JP2007505840A - 新規ｇｌｐ−１誘導体 - Google Patents

新規ｇｌｐ−１誘導体 Download PDF

Info

Publication number
JP2007505840A
JP2007505840A JP2006526519A JP2006526519A JP2007505840A JP 2007505840 A JP2007505840 A JP 2007505840A JP 2006526519 A JP2006526519 A JP 2006526519A JP 2006526519 A JP2006526519 A JP 2006526519A JP 2007505840 A JP2007505840 A JP 2007505840A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
ethoxy
glp
lys
xaa
acetyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP2006526519A
Other languages
English (en)
Other versions
JP4949838B2 (ja
Inventor
ラウ、イェスパー
ハンセン、トーマス・クルセ
マドセン、クイェルド
ブロホ、パウ
デルバルト、フロレンシオ・ザラゴザ
ヨハンセン、ニルス・ランゲランド
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Novo Nordisk AS
Original Assignee
Novo Nordisk AS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novo Nordisk AS filed Critical Novo Nordisk AS
Publication of JP2007505840A publication Critical patent/JP2007505840A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP4949838B2 publication Critical patent/JP4949838B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/26—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/542—Carboxylic acids, e.g. a fatty acid or an amino acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/001—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof by chemical synthesis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/605—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

持続的な作用プロファイルを有する新規ポリペプチド誘導体

Description

発明の分野
本発明は、グルカゴン様ペプチド１−（ＧＬＰ−１）の誘導体及びその断片、及び持続的な作用プロファイルを有するこのような断片の類縁体、並びにそれらを製造及び使用する方法に関する。本発明は、さらに、エキセンディンの新規誘導体及びこのような誘導体の使用に関する。
発明の背景
ペプチドは、組換えＤＮＡ技術によって製造することができるので、医療行為において広く使用されており、今後も、その重要性は増大すると予測できる。野生型のペプチド又はその類縁体を治療に使用する場合、それらは高いクリアランスを有するのが一般的である。治療剤の血中レベルを長期にわたって高く維持したい場合には、反復投与が必要となるので、治療剤のクリアランスが高いと不都合である。高いクリアランスを有するペプチドの例は、ＡＣＴＨ、クルチコトロピン放出因子、アンギオテンシン、カルシトニン、インシュリン、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド−１、グルカゴン様ペプチド−２、インシュリン様増殖因子−１、インシュリン様増殖因子−２、胃酸分泌抑制ホルモン、成長ホルモン放出因子、下垂体アデニル酸シクラーゼ活性化ペプチド、セクレチン、エンテロガストリン、ソマトスタチン、ソマトトロピン、ソマトメジン、副甲状腺ホルモン、トロンボポイエチン、エリストポイエチン、下垂体放出因子、プロラクチン、甲状腺刺激ホルモン、エンドルフィン、エンケファリン、バソプレッシン、オキシトシン、オピオイド及びその類縁体、スーパーオキシドジスムターゼ、インターフェロン、アスパラギナーゼ、アルギナーゼ、アルギニンデアミナーゼ、アデノシンデアミナーゼ並びにリボヌクレアーゼである。幾つかの事例では、適切な薬学的組成物を適用することによって、ペプチドの放出プロファイルに影響を与えることが可能であるが、このアプローチには、様々な欠点があり、一般的には、適用できない。
現在進行中のヒトゲノムの調査などの結果、興味深い生物活性を有する公知の内在性ペプチド及びタンパク質の数が急速に増加している。それらの生物学的活性のために、これらのポリペプチドの多くは、原理的には、治療剤として使用することが可能である。しかしながら、内在性ペプチドは、ペプチダーゼによる急速な分解及び／又は腎臓ろ過及び尿中への排泄のため、半減期が数分であることが多いので、薬剤候補として適しているとは限らない。ヒト血漿中でのポリペプチドの半減期は、（数分から一週間超まで）極めて大きく変動する。同様に、小分子薬物の半減期も極めて大きく変動する。しかしながら、ペプチド、タンパク質又はその他の化合物の血漿半減期の変動がこのように極めて大きい理由は、よく理解されていない。このため、低い毒性と治療的な利点を維持しながら、インビボでの作用期間がさらに長い治療化合物を修飾することが必要である。血清アルブミンは、一週間を超える半減期を有しており、ペプチドの血漿半減期を増加させる一つのアプローチは、血清アルブミンを結合する化学物質を用いて、ペプチドを誘導化することである。
Ｋｎｕｄｓｅｎら（Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２０００， ４３，１６６４−１６６９）は、アシル化されたＧＬＰ−１ペプチドが高い受容体効力を示し、ブタでの血漿半減期を１０倍増加させることを示した。Ｚｏｂｅｌら（Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． ２００３，１３，１５１３−１５１５）は、リン酸エステルをベースとする、血清アルブミンに結合する小分子で抗凝固ペプチドのアミノ末端を誘導体化すると、ウサギでの抗凝固ペプチドの血漿半減期が、１０から５０倍増加することを示した。
発明の概要
本発明は、親水性スペーサーを介してアルブミン結合残基に連結された治療用ポリペプチドを含む化合物に関する。
本発明は、少なくとも５つの非水素原子を含み、これらの原子の３０から５０％がＮ又はＯの何れかである化学的部分によって、ポリペプチドとアルブミン結合残基とを分割する親水性スペーサーを介してアルブミン結合残基に連結された治療用ポリペプチドを含む化合物にも関する。
本発明の一実施形態において、前記スペーサーは、
−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＥ］ｍ（ＣＨ２）ｐＱｑ−、
（式中、
ｌ、ｍ及びｎは、独立に、１から２０であり、ｐは０から１０であり、
Ｑは、−Ｚ−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＧ］ｍ（ＣＨ２）ｐ−であり、
ｑは、０から５の範囲の整数であり、
各Ｄ、Ｅ及びＧは、−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｎ（ＣＯＲ４）−、−ＰＲ５（Ｏ）−及び−Ｐ（ＯＲ６）（Ｏ）−から独立に選択され（Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、独立に、水素又はＣ１−６−アルキルを表す。）、
Ｚは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−ＮＨＣ（Ｏ）−から選択され（ｓは、０又は１である。）、
又は薬学的に許容されるそれらの塩若しくはプロドラッグとして定義される。
本発明は、式（Ｉ）：
Figure 2007505840
（式中、
Ａは、アルブミン結合残基であり、
Ｂは、−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＥ］ｍ（ＣＨ２）ｐＱｑ−である親水性スペーサーであり、
（式中、
ｌ、ｍ及びｎは、独立に、１から２０であり、ｐは０から１０であり、
Ｑは、−Ｚ−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＧ］ｍ（ＣＨ２）ｐ−であり、
ｑは、０から５の範囲の整数であり、
各Ｄ、Ｅ及びＧは、−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｎ（ＣＯＲ４）−、−ＰＲ５（Ｏ）−及び−Ｐ（ＯＲ６）（Ｏ）−から独立に選択され（Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、独立に、水素又はＣ１−６−アルキルを表す。）、
Ｚは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−ＮＨＣ（Ｏ）−から選択され（ｓは、０又は１である。）、
Ｙは、Ｂと治療剤を連結する化学基であり、
Ｗは、ＡとＢを連結する化学基である。）
を有する化合物にも関する。
本発明は、式（ＩＩ）：
Figure 2007505840
（式中、
Ａ及びＡ’は、アルブミン結合残基であり、
Ｂ及びＢ’は、−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＥ］ｍ（ＣＨ２）ｐＱｑ−から独立に選択される親水性スペーサーであり、
（式中、
ｌ、ｍ及びｎは、独立に、１から２０であり、ｐは０から１０であり、
Ｑは、−Ｚ−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＧ］ｍ（ＣＨ２）ｐ−であり、
ｑは、０から５の範囲の整数であり、
各Ｄ、Ｅ及びＧは、−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｎ（ＣＯＲ４）−、−ＰＲ５（Ｏ）−及び−Ｐ（ＯＲ６）（Ｏ）−から独立に選択され（Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、独立に、水素又はＣ１−６−アルキルを表す。）、
Ｚは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−ＮＨＣ（Ｏ）−から選択され（ｓは、０又は１である。）、
Ｙは、Ｂと治療剤を連結する化学基であり、
Ｙ’は、Ｂ’と治療剤を連結する化学基であり、
Ｗは、ＡとＢを連結する化学基であり、
Ｗ’は、Ａ’とＢ’を連結する化学基である。）
を有する化合物にも関する。
別の側面において、本発明は、式（ＩＩＩ）：
Figure 2007505840
（式中、
Ａ及びＡ’は、アルブミン結合残基であり、
Ｂは、−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＥ］ｍ（ＣＨ２）ｐＱｑ−から選択される親水性スペーサーであり、
（式中、
ｌ、ｍ及びｎは、独立に、１から２０であり、ｐは０から１０であり、
Ｑは、−Ｚ−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＧ］ｍ（ＣＨ２）ｐ−であり、
ｑは、０から５の範囲の整数であり、
各Ｄ、Ｅ及びＧは、−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｎ（ＣＯＲ４）−、−ＰＲ５（Ｏ）−及び−Ｐ（ＯＲ６）（Ｏ）−から独立に選択され（Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、独立に、水素又はＣ１−６−アルキルを表す。）、
Ｚは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−ＮＨＣ（Ｏ）−から選択され（ｓは、０又は１である。）、
Ｙは、Ｂと治療剤を連結する化学基であり、
Ｗ’’は、Ｂ’をＡ及びＡ’と連結する化学基である。）
を有する化合物に関する。
別の側面において、本発明は、治療用ペプチドと一又は複数のアルブミン結合残基との間に親水性スペーサーを含む化合物であって、前記治療用ペプチドに比較して持続的な作用プロファイルを有し、前記化合物の前記アルブミン結合画分と遊離画分が何れも、治療用ポリペプチドの効果を媒介する受容体に結合することが可能である、化合物に関する。
一実施形態において、前記親水性スペーサーは、治療用ポリペプチドのアミノ基とアルブミン結合残基の官能基との間に架橋を形成する、適切な官能基を両端に有する非分岐オリゴエチレングリコール部分である。
本発明の別の側面において、治療用ポリペプチドがＧＬＰ−１ペプチドである。
定義
本明細書において、以下の用語は表記の意味を有する。
本明細書において使用される「アルブミン結合残基」という用語は、ヒト血清アルブミンに非共有的に結合する残基を意味する。治療用ポリペプチドに付着されたアルブミン結合残基は、典型的には、ヒト血清アルブミンに対して、１０μＭ未満、より好ましくは１μＭ未満の親和性を有する。４から４０個の炭素原子を含有する直鎖及び分岐親油性部分、シクロペンタノフェナントレン骨格を有する化合物、１０から３０個のアミノ酸残基を有するペプチドなどの中に、幅広いアルブミン結合残基が知られている。
本明細書において使用される「親水性スペーサー」という用語は、少なくとも５個の非水素原子を含み、これらのうち３０から５０％がＮ又はＯの何れかである化学的部分によって、ペプチドとアルブミン結合残基とを分割するスペーサーを意味する。
本明細書において使用される「治療用ポリペプチド」という用語は、治療用途のために開発されているか、又は治療用途のために開発されたポリペプチドを意味する。
本明細書において使用される「ポリペプチド」及び「ペプチド」という用語は、ペプチド結合によって接続された少なくとも５つの成分アミノ酸から構成される化合物を意味する。成分アミノ酸は、遺伝コードによってコードされるアミノ酸の群から得ることができ、遺伝コードによってコードされていない天然アミノ酸及び合成アミノ酸とすることもできる。遺伝コードによってコードされていない天然アミノ酸は、例えば、ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタミン酸、オルニチン、ホスホセリン、Ｄ−アラニン及びＤ−グルタミンである。合成アミノ酸には、化学的合成によって製造されるアミノ酸、すなわち、Ｄ−アラニン及びＤ−ロイシン、Ａｉｂ（α−アミノイソ酪酸）、Ａｂｕ（α−アミノ酪酸）、Ｔｌｅ（ｔｅｒｔ−ブチルグリシン）、β−アラニン、３−アミノメチル安息香酸、アンスラニル酸など、遺伝コードによってコードされるアミノ酸のＤ−異性体が含まれる。
本明細書において、ポリペプチドに関して使用される「類縁体」という用語は、ペプチドの一又は複数のアミノ酸残基が、他のアミノ酸残基によって置換されており、及び／又は、一又は複数のアミノ酸残基がペプチドから欠失されており、及び／又は、一又は複数のアミノ酸残基がペプチドから欠失されており、及び／又は、一又は複数のアミノ酸残基がペプチドに付加されている、修飾されたペプチドを意味する。アミノ酸残基のこのような付加又は欠失は、ペプチドのＮ末端及び／又はペプチドのＣ末端に生じ得る。類縁体を記載するために、以下のような簡易なシステムを使用する。例えば、［Ａｒｇ３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓは、天然に存在する３４位のリジンがアルギニンと置換され、リジン残基がＣ末端（３８位）に付加されたＧＬＰ−１類縁体を表す。ペプチド類縁体及びそれらの誘導体の式は、ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ命名法に従って使用される、アミノ酸の標準的な一文字略号を使用して描かれる。
ペプチドに関して、本明細書に使用されている「誘導体」という用語は、少なくとも一つの置換基が非修飾ペプチド又はその類縁体中に存在しない、化学的に修飾されたペプチド又はその類縁体、すなわち、共有結合によって修飾されたペプチドを意味する。典型的な修飾は、アミド、炭水化物、アルキル基、アシル基、エステルなどである。ＧＬＰ−１（７−３７）の誘導体の例は、Ｎε２６−（γ−Ｇｌｕ（Ｎα−ヘキサデカノイル）））−［Ａｒｇ３４、Ｌｙｓ２６］）ＧＬＰ−１（７−３７）である。
本明細書において使用される「ＧＬＰ−１ペプチド」という用語は、ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）、ＧＬＰ−１類縁体、ＧＬＰ−１誘導体又はＧＬＰ−１類縁体の誘導体を意味する。一実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドは、インシュリン分泌剤である。
本明細書において使用される「インシュリン分泌剤」という用語は、ヒトＧＬＰ−１受容体のアゴニストである化合物、すなわち、ヒトＧＬＰ−１受容体を含有する適切な溶媒中でｃＡＭＰの形成を刺激する化合物を意味する。インシュリン分泌剤の効力は、以下に記載されているように、用量応答曲線からＥＣ５０値を計算することによって決定される。
ヒトＧＬＰ−１受容体を発現する、安定に形質移入された細胞株ＢＨＫ４６７−１２Ａ（ｔｋ−ｔｓ１３）から得られた精製形質膜をＧＬＰ−１及びペプチド類縁体で刺激し、Perkin Elmer Life SciencesのAlphaScreenTM cAMP Assay Kitを用いて、ｃＡＭＰ産生の効力を測定した。
安定に形質移入された細胞株をＮＮで調製し、高発現クローンをスクリーニングのために選択した。ＤＭＥＭ、５％ ＦＣＳ、１％ Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ及び０．５ｍｇ／ｍｌ Ｇ４１８中、５％ＣＯ２で、細胞を増殖した。
約８０％集密度の細胞を、ＰＢＳで２回洗浄し、Ｖｅｒｓｅｎｅを用いて採集し、１０００ｒｐｍで５分間遠心し、上清を除去した。さらなる工程は全て、氷上で行った。１０ｍｌのＢｕｆｆｅｒ １（２０ｍＭ Ｎａ−ＨＥＰＥＳ、１０ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ＝７．４）中で、Ｕｌｔｒａｔｈｕｒａｘによって、２０から３０秒間、細胞ペレットをホモゲナイズし、２０，０００ｒｐｍで１５分間遠心し、１０ｍＬのＢｕｆｆｅｒ ２（２０ｍＭ Ｎａ−ＨＥＰＥＳ、０．１ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ＝７．４）中にペレットを再懸濁した。懸濁液を２０から３０秒間ホモゲナイズし、２０，０００ｒｐｍで１５分間遠心した。Ｂｕｆｆｅｒ ２中への懸濁、ホモゲナイズ及び遠心を一回繰り返し、膜をＢｕｆｆｅｒ ２中に再懸濁し、さらなる分析のために直ちに使用するか、又は−８０℃で保存した。
機能的受容体アッセイは、ペプチドによって誘導されたｃＡＭＰの産生をThe AlphaScreen Technologyによって測定することによって実施した。The AlphaScreen Technologyの基本的な原理は、内在性ｃＡＭＰと外から加えたビオチン−ｃＡＭＰとの競合である。ｃＡＭＰの捕捉は、アクセプタビーズに抱合された特異的抗体を使用することによって行われる。形成されたｃＡＭＰを計数し、AlphaFusion Microplate Analyzerで測定した。ＥＣ５０値は、Ｇｒａｐｈ−Ｐａｄ Ｐｒｉｓｍｅソフトウェアを用いて計算した。
本明細書において使用される「ＧＬＰ−２ペプチド」という用語は、ＧＬＰ−２（１−３３）、ＧＬＰ−２類縁体、ＧＬＰ−２誘導体又はＧＬＰ−２類縁体の誘導体を意味する。
本明細書において使用される「エキセンディン−４ペプチド」という用語は、エキセンディン−４（１−３９）、エキセンディン−４類縁体、エキセンディン−４誘導体又はエキセンディン−４類縁体の誘導体を意味する。一実施形態において、エキセンディン−４ペプチドは、インシュリン分泌剤である。
本明細書において使用される「安定なエキセンディン−４ペプチド」及び「安定なＧＬＰ−１ペプチド」という用語は、エキセンディン−４（１−３９）又はＧＬＰ−１（７−３７）から誘導された、化学的に修飾されたペプチド、すなわち、以下の方法によって決定した場合に、ヒトでのインビボ血漿排除半減期が少なくとも１０時間である類縁体又は誘導体を意味する。エキセンディン−４ペプチド又はＧＬＰ−１のヒトでの血漿排除半減期を測定する方法は、以下のとおりである。等張緩衝液、ｐＨ７．４、ＰＢＳ又は任意の他の適切な緩衝液中に、ペプチドを溶解する。この用量を末梢、好ましくは腹部又は大腿上部に注射する。最終排除部分をカバーするために、活性ペプチドの測定用血液試料を頻繁な間隔で、十分な期間にわたって採取する（例えば、投薬前、投薬から１、２、３、４、５、６、７、８、１０、１２、２４（第２日）、３６（第２日）、４８（第３日）、６０（第３日）、７２（第４日）及び８４（第４日）時間後）。活性ペプチドの濃度の測定は、「Ｗｉｌｋｅｎ ｅｔ ａｌ．、Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ ４３（５１）：Ａ１４３、２０００」に記載されているとおりに行う。得られた薬物動態学的パラメータは、市販のソフトウェアＷｉｎＮｏｎｌｉｎ Ｖｅｒｓｉｏｎ ２．１（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ、Ｃａｒｙ、ＮＣ、ＵＳＡ）を用いて、ノンコンパートメント法を使用することにより、それぞれの各被検体に対する濃度−時間データから算出される。最終排除速度定数は、濃度−時間曲線の最終対数線形部分に対する対数−線形回帰によって推計され、排除半減期を算出するために使用される。
本明細書において、ポリペプチドに関して使用される「ＤＰＰ−ＩＶ保護された」という用語は、化合物を血漿ペプチダーゼジペプチジルアミノペプチダーゼ−４（ＤＰＰ−ＩＶ）に対して耐性にするために化学的に修飾されたポリペプチドを意味する。血漿中のＤＰＰ−ＩＶ酵素は、幾つかのペプチドホルモン（例えば、ＧＬＰ−１、ＧＬＰ−２、エキセンディン−４など）の分解に関わっていることが知られている。このため、ＤＰＰ−ＩＶによる分解の速度を低下させるために、ＤＰＰ−ＩＶによって媒介される加水分解を受けるポリペプチドの類縁体及び誘導体を開発するための多大な努力が行われている。
ジペプチジルアミノペプチダーゼＩＶによる分解に対するペプチドの耐性は、以下の分解アッセイによって決定される。
ペプチドの分割量を、精製されたジペプチジルアミノペプチダーゼＩＶの分割量とともに、ｐＨ７から８の適切な緩衝液（緩衝液は、アルブミンでない。）中において、３７℃で、４から２２時間インキュベートする。酵素反応は、トリフルオロ酢酸の添加によって停止され、ＨＰＬＣ又はＬＣ−ＭＳ分析を用いて、ペプチド分解産物を分離し、定量する。この分析を実施するための一つの方法は、以下のとおりである。Ｚｏｒｂａｘ ３００ＳＢ−Ｃ１８（３０ｎｍ孔、５μｍ粒子）１５０ｘ２．１ｍＭカラムに、この混合物を適用し、０．１％のトリフルオロ酢酸中アセトニトリルの線形グラジエント（３０分にわたって、０％から１００％のアセトニトリル）により、０．５ｍＬ／分の流速で溶出する。ペプチド及びそれらの分解産物は、２１４ｎｍ（ペプチド結合）又は２８０ｎｍ（芳香族アミノ酸）における吸光度によってモニターすることができ、それらのピーク面積を積算することによって定量する。分解パターンは、分離されたピークのＭＳスペクトルを決定することが可能なＬＣ−ＭＳを使用することによって決定することができる。ペプチドＤＰＰＩＶ安定性を推測するために、ある時刻における、分解されていない化合物／分解された化合物のパーセントが使用される。
ある時刻におけるパーセント非分解化合物に基づいて、天然ペプチドより１０倍安定な場合に、ペプチドは、ＤＰＰＩＶ安定化されていると定義される。このように、ＤＰＰＩＶ安定化されたＧＬＰ−１化合物は、ＧＬＰ−１（７−３７）より少なくとも１０倍安定である。
本明細書において使用される「Ｃ１−６アルキル」という用語は、１から６個の原子を有する、飽和、分岐、直鎖又は環状炭化水素基を意味する。代表的な例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソヘキシル、シクロヘキサンなどが含まれるが、これらに限定されるものではない。
発明の詳細な説明
本発明は、親水性スペーサーを介してアルブミン結合残基に連結された治療用ポリペプチドを含む化合物に関する。
本発明は、少なくとも５つの非水素原子を含み、これらの原子の３０から５０％がＮ又はＯの何れかである化学的部分によって、ポリペプチドとアルブミン結合残基とを分割する親水性スペーサーを介してアルブミン結合残基に連結された治療用ポリペプチドを含む化合物にも関する。
本発明の一実施形態において、前記スペーサーは、
−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＥ］ｍ（ＣＨ２）ｐＱｑ−
（式中、
ｌ、ｍ及びｎは、独立に、１から２０であり、ｐは０から１０であり、
Ｑは、−Ｚ−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＧ］ｍ（ＣＨ２）ｐ−であり、
ｑは、０から５の範囲の整数であり、
各Ｄ、Ｅ及びＧは、−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｎ（ＣＯＲ４）−、−ＰＲ５（Ｏ）−及び−Ｐ（ＯＲ６）（Ｏ）−から独立に選択され（Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、独立に、水素又はＣ１−６−アルキルを表す。）、
Ｚは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−ＮＨＣ（Ｏ）−から選択される。（ｓは、０又は１である。））、
又は薬学的に許容されるそれらの塩若しくはプロドラッグとして定義される。
本発明は、式（Ｉ）：
Ａ−Ｗ−Ｂ−Ｙ−治療用ペプチド（Ｉ）
（式中、
Ａは、アルブミン結合残基であり、
Ｂは、−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＥ］ｍ（ＣＨ２）ｐＱｑ−である親水性スペーサーであり、
（式中、
ｌ、ｍ及びｎは、独立に、１から２０であり、ｐは０から１０であり、
Ｑは、−Ｚ−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＧ］ｍ（ＣＨ２）ｐ−であり、
ｑは、０から５の範囲の整数であり、
各Ｄ、Ｅ及びＧは、−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｎ（ＣＯＲ４）−、−ＰＲ５（Ｏ）−及び−Ｐ（ＯＲ６）（Ｏ）−から独立に選択され（Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、独立に、水素又はＣ１−６−アルキルを表す。）、
Ｚは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−ＮＨＣ（Ｏ）−から選択され（ｓは、０又は１である。）
Ｙは、Ｂと治療剤を連結する化学基であり、
Ｗは、ＡとＢを連結する化学基である。）
を有する化合物にも関する。
本発明は、式（ＩＩ）：
Ａ−Ｗ−Ｂ−Ｙ−治療用ポリペプチド−Ｙ’−Ｂ’−Ｗ’−Ａ’（ＩＩ）
（式中、
Ａ及びＡ’は、アルブミン結合残基であり、
Ｂ及びＢ’は、−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＥ］ｍ（ＣＨ２）ｐＱｑ−から独立に選択される親水性スペーサーであり、
（式中、
ｌ、ｍ及びｎは、独立に、１から２０であり、ｐは０から１０であり、
Ｑは、−Ｚ−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＧ］ｍ（ＣＨ２）ｐ−であり、
ｑは、０から５の範囲の整数であり、
各Ｄ、Ｅ及びＧは、−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｎ（ＣＯＲ４）−、−ＰＲ５（Ｏ）−及び−Ｐ（ＯＲ６）（Ｏ）−から独立に選択され（Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、独立に、水素又はＣ１−６−アルキルを表す。）、
Ｚは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−ＮＨＣ（Ｏ）−から選択され（ｓは、０又は１である。）、
Ｙは、Ｂと治療剤を連結する化学基であり、
Ｙ’は、Ｂ’と治療剤を連結する化学基であり、
Ｗは、ＡとＢを連結する化学基であり、
Ｗ’は、Ａ’とＢ’を連結する化学基である。）
を有する化合物にも関する。
本発明の一実施形態において、Ｙ’は、Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨＣ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）−及び−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ｓは、０又は１である。）からなる群から選択される。
本発明のさらなる実施形態において、Ｗ’は、Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨＣ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）−及び−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ｓは、０又は１である。）からなる群から選択される。
別の側面において、本発明は、式（ＩＩＩ）：
Figure 2007505840
（式中、
Ａ及びＡ’は、アルブミン結合残基であり、
Ｂは、−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＥ］ｍ（ＣＨ２）ｐＱｑ−から選択される親水性スペーサーであり、
（式中、
ｌ、ｍ及びｎは、独立に、１から２０であり、ｐは０から１０であり、
Ｑは、−Ｚ−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＧ］ｍ（ＣＨ２）ｐ−であり、
ｑは、０から５の範囲の整数であり、
各Ｄ、Ｅ及びＧは、−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｎ（ＣＯＲ４）−、−ＰＲ５（Ｏ）−及び−Ｐ（ＯＲ６）（Ｏ）−から独立に選択され（Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、独立に、水素又はＣ１−６−アルキルを表す。）、
Ｚは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−ＮＨＣ（Ｏ）−から選択され（ｓは、０又は１である。）、
Ｙは、Ｂと治療剤を連結する化学基であり、
Ｗ’’は、ＢをＡ及びＡ’と連結する化学基である。）
を有する化合物に関する。
別の側面において、本発明は、治療用ペプチドと一又は複数のアルブミン結合残基との間に親水性スペーサーを含む化合物であって、前記治療用ペプチドに比較して持続的な作用プロファイルを有し、前記化合物の前記アルブミン結合画分と遊離画分が何れも、治療的ポリペプチドの効果を媒介する受容体に結合することが可能である、化合物に関する。
一実施形態において、前記親水性スペーサーは、治療用ポリペプチドのアミノ基とアルブミン結合残基の官能基との間に架橋を形成する、適切な官能基を両端に有する非分岐オリゴエチレングリコール部分である。
一実施形態において、Ｙは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨＣ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）−及び−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ｓは、０又は１である。）からなる群から選択される。
別の実施形態において、Ｗは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨＣ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）−及び−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ｓは、０又は１である。）からなる群から選択される。
別の実施形態において、Ｗ’’は、
Figure 2007505840
からなる群から選択される。
（式中、ｓは、０、１又は２である。）
別の実施形態において、ｌは１又は２であり、ｎ及びｍは独立に１から１０であり、ｐは０から１０である。
別の実施形態において、Ｄは−Ｏ−である。
本発明の別の実施形態において、Ｅは−Ｏ−である。
本発明のさらに別の実施形態において、前記親水性スペーサーは、
−ＣＨ２Ｏ［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ（ＣＨ２）ｐＱｑ−である（式中、ｍは１から１０であり、ｐは１から３であり、Ｑは−Ｚ−ＣＨ２Ｏ［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ（ＣＨ２）ｐ−である。）。
別の実施形態において、ｑは１である。
別の実施形態において、Ｇは−Ｏ−である。
本発明のさらに別の実施形態において、Ｚは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−及び−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−からなる群から選択される。
さらに別の実施形態において、ｑは０である。
別の実施形態において、ｌは２である。
別の実施形態において、ｎは２である。
さらに別の実施形態において、親水性スペーサーＢは、−［ＣＨ２ＣＨ２Ｏ］ｍ＋１（ＣＨ２）ｐＱｑ−である。
さらに別の実施形態において、親水性スペーサーＢは、−（ＣＨ２）ｌ−Ｏ−［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｍ−（ＣＨ２）ｐ−［Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）ｌ−Ｏ−［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｍ−（ＣＨ２）ｐ］ｑ−である（式中、ｌ、ｍ、ｎ及びｐは、独立に１から５であり、ｑは０から５である。）。
さらに別の実施形態において、−Ｗ−Ｂ−Ｙ−は、
Figure 2007505840
からなる群から選択される。
さらに別の実施形態において、＞Ｗ’’−Ｂ−Ｙ−は、
Figure 2007505840
である。
さらに別の実施形態において、アルブミン結合残基Ａは、
Figure 2007505840
（式中、キラル炭素原子は、Ｒ又はＳの何れかである。）
Figure 2007505840
（式中、キラル炭素原子は、Ｒ又はＳの何れかである。）
Figure 2007505840
（式中、キラル炭素原子は、Ｒ又はＳの何れかである。）
Figure 2007505840
（式中、２つのキラル炭素原子は、独立に、Ｒ又はＳの何れかである。）
Figure 2007505840
（式中、２つのキラル炭素原子は、独立に、Ｒ又はＳの何れかである。）
Figure 2007505840
（式中、２つのキラル炭素原子は、独立に、Ｌ又はＤの何れかである。）
Figure 2007505840
（式中、キラル炭素原子は、Ｒ又はＳの何れかである。）
Figure 2007505840
（式中、キラル炭素原子は、Ｒ又はＳの何れかである。）
Figure 2007505840
（式中、２つのキラル炭素原子は、独立に、Ｒ又はＳの何れかである。）
Figure 2007505840
（式中、２つのキラル炭素原子は、独立に、Ｒ又はＳの何れかである。）
Figure 2007505840
Figure 2007505840
Figure 2007505840
からなる群から選択される。
さらに別の実施形態において、前記親水性スペーサーの分子量は、８０Ｄから１０００Ｄの範囲又は８０Ｄから３００Ｄｎｏ範囲にある。
本発明の別の実施形態において、前記アルブミン結合残基は親油性残基である。
別の実施形態において、前記アルブミン結合残基は、生理的ｐＨにおいて負に帯電している。別の実施形態において、前記アルブミン結合残基は、負に帯電することが可能な基を含む。負に帯電することが可能な一つの好ましい基は、カルボン酸基である。
本発明の別の実施形態において、前記アルブミン結合残基はアルブミンに非共有結合する。別の実施形態において、前記アルブミン結合残基は、ヒト血清アルブミンに対して、約１０μＭ未満又は約１μＭ未満である結合親和性を有する。
本発明のさらに別の実施形態において、前記アルブミン結合残基は、直鎖アルキル基、分岐アルキル基、ω−カルボン酸基、部分的に又は完全に水素化されたシクロペンタノフェナントレン骨格を有する基から選択される。
別の実施形態において、前記アルブミン結合残基はシバクロニル残基である。
別の実施形態において、前記アルブミン結合残基は６から４０個の炭素原子、８から２６個の炭素原子又は８から２０個の炭素原子を有する。
別の実施形態において、前記アルブミン結合残基は、ＣＨ３（ＣＨ２）ｒＣＯ−（式中ｒは、４から３８の整数であり、好ましくは４から２４の整数である。）を含む群から選択されるアシル基であり、より好ましくは、ＣＨ３（ＣＨ２）６ＣＯ−、ＣＨ３（ＣＨ２）８ＣＯ−、ＣＨ３（ＣＨ２）１０ＣＯ−、ＣＨ３（ＣＨ２）１２ＣＯ−、ＣＨ３（ＣＨ２）１４ＣＯ−、ＣＨ３（ＣＨ２）１６ＣＯ−、ＣＨ３（ＣＨ２）１８ＣＯ−、ＣＨ３（ＣＨ２）２０ＣＯ−及びＣＨ３（ＣＨ２）２２ＣＯ−を含む群から選択されるアシル基である。
別の実施形態において、前記アルブミン結合残基は、直鎖又は分岐アルカンα，ω−ジカルボン酸のアシル基である。
別の実施形態において、前記アルブミン結合残基は、ＨＯＯＣ（ＣＨ２）ｓＣＯ−（式中ｓは、４から３８の整数であり、好ましくは４から２４の整数である。）を含む群から選択されるアシル基であり、より好ましくは、ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１４ＣＯ−、ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１６ＣＯ−、ＨＯＯＣ（ＣＨ２）１８ＣＯ−、ＨＯＯＣ（ＣＨ２）２０ＣＯ−及びＨＯＯＣ（ＣＨ２）２２ＣＯ−を含む群から選択されるアシル基である。
別の実施形態において、前記アルブミン結合残基は、式ＣＨ３（ＣＨ２）ｖＣＯ−ＮＨＣＨ（ＣＯＯＨ）（ＣＨ２）２ＣＯ−（ｖは、１０から２４の整数である。）の基である。
別の実施形態において、前記アルブミン結合残基は、式ＣＨ３（ＣＨ２）ｗＣＯ−ＮＨＣＨ（（ＣＨ２）２ＣＯＯＨ）ＣＯ−（ｗは、８から２４の整数である。）の基である。
別の実施形態において、前記アルブミン結合残基は、式ＣＯＯＨ（ＣＨ２）ｘＣＯ−（ｘは、８から２４の整数である。）の基である。
別の実施形態において、前記アルブミン結合残基は、式ＮＨＣＨ（ＣＯＯＨ）（ＣＨ２）４ＮＨ−ＣＯ（ＣＨ２）ｙＣＨ３（ｙは、８から１８の整数である。）の基である。
本発明の別の実施形態において、前記アルブミン結合残基は、４０個未満のアミノ酸残基を含むペプチドなどのペプチドである。アルブミン結合残基である多数の小ペプチド及びそれらの同定法は、「Ｊ． Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ． ２７７，３８（２００２）３５０３５−３５０４３」に記載されている。
本発明の別の実施形態において、前記アルブミン結合残基が、スペーサー及びリンカーを介して、リジン残基のε−アミノ基を介して前記治療用ポリペプチドに付着される。
別の実施形態において、スペーサー及びリンカーを介する前記アルブミン結合残基は、システイン、グルタミン酸及びアスパラギン酸から選択されるアミノ酸を介して前記治療用ポリペプチドに付着される。
本発明の一実施形態において、前記治療用ポリペプチドはＧＬＰ−１ペプチドである。
本発明の別の実施形態では、前記治療用ポリペプチドは、式（ＩＶ）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｘａａ１６−Ｓｅｒ−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｇｌｕ−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ａｌａ−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｘａａ３０−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１−Ｘａａ４２−Ｘａａ４３−Ｘａａ４４−Ｘａａ４５−Ｘａａ４６
式（ＩＶ）（配列番号２）
（式中、
Ｘａａ７は、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、β−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、Ｎα−アセチル−ヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジン、α−メチル−ヒスチジン、３−ピリジルアラニン、２−ピリジルアラニン又は４−ピリジルアラニンであり；
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ａｉｂ、（１−アミノシクロプロピル）カルボン酸、（１−アミノシクロブチル）カルボン酸、（１−アミノシクロペンチル）カルボン酸、（１−アミノシクロヘキシル）カルボン酸、（１−アミノシクロヘプチル）カルボン酸又は（１−アミノシクロオクチル）カルボン酸であり；
Ｘａａ１６は、Ｖａｌ又はＬｅｕであり；
Ｘａａ１８は、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ又はＡｒｇであり；
Ｘａａ１９は、Ｔｙｒ又はＧｌｎであり；
Ｘａａ２０は、Ｌｅｕ又はＭｅｔであり；
Ｘａａ２２は、Ｇｌｙ、Ｇｌｕ又はＡｉｂであり；
Ｘａａ２３は、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ又はＡｒｇであり；
Ｘａａ２５は、Ａｌａ又はＶａｌであり；
Ｘａａ２６は、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ又はＡｒｇであり；
Ｘａａ２７は、Ｇｌｕ又はＬｅｕであり；
Ｘａａ３０は、Ａｌａ、Ｇｌｕ又はＡｒｇであり；
Ｘａａ３３は、Ｖａｌ又はＬｙｓであり；
