JP5771005B2 - グルカゴンアンタゴニスト及びglp−1アゴニスト活性を示す化合物 - Google Patents
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Description
を有するシステインのアルキルカルボキシレート誘導体からなる群より選択されるアミノ酸で置換されている。
ここでAは、下記:
(i)フェニル乳酸(PLA);
(ii)PLAのオキシ誘導体;
(iii)連続した2個のアミノ酸がエステル又はエーテル結合を介して結合しているアミノ酸2〜6個のペプチド
からなる群より選択され;
Bは、配列番号1のアミノ酸i−26を表し(ここでiは、3、4、5、6又は7である)、更に、例えば、グルカゴンペプチド若しくはグルカゴン類縁体又はグルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニストについて記載された修飾のいずれかを含む、本明細書において更に記載される1つ以上のアミノ酸修飾を含んでもよく、、そして
Cは、
(x)X;
(xi)X−Y;
(xii)X−Y−Z;
(xiii)X−Y−Z−R10
(ここでXは、Met、Leu又はNleであり;Yは、Asn又は荷電アミノ酸であり;Zは、Thr、Gly、Cys、Lys、オルニチン(Orn)、ホモシステイン、アセチル−フェニルアラニン(Ac−Phe)又は荷電アミノ酸であり、R10は、配列番号21、26、27及び50からなる群より選択される)
からなる群より選択される。
本発明を記載し、特許請求するに際し、以下の用語を下記に記載した定義に従って使用する。
I.小型で脂肪族の非極性又は僅かに極性の残基:
Ala、Ser、Thr、Pro、Gly;
II.極性の負荷電残基及びそれらのアミド:
Asp、Asn、Glu、Gln;
III.極性の正荷電残基:
His、Arg、Lys、オルニチン(Orn);
IV.大型で脂肪族の非極性残基:
Met、Leu、Ile、Val、Cys、ノルロイシン(Nle)、ホモシステイン;
V.大型の芳香族残基:
Phe、Tyr、Trp、アセチルフェニルアラニン。
本明細書に開示されているものは、グルカゴンアンタゴニスト及びGLP−1アゴニストとして機能するグルカゴン類縁体である。そのようなグルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニストは、グルカゴンアゴニスト作用の抑制が望まれ、同時にGP−1活性の刺激も望まれるあらゆる状況に利用される。例えば、GLP−1刺激と一緒になったグルカゴンアンタゴニスト活性を、グルカゴンアンタゴニスト作用が高血糖症の前臨床モデルで血中グルコースの低下をもたらすことが実証され、且つGLP−1活性がインスリン産生と関連している、糖尿病の治療に使用することができる。GLP−1活性を示す化合物は、肥満の治療及び体重増加の防止にも有用であることが知られている。
を有するシステインのアルキルカルボキシレート誘導体からなる群より選択されるアミノ酸で置換し、グルカゴンのC末端部分(野生型グルカゴンのアミノ酸番号付けによるアミノ酸12〜29の前後)のアルファ−へリックス構造を、例えば、ラクタム架橋を、天然グルカゴンペプチドに対して、アミノ酸12と16又はアミノ酸16と20の側鎖同士の間に形成することによって、安定化する。
R1−Phe−Thr−Ser−Xaa−Tyr−Ser−Lys−Tyr−Leu−Xaa−Glu−Arg−Arg−Ala−Gln−Asp−Phe−Val−Gln−Trp−Leu−Xaa−Asn−Thr−R2(配列番号39)、
R1−Phe−Thr−Ser−Xaa−Tyr−Ser−Lys−Tyr−Leu−Asp−Glu−Arg−Arg−Ala−Gln−Xaa−Phe−Val−Gln−Trp−Leu−Xaa−Asn−Thr−R2(配列番号13)、
R1−Phe−Thr−Ser−Xaa−Tyr−Ser−Lys−Tyr−Leu−Asp−Glu−Arg−Arg−Ala−Gln−Asp−Phe−Val−Xaa−Trp−Leu−Xaa−Asn−Thr−R2(配列番号14)、及び
R1−Phe−Thr−Ser−Xaa−Tyr−Ser−Lys−Tyr−Leu−Asp−Glu−Arg−Arg−Ala−Gln−Xaa−Phe−Val−Xaa−Trp−Leu−Xaa−Asn−Thr−R2(配列番号12)
からなる群より選択されるグルカゴン類縁体を含む、グルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニストが提供され、
ここで、4位のXaaは、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸又はホモシステイン酸であり、10位のXaaは、Asp、Glu、システイン酸、ホモグルタミン酸及びホモシステイン酸であり、16位のXaaは、Asp、Cys、Orn、ホモシステイン又はアセチルフェニルアラニンであり、19位のXaaは、Gln、Cys、Orn、ホモシステイン及びアセチルフェニルアラニンであり、22位のXaaは、Met、Leu又はNleであり、R1はOH又はNH2であり、そしてR2は、Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser(配列番号21)、Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Xaa(配列番号50;ここでXaaは、Cys、Orn、ホモシステイン又はアセチルフェニルアラニンである)、COOH又はCONH2であり、ペプチドは更に、配列番号13の場合は16位、配列番号14の場合は19位、及び配列番号12の場合は16と19位でペグ化されていてもよい。一つの実施態様において、配列番号12〜14及び39の24位のThrは、Glyで置換されている。一つの実施態様によると、ペプチドは、R1がOHである配列番号13又は配列番号14の配列を含む。一つの実施態様によると、ペプチドは、R1がOHであり、R2がCONH2である、配列番号13又は配列番号14の配列を含む。一つの実施態様によると、ペプチドは、R1がOHであり、R2がCONH2であり、24位のトレオニンがグリシンで置換されている、配列番号13又は配列番号14の配列を含む。
ここでAは、下記:
(i)PLA;
(ii)PLAのオキシ誘導体;及び
(iii)連続した2個のアミノ酸がエステル又はエーテル結合を介して結合しているアミノ酸2〜6個のペプチド
からなる群より選択され;
Bは、配列番号1のアミノ酸p−26を表し(ここでpは、3、4、5、6又は7である)、更に、下記からなる群より選択される1つ以上のアミノ酸修飾を含んでもよく:
(iv)Glu、Cysのスルホン酸誘導体、ホモグルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、又は下記構造:
を有するシステインのアルキルカルボキシレート誘導体による、9位(配列番号1のアミノ酸番号付けによる)のAspの置換;
(v)エステル、エーテル、チオエーテル、アミド、又はアルキルアミン結合を介してアシル又はアルキル基に共有結合しているアミノ酸による、10、20及び24位(配列番号1のアミノ酸番号付けによる)のうちの1又は2個のアミノ酸の置換;
(vi)Cys、Lys、オルチニン、ホモシステイン、及びアセチル−フェニルアラニン(Ac−Phe)からなる群より選択されるアミノ酸による、16、17、20、21及び24位(配列番号1のアミノ酸番号付けによる)のうちの1又は2個のアミノ酸の置換(ここで前記群のアミノ酸は親水性部分に共有結合している);
(vii)システイン酸、グルタミン酸、ホモグルタミン酸、及びホモシステイン酸による15位(配列番号1の番号付けによる)のAspの置換;
(viii)システイン酸、グルタミン酸、ホモグルタミン酸、及びホモシステイン酸による16位(配列番号1の番号付けによる)のSerの置換;
(ix)Glnによる17位のArgの交換、Alaによる18位のArgの交換、Gluによる21位のAspの交換、Ileによる23位のValの交換、及びAlaによる24位のGlnの交換(配列番号1のアミノ酸番号付けによる);
(x)Gluによる16位のSerの交換、Gluによる20位のGlnの交換、又はGluによる24位のGlnの交換(配列番号1のアミノ酸番号付けによる);
そして
Cは、
(vii)X;
(viii)X−Y;
(ix)X−Y−Z;
(x)X−Y−Z−R10
(ここでXは、Met、Leu又はNleであり;Yは、Asn又は荷電アミノ酸であり;Zは、Thr、Gly、Cys、Lys、オルニチン(Orn)、ホモシステイン、アセチル−フェニルアラニン(Ac−Phe)又は荷電アミノ酸であり、R10は、配列番号21、26、27及び50からなる群より選択される)、
からなる群より選択される。
を含むことができる。
配列番号52 His−Ser−Gln−Gly−Thr−PLA
配列番号53 Ser−Gln−Gly−Thr−PLA
配列番号54 Gln−Gly−Thr−PLA
配列番号55 Gly−Thr−PLA
配列番号56 Thr−PLA
Xaa1−Xaa2−Xaa3−Thr−Gly−Phe(配列番号107);
Xaa2−Xaa3−Thr−Gly−Phe(配列番号108);又は
Xaa3−Thr−Gly−Phe(配列番号109)
のアミノ酸配列を含むことができ、
ここで、Xaa1は、His、D−ヒスチジン、アルファ,アルファ−ジメチルイミダゾール酢酸(DMIA)、N−メチルヒスチジン、アルファ−メチルヒスチジン、イミダゾール酢酸、デスアミノヒスチジン、ヒドロキシル−ヒスチジン、アセチル−ヒスチジン及びホモ−ヒスチジンからなる群より選択され;Xaa2は、Ser、D−セリン、D−アラニン、バリン、グリシン、N−メチルセリン、N−メチルアラニン及びアミノイソ酪酸(AIB)からなる群より選択され;そしてXaa3は、Gln又はGluである。
を有するCysのアルキル化誘導体からなる群より選択される。
(1)下記を含むが、これらに限定されない、グルカゴンアンタゴニスト活性を付与する修飾:
(a)PLAによる6位(野生型グルカゴンのアミノ酸番号付けによる)のPheの置換(更に、野生型グルカゴンのN末端から1〜5個のアミノ酸を欠失を伴ってもよい)、又は
(b)野生型グルカゴンのN末端からの2〜5個のアミノ酸の欠失(更に、グルタミン酸、ホモグルタミン酸、又はシステインのスルホン酸誘導体による、野生型グルカゴンの9位(野生型グルカゴンのアミノ酸番号付けによる)のAspの置換を伴ってもよい)、
並びに
(2)下記を含むが、これらに限定されない、GLP−1アゴニスト活性を付与する修飾:
(a)野生型グルカゴンのアミノ酸12〜29の範囲内、例えば16、17、18、19、20、21、24若しくは29位(野生型グルカゴンのアミノ酸番号付けによる)のうちの1、2、3、4若しくはそれ以上の位置でのα,α−二置換アミノ酸の挿入若しくは置換、又は
(b)野生型グルカゴンのアミノ酸12〜29の範囲内の分子内架橋、例えば、塩架橋若しくはラクタム架橋若しくは別の種類の共有結合の導入、又は
(c)例えば、Ser2がAlaで置換されている、Gln3がGluで置換されている、Arg17がGlnで置換されている、18位のArgがAlaで置換されている、21位のAspがGluで置換されている、23位のValがIleで置換されている、及び/若しくは24位のGlnがAlaで置換されている、GLP−1の対応するアミノ酸による2、3、17、18、21、23若しくは24位(野生型グルカゴンのアミノ酸番号付けによる)の1つ以上の位置でのアミノ酸の置換、又は
(d)野生型グルカゴンのアミノ酸番号付けによるアミノ酸12〜29位の前後のアルファ−へリックス構造を安定化する他の修飾、
並びに
(3)GLP−1アゴニスト活性を強化する他の修飾、例えば、
(a)C末端カルボキシレートの代わりにC末端アミド又はエステル;
そして、更に、
(4)以下の修飾のうちの1つ以上:
(a)例えばN末端、若しくは6、16、17、20、21、24、29、40位、若しくはC末端アミノ酸への、ポリエチレングルコールのような親水性部分の共有結合、及び/又は
(b)アシル化若しくはアルキル化;そして、更に、
(5)以下の追加的な修飾のうちの1つ以上:
(a)N末端へのアミノ酸の共有結合、例えばN末端への1〜5個のアミノ酸の共有結合(この結合は6位(野生型グルカゴンの番号付けによる)のPLAへのエステル結合を介してであってもよく、更に、本明細書に記載されているようなDPP−IV切断への耐性を改善する1又は2位での修飾を一緒に伴ってもよい);
(b)29位及び/又は28位(野生型グルカゴンの番号付けによる)(更に27位を含んでもよい)でのアミノ酸の欠失;
(c)C末端へのアミノ酸の共有結合;
(d)所望の活性を保持しながらの非保存的置換、保存的置換、付加、又は欠失、例えば、2、5、7、10、11、12、13、14、16、17、18、19、20、21、24、27、28又は29位の1つ以上の位置での保存的置換、Val又はPheによる10位のTyrの置換、Argによる12位のLysの置換、Alaによるこれらの位置の1つ以上での置換;
(e)分解を低減しうる、15位のアスパラギン酸の修飾、例えばグルタミン酸、ホモグルタミン酸、システイン酸若しくはホモシステイン酸での置換による修飾;又は、Asp15−Ser16結合の切断による分解を同様に低減しうる、16位のセリンの修飾、例えばトレオニン、AIB、グルタミン酸での置換、若しくは4原子の長さの側鎖を有する別の負荷電アミノ酸での置換、代替的にはグルタミン、ホモグルタミン酸若しくはホモシステイン酸のいずれかでの置換による修飾;
(f)酸化分解を低減するための、例えばロイシン又はノルロイシンでの置換による、27位のメチオニンの修飾;
(g)Glnの脱アミド化を介して生じる分解を低減するための、例えばAla又はAIBでの置換による、20又は24位のGlnの修飾;
(h)Aspが脱水により環状スクシンイミド中間体を形成し、続いて異性化によりイソアスパラギン酸塩を形成することにより生じる分解を低減するための、21位のAspの修飾、例えば、Gluでの置換による修飾;
(j)本明細書に記載されているホモ二量体化又はヘテロ二量体化;及び
(k)上記の組み合わせ。
(i)システイン酸、グルタミン酸、ホモグルタミン酸及びホモシステイン酸による、15位(配列番号1の番号付けによる)のAspの置換;
(ii)システイン酸、グルタミン酸、ホモグルタミン酸及びホモシステイン酸による、16位(配列番号1の番号付けによる)のSerの置換;
(iii)荷電アミノ酸による28位のAsnの置換;
(iv)Lys、Arg、His、Asp、Glu、システイン酸及びホモシステイン酸からなる群より選択される荷電アミノ酸による、28位のAsnの置換;
(v)Asn、Asp又はGluによる28位での置換;
(vi)Aspによる28位での置換;
(vii)Gluによる28位での置換;
(viii)荷電アミノ酸による29位のThrの置換;
