EA032775B1

EA032775B1 - Способы лечения злокачественной опухоли с использованием комбинированной терапии с коферментом q10

Info

Publication number: EA032775B1
Application number: EA201591924A
Authority: EA
Inventors: Нивен Раджин Нараин; Рангапрасад Сарангараджан
Original assignee: Берг Ллк
Priority date: 2013-04-08
Filing date: 2014-04-08
Publication date: 2019-07-31
Also published as: NZ713868A; EP2983654A4; AU2014251045A1; BR112015025424A2; JP6731336B2; US10933032B2; IL271495A; AU2014251045B2; EP2983654A1; JP6974369B2; US20140302014A1; JP2016519103A; JP2019089791A; MX2015014097A; KR20150142002A; MX2020012924A; AU2014251045A9; CA2909094C; CN113797343A; WO2014168993A1

Abstract

Предложены способы лечения онкологического заболевания у субъекта. Первый вариант способа включает (a) введение кофермента Q10 (CoQ10) субъекту; (b) прекращение введения кофермента Q10 и (c) введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту после прекращения введения CoQ10, где кофермент Q10 вводят путем непрерывной внутривенной инфузии в течение по меньшей мере 24 ч. Второй вариант способа включает (a) введение кофермента Q10 (CoQ10) субъекту; (b) введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту после начала введения CoQ10 и (c) продолжение лечения CoQ10 после начала введения по меньшей мере одного химиотерапевтического средства, где кофермент Q10 вводят путем непрерывной внутривенной инфузии в течение по меньшей мере 24 ч. Третий вариант способа включает (a) введение кофермента Q10 (CoQ10) субъекту и (b) введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту в дозе, которая ниже, чем стандартные дозы химиотерапевтического средства, используемые для лечения онкологического заболевания, где кофермент Q10 вводят путем непрерывной внутривенной инфузии в течение по меньшей мере 24 ч.

Description

Родственные заявки

По заявке на настоящий патент испрашивается приоритет в соответствии с предварительной заявкой на патент США № 61/809840, поданной 8 апреля 2013 г., содержание которой полностью включено в настоящий документ.

Область техники

Настоящее изобретение в целом относится к способам лечения онкологических заболеваний, включающим введение кофермента Q10 (CoQlO) и химиотерапевтического средства.

Уровень техники

Злокачественная опухоль в настоящее время представляет собой одну из ведущих причин смерти в развитых странах. Диагноз злокачественной опухоли традиционно включает в себя серьезные осложнения здоровья. Злокачественная опухоль может вызывать уродство, хроническую или острую боль, повреждения, органную недостаточность и даже смерть. Обычно диагностированные злокачественные опухоли включают в себя злокачественную опухоль поджелудочной железы, злокачественную опухоль молочной железы, злокачественную опухоль легких, меланому, лимфому, карциному, саркому, неходжкинскую лимфому, лейкоз, злокачественную опухоль эндометрия, злокачественную опухоль толстой и прямой кишки, злокачественную опухоль предстательной железы и злокачественную опухоль мочевого пузыря. Традиционно, многие виды злокачественных опухолей (например, злокачественную опухоль молочной железы, лейкоз, злокачественную опухоль легких или т.п.) подвергают лечению с помощью хирургии, химиотерапии, лучевой терапии или их комбинации. Химиотерапевтические средства, используемые при лечении злокачественной опухоли, как известно, приводят к нескольким серьезным и неприятным побочным эффектам у пациентов. Например, некоторые химиотерапевтические средства вызывают нейропатии, нефротоксичность (например, гиперлипидемию, протеинурию, гипопротеинемию их комбинации или т.п.), стоматит, мукозит, алопецию, анорексию, эзофагит, аменорею, снижение иммунитета, анемию, потерю слышимости высоких тонов, кардиотоксичность, усталость, невропатии или их комбинации. Усовершенствованные способы лечения онкологических заболеваний, включающих в себя злокачественную опухоль, и композиция, способная доставлять биологически активные средства, чтобы помочь в лечении заболеваний и других состояний, по-прежнему необходимы.

Кофермент Q10, также указанный в настоящем документе как CoQlO, убихинон или убидекаренон, представляет собой популярную пищевую добавку и может быть найден в форме капсул в магазинах продуктов питания, магазинах здорового питания, аптеках и т.п., в качестве витаминоподобного дополнения, для того, чтобы помочь защитить иммунную систему с помощью антиоксидантных свойств убихинола, восстановленной формы кофермента Q10. CoQlO находится в большинстве тканей организма человека и тканях других млекопитающих и сосредоточен в митохондриях. CoQlO представляет собой очень липофильное соединение и, по большей части, не растворим в воде. Нерастворимость связана с боковой цепью изопреноидов из 50 атомов углерода, углеводородной природы, как показано на

Сущность изобретения

В настоящем изобретении предусмотрены способы лечения онкологических заболеваний у субъекта путем введения CoQlO и по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту, таким образом, что онкологическое заболевание подвергается лечению.

Согласно некоторым вариантам осуществления способ лечения онкологического заболевания у субъекта включает (а) введение кофермента Q10 (CoQlO) субъекту; (Ь) прекращение введения кофермента Q10 и (с) введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту после прекращения введения CoQlO, где кофермент Q10 вводят путем непрерывной внутривенной инфузии в течение по меньшей мере 24 ч.

Согласно некоторым вариантам осуществления способ лечения онкологического заболевания у субъекта включает (а) введение кофермента Q10 (CoQlO) субъекту; (Ь) введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту после начала введения CoQlO и (с) продолжение лечения CoQlO после начала введения по меньшей мере одного химиотерапевтического средства, где кофермент Q10 вводят путем непрерывной внутривенной инфузии в течение по меньшей мере 24 ч.

Согласно конкретному варианту осуществления указанного выше способа CoQlO вводят в течение по меньшей мере 24 ч перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства.

Согласно конкретному варианту осуществления указанных выше способов введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства начинается по меньшей мере через 24 ч после начала введения CoQlO, через одну неделю после начала введения CoQlO, через две недели после начала

- 1 032775 введения CoQ10, через три недели после начала введения CoQ10, через четыре недели после начала введения CoQ10, через пять недель после начала введения CoQ10, через шесть недель после начала введения CoQ10, через семь недель после начала введения CoQ10 или через восемь недель после начала введения CoQ10.

Согласно конкретному варианту осуществления указанных выше способов CoQ10 вводят в дозе, составляющей приблизительно 5 мг/кг, приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 12,5 мг/кг, приблизительно 20 мг/кг, приблизительно 25 мг/кг, приблизительно 30 мг/кг, приблизительно 35 мг/кг, приблизительно 40 мг/кг, приблизительно 45 мг/кг, приблизительно 50 мг/кг, приблизительно 55 мг/кг, приблизительно 58 мг/кг, приблизительно 58,6 мг/кг, приблизительно 60 мг/кг, приблизительно 75 мг/кг, приблизительно 78 мг/кг, приблизительно 100 мг/кг, приблизительно 104 мг/кг, приблизительно 125 мг/кг, приблизительно 150 мг/кг, приблизительно 175 мг/кг, приблизительно 200 мг/кг, приблизительно 300 мг/кг или приблизительно 400 мг/кг.

Согласно некоторым вариантам осуществления способ лечения онкологического заболевания у субъекта включает (а) введение кофермента Q10 (CoQ10) субъекту и (b) введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту в дозе, которая ниже, чем стандартные дозы химиотерапевтического средства, используемые для лечения онкологического заболевания, где кофермент Q10 вводят путем непрерывной внутривенной инфузии в течение по меньшей мере 24 ч.

Согласно конкретному варианту осуществления указанного выше способа введение CoQ10 прекращается перед введением по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту.

Согласно конкретному варианту осуществления указанного выше способа введение CoQ10 продолжается после введения по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту.

Согласно конкретному варианту осуществления указанного выше способа CoQ10 вводят в течение по меньшей мере 24 ч, по меньшей мере 48 ч, по меньшей мере 1 недели, по меньшей мере 2 недель, по меньшей мере 3 недель или по меньшей мере 4 недель до введения по меньшей мере одного химиотерапевтического средства.

Согласно конкретному варианту осуществления указанного выше способа по меньшей мере одно химиотерапевтическое средство вводят по меньшей мере через 24 ч после начала введения CoQ10, через одну неделю после начала введения CoQ10, через две недели после начала введения CoQ10, через три недели после начала введения CoQ10, через четыре недели после начала введения CoQ10, через пять недель после начала введения CoQ10, через шесть недель после начала введения CoQ10, через семь недель после начала введения CoQ10 или через восемь недель после начала введения CoQ10.

Согласно конкретному варианту осуществления указанного выше способа CoQ10 вводят в дозе, составляющей приблизительно 5 мг/кг, приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 12,5 мг/кг, приблизительно 20 мг/кг, приблизительно 25 мг/кг, приблизительно 30 мг/кг, приблизительно 35 мг/кг, приблизительно 40 мг/кг, приблизительно 45 мг/кг, приблизительно 50 мг/кг, приблизительно 55 мг/кг, приблизительно 58 мг/кг, приблизительно 58,6 мг/кг, приблизительно 60 мг/кг, приблизительно 75 мг/кг, приблизительно 78 мг/кг, приблизительно 100 мг/кг, приблизительно 104 мг/кг, приблизительно 125 мг/кг, приблизительно 150 мг/кг, приблизительно 175 мг/кг, приблизительно 200 мг/кг, приблизительно 300 мг/кг или приблизительно 400 мг/кг.

Согласно конкретному варианту осуществления указанных выше способов по меньшей мере одно химиотерапевтическое средство включает химиотерапевтическое средство, выбранное из группы, состоящей из ингибитора топоизомеразы I, ингибитор топоизомеразы II, митотического ингибитора, алкилирующего средства, соединения платины и антиметаболитов. Согласно некоторым вариантам осуществления по меньшей мере одно химиотерапевтическое средство включает ингибитор топоизомеразы II. Согласно предпочтительному варианту осуществления ингибитор топоизомеразы II содержит по меньшей мере одно из следующего: доксорубицин, эпирубицин, идарубицин, митоксантрон, лозоксантрон, этопозид и тенипозид. Согласно другим вариантам осуществления по меньшей мере одно химиотерапевтическое средство включает ингибитор топоизомеразы I.

Ингибитор топоизомеразы I может включать по меньшей мере одно из следующего: иринотекан, топотекан, 9- нитрокамптотецин, камптотецин и производные камптотецина. Антиметаболит может включать по меньшей мере одно из следующего: 5-фторурацил, капецитабин, гемцитабин, метотрексат и эдатрексат.

Алкилирующее средство может включать по меньшей мере одно из следующего: азотистый иприт, соединение этиленимина, алкилсульфонат, нитрозомочевина, дакарбазин, циклофосфамид, ифосфамид и мелфалан. По меньшей мере одно химиотерапевтическое средство может включать соединение платины, включающее по меньшей мере одно из следующего: цисплатин, оксалиплатин и карбоплатин. Митотический ингибитор может включать по меньшей мере одно из следующего: паклитаксел, доцетаксел, винбластин, винкристин, винорелбин и производное подофиллотоксина.

Согласно более конкретному варианту осуществления указанных выше способов, одно химиотерапевтическое средство включает химиотерапевтическое средство, выбранное из группы, состоящей из амифостина (этиола), цисплатина, дакарбазина (DTIC), дактиномицина, мехлорэтамина (азотистого иприта), стрептозоцина, циклофосфамида, кармустина (BCNU), ломустина (CCNU),

- 2 032775 доксорубицина (адриамицина), доксорубицина липо (доксила), гемцитабина (гемзара), даунорубицина, даунорубицина липо (дауноксома), прокарбазина, митомицина, цитарабина, этопозида, метотрексата, 5фторурацила (5-FU), винбластина, винкристина, блеомицина, паклитаксела (таксола), доцетаксела (таксотера), алдеслейкина, аспарагиназы, бусульфана, карбоплатина, кладрибина, камптотецина, СРТ-I 1, 10-гидрокси-7-этилкамптотецина (SN38), дакарбазина, S-I капецитабина, фторафура, 5' дезоксифторуридина, UFT, энилурацила, дезоксицитидина, 5-азацитозина, 5-азадезоксицитозина, аллопуринола, 2-хлораденозина, триметрексата, аминоптерина, метилен-10-деазааминоптерина (MDAM), оксоплатина, пикоплатина, тетраплатина, сатраплатина, платина-DACH, ормаплатина, CI-973, JM-216 и его аналогов, эпирубицина, этопозидфосфата, 9-аминокамптотецина, 10,11-метилендиоксикамптотецина, каренитецина, 9-нитрокамптотецина, TAS 103, виндезина, L-фенилаланина мустард, ифосфамида, мефосфамида, перфосфамида, трофосфамида, кармустина, семустина, эпотилонов A-E, томудекса, 6меркаптопурина, 6-тиогуанина, амсакрина, этопозидфосфата, каренитецина, ацикловира, валацикловира, ганцикловира, амантадина, римантадина, ламивудина, зидовудина, бевацизумаба, ритуксимаба, трастузумаба, 5-фторурацила, капецитабина, пентостатина, триметрексата, кладрибина, флоксуридина, флударабина, гидроксимочевины, ифосфамида, идарубицина, месны, иринотекана, митоксантрона, топотекана, лейпролида, мегестрола, мелфалана, меркаптопурина, пликамицина, митотана, пэгаспаргазы, пентостатина, пипобромана, пликамицина, стрептозоцина, тамоксифена, тенипозида, тестолактона, тиогуанина, тиотепы, урацилового иприта, винорелбина, хлорамбуцила, цисплатина, доксорубицина, паклитаксела (таксола), блеомицина, mTor, рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) и факторов роста фибробластов (FGF) и их комбинаций.

Согласно конкретному варианту осуществления указанных выше способов онкологическое заболевание выбирают из группы, состоящей из карциномы, саркомы, лимфомы, меланомы и лейкоза.

Согласно конкретному варианту осуществления указанных выше способов онкологическое заболевание представляет собой трижды негативный рак молочной железы.

Согласно конкретному варианту осуществления указанных выше способов субъект представляет собой человека.

Согласно конкретному варианту осуществления указанных выше способов по меньшей мере одно химиотерапевтическое средство выбрано из группы, состоящей из гемцитабина, цисплатина, доцетаксела, циклофосфамида, доксорубицина, иринотекана и 5-фторурацила.

Согласно конкретному варианту осуществления указанных выше способов способ включает введение от приблизительно 100 мг/кг гемцитабина до приблизительно 10 мг/кг гемцитабина один раз в неделю в течение 3 недель с одной неделей перерыва.

Согласно конкретному варианту осуществления указанных выше способов способ включает введение 5 мг/кг доцетаксела, 1 мг/кг доксорубицина и 35 мг/кг циклофосфамида субъекту через каждые три недели в течение шести циклов.

Согласно некоторым вариантам осуществления указанных выше способов онкологическое заболевание выбирают из группы, состоящей из карциномы, саркомы, лимфомы, меланомы и лейкоза. Согласно предпочтительному варианту осуществления онкологическое заболевание выбирают из группы, состоящей из злокачественной опухоли поджелудочной железы, злокачественной опухоли молочной железы, злокачественной опухоли печени, злокачественной опухоли кожи, злокачественной опухоли легких, злокачественной опухоли толстой кишки, злокачественной опухоли предстательной железы, злокачественной опухоли щитовидной железы, злокачественной опухоли мочевого пузыря, злокачественной опухоли прямой кишки, злокачественной опухоли эндометрия, злокачественной опухоли почки, злокачественной опухоли кости, злокачественной опухоли мозга, злокачественной опухоли шейки матки, злокачественной опухоли желудка, злокачественных опухолей рта и ротовой полости, нейробластомы, злокачественной опухоли яичка, злокачественной опухоли матки и злокачественной опухоли вульвы. Согласно дополнительному предпочтительному варианту осуществления злокачественную опухоль кожи выбирают из группы, состоящей из меланомы, плоскоклеточной карциномы, базальноклеточной карциномы и кожной Т-клеточной лимфомы (CTCL). Согласно другому предпочтительному варианту осуществления онкологическое нарушение представляет собой трижды негативный рак молочной железы.

Согласно некоторым вариантам осуществления указанных выше способов онкологическое заболевание представляет собой не поддающееся лечению нарушение. Согласно некоторым вариантам осуществления указанных выше способов онкологическое заболевание не отвечало по меньшей мере на одно, два, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь или более предыдущих процедур лечения. Согласно некоторым вариантам осуществления указанных выше способов онкологическое заболевание представляет собой злокачественную опухоль на конечной стадии. Согласно некоторым вариантам осуществления указанных выше способов способы дополнительно включают выбор субъекта, характеризующегося наличием не поддающегося лечения онкологического заболевания для лечения. Согласно некоторым вариантам осуществления указанных выше способов способы дополнительно включают выбор субъекта, характеризующегося наличием онкологического заболевания, которое не ответило по меньшей мере на одно, два, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь или более

- 3 032775 предшествующих процедур лечения. Согласно некоторым вариантам осуществления указанных выше способов способы дополнительно включают выбор субъекта, характеризующегося наличием злокачественной опухоли на конечной стадии для лечения.

Краткое описание чертежей

Фиг. 1 представляет собой график, на котором показано влияние дозирования один раз в сутки с внутривенным CoQ10, отдельно или в сочетании с гемцитабином (дни), на время выживания на ксеногенной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы с использованием клеток MIAPaCa-2 злокачественной опухоли поджелудочной железы человека. На графике день 1 означает день, когда было начато лечение.

Фиг. 2 представляет собой фотографию, на которой показан эффект дозирования один раз в сутки с внутривенным CoQ10, отдельно или в комбинации с гемцитабином, на размер опухоли в момент смерти на ксеногенной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы с использованием клеток MIAPaCa-2 злокачественной опухоли поджелудочной железы человека. Опухоли в группе 1 собирали через 20 дней после начала лечения. Опухоли в группе 2 собирали через 50-60 дней после начала лечения. Опухоли в группе 3 собирали через 40-50 дней после начала лечения. Опухоли в 4 группе собирали через 50-60 дней после начала лечения.

Фиг. 3 представляет собой график, на котором показано влияние дозирования один раз в сутки с внутривенным CoQ10, отдельно или в сочетании с гемцитабином (дни), на размер опухоли на момент смерти на ксеногенной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы с использованием клеток MIAPaCa-2 злокачественной опухоли поджелудочной железы человека. Опухоли в группе 1 собирали через 20 дней после начала лечения. Опухоли в группе 2 собирали через 50-60 дней после начала лечения. Опухоли в группе 3 собирали через 40-50 дней после начала лечения. Опухоли в группе 4 собирали через 50-60 дней после начала лечения.

Фиг. 4 представляет собой график, на котором показано влияние дозирования два раза в день с внутривенным CoQ10, отдельно или в комбинации с гемцитабином, на время выживания (дни) на ксеногенной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы с использованием клеток MIAPaCa-2 злокачественной опухоли поджелудочной железы человека. На графике день 1 означает день, когда лечение было начато.

Фиг. 5А представляет собой график, на котором показано влияние на жизнеспособность клеток MIAPaCa-2 злокачественной опухоли поджелудочной железы 6-часового воздействия in vitro гемцитабина, CoQ10, внутривенного состава CoQ10 или внутривенного состава кофермента Q10 в комбинации с гемцитабином.

Фиг. 5B представляет собой график, на котором показано влияние на жизнеспособность клеток злокачественной опухоли молочной железы SK-Br3 6-часового воздействия in vitro гемцитабина, CoQ10, внутривенного состава CoQ10 или внутривенного состава кофермента Q10 в комбинации с гемцитабином.

Фиг. 6A представляет собой график, на котором показано влияние на жизнеспособность клеток злокачественной опухоли поджелудочной железы MIAPaCa-2 6-часового воздействия in vitro гемцитабина, CoQ10, внутривенного состава CoQ10 или внутривенного состава кофермента Q10 в комбинации с гемцитабином.

Фиг. 6B представляет собой график, на котором показано влияние на жизнеспособность клеток злокачественной опухоли молочной железы SK-Br3 6-часового воздействия in vitro гемцитабина, CoQ10, внутривенного состава CoQ10 или внутривенного состава кофермента Q10 в комбинации с гемцитабином.

Фиг. 7 представляет собой график, на котором показано влияние дозирования один раз в сутки внутривенного CoQ10 с доксорубицином или только доксорубицина на время выживания на ксеногенной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы с использованием злокачественных клеток поджелудочной железы MIAPaCa-2 опухоли поджелудочной железы человека.

Фиг. 8 представляет собой график, на котором показано влияние внутрибрюшинного дозирования три раза в день в указанных дозах внутривенного состава кофермента Q10, отдельно или в комбинации с гемцитабином, на время выживания на ксеногенной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы с использованием клеток MIAPaCa-2 опухоли поджелудочной железы человека. На графике день 1 означает день, когда было начато лечение.

Фиг. 9А представляет собой график, на котором показано влияние на жизнеспособность клеток Нер3В злокачественной опухоли печени in vitro воздействия химиотерапевтическим средством иринотекана (SN38), одного или в комбинации с CoQ10 (100 мкМ). Жизнеспособность оценивали путем подсчета живых клеток. Значения нормированы к числу клеток, не обработанных ни CoQ10, ни химиотерапевтическим средством.

Фиг. 9B представляет собой график, на котором показано влияние на жизнеспособность клеток Нер3 В злокачественной опухоли печени in vitro воздействия химиотерапевтическим средством цисплатин в отдельности или в комбинации с CoQ10 (100 мкМ). Жизнеспособность оценивали путем

- 4 032775 подсчета живых клеток. Значения нормированы к числу клеток, не обработанных ни CoQ10, ни химиотерапевтическим средством.

Фиг. 9C представляет собой график, на котором показано влияние на жизнеспособность клеток НерЗВ злокачественной опухоли печени in vitro воздействия химиотерапевтическим средством 5фторурацилом, одним или в комбинации с CoQ10 (100 мкМ). Жизнеспособность оценивали путем подсчета живых клеток. Значения нормированы к числу клеток, не обработанных ни CoQ10, ни химиотерапевтическим средством.

Фиг. 10 представляет собой график, на котором показано влияние на жизнеспособность клеток НерЗ В злокачественной опухоли печени in vitro воздействия химиотерапевтическим средством доксорубицином, одним или в комбинации с CoQ10 (100 мкМ). Жизнеспособность оценивали путем подсчета живых клеток. Значения нормированы к числу клеток, не обработанных ни CoQ10, ни химиотерапевтическим средством.

На фиг. 11A-11B показано изображение клеток Mia-PaCa2 злокачественной опухоли поджелудочной железы, обработанных гемцитабином отдельно или в сочетании с CoQ10 (100 мкМ). (А) Кофермент Q10 добавляли за 6 ч перед добавлением химиотерапии или (В) в то же время, что и химиотерапию.

Фиг. 12A-12B представляют собой графики результатов анализа ингибирования роста/ускорения гибели клеток, в котором клетки MIAPaCa2 злокачественной опухоли поджелудочной железы обрабатывали гемцитабином, отдельно или в комбинации с CoQ10 (100 мкМ). (А) Кофермент Q10 добавляли за 6 ч перед добавлением химиотерапии или (В) в то же время, что и химиотерапию. Ингибирование роста/ускорение гибели клеток оценивали путем подсчета живых клеток. Значения нормированы к числу клеток, не обработанных ни CoQ10, ни химиотерапевтическим средством.

Фиг. 1З представляет собой график, на котором показаны результаты анализа пролиферации, в котором клетки MIAPaCa2 злокачественной опухоли поджелудочной железы обрабатывали гемцитабином, отдельно или в комбинации с CoQ10, до оценки пролиферации с помощью анализа проточной цитометрии с использованием клеточного красителя CFSE, который окрашивает живые клетки. Значения нормированы к числу клеток, не обработанных ни CoQ10, ни химиотерапевтическим средством.

Фиг. 14 представляет собой график, на котором показаны результаты анализов, в которых клетки MIAPaCa2 злокачественной опухоли поджелудочной железы обрабатывали гемцитабином, отдельно или в комбинации с CoQ10, до оценки апоптоза остальных адгезивных клеток с помощью анализа проточной цитометрии с использованием пропидий йодида, который окрашивает мертвые клетки. Значения нормированы к числу клеток, не обработанных ни CoQ10, ни химиотерапевтическим средством.

Фиг. 15 представляет собой график, на котором показано влияние трехкратного внутрибрюшинного суточного дозирования с внутривенным составом кофермента Q10 (75 мг/кг/доза) в комбинации с гемцитабином (150 мг/кг/доза, 1 раз в З недели), на время выживания в ксеногенной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы с использованием злокачественных клеток поджелудочной железы MIAPaCa-2 опухоли поджелудочной железы человека. Введение CoQ10 начинали за 0, 1, 2 или З недели до начала лечения с гемцитабином. На графике, день 1 означает день, когда лечение было начато.

На фиг. 16 показано влияние воздействия CoQ10 на жизнеспособность различных опухолевых клеточных линий in vitro. Клетки обрабатывали 100 мкМ CoQ10 в течение 48-72 ч.

На фиг. 17 показано влияние воздействия CoQ10 на базальную скорость потребления кислорода (OCR), скорость внеклеточного закисления (ECAR) и активные формы кислорода (АФК) в клетках злокачественной опухоли молочной железы (MDA-MB231 и SKBR-3) и неонкогенных контрольных клетках (MCF12A) in vitro. Клетки обрабатывали 100 мкМ CoQ10 в течение 24 ч.

На фиг. 18 показано влияние воздействия CoQ10 на активность каспазы 3 в клетках злокачественной опухоли молочной железы (MDA-MB231 и SKBR-3).

На фиг. 19 показано влияние совместного воздействия против предварительного воздействия в злокачественных клетках А549, PC3 и SKOV3 с комбинациями CoQ10 и различными химиотерапевтическими средствами.

На фиг. 20 показаны клетки злокачественной опухоли молочной железы MDA-MB231 и SKBR-3 и контрольные клетки MCF12A, подвергнутые либо совместному воздействию CoQ10 (100 мкМ) и химиотерапевтических средств (5-фторурацил, 5-FU; доксорубицин, Doxo; SN38, активный метаболит иринотекан), либо предварительному воздействию CoQ10 (6 ч) с последующей совместной инкубацией с химиотерапевтическими средствами. Количество жизнеспособных клеток оценивали через 48 ч. Значения р указывают на взаимодействие с помощью двунаправленного дисперсионного анализа. * р <0,05 по сравнению с одним химиотерапевтическим средством.

На фиг. 21 показана кривая выживаемости мышей, несущих ксенотрансплантаты трижды негативного рака молочной железы (TNBC) и обрабатанных схемой лечения TAC (5 мг/кг доцетаксела, 1 мг/мг доксорубицина и 35 мг/кг циклофосфамида) с и без CoQ10 (BPM 31510) в дозе 75 мг/кг массы тела. ТАС давали каждые три недели в течение шести циклов.

- 5 032775

На фиг. 22 показаны клетки SkBr-3 злокачественной опухоли молочной железы, совместно обработанные 100 мкМ CoQ10 (BPM 31510) и 100 нг/мл доксорубицина. Активность каспазы 3 контролировали с течением времени с использованием расщепляемого флуоресцентного субстрата.

На фиг. 23 показаны клетки MDA-MB231 и SkBr-3 злокачественной опухоли молочной железы и неонкогенные контрольные клетки MCF12A, обработанные увеличенными дозами CoQ10 (BPM 31510). Количество жизнеспособных клеток оценивали через 48 ч. Величины ЕС₅₀ рассчитывали с использованием нелинейного регрессионного анализа.

На фиг. 24 показаны клетки MDA-MB231 и SkBr-3 злокачественной опухоли молочной железы и неонкогенные контрольные клетки MCF12A, обработанные 100 мкМ CoQ10 (BPM 31510) в течение 48 ч. Пропидий иодид (PI) и клеточный краситель CFSE использовали для измерения гибели и пролиферации клеток, соответственно, в клетках, обработанных CoQ10.

На фиг. 25 показаны клетки MDA-MB231 и SkBr-3 злокачественной опухоли молочной железы и неонкогенные контрольные клетки MCF12A, обработанные 100 мкМ CoQ10 (BPM 31510) в течение 24 ч. Митохондриальную функцию оценивали с использованием последовательного впрыскивания митохондриальных токсинов (олигомицин, CCCP и ротенон) в анализатор Seahorse XF96. Флуоресценции DCF также измеряли в качестве показателя производства активных форм кислорода в клетках, обработанных таким же образом. * p<0,05 по сравнению с контролем, N.S. обозначает отсутствие статистической значимости.

На фиг. 26 показано предварительное воздействие на клетки злокачественной опухоли поджелудочной железы человека (PcCa2) 100 мкМ CoQ10 (BPM31510) с последующей обработкой гемцитабином (0,1, 1 и 5 мкМ) или совместное воздействие на эти клетки CoQ10 и гемцитабином. Как предварительное воздействие, так и совместное воздействие значительно уменьшало количество жизнеспособных клеток (* р<0,05), по сравнению с одним гемцитабином.

На фиг. 27 показаны три схемы лечения для оценки эффекта CoQ10 (BPM 31510) отдельно или в комбинации с гемцитабином на выживаемость животных в ксенотрансплантной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы человека.

На фиг. 28 показан эффект схемы лечения 2 (описана на фиг. 27) с CoQ10 (API 31510) и гемцитабином на выживаемость животных в ксенотрансплантной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы человека. Гемцитабин один против гемцитабина + CoQ10 (50 мг/кг) р=7,3 Е-8.

На фиг. 29 показан эффект схемы лечения 3 (описана на фиг. 27) с CoQ10 (API 31510) и гемцитабином на выживаемость животных в ксенотрансплантной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы человека. Гемцитабин один против гемцитабина + CoQ10 (50 мг/кг) р=7,3 Е-8.

На фиг. 30 показано влияние различных концентраций CoQ10 (BPM 31510) на выживаемость животных в ксенотрансплантной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы человека с течением времени (дней). Непрерывная инфузия CoQ10 в концентрации 200 мг/кг значительно повышала выживаемость, по сравнению с концентрацией 50 мг/кг CoQ10 (р<0,00001). Например, мыши, получавшие 200 мг/кг CoQ10, характеризовались самым высоким уровнем выживаемости (вероятностью выживания) через 300 дней, мыши, получавшие 50 мг/кг CoQ10, характеризовались самым низким уровнем выживаемости (вероятностью выживания) через 300 дней, а мыши, которые получали 100 мг/кг CoQ10, характеризовались выживаемостью (вероятностью выживания) через 300 дней, которая была между двумя другими группами.

На фиг. 31 показано влияние CoQ10 и гемцитабина на выживаемость животных с течением времени (дней) в ксенотрансплантной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы человека. Предварительное воздействие CoQ10 (200 мг/кг) за шестьдесят дней до начала лечения с гемцитабином + CoQ10 улучшало выживаемость, в сравнении с воздействием гемцитабином + CoQ10 с начала лечения в ксенотрансплантной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы человека. Например, через 200 дней мыши, получавшие CoQ10 за 60 дней до начала гемцитабина и продолжавшие получать CoQ10, характеризовались самым высоким уровнем выживаемости (вероятностью выживания), мыши, получавшие гемцитабин и кофермент Q10 с самого начала, характеризовались следующим самым высоким уровнем выживаемости, мыши, получавшие CoQ10 с самого начала, характеризовались следующим самым высоким уровнем выживаемости и контрольные мыши характеризовались самым низким уровнем выживаемости.

Подробное описание изобретения

I. Определения.

В соответствии с настоящим изобретением и как используются в настоящем документе, следующие термины определены в следующих значениях, если явно не указано иное.

Используемый в настоящем документе термин фармацевтически приемлемый компонент представляет собой компонент, который пригоден для использования людьми и/или животными без нежелательных побочных эффектов (таких как токсичность, раздражение и аллергическая реакция), соразмерных с разумным отношением польза/риск.

- 6 032775

Лечение представляет собой вмешательство, осуществляемое с целью предупреждения развития или изменения патологии, симптомов и признаков нарушения. Соответственно, лечение относится как к терапевтическому лечению, так и профилактическим или превентивным мерам. Те, кто нуждаются в лечении, включают в себя тех, кто уже характеризуется наличием нарушения, а также тех, у которых нарушение должно быть предотвращено. Используемый в настоящем документе термин лечение относится к симптому или признаку, который приближается к нормализованному значению (например, значению, полученному у здорового пациента или индивидуума), например, чтобы отличаться менее чем на 50% от нормализованного значения, согласно вариантам осуществления, чтобы отличаться менее чем приблизительно на 25% от нормализованного значения, согласно другим вариантам осуществления, чтобы отличаться менее чем на 10% от нормализованного значения, и согласно еще другим вариантам осуществления присутствие симптома существенно не отличается от нормализованного значения, как определено с использованием обычных статистических тестов. Используемое в настоящем документе лечение может включать в себя уменьшение опухолевой нагрузки, ингибирование роста опухоли, включая в себя индукцию стабильного заболевания у субъекта с прогрессирующим заболеванием до лечения, увеличение времени до прогрессирования или увеличение времени выживания. Увеличения можно определить по отношению к соответствующему контролю или ожидаемым результатам. Используемое в настоящем документе лечение может включать в себя увеличение выживаемости субъекта с или без снижения опухолевой нагрузки, по сравнению с соответствующими контролями. Воздействие не обязательно должно быть лечебным.

Используемый в настоящем документе термин цикл понимается как схема лечения, используемая для введения CoQ10 или химиотерапевтического средства. Как правило, химиотерапевтические средства не вводятся в качестве единственного воздействия или воздействия в продолжающихся регулярных промежутках времени (например, ежедневно, еженедельно). Цикл включает в себя время химиотерапевтического воздействия, а затем перерыв до следующего воздействия, чтобы разрешить восстановление. Например, длящийся 4 недели цикл может содержать воздействие на 1-й, 2-й и 3-й дни, а затем ничего с 4 по 28 день. Затем цикл начинается снова. Или, в качестве другого примера, 3недельный цикл может содержать воздействие на 1-й и 8-й дни, но ничто в дни со 2 по 7 и в дни с 9 по 21. Согласно некоторым вариантам осуществления цикл может включать в себя воздействие комбинацией химиотерапевтических средств на одинаковые или различные графики, а затем окно без обработки, чтобы позволить восстановление.

Согласно некоторым вариантам осуществления один цикл CoQ10 вводят перед введением по меньшей мере одного цикла по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другим вариантам осуществления два или более циклов CoQ10 вводят перед введением по меньшей мере одного цикла по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другим вариантам осуществления три или более циклов CoQ10 вводят перед введением по меньшей мере одного цикла химиотерапевтического средства. Согласно еще дополнительным вариантам осуществления четыре или более циклов CoQ10 вводят перед введением по меньшей мере одного цикла химиотерапевтического средства.

Используемая в настоящем документе постоянная инфузия понимается как введение терапевтического средства непрерывно в течение периода, составляющего по меньшей мере 24 ч. Постоянная инфузия обычно осуществляется с использованием насоса, необязательно имплантируемого насоса. Постоянную инфузию можно вводить в контексте цикла лечения. Например, дозу терапевтического средства можно вводить путем постоянной инфузии в течение 24-часового периода раз в неделю каждую неделю. Лечение с постоянной инфузией не требует инфузии терапевтического средства субъекту в течение всего периода лечения.

Понятно, что постоянная инфузия может включать в себя короткие перерывы во введении, например, чтобы изменить резервуар вводимого кофермента Q10. Постоянная инфузия, как правило, облегчается путем использования насоса. Постоянная инфузия проводится без включения каких-либо значительных перерывов в дозировании продукта. Используемые в настоящем документе перерывы для оценки основных физиологических показателей и/или выполнения лабораторных исследований по обеспечению безопасности пациентов и того, чтобы не произошли недопустимые неблагоприятные события, не рассматриваются в качестве значимых перерывов. Перерывы в результате отказа оборудования, например отказа насоса, не представляют собой перерывы по разработке.

Термины онкологическое заболевание, злокачественная опухоль или опухоль хорошо известны в настоящей области техники и относятся к наличию, например, у субъекта, клеток, обладающих характеристиками типичных канцерогенных клеток, такими как неконтролируемая пролиферация, бессмертие, метастатический потенциал, высокие темпы роста и пролиферации, сниженная клеточная гибель/апоптоз и некоторые характерные морфологические особенности.

Используемые в настоящем документе термины онкологическое заболевание, злокачественная опухоль или опухоль относятся ко всем типам злокачественных опухолей или новообразований, или опухолей, обнаруженных у людей, включая в себя без ограничения: лейкозы, лимфомы, меланомы, карциномы и саркомы. Используемые в настоящем документе термины или выражения онкологическое

- 7 032775 заболевание, злокачественная опухоль, новообразование и опухоль используются взаимозаменяемо и либо в единственном, либо во множественном числе, относятся к клеткам, которые подверглись злокачественной трансформации, которая делает их патологическими по отношению к организму-хозяину. Первичные злокачественные клетки (т.е. клетки, полученные из места рядом со злокачественной трансформацией) могут быть легко отличимы от незлокачественных клеток с помощью устоявшихся техник, в частности, гистологического исследования. Определение злокачественной клетки, как оно использовано в настоящем документе, включает в себя не только первичную злокачественную клетку, но и злокачественные стволовые клетки, а также клетки-предшественники злокачественной опухоли или любую клетку, полученную из предка злокачественной клетки. Это включает в себя метастазы раковых клеток, а также культуры in vitro и клеточные линии, полученные из злокачественных клеток.

Солидная опухоль представляет собой опухоль, которая может быть обнаружена на основании массы опухоли; например, с помощью таких процедур, как томография, МРТ, рентген, ультразвук или пальпация, и/или которая обнаруживается из-за экспрессии одного или нескольких злокачественных антигенов в образце, получаемом от пациента. Опухоль не обязательно должна характеризоваться измеримыми размерами.

При обращении к типу злокачественной опухоли, который обычно проявляется в виде солидной опухоли, клинически обнаруживаемая опухоль представляет собой ту, которую можно обнаружить на основании массы опухоли; например, с помощью таких процедур, как томография, МРТ, рентген, ультразвук или пальпация, и/или которая обнаруживается из-за экспрессии одного или нескольких злокачественных антигенов в образце, получаемом от пациента.

Используемая в настоящем документе обнаруживаемая опухоль представляет собой опухоль, наличие которой у субъекта может быть подтверждено, например, с использованием способов визуализации (например, рентгеновского излучения, КТ, магнитно-резонансной томографии с или без контрастных средств, ультразвука), пальпации или других физических способов исследования, и/или прямым наблюдением с помощью хирургических способов или биопсии, как правило, в сочетании с гистологическим анализом, в случае солидных опухолей; или с помощью анализа образцов крови, например, полного анализа крови или гистологического анализа, в случае несолидных опухолей, например, лейкоза. Согласно некоторым вариантам осуществления опухоль может быть обнаружена на основании наличия или определенных маркеров. Понятно, что диагностика и выявление опухоли может включать в себя несколько тестов и диагностических способов.

Термин саркома, как правило, относится к опухоли, которая состоит из вещества, подобного эмбриональной соединительной ткани и, как правило, состоит из плотно упакованных клеток, внедренных в фибриллярную или гомогенную субстанцию. Примеры сарком, которые можно лечить с помощью коллоидной дисперсии CoQ10 в составе для внутривенного введения, включают в себя, например, хондросаркому, фибросаркому, лимфосаркому, меланосаркому, миксосаркому, остеосаркому, саркому Abemethy, злокачественную липому, липосаркому, альвеолярную саркому мягких тканей, амелобластосаркому, кистевидную саркому, хлорлейкозную саркому, хориокарциному, эмбриональную саркому, саркому опухоли Вильмса, саркому эндометрия, стромальную саркому, саркому Юинга, фасциальную саркому, саркому фибробластов, гигантоклеточную саркому, гранулоцитарную саркому, саркому Ходжкина, идиопатическую множественную геморрагическую саркому, иммунобластную саркому В-клеток, лимфому, иммунобластную саркому Т-клеток, саркому Иенсена, саркому Капоши, саркому клеток Купфера, ангиосаркому, лейкосаркому, злокачественную мезенхимомальную саркому, паростальную саркому, ретикулосаркому, саркому Рауса, серокистозную саркому, синовиальную саркому и телеангиэктатическую саркому.

