JP3712409B2 - 細胞の部位特異的な点滴注入または細胞の部位特異的形質転換による疾患の治療およびそのためのキット - Google Patents

細胞の部位特異的な点滴注入または細胞の部位特異的形質転換による疾患の治療およびそのためのキット Download PDF

Info

Publication number
JP3712409B2
JP3712409B2 JP50159093A JP50159093A JP3712409B2 JP 3712409 B2 JP3712409 B2 JP 3712409B2 JP 50159093 A JP50159093 A JP 50159093A JP 50159093 A JP50159093 A JP 50159093A JP 3712409 B2 JP3712409 B2 JP 3712409B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
cells
dna
cell
tumor
gene
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
JP50159093A
Other languages
English (en)
Other versions
JPH06509328A (ja
Inventor
ジー. ナーベル,エリザベス
ジェイ. ナーベル,ゲイリー
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
University of Michigan
Original Assignee
University of Michigan
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27110984&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=JP3712409(B2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by University of Michigan filed Critical University of Michigan
Publication of JPH06509328A publication Critical patent/JPH06509328A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP3712409B2 publication Critical patent/JP3712409B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/0075Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the delivery route, e.g. oral, subcutaneous
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61BDIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B17/00Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets
    • A61B17/22Implements for squeezing-off ulcers or the like on the inside of inner organs of the body; Implements for scraping-out cavities of body organs, e.g. bones; Calculus removers; Calculus smashing apparatus; Apparatus for removing obstructions in blood vessels, not otherwise provided for
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6957Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a device or a kit, e.g. stents or microdevices
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/0083Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the administration regime
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A61K9/0024Solid, semi-solid or solidifying implants, which are implanted or injected in body tissue
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L29/00Materials for catheters, medical tubing, cannulae, or endoscopes or for coating catheters
    • A61L29/14Materials characterised by their function or physical properties, e.g. lubricating compositions
    • A61L29/16Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • A61P31/14Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18Antivirals for RNA viruses for HIV
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61BDIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B17/00Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets
    • A61B17/22Implements for squeezing-off ulcers or the like on the inside of inner organs of the body; Implements for scraping-out cavities of body organs, e.g. bones; Calculus removers; Calculus smashing apparatus; Apparatus for removing obstructions in blood vessels, not otherwise provided for
    • A61B2017/22082Implements for squeezing-off ulcers or the like on the inside of inner organs of the body; Implements for scraping-out cavities of body organs, e.g. bones; Calculus removers; Calculus smashing apparatus; Apparatus for removing obstructions in blood vessels, not otherwise provided for after introduction of a substance
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61BDIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B17/00Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets
    • A61B17/22Implements for squeezing-off ulcers or the like on the inside of inner organs of the body; Implements for scraping-out cavities of body organs, e.g. bones; Calculus removers; Calculus smashing apparatus; Apparatus for removing obstructions in blood vessels, not otherwise provided for
    • A61B2017/22082Implements for squeezing-off ulcers or the like on the inside of inner organs of the body; Implements for scraping-out cavities of body organs, e.g. bones; Calculus removers; Calculus smashing apparatus; Apparatus for removing obstructions in blood vessels, not otherwise provided for after introduction of a substance
    • A61B2017/22084Implements for squeezing-off ulcers or the like on the inside of inner organs of the body; Implements for scraping-out cavities of body organs, e.g. bones; Calculus removers; Calculus smashing apparatus; Apparatus for removing obstructions in blood vessels, not otherwise provided for after introduction of a substance stone- or thrombus-dissolving
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/20Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
    • A61L2300/252Polypeptides, proteins, e.g. glycoproteins, lipoproteins, cytokines
    • A61L2300/254Enzymes, proenzymes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/20Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
    • A61L2300/252Polypeptides, proteins, e.g. glycoproteins, lipoproteins, cytokines
    • A61L2300/256Antibodies, e.g. immunoglobulins, vaccines
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/20Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
    • A61L2300/258Genetic materials, DNA, RNA, genes, vectors, e.g. plasmids
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/40Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
    • A61L2300/412Tissue-regenerating or healing or proliferative agents
    • A61L2300/414Growth factors
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/40Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
    • A61L2300/426Immunomodulating agents, i.e. cytokines, interleukins, interferons
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/60Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a special physical form
    • A61L2300/64Animal cells
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/80Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a special chemical form
    • A61L2300/802Additives, excipients, e.g. cyclodextrins, fatty acids, surfactants

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)