(ix)Lys、Arg、His、Asp、Glu、システイン酸及びホモシステイン酸からなる群より選択される荷電アミノ酸による、29位のThrの置換;
(x)Asn、Glu又はLysによる29位での置換;
(xii)Gluによる29位での置換;
(xii)29位の後への1〜3個の荷電アミノ酸の挿入;
(xiii)29位の後ろへのGlu又はLysの挿入;
(xiv)29位の後ろへのGlu−Lys又はLys−Lysの挿入;或いは
これらの組み合わせ。
1)配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、配列番号18、配列番号19、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号25及び配列番号51からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、グルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニスト;
2)本明細書に開示されているグルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニストの11、12、15、16、19又は24位(類縁体のアミノ酸配列による)にポリエチレン鎖が共有結合し、PEG鎖が約500〜約40,000ダルトンの分子量を有する、ペグ化グルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニスト;
3)本明細書に開示されているグルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニストの末端アミノ酸に配列番号21のペプチドが更に融合している、融合ペプチド;並びに
4)配列番号21(GPSSGAPPPS)又は配列番号51のアミノ酸配列がカルボキシ末端に更に結合しており、ポリエチレン鎖がグルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニストの11、12、15、16、19、24又は35位に共有結合し、更に、ポリエチレン鎖が約500〜約40,000ダルトンの分子量を有する、ペグ化グルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニスト。
グルカゴンペプチドのC末端部分(野生型グルカゴン、配列番号1のアミノ酸番号付けによるアミノ酸12〜29の前後)のアルファ−へリックス構造の安定化は、例えば、共有若しくは非共有分子内架橋の形成により又はアルファ−へリックス安定化アミノ酸(例えば、α,α−二置換アミノ酸)での12〜29位(野生型グルカゴンのアミノ酸番号付けによる)前後のアミノ酸の置換及び/若しくは挿入により実施することができる。
別の実施態様において、本明細書に開示されているグルカゴンペプチドの可溶性は、ペプチドへの親水性部分の共有結合により増強される。親水性部分を、タンパク質と活性化ポリマー分子との反応に使用される任意の適切な条件下でグルカゴンペプチドに結合することができる。アシル化、還元的アルキル化、マイケル付加、チオールアルキル化又はPEG部分に対する反応基(例えば、アルデヒド、アミノ、エステル、チオール、α−ハロアセチル、マレイミド又はヒドラジノ基)と標的化合物に対する反応基(例えば、アルデヒド、アミノ、エステル、チオール、α−ハロアセチル、マレイミド又はヒドラジノ基)との他の化学選択的結合/連結方法を含む、当該技術分野において既知のあらゆる方法を使用することができる。水溶性ポリマーを1つ以上のタンパク質に結合するのに使用できる活性化基には、スルホン、マレイミド、スルフヒドリル、チオール、トリフレート、トレシレート、アジリジン、オキシラン、及び5−ピリジルが含まれるが、これらに限定されない。還元的アルキル化によりペプチドに結合する場合、選択されるポリマーは、重合の程度が制御されるように単一の反応性アルデヒドを有するべきである。例えば、Kinstler et al., Adv. Drug. Delivery Rev. 54: 477-485 (2002); Roberts et al., Adv. Drug Delivery Rev. 54: 459-476 (2002)及びZalipsky et al., Adv. Drug Delivery Rev. 16: 157-182 (1995)を参照すること。
本開示は、本発明のグルカゴンペプチドが結合体部分に結合している、他の結合体も包含し、結合は共有結合を介してでもリンカーを介してでもよい。結合は、共有化学結合、静電気、水素、イオン、ファンデルワールスのような物理力、又は、疎水性若しくは親水性相互作用により達成することができる。ビオチン−アビジン、リガンド/受容体、酵素/基質、核酸/核酸結合タンパク質、脂質/脂質結合タンパク質、細胞付着分子パートナー又は互いに親和性を有する任意の結合パートナー若しくはそのフラグメントを含む、多様な非共有結合系を使用することもできる。
幾つかの実施態様によると、本明細書に開示されているグルカゴンペプチドは修飾されて、アシル基又はアルキル基を含む。アシル化又はアルキル化は、循環しているグルカゴンペプチドの半減期を増加させることができる。アシル化又はアルキル化は、有利には、グルカゴン及び/若しくはGLP−1受容体に対して作用の開始を遅延する及び/若しくは作用の持続時間を延長する、並びに/又はDPP−IVのようなプロテアーゼに対する耐性を改善する、並びに/又は可溶性を改善することができる。幾つかの実施態様において、アシル化グルカゴンペプチドの効力は、非アシル化型のグルカゴンペプチドに匹敵する。グルカゴンペプチドを、親水性部分が結合している同じアミノ酸の位置又は異なるアミノ酸の位置でアシル化又はアルキル化することができる。
本発明の化合物を、標準的な合成方法、組み換えDNA技術又はペプチド及び融合タンパク質を調製する他の任意の方法により調製することができる。特定の非天然アミノ酸は標準的な組み換えDNA技術により発現することができないが、それらを調製する技術は当該技術分野において知られている。非ペプチド部分を包含する本発明の化合物を、適用可能であれば、標準的なペプチド化学反応に加えて、標準的な有機化学反応により合成することができる。
グルカゴン類縁体を、改良Applied Biosystem 430 Aペプチド合成機により、0.2mmolのBoc Thr(OBzl)Pam樹脂から出発し、HBTU活性化「Fast Boc」単一カップリングを使用して合成した。Bocアミノ酸及びHBTUは、Midwest Biotech(Fishers, IN)から得た。使用した側鎖保護基は、Arg(Tos)、Asn(Xan)、Asp(OcHex)、Cys(pMeBzl)、His(Bom)、Lys(2Cl−Z)、Ser(OBzl)、Thr(OBzl)、Tyr(2Br−Z)及びTrp(CHO)であった。N末端Hisの側鎖保護基はBocであった。
典型的には、グルカゴンCys類縁体をリン酸緩衝食塩水(5〜10mg/ml)に溶解し、0.01Mエチレンジアミン四酢酸を加える(総容量の10〜15%)。過剰(2倍)量のマレイミドメトキシPEG試薬(Nektar)を加え、反応物を室温で撹拌し、その間、HPLCで反応進行をモニタリングする。8〜24時間後、反応混合物を酸性化し、精製のために0.1%TFA/アセトニトリル勾配を使用する分取逆相カラムに装填する。適切な画分をまとめ、凍結乾燥して、所望のペグ化誘導体を得た。
グルカゴンCys17(1−29)及び同様のモノCys類縁体の合成
60mlの反応容器中の0.2mmolのBoc Thr(OBzl) Pam樹脂(SynChem Inc)及び以下の配列を、FastBoc HBTU活性化単一カップリングを使用する改良Applied Biosystems 430A Peptide Synthesizerに入れ、稼働した。
HSQGTFTSDYSKYLDSCRAQDFVQWLMNT(配列番号40)
以下の側鎖保護基を使用した:Arg(Tos)、Asp(OcHex)、Asn(Xan)、Cys(pMeBzl)、Glu(OcHex)、His(Boc)、Lys(2Cl−Z)、Ser(Bzl)、Thr(Bzl)、Trp(CHO)及びTyr(Br−Z)。合成の完了したペプチジル樹脂を20%ピペリジン/ジメチルホルムアミドで処理して、Trpホルミル保護を除去し、次にHF反応容器に移し、真空下で乾燥した。1.0mlのp−クレゾール及び0.5mlのジメチルスルフィドを、磁気式撹拌バーと共に加えた。容器をHF装置(Pennisula Labs)に取り付け、ドライアイス/メタノール浴で冷却し、排気し、およそ10mlの液体フッ化水素を圧入した。反応物を氷浴で1時間撹拌し、次にHFを減圧留去した。残渣をエチルエーテルに懸濁し、固体を濾過し、エーテルで洗浄し、ペプチドを50mlの酢酸水溶液に抽出した。分析HPLC〔0.46×5cmのZorbax C8、1ml/分、45C、214nm、A緩衝液は0.1%TFA、B緩衝液は0.1%TFA/90%ACN、10分間かけて10%Bから80%Bの勾配〕を少量の切断抽出物試料を用いて実施した。残りの抽出物を2.2×25cmのKromasil C18分取逆相カラムに装填し、Pharmacia FPLC系を使用してアセトニトリル勾配を実施した。5分毎の画分を収集し、その間、214nm(2.0A)のUVでモニタリングした。A=0.1%TFA、B=0.1%TFA/50%アセトニトリル。勾配=450分間かけて30%Bから100%B。
グルカゴン−Cex及び他のC末端延長類縁体の合成
285mg(0.2mmol)のメトキシベンズヒドリルアミン樹脂(Midwest Biotech)を60mlの反応容器に入れ、以下の配列を、FastBoc HBTU活性化単一カップリングを使用する改良Applied Biosystems 430Aペプチド合成機に入れ、稼働した。
HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTGPSSGAPPPS(配列番号41)
以下の側鎖保護基を使用した:Arg(Tos)、Asp(OcHex)、Asn(Xan)、Cys(pMeBzl)、Glu(OcHex)、His(Boc)、Lys(2Cl−Z)、Ser(Bzl)、Thr(Bzl)、Trp(CHO)及びTyr(Br−Z)。合成の完了したペプチジル樹脂を20%ピペリジン/ジメチルホルムアミドで処理して、Trpホルミル保護を除去し、次にHF反応容器に移し、真空下で乾燥した。1.0mlのp−クレゾール及び0.5mlのジメチルスルフィドを、磁気式撹拌バーと共に加えた。容器をHF装置(Pennisula Labs)に取り付け、ドライアイス/メタノール浴で冷却し、排気し、およそ10mlの液体フッ化水素を圧入した。反応物を氷浴で1時間撹拌し、次にHFを減圧留去した。残渣をエチルエーテルに懸濁し、固体を濾過し、エーテルで洗浄し、ペプチドを50mlの酢酸水溶液に抽出した。分析HPLC〔0.46×5cmのZorbax C8、1ml/分、45C、214nm、A緩衝液は0.1%TFA、B緩衝液は0.1%TFA/90%ACN、10分間かけて10%Bから80%Bの勾配〕を切断抽出物のアリコートで実施した。残りの抽出物を2.2×25cmのKromasil C18分取逆相カラムに装填し、Pharmacia FPLC系を溶出に使用してアセトニトリル勾配を実施した。5分毎の画分を収集し、その間、214nm(2.0A)のUVでモニタリングした。A=0.1%TFA、B=0.1%TFA/50%アセトニトリル。勾配=450分間かけて30%Bから100%B。画分58−65をまとめて冷凍し、凍結乾燥して、198.1mgを得た。
グルカゴンCys17Mal−PEG−5K
15.1mgのグルカゴンCys17(1−29)及び27.3mgの平均分子量5000のメトキシポリ(エチレングリコール)マレイミド(mPEG−Mal−5000、Nektar Therapeutics)を、3.5mlのリン酸緩衝食塩水(PBS)に溶解し、0.5mlの0.01Mエチレンジアミン四酢酸(EDTA)を加えた。反応物を室温で撹拌し、反応の進行をHPLC分析〔0.46×5cmのZorbax C8、1ml/分、45C、214nm(0.5A)、A=0.1%TFA、B=0.1%TFA/90%ACN、勾配=10分間かけて10%Bから80%B〕によりモニターした。5時間後、反応混合物を2.2×25cmのKromasil C18分取逆送カラムに装填した。アセトニトリル勾配をPharmacia FPLCにより実施し、その間、214nmのUV波長でモニタリングし、5分毎の画分を収集した。A=0.1%TFA、B=0.1%TFA/50%アセトニトリル、勾配=450分間かけて30%Bから100%B。生成物に対応する画分をまとめて冷凍し、凍結乾燥して、25.9mgを得た。
グルカゴンCys21Mal−PEG−5K
21.6mgのグルカゴンCys21(1−29)及び24mgのmPEG−Mal−5000(Nektar Therapeutics)を、3.5mlのリン酸緩衝食塩水(PBS)に溶解し、0.5mlの0.01Mエチレンジアミン四酢酸(EDTA)を加えた。反応物を室温で撹拌した。2時間後、更なる12.7mgのmPEG−Mal−5000を加えた。8時間後、反応混合物を2.2×25cmのVydac C18分取逆相カラムに装填し、アセトニトリル勾配を4ml/分のPharmacia FPLCにより実施し、その間、5分毎の画分を収集した。A=0.1%TFA、B=0.1%TFA/50%ACN。勾配=450分間かけて20%から80%B。
グルカゴンCys24Mal−PEG−5K
20.1mgのグルカゴンC24(1−29)及び39.5mgのmPEG−Mal−5000(Nektar Therapeutics)を、3.5mlのPBSに撹拌しながら溶解し、0.5mlの0.01M EDTAを加えた。反応物を室温で7時間撹拌し、次に更なる40mgのmPEG−Mal−5000を加えた。およそ15時間後、反応混合物を、2.2×25cmのVydac C18分取逆相カラムに装填し、アセトニトリル勾配を、Pharmacia FPLCを使用して実施した。5分毎の画分を収集し、その間、214nm(2.0A)のUVでモニタリングした。A緩衝液=0.1%TFA、B緩衝液=0.1%TFA/50%ACN、勾配=450分間かけて30%Bから100%B。生成物に対応する画分をまとめて冷凍し、凍結乾燥して、45.8mgを得た。MALDI質量スペクトル分析は、最大9175.2の典型的なPEGの幅広のシグナルを示し、これはグルカゴンC24(3457.8)よりもおよそ5,000原子質量単位だけ多い。
グルカゴンCys24Mal−PEG−20K