Под термином меланома понимается опухоль, возникающая из меланоцитарной системы кожи и других органов. Меланомы, которые можно лечить с помощью коллоидных дисперсий CoQ10 в составе для внутривенного введения, включают в себя, например, акральную лентигинозную меланому, беспигментную меланому, эпителиоидный невус, меланому Клаудмана, меланому S91, меланому Хардинг-Пасси, ювенильную меланому, меланому типа злокачественного лентиго, злокачественную меланому, узловую меланому, подногтевую меланому и поверхностную распространяющуюся меланому.

Термин карцинома относится к злокачественному новообразованию, состоящему из клеток эпителия, характеризующихся тенденцией к инфильтрации в окружающие ткани, приводя к метастазам. Карциномы, которые можно лечить коллоидными дисперсиями CoQ10 в описанном в настоящем документе составе для внутривенного введения, включают в себя, например, ацинарную карциному, ацинозную карциному, аденоцистокарциному, аденокистозную карциному, аденоматоидную карциному, карциному коры надпочечника, альвеолярную карциному, карциному альвеолярных клеток, карциному базальных клеток, базалиому, базалоидную карциному, базоплоскоклеточную карциному, бронхоальвеолярную карциному, бронхиолярную карциному, бронхогенную карциному, мозговидную карциному, холангиоцеллюлярную карциному, хориокарциному, коллоидную карциному, угревидную карциному, карциному тела, ситовидную карциному, панцирную карциному, карциному кожи, карциному цилиндрического типа, карциному цилиндрических клеток, карциному протоков, твердую

- 8 032775 карциному, эмбриональную карциному, мозговидную карциному, эпидермоидную карциному, эпителиальную аденоидную карциному, экзофитную карциному, карциному из язвы, фиброзную карциному, листовидную карциному, слизеобразующую карциному, гигантоклеточную карциному, железистую карциному, аденокарциному, гранулезоклеточную карциному, базальноклеточную карциному, гематоидную карциному, печеночноклеточную карциному, карциному клеток Гюртле, хондрому, гипемефроидную карциному, детскую эмбриональную карциному, карциному in situ, внутриэпидермальную карциному, внутриэпителиальную карциному, карциному Кромпечера, карциному клеток Кульчитски, крупноклеточную карциному, чечевицеобразную карциному, лентикулярную карциному, липоматозную карциному, лимфоэпителиальную карциному, медуллярную карциному, меланотическую карциному, мягкую карциному, карциному из клеток Меркеля, слизеобразующую карциному, карциному muciparum, карциному слизеобразующих клеток, слизеобразующую плоскоклеточную карциному, карциному слизистых, слизистую карциному, миксоматозную карциному, назофарингиальную карциному, овсяноклеточную карциному, оссифицирующую карциному, остеоидную карциному, папиллярную карциному, перипортальную карциному, преинвазивную карциному, карциному шиловидных клеток, коллоидную карциному, светлоклеточную карциному почки, карциному резервных клеток, саркомоподобную карциному, карциному слизистой оболочки носовой полости, фиброзную карциному, карциному мошонки, перстневидно-клеточную карциному, недифференцированную карциному, мелкоклеточную карциному, соленоидную карциному, карциному из сферических клеток, веретеноклеточную карциному, губчатую карциному, сквамозную карциному, плоскоклеточную карциному, нитевидную карциному, телеангиэктатическую карциному, карциному из гладких мышечных волокон и сосудистой ткани, переходно-клеточную карциному, туберозную карциному, бугристую карциному, бородавчатую карциному и карциному villosum.

Конкретные критерии для стадирования злокачественной опухоли зависят от конкретного типа злокачественной опухоли, основанные на размере опухоли, гистологических характеристиках, опухолевых маркерах и других критериях, известных специалистам в настоящей области техники. Как правило, стадии злокачественной опухоли могут быть описаны следующим образом.

Стадия 0 - карцинома in situ.

Стадия I, стадия II и стадия III - большие числа указывают на более обширное заболевание: больший размер опухоли и/или распространение злокачественной опухоли за пределы органа, в котором она впервые развилась в близлежащие лимфатические узлы и/или ткани или органы, прилегающие к местоположению первичной опухоли.

Стадия IV - злокачественная опухоль распространилась на отдаленные ткани или органы.

Используемые в настоящем документе термины лечить, лечение или воздействие относятся, предпочтительно, к действию для получения положительного или желаемого клинического результата, включающего в себя без ограничения облегчение или улучшение состояния одного или нескольких признаков или симптомов заболевания или состояния (например, регрессия, частичная или полная), уменьшение степени заболевания, стабильности (т.е. не ухудшение, достижение стабильного заболевания) состояния заболевания, улучшение или временное облегчение состояния заболевания, уменьшение скорости или времени до прогрессирования и ремиссию (частичную или полную). Лечение злокачественной опухоли может также означать продление жизни по сравнению с ожидаемой выживаемостью в отсутствие лечения. Лечение не обязательно должно быть излечивающим. Согласно некоторым вариантам осуществления лечение включает одно или несколько из следующего: снижение боли или повышение качества жизни (QOL), что оценивается квалифицированным специалистом, например, лечащим врачом, например, с использованием принятых инструментов оценки боли и качества жизни. Согласно некоторым вариантам осуществления лечение не включает одно или несколько из следующего: снижение боли или повышение качества жизни (QOL), что оценивается квалифицированным специалистом, например, лечащим врачом, например, с использованием принятых инструментов оценки боли и качества жизни.

Критерии RECIST представляют собой клинически принятые критерии оценки, используемые для обеспечения стандартного подхода к измерению солидных опухолей и обеспечению определений объективной оценки изменения размера опухоли для использования в клинических испытаниях. Такие критерии также могут быть использованы для мониторинга реакции отдельного подвергаемого лечению индивидуума от солидной опухоли. Критерии RECIST 1.1 подробно обсуждаются в Eisenhauer et al., New response evaluation criteria in solid tumors: Revised RECIST guideline (version 1.1). Eur. J. Cancer. 45:228247, 2009, который включен в настоящий документе посредством ссылки. Критерии ответов поражений органов-мишеней включают в себя:

Полный ответ (CR): исчезновение всех поражений органов-мишеней. Любые патологические лимфатические узлы (будь они мишенями или нет) должны характеризоваться снижением короткой оси до <10 мм.

Частичный ответ (PR): по меньшей мере 30%-ное снижение суммы диаметров поражений органовмишеней, принимая в качестве эталона базовые суммы диаметров.

- 9 032775

Прогрессирующие заболевания (PD): по меньшей мере 20%-ное увеличение суммы диаметров поражений органов-мишеней, принимая в качестве эталона наименьшую сумму на исследование (это включает в себя базовую сумму, если она представляет собой наименьшую на исследование). В дополнение к относительному увеличению на 20%, сумма также должна демонстрировать абсолютное увеличение не менее чем на 5 мм (примечание: появление одного или нескольких новых поражений также считается прогрессированием.)

Стабильное заболевание (SD): отсутствие достаточного сжатия, чтобы претендовать на PR, отсутствие достаточного увеличения, чтобы претендовать на PD, принимая в качестве эталона наименьшие суммарные диаметры на исследование.

Критерии RECIST 1.1 также рассматривают поражения нецелевых органов, которые определены в качестве повреждений, которые могут быть измеримы, но не обязательно измерены, и должны быть оценены только качественно в нужные временные точки. Критерии ответа для нецелевых поражений включают в себя следующее.

Полный ответ (CR): исчезновение всех поражений нецелевых органов и нормализация содержания опухолевых маркеров. Все лимфатические узлы должны быть не патологического размера (<10 мм по короткой оси).

Не CR/не PD: стойкость одного или нескольких нецелевых поражений и/или поддержание содержания опухолевого маркера выше нормы.

Прогрессирующее заболевание (PD): однозначное прогрессирование (выделено в оригинале) существующих поражений нецелевых органов. Появление одного или нескольких новых поражений также считается прогрессированием. Для достижения однозначного прогрессирования на основании заболевания нецелевых органов, должен существовать общий уровень существенного ухудшения заболевания нецелевых органов, таких, что даже в присутствии SD или PR в заболевании органовмишеней, общее бремя опухоли увеличилось достаточно, чтобы заслужить прекращение терапии. Умеренного увеличения в размере одного или нескольких поражений нецелевых органов, как правило, не достаточно, чтобы претендовать на статус однозначного прогрессирования. Поэтому обозначение общего прогрессирования исключительно на основании изменений в заболевании нецелевых органов в условиях SD или PR в заболевании органов-мишеней будет крайне редким.

Клинически приемлемые критерии ответа на лечение при острых лейкозах представляют собой следующие.

Полная ремиссия (CR): у пациента не должно быть никаких симптомов, связанных с лейкемией и он должен содержать абсолютное количество нейтрофилов >1,0х10⁹/л, количество тромбоцитов >100х10⁹/л и нормальный костный мозг с <5% бластами и отсутствием палочек Ауэра.

Полная ремиссия при неполном восстановлении анализа крови (Cri): в соответствии с CE, но с остаточной тромбоцитопенией (количество тромбоцитов <100х10⁹/л) или остаточной нейтропенией (абсолютное количество нейтрофилов <1,0х10⁹/л).

Частичная ремиссия (PR): > 50% снижение бластов костного мозга от 5 до 25% аномальных клеток в костном мозге или CR с < 5% бластов, если палочки Ауэра присутствуют.

Неэффективность лечения: лечением не удалось достичь CR, CRI или PR. Повторное проявление.

Рецидив после подтвержденного CR: Повторное проявление лейкозных бластов в периферической крови или > 5% бластов в костном мозге, которые не относятся к какой-либо другой причине (например, регенерации костного мозга после консолидированной терапии) или появление новых диспластических изменений.

Химиотерапевтическое средство относится к лекарственному средству, используемому для лечения злокачественной опухоли. Химиотерапевтические средства включают в себя без ограничения небольшие молекулы, гормоны и аналоги гормонов и биологические соединения (например, антитела, пептидные лекарственные средства, лекарственные средства-нуклеиновые кислоты). Согласно некоторым вариантам осуществления химиотерапия не включает в себя гормоны и аналоги гормонов.

Химиотерапевтическая схема лечения представляет собой клинически принятый протокол дозирования для лечения злокачественной опухоли, который включает в себя введение одного или нескольких химиотерапевтических средств субъекту в определенных количествах по определенному графику. Согласно некоторым вариантам осуществления химиотерапевтическое средство может представлять собой средство в клинических испытаниях.

Используемое в настоящем документе совместное введение или комбинированная терапия следует понимать как введение двух или более активных средств с использованием отдельных составов или одного фармацевтического состава, или последовательное введение в любом порядке, так что, существует период времени, когда оба (или все) активные средства одновременно проявляют свои биологические активности. Предполагается, что в настоящем документе одно активное средство (например, CoQ10) может улучшать активность второго средства, например, может сенсибилизировать клетки-мишени, например, злокачественные клетки, к активностям второго средства. Совместное введение не требует того, чтобы средства вводили одновременно, с той же частотой или тем же путем

- 10 032775 введения. Используемое в настоящем документе совместное введение или комбинированная терапия включает в себя введение соединения CoQ10 с одним или несколькими дополнительными противораковыми средствами, например, химиотерапевтическими средствами, или введение двух или более соединений CoQ10. Примеры противораковых средств, включающие в себя химиотерапевтические средства, приведены в настоящем документе.

Согласно предпочтительному варианту осуществления дополнительные противораковые средства, например, химиотерапевтические средства или химиотерапевтическая схема лечения, вводимые в комбинации с CoQ10 в способах лечения, представленных в настоящем документе, не включают, например, исключают, CoQ10.

Химиотерапевтические схемы лечения могут включать в себя введение лекарственного средства на заданном цикле, включая в себя интервалы дозирования и не дозирования с одним или несколькими средствами для лечения злокачественной опухоли. Например, средство может быть введено один или несколько раз в неделю в течение трех последовательных недель, после чего следует неделя без вводимого средства, чтобы обеспечить четырехнедельный цикл. Цикл может быть повторен так, чтобы субъект был подвергнут трехнедельному лечению, одной неделе без лечения, трехнедельному лечению, одной неделе без лечения и т.д., для заданного числа циклов. Согласно некоторым вариантам осуществления эффективность и лабораторные показатели лечение (например, ферменты печени, анализ крови, функции почек) оцениваются в конце каждого цикла или каждый другой цикл.

Субъект, которому не помогла химиотерапевтическая схема лечения представляет собой субъект со злокачественной опухолью, который не отвечает или перестает реагировать на лечение с химиотерапевтической схемой лечения по критериям RECIST 1.1 (см., Eisenhauer et al., 2009 и как описано выше), т.е. не достигает, по меньшей мере, стабилизации заболевания (т.е. стабильного заболевания, частичного ответа или полного ответа) в поражениях органов-мишеней или не достигает, по меньшей мере, не CR/не PD (т.е. не CR/не PD или полный ответ) поражений нецелевых органов во время или после завершения химиотерапевтической схемы лечения либо самостоятельно, либо в сочетании с хирургическим вмешательством и/или лучевой терапией, которые, когда это возможно, часто клинически указываются в сочетании с химиотерапией. Неудачная химиотерапевтическая схема лечения приводит, например, к росту опухоли, увеличенной опухолевой нагрузке и/или метастазированию опухоли. Согласно некоторым вариантам осуществления неудачная химиотерапевтическая схема лечения, как используется в настоящем документе, включает в себя схему лечения, которая была прекращена из-за ограничения дозы токсичности, например III степени или IV степени токсичности, которые не могут быть решены, чтобы позволить продолжение или возобновление лечения с химиотерапевтическим средством или схемой лечения, которая вызвала токсичность. Согласно некоторым вариантам осуществления неудачная химиотерапевтическая схема лечения включает в себя схему лечения, которая не приводит, по меньшей мере, к стабильному заболеванию для всех поражений органов-мишеней и нецелевых органов в течение длительного периода, например, по меньшей мере 1 месяца, по меньшей мере 2 месяцев, по меньшей мере 3 месяцев, по меньшей мере 4 месяцев, по меньшей мере 5 месяцев, по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или любой период времени меньше, чем клинически определенное лечение. Согласно некоторым вариантам осуществления неудачная химиотерапевтическая схема лечения включает в себя схему лечения, которая приводит к прогрессирующему заболеванию по меньшей мере одного поражения органа-мишени во время лечения с химиотерапевтическим средством или приводит к прогрессирующему заболеванию менее чем через 2 недели, менее чем через 1 месяц, менее чем через два месяца, менее чем через 3 месяца, менее чем через 4 месяца, менее чем через 5 месяцев, менее чем через 6 месяцев, менее чем через 12 месяцев или менее чем через 18 месяцев после заключения схемы лечения или менее чем через любой период времени меньший, чем клинически определенное лечение.

Неудачная химиотерапевтическая схема лечения не включает в себя схему лечения, при которой субъект, получавший лечение от злокачественной опухоли, достигает клинически определенного излечения, например, 5 лет полного ответа после окончания схемы лечения, и при которой у субъекта впоследствии диагностируют отчетливую злокачественную опухоль, например, более чем через 5 лет, более чем через 6 лет, более чем через 7 лет, более чем через 8 лет, более чем через 9 лет, более чем через 10 лет, более чем через 11 лет, более чем через 12 лет, более чем через 13 лет, более чем через 14 лет или более чем через 15 лет после окончания схемы лечения. Например, у субъекта, который страдал от злокачественной опухоли в детском возрасте, может развиваться злокачественная опухоль позже в жизни после излечения от злокачественной опухоли в детстве. У такого субъекта химиотерапевтическая схема лечения для лечения злокачественной опухоли в детском возрасте считается успешной.

Устойчивая к лечению злокачественная опухоль представляет собой злокачественное новообразование, для которого операция неэффективна, которая представляет собой либо изначально не реагирующую на химио- или лучевую терапию, либо которая становится не реагирующей на химио- или лучевую терапию с течением времени.

- 11 032775

Термин терапевтически эффективное количество означает такое количество, достаточное для лечения заболевания у субъекта. Терапевтически эффективное количество может быть введено в один или несколько приемов.

Термины вводить или введение включают в себя любой способ доставки фармацевтической композиции или средства в систему субъекта или к конкретной области или на субъект. Согласно некоторым вариантам осуществления средство доставляется перорально. Согласно некоторым вариантам осуществления средство вводят парентерально. Согласно некоторым вариантам осуществления средство доставляется путем инъекции или инфузии. Согласно некоторым вариантам осуществления средство доставляется местно, включая в себя через слизистую. Согласно некоторым вариантам осуществления средство доставляется посредством ингаляции. Согласно некоторым вариантам осуществления настоящего изобретения средство вводят путем парентеральной доставки, включая в себя внутривенную, внутримышечную, подкожную, интрамедуллярную инъекции, а также интратекальную, прямую внутрижелудочковую, внутрибрюшинную, интраназальную или внутриглазную инъекции. Согласно одному варианту осуществления предусмотренные в настоящем изобретении композиции могут быть введены путем инъекции непосредственно в опухоль. Согласно некоторым вариантам осуществления составы согласно настоящему изобретению могут быть введены путем внутривенной инъекции или внутривенной инфузии. Согласно некоторым вариантам осуществления составы согласно настоящему изобретению можно вводить путем непрерывной инфузии. Согласно некоторым вариантам осуществления введение представляет собой не пероральное. Согласно некоторым вариантам осуществления введение представляет собой системное. Согласно некоторым вариантам осуществления введение представляет собой местное. Согласно некоторым вариантам осуществления один или несколько путей введения могут быть объединены, такие как, например, внутривенный и внутриопухолевый, внутривенный и пероральный или внутривенный и пероральный, внутривенный и местный или внутривенный и трансдермальный или через слизистую. Введение средства может быть выполнено с помощью ряда людей, работающих согласованно. Введение средства включает в себя, например, предписание средства для введения субъекту и/или предоставление инструкций, непосредственно или через другого для получения конкретного средства, либо путем самодоставки, например, как с помощью пероральной доставки, подкожной доставки, внутривенной доставки через центральную линию, и т.д.; или для доставки обученным профессионалом, например, внутривенная доставка, внутримышечная доставка, внутриопухолевая доставка и т.д.

Нежелательные явления или АЕ характеризуются степенью в зависимости от степени тяжести. Некоторые АЕ (например, тошнота, низкие показатели крови, боль, снижение свертываемости крови) можно лечить, так что специфическая химиотерапевтическая схема лечения может быть продолжена или возобновлена. Некоторые нежелательные явления (например, сердечная недостаточность, печеночная недостаточность или почечная недостаточность; тошнота) не могут быть излечимы, требуя прекращения приема лекарственного средства. Определение степени AE и соответствующих вмешательств может быть определено специалистами в настоящей области техники. Критерии общей терминологии для нежелательных явлений v4.0 (CTCAE) (дата публикации: 28 мая 2009 г.) обеспечивают балльную шкалу нежелательных явлений следующим образом:

степень - слабая; бессимптомные или умеренные симптомы; только клинические или диагностические наблюдения; вмешательство не показано;

степень - умеренная; показано минимальное, местное или неинвазивное вмешательство; ограничивающее соответствующие возрасту способности к самообслуживанию в повседневной жизни (ADL);

степень - тяжелые или медицински значительные, но не сразу опасные для жизни; показана госпитализация или продление госпитализации; потеря трудоспособности, ограничение самообслуживания ADL;

степень - опасные для жизни последствия; показано срочное вмешательство;

степень - смерть, связанная с нежелательным явлением.

Используемый в настоящем документе термин выживание обозначает продолжение жизни субъекта, которого лечили от заболевания или состояния, например злокачественной опухоли. Время выживания может быть определено от произвольной точки, такой как время вступления в клиническое испытание, время от завершения или неудачной или более ранней схемы лечения, время от диагноза и т.д.

Используемый в настоящем документе термин опсонизация относится к процессу, посредством которого липофильное биологически активное средство, как описано в настоящем документе, помечено для поглощения и разрушения фагоцитом. Опсонизация включает в себя связывание опсонина с биологически активным средством. После связывания опсонина с мембраной, фагоциты привлекают активное средство. Опсонин представляет собой любую молекулу, которая действует в качестве связующего усилителя для процесса фагоцитоза.

- 12 032775

Используемый в настоящем документе термин уменьшающее опсонизацию средство относится к любому средству, которое работает в сочетании с активным средством, чтобы уменьшить способность опсонинов действовать в качестве связующего усилителя для процесса фагоцитоза.

Используемый в настоящем документе термин дисперсия относится к системе, в которой частицы коллоидного размера любой природы (например, твердые, жидкие или газообразные) диспергируют в непрерывной фазе другого состава или состояния. При внутривенной доставке лекарственных средств непрерывная фаза представляет собой по существу воду и дисперсные частицы могут быть твердыми (суспензия) или не смешиваемой жидкостью (эмульсии).

Субъект, подлежащий лечению способом согласно настоящему изобретению, может означать либо человека, либо отличного от человека животного, предпочтительно млекопитающего, более предпочтительно человека. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект характеризуется наличием обнаруживаемой опухоли до начала лечения с использованием способов согласно настоящему изобретению. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект характеризуется наличием обнаруживаемой опухоли на момент начала лечения с использованием способов согласно настоящему изобретению.

Используемый в настоящем документе термин безопасное и терапевтически эффективное количество относится к количеству компонента, которое представляет собой достаточное для получения желаемого терапевтического результата без чрезмерных отрицательных побочных эффектов (таких как токсичность, раздражение или аллергическая реакция), соразмерных с разумным отношением пользы/риска при использовании в виде настоящего раскрытия.

Терапевтически эффективное количество означает количество соединения, которое при введении пациенту для лечения заболевания достаточно для осуществления такого лечения заболевания. При введении для профилактики заболевания, количество представляет собой достаточное для того, чтобы избежать или задержать начало заболевания. Терапевтически эффективное количество будет варьировать в зависимости от соединения, заболевания и его тяжести и возраста, массы и т. д., подлежащего лечению пациента. Терапевтически эффективное количество не обязательно должно быть лечебным. Терапевтически эффективное количество может не предотвращать заболевание или состояние от возникновения когда-либо. Вместо терапевтически эффективного количества существует количество, которое будет, по меньшей мере, задерживать или уменьшать начало, тяжесть или прогрессирование заболевания или состояния. Прогрессирование заболевания можно контролировать, например, с помощью одного или нескольких из следующего: опухолевая нагрузка, время до прогрессирования, время выживаемости или другие клинические измерения, используемые в настоящей области техники.

Термин терапевтический эффект относится к местному или системному эффекту у животных, в частности млекопитающих, а более конкретно людей, обусловленный воздействием фармакологически активного вещества. Таким образом, термин означает любое вещество, предназначенное для использования в диагностике, исцелении, смягчении последствий, лечении или профилактики заболеваний или в повышении желаемого физического или психического развития и условий у животного или человека. Фраза терапевтически эффективное количество означает такое количество такого вещества, которое производит некоторый желаемый местный или системный эффект при соотношении польза/риск, применимое к любому лечению. Согласно некоторым вариантам осуществления терапевтически эффективное количество соединения будет зависеть от его терапевтического индекса, растворимости и т.п.

Предотвращение или профилактика относится к уменьшению риска возникновения заболевания или нарушения (т.е. способствование отсутствию развития по меньшей мере одного из клинических признаков или симптомов заболевания у пациента, который может быть подвержен либо предрасположен к заболеванию, но еще не испытывает или не проявляет симптомы заболевания). Профилактика не требует того, чтобы заболевание или состояние никогда не происходило или не повторялось у субъекта.

Термины нарушения и заболевания используются включительно и относятся к любому отклонению от нормальной структуры или функции любой части, органа или системы организма (или любой их комбинации). Конкретное заболевание проявляется характерными симптомами и признаками, включающими в себя биологические, химические и физические изменения, и часто ассоциируется с различными другими факторами, включающими в себя без ограничения демографические, экологические, занятости, генетические факторы и медицинской истории. Некоторые характерные признаки, симптомы и связанные с ними факторы могут быть количественно определены с помощью различных способов, чтобы получить важную диагностическую информацию.

Во всех присутствиях в настоящей заявке, где есть ряд перечисленных числовых значений, следует понимать, что любое из указанных числовых значений может представлять собой верхний предел или нижний предел числового диапазона. Следует также понимать, что настоящее изобретение охватывает все такие числовые диапазоны, т. е. диапазон, содержащий комбинацию верхнего числового предела и нижнего числового предела, причем численное значение для каждого из верхнего предела и нижнего предела может представлять собой любое численное значение, указанное в настоящем документе.

- 13 032775

Представленные в настоящем документе диапазоны понимаются, как включающие все значения в пределах диапазона. Например, диапазон 1-10 следует понимать, как включающий все значения 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и 10 и дробные, как подходящие. Диапазоны, выражающиеся как до определенного значения, например, до 5, понимаются как все значения, включающие в себя верхний предел диапазона, например, 0, 1, 2, 3, 4 и 5 и дробные значения, как подходящие. До или в течение недели следует понимать, как диапазон, включающий 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7 дней. Точно так же, диапазоны, разделённые по меньшей мере, понимаются как включающие более низкое предусмотренное значение и все более высокие числа.

Все процентные составы представляют собой весовое отношение, если не указано иное.

Используемый в настоящем документе термин приблизительно понимается как включающий три стандартных отклонения от среднего значения или в пределах стандартных диапазонов толерантности в конкретной области техники. Согласно некоторым вариантам осуществления приблизительно понимается как изменение не более чем на 0,5.

Неопределенные артикли используются в настоящем документе для обозначения одного или более чем одного (т.е. по меньшей мере одного) грамматического объекта статьи. В качестве примера элемент означает один элемент или несколько элементов.

Термин включающий в себя используется в настоящем документе для обозначения и используется наравне с фразой включающий в себя без ограничения.

Термин или используется включительно в настоящем документе для обозначения, и используется взаимозаменяемо с термином и/или, если в контексте явно не указано иное.

Термин такие как используется включительно в настоящем документе для обозначения, и используются взаимозаменяемо с фразой такие как без ограничения.

Используемый в настоящем документе термин стандартная доза относится к дозе терапевтического средства, которая, как правило, используется для лечения нарушения. Например, рекомендуемая доза терапевтического средства, описанная во вкладыше продукта производителем терапевтического средства, будет рассматриваться как стандартная доза. Примеры стандартных доз химиотерапевтических средств приведены в табл. 3.

Например, как показано в таблице 3, стандартная доза гемцитабина для внутривенного применения для лечения злокачественной опухоли яичников составляет 1000 мг/м² в течение 30 мин в дни 1 и 8 каждого 21-дневного цикла; стандартная доза гемцитабина для внутривенного применения для лечения злокачественной опухоли молочной железы составляет 1250 мг/м² в течение 30 мин в дни 1 и 8 каждого 21-дневного цикла; стандартная доза гемцитабина для внутривенного применения для лечения немелкоклеточного рака легких составляет 1000 мг/м² в течение 30 мин в дни 1, 8 и 15 каждого 28дневного цикла или 1250 мг/м² в течение 30 мин в дни 1 и 8 каждого 21-дневного цикла; и стандартная доза гемцитабина для внутривенного применения для лечения злокачественной опухоли поджелудочной железы: 1000 мг/м² в течение 30 мин один раз в неделю в течение первых 7 недель, затем одна неделя перерыва, а затем один раз в неделю в течение 3 недель каждого 28-дневного цикла.

II. Соединения кофермента Q10.

Следует понимать, что все предусмотренные в настоящем изобретении способы могут включать в себя введение вместо кофермента Q10 любого другого соединения кофермента Q10 или его комбинации. Соединения кофермента Q10 предназначены для включения в себя класса соединений CoQlO. Соединения кофермента Q10, эффективные для описанных в настоящем документе способов, включают в себя CoQlO, метаболит CoQlO, биосинтетический предшественник Q10, аналог Q10, производное Q10 и родственные CoQlO соединения. Аналог CoQlO включает в себя аналоги, не содержащие ни одного или по меньшей мере один изопрениловый повтор. CoQlO характеризуется следующей структурой:

где х представляет собой 10. В настоящем изобретении соединения CoQlO могут включать в себя производные CoQlO, в которых х представляет собой любое число изопрениловых единиц от 4-10 или любое число изопрениловых единиц от 6-10, или любое число изопрениловых единиц от 8-10 или 9-10 изопрениловых единиц. CoQlO включает в себя полностью окисленную версию, также известную как убихинон, частично окисленную версию, также известную как семихинон или убисемихинон, или полностью восстановленную версию, известную также как убихинол; или любые их смеси или комбинации. Согласно некоторым вариантам осуществления соединение CoQlO для лечения злокачественной опухоли представляет собой убихинон. Согласно некоторым вариантам осуществления соединение CoQlO для лечения злокачественной опухоли представляет собой убихинол.

Согласно некоторым вариантам осуществления настоящего изобретения терапевтическое средство представляет собой кофермент Q10 (CoQlO). Кофермент Q10, также называемый в настоящем документе

-14032775

CoQ10, также известен как убихинон или убидекаренон. CoQ10 представляет собой признанный в настоящей области техники и дополнительно описан в международной публикации № WO 2005/069916 (заявка № PCT/US2005/001581), WO 2008/116135 (заявка № PCT/US08/57786), WO 2010/132507 (заявка № PCT/US2010/034453), WO 2011/112900 (заявка № PCT/US2011/028042) и WO 2012/174559 (заявка № PCT/US2012/043001), полное содержание каждой из которых непосредственно включено в настоящий документ посредством ссылки. CoQ10 представляет собой представителя из серии полипренил-2,3диметокси-5-метилбензохинона (убихинона), присутствующего в митохондриальной системе транспорта электронов эукариотических клеток. Человеческие клетки производят CoQ10 исключительно и он находится в клетке и митохондриальных мембранах всех клеток человека, с самым высоким содержанием в органах с высокими энергетическими потребностями, таких, как печень и сердце. Организменный пул кофермента Q10, по оценкам, составляет приблизительно 2 г, из которых более 50% представляет собой эндогенный. Приблизительно 0,5 г CoQ10 требуется из рациона или биосинтеза каждый день. CoQ10 производится в тонных количествах на мировом рынке добавок и может быть получен из Kaneka, с растениями в Пасадене, штат Техас и Takasagoshi, Японии.

Родственные с коферментом Q10 соединения включают в себя без ограничения бензохиноны, изопреноиды, фарнезолы, фарнезилацетат, фарнезилпирофосфат, 1-фенилаланин, d-фенилаланин, dlфенилаланин, 1-тирозин, d-тирозин, dl-тирозин, 4-гидроксифениллпируват, 4-гидроксифениллацетат, 4гидроксикоричную кислоту, дипептиды и трипептиды тирозина или фенилаланина, 3,4дигидроксиманделат, 3-метокси-4-гидроксифенилгликоль, 3-метокси-4-гидроксиманделат, ванилиновую кислоту, фенилацетат, пиридоксин, S-аденозилметионин, пантенол, мевалоновую кислоту, изопентилпирофосфат, фенилбутират, 4-гидроксибензоат, пирофосфат декапренила, бета-гидроксибутират, 3гидрокси-3-метилглутарат, ацетилкарнитин, ацетоацетилкарнитин, ацетилглицин, ацетоацетилглицин, карнитин, уксусную кислоту, пировиноградную кислоту, 3-гидрокси-3-метилглутарилкарнитин, все изомерные формы серина, аланина, цистеина, глицина, треонина, гидроксипролина, лизина, изолейцина и лейцина, даже жирные кислоты с числом атомов углерода C₄-C₈ (масляная, капроновая, каприловая, каприновая, лауриновая, миристиновая, пальмитиновая и стеариновая кислоты), соли карнитина и глицина, например, пальмитоилкарнитин и пальмитоилглицин и 4-гидроксибензоатполифенилтрансферазу, любые соли этих соединений, а также любые их комбинации и т.п. Согласно некоторым вариантам осуществления такие средства могут быть использованы для лечения злокачественной опухоли в соответствии с представленными в настоящем документе способами.

Метаболиты и биосинтетические предшественники CoQ10 включают в себя без ограничения те соединения, которые образуются между химическим/биологическим превращением тирозина и ацетилCoA в убихинол. Промежуточные соединения пути биосинтеза кофермента включают в себя тирозин, ацетил-CoA-3-гексапренил-4-гидроксибензоат, 3-гексапренил-4,5-дигидроксибензоат, 3-гексапренил-4гидрокси-5-метоксибензоат, 2-гексапренил-6-метокси-1,4-бензохинон, 2-гексапренил-3-метил-6-метокси1,4-бензохинон, 2-гексапренил-3-метил-5-гидрокси-6-метокси-1,4-бензохинон, 3-октапренил-4гидроксибензоат, 2-октапренилфенол, 2-октапренил-6-метоксифенол, 2-октапренил-3-метил-6-метокси1,4-бензохинон, 2-октапренил-3-метил-5-гидрокси-6-метокси-1,4-бензохинон, 2-декапренил-3-метил-5гидрокси-6-метокси-1,4-бензохинон, 2-декапренил-3 -метил-6-метокси-1,4-бензохинон, 2-декапренил-6метокси-1,4-бензохинон, 2-декапренил-6-метоксифенол, 3-декапренил-4-гидрокси-5-метоксибензоат, 3декапренил-4,5-дигидроксибензоат, 3-декапренил-4-гидроксибензоат, 4-гидроксифенилпируват, 4фениллацетат, 4-гидроксибензоат, 4-гидроксисициннамат и гексапренилдифосфат. Согласно некоторым вариантам осуществления такие средства могут быть использованы для лечения злокачественной опухоли в соответствии с представленными в настоящем документе способами.

III. Композиции.

В настоящем изобретении предусмотрены композиции, содержащие соединение CoQ10, например, кофермент Q10, для лечения и профилактики злокачественной опухоли. Композиции согласно настоящему изобретению могут быть введены пациенту либо сами по себе, либо в фармацевтических композициях, где они смешиваются с подходящими носителями или вспомогательным веществом(ами). При лечении пациента, проявляющего онкологическое нарушение, вводят терапевтически эффективное количество соединения CoQ10.

Подходящие способы введения настоящих композиций согласно настоящему изобретению могут включать парентеральную доставку, включающую в себя внутривенные, внутримышечные, подкожные, интрамедуллярные инъекции, а также интратекальные, прямые внутрижелудочковые, внутрибрюшинные, интраназальные или внутриглазные инъекции, только чтобы назвать несколько. Согласно одному варианту осуществления предусмотренные в настоящем изобретении композиции могут быть введены путем инъекции непосредственно в опухоль. Согласно некоторым вариантам осуществления составы согласно настоящему изобретению могут быть введены путем внутривенной инъекции или внутривенной инфузии. Согласно некоторым вариантам осуществления состав вводят путем непрерывной инфузии. Согласно одному варианту осуществления композиции согласно настоящему изобретению вводят путем внутривенной инъекции. Согласно одному варианту осуществления композиции согласно настоящему изобретению вводят путем внутривенной инфузии.

- 15 032775

Если путь введения представляет собой, например внутривенную инфузию, в настоящем документе предусмотрены варианты осуществления, где внутривенная инфузия содержит активное средство, например, CoQ10, в концентрации приблизительно 40 мг/мл. Если композицию вводят путем внутривенной инфузии, она может быть разбавлена в фармацевтически приемлемом водном растворе, таком как фосфатно-солевой буфер или физиологический раствор. Согласно некоторым вариантам осуществления один или несколько путей введения могут быть объединены, такие как, например, внутривенный и внутриопухолевый или внутривенный и пероральный, или внутривенный и пероральный, внутривенный или местный и трансдермальный, или через слизистую.

Описанные в настоящем документе композиции могут быть введены субъекту в любом подходящем составе. Они включают в себя, например, жидкие, полутвердые и твердые дозированные формы, такие как жидкие растворы (например, инъекционные и инфузионные растворы), дисперсии или суспензии, таблетки, пилюли, порошки, кремы, лосьоны, мази или пасты, капли для введения в глаз, ухо или нос, липосомы и суппозитории. Предпочтительная форма зависит от предполагаемого способа введения и терапевтического применения.

Согласно некоторым вариантам осуществления соединение CoQ10, например, CoQ10, может быть получено с носителем, который будет защищать от быстрого высвобождения, например, в виде состава с контролируемым высвобождением, включая в себя имплантаты, трансдермальные пластыри и микроинкапсулированные системы доставки. Могут быть использованы биоразлагаемые, биосовместимые полимеры, например этиленвинилацетат, полиангидриды, полигликолевая кислота, коллаген, полиортоэфиры и полимолочная кислота. Многие способы получения таких препаратов запатентованы или в целом известны специалистам в настоящей области техники. См., например, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978.

Например, соединение CoQ10, например, CoQ10, может быть составлено для парентеральной доставки, например, для подкожной, внутривенной, внутримышечной или внутриопухолевой инъекции. Композиции могут быть введены в виде одного болюса, многократных инъекций или путем непрерывной инфузии (например, внутривенно или путем перитонеального диализа). Для парентерального введения композиции могут быть приготовлены в стерилизованной апирогенной форме.

Использование фармацевтически приемлемых носителей для составления раскрытых в настоящем документе соединений, для практики настоящего изобретения, в дозах, подходящих для системного введения, находится в пределах объема настоящего изобретения. При правильном выборе носителя и подходящей производственной практики, композиции согласно настоящему изобретению, в частности, составленные в виде растворов, можно вводить парентерально, например, путем внутривенной инъекции.

Токсичность и терапевтическая эффективность таких соединений может быть определена с помощью стандартных фармацевтических процедур в клеточных культурах или на экспериментальных животных, например, для определения LD50 (дозы, летальной для 50% популяции) и ED50 (дозы, терапевтически эффективной у 50% популяции). Соотношение доз между токсическим и терапевтическим эффектами представляет собой терапевтический индекс, и он может быть выражен как отношение LD50/ED50. Соединения, которые обладают большими терапевтическими индексами, могут быть желательными. Данные, полученные из этих клеточных культур и исследований на животных, могут быть использованы для определения диапазона доз для применения у человека. Дозировка таких соединений может быть в пределах диапазона циркулирующих концентраций, которые включают в себя ED50 с небольшой токсичностью или без токсичности. Дозировка может варьировать в пределах этого диапазона в зависимости от используемой лекарственной формы и способа введения.

Фармацевтические композиции, пригодные для использования в настоящем изобретении, включают в себя композиции, в которых активные ингредиенты содержатся в количестве, эффективном для достижения поставленной цели. Определение эффективных количеств находится в пределах возможностей специалиста в настоящей области техники, особенно в свете предусмотренного в настоящем документе подробного описания. В дополнение к активным ингредиентам эти фармацевтические композиции могут содержать подходящие фармацевтически приемлемые носители, включающие в себя наполнители и вспомогательные вещества, облегчающие процессинг активных соединений в препараты, которые могут быть использованы фармацевтически. Препараты, составленные для внутривенного введения, могут быть в форме растворов коллоидной дисперсии.

Фармацевтические композиции для парентерального введения включают в себя водные растворы активных соединений в водорастворимой форме. Кроме того, суспензии активных соединений могут быть приготовлены в виде подходящих масляных инъекционных суспензий. Подходящие липофильные растворители или наполнители включают в себя жирные масла, такие как кунжутное масло, или синтетические сложные эфиры жирных кислот, такие как этилолеат или триглицериды, или липосомы. Водные инъекционные суспензии могут содержать вещества, которые увеличивают вязкость суспензии, такие как натрий-карбоксиметилцеллюлоза, сорбит или декстран. Необязательно, суспензия может также

- 16 032775 содержать подходящие стабилизаторы или средства, которые повышают растворимость соединений для обеспечения подготовки высококонцентрированных растворов.

IV. Составы.

Активное средство, например, соединение CoQ10, например, CoQ10, может быть доставлено в любом фармацевтически приемлемом носителе для желаемого пути введения. Используемые в настоящем документе составы, включающие в себя соединения CoQ10, составляют для любого пути введения, если явно не указано иное. Согласно предпочтительным вариантам осуществления составы представляют собой таковые для введения путем инъекции, инфузии или местного введения. Согласно некоторым вариантам осуществления соединения CoQ10 не доставляются перорально.