Description

これは1991年6月28日出願の米国特許出願番号07/724,509の一部継続出願であり、さらにそれは1989年3月31日出願の米国特許出願番号07/331,336の一部継続出願(現在、放棄)である。
技術分野
本発明は、細胞の部位特異的な点滴注入または細胞の部位特異的形質転換による疾患の治療、およびそのためのキットに関する。またこの発明は、生体中へのリコンビナント遺伝子の導入によって動物の免疫システムを調節する方法に関する。
背景技術
多くの後天的および先天的な疾患に対する効果的な治療は現代の医学にとってもまだ大きな挑戦課題として残されている。治療薬を生体の特定の部位に運ぶ能力は、たとえば、局所的な疾患の治療にとって非常に重要なものである。また、治療薬を循環器系を経由して灌流させることができれば、たとえば、先天的および後天的な疾患または癌の治療に効果的である。
たとえば、抗腫瘍剤またはトキシンを腫瘍部位のすぐ近くに確実に投与できることは望ましいことである。同様に、たとえば、糖尿病患者の血液中にインスリンを灌流させることも望ましいことである。しかしながら、多くの治療薬に関して、特定部位への投与または全身的投与のいずれにおいても満足できる方法はない。
加えて、多くの疾患において、局所的または全身的に、欠陥のある内因性遺伝子の発現、外因性遺伝子の発現、あるいは内因性遺伝子の抑制、を起こさせることができれば望ましいが、これらもまた、まだ達成されていない課題である。
特に、アテローム性動脈硬化症の発病はつぎの3つの基本的な生物学的なプロセスで特徴づけられる。これらは:1)血管内膜の平滑筋細胞の増殖とマクロファージの堆積;2)平滑筋細胞の増殖による大量の結合組織マトリックスの生成;3)細胞の中およびそれをとりまく結合組織中での脂質の蓄積(基本的にはコレステロールエステルおよびフリーのコレステロールの形で)、である。
最初に起こる事象は内皮細胞の損傷で、これは内皮の浸透膜の干渉となって現れ、内皮表面の非凝血特性が変化し、内皮の凝血促進特性が昴進する。単球が内皮細胞間を遊走し、スカベンジャー細胞として活発になり、マクロファージに分化する。
ついでマクロファージは、血小板誘導成長因子(PDGF),線維芽細胞成長因子(FGF)、表皮成長因子(EGF)、および形質転換成長因子α(TGF−α)を合成し、分泌する。これらの成長因子は、アテローム性動脈硬化プラクの中の線維芽細胞および平滑筋細胞の遊走および増殖を強力に刺激する。さらに、血小板は損傷した内皮細胞および活性化されたマクロファージとの相互作用で成長因子の生産および血栓の生成をもたらす。
冠動脈系の疾患の臨床管理における2つの大きな問題としては、急性の心筋虚血における血栓の生成および冠動脈形成術(PTCA)後の再狭窄がある。この両者とも、内皮の損傷、活性化されたマクロファージおよび血小板による成長因子群の放出といった一般的な細胞事象が関与する。冠動脈形成術を行うと、アテローム性動脈硬化プラクを破壊し、内皮を除去することになる。この血管の外傷は、血小板凝集およびPTCA部位での血栓生成を促進する。血小板やマクロファージからさらにマイトジェンが放出されると、平滑筋細胞の増殖および単球の浸潤によって再狭窄にいたる。
この問題は、抗血小板剤を使用する経験医学診療では予防できず、PTCA患者の1/3で起こっている。再狭窄の解決策は、血小板凝集の防止、血栓生成の防止、ならびに平滑筋細胞の増殖抑制である。
血栓の生成はまた、冠状症候群の安定から不安定への移行における決定的な細胞現象である。この病因には、多くの場合急性の内皮細胞の損傷あるいはプラクの破壊が関与し、内皮細胞の付着部の機能不全を促進し、下層のマクロファージフォーム細胞を露出させることになる。これによって、循環している血小板の付着、凝集、および血栓生成の機会が生まれる。
組織プラスミノーゲン活性化剤(tPA)のような血栓溶解剤の静脈内注射によって、急性の心筋梗塞患者の約70%において血栓を溶解するという結果が得られている。にもかかわらず、約30%の患者では再灌流ができず、また梗塞を起こした動脈でいったん再灌流をした患者の約25%が、24時間以内に血栓の再発を経験している。したがって、再血栓に対する効果的な治療法は現代の医学界における重要な課題として残されている。
上述のように、再血栓に対する効果的な治療法のみが現在残されている唯一の重要な課題というわけではない。不安定なアンギーナ、心筋梗塞や慢性の組織虚血といった、その他の虚血性の症状の治療、あるいは後天性及び遺伝性の疾患や癌などの治療も重要な課題である。これらの疾患は、抗凝固剤、血管拡張剤、血管形成剤、成長因子剤や成長抑制剤などの、患者に対する適切な投与によって治療することができる。このように、これらの診療分野すべてにおいて効果的な治療法が切望されている。
さらに、動物の免疫システムを調節できることは望ましいことである。特に、感染から守る免疫的防御を与えるためのワクチンの開発に関しては多大の努力が払われてきた。しかしながら、多くの患者に簡単に投与できる安全なワクチンについては問題が多いし、多くの病気(たとえばAIDSのような)に対しては安全で効果的なワクチンは今のところ得られていない。さらに、時には、移植の拒絶を防ぐために、動物の免疫反応を特別に抑えることも望まれている。移植の拒絶を抑えるための努力は、全体の免疫反応を抑える薬の開発をもたらしたが、これは移植の抗原だけを特別に抑えるものではなく、このような薬剤は常に効果的というわけではない。したがって、動物の免疫システムを調節する方法の必要性が残されている。
発明の開示
したがって、本発明の一つの目的は、治療薬の部位特異的な投与のための新規な方法を提供することにある。
本発明のもう一つの目的は、治療薬を患者の血流の中で灌流させる方法を提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、外因性遺伝子を患者の体内で発現させる方法を提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、欠陥内因性遺伝子を患者の体内で発現させる方法を提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、患者の体内の内因性遺伝子の発現を抑制する方法を提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、患者の体内の損傷した細胞を部位特異的に置き換える方法を提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、治療薬の部位特異的な投与または患者の血流内への灌流、のいずれかによって疾患を治療する方法を提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、患者の体内で、外因性遺伝子の発現、欠陥のある内因性遺伝子の発現、または内因性遺伝子の発現の抑制、のいずれかを引き起こすことによって疾患を治療する方法を提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、患者の体内の損傷した細胞を部位特異的に置き換えることによって疾患を治療する方法を提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、患者の体内へ正常または形質転換した細胞を部位特異的に点滴注入するキットを提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、生体内で細胞を部位特異的に形質転換するキットを提供するものである。
本発明のもう一つの目的は、動物の免疫システムを調節する方法を提供することにある。
本発明のもう一つの目的は、外来分子に対する感作性を動物に与えるために動物の免疫システムを調節する方法を提供することにある。
本発明のもう一つの目的は、微生物やウイルスによる感染を防ぐために、タンパク質を拒絶するための動物の免疫システムを刺激する方法を提供することにある。
本発明のもう一つの目的は、外来分子の受け入れを動物に許容させるために、動物の免疫システムを調節する方法を提供することにある。
本発明のもう一つの目的は、移植を拒絶する傾向を減ずるために、動物の免疫システムを調節する方法を提供することにある。
本発明のもう一つの目的は、全身的投与によって、生体中で細胞を形質転換させる新規なキットを提供することにある。
以下の詳細な説明で明らかになる本発明のこれらのおよびその他の目的は、本発明者らが下記のことを達成することによって、明らかにされたものである:a)(i)患者への正常細胞(形質転換されていない)または形質転換された細胞の部位特異的な点滴注入、または(ii)患者の細胞の部位特異的な形質転換、のいずれかからなる方法;および、b)カテーテルを含むキットであって、(i)正常細胞または形質転換された細胞の部位特異的な点滴注入、あるいは、(ii)細胞の部位特異的形質転換、のためのもの。
正常な細胞の部位特異的な点滴注入は損傷した細胞を置き換えるために使用でき、一方形質転換された細胞の点滴注入は欠陥のある内因性遺伝子または外因性遺伝子のいずれかの発現、あるいは内因性遺伝子産物の抑制、のために利用できる。患者の血管壁への細胞の点滴注入は血流中への治療薬の確実な灌流に使用することができる。
本発明者はまた、生体中で動物の細胞を形質転換させることによって、動物の免疫システムを調節することが可能であることを見いだした。特に、リコンビナント遺伝子を併用し、部位特異的または全身的な投与によって動物の細胞を形質転換させることによって、そのリコンビナント遺伝子がコードしている分子に動物が感作するように動物の免疫システムを調節することが可能である。あるいは、リコンビナント遺伝子を併用し、特に動物の免疫システムを特異的に決定する部位、(たとえば胸腺)、の細胞を形質転換させることによって、そのリコンビナント遺伝子がコードしている分子に対する免疫反応を抑制するように動物の免疫システムを調節することが可能である。
【図面の簡単な説明】
本発明およびこれに付随する多くの利点は、添付図面を参照しながら下記の詳細な説明を理解するにつれ容易により完全な理解、評価に到達できるものである。
図1および図2は本発明のカテーテルを、外科手術的または経皮的に細胞を血管内に移植するため、または患者の血管に存在する細胞を生体内で形質転換するために、使用する方法を示したものである。
図3は目的細胞の溶解%とそのエフェクター:CTL細胞の目標比;を示す。
図4はウェスタン・ブロット分析の結果を示す。
本発明を実施するための最良の形態
ここで、実施態様の1つでは、先天性の疾患、全身的な疾患、心血管系の疾患、特定の器官の疾患、あるいは腫瘍などの疾患の治療に、本発明の、正常細胞または形質転換細胞の点滴注入、または細胞の形質転換の方法を使用している。
本法において点滴注入される細胞には、内皮細胞、平滑筋細胞、線維芽細胞、単球、マクロファージ、および実質細胞などがある。これらの細胞は治療効果ないしは診断効果を有するタンパク質で、天然に存在するかまたはリコンビナント遺伝子物質に由来するタンパク質を産生するものである。
つぎに図を参照すると、ここでは、同一または対応する部位には、すべての図において同一の番号を付している。図1では、米国特許4,636,195に開示されているデザインのカテーテルを用いた本発明の実施態様を示している(この特許をここにレファレンスとして援用する)。このカテーテルは正常または遺伝子的に変換した細胞を血管の壁に供給したり、細胞の局所的形質転換のためにベクターを導入するために使うことができる。図においてがその血管壁である。図では膨張可能のバルーン手段およびを膨らませることによって、カテーテル部が所定の位置に保持されているところを示している。バルーン手段およびの間の部分に点滴注入口手段が備えられている。このカテーテルにはさらにガイドワイヤ手段を備えることもできる。図2は同様のカテーテルの使用が示されているが、このカテーテルには1個の膨張可能バルーン手段と複数の点滴注入口手段が備えられている点が図1のカテーテルと異なる。このカテーテルは最大12個の独立した点滴注入口手段を備えることができるが、図では5個備えているところを示している。
器官への供給のケースでは、このカテーテルは組織への補給を行う主要動脈に導入される。リコンビナント遺伝子またはベクターを含んだ細胞は、動脈循環を一時的に閉塞した後、中央の点滴注入口を通して導入される。このようにして、細胞またはベクターDNAは毛細管循環を通して、大量の実質組織に移入される。リコンビナント遺伝子もまた、ダブルのバルーンカテーテル手法を目的の器官のすぐ近くの動脈循環に使用して、脈管中に導入することができる。このようにすれば、リコンビナント遺伝子を、関与する組織を灌流する循環系の中に直接分泌させたり、その器官の中で直接合成させることができる。
1つの実施態様では、治療薬は血管細胞によって分泌され、病気に冒されている特定の器官に供給されている。たとえば、虚血性心筋症は冠循環系に脈管形成性の因子を導入することによって治療することができる。このアプローチはまた、脈管形成性の因子が脳やその他の組織の循環を改善できるような末梢血管や大脳血管の疾患に使用することができる。真性糖尿病はグルコース反応性のインスリン分泌細胞を門脈の循環、(そこでは通常肝臓に他の組織より高いインスリン濃度が見られる)に導入することによって治療することができる。
治療薬の局所的濃度を高めるためのほか、本法はリコンビナント遺伝子を実質組織に供給するためにも使用することができる。なぜならば、本法では高濃度のウイルス性ベクターやその他のベクターを特定の循環系に供給することができるからである。このアプローチを用いて、器官に特異的なタンパク質不全もまた治療することができる。たとえば、肝臓で、α−アンチトリプシンインヒビター不全や高コレステロール血症は、α−アンチトリプシンまたはLDL受容遺伝子を導入することによって治療することができる。さらに、このアプローチは悪性疾患の治療にも利用することができる。手術不能の腫瘍の循環系に対するリコンビナントトキシン遺伝子の分泌は治療効果をもたらす。例としては、切除不能の聴覚腫瘍やあるいはある種の血管腫がある。
臨床的状況においては、これらの治療用リコンビナント遺伝子は関与器官において循環供給される細胞の中に導入される。これらの細胞の導入場所としては動脈系および毛細血管系が好ましいが、静脈系でもよい。
局所的な血管損傷の治療の場合、本発明は、その局所にこの症状を改善するタンパク質を発現させる。1つの実施態様では、それらの部位に血管細胞が認められたので、それらを治療薬を運ぶキャリヤとして利用した。
本発明はこのように、その1つの様相においては、内皮およびその他の血管細胞の遺伝子的な変換、あるいは体細胞の遺伝子治療によって治療薬剤(すなわち、タンパク質、成長因子群)を損傷した局所に運ぶ。細胞への遺伝子移植を成功させるためには、4つの条件を満たさなければならない。第1に、細胞に移植しようとする遺伝子を同定し、単離しなければならない。第2に、発現させようとする遺伝子はクローン化され、遺伝子操作ができるようになっていなければならない。第3には、遺伝子は発現可能またはその機能が発揮されるような形で細胞に導入されなければならない。第4に、遺伝子的に変換された細胞は、それが必要とされる血管部位に正しく存在させなければならない。
本発明によれば、変換された細胞もしくは適当なベクターは、外科的、経皮的に、または静脈内に導入され、患者の血管壁の1部分に付着させる。あるいは、患者の血管壁に存在するいくつかの細胞を、望ましい遺伝子材料を用いて、または直接ベクターを適用して、形質転換させる。場合によっては、血管表面から失われたまたは損傷した細胞を置き換えるために、これらの方法を用いて、遺伝子的に変換されていない血管細胞を導入することもできる。
本発明によって、どのような血管も、すなわち動脈、静脈、毛細血管系も治療することができる。これらの血管は、ヒト、あるいはほ乳動物類の体内のいずれの器官の中、あるいはその近辺のものでもよい。
血管への正常なまたは遺伝子的に変換された細胞の導入
以下、本発明の実施態様を説明する。
I. 組織培養中での内皮またはその他の血管細胞の確立
最初に、1つの細胞系が確立され、液体窒素の中に貯蔵される。低温貯蔵に先だって、一定量を取り出し、希望する遺伝子材料を含んだベクター、ウイルスその他に感染もしくは形質移入させる。
内皮またはその他の血管細胞を、すでに発表されているJ.W.Ford他,In Vitro,17,40(1981)の手法を用いて、酵素学的に血管の一部から取り出す。血管を切除し、ステンレススチールのロッドの上に反転して置き、Ca++およびMg++を含まないHankのバランス塩溶液(BSS)、に0.125%のEDTAを加えた溶液の0.1%トリプシン溶液中で、pH8、37℃で10分間、インキュベートする。
細胞群(0.4から1.5x106)は遠心分離によって回収され、10%牛胎児血清、25μg/mlの内皮細胞成長補助液(ECGS、Collaborative Research、ウォルサム、マサチューセッツ州)、15U/mlのヘパリン、および50μg/mlのゲンタミシンを含んだ培養液199(GIBCO)中に再懸濁させる。細胞を、ゼラチン(蒸留水中2mg/ml)をプレスコートした75cm2の組織培養フラスコに加える。細胞群は交会に達するまで、2日ごとに上記培養液が与えられる。
培養2週間後、ブタの内皮を培養する場合には、ECGSおよびヘパリンを培養液から除外する。もし、血管の平滑筋細胞あるいは線維芽細胞を培養する場合には、ECGSおよびヘパリンは培養過程から完全に除外する。細胞のアリコートは、約106個の細胞を0.5mlの氷冷胎児子ウシ血清中に氷の上で再懸濁させることによって、液体窒素の中で貯蔵する。10%のDMSOを含む同量の氷冷胎児子ウシ血清を加え、細胞を冷やしたスクリューキャップ式のコーニング冷凍チューブに移す。これらの細胞は、長期間の液体窒素中での貯蔵の前に、3時間−70℃の冷凍庫に移される。
その後この細胞は、希望する遺伝子材料を含んだベクターに感染させる。
II.正常または外因性タンパク質を発現している細胞の脈管系への導入。
A.関連タンパク質を発現している細胞のカテーテル法による導入。
患者は、無菌手法を厳密に適用して、外科的にまたは経皮的にカテーテルを挿入できるように準備する。目標とする血管の静脈切開を行うか、あるいは適当な麻酔処理の後、目標とする血管の中に針を挿入する。血管(5)を穿刺し、米国特許4,636,195のようなカテーテル(これはUSCI,Billerica,マサチューセッツ州から入手可能。この米国特許の開示をここに援用する)、をもし必要なら蛍光透視ガイドのもとで、ガイドワイヤ手段(6)により、血管(5)の中に進ませる(図1)。このカテーテル手段(4)は、感染した内皮細胞を動脈の別々の部位に導入するようにデザインされている。このカテーテルは、遠位および近位のバルーン手段(2)および(1)を有し、(それぞれのバルーンの手段は、たとえば長さ約3mm,幅約4mmである)、バルーン手段の間には一定の長さのカテーテル手段がある。バルーンの間のカテーテル手段は、点滴注入口部(3)につながる1つの口部を有する。遠位および近位のバルーン手段が膨らまされると、血管の中に1つの中央スペースが形成され、口部を通して感染された細胞を点滴注入することができる。
解剖学的標識点により血管の部位が特定され、血管の裸化を行うために、近位のバルーン手段(2)を膨らませ、内皮を機械的外傷(たとえば、血管の中に部分的に膨らませたバルーンカテーテルを強制的に通過させる)または機械的外傷と少量のディスパーゼ、トリプシン、コラゲナーゼ、パパイン、ペプシン、キモトリプシン、またはカテプシンなどの蛋白分解酵素の組み合わせ、あるいはこれらの蛋白分解酵素だけを用いた培養により、裸化する。蛋白分解酵素のほか、リパーゼも使用できる。血管の当該部位はまた、NP−40、TritonX100、デオキシコール酸塩、あるいはSDSなどの弱い洗浄剤による処理によっても裸化できる。
裸化の条件は、細胞移入のためには基本的に内皮を完全に落とすか、直接感染の場合は約20から90%、好ましくは50から75%、の細胞を血管壁から落とすように調整する。ある場合には、細胞の除去をしなくてもよいこともある。ついでカテーテルを、点滴注入口(3)が裸化された内皮の部位にくるように進める。つぎに動脈の特定の部位に、感染、または形質移入した、あるいは正常な細胞を30分間点滴注入する。もし、血管がある程度の虚血を許容できる器官を灌流している場合、たとえば骨格筋、は遠位の灌流は特に問題にはならないが、もし必要ならば外部シャントで、あるいは遠位の灌流ができるカテーテルを使用して回復させることができる。感染した内皮細胞を点滴注入した後、バルーンカテーテルをはずし、動脈穿刺部位および皮膚切開箇所を修復する。もし、遠位の灌流が必要ならば、遠位灌流ができるようにデザインされた別のカテーテルを使用する。
B.リコンビナント遺伝子の血管壁の細胞への直接導入、または生体中の特定の循環系による灌流;器官壁または器官の細胞の感染または形質移入。
上記と同様の外科的手法が用いられる。感染した細胞を使うかわりに、形質導入したウイルス性ベクター(105から106個/ml)または運搬ベクターに複合化したDNAのような高力価の希望する遺伝子材料を、ダブルバルーンカテーテル手法を用いて、器官壁に直接点滴注入する。このベクターは、感染の効果を高めるために、血清およびポリブレン(10μg/ml)を含んだ培養液の中に注入される。カテーテルによってできたデッドスペース中で、充分な時間(0.2から2時間またはそれ以上)培養した後、この培養液は脱気され、燐酸緩衝生理塩液で静かに洗浄し、そして動脈循環を回復させる。術後の回復のためにも同様の手順が適用される。
器官の表面は機械的な裸化のみでも、あるいは少量のディスパーゼ、トリプシン、コラゲナーゼ、またはカテプシンなどの蛋白分解酵素との組み合わせ、またはこれらの蛋白分解酵素だけを用いた培養、によっても準備することができる。裸化の条件は器官壁からの細胞脱落が適当になるように調節される。
ウイルス性ベクターまたはDNA−ベクター複合体は、精製ウイルスまたは自原性の血清を含んだ複合体を用いて、ダルベッコの改変イーグル培地に滴下注入する。または、目標細胞に対するウイルス粒子の付着性を強化して感染効果を高めるために、ポリブレン(10μg/ml)、ポリ−L−リジン、デキストランサルフェートのような粘着性の物質、または生理学的に適当なポリカチオン性物質、またはウイルスあるいはベクターの被膜糖蛋白に対するハイブリッド抗体や器官壁中あるいは器官から灌流する組織中の関連する目標に対するハイブリッド抗体を含んだ複合体を用いる。ウイルスあるいはベクターの被膜糖蛋白や関連する目標細胞に対するハイブリッド抗体は、2つの方法のいずれかで作られる。異なるエピトープに対する抗体は化学的に架橋することができる(G.Jung,C.J.Honsik,R.A.Reisfeld,およびH.J.Muller−Eberhard,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,83,4479(1986);U.D.Staerz,O.Kanagawa,およびM.J.Bevan,Nature,314,628(1985);およびP.Perez,R.W.Hoffman,J.A.Titus,およびD.M.Segal,J.Exp.Med.,163,166(1986))、またはハイブリッドハイブリドーマを用いて生物学的にカップリングされる(U.D.StaerzおよびM.J.Bevan,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,83,1453(1986);およびC.MilsteinおよびA.C.Cuello,Nature,305,537(1983))。カテーテルの中央スペースの中で、0.2から2時間またはそれ以上培養した後、この培養液は脱気され、燐酸緩衝生理塩液で静かに洗浄し、そして循環を回復させる。
異なったカテーテルデザイン(図2参照)を用いて、異なった点滴注入プロトコールを使用することもできる。この2番目のアプローチでは、単一のバルーン手段(2)のカテーテルで、部分的に裸化された動脈部分の中にレトロウイルスを高圧で運搬できるような複数の口部手段(3)を有するものを使用する。器官の表面は上記のように準備され、同様の粘着性分子を使用して、欠陥ベクターを導入する。この場合、高圧運搬システムの使用は、ベクターと隣接する血管組織中の細胞との相互作用を最適なものとするのに役立つ。
本発明はまた、感染の効果を高めるために、成長因子をカテーテルによって局所的にまたは全身的に使用する方法も提供している。レトロウイルスベクターのほかに、ヘルペスウイルス、アデノウイルス、あるいはその他のウイルス性ベクターも本法の手法に適したベクターである。
また、器官の中または組織の中で細胞の形質転換を行わせることも可能である。器官または組織細胞の直接形質転換は、2つの方法のいずれかで行うことができる。第1の方法では高圧による形質導入が用いられる。高圧によって、ベクターは血管壁を通して回りの組織中に移行する。第2の方法では、キャピラリーベッドの中への注入(これは浸潤させるために損傷を受けた後でもよい)によって、とりまく組織を直接感染させる。
ベクターや細胞の点滴注入のために必要な時間は本発明のうちどの方法を使用するかによって異なる。細胞やベクターを血管中に点滴注入するのに適当な時間は0.01から12時間であり、好ましくは0.1から6時間、最も好ましくは0.2から2時間である。あるいは、ベクターや細胞の高圧点滴注入を行う場合は、より短時間が好ましい。
本発明で使用する細胞の入手:
”遺伝子的材料”という用語は、一般的にタンパク質をコードするためのDNAを指す。またRNAについても、RNAウイルスまたはRNAをベースとしたその他のベクターとともに使用されるときには、この用語を適用する。
形質転換は、直接感染、形質導入、または他の取り込み方法によって外因性遺伝子を細胞の中に組み込むプロセスである。
”ベクター”という用語は、広く知られており、よく使われることば”クローニングビヒクル”と同義である。ベクターは非染色体の二重らせんDNAで、完全なレプリコンからなり、単細胞有機物の中におかれたときに、たとえば形質転換のプロセスによって、複製される。ウイルス性ベクターには、レトロウイルス類、アデノウイルス類、ヘルペスウイルス、パポウイルス、または変性天然ウイルス類がある。ベクターはまた、DNAと細胞によって取り込むことができる化学品または物質の処方品も意味する。
もう1つの実施態様では本発明は遺伝子の発現を抑制する方法を提供する。この目的を達成するためには4つのアプローチを使うことができる。これらにはアンチセンス剤の使用が含まれ、mRNAに対して相補的な合成オリゴヌクレオチド(Maher III,L.J.およびDolnick,B.J.Arch.Biochem.Biophys.,253,214−220(1987)およびZamecnik,P.C.,他,Proc.Natl.Acad.Sci.,83,4143−4146,(1986))、またはこの遺伝子の逆相補体を発現するプラスミド(Izant,J.H.およびWeintraub,H.,Science,229,345−352,(1985);Cell,36,1077−1015(1984))、のいずれかを使用する。さらに、リボザイムと呼ばれる触媒的RNAsは特にRNAシーケンスを分解させることができる(Uhlenbeck,O.C.,Nature、328,596−600,(1987),Haseloff,J.およびGerlack,W.L.,Nature、334,585−591,(1988))。第3のアプローチは、”細胞内免疫化”であり、細胞内タンパク質の類似体が特にそれらの機能を阻害する(Friedman,A.D.,Triezenberg,S.J.およびMcknight,S.L.,Nature,335,452−454(1988))もので、以下に詳細に示す。
第1のアプローチは特に細胞内の転写を除去するのに使用できる。転写の除去はS1ヌクレアーゼ分析で確認することができ、結合タンパク質の発現は機能分析で確認される。転写ファクタmRNAのプロセシングおよび翻訳の阻害に単一らせんオリゴヌクレオチド類似体を使用することができる。要約すれば、目的遺伝子のコード鎖に相補的な合成オリゴヌクレオチドまたはチオールから誘導されたアナログ(20−50ヌクレオチド)が準備される。これらのアンチセンス剤はmRNAの異なる領域ごとに準備される。それらは、遺伝子の5’非翻訳領域、翻訳開始サイトおよびそれに続く20−50の塩基対、中央のコード領域、または3’非翻訳領域、に相補的なものである。アンチセンス剤は活性化の前に形質導入された細胞と一緒に培養される。どの領域がこれらの遺伝子の発現を阻止するのにより効果的かを確認するために、メッセンジャーRNAの異なる部位に対するアンチセンス剤の競合物質の効果を比較する。
RNAはまた、自動触媒的にはたらいて自己融解を起こさせたり、特に相補的RNAシーケンスを分解させる機能を有している(Uhlenbeck,O.C.,Nature,328,596−600(1987),Haseloff,J.およびGerlack,W.L.,Nature、334,585−591,(1988),およびHutchins,C.J.,他,Nucleic Acids Res.,14,3627−3640(1986))。RNA開裂がうまくゆくための条件としては、ハンマーヘッド構造とその構造のフランキング部位についた保存RNAシーケンスがある。この触媒的領域の隣接領域は特定のRNAに対して相補的であり、したがってリボザイムが特定の細胞mRNAsを目標とする。特定の目標遺伝子の生産を阻止するためには、この遺伝子をコードするmRNAをリボサイムを使用して分解してやればよい。要約すれば、RNA転写の中のどのようなGUGシーケンスもリボザイムを使用した分解の目標になりえる。これらはDNAシーケンス分析で確認され、RNA転写にまたがるGUGサイトがその特異的分解のために使用される。5’非翻訳領域の中のサイト、コード領域のサイト、および3’非翻訳領域の中のサイトが、この転写を分解するのにより効果的かどうかを決定するための目標とされる。GUGサイトの上流の20塩基対の相補的シーケンスをコードする合成オリゴヌクレオチド、ハンマーヘッド構造とこのサイトの下流の−20塩基対の相補的シーケンスが、cDNAの関係サイトに挿入される。このようにして、リボザイムは同じ細胞区画を内因性メッセージとして目標にする。特別のエンハンサーの下流に挿入されたリボザイムは、特定の細胞の中で高い発現を示すものを作り出す。これらのプラスミドは、ネオマイシン耐性プラスミドpSV2−Neoまたは選択的マーカーとともにエレクトロポレーションおよび同時形質導入によって、関係する目的細胞に導入される。これらの転写の発現はノーザン・ブロットおよびS1ヌクレアーゼ分析によって確認される。確認されると、mRNAの発現をS1ヌクレアーゼプロテクションによって、これらの転写の発現が目的mRNAおよびそれを規制する遺伝子の定常レベルを下げているかどうか評価する。タンパク質のレベルもまた確認する。
遺伝子はまた、活性化に必要な領域を欠いた変異転写を用意することによって阻害される。要約すれば、その領域を確定した後、機能を刺激できないような変異型を合成する。この切形遺伝子を、ネオマイシン耐性遺伝子を含んだプラスミドのSV−40エンハンサーの下流に挿入する(Mulligan,R.およびBerg,P.,Science,209,1422−1427(1980)(別の転写ユニットの中)。このプラスミドを細胞の中に導入し、G418を使って選別する。この遺伝子の変異型の存在は、S1ヌクレアーゼ分析および免疫沈降法によって確認される。これらの細胞中の内因性タンパク質の機能は2つの方法によって評価される。第1は、正常な遺伝子の発現を確認する。第2は、これらのタンパク質の既知の機能を評価する。もし、この細胞間阻害型変異株がその宿主に対して毒性がある場合には、メタロチオネインプロモーターのような誘導性のコントロールエレメントに導入する。安定した株を単離したあと、細胞をZnまたはCdとともに培養しこの遺伝子を発現させる。そのあと宿主細胞に対する影響を評価する。
特定の遺伝子を不活性化させるもう1つのアプローチは、その他の活性の機能や発現と拮抗するリコンビナントタンパク質を過剰に発現させることである。たとえば、もしTPAの発現を減らしたい場合(たとえば、播種性の血栓溶解の診療手段において)には、プラスミノーゲンアクチベーターインヒビターを過剰に発現させればよい。
近年の生化学および分子生物学の発展により、”リコンビナント”ベクター、たとえばその中のレトロウイルスおよびプラスミドが、外因性のRNAまたはDNAをそれぞれ含むもの、を作ることが可能になった。特殊なものでは、リコンビナントベクターが非相同のRNAまたはDNA(これはリコンビナントベクターによる形質転換ができる有機体では通常生成されないポリペプチドをコードしたRNAまたはDNAという意味であるが)を含むことも可能になった。リコンビナントRNAまたはDNAベクターの生産についてはよく知られており、詳細を説明するまでもない。しかし、参考のためにこのプロセスについて簡単に述べておく。
たとえば、レトロウイルスまたはプラスミドベクターは、開裂により連結可能な末端部をもつ直鎖RNAまたはDNAにすることができる。これらの末端部は相補的な同様の連結可能な末端部を有する外因性RNAまたはDNAと結びつき、完全なレプリコンおよび希望する発現特性を有して生物学的機能を発揮できるリコンビナントRNAまたはDNA分子となる。
RNAおよびDNAの組換えには、別々のRNAまたはDNAの隣りあった末端フラグメントを連結しやすいように調整するなど、種々の手法がある。
本発明で使用する外因性、すなわちドナーである、RNAまたはDNAは適当な細胞群から得ることができる。公知の手法を使って、ベクターを作り、治療薬タンパク質の生体中発現が可能な形質転換細胞を得る。形質転換細胞は、目的細胞を、目的細胞の中にRNAまたはDNAを取り込み形質転換できるような処方のRNAまたはDNAに接触させることにより得ることができる。そのような処方には、たとえば、レトロウイルス類、プラスミド類、リポソーム組成物、またはポリ−L−リジン,DEAC−デキストランのようなポリカチオン性の物質および目的リガンドなどが含まれる。
このように本発明は、治療薬または診断薬を、局所的または全身的な目的のために、血管の局所に送り込む方法として、細胞の遺伝子的変換を利用する方法を提供するものである。これらの細胞中で発現されるリコンビナントタンパク質の範囲は広くかつ種類が多い。これには、血栓症および再狭窄症、脈管形成の治療のためのtPa、または再血管形成の目的のための成長因子、および血管収縮または血管けいれんを改善するための血管作用性因子、などのタンパク質を発現するベクターを使用する遺伝子変換も含まれる。この手法はまた、遺伝的疾患、または後天的な病気、局所的あるいは全身的な疾患に対する遺伝子的な治療におよぶものである。本発明はまた、細胞が失われた特定の部位に正常な細胞を導入する、たとえば、血管形成手術やカテーテル処置の間に損傷した内皮を置き換える、ためにも使用できる。
たとえば、虚血性疾患(血栓症)の治療においては、tPAまたはその修飾物、ウロキナーゼまたはストレプトキナーゼなどをコードする遺伝子的材料が、細胞を形質転換するために使用される。虚血性器官(たとえば、心臓、腎臓、大腸、肝臓、など)疾患の治療においては、形質転換成長因子a(TGF−α)、形質転換成長因子s(TGF−β)、アンジオジェニン、腫瘍壊死因子α、腫瘍壊死因子β、酸性フィブロブラスト成長因子または基本フィブロブラスト成長因子のような側副枝再生剤(recollateralization agents)をコードする遺伝子的材料を使用することができる。血管運動系の疾患の治療においては、血管拡張剤または血管収縮剤をコードする遺伝子的材料を使用することができる。これらには、心房性ナトリウム排泄増加因子、血小板誘導成長因子またはエンドセリンが含まれる。糖尿病の治療においては、インスリンをコードする遺伝子的材料を使用することができる。
本発明はまた、悪性疾患の近接部に形質転換した細胞を置くことによって悪性疾患を治療するのに利用することができる。この用途では、ジフテリアトキシン、百日咳トキシン、またはコレラトキシンをコードする遺伝子的材料が使われる。
実施例の1つでは、本発明は腫瘍細胞に対する免疫反応を刺激するかあるいは腫瘍細胞の成長を抑制するか、または生体中での遺伝子的変性による転位のいずれかによる悪性疾患の治療法を提供する。このアプローチは、腫瘍細胞をインビトロで増殖、変性、選択する点がこれまでの方法と異なる。
本実施例によれば、本法はDNAシーケンスまたはRNAシーケンス(リコンビナント遺伝子も含む)を生体内の腫瘍細胞に次のような方法で送ることに使用される。(1)レトロウイルスまたはウイルスベクターをビヒクルとして、(2)DNAまたはRNA/リポソームをビヒクルとして、(3)DNAまたはRNAシーケンスを含んだ化学処方品で、そのシーケンスを目的細胞に運搬しやすいようなキャリヤ分子と結合させたものを利用して、または(4)細胞媒介の遺伝子移送を利用して遺伝子を生体内の特定の部位に送る、たとえば、インビトロで形質転換された血管平滑筋細胞や内皮細胞をビヒクルとして使用し腫瘍部位へリコンビナント遺伝子を送る。
本実施例は1面では、本発明は癌に対する防御方法を提供するために免疫システムに依拠し、悪性疾患のための補助的治療法として重要な役割を果たすものである。免疫療法はすでに悪性疾患の治療のための補助的アプローチとして有用なことが認められている。細胞溶解性T細胞およびリンフォカインの両方とも腫瘍細胞の破壊を容易にすることができ、サイトカインまたは腫瘍浸透リンパ球の投与が、腫瘍の退行を推し進める戦略として効果のあることが、動物モデルおよび人体実験で認められている。たとえば、リンフォカイン活性化キラー細胞(LAK)および腫瘍浸透リンパ球(TIL)は腫瘍性の細胞を溶解し、部分的または完全に腫瘍を撃退できることが知られている。悪性細胞の中でサイトカイン遺伝子の発現もまた腫瘍の退行を促すものである。
本発明は、生体中の腫瘍細胞にリコンビナント遺伝子を直接導入する方法によって、腫瘍に対する遺伝子導入の新しいアプローチを提供するものであるが、従来の遺伝子導入法がインビトロでの腫瘍細胞の変性に重点を置き、そしてその変性された細胞を移入するという点が本法とは対照的である。従来のアプローチでは、生体内で活動する細胞とは異なる成長条件のもとで細胞の選択が行われるという点が不都合であり、またそれぞれの悪性疾患ごとに細胞種を確立しなければならず、したがって、ヒトの病気に対する適用がきわめて難しいものであった。
本実施例で使用される遺伝子は、細胞内の、分泌された、または細胞表面の分子が患者にとって外因性のものであり、かつ、(1)患者に免疫原性のあるもの、(2)腫瘍に対して拒絶、退行、またはその両方を誘導するもの、(3)腫瘍の細胞に対して毒性のあるもの、をコードしたDNAシーケンス(または対応するRNAシーケンスのものでもよい)を含んだものである。
本発明で使用できるDNAシーケンス(または対応するRNAシーケンス)を含んだベクターとしては、そのようなDNAまたはRNAシーケンスを含んだ真核性発現ベクターである。外因性DNAまたはRNAシーケンスを宿主の中で発現させる手法はすでに知られている。たとえば、ここにレファレンスとして援用する、Kormanら,Proc.Nat.Acad.Sci.(USA)(1987)84,2150−2154、を参照されたい。
このベクターは、上記のように、レトロウイルスまたはその他のウイルスベクター(すなわち、ウイルスベクター)に入れて、DNAまたはRNA/リポソーム複合体、または細胞媒介の遺伝子トランスファー、によって患者に投与することができる。さらに、このベクターが非ウイルス性の形として存在する場合は、DNAまたはRNAシーケンスを含んだ化学処方品で、そのシーケンスを宿主細胞に運搬しやすいようなキャリヤ分子と結合させたものを利用して投与することができる。そのようなキャリヤ分子としては、そのベクターが供給される先の細胞に対して特異的な抗体、または目的細胞に結合したレセプターと反応し得る分子である。
本発明に基づいて、細胞媒介の遺伝子トランスファーを使用することができる。この方法の場合、リコンビナント遺伝子の生体への供給は、宿主から取り出された細胞への遺伝子的材料の導入および細胞培養での変性、そして遺伝子的に変換された細胞の宿主への導入、によることになる。本実施例で使用可能な典型的な細胞系パッケージは、Danos,他,Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)(1988)85:6460、に記載されており、ここにレファレンスとして援用する。
本発明に基づいた分子をコードするDNAシーケンスまたはRNAシーケンスは患者、これはヒトあるいはヒトでない動物でもよい、に局所的にあるいは全身的のいずれかで投与する。全身的投与の場合、非ウイルス性のDNAまたはRNA化学処方品で、宿主細胞に運搬しやすいようなキャリヤ分子と結合させたものを利用して行うのが望ましい。これらの投与は、IVまたはIM注射、または公知の手段を使った皮下注射、または本発明によるカテーテルの使用などで行うことができる。
本発明で用いられるレトロウイルスビヒクルは、天然のレトロウイルスから誘導したウイルス粒子で、本発明に基づいて、天然のレトロウイルスを遺伝子的に変換し複製欠陥とし、必要なリコンビナント遺伝子を発現させるようにしたものである。いったんウイルスが遺伝子的材料を細胞に供給すると、それ以外の感染性のウイルスを発生させることなく、外因性のリコンビナント遺伝子を細胞に導入する。
その他のウイルスベクターでは、使用されるウイルス粒子は、その他の天然ウイルスから誘導されたもので、天然のレトロウイルスを遺伝子的に変換し複製欠陥とし、必要なリコンビナント遺伝子を発現させるようにしたものである。そのようなウイルスベクターはアデノウイルス、乳頭腫ウイルス、ヘルペスウイルス、パルボウイルスなどから誘導される。
