EA019397B1 - Антигенсвязывающие белки il-17 рецептора а - Google Patents

Антигенсвязывающие белки il-17 рецептора а Download PDF

Info

Publication number
EA019397B1
EA019397B1 EA200900514A EA200900514A EA019397B1 EA 019397 B1 EA019397 B1 EA 019397B1 EA 200900514 A EA200900514 A EA 200900514A EA 200900514 A EA200900514 A EA 200900514A EA 019397 B1 EA019397 B1 EA 019397B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
light chain
heavy chain
variable domain
antibody
ber
Prior art date
Application number
EA200900514A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200900514A1 (ru
Inventor
Джоэль Токер
Жак Дж. Пешон
Дэвид Фитцпатрик
Джеймс Ф. Смотерс
Кристофер Мелин
Ай Чин Лим
Original Assignee
Кирин-Амген, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Кирин-Амген, Инк. filed Critical Кирин-Амген, Инк.
Publication of EA200900514A1 publication Critical patent/EA200900514A1/ru
Publication of EA019397B1 publication Critical patent/EA019397B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2866—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/12—Antidiarrhoeals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/10—Anti-acne agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • A61P5/16—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4 for decreasing, blocking or antagonising the activity of the thyroid hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/38—Drugs for disorders of the endocrine system of the suprarenal hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Virology (AREA)

Abstract

Изобретение относится к антигенсвязывающим белкам для IL-17 рецептора A (IL-17RA, или IL-17R), таким как антитела, полинуклеотидным последовательностям, кодирующим такие антигенсвязывающие белки, и композициям и способам диагностики и лечения заболеваний, опосредованных активацией IL-17 рецептора А одним или более IL-17 лигандов. Изобретение относится к идентификации нейтрализующих детерминант, которые конкурируют за связывание с нейтрализующими IL-17RA антителами по данному описанию.