Предпочтительные терапевтические составы для использования в способах согласно настоящему изобретению содержат активное вещество (например, соединение CoQ10, например, CoQ10) в образовании микрочастиц, например, для внутривенного введения. Такие внутривенные составы представлены, например, в WO 2011/112900 (заявка № PCT/US2011/028042), полное содержание которых специально включено в настоящий документ посредством ссылки, и иллюстративный состав для внутривенного введения, как описан в WO 2011/112900 (заявка № PCT/US2011/028042) используется в примерах, приведенных ниже. Благодаря гомогенизации высокого давления частицы активного средства (например, соединение CoQ10, например, CoQ10) уменьшаются для получения частиц, которые достаточно малы, чтобы пройти через 200-нм стерилизационный фильтр. Частицы, которые достаточно малы, чтобы пройти через 200 нм стерилизационный фильтр, могут быть введены внутривенно. Эти частицы намного меньше, чем клетки крови и, следовательно, не будут эмболизировать капилляры. Эритроциты, например, представляют собой диски размером 6-мкмх2 мкм. Частицы диспергируют и заключают в или окружают стабилизирующим средством. Без ограничения какой-либо теорией полагают, что стабилизирующие средства притягиваются к гидрофобному терапевтическому средству таким образом, что диспергированные частицы гидрофобного терапевтического средства окружаются стабилизирующим средством, образующим суспензию или эмульсию. Диспергированные частицы в суспензии или эмульсии содержат поверхность из стабилизирующего средства и ядро, состоящее из гидрофобного терапевтического средства, например, соединения CoQ10, например, CoQ10, в форме твердых частиц (суспензии) или в форме несмешивающейся жидкости (эмульсии). Дисперсные частицы могут быть зафиксированы в липофильных областях липосомы.

Дисперсные коллоидные системы позволяют высокую лекарственную нагрузку в составе без использования сорастворителей. Кроме того, высокие и относительно воспроизводимые уровни в плазме достигаются без зависимости от эндогенных носителей-липопротеинов низкой плотности. Что еще более важно, составы позволяют высокое содержание лекарственных средств с замедленным высвобождением в солидных опухолях за счет пассивного накопления коллоидных частиц гидрофобного терапевтического средства.

Предпочтительный внутривенный состав по существу содержит непрерывную фазу воды и диспергированных твердых частиц (суспензию) или диспергированную несмешивающуюся жидкость (эмульсию). Дисперсные коллоидные системы, в которых частицы состоят в основном из самого активного средства (лекарственного средства), часто могут доставлять больше лекарственного средства на единицу объема, чем непрерывная солюбилизирующая система, если система может быть выполнена достаточно стабильной.

Как среда состава, водный раствор может включать раствор Хенкса, раствор Рингера, забуференный фосфатом физиологический раствор (PBS), физиологический солевой буфер или другие подходящие соли или комбинации для достижения соответствующего рН и осмолярности для парентерально доставляемых составов. Водные растворы могут быть использованы для разбавления составов для введения до желаемой концентрации. Например, водные растворы могут быть использованы для разбавления состава для внутривенного введения с концентрацией приблизительно 4% вес./об. до более низкой концентрации, чтобы облегчить введение низких доз CoQ10. Водный раствор может содержать вещества, которые увеличивают вязкость раствора, такие как натрий-карбоксиметилцеллюлоза, сорбит или декстран.

Активное средство (например, соединение CoQ10, например, CoQ10) диспергируют в водном растворе таким образом, что образуется коллоидная дисперсия, в которой нанодисперсные частицы гидрофобного терапевтического средства покрыты или заключены или окружены стабилизирующими дисперсию средствами, чтобы образовать нанодисперсии частиц активного средства (например, соединения CoQ10 например, CoQ10). Нанодиспергированные частицы активного средства (например, соединения CoQ10, например, CoQ10) содержат ядро, образованное из гидрофобного терапевтического средства, которое окружено стабилизирующим средством. Аналогичным образом, согласно некоторым аспектам, стабилизирующее средство представляет собой фосфолипид, характеризующийся как гидрофильными, так и липофильными частями. Фосфолипиды образуют липосомы или другие наночастицы при гомогенизации. Согласно некоторым аспектам эти липосомы представляют собой двухслойные однослойные липосомы, в то время как согласно другим вариантам осуществления липосомы представляют собой двухслойные многослойные липосомы. Дисперсные частицы активного

- 17 032775 средства (например, соединения CoQ10, например, CoQ10) диспергируют в липофильной части двухслойной структуры липосомы, образованной из фосфолипидов. Согласно некоторым другим аспектам ядро липосомы, подобно ядру нанодисперсии частиц активного средства (например, соединения CoQ10, например CoQ10), образовано из гидрофобного терапевтического средства, и внешний слой образован из двуслойной структуры фосфолипида. Согласно некоторым вариантам осуществления коллоидные дисперсии подвергаются процессу лиофилизации, в результате чего дисперсия наночастиц превращается в сухой порошок.

Согласно некоторым вариантам осуществления используемый состав для инъекции или инфузии представляет собой 4% стерильную водную коллоидную дисперсию, содержащую CoQ10 в наносуспензии, как получено в WO 2011/112900. Согласно некоторым вариантам осуществления состав включает в себя водный раствор; гидрофобное активное средство, например, CoQ10, предшественник или метаболит CoQ10 или связанное с CoQ10 соединение, диспергированное с образованием коллоидной нанодисперсии частиц; и по меньшей мере одно из стабилизирующих дисперсию средств и уменьшающих опсонизацию средств; причем коллоидную нанодисперсию активного средства диспергируют в частицы нанодисперсии, характеризующиеся средним размером менее 200 нм.

Согласно некоторым вариантам осуществления стабилизирующее дисперсию средство включает в себя без ограничения пегилированное касторовое масло, Cremphor® EL, Cremophor® RH 40, пегилированный витамин Е, витамин Е TPGS и димиристоилфосфатидилхолин (ДМФХ).

Согласно некоторым вариантам осуществления уменьшающее опсонизацию средство представляет собой полоксамер или полоксамины.

Согласно некоторым вариантам осуществления коллоидная нанодисперсия представляет собой суспензию или эмульсию. При желании, коллоидная нанодисперсия находится в кристаллической форме или переохлажденной расплавленной форме.

Согласно некоторым вариантам осуществления состав для инъекции или инфузии включает в себя лиопротектор, такой как питательный сахар, включающий в себя без ограничения лактозу, маннозу, мальтозу, галактозу, фруктозу, сорбозу, раффинозу, нейраминовую кислоту, глюкозамин, галактозамин, N-метилглюкозамин, маннит, сорбит, аргинин, глицин и сахарозу или любую их комбинацию.

Согласно некоторым вариантам осуществления состав для инъекции или инфузии включает в себя водный раствор; гидрофобное активное средство, диспергированное с образованием коллоидной нанодисперсии частиц; и по меньшей мере один из стабилизирующих дисперсию средств и уменьшающее опсонизацию средство. Коллоидную нанодисперсию активного средства диспергируют в нанодисперсные частицы, характеризующиеся размерами менее чем 200 нм. Согласно некоторым вариантам осуществления стабилизирующее дисперсию средство выбирают из природных или полусинтетических фосфолипидов. Например, подходящие стабилизирующие средства включают в себя полиэтоксилированное (а/к/пегилированное) касторовое масло (Cremophor® EL), полиэтоксилированное гидрогенизированное касторовое масло (Cremophor® RH 40), токоферол полиэтиленгликоль сукцинат (пегилированный витамин Е, витамин Е TPGS), сложные эфиры жирных кислот сорбитана (Spans®), желчные кислоты и соли желчных кислот или димиристоилфосфатидилхолин (ДМФХ). Согласно некоторым вариантам осуществления стабилизирующее средство представляет собой ДМФХ.

Согласно некоторым вариантам осуществления состав представляет собой подходящий для парентерального введения, включая в себя внутривенные, внутрибрюшинные, ортотопические, внутричерепные, внутримышечные, подкожные, интрамедуллярные инъекции, а также интратекальные, прямые внутрижелудочковые, интраназальные или внутриглазные инъекции. Согласно некоторым вариантам осуществления состав содержит CoQ10, димиристоилфосфатидилхолин и полоксамер 188 в соотношении 4:3:1,5 соответственно, который предназначен для стабилизации наносуспензии частиц. Согласно некоторым вариантам осуществления состав включает в себя фосфатный буфер солевой раствор, который содержит двухосновный фосфат натрия, одноосновный фосфат калия, хлорид калия, хлорид натрия и воду для инъекций. Согласно некоторым вариантам осуществления предусмотрена 4% стерильная водная коллоидная дисперсия, содержащая CoQ10 в наносуспензии, разбавленная в фосфатном буферном солевом растворе, например, 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 1:7, 1:8. 1:9, 1:10, 1:11, 1:12, 1:13, 1:14, 1:15, 1:16, 1:17, 1:18, 1:19, 1:20 или другом соответствующем соотношении, ограниченном любыми двумя значениями.

Согласно некоторым вариантам осуществления состав представляет собой состав для местного применения. Предусмотрены составы для местного применения соединений CoQ10, например, в WO 2010/132507 (заявка согласно РСТ № PCT/US2010/034453), WO 2008116135 (заявка согласно РСТ № PCT/US2008/116135) и WO 2005/069916 (заявка согласно РСТ № РСт2005/001581), полное содержание каждой из которых специально включено в настоящий документ посредством ссылки.

Составы, пригодные для местного введения, включают в себя жидкие или полужидкие препараты, пригодные для проникновения через кожу, такие как линименты, лосьоны, кремы, мази или пасты, а также капли, подходящие для введения в глаз, ухо или нос. Капли в соответствии с настоящим изобретением могут включать в себя стерильные водные или масляные растворы или суспензии и могут быть приготовлены растворением активного ингредиента в подходящем водном растворе

- 18 032775 бактерицидного и/или фунгицидного средства и/или любого другого подходящего консерванта, а согласно некоторым вариантам осуществления включать в себя поверхностно-активное вещество. Полученный раствор может быть затем уточнен и стерилизован с помощью фильтрации и перенесен в контейнер с помощью асептической техники. Примеры бактерицидных и фунгицидных средств, пригодных для включения в капли, представляют собой нитрат или ацетат фенилртути (0,002%), хлорид бензалкония (0,01%) и ацетат хлоргексидина (0,01%). Подходящие растворители для приготовления масляного раствора включают в себя глицерин, разбавленный спирт и пропиленгликоль.

Лосьоны в соответствии с настоящим изобретением включают в себя такие, которые пригодны для нанесения на кожу или глаз. Глазной лосьон может включать в себя стерильный водный раствор, необязательно содержащий бактерицид, и может быть получен способами, аналогичными тем, которые необходимы для приготовления капель. Лосьоны или линименты для нанесения на кожу могут также включать в себя средство, чтобы ускорить высушивание и охлаждение кожи, такое как спирт, и/или увлажнитель, такой как глицерин или масло, такое как касторовое масло или арахисовое масло.

Кремы, мази или пасты, используемые в способах согласно настоящему изобретению, представляют собой полутвердые составы активного ингредиента для наружного применения. Они могут быть изготовлены путем смешивания активного ингредиента в тонко измельченной или порошкообразной форме, отдельно или в растворе или суспензии в водной или неводной жидкости, с помощью добавления подходящего устройства с жирной или нежирной основой. Основа может включать в себя углеводороды, такие как твердый, мягкий или жидкий парафин, глицерин, пчелиный воск, металлическое мыло; слизь; масло природного происхождения, такое как миндальное, кукурузное, арахисовое, касторовое или оливковое масло; ланолин или его производные, или жирную кислоту, такую как стеариновая или олеиновая кислота вместе со спиртом, таким как пропиленгликоль или макрогели. Состав может включать любое подходящее поверхностно-активное средство, такой как анионное, катионное или неионное поверхностно-активное средство, такое как сложные эфиры сорбита или их полиоксиэтиленовые производные. Также могут быть включены суспендирующие средства, такие как природные смолы, производные целлюлозы или неорганические материалы, такие как кремнеземы, силикаты и других ингредиенты, таких как ланолин.

Согласно некоторым вариантам осуществления оставшийся компонент наполнителя местного средства доставки может представлять собой воду или водную фазу, согласно вариантам осуществления очищенную, например, деионизированную воду, глицерин, пропиленгликоль, этоксидигликоль, феноксиэтанол и сшитые полимеры акриловой кислоты. Такие композиции средства доставки могут содержать воду или водную фазу в количестве от приблизительно 50 до приблизительно 95 процентов, в расчете на общую массу композиции. Конкретное количество присутствующей воды не представляет собой критическое, однако, регулируется, чтобы получить желаемую вязкость (как правило, приблизительно от 50 сП до приблизительно 10000 сП) и/или концентрацию других компонентов. Местное средство доставки может характеризоваться вязкостью, составляющей по меньшей мере приблизительно 30 сП.

Составы для местного применения могут также включать в себя масляную фазу, включающую в себя, например, масляную фазу, которая, в свою очередь, может включать в себя смягчающие вещества, жирные спирты, эмульгаторы, их комбинации и т.п. Например, масляная фаза может включать в себя смягчители, такие как алкилбензоаты C_12-15 (коммерчески доступные в FINSOLV™ TN от Finetex Inc. (Edison, NJ)), каприново-каприловые триглицериды (коммерчески доступные от Huls как MIGLYOL™ 812) и т.п. Другие подходящие смягчители, которые могут быть использованы, включают в себя полученные из растений масла (кукурузное масло, сафлоровое масло, оливковое масло, масло ореха макадамиан и т.д.); различные синтетические сложные эфиры, включающие в себя капраты, линолеаты, дилинолеаты, изостеараты, фумараты, себацинаты, лактаты, цитраты, стеараты, пальмитаты и т.п.; синтетические триглицериды со средней длиной цепи, силиконовые масла или полимеры; жирные спирты, такие как цетиловый спирт, стеариловый спирт, цетеариловый спирт, лауриловый спирт, их комбинации и т.п.; и эмульгаторы, включающие в себя глицерилстеарат, стеарат ПЭГ-100, глицерилстеарат, глицерилстеарат SE, нейтрализованные или частично нейтрализованные жирные кислоты, включающие в себя стеариновую, олеиновую, пальмитиновую и т.п.; масляные растительные экстракты, содержащие жирные кислоты, Ceteareth®-20, Ceteth®-20, стеарат ПЭГ-150, лаурат ПЭГ-8, олеат ПЭГ-8, стеарат ПЭГ-8, стеарат ПЭГ-20, стеарат ПЭГ-40, дистеарат ПЭГ-150, дистеарат ПЭГ-8 их комбинации и т. п.; или другие неполярные косметические или фармацевтически приемлемые материалы, используемые для смягчения кожи в пределах компетенции специалиста в настоящей области техники, их комбинации и т. п.

Составы для местного применения могут также включать в себя липосомальный концентрат, включающий в себя, например, фосфолипид, такой как лецитин, лизолецитин, фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилинозитол, фосфатидилглицерин, фосфатидную кислоту, фосфатидилсерин, лизофосфатидилхолин, лизофосфатидилэтаноламин, лизофосфатидилглицерин, лизофосфатидную кислоту, лизофосфатидилсерин, ПЭГ-фосфатидилэтаноламин, ПВПфосфатидилэтаноламин, а также их комбинации, по меньшей мере одно липофильное биологически

- 19 032775 активное средство, и по меньшей мере один солюбилизатор. Липосомальный концентрат может быть в сочетании по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем, обладающим по меньшей мере одним усилителем проницаемости в количестве от приблизительно 0,5% по массе до приблизительно 20% по массе композиции. Фосфолипид может присутствовать в композиции в количестве от приблизительно 2 до приблизительно 20% по массе композиции и биоактивное средство может присутствовать в количестве от приблизительно 0,5 до приблизительно 20% по массе композиции.

Трансдермальные усилители проницаемости кожи также могут быть использованы для облегчения доставки CoQ10. Иллюстративные представляют собой сульфоксиды, такие как этоксидигликоль, 1,3бутиленгликоль, изопентилдиол, 1,2-пентандиол, пропиленгликоль, 2-метилпропан-2-ол, пропан-2-ол, этил-2-гидроксипропаноат, гексан-2,5-диол, ди(2-гидроксипропил)эфир, пентан-2,4-диол, ацетон, полиоксиэтилен(2)метиловый эфир, 2-гидроксипропионовая кислота, 2-гидроксиоктаноевая кислота, пропан-1-ол, 1,4-диоксан, тетрагидрофуран, бутан-1,4-диол, пропиленгликольдипеларгонат, полиоксипропилен-15-стеариловый эфир, октиловый спирт, полиоксиэтиленовый эфир олеилового спирта, олеиловый спирт, лауриловый спирт, диоктиладипат, дикаприловый адипат, диизопропиладипат, диизопропилсебацинат, дибутилсебацинат, диэтилсебацинат, диметиловый эфир себациновой кислоты, диоктилфталатсебацат, дибутилсуберат, диоктилфталатазелат, дибензилсебацат, дибутилфталат, дибутиловый азелат, этилмиристат, диметилазелат, бутилмиристат, дибутилсукцинат, дидецилфталат, децилолеат, этилкапроат, этиловый эфир салициловой кислоты, изопропиловый пальмитат, этиллаурат, 2-этилгексилпеларгонат, изопропилизостеарат, бутиллаурат, бензилбензоат, бутилбензоат, гексиллаурат, этилкапрат, этилкаприлат, бутилстеарат, бензиловый салицилат, 2-гидроксиоктановая кислота, диметилсульфоксид, метилсульфонилметан, Ν,Ν-диметилацетамид, Ν,Ν-диметилформамид, 2пирролидон, 1-метил-2-пирролидон, 5-метил-2-пирролидон, 1,5-диметил-2-пирролидон, 1-этил-2пирролидон, оксиды фосфина, сложные эфиры сахаров, тетрагидрофурфураловые спирты, мочевина, диэтил-м-толуамид, 1-додецилазацилогептан-2-он и их комбинации.

Солюбилизаторы, в частности, для местного введения могут включать в себя без ограничения полиоксиалкиленовые декстраны, сложные эфиры жирных кислот сахарозы, эфиры жирных спиртов олигоглюкозидов, сложные эфиры жирных кислот глицерина, сложные эфиры жирных кислот полиоксиэтиленов, полиэтоксилированные эфиры жирных кислот сорбитана, сложные эфиры жирных кислот поли(этиленоксида), простые эфиры жирных спиртов поли(этиленоксида), эфиры алкилфенола поли(этиленоксида), блок-сополимеры полиоксиэтилена-полиоксипропилена, этоксилированные масла и их комбинации.

Композиции для местного применения могут включать в себя смягчающие средства, включающие в себя без ограничения С12-15 алкилбензоаты, каприновые-каприловые триглицериды, полученные из растений масла, капраты, линолеаты, дилинолеаты, изостеараты, фумараты, себацинаты, лактаты, цитраты, стеараты, пальмитаты, синтетическе триглицериды со средней цепью, силиконовые масла, полимеры и их комбинации; жирный спирт выбирают из группы, состоящей из цетилового спирта, стеарилового спирта, цетеарилового спирта, лаурилового спирта и их комбинации; и эмульгатор выбирают из группы, состоящей из стеарата глицерина, стеарата полиэтиленгликоля 100, нейтрализованных жирных кислот, частично нейтрализованных жирных кислот, стеарата полиэтиленгликоля 150, лаурата полиэтиленгликоля 8, олеата полиэтиленгликоля, стеарата полиэтиленгликоля 8, стеарата полиэтиленгликоля 20, стеарата полиэтиленгликоля 40, дистеарата полиэтиленгликоля 150, дистеарата полиэтиленгликоля 8, а также их комбинации.

Композиции для местного применения могут включать в себя фазу нейтрализации, содержащую одно или несколько из следующего: вода, амины, лактат натрия и молочная кислота.

Водная фаза может дополнительно необязательно включать в себя одно или несколько из водной фазы, содержащей усилитель проницаемости необязательно в сочетании с модификатором вязкости, выбранным из группы, состоящей из сшитого полимера акриловой кислоты, пуллулана, маннана, склероглюканов, поливинилпирролидона, поливинилового спирта, гуаровой смолы, гидроксипропиловой гуаровой камеди, ксантановой камеди, камеди акации, камеди аравии, трагаканта, галактана, камеди рожкового дерева, камеди карайи, камеди бобов рожкового дерева, каррагенана, пектина, амилопектина, агара, семян айвы, рисового крахмала, кукурузного крахмала, картофельного крахмала, пшеничного крахмала, экстракта водорослей, декстрана, сукциноглюкана, карбоксиметилкрахмала, метилгидроксипропилового крахмала, альгината натрия, сложных эфиров пропиленгликоля альгиновой кислоты, полиакрилата натрия, полиэтилакрилата, полиакриламида, полиэтиленимина, бентонита, алюминиевомагниевого силиката, лапонита, гектонита и безводной кремниевой кислоты.

Составы для местного применения могут также включать в себя пигмент, такой как диоксид титана.

Согласно одному варианту осуществления состав для местного применения для использования в способах согласно настоящему изобретению включает в себя масляную фазу, содержащую С12-15 алкилбензоаты или каприновый/каприловый триглицерид, цетиловый спирт, стеариловый спирт, глицерилстеарат, стеарат полиэтиленгликоля 100, в количестве от приблизительно 5 до приблизительно 20% по массе композиции; водную фазу, содержащую глицерин, пропиленгликоль, феноксиэтанол, этоксидигликоль, воду и сшитый полимер акриловой кислоты, в количестве от приблизительно 60 до

- 20 032775 приблизительно 80% по массе композиции; фазу нейтрализации, содержащую воду, триэтаноламин, лактат натрия и молочную кислоту, в количестве от приблизительно 0,1 до приблизительно 15% по массе композиции; пигмент, содержащий диоксид титана в количестве от приблизительно 0,2 до приблизительно 2% по массе композиции; и липосомальной концентрат, содержащий полиэтоксилированный эфир жирной кислоты сорбитана, кофермент Q10, лецитин фосфатидилхолина, феноксиэтанол, пропиленгликоль и воду, в количестве от приблизительно 0,1 до приблизительно 30% от массы композиции, причем пропиленгликоль и этоксидигликоль присутствуют в объединенном количестве от 3% по массе до приблизительно 15% по массе композиции и кофермент Q10 присутствует в количестве от приблизительно 0,75% по массе до приблизительно 10% по массе композиции. Другие составы для использования в способах согласно настоящему изобретению предусмотрены, например, в WO 2008/116135 (РСТ заявка № PCT/US08/57786) и в WO 2010/132507 (РСТ/^2010/034453), полное содержание каждой из которых специально включено в настоящий документ посредством ссылки.

Согласно одному варианту осуществления состав для местного применения для использования в способах согласно настоящему изобретению представляет собой крем с 3% CoQ10, как описано в патенте США 2011/0027247, полное содержание которого включено в настоящий документ посредством ссылки. Согласно одному варианту осуществления 3% CoQ10 содержит:

(1) фазу А, содержащую C₁₂.₁5 алкилбензоат или каприновый/каприловый триглицерид в концентрации приблизительно 4,0% в весовом отношении композиции, цетиловый спирт в концентрации приблизительно 2,00% в весовом отношении композиции, стеариловый спирт в концентрации приблизительно 1,5% в весовом отношении, глицерилстеарат и ПЭГ-100 в концентрации приблизительно 4,5% в весовом отношении;

(2) фазу В, содержащую глицерин в концентрации приблизительно 2,00% в весовом отношении, пропиленгликоль в концентрации приблизительно 1,5% в весовом отношении, этоксидигликоль в концентрации приблизительно 5,0% в весовом отношении, феноксиэтанол в концентрации приблизительно 0,475% в весовом отношении, карбомерную дисперсию в концентрации приблизительно 40% в весовом отношении, очищенную воду в концентрации приблизительно 16,7% в весовом отношении;

(3) фазу С, содержащую триэтаноламин в концентрации приблизительно 1,3% в весовом отношении, молочную кислоту в концентрации приблизительно 0,5% в весовом отношении, лактат натрия в концентрации 2,0% в весовом отношении, воду в концентрации приблизительно 2,5% в весовом отношении;

(4) фазу D, содержащую диоксид титана в концентрации приблизительно 1,0% в весовом отношении, и (5) фазу Е, содержащую 21%-ный концентрат CoQ10 в концентрации 15,0% в весовом отношении.

Композиция 21%-го концентрата CoQ10 (фаза Е в представленном выше 3% креме) может быть получена путем объединения фаз А и В, как описано ниже. Фаза А включает в себя убидекаренон USP (CoQ10) в концентрации 21% в весовом отношении и полисорбат 80 NF в концентрации 25% в весовом отношении. Фаза B включает в себя пропиленгликоль USP в концентрации 10,00% в весовом отношении, феноксиэтанол NF в концентрации 0,50% в весовом отношении, лецитин NF (фосфолипон 85G) в концентрации 8,00% в весовом отношении и очищенную воду USP в концентрации 35,50% в весовом отношении. Все массовые проценты представлены по отношению к массе всей композиции 21%-го концентрата CoQ10. Проценты и дополнительные детали приведены в табл. 1.

Таблица 1

Фаза	Торговая марка	Название по МНКИ	Процент
A	RITABATE 80	ПОЛИСОРБАТ 80	25,000
A	УБИДЕКАРЕНОН	УБИХИНОН	21,000
B	ОЧИЩЕННАЯ ВОДА	ВОДА	35,500
B	ПРОПИЛЕНГЛИКОЛЬ	ПРОПИЛЕНГЛИКОЛЬ	10,000
B	ФЕНОКСИЭТАНОЛ	ФЕНОКСИЭТАНОЛ	0,500
B	ФОСФОЛИПОН 85G	ЛЕЦИТИН	8,000
Всего			100,000

Феноксиэтанол и пропиленгликоль помещают в подходящую емкость и смешивают до получения прозрачного раствора. Необходимое количество воды добавляют во второй контейнер (смесительная емкость 1). Смесительную емкость 1 нагревают до 45-55°С при смешивании. Раствор феноксиэтанол/пропиленгликоля добавляют в воду и перемешивают, пока он не становится прозрачным и однородным. Когда содержимое водной фазы в смесительной емкости 1 находится в диапазоне от 45 до 55°С, добавляют фосфолипон G с перемешиванием от низкого до умеренного. Избегая образования пены, содержимое смесительной емкости 1 смешивают до тех пор, пока фосфолипон 85G не

- 21 032775 распределится равномерно. Полисорбат 89 добавляют в подходящий контейнер (смесительная емкость 2) и нагревают до 50-60°С. Убидекаренон затем добавляют к смесительной емкости 2. При сохранении температуры на уровне от 50 до 60°С смесительную емкость 2 смешивают, пока весь убидекаренон не растворится. После того как весь убидекаренон растворится, водную фазу медленно переносят в смесительную емкость 2. Когда все материалы объединяют, содержимое гомогенизируют до тех пор, пока дисперсия не станет гладкой и однородной. С осторожностью, чтобы не перегреть, температура поддерживается в пределах от 50 до 60°C. Гомогенизацию затем прекращают и содержимое смесительной емкости 2 переносят в подходящую емкость для хранения.

Согласно некоторым вариантам осуществления состав для любого пути введения для использования в настоящем изобретении может включать в себя от приблизительно 0,001 до приблизительно 20% (в весовом отношении) CoQ10, более предпочтительно от приблизительно 0,01 до приблизительно 15% и еще более предпочтительно от приблизительно 0,1 до приблизительно 10% (в весовом отношении) CoQ10. Согласно некоторым вариантам осуществления состав для любого пути введения для использования в настоящем изобретении может включать в себя от приблизительно 1 до приблизительно 10% (в весовом отношении) CoQ10. Согласно некоторым вариантам осуществления состав для любого пути введения для использования в настоящем изобретении может включать в себя от приблизительно 2 до приблизительно 8% (в весовом отношении) CoQ10. Согласно некоторым вариантам осуществления состав для любого пути введения для использования в настоящем изобретении может включать в себя от приблизительно 2 до приблизительно 7% (в весовом отношении) CoQ10. Согласно некоторым вариантам осуществления состав для любого пути введения для использования в настоящем изобретении может включать в себя от приблизительно 3 до приблизительно 6% (в весовом отношении) CoQ10. Согласно некоторым вариантам осуществления состав для любого пути введения для использования в настоящем изобретении может включать в себя от приблизительно 3 до приблизительно 5% (в весовом отношении) CoQ10. Согласно некоторым вариантам осуществления состав для любого пути введения для использования в настоящем изобретении может включать в себя от приблизительно 3,5 до приблизительно 4,5% (в весовом отношении) CoQ10. Согласно некоторым вариантам осуществления состав для любого пути введения для использования в настоящем изобретении может включать в себя от приблизительно 3,5 до приблизительно 5% (в весовом отношении) CoQ10. Согласно одному варианту осуществления состав содержит приблизительно 4% (в весовом отношении) CoQ10. Согласно одному варианту осуществления состав включает в себя приблизительно 8% (в весовом отношении) CoQ10. Согласно различным вариантам осуществления состав включает в себя приблизительно 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20% (в весовом отношении) CoQ10 или любой диапазон, ограниченный любыми двумя значениями. Согласно некоторым вариантам осуществления составы могут быть приготовлены в виде процента веса к объему, а не процента веса к весу. В зависимости от состава концентрация CoQ10 может быть такой же или приблизительно такой же в процентных составах в/в и в/о. CoQ10 может быть получен из Kaneka Q10 в виде Kaneka Q10 (USP убидекаренон) в порошкообразной форме (Пасадена, штат Техас, США). CoQ10, используемый в способах, примеры которых приведены в настоящем документе, имеет следующие характеристики: остаточные растворители удовлетворяют требованию USP 467; содержание воды составляет менее чем 0,0%, менее чем 0,05% или менее чем 0,2%; остаток в пересчете составляет 0,0%, менее чем 0,05% или менее чем 0,2%; содержание тяжелых металлов составляет менее чем 0,002% или менее чем 0,001%; чистота составляет 98-100, или 99,9, или 99,5%.

Согласно некоторым вариантам осуществления концентрация CoQ10 в составе составляет от 1 до 150 мг/мл. Согласно одному варианту осуществления концентрация CoQ10 в составе составляет от 5 до 125 мг/мл. Согласно одному варианту осуществления концентрация CoQ10 в составе составляет от 10 до 100 мг/мл. Согласно одному варианту осуществления концентрация CoQ10 в составе составляет от 20 до 90 мг/мл. Согласно одному варианту осуществления концентрация CoQ10 в составе составляет от 30 до мг/мл. Согласно одному варианту осуществления концентрация CoQ10 в составе составляет от 30 до мг/мл. Согласно одному варианту осуществления концентрация CoQ10 в составе составляет от 30 до мг/мл. Согласно одному варианту осуществления концентрация CoQ10 в составе составляет от 30 до мг/мл. Согласно одному варианту осуществления концентрация CoQ10 в составе составляет от 35 до мг/мл. Следует понимать, что дополнительные диапазоны, характеризующиеся любым из вышеприведенных значений в качестве верхнего или нижнего пределов, также предназначены, чтобы быть частью настоящего изобретения, например, от 10 до 50 мг/мл или от 20 до 60 мг/мл.

Согласно некоторым вариантам осуществления концентрация CoQ10 в составе составляет приблизительно 10, 15, 20, 25, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90 или 95 мг/мл. Согласно одному варианту осуществления концентрация CoQ10 в составе составляет приблизительно 50 мг/мл. Согласно одному варианту осуществления концентрация CoQ10 в составе составляет приблизительно 60 мг/мл. Согласно одному варианту осуществления концентрация CoQ10 в составе составляет приблизительно 30 мг/мл. Согласно предпочтительному варианту осуществления концентрация CoQ10 в составе составляет приблизительно 40 мг/мл. Следует понимать, что диапазоны, характеризующиеся одним из этих значений в качестве

- 22 032775 верхних или нижних пределов, также предназначены, чтобы быть частью настоящего изобретения, например, от 37 до 47 мг/мл или от 31 до 49 мг/мл.

Понятно, что могут быть аналогично получены составы, содержащие предшественники, метаболиты и родственные соединения CoQ10.

IV. Комбинированная терапия.

В настоящем документе предусмотрены способы лечения онкологических заболеваний у субъекта путем совместного введения CoQ10 и по меньшей мере одного химиотерапевтического средства нуждающемуся в этом субъекту. Используемый в настоящем документе термин совместное введение относится к введению CoQ10 до, одновременно или по существу одновременно с, после или с перерывами с введением химиотерапевтического средства. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят до и одновременно с химиотерапевтическим средством. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят до, но не одновременно с химиотерапевтическим средством, т. е. введение CoQ10 прекращают до начала лечения с или введения химиотерапевтического средства. Согласно одному варианту осуществления внутривенный (IV) состав CoQ10 может быть использован в комбинированной терапии по меньшей мере с одним другим химиотерапевтическим средством в соответствии со способами согласно настоящему изобретению. Согласно одному варианту осуществления состав CoQ10 для местного применения может быть использован в комбинированной терапии по меньшей мере с одним другим химиотерапевтическим средством в соответствии со способами согласно настоящему изобретению. Согласно одному варианту осуществления состав CoQ10 для ингаляции может быть использован в комбинированной терапии по меньшей мере с одним другим химиотерапевтическим средством в соответствии со способами согласно настоящему изобретению. CoQ10 и/или его фармацевтические составы и другое химиотерапевтический средство могут действовать аддитивно или, более предпочтительно, синергически. Согласно одному варианту осуществления CoQ10 и/или его состав вводят одновременно с введением другого химиотерапевтического средства. Согласно другому варианту осуществления CoQ10 и/или его фармацевтический состав вводят до или после введения другого химиотерапевтического средства. Согласно одному варианту осуществления CoQ10 и дополнительное химиотерапевтическое средство действуют синергически. Согласно некоторым вариантам осуществления синергетические результаты присутствуют при лечении онкологического заболевания. Согласно другим вариантам осуществления синергетические результаты присутствуют в модуляции токсичности, связанной с химиотерапевтическим средством. Согласно одному варианту осуществления CoQ10 и дополнительное терапевтическое средство действуют аддитивно. Согласно одному варианту осуществления CoQ10 сенсибилизирует онкологическое заболевание, злокачественную опухоль или злокачественные клетки к лечению другим химиотерапевтическим средством. Согласно одному варианту осуществления предварительное воздействие CoQ10 до воздействия химиотерапевтическим средством сенсибилизирует онкологическое заболевание, злокачественную опухоль или злокачественные клетки к лечению другим химиотерапевтическим средством. Согласно одному варианту осуществления предварительное воздействие CoQ10 и прекращение указанного воздействия до начала воздействия химиотерапевтическим средством сенсибилизирует онкологическое заболевание, злокачественную опухоль или злокачественные клетки к лечению другим химиотерапевтическим средством.

Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 находится в форме состава CoQ10 для внутривенного введения, состава CoQ10 для ингаляции или состава CoQ10 для местного применения. Составы CoQ10 для внутривенного введения раскрыты в WO 2011/112900, поданной 11 марта 2011 г. Раскрытие WO 2011/112900 полностью включено в настоящий документ. Составы CoQ10 для местного применения раскрыты в заявке на патент США № US2011/0027247, поданной 11 мая 2010 г. Раскрытие US2011/0027247 полностью включено в настоящий документ. Составы CoQ10 для ингаляции раскрыты в патентной публикации США № 20120321698, поданной 18 июня 2012 г., и 20110142914, поданной 5 декабря 2008 г. CoQ10 и химиотерапевтическое средство не обязательно должны быть доставлены одним и тем же путем введения. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 не вводится перорально.

Согласно некоторым вариантам осуществления предусмотрены способы для лечения онкологических заболеваний путем совместного введение внутривенных составов CoQ10 с химиотерапевтическим средством. Согласно некоторым вариантам осуществления химиотерапевтические средства представляют собой гемцитабин, доксорубицин, цисплатин, 5фторурацил и иринотекан. Согласно некоторым вариантам осуществления химиотерапевтические средства представляют собой антиметаболиты или антрациклин. Химиотерапевтические средства, как правило, принадлежат к различным классам, включающим в себя, например, 1) ингибиторы топоизомеразы II (цитотоксические антибиотики), такие как антрациклины/антрацендионы, например, доксорубицин, эпирубицин, идарубицин и неморубицин, антрахиноны, например, митоксантрон и лозоксантрон, и подофиллотоксины, например, этопозид и тенипозид; 2) средства, которые влияют на образование микротрубочек (ингибиторы митоза), такие как растительные алкалоиды (например, соединение, принадлежащее к семейству щелочных, азотсодержащих молекул, полученных из растений, которые представляют собой биологически активные и цитотоксические), например, таксаны, например,

- 23 032775 паклитаксел и доцетаксел, и винкаалкалоиды, например, винбластин, винкристин, винорелбин и производные подофиллотоксина; 3) алкилирующие средства, такие как азотистый иприт, этилениминовые соединения, алкилсульфонаты и другие соединения с алкилирующим действием, такие как нитрозомочевины, дакарбазин, циклофосфамид, ифосфамид и мелфалан; 4) антиметаболиты (нуклеозидные ингибиторы), например, фолаты, например, фолиевая кислота, фторпиримидины, пурин или аналоги пиримидина, такие как 5-фторурацил, капецитабин, гемцитабин, метотрексат и эдатрексат; 5) ингибиторы топоизомеразы I, такие как топотекан, иринотекан и 9-нитрокамптотецин и производные камптотецина; и 6) соединения/комплексы платины, такие как цисплатин, оксалиплатин и карбоплатин.

Иллюстративные химиотерапевтические средства для использования в способах согласно настоящему изобретению включают в себя без ограничения амифостин (этиол), цисплатин, дакарбазин (DTIC), дактиномицин, мехлорэтамин (азотистый иприт), стрептозоцин, циклофосфамид, кармустин (BCNU), ломустин (CCNU), доксорубицин (адриамицин), доксорубицин липо (доксил), гемцитабин (гемзар), даунорубицин, даунорубицин липо (дауноксом), прокарбазин, митомицин, цитарабин, этопозид, метотрексат, 5-фторурацил (5-FU), винбластин, винкристин, блеомицин, паклитаксел (таксол), доцетаксел (таксотер), альдеслейкин, аспарагиназу, бусульфан, карбоплатин, кладрибин, камптотецин, CPT-I l, 10-гидрокси-7-этилкамптотецин (SN38), дакарбазин, S-I капецитабин, фторафур, 5'дезоксифторуридин, UFT, энилурацил, дезоксицитидин, 5-азацитозин, 5-азадезоксицитозин, аллопуринол, 2-хлораденозин, триметрексат, аминоптерин, метилен-10-деазааминоптерин (MDAM), оксаплатин, пикоплатин, тетраплатин, сатраплатин, платина-DACH, ормаплатин, CI-973, JM-216 и его аналоги, эпирубицин, этопозидфосфат, 9-аминокамптотецин, 10,11-метилендиоксикамптотецин, каренитецин, 9-нитрокамптотецин, TAS 103, виндезин, L-фенилаланин горчицы, ифосфамидмефосфамид, перфосфамид, трофосфамид кармустин, семустин, эпотилоны A-E, томудекс, 6меркаптопурин, 6-тиогуанин, амсакрин, этопозидфосфат, каренитецин, ацикловир, валацикловир, ганцикловир, амантадин, римантадин, ламивудин, зидовудин, бевацизумаб, трастузумаб, ритуксимаб, 5фторурацил, капецитабин, пентостатин, триметрексат, кладрибин, флоксуридин, флударабин, гидроксимочевину, ифосфамид, идарубицин, месну, иринотекан, митоксантрон, топотекан, лейпролид, мегестрол, мелфалан, меркаптопурин, пликамицин, митотан, пэгаспаргазу, пентостатин, пипоброман, пликамицин, стрептозоцин, тамоксифен, тенипозид, тестолактон, тиогуанин, тиотепу, урациловый иприт, винорелбин, хлорамбуцил, цисплатин, доксорубицин, паклитаксел (таксол), блеомицин, mTor, рецептор эпидермального фактора роста (EGFR) и факторы роста фибробластов (FGF) и их комбинации, которые представляют собой очевидные для специалиста в настоящей области техники на основании соответствующего стандарта лечения конкретной опухоли или злокачественной опухоли.

Согласно некоторым вариантам осуществления дополнительное химиотерапевтическое средство для использования в комбинированной терапии согласно настоящему изобретению представляет собой биологическое средство. Биологические средства (также называемые биопрепараты) представляют собой продукты биологической системы, например, организма, клетки или рекомбинантной системы. Примеры таких биологических средств включают в себя молекулы нуклеиновых кислот (например, антисмысловые молекулы нуклеиновых кислот), интерфероны, интерлейкины, колониестимулирующие факторы, антитела, например, моноклональные антитела, средства анти-ангиогенеза и цитокины. Иллюстративные биологические средства обсуждаются более подробно ниже и обычно принадлежат к различным классам, включающим в себя, например, 1) гормоны, гормональные аналоги и гормональные комплексы, например, эстрогены и аналоги эстрогена, прогестерон, аналоги прогестерона и прогестины, андрогены, адренокортикостероиды, антиэстрогены, антиандрогены, антитестостероны, ингибиторы стероидов надпочечников и антилютеинизирующие гормоны; и 2) ферменты, белки, пептиды, поликлональные и/или моноклональные антитела, такие как интерлейкины, интерфероны, колониестимулирующий фактор и т. д.