25.7mgのグルカゴンC24(1−29)及び40.7mgのmPEG−Mal−20K(Nektar Therapeutics)を、3.5mlのPBSに室温で撹拌しながら溶解し、0.5mlの0.01M EDTAを加えた。6時間後、出発物質と生成物の比率は、HPLCにより決定すると、およそ60:40であった。更なる25.1mgのmPEG−Mal−20Kを加え、反応物を更に16時間撹拌した。生成物比率が有意に改善されなかったので、反応混合物を、2.2×25cmのKromasil C18分取逆相カラムに装填し、450分かけて30%Bから100%Bへの勾配を使用するPharmacia FPLCにより精製した。A緩衝液=0.1%TFA、B緩衝液=0.1%TFA/50%ACN、流量=4ml/分、5分毎の画分を収集し、その間、214nm(2.0A)のUVでモニタリングした。均質な生成物を含有する画分をまとめて冷凍し、凍結乾燥して、25.7mgを得た。分析HPLCにより決定された純度は約90%であった。MALDI質量スペクトル分析は、23,000〜27,000の広域のピークを示し、これは出発グルカゴンC24(3457.8)よりもおよそ20,000原子質量単位だけ多い。
グルカゴンCys29Mal−PEG−5K
20.0mgのグルカゴンCys29(1−29)及び24.7mgのmPEG−Mal−5000(Nektar Therapeutics)を、3.5mlのPBSに室温で撹拌しながら溶解し、0.5mlの0.01M EDTAを加えた。4時間後、更なる15.6mgのmPEG−Mal−5000を加えて、反応の完了を促進した。8時間後、反応混合物を、2.2×25cmのVydac C18分取逆相カラムに装填し、アセトニトリル勾配を、Pharmacia FPLC系により実施した。5分毎の画分を収集し、その間、214nm(2.0A)のUVでモニタリングした。A=0.1%TFA、B=0.1%TFA/50%ACN。画分75−97をまとめて冷凍し、凍結乾燥して、HPLCにより回収された出発物質(画分58−63)と異なる、40.0mgの生成物を得た。分析HPLC〔0.46×5cmのZorbax C8、1ml/分、45C、214nm(0.5A)、A=0.1%TFA、B=0.1%TFA/90%ACN、勾配=10分間かけて10%Bから80%B〕による生成物の分析は、95%を超える純度を示した。MALDI質量スペクトル分析は、8,000〜10,000(最大9025.3)の範囲の質量を有するPEG成分の存在を示し、これは出発物質(3484.8)よりも5,540原子質量単位だけ多い。
グルカゴンCys24(2−ブチロラクトン)
24.7mgのグルカゴンCys24(1−29)に、4mlの0.05M重炭酸アンモニウム/50%アセトニトリル及び5.5ulの2−ブロモ−4−ヒドロキシ酪酸−γ−ラクトンの溶液(アセトニトリル900ul中100ul)を加えた。室温で3時間撹拌した後、更なる105ulのラクトン溶液を反応溶液に加え、更に15時間撹拌した。反応混合物を、10%酢酸水溶液で10mlに希釈し、2.2×25cmのKromasil C18分取逆相カラムに装填した。アセトニトリル勾配(450分かけて20%Bから80%B)をPharmacia FPLCにより実施し、その間、5分毎の画分を収集し、214nm(2.0A)のUVでモニタリングした。流量=4ml/分、A=0.1%TFA、B=0.1%TFA/50%ACN。画分74−77をまとめて冷凍し、凍結乾燥して、7.5mgを得た。HPLC分析は、95%の純度を示し、MALDI質量スペクトル分析は、3540.7の質量又は出発物質よりも84質量単位だけ多い質量を示した。この結果は、単一ブチロラクトン部分の付加と一致している。
グルカゴンCys24(S−カルボキシメチル)
18.1mgのグルカゴンCys24(1−29)を、9.4mlの0.1Mリン酸ナトリウム緩衝液(pH=9.2)に溶解し、0.6mlのブロモ酢酸溶液(アセトニトリル中1.3mg/ml)を加えた。反応物を室温で撹拌し、反応の進行を分析HPLCにより追跡した。1時間後、更なる0.1mlのブロモ酢酸溶液を加えた。反応物を更に60分間撹拌し、酢酸水溶液で酸性化し、精製のために2.2×25cmのKromasil C18分取逆相カラムに装填した。アセトニトリル勾配をPharmacia FPLC(流量=4ml/分)により実施し、その間、5分毎の画分を収集し、214nm(2.0A)のUVでモニタリングした。A=0.1%TFA、B=0.1%TFA/50%ACN。画分26−29をまとめて冷凍し、凍結乾燥して、数mgの生成物を得た。分析HPLCは、90%の純度を示し、MALDI質量スペクトル分析は、所望の生成物の質量3515を確認した。
グルカゴンCys24マレイミド,PEG−3.4K−二量体
16mgのグルカゴンCys24及び1.02mgのMal−PEG−Mal−3400、平均分子量3400のポリ(エチレングルコール)−ビス−マレイミド(Nektar Therpeutics)を、3.5 のリン酸緩衝食塩水及び0.5mlの0.01M EDTAに溶解し、反応物を室温で撹拌した。16時間後、更なる16mgのグルカゴンCys24を加え、撹拌を続けた。およそ40時間後、反応混合物をPharmcia PepRPC 16/10カラムに装填し、アセトニトリル勾配をPharmacia FPLCにより実施し、その間、2分毎の画分を収集し、214nm(2.0A)のUVでモニタリングした。流量=2ml/分、A=0.1%TFA、B=0.1%TFA/50%ACN。画分69−74をまとめて冷凍し、凍結乾燥して、10.4mgを得た。分析HPLCは、90%の純度を示し、MALDI質量スペクトル分析は、9500〜11,000の範囲の成分を示し、これは所望の二量体と一致する。
グルカゴン可溶性アッセイ:
グルカゴン(又は類縁体)の溶液(1mg/ml又は3mg/ml)を0.01NのHClで調製する。100ulの原液を、0.01NのHClで1mlに希釈し、UV吸光度(276nm)を決定する。残りの原液のpHを、200〜250ulの0.1M Na2HOP4(pH9.2)を使用して、pH7に調整する。溶液を4℃で一晩放置し、次に遠心分離する。次に100ulの上澄みを、0.01NのHClで1mlに希釈し、UV吸光度を決定する(2回繰り返す)。
最終吸光度/初期吸光度×100=溶解率
グルカゴン受容体結合アッセイ
グルカゴン受容体へのペプチドの親和性を、シンチレーション近接アッセイ技術を利用する競争結合アッセイにより測定した。シンチレーション近接アッセイ緩衝液(0.05Mのトリス−HCl、pH7.5、0.15MのNaCl、0.1%w/vのウシ血清アルブミン)により作製したペプチドの3倍希釈系列を、0.05nMの(3−〔125I〕−ヨードチロシル)Tyr10グルカゴン(Amersham Biosciences, Piscataway, NJ)、1ウエルあたり1〜6マイクログラムの、ヒトグルカゴン受容体を過剰発現している細胞から調製した原形質膜画分及び1mg/ウエルのポリエチレンイミン処理ムギ胚芽凝集素A型シンチレーション近接アッセイビーズ(Amersham Biosciences, Piscataway, NJ)と共に、96穴白色/透明底プレート(Corning Inc., Acton, MA)で混合した。ロータリー振とう器により800rpmで5分間振とうしてから、プレートを室温で12時間インキュベートし、次にMicroBetal450液体シンチレーションカウンター(Perkin-Elmer, Wellesley, MA)で読み取った。試験試料の最高濃度よりも4倍高い濃度の「コールドの」天然リガンドを入れたウエルで非特異的結合(NSB)放射能を測定し、競合物質を入れなかったウェルで総結合放射能を検出した。特異的結合の率を以下のように計算した:特異的結合率=((結合−NSB)/(総結合−NSB))×100。IC50値は、Originソフトウェア(OriginLab, Northampton, MA)を使用して決定した。
機能アッセイ−cAMP合成
cAMPを誘導するグルカゴン類縁体の能力を、ホタルルシフェラーゼに基づいたレポーターアッセイにより測定した。グルカゴン受容体又はGLP受容体のいずれかと、cAMP応答配列に結合したルシフェラーゼ遺伝子とを同時形質移入されたHEK293細胞を、0.25%ウシ増殖血清(HyClone, Logan, UT)が補充されたDMEM(Invitrogen, Carlsbad, CA)で16時間培養することにより血清を取り除き、次にグルカゴン、GLP−1又は新規グルカゴン類縁体のいずれかの希釈系列と共に、96穴ポリ−D−リシン被覆「バイオコート」プレート(BD Biosciences, San Jose, CA)中で37℃、5%CO2で5時間インキュベートした。インキュベーションの終了時に、100マイクロリットルのLucLiteルミネセンス基質試薬(Perkin-Elmer, Wellesley, MA)を各ウエルに加えた。プレートを短時間振とうし、暗黒で10分間インキュベートし、発光をMicroBeta-1450液体シンチレーションカウンター(Perkin-Elmer, Wellesley, MA)で測定した。有効50%濃度は、Originソフトウェア(OriginLab, Northampton, MA)を使用して計算した。結果を図3、並びに表2及び3に示す。
グルカゴンCys−マレイミドPEG類縁体の安定性アッセイ
各グルカゴン類縁体を水又はPBSに溶解し、初期HPLC分析を実施した。pHを調整した後(4、5、6、7)、試料を37℃で特定の時間インキュベートし、HPLCにより再び分析して、ペプチドの完全性を決定した。特定の目的とするペプチドの濃度を決定し、無傷のまま残っている率を初期分析と比較して計算した。グルカゴンCys21−マレイミドPEG5κについての結果を図1及び2に示す。
グルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニスト
グルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニストは以下の一般的な戦略を使用して合成した。
グルカゴン類縁体を、改良Applied Biosystem 430Aペプチド合成機により、0.2mmolのMBHA樹脂から又はPam樹脂に結合した第1アミノ酸から出発し、HBTU活性化「Fast Boc」単一カップリングを使用して合成した。Bocアミノ酸及びHBTUは、Midwest Biotech(Fishers, IN)から得た。使用した一般的な側鎖保護基は以下の通りであった:Arg(Tos)、Asn(Xan)、Asp(OcHex)、Cys(pMeBzl)、His(Bom)、Lys(2Cl−Z)、Ser(OBzl)、Thr(OBzl)、Tyr(2Br−Z)及びTrp(CHO)。Boc−Glu(OFm)−OH及びBoc−Lys(Fmoc)−OH(Chem-Impex, Wood dale, IL)をラクタム架橋形成部位に使用した。自動固相合成の後、N末端3−フェニル乳酸(PLA)(Aldrich, Milwaukee, WI)を、手動で、BEPBT(3−(ジエトキシ−ホスホリルオキシ)−3H−ベンゾ〔d〕〔1,2,3〕トリアジン−4−オン)(Synchem Inc., Aurora, OH)によりカップリングした。
ペプチドは、カップリング試薬としてDIC/HOBTを使用し、Rink MBHAアミド樹脂を用いて又はWang樹脂(Novabiochem, San Diego, CA)に結合した第1アミノ酸を用いて、標準的Fmoc化学を使用するABI 433A自動ペプチド合成機により合成した。自動ペプチド合成の後、3−フェニル乳酸(PLA)を、手動で、BEPBTにカップリングした。Nα−Fmoc〔N−(9−フルオレニル)メトキシカルボニル〕アミノ酸の側鎖保護基は以下であった:Arg、Pmc;Asp、OtBu;Cys、Trt;Gln、Trt;His、Trt;Lys、Boc;Ser、tBu、Tyr、tBu;及びTrp、Boc(Pmc=2,2,5,7,8−ペンタメチルクロマン−6−スルホニル、OtBu=tert−ブチルエステル、Trt=トリチル、Boc=tert−ブチルオキシカルボニル及びtBu=tert−ブチルエステル)。Fmoc−Glu(O−2−PhiPr)−OH及びFmoc−Lys(Mmt)−OH(Novabiochem, San Diego, CA)をラクタム架橋形成部位に組み込んだ。
分析HPLCは、流量1.0mL/分の勾配溶離及び214nmでのモニタリングを用いて、ZORBAX SB-C8カラム(0.46×5cm、5μm、Agilent)を有するBeckman System GoldHPLC系により実施した。勾配は、10分間の10%Bから80%B、次に5分間の10%Bに設定した。緩衝液A=0.1%TFA及びB=0.1%TFA/90%アセトニトリル。
特に示されていない場合、ペプチドは、通常、準分取HPLCカラム(ZORBAX SB-C8、21.2×250mm、7μm、Agilent)を有する486モニター系に接続したWaters 600Eにより、214nm又は230nMでモニタリングしながら精製した。緩衝液A=0.1TFA/10%アセトニトリル及びB=0.1%TFA/90%アセトニトリル。精製に使用した勾配は、特に示されていない場合、12ml/分の流量による40分間の0〜30%B、次に30分間の30〜50%Bであった。画分を分析HPLCで分析し、質量分析法により調べた。90%を超える純度の画分を収集し、凍結乾燥し、保存した。60〜90%の純度の画分をまとめ、凍結乾燥し、再び精製した。
典型的には、グルカゴンCys類縁体をリン酸緩衝食塩水(5〜10mg/ml)に溶解し、0.01Mエチレンジアミン四酢酸を加える(総容量の10〜15%)。過剰(1.2〜2倍)量のマレイミドメトキシ−ポリエチレングリコール(MAL−m−dPEG)試薬を加え、反応物を室温で撹拌し、その間、HPLCで反応進行をモニタリングする。2〜12時間後、反応混合物を酸性化し、精製のため、0.1%TFA/アセトニトリル勾配を使用する分取逆相カラムに装填する。適切な画分をまとめ、凍結乾燥して、所望のペグ化誘導体を得た。
ペプチド配列TSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDT(配列番号49)を、最初に、カップリング試薬としてDIC/HOBTを使用し、0.1mmolのRink MBHAアミドを用いる0.1mmolのFmoc/HOBT/DCC化学プログラムを使用した、ABI 433A自動ペプチド合成機により固相合成した。以下のFmocアミノ酸を使用した:Ala、Arg(Pmc)、Asp(OtBu)、Asn(Trt)、Glu(O−2−PhiPr)、Gln(Trt)、Leu、Lys(Boc)、Lys(Mmt)、Met、PLA、Ser(tBu)、Thr(tBu)、Trp(Boc)、Tyr(tBu)及びVal。自動合成の後、ペプチジル樹脂を、4mlの5%DIEA/DMF中の3フェニル乳酸(83mg、0.5mmol)及びDEPBT(150mg、0.5mmol)と、約2時間手動でカップリングさせて、以下の配列を有するペプチジル樹脂を得た:HO−PLA−Thr−Ser−Asp−Tyr−Ser−Lys−Tyr−Leu−Asp−Glu−Arg−Arg−Ala−Lys−Asp−Phe−Val−Gln−Trp−Leu−Met−Asn−Thr−NH2(配列番号6)。
