物学的サンプルと接触させる工程;および(b)上記の複合体を検出する工程を包含する、プロセスが提供される。
【0029】
本発明を実行するために用いられ得る標準的な技術および手順(例えば、ワクチン接種目的または診断目的のために、開示された配列を利用するための)の要旨は以下の通りである。この要旨は、本発明に対する限定ではなく、むしろ使用され得るが必要とされるわけではない実施例を与えるものである。
【0030】
(一般)
本発明の実施は、他に示されなければ、分子生物学、微生物学、組換えDNA、および免疫学の慣習的な技術を使用し、これらは当該分野の技術の範囲内である。このような技術は以下の文献で十分説明されている(例えば、Sambrook Molecular Cloning;A Laboratory Manual 第2版(1989);DNA Cloning,Volumes I and ii(D.N Glover編 1985);Oligonucleotide Synthesis(M.J.Gait編 1984);Nucleic Acid Hybridization(B.D.HamesおよびS.J.Higgins編 1984);Transcription and Translation(B.D.HamesおよびS.J.Higgins編 1984);Animal Cell Culture(R.I.Freshney編 1986);Immobilized Cells and Enzymes(IRL Press,1986);B.Perbal,A Practial Guide to Molecular Cloning(1984);the Methods in Enzymology series(Academic Press,Inc.),特に154および155巻;Gene Transfer Vector for Mammalian Cells(J.H.MillerおよびM.P.Calos編1987,Cold Spring Harbor Laboratory);MayerおよびWalker,編(1987),Immunochemical Methods in Cell and Molecular Biology(Academic Press,London);Scopes,(1987)Protein Purification:Principles and Practice,第2版(Springer−Verlag,N.Y.)、およびHandbook of Experimental Immunology,Volumes I−IV(D.M.WeirおよびC.C.Blackwell編 1986)。
【0031】
ヌクレオチドおよびアミノ酸についての標準的な省略が、本明細書において使用される。
【0032】
本明細書中で引用される全ての刊行物、特許、および特許出願は参考としてその全体が援用される。特に、英国特許出願9723516.2、9724190.5、9724386.9、9725158.1、9726147.3、9800759.4、および9819016.8の内容が本明細書中に援用される。
【0033】
(定義)
Xを含む組成物は、組成物中の全X+Yの少なくとも85重量%がXであるとき、Yを「実質的に含まない」。好ましくは、Xは、組成物中の全X+Yの少なくとも90重量%を、さらに好ましくは少なくとも約95重量%または99重量%さえを含む。
【0034】
用語「含む(comprising)」は「含む(including)」および「からなる」を意味する。例えば、Xを「含む」組成物は、もっぱらXからなり得るか、またはX+YのようなXに付加したものも含み得る。
【0035】
用語「異種」とは、天然では共に見られない2つの生物学的成分をいう。この成分は、宿主細胞、遺伝子、調節領域(例えば、プロモーター)であり得る。異種成分は天然では共に見られないが、遺伝子に対して異種のプロモーターがその遺伝子に作動可能に連結されるときのように、それらは共に機能し得る。別の例は、ナイセリア配列がマウス宿主細胞に対して異種であることである。さらなる例は、天然においてみられない配置で単一タンパク質に組み立てられる同じタンパク質または異なるタンパク質由来の2つのエピトープである。
【0036】
「複製起点」とは、発現ベクターのような、ポリヌクレオチドの複製を開始または調節するポリヌクレオチド配列である。複製起点は、細胞内でのポリヌクレオチド複製の自律性ユニットとして振る舞い、それ自体の制御下で複製し得る。複製起点は、ベクターが特定の宿主細胞において複製するために必要であり得る。特定の複製起点を有せば、発現ベクターは、細胞内の適切なタンパク質の存在下で高いコピー数で再生され得る。起点の例は、酵母において有効な自律性複製配列;およびCOS−7細胞で有効であるウイルスT抗原である。
【0037】
「変異体」配列は、天然の配列または開示された配列とは異なるが配列同一性を有するDNA配列、RNA配列またはアミノ酸配列として規定される。特定の配列に依存して、天然の配列または開示された配列と変異体配列との間の配列同一性の程度は、好ましくは50%より大きい(例えば、上記記載のSmith−Watermanアルゴリズムを使用して算出して60%、70%、80%、90%、95%、99%またはそれ以上)。本明細書中で使用されるように、本明細書で核酸分子配列が提供される核酸分子、または領域の「対立遺伝子改変体」は、別のもしくは2番目の単離体のゲノム中の同じ遺伝子座で本質的に生ずる領域および、例えば、変異または組換えにより生ずる天然変化に起因して、類似するが、しかし同一でない核酸配列を有する核酸分子、または領域である。コード領域の対立遺伝子改変体は、代表的には、比較される遺伝子によってコードされるタンパク質の活性と類似した活性を有するタンパク質をコードする。対立遺伝子改変体はまた、遺伝子の5’または3’非翻訳領域(例えば、調節制御領域)での変化を含み得る(例えば、米国特許第5,753,235号)。
【0038】
(発現系)
ナイセリアヌクレオチド配列は、種々の異なる発現系;例えば、哺乳動物細胞、バキュロウイルス、植物、細菌、および酵母と共に使用される発現系において発現され得る。
【0039】
(i.哺乳動物系)
哺乳動物発現系は当該分野において公知である。哺乳動物プロモーターは、哺乳動物RNAポリメラーゼを結合し、コード配列(例えば、構造遺伝子)のmRNAへの下流(3’)転写を開始し得る任意のDNA配列である。プロモーターは、転写開始領域(これはコード配列の5’末端の近位に通常位置する)およびTATAボックス(転写開始部位の25〜30塩基対(bp)上流に通常位置する)を有する。TATAボックスは、その正しい部位においてRNAポリメラーゼIIにRNA合成を開始させるよう指示すると考えられている。哺乳動物プロモーターはまた、TATAボックスの100〜200bp上流以内に通常位置する上流プロモーターエレメントを含む。上流プロモーターエレメントは、転写が開始され、そしていずれかの方向において作用し得る速度を決定する(Sambrookら(1989)「Expression of Cloned Genes in Mammalian Cells」 Molecular Cloning:A Laboratory Manual、第2版)
哺乳動物ウイルス遺伝子は、しばしば高度に発現され、そして広い宿主範囲を有する;従って、哺乳動物ウイルス遺伝子をコードする配列は、特に有用なプロモーター配列を提供する。例は、SV40初期プロモーター、マウス乳癌ウイルスLTRプロモーター、アデノウイルス主要後期プロモーター(Ad MLP)、および単純疱疹ウイルスプロモーターを含む。さらに、マウスのメタロチオネイン遺伝子のような非ウイルス性遺伝子に由来する配列もまた、有用なプロモーター配列を提供する。発現は、構成性であるかまたは調節される(誘導可能)かいずれかであり得る、プロモーターに依存して、ホルモン応答性細胞においてグルココルチコイドで誘導され得る。
【0040】
上記に記載されるプロモーターエレメントと組み合わされるエンハンサーエレメント(エンハンサー)の存在は、通常発現レベルを増大させる。エンハンサーは、相同性プロモーターまたは異種プロモーターに連結されるとき、転写を100倍まで刺激し得る調節DNA配列であり、合成は、通常のRNA開始部位で開始する。エンハンサーはまた、それらが、通常方向もしくはflipped方向のいずれかで転写開始部位より上流または下流に、もしくはプロモーターから1000ヌクレオチドを超える距離で位置するとき、活性である(Maniatisら(1987) Science 236:1237;Albertsら(1989)Molecular Biology of the Cell,第2版)。ウイルス由来のエンハンサーエレメントは、それらは通常、より広い宿主範囲を有するため、特に有用であり得る。例は、SV40初期遺伝子エンハンサー(Dijkemaら(1985)EMBO J.4:761)およびラウス肉腫ウイルスの長末端反復(LTR)に由来するエンハンサー/プロモーター(Gormanら(1982b)Proc.Natl.Acad.Sci.79:6777)およびヒトサイトメガウイルスに由来するエンハンサー/プロモーター(Boshartら(1985)Cell 41:521)を包含する。さらに、いくつかのエンハンサーは調節可能であり、そしてホルモンまたは金属イオンのような誘導因子の存在下のみで活性になる(Sassone−CorsiおよびBorelli(1986)Trends Genet.2:215;Maniatisら(1987)Science 236:1237)。
【0041】
DNA分子は、哺乳動物細胞において細胞内で発現され得る。プロモーター配列は、組換えタンパク質のN末端における最初のアミノ酸が常にATG開始コドンによりコードされるメチオニンである場合、DNA分子と直接連結され得る。所望される場合、N末端は、臭化シアンとのインビトロでのインキュベーションによりタンパク質から切断され得る。
【0042】
あるいは、外来タンパク質もまた、哺乳動物細胞において外来タンパク質の分泌を提供するリーダー配列フラグメントで構成される融合タンパク質をコードするキメラDNA分子を作製することにより、細胞から成長培地へ分泌され得る。好ましくは、インビボまたはインビトロのいずれかにおいて切断され得る、リーダーフラグメントおよび外来遺伝子との間にコードされるプロセシング部位が存在する。リーダー配列フラグメントは通常、細胞からのタンパク質の分泌を指示する疎水性アミノ酸で構成される単一のペプチドをコードする。アデノウイルス3分割リーダーは、哺乳動物細胞における外来タンパク質の分泌を提供するリーダー配列の例である。
【0043】
通常、哺乳類細胞によって認識される転写終結配列およびポリアデニル化配列は、翻訳終止コドンの3’側に存在する調節領域であり、従って、プロモーターエレメントと共に、コード配列に隣接する。成熟mRNAの3’末端は、部位特異的転写後切断およびポリアデニル化により形成される(Birnstielら.(1985)Cell 41:349;ProudfootおよびWhitelaw(1988)「Termination and 3’end processing of eukaryotic RNA.」Transcription and splicing(B.D.HamesおよびD.M.Glover編);Proudfoot(1989)Trends Biochem.Sci.14:105)。これらの配列は、mRNAの転写を方向づけ、そのmRNAは、そのDNAにコードされるポリペプチドに翻訳され得る。転写終結/ポリアデニル化シグナルの例としては、SV40由来のシグナルが挙げられる(Sambrookら(1989)「Expression of cloned genes in cultured mammalian cells.」Molecular Cloning:A Laboratory Manual)。
【0044】
通常、プロモーター、ポリアデニル化シグナル、および転写終結配列を含む上記の構成要素は、発現構築物内に共に導入される。エンハンサー、機能的なスプライス供与部位および受容部位を有するイントロン、ならびにリーダー配列もまた、所望される場合、発現構築物内に含まれ得る。発現構築物はしばしば、哺乳類細胞または細菌のような宿主内で安定的に維持し得る染色体外エレメント(例えば、プラスミド)のような、レプリコン内で維持される。哺乳類の複製系としては、複製にトランス作用性の因子を必要とする、動物ウイルス由来の複製系が挙げられる。例えば、SV40(Gluzmam(1981)Cell 23:175)、あるいはポリオーマウイルスのようなパポバウイルスの複製系を含むプラスミドは、適切なウイルスのT抗原の存在下で極めて高いコピー数で複製する。哺乳類レプリコンの別の例としては、ウシパピローマウイルスおよびエプスタイン−バーウイルス由来のレプリコンが挙げられる。さらに、このレプリコンは、二つの複製系を有し得、従って、例えば、発現用の哺乳類細胞内で、ならびにクローニングおよび増幅用の原核生物の宿主内で、そのレプリコンは維持することが可能である。このような哺乳類−細菌シャトルベクターの例としては、pMT2(Kaufmanら.(1989)Mol.Cell.Biol.9:946)およびpHEBO(Shimizuら.(1986)Mol.Cell.Biol.6:1074)が挙げられる。
【0045】
使用される形質転換の手順は、形質転換される宿主に依存する。異種のポリヌクレオチドの哺乳類細胞への導入方法は、当該分野で公知であり、その方法としては、デキストラン媒介トランスフェクション、リン酸カルシウム沈殿、ポリブレン媒介トランスフェクション、プロトプラスト融合、エレクトロポレーション、リポソーム内でのポリヌクレオチドの封入、およびDNAの核内への直接微量注入が挙げられる。
【0046】
発現用宿主として利用可能な哺乳類細胞株は、当該分野で公知であり、そのような細胞株としては、チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞、HeLa細胞、乳仔ハムスター腎臓(BHK)細胞、サル腎臓細胞(COS)、ヒト肝細胞癌細胞(例えば、Hep G2)および多くの他の細胞株を含むが、これらに限定しない、American Type Culture Collection(ATCC)から入手可能な多くの不死化細胞株が含まれる。
【0047】
(ii バキュロウイルス系)
タンパク質をコードしているポリヌクレオチドはまた、適切な昆虫の発現ベクター内に挿入され得、そしてそのベクター内で、制御エレメントに作動可能に連結される。ベクターの構築には、当該分野で公知の技術を使用する。一般に、その発現系の構成要素として、以下のものが挙げられる:バキュロウイルスゲノムのフラグメント、および発現させる異種遺伝子の挿入用の簡便な制限部位の両方を有する転移ベクター(通常は細菌ベクター);転移ベクター内のバキュロウイルスに特異的なフラグメントに相同性のある配列を有する野生型バキュロウイルス(これは、バキュロウイルスゲノム内への異種遺伝子の相同組換えを可能にする);ならびに適切な昆虫宿主細胞および生育培地。
【0048】
転移ベクターにタンパク質をコードするDNA配列を挿入した後、そのベクターおよび野生型ウイルスゲノムを、昆虫宿主細胞にトランスフェクトし、そこでベクターとウイルスゲノムを組換え可能にする。パッケージングされた組換えウイルスは発現され、そして組換えプラークが同定されそして精製される。バキュロウイルス/昆虫細胞発現系の材料および方法は、特に、Invitrogen、San Diego CAからキット形態(「MaxBac」キット)で市販される。これらの技術は、一般に当業者に公知であり、そしてSummersならびにSmith,Texas Agricultural Experiment Station Bulletin No.1555(1987)(以下、「Summers and Smith」)に十分に記載されている。
【0049】
タンパク質をコードするDNA配列をバキュロウイルスゲノムに挿入するのに先立って、プロモーター配列、リーダー配列(所望される場合は)、目的のコード配列、および転写終結配列を含む上記の構成要素を、通常、中間転移構築物(転移ベクター)に構築する。この構築物は、単一の遺伝子および作動可能に連結された調節エレメント;操作可能に連結された調節エレメントのセットを各々が所有する複数の遺伝子;あるいは同じ調節エレメントのセットにより調節される複数の遺伝子を含み得る。中間転移構築物は、しばしば、細菌のような宿主内で安定的に維持し得る染色体外エレメント(例えば、プラスミド)のような、レプリコン内で維持される。レプリコンは、複製系を有しており、従って、それはクローニングおよび増幅用の適切な宿主内で維持され得る。
【0050】
現在、外来遺伝子のAcNPVへの導入のために最も一般に使用される転移ベクターは、pAc373である。当業者に公知の多くの他のベクターもまた設計され、これらのものとして、例えば、pVL985(ポリへドリンの開始コドンをATGからATTに変化させ、そしてそのATTから32塩基対下流に、BamHIクローニング部位を導入する;LuckowおよびSummers,Virology(1989)17:31)が挙げられる。
【0051】
そのプラスミドも通常、ポリへドリンポリアデニル化シグナル(Millerら、(1988)Ann.Rev.Microbiol.,42:177)、および原核生物のアンピシリン耐性(amp)遺伝子、および大腸菌においての選抜ならびに増殖のための複製起点を有する。
【0052】
バキュロウイルス転移ベクターは通常、バキュロウイルスプロモーターを有する。バキュロウイルスプロモーターは、バキュロウイルスRNAポリメラーゼに結合し、そしてコード配列(例えば、構造遺伝子)のmRNAへの下流(5’から3’)方向の転写を開始し得る任意のDNA配列である。プロモーターは、通常、コード配列の5’末端に近接して存在する転写開始領域を有している。この転写開始領域は通常、RNAポリメラーゼ結合部位および転写開始点を含む。バキュロウイルス転移ベクターは、またエンハンサーと呼ばれる第二のドメインを有し得、存在する場合は、通常、構造遺伝子に対し遠位にある。発現は調節され得るか、あるいは構成的であり得る。
【0053】
ウイルスの感染周期の後期で大量に転写される構造遺伝子は、特に有用なプロモーター配列を提供する。例としては、ウイルス多面体タンパク質をコードする遺伝子(Friesenら、(1986)「The Regulation of Baculovirus Gene Expression,」:The Molecular Biology of Baculoviruses(Walter Doerfler編);EPO公開番号127839および155476;ならびにp10タンパク質をコードする遺伝子(Vlakら,(1988),J.Gen.Virol.69:765)由来の配列が挙げられる。
【0054】
適切なシグナル配列をコードするDNAは、分泌昆虫タンパク質、あるいはバキュロウイルスポリへドリン遺伝子(Carbonellら,(1998)Gene,73:409)のような、分泌バキュロウイルスタンパク質の遺伝子から由来し得る。あるいは、哺乳類細胞の翻訳後修飾(シグナルペプチド切断、タンパク質分解性切断、およびリン酸化のような)のシグナルは、昆虫細胞に認識されると思われ、そして分泌および核蓄積に必要なシグナルはまた、無脊椎動物細胞および脊椎動物細胞間で保存されると思われるために、ヒトインターフェロンα(Maedaら,(1985),Nature 315:592);ヒトガストリン放出ペプチド(Lebacq−Verheydenら,(1988),Molec.Cell.Biol.8:3129);ヒトIL−2(Smithら,(1985)Proc.Nat’l Acad.Sci.USA、82:8404);マウスIL−3(Miyajimaら,(1987)Gene 58:273);およびヒトグルコセレブロシダーゼ(Martinら,(1988)DNA、7:99)をコードする遺伝子由来のような、非昆虫起源のリーダーも、昆虫での分泌を与えるために使用され得る。
【0055】
組換えポリペプチドあるいは組換えポリタンパク質は、細胞内に発現され得、あるいは適切な調節配列と共に発現される場合、分泌され得る。非融合の外来タンパク質の優れた細胞内発現には通常、ATG開始シグナルに先行する適切な翻訳開始シグナルを含む短いリーダー配列を理想的には有する異種遺伝子が必要である。所望であれば、N末端のメチオニンは、臭化シアンとのインビトロインキュベーションにより、成熟タンパク質から切断され得る。
【0056】
あるいは、自然に分泌されない組換えポリタンパク質あるいは組換えタンパク質は、昆虫において外来タンパク質の分泌を与えるリーダー配列フラグメントを含む、融合タンパク質をコードするキメラDNA分子を作成することにより、昆虫細胞から分泌され得る。リーダー配列フラグメントは通常、タンパク質の小胞体内への輸送を指示する疎水性アミノ酸からなるシグナルペプチドをコードしている。
【0057】
タンパク質の前駆体である発現産物をコードするDNA配列および/または遺伝子の挿入後、昆虫細胞宿主に、転移ベクターの異種DNAおよび野生型バキュロウイルスのゲノムDNAを同時形質転換(通常は、同時トランスフェクションによって)する。構築物のプロモーターおよび転写終結配列は、通常バキュロウイルスゲノムの2〜5kbの区域を含む。バキュロウイルスウイルスの望ましい部位に異種DNAを導入する方法は、当該分野で公知である(SummersおよびSmith、上記;Juら(1987);Smithら,Mol.Cell.Biol.(1983)3:2156;ならびにLuckowおよびSummers(1989)を参照のこと)。例えば、その挿入物は、相同二重交差組換え(homologous double crossover reconvination)により、ポリへドリン遺伝子のような遺伝子内にあり得る;挿入物はまた、所望のバキュロウイルス遺伝子に設計された制限酵素部位内にあり得る。Millerら、(1989)、Bioessays 4;91。発現ベクター内のポリへドリン遺伝子の代わりにクローン化される場合のDNA配列は、ポリへドリン特異的配列により5’および3’の両側で隣接され、そしてポリへドリンプロモーターの下流に位置される。
【0058】
新規に形成されたバキュロウイルス発現ベクターは続いて、感染性の組換えバキュロウイルス内にパッケージされる。相同組換えは、低い頻度で起こる(約1%〜約5%の間);それゆえ、同時トランスフェクション後に産生されたウイルスの大半は、依然野生型ウイルスである。従って、方法には、組換えウイルスの同定が必要となる。その発現系の利点は、組換えウイルスを区別させ得る可視的スクリーニングである。天然のウイルスにより産生されるポリへドリンタンパク質は、ウイルス感染後の後期で、その感染された細胞の核内で非常に高いレベルで産生される。蓄積されたポリへドリンタンパク質は、閉塞体を形成し、またそれは包理された粒子を含む。これらの閉塞体は、最大15μmの大きさで、高度に屈折し、明るく輝く外見を与え、容易に光学顕微鏡下で可視化される。組換えウイルスに感染された細胞は、閉塞体を欠く。組換えウイルスと野生型ウイルスを区別するために、トランスフェクションの上清を、当業者に公知の技術により昆虫細胞の単層にプラーク形成させた。すなわち、プラークを、光学顕微鏡下で閉塞体の存在(野性型ウイルスを示す)または非存在(組換えウイルスを示す)によりスクリーニングする。「Current Protocols in Microbiology」2巻(Ausubelら編)16.8(増補10、1990);SummersおよびSmith、上記;Millerら(1989)。
【0059】
組換えバキュロウイルス発現ベクターは、いくらかの昆虫細胞への感染用に開発された。例えば、組換えバキュロウイルスは、特に以下に示すもののために開発された:Aedes aegypti、Autographa californica、Bombyx mori、Drosophila melanogaster、Spodoptera frugiperda、およびTrichoplusia ni(WO89/046699;Carbonellら,(1985)J.Virol.56:153;Wright(1986)Nature 321:718;Smithら,(1983)Mol.Cell.Biol.3:2156;およびFraserら,(1989)In Vitro Cell.Dev.Biol.25:225を一般に参照のこと)。
【0060】
細胞および細胞培養培地は、バキュロウイルス/発現系における異種ポリペプチドの直接発現および融合発現の両方のために市販される;細胞培養技術は、一般に当業者に公知である。例えば、上記SummersおよびSmithを参照のこと。
【0061】
改変した昆虫細胞をさらに、適切な栄養培地で増殖し、その改変した昆虫宿主内で存在するプラスミドの安定的維持を可能にする。発現産物の遺伝子が、誘導性の制御下にある場合、宿主は高密度で増殖され得、そして発現は誘導され得る。あるいは、発現が構成的である場合、その産物は培地中に連続的に発現され、そして栄養培地を連続的に循環し、目的産物を取り出し、そして枯渇した栄養を補給する必要がある。その産物は、クロマトグラフィー(例えば、HPLC、アフィニティークロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィーなど);電気泳動;密度勾配遠心;溶媒抽出などのような技術により精製し得る。適切には、その産物をさらに精製し、必要ならば、培地中に分泌された、または昆虫細胞の溶解から生じた任意の昆虫タンパク質を実質的に除去し、宿主細片(例えば、タンパク質、脂質および多糖類)を少なくとも実質的に含まない産物を供給する。
【0062】
タンパク質の発現を得るために、形質転換体に由来する組換え宿主細胞は、組換えタンパク質をコードする配列の発現を可能にする条件下でインキュベートされる。これらの条件は、選択された宿主細胞に依存して変動する。しかし、その条件は、当該分野で公知の条件に基づいて、当業者に容易に確かめられる。
【0063】
(iii 植物系)
当該分野で公知の多くの植物細胞培養および全植物遺伝子発現系が存在する。例示的な植物細胞遺伝子発現系としては、米国特許第5,693,506号;米国特許第5,659,122号;米国特許第5,608,143号のような特許に記載されるものが挙げられる。植物細胞培養における遺伝子発現の別の例は、Zenk,Phytochemistry 30:3861−3863(1991)に記載された。植物タンパク質のシグナルペプチドの記載は、上記の参考文献に加え、以下に示すものの中においても確認される;Vaulcombeら,Mol.Gen.Genet.209:33−40(1987);Chandlerら,Plant Molecular Biology 3:407−418(1984);Rogers,J.Biol.Chem.260:3731−3738(1985);Rothsteinら,Gene 55:353−356(1987);Whittierら,Nucleic Acids Research 15:2515−2535(1987);Wirselら,Molecular Microbiology 3:3−14(1989);Yuら,Gene 122:247−253(1992)。植物ホルモン(ジベレリン酸およびジベレリン酸により誘導される分泌酵素)による植物遺伝子発現の調節の記載は、R.L.JonesおよびJ.MacMillin,Gibberellins:Advanced Plant Physiology,Malcolm B.Wilkins編 1984 Pitman Publishing Limited,London,21−52頁の中に確認され得る。他の代謝調節性遺伝子が記載される参考文献は;Sheen,Plant Cell,2:1027−1038(1990);Maasら,EMBO J.9:3447−3452(1990);BenkelおよびHickey、Proc.Natl.Acad.Sci.84:1337−1339(1987)。
【0064】
代表的に、当該分野で公知の技術を使用して、所望のポリヌクレオチド配列は、植物内で操作するために設計された遺伝子調節エレメントを含む発現カセットの中に挿入される。その発現カセットは、植物宿主内での発現に適切な発現カセットの上流および下流にコンパニオン配列を有する望ましい発現ベクターの中に挿入される。そのコンパニオン配列は、プラスミドまたはウイルス起源のものであり、そしてそのベクターが、細菌のような本来のクローニング宿主から、所望の植物宿主へDNAを移動させるために必要とされる特徴をベクターに提供する。基本的な細菌/植物ベクター構築物は、好ましくは、広い宿主範囲の原核生物の複製起点;原核生物の選択マーカー;および、アグロバクテリウムの形質転換については、アグロバクテリウム媒介転位のためのT DNA配列を植物染色体に提供する。異種遺伝子が容易に検出に従順しない場合は、好ましくは、その構築物はまた、植物細胞が形質転換されたかどうかを決定するために適した選択マーカー遺伝子を有する。適切なマーカーの一般的な総説は、例えば、イネ科については、WilminkおよびDons,1993,Plant Mol.Biol.Reptr,11(2):165−185に見られる。
【0065】
植物ゲノムへの異種配列の組み込みを可能にするために適した配列もまた、推奨される。これらは、植物ゲノム内へ異種発現カセットのランダム挿入を可能にする相同組換え用のためのトランスポゾン配列など、およびTi配列を含み得る。適切な原核生物選択マーカーとしては、アンピシリンまたはテトラサイクリンのような抗生物質に対する耐性が挙げられる。別の機能をコードしている他のDNA配列はまた、そのベクターの中に存在し得、当該分野で公知である。
【0066】
本発明の核酸分子はまた、目的のタンパク質の発現用の発現カセットに含まれ得る。2つ以上も可能であるが、通常はただ一つの発現カセットである。組換え発現カセットは、異種タンパクのコード配列に加え、以下のエレメントを含む;プロモーター領域、植物5’非翻訳配列、構造遺伝子がそれを備えているかどうかに依存して、開始コドン、ならびに転写および翻訳終結配列。そのカセットの5’および3’末端の独特な制限酵素部位は、既存のベクター内への容易な挿入を可能にする。
【0067】
異種のコード配列は、本発明に関係する任意のタンパク質のための配列であり得る。目的のタンパクをコードする配列は、そのタンパク質の適切なプロセッシングおよび輸送を可能にするシグナルペプチドをコードし、そして通常、本発明の所望のタンパク質の膜への結合を生じ得る任意の配列を欠いている。翻訳開始領域は、大部分は、発芽中に発現および輸送される遺伝子のためのものであるから、輸送を与えるシグナルペプチドを使用することにより、それはまた、目的のタンパク質の輸送を提供し得る。この方法で、目的のタンパク質は、それらが発現される細胞から輸送され、そして効率的に回収され得る。代表的には、種子における分泌は、種子の胚乳内へ、アリューロン層あるいは胚盤上皮層を通過する。タンパク質がそれが産生された細胞から分泌される必要がない場合、このことは組換えタンパク質の分離および精製を容易にする。
【0068】
所望の遺伝子産物の過剰発現が、真核生物におけるものであるために、クローン化した遺伝子の任意の部分が、イントロンのように、宿主のスプライセオソーム(splicosome)機構より、プロセッシングされる配列を含むかどうかを決定することが望ましい。そのような場合、「イントロン」領域の部位特異的変異誘発は、仮性イントロンコードとして遺伝的情報の一部を欠失することを防ぐために実施され得る。ReedおよびManiatis、Cell 41:95−105(1985)。
【0069】
ベクターは、組換えDNAを機械的に転移するためにマイクロピペットを用いて植物細胞内に直接的に微量注入され得る(Crossway、Mol.Gen.Genet,202:179−185、1985)。遺伝子物質はまた、ポリエチレングリコールを用いて植物細胞内に転移され得る(Krensら、Nature,296、72−74、1982)。核酸部分の導入の別の方法は、小さいビーズまたは微粒子のいずれかのマトリックスの内部に、あるいは表面に核酸を有する小さな微粒子による高速バリスティック(ballistic)穿通法である(Kleinら,Nature,327,70−73,1987ならびにKnudsenおよびMuller,1991,Planta,185:330−336は、大麦胚乳の粒子の照射(bombardment)によりトランスジェニック大麦を作製することを示している)。さらに別の導入方法は、他の物体、いずれかのミニ細胞、細胞、リソソームあるいは他の易融な脂肪表面体とのプロトプラストの融合である(Fraleyら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA,79,1859−1863,1982)。
【0070】
ベクターはまた、エレクトロポレーションにより植物細胞内に導入され得る(Frommら、Proc.Nati.Acad.Sci.USA 82:5824,1985)。この技術において、植物プロトプラストは、遺伝子構築物を含むプラスミドの存在中でエレクトロポレートされる。高い電界の強さの電気衝撃により、生体膜を可逆的に通過できるようにし、プラスミドの導入を可能にする。エレクトロポレートされた植物プロトプラストは細胞壁を再形成し、分裂し、植物カルス形成する。
【0071】
プロトプラストが単離され得、そして培養されて完全な再生植物を与え得る全ての植物は、本発明により形質転換され得、転移した遺伝子を保持する完全な植物が再生される。実際に、全ての植物は、さとうきび、甜菜、綿、果実および他の樹木、マメ科植物および野菜の全ての主要な種を含むがそれらに限定されない培養細胞あるいは組織から再生され得る。いくつかの適応した植物としては、例えば、以下の属由来の種が挙げられる;Fragaria,Lotus,Medicago,Onobrychis,Trifolium,Trigonella,Vigna,Citrus,Linum,Geranium,Manihot,Daucus,Arabidopsis,Brassica,Raphanus,Sinapis,Atropa,Capsicum,Datura,Hyoscyamus,Lycopersion,Nicotiana,Solanum,Petunia,Digitalis,Majorana,Cichorium,Helianthus,Lactuca,Bromus,Asparagus,Antirrhinum,Hererocallis,Nemesia,Pelargonium,Panicum,Pennisetum,Ranunculus,Senecio,Salpiglossis,Cucumis,Browaalia,Glycine,Lolium,Zea,Triticum,Sorghum,およびDatura。
【0072】
再生のための手法は、植物の種によって変化するが、しかし一般に異種遺伝子のコピーを含む形質転換されたプロトプラストの懸濁液が最初に提供される。カルス組織は形成され、そしてシュートがカルスから誘導され、続いて発根される。あるいは、胚形成がプロトプラスト懸濁液から誘導され得る。これらの胚は、天然の胚として発芽し、植物を形成する。培養培地は、一般に種々のアミノ酸、ならびにオーキシンおよびサイトカイニンのようなホルモンを含有する。またグルタミン酸およびプロリンを培地に添加することは、特にコーンおよびアルファルファのような種にとって有用である。シュートおよび根は通常、同時に発生する。効果的な再生は培地、遺伝子型、および培養遍歴に依存する。これらの3つの変数が制御される場合は、再生は十分に再現性がありそして繰り返し可能である。
【0073】
いくつかの植物細胞培養系において、本発明の所望のタンパク質は排出され、あるいはこのタンパク質は植物全体から抽出され得る。本発明の所望のタンパク質は培地内に分泌される場合、これは回収され得る。あるいは、胚および胚のない不完全な種子または他の植物組織は、機械的に破壊され細胞間および組織間の任意の分泌されたタンパク質を放出し得る。その混合物は緩衝液に懸濁され、可溶タンパクを回収し得る。次いで、慣用的なタンパク質分離および精製方法は組換えタンパク質を精製するために使用される。時間、温度、pH、酸素、および容量のパラメーターは、異種タンパク質の適切な発現および回収のために慣用的な方法により調整される。
【0074】
(IV.細菌系)
細菌の発現技術は、当該分野で公知である。細菌のプロモーターは、細菌のRNAポリメラーゼに結合し得、そしてコード配列(例えば、構造遺伝子)の下流方向(3’方向)へのmRNAへの転写を開始し得る任意のDNA配列である。プロモーターは、通常、コード配列の5’末端に近接して存在する転写開始領域を有する。この転写開始領域は、通常、RNAポリメラーゼ結合部位および転写開始部位を含む。細菌のプロモーターはまた、オペレーターと呼ばれる第二のドメインを有し、RNA合成が始まる近接のRNAポリメラーゼ結合部位と重複している。オペレーターは、遺伝子リプレッサータンパク質が、オペレーターに結合し、そのため特定の遺伝子の転写を抑制し得るような、負の調節された(誘導性の)転写を可能にする。構成的発現は、オペレーターのような負の調節エレメントの非存在下で起こり得る。さらに、正の調節は、遺伝子アクチベータータンパク質結合配列により達成され得、その配列が存在する場合は通常、RNAポリメラーゼ結合配列の(5’)側に近接している。遺伝子アクチベータータンパク質の例としては、異化活性化タンパク質(CAP)があり、それはEscherichia coli(E.Coli)におけるlacオペロンの転写の開始を助ける(Raibaudら(1984)Annu.Rev.Genet.18:173)。調節される発現は、それゆえ正または負のいずれかであり、従って転写を増強するかまたは低下し得る。
【0075】
代謝経路の酵素をコードする配列は、特に有用なプロモーター配列を提供する。例としては、ガラクトース、ラクトース(lac)(Changら.(1997)Nature 198:1056)、およびマルトースのような糖代謝の酵素由来のプロモーター配列が挙げられる。さらなる例としては、トリプトファン(trp)(Goeddelら.(1980)Nuc.Acids Res.8:4057;Yelvertonら.(1981)Nucl.Acids Res.9:731;米国特許第4,738,921号;EP−A−0036776号およびEP−A−0121775)のような生合成酵素由来のプロモーター配列が挙げられる。g−ラクタマーゼ(g−laotamase)(bla)プロモーター系(Weissmann(1981)「The cloning of Interferon and other mistakes.」Interferon3(I.Gresser編))、バクテリオファージλPL(Shimatakeら.(1981)Nature 292:128)およびT5(米国特許第4,689,406号)プロモーター系もまた有用なプロモーター配列を提供する。
【0076】
さらに、天然に存在しない合成プロモーターもまた、細菌のプロモーターとして機能する。例えば、あるバクテリアあるいはバクテリオファージプロモーターの転写活性化配列は、別のバクテリアあるいはバクテリオファージプロモーターのオペロン配列と結合し得、合成ハイブリッドプロモーターを形成する。(米国特許第4,551,433号)。例えば、tacプロモーターは、lacリプレッサーにより調節されるtrpプロモーター配列およびlacオペロン配列の両方から構成される、ハイブリッドtrp−lacプロモーターである(Amannら.(1983)Gene 25:167;de Boerら.(1983)Proc.Natl.Acad.Sci.80:21)。
【0077】
さらに、ある細菌のプロモーターは、細菌のRNAポリメラーゼに結合し、そして転写を開始させる能力を有する非細菌起源の天然に存在するプロモーターを含み得る。非細菌起源の天然に存在するプロモーターはまた、原核生物内でいくらかの遺伝子の高いレベルでの発現を生じるために、適合性のあるRNAポリメラーゼと結合され得る。バクテリオファージT7 RNAポリメラーゼ/プロモーター系は、連結したプロモーター系の例である(Studierら.(1986)J.Mol.Biol.189:113;Taborら.(1985)Proc Natl.Acad.Sci.82:1074)。さらに、ハイブリッドプロモーターはまた、バクテリオファージプロモーターおよびE.coliオペレーター領域から構成され得る(EPO−A−0267851)。
【0078】
機能性のプロモーター配列に加え、効果的なリボソーム結合部位はまた、原核生物における外来遺伝子の発現に有用である。E.coliにおいて、リボソーム結合部位は、シャイン−ダルガノ(SD)配列と呼ばれ、そして開始コドン(ATG)および開始コドンの3〜11ヌクレオチド上流に位置する長さ3〜9ヌクレオチドの配列を含む(Shineら.(1975)Nature 254:34)。SD配列は、SD配列とE.coliの16SrRNAの3’側との間の塩基対形成によりmRNAのリボソームへの結合を促進すると考えられている(Steitzら.(1979)「Genetic Signals and nucleotide sequences in messenger RNA.」Biological Regulation and Development:Gene Expression(R.F.Goldbergerら編))。弱いリボソーム結合部位を有する真核遺伝子および原核遺伝子の発現のためには(Sambrookら.(1989)「Expression of cloned genes in Escherichia coli.」Molecular Cloning:A Laboratory Manual)。
【0079】
DNA分子は、細胞内で発現され得る。プロモーター配列は、直接的にそのDNA分子と連結され得、この場合、N末端の最初のアミノ酸は、常に、ATG開始コドンによりコードされるメチオニンである。所望される場合、N末端のメチオニンは、臭化シアンとのインビトロインキュベーション、あるいは細菌のメチオニンN末端ペプチダーゼとのインビボまたはインビトロインキュベーションのいずれかによりタンパク質から切断され得る(EPO−A−0219237)。
【0080】
融合タンパク質は、直接的発現に代わるものを提供する。通常、内在性の細菌のタンパク質、あるいは他の安定なタンパク質のN末端部分をコードするDNA配列は、異種のコード配列の5’末端と融合される。発現の際に、この構築物は、2つのアミノ酸配列の融合を提供する。例えば、バクテリオファージλ細胞遺伝子は、外来遺伝子の5’末端と連結し得、そして細菌において発現され得る。生じた融合タンパク質は、好ましくは、外来遺伝子由来のバクテリオファージタンパク質を切断するための切断酵素(第Xa因子)用の部位を保持する(Nagaiら.(1984)Nature 309:810)。融合タンパク質はまた、lacZ(Jiaら.(1987)Gene 60:197)、trpE(Allenら.(1987)J.Biotechnol.5:93;Makoffら.(1989)J.Gen.Microbiol.135:11)、およびChey(EP−A−0324647)遺伝子由来の配列を用いて作製され得る。2つのアミノ酸配列の接合部でのDNA配列は、切断部位をコードしてもよいし、あるいはコードしなくてもよい。別の例としては、ユビキチン融合タンパク質である。そのような融合タンパク質は、好ましくは、外来タンパク質からユビキチンを切断するための切断酵素(例えば、ユビキチン特異的切断プロテアーゼ)用の部位を保持するユビキチン領域と共に作製され得る。この方法を通して、天然外来タンパク質は分離され得る(Millerら.(1989)Bio/Technology 7:698)。
【0081】
あるいは、外来タンパク質はまた、細菌における外来タンパク質の分泌を提供するシグナルペプチド配列フラグメントから構成される、融合タンパク質をコードするキメラDNA分子を作製することによって、細胞から分泌され得る(米国特許4,336,336)。シグナル配列フラグメントは、通常、細胞からのタンパク質の分泌を指向する、疎水性アミノ酸から構成されるシグナルペプチドをコードする。このタンパク質は、増殖培地(グラム陽性細菌)、または細胞の内膜と外膜との間に位置する細胞周辺腔(グラム陰性細菌)のいずれかへ分泌される。好ましくは、インビボまたはインビトロのいずれかで切断され得る、このシグナルペプチドフラグメントと外来遺伝子との間にコードされるプロセシング部位がある。
【0082】
適切なシグナル配列をコードするDNAは、E.coli外膜タンパク質遺伝子(ompA)(Masuiら(1983)、Experimetal Manipulation of Gene Expression;Ghrayebら、(1984)EMBO J.3:2437)およびE.coliアルカリホスファターゼシグナル配列(phoA)(Okaら(1985)Proc.Natl.Acad.Sci.82:7212)のような、分泌性細菌タンパク質に関する遺伝子由来であり得る。さらなる例として、種々のBacillus株由来のα−アミラーゼ遺伝子のシグナル配列は、B.subtilis由来の異種タンパク質を分泌するために使用され得る(Palvaら(1982)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 79:5582;EP−A−0244042)。
【0083】
通常、細菌によって認識される転写終結配列は、翻訳終止コドンの3’側に位置する調節領域であり、そして従って、プロモーターとともに、コード配列に隣接する。これらの配列は、そのDNAによってコードされるポリペプチドへと翻訳され得るmRNAの転写を指向する。転写終結配列は、しばしば、転写の終結を補助するステムループ構造を形成し得る、約50ヌクレオチドのDNA配列を含む。例は、強力なプロモーターを有する遺伝子(例えば、E.coliのtrp遺伝子および他の生合成遺伝子)由来の転写終結配列を含む。
【0084】
通常、上記の成分(プロモーター、シグナル配列(もし所望ならば)、目的のコード配列、および転写終結配列を含む)は、組み立てられて発現構築物となる。発現構築物は、しばしば、宿主(例えば細菌)における安定な保持が可能である染色体外エレメント(例えばプラスミド)のような、レプリコンに保持される。このレプリコンは複製系を有し、従って、このことが、発現またはクローニングおよび増幅のいずれかのために、レプリコンが原核生物宿主において保持されることを可能にする。さらに、レプリコンは、高コピー数プラスミドまたは低コピー数プラスミドのいずれかであり得る。高コピー数プラスミドは、一般に約5〜約200、そして通常約10〜約150の範囲のコピー数を有する。高コピー数プラスミドを含む宿主は、好ましくは少なくとも約10個、そしてより好ましくは少なくとも約20個のプラスミドを含む。高コピー数ベクターまたは低コピー数ベクターのいずれもが選択され得、それは、宿主に対するベクターおよび外来タンパク質の効果に依存する。
【0085】
あるいは、発現構築物は、組み込みベクターを用いて、細菌のゲノムへ組み込まれ得る。組み込みベクターは、通常、ベクターが組み込むのを可能にする、細菌の染色体と相同な少なくとも1つの配列を含む。組み込みは、ベクターにおける相同なDNAと細菌の染色体との間の組換えから生じるようである。例えば、種々のBacillus株からのDNAによって構築される組み込みベクターは、Bacillus染色体に組み込まれる(EP−A−0 127 328)。組み込みベクターはまた、バクテリオファージまたはトランスポゾン配列から構成され得る。
【0086】
通常、染色体外発現構築物および組み込み発現構築物は、選択マーカーを含んで、形質転換された細菌株の選択を可能にし得る。選択マーカーは、細菌宿主において発現され得、そして細菌が薬物(例えば、アンピシリン、クロラムフェニコール、エリスロマイシン、カナマイシン(ネオマイシン)、およびテトラサイクリン)に耐性になるようにする遺伝子を含み得る(Daviesら(1978)Annu.Rev.Microbiol.32:469)。選択マーカーはまた、ヒスチジン、トリプトファン、およびロイシンの生合成経路における生合成遺伝子のような、生合成遺伝子を含み得る。
【0087】
あるいは、上記の成分のいくつかは、形質転換ベクターにおいて組み立てられ得る。形質転換ベクターは、通常、上記のように、レプリコンにおいて保持されるか、または組み込みベクターへと開発されるかのいずれかの選択マーカー(market)から構成され得る。
【0088】
発現ベクターまたは形質転換ベクターは、染色体外レプリコンまたは組み込みベクターのいずれも、多くの細菌への形質転換のために開発されてきた。例えば、発現ベクターは、とりわけ、以下の細菌のために開発されてきた:Bacillus subtilis(Palvaら(1982)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 79:5582;EP−A−0 036 259およびEP−A−0 063 953;WO 84/04541)、Escherichia coli(Shimatakeら(1981)Nature 292:128;Amannら(1985)Gene 40:183;Studierら(1986)J.Mol.Biol.189:113;EP−A−0 036 776、EP−A−0 136 829およびEP−A−0 136 907)、Streptococcus cremoris(Powellら(1988)Appl.Environ.Microbiol.54:655);Streptococcus lividans(Powellら(1988)Appl.Environ.Microbiol.54:655)、Streptomyces lividans(米国特許4,745,056)。
【0089】
外来DNAを細菌宿主へ導入する方法は、当該分野において周知であり、そして通常、CaClまたは他の薬剤(例えば、2価の陽イオンおよびDMSO)のいずれかで処理された細菌の形質転換を含む。DNAはまた、エレクトロポレーションによって、細菌細胞へ導入され得る。形質転換の手順は、通常、形質転換される細菌の種によって変化する。例えば以下を参照のこと:(Massonら(1989)FEMS Microbiol.Lett.60:273;Palvaら(1982)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 79:5582;EP−A−0 036 259およびEP−A−063 953;WO 84/04541、Bacillus)、(Millerら(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.85:856;Wangら(1990)J.Bacteriol.172:949、Campylobacter)、(Cohenら(1973)Proc.Natl.Acad.Sci.69:2110;Dowerら(1988)Nucleic Acids Res.16:6127;Kushner(1978)「ColE1由来のプラスミドによるEscherichia coliの形質転換のための改良された方法」Genetic Engineering:Proceedings of the International Symposium on Genetic Engineering(H.W.BoyerおよびS.Nicosia編);Mandelら(1970)J.Mol.Biol.53:159;Taketo(1988)Biochim.Biophys.Acta 949:318;Escherichia)、(Chassyら(1987)FEMS Microbiol.Lett.44:173 Lactobacillus);(Fiedlerら(1988)Anal.Biochem 170:38、Pseudomonas);(Augustinら(1990)FEMS Microbiol.Lett.66:203、Staphylococcus)、(Baranyら(1980)J.Bacteriol.144:698;Harlander(1987)「エレクトロポレーションによるStreptococcus lactisの形質転換」Streptococcal Genetics(J.FerrettiおよびR.Curtiss III編);Perryら(1981)Infect.Immun.32:1295;Powellら(1988)Appl.Environ.Microbiol.54:655;Somkutiら(1987)Proc.4th Evr.Cong.Biotechnology 1:412、Streptococcus)。
【0090】
(v.酵母発現)
酵母発現系もまた、当業者に公知である。酵母プロモーターは、酵母RNAポリメラーゼに結合可能であり、そしてコード配列(例えば、構造遺伝子)からmRNAへの下流の(3’側の)転写を開始し得る、任意のDNA配列である。プロモーターは、通常、コード配列の5’末端の近位に位置する転写開始領域を有する。この転写開始領域は、通常、RNAポリメラーゼ結合部位(「TATAボックス」)および転写開始部位を含む。酵母プロモーターはまた、上流アクチベーター配列(UAS)と呼ばれる第2のドメインを有し得、これは、もし存在するならば、通常、構造遺伝子とは遠位である。このUASは、調節される(誘導できる)発現を可能にする。構成的発現は、UASの非存在下で生じる。調節される発現は、正または負のいずれかであり得、それによって転写を増加させるかまたは減少させるかのいずれかであり得る。
【0091】
酵母は、活性な代謝経路を有する発酵性微生物であり、従って、代謝経路における酵素をコードする配列は、特に有用なプロモーター配列を提供する。例としては、以下が挙げられる:アルコールデヒドロゲナーゼ(ADH)(EP−A−0 284 044)、エノラーゼ、グルコキナーゼ、グルコース−6−リン酸イソメラーゼ、グリセルアルデヒド−3−リン酸デヒドロゲナーゼ(GAPまたはGAPDH)、ヘキソキナーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、3−ホスホグリセリン酸ムターゼ、およびピルビン酸キナーゼ(PyK)(EPO−A−0 329 203)。酵母PHO5遺伝子はまた、酸性ホスファターゼをコードし、有用なプロモーター配列を提供する(Myanoharaら(1983)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 80:1)。
【0092】
さらに、天然には生じない合成プロモーターもまた、酵母のプロモーターとして機能する。例えば、ある1つの酵母プロモーターのUAS配列は、別の酵母プロモーターの転写活性化領域と連結され得、合成ハイブリッドプロモーターを生成し得る。このようなハイブリッドプロモーターの例は、GAP転写活性化領域と連結されるADH調節配列(米国特許第4,876,197号および同第4,880,734号)を含む。ハイブリッドプロモーターの他の例は、ADH2、GAL4、GAL10、またはPHO5遺伝子のいずれかの調節配列からなり、GAPまたはPyK(EP−A−0 164 556)のような解糖酵素遺伝子の転写活性化領域に結合されているプロモーターを含む。さらに、酵母プロモーターは、酵母RNAポリメラーゼと結合し、そして転写を開始する能力を有する、天然に生じる非酵母起源のプロモーターを含み得る。このようなプロモーターの例としては、とりわけ、以下が挙げられる:(Cohenら、(1980)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 77:1078;Henikoffら(1981)Nature 283:835;Hollenbergら(1981)Curr.Topics Microbiol.Immunol.96:119;Hollenbergら(1979)「酵母Saccharomyces cerevisiaeにおける細菌の抗生物質耐性遺伝子の発現」、Plasmids of Medical,Environmental and Commercial Importance(K.N.TimmisおよびA.Puhler編);Mercerau−Puigalonら(1980)Gene 11:163;Panthierら(1980)Curr.Genet.2:109;)。
【0093】
DNA分子は、酵母において、細胞内で発現され得る。プロモーター配列は、DNA分子と直接連結され得、その場合、組換えタンパク質のN末端にある最初のアミノ酸は常にATG開始コドンによってコードされているメチオニンである。もし所望ならば、N末端のメチオニンは、臭化シアンとのインビトロインキュベーションによって、タンパク質から切断され得る。
【0094】
融合タンパク質は、酵母発現系について、ならびに哺乳動物、バキュロウイルス、および細菌の発現系において、代替物を提供する。通常、内因性酵母タンパク質、または他の安定なタンパク質のN末端部分をコードするDNA配列は、異種コード配列の5’末端に融合される。発現において、この構築物は、2つのアミノ酸配列の融合物を提供する。例えば、酵母またはヒトのスーパーオキシドジスムターゼ(SOD)遺伝子は、外来遺伝子の5’末端に連結され、そして酵母において発現し得る。2つのアミノ酸配列の連結部にあるDNA配列は、切断部位をコードしてもよいし、コードしなくてもよい。例えば、EP−A−0 196 056を参照のこと。別の例はユビキチン融合タンパク質である。このような融合タンパク質は、外来タンパク質からユビキチンを切断するプロセシング酵素(例えば、ユビキチン特異的プロセシングプロテアーゼ)のための部位を好ましくは保持する、ユビキチン領域を伴って作製される。従って、この方法を通じて、ネイティブな融合タンパク質は、単離され得る(例えば、WO88/024066)。
【0095】
あるいは、外来タンパク質はまた、酵母における外来タンパク質の分泌を提供する、リーダー配列フラグメントから構成される融合タンパク質をコードする、キメラDNA分子を作製することによって、細胞から増殖培地へ分泌され得る。好ましくは、インビボまたはインビトロのいずれかで切断され得る、リーダーフラグメントと外来遺伝子との間にコードされるプロセシング部位が存在する。リーダー配列フラグメントは、細胞からのタンパク質の分泌を指向する、疎水性アミノ酸から構成されるシグナルペプチドを、通常コードする。
【0096】
適切なシグナル配列をコードするDNAは、分泌性酵母タンパク質に関する遺伝子由来であり得、その遺伝子は例えば、酵母インベルターゼ遺伝子(EP−A−0 012 873;JPO.62,096,086)およびA因子遺伝子(米国特許4,588,684)である。あるいは、インターフェロンリーダーのような、酵母における分泌もまた提供する、非酵母起源のリーダーが存在する(EP−A−0 060 057)。
【0097】
好ましいクラスの分泌リーダーは、酵母α因子遺伝子のフラグメントを使用するリーダーであり、これは「プレ」シグナル配列、および「プロ」領域の両方を含む。用いられ得るこの型のα因子フラグメントは、完全長の、プレ−プロα因子リーダー(約83アミノ酸残基)および短縮されたα因子リーダー(通常約25〜約50アミノ酸残基)を含む(米国特許4,546,083および4,870,008;EP−A−0 324 274)。分泌を提供するα因子リーダーフラグメントを使用するさらなるリーダーは、第1の酵母のプレ配列を有するが、第2の酵母α因子からのプロ領域を有しないで作製される、ハイブリッドα因子リーダーを含む(例えば、WO89/02463を参照のこと)。
【0098】
通常、酵母に認識される転写終結配列は、翻訳終止コドンの3’側に位置する調節領域であり、そして従って、プロモーターと共にコード配列に隣接する。これらの配列は、そのDNAにコードされるポリペプチドへと翻訳され得る、mRNAの転写を指向する。転写終結配列および他の酵母に認識される終結配列の例は、例えば、解糖酵素をコードする転写終結配列である。
【0099】
通常、上記の成分(プロモーター、リーダー(もし所望ならば)、目的のコード配列、および転写終結配列を含む)は、組み立てられて発現構築物になる。発現構築物は、宿主(例えば、酵母または細菌)において安定に保持され得る染色体外エレメント(例えば、プラスミド)のような、レプリコンにおいてしばしば保持される。このレプリコンは、2つの複製系を有し得、従って、このことが、例えば、発現のために酵母において、ならびにクローニングおよび増幅のために原核生物宿主において保持されることを可能にする。このような酵母−細菌シャトルベクターの例としては、以下が挙げられる:YEp24(Botsteinら(1979)Gene 8:17〜24)、pCl/1(Brakeら(1984)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 81:4642〜4646)、およびYRp17(Stinchcombら(1982)J.Mol.Biol.158:157)。さらに、レプリコンは、高コピー数プラスミドまたは低コピー数プラスミドのいずれかであり得る。高コピー数プラスミドは、一般に約5〜約200、そして通常約10〜約150の範囲のコピー数を有し得る。高コピー数プラスミドを含む宿主は、好ましくは少なくとも約10個、そしてより好ましくは少なくとも約20個を有する。高コピー数ベクターまたは低コピー数ベクターのいずれかが選択され得、それは、宿主に対するベクターおよび外来タンパク質の効果に依存する。例えば、Brakeら、前出を参照のこと。
【0100】
あるいは、発現構築物は、組み込みベクターを用いて、酵母のゲノムへ組み込まれ得る。組み込みベクターは、通常、ベクターが組み込むのを可能にする、酵母の染色体と相同な少なくとも1つの配列を含み、そして好ましくは、発現構築物に隣接する2つの相同配列を含む。組み込みは、ベクターにおける相同なDNAと酵母の染色体との間の組換えから生じるようである(Orr−Weaverら(1983)Methods in Enzymol.101:228〜245)。組み込みベクターは、そのベクター中に含有するために適切な相同配列を選択することによって、酵母における特定の遺伝子座を指向され得る。Orr−Weaverら、前出を参照のこと。1つ以上の発現構築物が組み込まれ得、おそらく産生される組換えタンパク質のレベルに影響を与え得る(Rineら(1983)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 80:6750)。ベクターに含まれる染色体配列は、ベクターにおける単一セグメント(ベクター全体の組み込みを生じる)、または染色体における隣接セグメントに相同でかつベクターにおける発現構築物に隣接する2つのセグメント(発現構築物のみの安定した組み込みを生じ得る)のいずれかとして生じ得る。
【0101】
通常、染色体外発現構築物および組み込み発現構築物は、選択マーカーを含み得、形質転換された酵母株の選択を可能にする。選択マーカーは、酵母宿主において発現され得る生合成遺伝子を含み得、それは例えば、ADE2、HIS4、LEU2、TRP1、およびALG7、ならびにG418耐性遺伝子であり、それぞれ、酵母細胞がツニカマイシンおよびG418に耐性になるようにする。さらに、適切な選択マーカーはまた、金属のような毒性化合物の存在下において増殖する能力を、酵母に提供し得る。例えば、CUP1の存在は、酵母が、銅イオンの存在下において増殖することを可能にする(Buttら(1987)Microbiol.Rev.51:351) あるいは、上記成分のうちのいくつかは、組み立てられて形質転換ベクターになり得る。形質転換ベクターは、通常、上記のように、レプリコンにおいて保持されるか、または組み込みベクターに開発されるかのいずれかである、選択マーカーから構成される。
【0102】
発現ベクターおよび形質転換ベクターは、染色体外レプリコンまたは組み込みベクターのいずれかであり、多くの酵母への形質転換のために開発されてきた。例えば、発現ベクターは、とりわけ、以下の酵母のために開発されてきた:Candida albicans(Kurtzら(1986)Mol.Cell.Biol.6:142)、Candida maltosa(Kunzeら(1985)J.Basic Microbiol.25:141)。Hansenula polymorpha(Gleesonら(1986)J.Gen.Microbiol.132:3459;Roggenkampら(1986)Mol.Gen.Genet.202:302)、Kluyveromyces fragilis(Dasら(1984)J.Bacteriol.158:1165)、Kluyveromyces lactis(De Louvencourtら(1983)J.Bacteriol.154:737;Van den Bergら(1990)Bio/Technology 8:135)、Pichia guillerimondii(Kunzeら(1985)J.Basic Microbiol.25:141)、Pichia pastoris(Creggら(1985)Mol.Cell.Biol.5:3376;米国特許第4,837,148号および同第4,929,555号)、Saccharomyces cerevisiae(Hinnenら(1978)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 75:1929;Itoら(1983)J.Bacteriol.153:163)、Schizosaccharomyces pombe(BeachおよびNurse(1981)Nature 300:706)、およびYarrowia lipolytica(Davidowら(1985)Curr.Genet.10:380471;Gaillardinら(1985)Curr.Genet.10:49)。
【0103】
外来DNAを酵母宿主へ導入する方法は、当該分野において周知であり、そして通常、スフェロプラストの、またはアルカリ陽イオンで処置された無傷の酵母細胞のいずれかの形質転換を含む。形質転換の手順は、通常、形質転換される酵母の種によって変化する。例えば以下を参照のこと:(Kurtzら(1986)Mol.Cell.Biol.6:142;Kunzeら(1985)J.Basic Microbiol.25:141;Candida);(Gleesonら(1986)J.Gen.Microbiol.132:3459;Roggenkampら(1986)Mol.Gen.Genet.202:302;Hansenula);(Dasら(1984)J.Bacteriol.158:1165;De Louvencourtら(1983)J.Bacteriol.154:1165;Van den Bergら(1990)Bio/Technology 8:135;Kluyveromyces);(Creggら(1985)Mol.Cell.Biol.5:3376;Kunzeら(1985)J.Basic Microbiol.25:141;米国特許第4,837,148号および同第4,929,555号;Pichia);(Hinnenら(1978)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 75:1929;Itoら(1983)J.Bacteriol.153:163 Saccharomyces);(BeachおよびNurse(1981)Nature 300:706;Schizosaccharomyces);(Davidowら(1985)Curr.Genet.10:39;Gaillardinら(1985)Curr.Genet.10:49;Yarrowia)。
【0104】
(抗体)
本明細書中で使用される場合、用語「抗体」とは、少なくとも1つの抗体結合部位から構成されるポリペプチドまたはポリペプチド群をいう。「抗体結合部位」は、内部表面形状および抗原のエピトープの特徴に相補的な電荷分布を有する、3次元結合空間であり、これが、抗体と抗原の結合を可能にする。「抗体」は、例えば、脊椎動物抗体、ハイブリッド抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、変化された抗体、単価抗体、Fabタンパク質、および単一ドメイン抗体を含む。
【0105】
本発明のタンパク質に対する抗体は、親和性クロマトグラフィー、免疫アッセイ、およびNeisseriaのタンパク質の識別/同定に有用である。
【0106】
本発明のタンパク質に対する抗体(ポリクローナルおよびモノクローナルの両方)は、従来の方法によって調製され得る。一般に、タンパク質は、最初に、適切な動物、好ましくはマウス、ラット、ウサギ、またはヤギを免疫するために使用される。ウサギおよびヤギは、得られ得る血清の容量、および標識された抗ウサギ抗体および抗ヤギ抗体の入手可能性に起因して、ポリクローナル血清の調製のために好ましい。免疫は、一般的に、タンパク質を生理的食塩水(好ましくはフロイント完全アジュバントのようなアジュバント)に混合または乳化し、そして混合物または乳化物を非経口的に(一般的に皮下、または筋肉内に)注射することによって、行われる。50〜200μg/注射の用量が、代表的に充分である。免疫は、一般的に、2〜6週後に生理的食塩水(好ましくはフロイント不完全アジュバント)中のタンパク質の1回以上の注射でブーストされる。あるいは、当該分野において公知の方法を使用するインビトロ免疫によって抗体を産生し得、これは、本発明の目的にとっては、インビボ免疫に等しいと考えられる。ポリクローナル抗血清は、免疫された動物からガラスまたはプラスチック製容器へ採血し、その血液を25℃で1時間インキュベートし、その後4℃で2〜18時間インキュベートすることによって得られる。この血清は、遠心分離(例えば1,000g、10分間)によって回収される。ウサギから、採血につき約20〜50mlが得られ得る。
【0107】
モノクローナル抗体は、KohlerおよびMilstein(Nature(1975)256:495〜96)の標準的方法、またはその改変版を使用して調製される。代表的には、マウスまたはラットが、上記のように免疫される。しかし、血清を抽出するために動物から採血するよりも、脾臓(および必要に応じていくつかの大きなリンパ節)が取り出され、そして単細胞へ解離される。もし所望ならば、脾臓細胞は、(非特異的付着細胞の回収後)細胞懸濁液をタンパク質抗原でコーティングされたプレートまたはウェルへアプライすることによって、スクリーニングされ得る。この抗原に特異的な膜結合免疫グロブリンを発現するB細胞は、このプレートに結合し、そして残りの懸濁液によって、洗い落とされない。生じるB細胞、または全ての解離された脾臓細胞は、次に骨髄腫細胞と融合するように誘導されてハイブリドーマを形成し、そして選択培地(例えばヒポキサンチン、アミノプテリン、チミジン培地、「HAT」)において培養される。生じるハイブリドーマは、限界希釈によってプレーティングされ、そして免疫する抗原に対して特異的に結合する(かつ関連しない抗原に結合しない)抗体の産生についてアッセイされる。選択されるMAb分泌ハイブリドーマは、次にインビトロ(例えば、組織培養瓶または中空線維リアクター中で)、またはインビボ(マウスにおける腹水として)のいずれかで培養される。
【0108】
もし所望ならば、抗体は(ポリクローナルまたはモノクローナルいずれであっても)、従来技術を使用して標識され得る。適切な標識としては、以下が挙げられる:発蛍光団、発色団、放射性原子(特に32Pおよび125I)、電子密度試薬、酵素、および特異的結合パートナーを有するリガンド。酵素は、代表的に、その活性によって検出される。例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼは、通常、3,3’,5,5’−テトラメチルベンジジン(TMB)を青い色素(分光光度計を用いて定量可能)へ変換するその能力によって、検出される。「特異的結合パートナー」とは、高い特異性でリガンド分子に結合し得るタンパク質をいい、例えば抗原およびそれに特異的なモノクローナル抗体の場合である。他の特異的結合パートナーは、ビオチンおよびアビジンまたはストレプトアビジン、IgGおよびプロテインA、ならびに当該分野において公知の多くのレセプター−リガンド対を含む。同じ標識がいくつかの異なる様式で働き得るので、以上の記載が、種々の標識を別個のクラスへ分類することを意味しないことは、理解されるべきである。例えば、125Iは、放射性標識として、または電子密度試薬として働き得る。HRPは、酵素として、またはMAbについての抗原として働き得る。さらに、所望の効果のために、種々の標識を組合せ得る。例えば、MAbおよびアビジンはまた、本発明の実施において、標識を必要とする。従って、MAbをビオチンで標識して、そして125Iで標識したアビジン、またはHRPで標識した抗ビオチンMAbで、その存在を検出し得る。他の置換および可能性は、当業者に容易に明らかであり、そして本発明の範囲内に等しいと考えられる。
【0109】
(薬学的組成物)
薬学的組成物は、本発明のポリペプチド、抗体または核酸のいずれかを含み得る。この薬学的組成物は、治療上有効な量の、本願発明のポリペプチド、抗体、またはポリヌクレオチドのいずれかを含む。
【0110】
本明細書において使用される用語「治療上有効な量」とは、所望の疾患または状態を処置、改善、または予防するための治療薬剤の量、または、検出可能な治療効果または予防効果を示すための治療薬剤の量をいう。この効果は、例えば、キメラマーカーまたは抗原レベルによって検出され得る。治療効果はまた、体温低下のような、身体の症状における減少を含む。被験体に関する正確な有効量は、被験体の大きさおよび健康、状態の性質および程度、および投与のために選択される治療または治療の組合せに依存する。従って、あらかじめ正確な有効量を特定することは有用ではない。しかし、所定情況のための有効量は、慣用的な実験によって決定され得、そして臨床医の判断内である。
【0111】
本発明の目的のために、有効な用量は、DNA構築物が投与される個体において、DNA構築物の約0.01mg/kg〜50mg/kgまたは0.05mg/kg〜約10mg/kgである。
【0112】
薬学的組成物はまた、薬学的に受容可能なキャリアを含み得る。用語「薬学的に受容可能なキャリア」とは、抗体またはポリペプチド、遺伝子、および他の治療薬剤のような、治療薬剤の投与のためのキャリアをいう。この用語は、この組成物を受け取る個体に有害な抗体の産生をそれ自体誘導しない、任意の薬学的キャリアをいい、そして、過度の毒性を伴わずに投与され得る。適切なキャリアは、タンパク質、多糖、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、重合アミノ酸、アミノ酸コポリマー、および不活性ウイルス粒子のように、大きく、遅く代謝される巨大分子であり得る。このようなキャリアは、当業者に周知である。
【0113】
薬学的に受容可能な塩が、その中で使用され得る。例えば、塩酸塩、臭化水素塩、リン酸塩、硫酸塩などのような鉱酸塩;および酢酸塩、プロピオン酸塩、マロン酸塩、安息香酸塩などのような有機酸の塩である。薬学的に受容可能な賦形剤の徹底的な議論は、Remington’s Pharmaceutical Sciences(Mack Pub.Co.、N.J.1991)にて利用可能である。
【0114】
治療組成物における薬学的に受容可能なキャリアは、水、生理的食塩水、グリセロールおよびエタノールのような液体を含み得る。さらに、湿潤剤または乳化剤、pH緩衝物質などのような補助物質が、このようなビヒクルに存在し得る。代表的には、治療組成物は、液体溶液または懸濁液のいずれかの、注射可能物質として調製される;注射前に液体ビヒクルに溶解または懸濁するのに適切な固体形態もまた、調製され得る。リポソームは、薬学的に受容可能なキャリアの定義中に含まれる。
【0115】
(送達方法)
一旦処方されると、本発明の組成物は、その被験体へ直接投与され得る。処置される被験体は、動物であり得;特に、ヒト被験体が処置され得る。
【0116】
その組成物直接送達は、一般的に、皮下的に、腹腔内に、静脈内に、または筋肉内のいずれかでの注入によって達成されるか、あるいは、組織の間質空間へ送達される。この組成物はまた、病巣へ投与され得る。他の投与様式には、経口投与、および肺投与、坐剤、および経皮(transdermal)適用または経皮(transcutaneous)適用(例えば、WO98/20734を参照のこと)、針、および遺伝子銃またはハイポスプレー(hypospray)が含まれる。投薬処置は、単回用量スケジュール、または多数回用量スケジュールであり得る。
【0117】
(ワクチン)
本発明に従うワクチンは、予防的(すなわち、感染を予防するため)または治療(すなわち、感染後の疾患を処置するため)のいずれかであり得る。
【0118】
このようなワクチンは、免疫抗原、免疫原、ポリペプチド、タンパク質または核酸を、通常「薬学的に受容可能なキャリア」とともに含み、このキャリア自体は、その組成物を受ける個体に有害である抗体の産生を誘発しない任意のキャリアを含む。適切なキャリアは、代表的に、大きく、ゆっくり代謝される高分子(例えば、タンパク質、ポリサッカリド、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリマー性アミノ酸、アミノ酸コポリマー、脂質凝集物(例えば、油小滴またはリポソーム)、および不活性ウイルス粒子である。このようなキャリアは、当該分野で周知である。さらに、これらのキャリアは免疫刺激薬剤(「アジュバント」)として機能し得る。さらに、この抗原または免疫原は、細菌毒素(例えば、ジフテリア、破傷風、コレラ、H.pyloriなどの病原因子からの毒素)と結合体化され得る。
【0119】
この組成物の効力を増強するために好ましいアジュバントは、(1)アルミニウム塩(「明礬」)(例えば、水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム、硫酸アルミニウムなど)、(2)水中油懸濁処方物(他の特定の免疫刺激薬剤(例えば、ムラミルペプチド(以下を参照のこと)または細菌細胞壁成分)を伴うか伴わない)を包含するが、それらに限定されず、例えば、以下:(a)5%スクアレン、0.5% Tween 80、および0.5% Span85(必要に応じて、種々の量のMTP−PE(以下を参照のこと)を含有するが、必要ではない)を含み、モデル110Y微小流体化器(Microfluidics、Newton、MA)のような微小流体化器を用いてμ未満の粒子へと処方されたMF59TM(WO90/14837;Vaccine design:the subunit and adjuvant approach、編、Powell & Newman、Plenum Press 1995の第10節);(b)μ未満のエマルジョンへと微小流体化されたか、またはボルテックスして、より大きな粒子径エマルジョンを生成したかのいずれかである、10%スクアレン、0.4%Tween80、5%プルロニックブロックポリマーL121、およびthr−MDP(以下を参照のこと)を含有するSAF、ならびに(c)2%スクアレン、0.2%Tween80、およびモノホスホリピドA(MPL)、トレハロースジミコレート(TDM)、および細胞壁骨格(CWS)好ましくはMPLおよびCWS(DetoxTM)からなる群由来の1つ以上の細菌細胞壁成分を含むRibiTMアジュバント系(RAS)、(Ribi Immunochem、Hamilton、MT);(3)サポニンアジュバント(例えば、StimulonTM)(Cambridge Bioscience、Worcester、MA)を使用し得るか、またはそれから粒子(例えば、ISCOM(免疫刺激性複合体)を生成し得る;(4)完全フロイントアジュバント(CFA)および不完全フロイントアジュバント(IFA);(5)サイトカイン(例えば、インターロイキン(例えば、IL−1、IL−2、IL−4、IL−5、IL−6、IL−7、IL−12など)、インターフェロン(例えば、γインターフェロン)、マクロファージコロニー刺激因子(M−CSF)、腫瘍壊死因子(TNF)など;および(6)その組成物の効力を強化するための免疫刺激因子として作用する他の物質を包含するがそれらに限定されない。ミョウバンおよびMF59TMが好ましい。
【0120】
上記で言及したように、ムラミルペプチドは、N−アセチル−ムラミル−L−スレオニル−D−イソグルタミン(thr−MDP)、N−アセチル−ノルムラミル−L−アラニル−D−イソグルタミン(ノル−MDP)、N−アセチルムラミル−L−アラニル−D−イソグルタミニル−L−アラニン−2−(1’−2’−ジパルミトイル−sn−グリセロ−3−ヒドロキシホスホリルオキシ)−エチルアミン(MTP−PE)などを包含するがそれらに限定されない。
【0121】
免疫原性組成物(例えば、免疫化抗原/免疫原/ポリペプチド/タンパク質/核酸、薬学的に受容可能なキャリア、およびアジュバント)は、代表的に、希釈剤(例えば、水、生理食塩水、グリセロール、エタノールなど)を含有する。さらに、補助物質(例えば、湿潤剤または乳化剤、pH緩衝物質など)は、このようなビヒクルにおいて存在し得る。
【0122】
代表的に、免疫原性組成物は、液体溶液または懸濁物として、注射剤として調製され;注射前に液体ビヒクルにおける溶液または懸濁物として適切な固体形態もまた調製され得る。この調製物はまた、薬学的に受容可能なキャリアの下で、上記に記載のように、アジュバント効果の強化のために乳化され得るかまたはリポソーム中にカプセル化され得る。
【0123】
ワクチンとして使用される免疫原性組成物は、免疫学的有効量の抗原性または免疫原性のポリペプチド、および任意の他の上記の成分を必要に応じて含む。「免疫学的有効量」とは、その量の個体への投与が、単回用量であれ、一連の(用量の)一部としてであれ、処置または予防に有効であることを意味する。この量は、処置される個体の健康および身体状態、処置される個体の分類学上の群(例えば、非ヒト霊長類、霊長類など)、個体の免疫系が抗体を合成する能力、所望される保護の程度、そのワクチンの処方物、処置する医師の医療的状況の評価、および他の関連する因子に依存して変動する。その量は、比較的広い範囲に入り、この量が慣用的な試行を通して決定され得ることが予想される。
【0124】
免疫学的組成物は、従来のように、非経口的(例えば、皮下、筋肉内または経皮(transudermally)/経皮(transucutaneously)のいずれかでの注射による)(例えば、WO98/20734)に投与される)。他の投与様式に適切なさらなる処方物は、経口処方物および肺処方物、坐剤、および経皮適用を含む。投薬処置は、単回用量スケジュールまたは多数回用量スケジュールであり得る。ワクチンは、他の免疫調節剤とともに投与され得る。
【0125】
タンパク質ベースのワクチンの代替として、DNAワクチンを使用し得る(例えば、RobinsonおよびTorres(1997)Seminars in Immunology 9:271−283;Donnellyら(1997)Annu Rev Immunol 15:617−648;本明細書中後半部を参照のこと)。
【0126】
(遺伝子送達ビヒクル)
本発明の治療剤のコード配列を含む、哺乳動物における発現のためにその哺乳動物へ送達される構築物の送達のための遺伝子治療ビヒクルは、局所または全身的のいずれかで投与され得る。これらの構築物は、ウイルスベクターアプローチまたは非ウイルスベクターアプローチを、インビボまたはエキソビボの様式で利用し得る。このようなコード配列の発現は、内因性哺乳動物プロモーターまたは外因性プロモーターを用いて誘導され得る。このコード配列のインビボでの発現は、構成性または調節性のいずれかであり得る。
【0127】
本発明は、意図された核酸配列を発現し得る遺伝子送達ビヒクルを含む。この遺伝子送達ビヒクルは、好ましくは、ウイルスベクター、およびより好ましくはレトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルス(AAV)ベクター、ヘルペスウイルスベクターまたはαウイルスベクターである。このウイルスベクターはまた、アストロウイルスベクター、コロナウイルスベクター、オルトミクソウイルスベクター、パポバウイルスベクター、パラミクソウイルスベクター、パルボウイルスベクター、ピコルナウイルスベクター、ポックスウイルスベクター、またはトガウイルスベクターであり得る。一般的には、Jolly(1994)Cancer Gene Therapy 1:51−64;Kimura(1994)Human Gene Therapy 5:845−852;Connelly(1995)Human Gene Therapy 6:185−193;およびKaplitt(1994)Nature Genetics 6:148−153を参照のこと。
【0128】
レトロウイルスベクターは、当該分野で周知であり、そして本発明者らは、任意のレトロウイルス遺伝子治療ベクターが本発明において使用可能であることを意図する。これには、B型、C型およびD型のレトロウイルス、異種栄養性ウイルス(例えば、NZB−X1、NZB−X2およびNZB9−1(O’Neill(1985)J.Virol.53:160を参照のこと)多栄養性レトロウイルス(例えば、MCFおよびMCF−MLV(Kelly(1983)J.Virol.45:291を参照のこと)、スプマウイルスおよびレンチウイルスが含まれる。RNA Tumor Viruses、第2版、Cold Spring Harobor Laboratory、1985を参照のこと。
【0129】
レトロウイルス遺伝子治療ベクターの部分は、異なるレトロウイルスに由来し得る。例えば、レトロウイルスLTRは、マウス肉腫ウイルスに由来し得、tRNA結合部位はラウス肉腫ウイルスに由来し得、パッケージングシグナルはマウス白血病ウイルスに由来し得、そして第二の鎖合成の起源はトリ白血病ウイルスに由来し得る。
【0130】
これらの組換えレトロウイルスベクターを使用して、適切なパッケージング細胞株へそれらを導入することによって形質導入適合性レトロウイルスベクター粒子を生成し得る(米国特許第5,591,624号を参照のこと)。レトロウイルスベクターは、レトロウイルス粒子へのキメラインテグラーゼ酵素の組込みによって宿主細胞DNAへの部位特異的組込みについて構築され得る(WO96/37626号を参照のこと)。この組換えウイルスベクターは複製欠損組換えウイルスであることが好ましい。
【0131】
上記に記載のレトロウイルスベクターを伴う使用について適切なパッケージング細胞株は、当該分野で周知であり、容易に調製され(WO95/30763号およびWO92/05266号を参照のこと)、そしてこれを使用して、組換えベクター粒子の生産のためのプロデューサー細胞株(これは、ベクター細胞株または「VCL」とも称される)を作製し得る。好ましくは、このパッケージング細胞株は、ヒトの親細胞(例えば、HT1080細胞)またはミンク親細胞株から作製され、これは、ヒト血清における不活化を除去する。
【0132】
レトロウイルス遺伝子治療ベクターの構築のために好ましいレトロウイルスは、トリ白血病ウイルス、ウシ白血病ウイルス、マウス白血病ウイルス、ミンク細胞フォーカス形成ウイルス、マウス肉腫ウイルス、細網内皮症ウイルス、およびラウス肉腫ウイルスを含む。特に好ましいマウス白血病ウイルスは、4070Aおよび1504A(HartleyおよびRowe(1976)J. Virol.19:19−25)、Abelson(ATCC番号VR−999)、Friend(ATCC番号VR−245)、Graffi、Gross(ATCC番号VR−590)、Kirsten、Harvey肉腫ウイルスおよびRauscher(ATCC番号VR−998)およびモロニーマウス白血病ウイルス(ATCC番号VR−190)を含む。このようなレトロウイルスベクターは、寄託機関または収集機関(例えば、アメリカンタイプカルチャーコレクション(「ATCC」)、Rockville、Maryland)から入手し得るか、
または一般に利用可能な技術を用いて公知の供給源から単離され得る。
【0133】
本発明において使用可能な例示的な公知のレトロウイルス遺伝子治療ベクターは、特許出願GB2200651、EP0415731、EP0345242、EP0334301、WO89/02468;WO89/05349、WO89/09271.WO90/02806、WO90/07936、WO94/03622、WO93/25698、WO93/25234、WO93/11230、WO93/10218、WO91/02805、WO91/02825、WO95/07994、米国特許第5,219,740号、同4,405,712号、同4,861,719号、同4,980,289号、同4,777,127号、同5,591,624号に記載されるものを含む。Vile(1993)Cancer Res 53:3860−3864;Vile(1993)Cancer Res.53:962−967;Ram(1993)Cancer Res 53(1993)83−88;Takamiya(1992)J Neurosci Res 33:493−503;Baba(1993)J Neurosurg 79:729−735;Mann(1983)Cell 33:153;Cane(1984)Proc Natl Acad Sci 81;6349;およびMiller(1990)Human Gene Therapy 1もまた参照のこと。
【0134】
ヒトアデノウイルス遺伝子治療ベクターもまた当該分野で公知であり、そして本発明において使用可能である。例えば、Berkner(1988)Biotechniques 6:616およびRosenfeld(1991)Science 252:431;ならびにWO93/07283、WO93/06223、およびWO93/07282を参照のこと。本発明において使用可能な例示的な公知のアデノウイルス遺伝子治療ベクターは、上記に参照される文書およびWO94/12649、WO93/03769、WO93/19191、WO94/28938、WO95/11984、WO95/00655、WO95/27071、WO95/29993、WO95/34671、WO96/05320、WO94/08026、WO94/11506、WO93/06223、WO94/24299、WO95/14102、WO95/24297、WO95/02697、WO94/28152、WO94/24299、WO95/09241,WO95/25807、WO95/05835、WO94/18922およびWO95/09654において記載されるものを含む。あるいは、Curiel(1992)Hum.Gene Ther.3:147−154に記載されるような殺傷したアデノウイルスに連結したDNAの投与が使用され得る。本発明の遺伝子送達ビヒクルはまた、アデノウイルス随伴ウイルス(AAV)ベクターを含む。本発明における使用のためのこのようなベクターの主要なおよび好ましい例は、Srivastava WO93/09239に開示されるAAV−2ベースのベクターである。最も好ましいAAVベクターは、2つのAAV逆方向末端反復を含む。ここで、ネイティブD配列は、ヌクレオチドの置換によって改変され、その結果、少なくとも5つのネイティブなヌクレオチドおよび18までのネイティブヌクレオチド、好ましくは少なくとも10のネイティブヌクレオチドから18までのネイティブヌクレオチド、最も好ましくは10のネイティブヌクレオチドが維持され、そしてD配列の残りのヌクレオチドが欠失またはネイティブでないヌクレオチドで置換されている。AAV逆方向末端反復のネイティブなD配列は、各AAV逆方向末端反復において(すなわち、各末端に1つの配列が存在する)20の連続するヌクレオチドの配列であって、これは、HP形成に関与しない。ネイティブでない置換ヌクレオチドは、同じ位置でのネイティブなD配列に見出されるヌクレオチド以外の任意のヌクレオチドであり得る。他の使用可能な例示的なAAVベクターは、、pWP−19、pWN−1であり、これらは両方ともNahreini(1993)Gene 124:257−262に開示される。このようなAAVベクターの別の例は、psub201(Samulski(1987)J.Virol.61:3096を参照のこと)である。別の例示的なAAVベクターは、Double−D ITRベクターである。Double−D ITRベクターの構築は、米国特許第5,478,745号に開示される。なお他のベクターは、Carter 米国特許第4,797,368号およびMuzyczka 米国特許第5,139,941号、Chartejee 米国特許第5,474,935号ならびにKotin WO94/288157に開示されるものである。本発明において使用可能なAAVベクターのなおさらなる例は、SSV9AFABTKneoであり、これは、AFPエンハンサーおよびアルブミンプロモーターを含み、そして肝臓において優性に発現を指向する。その構造および構築は、Su(1996)Human Gene Therapy 7:463−470に開示される。さらなるAAV遺伝子治療ベクターは、米国特許第5,354,678号、同5,173,414号、同5,139,941号、および同5,252,479号に開示される。
【0135】
本発明の遺伝子治療ベクターはまた、ヘルペスウイルスベクターを含む。主要なおよび好ましい例は、チミジンキナーゼポリペプチドをコードする配列を含む単純ヘルペスウイルスベクター(例えば、米国特許第5,288,641号、およびEP0176170(Roizman)に開示されるもの)である。さらなる例示的な単純ヘルペスウイルスベクターは、WO95/04139(Wistar Institute)に開示されるHFEM/ICP6−lacZ、Geller(1988)Science 241:1667−1669ならびにWO90/09441およびWO92/07945に記載されるpHSVlac、Fink(1992)Human Gene Therapy 3:11−19に記載されるHSV Us3::pgC−lacZ、ならびにEP0453242(Breakefieled)に記載されるHSV 7134、2RH 105およびGAL4、ならびにATCCに受託番号ATCC VR−977およびATCC VR−260として寄託されたものを含む。
【0136】
意図されるのはまた、本発明において使用され得るαウイルス遺伝子治療ベクターである。好ましいαウイルスベクターは、シンドビスウイルスベクターである。トガウイルス、セムリキ森林ウイルス(ATCC VR−67;ATCC VR−1247)、Middlebergウイルス(ATCC VR−370)、ロスリバーウイルス(ATCC VR−373;ATCC VR−1246)、ベネズエラウマ脳脊髄炎ウイルス(ATCC VR−923;ATCC VR−11250;ATCC VR−1249;ATCC VR−532)および米国特許第5,0091,309号、同5,217,879号、およびWO92/10578に記載されるもの。より詳細には、米国特許出願第08/405,627号(1995年3月15日出願)、WO94/21792号、WO92/10578号、WO95/07994号、米国特許第5,091,309号、および米国特許第5,217,879号に記載されるそれらのαウイルスベクターが使用可能である。このようなαウイルスは、ATCC、Rockville、Marylandのような寄託機関または収集機関から入手し得るか、または一般的に利用可能な技術を用いて公知の供給源から単離され得る。好ましくは、細胞傷害性が減少したαウイルスベクターを使用する(米国特許仮出願08/679640号を参照のこと)。
【0137】
DNAベクター系(例えば、真核細胞層状発現系)もまた、本発明の核酸の発現について有用である。真核生物層状発現系の詳細な説明についてはWO95/07994を参照のこと。好ましくは、本発明の真核細胞層状発現系はαウイルスベクターに由来し、そして最も好ましくはシンドビスウイルスベクターに由来する。
【0138】
本発明における使用に適切な他のウイルスベクターは、ポリオウイルス(例えば、ATCC VR−58およびEvans、Nature(1989)385およびSabin(1973)J.Biol.Standardization 1:115に記載されるもの;リノウイルス、例えば、ATCC VR−1110およびArnold(1990)J Cell Biochem L401に記載されるもの;ポックスウイルス(例えば、カナリアポックスルウイルスまたはワクシニアウイルス(例えば、ATCC VR−111およびATCC VR−2010ならびにFisher−Hoch(1989)Proc Natl Acad Sci 86:317;Flexner(1989)Ann NY Acad Sci 569:86、Flexner(1990)Vaccine 8:17;米国特許第4,603,112号および同4,769,330号ならびにWO89/01973号に記載されるもの));SV40ウイルス(例えば、ATCC VR−305およびMulligan(1979)Nature 277:108およびMadzak(1992)J Gen Virol 73:1533に記載されるもの);インフルエンザウイルス(例えば、ATCC VR−797および米国特許第5,166,057号およびEnami(1990)Proc Natl Acad Sci .87:3802−3805;EnamiおよびPalese(1991)J Virol 65:2711−2713およびLuytjes(1989)Cell 59−110(McMichael(1983)NEJ Med 309:13ならびにYap(1978)Nature 273:238およびNature(1979)277:108もまた参照のこと)に記載されるような逆遺伝子技術を使用して作製した組換えインフルエンザウイルス);EP−0386882およびBuchschachler(1992)J.Virol.66:2731に記載されるようなヒト免疫不全ウイルス;麻疹ウイルス(例えば、ATCC VR−67およびVR−1247ならびにEP−0440219に記載されるもの);アウラウイルス(例えば、ATCC VR−368);ベバルウイルス(例えば、ATCC VR−600およびATCC VR−1240);カバス(Cabassou)ウイルス(例えば、ATCC VR−922);チクングンヤウイルス(例えば、ATCC VR−64およびATCC VR−1241);フォートモーガン(Fort Morgan)ウイルス(例えば、ATCC VR−924);ゲタウイルス(例えば、ATCC VR−369およびATCC VR−1243);キジラガハ(Kyzylagach)ウイルス(例えば、ATCC VR−927);マヤロウイルス(例えば、ATCC VR−66);ムカンボウイルス(例えば、ATCC VR−580およびATCC VR−1244);ヌヅムウイルス(例えば、ATCC VR−371);ピクスナウイルス(例えば、ATCC VR−372およびATCC VR−1245);トナテ(Tonate)ウイルス(例えば、ATCC VR−925);トリニティウイルス(例えば、ATCC VR−469);ユナウイルス(例えば、ATCC VR−374);ワタロアウイルス(例えば、ATCC VR−926);Y−62−33ウイルス(例えば、ATCC VR−375);オニオニオンウイルス、東部ウマ脳脊髄炎ウイルス(例えば、ATCC VR−65およびATCC VR−1242);西部ウマ脳脊髄炎ウイルス(例えば、ATCC VR−70、ATCC VR−1251、ATCC VR−622およびATCC VR−1252);ならびにコロナウイルス(例えば、ATCC VR−740)およびHamre(1966)Proc Soc Exp Biol Med 121:190に記載のものを含む。
【0139】
本発明の組成物の細胞への送達は、上記に言及したウイルスベクターに限定されない。他の送達方法および媒体が使用され得る(例えば、核酸発現ベクター、殺傷したアデノウイルスに連結したかまたは連結してないポリカチオン性縮合DNA単独(例えば、米国特許出願番号08/366,787(1994年12月30日出願)およびCuriel(1992)Hum Gene Ther 3:147−154を参照のこと)、リガンド連結DNA(例えば、Wu(1989)J Biol Chem 264:16985−16987を参照のこと)、真核生物細胞送達ビヒクル細胞(例えば、米国特許出願番号08/240,030(1994年5月9日出願)および米国特許出願番号08/404,796を参照のこと)、光重合化ヒドロゲル物質の沈着、手動の遺伝子送達粒子銃(米国特許第5,149,655号に記載されるような)、米国特許第5,206,152およびWO92/11033に記載されるような電離放射線、核酸電荷中和または細胞膜との融合)。さらなるアプローチは、Philip(1994)Mol Cell Biol 14:2411−2418およびWoffendin(1994)Proc Natl Acad Sci 91:1581−1585に記載される。
【0140】
粒子媒介遺伝子送達が使用され得る(例えば、米国特許出願60/023,867号を参照のこと)。手短には、配列を、高レベル発現のための従来の制御配列を含む従来のベクターに挿入し得、次いで細胞標的化リガンド(例えば、アシアロオロソムコイド(WuおよびWu(1987)J.Biol.Chem.262:4429−4432に記載されるような)、Hucked(1990)Biochem Pharmacol 40:253−263に記載されるようなインスリン、Plank(1992)Bioconjugate Chem 3:533−539に記載されるようなガラクトース、ラクトースまたはトランスフェリン)に連結された合成遺伝子送達分子(例えば、重合DNA結合カチオン様ポリリジン、プロタミンおよびアルブミン)とともにインキュベートされ得る。
【0141】
裸のDNAもまた使用され得る。例示的な裸のDNA導入方法は、WO90/11092および米国特許第5,580,859号に記載される。取り込み効率は、生体分解性のラテックスビーズを用いて改良され得る。DNAコートラテックスビーズは、ビーズによるエンドサイトーシス開始の後に効率よく細胞へと輸送される。この方法は、ビーズを処理して疎水性を高め、それによってエンドソームの破壊および細胞質へのDNAの放出を容易にすることによってさらに改良され得る。
【0142】
遺伝子送達ビヒクルとして作用し得るリポソームは、米国特許第5,422,120号、WO95/13796、WO94/23697、WO91/14445、およびEP524,968に記載される。米国特許出願60/023,867に記載されるように、非ウイルス性送達において、ポリペプチドをコードする核酸配列は、高レベル発現のための従来の制御配列を含む従来のベクターへと挿入され得、次いで細胞標的化リガンド(例えば、アシアロオロソムコイド、インスリン、ガラクトース、ラクトースまたはトランスフェリン)に連結された、重合性DNA結合カチオン(例えば、ポリリジン、プロタミン、およびアルブミン)のような合成遺伝子伝達分子とともにインキュベートされ得る。他の送達系は、種々の組織特異的または普遍的作用性のプロモーターの制御下に遺伝子を含むDNAをカプセル化するためのリポソームの使用を含む。さらに、使用に適切な非ウイルス送達は、機械的送達系(例えば、Woffendinら(1994)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91(24):11581−11585に記載されるアプローチを含む。さらに、コード配列およびそのようなものの発現産物は、光重合化ヒドロゲル物質の沈着を介して送達され得る。コード配列の送達について使用され得る、遺伝子送達のための他の従来の方法は、例えば、手動の遺伝子送達粒子銃(米国特許第5,149,655号に記載されるような);移入された遺伝子を活性化するための電離放射線の使用(米国特許第5,206,152号およびWO92/11033に記載されるような)を含む。
【0143】
例示的なリポソームおよびポリカチオン性遺伝子送達ビヒクルは、米国特許第5,422,120号および同4,762,915号;WO95/13796;WO94/23697;およびWO91/14445;EP−0524968;およびStryer、Biochemistry、236−240頁(1975)、W.H.Freeman、San Francisco;Szoka(1980)Biochem Biophys Acta 600:1;Bayer(1979) Biochem Biophys Acta 550:464;Rivnay(1987)Meth Enzymol 149:119;Wang(1987)Proc Natl Acad Sci 84:7851;Plant(1989)Anal Biochem 176:420に記載されるものである。
【0144】
ポリヌクレオチド組成物は、治療有効量(この用語は上記に定義されるとおりである)の遺伝子治療ビヒクルを含み得る。本発明の目的のために、有効用量は、投与される個体において、約0.01mg/kg〜50mg/kgまたは0.05mg/kg〜約10mg/kgのDNA構築物である。
【0145】
(送達方法)
一旦処方されると、本発明のポリヌクレオチド組成物は、(1)被験体に直接);(2)エキソビボで被験体由来の細胞に送達されて;または(3)組換えタンパク質の発現のためにインビトロで、投与され得る。処置される被験体は、哺乳動物または鳥類であり得る。ヒト被験体もまた処置され得る。
【0146】
この組成物の直接送達は、皮下、腹腔内、静脈内、または筋肉内の注射によって、または組織の間質空間への送達のいずれかによって一般的に達成される。この組成物はまた、病巣へ投与され得る。他の投与様式は、経口投与または肺投与、坐剤、および経皮または経皮適用(例えば、WO98/20734を参照のこと)、針、および遺伝子銃またはハイポスプレーを含む。投薬治療は、単回用量スケジュールまたは多数回用量スケジュールであり得る。
【0147】
エキソビボ送達および被験体への形質転換細胞の再移植のための方法は、当該分野で公知であり、そして例えばWO93/14778に記載されている。エキソビボ適用に有用である細胞の例は、例えば、幹細胞、特に、造血細胞、リンパ細胞、マクロファージ、樹状細胞または腫瘍細胞を含む。
【0148】
一般的に、エキソビボ適用およびインビトロ適用の両方のための核酸の送達は、以下の手順:例えば、デキストラン媒介トランスフェクション、リン酸カルシウム沈降、ポリブレン媒介トランスフェクション、原形質融合、エレクトロポレーション、ポリヌクレオチドのリポソーム内へのカプセル化、およびDNAの核への直接の微量注入(これらはすべて当該分野で周知である)で達成され得る。
【0149】
(ポリヌクレオチドおよびポリペプチドの薬学的組成物)
上記に記載の薬学的に受容可能なキャリアおよび塩に加えて、以下のさらなる薬剤がポリヌクレオチド組成物および/またはポリペプチド組成物とともに使用され得る。
【0150】
(A.ポリペプチド)
1つの例は、限定することなく以下を包含する:アシアロオロソムコイド(ASOR);トランスフェリン;アシアロ糖タンパク質;抗体;抗体フラグメント;フェリチン;インターロイキン;インターフェロン;顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(GM−CSF)、顆粒球コロニー刺激因子(G−CSF)、マクロファージコロニー刺激因子(M−CSF)、幹細胞因子およびエリスロポエチン。ウイルス抗原(例えば、エンベロープタンパク質)もまた、使用され得る。また、他の侵襲性生物由来のタンパク質(例えば、RIIとして知られるPlasmodium falciparumの環境スポロゾイト(circumsporozoite)タンパク質由来の17アミノ酸ペプチド)。
【0151】
(B.ホルモン、ビタミンなど)
包含され得る他の群は、例えば、ホルモン、ステロイド、アンドロゲン、エストロゲン、甲状腺ホルモン、またはビタミン、葉酸である。
【0152】
(C.ポリアルキレン、ポリサッカリドなど)
また、ポリアルキレングリコールが、所望のポリヌクレオチド/ポリペプチドとともに含有され得る。好ましい実施態様において、ポリアルキレングリコールは、ポリエチレングリコールである。さらに、モノサッカリド、ジサッカリド、またはポリサッカリドが含有され得る。この局面の好ましい実施態様において、このポリサッカリドは、デキストランまたはDEAEデキストランである。また、キトサンおよびポリ(乳酸−コ−グリコリド)。
【0153】
(D.脂質およびリポソーム)
所望のポリヌクレオチド/ポリペプチドはまた、被験体またはそれに由来する細胞への送達の前に、脂質中にカプセル化され得るか、またはリポソーム中にパッケージングされ得る。
【0154】
脂質カプセル化は、一般的に核酸に安定に結合し得るか、または核酸を捕捉もしくは維持し得るリポソームを用いて達成される。縮合ポリヌクレオチドの脂質調製物に対する比は、変動し得るが、一般的に約1:1(mgDNA:マイクロモル脂質)であるか、またはより多くの脂質である。核酸の送達のためのキャリアとしてリポソーム使用の概説については、HugおよびSleight(1991)Biochim.Biophys.Acta.1097:1−17;Straubinger(1983)Meth.Enzymol.101:512−527を参照のこと。
【0155】
本発明における使用のためのリポソーム調製物は、カチオン性(正に荷電した)アニオン性(負に荷電した)および中性の調製物を包含する。カチオン性リポソームは、機能的な形態で、プラスミドDNA(Felgner(1987)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 84:7413−7416);mRNA(Malone(1989)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86:6077−6081;および精製した転写因子(Debs(1990)J.Biol.Chem.265:10189−10192)の細胞内送達を媒介することが示されている。
【0156】
カチオン性リポソームは容易に入手可能である。例えば、N[1−2,3−ジオレイルオキシ)プロピル]−N,N,N−トリエチルアンモニウム(DOTMA)リポソームは、GIBCO BRL、Grand Island、NYからの商標リポフェクチン(Lipofectin)の下で入手可能である(Fegner前出もまた参照のこと)。他の市販されているリポソームは、トランスフェクテース(transfectace)(DDAB/DOPE)およびDOTAP/DOPE(Boerhinger)を含む。他のカチオン性リポソームは、当該分野で周知の技法を使用する容易に利用可能な物質から調製され得る。例えば、DOTAP(1,2−ビス(オレイルオキシ)−3−(トリメチルアンモニオ)プロパン)リポソームの合成の記載について、Szoka(1978)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 75:4194−4198;WO90/11092を参照のこと。
【0157】
同様に、アニオン性および中性リポソームは、例えば、Avanti Polar Lipids(Birmingham,AL)から容易に入手可能であるか、または容易に入手可能な物質を使用してたやすく調製され得る。このような物質には、とりわけ、ホスファチジルコリン、コレステロール、ホスファチジルエタノールアミン、ジオレオイルホスファチジルコリン(DOPC)、ジオレオイルホスファチジルグリセロール(DOPG)、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン(DOPE)などが含まれる。これらの物質はまた、適切な比率のDOTMAおよびDOTAPの出発物質と混合され得る。これらの物質を使用してリポソームを作製する方法は、当該分野で周知である。
【0158】
このリポソームは、多重膜のベシクル(MLV)、小さな単一膜ベシクル(SUV)、または大きな単一膜のベシクル(LUV)を含み得る。種々のリポソーム−核酸複合体は当該分野で公知の方法を使用して調製され得る。例えば、Straubinger(1983)Meth.Immunol.101:512−527;Szoka(1978)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 75:4194−4198;Papahadjopoulos(1975)Biochim.Biophys.Acta 392:483;Wilson(1979)Cell 17:77);DeamerおよびBangham(1976)Biochim.Biophys.Acta 443:629;Ostro(1977)Biochem.Biophys.Res.Commun.76:836;Fraley(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 76:3348);EnochおよびStrittmatter(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 76:145;Fraley(1980)J.Biol.Chem.(1980)255:10431;SzokaおよびPapahadjopoulos(1978)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 75:145;ならびにSchaefer
−Ridder(1982)Science 215:166を参照のこと。
【0159】
(E.リポタンパク質)
さらに、リポタンパク質が、送達されるポリヌクレオチド/ポリペプチドとともに含まれ得る。利用されるリポタンパク質の例は、キロミクロン、HDL、IDL、LDL、およびVLDLを含む。これらのタンパク質の変異体、フラグメント、または融合物もまた、使用され得る。また、天然に存在するリポタンパク質の改変体(例えば、アセチル化されたLDL)が使用され得る。これらのリポタンパク質は、リポタンパク質レセプターを発現する細胞へ、ポリヌクレオチドの送達を標的化し得る。好ましくは、リポタンパク質が、送達されるポリヌクレオチドとともに含まれる場合、他の標的化リガンドはその組成物中には含まれない。
【0160】
天然に存在するリポタンパク質は、脂質部分およびタンパク質部分を含む。このタンパク質部分は、アポタンパク質として知られる。現在では、アポタンパク質A、B、C、D、およびEが単離および同定されている。少なくともこれらの2つはいくつかのタンパク質を含み、ローマ数字、AI、AII、AIV;CI、CII、CIIIによって命名されている。
【0161】
1つのリポタンパク質は、1を超えるアポタンパク質を含み得る。例えば、天然に存在するキロミクロンはA、B、C、およびEからなり、そして時間が経てばこれらのリポタンパク質はAを欠失し、そしてCおよびEアポタンパク質を獲得する。VLDLは、A、B、C、およびEアポタンパク質を含み、LDLはアポタンパク質Bを含み;そしてHDLはアポタンパク質A、C、およびEを含む。
【0162】
これらのアポタンパク質のアミノ酸は公知であり、そして例えば、Breslow(1985)Annu Rev.Biochem 54:699;Law(1986)Adv.Exp.Med.Biol.151:162;Chen(1986)J Biol Chem 261:12918;Kane(1980)Proc Natl Acad Sci USA 77:2465;Utermann(1984)Hum Genet 65:232に記載されている。
【0163】
リポタンパク質は、トリグリセリド、コレステロール(遊離およびエステル)、およびリン脂質を含む、種々の脂質を含む。この脂質の組成は、天然に存在するリポタンパク質において変化する。例えば、キロミクロンは主としてトリグリセリドを含む。天然に存在するリポタンパク質の脂質含有物のより詳細な記載は、例えば、Meth.Enzymol.128(1986)に見いだされ得る。この脂質の組成は、レセプター結合活性についてアポタンパク質の立体構造において補助するために選択される。脂質組成はまた、ポリヌクレオチド結合分子との疎水性相互作用および会合を容易にするように選択され得る。
【0164】
天然に存在するリポタンパク質は、例えば、血清から超遠心分離によって単離され得る。そのような方法は、Meth.Enzymol.(前出);Pitas(1980)J.Biochem.253:5454−5460およびMahey(1979)J Clin.Invest 64:743−750に記載される。リポタンパク質はまた、インビトロまたは所望の宿主細胞中のアポタンパク質遺伝子の発現による組換え方法によって産生され得る。例えば、Atkinson(1986)Annu Rev Biophys Chem 15:403およびRadding(1958)Biochim Biophys Acta 30:443を参照のこと。リポタンパク質はまた、Biomedical Techniologies,Inc.,Stoughton,Massachusetts,USAのような商業的な供給者から購入され得る。さらなるリポタンパク質の記載は、Zuckermannら、PCT/US97/14465に見い出され得る。
【0165】
(F.ポリカチオン性薬剤)
ポリカチオン性薬剤は、送達される所望のポリヌクレオチド/ポリペプチドを有する組成物中に、リポタンパク質を伴って、またはリポタンパク質を伴わずに含まれ得る。
【0166】
ポリカチオン性薬剤は、代表的には、生理的に適切なpHにおいて正味の正電荷を示し、そして所望の位置への送達を容易にするための核酸の電荷を中和し得る。これらの薬剤は、インビトロ、エキソビボ、およびインビボ適用のいずれもを有する。ポリカチオン性薬剤は、生きている被験体に、筋肉内、皮下などのいずれかで核酸を送達するために使用され得る。
【0167】
以下は、ポリカチオン性薬剤としての有用なポリペプチドの例である:ポリリジン、ポリアルギニン、ポリオルニチン、およびプロタミン。他の例は、ヒストン、プロタミン、ヒト血清アルブミン、DNA結合タンパク質、非ヒストン染色体タンパク質、DNAウイルス由来のコートタンパク質(例えば、X174)を含む。転写因子もまた、DNAに結合するドメインを含み、従って核酸縮合薬剤として有用であり得る。手短に言えば、転写因子(例えば、C/CEBP、c−jun、c−fos、AP−1、AP−2、AP−3、CPF、Prot−1、Sp−1、Oct−1、Oct−2、CREP、およびTFIID)は、DNA配列に結合する塩基性ドメインを含む。
【0168】
有機ポリカチオン性薬剤は、スペルミン、スペルミジン、およびプトレシン(purtrescine)を含む。
【0169】
ポリカチオン性薬剤の大きさおよびその物理的特性は、上記の表から外挿されて、他のポリカチオン性薬剤が構築され得るか、または合成ポリカチオン性薬剤が産生され得る。
【0170】
有用な合成ポリカチオン性薬剤は、例えば、DEAE−デキストラン、ポリブレンを含む。LipofectinTM、およびlipofectAMINETMは、ポリヌクレオチド/ポリペプチドと組み合わせた場合にポリカチオン性複合体を形成するモノマーである。
【0171】
(免疫診断アッセイ)
本発明のNeisseria抗原は、抗体レベルを検出するためのイムノアッセイにおいて使用され得る(または、逆に抗Neisseria抗体は抗原レベルを検出するために使用され得る)。充分に規定された組換え抗原に基づくイムノアッセイは、侵襲性の診断方法と置き換えるために開発され得る。生物学的サンプル(例えば、血液サンプルまたは血清サンプルを含む)内のNeisseriaタンパク質に対する抗体が検出され得る。このイムノアッセイの設計は、多くのバリエーションの対象であり、そして種々のこれらは当該分野で公知である。イムノアッセイのプロトコルは、例えば、競合アッセイ、または直接反応アッセイ、またはサンドイッチ型アッセイに基づき得る。プロトコルはまた、例えば、固体支持体を使用し得、または免疫沈降によってなされ得る。ほとんどのアッセイは、標識された抗体またはポリペプチドの使用を含み、その標識は、例えば、蛍光分子、化学発光分子、放射性分子、または色素分子であり得る。プローブからのシグナルを増幅するアッセイは公知である;これらの例は、ビオチンおよびアビジンを利用するアッセイ、ならびに酵素標識および酵素媒介イムノアッセイ(例えば、ELASAアッセイ)である。
【0172】
免疫診断に適切でありそして適切な標識試薬を備えるキットは、適切な容器中に、アッセイの実行に必要とされる残りの試薬および物質(例えば、適切な緩衝液、塩溶液など)ならびに適切なセットのアッセイの説明書と共に本発明の組成物を含む適切な物質を詰めることによって構築される。
【0173】
(核酸ハイブリダイゼーション)
「ハイブリダイゼーション」とは、水素結合による2つの核酸配列の互いの会合をいう。代表的には、1つの配列は、固体支持体に固定され、そして他方は溶液中で遊離している。次いで、2つの配列は水素結合に好ましい条件下で互いに接触される。この結合に影響を与える因子は以下を含む:溶媒のタイプおよび容量;反応温度;ハイブリダイゼーションの時間;撹拌;液体相の配列の固体支持体への非特異的な付着をブロックする薬剤(Denhardt’s試薬またはBLOTTO);配列の会合の速度を増大させる化合物(硫酸デキストランまたはポリエチレングリコール)の使用;およびハイブリダイゼーション後の洗浄条件のストリンジェンシー。Sambrookら(前出)第2巻、第9章、9.47〜9.57頁。
【0174】
「ストリンジェンシー」とは、異なる配列よりも非常に類似する配列の会合に好ましいハイブリダイゼーション反応における条件をいう。例えば、研究中のハイブリッドの計算されたTmより約120〜200℃低い温度および塩濃度の組み合わせが選択されるべきである。温度および塩条件はしばしば、フィルターに固定したゲノムDNAのサンプルが目的の配列にハイブリダイズし、次いで異なるストリンジェンシーの条件下で洗浄される、予備的な実験において経験的に決定され得る。Sambrookら、9.50頁を参照のこと。
【0175】
例えば、サザンブロットを行う場合、考慮する変数は、(1)ブロットされるDNAの複雑さ、および(2)プローブおよび検出される配列の間の相同性である。研究されるフラグメント全量は、プラスミドまたはファージ消化物については0.1〜1μg、高度に複雑な真核生物ゲノム中の単一コピーについては10−9〜10−8gまで、10倍変化し得る。より低い複雑さのポリヌクレオチドについては、実質的により短いブロッティング、ハイブリダイゼーション、および曝露回数、より少量の出発ポリヌクレオチド、およびより低い非活性のプローブが使用され得る。例えば、単一コピーの酵母遺伝子は、1μgの酵母DNAで開始し、2時間ブロットし、そして4〜8時間10cpm/μgを用いてハイブリダイズして、わずか1時間の曝露時間を用いて検出され得る。単一コピーの哺乳動物遺伝子について、保存性のアプローチは、10μgのDNAで開始し、一晩ブロットし、そして10cpm/μgより多いプローブを用いて10%硫酸デキストランの存在下で一晩ハイブリダイズし、約24時間露光時間を生じる。
【0176】
いくつかの因子が、プローブと目的のフラグメントとの間のDNA−DNAハイブリッドの融解温度(Tm)、ならびに、結果として、ハイブリダイゼーションおよび洗浄についての適切な条件に影響を与え得る。多くの場合において、そのプローブはフラグメントに対して100%相同なわけではない。他の共通して直面する変化には、長さ、ハイブリダイズする配列の全G+C含量、ならびにイオン強度およびハイブリダイゼーション緩衝液のホルムアミド含量が含まれる。これらのすべての因子の効果は、一つの式によって近似され得る:
Tm=81+16.6(log10Ci)+0.4[%(G+C)]−0.6(%ホルムアミド)−600/n−1.5(%ミスマッチ)。
ここでCiは塩濃度(一価イオン)であり、およびnは塩基対内のハイブリッドの長さである(MeinkothおよびWahl(1984)Anal.Biochem.138:267/284からわずかに改変した)。
【0177】
ハイブリダイゼーション実験の設計において、核酸ハイブリダイゼーションに影響を与えるいくつかの因子が簡便に変更され得る。ハイブリダイゼーションおよび洗浄の温度ならびに洗浄時の塩濃度を調整するのが最も単純である。ハイブリダイゼーション温度(すなわち、ストリンジェンシー)が上昇するにつれて、非相同的な鎖の間で起こるハイブリダイゼーションは起こりにくくなるようであり、結果として、バックグラウンドが減少する。放射標識したプローブが固定化されたフラグメントと完全に相同ではない場合(遺伝子ファミリーおよび種間のハイブリダイゼーション実験における場合で頻繁であるように)、ハイブリダイゼーション温度は低下されなければならず、そしてバックグラウンドが増大する。洗浄の温度は、類似の様式で、ハイブリダイゼーションバンドの強度、およびバックグラウンドの程度に影響を与える。洗浄のストリンジェンシーはまた、塩濃度の減少とともに増大する。
【0178】
一般的に、50%ホルミアミドの存在下で都合よいハイブリダイゼーション温度は、標的フラグメントに95%〜100%相同であるプローブについて42℃、90%〜95%相同性では37℃、85%〜90%相同性については32℃である。より低い相同性については、上記の式を用いて、適切にホルムアミド含量が低くされ、そして温度が調整されるべきである。プローブと標的フラグメントとの間の相同性が未知である場合、最も単純なアプローチは、ともにストリンジェントではないハイブリダイゼーション条件および洗浄条件で開始することである。オートラジオグラフィー後に非特異的バンドまたは高いバックグラウンドが観察される場合、フィルターは高ストリンジェンシーで洗浄され得、そして再び露光され得る。露光のために必要な時間がこのアプローチを非実用的にする場合、いくつかのハイブリダイゼーションおよび/または洗浄ストリンジェンシーが並行して試験されるべきである。
【0179】
(核酸プローブアッセイ)
本発明に従う核酸プローブを利用する、PCR、分枝DNAプローブアッセイ、またはブロッティング技術のような方法は、cDNAまたはmRNAの存在を決定し得る。プローブは、検出されるに十分に安定な、二重鎖または二本鎖複合体を形成し得る場合に、本発明の配列に「ハイブリダイズする」といわれる。
【0180】
核酸プローブは、本発明のNeisseriaヌクレオチド配列(センス鎖およびアンチセンス鎖の両方を含む)にハイブリダイズする。多くの異なるヌクレオチド配列がアミノ酸配列をコードするが、ネイティブなNeisseria配列は、細胞に存在する実際の配列であるので、好ましい。mRNAは、コード配列を表し、従ってプローブはコード配列に相補的であるべきであり、一本鎖cDNAはmRNAに相補的であり、従ってcDNAプローブは非コード配列に相補的であるべきである。
【0181】
プローブ配列はNeisseria配列(またはその相補物)に同一である必要はない。核酸プローブが標的ヌクレオチドと検出され得る二重鎖を形成し得る場合、配列および長さの変動は、アッセイの感受性の増加をもたらし得る。また、核酸プローブは、形成された二重鎖を安定化するためにさらなるヌクレオチドを含み得る。さらなるNeisseria配列もまた、形成された二重鎖を検出するための標識としての一助となり得る。例えば、非相補的ヌクレオチド配列が、そのプローブの5’末端に付着され得、ここでそのプローブ配列の残りはNeisseria配列に相補的である。あるいは、プローブ配列が、それとハイブリダイズし、そしてそれによって検出され得る二重鎖を形成するためにNeisseria配列との十分な相補性を有する場合、非相補的塩基またはより長い配列は、プローブ中に分散され得る。
【0182】
プローブの正確な長さおよび配列は、ハイブリダイゼーション条件(例えば、温度、塩条件など)に依存する。例えば、診断的適用については、分析物の配列の複雑さに依存して、核酸プローブは、代表的には、少なくとも10〜20ヌクレオチド、好ましくは15〜25、そして最も好ましくは少なくとも30ヌクレオチドを含むが、これよりも短くもあり得る。短いプライマーは、一般的には、鋳型との安定なハイブリッド複合体を形成するのにより低い温度を必要とする。
【0183】
プローブは、合成的手順(例えば、Matteucciらのトリエステル法、(J.Am.Chem.Soc.(1981)103:3185))、またはUrdeaら(Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1983)80:7461)に従って、または市販の自動オリゴヌクレオチド合成機を使用して、産生され得る。
【0184】
プローブの化学的性質は、優先度に従って選択され得る。特定の適用については、DNAまたはRNAが適切である。他の適用については、改変(例えば、ホスホロチオエートまたはメチルホスホネートのようなバックボーンの改変)が組み込まれ得、インビボの半減期を増大させるために使用され得、RNA親和性を変化させ、ヌクレアーゼ耐性などを増大させるなどを行い(例えば、AgrawalおよびIyer(1995)Curr Opin Biotechnol 6:12−19;Agrawal(1996)TIBTECH 14:376−387);ペプチド核酸のようなアナログもまた使用され得る(例えば、Corey(1997)TIBTECH 15 224−229;Buchardtら(1993)TIBTECH 11:384−386)。
【0185】
あるいは、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)は、少量の標的核酸を検出する別の周知の手段である。そのアッセイは、Mullisら、(Meth.Enzymol.(1987)155:335−350);米国特許第4,683,195号および同第4,683,202号に記載されている。2つの「プライマー」ヌクレオチドは、標的核酸とハイブリダイズし、そして反応を開始するために使用される。このプライマーは、増殖標的(またはその相補物)の配列にハイブリダイズしない、二重鎖の安定性を補助するための、または、例えば、首尾よい制限部位を組み込むための配列を含む。代表的には、このような配列は、所望のNeisseria配列に隣接する。
【0186】
熱安定性のポリメラーゼは、もともとの標的核酸を鋳型として使用して、プライマーから標的核酸のコピーを作製する。標的核酸の閾値量がポリメラーゼによって産生された後、それらはより従来的な方法(例えば、サザンブロット)によって検出され得る。サザンブロット法を使用する場合、標識されたプローブは、Neisseria配列(またはその相補物)にハイブリダイズする。
【0187】
また、mRNAまたはcDNAは、Sambrookら(前出)に記載される、従来的なブロッティング技術によって検出され得る。mRNA、またはmRNAからポリメラーゼ酵素を使用して生成されたcDNAは、ゲル電気泳動を使用して精製および分離され得る。次いで、ゲル上のこの核酸は、ニトロセルロースのような固体支持体にブロットされる。この固体支持体は、標識されたプローブに曝露され、次いですべてのハイブリダイズしていないプローブを洗浄して除去する。次に、標識プローブを含む二重鎖を検出する。代表的には、そのプローブは、放射活性部分で標識される。
【0188】
(実施例)
本実施例は、N.meningitidisで同定された核酸配列を、推定の翻訳産物と共に記載し、そしてまたN.gonorrhoeaeの核酸配列および翻訳産物も記載する。すべての核酸配列が完全なわけではなく、すなわち、それらは、全長の野生型タンパク質より短い配列をコードする。
【0189】
本実施例は一般的には以下の様式である:
・N.meningitidis(B株)において同定されたヌクレオチド配列
・この配列の推定の翻訳産物
・データベースの比較に基づく翻訳産物のコンピューター分析
・N.meningitidis(A株)およびN.gonorrhoeaeにおいて同定された対応する遺伝子およびタンパク質配列
・適切に抗原性であることを示すタンパク質の性質の記載
・生化学的分析の結果(発現、精製、ELISA、FACSなど)。
【0190】
本実施例は、代表的には種および株の間の配列同一性の詳細を含む。配列において類似のタンパク質は、一般的に構造および機能の両方において類似し、そして配列同一性はしばしば、共通の進化の起源を示す。公知の機能のタンパク質の配列との比較は、新しい配列に対する推定のタンパク質の機能の割り当てのための指針として広く使用され、そして、特に全ゲノム分析において有用であることが証明されている。
【0191】
配列比較を、BLAST、BLAST2、BLASTn、BLASTp、tBLASTn、BLASTx、およびtBLASTxの各アルゴリズム(例えば、Altschulら、(1997)Gapped BLAST and PSI−BLAST:a new generaion of protein database search programs.Nucleic Acids Resaerch 25:2289−3402もまた参照のこと)を使用して、NCBI(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)で行った。検索を、以下のデータベースに対して行った:縮重しないGenBank+EMBL+DDBL+PDB配列および縮重しないGenBank CDS 翻訳物+PDB+SwissProt+SPupdate+PIR配列。
【0192】
Meningcoccusの配列およびGonococcusの配列を比較するために、tBLASTxアルゴニズムを、http://www.genome.ou.edu/gono_blast.htmlに実施されるように使用した。FASTAアルゴリズムをまた使用して、ORFを比較した(GCG Wisconsin Package、バージョン9.0)。
【0193】
ヌクレオチド配列中のドット(例えば、配列番号11中の495位)は、リーディングフレームを維持するために任意に導入したヌクレオチドを示す。同様に、二重下線を付したヌクレオチドを取り除いた。小文字(例えば、配列番号11の496位)は、独立した配列決定反応のアラインメントの間に生じたあいまいさを示す(本実施例におけるヌクレオチド配列のいくつかは2つ以上の実験の結果を合わせて得られる)。
【0194】
ヌクレオチド配列を6つのリーディングフレームで走査して、Espostiら(Critical evaluation of the hydropathy of membrane proteins(1990)Eur J Biochem 190:207−219)の統計学的な研究に基づくアルゴニズムを用いて、疎水性ドメインの存在を予測した。これらのドメインは、潜在的な膜貫通ドメインまたは疎水性リーダー配列を表す。
【0195】
オープンリーディングフレームを、プログラムORFFINDER(NCBI)を使用して、フラグメント化されたヌクレオチド配列から予測した。
【0196】
下線を付したアミノ酸配列は、PSORTアルゴリズム(http://www.psort.nibb.ac.jp)によって予測される、ORF中の潜在的な膜貫通ドメインまたはリーダー配列を示す。機能的なドメインもまた、MOTIFSプログラム(GCG WisconsinおよびPROSITE)を使用して予測した。
【0197】
種々の試験を使用して、本実施例で同定されたタンパク質のインビボの免疫原性を評価し得る。例えば、そのタンパク質は、組換え的に発現され得、そしてイムノブロットによって患者の血清をスクリーニングするために使用し得る。タンパク質と患者の血清との間の陽性反応は、この患者が以前に問題のタンパク質に対する免疫応答を引き起こしたことを示す(すなわち、このタンパク質は免疫原である)。この方法はまた、免疫優性タンパク質を同定するために使用され得る。
【0198】
この組み換えタンパク質をまた、例えばマウスで抗体を調製するために簡便に使用し得る。タンパク質が細胞表面に局在することの直接的な確認のために、これらを使用し得る。標識された抗体(例えば、FACSのための蛍光標識)をインタクトな細菌とインキュベートし、そして細菌表面における標識の存在がこのタンパク質の局在を確認する。
【0199】
特に、以下の方法(A)〜(S)を使用して、本発明のタンパク質の発現、精製、および生化学的特徴付けを行った。
【0200】
(A.染色体DNA調製)
N.meningitidis株2996を、100mlのGC培地中で対数増殖期まで増殖させ、遠心分離によって収集し、そして5ml緩衝液(20%スクロース、50mM Tris−HCl、50mM EDTA、pH8)に再懸濁した。氷上で10分間インキュベーションした後、その細菌を10ml溶解溶液(50mM NaCl、1% Na−サルコシル、50μg/ml プロテイナーゼK)の添加によって溶菌し、そしてその懸濁液を37℃で2時間インキュベートした。2回のフェノール抽出(pH8に平衡化)および1回のクロロホルム/イソアミルアルコール(24:1)抽出を行った。DNAを、0.3M 酢酸ナトリウムおよび2容量のエタノールの添加によって沈殿させ、そして遠心分離によって収集した。ペレットを、70%エタノールで1回洗浄し、そして4ml緩衝液(10mM Tris−HCl、1mM EDTA、pH8)に再溶解した。DNA濃度を、260nmにおけるODを読みとることによって測定した。
【0201】
(B.オリゴヌクレオチド設計)
合成オリゴヌクレオチドプライマーを、(a)利用可能な場合にはmeningococcusB配列、または(b)gonococcus/meningococcusA配列を使用して、必要に応じて、meningococcusの好ましいコドンに適合させて、各々のORFのコード配列に基づいて設計した。予測されるリーダー配列の直後の下流の5’末端増幅プライマー配列を推定することによって、任意の予測されるシグナルペプチドを除外した。
【0202】
大部分のORFについて、5’プライマーは2つの制限酵素部位を含んだ(その遺伝子自体の制限パターンに依存して、BamHI−NdeI、BamHI−NheI、またはEcoRI−NheI);3’プライマーは、XhoI制限部位を含んだ。この手順を、各々の増幅産物(各々のORFに一致する)のクローニングを2つの異なる発現系:pGEX−KG(BamHI−XhoIまたはEcoRI−XhoIのいずれかを使用する)、およびpET21b+(NdeI−XhoIまたはNheI−XhoIのいずれかを使用する)に指向させるために確立した。
【0203】
5’末端プライマーテイル:CGCGGATCCCATATG (BamHI−NdeI)
CGCGGATCCGCTAGC (BamHI−NheI)
CCGGAATTCTAGCTAGC (EcoRI−NheI)
3’末端プライマーテイル: CCCGCTCGAG (XhoI)。
【0204】
ORF5、ORF15、ORF17、ORF19、ORF20、ORF22、ORF27、ORF28、ORF65、およびORF89については、2つの異なる増幅を、各々のORFを2つの発現系でクローニングされるように行った。2つの異なるPCRプライマーを、各々のORFについて使用した;同じ3’XhoIプライマーを以前のように使用した:
5’末端プライマーテイル:GGAATTCCATATGGCCATGG (NdeI)
5’末端プライマーテイル:CGGGATCC (BamHI)
ORF76をpTRC発現ベクターにクローニングし、そしてアミノ末端His−タグ融合物として発現した。特定の場合において、予想されたシグナルペプチドを最終産物に含めた。NheI−BamHI制限部位を、プライマーを使用して組み込んだ:
5’末端プライマーテイル:GATCAGCTAGCCATATG (NheI)
3’末端プライマーテイル:CGGGATCC (BamHI)。
【0205】
制限酵素認識配列を含むのと同様に、プライマーは、増幅される配列にハイブリダイズするヌクレオチドを含んだ。ハイブリダイズするヌクレオチドの数は、プライマー全体の融解温度に依存し、そして各々のプライマーについて以下の式を使用して決定した:
=4(G+C)+2(A+C) (テイルを除外)
=64.9+0.41(%GC)−600/N (プライマー全体)
選択したオリゴの融解温度は、オリゴ全体について65〜70℃であり、そしてハイブリダイズ領域単独では50〜55℃であった。
【0206】
表I(487頁)は、各増幅のために使用される正方向および逆方向のプライマーを示す。特定の場合において、プライマー配列は、ORFの配列に正確にはマッチしないことが注目される。対応する配列が、gonococcusにおいて同定されていたが、初期の増幅が行われた時、完全な5’および/または3’配列は、いくつかのmenigococcal ORFについて公知ではなかった。従って、増幅について、gonococcal配列を、プライマー設計についての基礎として使用し得、コドンの優先性を考慮して変化され得る。特に、以下のコドンを変化させた:ATA→ATT;TCG→TCT;CAG→CAA;AAG→AAA;GAG→GAA;CGA→CGC;CGG→CGC;GGG→GGC。表Iにおいてイタリックとしたヌクレオチドは、そのような変化を示す。一旦完全な配列が同定されると、このアプローチが一般的にもはや必要でないことが理解される。
【0207】
Perkin Elmer 394 DNA/RNA合成機によってオリゴを合成し、2mlのNHOH中でカラムから溶出し、56℃での5時間のインキュベートにより脱保護した。このオリゴを0.3M 酢酸ナトリウムおよび2容量のエタノールの添加によって沈殿させた。次に、このサンプル遠心分離し、そしてそのペレットを100μlまたは1mlの水のいずれかに再懸濁した。OD260を、Perkin Elmer Lambda Bio分光光度計を使用して決定し、濃度を決定し、そして2〜10pmol/μlに調整した。
【0208】
(C)増幅)
標準PCRプロトコールは、以下のとおりである:50〜200ngのゲノムDNAを、20〜40μMの各オリゴ、400〜800μMのdNTPs溶液、1×PCR緩衝液(1.5mM MgClを含む)、2.5単位のTaqI DNAポリメラーゼ(Perkin Elmer AmpliTaq、GIBCO Platinum、Pwo DNAポリメラーゼ、またはTakara Shuzo Taqポリメラーゼを使用する)の存在下でテンプレートとして使用した。
【0209】
いくつかの場合において、PCRを10μlのDMSOまたは50μlの2Mベタインの添加によって最適化した。
【0210】
ホットスタート(全混合物を95℃で予め3分間インキュベーションしている間にポリメラーゼを添加する)の後に、各サンプルに二工程増幅を行った:最初の5サイクルを、制限酵素のテールを除く1つのオリゴのハイブリダイゼーション温度を使用して行い、次にオリゴ全長のハイブリダイゼーション温度に従って30サイクルを行った。このサイクルの次に、72℃で最後の10分間の伸長をした。
【0211】
標準サイクルは、以下のとおりである:
変性 ハイブリダイゼーション 伸長
最初の5サイクル 30秒 30秒 30〜60秒
95℃ 50〜55℃ 72℃
最後の30サイクル 30秒 30秒 30〜60秒
伸長時間は、増幅されるORFの長さに従って変化する。
【0212】
増幅を9600または2400 Perkin Elmer GeneAmp PCRシステムのいずれかを使用して行った。結果を確認するために、増幅容量の1/10を1〜1.5%アガロースゲルにロードし、そして各増幅フラグメントのサイズをDNA分子量マーカーと比較した。
【0213】
増幅したDNAを、1%アガロースゲルに直接ロードしたか、またはまずエタノール沈殿をして、適切な容量中に再懸濁し、1%アガロースゲルにロードした。次に、正確なサイズのバンドに対応するDNAフラグメントを、Qiagen Gel Extraction Kitを使用し、製造業者の指示に従い、ゲルから溶出して精製した。DNAフラグメントの最終容量は、水または10mM Tris、pH8.5の、30μlまたは50μlのいずれかであった。
【0214】
(D)PCRフラグメントの切断)
増幅フラグメントに対応する精製DNAを2つのアリコートに分け、そして以下を用いて2重に消化した:
−pET−21b+へのクローニングおよびC末端His−タグ融合物としてのタンパク質のさらなる発現のためのNdeI/XhoIまたはNheI/XhoI
−pGEX−KGへのクローニングおよびN末端GST融合物としてのタンパク質のさらなる発現のためのBamHI/XhoIまたはEcoRI/XhoI−ORF76について、pTRC−HisAベクターへのクローニングおよびN末端His−タグ融合物としてのタンパク質のさらなる発現のためのNheI/BamHI
−pGex−HisへのクローニングおよびN末端His−タグ融合物としてのタンパク質のさらなる発現のためのEcoRI/PstI、EcoRI/SalI、SalI/PstI。
【0215】
各精製DNAフラグメントを、各制限酵素(New England Biolabs)20単位を用い、30または40μlのいずれかの最終容量中で、適切な緩衝液の存在下で、インキュベート(37℃で3時間〜オーバーナイト)した。次に、消化産物をQIAquick PCR精製キットを使用して、製造業者の指示に従い、精製し、そして、水または10mM Tris−HCl(pH8.5)のいずれかの30または50μlの最終容量中で溶出した。最終DNA濃度を、適定した分子量マーカーの存在下での1%アガロースゲル電気泳動によって決定した。
【0216】
(E)クローニングベクター(pET22B、pGEX−KG、pTRC−HisA、およびpGex−His)の消化)
10μgのプラスミドを、適切な緩衝液の存在下で、200μlの反応容量中で、50単位の各制限酵素を用いて、37℃でオーバーナイトのインキュベーションで2重に消化した。消化物全体を1%アガロースゲルにロードした後に、消化したベクターに対応するバンドを、Qiagen QIAquick Gel Extraction Kitを使用してゲルから精製し、そのDNAを50μlの10mM Tris−HCl(pH8.5)中に溶出した。DNA濃度をサンプルのOD260を測定することにより推定し、そして50μg/μlに調整した。1μlのプラスミドを、各クローニング手順に使用した。
【0217】
ベクターpGEX−Hisは、トロンビン切断部位の上流に6つのヒスチジン残基をコードする領域を有し、ベクターpTRC99(Pharmacia)の多重クローニング部位を含有する改変したpGEX−2Tベクターである。
【0218】
(F)クローニング)
以前に消化して精製した各ORFに対応するフラグメントを、pET22bおよびpGEX−KGの両方にライゲーションした。最終容量20μl中で、分子比3:1のフラグメント/ベクターを、0.5μlのNEB T4 DNAリガーゼ(400単位/μl)を使用して、製造業者から供給された緩衝液の存在下でライゲーションした。この反応物を、室温で3時間、インキュベートした。いくつかの実験において、ライゲーションを、Boheringerの「Rapid Ligation Kit」を使用して、製造業者の指示に従い、行った。
【0219】
適切な株に組換えプラスミドを導入するために、100μlのE.coli DH5コンピテント細胞を、リガーゼ反応溶液とともに、40分間氷上でインキュベートし、次に、37℃で3分間インキュベートし、次に、800μlのLBブロスを添加した後、再度37℃で20分間インキュベートした。次に細胞を、Eppendorfの微量遠心機において最大速度で遠心分離し、そして約200μlの上清に再懸濁した。次に、その懸濁物をLBアンピシリン(100mg/ml)上にプレーティングした。
【0220】
組換えクローンのスクリーニングを、無作為に選択した5つのコロニーを、100μg/mlのアンピシリンを加えた2ml(pGEXまたはpTCクローン)または5ml(pETクローン)のLBブロスのいずれかにおいて37℃でオーバーナイトで増殖させて、行った。次に、細胞をペレットにして、Qiagen QIAprep Spin Miniprep Kitを使用し、製造業者の指示に従い、DNAを最終容量30μlに抽出した。各々個々のミニプレップ(約1g)の5μlを、NdeI/XhoIまたはBamHI/XhoIのいずれかを用いて消化し、そして全消化物を、1〜1.5%アガロースゲル(予想インサートのサイズに依存する)に、分子量マーカー(1Kb DNA Ladder、GIBCO)と並行してロードした。陽性クローンのスクリーニングを、正確なインサートのサイズに基づいて行った。
【0221】
ORF110、111、113、115、119、122、125および130のクローニングのために、2重に消化したPCR産物を、EcoRI−PstIクローニング部位を使用して、2重消化したベクター中にライゲーションした。あるいは、ORF115および127のクローニングのために、EcoRI−SalIクローニング部位を使用したか、またはORF122のクローニングのために、SalI−PstIクローニング部位を使用した。クローニングの後に、組換えプラスミドをE.coli宿主W3110に導入した。個々のクローンを50μl/mlアンピシリンを含有するLブロス中で37℃で、オーバーナイトで増殖させた。
【0222】
(G)発現)
発現ベクター中の各ORFクローンを、組換えタンパク質産物の発現に適切な株中に形質転換した。各構築物の1μlを使用して、30μlのE.coli BL21(pGEXベクター)、E.coli TOP10(pTRCベクター)またはE.coli BL21−DE3(pETベクター)を、上記のように形質転換した。pGEX−Hisベクターの場合、同一のE.coli株(W3110)を初期のクローニングおよび発現のために使用した。単一の組換えコロニーを2mlのLBおよびアンピシリン(100μg/ml)に接種し、37℃でオーバーナイトでインキュベートし、次に、100mlのフラスコ中で20mlのLBおよびアンピシリン(100μg/ml)中に1:30で希釈した(OD600の範囲が0.1〜0.15の間であることを確認する)。このフラスコをODが発現の誘導に適切な指数増殖期を示すまで(pETおよびpTRCベクターについて、0.4〜0.8 OD;pGEXおよびpGEX−Hisベクターについて0.8〜1 OD)、回転型水浴振とう機中で30℃でインキュベートした。pET、pTRCおよびpGEX−Hisベクターについて、タンパク質の発現を1mM IPTGの添加によって誘導し、一方、pGEX系の場合、IPTGの最終濃度は、0.2mMであった。30℃での3時間のインキュベーションの後、サンプルの最終濃度を、ODによって確認した。発現を確認するために、1mlの各サンプルを取り出し、微量遠心機で遠心分離し、ペレットをPBS中で再懸濁し、そしてクマシーブルー染色を用いる12% SDS−PAGEによって分析した。全サンプルを6000gで遠心分離し、そしてペレットをさらなる使用のためにPBS中に再懸濁した。
【0223】
(H)GST融合タンパク質の大規模精製)
単一のコロニーをLBおよびアンピシリンアガープレート上で37℃でオーバーナイトで増殖させた。細菌を、水浴振とう機中の20mlのLBおよびアンピシリン液体培養物中に接種し、オーバーナイトで増殖させた。細菌を、600mlの新鮮な培地中に1:30に希釈し、最適な温度(20〜37℃)でOD550が0.8〜1まで増殖させた。タンパク質の発現を0.2mMのIPTGを用いて誘導し、続いて、3時間インキュベートした。培養物を8000rpmで4℃で遠心分離した。上清を捨て、細菌のペレットを7.5mlの冷PBS中に懸濁した。この細胞を、Branson sonifier B−15を使用し、氷上で、30秒間、40Wで超音波処理して、破砕し、2回凍結融解して、再度遠心分離した。この上清を回収し、150μlのグルタチオン−Sepharose 4B樹脂(Pharmacia)(前もってPBSで洗浄)と混合し、室温で30分間インキュベートした。このサンプルを700gで5分間4℃で遠心分離した。この樹脂を10mlの冷PBSを用いて、10分間、2回洗浄し、1mlの冷PBSに再懸濁し、そして使い捨てカラムにロードした。この樹脂を素通り画分が0.02〜0.06のOD280に到達するまで2mlの冷PBSで2回洗浄した。GST融合タンパク質を、700μlの冷グルタチオン溶出緩衝液(10mM 還元グルタチオン、50mM Tris−HCl)の添加によって溶出し、そして画分をOD280が0.1になるまで回収した。各画分の21μlを、Biorad SDS−PAGE Molecular weight standard broad range(M1)(200、116.25、97.4、66.2、45、31、21.5、14.4、6.5kDa)またはAmersham Rainbow Marker(M2)(220、66、46、30、21.5、14.3kDa)のいずれかを標準として使用する12% SDSゲル上にロードした。GSTの分子量が26kDaなので、この値を各GST融合タンパク質の分子量に添加しなければならない。
【0224】
(I)His−融合物の溶解度分析(ORF111〜129))
His融合発現産物の溶解度を分析するために、3ml培養物のペレットを、緩衝液M1(500μl PBS pH7.2)中に再懸濁した。25μlのリゾチーム(10mg/ml)を添加し、細菌を15分間、4℃でインキュベートした。このペレットを、Branson sonifier B−15を使用し、30秒間、40Wで超音波処理して、2回凍結融解して、再度、遠心分離工程によってペレットと上清に分離した。この上清を回収し、そしてこのペレットを緩衝液M2(8M 尿素、0.5M NaCl、20mM イミダゾールおよび0.1M NaHPO)に再懸濁し、3〜4時間4℃でインキュベートした。遠心分離の後、上清を回収し、そしてペレットを緩衝液M3(6M グアニジン−HCl、0.5M NaCl、20mM イミダゾールおよび0.1M NaHPO)に4℃、オーバーナイトで再懸濁した。全工程からの上清を、SDS−PAGEで分析した。
【0225】
ORF113、119および120から発現したタンパク質が、PBSに可溶性であることを見いだした。その一方で、可溶化のために、ORF111、122、126および129は、尿素を必要とし、そしてORF125および127は、グアニジン−HClを必要とした。
【0226】
(J)His−融合物の大規模精製)
単一のコロニーをLBおよびアンピシリンアガープレート上で37℃でオーバーナイトで増殖させた。細菌を、20mlのLBおよびアンピシリン液体培養物中に接種し、水浴振とう機中でオーバーナイトでインキュベートした。細菌を、600mlの新鮮な培地中に1:30に希釈し、最適な温度(20〜37℃)でOD550が0.6〜0.8まで増殖させた。タンパク質の発現を1mMのIPTGの添加によって誘導し、そして、培養物をさらに3時間インキュベートした。培養物を8000rpmで4℃で遠心分離した。上清を捨て、細菌のペレットを7.5mlの(i)可溶性タンパク質について冷緩衝液A(300mM NaCl、50mM リン酸緩衝液、10mM イミダゾール、pH8)、または(ii)不溶性タンパク質について緩衝液B(尿素8M、10mM Tris−HCl、100mM リン酸緩衝液、pH8.8)中に懸濁した。
【0227】
この細胞を、Branson sonifier B−15を使用し、氷上で、30秒間、40Wで超音波処理して、破砕し、2回凍結融解して、そして再度遠心分離した。
【0228】
不溶性タンパク質について、上清を−20℃に保存し、一方、ペレットを2mlの緩衝液C(6M 塩酸グアニジン、100mM リン酸緩衝液、10mM Tris―HCl、pH7.5)に再懸濁し、そしてホモジナイザー中で10サイクル処理した。この産物を13000rpmで40分間遠心分離した。
【0229】
上清を回収し、150μlのNi2+−樹脂(Pharmacia)(適切なように、緩衝液Aまたは緩衝液Bのいずれかで前もって洗浄する)と混合し、30分間、穏やかな撹拌をしながら、室温でインキュベートした。このサンプルを700gで5分間4℃で遠心分離した。この樹脂を10mlの緩衝液AまたはBを用いて10分間、2回洗浄し、1mlの緩衝液AまたはB中に再懸濁し、使い捨てカラムにロードした。この樹脂を、(i)2mlの冷緩衝液Aを用いて4℃で、または(ii)2mlの緩衝液Bを用いて室温でのいずれかで、素通り画分が0.02〜0.06のOD280に達するまで洗浄した。
【0230】
この樹脂を、(i)2mlの冷20mMのイミダゾール緩衝液(300mM NaCl、50mM リン酸緩衝液、20mM イミダゾール、pH8)、または(ii)緩衝液D(尿素8M、10mM Tris−HCl、100mM リン酸緩衝液、pH6.3)のいずれかで、素通り画分が0.02〜0.06のOD280に達するまで洗浄した。このHis−融合タンパク質を、700μlの(i)冷溶出緩衝液A(300mM NaCl、50mM リン酸緩衝液、250mM イミダゾール、pH8)、または(ii)溶出緩衝液B(尿素8M、10mM Tris−HCl、100mM リン酸緩衝液、pH4.5)のいずれかの添加によって溶出し、OD280が0.1になるまで、画分を回収した。21μlの各画分を、12%SDSゲルにロードした。