Ｘａａ３４は、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ａｓｎ又はＡｒｇであり；
Ｘａａ３５は、Ｇｌｙ又はＡｉｂであり；
Ｘａａ３６は、Ａｒｇ、Ｇｌｙ又はＬｙｓであり；
Ｘａａ３７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｇｌｕ、Ｐｒｏ、Ｌｙｓ、アミドであり、又は存在せず；
Ｘａａ３８は、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、アミドであり、又は存在せず．
Ｘａａ３９は、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、アミドであり、又は存在せず；
Ｘａａ４０は、Ｇｌｙ、アミドであり、又は存在せず；
Ｘａａ４１は、Ａｌａ、アミドであり、又は存在せず；
Ｘａａ４２は、Ｐｒｏ、アミドであり、又は存在せず；
Ｘａａ４３は、Ｐｒｏ、アミドであり、又は存在せず；
Ｘａａ４４は、Ｐｒｏ、アミドであり、又は存在せず；
Ｘａａ４５は、Ｓｅｒ、アミドであり、又は存在せず；
Ｘａａ４６は、アミドであり、又は存在せず；
但し、Ｘａａ３８、Ｘａａ３９、Ｘａａ４０、Ｘａａ４１、Ｘａａ４２、Ｘａａ４３、Ｘａａ４４、Ｘａａ４５又はＸａａ４６が存在しなければ、下流の各アミノ酸残基も存在しない。））
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１ペプチドである。
本発明の別の実施形態では、前記ポリペプチドは、式（Ｖ）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｘａａ１８−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｘａａ２６−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｘａａ３０−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｘａａ３８
式（Ｖ）（配列番号３）
（式中、
Ｘａａ７は、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、β−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、Ｎα−アセチル−ヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジン、α−メチル−ヒスチジン、３−ピリジルアラニン、２−ピリジルアラニン又は４−ピリジルアラニンであり；
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ａｉｂ、（１−アミノシクロプロピル）カルボン酸、（１−アミノシクロブチル）カルボン酸、（１−アミノシクロペンチル）カルボン酸、（１−アミノシクロヘキシル）カルボン酸、（１−アミノシクロヘプチル）カルボン酸又は（１−アミノシクロオクチル）カルボン酸；
Ｘａａ１８は、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ又はＡｒｇであり；
Ｘａａ２２は、Ｇｌｙ、Ｇｌｕ又はＡｉｂであり；
Ｘａａ２３は、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ又はＡｒｇであり；
Ｘａａ２６は、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ又はＡｒｇであり；
Ｘａａ３０は、Ａｌａ、Ｇｌｕ又はＡｒｇであり；
Ｘａａ３４は、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ又はＡｒｇであり；
Ｘａａ３５は、Ｇｌｙ又はＡｉｂであり；
Ｘａａ３６は、Ａｒｇ又はＬｙｓであり；
Ｘａａ３７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｇｌｕ又はＬｙｓであり；
Ｘａａ３８は、Ｌｙｓ、アミドであり、又は存在しない。））
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１ペプチドである。
本発明のさらに別の実施形態において、前記ＧＬＰ−１ペプチドは、ＧＬＰ−１（７−３５）、ＧＬＰ−１（７−３６）、ＧＬＰ−１（７−３６）−アミド、ＧＬＰ−１（７−３７）、ＧＬＰ−１（７−３８）、ＧＬＰ−１（７−３９）、ＧＬＰ−１（７−４０）、ＧＬＰ−１（７−４１）又はそれらの類縁体から選択される。
別の実施形態において、前記ＧＬＰ−１ペプチドは、ＧＬＰ−１（７−３５）、ＧＬＰ−１（７−３６）、ＧＬＰ−１（７−３６）−アミド、ＧＬＰ−１（７−３７）、ＧＬＰ−１（７−３８）、ＧＬＰ−１（７−３９）、ＧＬＰ−１（７−４０）及びＧＬＰ−１（７−４１）又はそれらの類縁体から選択されるペプチドの断片である。
本発明の別の実施形態において、前記ＧＬＰ−１ペプチドはＧＬＰ−１（Ａ−Ｂ）（Ａは、１から７の整数であり、Ｂ又は３８から４５の整数である。）、又は親水性スペーサーを介して、Ｃ末端アミノ酸残基に付着された一つのアルブミン結合残基を含み、他のアミノ酸残基の一つに付着された第二のアルブミン結合残基を必要に応じて含むその類縁体である。
別の実施形態において、前記ＧＬＰ−１ペプチドは、ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）に比べて、交換、付加若しくは欠失された１５以下のアミノ酸残基を含み、又はＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）に比べて、交換、付加若しくは欠失された１０以下のアミノ酸残基を含む。
別の実施形態において、前記ＧＬＰ−１ペプチドは、ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）に比べて、交換、付加若しくは欠失された６以下のアミノ酸残基を含む。
別の実施形態において、前記ＧＬＰペプチドは、遺伝コードによってコードされていない４以下のアミノ酸残基を含む。
別の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドは、ＤＰＰＩＶ保護されたＧＬＰ−１ペプチドである。
別の実施形態において、本発明の化合物はＤＰＰＩＶ安定化されている。
別の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドは、８位にＡｉｂ残基を含む。
別の実施形態において、前記ＧＬＰ−１ペプチドの７位のアミノ酸残基は、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、β−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、Ｎα−アセチル−ヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジン、α−メチル−ヒスチジン、３−ピリジルアラニン、２−ピリジルアラニン及び４−ピリジルアラニンからなる群から選択される。
別の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドは、Ａｒｇ３４ＧＬＰ−１（７−３７）、Ｌｙｓ３８Ａｒｇ２６，３４ＧＬＰ−１（７−３８）、Ｌｙｓ３８Ａｒｇ２６，３４ＧＬＰ−１（７−３８）−ＯＨ、Ｌｙｓ３６Ａｒｇ２６，３４ＧＬＰ−１（７−３６）、Ａｉｂ８，２２，３５ＧＬＰ−１（７−３７）、Ａｉｂ８，３５ＧＬＰ−１（７−３７）、Ａｉｂ８，２２ＧＬＰ−１（７−３７）、Ａｉｂ８，２２，３５Ａｒｇ２６，３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，３５Ａｒｇ２６，３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２Ａｒｇ２６，３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２，３５Ａｒｇ２６，３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，３５Ａｒｇ２６，３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２，３５Ａｒｇ２６Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，３５Ａｒｇ２６Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２Ａｒｇ２６Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２，３５Ａｒｇ３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，３５Ａｒｇ３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２Ａｒｇ３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２，３５Ａｌａ３７Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，３５Ａｌａ３７Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２Ａｌａ３７Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７ＧＬＰ−１（７−３７）、Ａｉｂ８，３５Ｌｙｓ３７ＧＬＰ−１（７−３７）及びＡｉｂ８，２２Ｌｙｓ３７ＧＬＰ−１（７−３８）からなる群から選択される。
別の実施形態において、前記ＧＬＰ−１ペプチドは、アミノ酸配列配列番号１に対して、２３、２６、３４、３６又は３８位のアミノ酸残基を介して、前記親水性スペーサーに付着されている。
別の実施形態において、前記ＧＬＰ−１ペプチドは、エキセンディン−４（配列番号４）である。
別の実施形態において、前記ＧＬＰ−１ペプチドは、ＺＰ−１０、すなわち、ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＳＫＫＫＫＫＫ−アミド（配列番号５）である。
別の実施形態において、前記ＧＬＰ−１ペプチドは、ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＸ（Ｘ＝Ｐ若しくはＹであり、又はその断片若しくは類縁体である。）である。
本発明の別の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドは、
Ａｒｇ１８、Ｌｅｕ２０、Ｇｌｎ３４、Ｌｙｓ３３（Ｎε−（γ−アミノブチロイル（Ｎα−ヘキサデカノイル）））エキセンディン−４−（７−４５）−アミド又はＡｒｇ３３、Ｌｅｕ２０、Ｇｌｎ３４、Ｌｙｓ１８（Ｎε−（γ−アミノブチロイル（Ｎα−ヘキサデカノイル）））エキセンディン−４−（７−４５）−アミドである。
本発明の別の実施形態において、一つのアルブミン結合残基は、親水性スペーサーを介して、前記ＧＬＰ−１ペプチドのＣ末端アミノ酸残基に付着されている。
本発明の別の実施形態において、第二のアルブミン結合残基は、ＧＬＰ−１ペプチドのＣ末端アミノ酸残基でないアミノ酸残基に付着されている。
別の実施形態において、親油性置換基は、スペーサーのカルボキシル基がＧＬＰ−１ペプチドのアミノ基とアミド結合を形成するように、親水性スペーサーによってＧＬＰ−１ペプチドに付着される。
本発明の別の実施形態において、前記化合物は、
Ｎε３７−（２−（２−（２−（ドデシルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
Figure 2007505840
Ｎε３７−（２−（２−（２−（１７−スルホヘキサデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
Figure 2007505840
Ｎε３７−｛２−［２−（２−（１５−カルボキシペンタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチル｝−［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
Figure 2007505840
Ｎε３７−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
Figure 2007505840
Ｎε３７−（２−（２−（２−（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
Figure 2007505840
Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）Ｌｙｓ（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリル）−ＯＨ
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（ヘキサデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
Ｎε３７−（２−［２−（２，６−（Ｓ）−Ｂｉｓ−｛２−［２−（２−（ドデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ｝ヘキサノイルアミノ）エトキシ］エトキシ｝）アセチル−［Ａｉｂ８，２２，３５］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
Figure 2007505840
Ｎε３７−（２−［２−（２，６−（Ｓ）−Ｂｉｓ−｛２−［２−（２−（テトラデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ｝ヘキサノイルアミノ）エトキシ］エトキシ｝）アセチル−［Ａｉｂ８，２２，３５］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８，２２，３５］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−｛２−［４−［４−（４−アミノ−９，１０−ジオキソ−３−スルホ−９，１０−ジヒドロ−アントラセン−１−イルアミノ）−２−スルホ−フェニルアミノ］−６−（２−スルホ−フェニルアミノ）−［１，３，５］トリアジン−２−イルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチル））アミド
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８，２２，３５］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（１５−カルボキシペンタデカノイルアミノ）−エトキシ］エトキシ｝アセチルアミノ）エトキシ］エトキシ｝アセチルアミノ）エトキシ］エトキシ｝アセチル））アミド
Figure 2007505840
Ｎε３７−（［２−（２−｛３−［２，５−ジオキソ−３−（１５−カルボキシペンタデシルスルファニル）−ピロリジン−１−イル］−プロピオニルアミノ｝エトキシ）エトキシ）アセチル］−［Ｄ−Ａｌａ８，Ｌｙｓ３７］−ＧＬＰ−１−［７−３７］アミド
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８，２２，３５Ａｌａ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−（２−（２−（１１−（オキサリルアミノ）ウンデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル−）））アミド
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｌａ３７］−ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−（１５−カルボキシ−ペンタデカノイルアミノ）−エトキシ］エトキシ｝アセチルアミノ）エトキシ］エトキシ｝アセチル）アミド
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｌａ３７］−ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−｛２−［１１−（５−ジメチルアミノナフタレン−１−スルホニルアミノ）ウンデカノイルアミノ］エトキシ｝エトキシ）アセチル）アミド
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｌａ３７］−ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（［２−（２−｛２−［１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル］アセチルアミノ｝エトキシ）エトキシ］アセチル））アミド
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｇｌｕ２２，２３，３０］ＧＬＰ−１ Ｈ（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）アミド
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｇｌｕ２２，２３，３０］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（エイコサノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）アミド
Figure 2007505840
［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１ Ｈ−（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチル）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８］−ＧＬＰ−１−（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチル）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（１７−カルボキシヘプタノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
Figure 2007505840
［Ｇｌｙ８、Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ１−（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチル）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８］ＧＬＰ−１−（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
Ｎε３７−（２−（２−（２−（ドデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１Ｈ（７−３７）−アミド
Figure 2007505840
Ｎε３７−（２−（２−（２−（テトラデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１Ｈ（７−３７）−アミド
Figure 2007505840
Ｎε３７−（２−（２−（２−（ヘキサデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）−アミド
Figure 2007505840
Ｎε３７−（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）−アミド
Figure 2007505840
Ｎε３７−（２−（２−（２−（エイコサノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）−アミド
Figure 2007505840
Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル））−［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル））［Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
Ｎε３６−｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
Ｎε３７−（２−（２−（２−（４−４（４，４，５，５，６，６，７，７，８，８，９，９，９−トリデカフルオロノナノイルスルファモイル−ブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル））［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
Ｎε３７−（２−（２−（２−（３，３，４，４，５，５，６，６，７，７，８，８，９，９，１０，１０，１１，１１，１２，１２，１２−ヘンエイコサフルオロ−ドデシルオキシアセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
Ｎε３７−（２−（２−（２−（４−（ヘキサデカノイルスルファモイル）ブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
［Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝）−ＯＨ
Figure 2007505840
［Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
Figure 2007505840
Ｎε２０−｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−エキセンディン（１−３９）
Figure 2007505840
［Ａｌａ８、Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−［２−（（２−オキサリルアミノ−３−カルボキシ−２−４，５，６，７−テトラヒドロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−６−イル−アセチルアミノ））エトキシ］エトキシアセチル）アミド
Figure 2007505840
［Ａｉｂ８，２２，３５］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−［２−（（２−オキサリルアミノ−３−カルボキシ−２−４，５，６，７−テトラヒドロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−６−イル−アセチルアミノ））エトキシ］エトキシアセチル）アミド
Figure 2007505840
Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
Ｎε３７−２−（２−（２−（４−（４−（ヘプタデカノイルアミノ）−４−（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）−４−（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル−［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＮＨ２
Figure 2007505840
Ｎε３７−２−（２−［２−（２−［２−（４−［４−（ヘプタデカノイルアミノ）−４−（Ｓ）カルボキシブチリルアミノ］−４−（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ］エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ］エトキシ）アセチル−［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＮＨ２
Figure 2007505840
Ｎε２６−（２−（２−（２−（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，Ａｒｇ３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
Ｎε２６−２−（２−２−（２−（２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル−［Ａｉｂ８、Ａｒｇ３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（１９−（カルボキシ）ノナデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−（２−（１７−（カルボキシ）ヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル））−ＯＨ
Figure 2007505840
［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（４−（１９−（カルボキシ）ノナデカノイルアミノ）−４−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（ヘキサデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）−アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
［Ｇｌｙ８、Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）−アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）ＮＨ２
Figure 2007505840
Ｎε２０（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（１７−（カルボキシ）ヘプタデカノイルアミノ）−４−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）Ｌｙｓ２０］エキセンディン−４（１−３９）−ＮＨ２
Figure 2007505840
Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４、Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１（７−３７）
Figure 2007505840
Ｎ−ε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｒｇ２６，３４、Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１（７−３７）
Figure 2007505840
Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１（７−３７）
Figure 2007505840
Ｎε２０−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）−エトキシ）アセチル）［Ｌｙｓ２０］エキセンディン−４（１−３９）アミド
Figure 2007505840
Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１−（７−３７）
Figure 2007505840
Ｎε２６−（２−［２−（２−［２−（２−［２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ］エトキシ）アセチルアミノ］エトキシ）エトキシ］アセチル）［Ａｒｇ３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
Ｎε２６−［２−（２−［２−（２−［２−（２−［４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ］エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ］エトキシ）アセチル］［Ａｒｇ３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
Ｎε２０−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ｌｙｓ２０］エキセンディン−４（１−３９）アミド
Figure 2007505840
［Ｇｌｙ８、Ｇｌｕ２２，２３，３０、Ａｒｇ１８，２６，３４］ＧＬＰ１（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ））エトキシ）アセチル）−ＮＨ２
Figure 2007505840
［イミダゾリルプロピオン酸７、Ａｓｐ１６、Ａｉｂ２２，３５］ＧＬＰ１（７−３７）Ｌｙｓ ＮＨ（（２−｛［４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブチルカルバモイル］メトキシ｝エトキシ）エトキシ））
Figure 2007505840
［イミダゾリルプロピオン酸７、Ａｉｂ２２，３５］ＧＬＰ１（７−３７）Ｌｙｓ ＮＨ（（２−｛［４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブチルカルバモイル］メトキシ｝エトキシ）エトキシ））
Figure 2007505840
及び、
［３−（５−イミダゾリル）プロピオニル７、Ａｉｂ８、Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（１７−カルボキシヘプタノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
Figure 2007505840
からなる群から選択される、からなる群から選択される。
別の実施形態において、前記治療用ポリペプチドはＧＬＰ−２ペプチドである。
別の実施形態において、ＧＬＰ−２ペプチドは、ＤＰＰＩＶ保護されたＧＬＰ−２ペプチドである。
別の実施形態において、ＧＬＰ−２ペプチドは、Ｇｌｙ２−ＧＬＰ−２（１−３３）である。
さらに別の実施形態において、ＧＬＰ−２ペプチドは、Ｌｙｓ１７Ａｒｇ３０−ＧＬＰ−２（１−３３）である。
本発明の別の実施形態において、前記治療用ポリペプチドはヒトインシュリン又はその類縁体である。
本発明の別の実施形態において、前記治療用ポリペプチドは、ＡｓｐＢ２８−ヒトインシュリン、ＬｙｓＢ２８，ＰｒｏＢ２９−ヒトインシュリン、ＬｙｓＢ３，ＧｌｕＢ２９−ヒトインシュリン、ＧｌｙＡ２１，ＡｒｇＢ３１，ＡｒｇＢ３２−ヒトインシュリン及びｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインシュリンからなる群から選択される。
本発明の別の実施形態において、前記治療用ポリペプチドはヒト成長ホルモン又はその類縁体である。
本発明の別の実施形態において、前記治療用ポリペプチドは副甲状腺ホルモン又はその類縁体である。
本発明の別の実施形態において、前記治療用ポリペプチドはヒト卵胞刺激ホルモン又はその類縁体である。
本発明の別の実施形態において、前記治療用ポリペプチドは１００ｋＤａ未満、５０ｋＤａ未満又は１０ｋＤａ未満の分子量を有する。
本発明の別の実施形態において、前記治療用ポリペプチドは、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、形質転換増殖因子α（ＴＧＦ−α）形質転換増殖因子β（ＴＧＦ−β）、内皮増殖因子（ＥＧＦ）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、インシュリン増殖因子Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）、インシュリン増殖因子ＩＩ（ＩＧＦ−ＩＩ）などの増殖因子、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、トロンボポエチン（ＴＰＯ）若しくはアンギオポエチンなどのソマトメジン、インターフェロン、プロ−ウロキナーゼ、ウロキナーゼ、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤１、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤２、フォンビルブランド因子、サイトカイン、例えば、インターロイキン（ＩＬ）１、ＩＬ−１Ｒａ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−９、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−２０又はＩＬ−２１などのインターロイキン、ＧＭ−ＣＳＦなどのコロニー刺激因子（ＣＦＳ）、幹細胞因子、ＴＮＦ−α、リンフォトキシン−α、リンフォトキシン−β、ＣＤ４０Ｌ若しくはＣＤ３０Ｌなどの腫瘍壊死因子、プロテアーゼ阻害剤、例えば、アプロチニン、スーパーオキシドジスムターゼ、アスパラギナーゼ、アルギナーゼ、アルギニンデアミナーゼ、アデノシンデアミナーゼ、リボヌクレアーゼ、カタラーゼ、ウリカーゼ、ビリルビンオキシダーゼ、トリプシン、パパイン、アルカリホスファターゼ、β−グルクロニダーゼ、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ若しくはバトロキソビンなどの酵素、オピオイド、例えば、エンドルフィン、エンケファリン若しくは非天然オピオイド、ホルモン若しくはニューロペプチド、例えば、カルシトニン、グルカゴン、ガストリン、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、コレシストキニン、黄体形成ホルモン、ゴナドトロピン放出ホルモン、絨毛性ゴナドトロピン、コルチコトロピン放出因子、バソプレッシン、オキシトシン、抗利尿ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン、リラキシン、プロラクチン、ペプチドＹＹ、ニューロペプチドＹ、膵臓ポリペプチド（ｐａｎｃｒｅａｓｔｉｃ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ）、レプチン、ＣＡＲＴ（ｃｏｃａｉｎｅ ａｎｄ ａｍｐｈｅｔａｍｉｎｅ ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ）、ＣＡＲＴ関連ペプチド、ペリリピン、ＭＣ−４などのメラノコルチン（メラニン細胞刺激ホルモン）、メラニン凝集ホルモン、ナトリウム利尿ペプチド、アドレノメデュリン、エンドセリン、セクレチン、アミリン、血管作用性小腸ペプチド（ＶＩＰ）、脳下垂体アデニル酸シクラーゼ活性化ポリペプチド（ＰＡＣＡＰ）、ボンベシン、ボンベシン様ペプチド、チモシン、ヘパリン結合タンパク質、可溶性ＣＤ４、視床下部放出因子、メラノトニン及びこれらの類縁体からなる群から選択される。
別の側面において、本発明は、本発明の化合物と薬学的に許容される賦形剤とを含む薬学的組成物に関する。
一実施形態において、前記薬学的組成物は、非経口投与に適している。
別の側面において、本発明は、医薬を調製するための、本発明の化合物の使用に関する。
本発明の一実施形態において、前記治療用ポリペプチドがＧＬＰ−１ペプチドである本発明の化合物は、高血糖、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、肥満、高血圧、シンドロームＸ、異脂肪血症、認知疾患、アテローム性動脈硬化、心筋梗塞、冠動脈心疾患及び他の心血管疾患、発作、炎症性超症候群、消化不良並びに胃潰瘍の治療又は予防用医薬の調製のために使用される。
本発明の別の実施形態において、前記治療用ポリペプチドがＧＬＰ−１ペプチドである本発明の化合物は、２型糖尿病における疾病の進行を遅延又は抑制するための医薬の調製のために使用される。
本発明の別の実施形態において、前記治療用ポリペプチドがＧＬＰ−１ペプチドである本発明の化合物は、食物摂取を減少し、β細胞のアポトーシスを減少し、β細胞の機能及びβ細胞の質量を増加し、及び／又はβ細胞に対するグルコース感受性を回復させるための医薬の調製のために使用される。
本発明の別の実施形態において、前記治療用ポリペプチドがＧＬＰ−２ペプチドである本発明の化合物は、小腸症候群、炎症性腸症候群又はクローン病の治療用医薬の調製のために使用される。
本発明の別の実施形態において、前記治療用ポリペプチドがインシュリンペプチドである本発明の化合物は、高血糖、１型糖尿病、２型糖尿病又はβ細胞欠乏の治療又は予防用医薬の調製のために使用される。
治療用ペプチドは、ペプチドの発現を可能とする条件下で、適切な栄養培地中において、該ポリペプチドをコードするＤＮＡ配列を含有し、該ポリペプチドを発言することが可能な宿主細胞を培養し、その後、得られたペプチドを培養物から回収することを含む方法によって作製することができる。
細胞を培養するために使用される培地は、適切な補充物を含有する最少培地又は複合培地など、宿主細胞を増殖させるのに適した任意の慣用培地であり得る。適切な培地は、業者から入手することができ、又は公開されている製法（例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎのカタログ）に従って調製し得る。次いで、細胞によって産生されたペプチドは、対象ペプチドのタイプに応じて、遠心又はろ過によって培地から宿主細胞を分離すること、塩（例えば、硫安）によって、上清又はろ液のタンパク質成分を沈殿させること、様々なクロマトグラフィー操作（例えば、イオン交換クロマトグラフィー、ゲルろ過クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィーなど）による精製など、慣用の操作による培地から回収することができる。
治療用ポリペプチドをコードするＤＮＡ配列は、好適には、例えば、ゲノム又はｃＤＮＡライブラリーを調製し、標準的な技術（例えば、Sambrook,J,Fritsch,EF and Maniatis,T,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory Press,New York, 1989を参照。）に従って合成オリゴヌクレオチドプローブを用いるハイブリダイゼーションによって、ポリペプチドの全部又は一部をコードするＤＮＡ配列をスクリーニングすることによって得られる、ゲノム又はｃＤＮＡ起源のものであり得る。ポリペプチドをコードするＤＮＡ配列は、確立された標準的な方法、例えば、「Beaucage and Caruthers,Tetrahedron Letters 22(1981),1859-1869」によって記載されているホスホアミダイト法、又は「Matthes et al.,EMBO Journal 3(1984),801-805」に記載されている方法によって、合成的に調製することもできる。ＤＮＡ配列は、例えば、米国特許４，６８３，２０２号又は「Saiki et al.,Science 239(1988),487-491」に記載されているように、特異的なプライマーを用いたポリメラーゼ連鎖反応によって調製することもできる。
ＤＮＡ配列は、組換えＤＮＡ操作に便利に供することができる任意のベクター中に挿入することができ、ベクターの選択は、多くの場合、その中に導入されるべき宿主細胞に依存する。このように、ベクターは、自己複製ベクター、すなわち、染色体外物質として存在し、その複製が染色体の複製とは独立しているベクター、例えば、プラスミドとすることができる。あるいは、前記ベクターは、宿主細胞中に導入されると、宿主細胞ゲノム中に組み込まれ、その中に組み込まれた染色体と一緒に複製されるベクターとすることができる。
好ましくは、前記ベクターは、前記ペプチドをコードするＤＮＡ配列がＤＮＡの転写に必要とされる追加セグメント（プロモーターなど）に作用可能にその中で連結されている発現ベクターである。前記プロモーターは、選択した宿主細胞中で転写活性を示す任意のＤＮＡ配列であり得、宿主細胞に対して相同又は異種のタンパク質をコードする遺伝子から誘導され得る。様々な宿主細胞中で、本発明のペプチドをコードするＤＮＡの転写を誘導するのに適切なプロモーターの例は、本分野において周知である（例えば、上記Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌを参照）。
前記ペプチドをコードするＤＮＡ配列は、必要であれば、適切なターミネーター、ポリアデニル化シグナル、転写エンハンサー配列及び翻訳エンハンサー配列に、作用可能に接続することもできる。本発明の組換えベクターは、さらに、対象宿主細胞中でベクターが複製できるようにするＤＮＡ配列を含み得る。
前記ベクターは、選択可能なマーカー、例えば、その産物が宿主細胞中の欠損を補う遺伝子、又は薬物（例えば、アンピシリン、カナマイシン、テトラサイクリン、クロラムフェニコール、ネオマイシン、ハイグロマイシン又はメトトレキサート）に対する耐性を付与する遺伝子も含み得る。
本発明の親ペプチドを宿主細胞の分泌経路中に誘導するために、分泌シグナル配列（リーダー配列、プレプロ配列又はプレ配列としても知られる。）を組換えベクター中に与えることができる。分泌シグナル配列は、正しいリーディングフレーム中にペプチドをコードするＤＮＡ配列に連結される。分泌シグナル配列は、一般に、ペプチドをコードするＤＮＡ配列の５’に配置される。分泌シグナル配列は、本来ペプチドに付随する分泌シグナル配列とすることができ、又は別の分泌されるタンパク質をコードする遺伝子から得ることができる。
それぞれ、本ペプチド、プロモーター、及び必要に応じてターミネーター及び／又は分泌シグナル配列をコードするＤＮＡ配列を連結し、複製に必要な情報を含有する適切なベクター中にそれらを挿入するために使用される操作は、当業者に周知である（例えば、上記Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌを参照。）。
その中にＤＮＡ配列又は組換えベクターが導入される宿主細胞は、本ペプチドを産生することができる任意の細胞とすることができ、細菌、酵母、真菌及びより高等な真核細胞が含まれる。本分野において周知であり、本分野で使用されている適切な宿主細胞の例は、Ｅ． ｃｏｌｉ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ又は哺乳類のＢＨＫ若しくはＣＨＯ細胞株であるが、これらに限定されない。
本発明においてＧＬＰ−１部分として有用であり得る化合物の例は、ＧＬＰ−１（７−３７）及びその機能的誘導体を含むペプチド断片に関し、並びにインシュリン分泌剤としてのその使用に関する国際特許出願８７／０６９４１号（Ｔｈｅ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）に記載されている。
さらなるＧＬＰ−１類縁体は、ＧＬＰ−１（７−３６）及びその機能的誘導体を含み、ＧＬＰ−１（１−３６）又はＧＬＰ−１（１−３７）のインシュリン分泌活性を超えるインシュリン分泌活性を有するペプチド断片並びにインシュリン分泌剤としてのそれらの使用に関する国際特許出願９０／１１２９６号（Ｔｈｅ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）に記載されている。