Согласно одному варианту осуществления биопрепарат представляет собой интерферон. Интерфероны (IFN) представляют собой тип биологического средства, который естественно производится в организме. Интерфероны также производят в лаборатории и их дают больным со злокачественной опухолью в биологической терапии. Было показано, что они улучшают борьбу иммунной системы пациента со злокачественной опухолью против злокачественных клеток.

Интерфероны могут действовать непосредственно на злокачественные клетки, замедляя их рост, или они могут вынуждать злокачественные клетки превращаться в клетки с более нормальным поведением. Некоторые интерфероны могут также стимулировать клетки натуральных киллеров (NK), Тклетки и макрофаги, которые представляют собой типы белых кровяных клеток в русле крови, которые помогают бороться со злокачественными клетками.

Согласно одному варианту осуществления биопрепараты представляет собой интерлейкин. Интерлейкины (IL) стимулируют рост и активность многих иммунных клеток. Они представляют собой белки (цитокины и хемокины), которые встречаются в природе в организме, но также могут быть получены в лаборатории. Некоторые интерлейкины стимулируют рост и активность иммунных клеток, таких как лимфоциты, которые действуют для уничтожения злокачественных клеток.

- 24 032775

Согласно другому варианту осуществления биопрепарат представляет собой колониестимулирующий фактор. Колониестимулирующие факторы (CSF) представляют собой белки, которые получают пациенты, чтобы стимулировать стволовые клетки в костном мозге производить больше клеток крови. Организм постоянно нуждается в новых лейкоцитах, эритроцитах и тромбоцитах, особенно когда присутствует злокачественная опухоль. CSF даются, наряду с химиотерапией, чтобы помочь стимулировать иммунную систему. Когда пациенты со злокачественной опухолью получают химиотерапию, способность костного мозга вырабатывать новые клетки крови подавляется, делая пациентов более склонными к развитию инфекций. Части иммунной системы не могут функционировать без клеток крови, таким образом, колониестимулирующие факторы стимулируют стволовые клетки костного мозга к производству лейкоцитов, тромбоцитов и эритроцитов. При правильном производстве клеток, другие способы лечения злокачественной опухоли могут продолжать позволять пациентам безопасно получать более высокие дозы химиотерапии.

Согласно другому варианту осуществления биопрепарат представляет собой антитело. Антитела, например, моноклональные антитела, представляют собой средства, произведенные в лаборатории, которые связываются со злокачественными клетками.

Средства моноклональных антител не разрушают здоровые клетки. Моноклональные антитела достигают терапевтического эффекта с помощью различных механизмов. Они могут характеризоваться прямым воздействием на производство апоптоза или запрограммированной клеточной смерти. Они могут блокировать рецепторы фактора роста, эффективно останавливая пролиферацию опухолевых клеток. В клетках, которые экспрессируют моноклональные антитела, они могут привести к образованию антиидиотипических антител.

Примеры антител, которые могут быть использованы в комбинированной терапии согласно настоящему изобретению, включают в себя антитела к CD20, такие как, но без ограничения, цетуксимаб, тозитумомаб, ритуксимаб и ибритумомаб. Антитела к HER2 могут быть также использованы в сочетании с коферментом Q10 для лечения злокачественной опухоли. Согласно одному варианту осуществления антитело к HER2 представляет собой трастузумаб (герцептин). Другие примеры антител, которые могут быть использованы в сочетании с коферментом Q10 для лечения злокачественной опухоли, включают в себя антитела к CD52 (например, алемтузумаб), антитела к CD-22 (например, эпратузумаб) и антитела к CD33 (например, гемтузумаб озогамицин). Антитела к VEGF могут быть также использованы в сочетании с коферментом Q10 для лечения злокачественной опухоли. Согласно одному варианту осуществления антитело к VEGF представляет собой бевацизумаб. Согласно другим вариантам осуществления биологическое средство представляет собой антитело, которое представляет собой антитело к EGFR, например, цетуксимаб. Другой пример представляет собой антитело эдреколомаб к гликопротеину 17-1A. Многочисленные другие противоопухолевые антитела известны в настоящей области техники и будут понятны специалисту в настоящей области техники, как охваченные настоящим изобретением.

Согласно другому варианту осуществления биопрепарат представляет собой цитокин. Цитокиновая терапия использует белки (цитокины), чтобы помочь иммунной системе субъекта распознать и уничтожить те клетки, которые представляют собой злокачественные. Цитокины естественным образом вырабатываются в организме иммунной системой, но также могут быть получены в лаборатории. Эта терапия используется с прогрессирующей меланомой и адъювантной терапией (терапией, получаемой после или в дополнение к основному лечению злокачественной опухоли). Цитокиновая терапия достигает всех частей тела для уничтожения злокачественных клеток и предотвращения опухоли от роста.

Согласно другому варианту осуществления биопрепарат представляет собой слитый белок. Например, рекомбинантный человеческий Apo2L/TRAIL (GENETECH) может быть использован в комбинированной терапии. Apo2/TRAIL представляет собой первый двойной проапоптотический агонист рецептора, разработанный для активации обоих проапоптотических рецепторов DR4 и DR5, которые участвуют в регуляции апоптоза (запрограммированной клеточной гибели).

Согласно одному варианту осуществления биопрепарат представляет собой терапевтическую молекулу нуклеиновой кислоты. Терапевтические нуклеиновые кислоты хорошо известны в настоящей области техники. Терапевтические нуклеиновых кислот включают в себя как одноцепочечные, так и двухцепочечные (т.е. терапевтические нуклеиновые кислоты, содержащие дополнительную область по меньшей мере из 15 нуклеотидов в длину) нуклеиновые кислоты, которые комплементарны последовательности-мишени в клетке. Терапевтические нуклеиновые кислоты могут быть направлены против практически любой последовательности-мишени нуклеиновой кислоты в клетке. Согласно некоторым вариантам осуществления терапевтическая нуклеиновая кислота направлено воздействует на последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую стимулятор ангиогенеза, например, VEGF, FGF, или опухолевого роста, например, EGFR.

Антисмысловые нуклеиновые кислоты-терапевтические средства представляют собой одноцепочечные терапевтические нуклеиновые кислотой, как правило, от 16 до 30 нуклеотидов в длину,

- 25 032775 и представляют собой комплементарные последовательности-мишени нуклеиновой кислоты в клетке, либо в культуре, либо в организме.

Согласно другому аспекту средство представляет собой одноцепочечную антисмысловую молекулу РНК. Антисмысловая молекула РНК комплементарна последовательности в мРНК-мишени. Антисмысловая РНК может ингибировать трансляцию стехиометрическим образом путем спаривания оснований с мРНК и физически препятствуя инструменту трансляции, смотрите Dias, N. et al. (2002) Mol Cancer Ther 1:347-355. Антисмысловая молекула РНК может содержать приблизительно 15-30 нуклеотидов, которые комплементарны мРНК-мишени. Патенты, направленные на антисмысловые нуклеиновые кислоты, химические модификации и терапевтическое использование предоставляется, например, в патенте США № 5898031, относящемуся к химически модифицированным РНКсодержащим терапевтическим соединениями, и в патенте США № 6107094, относящемуся к способам использования этих соединений в качестве терапевтического средства, в патенте США № 7432250, относящемуся к способам лечения пациентов путем введения одноцепочечных химически модифицированных РНК-подобных соединений; и в патенте США № 7432249, относящемуся к фармацевтическим композициям, содержащим одноцепочечные химически модифицированные РНКподобные соединения. Патент США № 7629321 относится к способам расщепления мРНК-мишени с использованием одноцепочечного олигонуклеотида, содержащего множество нуклеозидов РНК и по меньшей мере одну химическую модификацию. Полные содержания каждого из патентов, перечисленных в этом абзаце, включены в настоящий документ посредством ссылки.

Терапевтические средства-нуклеиновые кислоты для использования в способах согласно настоящему изобретению включают в себя также двухцепочечные терапевтические нуклеиновые кислоты. Термины средство РНК-интерференции, двухцепочечное средство РНК-интерференции, двухцепочечная молекула РНК (дцРНК), также упоминаемая как средство дцРНК, дцРНК, миРНК, средство мРНК, используемые в настоящем документе взаимозаменяемо, относятся к комплексу молекул рибонуклеиновой кислоты, характеризующихся дуплексной структурой, содержащей две антипараллельные и практически комплементарные, как определено ниже, нити нуклеиновой кислоты. Используемое в настоящем документе средство РНК-интерференции может также включать в себя dsiРНК (см., например, публикацию патента США № 20070104688, которая включена в настоящий документ посредством ссылки). В общем, большинство нуклеотидов каждой цепи представляет собой рибонуклеотиды, но, как описано в настоящем документе, каждая или обе цепи могут также включать один или несколько нерибонуклеотидов, например, дезоксирибонуклеотид и/или модифицированный нуклеотид. Кроме того, как используется в настоящем документе, средство РНК-интерференции может включать в себя рибонуклеотиды с химическими модификациями; средство РНК-интерференции может включать в себя существенные модификации в нескольких нуклеотидах. Такие модификации могут включать в себя все типы модификаций, раскрытые в настоящем документе или известные в настоящей области техники. Любые такие модификации, используемые в молекуле типа миРНК, охватываются средством РНК-интерференции для целей настоящего описания и формулы изобретения. Средства РНК-интерференции, которые используются в способах согласно настоящему изобретению, включают в себя средства с химическими модификациями, как описано, например, в предварительной заявке на патент США № 61/561,710, поданной 18 ноября 2011 г., международной заявке № PCT/US2011/051597, поданной 15 сентября 2010 г. и публикации согласно РСТ WO 2009/073809, полное содержание каждой из которых включено в настоящий документ посредством ссылки.

Дополнительные иллюстративные биологические средства для использования в способах согласно настоящему изобретению включают в себя без ограничения гефитинибом (Iressa), анастразол, диэтилстильбестрол, эстрадиол, премарин, ралоксифен, прогестерон, норетинодрел, эстистерон, диместистерон, мегестрол, медроксипрогестерона ацетат, гидроксипрогестерона капроат, норэтистерон, метилтестостерон, тестостерон, дексаметазон, преднизон, кортизол, солумедрол, тамоксифен, фулвестрант, торемифен, аминоглютетимид, тестолактон, дролоксифен, анастрозол, бикалутамид, флутамид, нилутамид, гозерелин, флутамид, лейпролид, трипторелин, аминоглютетимид, митотан, гозерелин, цетуксимаб, эрлотиниб, иматиниб, тозитумомаб, алемтузумаб, трастузумаб, гемтузумаб, ритуксимаб, ибритумомаб тиуксетан, бевацизумаб, денилейкин-дифтитокс, даклизумаб, интерферон альфа, интерферон бета, анти-4-LBB, анти-4-lBBL, анти-CD40, анти-CD-154, анти-OX40, анти-OX40L, анти-CD28, анти-CD80, анти-CD86, анти-CD70, анти-CD27, анти-HVEM, анти-LIGHT, анти-GITR, антиGITRL, анти-CTLA-4, растворимый OX40L, растворимые 4-IBBL, растворимый CD 154, растворимый GITRL, растворимый LIGHT, растворимый CD70, растворимый CD80, растворимый CD86, растворимый CTLA4-Ig, GV AX® и их комбинации, которые представляют собой очевидные для специалистов в настоящей области техники на основании соответствующего стандарта лечения конкретной опухоли или злокачественной опухоли. Могут быть получены растворимые формы средств, как, например, слитые белки, путем функционального связывания средства с, например, Ig-Fc областью.

Следует отметить, что более чем одно дополнительное противоопухолевое химиотерапевтическое средство, например, 2, 3, 4, 5 или более, может быть введено в сочетании с Q10, и составы кофермента Q10 представлены в настоящем документе. Например, согласно одному варианту осуществления два

- 26 032775 дополнительных химиотерапевтических средства могут быть введены в комбинации с коферментом Q10. Согласно одному варианту осуществления три дополнительных химиотерапевтических средства могут быть введены в комбинации с коферментом Q10. Согласно одному варианту осуществления четыре дополнительных химиотерапевтических средства могут быть введены в сочетании с коферментом Q10. Согласно одному варианту осуществления пять дополнительных химиотерапевтических средств могут быть введены в сочетании с коферментом Q10. Соответствующие дозы и пути введения предусмотренных в настоящем документе химиотерапевтических средств известны в настоящей области техники.

Согласно некоторым вариантам осуществления способы согласно настоящему изобретению включают лечение злокачественной опухоли путем непрерывной инфузии предусмотренного кофермента Q10 и комбинированной терапии с дополнительными противораковыми средствами или вмешательствами (например, излучение, хирургия, трансплантация костного мозга). Согласно некоторым вариантам осуществления комбинированная терапия включает в себя лечение с коферментом Q10 для уменьшения опухолевой нагрузки и/или улучшения клинического ответа. Введение кофермента Q10 с паллиативным лечением или лечением для смягчения побочных явлений лекарственного средства (например, для уменьшения тошноты, боли, беспокойства или воспаления, нормализации свертываемости) не считается комбинированным лечением злокачественной опухоли.

Согласно некоторым вариантам осуществления воздействие коферментом Q10 путем непрерывной инфузии комбинируют со стандартным лечением для лечения конкретной подлежащей лечению злокачественной опухоли, например, путем введения стандартной дозировки одного или нескольких химиотерапевтических средств. Стандарт медицинской помощи для конкретного типа злокачественной опухоли может быть определен специалистом в настоящей области техники на основании, например, типа и серьезности злокачественной опухоли, возраста, веса, пола и/или истории заболевания субъекта и успеха или неудачи предшествующих процедур.

Согласно некоторым вариантам осуществления при лечении пациентов с лейкозом, в частности, ALL или AML, введение (например, внутривенное, например, непрерывная инфузия) кофермента Q10 комбинируют с одним или предпочтительно обоими из следующих воздействий.

1. Флударабин, предпочтительно в дозе 15 мг/м², вводимый внутривенно в течение 15-30 мин + 15 мин, каждые 12 ч в течение 5 дней (или в течение 4 дней у пациентов старше 65 лет или с показателем общего состояния ECOG равным 3).

2. Цитарабин, предпочтительно вводимый в дозе 0,5 г/м² в 250 мл физиологического раствора, вводимый внутривенно, в течение 2 ч + 20 мин каждые 12 ч + 2 ч в течение 5 дней (или в течение 4 дней у пациентов старше 65 лет или с показателем общего состояния ECOG равным 3).

Согласно некоторым вариантам осуществления субъекту вводят 1, 2, 3, 4 или 5 циклов комбинированной терапии. Субъект оценивают по критериям ответа в конце каждого цикла. Субъект также контролируют в течение каждого цикла на наличие неблагоприятных явлений (например, свертывание, анемия, функции печени и почек и т.д.), чтобы убедиться, что схема лечения в настоящее время достаточно терпима.

Согласно некоторым вариантам осуществления лечение пациентов с солидными опухолями путем непрерывной инфузии кофермента Q10 комбинируют с одним или несколькими из следующих воздействий.

1. Гемцитабин, предпочтительно путем внутривенного введения при еженедельной дозе, начиная с 600 мг/м², с корректировкой дозы на основании толерантности субъекта к лекарственному средству.

2. 5-Фторурацил (5-FU), предпочтительно путем внутривенного введения с еженедельной начальной дозой 350 мг/м², с корректировкой дозы на основании толерантности субъекта к лекарственному средству, в комбинации с лейковорином в дозе 100 мг/м².

3. Доцетаксел, предпочтительно путем внутривенного введения один раз в неделю в начальной дозе 20 мг/м², с корректировкой дозы на основании толерантности субъекта к лекарственному средству.

Согласно некоторым вариантам осуществления субъекту вводят 1, 2, 3, 4 или 5 циклов комбинированной терапии. Субъекта оценивали на критерии ответа в конце каждого цикла. Субъекта также контролировали в течение каждого цикла на неблагоприятные явления (например, свертывание, анемию, функции печени и почек и т.д.), чтобы убедиться, что схема лечения достаточно терпима.

Согласно другим вариантам осуществления химиотерапевтическое средство вводят в дозе, которая ниже, чем стандартные дозы химиотерапевтического средства, используемые для лечения онкологического заболевания в соответствии со стандартом оказания медицинской помощи для конкретного онкологического заболевания. Стандартные дозы химиотерапевтических средств известны специалистам в настоящей области техники и могут быть получены, например, из листа-вкладыша продукта, предоставленного производителем химиотерапевтического средства. Примеры стандартных доз химиотерапевтических средств приведены в табл. 3. Согласно некоторым вариантам осуществления доза химиотерапевтического средства составляет на 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80 или 90% ниже, чем стандартная дозировка химиотерапевтического средства для конкретного онкологического заболевания. Согласно некоторым вариантам осуществления доза химиотерапевтического средства составляет 95, 90, 85,

- 27 032775

80, 75, 70, 65, 60, 55, 50, 45, 40, 35, 30, 25, 20, 15, 10 или 5% от стандартной дозы химиотерапевтического средства для конкретного онкологического заболевания. Согласно одному варианту осуществления, при котором вводят комбинацию химиотерапевтических средств без CoQ10, по меньшей мере одно из химиотерапевтических средств вводят в дозе, которая ниже, чем стандартная дозировка химиотерапевтического средства для конкретного онкологического заболевания. Согласно одному варианту осуществления, при котором вводят комбинацию химиотерапевтических средств (например, без CoQ10), по меньшей мере два из химиотерапевтических средств вводят в дозе, которая ниже, чем стандартная дозировка химиотерапевтических средств для конкретного онкологического заболевания. Согласно одному варианту осуществления, при котором вводят комбинацию химиотерапевтических средств (например, без CoQ10), по меньшей мере три из химиотерапевтических средств вводят в дозе, которая ниже, чем стандартная дозировка химиотерапевтических средств для конкретного онкологического заболевания. Согласно одному варианту осуществления, при котором вводят комбинацию химиотерапевтических средств (например, без CoQ10), все химиотерапевтические средства вводят в дозе, которая ниже, чем стандартная дозировка химиотерапевтических средств для конкретного онкологического заболевания.

Согласно некоторым вариантам осуществления кофермент Q10 вводят в количестве, которое будет терапевтически эффективным, если доставляется одно, т.е. кофермент Q10 вводят и/или он действует в качестве терапевтического средства против злокачественной опухоли, а не преимущественно в качестве средства для улучшения побочных эффектов другой химиотерапии или других видов лечения злокачественной опухоли.

V. Лечение онкологических заболеваний.

Комбинированные терапии согласно настоящему изобретению могут быть использованы для лечения онкологических заболеваний. Таким образом, настоящее изобретение относится к способам лечения или профилактики онкологического заболевания у субъекта, включающим введение составов согласно настоящему изобретению субъекту в количестве, достаточном для лечения или профилактики онкологического заболевания, тем самым обеспечивая лечение или профилактику онкологического заболевания. Композиции согласно настоящему изобретению также могут быть использованы для ингибирования роста опухолевых клеток. Соответственно, настоящее изобретение дополнительно включает способы ингибирования опухолевого клеточного роста у субъекта, включающие внутривенное введение составов согласно настоящему изобретению субъекту, таким образом, что рост опухолевых клеток ингибируется. Согласно некоторым вариантам осуществления лечение злокачественной опухоли включает расширение выживания или увеличение времени до прогрессирования опухоли, по сравнению с контролем, например, популяционным контролем. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект представляет собой субъекта-человека. Согласно предпочтительным вариантам осуществления субъекта идентифицируют как содержащего опухоль перед введением первой дозы CoQ10. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект характеризуется наличием опухоли на момент первого введения CoQ10.

Такие комбинированные способы лечения включают в себя, например, составы CoQ10, которые вводят совместно с химиотерапевтическими средствами, описанными или включенными в настоящее описание. Согласно некоторым вариантам осуществления способ лечения онкологического заболевания у субъекта включает в себя: (а) введение кофермента Q10 (CoQ10) субъекту; (b) прекращение лечения с CoQ10; и (с) введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту после того, как введение кофермента Q10 было прекращено, причем онкологическое заболевание подвергается лечению.

Согласно другим вариантам осуществления способ лечения онкологического заболевания у субъекта включает: (а) введение кофермента Q10 (CoQ10) субъекту; (b) введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту после начала введения CoQ10 и (с) продолжение лечения с CoQ10 после начала введения по меньшей мере одного химиотерапевтического средства, причем онкологическое заболевание подвергается лечению.

Согласно другим вариантам осуществления способ лечения онкологического заболевания у субъекта включает: предварительное лечения субъекта, характеризующегося наличием онкологического заболевания, коферментом Q10 (CoQ10) в течение достаточного времени до начала химиотерапевтической схемы лечения, причем химиотерапевтическая схема лечения включает введение одного или нескольких химиотерапевтических средств, таких, что ответ онкологического заболевания улучшается, по сравнению с воздействием только химиотерапевтической схемы лечения.

Согласно другим вариантам осуществления способ лечения онкологического заболевания у субъекта включает: (а) введение кофермента Q10 (CoQ10) субъекту; и (b) введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту в дозе, которая ниже, чем стандартная доза химиотерапевтического средства, используемого для лечения онкологического заболевания, таким образом, что онкологическое заболевание подвергается лечению.

Согласно предшествующим различным вариантам осуществления введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства может быть начато по меньшей мере через 24 ч после начала

- 28 032775 введения CoQ10, через одну или несколько недель после начала введения CoQ10, через две или более недель после начала введения CoQ10, через три или более недель после начала введения CoQ10, через четыре или более недель после начала введения CoQ10, через пять или более недель после начала введения CoQ10, через шесть или более недель после начала введения CoQ10, через семь или более недель после начала введения кофермента Q10 или через восемь и более недель после начала введения кофермента Q10.

Согласно предпочтительному варианту осуществления введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства начинается по меньшей мере через 24 ч после начала введения CoQ10. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства начинается через от 24 ч до 4 недель после начала введения CoQ10. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства начинается через от 2 до 4 недель после начала введения CoQ10. Согласно еще одному дополнительному предпочтительному варианту осуществления введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства начинается через 2 недели после начала введения CoQ10. Согласно еще одному дополнительному предпочтительному варианту осуществления введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства начинается через 1 неделю после начала введения CoQ10. Согласно еще одному дополнительному предпочтительному варианту осуществления введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства начинается через 3 недели после начала введения CoQ10. Согласно еще одному дополнительному предпочтительному варианту осуществления введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства начинается через 4 недели после начала введения CoQ10. Согласно еще одному дополнительному предпочтительному варианту осуществления введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства начинается через 5 недель после начала введения CoQ10. Согласно еще одному дополнительному предпочтительному варианту осуществления введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства начинается через 6 недель после начала введения CoQ10. Согласно еще одному дополнительному предпочтительному варианту осуществления введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства начинается через 7 недель после начала введения CoQ10. Согласно еще одному дополнительному предпочтительному варианту осуществления введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства начинается через 8 недель после начала введения CoQ10.

Составы CoQ10 могут представлять собой ингаляционные составы, внутривенные составы или составы для местного применения. Согласно некоторым вариантам осуществления состав CoQ10 не представляет собой пероральный состав. Например, внутривенные составы могут включать в себя CoQ10 или его метаболиты в фармацевтически приемлемом носителе. Согласно некоторым вариантам осуществления такой состав может включать в себя от приблизительно 0,001 до приблизительно 20% (в весовом отношении) CoQ10, более предпочтительно от приблизительно 0,01 до приблизительно 15% и еще более предпочтительно от приблизительно 0,1 до приблизительно 10% (в весовом отношении) CoQ10, более предпочтительно от приблизительно 3 до приблизительно 5% (в весовом отношении) от CoQ10. Согласно одному варианту осуществления композиция содержит приблизительно 4% (в весовом отношении) CoQ10. Согласно одному варианту осуществления состав включает в себя приблизительно 8% (в весовом отношении) CoQ10. Согласно различным вариантам осуществления композиция включает в себя приблизительно 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20% (в весовом отношении) CoQ10. Как уже отмечалось в настоящем документе, композиции согласно настоящему изобретению могут быть в жидкой форме, способной к введению в субъект с помощью любых средств или путем введения в пределах компетенции специалиста в настоящей области техники. Например, композиции могут быть введены с помощью путей введения, включающих в себя без ограничения внутривенный, внутрибрюшинный, внутриопухолевый, их комбинации и т. п.

Согласно некоторым вариантам осуществления химиотерапевтическую схему лечения вводят совместно с составом CoQ10 для лечения онкологического заболевания. Состав CoQ10 можно вводить до, одновременно или по существу одновременно с, до и одновременно, с перерывами с или после введения химиотерапевтической схемы лечения. Согласно некоторым вариантам осуществления нагрузочную дозу CoQ10, вводят перед введением химиотерапевтического средства. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят для достижения устойчивого состояния содержания CoQ10 до введения химиотерапевтического средства. Когда комбинированная терапия включает в себя внутривенное составы CoQ10, субъекту внутривенно вводят CoQ10 таким образом, чтобы онкологическое заболевание подвергалось лечению или предупреждению. Согласно одному варианту осуществления субъекту внутривенно вводят CoQ10 таким образом, чтобы ответ на химиотерапевтическое средство улучшался, например, по отношению к лечению только химиотерапевтическим средством.

Субъекту вводят дозу CoQ10 в пределах от приблизительно 0,5 до приблизительно 10000 мг/кг, от приблизительно 5 мг/кг до приблизительно 5000 мг/кг, от приблизительно 10 до приблизительно 3000 мг/кг. Согласно одному варианту осуществления кофермент Q10 вводят в диапазоне от приблизительно 10 до приблизительно 1400 мг/кг. Согласно одному варианту осуществления кофермент Q10 вводят в

- 29 032775 диапазоне от приблизительно 10 мг/кг до приблизительно 650 мг/кг. Согласно одному варианту осуществления кофермент Q10 вводят в диапазоне от приблизительно 10 мг/кг до приблизительно 200 мг/кг. Согласно различным вариантам осуществления кофермент Q10 вводят в дозе, равной приблизительно 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 58, 58,6, 60, 65, 70, 75, 78, 80, 85, 90, 95, 100, 104, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190 или 200 мг/кг. Следует понимать, что диапазоны, содержащие одно из этих значений в качестве верхнего или нижнего пределов, также предназначены, чтобы быть частью настоящего изобретения, например, от приблизительно 50 мг/кг до приблизительно 200 мг/кг или от приблизительно 650 мг/кг до приблизительно 1400 мг/кг. Согласно одному варианту осуществления введенная доза составляет по меньшей мере приблизительно 1 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 5 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 10 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 12,5 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 20 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 25 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 30 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 35 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 40 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 45 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 50 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 55 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 58 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 58,6 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 60 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 75 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 78 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 100 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 104 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 125 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 150 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 175 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 200 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 300 мг/кг или по меньшей мере приблизительно 400 мг/кг.

Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят по меньшей мере в одной дозе в день. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят по меньшей мере в двух дозах в день. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят по меньшей мере в трех дозах в день. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят в одной дозе в день. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят в двух дозах в день. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят в трех дозах в день. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят путем непрерывной инфузии.

Например, согласно некоторым вариантам осуществления вышеуказанные способы включают режим внутривенного введения CoQ10, например, по меньшей мере приблизительно 50 мг/кг CoQ10 один раз в день в течение 3 недель, при необходимости с одной неделей перерыва, а затем введение химиотерапевтического средства. Согласно другим вариантам осуществления способ включает режим внутривенного введение CoQ10, например, по меньшей мере приблизительно 75 мг/кг кофермента Q10 один раз в день в течение 3 недель, необязательно с одной неделей перерыва, и впоследствии введение химиотерапевтического средства.

Диапазоны дозирования для ингаляционных составов CoQ10 могут быть похожи на те, которые предусмотрены для введения путем инъекции. Понятно, что распылители и другие устройства для доставки путем ингаляции известны в настоящей области техники и могут быть использованы в сочетании со способами согласно настоящему изобретению.

Дозы CoQ10 для местного применения, как правило, зависят от размера площади воздействия. Например, применяемый местно CoQ10 может быть использован для лечения злокачественной опухоли кожи. CoQ10 применяется местно, как правило, один или два раза в день, в месте злокачественного поражении в количестве, достаточном для покрытия поражения, например, как применение лекарства от акне к прыщу. Если субъект содержит множество повреждений для лечения, CoQ10 применяется для многих мест, увеличивая общую дозу, вводимую субъекту. Если субъект содержит одно поражение, то CoQ10 применяют к одному сайту.

Согласно одному варианту осуществления химиотерапевтическое средство комбинированной терапии представляет собой гемцитабин. Если комбинированная терапия включает введение состава CoQ10 и гемцитабина, субъекту вводят состав CoQ10 и гемцитабина (например, внутривенно), так что онкологические заболевания подвергают лечению или предупреждению. Субъекту вводят дозу гемцитабина, находящуюся в диапазоне от приблизительно 10 до приблизительно 10000 мг/м², от приблизительно 10 до приблизительно 5000 мг/м², от приблизительно 10 до приблизительно 3000 мг/м². Согласно одному варианту осуществления гемцитабин вводят в диапазоне от приблизительно 10 до приблизительно 1500 мг/м². Согласно одному варианту осуществления гемцитабин вводят в диапазоне от приблизительно 10 до приблизительно 1000 мг/м². Согласно одному варианту осуществления гемцитабин вводят в диапазоне от приблизительно 10 до приблизительно 750 мг/м². Согласно одному варианту осуществления гемцитабин вводят в диапазоне от приблизительно 10 до приблизительно 500 мг/м². Согласно одному варианту осуществления гемцитабин вводят в диапазоне от приблизительно 10 до приблизительно 400 мг/м². Согласно одному варианту осуществления гемцитабин вводят в диапазоне от приблизительно 10 до приблизительно 300 мг/м². Согласно одному варианту осуществления гемцитабин вводят в диапазоне от приблизительно 10 до приблизительно 200 мг/м². Согласно одному варианту осуществления гемцитабин вводят в диапазоне от приблизительно 10 до приблизительно 100 мг/м². Согласно одному варианту осуществления гемцитабин вводят в диапазоне от приблизительно 10

- 30 032775 до приблизительно 70 мг/м². Согласно различным вариантам осуществления гемцитабин вводят в дозе, составляющей приблизительно 10, 20, 30, 40, 50, 60, 65, 70, 80, 90, 100, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1500, 2000, 3000 мг/м². Следует понимать, что диапазоны, содержащие одно из этих значений в качестве верхнего или нижнего предела, также предназначены, чтобы быть частью настоящего изобретения. Согласно одному варианту осуществления введенная доза гемцитабина составляет по меньшей мере приблизительно 10 мг/м², по меньшей мере приблизительно 30 мг/м², по меньшей мере приблизительно 50 мг/м², по меньшей мере приблизительно 65 мг/м², по меньшей мере

приблизительно	100	мг/м²,	по	меньшей	мере	приблизительно	150	мг/м²,	по	меньшей	мере
приблизительно	200	мг/м²,	по	меньшей	мере	приблизительно	300	мг/м²,	по	меньшей	мере
приблизительно	400	мг/м²,	по	меньшей	мере	приблизительно	500	мг/м²,	по	меньшей	мере
приблизительно	600	мг/м²,	по	меньшей	мере	приблизительно	700	мг/м²,	по	меньшей	мере
приблизительно	750	мг/м²,	по	меньшей	мере	приблизительно	800	мг/м²,	по	меньшей	мере
приблизительно	900	мг/м²,	по меньшей мере приблизительно 1000 мг/м² или	по	меньшей	мере

приблизительно 1500 мг/м². Согласно некоторым вариантам осуществления схема лечения включает в себя совместное введение внутривенной композиции CoQ10 и химиотерапевтического средства, такого как гемцитабин.

В первой иллюстративной схеме лечения (схема лечения один раз в день) дозу, составляющую по меньшей мере приблизительно 50 мг/кг/дозу или по меньшей мере приблизительно 75 мг/кг/дозу внутривенного состава CoQ10, вводят один раз в день в течение 3 недель подряд с последующей одной неделей перерыва, в то время как 150 мг/кг/дозу гемцитабина вводят один раз в неделю в течение 3 недель подряд с последующей одной неделей перерыва. На фиг. 1 показаны результаты схемы лечения комбинированной терапии, при которой совместно вводят внутривенный состав CoQ10 и внутривенный гемцитабин в соответствии с первой схемой лечения.

Во второй иллюстративной схеме лечения (схема лечения два раза в день) дозу, составляющую по меньшей мере приблизительно 50 мг/кг/дозу или по меньшей мере приблизительно 75 мг/кг внутривенного состава CoQ10, вводят дважды в день в течение 3 недель подряд с последующей одной неделей перерыва, в то время как 150 мг/кг/дозу гемцитабина вводят один раз в неделю в течение 3 недель подряд с последующей одной неделей перерыва. На фиг. 4 показаны результаты схемы лечения комбинированной терапии, при которой совместно вводят внутривенный состав CoQ10 и внутривенный гемцитабин в соответствии со второй схемой лечения.

В третьей иллюстративной схеме лечения (схема лечения три раза в день) дозу, составляющую по меньшей мере приблизительно 50 мг/кг/дозу или по меньшей мере приблизительно 75 мг/кг/дозу внутривенного состава CoQ10, вводят трижды в день в течение 3 недель подряд с последующей одной неделей перерыва, в то время как 150 мг/кг/дозу гемцитабина вводят один раз в неделю в течение 3 недель подряд с последующей одной неделей перерыва. На фиг. 8 показаны результаты схемы лечения комбинированной терапии, при которой совместно вводят внутривенный состав CoQ10 и внутривенный гемцитабин в соответствии с третьей схемой лечения.

В четвертой иллюстративной схеме лечения (предварительная схема лечения) дозу, составляющую по меньшей мере приблизительно 75 мг/кг/дозу внутривенной композиции CoQ10, вводят трижды в день в течение по меньшей мере 24 ч, 1 дня, 2, 3, 4, 5, 6 дней, 1 недели, 2, 3 недель или больше. Согласно некоторым вариантам осуществления предварительную схему лечения используют перед введением первой дозы химиотерапии. Согласно некоторым вариантам осуществления предварительную схему лечения используют перед введением каждой дозы химиотерапии. Согласно некоторым вариантам осуществления предварительную схему лечения используют перед введением каждого цикла химиотерапии.

В модифицированных схемах лечения 1-4 CoQ10 вводят в указанной суточной дозе с помощью непрерывной инфузии, а не в 1, 2 или 3 отдельных суточных дозах.

Например, согласно некоторым вариантам осуществления вышеуказанные способы включают схемы лечения путем внутривенного введения по меньшей мере приблизительно 50 мг/кг внутривенной композиции CoQ10 один раз в день в течение 3 недель с неделей перерыва и введение приблизительно 100 мг/кг гемцитабина и приблизительно 10 мг/кг гемцитабина один раз в неделю в течение 3 недель с одной неделей перерыва.

Согласно другим вариантам осуществления способы включают схему лечения путем внутривенного введения по меньшей мере приблизительно 50 мг/кг внутривенного состава CoQ10 два раза в день в течение 3 недель с неделей перерыва и введение приблизительно 100 мг/кг гемцитабина и приблизительно 10 мг/кг гемцитабина один раз в неделю в течение 3 недель с одной неделей перерыва. Согласно другим вариантам осуществления способ включает схему лечения путем внутривенного введения по меньшей мере приблизительно 50 мг/кг внутривенного состава CoQ10 три раза в день в течение 3 недель с неделей перерыва и введение приблизительно 100 мг/кг гемцитабина и приблизительно 10 мг/кг гемцитабина один раз в неделю в течение 3 недель с одной неделей перерыва. Согласно дополнительным вариантам осуществления способы включают схему лечения путем внутривенного введения по меньшей мере приблизительно 75 мг/кг внутривенного состава CoQ10 один

- 31 032775 раз в день в течение 3 недель с неделей перерыва и введение приблизительно 100 мг/кг гемцитабина и приблизительно 10 мг/кг гемцитабин один раз в неделю в течение 3 недель с одной неделей перерыва. Согласно дополнительным вариантам осуществления способы включают схему лечения путем внутривенного введения по меньшей мере приблизительно 75 мг/кг внутривенного состава CoQ10 два раза в день в течение 3 недель с неделей перерыва и введение приблизительно 100 мг/кг гемцитабина и приблизительно 10 мг/кг гемцитабина один раз в неделю в течение 3 недель с одной неделей перерыва. Согласно дополнительным вариантам осуществления способы включают схему лечения путем внутривенного введения по меньшей мере приблизительно 75 мг/кг внутривенного состава CoQ10 три раза в день в течение 3 недель с неделей перерыва и введение приблизительно 100 мг/кг гемцитабина и приблизительно 10 мг/кг гемцитабина один раз в неделю в течение 3 недель с одной неделей перерыва.

Согласно некоторым вариантам осуществления вышеуказанные способы включают введение 5 мг/кг доцетаксела, 1 мг/кг доксорубицина и 35 мг/кг циклофосфамида субъекту каждые три недели в течение шести циклов.

Согласно некоторым вариантам осуществления схема лечения комбинированной терапии включает совместное введение внутривенного состава CoQ10 и химиотерапевтического средства, такого как гемцитабин, нуждающемуся в этом пациенту. Согласно одному варианту осуществления гемцитабин комбинированной терапии вводят путем внутривенной инфузии в дозе 1000 мг/м² один раз в неделю в течение 7 недель (или до тех пор, пока токсичность не потребует уменьшения или удержания дозы) с последующей неделей перерыва от лечение в виде первого цикла лечения. Согласно некоторым вариантам осуществления в отсутствие дозолимитирующей токсичности CoQ10 вводят ежедневно с необходимой дозой и частотой. Согласно одному варианту осуществления за первым циклом введения следуют последующие циклы, состоящие из инфузий один раз в неделю в течение 3 недель подряд каждые 4 недели. Согласно одному варианту осуществления доза гемцитабина регулируется на основании степени гематологической токсичности, испытываемой пациентом. Согласно одному варианту осуществления, когда абсолютное количество гранулоцитов пациента больше или равно 1000х10⁶/л, а количество тромбоцитов пациента больше или равно 100000х10⁶/л, пациенту можно вводить полную дозу 1000 мг/м² один раз в неделю. Согласно одному варианту осуществления, когда абсолютное количество гранулоцитов пациента составляет от приблизительно 500 до 999х10⁶/л или количество тромбоцитов пациента составляет от приблизительно 50000 до 99000х10⁶/л, пациенту можно вводить 75% от полной дозы, например, 750 мг/м² один раз в неделю. Согласно одному варианту осуществления, когда абсолютное количество гранулоцитов пациента составляет менее чем 500х10⁶/л или количество тромбоцитов пациента составляет менее чем 50000х10⁶/л, введение гемцитабина следует удерживать до абсолютного количества гранулоцитов пациента, составляющего больше или равно 500х10⁶/л или количества тромбоцитов пациента, составляющего больше или равно 50000х10⁶/л.

Руководство по соответствующим режимам дозирования для химиотерапевтических средств, одобренных для использования при различных типах злокачественных опухолей известно в настоящей области техники. Схемы лечения CoQ10, представленные в настоящем документе, могут быть объединены с другими известными схемами лечения, основанными на иллюстративных идеях, представленных в настоящем документе.