15mg(0.005mmol)の〔PLA6,D9,E16K20(ラクタム),C24,D28〕グルカゴン(6−29)アミド及び120mg(0.006mmol)の20K m−PEG−MAL(分子量約20K、Chirotech Technology Ltd., Cambs CB4 OWG, Germany)を、9mlの25%アセトニトリル水及び約0.5〜1mlの1Mトリス塩基緩衝液(pH8.0〜8.5に調整)に溶解した。反応物を室温で撹拌し、反応の進行を分析HPLCによりモニターした。HPLCにより初期生成物が何も検出されなかった後(2〜6時間)、反応混合物を分取HPLCにより直接精製した。画分を、214nmの分析HPLCにより調べ、また、280nmのUVで測定した。90%のHPLC純度を有し、UV測定による高吸光度(A280nm=1.0〜2.0)も有する画分をまとめ、凍結乾燥した。分析HPLCの分析が8.5〜8.6分の保持時間を示し、MALDI−MSが22K〜24Kの広域質量分析を示す、約60〜80mgの〔PLA6,D9,E16K20(ラクタム),C24(20K),D28〕グルカゴン(6−29)アミドを得た。
20mg(0.00673mmol)の〔PLA6,D9,E16K20(ラクタム),C24,D28〕グルカゴン(6−29)アミドを6mlのPBS緩衝液、0.5〜1mlの1Mトリス塩基(pH8.0〜8.5に調整)及び3mlのDMSOに溶解した。反応混合物を開放容器中で撹拌し、分析HPLCにより2時間毎にモニターした。初期生成物(HPLC RTにより7.85分)が無くなった後、そして二量体生成物(HPLC RTにより7.96分)が生成物において優勢になった後(約24時間)、混合物を0.1%TFA 10%アセトニトリル水で希釈し、分取HPLCにより直接精製した。凍結乾燥した後、ESI−MSにおいて計算分子量の5942.6に相当する5942.0を示す、約6〜10mgの〔PLA6,D9,E16K20(ラクタム),C24,D28〕グルカゴン(6−29)アミドを得た。
グルカゴン類縁体のアンタゴニスト活性
グルカゴン及び多様なグルカゴン誘導体インヒビターの受容体結合、cAMP誘導及びcAMP阻害を比較した。受容体結合、cAMP誘導及びcAMP阻害を測定するアッセイは、実質的に実施例12及び13にそれぞれ開示されているアッセイ系を使用して実施した。
上付きの数字により示されているものは、天然グルカゴンの番号付けによるアミノ酸位置である。
上付きの数字により示されているものは、天然グルカゴンの番号付けによるアミノ酸位置である。
aデータは、少なくとも3回の独立した実験の平均±STDである。
bpA2、1単位のアゴニストの反応を0.5単位のアゴニストにより得られた反応に低減する、アンタゴニスト濃度の負の対数。データは、少なくとも二重の実験の平均±STDである。
c(I/A)50、阻害指数、添加された一定のグルカゴン(0.1〜0.2nM)に対するインヒビターのIC50比。データは、少なくとも3回の独立した実験の平均であり、EC50により規準化される。
dNA、完全なアンタゴニストではない。
eND、検出されず。
上付きの数字により示されているものは、天然グルカゴンの番号付けによるアミノ酸位置である。
ここに記載されている全てのペプチドは、特に示されていない限り、C末端カルボキシレートの代わりにC末端アミドを含む。ペプチドの名称で指定されているアミノ酸位置は、天然グルカゴンの番号付けに従っている。
グルカゴン及び多様なグルカゴン誘導体インヒビターの受容体結合、cAMP誘導、及びcAMP阻害を比較した。受容体結合、cAMP誘導、及びcAMP阻害を測定するアッセイは、実質的に実施例12及び13にそれぞれ開示されているアッセイ系を使用して実施した。
ここに記載されている全てのペプチドは、特に示されていない限り、C末端カルボキシレートの代わりにC末端アミドを含む。ペプチドの名称で指定されているアミノ酸位置は、天然グルカゴンの番号付けに従っている。
ここに記載されている全てのペプチドは、特に示されていない限り、C末端カルボキシレートの代わりにC末端アミドを含む。ペプチドの名称で指定されているアミノ酸位置は、天然グルカゴンの番号付けに従っている。
ラクタム架橋デプシペプチド〔Aib2,E3,Thr5−O−PLA6,E16K20(ラクタム),D28〕G(2−29)アミドの合成
配列HO−PLA−TSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDを有するペプチジル樹脂〔PLA6,E16,K20,D28〕グルカゴン(6−29)は、0.2mmolのMBHAアミド樹脂を用い、カップリング試薬としてDEPBTを用いるABI 430A自動ペプチド合成機を使用した固相Boc化学により合成した。以下のBocアミノ酸を使用した:Ala、Arg(Tos)、Asp(OcHx)、Asn(Xan)、Glu(OcHx)、Gln(Xan)、Leu、Lys(2−Cl−Z)、Met、PLA、Ser(OBzl)、Thr(OBzl)、Trp(HOC)、Tyr(2,6−ジ−Cl−Bzl)及びVal(但し、16位のグルタミン酸は、Boc−Glu(OFm)−OHにより組み込まれ、20位のリシンは、Boc−Lys(Fmoc)−OHにより組み込まれた)。DMF中20%ピペリジンにより16及び20のFm及びFmoc保護基を除去した後、ペプチジル樹脂を10%DIEA/DMFのDEPBT 300mg(1mmol)で4時間処理して、ラクタム架橋を形成した。このラクタム架橋ペプチジル樹脂に、DCM中のBoc−Thr(OBzl)−OH(2mmol)/DIC(1mmol)/DMAP(0.2mmol)から構成される事前活性化対称無水物溶液を加え、反応を16時間進行させた。残りのアミノ酸のBoc−Gly−OH、Boc−Glu(OcHx)−OH及びBoc−Aib−OHを、ここでも標準的Boc化学によりカップリングして、以下の配列のデシペプチジル樹脂を得た:Aib−Glu−Gly−Thr−O−PLA−Thr−Ser−Asp−Tyr−Ser−Lys−Tyr−Leu−Asp−Glu*−Arg−Arg−Ala−Lys*−Asp−Phe−Val−Gln−Trp−Leu−Met−Asp−Thr−NH2(*はラクタム架橋されている)。
ここに記載されている全てのペプチドは、特に示されていない限り、C末端カルボキシレートの代わりにC末端アミドを含む。ペプチドの名称で指定されているアミノ酸位置は、天然グルカゴンの番号付けに従っている。
ここに記載されている全てのペプチドは、特に示されていない限り、C末端カルボキシレートの代わりにC末端アミドを含む。ペプチドの名称で指定されているアミノ酸位置は、天然グルカゴンの番号付けに従っている。
コレステロール結合ラクタム架橋ペプチド〔PLA6,K10(COCH2CH2S−Chol),E16K20(ラクタム),D28〕G(2−29)アミドの合成
配列HO−PLA−TSDKSKYLDERRAKDFVQWLMDTを有するペプチジル樹脂〔PLA6,K10,E16,K20,D28〕グルカゴン(6−29)は、0.2mmolのMBHAアミド樹脂を用い、結合試薬としてDEPBTを用いるABI 430A自動ペプチド合成機を使用した固相Boc化学により合成した。以下のBocアミノ酸を使用した:Ala、Arg(Tos)、Asp(OcHx)、Asn(Xan)、Glu(OcHx)、Gln(Xan)、Leu、Lys(2−Cl−Z)、Met、PLA、Ser(OBzl)、Thr(OBzl)、Trp(HOC)、Tyr(2,6−ジ−Cl−Bzl)及びVal(但し、16位のグルタミン酸は、Boc−Glu(OFm)−OHにより組み込まれ、20位のリシンは、Boc−Lys(Fmoc)−OHにより組み込まれ、10位のリシンは、Boc−Lys(Alloc)−OHにより組み込まれた)。DMF中20%ピペリジンにより16及び20位のFm及びFmoc保護基を除去した後、ペプチジル樹脂を10%DIEA/DMF中のDEPBT 300mg(1mmol)で4時間処理して、ラクタム架橋を形成した。このラクタム架橋ペプチジル樹脂を、10mLのCHCl3中の100mg(0.4当量)のPd(PPh3)4、120uLのPhSiH3、0.25mLのN−メチルモルホリン及び0.5mLの酢酸から構成される溶液によりN2雰囲気下で約3時間処理して、Alloc基を除去した。次に3−トリチルチオプロピオン酸をDEPBTとカップリングして、HO−PLA−Thr−Ser−Asp−Lys(COCH2CH2SH)−Ser−Lys−Tyr−Leu−Asp−Glu*−Arg−Arg−Ala−Lys*−Asp−Phe−Val−Gln−Trp−Leu−Met−Asp−Thr−NH2(*はラクタム架橋されている)の配列を有するペプチジル樹脂を得た。
*2つの異なるアッセイの結果が示されている。
ここに記載されている全てのペプチドは、特に示されていない限り、C末端カルボキシレートの代わりにC末端アミドを含む。ペプチドの名称で指定されているアミノ酸位置は、天然グルカゴンの番号付けに従っている。
ここに記載されている全てのペプチドは、特に示されていない限り、C末端カルボキシレートの代わりにC末端アミドを含む。ペプチドの名称で指定されているアミノ酸位置は、天然グルカゴンの番号付けに従っている。
ここに記載されている全てのペプチドは、特に示されていない限り、C末端カルボキシレートの代わりにC末端アミドを含む。ペプチドの名称で指定されているアミノ酸位置は、天然グルカゴンの番号付けに従っている。
Claims (17)
- 一般構造A−B−Cを有するペプチドであって、
Aが、下記:
(i)PLA;
(ii)PLAのオキシ誘導体;及び、
(iii)連続した2個のアミノ酸がエステル又はエーテル結合を介して結合しているアミノ酸2〜6個のペプチド;
からなる群より選択され;
Bが、配列番号1のアミノ酸p−26を表すか、または、
Bが、下記(iv)〜(x)からなる群より選択される、1つ以上のアミノ酸修飾を有する配列番号1のアミノ酸p−26を表し、
(ここでpは、3、4、5、6又は7である):
(iv)Glu、Cysのスルホン酸誘導体、ホモグルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、又は、下記構造:
を有するシステインのアルキルカルボキシレート誘導体、による、9位(配列番号1のアミノ酸番号付けによる)のAspの置換;
(v)エステル、エーテル、チオエーテル、アミド又はアルキルアミン結合を介してアシル又はアルキル基に共有結合しているアミノ酸による、10、20及び24位(配列番号1のアミノ酸番号付けによる)のうちの1又は2個のアミノ酸の置換;
(vi)Cys、Lys、オルチニン、ホモシステイン及びアセチル−フェニルアラニン(Ac−Phe)からなる群より選択されるアミノ酸による、16、17、20、21及び24位(配列番号1のアミノ酸番号付けによる)のうちの1又は2個のアミノ酸の置換(ここで前記群のアミノ酸は親水性部分に共有結合している);
(vii)システイン酸、グルタミン酸、ホモグルタミン酸、及びホモシステイン酸による15位(配列番号1の番号付けによる)のAspの置換;
(viii)システイン酸、グルタミン酸、ホモグルタミン酸及びホモシステイン酸による16位(配列番号1の番号付けによる)のSerの置換;
(ix)Glnによる17位のArgの交換、Alaによる18位のArgの交換、Gluによる21位のAspの交換、Ileによる23位のValの交換、及びAlaによる24位のGlnの交換(配列番号1のアミノ酸番号付けによる);
(x)Gluによる16位のSerの交換、Gluによる20位のGlnの交換、又はGluによる24位のGlnの交換(配列番号1のアミノ酸番号付けによる);
そして
Cが、下記(xi)〜(xiv)からなる群より選択され:
(xi)X;
(xii)X−Y;
(xiii)X−Y−Z;
(xiv)X−Y−Z−R10
(ここでXは、Met、Leu又はNleであり;Yは、Asn又は荷電アミノ酸であり;Zは、Thr、Gly、Cys、Lys、オルニチン(Orn)、ホモシステイン、アセチル−フェニルアラニン(Ac−Phe)又は荷電アミノ酸であり、R10は、配列番号21,26,27,及び50からなる群より選択される);
下記(1)及び(2)を含む:
(1)分子内架橋、アルファ,アルファ−二置換アミノ酸、若しくは16位(配列番号1の番号付けによる)の酸性アミノ酸、又はそれらの組み合わせ、及び、
(2)C末端カルボキシレートの代わりにC末端アミド又はエステル。 - 請求項1のペプチドであって、
a)前記16位の酸性アミノ酸は、側鎖スルホン酸又は側鎖カルボン酸を含むアミノ酸であり、及び/又は
b)前記PLAのオキシ誘導体は、エステル結合又はエーテル結合を介して、アミノ酸、ペプチド、親水性ポリマー、アシル基、又はアルキル基に結合しているPLAであり、及び/又は
c)前記(iii)のペプチドは、配列番号1のアミノ酸q−6を含み(ここでqは、1、2、3、4又は5である)、及び/又は
d)Bは、配列番号1のアミノ酸7−26を表し、及び/又は
e)Y又はZが荷電アミノ酸である場合、該荷電アミノ酸は、Lys、Arg、His、Asp及びGluからなる群より選択され、及び/又は
f)CがX−Y−Zを含む場合、ZのC末端に荷電アミノ酸1〜2個を更に含む、
ペプチド。 - 前記16位(配列番号1の番号付けによる)の酸性アミノ酸が、側鎖スルホン酸又は側
鎖カルボン酸を含むアミノ酸であって、
該酸性アミノ酸が、Glu、Asp、ホモグルタミン酸、Cysのスルホン酸誘導体、
システイン酸、ホモシステイン酸、Asp、又は下記構造:
る〕
を有するCysのアルキル化誘導体からなる群より選択される、請求項1または2に記載のペプチド。 - 前記PLAのオキシ誘導体が、エステル結合を介してアミノ酸又はペプチドに共有結合しているPLAを含むデプシペプチドである、請求項1記載のペプチド。
- Bが、前記(v)若しくは(vi)で示されたアミノ酸修飾、又はそれらの組み合わせを含む、請求項1〜3のいずれか1項記載のペプチド。
- (i)配列番号1のアミノ酸番号付けによる16、21又は24位のアミノ酸残基又はC末端残基に共有結合している親水性部分及び/又はと、
(ii)エステル、エーテル、チオエーテル、アミド又はアルキルアミン結合を介して、アシル基又はアルキル基に共有結合したアミノ酸、を含み、
該アミノ酸が、10、20若しくは24位(配列番号1のアミノ酸番号付けによる)にあるアミノ酸であるか、又はN若しくはC末端の残基である、
請求項1〜4のいずれか1項記載のペプチド。 - 前記分子内架橋が、ラクタム架橋である、請求項1〜6のいずれか1項記載のペプチド。
- 前記ラクタム架橋は、9位と12位の2つのアミノ酸、12位と16位の2つのアミノ酸、16位と20位の2つのアミノ酸、20位と24位の2つのアミノ酸、または24位と28位の2つのアミノ酸(配列番号1のアミノ酸番号付けによる)の間にある、請求項7記載のペプチド。