本発明のシーケンスはまた、DNAまたはRNA/リポソーム複合体として投与することもできる。そのような複合体は、脂肪粒子、脂質(これらは遺伝子材料に結合する)、DNAまたはRNA(これらは疎水性の被膜を提供する)、の混合物であり、遺伝子材料を細胞に送り込む。この組成物は遺伝子トランスファーのための非ウイルス性ベクターを提供するものである。本発明で用いられるリポソームは、DOPE(ジオレイル・フォスファチジル・エタノールアミン)、CUDMEDA(N−(5−コレストラム−3−β−オール3−ウレサニル)−N’,N’−ジメチルエチレンジアミン)を含んだものを使用できる。
上に述べたように、本発明にはその他の非ウイルス性のベクターも使用することができる。これらには、キャリヤ分子(たとえば、抗体またはレセプターリガンド)と結合させたDNAまたはRNAの化学処方品があり、これらは宿主細胞の生物学的特性を変えるための宿主細胞への送り込みを容易にする。ここで用いる”化学処方品”という用語は、核酸化合物をタンパク質や脂質、またはその誘導物のキャリヤ分子にカップリングさせるための核酸変性物を指す。そのようなキャリヤ分子としては、宿主細胞に対して特異的な抗体またはレセプターリガンド、すなわち、宿主細胞に結合したレセプターと反応し得る分子である。
この分子として本発明で使用できるものには下記のものがある:(1)免疫刺激剤をコードした遺伝子で、クラスI組織適合性遺伝子、クラスII組織適合性遺伝子、バクテリア遺伝子(ミコバクテリア(PPD)遺伝子および熱ショックタンパク質をコードした遺伝子など)、ウイルス性グリコプロテイン(水胞性口内炎ウイルスGタンパク質、インフルエンザ血球凝集素およびヘルペスウイルスグリコプロテインβなど)をコードする遺伝子、マイナー組織適合性抗原、リゾチームや牛血清アルブミンのような外部タンパク質、およびEIA、P53(変異種)ならびにtaxを含む発ガン性遺伝子;(2)免疫および成長刺激剤/抑制剤で、インターロイキン−2(IL−2)、IL−4、3、6または8を含む刺激剤のような分化の誘発剤、TNF−αまたはβ、TGF−β(1、2または3)、IL−1のような抑制剤/誘発剤、溶解性成長因子レセプター(PDGF,FGFレセプター)、成長因子またはレセプターに対するリコンビナント抗体、成長因子の相似体(PDGF,FGF)、インターフェロン(α、βまたはγ)および粘着性分子;または(3)トキシンまたは逆選択性マーカー(チミジンキナーゼ、ジフテリアトキシン、百日咳トキシンまたは薬剤感受性タンパク質など)。
このDNA/RNAシーケンスは患者として同種のソースから入手するのが望ましいが、これは絶対的に要求されることではなく、本発明ではこの実施態様において、患者の異なったソースからから得たDNAシーケンスを使用する方法を提供している。本発明の好ましい実施態様では、免疫刺激剤をコードした遺伝子およびトキシンまたは逆選択性マーカー(上記の(1)および(3)に対応するもの)は、患者が属する種とは異なった種から選ばれている。免疫および成長刺激剤/抑制剤(上記の(2)に対応するもの)は、もう1つ別の好ましい実施態様に基づいて、患者の種と同一の種から得られた遺伝子を採用している。
本発明をAIDSの治療に使用する場合、溶解性CD4またはその誘導物をコードする遺伝子材料を使用することができる。遺伝子的な疾患の治療の場合(たとえば成長ホルモン欠乏)にはその必要とする物質をコードする遺伝子的材料(たとえばヒト成長ホルモン)を使用することができる。これらすべての遺伝子材料は、本分野の技術に習熟した当業者ならば容易に入手することができる。
もう1つの別の実施態様において、本発明は患者の病気を治療するキットを提供するが、このキットはカテーテル、ならびに酵素または弱性の洗浄剤のいずれかを含み、カテーテルは血管の中に挿入できるようになったものであり、かつ、前記血管の中に挿入できるようになったバルーンエレメントを備え、かつ、カテーテル部を血管の中に正しく保持できるように、血管の壁に対して膨らませることができるようになっている主カテーテル部、ならびに主カテーテル部に備えられた血管の中に溶液を供給するための手段、を含み、酵素または弱性の洗浄剤を含んだ溶液は生理学的に許容される溶液である。この溶液は、ディスパーゼ、トリプシン、コラゲナーゼ、パパイン、ペプシン、キモトリプシンなどの蛋白分解酵素を含む。弱性の洗浄剤として、この溶液はNP−40、Triton X100、デオキシコール酸塩、あるいはSDSなどを含む。
あるいは、このキットには生理学的に許容される溶液として、ヘパリン、ポリ−L−リジン、ポリブレン、デキストランサルフェート、ポリカチオン性物質のような薬剤、または二価の抗体を含んだものでもよい。この溶液はまた、ベクター類または細胞類(正常または形質転換されたもの)を含んでもよい。さらに別の実施例では、このキットはカテーテルおよび酵素または弱性の洗浄剤を含んだ溶液と、ヘパリン、ポリ−L−リジン、ポリブレン、デキストランサルフェート、ポリカチオン性物質のような薬剤、または二価の抗体を含んだ溶液(この溶液にはベクター類または細胞類を含んでもよい)の両方を含んだものでもよい。
このキットは、1個のバルーンと中央の遠位灌流口を備えたカテーテル、ならびに特定の器官への細胞の導入、またはキャピラリーベッドへのベクターの導入、あるいはこのキャピラリーベッドによって灌流される特定の器官や組織への細胞の導入を行うのに許容される溶液を含んでもよい。
あるいは、このキットは、間隔を開けて設けられ、血管に挿入できるようにした2つのバルーンエレメントを有し、血管の中に1つのチャンバ(室)を形成できるように、また主カテーテルを所望の位置に保持できるように、この両方のエレメントとも血管の壁に対して膨らませることができるようになっている1つの主カテーテル部を含んだものでもよい。この場合、チャンバへ溶液を供給する手段は、2つのバルーンの間に設ける。このキットは血管の中へ溶液を送り出すための複数の出口手段を備えたカテーテルとしてもよい。
このように、本発明は患者の疾患を治療する方法として、器官の壁に付着している細胞、または患者のこの器官から灌流される細胞に外因性の治療性タンパク質を発現させようとするもので、このタンパク質が疾患を治療し、または診断目的に有用なものとなる。本発明方法は虚血性疾患、血管運動系疾患、糖尿病、悪性疾患、AIDS,または遺伝子的疾患の治療に用いることができる。
本発明では、外因性治療性タンパク質として、tPAまたはその修飾物、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、酸性フィブロブラスト成長因子、塩基性フィブロブラスト成長因子、腫瘍壊死因子α、腫瘍壊死因子β、形質転換成長因子α、形質転換成長因子β、心房性ナトリウム排泄増加因子、血小板から誘導された成長因子、エンドセリン、インスリン、ジフテリアトキシン、百日咳トキシン、コレラトキシン、溶解性CD4またはその誘導物、および成長ホルモンなどを疾患治療のために使用できる。
本法では診断効果を持つ外因性タンパク質もまた使用できる。たとえば、β−ガラクトシダーゼのようなマーカープロテインを細胞遊走をモニタするために使用できる。
外因性の治療性タンパク質を発現させる細胞類は内皮細胞類が好ましい。
本発明のその他の特性は以下の参考実施例の説明を通して明らかになると思われるが、これらの実施例は本発明の説明のためであって、本発明を限定するものではない。
下記の報告データは、内皮細胞の移植および遺伝子移植の可能性を示すものであり;内皮細胞はカテーテル法により安定的に動脈壁にin situ移植され、リコンビナントマーカープロテイン、β−ガラクトシダーゼを生体内で発現している。
ブタのじゅく腫形成はヒトのそれと近似性があるので、動物モデルとして、近交のブタ系列、ユカタン・ミニピッグ(Charles River Laboratories,Inc.、ウィルミントン、マサチューセッツ州)が選ばれた(1)。最初の内皮細胞系は、8カ月の雌ミニピッグの内部頸静脈から確立された。この種の内皮細胞としての同定は、この細胞群が組織培養においてブタの内皮に特有の成長特性および形態学的特性を示したことにより確認された。この内皮細胞はまた、線維芽細胞やその他の間葉細胞群(2)とは対照的に、アセチル化低密度リポタンパク質(AcLDL)のレセプターを発現した。
ACLDLレセプター発現の分析を行ったところ、蛍光ACLDLの取り込みで判断して、培養した細胞の99%以上がこのレセプターを含んでいた。
2系列の独立したβ−ガラクトシダーゼ−発現内皮細胞系を、ネズミの両栄養性β−ガラクトシダーゼ−形質導入レトロウイルスベクター(BAG)で感染させた後単離した。このベクターは複製欠陥でβ−ガラクトシダーゼおよびネオマイシン耐性遺伝子(3)の両方を含んだものである。G−418の存在下での成長能力の点から、このベクターを含んだ細胞種が選ばれた。組織化学的染色により、選ばれた細胞群の90%以上がβ−ガラクトシダーゼを合成した。また、これらの遺伝子的に変性された細胞群の内皮特性も蛍光ACLDL取り込みの分析で確認された。BAGレトロウイルスによる感染も、さらにサザン・ブロット分析により立証されたが、それによれば完全なプロウイルスDNAがほぼ1ゲノムあたり1コピー存在することが明かとなった。
この近交の同系種からとられた内皮細胞群は、2匹以上のミニピッグの研究に供することができ、9項目の異なった実験課題で試験を行った。通常の麻酔処理のもとで、大腿および回腸動脈を露出し、カテーテルを器官に導入した(図1)。動脈壁の内膜組織を、少し膨らませたバルーンカテーテルを強制的に器官内に通し、機械的に裸化した。動脈をヘパリン化した生理食塩水で洗浄し、中性プロテアーゼおよびディスパーゼ(50U/ml)とともに培養した。これにより、残っていた管腔内皮細胞も除去された。残った酵素は、カテーテルバルーンをしぼませ器官の区画中を血液が流れるようにした後、血漿中でα2グロブリンにより急速に不活化した。β−ガラクトシダーゼを発現した培養内皮細胞群を、2バルーンで中央に1個の点滴注入口を持った特別にデザインされた(図1)動脈カテーテル(USCI,Billerica,マサチューセッツ州)を使用して導入した。
これらのバルーンが膨らまされた時、動脈の中に保護されたスペースができ、その中に点滴注入口を通して細胞が注入される(図1)。β−ガラクトシダーゼを発現するこれらの内皮細胞群は、裸化された器官への付着を容易にするため30分間培養される。そのあとカテーテルが取り除かれ、動脈支流が結さつされ、切開部が閉じられた。
β−ガラクトシダーゼ−発現内皮を接種された動脈部分を、2−4週間後取り除いた。X−galクロマゲンを用いた染色の後の動脈標本の全体検査で、複数の青色着色区域が見られ、感染していない内皮を植え付けた動脈との比較において、β−ガラクトシダーゼ活性を示している。光学顕微鏡では主として実験的に植え付けた器官の内膜の内皮細胞にβ−ガラクトシダーゼ着色が記録されている。
対照的に、β−ガラクトシダーゼを含まない内皮細胞を受け取ったコントロール区画では同様の着色はなんら認められなかった。β−ガラクトシダーゼ着色は、しばしば深部の内膜組織に認められ、これは植え付けた内皮が以前に損傷した器官壁に捕らえられるか、または移入することを示唆している。局所的な血栓症が最初の2つの実験課題で観察された。この複雑化は、その後の研究で内皮細胞移植手順に先だってアセチルサリチル酸を投与し、また接種の時にヘパリン抗凝血剤を使用することによって抑えることができた。血栓が形成されるケースでは、β−ガラクトシダーゼ着色が器官壁から血栓の表面に至る範囲の内皮細胞に見られた。
生体での遺伝子移植に関する第1の関心は、遺伝子的に生成された細胞からの、複製能力のあるレトロウイルスの生産である。これらのテストにおいては、複製欠陥のレトロウイルスを使用することで、この問題を最小にすることができた。これらの細胞系統では、試験管中で20回継代させた後でもヘルパーウイルスはまったく検出されなかった。感染の確度が高いことと宿主細胞ゲノムに対する同化が安定しているという理由で欠陥ウイルスを使用したが、遺伝子移植におけるこのアプローチはその他のウイルスベクターでも利用可能である。
2番目の関心は、生体中におけるリコンビナント遺伝子の発現寿命に関するものである。現在の研究では、器官の中での内皮細胞のβ−ガラクトシダーゼ発現は血管への導入後6週間までは安定している。
これらのテストは、遺伝子的に変換された内皮細胞は、動脈カテーテル法によってユカタン・ミニピッグの血管壁に導入可能であることを示している。したがって本法は、遺伝子的に変換された内皮をベクターとして用い、血管系の疾患の局所的な生化学的治療に使用可能である。
バルーンによる血管形成とか病気の器官への移植組織の挿入といった血管系疾患における現在の介入的な方法がもたらす大きな合併症は、アテローム硬化プラークの破壊ならびに局所的な組織の外傷部位での血栓形成(5)である。部分的には、内皮細胞損傷がこの合併の媒介となっている(6)。本データは、介入が存在するときに局所的な血栓症を抑えるために、遺伝子的に変換された内皮細胞の使用が可能であることを示している。
この手法は、不安定な狭心症や心筋梗塞を含めて、その他の虚血性疾患治療にも使用可能である。たとえば、組織プラスミノーゲンアクチベーターやウロキナーゼの遺伝子を発現する細胞を導入することで抗血栓効果を得ることができる。この手法はまた、慢性的な組織虚血症の治療にも有用である。たとえば、重症の虚血組織、たとえば心筋、に側副枝血管の生成を刺激するための脈管形成または成長因子(7)を形成させるのがそれである。最後に、全身的な先天性疾患のための体細胞の遺伝子取り替えも、この内皮細胞遺伝子移植手法を応用すれば可能である。
本発明のもう一つの方向は、リコンビナント遺伝子を使って、生体内で動物の細胞の形質転換をおこなうことにより、動物の免疫システムを調節する方法に関する。この形質転換は、非部位特異的または全身的に行うか、あるいは部位特異的のいずれかで行われる。もし形質転換が全身的に行われるかまたはその免疫システムの特異性を与える部位以外の所、たとえば、胸腺、で行われる場合には、リコンビナント遺伝子がコードする分子に動物が感作されるように、その免疫システムを調節する。あるいは、もし形質転換が部位特異的に行われ、かつその免疫システムの特異性を決定する部位で局部的、たとえば、胸腺、に行われる場合には、リコンビナント遺伝子がコードする分子を動物が許容するように、その免疫システムを調節する。
”感作される”という用語は、その免疫システムが、生体内形質転換の方が形質転換前にくらべて、DNAでコードされたその分子に対して強い反応を示すことを意味する。
”許容する”という用語は、その免疫システムが、形質転換後の方が形質転換前にくらべて、リコンビナント遺伝子にコードされた分子に対して弱い反応を示すことを意味する。このようにして、免疫システムを調節して、DNAにコードされた分子に対して、抵抗か許容のいずれかを与えるようにすることができる。
抵抗を与えるのが望ましい分子の例としては次のものがあげられる:細胞表面分子、たとえば、腫瘍抗原(がん胎児性抗原)、原生動物抗原(ニューモシスティス)、ウイルス性抗原(HIVgp120およびgp160、H.インフルエンザ抗原、およびHBs抗原)、ライム病抗原、細菌性抗原、および移植抗原(クラスIまたはII)、rasまたはその他の発ガン性遺伝子でerb−Aまたは、neuを含む;細胞質タンパク質、たとえばraf癌遺伝子、src癌遺伝子、およびabl癌遺伝子;核タンパク質、たとえばElA癌遺伝子、変異p53癌遺伝子、tat、tax、rev、vpu、vpx、肝炎コア抗原、EBNAおよびウイルス遺伝子;および分泌タンパク質、たとえばエンドトキシン、コレラトキシン、TNF、および破骨細胞活性化因子。
抵抗(許容)を与えるのが望ましい分子の例としてはつぎのものがあげられる:細胞表面分子、たとえば、成長因子レセプター、インスリンレセプター、甲状腺ホルモン、移植抗原(クラスIまたはII)、血液型抗原、およびLDLレセプター;細胞質タンパク質、たとえばチトクロームP450、ガラクトシルトランスフェラーゼ、ジストロフィン、ネオマイシン耐性遺伝子、および細菌性熱ショックタンパク質;核タンパク質、たとえば網膜芽細胞腫およびトランスドミナントrev;および分泌タンパク質、たとえば小人用成長ホルモン、糖尿病用インスリン、アデノシン脱アミノ酵素。
リコンビナント遺伝子の中の核酸、DNA,RNAまたはその誘導体の起源はどのようなものでもよい。すなわち、核酸は天然のソースから分離されたものでも、合成したものでもよい。
リコンビナント遺伝子は動物の細胞の中に従来からあるベクターを使って導入される。それらのベクターとしては、ウイルス性ベクター、DNAまたはRNAに複合化されたカチオン性の脂質(DNAまたはRNA/リポソーム)およびDEAE、デキストラン、およびポリブレンなどのDNAまたはRNAとポリカチオンの複合体がある。
上述のようにリコンビナント遺伝子は、リコンビナント遺伝子にコードされた分子に抵抗を与えるために、細胞の中に部位特異的に導入される。適当な部位としては、たとえば、血管系またはいずれの特定組織または器官の内皮細胞または細網内皮細胞がある。形質転換に使用するベクターおよびリコンビナントを含んだ製剤の形態は形質転換を行う組織によって異なったものとなる。内皮細胞を転換する場合の適当な製剤についてはこの明細書の他の箇所で述べている。さらに、経口またはその他の投与方法(たとえば、内視鏡法)に適する製剤は粘膜抵抗を与えるために使用できるであろう。そのような製剤には、ベクターおよび遺伝子以外に、洗浄剤、ゼラチン、カプセルまたはその他の供給用ビヒクルなどを、劣化防止および粘膜表面への供給を容易にするために含ませることができる。
あるいは、リコンビナント遺伝子は部位特異的に、免疫システムの特異性を決定する部位に導入される。胸腺はそのような部位である。(A.M.Posselt,他、Science、vol.249,p.1292(1990)参照)。このように、リコンビナント遺伝子を部位特異的に胸腺に導入してやると、その免疫システムは遺伝子にコードされた分子を許容するように調節される。このようにして、移植の拒絶は抑制される。部位特異的に腫瘍を転換するために使用した上記と同じ製剤と手法を、胸腺にリコンビナント遺伝子を導入するのにも使用できる。特に、転換のための製剤は胸腺または腫瘍部あるいは胸腺や腫瘍部の血液供給系に直接注入することができる。
本法は、どのような動物、たとえば鶏;または牛、馬、猫、犬、猿、キツネザルあるいは人間などのほ乳動物にも適用することができる。
リコンビナント遺伝子をリポソームを使って導入する場合、最初にインビトロでDNAに対する最適値を決定するのが望ましい:特定の形質転換すべき細胞についての細胞死亡および転換効率の係数としての脂質、そしてこれらの数値をインビボでの転換に使用するための、脂質比およびDNAの絶対濃度。これらの数値のインビトロでの決定は、本明細書の実験の部で述べる手法を使用すれば簡単にできる。
本発明のもう一つの方向は、動物の細胞にリコンビナント遺伝子を生体内で全身に導入するためのキットに関する。そのようなキットには、脂質などのキャリヤの最適数量、および核酸、および/または内視鏡またはシリンジなどの供給の手段、が含まれるであろう。このキットにはまた、形質転換用製剤の投与のための説明も含まれるであろう。キャリヤおよび核酸は凍結乾燥され、別々にパッケージされるかあるいはプレミックスすることもできる。このキットにはさらに、キャリヤおよび核酸の複合体を最適に再構成するための溶液が含まれ、これらを生体の細胞に効率的に供給するための手段となる。そのような溶液には、緩衝液、糖類、塩類、タンパク質類、および洗浄剤など1つまたはそれ以上の成分を含ませることができる。
発明を一般的に説明してきたが、本明細書中に提供しているいくつかの実施例を参照することによってさらに理解を深めることができると思われる。ただし、これらは説明のためのものであって、特に断らないかぎり本発明を限定するものではない。
実験の部
A.正常なブタ内皮細胞およびβ−ガラクトシダーゼが導入されたブタ内皮細胞中でのACLDLレセプター発現の分析。
ユカタン・ミニピッグから採取した内皮細胞系で、BAGレトロウイルスまたは3T3線維芽細胞コントロールで感染させた2つのサブ系について、蛍光標識したAcLDLを用いたAcLDLレセプターの発現を調べた。
中性のプロテアーゼ ディスパーゼ(8)を用いて、外部頸静脈から内皮細胞を採取した。切除した静脈部分をディスパーゼ(50U/ml、Hanksのバランス塩溶液中)で満たし、30℃で20分間インキュベートした。この方法で得た内皮を、胎児子ウシ血清(10%)、50μg/mlの内皮細胞成長補助液(ECGS)、およびヘパリン(100μg/ml)を添加した培養液199(GIBCO,Grand Island,ニューヨーク州)の中で保管した。これらの細胞はBAGレトロウイルスに感染させ、G−418耐性のあるものを選んだ。この細胞種を、(1,1’−ジオクタデシル−3,3,3’,3’−テトラメチルインドカルバシアニン・パークロレート)(Dil)AcLDL(Biomedical Technologies,スタウトン、マサチューセッツ州)(10μg/ml)とともに4−6時間、37℃で培養し、0.5%グルタルアルデヒドを含んだ燐酸緩衝生理食塩水で3回洗浄した。位相差および蛍光顕微鏡で細胞を視覚化した。
B.カテーテルによる内皮細胞の導入法。
内皮細胞の点滴注入にはダブルバルーンカテーテルを使用した。このカテーテルは近位および遠位のバルーンを有し、それぞれ長さ6mm,幅5mm、バルーンの間の距離は20mmである。カテーテルの中央部には点滴注入口につながる2mmの孔がある。近位および遠位のバルーンによって中央にスペースができ、器官(血管)の特定の区画に注入口を通して感染させた細胞の点滴注入ができるようになっている。カテーテルによる細胞導入の図解は、図1および図2を参照されたい。
動物の管理は、”Principles of Laboratory Animal Care”および”Guide for the Care and Use of Laboratory Animals”(NIH Publication No.80−23,1978年改訂)に準拠した。雌のユカタン・ミニピッグ(80−100kg)をペントバルビタール(20mg/kg)で麻酔処理し、挿管し、機械的換気を行った。これらの個体の回腸および大腿動脈を無菌手術で露出させた。遠位の大腿動脈を穿刺し、ガイドワイヤを使ってダブルバルーンカテーテルを回腸動脈に入れた。外部回腸動脈を確認し;近位のバルーンを少し膨らませ、内皮を機械的に裸化させるために遠位および近位を通過させた。ついで、カテーテルの中央スペースが裸化された内皮の位置にくるように調整して置き、両方のバルーンを膨らませた。裸化された区画をヘパリン化した生理食塩水で洗浄し、残留付着している細胞をディスパーゼ(20U/ml)を10分間点滴注入し除去した。裸化された器官(血管)はさらにヘパリン溶液で洗浄し、BAG感染内皮細胞を30分間点滴注入した。その後、バルーンカテーテルを取り外し、血流を順行状態に戻した。当該器官部分を2−4週間後に切除した。その動脈の1部を0.5%グルタルアルデヒド溶液に5分間入れ、燐酸緩衝生理食塩水に入れて保存し、他の部分を切断細分のためにパラフィンブロックで覆った。β−ガラクトシダーゼ発現のレトロウイルスの存在が標準組織化学手法により確認された(19)。
C.インビトロおよびインビボの内皮細胞の分析。
β−ガラクトシダーゼ活性は組織化学着色法により下記のものについて記録された。(A)ユカタン・ミニピッグから取り出された一次内皮細胞、(B)BAGレトロウイルスベクターに感染させたサブ系、(C)正常な動脈のコントロール区画、(D)BAGレトロウイルスベクターに感染させた内皮を点滴注入した動脈の区画、(E)正常コントロール動脈の顕微鏡区画、および(F)BAGレトロウイルスベクターに感染させた内皮を点滴注入した動脈の顕微鏡区画。
組織培養の中の内皮細胞は、組織化学的着色の前に0.5%グルタルアルデヒドの中で固定された。インビトロおよびインビボにおける感染された内皮細胞を確認するために、E.coliβ−ガラクトシダーゼタンパク質の酵素活性を利用した。β−ガラクトシダーゼ形質導入Mo−MuLVベクター(2)、(BAG)は、Dr.Constance Cepkoの好意により提供された。このベクターはワイルドタイプのMo−MuLV LTRをβ−ガラクトシダーゼ遺伝子のプロモーターとして使用している。Tn5ネオマイシン耐性遺伝子にリンクしたサルウイルス40(SV−40)早期プロモーターが薬剤G−418に対する抵抗性を与えるが、これをβ−ガラクトシダーゼ遺伝子の下流に挿入し、レトロウイルスを含んだβ−ガラクトシダーゼ発現細胞を選択するためのマーカーとさせる。この欠陥レトロウイルスはフィブロブラストψam細胞(3,10)から準備し、ダルベッコの改変イーグル培地(DMEM)および10%子ウシ血清の中で保存する。細胞はトリプシン化の後、一週間に2回継代させた。細胞に、上澄み液(力価104−105/ml、G−418耐性8コロニー)を2/3交会で加え、10%子ウシ血清を加えたDMEM中で12時間、37℃、5%CO2、8μg/mlのポリブレンの存在下で、培養した。ウイルス性の上澄み液を取り除き、細胞を10%胎児子ウシ血清、ECGS(50μg/ml)、を加えた培養液199、さらにG−418(50%ラセミ混合体0.7μg/ml)の中での選別に先立って、24から48時間内皮細胞調整培養液(20%)で、保存した。
G−418耐性細胞を単離し、標準の組織化学的着色(9)を用いて、β−ガラクトシダーゼ発現の分析を行った。β−ガラクトシダーゼ酵素を安定的に発現している細胞を連続培養しその後の必要に備えた。冷凍アリコートは液体窒素中で保存した。
D.生体内遺伝子移入による悪性疾患の免疫療法。
H−2Ks遺伝子を含有するレトロウイルスベクターを調製した。CT26細胞がインビトロで感染され、G418耐性のものが選ばれ、蛍光活性化細胞選別(FACS)により分析された。形質導入されたCT26細胞は、感染されていないCT26細胞ならびに他のレトロウイルスベクターで感染されたものより、高い平均蛍光強度を示した。H−2Ksを発現する106CT26細胞をこの抗原に感染されたBALB/Cマウス(H−2d)に皮下注射で与えた時、無調整のCT26(H−2d)腫瘍系統では常にこの投与量で腫瘍が発生するのとは対照的に、8週間腫瘍の発生は見られなかった。H−2Ksに対する免疫反応は従って、この抗原をもったCT26細胞に保護を与えた。しかしCT26H−2KsとCT26を同時接種したときは、腫瘍の成長がみられ、これはH−2Ksが、変性した細胞にだけ感受性を与えることを示唆している。
H−2Ksを成長中のCT26腫瘍に導入したときに防御効果があるかどうか調べるために、リコンビナントH−2Ksリポーターまたはβ−ガラクトシダーゼ遺伝子を、DNA/リポソームまたはレトロウイルスベクターのいずれかとともに、腫瘍に導入した。腫瘍カプセル(直径0.5−1cm)を外科的に露出し、多針注射(2−10)を実質組織に与えた。β−ガラクトシダーゼリポータープラスミドとともに、リコンビナント遺伝子発現は、DNA/リポソームまたはレトロウイルスベクターを腫瘍内に注射した後、容易に検出された。
H−2KsDNA/リポソーム複合体またはH−2Ksレトロウイルスベクターの腫瘍内注射を受けたマウスでは、PCRによって腫瘍の中あるいは時としてその他の組織の中にリコンビナントDNAがPCRによって検出された。その他の器官に検出された時は、病理学的には炎症または器官毒性の徴候はなんら認められなかった。しかしながら、これらの動物においては、リコンビナントH−2Ksタンパク質に対する免疫反応は明白であった。H−2Ks由来のβ−ガラクトシダーゼ形質導入腫瘍由来ではないリンパ球はレトロウイルスベクターによってもたらされたかあるいはリポソームによってもたらされたかを問わずに、H−2Ksに対する細胞溶解反応を示した。さらに重要なことは、そのH−2Ks由来のβ−ガラクトシダーゼ形質導入動物由来ではないリンパ球は無変性のCT26細胞を認識し溶解したことであり、これはこの刺激が遺伝子的に変性されていない腫瘍細胞に対する免疫反応を誘発したことを示している。
H−2Ksに対する免疫反応の防御効果を評価するために、生体中の腫瘍の成長を定量した。事前にH−2Ksの感作を受けていない動物では、H−2K8で形質導入された4つの腫瘍のうち1つで腫瘍成長の減衰が完全ではないが見られた。対照的に、無変性(n=4)またはβ−ガラクトシダーゼ形質導入のコントロール(n=4)では抗腫瘍効果は見られなかった。これらの腫瘍は最初の注射の時点ですでに大きなものであり、その後最初の免疫反応が出てくるまでにも成長し続けていたため、マウスをCT26H−2K8腫瘍細胞によって事前に免疫処理したり、ベクターの早期および/または頻繁な注射などによって抗腫瘍反応が適正になるように工夫した。12および32日目に、H−2Ksまたはβ−ガラクトシダーゼDNA/リポソームベクターの腫瘍内注射によって、腫瘍は形質導入された。H−2Ksリポソーム複合体による処理によって、生存率が改善され、腫瘍の成長が減衰した。対照的に、β−ガラクトシダーゼ形質導入腫瘍では注射をしていないコントロールとの間に成長率の差は見られなかった。完全な腫瘍の退縮は2匹のマウスにおいて、注射の回数を増やすことと早い段階でH−2Ksを腫瘍に与えることにより達成された。コントロール区の動物では腫瘍が成長し続け、35日以降の生存はなかったことから、この処理は防御効果があった。
E.免疫システムの調節。
カチオン性の脂質およびプラスミドの注射に対する反応は、BALB/Cマウス(6−12週令)への静脈内注射により確認された。最初の実験では、H−2Ks分子をコードした遺伝子を尾静脈注射により導入した。2から4週間後、脾臓細胞を取り出し、溶解性T細胞反応を弱める能力を分析した。これらの細胞を51Cr目的細胞(H−2Ksを発現しているCT26細胞)を使用してテストした結果、顕著な細胞溶解性が観察された。これは、コントロールベクターであるβ−ガラクトシダーゼを注射した動物では見られなかったものである(図3参照)。目的細胞の25%までが溶解しており、効果細胞:目的細胞比は25:1であった。
この特別の溶解性T細胞反応に加えて、発現ベクタープラスミドにコードされた遺伝子の血清学的または抗体反応も調査した。HIVのgp160分子をコードしたプラスミドを注射したとき、処理をマウスでは抗体反応が出た。β−ガラクトシダーゼを含んだカチオン性脂質を注射したコントロールのマウスの場合と対照的に、gp160プラスミドを含んだカチオン性の脂質を注射したマウスでは、この分子のgp160およびgp120の形に対して抗体反応が見られることが、ウェスタン・ブロット分析で示された(図4参照)。これらの結果は、カチオン性脂質/DNAの全身的投与が、外部の病原菌に対して細胞媒介または抗体媒介の免疫性をうまく誘発させるのに使用できることを示している。
F.最適形質移入条件の決定。
(1)プラスミドの構築
ラウスサルコマ肉腫ウイルスLTS(RSV−β−gal)(Norton and Coffin、Mol.Cell.Biol.、5(2)、281−190、1985)のコントロールのもとで、E.coli lacZを含んだプラスミドを、ブタの一次内皮およびヒーラー(HeLa)細胞への形質移入に使用した。さらに、プレプロエンドセリン−1 5’−フランキングDNA(−1410から+83)(Wilson他、Mol.Cell.Biol.、10(9)、4854−4862、1990)のコントロールのもとで、lacZ遺伝子を含んだプラスミドを、内皮細胞への形質移入に使用した。生体での毒性分析に、RSV−β−galプラスミド、およびH−2KsマウスMHCクラスI遺伝子をコードするcDNAを含んだPLJベクターから取り出されたプラスミドを使用した。
(2)細胞培養、形質移入分析、およびインビトロ毒性
ユカタン・ミニピッグから取り出された一次内皮細胞(YPE細胞)を、10%FBS、2mM l−グルタミン、50U/mlペニシリン、および5μg/mlストレプトマイシンを添加した199培養液(M199)で培養した。ヒーラー細胞は、5%FBS、2mM l−グルタミン、50U/mlペニシリン、および5μg/mlストレプトマイシンを添加したダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)の中で保存した。DNAリポソーム混合体は、ポリスチレンチューブの中で、0.2mlの血清を含まない溶媒またはリンゲルの乳酸溶液に2.5から25μM脂質濃度のDOPE/DC−cholを加えて準備した。ゆるやかに攪はんしたあと、その溶液を25−20分間室温で放置した。形質移入のために、細胞を60mm組織培養皿で75%交会またはそれ以上で成長させた。細胞は、血清を含まない溶媒またはリンゲルの乳酸溶液で2回洗浄し、0.5mlの同じ溶液中に入れた。DNAリポソーム溶液(0.2ml)を、ゆるやかに攪はんしながら、ゆっくり細胞に加え、最終的に0.7mlの容量にした。これによって、DNA濃度は0.7から7μg/ml(13−130nM)の間となり、脂質濃度は7−70μMとなった。1−5時間形質移入を進行させ、そのあと細胞を上記の添加溶媒中に入れた。24−48時間の形質移入の後、形質移入細胞を確認するために、E.coliβ−ガラクトシダーゼタンパク質の酵素活性を利用して、X−galクロマゲン染色を行った。インビトロ毒性は、細胞変性効果またはトリパンブルー排除法で評価した。
(3)動物の検討
静脈注射用として、インビトロの形質移入を検討するために、前記のようにDNAリポソームを0.2mlの血清を含まないM199または乳酸化リンゲル溶液に入れたものを用意した。15−20分の培養の後、この混合物を0.7mlに希釈し、この希釈液0.1−0.2mlを直ちに雌、成人のBALB/cマウスの尾静脈に注射した。血液は注射前および注射後9−11日に採取され、血清化学分析が行われた。注射後2−3週間で腎臓、肝臓、肺、心臓、および脳が取り出され、前記のように組織分析およびPCR DNA増殖分析に供された。CT26細胞の主要細胞内注射(Fearon他、Cell、60、397−403)およびその分析も前記のプロトコールにしたがって実施された。
(4)結果
DNA/リポソームの形質移入のための最適条件および毒性を、まず最初にインビトロで確認した。インビトロにおいて毒性を示さない最大の形質移入を得るために、カチオン性脂質に対するDNAの比、DNAまたは脂質の絶対濃度、DNAおよびカチオン性脂質の混合条件について検討した。カチオン性脂質の調合液は2つの化合物の処方品で、ジオレイル・フォスファチジル・エタノールアミン(DOPE)およびコレステン−3−β−オール 3−ウレサニル−N’,N’−ジメチルエチレンジアミン(DC−chol)を含んだものである。この薬剤のインビトロの形質移入効率は、いくつかの細胞系列において、リポフェクチン(商標)(BRL)と同等かそれ以上であった。内皮細胞(これは形質移入が難しい典型的なもの)、およびヒーラー細胞(これは種々の手法で簡単に形質移入が可能である)、の形質移入を、インビトロで確認した。
内皮細胞の形質移入の最適条件を決定するため、最初にDNA濃度は一定にし、脂質の濃度を変えたものを使用した。最高の形質移入効率は0.7μg/mlのDNAおよび21μMのDOPE/DC0chol脂質を使用したときに見られ、脂質濃度が高くなったり、または低くなると形質移入された細胞の数が急激に減少した。次に、脂質濃度を一定に保ち、DNA濃度を変えた。この分析においてDNA濃度に対する同様の傾向、すなわちDNA濃度の増加、0.4μg/mlという低濃度でも、に対応して形質移入される細胞の数が著しく減少することが明らかとなった。これらの結果は、DNAの脂質に対する比が形質移入の最高効率に重要であることを示しており、またそれぞれの成分の絶対濃度もまた形質移入の効率決定に重要であることを示している。DNAおよび脂質の最適濃度、すなわちDNA0.7μg/ml(13nM)、DOPE/DC−chol21μM、を越えた増加は、生育可能な細胞の数を減らし、かつ生き残った細胞の形質移入効率を上げるものではなかった。35μM以上の脂質濃度は、形質移入されていないコントロールと比較して生育可能な細胞数を50%減少させ、一方、最適濃度のDNA0.7μg/mlおよび脂質21μMにおいては、培養5時間以上では生育可能細胞数に対する影響はなかった。
異なった細胞のタイプの形質移入における最適濃度を比較するために、ヒーラー細胞でも形質移入を実施した。この場合、DNAと脂質の最適比は多少異なることが観察された。形質移入効率のピークは、脂質濃度は内皮細胞の場合と同じ(21μg/ml)であったが、DNA濃度では異なり少し低いところであった。DNA濃度1.4−4.2μg/mlでは同様に効果的であった。再び、DNAと脂質の比は変えないで、それぞれの濃度を1/3に減らしたところ、ごく僅かの細胞だけが形質移入され、形質移入細胞数を最高にするためにはDNAと脂質の比ならびにそれぞれの成分の絶対濃度の両方が重要であることが示された。もし、ヒーラー細胞が>80%またはそれ以上の交会で形質移入される場合、35μM迄の脂質を使用しても毒性はなかった。細胞が低い飽和濃度で形質移入されたときは、脂質7μMの低濃度でも形質移入されていないコントロールと比較して、細胞の生育可能性は著しく減少した。これらの結果は、形質移入の最適条件および毒性は細胞の系統によって多少異なることを示している。
リポソームの準備におけるもう1つの変数は、カチオン性脂質とDNAの複合体を作るために用いられる溶液の組成である。分析したいくつかの溶媒溶液、M199、McCoys、OptiMEM、またはRPMI媒体においては、形質移入効率ならびに毒性の点において実質的な差異はなかった。しかし、標準の乳酸化リンゲルを使用した場合、形質移入効率が著しく向上した。形質移入された細胞の数は、血清を含まない媒体に比べて、3倍以上増加した。ただし、長時間の培養(≧2時間)では、いくつかの細胞系統において細胞生育性の低下が見られた。
引用刊行物
1. J.S;Reitman,R.W.Mahley,D.L.Fry,Atherosclerosis 43,119(1982).
2. R.E.Pitos,T.L.Innerarity,J.N.Weinstein,R.W.Mahley,Arteriosclerosis 1,117(1981);T.J.C.Van Berkel,J.F.Kruijt FEBS Lett.132,61(1981);J.C.Voyta,P.A Netland,D.P.Via,E.P.Zetter,J.Cell.Biol.,99,81A(要約)(1984);J.M.Wilson,D.E.Johnston,D.M.Jefferson,R.C.Mulligan,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,84,4421(1988).
3. J.Price,D.Turner,C.Cepko,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,84,156(1987).
4. R.Mann,R.C.Mulligan,D.Baltimore,Cell,33,153(1983);C.L.Cepko,B.E.Roberts,R.C.Mulligan,Cell 37,1053(1984);M.A.Eglitis,W.F.Anderson,Biotechniques 6,608(1988).
5. S.G.Ellis,G.S.Roubin,S.B.King,J.S.Douglas,W.S.Weintraub et al.,Circulation 77,372(1988);L.Schwartz,M.G.Bourassa,J.Lesperance,H.E.Aldrige,F.Kazim,et al.,N.Engl.J.Med.318,1714(1988).
6. P.C.Block,R.K.Myler,S.Stertzer,J.T.Fallon,N.Engl.J.Med.305,382(1981);P.M.Steele,J.H.Chesebro,A.W.Stanson,Circ.Res.57,105(1985);J.R.Wilentz,T.A.Sanborn,C.C.Handenschild,C.R.Valeri,T.J.Ryan,D.P.Faxon,Circulation 75,636(1987);W.McBride,R.A.Lange,L.D.Hillis,N.Engl.J.Med.318,1734(1988).
7. J.Folkman,M.Klagsbrun,Science 235,442(1987);S.J.Leibovich,P.J.Polverini,H.Michael Shepard,D.M.Wiseman,V.Shavely,N.Nuseir,Nature 329,630(1987);J.Folkman,M.Klagsbrun,Nature 329,671(1987).
8. T.Matsumura,T.Yamanka,S.Hashizume,Y.Irie,K.Nitta,Japan.J.Exp.Med.45,377(1975);D.G.S.Thilo,S.Muller−Kusel,D.Heinrich,I.Kauffer,E.Weiss,Artery,8,25a(1980).
9. A.M.Dannenberg,M.Suga,Methods for studying Mononuclear Phagocytes,D.O.Adams,P.J.Edelson,H.S.Koren,Eds.(Academic Press,ニューヨーク,1981),pp375−395.
10. R.D.Cone,R.C.Mulligan,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.81,6349(1984).
米国特許出願番号07/724,509、1991年6月28日出願、および07/331,336、1989年3月31日出願の開示をここにリファレンスとして援用する。
いうまでもなく、上記教示に照らせば本発明は多くの改変法や変形法が可能である。したがって、添付のクレームの範囲において、本発明はここに特に記載した以外の方法でも実施可能であることを了解されたい。