Согласно некоторым вариантам осуществления схема лечения включает совместное введение внутривенного состава CoQ10 и химиотерапевтического средства, такого как гемцитабин. В первой схеме лечения (схема лечения один раз в день) дозу, составляющую по меньшей мере приблизительно 58 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 58,6 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 78 мг/кг или по меньшей мере приблизительно 104 мг/кг, внутривенного состава CoQ10 вводят один раз в день в течение 7 недель (или до тех пор, пока токсичность не потребует уменьшения или поддержания дозы), необязательно с последующими циклами, включающими инфузию один раз в день в течение 3 последовательных недель из каждых 4 недель; в то время как по меньшей мере приблизительно 1000 мг/м² или по меньшей мере приблизительно 750 мг/м² гемцитабина вводят один раз в неделю в течение 7 недель (или до тех пор, пока токсичность не потребует уменьшения или поддержания дозы), необязательно с последующими циклами, включающими инфузию один раз в день в течение 3 последовательных недель из каждых 4 недель. Во второй схеме лечения (схеме лечения дважды в день) дозу, составляющую по меньшей мере приблизительно 58 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 58,6 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 78 мг/кг или по меньшей мере приблизительно 104 мг/кг внутривенного состава CoQ10 вводят два раза в день в течение 7 недель (или до тех пор, пока токсичность не потребует уменьшения или поддержания дозы), необязательно с последующими циклами, включающими инфузию один раз в день в течение 3 последовательных недель из каждых 4 недель; в то время как по меньшей мере приблизительно 1000 мг/м² или по меньшей мере приблизительно 750 мг/м² гемцитабина вводят один раз в неделю в течение 7 недель (или до тех пор, пока токсичность не потребует уменьшения или поддержания дозы), необязательно с последующими циклами, включающими инфузию один раз в день в течение 3 последовательных недель из каждых 4 недель. В третьей схеме лечения (схема лечения три раза в день) дозу, составляющую по меньшей мере

- 32 032775 приблизительно 58 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 58,6 мг/кг, по меньшей мере приблизительно 78 мг/кг или по меньшей мере приблизительно 104 мг/кг, внутривенного состава CoQ10 вводят три раза в день в течение 7 недель (или до тех пор, пока токсичность не потребует уменьшения или поддержания дозы), необязательно с последующими циклами, включающими инфузию один раз в день в течение 3 последовательных недель из каждых 4 недель; в то время как по меньшей мере приблизительно 1000 мг/м² или по меньшей мере приблизительно 750 мг/м² гемцитабина вводят один раз в неделю в течение 7 недель (или до тех пор, пока токсичность не потребует уменьшения или поддержания дозы), необязательно с последующими циклами, включающими инфузию один раз в день в течение 3 последовательных недель из каждых 4 недель. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят путем непрерывной инфузии с общей дневной дозой, основанной на тех, которые предусмотрены в схемах лечения 1-3 выше. Согласно некоторым вариантам осуществления в отсутствие дозолимитирующей токсичности CoQ10 вводят ежедневно в требуемой дозе и с необходимой частотой.

Согласно одному варианту осуществления дозировку гемцитабина регулируют на основании степени гематологической токсичности, испытываемой пациентом. Согласно одному варианту осуществления, когда абсолютное количество гранулоцитов пациента больше или равно 1000х10⁶/л, а количество тромбоцитов пациента больше или равно 100000х10⁶/л, пациенту можно вводить полную дозу 1000 мг/м² один раз в неделю. Согласно одному варианту осуществления, когда абсолютное количество гранулоцитов пациента составляет от приблизительно 500 до 999х10⁶/л или количество тромбоцитов пациента составляет от приблизительно 50000 до 99000х10⁶/л, пациенту можно вводить 75% от полной дозы, например, 750 мг/м² один раз в неделю. Согласно одному варианту осуществления, когда абсолютное количество гранулоцитов пациента составляет менее чем 500х10⁶/л или количество тромбоцитов пациента составляет менее чем 50000х10⁶/л, введение гемцитабина следует удерживать до абсолютного количества гранулоцитов пациента, составляющего больше или равно 500х10⁶/л, или количества тромбоцитов пациента, составляющего больше или равно 50000х10⁶/л.

Согласно одному варианту осуществления предусмотренных в настоящем документе способов комбинированного лечения состав CoQ10 вводят один раз в неделю. Согласно одному варианту осуществления состав CoQ10 вводят 2 раза в неделю. Согласно одному варианту осуществления состав CoQ10 вводят 3 раза в неделю. Согласно другому варианту осуществления состав CoQ10 вводят 5 раз в неделю. Согласно одному варианту осуществления состав CoQ10 вводят один раз в день. Согласно одному варианту осуществления состав CoQ10 вводят дважды в день. Согласно одному варианту осуществления состав CoQ10 вводят трижды в день. Согласно некоторым вариантам осуществления, где внутривенный состав вводят путем инфузии, дозировку вводят путем инфузии в течение приблизительно 1, 2, 3, 4 ч или дольше. Согласно одному варианту осуществления внутривенный состав CoQ10 вводят путем инфузии в течение приблизительно 4 ч. Согласно некоторым вариантам осуществления внутривенный состав CoQ10 вводят путем инфузии в течение приблизительно 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22 или 24 ч.

Согласно другому варианту осуществления CoQ10 вводят в виде внутривенного состава CoQ10 в дозе от приблизительно 10 мг/кг до приблизительно 10000 мг/кг CoQ10, от приблизительно 20 мг/кг до приблизительно 5000 мг/кг, от приблизительно 50 мг/кг до приблизительно 3000 мг/кг, от приблизительно 100 мг/кг до приблизительно 2000 мг/кг, от приблизительно 200 мг/кг до приблизительно 1000 мг/кг или от приблизительно 300 мг/кг до приблизительно 500 мг/кг, причем состав CoQ10 содержит от приблизительно 1 до 10% кофермента Q10. Согласно одному варианту осуществления состав CoQ10 содержит от приблизительно 3 до приблизительно 5% кофермента Q10. Согласно одному варианту осуществления состав CoQ10 содержит приблизительно 4% кофермента Q10. Согласно одному варианту осуществления внутривенный состав CoQ10 содержит приблизительно 8% кофермента Q10. Согласно другим вариантам осуществления внутривенный состав CoQ10 содержит приблизительно 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 5,5, 6, 6,5, 7, 7,5, 8, 8,5, 9, 9,5 или 10% кофермента Q10. Следует понимать, что диапазоны, характеризующиеся одним из этих значений в виде верхнего или нижнего предела, также предназначены, чтобы быть частью настоящего изобретения.

Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят перед введением первой дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение по меньшей мере 24 ч перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение по меньшей мере 48 ч перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно дополнительному предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение по меньшей мере 1 недели перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение по меньшей мере 2 недель перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение по меньшей мере 3 недель перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту

- 33 032775 осуществления CoQ10 вводят в течение по меньшей мере 4 недель перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение по меньшей мере 5 недель до введения дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение по меньшей мере 6 недель перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение по меньшей мере 7 недель перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение по меньшей мере 8 недель перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства.

Согласно другим предпочтительным вариантам осуществления CoQ10 вводят в течение приблизительно 24 ч перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение приблизительно 48 ч перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение 1 недели перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение приблизительно 2 недель перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение 3 недель перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение 4 недель перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение 5 недель перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение 6 недель перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение приблизительно 7 недель перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят в течение 8 недель перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства.

Согласно некоторым вариантам осуществления введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства начинается по меньшей мере через 24 ч после начала введения CoQ10, через одну или несколько недель после начала введения CoQ10, через две или более недель после начала введения CoQ10, через три или более недель после начала введения CoQ10, через четыре или более недель после начала введения CoQ10, через пять или более недель после начала введения CoQ10, через шесть или более недель после начала введения CoQ10, через семь или более недель после начала введения CoQ10 или через восемь или более недель после начала введения кофермента Q10.

Согласно некоторым вариантам осуществления химиотерапевтическую схему лечения начинают по меньшей мере через 24 ч после начала предварительного воздействия CoQ10, через одну или несколько недель после начала предварительного воздействия CoQ10, через две или более недель после начала предварительного воздействия CoQ10, через три или более недель после начала предварительного воздействия CoQ10, через четыре или более недель после начала предварительного воздействия CoQ10, через пять или более недель после начала предварительного воздействия CoQ10, через шесть или более недель после начала предварительного воздействия CoQ10, через семь или более недель после начала предварительного воздействия CoQ10 или через восемь или более недель после начала предварительного воздействия CoQ10.

Согласно предпочтительному варианту осуществления ответ онкологического заболевания на лечение усовершенствуется, по сравнению с лечением по меньшей мере только одним химиотерапевтическим средством, т.е. в отсутствие введения CoQ10 субъекту. Согласно дополнительному предпочтительному варианту осуществления ответ улучшается по меньшей мере на 2%, по меньшей мере на 3%, по меньшей мере на 4%, по меньшей мере на 5%, по меньшей мере на 6%, по меньшей мере на 7%, по меньшей мере на 8%, по меньшей мере на 9%, по меньшей мере на 10%, по меньшей мере на 11%, по меньшей мере на 12%, по меньшей мере на 13%, по меньшей мере на 14%, по меньшей мере на 15%, по меньшей мере на 16%, по меньшей мере на 17%, по меньшей мере на 18%, по меньшей мере на 19%, по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 21%, по меньшей мере на 22%, по меньшей мере на 23%, по меньшей мере на 24%, по меньшей мере на 25%, по меньшей мере на 26%, по меньшей мере на 27%, по меньшей мере на 28%, по меньшей мере на 29%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 31%, по меньшей мере на 32%, по меньшей мере на 33%, по меньшей мере на 34%, по меньшей мере на 35%, по меньшей мере на 36%, по меньшей мере на 37%, по меньшей мере на 38%, по меньшей мере на 39%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 41%, по меньшей мере на 42%, по меньшей мере на 43%, по меньшей мере на 44%, по меньшей мере на 45%, по меньшей мере на 46%, по меньшей мере на 47%, по меньшей мере на 48%, по меньшей мере на 49%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 55%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 70%, по

- 34 032775 меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 100% по отношению к лечению по меньшей мере только одним химиотерапевтическим средством.

Согласно некоторым вариантам осуществления ответ включает любое одно или несколько из следующего: снижение опухолевой массы, уменьшение размера опухоли, ингибирование роста опухоли, замедление роста опухоли, улучшение критериев RECIST, достижение стабильного онкологического нарушения у субъекта с прогрессирующим онкологическим нарушением до лечения, увеличение времени до прогрессирования онкологического нарушения и увеличение времени выживания.

Согласно некоторым вариантам осуществления введение CoQ10 начинается по меньшей мере за 8 ч, по меньшей мере за 12 ч, по меньшей мере за 18 ч, по меньшей мере за 24 ч, по меньшей мере за 36 ч, по меньшей мере за 48 ч, по меньшей мере за 3 дня, по меньшей мере за 4 дня, по меньшей мере за 5 дней, по меньшей мере за 6 дней, по меньшей мере за 1 неделю, по меньшей мере за 2 недели, по меньшей мере за 3 недели, по меньшей мере за 4 недели, по меньшей мере за 5 недель, по меньшей мере за 6 недель, по меньшей мере за 7 недель или по меньшей мере за 8 недель до введения первой дозы химиотерапевтического средства или химиотерапевтической схемы лечения. Согласно одному варианту осуществления введение CoQ10 прекращают до начала лечения с химиотерапевтическим средством или химиотерапевтической схемой лечения, т. е. лечение с химиотерапевтическим средством исключает лечение с CoQ10. Согласно одному варианту осуществления введение CoQ10 продолжают или возобновляют после начала лечения с химиотерапевтическим средством или химиотерапевтической схемой лечения так, что CoQ10 и химиотерапевтическое средство вводят одновременно, например, по меньшей мере, в продолжение одного цикла.

При использовании в комбинированной терапии для лечения злокачественной опухоли, внутривенные составы CoQ10 могут быть в фармацевтически приемлемом носителе, который можно вводить в терапевтически эффективном количестве в область онкогенеза в качестве монотерапии в комбинации по меньшей мере с одним другим химиотерапевтическим средством для данного показания, в комбинации с лучевой терапией, после хирургического вмешательства для радикального удаления опухоли, в сочетании с другими альтернативными и/или дополнительными приемлемыми способами лечения злокачественной опухоли и т.п. Согласно некоторым вариантам осуществления настоящее изобретение также относится к способу реактивации мутированного/инактивированного белка p53 путем введения в зону онкогенеза у пациента композиции согласно настоящему изобретению.

В общем, комбинированная терапия, включающая в себя любой из составов CoQ10 и описанные в настоящем документе химиотерапевтические средства, может быть использована для профилактики или терапевтического лечения любого новообразования. Согласно конкретному варианту осуществления комбинированная терапия используется для лечения солидных опухолей. Согласно различным вариантам осуществления настоящего изобретения комбинированная терапия используется для лечения или профилактики злокачественной опухоли головного мозга, центральной нервной системы, головы и шеи, простаты, молочной железы, яичек, поджелудочной железы, печени, толстой кишки, мочевого пузыря, мочеиспускательного канала, желчного пузыря, почек, легких, немелкоклеточного рака легких, меланомы, мезотелиомы, матки, шейки матки, яичников, саркомы, кости, желудка, кожа и медуллобластомы. Согласно предпочтительному варианту осуществления, комбинированная терапия используется для лечения трижды негативного рака молочной железы (TNBC). Согласно одному варианту осуществления комбинированная терапия, включающая в себя описанный в настоящем документе CoQ10, может быть использована для лечения хлорлейкемии, например первичной хлорлейкемии или средней или метастатической хлорлейкемии, например, которая присутствует, мигрирует или метастазирует в том или ином органе, таком как, например, легкое, печень или центральная нервная система.

Тем не менее, лечение с использованием комбинированной терапии согласно настоящему изобретению не ограничено приведенными выше типами злокачественных опухолей. Примеры злокачественных опухолей, поддающихся лечению с использованием комбинированной терапии, включают в себя без ограничения, например, болезнь Ходжкина, неходжкинскую лимфому, множественную миелому, нейробластому, злокачественную опухоль молочной железы, злокачественную опухоль яичников, злокачественную опухоль легких, рабдомиосаркому, первичный тромбоцитоз, первичную макроглобулинемию, мелкоклеточные опухоли легких, первичные опухоли головного мозга, злокачественную опухоль желудка, злокачественную опухоль толстой кишки, злокачественную опухоль поджелудочной железы, злокачественный карциноид, злокачественную опухоль мочевого пузыря, предзлокачественные поражения кожи, злокачественную опухоль кожи, злокачественную опухоль яичек, лимфомы, злокачественную опухоль щитовидной железы, нейробластомы, злокачественную опухоль пищевода, злокачественную опухоль мочеполовой системы, злокачественную гиперкальциемию, злокачественную опухоль шейки матки, злокачественную опухоль эндометрия, злокачественную опухоль коры надпочечников и злокачественную опухоль простаты. Согласно одному варианту осуществления описанный в настоящем документе внутривенный состав CoQ10 может быть использован в комбинации с химиотерапевтическим средством для лечения или профилактики различных видов

- 35 032775 злокачественных опухолей кожи (например, плоскоклеточной карциномы или базальноклеточной карциномы), злокачественной опухоли поджелудочной железы, злокачественной опухоли молочной железы, злокачественной опухоли предстательной железы, злокачественной опухоли печени или злокачественной опухоли кости. Согласно одному варианту осуществления комбинированная терапия, включающая в себя CoQ10, используется для лечения онкологических заболеваний кожи, включающих в себя без ограничения плоскоклеточные карциномы (в том числе SCCIS (in situ) и более агрессивные плоскоклеточные карциномы), базальноклеточные карциномы (в том числе поверхностную, узловую и инфильтрующую базальноклеточные карциномы), меланомы, и старческий кератоз. Согласно одному варианту осуществления онкологическое заболевание или злокачественная опухоль, которые можно лечить с помощью комбинированной терапии, включающей в себя CoQ10, представляет собой не меланому. Согласно одному варианту осуществления онкологическое заболевание представляет собой карциному Меркеля (МСС). Согласно одному варианту осуществления онкологическое заболевание или злокачественная опухоль, которые можно лечить с помощью комбинированной терапии, включающей в себя CoQ10, представляет собой не злокачественную опухоль кожи.

Согласно некоторым вариантам осуществления эффект, который комбинированная терапия, включающая в себя CoQ10, может оказывать на злокачественные клетки, может зависеть, частично, от различных состояний метаболического и окислительного потока, проявляемого злокачественными клетками. CoQ10 может быть использован, чтобы прервать и/или помешать конверсии зависимости гликолиза онкогенной клетки и повышенного использования лактата. Поскольку это относится к состоянию злокачественной опухоли, это вмешательство в гликолитический и окислительный поток опухолевого микроокружения может влиять на апоптоз и ангиогенез таким образом, что снижается развитие злокачественных клеток. Согласно некоторым вариантам осуществления взаимодействие кофермента Q10 с факторами гликолитических и окислительных потоков может повысить способность кофермента Q10 оказывать свой апоптический эффект на злокачественную опухоль при установлении жизнеспособных мишеней для лекарственных средств при открытии и разработке лекарственных средств.

Согласно одному варианту осуществления введение CoQ10 и химиотерапевтического средства, как описано или включено в настоящий документ, уменьшает размер, вес или объем опухоли, увеличивает время до прогрессирования, ингибирует рост опухоли и/или продлевает продолжительность жизни субъекта, характеризующегося наличием онкологического нарушения. Согласно предпочтительному варианту осуществления CoQ10 вводят путем инъекции, например, путем внутривенного введения внутривенного состава CoQ10, как описано или включено в настоящий документ. Согласно некоторым вариантам осуществления введение CoQ10 и химиотерапевтического средства уменьшает размер, вес или объем опухоли, увеличивает время до прогрессирования, ингибирует рост опухоли и/или увеличивает время жизни субъекта по меньшей мере на 1, 2, 3, 4, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 200, 300, 400 или 500% по отношению к соответствующему контрольному субъекту, которому вводят только CoQ10 или только химиотерапевтическое средство. Согласно другим вариантам осуществления введение CoQ10 и химиотерапевтического средства стабилизирует онкологическое заболевание у субъекта с прогрессирующим онкологическим нарушением до лечения.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения опухолей у человека или другого животного путем внутривенного введения такому человеку или животному эффективного нетоксичного количества CoQ10. Специалист в настоящей области техники сможет, с помощью рутинных экспериментов, определить, какое количество CoQ10 будет эффективным, нетоксическим для целей лечения злокачественных опухолей. Например, терапевтически активное количество кофермента Q10 может варьировать в зависимости от таких факторов, как стадия заболевания (например, стадия I против стадии IV), возраста, пола, медицинских осложнений (например, с состояниями ослабления иммунитета или заболевания) и массы субъекта, и способности кофермента Q10 вызывать желаемую реакцию у субъекта. Режим дозировки можно регулировать для обеспечения оптимального терапевтического ответа. Например, несколько раздельных доз можно вводить ежедневно или путем непрерывной инфузии или доза может быть пропорционально уменьшена, как показано требованиями терапевтической ситуации.

В настоящем изобретении также предусмотрены, в другом аспекте, способы лечения или профилактики агрессивных онкологических заболеваний у людей. Эти способы включают внутривенное введение CoQ10 человеку в терапевтически эффективной дозе при совместном введении химиотерапевтического средства, чтобы происходило лечение или профилактика агрессивного онкологического заболевания. Согласно одному варианту осуществления эти способы включают в себя внутривенное введение CoQ10 субъекту в выбранной более низкой дозировке, чем режим дозирования, используемый или выбранный для менее агрессивного или неагрессивного онкологического нарушения, так что происходит лечение или профилактика агрессивного онкологического нарушения. Согласно некоторым вариантам осуществления агрессивное онкологическое заболевание включает в себя карциному поджелудочной железы, гепатоцеллюлярную карциному, саркому Юинга, метастатическую злокачественную опухоль молочной железы, метастатическую меланому, злокачественную опухоль

- 36 032775 мозга (астроцитому, глиобластому), нейроэндокринную злокачественную опухоль, злокачественную опухоль толстой кишки, злокачественную опухоль печени, злокачественную опухоль легких, остеосаркому, андрогеннезависимую злокачественную опухоль простаты, злокачественную опухоль яичников, злокачественную опухоль кожи и неходжкинскую лимфому.

Согласно другому аспекту в настоящем изобретении предусмотрены способы для местного применения CoQ10, особенно при лечении злокачественной опухоли кожи, в сочетании с введением химиотерапевтических средств любым способом введения. Такие способы включают в себя предварительную обработку CoQ10 до первого введения химиотерапевтического средства.

Согласно родственному аспекту в настоящем изобретении предусмотрен способ лечения или профилактики неагрессивных онкологических заболеваний у человека. Эти способы включают внутривенное совместное введение CoQ10 и химиотерапевтического средства этому субъекту в терапевтически эффективной дозе, так что происходит лечение или профилактика неагрессивного онкологического нарушения. Согласно одному варианту осуществления эти способы включают введение CoQ10 субъекту в выбранной более высокой дозировке, чем режим дозирования, используемый или выбранный для агрессивных онкологических заболеваний, так что происходит лечение или профилактика неагрессивного онкологического заболевания. Согласно некоторым вариантам осуществления неагрессивное онкологическое заболевание включает в себя неметастатическую злокачественную опухоль молочной железы, андрогензависимую злокачественную опухоль предстательной железы, немелкоклеточный рак легкого и острый лимфобластный лейкоз.

Согласно некоторым вариантам осуществления настоящего изобретения лечение или профилактика онкологического заболевания происходит через взаимодействие CoQ10 с белком или другим клеточным компонентом, выбранным из группы, состоящей из HNF'4-альфа, Bcl-xl, Bcl-xS, BNIP-2, Bcl-2, Birc6, Bcl2-L11 (Bim), XIAP, BRAF, Bax, c-Jun, Bmf, PUMA, cMyc, трансальдолазы 1, CoQ1, CoQ3, CoQ6, фенилтрансферазы, 4-гидробензоата, цитозольного фактора 2 нейтрофилов, синтазы окиси азота 2А, супероксиддисмутазы 2, VDAC, канала Вах, ANT, цитохрома с, комплекса 1, комплекса II, комплекса III, комплекса IV, Foxo 3a, DJ-1, IDH-1, Cpt1C и киназы Cam II. Согласно некоторым вариантам осуществления онкологическое заболевание выбирают из группы, состоящей из лейкоза, лимфомы, меланомы, карциномы и саркомы.

Согласно некоторым вариантам осуществления химиотерапевтическое средство, например гемцитабин, работает, повреждая РНК или ДНК, которая указывает злокачественным клеткам, как скопировать себя в митозе. Если клетки не могут делиться, то они погибнут. В некоторых случаях химиотерапевтическое средство индуцирует апоптоз. Гемцитабин включает себя в злокачественные клетки и предотвращает их деление. Как и фторурацил и другие пиримидины, трифосфатный аналог гемцитабина замещает одну из структурных единиц нуклеиновых кислот (т.е. цитидина) во время репликации ДНК. Это останавливает рост опухоли, поскольку только один дополнительный нуклеозид может быть прикреплен к неисправному нуклеозиду, что приводит к апоптозу. Гемцитабин также нацеленно воздействует на фермент рибонуклеотидредуктазу (RNR). Дифосфатный аналог связывается с активным центром РНР и необратимо инактивирует фермент. После ингибирования РНК клетка не может производить дезоксирибонуклеотиды, необходимые для репликации и репарации ДНК, и происходит апоптоз клеток. Согласно некоторым вариантам осуществления гемцитабин вводят с помощью схемы лечения GemCarbo, в которой гемцитабин вводят в комбинации с карбоплатином в течение 21-дневного цикла.

Публикация международной заявки на патент № WO/2009/126764, поданная 9 апреля 2009 г., раскрывает лечение злокачественной опухоли с CoQ10 и публикация международной заявки на патент № WO 2011/11290, поданная 11 марта 2011 г., раскрывает внутривенные составы кофермента Q10. Публикация заявки на патент США № US2011/0027247, поданная 11 мая 2010 г., раскрывает способы лечения онкологических заболеваний с использованием применяемого местно CoQ10. В международной патентной заявке № WO 2009073843, поданной 11 июня 2009 г., и WO 2012174559, поданной 18 июня 2012 г., раскрыты составы CoQ10 для введения путем ингаляции. Эти приложения полностью включены в настоящий документ посредством ссылки. Согласно некоторым вариантам осуществления настоящего изобретения способы дополнительно включают схему лечения, которая включает в себя любое из или комбинацию следующего: хирургия, радиация, гормональная терапия, антитела, терапия с факторами роста, цитокины и химиотерапия.

Теперь будет сделана подробная ссылка на предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения. В то время как настоящее изобретение будет описано в связи с предпочтительными вариантами осуществления, следует понимать, что оно не предназначено для ограничения настоящего изобретения до предпочтительных вариантов осуществления. Напротив, оно предназначено для охвата альтернатив, модификаций и эквивалентов, которые могут быть включены в пределах сущности и объема настоящего изобретения, как определено в прилагаемой формуле настоящего изобретения.

Согласно некоторым вариантам осуществления изобретения химиотерапевтическое средство представляет собой SN38 и онкологическое заболевание представляет собой злокачественную опухоль предстательной железы, химиотерапевтическое средство представляет собой SN38 и онкологическое

- 37 032775 заболевание представляет собой злокачественную опухоль печени, химиотерапевтическое средство представляет собой доксорубицин и онкологическое заболевание представляет собой злокачественную опухоль молочной железы, химиотерапевтическое средство представляет собой доксорубицин и онкологическое заболевание представляет собой злокачественную опухоль поджелудочной железы, химиотерапевтическое средство представляет собой доксорубицин и онкологическое заболевание представляет собой злокачественную опухоль печени, химиотерапевтическое средство представляет собой 5-фторурацил и онкологическое заболевание представляет собой злокачественную опухоль молочной железы, химиотерапевтическое средство представляет собой 5-фторурацил и онкологическое заболевание представляет собой трижды негативный рак молочной железы, химиотерапевтическое средство представляет собой 5-фторурацил и онкологическое заболевание представляет собой злокачественную опухоль печени, химиотерапевтическое средство представляет собой цисплатин и онкологическое заболевание представляет собой злокачественную опухоль легких, химиотерапевтическое средство представляет собой 4-HCP и онкологическое заболевание представляет собой злокачественную опухоль молочной железы, химиотерапевтическое средство представляет собой 4-HPC и онкологическое заболевание представляет собой трижды негативный рак молочной железы, химиотерапевтическое средство представляет собой 4-HPC и онкологическое заболевание представляет собой злокачественную опухоль молочной железы, химиотерапевтическое средство представляет собой 4-HPC и онкологическое заболевание представляет собой злокачественную опухоль яичников, химиотерапевтическое средство представляет собой тамоксифен и онкологическое заболевание представляет собой злокачественную опухоль молочной железы, химиотерапевтическое средство представляет собой гемцитабин и онкологическое заболевание представляет собой злокачественную опухоль легких, химиотерапевтическое средство представляет собой флутамид и онкологическое заболевание представляет собой злокачественную опухоль предстательной железы или химиотерапевтическое средство представляет собой госерелин и онкологическое заболевание представляет собой злокачественную опухоль простаты.

Согласно некоторым вариантам осуществления, при которых CoQ10 предусмотрен во внутривенном составе CoQ10, внутривенный состав CoQ10 содержит (1) водный раствор, (2) CoQ10, диспергированный в нанодисперсию частиц; и (3) по меньшей мере одно из стабилизирующих дисперсию средств и уменьшающее опсонизацию средство, причем нанодисперсия CoQ10 диспергируется в наночастицы, характеризующиеся средним размером частиц, составляющим менее 200 нм.

Согласно некоторым вариантам осуществления стабилизирующее дисперсию средство выбирают из группы, состоящей из пегилированного касторового масла, кремофора EL, кремофора RH 40, пегилированного витамина Е, витамина Е TPGS и димиристоилфосфатидилхолина (ДМФХ). Согласно некоторым вариантам осуществления стабилизирующее дисперсию средство представляет собой предпочтительно ДМФХ.

Согласно некоторым вариантам осуществления уменьшающее опсонизацию средство выбирают из группы, состоящей из полоксамеров и полоксаминов. Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления уменьшающее опсонизацию средство представляет собой полоксамер 188. Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления уменьшающее опсонизацию средство представляет собой полоксамер 188 и стабилизирующее дисперсию средство представляет собой ДМФХ.

Согласно некоторым вариантам осуществления состав CoQ10 характеризуется следующим соотношением вес-объем CoQ10, ДМФХ и полоксамера 188: 4, 3 и 1,5% соответственно.

Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 предусмотрен в составе CoQ10 для местного применения, в котором состав CoQ10 для местного применения представляет собой 3% крем CoQ10, содержащий: (1) фазу А, содержащую C12-15 алкилбензоат в количестве приблизительно 4,0% вес./вес. композиции, цетиловый спирт в количестве приблизительно 2,00% вес./вес. композиции, стеариловый спирт в количестве приблизительно 1,5% вес./вес., глицерилстеарат и ПЭГ-100 в количестве приблизительно 4,5% вес./вес.; (2) фазу В, содержащую глицерин в количестве приблизительно 2,00% вес./вес., пропиленгликоль в количестве приблизительно 1,5% вес./вес., этоксидигликоль в количестве приблизительно 5,0% вес./вес., феноксиэтанол в количестве приблизительно 0,475% вес./вес., карбомерную дисперсию в количестве приблизительно 40% вес./вес., очищенную воду в количестве приблизительно 16,7% вес./вес.; (3) фазу С, содержащую триэтаноламин в количестве приблизительно 1,3% вес./вес., молочную кислоту в количестве приблизительно 0,5% вес./вес., лактат натрия в количестве приблизительно 2,0% вес./вес., воду в количестве приблизительно 2,5% вес./вес.; (4) фазу D, содержащую диоксид титана в количестве приблизительно 1,0% вес./вес.; и (5) фазу Е, содержащую 21% концентрат CoQ10 в количестве приблизительно 15,0% вес./вес.

Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 содержится в составе для ингаляции, причем состав содержит фармацевтическую композицию, содержащую дисперсию липосомных частиц, подходящих для непрерывного аэрозолирования, причем композиция содержит: дисперсию липосомных частиц, характеризующихся средним диаметром от приблизительно 30 до 500 нм, каждая липосомальная частица, содержащая гидрофобное биологически активное средство, фосфолипид и носитель водной

- 38 032775 дисперсии, причем отношение гидрофобного биоактивного средства к фосфолипиду составляет от приблизительно 5:1 до приблизительно 1:5, гидрофобное биологически активное средство составляет приблизительно от 0,1 до 30% вес./вес. композиции, фосфолипид составляет от приблизительно 0,1 до 30% вес./вес. композиции, а липосомальные частицы диспергируют в носителе водной дисперсии, и причем при введении субъекту композиция характеризуется непрерывной аэрозолизацией, достаточной, чтобы обеспечить терапевтическую дозу гидрофобного биоактивного средства субъекту. Согласно некоторым вариантам осуществления носитель водной дисперсии содержит воду или водный раствор соли. Согласно некоторым вариантам осуществления дисперсия липосомальных частиц находится в виде непрерывно вдыхаемого аэрозоля, содержащего множество водных капелек, содержащих дисперсию липосомальных частиц и характеризующихся масс-медианным аэродинамическим диаметром (MMAD) от приблизительно 1 до 5 мкм. Согласно некоторым вариантам осуществления композиция характеризуется средним процентом передачи (APT) от приблизительно 50 до 100% в течение по меньшей мере 15 мин непрерывного аэрозолирования. Согласно некоторым вариантам осуществления множество капель характеризуется MMAD от приблизительно 1 до 5 мкм в течение по меньшей мере 15 мин непрерывного аэрозолирования.

Химиотерапевтические средства включают в себя без ограничения циклофосфамид, таксаны (например, паклитаксел или доцетаксел), бусульфан, цисплатин, метотрексат, даунорубицин, доксорубицин, мелфалан, кладрибин, винкристин, винбластин, хлорамбуцил, тамоксифен, таксол, этопозид (VP-16), адриамицин, 5-фторурацил (5FU), камптотецин, актиномицин-D, митомицин C, цисплатин (CDDP), комбретастатин(ы) и иринотекан, и их производные и пролекарства. Химиотерапевтические средства включают в себя антиангиогенные средства. Антиангиогенные средства включают в себя без ограничения ангиостатин, эндостатин, фрагмент пролактина размером 16 кДа, пептиды ламинина, пептиды фибронектина, ингибиторы тканевой металлопротеиназы (TIMP 1, 2, 3, 4), ингибиторы активатора плазминогена (PAI-1, -2), фактор некроза опухоли альфа, TGF-β!. интерфероны (ИФН-α, -β, γ), ELR- СХС хемокины: Ил-12; SDF-1; MIG; тромбоцитарный фактор 4 (PF-4); IP-10, тромбоспондин (TSP), SPARC, связанный с 2-метоксиэстрадиоловой пролиферацией белок, сурамин, талидомид, кортизон, фумагиллин (AGM-1470; TNP-470), тамоксифен, корейский экстракт омелы (Viscum album coloratum), ретиноиды, CM101, дексаметазон и ингибирующий лейкоз фактор (LIF). Дополнительные химиотерапевтические средства приведены в настоящем документе.

Согласно некоторым вариантам осуществления антиметаболит включает в себя по меньшей мере один из пуриновых или пиримидиновых аналогов. Согласно некоторым вариантам осуществления антиметаболит включает в себя по меньшей мере один из гемцитабина, 5-фторурацила, капецитабина, метотрексата и эдатрексата. Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления антиметаболит представляет собой гемцитабин.

Согласно некоторым вариантам осуществления антрациклиновый антибиотик представляет собой ингибитор топоизомеразы II. Согласно некоторым вариантам осуществления ингибитор топоизомеразы II включает по меньшей мере один из доксорубицина, эпирубицина, идарубицина, митоксантрона, лозоксантрона, этопозида и тенипозида. Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления ингибитор топоизомеразы II представляет собой доксорубицин.

Согласно некоторым вариантам осуществления химиотерапевтическое средство представляет собой ингибитор топоизомеразы I. Согласно некоторым вариантам осуществления ингибитор топоизомеразы I включает по меньшей мере один из иринотекана, топотекана, 9-нитрокамптотецина, камптотецина и производных камптотецина.

Пути и способы введения химиотерапевтических средств хорошо известны в настоящей области техники.

Согласно некоторым вариантам осуществления способ включает схему лечения, при которой субъекту вводят внутривенно по меньшей мере приблизительно 50 мг/кг/дозу внутривенного состава CoQ10 один раз в день в течение 3 недель с перерывом в одну неделю совместно с химиотерапевтическим средством на протяжении одного цикла.

Согласно некоторым вариантам осуществления способ включает схему лечения, при которой субъекту вводят внутривенно по меньшей мере приблизительно 50 мг/кг/дозу внутривенного состава CoQ10 два раза в день в течение 3 недель с перерывом в одну неделю совместно с химиотерапевтическим средством на протяжении одного цикла.

Согласно некоторым вариантам осуществления способ включает схему лечения, при которой субъекту вводят внутривенно по меньшей мере приблизительно 50 мг/кг/дозу внутривенного состава CoQ10 три раза в день в течение 3 недель с перерывом в одну неделю совместно с химиотерапевтическим средством на протяжении одного цикла.

Согласно некоторым вариантам осуществления способ включает режим, в котором субъекту вводят внутривенно по меньшей мере приблизительно 75 мг/кг/дозу внутривенного состава CoQ10 один раз в день в течение 3 недель с перерывом в одну неделю совместно с химиотерапевтическим средством на протяжении одного цикла.

- 39 032775

Согласно некоторым вариантам осуществления способ включает схему лечения, при которой субъекту вводят внутривенно по меньшей мере приблизительно 75 мг/кг/дозу внутривенного состава CoQ10 два раза в день в течение 3 недель с перерывом в одну неделю совместно с химиотерапевтическим средством на протяжении одного цикла.

Согласно некоторым вариантам осуществления способ включает схему лечения, при которой субъекту вводят внутривенно по меньшей мере приблизительно 75 мг/кг/дозу внутривенного состава CoQ10 три раза в день в течение 3 недель с перерывом в одну неделю совместно с химиотерапевтическим средством на протяжении одного цикла.

Согласно некоторым вариантам осуществления способ включает схему лечения, при которой субъекту вводят внутривенно по меньшей мере приблизительно 50 мг/кг/дозу внутривенного состава CoQ10 один раз в день в течение 3 недель с перерывом в одну неделю, а затем вводят химиотерапевтическое средство на протяжении одного цикла.

Согласно некоторым вариантам осуществления способ включает схему лечения, при которой субъекту вводят внутривенно по меньшей мере приблизительно 50 мг/кг/дозу внутривенного состава CoQ10 два раза в день в течение 3 недель с перерывом в одну неделю, а затем вводят химиотерапевтическое средство на протяжении одного цикла.

Согласно некоторым вариантам осуществления способ включает схему лечения, при которой субъекту вводят внутривенно по меньшей мере приблизительно 50 мг/кг/дозу внутривенного состава CoQ10 три раза в день в течение 3 недель с перерывом в одну неделю, а затем вводят химиотерапевтическое средство на протяжении одного цикла.

Согласно некоторым вариантам осуществления способ включает схему лечения, при которой субъекту вводят внутривенно по меньшей мере приблизительно 75 мг/кг/дозу внутривенного состава CoQ10 один раз в день в течение 3 недель с перерывом в одну неделю, а затем вводят химиотерапевтическое средство на протяжении одного цикла.

Согласно некоторым вариантам осуществления способ включает схему лечения, при которой субъекту вводят внутривенно по меньшей мере приблизительно 75 мг/кг/дозу внутривенного состава CoQ10 два раза в день в течение 3 недель с перерывом в одну неделю, а затем вводят химиотерапевтическое средство на протяжении одного цикла.

Согласно некоторым вариантам осуществления способ включает схему лечения, при которой субъекту вводят внутривенно по меньшей мере приблизительно 75 мг/кг/дозу внутривенного состава CoQ10 три раза в день в течение 3 недель с перерывом в одну неделю, а затем вводят химиотерапевтическое средство на протяжении одного цикла.

Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят каждый день без перерыва на неделю с трехнедельными интервалами. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят каждый день, пока не наблюдаются ограничивающие токсичности.

Согласно некоторым вариантам осуществления способ включает схему лечения, при которой субъекту вводят внутривенно CoQ10 путем непрерывной инфузии перед введением химиотерапевтического средства. Согласно некоторым вариантам осуществления непрерывная инфузия продолжается в течение 24 ч перед введением химиотерапевтического средства.

Согласно некоторым вариантам осуществления введение химиотерапевтического средства начинается в течение 24 ч с момента завершения введения дозы кофермента Q10. Согласно некоторым вариантам осуществления введение химиотерапевтического средства начинается в течение 18 ч с момента завершения введения дозы кофермента Q10. Согласно некоторым вариантам осуществления введение химиотерапевтического средства начинается в течение 12 ч с момента завершения введения дозы кофермента Q10. Согласно некоторым вариантам осуществления введение химиотерапевтического средства начинается в течение 6 ч с момента завершения введения дозы кофермента Q10. Согласно некоторым вариантам осуществления введение химиотерапевтического средства начинается в течение 4 ч с момента завершения введения дозы кофермента Q10. Согласно некоторым вариантам осуществления введение химиотерапевтического средства начинается в течение 3 ч с момента завершения введения дозы кофермента Q10. Согласно некоторым вариантам осуществления введение химиотерапевтического средства начинается в течение 2 ч с момента завершения введения дозы кофермента Q10. Согласно некоторым вариантам осуществления введение химиотерапевтического средства начинается в течение 1 ч с момента завершения введения дозы кофермента Q10.

Согласно некоторым вариантам осуществления после предварительного воздействия CoQ10, лечение CoQ10 продолжается во время лечения с химиотерапевтическим средством.

Согласно некоторым вариантам осуществления, при которых CoQ10 вводят до химиотерапевтического средства, два или более циклов CoQ10 (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 и т.д.) вводят до введения двух или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 и т.д.) циклов химиотерапевтического средства.

Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят в течение достаточного периода времени и в достаточном количестве до введения химиотерапевтического средства, чтобы достичь стабильного состояния CoQ10.

- 40 032775

Согласно некоторым вариантам осуществления нагрузочную дозу CoQ10 вводят до начала лечения с химиотерапевтическим средством.

Согласно некоторым вариантам осуществления, при которых CoQ10 вводят до химиотерапевтического средства, один цикл CoQ10 вводят до введения одного цикла химиотерапевтического средства. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят до каждой дозы химиотерапевтического средства в каждом цикле лечения. Согласно некоторым вариантам осуществления многократные циклы CoQ10 вводят поочередно с циклами химиотерапевтического средства. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят до каждой дозы химиотерапевтического средства в каждом цикле лечения. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят до и одновременно с каждой дозой химиотерапевтического средства. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят до и одновременно с каждым циклом введения химиотерапевтического средства.

Согласно некоторым вариантам осуществления изобретения CoQ10 вводят перед химиотерапевтическим средством, один цикл CoQ10 вводят перед введением двух или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 и т.д.) циклов химиотерапевтического средства.

Понятно, что химиотерапевтические средства часто вводят в коктейлях. Используемое в настоящем документе химиотерапевтическое средство следует понимать как один или несколько (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 и т.д.) химиотерапевтических средств. Кроме того, следует понимать, что, когда вводят многократные циклы химиотерапевтических средств, конкретные режимы дозирования и/или химиотерапевтические средства, используемые в каждом из циклов, не должны быть одинаковыми. Тем не менее, согласно некоторым вариантам осуществления химиотерапевтические средства и их режимы дозирования представляют собой одинаковые для всех циклов.

Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят одним и тем же путем введения, как и химиотерапевтическое средство. Согласно некоторым вариантам осуществления CoQ10 вводят другим путем введения, по сравнению с химиотерапевтическим средством.

Согласно некоторым вариантам осуществления субъекта подвергают лечению от онкологического заболевания, включающего в себя по меньшей мере одно из следующего: злокачественная опухоль поджелудочной железы, злокачественная опухоль молочной железы, злокачественная опухоль кожи, злокачественная опухоль печени, карцинома, саркома, лимфома, меланома или лейкемия. Согласно некоторым вариантам осуществления субъекта подвергают лечению от онкологического заболевания, содержащего солидную опухоль. Согласно некоторым вариантам осуществления субъекта подвергают лечению от онкологического заболевания, содержащего несолидную опухоль.

Примеры

В следующих примерах предусмотрены неограничивающие иллюстративные способы и результаты лечения онкологических заболеваний с использованием комбинированной терапии CoQ10 и химиотерапевтического средства.

Способы.

Пример 1. Схема лечения 1. Комбинация CoQ10 один раз в день внутривенно и гемцитабина один раз в неделю.

Злокачественная опухоль поджелудочной железы представляет собой одну из самых опасных видов злокачественных опухолей и, конечно, одну из наиболее клинически трудно управляемую, учитывая, что большинство диагнозов ставят на поздней стадии заболевания. Гемцитабин представляет собой один из немногих утвержденных лекарственных средств FDA, используемых отдельно и в сочетании с другими противоопухолевыми средствами для лечения злокачественной опухоли поджелудочной железы. Внутривенный 4%-ный состав CoQ10 использовали отдельно или в комбинации с гемцитабином в основанных на клетках анализах in vitro и в ксеногенных мышиных моделях злокачественной опухоли поджелудочной железы человека, чтобы продемонстрировать повышение эффективности комбинации CoQ10 с гемцитабином при лечении злокачественной опухоли поджелудочной железы. Конкретный используемый состав представлен в международной публикации патента WO 2011/112900, поданной 11 марта 2011 г., которая полностью включена в настоящее описание посредством ссылки.

Ксеногенная мышиная модель злокачественной опухоли поджелудочной железы человека.

Равное количество опухолевых клеток поджелудочной железы человека MIAPaCa-2 суспендировали в MATRIGEL® и вводили мышам NOD scid гамма (NSG). Мышиная модель NSG лишена врожденной и адаптивной иммунной системы и обеспечивает биологическую среду, подходящую для роста опухолей человека in vivo. MIAPaCa-2 представляет собой устойчивую происходящую от человеческой клеточную линию карциномы поджелудочной железы, которая может быть использована для обеспечения опухолей поджелудочной железы у животных с ослабленным иммунитетом. Опухолям MIAPaca-2 позволяли развиваться в течение, в среднем, по меньшей мере 3 недель у мышей до начала лечения. Животных с пальпируемыми опухолями рандомизировали на группы лечения. Результаты, показанные на графиках, указывают на количество дней выживания с первого дня лечения в исследовании.

- 41 032775

Клетки MIAPaca-2 (1х10⁷ клеток на животное) вводили мышам NSG с использованием предусмотренного выше способа. Мышей с пальпируемыми опухолями рандомизировали на 4 группы по 30 мышей в каждой следующим образом:

I. Группа 1 - без лечения.

II. Группа 2 - внутривенная доза 4% кофермента Q10, 50 мг/кг/день.

III. Группа 3 - внутривенная доза один раз в неделю гемцитабина в концентрации 150 мг/кг/неделю в течение 3 недель с одной неделей перерыва. Этот цикл повторяли с четырехнедельными интервалами.

IV. Группа 4 - комбинация внутривенной дозы 4% кофермента Q10, 50 мг/кг/день, и внутривенной дозы один раз в неделю гемцитабина в концентрации 150 мг/кг/неделю в течение 3 недель с одной неделей перерыва. Этот цикл повторяли с четырехнедельными интервалами.

Мышей наблюдали на жизнеспособность и наличие вторичных симптомов, и рост опухоли контролировали с помощью пальпации. При смертности, опухоли собирали от мышей и измеряли, взвешивали и анализировали на присутствие сосудистой системы опухоли.

Кривые выживаемости приведены на фиг. 1. Как видно, группа без воздействия проявляла высокие показатели смертности, в то время как воздействие только CoQ10, гемцитабином и комбинацией CoQ10 приводило к продлению жизни, по сравнению с необработанным контролем. Один CoQ10 оказывал значительно большее влияние на выживание, чем только гемцитабин. Животные, на которых воздействовали комбинацией гемцитабина и кофермента Q10, проявляли более длительное выживание и длительную ремиссию, которая была статистически значима, по сравнению с другими группами.

Опухоли, полученные от животных после смерти, показаны на фиг. 2. Опухоли от животных в группе 1 (контроль) собирали на 20-й день после начала лечения. Опухоли от животных в группе 2 (только кофермент Q10) собирали на 50-60 дни после начала лечения. Опухоли от животных в группе 3 (только гемцитабин) собирали на 40-50 дни после начала лечения. Опухоли от животных в группе 4 (гемцитабин + кофермент Q10) собирали на 50-60 дни после начала лечения. Размеры опухолей, показанные на фиг. 2, представляют собой репрезентативные размеры опухоли, в целом наблюдаемые в каждой группе в указанный период времени.

Хотя опухоли собирали от животных в контрольной группе (группа 1) за 20-40 дней до даты, в которую собирали опухоли в экспериментальных группах (2-4 группы), из фиг. 2 видно, что опухоли в контрольной группе, в среднем, были значительно больше, чем в любой из экспериментальных групп на момент смерти. Эти результаты показывают, что как кофермент Q10, так и гемцитабин ингибировали рост опухолей поджелудочной железы в ксеногенной мышиной модели опухоли человека.

Кроме того, опухоли взвешивали для количественного определения размера. Эти результаты показаны на фиг. 3. В среднем, опухоли от мышей, обработанных только коферментом Q10 (группа 2), были значительно меньше, чем опухоли от мышей в контрольной группе (группа 2, по сравнению с группой 1, р<0,001) или опухоли от мышей в группе, получавшей гемцитабин (группа 2 против группы 3, р<0,001). Было обнаружено, что опухоли от мышей, обработанных комбинацией кофермента Q10 и гемцитабина (группа 4), в среднем были значительно меньше, чем опухоли от мышей, обработанных только коферментом Q10 (группа 2 против группы 4, р=0,01) или только гемцитабином (группа 3 против группы4, р<0,0001).

Аналогичным образом, было отмечено, что пальпируемые опухоли уменьшались в экспериментальных группах, по сравнению с опухолями в контрольной группе. Кроме того, гистологический анализ опухолей выявил уменьшенное опухолевое кровоснабжение в опухолях от мышей, обработанных коферментом Q10, по сравнению, по меньшей мере, с опухолями от необработанных контрольных мышей (данные не показаны). Не проводился количественный анализ сосудистой системы опухоли.

Эти данные показывают, что внутривенное введение кофермента Q10 мышам, несущим опухоли поджелудочной железы, ингибирует рост опухоли поджелудочной железы, по сравнению с контрольными мышами без воздействия и по сравнению с мышами, обработанными только гемцитабином, средством, одобренным для лечения опухолей поджелудочной железы у человека. Кроме того, комбинация внутривенного введения кофермента Q10 и гемцитабина была более эффективной в ингибировании роста опухолей поджелудочной железы у мышей, чем лечение каждым лекарственным средством в отдельности.

Также наблюдалось, что внутривенное введение кофермента Q10 приводит к уменьшению количества сосудистой системы опухоли поджелудочной железы, по сравнению, по меньшей мере, с опухолью от контрольных мышей без воздействия, дополнительно демонстрируя эффективность кофермента Q10 в лечении злокачественной опухоли.

Эти данные дополнительно показывают, что внутривенное введение кофермента Q10 мышам, несущим опухоли поджелудочной железы, увеличивает время выживания мышей, по сравнению с контрольными животными без воздействия и по сравнению с животными, обработанными только гемцитабином, средством, одобренным для лечения опухолей поджелудочной железы у человека. Кроме того, комбинация кофермента Q10 и гемцитабина была более эффективна для увеличения времени

- 42 032775 выживания мышей, несущих опухоли поджелудочной железы, чем лечение каждым лекарственным средством по отдельности.

Пример 2. Схема 2. Комбинация CoQ10 два раза в день внутривенно и гемцитабина один раз в неделю для лечения злокачественной опухоли поджелудочной железы.

Во второй схеме лечения доза:

I. Контроль, без лечения.

II. 50 мг/кг внутривенного состава 4% кофермента Q10, вводимого внутрибрюшинно два раза в день в течение 3 недель с одной неделей перерыва.

III. 150 мг/кг гемцитабина один раз в неделю в течение 3 недель с одной неделей перерыва.

IV. 50 мг/кг внутривенного состава 4% кофермента Q10, вводимого внутрибрюшинно два раза в день в течение 3 недель с одной неделей перерыва, и доза 150 мг/кг гемцитабина один раз в неделю в течение 3 недель с одной неделей перерыва.

В этом примере внутривенный состав CoQ10 вводили внутрибрюшинно для предотвращения повреждения сосудов, что представляет собой результат частоты введения.

Мышей контролировали на выживание. Результаты, как показано на фиг. 4, показывают увеличение выживаемости мышей, получавших CoQ10, либо отдельно, либо в комбинации с гемцитабином, по сравнению с мышами без воздействия или мышами, получавшими только гемцитабин. Эти данные показывают, что CoQ10, либо отдельно, либо в комбинации с гемцитабином, более эффективен при лечении злокачественной опухоли поджелудочной железы, чем один гемцитабин.

Пример 3. Комбинированная терапия in vitro (CoQ10 + гемцитабин) злокачественных опухолей поджелудочной железы и молочной железы.

Анализ жизнеспособности клеток in vitro.

Клеточные линии (например, MiaPaCa-2, Нер3В и/или СК-Бг3) поддерживали в культуре с использованием стандартных условий культивирования для каждой клеточной линии. Клетки обрабатывали CoQ10 или указанными химиотерапевтическими средствами в указанных концентрациях в течение указанных промежутков времени. После заранее заданного времени инкубации клетки окрашивали на различие жизнеспособных и нежизнеспособных клеток с использованием стандартных способов. Клетки подсчитывали с помощью микроскопа или проточной цитометрии. Количество клеток после лечения нормировали по отношению к количеству клеток в необработанном образце.

В частности, для оценки эффективности кофермента Q10 в комбинации с гемцитабином in vitro, клетки карциномы поджелудочной железы MIAPaCa-2 поддерживали в культуре и подвергали воздействию возрастающих концентраций гемцитабина в комбинации с CoQ10, 4%-го состава CoQ10 для внутривенного введения или вспомогательного вещества в составе CoQ10 для внутривенного введения. На фиг. 5А показано влияние 6-часовой обработки с CoQ10 или 4%-ным составом CoQ10 для внутривенного введения, либо отдельно, либо в комбинации с гемцитабином, на клетки MIAPaCa-2 злокачественной опухоли поджелудочной железы. На фиг. 5В показано влияние 6-часовой обработки с CoQ10 или 4%-ным составом CoQ10 для внутривенного введения, либо отдельно, либо в комбинации с гемцитабином, на клетки SK-Br3 злокачественной опухоли молочной железы. Полученные результаты показывают увеличенную гибель клеток злокачественной опухоли как поджелудочной железы, так и молочной железы после воздействия 4%-го состава CoQ10 для внутривенного введения в комбинации с гемцитабином через 6 ч. Комбинированное лечение с гемцитабином и 4%-ным составом CoQ10 для внутривенного введения приводит к увеличению гибели клеток по сравнению с лечением только гемцитабином.

Пример 4. Комбинированная терапия in vitro (CoQ10 + доксорубицин) злокачественных опухолей поджелудочной железы и молочной железы.

Чтобы оценить эффективность CoQ10 в комбинации с доксорубицином in vitro, клетки карциномы поджелудочной железы MIAPaCa-2 поддерживали в культуре и подвергали воздействию возрастающих концентраций доксорубицина в комбинации с CoQ10, 4%-го состава CoQ10 для внутривенного введения или вспомогательного вещества в составе CoQ10 для внутривенного введения. На фиг. 6А показано влияние 6-часовой обработки с CoQ10 или 4%-ным составом CoQ10 для внутривенного введения, либо отдельно, либо в комбинации с доксорубицином, на клетки MIAPaCa-2 злокачественной опухоли поджелудочной железы. На фиг. 6В показано влияние 6-часовой обработки с CoQ10 или 4%-ным составом CoQ10 для внутривенного введения, либо отдельно, либо в комбинации с доксорубицином, на клетки SK-Br3 злокачественной опухоли молочной железы. Полученные результаты показывают увеличенную гибель клеток злокачественной опухоли как поджелудочной железы, так и молочной железы после воздействия 4%-го состава CoQ10 для внутривенного введения в комбинации с доксорубицином через 6 ч. Комбинированное лечение с доксорубицином и 4%-ным составом CoQ10 для внутривенного введения приводит к увеличению гибели клеток по сравнению с лечением только доксорубицином.

- 43 032775

Чтобы подтвердить результаты, наблюдаемые in vitro, описанную выше ксеногенную мышиную модель MIAPaca-2 использовали для оценки активности доксорубицина, либо отдельно, либо в сочетании с внутривенным составом CoQ10, чтобы увеличить выживаемость мышей. Как показано на фиг. 7, состав CoQ10 для внутривенного введения в комбинации с доксорубицином продлевал жизнеспособность по сравнению с лечением только доксорубицином.

Было установлено, что один CoQ10 или CoQ10 в комбинации с доксорубицином более эффективен, чем доксорубицин или гемцитабин в осуществлении ответов, связанных с благоприятными терапевтическими конечными точками при лечении злокачественной опухоли поджелудочной железы, в первую очередь с увеличением выживаемости. Внутривенный CoQ10 также характеризуется потенциальной полезностью в лечении злокачественных опухолей молочной железы. Составы CoQ10, либо самостоятельно, либо в сочетании с гемцитабином, продлевали жизнеспособность до 42 дней ксеногенной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы. Введение CoQ10 в комбинации с доксорубицином снижало уровень смертности, наблюдаемый в ксеногенной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы по сравнению с лечением только доксорубицином.

Пример 5. Схема лечения 3. Комбинация CoQ10 три раза в день внутривенно и гемцитабина один раз в неделю.

Равное количество опухолевых клеток поджелудочной железы человека MIAPaCa-2 (1х10⁷) суспендировали в MATRIGEL® и вводили мышам. Опухолям MIAPaca-2 позволяли развиваться в течение, в среднем, по меньшей мере 3 недель у мышей до начала лечения.

Мышей с пальпируемыми опухолями рандомизировали на 5 групп по 30 мышей в каждой следующим образом:

I. Группа 1 - без лечения.

II. Группа 2 - внутрибрюшинная доза 4%-го состава CoQ10 для внутривенного введения, 50 мг/кг/дозу, 3 раза в день (150 мг/кг/день).

III. Группа 3 - внутрибрюшинная доза 4%-го состава кофермента Q10 для внутривенного введения, 75 мг/кг/дозу, 3 раза в день (225 мг/кг/день).

IV. Группа 4 - комбинация внутрибрюшинной дозы 4%-го состава CoQ10 для внутривенного введения, 50 мг/кг/дозу, 3 раза в день (150 мг/кг/день), и внутривенной дозы один раз в неделю гемцитабина 150 мг/кг в течение 3 недель с одной неделей перерыва. Этот цикл повторяли с четырехнедельными интервалами.

V. Группа 5 - комбинация внутрибрюшинной дозы 4%-го состава CoQ10 для внутривенного введения, 75 мг/кг/дозу, 3 раза в день (225 мг/кг/день), и внутривенной дозы один раз в неделю гемцитабина 150 мг/кг в течение 3 недель с одной неделей перерыва. Этот цикл повторяли с четырехнедельными интервалами.

Высокая частота введения кофермента Q10 предотвращала внутривенное введение кофермента Q10 из-за сосудистых повреждений, вызванных высокой частотой внутривенных инъекций. Животных наблюдали на жизнеспособность и рост опухоли контролировали при пальпации.

Результаты выживаемости, собранные в течение 417 дней, показаны на фиг. 8. Все мыши в контрольной, необработанной группе (группа 1) умерли к 23 дню после начала введения терапевтических средств мышам в группах 2-5. В противоположность этому, по меньшей мере 50% животных в каждой из экспериментальных групп (группы 2-5) были жизнеспособными на 130 день после начала лечения. Животные, получавшие только кофермент Q10 в обеих экспериментальных дозах, отображали значительное увеличение выживаемости по сравнению с контрольными животными. Кроме того, у животных, обработанных комбинацией кофермента Q10 и гемцитабина, отображалась увеличенная выживаемость по сравнению с мышами, обработанными такой же дозой только кофермента Q10 на протяжении курса лечения.

Пример 6. Относительные чувствительности онкогенных и нормальных клеток к коферменту Q10.

Исследовали и сравнивали эффекты воздействия кофермента Q10 на различные онкогенные и нормальные клеточные линии. Чувствительность клеток к коферменту Q10 оценивали путем мониторинга индукции апоптоза. Обработку клеток CoQ10 проводили, как описано подробно ниже в разделе материалы и способы. Индукцию апоптоза оценивали в обработанных клетках путем мониторинга показателей раннего апоптоза (например, экспрессии Bcl-2, активации каспазы и с использованием анализов с аннексином V), как описано ниже. Из этих исследований определяли минимальную дозировку CoQ10, например, концентрацию CoQ10, и время лечения, необходимые для индукции апоптоза в панели клеточных линий.

Данные показали, что эффективность лечения с коферментом Q10 была больше в клеточных типах, которые проявляли повышенный потенциал онкогенности и/или большей метастатичности, т.е. типы клеток, которые были получены из более агрессивных видов злокачественных опухолей или опухолей. Результаты этих исследований приведены ниже в таблице. Данные показывают, что CoQ10 более эффективен как зависимым от времени, так и зависимым от концентрации образом против клеток в более агрессивном состояние злокачественной опухоли. Кроме того, удивительный расходящийся эффект

- 44 032775 наблюдался на нормальных клетках, по сравнению с онкогенными клетками. В частности, неожиданно было установлено, что кофермент Q10 проявляет слегка вспомогательную роль в нормальной тканевой среде, причем наблюдалась повышенная пролиферация и миграция в нормальных клетках, в том числе кератиноцитах и дермальных фибробластах.

Эффект кофермента Q10 на генные регулирующие и белковые механизмы при злокачественной опухоли отличается в нормальной клетке. Ключевой клеточный инструмент и компоненты, такие как архитектура цитоскелета, мембранная текучесть, транспортные механизмы, иммуномодуляция, ангиогенез, контроль клеточного цикла, геномная стабильность, окислительный контроль, гликолитический поток, метаболический контроль и целостность белков внеклеточного матрикса, которые дисрегулируют и, следовательно, изменяют генетические и молекулярный отпечаток клетки. Среда заболевания способствует управлению клеточными контрольными процессами. Предусмотренные в настоящем документе данные предполагает, что CoQ10 характеризуется большой эффективностью (например, в злокачественных клетках против нормальных клеток, и в клетках с более агрессивным состоянием злокачественной опухоли по сравнению с клетками с менее агрессивным или неагрессивным состоянием злокачественной опухоли) путем нормализации некоторых из ключевых вышеуказанных процессов таким образом, который позволяет восстановленние потенциала апоптоза.

Минимальные требования к концентрации CoQ10 и времени воздействия для индукции раннего апоптоза в различных типах клеток

Происхождение ткани (тип клеток)	Показатель раннего апоптоза (Bcl-2, аннексин V или активация каспазы)	Концентрация (мкМ)	Время (ч)	Уровень агрессивности: 1=нормальная ткань 2=злокачеств. 3=метастатич.
Кожа:
Кератиноциты (Heka, Hekn)	Отсутствует	Нет данных	Нет данных	1
Фибробласты (nFib)	Отсутствует	Нет данных	Нет данных	1
Меланоциты (Hema, LP)	Отсутствует	Нет данных	Нет данных	1
Меланома (Skmel 28)	Сильный	20	24	2
Меланома (Skmel 2)	Очень сильный	25	24	3
SCC, плоскоклеточная карцинома	Очень сильный	25	24	3

Молочная железа:
MCF-7	Сильный	50	48	2
SkBr-3	Очень сильный	50	24	3
BT-20	Сильный	100	48	2
ZR-75	Слабый	200	72	2
MDA MB 468	Сильный	100	48	2
Фибробласты молочной железы: 184A1 и 184B5 (Lawrence Berkeley)	Отсутствует	Нет данных		1

Предстательная железа:
PC3	Очень сильный	25	24	3

Печень:
HepG2	Очень сильный	50	24	3
Hep3B	Очень сильный	50	24	3

Кость:
Остеосаркома (143b)	Очень сильный	50	48	2
Саркома Юинга (NCI)	Чрезвычайно сильный	5	1	3

Поджелудочная железа:				3
PaCa2	Очень сильный	25	24

- 45 032775

Происхождение ткани (тип клеток)	Показатель раннего апоптоза (Bcl-2, аннексин V или активация каспазы)	Концентрация (мкМ)	Время (ч)	Уровень агрессивности: 1=нормальная ткань 2=злокачеств. 3=метастатич.

Сердце:
Гладкая мускулатура аорты (HASMC)	Отсутствует	Нет данных	Нет данных	1

Материалы и способы.

Подготовка и обработка клеток.

Клетки, подготовленные в чашках или колбах.

Клетки культивировали в колбах T-75 с соответствующей средой, дополненной 10% фетальной бычьей сывороткой (FBS), 1% PSA (пенициллин, стрептомицин, амфотерицин B) (Invitrogen и Cellgro) в инкубаторе при 37°C с содержанием СО₂, равным 5%, пока не было достигнуто 70-80% слияния. К собранным клеткам для обработки в колбы заливали 1 мл трипсина, аспирировали, трипсинизировали дополнительными 3 мл и инкубировали при 37°С в течение 3-5 мин. Клетки затем нейтрализовали равным объемом сред и затем раствор центрифугировали при 10000 об/мин в течение 8 мин. Супернатант аспирировали и клетки ресуспендировали в 8,5 мл среды. Смесь ресуспендирования объемом 500 мкл и 9,5 мл изопропанола считывали дважды с помощью счетчика Культера и определяли соответствующее количество клеток для высевания в каждую чашку. Контроль и концентрацию в пределах групп 0-200 мкМ исследовали в трех повторах. Из 500 мкМ маточного раствора CoQ10 проводили серийные разведения для достижения желаемой экспериментальной концентрации в соответствующих чашках. Чашки инкубировали при 37°C инкубаторе с содержанием 5% CO₂ в течение 0-72 ч в зависимости от типа клеток и экспериментального протокола.

Выделение и количественное определение белка.

Клетки, подготовленные в чашках.

После окончания инкубационного периода обработки клеток, производили выделение белка. Чашки всех экспериментальных групп дважды промывали 2 мл и один раз 1 мл охлажденного льдом 1-кратным забуференный фосфатом физиологическим раствором (PBS). PBS аспирировали из чашек только после первых 2 отмывок. Клетки осторожно соскабливали и собирали в микроцентрифужные пробирки с использованием конечного объема от третьей промывки и центрифугировали при 10000 об/мин в течение 10 мин. После центрифугирования супернатант аспирировали, а осадок лизировали с 50 мкл буфера для лизиса (1 мкл протеазы и ингибитора фосфатазы на каждые 100 мкл буфера для лизиса). Образцы замораживали в течение ночи при -20°С.

Клетки, подготовленные в колбах.

После окончания инкубационного периода обработки клеток, производили выделение белка. Колбы всех экспериментальных групп дважды промывали 5 мл и один раз 3 мл охлажденного льдом 1-кратным PBS. PBS аспирировали из колб только после первых 2 отмывок. Клетки осторожно соскабливали и собирали в микроцентрифужные пробирки объемом 15 мл с использованием конечного объема от третьей промывки и центрифугировали при 10000 об/мин в течение 10 мин. После центрифугирования супернатант аспирировали, а осадок лизировали с соответствующим объемом буфера для лизиса (1 мкл протеазы и ингибитора фосфатазы на каждые 100 мкл буфера для лизиса). Объем лизирующего буфера зависел от размера осадка. Образцы переносили в микроцентрифужные пробирки и замораживали в течение ночи при -20°С.

Количественное определение белка.

Образцы оттаивали при 4°С и обрабатывали ультразвуком, чтобы обеспечить однородность на следующий день после выделения белка. Количественную оценку белка проводили с использованием набора для анализа белка micro BCA (Pierce). Чтобы подготовить образцы для иммуноблоттинга, получали раствор 1:19 бетамеркаптоэтанола (Sigma) к буферу для образца (Bio-Rad). Пробы разводили 1:1 с буферным раствором бетамеркаптоэтанол-буфер для образца, варили при температуре 95°С в течение 5 мин и замораживали в течение ночи при -20°С.

Иммуноблоттинг.

Bcl-2, каспаза 9, цитохром с.

Объем образца для загрузки на лунку определяли с использованием сырой средней концентрации белка, полученного из белкового анализа BCA. Загружали приблизительно 30-60 мкг белка для каждой временной точки воздействия. Белки разгоняли в трех повторах на готовых гелях 12% Трис-HCl (BioRAD®) или полученных вручную гелях в 1-кратном подвижном буфере при 85 и 100 вольт (В). Белки переносили на нитроцеллюлозную бумагу в течение 1 ч при 100 В и блокировали в течение еще одного часа в 5%-ном растворе молока. Мембраны помещали в первичные антитела (1 мкл антител: 1000 мкл

- 46 032775

TBST) (Cell Signaling) в течение ночи при -4°С. На следующий день мембраны промывали три раза в течение 10 мин каждый с Трис-солевым буфером Tween®-20 (TBST) и вторичное антитело (антикроличье; 1 мкл антител: 1000 мкл TBST) наносили в течение 1 ч при -4°С. Мембраны снова промывали три раза в течение 10 мин с TBST и завершали хемилюминесценцию с использованием субстрата Пико или Фемто (Pierce®). Мембраны затем проявляли во временные интервалы, которые производят лучшие визуальные результаты. После проявления мембраны хранили в TBST при -4°С до тех пор, пока можно было измерить содержание актина.

Актин.

Мембраны помещали в первичное антитело к актину (1 мкл антитела: 5000 мкл TBST) (клеточная сигнализация) в течение 1 ч при -4°С, промывали три раза в течение 10 мин каждую с TBST и наносили вторичное антитело (антитело против мышиного; 1 мкл антитела: 1000 мкл TBST) в течение 1 ч при -4°С. Мембраны снова промывали три раза в течение 10 мин каждую с TBST и завершали хемилюминесценцию с использованием субстрата Пико (Pierce). Мембраны затем проявляли во временные интервалы, которые производят лучшие визуальные результаты.

Анализ с аннексином V.

Клетки промывали дважды в PBS и ресуспендировали в связывающем буфере (0,1 М HEPES, рН 7,4, 1,4 М NaCl; 25 мМ CaCl₂). Образцы объемом 100 мкл добавляли к пробирке для культуры с красителем аннексин-PE или 7-ADD объемом 5 мкл. Клетки перемешивали и инкубировали без света при комнатной температуре в течение 15 мин. После этого 400 мкл 1-кратного связывающего буфера добавляли к каждому образцу и подвергали анализу с помощью проточной цитометрии.

Пример 7. Воздействие CoQ10 делает опухоли чувствительными к химиотерапевтическим средствам in vivo.

С использованием способов в примере 6 клетки исследовали для определения того, оказывает ли относительное время обработки клеток CoQ10 и химиотерапевтическими средствами влияние на гибель клеток, например, путем обеспечения апоптоза, индукции лизиса опухоли, ингибирования пролиферации клеток.

Вкратце, клетки культивировали, как в примере 6. Клетки обрабатывали CoQ10 и химиотерапевтическими средствами, либо по отдельности, либо в комбинации, или соответствующими контрольным наполнителем. Для клеток, обработанных как CoQ10, так и химиотерапевтическими средствами, клетки контактировали с CoQ10 и химиотерапевтическими средствами в различных последовательностях. Использовали различные концентрации кофермента Q10 и химиотерапевтических средств. Также использовали различные времена обработки. Примеры условий представлены в таблице ниже.

	Обработка № 1	Обработка № 2
CoQ10	Химиотерапия	CoQ10	Химиотерапия
1	+	+	+	+
2	+	--	+	--
3	--	+	--	+
4	+	--	+	+
5	+			+

Используют соответствующие контрольные наполнители для каждого CoQ10 и химиотерапевтического средства.

После обработки CoQ10 и химиотерапии, как указано, клетки собирали и анализировали на жизнеспособность и апоптоз с использованием способов, приведенных выше. Было показано, что предварительная обработка CoQ10 до обработки химиотерапией более эффективна для гибели клеток, чем совместная обработка CoQ10 и химиотерапией или обработка CoQ10 после химиотерапии. В частности, предварительная обработка CoQ10 с последующей обработкой CoQ10 и химиотерапией, представляет собой эффективную в гибели клеток. Предварительная обработка CoQ10 и прекращение CoQ10, с последующей обработкой с химиотерапией представляет собой также эффективную в гибели клеток. Без ограничения какой-либо теорией предполагают, что CoQ10 переучивает зависимую от гликолиза злокачественную опухоль использовать дыхательную цепь митохондрий в качестве источника энергии с помощью изменения экспрессии ключевых регуляторных ферментов в пентозофосфатном шунте, гликолизе и окислительном фосфорилировании. Метаболический переключатель, осуществленный с помощью CoQ10 в злокачественных клетках, связан с индукцией новой интегрированной перекрестной помехи передачи сигналов с участием TP53, Bcl-2/Bax и VEGF, что приводит к повторению путей апоптоза. Эти данные свидетельствуют о непосредственном влиянии CoQ10 на митохондриально-ориентированные пути в сенсибилизации злокачественных клеток к цитотоксическим эффектам химиотерапии при обеспечении защиты нормальных клеток.

Пример 8. Обработка CoQ10 делает опухоли чувствительными к химиотерапевтическим средствам in vivo.

- 47 032775

В ксенотрансплантантной модели опухоли in vivo мышам имплантировали опухоли. Например, клетки злокачественной опухоли поджелудочной железы MIAPaCa-2, суспендированные в MATRIGEL, вводили мышам NSG. Кроме того, в ксенотрансплантатной мышиной модели использовали другие линии опухолевых клеток, например, трижды негативный рак молочной железы, злокачественную опухоль печени, злокачественную опухоль предстательной железы, клеточные линии меланомы, саркомы, карциномы. Также могут быть использованы химически индуцируемые опухоли и другие животные модели злокачественной опухоли. У всех животных присутствие опухолей подтверждается до начала воздействия.

Различные последовательные схемы лечения и комбинации CoQ10 и химиотерапевтических средств исследовали на способность снижать нагрузку опухоли и/или уменьшать опухолевые метастазы. Например, используют иллюстративные схемы лечения, приведенные в таблице в примере 7. Каждая обработка № 1 и 2, как показано в таблице в примере 7, может представлять собой один или несколько циклов обработки средством. Например, у некоторых животных 2 или более циклов CoQ10 вводят в обработке № 1 перед одним или несколькими циклами химиотерапевтического средства в обработке №

2. У некоторых животных один цикл CoQ10 вводят в обработке № 1 до введения множественных циклов химиотерапии в обработке № 2.

Объемы опухолей контролируют с использованием стандартных способов, например, калиперов, анализов изображений. В конце исследования, опухоли вырезали и анализировали с использованием обычных способов, например, по размеру (например, весу и объему), гистологическим признакам, классу и васкуляризации. Было показано, что обработка одним или несколькими циклами CoQ10 до обработки с химиотерапевтическими средствами более эффективна, чем совместное введение CoQ10 с химиотерапевтическим средством или только химиотерапевтического средства.

Пример 9. Обработка CoQ10 повышает эффективность химиотерапевтических средств в лечении злокачественной опухоли печени клетки in vitro.

Клетки злокачественной опухоли печени Нер3В культивировали в стандартных условиях. Клетки обрабатывали химиотерапевтическими средствами: иринотеканом (SN38), цисплатином, 5фторурацилом или доксорубицином в указанных концентрациях по отдельности или в комбинации с CoQ10 (100 мкМ) в течение заданного периода времени.

Ингибирование роста/обеспечение гибели клеток оценивали путем подсчета живых клеток. Результаты показаны на фиг. 9А-9С и 10. Было продемонстрировано, что CoQ10 увеличивает эффективность всех химиотерапевтических средств, увеличивая клеточную гибель и уменьшая число живых клеток. Эти данные свидетельствуют о том, что комбинация этих терапевтических средств более эффективна в лечении злокачественной опухоли печени, чем одно химиотерапевтическое средство.

Пример 10. Митохондриальное примирование апоптического аппарата при злокачественной опухоли поджелудочной железы с помощью CoQ10 для усиления эффективности химиотерапии.

Без привязки к механизму предлагается, что CoQ10 приводит в исполнение метаболический переключатель от гликолиза к повышенному митохондриальному окислительному фосфорилированию, приводя к рекапитуляции апоптоза при злокачественной опухоли. Исследовали эффекты CoQ10, чтобы определить, приводит ли предварительная обработка с CoQ10 к митохондриальному примированию, тем самым увеличивая цитотоксическое действие химиотерапевтических средств стандартного лечения. Клетки MIAPaCa-2 злокачественной опухоли поджелудочной железы человека либо (а) предварительно обрабатывали CoQ10 до обработки гемцитабином, либо (b) совместно обрабатывали CoQ10 и гемцитабином. Контролировали влияние воздействий на жизнеспособность клеток, и результаты показаны на фиг. 10-14.

Воздействие CoQ10 приводило к сниженной пролиферации клеток MIAPaca-2 по сравнению с воздействием с использованием только гемцитабина. Обработка клеток MIAPaca-2 с CoQ10 дополняла цитотоксический потенциал гемцитабина как при предварительной обработке, так и в совместной схеме лечения.

Пример 11. Митохондриальное примирование апоптического аппарата при злокачественной опухоли поджелудочной железы с помощью кофермента Q10 для повышения эффективности химиотерапии.

Равное количество опухолевых клеток поджелудочной железы человека MIAPaCa-2 (1х10⁷) суспендировали в MATRIGEL® и вводили мышам. Опухолям позволяли развиваться в течение, в среднем, по меньшей мере 3 недель до начала лечения.

I. Группа 1 - без лечения.

II. Группа 2 - внутрибрюшинная доза 4%-го состава CoQ10 для внутривенного введения, 75 мг/кг/дозу, 3 раза в день (225 мг/кг/день), и внутривенная доза один раз в неделю гемцитабина 150 мг/кг в течение 3 недель с одной неделей перерыва, начатой в тот же день.

- 48 032775

III. Группа 3 - внутрибрюшинная доза 4%-го состава CoQ10 для внутривенного введения, 75 мг/кг/дозу, 3 раза в день (225 мг/кг/день), и внутривенная доза один раз в неделю гемцитабина 150 мг/кг в течение 3 недель с одной неделей перерыва, начатой после начала лечения с CoQ10.

IV. Группа 4 - внутрибрюшинная доза 4%-го состава CoQ10 для внутривенного введения, 75 мг/кг/дозу, 3 раза в день (225 мг/кг/день), и внутривенная доза один раз в неделю гемцитабина 150 мг/кг в течение 3 недель с одной неделей перерыва, начатой через две недели после начала лечения с CoQ10.

V. Группа 5 - внутрибрюшинная доза 4%-го состава CoQ10 для внутривенного введения, 75 мг/кг/дозу, 3 раза в день (225 мг/кг/день), и внутривенная доза один раз в неделю гемцитабина 150 мг/кг в течение 3 недель с одной неделей перерыва, начатой через три недели после начала лечения с CoQ10.

Высокая частота введения кофермента Q10 предотвращала внутривенное введение кофермента Q10 из-за сосудистых повреждений, вызванных высокой частотой внутривенных инъекций. Животных наблюдали на жизнеспособность и рост опухоли контролировали путем пальпации.

Ранние моменты времени показывают, что предварительная обработка внутривенным CoQ10 с последующим гемцитабином приводит к улучшенной выживаемости в модели злокачественной опухоли поджелудочной железы, по сравнению с совместной схемой лечения (фиг. 15А). Без привязки к механизму данные показывают, что CoQ10 может представлять собой жизнеспособное средство митохондриального примирования для повышения чувствительности злокачественных клеток к цитотоксическим эффектам гемцитабина при злокачественной опухоли поджелудочной железы. Данные показывают, что добавление CoQ10 увеличивает цитотоксическое действие гемцитабина при злокачественной опухоли поджелудочной железы и увеличивает выживаемость статистически значимым образом, по сравнению с необработанным контролем в самой последней временной точке (смотрите ниже) Кроме того, обработка CoQ10 с последующей обработкой гемцитабином связана с улучшением выживаемости (см., например, CoQ10 75 мг/кг, начатый одновременно с химиотерапией, по сравнению с CoQ10 75 мг/кг в течение 3 недель с последующей химиотерапией).

Условие 1	Условие 2	p-величина
Контроль	CoQ10 75 мг/кг, начатый одновременно с химиотерапией	<0,00001
Контроль	CoQ10 75 мг/кг в течение 1 недели, а затем химиотерапия	<0,00001
Контроль	CoQ10 75 мг/кг в течение 2 недель, а затем химиотерапия	<0,00001
Контроль	CoQ10 75 мг/кг в течение 3 недель, а затем химиотерапия	<0,00001
CoQ10 75 мг/кг, начатый одновременно с химиотерапией	CoQ10 75 мг/кг в течение 1 недели, а затем химиотерапия	0,26503
CoQ10 75 мг/кг, начатый одновременно с химиотерапией	CoQ10 75 мг/кг в течение 2 недель, а затем химиотерапия	0,45960
CoQ10 75 мг/кг, начатый одновременно с химиотерапией	CoQ10 75 мг/кг в течение 3 недель, а затем химиотерапия	0,02724*
CoQ10 75 мг/кг в течение 1 недели, а затем химиотерапия	CoQ10 75 мг/кг в течение 2 недель, а затем химиотерапия	0,82980
CoQ10 75 мг/кг в течение 1 недели, а затем химиотерапия	CoQ10 75 мг/кг в течение 3 недель, а затем химиотерапия	0,20885
CoQ10 75 мг/кг в течение 2 недель, а затем химиотерапия	CoQ10 75 мг/кг в течение 3 недель, а затем химиотерапия	0,15515

Пример 12. Монотерапия CoQ10 in vitro различных типов злокачественных клеток.

Чтобы оценить эффективность кофермента Q10 in vitro, различные злокачественные клетки (клетки карциномы поджелудочной железы MIAPaCa-2, клетки злокачественной опухоли яичников SKOV-3, клетки злокачественной опухоли предстательной железы PC-3, клетки злокачественной опухоли толстой кишки НТ-29, клетки злокачественной опухоли молочной железы MCF7, клетки злокачественной опухоли молочной железы MDA-MB231, клетки злокачественной опухоли молочной железы SKBR-3, клетки злокачественной опухоли легких А549, клетки злокачественной опухоли печени Нер3В) поддерживали в культуре и подвергали воздействию 100 мкМ CoQ10 в течение 48-72 ч. На фиг. 16 показано влияние обработки CoQ10 на различные злокачественные клетки. Результаты демонстрируют повышенную клеточную гибель злокачественных клеток после воздействия CoQ10.

Пример 13. Влияние CoQ10 на клеточный метаболизм и активность каспазы 3.

Базальную норму расхода кислорода (OCR) и скорость внеклеточного закисления (ECAR) измеряли в клетках злокачественной опухоли молочной железы MDA-MB213 и SKBR-3, обработанных 100 мкМ CoQ10 в течение 24 ч. На фиг. 17 показан эффект воздействия CoQ10 на OCR и ECAR в клетках злокачественной опухоли молочной железы. Более высокое отношение OCR для ECAR в клетках

- 49 032775 злокачественной опухоли молочной железы, обработанных CoQ10, указывает на то, что CoQ10 увеличивает окислительное фосфорилирование (OXPHOS) и снижает гликолиз в клетках злокачественной опухоли молочной железы. Производство активных форм кислорода (АФК) также измеряли в клетках злокачественной опухоли молочной железы MDA-MB213 и SKBR-3 и неонкогенных контрольных клетках (MCF12A), обработанных 100 мкМ CoQ10 в течение 24 ч. Митохондрии представляют собой значительный источник АФК, который, как известно, участвует в активации путей клеточной гибели. На фиг. 17 показано, что воздействие CoQ10 увеличивает производство АФК как в клетках злокачественной опухоли молочной железы, так и в контрольных клетках.