国際特許出願９１／１１４５７（Ｂｕｃｋｌｅｙ ｅｔ ａｌ．，）は、本発明においてＧＬＰ−１部分としても有用であり得る、活性なＧＬＰ−１ペプチド ７−３４、７−３５、７−３６及び７−３７の類縁体を開示している。
＜薬学的組成物＞
本発明の化合物を含有する薬学的組成物は、例えば、「Remington’s Pharmaceutical Sciences, 1985」又は「Remington:The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995」に記載されているように、慣用の技術によって調製され得る。
本発明の一つの目的は、約０．１ｍｇ／ｍＬから約２５ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する本発明の化合物を含み、２．０から１０．０のｐＨを有する薬学的製剤を提供することである。
前記薬学的製剤は、約０．１ｍｇ／ｍＬから約５０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する本発明の化合物を含むことができ、２．０から１０．０のｐＨを有する。
前記製剤は、緩衝系、防腐剤、等張化剤、キレート剤、安定化剤及び界面活性剤をさらに含み得る。本発明の一実施形態において、前記薬学的製剤は、水性製剤、すなわち、水を含む製剤である。このような製剤は、典型的には、溶液又は懸濁液である。本発明のさらなる実施形態において、前記薬学的製剤は、水性溶液である。「水性製剤」という用語は、少なくとも５０％ｗ／ｗの水を含む製剤として定義される。同様に、「水性溶液」という用語は、少なくとも５０％ｗ／ｗの水を含む溶液として定義され、「水性懸濁液」という用語は、少なくとも５０％ｗ／ｗの水を含む懸濁液として定義される。
別の実施形態において、前記薬学的製剤は凍結乾燥された製剤である、使用前に、医師又は患者がこれに溶媒及び／又は希釈剤を添加する。
別の実施形態において、前記薬学的製剤は、事前の溶解なしに即時使用される、乾燥された製剤（例えば、凍結乾燥され、又は噴霧乾燥されている。）である。
さらなる側面において、本発明は、本発明の化合物の水溶液と緩衝液を含み、前記化合物が０．１ｍｇ／ｍＬ以上の濃度で存在し、約２．０から約１０．０のｐＨを有する薬学的製剤に関する。
さらなる側面において、本発明は、本発明の化合物の水溶液と緩衝液を含み、前記化合物が０．１ｍｇ／ｍＬ以上の濃度で存在し、約７．０から約８．５のｐＨを有する薬学的製剤に関する。
本発明の別の実施形態において、前記製剤のｐＨは、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８．０、８．１、８．２、８．３、８．４、８．５、８．６、８．７、８．８、８．９、９．０、９．１、９．２、９．３、９．４、９．５、９．６、９．７、９．８、９．９及び１０．０からなるリストから選択される。好ましくは、前記製剤のｐＨは本発明の化合物の等電点から少なくとも１ｐＨ単位にある、より好ましくは、前記製剤のｐＨは本発明の化合物の等電点から少なくとも２ｐＨ単位にある。
本発明のさらなる実施形態において、前記緩衝液は、酢酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、クエン酸塩、グリシルグリシン、ヒスチジン、グリシン、リジン、アルギニン、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸ナトリウム、及びトリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン、ｈｅｐｅｓ、ビシン、トリシン、リンゴ酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、アスパラギン酸又はそれらの混合物からなる群から選択される。これらの具体的な緩衝液の一つは、それぞれ、本発明の別の実施形態を構成する。
本発明のさらなる実施形態において、前記製剤は、薬学的に許容される防腐剤をさらに含む。本発明のさらなる実施形態において、前記防腐剤は、フェノール、ｏ−クレゾール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル、２−フェノキシエタノール、ｐ−ヒドロキシ安息香酸ブチル、２−フェニルエタノール、ベンジルアルコール、エタノール、クロロブタノール、及びチメロサール（ｔｈｉｏｍｅｒｏｓａｌ）、ブロノポール、安息香酸、イミド尿素（ｉｍｉｄｕｒｅａ）、クロロヘキシジン、デヒドロ酢酸ナトリウム、クロロクレゾール、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル、塩化ベンズエトニウム、クロルフェネシン（３ｐ−クロルフェノキシプロパン−１，２−ジオール）又はそれらの混合物からなる群から選択される。本発明のさらなる実施形態において、前記防腐剤は０．１ｍｇ／ｍＬないし３０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。本発明のさらなる実施形態において、前記防腐剤は０．１ｍｇ／ｍＬないし２０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。本発明のさらなる実施形態において、前記防腐剤は０．１ｍｇ／ｍＬないし５ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。本発明のさらなる実施形態において、前記防腐剤は５ｍｇ／ｍＬないし１０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。本発明のさらなる実施形態において、前記防腐剤は１０ｍｇ／ｍＬないし２０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。これらの具体的な防腐剤の一つは、それぞれ、本発明の別の実施形態を構成する。薬学的組成物中での防腐剤の使用は、当業者に周知である。便利な参考文献は、「Remington:The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995」である。
本発明のさらなる実施形態において、前記製剤は、さらに等張化剤を含む。本発明のさらなる実施形態において、前記等張化剤は、塩（例えば、塩化ナトリウム）、糖若しくは糖アルコール、アミノ酸（例えば、Ｌ−グリシン、Ｌ−ヒスチジン、アルギニン、リジン、イソロイシン、アスパラギン酸、トリプトファン、スレオニン）、アルジトール（例えば、グリセロール（グリセリン）、１，２−プロパンジオール（プロピレングリコール）、１，３−プロパンジオール、１，３−ブタンジオール）ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ−４０００）又はこれらの混合物からなる群から選択される。単糖、二糖若しくは多糖又は水溶性グリカンなどの任意の糖（例えば、フルクトース、グルコース、マンノース、ソルボース、キシロース、マルトース、ラクトース、スクロース、トレハロース、デキストラン、プルラン、デキストリン、シクロデキストリン、可溶性デンプン、ヒドロキシエチルデンプン及びカルボキシメチルセルロースナトリウムを含む。）を使用し得る。一実施形態において、前記糖添加物はスクロースである。糖アルコールは、少なくとも一つの――ＯＨ基を有するＣ４−Ｃ８炭化水素として定義され、例えば、マニトール、ソルビトール、イノシトール、ガラシチトール（ｇａｌａｃｉｔｉｔｏｌ）、ズルシトール、キシリトール及びアラビトールが含まれる。一実施形態において、前記糖アルコール添加物はマニトールである。上記糖又は糖アルコールは、個別に、又は組み合わせて使用され得る。糖又は糖アルコールが液体調製物中に溶け、本発明の方法を用いて達成される安定化効果に対して悪影響を与えなければ、使用される量には、一定の制限は存在しない。一実施形態において、前記糖又は糖アルコールの濃度は、約１ｍｇ／ｍＬから約１５０ｍｇ／ｍＬの間にある。本発明のさらなる実施形態において、前記等張化剤は１ｍｇ／ｍＬないし５０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。本発明のさらなる実施形態において、前記等張化剤は１ｍｇ／ｍＬないし７ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。本発明のさらなる実施形態において、前記等張化剤は８ｍｇ／ｍＬないし２４ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。本発明のさらなる実施形態において、前記等張化剤は２５ｍｇ／ｍＬないし５０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。これらの具体的な等張化剤の一つは、それぞれ、本発明の別の実施形態を構成する。薬学的組成物中での等張化剤の使用は、当業者に周知である。便利な参考文献は、「Remington:The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995」である。
本発明のさらなる実施形態において、前記製剤は、さらにキレート剤を含む。本発明のさらなる実施形態において、前記キレート剤は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸及びアスパラギン酸並びにこれらの混合物の塩から選択される。本発明のさらなる実施形態において、前記キレート剤は０．１ｍｇ／ｍＬないし５ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。本発明のさらなる実施形態において、前記キレート剤は０．１ｍｇ／ｍＬないし２ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。本発明のさらなる実施形態において、前記キレート剤は２ｍｇ／ｍＬないし５ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。これらの具体的なキレート剤の一つは、それぞれ、本発明の別の実施形態を構成する。薬学的組成物中でのキレート剤の使用は、当業者に周知である。便利な参考文献は、「Remington:The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995」である。
本発明のさらなる実施形態において、前記製剤は、さらに安定化剤を含む。薬学的組成物中での安定化剤の使用は、当業者に周知である。便利な参考文献は、「Remington:The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995」である。
より具体的には、本発明の組成物は、液体薬学的組成物中での保存時に、凝集物の形成の可能性があるポリペプチドをその治療的活性成分に含む、安定化された液体薬学的組成物である。「凝集物の形成」とは、なお溶解することができるオリゴマー又は溶液から沈殿する可視的な巨大凝集物の形成をもたらすポリペプチド分子間の物理的相互作用を意味する。「保存時」とは、一旦調製された、液体薬学的組成物又は製剤が、直ちに被験体に投与されないことを意味する。むしろ、調製後、液体形態で、凍結された状態で、若しくは後に液体形態に戻すために乾燥された形態で、又は被験体への投与に適したその他の形態で、保存のために梱包される。「乾燥された形態」とは、液体薬学的組成物又は製剤が、フリーズドライ（すなわち、凍結乾燥；例えば、Williams and Polli(1984)J. Parenteral Sci. Technol. 38:48-59を参照）、噴霧乾燥（Masters(1991)in Spray-Drying Handbook(5th ed;Longman Scientific and Technical,Essez、U.K.)、pp.491-676;Broadhead et al.(1992)Drug Devel. Ind. Pharm. 18:1169-1206;およびMumenthaler et al.(1994)Pharm. Res. 11:12-20を参照）、又は風乾（Carpenter and Crowe(1988)Cryobiology 25:459-470;及びRoser(1991)Biopharm. 4:47-53）の何れかによって乾燥されていることを意味する。液体薬学的組成物の保存時における、ポリペプチドによる凝集物の形成は、そのポリペプチドの生物学的活性に悪影響を与え、薬学的組成物の治療的効果の喪失をもたらすことがある。さらに、凝集物の形成は、ポリペプチドを含有する薬学的組成物が、注入系を用いて投与されるときには、管、膜又はポンプの閉塞などその他の問題を引き起こすことがある。
本発明の薬学的組成物は、さらに、組成物の保存時における、ポリペプチドによる凝集物の形成を減少するのに十分な量のアミノ酸塩基を含み得る。「アミノ酸塩基」とは、与えられた全てのアミノ酸がその遊離塩基形態又はその塩形態で存在する、アミノ酸又はアミノ酸の組み合わせを意味する。アミノ酸の組み合わせが使用される場合、アミノ酸の全てがそれらの遊離塩基形態で存在し、全てがそれらの塩形態で存在し、又は一部がそれらの遊離塩基形態で存在するが、残りがそれらの塩形態で存在し得る。一実施形態において、本発明の組成物を調製するために使用されるアミノ酸は、アルギニン、リジン、アスパラギン酸及びグルタミン酸などの帯電した側鎖を有するアミノ酸である。一実施形態において、本発明の組成物を調製するために使用されるアミノ酸はグリシンである。あるアミノ酸が、その遊離塩基形態又はその塩形態で存在する限り、あるアミノ酸（例えば、メチオニン、ヒスチジン、イミダゾール、アルギニン、リジン、イソロイシン、アスパラギン酸、トリプトファン、スレオニン及びそれらの混合物）の任意の立体異性体（すなわち、Ｌ又はＤ）又はこれらの立体異性体の組み合わせが、本発明の薬学的組成物中に存在し得る。一実施形態において、Ｌ−立体異性体が使用される。本発明の組成物は、これらのアミノ酸の類縁体とともに調合することもできる。「アミノ酸類縁体」とは、本発明の液体薬学的組成物の保存時における、ポリペプチドによる凝集物の形成を減少させる所望の効果をもたらす、天然に存在するアミノ酸の誘導体を意味する。例えば、適切なアルギニン類縁体には、アミノグアニジン、オルニチン及びＮ−モノエチル Ｌ−アルギニンが含まれ、適切なメチオニン類縁体には、エチオニン及びブチオニンが含まれ、適切なシステイン類縁体には、Ｓ−メチル−Ｌ−システインが含まれる。他のアミノ酸と同様に、アミノ酸類縁体は、それらの遊離塩基形態又はそれらの塩形態で、組成物中に取り込まれる。本発明のさらなる実施形態において、アミノ酸又はアミノ酸類縁体は、タンパク質の凝集を抑制又は遅延させるのに十分な濃度で使用される。
本発明のさらなる実施形態では、治療剤として作用するポリペプチドが、このような酸化を受けやすい少なくとも一つのメチオニン残基を含むポリペプチドである場合、メチオニン残基のメチオニンスルホキシドへの酸化を阻害するために、メチオニン（又は他の硫酸アミノ酸若しくはアミノ酸類縁体）を添加することができる。「阻害する」とは、メチオニンが酸化された種の経時的な蓄積が最小限であることを意味する。メチオニン酸化を阻害することによって、ポリペプチドが適切な分子形態に保持される度合いが高くなる。メチオニンの任意の立体異性体（Ｌ、Ｄ又はその混合物）を使用することができる。添加すべき量は、メチオニンスルホキシドの量が規制当局によって許容されるように、メチオニン残基の酸化を阻害するのに十分な量とすべきである。典型的には、このことは、組成物が約１０％から約３０％以下のメチオニンスルホキシドを含有することを意味する。これは、一般的に、メチオニン残基に対する添加されたメチオニンの比が約１：１から約１０００：１までの範囲（１０：１から約１００：１など）であるように、メチオニンを添加することによって達成することが可能である。
本発明のさらなる実施形態において、前記製剤は、高分子量ポリマー又は低分子化合物の群から選択される安定化剤をさらに含む。本発明のさらなる実施形態において、前記安定化剤は、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ ３３５０）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン、カルボキシ−／ヒドロキシセルロース又はそれらの誘導体（例えば、ＨＰＣ、ＨＰＣ−ＳＬ、ＨＰＣ−Ｌ及びＨＰＭＣ）、シクロデキストリン、モノチオグリセロール、チオグリコール酸及び２−メチルチオエタノールなどの含硫物質、並びに様々な塩（例えば、塩化ナトリウム）から選択される。これらの具体的な安定化剤の一つは、それぞれ、本発明の別の実施形態を構成する。
前記薬学的組成物は、その中に存在する治療的に活性なポリペプチドの安定性をさらに増強する追加の安定化剤も含み得る。本発明に対して特に興味深い安定化剤には、メチオニン酸化に対してポリペプチドを保護するメチオニン及びＥＤＴＡ、並びに、凍結融解又は力学的剪断に付随する凝集に対してポリペプチドを保護する非イオン性界面活性剤が含まれるが、これらに限定されるものではない。
本発明のさらなる実施形態において、前記製剤は界面活性剤をさらに含む。本発明のさらなる実施形態において、前記界面活性剤は、洗浄剤（ｄｅｔｅｒｇｅｎｔ）、エトキシル化されたひまし油、ポリグリコール化されたグリセリド、アセチル化されたモノグリセリド、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシプロピレン−ポリオキシエチレンブロックポリマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標） Ｆ６８、ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８ ａｎｄ ４０７、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００などのポロキサマー）、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、星形のＰＥＯ、アルキル化及びアルオキシル化された誘導体（ｔｗｅｅｎｓ、例えば、Ｔｗｅｅｎ−２０、Ｔｗｅｅｎ−４０、Ｔｗｅｅｎ−８０及びＢｒｉｊ−３５）などのポリオキシエチレン及びポリエチレン誘導体、ヒドロキシステアリン酸ポリオキシエチレン、モノグリセリド又はそのエトキシル化誘導体、ジグリセリド又はそのポリオキシエチレン誘導体、アルコール、グリセロール、レシチン及びリン脂質（例えば、ホスファチジルセリン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ジホスファチジルグリセロール及びスフィンゴミエリン）、リン脂質（例えば、ジパルミトイルホスファチジン酸）及びリゾリン脂質（例えば、エタノールアミン、コリン、セリン又はスレオニンのパルミトイルリゾホスファチジル−Ｌ−セリン及び１−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸エステル）の誘導体並びにリゾホスファチジル及びホスファチジルコリンのアルキル、アルコキシル（アルキルエステル）、アルコキシ（アルキルエーテル）誘導体（例えば、リゾホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリンのラウロイル及びミリストイル誘導体）、並びに極性頭部基（すなわち、コリン、エタノールアミン、ホスファチジン酸、セリン、スレオニン、グリセロール、イノシトール及び正に帯電したＤＯＰＡＣ、ＤＯＴＭＡ、ＤＣＰ、ＢＩＳＨＯＰ）の修飾物、リゾホスファチジルセリン及びリゾホスファチジルスレオニン、及びグリセロリン脂質（例えば、セファリン）、グリセロ糖脂質（例えば、ガラクトピラノシド）、スフィンゴ糖脂質（例えば、セラミド、ガングリオシド）、ドデシルホスホコリン、ニワトリ卵リゾレシチン、フシジン酸誘導体（例えば、タウロジヒドロフシジン酸ナトリウムなど）、長鎖脂肪酸及びその塩Ｃ６−Ｃ１２（例えば、オレイン酸及びカプリル酸）、アシルカルニチン及び誘導体、リジン、アルギニン若しくはヒスチジンのＮα−アシル化誘導体、又はリジン若しくはアルギニンの側鎖アシル化誘導体、リジン、アルギニン若しくはヒスチジンと中性若しくは酸性アミノ酸の任意の組み合わせを含むジペプチドのＮα−アシル化誘導体、中性アミノ酸と２つの帯電アミノ酸の任意の組み合わせを含むトリペプチドのＮα−アシル化誘導体、ＤＳＳ（ドキュセートナトリウム、ＣＡＳ登録番号［５７７−１１−７］）、ドキュセートカルシウム、ＣＡＳ登録番号［１２８−４９−４］）、ドキュセートカリウム、ＣＡＳ登録番号［７４９１−０９−０］）、ＳＤＳ（ドデシル硫酸ナトリウム又はラウリル硫酸ナトリウム）、カプリル酸ナトリウム、コール酸又はその誘導体、胆汁酸及びその塩及びグリシン又はタウリン抱合体、ウルソデオキシコール酸、コール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、グリココール酸ナトリウム、Ｎ−ヘキサデシル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アンモニオ−１−プロパンスルホン酸、陰イオン性（アルキル−アリール−スルホネート）一価界面活性剤、双性イオン界面活性剤（例えば、Ｎ−アルキル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアンモニオ−１−プロパンスルホネート、３−コールアミド−１−プロピルジメチルアンモニオ−１−プロパンスルホネート、陽イオン性界面活性剤）（四級アンモニム塩基）（例えば、セチルトリメチルアンモニウムブロミド、セチルピリジニウムクロリド）、非イオン性界面活性剤（例えば、ドデシル β−Ｄ−グルコピラノシド）、ポロキサミン（例えば、Ｔｅｔｒｏｎｉｃ’ｓ）（酸化プロピレン及び酸化エチレンをエチレンジアミンに順次添加することによって得られる四官能基のブロック共重合体）、若しくはイミダゾリン誘導体の群から選択され得る界面活性剤、又はこれらの混合物から選択される。これらの具体的な界面活性剤の一つは、それぞれ、本発明の別の実施形態を構成する。
薬学的組成物中での界面活性剤の使用は、当業者に周知である。便利な参考文献は、「Remington:The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995」である。
ＧＬＰ−１化合物の非経口投与用組成物は、例えば、ＷＯ ０３／００２１３６号に記載されているように調製され得る。
本発明のペプチド薬学的製剤中に、他の成分が存在し得ることも可能である。このような追加成分には、湿潤剤、乳化剤、抗酸化剤、充填剤、等張化剤、キレート剤、金属イオン、油性ビヒクル、タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン、ゼラチン又はタンパク質）及び双性イオン（例えば、ベタイン、タウリン、アルギニン、グリシン、リジン及びヒスチジンなどのアミノ酸）が含まれ得る。このような追加成分は、もちろん、本発明の薬学的製剤の全体的な安定性に対して悪影響を与えるべきでない。
本発明の化合物を含有する薬学的組成物は、幾つかの部位、例えば、局所部位（例えば、皮膚及び粘膜部位）、吸収を迂回する部位（例えば、動脈、静脈、心臓内投与）、及び吸収を伴う部位（例えば、皮膚、皮下、筋肉内又は腹部内投与）で、このような治療を必要としている患者に、投与され得る。
本発明の薬学的組成物の投与は、例えば、舌、舌下、頬、口腔内、経口、胃及び腸内、鼻、肺、例えば、細気管支及び肺胞又はこれらの組み合わせ、上皮、皮膚、経皮、膣、直腸、目（例えば、結膜を介して）、尿管（ｕｒｅｔａｌ）、並びに非経口などの複数の経路を介して、このような治療を必要とする患者に与え得る。
本発明の組成物は、例えば、溶液、懸濁液、エマルジョン、ミクロエマルジョン、多重エマルジョン（multiple emulsion）、発泡、軟膏（salve）、ペースト、膏薬、軟膏（ointment）、錠剤、被覆錠、リンス、カプセル（例えば、硬ゼラチンカプセル及び軟ゼラチンカプセル）、坐薬、直腸カプセル、ドロップ、ゲル、スプレー、粉末、エアロゾル、吸入薬、点眼薬、眼軟膏、眼用リンス、膣ペッサリー、膣リング、膣軟膏、注射溶液、インシチュ変換溶液（例えば、インシチュでのゲル化、インシチュでの硬化、インシチュでの沈殿、インシチュでの結晶化、注入溶液及びインプラント）のような幾つかの剤形で投与することができる。
さらに、本発明の組成物は、化合物の安定性をさらに増強するため、生物学的利用度を増加するため、溶解度を増加するため、有害な効果を減少するため、当業者に周知の時間療法を達成するため、患者の服用遵守を強化するため、又はこれらの任意の組み合わせのために、例えば、共有、疎水性及び静電的相互作用を通じて、薬物担体、薬物送達系及び高度薬物送達系の中に配合し、又は付着させることができる。担体、薬物送達系及び高度薬物送達系の例には、ポリマー、例えば、セルロース及び誘導体、多糖、例えばデキストラン及び誘導体、デンプン及び誘導体、ポリ（ビニルアルコール）、アクリル酸及びメタクリル酸ポリマー、ポリ乳酸及びポリグリコール酸及びそれらのブロック共重合体、ポリエチレングリコ−ル、担体タンパク質、例えば、アルブミン、ゲル、例えば、サーモゲル系、例えば、当業者に周知のブロック共重合体系、ミセル、リポソーム、細粒、ナノ粒子、液晶及びその分散系、Ｌ２相及びその分散系（当業者に周知の脂質−水系中での相挙動）、ポリマー性ミセル、多重エマルジョン、自己乳化、自己マイクロエマルジョン化、シクロデキストリン及びそれらの誘導体、並びにデンドリマーが含まれるが、これらに限定されるものではない。
本発明の組成物は、例えば、定量吸入器、乾燥粉末吸入器及び噴霧器（全て、当業者に周知の装置である。）を用いて、化合物の経肺投与のための、固体、半固体、粉末及び溶液の製剤において有用である。
本発明の組成物は、制御された、持続性の、長期の、遅延された、及び徐放薬物送達系の製剤において、特に有用である。より具体的には、組成物は、当業者に周知の、非経口制御放出及び持続性放出系（両系とも、投与の回数が大幅に減少する。）の製剤において有用であるが、これらに限定されない。さらに好ましいのは、皮下から投与される制御放出及び持続性放出系である。本発明の範囲を限定するものではないが、有用な制御放出系及び組成物の例は、ヒドロゲル、油性ゲル、液晶、ポリマー性ミセル、細粒、ナノ粒子である。
本発明の組成物に対して有用な制御放出系を作製する方法には、結晶化、濃縮、共結晶化（ｃｏ−ｃｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ）、沈殿、共沈殿、乳化、分散、高圧ホモゲナイゼネーション、カプセル化、噴霧乾燥、ミクロカプセル化、コアセルベーション、相分離、細粒を作製するための溶媒蒸発、射出及び超臨界流体プロセスが含まれるが、これらに限定されない。一般的な参考文献として、「Handbook of Pharmaceutical Controlled Release(Wise,D.L.,ed. Marcel Dekker,New York,2000)」及び「Drug and the Pharmaceutical Sciences vol. 99:Protein Formulation and Delivery(MacNally,E.J.,ed. Marcel Dekker,New York,2000)」を参照されたい。
非経口投与は、注射器、必要に応じてペン様注射器を使用して、皮下、筋肉内、腹腔内又は静脈内注射によって行い得る。あるいは、非経口投与は、注入ポンプによって行うことが可能である。さらなる選択肢は、鼻又は肺用スプレーの形態で、本発明の化合物を投与するための溶液又は懸濁液であり得る組成物である。さらなる選択肢として、本発明の化合物を含有する薬学的組成物は、例えば、無針注射による、若しくはパッチ、必要に応じてイオン注入パッチからの経皮投与、又は経粘膜投与（例えば、頬）に適合することも可能である。
「安定化された製剤」という用語は、増加した物理的安定性、増加した化学的安定性又は物理的及び化学的安定性を有する製剤を表す。
本明細書において使用されるタンパク質製剤の「物理的安定性」という用語は、タンパク質が熱−機械的ストレスへのタンパク質の曝露及び／又は不安定化させる界面及び表面（疎水性表面及び界面など）との相互作用の結果として、生物学的に不活性な及び／又は不溶性のタンパク質凝集物を形成する、タンパク質の傾向を表す。水性タンパク質製剤の物理的安定性は、適切な容器中（例えば、カートリッジ又はバイアル）に充填された製剤を、様々な温度で、様々な時間にわたって、機械的／物理的ストレス（例えば、撹拌）に曝露した後に、目視の検査及び／又は濁度測定を用いて評価される。製剤の目視的検査は、暗い背景を用いて、鋭く集光された光の中で行われる。製剤の濁度は、例えば、０から３のスケールで、濁りの度合いをランク付けする視覚的スコアによって特徴付けられる（濁りを全く示さない製剤が視覚的スコア０に相当し、日光の中で視覚的濁りを示す製剤が視覚的スコア３に相当する。）。製剤が、日光の中で視覚的な濁りを示す場合、製剤はタンパク質凝集に関して物理的に不安定であると分類される。あるいは、製剤のにごりは、当業者に周知の簡易な濁度測定によって評価することも可能である。水性タンパク質製剤の物理的安定性は、タンパク質の高次構造状態の分光剤又はプローブを用いることによって、評価することも可能である。プローブは、好ましくは、タンパク質の非固有配座異性体に優先的に結合する小分子である。タンパク質構造の小分子分光的プローブの一例は、チオフラビンＴである。チオフラビンＴは、アミロイド原繊維の検出用に広く使用されてきた蛍光色素である。原繊維の存在下、及びおそらくは他のタンパク質形態の存在下でも、チオフラビンＴは、原繊維タンパク質形態に結合されたときに、約４５０ｎｍに新しい励起極大と約４８２ｎｍに増強された発光を生じる。結合していないチオフラビンＴは、前記波長では、実質的に非蛍光である。
固有状態から非固有状態へのタンパク質構造の変化のプローブとして、他の小分子を使用することも可能である。例えば、「疎水性パッチ」プローブは、タンパク質の露出された疎水性パッチに優先的に結合する。疎水性パッチは、一般的に、その固有状態にあるタンパク質の三次構造内に埋め込まれているが、タンパク質の折りたたみが解消し、又はタンパク質が変性を始めるにつれて、露出された状態となる。これらの小分子、分光学的プローブの例は、アントラセン、アクリジン、フェナンスロリンなどの芳香族疎水性色素である。他の分光学的プローブは、ファニルアラニン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン及びバリンなどの疎水性アミノ酸のコバルト金属錯体のような、金属−アミノ酸錯体である。
本明細書において使用される、タンパク質製剤の「化学的安定性」という用語は、固有のタンパク質構造に比べて、生物学的効力が低下し、及び／又は免疫原性特性が増加する可能性がある化学的分解産物の形成をもたらす、タンパク質構造中の化学的共有結合変化を表す。未変性タンパク質の種類及び性質並びにタンパク質が曝露される環境に応じて、様々な化学的分解産物が形成され得る。化学的分解の除去は完全に回避できない可能性が極めて高く、漸増量の化学的分解産物は、当業者に周知であるように、タンパク質製剤の保存及び使用時に見られることが多い。多くのタンパク質は、脱アミノ化（グルタミル残基又はアスパラギン残基中の側鎖アミド基が加水分解されて、遊離のカルボン酸を形成するプロセス）を受けやすい。その他の分解経路には、二以上のタンパク質分子が、アミド基転移及び／又はジスルフィド相互作用を通じて互いに共有結合されて、共有結合された二量体、オリゴマー及びポリマー分解産物の形成をもたらす高分子量の変換産物の形成が含まれる（Stability of Protein Pharmaceuticals, Ahern. T.J. & Manning M.C., Plenum Press, New York 1992）。化学的分解の別の変異形として、（例えばメチオニン残基の）酸化を挙げることができる。タンパク質製剤の化学的安定性は、異なる環境条件への曝露後に様々な時点で化学的分解産物の量を測定することによって（分解産物の形成は、しばしば、例えば、温度を上げることによって加速することが可能である。）評価することが可能である。各分解産物の量は、多くの場合、様々なクロマトグラフィー（例えば，ＳＥＣ−ＨＰＬＣ及び／又はＲＰ−ＨＰＬＣ）を使用し、分子サイズ及び／又は電化に依存した分解産物の分離によって決定される。
このように、上記に略述されているように、「安定化された製剤」とは、増加した物理的安定性、増加した化学的安定性又は増加した物理的及び化学的安定性を有する製剤を表す。一般に、製剤は、有効期限に到達するまで、（推薦された使用及び保存条件を守って）使用及び保存している間に安定でなければならない。
本発明の一実施形態において、本発明の化合物を含む薬学的製剤は、６週の使用を超えて、及び３年の保存を超えて安定である。
本発明の別の実施形態において、本発明の化合物を含む薬学的製剤は、４週の使用を超えて、及び３年の保存を超えて安定である。
本発明のさらなる実施形態において、本発明の化合物を含む薬学的製剤は、４週の使用を超えて、及び２年の保存を超えて安定である。
本発明のさらなる実施形態において、前記化合物を含む薬学的製剤は、２週の使用を超えて、及び２年の保存を超えて安定である。
本発明のＧＬＰ−１誘導体を含有する薬学的組成物は、このような治療を必要とする患者に、非経口的に投与され得る。非経口投与は、注射器、必要に応じてペン様注射器を使用して、皮下、筋肉内又は静脈内注射によって行い得る。あるいは、非経口投与は、注入ポンプによって行うことが可能である。さらなる選択肢は、鼻又は肺用スプレーの形態で、ＧＬＰ−１誘導体を投与するための粉末又は液体であり得る組成物である。さらなるオプションとして、例えば、パッチ、必要に応じてイオン注入パッチから経皮的に、例えば、頬から経粘膜的に、本発明のＧＬＰ−１誘導体を投与することも可能である。
このように、本発明のＧＬＰ−１誘導体の注射可能組成物は、所望の最終産物を与えるために、適宜、成分を溶解及び混合する薬学産業の慣用技術を用いて調製することが可能である。
一つの手順によれば、ＧＬＰ−１誘導体は、調製されるべき組成物の最終容量より若干少ない量の水の中に溶解される。等張剤、防腐剤及び緩衝液を必要に応じて添加し、必要であれば、酸（例えば、塩酸）又は塩基（例えば、水酸化ナトリウム水溶液）を必要に応じて使用して、溶液のｐＨ値を調整する。最後に、成分の所望の濃度を与えるために、溶液の容量を水で調整する。
上記成分に加えて、本発明のＧＬＰ−１誘導体を含有する溶液は、ＧＬＰ−１誘導体の溶解度及び／又は安定性を向上させるために、界面活性剤を含有することもできる。
ある種のペプチドの経鼻投与用組成物は、例えば、欧州特許２７２０９７号（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ Ａ／Ｓ）又はＷＯ ９３／１８７８５に記載されているように調製することができる。
本発明の好ましい一実施形態によれば、ＧＬＰ−１誘導体は、注射による投与に適した組成物の形態で与えられる。このような組成物は、即時使用するための注射溶液とするか、又は注射できる前に、溶媒中に溶解させなければならない一定量の固体組成物（例えば、凍結乾燥された産物）とすることが可能である。注射溶液は、好ましくは、約２ｍｇ／ｍＬ以上、好ましくは約５ｍｇ／ｍＬ以上、より好ましくは約１０ｍｇ／ｍＬ以上のＧＬＰ−１誘導体、好ましくは、約１００ｍｇ／ｍＬ以下のＧＬＰ−１誘導体を含有する。
本発明のＧＬＰ−１誘導体は、様々な疾病の治療において使用することが可能である。任意の患者に対して使用すべき具体的なＧＬＰ−１誘導体及び最適な投薬レベルは、治療すべき疾病並びに、使用される具体的なペプチド誘導体の効力、年齢、体重、物理的活性、及び患者の食事、併用され得る他の薬物、症例の重さなどの様々な要因に依存するであろう。本発明のＧＬＰ−１誘導体の投薬量は、当業者によって、それぞれの各患者に対して決定されることが推奨される。
特に、ＧＬＰ−１誘導体は、非インシュリン依存性糖尿病の治療及び／又は肥満の治療のために、持続的な作用プロファイルを有する医薬を調製するのに有用であると想定される。
別の側面において、本発明は、医薬を調製するための、本発明の化合物の使用に関する。
一実施形態において、本発明は、高血糖、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、肥満、高血圧、シンドロームＸ、異脂肪血症、β細胞アポトーシス、β細胞欠乏、心筋梗塞、炎症性腸症候群、消化不良、認知疾患、例えば、認識促進、神経保護、アテローム性動脈硬化、冠動脈心疾患及び他の心血管疾患の治療用医薬を調製するための、本発明の化合物の使用に関する。
別の実施形態において、本発明は、小腸症候群、炎症性腸症候群又はクローン病の治療用医薬を調製するための、本発明の化合物の使用に関する。
別の実施形態において、本発明は、高血糖、１型糖尿病、２型糖尿病又はβ細胞欠乏の治療用医薬を調製するための、本発明の化合物の使用に関する。
本発明の化合物による治療は、例えば、抗糖尿病薬、抗肥満薬、食欲調節剤、降圧剤、糖尿病に起因し、又は糖尿病に付随する合併症の治療及び／又は予防用の薬剤並びに肥満に起因し、又は肥満に付随する合併症及び疾患の治療及び／又は予防用の薬剤から選択される、薬理学的に活性な２以上の物質と併用することもできる。本明細書において、「抗糖尿病薬」という表現には、インシュリン抵抗性の治療及びインシュリン抵抗性が病態生理学的機序である疾病の治療及び／又は予防用化合物が含まれる。
これらの薬理学的に活性な物質の例は、インシュリン、ＧＬＰ−１アゴニスト、スルホニル尿素（例えば、トルブタミド、グリベンクラミド、グリピジドおよびグリクラジド）、ビグアニド、例えば、メトホルミン、メグリチニド、グルコシダーゼ阻害剤（例えば、アコルボース）、グルカゴンアンタゴニスト、ＤＰＰ−ＩＶ（ジペプチジルペプチダーゼ−ＩＶ）阻害剤、糖新生及び／又はグリコーゲン分解の刺激に関与する肝臓酵素の阻害剤、グルコース取り込み調節物質、トログリタゾン及びシグリタゾンなどのチアゾリジンジオン、ＨＭＧ ＣｏＡ阻害剤などの高脂血症剤（スタチン類）などの脂質代謝を改変する化合物、食物摂取を低下させる化合物、ＲＸＲアゴニスト及びβ細胞のＡＴＰ依存性カリウムチャネルに対して作用する薬剤、例えば、グリベンクラミド、グリピジド、グリクラジド及びレパグリニド；コレスチラミン、コレスチポール、クロフィブラート、ゲムフィブロジル、ロバスタチン、プラバスタチン、シンバスタチン、プロブコール、デキストロチロキシン、ネテグリニド、レパグリニド；アルプレノロール、アテノロール、チモロール、ピンドロール、プロプラノロール及びメトプロロールなどのβ遮断薬、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、フォシノプリル、リシノプリル、アラトリオプリル、キナプリル及びラミプリルなどのＡＣＥ（アンギオテンシン変換酵素）阻害剤、ニフェジピン、フェロジピン、ニカルジピン、イスラジピン、ニモジピン、ジルチアゼム及びベラパミルなどのカルシウムチャネル遮断剤並びにドキサゾシン、ウラピジル、プラゾシン及びテラゾシンなどのα−遮断剤；ＣＡＲＴ（コカインアンフェタミン制御転写物）アゴニスト）、ＮＰＹ（ニューロペプチドＹ）アンタゴニスト、ＭＣ４（メラノコルチン４）アゴニスト、オレキシンアンタゴニスト、ＴＮＦ（腫瘍壊死因子）アゴニスト、ＣＲＦ（コルチコトロピン放出因子）アゴニスト、ＣＲＦ ＢＰ（コルチコトロピン放出因子結合タンパク質）アンタゴニスト、ウロコルチンアゴニスト、β３アゴニスト、ＭＳＨ（メラニン形成細胞刺激ホルモン）アゴニスト、ＭＣＨ（メラニン形成細胞凝集ホルモン）アンタゴニスト、ＣＣＫ（コレシストキニン）アゴニスト、セロトニン再取り込み阻害剤、セロトニン及びノルアドレナリン再取り込み阻害剤、混合セロトニン及びノルアドレナリン作動性化合物、５ＨＴ（セロトニン）アゴニスト、ボンベシンアゴニスト、ガラニンアンタゴニスト、成長ホルモン、成長ホルモン放出化合物、ＴＲＨ（甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン）アゴニスト、ＵＣＰ２又は３（ｕｎｃｏｕｐｌｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ２又は３）調節物質、レプチンアゴニスト、ＤＡアゴニスト（ブロモクリプチン、ドプレキシン）、リパーゼ／アミラーゼ阻害剤、ＲＸＲ（レチノイドＸ受容体）調節物質、ＴＲ βアゴニスト；ヒスタミンＨ３アンタゴニストである。
一又は複数の上記化合物及び必要に応じて一又は複数のさらなる薬理学的に活性な物質と、本発明の化合物の任意の適切な組み合わせは、本発明の範囲に属するものと考えられることを理解しなければならない。
本発明は、以下の実施例によって、さらに説明されるが、本発明の範囲を限定するものと解釈してはならない。先述の記載及び以下の実施例に開示されている特徴は、個別に及びそれらの任意の組み合わせにより、本発明を多様な形態で実現するために重要なものとなり得る。
実施例に関する説明
市販の化学物質に対する以下の頭字語を使用する。
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＣＣ：Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＮＭＰ：Ｎ−メチル−２−ピロリドン
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＤＩＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン
Ｈ２Ｏ：水
ＣＨ３ＣＮ：アセトニトリル
ＨＢＴＵ：２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸
Ｆｍｏｃ：９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニル
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ＯｔＢｕ：ｔｅｒｔブチルエステル
ｔＢｕ：ｔｅｒｔブチル
Ｔｒｔ：トリフェニルメチル
Ｐｍｃ：２，２，５，７，８−ペンタメチル−クロマン−６−スルホニル
Ｄｄｅ：１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキシリデン）エチル
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＴＩＳ：トリイソプロピルシラン
Ｅｔ２Ｏ：ジエチルエーテル
Ｈ−Ｇｌｕ（ＯＨ）−ＯＢｕｔ：：Ｌ−グルタミン酸 α−ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＨＯＯＣ−（ＣＨ２）１２−ＣＯＯＮＳｕ：ω−カルボキシトリデカノイン酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イルエステル
ＨＯＯＣ−（ＣＨ２）１４−ＣＯＯＮＳｕ：ω−カルボキシペンタデカノイン酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イルエステル