【0231】
(K)His−融合タンパク質の再生) 10%グリセロールを、変性タンパク質に添加した。次にこのタンパク質を透析緩衝液I(10%グリセロール、0.5M アルギニン、50mM リン酸緩衝液、5mM 還元型グルタチオン、0.5mM 酸化型グルタチオン、2M 尿素、pH8.8)を使用して20μg/mlまで希釈し、同じ緩衝液に対して、4℃で12〜14時間透析した。このタンパク質をさらに透析緩衝液II(10%グリセロール、0.5M アルギニン、50mM リン酸緩衝液、5mM 還元型グルタチオン、0.5mM 酸化型グルタチオン、pH8.8)に対して4℃で12〜14時間透析した。タンパク質濃度を、以下の式を用いて推定した:
タンパク質(mg/ml)=(1.55×OD280)−(0.76×OD260)。
【0232】
(L)His−融合物の大規模精製(ORF111〜129))
500mlの細菌培養物を誘導し、そして融合タンパク質を、上記の手順を使用して、緩衝液M1、M2またはM3中で可溶化した。細菌の粗抽出物を、この融合タンパク質の可溶化緩衝液に依存して、緩衝液M1、M2またはM3を用いて平衡化したNi−NTAスーパーフローカラム(Quiagen)上にロードした。結合しない物質を、カラムを同一の緩衝液で洗浄することにより溶出した。対応する500mMのイミダゾールを含有する緩衝液を用いて、特異的なタンパク質を溶出し、イミダゾールを含有しない対応する緩衝液に対して、透析した。各操作の後、このカラムを、少なくとも2カラム容量の0.5M 水酸化ナトリウムを用いて洗浄することにより、消毒し、次の使用の前に再度平衡化した。
【0233】
(M)マウスの免疫化
20μgの各精製タンパク質を使用して、マウスの腹腔内で免疫した。ORF2、4、15、22、27、28、37、76、89および97の場合、Balb−Cマウスを、Al(OH)をアジュバントとして用いて、1、21および42日目に免疫し、そして56日目に採取したサンプルにおける免疫応答をモニターした。ORF44、106および132について、CD1マウスを、同一のプロトコールを用いて免疫した。ORF25および40について、CD1マウスを、AL(OH)ではなくフロイントアジュバントを用いて免疫し、そして免疫応答を56日目ではなく42日目に測定したことを除いて、同一の免疫プロトコールを使用した。同様に、ORF23、32、38および79について、CD1マウスをフロイントアジュバントを用いて免疫したが、免疫応答を49日目に測定した。
【0234】
(N)ELISAアッセイ(血清分析))
無莢膜のMenB M7株を、チョコレートアガープレート上にプレートし、37℃でオーバーナイトでインキュベートした。細菌のコロニーをアガープレートから滅菌ドラコン(dracon)スワブを使用して回収し、0.25%グルコースを含有する7mlのMueller−Hintonブロス(Difco)中に接種した。細菌の増殖を30分毎に、OD620を追跡することによりモニターした。細菌をODが0.3〜0.4の値に達するまで増殖させた。培養物を10分間10000rpmで遠心分離した。上清を捨て、細菌をPBSで1回洗浄し、0.025%のホルムアルデヒドを含有するPBS中に再懸濁し、室温で2時間インキュベートし、次に4℃でオーバーナイトで攪拌しながらインキュベートした。100μlの細菌細胞を、96ウェルGreinerプレートの各ウェルに添加し、そして4℃でオーバーナイトでインキュベートした。次にそのウェルをPBT洗浄緩衝液(PBS中の0.1% Tween−20)を用いて3回洗浄した。200μlの飽和緩衝液(水中に2.7%のポリビニルピロリドン 10)を各ウェルに添加し、そしてプレートを37℃で2時間インキュベートした。ウェルをPBTで3回洗浄した。200μlの希釈血清(希釈緩衝液:PBS中に1% BSA、0.1% Tween−20、0.1% NaN)を各ウェルに添加し、そしてそのプレートを37℃で90分間インキュベートした。ウェルをPBTで3回洗浄した。希釈緩衝液中に1:2000に希釈した100μlのHRP−結合体化ウサギ抗マウス(Dako)血清を、各ウェルに添加し、そのプレートを37℃で90分間インキュベートした。ウェルを、PBT緩衝液で3回洗浄した。100μlのHRPのための基質緩衝液(25mlのクエン酸緩衝液、pH5、10mgのO−フェニルジアミンおよび10μlのHO)を各ウェルに添加し、このプレートを室温に20分間放置した。100μlのHSOを各ウェルに添加し、OD490を追跡した。OD490が対応する免疫前血清の2.5倍である場合、ELISAが陽性であると考慮した。
【0235】
(O)FACScan細菌結合アッセイ手順)
無莢膜MenB M7株をチョコレートアガープレートにプレートし、37℃でオーバーナイトでインキュベートした。細菌のコロニーをアガープレートから滅菌ドラコン(dracon)スワブを使用して回収し、0.25%グルコースを含有する8mlのMueller−Hintonブロス(Difco)を含む4本のチューブに中に接種した。細菌の増殖を30分毎に、OD620を追跡することによりモニターした。細菌をODが0.35〜0.5の値に達するまで増殖させた。培養物を5分間4000rpmで遠心分離した。上清を捨て、ペレットをブロッキング緩衝液(1% BSA、0.4% NaN)中に再懸濁し、5分間4000rpmで遠心分離した。細胞をOD620が0.07に達するようにブロッキング緩衝液に再懸濁した。100μlの細菌細胞を、Coster96ウェルプレートの各ウェルに添加した。100μlの希釈(1:200)血清(ブロッキング緩衝液中)を各ウェルに添加し、そしてそのプレートを4℃で2時間インキュベートした。細胞を5分間4000rpmで遠心分離し、その上清を吸引し、各ウェルに200μl/ウェルのブロッキング緩衝液を添加することにより、細胞を洗浄した。100μlのR−フィコエリトリン結合体化F(ab)ヤギ抗マウス(1:100希釈)を各ウェルに添加し、そしてプレートを1時間4℃でインキュベートした。細胞を、4000rpm5分間の遠心分離によって遠心沈殿し、200μl/ウェルのブロッキング緩衝液を添加することにより、洗浄した。その上清を吸引し、そして細胞を200μl/ウェルのPBS、0.25%のホルムアルデヒドに再懸濁した。そのサンプルをFACScanチューブに移して、読み取った。FACScan設定の状態は、以下のとおりである:FL1 オン、FL2およびFL3 オフ;FSC−H閾値:92;FSC PMT電圧:E 02;SSC PMT:474;増幅利得 7.1:FL−2 PMT:539;補償値:0。
【0236】
(P)OMV調製)
細菌を5GCプレート上でオーバーナイトで増殖させ、ループを用いて収穫し、そして10mlの20mM Tris−HClに再懸濁した。56℃、30分の熱不活化を行い、そして細菌を10分間氷上で超音波処理することにより破壊した(50% 衝撃係数、50% 出力)。未破壊細胞を5000g、10分間の遠心分離によって除去し、そして全細胞エンベロープ画分を50000g、4℃、75分間の遠心分離によって回収した。細胞質膜タンパク質を粗外膜から抽出するために、全画分を2%サルコシル(Sigma)中に再懸濁し、そして室温で20分間インキュベートした。この懸濁液を、10000gで10分間遠心し、凝集物を除去し、そしてこの上清をさらに50000gで75分間、超遠心分離して、外膜をペレット化した。この外膜を、10mM Tris−HCl(pH8)に再懸濁し、そしてそのタンパク質濃度をBio−Rad Proteinアッセイによって、BSAを標準として測定した。
【0237】
(Q)全抽出物の調製)
細菌をGCプレート上でオーバーナイトで増殖させ、ループを用いて収穫し、そして1mlの20mM Tris−HClに再懸濁した。56℃、30分の熱不活化を行った。
【0238】
(R)ウェスタンブロッティング)
MenB株2996由来の精製タンパク質(500ng/レーン)、外膜ベシクル(5μg)および全細胞抽出物(25μg)を、15%SDS−PAGE上にロードし、ニトロセルロース膜上に転写した。この転写を、2時間、150mA、4℃、転写緩衝液中(0.3% Tris Base、1.44% グリシン、20% メタノール)で行った。この膜を飽和緩衝液(PBS中の10% スキムミルク、0.1% Triton X100)中での4℃のオーバーナイトのインキュベートにより飽和させた。この膜を洗浄緩衝液(PBS中の3% スキムミルク、0.1% Triton X100)を用いて2回洗浄し、洗浄緩衝液中に1:200に希釈したマウス血清とともに、2時間37℃でインキュベートした。この膜を2回洗浄し、1:2000希釈の西洋わさびペルオキシダーゼ標識化抗マウスIgとともに90分間インキュベートした。この膜をPBS中の0.1% Triton X100を用いて2回洗浄し、Opti−4CN基質キット(Bio−Rad)を用いて、発色させた。この反応を水を添加して停止した。
【0239】
(S)殺菌性アッセイ)
MC58株をチョコレートアガープレート上で、37℃でオーバーナイトで増殖させた。5〜7のコロニーを回収し、そして7mlのMueller−Hintonブロスに接種するために使用した。この懸濁液を、旋回装置上で37℃でインキュベートし、OD620が0.5〜0.8になるまで増殖させた。この培養物を滅菌1.5mlエッペンドルフチューブに等分し、微量遠心機中で最大速度で20分間遠心分離した。このペレットをGey緩衝液(Gibco)中で1回洗浄し、そして同一の緩衝液中でOD620を0.5に再懸濁し、Gey緩衝液中に1:20000に希釈し、25℃で保存した。
【0240】
50μlのGey緩衝液/1% BSAを96ウェル組織培養プレートの各ウェルに添加した。25μlの希釈マウス血清(Gey緩衝液/0.2% BSA中に1:100)を各ウェルに添加し、そのプレートを4℃でインキュベートした。上記記載の細菌懸濁液の25μlを各ウェルに添加した。熱不活化(56℃水浴中に30分)または正常乳児ウサギ補体のいずれかの25μlを各ウェルに添加した。乳児ウサギ補体の添加の直後に、1ウェルあたり22μlの各サンプルをMueller−Hintonアガープレート上にプレートした(時間0)。この96ウェルプレートを1時間37℃で回転しながらインキュベートし、次に、1ウェルあたり22μlの各サンプルをMueller−Hintonアガープレート上にプレートした(時間1)。オーバーナイトのインキュベートの後、時間0および時間1に対応するコロニーを計数した。
【0241】
表IIは、クローニング、発現および精製結果の概要を示す。
【0242】
(実施例1)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidisで同定された(配列番号1):
【0243】
【化1】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号2;ORF37)に対応する:
【0244】
【化2】
Figure 0004472866
さらなる研究は、以下の完全ヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号3)
【0245】
【化3】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号4;ORF37−1)に対応する:
【0246】
【化4】
Figure 0004472866
さらなる研究は、N.meningitidisのA系統における対応遺伝子を同定した(配列番号5):
【0247】
【化5】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号6;ORF37a)を有するタンパク質をコードする:
【0248】
【化6】
Figure 0004472866
初めに同定されたB系統部分配列(ORF37)は、ORF37aとの75アミノ酸にわたる重複で68.0%の同一性示す:
【0249】
【化7】
Figure 0004472866
さらなる研究は、N.gonorrhoeaeにおいて対応する遺伝子を同定した(配列番号7):
【0250】
【化8】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号8;ORF37ng)を有するタンパク質をコードする:
【0251】
【化9】
Figure 0004472866
初めに同定されたB系統部分配列(ORF37)は、ORF37ngとの111アミノ酸にわたる重複で64.9%の同一性示す:
【0252】
【化10】
Figure 0004472866
B系統完全配列(ORF37−1)およびORF37ngは、198アミノ酸の重複において51.5%の同一性を示す:
【0253】
【化11】
Figure 0004472866
これらのアミノ酸配列に関するコンピューター分析は推定リーダー配列を示し、そしてN.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、ならびにそれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のため、または抗体の惹起のための有用な抗原になり得ることが予測された。
【0254】
ORF37−1(11kDa)を上記のように、pETベクターおよびpGexベクターにクローン化し、E.coliにおいて発現させた。タンパク質発現および精製の産物を、SDS−PAGEにより分析した。図1AはGST融合タンパク質のアフィニティ−精製の結果を示し、図1BはE.coliにおけるHis融合体の発現の結果を示す。精製GST融合タンパク質を使用してマウスを免疫し、その血清をELISAのため(陽性結果)、FACS分析のため(図1C)および殺菌性アッセイのため(図1D)に使用した。これらの実験は、ORF37−1が表面露出タンパク質であり、そして有用な免疫原であることを確認する。
【0255】
図1Eは、ORF37−1についての親水性、抗原性指標、およびAMPHI領域のプロットを示す。
【0256】
(実施例2)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号9):
【0257】
【化12】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号10)に対応する。
【0258】
【化13】
Figure 0004472866
【0259】
【化14】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列に関するコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(仮定のH.influenzaeタンパク質(ybrd.haein;登録番号p45029)との相同性)
配列番号9およびybrd.haeinは、122アミノ酸の重複内で48.4%のアミノ酸同一性を示す:
【0260】
【化15】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
配列番号9は、N.gonorrhoeae由来の推定ORFと118アミノ酸にわたる重複で99.2%の同一性を示す:
【0261】
【化16】
Figure 0004472866
完全yrbd H.influenzae配列は、リーダー配列を有し、そして、全長相同性N.meningitidisタンパク質もまたリーダー配列を有することが予測される。これは、それが膜タンパク質、分泌タンパク質、または表面タンパク質のいずれかであること、およびそのタンパク質、またはそのエピトープの1つが、ワクチンまたは診断薬のための有用な抗原であり得ることを示唆する。
【0262】
(実施例3)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号11):
【0263】
【化17】
Figure 0004472866
【0264】
【化18】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号12;ORF3)に対応する:
【0265】
【化19】
Figure 0004472866
さらなる配列分析は、以下の完全ヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号13):
【0266】
【化20】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号14;ORF3−1)に対応する:
【0267】
【化21】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列に関するコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(A系統)由来の推定ORFとの相同性) ORF3は、N.meningitidisのA系統由来のORF(ORF3a)との286アミノ酸にわたる重複で93.0%の同一性を示す:
【0268】
【化22】
Figure 0004472866
完全長ORF3aヌクレオチド配列(配列番号15)は以下に示す:
【0269】
【化23】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号16)を有するタンパク質をコードすると予測される:
【0270】
【化24】
Figure 0004472866
【0271】
【化25】
Figure 0004472866
2つの膜貫通ドメインに、下線を付す。
【0272】
ORF3−1はORF3aとの410アミノ酸の重複内で94.6%の同一性を示す:
【0273】
【化26】
Figure 0004472866
(B.subtilisのyvfc遺伝子(登録番号Z71928)によりコードされる仮定タンパク質との相同性)
ORF3およびYVFCタンパク質は、170アミノ酸の重複(BLASTp)において55%のアミノ酸同一性を示す:
【0274】
【化27】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF3は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF3.ng)との286アミノ酸にわたる重複で86.3%の同一性を示す:
【0275】
【化28】
Figure 0004472866
完全長ORF3ngヌクレオチド配列(配列番号17)は、以下に示す:
【0276】
【化29】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号18)を有するタンパク質をコードする:
【0277】
【化30】
Figure 0004472866
このタンパク質はORF3−1との413アミノ酸の重複内で86.9%の同一性を示す:
【0278】
【化31】
Figure 0004472866
さらに、ORF3ngはB.subtilis由来の仮定タンパク質との有意な相同性を示す:
【0279】
【化32】
Figure 0004472866
yvfc遺伝子の仮定の産物は、R.melilotiのEXOY(エキソ多糖類生産タンパク質)に類似性を示す。このこと、および相同性N.gonorrhoeae配列内の2つの推定膜貫通領域に基づき、これらのタンパク質、またはこれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のための、または抗体の惹起のための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0280】
(実施例4)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号19):
【0281】
【化33】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号20;ORF5)に対応する:
【0282】
【化34】
Figure 0004472866
さらなる配列分析は、完全DNA配列が以下の配列(配列番号21)であることを明らかにした:
【0283】
【化35】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号22;ORF5−1)に対応する:
【0284】
【化36】
Figure 0004472866
さらなる研究は、N.meningitidisのA系統における対応遺伝子を同定した(配列番号23):
【0285】
【化37】
Figure 0004472866
【0286】
【化38】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号24;ORF5a)を有するタンパク質をコードする:
【0287】
【化39】
Figure 0004472866
初めに同定されたB系統部分配列(ORF5)は、ORF5aとの124アミノ酸にわたる重複で54.7%の同一性を示す:
【0288】
【化40】
Figure 0004472866
B系統完全配列(ORF5−1)およびORF5aは300アミノ酸の重複内で92.7%の同一性を示す:
【0289】
【化41】
Figure 0004472866
【0290】
【化42】
Figure 0004472866
さらなる研究は、N.gonorrhoeaeにおけるDNA部分配列(配列番号25)を同定した。これは、以下のアミノ酸配列(配列番号26;ORF5ng)を有するタンパク質をコードする。:
【0291】
【化43】
Figure 0004472866
さらなる分析は完全淋菌ヌクレオチド配列(配列番号27)が以下であることを明らかにした:
【0292】
【化44】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号28;ORF5ng−1)を有するタンパク質をコードする:
【0293】
【化45】
Figure 0004472866
初めに同定されたB系統部分配列(ORF5)は、部分淋菌配列(ORF5ng)との135アミノ酸にわたる重複で83.1%の同一性を示す:
【0294】
【化46】
Figure 0004472866
B系統完全配列および淋菌配列(ORF5−1およびORF5ng−1)は、304アミノ酸の重複内で92.4%の同一性を示す:
【0295】
【化47】
Figure 0004472866
【0296】
【化48】
Figure 0004472866
これらのアミノ酸配列に関するコンピューター分析は、推定リーダー配列を示し、そして以下の相同性を同定した:
(H.influenzaeの溶血素ホモログTlyC(登録番号U32716)との相同性)
ORF5およびTlyCタンパク質は、77アミノ酸の重複(BLASTp)において58%のアミノ酸同一性を示す。
【0297】
【化49】
Figure 0004472866
ORF5ng−1はまたTlyCとの有意な相同性を示す:
【0298】
【化50】
Figure 0004472866
【0299】
【化51】
Figure 0004472866
(E.coli由来の仮定の分泌タンパク質との相同性)
ORF5aはE.coli由来の仮定の分泌タンパク質との相同性を示す:
【0300】
【化52】
Figure 0004472866
この分析(H.influenzae由来のTlyC溶血素ホモログ(溶血素は分泌タンパク質である)に対するアミノ酸相同性を含む)に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質は分泌され、従って、ワクチンまたは診断薬に有用な抗原であり得ることが予測された。
【0301】
ORF5−1(30.7kDa)を、上記のようにpGexベクターにクローン化し、そしてE.coliにおいて発現させた。タンパク質発現および精製の産物をSDS−PAGEにより分析した。図2Aは、GST融合タンパク質のアフィニティ−精製の結果を示す。精製GST融合タンパク質使用してマウスを免疫し、その血清をウエスタンブロット分析(図1B)のために使用した。これらの実験は、ORF5−1が表面露出タンパク質であり、そして有用な免疫原であることを確認する。
【0302】
(実施例5)
以下の部分DNA配列はN.meningitidisにおいて同定された(配列番号29):
【0303】
【化53】
Figure 0004472866
【0304】
【化54】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号30;ORF7)に対応する:
【0305】
【化55】
Figure 0004472866
さらなる配列分析は、以下の完全DNA配列(配列番号31)を明らかにした:
【0306】
【化56】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号32;ORF7−1)に対応する:
【0307】
【化57】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列に関するコンピューター分析は以下の結果を与えた:
(H.influenzaeのyceg遺伝子(登録番号P44270)によりコードされる仮定のタンパク質との相同性)
ORF7およびycegタンパク質は192アミノ酸の重複内で44%のアミノ酸同一性を示す:
【0308】
【化58】
Figure 0004472866
【0309】
【化59】
Figure 0004472866
完全長YCEGタンパク質は以下の配列を有する:
【0310】
【化60】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A系統)由来の推定ORFとの相同性)
ORF7は、N.meningitidisのA系統由来のORF(ORF7a)との187アミノ酸にわたる重複で95.2%の同一性を示す:
【0311】
【化61】
Figure 0004472866
完全長ORF7aヌクレオチド配列(配列番号33)は以下に示す:
【0312】
【化62】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号34)を有するタンパク質をコードすると予測される:
【0313】
【化63】
Figure 0004472866
リーダー配列に下線を付す。
【0314】
ORF7aおよびORF7−1は、331アミノ酸重複において98.8%の同一性を示す:
【0315】
【化64】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF7は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF7.ng)との187アミノ酸にわたる重複で94.7%の同一性を示す:
【0316】
【化65】
Figure 0004472866
【0317】
【化66】
Figure 0004472866
ORF7ngヌクレオチド配列(配列番号35)は、以下のアミノ酸配列(配列番号36)を有するタンパク質をコードすると予測される:
【0318】
【化67】
Figure 0004472866
さらなる配列分析は、ORF7ngの部分DNA配列を明らかにした(配列番号37):
【0319】
【化68】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号38;ORF7ng−1)に対応する:
【0320】
【化69】
Figure 0004472866
ORF7ng−1およびORF7−1は、298アミノ酸の重複内で98.0%の同一性を示す:
【0321】
【化70】
Figure 0004472866
【0322】
【化71】
Figure 0004472866
さらに、ORF7ng−1は、仮定のE.coliタンパク質との有意な相同性を示す:
【0323】
【化72】
Figure 0004472866
この分析(H.influenzae YCEGタンパク質が可能性のあるリーダー配列を有するという事実を含む)に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、およびそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断薬のための、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0324】
(実施例6)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号39):
【0325】
【化73】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号40;ORF9)に対応する:
【0326】
【化74】
Figure 0004472866
【0327】
【化75】
Figure 0004472866
さらなる配列分析は、完全DNA配列を明らかにした(配列番号41):
【0328】
【化76】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号42;ORF9−1)に対応する:
【0329】
【化77】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列に関するコンピューター分析は以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(A系統)由来の推定ORFとの相同性)
ORF9は、N.meningitidisのA系統由来のORF(ORF9a)との166アミノ酸にわたる重複で89.8%の同一性を示す:
【0330】
【化78】
Figure 0004472866
【0331】
【化79】
Figure 0004472866
完全長ORF9aヌクレオチド配列(配列番号43)は、以下に示す:
【0332】
【化80】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号44)を有するタンパク質をコードする:
【0333】
【化81】
Figure 0004472866
【0334】
【化82】
Figure 0004472866
ORF9aおよびORF9−1は614アミノ酸の重複内で95.3%の同一性を示す:
【0335】
【化83】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF9は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF9.ng)との163アミノ酸にわたる重複で82.8%の同一性を示す:
【0336】
【化84】
Figure 0004472866
ORF9ngヌクレオチド配列(配列番号45)は、以下のアミノ酸配列(配列番号46)を有するタンパク質をコードすると予測された:
【0337】
【化85】
Figure 0004472866
アミノ酸1〜28は推定リーダー配列であり、そしてアミノ酸173〜189は膜貫通ドメインであると予測される。
【0338】
さらなる配列分析は完全長ORF9ng DNA配列(配列番号47)を明らかにした:
【0339】
【化86】
Figure 0004472866
【0340】
【化87】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号48)を有するタンパク質をコードする:
【0341】
【化88】
Figure 0004472866
ORF9ngおよびORF9−1は、614アミノ酸の重複内で88.1%の同一性を示す:
【0342】
【化89】
Figure 0004472866
【0343】
【化90】
Figure 0004472866
さらに、ORF9ngはP.aeruginosa由来の仮定のタンパク質との有意な相同性を示す:
【0344】
【化91】
Figure 0004472866
【0345】
【化92】
Figure 0004472866
この分析に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、およびそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断薬のための、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0346】
(実施例7)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号49);
【0347】
【化93】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号50;ORF11)に対応する:
【0348】
【化94】
Figure 0004472866
さらなる配列分析は完全DNA配列(配列番号51)を明らかにした:
【0349】
【化95】
Figure 0004472866
【0350】
【化96】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号52;ORF11−1)に対応する:
【0351】
【化97】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列に関するコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(Pseudomonas putidaの60kDa内膜タンパク質(登録番号P25754)との相同性)
ORF11および60kDaタンパク質は、229アミノ酸重複において58%のアミノ酸同一性を示す(BLASTp)。
【0352】
【化98】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A系統)由来の推定ORFとの相同性)
ORF11は、N.meningitidisのA系統由来のORF(ORF11a)との240アミノ酸にわたる重複で97.9%の同一性を示す:
【0353】
【化99】
Figure 0004472866
【0354】
【化100】
Figure 0004472866
完全長ORF11aヌクレオチド配列(配列番号53)は以下に示す:
【0355】
【化101】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号54)を有するタンパク質をコードする:
【0356】
【化102】
Figure 0004472866
ORF11aおよびORF11−1は、544アミノ酸の重複内で95.2%の同一性を示す:
【0357】
【化103】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF11は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF11.ng)との240アミノ酸にわたる重複で96.3%の同一性を示す:
【0358】
【化104】
Figure 0004472866
【0359】
【化105】
Figure 0004472866
ORF11ngヌクレオチド配列(配列番号55)は、以下のアミノ酸配列(配列番号56)を有するタンパク質をコードすると予測された:
【0360】
【化106】
Figure 0004472866
さらなる配列分析は、完全淋菌DNA配列(配列番号57)が以下の配列であることを明らかにした:
【0361】
【化107】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号58;ORF11ng−1)を有するタンパク質をコードする:
【0362】
【化108】
Figure 0004472866
【0363】
【化109】
Figure 0004472866
ORF11ng−1およびORF11−1は、546アミノ酸の重複内で95.1%の同一性を示す:
【0364】
【化110】
Figure 0004472866
さらに、ORF11ng−1は、データベースからの内膜タンパク質(登録番号p25754)との有意な相同性を示す:
【0365】
【化111】
Figure 0004472866
この分析(P.putida由来の内膜タンパク質および推定膜貫通ドメイン(髄膜炎菌性および淋菌性タンパク質の両方において見られる)に対する相同性を含む)に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断薬のための、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0366】
(実施例8)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号59):
【0367】
【化112】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号60;ORF13)に対応する:
【0368】
【化113】
Figure 0004472866
さらなる配列分析は、DNA配列をわずかに精巧にした(配列番号61):
【0369】
【化114】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号62;ORF13−1)に対応する:
【0370】
【化115】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列に関するコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(A系統)由来の推定ORFとの相同性)
ORF13は、N.meningitidisのA系統由来のORF(ORF13a)との126アミノ酸にわたる重複で92.9%の同一性を示す:
【0371】
【化116】
Figure 0004472866
【0372】
【化117】
Figure 0004472866
完全長ORF13aヌクレオチド配列(配列番号63)は、以下に示す:
【0373】
【化118】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号64)を有するタンパク質をコードする:
【0374】
【化119】
Figure 0004472866
ORF13aおよびORF13−1は、126アミノ酸重複において94.4%の同一性を示す:
【0375】
【化120】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF13は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF13.ng)との126アミノ酸配列にわたる重複で89.7%の同一性を示す:
【0376】
【化121】
Figure 0004472866
完全長ORF13ngヌクレオチド配列(配列番号65)は、以下に示す:
【0377】
【化122】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号66)を有するタンパク質をコードする:
【0378】
【化123】
Figure 0004472866
ORF13ngは、ORF13−1との126アミノ酸重複において91.3%の同一性を示す:
【0379】
【化124】
Figure 0004472866
この分析(このタンパク質中の延長リーダー配列を含む)に基づき、ORF13およびORF13ngは外膜タンパク質である可能性が高いと予測される。よって、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、ならびにそれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のための、または抗体の惹起のための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0380】
(実施例9)
以下のDNA配列はN.meningitidisにおいて同定された(配列番号67):
【0381】
【化125】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号68;ORF2)に対応する:
【0382】
【化126】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全ヌクレオチド配列(配列番号69)を明らかにした:
【0383】
【化127】
Figure 0004472866
【0384】
【化128】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号70;ORF2−1)に対応する:
【0385】
【化129】
Figure 0004472866
さらなる研究は、N.meningitidisのA系統において対応する遺伝子を同定した(配列番号71):
【0386】
【化130】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号72;ORF2a)をコードする:
【0387】
【化131】
Figure 0004472866
初めに同定されたB系統部分配列(ORF2)は、ORF2aとの118アミノ酸にわたる重複で97.5%の同一性を示す:
【0388】
【化132】
Figure 0004472866
B系統完全配列(ORF2−1)およびORF2aは、228アミノ酸の重複内で98.2%の同一性を示す:
【0389】
【化133】
Figure 0004472866
【0390】
【化134】
Figure 0004472866
さらなる研究は、以下のアミノ酸配列(配列番号74;ORF2ng)をコードする、N.gonorrhoeaeにおける部分DNA配列(配列番号73)を同定した:
【0391】
【化135】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全淋菌遺伝子配列(配列番号75)を同定した:
【0392】
【化136】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号76;ORF2ng−1)を有するタンパク質をコードする:
【0393】
【化137】
Figure 0004472866
初めに同定されたB系統部分配列(ORF2)は、ORF2ngと136アミノ酸にわたる重複で87.5%の同一性を示す:
【0394】
【化138】
Figure 0004472866
B系統完全配列および淋菌配列(ORF2−1およびORF2ng−1)は、229アミノ酸重複において91.7%の同一性を示す:
【0395】
【化139】
Figure 0004472866
【0396】
【化140】
Figure 0004472866
これらのアミノ酸配列に関するコンピューター分析は、膜貫通領域(下線)を示し、そしてまた淋菌配列とE.coliのTatBタンパク質との間の相同性(59%の同一性)を明らかにした:
【0397】
【化141】
Figure 0004472866
この分析に基づき、ORF2、ORF2a、およびORF2ngは膜タンパク質である可能性が高いこと、従ってN.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、ならびにそれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のための、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0398】
ORF2−1(16kDa)を、上記のように、pETおよびpGexベクターにクローン化し、E.coliにおいて発現させた。タンパク質発現および精製の産物をSDS−PAGEにより分析した。図3Aは、GST融合タンパク質のアフィニティ−精製の結果を示し、そして図3Bは、E.coliにおけるHis融合タンパク質の発現の結果を示す。精製GST融合タンパク質を使用してマウスを免疫し、その血清をウェスタンブロットために(図3C)、ELISAのために(陽性結果)、およびFACS分析のために(図3D)使用した。これらの実験は、ORF37−1が表面露出タンパク質であり、そして有用な免疫原であることを確認する。
【0399】
(実施例10)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号77):
【0400】
【化142】
Figure 0004472866
【0401】
【化143】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号78;ORF15)に対応する:
【0402】
【化144】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全ヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号79)
【0403】
【化145】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号80;ORF15−1)に対応する:
【0404】
【化146】
Figure 0004472866
さらなる研究は、N.meningitidisのA系統における対応遺伝子を同定した(配列番号81):
【0405】
【化147】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号82;ORF15a)を有するタンパク質をコードする:
【0406】
【化148】
Figure 0004472866
【0407】
【化149】
Figure 0004472866
初めに同定されたB系統部分配列(ORF15)は、ORF15aとの213アミノ酸にわたる重複で98.1%の同一性を示す:
【0408】
【化150】
Figure 0004472866
B系統完全配列(ORF15−1)およびORF15aは、320アミノ酸重複において98.8%の同一性を示す:
【0409】
【化151】
Figure 0004472866
【0410】
【化152】
Figure 0004472866
さらなる研究は、N.gonorrhoeaeにおける対応遺伝子を同定した(配列番号83):
【0411】
【化153】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号84;ORF15ng)を有するタンパク質をコードする:
【0412】
【化154】
Figure 0004472866
初めに同定されたB系統部分配列(ORF15)は、ORF15ngとの213アミノ酸にわたる重複で97.2%の同一性を示す:
【0413】
【化155】
Figure 0004472866
B系統完全配列(ORF15−1)およびORF15ngは、320アミノ酸重複において98.8%の同一性を示す:
【0414】
【化156】
Figure 0004472866
【0415】
【化157】
Figure 0004472866
これらのアミノ酸配列に関するコンピューター分析は、ILSACモチーフ(MOTIFSプログラムにより予測されるように、推定の膜リポタンパク質脂質結合部位)を明らかにし、推定リーダー配列を示し、そしてN.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断薬のために、または抗体を惹起するために有用な抗原であり得ることが予測される。
【0416】
ORF15−1(31.7kDa)を、上記のように、pETベクターおよびpGexベクターにクローン化し、そしてE.coliにおいて発現させた。タンパク質発現および精製の産物をSDS−PAGEにより分析した。図4AはGST融合タンパク質のアフィニティ−精製の結果を示し、そして図4BはE.coliにおけるHis融合タンパク質の発現の結果を示す。精製GST融合タンパク質を使用してマウスを免疫し、その血清をウェスタンブロットのために(図4C)およびELISAのために(陽性結果)使用した。これらの実験は、ORFX−1が表面露出タンパク質であり、そして有用な免疫原であることを確認する。
【0417】
(実施例11)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号85):
【0418】
【化158】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号86;ORF17)に対応する:
【0419】
【化159】
Figure 0004472866
【0420】
【化160】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全ヌクレオチド配列(配列番号87)を明らかにした:
【0421】
【化161】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号88;ORF17−1)に対応する:
【0422】
【化162】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列に関するコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(仮定のH.influenzae膜貫通タンパク質HI0902(登録番号P44070)との相同性)
ORF17およびHI0902タンパク質は、192アミノ酸の重複において28%のアミノ酸同一性を示す:
【0423】
【化163】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A系統)由来の推定ORFとの相同性)
ORF17は、N.meningitidisのA系統由来のORF(ORF17a)との196アミノ酸にわたる重複で96.9%の同一性を示す:
【0424】
【化164】
Figure 0004472866
【0425】
【化165】
Figure 0004472866
完全長ORF17aヌクレオチド配列(配列番号89)は、以下に示す:
【0426】
【化166】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号90)を有するタンパク質をコードする:
【0427】
【化167】
Figure 0004472866
ORF17aおよびORF17−1は、268アミノ酸重複において98.9%の同一性を示す:
【0428】
【化168】
Figure 0004472866
【0429】
【化169】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF17は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF17.ng)との196アミノ酸にわたる重複で93.9%の同一性を示す:
【0430】
【化170】
Figure 0004472866
ORF17ngヌクレオチド配列(配列番号91)は、以下のアミノ酸配列(配列番号92)を有するタンパク質をコードすると予測される:
【0431】
【化171】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全淋菌DNA配列(配列番号93)を明らかにした:
【0432】
【化172】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号94;ORF17ng−1)に対応する:
【0433】
【化173】
Figure 0004472866
ORF17ng−1およびORF17−1は、268アミノ酸重複において96.6%の同一性を示す:
【0434】
【化174】
Figure 0004472866
【0435】
【化175】
Figure 0004472866
さらに、ORF17ng−1は、仮定のH.influenzaeタンパク質との有意な相同性を示す:
【0436】
【化176】
Figure 0004472866
この分析は(仮定のH.influenzae膜貫通タンパク質との相同性を含む)、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断薬のための、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ることを示唆する。
【0437】
(実施例12)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号95):
【0438】
【化177】
Figure 0004472866
【0439】
【化178】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号96;ORF18)に対応する:
【0440】
【化179】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全ヌクレオチド配列(配列番号97)を明らかにした:
【0441】
【化180】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号98;ORF18−1)に対応する:
【0442】
【化181】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列に関するコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(A系統)由来の推定ORFとの相同性)
ORF18は、N.meningitidisのA系統由来のORF(ORF18a)との116アミノ酸にわたる重複で98.3%の同一性を示す:
【0443】
【化182】
Figure 0004472866
完全長ORF18aヌクレオチド配列(配列番号99)は、以下に示す:
【0444】
【化183】
Figure 0004472866
【0445】
【化184】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号100)を有するタンパク質をコードする:
【0446】
【化185】
Figure 0004472866
ORF18aおよびORF18−1は、201アミノ酸重複において99.0%の同一性を示す:
【0447】
【化186】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF18は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF18.ng)との116アミノ酸にわたる重複において93.1%の同一性を示す:
【0448】
【化187】
Figure 0004472866
完全長ORF18ngヌクレオチド配列は、以下(配列番号101)である:
【0449】
【化188】
Figure 0004472866
【0450】
【化189】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号102)を有するタンパク質をコードする:
【0451】
【化190】
Figure 0004472866
このORF18ngタンパク質配列は、ORF18−1との201アミノ酸重複において94.0%の同一性を示す:
【0452】
【化191】
Figure 0004472866
この分析(淋菌タンパク質内のいくつかの推定膜貫通ドメインの存在を含む)に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、ならびにそれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のための、または抗体の惹起のための有用な抗原であり得ることが予測される:
(実施例13)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号103):
【0453】
【化192】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号104;ORF19)に対応する:
【0454】
【化193】
Figure 0004472866
さらなる研究は、以下の完全ヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号105):
【0455】
【化194】
Figure 0004472866
【0456】
【化195】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号106;ORF19−1)に対応する:
【0457】
【化196】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列に関するコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(H.influenzaeの推定膜貫通タンパク質YHFK(登録番号P44289)との相同性)
ORF19およびYHFKタンパク質は、97アミノ酸重複において45%のアミノ酸同一性を示す:
【0458】
【化197】
Figure 0004472866
【0459】
【化198】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A系統)由来の推定ORFとの相同性)
ORF19は、N.meningitidisのA系統由来のORF(ORF19a)との102アミノ酸にわたる重複で92.2%の同一性を示す:
【0460】
【化199】
Figure 0004472866
完全長ORF19aヌクレオチド配列(配列番号107)は、以下に示す:
【0461】
【化200】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号108)を有するタンパク質をコードする:
【0462】
【化201】
Figure 0004472866
ORF19aおよびORF19−1は、716アミノ酸重複において98.3%の同一性を示す:
【0463】
【化202】
Figure 0004472866
【0464】
【化203】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF19は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF19.ng)と、102アミノ酸の重複にわたって、95.1%の同一性を示す。
【0465】
【化204】
Figure 0004472866
ORF19ngヌクレオチド配列(配列番号109)は、以下のアミノ酸配列(配列番号110)を有するタンパク質をコードすると予測される:
【0466】
【化205】
Figure 0004472866
さらなる研究は、以下の完全ヌクレオチド配列(配列番号111)を明らかにした:
【0467】
【化206】
Figure 0004472866
【0468】
【化207】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号112;ORF19ng−1)に対応する:
【0469】
【化208】
Figure 0004472866
ORF19ng−1およびORF19−1は、716アミノ酸重複において95.5%の同一性を示す:
【0470】
【化209】
Figure 0004472866
【0471】
【化210】
Figure 0004472866
さらに、ORF19ng−1は、以前にデータベース登録された仮定の淋菌タンパク質に対して有意な相同性を示す:
【0472】
【化211】
Figure 0004472866
【0473】
【化212】
Figure 0004472866
この分析(淋菌タンパク質内のいくつかの推定膜貫通ドメインの存在(そのうちの最初のものは、髄膜炎菌性タンパク質においてもまた見られる)を含む)、およびYHKタンパク質との相同性に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、ならびにそれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のための、または抗体の惹起のための有用な抗原であり得ることが予測される:
(実施例14)
完全であると考えられる、以下のDNA配列は、N.meningitidis中で同定された(配列番号113):
【0474】
【化213】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号114;ORF20)に対応する:
【0475】
【化214】
Figure 0004472866
これらの配列がさらに精巧に配列決定され、そしてその完全なDNA配列(配列番号115)は以下である:
【0476】
【化215】
Figure 0004472866
【0477】
【化216】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号116;ORF20−1)に対応する:
【0478】
【化217】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター解析は、以下の結果を与えた。
【0479】
(S.typhimuriumのMviNのビルレニス因子(登録番号P37169)との相同性)
ORF20およびMviNタンパク質は、440アミノ酸重複において63%アミノ酸同一性を示す:
【0480】
【化218】
Figure 0004472866
【0481】
【化219】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF20は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF20a)と447アミノ酸重複にわたって93.5%の同一性を示す:
【0482】
【化220】
Figure 0004472866
完全長ORF20aヌクレオチド配列(配列番号117)は以下である:
【0483】
【化221】
Figure 0004472866
【0484】
【化222】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号118)を有するタンパク質をコードする:
【0485】
【化223】
Figure 0004472866
ORF20aおよびORF20−1は、512アミノ酸重複において96.5%の同一性を示す:
【0486】
【化224】
Figure 0004472866
【0487】
【化225】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF20は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF20ng)と454アミノ酸重複にわたって92.1%の同一性を示す:
【0488】
【化226】
Figure 0004472866
ORF20ngヌクレオチド配列(配列番号119)は、アミノ酸配列(配列番号120)を有するタンパク質をコードすると推定された:
【0489】
【化227】
Figure 0004472866
さらなるDNA配列の解析は、以下のDNA配列(配列番号121)を示した:
【0490】
【化228】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号122;ORF20ng−1)をコードする:
【0491】
【化229】
Figure 0004472866
ORF20ng−1およびORF20−1は、512アミノ酸重複中で95.7%の同一性を示す:
【0492】
【化230】
Figure 0004472866
【0493】
【化231】
Figure 0004472866
さらに、ORF20ng−1は、S.typhimuriumのビルレニス因子と有意な相同性を示す:
【0494】
【化232】
Figure 0004472866
【0495】
【化233】
Figure 0004472866
S.typhimurium由来のビルレニス因子との相同性を含むこの解析に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、およびそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断のため、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ると推定される。
【0496】
(実施例15)
以下の部分的DNA配列は、N.meningitidis中で同定された(配列番号123):
【0497】
【化234】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号124;ORF22)に対応する:
【0498】
【化235】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全なヌクレオチド配列(配列番号125)を示した:
【0499】
【化236】
Figure 0004472866
【0500】
【化237】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号126;ORF22−1)に対応する:
【0501】
【化238】
Figure 0004472866
さらなる研究は、N.meningitidisのA株中で対応する遺伝子を同定した(配列番号127):
【0502】
【化239】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号128;ORF22a)を有するタンパク質をコードする:
【0503】
【化240】
Figure 0004472866
最初に同定された部分的なB株の配列(ORF22)は、ORF20aと158アミノ酸重複にわたって94.2%の同一性を示す:
【0504】
【化241】
Figure 0004472866
【0505】
【化242】
Figure 0004472866
完全なB株配列は(ORF22−1)およびORF22aは、447アミノ酸重複中で94.9%同一性を示す:
【0506】
【化243】
Figure 0004472866
さらなる研究は、以下のアミノ酸配列(配列番号130;ORF22ng)をコードする、N.gonorrhoeae由来の部分的な遺伝子配列(配列番号129)を同定した:
【0507】
【化244】
Figure 0004472866
【0508】
【化245】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全な淋菌遺伝子を同定した(配列番号131):
【0509】
【化246】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号132;ORF22ng−1)を有するタンパク質をコードする:
【0510】
【化247】
Figure 0004472866
最初に同定された部分的なB株配列(ORF22)は、ORF22ngと158アミノ酸重複にわたって93.7%の同一性を示す:
【0511】
【化248】
Figure 0004472866
B株(ORF22−1)および淋菌(ORF22ng)由来の完全な配列は、447アミノ酸重複にわたって96.2%の同一性を示す:
【0512】
【化249】
Figure 0004472866
【0513】
【化250】
Figure 0004472866
これらの配列のコンピューター解析は、以下の結果を与えた。
【0514】
(Actinobacillus pleuropneumoniaeの48kDa外膜タンパク質(登録番号U24492)との相同性)
ORF22およびこの48kDaタンパク質は、158アミノ酸重複において72%の同一性を示す:
【0515】
【化251】
Figure 0004472866
ORF22aもまた、48kDa Actinobacillus pleuropneumoniaeタンパク質と相同性を示す:
【0516】
【化252】
Figure 0004472866
【0517】
【化253】
Figure 0004472866
ORF22ng−1もまた、A.pleuropneumoniae由来OMPと相同性を示す:
【0518】
【化254】
Figure 0004472866
Actinobacillus pleuropneumoniaeの外膜タンパク質との相同性を含むこの解析に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、およびそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断のため、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ると推定された。
【0519】
上記のように、ORF22−1(35.4kDa)は、pETおよびpGexベクターにクローニングされ、そしてE.coli中で発現された。タンパク質の発現および精製の産物は、SDS−PAGEにより分析された。図5Aは、GST融合タンパク質のアフィニティー精製の結果を示し、そして図5Bは、E.coli中でのHis融合物の発現の結果を示す。精製されたGST融合タンパク質は、マウスを免疫するために用いられ、このマウスの血清はELISA(陽性結果)およびFACS分析(図5C)に用いられた。これらの実験は、ORF22−1が表面に曝露されるタンパク質であり、そしてそれが有用な免疫原であることを確認する。
【0520】
(実施例16)
以下の部分的DNA配列は、N.meningitidis中で同定された:
(配列番号133)
【0521】
【化255】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号134;ORF12)に対応する:
【0522】
【化256】
Figure 0004472866
さらなる配列解析は、完全なDNA配列(配列番号135)が以下であることを示した:
【0523】
【化257】
Figure 0004472866
【0524】
【化258】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号136;ORF12−1)に対応する:
【0525】
【化259】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター解析は、以下の結果を与えた。
【0526】
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF12は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF12a)と320アミノ酸重複にわたって96.3%の同一性を示す:
【0527】
【化260】
Figure 0004472866
【0528】
【化261】
Figure 0004472866
完全長ORF12aヌクレオチド配列(配列番号137)は以下である:
【0529】
【化262】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号138)を有するタンパク質をコードする:
【0530】
【化263】
Figure 0004472866
ORF12aおよびORF12−1は、522アミノ酸重複中で99.0%同一性を示す:
【0531】
【化264】
Figure 0004472866
【0532】
【化265】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF12は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF12.ng)と320アミノ酸重複にわたって92.5%の同一性を示す:
【0533】
【化266】
Figure 0004472866
【0534】
【化267】
Figure 0004472866
完全長ORF12ngヌクレオチド配列(配列番号139)は以下である:
【0535】
【化268】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号140)を有するタンパク質をコードする:
【0536】
【化269】
Figure 0004472866
ORF12ngは、ORF12−1と522アミノ酸重複中で97.1%同一性を示す:
【0537】
【化270】
Figure 0004472866
【0538】
【化271】
Figure 0004472866
さらに、ORF12ngは、E.coli由来のハイポセティカルタンパク質と有意な相同性を示す:
【0539】
【化272】
Figure 0004472866
【0540】
【化273】
Figure 0004472866
いくつかの推定膜貫通ドメインおよび淋菌タンパク質中の推定アクチン型アクチン結合ドメイン記号(太字で示す)の存在を含む、この解析に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のそのタンパク質、およびそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断のため、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ると推定される。
【0541】
(実施例17)
以下の部分的DNA配列は、N.meningitidis中で同定された(配列番号141):
【0542】
【化274】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号142;ORF14)に対応する:
【0543】
【化275】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター解析は、以下の結果を与えた。
【0544】
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF14は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF14a)と167アミノ酸重複にわたって94.0%同一性を示す:
【0545】
【化276】
Figure 0004472866
【0546】
【化277】
Figure 0004472866
完全長ORF14aヌクレオチド配列(配列番号143)は以下である:
【0547】
【化278】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号144)を有するタンパク質をコードする:
【0548】
【化279】
Figure 0004472866
この配列が、118の位置の終止コドン含むことに留意すべきである。
【0549】
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF14は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF14.ng)と167アミノ酸重複にわたって89.8%同一性を示す:
【0550】
【化280】
Figure 0004472866
完全長ORF14ngヌクレオチド配列(配列番号145)は、アミノ酸配列(配列番号146)を有するタンパク質をコードすると推定される:
【0551】
【化281】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質中の推定の膜貫通ドメインに基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のそのタンパク質、およびそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断のため、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ると推定される。
【0552】
(実施例18)
以下の部分的なDNA配列は、N.meningitidis中で同定された(配列番号147):
【0553】
【化282】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号148;ORF16)に対応する:
【0554】
【化283】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全なヌクレオチド配列を示した(配列番号149):
【0555】
【化284】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号150;ORF16−1)に対応する:
【0556】
【化285】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター解析は、以下の結果を与えた。
【0557】
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF16は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF16a)と181アミノ酸重複にわたって96.7%の同一性を示す:
【0558】
【化286】
Figure 0004472866
完全長ORF16aヌクレオチド配列(配列番号151)は以下である:
【0559】
【化287】
Figure 0004472866
【0560】
【化288】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号152)を有するタンパク質をコードする:
【0561】
【化289】
Figure 0004472866
ORF16aおよびORF16−1は、451アミノ酸重複中で99.6%同一性を示す:
【0562】
【化290】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF16は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF16.ng)と181アミノ酸重複にわたって93.9%の同一性を示す:
【0563】
【化291】
Figure 0004472866
完全長ORF16ngヌクレオチド配列(配列番号153)は以下である:
【0564】
【化292】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号154)を有するタンパク質をコードする:
【0565】
【化293】
Figure 0004472866
ORF16ngおよびORF16−1は、261アミノ酸重複中で89.3%同一性を示す:
【0566】
【化294】
Figure 0004472866
【0567】
【化295】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質中のいくつかの推定の膜貫通ドメインの存在を含む、この解析に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のそのタンパク質、およびそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断のため、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ると推定される。
【0568】
(実施例19)
以下の部分的DNA配列は、N.meningitidis中で同定された(配列番号155):
【0569】
【化296】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号156;ORF28)に対応する:
【0570】
【化297】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全なヌクレオチド配列(配列番号157)を示した:
【0571】
【化298】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号158;ORF28−1)に対応する:
【0572】
【化299】
Figure 0004472866
【0573】
【化300】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター解析は、以下の結果を与えた。
【0574】
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF28は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF28a)と120アミノ酸重複にわたって79.2%の同一性を示す:
【0575】
【化301】
Figure 0004472866
完全長ORF28aヌクレオチド配列(配列番号159)は以下である:
【0576】
【化302】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号160)を有するタンパク質をコードする:
【0577】
【化303】
Figure 0004472866
ORF28aおよびORF28−1は、238アミノ酸重複中で86.1%同一性を示す:
【0578】
【化304】
Figure 0004472866
【0579】
【化305】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF28は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF28.ng)と120アミノ酸重複にわたって84.2%の同一性を示す:
【0580】
【化306】
Figure 0004472866
完全長ORF28ngヌクレオチド配列(配列番号161)は以下である:
【0581】
【化307】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号162)を有するタンパク質をコードする:
【0582】
【化308】
Figure 0004472866
ORF28ngおよびORF28−1は、231アミノ酸重複中で90.0%同一性を共有する:
【0583】
【化309】
Figure 0004472866
【0584】
【化310】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質中の推定の膜貫通ドメインの存在を含むこの解析に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、およびそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断のため、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ると推定された。
【0585】
上記のように、ORF28−1(24kDa)は、pETおよびpGexベクターにクローニングされ、そしてE.coli中で発現された。タンパク質の発現および精製の産物は、SDS−PAGEにより分析された。図6Aは、GST融合タンパク質のアフィニティー精製の結果を示し、そして図6Bは、E.coli中でのHis融合物の発現の結果を示す。精製されたGST融合タンパク質は、マウスを免疫するために用いられ、このマウスの血清はELISAに用いられ、ELISAは陽性結果を与えた。これらの実験は、ORF22−1が、表面に曝露されるタンパク質であり、そしてそれが有用な免疫原であり得ることを確認する。
【0586】
(実施例20)
以下の部分的DNA配列は、N.meningitidis中で同定された(配列番号163):
【0587】
【化311】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号164;ORF29)に対応する:
【0588】
【化312】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全なヌクレオチド配列(配列番号165)を示した:
【0589】
【化313】
Figure 0004472866
【0590】
【化314】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号166;ORF29−1)に対応する:
【0591】
【化315】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター解析は、以下の結果を与えた。
【0592】
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF29は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF29a)と125アミノ酸重複にわたって88.0%の同一性を示す:
【0593】
【化316】
Figure 0004472866
完全長ORF29aヌクレオチド配列(配列番号167)は以下である:
【0594】
【化317】
Figure 0004472866
【0595】
【化318】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号168)を有するタンパク質をコードする:
【0596】
【化319】
Figure 0004472866
ORF29aおよびORF29−1は、358アミノ酸重複中で90.1%同一性を示す:
【0597】
【化320】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF29は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF29.ng)と125アミノ酸重複にわたって88.8%の同一性を示す:
【0598】
【化321】
Figure 0004472866
完全長ORF29ngヌクレオチド配列(配列番号169)は、アミノ酸配列(配列番号170)を有するタンパク質をコードすることが推定される:
【0599】
【化322】
Figure 0004472866
2番目の実験で、以下のDNA配列(配列番号171)が同定された:
【0600】
【化323】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号172;ORF29ng−1)を有するタンパク質をコードする:
【0601】
【化324】
Figure 0004472866
【0602】
【化325】
Figure 0004472866
ORF29ng−1およびORF29−1は、401アミノ酸重複中で86.0%同一性を示す:
【0603】
【化326】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質中の推定のリーダー配列の存在を含む、この解析に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、およびそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断のため、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ると推定される。
【0604】
(実施例21)
以下の部分的DNA配列は、N.meningitidis中で同定された(配列番号173):
【0605】
【化327】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号174;ORF30)に対応する:
【0606】
【化328】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全なヌクレオチド配列(配列番号175)を示した:
【0607】
【化329】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号176;ORF30−1)に対応する:
【0608】
【化330】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター解析は、以下の結果を与えた。
【0609】
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF30は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF30a)と42アミノ酸重複にわたって97.6%の同一性を示す:
【0610】
【化331】
Figure 0004472866
完全長ORF30aヌクレオチド配列(配列番号177)は以下である:
【0611】
【化332】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号178)を有するタンパク質をコードする:
【0612】
【化333】
Figure 0004472866
ORF30aおよびORF30−1は、181アミノ酸重複中で97.8%同一性を示す:
【0613】
【化334】
Figure 0004472866
【0614】
【化335】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF30は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF30.ng)と42アミノ酸重複にわたって97.6%の同一性を示す:
【0615】
【化336】
Figure 0004472866
完全長ORF30ngヌクレオチド配列(配列番号179)は以下である
【0616】
【化337】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号180)を有するタンパク質をコードする:
【0617】
【化338】
Figure 0004472866
ORF30ngおよびORF30−1は、181アミノ酸重複中で98.3%同一性を示す:
【0618】
【化339】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質中の推定のリーダー配列の存在を含むこの解析に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、およびそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断のため、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ると推定される。
【0619】
(実施例22)
以下の部分的DNA配列は、N.meningitidis中で同定された(配列番号181):
【0620】
【化340】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号182;ORF31)に対応する:
【0621】
【化341】
Figure 0004472866
さらなる研究は、さらなる部分的ヌクレオチド配列(配列番号183)を示した:
【0622】
【化342】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号184;ORF31−1)に対応する:
【0623】
【化343】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター解析は、以下の結果を与えた。
【0624】
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF31は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF31.ng)と84アミノ酸重複にわたって76.2%の同一性を示す:
【0625】
【化344】
Figure 0004472866
完全長ORF31ngヌクレオチド配列(配列番号185)は以下である:
【0626】
【化345】
Figure 0004472866
【0627】
【化346】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号186)を有するタンパク質をコードする:
【0628】
【化347】
Figure 0004472866
この淋菌タンパク質は、Erwinia chrysanthemi(登録番号L39897)由来の細孔形成(pore−forming)溶血素類似HecAタンパク質と149アミノ酸重複にわたって50.0%の同一性を共有する:
【0629】
【化348】
Figure 0004472866
さらに、ORF31ngおよびORF31−1は、83アミノ酸重複中で79.5%同一性を示す:
【0630】
【化349】
Figure 0004472866
溶血素との相同性、およびまた付着因子との相同性を含むこの解析に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、およびそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断のため、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ると推定される。
【0631】
(実施例23)
以下の部分的DNA配列は、N.meningitidis中で同定された(配列番号187):
【0632】
【化350】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号188;ORF32)に対応する:
【0633】
【化351】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全なヌクレオチド配列(配列番号189)を示した:
【0634】
【化352】
Figure 0004472866
【0635】
【化353】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号190;ORF32−1)に対応する:
【0636】
【化354】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター解析は、以下の結果を与えた。
【0637】
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF32は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF32a)と81アミノ酸重複にわたって93.8%の同一性を示す:
【0638】
【化355】
Figure 0004472866
完全長ORF32aヌクレオチド配列(配列番号191)は以下である:
【0639】
【化356】
Figure 0004472866
【0640】
【化357】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号192)を有するタンパク質をコードする:
【0641】
【化358】
Figure 0004472866
ORF32aおよびORF32−1は、382アミノ酸重複中で93.2%同一性を示す:
【0642】
【化359】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF32は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF32.ng)と82アミノ酸重複にわたって95.1%の同一性を示す:
【0643】
【化360】
Figure 0004472866
【0644】
【化361】
Figure 0004472866
ORF32ngヌクレオチド配列(配列番号193)は、アミノ酸配列(配列番号194)を有するタンパク質をコードすると推定された:
【0645】
【化362】
Figure 0004472866
さらなる配列決定は、以下のDNA配列(配列番号195)を示した:
【0646】
【化363】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号196;ORF32ng−1)を有するタンパク質をコードする:
【0647】
【化364】
Figure 0004472866
ORF32ng−1およびORF32−1は、383アミノ酸重複中で93.5%同一性を示す:
【0648】
【化365】
Figure 0004472866
【0649】
【化366】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質中の付着因子に特徴的な、RGD配列を含むこの解析に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、およびそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断のため、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ると推定される。
【0650】
上記のように、ORF32−1(42kDa)は、pETおよびpGexベクターにクローニングされ、そしてE.coli中で発現された。タンパク質の発現および精製の産物は、SDS−PAGEにより分析された。図7Aは、His融合タンパク質のアフィニティー精製の結果を示し、そして図7Bは、E.coli中のGST融合物の発現の結果を示す。精製されたHis融合タンパク質は、マウスを免疫するために用いられ、このマウスの血清はELISAに用いられ、ELISAは陽性結果を与えた。これらの実験は、ORF32−1が、表面に曝露されるタンパク質であり、そしてそれは有用な免疫原であり得ることを確認する。
【0651】
(実施例24)
以下の部分的DNA配列は、N.meningitidis中で同定された(配列番号197):
【0652】
【化367】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号198;ORF33)に対応する:
【0653】
【化368】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全なヌクレオチド配列(配列番号199)を示した:
【0654】
【化369】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号200;ORF33−1)に対応する:
【0655】
【化370】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター解析は、以下の結果を与えた。
【0656】
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF33は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF33a)と143アミノ酸重複にわたって90.9%の同一性を示す:
【0657】
【化371】
Figure 0004472866
完全長ORF33aヌクレオチド配列(配列番号201)は以下である:
【0658】
【化372】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号202)を有するタンパク質をコードする:
【0659】
【化373】
Figure 0004472866
ORF33aおよびORF33−1は、444アミノ酸重複中で94.1%同一性を示す:
【0660】
【化374】
Figure 0004472866
【0661】
【化375】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF33は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF33.ng)と143アミノ酸重複にわたって91.6%の同一性を示す:
【0662】
【化376】
Figure 0004472866
ORF33ngヌクレオチド配列(配列番号203)は、アミノ酸配列(配列番号204)を有するタンパク質をコードすると推定された:
【0663】
【化377】
Figure 0004472866
さらに配列解析は、以下のDNA配列(配列番号205)を示した:
【0664】
【化378】
Figure 0004472866
【0665】
【化379】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号206;ORF33ng−1)を有するタンパク質をコードする:
【0666】
【化380】
Figure 0004472866
ORF33ng−1およびORF33−1は、446アミノ酸重複中で94.6%同一性を示す:
【0667】
【化381】
Figure 0004472866
【0668】
【化382】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質中のいくつかの推定の膜貫通ドメインの存在に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、およびそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断のため、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ると推定される。
【0669】
(実施例25)
以下の部分的DNA配列は、N.meningitidis中で同定された(配列番号207):
【0670】
【化383】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号208;ORF34)に対応する:
【0671】
【化384】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全なヌクレオチド配列(配列番号209)を示した:
【0672】
【化385】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号210;ORF34−1)に対応する:
【0673】
【化386】
Figure 0004472866
【0674】
【化387】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター解析は、以下の結果を与えた。
【0675】
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF34は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF34a)と161アミノ酸重複にわたって73.3%の同一性を示す:
【0676】
【化388】
Figure 0004472866
完全長ORF34aヌクレオチド配列(配列番号211)は以下である:
【0677】
【化389】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号212)を有するタンパク質をコードする:
【0678】
【化390】
Figure 0004472866
ORF34aおよびORF34−1は、459アミノ酸重複中で91.3%同一性を示す:
【0679】
【化391】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF34は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF34.ng)と161アミノ酸重複にわたって77.6%の同一性を示す:
【0680】
【化392】
Figure 0004472866
【0681】
【化393】
Figure 0004472866
完全長ORF34ngヌクレオチド配列(配列番号213)は以下である:
【0682】
【化394】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号214)を有するタンパク質をコードする:
【0683】
【化395】
Figure 0004472866
ORF34ngおよびORF34−1は、459アミノ酸重複中で90.0%同一性を示す:
【0684】
【化396】
Figure 0004472866
【0685】
【化397】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質中の推定のリーダー配列(二重下線)およびいくつかの推定の膜貫通ドメイン(下線)の存在を含むこの解析に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、およびそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断のため、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ると推定される。
【0686】
(実施例26)
以下の部分的DNA配列は、N.meningitidis中で同定された(配列番号215):
【0687】
【化398】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号216;ORF4)に対応する:
【0688】
【化399】
Figure 0004472866
さらに配列解析は、完全なヌクレオチド配列(配列番号217)を示した:
【0689】
【化400】
Figure 0004472866
【0690】
【化401】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号218;ORF4−1)に対応する:
【0691】
【化402】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター解析は、以下の結果を与えた。
【0692】
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF4は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF4a)と93アミノ酸重複にわたって93.5%の同一性を示す:
【0693】
【化403】
Figure 0004472866
完全長ORF4aヌクレオチド配列(配列番号219)は以下である:
【0694】
【化404】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号220)を有するタンパク質をコードすると推定される:
【0695】
【化405】
Figure 0004472866
【0696】
【化406】
Figure 0004472866
リーダーペプチドは下線である。
【0697】
これらのA株配列のさらなる解析は、完全なDNA配列(配列番号221)を示した:
【0698】
【化407】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号222;ORF4a−1)を有するタンパク質をコードする:
【0699】
【化408】
Figure 0004472866
ORF4a−1およびORF4−1は、287アミノ酸重複中で99.7%同一性を示す:
【0700】
【化409】
Figure 0004472866
(Pasteurella hamolitica(登録番号q08869)の外膜タンパク質との相同性)
ORF4およびこの外膜タンパク質は、91アミノ酸重複中で33%同一性を示す:
【0701】
【化410】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF4は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF4.ng)と94アミノ酸重複にわたって93.6%の同一性を示す:
【0702】
【化411】
Figure 0004472866
完全長ORF4ngヌクレオチド配列(配列番号223)は、アミノ酸配列(配列番号224)を有するタンパク質をコードすると推定された:
【0703】
【化412】
Figure 0004472866
さらなる解析は、完全長ORF4ngDNA配列(配列番号225)が以下であることを示した:
【0704】
【化413】
Figure 0004472866
【0705】
【化414】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号226;ORF4ng−1)を有するタンパク質をコードする:
【0706】
【化415】
Figure 0004472866
これは、ORF4−1と288アミノ酸重複中で97.6%同一性を示す:
【0707】
【化416】
Figure 0004472866
さらに、ORF4ng−1は、データベースから外膜タンパク質と有意な相同性を示す:
【0708】
【化417】
Figure 0004472866
【0709】
【化418】
Figure 0004472866
Pasteurella hamoliticaの外膜タンパク質との相同性を含むこの解析、および淋菌タンパク質中の推定の原核生物膜リポタンパク質の脂質付着部位の存在に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、およびそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断のため、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ると推定された。
【0710】
上記のように、ORF4−1(30kDa)は、pETおよびpGexベクターにクローニングされ、そしてE.coli中で発現された。タンパク質の発現および精製のその産物は、SDS−PAGEにより分析された。図8Aおよび8Bは、それぞれ、His融合物およびGST融合タンパク質のアフィニティー精製の結果を示す。精製されたHis融合タンパク質は、マウスを免疫するために用いられ、このマウスの血清はELISA(陽性結果)、ウエスタンブロット(図8C)、FACS解析(図8D)、および殺菌性解析(図8E)に用いられた。これらの実験は、ORF4−1が、表面に曝露されるタンパク質であり、有用な免疫原であることを確認する。
【0711】
図8Fは、ORF4−1のための、親水性のプロット、抗原性指数、およびAMPHI領域を示す。
【0712】
(実施例27)
以下の部分的DNA配列は、N.meningitidis中で同定された(配列番号227):
【0713】
【化419】
Figure 0004472866
【0714】
【化420】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号228;ORF8)に対応する:
【0715】
【化421】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター解析は、以下の結果を与えた。
【0716】
(配列モチーフ)
ORF8は、プロリンリッチであり、そして表面局在と一致しているプロリン残基の分布を有する。さらに、RGDモチーフの存在は、細菌接着事象において可能な役割を示し得る。
【0717】
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF8は、N.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF8.ng)に対して、312aaのオーバーラップにわたって、86.5%の同一性を示す:
【0718】
【化422】
Figure 0004472866
この完全長のORF8ngヌクレオチド配列<配列番号229>は、以下のアミノ酸配列<配列番号230>を有するタンパク質をコードすることが予測される:
【0719】
【化423】
Figure 0004472866
【0720】
【化424】
Figure 0004472866
これらのタンパク質における配列モチーフに基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のための、または抗体を産生させるための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0721】
(実施例28)
以下に示す部分的なDNA配列を、N.meningitidisで同定した<配列番号231>:
【0722】
【化425】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号232;ORF61>に対応する:
【0723】
【化426】
Figure 0004472866
さらなる研究により、以下の完全なヌクレオチド配列<配列番号233>を明らかにした:
【0724】
【化427】
Figure 0004472866
【0725】
【化428】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号234;ORF61−1>に対応する:
【0726】
【化429】
Figure 0004472866
図9は、ORF61−1について、親水性領域、抗原性領域、およびAMPHI領域のプロットを示す。このアミノ酸配列のさらなるコンピュータ解析の結果を以下に示す:
(B.pertussisのbafタンパク質(登録番号第U12020号)との相同性)
ORF61およびbafタンパク質は、166aaが一致し、33%のaa同一性を示す:
【0727】
【化430】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(菌株A)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF61は、N.meningitidisの菌株A由来のORF(ORF61a)に対して、189aaのオーバーラップにわたって、97.4%の同一性を示す:
【0728】
【化431】
Figure 0004472866
【0729】
【化432】
Figure 0004472866
この完全長ORF61aヌクレオチド配列<配列番号235>は、以下の通りである:
【0730】
【化433】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号236>を有するタンパク質をコードする:
【0731】
【化434】
Figure 0004472866
ORF61およびORF61−1は、591aaのオーバーラップにおいて、98.5%の同一性を示す:
【0732】
【化435】
Figure 0004472866
【0733】
【化436】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF61は、N.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF61.ng)に対して、89aaのオーバーラップにわたって、94.2%の相同性を示す:
【0734】
【化437】
Figure 0004472866
ORF61ngヌクレオチド配列<配列番号237>は、以下のアミノ酸配列<配列番号238>を有するタンパク質をコードすることが予測された:
【0735】
【化438】
Figure 0004472866
さらなる解析により、以下に示す完全な淋菌DNA配列<配列番号239>が明らかになった:
【0736】
【化439】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号240;ORF61ng−1>に対応する:
【0737】
【化440】
Figure 0004472866
ORF61ng−1およびORF61−1は、591aaにおいて、93.9%の同一性を示す:
【0738】
【化441】
Figure 0004472866
この解析(B.pertussisのbafタンパク質との相同性および推定される原核生物の膜リポタンパク質脂質付着部位の存在を含む)に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のため、または抗体を産生するために有用な抗原であり得ることが予測される。
【0739】
(実施例29)
以下に示す部分的なDNA配列を、N.meningitidis<配列番号241>で同定した。
【0740】
【化442】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号242;ORF62>に対応する:
【0741】
【化443】
Figure 0004472866
さらなる研究により、以下の完全なヌクレオチド配列<配列番号243>が明らかになった:
【0742】
【化444】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号244;ORF62−1>に対応する:
【0743】
【化445】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピュータ解析は、以下の結果を与えた:
(H.influenzaeの仮定的膜貫通タンパク質H10976(登録番号第O57147)の相同性)
ORF62およびHI0976は、114aaのオーバーラップにわたって、50%のaa同一性を示す:
【0744】
【化446】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(菌株A)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF62は、N.meningitidisの菌株A由来のORF(ORF62a)に対して、216aaのオーバーラップにわたって、99.5%の同一性を示す:
【0745】
【化447】
Figure 0004472866
【0746】
【化448】
Figure 0004472866
この完全長ORF62aヌクレオチド配列<配列番号245>は、以下の通りである:
【0747】
【化449】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号246>を有するタンパク質をコードする:
【0748】
【化450】
Figure 0004472866
ORF62aおよびORF62−1は、284aaのオーバーラップにわたって、98.9%の同一性を示す:
【0749】
【化451】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF62は、N.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF62.ng)と216aaのオーバーラップにわたって、99.5%の相同性を示す:
【0750】
【化452】
Figure 0004472866
この完全長ORF62ngヌクレオチド配列<配列番号247>は、以下の通りである:
【0751】
【化453】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号248>を有するタンパク質をコードする:
【0752】
【化454】
Figure 0004472866
ORF62ngおよびORF62−1は、283aaのオーバーラップにおいて、97.9%の同一性を示す:
【0753】
【化455】
Figure 0004472866
【0754】
【化456】
Figure 0004472866
さらに、ORF62ngは、仮定的H.influenzaeタンパク質と有意な相同性を示す:
【0755】
【化457】
Figure 0004472866
この解析(H.influenzaeの膜貫通タンパク質および淋菌タンパク質中の推定されるリーダー配列およびいくつかの膜貫通ドメインとの相同性を含む)に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のため、または抗体を産生するために有用な抗原であり得ることが予測される。
【0756】
(実施例30)
以下の部分的DNA配列を、N.meningitidisで同定した<配列番号249>:
【0757】
【化458】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号250;ORF64>に対応する:
【0758】
【化459】
Figure 0004472866
【0759】
【化460】
Figure 0004472866
さらなる研究により、以下の完全なヌクレオチド配列<配列番号251>を明らかにした:
【0760】
【化461】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号252;ORF64−1>に対応する:
【0761】
【化462】
Figure 0004472866
このアミノ酸のコンピュータ解析の結果を以下に示す:
(N.meningitidis(菌株A)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF64は、N.meningitidisの菌株A由来のORF(ORF64a)と392aaのオーバーラップにわたって、92.6%の同一性を示す:
【0762】
【化463】
Figure 0004472866
この完全長ORF64aヌクレオチド配列<配列番号253>は、以下の通りである:
【0763】
【化464】
Figure 0004472866
【0764】
【化465】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号254>を有するタンパク質をコードする:
【0765】
【化466】
Figure 0004472866
ORF64aおよびORF64−1は、706aaのオーバーラップにわたって、96.6%の同一性を示す:
【0766】
【化467】
Figure 0004472866
【0767】
【化468】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF64は、N.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF64.ng)と387aaのオーバーラップにわたって、86.6%の同一性を示す:
【0768】
【化469】
Figure 0004472866
【0769】
【化470】
Figure 0004472866
ORF64ngヌクレオチド配列<配列番号255>は、アミノ酸配列<配列番号256>を有するタンパク質をコードすることが予測された:
【0770】
【化471】
Figure 0004472866
さらなる研究により、完全な淋菌DNA配列<配列番号257>が明らかになった:
【0771】
【化472】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号258;ORF64ng−1>に対応する:
【0772】
【化473】
Figure 0004472866
ORF64ng−1およびORF64−1は、706aaのオーバーラップにおいて93.8%の同一性を示す:
【0773】
【化474】
Figure 0004472866
【0774】
【化475】
Figure 0004472866
さらに、ORF64ng−1は、A.caulinodans由来のタンパク質と有意な同一性を示す:
【0775】
【化476】
Figure 0004472866
【0776】
【化477】
Figure 0004472866
この解析(淋菌タンパク質中の推定されるリーダー配列(二重下線)およびいくつかの推定される膜貫通ドメイン(一重下線)の存在を含む)に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のため、または抗体を産生するための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0777】
(実施例31)
以下に示す部分的なDNA配列を、N.meningitidisで同定した<配列番号259>:
【0778】
【化478】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号260;ORF66>に対応する:
【0779】
【化479】
Figure 0004472866
さらなる研究により、以下の完全なヌクレオチド配列<配列番号261>が明らかになった:
【0780】
【化480】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号262;ORF66−1>に対応する:
【0781】
【化481】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピュータ解析は、以下の結果を与えた:
(E.coliの仮定的タンパク質o221(登録番号第P37619号)との相同性)
ORF66およびo221タンパク質は、155aaのオーバーラップにおいて、67%の同一性を示す:
【0782】
【化482】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(菌株A)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF66は、N.meningitidisの菌株A由来のORF(ORF66a)と155aaのオーバーラップにわたって、96.1%の相同性を示す:
【0783】
【化483】
Figure 0004472866
この完全長ORF66aヌクレオチド配列<配列番号263>を以下に示す:
【0784】
【化484】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号264>を有するタンパク質をコードする:
【0785】
【化485】
Figure 0004472866
ORF66aおよびORF66−1は、228aaのオーバーラップにおいて、97.8%の同一性を示す:
【0786】
【化486】
Figure 0004472866
【0787】
【化487】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されたORFとの同一性)
ORF66は、N.gonorrhoeae由来の予測されたORF(ORF66.ng)と155aaのオーバーラップにわたって、94.2%の同一性を示す:
【0788】
【化488】
Figure 0004472866
この完全長ORF66ngヌクレオチド配列<配列番号265>は、以下の通りである:
【0789】
【化489】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号266>を有するタンパク質をコードする:
【0790】
【化490】
Figure 0004472866
代替の注釈の配列は、以下の通りである:
【0791】
【化491】
Figure 0004472866
ORF66ngおよびORF66−1は、228aaのオーバーラップにおいって、96.1%の同一性を示す:
【0792】
【化492】
Figure 0004472866
さらに、ORF66ngは、E.coli ORFと有意な相同性を示す:
【0793】
【化493】
Figure 0004472866
この解析(E.coliタンパク質との相同性および淋菌タンパク質中のいくつかの推定膜貫通ドメインの存在を含む)に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のため、または抗体を産生するための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0794】
(実施例32)
以下に示す部分的なDNA配列を、N.meningitidisで同定した<配列番号267>:
【0795】
【化494】
Figure 0004472866
【0796】
【化495】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号268;ORF72>に対応する:
【0797】
【化496】
Figure 0004472866
さらなる研究により、完全なヌクレオチド配列<配列番号269>が明らかになった:
【0798】
【化497】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号270;ORF72−1>に対応する:
【0799】
【化498】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピュータ解析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(菌株A)由来の予測されたORFとの相同性)
ORF72は、N.meningitidisの菌株A由来の予測されたORF(ORF72a)と147aaのオーバーラップにわたって、98.0%の同一性を示す:
【0800】
【化499】
Figure 0004472866
この全長ORF72aヌクレオチド配列<配列番号271>は、以下の通りである:
【0801】
【化500】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号272>を有するタンパク質をコードする:
【0802】
【化501】
Figure 0004472866
ORF72およびORF72−1は、150aaのオーバーラップにおいて、100%の同一性を示す:
【0803】
【化502】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されたORFとの相同性)
ORF72は、N.gonorrhoeae由来の予測されたORF(ORF72.ng)と173aaのオーバーラップにわたって、89%の同一性を示す:
【0804】
【化503】
Figure 0004472866
ORF72ngヌクレオチド配列<配列番号273>は、以下のアミノ酸配列<配列番号274>を有するタンパク質をコードすることが予測された:
【0805】
【化504】
Figure 0004472866
さらなる解析後、以下の淋菌DNA配列<配列番号275>を同定した:
【0806】
【化505】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列<配列番号276;ORF72ng−1>に対応する:
【0807】
【化506】
Figure 0004472866
ORF72ng−1およびORF721−1は、145aaのオーバーラップにおいて、89.7%の同一性を示す:
【0808】
【化507】
Figure 0004472866
この解析(淋菌タンパク質中での推定されるリーダー配列および膜貫通ドメインの存在を含む)に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のため、または抗体を産生するために有用な抗原であり得ることが予測される。
【0809】
(実施例33)
以下の部分的なDNA配列を、N.meningitidisで同定した<配列番号277>:
【0810】
【化508】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号278;ORF73>に対応する:
【0811】
【化509】
Figure 0004472866
さらなる研究により、完全なヌクレオチド配列<配列番号279>を明らかにした:
【0812】
【化510】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号280;ORF73−1>に対応する:
【0813】
【化511】
Figure 0004472866
【0814】
【化512】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピュータ解析は、以下の結果を与えた:
(N.meniningtidis(菌株A)由来の予測されたORFとの相同性)
ORF73は、N.meniningtidisの菌株A由来の予測されたORF(ORF73a)と76aaのオーバーラップにわたって、90.8%の同一性を示す:
【0815】
【化513】
Figure 0004472866
この完全長ORF73aヌクレオチド配列<配列番号281>は以下の通りである:
【0816】
【化514】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号282>を有するタンパク質をコードする:
【0817】
【化515】
Figure 0004472866
ORF73aおよびORF73−1は、161aaのオーバーラップにおいて、91.3%の同一性を示す
【0818】
【化516】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されたORFとの相同性)
ORFは、N.gonorrhoeae由来の予測されたORF(ORF73.ng)と76aaのオーバーラップにわたって、92.1%の同一性を示す:
【0819】
【化517】
Figure 0004472866
【0820】
【化518】
Figure 0004472866
この完全長ORF73ngヌクレオチド配列<配列番号283>は以下の通りである:
【0821】
【化519】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号284>を有するタンパク質をコードする:
【0822】
【化520】
Figure 0004472866
ORF73ngおよびORG73−1は、161aaのオーバーラップにおいて、93.8%の同一性を示す:
【0823】
【化521】
Figure 0004472866
この解析(淋菌タンパク質中で推定されるリーダー配列および推定膜貫通ドメインの存在を含む)に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のため、または抗体を産生するために有用な抗原であり得ることが予測される。
【0824】
(実施例34)
以下の部分的DNA配列を、N.meningitidisで同定した<配列番号285>:
【0825】
【化522】
Figure 0004472866
【0826】
【化523】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号286;ORF75>に対応する:
【0827】
【化524】
Figure 0004472866
さらなる研究により、完全ヌクレオチド配列<配列番号287>が明らかになった:
【0828】
【化525】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号288;ORF75−1>に対応する:
【0829】
【化526】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピュータ解析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(菌株A)由来の予測されたORFとの相同性)
ORF75は、N.meningitidisの菌株A由来の予測されたORF(ORF75a)と283aaのオーバーラップにわたって、95.8%の同一性を示す:
【0830】
【化527】
Figure 0004472866
【0831】
【化528】
Figure 0004472866
この完全長ORF75aヌクレオチド配列<配列番号289>は、以下の通りである:
【0832】
【化529】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号290>を有するタンパク質をコードする:
【0833】
【化530】
Figure 0004472866
ORF75aおよびORF75−1は、291aaのオーバーラップにおいて、98.3%の同一性を示す:
【0834】
【化531】
Figure 0004472866
【0835】
【化532】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF75は、N.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF75.ng)と292aaのオーバーラップにわたって、93.2%の同一性を示す:
【0836】
【化533】
Figure 0004472866
ORF75ngヌクレオチド配列<配列番号291>は、以下のアミノ酸配列<配列番号292>を有するタンパク質をコードすることが予測された:
【0837】
【化534】
Figure 0004472866
さらなる解析後、以下の淋菌DNA配列<配列番号293>を同定した:
【0838】
【化535】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号294;ORF75ng−1>に対応する:
【0839】
【化536】
Figure 0004472866
ORF75ng−1およびORF75−1は、291aaのオーバーラップにわたって、96.2%の同一性を示す:
【0840】
【化537】
Figure 0004472866
さらに、ORG75ng−1は、仮定的なE.coliタンパク質と有意な相同性を示す:
【0841】
【化538】
Figure 0004472866
この解析(淋菌タンパク質中での推定される膜貫通ドメインの存在を含む)に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のため、または抗体を産生させるための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0842】
(実施例35)
以下の部分的なDNA配列を、N.meningitidisで同定した<配列番号295>:
【0843】
【化539】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号296;ORF76>に対応する:
【0844】
【化540】
Figure 0004472866
さらなる研究により、完全なヌクレオチド配列<配列番号297>が明らかになった:
【0845】
【化541】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号298;ORF76−1>に対応する:
【0846】
【化542】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピュータ解析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(菌株A)由来の予測されたORFとの相同性)
ORF76は、N.meningitidisの菌株A由来の予測されたORF(ORF76a)と30aaのオーバーラップにわたって96.7%の同一性を示し、そして31aaのオーバーラップにわたって96.8%の同一性を示す:
【0847】
【化543】
Figure 0004472866
【0848】
【化544】
Figure 0004472866
この完全長ORF76aヌクレオチド配列<配列番号299>は、以下の通りである:
【0849】
【化545】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列<配列番号300>を有するポリペプチドをコードする:
【0850】
【化546】
Figure 0004472866
ORF76aおよびORF76−1は、252aaのオーバーラップにおいて、97.6%の同一性を示す:
【0851】
【化547】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されたORFとの相同性)
N末端およびC末端のN.gonorrhoeae由来のORF76ならびに予測されたORF(ORF76.ng)の整列化したaa配列は、それぞれ、30aaおよび31aaのオーバーラップにわたって、96.7%および100%同一性を示す:
【0852】
【化548】
Figure 0004472866
この完全長ORF76ngヌクレオチド配列<配列番号301>は、以下の通りである:
【0853】
【化549】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号302>を有するタンパク質をコードする:
【0854】
【化550】
Figure 0004472866
ORF76ngおよびORF76−1は、252aaのオーバーラップにおいて、96.0%の同一性を示す:
【0855】
【化551】
Figure 0004472866
さらに、ORF76ngは、B.subtilisエクスポートタンパク質前駆体との有意な同一性を示す:
【0856】
【化552】
Figure 0004472866
この解析(淋菌タンパク質中で推定されるリーダー配列およびRGDモチーフの存在を含む)に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のため、または抗体を産生するための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0857】
ORF76−1(27.8kDa)を、上記に記載したように、pETベクターにおいてクローン化し、そしてE.coliにおいて発現した。タンパク質発現および精製の産物を、SDS−PAGEによって分析した。図10Aは、His融合タンパク質のアフィニティ精製の結果を示し、精製されたHis融合タンパク質を、免疫マウス(この血清はウエスタンブロット(図10B)について使用された)、ELISA(陽性結果)、およびFACS分析(図10C)に使用した。これらの実験は、ORF76−1は表面が曝露されたタンパク質であり、そして有用な免疫原であることを確認する。
【0858】
(実施例36)
以下の部分的DNA配列を、N.meningitidis<配列番号303>で同定した:
【0859】
【化553】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号304;ORF81>に対応する:
【0860】
【化554】
Figure 0004472866
【0861】
【化555】
Figure 0004472866
さらなる研究により、以下の完全はヌクレオチド配列<配列番号305>が明らかになった:
【0862】
【化556】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号306;ORF81−1>に対応する:
【0863】
【化557】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピュータ解析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(菌株A)由来の予測されたORFとの相同性)
ORF81は、N.meningitidisの菌株A由来のORF(ORF81a)と85aaのオーバーラップにわたって84.7%の同一性を示し、そして121aaのオーバーラップにわたって99.2%の同一性を示す:
【0864】
【化558】
Figure 0004472866
【0865】
【化559】
Figure 0004472866
この完全長ORF81aヌクレオチド配列<配列番号307>は、以下の通り
である:
【0866】
【化560】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号308>を有するタンパク質をコードする:
【0867】
【化561】
Figure 0004472866
ORF81aおよびORF81−1は、524aaのオーバーラップにおいて、77.9%の同一性を示す:
【0868】
【化562】
Figure 0004472866
【0869】
【化563】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されたORFとの相同性)
N末端およびC末端のN.gonorrhoeae由来のORF81ならびに予測されたORF(ORF81.ng)の整列化したaa配列は、それぞれ、85aaおよび121aaのオーバーラップにおいて、82.4%および97.5%同一性を示す:
【0870】
【化564】
Figure 0004472866
【0871】
【化565】
Figure 0004472866
この完全長ORF81ngヌクレオチド配列<配列番号309>は、以下の通りである:
【0872】
【化566】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号310>を有するタンパク質をコードする:
【0873】
【化567】
Figure 0004472866
ORF81ngおよびORF81−1は、524aaのオーバーラップにおいて、96.4%の同一性を示す:
【0874】
【化568】
Figure 0004472866
【0875】
【化569】
Figure 0004472866
さらに、ORF81ngは、E.coli OMPと有意な相同性を示す:
【0876】
【化570】
Figure 0004472866
【0877】
【化571】
Figure 0004472866
この解析(淋菌タンパク質中の推定されるリーダー配列(二重下線)およびいくつかの推定される膜貫通ドメイン(一重下線)を含む)に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のため、または抗体を産生するための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0878】
(実施例37)
以下の部分的なDNA配列を、N.meningitidis<配列番号311>で同定した:
【0879】
【化572】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号312;ORF83>に対応する:
【0880】
【化573】
Figure 0004472866
さらなる研究により、以下の完全なヌクレオチド配列<配列番号313>が明らかになった:
【0881】
【化574】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号314;ORF83−1>に対応する:
【0882】
【化575】
Figure 0004472866
【0883】
【化576】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピュータ解析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(菌株A)由来の予測されたORFとの相同性)
ORF83は、N.meningitidis(菌株A)由来のORF(ORF83a)と197aaのオーバーラップにわたって、96.4%の相同性を示す:
【0884】
【化577】
Figure 0004472866
この完全長ORF83aヌクレオチド配列<配列番号315>は、以下の通りである:
【0885】
【化578】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列<配列番号316>を有するタンパク質をコードする:
【0886】
【化579】
Figure 0004472866
ORF83aおよびORF83−1は、313aaのオーバーラップにおいて、98.4%の同一性を示す:
【0887】
【化580】
Figure 0004472866
【0888】
【化581】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されたORFとの相同性)
ORF83は、N.gonorrhoeae由来の予測されたORF(ORF83.ng)と197aaのオーバーラップにわたって、94.9%の同一性を示す:
【0889】
【化582】
Figure 0004472866
この完全長ORF83ngヌクレオチド配列<配列番号317>は、以下の通りである:
【0890】
【化583】
Figure 0004472866
【0891】
【化584】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号318>を有するタンパク質をコードする:
【0892】
【化585】
Figure 0004472866
ORF83ngおよびORF83−1は、313aaのオーバーラップにわたって、97.1%の同一性を示す:
【0893】
【化586】
Figure 0004472866
この解析(淋菌タンパク質中の推定されるATP/GTP結合部位モチーフA(Pループ)(二重下線)、および推定される原核生物の膜リポタンパク質脂質吸着部位(一重下線)の存在を含む)に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のため、または抗体を産生するための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0894】
(実施例38)
完全であると考えられる以下のDNA配列を、N.meningitidis<配列番号319>で同定した:
【0895】
【化587】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号320;ORF84>に対応する:
【0896】
【化588】
Figure 0004472866
さらなる研究により完全なヌクレオチド配列<配列番号321>が明らかになった:
【0897】
【化589】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列<配列番号322;ORF84−1>に対応する:
【0898】
【化590】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピュータ解析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(菌株A)由来の予測されたORFとの相同性)
ORF84は、N.meningitidisの菌株A由来のORF(ORF84a)と395aaのオーバーラップにわたって、93.9%の相同性を示す:
【0899】
【化591】
Figure 0004472866
この全長ORF84aヌクレオチド配列<配列番号323>は、以下の通りである:
【0900】
【化592】
Figure 0004472866
【0901】
【化593】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列<配列番号324>を有するタンパク質をコードする:
【0902】
【化594】
Figure 0004472866
ORF84aおよびORF84−1は、395aaのオーバーラップにおいて、95.2%の同一性を示す:
【0903】
【化595】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されたORFとの相同性)
ORF84は、N.gonorrhoeae由来の予測されたORF(ORF84.ng)と395aaのオーバーラップにわたって、94.2%の同一性を示す:
【0904】
【化596】
Figure 0004472866
この完全長ORF84ngヌクレオチド配列<配列番号325>は、以下の通りである:
【0905】
【化597】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号326>を有するタンパク質をコードする:
【0906】
【化598】
Figure 0004472866
ORF84ngおよびORF84−1は、395aaのオーバーラップにわたって、95.4%の同一性を示す:
【0907】
【化599】
Figure 0004472866
この解析(淋菌タンパク質中の推定される膜通過ドメイン(一重下線)、および仮定的ATP/GTP結合部位モチーフA(Pループ、二重下線)の存在を含む)に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のため、または抗体を産生するための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0908】
(実施例39)
以下の部分的なDNA配列を、N.meningitidisで同定した<配列番号327>:
【0909】
【化600】
Figure 0004472866
【0910】
【化601】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号328;ORF88>に対応する:
【0911】
【化602】
Figure 0004472866
さらなる研究により、以下の完全なヌクレオチド配列<配列番号329>が明らかになった:
【0912】
【化603】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号330;ORF88−1>に対応する:
【0913】
【化604】
Figure 0004472866
【0914】
【化605】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピュータ解析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(菌株A)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF88は、N.meningitidis(菌株A)由来のORF(ORF88a)と371aaのオーバーラップにわたって、95.7%の同一性を示す:
【0915】
【化606】
Figure 0004472866
この完全長ORF88aヌクレオチド配列<配列番号331>は、以下の通りである:
【0916】
【化607】
Figure 0004472866
【0917】
【化608】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列<配列番号332>を有するタンパク質をコードする:
【0918】
【化609】
Figure 0004472866
ORF88aおよびORF88−1は、671aaのオーバーラップにおいて、100.0%の同一性を示す:
【0919】
【化610】
Figure 0004472866
【0920】
【化611】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF88は、N.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF88.ng)と371aaのオーバーラップにわたって、93.8%の同一性を示す:
【0921】
【化612】
Figure 0004472866
ORF88ngヌクレオチド配列<配列番号333>は、以下のアミノ酸配列<配列番号334>を有するタンパク質をコードすることが予測された:
【0922】
【化613】
Figure 0004472866
さらなる研究により、完全な淋菌DNA配列<配列番号335>が明らかになった:
【0923】
【化614】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列<配列番号336;ORF88ng−1>に対応する:
【0924】
【化615】
Figure 0004472866
【0925】
【化616】
Figure 0004472866
ORF88ng−1およびORF88−1は、671aaのオーバーラップにおいて、97.0%の同一性を示す:
【0926】
【化617】
Figure 0004472866
さらに、ORG88ng−1は、Aquifex aeolicus由来の仮定的タンパク質と同一性を示す:
【0927】
【化618】
Figure 0004472866
【0928】
【化619】
Figure 0004472866
この解析(淋菌タンパク質中の推定される膜貫通ドメインを含む)に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断薬のため、または抗体を産生するための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0929】
(実施例40)
以下のDNA配列は完全であると考えられ、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号337):
【0930】
【化620】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号338;ORF89)に対応する:
【0931】
【化621】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号339):
【0932】