- 16、20、21、又は24位(配列番号1のアミノ酸番号付けによる)にαイソブチル酸(AIB)を含む、請求項1〜8のいずれか1項記載のペプチド。
- 配列番号60〜70、73〜78、80〜88,90〜96,103,104,106及び114〜118のいずれかのアミノ酸配列を含むか、又は、表13に記載のペプチド2〜6、表14に記載のペプチド1〜8、及び表15に記載のペプチド2〜6,8,及び9のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項1〜9のいずれか1項記載のペプチド。
- GLP−1受容体に対して天然GLP−1により達成される最大アゴニスト作用の少なくとも50%を示し、グルカゴン受容体に対して天然グルカゴンにより達成される最大反応の少なくとも50%の阻害を示す、請求項1〜10のいずれか1項記載のペプチド。
- Aが、PLAである、請求項1〜11のいずれか1項記載のペプチド。
- 配列番号51の配列を含む、グルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニストであって、ここで、配列番号51の4位と7位、7位と11位、11位と15位、15位と19位、又は、19位と23位の2つのアミノ酸同士が、ラクタム架橋を介して結合している、
グルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニスト。 - a)当該グルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニストのアミノ酸24に結合した配列番号21又は配列番号50の配列、及び/又は
b)配列番号51の16又は19位のアミノ酸残基に共有結合している親水性部分と、当該グルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニストの薬学的に許容される塩、及び/又は
c)天然のC末端アミノ酸のカルボン酸基の代わりのアミド基と、及び/又は
d)配列番号5〜9,配列番号12〜14,及び配列番号22〜25からなる群から選択されたアミノ酸配列、または配列番号16−19,32,33,35,36,45−48,60,62,64,74−79,89,91−93,95,115−118からなる群から選択されたアミノ酸配列、または配列番号2,10,11,15,20,34,38,39,61,72,94,99,105,110からなる群から選択されたアミノ酸配列、または配列番号66,70,86,87,112,113からなる群から選択されたアミノ酸配列、
を含む請求項13のグルカゴンアンタゴニスト/GLP−1アゴニスト。 - 請求項1〜12のいずれか1項記載のペプチドを含む、多量体又は二量体、あるいは、
請求項1〜12のいずれか1項記載のペプチドと、異種ペプチド又はポリペプチドとを含む、結合体。 - 請求項1〜12のいずれか1項記載のペプチド、請求項15記載の多量体若しくは二量体若しくは結合体、又はこれらの組み合わせと、薬学的に許容される担体とを含む、滅菌された医薬組成物。
- 患者における、高血糖症若しくは糖尿病の治療、食欲の抑制、体重増加の低減、又は減量の誘導に使用するための組成物であって、請求項1〜12のいずれか1項に記載のペプチド、請求項15に記載の多量体若しくは二量体若しくは結合体、又はそれらの組み合わせと、薬学的に許容される担体とを含む、組成物。
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BR112012028707A2 (pt) * | 2010-05-13 | 2019-09-24 | Univ Indiana Res & Tech Corp | composto de glucagon da superfamília de peptídeos exibindo atividade do receptor g com proteína acoplada, pró farmaco, dímero ou multímro, composição farmacêutica que o compreendem e método de administração do mesmo. |
US8530413B2 (en) | 2010-06-21 | 2013-09-10 | Sanofi | Heterocyclically substituted methoxyphenyl derivatives with an oxo group, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments |
KR20130102470A (ko) | 2010-06-24 | 2013-09-17 | 인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코퍼레이션 | 아미드계 글루카곤 슈퍼패밀리 펩티드 프로드러그 |
TW201215388A (en) | 2010-07-05 | 2012-04-16 | Sanofi Sa | (2-aryloxyacetylamino)phenylpropionic acid derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments |
TW201221505A (en) | 2010-07-05 | 2012-06-01 | Sanofi Sa | Aryloxyalkylene-substituted hydroxyphenylhexynoic acids, process for preparation thereof and use thereof as a medicament |
TW201215387A (en) | 2010-07-05 | 2012-04-16 | Sanofi Aventis | Spirocyclically substituted 1,3-propane dioxide derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as a medicament |
WO2012059764A1 (en) | 2010-11-03 | 2012-05-10 | Arecor Limited | Novel composition comprising glucagon |
EA201390941A1 (ru) | 2010-12-22 | 2013-12-30 | Индиана Юниверсити Рисерч Энд Текнолоджи Корпорейшн | Аналоги глюкагона, проявляющие активность на рецепторе gip |
US9790262B2 (en) | 2011-04-05 | 2017-10-17 | Longevity Biotech, Inc. | Compositions comprising glucagon analogs and methods of making and using the same |
DK3434687T3 (da) | 2011-06-10 | 2021-06-07 | Hanmi Science Co Ltd | Hidtil ukendte oxyntomodulinderivater og farmaceutisk præparat til behandling af fedme omfattende samme |
PE20181268A1 (es) | 2011-06-17 | 2018-08-03 | Hanmi Science Co Ltd | Un conjugado que comprende oxintomodulina y un fragmento de inmunoglobulina, y el uso del mismo |
GEP20176629B (en) | 2011-06-22 | 2017-02-27 | Indiana Unversity Research And Tech Corporation | Glucagon/glp-1 receptor co-agonists |
US9309301B2 (en) | 2011-06-22 | 2016-04-12 | Indiana University Research And Technology Corporation | Glucagon/GLP-1 receptor co-agonists |
WO2013004983A1 (en) | 2011-07-04 | 2013-01-10 | Imperial Innovations Limited | Novel compounds and their effects on feeding behaviour |
EP2567959B1 (en) | 2011-09-12 | 2014-04-16 | Sanofi | 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors |
WO2013037390A1 (en) | 2011-09-12 | 2013-03-21 | Sanofi | 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors |
WO2013045413A1 (en) | 2011-09-27 | 2013-04-04 | Sanofi | 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-alkyl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors |
CA2847246A1 (en) * | 2011-11-17 | 2013-05-23 | Indiana University Research And Technology Corporation | Glucagon superfamily peptides exhibiting glucocorticoid receptor activity |
JP6300735B2 (ja) | 2012-03-01 | 2018-03-28 | ノヴォ ノルディスク アー/エス | Glp−1プロドラッグ |
CN104302772B (zh) | 2012-05-18 | 2017-11-10 | 爱德迪安(北京)生物技术有限公司 | 用于糖尿病治疗的蛋白、蛋白缀合物及其应用 |
MX2014015558A (es) | 2012-06-21 | 2015-03-05 | Univ Indiana Res & Tech Corp | Analogos de glucagon que exhiben actividad del receptor gip. |
KR101968344B1 (ko) | 2012-07-25 | 2019-04-12 | 한미약품 주식회사 | 옥신토모듈린 유도체를 포함하는 고지혈증 치료용 조성물 |
AR092873A1 (es) | 2012-09-26 | 2015-05-06 | Cadila Healthcare Ltd | Peptidos como agonistas triples de los receptores de gip, glp-1 y glugagon |
UA116217C2 (uk) | 2012-10-09 | 2018-02-26 | Санофі | Пептидна сполука як подвійний агоніст рецепторів glp1-1 та глюкагону |
EP2911655A1 (en) | 2012-10-24 | 2015-09-02 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Tpl2 kinase inhibitors for preventing or treating diabetes and for promoting -cell survival |
PH12018501454A1 (en) | 2012-11-06 | 2020-02-17 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Liquid formulation of protein conjugate comprising the oxyntomodulin and an immunoglubin fragment |
KR101993393B1 (ko) | 2012-11-06 | 2019-10-01 | 한미약품 주식회사 | 옥신토모듈린 유도체를 포함하는 당뇨병 또는 비만성 당뇨병 치료용 조성물 |
TWI674270B (zh) * | 2012-12-11 | 2019-10-11 | 英商梅迪繆思有限公司 | 用於治療肥胖之升糖素與glp-1共促效劑 |
UA116553C2 (uk) | 2012-12-21 | 2018-04-10 | Санофі | Пептидна сполука - агоніст рецептора glp-1 i glp |
BR112015023071A2 (pt) | 2013-03-14 | 2017-07-18 | Univ Indiana Res & Tech Corp | conjugados de insulina-incretina |
CN105934257B (zh) | 2013-12-06 | 2020-10-09 | 韩捷 | 用于含氮和羟基的药物的生物可逆引入基团 |
TW201609799A (zh) | 2013-12-13 | 2016-03-16 | 賽諾菲公司 | 雙重glp-1/gip受體促效劑 |
TW201609795A (zh) | 2013-12-13 | 2016-03-16 | 賽諾菲公司 | 作為雙重glp-1/gip受體促效劑的艾塞那肽-4(exendin-4)胜肽類似物 |
TW201609797A (zh) | 2013-12-13 | 2016-03-16 | 賽諾菲公司 | 雙重glp-1/升糖素受體促效劑 |
WO2015086730A1 (en) | 2013-12-13 | 2015-06-18 | Sanofi | Non-acylated exendin-4 peptide analogues |
TW201625668A (zh) | 2014-04-07 | 2016-07-16 | 賽諾菲公司 | 作為胜肽性雙重glp-1/昇糖素受體激動劑之艾塞那肽-4衍生物 |
TW201625669A (zh) | 2014-04-07 | 2016-07-16 | 賽諾菲公司 | 衍生自艾塞那肽-4(Exendin-4)之肽類雙重GLP-1/升糖素受體促效劑 |
TW201625670A (zh) | 2014-04-07 | 2016-07-16 | 賽諾菲公司 | 衍生自exendin-4之雙重glp-1/升糖素受體促效劑 |