Claims (6)

  1. 哺乳動物において、腫瘍または該腫瘍の周囲の組織中にDNAまたはRNA配列を直接注入することによって、腫瘍細胞または該腫瘍細胞の周囲の組織をインビボで形質転換するための組成物であって、以下:
    細胞表面分子をコードするDNAまたはRNA配列であって、該腫瘍細胞または該腫瘍細胞の周囲の組織を形質転換するために有効な量の、DNAまたはRNA配列、および
    該配列のためのビヒクルであって、該ビヒクルは該腫瘍細胞または該腫瘍細胞の周囲の組織への該配列のインビボ送達を容易にするウイルスベクターである、ビヒクル、
    を含み、
    ここで、該DNAまたはRNA配列は、該哺乳動物に対して外因性であり、そして該腫瘍細胞に対する免疫応答を刺激する分子をコードする、
    組成物。
  2. 哺乳動物において、腫瘍または該腫瘍の周囲の組織中にDNAまたはRNA配列を直接注入することによって、腫瘍細胞または該腫瘍細胞の周囲の組織をインビボで形質転換するための組成物であって、以下:
    該哺乳動物において免疫原性であるタンパク質をコードするDNAまたはRNA配列であって、該腫瘍細胞または該腫瘍細胞の周囲の組織を形質転換するために有効な量の、DNAまたはRNA配列、および
    該配列のためのビヒクルであって、該ビヒクルは該腫瘍細胞または該腫瘍細胞の周囲の組織への該配列のインビボ送達を容易にするウイルスベクターである、ビヒクル、
    を含み、
    ここで、該DNAまたはRNA配列は、クラスI組織適合性遺伝子およびクラスII組織適合性遺伝子からなる群から選択される1つのメンバーである、
    組成物。
  3. 哺乳動物における腫瘍に関連する悪性疾患を処置するための、請求項1〜のいずれか一項に記載の組成物。
  4. 前記DNAまたはRNA配列が、前記哺乳動物と同じ種から得られる、請求項1〜のいずれか一項に記載の組成物。
  5. 前記DNAまたはRNA配列が、前記哺乳動物とは異なる種から得られる、請求項1〜のいずれか一項に記載の組成物。
  6. 前記ビヒクルがレトロウイルスベクターまたはアデノウイルスベクターである、請求項1〜5のいずれか一項に記載の組成物。
JP50159093A 1991-06-28 1992-06-26 細胞の部位特異的な点滴注入または細胞の部位特異的形質転換による疾患の治療およびそのためのキット Expired - Fee Related JP3712409B2 (ja)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US72450991A 1991-06-28 1991-06-28
US724,509 1991-06-28
US741,244 1991-07-26
US07/741,244 US5328470A (en) 1989-03-31 1991-07-26 Treatment of diseases by site-specific instillation of cells or site-specific transformation of cells and kits therefor
PCT/US1992/005242 WO1993000051A1 (en) 1991-06-28 1992-06-26 Treatment of diseases by site-specific instillation of cells or site-specific transformation of cells and kits therefor

Related Child Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2000370792A Division JP2001213806A (ja) 1991-06-28 2000-12-05 細胞の部位特異的な点滴注入または細胞の部位特異的形質転換による疾患の治療およびそのためのキット
JP2001394962A Division JP2002239010A (ja) 1991-06-28 2001-12-26 細胞の部位特異的な点滴注入または細胞の部位特異的形質転換による疾患の治療およびそのためのキット

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPH06509328A JPH06509328A (ja) 1994-10-20
JP3712409B2 true JP3712409B2 (ja) 2005-11-02

Family

ID=27110984

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP50159093A Expired - Fee Related JP3712409B2 (ja) 1991-06-28 1992-06-26 細胞の部位特異的な点滴注入または細胞の部位特異的形質転換による疾患の治療およびそのためのキット
JP2000370792A Pending JP2001213806A (ja) 1991-06-28 2000-12-05 細胞の部位特異的な点滴注入または細胞の部位特異的形質転換による疾患の治療およびそのためのキット
JP2001394962A Withdrawn JP2002239010A (ja) 1991-06-28 2001-12-26 細胞の部位特異的な点滴注入または細胞の部位特異的形質転換による疾患の治療およびそのためのキット