ＨＯＯＣ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＮＳｕ：ω−カルボキシヘプタデカノイン酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イルエステル
ＨＯＯＣ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯＮＳｕ：ω−カルボキシノナデカノイン酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イルエステル
略号
ｒ．ｔ 室温
ＰＤＭＳ：プラズマ脱離質量分析
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：マトリックス支援レーザー脱離／イオン化質量分析
ＨＰＬＣ：高性能液体クロマトグラフィー
ａｍｕ：原子質量単位
分析：
ジペプチジルアミノペプチダーゼＩＶによる分解に対するペプチドの抵抗性は、以下の分解アッセイによって決定される。
ｐＨ７から８で、適切な緩衝液中（緩衝液はアルブミンでない。）、４から２２時間にわたり、精製されたジペプチジルアミノペプチダーゼＩＶの分割量とともに、ペプチドの分割量を３７℃でインキュベートする。トリフルオロ酢酸の添加によって酵素反応を停止させ、ＨＰＬＣ又はＬＣ−ＭＳ分析を用いて、ペプチド分解産物を分離し、定量する。この分析を実施するための一つの方法は、Ｚｏｒｂａｘ ３００ＳＢ−Ｃ１８（３０ｎｍ径、５μｍ粒子）１５０×２．１ｍｍカラムに混合物をかけ、０．１％のトリフルオロ酢酸中のアセトニトリルの線形グラジエント（３０分にわたって、０％から１００％のアセトニトリル）を用いて、０．５ｍＬ／分の流速で溶出する。ペプチド及びそれらの分解産物は、２１４ｎｍ（ペプチド結合）又は２８０ｎｍ（芳香族アミノ酸）の吸光度によってモニターすることができ、それらのピーク面積を積算することによって定量する。分割されたピークのＭＳスペクトルが決定できる場合には、分解パターンは、ＬＣ−ＭＳを使用することによって決定することが可能である。ペプチドＤＰＰＩＶ安定性を評価するために、ある時点における非分解／分解化合物のパーセントを使用する。ある時点における非分解化合物のパーセントに基づき、天然ペプチドより１０倍安定であるときに、ペプチドはＤＰＰＩＶ安定化されていると定義される。このように、ＤＰＰＩＶ安定化されたＧＬＰ−１化合物は、ＧＬＰ−（１−３７）より少なくとも１０倍安定である。 一般的な合成法
ペプチドは、Ｆｍｏｃ保護されたＲｉｎｋアミド樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）又はクロロトリチル樹脂又は固相ペプチド合成に適した類似の樹脂上で合成され得る。Ｂｏｃ化学反応を使用することができるが、より便利なのは、Ｎ−メチルピロリドン（Ｎ−メチルピロリドン）中でのＨＢＴＵ（２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロリン酸）を媒介したカップリング（妨害されるカップリングには、ＨＡＴＵのほうが適している。）とＦｍｏｃ保護基の脱保護のＵＶモニタリングを使用するＦａｓｔＭｏｃ ＵＶプロトコールを用いて、０．２５ｍｍｏｌのスケールで、最終的にＡｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ ４３３Ａペプチド合成機上でＦｍｏｃ戦略を使用することである。例えば、「Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００４，８：２１１−２２１」に記載されているＨＢＴＵ及びＨＡＴＵ以外の他のカップリング試薬も使用し得る。使用される保護されたアミノ酸誘導体は、Ｂａｃｈｅｍなどの供給業者から購入され、空のカートリッジに移されるＦｍｏｃ−Ａｉｂ−ＯＨ（Ｆｍｏｃ−アミノイソ酪酸）のような非天然アミノ酸を除く、ＡＢＩ４３３Ａ合成機に適した、予め秤量されたカートリッジ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）中に供給される標準的なＦｍｏｃアミノ酸であり得る。カップリングされた最後のアミノ酸は、Ｂｏｃ保護され得る。
未精製樹脂に結合された保護ペプチド上の特異的リジン残基への側鎖及びリンカーの付着は、最終的に、自動化された合成中にＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨを取り込んだ後、ヒドラジンで選択的な脱保護を行うことによって、特異的な位置に導入することができる。他の直行性保護基をリジンに対して使用し得る。 Ｄｄｅ保護を除去するための操作 手動震盪器／ろ過装置中に樹脂（０．２５ｍｍｏｌ）を置き、ＤＤＥ基を除去するために、Ｎ−メチルピロリドン中の２％ ヒドラジンで処理し（２０ｍＬ、２×１２分）、続いて、Ｎ−メチルピロリドン（４×２０ｍＬ）で洗浄し得る。
リジン残基に側鎖を付着するための操作 アミノ酸（樹脂に対して４モル当量）を、Ｎ−メチルピロリドン／塩化メチレン（１：１、１０ｍＬ）中に溶かし得る。ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（樹脂に対して４モル当量）及びジイソプロピルカルボジイミド（樹脂に対して４モル当量）を添加し、溶液を１５分間撹拌した。この溶液を前記樹脂に添加し、ジイソプロピルエチルアミン（樹脂に対して４モル当量）を添加する。この樹脂を室温で２４時間震盪する。Ｎ−メチルピロリドン（２×２０ｍＬ）、Ｎ−メチルピロリドン／塩化メチレン（１：１）（２×２０ｍＬ）及び塩化メチレン（２×２０ｍＬ）で、この樹脂を洗浄する。
Ｆｍｏｃ保護を除去するための操作：
手動震盪装置中のろ過フラスコ中に樹脂（０．２５ｍｍｏｌ）を置き、Ｎ−メチルピロリジン／塩化メチレン（１：１）（２×２０ｍｌ）およびＮ−メチルピロリドン（１×２０ｍｌ）、Ｎ−メチルピロリドン中の２０％ピペリジン溶液（３×２０ｍＬ）、各１０分）で処理する。Ｎ−メチルピロリドン（２×２０ｍＬ）、Ｎ−メチルピロリドン／塩化メチレン（１：１）（２×２０ｍＬ）及び塩化メチレン（２×２０ｍＬ）で、この樹脂を洗浄する。
樹脂からペプチドを切断する操作：
トリフルオロ酢酸、水及びトリイソプロピルシラン（９５：２．５：２．５）の混合物とともに、室温で１８０分間撹拌することによって、ペプチドを樹脂から切断する。切断混合物をろ過し、窒素の流れによって、ろ液を油になるまで濃縮する。４５ｍＬのジエチルエーテルで、未精製ペプチドをこの油から沈殿させ、４５ｍＬのジエチルエーテルで３回洗浄する。 精製：７μのＣ−１８シリカが充填された２０ｍｍ×２５０ｍｍのカラム上での半調製用ＨＰＬＣによって、未精製ペプチドを精製し得る。ペプチドに応じて、一又は二の精製システムを使用し得る。
硫安：濃Ｈ２ＳＯ４でｐＨ２．５に調整された、０．０５Ｍ（ＮＨ４）２ＳＯ４中の４０％ ＣＨ３ＣＮでカラムを平衡化する。乾燥後、未精製ペプチドを５ｍＬの５０％酢酸Ｈ２Ｏ中に溶かし、Ｈ２Ｏで２０ｍＬに希釈し、カラムに注入し、次いで、４０℃で５０分間、１０ｍＬ／分で、０．０５Ｍ（ＮＨ４）２ＳＯ４、ｐＨ２．５中の４０％−６０％ ＣＨ３ＣＮのグラジエントにより溶出する。ペプチド含有画分を集め、３倍容量のＨ２Ｏで希釈し、０．１％のＴＦＡで平衡化されたＳｅｐ−Ｐａｋ（登録商標） Ｃ１８カートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ ｐａｒｔ． ＃：５１９１０）を通過させる。０．１％ ＴＦＡを含有する７０％ ＣＨ３ＣＮで溶出し、溶出液を水で希釈した後、精製されたペプチドを凍結乾燥によって単離する。
ＴＦＡ：乾燥後、５ｍＬの５０％酢酸Ｈ２Ｏ中に未精製ペプチドを溶かし、２０ｍＬになるようにＨ２Ｏで希釈し、カラムに注入し、次いで、４０℃で５０分間、１０ｍＬ／分で、０．１％ ＴＦＡ中の４０−６０％ ＣＨ３ＣＮのグラジエントを溶出する。ペプチド含有画分を集める。溶出液を水で希釈した後、精製されたペプチドを凍結乾燥する。分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（保持時間）及びＬＣＭＳによって、得られた最終産物の特徴を決定し得る。
実験の部で行ったＲＰ−ＨＰＬＣ分析は、２１４ｎｍのＵＶ検出とＶｙｄａｃ ２１８ＴＰ５４ ４．６ｍｍ ｘ ２５０ｍｍ ５μＣ−１８シリカカラム（Ｔｈｅ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓ Ｇｒｏｕｐ、Ｈｅｓｐｅｒｉａ、ＵＳＡ）（４２℃、１ｍＬ分で溶出）を用いて行った。異なる溶出条件は、以下のとおりであった。
Ａ１：濃Ｈ２ＳＯ４でｐＨ２．５になるように調整された０．１Ｍ （ＮＨ４）２ＳＯ４からなる緩衝液でカラムを平衡化し、５０分間、同一緩衝液中の０％から６０％へのＣＨ３ＣＮのグラジエントによって溶出。
Ｂ１：０．１％ ＴＦＡ／Ｈ２Ｏによるカラムの平衡化と、５０分間、０％ ＣＨ３ＣＮ／０．１％ ＴＦＡ／Ｈ２Ｏから６０％ ＣＨ３ＣＮ／０．１％ ＴＦＡ／Ｈ２Ｏへのグラジエントによる溶出
Ｂ６：０．１％ ＴＦＡ／Ｈ２Ｏによるカラムの平衡化と、５０分間、０％ ＣＨ３ＣＮ／０．１％ ＴＦＡ／Ｈ２Ｏから９０％ ＣＨ３ＣＮ／０．１％ ＴＦＡ／Ｈ２Ｏへのグラジエントによる溶出
別のシステムは、以下のとおりであった。
Ｂ４：Ｗａｔｅｒｓ ２４８７デュアルバンド検出器を取り付けたＡｌｌｉａｎｃｅ Ｗａｔｅｒｓ ２６９５システムを用いて、ＲＰ分析を行った。Ｓｙｍｍｅｔｒｙ３００ Ｃ１８ 、５ｕｍ、３．９ｍｍ×１５０ｍｍカラム、４２℃を用いて、２１４ｎｍおよび２５４ｎｍでのＵＶ検出を収集した。１．０分／分の流速で、１５分間、５から９５％アセトニトリル、９０から０％の水及び５％トリフルオロ酢酸水溶液（１．０％）の線形グラジエントで溶出した。
ＬＣＭＳは、ＨＰ Ｃｈｅｍｓｔａｔｉｏｎ ソフトウェアによって制御された、Hewlett Packard series 1100 G1312A Bin Pump、Hewlett Packard series 1100 Column compartment、Hewlett Packard series 1100 G1315A ＤＡＤダイオードアレイ検出器、Hewlett Packard series 1100 MSD及びSedere 75 Evaporative Light Scattering検出器からなる装備上で行った。ＨＰＬＣポンプは、以下のものを含有する２つの溶出液貯蔵容器に接続されている。
Ａ：０．０５％ ＴＦＡ／水
Ｂ：０．０５％ＴＦＡ／アセトニトリル
あるいは、２つのシステムは、
Ａ：水中の１０ｍＭ ＮＨ４ＯＨ
Ｂ：９０％アセトニトリル中の１０ｍＭ ＮＨ４ＯＨ
とすることができる。
分析は、適切な容量の試料（好ましくは、２０μＬ）をＡ及びＢのグラジエントで溶出されるカラム上に注入することによって、２３℃で行った。
ＨＰＬＣ条件、使用した検出器の設定及び質量分析計の設定は、以下の表に記載されている。
カラム Ｗａｔｅｒｓ Ｘｔｅｒｒａ ＭＳ Ｃ−１８（５０×３ｍｍ ｉｄ ５μｍ）
グラジエント １．５ｍｌ／分で、６．５分の間に５％−１００％アセトニトリル、線形
検出 ２１０ｎｍ（ＤＡＤからのアナログ出力）
ＥＬＳ （ＥＬＳからのアナログ出力）
ＭＳイオン化モード ＡＰＩＥＳ。Ｓｃａｎ ５５０−１５００ ａｍｕ ステップ ０．１ａｍｕ
あるいは、ＬＣ−ＭＳ分析は、２つのＰｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ Ｓｅｒｉｅｓ ２００ Ｍｉｃｒｏｐｕｍｐ、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ Ｓｅｒｉｅｓ ２００オートサンプラー、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ ７８５Ａ ＵＶ検出器及びＳｅｄｅｘ ７５ Ｅｖａｐｏｒａｔｉｖｅ Ｌｉｇｈｔ Ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ検出器を取り付けたＰＥ−Ｓｃｉｅｘ ＡＰＩ １００質量分析計で行うことも可能であった。Ｗａｔｅｒｓ Ｘｔｅｒｒａ ３．０ｍｍ×５０ｍｍ ５μ Ｃ−１８シリカカラムを、室温で、１．５ｍｌ／分で溶出した。これを、５％ ＣＨ３ＣＮ／０．０５％ ＴＦＡ／Ｈ２Ｏで平衡化し、５％ ＣＨ３ＣＮ／０．０５％ ＴＦＡ／Ｈ２Ｏで１分間溶出し、次いで、７分間で９０％ ＣＨ３ＣＮ／０．０５％ ＴＦＡ／Ｈ２Ｏになる線形グラジエントで溶出した。検出は、２１４ｎｍでのＵＶ検出及びＥｖａｐｏｒａｔｉｖｅ ｌｉｇｈｔ Ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇによって行った。カラム溶出液の画分を、ＰＥ−Ｓｃｉｅｘ ＡＰＩ １００質量分析器のイオンスプレーインターフェース中に導入した。操作の間、２秒ごとに、３００−２０００ａｍｕの重量域を走査した。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ ＭＳ分析は、遅延抽出を備え、線形モードで作動されるＶｏｙａｇｅｒ ＲＰ装置（ＰｅｒＳｅｐｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ．、Ｆｒａｍｉｎｇｈａｍ、ＭＡ）を用いて実行した。Ａｌｐｈａ−ｃｙａｎｏ−４−ヒドロキシ桂皮酸をマトリックスとして使用し、質量数の決定は外部較正に基づいて行った。
Ｎε３７−（２−（２−（２−（ドデシルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
Figure 2007505840
ＡＢＩ４３３Ａ機器上で一次配列を作製するために、製造業者のガイドラインに従って、樹脂（Ｒｉｎｋアミド、０．６８ｍｍｏｌ／ｇ Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ ０．２５ｍｍｏｌｅ）を使用した。３７位に使用した残基（ＦｍｏｃＬｙｓ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨ、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）を除く全ての保護基は酸に対して不安定であり、他の全てのリジンを除く、このリジンの特異的な脱保護が可能となる。
操作
ＧＬＰ−１類縁体アミノ酸配列を含有する上で調製した樹脂（０．２５ｍｍｏｌｅ）を、手動の震盪器／ろ過装置中に配置し、Ｎ−メチルピロリドン中の２％ヒドラジンで処理して（２×１２分。２×２０ｍＬ）、Ｄｄｅ基を除去した。Ｎ−メチルピロリドン（４×２０ｍＬ）で、この樹脂を洗浄した。Ｆｍｏｃ−８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（Ｎｅｏｓｙｓｔｅｍ ＦＡ０３２０２）（樹脂に対して４モル当量）を、Ｎ−メチルピロリドン／塩化メチレン（１：１、２０ｍＬ）中に溶解した。ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（樹脂に対して４モル当量）及びジイソプロピルカルボジイミド（樹脂に対して４モル当量）を添加し、溶液を１５分間撹拌した。この溶液を前記樹脂に添加し、ジイソプロピルエチルアミン（樹脂に対して４モル当量）を添加した。この樹脂を、室温で２４時間震盪した。この樹脂を、Ｎ−メチルピロリドン（４×２０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ−メチルピロリドン（３×２０ｍｌ、各１０分）中の２０％ピペリジンの溶液を、震盪しながら樹脂に添加した。この樹脂をＮ−メチルピロリドン（４×２０ｍＬ）で洗浄した。ドデカノイン酸（樹脂に対して４モル当量）を、Ｎ−メチルピロリドン塩化メチレン（１：１、２０ｍｌ）中に溶かした。ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢｔ；Ｈ２Ｏ）（樹脂に対して４モル当量）及びジイソプロピルカルボジイミド（樹脂に対して４モル当量）を添加し、この溶液を１５分間撹拌した。この溶液を樹脂に添加し、ジイソプロピルエチルアミン（樹脂に対して４モル当量）を添加した。この樹脂を室温で２４時間震盪した。Ｎ−メチルピロリドン（２×２０ｍＬ）、Ｎ−メチルピロリドン／塩化メチレン（１：１）（２×２０ｍＬ）及び塩化メチレン（２×２０ｍＬ）でこの樹脂を洗浄した。トリフルオロ酢酸、水及びトリイソプロピルシランの混合物（９５：２．５：２．５ １５ｍｌ）とともに、室温で１８０分間撹拌することによって、ペプチドを樹脂から切断した。切断混合物をろ過し、油になるまで真空中でろ液を濃縮した。４５ｍＬのジエチルエーテルで、この油から未精製ペプチドを沈殿させ、４５ｍＬのジエチルエーテルで３回洗浄した。７μ Ｃ−１８シリカが充填された２０ｍｍ×２５０ｍｍカラム上の調製用ＨＰＬＣによって、この未精製ペプチドを精製した。５ｍＬの５０％酢酸水中に、前記未精製ペプチドを溶解し、Ｈ２Ｏで２０ｍＬになるように希釈し、カラムに注入し、次いで、４０℃で５０分間、１０ｍＬ／分で、４０％−６０％のグラジエント（０．１％ ＴＦＡを加えた水中のＣＨ３ＣＮ）のグラジエントにより溶出した。画分を含有するペプチドを集めた。水で溶出液を希釈した後、精製されたペプチドを凍結乾燥した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３２．８分
ＨＰＬＣ：（方法Ａ１）：ＲＴ＝４３．６分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝７６５．０（Ｍ＋５Ｈ）５＋、９５７．０（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１２７５．０（Ｍ＋３Ｈ）３＋。計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８２５．０
Ｎε３７−（２−（２−（２−（１７−スルホヘキサデカイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ１）：ＲＴ＝４５．５分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝７９２．９（Ｍ＋５Ｈ）５＋、９９０．９（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３２０．９（Ｍ＋３Ｈ）３＋計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９５９．９
Ｎε３７−｛２−［２−（２−（１５−カルボキシペンタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチル−［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ１）：ＲＴ＝４３．８分
ＨＰＬＣ：（方法Ａ１）：ＲＴ＝４２．０分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝９７８．３（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３０３．８（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９０９．６
Ｎε３７−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ１）：ＲＴ＝４６．４分
ＨＰＬＣ：（方法Ａ１）：ＲＴ＝４４．４分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝９８５．５（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３１３．４（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９３７．６
Ｎε３７−（２−（２−（２−（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ１）：ＲＴ＝４９．５分
ＨＰＬＣ：（方法Ａ１）：ＲＴ＝４７．１分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝９９２．５（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３２２．６（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９６５．７
［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）Ｌｙｓ（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリル）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３６．２８ｍｉｎ
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝９９５（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３２６（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９７７．６
［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（ヘキサデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３７．１ｍｉｎ
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝９９９（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３３２（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９９３．７
Ｎε３７（２−［２−（２，６−（Ｓ）−ビ−｛２−［２−（２−（ドデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノヘキサノイルアミノ）エトキシ］エトキシ）アセチル−［Ａｉｂ８，２２，３５］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３８．２分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１１０６．７（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１４７５．３（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４３３．０
Ｎε３７−（２−［２−（２，６−（Ｓ）−ビ−｛２−［２−（２−（テトラデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノヘキサノイルアミノ）エトキシ］エトキシ）アセチル−［Ａｉｂ８，２２，３５］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝４２．９分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１１２０．９（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１４９４．２（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４８０．４
［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３６．０分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１０３２．０（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３７４．０（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１２２．８
［Ａｉｂ８，２２，３５］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−｛２−［４−［４−（４−アミノ−９，１０−ジオキソ−３−スルホ−９，１０−ジヒドロ−アントラセン−１−イルアミノ）−２−スルホ−フェニルアミノ］−６−（２−スルホ−フェニルアミノ）−［１，３，５］トリアジン−２−イルアミノ］−エトキシ−エトキシ）−アセチル））アミド
Figure 2007505840
ＤｅｄＬｙｓ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨをＲｉｎｋ樹脂上に載せることによって調製した。次いで、Ｆｍｏｃを選択的に除去するために、「合成法」に記載されているように、樹脂をピペリジンで処理した。リジンのεアミン基上に２−（２−（２−（Ｆｍｏｃ−アミノ）エトキシ）エトキシ）酢酸をカップリングし、Ｆｍｏｃを除去した。ＤＭＳＯ及びＣｉｂａｃｒｏｎ Ｂｌｕｅ ３ＧＡ（１７当量）（Ｓｉｇｍａ Ｃ−９５３４）を添加し、この混合物を６０℃で１５時間加熱し、水（３回）、メタノール（２回）、ＴＨＦ（２回）及びジエチルエーテル（２回）で洗浄した。Ｄｄｅ保護基を除去し、「合成法」に記載されているように、残りのアミノ酸を添加した。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ１）：ＲＴ＝３８．１分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１１１０．４（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１４３６．４（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４３５．９
［Ａｉｂ８，２２，３５］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（１５−カルボキシペンタデカノイルアミノ）−エトキシ］エトキシアセチルアミノ）エトキシ］エトキシアセチル アミノ）エトキシ］エトキシアセチル））アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ１）：ＲＴ＝４１．２分
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３０．７分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１０６９．１（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１４２４．６（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２７１
Ｎε３７−（［２−（２−｛３−［２，５−ジオキソ−３−（１５−カルボキシペンタデシルスルファニル）−ピロリジン−１−イル］−プロピオニルアミノエトキシ）エトキシ）アセチル］−［Ｄ−Ａｌａ８，Ｌｙｓ３７］−ＧＬＰ−１−［７−３７］アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ１）：ＲＴ＝４５．２分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１００４．０（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３３８．２（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０１０．７．
［Ａｉｂ８，２２，３５Ａｌａ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−（２−（２−（１１−（オキサイルアミノ）ウンデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル−）））アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ａ１）：ＲＴ＝３７．９分
ＨＰＬＣ（方法Ｂ１）：ＲＴ＝３９．５分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝９９３．３（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３２３．９（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９６７．６
［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｌａ３７］−ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−（１５−カルボキシ−ペンタデカノイルアミノ）−エトキシ］エトキシアセチルアミノ）エトキシ］エトキシアセチル）アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３１．１分
ＨＰＬＣ（方法Ａ１）：ＲＴ＝４１．９分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１３７６．３（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１２５．８
［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｌａ３７］−ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−｛２−［１１−（５−ジメチルアミノナフタレン−１−スルホニルアミノ）ウンデカノイルアミノ］エトキシエトキシ）アセチル）アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ａ１）：ＲＴ＝４２．６分
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３０．４分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１３７７．３（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１２８．８
［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｌａ３７］−ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（［２−（２−｛２−［１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル］アセチルアミノエトキシ）エトキシ］アセチル））アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ａ１）：ＲＴ＝４１．１分
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３１．１分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１３５１．８（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０５２．０
［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｇｌｕ２２，２３，３０］ＧＬＰ−１ Ｈ（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３９．３分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１３６６．６（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０９５．６
［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｇｌｕ２２，２３，３０］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（エイコサノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝４２．６分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１３７５．７（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１２３．７．
［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１ Ｈ−（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３８．０分（９９．９％）
ＨＰＬＣ（方法Ａ１）：ＲＴ＝４９．０分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１０５４．６（Ｍ＋４Ｈ）４＋ １４０５．３（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２１１．８．
［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチル）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３８．７分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１０２９．２（Ｍ＋４Ｈ）４＋ １３７１．４（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１１０．８
［Ａｉｂ８］−ＧＬＰ−１−（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３４．７分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１０００．３（Ｍ＋４Ｈ）４＋ １３３７．４（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１１０．８
［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチル）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３７．５分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１４１４．９（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２３９．８
［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（１７−カルボキシヘプタノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３２．４分
ＨＰＬＣ（方法Ａ１）：ＲＴ＝４３．８分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１３８１．３（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１４０．０
［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ１−（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチル）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ａ１）：ＲＴ＝４２．３分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１３７２．３（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１１２．７
［Ａｉｂ８］ＧＬＰ−１−（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３３．５分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１０４０．３（Ｍ＋４Ｈ）４＋ １３８６．６（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１５５．８
Ｎε３７−（２−（２−（２−（ドデカイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１ Ｈ（７−３７）−アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３２．８分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７６５．７（Ｍ＋Ｈ）５＋、９５７．０（Ｍ＋Ｈ）４＋、１２７５．７（Ｍ＋Ｈ）３＋＝計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８２２．９
Ｎε３７−（２−（２−（２−（テトラデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ ＧＬＰ−１ Ｈ（７−３７）−アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３４，６分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７７１，４（Ｍ＋５Ｈ）５＋、 ９６４，１（Ｍ＋４Ｈ）４＋、 １２８４，９（Ｍ＋Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８５１，５
Ｎε３７−（２−（２−（２−（ヘキサデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）−アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３６，８分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝９７０．７（Ｍ＋４Ｈ）４＋、 １２９４．３（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８７９，６
Ｎε３７−（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）−アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３９，４分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝９７７，９（Ｍ＋４Ｈ）４＋、 １３０３，７（Ｍ＋Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９０７，６．
Ｎε３７−（２−（２−（２−（エイコサノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）−アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝４２．７分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝９８４．８（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３１２．８（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９３５．７
Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル））−［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）ＲＴ＝４０．７ｍｉｎ
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７９２．３（Ｍ＋５Ｈ）５＋、９８９．８（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３１９．２（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９５５．５
Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル））［Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）ＲＴ＝４０．５分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７８９．５（Ｍ＋５Ｈ）５＋、９８６．３（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３１４．８（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９４１．５
Ｎε３６−｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）ｅエトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）ＲＴ＝３８，３分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７８６．８（Ｍ＋５Ｈ）５＋、９８２．８（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３１０．１（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９２７，５
Ｎε３７−（２−（２−（２−（４−４（４，４，５，５，６，６，７，７，８，８，９，９，９−トリデカフルオロノナノイルスルファモイル−ブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル））［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）ＲＴ＝３２．４分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１０４２．７（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３８９．９（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１６６．４
Ｎε３７−（２−（２−（２−（３，３，４，４，５，５，６，６，７，７，８，８，９，９，１０，１０，１１，１１，１２，１２，１２−ヘネイコサフルオロ−ドデシルオキシアセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）ＲＴ＝３６．７分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１０６２．８（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１４１６．９（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２４７．３