Description

Изобретение относится к антигснсвязывающим белкам для 1Ь-17 рецептора А (1Ь-17ВА, или 1Ь-17В), таким как антитела, полинуклеотидным последовательностям, кодирующим такие антигенсвязывающие белки, и композициям и способам диагностики и лечения заболеваний, опосредованных активацией 1Ь-17 рецептора А одним или более 1Ь-17 лигандов. Изобретение относится к идентификации нейтрализующих детерминант, которые конкурируют за связывание с нейтрализующими 1Ь-17КА антителами по данному описанию.
Область, к которой относится изобретение
Изобретение относится к антигенсвязывающим белкам для 1Б-17 рецептора А (1Б-17КА или 1Ь17К), таким как антитела, полинуклеотидным последовательностям, кодирующим указанные антигенсвязывающие белки, и композициям и способам диагностики и лечения заболеваний, опосредованных активацией 1Б-17 рецептора А одним или более 1Б-17 лигандов. Настоящее изобретение относится к идентификации нейтрализующих детерминант на 1Б-17 рецепторе А (1Б-17КА или 1Б-17К) и антител, которые с ними связываются. Аспекты изобретения включают также антитела, которые конкурируют за связывание с нейтрализующими антителами к 1Б-17КА по данному описанию.
Предпосылки создания изобретения
1Б-17А представляет собой противовоспалительный цитокин, определяемый как транскрипт, селективно экспрессируемый активированными Т клетками. 1Б-17КА экспрессируется убиквитарно, и показано, что он связывает 1Б-17А с аффинностью около 0.5 нМ (Уао е! а1., 1995, 1штиийу 3: 811- 821). Идентифицировано пять дополнительных 1Ь-17-подобных лигандов (1Ь-17В-1Ь-17Р) и четыре дополнительных 1Ь-17КА-подобных рецепторов (1Ь-17КВ-1Ь-17КЕ) (Ко11к апб Ьшбеп, 2004, 1ттиийу 21: 467-476).
Показано, что 1Б-17КС связывает 1Б-17А и 1Б-17Р. Результаты наблюдений, показывающие, что недостаточность 1Б-17КА и нейтрализация антителом к 1Б-17КА вызывают к утрате как 1Ь-17А, так и 1Ь17Р функции, наводя на мысль, что 1Б-17КС не могут доставлять сигнал 1Ь-17А или 1Ь-17Р в отсутствие 1Б-17КА (Тоу е! а1., 2006, 1. 1ттипо1. 177: 36-39; МсАШйег е! а1., 2005, 1. 1ттипо1. 175: 404-412). Кроме того, усиленная экспрессия 1Б-17КС в 1Ь-17КА-дефицитных клетках не восстанавливает 1Ь-17А или 1Ь17Р функцию (Тоу е! а1., 2006, 1. 1ттипо1. 177: 36-39).
1Ь-17А и 1Ь-17Р преимущественно экспрессируются СЭ4' Т клетками памяти (Ко11к апб Ьшбеп, 2004, см. выше). Было высказано предположение, что продуцирующая 1Ь-17А патогенная субпопуляция ί.Ό4' Т клеток, ТЫЬ-17, увеличивается в присутствии 1Б-23 (ЬапдгЫ1 е! а1., 2005, 1. Ехр. Меб. 201: 233240). Кроме того, было показано, что как 1Б-15. так и член суперсемейства ТИР ОХ40Ь индуцируют экспрессию 1Ь-17А (Иакае е! а1., 2003Б, Ргос. Иа!1. Асаб. 8ск И.8.А. 100: 5986- 5990; 2ю1ко\\ъка е! а1., 2000, 1. 1ттипо1 164: 2832-2838). 1Ь-6 и ТСР-бета также индуцируют экспрессию 1Ь-17А.
1Ь-17А и 1Ь-17Р связывают и активируют 1Ь-17КА. Показано, что 1Ь-17КА играет важную роль в регуляции иммунного ответа. Активация ТЬ-17КА ведёт к продуцированию цитокинов, хемокинов, факторов роста и других белков, которые способствуют появлению симптомов и/или патологии многочисленных заболеваний. 1Ь-17А представляет собой воспалительный цитокин, который индуцирует продуцирование цитокинов и других медиаторов, приводящих к заболеваниям и физиологическим эффектам, таким как воспаление, деградацию хряща и резорбцию кости. 1Ь-17А также участвует в ряде воспалительных состояний, включая артрит (ревматоидный артрит), псориаз, воспалительное заболевание кишечника, рассеянный склероз и астму. (Ь1 е! а1., 2004, Ниахйопд υπίν. 8ск Тесйпо1од. Меб. 8ск 24: 294296; Рирпо е! а1., 2003, Си!. 52: 65-70; Каийтап е! а1., 2004, 1. 1пуек!. ЬегтаЮк 123: 1037-1044; Маппоп е! а1., 2004, N. Епд1. 1 Меб. 351: 2069-2079; МаШкеуюшк е! а1., 1999, Ми1! 8с1ег 5, 101-104; Ьшбеп е! а1., Еиг Кекрц· 1. 2000 Мау;15(5): 973-7; Мо1е! е! а1., 2001, 1. А11егду С1ш 1ттипо1. 108: 430-438). Последние исследования показывают, что 1Ь-17Р участвует в индукции воспалительных заболеваний (Оба е! а1., 2006, Атепсап 1. Кекр. Сгб. Саге Мебюше, 1ап. 15, 2006; Иптакак! е! а1., 2004, 1ттипо1 Ье!!. 95: 97-104).