US9932381B2 (en) | 2014-06-18 | 2018-04-03 | Sanofi | Exendin-4 derivatives as selective glucagon receptor agonists |
TWI772252B (zh) | 2014-09-16 | 2022-08-01 | 南韓商韓美藥品股份有限公司 | 長效glp-1/高血糖素受體雙促效劑治療非酒精性脂肝疾病之用途 |
CN108271356A (zh) | 2014-09-24 | 2018-07-10 | 印第安纳大学研究及科技有限公司 | 肠降血糖素-胰岛素缀合物 |
MA55068A (fr) | 2014-10-24 | 2022-01-05 | Merck Sharp & Dohme | Co-agonistes des récepteurs du glucagon et du glp-1 |
KR102418477B1 (ko) | 2014-12-30 | 2022-07-08 | 한미약품 주식회사 | 글루카곤 유도체 |
CN110204617B (zh) * | 2014-12-31 | 2023-06-16 | 天境生物科技(上海)有限公司 | 含胰高血糖素样肽-1和免疫球蛋白杂合Fc的融合多肽及其用途 |
WO2016151018A1 (en) | 2015-03-24 | 2016-09-29 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Method and pharmaceutical composition for use in the treatment of diabetes |
AR105319A1 (es) | 2015-06-05 | 2017-09-27 | Sanofi Sa | Profármacos que comprenden un conjugado agonista dual de glp-1 / glucagón conector ácido hialurónico |
AR105284A1 (es) | 2015-07-10 | 2017-09-20 | Sanofi Sa | Derivados de exendina-4 como agonistas peptídicos duales específicos de los receptores de glp-1 / glucagón |
US10800826B2 (en) | 2015-10-05 | 2020-10-13 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Antibody peptide conjugates that have agonist activity at both the glucagon and glucagon-like peptide 1 receptors |
US11510993B2 (en) | 2015-10-06 | 2022-11-29 | Merck Sharp & Dohme Llc | Antibody drug conjugate for anti-inflammatory applications |
EP3407916B1 (en) | 2016-01-29 | 2023-12-20 | Merck Sharp & Dohme LLC | Phosphonate linkers and their use to facilitate cellular retention of compounds |
EP3463424A1 (en) * | 2016-06-02 | 2019-04-10 | Indiana University Research & Technology Corporation | Glucagon-like peptide-1-t3 conjugates |
WO2017210168A1 (en) * | 2016-06-02 | 2017-12-07 | Indiana University Research And Technology Corporation | Aqueously soluble and chemically stable depsi glucagon agonists |
GB201611077D0 (en) | 2016-06-24 | 2016-08-10 | Arecor Ltd | Novel composition |
US11739118B2 (en) | 2017-02-15 | 2023-08-29 | Bioprocessia Technologies Llc | Affinity chromatography ligands with mild elution pH |
WO2018213151A1 (en) | 2017-05-18 | 2018-11-22 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Pharmaceutical formulation comprising incretin-insulin conjugates |
CN109836503B (zh) * | 2017-11-24 | 2022-09-16 | 浙江道尔生物科技有限公司 | 一种治疗代谢疾病的多重活性蛋白 |
PL3774862T3 (pl) | 2018-04-05 | 2022-10-03 | Sun Pharmaceutical Industries Limited | Nowe analogi glp-1 |
CN111269321B (zh) * | 2018-12-04 | 2023-05-12 | 鲁南制药集团股份有限公司 | 一种glp-1类似物融合蛋白质 |
WO2022087749A1 (en) * | 2020-10-30 | 2022-05-05 | Duncan Robin Elaine | Modulation of glucagon-like peptide 1 and uses thereof |
Family Cites Families (125)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4275152A (en) * | 1977-02-03 | 1981-06-23 | Eastman Kodak Company | Hydrolysis of protein-bound cholesterol esters |
PT83613B (en) | 1985-10-28 | 1988-11-21 | Lilly Co Eli | Process for the selective chemical removal of a protein amino-terminal residue |
WO1987005330A1 (en) | 1986-03-07 | 1987-09-11 | Michel Louis Eugene Bergh | Method for enhancing glycoprotein stability |
US5539084A (en) * | 1989-02-17 | 1996-07-23 | Coselco Mimotopes Pty. Ltd. | Method for the use and synthesis of peptides |
DE69129226T2 (de) | 1990-01-24 | 1998-07-30 | Douglas I Buckley | Glp-1-analoga verwendbar in der diabetesbehandlung |
US5545618A (en) * | 1990-01-24 | 1996-08-13 | Buckley; Douglas I. | GLP-1 analogs useful for diabetes treatment |
CA2024855C (en) | 1990-09-07 | 1997-12-09 | Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd./ Boehringer Ingelheim (Canada) Ltee | Process and intermediates for producing glucagon |
JPH04145099A (ja) | 1990-10-05 | 1992-05-19 | Sanwa Kagaku Kenkyusho Co Ltd | Gip様活性を有するポリペプチド誘導体及びその用途 |
US5510459A (en) * | 1991-01-17 | 1996-04-23 | Zymogenetics, Inc. | Glucagon antagonists |
US5359030A (en) * | 1993-05-10 | 1994-10-25 | Protein Delivery, Inc. | Conjugation-stabilized polypeptide compositions, therapeutic delivery and diagnostic formulations comprising same, and method of making and using the same |
US5480867A (en) * | 1993-12-29 | 1996-01-02 | The Rockefeller University | Glucagon analogs with serine replacements |
US5512549A (en) | 1994-10-18 | 1996-04-30 | Eli Lilly And Company | Glucagon-like insulinotropic peptide analogs, compositions, and methods of use |
US5691309A (en) | 1995-01-31 | 1997-11-25 | Eli Lilly And Company | Anti-obesity proteins |
US5869602A (en) | 1995-03-17 | 1999-02-09 | Novo Nordisk A/S | Peptide derivatives |
DE19530865A1 (de) | 1995-08-22 | 1997-02-27 | Michael Dr Med Nauck | Wirkstoff sowie Mittel zur parenteralen Ernährung |
CA2208215A1 (en) | 1995-10-12 | 1997-04-17 | Supergen, Inc. | Liposome formulations of 5.beta. steroids |
CA2243718A1 (en) | 1996-02-06 | 1997-08-14 | Eli Lilly And Company | Diabetes therapy |
AU723694B2 (en) | 1996-06-05 | 2000-08-31 | Roche Diagnostics Gmbh | Exendin analogues, processes for their preparation and medicaments containing them |
NZ334595A (en) | 1996-09-09 | 2000-08-25 | Zealand Pharmaceuticals As | Peptide prodrugs containing an alpha-hydroxyacid linker that have increased stability against enzymatic cleavage |
UA65549C2 (uk) * | 1996-11-05 | 2004-04-15 | Елі Ліллі Енд Компані | Спосіб регулювання ожиріння шляхом периферійного введення аналогів та похідних glp-1 (варіанти) та фармацевтична композиція |
WO1998024464A1 (en) | 1996-12-03 | 1998-06-11 | Trustees Of Boston University | Specific antagonists for glucose-dependent insulinotropic polypeptide (gip) |
EP1950223A3 (en) | 1998-03-09 | 2009-05-13 | Zealand Pharma A/S | Pharmacologically active peptide conjugates having a reduced tendency towards enzymatic hydrolysis |
DE19828113A1 (de) * | 1998-06-24 | 2000-01-05 | Probiodrug Ges Fuer Arzneim | Prodrugs von Inhibitoren der Dipeptidyl Peptidase IV |
US20030236190A1 (en) * | 1998-09-02 | 2003-12-25 | Renuka Pillutla | Isulin and IGF-1 receptor agonists and antagonists |
DE69926007T2 (de) | 1998-10-07 | 2005-12-29 | Medical College Of Georgia Research Institute, Inc. | Glukose-abhängiges, insulinotropisches peptid für die verwendung als osteotropes hormon |
KR20050037004A (ko) | 1998-12-07 | 2005-04-20 | 소시에떼 더 콘세이유 더 레세르세 에 다플리까띠옹 시엔띠피끄, 에스.아.에스. | Glp-1의 유사체 |
WO2000042026A1 (en) | 1999-01-15 | 2000-07-20 | Novo Nordisk A/S | Non-peptide glp-1 agonists |
GB0404124D0 (en) | 2004-02-25 | 2004-03-31 | Univ Ulster | Antagonists of GIP |
DE60012721D1 (de) * | 1999-03-29 | 2004-09-09 | Uutech Ltd | Analoge des magensaft inhibierenden peptides und ihre verwendung für die behandlung von diabetes |