Ｎε３７−（２−（２−（２−（４−（ヘキサデカノイルスルファモイル）ブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３７．４分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１００８．８（Ｍ＋４Ｈ）４＋１３４４．３（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０３０．７
［Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３８．５分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝（Ｍ＋４Ｈ）４＋１０２５．１ （Ｍ＋３Ｈ）３＋１３６６．７ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０９６．０
［Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３７．７分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝（Ｍ＋４Ｈ）４＋１０５７．８ （Ｍ＋３Ｈ）３＋１４１０．２ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２３５．９
Ｎε２０−｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−エキセンディン（１−３９）
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３３．６分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝（Ｍ＋４Ｈ）４＋１２０５．３ （Ｍ＋３Ｈ）３＋１６０６．９ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８１６．５
［Ａｌａ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−［２−（（２−オキサイルアミノ−３−カルボキシ−２−４，５，６，７−テトラヒドロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−６−イル−アセチルアミノ））エトキシ］エトキシアセチル）アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３２．１分
ＨＰＬＣ（方法Ａ１）：ＲＴ＝４２．２分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１０３３．３（Ｍ＋４Ｈ）４＋１３７６．６ （Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１２６．７
［Ａｉｂ８，２２，３５］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−［２−（（２−オキサイルアミノ−３−カルボキシ−２−４，５，６，７−テトラヒドロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−６−イル−アセチルアミノ））エトキシ］エトキシアセチル）アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ１）：ＲＴ＝３７．４分
ＨＰＬＣ（方法Ａ１）：ＲＴ＝３５．５分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１００２．５（Ｍ＋４Ｈ）４＋１３３６．７ （Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４００７．５
Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３９．０分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１０２２．３（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３６２．３（Ｍ＋３Ｈ）３＋、計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０８４．６
Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３８，６分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１０１５．２（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３５３．４（Ｍ＋３Ｈ）３＋、計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０５６．６
Ｎε３７−２−（２−（２−（４−（４−（ヘプタデカノイルアミノ）−４−（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）−４−（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル−［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＮＨ２
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ４）：ＲＴ＝１０．７２ｍｉｎ
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１０３９．０（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３８５．０（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１５２．０
Ｎε３７−２−（２−［２−（２−［２−（４−［４−（ヘプタデカノイルアミノ）−４−（Ｓ）カルボキシブチリルアミノ］−４−（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ］エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ］エトキシ）アセチル−［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＮＨ２
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ４）：ＲＴ＝１０．７４分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１０７４（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１４３３（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９７．
Ｎε３７−（２−（２−（２−（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，Ａｒｇ３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ４）：ＲＴ＝１０．７１分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝９７９．０（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３０４．０（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９１０．０
Ｎε２６−２−（２−２−（２−（２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル−［Ａｉｂ８，Ａｒｇ３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ４）：ＲＴ＝１１．３２分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１０２１（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３６２（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０８４
Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｔｅｃｈ ３４８ペプチド合成機（０．５ｍＭｏｌ／ｇ、１００ ｍｇ樹脂／ホール及び１０個のホールを使用した。）上でＦｍｏｃ戦略を使用して、クロロトリチル樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）上でペプチドを合成した。１−メチルピロリジン−２−オン（ＮＭＰ）中の、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）（Ｆｌｕｋａ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）／１−ヒドロキシ−７−アザ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）（２：１）（Ｓｅｎｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）中で、カップリングを媒介し、１０モル当量のアミノ酸とカップリング試薬を適用した。使用した保護されたアミノ酸誘導体は、アミノ酸Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（ｉｖＤｄｅ）（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）及びＦｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（Ｂａｃｈｅｍ）を除いて、標準的なＦｍｏｃ−アミノ酸（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｔｅｃｈ）であった。その後、この樹脂を、５つの部分（０．１ｍｍｏｌ）に分割し、次いで、ＮＭＰ中の（Ｂｏｃ）２Ｏ及びＤＩＥＡ（５モル当量）でＮ末端を処理した。
自動化された合成中に、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨを取り込ませた後、ヒドラジンの選択的脱保護を行うことによって、樹脂が結合された、未精製の保護されたペプチド上にある特定のリジン残基に側鎖及びリンカーを特定の位置に付着させた。
Ｄｄｅ保護を除去するための操作 シリンジ中に樹脂（０．１ｍｍｏｌ）を配置し、ＮＭＰ中の３％ヒドラジン及び３％ピペラジンで処理して（室温で５０分）、Ｄｄｅ基を除去し、ＮＭＰ（４×５ｍＬ）で洗浄した。
リジン残基に側鎖を付着させるための操作 ＯＥＧ又はアミノ酸（樹脂に対して７モル当量）をＮＭＰ中に溶かした。ＨＯＡｔ（樹脂に対して７モル当量）及びジイソプロピルカルボジイミド（樹脂に対して７モル当量）を添加し、この溶液を１５分間撹拌した。次いで、この溶液を樹脂に添加した。この樹脂を室温で一晩震盪した。樹脂をＮＭＰ（３×５ｍＬ）で洗浄した。
Ｆｍｏｃ保護を除去するための操作：シリンジ中に樹脂（０．１ｍｍｏｌ）を入れ、ＮＭＰ中の３０％ピペラジンの溶液で処理した（２０分で５ｍＬ）。この樹脂を、ＮＭＰ（２×５ｍＬ）及び塩化メチレン（２×５ｍＬ）で洗浄した。
樹脂をペプチドから切断するための操作：
トリフルオロ酢酸、水及びトリイソプロピルシラン（９４：３：３）の混合物とともに、室温で１２０分間撹拌することによって、ペプチドを樹脂から切断した。切断混合物をろ過し、窒素の流れによって、油になるまでろ液を濃縮した。
１０ｍＬのジエチルエーテルで、未精製ペプチドをこの油から沈殿させ、１０ｍＬのジエチルエーテルで２回洗浄した。
［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（１９−（カルボキシ）ノナデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｔｅｃｈ ３４８機器上で一次配列を作製するために、クロロトリチル樹脂（０．５ｍｍｏｌ／ｇ Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ、０．１ｍｍｏｌｅ）を使用した。３７位に使用した残基（ＦｍｏｃＬｙｓ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨ、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）を除く全ての保護基は酸に対して不安定であり、他の全てのリジンを除く、このリジンの特異的な脱保護が可能となる。
操作
ＧＬＰ−１類縁体アミノ酸配列を含有する上で調製した樹脂（０．１ｍｍｏｌｅ）をシリンジ中に入れ、Ｄｄｅ基を除去するために、Ｎ−メチルピロリドン中の３％ヒドラジン及び３％ピペラジンで処理した（５０分）。ＮＭＰ（４×５ｍＬ）で、この樹脂を洗浄した。Ｆｍｏｃ−８−３，６−ジオキサオクタン酸（Ｎｅｏｓｙｓｔｅｍ ＦＡ０３２０２）（樹脂に対して７モル当量）を、ＮＭＰ中に溶解した。ＨＯＡｔ（樹脂に対して７モル当量）及びジイソプロピルカルボジイミド（樹脂に対して７モル当量）を添加し、溶液を１５分間撹拌した。次いで、この溶液を前記樹脂に添加した。この樹脂を、室温で一晩震盪した。この樹脂を、ＮＭＰ（４×５ｍＬ）で洗浄した。ＮＭＰ中の３０％ピペリジンの溶液を樹脂に添加した（５ｍＬ、２０分）。この樹脂をＮＭＰ（４×５ｍＬ）で洗浄した。Ｃ２０のＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（樹脂に対して６モル当量、ＫＪ． Ｒｏｓｓ−Ｐｅｔｅｒｓｅｎ Ａ／Ｓ）及びＤＩＥＡをＮＭＰ中に溶かし、樹脂に添加した。この樹脂を室温で一晩震盪した。ＮＭＰ（３×５ｍＬ）及び塩化メチレン（２×５ｍＬ）でこの樹脂を洗浄した。トリフルオロ酢酸、水及びトリイソプロピルシランの混合物（９４：３：３、３ ｍｌ）とともに、室温で１２０分間撹拌することによって、ペプチドを樹脂から切断した。切断混合物をろ過し、油になるまで真空中でろ液を濃縮した。１０ｍＬのジエチルエーテルで、この油から未精製ペプチドを沈殿させ、１０ｍＬのジエチルエーテルで２回洗浄した。
精製
５から１０ｍｇ／２００μＬの濃度で、未精製ペプチドをＤＭＳＯ中に溶解し、４０℃で動作する７．８×３００ｍｍ Ｘ−Ｔｅｒｒａ Ｐｒｅｐ ＭＳ Ｃ１８ １０μｍカラムにかけた。３０％ ＣＨ３ＣＮ、０．０８％ ＴＦＡ、４ ｍｌ／分で５分後、３５分間に３０から６５％のＣＨ３ＣＮとなる線形グラジエントでカラムを溶出した。主なＵＶピークを手動で集め、ＭＡＬＤＩ−ＭＳによって所望のピークを同定した。
溶出液中のペプチドの濃度は、それぞれ、チロシン及びトリプトファンのモル吸光係数を１２８０及び３６９０と仮定して、２８０ｎｍのＵＶ吸収を測定することによって決定された。濃度測定後、所望の量を含有するバイアル中に溶出液を分取し、真空遠心によって乾燥した。
ＨＰＬＣ：２７．９分に溶出＝５２．９％ ＣＨ３ＣＮ
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：３９９６（ＭＨ＋）
［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−（２−（１７−（カルボキシ）ヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル））−ＯＨ
Figure 2007505840
一保護されたｔｅｒｔ−ブチルエステル（樹脂に対して３モル当量）として、オクタデカンジオン酸Ｃ１８を付着し、ＮＭＰ中のＨＯＡｔ及びＤＩＣ（同じく、樹脂に対して３モル当量）を介してカップリングを行ったことを除いて、前実施例のとおりに、及び「合成方法」に従って、化合物を調製した。精製するために、２２．５％ＣＨ３ＣＮ、０．１Ｎ ＮａＯＨ中に未精製ペプチドを溶解した。
ＨＰＬＣ：２５．４分に溶出＝５０．４％ ＣＨ３ＣＮ
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：３９６９（ＭＨ＋）
［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（４−（１９−（カルボキシ）ノナデカノイルアミノ）−４−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
前二例の実施例及び「合成方法」に従って、化合物を調製した。ＨＯＡｔ及びＤＩＣ（樹脂に対して６モル当量）を用いて、アミノ酸Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）（樹脂に対して６モル当量）を樹脂にカップリングさせた。精製するために、２２．５％ＣＨ３ＣＮ、０．１Ｎ ＮａＯＨ中に未精製ペプチドを溶解した。
ＨＰＬＣ：２７．２分に溶出する＝５２．２％ ＣＨ３ＣＮ
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：４１２４（ＭＨ＋）
［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（ヘキサデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）−アセチル）−ＯＨ
Figure 2007505840
さらに２つのＯＥＧをＬｙｓの側鎖にカップリングしたことを除き、前三例の実施例及び「合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：２５．０分で溶出＝５０．０％ ＣＨ３ＣＮ
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：４２５９（ＭＨ＋）
［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）−アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）ＮＨ２
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３８．８分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１０２２．３（Ｍ＋４Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０８１．７
Ｎε２０（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（１７−（カルボキシ）ヘプタデカノイルアミノ）−４−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ｌｙｓ２０］エキセンディン−４（１−３９）−ＮＨ２
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ（方法Ａ１）：ＲＴ＝４１．９分
ＨＰＬＣ（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３１．３分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１７２２．７（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１６４．９
Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１（７−３７）
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３４，２分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝９９７，２（Ｍ＋４Ｈ）４＋、 １３２９，４（Ｍ＋３Ｈ）３＋、１９９３，２（Ｍ＋２Ｈ）２＋、計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９８５，５
Ｎ−ε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１（７−３７）
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３４，２分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝９９３．８（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３２４．６（Ｍ＋３Ｈ）３＋、１９８７．２（Ｍ＋２Ｈ）２＋、計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９７１
Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１（７−３７）
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３４，２分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝９９０．３（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３２０．３（Ｍ＋３Ｈ）３＋、計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９５７．４
Ｎε２０−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）−エトキシ）アセチル）［Ｌｙｓ２０］エキセンディン−４（１−３９）アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３７．７分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１２１６．６（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１６２１．４（Ｍ＋３Ｈ）３＋、計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８６１．５
Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１−（７−３７）
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３９．１分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１０１８．８（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３５７．６（Ｍ＋３Ｈ）３＋、計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０７０．６
Ｎε２６−（２−［２−（２−［２−（２−［２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ］エトキシ）アセチルアミノ］エトキシ）エトキシ］アセチル）［Ａｒｇ３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ４）：ＲＴ＝１２．１分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝９９３．０（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３２５．０（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９７０．０
Ｎε２６−［２−（２−［２−（２−［２−（２−［４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ］エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ］エトキシ）アセチル］［Ａｒｇ３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ４）：ＲＴ＝１１．８分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１０２６（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３６８（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１００
Ｎε２０−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル−アミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ｌｙｓ２０］エキセンディン−４（１−３９）アミド
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３２，３分
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１２２３．９（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１６３０．８（Ｍ＋３Ｈ）３＋、計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８９１．５
［Ｇｌｙ８，Ｇｌｕ２２，２３，３０，Ａｒｇ１８，２６，３４］ＧＬＰ１（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ））エトキシ）アセチル）−ＮＨ２
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３２．０分
ＨＰＬＣ：（方法Ａ１）：ＲＴ＝４３．４分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１４３８．７（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３１１．８
［イミダゾリルプロピオン酸、Ａｓｐ１６，Ａｉｂ２２，３５］ＧＬＰ１（７−３７）Ｌｙｓ ＮＨ（（２−｛［４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブチルカルバモイル］メトキシエトキシ）エトキシ））
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ１）：ＲＴ＝３２．５分
ＨＰＬＣ：（方法Ａ１）：ＲＴ＝４３．５分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１０２８．８（Ｍ＋４Ｈ）４＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１０８．７
［イミダゾリルプロピオン酸、Ａｉｂ２２，３５］ＧＬＰ１（７−３７）Ｌｙｓ ＮＨ（（２−｛［４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブチルカルバモイル］メトキシエトキシ）エトキシ））
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ６）：ＲＴ＝３３．７分
ＨＰＬＣ：（方法Ａ１）：ＲＴ＝４４．８分
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝１０２４．８（Ｍ＋４Ｈ）４＋、１３６５．４（Ｍ＋３Ｈ）３＋ 計算値（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０９２．８
［３−（５−イミダゾイル）プロピオニル，Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（１７−カルボキシヘプタノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
Figure 2007505840
実施例１の方法及び「一般的な合成方法」に従って、化合物を調製した。
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：４１２７（ＭＨ＋）
ＨＰＬＣ：溶出：２５．５分＝５０．６％ ＣＨ３ＣＮ
生物学的発見
静脈内又は皮下投与後におけるＧＬＰ−１誘導体の延長
以下に記載されている方法を使用して、健康なブタに皮下投与した後のその血漿中濃度をモニタリングすることによって、本発明の多数のＧＬＰ−１誘導体の延長を測定した。比較のため、皮下投与後のＧＬＰ−１（７−３７）の血漿中濃度も追跡した。本発明の他のＧＬＰ−１誘導体の延長も、同様にして測定することができる。
ミニブタでのＧＬＰ類縁体の薬物動態学的検査
皮下又は静脈内投与に適したビヒクル中に検査物質を溶かした。投薬容量が約１ｍＬとなるように濃度を調整した。
研究は、Ellegaard Gottingen Minipigs ApSから入手した１２匹の雄のＧｏｔｔｉｎｇｅｎミニブタで行った。動物が研究に入る前に、約１０日の馴化期間を置いた。馴化期間の開始時点で、ミニブタは約５月齢であり、８から１０ｋｇの体重であった。研究は、室温が２１から２３℃、相対湿度５０％以上に設定された適切な動物室で行った。１２時間の明期と１２時間の暗期のサイクルを与えるように、部屋を照射した。明期は、６：００か１８：００時であった。動物は、藁を敷いた檻の中で飼育し、各檻の中に６匹を入れた。動物は、実験を通じて、家庭用品質の飲料水を自由に飲むことができたが、投薬の前日のおよそ午後４時から、投薬からおよそ１２時間後まで絶食した。動物は、到着時及び投薬日に秤量した。
動物に、単回の静脈内注射又は皮下注射を与えた。皮下注射は、首の右側（耳から約５ないし７ｃｍ及び首の中央から７ないし９ｃｍ）に行った。針上のストッパーを用いて注射を与え、針の０．５ｃｍを導入できるようにした。各試験物質を三匹の動物に与えた。各動物には、２ｎｍｏｌ／ｋｇ体重の用量を与えた。毎週６匹の動物に投薬し、残り６匹は休息させた。
完全な血漿濃度時間プロファイルを各動物から取得した。血液試料は、以下のスケジュールに従って集めた。
静脈内投与後
投薬前（０）、注射から０．１７（１０分）０．５、１、２、４、６、８、１２、２４、４８、７２、９６及び１２０時間後。
皮下投与後
投薬前（０）、注射から０．５、１、２、４、６、８、１２、２４、４８、７２、９６及び１２０時間後。各試料採取時間時に、２ｍＬの血液を各動物から採取した。血液試料は、頚静脈から採取した。ＧＬＰ−１類縁体の酵素的分解を抑えるために、安定化用緩衝液を含有する試験管の中に血液試料を集めた。血漿を直ちにＭｉｃｒｏｎｉｃチューブに移した。約２００μＬの血漿を各Ｍｉｃｒｏｎｉｃチューブに移した。血漿は、アッセイするまで、−２０℃で保存した。イムノアッセイを用いて、ＧＬＰ−１類縁体の含量について、血漿試料をアッセイした。血漿濃度−時間プロファイルは、非コンパートメント薬物動態分析によって分析した。各時点で、以下の薬物動態学的パラメータ：ＡＵＣ、ＡＵＣ／Ｄｏｓｅ、ＡＵＣ％Ｅｘｔｒａｐ、Ｃｍａｘ、ｔｍａｘ、λｚ、ｔ1/2、ＣＬ、ＣＬ／ｆ、Ｖｚ、Ｖｚ／ｆ及びＭＲＴを算出した。
本発明の選択された化合物をＤａｎｉｓｈ Ｌａｎｄｒａｃｅブタで検査した。
ブタにおけるＧＬＰ−１類縁体の薬物動態学的検査
ブタ（５０％ Ｄｕｒｏｃ、２５％ Ｙｏｒｋｓｈｉｒｅ、２５％ Ｄａｎｉｓｈ Ｌａｎｄｒａｃｅ、約４０ｋｇ）は、実験の初めから絶食した。各ブタに、５０μＭの等張溶液（５ｍＭリン酸、ｐＨ７．４、０．０２％ Ｔｗｅｅｎ（登録商標）−２０（Ｍｅｒｃｋ）、４５ｍｇ／ｍＬマニトール（発熱物質なし、Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ）中の０．５ｎｍｏｌ／ｋｇ体重の検査化合物を投与した。血液試料は、頚静脈中のカテーテルから採取した。１７５μＬの以下の溶液：０．１８Ｍ ＥＤＴＡ、１５０００ＫＩＥ／ｍＬのアプロチニン（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ）及び０．３０ｍＭのＶａｌｉｎｅ−Ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｄｅ（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ）、ｐＨ ７．４を含有する冷やしたグラス中に、５ｍＬの血液試料を注いだ。３０分以内に、この試料を５から６０００＊ｇで１０分間遠心した。温度は、４℃に保った。ピペットで異なるグラス中に上清を加え、使用まで−２０℃に保った。
ペプチドの血漿濃度は、サンドイッチＥＬＩＳＡ中で、又は様々なモノクローナル若しくはポリクローナル抗体を用いたＲＩＡによって測定した。抗体の選択は、ＧＬＰ−１誘導体に依存する。血漿中のピーク濃度が達成される時間は、選択したＧＬＰ−１誘導体に応じて、広い限界内を変動する。
９６ウェルマイクロタイタープレート中でのサンドイッチＥＬＩＳＡの一般的なアッセイプロトコール
コーティング緩衝液（ＰＢＳ）：リン酸緩衝化生理的食塩水、ｐＨ７．２
洗浄緩衝液（ＰＢＳ−ｗａｓｈ）：リン酸緩衝化生理的食塩水、０．０５％ ｖ／ｖ Ｔｗｅｅｎ ２０、ｐＨ７．２
アッセイ緩衝液（ＢＳＡ−ｂｕｆｆｅｒ）：リン酸緩衝化生理的食塩水、１０ｇ／Ｌウシ血清アルブミン（Ｆｌｕｋａ ０５４７７）、０．０５％ ｖ／ｖ Ｔｗｅｅｎ ２０、ｐＨ ７．２
ストレプトアビジン緩衝液：リン酸緩衝化生理的食塩水、０．５Ｍ ＮａＣｌ、０．０５％ ｖ／ｖ Ｔｗｅｅｎ ２０、ｐＨ７．２
標準：血漿−マトリックス中の各化合物
Ａ−ＴＮＰ：Ｎｏｎｓｅｎｓ抗体
ＡＭＤＥＸ：ストレプトアビジン−西洋ワサビ−ペルオキソダーゼ（Ａｍｅｒｓｈａｍ ＲＰＮ４４０１Ｖ）
ＴＭＢ−基質：３，３’，５，５’テトラメチルベンジジン（＜０．０２ ％）、過酸化水素
アッセイは、以下のようにして行った（容量／ウェル）
１）ＰＢＳ緩衝液中の１００μＬの捕捉抗体５μｇ／ｍＬでコート
→インキュベートｏ／ｎ 、４℃
→５ｘ ＰＢＳ−ｗａｓｈ→最低３０分の最後の洗浄でブロック
→次いで、プレートを空にする
２）２０μｌ試料＋ １０μｇ／ｍＬのＡ−ＴＮＰを加えたＢＳＡ−ｂｕｆｆｅｒ中の１００μＬのビオチン化された検出抗体１μｇ／ｍＬ
→２時間インキュベート、室温、震盪器→５×ＰＢＳ−ｗａｓｈ、次いで、プレートを空にする
３）１００μＬのＡＭＤＥＸ ストレプトアビジン緩衝液中１：８０００
→４５から６０分インキュベート、室温、震盪器
→５×ＰＢＳ−ｗａｓｈ、次いで、プレートを空にする
４）１００μＬのＴＭＢ−基質
→震盪器上、室温でｘ分インキュベートする
→１００μＬの ４Ｍ Ｈ３ＰＯ４で反応を停止
６２０ｎｍを参照として、４５０ｎｍの吸光度を読む
標準曲線から試料中の濃度を計算した。
ＲＩＡ用の一般的なアッセイプロトコール
ＤＢ−緩衝液：８０ｍＭのリン酸緩衝液、０．１％ヒト血清アルブミン、１０ｍＭ ＥＤＴＡ、０．６ｍＭ チメロサール、ｐＨ７．５
ＦＡＭ−緩衝液：４０ｍＭのリン酸緩衝液、０．１％ヒト血清アルブミン、０．６ｍＭ チメロサール、ｐＨ７．５
活性炭：４０ｍＭのリン酸緩衝液、０．６ｍＭ チメロサール、１６．７％のウシ血漿、１５ｇ／Ｌの活性炭、ｐＨ７．５
（使用前に、４℃で最低１時間、懸濁物を混合する。）
標準：血漿−マトリックス中の各化合物
アッセイは、ｍｉｎｉｓｏｒｐチューブ１２×７５ｍｍ中で、以下のように行った（容量／チューブ）。
Figure 2007505840
ミックス−４℃で３０分間インキュベート−３０００ｒｐｍで３０分遠心−その後直ちに、ストッパーで閉じた新しいチューブに上清を移し、ガンマカウンターで１分間カウントする。資料中の濃度は、各標準曲線から計算した。
ＧＬＰ−１比受容体アッセイ（ＲＲＡ；ｒａｔｉｏ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｓｓａｙ）
この方法は、ＬＥＡＤｓｅｅｋｅｒ撮像粒子を用いた放射測定−リガンド結合アッセイである。このアッセイは、ＧＬＰ−１受容体を含有する膜断片、非標識ＧＬＰ−１類縁体、１２５Ｉで標識されたヒトＧＬＰ−１及びコムギ麦芽凝集素（ＷＧＡ）でコートされたＰＳ LEADseeker粒子から構成される。非標識及び１２５Ｉ−標識ＧＬＰ−１は、受容体への結合を競合する。ＬＥＡＤｓｅｅｋｅｒ粒子を添加すると、それらは、ＷＧＡ−残基を介して、膜断片上の炭水化物残基に結合する。１２５Ｉ−分子とLEADseeker粒子間の距離が近接すると、粒子からの発光が引き起こされる。LEADseekerは、発光された光を造影し、これは、試料中に存在するＧＬＰ−１類縁体の量に逆相関する。
試薬と材料
動物血漿の前処理：動物の血漿を５６℃で４時間熱処理し、１０，０００ｒｐｍで１０分間遠心した。その後、Ｖａｌ−Ｐｙｒ（１０μＭ）及びアプロテニン（５００ ＫＩＥ／ｍＬ）を添加し、使用するまで、−１８℃未満で保存した。
ＧＬＰ−１類縁体の較正：約１μＭから１ｐＭにわたる希釈線を作製するために、ＧＬＰ−１類縁体を熱処理された血漿中にスパイクした。
ＧＬＰ−１ ＲＲＡアッセイ緩衝液：２５ｍＭ Ｎａ−ＨＥＰＥＳ（ｐＨ＝７．５）、２．５ｍＭ ＣａＣｌ２、１ｍＭ ＭｇＣｌ２、５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．１％ オボアルブミン、０．００３％ ｔｗｅｅｎ ２０、０．００５％ バシトラシン、０．０５％ ＮａＮ３。
ＧＬＰ−１受容体の懸濁：ヒト膵臓ＧＬＰ−１受容体を発現する新生仔ハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞から、ＧＬＰ−１受容体膜断片を精製した。使用するまで、−８０℃で保存した。
ＷＧＡが結合されたポリスチレンＬＥＡＤｓｅｅｋｅｒ造影ビーズ（ＲＰＮＱ０２６０、Ａｍｅｒｓｈａｍ）：１３．３ｍｇ／ｍＬの濃度になるように、このビーズをＧＬＰ−１ ＲＲＡアッセイ緩衝液で再構成した。次いで、ＧＬＰ−１受容体膜懸濁液を添加し、使用前に少なくとも１時間、逆さまにして、低温（２−８℃）でインキュベートした。
［１２５Ｉ］−ＧＬＰ−１（７−３６）アミド(Novo Nordisk A/S)。使用するまで、−１８℃未満で保存。
エタノール９９．９％ ｖｏｌ(De Dansk Spritfabrikker A/S)。使用するまで、−１８℃未満で保存。
ＭｕｌｔｉＳｃｒｅｅｎ（登録商標） Ｓｏｌｖｉｎｅｒｔ ０．４５μｍ疎水性ＰＴＦＥプレート（ＭＳＲＰＮ０４５０、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｃｏｒｐ．）
ポリプロピレンプレート（ｃａｔ． ｎｏ． ６５０２０１、Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ−Ｏｎｅ）
White polystyrene ３８４ウェルプレート（cat. no. 781075、Greiner Bio-One）
装置：
水平プレートミキサー
標準的なスイング型マイクロタイタープレートローター装置で遠心
UltraVap-Drydown Sample Concentrator(Porvair)
LEADseekerTM Multimodality Imaging System(Amersham)
アッセイの手順：
試料の調製：
ろ液を集めるために、MultiScreen(登録商標) Solvinertフィルタープレートを、化学的に同等のレシーバープレート（すなわち、ポリプロピレンプレート）上に載せた。１５０μＬの氷冷したエタノール９９．９％を、MultiScreen（登録商標） Solvinertフィルタープレートの空のウェル中に添加し、続いて、５０μＬの較正サンプル又は血漿試料を添加した。保存蓋をフィルタープレート上に置いた。水平プレートミキサー上で、１５分間、１８から２２℃でインキュベートする。組み立てられたフィルターとレシーバープレート（蓋付き）を、標準的なスイング型マイクロタイタープレートローター装置中に配置する。次いで、１５００ｒｐｍで、２分間、レシーバープレートの空のウェル中にろ液を集める。加熱した（４０℃）Ｎ２を加えたＵｌｔｒａＶａｐを１５分にわたって使用することにより、ろ液を乾燥する。１００μＬのＧＬＰ−１ ＲＲＡアッセイ緩衝液を各ウェルの中に添加することにより、乾燥した材料を再構成する。水平ミキサー上で５分間インキュベートする。
ＧＬＰ−１比受容体アッセイ：
以下のピペット操作スキームと白色ポリスチレン３８４ウェルプレートを使用する。
・３５μＬのＧＬＰ−１ ＲＲＡアッセイ緩衝液
・５μＬの再構成されたろ液。
・１０μＬの［１２５Ｉ］−ＧＬＰ−１（７−３６）アミド。２０，０００ｃｐｍ／ウェルになるように、使用前にＧＬＰ−１ ＲＲＡアッセイ緩衝液中に原溶液を希釈した。
・ＷＧＡ−ポリスチレンＬＥＡＤｓｅｅｋｅｒ造影ビーズ（０．２ｍｇ／ウェル）に予めコートされた１５μＬのＧＬＰ−１受容体膜断片（約０．５μｇ／ウェル）
プレートを密封し、１８から２２℃で一晩インキュベートする
LEADseekerTM Multimodality Imaging Systemを使用することによって、各ウェルからの発光を１０分間にわたって検出する。
クローニングされたヒトＧＬＰ−１受容体を発現する細胞株中でのｃＡＭＰ形成の刺激
ヒトＧＬＰ−１受容体を発現する、安定に形質導入された細胞株ＢＨＫ４６７−１２Ａ（ｔｋ−ｔｓ１３）から得た精製形質膜をＧＬＰ−１及びペプチド類縁体で刺激し、Perkin Elmer Life SciencesのAlphaScreenTM cAMP Assay Kitを用いて、ｃＡＭＰ産生の効力を測定した。安定に形質導入された細胞株をＮＮで調製し、スクリーニングのために、高発現クローンを選択した。ＤＭＥＭ中５％ ＣＯ２、５％ ＦＣＡ、１％ Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ及び０．５ｍｇ／ｍＬのＧ４１８中で細胞を増殖した。約８０％の集密度の細胞を、ＰＢＳで２回洗浄し、Ｖｅｒｓｅｎｅで採集し、１，０００ｒｐｍで５分間遠心し、上清を除去した。追加の工程は、全て氷上で行った。１０ｍＬの緩衝液１（２０ｍＭ Ｎａ−ＨＥＰＥＳ、１０ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ＝７．４）中で、２０から３０秒間、Ｕｌｔｒａｔｈｕｒａｘによって細胞ペレットをホモゲナイズし、２０，０００ｒｐｍで１５分間遠心し、このペレットを１０ｍＬの緩衝液２（２０ｍＭ Ｎａ−ＨＥＰＥＳ、０．１ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ＝７．４）中に再懸濁した。この懸濁液を２０から３０秒間ホモゲナイズし、２０，０００ｒｐｍで１５分遠心した。緩衝液２中での懸濁、ホモゲナイゼーション及び遠心をもう一度繰り返し、膜を緩衝液２の中に再懸濁し、さらなる分析にそのまま使用するか、又は−８０℃で保存した。AlphaScreen Technologyによりペプチド誘導性ｃＡＭＰ産生を測定することによって、機能的受容体アッセイを行った。The AlphaScreen Technologyの基本的原理は、内因性ｃＡＭＰと外から添加されたビオチン−ｃＡＭＰ間での競合である。ｃＡＭＰの捕捉は、アクセプタービーズに抱合された特異的抗体を使用することによって達成される。AlphaFusion Microplate Analyzerで、形成されたｃＡＭＰを計数し、測定した。ＥＣ５０値は、Graph-Pad Prismeを用いて計算した。