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2000370792A Pending JP2001213806A (ja) 1991-06-28 2000-12-05 細胞の部位特異的な点滴注入または細胞の部位特異的形質転換による疾患の治療およびそのためのキット
JP2001394962A Withdrawn JP2002239010A (ja) 1991-06-28 2001-12-26 細胞の部位特異的な点滴注入または細胞の部位特異的形質転換による疾患の治療およびそのためのキット

Country Status (9)

Country Link
US (1) US5328470A (ja)
EP (4) EP0591385B1 (ja)
JP (3) JP3712409B2 (ja)
AT (2) ATE214576T1 (ja)
CA (1) CA2112376A1 (ja)
DE (2) DE1213032T1 (ja)
DK (1) DK0591385T3 (ja)
ES (1) ES2301602T3 (ja)
WO (1) WO1993000051A1 (ja)

Families Citing this family (592)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5328471A (en) 1990-02-26 1994-07-12 Endoluminal Therapeutics, Inc. Method and apparatus for treatment of focal disease in hollow tubular organs and other tissue lumens
US5575815A (en) * 1988-08-24 1996-11-19 Endoluminal Therapeutics, Inc. Local polymeric gel therapy
US5843156A (en) 1988-08-24 1998-12-01 Endoluminal Therapeutics, Inc. Local polymeric gel cellular therapy
US5843089A (en) * 1990-12-28 1998-12-01 Boston Scientific Corporation Stent lining
US5674192A (en) * 1990-12-28 1997-10-07 Boston Scientific Corporation Drug delivery
US6706694B1 (en) 1990-03-21 2004-03-16 Vical Incorporated Expression of exogenous polynucleotide sequences in a vertebrate
US6228844B1 (en) 1991-11-12 2001-05-08 Vical Incorporated Stimulating vascular growth by administration of DNA sequences encoding VEGF
EP0575518A1 (en) 1991-03-06 1993-12-29 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions for the selective inhibition of gene expression
US6410010B1 (en) 1992-10-13 2002-06-25 Board Of Regents, The University Of Texas System Recombinant P53 adenovirus compositions
US5747469A (en) 1991-03-06 1998-05-05 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions comprising DNA damaging agents and p53
US6743623B2 (en) * 1991-09-27 2004-06-01 Centre National De La Recherche Scientifique Viral recombinant vectors for expression in muscle cells
US5586982A (en) 1992-04-10 1996-12-24 Abela; George S. Cell transfection apparatus and method
US5713848A (en) 1993-05-19 1998-02-03 Dubrul; Will R. Vibrating catheter
US6936025B1 (en) 1992-05-19 2005-08-30 Bacchus Vascular, Inc. Thrombolysis device
US6806084B1 (en) * 1992-06-04 2004-10-19 The Regents Of The University Of California Methods for compositions for in vivo gene delivery
US5646042A (en) * 1992-08-26 1997-07-08 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. C-myb targeted ribozymes
WO1994011524A1 (en) 1992-11-09 1994-05-26 The United States Government As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Targetable vector particles
GB9223816D0 (en) 1992-11-13 1993-01-06 Medical Res Council Heat shock proteins and the treatment of tumours
DE69331526T2 (de) * 1992-11-18 2002-10-24 Arch Development Corp., Chicago Adenovirus gelenkter gen-transfer zum herz- und glatten vaskularen muskel
US5830461A (en) * 1992-11-25 1998-11-03 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Methods for promoting wound healing and treating transplant-associated vasculopathy
US5658565A (en) * 1994-06-24 1997-08-19 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Inducible nitric oxide synthase gene for treatment of disease
US5658780A (en) * 1992-12-07 1997-08-19 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Rel a targeted ribozymes
ATE221575T1 (de) * 1993-05-10 2002-08-15 Univ Michigan Gentransfer zu den pankreatischen epithelzellen
AU7019494A (en) * 1993-05-20 1994-12-20 Baylor College Of Medicine Genetic therapy for cardiovascular disease
WO1994027435A1 (en) * 1993-06-01 1994-12-08 Life Technologies, Inc. Genetic immunization with cationic lipids
WO1995003843A1 (en) * 1993-07-30 1995-02-09 The Regents Of The University Of California Endocardial infusion catheter
US6682728B1 (en) * 1993-10-13 2004-01-27 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Efficient and selective adenoviral-mediated gene transfer into vascular neointima
ES2077519B1 (es) * 1993-11-22 1996-07-01 Fernandez De Lomana Euge Anaya Cateter intraaortico para perfusion y conservacion renal.
US5792106A (en) * 1993-12-02 1998-08-11 Scimed Life Systems, Inc. In situ stent forming catheter
EP0741783B1 (en) 1993-12-30 2009-03-18 President And Fellows Of Harvard College Vertebrate embryonic pattern-inducing hedgehog-like proteins
US5409012A (en) * 1993-12-30 1995-04-25 Boston Scientific Corporation Sample collection using catheter with expandable member
DE4411402A1 (de) * 1994-03-31 1995-10-05 Juergen Schrader DNA-Expressionsvektoren zur Verwendung in der gentherapeutischen Behandlung von Gefäßerkrankungen
AU2283895A (en) * 1994-04-11 1995-10-30 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Defective herpes and defective adeno-associated virus vectors with p53 for the treatment of cancer
US6103890A (en) * 1994-05-18 2000-08-15 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Enzymatic nucleic acids that cleave C-fos
US6150137A (en) 1994-05-27 2000-11-21 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Immunosuppressant target proteins
FR2723697B1 (fr) * 1994-08-17 1996-09-20 Rhone Poulenc Rorer Sa Methode de traitement de la restenose par la therapie genique
NO180167C (no) * 1994-09-08 1997-02-26 Photocure As Fotokjemisk fremgangsmåte til å innföre molekyler i cellers cytosol
US5652225A (en) * 1994-10-04 1997-07-29 St. Elizabeth's Medical Center Of Boston, Inc. Methods and products for nucleic acid delivery
US6911216B1 (en) 1994-10-12 2005-06-28 Genzyme Corporation Targeted delivery via biodegradable polymers
WO1996011671A1 (en) * 1994-10-12 1996-04-25 Focal, Inc. Targeted delivery via biodegradable polymers
US5713861A (en) * 1994-10-17 1998-02-03 Vanarthos; William Trauma urethral catheter and method of using same
US5641665A (en) * 1994-11-28 1997-06-24 Vical Incorporated Plasmids suitable for IL-2 expression
US5948767A (en) * 1994-12-09 1999-09-07 Genzyme Corporation Cationic amphiphile/DNA complexes
US5888821A (en) * 1994-12-28 1999-03-30 Max-Delbruck-Centrum Fur Molekulare Medizin Cholesterol derivative for liposomal gene transfer
WO1996020731A1 (en) * 1994-12-30 1996-07-11 Chiron Viagene, Inc. Direct administration of gene delivery vehicles at multiple sites
US6818439B1 (en) 1994-12-30 2004-11-16 Chiron Corporation Methods for administration of recombinant gene delivery vehicles for treatment of hemophilia and other disorders
US6630455B1 (en) 1995-01-13 2003-10-07 Vanderbilt University Methods for inducing mucosal immune responses
US20030148968A1 (en) * 1995-02-28 2003-08-07 Hammond H. Kirk Techniques and compositions for treating cardiovascular disease by in vivo gene delivery
CN1136920C (zh) 1995-02-28 2004-02-04 加利福尼亚大学董事会 基因转移介导的血管形成疗法
US6176842B1 (en) * 1995-03-08 2001-01-23 Ekos Corporation Ultrasound assembly for use with light activated drugs
US6210356B1 (en) 1998-08-05 2001-04-03 Ekos Corporation Ultrasound assembly for use with a catheter
US6531455B1 (en) * 1995-03-24 2003-03-11 The Regents Of The University Of California Delivery of polynucleotides by secretory gland expression
US5837693A (en) * 1995-03-24 1998-11-17 The Regents Of The University Of California Intravenous hormone polypeptide delivery by salivary gland expression
US5885971A (en) 1995-03-24 1999-03-23 The Regents Of The University Of California Gene therapy by secretory gland expression
US5922687A (en) * 1995-05-04 1999-07-13 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Intracellular delivery of nucleic acids using pressure
US5766901A (en) * 1995-05-04 1998-06-16 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Apparatus and method for delivering a nucleotide into cell nuclei
US6322548B1 (en) 1995-05-10 2001-11-27 Eclipse Surgical Technologies Delivery catheter system for heart chamber
US6638264B1 (en) * 1995-05-16 2003-10-28 Biostratum Incorporation Perfusion apparatus and methods for pharmaceutical delivery
ES2187648T3 (es) * 1995-05-16 2003-06-16 Karl Tryggvason Metodo para la administracion de farmacos para terapia genica.
US5797870A (en) * 1995-06-07 1998-08-25 Indiana University Foundation Pericardial delivery of therapeutic and diagnostic agents
US5674198A (en) * 1995-06-23 1997-10-07 Cordis Corporation Tandem balloon catheter
PT835137E (pt) * 1995-06-27 2004-12-31 Gsf Forschungszentrum Umwelt U Celulas encapsuladas produtoras de particulas virais
US7011976B1 (en) 1997-03-03 2006-03-14 Calydon, Inc. Adenovirus vectors specific for cells expressing alpha-fetoprotein and methods of use thereof
US6254862B1 (en) 1997-03-03 2001-07-03 Calydon, Inc. Adenovirus vectors specific for cells expressing alpha-fetoprotein and methods of use thereof
US5725568A (en) * 1995-06-27 1998-03-10 Scimed Life Systems, Inc. Method and device for recanalizing and grafting arteries
US6121246A (en) * 1995-10-20 2000-09-19 St. Elizabeth's Medical Center Of Boston, Inc. Method for treating ischemic tissue
US5837534A (en) * 1995-11-14 1998-11-17 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Smooth muscle 22α promoter, gene transfer vectors containing the same, and method of use of the same to target gene expression in arterial smooth muscle cells
AU722042B2 (en) * 1995-11-30 2000-07-20 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions for the diagnosis and treatment of cancer
US5941868A (en) * 1995-12-22 1999-08-24 Localmed, Inc. Localized intravascular delivery of growth factors for promotion of angiogenesis
US5998384A (en) * 1996-01-26 1999-12-07 Hisamitsu Pharmaceutical Co., Inc. Endoscopic administration of an HSV-tk gene to treat digestive organ cancer
JP4512882B2 (ja) * 1996-02-09 2010-07-28 チェング ピー―ワン 受容体リガンドにより促進される生物活性分子の送達
AU721034B2 (en) 1996-02-15 2000-06-22 Biosense, Inc. Catheter based surgery
US6037332A (en) * 1996-02-20 2000-03-14 Emory University Method of urinary bladder instillation
US5866340A (en) * 1996-03-22 1999-02-02 Johns Hopkins University Selective expression of desired genes in cells expressing oncoproteins
US6777217B1 (en) 1996-03-26 2004-08-17 President And Fellows Of Harvard College Histone deacetylases, and uses related thereto
DE19620687A1 (de) * 1996-05-22 1997-11-27 Centeon Pharma Gmbh Neuer adenoviraler Vektor für den Transfer humaner Gene in vivo
AU2458597A (en) * 1996-07-17 1998-02-09 Medtronic, Inc. System for genetically treating cardiac conduction disturbances
WO1998002040A1 (en) 1996-07-17 1998-01-22 Medtronic, Inc. System for enhancing cardiac signal sensing by cardiac pacemakers through genetic treatment
US6443974B1 (en) 1996-07-28 2002-09-03 Biosense, Inc. Electromagnetic cardiac biostimulation
US6225290B1 (en) * 1996-09-19 2001-05-01 The Regents Of The University Of California Systemic gene therapy by intestinal cell transformation
US6335010B1 (en) * 1996-11-08 2002-01-01 University Of California At San Diego Gene therapy in coronary angioplasty and bypass
US6797276B1 (en) 1996-11-14 2004-09-28 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Use of penetration enhancers and barrier disruption agents to enhance the transcutaneous immune response
US20060002949A1 (en) 1996-11-14 2006-01-05 Army Govt. Of The Usa, As Rep. By Secretary Of The Office Of The Command Judge Advocate, Hq Usamrmc. Transcutaneous immunization without heterologous adjuvant
US5980898A (en) 1996-11-14 1999-11-09 The United States Of America As Represented By The U.S. Army Medical Research & Material Command Adjuvant for transcutaneous immunization
US5868719A (en) * 1997-01-15 1999-02-09 Boston Scientific Corporation Drug delivery balloon catheter device
US6494861B1 (en) 1997-01-15 2002-12-17 Boston Scientific Corporation Drug delivery system
WO1998033545A1 (en) * 1997-02-04 1998-08-06 Cook Urological Inc. Suprapubic drainage catheter
US5837283A (en) * 1997-03-12 1998-11-17 The Regents Of The University Of California Cationic lipid compositions targeting angiogenic endothelial cells
US7112338B2 (en) * 1997-03-12 2006-09-26 The Regents Of The University Of California Cationic liposome delivery of taxanes to angiogenic blood vessels
DE69839243T2 (de) * 1997-04-10 2009-04-30 University Of Southern California, Los Angeles Sich an extrazelluläre matrixbestandteile anbindende modifizierte proteine
PT975755E (pt) 1997-04-16 2007-06-26 Millennium Pharm Inc Proteínas crsp (proteínas segregadas ricas em cisteínas), moléculas de ácido nucleico que as codificam e suas utilizações
US6582392B1 (en) 1998-05-01 2003-06-24 Ekos Corporation Ultrasound assembly for use with a catheter
US6001069A (en) * 1997-05-01 1999-12-14 Ekos Corporation Ultrasound catheter for providing a therapeutic effect to a vessel of a body
US6676626B1 (en) * 1998-05-01 2004-01-13 Ekos Corporation Ultrasound assembly with increased efficacy
US6723063B1 (en) 1998-06-29 2004-04-20 Ekos Corporation Sheath for use with an ultrasound element
DE19726244C2 (de) * 1997-06-20 2000-03-02 Mucos Pharma Gmbh & Co Verwendung proteolytischer Enzyme und Rutosid zur Vorbeugung bzw. Behandlung der Transplantatabstoßung
US6994851B1 (en) * 1997-07-10 2006-02-07 Mannkind Corporation Method of inducing a CTL response
US6977074B2 (en) * 1997-07-10 2005-12-20 Mannkind Corporation Method of inducing a CTL response
DE19729769A1 (de) * 1997-07-11 1999-01-14 Cardiogene Gentherapeutische S Transfektionssystem, seine Herstellung und Verwendung in der somatischen Gentherapie
US6177272B1 (en) * 1997-07-21 2001-01-23 The Regents Of The University Of Michigan Method for treating vascular proliferative diseases with p27 and fusions thereof
US20090239940A1 (en) * 1997-07-22 2009-09-24 Del Monte Federica Treating heart failure and ventricular arrhythmias
DE69838584T2 (de) 1997-08-04 2008-06-26 Cell Genesys, Inc., Foster City Enhancer des menschlichen glandulären kallikreingens, vektoren die ihn enthalten und methoden für seine verwendung
US6696423B1 (en) 1997-08-29 2004-02-24 Biogen, Inc. Methods and compositions for therapies using genes encoding secreted proteins such as interferon-beta
WO1999018792A1 (en) * 1997-10-10 1999-04-22 Johns Hopkins University Gene delivery compositions and methods
US20020055731A1 (en) * 1997-10-24 2002-05-09 Anthony Atala Methods for promoting cell transfection in vivo
US6610497B1 (en) * 1997-12-11 2003-08-26 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Angiotensin converting enzyme homolog and therapeutic and diagnostic uses therefor
US6197324B1 (en) 1997-12-18 2001-03-06 C. R. Bard, Inc. System and methods for local delivery of an agent
US6251418B1 (en) 1997-12-18 2001-06-26 C.R. Bard, Inc. Systems and methods for local delivery of an agent
US6372498B2 (en) * 1997-12-31 2002-04-16 Pharmasonics, Inc. Methods, systems, and kits for intravascular nucleic acid delivery
US6699231B1 (en) 1997-12-31 2004-03-02 Heartport, Inc. Methods and apparatus for perfusion of isolated tissue structure
US6794369B2 (en) 1997-12-31 2004-09-21 Pharmasonics Methods, systems, and kits for intravascular nucleic acid delivery
US6221425B1 (en) 1998-01-30 2001-04-24 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Lubricious hydrophilic coating for an intracorporeal medical device
US20030129750A1 (en) * 1998-02-05 2003-07-10 Yitzhack Schwartz Homing of donor cells to a target zone in tissue using active therapeutics or substances
US20030113303A1 (en) * 1998-02-05 2003-06-19 Yitzhack Schwartz Homing of embryonic stem cells to a target zone in tissue using active therapeutics or substances
ES2255155T3 (es) 1998-02-05 2006-06-16 Biosense Webster, Inc. Dispositivo para la administracion intracardiaca de farmacos.
US7749215B1 (en) * 1998-02-05 2010-07-06 Biosense, Inc. Intracardiac cell delivery and cell transplantation
JP2002502608A (ja) 1998-02-06 2002-01-29 コラテラル・セラピューティックス・インコーポレイテッド 血管新生促進因子である血管内皮細胞成長因子:vegfの変異体
US6148222A (en) * 1998-07-10 2000-11-14 Cardiocommand, Inc. Esophageal catheters and method of use
US7700353B2 (en) * 1998-07-22 2010-04-20 E-P Therapeutics, Inc. Compositions and methods for inducing apoptosis in tumor cells
DE69935862T2 (de) * 1998-08-26 2008-01-10 Stürzl, Michael, Prof. Dr. rer. nat. Guanylat-bindendes protein (gbp-1) als inhibitor der zellproliferation
US6312402B1 (en) 1998-09-24 2001-11-06 Ekos Corporation Ultrasound catheter for improving blood flow to the heart
US6689121B1 (en) 1998-09-24 2004-02-10 C. R. Bard, Inc. Systems and methods for treating ischemia
US6135976A (en) * 1998-09-25 2000-10-24 Ekos Corporation Method, device and kit for performing gene therapy
US6251079B1 (en) 1998-09-30 2001-06-26 C. R. Bard, Inc. Transthoracic drug delivery device
US20060205034A1 (en) * 1998-10-30 2006-09-14 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Novel genes encoding proteins having prognostic, diagnostic, preventive, therapeutic, and other uses
US20030027998A1 (en) * 1998-10-30 2003-02-06 Holtzman Douglas A. Novel genes encoding proteins having prognostic, diagnostic, preventive, therapeutic, and other uses
PT1129064E (pt) 1998-11-12 2008-01-31 Invitrogen Corp Reagentes de transfecção
ATE267032T1 (de) * 1998-12-14 2004-06-15 Tre Esse Progettazione Biomedi Kathetersystem zur durchführung einer intramyokardialen therapeutischen behandlung
US7780628B1 (en) 1999-01-11 2010-08-24 Angiodynamics, Inc. Apparatus and methods for treating congestive heart disease
US6749598B1 (en) * 1999-01-11 2004-06-15 Flowmedica, Inc. Apparatus and methods for treating congestive heart disease
US7481803B2 (en) * 2000-11-28 2009-01-27 Flowmedica, Inc. Intra-aortic renal drug delivery catheter
US7329236B2 (en) * 1999-01-11 2008-02-12 Flowmedica, Inc. Intra-aortic renal drug delivery catheter
US7122019B1 (en) 2000-11-28 2006-10-17 Flowmedica Inc. Intra-aortic renal drug delivery catheter
US6695830B2 (en) * 1999-01-15 2004-02-24 Scimed Life Systems, Inc. Method for delivering medication into an arterial wall for prevention of restenosis
DE19956568A1 (de) * 1999-01-30 2000-08-17 Roland Kreutzer Verfahren und Medikament zur Hemmung der Expression eines vorgegebenen Gens
EP2301947A3 (en) 1999-02-26 2011-11-23 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Secreted proteins and uses thereof
EP1119368A2 (en) * 1999-03-03 2001-08-01 Biogen, Inc. Methods of modulating lipid metabolism and storage
EP1165132B1 (en) * 1999-04-08 2011-10-19 Intercell USA, Inc. Dry formulation for transcutaneous immunization
US6224566B1 (en) 1999-05-04 2001-05-01 Cardiodyne, Inc. Method and devices for creating a trap for confining therapeutic drugs and/or genes in the myocardium
US6565528B1 (en) 1999-05-07 2003-05-20 Scimed Life Systems, Inc. Apparatus and method for delivering therapeutic and diagnostic agents
US6974684B2 (en) * 2001-08-08 2005-12-13 Curagen Corporation Therapeutic polypeptides, nucleic acids encoding same, and methods of use
US20040023874A1 (en) * 2002-03-15 2004-02-05 Burgess Catherine E. Therapeutic polypeptides, nucleic acids encoding same, and methods of use
US20040229779A1 (en) * 1999-05-14 2004-11-18 Ramesh Kekuda Therapeutic polypeptides, nucleic acids encoding same, and methods of use
US6774120B1 (en) * 1999-06-01 2004-08-10 Sarah Ferber Methods of inducing regulated pancreatic hormone production in non-pancreatic islet tissues
US8778899B2 (en) * 1999-06-01 2014-07-15 Sarah Ferber Methods of inducing regulated pancreatic hormone production in non-pancreatic islet tissues
US7147633B2 (en) * 1999-06-02 2006-12-12 Boston Scientific Scimed, Inc. Method and apparatus for treatment of atrial fibrillation
EP1187652B1 (en) 1999-06-02 2006-10-11 Boston Scientific Limited Devices for delivering a drug
US20040067490A1 (en) * 2001-09-07 2004-04-08 Mei Zhong Therapeutic polypeptides, nucleic acids encoding same, and methods of use
US7291714B1 (en) 1999-06-30 2007-11-06 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Glycoprotein VI and uses thereof
US7001766B2 (en) * 1999-07-20 2006-02-21 Curagen Corporation Nucleic acid sequences encoding human angiopoietin-like polypeptides
AU6748000A (en) 1999-07-22 2001-02-13 General Hospital Corporation, The Method for identifying compounds which modulate circadian rhythm
EP1204674A4 (en) * 1999-07-27 2005-06-01 Abgenix Inc METHODS AND COMPOUNDS FOR PREVENTING POLYPEPTIDE COLLECTIONS ASSOCIATED WITH NEUROLOGICAL DISORDERS
US6855160B1 (en) 1999-08-04 2005-02-15 C. R. Bard, Inc. Implant and agent delivery device
IL147972A0 (en) 1999-08-23 2002-09-12 Dana Farber Cancer Inst Inc Ge Pd-1, a receptor for b7-4 and uses therefor
US6429303B1 (en) 1999-09-03 2002-08-06 Curagen Corporation Nucleic acids encoding members of the human B lymphocyte activation antigen B7 family and methods of using the same
JP4848113B2 (ja) * 1999-09-09 2011-12-28 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 血管新生血管に対するタキサンの陽イオン性リポソーム送達
AU7612100A (en) * 1999-09-24 2001-04-24 Johns Hopkins University, The Systems and methods for opening obstructed biological conduits
US6855806B1 (en) * 1999-10-15 2005-02-15 Curagen Corporation Thymosin beta 10-like proteins and nucleic acids encoding same
US8808272B2 (en) * 1999-10-28 2014-08-19 Boston Scientific Scimed, Inc. Biocompatible medical devices
US6759520B1 (en) 1999-10-28 2004-07-06 The New England Medical Center Hospitals, Inc. Chimeric analgesic peptides
DE10100586C1 (de) * 2001-01-09 2002-04-11 Ribopharma Ag Verfahren zur Hemmung der Expression eines Ziegens
US6951839B1 (en) 1999-11-30 2005-10-04 Curis, Inc. Methods and compositions for regulating lymphocyte activity
US8168178B2 (en) * 1999-11-30 2012-05-01 Curis, Inc. Methods and compositions for regulating lymphocyte activity
EP1254230A2 (en) 2000-02-29 2002-11-06 Millennium Pharmaceuticals, Inc. 1983, 52881, 2398, 45449, 50289, and 52872, g protein-coupled receptors and uses therefor
CN101117644A (zh) 2000-02-29 2008-02-06 阿尔康公司 青光眼的诊断和治疗药物
US20030129724A1 (en) 2000-03-03 2003-07-10 Grozinger Christina M. Class II human histone deacetylases, and uses related thereto
EP1790725A2 (en) * 2000-03-03 2007-05-30 Curagen Corporation Proteins named after FCTRX and nucleic acids encoding same
US7517352B2 (en) 2000-04-07 2009-04-14 Bacchus Vascular, Inc. Devices for percutaneous remote endarterectomy
US6926898B2 (en) 2000-04-12 2005-08-09 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
EP2348047A1 (en) 2000-04-21 2011-07-27 New England Medical Center G protein coupled receptor (GPCR) agonists and antagonists and methods of activating and inhibiting GPCR using the same
ATE412185T1 (de) 2000-04-29 2008-11-15 Univ Iowa Res Found Diagnostika und therapeutika für makula degeneration erkrankungen
US20030219786A1 (en) * 2000-08-11 2003-11-27 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Novel glycoproteins and methods of use thereof
US20040005554A1 (en) * 2000-05-08 2004-01-08 Tayar Nabil El Novel glycoproteins and methods of use thereof
US7232421B1 (en) 2000-05-12 2007-06-19 C. R. Bard, Inc. Agent delivery systems
EP1714661A3 (en) 2000-05-19 2012-03-14 The Center for Blood Research, INC. Methods for diagnosing and treating hemostatic disorders by modulating p-selectin activity
US20050048614A1 (en) * 2000-06-13 2005-03-03 Children's Medical Center Corporation Biosynthetic oncolytic molecules and uses therefor
US20040034193A1 (en) * 2001-06-13 2004-02-19 Samy Ashkar Biosynthetic oncolytic molecules and uses therefor
US20040023259A1 (en) * 2000-07-26 2004-02-05 Luca Rastelli Therapeutic polypeptides, nucleic acids encoding same, and methods of use
WO2002011785A2 (en) * 2000-08-03 2002-02-14 The University Of Utah Research Foundation Manipulation of arterial-venous identity
AU2001286584A1 (en) * 2000-08-18 2002-03-04 Massachusetts Institute Of Technology Inhibition of protein-protein interaction
US6740331B1 (en) * 2000-08-25 2004-05-25 Global Gene Therapies, Inc. Apparatus for the delivery of drugs or gene therapy into a patient's vasculature and methods of use
US7651696B2 (en) * 2000-08-25 2010-01-26 Nexeon Medical Systems, Inc. Implantable device for treating disease states and methods of using same
WO2002018583A2 (en) 2000-09-01 2002-03-07 The Center For Blood Research, Inc. Modified polypeptides stabilized in a desired conformation and methods for producing same
UA83458C2 (uk) 2000-09-18 2008-07-25 Байоджен Айдек Ма Інк. Виділений поліпептид baff-r (рецептор фактора активації в-клітин сімейства tnf)
MXPA03002413A (es) * 2000-09-20 2003-06-19 Amgen Inc Moleculas tipo b7 y uso de las mismas.
DE60140903D1 (de) 2000-10-18 2010-02-04 Brigham & Womens Hospital E-selectin/l-selectin-liganden-polypeptide hämatopoetischer zellen und verfahren zu deren verwendung
WO2002044418A2 (en) 2000-11-28 2002-06-06 Wyeth Expression analysis of fkbp nucleic acids and polypeptides useful in the diagnosis and treatment of prostate cancer
NZ526617A (en) 2000-11-28 2004-09-24 Wyeth Corp Expression analysis of KIAA nucleic acids and polypeptides useful in the diagnosis and treatment of prostate cancer
US20020177571A1 (en) * 2000-11-29 2002-11-28 Gordon Erlinda M. Targeted vectors for cancer immunotherapy
US7247704B2 (en) 2000-12-18 2007-07-24 Arriva Pharmaceuticals, Inc. Multifunctional protease inhibitors and their use in treatment of disease
US7423142B2 (en) * 2001-01-09 2008-09-09 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of anti-apoptotic genes
US7767802B2 (en) * 2001-01-09 2010-08-03 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of anti-apoptotic genes
US6964849B2 (en) 2001-01-11 2005-11-15 Curagen Corporation Proteins and nucleic acids encoding same
US20040043928A1 (en) * 2001-08-02 2004-03-04 Ramesh Kekuda Therapeutic polypeptides, nucleic acids encoding same, and methods of use
AU2002248418A1 (en) * 2001-02-09 2002-08-28 Massachusetts Institute Of Technology Methods of identifying agents that mediate polypeptide aggregation
WO2002064162A2 (en) 2001-02-13 2002-08-22 Government Of The United States, As Represented By The Secretary Of The Army Vaccine for transcutaneous immunization
US7491394B2 (en) 2001-02-15 2009-02-17 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Cytotoxic factors for modulating cell death
US20090081199A1 (en) * 2001-03-20 2009-03-26 Bioxell S.P.A. Novel receptor trem (triggering receptor expressed on myeloid cells) and uses thereof
CA2342376C (en) * 2001-03-20 2013-11-12 Marco Colonna A receptor trem (triggering receptor expressed on myeloid cells) and uses thereof
US8231878B2 (en) * 2001-03-20 2012-07-31 Cosmo Research & Development S.P.A. Receptor trem (triggering receptor expressed on myeloid cells) and uses thereof
US8981061B2 (en) 2001-03-20 2015-03-17 Novo Nordisk A/S Receptor TREM (triggering receptor expressed on myeloid cells) and uses thereof
CA2442066C (en) 2001-04-02 2005-11-01 Wyeth Pd-1, a receptor for b7-4, and uses therefor
US20030148298A1 (en) * 2001-04-03 2003-08-07 O''toole Margot Methods for diagnosing and treating systemic lupus erythematosus disease and compositions thereof
US6820011B2 (en) 2001-04-11 2004-11-16 The Regents Of The University Of Colorado Three-dimensional structure of complement receptor type 2 and uses thereof
EP2258842A1 (en) 2001-04-16 2010-12-08 Wyeth Holdings Corporation Streptococcus pneumoniae open reading frames encoding polypeptide antigens and uses thereof
US20030017159A1 (en) * 2001-05-02 2003-01-23 Jerome Ritz Immunogenic tumor antigens: nucleic acids and polypeptides encoding the same and methods of use thereof
US7244853B2 (en) * 2001-05-09 2007-07-17 President And Fellows Of Harvard College Dioxanes and uses thereof
WO2002101350A2 (en) 2001-06-07 2002-12-19 Chemocentryx Cell migration assay
MXPA03011260A (es) * 2001-06-07 2004-02-27 Wyeth Corp Receptor acoplado a proteina g y usos del mismo.
KR20040026665A (ko) * 2001-06-15 2004-03-31 인터레우킨 제네틱스, 인코포레이티드 노화 관련 증상의 조기 개시를 검출 및 치료하는 방법
US20040236377A1 (en) * 2001-07-02 2004-11-25 Medtronic, Inc. System and method for enhancing cardiac signal sensing by cardiac pacemakers through genetic treatment
US20030087274A1 (en) * 2001-07-05 2003-05-08 Anderson David W. Therapeutic polypeptides, nucleic acids encoding same, and methods of use
US20030129613A1 (en) * 2001-07-05 2003-07-10 Fernandes Elma R. Novel human proteins and polynucleotides encoding them
US20040029790A1 (en) * 2001-07-05 2004-02-12 Meera Patturajan Novel human proteins, polynucleotides encoding them and methods of using the same
EP1900815B1 (en) 2001-07-12 2016-09-07 University of Massachusetts In vivo production of small interfering RNAs that mediate gene silencing
CA2921821A1 (en) 2001-07-12 2003-01-23 University Of Massachusetts In vivo production of small interfering rnas that mediate gene silencing
US20040030096A1 (en) * 2001-08-02 2004-02-12 Linda Gorman Novel human proteins, polynucleotides encoding them and methods of using the same
CA2455884C (en) 2001-08-15 2015-09-22 Justin R. Fallon Treatment of muscular dystrophies and related disorders
US20040142325A1 (en) * 2001-09-14 2004-07-22 Liat Mintz Methods and systems for annotating biomolecular sequences
US7981863B2 (en) 2001-09-19 2011-07-19 Neuronova Ab Treatment of Parkinson's disease with PDGF
DE60238872D1 (de) 2001-09-28 2011-02-17 Univ Brigham Young Neue cyclooxygenase-varianten und verwendungsverfahren
US6808518B2 (en) * 2001-09-28 2004-10-26 Ethicon, Inc. Methods and devices for treating diseased blood vessels
PT1438065E (pt) * 2001-10-01 2013-01-24 Matrizyme Pharma Corp Utilização de colagenase para facilitar a passagem de um passa-fios em oclusões crónicas das artérias
US20030215460A1 (en) * 2002-05-07 2003-11-20 Schall Thomas J. Methods and compositions for inducing an immune response
US20030199442A1 (en) * 2001-10-09 2003-10-23 Alsobrook John P. Therapeutic polypeptides, nucleic acids encoding same, and methods of use
US20030096260A1 (en) * 2001-10-09 2003-05-22 Zhenhua Miao Compositions useful as ligands for the formyl peptide receptor like 1 receptor and methods of use thereof
US7745418B2 (en) * 2001-10-12 2010-06-29 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting viral replication
AU2002353016A1 (en) * 2001-12-03 2003-06-17 Ekos Corporation Small vessel ultrasound catheter
ATE319378T1 (de) 2001-12-03 2006-03-15 Ekos Corp Katheter mit mehreren ultraschall-abstrahlenden teilen
US7141044B2 (en) 2001-12-11 2006-11-28 Ekos Corporation Alternate site gene therapy
US20030170691A1 (en) 2001-12-19 2003-09-11 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Human diacylglycerol acyltransferase 2 (DGAT2) family members and uses therefor
ES2500918T3 (es) 2001-12-21 2014-10-01 Human Genome Sciences, Inc. Proteínas de fusión de albúmina e interferón beta
US6939374B2 (en) * 2001-12-21 2005-09-06 Scimed Life Systems, Inc. Stents, stenting systems, and related methods for agent delivery
JP2005516607A (ja) 2002-02-07 2005-06-09 デルタ バイオテクノロジー リミテッド Hiv阻害タンパク質
AU2003212481A1 (en) 2002-02-28 2003-09-09 Ekos Corporation Ultrasound assembly for use with a catheter
US7153685B2 (en) * 2002-03-11 2006-12-26 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Tamoxifen and 4-hydroxytamoxifen-activated system for regulated production of proteins in eukaryotic cells
US8226629B1 (en) 2002-04-01 2012-07-24 Ekos Corporation Ultrasonic catheter power control
CA2483476A1 (en) * 2002-04-22 2003-10-30 Absorber, Ab Fusion polypeptides and methods for inhibiting microbial adhesion
EP1572950B1 (en) 2002-06-17 2012-10-10 Thrasos, Inc. Single domain tdf-related compounds and analogs thereof
MXPA05000655A (es) * 2002-07-15 2006-02-22 Harvard College Metodos y composiciones para modular el desarrollo y la funcion de las celulas t helper (th).
US7361511B2 (en) 2002-08-20 2008-04-22 Millenium Pharmaceuticals, Inc. Compositions, kits, and methods for identification, assessment, prevention, and therapy of cervical cancer
WO2004034767A2 (en) 2002-09-20 2004-04-29 Flowmedica, Inc. Catheter system for renal therapy
US7993325B2 (en) 2002-09-20 2011-08-09 Angio Dynamics, Inc. Renal infusion systems and methods
US7063679B2 (en) 2002-09-20 2006-06-20 Flowmedica, Inc. Intra-aortic renal delivery catheter
JP2006508776A (ja) 2002-09-20 2006-03-16 フローメディカ,インコーポレイテッド 腎臓内カテーテルを介する選択的物質送達のための方法および装置
US20050197624A1 (en) 2004-03-04 2005-09-08 Flowmedica, Inc. Sheath for use in peripheral interventions
AU2003294226A1 (en) 2002-09-20 2004-04-23 Flowmedica, Inc. Method and apparatus for intra aortic substance delivery to a branch vessel
US6921371B2 (en) 2002-10-14 2005-07-26 Ekos Corporation Ultrasound radiating members for catheter
US20080026077A1 (en) * 2002-11-12 2008-01-31 John Hilfinger Methods and compositions of gene delivery agents for systemic and local therapy
US20050026859A1 (en) * 2002-11-12 2005-02-03 John Hilfinger Methods and compositions of gene delivery agents for systemic and local therapy
ES2392511T3 (es) 2002-11-15 2012-12-11 Musc Foundation For Research Development Moduladores de complemento dianas sobre el receptor 2 de complemento
AU2003293013A1 (en) * 2002-11-21 2004-06-18 University Of Massachusets Diagnosing and treating hematopoietic cancers
EP2112229A3 (en) 2002-11-25 2009-12-02 Sequenom, Inc. Methods for identifying risk of breast cancer and treatments thereof
EP1583569A4 (en) * 2003-01-03 2009-05-06 Ekos Corp ULTRASONIC CATHETER COMPRISING AN AXIAL ENERGY FIELD
JP2007525423A (ja) * 2003-02-20 2007-09-06 プロテオン セラピューティクス,インコーポレーテッド 生体導管の疾患を治療および予防するための方法
US20050233342A1 (en) * 2003-03-07 2005-10-20 Muthiah Manoharan Methods of preventing off-target gene silencing
US20070179100A1 (en) * 2003-04-09 2007-08-02 Muthiah Manoharan Protected monomers
ES2702942T3 (es) * 2003-04-17 2019-03-06 Alnylam Pharmaceuticals Inc Agentes de ARNi modificados
US7723509B2 (en) 2003-04-17 2010-05-25 Alnylam Pharmaceuticals IRNA agents with biocleavable tethers
US8017762B2 (en) * 2003-04-17 2011-09-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Modified iRNA agents
CA2522349A1 (en) 2003-04-17 2004-11-04 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Protected monomers
US8796436B2 (en) 2003-04-17 2014-08-05 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Modified iRNA agents
US7851615B2 (en) * 2003-04-17 2010-12-14 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipophilic conjugated iRNA agents
US20070178066A1 (en) * 2003-04-21 2007-08-02 Hall Frederick L Pathotropic targeted gene delivery system for cancer and other disorders
US20090123428A1 (en) * 2003-04-21 2009-05-14 Hall Frederick L Pathotropic targeted gene delivery system for cancer and other disorders
EP1619951B1 (en) * 2003-04-21 2011-06-22 Epeius Biotechnologies Corporation Methods and compositions for treating disorders
EP1619995A2 (en) * 2003-04-22 2006-02-01 Ekos Corporation Ultrasound enhanced central venous catheter
EP1635736A2 (en) 2003-06-05 2006-03-22 FlowMedica, Inc. Systems and methods for performing bi-lateral interventions or diagnosis in branched body lumens
WO2005004794A2 (en) 2003-06-09 2005-01-20 Alnylam Pharmaceuticals Inc. Method of treating neurodegenerative disease
US7595306B2 (en) * 2003-06-09 2009-09-29 Alnylam Pharmaceuticals Inc Method of treating neurodegenerative disease
US20060134287A1 (en) * 2003-08-20 2006-06-22 Vimini Robert J Packaging and cooking bag and method for packaging and preparing a meat product
ES2366830T3 (es) 2003-08-25 2011-10-25 Funzyme Biotechnologies Sa Nuevas proteínas fúngicas y ácidos nucelicos que codifican las mismas.
US7291604B2 (en) * 2003-09-03 2007-11-06 The General Hospital Corporation Methods of treating restenosis
US8680063B2 (en) 2003-09-12 2014-03-25 University Of Massachusetts RNA interference for the treatment of gain-of-function disorders
EP2821085B1 (en) * 2003-09-12 2020-04-29 University of Massachusetts Rna interference for the treatment of gain-of-function disorders
US20050059999A1 (en) * 2003-09-15 2005-03-17 Mongeon Luc R. Delivering genetic material to a stimulation site
EP2051077A3 (en) 2003-10-07 2009-05-27 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Nucleic acid molecules and proteins for the identification, assessment, prevention, and therapy of ovarian cancer
WO2005037232A2 (en) 2003-10-17 2005-04-28 Joslin Diabetes Center, Inc. Methods and compositions for modulating adipocyte function
US20050125914A1 (en) * 2003-11-18 2005-06-16 Gerard Malle Hair shaping composition comprising at least one- non-hydroxide base
EP2260776A1 (en) * 2003-11-21 2010-12-15 Vnus Medical Technologies, Inc. Apparatus for treating the carotid artery
CA2487107A1 (en) * 2003-12-22 2005-06-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel targets for obesity from skeletal muscle
CA2487098A1 (en) * 2003-12-22 2005-06-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel targets for obesity from fat tissue
US20070087986A1 (en) * 2004-01-26 2007-04-19 Brett Premack Compositions and methods for enhancing immunity by chemoattractant adjuvants
US20050234004A1 (en) * 2004-01-26 2005-10-20 Brett Premack Compositions and methods of use of W-peptides
EP1716227A4 (en) * 2004-01-27 2010-01-06 Compugen Ltd METHOD OF IDENTIFYING PUTATIVE GENE PRODUCTS USING THE INTERSPEZIES SEQUENCE COMPARISON AND BIOMOLECULAR SEQUENCES DISCOVERED THEREFOR
EP1713900A4 (en) * 2004-01-27 2009-06-17 Compugen Ltd METHOD AND SYSTEMS FOR COMMENTING BIOMOLECULAR SEQUENCES
US8404747B2 (en) * 2004-03-05 2013-03-26 The General Hospital Corporation Compositions and methods for modulating interaction between polypeptides
CA2559161C (en) * 2004-03-12 2013-06-11 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Irna agents targeting vegf
GB0406728D0 (en) * 2004-03-25 2004-04-28 Hydrodynamic Gene Delivery Ltd Gene therapy
ATE418346T1 (de) * 2004-04-08 2009-01-15 Sangamo Biosciences Inc Zusammensetzungen zur behandlung von neuropathischen und neurodegenerativen erkrankungen
EP1732945B1 (en) * 2004-04-08 2014-12-24 Sangamo BioSciences, Inc. Methods and compositions for modulating cardiac contractility
EP1750506A4 (en) 2004-05-14 2010-03-17 Flowmedica Inc BILATERAL LOCAL RENAL DELIVERY FOR THE TREATMENT OF CONGESTIVE HEART FAILURE AND BNP THERAPY
AU2005250369A1 (en) * 2004-05-18 2005-12-15 Genentech, Inc. M13 virus major coat protein variants for C-terminal and BI-terminal display of a heterologous protein
CA2566333A1 (en) * 2004-05-19 2005-12-01 Wyeth Modulation of immunoglobulin production and atopic disorders
US7875275B2 (en) * 2004-06-16 2011-01-25 The General Hospital Corporation Use of Bridge-1 and activators and inhibitors thereof in the treatment of insulin deficiency and diabetes
EP2789342A1 (en) 2004-06-17 2014-10-15 Thrasos Innovation, Inc. TDF-related compounds and analogs thereof
US7342093B2 (en) 2004-07-23 2008-03-11 University Of Massachusetts Compounds that inhibit Hsp90 protein-protein interactions with IAP proteins
EP1789070B1 (en) 2004-08-03 2012-10-24 Biogen Idec MA Inc. Taj in neuronal function
US20060051338A1 (en) 2004-08-20 2006-03-09 New York University Inhibition of mitogen-activated protein kinases in cardiovascular disease