【化622】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号340;ORF89−1)に対応する:
【0933】
【化623】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(N.gonorrhoeaeのPilEとの相同性(受託番号Z69260))
ORF89およびPilEタンパク質は120aaの重複部分にわたって30%の同一性を示す:
【0934】
【化624】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A株)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF89は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF89a)と162aa重複部分にわたって83.3%の同一性を示す:
【0935】
【化625】
Figure 0004472866
完全長ORF89aヌクレオチド配列(配列番号341)は以下である:
【0936】
【化626】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号342)を有するタンパク質をコードする:
【0937】
【化627】
Figure 0004472866
ORF89aおよびORF89−1は162aaの重複部分において83.3%の同一性を示す:
【0938】
【化628】
Figure 0004472866
【0939】
【化629】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF89はN.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF89.ng)と162aaの重複部分にわたって84.6%の同一性を示す:
【0940】
【化630】
Figure 0004472866
完全長ORF89ngヌクレオチド配列(配列番号343)は以下である:
【0941】
【化631】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号344)を有するタンパク質をコードする:
【0942】
【化632】
Figure 0004472866
この淋菌タンパク質は、推定リーダーペプチド(下線)およびN末端メチル化部位(NMePheまたはtype−4 pili、二重下線)を有する。さらに、ORF89ngおよびORF89−1は、162aaの重複部分において88.3%の同一性を示す:
【0943】
【化633】
Figure 0004472866
淋菌性モチーフおよび公知のPilEタンパク質との相同性を含む、この分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープが、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得ることが予測された。
【0944】
上述したように、ORF89−1(13.6kDa)を、pGexベクターでクローン化し、そしてE.coliで発現させた。タンパク質の発現および精製の産物をSDS−PAGEで分析した。図11AはGST融合タンパク質のアフィニティー精製の結果を示す。精製したGST融合タンパク質を使用してマウスを免疫し、この血清はELISA試験において陽性結果を生じた。ORF89−1は表面に露出されるタンパク質(surface−exposed protein)であり、有用な免疫原であることを確認した。
【0945】
(実施例41)
以下の部分的なDNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号345):
【0946】
【化634】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号346;ORF91)に対応する:
【0947】
【化635】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号347):
【0948】
【化636】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号348;ORF91−1)に対応する:
【0949】
【化637】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(N.meningitidis(A株)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF91は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF91a)と92aa重複部分にわたって92.4%の同一性を示す:
【0950】
【化638】
Figure 0004472866
【0951】
【化639】
Figure 0004472866
完全長ORF91aヌクレオチド配列(配列番号349)は以下である:
【0952】
【化640】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号350)を有するタンパク質をコードする:
【0953】
【化641】
Figure 0004472866
ORF91aおよびORF91−1は196aaの重複部分において98.0%の同一性を示す:
【0954】
【化642】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF91はN.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF91.ng)と92aaの重複部分にわたって84.8%の同一性を示す:
【0955】
【化643】
Figure 0004472866
完全長ORF91ngヌクレオチド配列(配列番号351)は、アミノ酸配列(配列番号352)を有するタンパク質をコードすると予測される:
【0956】
【化644】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号353):
【0957】
【化645】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号354;ORF91ng−1)に対応する:
【0958】
【化646】
Figure 0004472866
ORF91ng−1およびORF91−1は196aaの重複部分において92.3%の同一性を示す:
【0959】
【化647】
Figure 0004472866
さらに、ORF91ng−1は仮定のE.coliのタンパク質と相同性を示す:
【0960】
【化648】
Figure 0004472866
【0961】
【化649】
Figure 0004472866
淋菌性タンパク質における推定リーダー配列の存在を含む、この分析に基づいて、N.meningitidis由来およびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープが、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得ることが予測される。
【0962】
(実施例42)
以下のDNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号355):
【0963】
【化650】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号356;ORF97)に対応する:
【0964】
【化651】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号357):
【0965】
【化652】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号358;ORF97−1)に対応する:
【0966】
【化653】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(N.meningitidis(A株)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF97は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF91a)と159aa重複部分にわたって88.7%の同一性を示す:
【0967】
【化654】
Figure 0004472866
【0968】
【化655】
Figure 0004472866
完全長ORF97aヌクレオチド配列(配列番号359)は以下である:
【0969】
【化656】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号360)を有するタンパク質をコードする:
【0970】
【化657】
Figure 0004472866
ORF97aおよびORF97−1は159aaの重複部分にわたって95.6%の同一性を示す:
【0971】
【化658】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF97はN.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF97.ng)と159aaの重複部分にわたって88.1%の同一性を示す:
【0972】
【化659】
Figure 0004472866
完全長ORF97ngヌクレオチド配列(配列番号361)は、アミノ酸配列(配列番号362)を有するタンパク質をコードすると予測される:
【0973】
【化660】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号363):
【0974】
【化661】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号364;ORF97ng−1)に対応する:
【0975】
【化662】
Figure 0004472866
ORF97ng−1およびORF97−1は159aaの重複部分において96.2%の同一性を示す:
【0976】
【化663】
Figure 0004472866
淋菌性タンパク質における推定リーダー配列の存在を含む、この分析に基づいて、N.meningitidis由来およびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープが、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得ることが予測された。
【0977】
上述したように、ORF97−1(15.3kDa)を、pETベクターおよびpGexベクターでクローン化し、そしてE.coliで発現させた。タンパク質の発現および精製の産物をSDS−PAGEで分析した。図12Aおよび図12Bはそれぞれ、GST融合タンパク質のアフィニティー精製の結果、ならびにHis融合タンパク質のアフィニティー精製の結果を示す。精製したGST融合タンパク質を使用してマウスを免疫し、この血清を、ウエスタンブロット解析(図12C)、ELISA解析(陽性結果)、およびFACS解析(図12D)のために使用した。これらの実験は、ORF97−1は表面に露出されるタンパク質であり、有用な免疫原であることを確認した。図12Eは、ORF97−1についての親水性、抗原性指数、およびAMPHI領域のプロットを示す。
【0978】
(実施例43)
以下のDNA配列は完全である考えられ、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号365):
【0979】
【化664】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号366;ORF106)に対応する:
【0980】
【化665】
Figure 0004472866
さらなる研究は以下のDNA配列を明らかにした(配列番号367):
【0981】
【化666】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号368;ORF106−1)に対応する:
【0982】
【化667】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(N.meningitidis(A株)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF106はN.meningitidisのA株由来の予測されるORF(ORF106a)と199aaの重複部分にわたって87.4%の同一性を示す:
【0983】
【化668】
Figure 0004472866
【0984】
【化669】
Figure 0004472866
111残基でのK→N置換のために、ORF106aとORF106−1との間の相同性は、同様の199aaの重複部分にわたって87.9%である。
【0985】
完全長ORF106aヌクレオチド配列(配列番号369)は以下である:
【0986】
【化670】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号370)を有するタンパク質をコードする:
【0987】
【化671】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF106はN.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF106.ng)と199aaの重複部分にわたって90.5%の同一性を示す:
【0988】
【化672】
Figure 0004472866
111残基でのK→N置換のために、ORF106ngとORF106−1との間の相同性は、同様の199aaの重複部分にわたって91.0%である。
【0989】
完全長ORF106ngヌクレオチド配列(配列番号371)は以下である:
【0990】
【化673】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号372)を有するタンパク質をコードする:
【0991】
【化674】
Figure 0004472866
淋菌性タンパク質の推定リーダー配列の存在を含む、この分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープが、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得ることが予測された。
【0992】
上述したように、ORF106−1(18kDa)を、pETベクターおよびpGexベクターでクローン化し、そしてE.coliで発現させた。タンパク質の発現および精製の産物をSDS−PAGEで分析した。図13AはHis融合タンパク質のアフィニティー精製の結果、および図13BはE.coliにおけるGST融合の発現の結果を示す。精製したHis融合タンパク質を使用してマウスを免疫し、この血清をFACS解析(図13C)のために使用した。これらの実験は、ORF106−1は表面に露出されるタンパク質であり、有用な免疫原であることを確認する。
【0993】
(実施例44)
以下のDNA配列は、完全あると考えられ、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号373):
【0994】
【化675】
Figure 0004472866
【0995】
【化676】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号374;ORF10)に対応する:
【0996】
【化677】
Figure 0004472866
さらなる配列解析は以下の完全DNA配列を明らかにした(配列番号375):
【0997】
【化678】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号376;ORF10−1)に対応する:
【0998】
【化679】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(予測)
ORF10−1は、いくつか(12−13)の潜在的な膜貫通セグメントを包含しているので、内在性膜蛋白の前駆体であり、推定切断可能なシグナルペプチドであると予測される。
【0999】
(Streptoccus thermophilus(受託番号U40830)由来のEpsとの相同性)
ORF10はS.thermophilusのepsM遺伝子と相同性を示す。epsM遺伝子は、ORF10と類似する大きさのタンパク質をコードし、そしてエクソポリサッカリド合成に関与する。他の相同性は原核生物の膜タンパク質とである:
【1000】
【化680】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A株)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF10はN.meningitidisのA株由来のORF(ORF10a)と475aaの重複部分にわたって95.4%の同一性を示す:
【1001】
【化681】
Figure 0004472866
【1002】
【化682】
Figure 0004472866
完全長ORF10aヌクレオチド配列(配列番号377)は以下である:
【1003】
【化683】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号378)を有するタンパク質をコードする:
【1004】
【化684】
Figure 0004472866
ORF10aおよびORF10−1は475aaの重複部分において95.4%の同一性を示す:
【1005】
【化685】
Figure 0004472866
【1006】
【化686】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF10は、N.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF10.ng)と475aaにわたり94.1%の相同性を示す:
【1007】
【化687】
Figure 0004472866
【1008】
【化688】
Figure 0004472866
完全長ORF10ngヌクレオチド配列(配列番号379)は以下である:
【1009】
【化689】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号380)を有するタンパク質をコードする:
【1010】
【化690】
Figure 0004472866
ORF10ngおよびORF10−1は473aaの重複部分において96.4%の同一性を示す:
【1011】
【化691】
Figure 0004472866
【1012】
【化692】
Figure 0004472866
推定リーダーペプチドおよびいくつかの膜貫通セグメントの存在、ならびにロイシンジッパーモチーフ(4Leu残基が6aaによって区切られる、太字で示している)の存在を含む、この分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得ることが予測される。
【1013】
(実施例45)
以下の部分的なDNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号381):
【1014】
【化693】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号382;ORF65)に対応する:
【1015】
【化694】
Figure 0004472866
【1016】
【化695】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号383):
【1017】
【化696】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号384;ORF65−1)に対応する:
【1018】
【化697】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(N.meningitidis(A株)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF65は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF65a)と150aa重複部分にわたって92.0%の同一性を示す:
【1019】
【化698】
Figure 0004472866
完全長ORF65aヌクレオチド配列(配列番号385)は以下である:
【1020】
【化699】
Figure 0004472866
【1021】
【化700】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号386)を有するタンパク質をコードする:
【1022】
【化701】
Figure 0004472866
ORF65aおよびORF65−1は289aaの重複部分にわたって96.5%の同一性を示す:
【1023】
【化702】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF65はN.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF65.ng)と212aaの重複部分にわたって89.6%の同一性を示す:
【1024】
【化703】
Figure 0004472866
【1025】
【化704】
Figure 0004472866
ORF65ngヌクレオチド配列(配列番号387)は、アミノ酸配列(配列番号388)を有するタンパク質をコードすると予測される:
【1026】
【化705】
Figure 0004472866
さらなる解析の後、完全な淋菌DNA配列(配列番号389)が以下であることを見出した:
【1027】
【化706】
Figure 0004472866
これは以下のアミノ酸配列(配列番号390)をコードする:
【1028】
【化707】
Figure 0004472866
ORF65ng−1およびORF65−1は290aaの重複部分において89.0%の同一性を示す:
【1029】
【化708】
Figure 0004472866
【1030】
【化709】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質の推定膜貫通ドメインの存在を含む、この基準に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得ることが予測される。
【1031】
(実施例46)
以下のDNA配列は完全であると考えられ、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号391):
【1032】
【化710】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号392;ORF103)に対応する:
【1033】
【化711】
Figure 0004472866
さらなる研究は以下のようなDNA配列を合成(elaborate)した(配列番号393):
【1034】
【化712】
Figure 0004472866
【1035】
【化713】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号394;ORF103−1)に対応する:
【1036】
【化714】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(N.meningitidis(A株)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF103は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF103a)と222aa重複部分にわたって93.8%の同一性を示す:
【1037】
【化715】
Figure 0004472866
完全長のORF103aヌクレオチド配列(配列番号395)は以下である:
【1038】
【化716】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号396)を有するタンパク質をコードする:
【1039】
【化717】
Figure 0004472866
【1040】
【化718】
Figure 0004472866
ORF103aおよびORF103−1は222aaの重複部分において97.7%の同一性を示す:
【1041】
【化719】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeaeの予測されたORFとの相同性)
ORF103はN.gonorrhoeaeの予測されるORF(ORF103.ng)と222aaの重複部分にわたって95.5%の同一性を示す:
【1042】
【化720】
Figure 0004472866
完全長ORF103ngヌクレオチド配列(配列番号397)は以下である:
【1043】
【化721】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号398)を有するタンパク質をコードする:
【1044】
【化722】
Figure 0004472866
さらに、ORF103ngおよびORF103−1は222aaの重複部分において97.3%の同一性を示す:
【1045】
【化723】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質における推定リーダー配列(二重線)およびいくつかの推定の膜貫通ドメイン(一重線)の存在を含む、この解析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得ることが予測される。
【1046】
(実施例47)
以下の部分的なDNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号399):
【1047】
【化724】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号400;ORF104)に対応する:
【1048】
【化725】
Figure 0004472866
【1049】
【化726】
Figure 0004472866
さらなる研究は、さらなる部分的なDNA配列を明らかにした(配列番号401):
【1050】
【化727】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号402;ORF104−1)に対応する:
【1051】
【化728】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(H.influenzae(受託番号U32769)の仮定のHI0878タンパク質との相同性)
ORF104およびHI0878は、277aaの重複部分にわたって40%aaの同一性を示す:
【1052】
【化729】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A株)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF104は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF104a)と277aa重複部分にわたって95.3%の同一性を示す:
【1053】
【化730】
Figure 0004472866
【1054】
【化731】
Figure 0004472866
完全長ORF104aヌクレオチド配列(配列番号403)は以下である:
【1055】
【化732】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号404)を有するタンパク質をコードする:
【1056】
【化733】
Figure 0004472866
ORF104aおよびORF104−1は277aaの重複部分において98.2%の同一性を示す:
【1057】
【化734】
Figure 0004472866
【1058】
【化735】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF104はN.gonorrhoeae由来の予測されるORF(OR104.ng)と277aaの重複部分にわたって93.9%の同一性を示す:
【1059】
【化736】
Figure 0004472866
完全長ORF104ngヌクレオチド配列(配列番号405)を、アミノ酸配列(配列番号406)を有するタンパク質をコードすると予測される:
【1060】
【化737】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全な淋菌のヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号407):
【1061】
【化738】
Figure 0004472866
【1062】
【化739】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号408;ORF104ng−1)に対応する:
【1063】
【化740】
Figure 0004472866
ORF104ng−1およびORF104−1は277aaの重複部分にわたって97.5%の同一性を示す:
【1064】
【化741】
Figure 0004472866
さらに、ORF104ng−1は、仮定のH.influenzaeのタンパク質と有意な相同性を示す。
【1065】
【化742】
Figure 0004472866
【1066】
【化743】
Figure 0004472866
淋菌のタンパク質の、推定リーダー配列、およびいくつかの推定膜貫通ドメインの存在を含む、これらの解析に基づき、N.meningitidis由来およびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得ることが予測される。
【1067】
(実施例48)
以下の部分的なDNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号409):
【1068】
【化744】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号410;ORF105)に対応する:
【1069】
【化745】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号411):
【1070】
【化746】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号412;ORF105−1)に対応する:
【1071】
【化747】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(N.meningitidis(A株)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF105は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF105a)と226aaの重複部分にわたって89.4%の同一性を示す:
【1072】
【化748】
Figure 0004472866
完全長ORF105aヌクレオチド配列(配列番号413)は以下である:
【1073】
【化749】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号414)を有するタンパク質をコードする:
【1074】
【化750】
Figure 0004472866
【1075】
【化751】
Figure 0004472866
ORF105aおよびORF105−1は291aaの重複部分において93.8%の同一性を示す:
【1076】
【化752】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF105はN.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF105.ng)と312aaの重複部分にわたって87.5%の同一性を示す:
【1077】
【化753】
Figure 0004472866
完全長ORF105ngヌクレオチド配列(配列番号415)は、アミノ酸配列(配列番号416)を有するタンパク質をコードすると予測される:
【1078】
【化754】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号417):
【1079】
【化755】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号418;ORF105ng−1)に対応する:
【1080】
【化756】
Figure 0004472866
ORF105ng−1およびORF105−1は291aaの重複部分において93.5%の同一性を示す:
【1081】
【化757】
Figure 0004472866
さらに、ORF105ng−1は酵母の酵素と相同性を示す:
【1082】
【化758】
Figure 0004472866
淋菌のタンパク質における推定膜貫通ドメインの存在を含む、これらの解析に基づき、N.meningitidis由来およびN.gonorrhoeaeこれらののタンパク質、ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得ることが予測される。
【1083】
(実施例49)
以下のDNA配列は、完全であると考えられ、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号419):
【1084】
【化759】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号420;ORF107)に対応する:
【1085】
【化760】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(N.meningitidis(A株)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF107は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF107a)と186aaの重複部分にわたって97.8%の同一性を示す:
【1086】
【化761】
Figure 0004472866
【1087】
【化762】
Figure 0004472866
完全長ORF107aヌクレオチド配列(配列番号421)は以下である:
【1088】
【化763】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号422)を有するタンパク質をコードする:
【1089】
【化764】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeaeの予測されるORFとの相同性)
ORF107は、N.gonorrhoeaeのA株由来の予測されるORF(ORF107.ng)と188aaの重複部分にわたって95.7%の同一性を示す:
【1090】
【化765】
Figure 0004472866
完全長ORF107ngヌクレオチド配列(配列番号423)は、アミノ酸配列(配列番号424)を有するタンパク質をコードすると予測される:
【1091】
【化766】
Figure 0004472866
淋菌のタンパク質における、推定膜貫通ドメインの存在に基づいて、N.meningitidis由来およびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質が予測され、そしてこれらのエピトープは、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得ることが予測される。
【1092】
(実施例50)
以下のDNA配列は完全である考えられ、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号425):
【1093】
【化767】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号426;ORF108)に対応する:
【1094】
【化768】
Figure 0004472866
さらなる研究は以下のDNA配列を明らかにした(配列番号427):
【1095】
【化769】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号428;ORF108−1)に対応する:
【1096】
【化770】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF108はN.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF108.ng)と181aaの重複部分にわたって88.4%の同一性を示す:
【1097】
【化771】
Figure 0004472866
ORF108−1はORF108ngと181aaの重複部分にわたって92.3%の同一性を示す:
【1098】
【化772】
Figure 0004472866
完全長ORF108ngヌクレオチド配列(配列番号429)は以下である:
【1099】
【化773】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号430)を有するタンパク質をコードする:
【1100】
【化774】
Figure 0004472866
淋菌のタンパク質における、予測される原核生物の膜リポタンパク質脂質結合部位(下線)および推定ATP/GTP結合部位モチーフA(Pループ、二重下線)の存在を含む、この解析に基づいて、N.meningitidis由来およびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得ることが予測される。
【1101】
(実施例51)
以下のDNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号431):
【1102】
【化775】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号432;ORF109)に対応する:
【1103】
【化776】
Figure 0004472866
さらなる研究は以下のDNA配列を明らかにした(配列番号433):
【1104】
【化777】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号434;ORF109−1)に対応する:
【1105】
【化778】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(N.meningitidis(A株)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF109は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF109a)と147aaの重複部分にわたって95.9%の同一性を示す:
【1106】
【化779】
Figure 0004472866
【1107】
【化780】
Figure 0004472866
完全長ORF109aヌクレオチド配列(配列番号435)は以下である:
【1108】
【化781】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号436)を有するタンパク質をコードする:
【1109】
【化782】
Figure 0004472866
ORF109aおよびORF109−1は262aaの重複部分において99.2%の同一性を示す:
【1110】
【化783】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF109はN.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF109.ng)と231aaの重複部分にわたって98.3%の同一性を示す:
【1111】
【化784】
Figure 0004472866
ORF109ngヌクレオチド配列(配列番号437)は、アミノ酸配列(配列番号438)を有するタンパク質をコードすると予測された:
【1112】
【化785】
Figure 0004472866
さらなる研究は、以下の淋菌DNA配列を明らかにした(配列番号439):
【1113】
【化786】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号440;ORF109ng−1)に対応する:
【1114】
【化787】
Figure 0004472866
ORF109ng−1およびORF109−1は262aaの重複部分にわたって98.9%の同一性を示す:
【1115】
【化788】
Figure 0004472866
【1116】
【化789】
Figure 0004472866
さらに、ORF109ng−1は、仮定のPseudomonasタンパク質に対して相同性を示す:
【1117】
【化790】
Figure 0004472866
淋菌のタンパク質において推定リーダー配列(二重下線)およびいくつかの推定膜貫通ドメイン(一重下線)の存在を含む、この分析に基づいて、N.meningitidis由来およびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープは、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得ることが予測される。
【1118】
(実施例52)
以下の部分的なDNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号441):
【1119】
【化791】
Figure 0004472866
【1120】
【化792】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号442;ORF110)に対応する:
【1121】
【化793】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(N.meningitidis(A株)由来のORF88aとの相同性)
ORF110は、N.meningitidisのA株由来のORF88aと188aaの重複部分にわたって91.5%の同一性を示す:
【1122】
【化794】
Figure 0004472866
しかし、ORF88およびORF110は2つの異なる同種のタンパク質フラグメントを示すため、整列しない。
【1123】
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF110はN.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF110.ng)と211aaの重複部分にわたって88.6%の同一性を示す:
【1124】
【化795】
Figure 0004472866
【1125】
【化796】
Figure 0004472866
完全長ORF110ngヌクレオチド配列(配列番号443)は、アミノ酸配列(配列番号444)を有するタンパク質をコードすると予測される:
【1126】
【化797】
Figure 0004472866
淋菌のタンパク質における推定膜貫通ドメインに基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープが、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得ることが予測される。
【1127】
(実施例53)
以下のDNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号445):
【1128】
【化798】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号446;ORF111)に対応する:
【1129】
【化799】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示す:
(N.meningitidis(A株)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF111は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF111a)と351aa重複部分にわたって96.9%の同一性を示す:
【1130】
【化800】
Figure 0004472866
完全長ORF111aヌクレオチド配列(配列番号447)は以下である:
【1131】
【化801】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号448)を有するタンパク質をコードする:
【1132】
【化802】
Figure 0004472866
【1133】
【化803】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定されるORFとの相同性)
ORF111はN.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF111.ng)と351aaの重複部分にわたって96.6%の同一性を示す:
【1134】
【化804】
Figure 0004472866
完全長ORF111ngヌクレオチド配列(配列番号449)は以下である:
【1135】
【化805】
Figure 0004472866
【1136】
【化806】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号450)を有するタンパク質をコードする:
【1137】
【化807】
Figure 0004472866
これはH.influenzae由来の仮定のリポタンパク質前駆体との相同性を示す:
【1138】
【化808】
Figure 0004472866
この解析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープが、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得ることが予測される。
【1139】
(実施例54)
以下の部分的なDNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号451):
【1140】
【化809】
Figure 0004472866
【1141】
【化810】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号452;ORF35)に対応する:
【1142】
【化811】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(N.meningitidis(受託番号A32247)の推定分泌VirGホモログとの相同性)
ORFおよびvirg−hタンパク質は、261aaの重複部分において51%の同一性を示す:
【1143】
【化812】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A株)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF35は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF35a)と259aaの重複部分にわたって96.9%の同一性を示す:
【1144】
【化813】
Figure 0004472866
【1145】
【化814】
Figure 0004472866
完全長ORF35aヌクレオチド配列(配列番号453)は以下である:
【1146】
【化815】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号454)を有するタンパク質をコードする:
【1147】
【化816】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF35は、N.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF35ngh)と261aaの重複部分にわたって51.7%の同一性を示す:
【1148】
【化817】
Figure 0004472866
【1149】
【化818】
Figure 0004472866
部分的なORF35nghのヌクレオチド配列(配列番号455)は、部分的なアミノ酸配列(配列番号456)を有するタンパク質をコードすると予測される:
【1150】
【化819】
Figure 0004472866
この予測に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープが、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得る。
【1151】
(実施例55)
以下の部分的なDNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号457):
【1152】
【化820】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号458;ORF46)に対応する:
【1153】
【化821】
Figure 0004472866
さらなる研究は、さらに部分的なヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号459):
【1154】
【化822】
Figure 0004472866
【1155】
【化823】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号460;ORF46−1)に対応する:
【1156】
【化824】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(N.gonorrhoeae由来の予測されるORFとの相同性)
ORF46はN.gonorrhoeae由来の予測されるORF(ORF46ng)と111aaの重複部分にわたって98.2%の同一性を示す:
【1157】
【化825】
Figure 0004472866
部分的なORF46ngヌクレオチド配列(配列番号461)は、部分的なアミノ酸配列(配列番号462)を有するタンパク質をコードすると予測される:
【1158】
【化826】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全な淋菌のDNA配列を明らかにした(配列番号463):
【1159】
【化827】
Figure 0004472866
【1160】
【化828】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号464;ORF46ng−1)に対応する:
【1161】
【化829】
Figure 0004472866
ORF46ng−1およびORF46−1は227aaの重複部分において94.7%の同一性を示す。
【1162】
【化830】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A株)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF49ng−1は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF46a)と486aaの重複部分にわたって87.4%の同一性を示す:
【1163】
【化831】
Figure 0004472866
【1164】
【化832】
Figure 0004472866
完全長ORF46aDNA配列(配列番号465)は以下である:
【1165】
【化833】
Figure 0004472866
【1166】
【化834】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号466)に対応する:
【1167】
【化835】
Figure 0004472866
淋菌のタンパク質(特に付着因子)におけるRGD配列の存在を含む、この解析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープが、ワクチンまたは診断薬のため、あるいは抗体産生のための有用な抗原であり得ることが予測される。
【1168】
(実施例56)
以下の部分的なDNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号467):
【1169】
【化836】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号468;ORF48)に対応する:
【1170】
【化837】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号469):
【1171】
【化838】
Figure 0004472866
【1172】
【化839】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号470;ORF48−1)に対応する:
【1173】
【化840】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を示した:
(N.meningitidis(A株)由来の予測されるORFとの相同性)
ORF48は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF48a)と119aaの重複部分にわたって94.1%の同一性を示す:
【1174】
【化841】
Figure 0004472866
完全長ORF48aヌクレオチド配列(配列番号471)は以下である:
【1175】
【化842】
Figure 0004472866
【1176】
【化843】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号472)を有するタンパク質をコードする:
【1177】
【化844】
Figure 0004472866
ORF48aおよびORF48−1は472aaの重複部分において96.8%の同一性を示す:
【1178】
【化845】
Figure 0004472866
【1179】
【化846】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF48は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF48ng)と119アミノ酸の重複にわたって97.5%の同一性を示す:
【1180】
【化847】
Figure 0004472866
このORF48ngヌクレオチド配列(配列番号473)は、アミノ酸配列(配列番号474)を有するタンパク質をコードすると推定された:
【1181】
【化848】
Figure 0004472866
さらなる仕事は、完全な淋菌DNA配列(配列番号475)を同定した:
【1182】
【化849】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号476;ORF48ng−1)を有するタンパク質をコードする:
【1183】
【化850】
Figure 0004472866
ORF48ng−1およびORF48−1は、472アミノ酸の重複にわたって97.9%の同一性を示す。
【1184】
【化851】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質における推定リーダー配列(二重下線)および2つの推定膜貫通ドメイン(一重下線)の存在を含むこの分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断、あるいは抗体の惹起のための有用な抗原であり得ることが推定される。
【1185】
(実施例57)
以下の部分DNA配列を、N.meningitidis(配列番号477)において同定した:
【1186】
【化852】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号478;ORF53)に対応する:
【1187】
【化853】
Figure 0004472866
さらなる仕事は完全なヌクレオチド配列(配列番号479)を明らかにした:
【1188】
【化854】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号480;ORF53−1)に対応する:
【1189】
【化855】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(株A)由来の推定ORFとの相同性)
ORF53はN.meningitidisの株A由来のORF(ORF53a)と139アミノ酸配列の重複にわたって93.5%の同一性を示す:
【1190】
【化856】
Figure 0004472866
この完全な長さのORF53aヌクレオチド配列(配列番号481)は:
【1191】
【化857】
Figure 0004472866
である。
【1192】
これはアミノ酸配列(配列番号482)を有するタンパク質をコードする:
【1193】
【化858】
Figure 0004472866
ORF53aはORF53−1と417アミノ酸の重複にわたって100%の同一性を示す:
【1194】
【化859】
Figure 0004472866
【1195】
【化860】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF53はN.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF53ng)と139アミノ酸の重複にわたって92.1%の同一性を示す:
【1196】
【化861】
Figure 0004472866
ORF53ngヌクレオチド配列(配列番号483)は、アミノ酸配列(配列番号484)を有するタンパク質をコードすると推定された:
【1197】
【化862】
Figure 0004472866
さらなる分析は、さらなる部分DNA淋菌配列(配列番号485)を明らかにした:
【1198】
【化863】
Figure 0004472866
【1199】
【化864】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号486;ORF53ng−1)に対応する:
【1200】
【化865】
Figure 0004472866
ORF53ng−1およびORF53−1は、336個のアミノ酸配列の重複にわたって94.0%の同一性を示す:
【1201】
【化866】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質において推定リーダー配列(二重下線)およびいくつかの推定膜貫通ドメイン(一重下線)の存在を含むこの分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来タンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断、あるいは抗体の惹起のための有用な抗原であり得ることが推定される。
【1202】
(実施例58)
以下の部分DNA配列をN.meningitidis(配列番号487)において同定した:
【1203】
【化867】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号488;ORF58)に対応する:
【1204】
【化868】
Figure 0004472866
さらなる仕事は完全なヌクレオチド配列(配列番号489)を明らかにした:
【1205】
【化869】
Figure 0004472866
【1206】
【化870】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号490;ORF58−1)に対応する:
【1207】
【化871】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、示された膜貫通領域を推定し、そしてまた以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(株A)由来の推定ORFとの相同性)
ORF58はN.meningitidisの株A由来のORF(ORF58a)と139個のアミノ酸配列の重複にわたって96.6%の同一性を示す:
【1208】
【化872】
Figure 0004472866
この完全な長さのORF53aヌクレオチド配列(配列番号491)は:
【1209】
【化873】
Figure 0004472866
である。
【1210】
これはアミノ酸配列(配列番号492)を有するタンパク質をコードする:
【1211】
【化874】
Figure 0004472866
【1212】
【化875】
Figure 0004472866
ORF58aおよびORF58−1は、1014個のアミノ酸の重複にわたって96.6%の同一性を示す:
【1213】
【化876】
Figure 0004472866
【1214】
【化877】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF58はN.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF58ng)と9アミノ酸の重複にわたって完全な同一性を示す:
【1215】
【化878】
Figure 0004472866
ORF58ngヌクレオチド配列(配列番号493)は、部分アミノ酸配列(配列番号494)を有するタンパク質をコードすると推定される:
【1216】
【化879】
Figure 0004472866
【1217】
【化880】
Figure 0004472866
この部分淋菌配列は、推定膜貫通領域および推定ATP/GTP結合部位モチーフA(P−ループ;二重下線)を含む。さらに、それはE.coliのFTSK細胞分裂タンパク質に相同なドメインを有する。ORF58ngおよびFtsK(登録番号p46889)の整合は、459個の重複にわたって65%のアミノ酸同一性を示す:
【1218】
【化881】
Figure 0004472866
ORF58ngに関するさらなる仕事は、完全な淋菌DNA配列が(配列番号495)であることを明らかにした:
【1219】
【化882】
Figure 0004472866
【1220】
【化883】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号496;ORF58ng−1)に対応する:
【1221】
【化884】
Figure 0004472866
ORF58ng−1およびORF58−1は、1014個のアミノ酸の重複にわたって97.2%の同一性を示す:
【1222】
【化885】
Figure 0004472866
【1223】
【化886】
Figure 0004472866
さらに、ORF58ng−1は、E.coliタンパク質、FtsKに対する有意な相同性を示す:
【1224】
【化887】
Figure 0004472866
この分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにエピトープは、ワクチンまたは診断、あるいは抗体の惹起のために有用な抗原であり得ることが推定される。
【1225】
(実施例59)
以下の部分的なDNA配列をN.meningitidis(配列番号497)において同定した:
【1226】
【化888】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号498;ORF101)に対応する:
【1227】
【化889】
Figure 0004472866
さらなる仕事は完全なヌクレオチド配列(配列番号499)を明らかにした:
【1228】
【化890】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号500;ORF101−1)に対応する:
【1229】
【化891】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(株A)由来の推定ORFとの相同性)
ORF101は、N.meningitidisの株A由来のORF(ORF101a)と57個のアミノ酸の重複にわたって91.2%の同一性および69個のアミノ酸の重複にわたって95.7%の同一性を示す:
【1230】
【化892】
Figure 0004472866
この完全な長さのORF101aヌクレオチド配列(配列番号501)は:
【1231】
【化893】
Figure 0004472866
である。
【1232】
これはアミノ酸配列(配列番号502)を有するタンパク質をコードする:
【1233】
【化894】
Figure 0004472866
ORF101aおよびORF101−1は、371個のアミノ酸の重複にわたって95.4%の同一性を示す:
【1234】
【化895】
Figure 0004472866
【1235】
【化896】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF101は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF101ng)とN末端ドメインにおける57個のアミノ酸の重複にわたって96.5%の同一性、C末端ドメインにおける61個のアミノ酸の重複にわたって95.1%の同一性をそれぞれ示す:
【1236】
【化897】
Figure 0004472866
【1237】
【化898】
Figure 0004472866
ORF101ngヌクレオチド配列(配列番号503)は、部分アミノ酸配列(配列番号504)を有するタンパク質をコードすると推定される:
【1238】
【化899】
Figure 0004472866
さらなる仕事は、完全なヌクレオチド配列(配列番号505)を明らかにした:
【1239】
【化900】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号506;ORF101ng−1)に対応する:
【1240】
【化901】
Figure 0004472866
ORF101ng−1およびORF101−1は、371個のアミノ酸の重複にわたって97.6%の同一性を示す:
【1241】
【化902】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質において推定リーダー配列(二重下線)およびいくつかの推定膜貫通ドメイン(一重下線)の存在を含むこの分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断、あるいは抗体の惹起のために有用な抗原であり得ることが推定される。
【1242】
(実施例60)
以下の部分DNA配列をN.meningitidis(配列番号507)において同定した:
【1243】
【化903】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号508;ORF113)に対応する:
【1244】
【化904】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidisのpspA推定分泌タンパク質(登録番号AF030941)との相同性)
ORFおよびpspAは、179個のアミノ酸重複にわたって44%のアミノ酸の同一性を示す:
【1245】
【化905】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF113は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF113ng)とN末端部分における52個のアミノ酸の重複にわたって86.5%の同一性、C末端部分における17個のアミノ酸の重複にわたって94.1%の同一性を示す:
【1246】
【化906】
Figure 0004472866
完全長のORF113ngヌクレオチド配列(配列番号509)は、アミノ酸配列(配列番号510)を有するタンパク質をコードすると推定される:
【1247】
【化907】
Figure 0004472866
【1248】
【化908】
Figure 0004472866
この分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断、あるいは抗体の惹起のために有用な抗原であり得ることが推定される。
【1249】
(実施例61)
以下の部分DNA配列をN.meningitidis(配列番号511)において同定した:
【1250】
【化909】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号512;ORF115)に対応する:
【1251】
【化910】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis由来のpspA推定分泌タンパク質(登録番号AF030941)との相同性)
ORF115およびpspAタンパク質は、325個のアミノ酸の重複にわたって50%のアミノ酸同一性を示す:
【1252】
【化911】
Figure 0004472866
【1253】
【化912】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF115は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF115ng)と334個のアミノ酸の重複にわたって91.9%の同一性を示す:
【1254】
【化913】
Figure 0004472866
ORF115ngヌクレオチド配列(配列番号513)は、アミノ酸配列(配列番号514)を有するタンパク質をコードすると推定された:
【1255】
【化914】
Figure 0004472866
さらなる仕事は、以下の部分DNA配列(配列番号515)を明らかにした:
【1256】
【化915】
Figure 0004472866
【1257】
【化916】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号516;ORF115ng−1)に対応する:
【1258】
【化917】
Figure 0004472866
この淋菌タンパク質(ORF115ng−1)は、334個のアミノ酸にわたってORF115と91.9%の同一性を示す:
【1259】
【化918】
Figure 0004472866
【1260】
【化919】
Figure 0004472866
さらに、それはデータベース中の分泌N.meningitidisタンパク質との相同性を示す:
【1261】
【化920】
Figure 0004472866
【1262】
【化921】
Figure 0004472866
この分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeのタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断、あるいは抗体の惹起のために有用な抗原であり得ることが推定される。
【1263】
(実施例62)
以下の部分DNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号517):
【1264】
【化922】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号518;ORF117)に対応する:
【1265】
【化923】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidisのpspA推定分泌タンパク質(登録番号AF030941)との相同性)
ORF117およびpspAタンパク質は、224個のアミノ酸重複にわたって45%のアミノ酸同一性を示す:
【1266】
【化924】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF117は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF117ng)と230個のアミノ酸の重複にわたって90%の同一性を示す:
【1267】
【化925】
Figure 0004472866
ORF117ngヌクレオチド配列(配列番号519)は、アミノ酸配列(配列番号520)を有するタンパク質をコードすると推定された:
【1268】
【化926】
Figure 0004472866
さらなる仕事は、以下の淋菌の部分DNA配列(配列番号521)を明らかにした:
【1269】
【化927】
Figure 0004472866
【1270】
【化928】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号522;ORF117ng−1)に対応する:
【1271】
【化929】
Figure 0004472866
ORF117ng−1は、ORF117と230個のアミノ酸にわたって同じ90%の同一性を示す。さらに、それはデータベース中の分泌N.meningitidisタンパク質との相同性を示す:
【1272】
【化930】
Figure 0004472866
【1273】
【化931】
Figure 0004472866
この分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断、あるいは抗体の惹起のために有用な抗原であり得ることが推定される。
【1274】
(実施例63)
以下の部分DNA配列をN.meningitidis(配列番号523)において同定した:
【1275】
【化932】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号524;ORF119)に対応する:
【1276】
【化933】
Figure 0004472866
さらなる仕事は完全なヌクレオチド配列(配列番号525)を明らかにした:
【1277】
【化934】
Figure 0004472866
【1278】
【化935】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号526;ORF119−1)に対応する:
【1279】
【化936】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(株A)由来の推定ORFとの相同性)
ORF119は、N.meningitidisの株A由来のORF(ORF119a)と175個のアミノ酸配列の重複にわたって93.7%の同一性を示す:
【1280】
【化937】
Figure 0004472866
この完全長のORF119aヌクレオチド配列(配列番号527)は:
【1281】
【化938】
Figure 0004472866
【1282】
【化939】
Figure 0004472866
である。
【1283】
これはアミノ酸配列(配列番号528)を有するタンパク質をコードする:
【1284】
【化940】
Figure 0004472866
ORF119aおよびORF119−1は、428個のアミノ酸の重複にわたって98.6%の同一性を示す:
【1285】
【化941】
Figure 0004472866
【1286】
【化942】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF119は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF119ng)と175個のアミノ酸の重複にわたって93.1%の同一性を示す:
【1287】
【化943】
Figure 0004472866
この完全長のORF119ngヌクレオチド配列(配列番号529)は:
【1288】
【化944】
Figure 0004472866
である。
【1289】
これはアミノ酸配列(配列番号530)を有するタンパク質をコードする:
【1290】
【化945】
Figure 0004472866
ORF119ngおよびORF119−1は、428個のアミノ酸の重複にわたって98.4%の同一性を示す:
【1291】
【化946】
Figure 0004472866
【1292】
【化947】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質における推定リーダー配列の存在を含むこの分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断、あるいは抗体の惹起のために有用な抗原であり得ることが推定される。
【1293】
(実施例64)
以下の部分DNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号531):
【1294】
【化948】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号532;ORF134)に対応する:
【1295】
【化949】
Figure 0004472866
さらなる仕事は完全なヌクレオチド配列(配列番号533)を明らかにした:
【1296】
【化950】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号534;ORF134−1)に対応する:
【1297】
【化951】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(E.coliの仮定タンパク質o648(登録番号AE000189)との相同性)
ORF134およびo648タンパク質は、153個のアミノ酸重複にわたって45%のアミノ酸同一性を示す。
【1298】
【化952】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(株A)由来の推定ORFとの相同性)
ORF134はN.meningitidisの株A由来のORF(ORF134a)と154個のアミノ酸配列の重複にわたって98.7%の同一性を示す:
【1299】
【化953】
Figure 0004472866
【1300】
【化954】
Figure 0004472866
この完全長のORF134aヌクレオチド配列(配列番号535)は:
【1301】
【化955】
Figure 0004472866
である。
【1302】
これはアミノ酸配列(配列番号536)を有するタンパク質をコードする:
【1303】
【化956】
Figure 0004472866
ORF134aおよびORF134−1は、388個のアミノ酸の重複にわたって100%の同一性を示す:
【1304】
【化957】
Figure 0004472866
【1305】
【化958】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF134は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF134ng)と154アミノ酸の重複にわたって96.8%の同一性を示す:
【1306】
【化959】
Figure 0004472866
この完全長のORF134ngヌクレオチド配列(配列番号537)は、
【1307】
【化960】
Figure 0004472866
である。
【1308】
これはアミノ酸配列(配列番号538)を有するタンパク質をコードする:
【1309】
【化961】
Figure 0004472866
【1310】
【化962】
Figure 0004472866
ORF134ngおよびORF134−1は、388個のアミノ酸の重複にわたって97.9%の同一性を示す:
【1311】
【化963】
Figure 0004472866
ORF134ngはまた、E.coli ABC輸送担体に対する相同性を示す:
【1312】
【化964】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質における推定リーダー配列および膜貫通領域の存在を含むこの分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断、あるいは抗体の惹起について有用な抗原であり得ることが推定される。
【1313】
(実施例65)
以下の部分DNA配列をN.meningitidis(配列番号539)において同定した:
【1314】
【化965】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号540;ORF135)に対応する:
【1315】
【化966】
Figure 0004472866
さらなる仕事は完全なヌクレオチド配列(配列番号541)を明らかにした:
【1316】
【化967】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号542;ORF135−1)に対応する:
【1317】
【化968】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(株A)由来の推定ORFとの相同性)
ORF135は、N.meningitidisの株A由来のORF(ORF135a)と197個のアミノ酸配列の重複にわたって99.0%の同一性を示す:
【1318】
【化969】
Figure 0004472866
この完全長のORF135aヌクレオチド配列(配列番号543)は:
【1319】
【化970】
Figure 0004472866
である。
【1320】
これはアミノ酸配列(配列番号544)を有するタンパク質をコードする:
【1321】
【化971】
Figure 0004472866
ORF135aおよびORF135−1は、300個のアミノ酸の重複にわたって99.3%の同一性を示す:
【1322】
【化972】
Figure 0004472866
【1323】
【化973】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF135は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF135ng)と201個のアミノ酸の重複にわたって97%の同一性を示す:
【1324】
【化974】
Figure 0004472866
ORF135ngヌクレオチド配列(配列番号545)は、アミノ酸配列(配列番号546)を有するタンパク質をコードすると推定された:
【1325】
【化975】
Figure 0004472866
さらなる仕事は、以下の淋菌配列(配列番号547)を明らかにした:
【1326】
【化976】
Figure 0004472866
【1327】
【化977】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号548;ORF135ng−1)に対応する:
【1328】
【化978】
Figure 0004472866
ORF135ng−1およびORF135−1は、300個のアミノ酸の重複にわたって97.0%の同一性を示す:
【1329】
【化979】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質のいくつかの推定膜貫通ドメインの存在を含むこの分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断、あるいは抗体の惹起のために有用な抗原であり得ることが推定される。
【1330】
(実施例66)
以下の部分DNA配列をN.meningitidis(配列番号549)において同定した:
【1331】
【化980】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号550;ORF136)に対応する:
【1332】
【化981】
Figure 0004472866
【1333】
【化982】
Figure 0004472866
さらなる仕事は完全なヌクレオチド配列(配列番号551)を明らかにした:
【1334】
【化983】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号552;ORF136−1)に対応する:
【1335】
【化984】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(株A)由来の推定ORFとの相同性)
ORF136は、N.meningitidisの株A由来のORF(ORF136a)と237個のアミノ酸の重複にわたって71.7%の同一性を示す:
【1336】
【化985】
Figure 0004472866
この完全長のORF136aヌクレオチド配列(配列番号553)は:
【1337】
【化986】
Figure 0004472866
【1338】
【化987】
Figure 0004472866
である。
【1339】
これはアミノ酸配列(配列番号554)を有するタンパク質をコードする:
【1340】
【化988】
Figure 0004472866
ORF136aおよびORF136−1は、238個のアミノ酸の重複にわたって73.1%の同一性を示す:
【1341】
【化989】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF136は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF136ng)と234個のアミノ酸の重複にわたって92.3%の同一性を示す:
【1342】
【化990】
Figure 0004472866
この完全長のORF136ngヌクレオチド配列(配列番号555)は:
【1343】
【化991】
Figure 0004472866
【1344】
【化992】
Figure 0004472866
である。
【1345】
これはアミノ酸配列(配列番号556)を有するタンパク質をコードする:
【1346】
【化993】
Figure 0004472866
ORF136ngおよびORF136−1は、235個のアミノ酸の重複にわたって93.6%の同一性を示す:
【1347】
【化994】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質における推定膜貫通ドメインの存在に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断、あるいは抗体の惹起のために有用な抗原であり得ることが推定される。
【1348】
(実施例67)
以下の部分DNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号557):
【1349】
【化995】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号558;ORF137)に対応する:
【1350】
【化996】
Figure 0004472866
さらなる仕事は、完全なヌクレオチド配列(配列番号559)を明らかにした:
【1351】
【化997】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号560;ORF137−1)に対応する:
【1352】
【化998】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(株A)由来の推定ORFとの相同性)
ORF137は、N.meningitidisの株A由来のORF(ORF137a)と149個のアミノ酸配列の重複にわたって93.3%の同一性を示す:
【1353】
【化999】
Figure 0004472866
この完全長のORF137aヌクレオチド配列(配列番号561)は:
【1354】
【化1000】
Figure 0004472866
【1355】
【化1001】
Figure 0004472866
である。
【1356】
これはアミノ酸配列(配列番号562)を有するタンパク質をコードする:
【1357】
【化1002】
Figure 0004472866
ORF137aおよびORF137−1は、300個のアミノ酸の重複にわたって97.3%の同一性を示す:
【1358】
【化1003】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF137は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF137ng)と149個のアミノ酸の重複にわたって89.9%の同一性を示す:
【1359】
【化1004】
Figure 0004472866
この完全長のORF137ngヌクレオチド配列(配列番号563)は:
【1360】
【化1005】
Figure 0004472866
【1361】
【化1006】
Figure 0004472866
である。
【1362】
これはアミノ酸配列(配列番号564)を有するタンパク質をコードする:
【1363】
【化1007】
Figure 0004472866
ORF137ngおよびORF137−1は、300個のアミノ酸の重複にわたって96.0%の同一性を示す:
【1364】
【化1008】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質における原核生物の推定膜リポタンパク質脂質付着部位の存在に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断、あるいは抗体の惹起のために有用な抗原であり得ることが推定される。
【1365】
(実施例68)
以下の部分DNA配列をN.meningitidis(配列番号565)において同定した:
【1366】
【化1009】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号566;ORF138)に対応する:
【1367】
【化1010】
Figure 0004472866
さらなる仕事は完全なヌクレオチド配列(配列番号567)を明らかにした:
【1368】
【化1011】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号568;ORF138−1)に対応する:
【1369】
【化1012】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(株A)由来の推定ORFとの相同性)
ORF138は、N.meningitidisの株A由来のORF(ORF138a)と123個のアミノ酸の重複にわたって99.2%の同一性を示す:
【1370】
【化1013】
Figure 0004472866
この完全長のORF138aヌクレオチド配列(配列番号569)は:
【1371】
【化1014】
Figure 0004472866
【1372】
【化1015】
Figure 0004472866
である。
【1373】
これはアミノ酸配列(配列番号570)を有するタンパク質をコードする:
【1374】
【化1016】
Figure 0004472866
ORF138aおよびORF138−1は、298個のアミノ酸の重複にわたって99.7%の同一性を示す:
【1375】
【化1017】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF138は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF138ng)と12個のアミノ酸の重複にわたって94.3%の同一性を示す:
【1376】
【化1018】
Figure 0004472866
この完全長のORF138ngヌクレオチド配列(配列番号571)は:
【1377】
【化1019】
Figure 0004472866
【1378】
【化1020】
Figure 0004472866
である。
【1379】
これはアミノ酸配列(配列番号572)を有するタンパク質をコードする:
【1380】
【化1021】
Figure 0004472866
ORF138ngおよびORF138−1は、299個のアミノ酸の重複にわたって94.3%の同一性を示す:
【1381】
【化1022】
Figure 0004472866
さらに、ORF138ngは、Pseudomonas fluorescens由来のhtrBタンパク質と相同的である:
【1382】
【化1023】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質において推定膜貫通ドメインの存在を含むこの分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断、あるいは抗体の惹起のために有用な抗原であり得ることが推定される。
【1383】
上記のように、pGexベクターにORF138−1(57kDa)をクローン化し、そして大腸菌で発現した。SDS−PAGEによってタンパク質発現およびタンパク質精製の産物を分析した。図14Aは、GST融合タンパク質のアフィニティー精製の結果を示す。精製されたGST融合タンパク質を使用しマウスを免疫した。この血清をELISA(陽性結果)およびFACS分析に使用した(図14B)。これらの実験は、ORF138−1が表面に暴露されたタンパク質であり、そしてそれは有用な免疫原であることを確認する。
【1384】
(実施例69)
以下の部分DNA配列をN.meningitidis(配列番号573)において同定した:
【1385】
【化1024】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号574;ORF139)に対応する:
【1386】
【化1025】
Figure 0004472866
さらなる仕事は完全なヌクレオチド配列(配列番号575)を明らかにした:
【1387】
【化1026】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号576;ORF139−1)に対応する:
【1388】
【化1027】
Figure 0004472866
【1389】
【化1028】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(株A)由来の推定ORFとの相同性)
ORF139は、N.meningitidisの株A由来のORF(ORF139a)と189個のアミノ酸の重複にわたって94.7%の同一性を示す:
【1390】
【化1029】
Figure 0004472866
この完全長のORF139aヌクレオチド配列(配列番号577)は:
【1391】
【化1030】
Figure 0004472866
【1392】
【化1031】
Figure 0004472866
である。
【1393】
これはアミノ酸配列(配列番号578)を有するタンパク質をコードする:
【1394】
【化1032】
Figure 0004472866
ORF139aおよびORF139−1は、514個のアミノ酸の重複にわたって96.5%の同一性を示す:
【1395】
【化1033】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF139は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF139ng)と189個のアミノ酸の重複にわたって95.2%の同一性を示す:
【1396】
【化1034】
Figure 0004472866
【1397】
【化1035】
Figure 0004472866
この完全長のORF139ngヌクレオチド配列(配列番号579)は、アミノ酸配列(配列番号580)を有するタンパク質をコードすると推定される:
【1398】
【化1036】
Figure 0004472866
さらなる仕事は変異体の淋菌DNA配列(配列番号581)を明らかにした:
【1399】
【化1037】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号582;ORF139ng−1)に対応する:
【1400】
【化1038】
Figure 0004472866
ORF139ng−1およびORF139−1は、513個のアミノ酸の重複にわたって95.9%の同一性を示す:
【1401】
【化1039】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質における推定結合タンパク質依存性輸送系内膜成分記号(下線)の存在に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断、あるいは抗体の惹起のための有用な抗原であり得ることが推定される。
【1402】
(実施例70)
以下の部分DNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号583):
【1403】
【化1040】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号584;ORF140)に対応する:
【1404】
【化1041】
Figure 0004472866
さらなる仕事は、完全なヌクレオチド配列(配列番号585)を明らかにした:
【1405】
【化1042】
Figure 0004472866
【1406】
【化1043】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号586;ORF140−1)に対応する:
【1407】
【化1044】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(株A)由来の推定ORFとの相同性)
ORF140は、N.meningitidisの株A由来のORF(ORF140a)と87個のアミノ酸配列の重複にわたって95.4%の同一性を示す:
【1408】
【化1045】
Figure 0004472866
この完全長のORF140aヌクレオチド配列(配列番号587)は:
【1409】
【化1046】
Figure 0004472866
【1410】
【化1047】
Figure 0004472866
である。
【1411】
これはアミノ酸配列(配列番号588)を有するタンパク質をコードする:
【1412】
【化1048】
Figure 0004472866
ORF140aおよびORF140−1は、461個のアミノ酸の重複にわたって99.8%の同一性を示す:
【1413】
【化1049】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF140は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF140ng)と87アミノ酸の重複部分に渡って92%の同一性を示す:
N.gonorrhoeae:
【1414】
【化1050】
Figure 0004472866
完全長ORF140ngのヌクレオチド配列(配列番号589)は、アミノ酸配列(配列番号590)を有するタンパク質をコードすることが推定された:
【1415】
【化1051】
Figure 0004472866
さらなる研究は、改変型淋菌DNA配列(配列番号591)を明らかにした:
【1416】
【化1052】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号592;ORF140ng−1)に相当する:
【1417】
【化1053】
Figure 0004472866
ORF140ng−1およびORF140−1は、461アミノ酸の重複部分に渡って96.3%の同一性を示す:
【1418】
【化1054】
Figure 0004472866
【1419】
【化1055】
Figure 0004472866
さらに、ORF140ng−1は、E.coliタンパク質に対して相同性である:
【1420】
【化1056】
Figure 0004472866
この分析(淋菌タンパク質における推定リーダー配列(二重下線を附す)およびいくつかの推定膜貫通ドメイン(1重下線を附す)の存在の同定を含む)に基いて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeならびにそれらのエピトープに由来するタンパク質が、ワクチンまたは診断について、あるいは抗体を惹起するために有用な抗原であり得ると推定される。
【1421】
(実施例71)
以下の部分的DNA配列はN.meningitidisと同一であった(配列番号593):
【1422】
【化1057】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号594;ORF141)に相当する:
【1423】
【化1058】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列(配列番号595)を明らかにした:
【1424】
【化1059】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号596;ORF141−1)に相当する:
【1425】
【化1060】
Figure 0004472866
【1426】
【化1061】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析から以下の結果を得た。
【1427】
(N.Meningotidis(A株)由来の推定ORF配列との相同性)
ORF141は、N.MeningitidisのA株由来のORF(ORF141a)と140アミノ酸の重複部分に渡って95.0%の同一性を示す:
【1428】
【化1062】
Figure 0004472866
完全長ORF141aのヌクレオチド配列(配列番号597)は以下である:
【1429】
【化1063】
Figure 0004472866
【1430】
【化1064】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号598)を有するタンパク質をコードする:
【1431】
【化1065】
Figure 0004472866
ORF141aおよびORF141−1は553アミノ酸の重複部分において98.2%の同一性を示す:
【1432】
【化1066】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF141は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF141ng)と141アミノ酸の重複部分に渡って95%の同一性を示す:
【1433】
【化1067】
Figure 0004472866
【1434】
【化1068】
Figure 0004472866
ORF141ngのヌクレオチド配列(配列番号599)は、アミノ酸配列(配列番号600)を有するタンパク質をコードすることが推定された。
【1435】
【化1069】
Figure 0004472866
さらなる研究は、以下の淋菌DNA配列(配列番号601)を明らかにした:
【1436】
【化1070】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号602;ORF141ng−1)に相当する:
【1437】
【化1071】
Figure 0004472866
【1438】
【化1072】
Figure 0004472866
ORF141ng−1およびORF141−1は、553アミノ酸の重複部分において97.5%の同一性を示す:
【1439】
【化1073】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質におけるいくつかの推定膜貫通ドメインの存在に基づいて、N.MeningitidisおよびN.gonorrhoaeならびにそれらのエピトープに由来するタンパク質は、ワクチンもしくは診断について、または抗体を惹起するために有用な抗原であり得ることが推定される。
【1440】
(実施例72)
以下の部分的DNA配列(配列番号603)はN.meningitidisにおいて同定された:
【1441】
【化1074】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号604;ORF142)に相当する:
【1442】
【化1075】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列(配列番号605)を明らかにした:
【1443】
【化1076】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号606;ORF142−1)に相当する:
【1444】
【化1077】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析から以下の結果を得た:
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF142は、N.gonorrhoae由来の推定ORF(ORF142ng)と59アミノ酸の重複部分に渡って88.1%の同一性を示す:
【1445】
【化1078】
Figure 0004472866
全長ORF142ngのヌクレオチド配列(配列番号607)は以下である:
【1446】
【化1079】
Figure 0004472866
【1447】
【化1080】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号608)を有するタンパク質をコードする:
【1448】
【化1081】
Figure 0004472866
下線を附した配列(芳香族−Xaa−芳香族のアミノ酸モチーフ)は、外膜タンパク質のC末端において通常は見出される。
【1449】
ORF142ngおよびORF142−1は、342アミノ酸の重複部分に渡って95.6%の同一性を示す:
【1450】
【化1082】
Figure 0004472866
ORF142ngはさらに、E.chrysanthemiのHecBタンパク質と相同性である:
【1451】
【化1083】
Figure 0004472866
この分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、ならびにそれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断のための、または抗体を惹起するために有用な抗原であり得ることが推定される。
【1452】
(実施例73)
以下の部分的なDNA配列(配列番号609)は、N.Meningitidisにおいて同定された。
【1453】
【化1084】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号610;ORF143)に相当する:
【1454】
【化1085】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全なヌクレオチド配列(配列番号611)を明らかにした:
【1455】
【化1086】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号612;ORF143−1)に相当する:
【1456】
【化1087】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析から以下の結果を得た:
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF143は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF143a)と105アミノ酸の重複部分に渡って92.4%の相同性を示す:
【1457】
【化1088】
Figure 0004472866
【1458】
【化1089】
Figure 0004472866
全長ORF143aのヌクレオチド配列(配列番号613)は以下である;
【1459】
【化1090】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号614)を有するタンパク質をコードする:
【1460】
【化1091】
Figure 0004472866
ORF143aおよびORF143−1は、207アミノ酸の重複部分において97.1%の同一性を示す:
【1461】
【化1092】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF143はN.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF143ng)と110アミノ酸の重複部分に渡って95.5%の同一性を示す:
【1462】
【化1093】
Figure 0004472866
ORF143ngヌクレオチド配列(配列番号615)は、アミノ酸配列(配列番号616)を有するタンパク質をコードすると推定された:
【1463】
【化1094】
Figure 0004472866
さらなる研究は、以下の淋菌のDNA配列(配列番号617)を明らかにした:
【1464】
【化1095】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号618;ORF143ng−1)に相当する:
【1465】
【化1096】
Figure 0004472866
ORF143ng−1およびORF143−1は、241アミノ酸の重複部分において95.8%の同一性を示す:
【1466】
【化1097】
Figure 0004472866
淋菌のタンパク質における推定膜貫通ドメインの存在に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびびにそれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断について、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ることが推定される:
(実施例74)
以下の部分的なDNA配列は、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号619):
【1467】
【化1098】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号620;ORF144)に相当する;
【1468】
【化1099】
Figure 0004472866
さらなる研究は全長ヌクレオチド配列(配列番号621)を明らかにした:
【1469】
【化1100】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号番号622;ORF144−1)に相当する:
【1470】
【化1101】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析から以下の結果を得た:
(N.menigitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF144は、N.meningitidisA株由来のORF(ORF144a)と136アミノ酸の重複部分に渡って96.3%の同一性を示す:
【1471】
【化1102】
Figure 0004472866
【1472】
【化1103】
Figure 0004472866
全長ORF144aのヌクレオチド配列(配列番号623)は以下である;
【1473】
【化1104】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号624)を有するタンパク質をコードする:
【1474】
【化1105】
Figure 0004472866
ORF144aおよびORF144−1は、406アミノ酸の重複部分において97.8%の同一性を示す:
【1475】
【化1106】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF144はN.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF144ng)と136アミノ酸の重複部分に渡って91.2%の同一性を示す:
【1476】
【化1107】
Figure 0004472866
全長ORF144ngヌクレオチド配列(配列番号625)は、アミノ酸配列(配列番号626)を有するタンパク質をコードすると推定される:
【1477】
【化1108】
Figure 0004472866
さらなる研究は、以下の淋菌のDNA配列(配列番号627)を明らかにした:
【1478】
【化1109】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号628;ORF144ng−1)を有するORF144ngに相当する:
【1479】
【化1110】
Figure 0004472866
【1480】
【化1111】
Figure 0004472866
ORF144ng−1およそORF144−1は、406アミノ酸の重複部分において94.1%の同一性を示す:
【1481】
【化1112】
Figure 0004472866
淋菌のタンパク質におけるいくつかの推定膜貫通ドメインの同定を含む、この分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断について、または抗体を惹起するために有用な抗原であり得ることが推定される:
(実施例75)
以下の部分的なDNA配列は、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号619):
【1482】
【化1113】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号630;ORF146)に相当する;
【1483】
【化1114】
Figure 0004472866
さらなる研究は全長ヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号631):
【1484】
【化1115】
Figure 0004472866
【1485】
【化1116】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号632;ORF146−1)に相当する:
【1486】
【化1117】
Figure 0004472866
このアミノ酸配のコンピューター分析から以下の結果を得た:
(N.meningitidism(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF146は、N.meningitidis(A株)由来のORF(ORF146a)と74アミノ酸の重複部分に渡って98.6%の同一性を示す:
【1487】
【化1118】
Figure 0004472866
全長ORF146aヌクレオチド配列(配列番号633)は以下である:
【1488】
【化1119】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号634)を有するタンパク質をコードする:
【1489】
【化1120】
Figure 0004472866
ORF146aおよびORF146−1は374アミノ酸の重複部分において99.5%の同一性を示す:
【1490】
【化1121】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF146はN.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF146ng)と75アミノ酸の重複部分に渡って97.3%の同一性を示す:
【1491】
【化1122】
Figure 0004472866
ORF146ngのヌクレオチド配列番号(配列番号635)は、アミノ酸配列(配列番号636)を有するタンパク質をコードすると推定された:
【1492】
【化1123】
Figure 0004472866
さらなる研究は、以下の淋菌のDNA配列(配列番号637)を明らかにした:
【1493】
【化1124】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号638;ORF146ng−1)に相当する
【1494】
【化1125】
Figure 0004472866
ORF146ng−1およびORF146−1は375アミノ酸重複部分において96.5%の同一性を示す:
【1495】
【化1126】
Figure 0004472866
さらに、ORF146−ng1は仮定されるE.coliタンパク質との相同性を示す。
【1496】
【化1127】
Figure 0004472866
【1497】
【化1128】
Figure 0004472866
この分析(淋菌タンパク質における幾つかの膜貫通ドメインの同定を含む)に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断または抗体を惹起するために有用な抗原であり得ることが推定される:
(実施例76)
以下のDNA配列を、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号639):
【1498】
【化1129】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号640;ORF147)に相当する:
【1499】
【化1130】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列(配列番号641)を明らかにした:
【1500】
【化1131】
Figure 0004472866
【1501】
【化1132】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号642;ORF147−1)に相当する:
【1502】
【化1133】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析から以下の結果を得た:
(E.coliの仮定タンパク質のORF286(登録番号U18997)との相同性)
ORF147およびE.coliのORF286のタンパク質は、237アミノ酸重複部分において36%の同一性を示す:
【1503】
【化1134】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF147は、N.meningitidisのA株由来のORF75aと237アミノ酸の重複部分に渡って96.6%の同一性を示す:
【1504】
【化1135】
Figure 0004472866
【1505】
【化1136】
Figure 0004472866
ORF147aはORF75aと同一であり、これはORF75の56〜292アミノ酸を含む。
【1506】
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF147は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF147ng)と237アミノ酸の重複部分に渡って94.1%の同一性を示す:
【1507】
【化1137】
Figure 0004472866
ORF147ngヌクレオチド配列(配列番号643)は、アミノ酸配列(配列番号644)を有するタンパク質をコードすると推定された:
【1508】
【化1138】
Figure 0004472866
さらなる研究は以下の淋菌のDNA配列(配列番号645)を明らかにした:
【1509】
【化1139】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列に相当する(配列番号646;ORF147ng−1):
【1510】
【化1140】
Figure 0004472866
ORF147ngは、仮定上のE.coliタンパク質との相同性を示す:
【1511】
【化1141】
Figure 0004472866
淋菌のタンパク質におけるコンピューター分析および推定膜貫通ドメインの存在に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンまたは診断についての、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ると推定される。
【1512】
(実施例77)
以下の部分的なDNA配列は、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号番号647):
【1513】
【化1142】
Figure 0004472866
【1514】
【化1143】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列番号(配列番号648;ORF1)に相当する:
【1515】
【化1144】
Figure 0004472866
【1516】
【化1145】
Figure 0004472866
さらなる配列決定分析は全長ヌクレオチド配列(配列番号649)を明らかにした:
【1517】
【化1146】
Figure 0004472866
【1518】
【化1147】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号650;ORF1−1)に相当する:
【1519】
【化1148】
Figure 0004472866
これらの配列のコンピューター分析により以下の結果を得た:
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF1は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF1a)と1456アミノ酸の重複部分に渡って57.8%の同一性を示す:
【1520】
【化1149】
Figure 0004472866
【1521】
【化1150】
Figure 0004472866
【1522】
【化1151】
Figure 0004472866
全長ORF1aのヌクレオチド配列(配列番号651)は、以下である:
【1523】
【化1152】
Figure 0004472866
【1524】
【化1153】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号652)を有するタンパク質をコードする:
【1525】
【化1154】
Figure 0004472866
膜貫通領域に下線を附す。
【1526】
ORF1−1はORF1aと1462アミノ酸の重複部分に渡って86.7%の同一性を示す:
【1527】
【化1155】
Figure 0004472866
【1528】
【化1156】
Figure 0004472866
【1529】
【化1157】
Figure 0004472866
(H.influenzae(登録番号P45387)の接着および透過タンパク質であるhap前駆体との相同性)
ORF1のアミノ酸23〜423は、450アミノ酸の重複部分でhapタンパク質と59%のアミノ酸同一性を示す:
【1530】
【化1158】
Figure 0004472866
【1531】
【化1159】
Figure 0004472866
ORF1のアミノ酸715〜1011は、258アミノ酸の重複部分においてhapタンパク質と50%のアミノ酸同一性を示す:
【1532】
【化1160】
Figure 0004472866
ORF1のアミノ酸1192〜1450は、259アミノ酸の重複部分においてhapタンパク質と41%のアミノ酸の同一性を示す:
【1533】
【化1161】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF1のブロックは、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF1ng)とそれぞれ467アミノ酸、298アミノ酸および259アミノ酸の重複部分において83.5%、88.3%および99.7%の同一性を示す:
【1534】
【化1162】
Figure 0004472866
【1535】
【化1163】
Figure 0004472866
全長ORF1ngのヌクレオチド配列を同定した(配列番号653):
【1536】
【化1164】
Figure 0004472866
【1537】
【化1165】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号654)を有するタンパク質をコードすると推定される:
【1538】
【化1166】
Figure 0004472866
下線を附した配列および二重下線を附した配列は、セリンプロテアーゼ(トリプシンファミリー)の活性部位およびATP/GTP結合部位のモチーフA(P−ループ)を表す。
【1539】
ORF−1およびORF1ngは、1471アミノ酸の重複部分において93.7%の同一性を示す:
【1540】
【化1167】
Figure 0004472866
【1541】
【化1168】
Figure 0004472866
【1542】
【化1169】
Figure 0004472866
さらに、ORF1ngはhapタンパク質(P45387)と1455アミノ酸重複部分に渡って55.7%の同一性を示す:
【1543】
【化1170】
Figure 0004472866
【1544】
【化1171】
Figure 0004472866
【1545】
【化1172】
Figure 0004472866
この分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断についての、または抗体を惹起するための有用な抗原であることが推定される。
【1546】
(実施例78)
以下の部分的DNA配列はN.meningitidisにおいて同定された(配列番号655)
【1547】
【化1173】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号656;ORF6)に相当する:
【1548】
【化1174】
Figure 0004472866
さらなる配列分析はさらなる部分的DNA配列を明らかにした(配列番号657):
【1549】
【化1175】
Figure 0004472866
これは、アミノ配列(配列番号658;ORF6−1)に相当する:
【1550】
【化1176】
Figure 0004472866
アミノ酸配列のコンピューター分析はから以下の結果を得た:
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF6は、N.meningitidisのA株に由来するORF(ORF6a)と140アミノ酸の重複部分に渡って98.6%の同一性を示す:
【1551】
【化1177】
Figure 0004472866
【1552】
【化1178】
Figure 0004472866
全長ORF6aのヌクレオチド配列(配列番号659):
【1553】
【化1179】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号660)を有するタンパク質をコードすると推定される:
【1554】
【化1180】
Figure 0004472866
ORF6aおよびORF6−1は131アミノ酸配列の重複部分において100.0%の同一性を示す:
【1555】
【化1181】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF6は、N.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF6ng)と140アミノ酸の重複部分に渡って95.7%の同一性を示す:
【1556】
【化1182】
Figure 0004472866
全長ORF6ngのヌクレオチド配列(配列番号661)は以下のように同定した:
【1557】
【化1183】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号662)を有するタンパク質をコードする:
【1558】
【化1184】
Figure 0004472866
ORF6ngおよびORF6−1は、131アミノ酸重複部分において96.9%の同一性を示す:
【1559】
【化1185】
Figure 0004472866
N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断について、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ることが推定される。
【1560】
(実施例79)
以下の部分的DNA配列を、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号663):
【1561】
【化1186】
Figure 0004472866
【1562】
【化1187】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号664;ORF23)に対応する:
【1563】
【化1188】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号665):
【1564】
【化1189】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号666;ORF23−1)に相当する:
【1565】
【化1190】
Figure 0004472866
【1566】
【化1191】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析から以下の結果を得た:
(Pseudomonas putidaの鉄の擬バクチン(bactin)レセプターであるPupB(登録番号P38047)との相同性)
ORF23およびPupBタンパク質は205アミノ酸配列の重複部分において32%の同一性を示す:
【1567】
【化1192】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF23は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF23a)と211アミノ酸の重複部分に渡って95.7%の同一性を示す:
【1568】
【化1193】
Figure 0004472866
完全長ORF23aのヌクレオチド配列(配列番号667)は、以下である:
【1569】
【化1194】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号668)を有するタンパク質をコードする:
【1570】
【化1195】
Figure 0004472866
ORF23aおよびORF23−1は725アミノ酸の重複部分において99.2%の同一性を示す:
【1571】
【化1196】
Figure 0004472866
【1572】
【化1197】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF23はN.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF23.ng)と211アミノ酸の重複部分に渡って93.4%の同一性を示す:
【1573】
【化1198】
Figure 0004472866
ORF23ngのヌクレオチド配列(配列番号669)はアミノ酸配列(配列番号670)を含むタンパク質をコードすると推測される:
【1574】
【化1199】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列番号を明らかにした(配列番号671):
【1575】
【化1200】
Figure 0004472866
【1576】
【化1201】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号672;ORF23ng−1)に相当する:
【1577】
【化1202】
Figure 0004472866
ORF23ng−1およびORF23−1は725アミノ酸の重複部分において95.9%の同一性を示す:
【1578】
【化1203】
Figure 0004472866
【1579】
【化1204】
Figure 0004472866
さらに、ORF23ng−1は、E.coli由来のOMPと有意な相同性を示す:
【1580】
【化1205】
Figure 0004472866
【1581】
【化1206】
Figure 0004472866
この分析に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質ならびにそれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断について、または抗体を惹起するための有用な抗原であり得ると推定される。
【1582】
ORF23−1(77.5kDa)をpETベクターおよびpGexベクターにクローニングし、そして上記のようにE.coli中で発現させる。タンパク質の発現産物および精製物をSDS−PAGEにより分析した。図15Aは、His融合タンパク質のアフィニティー精製の結果を示し、そして図15BはE.coliにおけるGST融合物の発現の結果を示す。精製したHis融合タンパク質を使用してマウスを免疫し、マウスの血清をウェスタンブロット(図15C)およびELISA(陽性結果)について使用した。これらの実験は、ORF23−1が表面露出型タンパク質であり、しかも免疫原として有用であることを確実にする。
【1583】
(実施例80)
以下の部分的DNA配列をN.meningitidisにおいて同定した(配列番号673):
【1584】
【化1207】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号674;ORF24)に相当する:
【1585】
【化1208】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列を明らかにした(配列番号675):
【1586】
【化1209】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号676;ORF24−1)に相当する:
【1587】
【化1210】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析から以下の結果を得た:
(N.meningitidis(A株)由来の推定ORFとの相同性)
ORF24は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF24a)と307アミノ酸の重複部分に渡って96.4%の同一性を示す:
【1588】
【化1211】
Figure 0004472866
【1589】
【化1212】
Figure 0004472866
完全長ORF24aのヌクレオチド配列(配列番号677)は以下である:
【1590】
【化1213】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号678)を有するタンパク質をコードする:
【1591】
【化1214】
Figure 0004472866
このタンパク質は、198位にて停止コドンを含むことに留意すべきである。
【1592】
ORF24aおよびORF24−1は、307アミノ酸の重複部分において96.4%の同一性を示す:
【1593】
【化1215】
Figure 0004472866
【1594】
【化1216】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定ORFとの相同性)
ORF24はN.gonorrhoeae由来の推定ORF(ORF24ng)と121アミノ酸の重複部分に渡って96.7%の同一性を示す:
【1595】
【化1217】
Figure 0004472866
全長ORF24ngのヌクレオチド配列(配列番号679)は、以下である:
【1596】
【化1218】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号680)を有するタンパク質をコードする:
【1597】
【化1219】
Figure 0004472866
ORF24ngおよびORF24−1は307アミノ酸の重複部分において96.1%の同一性を示す:
【1598】
【化1220】
Figure 0004472866
【1599】
【化1221】
Figure 0004472866
この分析(淋菌タンパク質における推定リーダー配列(最初の18アミノ酸−2重線で下線を附した)および推定膜貫通ドメイン(1本線で下線を附した)の存在を含む)に基づいて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質ならびにそれらのエピトープはワクチンもしくは診断について、または抗体を惹起するために有用な抗原であり得ることが推定される。
【1600】
(実施例81)
以下の部分的なDNA配列は、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号681):
【1601】
【化1222】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号682;ORF25)に対応する:
【1602】
【化1223】
Figure 0004472866
さらなる研究が完全なヌクレオチド配列(配列番号683)を明らかにした:
【1603】
【化1224】
Figure 0004472866
これは、以下のアミノ酸配列(配列番号684;ORF25−1)に対応する:
【1604】
【化1225】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(A株)からの予想されるORFとの相同性)
ORF25は、N.meningitidisのA株からのORF(ORF25a)と60アミノ酸にわたる重複において,98,3%の同一性を示す:
【1605】
【化1226】
Figure 0004472866
完全な長さのORF25aヌクレオチド配列(配列番号685)は:
【1606】
【化1227】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号686)を有するタンパク質をコードする:
【1607】
【化1228】
Figure 0004472866
ORF25aおよびORF25−1は、338アミノ酸配列重複において93,5%の同一性を示す:
【1608】
【化1229】
Figure 0004472866
【1609】
【化1230】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeaeからの推定のORFとの相同性)
ORF25は、N.gonorrhoeaeからの予想されるORF(ORF25ng)との60アミノ酸にわたる重複において、100%の同一性を示す:
【1610】
【化1231】
Figure 0004472866
完全な長さのORF25ngのヌクレオチド配列(配列番号687)は:
【1611】
【化1232】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号688)を有するタンパク質をコードする:
【1612】
【化1233】
Figure 0004472866
ORF25ngおよびORF25−1は、338アミノ酸重複において95.9%の同一性を示す:
【1613】
【化1234】
Figure 0004472866
この分析をもとに(淋菌タンパク質において予想される原核生物膜リポタンパク質脂質の付着(attchment)部位(下線部)の存在を含む)、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeからのタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断のための、または抗体惹起のための有用な抗原となり得ると予想された。
【1614】
ORF25−1(37KDa)は、上記に記載されるように、pETおよびpGexベクターにおいてクローン化し、そしてE.coliにおいて発現された。タンパク質発現産物および精製産物を、SDS−PAGEにより分析した。図16Aは、GST融合タンパク質のアフィニティー精製の結果を示し、そして図16Bは、E.coliにおけるHis融合の結果を示す。精製されたHis融合タンパク質を用いて、マウスを免疫化した。このマウスの血清を、ウエスタンブロット(図16C)、ELISA(陽性コントロール)、およびFACS分析(図16D)について使用した。これらの実験により、ORF25−1は、表面露出タンパク質であること、およびそれが有用な免疫原であることを確認する。
【1615】
図16Eは、ORF25−1について親水性のプロット、抗原性指数およびAMPHI領域を示す。
【1616】
(実施例82)
以下の部分的なDNA配列を、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号689)
【1617】
【化1235】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号690;ORF26)に対応する:
【1618】
【化1236】
Figure 0004472866
さらなる研究が完全なヌクレオチド配列(配列番号691)を明らかにした:
【1619】
【化1237】
Figure 0004472866
【1620】
【化1238】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号692;ORF26−1)に対応する:
【1621】
【化1239】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を与えた:
(H.influenzaeの仮説的膜貫通タンパク質HI1586(受託番号P44263)との相同性)
ORF26およびHI1586は、それぞれN末端およびC末端の、97および221アミノ酸重複において、53%および49%のアミノ酸同一性を示す:
【1622】
【化1240】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A株)からの推定されるORFとの相同性)
ORF26は、N.meningitidisのA株からのORF(ORF26a)と502アミノ酸にわたる重複において部分において58.2%の同一性を示す:
【1623】
【化1241】
Figure 0004472866
【1624】
【化1242】
Figure 0004472866
完全な長さのORF26aヌクレオチド配列(配列番号693)は:
【1625】
【化1243】
Figure 0004472866
【1626】
【化1244】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号694)を有するタンパク質をコードする:
【1627】
【化1245】
Figure 0004472866
ORF26aおよびORF26−1は、506アミノ酸重複において97.8%の同一性を示す:
【1628】
【化1246】
Figure 0004472866
【1629】
【化1247】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeaeからの予想されるORFとの相同性)
ORF26は、N.gonorrhoeaeからの予想されるORF(ORF26ng)と、それぞれN末端およびC末端の、97および206アミノ酸重複において、98.4%および99%の同一性を示す:
【1630】
【化1248】
Figure 0004472866
完全な長さのORF26ngヌクレオチド配列(配列番号695)は:
【1631】
【化1249】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号696)を有するタンパク質をコードする:
【1632】
【化1250】
Figure 0004472866
ORF26ngおよびORF26−1は、505アミノ酸重複において98.4%の同一性を示す:
【1633】
【化1251】
Figure 0004472866
さらに、ORF25ngは、仮説的なH.influenzaeタンパク質に対して有意な相同性を示す:
【1634】
【化1252】
Figure 0004472866
この分析に基づき、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeからのこれらのタンパク質ならびにこれらのエピトープは、ワクチンもしくは診断、または抗体惹起のための有用な抗原となり得ることが予想される。
【1635】
(実施例83)
以下の部分的なDNA配列が、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号697):
【1636】
【化1253】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号698;ORF27)に対応する:
【1637】
【化1254】
Figure 0004472866
さらなる研究が完全なヌクレオチド配列(配列番号699)を明らかにした:
【1638】
【化1255】
Figure 0004472866
【1639】
【化1256】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号700;ORF27−1)に対応する:
【1640】
【化1257】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(A株)からの予想されるORFとの相同性)
ORF27は、N.meningitidisA株から得たORF(ORF27a)と、82アミノ酸にわたる重複において、91.5%の同一性を示す:
【1641】
【化1258】
Figure 0004472866
完全な長さのORF27aのヌクレオチド配列(配列番号701)は:
【1642】
【化1259】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号702)を有するタンパク質をコードする:
【1643】
【化1260】
Figure 0004472866
ORF27およびORF27−1は、245アミノ酸重複において94.7%の同一性を示す:
【1644】
【化1261】
Figure 0004472866
【1645】
【化1262】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeaeからの予想されるORFとの相同性)
ORF27は、N.gonorrhoeaeからの予想されるORF(ORF27ng)と、82アミノ酸にわたる重複において96.3%の同一性を示す:
【1646】
【化1263】
Figure 0004472866
完全な長さのORF27ngヌクレオチド配列(配列番号703)は:
【1647】
【化1264】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号704)を有するタンパク質をコードする:
【1648】
【化1265】
Figure 0004472866
ORF27ngおよびORF27−1は、245アミノ酸重複において98.8%の相同性を示す:
【1649】
【化1266】
Figure 0004472866
【1650】
【化1267A】
Figure 0004472866
この分析をもとに(淋菌のタンパク質における推定されるリーダー配列を含む)、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeからのタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断のための、または抗体惹起のための有用な抗原であり得ると予想された。
【1651】
ORF27−1(24.5KDa)を、上記に記載されるように、pETおよびpGexベクターにおいてクローン化し、そしてE.coliにおいて発現した。タンパク質発現産物および精製産物を、SDS−PAGEにより分析した。図17Aは、GST融合タンパク質のアフィニティー精製の結果を示し、そして図17Bは、E.coliにおけるGst融合の発現の結果を示す。精製したGst融合タンパク質を用いて、マウスを免疫した。このマウスの血清は、ELISAについて用いた。これは、陽性の結果を与え、ORF27−1が、表面露出タンパク質であること、およびそれが有用な免疫原であることを確認した。
【1652】
(実施例84)
以下の部分的なDNA配列を、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号705):
【1653】
【化1267B】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号706;ORF47)に対応する:
【1654】
【化1268】
Figure 0004472866
【1655】
【化1269】
Figure 0004472866
さらなる研究が完全なヌクレオチド配列(配列番号707)を明らかにした:
【1656】
【化1270】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号708;ORF47−1)に対応する:
【1657】
【化1271】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析によりリーダーペプチドを予想し、そしてまた以下の結果を得た:
(N.meningitidis(A株)からの予想されるORFとの相同性)
ORF47は、A株のN.meningitidisから得たORF(ORF47a)と、172アミノ酸にわたる重複において、99.4%の同一性を示す:
【1658】
【化1272】
Figure 0004472866
完全な長さのORF47aのヌクレオチド配列(配列番号709)は:
【1659】
【化1273】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号710)を有するタンパク質をコードする:
【1660】
【化1274】
Figure 0004472866
ORF47aおよびORF47−1は、384アミノ酸重複において99.2%の同一性を示す:
【1661】
【化1275】
Figure 0004472866
【1662】
【化1276】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeaeからの予想されるORFとの相同性)
ORF47は、N.gonorrhoeaeからの予想されるORF(ORF47ng)と、172アミノ酸にわたる重複において97.1%の同一性を示す:
【1663】
【化1277】
Figure 0004472866
ORF47ngヌクレオチド配列(配列番号711)は、アミノ酸配列(配列番号712)を含むタンパク質をコードすると予想される:
【1664】
【化1278】
Figure 0004472866
予想されるリーダーペプチドおよび膜貫通ドメインは、(87位の残基のIle/Ala置換および140位の残基のLeu/Ile置換を除く)髄膜炎菌のタンパク質と同一である(Pseudomonas stutzeri orf396、受託番号e246540参照のこと):
【1665】
【化1279】
Figure 0004472866
さらなる研究が、完全な淋菌のDNA配列(配列番号713)を明らかにした:
【1666】
【化1280】
Figure 0004472866
【1667】
【化1281】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号714;ORF47ng−1)を有するタンパク質をコードする:
【1668】
【化1282】
Figure 0004472866
ORF47ng−1およびORF47−1は、384重複アミノ酸において、97.4%の同一性を示す:
【1669】
【化1283】
Figure 0004472866
さらに、ORF47ng−1は、Pseudomonas stutzeriからのORFと有意な相同性を示す:
【1670】
【化1284】
Figure 0004472866
【1671】
【化1285】
Figure 0004472866
この分析をもとに、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeからのタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断のための、または抗体惹起のための有用な抗原となり得ると予想される。
【1672】
(実施例85)
以下の部分的なDNA配列が、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号715):
【1673】
【化1286】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号716;ORF67)に対応する:
【1674】
【化1287】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は以下の結果を与えた:
(N.gonorrhoeaeからの予想されるORFとの相同性)
ORF67は、N.gonorrhoeaeからの予想されるORF(ORF67ng)と、199アミノ酸にわたる重複において51.8%の同一性を示す:
【1675】
【化1288】
Figure 0004472866
ORF67ngヌクレオチド配列(配列番号717)は、アミノ酸配列(配列番号718)を含むタンパク質をコードすると予想される:
【1676】
【化1289】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質のいくつかの推定される膜貫通ドメインの存在をもとに、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeからのタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断のための、または抗体惹起のための有用な抗原となり得ると予想される。
【1677】
(実施例86)
以下の部分的なDNA配列を、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号719):
【1678】
【化1290】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号720;ORF78)に対応する:
【1679】
【化1291】
Figure 0004472866
さらなる研究が、ヌクレオチド配列(配列番号721)を明らかにした:
【1680】
【化1292】
Figure 0004472866
【1681】
【化1293】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号722;ORF78−1)に対応する:
【1682】
【化1294】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピュータ分析は、いくつかの膜貫通ドメインを予想し、そしてまた以下の結果を与えた:
(H.influenzaeのdedAホモログ(受託番号P45280)、との相同性)
ORF78およびdedAホモログは、144アミノ酸重複において58%のアミノ酸の同一性を示す.