Claims (74)

  1. 親水性スペーサーを介してアルブミン結合残基に連結された治療用ポリペプチドを含む化合物。
  2. 親水性スペーサー−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＥ］ｍ（ＣＨ２）ｐＱｑ−
    （式中、
    ｌ、ｍ及びｎは、独立に、１から２０であり、ｐは０から１０であり、
    Ｑは、−Ｚ−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＧ］ｍ（ＣＨ２）ｐ−であり、
    ｑは、０から５の範囲の整数であり、
    各Ｄ、Ｅ及びＧは、−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｎ（ＣＯＲ４）−、−ＰＲ５（Ｏ）−及び−Ｐ（ＯＲ６）（Ｏ）−から独立に選択され（Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、独立に、水素又はＣ１−６−アルキルを表す。）、
    Ｚは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−ＮＨＣ（Ｏ）−から選択され（ｓは、０又は１である。）、
    を介してアルブミン結合残基に連結された治療用ポリペプチドを含む化合物又は薬学的に許容されるその塩又はプロドラッグ。
  3. 式（Ｉ）：
    Ａ−Ｗ−Ｂ−Ｙ−治療用ペプチド（Ｉ）
    （式中、
    Ａは、アルブミン結合残基であり、
    Ｂは、−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＥ］ｍ（ＣＨ２）ｐＱｑ−である親水性スペーサーであり、
    （式中、
    ｌ、ｍ及びｎは、独立に、１から２０であり、ｐは０から１０であり、
    Ｑは、−Ｚ−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＧ］ｍ（ＣＨ２）ｐ−であり、
    ｑは、０から５の範囲の整数であり、
    各Ｄ、Ｅ及びＧは、−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｎ（ＣＯＲ４）−、−ＰＲ５（Ｏ）−及び−Ｐ（ＯＲ６）（Ｏ）−から独立に選択され（Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、独立に、水素又はＣ１−６−アルキルを表す。）、
    Ｚは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−ＮＨＣ（Ｏ）−から選択され（ｓは、０又は１である。）、
    Ｙは、Ｂと治療剤を連結する化学基であり、
    Ｗは、ＡとＢを連結する化学基である。）
    を有する請求項２に記載の化合物。
  4. 式（ＩＩ）：
    Ａ−Ｗ−Ｂ−Ｙ−治療用ポリペプチド−Ｙ’−Ｂ’−Ｗ’−Ａ’（ＩＩ）
    （式中、
    Ａ及びＡ’は、アルブミン結合残基であり、
    Ｂ及びＢ’は、−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＥ］ｍ（ＣＨ２）ｐＱｑ−から独立に選択される親水性スペーサーであり、
    （式中、
    ｌ、ｍ及びｎは、独立に、１から２０であり、ｐは０から１０であり、
    Ｑは、−Ｚ−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＧ］ｍ（ＣＨ２）ｐ−であり、
    ｑは、０から５の範囲の整数であり、
    各Ｄ、Ｅ及びＧは、−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｎ（ＣＯＲ４）−、−ＰＲ５（Ｏ）−及び−Ｐ（ＯＲ６）（Ｏ）−から独立に選択され（Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、独立に、水素又はＣ１−６−アルキルを表す。）、
    Ｚは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−ＮＨＣ（Ｏ）−から選択され（ｓは、０又は１である。）、
    Ｙは、Ｂと治療剤を連結する化学基であり、
    Ｙ’は、Ｂ’と治療剤を連結する化学基であり、
    Ｗは、ＡとＢを連結する化学基であり、
    Ｗ’は、Ａ’とＢ’を連結する化学基である。）
    を有する請求項２に記載の化合物。
  5. Ｙ’が、Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨＣ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）−及び−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ｓは、０又は１である。）から選択される、請求項４に記載の化合物。
  6. Ｗ’が、Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨＣ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）−及び−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ｓは、０又は１である。）からなる群から選択される、請求項４から５の何れか１項に記載の化合物。
  7. 式（ＩＩＩ）
    Figure 2007505840
     （式中、
    Ａ及びＡ’は、アルブミン結合残基であり、
    Ｂは、−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＥ］ｍ（ＣＨ２）ｐＱｑ−から選択される親水性スペーサーであり、
    （式中、
    ｌ、ｍ及びｎは、独立に、１から２０であり、ｐは０から１０であり、
    Ｑは、−Ｚ−（ＣＨ２）ｌＤ［（ＣＨ２）ｎＧ］ｍ（ＣＨ２）ｐ−であり、
    ｑは、０から５の範囲の整数であり、
    各Ｄ、Ｅ及びＧは、−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｎ（ＣＯＲ４）−、−ＰＲ５（Ｏ）−及び−Ｐ（ＯＲ６）（Ｏ）−から独立に選択され（Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、独立に、水素又はＣ１−６−アルキルを表す。）、
    Ｚは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−ＮＨＣ（Ｏ）−から選択され（ｓは、０又は１である。）、
    Ｙは、Ｂと治療剤を連結する化学基であり、
    Ｗ’’は、ＢをＡ及びＡ’と連結する化学基である。）
    を有する請求項２に記載の化合物。
  8. Ｗ’’が、
    Figure 2007505840
     からなる群から選択される（式中、ｓは、０、１又は２である。）、請求項７に記載の化合物。
  9. Ｙが、Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨＣ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）−及び−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ｓは、０又は１である。）からなる群から選択される、請求項３から８の何れか１項に記載の化合物。
  10. Ｗが、Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨＣ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）−及び−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ｓは、０又は１である。）からなる群から選択される、請求項３から９の何れか１項に記載の化合物。
  11. ｌが１又は２であり、ｎ及びｍが独立に１から１０であり、ｐが０から１０である、請求項２から１０の何れか１項に記載の化合物。
  12. Ｄが−Ｏ−である、請求項２から１１の何れか１項に記載の化合物。
  13. Ｅが−Ｏ−である、請求項２から１２の何れか１項に記載の化合物。
  14. 親水性スペーサーが−ＣＨ２Ｏ［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ（ＣＨ２）ｐＱｑ−である（式中、ｍは１から１０であり、ｐは１から３であり、Ｑは−Ｚ−ＣＨ２Ｏ［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ（ＣＨ２）ｐ−である。）、請求項２から１０の何れか１項に記載の化合物。
  15. ｑが０又は１である、先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物。
  16. ｑが１である、先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物。
  17. Ｇが−Ｏ−である、請求項２から１０及び１２から１５の何れか１項に記載の化合物。
  18. Ｚが、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−及び−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−からなる群から選択される、先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物。
  19. ｑが０である、請求項２から１５の何れか１項に記載の化合物。
  20. ｌが２である、請求項２から１３の何れか１項に記載の化合物。
  21. ｎが２である、先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物。
  22. 親水性スペーサーＢが［ＣＨ２ＣＨ２Ｏ］ｍ＋１（ＣＨ２）ｐＱｑ−である、請求項２から１５の何れか１項に記載の化合物。
  23. 親水性スペーサーＢが−（ＣＨ２）ｌ−Ｏ−［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｍ−（ＣＨ２）ｐ−［Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）ｌ−Ｏ−［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｍ−（ＣＨ２）ｐ］ｑ−である（式中、ｌ、ｍ，ｎ及びｐは１から５であり、ｑは０から５である。）、請求項２から１５の何れか１項に記載の化合物。
  24. −Ｗ−Ｂ−Ｙ−が、
    Figure 2007505840
    Figure 2007505840
     からなる群から選択される、先行する請求項の何れか１項に記載の化合物。
  25. ＞Ｗ’’−Ｂ−Ｙ−が、
    Figure 2007505840
     である、請求項７に記載の化合物。
  26. Ａが、
    Figure 2007505840
     （キラル炭素原子は、Ｒ又はＳの何れかである。）
    Figure 2007505840
     （キラル炭素原子は、Ｒ又はＳの何れかである。）
    Figure 2007505840
     （キラル炭素原子は、Ｒ又はＳの何れかである。）
    Figure 2007505840
     （２つのキラル炭素原子は、独立に、Ｒ又はＳの何れかである。）
    Figure 2007505840
     （２つのキラル炭素原子は、独立に、Ｒ又はＳの何れかである。）
    Figure 2007505840
     （２つのキラル炭素原子は、独立に、Ｌ又はＤの何れかである。）
    Figure 2007505840
     （キラル炭素原子は、Ｒ又はＳの何れかである。）
    Figure 2007505840
     （キラル炭素原子は、Ｒ又はＳの何れかである。）
    Figure 2007505840
     （２つのキラル炭素原子は、独立に、Ｒ又はＳの何れかである。）
    Figure 2007505840
     （２つのキラル炭素原子は、独立に、Ｒ又はＳの何れかである。）
    Figure 2007505840
    Figure 2007505840
    Figure 2007505840
     からなる群から選択される、先行する請求項の何れか１項に記載の化合物。
  27. 前記親水性スペーサーの分子量が８０Ｄから１０００Ｄの範囲又は８０Ｄから３００Ｄの範囲にある、先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物。
  28. 前記アルブミン結合残基が親油性残基である、先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物。
  29. 前記アルブミン結合残基が非共有結合によってアルブミンに結合する、先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物。
  30. 前記アルブミン結合残基が、生理的ｐＨにおいて、負に帯電している、先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物。
  31. 前記アルブミン残基が、ヒト血清アルブミンに対して、約１０μＭ未満又は約１μＭ未満の結合親和性を有する、先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物。
  32. 前記アルブミン結合残基が、直鎖アルキル基、分岐アルキル基、ω−カルボン酸基、部分的に又は完全に水素化されたシクロペンタノフェナントレン骨格を有する基から選択される、先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物。
  33. 前記アルブミン結合残基がチバクロニル残基である、先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物。
  34. 前記アルブミン結合残基が、６から４０個の炭素原子、８から２６個の炭素原子又は８から２０個の炭素原子を有する、先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物。
  35. 前記アルブミン結合残基が、４０個未満のアミノ酸残基を含むペプチドなどのペプチドである、先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物。
  36. 前記アルブミン結合残基が、スペーサー及びリンカーを介して、リジン残基のε−アミノ基を介して前記治療用ポリペプチドに付着される、先行する請求項の何れか１項に記載の化合物。
  37. スペーサー及びリンカーを介するアルブミン結合残基が、システイン、グルタミン酸及びアスパラギン酸から選択されるアミノ酸残基へのリンカーを介して治療用ポリペプチドに付着される、先行する請求項の何れか１項に記載の化合物。
  38. 前記治療用ポリペプチドがＧＬＰ−１ペプチドである、先行する全請求項の何れか１項に記載の化合物。
  39. 前記ポリペプチドが、式（ＩＶ）：
    Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｘａａ１６−Ｓｅｒ−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｇｌｕ−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ａｌａ−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｘａａ３０−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１−Ｘａａ４２−Ｘａａ４３−Ｘａａ４４−Ｘａａ４５−Ｘａａ４６
    式（ＩＶ）（配列番号２）
    （式中、
    Ｘａａ７は、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、β−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、Ｎα−アセチル−ヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジン、α−メチル−ヒスチジン、３−ピリジルアラニン、２−ピリジルアラニン又は４−ピリジルアラニンであり；
    Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ａｉｂ、（１−アミノシクロプロピル）カルボン酸、（１−アミノシクロブチル）カルボン酸、（１−アミノシクロペンチル）カルボン酸、（１−アミノシクロヘキシル）カルボン酸、（１−アミノシクロヘプチル）カルボン酸又は（１−アミノシクロオクチル）カルボン酸であり；
    Ｘａａ１６は、Ｖａｌ又はＬｅｕであり；
    Ｘａａ１８は、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ又はＡｒｇであり；
    Ｘａａ１９は、Ｔｙｒ又はＧｌｎであり；
    Ｘａａ２０は、Ｌｅｕ又はＭｅｔであり；
    Ｘａａ２２は、Ｇｌｙ、Ｇｌｕ又はＡｉｂであり；
    Ｘａａ２３は、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ又はＡｒｇであり；
    Ｘａａ２５は、Ａｌａ又はＶａｌであり；
    Ｘａａ２６は、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ又はＡｒｇであり；
    Ｘａａ２７は、Ｇｌｕ又はＬｅｕであり；
    Ｘａａ３０は、Ａｌａ、Ｇｌｕ又はＡｒｇであり；
    Ｘａａ３３は、Ｖａｌ又はＬｙｓであり；
    Ｘａａ３４は、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ａｓｎ又はＡｒｇであり；
    Ｘａａ３５は、Ｇｌｙ又はＡｉｂであり；
    Ｘａａ３６は、Ａｒｇ、Ｇｌｙ又はＬｙｓであり；
    Ｘａａ３７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｇｌｕ、Ｐｒｏ、Ｌｙｓ、アミドであり、又は存在せず；
    Ｘａａ３８は、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、アミドであり、又は存在せず．
    Ｘａａ３９は、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、アミドであり、又は存在せず；
    Ｘａａ４０は、Ｇｌｙ、アミドであり、又は存在せず；
    Ｘａａ４１は、Ａｌａ、アミドであり、又は存在せず；
    Ｘａａ４２は、Ｐｒｏ、アミドであり、又は存在せず；
    Ｘａａ４３は、Ｐｒｏ、アミドであり、又は存在せず；
    Ｘａａ４４は、Ｐｒｏ、アミドであり、又は存在せず；
    Ｘａａ４５は、Ｓｅｒ、アミドであり、又は存在せず；
    Ｘａａ４６は、アミドであり、又は存在せず；
    但し、Ｘａａ３８、Ｘａａ３９、Ｘａａ４０、Ｘａａ４１、Ｘａａ４２、Ｘａａ４３、Ｘａａ４４、Ｘａａ４５又はＸａａ４６が存在しなければ、下流の各アミノ酸残基も存在しない。））
    のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１ペプチドである、請求項３４に記載の化合物。
  40. 前記ポリペプチドが、式（Ｖ）：
    （Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｘａａ１８−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｘａａ２６−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｘａａ３０−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｘａａ３８
    式（Ｖ）（配列番号３）
    （式中、
    Ｘａａ７は、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、β−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、Ｎα−アセチル−ヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジン、α−メチル−ヒスチジン、３−ピリジルアラニン、２−ピリジルアラニン又は４−ピリジルアラニンであり；
    Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ａｉｂ、（１−アミノシクロプロピル）カルボン酸、（１−アミノシクロブチル）カルボン酸、（１−アミノシクロペンチル）カルボン酸、（１−アミノシクロヘキシル）カルボン酸、（１−アミノシクロヘプチル）カルボン酸又は（１−アミノシクロオクチル）カルボン酸；
    Ｘａａ１８は、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ又はＡｒｇであり；
    Ｘａａ２２は、Ｇｌｙ、Ｇｌｕ又はＡｉｂであり；
    Ｘａａ２３は、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ又はＡｒｇであり；
    Ｘａａ２６は、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ又はＡｒｇであり；
    Ｘａａ３０は、Ａｌａ、Ｇｌｕ又はＡｒｇであり；
    Ｘａａ３４は、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ又はＡｒｇであり；
    Ｘａａ３５は、Ｇｌｙ又はＡｉｂであり；
    Ｘａａ３６は、Ａｒｇ又はＬｙｓであり；
    Ｘａａ３７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｇｌｕ又はＬｙｓであり；
    Ｘａａ３８は、Ｌｙｓ、アミドであり、又は存在しない。））
    のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１ペプチドである、請求項３９に記載の化合物。
  41. 前記ＧＬＰ−１ペプチドがＧＬＰ−１（７−３５）、ＧＬＰ−１（７−３６）、ＧＬＰ−１（７−３６）−アミド、ＧＬＰ−１（７−３７）、ＧＬＰ−１（７−３８）、ＧＬＰ−１（７−３９）、ＧＬＰ−１（７−４０）、ＧＬＰ−１（７−４１）又はそれらの類縁体から選択される、請求項３８から４０の何れか１項に記載の化合物。
  42. 前記ＧＬＰ−１ペプチドが、ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）に比べて、交換、付加若しくは欠失された１５以下のアミノ酸残基を含み、又はＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）に比べて、交換、付加若しくは欠失された１０以下のアミノ酸残基を含む、請求項３８から４１の何れか１項に記載の化合物。
  43. 前記ＧＬＰ−１ペプチドが、ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）に比べて、交換、付加若しくは欠失された６以下のアミノ酸残基を含む、請求項４２に記載の化合物。
  44. 前記ＧＬＰペプチドが、遺伝コードによってコードされていない４以下のアミノ酸残基を含む、請求項４２から４３の何れか１項に記載の化合物。
  45. 前記ＧＬＰ−１ペプチドがＤＰＰＩＶ保護されたＧＬＰ−１ペプチドである、請求項３８に記載の化合物。
  46. 前記化合物がＤＰＰＩＶ安定化されている、請求項３８に記載の化合物。
  47. 前記ＧＬＰ−１ペプチドが８位にＡｉｂ残基を含む、請求項３８から４６の何れか１項に記載の化合物。
  48. 前記ＧＬＰ−１ペプチドの７位のアミノ酸残基が、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、β−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、Ｎα−アセチル−ヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジン、α−メチル−ヒスチジン、３−ピリジルアラニン、２−ピリジルアラニン及び４−ピリジルアラニンからなる群から選択される、請求項３８から４７の何れか１項に記載の化合物。
  49. 前記ＧＬＰ−１ペプチドが、Ａｒｇ３４ＧＬＰ−１（７−３７）、Ｌｙｓ３８Ａｒｇ２６，３４ＧＬＰ−１（７−３８）、Ｌｙｓ３８Ａｒｇ２６，３４ＧＬＰ−１（７−３８）−ＯＨ、Ｌｙｓ３６Ａｒｇ２６，３４ＧＬＰ−１（７−３６）、Ａｉｂ８，２２，３５ＧＬＰ−１（７−３７）、Ａｉｂ８，３５ＧＬＰ−１（７−３７）、Ａｉｂ８，２２ＧＬＰ−１（７−３７）、Ａｉｂ８，２２，３５Ａｒｇ２６，３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，３５Ａｒｇ２６，３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２Ａｒｇ２６，３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２，３５Ａｒｇ２６，３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，３５Ａｒｇ２６，３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２，３５Ａｒｇ２６Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，３５Ａｒｇ２６Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２Ａｒｇ２６Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２，３５Ａｒｇ３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，３５Ａｒｇ３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２Ａｒｇ３４Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２，３５Ａｌａ３７Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，３５Ａｌａ３７Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２Ａｌａ３７Ｌｙｓ３８ＧＬＰ−１（７−３８）、Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７ＧＬＰ−１（７−３７）、Ａｉｂ８，３５Ｌｙｓ３７ＧＬＰ−１（７−３７）及びＡｉｂ８，２２Ｌｙｓ３７ＧＬＰ−１（７−３８）からなる群から選択される、請求項３８から４８の何れか１項に記載の化合物。
  50. 前記ＧＬＰ−１ペプチドが、アミノ酸配列 配列番号１に対して、２３、２６、３４、３６又は３８位のアミノ酸残基を介して、前記親水性スペーサーに付着されている、請求項３８から４９の何れか１項に記載の化合物。
  51. 前記ＧＬＰ−１ペプチドがエキセンディン−４である、請求項３８から４１の何れか１項に記載の化合物。
  52. 前記ＧＬＰ−１ペプチドが、ＺＰ−１０、すなわちＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＳＫＫＫＫＫＫ−アミドである、請求項３８から４１の何れか１項に記載の化合物。
  53. 前記親水性スペーサーを介する一つのアルブミン結合残基が、前記ＧＬＰ−１のＣ末端アミノ酸残基に付着されている、請求項３８から５２の何れか１項に記載の化合物。
  54. 第二のアルブミン結合残基が、Ｃ末端アミノ酸残基でないアミノ酸残基に付着されている、請求項５３に記載の化合物。
  55. 前記化合物が、
    Ｎε３７−（２−（２−（２−（ドデシルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−（２−（２−（２−（１７−スルホヘキサデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−｛２−［２−（２−（１５−カルボキシペンタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチル｝−［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−（２−（２−（２−（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
    Figure 2007505840
     Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）Ｌｙｓ（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリル）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（ヘキサデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−（２−［２−（２，６−（Ｓ）−Ｂｉｓ−｛２−［２−（２−（ドデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ｝ヘキサノイルアミノ）エトキシ］エトキシ｝）アセチル−［Ａｉｂ８，２２，３５］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−（２−［２−（２，６−（Ｓ）−Ｂｉｓ−｛２−［２−（２−（テトラデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ｝ヘキサノイルアミノ）エトキシ］エトキシ｝）アセチル−［Ａｉｂ８，２２，３５］ＧＬＰ−１（７−３７）アミド
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８，２２，３５］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−｛２−［４−［４−（４−アミノ−９，１０−ジオキソ−３−スルホ−９，１０−ジヒドロ−アントラセン−１−イルアミノ）−２−スルホ−フェニルアミノ］−６−（２−スルホ−フェニルアミノ）−［１，３，５］トリアジン−２−イルアミノ］−エトキシ｝−エトキシ）−アセチル））アミド
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８，２２，３５］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（１５−カルボキシペンタデカノイルアミノ）−エトキシ］エトキシ｝アセチルアミノ）エトキシ］エトキシ｝アセチルアミノ）エトキシ］エトキシ｝アセチル））アミド
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−（［２−（２−｛３−［２，５−ジオキソ−３−（１５−カルボキシペンタデシルスルファニル）−ピロリジン−１−イル］−プロピオニルアミノ｝エトキシ）エトキシ）アセチル］−［Ｄ−Ａｌａ８，Ｌｙｓ３７］−ＧＬＰ−１−［７−３７］アミド
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８，２２，３５Ａｌａ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−（２−（２−（１１−（オキサリルアミノ）ウンデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル−）））アミド
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｌａ３７］−ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−（１５−カルボキシ−ペンタデカノイルアミノ）−エトキシ］エトキシ｝アセチルアミノ）エトキシ］エトキシ｝アセチル）アミド
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｌａ３７］−ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−｛２−［１１−（５−ジメチルアミノナフタレン−１−スルホニルアミノ）ウンデカノイルアミノ］エトキシ｝エトキシ）アセチル）アミド
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８，２２，３５，Ａｌａ３７］−ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（［２−（２−｛２−［１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル］アセチルアミノ｝エトキシ）エトキシ］アセチル））アミド
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｇｌｕ２２，２３，３０］ＧＬＰ−１ Ｈ（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）アミド
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｇｌｕ２２，２３，３０］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（エイコサノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）アミド
    Figure 2007505840
     ［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１ Ｈ−（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチル）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８］−ＧＬＰ−１−（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチル）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（１７−カルボキシヘプタノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
    Figure 2007505840
     ［Ｇｌｙ８、Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ１−（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチル）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８］ＧＬＰ−１−（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−（２−（２−（２−（ドデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１Ｈ（７−３７）−アミド
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−（２−（２−（２−（テトラデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１Ｈ（７−３７）−アミド
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−（２−（２−（２−（ヘキサデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）−アミド
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）−アミド
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−（２−（２−（２−（エイコサノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，２２，３５Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１（７−３７）−アミド
    Figure 2007505840
     Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル））−［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル））［Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     Ｎε３６−｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−（２−（２−（２−（４−４（４，４，５，５，６，６，７，７，８，８，９，９，９−トリデカフルオロノナノイルスルファモイル−ブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル））［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−（２−（２−（２−（３，３，４，４，５，５，６，６，７，７，８，８，９，９，１０，１０，１１，１１，１２，１２，１２−ヘンエイコサフルオロ−ドデシルオキシアセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−（２−（２−（２−（４−（ヘキサデカノイルスルファモイル）ブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     ［Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     ［Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
    Figure 2007505840
     Ｎε２０−｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−エキセンディン（１−３９）
    Figure 2007505840
     ［Ａｌａ８、Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−［２−（（２−オキサリルアミノ−３−カルボキシ−２−４，５，６，７−テトラヒドロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−６−イル−アセチルアミノ））エトキシ］エトキシアセチル）アミド
    Figure 2007505840
     ［Ａｉｂ８，２２，３５］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−［２−（（２−オキサリルアミノ−３−カルボキシ−２−４，５，６，７−テトラヒドロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−６−イル−アセチルアミノ））エトキシ］エトキシアセチル）アミド
    Figure 2007505840
     Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−２−（２−（２−（４−（４−（ヘプタデカノイルアミノ）−４−（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）−４−（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル−［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＮＨ２
    Figure 2007505840
     Ｎε３７−２−（２−［２−（２−［２−（４−［４−（ヘプタデカノイルアミノ）−４−（Ｓ）カルボキシブチリルアミノ］−４−（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ］エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ］エトキシ）アセチル−［Ａｉｂ８，２２，３５，Ｌｙｓ３７］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＮＨ２
    Figure 2007505840
     Ｎε２６−（２−（２−（２−（４−（ヘキサデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｉｂ８，Ａｒｇ３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     Ｎε２６−２−（２−２−（２−（２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル−［Ａｉｂ８、Ａｒｇ３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     ［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（１９−（カルボキシ）ノナデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     ［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−（２−（１７−（カルボキシ）ヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル））−ＯＨ
    Figure 2007505840
     ［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（４−（１９−（カルボキシ）ノナデカノイルアミノ）−４−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     ［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（ヘキサデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）−アセチル）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     ［Ｇｌｙ８、Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）−アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）ＮＨ２
    Figure 2007505840
     Ｎε２０（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（１７−（カルボキシ）ヘプタデカノイルアミノ）−４−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）Ｌｙｓ２０］エキセンディン−４（１−３９）−ＮＨ２
    Figure 2007505840
     Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｉｂ８，Ａｒｇ２６，３４、Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１（７−３７）
    Figure 2007505840
     Ｎ−ε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ａｒｇ２６，３４、Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１（７−３７）
    Figure 2007505840
     Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ｇｌｙ８，Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１（７−３７）
    Figure 2007505840
     Ｎε２０−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（オクタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）−エトキシ）アセチル）［Ｌｙｓ２０］エキセンディン−４（１−３９）アミド
    Figure 2007505840
     Ｎε３６−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（４−（オクタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）−［Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６］ＧＬＰ−１−（７−３７）
    Figure 2007505840
     Ｎε２６−（２−［２−（２−［２−（２−［２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ］エトキシ）アセチルアミノ］エトキシ）エトキシ］アセチル）［Ａｒｇ３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     Ｎε２６−［２−（２−［２−（２−［２−（２−［４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）−４（Ｓ）−カルボキシブチリルアミノ］エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ］エトキシ）アセチル］［Ａｒｇ３４］ＧＬＰ−１−（７−３７）−ＯＨ
    Figure 2007505840
     Ｎε２０−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）［Ｌｙｓ２０］エキセンディン−４（１−３９）アミド
    Figure 2007505840
     ［Ｇｌｙ８、Ｇｌｕ２２，２３，３０、Ａｒｇ１８，２６，３４］ＧＬＰ１（７−３７）Ｌｙｓ（２−（２−（２−（２−（２−（２−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチルアミノ）エトキシ））エトキシ）アセチル）−ＮＨ２
    Figure 2007505840
     ［イミダゾリルプロピオン酸７、Ａｓｐ１６、Ａｉｂ２２，３５］ＧＬＰ１（７−３７）Ｌｙｓ ＮＨ（（２−｛［４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブチルカルバモイル］メトキシ｝エトキシ）エトキシ））
    Figure 2007505840
     ［イミダゾリルプロピオン酸７、Ａｉｂ２２，３５］ＧＬＰ１（７−３７）Ｌｙｓ ＮＨ（（２−｛［４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブチルカルバモイル］メトキシ｝エトキシ）エトキシ））
    Figure 2007505840
     及び、
    ［３−（５−イミダゾリル）プロピオニル７、Ａｉｂ８、Ａｒｇ２６，３４］ＧＬＰ−１（７−３７）Ｌｙｓ｛２−（２−（２−（２−［２−（２−（１７−カルボキシヘプタノイルアミノ）エトキシ）エトキシ］アセチルアミノ）エトキシ）エトキシ）アセチル）｝−ＯＨ
    Figure 2007505840
     からなる群から選択される、先行する請求項の何れか１項に記載の化合物。
  56. 前記治療用ポリペプチドがＧＬＰ−２ペプチドである、請求項１から３７の何れか１項に記載の化合物。
  57. 前記ＧＬＰ−２ペプチドがＤＰＰＩＶ保護されたＧＬＰ−２ペプチドである、請求項５６に記載の化合物。
  58. 前記ＧＬＰ−２ペプチドがＧｌｙ２−ＧＬＰ−２（１−３３）である、請求項５６に記載の化合物。
  59. 前記ＧＬＰ−２ペプチドがＬｙｓ１７Ａｒｇ３０−ＧＬＰ−２（１−３３）である、請求項５６に記載の化合物。
  60. 前記治療用ポリペプチドがヒトインシュリン又はその類縁体である、請求項１から３７の何れか１項に記載の化合物。
  61. 前記治療用ポリペプチドが、ＡｓｐＢ２８−ヒトインシュリン、ＬｙｓＢ２８，ＰｒｏＢ２９−ヒトインシュリン、ＬｙｓＢ３，ＧｌｕＢ２９−ヒトインシュリン、ＧｌｙＡ２１，ＡｒｇＢ３１，ＡｒｇＢ３２−ヒトインシュリン及びｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインシュリンからなる群から選択される、請求項６０に記載の化合物。
  62. 前記治療用ポリペプチドがヒト成長ホルモン又はその類縁体である、請求項１から３７の何れか１項に記載の化合物。
  63. 前記治療用ポリペプチドが副甲状腺ホルモン又はその類縁体である、請求項１から３７の何れか１項に記載の化合物。
  64. 前記治療用ポリペプチドがヒト卵胞刺激ホルモン又はその類縁体である、請求項１から３７の何れか１項に記載の化合物。
  65. 前記治療用ポリペプチドが１００ｋＤａ未満、５０ｋＤａ未満又は１０ｋＤａ未満の分子量を有する、請求項１から３７の何れか１項に記載の化合物。
  66. 前記治療用ポリペプチドが、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、形質転換増殖因子α（ＴＧＦ−α）形質転換増殖因子β（ＴＧＦ−β）、内皮増殖因子（ＥＧＦ）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）などの増殖因子、インシュリン増殖因子Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）、インシュリン増殖因子ＩＩ（ＩＧＦ−ＩＩ）、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、トロンボポエチン（ＴＰＯ）若しくはアンギオポエチンなどのソマトメジン、インターフェロン、プロ−ウロキナーゼ、ウロキナーゼ、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤１、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤２、フォンビルブランド因子、サイトカイン、例えば、インターロイキン（ＩＬ）１、ＩＬ−１Ｒａ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−９、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−２０若しくはＩＬ−２１などのインターロイキン、ＧＭ−ＣＳＦなどのコロニー刺激因子（ＣＦＳ）、幹細胞因子、ＴＮＦ−αなどの腫瘍壊死因子、リンフォトキシン−α、リンフォトキシン−β、ＣＤ４０Ｌ若しくはＣＤ３０Ｌ、プロテアーゼ阻害剤、例えば、アプロチニン、スーパーオキシドジスムターゼ、アスパラギナーゼ、アルギナーゼ、アルギニンデアミナーゼ、アデノシンデアミナーゼ、リボヌクレアーゼ、カタラーゼ、ウリカーゼ、ビリルビンオキシダーゼ、トリプシン、パパイン、アルカリホスファターゼ、β−グルクロニダーゼ（β−ｇｌｕｃｏｒｏｎｉｄａｓｅ）、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ若しくはバトロキソビンなどの酵素、オピオイド、例えば、エンドルフィン、エンケファリン若しくは非天然オピオイド、ホルモン若しくはニューロペプチド、例えば、カルシトニン、グルカゴン、ガストリン、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、コレシストキニン、黄体形成ホルモン、ゴナドトロピン放出ホルモン、絨毛性ゴナドトロピン、コルチコトロピン放出因子、バソプレッシン、オキシトシン、抗利尿ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン、リラキシン、プロラクチン、ペプチドＹＹ、ニューロペプチドＹ、膵臓ポリペプチド(pancreastic polypeptide)、レプチン、ＣＡＲＴ(cocaine and amphetamine regulated transcript)
    、ＣＡＲＴ関連ペプチド、ペリリピン、ＭＣ−４などのメラノコルチン（メラニン細胞刺激ホルモン）、メラニン凝集ホルモン、ナトリウム利尿ペプチド、アドレノメデュリン、エンドセリン、セクレチン、アミリン、血管作用性小腸ペプチド（ＶＩＰ）、脳下垂体アデニル酸シクラーゼ活性化ポリペプチド（ＰＡＣＡＰ）、ボンベシン、ボンベシン様ペプチド、チモシン、ヘパリン結合タンパク質、可溶性ＣＤ４、視床下部放出因子、メラノトニン及びこれらの類縁体からなる群から選択される、請求項１から３７の何れか１項に記載の化合物。
  67. 請求項１から６６の何れか１項に記載の化合物と薬学的に許容される賦形剤とを含む薬学的組成物。
  68. 非経口投与用に適している、請求項６７に記載の薬学的組成物。
  69. 医薬を調製するための、請求項１から６６の何れか１項に記載の化合物の使用。
  70. 高血糖、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、肥満、高血圧、シンドロームＸ、異脂肪血症、認知疾患、アテローム性動脈硬化、心筋梗塞、冠動脈心疾患及び他の心血管疾患、発作、炎症性腸症候群、消化不良並びに胃潰瘍の治療又は予防用医薬の調製のための、請求項３８から５５の何れか１項に記載の化合物の使用。
  71. ２型糖尿病における疾病の進行を遅延又は抑制するための医薬の調製のための、請求項３８から５５の何れか１項に記載の化合物の使用。
  72. 食物摂取を減少し、β細胞のアポトーシスを減少し、β細胞の機能及びβ細胞の質量を増加し、及び／又はβ細胞に対するグルコース感受性を回復させるための医薬の調製のための、請求項３８から５５の何れか１項に記載の化合物の使用。
  73. 小腸症候群、炎症性腸症候群又はクローン病の治療のための医薬の調製のための、請求項５６から５９の何れか１項に記載の化合物の使用
  74. 高血糖、１型糖尿病、２型糖尿病又はβ細胞欠乏の治療又は予防用医薬の調製のための、請求項６０から６１の何れか１項に記載の化合物の使用。
JP2006526519A 2003-09-19 2004-09-17 新規ｇｌｐ−１誘導体 Active JP4949838B2 (ja)