CA2579349A1 (en) 2004-09-07 2006-03-16 Telethon Institute For Child Health Research Agents for treatment or prevention of an allergic disorder
US20060069323A1 (en) * 2004-09-24 2006-03-30 Flowmedica, Inc. Systems and methods for bi-lateral guidewire cannulation of branched body lumens
US7528118B2 (en) 2004-09-24 2009-05-05 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. RNAi modulation of ApoB and uses thereof
JP2008521401A (ja) * 2004-11-24 2008-06-26 アルナイラム ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド BCR−ABL融合遺伝子のRNAi調節およびその使用方法
GB0426146D0 (en) 2004-11-29 2004-12-29 Bioxell Spa Therapeutic peptides and method
MX2007006524A (es) * 2004-12-01 2007-06-22 Genzyme Corp Metodos para el suministro dirigido de material genetico al higado.
US20060154285A1 (en) * 2004-12-29 2006-07-13 Robishaw Janet D Zebrafish heterotrimer G-protein gamma 2 subunit (GNG2)
US8168588B2 (en) 2005-01-25 2012-05-01 Five Prime Therapeutics, Inc. Compositions comprising FGF-9 and betacellulin and methods for treating cardiac conditions
CA2595848C (en) 2005-01-25 2014-06-17 Prolexys Pharmaceuticals, Inc. Erastin and erastin binding proteins, and uses thereof
WO2006102557A2 (en) 2005-03-22 2006-09-28 The President And Fellows Of Harvard College Treatment of protein degradation disorders
NZ581779A (en) 2005-05-17 2011-09-30 Univ Connecticut Composition and methods for immunomodulation in an organism comprising interleukin-15 polypeptide and interleukin-15 receptor subunit A polypeptide complex
US20060281670A1 (en) * 2005-06-10 2006-12-14 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Compositions and methods for modulating angiogenesis
WO2006138690A2 (en) * 2005-06-17 2006-12-28 Abbott Laboratories Improved method of treating degenerative spinal disorders
CA2615491C (en) 2005-07-19 2016-11-29 Stemgen S.P.A. Inhibition of the tumorigenic potential of tumor stem cells by lif and bmps
CA2607668A1 (en) * 2005-07-21 2007-02-01 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Rnai modulation of the rho-a gene and uses thereof
WO2007018318A1 (ja) * 2005-08-10 2007-02-15 National University Corporation Kanazawa University 小脳星状細胞及び/又は籠細胞特異的な遺伝子発現方法
US20070161591A1 (en) 2005-08-18 2007-07-12 University Of Massachusetts Methods and compositions for treating neurological disease
WO2007024589A2 (en) * 2005-08-24 2007-03-01 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Phagocyte enhancement therapy for atherosclerosis
US7943134B2 (en) * 2005-08-31 2011-05-17 Academia Sinica Compositions and methods for identifying response targets and treating flavivirus infection responses
TWI333959B (en) * 2005-08-31 2010-12-01 Academia Sinica Methods and reagents for the analysis and purification of polysaccharides
EP1931384A4 (en) 2005-09-09 2010-03-10 Univ Johns Hopkins MANIPULATION OF THE REGULATORY T CELL AND DC FUNCTION BY TARGETING THE NEURITINE GENE WITH ANTIBODIES, AGONISTS AND ANTAGONISTS
HUE026634T2 (en) 2005-09-20 2016-07-28 Thrasos Innovation Inc TDF-related compounds and analogues thereof
EP1937311A2 (en) 2005-09-30 2008-07-02 The Government of the United States of America, as represented by the Secretary of the Department of Health and Human Services Methods and compositions for modulating immune tolerance
US20070100323A1 (en) * 2005-10-31 2007-05-03 Ludwig Florian N Facilitation of endothelialization by in situ surface modification
KR20080086440A (ko) * 2005-11-01 2008-09-25 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 인플루엔자 바이러스 복제의 RNAi 억제
EP1942948A4 (en) * 2005-11-04 2010-03-03 Alnylam Pharmaceuticals Inc COMPOSITIONS AND METHODS FOR INHIBITING THE EXPRESSION OF THE NAV1.8 GENE
WO2007056388A2 (en) * 2005-11-07 2007-05-18 The General Hospital Corporation Compositions and methods for modulating poly (adp-ribose) polymerase activity
AU2006311730B2 (en) 2005-11-09 2010-12-02 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of Factor V Leiden mutant gene
ATE480559T1 (de) 2005-12-14 2010-09-15 Licentia Ltd Verwendungen eines neurotrophischen faktors
US8172792B2 (en) * 2005-12-27 2012-05-08 Tyco Healthcare Group Lp Embolic protection systems for bifurcated conduits
AU2007251256B2 (en) 2006-01-26 2013-03-07 Recopharma Ab Compositions and methods for inhibiting viral adhesion
US8229398B2 (en) * 2006-01-30 2012-07-24 Qualcomm Incorporated GSM authentication in a CDMA network
EP1818395A1 (en) 2006-02-08 2007-08-15 Diatos Compositions and methods for treating lysosomal storage diseases
EP2441770A1 (en) 2006-02-10 2012-04-18 The University of Cincinnati Phosphatase inhibitor protein-1 as a regulator of cardiac function
CN101400362B (zh) * 2006-02-14 2016-10-12 哈佛大学校长及研究员协会 双官能组蛋白去乙酰化酶抑制剂
US20090221072A1 (en) * 2006-02-15 2009-09-03 Chen Thomas T Compositions and methods for modulating cell differentiation
US20070225750A1 (en) 2006-03-10 2007-09-27 Brooke Ren Embolic protection systems
NZ571568A (en) 2006-03-31 2010-11-26 Alnylam Pharmaceuticals Inc Double-stranded RNA molecule compositions and methods for inhibiting expression of Eg5 gene
CN103351425B (zh) 2006-04-10 2016-01-20 健泰科生物技术公司 散乱蛋白pdz调节剂
WO2007127919A2 (en) * 2006-04-28 2007-11-08 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of a gene from the jc virus
EP2360277A1 (en) 2006-05-03 2011-08-24 Geisinger Clinic Methods for diagnosing and predicting non-alcoholic steatohepatitis (NASH)
CA2654540C (en) * 2006-05-03 2017-01-17 President And Fellows Of Harvard College Histone deacetylase and tubulin deacetylase inhibitors
JP5570806B2 (ja) 2006-05-11 2014-08-13 アルナイラム ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッド Pcsk9遺伝子の発現を阻害するための組成物および方法
WO2007137156A2 (en) 2006-05-19 2007-11-29 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Rnai modulation of aha and therapeutic uses thereof
AU2007253677B2 (en) * 2006-05-22 2011-02-10 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of IKK-B gene
US8383597B2 (en) * 2006-05-25 2013-02-26 Cornell Research Foundation, Inc. G proteins in tumor growth and angiogenesis
US8598333B2 (en) * 2006-05-26 2013-12-03 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. SiRNA silencing of genes expressed in cancer
WO2007140599A1 (en) 2006-06-05 2007-12-13 Cancer Care Ontario Assessment of risk for colorectal cancer
US7771401B2 (en) 2006-06-08 2010-08-10 Angiodynamics, Inc. Selective renal cannulation and infusion systems and methods
CN101563363B (zh) 2006-06-21 2013-01-02 南卡罗来纳医疗大学研究发展基金会 用于治疗疾病的靶向补体因子h
US7981866B2 (en) 2006-07-11 2011-07-19 University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey MG53 compositions and methods of use
US20080021063A1 (en) * 2006-07-18 2008-01-24 Kazantsev Aleksey G Compositions and methods for modulating sirtuin activity
US8153803B2 (en) * 2006-07-18 2012-04-10 The General Hospital Corporation Compositions and methods for modulating sirtuin activity
WO2008028044A2 (en) * 2006-08-30 2008-03-06 Centocor, Inc. Markers and methods for assessing and treating ulcerative colitis and related disorders using 66 gene panel
EP2418291A1 (en) 2006-09-14 2012-02-15 Institut Pasteur A CD26 (DPP-4) inhibitor for use in treatment of HCV infection
CN101557818A (zh) 2006-10-03 2009-10-14 新泽西医科和牙科大学 Atap肽、编码atap肽的核酸以及相关的应用方法
US8192363B2 (en) 2006-10-27 2012-06-05 Ekos Corporation Catheter with multiple ultrasound radiating members
DE102006051623A1 (de) 2006-11-02 2008-07-31 Horn, Peter A. Verfahren und Stoffgemisch zur Verbesserung eines in vivo Genfransfers
RS60019B1 (sr) 2006-12-21 2020-04-30 H Lundbeck As Modulacija aktivnosti proneurotrofina
US10182833B2 (en) 2007-01-08 2019-01-22 Ekos Corporation Power parameters for ultrasonic catheter
CA2963138C (en) 2007-01-30 2019-05-14 Epivax, Inc. Regulatory t cell epitopes, compositions and uses thereof
WO2008103336A1 (en) * 2007-02-21 2008-08-28 Cook Incorporated Methods for intravascular engraftment in heart
US20110189663A1 (en) 2007-03-05 2011-08-04 Cancer Care Ontario Assessment of risk for colorectal cancer
EP2134365B1 (en) 2007-03-21 2019-03-13 Effat Emamian Compositions and methods for inhibiting tumor cell growth
PE20090064A1 (es) 2007-03-26 2009-03-02 Novartis Ag Acido ribonucleico de doble cadena para inhibir la expresion del gen e6ap humano y composicion farmaceutica que lo comprende
WO2008143774A2 (en) * 2007-05-01 2008-11-27 University Of Massachusetts Methods and compositions for locating snp heterozygosity for allele specific diagnosis and therapy
AR066984A1 (es) * 2007-06-15 2009-09-23 Novartis Ag Inhibicion de la expresion de la subunidad alfa del canal epitelial de sodio (enac) por medio de arni (arn de interferencia)
EP2170181B1 (en) 2007-06-22 2014-04-16 Ekos Corporation Method and apparatus for treatment of intracranial hemorrhages
CN103215269B (zh) 2007-07-05 2015-01-21 诺瓦提斯公司 用于治疗病毒感染的dsRNA
EP2173425B1 (en) 2007-07-18 2012-11-21 Silk Road Medical, Inc. Systems for establishing retrograde carotid arterial blood flow
US8858490B2 (en) 2007-07-18 2014-10-14 Silk Road Medical, Inc. Systems and methods for treating a carotid artery
CA3043911A1 (en) 2007-12-04 2009-07-02 Arbutus Biopharma Corporation Targeting lipids
WO2009076400A2 (en) 2007-12-10 2009-06-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of factor vii gene
WO2009079399A2 (en) * 2007-12-14 2009-06-25 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Method of treating neurodegenerative disease
EP2245055A2 (en) * 2008-01-31 2010-11-03 Compugen Ltd. Polypeptides and polynucleotides, and uses thereof as a drug target for producing drugs and biologics
ES2821762T3 (es) 2008-02-05 2021-04-27 Silk Road Medical Inc Sistema de catéter de intervención
WO2009099764A1 (en) * 2008-02-05 2009-08-13 Silk Road Medical, Inc. Interventional sheath with retention features
US8221738B2 (en) 2008-02-19 2012-07-17 Celladon Corporation Method for enhanced uptake of viral vectors in the myocardium
NZ588280A (en) * 2008-03-05 2012-11-30 Alnylam Pharmaceuticals Inc Compositions and methods for inhibiting expression of eg5 and vegf genes
AU2009234266B2 (en) 2008-04-11 2015-08-06 Tekmira Pharmaceuticals Corporation Site-specific delivery of nucleic acids by combining targeting ligands with endosomolytic components
EP2280995A2 (en) * 2008-04-29 2011-02-09 Wyeth LLC Methods for treating inflammation
FI20080326A0 (fi) 2008-04-30 2008-04-30 Licentia Oy Neurotroofinen tekijä MANF ja sen käytöt
US20090280134A1 (en) * 2008-05-09 2009-11-12 Recopharma Ab Compositions and methods for inhibiting toxin a from clostridium difficile
US20090280104A1 (en) * 2008-05-09 2009-11-12 Recopharma Ab Compositions and methods for inhibiting shiga toxin and shiga-like toxin
WO2009149021A2 (en) 2008-06-02 2009-12-10 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Xbp1, cd138, and cs1 peptides
CA2728467A1 (en) * 2008-07-15 2010-01-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Compositions and methods for inhibiting expression of tgf-beta receptor genes
CA2731730C (en) 2008-07-23 2017-06-13 President And Fellows Of Harvard College Deacetylase inhibitors and uses thereof
US8574245B2 (en) 2008-08-13 2013-11-05 Silk Road Medical, Inc. Suture delivery device
DK2329259T3 (en) 2008-08-29 2016-05-09 Janssen Biotech Inc MARKERS AND PROCEDURES FOR ASSESSING AND TREATING ULCERATIVE COLITIS AND RELATED DISEASES USING A 20-GEN PANEL
US8318693B2 (en) 2008-09-02 2012-11-27 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of mutant EGFR gene
EP3584320A1 (en) 2008-09-25 2019-12-25 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid formulated compositions and methods for inhibiting expression of serum amyloid a gene
US9207242B2 (en) 2008-10-09 2015-12-08 The University Of Hong Kong Cadherin-17 as diagnostic marker and therapeutic target for liver cancer
PL3335728T3 (pl) 2008-10-10 2020-06-29 Children's Medical Center Corporation Biochemicznie stabilizowana szczepionka zawierająca trimer env wirusa HIV-1
EA029762B1 (ru) 2008-10-20 2018-05-31 Элнилэм Фармасьютикалз, Инк. Композиции и способы для ингибирования экспрессии транстиретина
EP2352998A4 (en) 2008-11-07 2011-09-21 Centocor Ortho Biotech Inc MARKERS AND METHOD FOR THE STUDY AND TREATMENT OF LIGHT-SENSITIVELY LUPUS PATIENTS
CA2746514C (en) 2008-12-10 2018-11-27 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Gnaq targeted dsrna compositions and methods for inhibiting expression
US9181315B2 (en) 2009-01-08 2015-11-10 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods for induced brown fat differentiation
AU2010211133A1 (en) 2009-02-03 2011-07-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Compositions and methods for inhibiting expression of PTP1B genes
WO2010099341A1 (en) 2009-02-26 2010-09-02 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of mig-12 gene
CN102421900B (zh) 2009-03-12 2015-07-22 阿尔尼拉姆医药品有限公司 用于抑制Eg5和VEGF基因表达的脂质配制的组合物以及方法
WO2010110931A2 (en) 2009-03-23 2010-09-30 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Glycoconjugate vaccines
US9675673B2 (en) * 2009-04-24 2017-06-13 Ingeneron Incorporated Transluminal delivery of oncoltyic viruses for cancer therapy
CA2759801C (en) 2009-05-02 2019-04-02 Marco A. Passini Gene therapy for neurodegenerative disorders
EP2429657A2 (en) * 2009-05-15 2012-03-21 F. Hoffmann-La Roche AG Compositions and methods for inhibiting expression of glucocorticoid receptor (gcr) genes
WO2010141752A1 (en) * 2009-06-03 2010-12-09 Silk Road Medical, Inc. System and methods for controlling retrograde carotid arterial blood flow
WO2010144711A2 (en) 2009-06-10 2010-12-16 New York University Immunological targeting of pathological tau proteins
US9050276B2 (en) 2009-06-16 2015-06-09 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Autism-associated biomarkers and uses thereof
WO2011005496A2 (en) 2009-06-22 2011-01-13 Massachusetts Eye & Ear Infirmary Islet1 (isl1) and hearing loss
RS20120461A1 (en) 2009-07-02 2013-06-28 Musc Foundation For Research Development METHODS FOR STIMULATION OF LIVER REGENERATION
WO2011019393A2 (en) 2009-08-11 2011-02-17 President And Fellows Of Harvard College Class- and isoform-specific hdac inhibitors and uses thereof
US10155099B2 (en) 2009-09-21 2018-12-18 Cook Regentec Llc Method for infusing stem cells
AU2010314931A1 (en) 2009-11-05 2012-06-21 Taligen Therapeutics, Inc. Treatment of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria, hemolytic anemias and disease states involving intravascular and extravascular hemolysis
WO2011054939A2 (en) 2009-11-09 2011-05-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Compositions and methods for inhibiting expression of kif10 genes
EP2499159B1 (en) 2009-11-13 2017-01-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions, kits, and methods for the diagnosis, prognosis, monitoring, treatment and modulation of post-transplant lymphoproliferative disorders and hypoxia associated angiogenesis disorders using galectin-1
US20110152349A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Anke Geick Compositions and methods for inhibiting expression of il-18 genes
AU2011207210A1 (en) 2010-01-22 2012-08-16 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions,kits, and methods for identification, assessment, prevention, and therapy of metabolic disorders
US20110196016A1 (en) 2010-02-05 2011-08-11 Anke Geick Compositions and Methods for Inhibiting Expression of IKK2 Genes
US20150231215A1 (en) 2012-06-22 2015-08-20 Randolph J. Noelle VISTA Antagonist and Methods of Use
US10745467B2 (en) 2010-03-26 2020-08-18 The Trustees Of Dartmouth College VISTA-Ig for treatment of autoimmune, allergic and inflammatory disorders
EP2552947A4 (en) 2010-03-26 2013-11-13 Dartmouth College VISTA REGULATORY T CELL MEDIATOR PROTEIN, VISTA BINDING ACTIVE SUBSTANCES AND USE THEREOF
JP5860029B2 (ja) 2010-03-29 2016-02-16 アルナイラム ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッドAlnylam Pharmaceuticals, Inc. トランスチレチン(TTR)関連眼アミロイドーシスのためのsiRNA療法
EP2377888A1 (en) 2010-04-07 2011-10-19 Corimmun GmbH Fusion protein
US11020444B2 (en) * 2010-04-23 2021-06-01 Scicotec Gmbh Transluminal delivery of viruses for treatment of diseased tissue
PT2563450T (pt) 2010-04-28 2017-08-28 Kimberly Clark Co Dispositivo para entrega de medicação para a artrite reumatóide
DK2563453T3 (en) 2010-04-28 2017-05-22 Kimberly Clark Co Nano-patterned medical device with improved cellular interaction and process for its preparation
CN102985131B (zh) * 2010-04-28 2016-06-29 金伯利-克拉克环球有限公司 用于递送siRNA的医疗装置
AU2011311255B2 (en) 2010-04-28 2015-10-08 Sorrento Therapeutics, Inc. Method for increasing permeability of an epithelial barrier
JP5986990B2 (ja) 2010-05-14 2016-09-06 ザ リージェンツ オブ ザ ユニヴァーシティ オブ コロラド,ア ボディ コーポレート 改善された補体レセプター2(cr2)ターゲティング基
WO2011163412A1 (en) 2010-06-22 2011-12-29 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Antibodies to the c3d fragment of complement component 3
RU2586774C2 (ru) 2010-08-27 2016-06-10 Пантархей Байосайенс Б.В. Иммунотерапевтический способ лечения рака простаты
US9290760B2 (en) 2010-09-15 2016-03-22 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Modified iRNA agents
US20120076736A1 (en) * 2010-09-17 2012-03-29 Rochester Institute Of Technology Host supported genetic biosensors
BR112013009196A2 (pt) 2010-10-15 2020-08-25 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York usos de polipeptídeo para redução da aquisição de ácido graxo e da ingestão de alimento, bem como para promoção de saciedade relacionados à obesidade
EP3434772A3 (en) 2010-10-18 2019-03-20 Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of rrm2 genes
WO2012061537A2 (en) 2010-11-02 2012-05-10 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Methods for treating hair loss disorders
US9539427B2 (en) 2010-11-08 2017-01-10 The Johns Hopkins University Methods for improving heart function
GB2485385A (en) 2010-11-12 2012-05-16 Univ Manchester Trimeric fusion protein comprising collagen and a prokaryotic/ viral trimerisation domain
EP2640425A2 (en) 2010-11-18 2013-09-25 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Methods of treating obesity by inhibiting nicotinamide n-methyl transferase (nnmt)
WO2012075243A2 (en) 2010-12-01 2012-06-07 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for targeting sites of neovascular growth
EP2659271A4 (en) 2010-12-27 2015-04-08 Univ Brown THERAPEUTIC AND DIAGNOSTIC PROCEDURES USING BIGLYCAN AND UTROPHINE
US11458290B2 (en) 2011-05-11 2022-10-04 Ekos Corporation Ultrasound system
US9592398B2 (en) 2011-05-12 2017-03-14 Medtronic, Inc. Leadless implantable medical device with osmotic pump
KR20230084331A (ko) 2011-06-21 2023-06-12 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 아포리포단백질 c-iii(apoc3) 유전자의 발현 억제를 위한 조성물 및 방법
EP2723351B1 (en) 2011-06-21 2018-02-14 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibition of expression of protein c (proc) genes
JP6165723B2 (ja) 2011-06-30 2017-07-19 アローヘッド ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド B型肝炎ウイルスの遺伝子発現を阻害するための組成物および方法
US10093705B2 (en) 2011-09-13 2018-10-09 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods for brown fat induction and activity using FNDC5
WO2013055911A1 (en) 2011-10-14 2013-04-18 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Znf365/zfp365 biomarker predictive of anti-cancer response
MX355128B (es) 2011-10-14 2018-04-06 Genentech Inc Péptidos inhibidores de bace1 y uso de los mismos para el tratamiento de enfermedades o trastornos neurológicos.
KR102689177B1 (ko) 2011-11-18 2024-07-30 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 변형된 RNAi 제제
KR102063195B1 (ko) * 2012-02-07 2020-01-07 글로벌 바이오 테라퓨틱스, 인크. 핵산 전달의 구획화된 방법 및 이의 조성물 및 용도
US9550830B2 (en) 2012-02-15 2017-01-24 Novo Nordisk A/S Antibodies that bind and block triggering receptor expressed on myeloid cells-1 (TREM-1)
EP2814844B1 (en) 2012-02-15 2017-08-02 Novo Nordisk A/S Antibodies that bind and block triggering receptor expressed on myeloid cells-1 (trem-1)
EP2814842B1 (en) 2012-02-15 2018-08-22 Novo Nordisk A/S Antibodies that bind peptidoglycan recognition protein 1
US10039777B2 (en) 2012-03-20 2018-08-07 Neuro-Lm Sas Methods and pharmaceutical compositions of the treatment of autistic syndrome disorders
PL2830662T3 (pl) 2012-03-29 2019-02-28 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Sposoby leczenia zaburzeń utraty włosów
WO2013152230A1 (en) 2012-04-04 2013-10-10 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Smooth muscle specific inhibition for anti-restenotic therapy
JP6499578B2 (ja) 2012-06-05 2019-04-10 マフィン・インコーポレイテッドMuffin Incorporated 細胞療法に有用なカテーテルシステム及び方法
US9890215B2 (en) 2012-06-22 2018-02-13 King's College London Vista modulators for diagnosis and treatment of cancer
US9921221B2 (en) 2012-07-26 2018-03-20 Joslin Diabetes Center, Inc. Predicting and treating diabetic complications
AU2013296321B2 (en) 2012-08-03 2019-05-16 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Modified RNAi agents
WO2014022759A1 (en) 2012-08-03 2014-02-06 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Agents that modulate immune cell activation and methods of use thereof
AU2013302441B2 (en) 2012-08-17 2018-05-10 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Compositions and methods for detecting complement activation
US10413620B2 (en) 2012-08-17 2019-09-17 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Light-emitting versions of the monoclonal antibody to C3D (MAB 3D29) for imaging
CA2884704C (en) 2012-09-07 2023-04-04 Randolph J. Noelle Vista modulators for diagnosis and treatment of cancer
US9950047B2 (en) 2012-11-05 2018-04-24 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. XBP1, CD138, and CS1 peptides, pharmaceutical compositions that include the peptides, and methods of using such peptides and compositions
US9340787B2 (en) 2012-11-15 2016-05-17 Yale University Compositions and methods of using micro RNAs
EP2851086A1 (en) 2013-09-20 2015-03-25 Sanofi Serpins: methods of therapeutic ß-cell regeneration and function
EP2769732A1 (en) 2013-02-22 2014-08-27 Sanofi Serpins: methods of therapeutic beta-cell regeneration and function
EP2958585A1 (en) 2013-02-22 2015-12-30 Sanofi Serpins: methods of therapeutic beta-cell regeneration and function
JP6561042B2 (ja) 2013-03-13 2019-08-14 ジェンザイム・コーポレーション Pdgfおよびvegf結合部分を含む融合タンパク質ならびにその使用方法
AU2014236947A1 (en) 2013-03-15 2015-09-03 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Fusion proteins and methods thereof
EP2992112B1 (en) 2013-04-22 2020-06-03 Icahn School of Medicine at Mount Sinai Mutations in pdgfrb and notch3 as causes of autosomal dominant infantile myofibromatosis
WO2014178863A1 (en) 2013-05-01 2014-11-06 Genzyme Corporation Compositions and methods for treating spinal muscular atrophy
WO2014191630A2 (en) 2013-05-28 2014-12-04 Helsingin Yliopisto Non-human animal model encoding a non-functional manf gene
CA2913490A1 (en) 2013-06-06 2014-12-11 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods for identification, assessment, prevention, and treatment of cancer using pd-l1 isoforms
CA2915143C (en) 2013-06-13 2021-08-03 Orgenesis Ltd. Cell populations, methods of transdifferentiation and methods of use thereof
AU2014296288B2 (en) 2013-07-31 2020-02-13 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods for modulating thermogenesis using PTH-related and EGF-related molecules
US11364032B2 (en) 2013-08-08 2022-06-21 Global Bio Therapeutics, Inc. Clamp device for minimally invasive procedures and uses thereof
JP6293892B2 (ja) 2013-08-08 2018-03-14 グローバル・バイオ・セラピューティクス・インコーポレイテッドGlobal Bio Therapeutics,Inc. 低侵襲処置用インジェクションデバイスおよびその使用
EP3757130A1 (en) 2013-09-26 2020-12-30 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
JP6317440B2 (ja) 2013-10-29 2018-04-25 プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ 酸化ストレスを阻害するための方法および組成物
US10294295B2 (en) 2013-11-27 2019-05-21 Inis Biotech Llc Methods for modulating angiogenesis of cancers refractory to anti-VEGF treatment
US11708411B2 (en) 2013-12-20 2023-07-25 Wake Forest University Health Sciences Methods and compositions for increasing protective antibody levels induced by pneumococcal polysaccharide vaccines
US9682123B2 (en) 2013-12-20 2017-06-20 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Methods of treating metabolic disease
CN106661107B (zh) 2013-12-24 2021-12-24 杨森制药公司 抗vista抗体及片段
US11014987B2 (en) 2013-12-24 2021-05-25 Janssen Pharmaceutics Nv Anti-vista antibodies and fragments, uses thereof, and methods of identifying same
WO2015106128A2 (en) 2014-01-09 2015-07-16 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. MODIFIED RNAi AGENTS
AU2015249374A1 (en) 2014-04-24 2016-12-01 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Tumor suppressor and oncogene biomarkers predictive of anti-immune checkpoint inhibitor response
EP3155117A4 (en) 2014-06-11 2017-11-22 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Alpha1-antitrypsin compositions and methods of treating autoimmune diseases
WO2015191881A2 (en) 2014-06-11 2015-12-17 Green Kathy A Use of vista agonists and antagonists to suppress or enhance humoral immunity
WO2016011203A1 (en) 2014-07-15 2016-01-21 Life Technologies Corporation Compositions with lipid aggregates and methods for efficient delivery of molecules to cells
CN106536559B (zh) 2014-07-17 2021-04-27 诺和诺德股份有限公司 定点诱变trem-1抗体以降低黏度
JP7289610B2 (ja) 2014-08-20 2023-06-12 アルナイラム ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッド 修飾二本鎖rna剤
US20170246259A1 (en) 2014-09-10 2017-08-31 Georgetown University Compositions and Methods of Using Interleukin-4 Induced Gene 1 (IL-4I1)
JP6214790B2 (ja) 2014-09-16 2017-10-18 イース チャーム リミテッド 抗egfr抗体および同抗体の使用法
US10092742B2 (en) 2014-09-22 2018-10-09 Ekos Corporation Catheter system
AU2015328411C1 (en) 2014-10-06 2022-03-03 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Angiopoietin-2 biomarkers predictive of anti-immune checkpoint response
AU2015328163B2 (en) 2014-10-09 2020-10-15 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Multiple-variable IL-2 dose regimen for treating immune disorders
US20170304459A1 (en) 2014-10-10 2017-10-26 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for inhalation delivery of conjugated oligonucleotide
EP3215182B1 (en) 2014-11-05 2023-01-04 The Regents of The University of California Combination immunotherapy
WO2016080830A2 (en) 2014-11-18 2016-05-26 Pantarhei Bioscience B.V. Immunotherapeutic method for treating pancreatic cancer
CN107405398A (zh) 2014-12-05 2017-11-28 伊穆奈克斯特股份有限公司 鉴定vsig8作为推定vista受体及其用以产生vista/vsig8激动剂和拮抗剂的用途
US11220545B2 (en) 2014-12-08 2022-01-11 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods for upregulating immune responses using combinations of anti-RGMb and anti-PD-1 agents
WO2016105517A1 (en) 2014-12-23 2016-06-30 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Fusion proteins and methods thereof
MA41296A (fr) 2014-12-30 2017-11-07 Orgenesis Ltd Procédés de transdifférenciation et procédés d'utilisation de ceux-ci
WO2016131048A1 (en) 2015-02-13 2016-08-18 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Rna containing compositions and methods of their use
WO2016138287A1 (en) 2015-02-25 2016-09-01 Washington University METHODS TO DETECT MOTOR NEURON DISEASE COMPRISING MICRO-RNAs
WO2016144673A1 (en) 2015-03-06 2016-09-15 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Pd-l2 biomarkers predictive of pd-1 pathway inhibitor responses in esophagogastric cancers
US20180042998A1 (en) 2015-03-10 2018-02-15 University Of Massachusetts Targeting gdf6 and bmp signaling for anti-melanoma therapy
RS62672B1 (sr) 2015-04-03 2021-12-31 Univ Massachusetts Oligonukleotidna jedinjenja za tretman preeklampsije i drugih angiogenskih poremećaja
PT3277814T (pt) 2015-04-03 2020-07-28 Univ Massachusetts Compostos de oligonucleótidos para visar marn de huntingtina
ES2755725T3 (es) 2015-04-08 2020-04-23 Us Health Terapia génica viral como tratamiento para una enfermedad o un trastorno por almacenamiento de colesterol
AU2016258326A1 (en) 2015-05-05 2017-11-23 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd Nucleic acid-cationic polymer compositions and methods of making and using the same
EP3294332A4 (en) 2015-05-14 2018-12-26 Joslin Diabetes Center, Inc. Retinol-binding protein 3 (rbp3) as a protective factor in non-diabetic retinal degeneration
WO2016201136A1 (en) 2015-06-10 2016-12-15 Ekos Corporation Ultrasound catheter
DK3313882T3 (da) 2015-06-24 2020-05-11 Janssen Pharmaceutica Nv Anti-VISTA antistoffer og fragmenter
US10842763B2 (en) 2015-07-31 2020-11-24 The Johns Hopkins University Methods for cancer and immunotherapy using prodrugs of glutamine analogs
CA2994256A1 (en) 2015-07-31 2017-02-09 The Johns Hopkins University Methods and compositions for treating metabolic reprogramming disorders
FI3328827T3 (fi) 2015-07-31 2023-09-26 Univ Johns Hopkins Glutamiinianalogien aihiolääkkeitä
AU2016306275A1 (en) 2015-08-07 2018-02-08 Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. RNAi therapy for Hepatitis B virus infection
EP3334499A4 (en) 2015-08-14 2019-04-17 University of Massachusetts BIOACTIVE CONJUGATES FOR THE RELEASE OF OLIGONUCLEOTIDES
CA2997947A1 (en) 2015-09-09 2017-03-16 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Reduction of er-mam-localized app-c99 and methods of treating alzheimer's disease
EP3362074B1 (en) 2015-10-16 2023-08-09 President and Fellows of Harvard College Regulatory t cell pd-1 modulation for regulating t cell effector immune responses
WO2017066796A2 (en) 2015-10-16 2017-04-20 The Children's Medical Center Corporation Modulators of telomere disease
WO2017066712A2 (en) 2015-10-16 2017-04-20 The Children's Medical Center Corporation Modulators of telomere disease
US10188750B1 (en) 2015-10-23 2019-01-29 University Of South Florida Self-replicating cell selective gene delivery compositions, methods, and uses thereof
WO2017075329A2 (en) 2015-10-29 2017-05-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods for identification, assessment, prevention, and treatment of metabolic disorders using pm20d1 and n-lipidated amino acids
CA3005878A1 (en) 2015-11-19 2017-05-26 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Lymphocyte antigen cd5-like (cd5l)-interleukin 12b (p40) heterodimers in immunity
EP3769788A1 (en) 2016-01-13 2021-01-27 Genzyme Corporation Recombinant aav vectors expressing osteoprotective genes, including has2 and lubricin, useful in the treatment of osteoarthritis and related joint conditions in mammals
CA3011894A1 (en) 2016-01-31 2017-08-03 University Of Massachusetts Branched oligonucleotides
CA3014013A1 (en) 2016-02-12 2017-08-17 Janssen Pharmaceutica Nv Anti-vista (b7h5) antibodies
US20210309965A1 (en) 2016-03-21 2021-10-07 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. T-cell exhaustion state-specific gene expression regulators and uses thereof
CR20180537A (es) 2016-04-15 2019-03-04 Immunext Inc Anticuerpos vista antihumanos y su uso
CA2932910A1 (en) 2016-06-14 2017-12-14 Entos Pharmaceuticals Inc. Methods for diagnosing and treating metastatic cancer
JOP20170161A1 (ar) 2016-08-04 2019-01-30 Arrowhead Pharmaceuticals Inc عوامل RNAi للعدوى بفيروس التهاب الكبد ب
CA3033368A1 (en) 2016-08-12 2018-02-15 University Of Massachusetts Conjugated oligonucleotides
CA3034643A1 (en) 2016-09-20 2018-03-29 Ellen Weisberg Compositions and methods for identification, assessment, prevention, and treatment of aml using usp10 biomarkers and modulators
US11154591B2 (en) 2016-10-14 2021-10-26 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Methods of treating alcohol abuse disorder
US11007254B2 (en) 2016-10-17 2021-05-18 Musc Foundation For Research Development Compositions and methods for treating central nervous system injury
WO2018085836A1 (en) 2016-11-07 2018-05-11 Colorado State University Research Foundation Anti-hiv peptides
US10443055B2 (en) 2016-12-22 2019-10-15 Beth Israel Deaconess Medical Center Compounds that target MYC microRNA responsive elements for the treatment of MYC-associated cancer
WO2018191599A1 (en) 2017-04-14 2018-10-18 University Of Massachusetts Brown fat-selective adipokines
EP3635106A4 (en) 2017-05-08 2021-01-06 Orgenesis Ltd. TRANSDIFFERENTIAL CELL POPULATIONS AND METHOD OF USING THEM
US11820822B2 (en) 2017-06-06 2023-11-21 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods for sensitizing cancer cells to T cell-mediated killing by modulating molecular pathways
WO2018237066A1 (en) 2017-06-20 2018-12-27 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services CODON OPTIMIZED HUMAN NPC1 GENES FOR THE TREATMENT OF C1-TYPE NIEMANN-PICK DISEASE AND ASSOCIATED STATES
EP3642341A4 (en) 2017-06-23 2021-06-16 University Of Massachusetts TWO-DAY SELF-RELEASING SIRNA AND RELATED PROCEDURES
WO2019010274A1 (en) 2017-07-06 2019-01-10 Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. RNAI AGENTS OF INHIBITION OF ALPHA-ENAC GENE EXPRESSION AND METHODS OF USE
EP3675897A1 (en) 2017-09-01 2020-07-08 Dana Farber Cancer Institute, Inc. Immunogenic peptides specific to bcma and taci antigens for treatment of cancer
EP3460057A1 (en) 2017-09-22 2019-03-27 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Kdac variants and uses thereof
EP3691673A4 (en) 2017-10-05 2021-06-09 Epivax, Inc. REGULATORY T-CELL EPITOPES
JP7348185B2 (ja) 2017-12-21 2023-09-20 アルニラム ファーマスーティカルズ インコーポレイテッド キラル富化二本鎖rna剤
MX2020010204A (es) 2018-04-02 2021-01-29 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos anti-trem-1 y usos de los mismos.
BR112020020266A2 (pt) 2018-04-03 2021-01-19 Stridebio, Inc. Vetores de vírus com evasão de anticorpos
EP3773743A1 (en) 2018-04-03 2021-02-17 Stridebio, Inc. Virus vectors for targeting ophthalmic tissues
MX2020010466A (es) 2018-04-03 2021-01-08 Vectores de virus que evitan anticuerpos.
AU2019276372A1 (en) 2018-06-01 2020-12-24 Evotec International Gmbh Combination therapy for treating hepatitis B virus infection
CN112654366A (zh) 2018-06-21 2021-04-13 罗切斯特大学 治疗或抑制亨廷顿病发作的方法
JP2021533762A (ja) 2018-08-10 2021-12-09 ユニバーシティ・オブ・マサチューセッツUniversity Of Massachusetts Snpを標的化する修飾オリゴヌクレオチド
EP3626820A1 (en) 2018-09-20 2020-03-25 Fundación Imdea Nanociencia Anticancer compositions containing mirna mimics and uses thereof
US20220056444A1 (en) 2018-12-05 2022-02-24 Empirico Inc. Process to inhibit or eliminate eosinophilic diseases of the airway and related conditions
WO2020150265A1 (en) 2019-01-15 2020-07-23 Empirico Inc. Prodrugs of alox-15 inhibitors and methods of using the same
US20230057355A1 (en) 2019-02-13 2023-02-23 University Of Rochester Gene networks that mediate remyelination of the human brain
AU2020231218A1 (en) 2019-03-06 2021-09-16 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. T cell receptors specific to B-cell maturation antigen for treatment of cancer
KR20220011616A (ko) 2019-03-21 2022-01-28 스트라이드바이오 인코포레이티드 재조합 아데노 관련 바이러스 벡터
CN113924365A (zh) 2019-03-29 2022-01-11 迪克纳制药公司 用于治疗kras相关疾病或病症的组合物和方法
EP3962529A4 (en) 2019-04-30 2023-11-01 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. METHOD FOR CANCER TREATMENT USING ANTI-CX3CR1 AND IMMUNE CHECKPOINT BLOCKING REAGENTS COMBINATIONS
CN114072501A (zh) 2019-05-06 2022-02-18 马萨诸塞大学 抗c9orf72寡核苷酸及相关方法
EP4010476A4 (en) 2019-08-09 2023-12-27 University Of Massachusetts CHEMICALLY MODIFIED OLIGONUCLEOTIDES TARGETING SNPs
AU2020367532A1 (en) 2019-10-17 2022-05-12 Ginkgo Bioworks, Inc. Adeno-associated viral vectors for treatment of Niemann-Pick disease type C
AU2020397416A1 (en) 2019-12-03 2022-07-14 Evotec International Gmbh Interferon-associated antigen binding proteins for use in treating hepatitis B infection
CN115052625A (zh) 2019-12-03 2022-09-13 埃沃特克国际有限责任公司 干扰素相关抗原结合蛋白及其用途
EP4081302A1 (en) 2019-12-23 2022-11-02 University Of Massachusetts Oligonucleotides for tissue specific gene expression modulation
WO2021141733A1 (en) 2020-01-07 2021-07-15 The Procter & Gamble Company Method of modulating a fibrotic condition
CN115698291A (zh) 2020-05-28 2023-02-03 马萨诸塞大学 用于SARS-CoV-2调节的寡核苷酸
CN116171324A (zh) 2020-07-20 2023-05-26 丹娜法伯癌症研究院 用于治疗和预防冠状病毒感染的方法和组合物
KR20230068444A (ko) 2020-08-19 2023-05-17 사렙타 쎄러퓨틱스 인코퍼레이티드 레트 증후군의 치료를 위한 아데노 관련 바이러스 벡터
US12006550B2 (en) 2020-10-12 2024-06-11 University Of South Carolina Targeting treatment for ADAM30 in pathological cells
EP4229222A2 (en) 2020-10-19 2023-08-23 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Germline biomarkers of clinical response and benefit to immune checkpoint inhibitor therapy
WO2022159793A2 (en) 2021-01-25 2022-07-28 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods and compositions for identifying neuroendocrine prostate cancer
EP4291175A1 (en) 2021-02-11 2023-12-20 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods of treating cancers using sting agonists
IL305575A (en) 2021-03-02 2023-10-01 Dana Farber Cancer Inst Inc Methods for treating red blood cell disorders
WO2022240741A1 (en) 2021-05-12 2022-11-17 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Lag3 and gal3 inhibitory agents, xbp1, cs1, and cd138 peptides, and methods of use thereof
US20240280561A1 (en) 2021-06-08 2024-08-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods for treating and/or identifying an agent for treating intestinal cancers
CA3220925A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Kara Carter Interferon-associated antigen binding proteins for use for the treatment or prevention of coronavirus infection
AR126207A1 (es) 2021-06-23 2023-09-27 Univ Massachusetts Compuestos de oligonucleotidos anti-flt1 optimizados para el tratamiento de la preeclampsia y otros desordenes angiogénicos
EP4367243A1 (en) 2021-07-09 2024-05-15 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Methods for improving relaxation of striated myocytes
US20230270818A1 (en) 2021-11-02 2023-08-31 University Of Rochester Tcf7l2 mediated remyelination in the brain
WO2023097119A2 (en) 2021-11-29 2023-06-01 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods and compositions to modulate riok2
AU2023221961A1 (en) 2022-02-16 2024-09-26 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods for decreasing pathologic alpha-synuclein using agents that modulate fndc5 or biologically active fragments thereof
WO2024126289A1 (en) 2022-12-13 2024-06-20 Evotec International Gmbh Interferon-associated antigen binding proteins for use for the treatment or prevention of influenza virus infection
WO2024126293A1 (en) 2022-12-13 2024-06-20 Evotec International Gmbh Interferon-associated antigen binding proteins for use for the treatment or prevention of respiratory syncytial virus infection
WO2024126294A1 (en) 2022-12-13 2024-06-20 Evotec International Gmbh Interferon-associated antigen binding proteins for use for the treatment or prevention of parainfluenza virus infection
WO2024163747A2 (en) 2023-02-02 2024-08-08 University Of Rochester Competitive replacement of glial cells