【1683】
【化1295】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A株)からの予想されるORFとの相同性)
ORF78は、N.meningitidisのA株からのORF(ORF78a)と、145アミノ酸にわたる重複において93.8%の同一性を示す:
【1684】
【化1296】
Figure 0004472866
完全な長さのORF78aのヌクレオチド配列(配列番号723)は:
【1685】
【化1297】
Figure 0004472866
【1686】
【化1298】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号724)を有するタンパク質をコードする:
【1687】
【化1299】
Figure 0004472866
ORF78aおよびORF78−1は227のアミノ酸重複において89.0%の同一性を示す:
【1688】
【化1300】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeaeからの予想されるORFとの相同性)
ORF78は、N.gonorrhoeaeからの予想されるORF(ORF78ng)と38アミノ酸にわたる重複において97.4%の同一性を示す:
【1689】
【化1301】
Figure 0004472866
ORF78ngヌクレオチド配列(配列番号725)は、アミノ酸配列(配列番号726)を含むタンパク質をコードすることが予想される:
【1690】
【化1302】
Figure 0004472866
さらなる研究が、淋菌の完全なヌクレオチド配列(配列番号727)を明らかにした:
【1691】
【化1303】
Figure 0004472866
【1692】
【化1304】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号728;ORF78ng−1)に対応する:
【1693】
【化1305】
Figure 0004472866
ORF78ng−1およびORF78−1は、227重複アミノ酸において、88.1%の同一性を示す:
【1694】
【化1306】
Figure 0004472866
さらに、ORF78ng−1は、H.influenzaeのdedAタンパク質と相同性を示す:
【1695】
【化1307】
Figure 0004472866
この分析をもとに(推定の膜貫通ドメインの存在を含む)、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeからのタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断のための、または抗体惹起のための有用な抗原となり得ると予想される。
【1696】
(実施例87)
以下の部分的なDNA配列が、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号729):
【1697】
【化1308】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号730;ORF79)に対応する:
【1698】
【化1309】
Figure 0004472866
さらなる研究が、完全なヌクレオチド配列(配列番号731)を明らかにした:
【1699】
【化1310】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号732;ORF79−1)に対応する:
【1700】
【化1311】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピュータ分析は、推定されるリーダーペプチドを明らかとし、そしてまた以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(A株)からの予想されるORFとの相同性)
ORF79は、N.meningitidisのA株からの予想されるORF(ORF79a)と、147アミノ酸にわたる重複において、94.6%の同一性を示す:
【1701】
【化1312】
Figure 0004472866
【1702】
【化1313】
Figure 0004472866
完全な長さのORF79aヌクレオチド配列(配列番号733)は:
【1703】
【化1314】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号734)を有するタンパク質をコードする:
【1704】
【化1315】
Figure 0004472866
ORF79aおよびORF79−1は、157アミノ酸重複において94.9%の相同性を有する:
【1705】
【化1316】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeaeからの予想されるORFとの相同性)
ORF79は、N.gonorrhoeaeからの予想されるORF(ORF79ng)と、76アミノ酸にわたる重複において96.1%の同一性を示す:
【1706】
【化1317】
Figure 0004472866
ORF79ngヌクレオチド配列(配列番号735)は、アミノ酸配列(配列番号736)を含むタンパク質をコードすることが予想された
【1707】
【化1318】
Figure 0004472866
さらなる研究が、淋菌の完全なDNA配列(配列番号737)を明らかにした:
【1708】
【化1319】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号738;ORF79ng−1)に対応する:
【1709】
【化1320】
Figure 0004472866
ORF79ng−1およびORF79−1は、157重複アミノ酸において、95.5%の同一性を示す:
【1710】
【化1321】
Figure 0004472866
さらに、ORF79ng−1は、Aquifex aeolicusからのタンパク質と有意な相同性を示す:
【1711】
【化1322】
Figure 0004472866
この分析をもとに、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeからのタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断のための、または抗体惹起のための有用な抗原であり得ると予想される。
【1712】
ORF79−1(15.6KDa)と、上記に記載されるように、pETベクターにクローニングし、そしてE.coliにおいて発現した。タンパク質発現産物および精製産物を、SDS−PAGEにより分析した。図18Aは、His融合タンパク質のアフィニティー精製の結果を示す。精製したHis融合タンパク質を用いて、マウスを免疫した。このマウスの血清を、ELISA(陽性コントロール)、およびFACS分析(図18B)について使用した。これらの研究により、ORF79−1は、表面露出タンパク質であること、およびそれが免疫原として有用であることを確認する。
【1713】
(実施例88)
以下のDNA配列(完全であると考えられる)を、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号739):
【1714】
【化1323】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号740;ORF98)に対応する:
【1715】
【化1324】
Figure 0004472866
さらなる研究が完全なヌクレオチド配列(配列番号741)を明らかにした:
【1716】
【化1325】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号742;ORF98−1)に対応する:
【1717】
【化1326】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析により以下の結果を得た:
(N.meningitidis(A株)からの予想されるORFとの相同性)
ORF98は、N.meningitidisのA株から得たORF(ORF98a)と233アミノ酸にわたる重複において96.1%の同一性を示す:
【1718】
【化1327】
Figure 0004472866
【1719】
【化1328】
Figure 0004472866
完全な長さのORF98aのヌクレオチド配列(配列番号743)は:
【1720】
【化1329】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号744)を有するタンパク質をコードする:
【1721】
【化1330】
Figure 0004472866
ORF98aおよびORF98−1は、233アミノ酸重複において98.7%の同一性を示す:
【1722】
【化1331】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeaeからの予想されるORFとの相同性)
ORF98は、N.gonorrhoeaeからの予想されるORF(ORF98ng)と、233アミノ酸にわたる重複において95.3%の同一性を示す:
【1723】
【化1332】
Figure 0004472866
完全な長さのORF98ngヌクレオチド配列(配列番号745)は、アミノ酸配列(配列番号746)を有するタンパク質をコードすることが予想される:
【1724】
【化1333】
Figure 0004472866
さらなる研究が、完全なヌクレオチド配列(配列番号747)を明らかにした:
【1725】
【化1334】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号748;ORF98ng−1)に対応する:
【1726】
【化1335】
Figure 0004472866
ORF98ng−1およびORF98−1は、233アミノ酸重複において、97.9%の同一性を示す:
【1727】
【化1336】
Figure 0004472866
【1728】
【化1337】
Figure 0004472866
この分析をもとに(淋菌タンパク質における推定の膜貫通ドメインが、髄膜炎菌タンパク質の配列と一致するという事実を含む)、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeからのタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断のための、または抗体惹起のための有用な抗原となり得ると予想される。
【1729】
(実施例89)
以下の部分的なDNA配列を、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号749):
【1730】
【化1338】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号750;ORF100)に対応する:
【1731】
【化1339】
Figure 0004472866
さらなる研究が完全なヌクレオチド配列(配列番号751)を明らかにした:
【1732】
【化1340】
Figure 0004472866
【1733】
【化1341】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号752;ORF100−1)に対応する:
【1734】
【化1342】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析により以下の結果を得た:
(N.meningitidis(A株)からの予想されるORFとの相同性)
ORF100は、A株のN.meningitidisから得たORF(ORF100a)と、386アミノ酸にわたる重複において93.5%の同一性を示す:
【1735】
【化1343】
Figure 0004472866
【1736】
【化1344】
Figure 0004472866
完全な長さのORF100aのヌクレオチド配列(配列番号753)は:
【1737】
【化1345】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号754)を有するタンパク質をコードする:
【1738】
【化1346】
Figure 0004472866
ORF100aおよびORF100−1は、406アミノ酸重複において95.1%の同一性を示す:
【1739】
【化1347】
Figure 0004472866
【1740】
【化1348】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeaeからの予想されるORFとの相同性)
ORF100は、N.gonorrhoeaeからの予想されるORF(ORF100ng)と、386アミノ酸にわたる重複において93.3%の同一性を示す:
【1741】
【化1349】
Figure 0004472866
完全な長さのORF100ngのヌクレオチド配列(配列番号755)は:
【1742】
【化1350】
Figure 0004472866
【1743】
【化1351】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号756)を有するタンパク質をコードする:
【1744】
【化1352】
Figure 0004472866
ORF100ngおよびORF100−1は、402アミノ酸重複において95.3%の同一性を示す:
【1745】
【化1353】
Figure 0004472866
【1746】
【化1354】
Figure 0004472866
この分析をもとに(推定のリーダー配列、推定の膜貫通ドメイン、およびRGDモチーフの存在を含む)、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeからのタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断のための、または抗体惹起のための有用な抗原となり得ると予想される。
【1747】
(実施例90)
以下のDNA配列(完全であると考えられる)を、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号757):
【1748】
【化1355】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号758;ORF102)に対応する:
【1749】
【化1356】
Figure 0004472866
さらなる研究が完全なヌクレオチド配列(配列番号759)を明らかにした:
【1750】
【化1357】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号760;ORF102−1)に対応する:
【1751】
【化1358】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析により以下の結果を得た:
(H.pyloriからのHP1484仮説的な内在性膜タンパク質(受託番号AE000647)との相同性)
ORF102とHP1484は、143アミノ酸重複において33%の同一性を示す:
【1752】
【化1359】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A株)からの予想されるORFとの相同性)
ORF102は、A株のN.meningitidisから得たORF(ORF102a)と、142アミノ酸にわたる重複において99.3%の同一性を示す:
【1753】
【化1360】
Figure 0004472866
完全な長さのORF102aのヌクレオチド配列(配列番号761)は:
【1754】
【化1361】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号762)を有するタンパク質をコードする:
【1755】
【化1362】
Figure 0004472866
ORF102aおよびORF102−1は、142アミノ酸重複において完全な相同性を示す:
【1756】
【化1363】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeaeからの予想されるORFとの相同性)
ORF102は、N.gonorrhoeaeからの予想されるORF(ORF102ng)と、142アミノ酸にわたる重複において97.9%の同一性を示す:
【1757】
【化1364】
Figure 0004472866
完全な長さのORF102ngヌクレオチド配列(配列番号763)は:
【1758】
【化1365】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号764)を有するタンパク質をコードする:
【1759】
【化1366】
Figure 0004472866
ORF102ngおよびORF102−1は、142アミノ酸重複において98.6%の相同性を有する:
【1760】
【化1367】
Figure 0004472866
さらに、ORF102ngは、H.pyloriからの膜タンパク質と有意な相同性を示す:
【1761】
【化1368】
Figure 0004472866
この分析をもとに、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeからのタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断のための、または抗体惹起のための有用な抗原であり得ると予想される。
【1762】
(実施例91)
以下の部分的なDNA配列を、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号765):
【1763】
【化1369】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号766;ORF85)に対応する:
【1764】
【化1370】
Figure 0004472866
さらなる研究がさらに部分的なヌクレオチド配列(配列番号767)を明らかにした:
【1765】
【化1371】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号768;ORF85−1)に対応する:
【1766】
【化1372】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析により以下の結果を得た:
(N.meningitidis(A株)からの予想されるORFとの相同性)
ORF85は、N.meningitidisのA株から得たORF(ORF85a)との41アミノ酸にわたる重複において87.8%の同一性を示し、153アミノ酸にわたる重複において99.3%の同一性を示す:
【1767】
【化1373】
Figure 0004472866
完全な長さのORF85aのヌクレオチド配列(配列番号769)は:
【1768】
【化1374】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号770)を有するタンパク質をコードする:
【1769】
【化1375】
Figure 0004472866
【1770】
【化1376】
Figure 0004472866
ORF85aおよびORF85−1は、334アミノ酸重複において98.2%の同一性を示す:
【1771】
【化1377】
Figure 0004472866
図19Dは、ORF85aについての親水性プロット、抗原性指数、およびAMPHI領域を示す。
【1772】
(N.gonorrhoeaeからの予想されるORFとの相同性)
ORF85は、N.gonorrhoeaeからの予想されるORF(ORF85ng)との高い程度の同一性を示す:
【1773】
【化1378】
Figure 0004472866
完全な長さのORF85ngヌクレオチド配列(配列番号771)は:
【1774】
【化1379】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号772)を有するタンパク質をコードする:
【1775】
【化1380】
Figure 0004472866
ORF85ngおよびORF85−1は334アミノ酸重複において96.1%の同一性を示す:
【1776】
【化1381】
Figure 0004472866
【1777】
【化1382】
Figure 0004472866
さらに、ORF85ngは、E.coli膜融合タンパク質と有意な相同性を示す:
【1778】
【化1383】
Figure 0004472866
この分析をもとに、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeからのタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断のための、または抗体惹起のための有用な抗原であり得ると予想された。
【1779】
ORF85−1(40.4KDa)と、上記に記載されるように、pGexベクターにおいてクローン化し、そしてE.coliにおいて発現した。タンパク質発現産物および精製産物を、SDS−PAGEにより分析した。図19Aは、GST融合タンパク質のアフィニティー精製の結果を示す。精製されたGST融合タンパク質を使用して、マウスを免疫した。このマウスの血清は、ウエスタンブロット(図19B)、FACS分析(図19C)、およびELISAの陽性の結果について使用した。これらの研究により、ORF85−1は、表面露出タンパク質であること、およびそれが有用な免疫原であることが確認される。
【1780】
(実施例92)
以下の部分的なDNA配列を、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号773):
【1781】
【化1384】
Figure 0004472866
【1782】
【化1385】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号774;ORF120)に対応する:
【1783】
【化1386】
Figure 0004472866
さらなる研究が完全なヌクレオチド配列(配列番号775)を明らかにした:
【1784】
【化1387】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号776;ORF120−1)に対応する:
【1785】
【化1388】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析により以下の結果を得た:
(N.meningitidis(A株)からの予想されるORFとの相同性)
ORF120は、N.meningitidisのA株からのORF(ORF120a)と、184アミノ酸にわたる重複において92.4%の同一性を示す:
【1786】
【化1389】
Figure 0004472866
【1787】
【化1390】
Figure 0004472866
完全な長さのORF120aのヌクレオチド配列(配列番号777)は:
【1788】
【化1391】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号778)を有するタンパク質をコードする:
【1789】
【化1392】
Figure 0004472866
ORF120aおよびORF120−1は、223アミノ酸重複において93.3%の同一性を示す:
【1790】
【化1393】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeaeからの予想されるORFとの相同性)
ORF120は、N.gonorrhoeaeからの予想されるORF(ORF120ng)と、184アミノ酸にわたる重複において97.8%の同一性を示す:
【1791】
【化1394】
Figure 0004472866
【1792】
【化1395】
Figure 0004472866
完全な長さのORF120ngヌクレオチド配列(配列番号779)は:
【1793】
【化1396】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号780)を有するタンパク質をコードする:
【1794】
【化1397】
Figure 0004472866
ORF120−1と比較して、ORF120ngは、223アミノ酸重複において、97.8%の同一性を示す:
【1795】
【化1398】
Figure 0004472866
この分析は、(淋菌タンパク質における推定されるリーダー配列の存在を含む)N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeからのタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断のための、または抗体惹起のための有用な抗原であり得ることを示唆する。
【1796】
(実施例93)
以下の部分的なDNA配列を、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号781):
【1797】
【化1399】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号782;ORF121)に対応する:
【1798】
【化1400】
Figure 0004472866
さらなる研究が完全なヌクレオチド配列(配列番号783)を明らかにした:
【1799】
【化1401】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号784;ORF121−1)に対応する:
【1800】
【化1402】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析により以下の結果を得た:
(N.meningitidis(A株)からの予想されるORFとの相同性)
ORF121は、N.meningitidisのA株から得たORF(ORF121a)との156アミノ酸にわたる重複において98.7%の同一性を示す:
【1801】
【化1403】
Figure 0004472866
【1802】
【化1404】
Figure 0004472866
完全な長さのORF121aのヌクレオチド配列(配列番号785)は:
【1803】
【化1405】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号786)を有するタンパク質をコードする:
【1804】
【化1406】
Figure 0004472866
ORF121aおよびORF121−1は、356アミノ酸重複において99.2%の同一性を示す:
【1805】
【化1407】
Figure 0004472866
【1806】
【化1408】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeaeからの予想されるORFとの相同性)
ORF121は、N.gonorrhoeaeからの予想されるORF(ORF121ng)と、156アミノ酸にわたる重複において97.4%の同一性を示す:
【1807】
【化1409】
Figure 0004472866
ORF121ngヌクレオチド配列(配列番号787)は、アミノ酸配列(配列番号788)を有するタンパク質をコードすることが予想された:
【1808】
【化1410】
Figure 0004472866
さらなる研究が、以下の淋菌のDNA配列(配列番号789)を明らかにした:
【1809】
【化1411】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号790;ORF121ng−1)に対応する:
【1810】
【化1412】
Figure 0004472866
ORF121ng−1およびORF121−1は、356アミノ酸重複において、97.5%の同一性を示す:
【1811】
【化1413】
Figure 0004472866
さらに、ORF121ng−1は、H.influenzaeからの透過酵素と相同性を示す:
【1812】
【化1414】
Figure 0004472866
【1813】
【化1415】
Figure 0004472866
この分析をもとに(これらの2つのタンパク質における推定リーダー配列および膜貫通ドメインの存在を含む)、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeからのタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断のための、または抗体惹起のための有用な抗原であり得ると予想された。
【1814】
(実施例94)
以下の部分的なDNA配列を、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号791):
【1815】
【化1416】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号792;ORF122)に対応する:
【1816】
【化1417】
Figure 0004472866
さらなる研究が完全なヌクレオチド配列(配列番号793)を明らかにした:
【1817】
【化1418】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号794;ORF122−1)に対応する:
【1818】
【化1419】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析により以下の結果を得た:
(N.meningitidis(A株)からの予想されるORFとの相同性)
ORF122は、N.meningitidisのA株から得たORF(ORF122a)と、182アミノ酸にわたる重複において94.0%の同一性を示す:
【1819】
【化1420】
Figure 0004472866
完全な長さのORF122aのヌクレオチド配列(配列番号795)は:
【1820】
【化1421】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号796)を有するタンパク質をコードする:
【1821】
【化1422】
Figure 0004472866
ORF122aおよびORF122−1は、256アミノ酸重複において96.9%の同一性を示す:
【1822】
【化1423】
Figure 0004472866
【1823】
【化1424】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeaeからの予想されるORFとの相同性)
ORF122は、N.gonorrhoeaeからの予想されるORF(ORF122ng)と、182アミノ酸にわたる重複において89.6%の同一性を示す:
【1824】
【化1425】
Figure 0004472866
完全な長さのORF122ngヌクレオチド配列(配列番号797)は:
【1825】
【化1426】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号798)を有するタンパク質をコードする:
【1826】
【化1427】
Figure 0004472866
ORF122ngおよびORF122−1は、256アミノ酸重複において、92.6%の同一性を示す:
【1827】
【化1428】
Figure 0004472866
この分析をもとに、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeaeからのタンパク質、ならびにそれらのエピトープが、ワクチンもしくは診断のための、または抗体惹起のための有用な抗原であり得ると予想される。
【1828】
(実施例95)
以下の部分的なDNA配列を、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号799):
【1829】
【化1429】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号800;ORF125)に対応する:
【1830】
【化1430】
Figure 0004472866
さらなる研究が完全なヌクレオチド配列(配列番号801)を明らかにした:
【1831】
【化1431】
Figure 0004472866
【1832】
【化1432】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号802;ORF125−1)に対応する:
【1833】
【化1433】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析により以下の結果を得た:
(N.meningitidis(A株)からの予想されるORFとの相同性)
ORF125は、A株のN.meningitidisから得たORF(ORF125a)と、51アミノ酸にわたる重複において76.5%の同一性を示す:
【1834】
【化1434】
Figure 0004472866
ORF125aの部分的なヌクレオチド配列(配列番号803)は:
【1835】
【化1435】
Figure 0004472866
これは、部分的なアミノ酸配列(配列番号804)を有するタンパク質をコードする:
【1836】
【化1436】
Figure 0004472866
【1837】
【化1437】
Figure 0004472866
ORF125aおよびORF125−1は、347アミノ酸重複において94.5%の同一性を示す:
【1838】
【化1438】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeaeからの予想されるORFとの相同性)
ORF125は、N.gonorrhoeaeからの予想されるORF(ORF125ng)と、65アミノ酸にわたる重複において86.2%の同一性を示す:
【1839】
【化1439】
Figure 0004472866
ORF125ngヌクレオチド配列(配列番号805)は、アミノ酸配列(配列番号806)を有するタンパク質をコードすることが予想された:
【1840】
【化1440】
Figure 0004472866
さらなる研究が、以下の淋菌のDNA配列(配列番号807)を明らかにした:
【1841】
【化1441】
Figure 0004472866
これは、アミノ酸配列(配列番号808;ORF125ng−1)に対応する:
【1842】
【化1442】
Figure 0004472866
ORF125ng−1およびORF125−1は、408aaの重複部分にわたって95.1%の同一性を示す。
【1843】
【化1443】
Figure 0004472866
【1844】
【化1444】
Figure 0004472866
淋菌のタンパク質において推定のリーダー配列および膜貫通ドメインの存在を含むこの分析に基いて、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のそれらのタンパク質、およびそのエピトープは、ワクチンまたは診断のために、もしくは抗体を惹起するための有用な抗原であり得ることを予測する。
【1845】
(実施例96)
以下の部分DNA配列(配列番号809)を、N.meningitidisにおいて同定した:
【1846】
【化1445】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号810;ORF126)に対応する:
【1847】
【化1446】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列(配列番号811)を明らかにした:
【1848】
【化1447】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号812;ORF126−1)に対応する:
【1849】
【化1448】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(A株)由来の推定されるORFとの相同性)
ORF126は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF126a)と180aaの重複部分にわたって90.0%の同一性を示す:
【1850】
【化1449】
Figure 0004472866
完全長のORF126aヌクレオチド配列(配列番号813)は:
【1851】
【化1450】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号814)を有するタンパク質をコードする:
【1852】
【化1451】
Figure 0004472866
【1853】
【化1452】
Figure 0004472866
ORF126aおよびORF126−1は、366aaの重複部分にわたって95.4%の同一性を示す:
【1854】
【化1453】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定されるORFとの相同性)
ORF126は、N.gonorrhoeae由来の推定されるORF(ORF126ng)と180aaの重複部分にわたって90%の同一性を示す:
【1855】
【化1454】
Figure 0004472866
ORF126ngヌクレオチド配列(配列番号815)は、アミノ酸配列(配列番号816)を有するタンパク質をコードすることが推定された。
【1856】
【化1455】
Figure 0004472866
【1857】
【化1456】
Figure 0004472866
さらなる研究は以下の淋菌DNA配列(配列番号817)を明らかにした:
【1858】
【化1457】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号818;ORF126ng−1)に対応する:
【1859】
【化1458】
Figure 0004472866
ORF126ng−1およびPRF126−1は、366aaの重複部分にわたって95.1%の同一性を示す。
【1860】
【化1459】
Figure 0004472866
【1861】
【化1460】
Figure 0004472866
さらに、ORF126ng−1は推定のRhizobiumオキシダーゼフラビンタンパク質と相同性を示す:
【1862】
【化1461】
Figure 0004472866
この分析は、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のそれらのタンパク質、およびそのエピトープが、ワクチンまたは診断のための抗原として、あるいは抗体を惹起するための有用な抗原であり得ることを示唆する。
【1863】
(実施例97)
完全であると考えられる以下のDNA配列を、N.meningitidisにおいて同定した(配列番号819):
【1864】
【化1462】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号820;ORF127)に対応する:
【1865】
【化1463】
Figure 0004472866
さらなる仕事は以下のDNA配列(配列番号821)を明らかにした:
【1866】
【化1464】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号822;ORF127−1)に対応する:
【1867】
【化1465】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(A株)由来の予想されるORFとの相同性)
ORF127は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF127a)と150aaの重複部分にわたって98.0%の同一性を示す:
【1868】
【化1466】
Figure 0004472866
完全長ORF127aヌクレオチド配列(配列番号823)は:
【1869】
【化1467】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号824)を有するタンパク質をコードする:
【1870】
【化1468】
Figure 0004472866
ORF127aおよびORF127−1は、149aaの重複部分において99.3%の同一性を示す:
【1871】
【化1469】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予想されるORFとの相同性)
ORF127は、N.gonorrhoeae由来の予想されるORF(ORF127ng)と150aaの重複部分にわたって97.3%の相同性を示す:
【1872】
【化1470】
Figure 0004472866
完全長ORF127ngヌクレオチド配列(配列番号825)は:
【1873】
【化1471】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号826)を有するタンパク質をコードする:
【1874】
【化1472】
Figure 0004472866
ORF127ngおよびORF127−1は、149aaの重複部分において100.0%の同一性を示す:
【1875】
【化1473】
Figure 0004472866
【1876】
【化1474】
Figure 0004472866
予想された膜貫通ドメインが、骨髄炎菌性および淋菌性のタンパク質に共有されることの事実を含むこの分析は、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のそれらのタンパク質、ならびにそのエピトープが、ワクチンまたは診断のために、あるいは抗体を惹起するために有用な抗原であり得ることを示唆する。
【1877】
(実施例98)
以下部分的DNA配列は、N.meningitidisにおいて同定された(配列番号827)
【1878】
【化1475】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号828;ORF128)に対応する:
【1879】
【化1476】
Figure 0004472866
さらなる研究は完全なヌクレオチド配列(配列番号829)を明らかにした:
【1880】
【化1477】
Figure 0004472866
【1881】
【化1478】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号830;ORF128−1)に対応する:
【1882】
【化1479】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(H.influenzaeの仮定の完全な膜タンパク質HI0392(受託番号U32723)との相同性)
ORF128およびHI0392は、180aaの重複部分において52%aaの同一性を示す:
【1883】
【化1480】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A株)由来の予想されたORFとの相同性

ORF128は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF128a)と244aaの重複部分にわたって98.0%の同一性を示す:
【1884】
【化1481】
Figure 0004472866
【1885】
【化1482】
Figure 0004472866
完全長ORF128aヌクレオチド配列(配列番号831)は:
【1886】
【化1483】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号832)を有するタンパク質をコードする:
【1887】
【化1484】
Figure 0004472866
【1888】
【化1485】
Figure 0004472866
ORF128aおよびORF128−1は、622aaの重複部分において99.5%の同一性を示す:
【1889】
【化1486】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の予想されるORFとの相同性
ORF128は、N.gonorrhoeae由来の予想されるORF(ORF128ng)と244aaの重複部分にわたって93.4%の同一性を示す:
【1890】
【化1487】
Figure 0004472866
【1891】
【化1488】
Figure 0004472866
完全長ORF128ngヌクレオチド配列(配列番号833)は:
【1892】
【化1489】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号834)を有するタンパク質をコードする:
【1893】
【化1490】
Figure 0004472866
ORF128ngおよびORF128−1は、622aaの重複部分において95.7%の同一性を示す:
【1894】
【化1491】
Figure 0004472866
【1895】
【化1492】
Figure 0004472866
さらに、ORF218ngは、仮定のH.influenzaeタンパク質と相同性を示す。
【1896】
【化1493】
Figure 0004472866
いくつかの推定の膜貫通ドメインの同定を含むこの分析は、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のそれらのタンパク質、ならびにそのエピトープが、ワクチンまたは診断のために、あるいは抗体を惹起するために有用な抗原であり得ることを示唆する。
【1897】
(実施例99)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidis(配列番号835)において同定された:
【1898】
【化1494】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号836;ORF129)に対応する:
【1899】
【化1495】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全なヌクレオチド配列(配列番号837)を明らかにした:
【1900】
【化1496】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号838;ORF129−1)に対応する:
【1901】
【化1497】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(A株)由来の推定されるORFとの相同性)
ORF129は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF129a)と88aaの重複部分にわたって98.9%の同一性を示す:
【1902】
【化1498】
Figure 0004472866
完全長ORF129aヌクレオチド配列(配列番号839)は:
【1903】
【化1499】
Figure 0004472866
【1904】
【化1500】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号840)を有するタンパク質をコードする:
【1905】
【化1501】
Figure 0004472866
ORF129aおよびORF129−1は、248aaの重複部分において100.0%の同一性を示す:
【1906】
【化1502】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定されるORFとの相同性)
ORF129は、N.gonorrhoeae由来の推定されるORF(ORF129ng)と88aaの重複部分にわたって98.9%の同一性を示す:
【1907】
【化1503】
Figure 0004472866
ORF129ngヌクレオチド配列(配列番号841)は、アミノ酸配列(配列番号842)を有するタンパク質をコードすることを予想される:
【1908】
【化1504】
Figure 0004472866
さらなる研究は、以下の淋菌の配列(配列番号843)を明らかにした:
【1909】
【化1505】
Figure 0004472866
【1910】
【化1506】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号844;ORF129ng−1)に対応する:
【1911】
【化1507】
Figure 0004472866
ORF129ng−1およびORF129−1は、248aaの重複部分において99.2%の同一性を示す:
【1912】
【化1508】
Figure 0004472866
さらに、ORF129ng−1は、A.fulgidus由来のABCトランスポーターと相同である:
【1913】
【化1509】
Figure 0004472866
2つのタンパク質における膜貫通ドメインの同定を含むこの分析は、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のそれらのタンパク質、ならびにそのエピトープが、ワクチンまたは診断のために、あるいは抗体の惹起のために有用な抗原であり得ることを示唆する。
【1914】
(実施例100)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidis(配列番号845)
において同定された:
【1915】
【化1510】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号846;ORF130)に対応する:
【1916】
【化1511】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全なヌクレオチド配列(配列番号847)を明らかにした:
【1917】
【化1512】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号848;ORF130−1)に対応する:
【1918】
【化1513】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N,meningitidis(A株)由来の推定されるORFとの相同性)
ORF130は、N,meningitidisのA株由来のORF(ORF130a)と193aaの重複部分にわたって94.3%の同一性を示す:
【1919】
【化1514】
Figure 0004472866
完全長のORF130aヌクレオチド配列(配列番号849)は:
【1920】
【化1515】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号850)を有するタンパク質をコードする:
【1921】
【化1516】
Figure 0004472866
ORF130aおよびORF130−1は、357aaの重複部分において98.3%の同一性を示す:
【1922】
【化1517】
Figure 0004472866
【1923】
【化1518】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定されるORFとの相同性)
ORF130は、N.gonorrhoeae由来の推定されるORF(ORF130ng)と193aaの重複部分にわたって91.7%の同一性を示す:
【1924】
【化1519】
Figure 0004472866
ORF130ngヌクレオチド配列(配列番号851)は、アミノ酸配列(配列番号852)を有するタンパク質をコードすることを予想された:
【1925】
【化1520】
Figure 0004472866
さらなる研究は、以下の淋菌DNA配列(配列番号853)を明らかにした:
【1926】
【化1521】
Figure 0004472866
【1927】
【化1522】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号854;ORF130ng−1)に対応する:
【1928】
【化1523】
Figure 0004472866
ORF130ng−1およびORF130−1は、357aaの重複部分において92.4%の同一性を示す:
【1929】
【化1524】
Figure 0004472866
この分析に基き、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープが、ワクチンまたは診断のために、あるいは抗体の惹起のために有用な抗原であり得ることを予測する。
【1930】
(実施例101)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidis(配列番号855)
において同定された:
【1931】
【化1525】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号856;ORF131)に対応する:
【1932】
【化1526】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全なヌクレオチド配列(配列番号857)を明らかにした:
【1933】
【化1527】
Figure 0004472866
【1934】
【化1528】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号858;ORF131−1)に対応する:
【1935】
【化1529】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N,meningitidis(A株)由来の推定されるORFとの相同性)
ORF131は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF131a)と121aaの重複部分にわたって95.0%の同一性を示す:
【1936】
【化1530】
Figure 0004472866
完全長のORF131aヌクレオチド配列(配列番号859)は:
【1937】
【化1531】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号860)を有するタンパク質をコードする:
【1938】
【化1532】
Figure 0004472866
ORF131aおよびORF131−1は、135aaの重複部分において97.0%の同一性を示す:
【1939】
【化1533】
Figure 0004472866
【1940】
【化1534】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定されるORFとの相同性)
ORF131は、N.gonorrhoeae由来の推定されるORF(ORF131ng)と121aaの重複部分にわたって89.3%の同一性を示す:
【1941】
【化1535】
Figure 0004472866
完全長ORF131ngヌクレオチド配列(配列番号861)は、アミノ酸配列(配列番号862)を有するタンパク質をコードすることを予想された:
【1942】
【化1536】
Figure 0004472866
さらなる研究は、以下の淋菌DNA配列(配列番号863)を明らかにした:
【1943】
【化1537】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号864;ORF131ng−1)に対応する:
【1944】
【化1538】
Figure 0004472866
ORF131ng−1およびORF131−1は、135aaの重複部分において92.6%の同一性を示す:
【1945】
【化1539】
Figure 0004472866
推定される原核生物膜リポタンパク質脂質付着部位の存在に基き、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のそれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープが、ワクチンまたは診断のために、あるいは抗体を惹起するために有用な抗原であり得ることを予測する。
【1946】
(実施例102)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidis(配列番号865)において同定された:
【1947】
【化1540】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号866;ORF132)に対応する:
【1948】
【化1541】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全なヌクレオチド配列(配列番号867)を明らかにした:
【1949】
【化1542】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号868;ORF132−1)に対応する:
【1950】
【化1543】
Figure 0004472866
【1951】
【化1544】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(E.coliの仮定のo457タンパク質との相同性(受託番号U14003))
ORF132およびo457は、140aaの重複部分にわたって58%の同一性を示す:
【1952】
【化1545】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A株)由来の推定されるORFとの相同性)
ORF132は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF132a)と189aaの重複部分にわたって74.6%の同一性を示す:
【1953】
【化1546】
Figure 0004472866
完全長のORF132aヌクレオチド配列(配列番号869):
【1954】
【化1547】
Figure 0004472866
【1955】
【化1548】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号870)を有するタンパク質をコードする:
【1956】
【化1549】
Figure 0004472866
ORF132aおよびORF132−1は、458aaの重複部分において93.9%の同一性を示す:
【1957】
【化1550】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定されるORFとの相同性)
ORF132は、N.gonorrhoeae由来の推定されるORF(ORF132ng)と259aaの重複部分にわたって89.6%の同一性を示す:
【1958】
【化1551】
Figure 0004472866
【1959】
【化1552】
Figure 0004472866
ORF132ngヌクレオチド配列(配列番号871)は、アミノ酸配列(配列番号872)を有するタンパク質をコードすることを予想された:
【1960】
【化1553】
Figure 0004472866
さらなる研究は、以下の淋菌DNA配列(配列番号873)を示した:
【1961】
【化1554】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号874;ORF132ng−1)に対応する:
【1962】
【化1555】
Figure 0004472866
ORF132ng−1およびORF132−1は、458aaの重複部分において93.2%の同一性を示す:
【1963】
【化1556】
Figure 0004472866
さらに、ORF132ng−1は、仮定のE.coliタンパク質と相同である:
【1964】
【化1557】
Figure 0004472866
【1965】
【化1558】
Figure 0004472866
この分析に基き、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のそれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープが、ワクチンまたは診断のために、あるいは抗体を惹起するために有用な抗原であり得ることを予測する。
【1966】
ORF132−1(26.4kDa)を、上記のように、pETおよびpGexベクターにクローニングし、そしてE.coli中に発現させた。タンパク質発現および精製の産物をDSD−PAGEにより分析した。図20Aは、His融合タンパク質のアフィニティー精製の結果を示し、そして図20Bは、E.coliでのGST融合物の発現の結果を示す。精製したHis融合タンパク質を、マウスを免疫するために使用し、マウスの血清を、FACS分析(図20C)およびELISA(ポジティブな結果)のために使用した。これらの実験は、ORF132が、表面露出タンパク質であること、および有用な免疫原であることを確認する。
【1967】
(実施例103)
以下の部分DNA配列を、N.meningitidis(配列番号875)において同定した:
【1968】
【化1559】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号876;ORF133)に対応する:
【1969】
【化1560】
Figure 0004472866
さらなる研究は、完全なヌクレオチド配列(配列番号877)を明らかにした:
【1970】
【化1561】
Figure 0004472866
【1971】
【化1562】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号878;ORF133−1)に対応する:
【1972】
【化1563】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(H.influenzaeの有望なTonB依存性レセプターHI121との相同性(受託番号U32801))
ORF133およびHI121は、363aaの重複部分にわたって57%の同一性を示す:
【1973】
【化1564】
Figure 0004472866
(N.meningitidis(A株)由来の推定されるORFとの相同性)
ORF133は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF133a)と392aaの重複部分にわたって90.8%の同一性を示す:
【1974】
【化1565】
Figure 0004472866
【1975】
【化1566】
Figure 0004472866
部分的ORF133aヌクレオチド配列(配列番号879)は:
【1976】
【化1567】
Figure 0004472866
これは(部分的)アミノ酸配列(配列番号880)を有するタンパク質をコードする:
【1977】
【化1568】
Figure 0004472866
ORF133aおよびORF133−1は、871aaの重複部分において94.3%の同一性を示す:
【1978】
【化1569】
Figure 0004472866
【1979】
【化1570】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定されるORFとの相同性)
ORF133は、N.gonorrhoeae由来の推定されるORF(ORF133ng)と392aaの重複部分にわたって92.3%の同一性を示す:
【1980】
【化1571】
Figure 0004472866
【1981】
【化1572】
Figure 0004472866
完全長ORF133ngヌクレオチド配列(配列番号881)は、アミノ酸配列(配列番号882)を有するタンパク質をコードすることを予想された:
【1982】
【化1573】
Figure 0004472866
改変体もまた、淋菌DNA配列(配列番号883)によりコードされることが同定された:
【1983】
【化1574】
Figure 0004472866
【1984】
【化1575】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号884;ORF133ng−1)に対応する:
【1985】
【化1576】
Figure 0004472866
ORF133ng−1およびORF133−1は、889aaの重複部分において96.2%の同一性を示す:
【1986】
【化1577】
Figure 0004472866
【1987】
【化1578】
Figure 0004472866
さらに、ORF133ng−1は、H.influenzaeにおけるTonB依存性レセプターと相同である:
【1988】
【化1579】
Figure 0004472866
淋菌タンパク質(骨髄炎菌のタンパク質にも存在する)における下線を引いたモチーフは、ATP/GTP結合部位モチーフA(P−ループ)であると予想され、そしてこの分析は、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のタンパク質、ならびにこれらのエピトープが、ワクチンまたは診断のために、あるいは抗体を惹起するために有用な抗原であり得ることを示唆する。
【1989】
(実施例104)
以下の部分DNA配列は、N.meningitidis(配列番号885)において同定された:
【1990】
【化1580】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号886;ORF112)に対応する:
【1991】
【化1581】
Figure 0004472866
さらなる研究は、さらに部分的なヌクレオチド配列(配列番号887)を明らかにした:
【1992】
【化1582】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号888;ORF112−1)に対応する:
【1993】
【化1583】
Figure 0004472866
このアミノ酸配列のコンピューター分析は、以下の結果を与えた:
(N.meningitidis(A株)由来の推定されるORFとの相同性)
ORF112は、N.meningitidisのA株由来のORF(ORF112a)と166aaの重複部分にわたって96.4%の同一性を示す:
【1994】
【化1584】
Figure 0004472866
ORF112aヌクレオチド配列(配列番号889)は:
【1995】
【化1585】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号890)を有するタンパク質をコードする:
【1996】
【化1586】
Figure 0004472866
ORF112aおよびORF112−1は、326aaの重複部分において96.3%の同一性を示す:
【1997】
【化1587】
Figure 0004472866
【1998】
【化1588】
Figure 0004472866
(N.gonorrhoeae由来の推定されるORFとの相同性)
ORF112は、N.gonorrhoeae由来の推定されるORF(ORF112ng)と166aaの重複部分にわたって95.8%の同一性を示す:
【1999】
【化1589】
Figure 0004472866
完全長ORF112ngヌクレオチド配列(配列番号891):
【2000】
【化1590】
Figure 0004472866
これはアミノ酸配列(配列番号892)を有するタンパク質をコードする:
【2001】
【化1591】
Figure 0004472866
【2002】
【化1592】
Figure 0004472866
ORF112ngおよびORF112−1は、326aaの重複部分において94.2%の同一性を示す:
【2003】
【化1593】
Figure 0004472866
この分析は、N.meningitidisおよびN.gonorrhoeae由来のこれらのタンパク質、ならびにこれらのエピトープが、ワクチンまたは診断のために、あるいは抗体を惹起するために有用な抗原であり得ることを示唆する。
【2004】
本発明が、例示のみのために記載され、そして改変が発明の精神および範囲内でなされ得ることを理解する。
【2005】
【表1】
Figure 0004472866
Figure 0004472866
Figure 0004472866
Figure 0004472866
Figure 0004472866
Figure 0004472866
【2006】
【表2】
Figure 0004472866
Figure 0004472866
【2007】
(配列表)
SEQUENCE LISTING
<110> Chiron S.r.l.
<120> Neisserial antigens
<130> F100811840
<140> JP 2000-520572
<141> 1998-10-09
<150> GB 9723516.2
<151> 1997-11-06
<150> GB 9724190.5
<151> 1997-11-14
<150> GB 9724386.9
<151> 1997-11-18
<150> GB 9725158.1
<151> 1997-11-27
<150> GB 9726147.3
<151> 1997-12-10
<150> GB 9800759.4
<151> 1998-01-14
<150> GB 9819016.8
<151> 1998-09-01
<160> 892
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 506
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (18)..(18)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (67)..(67)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (102)..(102)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (154)..(154)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (276)..(276)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (487)..(487)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 1
atgaaacaga cagtcaanat gcttgccgcc gccctgattg ccttgggctt gaaccgaccg 60
gtgtggncgg atgacgtatc ggattttcgg gaaaacttgc angcggcagc acagggaaat 120
gcagcagccc aatacaattt gggcgcaatg tatntacaaa ggacgcgcgt gcgccgggat 180
gatgctgaag cggtcagatg gtatcggcag ccggcggaac aggggttagc ccaagcccaa 240
tacaatttgg gctggatgta tgccaacggg cgcgcngtgc gccaagatga taccgaagcg 300
gtcagatggt atcggcaggc ggcagcgcag ggggttgtcc aagcccaata caatttgggc 360
gtgatatatg ccgaaggacg tggagtgcgc caagacgatg tcgaagcggt cagatggttt 420
cggcaggcgg cagcgcaggg ggtagcccaa gcccaaaaca atttgggcgt gatgtatgcc 480
gaaagancgc gcgtgcgcca agaccg 506
<210> 2
<211> 168
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (6)..(6)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (34)..(34)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (52)..(52)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (92)..(92)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (163)..(163)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 2
Met Lys Gln Thr Val Xaa Met Leu Ala Ala Ala Leu Ile Ala Leu Gly
1 5 10 15
Leu Asn Arg Pro Val Trp Xaa Asp Asp Val Ser Asp Phe Arg Glu Asn
20 25 30
Leu Xaa Ala Ala Ala Gln Gly Asn Ala Ala Ala Gln Tyr Asn Leu Gly
35 40 45
Ala Met Tyr Xaa Gln Arg Thr Arg Val Arg Arg Asp Asp Ala Glu Ala
50 55 60
Val Arg Trp Tyr Arg Gln Pro Ala Glu Gln Gly Leu Ala Gln Ala Gln
65 70 75 80
Tyr Asn Leu Gly Trp Met Tyr Ala Asn Gly Arg Xaa Val Arg Gln Asp
85 90 95
Asp Thr Glu Ala Val Arg Trp Tyr Arg Gln Ala Ala Ala Gln Gly Val
100 105 110
Val Gln Ala Gln Tyr Asn Leu Gly Val Ile Tyr Ala Glu Gly Arg Gly
115 120 125
Val Arg Gln Asp Asp Val Glu Ala Val Arg Trp Phe Arg Gln Ala Ala
130 135 140
Ala Gln Gly Val Ala Gln Ala Gln Asn Asn Leu Gly Val Met Tyr Ala
145 150 155 160
Glu Arg Xaa Arg Val Arg Gln Asp
165
<210> 3
<211> 597
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 3
atgaaacaga cagtcaaatg gcttgccgcc gccctgattg ccttgggctt gaaccgagcg 60
gtgtgggcgg atgacgtatc ggattttcgg gaaaacttgc aggcggcagc acagggaaat 120
gcagcagccc aatacaattt gggcgcaatg tattacaaag gacgcggcgt gcgccgggat 180
gatgctgaag cggtcagatg gtatcggcag gcggcggaac aggggttagc ccaagcccaa 240
tacaatttgg gctggatgta tgccaacggg cgcggcgtgc gccaagatga taccgaagcg 300
gtcagatggt atcggcaggc ggcagcgcag ggggttgtcc aagcccaata caatttgggc 360
gtgatatatg ccgaaggacg tggagtgcgc caagacgatg tcgaagcggt cagatggttt 420
cggcaggcgg cagcgcaggg ggtagcccaa gcccaaaaca atttgggcgt gatgtatgcc 480
gaaagacgcg gcgtgcgcca agaccgcgcc cttgcacaag aatggtttgg caaggcttgt 540
caaaacggag accaagacgg ctgcgacaat gaccaacgcc tgaaggcggg ttattga 597
<210> 4
<211> 198
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 4
Met Lys Gln Thr Val Lys Trp Leu Ala Ala Ala Leu Ile Ala Leu Gly
1 5 10 15
Leu Asn Arg Ala Val Trp Ala Asp Asp Val Ser Asp Phe Arg Glu Asn
20 25 30
Leu Gln Ala Ala Ala Gln Gly Asn Ala Ala Ala Gln Tyr Asn Leu Gly
35 40 45
Ala Met Tyr Tyr Lys Gly Arg Gly Val Arg Arg Asp Asp Ala Glu Ala
50 55 60
Val Arg Trp Tyr Arg Gln Ala Ala Glu Gln Gly Leu Ala Gln Ala Gln
65 70 75 80
Tyr Asn Leu Gly Trp Met Tyr Ala Asn Gly Arg Gly Val Arg Gln Asp
85 90 95
Asp Thr Glu Ala Val Arg Trp Tyr Arg Gln Ala Ala Ala Gln Gly Val
100 105 110
Val Gln Ala Gln Tyr Asn Leu Gly Val Ile Tyr Ala Glu Gly Arg Gly
115 120 125
Val Arg Gln Asp Asp Val Glu Ala Val Arg Trp Phe Arg Gln Ala Ala
130 135 140
Ala Gln Gly Val Ala Gln Ala Gln Asn Asn Leu Gly Val Met Tyr Ala
145 150 155 160
Glu Arg Arg Gly Val Arg Gln Asp Arg Ala Leu Ala Gln Glu Trp Phe
165 170 175
Gly Lys Ala Cys Gln Asn Gly Asp Gln Asp Gly Cys Asp Asn Asp Gln
180 185 190
Arg Leu Lys Ala Gly Tyr
195
<210> 5
<211> 273
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 5
atgaaacaga cagtcaaatg gcttgccgcc gccctgattg ccttgggctt gaaccaagcg 60
gtgtgggcgg atgacgtatc ggattttcgg gaaaacttgc aggcggcagc acagggaaat 120
gcagcagccc aaaacaattt gggcgtgatg tatgccgaaa gacgcggcgt gcgccaagac 180
cgcgcccttg cacaagaatg gcttggcaag gcttgtcaaa acggatacca agacagctgc 240
gacaatgacc aacgcctgaa agcgggttat tga 273
<210> 6
<211> 90
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 6
Met Lys Gln Thr Val Lys Trp Leu Ala Ala Ala Leu Ile Ala Leu Gly
1 5 10 15
Leu Asn Gln Ala Val Trp Ala Asp Asp Val Ser Asp Phe Arg Glu Asn
20 25 30
Leu Gln Ala Ala Ala Gln Gly Asn Ala Ala Ala Gln Asn Asn Leu Gly
35 40 45
Val Met Tyr Ala Glu Arg Arg Gly Val Arg Gln Asp Arg Ala Leu Ala
50 55 60
Gln Glu Trp Leu Gly Lys Ala Cys Gln Asn Gly Tyr Gln Asp Ser Cys
65 70 75 80
Asp Asn Asp Gln Arg Leu Lys Ala Gly Tyr
85 90
<210> 7
<211> 381
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 7
atgaaacaga cagtcaaatg gcttgccgcc gccctgattg ccttgggctt gaaccaagcg 60
gtgtgggcgg gtgacgtatc ggattttcgg gaaaacttgc aggcggcaga acagggaaat 120
gcagcagccc aattcaattt gggcgtgatg tatgaaaatg gacaaggagt tcgtcaagat 180
tatgtacagg cagtgcagtg gtatcgcaag gcttcagaac aaggggatgc ccaagcccaa 240
tacaatttgg gcttgatgta ttacgatgga cgcggcgtgc gccaagacct tgcgctcgct 300
caacaatggc ttggcaaggc ttgtcaaaac ggagaccaaa acagctgcga caatgaccaa 360
cgcctgaagg cgggttatta a 381
<210> 8
<211> 126
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 8
Met Lys Gln Thr Val Lys Trp Leu Ala Ala Ala Leu Ile Ala Leu Gly
1 5 10 15
Leu Asn Gln Ala Val Trp Ala Gly Asp Val Ser Asp Phe Arg Glu Asn
20 25 30
Leu Gln Ala Ala Glu Gln Gly Asn Ala Ala Ala Gln Phe Asn Leu Gly
35 40 45
Val Met Tyr Glu Asn Gly Gln Gly Val Arg Gln Asp Tyr Val Gln Ala
50 55 60
Val Gln Trp Tyr Arg Lys Ala Ser Glu Gln Gly Asp Ala Gln Ala Gln
65 70 75 80
Tyr Asn Leu Gly Leu Met Tyr Tyr Asp Gly Arg Gly Val Arg Gln Asp
85 90 95
Leu Ala Leu Ala Gln Gln Trp Leu Gly Lys Ala Cys Gln Asn Gly Asp
100 105 110
Gln Asn Ser Cys Asp Asn Asp Gln Arg Leu Lys Ala Gly Tyr
115 120 125
<210> 9
<211> 357
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 9
ttcggcgaca tcggcggttt gaaggtcaat gcccccgtca aatccgcagg cgtattggtc 60
gggcgcgtcg gcgctatcgg acttgacccg aaatcctatc aggcgagggt gcgcctcgat 120
ttggacggca agtatcagtt cagcagcgac gtttccgcgc aaatcctgac ttcsggactt 180
ttgggcgagc agtacatcgg gctgcagcag ggcggcgaca cggaaaacct tgctgccggc 240
gacaccatct ccgtaaccag ttctgcaatg gttctggaaa accttatcgg caaattcatg 300
acgagttttg ccgagaaaaa tgccgacggc ggcaatgcgg aaaaagccgc cgaataa 357
<210> 10
<211> 118
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 10
Phe Gly Asp Ile Gly Gly Leu Lys Val Asn Ala Pro Val Lys Ser Ala
1 5 10 15
Gly Val Leu Val Gly Arg Val Gly Ala Ile Gly Leu Asp Pro Lys Ser
20 25 30
Tyr Gln Ala Arg Val Arg Leu Asp Leu Asp Gly Lys Tyr Gln Phe Ser
35 40 45
Ser Asp Val Ser Ala Gln Ile Leu Thr Ser Gly Leu Leu Gly Glu Gln
50 55 60
Tyr Ile Gly Leu Gln Gln Gly Gly Asp Thr Glu Asn Leu Ala Ala Gly
65 70 75 80
Asp Thr Ile Ser Val Thr Ser Ser Ala Met Val Leu Glu Asn Leu Ile
85 90 95
Gly Lys Phe Met Thr Ser Phe Ala Glu Lys Asn Ala Asp Gly Gly Asn
100 105 110
Ala Glu Lys Ala Ala Glu
115
<210> 11
<211> 859
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (495)..(495)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 11
attttgatat acctcatccg caagaatcta ggttcgcccg tcttcttctt tcaggaacgc 60
cccggaaagg acggaaaacc ttttaaaatg gtcaaattcc gttccatgcg cgacggcttg 120
tattcagacg gcattccgct gcccgacgga gaacgcctga caccgttcgg caaaaaactg 180
cgtgccgcca gtwtggacga actgcctgaa ttatggaata tcttaaaagg cgagatgagc 240
ctggtcggcc cccgcccgct gctgatgcaa tatctgccgc tgtacgacaa cttccaaaac 300
cgccgccacg aaatgaaacc cggcattacc ggctgggcgc aggtcaacgg gcgcaacgcg 360
ctttcgtggg acgaaaaatt cgcctgcgat gtttggtata tcgaccactt cagcctgtgc 420
ctcgacatca aaatcctact gctgacggtt aaaaaagtat taatcaagga agggatttcc 480
gcacagggcg aacanaccat gccccctttc acaggaaaac gcaaactcgc cgtcgtcggt 540
gcgggcggac acggaaaagt cgttgccgac cttgccgccg cactcggccg gtacagggaa 600
atcgtttttc tggacgaccg cgcacaaggc agcgtcaacg gcttttccgt catcggcacg 660
acgctgctgc ttgaaaacag tttatcgccc gaacaatacg acgtcgccgt cgccgtcggc 720
aacaaccgca tccgccgcca aatcgccgaa aaagccgccg cgctcggctt cgccctgccc 780
gtactggttc atccggacgc gaccgtctcg ccttctgcaa cagtcggaca aggcagcgtc 840
gttatggcga aagcggtcg 859
<210> 12
<211> 286
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (65)..(65)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (165)..(165)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 12
Ile Leu Ile Tyr Leu Ile Arg Lys Asn Leu Gly Ser Pro Val Phe Phe
1 5 10 15
Phe Gln Glu Arg Pro Gly Lys Asp Gly Lys Pro Phe Lys Met Val Lys
20 25 30
Phe Arg Ser Met Arg Asp Gly Leu Tyr Ser Asp Gly Ile Pro Leu Pro
35 40 45
Asp Gly Glu Arg Leu Thr Pro Phe Gly Lys Lys Leu Arg Ala Ala Ser
50 55 60
Xaa Asp Glu Leu Pro Glu Leu Trp Asn Ile Leu Lys Gly Glu Met Ser
65 70 75 80
Leu Val Gly Pro Arg Pro Leu Leu Met Gln Tyr Leu Pro Leu Tyr Asp
85 90 95
Asn Phe Gln Asn Arg Arg His Glu Met Lys Pro Gly Ile Thr Gly Trp
100 105 110
Ala Gln Val Asn Gly Arg Asn Ala Leu Ser Trp Asp Glu Lys Phe Ala
115 120 125
Cys Asp Val Trp Tyr Ile Asp His Phe Ser Leu Cys Leu Asp Ile Lys
130 135 140
Ile Leu Leu Leu Thr Val Lys Lys Val Leu Ile Lys Glu Gly Ile Ser
145 150 155 160
Ala Gln Gly Glu Xaa Thr Met Pro Pro Phe Thr Gly Lys Arg Lys Leu
165 170 175
Ala Val Val Gly Ala Gly Gly His Gly Lys Val Val Ala Asp Leu Ala
180 185 190
Ala Ala Leu Gly Arg Tyr Arg Glu Ile Val Phe Leu Asp Asp Arg Ala
195 200 205
Gln Gly Ser Val Asn Gly Phe Ser Val Ile Gly Thr Thr Leu Leu Leu
210 215 220
Glu Asn Ser Leu Ser Pro Glu Gln Tyr Asp Val Ala Val Ala Val Gly
225 230 235 240
Asn Asn Arg Ile Arg Arg Gln Ile Ala Glu Lys Ala Ala Ala Leu Gly
245 250 255
Phe Ala Leu Pro Val Leu Val His Pro Asp Ala Thr Val Ser Pro Ser
260 265 270
Ala Thr Val Gly Gln Gly Ser Val Val Met Ala Lys Ala Val
275 280 285
<210> 13
<211> 1242
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 13
atgagtaaat tcttcaaacg cctgtttgac attgttgcct ccgcctcggg actgattttc 60
ctctcgccag tatttttgat tttgatatac ctcatccgca agaatctagg ttcgcccgtc 120
ttcttctttc aggaacgccc cggaaaggac ggaaaacctt ttaaaatggt caaattccgt 180
tccatgcgcg acgcgcttga ttcagacggc attccgctgc ccgacggaga acgcctgaca 240
ccgttcggca aaaaactgcg tgccgccagt ttggacgaac tgcctgaatt atggaatatc 300
ttaaaaggcg agatgagcct ggtcggcccc cgcccgctgc tgatgcaata tctgccgctg 360
tacgacaact tccaaaaccg ccgccacgaa atgaaacccg gcattaccgg ctgggcgcag 420
gtcaacgggc gcaacgcgct ttcgtgggac gaaaaattcg cctgcgatgt ttggtatatc 480
gaccacttca gcctgtgcct cgacatcaaa atcctactgc tgacggttaa aaaagtatta 540
atcaaggaag ggatttccgc acagggcgaa gccaccatgc cccctttcac aggaaaacgc 600
aaactcgccg tcgtcggtgc gggcggacac ggaaaagtcg ttgccgacct tgccgccgca 660
ctcggccggt acagggaaat cgtttttctg gacgaccgcg cacaaggcag cgtcaacggc 720
ttttccgtca tcggcacgac gctgctgctt gaaaacagtt tatcgcccga acaatacgac 780
gtcgccgtcg ccgtcggcaa caaccgcatc cgccgccaaa tcgccgaaaa agccgccgcg 840
ctcggcttcg ccctgcccgt tctggttcat ccggacgcga ccgtctcgcc ttctgcaaca 900
gtcggacaag gcagcgtcgt tatggcgaaa gccgtcgtac aggcaggcag cgtattgaaa 960
gacggcgtga ttgtgaacac tgccgccacc gtcgatcacg actgcctgct taacgctttc 1020
gtccacatca gcccaggcgc gcacctgtcg ggcaacacgc atatcggcga agaaagctgg 1080
ataggcacgg gcgcgtgcag ccgccagcag atccgtatcg gcagccgcgc aaccattgga 1140
gcgggcgcag tcgtcgtacg cgacgtttca gacggcatga ccgtcgcggg caatccggca 1200
aagccgctgc cgcgcaaaaa ccccgagacc tcgacagcat aa 1242
<210> 14
<211> 413
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 14
Met Ser Lys Phe Phe Lys Arg Leu Phe Asp Ile Val Ala Ser Ala Ser
1 5 10 15
Gly Leu Ile Phe Leu Ser Pro Val Phe Leu Ile Leu Ile Tyr Leu Ile
20 25 30
Arg Lys Asn Leu Gly Ser Pro Val Phe Phe Phe Gln Glu Arg Pro Gly
35 40 45
Lys Asp Gly Lys Pro Phe Lys Met Val Lys Phe Arg Ser Met Arg Asp
50 55 60
Ala Leu Asp Ser Asp Gly Ile Pro Leu Pro Asp Gly Glu Arg Leu Thr
65 70 75 80
Pro Phe Gly Lys Lys Leu Arg Ala Ala Ser Leu Asp Glu Leu Pro Glu
85 90 95
Leu Trp Asn Ile Leu Lys Gly Glu Met Ser Leu Val Gly Pro Arg Pro
100 105 110
Leu Leu Met Gln Tyr Leu Pro Leu Tyr Asp Asn Phe Gln Asn Arg Arg
115 120 125
His Glu Met Lys Pro Gly Ile Thr Gly Trp Ala Gln Val Asn Gly Arg
130 135 140
Asn Ala Leu Ser Trp Asp Glu Lys Phe Ala Cys Asp Val Trp Tyr Ile
145 150 155 160
Asp His Phe Ser Leu Cys Leu Asp Ile Lys Ile Leu Leu Leu Thr Val
165 170 175
Lys Lys Val Leu Ile Lys Glu Gly Ile Ser Ala Gln Gly Glu Ala Thr
180 185 190
Met Pro Pro Phe Thr Gly Lys Arg Lys Leu Ala Val Val Gly Ala Gly
195 200 205
Gly His Gly Lys Val Val Ala Asp Leu Ala Ala Ala Leu Gly Arg Tyr
210 215 220
Arg Glu Ile Val Phe Leu Asp Asp Arg Ala Gln Gly Ser Val Asn Gly
225 230 235 240
Phe Ser Val Ile Gly Thr Thr Leu Leu Leu Glu Asn Ser Leu Ser Pro
245 250 255
Glu Gln Tyr Asp Val Ala Val Ala Val Gly Asn Asn Arg Ile Arg Arg
260 265 270
Gln Ile Ala Glu Lys Ala Ala Ala Leu Gly Phe Ala Leu Pro Val Leu
275 280 285
Val His Pro Asp Ala Thr Val Ser Pro Ser Ala Thr Val Gly Gln Gly
290 295 300
Ser Val Val Met Ala Lys Ala Val Val Gln Ala Gly Ser Val Leu Lys
305 310 315 320
Asp Gly Val Ile Val Asn Thr Ala Ala Thr Val Asp His Asp Cys Leu
325 330 335
Leu Asn Ala Phe Val His Ile Ser Pro Gly Ala His Leu Ser Gly Asn
340 345 350
Thr His Ile Gly Glu Glu Ser Trp Ile Gly Thr Gly Ala Cys Ser Arg
355 360 365
Gln Gln Ile Arg Ile Gly Ser Arg Ala Thr Ile Gly Ala Gly Ala Val
370 375 380
Val Val Arg Asp Val Ser Asp Gly Met Thr Val Ala Gly Asn Pro Ala
385 390 395 400
Lys Pro Leu Pro Arg Lys Asn Pro Glu Thr Ser Thr Ala
405 410
<210> 15
<211> 1242
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 15
atgagtaaat tcttcaaacg cctgtttgac attgttgcct ccgcctcggg actgattttc 60
ctctcgccag tatttttgat tttgatatac ctcatccgca agaatctggg ttcgcccgtc 120
ttcttctttc aggaacgccc cggaaaggac ggaaaacctt ttaaaatggt caaattccgt 180
tccatgcacg acgcgcttga ttcagacggc attctgctgc ccgacggaga acgcctgaca 240
ccgttcggca aaaaactgcg tgccgccagt ttggacgaac tgcccgaact gtggaacgtc 300
ctcaaaggcg acatgagcct ggtcggcccc cgcccgctgc tgatgcaata tctgccgctg 360
tacgacaact tccaaaaccg ccgccacgaa atgaaaccgg gcattaccgg ctgggcgcag 420
gtcaacgggc gcaacgcgct ttcgtgggac gaacgcttcg catgcgacat ctggtatatc 480
gaccacttca gcctgtgcct cgacatcaaa atcctactgc tgacggttaa aaaagtatta 540
atcaaagaag ggatttccgc acagggcgaa gccaccatgc cccctttcac aggaaaacgc 600
aaacttgccg tcgtcggtgc gggcggacac ggcaaagtcg ttgccgagct tgccgccgca 660
ctcggcacat acggcgaaat cgtttttctg gacgaccgcg tccaaggcag cgtcaacggc 720
ttccccgtca tcggcacgac gctgctgctt gaaaacagtt tatcgcccga acaattcgac 780
atcgccgtcg ccgtcggcaa caaccgcatc cgccgccaaa tcgccgaaaa agccgccgcg 840
ctcggcttcg ccctgcccgt cctgattcat ccggactcga ccgtctcgcc ttctgcaaca 900
gtcggacaag gcggcgtcgt tatggcgaaa gccgtcgtac aggctgacag cgtattgaaa 960
gacggcgtaa ttgtgaacac tgccgccacc gtcgatcacg attgcctgct tgatgctttc 1020
gtccacatca gcccgggcgc gcacctgtcg ggcaacacgc gtatcggcga agaaagctgg 1080
ataggcacag gcgcgtgcag ccgccagcag atccgtatcg gcagccgcgc aaccattgga 1140
gcgggcgcag tcgtcgtgcg cgacgtttca gacggcatga ccgtcgcggg caacccggca 1200
aaaccattgg caggcaaaaa taccgagacc ctgcggtcgt aa 1242
<210> 16
<211> 413
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 16
Met Ser Lys Phe Phe Lys Arg Leu Phe Asp Ile Val Ala Ser Ala Ser
1 5 10 15
Gly Leu Ile Phe Leu Ser Pro Val Phe Leu Ile Leu Ile Tyr Leu Ile
20 25 30
Arg Lys Asn Leu Gly Ser Pro Val Phe Phe Phe Gln Glu Arg Pro Gly
35 40 45
Lys Asp Gly Lys Pro Phe Lys Met Val Lys Phe Arg Ser Met His Asp
50 55 60
Ala Leu Asp Ser Asp Gly Ile Leu Leu Pro Asp Gly Glu Arg Leu Thr
65 70 75 80
Pro Phe Gly Lys Lys Leu Arg Ala Ala Ser Leu Asp Glu Leu Pro Glu
85 90 95
Leu Trp Asn Val Leu Lys Gly Asp Met Ser Leu Val Gly Pro Arg Pro
100 105 110
Leu Leu Met Gln Tyr Leu Pro Leu Tyr Asp Asn Phe Gln Asn Arg Arg
115 120 125
His Glu Met Lys Pro Gly Ile Thr Gly Trp Ala Gln Val Asn Gly Arg
130 135 140
Asn Ala Leu Ser Trp Asp Glu Arg Phe Ala Cys Asp Ile Trp Tyr Ile
145 150 155 160
Asp His Phe Ser Leu Cys Leu Asp Ile Lys Ile Leu Leu Leu Thr Val
165 170 175
Lys Lys Val Leu Ile Lys Glu Gly Ile Ser Ala Gln Gly Glu Ala Thr
180 185 190
Met Pro Pro Phe Thr Gly Lys Arg Lys Leu Ala Val Val Gly Ala Gly
195 200 205
Gly His Gly Lys Val Val Ala Glu Leu Ala Ala Ala Leu Gly Thr Tyr
210 215 220
Gly Glu Ile Val Phe Leu Asp Asp Arg Val Gln Gly Ser Val Asn Gly
225 230 235 240
Phe Pro Val Ile Gly Thr Thr Leu Leu Leu Glu Asn Ser Leu Ser Pro
245 250 255
Glu Gln Phe Asp Ile Ala Val Ala Val Gly Asn Asn Arg Ile Arg Arg
260 265 270
Gln Ile Ala Glu Lys Ala Ala Ala Leu Gly Phe Ala Leu Pro Val Leu
275 280 285
Ile His Pro Asp Ser Thr Val Ser Pro Ser Ala Thr Val Gly Gln Gly
290 295 300
Gly Val Val Met Ala Lys Ala Val Val Gln Ala Asp Ser Val Leu Lys
305 310 315 320
Asp Gly Val Ile Val Asn Thr Ala Ala Thr Val Asp His Asp Cys Leu
325 330 335
Leu Asp Ala Phe Val His Ile Ser Pro Gly Ala His Leu Ser Gly Asn
340 345 350
Thr Arg Ile Gly Glu Glu Ser Trp Ile Gly Thr Gly Ala Cys Ser Arg
355 360 365
Gln Gln Ile Arg Ile Gly Ser Arg Ala Thr Ile Gly Ala Gly Ala Val
370 375 380
Val Val Arg Asp Val Ser Asp Gly Met Thr Val Ala Gly Asn Pro Ala
385 390 395 400
Lys Pro Leu Ala Gly Lys Asn Thr Glu Thr Leu Arg Ser
405 410
<210> 17
<211> 1242
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 17
atgagtaaag ccgtcaaacg cctgttcgac atcatcgcat ccgcatcggg gctgattgtc 60
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aaactcgccg ttatcggcgc gggcggacac ggcaaagtcg ttgccgagct tgccgccgca 660
ctcggcacat acggcgaaat cgtttttctg gacgaccgca cccaaggcag cgtcaacggc 720
ttccccgtca tcggcacgac gctgctgctt gaaaacagtt tatcgcccga acaattcgac 780
atcaccgtcg ccgtcggcaa caaccgcatc cgccgccaaa tcaccgaaaa cgccgccgcg 840
ctcggcttca aactgcccgt tctgattcat cccgacgcga ccgtctcgcc ttctgcaata 900
atcggacaag gcagcgtcgt aatggcgaaa gccgtcgtac aggccggcag cgtattgaaa 960
gacggcgtga ttgtgaacac tgccgccacc gtcgatcacg actgcctgct tgacgctttc 1020
gtccacatca gcccgggcgc gcacctgtcg ggcaacacgc gtatcggcga agaaagccgg 1080
ataggcacgg gcgcgtgcag ccgccagcag acaaccgtcg gcagcggggt taccgccggt 1140
gcaggggcgg ttatcgtatg cgacatcccg gacggcatga ccgtcgcggg caacccggca 1200
aagcccctta cgggcaaaaa ccccaagacc gggacggcat aa 1242
<210> 18
<211> 413
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 18
Met Ser Lys Ala Val Lys Arg Leu Phe Asp Ile Ile Ala Ser Ala Ser
1 5 10 15
Gly Leu Ile Val Leu Ser Pro Val Phe Leu Val Leu Ile Tyr Leu Ile
20 25 30
Arg Lys Asn Leu Gly Ser Pro Val Phe Phe Ile Arg Glu Arg Pro Gly
35 40 45
Lys Asp Gly Lys Pro Phe Lys Met Val Lys Phe Arg Ser Met Arg Asp
50 55 60
Ala Leu Asp Ser Asp Gly Ile Pro Leu Pro Asp Ser Glu Arg Leu Thr
65 70 75 80
Asp Phe Gly Lys Lys Leu Arg Ala Thr Ser Leu Asp Glu Leu Pro Glu
85 90 95
Leu Trp Asn Val Leu Lys Gly Glu Met Ser Leu Val Gly Pro Arg Pro
100 105 110
Leu Leu Met Gln Tyr Leu Pro Leu Tyr Asn Lys Phe Gln Asn Arg Arg
115 120 125
His Glu Met Lys Pro Gly Ile Thr Gly Trp Ala Gln Val Asn Gly Arg
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Asn Ala Leu Ser Trp Asp Glu Lys Phe Ser Cys Asp Val Trp Tyr Thr
145 150 155 160
Asp Asn Phe Ser Phe Trp Leu Asp Met Lys Ile Leu Phe Leu Thr Val
165 170 175
Lys Lys Val Leu Ile Lys Glu Gly Ile Ser Ala Gln Gly Glu Ala Thr
180 185 190
Met Pro Pro Phe Ala Gly Asn Arg Lys Leu Ala Val Ile Gly Ala Gly
195 200 205
Gly His Gly Lys Val Val Ala Glu Leu Ala Ala Ala Leu Gly Thr Tyr
210 215 220
Gly Glu Ile Val Phe Leu Asp Asp Arg Thr Gln Gly Ser Val Asn Gly
225 230 235 240
Phe Pro Val Ile Gly Thr Thr Leu Leu Leu Glu Asn Ser Leu Ser Pro
245 250 255
Glu Gln Phe Asp Ile Thr Val Ala Val Gly Asn Asn Arg Ile Arg Arg
260 265 270
Gln Ile Thr Glu Asn Ala Ala Ala Leu Gly Phe Lys Leu Pro Val Leu
275 280 285
Ile His Pro Asp Ala Thr Val Ser Pro Ser Ala Ile Ile Gly Gln Gly
290 295 300
Ser Val Val Met Ala Lys Ala Val Val Gln Ala Gly Ser Val Leu Lys
305 310 315 320
Asp Gly Val Ile Val Asn Thr Ala Ala Thr Val Asp His Asp Cys Leu
325 330 335
Leu Asp Ala Phe Val His Ile Ser Pro Gly Ala His Leu Ser Gly Asn
340 345 350
Thr Arg Ile Gly Glu Glu Ser Arg Ile Gly Thr Gly Ala Cys Ser Arg
355 360 365
Gln Gln Thr Thr Val Gly Ser Gly Val Thr Ala Gly Ala Gly Ala Val
370 375 380
Ile Val Cys Asp Ile Pro Asp Gly Met Thr Val Ala Gly Asn Pro Ala
385 390 395 400
Lys Pro Leu Thr Gly Lys Asn Pro Lys Thr Gly Thr Ala
405 410
<210> 19
<211> 408
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (235)..(235)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (373)..(385)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 19
aaccatatgg cgattgtcat cgacgaatac ggcggcacat ccggcttggt cacctttgaa 60
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cgtgaagtaa gcnnnnnnnn nnnnnaccgc cgtttctgca cagtttag 408
<210> 20
<211> 135
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (79)..(79)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (125)..(129)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 20
Asn His Met Ala Ile Val Ile Asp Glu Tyr Gly Gly Thr Ser Gly Leu
1 5 10 15
Val Thr Phe Glu Asp Ile Ile Glu Gln Ile Val Gly Glu Ile Glu Asp
20 25 30
Glu Phe Asp Glu Asp Asp Ser Ala Asp Asn Ile His Ala Val Ser Ser
35 40 45
Asp Thr Trp Arg Ile His Ala Ala Thr Glu Ile Glu Asp Ile Asn Thr
50 55 60
Phe Phe Gly Thr Glu Tyr Ser Ile Glu Glu Ala Asp Thr Ile Xaa Arg
65 70 75 80
Pro Gly His Ser Arg Val Gly Thr Ser Ala Arg Ala Arg Arg Lys Ser
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Pro Tyr Arg Arg Phe Ala Val His Arg Arg Thr Arg Arg Gln Pro Pro
100 105 110
Pro Ala Tyr Ala Asp Gly Asp Pro Arg Glu Val Ser Xaa Xaa Xaa Xaa
115 120 125
Xaa Arg Arg Phe Cys Thr Val
130 135
<210> 21
<211> 900
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 21
atggacggcg cacaaccgaa aacgaatttt tttgaacgcc tgattgcccg actcgcccgc 60
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gaatacagca gcgaagaagc cgacaccatt cggcctggtc attcaagagt tgggacatct 720
gcccgtgcgc ggcgaaaaag tccttatcgg cggtttgcag ttcaccgtcg cacgcgccga 780
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cagtttagga tgacggtacg ggcgttttct gtttcaatcc gccccatccg ccaaacataa 900
<210> 22
<211> 299
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 22
Met Asp Gly Ala Gln Pro Lys Thr Asn Phe Phe Glu Arg Leu Ile Ala
1 5 10 15
Arg Leu Ala Arg Glu Pro Asp Ser Ala Glu Asp Val Leu Asn Leu Leu
20 25 30
Arg Gln Ala His Glu Gln Glu Val Phe Asp Ala Asp Thr Leu Leu Arg
35 40 45
Leu Glu Lys Val Leu Asp Phe Ser Asp Leu Glu Val Arg Asp Ala Met
50 55 60
Ile Thr Arg Ser Arg Met Asn Val Leu Lys Glu Asn Asp Ser Ile Glu
65 70 75 80
Arg Ile Thr Ala Tyr Val Ile Asp Thr Ala His Ser Arg Phe Pro Val
85 90 95
Ile Gly Glu Asp Lys Asp Glu Val Leu Gly Ile Leu His Ala Lys Asp
100 105 110
Leu Leu Lys Tyr Met Phe Asn Pro Glu Gln Phe His Leu Lys Ser Ile
115 120 125
Leu Arg Pro Ala Val Phe Val Pro Glu Gly Lys Ser Leu Thr Ala Leu
130 135 140
Leu Lys Glu Phe Arg Glu Gln Arg Asn His Met Ala Ile Val Ile Asp
145 150 155 160
Glu Tyr Gly Gly Thr Ser Gly Leu Val Thr Phe Glu Asp Ile Ile Glu
165 170 175
Gln Ile Val Gly Glu Ile Glu Asp Glu Phe Asp Glu Asp Asp Ser Ala
180 185 190
Asp Asn Ile His Ala Val Ser Ser Glu Arg Trp Arg Ile His Ala Ala
195 200 205
Thr Glu Ile Glu Asp Ile Asn Thr Phe Phe Gly Thr Glu Tyr Ser Ser
210 215 220
Glu Glu Ala Asp Thr Ile Arg Pro Gly His Ser Arg Val Gly Thr Ser
225 230 235 240
Ala Arg Ala Arg Arg Lys Ser Pro Tyr Arg Arg Phe Ala Val His Arg
245 250 255
Arg Thr Arg Arg Gln Pro Pro Pro Ala Tyr Ala Asp Gly Asp Pro Arg
260 265 270
Glu Val Ser Thr Ala Val Ser Ala Gln Phe Arg Met Thr Val Arg Ala
275 280 285
Phe Ser Val Ser Ile Arg Pro Ile Arg Gln Thr
290 295
<210> 23
<211> 903
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (33)..(34)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (763)..(763)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (769)..(769)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (776)..(776)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (781)..(781)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (897)..(897)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 23
atggacggcg cacaaccgaa aacaaatttt ttnnaacgcc tgattgcccg actcgcccgc 60
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gacatcgaag atgagtttga cgaagacgaa agcgcggaca acatccacgc cgtttccgcc 600
gaacgctggc gcatccacgc ggctaccgaa atcgaagaca tcaacgcctt tttcggcacg 660
gaatacagca gcgaagaagc cgacaccatc ggcggccntg gtcattcagg aattggnaca 720
cctgcccgtg cgcggcgaaa aagtcnttat cggcgnnttg canttcacng tcgccngcgc 780
ngacaaccgc cgcctgcata cgctgatggc gacccgcgtg aagtaagctc cgccgtttct 840
gtacagttta ggatgacggt acgggcgttt tctgtttcaa tccgccccat ccgccanaca 900
taa 903
<210> 24
<211> 300
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (11)..(12)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (233)..(233)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (249)..(249)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (257)..(257)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (259)..(259)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (261)..(261)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (299)..(299)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 24
Met Asp Gly Ala Gln Pro Lys Thr Asn Phe Xaa Xaa Arg Leu Ile Ala
1 5 10 15
Arg Leu Ala Arg Glu Pro Asp Ser Ala Glu Asp Val Leu Thr Leu Leu
20 25 30
Arg Gln Ala His Glu Gln Glu Val Phe Asp Ala Asp Thr Leu Leu Arg
35 40 45
Leu Glu Lys Val Leu Asp Phe Ser Asp Leu Glu Val Arg Asp Ala Met
50 55 60
Ile Thr Arg Ser Arg Met Asn Val Leu Lys Glu Asn Asp Ser Ile Glu
65 70 75 80
Arg Ile Thr Ala Tyr Val Ile Asp Thr Ala His Ser Arg Phe Pro Val
85 90 95
Ile Gly Glu Asp Lys Asp Glu Val Leu Gly Ile Leu His Ala Lys Asp
100 105 110
Leu Leu Lys Tyr Met Phe Asn Pro Glu Gln Phe His Leu Lys Ser Ile
115 120 125
Leu Arg Pro Ala Val Phe Val Pro Glu Gly Lys Ser Leu Thr Ala Leu
130 135 140
Leu Lys Glu Phe Arg Glu Gln Arg Asn His Met Ala Ile Val Ile Asp
145 150 155 160
Glu Tyr Gly Gly Thr Ser Gly Leu Val Thr Phe Glu Asp Ile Ile Glu
165 170 175
Gln Ile Val Gly Asp Ile Glu Asp Glu Phe Asp Glu Asp Glu Ser Ala
180 185 190
Asp Asn Ile His Ala Val Ser Ala Glu Arg Trp Arg Ile His Ala Ala
195 200 205
Thr Glu Ile Glu Asp Ile Asn Ala Phe Phe Gly Thr Glu Tyr Ser Ser
210 215 220
Glu Glu Ala Asp Thr Ile Gly Gly Xaa Gly His Ser Gly Ile Gly Thr
225 230 235 240
Pro Ala Arg Ala Arg Arg Lys Ser Xaa Tyr Arg Arg Xaa Ala Xaa His
245 250 255
Xaa Arg Xaa Arg Xaa Gln Pro Pro Pro Ala Tyr Ala Asp Gly Asp Pro
260 265 270
Arg Glu Val Ser Ser Ala Val Ser Val Gln Phe Arg Met Thr Val Arg
275 280 285
Ala Phe Ser Val Ser Ile Arg Pro Ile Arg Xaa Thr
290 295 300
<210> 25
<211> 1
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 25
n 1
<210> 26
<211> 287
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 26
Met Asp Gly Ala Gln Pro Lys Thr Asn Phe Phe Glu Arg Leu Ile Ala
1 5 10 15
Arg Leu Ala Arg Glu Pro Asp Ser Ala Glu Asp Val Leu Asn Leu Leu
20 25 30
Arg Gln Ala His Glu Gln Glu Val Phe Asp Ala Asp Thr Leu Thr Arg
35 40 45
Leu Glu Lys Val Leu Asp Phe Ala Glu Leu Glu Val Arg Asp Ala Met
50 55 60
Ile Thr Arg Ser Arg Met Asn Val Leu Lys Glu Asn Asp Ser Ile Glu
65 70 75 80
Arg Ile Thr Ala Tyr Val Ile Asp Thr Ala His Ser Arg Phe Pro Val
85 90 95
Ile Gly Glu Asp Lys Asp Glu Val Leu Gly Ile Leu His Ala Lys Asp
100 105 110
Leu Leu Lys Tyr Met Phe Asn Pro Glu Gln Phe His Leu Lys Ser Val
115 120 125
Leu Arg Pro Ala Val Phe Val Pro Glu Gly Lys Ser Leu Thr Ala Leu
130 135 140
Leu Lys Glu Phe Arg Glu Gln Arg Asn His Met Ala Ile Val Ile Asp
145 150 155 160
Glu Tyr Gly Gly Thr Ser Gly Leu Val Thr Phe Glu Asp Ile Ile Glu
165 170 175
Gln Ile Val Gly Asp Ile Glu Asp Glu Phe Asp Glu Asp Glu Ser Ala
180 185 190
Asp Asp Ile His Ser Val Ser Ala Glu Arg Trp Arg Ile His Ala Ala
195 200 205
Thr Glu Ile Glu Asp Ile Asn Ala Phe Phe Gly Thr Glu Tyr Gly Ser
210 215 220
Glu Glu Ala Asp Thr Ile Arg Arg Leu Gly His Ser Gly Ile Gly Thr
225 230 235 240
Pro Ala Arg Ala Arg Arg Lys Ser Pro Tyr Arg Arg Phe Ala Val His
245 250 255
Arg Arg Pro Arg Arg Gln Pro Pro Pro Ala His Ala Asp Gly Asp Pro
260 265 270
Arg Glu Val Ser Arg Ala Cys Pro His Arg Arg Phe Cys Thr Val
275 280 285
<210> 27
<211> 915
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 27
atggacggcg cacaaccgaa aacaaatttt tttgaacgcc tgattgcccg actcgcccgc 60
gaacccgatt ccgccgaaga cgtattaaac ctgcttcggc aggcgcacga acaggaagtt 120
tttgatgccg acacactgac ccggctggaa aaagtattgg actttgccga gctggaagtg 180
cgcgatgcga tgattacgcg cagccgcatg aacgtattga aagaaaacga cagcatcgaa 240
cgcatcaccg cctacgtcat cgataccgcc cattcgcgct tccccgtcat cggcgaagac 300
aaagacgaag ttttgggcat tttgcacgcc aaagacctgc tcaaatatat gttcaacccc 360
gagcagttcc acctgaaatc cgtcttgcgc cctgccgttt tcgtgcccga aggcaaatct 420
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gaatacggcg gcacgtcggg tttggtcacc tttgaagaca tcatcgagca aatcgtcggt 540
gacatcgaag acgagtttga cgaagacgaa agcgccgacg acatccactc cgtttccgcc 600
gaacgctggc gcatccacgc ggctaccgaa atcgaagaca tcaacgcctt tttcggtacg 660
gaatacggca gcgaagaagc cgacaccatc cggcggcttg gtcattcagg aattgggaca 720
cctgcccgtg cgcggcgaaa aagtccttat cggcggtttg cagttcaccg tcgcccgcgc 780
cgacaaccgc cgcctgcaca cgctgatggc gacccgcgtg aagtaagcag agcctgcccg 840
accgccgttt ctgcacagtt taggatgacg gtacggtcgt tttctgtttc aatccgcccc 900
atccgccaaa cataa 915
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<211> 304
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 28
Met Asp Gly Ala Gln Pro Lys Thr Asn Phe Phe Glu Arg Leu Ile Ala
1 5 10 15
Arg Leu Ala Arg Glu Pro Asp Ser Ala Glu Asp Val Leu Asn Leu Leu
20 25 30
Arg Gln Ala His Glu Gln Glu Val Phe Asp Ala Asp Thr Leu Thr Arg
35 40 45
Leu Glu Lys Val Leu Asp Phe Ala Glu Leu Glu Val Arg Asp Ala Met
50 55 60
Ile Thr Arg Ser Arg Met Asn Val Leu Lys Glu Asn Asp Ser Ile Glu
65 70 75 80
Arg Ile Thr Ala Tyr Val Ile Asp Thr Ala His Ser Arg Phe Pro Val
85 90 95
Ile Gly Glu Asp Lys Asp Glu Val Leu Gly Ile Leu His Ala Lys Asp
100 105 110
Leu Leu Lys Tyr Met Phe Asn Pro Glu Gln Phe His Leu Lys Ser Val
115 120 125
Leu Arg Pro Ala Val Phe Val Pro Glu Gly Lys Ser Leu Thr Ala Leu
130 135 140
Leu Lys Glu Phe Arg Glu Gln Arg Asn His Met Ala Ile Val Ile Asp
145 150 155 160
Glu Tyr Gly Gly Thr Ser Gly Leu Val Thr Phe Glu Asp Ile Ile Glu
165 170 175
Gln Ile Val Gly Asp Ile Glu Asp Glu Phe Asp Glu Asp Glu Ser Ala
180 185 190
Asp Asp Ile His Ser Val Ser Ala Glu Arg Trp Arg Ile His Ala Ala
195 200 205
Thr Glu Ile Glu Asp Ile Asn Ala Phe Phe Gly Thr Glu Tyr Gly Ser
210 215 220
Glu Glu Ala Asp Thr Ile Arg Arg Leu Gly His Ser Gly Ile Gly Thr
225 230 235 240
Pro Ala Arg Ala Arg Arg Lys Ser Pro Tyr Arg Arg Phe Ala Val His
245 250 255
Arg Arg Pro Arg Arg Gln Pro Pro Pro Ala His Ala Asp Gly Asp Pro
260 265 270
Arg Glu Val Ser Arg Ala Cys Pro Thr Ala Val Ser Ala Gln Phe Arg
275 280 285
Met Thr Val Arg Ser Phe Ser Val Ser Ile Arg Pro Ile Arg Gln Thr
290 295 300
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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catatgagga aagtcatcga cgcaacgccc gacatcggac acgacaccaa aggctggagc 120
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (113)..(113)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (124)..(125)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (145)..(146)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 30
Met Arg Gly Gly Arg Pro Asp Ser Val Thr Val Gln Ile Ile Glu Gly
1 5 10 15
Ser Arg Phe Ser His Met Arg Lys Val Ile Asp Ala Thr Pro Asp Ile
20 25 30
Gly His Asp Thr Lys Gly Trp Ser Asn Glu Lys Leu Met Ala Glu Val
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Ala Pro Asp Ala Phe Ser Gly Asn Pro Glu Gly Gln Phe Phe Pro Asp
50 55 60
Ser Tyr Glu Ile Asp Ala Gly Gly Ser Asp Leu Gln Ile Tyr Gln Thr
65 70 75 80
Ala Tyr Lys Ala Met Gln Arg Arg Leu Asn Glu Ala Trp Glu Ser Arg
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Gln Asp Gly Leu Pro Tyr Lys Asn Pro Tyr Glu Met Leu Ile Met Ala
100 105 110
Xaa Leu Val Glu Lys Glu Thr Gly His Glu Ala Xaa Xaa Asp His Val
115 120 125
Ala Ser Val Phe Val Asn Arg Leu Lys Ile Gly Met Arg Leu Gln Thr
130 135 140
Xaa Xaa Ser Val Ile Tyr Gly Met Gly Ala Ala Tyr Lys Gly Lys Ile
145 150 155 160
Arg Lys Ala Asp Leu Arg Arg Asp Thr Pro Tyr Asn Thr Tyr Thr Arg
165 170 175
Gly Gly Leu Pro Pro Thr Pro Ile Ala Leu Pro
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 32
Met Leu Arg Lys Leu Leu Lys Trp Ser Ala Val Phe Leu Thr Val Ser
1 5 10 15
Ala Ala Val Phe Ala Ala Leu Leu Phe Val Pro Lys Asp Asn Gly Arg
20 25 30
Ala Tyr Arg Ile Lys Ile Ala Lys Asn Gln Gly Ile Ser Ser Val Gly
35 40 45
Arg Lys Leu Ala Glu Asp Arg Ile Val Phe Ser Arg His Val Leu Thr
50 55 60
Ala Ala Ala Tyr Val Leu Gly Val His Asn Arg Leu His Thr Gly Thr
65 70 75 80
Tyr Arg Leu Pro Ser Glu Val Ser Ala Trp Asp Ile Leu Gln Lys Met
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100 105 110
Arg Phe Ser His Met Arg Lys Val Ile Asp Ala Thr Pro Asp Ile Gly
115 120 125
His Asp Thr Lys Gly Trp Ser Asn Glu Lys Leu Met Ala Glu Val Ala
130 135 140
Pro Asp Ala Phe Ser Gly Asn Pro Glu Gly Gln Phe Phe Pro Asp Ser
145 150 155 160
Tyr Glu Ile Asp Ala Gly Gly Ser Asp Leu Gln Ile Tyr Gln Thr Ala
165 170 175
Tyr Lys Ala Met Gln Arg Arg Leu Asn Glu Ala Trp Glu Ser Arg Gln
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Leu Val Glu Lys Glu Thr Gly His Glu Ala Asp Arg Asp His Val Ala
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Ser Val Phe Val Asn Arg Leu Lys Ile Gly Met Arg Leu Gln Thr Asp
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Pro Ser Val Ile Tyr Gly Met Gly Ala Ala Tyr Lys Gly Lys Ile Arg
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<213> Neisseria meningitidis
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atgttgagaa aattgttgaa atggtctgcc gtttttttga ccgtatcggc agccgttttc 60
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 34
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Ala Ala Val Phe Ala Ala Leu Leu Phe Val Pro Lys Asp Asn Gly Arg
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Ala Tyr Arg Ile Lys Ile Ala Lys Asn Gln Gly Ile Ser Ser Val Gly
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Lys Ala Asp Leu Arg Arg Asp Thr Pro Tyr Asn Thr Tyr Thr Arg Gly
260 265 270
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
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<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
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n 1
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<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 36
Met Arg Gly Gly Arg Pro Asp Ser Val Thr Val Gln Ile Ile Glu Gly
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Ser Arg Phe Ser His Met Arg Lys Val Ile Asp Ala Thr Pro Asp Ile
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Gly His Asp Thr Lys Gly Trp Ser Asn Glu Lys Leu Met Ala Glu Val
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Ala Tyr Lys Ala Met Gln Arg Arg Leu Asn Glu Ala Trp Ala Gly Arg
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Asp Pro Ser Val Ile Tyr Gly Met Gly Ala Ala Tyr Lys Gly Lys Ile
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His Asn Ala Ala Val Arg Lys Tyr Ile Leu Lys Lys
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
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<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 38
Tyr Arg Ile Lys Ile Ala Lys Asn Gln Gly Ile Ser Ser Val Gly Arg
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Lys Leu Ala Glu Asp Arg Ile Val Phe Ser Arg His Val Leu Thr Ala
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Ala Ala Tyr Val Leu Gly Val His Asn Arg Leu His Thr Gly Thr Tyr
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Arg Leu Pro Ser Glu Val Ser Ala Trp Asp Ile Leu Gln Lys Met Arg
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Gly Leu Pro Tyr Lys Asn Pro Tyr Glu Met Leu Ile Met Ala Ser Leu
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Ile Glu Lys Glu Thr Gly His Glu Ala Asp Arg Asp His Val Ala Ser
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Val Phe Val Asn Arg Leu Lys Ile Gly Met Arg Leu Gln Thr Asp Pro
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Ser Val Ile Tyr Gly Met Gly Ala Ala Tyr Lys Gly Lys Ile Arg Lys
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Ala Asp Leu Arg Arg Asp Thr Pro Tyr Asn Thr Tyr Thr Gly Gly Gly
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Leu Pro Pro Thr Arg Ile Ala Leu Pro Gly Lys Ala Ala Met Asp Ala
245 250 255
Ala Ala His Pro Ser Gly Glu Lys Tyr Leu Tyr Phe Val Ser Lys Met
260 265 270
Asp Gly Thr Gly Leu Ser Gln Phe Ser His Asp Leu Thr Glu His Asn
275 280 285
Ala Ala Val Arg Lys Tyr Ile Leu Lys Lys
290 295
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<211> 498
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 39
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<211> 166
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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Arg Phe Lys Met Leu Thr Val Leu Thr Ala Thr Leu Ile Ala Gly Gln
1 5 10 15
Val Ser Ala Ala Gly Gly Gly Ala Gly Asp Met Lys Gln Pro Lys Glu
20 25 30
Val Gly Lys Val Phe Arg Lys Gln Gln Arg Tyr Ser Glu Glu Glu Ile
35 40 45
Lys Asn Glu Arg Ala Arg Leu Ala Ala Val Gly Glu Arg Val Asn Gln
50 55 60
Ile Phe Thr Leu Leu Gly Gly Glu Thr Ala Leu Gln Lys Gly Gln Ala
65 70 75 80
Gly Thr Ala Leu Ala Thr Tyr Met Leu Met Leu Glu Arg Thr Lys Ser
85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
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130 135 140
Arg Glu Arg Gly Asn Gln His Leu Asp Gly Arg Glu Glu Val Leu Ala
145 150 155 160
Gln Ala Asp Glu Gly Gln
165
<210> 41
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 41
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cagtgggcga gcgggttaat cagatattta cgttgctggg aggggaaacc gccttgcaaa 240
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cggggtggct gcggaacgtg ctgagggaaa gaggaaatca gcatctggac ggactggaag 480
aagtgctggc tcaggcggac gaaggacaga accgcagggt gtttttattg ttggcacaag 540
ccgccgtgca acaggacggg ttggcgcaaa aagcatcgaa agcggttcgc cgcgcggcgt 600
tgaaatatga acatctgccc gaagcggcgg ttgccgatgt ggtgttcagc gtacagggac 660
gcgaaaagga aaaggcaatc ggagctttgc agcgtttggc gaagctcgat acggaaatat 720
tgccccccac tttaatgacg ttgcgtctga ctgcacgcaa atatcccgaa atactcgacg 780
gctttttcga gcagacagac acccaaaacc tttcggccgt ctggcaggaa atggaaatta 840
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aacgcaatcc gaatgcagac ctgtatattc aggcagcgat attggcggca aaccgaaaag 960
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<210> 42
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<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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caggcggcac accttagggg agacaagaaa atatggcggg agacgctcaa acgctacgga 1800
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<220>
<221> misc_feature
<222> (198)..(199)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (207)..(207)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 50
Asn Leu Tyr Ala Gly Pro Gln Thr Thr Ser Val Ile Ala Asn Ile Ala
1 5 10 15
Asp Asn Leu Gln Leu Ala Lys Asp Tyr Gly Lys Val His Trp Phe Ala
20 25 30
Ser Pro Leu Phe Trp Leu Leu Asn Gln Leu His Asn Ile Ile Gly Asn
35 40 45
Trp Gly Trp Ala Ile Ile Val Leu Thr Ile Ile Val Lys Ala Val Leu
50 55 60
Tyr Pro Leu Thr Asn Ala Ser Tyr Arg Ser Met Ala Lys Met Arg Ala
65 70 75 80
Ala Ala Pro Lys Leu Gln Ala Ile Lys Glu Lys Tyr Gly Asp Asp Arg
85 90 95
Met Ala Gln Gln Gln Ala Met Met Gln Leu Tyr Thr Asp Glu Lys Ile
100 105 110
Asn Pro Leu Gly Gly Cys Leu Pro Met Leu Leu Gln Ile Pro Val Phe
115 120 125
Ile Gly Leu Tyr Trp Ala Leu Phe Ala Ser Val Glu Leu Arg Gln Ala
130 135 140
Pro Trp Leu Gly Trp Ile Thr Asp Leu Ser Arg Ala Asp Pro Tyr Tyr
145 150 155 160
Ile Leu Pro Ile Ile Met Ala Ala Thr Met Phe Ala Gln Thr Tyr Leu
165 170 175
Asn Pro Pro Pro Thr Asp Pro Met Gln Ala Lys Met Met Lys Ile Met
180 185 190
Pro Leu Val Phe Ser Xaa Xaa Phe Phe Phe Phe Pro Ala Gly Xaa Val
195 200 205
Leu Tyr Trp Val Val Asn Asn Leu Leu Thr Ile Ala Gln Gln Trp His
210 215 220
Ile Asn Arg Ser Ile Glu Lys Gln Arg Ala Gln Gly Glu Val Val Ser
225 230 235 240
<210> 51
<211> 1638
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 51
atggatttta aaagactcac ggcgtttttc gccatcgcgc tggtgattat gatcggctgg 60
gaaaagatgt tccccactcc gaagccagtc cccgcgcccc aacaggcagc acaacaacag 120
gccgtaaccg cttccgccga agccgcgctc gcgcccgcaa cgccgattac cgtaacgacc 180
gacacggttc aagccgtcat tgatgaaaaa agcggcgacc tgcgccggct gaccctgctc 240
aaatacaaag caaccggcga cgaaaataaa ccgttcatcc tgtttggcga cggcaaagaa 300
tacacctacg tcgcccaatc cgaacttttg gacgcgcagg gcaacaacat tctaaaaggc 360
atcggcttta gcgcaccgaa aaaacagtac agcttggaag gcgacaaagt tgaagtccgc 420
ctgagcgcgc ctgaaacacg cggtctgaaa atcgacaaag tttatacttt caccaaaggc 480
agctatctgg tcaacgtccg cttcgacatc gccaacggca gcggtcaaac cgccaacctg 540
agcgcggact accgcatcgt ccgcgaccac agcgaacccg agggtcaagg ttactttacc 600
cactcttacg tcggccctgt tgtttatacc cctgaaggca acttccaaaa agtcagcttt 660
tccgacttgg acgacgatgc caaatccggc aaatccgagg ccgaatacat ccgcaaaacc 720
ccgaccggct ggctcggcat gattgaacac cacttcatgt ccacctggat tctccaacct 780
aaaggcagac aaagcgtttg cgccgcaggc gagtgcaaca tcgacatcaa acgccgcaac 840
gacaagctgt acagcaccag cgtcagcgtg cctttagccg ccatccaaaa cggcgcgaaa 900
gccgaagcct ccatcaacct ctacgccggc ccgcagacca catccgtcat cgcaaacatc 960
gccgacaacc tgcaactggc caaagactac ggcaaagtac actggttcgc ctccccgctc 1020
ttctggctcc tgaaccaact gcacaacatc atcggcaact ggggctgggc gattatcgtt 1080
ttaaccatca tcgtcaaagc cgtactgtat ccattgacca acgcctctta ccgctctatg 1140
gcgaaaatgc gtgccgccgc acccaaactg caagccatca aagagaaata cggcgacgac 1200
cgtatggcgc aacaacaggc gatgatgcag ctttacacag acgagaaaat caacccgctg 1260
ggcggctgcc tgcctatgct gttgcaaatc cccgtcttca tcggattgta ttgggcattg 1320
ttcgcctccg tagaattgcg ccaggcacct tggctgggtt ggattaccga cctcagccgc 1380
gccgacccct actacatcct gcccatcatt atggcggcaa cgatgttcgc ccaaacttat 1440
ctgaacccgc cgccgaccga cccgatgcag gcgaaaatga tgaaaatcat gccgttggtt 1500
ttctccgtca tgttcttctt cttccctgcc ggtctggtat tgtactgggt agtcaacaac 1560
ctcctgacca tcgcccagca atggcacatc aaccgcagca tcgaaaaaca acgcgcccaa 1620
ggcgaagtcg tttcctaa 1638
<210> 52
<211> 545
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 52
Met Asp Phe Lys Arg Leu Thr Ala Phe Phe Ala Ile Ala Leu Val Ile
1 5 10 15
Met Ile Gly Trp Glu Lys Met Phe Pro Thr Pro Lys Pro Val Pro Ala
20 25 30
Pro Gln Gln Ala Ala Gln Gln Gln Ala Val Thr Ala Ser Ala Glu Ala
35 40 45
Ala Leu Ala Pro Ala Thr Pro Ile Thr Val Thr Thr Asp Thr Val Gln
50 55 60
Ala Val Ile Asp Glu Lys Ser Gly Asp Leu Arg Arg Leu Thr Leu Leu
65 70 75 80
Lys Tyr Lys Ala Thr Gly Asp Glu Asn Lys Pro Phe Ile Leu Phe Gly
85 90 95
Asp Gly Lys Glu Tyr Thr Tyr Val Ala Gln Ser Glu Leu Leu Asp Ala
100 105 110
Gln Gly Asn Asn Ile Leu Lys Gly Ile Gly Phe Ser Ala Pro Lys Lys
115 120 125
Gln Tyr Ser Leu Glu Gly Asp Lys Val Glu Val Arg Leu Ser Ala Pro
130 135 140
Glu Thr Arg Gly Leu Lys Ile Asp Lys Val Tyr Thr Phe Thr Lys Gly
145 150 155 160
Ser Tyr Leu Val Asn Val Arg Phe Asp Ile Ala Asn Gly Ser Gly Gln
165 170 175
Thr Ala Asn Leu Ser Ala Asp Tyr Arg Ile Val Arg Asp His Ser Glu
180 185 190
Pro Glu Gly Gln Gly Tyr Phe Thr His Ser Tyr Val Gly Pro Val Val
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Tyr Thr Pro Glu Gly Asn Phe Gln Lys Val Ser Phe Ser Asp Leu Asp
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Asp Asp Ala Lys Ser Gly Lys Ser Glu Ala Glu Tyr Ile Arg Lys Thr
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Pro Thr Gly Trp Leu Gly Met Ile Glu His His Phe Met Ser Thr Trp
245 250 255
Ile Leu Gln Pro Lys Gly Arg Gln Ser Val Cys Ala Ala Gly Glu Cys
260 265 270
Asn Ile Asp Ile Lys Arg Arg Asn Asp Lys Leu Tyr Ser Thr Ser Val
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Ile Asn Leu Tyr Ala Gly Pro Gln Thr Thr Ser Val Ile Ala Asn Ile
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Ala Asp Asn Leu Gln Leu Ala Lys Asp Tyr Gly Lys Val His Trp Phe
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Ala Ser Pro Leu Phe Trp Leu Leu Asn Gln Leu His Asn Ile Ile Gly
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Leu Tyr Pro Leu Thr Asn Ala Ser Tyr Arg Ser Met Ala Lys Met Arg
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Ala Ala Ala Pro Lys Leu Gln Ala Ile Lys Glu Lys Tyr Gly Asp Asp
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Tyr Ile Leu Pro Ile Ile Met Ala Ala Thr Met Phe Ala Gln Thr Tyr
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Leu Asn Pro Pro Pro Thr Asp Pro Met Gln Ala Lys Met Met Lys Ile
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Met Pro Leu Val Phe Ser Val Met Phe Phe Phe Phe Pro Ala Gly Leu
500 505 510
Val Leu Tyr Trp Val Val Asn Asn Leu Leu Thr Ile Ala Gln Gln Trp
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His Ile Asn Arg Ser Ile Glu Lys Gln Arg Ala Gln Gly Glu Val Val
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Ser
545
<210> 53
<211> 1638
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (2)..(2)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (1511)..(1511)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (1519)..(1520)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 53
anggatttta aaagactcac ngngtttttc gccatcgcac tggtgattat gatcggatng 60
naaangatgt tccccactcc gaagcccgtc cccgcgcccc aacagacggc acaacaacag 120
gccgtaancg cttccgccga agccgcgctc gcgcccgnan cgccgattac cgtaacgacc 180
gacacggttc aagccgtcat tgatgaaaaa agcggcgacc tgcgccggct gaccctgctc 240
aaatacaaag caaccggcga cnaaaataaa ccgttcatcc tgtttggcga cggcaaanaa 300
tacacctacn tcgcccantc cgaacttttg gacgcgcagg gcaacaacat tctaaaaggc 360
atcggcttta gcgcaccgaa aaaacagtac agcttggaag gcgacaaagt tgaagtccgc 420
ctgagcgcac ctgaaacacg cggtctgaaa atcgacaaag tttatacttt caccaaaggc 480
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agcgcggact accgcatcgt ccgcgaccac agcgaacccg agggtcaagg ctactttacc 600
cactcttacg tcggccctgt tgtttatacc cctgaaggca acttccaaaa agtcagcttc 660
tccgacttgg acgacgatgc caantccggn aaatccgagg ccgaatacat ccgcaaaacc 720
cngaccggct ggctcggcat gattgaacac cacttcatgt ccacctggat cctccaaccc 780
aaaggcggac aaagcgtttg cgccgctggc gactgcngta tngacatcaa acgccgcaac 840
gacaagctgt acagcaccag cgtcagcgtg cctttagccg ctatccaaaa cggtgcgaaa 900
tccnaagcct ccatcaacct ctacgccggc ccacagacca catcngttat cgcaaacatc 960
gccgacaacc tgcaactggn caaagactac ggcaaagtac actggttcgc ctcccccctc 1020
ttttggcttt tgaaccaact gcacaacatc atcggcaact ggggctgggc gattatcgtt 1080
ttaaccatca tcgtcaaagc cgtactgtat ccattgacca acgcctctta ccgttcgatg 1140
gcgaaaatgc gtgccgccgc gcccaaactg caagccatca aagagaaata cggcgacgac 1200
cgtatggcgc agcaacaagc catgatgcag ctttacacag acgagaaaat caacccgctg 1260
ggcggctgcc tgcctatgct gttgcaaatc cccgtcttca tcggattgta ttgggcattg 1320
ttcgcctccg tagaattgcg ccaggcacct tggctgggtt ggattaccga cctcagccgc 1380
gccgacccnt actacatcct gcccatcatt atggcggcaa cgatgttcgc ccaaacctat 1440
ctgaacccgc cgccgaccga cccgatgcag gcgaaaatga tgaaaatcat gcctttggtt 1500
ntntcnnnna ngttcttcnn cttccctgcc ggtctggtat tgtactgggt gatcaacaac 1560
ctcctgacca tcgcccagca atggcacatc aaccgcagca tcgaaaaaca acgcgcccaa 1620
ggcgaagtcg tttcctaa 1638
<210> 54
<211> 545
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (8)..(8)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(22)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (327)..(327)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (501)..(501)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (503)..(504)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (507)..(507)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 54
Xaa Asp Phe Lys Arg Leu Thr Xaa Phe Phe Ala Ile Ala Leu Val Ile
1 5 10 15
Met Ile Gly Xaa Xaa Xaa Met Phe Pro Thr Pro Lys Pro Val Pro Ala
20 25 30
Pro Gln Gln Thr Ala Gln Gln Gln Ala Val Xaa Ala Ser Ala Glu Ala
35 40 45
Ala Leu Ala Pro Xaa Xaa Pro Ile Thr Val Thr Thr Asp Thr Val Gln
50 55 60
Ala Val Ile Asp Glu Lys Ser Gly Asp Leu Arg Arg Leu Thr Leu Leu
65 70 75 80
Lys Tyr Lys Ala Thr Gly Asp Xaa Asn Lys Pro Phe Ile Leu Phe Gly
85 90 95
Asp Gly Lys Xaa Tyr Thr Tyr Xaa Ala Xaa Ser Glu Leu Leu Asp Ala
100 105 110
Gln Gly Asn Asn Ile Leu Lys Gly Ile Gly Phe Ser Ala Pro Lys Lys
115 120 125
Gln Tyr Ser Leu Glu Gly Asp Lys Val Glu Val Arg Leu Ser Ala Pro
130 135 140
Glu Thr Arg Gly Leu Lys Ile Asp Lys Val Tyr Thr Phe Thr Lys Gly
145 150 155 160
Ser Tyr Leu Val Asn Val Arg Phe Asp Ile Ala Asn Gly Ser Gly Gln
165 170 175
Thr Ala Asn Leu Ser Ala Asp Tyr Arg Ile Val Arg Asp His Ser Glu
180 185 190
Pro Glu Gly Gln Gly Tyr Phe Thr His Ser Tyr Val Gly Pro Val Val
195 200 205
Tyr Thr Pro Glu Gly Asn Phe Gln Lys Val Ser Phe Ser Asp Leu Asp
210 215 220
Asp Asp Ala Xaa Ser Gly Lys Ser Glu Ala Glu Tyr Ile Arg Lys Thr
225 230 235 240
Xaa Thr Gly Trp Leu Gly Met Ile Glu His His Phe Met Ser Thr Trp
245 250 255
Ile Leu Gln Pro Lys Gly Gly Gln Ser Val Cys Ala Ala Gly Asp Cys
260 265 270
Xaa Xaa Asp Ile Lys Arg Arg Asn Asp Lys Leu Tyr Ser Thr Ser Val
275 280 285
Ser Val Pro Leu Ala Ala Ile Gln Asn Gly Ala Lys Ser Xaa Ala Ser
290 295 300
Ile Asn Leu Tyr Ala Gly Pro Gln Thr Thr Ser Val Ile Ala Asn Ile
305 310 315 320
Ala Asp Asn Leu Gln Leu Xaa Lys Asp Tyr Gly Lys Val His Trp Phe
325 330 335
Ala Ser Pro Leu Phe Trp Leu Leu Asn Gln Leu His Asn Ile Ile Gly
340 345 350
Asn Trp Gly Trp Ala Ile Ile Val Leu Thr Ile Ile Val Lys Ala Val
355 360 365
Leu Tyr Pro Leu Thr Asn Ala Ser Tyr Arg Ser Met Ala Lys Met Arg
370 375 380
Ala Ala Ala Pro Lys Leu Gln Ala Ile Lys Glu Lys Tyr Gly Asp Asp
385 390 395 400
Arg Met Ala Gln Gln Gln Ala Met Met Gln Leu Tyr Thr Asp Glu Lys
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Ile Asn Pro Leu Gly Gly Cys Leu Pro Met Leu Leu Gln Ile Pro Val
420 425 430
Phe Ile Gly Leu Tyr Trp Ala Leu Phe Ala Ser Val Glu Leu Arg Gln
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Ala Pro Trp Leu Gly Trp Ile Thr Asp Leu Ser Arg Ala Asp Pro Tyr
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Tyr Ile Leu Pro Ile Ile Met Ala Ala Thr Met Phe Ala Gln Thr Tyr
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Leu Asn Pro Pro Pro Thr Asp Pro Met Gln Ala Lys Met Met Lys Ile
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Val Leu Tyr Trp Val Ile Asn Asn Leu Leu Thr Ile Ala Gln Gln Trp
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His Ile Asn Arg Ser Ile Glu Lys Gln Arg Ala Gln Gly Glu Val Val
530 535 540
Ser
545
<210> 55
<211> 1
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 55
n 1
<210> 56
<211> 243
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 56
Met Ala Val Asn Leu Tyr Ala Gly Pro Gln Thr Thr Ser Val Ile Ala
1 5 10 15
Asn Ile Ala Asp Asn Leu Gln Leu Ala Lys Asp Tyr Gly Lys Val His
20 25 30
Trp Phe Ala Ser Pro Leu Phe Trp Leu Leu Asn Gln Leu His Asn Ile
35 40 45
Ile Gly Asn Trp Gly Trp Ala Ile Val Val Leu Thr Ile Ile Val Lys
50 55 60
Ala Val Leu Tyr Pro Leu Thr Asn Ala Ser Tyr Arg Ser Met Ala Lys
65 70 75 80
Met Arg Ala Ala Ala Pro Glu Leu Gln Thr Ile Lys Glu Lys Tyr Gly
85 90 95
Asp Asp Arg Met Ala Gln Gln Gln Ala Met Met Gln Leu Phe Glu Asp
100 105 110
Glu Glu Ile Asn Pro Leu Gly Gly Cys Leu Pro Met Leu Leu Gln Ile
115 120 125
Pro Val Phe Ile Gly Leu Tyr Trp Ala Leu Phe Ala Ser Val Glu Leu
130 135 140
Arg Gln Ala Pro Trp Leu Gly Trp Ile Thr Asp Leu Ser Arg Ala Asp
145 150 155 160
Pro Tyr Tyr Ile Leu Pro Ile Ile Met Ala Ala Thr Met Phe Ala Gln
165 170 175
Thr Tyr Leu Asn Pro Pro Pro Thr Asp Pro Met Gln Ala Lys Met Met
180 185 190
Lys Ile Met Pro Leu Val Phe Ser Val Met Phe Phe Phe Phe Pro Ala
195 200 205
Gly Leu Val Leu Tyr Trp Val Val Asn Asn Leu Leu Thr Ile Ala Gln
210 215 220
Gln Trp His Ile Asn Arg Ser Ile Glu Lys Gln Arg Ala Gln Gly Glu
225 230 235 240
Val Val Ser
<210> 57
<211> 1641
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 57
atggatttta aaagactcac ggcgtttttc gccatcgcgc tggtgattat gatcggctgg 60
gaaaaaatgt tccccacccc gaaacccgtc cccgcgcccc aacaggcggc acaaaaacag 120
gcagcaaccg cttccgccga agccgcgctc gcgcccgcaa cgccgattac cgtaacgacc 180
gacacggttc aagccgttat tgatgaaaaa agtggcgacc tgcgccggct gaccctgctc 240
aaatacaaag caaccggcga cgaaaacaaa ccgttcgtcc tgtttggcga cggcaaagaa 300
tacacctacg tcgcccaatc cgaacttttg gacgcgcagg gcaacaacat tctgaaaggc 360
atcggcttta gcgcaccgaa aaaacagtac accctcaacg gcgacacagt cgaagtccgc 420
ctgagcgcgc ccgaaaccaa cggactgaaa atcgacaaag tctatacctt taccaaagac 480
agctatctgg tcaacgtccg cttcgacatc gccaacggca gcggtcaaac cgccaacctg 540
agcgcggact accgcatcgt ccgcgaccac agcgaacccg agggtcaagg ctactttacc 600
cactcttacg tcggccctgt tgtttatacc cctgaaggca acttccaaaa agtcagcttc 660
tccgacttgg acgacgatgc gaaatccggc aaatccgagg ccgaatacat ccgcaaaacc 720
ccgaccggtt ggctcggcat gattgaacac cacttcatgt ccacctggat cctccaacct 780
aaaggcggcc aaaacgtttg cgcccaggga gactgccgta tcgacattaa acgccgcaac 840
gacaagctgt acagcgcaag cgtcagcgtg cctttaaccg ctatcccaac ccgggggcca 900
aaaccgaaaa tggcggtcaa cctgtatgcc ggtccgcaaa ccacatccgt tatcgcaaac 960
atcgccgaca acctgcaact ggcaaaagac tacggtaaag tacactggtt cgcatcgccg 1020
ctcttctggc tcctgaacca actgcacaac attatcggca actggggctg ggcaatcgtc 1080
gttttgacca tcatcgtcaa agccgtactg tatccattga ccaacgcctc ctaccgttcg 1140
atggcgaaaa tgcgtgccgc cgcacccaaa ctgcagacca tcaaagaaaa atacggcgac 1200
gaccgtatgg cgcaacagca agcgatgatg cagctttaca aagacgagaa aatcaacccg 1260
ctgggcggct gtctgcctat gctgttgcaa atccccgtct tcatcggctt gtactgggca 1320
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gttttctccg tcatgttctt cttcttccct gccggtttgg ttctctactg ggtggtcaac 1560
aacctcctga ccatcgccca gcagtggcac atcaaccgca gcatcgaaaa acaacgcgcc 1620
caaggcgaag tcgtttccta a 1641
<210> 58
<211> 546
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 58
Met Asp Phe Lys Arg Leu Thr Ala Phe Phe Ala Ile Ala Leu Val Ile
1 5 10 15
Met Ile Gly Trp Glu Lys Met Phe Pro Thr Pro Lys Pro Val Pro Ala
20 25 30
Pro Gln Gln Ala Ala Gln Lys Gln Ala Ala Thr Ala Ser Ala Glu Ala
35 40 45
Ala Leu Ala Pro Ala Thr Pro Ile Thr Val Thr Thr Asp Thr Val Gln
50 55 60
Ala Val Ile Asp Glu Lys Ser Gly Asp Leu Arg Arg Leu Thr Leu Leu
65 70 75 80
Lys Tyr Lys Ala Thr Gly Asp Glu Asn Lys Pro Phe Val Leu Phe Gly
85 90 95
Asp Gly Lys Glu Tyr Thr Tyr Val Ala Gln Ser Glu Leu Leu Asp Ala
100 105 110
Gln Gly Asn Asn Ile Leu Lys Gly Ile Gly Phe Ser Ala Pro Lys Lys
115 120 125