Applications Claiming Priority (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DKPA200301367 2003-09-19
DKPA200301367 2003-09-19
US50573903P 2003-09-25 2003-09-25
US60/505,739 2003-09-25
US52684703P 2003-12-04 2003-12-04
US60/526,847 2003-12-04
DKPA200301789 2003-12-04
DKPA200301789 2003-12-04
PCT/DK2004/000624 WO2005027978A2 (en) 2003-09-19 2004-09-17 Albumin-binding derivatives of therapeutic peptides

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2007505840A true JP2007505840A (ja) 2007-03-15
JP4949838B2 JP4949838B2 (ja) 2012-06-13

Family

ID=46045404

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2006526519A Active JP4949838B2 (ja) 2003-09-19 2004-09-17 新規ｇｌｐ−１誘導体

Country Status (13)

Country Link
US (6) US20070203058A1 (ja)
EP (2) EP1670515A2 (ja)
JP (1) JP4949838B2 (ja)
KR (1) KR101241862B1 (ja)
AU (2) AU2004273573B2 (ja)
BR (2) BR122019021416A2 (ja)
CA (1) CA2539253A1 (ja)
IL (1) IL174154A (ja)
MX (1) MXPA06002941A (ja)
NO (1) NO343825B1 (ja)
SI (1) SI2932981T1 (ja)
TW (1) TW200526254A (ja)
WO (1) WO2005027978A2 (ja)

Cited By (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011515363A (ja) * 2008-03-20 2011-05-19 ナームローゼ・フエンノートチヤツプ・オルガノン 骨密度を増加させるための医薬組成物の製造
JP2011520847A (ja) * 2008-05-16 2011-07-21 ノボ・ノルデイスク・エー／エス 遅効型ｙ２及び／又はｙ４レセプターアゴニスト
JP2011529948A (ja) * 2008-08-06 2011-12-15 ノヴォ・ノルディスク・ヘルス・ケア・アーゲー 長期のインビボ有効性を有するコンジュゲートタンパク質
JP2012515747A (ja) * 2009-01-23 2012-07-12 ノヴォ・ノルディスク・アー／エス アルブミンバインダーａ−ｂ−ｃ−ｄ−ｅ−を有するｆｇｆ２１誘導体及びそれらの使用
JP2013501036A (ja) * 2009-08-06 2013-01-10 ノヴォ・ノルディスク・ヘルス・ケア・アーゲー 長期のインビボ有効性を有する成長ホルモン
JP2013518038A (ja) * 2010-01-22 2013-05-20 ノヴォ・ノルディスク・ヘルス・ケア・アーゲー ｉｎ−ｖｉｖｏにおける効力が延長された成長ホルモン
JP2013523619A (ja) * 2010-03-26 2013-06-17 ノヴォ ノルディスク アー／エス 新規のグルカゴンアナログ
JP2013532644A (ja) * 2010-07-20 2013-08-19 ノヴォ ノルディスク アー／エス Ｎ末端が修飾されたｆｇｆ２１化合物
JP2014502252A (ja) * 2010-09-28 2014-01-30 アミリン・ファーマシューティカルズ，リミテッド・ライアビリティ・カンパニー 作用持続時間が増した改変ポリペプチド
JP2014527975A (ja) * 2011-09-23 2014-10-23 ノヴォ ノルディスク アー／エス 新規のグルカゴン類似体
JP2015517478A (ja) * 2012-05-08 2015-06-22 ノヴォ ノルディスク アー／エス 二重アシル化されたｇｌｐ−１誘導体
JP2015517477A (ja) * 2012-05-08 2015-06-22 ノヴォ ノルディスク アー／エス 二重アシル化されたｇｌｐ−１誘導体
JP2016523243A (ja) * 2013-06-20 2016-08-08 ノヴォ ノルディスク アー／エス Ｇｌｐ−１誘導体及びその使用
US9751927B2 (en) 2013-04-18 2017-09-05 Novo Nordisk A/S Stable, protracted GLP-1/glucagon receptor co-agonists for medical use
JP2018506507A (ja) * 2014-11-27 2018-03-08 ノヴォ ノルディスク アー／エス Ｇｌｐ−１誘導体及びその使用
US10570184B2 (en) 2014-06-04 2020-02-25 Novo Nordisk A/S GLP-1/glucagon receptor co-agonists for medical use
JP2021516222A (ja) * 2018-03-16 2021-07-01 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション 副甲状腺ホルモンポリペプチドコンジュゲートおよびその使用方法
JP2022551233A (ja) * 2019-10-12 2022-12-08 南京楓▲ケイ▼生物医薬科技有限公司 異なる構造のｇｌｐ－１アナログペプチド修飾二量体およびその調製方法のｉｉ型糖尿病の治療における用途