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4351337A (en) * 1973-05-17 1982-09-28 Arthur D. Little, Inc. Biodegradable, implantable drug delivery device, and process for preparing and using the same
US4182330A (en) * 1977-07-25 1980-01-08 Alza Corporation Means for administering amphipathic medicament
US4332893A (en) * 1980-06-13 1982-06-01 Rosenberg Ralph A Process for the production of an insulin-producing cell line of pancreatic beta cells
US4353888A (en) * 1980-12-23 1982-10-12 Sefton Michael V Encapsulation of live animal cells
US4636195A (en) * 1982-04-02 1987-01-13 Harvey Wolinsky Method and apparatus for removing arterial constriction
US4824436A (en) * 1985-04-09 1989-04-25 Harvey Wolinsky Method for the prevention of restenosis
EP0273085A1 (en) * 1986-12-29 1988-07-06 IntraCel Corporation A method for internalizing nucleic acids into eukaryotic cells
DE3744785A1 (de) * 1987-12-11 1989-08-17 Theurer Karl Eugen Verwendung von ruecklaeufigen spiegelbildlichen anti-sense-nucleinsaeuren gegen krebserkrankungen
US5011472A (en) * 1988-09-06 1991-04-30 Brown University Research Foundation Implantable delivery system for biological factors
DE69034078T2 (de) 1989-03-21 2004-04-01 Vical, Inc., San Diego Expression von exogenen Polynukleotidsequenzen in Wirbeltieren
JPH04504216A (ja) * 1989-03-31 1992-07-30 ザ・リージエンツ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ミシガン 細胞の特定部位点滴注入または細胞の部位特異的形質転換による疾患の治療及び該治療のためのキット
US5049132A (en) * 1990-01-08 1991-09-17 Cordis Corporation Balloon catheter for delivering therapeutic agents
US7331366B1 (en) 2005-05-31 2008-02-19 Patterson Brian A Money and card holding assembly