Gln Tyr Thr Leu Asn Gly Asp Thr Val Glu Val Arg Leu Ser Ala Pro
130 135 140
Glu Thr Asn Gly Leu Lys Ile Asp Lys Val Tyr Thr Phe Thr Lys Asp
145 150 155 160
Ser Tyr Leu Val Asn Val Arg Phe Asp Ile Ala Asn Gly Ser Gly Gln
165 170 175
Thr Ala Asn Leu Ser Ala Asp Tyr Arg Ile Val Arg Asp His Ser Glu
180 185 190
Pro Glu Gly Gln Gly Tyr Phe Thr His Ser Tyr Val Gly Pro Val Val
195 200 205
Tyr Thr Pro Glu Gly Asn Phe Gln Lys Val Ser Phe Ser Asp Leu Asp
210 215 220
Asp Asp Ala Lys Ser Gly Lys Ser Glu Ala Glu Tyr Ile Arg Lys Thr
225 230 235 240
Pro Thr Gly Trp Leu Gly Met Ile Glu His His Phe Met Ser Thr Trp
245 250 255
Ile Leu Gln Pro Lys Gly Gly Gln Asn Val Cys Ala Gln Gly Asp Cys
260 265 270
Arg Ile Asp Ile Lys Arg Arg Asn Asp Lys Leu Tyr Ser Ala Ser Val
275 280 285
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290 295 300
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305 310 315 320
Ile Ala Asp Asn Leu Gln Leu Ala Lys Asp Tyr Gly Lys Val His Trp
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Phe Ala Ser Pro Leu Phe Trp Leu Leu Asn Gln Leu His Asn Ile Ile
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Gly Asn Trp Gly Trp Ala Ile Val Val Leu Thr Ile Ile Val Lys Ala
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Val Leu Tyr Pro Leu Thr Asn Ala Ser Tyr Arg Ser Met Ala Lys Met
370 375 380
Arg Ala Ala Ala Pro Lys Leu Gln Thr Ile Lys Glu Lys Tyr Gly Asp
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Asp Arg Met Ala Gln Gln Gln Ala Met Met Gln Leu Tyr Lys Asp Glu
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Lys Ile Asn Pro Leu Gly Gly Cys Leu Pro Met Leu Leu Gln Ile Pro
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Val Phe Ile Gly Leu Tyr Trp Ala Leu Phe Ala Ser Val Glu Leu Arg
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Gln Ala Pro Trp Leu Gly Trp Ile Thr Asp Leu Ser Arg Ala Asp Pro
450 455 460
Tyr Tyr Ile Leu Pro Ile Ile Met Ala Ala Thr Met Phe Ala Gln Thr
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Tyr Leu Asn Pro Pro Pro Thr Asp Pro Met Gln Ala Lys Met Met Lys
485 490 495
Ile Met Pro Leu Val Phe Ser Val Met Phe Phe Phe Phe Pro Ala Gly
500 505 510
Leu Val Leu Tyr Trp Val Val Asn Asn Leu Leu Thr Ile Ala Gln Gln
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545
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<213> Neisseria meningitidis
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<220>
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<220>
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<220>
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gccgtcttaa tcatcgaatt attgacggga acggtttatc ttttggttgt nagcgcggct 60
ttggcgggtt cgggcattgc ttacgggctg accggcagta cgcctgccgc cgtcttgacc 120
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gggcaagaag agcttgaacc aggaactcgc gccctcattg tccgcaagga aggcaacctt 360
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<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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Ala Val Leu Ile Ile Glu Leu Leu Thr Gly Thr Val Tyr Leu Leu Val
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Val Ser Ala Ala Leu Ala Gly Ser Gly Ile Ala Tyr Gly Leu Thr Gly
20 25 30
Ser Thr Pro Ala Ala Val Leu Thr Xaa Ala Leu Leu Ser Ala Leu Gly
35 40 45
Ile Xaa Phe Val His Ala Lys Thr Ala Val Arg Lys Val Glu Thr Asp
50 55 60
Ser Tyr Gln Asp Leu Asp Ala Gly Gln Tyr Val Glu Ile Leu Arg His
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Thr Gly Gly Asn Arg Tyr Glu Val Xaa Tyr Arg Gly Thr Xaa Trp Gln
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Ile Val Arg Lys Glu Gly Asn Leu Leu Ile Ile Thr His Pro
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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<222> (41)..(41)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (50)..(50)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 62
Ala Val Leu Ile Ile Glu Leu Leu Thr Gly Thr Val Tyr Leu Leu Val
1 5 10 15
Val Ser Ala Ala Leu Ala Gly Ser Gly Ile Ala Tyr Gly Leu Thr Gly
20 25 30
Ser Thr Pro Ala Ala Val Leu Thr Xaa Ala Leu Leu Ser Ala Leu Gly
35 40 45
Ile Xaa Phe Val His Ala Lys Thr Ala Val Arg Lys Val Glu Thr Asp
50 55 60
Ser Tyr Gln Asp Leu Asp Ala Gly Gln Tyr Val Glu Ile Leu Arg His
65 70 75 80
Thr Gly Gly Asn Arg Tyr Glu Val Phe Tyr Arg Gly Thr His Trp Gln
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Ala Gln Asn Thr Gly Gln Glu Glu Leu Glu Pro Gly Thr Arg Ala Leu
100 105 110
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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atgactgtat ggtttgttgc cgctgttgcc gtcttaatca tcgaattatt gacgggaacg 60
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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Met Thr Val Trp Phe Val Ala Ala Val Ala Val Leu Ile Ile Glu Leu
1 5 10 15
Leu Thr Gly Thr Val Tyr Leu Leu Val Val Ser Ala Ala Leu Ala Gly
20 25 30
Ser Gly Ile Ala Tyr Gly Leu Thr Gly Ser Thr Pro Ala Ala Val Leu
35 40 45
Thr Ala Ala Leu Leu Ser Ala Leu Gly Ile Trp Phe Val His Ala Lys
50 55 60
Thr Ala Val Gly Lys Val Glu Thr Asp Ser Tyr Gln Asp Leu Asp Ala
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Gly Gln Tyr Ala Glu Ile Leu Arg His Ala Gly Gly Asn Arg Tyr Glu
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100 105 110
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Leu Leu Ile Ile Ala Lys Pro
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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Met Thr Val Trp Phe Val Ala Ala Val Ala Val Leu Ile Ile Glu Leu
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Leu Thr Gly Thr Val Tyr Leu Leu Val Val Ser Ala Ala Leu Ala Gly
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Ser Gly Ile Ala Tyr Gly Leu Thr Gly Ser Thr Pro Ala Ala Val Leu
35 40 45
Thr Ala Ala Leu Leu Ser Ala Leu Gly Ile Trp Phe Val His Ala Lys
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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Met Xaa Asp Phe Gly Leu Gly Glu Leu Val Phe Val Gly Ile Ile Ala
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Leu Ile Val Leu Gly Pro Glu Arg Xaa Pro Glu Ala Ala Arg Xaa Ala
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Gly Arg Leu Ile Gly Arg Leu Gln Arg Phe Val Gly Ser Val Lys Gln
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Gly Thr Asp Met Glu Gly Asn Leu His Asp Ile Ser Asp Gly Leu Lys
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<213> Neisseria meningitidis
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cgctttgtcg gcagcgtcaa acaggaattt gacactcaaa tcgaactgga agaactgagg 180
aaggcaaagc aggaatttga agctgccgcc gctcaggttc gagacagcct caaagaaacc 240
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<213> Neisseria meningitidis
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Leu Ile Val Leu Gly Pro Glu Arg Leu Pro Glu Ala Ala Arg Thr Ala
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Gly Arg Leu Ile Gly Arg Leu Gln Arg Phe Val Gly Ser Val Lys Gln
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Glu Phe Asp Thr Gln Ile Glu Leu Glu Glu Leu Arg Lys Ala Lys Gln
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65 70 75 80
Gly Thr Asp Met Glu Gly Asn Leu His Asp Ile Ser Asp Gly Leu Lys
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Pro Trp Glu Lys Leu Pro Glu Gln Arg Thr Pro Ala Asp Phe Gly Val
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Asp Glu Asn Gly Asn Pro Leu Pro Asp Ala Ala Asn Thr Leu Ser Asp
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Gly Ile Ser Asp Val Met Pro Ser Glu Arg Ser Tyr Ala Ser Ala Glu
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Thr Leu Gly Asp Ser Gly Gln Thr Gly Ser Thr Ala Glu Pro Ala Glu
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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Val Pro Val Val Leu Trp Val Leu Asp Leu Gln Gly Leu Ala Gln His
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50 55 60
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Ile Phe Phe Ile Leu Phe Leu Thr Ala Val Ala Phe Lys Thr Leu His
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Thr Ala Val Ser Thr Leu Phe Gly Thr Met Ser Ser Trp Val Gly Ile
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Leu Ser Ala Ala Thr Ile Ala Phe Ala Pro Leu Gly Val Lys Thr Ala
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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Met Trp His Trp Asp Ile Ile Leu Ile Leu Leu Ala Val Gly Ser Ala
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Ala Gly Phe Ile Ala Gly Leu Phe Gly Val Gly Gly Gly Thr Leu Ile
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 104
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<213> Neisseria meningitidis
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<222> (239)..(239)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (495)..(495)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (1316)..(1316)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (1338)..(1338)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 113
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<220>
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<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (438)..(438)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<222> (446)..(446)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 114
Met Asn Met Leu Gly Ala Leu Ala Lys Val Gly Ser Leu Thr Met Val
1 5 10 15
Ser Arg Val Leu Gly Phe Val Arg Asp Thr Val Ile Ala Arg Ala Phe
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Gly Ala Gly Met Ala Thr Asp Ala Phe Phe Val Ala Phe Lys Leu Pro
35 40 45
Asn Leu Leu Arg Arg Val Phe Ala Glu Gly Ala Phe Ala Gln Ala Phe
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Val Pro Ile Leu Ala Glu Tyr Lys Glu Thr Arg Ser Lys Glu Ala Xaa
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Glu Ala Phe Ile Arg His Val Ala Gly Met Leu Ser Phe Val Leu Val
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Ser Ala Pro Ser Phe Ala Gln Asp Ala Asp Lys Phe Gln Leu Ser Ile
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Ser Phe Val Gly Ser Val Leu Asn Ser Tyr His Lys Phe Gly Ile Pro
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Ala Phe Thr Pro Xaa Phe Leu Asn Val Ser Phe Ile Val Phe Ala Leu
165 170 175
Phe Phe Val Pro Tyr Phe Asp Pro Pro Val Thr Ala Xaa Ala Trp Ala
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Val Phe Val Gly Gly Ile Leu Gln Leu Xaa Phe Gln Leu Pro Trp Leu
195 200 205
Ala Lys Leu Gly Phe Leu Lys Leu Pro Lys Leu Ser Phe Lys Asp Ala
210 215 220
Ala Val Asn Arg Val Met Lys Gln Met Ala Pro Ala Ile Leu Gly Val
225 230 235 240
Ser Val Ala Gln Val Ser Leu Val Ile Asn Thr Ile Phe Ala Ser Tyr
245 250 255
Leu Gln Ser Gly Ser Val Ser Trp Met Tyr Tyr Ala Asp Arg Met Met
260 265 270
Glu Leu Pro Ser Gly Val Leu Gly Ala Ala Leu Gly Thr Ile Leu Leu
275 280 285
Pro Thr Leu Ser Lys His Ser Ala Asn Gln Asp Thr Glu Gln Phe Ser
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Ala Ala Val Gly Leu Ala Val Leu Ser Phe Pro Leu Val Ala Thr Leu
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Phe Met Tyr Arg Xaa Phe Thr Leu Phe Asp Ala Gln Met Thr Gln His
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355 360 365
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<210> 115
<211> 1539
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 115
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gcccaagcgt ttgtgccgat tttggcggaa tacaaggaaa cgcgttcaaa agaggcggcg 240
gaggctttta tccgccatgt ggcggggatg ctgtcgtttg tactggttat cgttaccgcg 300
ctgggcatac ttgccgcgcc ttgggtgatt tatgtttccg cacccggttt tgcccaagat 360
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atttccctgt cttcatttgt cggctcggta ctcaattctt atcataagtt cggcattccg 480
gcgtttacgc ccacgtttct gaacgtgtcg tttatcgtat tcgcgctgtt tttcgtgccg 540
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 116
Met Asn Met Leu Gly Ala Leu Ala Lys Val Gly Ser Leu Thr Met Val
1 5 10 15
Ser Arg Val Leu Gly Phe Val Arg Asp Thr Val Ile Ala Arg Ala Phe
20 25 30
Gly Ala Gly Met Ala Thr Asp Ala Phe Phe Val Ala Phe Lys Leu Pro
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Asn Leu Leu Arg Arg Val Phe Ala Glu Gly Ala Phe Ala Gln Ala Phe
50 55 60
Val Pro Ile Leu Ala Glu Tyr Lys Glu Thr Arg Ser Lys Glu Ala Ala
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Glu Ala Phe Ile Arg His Val Ala Gly Met Leu Ser Phe Val Leu Val
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Ile Val Thr Ala Leu Gly Ile Leu Ala Ala Pro Trp Val Ile Tyr Val
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Ser Ala Pro Gly Phe Ala Gln Asp Ala Asp Lys Phe Gln Leu Ser Ile
115 120 125
Asp Leu Leu Arg Ile Thr Phe Pro Tyr Ile Leu Leu Ile Ser Leu Ser
130 135 140
Ser Phe Val Gly Ser Val Leu Asn Ser Tyr His Lys Phe Gly Ile Pro
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Ala Phe Thr Pro Thr Phe Leu Asn Val Ser Phe Ile Val Phe Ala Leu
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Phe Phe Val Pro Tyr Phe Asp Pro Pro Val Thr Ala Leu Ala Trp Ala
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Val Phe Val Gly Gly Ile Leu Gln Leu Gly Phe Gln Leu Pro Trp Leu
195 200 205
Ala Lys Leu Gly Phe Leu Lys Leu Pro Lys Leu Ser Phe Lys Asp Ala
210 215 220
Ala Val Asn Arg Val Met Lys Gln Met Ala Pro Ala Ile Leu Gly Val
225 230 235 240
Ser Val Ala Gln Val Ser Leu Val Ile Asn Thr Ile Phe Ala Ser Tyr
245 250 255
Leu Gln Ser Gly Ser Val Ser Trp Met Tyr Tyr Ala Asp Arg Met Met
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Glu Leu Pro Ser Gly Val Leu Gly Ala Ala Leu Gly Thr Ile Leu Leu
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Ala Leu Ile Ala Tyr Ser Phe Gly Leu Ile Gly Leu Ile Met Ile Lys
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Lys Ile Ala Ile Phe Thr Leu Ile Cys Thr Gln Leu Met Asn Leu Ala
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Phe Ile Gly Pro Leu Lys His Val Gly Leu Ser Leu Ala Ile Gly Leu
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Gly Ala Cys Ile Asn Ala Gly Leu Leu Phe Tyr Leu Leu Arg Arg His
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Gly Ile Tyr Gln Pro Gly Lys Gly Trp Ala Ala Phe Leu Ala Lys Met
435 440 445
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Gln Leu Cys Ile Leu Ile Ala Val Gly Gly Gly Leu Tyr Phe Ala Ser
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Leu Ala Ala Leu Gly Phe Arg Pro Arg His Phe Lys Arg Val Glu Asn
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<210> 117
<211> 1538
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (936)..(936)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 117
atgaatatgc tgggagcttt ggtaaaagtc ggcagcctga cgatggtgtc gcgcgttttg 60
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<222> (313)..(313)
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Ser Val Ala Gln Ile Ser Leu Val Ile Asn Thr Ile Phe Ala Ser Tyr
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<220>
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Cys Cys Ser Arg Ser Pro
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<211> 1539
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 121
atgaatatgc ttggagcttt ggcaaaagtc ggcagcctga cgatggtgtc gcgcgttttg 60
ggatttgtgc gcgatacggt cattgcgcgg gcattcggcg cgggtatggc gacggatgcg 120
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gcggacaagt tccaactttc catcagcctg ctgcggatta cgtttcctta tatattattg 420
atttctttgt cttcttttgt cggctcgata ctcaattcct accataagtt cggcattccc 480
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tatttcgatc cgcccgttac cgcgctggcg tgggcggttt ttgtcggcgg tattttgcag 600
ctcggtttcc aactgccgtg gctggcgaaa ctgggctttt tgaaactgcc caaactgaat 660
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aaaacgcccg tcaaaatcgc catcttcacg ctcatctgca cgcagttgat gaacctcgcc 1200
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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50 55 60
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<213> Neisseria meningitidis
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 128
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<221> misc_feature
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 131
atgattaaaa tcaaaaaagg tctaaatctg cccatcgcgg gcagaccgga gcaagtcatt 60
tatgacggcc cggccattac cgaagtcgcg ttgcttggcg aagaatatgt cggcatgcgc 120
ccctcgatga aaatcaagga aggtgaagcc gtcaaaaaag gccaagtgct gtttgaagac 180
aaaaagaatc cgggcgtagt atttactgcg ccggcttcag gcaaaatcgc cgctattcac 240
cgtggcgaaa agcgcgtact tcagtcagtc gtgattgccg ttgaaggcaa cgacgaaatc 300
gagttcgaac gctacgtacc tgaagcgctg gcaaaattga gcagcgaaaa agtgcgccgc 360
aacctgattc aatcaggctt atggactgcg cttcgcaccc gtccgttcag caaaatccct 420
gccgtagatg ccgagccgtt cgccatcttc gtcaatgcga tggacaccaa tccgctggct 480
gccgacccta cggtcatcat caaagaagcc gccgaagact tcaaacgcgg cctgttggta 540
ttgagccgcc tgaccgaacg taaaatccat gtgtgtaaag cagcaggcgc agacgtgccg 600
tctgaaaatg ctgccaatat cgaaacacat gaatttggcg gcccgcatcc tgccggcttg 660
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tccggttcgg tattgaacgg tgcgattgca caaggcgcgc atgattattt gggacgctac 960
cacaatcaga tttccgttat cgaagaaggc cgcagcaaag agctgttcgg ctgggttgcg 1020
ccgcagccgg acaaatactc catcacgcgc accactctcg gccatttcct aaaaaacaaa 1080
ctcttcaagt tcacgacagc cgtcaacggc ggcgaccgcg ccatggtacc gatcggcact 1140
tatgagcgcg taatgccgtt ggacatcctg cctaccttgc ttttgcgcga tttaatcgtc 1200
ggcgataccg acagcgcgca ggctttgggt tgcttggaat tggacgaaga agacctcgct 1260
ttgtgcagct tcgtctgccc gggcaaatac gaatacggcc cgctgttgcg caaagtgctg 1320
gaaaccattg agaaggaagg ctga 1344
<210> 132
<211> 447
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 132
Met Ile Lys Ile Lys Lys Gly Leu Asn Leu Pro Ile Ala Gly Arg Pro
1 5 10 15
Glu Gln Val Ile Tyr Asp Gly Pro Ala Ile Thr Glu Val Ala Leu Leu
20 25 30
Gly Glu Glu Tyr Val Gly Met Arg Pro Ser Met Lys Ile Lys Glu Gly
35 40 45
Glu Ala Val Lys Lys Gly Gln Val Leu Phe Glu Asp Lys Lys Asn Pro
50 55 60
Gly Val Val Phe Thr Ala Pro Ala Ser Gly Lys Ile Ala Ala Ile His
65 70 75 80
Arg Gly Glu Lys Arg Val Leu Gln Ser Val Val Ile Ala Val Glu Gly
85 90 95
Asn Asp Glu Ile Glu Phe Glu Arg Tyr Val Pro Glu Ala Leu Ala Lys
100 105 110
Leu Ser Ser Glu Lys Val Arg Arg Asn Leu Ile Gln Ser Gly Leu Trp
115 120 125
Thr Ala Leu Arg Thr Arg Pro Phe Ser Lys Ile Pro Ala Val Asp Ala
130 135 140
Glu Pro Phe Ala Ile Phe Val Asn Ala Met Asp Thr Asn Pro Leu Ala
145 150 155 160
Ala Asp Pro Thr Val Ile Ile Lys Glu Ala Ala Glu Asp Phe Lys Arg
165 170 175
Gly Leu Leu Val Leu Ser Arg Leu Thr Glu Arg Lys Ile His Val Cys
180 185 190
Lys Ala Ala Gly Ala Asp Val Pro Ser Glu Asn Ala Ala Asn Ile Glu
195 200 205
Thr His Glu Phe Gly Gly Pro His Pro Ala Gly Leu Ser Gly Thr His
210 215 220
Ile His Phe Ile Glu Pro Val Gly Ala Asn Lys Thr Val Trp Thr Ile
225 230 235 240
Asn Tyr Gln Asp Val Ile Ala Ile Gly Arg Leu Phe Val Thr Gly Arg
245 250 255
Leu Asn Thr Glu Arg Val Val Ala Leu Gly Gly Leu Gln Val Asn Lys
260 265 270
Pro Arg Leu Leu Arg Thr Val Leu Gly Ala Lys Val Ser Gln Leu Thr
275 280 285
Ala Gly Glu Leu Val Asp Ala Asp Asn Arg Val Ile Ser Gly Ser Val
290 295 300
Leu Asn Gly Ala Ile Ala Gln Gly Ala His Asp Tyr Leu Gly Arg Tyr
305 310 315 320
His Asn Gln Ile Ser Val Ile Glu Glu Gly Arg Ser Lys Glu Leu Phe
325 330 335
Gly Trp Val Ala Pro Gln Pro Asp Lys Tyr Ser Ile Thr Arg Thr Thr
340 345 350
Leu Gly His Phe Leu Lys Asn Lys Leu Phe Lys Phe Thr Thr Ala Val
355 360 365
Asn Gly Gly Asp Arg Ala Met Val Pro Ile Gly Thr Tyr Glu Arg Val
370 375 380
Met Pro Leu Asp Ile Leu Pro Thr Leu Leu Leu Arg Asp Leu Ile Val
385 390 395 400
Gly Asp Thr Asp Ser Ala Gln Ala Leu Gly Cys Leu Glu Leu Asp Glu
405 410 415
Glu Asp Leu Ala Leu Cys Ser Phe Val Cys Pro Gly Lys Tyr Glu Tyr
420 425 430
Gly Pro Leu Leu Arg Lys Val Leu Glu Thr Ile Glu Lys Glu Gly
435 440 445
<210> 133
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (4)..(4)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(25)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 133
gcgncgnaaa tcatccatcc ccnnnacgtc gtaggccctg aagccaactg gttttttatg 60
gtagccagta cgtttgtgat tgctttgatt ggttattttg ttactgaaaa aatcgtcgaa 120
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<213> Neisseria meningitidis
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 134
Ala Xaa Xaa Ile Ile His Pro Xaa Xaa Val Val Gly Pro Glu Ala Asn
1 5 10 15
Trp Phe Phe Met Val Ala Ser Thr Phe Val Ile Ala Leu Ile Gly Tyr
20 25 30
Phe Val Thr Glu Lys Ile Val Glu Pro Gln Leu Gly Pro Tyr Gln Ser
35 40 45
Asp Leu Ser Gln Glu Glu Lys Asp Ile Arg His Ser Asn Glu Ile Thr
50 55 60
Pro Leu Glu Tyr Lys Gly Leu Ile Trp Ala Gly Val Val Phe Val Ala
65 70 75 80
Leu Ser Ala Leu Leu Ala Trp Ser Ile Val Pro Ala Asp Gly Ile Leu
85 90 95
Arg His Pro Glu Thr Gly Leu Val Ser Gly Ser Pro Phe Leu Lys Ser
100 105 110
Ile Val Val Phe Ile Phe Leu Leu Phe Ala Leu Pro Gly Ile Val Tyr
115 120 125
Gly Arg Val Thr Arg Ser Leu Arg Gly Glu Gln Glu Val Val Asn Ala
130 135 140
Xaa Ala Glu Ser Met Ser Thr Leu Xaa Leu Xaa Leu Xaa Xaa Ile Phe
145 150 155 160
Phe Ala Ala Gln Phe Val Ala Phe Phe Asn Trp Thr Asn Ile Gly Gln
165 170 175
Tyr Ile Ala Val Lys Gly Ala Thr Phe Leu Lys Glu Val Gly Leu Gly
180 185 190
Gly Ser Val Leu Phe Ile Gly Phe Ile Leu Ile Cys Ala Phe Ile Asn
195 200 205
Leu Met Ile Gly Ser Ala Ser Ala Gln Trp Ala Val Thr Ala Pro Ile
210 215 220
Phe Val Pro Met Leu Met Leu Ala Gly Tyr Ala Pro Glu Val Ile Gln
225 230 235 240
Ala Ala Tyr Arg Ile Gly Asp Ser Val Thr Asn Ile Ile Thr Pro Met
245 250 255
Met Ser Tyr Phe Gly Leu Ile Met Ala Thr Val Xaa Xaa Tyr Lys Lys
260 265 270
Asp Ala Gly Val Gly Thr Leu Ile Xaa Met Met Leu Pro Tyr Ser Ala
275 280 285
Phe Phe Leu Ile Ala Trp Ile Ala Leu Phe Cys Ile Trp Val Phe Val
290 295 300
Leu Gly Leu Pro Val Gly Pro Gly Ala Pro Thr Phe Tyr Pro Ala Pro
305 310 315 320
<210> 135
<211> 1568
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 135
atgagtcaaa ccgatacgca acgggacgga cgatttttac gcacagtcga atggctgggc 60
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caccttaa 1568
<210> 136
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 136
Met Ser Gln Thr Asp Thr Gln Arg Asp Gly Arg Phe Leu Arg Thr Val
1 5 10 15
Glu Trp Leu Gly Asn Met Leu Pro His Pro Val Thr Leu Phe Ile Ile
20 25 30
Phe Ile Val Leu Leu Leu Ile Ala Ser Ala Val Gly Ala Tyr Phe Gly
35 40 45
Leu Ser Val Pro Asp Pro Arg Pro Val Gly Ala Lys Gly Arg Ala Asp
50 55 60
Asp Gly Leu Ile Tyr Ile Val Ser Leu Leu Asn Ala Asp Gly Phe Ile
65 70 75 80
Lys Ile Leu Thr His Thr Val Lys Asn Phe Thr Gly Phe Ala Pro Leu
85 90 95
Gly Thr Val Leu Val Ser Leu Leu Gly Val Gly Ile Ala Glu Lys Ser
100 105 110
Gly Leu Ile Ser Ala Leu Met Arg Leu Leu Leu Thr Lys Ser Pro Arg
115 120 125
Lys Leu Thr Thr Phe Met Val Val Phe Thr Gly Ile Leu Ser Asn Thr
130 135 140
Ala Ser Glu Leu Gly Tyr Val Val Leu Ile Pro Leu Ser Ala Ile Ile
145 150 155 160
Phe His Ser Leu Gly Arg His Pro Leu Ala Gly Leu Ala Ala Ala Phe
165 170 175
Ala Gly Val Ser Gly Gly Tyr Ser Ala Asn Leu Phe Leu Gly Thr Ile
180 185 190
Asp Pro Leu Leu Ala Gly Ile Thr Gln Gln Ala Ala Gln Ile Ile His
195 200 205
Pro Asp Tyr Val Val Gly Pro Glu Ala Asn Trp Phe Phe Met Val Ala
210 215 220
Ser Thr Phe Val Ile Ala Leu Ile Gly Tyr Phe Val Thr Glu Lys Ile
225 230 235 240
Val Glu Pro Gln Leu Gly Pro Tyr Gln Ser Asp Leu Ser Gln Glu Glu
245 250 255
Lys Asp Ile Arg His Ser Asn Glu Ile Thr Pro Leu Glu Tyr Lys Gly
260 265 270
Leu Ile Trp Ala Gly Val Val Phe Val Ala Leu Ser Ala Leu Leu Ala
275 280 285
Trp Ser Ile Val Pro Ala Asp Gly Ile Leu Arg His Pro Glu Thr Gly
290 295 300
Leu Val Ser Gly Ser Pro Phe Leu Lys Ser Ile Val Val Phe Ile Phe
305 310 315 320
Leu Leu Phe Ala Leu Pro Gly Ile Val Tyr Gly Arg Val Thr Arg Ser
325 330 335
Leu Arg Gly Glu Gln Glu Val Val Asn Ala Met Ala Glu Ser Met Ser
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Thr Leu Gly Leu Tyr Leu Val Ile Ile Phe Phe Ala Ala Gln Phe Val
355 360 365
Ala Phe Phe Asn Trp Thr Asn Ile Gly Gln Tyr Ile Ala Val Lys Gly
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Ala Thr Phe Leu Lys Glu Val Gly Leu Gly Gly Ser Val Leu Phe Ile
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Gly Phe Ile Leu Ile Cys Ala Phe Ile Asn Leu Met Ile Gly Ser Ala
405 410 415
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420 425 430
Leu Ala Gly Tyr Ala Pro Glu Val Ile Gln Ala Ala Tyr Arg Ile Gly
435 440 445
Asp Ser Val Thr Asn Ile Ile Thr Pro Met Met Ser Tyr Phe Gly Leu
450 455 460
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465 470 475 480
Leu Ile Ser Met Met Leu Pro Tyr Ser Ala Phe Phe Leu Ile Ala Trp
485 490 495
Ile Ala Leu Phe Cys Ile Trp Val Phe Val Leu Gly Leu Pro Val Gly
500 505 510
Pro Gly Ala Pro Thr Phe Tyr Pro Ala Pro
515 520
<210> 137
<211> 1569
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 137
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gcaccttaa 1569
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 138
Met Ser Gln Thr Asp Thr Gln Arg Asp Gly Arg Phe Leu Arg Thr Val
1 5 10 15
Glu Trp Leu Gly Asn Met Leu Pro His Pro Val Thr Leu Phe Ile Ile
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Phe Ile Val Leu Leu Leu Ile Ala Ser Ala Ala Gly Ala Tyr Phe Gly
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Leu Ser Val Pro Asp Pro Arg Pro Val Gly Ala Lys Gly Arg Ala Asp
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Asp Gly Leu Ile His Val Val Ser Leu Leu Asp Ala Asp Gly Leu Ile
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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ggcggttatt cggccaatct gttcttaggc acaatcgatc cgctcttggc aggcatcacc 600
caacaggcgg cgcaaatcat ccatcccgac tacgtcgtag gccctgaagc caactggttt 660
tttatggcag ccagtacgtt tgtgattgct ttgattggtt attttgttac tgaaaaaatc 720
gtcgaaccgc aattgggccc ttatcaatca gatttgtcac aagaagaaaa agacattcgg 780
cattccaatg aaatcacgcc tttggaatat aaaggattaa tttgggcagg cgtggtgttt 840
gttgccttat ccgccctatt ggcttggagc atcgtccctg ccgacggtat tttgcgtcat 900
cctgaaacag gattggttgc cggttcgccg tttttaaaat cgattgttgt ttttattttc 960
ttgttgtttg cgctgccggg cattgtttat ggccggataa cccgaagttt gcgcggcgaa 1020
cgggaagtcg ttaatgcgat ggccgaatcg atgagtactt tgggacttta tttggtcatc 1080
atcttttttg ccgcacagtt tgtcgcattt tttaattgga cgaatattgg gcaatatatt 1140
gccgttaaag gggcggtgtt cttaaaagaa gtcggcttgg gcggcagtgt gttgtttatc 1200
ggttttattt taatttgtgc ttttatcaat ctgatgatag gctccgcctc cgcgcaatgg 1260
gcggtaactg cgccgatttt cgtccctatg ctgatgttgg ccggctacgc gcccgaagtc 1320
attcaagccg cttaccgcat cggtgattcc gttaccaata ttattacgcc gatgatgagt 1380
tatttcgggc tgattatggc gacggtaatc aaatacaaaa aagatgcggg cgtaggcacg 1440
ctgatttcta tgatgttgcc gtattccgct ttcttcttaa ttgcatggat cgccttattc 1500
tgcatttggg tatttgtttt gggtctgccc gtcggtcccg gcacacccac attctatccg 1560
gtgccttaa 1569
<210> 140
<211> 522
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 140
Met Ser Gln Thr Asp Ala Arg Arg Ser Gly Arg Phe Leu Arg Thr Val
1 5 10 15
Glu Trp Leu Gly Asn Met Leu Pro His Pro Val Thr Leu Phe Ile Ile
20 25 30
Phe Ile Val Leu Leu Leu Ile Ala Ser Ala Val Gly Ala Tyr Phe Gly
35 40 45
Leu Ser Val Pro Asp Pro Arg Pro Val Gly Ala Lys Gly Arg Ala Asp
50 55 60
Asp Gly Leu Ile His Val Val Ser Leu Leu Asp Ala Asp Gly Leu Ile
65 70 75 80
Lys Ile Leu Thr His Thr Val Lys Asn Phe Thr Gly Phe Ala Pro Leu
85 90 95
Gly Thr Val Leu Val Ser Leu Leu Gly Val Gly Ile Ala Glu Lys Ser
100 105 110
Gly Leu Ile Ser Ala Leu Met Arg Leu Leu Leu Thr Lys Ser Pro Arg
115 120 125
Lys Leu Thr Thr Phe Met Val Val Phe Thr Gly Ile Leu Ser Asn Thr
130 135 140
Ala Ser Glu Leu Gly Tyr Val Val Leu Ile Pro Leu Ser Ala Val Ile
145 150 155 160
Phe His Ser Leu Gly Arg His Pro Leu Ala Gly Leu Ala Ala Ala Phe
165 170 175
Ala Gly Val Ser Gly Gly Tyr Ser Ala Asn Leu Phe Leu Gly Thr Ile
180 185 190
Asp Pro Leu Leu Ala Gly Ile Thr Gln Gln Ala Ala Gln Ile Ile His
195 200 205
Pro Asp Tyr Val Val Gly Pro Glu Ala Asn Trp Phe Phe Met Ala Ala
210 215 220
Ser Thr Phe Val Ile Ala Leu Ile Gly Tyr Phe Val Thr Glu Lys Ile
225 230 235 240
Val Glu Pro Gln Leu Gly Pro Tyr Gln Ser Asp Leu Ser Gln Glu Glu
245 250 255
Lys Asp Ile Arg His Ser Asn Glu Ile Thr Pro Leu Glu Tyr Lys Gly
260 265 270
Leu Ile Trp Ala Gly Val Val Phe Val Ala Leu Ser Ala Leu Leu Ala
275 280 285
Trp Ser Ile Val Pro Ala Asp Gly Ile Leu Arg His Pro Glu Thr Gly
290 295 300
Leu Val Ala Gly Ser Pro Phe Leu Lys Ser Ile Val Val Phe Ile Phe
305 310 315 320
Leu Leu Phe Ala Leu Pro Gly Ile Val Tyr Gly Arg Ile Thr Arg Ser
325 330 335
Leu Arg Gly Glu Arg Glu Val Val Asn Ala Met Ala Glu Ser Met Ser
340 345 350
Thr Leu Gly Leu Tyr Leu Val Ile Ile Phe Phe Ala Ala Gln Phe Val
355 360 365
Ala Phe Phe Asn Trp Thr Asn Ile Gly Gln Tyr Ile Ala Val Lys Gly
370 375 380
Ala Val Phe Leu Lys Lys Phe Arg Leu Gly Gly Ser Val Leu Phe Ile
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Gly Phe Ile Leu Ile Cys Ala Phe Ile Asn Leu Met Ile Gly Ser Ala
405 410 415
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Leu Ala Gly Asn Ala Pro Gln Val Ile Gln Ala Ala Tyr Arg Ile Gly
435 440 445
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Leu Ile Ser Met Met Leu Pro Tyr Ser Ala Phe Phe Leu Ile Ala Trp
485 490 495
Ile Ala Leu Phe Cys Ile Trp Val Phe Val Leu Gly Leu Pro Val Gly
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Pro Gly Thr Pro Thr Phe Tyr Pro Val Pro
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<210> 141
<211> 503
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(22)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (459)..(459)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 141
acagccggcg cagcaggttn cncggtcttc gttttcgtaa cggacagtca ggtggaggtg 60
ttcgggaaca tccagaccgc agtggaaaca ggtttttttc atggcatttc ggtttcgtct 120
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (7)..(8)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (152)..(152)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 142
Thr Ala Gly Ala Ala Gly Xaa Xaa Val Phe Val Phe Val Thr Asp Ser
1 5 10 15
Gln Val Glu Val Phe Gly Asn Ile Gln Thr Ala Val Glu Thr Gly Phe
20 25 30
Phe His Gly Ile Ser Val Ser Ser Val Phe Gly Ala Ala Ala Gln Asp
35 40 45
Ser Ala Met Ala Ser Arg Ser Ala Ser Ile Pro Val Phe Ser Ala Thr
50 55 60
Glu Met Arg Thr Ala Ala Ile Phe Pro Ala Ala Ser Arg His Met Pro
65 70 75 80
Val Phe Cys Ser Ser Asp Gly Ser Arg Ser Val Leu Leu Tyr Thr Leu
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Met His Gly Ile Ser Pro Ala Trp Ile Ser Cys Ser Thr Phe Ser Thr
100 105 110
Ser Ser Ile Cys Cys Pro Leu Phe Gly Ala Ala Ala Ser Thr Thr Cys
115 120 125
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130 135 140
Glu Ile Ser Leu Cys Gly Arg Xaa Leu Thr Asn Pro Thr Val Ser Val
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Arg Ile Met Leu His Ser Gly
165
<210> 143
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 143
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 144
Met Glu Asp Leu Gln Glu Ile Gly Phe Asp Val Ala Ala Val Lys Val
1 5 10 15
Gly Arg Gln Arg Glu His His Arg Leu His His Pro Gln Pro Gly Asn
20 25 30
Gly Glu Ala Asp Asp Val Leu Phe Ala Phe Phe Leu Val Gly Gly Phe
35 40 45
Asp Phe Leu Arg Val Ile Gly Cys Gly Gly Val Ala Tyr Leu Pro Asp
50 55 60
Phe Gln Gln Asn Val Gly Lys Ala Asp Phe Ala Val Val Pro Asp Asp
65 70 75 80
Ala Ala Ala Val Arg Ala Val Ile Glu Val Asp Ala Asp Asp Ala Val
85 90 95
Cys Thr Gln Lys Leu Leu Phe Asp Gln Pro Asp Ala Gly Gly Ala Gly
100 105 110
Asp Ala Ala Glu His Asn Arg Leu Ala Arg Ala Ala Val Gly Phe His
115 120 125
Lys Val Gly Leu Asp Phe Gly Gln Val Val Gln Ala Asp Leu Val Glu
130 135 140
Asp Phe Leu Gly Arg Gln Leu Gly Phe Leu Arg Val Gly Gly Ala Leu
145 150 155 160
Phe Val Ile Thr Ala Gln Ala Arg Val Asn Asn Ala Leu Cys Asp Cys
165 170 175
Leu Thr Thr Gly Ala Ala Gly Phe Ala Val Phe Val Phe Val Thr Asp
180 185 190
Gly Gln Met Gln Val Phe Gly Asn Val Gln Pro Ala Val Glu Thr Gly
195 200 205
Phe Phe His Gly Ile Ser Val Ser Ser Val Phe Gly Ala Ala Ala Gln
210 215 220
Tyr Ser Ala Met Ala Ser Arg Ser Ala Ser Ile Pro Val Phe Ser Ala
225 230 235 240
Thr Glu Met Arg Thr Ala Ala Ile Phe Pro Ala Ala Ser Arg His Met
245 250 255
Pro Val Phe Cys Ser Ser Asp Gly Ser Arg Ser Val Leu Leu Tyr Thr
260 265 270
Leu Met His Gly Ile Ser Pro Ala Trp Ile Ser Cys Ser Thr Phe Ser
275 280 285
Thr Ser Ser Ile Cys Cys Pro Leu Phe Gly Ala Ala Ala Ser Thr Thr
290 295 300
Cys Ser Ser Thr Ser Ala Cys Ala Val Ser Ser Ser Val Ala Glu Lys
305 310 315 320
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325 330 335
Val Arg Ile Met Leu His Ser Gly Leu Met Tyr Ser Arg Arg Ala Val
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Val Ser Ser Val Ala Lys Ser Trp Ser Phe Ala Tyr Met Pro Asp Leu
355 360 365
Val Ser Arg Leu Asn Arg Leu Asp Leu Pro Thr Leu Val
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<210> 145
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> n is a, c, g, or t
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n 1
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 146
Met Glu Asp Leu Gln Glu Ile Gly Phe Asp Val Ala Ala Val Lys Val
1 5 10 15
Gly Arg Gln Arg Glu His His Arg Leu His His Thr Gln Ser Gly Asn
20 25 30
Gly Lys Ala Asp Asp Val Leu Phe Ala Phe Phe Leu Val Gly Gly Phe
35 40 45
Asp Phe Leu Arg Val Ile Gly Cys Gly Gly Val Ala Cys Leu Pro Asp
50 55 60
Phe Gln Gln Asn Val Gly Glu Ala Asp Phe Ala Val Val Pro Asp Asp
65 70 75 80
Ala Ala Ala Val Arg Ala Val Ile Glu Val Asp Ala Asp Asp Ala Val
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Cys Ala Gln Lys Leu Leu Phe Asp Gln Pro Asp Ala Gly Gly Ala Gly
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Asn Ala Ala Glu His Gln His Cys Phe Val Arg Ala Ile Met Gly Phe
115 120 125
His Lys Val Gly Leu Asp Phe Gly Gln Val Val Gln Ala Asp Leu Val
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Glu Asp Phe Leu Gly Arg Gln Phe Gly Phe Phe Arg Val Gly Gly Ala
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Ser Phe Val Ile Thr Ala Gln Ala Gly Ile Asp Asp Ala Leu Cys Asp
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Cys Leu Thr Ala Asp Ala Ala Gly Phe Ala Val Phe Ala Phe Val Ala
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Asp Gly Gln Met Gln Val Phe Gly Asn Val Gln Pro Ala Val Glu Thr
195 200 205
Gly Phe Phe His Gly Ile Ser Val Ser Ser Val Phe Gly Ala Ala Ala
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Gln Tyr Ser Ala Met Ala Ser Arg Ser Ala Ser Ile Pro Val Phe Ser
225 230 235 240
Ala Thr Glu Met Arg Thr Ala Ala Ile Phe Pro Ala Ala Ser Arg His
245 250 255
Met Pro Val Phe Cys Ser Ser Asp Gly Ser Arg Ser Val Leu Leu Tyr
260 265 270
Thr Leu Met His Gly Ile Ser Trp Ala Trp Ile Ser Cys Ser Thr Phe
275 280 285
Ser Thr Ser Ser Ile Cys Cys Pro Leu Phe Arg Ala Ala Ala Ser Thr
290 295 300
Thr Cys Ser Ser Thr Ser Ala Cys Thr Val Ser Ser Lys Val Ala Glu
305 310 315 320
Lys Ala Glu Ile Ser Leu Cys Gly Arg Ser Leu Thr Asn Pro Thr Val
325 330 335
Ser Val Arg Ile Met Leu His Ala Gly Leu Met Tyr Ser Arg Arg Ala
340 345 350
Val Val Ser Arg Val Ala Lys Ser Trp Ser Phe Ala Tyr Met Pro Asp
355 360 365
Leu Val Ser Arg Leu Asn Arg Leu Asp Leu Pro Thr Leu Val
370 375 380
<210> 147
<211> 544
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (459)..(459)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (538)..(538)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 147
ggccattact ccgaccgcac ttggaagccg cgtttggncg gccgccgtct gccgtatctg 60
ctttatggca cgctgattgc ggttattgtg atgattttga tgccgaactc gggcagcttc 120
ggtttcggct atgcgtcgct ggcggctttg tcgttcggcg cgctgatgat tgcgctgtta 180
gacgtgtcgt caaatatggc gatgcagccg tttaagatga tggtcggcga catggtcaac 240
gaggagcaga aaanntacgc ctacgggatt caaagtttct tagcaaatac gggcgcggtc 300
gtggcggcga ttctgccgtt tgtgtttgcg tatatcggtt tggcgaacac cgccganaaa 360
ggcgttgtgc cgcagaccgt ggtcgtggcg ttttatgtgg gtgcggcgtt gctggtgatt 420
accagcgcgt tcacgatttt caaagtgaag gaatacganc cggaaaccta cgcccgttac 480
cacggcatcg atgtcgccgc gaatcaggaa aaagccaact ggatcgcact cttaaaancc 540
gcgc 544
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<211> 181
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (13)..(13)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (119)..(119)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (153)..(153)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (180)..(180)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 148
Gly His Tyr Ser Asp Arg Thr Trp Lys Pro Arg Leu Xaa Gly Arg Arg
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Leu Pro Tyr Leu Leu Tyr Gly Thr Leu Ile Ala Val Ile Val Met Ile
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Leu Met Pro Asn Ser Gly Ser Phe Gly Phe Gly Tyr Ala Ser Leu Ala
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Ala Leu Ser Phe Gly Ala Leu Met Ile Ala Leu Leu Asp Val Ser Ser
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Glu Glu Gln Lys Xaa Tyr Ala Tyr Gly Ile Gln Ser Phe Leu Ala Asn
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Thr Gly Ala Val Val Ala Ala Ile Leu Pro Phe Val Phe Ala Tyr Ile
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Gly Leu Ala Asn Thr Ala Xaa Lys Gly Val Val Pro Gln Thr Val Val
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Val Ala Phe Tyr Val Gly Ala Ala Leu Leu Val Ile Thr Ser Ala Phe
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Thr Ile Phe Lys Val Lys Glu Tyr Xaa Pro Glu Thr Tyr Ala Arg Tyr
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165 170 175
Leu Leu Lys Xaa Ala
180
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 149
atgtcggaat atacgcctca aacagcaaaa caaggtttgc ccgcgctggc aaaaagcacg 60
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acttggaagc cgcgtttggg cggccgccgt ctgccgtatc tgctttatgg cacgctgatt 300
gcggttattg tgatgatttt gatgccgaac tcgggcagct tcggtttcgg ctatgcgtcg 360
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gtggtcgtgg cgttttatgt gggtgcggcg ttgctggtga ttaccagcgc gttcacgatt 660
ttcaaagtga aggaatacga tccggaaacc tacgcccgtt accacggcat cgatgtcgcc 720
gcgaatcagg aaaaagccaa ctggatcgaa ctcttgaaaa ccgcgcctaa ggcgttttgg 780
acggttactt tggtgcaatt cttctgctgg ttcgccttcc aatatatgtg gacttactcg 840
gcaggcgcga ttgcggaaaa cgtctggcac accaccgatg cgtcttccgt aggttatcag 900
gaggcgggta actggtacgg cgttttggcg gcggtgcagt cggttgcggc ggtgatttgt 960
tcgtttgtat tggcgaaagt gccgaataaa taccataagg cgggttattt cggctgtttg 1020
gctttgggcg cgctcggctt tttctccgtt ttcttcatcg gcaaccaata cgcgctggtg 1080
ttgtcttata ccttaatcgg catcgcttgg gcgggcatta tcacttatcc gctgacgatt 1140
gtgaccaacg ccttgtcggg caagcatatg ggcacttact tgggcttgtt taacggctct 1200
atctgtatgc ctcaaatcgt cgcttcgctg ttgagtttcg tgcttttccc tatgctgggc 1260
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gtgttcctga ttaaagaaac acacggcggg gtttga 1356
<210> 150
<211> 451
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 150
Met Ser Glu Tyr Thr Pro Gln Thr Ala Lys Gln Gly Leu Pro Ala Leu
1 5 10 15
Ala Lys Ser Thr Ile Trp Met Leu Ser Phe Gly Phe Leu Gly Val Gln
20 25 30
Thr Ala Phe Thr Leu Gln Ser Ser Gln Met Ser Arg Ile Phe Gln Thr
35 40 45
Leu Gly Ala Asp Pro His Asn Leu Gly Trp Phe Phe Ile Leu Pro Pro
50 55 60
Leu Ala Gly Met Leu Val Gln Pro Ile Val Gly His Tyr Ser Asp Arg
65 70 75 80
Thr Trp Lys Pro Arg Leu Gly Gly Arg Arg Leu Pro Tyr Leu Leu Tyr
85 90 95
Gly Thr Leu Ile Ala Val Ile Val Met Ile Leu Met Pro Asn Ser Gly
100 105 110
Ser Phe Gly Phe Gly Tyr Ala Ser Leu Ala Ala Leu Ser Phe Gly Ala
115 120 125
Leu Met Ile Ala Leu Leu Asp Val Ser Ser Asn Met Ala Met Gln Pro
130 135 140
Phe Lys Met Met Val Gly Asp Met Val Asn Glu Glu Gln Lys Gly Tyr
145 150 155 160
Ala Tyr Gly Ile Gln Ser Phe Leu Ala Asn Thr Gly Ala Val Val Ala
165 170 175
Ala Ile Leu Pro Phe Val Phe Ala Tyr Ile Gly Leu Ala Asn Thr Ala
180 185 190
Glu Lys Gly Val Val Pro Gln Thr Val Val Val Ala Phe Tyr Val Gly
195 200 205
Ala Ala Leu Leu Val Ile Thr Ser Ala Phe Thr Ile Phe Lys Val Lys
210 215 220
Glu Tyr Asp Pro Glu Thr Tyr Ala Arg Tyr His Gly Ile Asp Val Ala
225 230 235 240
Ala Asn Gln Glu Lys Ala Asn Trp Ile Glu Leu Leu Lys Thr Ala Pro
245 250 255
Lys Ala Phe Trp Thr Val Thr Leu Val Gln Phe Phe Cys Trp Phe Ala
260 265 270
Phe Gln Tyr Met Trp Thr Tyr Ser Ala Gly Ala Ile Ala Glu Asn Val
275 280 285
Trp His Thr Thr Asp Ala Ser Ser Val Gly Tyr Gln Glu Ala Gly Asn
290 295 300
Trp Tyr Gly Val Leu Ala Ala Val Gln Ser Val Ala Ala Val Ile Cys
305 310 315 320
Ser Phe Val Leu Ala Lys Val Pro Asn Lys Tyr His Lys Ala Gly Tyr
325 330 335
Phe Gly Cys Leu Ala Leu Gly Ala Leu Gly Phe Phe Ser Val Phe Phe
340 345 350
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355 360 365
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405 410 415
Pro Met Leu Gly Gly Leu Gln Ala Thr Met Phe Leu Val Gly Gly Val
420 425 430
Val Leu Leu Leu Gly Ala Phe Ser Val Phe Leu Ile Lys Glu Thr His
435 440 445
Gly Gly Val
450
<210> 151
<211> 1356
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 151
atgtcggaat atacgcctca aacagcaaaa caaggtttgc ccgcgctggc aaaaagcacg 60
atttggatgc tcagtttcgg ctttctcggc gttcagacgg cctttaccct gcaaagctcg 120
cagatgagcc gcatcttcca gacgctcggt gccgatccgc acagcctcgg ctggttcttt 180
atcctgccgc cgctggcggg gatgctggtg cagccgattg tcggccatta ctccgaccgc 240
acttggaagc cgcgtttggg cggccgccgt ctgccgtatc tgctttatgg cacgctgatt 300
gcggttattg tgatgatttt gatgccgaac tcgggcagct tcggtttcgg ctatgcgtcg 360
ctggcggctt tgtcgttcgg cgcgctgatg attgcgctgt tagacgtgtc gtcaaatatg 420
gcgatgcagc cgtttaagat gatggtcggc gacatggtca acgaggagca gaaaggctac 480
gcctacggga ttcaaagttt cttagcgaat acgggcgcgg tcgtggcggc gattctgccg 540
tttgtgtttg cgtatatcgg tttggcgaac accgccgaga aaggcgttgt gccgcagacc 600
gtggtcgtgg cgttttatgt gggtgcggcg ttgctggtga ttaccagcgc gttcacgatt 660
ttcaaagtga aggaatacaa tccggaaacc tacgcccgtt accacggcat cgatgtcgcc 720
gcgaatcagg aaaaagccaa ctggatcgaa ctcttgaaaa ccgcgcctaa ggcgttttgg 780
acggttactt tggtgcaatt cttctgctgg ttcgccttcc aatatatgtg gacttactcg 840
gcaggcgcga ttgcggaaaa cgtctggcac accaccgatg cgtcttccgt aggttatcag 900
gaggcgggta actggtacgg cgttttggcg gcggtgcagt cggttgcggc ggtgatttgt 960
tcgtttgtat tggcgaaagt gccgaataaa taccataagg cgggttattt cggctgtttg 1020
gctttgggcg cgctcggctt tttctccgtt ttcttcatcg gcaaccaata cgcgctggtg 1080
ttgtcttata ccttaatcgg catcgcttgg gcgggcatta tcacttatcc gctgacgatt 1140
gtgaccaacg ccttgtcggg caagcatatg ggcacttact tgggcctgtt taacggctct 1200
atctgtatgc cgcaaatcgt cgcttcgctg ttgagtttcg tgcttttccc tatgctgggc 1260
ggcttgcagg ccactatgtt cttggtaggg ggcgtcgtcc tgctgctggg cgcgttttcc 1320
gtgttcctga ttaaagaaac acacggcggg gtttga 1356
<210> 152
<211> 451
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 152
Met Ser Glu Tyr Thr Pro Gln Thr Ala Lys Gln Gly Leu Pro Ala Leu
1 5 10 15
Ala Lys Ser Thr Ile Trp Met Leu Ser Phe Gly Phe Leu Gly Val Gln
20 25 30
Thr Ala Phe Thr Leu Gln Ser Ser Gln Met Ser Arg Ile Phe Gln Thr
35 40 45
Leu Gly Ala Asp Pro His Ser Leu Gly Trp Phe Phe Ile Leu Pro Pro
50 55 60
Leu Ala Gly Met Leu Val Gln Pro Ile Val Gly His Tyr Ser Asp Arg
65 70 75 80
Thr Trp Lys Pro Arg Leu Gly Gly Arg Arg Leu Pro Tyr Leu Leu Tyr
85 90 95
Gly Thr Leu Ile Ala Val Ile Val Met Ile Leu Met Pro Asn Ser Gly
100 105 110
Ser Phe Gly Phe Gly Tyr Ala Ser Leu Ala Ala Leu Ser Phe Gly Ala
115 120 125
Leu Met Ile Ala Leu Leu Asp Val Ser Ser Asn Met Ala Met Gln Pro
130 135 140
Phe Lys Met Met Val Gly Asp Met Val Asn Glu Glu Gln Lys Gly Tyr
145 150 155 160
Ala Tyr Gly Ile Gln Ser Phe Leu Ala Asn Thr Gly Ala Val Val Ala
165 170 175
Ala Ile Leu Pro Phe Val Phe Ala Tyr Ile Gly Leu Ala Asn Thr Ala
180 185 190
Glu Lys Gly Val Val Pro Gln Thr Val Val Val Ala Phe Tyr Val Gly
195 200 205
Ala Ala Leu Leu Val Ile Thr Ser Ala Phe Thr Ile Phe Lys Val Lys
210 215 220
Glu Tyr Asn Pro Glu Thr Tyr Ala Arg Tyr His Gly Ile Asp Val Ala
225 230 235 240
Ala Asn Gln Glu Lys Ala Asn Trp Ile Glu Leu Leu Lys Thr Ala Pro
245 250 255
Lys Ala Phe Trp Thr Val Thr Leu Val Gln Phe Phe Cys Trp Phe Ala
260 265 270
Phe Gln Tyr Met Trp Thr Tyr Ser Ala Gly Ala Ile Ala Glu Asn Val
275 280 285
Trp His Thr Thr Asp Ala Ser Ser Val Gly Tyr Gln Glu Ala Gly Asn
290 295 300
Trp Tyr Gly Val Leu Ala Ala Val Gln Ser Val Ala Ala Val Ile Cys
305 310 315 320
Ser Phe Val Leu Ala Lys Val Pro Asn Lys Tyr His Lys Ala Gly Tyr
325 330 335
Phe Gly Cys Leu Ala Leu Gly Ala Leu Gly Phe Phe Ser Val Phe Phe
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Ile Gly Asn Gln Tyr Ala Leu Val Leu Ser Tyr Thr Leu Ile Gly Ile
355 360 365
Ala Trp Ala Gly Ile Ile Thr Tyr Pro Leu Thr Ile Val Thr Asn Ala
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Leu Ser Gly Lys His Met Gly Thr Tyr Leu Gly Leu Phe Asn Gly Ser
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Ile Cys Met Pro Gln Ile Val Ala Ser Leu Leu Ser Phe Val Leu Phe
405 410 415
Pro Met Leu Gly Gly Leu Gln Ala Thr Met Phe Leu Val Gly Gly Val
420 425 430
Val Leu Leu Leu Gly Ala Phe Ser Val Phe Leu Ile Lys Glu Thr His
435 440 445
Gly Gly Val
450
<210> 153
<211> 1020
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 153
atgatagggg atcgccgcgc cggcaaccat ttcggatttt ccaaagcaaa tacttttcaa 60
atcaaaaaaa aggatttact ttatgtcgga atatacgcct caaacagcaa aacaaggttt 120
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gcacaatttg ggctggtttt tcatcctgcc gccgctggcg gggatgctgg ttcagccgat 300
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aacgaggagc agaaaagcta cgcctacggg attcaaagtt tcttagcgaa tacggacgcg 600
gttgtggcag cgattctgcc gtttgtgttc gcgtatatcg gtttggcgaa cactgccgag 660
aaaggcgttg tgccacaaac cgtggtcgta gcattctatg tgggtgcggc gttactgatt 720
attaccagtg cgttcacaat ctccaaagtc aaagaatacg acccggaaac ctacgcccgt 780
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cggtatatgt ggacttactc ggcaggcgcg attgcagaaa acgtctggca cactaccgat 960
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<210> 154
<211> 339
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 154
Met Ile Gly Asp Arg Arg Ala Gly Asn His Phe Gly Phe Ser Lys Ala
1 5 10 15
Asn Thr Phe Gln Ile Lys Lys Lys Asp Leu Leu Tyr Val Gly Ile Tyr
20 25 30
Ala Ser Asn Ser Lys Thr Arg Phe Ala Arg Ala Gly Lys Lys His Asp
35 40 45
Leu Asp Val Glu Leu Arg Leu Ser Arg Arg Ser Asp Gly Leu Tyr Pro
50 55 60
Ala Lys Leu Ala Asp Glu Pro His Phe Ser Asn Ala Arg Arg Arg Pro
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Ala Gln Phe Gly Leu Val Phe His Pro Ala Ala Ala Gly Gly Asp Ala
85 90 95
Gly Ser Ala Asp Ser Gly Tyr Tyr Ser Asp Arg Thr Trp Lys Pro Arg
100 105 110
Leu Gly Gly Arg Arg Leu Pro Tyr Leu Leu Tyr Gly Thr Leu Ile Ala
115 120 125
Val Ile Val Met Ile Leu Met Pro Asn Ser Gly Ser Phe Gly Phe Gly
130 135 140
Tyr Ala Ser Leu Ala Ala Leu Ser Phe Gly Ala Leu Met Ile Ala Leu
145 150 155 160
Leu Asp Val Ser Ser Asn Met Ala Met Gln Pro Phe Lys Met Met Val
165 170 175
Gly Asp Met Val Asn Glu Glu Gln Lys Ser Tyr Ala Tyr Gly Ile Gln
180 185 190
Ser Phe Leu Ala Asn Thr Asp Ala Val Val Ala Ala Ile Leu Pro Phe
195 200 205
Val Phe Ala Tyr Ile Gly Leu Ala Asn Thr Ala Glu Lys Gly Val Val
210 215 220
Pro Gln Thr Val Val Val Ala Phe Tyr Val Gly Ala Ala Leu Leu Ile
225 230 235 240
Ile Thr Ser Ala Phe Thr Ile Ser Lys Val Lys Glu Tyr Asp Pro Glu
245 250 255
Thr Tyr Ala Arg Tyr His Gly Ile Asp Val Ala Ala Asn Gln Glu Lys
260 265 270
Ala Asn Trp Phe Glu Leu Leu Lys Thr Ala Pro Lys Val Phe Trp Thr
275 280 285
Val Thr Pro Val Gln Phe Phe Cys Trp Phe Ala Phe Arg Tyr Met Trp
290 295 300
Thr Tyr Ser Ala Gly Ala Ile Ala Glu Asn Val Trp His Thr Thr Asp
305 310 315 320
Ala Ser Ser Val Gly His Gln Glu Ala Gly Asn Arg Tyr Gly Val Leu
325 330 335
Ala Ala Val
<210> 155
<211> 360
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<400> 155
atgttgttcc gtaaaacgac cgccgccgtt ttggcgcata ccttgatgct gaacggctgt 60
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 156
Met Leu Phe Arg Lys Thr Thr Ala Ala Val Leu Ala His Thr Leu Met
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Leu Asn Gly Cys Thr Leu Met Leu Trp Gly Met Asn Asn Pro Val Ser
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Glu Thr Ile Thr Arg Lys His Val Xaa Lys Asp Gln Ile Arg Xaa Phe
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Gly Val Val Ala Glu Asp Asn Ala Gln Leu Glu Lys Gly Ser Leu Val
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<211> 716
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 157
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<211> 238
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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Met Leu Phe Arg Lys Thr Thr Ala Ala Val Leu Ala Ala Thr Leu Met
1 5 10 15
Leu Asn Gly Cys Thr Leu Met Leu Trp Gly Met Asn Asn Pro Val Ser
20 25 30
Glu Thr Ile Thr Arg Lys His Val Asp Lys Asp Gln Ile Arg Ala Phe
35 40 45
Gly Val Val Ala Glu Asp Asn Ala Gln Leu Glu Lys Gly Ser Leu Val
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65 70 75 80
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Val Glu Asp Thr Pro Ser Tyr Ala Arg His Gln Ala Leu Pro Val Lys
100 105 110
Leu Glu Ser Pro Gly Ser Gln Asn Phe Ser Thr Glu Gly Leu Cys Leu
115 120 125
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Gly Phe Glu Ala Val Lys Leu Asp Asn Arg Thr Ile Tyr Thr Arg Cys
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Val Ser Ala Lys Gly Lys Tyr Tyr Ala Thr Pro Gln Lys Leu Asn Ala
165 170 175
Asp Tyr His Phe Glu Gln Ser Val Pro Ala Asp Ile Tyr Tyr Thr Val
180 185 190
Thr Glu Glu His Thr Asp Lys Ser Lys Leu Phe Ala Asn Ile Leu Tyr
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Thr Pro Pro Phe Leu Ile Leu Asp Ala Ala Gly Ala Val Leu Ala Leu
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Pro Ala Ala Ala Leu Gly Ala Val Val Asp Ala Ala Arg Lys
225 230 235
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 159
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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Met Leu Phe Arg Lys Thr Thr Ala Ala Val Leu Ala Ala Thr Leu Met
1 5 10 15
Leu Asn Gly Cys Thr Val Met Met Trp Gly Met Asn Ser Pro Phe Ser
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Glu Thr Thr Ala Arg Lys His Val Asp Lys Asp Gln Ile Arg Ala Phe
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Lys Leu Thr Gly Ile Leu Lys Ala Gly Leu Asp Lys Gln Phe Gln Met
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165 170 175
Tyr His Phe Glu Gln Ser Val Pro Ala Asp Ile Tyr Tyr Thr Val Thr
180 185 190
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Pro Thr Thr Leu Ile Leu Asp Ala Val Gly Ala Val Leu Ala Leu Pro
210 215 220
Val Ala Ala Leu Ile Ala Ala Thr Asn Ser Ser Asp Lys
225 230 235
<210> 161
<211> 714
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 161
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<210> 162
<211> 237
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 162
Met Leu Phe Arg Lys Thr Thr Ala Ala Val Leu Ala Ala Thr Leu Ile
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Pro Met Ala Leu Ile Ala Ala Ala Asn Ser Ser Asp Lys
225 230 235
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<211> 375
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (235)..(235)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 163
gtcagtcctg tactgcctat tacacacgaa cggacagggt ttgaaggtgt tatcggttat 60
gaaacccatt tttcagggca cggacatgaa gtacacagtc cgttcgatca tcatgattca 120
aaaagcactt ctgatttcag cggcggtgta gacggcggtt ttactgttta ccaacttcat 180
cgaacatggt cggaaatcca tccggaggat gaatatgacg ggccgcaagc agcgnattat 240
ccgccccccg gaggagcaag ggatatatac agctattatg tcaaaggaac ttcaacaaaa 300
acaaagacta gtattgtccc tcaagcccca ttttcagacc gttggctaga agaaaatgcc 360
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<210> 164
<211> 125
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (79)..(79)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 164
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Thr Ser Thr Lys Thr Lys Thr Ser Ile Val Pro Gln Ala Pro Phe Ser
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Asp Arg Trp Leu Glu Glu Asn Ala Gly Ala Ala Ser Gly
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 166
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His Leu Phe Gly Asn Ala Arg Gly Ser Val Lys Lys Arg Val Tyr Ala
50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
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Gly Ala Ala Ser Gly Phe Phe Ser Arg Ala Asp Glu Ala Gly Lys Leu
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210 215 220
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Ala Asp Ala His Pro Asn Ile Thr Ala Thr Ala Gln Thr Ala Leu Ser
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Ala Ala Arg His Met Gln Thr Leu Asp Gly Glu Met Ala Gly Gly Asn
355 360 365
Lys Pro Ile Lys Ser Leu Pro Asn Ser Ala Ala Glu Lys Arg Lys Gln
370 375 380
Asn Phe Glu Lys Phe Asn Ser Asn Trp Ser Ser Ala Ser Phe Asp Ser
385 390 395 400
Val His Lys Thr Leu Thr Pro Asn Ala Pro Gly Ile Leu Ser Pro Asp
405 410 415
Lys Val Lys Thr Arg Tyr Thr Ser Leu Asp Gly Lys Ile Thr Ile Ile
420 425 430
Lys Asp Asn Glu Asn Asn Tyr Phe Arg Ile His Asp Asn Ser Arg Lys
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Gly Lys Gln Ala Lys Asp Tyr Leu Gln Gln Gln Thr His Ile Arg Asn
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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cacgaagtac acagtccgtt cgataatcat gattcaaaaa gcacttctga tttcagcggc 360
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tttcaagggg tagggattgg ggcaattaca gacagtgcgg taagcccggt cacagataca 780
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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aacggcttgg acaatcaggc atttgaagac caaatgttcc acacgcgggc agatgcaccg 120
atgcag 126
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 174
Met Lys Lys Gln Ile Thr Ala Ala Val Met Met Leu Ser Met Ile Ala
1 5 10 15
Pro Ala Met Ala Asn Gly Leu Asp Asn Gln Ala Phe Glu Asp Gln Met
20 25 30
Phe His Thr Arg Ala Asp Ala Pro Met Gln
35 40
<210> 175
<211> 546
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 175
atgaaaaaac aaatcaccgc agccgtaatg atgctgtcta tgattgcccc cgcaatggca 60
aacggcttgg acaatcaggc atttgaagac caagtgttcc acacgcgggc agatgcaccg 120
atgcagttgg cggagctttc tcaaaaggag atgaaggaga cagagggggc gtttcttcca 180
ttggctatct tgggtggtgc tgccattggt atgtggacac agcatggttt tagttatgca 240
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aaatttcccc attatcatcg tcgagttacg gataatacgg gcaagacttt gcctggacag 480
ggaattggtc gtcatcgccc ttgggaatca aaatctacgg acagatcatg gaaaaaccgc 540
ttctaa 546
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 176
Met Lys Lys Gln Ile Thr Ala Ala Val Met Met Leu Ser Met Ile Ala
1 5 10 15
Pro Ala Met Ala Asn Gly Leu Asp Asn Gln Ala Phe Glu Asp Gln Val
20 25 30
Phe His Thr Arg Ala Asp Ala Pro Met Gln Leu Ala Glu Leu Ser Gln
35 40 45
Lys Glu Met Lys Glu Thr Glu Gly Ala Phe Leu Pro Leu Ala Ile Leu
50 55 60
Gly Gly Ala Ala Ile Gly Met Trp Thr Gln His Gly Phe Ser Tyr Ala
65 70 75 80
Thr Thr Gly Arg Pro Ala Ser Val Arg Asp Val Ala Ile Ala Gly Gly
85 90 95
Leu Gly Ala Ile Pro Gly Gly Val Gly Ala Ala Gly Lys Val Val Ser
100 105 110
Phe Ala Lys Tyr Gly Arg Glu Ile Lys Ile Gly Asn Asn Met Arg Ile
115 120 125
Ala Pro Phe Gly Asn Arg Thr Gly His Pro Ile Gly Lys Phe Pro His
130 135 140
Tyr His Arg Arg Val Thr Asp Asn Thr Gly Lys Thr Leu Pro Gly Gln
145 150 155 160
Gly Ile Gly Arg His Arg Pro Trp Glu Ser Lys Ser Thr Asp Arg Ser
165 170 175
Trp Lys Asn Arg Phe
180
<210> 177
<211> 546
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
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atgaaaaaac aaatcaccgc agccgtaatg atgctgtcta tgattgcccc cgcaatggca 60
aacggcttgg acaatcaggc atttgaagac caagtgttcc acacgcgggc agatgcaccg 120
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ttggntatct tgggtggtgc tgccattggt atgtggacac agcatggttt tagttatgca 240
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aaatttcccc attatcatcg tcgagttacg gataatacgg gcaagacttt gcctggacag 480
ggaattggtc gtcatcgccc ttgggaatca aaatctacgg acagatcatg gaaaaaccgc 540
ttctaa 546
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 178
Met Lys Lys Gln Ile Thr Ala Ala Val Met Met Leu Ser Met Ile Ala
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Pro Ala Met Ala Asn Gly Leu Asp Asn Gln Ala Phe Glu Asp Gln Val
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Phe His Thr Arg Ala Asp Ala Pro Met Gln Leu Ala Glu Leu Ser Gln
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Gly Gly Ala Ala Ile Gly Met Trp Thr Gln His Gly Phe Ser Tyr Ala
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
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<211> 179
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 180
Met Lys Lys Gln Ile Thr Ala Ala Val Met Met Leu Ser Met Ile Ala
1 5 10 15
Pro Ala Met Ala Asn Gly Leu Asp Asn Gln Ala Phe Glu Asp Gln Val
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Phe His Thr Arg Ala Asp Ala Pro Met Gln Leu Ala Glu Leu Ser Gln
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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<400> 181
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 182
Met Asn Lys Thr Leu Tyr Arg Val Ile Phe Asn Arg Lys Arg Gly Ala
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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Met Asn Lys Thr Leu Tyr Arg Val Ile Phe Asn Arg Lys Arg Gly Ala
1 5 10 15
Val Val Ala Val Ala Glu Thr Thr Lys Arg Glu Gly Lys Ser Cys Ala
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Asp Ser Asp Ser Gly Ser Ala His Val Lys Ser Val Pro Phe Gly Thr
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 185
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 186
Met Asn Lys Thr Leu Tyr Arg Val Ile Phe Asn Arg Lys Arg Gly Ala
1 5 10 15
Val Val Ala Val Ala Glu Thr Thr Lys Arg Glu Gly Lys Ser Cys Ala
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Leu Ala Leu Gly Thr Val Asn Ile Ala Phe Ala Asp Gly Ile Ile Thr
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100 105 110
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115 120 125
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145 150 155 160
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165 170 175
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<210> 187
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 187
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<211> 81
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 188
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1 5 10 15
Asn Phe Gly Asp Ile Gly Val Ser Trp Arg Leu Ala Arg Val Leu His
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Arg Glu Leu Gly Trp Gln Val His Leu Trp Thr Asp Asp Val Ser Ala
35 40 45
Leu Arg Ala Leu Cys Pro Asp Leu Pro Asp Val Pro Cys Val His Gln
50 55 60
Asp Ile His Val Arg Thr Trp His Ser Asp Ala Ala Asp Ile Asp Thr
65 70 75 80
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<210> 189
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 189
atgaatactc ctccttttgt ctgttggatt ttttgcaagg tcatcgacaa tttcggcgac 60
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 190
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Asn Phe Gly Asp Ile Gly Val Ser Trp Arg Leu Ala Arg Val Leu His
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Arg Glu Leu Gly Trp Gln Val His Leu Trp Thr Asp Asp Val Ser Ala
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Leu Arg Ala Leu Cys Pro Asp Leu Pro Asp Val Pro Cys Val His Gln
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65 70 75 80
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100 105 110
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Pro Ser Pro Gln Glu Gly Val Gln Lys Tyr Phe Trp Phe Met Gly Phe
130 135 140
Ser Glu Lys Ser Gly Gly Leu Ile Arg Glu Arg Asp Tyr Cys Glu Ala
145 150 155 160
Val Arg Phe Asp Thr Glu Ala Leu Arg Glu Arg Leu Met Leu Pro Glu
165 170 175
Lys Asn Ala Ser Glu Trp Leu Leu Phe Gly Tyr Arg Ser Asp Val Trp
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Ala Lys Trp Leu Glu Met Trp Arg Gln Ala Gly Ser Pro Met Thr Leu
195 200 205
Leu Leu Ala Gly Thr Gln Ile Ile Asp Ser Leu Lys Gln Ser Gly Val
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<211> 1149
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<221> misc_feature
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<220>
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<222> (642)..(642)
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<400> 191
atgaatactc ctcctttttc tgctggantt ttttgcaagg tcatcgacaa tttcggcgac 60
atcggcgttt cgtggcggct tgcccgtgtt ttgcaccgcg aactcggttg gcaggtgcat 120
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gcgcctgttc ncgatgtcgt catcgaaact tttgcctgcg acctgcccga aaatgtgctg 300
cacatcatcc gccgacacaa gccgctttgg ctgaantggg aatatttgag cgcggaggan 360
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aaacccttct tttggcacat ctacccgcaa gatgagaatg tccatctcga caaactccac 900
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ctttcagacg acctcaacgg cggagaggct ttatccgcaa cacaacgcct cgaatgttgg 1020
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 192
Met Asn Thr Pro Pro Phe Ser Ala Gly Xaa Phe Cys Lys Val Ile Asp
1 5 10 15
Asn Phe Gly Asp Ile Gly Val Ser Trp Arg Leu Ala Arg Val Leu His
20 25 30
Arg Glu Leu Gly Trp Gln Val His Leu Trp Thr Asp Asp Val Ser Ala
35 40 45
Leu Arg Ala Leu Cys Pro Asp Leu Pro Asp Val Xaa Cys Val His Gln
50 55 60
Asp Ile His Val Arg Thr Trp His Ser Asp Ala Ala Asp Ile Asp Thr
65 70 75 80
Ala Pro Val Xaa Asp Val Val Ile Glu Thr Phe Ala Cys Asp Leu Pro
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Ser Val Arg Leu Val Lys Ile Pro Phe Val Pro Gln Gln Asp Phe Asp
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Lys Leu Leu His Leu Ala Asp Cys Ala Val Ile Arg Gly Glu Asp Ser
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Phe Val Arg Ala Gln Leu Ala Gly Lys Pro Phe Phe Trp His Ile Tyr
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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Val Ile Asp Asn Phe Gly Asp Ile Gly Val Ser Trp Arg Leu Ala Arg
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Val Leu His Arg Glu Leu Gly Trp Gln Val His Leu Trp Thr Asp Asp
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Val Ser Ala Leu Arg Ala Leu Cys Pro Asp Leu Pro Asp Val Pro Phe
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His Leu Met Pro Ser Pro Gln Glu Gly Val Gln Lys Tyr Phe Trp Phe
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Met Gly Phe Ser Glu Lys Ser Gly Gly Leu Ile Arg Glu Arg Asp Tyr
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His Arg Leu Leu Ser Asp Asp Leu Asn Gly Gly Glu Ala Leu Ser Ala
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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Met Asn Thr Tyr Ala Phe Pro Val Cys Trp Ile Phe Cys Lys Val Ile
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Asp Asn Phe Gly Asp Ile Gly Val Ser Trp Arg Leu Ala Arg Val Leu
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His Arg Glu Leu Gly Trp Gln Val His Leu Trp Thr Asp Asp Val Ser
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Ala Leu Arg Ala Leu Cys Pro Asp Leu Pro Asp Val Pro Phe Val His
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Asn Trp Glu Tyr Leu Ser Ala Glu Glu Ser Asn Glu Arg Leu His Leu
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Ala Val Arg Phe Asp Thr Glu Ala Leu Arg Arg Arg Leu Val Leu Pro
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Glu Lys Asn Ala Pro Glu Trp Leu Leu Phe Gly Tyr Arg Gly Asp Val
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Trp Ala Lys Trp Leu Asp Met Trp Gln Gln Ala Gly Ser Leu Met Thr
195 200 205
Leu Leu Leu Ala Gly Ala Gln Ile Ile Asp Ser Leu Lys Gln Ser Gly
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Val Ile Pro Gln Asn Ala Leu Gln Asn Glu Gly Gly Val Phe Gln Thr
225 230 235 240
Ala Ser Val Arg Leu Val Lys Ile Pro Phe Val Pro Gln Gln Asp Phe
245 250 255
Asp Lys Leu Leu His Leu Ala Asp Cys Ala Val Ile Arg Gly Glu Asp
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Asp Lys Ala Tyr Gly Phe Tyr Thr Pro Glu Thr Ala Ser Val His Arg
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Leu Leu Ser Asp Asp Leu Asn Gly Gly Glu Ala Leu Ser Ala Thr Gln
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Gln Gly Ala Glu Asp Trp Ser Arg Tyr Leu Phe Gly Gln Pro Ser Ala
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Ser Glu Lys Leu Ala Ala Phe Val Ser Lys His Gln Lys Ile Arg
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<212> DNA
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ttgttcctgc gtgtnaaagt ggggcgtttt ttcagcagtc cggcgacgtg gtttcgggnc 60
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 198
Leu Phe Leu Arg Val Lys Val Gly Arg Phe Phe Ser Ser Pro Ala Thr
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Trp Phe Arg Xaa Lys Asp Pro Val Asn Gln Ala Val Leu Arg Leu Tyr
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Ser His Ser Leu Trp Leu Cys Thr Leu Leu Gly Met Leu Val Ser Val
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Leu Leu Ser Asn Ala Ala Ser Val Arg Ala Val Glu Met Leu Ala Trp
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Leu Pro Ser Lys Leu Gly Phe Pro Val Pro Asp Ala Arg Ser Val Ile
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Glu Gly Arg Leu Asn Gly Asn Ile Ala Asp Ala Arg Ala Trp Ser Gly
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Leu Leu Val Xaa Ser Ile Ala Cys Xaa Gly Ile Leu Pro Arg Leu
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 199
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 200
Met Leu Asn Pro Ser Arg Lys Leu Val Glu Leu Val Arg Ile Leu Asp
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Glu Gly Gly Phe Ile Phe Ser Gly Asp Pro Val Gln Ala Thr Glu Ala
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Leu Arg Arg Val Asp Gly Ser Thr Glu Glu Lys Ile Ile Arg Arg Ala
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Glu Met Ile Asp Arg Asn Arg Met Leu Arg Glu Thr Leu Glu Arg Val
50 55 60
Arg Ala Gly Ser Phe Trp Leu Trp Val Val Ala Ala Thr Phe Ala Phe
65 70 75 80
Phe Thr Gly Phe Ser Val Thr Tyr Leu Leu Met Asp Asn Gln Gly Leu
85 90 95
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Leu Ala Val Trp Leu Ala Met Leu Phe Leu Arg Val Lys Val Gly Arg
115 120 125
Phe Phe Ser Ser Pro Ala Thr Trp Phe Arg Gly Lys Asp Pro Val Asn
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Gln Ala Val Leu Arg Leu Tyr Ala Asp Glu Trp Arg Gln Pro Ser Val
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Arg Trp Lys Ile Gly Ala Thr Ser His Ser Leu Trp Leu Cys Thr Leu
165 170 175
Leu Gly Met Leu Val Ser Val Leu Leu Leu Leu Leu Val Arg Gln Tyr
180 185 190
Thr Phe Asn Trp Glu Ser Thr Leu Leu Ser Asn Ala Ala Ser Val Arg
195 200 205
Ala Val Glu Met Leu Ala Trp Leu Pro Ser Lys Leu Gly Phe Pro Val
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Pro Asp Ala Arg Ala Val Ile Glu Gly Arg Leu Asn Gly Asn Ile Ala
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Asp Ala Arg Ala Trp Ser Gly Leu Leu Val Gly Ser Ile Ala Cys Tyr
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Gly Ile Leu Pro Arg Leu Leu Ala Trp Val Val Cys Lys Ile Leu Leu
260 265 270
Lys Thr Ser Glu Asn Gly Leu Asp Leu Glu Lys Pro Tyr Tyr Gln Ala
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Glu Gly Arg Leu Ala Gln Glu Trp Leu Asp Lys Gly Val Ala Thr Asn
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Arg Glu Gln Val Ala Ala Leu Glu Thr Glu Leu Lys Gln Lys Pro Ala
355 360 365
Gln Leu Leu Ile Gly Val Arg Ala Gln Thr Val Pro Asp Arg Gly Val
370 375 380
Leu Arg Gln Ile Val Arg Leu Ser Glu Ala Ala Gln Gly Gly Ala Val
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<212> DNA
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<400> 201
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 202
Met Leu Asn Pro Ser Arg Lys Leu Val Glu Leu Val Arg Ile Leu Glu
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Glu Gly Gly Phe Ile Phe Ser Gly Asp Pro Val Gln Ala Thr Glu Ala
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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Leu Arg Arg Val Asp Gly Ser Thr Glu Glu Lys Ile Phe Arg Arg Ala
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Leu Gly Met Leu Val Ser Val Leu Leu Leu Leu Leu Val Arg Gln Tyr
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<222> (734)..(734)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (973)..(973)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
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<222> (1105)..(1105)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
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<222> (1184)..(1184)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 211
atgatgatnc cgttnataat gcttccttgg attgcgggtg tgcctgccgt gccgggtcag 60
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tctttgagtg tgttttcagc ttgtgctccg gcgtcgtccg gctgcctgtc ggtttnagct 300
gtgtcggcag gttgcggttt gacccggntt ttcttnggtg cggcagggga cggcagtccg 360
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ttggacgtag tttnggtaga gggtgatgac tttttgtacg ccgacggtgg tgctgacttt 780
ttgggtaatc tgcgcctgtt cttcgggggt gaggatgccc ataacgtagg ttacgttgcc 840
gtaggtaacg attttgacgc gcgcctgtgt ggcggggctg atgcccaaca gcgtggcgcg 900
gactttggat gtgttccaag tgtcgccggc gatgtcgccg gcagtgcgcg gcagggaggc 960
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<210> 212
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
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<222> (3)..(3)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 212
Met Met Xaa Pro Xaa Ile Met Leu Pro Trp Ile Ala Gly Val Pro Ala
1 5 10 15
Val Pro Gly Gln Lys Arg Leu Ser Arg Xaa Ser Leu Trp Gly Leu Gly
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Gly Xaa Phe Phe Gly Val Ser Gly Leu Val Trp Phe Ser Leu Gly Val
35 40 45
Ser Xaa Ser Leu Gly Val Ser Xaa Gly Cys Ala Cys Phe Ser Gly Val
50 55 60
Ser Phe Arg Gly Ser Gly Arg Gly Thr Phe Val Gly Ser Thr Gly Val
65 70 75 80
Ser Leu Ser Val Phe Ser Ala Cys Ala Pro Ala Ser Ser Gly Cys Leu
85 90 95
Ser Val Xaa Ala Val Ser Ala Gly Cys Gly Leu Thr Arg Xaa Phe Xaa
100 105 110
Gly Ala Ala Gly Asp Gly Ser Pro Leu Pro Leu Ser Ser Val Pro Ser
115 120 125
Gly Cys Ala Gly Ala Asp Glu Glu Ala Xaa Xaa Cys Ser Gly Trp Ala
130 135 140
Ala Ser Cys Pro Thr Thr Pro Phe Gly Ser Gln Asn Ser Val Ser Arg
145 150 155 160
Gly Leu Ser Val Cys Cys Gly Ser Val Trp Arg Val Leu Ser Pro Phe
165 170 175
Gly Xaa Asn Val Leu Thr Met Pro Ile Ala Asn Ala Pro Met Ala Val
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Ile Gln Met Ser Asn Thr Ala Arg Ile Arg Ser Leu Gly Val Ser Leu
195 200 205
Lys Gly Leu Phe Xaa Phe Phe Ala Ile Leu Ile Val Leu Leu Gly Cys
210 215 220
Arg Ala Met Pro Ser Glu Gly Gly Ser Asp Gly Ile Ala Glu Ser Ala
225 230 235 240
Leu Asp Val Val Xaa Val Glu Gly Asp Asp Phe Leu Tyr Ala Asp Gly
245 250 255
Gly Ala Asp Phe Leu Gly Asn Leu Arg Leu Phe Phe Gly Gly Glu Asp
260 265 270
Ala His Asn Val Gly Tyr Val Ala Val Gly Asn Asp Phe Asp Ala Arg
275 280 285
Leu Cys Gly Gly Ala Asp Ala Gln Gln Arg Gly Ala Asp Phe Gly Cys
290 295 300
Val Pro Ser Val Ala Gly Asp Val Ala Gly Ser Ala Arg Gln Gly Gly
305 310 315 320
Asp Gly Asn Val Xaa Val His Ala Phe Gly Gly Leu Phe Gly Thr Cys
325 330 335
Asn Leu Thr Asp Glu Leu Phe Leu Ala Phe Gly Gly Asp Leu Ser Glu
340 345 350
Gln Gln Gln Val Ala Val Val Ala Asp Asn Gly Asp Leu Gly Arg Val
355 360 365
Xaa Phe Gly Leu Val Val Leu Ala Gln Ile Gly Ala Gly Gly Gly Phe
370 375 380
Asp Thr Gln Arg His Tyr Val Val Val Gly Xaa Arg Ala Gly Gly Ser
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Ala Val Asp Gly Gly Phe Arg Ala Asp Arg Arg Ala Ala Asp Asp Cys
405 410 415
Ala Asp Ala Ala Ala Glu Gly Lys Ala Glu Asp Gly Gly Ser Gln Gly
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Ala Asp Gly Val Arg Phe Gly Phe His Arg Val Leu Pro Phe Leu Gly
435 440 445
Val Ser Asp Gly Ile Ala Leu Arg His Ala Val
450 455
<210> 213
<211> 1380
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 213
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
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Gly Val Phe Phe Gly Val Ser Gly Leu Val Trp Phe Ser Leu Gly Val
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Ser Phe Ser Leu Gly Val Ser Leu Gly Cys Ala Cys Phe Ser Gly Val
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Ser Phe Arg Gly Ser Gly Trp Gly Ala Phe Val Gly Ser Thr Gly Val
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Ser Leu Ser Val Phe Ser Ala Cys Val Pro Val Pro Val Asn Glu Ser
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Gly Ala Ala Gly Asp Gly Ser Pro Leu Pro Leu Ser Ser Val Pro Ser
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Gly Cys Ala Gly Ser Asp Glu Ala Ala Trp Trp Cys Ser Gly Trp Ala
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Gly Leu Ser Val Cys Cys Gly Ser Val Trp Arg Val Leu Ser Pro Phe
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Arg Ala Met Pro Ser Glu Gly Gly Ser Asp Gly Ile Ala Glu Ser Ala
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Leu Asp Val Val Leu Val Glu Gly Asn Asp Phe Leu Tyr Ala Asp Gly
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Gly Ala Asp Phe Leu Gly Asn Leu Arg Leu Phe Phe Gly Gly Glu Asp
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Asp Gly Asn Val Val Val Tyr Ala Phe Gly Gly Leu Phe Gly Thr Cys
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Asn Leu Thr Asp Glu Leu Phe Phe Ala Phe Gly Gly Asp Leu Ser Glu
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Gln Gln Gln Val Ala Val Val Ala Asp Asp Gly Asp Leu Gly Arg Val
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Ala Phe Gly Leu Val Val Leu Ala Gln Val Gly Thr Gly Gly Gly Phe
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Ala Val Asp Asp Gly Phe Cys Ala Asp Gly Gly Pro Ala Asp Asp Cys
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Ala Asp Gly Val Trp Phe Gly Phe His Arg Gly Leu Pro Phe Leu Gly
435 440 445
Val Ser Asp Gly Ile Ala Leu Arg His Ala Val
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<210> 215
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<212> DNA
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<220>
<221> misc_feature
<222> (66)..(66)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 215
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<210> 216
<211> 93
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(22)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 216
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
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<400> 219
atgaaaacct tcttcaaaac cctttccgcc gccgcactcg cgctcatcct cgccgcctgc 60
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gcgaanaaag aaatcgtctt cggcacgacc gtcggcgact tcggcgatat ggtcaaagaa 180
canatccaac ccgagctgga gaaaaaaggc tacaccgtca aactggtcga gtntaccgac 240
tatgtgcgcn cgaatctggc attggctgag ggcgagttgg acatcaacgt cttncaacac 300
anacnctatc ttgacgactn caaaaaanaa cacaatctgg acatcaccnn agtcttncaa 360
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ctcgacgaac tgggttngat caaactcaaa gacngcatca nnnngnngnn nnnancnana 540
nnnganannn nnnnannnnt nnnnnnnnnn nnnnncnncg nnnnnnnann nnnnnnnnnn 600
ncgnntnnnn nngcnnnnnt nnannntnnn nncnncnnnn nnnnntnnnn nannannagc 660
ggcatgaagc tgaccgaagc cctgttccaa gaaccgagct ttgcctatgt caactggtct 720
gccgtcaaaa ccgccgacaa agacagccaa tggcttaaag acgtaaccga ggcctataac 780
tccgacgcgt tcaaagccta cgcgcacaaa cgcttcgagg gctacaaatc ccctgccgca 840
tggaatgaag gcgcagccaa ataa 864
<210> 220
<211> 287
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 220
Met Lys Thr Phe Phe Lys Thr Leu Ser Ala Ala Ala Leu Ala Leu Ile
1 5 10 15
Leu Ala Ala Cys Gly Gly Gln Lys Asp Ser Ala Pro Ala Ala Ser Ala
20 25 30
Ser Ala Ala Ala Asp Asn Gly Ala Ala Xaa Lys Glu Ile Val Phe Gly
35 40 45
Thr Thr Val Gly Asp Phe Gly Asp Met Val Lys Glu Xaa Ile Gln Pro
50 55 60
Glu Leu Glu Lys Lys Gly Tyr Thr Val Lys Leu Val Glu Xaa Thr Asp
65 70 75 80
Tyr Val Arg Xaa Asn Leu Ala Leu Ala Glu Gly Glu Leu Asp Ile Asn
85 90 95
Val Xaa Gln His Xaa Xaa Tyr Leu Asp Asp Xaa Lys Lys Xaa His Asn
100 105 110
Leu Asp Ile Thr Xaa Val Xaa Gln Val Pro Thr Ala Pro Leu Gly Leu
115 120 125
Tyr Pro Gly Lys Leu Lys Ser Leu Xaa Xaa Val Lys Xaa Gly Ser Thr
130 135 140
Val Ser Ala Pro Asn Asp Pro Xaa Xaa Phe Xaa Arg Val Leu Val Met
145 150 155 160
Leu Asp Glu Leu Gly Xaa Ile Lys Leu Lys Asp Xaa Ile Xaa Xaa Xaa
165 170 175
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
180 185 190
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ala Xaa Xaa Xaa
195 200 205
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Gly Met Lys Leu
210 215 220
Thr Glu Ala Leu Phe Gln Glu Pro Ser Phe Ala Tyr Val Asn Trp Ser
225 230 235 240
Ala Val Lys Thr Ala Asp Lys Asp Ser Gln Trp Leu Lys Asp Val Thr
245 250 255
Glu Ala Tyr Asn Ser Asp Ala Phe Lys Ala Tyr Ala His Lys Arg Phe
260 265 270
Glu Gly Tyr Lys Ser Pro Ala Ala Trp Asn Glu Gly Ala Ala Lys
275 280 285
<210> 221
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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atgaaaacct tcttcaaaac cctttccgcc gccgcactcg cgctcatcct cgccgcctgc 60
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<211> 287
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 222
Met Lys Thr Phe Phe Lys Thr Leu Ser Ala Ala Ala Leu Ala Leu Ile
1 5 10 15
Leu Ala Ala Cys Gly Gly Gln Lys Asp Ser Ala Pro Ala Ala Ser Ala
20 25 30
Ser Ala Ala Ala Asp Asn Gly Ala Ala Lys Lys Glu Ile Val Phe Gly
35 40 45
Thr Thr Val Gly Asp Phe Gly Asp Met Val Lys Glu Gln Ile Gln Pro
50 55 60
Glu Leu Glu Lys Lys Gly Tyr Thr Val Lys Leu Val Glu Phe Thr Asp
65 70 75 80
Tyr Val Arg Pro Asn Leu Ala Leu Ala Glu Gly Glu Leu Asp Ile Asn
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100 105 110
Leu Asp Ile Thr Glu Val Phe Gln Val Pro Thr Ala Pro Leu Gly Leu
115 120 125
Tyr Pro Gly Lys Leu Lys Ser Leu Glu Glu Val Lys Asp Gly Ser Thr
130 135 140
Val Ser Ala Pro Asn Asp Pro Ser Asn Phe Ala Arg Val Leu Val Met
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Leu Asp Glu Leu Gly Trp Ile Lys Leu Lys Asp Gly Ile Asn Pro Leu
165 170 175
Thr Ala Ser Lys Ala Asp Ile Ala Glu Asn Leu Lys Asn Ile Lys Ile
180 185 190
Val Glu Leu Glu Ala Ala Gln Leu Pro Arg Ser Arg Ala Asp Val Asp
195 200 205
Phe Ala Val Val Asn Gly Asn Tyr Ala Ile Ser Ser Gly Met Lys Leu
210 215 220
Thr Glu Ala Leu Phe Gln Glu Pro Ser Phe Ala Tyr Val Asn Trp Ser
225 230 235 240
Ala Val Lys Thr Ala Asp Lys Asp Ser Gln Trp Leu Lys Asp Val Thr
245 250 255
Glu Ala Tyr Asn Ser Asp Ala Phe Lys Ala Tyr Ala His Lys Arg Phe
260 265 270
Glu Gly Tyr Lys Ser Pro Ala Ala Trp Asn Glu Gly Ala Ala Lys
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
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n 1
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 224
Met Lys Thr Phe Phe Lys Thr Leu Ser Thr Ala Ser Leu Ala Leu Ile
1 5 10 15
Leu Ala Ala Cys Gly Gly Gln Lys Asp Ser Ala Pro Ala Ala Ser Ala
20 25 30
Ala Ala Pro Ser Ala Asp Asn Gly Ala Ala Lys Lys Glu Ile Val Phe
35 40 45
Gly Thr Thr Val Gly Asp Phe Gly Asp Met Val Lys Glu Gln Ile Gln
50 55 60
Ala Glu Leu Glu Lys Lys Gly Tyr Thr Val Lys Leu Val Glu Phe Thr
65 70 75 80
Asp Tyr Val Arg Pro Asn Leu Ala Leu Ala Glu Gly Glu Leu Asp Ile
85 90 95
Asn Val Phe Gln His Lys Pro Tyr Leu Asp Asp Phe Lys Lys Glu His
100 105 110
Asn Leu Asp Ile Thr Glu Ala Phe Gln Val Pro Thr Ala Pro Leu Gly
115 120 125
Leu Tyr Pro Gly Lys Leu Lys Ser Leu Glu Glu Val Lys Asp Gly Ser
130 135 140
Thr Val Ser Ala Pro Asn Asp Pro Ser Asn Phe Ala Arg Ala Leu Val
145 150 155 160
Met Leu Asn Glu Leu Gly Trp Ile Lys Leu Lys Asp Gly Ile Asn Pro
165 170 175
Leu Thr Ala Ser Lys Ala Asp Ile Ala Glu Asn Leu Lys Asn Ile Lys
180 185 190
Ile Val Glu Leu Glu Ala Ala Gln Leu Pro Arg Ser Arg Ala Asp Val
195 200 205
Asp Phe Ala Val Val Asn Gly Asn Tyr Ala Ile Ser Ser Gly Met Lys
210 215 220
Leu Thr Glu Ala Leu Phe Gln Glu Pro Ser Phe Ala Tyr Val Asn Trp
225 230 235 240
Ser Ala Val Lys Thr Ala Asp Lys Asp Ser Gln Trp Leu Lys Asp Val
245 250 255
Thr Glu Ala Tyr Asn Ser Asp Ala Phe Lys Ala Tyr Ala His Lys Arg
260 265 270
Phe Glu Gly Tyr Lys Tyr Pro Ala Ala Trp Asn Glu Gly Ala Ala Lys
275 280 285
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<211> 867
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 225
atgaaaacct tcttcaaaac cctttccgcc gccgcactcg cgctcatcct cgcagcctgc 60
ggcggtcaaa aagacagcgc gcccgcagcc tctgccgccg ccccttctgc cgataacggc 120
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<211> 288
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 226
Met Lys Thr Phe Phe Lys Thr Leu Ser Ala Ala Ala Leu Ala Leu Ile
1 5 10 15
Leu Ala Ala Cys Gly Gly Gln Lys Asp Ser Ala Pro Ala Ala Ser Ala
20 25 30
Ala Ala Pro Ser Ala Asp Asn Gly Ala Ala Lys Lys Glu Ile Val Phe
35 40 45
Gly Thr Thr Val Gly Asp Phe Gly Asp Met Val Lys Glu Gln Ile Gln
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Ala Glu Leu Glu Lys Lys Gly Tyr Thr Val Lys Leu Val Glu Phe Thr
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Asp Tyr Val Arg Pro Asn Leu Ala Leu Ala Glu Gly Glu Leu Asp Ile
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Asn Val Phe Gln His Lys Pro Tyr Leu Asp Asp Phe Lys Lys Glu His
100 105 110
Asn Leu Asp Ile Thr Glu Ala Phe Gln Val Pro Thr Ala Pro Leu Gly
115 120 125
Leu Tyr Pro Gly Lys Leu Lys Ser Leu Glu Glu Val Lys Asp Gly Ser
130 135 140
Thr Val Ser Ala Pro Asn Asp Pro Ser Asn Phe Ala Arg Ala Leu Val
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Met Leu Asn Glu Leu Gly Trp Ile Lys Leu Lys Asp Gly Ile Asn Pro
165 170 175
Leu Thr Ala Ser Lys Ala Asp Ile Ala Glu Asn Leu Lys Asn Ile Lys
180 185 190
Ile Val Glu Leu Glu Ala Ala Gln Leu Pro Arg Ser Arg Ala Asp Val
195 200 205
Asp Phe Ala Val Val Asn Gly Asn Tyr Ala Ile Ser Ser Gly Met Lys
210 215 220
Leu Thr Glu Ala Leu Phe Gln Glu Pro Ser Phe Ala Tyr Val Asn Trp
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Ser Ala Val Lys Thr Ala Asp Lys Asp Ser Gln Trp Leu Lys Asp Val
245 250 255
Thr Glu Ala Tyr Asn Ser Asp Ala Phe Lys Ala Tyr Ala His Lys Arg
260 265 270
Phe Glu Gly Tyr Lys Tyr Pro Ala Ala Trp Asn Glu Gly Ala Ala Lys
275 280 285
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (697)..(728)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 227
cctcgtcgtc ctcggcatgc tccagtttca aggggcgatt tactccaagg cggtggaacg 60
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gatgtggcgt ttcatgcttg ccgacaacct ggccgactgc agcaaaatga ttgccgaaat 420
cagcaacggc aggcgcatga cccgcgaacg cctcgaggag aacatggcga aaatgcgcca 480
aatcaacgca cgcatggtca aaagccgcag ccatctcgcc gccacatcgg gcgaaagctg 540
catcagcccc gccatgatgg aagccatgca gcacgcccac cgtaaaatcg tcaacaccac 600
cgagctgctc ctgaccaccg ccgccaagct gcaatctccc aaactcaacg gcagcgaaat 660
ccggctgctt gaccgccact tcacactgct ccaaacnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 720
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tgcccacgaa cgccaacacc tgcgccaaag cctgcttga 939
<210> 228
<211> 318
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(6)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (78)..(78)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (201)..(201)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (230)..(230)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (239)..(249)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 228
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Arg Arg Pro Arg His Ala Pro Val Ser
1 5 10 15
Arg Gly Asp Leu Leu Gln Gly Gly Gly Thr Tyr Ala Arg His Gly His
20 25 30
Arg Ala Gly Arg Gly Phe Gly Arg Phe Met Ala Glu Pro Ala Leu Phe
35 40 45
Pro Arg Gln Pro Pro Leu Leu Pro His Arg Arg His Gly Lys Arg Thr
50 55 60
Gly Arg Leu Gly Gly Gly Arg Gln Lys Arg Leu Arg Pro Xaa Ala Gly
65 70 75 80
Arg Ala Asp Asp Val Tyr Ala His Arg Arg Gln Arg Gln Arg Met Ala
85 90 95
Arg Gln Arg Thr His Ala Arg His Glu Arg Pro His Arg Arg Gly His
100 105 110
Arg His Arg Arg Arg Gln Thr Ala Ala Ala Glu Ile His Thr Asp Val
115 120 125
Ala Phe His Ala Cys Arg Gln Pro Gly Arg Leu Gln Gln Asn Asp Cys
130 135 140
Arg Asn Gln Gln Arg Gln Ala His Asp Pro Arg Thr Pro Arg Gly Glu
145 150 155 160
His Gly Glu Asn Ala Pro Asn Gln Arg Thr His Gly Gln Lys Pro Gln
165 170 175
Pro Ser Arg Arg His Ile Gly Arg Lys Leu His Gln Pro Arg His Asp
180 185 190
Gly Ser His Ala Ala Arg Pro Pro Xaa Asn Arg Gln His His Arg Ala
195 200 205
Ala Pro Asp His Arg Arg Gln Ala Ala Ile Ser Gln Thr Gln Arg Gln
210 215 220
Arg Asn Pro Ala Ala Xaa Pro Pro Leu His Thr Ala Pro Asn Xaa Xaa
225 230 235 240
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Gln Thr Arg Pro Pro His Pro
245 250 255
His Arg His Arg His Gln Pro Arg Thr Gly Ser Pro Arg Arg Thr Pro
260 265 270
Pro Leu Pro Met Ala Gly Leu Pro Leu Ala Gln His Arg Tyr Ala Ser
275 280 285
Gly Asn Phe Arg Pro Arg His Pro Ala Ala Thr His Pro Pro Gln Met
290 295 300
Ala Gly Cys Pro Arg Thr Pro Thr Pro Ala Pro Lys Pro Ala
305 310 315
<210> 229
<211> 1
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 229
n 1
<210> 230
<211> 318
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 230
Met Asp Arg Asp Asp Arg Leu Arg Arg Pro Arg His Ala Pro Val Pro
1 5 10 15
Arg Arg Asp Leu Leu Gln Arg Gly Gly Thr Tyr Ala Arg Tyr Gly His
20 25 30
Arg Ala Gly Arg Gly Phe Gly Arg Phe Met Ala Glu Pro Ala Leu Phe
35 40 45
Pro Arg Gln Pro Pro Leu Leu Pro Asp His Arg His Gly Lys Arg Thr
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Gly Arg Leu Gly Gly Gly Arg Gln Lys Arg Leu Arg Pro Tyr Val Gly
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Gly Ala Asp Asp Val His Ala His Arg Arg Gln Arg Gln Arg Met Ala