US7601691B2 (en) | 1999-05-17 | 2009-10-13 | Conjuchem Biotechnologies Inc. | Anti-obesity agents |
AU2001257278A1 (en) | 2000-04-27 | 2001-11-07 | Bionebraska, Inc. | Gastric inhibitory polypeptide diagnostic test for detecting susceptibility to type-2 diabetes, impaired glucose tolerance, or impaired fasting glucose |
US6677136B2 (en) * | 2000-05-03 | 2004-01-13 | Amgen Inc. | Glucagon antagonists |
WO2001096368A2 (en) * | 2000-06-14 | 2001-12-20 | Cytovax Biotechnologies, Inc. | Use of coiled-coil structural scaffold to generate structure-specific peptides |
AU6479101A (en) | 2000-06-16 | 2002-01-02 | Lilly Co Eli | Glucagon-like peptide-1 analogs |
CN1454214A (zh) | 2000-08-02 | 2003-11-05 | 赛莱技术公司 | 具有增高功效的修饰生物肽 |
US20020045572A1 (en) | 2000-08-15 | 2002-04-18 | Cpd, Llc | Method of treating the syndrome of type 2 diabetes in humans |
US6846831B2 (en) | 2000-08-15 | 2005-01-25 | Cpd, Llc | Method of treating the syndrome of lipodystrophy |
US6262062B1 (en) | 2000-08-15 | 2001-07-17 | Cpd, Llc | Method of treating the syndrome of coronary heart disease risk factors in humans |
US6528520B2 (en) | 2000-08-15 | 2003-03-04 | Cpd, Llc | Method of treating the syndrome of coronary heart disease risk factors in humans |
ES2367891T3 (es) * | 2000-09-29 | 2011-11-10 | Schering Corporation | Interleucina-10 pegilada. |
WO2002048192A2 (en) | 2000-12-13 | 2002-06-20 | Eli Lilly And Company | Amidated glucagon-like peptide-1 |
AU2002317599B2 (en) | 2001-07-31 | 2008-04-03 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | GLP-1 exendin-4 peptide analogs and uses thereof |
WO2003014318A2 (en) * | 2001-08-08 | 2003-02-20 | Genzyme Corporation | Methods for treating diabetes and other blood sugar disorders |
EP1432430A4 (en) * | 2001-08-28 | 2006-05-10 | Lilly Co Eli | PREMIXTURES OF GLP-1 AND BASALINSULIN |
GB0121709D0 (en) | 2001-09-07 | 2001-10-31 | Imp College Innovations Ltd | Food inhibition agent |
AR036711A1 (es) * | 2001-10-05 | 2004-09-29 | Bayer Corp | Peptidos que actuan como agonistas del receptor del glp-1 y como antagonistas del receptor del glucagon y sus metodos de uso farmacologico |
US7041646B2 (en) * | 2001-10-05 | 2006-05-09 | Bayer Pharmaceuticals Corporation | Methods of treating type 2 diabetes with peptides acting as both GLP-1 receptor agonists and glucagon receptor antagonists |
NZ531788A (en) * | 2001-10-18 | 2008-01-31 | Bristol Myers Squibb Co | Human glucagon-like-peptide-1 mimics and their use in the treatment of diabetes and related conditions |
EP1448222A4 (en) | 2001-10-19 | 2006-05-17 | Lilly Co Eli | BIPHASIC MIXTURES OF GLP-1 AND INSULIN |
JP2005518408A (ja) * | 2001-12-29 | 2005-06-23 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | 異常脂肪血症を治療するための、glp−1化合物と他の薬物との組み合わせ使用 |
CA2468700A1 (en) | 2002-01-08 | 2003-07-17 | Eli Lilly And Company | Extended glucagon-like peptide-1 analogs |
US20030232761A1 (en) | 2002-03-28 | 2003-12-18 | Hinke Simon A. | Novel analogues of glucose-dependent insulinotropic polypeptide |
US20060252916A1 (en) * | 2002-06-04 | 2006-11-09 | Eli Lilly And Company | Modified glucagon-like peptide-1 analogs |
WO2003103697A2 (en) | 2002-06-11 | 2003-12-18 | Cell Therapeutics Scandinavia Ab | Use of compounds having gip activity for the treatment of disorders associated with abnormal loss of cells and/or for the treatment of obesity |
AU2003248676A1 (en) | 2002-06-15 | 2003-12-31 | Enteromed, Inc. | Treatment of non-alcoholic fatty liver disease |
JP2006501820A (ja) | 2002-09-06 | 2006-01-19 | バイエル・フアーマシユーチカルズ・コーポレーシヨン | 修飾glp−1受容体アゴニストおよびそれらの薬理学的使用法 |
US7192922B2 (en) * | 2002-11-19 | 2007-03-20 | Allegheny-Singer Research Institute | Method of treating left ventricular dysfunction |
JP2006524039A (ja) | 2003-01-09 | 2006-10-26 | マクロジェニクス,インコーポレーテッド | 変異型Fc領域を含む抗体の同定および作製ならびにその利用法 |
WO2004067548A2 (en) * | 2003-01-31 | 2004-08-12 | Theratechnologies Inc. | Chemically modified metabolites of regulatory peptides and methods of producing and using same |
WO2004078777A2 (en) | 2003-03-04 | 2004-09-16 | Biorexis Pharmaceutical Corporation | Dipeptidyl-peptidase protected proteins |
CN1832959A (zh) * | 2003-03-19 | 2006-09-13 | 伊莱利利公司 | 聚乙二醇连接的glp-1化合物 |
JP4698579B2 (ja) * | 2003-04-08 | 2011-06-08 | イエダ リサーチ アンド デベロップメント カンパニー リミテッド | 可逆的peg化薬物 |
TWI353991B (en) | 2003-05-06 | 2011-12-11 | Syntonix Pharmaceuticals Inc | Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids |
US7259234B2 (en) | 2003-05-15 | 2007-08-21 | Trustees Of Tufts College | Stable analogs of peptide and polypeptide therapeutics |
PL1633391T3 (pl) | 2003-06-03 | 2012-03-30 | Novo Nordisk As | Stabilizowane farmaceutycznie kompozycje peptydowe |
PL1633390T3 (pl) | 2003-06-03 | 2012-06-29 | Novo Nordisk As | Stabilizowane kompozycje farmaceutyczne peptydu glp-1 |
KR100758755B1 (ko) * | 2003-06-12 | 2007-09-14 | 일라이 릴리 앤드 캄파니 | Glp-1 유사체 융합 단백질 |
US20050124550A1 (en) * | 2003-06-18 | 2005-06-09 | Peri Krishna G. | Compounds that modulate the glucagon response and uses thereof |
CA2539253A1 (en) * | 2003-09-19 | 2005-03-31 | Novo Nordisk A/S | Albumin-binding derivatives of therapeutic peptides |
US7364875B2 (en) * | 2003-10-30 | 2008-04-29 | Cresent Innovations, Inc. | Method for producing medical and commercial grade poly-gamma-glutamic acid of high molecular weight |
DE602004026113D1 (de) * | 2003-12-18 | 2010-04-29 | Novo Nordisk As | Glp-1-verbindungen |
US20060286129A1 (en) * | 2003-12-19 | 2006-12-21 | Emisphere Technologies, Inc. | Oral GLP-1 formulations |
US20080318837A1 (en) * | 2003-12-26 | 2008-12-25 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Pharmaceutical Formation For Increased Epithelial Permeability of Glucose-Regulating Peptide |
US7442682B2 (en) * | 2004-10-19 | 2008-10-28 | Nitto Denko Corporation | Transepithelial delivery of peptides with incretin hormone activities |
US8263545B2 (en) * | 2005-02-11 | 2012-09-11 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | GIP analog and hybrid polypeptides with selectable properties |
EP1853627A2 (en) * | 2005-02-11 | 2007-11-14 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Gip analog and hybrid polypeptides with selectable properties |
WO2006097536A2 (en) * | 2005-03-18 | 2006-09-21 | Novo Nordisk A/S | Dimeric peptide agonists of the glp-1 receptor |
WO2006121904A1 (en) | 2005-05-06 | 2006-11-16 | Bayer Pharmaceuticals Corporation | Glucose-dependent insulinotropic polypeptide (gip) receptor agonists and their pharmacological methods of use |
WO2006124529A1 (en) | 2005-05-13 | 2006-11-23 | Eli Lilly And Company | Glp-1 pegylated compounds |