Families Citing this family (219)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW200522976A (en) * 2003-09-19 2005-07-16 Novo Nordisk As Novel plasma protein affinity tags
PT1740154E (pt) * 2004-03-12 2009-09-11 Biodel Inc Composições de insulina com absorção melhorada
US7878978B2 (en) 2004-03-18 2011-02-01 University Of Pittsburgh- Of The Commonwealth System Of Higher Education Use of relaxin to increase arterial compliance
JP2007537274A (ja) 2004-05-10 2007-12-20 ナステック ファーマスーティカル カンパニー インク． 副甲状腺ホルモンの粘膜送達を増強するための組成物及び方法
WO2005118642A2 (en) 2004-06-01 2005-12-15 Domantis Limited Bispecific fusion antibodies with enhanced serum half-life
MXPA06015049A (es) * 2004-07-08 2007-02-08 Novo Nordisk As Marcadores prolongadores de polipeptidos que comprenden una porcion tetrazol.
JP5107713B2 (ja) 2004-10-07 2012-12-26 ノヴォ ノルディスク アー／エス 遅延性のエキセンディン−４化合物
US7893017B2 (en) 2004-10-07 2011-02-22 Novo Nordisk A/S Protracted GLP-1 compounds
WO2007055728A1 (en) * 2005-11-01 2007-05-18 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Treatment of obesity and related disorders
US8394765B2 (en) 2004-11-01 2013-03-12 Amylin Pharmaceuticals Llc Methods of treating obesity with two different anti-obesity agents
AU2005311099B2 (en) 2004-12-02 2012-02-02 Domantis Limited Bispecific domain antibodies targeting serum albumin and GLP-1 or PYY
TWI362392B (en) * 2005-03-18 2012-04-21 Novo Nordisk As Acylated glp-1 compounds
CN101128214A (zh) 2005-03-18 2008-02-20 诺和诺德公司 长效glp-1化合物
PL1877435T5 (pl) * 2005-05-04 2021-09-27 Zealand Pharma A/S Analogi peptydu glukagonopodobnego 2 (GLP-2)
US8546326B2 (en) * 2005-06-06 2013-10-01 Camurus Ab Glp-1 analogue formulations
CN100429227C (zh) * 2005-06-29 2008-10-29 常州制药厂有限公司 Exendin4多肽片段
US7855279B2 (en) * 2005-09-27 2010-12-21 Amunix Operating, Inc. Unstructured recombinant polymers and uses thereof
US7846445B2 (en) * 2005-09-27 2010-12-07 Amunix Operating, Inc. Methods for production of unstructured recombinant polymers and uses thereof
EP1959986B1 (en) 2005-11-07 2014-07-23 Indiana University Research and Technology Corporation Glucagon analogs exhibiting physiological solubility and stability
WO2007068718A1 (en) 2005-12-14 2007-06-21 Novo Nordisk A/S Polypeptide protracting tags
ES2390286T3 (es) 2005-12-16 2012-11-08 Nektar Therapeutics Conjugados poliméricos de GLP-1
DK1987052T3 (da) * 2006-02-08 2011-08-15 Lonza Ag Syntese af glucagonlignende peptider
CN101400698A (zh) 2006-03-15 2009-04-01 诺沃-诺迪斯克有限公司 胰岛淀粉样多肽衍生物
US8288339B2 (en) * 2006-04-20 2012-10-16 Amgen Inc. GLP-1 compounds
RU2009108280A (ru) 2006-08-08 2010-09-20 Санофи-Авентис (Fr) Ариламиноарилалкилзамещенные имидазолидин-2,4-дионы, способы их получения, содержащие эти соединения лекарственные средства и их применение
US20090318353A1 (en) * 2006-08-25 2009-12-24 Novo Nordisk A/S Acylated Exendin-4 Compounds
WO2008056155A1 (en) 2006-11-08 2008-05-15 Zealand Pharma A/S Selective glucagon-like-peptide-2 (glp-2) analogues
JP2010043001A (ja) * 2006-11-09 2010-02-25 Sanwa Kagaku Kenkyusho Co Ltd Ｇｌｐ−１誘導体とその用途
SG177953A1 (en) * 2007-01-05 2012-02-28 Univ Indiana Res & Tech Corp Glucagon analogs exhibiting enhanced solubility in physiological ph buffers
DE102007005045B4 (de) 2007-01-26 2008-12-18 Sanofi-Aventis Phenothiazin Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
MX2009008241A (es) 2007-02-15 2009-10-08 Univ Indiana Res & Tech Corp Co-agonistas de receptor de glucagon/glp-1.
AU2008275911A1 (en) * 2007-07-19 2009-01-22 Arizona Board of Regents, a body corporate acting for and on behalf of Arizona State University Self- anchoring MEMS intrafascicular neural electrode
KR20100058541A (ko) * 2007-08-15 2010-06-03 아뮤닉스 인코포레이티드 생물학적 활성 폴리펩티드의 특성을 변경하기 위한 조성물 및 방법
EP2025674A1 (de) 2007-08-15 2009-02-18 sanofi-aventis Substituierte Tetrahydronaphthaline, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
WO2009030774A1 (en) * 2007-09-05 2009-03-12 Novo Nordisk A/S Truncated glp-1 derivatives and their therapeutical use
EP2679597A1 (en) 2007-09-05 2014-01-01 Novo Nordisk A/S Glucagon-like peptide-1 derivatives and their pharmaceutical use
ES2532116T3 (es) 2007-09-05 2015-03-24 Novo Nordisk A/S Péptidos derivados con A-B-C-D y sus usos terapéuticos
EP2036923A1 (en) * 2007-09-11 2009-03-18 Novo Nordisk A/S Improved derivates of amylin
JP5771005B2 (ja) * 2007-10-30 2015-08-26 インディアナ ユニバーシティー リサーチ アンド テクノロジー コーポレーションＩｎｄｉａｎａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ グルカゴンアンタゴニスト及びｇｌｐ−１アゴニスト活性を示す化合物
JP5669582B2 (ja) 2007-10-30 2015-02-12 インディアナ ユニバーシティー リサーチ アンド テクノロジー コーポレーションＩｎｄｉａｎａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ グルカゴンアンタゴニスト
DE102007054497B3 (de) 2007-11-13 2009-07-23 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue kristalline Diphenylazetidinonhydrate und Verfahren zu deren Herstellung
KR101616995B1 (ko) * 2007-12-03 2016-06-07 (주)아모레퍼시픽 슬리밍용 조성물
US20100317057A1 (en) * 2007-12-28 2010-12-16 Novo Nordisk A/S Semi-recombinant preparation of glp-1 analogues
CN101951957A (zh) * 2008-01-04 2011-01-19 百达尔公司 胰岛素释放作为组织的葡萄糖水平的函数的胰岛素制剂
WO2009099763A1 (en) * 2008-01-30 2009-08-13 Indiana University Research And Technology Corporation Ester-based peptide prodrugs
PL2254906T3 (pl) 2008-03-18 2017-04-28 Novo Nordisk A/S Stabilizowane względem proteaz, acylowane analogi insuliny
KR20100132535A (ko) 2008-03-31 2010-12-17 글락소 그룹 리미티드 약물 융합체 및 컨주게이트
JP5753779B2 (ja) * 2008-06-17 2015-07-22 インディアナ ユニバーシティー リサーチ アンド テクノロジー コーポレーションＩｎｄｉａｎａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ 生理学的ｐＨの緩衝液中で向上した溶解性及び安定性を示すグルカゴン類縁体
EA019203B9 (ru) 2008-06-17 2014-03-31 Индиана Юниверсити Рисерч Энд Текнолоджи Корпорейшн Коагонисты глюкагонового рецептора/glp-1-рецептора
JP6108659B2 (ja) * 2008-06-17 2017-04-05 インディアナ ユニバーシティー リサーチ アンド テクノロジー コーポレーションＩｎｄｉａｎａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ 代謝疾患および肥満の治療のためのｇｉｐに基づいた混合アゴニスト
TW201014822A (en) 2008-07-09 2010-04-16 Sanofi Aventis Heterocyclic compounds, processes for their preparation, medicaments comprising these compounds, and the use thereof
EP2340261B1 (en) 2008-10-21 2017-12-20 Novo Nordisk A/S Amylin derivatives
SG194383A1 (en) 2008-12-05 2013-11-29 Glaxo Group Ltd Methods for selecting protease resistant polypeptides
WO2010068601A1 (en) 2008-12-08 2010-06-17 Sanofi-Aventis A crystalline heteroaromatic fluoroglycoside hydrate, processes for making, methods of use and pharmaceutical compositions thereof
AR074811A1 (es) 2008-12-19 2011-02-16 Univ Indiana Res & Tech Corp Profarmaco de peptido de la superfamilia de glucagon basados en amida
EP2376098A4 (en) * 2008-12-19 2014-06-11 Univ Indiana Res & Tech Corp DIPEPTIDE-LINKED MEDICAL AGENTS
CN102245624B (zh) 2008-12-19 2016-08-10 印第安纳大学研究及科技有限公司 基于酰胺的胰岛素前药
EP2389389B1 (en) 2009-01-22 2015-04-15 Novo Nordisk Health Care AG Stable growth hormone compounds
US8680050B2 (en) * 2009-02-03 2014-03-25 Amunix Operating Inc. Growth hormone polypeptides fused to extended recombinant polypeptides and methods of making and using same
ES2730800T3 (es) 2009-02-03 2019-11-12 Amunix Pharmaceuticals Inc Polipéptidos recombinantes extendidos y composiciones que comprenden los mismos
US8703717B2 (en) 2009-02-03 2014-04-22 Amunix Operating Inc. Growth hormone polypeptides and methods of making and using same
US9060927B2 (en) * 2009-03-03 2015-06-23 Biodel Inc. Insulin formulations for rapid uptake
JP2012521971A (ja) 2009-03-27 2012-09-20 グラクソ グループ リミテッド 薬物融合体および複合体
US9849188B2 (en) 2009-06-08 2017-12-26 Amunix Operating Inc. Growth hormone polypeptides and methods of making and using same
DK2440228T3 (en) 2009-06-08 2018-12-17 Amunix Operating Inc Glucose regulating polypeptides and methods for their preparation and use
CN102459325B (zh) 2009-06-16 2015-03-25 印第安纳大学科技研究有限公司 胃抑胜肽受体活化的胰高血糖素化合物
AU2010290131C1 (en) 2009-08-24 2015-12-03 Amunix Operating Inc. Coagulation factor VII compositions and methods of making and using same
JP2013503135A (ja) 2009-08-26 2013-01-31 サノフイ 新規な結晶性複素芳香族フルオログリコシド水和物、その化合物を含んでなる医薬及びその使用
WO2011033068A1 (en) * 2009-09-18 2011-03-24 Novo Nordisk A/S Long-acting y2 receptor agonists
CA2774552A1 (en) 2009-09-30 2011-04-07 Glaxo Group Limited Drug fusions and conjugates with extended half life
US8835379B2 (en) 2009-10-30 2014-09-16 Novo Nordisk A/S Derivatives of CGRP
WO2011058165A1 (en) * 2009-11-13 2011-05-19 Novo Nordisk A/S Long-acting y2 receptor agonists
ES2625735T3 (es) 2009-12-16 2017-07-20 Novo Nordisk A/S Análogos y derivados de GLP-1
EP2512503A4 (en) 2009-12-18 2013-08-21 Univ Indiana Res & Tech Corp COAGONISTS OF GLUCAGON / GLP-1 RECEPTOR
CA2787895A1 (en) 2010-01-22 2011-07-28 Novo Nordisk Health Care Ag Stable growth hormone compounds
KR20120123443A (ko) 2010-01-27 2012-11-08 인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코퍼레이션 대사 장애 및 비만 치료용 글루카곤 길항제-ｇｉｐ 항진제 콘쥬게이트
ES2582590T3 (es) * 2010-02-16 2016-09-13 Novo Nordisk A/S Método de purificación
WO2011107494A1 (de) 2010-03-03 2011-09-09 Sanofi Neue aromatische glykosidderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
WO2011109787A1 (en) * 2010-03-05 2011-09-09 Conjuchem, Llc Methods of administering insulinotropic peptides
US8557961B2 (en) 2010-04-02 2013-10-15 Amunix Operating Inc. Alpha 1-antitrypsin compositions and methods of making and using same
DE102010015123A1 (de) 2010-04-16 2011-10-20 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Benzylamidische Diphenylazetidinone, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung
EP2560675A1 (en) 2010-04-20 2013-02-27 Novo Nordisk A/S Long-acting gastrin derivatives
CA2797431C (en) * 2010-04-27 2016-06-21 Zhejiang Beta Pharma Inc. Glucagon-like peptide-1 analogue and use thereof
CN102869676A (zh) 2010-04-30 2013-01-09 株式会社三和化学研究所 用于提高生理活性物质等的生物体内稳定性的肽和提高了生物体内稳定性的生理活性物质
CN103179976A (zh) 2010-05-13 2013-06-26 印第安纳大学研究及科技有限公司 呈现g蛋白偶联受体活性的胰高血糖素超家族肽
US9127088B2 (en) 2010-05-13 2015-09-08 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon superfamily peptides exhibiting nuclear hormone receptor activity
US8940860B2 (en) 2010-06-16 2015-01-27 Indiana University Research And Technology Corporation Single-chain insulin agonists exhibiting high activity at the insulin receptor
EP2582709B1 (de) 2010-06-18 2018-01-24 Sanofi Azolopyridin-3-on-derivate als inhibitoren von lipasen und phospholipasen
US8530413B2 (en) 2010-06-21 2013-09-10 Sanofi Heterocyclically substituted methoxyphenyl derivatives with an oxo group, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments
EP2585102B1 (en) 2010-06-24 2015-05-06 Indiana University Research and Technology Corporation Amide-based insulin prodrugs
KR20130102470A (ko) 2010-06-24 2013-09-17 인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코퍼레이션 아미드계 글루카곤 슈퍼패밀리 펩티드 프로드러그
TW201221505A (en) 2010-07-05 2012-06-01 Sanofi Sa Aryloxyalkylene-substituted hydroxyphenylhexynoic acids, process for preparation thereof and use thereof as a medicament
TW201215387A (en) 2010-07-05 2012-04-16 Sanofi Aventis Spirocyclically substituted 1,3-propane dioxide derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as a medicament
TW201215388A (en) 2010-07-05 2012-04-16 Sanofi Sa (2-aryloxyacetylamino)phenylpropionic acid derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments
US9006178B2 (en) 2010-11-09 2015-04-14 Novo Nordisk A/S Double-acylated GLP-1 derivatives with a linker
JP5902194B2 (ja) 2010-12-16 2016-04-13 ノヴォ ノルディスク アー／エス Ｇｌｐ−１アゴニストとｎ−（８−（２−ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸の塩とを含む固形組成物
ES2713952T3 (es) 2010-12-22 2019-05-24 Univ Indiana Res & Tech Corp Análogos de glucagón que muestran actividad de receptor de GIP
WO2012101124A1 (en) * 2011-01-26 2012-08-02 Novo Nordisk A/S Leptin derivatives
US8895547B2 (en) 2011-03-08 2014-11-25 Sanofi Substituted phenyl-oxathiazine derivatives, method for producing them, drugs containing said compounds and the use thereof
WO2012120055A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Di- und trisubstituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
WO2012120053A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Verzweigte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
WO2012120054A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Di- und trisubstituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
EP2683700B1 (de) 2011-03-08 2015-02-18 Sanofi Tetrasubstituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
EP2683701B1 (de) 2011-03-08 2014-12-24 Sanofi Mit benzyl- oder heteromethylengruppen substituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
EP2766349B1 (de) 2011-03-08 2016-06-01 Sanofi Mit carbozyklen oder heterozyklen substituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
WO2012120051A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Mit adamantan- oder noradamantan substituierte benzyl-oxathiazinderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
US8809324B2 (en) 2011-03-08 2014-08-19 Sanofi Substituted phenyl-oxathiazine derivatives, method for producing them, drugs containing said compounds and the use thereof
JP5871905B2 (ja) 2011-03-30 2016-03-01 ベータ ファーマシューティカルズ カンパニー リミテッド グルカゴン様ペプチド−１類似体およびその使用
WO2012136790A1 (en) 2011-04-07 2012-10-11 Glaxo Group Limited Compositions comprising fusion proteins or conjugates with an improved half -life
WO2012136792A2 (en) 2011-04-07 2012-10-11 Glaxo Group Limited Cck compositions
WO2012140647A2 (en) 2011-04-11 2012-10-18 Yeda Research And Development Co. Ltd Albumin binding probes and drug conjugates thereof
ES2612278T3 (es) 2011-04-12 2017-05-16 Novo Nordisk A/S Derivados de GLP-1 doble-acilados
US9320777B2 (en) 2011-05-13 2016-04-26 Bolder Biotechnology, Inc. Methods and use of growth hormone supergene family protein analogs for treatment of radiation exposure
BR112013032717A2 (pt) 2011-06-22 2017-01-24 Univ Indiana Res & Tech Corp coagonistas do receptor de glucagon/glp-1
RS56173B1 (sr) 2011-06-22 2017-11-30 Univ Indiana Res & Tech Corp Koagonisti receptora za glukagon/glp-1 receptora
JP6006309B2 (ja) * 2011-07-08 2016-10-12 アミリン・ファーマシューティカルズ，リミテッド・ライアビリティ・カンパニーＡｍｙｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｌｌｃ 作用持続期間が増大し、免疫原性が減少した操作されたポリペプチド
DK2729160T3 (da) 2011-07-08 2019-07-01 Aegerion Pharmaceuticals Inc Manipulerede polypeptider, der har forbedret virkningstid og reduceret immunogenicitet
WO2013037390A1 (en) 2011-09-12 2013-03-21 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
EP2567959B1 (en) 2011-09-12 2014-04-16 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
WO2013045413A1 (en) 2011-09-27 2013-04-04 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-alkyl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
CN103957927B (zh) 2011-11-17 2016-11-09 印第安纳大学研究及科技有限公司 呈现糖皮质激素受体活性的胰高血糖素超家族肽
JP2015500823A (ja) 2011-12-09 2015-01-08 ノヴォ ノルディスク アー／エス Ｇｌｐ−１アゴニスト
US9573987B2 (en) 2011-12-20 2017-02-21 Indiana University Research And Technology Corporation CTP-based insulin analogs for treatment of diabetes
WO2013096939A1 (en) * 2011-12-23 2013-06-27 Sri International Selective binding compounds
RU2643515C2 (ru) 2011-12-29 2018-02-02 Ново Нордиск А/С Дипептид, содержащий непротеиногенную аминокислоту
CA2864126A1 (en) 2012-02-15 2013-08-22 Biogen Idec Ma Inc. Recombinant factor viii proteins
SI3564260T1 (sl) 2012-02-15 2023-02-28 Bioverativ Therapeutics Inc. Sestavki faktorja VIII in postopki njegove izdelave in uporabe
KR102057356B1 (ko) 2012-02-27 2019-12-18 아뮤닉스 파마슈티컬스, 인크. Ｘｔｅｎ 콘주게이트 조성물 및 그의 제조 방법
ES2952874T3 (es) 2012-03-22 2023-11-06 Novo Nordisk As Composiciones de péptidos GLP-1 y preparación de estas
JP6356660B2 (ja) 2012-03-22 2018-07-11 ノヴォ ノルディスク アー／エス 送達剤を含む組成物およびその調製
PT2827845T (pt) 2012-03-22 2019-03-29 Novo Nordisk As Composições compreendendo um agente de entrega e sua preparação
JP6298044B2 (ja) 2012-05-03 2018-03-20 ジーランド ファーマ アクティーゼルスカブ グルカゴン様ペプチド−２（ｇｌｐ−２）類似体
KR20150010953A (ko) 2012-05-16 2015-01-29 글락소 그룹 리미티드 경구 투여를 위한 폴리펩티드 로딩된 poca 나노입자
JP6517690B2 (ja) 2012-06-20 2019-05-22 ノヴォ ノルディスク アー／エス ペプチド及び送達剤を含む錠剤製剤
EP2864351B1 (en) 2012-06-21 2016-08-10 Indiana University Research and Technology Corporation Glucagon analogs exhibiting gip receptor activity
CA2877056A1 (en) 2012-07-01 2014-01-09 Novo Nordisk A/S Use of long-acting glp-1 peptides
AU2013323669B2 (en) 2012-09-26 2018-03-01 Indiana University Research And Technology Corporation Insulin analog dimers
US20150273069A1 (en) 2012-10-17 2015-10-01 Novo Nordisk A/S Fatty acid acylated amino acids for oral peptide delivery
WO2014064215A1 (en) 2012-10-24 2014-05-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) TPL2 KINASE INHIBITORS FOR PREVENTING OR TREATING DIABETES AND FOR PROMOTING β-CELL SURVIVAL
AU2014241743B2 (en) 2013-03-14 2018-07-05 Indiana University Research And Technology Corporation Insulin-incretin conjugates
CN103217522A (zh) * 2013-03-18 2013-07-24 中国人民解放军第四军医大学 一种采用消化法消化提取细胞流式检测组织内细胞凋亡率的方法
JP6464145B2 (ja) 2013-04-05 2019-02-06 ノヴォ・ノルディスク・ヘルス・ケア・アーゲー 成長ホルモン化合物製剤
EP3013370A1 (en) * 2013-06-24 2016-05-04 Riogin Corporation Double binding constructs
EP3033097B1 (en) 2013-08-14 2021-03-10 Bioverativ Therapeutics Inc. Factor viii-xten fusions and uses thereof
CN105451776B (zh) 2013-08-15 2020-04-17 诺和诺德股份有限公司 Glp-1衍生物及其用途
US10286078B2 (en) 2013-09-13 2019-05-14 The California Institute For Biomedical Research Modified therapeutic agents and compositions thereof
CA2926701A1 (en) * 2013-10-07 2015-04-16 Novo Nordisk A/S Novel derivative of an insulin analogue
WO2015067791A1 (en) * 2013-11-11 2015-05-14 Ascendis Pharma Relaxin Division A/S Relaxin prodrugs
JP6629198B2 (ja) 2013-11-15 2020-01-15 ノヴォ ノルディスク アー／エス ３５位にβ−ホモアルギニン置換を有するＨＰＹＹ（１−３６）
MX369818B (es) 2013-11-15 2019-11-22 Novo Nordisk As Compuestos selectivos de peptido yy (pyy) y usos de los mismos.
CN106456589B (zh) 2013-12-18 2020-07-07 斯克利普斯研究所 修饰的治疗剂、订合的肽脂质缀合物及其组合物
CN103985909B (zh) * 2014-05-14 2016-08-24 山东爱通工业机器人科技有限公司 一种锂电池电池片组左右两侧面贴胶装置
US10588980B2 (en) 2014-06-23 2020-03-17 Novartis Ag Fatty acids and their use in conjugation to biomolecules
US10232020B2 (en) 2014-09-24 2019-03-19 Indiana University Research And Technology Corporation Incretin-insulin conjugates
US10385107B2 (en) 2014-09-24 2019-08-20 Indiana Univeresity Researc and Technology Corporation Lipidated amide-based insulin prodrugs
DK3006045T3 (en) 2014-10-07 2017-07-17 Cyprumed Gmbh Pharmaceutical formulations for oral administration of peptide or protein drugs
CA2964463C (en) 2014-10-22 2024-02-13 Extend Biosciences, Inc. Therapeutic vitamin d conjugates
HRP20211734T8 (hr) 2014-11-21 2022-03-04 Ascendis Pharma Endocrinology Division A/S Dozni oblici dugodjelujućeg hormona rasta
EP3233898A1 (en) 2014-12-17 2017-10-25 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives and uses thereof
TWI681966B (zh) 2014-12-23 2020-01-11 丹麥商諾佛 儂迪克股份有限公司 Ｆｇｆ２１衍生物及其用途
US9687526B2 (en) 2015-01-30 2017-06-27 Par Pharmaceutical, Inc. Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension
US9937223B2 (en) 2015-01-30 2018-04-10 Par Pharmaceutical, Inc. Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension
US9925233B2 (en) 2015-01-30 2018-03-27 Par Pharmaceutical, Inc. Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension
US9750785B2 (en) 2015-01-30 2017-09-05 Par Pharmaceutical, Inc. Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension
US9744209B2 (en) 2015-01-30 2017-08-29 Par Pharmaceutical, Inc. Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension
US9375478B1 (en) 2015-01-30 2016-06-28 Par Pharmaceutical, Inc. Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension
US10426818B2 (en) 2015-03-24 2019-10-01 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Method and pharmaceutical composition for use in the treatment of diabetes
AR104984A1 (es) 2015-06-12 2017-08-30 Novo Nordisk As Compuestos selectivos para pyy y sus usos
CN108472337B (zh) 2015-08-03 2022-11-25 比奥贝拉蒂治疗公司 因子ix融合蛋白以及其制备和使用方法
EP3341009A4 (en) 2015-08-28 2019-05-01 Amunix Pharmaceuticals, Inc. CHIMERIC POLYPEPTIDE ASSEMBLY AND METHODS OF PREPARING AND USING THE SAME
US11229683B2 (en) 2015-09-18 2022-01-25 Bolder Biotechnology, Inc. Hematopoietic growth factor proteins and analogs thereof and angiotensin converting enzyme inhibitors for treatment of radiation exposure
US10286079B2 (en) 2015-09-22 2019-05-14 The Regents Of The University Of California Modified cytotoxins and their therapeutic use
WO2017053391A1 (en) 2015-09-22 2017-03-30 The Regents Of The University Of California Modified cytotoxins and their therapeutic use
AU2016335287A1 (en) 2015-10-07 2018-04-12 Cyprumed Gmbh Pharmaceutical formulations for the oral delivery of peptide drugs
WO2017083604A1 (en) * 2015-11-12 2017-05-18 Amgen Inc. Triazine mediated pharmacokinetic enhancement of therapeutics
JP6946304B2 (ja) 2015-12-22 2021-10-06 ノバルティス アーゲー 増殖分化因子１５（ｇｄｆ−１５）を使用して代謝障害を処置するまたは軽快させる方法
MX2018009938A (es) * 2016-03-01 2019-03-14 Ascendis Pharma Bone Diseases As Profarmacos de hormona paratiroidea (pth).
US11896671B2 (en) 2016-07-13 2024-02-13 Ascendis Pharma A/S Conjugation method for carrier-linked prodrugs
DK3518961T3 (da) 2016-09-29 2023-04-24 Ascendis Pharma Bone Diseases As PTH-forbindelser med lave forhold mellem top og bund
CN116059321A (zh) 2016-09-29 2023-05-05 阿森迪斯药物骨疾病股份有限公司 控释pth的药物组合物
CA3037442A1 (en) 2016-09-29 2018-04-05 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Dosage regimen for a controlled-release pth compound
DK3518930T3 (da) 2016-09-29 2023-05-01 Ascendis Pharma Growth Disorders As Kombinationsbehandling af en CNP-agonist med kontrolleret frigivelse
WO2018065634A1 (en) 2016-10-07 2018-04-12 Cyprumed Gmbh Pharmaceutical compositions for the nasal delivery of peptide or protein drugs
US10913952B2 (en) * 2016-10-26 2021-02-09 Salk Institute For Biological Studies Environmental stress response transcriptional regulatory network
KR102502040B1 (ko) 2016-12-09 2023-02-24 질랜드 파마 에이/에스 아실화 glp-1/glp-2 이중 효능제
EP3554534B1 (en) 2016-12-16 2021-06-23 Novo Nordisk A/S Insulin containing pharmaceutical compositions
WO2019038412A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Novo Nordisk A/S GLP-1 COMPOSITIONS AND USES THEREOF
JP6898518B2 (ja) 2018-02-02 2021-07-07 ノヴォ ノルディスク アー／エス Ｇｌｐ−１アゴニスト、ｎ−（８−（２−ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸の塩及び滑沢剤を含む固形組成物
AU2019237507A1 (en) * 2018-03-23 2020-10-08 Carmot Therapeutics, Inc. Modulators of G-protein coupled receptors
IL277572B2 (en) 2018-03-28 2024-05-01 Ascendis Pharma Oncology Div A/S IL-2 conjugates
WO2019185706A1 (en) 2018-03-28 2019-10-03 Ascendis Pharma A/S Conjugates
AU2019247936C1 (en) 2018-04-05 2023-06-15 Sun Pharmaceutical Industries Limited Novel GLP-1 analogues
US20210087250A1 (en) 2018-04-06 2021-03-25 Cyprumed Gmbh Pharmaceutical compositions for the transmucosal delivery of therapeutic peptides and proteins
TWI829687B (zh) 2018-05-07 2024-01-21 丹麥商諾佛 儂迪克股份有限公司 包含glp-1促效劑與n-(8-(2-羥基苯甲醯基)胺基)辛酸之鹽的固體組成物
WO2019219896A1 (en) 2018-05-18 2019-11-21 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Starting dose of pth conjugates
CN116920081A (zh) * 2018-05-31 2023-10-24 香港理工大学 用于癌症、肥胖症、代谢紊乱和相关并发症及合并症的精氨酸耗竭剂的组合物和应用
KR20210016390A (ko) 2018-06-01 2021-02-15 노파르티스 아게 Bcma에 대한 결합 분자 및 이의 용도
CN113396158A (zh) 2018-11-26 2021-09-14 诺华股份有限公司 Lpl-gpihbp1融合多肽
WO2020152367A1 (en) 2019-01-25 2020-07-30 Ospedale San Raffaele S.R.L. Inhibitor of dux4 and uses thereof
CA3129357A1 (en) 2019-02-11 2020-08-20 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Liquid pharmaceutical formulations of pth conjugates
SG11202108735QA (en) 2019-03-04 2021-09-29 Ascendis Pharma Endocrinology Div A/S Long-acting growth hormone dosage forms with superior efficacy to daily somatropin
US20230071196A1 (en) 2019-05-21 2023-03-09 Novartis Ag Variant cd58 domains and uses thereof
MX2021014164A (es) 2019-05-21 2022-01-04 Novartis Ag Moleculas de union a cd19 y usos de las mismas.
EP4085077A4 (en) 2019-12-31 2024-01-17 Beijing Ql Biopharmaceutical Co Ltd FUSION PROTEINS FROM GLP-1 AND GDF15 AND CONJUGATES THEREOF
IL294357A (en) 2020-01-13 2022-08-01 Ascendis Pharma Bone Diseases As Treatment of hypothyroidism
AU2021207313A1 (en) 2020-02-18 2022-07-28 Novo Nordisk A/S Pharmaceutical formulations
JP2023524695A (ja) 2020-04-29 2023-06-13 ノヴォ ノルディスク アー／エス Ｇｌｐ－１作動薬およびヒスチジンを含む固形組成物
EP4161956A1 (en) 2020-06-03 2023-04-12 Ascendis Pharma Oncology Division A/S Il-2 sequences and uses thereof
EP4204439A1 (en) 2020-08-28 2023-07-05 Ascendis Pharma Oncology Division A/S Glycosylated il-2 proteins and uses thereof
EP4210680A1 (en) 2020-09-07 2023-07-19 Cyprumed GmbH Improved pharmaceutical formulations of glp-1 receptor agonists
JP2023543265A (ja) 2020-09-28 2023-10-13 アセンディス ファーマ ボーン ディジージズ エー／エス 副甲状腺機能低下症を有する患者の身体的及び精神的ウェルビーイングの改善
CN115925995A (zh) * 2020-09-30 2023-04-07 北京质肽生物医药科技有限公司 多肽缀合物和使用方法
IL302569A (en) 2020-11-06 2023-07-01 Novartis Ag CD19 binding molecules and their uses
WO2022159395A1 (en) 2021-01-20 2022-07-28 Viking Therapeutics, Inc. Compositions and methods for the treatment of metabolic and liver disorders
KR20230164709A (ko) 2021-04-01 2023-12-04 아센디스 파마 에이에스 염증 유발 질환을 치료하기 위한 지속형 성장 호르몬의 용도
EP4360645A1 (en) * 2021-06-25 2024-05-01 Gan & Lee Pharmaceuticals Co., Ltd. Pharmaceutical composition containing glp-1 compound
WO2023012263A1 (en) 2021-08-04 2023-02-09 Novo Nordisk A/S Solid oral peptide formulations
WO2023046732A1 (en) 2021-09-22 2023-03-30 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Long-acting pth compound treatments
WO2024094673A1 (en) 2022-11-02 2024-05-10 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Pth treatment regimen comprising two pth compounds

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998008872A1 (en) * 1996-08-30 1998-03-05 Novo Nordisk A/S Glp-2 derivatives
WO1999043707A1 (en) * 1998-02-27 1999-09-02 Novo Nordisk A/S N-terminally modified glp-1 derivatives
WO1999043341A1 (en) * 1998-02-27 1999-09-02 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives with helix-content exceeding 25 %, forming partially structured micellar-like aggregates
WO2001004156A1 (en) * 1999-07-12 2001-01-18 Zealand Pharmaceuticals A/S Peptides that lower blood glucose levels
WO2001051071A2 (en) * 2000-01-11 2001-07-19 Novo Nordisk A/S Transepithelial delivery of glp-1 derivatives
JP2002504527A (ja) * 1998-02-27 2002-02-12 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ 部分的に組織化したミセル様凝集物を形成する２５％を越えるヘリックス成分を有するｇｌｐ−２誘導体
JP2002508162A (ja) * 1998-02-27 2002-03-19 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ Ｎ末端を短縮したｇｌｐ−１誘導体
WO2002058725A2 (fr) * 2001-01-23 2002-08-01 Pierre Fabre Medicament Peptides non glycosyles derives de la proteine g du vrs et leur utilisation dans un vaccin
WO2003002136A2 (en) * 2001-06-28 2003-01-09 Novo Nordisk A/S Stable formulation of modified glp-1

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
EP1498425A1 (en) 1986-05-05 2005-01-19 The General Hospital Corporation Use of glucagone-like-peptide 1 (GLP-1) derivatives for the preparation of pharmaceutical compositions
NZ222907A (en) 1986-12-16 1990-08-28 Novo Industri As Preparation for intranasal administration containing a phospholipid absorption enhancing system
JPH04504246A (ja) 1989-03-20 1992-07-30 ザ・ジェネラル・ホスピタル・コーポレーション インシュリン刺激ホルモン
WO1991011457A1 (en) 1990-01-24 1991-08-08 Buckley Douglas I Glp-1 analogs useful for diabetes treatment
US5545618A (en) * 1990-01-24 1996-08-13 Buckley; Douglas I. GLP-1 analogs useful for diabetes treatment
DK36492D0 (da) 1992-03-19 1992-03-19 Novo Nordisk As Praeparat
US6268343B1 (en) * 1996-08-30 2001-07-31 Novo Nordisk A/S Derivatives of GLP-1 analogs
US6528486B1 (en) * 1999-07-12 2003-03-04 Zealand Pharma A/S Peptide agonists of GLP-1 activity
US20040001827A1 (en) * 2002-06-28 2004-01-01 Dennis Mark S. Serum albumin binding peptides for tumor targeting
JP2004528014A (ja) * 2000-12-07 2004-09-16 イーライ・リリー・アンド・カンパニー Ｇｌｐ−１融合タンパク質
EP1423136A4 (en) * 2001-08-10 2007-07-25 Epix Pharm Inc POLYPEPTIDE CONJUGATES HAVING INCREASED CIRCULATION HALF-VIES
BR0308904A (pt) * 2002-04-10 2005-05-03 Lilly Co Eli Método de tratamento de gastroparesia, e, uso de um composto de glp-1
TW200522976A (en) * 2003-09-19 2005-07-16 Novo Nordisk As Novel plasma protein affinity tags
TWI362392B (en) * 2005-03-18 2012-04-21 Novo Nordisk As Acylated glp-1 compounds
EP2066337A2 (en) * 2006-08-04 2009-06-10 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Use of exendins, exendin agonists and glp-1 receptor agonists for altering the concentration of fibrinogen
US8637647B2 (en) * 2008-09-12 2014-01-28 Novo Nordisk A/S Method of acylating a peptide or protein

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998008872A1 (en) * 1996-08-30 1998-03-05 Novo Nordisk A/S Glp-2 derivatives
WO1999043707A1 (en) * 1998-02-27 1999-09-02 Novo Nordisk A/S N-terminally modified glp-1 derivatives
WO1999043341A1 (en) * 1998-02-27 1999-09-02 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives with helix-content exceeding 25 %, forming partially structured micellar-like aggregates
JP2002504527A (ja) * 1998-02-27 2002-02-12 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ 部分的に組織化したミセル様凝集物を形成する２５％を越えるヘリックス成分を有するｇｌｐ−２誘導体
JP2002508162A (ja) * 1998-02-27 2002-03-19 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ Ｎ末端を短縮したｇｌｐ−１誘導体
WO2001004156A1 (en) * 1999-07-12 2001-01-18 Zealand Pharmaceuticals A/S Peptides that lower blood glucose levels
WO2001051071A2 (en) * 2000-01-11 2001-07-19 Novo Nordisk A/S Transepithelial delivery of glp-1 derivatives
WO2002058725A2 (fr) * 2001-01-23 2002-08-01 Pierre Fabre Medicament Peptides non glycosyles derives de la proteine g du vrs et leur utilisation dans un vaccin
WO2003002136A2 (en) * 2001-06-28 2003-01-09 Novo Nordisk A/S Stable formulation of modified glp-1

Cited By (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011515363A (ja) * 2008-03-20 2011-05-19 ナームローゼ・フエンノートチヤツプ・オルガノン 骨密度を増加させるための医薬組成物の製造
JP2011520847A (ja) * 2008-05-16 2011-07-21 ノボ・ノルデイスク・エー／エス 遅効型ｙ２及び／又はｙ４レセプターアゴニスト
JP2011529948A (ja) * 2008-08-06 2011-12-15 ノヴォ・ノルディスク・ヘルス・ケア・アーゲー 長期のインビボ有効性を有するコンジュゲートタンパク質
JP2012515747A (ja) * 2009-01-23 2012-07-12 ノヴォ・ノルディスク・アー／エス アルブミンバインダーａ−ｂ−ｃ−ｄ−ｅ−を有するｆｇｆ２１誘導体及びそれらの使用
JP2013501036A (ja) * 2009-08-06 2013-01-10 ノヴォ・ノルディスク・ヘルス・ケア・アーゲー 長期のインビボ有効性を有する成長ホルモン
JP2016190871A (ja) * 2009-08-06 2016-11-10 ノヴォ・ノルディスク・ヘルス・ケア・アーゲー 長期のインビボ有効性を有する成長ホルモン
JP2013518038A (ja) * 2010-01-22 2013-05-20 ノヴォ・ノルディスク・ヘルス・ケア・アーゲー ｉｎ−ｖｉｖｏにおける効力が延長された成長ホルモン
JP2016026204A (ja) * 2010-01-22 2016-02-12 ノヴォ・ノルディスク・ヘルス・ケア・アーゲー ｉｎ−ｖｉｖｏにおける効力が延長された成長ホルモン
JP2013523619A (ja) * 2010-03-26 2013-06-17 ノヴォ ノルディスク アー／エス 新規のグルカゴンアナログ
JP2013523618A (ja) * 2010-03-26 2013-06-17 ノヴォ ノルディスク アー／エス 新規のグルカゴン類似体
JP2016183192A (ja) * 2010-03-26 2016-10-20 ノヴォ ノルディスク アー／エス 新規のグルカゴンアナログ
JP2013532644A (ja) * 2010-07-20 2013-08-19 ノヴォ ノルディスク アー／エス Ｎ末端が修飾されたｆｇｆ２１化合物
JP2017141232A (ja) * 2010-09-28 2017-08-17 アエゲリオン ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド 作用持続時間が増した改変ポリペプチド
JP2014502252A (ja) * 2010-09-28 2014-01-30 アミリン・ファーマシューティカルズ，リミテッド・ライアビリティ・カンパニー 作用持続時間が増した改変ポリペプチド
JP2018021081A (ja) * 2011-09-23 2018-02-08 ノヴォ ノルディスク アー／エス 新規のグルカゴン類似体
JP2014527975A (ja) * 2011-09-23 2014-10-23 ノヴォ ノルディスク アー／エス 新規のグルカゴン類似体
US10000542B2 (en) 2012-05-08 2018-06-19 Novo Nordisk A/S Double-acylated GLP-1 derivatives
JP2015517477A (ja) * 2012-05-08 2015-06-22 ノヴォ ノルディスク アー／エス 二重アシル化されたｇｌｐ−１誘導体
JP2015517478A (ja) * 2012-05-08 2015-06-22 ノヴォ ノルディスク アー／エス 二重アシル化されたｇｌｐ−１誘導体
US10604554B2 (en) 2012-05-08 2020-03-31 Novo Nordisk A/S Double-acylated GLP-1 derivatives
US11274135B2 (en) 2012-05-08 2022-03-15 Novo Nordisk A/S Double-acylated GLP-1 derivatives
US11518795B2 (en) 2012-05-08 2022-12-06 Novo Nordisk A/S Double-acylated GLP-1 derivatives
US9751927B2 (en) 2013-04-18 2017-09-05 Novo Nordisk A/S Stable, protracted GLP-1/glucagon receptor co-agonists for medical use
JP2016523243A (ja) * 2013-06-20 2016-08-08 ノヴォ ノルディスク アー／エス Ｇｌｐ−１誘導体及びその使用
US10570184B2 (en) 2014-06-04 2020-02-25 Novo Nordisk A/S GLP-1/glucagon receptor co-agonists for medical use
JP2018506507A (ja) * 2014-11-27 2018-03-08 ノヴォ ノルディスク アー／エス Ｇｌｐ−１誘導体及びその使用
JP2021516222A (ja) * 2018-03-16 2021-07-01 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション 副甲状腺ホルモンポリペプチドコンジュゲートおよびその使用方法
JP2022551233A (ja) * 2019-10-12 2022-12-08 南京楓▲ケイ▼生物医薬科技有限公司 異なる構造のｇｌｐ－１アナログペプチド修飾二量体およびその調製方法のｉｉ型糖尿病の治療における用途

Also Published As

Publication number Publication date
IL174154A (en) 2013-09-30
MXPA06002941A (es) 2006-05-31
AU2010203063B2 (en) 2012-10-25
KR101241862B1 (ko) 2013-03-13
US20130244931A1 (en) 2013-09-19
WO2005027978A2 (en) 2005-03-31
US20130040884A1 (en) 2013-02-14
BRPI0414539B8 (pt) 2021-05-25
US20160108102A1 (en) 2016-04-21
US20070203058A1 (en) 2007-08-30
WO2005027978A3 (en) 2005-05-19
BRPI0414539A (pt) 2006-11-07
EP2932981A2 (en) 2015-10-21
BRPI0414539B1 (pt) 2020-12-29
KR101241862B9 (ko) 2022-12-09
NO20061722L (no) 2006-06-12
AU2004273573A1 (en) 2005-03-31
AU2010203063A1 (en) 2010-08-12
US20100305032A1 (en) 2010-12-02
CA2539253A1 (en) 2005-03-31
EP1670515A2 (en) 2006-06-21
EP2932981B1 (en) 2021-06-16
EP2932981A3 (en) 2016-02-24
AU2004273573B2 (en) 2010-04-22
BR122019021416A2 (ja) 2019-12-21
SI2932981T1 (sl) 2021-11-30
JP4949838B2 (ja) 2012-06-13
US20130053315A1 (en) 2013-02-28
KR20060096997A (ko) 2006-09-13
IL174154A0 (en) 2006-08-01
TW200526254A (en) 2005-08-16
NO343825B1 (no) 2019-06-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP4949838B2 (ja) 新規ｇｌｐ−１誘導体
US9657079B2 (en) Truncated GLP-1 derivatives and their therapeutical use
US9067977B2 (en) Peptides derivatized with A-B-C-D- and their therapeutical use
US9409966B2 (en) Glucagon-like peptide-1 derivatives and their pharmaceutical use
US7893017B2 (en) Protracted GLP-1 compounds
JP5209463B2 (ja) アシル化ｇｌｐ−１化合物

Legal Events

Date Code Title Description
A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20070711

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20101005

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20101108

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20101115

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20110405

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20110628

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20110922

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20110930

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20110930

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20111227

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20120207

A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20120308

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150316

Year of fee payment: 3

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 4949838

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R153 Grant of patent term extension

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R153

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250