85 90 95
Arg Gln Arg Pro Asp Ala Arg Asp Glu Arg Pro His Arg Arg Arg His
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Arg His Cys Arg Arg Gln Thr Ala Ala Ala Glu Ile His Thr Asp Val
115 120 125
Ala Phe His Ala Cys Arg Gln Pro Gly Arg Leu Gln Gln Asn Asp Cys
130 135 140
Arg Asn Gln Gln Arg Gln Ala Tyr Asp Ala Arg Thr Phe Gly Ala Glu
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Tyr Gly Gln Asn Ala Pro Asn Gln Arg Thr His Gly Gln Lys Pro Gln
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Pro Pro Arg Arg His Ile Gly Arg Lys Pro His Gln Pro Leu His Asp
180 185 190
Gly Ser His Ala Ala Arg Pro Pro Gln Asn Arg Gln His His Arg Ala
195 200 205
Ala Pro Asp His Arg Arg Gln Ala Ala Ile Ser Gln Thr Gln Arg Gln
210 215 220
Arg Asn Pro Ala Ala Arg Pro Pro Leu His Thr Ala Pro Asn Arg Pro
225 230 235 240
Ala Thr Asn Arg Arg Pro His Gln Arg Gln Thr Arg Pro Pro His Pro
245 250 255
His Arg His Arg His Gln Pro Arg Thr Gly Ser Pro Arg Arg Thr Pro
260 265 270
Pro Leu Pro Met Ala Gly Phe Pro Leu Ala Gln His Gln Tyr Ala Ser
275 280 285
Gly Asn Phe Arg Pro Arg His Pro Pro Ala Thr His Pro Pro Gln Met
290 295 300
Ala Gly Cys Pro Arg Thr Pro Thr Pro Ala Pro Lys Pro Ala
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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<221> misc_feature
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
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<222> (8)..(8)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 232
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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145 150 155 160
Leu Ala Cys Arg Arg Ala Leu Gly Cys Leu Gly Leu Glu Thr Gln Ile
165 170 175
Lys Trp Pro Asn Asp Leu Val Val Gly Arg Asp Lys Leu Gly Gly Ile
180 185 190
Leu Ile Glu Thr Val Arg Ala Gly Gly Lys Thr Val Ala Val Val Gly
195 200 205
Ile Gly Ile Asn Phe Val Leu Pro Lys Glu Val Glu Asn Ala Ala Ser
210 215 220
Val Gln Ser Leu Phe Gln Thr Ala Ser Arg Arg Gly Asn Ala Asp Ala
225 230 235 240
Ala Val Leu Leu Glu Thr Leu Leu Ala Glu Leu Gly Ala Val Leu Glu
245 250 255
Gln Tyr Ala Glu Glu Gly Phe Ala Pro Phe Leu Asn Glu Tyr Glu Thr
260 265 270
Ala Asn Arg Asp His Gly Lys Ala Val Leu Leu Leu Arg Asp Gly Glu
275 280 285
Thr Val Cys Glu Gly Thr Val Lys Gly Val Asp Gly Arg Gly Val Leu
290 295 300
His Leu Glu Thr Ala Glu Gly Glu Gln Thr Val Val Ser Gly Glu Ile
305 310 315 320
Ser Leu Arg Pro Asp Asn Arg Ser Val Ser Val Pro Lys Arg Pro Asp
325 330 335
Ser Glu Arg Phe Leu Leu Leu Glu Gly Gly Asn Ser Arg Leu Lys Trp
340 345 350
Ala Trp Val Glu Asn Gly Thr Phe Ala Thr Val Gly Ser Ala Pro Tyr
355 360 365
Arg Asp Leu Ser Pro Leu Gly Ala Glu Trp Ala Glu Lys Ala Asp Gly
370 375 380
Asn Val Arg Ile Val Gly Cys Ala Val Cys Gly Glu Ser Lys Lys Ala
385 390 395 400
Gln Val Lys Glu Gln Leu Ala Arg Lys Ile Glu Trp Leu Pro Ser Ser
405 410 415
Ala Gln Ala Leu Gly Ile Arg Asn His Tyr Arg His Pro Glu Glu His
420 425 430
Gly Ser Asp Arg Trp Phe Asn Ala Leu Gly Ser Arg Arg Phe Ser Arg
435 440 445
Asn Ala Cys Val Val Val Ser Cys Gly Thr Ala Val Thr Val Asp Ala
450 455 460
Leu Thr Asp Asp Gly His Tyr Leu Gly Gly Thr Ile Met Pro Gly Phe
465 470 475 480
His Leu Met Lys Glu Ser Leu Ala Val Arg Thr Ala Asn Leu Asn Arg
485 490 495
Pro Ala Gly Lys Arg Tyr Pro Phe Pro Thr Thr Thr Gly Asn Ala Val
500 505 510
Ala Ser Gly Met Met Asp Ala Val Cys Gly Ser Ile Met Met Met His
515 520 525
Gly Arg Leu Lys Glu Lys Asn Gly Ala Gly Lys Pro Val Asp Val Ile
530 535 540
Ile Thr Gly Gly Gly Ala Ala Lys Val Ala Glu Ala Leu Pro Pro Ala
545 550 555 560
Phe Leu Ala Glu Asn Thr Val Arg Val Ala Asp Asn Leu Val Ile His
565 570 575
Gly Leu Leu Asn Leu Ile Ala Ala Glu Gly Gly Glu Ser Glu His Ala
580 585 590
<210> 241
<211> 648
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 241
atgttttacc aaatccttgc cctgattatc tggagcagct cgtttattgc cgccaaatat 60
gtctatggcg gcatcgatcc cgcattgatg gtcggcgtgc gcctgctaat tgccgcgctg 120
cctgcactgc ccgcctgccg ccgtcatgtc ggcaagattc cgcgtgagga atggaagccg 180
ttgctgattg tgtcgttcgt caactatgtg ctgaccctgc tgcttcagtt tgtcgggttg 240
aaatacactt ccgccgccag cgcatcggtc attgtcggac tcgagccgct gctgatggtg 300
tttgtcggac actttttctt caacgacaaa gcgcgtgcct accactggat atgcggcgcg 360
gcggcatttg ccggtgtcgc gctgctgatg gcgggcggtg cggaagaggg cggcgaagtc 420
ggctggttcg gctgcctgct ggtgttgttg gcgggcgcgg gcttttgtgc cgctatgcgt 480
ccgacgcaaa ggctgattgc acgcatcggc gcaccggcat tcacatctgt ttccattgcc 540
gccgcatcgt tgatgtgcct gccgttttcg cttgctttgg cgcaaagtta taccgtggac 600
tggagcgtcg ggatggtatt gtcgctgctg tatttgggtt tggggtgc 648
<210> 242
<211> 216
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 242
Met Phe Tyr Gln Ile Leu Ala Leu Ile Ile Trp Ser Ser Ser Phe Ile
1 5 10 15
Ala Ala Lys Tyr Val Tyr Gly Gly Ile Asp Pro Ala Leu Met Val Gly
20 25 30
Val Arg Leu Leu Ile Ala Ala Leu Pro Ala Leu Pro Ala Cys Arg Arg
35 40 45
His Val Gly Lys Ile Pro Arg Glu Glu Trp Lys Pro Leu Leu Ile Val
50 55 60
Ser Phe Val Asn Tyr Val Leu Thr Leu Leu Leu Gln Phe Val Gly Leu
65 70 75 80
Lys Tyr Thr Ser Ala Ala Ser Ala Ser Val Ile Val Gly Leu Glu Pro
85 90 95
Leu Leu Met Val Phe Val Gly His Phe Phe Phe Asn Asp Lys Ala Arg
100 105 110
Ala Tyr His Trp Ile Cys Gly Ala Ala Ala Phe Ala Gly Val Ala Leu
115 120 125
Leu Met Ala Gly Gly Ala Glu Glu Gly Gly Glu Val Gly Trp Phe Gly
130 135 140
Cys Leu Leu Val Leu Leu Ala Gly Ala Gly Phe Cys Ala Ala Met Arg
145 150 155 160
Pro Thr Gln Arg Leu Ile Ala Arg Ile Gly Ala Pro Ala Phe Thr Ser
165 170 175
Val Ser Ile Ala Ala Ala Ser Leu Met Cys Leu Pro Phe Ser Leu Ala
180 185 190
Leu Ala Gln Ser Tyr Thr Val Asp Trp Ser Val Gly Met Val Leu Ser
195 200 205
Leu Leu Tyr Leu Gly Leu Gly Cys
210 215
<210> 243
<211> 855
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 243
atgttttacc aaatccttgc cctgattatc tggagcagct cgtttattgc cgccaaatat 60
gtctatggcg gcatcgatcc cgcattgatg gtcggcgtgc gcctgctaat tgccgcgctg 120
cctgcactgc ccgcctgccg ccgtcatgtc ggcaagattc cgcgtgagga atggaagccg 180
ttgctgattg tgtcgttcgt caactatgtg ctgaccctgc tgcttcagtt tgtcgggttg 240
aaatacactt ccgccgccag cgcatcggtc attgtcggac tcgagccgct gctgatggtg 300
tttgtcggac actttttctt caacgacaaa gcgcgtgcct accactggat atgcggcgcg 360
gcggcatttg ccggtgtcgc gctgctgatg gcgggcggtg cggaagaggg cggcgaagtc 420
ggctggttcg gctgcctgct ggtgttgttg gcgggcgcgg gcttttgtgc cgctatgcgt 480
ccgacgcaaa ggctgattgc acgcatcggc gcaccggcat tcacatctgt ttccattgcc 540
gccgcatcgt tgatgtgcct gccgttttcg cttgctttgg cgcaaagtta taccgtggac 600
tggagcgtcg ggatggtatt gtcgctgctg tatttgggtt tggggtgcgg ctggtacgcc 660
tattggctgt ggaacaaggg gatgagccgt gttcctgcca atgtttcggg actgttgatt 720
tcgctcgaac ccgtcgtcgg cgtgctgctg gcggttttga ttttgggcga acacctgtcg 780
cccgtgtccg ccttgggcgt gtttgtcgtc atcgccgcca ccttggttgc cggccggctg 840
tcgcatcaaa aataa 855
<210> 244
<211> 284
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 244
Met Phe Tyr Gln Ile Leu Ala Leu Ile Ile Trp Ser Ser Ser Phe Ile
1 5 10 15
Ala Ala Lys Tyr Val Tyr Gly Gly Ile Asp Pro Ala Leu Met Val Gly
20 25 30
Val Arg Leu Leu Ile Ala Ala Leu Pro Ala Leu Pro Ala Cys Arg Arg
35 40 45
His Val Gly Lys Ile Pro Arg Glu Glu Trp Lys Pro Leu Leu Ile Val
50 55 60
Ser Phe Val Asn Tyr Val Leu Thr Leu Leu Leu Gln Phe Val Gly Leu
65 70 75 80
Lys Tyr Thr Ser Ala Ala Ser Ala Ser Val Ile Val Gly Leu Glu Pro
85 90 95
Leu Leu Met Val Phe Val Gly His Phe Phe Phe Asn Asp Lys Ala Arg
100 105 110
Ala Tyr His Trp Ile Cys Gly Ala Ala Ala Phe Ala Gly Val Ala Leu
115 120 125
Leu Met Ala Gly Gly Ala Glu Glu Gly Gly Glu Val Gly Trp Phe Gly
130 135 140
Cys Leu Leu Val Leu Leu Ala Gly Ala Gly Phe Cys Ala Ala Met Arg
145 150 155 160
Pro Thr Gln Arg Leu Ile Ala Arg Ile Gly Ala Pro Ala Phe Thr Ser
165 170 175
Val Ser Ile Ala Ala Ala Ser Leu Met Cys Leu Pro Phe Ser Leu Ala
180 185 190
Leu Ala Gln Ser Tyr Thr Val Asp Trp Ser Val Gly Met Val Leu Ser
195 200 205
Leu Leu Tyr Leu Gly Leu Gly Cys Gly Trp Tyr Ala Tyr Trp Leu Trp
210 215 220
Asn Lys Gly Met Ser Arg Val Pro Ala Asn Val Ser Gly Leu Leu Ile
225 230 235 240
Ser Leu Glu Pro Val Val Gly Val Leu Leu Ala Val Leu Ile Leu Gly
245 250 255
Glu His Leu Ser Pro Val Ser Ala Leu Gly Val Phe Val Val Ile Ala
260 265 270
Ala Thr Leu Val Ala Gly Arg Leu Ser His Gln Lys
275 280
<210> 245
<211> 855
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 245
atgttttacc aaatccttgc cctgattatc tggagcagct cgtttattgc cgccaaatat 60
gtctatggcg gcatcgatcc cgcattgatg gtcggcgtgc gcctgctgat tgctgcgctg 120
cctgcactgc ccgcctgccg ccgtcatgtc ggcaagattc cgcgtgagga atggaagccg 180
ttgctgattg tgtcgttcgt caactatgtg ctgaccctgc tacttcagtt tgtcgggttg 240
aaatacactt ccgccgccag cgcatcggtc attgtcggac tcgagccact gctgatggtg 300
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tggagcgtcg gaatggtatt gtcgctgctg tatttgggcg tggggtgcag ctggtacgcc 660
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tcgctcgaac ccgtcgtcgg cgtgctgctg gcggttttga ttttgggcga acacctgtcg 780
cccgtgtccg tcttgggcgt gtttgtcgtc atcgccgcca ccttggttgc cggccggctg 840
tcgcatcaaa aataa 855
<210> 246
<211> 284
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 246
Met Phe Tyr Gln Ile Leu Ala Leu Ile Ile Trp Ser Ser Ser Phe Ile
1 5 10 15
Ala Ala Lys Tyr Val Tyr Gly Gly Ile Asp Pro Ala Leu Met Val Gly
20 25 30
Val Arg Leu Leu Ile Ala Ala Leu Pro Ala Leu Pro Ala Cys Arg Arg
35 40 45
His Val Gly Lys Ile Pro Arg Glu Glu Trp Lys Pro Leu Leu Ile Val
50 55 60
Ser Phe Val Asn Tyr Val Leu Thr Leu Leu Leu Gln Phe Val Gly Leu
65 70 75 80
Lys Tyr Thr Ser Ala Ala Ser Ala Ser Val Ile Val Gly Leu Glu Pro
85 90 95
Leu Leu Met Val Phe Val Gly His Phe Phe Phe Asn Asp Lys Ala Arg
100 105 110
Ala Tyr His Trp Ile Cys Gly Ala Ala Ala Phe Ala Gly Val Ala Leu
115 120 125
Leu Met Ala Gly Gly Ala Glu Glu Gly Gly Glu Val Gly Trp Phe Gly
130 135 140
Cys Leu Leu Val Leu Leu Ala Gly Ala Gly Phe Cys Ala Ala Met Arg
145 150 155 160
Pro Thr Gln Arg Leu Ile Ala Arg Ile Gly Ala Pro Ala Phe Thr Ser
165 170 175
Val Ser Ile Ala Ala Ala Ser Leu Met Cys Leu Pro Phe Ser Leu Ala
180 185 190
Leu Ala Gln Ser Tyr Thr Val Asp Trp Ser Val Gly Met Val Leu Ser
195 200 205
Leu Leu Tyr Leu Gly Val Gly Cys Ser Trp Tyr Ala Tyr Trp Leu Trp
210 215 220
Asn Lys Gly Met Ser Arg Val Pro Ala Asn Val Ser Gly Leu Leu Ile
225 230 235 240
Ser Leu Glu Pro Val Val Gly Val Leu Leu Ala Val Leu Ile Leu Gly
245 250 255
Glu His Leu Ser Pro Val Ser Val Leu Gly Val Phe Val Val Ile Ala
260 265 270
Ala Thr Leu Val Ala Gly Arg Leu Ser His Gln Lys
275 280
<210> 247
<211> 876
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 247
atgttttacc aaatccttgc cctgattatc tggggcagct cgtttattgc cgccaaatat 60
gtctatggcg gcatcgatcc cgcattgatg gtcggcgtgc gcctgctgat tgccgcgctg 120
cctgcactgc ccgcctgccg ccgtcatgtc ggcaagattc cgcgtgagga atggaagccg 180
ttgctgattg tgtcgttcgt caactatgtg ctgaccctgc tgcttcagtt tgtcgggttg 240
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gcggcatttg ccggtgtcgc gctgctgatg gcgggcggtg cggaagaggg cggcgaagtc 420
ggctggttcg gctgcctgct ggtgttgttg gcgggcgcgg gcttttgtgc cgctatgcgt 480
ccgacgcaaa ggctgattgc ccgcatcggc gcaccggcat tcacatctgt ttccattgcc 540
gccgcatcgt tgatgtgcct gccgttttcg cttgctttgg cgcaaagtta taccgtggac 600
tggagcgtcg ggatggtatt gtcgctgttg tatttgggtt tggggtgcgg ctggtacgcc 660
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tcgcgcaggg acgcgcaaaa cggcaatgcc gtctga 876
<210> 248
<211> 291
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 248
Met Phe Tyr Gln Ile Leu Ala Leu Ile Ile Trp Gly Ser Ser Phe Ile
1 5 10 15
Ala Ala Lys Tyr Val Tyr Gly Gly Ile Asp Pro Ala Leu Met Val Gly
20 25 30
Val Arg Leu Leu Ile Ala Ala Leu Pro Ala Leu Pro Ala Cys Arg Arg
35 40 45
His Val Gly Lys Ile Pro Arg Glu Glu Trp Lys Pro Leu Leu Ile Val
50 55 60
Ser Phe Val Asn Tyr Val Leu Thr Leu Leu Leu Gln Phe Val Gly Leu
65 70 75 80
Lys Tyr Thr Ser Ala Ala Ser Ala Ser Val Ile Val Gly Leu Glu Pro
85 90 95
Leu Leu Met Val Phe Val Gly His Phe Phe Phe Asn Asp Lys Ala Arg
100 105 110
Ala Tyr His Trp Ile Cys Gly Ala Ala Ala Phe Ala Gly Val Ala Leu
115 120 125
Leu Met Ala Gly Gly Ala Glu Glu Gly Gly Glu Val Gly Trp Phe Gly
130 135 140
Cys Leu Leu Val Leu Leu Ala Gly Ala Gly Phe Cys Ala Ala Met Arg
145 150 155 160
Pro Thr Gln Arg Leu Ile Ala Arg Ile Gly Ala Pro Ala Phe Thr Ser
165 170 175
Val Ser Ile Ala Ala Ala Ser Leu Met Cys Leu Pro Phe Ser Leu Ala
180 185 190
Leu Ala Gln Ser Tyr Thr Val Asp Trp Ser Val Gly Met Val Leu Ser
195 200 205
Leu Leu Tyr Leu Gly Leu Gly Cys Gly Trp Tyr Ala Tyr Trp Leu Trp
210 215 220
Asn Lys Gly Met Ser Arg Val Pro Ala Asn Ala Ser Gly Leu Leu Ile
225 230 235 240
Ser Leu Glu Pro Val Val Gly Val Leu Leu Ala Val Leu Ile Leu Gly
245 250 255
Glu His Leu Ser Pro Val Ser Ala Leu Gly Val Phe Val Val Ile Ala
260 265 270
Ala Thr Phe Ala Ala Gly Arg Leu Ser Arg Arg Asp Ala Gln Asn Gly
275 280 285
Asn Ala Val
290
<210> 249
<211> 1183
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (235)..(235)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 249
atgcgccgtt ttctaccgat cgcagccata tgcgcmgwms tcctgkkgta sggactgacg 60
gcggcaaccg gcagcaccag ttcgctggcg gattatttct ggtggattgt tgcgttcagc 120
gcaatgctgc tgctggtgtt gtccgccgtt ttggcacgtt atgtcatatt gctgttgaaa 180
gacaggcgcg acggcgtatt cggttcgcta srtygccaaa gsgcctgkks tgggnatgtt 240
tacgctggtt gccgkactgc ccggcgtgtt tctgttcggc tttcccgcac agttcatcaa 300
cggcacgatt aattcgtggt tcggcaacga tacccacgag gcgcttgaac gcagcctcaa 360
tttgagcaag tccgcattga atttggcggc agacaacgcc ctcggcaacg ccgtccccgt 420
gcagatagac ctcatcggcg cggcttccct gcccggggat atgggcaggg tgctggaaca 480
ttacgccggc agcggttttg cccagcttgc cctgtacaay kscgcaagcg gcaaaatcga 540
aaaaagcatc aacccgcaca agctcgatca gccgtttcca ggtaaggcgc gttgggaaaa 600
aatccaacgg gcgggttcgg tcagggattt ggaaagcata ggcggcgtat tgtacgcgca 660
gggctggctg tcggcgggta cgcacwacgg gcgcgattac gccttgtttt tccgtcagcc 720
ggttcccaaa ggcgtggcag aggatgccgt yttaatcgaa aaggcaaggg cgaaatatgc 780
tgagttgagt tacagcaaaa aaggtttgca gacctttttc ctggcaaccc tgctgattgc 840
ctcgctgctg tcgatttttc ttgcactggt catggcactg tatttcgccc gccgtttcgt 900
cgaacccgtc ctatcgcttg ccgagggggc gaaggcggtg gcgcaaggcg atttcagcca 960
gacgcgcccc gtgttgcgca acgacgagtt cggacgcttg accargttgt tcaaccacat 1020
gaccgagcag ctttccatcg ccaaagatgc agacgagcgc aaccgccggc gcgaggaagc 1080
cgccaggcat tatcttgaat gcgtgttgga ggggctgacc acgggcgtgg tggtgtttga 1140
cgaacaaggc tgtctgaaaa ccttcaacaa agcggcgggt acc 1183
<210> 250
<211> 394
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (13)..(14)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(17)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (70)..(71)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (74)..(74)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (76)..(78)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (85)..(85)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (174)..(174)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (229)..(229)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (335)..(335)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 250
Met Arg Arg Phe Leu Pro Ile Ala Ala Ile Cys Ala Xaa Xaa Leu Xaa
1 5 10 15
Xaa Gly Leu Thr Ala Ala Thr Gly Ser Thr Ser Ser Leu Ala Asp Tyr
20 25 30
Phe Trp Trp Ile Val Ala Phe Ser Ala Met Leu Leu Leu Val Leu Ser
35 40 45
Ala Val Leu Ala Arg Tyr Val Ile Leu Leu Leu Lys Asp Arg Arg Asp
50 55 60
Gly Val Phe Gly Ser Xaa Xaa Ala Lys Xaa Pro Xaa Xaa Xaa Met Phe
65 70 75 80
Thr Leu Val Ala Xaa Leu Pro Gly Val Phe Leu Phe Gly Phe Pro Ala
85 90 95
Gln Phe Ile Asn Gly Thr Ile Asn Ser Trp Phe Gly Asn Asp Thr His
100 105 110
Glu Ala Leu Glu Arg Ser Leu Asn Leu Ser Lys Ser Ala Leu Asn Leu
115 120 125
Ala Ala Asp Asn Ala Leu Gly Asn Ala Val Pro Val Gln Ile Asp Leu
130 135 140
Ile Gly Ala Ala Ser Leu Pro Gly Asp Met Gly Arg Val Leu Glu His
145 150 155 160
Tyr Ala Gly Ser Gly Phe Ala Gln Leu Ala Leu Tyr Asn Xaa Ala Ser
165 170 175
Gly Lys Ile Glu Lys Ser Ile Asn Pro His Lys Leu Asp Gln Pro Phe
180 185 190
Pro Gly Lys Ala Arg Trp Glu Lys Ile Gln Arg Ala Gly Ser Val Arg
195 200 205
Asp Leu Glu Ser Ile Gly Gly Val Leu Tyr Ala Gln Gly Trp Leu Ser
210 215 220
Ala Gly Thr His Xaa Gly Arg Asp Tyr Ala Leu Phe Phe Arg Gln Pro
225 230 235 240
Val Pro Lys Gly Val Ala Glu Asp Ala Val Leu Ile Glu Lys Ala Arg
245 250 255
Ala Lys Tyr Ala Glu Leu Ser Tyr Ser Lys Lys Gly Leu Gln Thr Phe
260 265 270
Phe Leu Ala Thr Leu Leu Ile Ala Ser Leu Leu Ser Ile Phe Leu Ala
275 280 285
Leu Val Met Ala Leu Tyr Phe Ala Arg Arg Phe Val Glu Pro Val Leu
290 295 300
Ser Leu Ala Glu Gly Ala Lys Ala Val Ala Gln Gly Asp Phe Ser Gln
305 310 315 320
Thr Arg Pro Val Leu Arg Asn Asp Glu Phe Gly Arg Leu Thr Xaa Leu
325 330 335
Phe Asn His Met Thr Glu Gln Leu Ser Ile Ala Lys Asp Ala Asp Glu
340 345 350
Arg Asn Arg Arg Arg Glu Glu Ala Ala Arg His Tyr Leu Glu Cys Val
355 360 365
Leu Glu Gly Leu Thr Thr Gly Val Val Val Phe Asp Glu Gln Gly Cys
370 375 380
Leu Lys Thr Phe Asn Lys Ala Ala Gly Thr
385 390
<210> 251
<211> 2121
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 251
atgcgccgtt ttctaccgat cgcagccata tgcgccgtcg tcctgttgta cggactgacg 60
gcggcaaccg gcagcaccag ttcgctggcg gattatttct ggtggattgt tgcgttcagc 120
gcaatgctgc tgctggtgtt gtccgccgtt ttggcacgtt atgtcatatt gctgttgaaa 180
gacaggcgcg acggcgtatt cggttcgcag attgccaaac gcctttctgg gatgtttacg 240
ctggttgccg tactgcccgg cgtgtttctg ttcggcgttt ccgcacagtt catcaacggc 300
acgattaatt cgtggttcgg caacgatacc cacgaggcgc ttgaacgcag cctcaatttg 360
agcaagtccg cattgaattt ggcggcagac aacgccctcg gcaacgccgt ccccgtgcag 420
atagacctca tcggcgcggc ttccctgccc ggggatatgg gcagggtgct ggaacattac 480
gccggcagcg gttttgccca gcttgccctg tacaatgccg caagcggcaa aatcgaaaaa 540
agcatcaacc cgcacaagct cgatcagccg tttccaggta aggcgcgttg ggaaaaaatc 600
caacgggcgg gttcggtcag ggatttggaa agcataggcg gcgtattgta cgcgcagggc 660
tggctgtcgg cgggtacgca caacgggcgc gattacgcct tgtttttccg tcagccggtt 720
cccaaaggcg tggcagagga tgccgtctta atcgaaaagg caagggcgaa atatgctgag 780
ttgagttaca gcaaaaaagg tttgcagacc tttttcctgg caaccctgct gattgcctcg 840
ctgctgtcga tttttcttgc actggtcatg gcactgtatt tcgcccgccg tttcgtcgaa 900
cccgtcctat cgcttgccga gggggcgaag gcggtggcgc aaggcgattt cagccagacg 960
cgccccgtgt tgcgcaacga cgagttcgga cgcttgacca agttgttcaa ccacatgacc 1020
gagcagcttt ccatcgccaa agaagcagac gagcgcaacc gccggcgcga ggaagccgcc 1080
aggcattatc ttgaatgcgt gttggagggg ctgaccacgg gcgtggtggt gtttgacgaa 1140
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ccggcgggaa cgggattggg tctgcctgtg gtgaaaaaaa tcattgaaga acacggcggc 2040
cgcatcagcc tgagcaatca ggatgcgggt ggcgcgtgtg tcagaatcat cttgccaaaa 2100
acggtaaaaa cttatgcgta g 2121
<210> 252
<211> 706
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 252
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1 5 10 15
Tyr Gly Leu Thr Ala Ala Thr Gly Ser Thr Ser Ser Leu Ala Asp Tyr
20 25 30
Phe Trp Trp Ile Val Ala Phe Ser Ala Met Leu Leu Leu Val Leu Ser
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65 70 75 80
Leu Val Ala Val Leu Pro Gly Val Phe Leu Phe Gly Val Ser Ala Gln
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290 295 300
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Tyr Ala
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cccctgtggg gcagcagccg gcacggttgg cacggcgttt cggcgcagca gtccctgctt 1260
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<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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cgtcactacc tcgagtgcgt gttggatggg ttgactaccg gtgtggtggt gtttgacgaa 1140
aaaggccgtt tgaaaacctt caacaaggcg gcggaacaga ttttggggat gccgctcgcc 1200
cccctgtggg gcagcagccg gcacggttgg cacggcgttt cggcgcagca gtccctgctt 1260
gccgaagtgt ttgccgccat cggtgcggcg gcaggtacgg acaaaccggt ccaggtggaa 1320
tatgccgcgc cggacgatgc caaaatcctg ctgggcaagg cgacggtatt gcccgaagac 1380
aacggcaacg gcgtggtgat ggtgattgac gacatcaccg tgctgatacg cgcgcaaaaa 1440
gaagccgcgt ggggtgaagt ggcgaagcgg ctggcacacg aaatccgcaa tccgctcacg 1500
cccatccagc tttccgccga acggctggcg tggaaattgg gcgggaagct ggacgatcag 1560
gacgcgcaaa tcctgacgcg ttcgaccgac accatcatca aacaggtggc ggcgttaaaa 1620
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gtgctgcaca atattttcaa aaatgccgcc gaagcggcgg aagaagccga tatgcccgaa 1860
gtcagggtaa aatcggaaac ggggcaggac ggacggattg tcctgacggt ttgcgacaac 1920
ggcaagggat tcggcaagga aatgctgcac aatgctttcg agccgtatgt gacggataag 1980
ccggcgggaa cgggactggg tctgcctgta gtgaaaaaaa tcattggaga acacggcggc 2040
cgcatcagcc tgagcaatca ggatgcgggt ggggcgtgtg tcagaatcat cttgccaaaa 2100
acggtagaaa cttatgcgta g 2121
<210> 258
<211> 706
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 258
Met Arg Arg Phe Leu Pro Ile Ala Ala Ile Cys Ala Val Val Leu Leu
1 5 10 15
Tyr Gly Leu Thr Ala Ala Thr Gly Ser Thr Ser Ser Leu Ala Asp Tyr
20 25 30
Phe Trp Trp Ile Val Ser Phe Ser Ala Met Leu Leu Leu Val Leu Ser
35 40 45
Ala Val Leu Ala Arg Tyr Val Ile Leu Leu Leu Lys Asp Arg Arg Asn
50 55 60
Gly Val Phe Gly Ser Gln Ile Ala Lys Arg Leu Ser Gly Met Phe Thr
65 70 75 80
Leu Val Ala Val Leu Pro Gly Leu Phe Leu Phe Gly Ile Ser Ala Gln
85 90 95
Phe Ile Asn Gly Thr Ile Asn Ser Trp Phe Gly Asn Asp Thr His Glu
100 105 110
Ala Leu Glu Arg Ser Leu Asn Leu Ser Lys Ser Ala Leu Asp Leu Ala
115 120 125
Ala Asp Asn Ala Val Ser Asn Ala Val Pro Val Gln Ile Asp Leu Ile
130 135 140
Gly Thr Ala Ser Leu Ser Gly Asn Met Gly Ser Val Leu Glu His Tyr
145 150 155 160
Ala Gly Ser Gly Phe Ala Gln Leu Ala Leu Tyr Asn Ala Ala Ser Gly
165 170 175
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180 185 190
Asp Lys Glu His Trp Glu Gln Ile Gln Gln Thr Gly Ser Val Arg Ser
195 200 205
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210 215 220
Gly Thr His Asn Gly Arg Asp Tyr Ala Leu Phe Phe Arg Gln Pro Ile
225 230 235 240
Pro Glu Asn Val Ala Gln Asp Ala Val Leu Ile Glu Lys Ala Arg Ala
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Leu Val Thr Leu Leu Ile Ala Ser Leu Leu Ser Ile Phe Leu Ala Leu
275 280 285
Val Met Ala Leu Tyr Phe Ala Arg Arg Phe Val Glu Pro Ile Leu Ser
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305 310 315 320
Arg Pro Val Leu Arg Asn Asp Glu Phe Gly Arg Leu Thr Lys Leu Phe
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Asn His Met Thr Glu Gln Leu Ser Ile Ala Lys Glu Ala Asp Glu Arg
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Asn Arg Arg Arg Glu Glu Ala Ala Arg His Tyr Leu Glu Cys Val Leu
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420 425 430
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Glu Ala Ala Trp Gly Glu Val Ala Lys Arg Leu Ala His Glu Ile Arg
485 490 495
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<210> 259
<211> 465
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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Val Leu Phe His Ile Leu Ile Ile Ala Ala Ser Asn Tyr Leu Val Gln
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<213> Neisseria meningitidis
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<211> 228
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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Met Tyr Ala Phe Thr Ala Ala Gln Gln Gln Lys Ala Leu Phe Arg Leu
1 5 10 15
Val Leu Phe His Ile Leu Ile Ile Ala Ala Ser Asn Tyr Leu Val Gln
20 25 30
Phe Pro Phe Gln Ile Phe Gly Ile His Thr Thr Trp Gly Ala Phe Ser
35 40 45
Phe Pro Phe Ile Phe Leu Ala Thr Asp Leu Thr Val Arg Ile Phe Gly
50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
Gly Leu Gly Ala Leu Ser Glu Phe Asn Thr Phe Val Gly Arg Ile Ala
100 105 110
Leu Ala Ser Phe Ala Ala Tyr Ala Ile Gly Gln Ile Leu Asp Ile Phe
115 120 125
Val Phe Asn Lys Leu Arg Arg Leu Lys Ala Trp Trp Ile Ala Pro Thr
130 135 140
Ala Ser Thr Val Ile Gly Asn Ala Leu Asp Thr Leu Val Phe Phe Ala
145 150 155 160
Val Ala Phe Tyr Ala Ser Ser Asp Gly Phe Met Ala Ala Asn Trp Gln
165 170 175
Gly Ile Ala Phe Val Asp Tyr Leu Phe Lys Leu Thr Val Cys Thr Leu
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225
<210> 263
<211> 687
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 263
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<211> 228
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 264
Met Tyr Ala Phe Thr Ala Ala Gln Gln Gln Lys Ala Leu Phe Trp Leu
1 5 10 15
Val Leu Phe His Ile Leu Ile Ile Ala Ala Ser Asn Tyr Leu Val Gln
20 25 30
Phe Pro Phe Gln Ile Ser Gly Ile His Thr Thr Trp Gly Ala Phe Ser
35 40 45
Phe Pro Phe Ile Phe Leu Ala Thr Asp Leu Thr Val Arg Ile Phe Gly
50 55 60
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Leu Leu Ser Tyr Val Phe Ser Val Leu Phe His Asn Gly Ser Trp Thr
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Gly Leu Gly Ala Leu Ser Glu Phe Asn Thr Phe Val Gly Arg Ile Ala
100 105 110
Leu Ala Ser Phe Ala Ala Tyr Ala Leu Gly Gln Ile Leu Asp Ile Phe
115 120 125
Val Phe Asn Lys Leu Arg Arg Leu Lys Ala Trp Trp Val Ala Pro Thr
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Val Ala Phe Tyr Ala Ser Ser Asp Gly Phe Met Ala Ala Asn Trp Gln
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 265
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<211> 228
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 266
Met Tyr Ala Leu Thr Ala Ala Gln Gln Gln Lys Ala Leu Phe Arg Leu
1 5 10 15
Val Leu Phe His Ile Leu Ile Ile Ala Ala Ser Asn Tyr Leu Val Gln
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Phe Pro Phe Arg Ile Phe Gly Ile His Thr Thr Trp Gly Ala Phe Ser
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Phe Pro Phe Ile Phe Leu Ala Thr Asp Leu Thr Val Arg Ile Phe Gly
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 267
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (32)..(32)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (71)..(71)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 268
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Arg Arg Ile Asn Arg Thr Tyr Gly Cys Tyr Gly Val Asp
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<211> 453
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 269
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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<211> 453
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 271
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gccaaaataa ccgccagcgt atcccgcgcc ggcgtattgg cgggggtcgg caaacttgcc 300
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 272
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<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> n is a, c, g, or t
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n 1
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 274
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Ala Lys Ile Thr Ala Ser Val Ser Arg Ala Gly Val Leu Ser Gly Val
85 90 95
Gly Lys Leu Val Arg Gln Gly Ala Lys Phe Gly Thr Arg Ala Val Pro
100 105 110
Tyr Val Gly Thr Ala Leu Leu Ala His Asp Val Tyr Glu Thr Phe Lys
115 120 125
Glu Asp Ile Gln Ala Arg Gly Cys Arg Tyr Asp Pro Glu Thr Asp Lys
130 135 140
Phe Val Lys Gly Tyr Glu Tyr Ala Asn Cys Leu Trp Tyr Glu Asp Glu
145 150 155 160
Arg Arg Ile Asn Arg Thr Tyr Gly Cys Tyr Gly Val Asp Ser Ser Ile
165 170 175
Met Arg Leu Met Pro Asp Arg Ser Arg Phe Pro Glu Val Lys Gln Leu
180 185 190
Met Glu Ser Gln Met Tyr Arg Leu Ala Arg Pro Phe Trp Asn Trp Arg
195 200 205
Lys Glu Glu Leu Asn Lys Leu Ser Ser Leu Asp Trp Asn Asn Phe Val
210 215 220
Leu Asn Arg Cys Thr Phe Asp Trp Asn Gly Gly Gly Cys Ala Val Asn
225 230 235 240
Lys Gly Asp Asp Phe Arg Ala Gly Ala Ser Phe Ser Leu Gly Arg Asn
245 250 255
Pro Lys Tyr Lys Glu Glu Met Asp Ala Lys Lys Pro Glu Glu Ile Leu
260 265 270
Ser Leu Lys Val Asp Ala Asp Pro Asp Lys Tyr Ile Glu Ala Thr Gly
275 280 285
Tyr Pro Gly Tyr Ser Glu Lys Val Glu Val Ala Pro Gly Thr Lys Val
290 295 300
Asn Met Gly Pro Val Thr Asp Arg Asn Gly Asn Pro Val Gln Val Ala
305 310 315 320
Ala Thr Phe Gly Arg Asp Ala Gln Gly Asn Thr Thr Ala Asp Val Gln
325 330 335
Val Ile Pro Arg Pro Asp Leu Thr Pro Ala Ser Ala Glu Ala Pro His
340 345 350
Ala Gln Pro Leu Pro Glu Val Ser Pro Ala Glu Asn Pro Ala Asn Asn
355 360 365
Pro Asp Pro Asp Glu Asn Pro Gly Thr Arg Pro Asn Pro Glu Pro Asp
370 375 380
Pro Asp Leu Asn Pro Asp Ala Asn Pro Asp Thr Asp Gly Gln Pro Gly
385 390 395 400
Thr Ser Pro Asp Ser Pro Ala Val Pro Asp Arg Pro Asn Gly Arg His
405 410 415
Arg Lys Glu Arg Lys Glu Gly Glu Asp Gly Gly Leu Ser Cys Asp Tyr
420 425 430
Phe Pro Glu Ile Leu Ala Cys Gln Glu Met Gly Lys Pro Ser Asp Arg
435 440 445
Met Phe His Asp Ile Ser Ile Pro Gln Val Thr Asp Asp Lys Thr Trp
450 455 460
Ser Ser His Asn Phe Leu Pro Ser Asn Gly Val Cys Pro Gln Pro Lys
465 470 475 480
Thr Phe His Val Phe Gly Arg Gln Tyr Arg Ala Ser Tyr Glu Pro Leu
485 490 495
Cys Val Phe Ala Glu Lys Ile Arg Phe Ala Val Leu Leu Ala Phe Ile
500 505 510
Ile Met Ser Ala Phe Val Val Phe Gly Ser Leu Gly Gly Glu
515 520 525
<210> 275
<211> 435
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 275
atggtcacaa aacatacaaa tttgaatttt gcgaaattgt cgataattgc aattttgatg 60
atgtattcgt ttgaagcgaa tgcaaatgca gtaaaaatat ctgaaactct ttcggttgat 120
accggacaag gcgcgaaagt tcataagttc gttcctaaat caagtaatat ttattcatct 180
gatttaacaa aagcggtaga tttaacgcat atccccacgg gcgcaaaagc ccgaatcaac 240
gccaaaataa ccgccagcgt atcccgcgcc ggcgtattgt cgggggtcgg caaacttgtc 300
cgccaaggcg cgaaattcgg cacaagggcg gttccctatg tcggaacagc ccttttagcc 360
cacgacgtat acgaaacttt caaagaagac atacaggcac gaggctgccg atacgatccc 420
gaaaccgaca aattt 435
<210> 276
<211> 145
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 276
Met Val Thr Lys His Thr Asn Leu Asn Phe Ala Lys Leu Ser Ile Ile
1 5 10 15
Ala Ile Leu Met Met Tyr Ser Phe Glu Ala Asn Ala Asn Ala Val Lys
20 25 30
Ile Ser Glu Thr Leu Ser Val Asp Thr Gly Gln Gly Ala Lys Val His
35 40 45
Lys Phe Val Pro Lys Ser Ser Asn Ile Tyr Ser Ser Asp Leu Thr Lys
50 55 60
Ala Val Asp Leu Thr His Ile Pro Thr Gly Ala Lys Ala Arg Ile Asn
65 70 75 80
Ala Lys Ile Thr Ala Ser Val Ser Arg Ala Gly Val Leu Ser Gly Val
85 90 95
Gly Lys Leu Val Arg Gln Gly Ala Lys Phe Gly Thr Arg Ala Val Pro
100 105 110
Tyr Val Gly Thr Ala Leu Leu Ala His Asp Val Tyr Glu Thr Phe Lys
115 120 125
Glu Asp Ile Gln Ala Arg Gly Cys Arg Tyr Asp Pro Glu Thr Asp Lys
130 135 140
Phe
145
<210> 277
<211> 229
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 277
atgagatttt tcggtatcgg ttttttggtg ctgctgtttt tggagattat gtcgattgtg 60
tgggttgccg attggctggg cggcggctgg acgttgtttt tgatggcggc aggttttgcc 120
gccggcgtgc tgatgctcag gcaaaccggg gctgaccggt cttttattgg cgggcgcggc 180
aatgagaagc ggcgggaagg tatccgttta tcagatgttg tggcctatc 229
<210> 278
<211> 76
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 278
Met Arg Phe Phe Gly Ile Gly Phe Leu Val Leu Leu Phe Leu Glu Ile
1 5 10 15
Met Ser Ile Val Trp Val Ala Asp Trp Leu Gly Gly Gly Trp Thr Leu
20 25 30
Phe Leu Met Ala Ala Gly Phe Ala Ala Gly Val Leu Met Leu Arg Gln
35 40 45
Thr Gly Leu Thr Gly Leu Leu Leu Ala Gly Ala Ala Met Arg Ser Gly
50 55 60
Gly Lys Val Ser Val Tyr Gln Met Leu Trp Pro Ile
65 70 75
<210> 279
<211> 486
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 279
atgagatttt tcggtatcgg ttttttggtg ctgctgtttt tggagattat gtcgattgtg 60
tgggttgccg attggctggg cggcggctgg acgttgtttt tgatggcggc aggttttgcc 120
gccggcgtgc tgatgctcag gcatacgggg ctgtccggtc ttttattggc gggcgcggca 180
atgagaagcg gcgggagggt atccgtttat cagatgttgt ggcctatccg ttatacggtg 240
gcggctgtgt gtctgatgag tccgggattc gtatcctcgg tgttggcggt attgctgctg 300
ctgccgttta agggaggggc agtgttgcag gcaggaggtg cggaaaattt tttcaacatg 360
aaccaatcgg gcagaaaaga gggcttttcc cgcgatgacg atattatcga gggagaatat 420
acggttgaag agccttacgg cggcaatcgt tcccgaaacg ccatcgaaca caaaaaagac 480
gaataa 486
<210> 280
<211> 161
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 280
Met Arg Phe Phe Gly Ile Gly Phe Leu Val Leu Leu Phe Leu Glu Ile
1 5 10 15
Met Ser Ile Val Trp Val Ala Asp Trp Leu Gly Gly Gly Trp Thr Leu
20 25 30
Phe Leu Met Ala Ala Gly Phe Ala Ala Gly Val Leu Met Leu Arg His
35 40 45
Thr Gly Leu Ser Gly Leu Leu Leu Ala Gly Ala Ala Met Arg Ser Gly
50 55 60
Gly Arg Val Ser Val Tyr Gln Met Leu Trp Pro Ile Arg Tyr Thr Val
65 70 75 80
Ala Ala Val Cys Leu Met Ser Pro Gly Phe Val Ser Ser Val Leu Ala
85 90 95
Val Leu Leu Leu Leu Pro Phe Lys Gly Gly Ala Val Leu Gln Ala Gly
100 105 110
Gly Ala Glu Asn Phe Phe Asn Met Asn Gln Ser Gly Arg Lys Glu Gly
115 120 125
Phe Ser Arg Asp Asp Asp Ile Ile Glu Gly Glu Tyr Thr Val Glu Glu
130 135 140
Pro Tyr Gly Gly Asn Arg Ser Arg Asn Ala Ile Glu His Lys Lys Asp
145 150 155 160
Glu
<210> 281
<211> 486
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (213)..(213)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (224)..(224)
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
<222> (284)..(284)
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
<222> (366)..(366)
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<220>
<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (385)..(385)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (432)..(432)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (446)..(446)
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<220>
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<220>
<221> misc_feature
<222> (465)..(465)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 281
atgagatttt tcggtatcgg ttttttggtg ctgctgtttt tggagattat gtcgattgtg 60
tgggttgccg attggttggg cggcggttgg acgctgtttc taatggcggc aacctttgcc 120
gccggcgtgg tgatgctcag gcatacgggg ctgtccggtc ttttattggc gggcgcggca 180
atgagaagcg gcgggagggt atccgtttat canatgttgt ggcntatccg ttatacggtg 240
gcggcggtgt gtcngatgag tccgggattc gtatcctcgg tgtnggcggt attgctgntg 300
ctnccgttta agggaggtgc agtgttgcag gcaggaggtg cggaaaattt tttcaacatg 360
aaccantcgg gcagaaaaga nggcntttcc cgcgatgacg atattatcga gggggaatat 420
acggttgaag anccttacgg cggcantcgt ttccgaaacg ccntngaaca caaaaaagac 480
gaataa 486
<210> 282
<211> 161
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (71)..(71)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (85)..(85)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (100)..(100)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (144)..(144)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (155)..(155)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 282
Met Arg Phe Phe Gly Ile Gly Phe Leu Val Leu Leu Phe Leu Glu Ile
1 5 10 15
Met Ser Ile Val Trp Val Ala Asp Trp Leu Gly Gly Gly Trp Thr Leu
20 25 30
Phe Leu Met Ala Ala Thr Phe Ala Ala Gly Val Val Met Leu Arg His
35 40 45
Thr Gly Leu Ser Gly Leu Leu Leu Ala Gly Ala Ala Met Arg Ser Gly
50 55 60
Gly Arg Val Ser Val Tyr Xaa Met Leu Trp Xaa Ile Arg Tyr Thr Val
65 70 75 80
Ala Ala Val Cys Xaa Met Ser Pro Gly Phe Val Ser Ser Val Xaa Ala
85 90 95
Val Leu Leu Xaa Leu Pro Phe Lys Gly Gly Ala Val Leu Gln Ala Gly
100 105 110
Gly Ala Glu Asn Phe Phe Asn Met Asn Xaa Ser Gly Arg Lys Xaa Gly
115 120 125
Xaa Ser Arg Asp Asp Asp Ile Ile Glu Gly Glu Tyr Thr Val Glu Xaa
130 135 140
Pro Tyr Gly Gly Xaa Arg Phe Arg Asn Ala Xaa Glu His Lys Lys Asp
145 150 155 160
Glu
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<211> 486
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 283
atgagatttt tcggtatcgg ttttttggtg ctgctgtttt tggaaattat gtcgattgtg 60
tgggttgccg attggctggg cggcggttgg acgctgtttc taatggcggc aacctttgcc 120
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gcggcggtgt gtctgatgag tccgggattc gtatcctccg tgttggcggt attgctgctg 300
ctgccgttta agggaggggc agtgttgcag gcaggaggtg cggaaaattt tttcaacatg 360
aaccaatcgg gcagaaaaga gggatttttc cacgatgacg atattatcga gggagaatat 420
acggttgaaa aacctgacgg cggcaatcgt tcccgaaacg ccatcgaaca cgaaaaagac 480
gaataa 486
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<211> 161
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 284
Met Arg Phe Phe Gly Ile Gly Phe Leu Val Leu Leu Phe Leu Glu Ile
1 5 10 15
Met Ser Ile Val Trp Val Ala Asp Trp Leu Gly Gly Gly Trp Thr Leu
20 25 30
Phe Leu Met Ala Ala Thr Phe Ala Ala Gly Val Leu Met Leu Arg His
35 40 45
Thr Gly Leu Ser Gly Leu Leu Leu Ala Gly Ala Ala Val Lys Ser Ser
50 55 60
Gly Lys Val Ser Val Tyr Gln Met Leu Trp Pro Ile Arg Tyr Thr Val
65 70 75 80
Ala Ala Val Cys Leu Met Ser Pro Gly Phe Val Ser Ser Val Leu Ala
85 90 95
Val Leu Leu Leu Leu Pro Phe Lys Gly Gly Ala Val Leu Gln Ala Gly
100 105 110
Gly Ala Glu Asn Phe Phe Asn Met Asn Gln Ser Gly Arg Lys Glu Gly
115 120 125
Phe Phe His Asp Asp Asp Ile Ile Glu Gly Glu Tyr Thr Val Glu Lys
130 135 140
Pro Asp Gly Gly Asn Arg Ser Arg Asn Ala Ile Glu His Glu Lys Asp
145 150 155 160
Glu
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (408)..(408)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 285
atgtttgttt ttcagacggc attcttnatg tttcagaaac atttgcagaa agcctccgac 60
agcgtcgtcg gagggacatt atacgtggtt gccacgccca tcggcaattt ggcggacatt 120
accctgcgcg ctttggcggt attgcaaaag gcgnnnnnnn nnnnngccga agacacgcgc 180
gttaccgcac agcttttgag cgcgtacggc attcagggca aactcgtcag tgtgcgcgaa 240
cacaacgaac ggcagatggc ggacaagatt gtcggctatc tttcagacgg catggttgtg 300
gcacaggttt ccgatgcggg tacgccggcc gtgtgcgacc cgggcgcgaa actcgcccgc 360
cgcgtgcgtg aggccgggtt taaagtcgtt cccgtcgtgg gcgcaacngc ggtgatggcg 420
gctttgagcg tggccggtgt ggaaggatcc gatttttatt tcaacggttt tgtaccgccg 480
aaatcgggag aacgcaggaa actgtttgcc aaatgggtgc gggcggcgtt tcctatcgtc 540
atgtttgaaa cgccgcaccg catcggtgca gcgcttgccg atatggcgga actgttcccc 600
gaacgccgat taatgctggc gcgcgaaatt acgaaaacgt ttgaaacgtt cttaagcggc 660
acggttgggg aaattcagac ggcattgtct gccgacggcg accaatcgcg cggcgagatg 720
gtgttggtgc tttatccggc gcaggatgaa aaacacgaag gcttgtccga gtccgcgcaa 780
aacatcatga aaatcctcac agccgagctg ccgaccaaac aggcggcgga gcttgctgcc 840
aaaatcacgg gcgagggaaa gaaagctttg tacgat 876
<210> 286
<211> 292
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (52)..(55)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (136)..(136)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 286
Met Phe Val Phe Gln Thr Ala Phe Xaa Met Phe Gln Lys His Leu Gln
1 5 10 15
Lys Ala Ser Asp Ser Val Val Gly Gly Thr Leu Tyr Val Val Ala Thr
20 25 30
Pro Ile Gly Asn Leu Ala Asp Ile Thr Leu Arg Ala Leu Ala Val Leu
35 40 45
Gln Lys Ala Xaa Xaa Xaa Xaa Ala Glu Asp Thr Arg Val Thr Ala Gln
50 55 60
Leu Leu Ser Ala Tyr Gly Ile Gln Gly Lys Leu Val Ser Val Arg Glu
65 70 75 80
His Asn Glu Arg Gln Met Ala Asp Lys Ile Val Gly Tyr Leu Ser Asp
85 90 95
Gly Met Val Val Ala Gln Val Ser Asp Ala Gly Thr Pro Ala Val Cys
100 105 110
Asp Pro Gly Ala Lys Leu Ala Arg Arg Val Arg Glu Ala Gly Phe Lys
115 120 125
Val Val Pro Val Val Gly Ala Xaa Ala Val Met Ala Ala Leu Ser Val
130 135 140
Ala Gly Val Glu Gly Ser Asp Phe Tyr Phe Asn Gly Phe Val Pro Pro
145 150 155 160
Lys Ser Gly Glu Arg Arg Lys Leu Phe Ala Lys Trp Val Arg Ala Ala
165 170 175
Phe Pro Ile Val Met Phe Glu Thr Pro His Arg Ile Gly Ala Ala Leu
180 185 190
Ala Asp Met Ala Glu Leu Phe Pro Glu Arg Arg Leu Met Leu Ala Arg
195 200 205
Glu Ile Thr Lys Thr Phe Glu Thr Phe Leu Ser Gly Thr Val Gly Glu
210 215 220
Ile Gln Thr Ala Leu Ser Ala Asp Gly Asp Gln Ser Arg Gly Glu Met
225 230 235 240
Val Leu Val Leu Tyr Pro Ala Gln Asp Glu Lys His Glu Gly Leu Ser
245 250 255
Glu Ser Ala Gln Asn Ile Met Lys Ile Leu Thr Ala Glu Leu Pro Thr
260 265 270
Lys Gln Ala Ala Glu Leu Ala Ala Lys Ile Thr Gly Glu Gly Lys Lys
275 280 285
Ala Leu Tyr Asp
290
<210> 287
<211> 876
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 287
atgtttcaga aacatttgca gaaagcctcc gacagcgtcg tcggagggac attatacgtg 60
gttgccacgc ccatcggcaa tttggcggac attaccctgc gcgctttggc ggtattgcaa 120
aaggcggaca tcatctgtgc cgaagacacg cgcgttaccg cacagctttt gagcgcgtac 180
ggcattcagg gcaaactcgt cagtgtgcgc gaacacaacg aacggcagat ggcggacaag 240
attgtcggct atctttcaga cggcatggtt gtggcacagg tttccgatgc gggtacgccg 300
gccgtgtgcg acccgggcgc gaaactcgcc cgccgcgtgc gtgaggccgg gtttaaagtc 360
gttcccgtcg tgggcgcaag cgcggtgatg gcggctttga gcgtggccgg tgtggaagga 420
tccgattttt atttcaacgg ttttgtaccg ccgaaatcgg gagaacgcag gaaactgttt 480
gccaaatggg tgcgggcggc gtttcctatc gtcatgtttg aaacgccgca ccgcatcggt 540
gcgacgcttg ccgatatggc ggaactgttc cccgaacgcc gattaatgct ggcgcgcgaa 600
attacgaaaa cgtttgaaac gttcttaagc ggcacggttg gggaaattca gacggcattg 660
tctgccgacg gcaaccaatc gcgcggcgag atggtgttgg tgctttatcc ggcgcaggat 720
gaaaaacacg aaggcttgtc cgagtccgcg caaaacatca tgaaaatcct cacagccgag 780
ctgccgacca aacaggcggc ggagcttgct gccaaaatca cgggcgaggg aaagaaagct 840
ttgtacgatc tggctctgtc ttggaaaaac aaatag 876
<210> 288
<211> 291
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 288
Met Phe Gln Lys His Leu Gln Lys Ala Ser Asp Ser Val Val Gly Gly
1 5 10 15
Thr Leu Tyr Val Val Ala Thr Pro Ile Gly Asn Leu Ala Asp Ile Thr
20 25 30
Leu Arg Ala Leu Ala Val Leu Gln Lys Ala Asp Ile Ile Cys Ala Glu
35 40 45
Asp Thr Arg Val Thr Ala Gln Leu Leu Ser Ala Tyr Gly Ile Gln Gly
50 55 60
Lys Leu Val Ser Val Arg Glu His Asn Glu Arg Gln Met Ala Asp Lys
65 70 75 80
Ile Val Gly Tyr Leu Ser Asp Gly Met Val Val Ala Gln Val Ser Asp
85 90 95
Ala Gly Thr Pro Ala Val Cys Asp Pro Gly Ala Lys Leu Ala Arg Arg
100 105 110
Val Arg Glu Ala Gly Phe Lys Val Val Pro Val Val Gly Ala Ser Ala
115 120 125
Val Met Ala Ala Leu Ser Val Ala Gly Val Glu Gly Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Phe Asn Gly Phe Val Pro Pro Lys Ser Gly Glu Arg Arg Lys Leu Phe
145 150 155 160
Ala Lys Trp Val Arg Ala Ala Phe Pro Ile Val Met Phe Glu Thr Pro
165 170 175
His Arg Ile Gly Ala Thr Leu Ala Asp Met Ala Glu Leu Phe Pro Glu
180 185 190
Arg Arg Leu Met Leu Ala Arg Glu Ile Thr Lys Thr Phe Glu Thr Phe
195 200 205
Leu Ser Gly Thr Val Gly Glu Ile Gln Thr Ala Leu Ser Ala Asp Gly
210 215 220
Asn Gln Ser Arg Gly Glu Met Val Leu Val Leu Tyr Pro Ala Gln Asp
225 230 235 240
Glu Lys His Glu Gly Leu Ser Glu Ser Ala Gln Asn Ile Met Lys Ile
245 250 255
Leu Thr Ala Glu Leu Pro Thr Lys Gln Ala Ala Glu Leu Ala Ala Lys
260 265 270
Ile Thr Gly Glu Gly Lys Lys Ala Leu Tyr Asp Leu Ala Leu Ser Trp
275 280 285
Lys Asn Lys
290
<210> 289
<211> 875
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 289
atgtttcaga aactttgcag aaagcctccg acagcgtcgt cggagggaca ttatacgtgg 60
ttgccacgcc catcggcaat ttggcggaca ttaccctgcg cgctttggcg gtattgcaaa 120
aggcggacat catctgtgcc gaagacacgc gcgttaccgc gcagcttttg agcgcgtacg 180
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 1020
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 1080
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 1140
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 1200
nnnnnnnnnn caaaccgtat tcgagcagct gcaaaagact cctgacggca actggctgtt 1260
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<213> Neisseria meningitidis
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<221> misc_feature
<222> (86)..(403)
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Ala Ala Lys Ile Ala Glu Thr Phe Ala Leu Thr Phe Val Ile Ala Ala
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (12)..(12)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (58)..(58)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (128)..(128)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (185)..(185)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 312
Thr Leu Leu Leu Phe Ile Pro Leu Val Leu Thr Xaa Cys Gly Thr Leu
1 5 10 15
Thr Gly Ile Leu Ala His Gly Gly Gly Lys Arg Phe Ala Val Glu Gln
20 25 30
Glu Leu Val Ala Ala Ser Ser Arg Ala Ala Val Lys Glu Met Asp Leu
35 40 45
Ser Ala Leu Lys Gly Arg Lys Ala Ala Xaa Tyr Val Ser Val Met Gly
50 55 60
Asp Gln Gly Ser Gly Asn Ile Ser Gly Gly Arg Tyr Ser Ile Asp Ala
65 70 75 80
Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Asn Asn Pro Glu Ser Ala Thr Gln Tyr
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Arg Asp Val Ser Phe Leu Thr Asn Leu Ile Gln Thr Val Phe Tyr Leu
165 170 175
Arg Gly Ile Glu Val Val Pro Pro Xaa Tyr Ala Asp Thr Asp Val Phe
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Val Thr Val Asp Val
195
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 314
Met Lys Thr Leu Leu Leu Leu Ile Pro Leu Val Leu Thr Ala Cys Gly
1 5 10 15
Thr Leu Thr Gly Ile Pro Ala His Gly Gly Gly Lys Arg Phe Ala Val
20 25 30
Glu Gln Glu Leu Val Ala Ala Ser Ser Arg Ala Ala Val Lys Glu Met
35 40 45
Asp Leu Ser Ala Leu Lys Gly Arg Lys Ala Ala Leu Tyr Val Ser Val
50 55 60
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Asp Ala Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Asn Asn Pro Glu Ser Ala Thr
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100 105 110
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130 135 140
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Leu His Leu Tyr Asn Ala Glu Thr Leu Lys Ala Gln Thr Lys Leu Glu
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> n is a, c, g, or t
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<210> 316
<211> 313
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (6)..(6)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 316
Met Lys Thr Leu Leu Xaa Leu Ile Pro Leu Val Leu Thr Ala Cys Gly
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Thr Leu Thr Gly Ile Pro Ala His Gly Gly Gly Lys Arg Phe Ala Val
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Glu Gln Glu Leu Val Ala Ala Ser Ser Arg Ala Ala Val Lys Glu Met
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Asp Leu Ser Ala Leu Lys Gly Arg Lys Ala Ala Leu Tyr Val Ser Val
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 317
atgaaaaccc tgctcctcct catccccctc gtactcaccg cctgcggcac actgaccggc 60
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gacgcactga tacgcggcgg ctaccacaac aaccccgaca gcgccacccg atacagctac 300
cccgcctatg acactaccgc caccaccaaa tccgacgcgc tctccggcgt aaccacttcc 360
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cgctccgccg gactgtccgt caacggcacg ggcgactacc gcaacgaaac cctgctcgcc 480
aacccccgcg acgtttcctt cctgaccaac ctcatccaaa ccgtcttcta cctgcgcggc 540
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 318
Met Lys Thr Leu Leu Leu Leu Ile Pro Leu Val Leu Thr Ala Cys Gly
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Thr Leu Thr Gly Ile Pro Ala His Gly Gly Gly Lys Arg Phe Ala Val
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35 40 45
Asp Leu Ser Ala Leu Lys Gly Arg Lys Ala Ala Leu Tyr Val Ser Val
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Met Gly Asp Gln Gly Ser Gly Asn Ile Ser Gly Gly Arg Tyr Ser Ile
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Asp Ala Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Asn Asn Pro Asp Ser Ala Thr
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Ala Ala Leu Thr Lys Asn Asn Gly Arg Lys Gly Glu Arg Ser Ala Gly
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 319
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aatcggcggc aacagaacag caggcagtac ttccggataa aacagaaggc gagccggtaa 780
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<210> 320
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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<221> misc_feature
<222> (190)..(191)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (279)..(279)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (368)..(368)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 320
Met Ala Glu Ile Cys Leu Ile Thr Gly Thr Pro Gly Ser Gly Lys Thr
1 5 10 15
Leu Lys Met Val Ser Met Met Ala Asn Asp Glu Met Phe Lys Pro Asp
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Glu Lys Ala Ile Arg Arg Lys Val Phe Thr Asn Ile Lys Gly Leu Lys
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Ile Pro His Thr Tyr Ile Glu Thr Asp Ala Lys Lys Leu Pro Lys Ser
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Gly Pro Lys Leu Leu Asp Gln Asn Leu Arg Thr Leu Val Arg Lys His
130 135 140
Tyr His Ile Ala Ser Asn Lys Met Gly Met Arg Thr Leu Leu Glu Trp
145 150 155 160
Lys Ile Cys Ala Asp Asp Pro Val Lys Met Ala Ser Ser Ala Phe Ser
165 170 175
Ser Ile Tyr Thr Leu Asp Lys Lys Val Tyr Asp Leu Tyr Xaa Xaa Ala
180 185 190
Glu Val His Thr Val Asn Lys Val Lys Arg Ser Lys Trp Phe Tyr Thr
195 200 205
Leu Pro Val Ile Val Leu Leu Ile Pro Val Phe Val Gly Leu Ser Tyr
210 215 220
Lys Met Leu Ser Ser Tyr Gly Lys Lys Gln Glu Glu Pro Ala Ala Gln
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Glu Ser Ala Ala Thr Glu Gln Gln Ala Val Leu Pro Asp Lys Thr Glu
245 250 255
Gly Glu Pro Val Asn Asn Gly Asn Leu Thr Ala Asp Met Phe Val Pro
260 265 270
Thr Leu Ser Glu Lys Pro Xaa Ser Lys Pro Ile Tyr Asn Gly Val Arg
275 280 285
Gln Val Arg Thr Phe Glu Tyr Ile Ala Gly Cys Ile Glu Gly Gly Arg
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<211> 1187
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 321
atggcagaga tctgtttgat aaccggcacg cccggttcag ggaaaacatt aaaaatggtt 60
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<211> 394
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 322
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Lys Met Leu Ser Ser Tyr Gly Lys Lys Gln Glu Glu Pro Ala Ala Gln
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Glu Ser Ala Ala Thr Glu Gln Gln Ala Val Leu Pro Asp Lys Thr Glu
245 250 255
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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attgatatat ttgttttgac tcaaggctct aagcttctag atcaaaatct tagaacgctt 420
gtacggaaac attaccacat cgcttcaaac aagatgggta tgcgtacgct tttagaatgg 480
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ctggataaaa aagtttatga cttgtacgaa tcagcggaag ttcataccgt aaataaggtc 600
aagcggtcaa aatggtttta tactctgcca gtaataatat tgctgattcc cgtttttgtc 660
ggcctgtcct ataaaatgtt aagtagttat ggaaaaaaac aggaagaacc cgcagcacaa 720
gaatcggcgg caacagaaca tcaggcagta tttcaggata aaacagaagg cgagccggta 780
aacaacggta accttaccgc agatatgttt gttccgacat tgtccgaaaa acccgaaagc 840
aagccgattt ataacggtgt aaggcaggta agaacctttg aatatatagc aggctgtgta 900
gaaggcggaa gaaccggatg cacatgctat tcgcatcaag ggacggcatt gaaagaaatt 960
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<213> Neisseria meningitidis
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
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<211> 2015
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 331
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (179)..(179)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (315)..(315)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 341
atgatgagta ataaaatgga acaaaaaggg tttacattga ttgngangnt natngncntc 60
gcgatacncn gcnttancag cgtcattncn atnnntncnt atcnnagtta tattgaaaaa 120
ggctatcagt cccagcttta tacggagatg gtcggtatca acaatatttc caaacagtnt 180
attttgaaaa atcccctgga cgataatcag accatcaaga gcaaactgga aatatttgtc 240
tcaggctata agatgaatcc gaaaattgcc gaaaaatata atgtttcggt gcattttgtc 300
aatgaggaaa aaccnagggc atacagcttg gtcggcgttc caaagacggg gacgggttat 360
actttgtcgg tatggatgaa cagcgtgggc gacggataca aatgccgtga tgccgcttct 420
gcccgagccc atttggagac cttgtcctca gatgtcggct gtgaagcctt ctctaatcgt 480
aaaaaatag 489
<210> 342
<211> 162
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(20)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(26)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (30)..(33)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (35)..(35)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (60)..(60)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 342
Met Met Ser Asn Lys Met Glu Gln Lys Gly Phe Thr Leu Ile Xaa Xaa
1 5 10 15
Xaa Xaa Xaa Xaa Ala Ile Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Val Ile Xaa Xaa Xaa
20 25 30
Xaa Tyr Xaa Ser Tyr Ile Glu Lys Gly Tyr Gln Ser Gln Leu Tyr Thr
35 40 45
Glu Met Val Gly Ile Asn Asn Ile Ser Lys Gln Xaa Ile Leu Lys Asn
50 55 60
Pro Leu Asp Asp Asn Gln Thr Ile Lys Ser Lys Leu Glu Ile Phe Val
65 70 75 80
Ser Gly Tyr Lys Met Asn Pro Lys Ile Ala Glu Lys Tyr Asn Val Ser
85 90 95
Val His Phe Val Asn Glu Glu Lys Pro Arg Ala Tyr Ser Leu Val Gly
100 105 110
Val Pro Lys Thr Gly Thr Gly Tyr Thr Leu Ser Val Trp Met Asn Ser
115 120 125
Val Gly Asp Gly Tyr Lys Cys Arg Asp Ala Ala Ser Ala Arg Ala His
130 135 140
Leu Glu Thr Leu Ser Ser Asp Val Gly Cys Glu Ala Phe Ser Asn Arg
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Lys Lys
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
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atgatgagca ataaaatgga acaaaaaggg tttacattga ttgagatgat gatagttgtc 60
acgatactcg gcatcatcag cgtcattgcc ataccttctt atcagagtta tattgaaaaa 120
ggctatcagt cccagcttta tacggagatg gtcggtatca acaatgttct caaacagttt 180
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actttgtcgg tatggatgaa cagcgtgggc gacggataca aatgccgtga tgccacttct 420
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aaaaaatag 489
<210> 344
<211> 162
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 344
Met Met Ser Asn Lys Met Glu Gln Lys Gly Phe Thr Leu Ile Glu Met
1 5 10 15
Met Ile Val Val Thr Ile Leu Gly Ile Ile Ser Val Ile Ala Ile Pro
20 25 30
Ser Tyr Gln Ser Tyr Ile Glu Lys Gly Tyr Gln Ser Gln Leu Tyr Thr
35 40 45
Glu Met Val Gly Ile Asn Asn Val Leu Lys Gln Phe Ile Leu Lys Asn
50 55 60
Pro Gln Asp Asp Asn Asp Thr Leu Lys Ser Lys Leu Lys Ile Phe Val
65 70 75 80
Ser Gly Tyr Lys Met Asn Pro Lys Ile Ala Lys Lys Tyr Ser Val Ser
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Val Arg Phe Val Asp Ala Glu Lys Pro Arg Ala Tyr Arg Leu Val Gly
100 105 110
Val Pro Asn Ala Gly Thr Gly Tyr Thr Leu Ser Val Trp Met Asn Ser
115 120 125
Val Gly Asp Gly Tyr Lys Cys Arg Asp Ala Thr Ser Ala Gln Ala Tyr
130 135 140
Ser Asp Thr Leu Ser Ala Asp Ser Gly Cys Glu Ala Phe Ser Asn Arg
145 150 155 160
Lys Lys
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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atgaaaaaat cctccctcat cagcgcattg ggcatcggta ttttgagcat cggcatggca 60
tttgccgccc ctgccgacgc ggtaagccaa atccgtcaaa acgccactca agtattgagc 120
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<210> 346
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 346
Met Lys Lys Ser Ser Leu Ile Ser Ala Leu Gly Ile Gly Ile Leu Ser
1 5 10 15
Ile Gly Met Ala Phe Ala Ala Pro Ala Asp Ala Val Ser Gln Ile Arg
20 25 30
Gln Asn Ala Thr Gln Val Leu Ser Ile Leu Lys Asn Gly Asp Ala Asn
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 347
atgaaaaaat cctccctcat cagcgcattg ggcatcggta ttttgagcat cggcatggca 60
tttgccgccc ctgccgacgc ggtaagccaa atccgtcaaa acgccactca agtattgagc 120
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 348
Met Lys Lys Ser Ser Leu Ile Ser Ala Leu Gly Ile Gly Ile Leu Ser
1 5 10 15
Ile Gly Met Ala Phe Ala Ala Pro Ala Asp Ala Val Ser Gln Ile Arg
20 25 30
Gln Asn Ala Thr Gln Val Leu Ser Ile Leu Lys Asn Gly Asp Ala Asn
35 40 45
Thr Ala Arg Gln Lys Ala Glu Ala Tyr Ala Ile Pro Tyr Phe Asp Phe
50 55 60
Gln Arg Met Thr Ala Leu Ala Val Gly Asn Pro Trp Arg Thr Ala Ser
65 70 75 80
Asp Ala Gln Lys Gln Ala Leu Ala Lys Glu Phe Gln Thr Leu Leu Ile
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100 105 110
Val Lys Asp Asn Pro Ile Val Asn Lys Gly Gly Lys Glu Ile Ile Val
115 120 125
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130 135 140
Thr Thr Tyr Gln Ser Gly Gly Lys Tyr Arg Thr Tyr Asn Val Ala Ile
145 150 155 160
Glu Gly Ala Ser Leu Val Thr Val Tyr Arg Asn Gln Phe Gly Glu Ile
165 170 175
Ile Lys Ala Lys Gly Val Asp Gly Leu Ile Ala Glu Leu Lys Ala Lys
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Asn Gly Gly Lys
195
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<211> 591
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 349
atgaaaaaat cctccttcat cagcgcattg ggcatcggta ttttgagcat cggcatggca 60
tttgccgccc ctgccgacgc ggtaaaccaa atccgtcaaa acgccactca agtattgagc 120
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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Met Lys Lys Ser Ser Phe Ile Ser Ala Leu Gly Ile Gly Ile Leu Ser
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Ile Gly Met Ala Phe Ala Ala Pro Ala Asp Ala Val Asn Gln Ile Arg
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Gln Asn Ala Thr Gln Val Leu Ser Ile Leu Lys Ser Gly Asp Ala Asn
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115 120 125
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<212> DNA
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<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
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n 1
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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Val Lys Lys Ser Ser Phe Ile Ser Ala Leu Gly Ile Gly Ile Leu Ser
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Ile Gly Met Ala Phe Ala Ser Pro Ala Asp Ala Val Gly Gln Ile Arg
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195
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 353
atgaaaaaat cctccttcat cagcgcattg ggcatcggta ttttgagcat cggcatggca 60
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 354
Met Lys Lys Ser Ser Phe Ile Ser Ala Leu Gly Ile Gly Ile Leu Ser
1 5 10 15
Ile Gly Met Ala Phe Ala Ser Pro Ala Asp Ala Val Gly Gln Ile Arg
20 25 30
Gln Asn Ala Thr Gln Val Leu Thr Ile Leu Lys Ser Gly Asp Ala Ala
35 40 45
Ser Ala Arg Pro Lys Ala Glu Ala Tyr Ala Val Pro Tyr Phe Asp Phe
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Gln Arg Met Thr Ala Leu Ala Val Gly Asn Pro Trp Arg Thr Ala Ser
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Asp Ala Gln Lys Gln Ala Leu Ala Lys Glu Phe Gln Thr Leu Leu Ile
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Arg Thr Tyr Ser Gly Thr Met Leu Lys Phe Lys Asn Ala Thr Val Asn
100 105 110
Val Lys Asp Asn Pro Ile Val Asn Lys Gly Gly Lys Glu Ile Val Val
115 120 125
Arg Ala Glu Val Gly Ile Pro Gly Gln Lys Pro Val Asn Met Asp Phe
130 135 140
Thr Thr Tyr Gln Ser Gly Gly Lys Tyr Arg Thr Tyr Asn Val Ala Ile
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180 185 190
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (138)..(162)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 355
atgaaacaca tactccccct gattgccgca tccgcactct gcatttcaac cgcttcggca 60
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (47)..(54)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 356
Met Lys His Ile Leu Pro Leu Ile Ala Ala Ser Ala Leu Cys Ile Ser
1 5 10 15
Thr Ala Ser Ala His Pro Ala Ser Glu Pro Ser Thr Gln Asn Glu Thr
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Ala Met Ile Thr His Thr Leu Ile Ser Lys Tyr Ser Phe Gly Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ala Ile Lys Ser Lys Gly Met Asp Ile Phe
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<211> 480
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 357
atgaaacaca tactccccct gattgccgca tccgcactct gcatttcaac cgcttcggca 60
catcctgcca gcgaaccgtc cacccaaaac gaaaccgcta tgaccacgca taccctcacc 120
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gaagtggcaa acactttggc aaacgccgaa aaactgatac aaaaaaccgt aggcgaataa 480
<210> 358
<211> 159
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 358
Met Lys His Ile Leu Pro Leu Ile Ala Ala Ser Ala Leu Cys Ile Ser
1 5 10 15
Thr Ala Ser Ala His Pro Ala Ser Glu Pro Ser Thr Gln Asn Glu Thr
20 25 30
Ala Met Thr Thr His Thr Leu Thr Ser Lys Tyr Ser Phe Asp Glu Thr
35 40 45
Val Ser Arg Leu Glu Thr Ala Ile Lys Ser Lys Gly Met Asp Ile Phe
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Ala Val Ile Asp His Gln Glu Ala Ala Arg Arg Asn Gly Leu Thr Met
65 70 75 80
Gln Pro Ala Lys Val Ile Val Phe Gly Thr Pro Lys Ala Gly Thr Pro
85 90 95
Leu Met Val Lys Asp Pro Ala Phe Ala Leu Gln Leu Pro Leu Arg Val
100 105 110
Leu Val Thr Glu Thr Asp Gly Lys Val Arg Ala Ala Tyr Thr Asp Thr
115 120 125
Arg Ala Leu Ile Ala Gly Ser Arg Ile Gly Phe Asp Glu Val Ala Asn
130 135 140
Thr Leu Ala Asn Ala Glu Lys Leu Ile Gln Lys Thr Val Gly Glu
145 150 155
<210> 359
<211> 480
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (5)..(5)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (26)..(26)
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<220>
<221> misc_feature
<222> (59)..(60)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (337)..(337)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 359
atganacaca tactccccct gantgncgca tccgcactct gcatttcaac cgcttcggnn 60
catcctgcca gcgaaccgca aacccaaaac gaaaccgcta tgaccacgca taccctcacc 120
tcaaaataca gttttgacga aaccgtcagc cgccttgaaa ccgccataaa aagcaaaggg 180
atggacattt ttgccgtcat cgaccatcag gaagccgccc gccgaaacgg cttaacgatg 240
cagccggcaa aagtcatcgt cttcggcacg cccaaagccg gtacgccgct gatggtcaaa 300
gaccccgcct tcgccctgca actgcccctg cgcgtcntcg ttaccgaaac ggacggcaaa 360
gtacgcgccg cctataccga tacgcgcgcc ctcatcgccg gcagccgcat cggtttcgac 420
gaagtggcaa acactttggc aaacgccgaa aaactgatac aaaaaaccat aggcgaataa 480
<210> 360
<211> 159
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (2)..(2)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (8)..(9)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (113)..(113)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 360
Met Xaa His Ile Leu Pro Leu Xaa Xaa Ala Ser Ala Leu Cys Ile Ser
1 5 10 15
Thr Ala Ser Xaa His Pro Ala Ser Glu Pro Gln Thr Gln Asn Glu Thr
20 25 30
Ala Met Thr Thr His Thr Leu Thr Ser Lys Tyr Ser Phe Asp Glu Thr
35 40 45
Val Ser Arg Leu Glu Thr Ala Ile Lys Ser Lys Gly Met Asp Ile Phe
50 55 60
Ala Val Ile Asp His Gln Glu Ala Ala Arg Arg Asn Gly Leu Thr Met
65 70 75 80
Gln Pro Ala Lys Val Ile Val Phe Gly Thr Pro Lys Ala Gly Thr Pro
85 90 95
Leu Met Val Lys Asp Pro Ala Phe Ala Leu Gln Leu Pro Leu Arg Val
100 105 110
Xaa Val Thr Glu Thr Asp Gly Lys Val Arg Ala Ala Tyr Thr Asp Thr
115 120 125
Arg Ala Leu Ile Ala Gly Ser Arg Ile Gly Phe Asp Glu Val Ala Asn
130 135 140
Thr Leu Ala Asn Ala Glu Lys Leu Ile Gln Lys Thr Ile Gly Glu
145 150 155
<210> 361
<211> 1
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 361
n 1
<210> 362
<211> 159
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 362
Met Lys His Ile Leu Pro Pro Ile Ala Ala Ser Ala Phe Cys Ile Ser
1 5 10 15
Thr Ala Ser Ala His Pro Ala Gly Lys Pro Pro Thr Gln Asn Glu Thr
20 25 30
Ala Met Thr Thr His Thr Leu Thr Ser Lys Tyr Ser Phe Asp Glu Thr
35 40 45
Val Ser Arg Leu Glu Thr Ala Ile Lys Ser Lys Gly Met Asp Ile Phe
50 55 60
Ala Val Ile Asp His Gln Glu Ala Ala Arg Arg Asn Gly Leu Thr Met
65 70 75 80
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85 90 95
Leu Met Val Lys Asp Pro Ala Phe Ala Leu Gln Leu Pro Leu Arg Val
100 105 110
Leu Val Thr Glu Thr Asp Gly Lys Val Arg Thr Ala Tyr Thr Asp Thr
115 120 125
Arg Ala Leu Ile Val Gly Ser Arg Ile Ser Phe Asp Glu Val Ala Asn
130 135 140
Thr Leu Ala Asn Ala Glu Lys Leu Ile Gln Lys Thr Val Gly Glu
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
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atgaaacaca tactccccct gatcgccgca tccgcactct gcatttcaac cgcttcggca 60
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<211> 159
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 364
Met Lys His Ile Leu Pro Leu Ile Ala Ala Ser Ala Leu Cys Ile Ser
1 5 10 15
Thr Ala Ser Ala His Pro Ala Gly Lys Pro Pro Thr Gln Asn Glu Thr
20 25 30
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35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
Leu Met Val Lys Asp Pro Ala Phe Ala Leu Gln Leu Pro Leu Arg Val
100 105 110
Leu Val Thr Glu Thr Asp Gly Lys Val Arg Thr Ala Tyr Thr Asp Thr
115 120 125
Arg Ala Leu Ile Val Gly Ser Arg Ile Ser Phe Asp Glu Val Ala Asn
130 135 140
Thr Leu Ala Asn Ala Glu Lys Leu Ile Gln Lys Thr Val Gly Glu
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 365
atggctttta ttacgcgctt attcaaaagc agtaaatggc tgattgtgcc gctgatgctc 60
cccgcctttc agaatgtggc ggcggagggg atagatgtga gccgtgccga agcgaggata 120
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 366
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1 5 10 15
Pro Leu Met Leu Pro Ala Phe Gln Asn Val Ala Ala Glu Gly Ile Asp
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35 40 45
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Arg Arg Gly Val Pro Leu Asn Phe Thr Leu Ser Trp Gln Leu Ser Ala
65 70 75 80
Pro Ile Ile Ala Ser Tyr Arg Phe Lys Leu Gly Gln Leu Ile Gly Asp
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 367
atggctttta ttacgcgctt attcaaaagc agtaaatggc tgattgtgcc gctgatgctc 60
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cgcctgacgc tgtccacttc aaaactgccc aagccttttc aaatcaatgc attgacttct 540
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<211> 198
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 368
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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atggctttta ttacgcgctt attcaaaagc attaaacaat ggcttgtgct gctgccgatg 60
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<211> 199
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 372
Met Ala Phe Ile Thr Arg Leu Phe Lys Ser Ile Lys Gln Trp Leu Val
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Leu Leu Pro Ile Leu Ser Val Leu Pro Asp Ala Ala Ala Glu Gly Ile
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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<221> misc_feature
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<400> 373
atggacacaa aagaaatcct cggntacgcg gcaggctcga tcggcagcgc ggttttagcc 60
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cacaaactgt ttcattattt gaaaaaacaa ggtttcccat tatga 1425
<210> 374
<211> 474
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (8)..(8)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (157)..(157)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (213)..(213)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (304)..(304)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (332)..(332)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (382)..(382)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 374
Met Asp Thr Lys Glu Ile Leu Xaa Tyr Ala Ala Gly Ser Ile Gly Ser
1 5 10 15
Ala Val Leu Ala Val Ile Ile Leu Pro Leu Leu Ser Trp Tyr Phe Pro
20 25 30
Ala Asp Asp Ile Gly Arg Ile Val Leu Met Gln Thr Ala Ala Gly Leu
35 40 45
Thr Val Ser Val Leu Cys Leu Gly Leu Asp Gln Ala Tyr Val Arg Glu
50 55 60
Tyr Tyr Ala Thr Ala Asp Lys Asp Thr Leu Phe Lys Thr Leu Phe Leu
65 70 75 80
Pro Pro Leu Leu Ser Ala Ala Ala Ile Ala Ala Leu Leu Leu Ser Arg
85 90 95
Pro Ser Leu Pro Ser Glu Ile Leu Phe Ser Leu Asp Asp Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Ile Gly Leu Val Leu Phe Glu Leu Ser Phe Leu Pro Ile Arg Phe
115 120 125
Leu Leu Leu Val Leu Arg Met Glu Gly Arg Ala Leu Ala Phe Ser Ser
130 135 140
Ala Gln Leu Val Pro Lys Leu Ala Ile Leu Leu Leu Xaa Pro Leu Thr
145 150 155 160
Val Gly Leu Leu His Phe Pro Ala Asn Thr Ala Val Leu Thr Ala Val
165 170 175
Tyr Ala Leu Ala Asn Leu Ala Ala Ala Ala Phe Leu Leu Phe Gln Asn
180 185 190
Arg Cys Arg Leu Lys Ala Val Arg His Ala Pro Phe Ser Pro Ala Val
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Leu His Arg Gly Xaa Arg Tyr Gly Ile Pro Ile Ala Leu Ser Ser Ile
210 215 220
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<210> 375
<211> 1422
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 375
atggacacaa aagaaatcct cggctacgcg gcaggctcga tcggcagcgc ggttttagcc 60
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<210> 376
<211> 473
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 376
Met Asp Thr Lys Glu Ile Leu Gly Tyr Ala Ala Gly Ser Ile Gly Ser
1 5 10 15
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Ala Asp Asp Ile Gly Arg Ile Val Leu Met Gln Thr Ala Ala Gly Leu
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Pro Pro Leu Leu Ser Ala Ala Ala Ile Ala Ala Leu Leu Leu Ser Arg
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Gly Ile Gly Leu Val Leu Phe Glu Leu Ser Phe Leu Pro Ile Arg Phe
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Leu His Arg Gly Leu Arg Tyr Gly Ile Pro Ile Ala Leu Ser Ser Ile
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<212> DNA
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<400> 377
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 378
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 379
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<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 380
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<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 382
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 385
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gatgctgcga aagaggcaga gcagtcggat gcggaaaaag ctgccgacaa gcagcccgtt 300
gccgacaaag ccgacgaggt tgaggaaaag gcggacgagc cggagcggga aaagtcggac 360
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gcgcagaaga aagatgccga aacggttaaa aaacaagcgg taaaaccatc taaagaaaca 480
gagaaaaaag cttcaaaaga agagaaaaag gcggagaagg aaaaagttgc acccaaaccg 540
accccggaac aaatcctcaa cagcggcagc atcgaaaaag cgcgcagtgc cgctgccaaa 600
gaagtgcaga aaatgaaaac gcccgacaag gcggaagcaa cgcattatct gcaaatgggc 660
gcgtatgccg accgccggag cgcggaaggg cagcgtgcca aactggcaat cttgggcata 720
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 386
Met Phe Met Asn Lys Phe Ser Gln Ser Gly Lys Gly Leu Ser Gly Phe
1 5 10 15
Phe Phe Gly Leu Ile Leu Ala Thr Val Ile Ile Ala Gly Ile Leu Phe
20 25 30
Tyr Leu Asn Gln Ser Gly Gln Asn Ala Phe Lys Ile Pro Val Pro Ser
35 40 45
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50 55 60
Glu Asp Ile Gln Pro Glu Pro Ala Asp Gln Asn Ala Leu Ser Glu Pro
65 70 75 80
Asp Ala Ala Lys Glu Ala Glu Gln Ser Asp Ala Glu Lys Ala Ala Asp
85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
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Glu Lys Lys Ala Ser Lys Glu Glu Lys Lys Ala Glu Lys Glu Lys Val
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Glu Leu Lys Lys His Glu Val Ala Ser Leu Ile Arg Ser Ile Glu Ser
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Lys
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<212> DNA
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 388
Met Phe Met Asn Lys Phe Ser Gln Ser Gly Lys Gly Leu Ser Gly Phe
1 5 10 15
Phe Phe Gly Leu Ile Leu Ala Thr Val Ile Ile Ala Gly Ile Leu Leu
20 25 30
Tyr Leu Asn Gln Gly Gly Gln Asn Ala Phe Lys Ile Pro Ala Pro Ser
35 40 45
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50 55 60
Glu Asp Ile Gln Pro Glu Pro Ala Asp Gln Asn Ala Leu Ser Glu Pro
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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Glu Lys Lys Ala Ser Lys Glu Glu Lys Lys Ala Ala Lys Glu Lys Val
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Gly Gln Gly Gly Ser Gln Arg Ile Ile Cys Lys Trp Ala Arg Met Pro
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225 230 235 240
Ile Ser Ser Glu Val Val Gly Tyr Gln Ala Gly His Lys Thr Leu Tyr
245 250 255
Arg Val Gln Ser Gly Asn Met Ser Ala Asp Ala Val Lys Lys Met Gln
260 265 270
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Gly Lys
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<212> DNA
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 394
Met Asn His Asp Ile Thr Phe Leu Thr Leu Phe Leu Leu Gly Phe Phe
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Gly Gly Thr His Cys Ile Gly Met Cys Gly Gly Leu Ser Ser Ala Phe
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Ala Leu Gln Leu Pro Pro His Ile Asn Arg Phe Trp Leu Ile Leu Leu
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Leu Asn Thr Gly Arg Val Ser Ser Tyr Thr Ala Ile Gly Leu Ile Leu
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Gly Thr Leu Pro Asn Leu Leu Ala Ile Gly Ile Phe Ser Leu Gln Leu
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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Met Asn Xaa Asp Ile Thr Phe Leu Thr Leu Phe Leu Leu Gly Phe Phe
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Gly Gly Thr His Cys Ile Gly Met Cys Gly Gly Leu Ser Ser Ala Phe
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Ala Leu Gln Leu Pro Pro His Ile Asn Arg Xaa Trp Leu Ile Leu Leu
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Leu Asn Thr Gly Arg Val Ser Ser Tyr Thr Ala Ile Gly Leu Ile Leu
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Gln Asn Ile Leu Tyr Thr Ala Ala Asn Leu Leu Leu Leu Phe Leu Gly
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Leu Tyr Leu Ser Gly Ile Ser Ser Leu Ala Ala Lys Ile Glu Lys Ile
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Gly Lys Pro Ile Trp Arg Asn Leu Asn Pro Ile Leu Asn Arg Leu Leu
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Ser Gly Ser Ala Ala Thr Gly Gly Leu Tyr Met Leu Ala Phe Ala Leu
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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Ala Leu Gln Leu Pro Pro His Ile Asn Arg Phe Trp Leu Ile Leu Leu
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Leu Tyr Leu Ser Gly Ile Ser Ser Leu Ala Ala Lys Ile Glu Lys Ile
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Gly Thr Leu Pro Asn Leu Leu Ala Ile Gly Ile Phe Ser Leu Gln Leu
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Val Ser Leu Trp Ala Leu Trp Lys Leu Ala Val Leu Trp Leu
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<213> Neisseria meningitidis
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atgtattgcg tattgctgct tgaatacgtt aatcggttac ggctcgttcg gcgaggcgtt 720
gaaacattgg gaggcttcca aagtcagcgc ggtaacaacc ttgctccccg tgtttaccgt 780
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<210> 400
<211> 277
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (25)..(25)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (157)..(157)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 400
Met Glu Asn Gln Arg Pro Leu Leu Gly Phe Arg Leu Ala Leu Leu Ala
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Ala Met Thr Trp Gly Thr Leu Pro Xaa Ser Val Arg Gln Val Leu Lys
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Ile Val Val Gly Val Leu Val Phe Lys Asp Arg Met Thr Ala Ala Gln
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Asp Lys Phe Gly Glu Leu Ser Gly Leu Gly Ala Tyr Xaa Lys Gly Val
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 413
atgccgaccg tccgttttac cgaatccgtc agcaaacacg accttgatgc cctattcgag 60
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tgctcggagt cttcagacgg cattttcctg aatgcggacg gctggccaga tatgggcaga 240
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gagtgtttcg acctgaccga cggcggcagc aatcccttgt tcgcgctcga acgcgccgct 360
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<211> 291
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 414
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Trp Ala Glu Arg Val Lys Lys Asp Trp Glu Ala Gly Cys Ser Glu Ser
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Ser Asp Gly Ile Phe Leu Asn Ala Asp Gly Trp Pro Asp Met Gly Arg
65 70 75 80
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Arg Ala Val His Leu Asn Gly Leu Val Glu Ser Asp Gly Arg Trp His
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Phe Trp Ile Gly Arg Arg Ser Pro His Lys Ala Val Asp Pro Asp Lys
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Leu Asp Asn Thr Ala Ala Gly Gly Val Ser Ser Gly Glu Leu Pro Ser
165 170 175
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180 185 190
Leu Leu Pro Leu Ile Arg Pro Val Ser Gln Leu His Ser Leu Arg Pro
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210 215 220
Leu Pro Glu Thr Phe Leu Pro Glu Asn Gln Asp Gly Glu Val Ala Gly
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Phe Glu Lys Met Asp Ile Gly Gly Leu Leu Ala Ala Met Leu Ser Gly
245 250 255
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Ile Arg Leu
290
<210> 415
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<213> Neisseria gonorrhoeae
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> n is a, c, g, or t
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 416
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1 5 10 15
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35 40 45
Pro Ala Ala Ile Ser Glu Arg Gln Ala Ala Val Cys Leu Arg Leu Gln
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65 70 75 80
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Ile Arg Ala Val His Leu Asn Gly Leu Val Glu Ser Asn Gly Arg Trp
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His Phe Trp Ile Gly Arg Arg Ser Pro His Lys Ala Val Asp Pro Gly
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 418
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Ala Leu Phe Glu Arg Ala Lys Ala Ser Tyr Gly Ala Glu Ser Cys Trp
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<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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<400> 422
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<212> DNA
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<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 423
n 1
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 424
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (45)..(45)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 425
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 426
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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tattga 546
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<211> 181
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 428
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 429
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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Asp Lys Ile Ile Leu Lys Gln Gly Lys Asp Tyr Ala Ser Leu Ser Lys
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Thr His Pro Lys Ala Tyr Leu Asp Leu Ser Ser Ile Ala Lys Gly Phe
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Tyr Leu Val Glu Ile Gly Gly Glu Leu His Gly Lys Gly Lys Asn Ala
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<212> DNA
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Lys Ser Asp Ile Phe Ala Leu Ala Ser Gln Ile Lys Asn Ser His Ile
115 120 125
Asn Ser Glu Ile Leu Ser Val Gly Asn Tyr Ile Glu Trp Leu Arg Pro
130 135 140
Thr Leu Asn Lys Leu Thr Gly Trp Gln Glu His Leu Tyr Ala Gly Leu
145 150 155 160
Asp Pro Phe His Tyr Ile Glu Val Thr Asp Asn Ser His Val Ile Gly
165 170 175
Gln Thr Ile Asp Leu Gly Ala Leu Glu Leu Thr Asn Ser Leu Trp Lys
180 185 190
Pro Arg Trp Asn Ser Asn Ile Asp Tyr Leu Ile Thr Lys Asn Ala Glu
195 200 205
Ile Arg Phe Asn Thr Lys Asn Glu Ser Leu Leu Val Lys Glu Asp Tyr
210 215 220
Ala Gly Gly Ala Arg Phe Arg Phe Ala Tyr Asp Leu Lys Asp Lys Val
225 230 235 240
Pro Glu Ile Pro Val Leu Thr Phe Glu Lys Asn Ile Thr Gly Thr Ser
245 250 255
Asp Ile Ile Phe Glu Gly Lys Ala Leu Asp Asn Leu Lys His Leu Asp
260 265 270
Gly His Gln Ile Val Lys Val Asn Asp Thr Ala Asp Lys Asp Ala Phe
275 280 285
Arg Leu Ser Ser Lys Tyr Arg Lys Gly Ile Tyr Thr Leu Ser Leu Gln
290 295 300
Gln Arg Pro Glu Gly Phe Phe Thr Lys Val Gln Glu Arg Asp Asp Ile
305 310 315 320
Ala Ile Tyr Ala Gln Gln Ala Gln Ala Ala Asn Thr Leu Phe Ala Leu
325 330 335
Arg Leu Asn Asp Lys Asn Ser Asp Ile Phe Asp Arg Thr Leu Pro Arg
340 345 350
Lys Gly Leu Trp Leu Arg Val Ile Asp Gly His Ser Asn Gln Trp Val
355 360 365
Gln Gly Lys Thr Ala Pro Val Glu Gly Tyr Arg Lys Gly Val Gln Leu
370 375 380
Gly Gly Glu Val Phe Thr Trp Gln Asn Glu Ser Asn Gln Leu Ser Ile
385 390 395 400
Gly Leu Met Gly Gly Gln Ala Glu Gln Arg Ser Thr Phe Arg Asn Pro
405 410 415
Asp Thr Asp Asn Leu Thr Thr Gly Asn Val Lys Gly Phe Gly Ala Gly
420 425 430
Val Tyr Ala Thr Trp His Gln Leu Gln Asp Lys Gln Thr Gly Ala Tyr
435 440 445
Val Asp Ser Trp Met Gln Tyr Gln Arg Phe Arg His Arg Ile Asn Thr
450 455 460
Glu Tyr Ala Thr Glu Arg Phe Thr Ser Lys Gly Ile Thr Ala Ser Ile
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Glu Ala Gly Tyr Asn Ala Leu Leu Ala Glu His Phe Thr Lys Lys Gly
485 490 495
Asn Ser Leu Arg Val Tyr Leu Gln Pro Gln Ala Gln Leu Thr Tyr Leu
500 505 510
Gly Val Asn Gly Lys Phe Ser Asp Ser Glu Asn Ala Gln Val Asn Leu
515 520 525
Leu Gly Ser Arg Gln Leu Gln Ser Arg Val Gly Val Gln Ala Lys Ala
530 535 540
Gln Phe Ala Phe Thr Asn Gly Val Thr Phe Gln Pro Phe Val Ala Val
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Asn Ser Ile Tyr Gln Gln Lys Pro Phe Gly Val Glu Ile Asp Gly Asp
565 570 575
Arg Arg Val Ile Asn Asn Lys Thr Val Ile Glu Thr Gln Leu Gly Val
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<213> Neisseria meningitidis
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
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<222> (380)..(380)
<223> n is a, c, g, or t
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gcggaatatg ttcagttctc tatagatttg ttcagtgtgg gtaaatcggg gggcggtata 60
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 458
Ala Glu Tyr Val Gln Phe Ser Ile Asp Leu Phe Ser Val Gly Lys Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ile Pro Lys Ala Lys Pro Val Phe Asp Ala Lys Pro Arg
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Trp Glu Val Asp Arg Lys Leu Asn Lys Leu Thr Thr Arg Glu Gln Val
35 40 45
Glu Lys Asn Val Gln Glu Thr Arg Arg Arg Ser Gln Ser Ser Gln Phe
50 55 60
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Asn His Phe Ile Gly Gly Asp Ile Asn Lys Lys Gly Thr Val Thr Gly
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
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<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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Ala Val Cys Leu Pro Met His Ala His Ala Ser Xaa Leu Ala Asn Asp
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Ser Phe Ile Arg Gln Val Leu Asp Arg Gln His Phe Glu Pro Asp Gly
20 25 30
Lys Tyr His Leu Phe Gly Ser Arg Gly Glu Leu Ala Glu Arg Gln Ser
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Ser Asp His Gly His Glu Val His Ser Pro Phe Asp Asn His Ala Ser
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Leu Thr Asp Asn Arg Ser Thr Gly Gln Arg Leu Ala Asp Arg Phe His
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 462
Arg Arg Leu Lys His Cys Cys His Ala Arg Leu Gly Ser Ala Phe His
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Arg Lys Gln Asp Gly Ala His Gln Arg Phe Gly Arg Tyr Gly Ala Thr
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Gln Arg Leu Cys Arg Ser Ser His Pro Arg Leu Gly Ser Pro Lys Pro
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Gln Glu Thr Arg Arg Arg Ser Gln Ser Ser Gln Phe Lys Ala His Ala
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Gln Arg Glu Trp Glu Asn Lys Thr Gly Leu Asp Phe Asn His Phe Ile
245 250 255
Gly Gly Asp Ile Asn Lys Lys Gly Ala Val Thr Gly Gly His Ser Leu
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Thr Arg Gly Asp Val Arg Val Ile Gln Gln Thr Ser Ala Pro Asp Lys
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His Gly Val Leu Ser Ser Asp Ser Gly Asn
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<220>
<221> misc_feature
<222> (175)..(175)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 463
ttgggcattt cccgcaaaat atcccttatt ctgtccatac tggcagtgtg cctgccgatg 60
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agaacagcat atcccattta tgaatag 1887
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<211> 628
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<220>
<221> misc_feature
<222> (59)..(59)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 464
Leu Gly Ile Ser Arg Lys Ile Ser Leu Ile Leu Ser Ile Leu Ala Val
1 5 10 15
Cys Leu Pro Met His Ala His Ala Ser Asp Leu Ala Asn Asp Pro Phe
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Ile Arg Gln Val Leu Asp Arg Gln His Phe Glu Pro Asp Gly Lys Tyr
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His Leu Phe Gly Ser Arg Gly Glu Leu Ala Xaa Arg Asn Gly His Ile
50 55 60
Gly Leu Gly Asn Ile Gln Ser His Gln Leu Gly His Leu Met Ile Gln
65 70 75 80
Gln Ala Ala Val Glu Gly Asn Ile Gly Tyr Ile Val Arg Phe Ser Asp
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His Gly His Lys Phe His Ser Pro Phe Asp Asn His Ala Ser His Ser
100 105 110
Asp Ser Asp Glu Ala Gly Ser Pro Val Asp Gly Phe Ser Leu Tyr Arg
115 120 125
Ile His Trp Asp Gly Tyr Glu His His Pro Ala Asp Gly Tyr Asp Gly
130 135 140
Pro Gln Gly Gly Gly Tyr Pro Ala Pro Lys Gly Ala Arg Asp Ile Tyr
145 150 155 160
Ser Tyr Asp Ile Lys Gly Val Ala Gln Asn Ile Arg Leu Asn Leu Thr
165 170 175
Asp Asn Arg Ser Thr Gly Gln Arg Leu Ala Asp Arg Phe His Asn Ala
180 185 190
Gly Ala Met Leu Thr Gln Gly Val Gly Asp Gly Phe Lys Arg Ala Thr
195 200 205
Arg Tyr Ser Pro Glu Leu Asp Arg Ser Gly Asn Ala Ala Glu Ala Phe
210 215 220
Asn Gly Thr Ala Asp Ile Val Lys Asn Ile Ile Gly Ala Ala Gly Glu
225 230 235 240
Ile Val Gly Ala Gly Asp Ala Val Gln Gly Ile Ser Glu Gly Ser Asn
245 250 255
Ile Ala Val Met His Gly Leu Gly Leu Leu Ser Thr Glu Asn Lys Met
260 265 270
Ala Arg Ile Asn Asp Leu Ala Asp Met Ala Gln Leu Lys Asp Tyr Ala
275 280 285
Ala Ala Ala Ile Arg Asp Trp Ala Val Gln Asn Pro Asn Ala Ala Gln
290 295 300
Gly Ile Glu Ala Val Ser Asn Ile Phe Met Ala Ala Ile Pro Ile Lys
305 310 315 320
Gly Ile Gly Ala Val Arg Gly Lys Tyr Gly Leu Gly Gly Ile Thr Ala
325 330 335
His Pro Val Lys Arg Ser Gln Met Gly Ala Ile Ala Leu Pro Lys Gly
340 345 350
Lys Ser Ala Val Ser Asp Asn Phe Ala Asp Ala Ala Tyr Ala Lys Tyr
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Pro Ser Pro Tyr His Ser Arg Asn Ile Arg Ser Asn Leu Glu Gln Arg
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Tyr Gly Lys Glu Asn Ile Thr Ser Ser Thr Val Pro Pro Ser Asn Gly
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Lys Asn Val Lys Leu Ala Asp Gln Arg His Pro Lys Thr Gly Val Pro
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Phe Asp Gly Lys Gly Phe Pro Asn Phe Glu Lys His Val Lys Tyr Asp
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Thr Lys Leu Asp Ile Gln Glu Leu Ser Gly Gly Gly Ile Pro Lys Ala
435 440 445
Lys Pro Val Phe Asp Ala Lys Pro Arg Trp Glu Val Asp Arg Lys Leu