Активность каспазы 3 сравнивали в клетках злокачественной опухоли молочной железы MDAMB213 и SKBR-3, обработанных 100 мкМ CoQ10 в течение 72-96 ч, в контрольных клетках злокачественной опухоли молочной железы MDA-MB213 и SKBR-3, которые не были обработаны. Каспаза 3 представляет собой каспазу-палача, необходимую как для внутреннего (митохондриального), так и внешнего путей апоптоза. На фиг. 18 показано, что воздействие CoQ10 увеличивает активность каспазы 3 в клетках злокачественной опухоли молочной железы MDA-MB213 и SKBR-3.

Пример 14. Анализ in vitro предварительной обработки и совместной обработки CoQ10 в различных злокачественных клетках.

Клетки злокачественной опухоли легких A549, клетки злокачественной опухоли предстательной железы РС3 и клетки злокачественной опухоли яичников SKOV3 предварительно обрабатывали или совместно обрабатывали CoQ10 и химиотерапевтическими средствами цисплатином, доцетакселом и циклофосфамидом, соответственно. Для предварительной обработки клетки обрабатывали в течение 6 ч CoQ10 и затем назначенное химиотерапевтическое средство добавляли к среде. Таким образом, обработку CoQ10 продолжали во время воздействия химиотерапевтическим средством для групп предварительной обработки. Продолжительность времени воздействия химиотерапевтическим средством варьировала в зависимости от типа клеток. Клетки А549 обрабатывали цисплатином в течение 48 ч, клетки РС3 обрабатывали доцетакселом в течение 48 ч и клетки SKOV3 обрабатывали циклофосфамидом в течение 72 ч. Совместно обработанные и предварительно обработанные клетки обрабатывали химиотерапевтическим средством в течение того же периода времени. На фиг. 19 показан эффект совместной обработки и предварительной обработки CoQ10 и химиотерапевтическим средством.

Пример 15. Оценка животной модели трижды негативного рака молочной железы (TNBC) в ответ на один CoQ10 или в комбинации со стандартной химиотерапией.

Мышей, несущих ксенотрансплантаты трижды негативного рака молочной железы (TNBC), лечили с использованием схемы лечения TAC (5 мг/кг доцетаксела, 1 мг/мг доксорубицина и 35 мг/кг циклофосфамида) с и без CoQ10. ТАС давали каждые три недели в течение шести циклов. Мышей также лечили только CoQ10. CoQ10 отдельно или в сочетании со схемой лечения TAC значительно улучшал выживание. См. фиг. 21.

Пример 16. Исследования in vitro клеток злокачественной опухоли молочной железы, обработанных CoQ10 и химиотерапевтическими средствами.

Клетки злокачественной опухоли молочной железы человека различного рецепторного статуса (SKBR3, MDA-MB231) подвергали либо (а) предварительной обработке CoQ10 (6 ч) с последующей совместной инкубацией с химиотерапевтическими средствами (5-фторурацил, 5-FU; доксорубицин, Doxo; SN38, активный метаболит иринотекан) в течение 48 ч, или (b) совместной обработке CoQ10 и химиотерапевтическими средствами. Ответы злокачественных клеток сравнивали с неонкогенными клетками молочной железы (MCF12A). Количество жизнеспособных клеток оценивали через 48 ч. Пропидий йодид (PI) и клеточное меченое вещество CFSE использовали для измерения гибели и пролиферации клеток, соответственно, в обработанных клетках. Как один CoQ10 или предварительная обработка им, так и стратегия совместной обработки с CoQ10 плюс стандартное лечение приводили к значительному снижению жизнеспособных клеток злокачественной опухоли молочной железы по сравнению с химиотерапевтическими средствами; однако минимальные эффекты наблюдались в неонкогенных клетках MCF12A. См. фиг. 20, 23 и 24.

Вдобавок, CoQ10 в комбинации с химиотерапевтическими средствами усиливал активацию каспазы 3 и апоптическую гибель клеток, указывая на то, что CoQ10 повышает апоптическую сигнализацию. См. фиг. 22. Взятые вместе, эти данные показывают, что CoQ10 представляет собой новое средство, которое перестраивает клеточные метаболические и апоптический устройства злокачественных клеток, независимо от генетического строения, лежащего в основе злокачественного новообразования. Кроме того, CoQ10 усиливает цитотоксичность химиотерапевтических средств стандартного оказания медицинской помощи в клетках злокачественной опухоли молочной железы путем регулирования митохондриального метаболизма и окислительного стресса. Эти данные подтверждают, что CoQ10 представляет собой новое средство с несколькими состояниями (в виде единственного средства или в комбинации) при злокачественной опухоли молочной железы, включая в себя TNBC, которые в противном случае характеризуются плохим прогнозом и ограниченными терапевтическими возможностями.

Для определения влияния митохондриальной биоэнергетики и производства активных форм кислорода, клетки злокачественной опухоли молочной железы MDA-MB231 и SKBR-3 и контрольные

- 50 032775 клетки MCF12A обрабатывали 100 мкМ CoQ10 (BPM 31510) в течение 24 ч. Митохондриальную функцию оценивали с использованием последовательного введения митохондриальных токсинов (олигомицин, CCCP и ротенон) в анализаторе Seahorse XF96. Флуоресценцию DCF также измеряли в качестве показателя производства активных форм кислорода в клетках, обработанных тем же образом. Клеточное биоэнергетическое профилирование показало, что CoQ10 смещал клеточный метаболизм от гликолиза к митохондриальному метаболизму, и этот метаболический сдвиг был связан со значительным увеличением активных форм кислорода (АФК). См. фиг. 25.

Пример 17. Влияние предварительной обработки, дозы и пути введения одного CoQ10 или в комбинации с гемцитабином в ксенотрансплантантной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы человека.

Три схемы лечения, показанные на фиг. 27 (схема лечения 1, схема лечения 2 и схема лечения 3), оценивали на ксенотрансплантатной мышиной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы человека, чтобы определить влияние CoQ10 отдельно или в сочетании с гемцитабином на выживание животных. Влияние лечения со схемой 1 описано в примере 1 выше. CoQ10, вводимый в трех различных дозах внутривенно (50 мг/кг или 75 мг/кг веса тела в день, схема лечения 3), был связан с дозозависимым увеличением выживаемости и характеризовался дополнительным эффектом к гемцитабину. См. фиг. 29. Непрерывная инфузия CoQ10 значительно улучшала выживаемость по сравнению с тремя дозами (50 или 75 мг/кг) CoQ10, с лучшими результатами при 200 мг/кг. См. фиг. 30. Предварительная обработка на протяжении шестидесяти дней только CoQ10 с последующей комбинацией с гемцитабином была также связана с улучшением результатов выживаемости либо с гемцитабином, либо с CoQ10 в одиночку. См. фиг. 31. Данные показывают, что доза и путь введения одного CoQ10 или в комбинации со стандартным лечением химиотерапевтическими средствами влияет и улучшает выживаемость в животной модели злокачественной опухоли поджелудочной железы.

Пример 18. Влияние предварительной обработки CoQ10 с последующей обработкой гемцитабином на выживаемость клеток злокачественной опухоли поджелудочной железы человека in vitro.

Клетки злокачественной опухоли поджелудочной железы человека (PcCa₂) предварительно обрабатывали 100 мкМ CoQ10 с последующей обработкой гемцитабином (0,1, 1 и 5 мкМ) или совместно обрабатывали CoQ10 и гемцитабином. Как предварительная обработка, так и совместная обработка значительно уменьшали количество жизнеспособных клеток (*р<0,05) по сравнению с одним гемцитабином. См. фиг. 26.

Пример 19. Анализы in vitro CoQ10 в комбинации с различными химиотерапиями в диапазоне различных злокачественных клеток.

Различные злокачественные клетки обрабатывают с помощью комбинации CoQ10 и злокачественных терапевтических средств для определения влияния комбинированных способов лечения на выживаемость клеток и клеточный метаболизм. Злокачественные клетки и соответствующие контрольные клетки показаны в таблице.

Молочной железы	SKBR-3
MDA-231
BT549
MCF-7
MCF12A (контроль)
Поджелудочной железы	PaCa₂
PL-45
Panc1
Легкого	A549
Толстого кишечника	CaCo2
HT29
Печени	Hep3B
THLE-2 (контроль)
Цервикальные	Scc25
Предстательной железы	PC-3
LnCap
PNT2 (контроль)
Яичниковые	SKOV-3

- 51 032775

Исследовали следующие терапевтические средства против злокачественных опухолей:

Лекарственное средство

Г ерцептин

Иринотекан Цисплатин фторурацил

Доцетаксел

4-гидроксицикл офосфамид Гемцитабин Доксорубицин

Механизм действия

Мишень

Паклитаксел

Флутамид

Эстрамустин

Этопозид Оксалиплатин

Гозерелин

Тамоксифен

Антитело, которое связывается с

HER. 2

Ингибирует топоизомеразу I

Внутри- и перекрестные сшивки ДНК

Ингибирует образование тимидина

Предотвращает деполимеризацию микротрубочек

Алкилирующее средство

Нуклеозидные с фтором

Ингибитор топоизоП и индуцирует окислительный стресс. Ингибирует mit комплекс 1

Стабилизатор микротрубочек Блокатор рецепторов андрогенов (DHT)

Алкилирующее средствопроизводное эстрогена Ингибитор топоизомеразы II Бидентатная платиновая пластина, которая сшивает ДНК Агонист GnRH и LHRH Антагонист рецептора эстрогена

Большинство злокачественных опухолей молочной железы/НЕК2+ Все делящиеся клетки Все делящиеся клетки

Все делящиеся клетки

Все делящиеся клетки Содержащие андрогеновый рецептор клетки Индуцирующие эстроген клетки

Все делящиеся клетки Все делящиеся клетки

Содержащие ER клетки

Следующие анализы используют для измерения выживаемости и метаболизма клеток:

Анализ	Способ	Прибор
Подсчет клеток	Трипановый синий	Nexcelon Cellometer
Пролиферация	Пропидий йодид в фиксированных клетках	Проточный цитометр
Клеточная гибель	Пропидий йодид	Проточный цитометр
Апоптоз (каспаза 3)	Краситель на каспазу 3	Флуоресцентная микроскопия
АФК	Краситель CM-DCFDA	Проточный цитометр
Потребление кислорода	Митохондриальный стресс	Анализатор Seahorse Xtracellular
Внеклеточное закисление	Путь гликолиза	Анализатор Seahorse Xtracellular

Клетки культивируют в следующей ростовой среде:

	Среда	Источник	Сыворотка	Антибиотики
PaCa2	DMEM без пирувата натрия	Lonza	5% FBS; 2,5% HS	1-кратн. пениц./стрепт./амфот. B
PC-3	DMEM без пирувата натрия	Lonza	5% FBS	1-кратн. пениц./стрепт./амфот. B
MDA231	RPMI 1640	Lonza	5% FBS	Гентамицин (GA-1000)
SKBR-3	McCoy's 5A	Lonza	5% FBS	1-кратн. пениц./стрепт./амфот. B
Hep3B	EMEM	Lonza	5% FBS	1-кратн. пениц./стрепт./амфот. B
A549	KF-12	Invitrogen	5% FBS	1-кратн. пениц./стрепт./амфот. B
HT-29	McCoy's 5A	Lonza	5% FBS	1-кратн. пениц./стрепт./амфот. B
SKOV-3	McCoy's 5 A	Lonza	5% FBS	1-кратн. пениц./стрепт./амфот. B

- 52 032775

MCF-7	MEM + NEEA	Invitrogen	5% FBS	1-кратн. пениц./стрепт./амфот. B
HUMEC	Среды HUMEC	Invitrogen		1-кратн. пениц./стрепт./амфот. B
PNT2	RPMI 1640	Lonza	10% FBS	1-кратн. пениц./стрепт./амфот. B
Panc1	DMEM	Lonza	5%FBS	1-кратн. пениц./стрепт./амфот. B
MCF-12A	HAM/F-12	Lonza	5% лошадиная сыворотка	1-кратн. пениц./стрепт./амфот. B
BT-549	RPMI 1640	Lonza	10%FBS	1-кратн. пениц./стрепт./амфот. B

Дополнения.

	Дополнение
Hep3B	1-кратный глютамакс
MCF-7	1-кратный глютамакс
MCF-12A	20 нг/мл hEGF	10 мкг/мл инсулина	500 нг/мл гидрокортизона
BT-549	0,5 мкг/мл инсулина

Способ посева клеток.

Для подсчета клеток, пролиферации и измерения активных форм кислорода (АФК), количество клеток и способ посева и обработки клеток представляют собой одинаковые. Клетки высевают в то же время, что и добавляется обработка. Клетки высевают в 24-луночный планшет следующим образом:

Образец	Клеток на лунку	Образец	Клеток на лунку	Образец	Клеток на лунку
SKBR-3	60k	PC3	60k	HT-29	100k
MDA231	60k	PaCa2	50K	BT549	30K
MCF-7	50K	Panc-1	50K	Hep3B	60K
MCF12A	60k	A-549	100k	SKOV-3	60k

Для анализов с каспазой 3 для измерения апоптоза, клетки высевают в стеклянные 12-луночные планшеты, в которых клетки находятся в соотношении 110k/лунку, и давали возможность прикрепиться в течение от 5 до 18 ч, затем добавляли обработку. Для измерения потребления кислорода и внеклеточного подкисление клетки высевают в планшет Seahorse XF-96. Примеры количества клеток для различных клеточных линий приведены в таблице.

Образец	Клеток на лунку
SKBR-3	10k
MDA231	10k
MCF12A	30k

Источники, растворители и исходные концентрации для химиотерапевтических средств приведены в таблице.

- 53 032775

Исходный препарат	№ в каталоге	Растворитель	флакон	Исходный []
SN38	Sigma Н0165-10 мг	255 мкл DMSO	10 мг	100 мМ
Цисплатин***	Enzo ALX-400-040- М050	33 мл 0,9% физ.р-ра	50 мг	5 мМ
Doxo	Sigma D-1515	1 мл DMSu	10 мг	10 мг/'мл
5FU	Amresco 0597-5G	1 мл DMSO	вес 13 мг	100 мМ
Г ерцептин	Thermo Fisher	20 мл в H₂O	400 мг	20 мг/мл
Циклофосфамид	Santa Cruz sc-219703	500 мкл Н2О + тиосульфат	25 мг	4,4 мМ
Г емцитабин	Sigma G6423-10 мг	3,3 мл Н2О	10 мг	10 мМ
Паклитаксел	Sigma T7402-1 мг	118 мкл DMSO	1 мг	10 мМ
Доцетаксел	Sigma 01885-5mt-F	618 мкл DMSO	5 мг	10 мМ
Тамоксифен	Sigma H7904 Myoderm Medical supply Sigma#SLBD7083V	1290 мкл EtOH	5 мг	10 мМ
Авастин
Эстрамустин	1 мл DMSO	5,6 мг	100 мМ
Этопозид	Sigma lot# BCBH0586V	425 мкл DMSO	25 мг	100 мМ
Оксалиплатин	Sigma lot# SLBD0630V	1,25 мл DMSO	5 мг	100 мМ

Для каждой химиотерапии диапазоны концентраций для исследования могут быть получены из концентрационных диапазонов, известных в настоящей области техники. Кривые дозовой зависимости получают для каждого химиотерапевтического средства, как показано в таблице.

Лекарственные средства	Концентрации кривой дозовой зависимости
SN38	0,1 нМ	1 нМ	10 нМ	100 нМ	1000 нМ
Цисплатин	1 мкМ	6 мкМ	12 мкМ	25 мкМ	50 мкМ
Doxo	1 нг/мл	10 нг/мл	100 нг/мл	1 мкг/мл	10 мкг/мл
5FU	0,1 мкМ	1 мкМ	10 мкМ	100 мкМ	1000 мкМ
1 мкМ	5 мкМ	10 мкМ	25 мкМ	50 мкМ
Герцептин	10 мкг/мл	25 мкг/мл	50 мкг/мл	100 мкг/мл	250 мкг/мл
1 мкг/мл	5 мкг/мл	10 мкг/мл	25 мкг/мл	50 мкг/мл
Циклофосфамид	0,05 мкМ	0,25 мкМ	1 мкМ	4 мкМ	12,5 мкМ
Гемцитабин	0,1 мкМ	1 мкМ	10 мкМ	100 мкМ	1000 мкМ
Паклитаксел	5 нМ	10 нМ	25 нМ	50 нМ	100 нМ
Доцетаксел	0,1 нМ	1 нМ	10 нМ	100 нМ	1000 нМ
Тамоксифен	0,3 мкМ	0,62 мкМ	1,25 мкМ	2,5 мкМ	5 мкМ
Флутамид	0,01 мкМ	0,1 мкМ	1 мкМ	10 мкМ	100 мкМ
Эстрамустин	0,01 мкМ	0,1 мкМ	1 мкМ	10 мкМ	100 мкМ
Этопозид	0,01 мкМ	0,1 мкМ	1 мкМ	10 мкМ	100 мкМ
Оксалиплатин	0,1 мкМ	1 мкМ	10 мкМ	100 мкМ	1000 мкМ

Для экспериментов совместной обработки для каждой клеточной линии выбирали следующие дозы.

- 54 032775

	Комбинированные концентрации
Лекарственные средства	SKBR- 3	Hep3B	MDA2 31	Paca2	A54 9	PC-3	THL E- 2	SKO V-3	HT- 29	MCF -7
SN38	1, 10, 100 нМ	10, 100 нМ	1, 10, 25 нМ			25, 100, 250 нМ	1, 10 нМ		0,5, 1, 10 нМ	1, 5, 10 нМ
Цисплатин	1, 5, 10 мкМ	1, 5, 10 мкМ			0,1, 1, 10 мкМ			0,5, 2,5, 5 мкМ		1,5, 3, 6 мкМ
Доксорубицин	10, 50, 100 нг/мл	10, 25, 50 нг/мл	0,1, 1, 10 нг/мл	10, 50, 100 мкг/м л						2, 4, 8 нг/м л
5-Фтор- урацил	0,1, 1, 10 мкМ	0,1, 1, 10 мкМ	0,1, 1, 10 мкМ						0,1, 1, 10 нМ
Герцептин	10, 25, 50 мкг/мл
Циклофосфамид	0,5, 1, 2 мкМ		1, 2, 4 мкМ, 0,5, 1, 2 мкМ					0,25, 4, 8 мкМ		0,5, 1, 2 мкМ
Гемцитабин				0,1, 1, 5 мкМ	0,01, 0,1, 1 мкМ	25, 100, 200 нМ
Паклитак- сел			10, 50, 100 нМ, 10, 25, 50 нМ		5, 10, 25 нМ	25, 100, 200 нМ
Доцетаксел	0,01, 0,1, 1 нМ				0,1, 1, 10 нМ	1, 10, 100 мкМ
Тамоксифен										2, 4, 6 мкМ
Флутамид						0,01, 0,1, 1 мкМ
Эстрамус- тин						1, 10 100 мкМ
Этопозид						0,01, 0,1, 1 мкМ
Оксалиплатин				1, 10, 50 мкМ				10, 50, 100 мкМ

Время обработки оптимизируют в соответствии с ожидаемым результатом анализа, например: для метаболических анализов используются более короткие периоды инкубации; для подсчета клеток используются более длинные периоды инкубации. Инкубации, которые связаны с пролиферацией и количеством клеток, выбирают на основании времени удвоения клеток, т. е. как быстро клетки растут. В таблице ниже приведены времена инкубации для различных типов клеток и анализов.

- 55 032775

	Количества клеток, АФК, пролиферация клеток (пропидий йодид)	OCR, ECAR	Каспаза 3
SKBR-3	48 ч	24 ч	96 ч
MDA-231	48 ч	24 ч	96 ч
BT549	48 ч	24 ч	96 ч
MCF-7	72 ч	24 ч	96 ч
MCF12A	48 ч	24 ч	96 ч
PaCa₂	72 ч	24 ч	96 ч
PL-45	48 ч	24 ч	96 ч
Panc1	48 ч	24 ч	96 ч
A549	48 ч	24 ч	96 ч
CaCo2	48 ч	24 ч	96 ч
HT29	48 ч	24 ч	96 ч
Hep3B	48 ч	24 ч	96 ч
THLE-2	48 ч	24 ч	96 ч
Scc25	48 ч	24 ч	96 ч
PC-3	48 ч	24 ч	96 ч
LnCap	48 ч	24 ч	96 ч
PNT2	48 ч	24 ч	96 ч
SKOV-3	72 ч	24 ч	96 ч

Пример 20. Влияние предварительной обработки CoQ10 с последующей обработкой химиотерапевтическими средствами на различные опухоли in vivo.

Используют концентрированную водную нанодисперсию CoQ10 в соотношении 4:3:1,5 CoQ10 (4% вес./об.): DMPC (3% вес./об.): полоксамер 188 (1,5% вес./об.) в воде; концентрат нанодисперсии содержит 40 мг/мл кофермента Q10 с размером частиц 30-50 нм. Одна контрольная группа наполнителя получает стерильный раствор 3% вес./об. DMPC и 1,5% вес./об. полоксамер 188, дозированные в высшей переносимой дозе (1000 мг API эквивалента). Одна группа отрицательного контроля получает буферный стерильный физиологический раствор. Нанодисперсию CoQ10 готовят в течение 2 недель после начала исследования и хранят при температуре 4-25⁰С в продолжение исследования. Исследуемые образцы анализировали на активность CoQ10 и распределение частиц по размерам в начале и в конце исследования.

Вспомогательные вещества, используемые в нанодисперсии, DMPC и полоксамер 188, используются для состава водной нанодисперсии CoQ10. Концентрированную нанодисперсию разбавляют в точке использования с в стерильном забуференном физиологическом растворе (PBS). Наполнитель содержит PBS в качестве разбавителей и PBS используется неразбавленным в качестве контрольного физиологического раствора. Используют мышей с ослабленным иммунитетом от Jackson Laboratories и Harlan Laboratories. Мыши с ослабленным иммунитетом характеризуются отсутствием врожденной и адаптационной иммунной системы. Это обеспечивает биологическую среду, подходящую для роста опухолей человека in vivo. Эти животные представляют собой особенно подходящие для прививки разных злокачественных опухолей человека.

4-Недельные мыши прибывают на объекты и спустя 48 ч выполняются эксперименты. Мышей размещают по 5 особей в клетке под одним идентификационным номером. Животных взвешивают по прибытии и на протяжении всего опыта, чтобы иметь еще один параметр в ответ на различные формулы. Применяемая диета представляет собой состав Lab Diet® 5001 Rodent Diet, производства PMI Nutrition International, LLC. Этот производитель представляет собой сертифицированный объект ISO 9001:2000. Диету приобретают каждые 6 месяцев и номера партий можно проследить в каждой комнате, и он будет записан техником. Пища, вводимая мышам NSG, должна быть автоклавирована перед помещением в клетки животных. Вода подается ad libitum всем мышам. Воду получают из Департамента воды Флориды и разливают по чистым бутылкам в каждой клетке техниками животных. Воду проверяют каждый день на наличие мусора и заменяют чистой водой. Вода, получаемая мышами NSG, должна быть стерильной до введения животным. Животных умерщвляют с помощью ингаляции СО2 в 20-дневном возрасте.

- 56 032775

Чтобы вызвать гибель, выполняли смещение шейных позвонков для каждого животного и прокалывали диафрагму.

Стерильный состав CoQ10 и подходящий стерильный контроль вводят внутривенно. Дозы CoQ10 вводят на основании текущих результатов. До экспериментов не было выявлено никаких признаков токсичности при введении CoQ10 три раза в неделю в концентрации до 50 мг/кг, и MTD у крыс была создана при 250 мг/кг три раза в неделю в течение 4 недель. Влияние CoQ10 сравнивают с другими схемами лечения с помощью химиотерапии, специфичными для каждой линии злокачественной опухоли. Другой аспект исследования оценивает синергетические эффекты между CoQ10 и другими химиотерапевтическими средствами.

Оценивают следующие злокачественные клетки:

Обозначение клеток

Молочная железа	Трижды негативный	MDA-MB-231
Легкое	Мелкоклеточные	Н522
	Немелкоклеточные	А549
Яичник		SK-OV-3
Печень		HepG2
Предстательная железа		LnCap
Острый лейкоз		Kgl, К562
Толстый кишечник		НТ29, СаСо
Глиобластома		LN229

Все клетки культивируют в инкубаторе с содержанием CO₂ равным 5% при 100% влажности при температуре 37°С. Основная среда варьирует в зависимости от каждой клетки. Чтобы получить полную среду для роста, добавляют следующие компоненты в основную среду: фетальную бычью сыворотку до конечной концентрации 10%. Перед инъекцией клеток в животных, их выращивают до 50% слияния, а затем прикрепляют или центрифугируют согласно клеточному протоколу. Собирают следующие органы: почку, поджелудочную железу, легкие, сердце и печень. Органы взвешивают и записывают. Выполняют патологический отчет традиционного окрашивания Райта или окрашивания гематоксилином/эозином. Составы CoQ10 и химиотерапевтические средства вводят внутрибрюшинно или внутривенно.

Наблюдается отсутствие лактации, вялость и снижение массы тела. Такие признаки состояния агонии представляют собой основу ранней скарификации, и производится вскрытие животного (т.е. вес органов, патологические исследования).

В стерильных условиях животным вводят соединения, как описано выше. Животных рандомизируют в соответствии с идентификационным номером клетки и записывают вес каждого животного. Мышей затем возвращают в их клетки. После этого мышам вводят внутрибрюшинно ежедневную дозу, пока их не забивают из-за опухолевой нагрузки или их выживания.

Следующие схемы лечения с использованием химиотерапии исследуют на различных злокачественных клетках:

Злокачественная опухоль молочной железы (неметастатическая).

Комбинированная химиотерапия. Доксорубицин/циклофосфамид.

Циклофосфамид/доксорубицин/5-фторурацил.

Рак легких (мелкоклеточный).

Комбинированная химиотерапия.

Циклофосфамид/доксорубицин/винкристин. Циклофосфамид/доксорубицин/этопозид.

Рак легких (немелкоклеточный).

Комбинированная химиотерапия.

Цисплатин/паклитаксел.

Доцетаксел/цисплатин.

Гемцитабин/цисплатин.

Злокачественная опухоль яичников. Комбинированная химиотерапия. Цисплатин/циклофосфамид.

Цисплатин/паклитаксел.

Гепатоцеллюлярный рак.

- 57 032775

Одиночные средства.

Доксорубицин.

Цисплатин.

Капецитабин.

Злокачественная опухоль простаты.

Комбинированная химиотерапия.

Паклитаксел/эстрамустин.

Доцетаксел/эстрамустин.

Острый лейкоз.

Комбинированная химиотерапия.

Цитарабин/даунорубицин.

Цитарабин/идарубицин.

Цитарабин/доксорубицин.

Злокачественная опухоль толстой кишки.

Одно средство.

Капецитабин.

Глиобластома.

Одно средство.

Бевацизумаб.

Валганцикловир.

Пример 21. Анализы in vitro различных линий злокачественных клеток, обработанных CoQ10 и химиотерапевтическими средствами.

Различные линии злокачественных клеток совместно обрабатывали или предварительно обрабатывали CoQ10 и различными химиотерапевтическими средствами, как описано в примере 14 выше. Комбинации CoQ10/химиотерапевтического средства, которые значительно снижали количества живых клеток, приведены в табл. 2.

Таблица 2

Сводный обзор исследований in vitro с различными клеточными линиями злокачественных опухолей, обработанных CoQ10 и различными химиотерапевтическими средствами

	РСЗ	SkBr-3 МВ231	MCF-7 MiaPaCa2	ВТ549	НерЗВ А549	SKOV3
	Предст. Молочн.	Молочн.	Поджел.	Молочн.	Печень Легкое Яичник
	железа	железа	железа	железа	железа
						Совм.
SN38		Совм.				и
						Пред.
Доксо		Пред.	Пред.	Пред.	Пред.	Совм.
5-FU		Совм. Совм.				Совм.
Цисплатин							Пред.
4-НСР		Совм. Совм.	Совм.					Совм.
Паклитаксел							Совм.
Тамоксифен			Пред.
Гемцитабин							Пред.
Флутамид	Пред.
Госерелин	Пред.

Совм.: совместная обработка;

Пред.: предварительная обработка.

- 58 0327Ί5

Таблица 3 Стандартные дозы химиотерапевтических средств. Стандартные дозы были получены из листовки-вкладыша продукта производителя для химиотерапевтического средства.

Химиотерапевтическое средство	Рекомендованные дозы
Доксорубицин	Вводить доксил с начальной скоростью 1 мг/мин для минимизации риска инфузионных реакций. Если отсутствуют связанные с инфузией реакции, повышать скорость инфузии до полного введения в течение 1 часа. Не вводить как болюсную инъекцию или неразбавленный раствор. Злокачественная опухоль яичников: 50 мг/м² внутривенно каждые 4 недели для минимум 4 курсов Связанная со СПИДом саркома Капоши: 20 мг/м² внутривенно каждые 3 недели Множественная миелома: 30 мг/м² внутривенно в день 4 после бортезомиба, который вводят в болюсе 1,3 мг/м² в дни 1, 4, 8 и 11, каждые 3 недели
Циклофосфамид	Лечение злокачественных заболеваний - взрослых и детей: При использовании в качестве единственной онколитической лекарственной терапии начальный курс цитоксана для пациентов с отсутствием гематологического дефицита, как правило, составляет от 40 до 50 мг/кг при внутривенном введении в разделенных дозах в течение от 2 до 5 дней. Другие внутривенные режимы включают от 10 до 15 мг/кг, вводимые каждые 7-10 дней, или от 3 до 5 мг/кг два раза в неделю. Дозировка перорального цитоксана, как правило, находится в диапазоне от 1 до 5 мг/кг/день, как при начальной, так и поддерживающей дозе. Когда цитоксан входит в комбинированные цитотоксические схемы лечения, может быть необходимым снизить дозу цитоксана, а также у других лекарственных средств. Лечение доброкачественных заболеваний - подтвержденная биопсия нефротического синдрома с минимальными изменениями у детей: Рекомендуемая пероральная доза составляет от 2,5 до 3 мг/кг ежедневно в течение 60-90 дней. У мужчин случаи возникновения олигоспермии и азооспермии увеличиваются, если продолжительность лечения цитоксаном превышает 60 дней. Лечение более 90 дней увеличивает вероятность бесплодия. Адренокортикостероидная терапия может быть с постепенным снижением дозы и прекращаться в ходе терапии с цитоксаном.

- 59 032775

5-фторурацил	Инъекции фторурацила следует вводить только внутривенно. Дозировка: 12 мг/кг внутривенно один раз в день в течение 4 дней подряд. Суточная доза не должна превышать 800 мг. Если не наблюдается токсичность, вводят 6 мг/кг на 6-й, 8-й, 10-й и 12-й дни, если не происходит токсичность. Лечение не дают на 5-й, 7й, 9-й или 11-й дни. Терапия должна быть прекращена в конце 12го дня, даже если не наблюдается очевидная токсичность. Пациенты высокого риска или те, кто не в адекватном алиментарном статусе, должны получать 6 мг/кг/день в течение 3 дней. Если не наблюдается токсичность, 3 мг/кг можно вводить на 5-й, 7-й и 9-й дни, если не происходит токсичность. Лечение не дают на 4-й, 6-й или 8-й дни. Суточная доза не должна превышать 400 мг. Поддерживающая терапия: В случаях, когда токсичность не является проблемой, рекомендуется продолжать терапию с использованием одной из следующих схем: 1. Повторять дозу первого курса каждые 30 дней после последнего дня предыдущего курса лечения. 2. При убывании токсических признаков, возникающих в результате первоначального курса терапии, введение поддерживают в виде дозы от 10 до 15 мг/кг/неделю как разовой дозы. Не превышать 1 г в неделю.
Винкристин	Лекарственное средство вводят внутривенно с недельными интервалами. Обычная доза винкристина сульфата для пациентов детского возраста составляет 2 мг/м². Для пациентов детского возраста весом 10 кг или меньше начальная доза должна составлять от 0,05 мг/кг, вводимая один раз в неделю. Обычная доза сульфата винкристина для взрослых составляет 1,4 мг/м². 50%-ное снижение дозы сульфата винкристина рекомендуется для пациентов, характеризующихся значением прямого билирубина в сыворотке выше 3 мг/100 мл.
Этопозид	При злокачественной опухоли яичек обычная доза инъекций этопозида в сочетании с другими утвержденными химиотерапевтическими средствами находится в диапазоне от 50 до 100 мг/м²/день, в дни с 1 по 5, до 100 мг/м²/день в дни 1, 3 и 5. При мелкоклеточном раке легких доза инъекций этопозида в сочетании с другими утвержденными химиотерапевтическими средствами находится в диапазоне от 35 мг/м²/день в течение 4 дней до 50 мг/м²/день в течение 5 дней.

- 60 032775

	Курсы химиотерапии повторяют с 3-4-недельными интервалами после адекватного восстановления от любой токсичности.
Цисплатин	Цисплатин вводят путем медленной внутривенной инфузии. Метастатические опухоли яичка: Как правило, доза цисплатина (инъекции цисплатина) для лечения злокачественной опухоли яичка в сочетании с другими утвержденными химиотерапевтическими средствами составляет 20 мг/м²внутривенно в день в течение 5 дней на цикл. Метастатические опухоли яичников: Как правило, доза цисплатина (инъекции цисплатина) для лечения метастатических опухолей яичников в сочетании с циклофосфамидом составляет от 75 до 100 мг/м² внутривенно на цикл один раз каждые 4 недели (день 1). Доза циклофосфамида при использовании в сочетании с цисплатином (инъекцией цисплатина) составляет 600 мг/м²внутривенно каждые 4 недели (день 1). В комбинированной терапии цисплатин (инъекцию цисплатина) и циклофосфамид вводят последовательно. В качестве единственного средства цисплатин (инъекцию цисплатина) следует вводить в дозе 100 мг/м² внутривенно за цикл раз в каждые 4 недели. Распространенная злокачественная опухоль мочевого пузыря: цисплатин (инъекцию цисплатина) следует вводить в качестве единственного средства в дозе от 50 до 70 мг/м² внутривенно за цикл каждые 3-4 недели в зависимости от степени предварительного воздействия лучевой терапии и/или предшествующей химиотерапии. Для подвергнутых сильному предварительному лечению пациентов рекомендуется начальная доза 50 мг/м² на цикл, повторяемый каждые 4 недели.
Паклитаксел	Все пациенты должны быть подвергнуты премедикации перед введением паклитаксела, чтобы предотвратить серьезные реакции гиперчувствительности. Такая премедикация может состоять из дексаметазона 20 мг, вводимого перорально приблизительно за 12 и 6 часов до паклитаксела, дифенгидрамина (или его эквивалента) 50 мг внутривенно за 30-60 минут до паклитаксела и циметидина (300 мг) или ранитидина (50 мг) внутривенно за 30-60 минут до паклитаксела. Карцинома яичников: 1) Для пациентов, которые ранее не подвергались лечению, с карциномой яичника, может быть выбрана одна из следующих рекомендованных схем лечения, вводимая каждые 3 недели.

- 61 032775

Паклитаксел, вводимый внутривенно в течение 3 ч в дозе 175 мг/м² с последующим введением цисплатина в дозе 75 мг/м²; или Паклитаксел, вводимый внутривенно в течение 24 часов в дозе 135 мг/м² с последующим введением цисплатина в дозе 75 мг/м². 2) У пациентов, ранее получавших химиотерапию от карциномы яичника, паклитаксел использовали в нескольких дозах и по нескольким графикам; однако, оптимальная схема лечения еще не ясна. Рекомендуемая схема лечения представляет собой следующую: паклитаксел 135 мг/м² или 175 мг/м² внутривенно в течение 3 часов каждые 3 недели. Карцинома молочной железы: 1) в качестве лечения вспомогательными лекарственными средствами злокачественной опухоли молочной железы с поражением лимфоузлов, рекомендуемая схема лечения представляет собой следующую: паклитаксел в дозе 175 мг/м²внутривенно в течение 3 часов каждые 3 недели в течение 4 курсов, вводимых последовательно с содержащей доксорубицин комбинированной химиотерапией. 2) После неудачной начальной химиотерапии метастазов или рецидива в течение 6 месяцев химиотерапии вспомогательными лекарственными средствами, было показано, что эффективен паклитаксел в дозе 175 мг/м², вводимый внутривенно в течение 3 часов каждые 3 недели. Немелкоклеточная карцинома легких: Рекомендуемая схема лечения, вводимая каждые 3 недели, представляет собой паклитаксел, вводимый внутривенно в течение 24 часов в дозе 135 мг/м² с последующим введением цисплатина в дозе 75 мг/м². Связанная со СПИДом саркома Капоши: Рекомендуется паклитаксел, вводимый в дозе 135 мг/м²внутривенно в течение 3 часов каждые 3 недели или в дозе 100 мг/м² внутривенно в течение 3 часов каждые 2 недели (интенсивность дозы 45-50 мг/м²/неделю). Распространенное ВИЧ-заболевание: 1) Уменьшить дозу дексаметазона как 1 из 3 лекарственных средств премедикации до 10 мг перорально (вместо 20 мг перорально); 2) Начинать или повторять лечение паклитакселом, только если

- 62 032775 число нейтрофилов составляет не менее 1000 клеток/мм³;

3) Уменьшить дозу последующих курсов паклитаксела на 20% для пациентов, которые испытывают серьезную нейтропению (количество нейтрофилов <500 клеток/мм³ в течение недели или более); и

4) Начать сопутствующий гематопоэтический фактор роста (GCSF), как клинически показано.

Печеночная недостаточность:

Рекомендации по коррекции дозы для первого курса терапии приведены в таблице ниже для обеих 3- и 24-часовых инфузий. Дополнительное снижение дозы в последующих курсах должно быть основано на индивидуальной переносимости.

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ДОЗИРОВАНИЯ У ПАЦИЕНТОВ С ПЕЧЕНОЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТЬЮ НА ОСНОВАНИИ ДАННЫХ КЛИНИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ*

Степень печеночной недостаточности
Содержание трансаминазы С	одержание билирубина¹⁵ Рекомендованная доза таксола'
24-часовая инфузия
<2 х верхи, гран, нормы	И	<1,5 мг/дл	135 мг/м²
2 до <10 х верхн.гран.нормы	и	<1,5 мг/дл	100 мг/м²
<10 х верхн.гран.нормы	и	1,6-7,5 мг/дл	50 мг/м²
>10 X верхн.гран.нормы	или	>7,5 мг/дл	Не рекомендуется
3-часовая инфузия
<10 X верхн.гран.нормы	и	<1,25 х верхн.гран.нормы	175 мг/м²
<10 х верхн.гран.нормы	и	1,26-2,0 х верхн.гран.нормы	135 мг/м²
<10 х верхн.гран.нормы	и	2,01-5,0 х верхн.гран.нормы	90 мг/м²
>10 х верхн.гран.нормы	или	>5,0 х верхн.гран.нормы	Не рекомендуется

Доцетаксел ^а Эти рекомендации основываются на дозах для пациентов без печеночной недостаточности 135 мг/м² в течение 24 часов или 175 мг/м² в течение 3 часов: нет данных для получения корректировки дозы для других схем лечения (например, для связанной со СПИДом саркомы Калоши).

^ь Отличия в критериях для содержания билирубина между 3- и 24-часовой инфузией наблюдаются из-за различий в разработке клинических исследований.