AU2006258841B2 (en) | 2005-06-13 | 2012-05-03 | Imperial Innovations Limited | Oxyntomodulin analogues and their effects on feeding behaviour |
CA2617649A1 (en) | 2005-08-11 | 2007-02-22 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Hybrid polypeptides with selectable properties |
EP1943274A2 (en) | 2005-09-08 | 2008-07-16 | Uutech Limited | Treatment of diabetes related obesity |
US20090286722A1 (en) | 2005-09-08 | 2009-11-19 | Utech Limited | Analogs of Gastric Inhibitory Polypeptide as a Treatment for Age Related Decreased Pancreatic Beta Cell Function |
WO2007056362A2 (en) * | 2005-11-07 | 2007-05-18 | Indiana University Research And Technology Corporation | Glucagon analogs exhibiting physiological solubility and stability |
EP1991574B1 (en) | 2006-02-22 | 2016-10-12 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Oxyntomodulin derivatives |
CA2638733A1 (en) * | 2006-02-28 | 2007-09-07 | Eli Lilly And Company | Selective vpac2 receptor peptide agonists |
EP1996224B1 (en) * | 2006-03-15 | 2012-11-07 | Novo Nordisk A/S | Mixtures of amylin and insulin |
WO2007109354A2 (en) | 2006-03-21 | 2007-09-27 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Peptide-peptidase inhibitor conjugates and methods of using same |
EP2573111A1 (en) | 2006-04-20 | 2013-03-27 | Amgen Inc. | GLP-1 compounds |
WO2008022015A2 (en) | 2006-08-11 | 2008-02-21 | Trustees Of Tufts College | Retro-inverso incretin analogues, and methods of use thereof |
WO2008021560A2 (en) | 2006-08-17 | 2008-02-21 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Dpp-iv resistant gip hybrid polypeptides with selectable properties |
WO2008023050A1 (en) | 2006-08-25 | 2008-02-28 | Novo Nordisk A/S | Acylated exendin-4 compounds |
CN104193815A (zh) * | 2006-09-08 | 2014-12-10 | Ambrx公司 | 经修饰的人类血浆多肽或Fc骨架和其用途 |
WO2008076933A2 (en) | 2006-12-14 | 2008-06-26 | Bolder Biotechnology, Inc. | Long acting proteins and peptides and methods of making and using the same |
WO2008086086A2 (en) | 2007-01-05 | 2008-07-17 | Indiana University Research And Technology Corporation | Glucagon analogs exhibiting enhanced solubility in physiological ph buffers |
EA017849B1 (ru) * | 2007-02-15 | 2013-03-29 | Индиана Юниверсити Рисерч Энд Текнолоджи Корпорейшн | Соагонисты глюкагоновых/glp-1-рецепторов |
JP5385266B2 (ja) * | 2007-06-15 | 2014-01-08 | ジーランド ファーマ アクティーゼルスカブ | グルカゴン類似体 |
US7859468B2 (en) * | 2007-08-30 | 2010-12-28 | Research In Motion Limited | Mobile wireless communications device including a folded monopole multi-band antenna and related methods |
WO2009030738A1 (en) | 2007-09-05 | 2009-03-12 | Novo Nordisk A/S | Glucagon-like peptide-1 derivatives and their pharmaceutical use |
CN101842386A (zh) | 2007-09-05 | 2010-09-22 | 诺沃-诺迪斯克有限公司 | 截短的glp-1衍生物和它们的治疗用途 |
US20100256056A1 (en) | 2007-09-07 | 2010-10-07 | Zheng Xin Dong | Analogues of exendin-4 and exendin-3 |
EP2036539A1 (en) | 2007-09-11 | 2009-03-18 | Novo Nordisk A/S | Stable formulations of amylin and its analogues |
EP2036923A1 (en) | 2007-09-11 | 2009-03-18 | Novo Nordisk A/S | Improved derivates of amylin |
US20100222251A1 (en) | 2007-09-11 | 2010-09-02 | Novo Nordisk A/S | Mixture comprising an amylin peptide and a protracted insulin |
ES2509883T3 (es) | 2007-10-30 | 2014-10-20 | Indiana University Research And Technology Corporation | Antagonistas de glucagón |
EP2214691B1 (en) | 2007-10-30 | 2015-09-30 | Indiana University Research and Technology Corporation | Compounds exhibiting glucagon antagonist and glp-1 agonist activity |
JP2011503000A (ja) | 2007-11-02 | 2011-01-27 | セントコア・オーソ・バイオテツク・インコーポレーテツド | 半合成GLP−1ペプチド−Fc融合コンストラクト、その方法及び使用 |
JP2011511778A (ja) | 2008-01-30 | 2011-04-14 | インディアナ ユニバーシティー リサーチ アンド テクノロジー コーポレーション | エステルに基づいたペプチドプロドラッグ |
PL2237799T3 (pl) | 2008-02-01 | 2019-09-30 | Ascendis Pharma A/S | Prolek zawierający samorozszczepiający się łącznik |
JP5753779B2 (ja) * | 2008-06-17 | 2015-07-22 | インディアナ ユニバーシティー リサーチ アンド テクノロジー コーポレーションIndiana University Research And Technology Corporation | 生理学的pHの緩衝液中で向上した溶解性及び安定性を示すグルカゴン類縁体 |
ES2579502T3 (es) * | 2008-06-17 | 2016-08-11 | Indiana University Research And Technology Corporation | Coagonistas de receptores de glucagón/GLP-1 |
ES2650038T3 (es) | 2008-06-17 | 2018-01-16 | Indiana University Research And Technology Corporation | Agonistas mixtos a base de GIP para el tratamiento de trastornos metabólicos y obesidad |
KR20110114568A (ko) | 2008-12-19 | 2011-10-19 | 인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코퍼레이션 | 디펩티드 링크된 약효 물질 |
SG172291A1 (en) * | 2008-12-19 | 2011-07-28 | Univ Indiana Res & Tech Corp | Amide based glucagon superfamily peptide prodrugs |
WO2010096052A1 (en) | 2009-02-19 | 2010-08-26 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Oxyntomodulin analogs |
JP5887265B2 (ja) | 2009-06-16 | 2016-03-16 | インディアナ・ユニバーシティ・リサーチ・アンド・テクノロジー・コーポレーション | Gip受容体活性グルカゴン化合物 |
EP2512503A4 (en) | 2009-12-18 | 2013-08-21 | Univ Indiana Res & Tech Corp | COAGONISTS OF GLUCAGON / GLP-1 RECEPTOR |
AR079344A1 (es) | 2009-12-22 | 2012-01-18 | Lilly Co Eli | Analogo peptidico de oxintomodulina, composicion farmaceutica que lo comprende y uso para preparar un medicamento util para tratar diabetes no insulinodependiente y/u obesidad |
AR079345A1 (es) | 2009-12-22 | 2012-01-18 | Lilly Co Eli | Analogo peptidico de oxintomodulina |
RU2012136450A (ru) | 2010-01-27 | 2014-03-10 | Индиана Юниверсити Рисерч Энд Текнолоджи Корпорейшн | Конъюгаты антагонист глюкагона - агонист gip и композиции для лечения метаболических расстройств и ожирения |
AR080592A1 (es) | 2010-03-26 | 2012-04-18 | Lilly Co Eli | Peptido con actividad para el gip-r y glp-1-r, formulacion famaceutica que lo comprende, su uso para preparar un medicamento util para el tratamiento de diabetes mellitus y para inducir la perdida de peso |
BR112012028707A2 (pt) | 2010-05-13 | 2019-09-24 | Univ Indiana Res & Tech Corp | composto de glucagon da superfamília de peptídeos exibindo atividade do receptor g com proteína acoplada, pró farmaco, dímero ou multímro, composição farmacêutica que o compreendem e método de administração do mesmo. |
CA2797095A1 (en) | 2010-05-13 | 2011-11-17 | Indiana University Research And Technology Corporation | Glucagon superfamily peptides exhibiting nuclear hormone receptor activity |
KR20130102470A (ko) | 2010-06-24 | 2013-09-17 | 인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코퍼레이션 | 아미드계 글루카곤 슈퍼패밀리 펩티드 프로드러그 |
WO2011163473A1 (en) | 2010-06-25 | 2011-12-29 | Indiana University Research And Technology Corporation | Glucagon analogs exhibiting enhanced solubility and stability in physiological ph buffers |
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