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Asn Lys Leu Thr Thr Arg Glu Gln Val Glu Lys Asn Val Gln Glu Thr
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Arg Arg Arg Ser Gln Ser Ser Gln Phe Lys Ala His Ala Gln Arg Glu
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Trp Glu Asn Lys Thr Gly Leu Asp Phe Asn His Phe Ile Gly Gly Asp
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Ile Asn Lys Lys Gly Thr Val Thr Gly Gly His Ser Leu Thr Arg Gly
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Asp Val Arg Val Ile Gln Gln Thr Ser Ala Pro Asp Lys His Gly Val
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Tyr Gln Ala Thr Val Glu Ile Lys Lys Pro Asp Gly Ser Trp Glu Val
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Lys Thr Lys Lys Gly Gly Lys Val Met Thr Lys His Thr Met Phe Pro
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Lys Asp Trp Asp Glu Ala Arg Ile Arg Ala Glu Val Thr Ser Ala Trp
580 585 590
Glu Ser Arg Ile Met Leu Lys Asp Asn Lys Trp Gln Gly Thr Ser Lys
595 600 605
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Pro Ile Tyr Glu
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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ttgggcattt cccgcaaaat atcccttatt ctgtccatac tggcagtgtg cctgccgatg 60
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attgtcggcg caggcgatgc cgtgcagggt ataagcgaag gctcaaacat tgctgttatg 780
cacggcttgg gtctgctttc caccgaaaac aagatggcgc gcatcaacga tttggcagat 840
atggcgcaac tcaaagacta tgccgcagca gccatccgcg attgggcagt ccaaaacccc 900
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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Leu Gly Ile Ser Arg Lys Ile Ser Leu Ile Leu Ser Ile Leu Ala Val
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His Leu Phe Gly Ser Arg Gly Glu Leu Ala Glu Arg Ser Gly His Ile
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Gly Leu Gly Asn Ile Gln Ser His Gln Leu Gly Asn Leu Phe Ile Gln
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Gln Ala Ala Ile Lys Gly Asn Ile Gly Tyr Ile Val Arg Phe Ser Asp
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His Gly His Glu Val His Ser Pro Phe Asp Asn His Ala Ser His Ser
100 105 110
Asp Ser Asp Glu Ala Gly Ser Pro Val Asp Gly Phe Ser Leu Tyr Arg
115 120 125
Ile His Trp Asp Gly Tyr Glu His His Pro Ala Asp Gly Tyr Asp Gly
130 135 140
Pro Gln Gly Gly Gly Tyr Pro Ala Pro Lys Gly Ala Arg Asp Ile Tyr
145 150 155 160
Ser Tyr Asp Ile Lys Gly Val Ala Gln Asn Ile Arg Leu Asn Leu Thr
165 170 175
Asp Asn Arg Ser Thr Gly Gln Arg Leu Val Asp Arg Phe His Asn Thr
180 185 190
Gly Ser Met Leu Thr Gln Gly Val Gly Asp Gly Phe Lys Arg Ala Thr
195 200 205
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210 215 220
Asn Gly Thr Ala Asp Ile Val Lys Asn Ile Ile Gly Ala Ala Gly Glu
225 230 235 240
Ile Val Gly Ala Gly Asp Ala Val Gln Gly Ile Ser Glu Gly Ser Asn
245 250 255
Ile Ala Val Met His Gly Leu Gly Leu Leu Ser Thr Glu Asn Lys Met
260 265 270
Ala Arg Ile Asn Asp Leu Ala Asp Met Ala Gln Leu Lys Asp Tyr Ala
275 280 285
Ala Ala Ala Ile Arg Asp Trp Ala Val Gln Asn Pro Asn Ala Ala Gln
290 295 300
Gly Ile Glu Ala Val Ser Asn Ile Phe Thr Ala Val Ile Pro Val Lys
305 310 315 320
Gly Ile Gly Ala Val Arg Gly Lys Tyr Gly Leu Gly Gly Ile Thr Ala
325 330 335
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
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Leu Pro Lys Arg Leu Leu Leu Ser Leu Leu Ile Leu Leu Ala Pro Asn
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Glu Met Lys Gly Thr Glu Val Ile Ile Val Gly Asp His Pro Pro Pro
435 440 445
Val Gly Asn Leu Asn Glu Thr Phe Arg Tyr Leu Lys Gln Gly His Val
450 455 460
Ala Trp Leu His Phe Lys Ile Lys
465 470
<210> 477
<211> 417
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (339)..(339)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (363)..(363)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 477
gtgagcggac gttaccgcgc tttggatcgc gtttccaaaa tcatcatcgt tactttgagt 60
atcgccacgc ttgccgccgc cggcatcgct atgtcgcgcg gtatgcagat gcagtccgat 120
tttatcgagc cgacaccgtg gacgcttgcc ggtttgggct tcctgatcgc gctgatgggc 180
tggatgcccg cgccgattga aatttccgcc atcaattctt tgtgggtaac cgaaaaacaa 240
cgcatcaatc cttccgaata ccgcgacggg atttttgaat tcaacgtcgg ttatatcgcc 300
agtgcggttt tggctttggt tttccttgca ctgggcgcng tagcgccgaa cggcaacggc 360
ganacagtgc agatggcggg cggcaaatat aacgggcaat tgatcaatat gtacgcc 417
<210> 478
<211> 139
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (113)..(113)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (121)..(121)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 478
Val Ser Gly Arg Tyr Arg Ala Leu Asp Arg Val Ser Lys Ile Ile Ile
1 5 10 15
Val Thr Leu Ser Ile Ala Thr Leu Ala Ala Ala Gly Ile Ala Met Ser
20 25 30
Arg Gly Met Gln Met Gln Ser Asp Phe Ile Glu Pro Thr Pro Trp Thr
35 40 45
Leu Ala Gly Leu Gly Phe Leu Ile Ala Leu Met Gly Trp Met Pro Ala
50 55 60
Pro Ile Glu Ile Ser Ala Ile Asn Ser Leu Trp Val Thr Glu Lys Gln
65 70 75 80
Arg Ile Asn Pro Ser Glu Tyr Arg Asp Gly Ile Phe Glu Phe Asn Val
85 90 95
Gly Tyr Ile Ala Ser Ala Val Leu Ala Leu Val Phe Leu Ala Leu Gly
100 105 110
Xaa Val Ala Pro Asn Gly Asn Gly Xaa Thr Val Gln Met Ala Gly Gly
115 120 125
Lys Tyr Asn Gly Gln Leu Ile Asn Met Tyr Ala
130 135
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<211> 1253
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 479
atgtccgaac aacatatttc gacttggaaa agtaaaatca acgcattggg tccggggatc 60
atgatggctt cggcggcggt cggcggttcg cacctgattg cctcgacgca ggcggcgcgc 120
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<210> 480
<211> 417
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 480
Met Ser Glu Gln His Ile Ser Thr Trp Lys Ser Lys Ile Asn Ala Leu
1 5 10 15
Gly Pro Gly Ile Met Met Ala Ser Ala Ala Val Gly Gly Ser His Leu
20 25 30
Ile Ala Ser Thr Gln Ala Gly Ala Leu Tyr Gly Trp Gln Ile Ala Leu
35 40 45
Ile Ile Ile Leu Thr Asn Leu Phe Lys Tyr Pro Phe Phe Arg Phe Ser
50 55 60
Ala His Tyr Thr Leu Asp Thr Gly Lys Ser Leu Ile Glu Gly Tyr Ala
65 70 75 80
Glu Lys Ser Arg Val Tyr Leu Trp Val Phe Leu Ile Leu Cys Ile Leu
85 90 95
Ser Ala Thr Ile Asn Ala Gly Ala Val Ala Ile Val Thr Ala Ala Ile
100 105 110
Val Lys Met Ala Ile Pro Ser Leu Met Phe Asp Ala Gly Thr Val Ala
115 120 125
Ala Leu Ile Met Ala Ser Cys Leu Ile Ile Leu Val Ser Gly Arg Tyr
130 135 140
Arg Ala Leu Asp Arg Val Ser Lys Ile Ile Ile Val Thr Leu Ser Ile
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Ala Thr Leu Ala Ala Ala Gly Ile Ala Met Ser Arg Gly Met Gln Met
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Gln Ser Asp Phe Ile Glu Pro Thr Pro Trp Thr Leu Ala Gly Leu Gly
180 185 190
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195 200 205
Ala Ile Asn Ser Leu Trp Val Thr Glu Lys Gln Arg Ile Asn Pro Ser
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Glu Tyr Arg Asp Gly Ile Phe Asp Phe Asn Val Gly Tyr Ile Ala Ser
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Ala Val Leu Ala Leu Val Phe Leu Ala Leu Gly Ala Phe Val Gln Tyr
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Gly Asn Gly Glu Ala Val Gln Met Ala Gly Gly Lys Tyr Ile Gly Gln
260 265 270
Leu Ile Asn Met Tyr Ala Val Thr Ile Gly Gly Trp Ser Arg Pro Leu
275 280 285
Val Ala Phe Ile Ala Phe Ala Cys Met Tyr Gly Thr Thr Ile Thr Val
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Val Ala Gly Ser Gly Leu Ala Val Ile Phe Trp Phe Asp Gly Val Met
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Ala Asn Leu Leu Lys Phe Ala Met Ile Ala Ala Phe Val Ser Ala Pro
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Val Phe Ala Trp Leu Asn Tyr Arg Leu Val Lys Gly Asp Glu Lys His
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Lys
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 481
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<211> 417
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 482
Met Ser Glu Gln His Ile Ser Thr Trp Lys Ser Lys Ile Asn Ala Leu
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Gly Pro Gly Ile Met Met Ala Ser Ala Ala Val Gly Gly Ser His Leu
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Ile Ile Ile Leu Thr Asn Leu Phe Lys Tyr Pro Phe Phe Arg Phe Ser
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65 70 75 80
Glu Lys Ser Arg Val Tyr Leu Trp Val Phe Leu Ile Leu Cys Ile Leu
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Val Lys Met Ala Ile Pro Ser Leu Met Phe Asp Ala Gly Thr Val Ala
115 120 125
Ala Leu Ile Met Ala Ser Cys Leu Ile Ile Leu Val Ser Gly Arg Tyr
130 135 140
Arg Ala Leu Asp Arg Val Ser Lys Ile Ile Ile Val Thr Leu Ser Ile
145 150 155 160
Ala Thr Leu Ala Ala Ala Gly Ile Ala Met Ser Arg Gly Met Gln Met
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Gln Ser Asp Phe Ile Glu Pro Thr Pro Trp Thr Leu Ala Gly Leu Gly
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Phe Leu Ile Ala Leu Met Gly Trp Met Pro Ala Pro Ile Glu Ile Ser
195 200 205
Ala Ile Asn Ser Leu Trp Val Thr Glu Lys Gln Arg Ile Asn Pro Ser
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Glu Tyr Arg Asp Gly Ile Phe Asp Phe Asn Val Gly Tyr Ile Ala Ser
225 230 235 240
Ala Val Leu Ala Leu Val Phe Leu Ala Leu Gly Ala Phe Val Gln Tyr
245 250 255
Gly Asn Gly Glu Ala Val Gln Met Ala Gly Gly Lys Tyr Ile Gly Gln
260 265 270
Leu Ile Asn Met Tyr Ala Val Thr Ile Gly Gly Trp Ser Arg Pro Leu
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Val Ala Phe Ile Ala Phe Ala Cys Met Tyr Gly Thr Thr Ile Thr Val
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Val Asp Gly Tyr Ala Arg Ala Ile Ala Glu Pro Val Arg Leu Leu Arg
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Gly Lys Asp Lys Thr Gly Asn Ala Glu Phe Phe Ala Trp Asn Ile Trp
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Val Ala Gly Ser Gly Leu Ala Val Ile Phe Trp Phe Asp Gly Val Met
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Ala Asn Leu Leu Lys Phe Ala Met Ile Ala Ala Phe Val Ser Ala Pro
355 360 365
Val Phe Ala Trp Leu Asn Tyr Arg Leu Val Lys Gly Asp Glu Lys His
370 375 380
Lys Leu Thr Ser Gly Met Asn Ala Leu Ala Leu Ala Gly Leu Ile Tyr
385 390 395 400
Leu Thr Gly Phe Thr Val Leu Phe Leu Leu Asn Leu Ala Gly Met Phe
405 410 415
Lys
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 483
n 1
<210> 484
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 484
Met Pro Lys Lys Ser Cys Val Tyr Leu Trp Val Phe Leu Ile Leu Cys
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Ile Ala Ser Ala Thr Ile Asn Ala Gly Ala Val Ala Ile Val Thr Ala
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Ala Ile Val Lys Met Ala Ile Pro Ser Leu Met Phe Asp Ala Gly Thr
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Val Ala Ala Leu Ile Met Ala Ser Cys Leu Ile Ile Leu Val Ser Gly
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Arg Tyr Arg Ala Leu Asp Arg Val Ser Lys Ile Ile Ile Val Thr Leu
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Ser Ile Ala Thr Leu Ala Ala Ala Gly Ile Ala Met Ser Arg Gly Met
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Ala Ser Ala Val Leu Ala Leu Val Phe Leu Ala Leu Gly Ala Phe Val
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Pro Leu Val Ala Phe Ile Ala Phe Ala Cys Met Tyr Gly Ala Ala Ser
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Leu Gly Gly Arg His Arg Phe Gly Arg Asp Phe Leu Val
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 485
aagaaaagct gcgtttattt gtgggttttt ttgattttgt gtatcgcctc cgccacgatt 60
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 486
Lys Lys Ser Cys Val Tyr Leu Trp Val Phe Leu Ile Leu Cys Ile Ala
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Ser Ala Thr Ile Asn Ala Gly Ala Val Ala Ile Val Thr Ala Ala Ile
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Ala Val Leu Ala Leu Val Phe Leu Ala Leu Gly Ala Phe Val Gln Tyr
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Val Ala Gly Ser Gly Leu Ala Val Ile Phe Trp Phe Asp Gly Ala Met
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Ala Glu Leu Leu Lys Phe Ala Met Ile Ala Ala Phe Val Ser Ala Pro
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Val Phe Ala Trp Leu Asn Tyr Arg Leu Val Lys Gly Asp Lys Arg His
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Ala
<210> 487
<211> 309
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 487
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 488
Leu Arg Glu Thr Ala Tyr Val Leu Asp Ser Phe Asp Arg Tyr Phe Val
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Val Ala Leu Ala Gly Leu Phe Phe Val Arg Ala Gln Ser Glu Arg Glu
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 489
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 493
n 1
<210> 494
<211> 925
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 494
Ser Glu Pro Asp Arg Pro Val Pro Pro Ala Ser Ala Asn Arg Ala Asp
1 5 10 15
Val Pro Thr Ala Ser Asp Gly Tyr Ser Asp Ser Gly Asn Gly Thr Glu
20 25 30
Glu Ala Glu Thr Glu Ala Ala Glu Ala Ala Glu Glu Glu Ala Ala Asp
35 40 45
Thr Glu Asp Ile Ala Thr Ala Val Ile Asp Asn Arg Arg Ile Pro Phe
50 55 60
Asp Arg Ser Ile Ala Glu Gly Leu Met Gln Ser Glu Ser Lys Thr Ser
65 70 75 80
Pro Val Arg Pro Val Phe Lys Glu Ile Thr Leu Glu Glu Ala Thr Arg
85 90 95
Ala Leu Ser Ser Ala Ala Leu Arg Glu Thr Lys Lys Arg Tyr Ile Asp
100 105 110
Ala Phe Glu Lys Asn Gly Thr Ala Val Pro Lys Val Arg Val Ser Asp
115 120 125
Thr Pro Met Glu Gly Leu Gln Ile Ile Gly Leu Asp Asp Pro Val Leu
130 135 140
Gln Arg Thr Tyr Ser Arg Met Phe Asp Ala Asp Lys Glu Ala Phe Ser
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Glu Ser Ala Asp Tyr Gly Phe Glu Pro Tyr Phe Glu Lys Gln His Pro
165 170 175
Ser Ala Phe Ser Ala Val Lys Ala Glu Asn Ala Arg Asn Ala Pro Phe
180 185 190
Arg Arg His Ala Gly Gln Glu Lys Gly Gln Ala Glu Ala Lys Ser Pro
195 200 205
Asp Val Ser Gln Gly Gln Ser Val Ser Asp Gly Thr Ala Val Arg Asp
210 215 220
Ala Arg Arg Arg Val Ser Val Asn Leu Lys Glu Pro Asn Lys Ala Thr
225 230 235 240
Val Ser Ala Glu Ala Arg Ile Ser Arg Leu Ile Pro Glu Ser Arg Thr
245 250 255
Val Val Gly Lys Arg Asp Val Glu Met Pro Ser Glu Thr Glu Asn Val
260 265 270
Phe Thr Glu Thr Val Ser Ser Val Gly Tyr Gly Gly Pro Val Tyr Asp
275 280 285
Glu Ala Ala Asp Ile His Ile Glu Glu Pro Ala Ala Pro Asp Ala Trp
290 295 300
Val Val Glu Pro Pro Glu Val Pro Glu Val Ala Val Pro Glu Ile Asp
305 310 315 320
Ile Leu Pro Pro Pro Pro Val Ser Glu Ile Tyr Asn Arg Thr Tyr Glu
325 330 335
Pro Pro Ala Gly Phe Glu Gln Ala Gln Arg Ser Arg Ile Ala Glu Thr
340 345 350
Asp His Leu Ala Ala Asp Val Leu Asn Gly Gly Trp Gln Glu Glu Thr
355 360 365
Ala Ala Ile Ala Asp Asp Gly Ser Glu Gly Ala Ala Glu Arg Ser Ser
370 375 380
Gly Gln Tyr Leu Ser Glu Thr Glu Ala Phe Gly His Asp Ser Gln Ala
385 390 395 400
Val Cys Pro Phe Glu Asp Val Pro Ser Glu Arg Pro Ser Cys Arg Val
405 410 415
Ser Asp Thr Glu Ala Asp Glu Gly Ala Phe Gln Ser Glu Glu Thr Gly
420 425 430
Ala Val Ser Glu His Leu Pro Thr Thr Asp Leu Leu Leu Pro Pro Leu
435 440 445
Phe Asn Pro Glu Ala Thr Gln Thr Glu Glu Glu Leu Leu Glu Asn Ser
450 455 460
Ile Thr Ile Glu Glu Lys Leu Ala Glu Phe Lys Val Lys Val Lys Val
465 470 475 480
Val Asp Ser Tyr Ser Gly Pro Val Ile Thr Arg Tyr Glu Ile Glu Pro
485 490 495
Asp Val Gly Val Arg Gly Asn Ser Val Leu Asn Leu Glu Lys Asp Leu
500 505 510
Ala Arg Ser Leu Gly Val Ala Ser Ile Arg Val Val Glu Thr Ile Pro
515 520 525
Gly Lys Thr Cys Met Gly Leu Glu Leu Pro Asn Pro Lys Arg Gln Met
530 535 540
Ile Arg Leu Ser Glu Ile Phe Asn Ser Pro Glu Phe Ala Glu Ser Lys
545 550 555 560
Ser Lys Leu Thr Leu Ala Leu Gly Gln Asp Ile Thr Gly Gln Pro Val
565 570 575
Val Thr Asp Leu Gly Lys Ala Pro His Leu Leu Val Ala Gly Thr Thr
580 585 590
Gly Ser Gly Lys Ser Val Gly Val Asn Ala Met Ile Leu Ser Met Leu
595 600 605
Phe Lys Ala Ala Pro Glu Asp Val Arg Met Ile Met Ile Asp Pro Lys
610 615 620
Met Leu Glu Leu Ser Ile Tyr Glu Gly Ile Thr His Leu Leu Ala Pro
625 630 635 640
Val Val Thr Asp Met Lys Leu Ala Ala Asn Ala Leu Asn Trp Cys Val
645 650 655
Asn Glu Met Glu Lys Arg Tyr Arg Leu Met Ser Phe Met Gly Val Arg
660 665 670
Asn Leu Ala Gly Phe Asn Gln Lys Ile Ala Glu Ala Ala Ala Arg Gly
675 680 685
Glu Lys Ile Gly Asn Pro Phe Ser Leu Thr Pro Asp Asp Pro Glu Pro
690 695 700
Leu Glu Lys Leu Pro Phe Ile Val Val Val Val Asp Glu Phe Ala Asp
705 710 715 720
Leu Met Met Thr Ala Gly Lys Lys Ile Glu Glu Leu Ile Ala Arg Leu
725 730 735
Ala Gln Lys Ala Arg Ala Ala Gly Ile His Leu Ile Leu Ala Thr Gln
740 745 750
Arg Pro Ser Val Asp Val Ile Thr Gly Leu Ile Lys Ala Asn Ile Pro
755 760 765
Thr Arg Ile Ala Phe Gln Val Ser Ser Lys Ile Asp Ser Arg Thr Ile
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Leu Asp Gln Met Gly Ala Glu Asn Leu Leu Gly Gln Gly Asp Met Leu
785 790 795 800
Phe Leu Pro Pro Gly Thr Ala Tyr Pro Gln Arg Val His Gly Ala Phe
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Ala Ser Asp Glu Glu Val His Arg Val Val Glu Tyr Leu Lys Gln Phe
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Gly Glu Pro Asp Tyr Val Asp Asp Ile Leu Ser Gly Gly Gly Ser Glu
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Glu Leu Pro Gly Ile Gly Arg Ser Gly Asp Gly Glu Thr Asp Pro Met
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Asn Gly Asn Arg Thr Ile Leu Val Pro Leu Asp Asn Ala
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<210> 495
<211> 3045
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 495
atgttttgga tagttttgat cgttattgtg ttgcttgcgc ttgccggcct gttttttgtc 60
cgcgcacaat ccgaacgcga gtggatgcgc gaggtttctg cgtggcagga aaagaaaggg 120
gaaaaacagg cggagctgcc tgaaatcaaa gacggtatgc ccgattttcc cgagttttcc 180
ctgatgcttt tccatgccgt caaaacggca gtgtattggc tgtttgtcgg tgtcgtccgt 240
ttctgccgaa actatctggc gcacgaatcc gaaccggaca ggcccgttcc gcctgcttct 300
gcaaaccgtg cggatgttcc gaccgcatcc gacgggtatt cagacagtgg aaacgggacg 360
gaagaagcgg aaacggaagc agcagaagct gcggaggaag aggctgccga tacggaagac 420
attgcaactg ccgtaatcga caaccgccgc atcccattcg accggagtat tgctgaaggg 480
ttgatgcagt ctgaaagcaa aacttcgccc gtccgtccgg tttttaagga aatcactttg 540
gaagaagcaa cgcgtgcttt aagcagcgcg gctttaaggg aaacgaaaaa acgctatatc 600
gatgcatttg agaaaaacgg aacagccgtc cccaaagtac gcgtgtccga taccccgatg 660
gaagggctgc agattatcgg tttggacgac cctgtgcttc aacgcacgta ttcccgtatg 720
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gagaagcagc atccgtctgc cttttctgca gtcaaagccg aaaatgcacg gaatgcgccg 840
ttccgccgtc atgcagggca ggagaaaggg caggcggagg caaaatcccc ggatgtttcc 900
caagggcagt ccgtttcaga cggcacagcc gtccgcgatg cccgccgccg cgtttccgtc 960
aatttgaaag aaccgaacaa ggcaacggtt tctgcggagg cgcggatttc gcgcctgatt 1020
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gatatccata ttgaagagcc tgccgcgccc gatgcttggg tggtcgaacc acccgaagtg 1200
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aaccgtacct atgagccgcc ggcaggattc gagcaggcgc aacgcagccg cattgccgaa 1320
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gcagatgacg gcagtgaggg tgcggcagag cggtcaagcg ggcaatatct gtcggaaacc 1440
gaagcgttcg ggcatgacag tcaggcggtt tgtccgtttg aagatgtgcc gtctgaacgc 1500
ccgtcctgcc gggtatcgga tacggaagcg gatgaagggg cgttccaatc ggaagagacc 1560
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tatgaaatcg aacccgatgt cggcgtgcgc ggcaattccg ttctgaattt ggaaaaagac 1800
ttggcgcgtt cgctcggcgt ggcttccatc cgcgttgtcg aaaccatccc cggcaaaacc 1860
tgcatgggtt tggaacttcc gaacccgaaa cgccaaatga tacgcctgag cgaaattttc 1920
aattcgcccg agtttgccga atccaaatcc aagctgacgc tcgcgctcgg tcaggacatt 1980
accggacagc ccgtcgtaac cgacttgggc aaagcaccgc atttgctggt tgccggcacg 2040
accggttcgg gcaaatcggt gggtgtcaac gcgatgattc tgtctatgct tttcaaagcc 2100
gcgccggaag acgtgcgtat gattatgatc gatccgaaaa tgctggaatt gagcatttac 2160
gaaggcatca cgcacctgct cgcccctgtc gttaccgata tgaagctggc ggcaaacgcg 2220
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cgcaatcttg cgggcttcaa ccaaaaaatc gccgaagccg cagcaagggg agaaaaaatc 2340
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gcgttccaag tgtccagcaa aatcgacagc cgcacgattc tcgaccaaat gggcgcggaa 2640
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aaccgcgccg cgcgtctgat tgaccaaatg gaagcggaag gcattgtgtc cgcaccggaa 3000
cacaacggca accgtacgat tctcgtcccc ttggacaatg cttga 3045
<210> 496
<211> 1014
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 496
Met Phe Trp Ile Val Leu Ile Val Ile Val Leu Leu Ala Leu Ala Gly
1 5 10 15
Leu Phe Phe Val Arg Ala Gln Ser Glu Arg Glu Trp Met Arg Glu Val
20 25 30
Ser Ala Trp Gln Glu Lys Lys Gly Glu Lys Gln Ala Glu Leu Pro Glu
35 40 45
Ile Lys Asp Gly Met Pro Asp Phe Pro Glu Phe Ser Leu Met Leu Phe
50 55 60
His Ala Val Lys Thr Ala Val Tyr Trp Leu Phe Val Gly Val Val Arg
65 70 75 80
Phe Cys Arg Asn Tyr Leu Ala His Glu Ser Glu Pro Asp Arg Pro Val
85 90 95
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100 105 110
Tyr Ser Asp Ser Gly Asn Gly Thr Glu Glu Ala Glu Thr Glu Ala Ala
115 120 125
Glu Ala Ala Glu Glu Glu Ala Ala Asp Thr Glu Asp Ile Ala Thr Ala
130 135 140
Val Ile Asp Asn Arg Arg Ile Pro Phe Asp Arg Ser Ile Ala Glu Gly
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Leu Met Gln Ser Glu Ser Lys Thr Ser Pro Val Arg Pro Val Phe Lys
165 170 175
Glu Ile Thr Leu Glu Glu Ala Thr Arg Ala Leu Ser Ser Ala Ala Leu
180 185 190
Arg Glu Thr Lys Lys Arg Tyr Ile Asp Ala Phe Glu Lys Asn Gly Thr
195 200 205
Ala Val Pro Lys Val Arg Val Ser Asp Thr Pro Met Glu Gly Leu Gln
210 215 220
Ile Ile Gly Leu Asp Asp Pro Val Leu Gln Arg Thr Tyr Ser Arg Met
225 230 235 240
Phe Asp Ala Asp Lys Glu Ala Phe Ser Glu Ser Ala Asp Tyr Gly Phe
245 250 255
Glu Pro Tyr Phe Glu Lys Gln His Pro Ser Ala Phe Ser Ala Val Lys
260 265 270
Ala Glu Asn Ala Arg Asn Ala Pro Phe Arg Arg His Ala Gly Gln Glu
275 280 285
Lys Gly Gln Ala Glu Ala Lys Ser Pro Asp Val Ser Gln Gly Gln Ser
290 295 300
Val Ser Asp Gly Thr Ala Val Arg Asp Ala Arg Arg Arg Val Ser Val
305 310 315 320
Asn Leu Lys Glu Pro Asn Lys Ala Thr Val Ser Ala Glu Ala Arg Ile
325 330 335
Ser Arg Leu Ile Pro Glu Ser Arg Thr Val Val Gly Lys Arg Asp Val
340 345 350
Glu Met Pro Ser Glu Thr Glu Asn Val Phe Thr Glu Thr Val Ser Ser
355 360 365
Val Gly Tyr Gly Gly Pro Val Tyr Asp Glu Ala Ala Asp Ile His Ile
370 375 380
Glu Glu Pro Ala Ala Pro Asp Ala Trp Val Val Glu Pro Pro Glu Val
385 390 395 400
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405 410 415
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420 425 430
Ala Gln Arg Ser Arg Ile Ala Glu Thr Asp His Leu Ala Ala Asp Val
435 440 445
Leu Asn Gly Gly Trp Gln Glu Glu Thr Ala Ala Ile Ala Asp Asp Gly
450 455 460
Ser Glu Gly Ala Ala Glu Arg Ser Ser Gly Gln Tyr Leu Ser Glu Thr
465 470 475 480
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485 490 495
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500 505 510
Gly Ala Phe Gln Ser Glu Glu Thr Gly Ala Val Ser Glu His Leu Pro
515 520 525
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530 535 540
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565 570 575
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580 585 590
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595 600 605
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Asn Ser Pro Glu Phe Ala Glu Ser Lys Ser Lys Leu Thr Leu Ala Leu
645 650 655
Gly Gln Asp Ile Thr Gly Gln Pro Val Val Thr Asp Leu Gly Lys Ala
660 665 670
Pro His Leu Leu Val Ala Gly Thr Thr Gly Ser Gly Lys Ser Val Gly
675 680 685
Val Asn Ala Met Ile Leu Ser Met Leu Phe Lys Ala Ala Pro Glu Asp
690 695 700
Val Arg Met Ile Met Ile Asp Pro Lys Met Leu Glu Leu Ser Ile Tyr
705 710 715 720
Glu Gly Ile Thr His Leu Leu Ala Pro Val Val Thr Asp Met Lys Leu
725 730 735
Ala Ala Asn Ala Leu Asn Trp Cys Val Asn Glu Met Glu Lys Arg Tyr
740 745 750
Arg Leu Met Ser Phe Met Gly Val Arg Asn Leu Ala Gly Phe Asn Gln
755 760 765
Lys Ile Ala Glu Ala Ala Ala Arg Gly Glu Lys Ile Gly Asn Pro Phe
770 775 780
Ser Leu Thr Pro Asp Asp Pro Glu Pro Leu Glu Lys Leu Pro Phe Ile
785 790 795 800
Val Val Val Val Asp Glu Phe Ala Asp Leu Met Met Thr Ala Gly Lys
805 810 815
Lys Ile Glu Glu Leu Ile Ala Arg Leu Ala Gln Lys Ala Arg Ala Ala
820 825 830
Gly Ile His Leu Ile Leu Ala Thr Gln Arg Pro Ser Val Asp Val Ile
835 840 845
Thr Gly Leu Ile Lys Ala Asn Ile Pro Thr Arg Ile Ala Phe Gln Val
850 855 860
Ser Ser Lys Ile Asp Ser Arg Thr Ile Leu Asp Gln Met Gly Ala Glu
865 870 875 880
Asn Leu Leu Gly Gln Gly Asp Met Leu Phe Leu Pro Pro Gly Thr Ala
885 890 895
Tyr Pro Gln Arg Val His Gly Ala Phe Ala Ser Asp Glu Glu Val His
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Asp Ile Leu Ser Gly Gly Gly Ser Glu Glu Leu Pro Gly Ile Gly Arg
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Arg Ile Gly Tyr Asn Arg Ala Ala Arg Leu Ile Asp Gln Met Glu Ala
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<210> 497
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (125)..(126)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (172)..(909)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 497
atgatttatc aaagaaacct catcaaagaa ctctctttta ccgccgtcgg cattttcgtc 60
gtcctcttgg cggtattggt ctccacgcag gcaatcaacc tgctcggccg tgccgccgac 120
gggcnngtga tcgccatcga tgccgtgttg gcattggtcg gcttctgggt cnnnnnnnnn 180
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 240
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 300
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 360
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 420
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 480
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 540
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 600
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 660
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 720
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 780
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 840
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 900
nnnnnnnnna ttgccatcgg tttgttttta atttaccaaa acgggctgac cctgcttttt 960
gaagccgtgg aagacggcaa aatccatttt tggctcggac tgctgcctat gcacattatc 1020
atgtttgtcc ttgcactcat cctgttgcgc gtccgcagta tgcccagcca gcccttctgg 1080
caggcggttg gcaaaagtct gacattgaaa ggcggaaaat ga 1122
<210> 498
<211> 373
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(42)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (58)..(303)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 498
Met Ile Tyr Gln Arg Asn Leu Ile Lys Glu Leu Ser Phe Thr Ala Val
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Gly Ile Phe Val Val Leu Leu Ala Val Leu Val Ser Thr Gln Ala Ile
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Asn Leu Leu Gly Arg Ala Ala Asp Gly Xaa Val Ile Ala Ile Asp Ala
35 40 45
Val Leu Ala Leu Val Gly Phe Trp Val Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
50 55 60
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
65 70 75 80
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
85 90 95
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
100 105 110
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
115 120 125
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
130 135 140
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
145 150 155 160
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
165 170 175
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
180 185 190
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
195 200 205
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
210 215 220
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
225 230 235 240
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
245 250 255
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
260 265 270
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
275 280 285
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ile
290 295 300
Ala Ile Gly Leu Phe Leu Ile Tyr Gln Asn Gly Leu Thr Leu Leu Phe
305 310 315 320
Glu Ala Val Glu Asp Gly Lys Ile His Phe Trp Leu Gly Leu Leu Pro
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Met His Ile Ile Met Phe Val Leu Ala Leu Ile Leu Leu Arg Val Arg
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Ser Met Pro Ser Gln Pro Phe Trp Gln Ala Val Gly Lys Ser Leu Thr
355 360 365
Leu Lys Gly Gly Lys
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 499
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gtcctcttgg cggtattggt ctccacgcag gcaatcaacc tgctcggccg tgccgccgac 120
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acttag 2166
<210> 522
<211> 721
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 522
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50 55 60
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100 105 110
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180 185 190
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195 200 205
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210 215 220
Leu Thr Ser Asp Ile Val Trp Leu Val Gln Lys Glu Val Lys Leu Pro
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Asp Gly Gly Thr Gln Thr Val Leu Met Pro Gln Val Tyr Val Arg Val
245 250 255
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260 265 270
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275 280 285
Gly Arg Asn Ala Leu Ile Ile Asn Thr Asp Thr Leu Asp Asn Ile Gly
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Gly Arg Ile His Ala Gln Lys Ser Ala Val Thr Ala Thr Gln Asp Ile
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Asn Asn Ile Gly Gly Ile Leu Ser Ala Glu Gln Thr Leu Leu Leu Asn
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Arg Leu Gln Ala Gly Arg Asp Ile Asn Leu Asp Thr Val Gln Thr Gly
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Thr
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (45)..(45)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<213> Neisseria meningitidis
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 526
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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145 150 155 160
Val Glu Leu Pro Trp Phe Asp Val Arg Phe Asp Phe Ile Ser Tyr Ile
165 170 175
Ala Leu Thr Glu Ala Lys Glu Leu His Ala Leu Pro Arg Leu Ser Asn
180 185 190
Arg Cys Arg Tyr Gln Ile Val Gly Cys Thr Met Asp Asp His Phe Gln
195 200 205
Ile Ala Glu Pro Ile Pro Gly Ile Arg Tyr Gln Ala Phe Ile Val Gly
210 215 220
Ile Gln Ala Val Ser Arg Asn Gly Leu Ala Ser Gln Glu Glu Leu Ser
225 230 235 240
Ala Phe Asn Arg Gln Ala Asp Ala Phe Ala Gln Ser Met Gly Gly Gln
245 250 255
Thr Leu His Thr Asp Leu Ala Ala Phe Ile Glu Val Ala Ser Ala Leu
260 265 270
Asp Ala Phe Cys Ala Arg Val Asp Gln Thr Ile Ala Ile His Leu Val
275 280 285
Ser Pro Thr Ser Ile Ser Gly Val Glu Leu Arg Ser Ala Val Thr Gly
290 295 300
Val Gly Phe Val Leu Glu Asp Asp Gly Ala Phe His Tyr Thr Asp Thr
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Ser Gly Ser Thr Met Phe Ser Ile Cys Ser Leu Asn Asn Glu Pro Phe
325 330 335
Thr Asn Ala Leu Leu Asp Asn Gln Ser Tyr Lys Gly Phe Ser Met Leu
340 345 350
Leu Asp Ile Pro His Ser Pro Ala Gly Glu Lys Thr Phe Asp Asp Leu
355 360 365
Phe Met Asp Leu Ala Val Arg Leu Ser Gly Gln Leu Asn Leu Asn Leu
370 375 380
Val Asn Asp Lys Met Glu Glu Val Ser Thr Gln Trp Leu Lys Asp Val
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Arg Thr Tyr Val Leu Ala Arg Gln Ser Glu Met Leu Lys Val Gly Ile
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<210> 531
<211> 465
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (45)..(45)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 531
gcgcggcacg gcacggaaga tttcttcatg aacaacagcg acacnatcag gcagatagtc 60
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<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (75)..(75)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 532
Ala Arg His Gly Thr Glu Asp Phe Phe Met Asn Asn Ser Asp Xaa Ile
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Arg Gln Ile Val Glu Ser Thr Thr Gly Thr Met Lys Leu Leu Ile Ser
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Ser Ile Ala Leu Ile Ser Leu Val Val Gly Gly Ile Gly Val Met Asn
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Ile Met Leu Val Ser Val Thr Glu Arg Thr Lys Glu Ile Gly Ile Arg
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Met Asp Ile Ser Ala Met Ser Val Ile Gly Ala Val Ala Cys Ser Thr
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Gly Ile Gly Ile Ala Phe Gly Phe Met Pro Ala Asn Lys Ala Ala Lys
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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<212> PRT
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<400> 534
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Thr Thr Gly Thr Met Lys Leu Leu Ile Ser Ser Ile Ala Leu Ile Ser
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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<211> 388
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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Met Leu Gly Ile Ile Ile Gly Ile Ala Ser Val Val Ser Val Val Ala
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Asp Phe Phe Met Asn Asn Ser Asp Ser Ile Arg Gln Ile Val Glu Ser
245 250 255
Thr Thr Gly Thr Met Lys Leu Leu Ile Ser Ser Ile Ala Leu Ile Ser
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Leu Val Val Gly Gly Ile Gly Val Met Asn Ile Met Leu Val Ser Val
275 280 285
Thr Glu Arg Thr Lys Glu Ile Gly Ile Arg Met Ala Ile Gly Ala Arg
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Arg Gly Asn Ile Leu Gln Gln Phe Leu Ile Glu Ala Val Leu Ile Cys
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Val Ile Gly Gly Leu Val Gly Val Gly Leu Ser Ala Ala Val Ser Leu
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385
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
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<211> 388
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 538
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(42)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 539
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<213> Neisseria meningitidis
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<221> misc_feature
<222> (64)..(64)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 542
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<213> Neisseria meningitidis
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ctgctgttca tcacgccgca catcggcagc tacgatttgg gcggacgcta catcagccag 420
cagcttccgt tccacctgac cgccatgtac aagccgccga aaatcaaagc gatagacaaa 480
atcatgcagg cgggcagggt gcgcggcaaa ggcaaaaccg cgcccaccgg catacaaggg 540
gtcaaacaaa tcatcaaggc cctgcgcgcg ggcgaggcaa ccatcatcct gcccgaccac 600
gtcccttctc cgcaggaagg cggcggcgtg tgggcggatt ttttcggcaa acctgcatac 660
accatgacac tggcggcaaa attggcacac gtcaaaggcg tgaaaaccct gtttttctgc 720
tgcgaacgcc tgcccgacgg acaaggcttc gtgttgcaca tccgccccgt ccaaggggaa 780
ttgaacggca acaaagccca cgatgccgcc gtgttcaacc gcaataccga atattggata 840
cgccgttttc cgacgcagta tctgtttatg tacaaccgct ataaaacgcc gtaa 894
<210> 572
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 572
Met Phe Arg Leu Gln Phe Arg Leu Phe Pro Pro Leu Arg Thr Ala Met
1 5 10 15
His Ile Leu Leu Thr Ala Leu Leu Lys Cys Leu Ser Leu Leu Ser Leu
20 25 30
Ser Cys Leu His Thr Leu Gly Asn Arg Leu Gly His Leu Ala Phe Tyr
35 40 45
Leu Leu Lys Glu Asp Arg Ala Arg Ile Val Ala Asn Met Arg Gln Ala
50 55 60
Gly Leu Asn Pro Asp Thr Gln Thr Val Lys Ala Val Phe Ala Glu Thr
65 70 75 80
Ala Lys Cys Gly Leu Glu Leu Ala Pro Ala Phe Phe Lys Lys Pro Glu
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Gly Ser Tyr Asp Leu Gly Gly Arg Tyr Ile Ser Gln Gln Leu Pro Phe
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195 200 205
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210 215 220
Ala Ala Lys Leu Ala His Val Lys Gly Val Lys Thr Leu Phe Phe Cys
225 230 235 240
Cys Glu Arg Leu Pro Asp Gly Gln Gly Phe Val Leu His Ile Arg Pro
245 250 255
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 573
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (57)..(57)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 574
Ala Trp Ser Ala Gly Glu Ser Trp Arg Val Leu Met Glu Ser Glu Thr
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Ala Ala Ala Val Leu Gly Val Val Tyr Ala Ala Pro Ala Arg Arg Ser
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Ala Trp Met Arg Gly Leu Met Phe Xaa Pro Phe Met Val Ser Pro Val
50 55 60
Cys Val Ser Ala Gly Val Leu Leu Leu Tyr Pro Gln Trp Thr Ala Ser
65 70 75 80
Leu Pro Leu Leu Leu Ala Met Tyr Ala Leu Leu Ala Tyr Pro Phe Val
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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Ser Ala Phe Leu Ala Val Met Val Val Ala Pro Leu Trp Ala Val Ala
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Ala Tyr Asp Gly Leu Ala Trp Arg Ala Val Leu Ser Asp Ala Tyr Met
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Leu Val Leu Pro Leu Gly Val Pro Val Ala Trp Val Leu Ala Arg Leu
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Ala Asp Gly Leu Leu Trp Arg Gly Arg Gln Asp Thr Pro Tyr Leu Leu
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Thr Leu Gly Ala Gly Ala Trp Arg Arg Phe Trp Asp Ile Glu Met Pro
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Ala Ala Gly Leu Leu Tyr Ala Trp Phe Gly Arg Arg Ala Val Ser Asp
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Tyr Val Leu Leu Ala Phe Ala Ala Ala Val Leu Ser Val Cys Cys Leu
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<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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Ala Ala Gly Leu Leu Tyr Ala Trp Phe Gly Arg Arg Ala Val Ser Asp
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Val Leu Arg Pro Trp Leu Ala Gly Gly Val Cys Leu Val Phe Leu Tyr
180 185 190
Cys Phe Ser Gly Phe Gly Leu Ala Leu Leu Leu Gly Gly Ser Arg Tyr
195 200 205
Ala Thr Val Glu Val Glu Ile Tyr Gln Leu Val Met Phe Glu Leu Asp
210 215 220
Met Ala Gly Ala Ser Ala Leu Val Trp Leu Val Leu Gly Val Thr Ala
225 230 235 240
Ala Ala Gly Leu Leu Tyr Ala Trp Phe Gly Arg Arg Ala Val Ser Asp
245 250 255
Lys Ala Val Ser Pro Val Met Pro Ser Pro Pro Gln Ser Val Gly Glu
260 265 270
Tyr Val Leu Leu Ala Phe Ser Val Ala Val Leu Ser Val Cys Cys Leu
275 280 285
Phe Pro Leu Ser Ala Ile Val Val Lys Ala Trp Ser Ala Gly Glu Ser
290 295 300
Arg Arg Val Leu Met Glu Ser Glu Thr Trp Gln Ala Val Trp Asn Thr
305 310 315 320
Leu Arg Phe Ser Ala Ala Ala Val Phe Ala Ala Ala Val Leu Gly Val
325 330 335
Val Tyr Ala Ala Ala Ala Arg Arg Leu Val Trp Met Arg Gly Leu Val
340 345 350
Phe Leu Pro Phe Met Val Ser Pro Val Cys Val Ser Ala Gly Val Leu
355 360 365
Leu Leu Tyr Pro Gly Trp Thr Ala Ser Leu Pro Leu Leu Leu Ala Met
370 375 380
Tyr Ala Leu Leu Ala Tyr Pro Phe Val Ala Lys Asp Val Leu Ser Ala
385 390 395 400
Trp Asp Ala Leu Pro Pro Asp Tyr Gly Arg Ala Ala Ala Gly Leu Gly
405 410 415
Ala Asn Gly Phe Gln Thr Ala Cys Arg Ile Thr Phe Pro Leu Leu Lys
420 425 430
Pro Ala Leu Arg Arg Gly Leu Thr Leu Ala Ala Ala Thr Cys Val Gly
435 440 445
Glu Phe Ala Ala Thr Leu Phe Leu Ser Arg Pro Glu Trp Gln Thr Leu
450 455 460
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Ala Arg Ala Met Val Leu Thr Leu Leu Leu Ser Ala Phe Ala Val Cys
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500 505 510
Leu
<210> 581
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 581
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<210> 582
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 582
Met Asp Gly Arg Cys Trp Ala Val Arg Gly Ala Phe Ser Leu Leu Pro
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Ser Ala Phe Leu Ala Val Met Val Val Ala Pro Leu Trp Ala Val Ala
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Ala Tyr Asp Gly Leu Ala Trp Arg Ala Val Leu Ser Asp Ala Tyr Met
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Val Leu Arg Pro Trp Leu Ala Gly Gly Val Cys Leu Val Phe Leu Tyr
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Cys Phe Ser Gly Phe Gly Leu Ala Leu Leu Leu Gly Gly Ser Arg Tyr
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Met Ala Gly Ala Ser Ala Leu Val Trp Leu Val Leu Gly Val Thr Ala
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Ala Ala Gly Leu Leu Tyr Ala Trp Phe Gly Arg Arg Ala Val Ser Asp
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<210> 583
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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85
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 585
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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<210> 587
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 587
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
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Ser Ala Ala Ala Ile Ile Leu Ile Leu Ile Leu Ile Val Lys Phe Arg
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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545 550 555 560
Ala Arg Pro Arg Asn Lys Asp Ser Lys Phe Ala Leu Ile Arg Lys Ile
565 570 575
Gly Glu Asn Ile Leu Lys Thr Thr Asp
580 585
<210> 601
<211> 1677
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 601
atgctgacct ataccccgcc cgatgcccgc ccgcccgcca aaacccacga aaaaccgtgg 60
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aatcctgccg aacctgccgt ctataccgcc gtcgaagcac tggcaggcag ccccaccccc 180
ttggttgccc atctgttcgg tcaaaccgat ttcggcatac cgcccgtgta tctttgggtt 240
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tttgcaggcg tattttttgc cgttatcgga ctgacttctt gcggctttgc cggtttcaac 360
tttttgggca gacaccacgg gcgcagcgtt gttttaatcc atatcggctg tatcgggctg 420
attccggttg cccatttcct caatcccgcc gccgccgcct ttgccgccgc cggactggtg 480
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ctgcccgtgc tgatgttttt ccgtccgtgg caaagcaggc gtttgatgtt gacggcagtc 660
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<210> 602
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 602
Met Leu Thr Tyr Thr Pro Pro Asp Ala Arg Pro Pro Ala Lys Thr His
1 5 10 15
Glu Lys Pro Trp Leu Leu Leu Leu Met Ala Phe Ala Trp Leu Trp Pro
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Gly Val Phe Ser His Asp Leu Trp Asn Pro Ala Glu Pro Ala Val Tyr
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65 70 75 80
Ala Ala Ala Phe Lys His Leu Leu Ser Pro Trp Ala Ala Asp Pro Tyr
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Asp Ala Ala Arg Phe Ala Gly Val Phe Phe Ala Val Ile Gly Leu Thr
100 105 110
Ser Cys Gly Phe Ala Gly Phe Asn Phe Leu Gly Arg His His Gly Arg
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Ser Val Val Leu Ile His Ile Gly Cys Ile Gly Leu Ile Pro Val Ala
130 135 140
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Leu His Gly Tyr Ser Leu Ala Arg Arg Arg Val Ile Ala Ala Ser Phe
165 170 175
Leu Leu Gly Thr Gly Trp Thr Leu Met Ser Leu Ala Ala Ala Tyr Pro
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Ala Ala Phe Ala Leu Met Leu Pro Leu Pro Val Leu Met Phe Phe Arg
195 200 205
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245 250 255
Phe Gly Gly Val Arg His Ile Gln Arg Ala Phe Ser Leu Phe His Tyr
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 605
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<211> 342
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 606
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195 200 205
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<210> 607
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
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tcgttttga 1029
<210> 608
<211> 342
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 608
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Val Arg Gly Phe Asp Gly Glu Met Ser Leu Pro Ala Glu Arg Gly Trp
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<213> Neisseria meningitidis
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tcaaccaaat ttattttggt tatcggcggc attcccgatt tgggcaaaga ggcatttgtt 600
actttggtaa ggatnttata ccnccngtta cagcaaccgc gtgtaaaact tgggagagag 660
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (13)..(13)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (28)..(28)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<222> (221)..(221)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 614
Met Glu Ser Thr Xaa Ser Leu Gln Ala Asn Leu Tyr Xaa Arg Leu Thr
1 5 10 15
Pro Ala Gly Ala Phe Tyr Ala Val Ser Ser Asp Xaa Pro Ser Ala Gly
20 25 30
Lys Thr Leu Leu His Ser Leu Leu Lys Ala Asp Ala Asp Glu Met Val
35 40 45
Ser Ser Glu Lys Leu Leu Thr Trp Ala Xaa Thr Ala Asp Ile Asp Thr
50 55 60
Ala Leu Asn Leu Leu Tyr Arg Leu Gln Lys Leu Glu Phe Leu Tyr Gly
65 70 75 80
Asp Glu Asn Gly His Ser Asp Gly Ile Asn Leu Ser Asp Glu Gln Leu
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Pro Leu Leu Met Glu Gln Leu Ser Gly Ser Gly Lys Ala Leu Leu Val
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Asp Arg Asn Gly Leu Tyr Leu Ala Asn Ala Asn Phe His His Glu Ala
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130 135 140
Lys Tyr Arg Leu Xaa Ile Lys Asn Asn Leu Tyr Ile Asn Asn Asn Ala
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225
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 615
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 616
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1 5 10 15
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<211> 406
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 622
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<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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245 250 255
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<400> 628
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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20 25 30
Asp Lys Ile Val Gly Tyr Leu Ser Asp Gly Met Val Val Ala Gln Val
35 40 45
Ser Asp Ala Gly Thr Pro Ala Val Cys Asp Pro Gly Ala Lys Leu Ala
50 55 60
Arg Arg Val Arg Glu Ala Gly Phe Lys Val Val Pro Val Val Gly Ala
65 70 75 80
Xaa Ala Val Met Ala Ala Leu Ser Val Ala Gly Val Glu Gly Ser Asp
85 90 95
Phe Tyr Phe Asn Gly Phe Val Pro Pro Lys Ser Gly Glu Arg Arg Lys
100 105 110
Leu Phe Ala Lys Trp Val Arg Ala Ala Phe Pro Ile Val Met Phe Glu
115 120 125
Thr Pro His Arg Ile Gly Ala Ala Leu Ala Asp Met Ala Glu Leu Phe
130 135 140
Pro Glu Arg Arg Leu Met Leu Ala Arg Glu Ile Thr Lys Thr Phe Glu
145 150 155 160
Thr Phe Leu Ser Gly Thr Val Gly Glu Ile Gln Thr Ala Leu Ser Ala
165 170 175
Asp Gly Asp Gln Ser Arg Gly Glu Met Val Leu Val Leu Tyr Pro Ala
180 185 190
Gln Asp Glu Lys His Glu Gly Leu Ser Glu Ser Ala Gln Asn Ile Met
195 200 205
Lys Ile Leu Thr Ala Glu Leu Pro Thr Lys Gln Ala Ala Glu Leu Ala
210 215 220
Ala Lys Ile Thr Gly Glu Gly Lys Lys Ala Leu Tyr Asp
225 230 235
<210> 641
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 641
atgtttcaga aacatttgca gaaagcctcc gacagcgtcg tcggagggac attatacgtg 60
gttgccacgc ccatcggcaa tttggcggac attaccctgc gcgctttggc ggtattgcaa 120
aaggcggaca tcatctgtgc cgaagacacg cgcgttaccg cacagctttt gagcgcgtac 180
ggcattcagg gcaaactcgt cagtgtgcgc gaacacaacg aacggcagat ggcggacaag 240
attgtcggct atctttcaga cggcatggtt gtggcacagg tttccgatgc gggtacgccg 300
gccgtgtgcg acccgggcgc gaaactcgcc cgccgcgtgc gtgaggccgg gtttaaagtc 360
gttcccgtcg tgggcgcaag cgcggtgatg gcggctttga gcgtggccgg tgtggaagga 420
tccgattttt atttcaacgg ttttgtaccg ccgaaatcgg gagaacgcag gaaactgttt 480
gccaaatggg tgcgggcggc gtttcctatc gtcatgtttg aaacgccgca ccgcatcggt 540
gcgacgcttg ccgatatggc ggaactgttc cccgaacgcc gattaatgct ggcgcgcgaa 600
attacgaaaa cgtttgaaac gttcttaagc ggcacggttg gggaaattca gacggcattg 660
tctgccgacg gcaaccaatc gcgcggcgag atggtgttgg tgctttatcc ggcgcaggat 720
gaaaaacacg aaggcttgtc cgagtccgcg caaaacatca tgaaaatcct cacagccgag 780
ctgccgacca aacaggcggc ggagcttgct gccaaaatca cgggcgaggg aaagaaagct 840
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<210> 642
<211> 291
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 642
Met Phe Gln Lys His Leu Gln Lys Ala Ser Asp Ser Val Val Gly Gly
1 5 10 15
Thr Leu Tyr Val Val Ala Thr Pro Ile Gly Asn Leu Ala Asp Ile Thr
20 25 30
Leu Arg Ala Leu Ala Val Leu Gln Lys Ala Asp Ile Ile Cys Ala Glu
35 40 45
Asp Thr Arg Val Thr Ala Gln Leu Leu Ser Ala Tyr Gly Ile Gln Gly
50 55 60
Lys Leu Val Ser Val Arg Glu His Asn Glu Arg Gln Met Ala Asp Lys
65 70 75 80
Ile Val Gly Tyr Leu Ser Asp Gly Met Val Val Ala Gln Val Ser Asp
85 90 95
Ala Gly Thr Pro Ala Val Cys Asp Pro Gly Ala Lys Leu Ala Arg Arg
100 105 110
Val Arg Glu Ala Gly Phe Lys Val Val Pro Val Val Gly Ala Ser Ala
115 120 125
Val Met Ala Ala Leu Ser Val Ala Gly Val Glu Gly Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Phe Asn Gly Phe Val Pro Pro Lys Ser Gly Glu Arg Arg Lys Leu Phe
145 150 155 160
Ala Lys Trp Val Arg Ala Ala Phe Pro Ile Val Met Phe Glu Thr Pro
165 170 175
His Arg Ile Gly Ala Thr Leu Ala Asp Met Ala Glu Leu Phe Pro Glu
180 185 190
Arg Arg Leu Met Leu Ala Arg Glu Ile Thr Lys Thr Phe Glu Thr Phe
195 200 205
Leu Ser Gly Thr Val Gly Glu Ile Gln Thr Ala Leu Ser Ala Asp Gly
210 215 220
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290
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<212> DNA
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<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> n is a, c, g, or t
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n 1
<210> 644
<211> 300
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 644
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Lys Ala Ser Asp Ser Val Val Gly Gly Thr Leu Tyr Val Val Ala Thr
20 25 30
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35 40 45
Gln Lys Ala Asp Ile Ile Cys Ala Glu Asp Thr Arg Val Thr Ala Gln
50 55 60
Leu Leu Ser Ala Tyr Gly Ile Gln Gly Arg Leu Val Ser Val Arg Glu
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His Asn Glu Arg Gln Met Ala Asp Lys Val Ile Gly Phe Leu Ser Asp
85 90 95
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100 105 110
Asp Pro Gly Ala Lys Leu Ala Arg Arg Val Arg Glu Ala Gly Phe Lys
115 120 125
Val Val Pro Val Val Gly Ala Ser Ala Val Met Ala Ala Leu Ser Val
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Ala Gly Val Ala Glu Ser Asp Phe Tyr Phe Asn Gly Phe Val Pro Pro
145 150 155 160
Lys Ser Gly Glu Arg Arg Lys Leu Phe Ala Lys Trp Val Arg Ala Ala
165 170 175
Phe Pro Val Val Met Phe Glu Thr Pro His Arg Ile Gly Ala Thr Leu
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Ala Asp Met Ala Glu Leu Phe Pro Glu Arg Arg Leu Met Leu Ala Arg
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Glu Ile Thr Lys Thr Phe Glu Thr Phe Leu Ser Gly Thr Val Gly Glu
210 215 220
Ile Gln Thr Ala Leu Ala Ala Asp Gly Asn Gln Ser Arg Gly Glu Met
225 230 235 240
Val Leu Val Leu Tyr Pro Ala Gln Asp Glu Lys His Glu Gly Leu Ser
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Glu Ser Ala Gln Asn Ala Met Lys Ile Leu Ala Ala Glu Leu Pro Thr
260 265 270
Lys Gln Ala Ala Glu Leu Ala Ala Lys Ile Thr Gly Glu Gly Lys Lys
275 280 285
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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gttcccgtcg tgggcgcaag cgcggtaatg gcggcgttga gtgtggccgg tgtggcggaa 420
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 646
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1 5 10 15
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Leu Arg Ala Leu Ala Val Leu Gln Lys Ala Asp Ile Ile Cys Ala Glu
35 40 45
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65 70 75 80
Val Ile Gly Phe Leu Ser Asp Gly Leu Val Val Ala Gln Val Ser Asp
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Ala Gly Thr Pro Ala Val Cys Asp Pro Gly Ala Lys Leu Ala Arg Arg
100 105 110
Val Arg Glu Ala Gly Phe Lys Val Val Pro Val Val Gly Ala Ser Ala
115 120 125
Val Met Ala Ala Leu Ser Val Ala Gly Val Ala Glu Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Phe Asn Gly Phe Val Pro Pro Lys Ser Gly Glu Arg Arg Lys Leu Phe
145 150 155 160
Ala Lys Trp Val Arg Ala Ala Phe Pro Val Val Met Phe Glu Thr Pro
165 170 175
His Arg Ile Gly Ala Thr Leu Ala Asp Met Ala Glu Leu Phe Pro Glu
180 185 190
Arg Arg Leu Met Leu Ala Arg Glu Ile Thr Lys Thr Phe Glu Thr Phe
195 200 205
Leu Ser Gly Thr Val Gly Glu Ile Gln Thr Ala Leu Ala Ala Asp Gly
210 215 220
Asn Gln Ser Arg Gly Glu Met Val Leu Val Leu Tyr Pro Ala Gln Asp
225 230 235 240
Glu Lys His Glu Gly Leu Ser Glu Ser Ala Gln Asn Ala Met Lys Ile
245 250 255
Leu Ala Ala Glu Leu Pro Thr Lys Gln Ala Ala Glu Leu Ala Ala Lys
260 265 270
Ile Thr Gly Glu Gly Lys Lys Ala Leu Tyr Asp Leu Ala Leu Ser Trp
275 280 285
Lys Asn Lys
290
<210> 647
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
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<220>
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
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<400> 647
atgaaaacaa ccgacaaacg gacaaccgaa acacaccgca aagccccgaa aaccggtcgc 60
atccgcttct cngctgctta cttagccata tgcctgtcgt tcggcattct tccccaagcc 120
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aaaggcaagt ttgcagtcgg ggcgaaagat attgaggttt acaacaaaaa aggggagttg 240
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caacgttgat tttggtgcgg aaggaaknaa tatcccngat caacawcgww ttacttataa 420
aattgtgaaa cggaataatt ataaagcagg gactaaaggc catccttatg gcggcgatta 480
tcatatgccg cgtttgcata aatwtgtcac agatgcagaa cctgttgaaa tgaccagtta 540
tatggatggg cggaaatata tcgatcaaaa taattaccct gaccgtgttc gtattggggc 600
aggcaggcaa tattggcgat ctgatgaaga tgagcccaat aaccgcgaaa gttcatatca 660
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accaatgttt atctatgatg cccaaaagca aaagtggtta attaatgggg tattgcaaac 780
gggcaacccc tatataggaa aaagcaatgg cttccagctg gttcgtaaag attggttcta 840
tgatgaaatc tttgctggag atacccattc agtattctac gaaccacgtc aaaatgggaa 900
atactctttt aacgacgata ataatggcac aggaaaaatc aatgccaaac atgaacacaa 960
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gacagcaaga gaacctgttt atcatgctgc aggtggtgtc aacagttatc gacccagact 1080
gaataatgga gaaaatattt cctttattga cgaaggaaaa ggcgaattga tacttaccag 1140
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nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 1380
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 1440
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 1500
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 1560
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 1620
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 1680
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 1740
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 1800
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 1860
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 1920
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 1980
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 2040
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 2100
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnngataaag tgactgcttc 2160
attgactaag accgacatca gcggcaatgt cgatcttgcc gatcacgctc atttaaatct 2220
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taatcaagcc acattaaacg gcaacacatc ggcttcgggc aatgcttcat ttaatctaag 2400
cgaccacgcc gtacaaaacg gcagtctgac gctttccggc aacgctaagg caaacgtaag 2460
ccattccgca ctcaacggta atgtctccct agccgataag gcagtattcc attttgaaag 2520
cagccgcttt accggacaaa tcagcggcgg caaggatacg gcattacact taaaagacag 2580
cgaatggacg ctgccgtcag garcggaatt aggcaattta aaccttgaca acgccaccat 2640
tacactcaat tccgcctatc gccacgatgc ggcaggggcg caaaccggca gtgcgacaga 2700
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attccgcttt atgtcggaac tcttcggcta ccgcagcgac aaattgaagc tggcggaaag 2880
ttccgaaggc acttacacct tggcggtcaa caataccggc aacgaacctg caagcctcga 2940
acaattgacg gtagtggaag gaaaagacaa caaaccgctg tccgaaaacc ttaatttcac 3000
cctgcaaaac gaacacgtcg atgcaggcgc gtggnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 3060
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 3120
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 3180
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 3240
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 3300
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 3360
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 3420
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 3480
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 3540
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnttagac cgcgtatttg ccgaagaccg 3600
ccgcaacgcc gtttggacaa gcggcatccg ggacaccaaa cactaccgtt cgcaagattt 3660
ccgcgcctac cgccaacaaa ccgacctgcg ccaaatcggt atgcagaaaa acctcggcag 3720
cgggcgcgtc ggcatcctgt tttcgcacaa ccggaccgaa aacaccttcg acgacggcat 3780
cggcaactcg gcacggcttg cccacggcgc cgttttcggg caatacggca tcgacaggtt 3840
ctacatcggc atcagncgcg ggcgcgggtt ttagcagcgg cagcctttca gacggcatcg 3900
gagsmaaawt ccgccgccgc gtgctgcatt acggcattca ggcacgatac cgcgccggtt 3960
tcggcggatt cggcatcgaa ccgcacatcg gcgcaacgcg ctatttcgtc caaaaagcgg 4020
attaccgcta cgaaaacgtc aatatcgcca cccccggcct tgcattcaac cgctaccgcg 4080
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tattggctca ggatttcggc aaaacccgca gtgcggaatg gggcgtaaac gccgaaatca 4260
aaggtttcac gctgtccctc cacgctgccg ccgccaaagg cccgcaactg gaagcgcaac 4320
acagcgcggg catcaaatta ggctaccgct ggtaa 4355
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<211> 1450
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (137)..(137)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (168)..(168)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (439)..(714)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (774)..(774)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (1012)..(1191)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (1301)..(1301)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (1303)..(1303)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 648
Met Lys Thr Thr Asp Lys Arg Thr Thr Glu Thr His Arg Lys Ala Pro
1 5 10 15
Lys Thr Gly Arg Ile Arg Phe Xaa Ala Ala Tyr Leu Ala Ile Cys Leu
20 25 30
Ser Phe Gly Ile Leu Pro Gln Ala Trp Ala Gly His Thr Tyr Phe Gly
35 40 45
Ile Asn Tyr Gln Tyr Tyr Arg Asp Phe Ala Glu Asn Lys Gly Lys Phe
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Ala Val Gly Ala Lys Asp Ile Glu Val Tyr Asn Lys Lys Gly Glu Leu
65 70 75 80
Val Gly Lys Ser Met Thr Lys Ala Pro Met Ile Asp Phe Ser Val Val
85 90 95
Ser Arg Asn Gly Val Ala Ala Leu Val Gly Val Gln Tyr Ile Val Ser
100 105 110
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115 120 125
Xaa Asn Ile Xaa Asp Gln Xaa Arg Xaa Thr Tyr Lys Ile Val Lys Arg
130 135 140
Asn Asn Tyr Lys Ala Gly Thr Lys Gly His Pro Tyr Gly Gly Asp Tyr
145 150 155 160
His Met Pro Arg Leu His Lys Xaa Val Thr Asp Ala Glu Pro Val Glu
165 170 175
Met Thr Ser Tyr Met Asp Gly Arg Lys Tyr Ile Asp Gln Asn Asn Tyr
180 185 190
Pro Asp Arg Val Arg Ile Gly Ala Gly Arg Gln Tyr Trp Arg Ser Asp
195 200 205
Glu Asp Glu Pro Asn Asn Arg Glu Ser Ser Tyr His Ile Ala Ser Xaa
210 215 220
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Ser
225 230 235 240
Pro Met Phe Ile Tyr Asp Ala Gln Lys Gln Lys Trp Leu Ile Asn Gly
245 250 255
Val Leu Gln Thr Gly Asn Pro Tyr Ile Gly Lys Ser Asn Gly Phe Gln
260 265 270
Leu Val Arg Lys Asp Trp Phe Tyr Asp Glu Ile Phe Ala Gly Asp Thr
275 280 285
His Ser Val Phe Tyr Glu Pro Arg Gln Asn Gly Lys Tyr Ser Phe Asn
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Asp Asp Asn Asn Gly Thr Gly Lys Ile Asn Ala Lys His Glu His Asn
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420 425 430
Ile Gly Lys Gly Thr Leu Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
435 440 445
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
450 455 460
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
465 470 475 480
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
485 490 495
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
500 505 510
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
515 520 525
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
530 535 540
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
545 550 555 560
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
565 570 575
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
580 585 590
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
595 600 605
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
610 615 620
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
625 630 635 640
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
645 650 655
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
660 665 670
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
675 680 685
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
690 695 700
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Asp Lys Val Thr Ala Ser
705 710 715 720
Leu Thr Lys Thr Asp Ile Ser Gly Asn Val Asp Leu Ala Asp His Ala
725 730 735
His Leu Asn Leu Thr Gly Leu Ala Thr Leu Asn Gly Asn Leu Ser Ala
740 745 750
Asn Gly Asp Thr Arg Tyr Thr Val Ser His Asn Ala Thr Gln Asn Gly
755 760 765
Asn Xaa Ser Leu Val Xaa Asn Ala Gln Ala Thr Phe Asn Gln Ala Thr
770 775 780
Leu Asn Gly Asn Thr Ser Ala Ser Gly Asn Ala Ser Phe Asn Leu Ser
785 790 795 800
Asp His Ala Val Gln Asn Gly Ser Leu Thr Leu Ser Gly Asn Ala Lys
805 810 815
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820 825 830
Lys Ala Val Phe His Phe Glu Ser Ser Arg Phe Thr Gly Gln Ile Ser
835 840 845
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850 855 860
Pro Ser Gly Xaa Glu Leu Gly Asn Leu Asn Leu Asp Asn Ala Thr Ile
865 870 875 880
Thr Leu Asn Ser Ala Tyr Arg His Asp Ala Ala Gly Ala Gln Thr Gly
885 890 895
Ser Ala Thr Asp Ala Pro Arg Arg Arg Ser Arg Arg Ser Arg Arg Ser
900 905 910
Leu Leu Xaa Val Thr Pro Pro Thr Ser Val Glu Ser Arg Phe Asn Thr
915 920 925
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Ser Glu Gly Thr Tyr Thr Leu Ala Val Asn Asn Thr Gly Asn Glu Pro
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Leu Ser Glu Asn Leu Asn Phe Thr Leu Gln Asn Glu His Val Asp Ala
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Gly Ala Trp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1010 1015 1020
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1025 1030 1035
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1040 1045 1050
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1055 1060 1065
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1070 1075 1080
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1085 1090 1095
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1100 1105 1110
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1115 1120 1125
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1145 1150 1155
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1160 1165 1170
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1175 1180 1185
Xaa Xaa Xaa Leu Asp Arg Val Phe Ala Glu Asp Arg Arg Asn Ala
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Arg Phe Tyr Ile Gly Ile Ser Ala Gly Ala Gly Phe Ser Ser Gly
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Ser Leu Ser Asp Gly Ile Gly Xaa Lys Xaa Arg Arg Arg Val Leu
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His Tyr Gly Ile Gln Ala Arg Tyr Arg Ala Gly Phe Gly Gly Phe
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Gly Ile Glu Pro His Ile Gly Ala Thr Arg Tyr Phe Val Gln Lys
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Ala Asp Tyr Arg Tyr Glu Asn Val Asn Ile Ala Thr Pro Gly Leu
1340 1345 1350
Ala Phe Asn Arg Tyr Arg Ala Gly Ile Lys Ala Asp Tyr Ser Phe
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Lys Pro Ala Gln His Ile Ser Ile Thr Pro Tyr Leu Ser Leu Ser
1370 1375 1380
Tyr Thr Asp Ala Ala Ser Gly Lys Val Arg Thr Arg Val Asn Thr
1385 1390 1395
Ala Val Leu Ala Gln Asp Phe Gly Lys Thr Arg Ser Ala Glu Trp
1400 1405 1410
Gly Val Asn Ala Glu Ile Lys Gly Phe Thr Leu Ser Leu His Ala
1415 1420 1425
Ala Ala Ala Lys Gly Pro Gln Leu Glu Ala Gln His Ser Ala Gly
1430 1435 1440
Ile Lys Leu Gly Tyr Arg Trp
1445 1450
<210> 649
<211> 4374
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 649
atgaaaacaa ccgacaaacg gacaaccgaa acacaccgca aagccccgaa aaccggccgc 60
atccgcttct cgcctgctta cttagccata tgcctgtcgt tcggcattct tccccaagcc 120
tgggcgggac acacttattt cggcatcaac taccaatact atcgcgactt tgccgaaaat 180
aaaggcaagt ttgcagtcgg ggcgaaagat attgaggttt acaacaaaaa aggggagttg 240
gtcggcaaat caatgacaaa agccccgatg attgattttt ctgtggtgtc gcgtaacggc 300
gtggcggcat tggtgggcga tcaatatatt gtgagcgtgg cacataacgg cggctataac 360
aacgttgatt ttggtgcgga aggaagaaat cccgatcaac atcgttttac ttataaaatt 420
gtgaaacgga ataattataa agcagggact aaaggccatc cttatggcgg cgattatcat 480
atgccgcgtt tgcataaatt tgtcacagat gcagaacctg ttgaaatgac cagttatatg 540
gatgggcgga aatatatcga tcaaaataat taccctgacc gtgttcgtat tggggcaggc 600
aggcaatatt ggcgatctga tgaagatgag cccaataacc gcgaaagttc atatcatatt 660
gcaagtgcgt attcttggct cgttggtggc aatacctttg cacaaaatgg atcaggtggt 720
ggcacagtca acttaggtag tgaaaaaatt aaacatagcc catatggttt tttaccaaca 780
ggaggctcat ttggcgacag tggctcacca atgtttatct atgatgccca aaagcaaaag 840
tggttaatta atggggtatt gcaaacgggc aacccctata taggaaaaag caatggcttc 900
cagctggttc gtaaagattg gttctatgat gaaatctttg ctggagatac ccattcagta 960
ttctacgaac cacgtcaaaa tgggaaatac tcttttaacg acgataataa tggcacagga 1020
aaaatcaatg ccaaacatga acacaattct ctgcctaata gattaaaaac acgaaccgtt 1080
caattgttta atgtttcttt atccgagaca gcaagagaac ctgtttatca tgctgcaggt 1140
ggtgtcaaca gttatcgacc cagactgaat aatggagaaa atatttcctt tattgacgaa 1200
ggaaaaggcg aattgatact taccagcaac atcaatcaag gtgctggagg attatatttc 1260
caaggagatt ttacggtctc gcctgaaaat aacgaaactt ggcaaggcgc gggcgttcat 1320
atcagtgaag acagtaccgt tacttggaaa gtaaacggcg tggcaaacga ccgcctgtcc 1380
aaaatcggca aaggcacgct gcacgttcaa gccaaagggg aaaaccaagg ctcgatcagc 1440
gtgggcgacg gtacagtcat tttggatcag caggcagacg ataaaggcaa aaaacaagcc 1500
tttagtgaaa tcggcttggt cagcggcagg ggtacggtgc aactgaatgc cgataatcag 1560
ttcaaccccg acaaactcta tttcggcttt cgcggcggac gtttggattt aaacgggcat 1620
tcgctttcgt tccaccgtat tcaaaatacc gatgaagggg cgatgattgt caaccacaat 1680
caagacaaag aatccaccgt taccattaca ggcaataaag atattgctac aaccggcaat 1740
aacaacagct tggatagcaa aaaagaaatt gcctacaacg gttggtttgg cgagaaagat 1800
acgaccaaaa cgaacgggcg gctcaacctt gtttaccagc ccgccgcaga agaccgcacc 1860
ctgctgcttt ccggcggaac aaatttaaac ggcaacatca cgcaaacaaa cggcaaactg 1920
tttttcagcg gcagaccaac accgcacgcc tacaatcatt taaacgacca ttggtcgcaa 1980
aaagagggca ttcctcgcgg ggaaatcgtg tgggacaacg actggatcaa ccgcacattt 2040
aaagcggaaa acttccaaat taaaggcgga caggcggtgg tttcccgcaa tgttgccaaa 2100
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caaagccaca caatctgtac acgttcggac tggacgggtc tgacaaattg tgtcgaaaaa 2220
accattaccg acgataaagt gattgcttca ttgactaaga ccgacatcag cggcaatgtc 2280
gatcttgccg atcacgctca tttaaatctc acagggcttg ccacactcaa cggcaatctt 2340
agtgcaaatg gcgatacacg ttatacagtc agccacaacg ccacccaaaa cggcaacctt 2400
agcctcgtgg gcaatgccca agcaacattt aatcaagcca cattaaacgg caacacatcg 2460
gcttcgggca atgcttcatt taatctaagc gaccacgccg tacaaaacgg cagtctgacg 2520
ctttccggca acgctaaggc aaacgtaagc cattccgcac tcaacggtaa tgtctcccta 2580
gccgataagg cagtattcca ttttgaaagc agccgcttta ccggacaaat cagcggcggc 2640
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cgttccctat tatccgttac accgccaact tcggtagaat cccgtttcaa cacgctgacg 2880
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cgcagcgaca aattgaagct ggcggaaagt tccgaaggca cttacacctt ggcggtcaac 3000
aataccggca acgaacctgc aagcctcgaa caattgacgg tagtggaagg aaaagacaac 3060
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tggcgttacc aactcatccg caaagacggc gagttccgcc tgcataatcc ggtcaaagaa 3180
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acccggccgg ctaccaccgc cttcccccgc gcccgccgcg cccgccggga tttgccgcaa 3480
ctgcaacccc aaccgcagcc ccaaccgcag cgcgacctga tcagccgtta tgccaatagc 3540
ggtttgagtg aattttccgc cacgctcaac agcgttttcg ccgtacagga cgaattagac 3600
cgcgtatttg ccgaagaccg ccgcaacgcc gtttggacaa gcggcatccg ggacaccaaa 3660
cactaccgtt cgcaagattt ccgcgcctac cgccaacaaa ccgacctgcg ccaaatcggt 3720
atgcagaaaa acctcggcag cgggcgcgtc ggcatcctgt tttcgcacaa ccggaccgaa 3780
aacaccttcg acgacggcat cggcaactcg gcacggcttg cccacggcgc cgttttcggg 3840
caatacggca tcgacaggtt ctacatcggc atcagcgcgg gcgcgggttt tagcagcggc 3900
agcctttcag acggcatcgg aggcaaaatc cgccgccgcg tgctgcatta cggcattcag 3960
gcacgatacc gcgccggttt cggcggattc ggcatcgaac cgcacatcgg cgcaacgcgc 4020
tatttcgtcc aaaaagcgga ttaccgctac gaaaacgtca atatcgccac ccccggcctt 4080
gcattcaacc gctaccgcgc gggcattaag gcagattatt cattcaaacc ggcgcaacac 4140
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ggcgtaaacg ccgaaatcaa aggtttcacg ctgtccctcc acgctgccgc cgccaaaggc 4320
ccgcaactgg aagcgcaaca cagcgcgggc atcaaattag gctaccgctg gtaa 4374
<210> 650
<211> 1457
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 650
Met Lys Thr Thr Asp Lys Arg Thr Thr Glu Thr His Arg Lys Ala Pro
1 5 10 15
Lys Thr Gly Arg Ile Arg Phe Ser Pro Ala Tyr Leu Ala Ile Cys Leu
20 25 30
Ser Phe Gly Ile Leu Pro Gln Ala Trp Ala Gly His Thr Tyr Phe Gly
35 40 45
Ile Asn Tyr Gln Tyr Tyr Arg Asp Phe Ala Glu Asn Lys Gly Lys Phe
50 55 60
Ala Val Gly Ala Lys Asp Ile Glu Val Tyr Asn Lys Lys Gly Glu Leu
65 70 75 80
Val Gly Lys Ser Met Thr Lys Ala Pro Met Ile Asp Phe Ser Val Val
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Ser Arg Asn Gly Val Ala Ala Leu Val Gly Asp Gln Tyr Ile Val Ser
100 105 110
Val Ala His Asn Gly Gly Tyr Asn Asn Val Asp Phe Gly Ala Glu Gly
115 120 125
Arg Asn Pro Asp Gln His Arg Phe Thr Tyr Lys Ile Val Lys Arg Asn
130 135 140
Asn Tyr Lys Ala Gly Thr Lys Gly His Pro Tyr Gly Gly Asp Tyr His
145 150 155 160
Met Pro Arg Leu His Lys Phe Val Thr Asp Ala Glu Pro Val Glu Met
165 170 175
Thr Ser Tyr Met Asp Gly Arg Lys Tyr Ile Asp Gln Asn Asn Tyr Pro
180 185 190
Asp Arg Val Arg Ile Gly Ala Gly Arg Gln Tyr Trp Arg Ser Asp Glu
195 200 205
Asp Glu Pro Asn Asn Arg Glu Ser Ser Tyr His Ile Ala Ser Ala Tyr
210 215 220
Ser Trp Leu Val Gly Gly Asn Thr Phe Ala Gln Asn Gly Ser Gly Gly
225 230 235 240
Gly Thr Val Asn Leu Gly Ser Glu Lys Ile Lys His Ser Pro Tyr Gly
245 250 255
Phe Leu Pro Thr Gly Gly Ser Phe Gly Asp Ser Gly Ser Pro Met Phe
260 265 270
Ile Tyr Asp Ala Gln Lys Gln Lys Trp Leu Ile Asn Gly Val Leu Gln
275 280 285
Thr Gly Asn Pro Tyr Ile Gly Lys Ser Asn Gly Phe Gln Leu Val Arg
290 295 300
Lys Asp Trp Phe Tyr Asp Glu Ile Phe Ala Gly Asp Thr His Ser Val
305 310 315 320
Phe Tyr Glu Pro Arg Gln Asn Gly Lys Tyr Ser Phe Asn Asp Asp Asn
325 330 335
Asn Gly Thr Gly Lys Ile Asn Ala Lys His Glu His Asn Ser Leu Pro
340 345 350
Asn Arg Leu Lys Thr Arg Thr Val Gln Leu Phe Asn Val Ser Leu Ser
355 360 365
Glu Thr Ala Arg Glu Pro Val Tyr His Ala Ala Gly Gly Val Asn Ser
370 375 380
Tyr Arg Pro Arg Leu Asn Asn Gly Glu Asn Ile Ser Phe Ile Asp Glu
385 390 395 400
Gly Lys Gly Glu Leu Ile Leu Thr Ser Asn Ile Asn Gln Gly Ala Gly
405 410 415
Gly Leu Tyr Phe Gln Gly Asp Phe Thr Val Ser Pro Glu Asn Asn Glu
420 425 430
Thr Trp Gln Gly Ala Gly Val His Ile Ser Glu Asp Ser Thr Val Thr
435 440 445
Trp Lys Val Asn Gly Val Ala Asn Asp Arg Leu Ser Lys Ile Gly Lys
450 455 460
Gly Thr Leu His Val Gln Ala Lys Gly Glu Asn Gln Gly Ser Ile Ser
465 470 475 480
Val Gly Asp Gly Thr Val Ile Leu Asp Gln Gln Ala Asp Asp Lys Gly
485 490 495
Lys Lys Gln Ala Phe Ser Glu Ile Gly Leu Val Ser Gly Arg Gly Thr
500 505 510
Val Gln Leu Asn Ala Asp Asn Gln Phe Asn Pro Asp Lys Leu Tyr Phe
515 520 525
Gly Phe Arg Gly Gly Arg Leu Asp Leu Asn Gly His Ser Leu Ser Phe
530 535 540
His Arg Ile Gln Asn Thr Asp Glu Gly Ala Met Ile Val Asn His Asn
545 550 555 560
Gln Asp Lys Glu Ser Thr Val Thr Ile Thr Gly Asn Lys Asp Ile Ala
565 570 575
Thr Thr Gly Asn Asn Asn Ser Leu Asp Ser Lys Lys Glu Ile Ala Tyr
580 585 590
Asn Gly Trp Phe Gly Glu Lys Asp Thr Thr Lys Thr Asn Gly Arg Leu
595 600 605
Asn Leu Val Tyr Gln Pro Ala Ala Glu Asp Arg Thr Leu Leu Leu Ser
610 615 620
Gly Gly Thr Asn Leu Asn Gly Asn Ile Thr Gln Thr Asn Gly Lys Leu
625 630 635 640
Phe Phe Ser Gly Arg Pro Thr Pro His Ala Tyr Asn His Leu Asn Asp
645 650 655
His Trp Ser Gln Lys Glu Gly Ile Pro Arg Gly Glu Ile Val Trp Asp
660 665 670
Asn Asp Trp Ile Asn Arg Thr Phe Lys Ala Glu Asn Phe Gln Ile Lys
675 680 685
Gly Gly Gln Ala Val Val Ser Arg Asn Val Ala Lys Val Lys Gly Asp
690 695 700
Trp His Leu Ser Asn His Ala Gln Ala Val Phe Gly Val Ala Pro His
705 710 715 720
Gln Ser His Thr Ile Cys Thr Arg Ser Asp Trp Thr Gly Leu Thr Asn
725 730 735
Cys Val Glu Lys Thr Ile Thr Asp Asp Lys Val Ile Ala Ser Leu Thr
740 745 750
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755 760 765
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770 775 780
Asp Thr Arg Tyr Thr Val Ser His Asn Ala Thr Gln Asn Gly Asn Leu
785 790 795 800
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835 840 845
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850 855 860
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Lys Asp Thr Ala Leu His Leu Lys Asp Ser Glu Trp Thr Leu Pro Ser
885 890 895
Gly Thr Glu Leu Gly Asn Leu Asn Leu Asp Asn Ala Thr Ile Thr Leu
900 905 910
Asn Ser Ala Tyr Arg His Asp Ala Ala Gly Ala Gln Thr Gly Ser Ala
915 920 925
Thr Asp Ala Pro Arg Arg Arg Ser Arg Arg Ser Arg Arg Ser Leu Leu
930 935 940
Ser Val Thr Pro Pro Thr Ser Val Glu Ser Arg Phe Asn Thr Leu Thr
945 950 955 960
Val Asn Gly Lys Leu Asn Gly Gln Gly Thr Phe Arg Phe Met Ser Glu
965 970 975
Leu Phe Gly Tyr Arg Ser Asp Lys Leu Lys Leu Ala Glu Ser Ser Glu
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1070 1075 1080
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1085 1090 1095
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1100 1105 1110
Gly Ile Met Gln Ala Glu Glu Glu Lys Lys Arg Val Gln Ala Asp
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1175 1180 1185
Leu Asn Ser Val Phe Ala Val Gln Asp Glu Leu Asp Arg Val Phe
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Ala Glu Asp Arg Arg Asn Ala Val Trp Thr Ser Gly Ile Arg Asp
1205 1210 1215
Thr Lys His Tyr Arg Ser Gln Asp Phe Arg Ala Tyr Arg Gln Gln
1220 1225 1230
Thr Asp Leu Arg Gln Ile Gly Met Gln Lys Asn Leu Gly Ser Gly
1235 1240 1245
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1250 1255 1260
Asp Asp Gly Ile Gly Asn Ser Ala Arg Leu Ala His Gly Ala Val
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1340 1345 1350
Asn Ile Ala Thr Pro Gly Leu Ala Phe Asn Arg Tyr Arg Ala Gly
1355 1360 1365
Ile Lys Ala Asp Tyr Ser Phe Lys Pro Ala Gln His Ile Ser Ile
1370 1375 1380
Thr Pro Tyr Leu Ser Leu Ser Tyr Thr Asp Ala Ala Ser Gly Lys
1385 1390 1395
Val Arg Thr Arg Val Asn Thr Ala Val Leu Ala Gln Asp Phe Gly
1400 1405 1410
Lys Thr Arg Ser Ala Glu Trp Gly Val Asn Ala Glu Ile Lys Gly
1415 1420 1425
Phe Thr Leu Ser Leu His Ala Ala Ala Ala Lys Gly Pro Gln Leu
1430 1435 1440
Glu Ala Gln His Ser Ala Gly Ile Lys Leu Gly Tyr Arg Trp
1445 1450 1455
<210> 651
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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<400> 651
atgaaaacaa ccgacaaacg gacaaccgaa acacaccgca aagccccgaa aaccggccgc 60
atccgcttct cgcctgctta cttagccata tgcctgtcgt tcggcattct tccccaagct 120
tgggcgggac acacttattt cggcatcaac taccaatact atcgcgactt tgccgaaaat 180
aaaggcaagt ttgcagtcgg ggcgaaagat attgaggtnt acaacaaaaa aggggagttg 240
gtcggcaaat caatgacaaa agccccgatg attgattttt ctgtggtgtc gcgtaacggc 300
gtggcggcat tggtgggcga tcaatatatt gtgagcgtgg cacataacgg cggctataac 360
aacgttgatt ttggtgcgga aggaagnaat cccgatcagc accgtttttc ttaccaaatt 420
gtgaaaagaa ataattataa gcctgacaat tcacaccctt acaacggcga ttancatatg 480
ccgcgtttgc ataaatttgt cacagatgca gaacctgtcg aaatgacgag tgacatgagg 540
gggaatacct attccgataa agaaaaatat cccgagcgtg tccgcatcgg ctcaggacac 600
cactattggc gttatgatga tgacaaacac ggcgatttat cctactccgg cgcatggtta 660
attggcggca atacacatat gcagggttgg ggaaataatg gcgtanttag tttgagcggc 720
gatgtgcgcc atgccaacga ctatggccct atgccgattg caggtgcggc aggcgacagc 780
ggttcgccaa tgtttattta tgacaaaaca aacaataaat ggctgctcaa cggagtttta 840
caaaccggct acccttattc cggcagggaa aacggtttcc agctgatacg caaagattgg 900
ttctacgatg acatttacag aggcgataca cataccgtct nttttgaacc gcgcagtaac 960
ggacattttt cctttacatc caacaacaac ggtacgggta cggtaacaga aaccaacgaa 1020
aaggtntcca atccaaagct taaagtacag acagtccgac tgtttgacga atctttgaat 1080
gaaactgata aagaaccagt ttacgcggca gggggtgtta atcagtaccg tccaaggtta 1140
aacaacggtg aaaacctttc ttttatcgat tacggcaacg gcaaactcat cttatcaaac 1200
aacatcaacc aaggcgcggg cggtttgtat tttgaaggtg attttacggt ctcgcctgaa 1260
aacaacgaaa cgtggcaagg cgcgggcgtt catatcagtg aagacagtac cgttacttgg 1320
aaagtaaacg gcgtggcaaa cgaccgcctg tccaaaatcg gcaaaggcac gctgcacgtt 1380
caagccaaag gggaaaacca aggctcgatc agcgtgggcg acggtacagt cattttggat 1440
cagcaggcag acgataaagg caaaaaacaa gcctttagtg aaatcggctt gntcagcggc 1500
aggggtacgg tgcaactgaa tgccgataat cagttcaacc ccgacaaact ctatttcggc 1560
tttcgcggcg gacgtttgga tttaaacggg cattcgcttt cgttccaccg tattcaaaat 1620
accgatgaag gggcgatgat tgncnatcat aatgcacaac aacatccacc gttaccatta 1680
cagggaatga aagtattaca caaccgagtg gtaagaatat caatagactt aattacagca 1740
aagaaattgc ctacaacggt tggtttggcg agaaagatac gaccaaaacg aacgggcggc 1800
tcaaccttgt ttaccagccc gccgcagaag accgcacccn gctgctttcc ggcggaacaa 1860
atttaaacgg caacatcacg caaacaaacg gcaaactgtt tttcagcggc agaccgacac 1920
cgcacgccta caatcattta ggaagcgggt ggtcaaaaat ggaaggtatc ccacaaggag 1980
aaatcgtgtg ggacaacgac tggatcnacc gcacgtttaa agcggaaaat ttccatattc 2040
agggcgggca ggcggtgatt tcccgcaatg ttgccaaagt ggaaggcgat tgncatttga 2100
gcaatcacgc ccaagcagtt tttggtgtcg caccgcatca aagccataca atctgtacac 2160
gttcggactg gacnggtctg acaaattgtg tcgaanaaan cattaccgac gataaagtga 2220
ttgcttcatt gactaagacn gacntnagcg gcantgtnag nctnnccnat nacgntnntt 2280
naaanctcnc ngggcntgcn ncactnaang gcaatcttag tgcaaatggc gatacacgtt 2340
atacagtcag ccacaacgcc acccaaaacg gcaaccttag cctcgtgggc aatgcccaag 2400
caacatttaa tcaagccaca ttaaacggca acncatcggn ttcgggcaat gcttcattta 2460
atctaagcaa caacgccgca caaaacggca gtctgacgct ttccgacaac gctaaggcaa 2520
acgtaagcca ttccgcactc aacggcaatg tctccctagc cgataaggca gtattccatt 2580
ttgaaaacag ccgctttacc ggacaactca gcggcagcaa gganacagca ttacacttaa 2640
aagacagcga atggacgctg ccgtcaggca cggaattagg caatttaaac cttgacaacg 2700
ccaccattac actcaattcc gcctatcgcc acgatgctgc aggcgcgcaa accggcagng 2760
tgtcagacac gccgcgccgc cgttcgcgcc gttccctatt atccgttaca ccgccaactt 2820
cggtagaatc ccgtttcaac acgctgacgg taaacggcaa attgaacngt caaggaacat 2880
tccgctttat gtcggaactc ttcggctacc gaagcgacaa attgaagctg gcggaaagtt 2940
ccgaaggnac ttacaccttg gcggtcaaca ataccggcaa cgaacccgta agcctcgatc 3000
aattgacggt agtggaaggg aaagacaaca aaccgctgtc cgaaaacctt aatttcaccc 3060
tgcaaaacga acacgtcgat gccggcgcgt ggcgttacca actcatccgc aaagacggcg 3120
agttccgcct gcataatccg gtcaaagaac aagagctttc cgacaaactc ggcaaggcag 3180
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tcaacagcgt tttcgccgta caggacgaat tggaccgcgt gtttgccgaa gaccgccgca 3600
acgcngtttg gacaagcngc atccggnaca ccaaacacta ccgttcgcaa gatttccgcg 3660
cctaccgcca acaaaccgac ctgcgccaaa tcggtatgca gaaaaacctc ggcagcgggc 3720
gcgtcggcat cctgttttcg cacaaccgga ccgaaaacan cttcgacgac ggcatcggca 3780
actcggcacg gcttgcccac ggcgccgttt tcgggcaata cggcatcggc aggttcgaca 3840
tcggcatcag cacgggcgcg ggttttagca gcggcantct ntcagacggc atcggaggca 3900
aaatccgccg ccgcgtgctg cattacggca ttcaggcacg ataccgcgcc ggtttcggcg 3960
gattcggcat cgaaccgtac atcggcgcaa cgcgctattt cgtccaaaaa gcggattacc 4020
gctacgaaaa cgtcaatatc gccacccccg gtcttgcgtt caaccgntac cgngcgggca 4080
ttaaggcaga ttattcattc aaaccggcgc aacacatntc catcacncct tatttnagcc 4140
tgtcctatac cgatgccgct tcgggcaaag tccgaacacg cgtcaatacc gcngtattgg 4200
ctcaggattt cggcaaaacc cgcagtgcgg aatggggcgt aaacgccgaa atcaaaggtt 4260
tcacgctgtc cntccacgct gccgccgcca aaggnccgca actggaagcg caacacagcg 4320
cgggcatcaa attaggctac cgctggtaa 4349
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 652
Met Lys Thr Thr Asp Lys Arg Thr Thr Glu Thr His Arg Lys Ala Pro
1 5 10 15
Lys Thr Gly Arg Ile Arg Phe Ser Pro Ala Tyr Leu Ala Ile Cys Leu
20 25 30
Ser Phe Gly Ile Leu Pro Gln Ala Trp Ala Gly His Thr Tyr Phe Gly
35 40 45
Ile Asn Tyr Gln Tyr Tyr Arg Asp Phe Ala Glu Asn Lys Gly Lys Phe
50 55 60
Ala Val Gly Ala Lys Asp Ile Glu Val Tyr Asn Lys Lys Gly Glu Leu
65 70 75 80
Val Gly Lys Ser Met Thr Lys Ala Pro Met Ile Asp Phe Ser Val Val
85 90 95
Ser Arg Asn Gly Val Ala Ala Leu Val Gly Asp Gln Tyr Ile Val Ser
100 105 110
Val Ala His Asn Gly Gly Tyr Asn Asn Val Asp Phe Gly Ala Glu Gly
115 120 125
Xaa Asn Pro Asp Gln His Arg Phe Ser Tyr Gln Ile Val Lys Arg Asn
130 135 140
Asn Tyr Lys Pro Asp Asn Ser His Pro Tyr Asn Gly Asp Xaa His Met
145 150 155 160
Pro Arg Leu His Lys Phe Val Thr Asp Ala Glu Pro Val Glu Met Thr
165 170 175
Ser Asp Met Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Asp Lys Glu Lys Tyr Pro Glu
180 185 190
Arg Val Arg Ile Gly Ser Gly His His Tyr Trp Arg Tyr Asp Asp Asp
195 200 205
Lys His Gly Asp Leu Ser Tyr Ser Gly Ala Trp Leu Ile Gly Gly Asn
210 215 220
Thr His Met Gln Gly Trp Gly Asn Asn Gly Val Xaa Ser Leu Ser Gly
225 230 235 240
Asp Val Arg His Ala Asn Asp Tyr Gly Pro Met Pro Ile Ala Gly Ala
245 250 255
Ala Gly Asp Ser Gly Ser Pro Met Phe Ile Tyr Asp Lys Thr Asn Asn
260 265 270
Lys Trp Leu Leu Asn Gly Val Leu Gln Thr Gly Tyr Pro Tyr Ser Gly
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Arg Glu Asn Gly Phe Gln Leu Ile Arg Lys Asp Trp Phe Tyr Asp Asp
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Ile Tyr Arg Gly Asp Thr His Thr Val Xaa Phe Glu Pro Arg Ser Asn
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Arg Leu Phe Asp Glu Ser Leu Asn Glu Thr Asp Lys Glu Pro Val Tyr
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Ala Ala Gly Gly Val Asn Gln Tyr Arg Pro Arg Leu Asn Asn Gly Glu
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Asn Leu Ser Phe Ile Asp Tyr Gly Asn Gly Lys Leu Ile Leu Ser Asn
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1445
<210> 653
<211> 4407
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 653
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<210> 654
<211> 1468
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 654
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1355 1360 1365
Pro Gly Leu Ala Phe Asn Arg Tyr Arg Ala Gly Ile Lys Ala Asp
1370 1375 1380
Tyr Ser Phe Lys Pro Ala Gln His Ile Ser Ile Thr Pro Tyr Leu
1385 1390 1395
Ser Leu Ser Tyr Thr Asp Ala Ala Ser Gly Lys Val Arg Thr Arg
1400 1405 1410
Val Asn Thr Ala Val Leu Ala Gln Asp Phe Gly Lys Thr Arg Ser
1415 1420 1425
Ala Glu Trp Gly Val Asn Ala Glu Ile Lys Gly Phe Thr Leu Ser
1430 1435 1440
Leu His Ala Ala Ala Ala Lys Gly Pro Gln Leu Glu Ala Gln His
1445 1450 1455
Ser Ala Gly Ile Lys Leu Gly Tyr Arg Trp
1460 1465
<210> 655
<211> 423
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (24)..(24)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 655
aaggtgtggc aatttgtcga aganccgctg cgtgccgtcg tgcctgccga cagttttgaa 60
ccgaccgcgc aaaaattgaa cctgtttaag gcgggtgcgg caaccatttt gttttatgaa 120
gatcaaaatg tcgtcaaagg tttgcaggag cagttccctg cttatgccgc taacttcccc 180
gtttgggcgg atcaggcaaa cgcgatggtg cagtatgccg tttggacgac acttgccgcg 240
gtcggcgtag gtgcaaacct gcaacattac aatcccttgc ccgatgcggc gattgccaaa 300
gcgtggaata tccccgaaaa ctggttgttg cgcgcacaaa tggttatcgg cggtattgaa 360
ggggcggcag gtgaaaagac ctttgaaccc gttgcagaac gtttgaaagt gttcggcgca 420
taa 423
<210> 656
<211> 140
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (8)..(8)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 656
Lys Val Trp Gln Phe Val Glu Xaa Pro Leu Arg Ala Val Val Pro Ala
1 5 10 15
Asp Ser Phe Glu Pro Thr Ala Gln Lys Leu Asn Leu Phe Lys Ala Gly
20 25 30
Ala Ala Thr Ile Leu Phe Tyr Glu Asp Gln Asn Val Val Lys Gly Leu
35 40 45
Gln Glu Gln Phe Pro Ala Tyr Ala Ala Asn Phe Pro Val Trp Ala Asp
50 55 60
Gln Ala Asn Ala Met Val Gln Tyr Ala Val Trp Thr Thr Leu Ala Ala
65 70 75 80
Val Gly Val Gly Ala Asn Leu Gln His Tyr Asn Pro Leu Pro Asp Ala
85 90 95
Ala Ile Ala Lys Ala Trp Asn Ile Pro Glu Asn Trp Leu Leu Arg Ala
100 105 110
Gln Met Val Ile Gly Gly Ile Glu Gly Ala Ala Gly Glu Lys Thr Phe
115 120 125
Glu Pro Val Ala Glu Arg Leu Lys Val Phe Gly Ala
130 135 140
<210> 657
<211> 396
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 657
ctgcgtgccg tcgtgcctgc cgacagtttt gaaccgaccg cgcaaaaatt gaacctgttt 60
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<211> 131
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 658
Leu Arg Ala Val Val Pro Ala Asp Ser Phe Glu Pro Thr Ala Gln Lys
1 5 10 15
Leu Asn Leu Phe Lys Ala Gly Ala Ala Thr Ile Leu Phe Tyr Glu Asp
20 25 30
Gln Asn Val Val Lys Gly Leu Gln Glu Gln Phe Pro Ala Tyr Ala Ala
35 40 45
Asn Phe Pro Val Trp Ala Asp Gln Ala Asn Ala Met Val Gln Tyr Ala
50 55 60
Val Trp Thr Thr Leu Ala Ala Val Gly Val Gly Ala Asn Leu Gln His
65 70 75 80
Tyr Asn Pro Leu Pro Asp Ala Ala Ile Ala Lys Ala Trp Asn Ile Pro
85 90 95
Glu Asn Trp Leu Leu Arg Ala Gln Met Val Ile Gly Gly Ile Glu Gly
100 105 110
Ala Ala Gly Glu Lys Thr Phe Glu Pro Val Ala Glu Arg Leu Lys Val
115 120 125
Phe Gly Ala
130
<210> 659
<211> 606
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 659
atgacccgtc aatctctgca acaggctgcc gaaagccgcc gttccattta ttcgttaaat 60
aaaaatctgc ccgtcggcaa agatgaaatc gtccaaatcg tcgaacacgc cgttttgcac 120
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gataaggtgt ggcaatttgt cgaagacgcg ctgcgtgccg tcgtgcctgc cgacagtttt 240
gaaccgaccg cgcaaaaatt gaacctgttt aaggcgggtg cggcaactat tttgttttat 300
gaagatcaaa atgtcgtcaa aggtttgcag gagcagttcc ctgcttatgc cgccaacttt 360
cccgtttggg cggaccaggc gaacgcgatg gtgcagtatg ccgtttggac gacacttgcc 420
gcggtcggcg taggtgcaaa cctgcaacat tacaatccct tgcccgatgc ggcgattgcc 480
aaagcgtgga atatccccga aaactggttg ttgcgcgcac aaatggttat cggcggtatt 540