^с Рекомендации по дозировке существуют для первого курса терапии; дополнительное снижение дозы в последующих курсах должно основываться на индивидуальной переносимости.________________________________________

Вводить в учреждении, оборудованном с возможностью

- 63 032775

справляться с возможными осложнениями (например, анафилаксией). Вводить внутривенно (IV) в течение 1 часа каждые 3 недели. Оборудование PVC не рекомендуется. Использовать только иглу размером 21 для отбирания TAXOTERE из флакона. Местно-распространенная или метастатическая злокачественная опухоль молочной железы (ВС): единственное средство от 60 мг/м² до 100 мг/м² Вспомогательное вещество ВС: 75 мг/м², вводимый через 1 час после доксорубицина в дозе 50 мг/м² и циклофосфамида в дозе 500 мг/м² каждые 3 недели в течение 6 циклов. НМРЛ: после неудачи терапии с платиной: единственное средство 75 мг/м² НМРЛ: без предварительной химиотерапии: 75 мг/м² с последующим цисплатином в дозе 75 мг/м² НМРЛ: 75 мг/м² с 5 мг преднизолона два раза в день непрерывно GC: 75 мг/м² с последующим цисплатином в дозе 75 мг/м² (оба только в день 1), затем фторурацил в дозе 750 мг/м² в день в виде 24-часового внутривенного введения (дни 1-5), начиная с конца инфузии цисплатина SCCHN: 75 мг/м² с последующим введением цисплатина в дозе 75 мг/м² внутривенно (1 день), а затем фторурацил в дозе 750 мг/м² в день в виде 24-часового внутривенного введения (дни 1-5), начиная с конца инфузии цисплатина в течение 4 циклов SCCHN:: 75 мг/м² с последующим введением цисплатина в дозе 100 мг/м² внутривенно (1 день), а затем фторурацила в дозе 1000 мг/м² в день в виде 24-часового внутривенного введения (дни 1-4) в течение 3 циклов Для всех пациентов: премедикация с пероральными кортикостероидами, а также корректировка дозы при необходимости

Г емцитабин

Гемзар представляет собой лекарственное средство только для внутривенного использования. Злокачественная опухоль яичников: 1000 мг/м² в течение 30 минут в дни 1 и 8 каждого 21 -дневного цикла. Злокачественная опухоль молочной железы: 1250 мг/м² в

- 64 032775

	течение 30 минут в дни 1 и 8 каждого 21-дневного цикла. Немелкоклеточный рак легких: 1000 мг/м² в течение 30 мин в дни 1, 8 и 15 каждого 28-дневного цикла или 1250 мг/м² в течение 30 мин в дни 1 и 8 каждого 21-дневного цикла. Злокачественная опухоль поджелудочной железы: 1000 мг/м² в течение 30 мин один раз в неделю в течение первых 7 недель, затем одна неделя перерыва, а затем один раз в неделю в течение 3 недель каждого 28-дневного цикла.
Капецитабин	Принимать кселоду с водой в течение 30 мин после еды. Монотерапия: 1250 мг/м² перорально дважды в день (утром и вечером; эквивалентно общей суточной дозе 2500 мг/м²) в течение 2 недель с последующим 1-недельным периодом отдыха в виде 3недельных циклов. Лечение вспомогательными веществами рекомендуется в общей сложности в течение 6 месяцев (8 циклов). В сочетании с доцетакселом рекомендуемая доза кселоды составляет 1250 мг/м² два раза в день в течение 2 недель с последующим 1-недельным периодом покоя, в сочетании с доцетакселом в дозе 75 мг/м² в виде 1-часовой внутривенной инфузии каждые 3 недели. Может потребоваться, чтобы дозировка кселоды была индивидуализирована для оптимизации управления пациентом. Уменьшать дозу кселоды на 25% у пациентов с умеренной почечной недостаточностью.
Эстрамустин	Рекомендуемая суточная доза составляет 14 мг на кг веса тела (т.е. капсула 140 мг на каждые 10 кг или 22 фунта веса тела), принимаемая в виде 3 или 4 разделенных доз. Большинство пациентов в исследованиях в Соединенных Штатах получали дозировку в интервале доз от 10 до 16 мг на кг в день. Пациенты должны быть проинструктированы о приеме капсул эмцит по меньшей мере за 1 час до или через 2 часа после еды. Эмцит следует проглатывать с водой. Молоко, молочные продукты, и богатые кальцием продукты или лекарства (например, кальций-содержащие антациды) не должны приниматься одновременно с эмцитом. Пациенты должны подвергаться лечению в течение от 30 до 90 дней до того, как врач определит возможные преимущества продолжения терапии. Терапия должна быть продолжена до тех пор, пока продолжается благоприятный ответ. Некоторые

- 65 032775

	пациенты поддерживают терапию в течение более чем 3-х лет в дозах от 10 до 16 мг на кг массы тела в день.
Цитарабин	Цитарабин не активен при приеме внутрь. График и способ введения меняется с программой терапии, которая будет использоваться. Цитарабин можно вводить путем внутривенной инфузии или инъекции, подкожно или интратекально. В индукционной терапии острого нелимфоцитарного лейкоза обычная доза цитарабина в комбинации с другими противоопухолевыми лекарственными средствами составляет 100 мг/м²/день при непрерывной внутривенной инфузии (дни с 1 по 7) или 100 мг/м² внутривенно каждые 12 часов (в дни 1-7). Интратекальное использование при менингеальной лейкемии: цитарабин использовали интратекально при остром лейкозе в дозах от 5 до 75 мг/м² площади поверхности тела. Частота введения варьировала от одного раза в день в течение 4 дней до одного раза в 4 дня.
Даунорубицин	Острый нелимфоцитарный лейкоз взрослых: В комбинации: Для пациентов в возрасте до 60 лет вводят даунорубицина гидрохлорид в дозе 45 мг/м²/день внутривенно в дни 1, 2 и 3 первого курса и в дни 1, 2 последующих курсов и цитозинарабинозид в дозе 100 мг/м²/день внутривенная инфузия ежедневно в течение 7 дней для первого курса и 5 дней для последующих курсов. Для пациентов в возрасте 60 лет и выше доза даунорубицина гидрохлорида составляет 30 мг/м²/день внутривенно в дни 1, 2 и 3 первого курса и в дни 1, 2 последующих курсов и доза цитозинарабинозида составляет 100 мг/м²/день в виде внутривенной инфузии ежедневно в течение 7 дней для первого курса и в течение 5 дней для последующих курсов. Детский острый лимфоцитарный лейкоз: В комбинации: Даунорубицина гидрохлорид в дозе 25 мг/м² внутривенно в 1-й день каждую неделю, винкристин в дозе 1,5 мг/м² внутривенно в 1-й день каждую неделю, преднизолон в дозе 40 мг/м² перорально ежедневно. Детям, возрастом менее чем 2 года или с площадью поверхности тела менее 0,5 м² было рекомендовано, чтобы расчет дозировки даунорубицина гидрохлорида основывался на весе (1 мг/кг), а не площади поверхности тела. Острый лимфоцитарный лейкоз взрослых:

- 66 032775

	В комбинации: Даунорубицина гидрохлорид в дозе 45 мг/м²/день внутривенно в дни1, 2 и 3 и винкристин в дозе 2 мг внутривенно в дни 1, 8 и 15; преднизолон в дозе 40 мг/м²/день перорально в дни с 1 по 22, затем постепенное снижение дозы между днями 22 и 29; Lаспарагиназа в дозе 500 МЕ/кг/день х 10 дней внутривенно в дни с 22 по 32.
Идарубицин Бевацитумаб	Для индукционной терапии у взрослых пациентов с ОМЛ рекомендуется следующий график доз: Инъекция идарубицина гидрохлорида в дозе 12 мг/м² в день в течение 3 дней путем медленной (от 10 до 15 мин) внутривенной инъекции в сочетании с цитарабином. Цитарабин может вводиться в дозе 100 мг/м² ежедневно путем непрерывной инфузии в течение 7 дней или после 25 мг/м² цитарабина внутривенно болюсно следует цитарабин в дозе 200 мг/м² в день в течение 5 дней непрерывной инфузии. У больных с бесспорным доказательством лейкоза после первого вводного курса можно вводить второй курс. Введение второго курса должно быть отложено у пациентов, которые испытывают серьезный мукозит, пока не произошло восстановление от этой токсичности, и рекомендуется снижение дозы на 25%. У пациентов с печеночной и/или почечной недостаточностью должно быть рассмотрено снижение дозы инъекции идарубицина гидрохлорида. Инъекцию идарубицина гидрохлорида не следует осуществлять, если содержание билирубина превышает 5 мг%. Не вводить в виде внутривенного струйного вливания или болюса. Не начинать авастин в течение 28 дней после серьезной хирургической операции и до того, как хирургическая рана полностью заживет. Метастатическая злокачественная опухоль толстой кишки • 5 мг/кг внутривенно каждые 2 недели с болюсом IFL • 10 мг/кг внутривенно каждые 2 недели с FOLFOX4 • 5 мг/кг внутривенно каждые 2 недели или 7,5 мг/кг внутривенно каждые 3 недели с основанной на фторпиримидин-иринотекане или фторпиримидин-оксалиплатине химиотерапией после прогрессирования на первой линии содержащей Авастин схемы лечения. Неплоскоклеточная немелкоклеточная злокачественная опухоль легкого • 15 мг/кг внутривенно каждые 3 недели с карбоплатином/ паклитакселом
	Глиобластома • 10 мг/кг внутривенно каждые 2 недели Метастатическая почечно-клеточная карцинома (mRCC) • 10 мг/кг внутривенно каждые 2 недели с интерфероном альфа

- 67 032775

Валганцикловир

Взрослые пациенты с нормальной функцией почек Лечение ЦМВ ретинита Индукция: рекомендуемая доза составляет 900 мг (две таблетки по 450 мг) два раза в день в течение 21 дня. Поддержание: послеиндукционное лечение или у взрослых пациентов с неактивным ЦМВ ретинитом, рекомендуемая доза составляет 900 мг (две таблетки по 450 мг) один раз в день. Профилактика ЦМВ заболевания Для взрослых пациентов, получивших трансплантат сердца или почки-поджелудочной железы, рекомендуемая доза составляет 900 мг (две таблетки по 450 мг) один раз в день, начиная в течение 10 дней после трансплантации до 100 дней после трансплантации. Для взрослых пациентов, получивших трансплантат почки, рекомендуемая доза составляет 900 мг (две таблетки по 450 мг) один раз в день начиная в течение 10 дней после трансплантации до 200 дней после трансплантации. Пациенты детского возраста Профилактика ЦМВ заболевания Для пациентов детского возраста от 4 месяцев до 16 лет, которые получили пересадку почки или сердца, рекомендуемая доза вальцита составляет один раз в день, начиная в течение 10 дней после трансплантации до 100 дней после трансплантации, основывается на площади поверхности тела (BSA) и клиренсе креатинина (СгС1), полученном из модифицированной формулы Шварца, и рассчитывается с использованием уравнения ниже: Детская доза (мг) = 7 х BSA х СгС1 (рассчитывается с использованием модифицированной формулы Шварца). Если вычисленный клиренс креатинина Шварца превышает 150 мл/мин/1,73 м², то в уравнении следует использовать максимальное значение 150 мл/мин/1,73м². BSA Мостеллера (м²)='\Рост (см) х Вес (кг)/3600 Клиренс креатинина Шварца мл/мин/1,73м²)= к х Рост (см)/креатинин сыворотки (мг/дл), где к = 0,45 для пациентов в возрасте от 4 месяцев до < 1 года, 0,45 для пациентов в возрасте от 1 до < 2 лет (обратите внимание, что значение к составляет 0,45 вместо типичного значения 0,55), 0,55 для мальчиков в возрасте от 2 до < 13 лет и девочек в возрасте от 2 до 16 лет, и 0,7 для мальчиков в возрасте от 13 до 16 лет. Все рассчитанные дозы должны быть округлены до ближайшего

- 68 032775

инкремента 25 мг для фактической доставляемой дозы. Если расчетная доза превышает 900 мг, следует вводить максимальную дозу 900 мг. Вальцит для перорального раствора представляет собой предпочтительный состав, поскольку он обеспечивает возможность вводить дозу, рассчитанную в соответствии с приведенной выше формулой; однако, таблетки вальцита могут быть использованы, если вычисленные дозы находятся в пределах 10% доступной прочности таблетки (450 мг). Например, если вычисленная доза составляет от 405 мг до 495 мг, может быть принята одна таблетка 450 мг

Метотрексат

Неопластические заболевания: Пероральное введение в форме таблеток часто представляет собой предпочтительное, когда вводят низкие дозы, поскольку поглощение происходит быстро и получаются эффективные уровни в сыворотке. Инъекции метотрексата могут вводиться внутримышечным, внутривенным или внутриартериальным путем. Хориокарцинома и сходные трофобластические заболевания: Метотрексат вводят перорально или внутримышечно в дозах от 15 до 30 мг в день в течение пятидневного курса. Такие курсы, как правило, повторяются от 3 до 5 раз, по мере необходимости, с периодами отдыха, составляющими одну или несколько недель, между курсами, пока какие-либо проявляющиеся симптомы токсичности не спадут. Эффективность терапии, как правило, оценивают с помощью суточного количественного анализа хорионического гонадотропина человека (ХГЧ) в моче, который должен вернуться к нормальному или менее чем 50 МЕ/24 ч, как правило, после третьего или четвертого курса и, как правило, после этого следует полное разрешение измеримых поражений через 4-6 недель. Как правило, рекомендуется один-два курса метотрексата после нормализации ХГЧ. Перед каждым курсом важно осуществление тщательного клинического исследования лекарственного средства. Сообщалось, что также полезна циклическая комбинированная терапия метотрексатом с другими противоопухолевыми лекарственными средствами. Лейкоз: Метотрексат отдельно или в комбинации со стероидами первоначально использовался для индукции ремиссии при остром лимфоцитарном лейкозе. Совсем недавно оказалось, что терапия кортикостероидами в комбинации с другими противолейкозными лекарственными средствами или в комбинации с циклическим метотрексатом производит быстрые и эффективные ремиссии. При использовании для индукции метотрексат в дозе 33 мг/м² в комбинации с 60 мг/м² преднизона, вводимые ежедневно, вызывает ремиссию у 50% пациентов, получавших, как правило, в течение от 4 до 6 недель. Метотрексат в комбинации с другими средствами, похоже, представляет собой лекарственное средство

- 69 032775

выбора для обеспечения поддержания медикаментозной ремиссии. Когда достигается ремиссия и поддерживающее лечение производит общее клиническое улучшение, начинается следующая поддерживающая терапия: метотрексат вводят 2 раза в неделю либо перорально, либо внутримышечно с общей еженедельной дозой, составляющей 30 мг/м². Кроме того, его вводили в дозах 2,5 мг/кг внутривенно каждые 14 дней. Если и когда происходят рецидивы, реиндукция ремиссии может снова, как правило, быть получена путем повторения начальной индукционной схемы лечения. Лимфомы: В опухоли Беркитта, стадии Ι-П, метотрексат приводил к длительным ремиссиям в некоторых случаях. Рекомендуемая дозировка составляет от 10 до 25 мг/день перорально в течение от 4 до 8 дней. На стадии III, метотрексат, как правило, вводят одновременно с другими противоопухолевыми средствами. Лечение на всех стадиях, как правило, состоит из нескольких курсов лекарственных средств, прерываемых 7-10 днями периодов отдыха. Лимфосаркомы на стадии III могут реагировать на комбинированную лекарственную терапию с метотрексатом в дозах от 0,625 до 2,5 мг/кг ежедневно. Грибовидный микоз (кожная Т-клеточная лимфома): Терапия с метотрексатом в виде единственного средства, кажется, производит клинический ответ у до 50% получавших лечение пациентов. Дозировка на ранних стадиях представляет собой, как правило, от 5 до 50 мг один раз в неделю. Снижение дозы или прекращение ориентируется на реакции пациента и гематологическом контроле. Метотрексат также вводили дважды в неделю в дозах от 15 до 37,5 мг у пациентов, которые плохо откликнулись на еженедельную терапию. Схемы лечения с использованием комбинированной химиотерапии, которые включают внутривенное введение метотрексата в высоких дозах с лейковорином, использовали на прогрессирующих стадиях заболевания. Остеосаркома: эффективная схема лечения химиотерапией со вспомогательными веществами требует введения нескольких цитотоксических химиотерапевтических средств. В дополнение к высокой дозе метотрексата с лейковорином, эти средства могут включать в себя доксорубицин, цисплатин и комбинацию блеомицина, циклофосф амида и дактиномицина (BCD) в дозах и графиках, показанных в таблице ниже: Начальная доза для лечения метотрексатом в высоких дозах составляет 12 г/м². Если этой дозы не достаточно для получения максимальной концентрации метотрексата в сыворотке 1000 мкМ в конце инфузии метотрексата, доза может вырасти до 15 г/м² в

- 70 032775

последующие процедуры. Если у пациента наблюдается рвота или он не в состоянии переносить пероральные лекарства, лейковорин вводится внутривенно или внутримышечно в той же дозе и по такому же графику. Ревматоидный артрит взрослых: Графики рекомендуемых начальных дозировок 1. Однократные пероральные дозы 7,5 мг один раз в неделю. 2. Разделенные пероральные дозы 2,5 мг с 12-часовыми интервалами в течение 3 доз, вводимых в виде курса раз в неделю. Полиартикулярный ювенильный ревматоидный артрит: Рекомендованная начальная доза составляет 10 мг/м², вводимая один раз в неделю. Псориаз: График рекомендуемой начальной дозы: 1. Еженедельный однократный пероральный, внутримышечный или внутривенный график дозировки: от 10 до 25 мг в неделю до достижения адекватного ответа 2. График разделенных пероральных доз 2,5 мг с 12-часовыми интервалами на протяжении трех доз

Эпирубицин

Внутривенное введение повторяется 3-4-недельными циклами, либо общей дозой в 1-й день каждого цикла, либо разделенные поровну и вводимые в 1 и 8 дни каждого цикла. Рекомендуемая начальная доза инъекции эпирубицина гидрохлорида составляет от 100 до 120 мг/м². Рекомендуются следующие схемы лечения: CEF-120: циклофосфамид в дозе 75 мг/м² перорально с D1 до 14, инъекции эпирубицина гидрохлорида в дозе 60 мг/м² внутривенно в D1 и 8, 5-фторурацил в дозе 500 мг/м² внутривенно в D1 и 8, повторяемые каждые 28 дней в течение 6 циклов FEC-100: 5-фторурацил в дозе 500 мг/м², инъекции эпирубицина гидрохлорида в дозе 100 мг/м², циклофосфамид в дозе 500 мг/м² Все лекарственные средства вводить внутривенно в 1-й день и повторять каждый 21 день в течение 6 циклов. Сокращение дозировки возможно, когда вводятся в определенных комбинациях. Корректировки дозировка после первого цикла лечения должны быть сделаны на основании гематологической и негематологической токсичности. Снизить дозу у пациентов с печеночной недостаточностью.

- 71 032775

	Рассмотреть более низкие дозы у пациентов с тяжелой почечной недостаточностью.
Митоксантрон	Рассеянный склероз: рекомендуется дозировка новантрона составляет 12 мг/м², вводимая в виде короткой (приблизительно от 5 до 15 минут) внутривенной инфузии каждые 3 месяца. Гормонорезистентный рак предстательной железы: рекомендуемая дозировка новантрона составляет от 12 до 14 мг/м², вводимая в виде короткой внутривенной инфузии каждый 21 день Комбинированная начальная терапия для ANLL у взрослых: для индукции рекомендуемая доза составляет 12 мг/м² новантрона ежедневно в дни 1-3, вводимая в виде внутривенной инфузии, и 100 мг/м² цитарабина в течение 7 дней в виде непрерывной 24часовой инфузии в дни 1-7.
Тенипозид	В одном исследовании пациентов-детей с ALL, у которых была неудачной индукционная терапия с содержащими цитарабин схемами лечения, подвергали лечению комбинацией вумона в дозе 165 мг/м² и цитарабина в дозе 300 мг/м² внутривенно, дважды в неделю на протяжении 8-9 доз. В другом исследовании пациентов-детей с ALL, устойчивых к содержащим винкристин/преднизон схемам лечения, подвергали лечению комбинацией вумона в дозе 250 мг/м² и винкристина в дозе 1,5 мг/м² внутривенно, еженедельно на протяжении 4-8 недель, и преднизона в дозе 40 мг/м² перорально в течение 28 дней.
Иринотекан	Комбинированная схема лечения 1 злокачественной опухоли толстой кишки: внутривенная инфузия камптосара в дозе 125 мг/м² в течение 90 мин в дни 1, 8, 15, 22 с внутривенной болюсной инфузией LV в дозе 20 мг/м² в дни 1, 8, 15, 22, а затем внутривенная болюсная инфузия 5-FU в дни 1, 8, 15, 22 каждые 6 недель. Комбинированная схема лечения 2 злокачественной опухоли толстой кишки внутривенная инфузия камптосара в дозе 180 мг/м² в течение 90 минут в дни 1, 15, 29 с внутривенной инфузией LV в дозе 200 мг/м² в течение 2 часов в дни 1, 2, 15, 16, 29, 20, а затем внутривенная болюсная инфузия 5 -FU в дозе 400 мг/м² в дни 1, 2, 15, 16, 29, 30 и внутривенная инфузия 5-FU в дозе 600 мг/м² в течение 22 часов в дни 1,2, 15, 16, 29, 30. Схема лечения 1 с единственным средством злокачественной опухоли толстой кишки: внутривенная инфузия камптосара в дозе 125 мг/м² в течение 90 минут в дни 1, 8, 15, 22, затем 2 недели

- 72 032775

	отдыха. Схема лечения 2 с единственным средством злокачественной опухоли толстой кишки: внутривенная инфузия камптосара в дозе 350 мг/м² в течение 90 минут в день 1 каждые 3 недели.
Топотекан	Рекомендуемая доза капсулы гикамтина составляет 2,3 мг/м²/день ежедневно в течение 5 дней подряд, повторяемая каждые 21 день. Рекомендуемая доза гикамтина составляет 1,5 мг/м² путем внутривенной инфузии в течение 30 мин в день в течение 5 дней подряд, начиная с дня 1 21-дневного курса. При отсутствии прогрессирования опухоли рекомендуется минимум 4 курса, потому что ответ опухоли может быть отложен. Почечная функциональная недостаточность: рекомендуется корректировка дозы до 0,75 мг/м² для пациентов с умеренной почечной недостаточностью (20 до 39 мл/мин).
Бусульфан	Бусульфан вводят перорально. Обычная доза для взрослых, варьируемая для индукции ремиссии, составляет от 4 до 8 мг, общая доза, ежедневно. Дозирование на основании массы представляет собой одинаковое, как для пациентов детского возраста, так и для взрослых, и составляет приблизительно 60 мкг/кг массы тела или 1,8 мг/м² поверхности тела ежедневно. Инъекцию бусульфекса® (бусульфана) вводят в виде компонента кондиционированной схемы лечения ВиСу перед заменой клеток-предшественников костного мозга или периферической крови, рекомендуемые дозы представляют собой следующие: Обычная доза для взрослых составляет 0,8 мг/кг идеальной массы тела или фактической массы тела, в зависимости от того, какая меньше, вводимая каждые шесть часов в течение четырех дней (в общей сложности 16 доз). Для страдающих от ожирения или больных с тяжелым ожирением бусульфекс следует вводить на основании скорректированного идеального веса тела. Идеальный вес тела (НВТ) должен рассчитываться следующим образом (рост в см и вес в кг); ИВТ (кг, мужчины) ⁼ 50 + 0,91 х (рост в см -152); НВТ (кг, женщины) = 45 + 0,91 х (рост в см - 152). Скорректированный идеальный вес тела (AIBW) должен быть рассчитан следующим образом: AIBW = ИВТ + 0,25 х (фактический вес - ИВТ). Циклофосфамид вводят в каждый из двух дней в виде одночасовой инфузии в дозе 60 мг/кг, начиная с дня 3 ВМТ, не раньше, чем через шесть часов после 16-й дозы бусульфекса.
Me лф алан	Мелфалан для инъекций: Обычная внутривенная доза составляет 16 мг/м². Лекарственное

- 73 032775

	средство вводят в виде одной инфузии в течение 15-20 минут. Алкеран вводят с 2-недельными интервалами в течение четырех доз, затем, после адекватного выхода из токсичности, с 4недельными интервалами. Дозу корректируют по мере необходимости на основании проведенных анализов крови приблизительно с недельными интервалами. После 2-3 недель лечения введение лекарственного средства следует прекратить на время до 4 недель, в течение которых следует тщательно исследовать анализ крови. Таблетки мелфалана: Множественная миелома: обычная пероральная доза составляет 6 мг (3 таблетки) в день. Эпителиальный рак яичников: обычно используемая схема лечения карциномы яичников представляет собой введение алкерана в дозе 0,2 мг/кг ежедневно в течение 5 дней в виде одного курса. Курсы повторяют каждые 4-5 недель в зависимости от гематологической толерантности.
Кладрибин	Лейкоз ворсистых клеток: Рекомендуемая доза и график инъекций лейстатина представляет собой один курс, вводимый путем непрерывной инфузии в течение 7 дней подряд в дозе 0,09 мг/кг/день. Хронический лимфоцитарный лейкоз: рекомендуемое лечение состоит из непрерывной инфузии инъекции лейстатина в течение 2 часов в дни с 1 по 5 28-дневного цикла в дозе 0,12 мг/кг/день (4,8 мг/м²/день). Рекомендуется, чтобы инъекции лейстатина вводили отвечающим пациентам максимум до 6 ежемесячных циклов и чтобы неотвечающие пациенты не получали более 2 циклов лечения.
Винбластин	Этот препарат предназначен только для внутривенного применения. Взрослые пациенты: Упрощенный и консервативный постепенный подход к дозировке с интервалом в неделю для взрослых может представлять собой следующий: Первая доза...........................3,7 мг/м² площади поверхности тела Вторая доза...........................5,5 мг/м² площади поверхности тела Третья доза............................7,4 мг/м² площади поверхности тела Четвертая доза......................9,25 мг/м² площади поверхности тела Пятая доза............................. 11,1 мг/м² площади поверхности тела Вышеуказанные увеличения могут быть использованы до тех пор, пока не достигается максимальная доза, превышающая 18,5 мг/м²площади поверхности тела для взрослых.

- 74 032775

Пациенты детского возраста В качестве единственного средства для лечения болезни Леттерера-Сиве (гистиоцитоз X) начальная доза винбластина сульфата составляет 6,5 мг/м². Когда винбластина сульфат используется в комбинации с другими химиотерапевтическими средствами для лечения заболевания Ходжкина, начальная доза, как сообщалось, составляет 6 мг/м². Для злокачественной опухоли половых клеток яичек, начальная доза винбластина сульфата, как сообщалось, составляет 3 мг/м² в комбинированной схеме лечения. Пациенты с почечной или печеночной недостаточностью Снижение на 50% дозы винбластина сульфата рекомендуется для пациентов, характеризующихся значением прямого билирубина в сыворотке выше 3 мг/100 мл. Поскольку метаболизм и выведение осуществляется прежде всего печенью, никакие модификации не рекомендуется для пациентов с нарушениями функции почек.

Хлорамбуцил

Обычная непппяттьняя ттекяпственняя ппчиппвкя гостя иттяет пт 0 1 до 0,2 мг/кг массы тела в день в течение от 3 до 6 недель по мере необходимости. Эти количества, как правило, составляют от 4 до 10 мг в день для среднего пациента. Вся суточная доза может быть введена в одно время. Пациенты с болезнью Ходжкина обычно требуют 0,2 мг/кг в день, в то время как пациенты с другими лимфомами или хроническим лимфоцитарным лейкозом, как правило, требуют только 0,1 мг/кг ежедневно. Когда присутствует лимфоцитарная инфильтрация костного мозга или при гипоплазии костного мозга суточная доза не должна превышать 0,1 мг/кг (приблизительно 6 мг для среднего пациента). Были зарегистрированы альтернативные схемы для лечения хронического лимфоцитарного лейкоза с использованием прерывистых, в две недели или один раз в месяц импульсных доз хлорамбуцила. Прерывистые графики хлорамбуцила начинают с начальной разовой дозы 0,4 мг/кг. Дозы, как правило, увеличивают на 0 1 мг/кг пока не будет наблюдаться контрольный лимфоцитоз или токсичность. Последующие дозы модифицируют для получения умеренной гематологической токсичности. Если используется поддерживающая дозировка, она не должна превышать 0,1 мг/кг в день и вполне может быть минимальной в виде 0,03 мг/кг ежедневно. Типичная поддержавающая доза составляет от 2 мг до 4 мг в день или меньше, в зависимости от статуса показателей крови.

- 75 032775

Тамоксифен	Для пациентов со злокачественной опухолью молочной железы рекомендуемая суточная доза составляет 20-40 мг. Дозы более чем 20 мг в день должны быть введены в разделенных дозах (утром и вечером). Протоковая карцинома in Situ (DCIS): Рекомендуемая доза составляет 20 мг в день на протяжении 5 лет. Снижение заболеваемости злокачественной опухолью молочной железы у женщин с высоким риском: рекомендуемая доза составляет 20 мг в день на протяжении 5 лет.
Актиномицин-D	Не для перорального введения Интенсивность дозы за 2-недельный цикл для взрослых или детей не должна превышать 15 мкг/кг/день или 400-600 мкг/м²/день внутривенно в течение пяти дней. Опухоль Вильмса, рабдомиосаркома у детей и саркома Юинга: схемы лечения в дозе 15 мкг/кг внутривенно ежедневно в течение пяти дней, вводимые в различных сочетаниях и с различными графиками с другими химиотерапевтическими средствами, были использованы при лечении опухоли Вильмса, рабдомиосаркомы и саркомы Юинга. Метастатический несеминомный рак яичка: 1000 мкг/м²внутривенно в 1-й день как часть комбинированной схемы лечения с циклофосфамидом, блеомицином, винбластином, цисплатином. Гестационные трофобластические новообразования: 12 мкг/кг внутривенно ежедневно в течение пяти дней в качестве единственного средства. 500 мкг внутривенно в дни 1 и 2 в качестве части комбинированной схемы лечения с этопозидом, метотрексатом, фолиновой кислотой, винкристином, циклофосфамидом и цисплатином. Региональная перфузия в местно-рецидивирующих и локальных солидных злокачественных новообразованиях: В общем, предложены следующие дозы: 50 мкг (0,05 мг) на килограмм массы тела для нижней конечности или таза. 35 мкг (0,035 мг) на килограмм массы тела верхней конечности. Может быть желательным использование более низких доз у пациентов с ожирением или когда была использована предыдущая химиотерапия или лучевая терапия
Митомицин С	Митомицин следует вводить только внутривенно.

- 76 032775

Следующий график дозировки может быть использован с 6-8недельными интервалами: 20 мг/м² внутривенно в виде разовой дозы через функционирующий внутривенный катетер. Когда митомицин используется в комбинации с другими миелосупрессивными средствами, дозы должны быть соответствующим образом скорректированы. Если заболевание продолжает прогрессировать после двух курсов митомицина, введение лекарственного средства должно быть остановлено, так как шансы на ответ минимальны.

Верапамил

Таблетки верапамила гидрохлорида с замедленным высвобождением: Начинать лечение с таблеток гидрохлорида верапамила с замедленным высвобождением с дозой 180 мг, принимаемых в первой половине дня. Более низкие первоначальные дозы 120 мг в день могут быть оправданными у пациентов, которые могут характеризоваться повышенной реакцией на верапамил (например, пожилые или маленькие люди). Если адекватный ответ не получен таблетками гидрохлорида верапамила с замедленным высвобождением с дозой 180 мг, доза может быть повышена следующим образом: 1.240 мг каждое утро, 2,180 мг каждое утро плюс 180 мг каждый вечер; или 240 мг каждое утро плюс 120 мг каждый вечер, 3.240 мг каждые 12 часов. Инъекции верапамила гидрохлорида: Рекомендуемые внутривенные дозы верапамила представляют собой следующие: ВЗРОСЛЫЕ: Начальная доза: от 5 до 10 мг (от 0,075 до 0,15 мг/кг массы тела) в виде внутривенного болюса в течение не менее 2 минут. Повторная доза: 10 мг (0,15 мг/кг массы тела) через 30 минут после первой дозы, если первоначальный ответ не представляет собой адекватный. Оптимальный интервал для последующих внутривенных доз не был определен и должен быть индивидуальным для каждого пациента. Пожилые пациенты: Доза должна вводиться в течение по меньшей мере 3 минут, чтобы свести к минимуму риск нежелательных эффектов лекарственного средства.

- 77 032775

ДЕТСКИЕ: Первоначальная доза: 0-1 год: от 0,1 до 0,2 мг/кг массы тела (как правило, однократная доза находится в диапазоне от 0,75 до 2 мг) следует вводить в виде внутривенного болюса в течение не менее 2 минут при непрерывном мониторинге ЭКГ. 1-15 лет: от 0,1 до 0,3 мг/кг массы тела (как правило, однократная доза находится в диапазоне от 2 до 5 мг) следует вводить в виде внутривенного болюса в течение не менее 2 минут. Не превышать 5 мг. Повторная доза: 0-1 год: от 0,1 до 0,2 мг/кг массы тела (как правило, однократная доза находится в диапазоне от 0,75 до 2 мг) через 30 минут после первой дозы, если первоначальный ответ не представляет собой адекватный (при непрерывном мониторинге ЭКГ). 1-15 лет: от 0,1 до 0,3 мг/кг массы тела (как правило, однократная доза находится в диапазоне от 2 до 5 мг) через 30 минут после первой дозы, если первоначальный ответ не представляет собой адекватный. Не превышать 10 мг в виде однократной дозы.

Под оф ИЛЛ 0токсин

Применять дважды в день утром и вечером (каждые 12 часов) в течение 3 дней подряд, а затем использовать для поддерживания 4 дня подряд. Этот недельный цикл лечения можно повторять до четырех раз, пока не будет видно бородавочной ткани.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Claims

1. Способ лечения онкологического заболевания у субъекта, включающий:

(a) введение кофермента Q10 (CoQ10) субъекту;

(b) прекращение введения кофермента Q10 и (c) введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту после прекращения введения CoQ10, где кофермент Q10 вводят путем непрерывной внутривенной инфузии в течение по меньшей мере 24 ч.

2. Способ лечения онкологического заболевания у субъекта, включающий:

(a) введение кофермента Q10 (CoQ10) субъекту;

(b) введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту после начала введения CoQ10 и (c) продолжение лечения CoQ10 после начала введения по меньшей мере одного химиотерапевтического средства, где кофермент Q10 вводят путем непрерывной внутривенной инфузии в течение по меньшей мере 24 ч.

3. Способ по п.2, при котором CoQ10 вводят в течение по меньшей мере 24 ч перед введением дозы по меньшей мере одного химиотерапевтического средства.

4. Способ по п.1 или 2, при котором введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства начинается по меньшей мере через 24 ч после начала введения CoQ10, через одну неделю после начала введения CoQ10, через две недели после начала введения CoQ10, через три недели после начала введения CoQ10, через четыре недели после начала введения CoQ10, через пять недель после начала введения CoQ10, через шесть недель после начала введения CoQ10, через семь недель после начала введения CoQ10 или через восемь недель после начала введения CoQ10.

5. Способ по п.1 или 2, при котором CoQ10 вводят в дозе, составляющей приблизительно 5, приблизительно 10, приблизительно 12,5, приблизительно 20, приблизительно 25, приблизительно 30, приблизительно 35, приблизительно 40, приблизительно 45, приблизительно 50, приблизительно 55, приблизительно 58, приблизительно 58,6, приблизительно 60, приблизительно 75, приблизительно 78, приблизительно 100, приблизительно 104, приблизительно 125, приблизительно 150, приблизительно 175, приблизительно 200, приблизительно 300 или приблизительно 400 мг/кг.

6. Способ лечения онкологического заболевания у субъекта, включающий:

(a) введение кофермента Q10 (CoQ10) субъекту и (b) введение по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту в дозе, которая ниже, чем стандартные дозы химиотерапевтического средства, используемые для лечения онкологического заболевания,

- 78 032775 где кофермент Q10 вводят путем непрерывной внутривенной инфузии в течение по меньшей мере 24 ч.

7. Способ по п.6, при котором введение CoQ10 прекращается перед введением по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту.

8. Способ по п.6, при котором введение CoQ10 продолжается после введения по меньшей мере одного химиотерапевтического средства субъекту.

9. Способ по п.6, при котором CoQ10 вводят в течение по меньшей мере 24 ч, по меньшей мере 48 ч, по меньшей мере 1 недели, по меньшей мере 2 недель, по меньшей мере 3 недель или по меньшей мере 4 недель до введения по меньшей мере одного химиотерапевтического средства.

10. Способ по п.6, при котором по меньшей мере одно химиотерапевтическое средство вводят по меньшей мере через 24 ч после начала введения CoQ10, через одну неделю после начала введения CoQ10, через две недели после начала введения CoQ10, через три недели после начала введения CoQ10, через четыре недели после начала введения CoQ10, через пять недель после начала введения CoQ10, через шесть недель после начала введения CoQ10, через семь недель после начала введения CoQ10 или через восемь недель после начала введения CoQ10.

11. Способ по п.6, при котором CoQ10 вводят в дозе, составляющей приблизительно 5, приблизительно 10, приблизительно 12,5, приблизительно 20, приблизительно 25, приблизительно 30, приблизительно 35, приблизительно 40, приблизительно 45, приблизительно 50, приблизительно 55, приблизительно 58, приблизительно 58,6, приблизительно 60, приблизительно 75, приблизительно 78, приблизительно 100, приблизительно 104, приблизительно 125, приблизительно 150, приблизительно 175, приблизительно 200, приблизительно 300 или приблизительно 400 мг/кг.

12. Способ по любому из пп.1-11, при котором по меньшей мере одно химиотерапевтическое средство включает химиотерапевтическое средство, выбранное из группы, состоящей из амифостина (этиола), цисплатина, дакарбазина (DTIC), дактиномицина, мехлорэтамина (азотистого иприта), стрептозоцина, циклофосфамида, кармустина (BCNU), ломустина (CCNU), доксорубицина (адриамицина), доксорубицина липо (доксила), гемцитабина (гемзара), даунорубицина, даунорубицина липо (дауноксома), прокарбазина, митомицина, цитарабина, этопозида, метотрексата, 5-фторурацила (5FU), винбластина, винкристина, блеомицина, паклитаксела (таксола), доцетаксела (таксотера), алдеслейкина, аспарагиназы, бусульфана, карбоплатина, кладрибина, камптотецина, СРТ-I 1, 10гидрокси-7-этилкамптотецина (SN38), дакарбазина, S-I капецитабина, фторафура, 5'дезоксифторуридина, UFT, энилурацила, дезоксицитидина, 5-азацитозина, 5-азадезоксицитозина, аллопуринола, 2-хлораденозина, триметрексата, аминоптерина, метилен-10-деазааминоптерина (MDAM), оксоплатина, пикоплатина, тетраплатина, сатраплатина, платина-DACH, ормаплатина, CI-973, JM-216 и его аналогов, эпирубицина, этопозидфосфата, 9-аминокамптотецина, 10,11-метилендиоксикамптотецина, каренитецина, 9-нитрокамптотецина, TAS 103, виндезина, L-фенилаланина мустард, ифосфамида, мефосфамида, перфосфамида, трофосфамида, кармустина, семустина, эпотилонов A-E, томудекса, 6меркаптопурина, 6-тиогуанина, амсакрина, этопозидфосфата, каренитецина, ацикловира, валацикловира, ганцикловира, амантадина, римантадина, ламивудина, зидовудина, бевацизумаба, ритуксимаба, трастузумаба, 5-фторурацила, капецитабина, пентостатина, триметрексата, кладрибина, флоксуридина, флударабина, гидроксимочевины, ифосфамида, идарубицина, месны, иринотекана, митоксантрона, топотекана, лейпролида, мегестрола, мелфалана, меркаптопурина, пликамицина, митотана, пэгаспаргазы, пентостатина, пипобромана, пликамицина, стрептозоцина, тамоксифена, тенипозида, тестолактона, тиогуанина, тиотепы, урацилового иприта, винорелбина, хлорамбуцила, цисплатина, доксорубицина, паклитаксела (таксола), блеомицина, mTor, рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) и факторов роста фибробластов (FGF) и их комбинаций.

13. Способ по любому из пп.1-12, при котором онкологическое заболевание выбирают из группы, состоящей из карциномы, саркомы, лимфомы, меланомы и лейкоза.

14. Способ по любому из пп.1-13, при котором онкологическое заболевание представляет собой трижды негативный рак молочной железы.

15. Способ по любому из пп.1-14, при котором субъект представляет собой человека.

16. Способ по любому из пп.1-15, при котором по меньшей мере одно химиотерапевтическое средство выбрано из группы, состоящей из гемцитабина, цисплатина, доцетаксела, циклофосфамида, доксорубицина, иринотекана и 5-фторурацила.

17. Способ по п.16, при котором способ включает введение от приблизительно 100 до приблизительно 10 мг/кг гемцитабина один раз в неделю в течение 3 недель с одной неделей перерыва.

18. Способ по п.16, при котором способ включает введение 5 мг/кг доцетаксела, 1 мг/кг доксорубицина и 35 мг/кг циклофосфамида субъекту через каждые три недели в течение шести циклов.