Also Published As

Publication number Publication date
EP1213032A1 (en) 2002-06-12
DE1213032T1 (de) 2003-02-06
JP2001213806A (ja) 2001-08-07
JP2002239010A (ja) 2002-08-27
DK0591385T3 (da) 2002-06-24
EP1013287A3 (en) 2000-07-05
JPH06509328A (ja) 1994-10-20
DE69232497D1 (de) 2002-04-25
DE69232497T2 (de) 2002-11-14
CA2112376A1 (en) 1993-01-07
EP0591385B1 (en) 2002-03-20
EP1013287A2 (en) 2000-06-28
EP1927368A2 (en) 2008-06-04
EP1213032B1 (en) 2008-02-13
EP0591385A1 (en) 1994-04-13
EP0591385A4 (en) 1996-11-27
EP1927368A3 (en) 2008-06-11
ATE214576T1 (de) 2002-04-15
ES2301602T3 (es) 2008-07-01
WO1993000051A1 (en) 1993-01-07
US5328470A (en) 1994-07-12
ATE385810T1 (de) 2008-03-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP3712409B2 (ja) 細胞の部位特異的な点滴注入または細胞の部位特異的形質転換による疾患の治療およびそのためのキット
US7226589B2 (en) Treatment of diseases by site specific instillation of cells or site specific transformation of cells and kits therefor
Bonadio et al. Gene therapy for tissue repair and regeneration
US8119590B2 (en) Prevention and treatment of restenosis by local administration of drug
US7147846B2 (en) Prosthetic grafts
DE69233725T2 (de) Verwendung von DNA oder RNA zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Tumoren
JP2011087592A (ja) 微小器官外植片、及びその生産方法
WO1990011734A1 (en) Treatment of diseases by site-specific instillation of cells or site-specific transformation of cells and kits therefor
US7238673B2 (en) Treatment of diseases by site-specific instillation of cells or site-specific transformation of cells and kits therefor
Morgan et al. Gene therapy in tissue engineering
EP0753312A1 (en) Arteriosclerosis remedy
US20180126048A1 (en) Nanoparticle-medicated genetic delivery of growth inhibiting genes on balloon angioplasty to suppress intimal hyperplasia
Shively et al. Research initiatives in vascular disease
JP2003509463A (ja) 肺系のための細胞ベースの遺伝子治療
Ehsan et al. Gene Therapy for Cardiovascular Diseases: An Overview
Mangi et al. Gene therapy for cardiovascular disease and vascular grafts

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20050407

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20050817

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090826

Year of fee payment: 4

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100826

Year of fee payment: 5

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110826

Year of fee payment: 6

LAPS Cancellation because of no payment of annual fees