gaaggggcgg caggtgaaaa gacctttgaa ccagttgcag aacgtttgaa agtgttcggc 600
gcataa 606
<210> 660
<211> 201
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 660
Met Thr Arg Gln Ser Leu Gln Gln Ala Ala Glu Ser Arg Arg Ser Ile
1 5 10 15
Tyr Ser Leu Asn Lys Asn Leu Pro Val Gly Lys Asp Glu Ile Val Gln
20 25 30
Ile Val Glu His Ala Val Leu His Thr Pro Ser Ser Phe Asn Ser Gln
35 40 45
Ser Ala Arg Val Val Val Leu Phe Gly Glu Glu His Asp Lys Val Trp
50 55 60
Gln Phe Val Glu Asp Ala Leu Arg Ala Val Val Pro Ala Asp Ser Phe
65 70 75 80
Glu Pro Thr Ala Gln Lys Leu Asn Leu Phe Lys Ala Gly Ala Ala Thr
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Ile Leu Phe Tyr Glu Asp Gln Asn Val Val Lys Gly Leu Gln Glu Gln
100 105 110
Phe Pro Ala Tyr Ala Ala Asn Phe Pro Val Trp Ala Asp Gln Ala Asn
115 120 125
Ala Met Val Gln Tyr Ala Val Trp Thr Thr Leu Ala Ala Val Gly Val
130 135 140
Gly Ala Asn Leu Gln His Tyr Asn Pro Leu Pro Asp Ala Ala Ile Ala
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Lys Ala Trp Asn Ile Pro Glu Asn Trp Leu Leu Arg Ala Gln Met Val
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Ile Gly Gly Ile Glu Gly Ala Ala Gly Glu Lys Thr Phe Glu Pro Val
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Ala Glu Arg Leu Lys Val Phe Gly Ala
195 200
<210> 661
<211> 525
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 661
atggccgttg cgtcaaatgt cagcttggat atgtccaatc ctacggtgtt acgcatggga 60
ttacccttat atattgcgtc cctaagaagg ggcgcaatat ataaggtgtg gcaatttgtc 120
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<210> 662
<211> 174
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 662
Met Ala Val Ala Ser Asn Val Ser Leu Asp Met Ser Asn Pro Thr Val
1 5 10 15
Leu Arg Met Gly Leu Pro Leu Tyr Ile Ala Ser Leu Arg Arg Gly Ala
20 25 30
Ile Tyr Lys Val Trp Gln Phe Val Glu Asp Ala Leu Arg Ala Val Val
35 40 45
Pro Ala Asp Ser Phe Glu Pro Thr Ala Gln Lys Leu Lys Leu Phe Lys
50 55 60
Ala Gly Ala Ala Thr Ile Leu Phe Tyr Glu Asp Gln Asn Val Val Lys
65 70 75 80
Gly Leu Gln Glu Gln Phe Pro Ala Tyr Ala Ala Asn Phe Pro Val Trp
85 90 95
Ala Asp Gln Ala Asn Ala Met Val Gln Tyr Ala Val Trp Thr Thr Leu
100 105 110
Ala Ala Val Gly Ala Gly Ala Asn Leu Gln His Tyr Asn Pro Leu Pro
115 120 125
Asp Val Ala Ile Ala Lys Ala Trp Asn Ile Pro Glu Asn Trp Leu Leu
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Arg Ala Gln Met Val Ile Gly Gly Ile Glu Gly Ala Ala Gly Glu Lys
145 150 155 160
Val Phe Glu Pro Val Ala Glu Arg Leu Lys Val Phe Gly Ala
165 170
<210> 663
<211> 634
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (297)..(297)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 663
ggctacaact acctgttcgc gcgcggcagc cgcatcgcca actaccaaat caacggcatc 60
cccgttgccg acgcgctggc cgatacgggt caatgccaac accgccgcct atgagcgcgt 120
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caaccgcaaa catttcgggc tggacgcgga cgtatcgggc agcctgaaca ccgaagncrc 300
rctgcgcggc cgcctggttt ccaccttcgg acgcggcgac tcgtggcggc ggcgcgaacg 360
cagccgskat gccgaactct acggcatttt ggaatacgac atcgcaccgc aaacccgcgt 420
ccacgcargc atggactacc agcaggcgaa agaaaccgcc gacgcgccgc tcagctacgc 480
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ccaagactgg aaactcaaag ccgaatacga ctac 634
<210> 664
<211> 211
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (99)..(100)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (123)..(123)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (143)..(143)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 664
Gly Tyr Asn Tyr Leu Phe Ala Arg Gly Ser Arg Ile Ala Asn Tyr Gln
1 5 10 15
Ile Asn Gly Ile Pro Val Ala Asp Ala Leu Ala Asp Thr Gly Asn Ala
20 25 30
Asn Thr Ala Ala Tyr Glu Arg Val Glu Val Val Arg Gly Val Ala Gly
35 40 45
Leu Leu Asp Gly Thr Gly Glu Pro Ser Ala Thr Val Asn Leu Val Arg
50 55 60
Lys Arg Leu Thr Arg Lys Pro Leu Phe Glu Val Arg Ala Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asn Arg Lys His Phe Gly Leu Asp Ala Asp Val Ser Gly Ser Leu Asn
85 90 95
Thr Glu Xaa Xaa Leu Arg Gly Arg Leu Val Ser Thr Phe Gly Arg Gly
100 105 110
Asp Ser Trp Arg Arg Arg Glu Arg Ser Arg Xaa Ala Glu Leu Tyr Gly
115 120 125
Ile Leu Glu Tyr Asp Ile Ala Pro Gln Thr Arg Val His Ala Xaa Met
130 135 140
Asp Tyr Gln Gln Ala Lys Glu Thr Ala Asp Ala Pro Leu Ser Tyr Ala
145 150 155 160
Val Tyr Asp Ser Gln Gly Tyr Ala Thr Ala Phe Gly Pro Lys Asp Asn
165 170 175
Pro Ala Thr Asn Trp Ala Asn Ser His His Arg Ala Leu Asn Leu Phe
180 185 190
Ala Gly Ile Glu His Arg Phe Asn Gln Asp Trp Lys Leu Lys Ala Glu
195 200 205
Tyr Asp Tyr
210
<210> 665
<211> 2178
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 665
atgacacgct tcaaatattc cctgctgttt gccgccctgt tgcccgtgta cgcgcaggcc 60
gatgtttctg tttcagacga ccccaaaccg caggaaagca ctgaattgcc gaccatcacc 120
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gcccgcgccg ccgacaacag ccgccaaaaa gcctacgccg tcgccgacat catggcgcgt 2040
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acctatcggt ttaaataa 2178
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 666
Met Thr Arg Phe Lys Tyr Ser Leu Leu Phe Ala Ala Leu Leu Pro Val
1 5 10 15
Tyr Ala Gln Ala Asp Val Ser Val Ser Asp Asp Pro Lys Pro Gln Glu
20 25 30
Ser Thr Glu Leu Pro Thr Ile Thr Val Thr Ala Asp Arg Thr Ala Ser
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Ser Asn Asp Gly Tyr Thr Val Ser Gly Thr His Thr Pro Leu Gly Leu
50 55 60
Pro Met Thr Leu Arg Glu Ile Pro Gln Ser Val Ser Val Ile Thr Ser
65 70 75 80
Gln Gln Met Arg Asp Gln Asn Ile Lys Thr Leu Asp Arg Ala Leu Leu
85 90 95
Gln Ala Thr Gly Thr Ser Arg Gln Ile Tyr Gly Ser Asp Arg Ala Gly
100 105 110
Tyr Asn Tyr Leu Phe Ala Arg Gly Ser Arg Ile Ala Asn Tyr Gln Ile
115 120 125
Asn Gly Ile Pro Val Ala Asp Ala Leu Ala Asp Thr Gly Asn Ala Asn
130 135 140
Thr Ala Ala Tyr Glu Arg Val Glu Val Val Arg Gly Val Ala Gly Leu
145 150 155 160
Leu Asp Gly Thr Gly Glu Pro Ser Ala Thr Val Asn Leu Val Arg Lys
165 170 175
Arg Leu Thr Arg Lys Pro Leu Phe Glu Val Arg Ala Glu Ala Gly Asn
180 185 190
Arg Lys His Phe Gly Leu Asp Ala Asp Val Ser Gly Ser Leu Asn Thr
195 200 205
Glu Gly Thr Leu Arg Gly Arg Leu Val Ser Thr Phe Gly Arg Gly Asp
210 215 220
Ser Trp Arg Arg Arg Glu Arg Ser Arg Asp Ala Glu Leu Tyr Gly Ile
225 230 235 240
Leu Glu Tyr Asp Ile Ala Pro Gln Thr Arg Val His Ala Gly Met Asp
245 250 255
Tyr Gln Gln Ala Lys Glu Thr Ala Asp Ala Pro Leu Ser Tyr Ala Val
260 265 270
Tyr Asp Ser Gln Gly Tyr Ala Thr Ala Phe Gly Pro Lys Asp Asn Pro
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Ala Thr Asn Trp Ala Asn Ser Arg His Arg Ala Leu Asn Leu Phe Ala
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Gly Ile Glu His Arg Phe Asn Gln Asp Trp Lys Leu Lys Ala Glu Tyr
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Asp Tyr Thr Arg Ser Arg Phe Arg Gln Pro Tyr Gly Val Ala Gly Val
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Leu Ser Ile Asp His Asn Thr Ala Ala Thr Asp Leu Ile Pro Gly Tyr
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435 440 445
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Gly Ser Tyr Leu Lys Pro Val Thr Gly Asn Asn Leu Glu Ala Gly Ile
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Pro Asp Ser Val Pro Glu Arg Ser Phe Lys Leu Phe Thr Ala Tyr His
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<211> 2178
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 667
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gatgtttctg tttcagacga cccaaaaccg caggaaagca ctgaattgcc gaccatcacc 120
gttaccgccg accgcaccgc gagttccaac gacggctaca ctgtttccgg cacgcacacc 180
ccgctcgggc tgcccatgac cctgcgcgaa atcccgcaga gcgtcagcgt catcacatcg 240
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gccttcggcc cgaaagacaa ccccgccaca aattgggcga acagccgcca ccgtgcgctc 900
aacctgttcg ccggcatcga acaccgcttc aaccaagact ggaaactcaa agccgaatac 960
gactacaccc gcagccgctt ccgccagccc tacggcgtag caggcgtgct ttccatcgac 1020
cacaacaccg ccgccaccga cctgattccc ggttattggc acgccgaccc gcgcacccac 1080
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<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 672
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<220>
<221> misc_feature
<222> (111)..(111)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (201)..(201)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (610)..(610)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (625)..(625)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (682)..(682)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (810)..(810)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 677
atgcgcacgg cagtggtttt gctgttgatc atgccgatgg cggcttcgtc ggcaatgatg 60
ccggaaatgg tgtgcgcggg tgtgtcgccg ggaacggcaa tcatatccaa nccgaccgaa 120
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gaagccatca tgccgccctt tttcacggca tcgttcagca atgccaaagc tgctgttgtg 300
ccgtgcgtac cgcagacgct caaacccatt tcttcaagaa tgcgcgccac cgagtcgccg 360
acggcagggg tcggtgccag cgacaagtcg agaataccaa acgggatatt cagcattttt 420
gaggcttcgc ggccgatgag ttcgcccacg cgggtaattt tgaaggcggt tttcttcaca 480
acttcggcaa cttcggtcaa tgtcgttgca tccgaatttt ccaacgcggc ttttacgaca 540
cccgggccgg atacgccgac attaatcaca gcatccgctt cgcctgagcc gtgaaacgcg 600
cccgccatan acgggttgtc ttccnccgcg ttgcagaaca cgacgatttt ggcgcagccg 660
aaaccttcta gtgtgatttc anccgtgcgt ttgatggttt cgcccgccag tctgaccgcg 720
tccatattga taccggcgcg cgtactgccg atattgatgg agctgcacac gatatcagta 780
gtcttcatcg cttcgggaat ggaacggatn aacacctcgt cagaaggcga catacctttt 840
tgcaccagcg cggaaaagcc gccaataaaa gacacgccga tggctttggc agccttatcc 900
aaagtttgcg ccacgctgac gtaa 924
<210> 678
<211> 307
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (37)..(37)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (67)..(67)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (198)..(198)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (204)..(204)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (209)..(209)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (228)..(228)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (270)..(270)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 678
Met Arg Thr Ala Val Val Leu Leu Leu Ile Met Pro Met Ala Ala Ser
1 5 10 15
Ser Ala Met Met Pro Glu Met Val Cys Ala Gly Val Ser Pro Gly Thr
20 25 30
Ala Ile Ile Ser Xaa Pro Thr Glu Gln Thr Ala Val Ile Ala Ser Ser
35 40 45
Leu Ser Asn Val Ser Thr Pro Ala Ser Ala Ala Ala Ile Ile Pro Ser
50 55 60
Ser Ser Xaa Thr Gly Ile Asn Ala Pro Leu Lys Pro Pro Thr Ala Leu
65 70 75 80
Glu Ala Ile Met Pro Pro Phe Phe Thr Ala Ser Phe Ser Asn Ala Lys
85 90 95
Ala Ala Val Val Pro Cys Val Pro Gln Thr Leu Lys Pro Ile Ser Ser
100 105 110
Arg Met Arg Ala Thr Glu Ser Pro Thr Ala Gly Val Gly Ala Ser Asp
115 120 125
Lys Ser Arg Ile Pro Asn Gly Ile Phe Ser Ile Phe Glu Ala Ser Arg
130 135 140
Pro Met Ser Ser Pro Thr Arg Val Ile Leu Lys Ala Val Phe Phe Thr
145 150 155 160
Thr Ser Ala Thr Ser Val Asn Val Val Ala Ser Glu Phe Ser Asn Ala
165 170 175
Ala Phe Thr Thr Pro Gly Pro Asp Thr Pro Thr Leu Ile Thr Ala Ser
180 185 190
Ala Ser Pro Glu Pro Xaa Asn Ala Pro Ala Ile Xaa Gly Leu Ser Ser
195 200 205
Xaa Ala Leu Gln Asn Thr Thr Ile Leu Ala Gln Pro Lys Pro Ser Ser
210 215 220
Val Ile Ser Xaa Val Arg Leu Met Val Ser Pro Ala Ser Leu Thr Ala
225 230 235 240
Ser Ile Leu Ile Pro Ala Arg Val Leu Pro Ile Leu Met Glu Leu His
245 250 255
Thr Ile Ser Val Val Phe Ile Ala Ser Gly Met Glu Arg Xaa Asn Thr
260 265 270
Ser Ser Glu Gly Asp Ile Pro Phe Cys Thr Ser Ala Glu Lys Pro Pro
275 280 285
Ile Lys Asp Thr Pro Met Ala Leu Ala Ala Leu Ser Lys Val Cys Ala
290 295 300
Thr Leu Thr
305
<210> 679
<211> 924
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 679
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ccggaaatgg tgtgcgcggg cgtgtcgccg ggaacggcaa tcatgtccaa accaacggag 120
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acggcggggg tcggtgccag cgacaaatcg agaatgccga acgggatatt cagcattttt 420
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acttcggcga cctcggtcag gctgaccgcg tccgaatttt ccagcgcggc tttgaccacg 540
cctggaccgg atacgccgac attaatcaca gcatccgctt cgcccgagcc gtggaacgca 600
cccgccataa acggattgtc ttccaccgcg ttgcagaaca cgacgatttt ggcgcagccg 660
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tccatattga taccggcacg cgtgctgccg atattgatgg agctgcacac gatatcggta 780
gttttcatcg cttcgggaac ggaacggatc aacacctcat ccgaaggcga catacctttt 840
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aaagtctgcg ccacgctgac ataa 924
<210> 680
<211> 307
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 680
Met Arg Thr Ala Val Val Leu Leu Leu Ile Met Pro Met Ala Ala Ser
1 5 10 15
Ser Ala Met Met Pro Glu Met Val Cys Ala Gly Val Ser Pro Gly Thr
20 25 30
Ala Ile Met Ser Lys Pro Thr Glu Gln Thr Ala Val Met Ala Ser Ser
35 40 45
Leu Ser Ser Val Asn Thr Pro Ala Ser Ala Ala Ala Ile Ile Pro Ser
50 55 60
Ser Ser Glu Thr Gly Ile Asn Ala Pro Leu Lys Pro Pro Thr Ala Leu
65 70 75 80
Glu Ala Ile Met Pro Pro Phe Phe Thr Ala Ser Phe Ser Asn Ala Lys
85 90 95
Ala Ala Val Val Pro Cys Val Pro Gln Thr Leu Lys Pro Ile Ser Ser
100 105 110
Arg Met Arg Ala Thr Glu Ser Pro Thr Ala Gly Val Gly Ala Ser Asp
115 120 125
Lys Ser Arg Met Pro Asn Gly Ile Phe Ser Ile Phe Glu Ala Ser Arg
130 135 140
Pro Met Ser Ser Pro Thr Arg Val Ile Leu Lys Ala Val Phe Phe Thr
145 150 155 160
Thr Ser Ala Thr Ser Val Arg Leu Thr Ala Ser Glu Phe Ser Ser Ala
165 170 175
Ala Leu Thr Thr Pro Gly Pro Asp Thr Pro Thr Leu Ile Thr Ala Ser
180 185 190
Ala Ser Pro Glu Pro Trp Asn Ala Pro Ala Ile Asn Gly Leu Ser Ser
195 200 205
Thr Ala Leu Gln Asn Thr Thr Ile Leu Ala Gln Pro Lys Pro Ser Gly
210 215 220
Val Ile Ser Ala Val Arg Leu Met Val Ser Pro Ala Ser Leu Thr Ala
225 230 235 240
Ser Ile Leu Ile Pro Ala Arg Val Leu Pro Ile Leu Met Glu Leu His
245 250 255
Thr Ile Ser Val Val Phe Ile Ala Ser Gly Thr Glu Arg Ile Asn Thr
260 265 270
Ser Ser Glu Gly Asp Ile Pro Phe Cys Thr Ser Ala Glu Lys Pro Pro
275 280 285
Ile Lys Asp Thr Pro Met Ala Leu Ala Ala Leu Ser Lys Val Cys Ala
290 295 300
Thr Leu Thr
305
<210> 681
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 681
accgacgtgc aaaaagagtt ggtcggcgaa caacgcaagt gggcgcagga aaaaatcagc 60
aactgccgac aagccgccgc gcaggcagac cggcaggaat acgccgaata cctcaagctg 120
caatgcgaca cgcggatgac gcgcgaacgg atacagtatc ttcgcggcta ttccatcgat 180
tag 183
<210> 682
<211> 60
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 682
Thr Asp Val Gln Lys Glu Leu Val Gly Glu Gln Arg Lys Trp Ala Gln
1 5 10 15
Glu Lys Ile Ser Asn Cys Arg Gln Ala Ala Ala Gln Ala Asp Arg Gln
20 25 30
Glu Tyr Ala Glu Tyr Leu Lys Leu Gln Cys Asp Thr Arg Met Thr Arg
35 40 45
Glu Arg Ile Gln Tyr Leu Arg Gly Tyr Ser Ile Asp
50 55 60
<210> 683
<211> 1017
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 683
atgtatcgga aactcattgc gctgccgttt gccctgctgc ttgccgcttg cggcagggaa 60
gaaccgccca aggcattgga atgcgccaac cccgccgtgt tgcaaggcat acgcggcaat 120
attcaggaaa cgctcacgca ggaagcgcgt tctttcgcgc gcgaagacgg caggcagttt 180
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gcagccgtcc gcttcctgcc cgtcaaagac ggtcagacgg catttgtcga caacacggtc 480
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ggcgatgcgg gcgtacccca agccgcagaa ggcgcgcccg aaccggaaat cctgcatcct 720
gacgacggcg agcgtgccga taccgttacc gtatcacggg gcgaagtgga agaggcgcgc 780
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gacacgcgga tgacgcgcga acggatacag tatcttcgcg gctattccat cgattag 1017
<210> 684
<211> 338
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 684
Met Tyr Arg Lys Leu Ile Ala Leu Pro Phe Ala Leu Leu Leu Ala Ala
1 5 10 15
Cys Gly Arg Glu Glu Pro Pro Lys Ala Leu Glu Cys Ala Asn Pro Ala
20 25 30
Val Leu Gln Gly Ile Arg Gly Asn Ile Gln Glu Thr Leu Thr Gln Glu
35 40 45
Ala Arg Ser Phe Ala Arg Glu Asp Gly Arg Gln Phe Val Asp Ala Asp
50 55 60
Lys Ile Ile Ala Ala Ala Tyr Gly Leu Ala Phe Ser Leu Glu His Ala
65 70 75 80
Ser Glu Thr Gln Glu Gly Gly Arg Thr Phe Cys Ile Ala Asp Leu Asn
85 90 95
Ile Thr Val Pro Ser Glu Thr Leu Ala Asp Ala Lys Ala Asn Ser Pro
100 105 110
Leu Leu Tyr Gly Glu Thr Ala Leu Ser Asp Ile Val Arg Gln Lys Thr
115 120 125
Gly Gly Asn Val Glu Phe Lys Asp Gly Val Leu Thr Ala Ala Val Arg
130 135 140
Phe Leu Pro Val Lys Asp Gly Gln Thr Ala Phe Val Asp Asn Thr Val
145 150 155 160
Gly Met Ala Ala Gln Thr Leu Ser Ala Ala Leu Leu Pro Tyr Gly Val
165 170 175
Lys Ser Ile Val Met Ile Asp Gly Lys Ala Val Lys Lys Glu Asp Ala
180 185 190
Val Arg Ile Leu Ser Gly Lys Ala Arg Glu Glu Glu Pro Ser Lys Pro
195 200 205
Thr Pro Glu Asp Ile Leu Glu His Asn Ala Ala Gly Gly Asp Ala Gly
210 215 220
Val Pro Gln Ala Ala Glu Gly Ala Pro Glu Pro Glu Ile Leu His Pro
225 230 235 240
Asp Asp Gly Glu Arg Ala Asp Thr Val Thr Val Ser Arg Gly Glu Val
245 250 255
Glu Glu Ala Arg Val Gln Asn Gln Arg Ala Glu Ser Glu Ile Thr Lys
260 265 270
Leu Trp Gly Gly Leu Asp Thr Asp Val Gln Lys Glu Leu Val Gly Glu
275 280 285
Gln Arg Lys Trp Ala Gln Glu Lys Ile Ser Asn Cys Arg Gln Ala Ala
290 295 300
Ala Gln Ala Asp Arg Gln Glu Tyr Ala Glu Tyr Leu Lys Leu Gln Cys
305 310 315 320
Asp Thr Arg Met Thr Arg Glu Arg Ile Gln Tyr Leu Arg Gly Tyr Ser
325 330 335
Ile Asp
<210> 685
<211> 1017
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (106)..(106)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (115)..(115)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (169)..(169)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (173)..(173)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (193)..(193)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (213)..(213)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (217)..(218)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (220)..(221)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (223)..(223)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (225)..(225)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (595)..(595)
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<220>
<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (622)..(622)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (625)..(626)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (780)..(780)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (865)..(865)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 685
atgtatcgga aactcattgc gctgccgttt gccctgctgc ttgccgcttg cggcagggaa 60
gaaccgccca aggcattgga atgcgccaac cccgccgtgt tgcaangcat acgcngcaat 120
attcaggaaa cgctcacgca ggaagcgcgt tctttcgcgc gcgaagacng cangcagttt 180
gtcgatgccg acnaaattat cgccgccgcc tangntnngn ngntntcttt ggaacacgct 240
tcggaaacgc aggaaggcgg gcgcacgttc tgtntcgccg atttgaacat taccgtgccg 300
tctgaaacgc ttgccgatgc caaggcaaac agccccctgc tgtacgggga aaccgctttg 360
tcggatattg tgcggcagaa gacgggcggc aatgtcgagt ttaaagacgg cgtattgacg 420
gcagccgtcc gcttcctacc cgtcaaagac ggtcagangg catttgtcga caacacggtc 480
ggtatggcgg cgcaaacgct gtctgccgcg ttgctgcctt acggcgtgaa gagcatcgtg 540
atgatagacg gcaaggcggt aaaaaaagaa gacgcggtca ggattntgag cnganaagcc 600
cgtgaanaag aaccgtccaa anccnngccc gaagacattt tggaacataa tgccgccgga 660
ggggatgcag acgtacccca agccggagaa gacgcgcccg aaccggaaat cctgcatcct 720
gacgacggcg agcgtgccga taccgttacc gtatcacggg gcgaagtgga agaggcgcgn 780
gtacaaaacc agcgtgcgga atccgaaatt accaaacttt ggggaggact cgataccgac 840
gtgcaaaaag agttggtcgg cgaanaacgc aagtgggcgc aggaaaaaat cagcaactgc 900
cgacaagccg ccgcgcaggc agaccggcag gaatacgccg aatacctcaa gctgcaatgc 960
gacacgcgga tgacgcgcga acggatacag tatcttcgcg gctattccat cgattag 1017
<210> 686
<211> 338
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (36)..(36)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (39)..(39)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (57)..(58)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (65)..(65)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (71)..(75)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (92)..(92)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (153)..(153)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (196)..(196)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (198)..(199)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (203)..(203)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (208)..(209)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (289)..(289)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 686
Met Tyr Arg Lys Leu Ile Ala Leu Pro Phe Ala Leu Leu Leu Ala Ala
1 5 10 15
Cys Gly Arg Glu Glu Pro Pro Lys Ala Leu Glu Cys Ala Asn Pro Ala
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Val Leu Gln Xaa Ile Arg Xaa Asn Ile Gln Glu Thr Leu Thr Gln Glu
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Ala Arg Ser Phe Ala Arg Glu Asp Xaa Xaa Gln Phe Val Asp Ala Asp
50 55 60
Xaa Ile Ile Ala Ala Ala Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Leu Glu His Ala
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Ser Glu Thr Gln Glu Gly Gly Arg Thr Phe Cys Xaa Ala Asp Leu Asn
85 90 95
Ile Thr Val Pro Ser Glu Thr Leu Ala Asp Ala Lys Ala Asn Ser Pro
100 105 110
Leu Leu Tyr Gly Glu Thr Ala Leu Ser Asp Ile Val Arg Gln Lys Thr
115 120 125
Gly Gly Asn Val Glu Phe Lys Asp Gly Val Leu Thr Ala Ala Val Arg
130 135 140
Phe Leu Pro Val Lys Asp Gly Gln Xaa Ala Phe Val Asp Asn Thr Val
145 150 155 160
Gly Met Ala Ala Gln Thr Leu Ser Ala Ala Leu Leu Pro Tyr Gly Val
165 170 175
Lys Ser Ile Val Met Ile Asp Gly Lys Ala Val Lys Lys Glu Asp Ala
180 185 190
Val Arg Ile Xaa Ser Xaa Xaa Ala Arg Glu Xaa Glu Pro Ser Lys Xaa
195 200 205
Xaa Pro Glu Asp Ile Leu Glu His Asn Ala Ala Gly Gly Asp Ala Asp
210 215 220
Val Pro Gln Ala Gly Glu Asp Ala Pro Glu Pro Glu Ile Leu His Pro
225 230 235 240
Asp Asp Gly Glu Arg Ala Asp Thr Val Thr Val Ser Arg Gly Glu Val
245 250 255
Glu Glu Ala Arg Val Gln Asn Gln Arg Ala Glu Ser Glu Ile Thr Lys
260 265 270
Leu Trp Gly Gly Leu Asp Thr Asp Val Gln Lys Glu Leu Val Gly Glu
275 280 285
Xaa Arg Lys Trp Ala Gln Glu Lys Ile Ser Asn Cys Arg Gln Ala Ala
290 295 300
Ala Gln Ala Asp Arg Gln Glu Tyr Ala Glu Tyr Leu Lys Leu Gln Cys
305 310 315 320
Asp Thr Arg Met Thr Arg Glu Arg Ile Gln Tyr Leu Arg Gly Tyr Ser
325 330 335
Ile Asp
<210> 687
<211> 1017
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 687
atgtatcgga aactcattgc gctgccgttt gccctgctgc ttgcagcgtg cggcagggaa 60
gaaccgccca aggcgttgga atgcgccaac cccgccgtgt tgcaggacat acgcggcagt 120
attcaggaaa cgctcacgca ggaagcgcgt tctttcgcgc gcgaagacgg caggcagttt 180
gtcgatgccg acaaaattat cgccgccgcc tacggtttgg cgttttcttt ggaacacgct 240
tcggaaacgc aggaaggcgg gcgcacgttc tgtatcgccg atttgaacat taccgtgccg 300
tctgaaacgc ttgccgatgc cgaggcaaac agccccctgc tgtatgggga aacgtctttg 360
gcagacatcg tgcagcagaa gacgggcggc aatgtcgagt ttaaagacgg cgtattgacg 420
gcagccgtcc gcttcctgcc cgccaaagac gctcggacgg catttatcga caacacggtc 480
ggtatggcga cgcaaacgct gtctgccgcg ttgctgcctt acggcgtgaa gagcatcgtg 540
atgatagacg gcaaggcggt gacaaaagaa gacgcggtca gggttttgag cggcaaagcc 600
cgtgaagaag aaccgtccaa acccaccccc gaagacattt tggaacacaa tgccgccggc 660
ggcgatgcgg gcgtacccca agccgcagaa ggcgcacccg aacccgaaat cctgcatccc 720
gacgacgtcg agcgtgccga taccgttacc gtatcacggg gcgaagtgga agaggcgcgc 780
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gacacgcgga tgacgcgcga acggatacag tatcttcgcg gctattccat cgattag 1017
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 688
Met Tyr Arg Lys Leu Ile Ala Leu Pro Phe Ala Leu Leu Leu Ala Ala
1 5 10 15
Cys Gly Arg Glu Glu Pro Pro Lys Ala Leu Glu Cys Ala Asn Pro Ala
20 25 30
Val Leu Gln Asp Ile Arg Gly Ser Ile Gln Glu Thr Leu Thr Gln Glu
35 40 45
Ala Arg Ser Phe Ala Arg Glu Asp Gly Arg Gln Phe Val Asp Ala Asp
50 55 60
Lys Ile Ile Ala Ala Ala Tyr Gly Leu Ala Phe Ser Leu Glu His Ala
65 70 75 80
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Gly Met Ala Thr Gln Thr Leu Ser Ala Ala Leu Leu Pro Tyr Gly Val
165 170 175
Lys Ser Ile Val Met Ile Asp Gly Lys Ala Val Thr Lys Glu Asp Ala
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Val Arg Val Leu Ser Gly Lys Ala Arg Glu Glu Glu Pro Ser Lys Pro
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Thr Pro Glu Asp Ile Leu Glu His Asn Ala Ala Gly Gly Asp Ala Gly
210 215 220
Val Pro Gln Ala Ala Glu Gly Ala Pro Glu Pro Glu Ile Leu His Pro
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Asp Asp Val Glu Arg Ala Asp Thr Val Thr Val Ser Arg Gly Glu Val
245 250 255
Glu Glu Ala Arg Val Gln Asn Gln Arg Ala Glu Ser Glu Ile Thr Lys
260 265 270
Leu Trp Gly Gly Leu Asp Thr Asp Val Gln Lys Glu Leu Val Gly Glu
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Gln Arg Lys Trp Ala Gln Glu Lys Ile Ser Asn Cys Arg Gln Ala Ala
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Asp Thr Arg Met Thr Arg Glu Arg Ile Gln Tyr Leu Arg Gly Tyr Ser
325 330 335
Ile Asp
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
<400> 689
atgcagctga tcgactattc acattcattt ttctcggttg tgcacccttt ttggcactgg 60
cacttgccgt cattacccgc cgcgtactgc tgtctttagg catcggtatt ctggwysgcg 120
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kgatactttt gggtattttt acttccctgc tgacctactc cggcagcaat nnnnnnnnnn 300
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 360
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 420
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 480
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 540
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 600
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 660
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 720
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 780
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 840
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnact tcgctggtat 900
tcggcggcac ttgcggcgtc tttgccgtcg ttctctgcac gctcggcacg attaaaaccg 960
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<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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Met Gln Leu Ile Asp Tyr Ser His Ser Phe Phe Ser Val Val Pro Pro
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Phe Leu Ala Leu Ala Leu Ala Val Ile Thr Arg Arg Val Leu Leu Ser
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Leu Gly Ile Gly Ile Leu Xaa Xaa Val Ala Phe Leu Val Gly Gly Asn
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
210 215 220
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Thr Ser Leu Val Phe Gly Gly Thr
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Ala Ile Ala Ile Leu Ile Leu Ala Trp Leu Ile Ser Thr Val Val Gly
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Ala Phe Ala Thr Gly Thr Ser Trp Gly Thr Phe Gly Ile Met Leu Pro
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Ile Ala Ala Ala Met Ala Val Lys Val Glu Pro Ala Leu Ile Ile Pro
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<211> 1521
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 691
atgcagctga tcgactattc acattcattt ttctcggttg tgccaccctt tttggcactg 60
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 692
Met Gln Leu Ile Asp Tyr Ser His Ser Phe Phe Ser Val Val Pro Pro
1 5 10 15
Phe Leu Ala Leu Ala Leu Ala Val Ile Thr Arg Arg Val Leu Leu Ser
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Leu Gly Ile Gly Ile Leu Val Gly Val Ala Phe Leu Val Gly Gly Asn
35 40 45
Pro Val Asp Gly Leu Thr His Leu Lys Asp Met Val Val Gly Leu Ala
50 55 60
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Leu Ile Leu Leu Gly Ile Phe Thr Ser Leu Leu Thr Tyr Ser Gly Ser
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Thr Ala Ala Pro Met Cys Val Leu Met Pro Val Ser Ser Trp Gly Ala
165 170 175
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Tyr Ala Leu Phe Ala Leu Ile Met Val Phe Val Val Ala Trp Phe Ser
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Phe Asp Ile Gly Ser Met Ala Arg Phe Glu Gln Ala Ala Leu Asn Glu
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Ala His Asp Glu Thr Ala Val Ser Asp Ala Thr Lys Gly Arg Val Tyr
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Ala Leu Ile Ile Pro Val Leu Ala Leu Ile Ala Ser Thr Val Ser Ala
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Ala Asp Tyr Pro Lys Ala Val Trp Gln Gly Ala Lys Ser Met Phe Gly
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Ala Ile Ala Ile Leu Ile Leu Ala Trp Leu Ile Ser Thr Val Val Gly
340 345 350
Glu Met His Thr Gly Asp Tyr Leu Ser Thr Leu Val Ala Gly Asn Ile
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His Pro Gly Phe Leu Pro Val Ile Leu Phe Leu Leu Ala Ser Val Met
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Ala Phe Ala Thr Gly Thr Ser Trp Gly Thr Phe Gly Ile Met Leu Pro
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Ile Ala Ala Ala Met Ala Val Lys Val Glu Pro Ala Leu Ile Ile Pro
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Cys Met Ser Ala Val Met Ala Gly Ala Val Cys Gly Asp His Cys Ser
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Pro Ile Ser Asp Thr Thr Ile Leu Ser Ser Thr Gly Ala Arg Cys Asn
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Ala Ala Ala Ala Ser Gly Tyr Leu Ala Leu Gly Leu Thr Lys Ser Ala
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Leu Leu Lys Asp Lys Lys Arg Ala Asn Ala
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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<223> n is a, c, g, or t
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<211> 506
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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165 170 175
Ser Ile Ile Ala Thr Leu Ala Gly Leu Leu Val Thr Tyr Lys Ile Thr
180 185 190
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Ala His Asp Glu Thr Ala Val Ser Asp Gly Ser Trp Gly Arg Val Tyr
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gcacttgccg tcattacccg ccgcgtactg ctgtctttag gcatcggtat tttggtcggc 120
gttgcctttt tggtcggcgg caaccccgtc gacggtctga cacacctgaa agacatggtc 180
gtcggcttgg cttgggcaga cggcgattgg tcgctgggca aaccaaaaat cttggttttc 240
ctgatacttt tgggcatttt cacttcactg ctgacctact ccggcagcaa tcaggcgttt 300
gccgactggg caaaacggca cattaaaaac cggtgcggcg cgaaaatgct gaccgcctgc 360
ctcgtgttcg taacctttat cgacgactat ttccacagcc tcgccgtcgg tgcgattgcc 420
cgccccgtta ccgacaagtt taaagtttcc cgcgccaaac tcgcctacat cctcgactcc 480
actgcctcgc ccatgtgcgt gctgatgccc gtttcaagct ggggcgcgtc gattatcgcc 540
acgcttgccg gattgctcgt tacctacaaa attaccgaat acacgccgat ggggacgttt 600
gtcgccatga gcctgatgaa ctattacgcg ctgtttgccc tgattatggt attcgtcgtc 660
gcatggttct ccttcgacat cggctcgatg gcgcgtttcg aacaggctgc gttgaacgaa 720
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aaaaaacgcg ccgacgtttg a 1521
<210> 696
<211> 506
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 696
Met Gln Leu Ile Asp Tyr Ser His Ser Phe Phe Ser Val Val Pro Pro
1 5 10 15
Phe Leu Ala Leu Ala Leu Ala Val Ile Thr Arg Arg Val Leu Leu Ser
20 25 30
Leu Gly Ile Gly Ile Leu Val Gly Val Ala Phe Leu Val Gly Gly Asn
35 40 45
Pro Val Asp Gly Leu Thr His Leu Lys Asp Met Val Val Gly Leu Ala
50 55 60
Trp Ala Asp Gly Asp Trp Ser Leu Gly Lys Pro Lys Ile Leu Val Phe
65 70 75 80
Leu Ile Leu Leu Gly Ile Phe Thr Ser Leu Leu Thr Tyr Ser Gly Ser
85 90 95
Asn Gln Ala Phe Ala Asp Trp Ala Lys Arg His Ile Lys Asn Arg Cys
100 105 110
Gly Ala Lys Met Leu Thr Ala Cys Leu Val Phe Val Thr Phe Ile Asp
115 120 125
Asp Tyr Phe His Ser Leu Ala Val Gly Ala Ile Ala Arg Pro Val Thr
130 135 140
Asp Lys Phe Lys Val Ser Arg Ala Lys Leu Ala Tyr Ile Leu Asp Ser
145 150 155 160
Thr Ala Ser Pro Met Cys Val Leu Met Pro Val Ser Ser Trp Gly Ala
165 170 175
Ser Ile Ile Ala Thr Leu Ala Gly Leu Leu Val Thr Tyr Lys Ile Thr
180 185 190
Glu Tyr Thr Pro Met Gly Thr Phe Val Ala Met Ser Leu Met Asn Tyr
195 200 205
Tyr Ala Leu Phe Ala Leu Ile Met Val Phe Val Val Ala Trp Phe Ser
210 215 220
Phe Asp Ile Gly Ser Met Ala Arg Phe Glu Gln Ala Ala Leu Asn Glu
225 230 235 240
Ala Gln Asp Glu Thr Ala Ala Ser Asp Ala Thr Lys Gly Arg Val Tyr
245 250 255
Ala Leu Ile Ile Pro Val Leu Ala Leu Ile Ala Ser Thr Val Ser Ala
260 265 270
Met Ile Tyr Thr Gly Ala Gln Ala Ser Glu Thr Phe Ser Ile Leu Gly
275 280 285
Ala Phe Glu Asn Thr Asp Val Asn Thr Ser Leu Val Phe Gly Gly Thr
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Ala Asp Tyr Pro Lys Ala Val Trp Gln Gly Ala Lys Ser Met Phe Gly
325 330 335
Ala Ile Ala Ile Leu Ile Leu Ala Trp Leu Ile Ser Thr Val Val Gly
340 345 350
Glu Met His Thr Gly Asp Tyr Leu Ser Thr Leu Val Ala Gly Asn Ile
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Ala Phe Ala Thr Gly Thr Ser Trp Gly Thr Phe Gly Ile Met Leu Pro
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Ile Ala Ala Ala Met Ala Val Lys Val Glu Pro Ala Leu Ile Ile Pro
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Cys Met Ser Ala Val Met Ala Gly Ala Val Cys Gly Asp His Cys Ser
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Pro Ile Ser Asp Thr Thr Ile Leu Ser Ser Thr Gly Ala Arg Cys Asn
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450 455 460
Ala Ala Ala Ala Ser Gly Tyr Leu Ala Leu Gly Leu Thr Lys Ser Ala
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Leu Leu Gly Phe Gly Thr Thr Gly Ile Val Leu Ala Val Leu Ile Phe
485 490 495
Leu Leu Lys Asp Lys Lys Arg Ala Asp Val
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<211> 249
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
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<220>
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<223> n is a, c, g, or t
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<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (60)..(60)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 698
Lys Gln Trp Tyr Ala Asp Xaa Ser Ile Lys Thr Glu Met Val Met Val
1 5 10 15
Asn Asp Glu Pro Ala Lys Ile Leu Thr Trp Asp Glu Ser Gly Arg Leu
20 25 30
Leu Ser Glu Leu Ser Ile Arg His His Gln Arg Asn Gly Val Val Leu
35 40 45
Glu Trp Tyr Glu Asp Gly Ser Lys Lys Ser Glu Xaa Val Tyr Gln Asp
50 55 60
Asp Lys Leu Val Arg Lys Thr Gln Trp Asp Lys Asp Gly Tyr Leu Ile
65 70 75 80
Glu Pro
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 699
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 700
Met Lys Lys Leu Ser Arg Ile Val Phe Ser Thr Val Leu Leu Gly Phe
1 5 10 15
Ser Ala Ala Leu Pro Ala Gln Thr Tyr Ser Val Tyr Phe Asn Gln Asn
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Gly Lys Leu Thr Ala Thr Met Ser Ser Ala Ala Tyr Ile Arg Gln Tyr
35 40 45
Ser Val Val Ala Gly Ile Ala His Ala Gln Asp Phe Tyr Tyr Pro Ser
50 55 60
Met Lys Lys Tyr Ser Glu Pro Tyr Ile Val Ala Ser Thr Gln Ile Lys
65 70 75 80
Ser Phe Val Pro Thr Leu Gln Asn Gly Met Leu Ile Leu Trp His Phe
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Asn Gly Gln Lys Lys Met Ala Gly Gly Phe Ser Lys Gly Lys Pro Asp
100 105 110
Gly Glu Trp Val Asn Trp Tyr Pro Asn Gly Lys Lys Ser Ala Val Met
115 120 125
Pro Tyr Lys Asn Gly Leu Ser Glu Gly Thr Gly Tyr Arg Tyr Tyr Arg
130 135 140
Asn Gly Gly Lys Glu Ser Glu Ile Gln Phe Lys Gln Asn Lys Ala Asn
145 150 155 160
Gly Val Trp Lys Gln Trp Tyr Ala Asp Gly Ser Ile Lys Thr Glu Met
165 170 175
Val Met Val Asn Asp Glu Pro Ala Lys Ile Leu Thr Trp Asp Glu Ser
180 185 190
Gly Arg Leu Leu Ser Glu Leu Ser Ile Arg His His Gln Arg Asn Gly
195 200 205
Val Val Leu Glu Trp Tyr Glu Asp Gly Ser Lys Lys Ser Glu Ala Val
210 215 220
Tyr Gln Asp Asp Lys Leu Val Arg Lys Thr Gln Trp Asp Lys Asp Gly
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Tyr Leu Ile Glu Pro
245
<210> 701
<211> 738
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<213> Neisseria meningitidis
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tatttaatcg aaccctga 738
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 702
Met Lys Lys Leu Ser Arg Ile Val Phe Ser Thr Val Leu Leu Gly Phe
1 5 10 15
Ser Ala Ala Leu Pro Ala Gln Xaa Tyr Ser Val Tyr Phe Asn Gln Asn
20 25 30
Gly Lys Leu Thr Ala Thr Xaa Ser Ser Ala Ala Tyr Ile Arg Gln Tyr
35 40 45
Ser Val Ala Glu Gly Ile Ala His Ala Gln Xaa Phe Xaa Tyr Pro Ser
50 55 60
Met Lys Lys Tyr Ser Glu Pro Tyr Ile Val Ala Ser Thr Gln Ile Lys
65 70 75 80
Ser Phe Val Pro Thr Leu Gln Asn Gly Met Leu Ile Leu Trp His Phe
85 90 95
Xaa Gly Gln Lys Lys Met Ala Gly Gly Phe Ser Lys Gly Lys Pro Asp
100 105 110
Gly Glu Trp Val Asn Trp Tyr Pro Asn Gly Lys Lys Ser Ala Val Met
115 120 125
Pro Tyr Lys Asn Gly Leu Ser Glu Gly Thr Gly Xaa Arg Tyr Tyr Arg
130 135 140
Asn Gly Gly Lys Glu Ser Glu Ile Gln Phe Lys Gln Asn Lys Ala Asn
145 150 155 160
Gly Val Trp Lys Gln Trp Tyr Ala Asp Gly Asn Ile Lys Thr Glu Met
165 170 175
Val Met Val Asn Asp Glu Pro Ala Lys Ile Leu Thr Trp Asp Glu Ser
180 185 190
Gly Arg Leu Leu Ser Glu Leu Ser Ile His His His Xaa Arg Asn Gly
195 200 205
Val Val Leu Glu Trp Tyr Glu Asp Gly Ser Lys Lys Xaa Glu Ala Val
210 215 220
Tyr Gln Asp Asp Lys Leu Val Arg Lys Thr Gln Trp Asp Xaa Asp Gly
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Tyr Leu Ile Glu Pro
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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Met Lys Lys Leu Ser Arg Ile Val Phe Ser Ile Val Leu Leu Gly Phe
1 5 10 15
Ser Ala Ala Leu Pro Ala Gln Thr Tyr Ser Val Tyr Phe Asn Gln Asn
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Gly Lys Leu Thr Ala Thr Met Ser Ser Ala Ala Tyr Ile Arg Gln Tyr
35 40 45
Ser Val Ala Ala Gly Ile Ala His Ala Gln Asp Phe Tyr Tyr Pro Ser
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Met Lys Lys Tyr Ser Glu Pro Tyr Ile Val Ala Ser Thr Gln Ile Lys
65 70 75 80
Ser Phe Val Pro Thr Leu Gln Asn Gly Met Leu Ile Leu Trp His Phe
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Asn Gly Gln Lys Lys Met Ala Gly Gly Phe Ser Lys Gly Lys Pro Asp
100 105 110
Gly Glu Trp Val Asn Trp Tyr Pro Asn Gly Lys Lys Ser Ala Val Met
115 120 125
Pro Tyr Lys Asn Gly Leu Ser Glu Gly Thr Gly Tyr Arg Tyr Tyr Arg
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Gly Val Trp Lys Gln Trp Tyr Ala Asp Gly Ser Ile Lys Thr Glu Met
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Gly Arg Leu Leu Ser Glu Leu Ser Ile Arg His His Lys Arg Asn Gly
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 706
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 707
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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Asp Ser Leu Lys Asn Gly Glu Leu Ser Val Ser Val Ala Glu Lys Tyr
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (222)..(222)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (240)..(240)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (335)..(335)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 754
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1 5 10 15
Leu Ala Leu Ala Ser Gly Ile Xaa Thr Gly Asp Val Tyr Ile Val Leu
20 25 30
Gly Gln Thr Met Leu Arg Ile Asn Leu His Ala Phe Val Leu Gly Ser
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Leu Ile Ala Val Val Val Trp Tyr Phe Leu Phe Lys Phe Ile Ile Gly
50 55 60
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65 70 75 80
Gly Arg Lys Ala Ala Leu Ala Leu Asn Lys Ala Gly Leu Ala Tyr Phe
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
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Val Leu Ala Lys Thr Glu Lys Leu Ser Lys Ala Gly Ala Leu Gly Lys
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Asp Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Lys Thr Cys Leu Lys Arg Ile Pro
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 765
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (24)..(24)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(239)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 766
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ile
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<213> Neisseria meningitidis
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195 200 205
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210 215 220
Tyr Tyr Tyr Ala Arg Ser Phe Val Pro Asn Pro Asp Gly Lys Leu Ala
225 230 235 240
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245 250 255
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260 265 270
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275 280 285
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290 295 300
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305 310 315 320
Gln Glu Ser Gly Glu Arg Ala Leu Gly Gly Pro Pro Arg Arg
325 330
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 769
atggcaaaaa tgatgaaatg ggcggctgtt gcggcggtcg cggcggcagc ggtttggggc 60
ggatggtctt atctgaagcc cgagccgcag gctgcttata ttacggaaac ggtcaggcgc 120
ggcgacatca gccggacggt ttctgcaaca ggggagattt cgccgtccaa cctggtatcg 180
gtcggcgcgc aggcatcggg gcagattaag aaactttatg tcaaactcgg gcaacaggtt 240
aaaaagggcg atttgattgc ggaaatcaat tcgacctcgc agaccaatac gctcaatacg 300
gaaaaatcca aattggaaac gtatcaggcg aagctggtgt cggcacagat tgcattgggc 360
agcgcggaga agaaatataa gcgtcaggcg gcgttgtgga aggatgatgc gaccgctaaa 420
gaagatttgg aaagcgcaca ggatgcgctt gccgccgcca aagccaatgt tgccgagctg 480
aaggctctaa tcagacagag caaaatttcc atcaataccg ccgagtcgga attgggctac 540
acgcgcatta ccgcaacgat ggacggcacg gtggtggcga ttctcgtgga agaggggcag 600
actgtgaacg cggcgcagtc tacgccgacg attgtccaat tggcgaatct ggatatgatg 660
ttgaacaaaa tgcagattgc cgagggcgat attaccaagg tgaaggcggg gcaggatatt 720
tcgtttacga ttttgtccga accggatacg ccgattaagg cgaagctcga cagcgtcgac 780
cccgggctga ccacgatgtc gtcgggcggc tacaacagca gtacggatac ggcttccaat 840
gcggtctact attatgcccg ttcgtttgtg ccgaatccgg acggcaaact cgccacgggg 900
atgacgacgc agaatacggt tgaaatcgac ggtgtgaaaa atgtgctgat tattccgtcg 960
ctgaccgtga aaaatcgcgg cggcagggcg tttgtgcgcg tgttgggtgc agacggcaag 1020
gcggcggaac gcgaaatccg gaccggtatg agagacagta tgaataccga agtaaaaagc 1080
gggttgaaag agggggacaa agtggtcatc tccgaaataa ccgccgccga gcagcaggaa 1140
acggcgaacg cgccctaggc ggcccgccgc gccgataa 1178
<210> 770
<211> 392
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 770
Met Ala Lys Met Met Lys Trp Ala Ala Val Ala Ala Val Ala Ala Ala
1 5 10 15
Ala Val Trp Gly Gly Trp Ser Tyr Leu Lys Pro Glu Pro Gln Ala Ala
20 25 30
Tyr Ile Thr Glu Thr Val Arg Arg Gly Asp Ile Ser Arg Thr Val Ser
35 40 45
Ala Thr Gly Glu Ile Ser Pro Ser Asn Leu Val Ser Val Gly Ala Gln
50 55 60
Ala Ser Gly Gln Ile Lys Lys Leu Tyr Val Lys Leu Gly Gln Gln Val
65 70 75 80
Lys Lys Gly Asp Leu Ile Ala Glu Ile Asn Ser Thr Ser Gln Thr Asn
85 90 95
Thr Leu Asn Thr Glu Lys Ser Lys Leu Glu Thr Tyr Gln Ala Lys Leu
100 105 110
Val Ser Ala Gln Ile Ala Leu Gly Ser Ala Glu Lys Lys Tyr Lys Arg
115 120 125
Gln Ala Ala Leu Trp Lys Asp Asp Ala Thr Ala Lys Glu Asp Leu Glu
130 135 140
Ser Ala Gln Asp Ala Leu Ala Ala Ala Lys Ala Asn Val Ala Glu Leu
145 150 155 160
Lys Ala Leu Ile Arg Gln Ser Lys Ile Ser Ile Asn Thr Ala Glu Ser
165 170 175
Glu Leu Gly Tyr Thr Arg Ile Thr Ala Thr Met Asp Gly Thr Val Val
180 185 190
Ala Ile Leu Val Glu Glu Gly Gln Thr Val Asn Ala Ala Gln Ser Thr
195 200 205
Pro Thr Ile Val Gln Leu Ala Asn Leu Asp Met Met Leu Asn Lys Met
210 215 220
Gln Ile Ala Glu Gly Asp Ile Thr Lys Val Lys Ala Gly Gln Asp Ile
225 230 235 240
Ser Phe Thr Ile Leu Ser Glu Pro Asp Thr Pro Ile Lys Ala Lys Leu
245 250 255
Asp Ser Val Asp Pro Gly Leu Thr Thr Met Ser Ser Gly Gly Tyr Asn
260 265 270
Ser Ser Thr Asp Thr Ala Ser Asn Ala Val Tyr Tyr Tyr Ala Arg Ser
275 280 285
Phe Val Pro Asn Pro Asp Gly Lys Leu Ala Thr Gly Met Thr Thr Gln
290 295 300
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305 310 315 320
Leu Thr Val Lys Asn Arg Gly Gly Arg Ala Phe Val Arg Val Leu Gly
325 330 335
Ala Asp Gly Lys Ala Ala Glu Arg Glu Ile Arg Thr Gly Met Arg Asp
340 345 350
Ser Met Asn Thr Glu Val Lys Ser Gly Leu Lys Glu Gly Asp Lys Val
355 360 365
Val Ile Ser Glu Ile Thr Ala Ala Glu Gln Gln Glu Ser Gly Glu Arg
370 375 380
Ala Leu Gly Gly Pro Pro Arg Arg
385 390
<210> 771
<211> 1179
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 771
atggcaaaaa tgatgaaatg ggcggctgtt gcggcggtcg cggcggcaac ggtttggggc 60
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ttgaacaaaa tgcagattgc cgagggcgat attaccaagg tgaaggcggg gcaggatatt 720
tcgtttacga ttttgtccga accggatacg ccgattaagg cgaagctcga cagcgtcgac 780
cccgggctga ccacgatgtc gtcgggcggc tacaacagca gtacggatac ggcttccaat 840
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<210> 772
<211> 392
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 772
Met Ala Lys Met Met Lys Trp Ala Ala Val Ala Ala Val Ala Ala Ala
1 5 10 15
Ala Val Trp Gly Gly Trp Ser Tyr Leu Lys Pro Glu Pro Gln Ala Ala
20 25 30
Tyr Ile Thr Glu Ala Val Arg Arg Gly Asp Ile Ser Arg Thr Val Ser
35 40 45
Ala Thr Gly Glu Ile Ser Pro Ser Asn Leu Val Ser Val Gly Ala Gln
50 55 60
Ala Ser Gly Gln Ile Lys Lys Leu Tyr Val Lys Leu Gly Gln Gln Val
65 70 75 80
Lys Lys Gly Asp Leu Ile Ala Glu Ile Asn Ser Thr Thr Gln Thr Asn
85 90 95
Thr Ile Asp Met Glu Lys Ser Lys Leu Glu Thr Tyr Gln Ala Lys Leu
100 105 110
Val Ser Ala Gln Ile Ala Leu Gly Ser Ala Glu Lys Lys Tyr Lys Arg
115 120 125
Gln Ala Ala Leu Trp Lys Asp Asp Ala Thr Ser Lys Glu Asp Leu Glu
130 135 140
Ser Ala Gln Asp Ala Leu Ala Ala Ala Lys Ala Asn Val Ala Glu Leu
145 150 155 160
Lys Ala Leu Ile Arg Gln Ser Lys Ile Ser Ile Asn Thr Ala Glu Ser
165 170 175
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195 200 205
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210 215 220
Gln Ile Ala Glu Gly Asp Ile Thr Lys Val Lys Ala Gly Gln Asp Ile
225 230 235 240
Ser Phe Thr Ile Leu Ser Glu Pro Asp Thr Pro Ile Lys Ala Lys Leu
245 250 255
Asp Ser Val Asp Pro Gly Leu Thr Thr Met Ser Ser Gly Gly Tyr Asn
260 265 270
Ser Ser Thr Asp Thr Ala Ser Asn Ala Val Tyr Tyr Tyr Ala Arg Ser
275 280 285
Phe Val Pro Asn Pro Asp Gly Lys Leu Ala Thr Gly Met Thr Thr Gln
290 295 300
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355 360 365
Val Ile Ser Glu Ile Thr Ala Ala Glu Gln Gln Glu Ser Gly Glu Arg
370 375 380
Ala Leu Gly Gly Pro Pro Arg Arg
385 390
<210> 773
<211> 555
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 773
attcccgcca cgatgacatt tgaacgcagc ggcaatgctt acaaaatcgt ttcgacgatt 60
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<210> 774
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 774
Ile Pro Ala Thr Met Thr Phe Glu Arg Ser Gly Asn Ala Tyr Lys Ile
1 5 10 15
Val Ser Thr Ile Lys Val Pro Leu Tyr Asn Ile Arg Phe Glu Ser Gly
20 25 30
Gly Thr Val Val Gly Asn Thr Leu His Pro Thr Tyr Tyr Arg Asp Ile
35 40 45
Arg Arg Gly Lys Leu Tyr Ala Glu Ala Lys Phe Ala Asp Gly Ser Val
50 55 60
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65 70 75 80
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Leu Pro Pro Gly Leu Lys Ile Thr Asn Gly Lys Lys Leu Tyr Ser Val
100 105 110
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115 120 125
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130 135 140
Met Tyr Phe Phe Ala Pro Ser Leu Asn Asn Ile Pro Ala Gln Ile Gly
145 150 155 160
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165 170 175
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180
<210> 775
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 775
atgatgaaga cttttaaaaa tatattttcc gccgccattt tgtccgccgc cctgccgtgc 60
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<210> 776
<211> 223
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 776
Met Met Lys Thr Phe Lys Asn Ile Phe Ser Ala Ala Ile Leu Ser Ala
1 5 10 15
Ala Leu Pro Cys Ala Tyr Ala Ala Gly Leu Pro Gln Ser Ala Val Leu
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35 40 45
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130 135 140
Gly Lys Lys Leu Tyr Ser Val Gly Gly Leu Asn Lys Ala Gly Thr Gly
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Lys Tyr Ser Ile Gly Gly Val Glu Thr Glu Val Val Lys Tyr Arg Val
165 170 175
Arg Arg Gly Asp Asp Ala Val Met Tyr Phe Phe Ala Pro Ser Leu Asn
180 185 190
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Leu Lys Leu Lys Ser Val Gln Ile Asn Gly Gln Ala Ala Lys Pro
210 215 220
<210> 777
<211> 672
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (82)..(82)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (129)..(129)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (131)..(132)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (134)..(135)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (137)..(138)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (140)..(140)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (143)..(145)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (147)..(147)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (149)..(149)
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<220>
<221> misc_feature
<222> (158)..(158)
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<220>
<221> misc_feature
<222> (326)..(330)
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<220>
<221> misc_feature
<222> (332)..(332)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (334)..(339)
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<220>
<221> misc_feature
<222> (341)..(341)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
<221> misc_feature
<222> (378)..(378)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 777
atgatgaaga cttttaaaaa tatattttcc gccgccattt tgtccgccgc cctgccgtgc 60
gcgtatgcgg cagggctgcc cnaatccgcc gtgctgcact attccggcag ctacggcatt 120
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cctacctact atagagacat acgcaggggc aaactgtatg cggaagccaa attcgccgac 300
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gatttgttca cgcttgcntg gcagttggcg gcaaatgacg cgaaactccc cccggggctg 420
aaaatcacca acggcaaaaa actttattcc gtcggcggtt tgaataaggc gggtacagga 480
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accgacgacg gcaaaaccta tacgctgaaa ctcaaatcgg tgcagatcaa cggccaggca 660
gccaaaccgt aa 672
<210> 778
<211> 223
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (28)..(28)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (44)..(50)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (53)..(53)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (109)..(114)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 778
Met Met Lys Thr Phe Lys Asn Ile Phe Ser Ala Ala Ile Leu Ser Ala
1 5 10 15
Ala Leu Pro Cys Ala Tyr Ala Ala Gly Leu Pro Xaa Ser Ala Val Leu
20 25 30
His Tyr Ser Gly Ser Tyr Gly Ile Pro Ala Thr Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
35 40 45
Xaa Xaa Asn Ala Xaa Lys Ile Val Ser Thr Ile Lys Val Pro Leu Tyr
50 55 60
Asn Ile Arg Phe Glu Ser Gly Gly Thr Val Val Gly Asn Thr Leu His
65 70 75 80
Pro Thr Tyr Tyr Arg Asp Ile Arg Arg Gly Lys Leu Tyr Ala Glu Ala
85 90 95
Lys Phe Ala Asp Gly Ser Val Thr Tyr Gly Lys Ala Xaa Xaa Xaa Xaa
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Xaa Xaa Gln Ser Pro Lys Ala Met Asp Leu Phe Thr Leu Ala Trp Gln
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Leu Ala Ala Asn Asp Ala Lys Leu Pro Pro Gly Leu Lys Ile Thr Asn
130 135 140
Gly Lys Lys Leu Tyr Ser Val Gly Gly Leu Asn Lys Ala Gly Thr Gly
145 150 155 160
Lys Tyr Ser Ile Gly Gly Val Glu Thr Glu Val Val Lys Tyr Arg Val
165 170 175
Arg Arg Gly Asp Asp Ala Val Met Tyr Phe Phe Ala Pro Ser Leu Asn
180 185 190
Asn Ile Pro Ala Gln Ile Gly Tyr Thr Asp Asp Gly Lys Thr Tyr Thr
195 200 205
Leu Lys Leu Lys Ser Val Gln Ile Asn Gly Gln Ala Ala Lys Pro
210 215 220
<210> 779
<211> 672
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 779
atgatgaaga cttttaaaaa tatattttcc gccgccattt tgtccgccgc cctgccgtgc 60
gcgtatgcgg caaggctacc ccaatccgcc gtgctgcact attccggcag ctacggcatt 120
cccgccacga tgacatttga acgcagcggc aatgcttaca aaatcgtttc gacgattaaa 180
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accgacgacg gcaaaaccta tacgctgaag ctcaaatcgg tgcagatcaa cggacaggcc 660
gccaaaccgt aa 672
<210> 780
<211> 223
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 780
Met Met Lys Thr Phe Lys Asn Ile Phe Ser Ala Ala Ile Leu Ser Ala
1 5 10 15
Ala Leu Pro Cys Ala Tyr Ala Ala Arg Leu Pro Gln Ser Ala Val Leu
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35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
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100 105 110
Thr Glu Gln Ser Pro Lys Ala Met Asp Leu Phe Thr Leu Ala Trp Gln
115 120 125
Leu Ala Ala Asn Asp Ala Lys Leu Pro Pro Gly Leu Lys Ile Thr Asn
130 135 140
Gly Lys Lys Leu Tyr Ser Val Gly Gly Leu Asn Lys Ala Gly Thr Gly
145 150 155 160
Lys Tyr Ser Ile Gly Gly Val Glu Thr Glu Val Val Lys Tyr Arg Val
165 170 175
Arg Arg Gly Asp Asp Thr Val Thr Tyr Phe Phe Ala Pro Ser Leu Asn
180 185 190
Asn Ile Pro Ala Gln Ile Gly Tyr Thr Asp Asp Gly Lys Thr Tyr Thr
195 200 205
Leu Lys Leu Lys Ser Val Gln Ile Asn Gly Gln Ala Ala Lys Pro
210 215 220
<210> 781
<211> 468
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (51)..(51)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 781
atgtatcgga ggaaagggcg gggcatcaag ccgtggatgg gtgccggtgc ngcgtttgcc 60
gccttggtct ggctggtttt cgcgctcggc gatactttga ctccgtttgc ggttgcggcg 120
gtgctggcgt atgtattgga ccctttggtc gaatggttgc agaaaaaggg tttgaaccgt 180
gcatccgctt cgatgtctgt gatggtgttt tccttgattt tgttgttggc attattgttg 240
attatcgtcc ctatgctggt cgggcagttc aacaatttgg catcgcgcct gccccaatta 300
atcggtttta tgcagaacac gctgctgccg tggttgaaaa atacaatcgg cggatatgtg 360
gaaatcgatc aggcatctat tattgcgtgg cttcaggcgc atacgggaga gttgagcaac 420
gcgcttaagg cgtggtttcc cgttttgatg aggcagggcg gcaatatt 468
<210> 782
<211> 156
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (17)..(17)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 782
Met Tyr Arg Arg Lys Gly Arg Gly Ile Lys Pro Trp Met Gly Ala Gly
1 5 10 15
Xaa Ala Phe Ala Ala Leu Val Trp Leu Val Phe Ala Leu Gly Asp Thr
20 25 30
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130 135 140
Glu Phe Gly Phe Leu Cys Asn His Gly Arg Ile Asp Ile Asp Arg Leu
145 150 155 160
Pro Thr Leu Arg Leu Asn Ala Leu Ile Arg Arg Thr Gln Lys Asp Ala
165 170 175
Ala Val Arg Ile Phe Glu Leu Cys Gly Gly Val Gly Glu Met Ala Ala
180 185 190
Asp Ile Ala Gln Thr Cys Arg Thr Glu Gln Arg Val Gly Asn Gly Val
195 200 205
Gln Gln Arg Ile Gly Ile Gly Val Ser Glu Gln Pro Phe Phe Lys Trp
210 215 220
Asp Phe Asn Ser Ala Lys Tyr Gln Leu Ser Ala Phe Gly Gln Leu Val
225 230 235 240
Asp Ile Val Ala Leu Ser Asp Thr Asp Val Arg His Arg Leu Cys Ser
245 250 255
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<211> 771
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 797
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ttaacatttt tttgcacgtc ctggccgccg cgttcaaatc cgtaccagca ataccgccgc 300
ctgcgcctct atgccttcca tccgcccgag atagccgagt ttttcgttgg ttttgccttt 360
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 798
Met Ser Tyr Arg Ala Ser Ser Ser Pro Asp Phe Leu Glu Val Glu Thr
1 5 10 15
Ala Pro Leu Ile Phe Leu Pro Leu Leu Pro Lys Ala Ser Met Lys Lys
20 25 30
Leu Met Val Glu Pro Val Pro Met Pro Met Tyr Ser Phe Ser Gly Thr
35 40 45
Asn Ser Thr Ala Phe Ser Ala Ala Met Arg Leu Ser Ser Ser Cys Val
50 55 60
Val Ile Phe Leu Ser Phe Gly Lys Pro Tyr Gln Gln Thr Ala Ala Ile
65 70 75 80
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Gln Tyr Arg Arg Leu Arg Leu Tyr Ala Phe His Pro Pro Glu Ile Ala
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Glu Phe Phe Val Gly Phe Ala Phe Asp Ile Asp Ala Arg Asn Ile Asp
115 120 125
Thr Gln Ile Gly Gly Asp Val Gly Thr His Leu Arg Asn Val Arg Cys
130 135 140
Glu Phe Gly Phe Leu Cys Asn His Gly Arg Ile Asp Ile Asp His Leu
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Pro Thr Leu Arg Leu Asn Ala Leu Ile Arg Arg Thr Gln Lys Asp Ala
165 170 175
Ala Val Arg Ile Phe Glu Leu Cys Gly Gly Val Gly Lys Met Ala Ala
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Asp Ile Val Ala Leu Ser Asp Thr Asp Ile Arg His Arg Leu Cys Ser
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 799
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 800
Ala Gly Ala Ser Ala Asn Asn Ile Ser Ala Arg Phe Ala Glu Thr Pro
1 5 10 15
Val Ala Val Ser Val Thr Leu Ile Gly Thr Val Leu Ala Val Met Leu
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Pro Val Thr Glu Tyr Glu Asn Phe Leu Leu Leu Ile Gly Ser Val Phe
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Ala Pro Met Gly Gly Phe Asp Cys Arg Leu Phe Arg Leu Glu Thr Ala
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 801
atgtcgggca atgcctcctc tccttcatct tcctccgcca tcgggctgat ttggttcggc 60
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 802
Met Ser Gly Asn Ala Ser Ser Pro Ser Ser Ser Ser Ala Ile Gly Leu
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Ile Trp Phe Gly Ala Ala Val Ser Ile Ala Glu Ile Ser Thr Gly Thr
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Leu Leu Ala Pro Leu Gly Trp Gln Arg Gly Leu Ala Ala Leu Leu Leu
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Leu Gly Lys Val Leu Trp Asp Gly Glu Ser Phe Val Trp Trp Ala Leu
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Ala Asn Gly Ala Leu Ile Val Leu Trp Leu Val Phe Gly Ala Arg Lys
130 135 140
Thr Gly Gly Leu Lys Thr Val Ser Met Leu Leu Met Leu Leu Ala Val
145 150 155 160
Leu Trp Leu Ser Ala Glu Val Phe Ser Thr Ala Gly Ser Thr Ala Ala
165 170 175
Gln Val Ser Asp Gly Met Ser Phe Gly Thr Ala Val Glu Leu Ser Ala
180 185 190
Val Met Pro Leu Ser Trp Leu Pro Leu Ala Ala Asp Tyr Thr Arg His
195 200 205
Ala Arg Arg Pro Phe Ala Ala Thr Leu Thr Ala Thr Leu Ala Tyr Thr
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Leu Thr Gly Cys Trp Met Tyr Ala Leu Gly Leu Ala Ala Ala Leu Phe
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Thr Gly Glu Thr Asp Val Ala Lys Ile Leu Leu Gly Ala Gly Leu Gly
245 250 255
Ala Ala Gly Ile Leu Ala Val Val Leu Ser Thr Val Thr Thr Thr Phe
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
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<220>
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<220>
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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atgtcgggca atgcctcctc tcnttcatct tccgccgcca tcgggctgat ttggttcggc 60
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<213> Neisseria meningitidis
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<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 804
Met Ser Gly Asn Ala Ser Ser Xaa Ser Ser Ser Ala Ala Ile Gly Leu
1 5 10 15
Ile Trp Phe Gly Ala Ala Val Ser Ile Ala Glu Ile Ser Thr Gly Thr
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Leu Leu Ala Pro Leu Gly Trp Gln Arg Gly Leu Ala Ala Leu Leu Leu
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Lys Arg Gly Ser Val Leu Phe Ser Val Ala Asn Met Leu Gln Leu Ala
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Leu Gly Lys Val Leu Trp Asp Gly Glu Ser Phe Val Trp Trp Ala Leu
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Ala Asn Gly Ala Leu Ile Val Leu Trp Leu Val Phe Gly Ala Arg Lys
130 135 140
Thr Gly Gly Leu Lys Thr Val Ser Met Leu Leu Met Leu Leu Ala Val
145 150 155 160
Leu Trp Leu Ser Ala Glu Xaa Phe Ser Thr Ala Gly Ser Thr Ala Ala
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Xaa Val Xaa Asp Gly Met Ser Phe Gly Thr Ala Val Glu Leu Ser Ala
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Val Met Pro Leu Ser Trp Leu Pro Leu Ala Ala Asp Tyr Thr Arg His
195 200 205
Ala Arg Arg Pro Phe Ala Ala Thr Leu Thr Ala Thr Leu Ala Tyr Thr
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Leu Thr Gly Cys Trp Met Tyr Ala Leu Gly Leu Ala Ala Ala Leu Phe
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Thr Gly Glu Thr Asp Val Ala Lys Ile Leu Leu Gly Ala Gly Leu Gly
245 250 255
Ala Ala Gly Ile Leu Ala Val Val Leu Ser Thr Val Thr Thr Thr Phe
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Leu Ser Glu Ile Pro Ile Ala Val Ala Val Ala Val Val Gly Thr Leu
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Leu Ala Val Leu Leu Pro Val Thr Glu Tyr Glu Asn Phe Leu Leu Leu
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<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 806
Met Ser Gly Asn Ala Ser Ser Pro Ser Ser Ser Ala Ala Ile Gly Leu
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Leu Leu Ala Pro Leu Gly Trp Gln Arg Gly Leu Ala Ala Leu Leu Leu
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Gly His Ala Val Gly Gly Ala Leu Phe Phe Ala Ala Ala Tyr Ile Gly
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Ala Leu Thr Gly Arg Ser Ser Met Glu Ser Val Arg Leu Ser Phe Gly
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 807
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<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 808
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Gly His Ala Val Gly Gly Ala Leu Phe Phe Ala Ala Ala Tyr Ile Gly
50 55 60
Ala Leu Thr Gly Arg Ser Ser Met Glu Ser Val Arg Leu Ser Phe Gly
65 70 75 80
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245 250 255
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260 265 270
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<213> Neisseria meningitidis
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<221> misc_feature
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<223> n is a, c, g, or t
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<222> (345)..(345)
<223> n is a, c, g, or t
<220>
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<222> (447)..(447)
<223> n is a, c, g, or t
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atgacccgta tcgccatcct cggcggcggc ctctcgggaa ggctgaccgc gttgcagctt 60
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<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 810
Met Thr Arg Ile Ala Ile Leu Gly Gly Gly Leu Ser Gly Arg Leu Thr
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20 25 30
Ser Cys Arg Arg Gly Glu His Ala Ala Ala Tyr Val Ala Ala Ala Met
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130 135 140
Leu Pro Thr Glu Xaa Gln Leu Asp Gly Arg Gln Leu Xaa Ser Ala Leu
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Ala Asp Ala Leu Asp Glu Leu Asn Val Pro Cys His Trp Glu His Glu
165 170 175
Cys Val Pro Glu Ala Cys Lys
180
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 811
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<211> 366
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 812
Met Thr Arg Ile Ala Ile Leu Gly Gly Gly Leu Ser Gly Arg Leu Thr
1 5 10 15
Ala Leu Gln Leu Ala Glu Gln Gly Tyr Gln Ile Ala Leu Phe Asp Lys
20 25 30
Gly Cys Arg Arg Gly Glu His Ala Ala Ala Tyr Val Ala Ala Ala Met
35 40 45
Leu Ala Pro Ala Ala Glu Ala Val Glu Ala Thr Pro Glu Val Val Arg
50 55 60
Leu Gly Arg Gln Ser Ile Pro Leu Trp Arg Gly Ile Arg Cys Arg Leu
65 70 75 80
Asn Thr His Thr Met Met Gln Glu Asn Gly Ser Leu Ile Val Trp His
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100 105 110
Gly Gly Val Ala Asp Asp Glu Ile Val Arg Trp Arg Ala Asp Asp Ile
115 120 125
Ala Glu Arg Glu Pro Gln Leu Gly Gly Arg Phe Ser Asp Gly Ile Tyr
130 135 140
Leu Pro Thr Glu Gly Gln Leu Asp Gly Arg Gln Ile Leu Ser Ala Leu
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Cys Val Pro Glu Gly Leu Gln Ala Gln Tyr Asp Trp Leu Ile Asp Cys
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Gln Ile Glu Ser Glu Ser Gln Ala Pro Ala Ser Val Arg Ser Gly Leu
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Glu Leu Leu Ser Ala Leu Tyr Ala Ile His Pro Ala Phe Gly Glu Ala
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<212> DNA
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gaagtggtca ggctgggcag gcagancatc ccgctttggc gcggcatccg atgccatctg 240
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gacggcatct acctgccgac cgaaggccag ctcgacgggc ggcaaatatt gtctgcactt 480
gccgacgctt tggacgaact gaacgtcccc tgccattggg aacacgaatg tgcccccgaa 540
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
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<222> (349)..(349)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 814
Met Thr Arg Ile Ala Ile Leu Gly Gly Gly Leu Ser Gly Arg Leu Thr
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Leu Ala Pro Ala Ala Glu Ala Val Glu Ala Thr Pro Glu Val Val Arg
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<220>
<221> misc_feature
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<210> 816
<211> 366
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 816
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Ala Leu Gln Leu Ala Glu Gln Gly Tyr Gln Ile Glu Leu Phe Asp Lys
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Gly Thr Arg Gln Gly Glu His Ala Ala Ala Tyr Val Ala Ala Ala Met
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Leu Ala Pro Ala Ala Glu Ala Val Glu Ala Thr Pro Glu Val Ile Arg
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Ala Glu Arg Glu Pro Gln Leu Gly Gly Arg Phe Ser Asp Gly Ile Tyr
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 817
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<210> 818
<211> 366
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 818
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Glu Leu Leu Ser Ala Leu Tyr Ala Val His Pro Ala Phe Gly Glu Ala
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<220>
<221> misc_feature
<222> (275)..(276)
<223> n is a, c, g, or t
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<210> 820
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (92)..(92)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 820
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 821
atgactgata atcgggggtt tacgctggtt gaattaatat cagtggtctt gatattgtct 60
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acctttattt gcaagaagtc cgccagttcg tgtagtgacg ggctggatta ttttaaagga 420
aatgataagg actgcaagtt acttaagtag 450
<210> 822
<211> 149
<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 822
Met Thr Asp Asn Arg Gly Phe Thr Leu Val Glu Leu Ile Ser Val Val
1 5 10 15
Leu Ile Leu Ser Val Leu Ala Leu Ile Val Tyr Pro Ser Tyr Arg Asn
20 25 30
Tyr Val Glu Lys Ala Lys Ile Asn Ala Val Arg Ala Ala Leu Leu Glu
35 40 45
Asn Ala His Phe Met Glu Lys Phe Tyr Leu Gln Asn Gly Arg Phe Lys
50 55 60
Gln Thr Ser Thr Lys Trp Pro Ser Leu Pro Ile Lys Glu Ala Glu Gly
65 70 75 80
Phe Cys Ile Arg Leu Asn Gly Ile Ala Arg Gly Ala Leu Asp Ser Lys
85 90 95
Phe Met Leu Lys Ala Val Ala Ile Asp Lys Asp Lys Asn Pro Phe Ile
100 105 110
Ile Lys Met Asn Glu Asn Leu Val Thr Phe Ile Cys Lys Lys Ser Ala
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Ser Ser Cys Ser Asp Gly Leu Asp Tyr Phe Lys Gly Asn Asp Lys Asp
130 135 140
Cys Lys Leu Leu Lys
145
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<211> 450
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<400> 823
atgactgata atcgggggtt tacgctggtt gaattaatat cagtggtctt gatattgtct 60
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 824
Met Thr Asp Asn Arg Gly Phe Thr Leu Val Glu Leu Ile Ser Val Val
1 5 10 15
Leu Ile Leu Ser Val Leu Ala Leu Ile Val Tyr Pro Ser Tyr Arg Asn
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Tyr Val Glu Lys Ala Lys Ile Asn Thr Val Arg Ala Ala Leu Leu Glu
35 40 45
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65 70 75 80
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<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
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atgactgata atcgggggtt tacactggtt gaattaatat cagtggtctt gatattgtct 60
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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Met Thr Asp Asn Arg Gly Phe Thr Leu Val Glu Leu Ile Ser Val Val
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Leu Ile Leu Ser Val Leu Ala Leu Ile Val Tyr Pro Ser Tyr Arg Asn
20 25 30
Tyr Val Glu Lys Ala Lys Ile Asn Ala Val Arg Ala Ala Phe Leu Glu
35 40 45
Asn Ala His Phe Met Glu Lys Phe Tyr Leu Gln Asn Gly Arg Phe Lys
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145
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<213> Neisseria meningitidis
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Asn Ile Tyr Leu Gly Phe Gln Gln Gly Tyr Phe Asp Leu Ser Ala Asp
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<212> PRT
<213> Neisseria meningitidis
<400> 830
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Pro Val Pro Arg Phe Glu Ala Gln Ser Phe Leu Ile Pro Gly Phe Pro
485 490 495
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565 570 575
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<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
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Ala Ala Val Ser Leu Ala Ser Val Ile Ala Ser Gln Ile Phe Leu Tyr
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Arg Arg Gln Thr Glu Asn Gly Lys Arg Gln Leu Leu Ser Leu Leu Cys
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His Glu Leu Leu Arg Lys His Tyr Val Arg Thr Tyr Tyr Leu Leu Gln
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Leu Phe Ala Ala Ala Gly Tyr Leu Trp Thr Gly Ala Ala Lys Leu Gln
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Asn Leu Pro Ala Ser Ala Pro Leu His Leu Ile Thr Leu Gly Gly Met
260 265 270
Met Gly Gly Val Met Met Val Trp Leu Thr Ala Gly Leu Trp His Ser
275 280 285
Gly Phe Thr Lys Leu Asp Tyr Pro Lys Leu Cys Arg Ile Ala Val Pro
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Ile Leu Phe Ala Ala Ala Val Ser Arg Ala Phe Leu Met Asn Val Asn
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Pro Ile Phe Phe Ile Thr Val Pro Ala Ile Leu Thr Ala Ala Val Phe
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Val Leu Tyr Leu Phe Thr Phe Ile Pro Ile Phe Arg Ala Asn Ala Phe
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Thr Asp Asp Pro Glu
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 866
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (353)..(353)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 876
Pro Gly Tyr Tyr Gly Ser Asp Asp Glu Phe Lys Arg Ala Phe Gly Glu
1 5 10 15
Asn Ser Pro Thr Xaa Lys Lys His Cys Asn Arg Ser Cys Gly Ile Tyr
20 25 30
Glu Pro Val Leu Lys Lys Tyr Gly Lys Lys Arg Ala Asn Asn His Ser
35 40 45
Val Ser Ile Ser Ala Asp Phe Gly Asp Tyr Phe Met Pro Phe Ala Ser
50 55 60
Tyr Ser Arg Thr His Arg Met Pro Asn Ile Gln Glu Met Tyr Phe Ser
65 70 75 80
Gln Ile Gly Asp Ser Gly Val His Thr Ala Leu Lys Pro Glu Arg Ala
85 90 95
Asn Thr Trp Gln Phe Gly Phe Xaa Thr Tyr Lys Lys Gly Leu Leu Lys
100 105 110
Gln Asp Asp Thr Leu Gly Leu Lys Leu Val Gly Tyr Arg Ser Arg Ile
115 120 125
Asp Asn Tyr Ile His Asn Val Tyr Gly Lys Trp Trp Asp Leu Asn Gly
130 135 140
Asp Ile Pro Ser Trp Val Ser Ser Thr Gly Leu Ala Tyr Thr Ile Gln
145 150 155 160
His Arg Xaa Phe Xaa Asp Lys Val His Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
165 170 175
Xaa Xaa Tyr Asp Tyr Gly Arg Phe Phe Thr Asn Leu Ser Tyr Ala Tyr
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195 200 205
Asn Asn Ala Ser Lys Glu Asp Gln Leu Lys Gln Gly Tyr Gly Leu Ser
210 215 220
Arg Val Ser Ala Leu Pro Arg Asp Tyr Gly Arg Leu Glu Val Gly Thr
225 230 235 240
Arg Trp Leu Gly Asn Lys Leu Thr Leu Gly Gly Ala Met Arg Tyr Phe
245 250 255
Gly Lys Ser Ile Arg Ala Thr Ala Glu Glu Arg Tyr Ile Asp Gly Thr
260 265 270
Asn Gly Gly Asn Thr Ser Asn Phe Arg Gln Leu Gly Lys Arg Ser Ile
275 280 285
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Asn Leu Phe Asp Arg Arg Tyr Ile Asp Pro Leu Asp Ala Gly Asn Asp
325 330 335
Ala Ala Xaa Glu Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Asp Pro Lys Asp Lys Asp
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<211> 2667
<212> DNA
<213> Neisseria meningitidis
<220>
<221> misc_feature
<222> (835)..(835)
<223> n is a, c, g, or t
<400> 877
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accggcacca attcaaccaa aggtaatgcg atggcggcga taggtgcgcg caaatggctg 540
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caagaactac aaaaatacat cgaagagcat gacaaaagct ggcgggaaaa cctgncaccg 840
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cggtttaagg gcgataaagg gctgctgccc caaaaatcaa ccattgtcca accggccggc 1380
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aactacagca ccaataccgt cggctaccgt ttcggcggcg aatatacggg ctattacggc 1500
tcggatgacg aatttaagcg ggcattcgga gaaaactcgc cgacatacaa gaaacattgc 1560
aaccggagct gcgggattta tgaacccgta ttgaaaaaat acggcaaaaa gcgcgccaac 1620
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<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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50 55 60
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Val Asp Gly Ile Thr Gln Thr Phe Tyr Ser Thr Ser Thr Asp Ala Gly
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Ile Ala Gly Leu Asp Val Val Lys Gly Ser Phe Ser Gly Ser Ala Gly
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Asp Val Val Gln Gly Asn Asn Thr Tyr Gly Leu Leu Leu Lys Gly Leu
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Ser Trp Arg Glu Asn Leu Xaa Pro Gln Tyr Asp Ile Thr Pro Ile Asp
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Pro Ser Ser Leu Lys Gln Gln Ser Ala Gly Asn Leu Phe Lys Leu Glu
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Tyr Asp Gly Val Phe Asn Lys Tyr Thr Ala Gln Phe Arg Asp Leu Asn
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Thr Lys Ile Gly Ser Arg Lys Ile Ile Asn Arg Asn Tyr Gln Phe Asn
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Tyr Gly Leu Ser Leu Asn Pro Tyr Thr Asn Leu Asn Leu Thr Ala Ala
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Tyr Asn Ser Gly Arg Gln Lys Tyr Pro Lys Gly Ser Lys Phe Thr Gly
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Trp Gly Leu Leu Lys Asp Phe Glu Thr Tyr Asn Asn Ala Lys Ile Leu
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Asp Leu Asn Asn Thr Ala Thr Phe Arg Leu Pro Arg Glu Thr Glu Leu
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Asn Thr Phe Tyr Phe Asp Ala Ala Leu Lys Lys Asp Ile Tyr Arg Leu
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Asn Tyr Ser Thr Asn Thr Val Gly Tyr Arg Phe Gly Gly Glu Tyr Thr
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Gly Tyr Tyr Gly Ser Asp Asp Glu Phe Lys Arg Ala Phe Gly Glu Asn
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Ser Pro Thr Tyr Lys Lys His Cys Asn Arg Ser Cys Gly Ile Tyr Glu
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Pro Val Leu Lys Lys Tyr Gly Lys Lys Arg Ala Asn Asn His Ser Val
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<213> Neisseria meningitidis
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Ser Leu Ala Gly Ser Ala Asn Leu Arg Thr Leu Xaa Val Asp Asp Val
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<213> Neisseria gonorrhoeae
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<211> 922
<212> PRT
<213> Neisseria gonorrhoeae
<400> 884
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Val Met Leu Tyr His His Ser Tyr Ala Glu Asp Ala Gly Arg Ala Gly
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Arg Ser Ile Pro Gly Ala Phe Thr Gln Gln Asp Lys Ser Ser Gly Ile
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115 120 125
Gly Arg Ala Gly Gly Ser Ser Gln Phe Gly Ala Ser Val Asp Ser Asn
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Phe Ile Ala Gly Leu Asp Val Val Lys Gly Ser Phe Ser Gly Ser Ala
145 150 155 160
Gly Ile Asn Ser Leu Ala Gly Ser Ala Asn Leu Arg Thr Leu Gly Val
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Leu Thr Gly Thr Asn Ser Thr Lys Gly Asn Ala Met Ala Ala Ile Gly
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Ala Arg Lys Trp Leu Glu Ser Gly Ala Ser Val Gly Val Leu Tyr Gly
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His Ser Arg Arg Gly Val Ala Gln Asn Tyr Arg Val Gly Gly Gly Gly
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Gln His Ile Gly Asn Phe Gly Glu Glu Tyr Leu Glu Arg Arg Lys Gln
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Ser Gln Ile Gly Asp Ser Gly Val His Thr Ala Leu Lys Pro Glu Arg
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Lys Gln Asp Asp Ile Leu Gly Leu Lys Leu Val Gly Tyr Arg Ser Arg
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Ile Asp Asn Tyr Ile His Asn Val Tyr Gly Lys Trp Trp Asp Leu Asn
660 665 670
Gly Asp Ile Pro Ser Trp Val Gly Ser Thr Gly Leu Ala Tyr Thr Ile
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Pro Asn Asn Ala Ser Lys Glu Asp Gln Leu Lys Gln Gly Tyr Gly Leu
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Ser Arg Val Ser Ala Leu Pro Arg Asp Tyr Gly Arg Leu Glu Val Gly
755 760 765
Thr Arg Trp Leu Gly Asn Lys Leu Thr Leu Gly Gly Ala Met Arg Tyr
770 775 780
Phe Gly Lys Ser Ile Arg Ala Thr Ala Glu Glu Arg Tyr Ile Asp Gly
785 790 795 800
Thr Asn Gly Gly Asn Thr Ser Asn Val Arg Gln Leu Gly Lys Arg Ser
805 810 815
Ile Lys Gln Thr Glu Thr Leu Ala Arg Gln Pro Leu Ile Phe Asp Phe
820 825 830
Tyr Ala Ala Tyr Glu Pro Lys Lys Asn Leu Ile Phe Arg Ala Glu Val
835 840 845
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850 855 860
Asp Ala Ala Thr Gln Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Asp Pro Lys Asp Lys
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Asp Glu Asp Val Thr Cys Asn Ala Asp Lys Thr Leu Cys Asn Gly Lys
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Tyr Gly Gly Thr Ser Lys Ser Val Leu Thr Asn Phe Ala Arg Gly Arg
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Thr Phe Leu Met Thr Met Ser Tyr Lys Phe
915 920
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<213> Neisseria meningitidis
<400> 885
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Ile Pro Leu Ala Val Leu Ile Gly Gly Leu Val Ser Leu Ser Gln Leu
65 70 75 80
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85 90 95
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<213> Neisseria meningitidis
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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1 5 10 15
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Ala Ala Gly Ser Glu Leu Xaa Val Ile Lys Ala Ser Gly Met Ser Thr
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Lys Lys Leu Leu Leu Ile Leu Ser Gln Phe Gly Phe Ile Phe Ala Ile
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180 185 190
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195 200 205
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210 215 220
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245 250 255
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275 280 285
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Gln Glu Lys Arg
355
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<211> 1071
<212> DNA
<213> Neisseria gonorrhoeae
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325 330 335
Leu Pro Thr Ile Ala Phe Ala Leu Leu Ala Val Trp Leu Ile Arg Lys
340 345 350
Gln Glu Lys Arg
355
【図面の簡単な説明】
【図1】 図1は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF37を示す。M1は分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。殺菌性アッセイの結果において:菱形は、免疫前のデータを示し;三角形は、GSTコントロールデータを示し;丸は、組換えN.meningitidisタンパク質のデータを示す。コンピューター分析は、親水性プロット(上段)、抗原性指数(中段)、およびAMPHI分析(下段)を示す。AMPHIプログラムは、T細胞エピトープ(Gaoら(1989)J.Immunol.143:3007;Robertsら(1996)AIDS Res Hum Retrovir 12:593;Quakyiら(1992)Scand J Immunol 補遺 11:9)を予測するために使用されており、そしてDNASTAR,Inc.(1228 South Park Street,Madison,Wisconsin 53715 USA)のProtean packageで利用可能である。
【図2】 図2は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF5を示す。M1は分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。TPは、N.meningitidis全タンパク質抽出物を示す。
【図3】 図3は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF2を示す。M1は分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。TPは、N.meningitidis全タンパク質抽出物を示す。OMVは、N.meningitidis外膜ベシクル調製物を示す。
【図4】 図4は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF15を示す。M1およびM2は、分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。TPは、N.meningitidis全タンパク質抽出物を示す。OMVは、N.meningitidis外膜ベシクル調製物を示す。
【図5】 図5は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF22を示す。M1およびM2は、分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。
【図6】 図6は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF28を示す。M1およびM2は、分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。
【図7】 図7は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF32を示す。M1は分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。
【図8】 図8は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF4を示す。M1は分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。TPは、N.meningitidis全タンパク質抽出物を示す。OMVは、N.meningitidis外膜ベシクル調製物を示す。殺菌性アッセイの結果において;菱形は、免疫前のデータを示し;三角形は、GSTコントロールデータを示し;丸は、組換えN.meningitidisタンパク質のデータを示す。コンピューター分析は、親水性プロット(上段)、抗原性指数(中段)、およびAMPHI分析(下段)を示す。AMPHIプログラムは、T細胞エピトープ(Gaoら(1989)J.Immunol.143:3007;Robertsら(1996)AIDS Res Hum Retrovir 12:593;Quakyiら(1992)Scand J Immunol 補遺 11:9)を予測するために使用されており、そしてDNASTAR,Inc.(1228 South Park Street,Madison,Wisconsin 53715 USA)のProtean packageで利用可能である。
【図9】 図9は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF61を示す。コンピューター分析は、親水性プロット(上段)、抗原性指数(中段)、およびAMPHI分析(下段)を示す。AMPHIプログラムは、T細胞エピトープ(Gaoら(1989)J.Immunol.143:3007;Robertsら(1996)AIDS Res Hum Retrovir 12:593;Quakyiら(1992)Scand J Immunol 補遺 11:9)を予測するために使用されており、そしてDNASTAR,Inc.(1228 South Park Street,Madison,Wisconsin 53715 USA)のProtean packageで利用可能である。
【図10】 図10は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF76を示す。M1は分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。TPは、N.meningitidis全タンパク質抽出物を示す。OMVは、N.meningitidis外膜ベシクル調製物を示す。
【図11】 図11は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF89を示す。M1は分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。
【図12】 図12は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF97を示す。M1は分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。TPは、N.meningitidis全タンパク質抽出物を示す;OMVは、N.meningitidis外膜ベシクル調製物を示す。コンピューター分析は、親水性プロット(上段)、抗原性指数(中段)、およびAMPHI分析(下段)を示す。AMPHIプログラムは、T細胞エピトープ(Gaoら(1989)J.Immunol.143:3007;Robertsら(1996)AIDS Res Hum Retrovir 12:593;Quakyiら(1992)Scand J Immunol 補遺 11:9)を予測するために使用されており、そしてDNASTAR,Inc.(1228 South Park Street,Madison,Wisconsin 53715 USA)のProtean packageで利用可能である。
【図13】 図13は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF106を示す。M1およびM2は、分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。コンピューター分析は、親水性プロット(上段)、抗原性指数(中段)、およびAMPHI分析(下段)を示す。AMPHIプログラムは、T細胞エピトープ(Gaoら(1989)J.Immunol.143:3007;Robertsら(1996)AIDS Res Hum Retrovir 12:593;Quakyiら(1992)Scand J Immunol 補遺 11:9)を予測するために使用されており、そしてDNASTAR,Inc.(1228 South Park Street,Madison,Wisconsin 53715 USA)のProtean packageで利用可能である。
【図14】 図14は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF138を示す。M1は分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。コンピューター分析は、親水性プロット(上段)、抗原性指数(中段)、およびAMPHI分析(下段)を示す。AMPHIプログラムは、T細胞エピトープ(Gaoら(1989)J.Immunol.143:3007;Robertsら(1996)AIDS Res Hum Retrovir 12:593;Quakyiら(1992)Scand J Immunol 補遺 11:9)を予測するために使用されており、そしてDNASTAR,Inc.(1228 South Park Street,Madison,Wisconsin 53715 USA)のProtean packageで利用可能である。
【図15】 図15は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF23を示す。M1およびM2は、分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。TPは、N.meningitidis全タンパク質抽出物を示す;OMVは、N.meningitidis外膜ベシクル調製物を示す。
【図16】 図16は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF25を示す。M1およびM2は、分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。TPは、N.meningitidis全タンパク質抽出物を示す;OMVは、N.meningitidis外膜ベシクル調製物を示す。コンピューター分析は、親水性プロット(上段)、抗原性指数(中段)、およびAMPHI分析(下段)を示す。AMPHIプログラムは、T細胞エピトープ(Gaoら(1989)J.Immunol.143:3007;Robertsら(1996)AIDS Res Hum Retrovir 12:593;Quakyiら(1992)Scand J Immunol 補遺 11:9)を予測するために使用されており、そしてDNASTAR,Inc.(1228 South Park Street,Madison,Wisconsin 53715 USA)のProtean packageで利用可能である。
【図17】 図17は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF27を示す。M1およびM2は、分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。
【図18】 図18は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF79を示す。M1は分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。コンピューター分析は、親水性プロット(上段)、抗原性指数(中段)、およびAMPHI分析(下段)を示す。AMPHIプログラムは、T細胞エピトープ(Gaoら(1989)J.Immunol.143:3007;Robertsら(1996)AIDS Res Hum Retrovir 12:593;Quakyiら(1992)Scand J Immunol 補遺 11:9)を予測するために使用されており、そしてDNASTAR,Inc.(1228 South Park Street,Madison,Wisconsin 53715 USA)のProtean packageで利用可能である。
【図19】 図19は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF85を示す。M1は分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。TPは、N.meningitidis全タンパク質抽出物を示す;OMVは、N.meningitidis外膜ベシクル調製物を示す。コンピューター分析は、親水性プロット(上段)、抗原性指数(中段)、およびAMPHI分析(下段)を示す。AMPHIプログラムは、T細胞エピトープ(Gaoら(1989)J.Immunol.143:3007;Robertsら(1996)AIDS Res Hum Retrovir 12:593;Quakyiら(1992)Scand J Immunol 補遺 11:9)を予測するために使用されており、そしてDNASTAR,Inc.(1228 South Park Street,Madison,Wisconsin 53715 USA)のProtean packageで利用可能である。
【図20】 図20は、実施例から得られた生化学的データを示し、そしてまた配列分析、ORF132を示す。M1およびM2は、分子量マーカーである。矢印は、ウェスタンブロッティングにおける主要な組換え産物の位置を示すか、または主要なN.meningitidis免疫活性バンドの位置を示す。TPは、N.meningitidis全タンパク質抽出物を示す;OMVは、N.meningitidis外膜ベシクル調製物を示す。コンピューター分析は、親水性プロット(上段)、抗原性指数(中段)、およびAMPHI分析(下段)を示す。AMPHIプログラムは、T細胞エピトープ(Gaoら(1989)J.Immunol.143:3007;Robertsら(1996)AIDS Res Hum Retrovir 12:593;Quakyiら(1992)Scand J Immunol 補遺 11:9)を予測するために使用されており、そしてDNASTAR,Inc.(1228 South Park Street,Madison,Wisconsin 53715 USA)のProtean packageで利用可能である。

Claims (9)

  1. 配列番号4、6および8からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、タンパク質。
  2. 請求項1に記載のタンパク質をコードする、核酸分子。
  3. 配列番号3、5および7からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項2に記載の核酸分子。
  4. 請求項1に記載のタンパク質と90%またはそれより多くの配列同一性を有する、タンパク質であって、
    該タンパク質は、Neisseria細菌に対する免疫原性活性を示し、
    該タンパク質を免疫原として使用した場合、Neisseria細菌に対する殺菌活性を示す免疫応答が惹起される、タンパク質。
  5. 請求項1または4のいずれか1つの請求項に記載のタンパク質と結合する抗体。
  6. 請求項1または4のいずれか1つの請求項に記載のタンパク質をコードする、核酸分子。
  7. 請求項6に記載の核酸分子と相補的なヌクレオチド配列を含む、核酸分子。
  8. 請求項3に記載の核酸分子と90%またはそれより多くの配列同一性を有するヌクレオチド配列を含む、核酸分子であって、
    該核酸分子によりコードされるタンパク質は、Neisseria細菌に対する免疫原性活性を示し、
    該タンパク質を免疫原として使用した場合、Neisseria細菌に対する殺菌活性を示す免疫応答が惹起される、核酸分子。
  9. 配列番号3、5および7からなる群から選択されるヌクレオチド配列もしくはその相補鎖、または少なくとも15ヌクレオチドの長さであるそれらの断片であるプローブまたはプライマーであって、配列番号3、5および7からなる群から選択されるヌクレオチド配列またはその相補鎖を特異的に検出または増幅できるプローブまたはプライマー。
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