Аспекты изобретения предусматривают антигенсвязывающие белки, которые специфически связывают 1Ь-17КА и ингибируют активацию 1Ь-17КА, опосредуемую членами семейства 1Ь-17, например, такими, но без ограничения, 1Ь-17А и/или 1Ь-17Р, как более подробно представлено в данном описании.
Краткое описание фигур
На фиг. 1 представлен анализ СОК (гипервариабельных областей, участков) с помощью филогенетической дентограммы вариабельной области тяжёлой (Ун) и вариабельной области лёгкой (Уь) цепи различных антигенсвязывающих белков (антител) для 1Ь-17К.
На фиг. 2 показано выравнивание аминокислотных последовательностей СОК вариабельной области тяжёлой цепи (Ун) различных антигенсвязывающих белков (антител) для 1Ь-17К. Области (участки) СПИР СЭК2 и СЭК3 указаны.
На фиг. 3 показано выравнивание аминокислотных последовательностей СОК вариабельной области лёгкой цепи (Уь) различных антигенсвязывающих белков (антител) для 1Ь-17К. Области (участки) СПИР СЭК2 и СЭК3 указаны.
На фиг. 4 на С1А модели артрита показано, что средние клинические оценки РЬ-17КА-/- мышей (нокаутированных мышей или КО мышей) ниже, чем клинические оценки мышей дикого типа (^Т).
На фиг. 5 на модели экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (ЭаЭ, ЕАЕ), вызванного гликопротеином миелина олигодендроцитов (гМО, МОС), показана задержка начала ЭаЭ (ЕАЕ) у 1Ь17КА нокаутированных мышей по сравнению с мышами дикого типа.
На фиг. 6 на гМО (МОС)-индуцированной модели показаны пониженные клинические оценки 1Ь17КА нокаутированных мышей по сравнению с мышами дикого типа.
На фиг. 7 на модели вызванной овальбумином астмы показано, что у РЬ-17КА нокаутированных мышей пониженное число воспалительных клеток в БАЛ (ВАЬ, бронхоальвеолярный лаваж) жидкости по сравнению с мышами дикого типа.
- 1 019397
На фиг. 8 на модели, вызванной овальбумином астмы, показано, что у 1Ь-17КА нокаутированных мышей пониженное число эозинофилов (фиг. 8А), нейтрофилов (фиг. 8В) и лимфоцитов (фиг. 8С) в бронхоальвеолярном лаваже (БАЛ, ВАЬ) по сравнению с мышами дикого типа. На фиг. 8Ό не видно никаких изменений макрофагов в БАЛ (ВЛЬ)-жидкости \УТ или нокаутированных по 1Б-17КА мышей (наивных и ОУЛ сенсибилизированных).
На фиг. 9 показано зависимое от дозы ингибирование с помощью 1Б-17КА тАЬ у мышей дикого типа (^Т) на индуцированной коллагеном модели артрита (С1А). Видно, что Р<0.05 при сравнении групп, получающих 1Е-17КА тАЬ в количестве 100 мкг и 300 мкг, по сравнению с контрольной экспериментальной группой (дни 13, 15 и 16).
На фиг. 10 показаны результаты терапевтического лечения с помощью 1Е-17КА тАЬ. Данные показывают стабилизированные средние клинические оценки у мышей дикого типа на стандартной С1А модели артрита. Эти данные показывают, что ингибирование 1Е-17КА с помощью антигенсвязывающего белка для 1Е-17КА может принести терапевтическую пользу при лечении ревматоидного артрита (КА), в особенности для сохранения сочленяющихся костей и суставного хряща.
На фиг. 11 показано, что терапевтическое лечение с помощью антитела тАЬ против 1Ь-17КА стабилизирует средние клинические оценки у нокаутированных по ΤΝΡΚ р55/р75 мышей на стандартной С1А модели артрита. Эти данные показывают, что ингибирование 1Ь-17КА с помощью антигенсвязывающего белка для 1Ь-17КА может принести терапевтическую пользу при лечении КА, особенности для сохранения сочленяющихся костей и суставного хряща. Следует отметить, что ингибирование 1Ь-17КА может стабилизировать ингибирование на модели, не зависящей от ΤΝΡ передачи сигнала.
На фиг. 12 показано, что типичные человеческие тАЬ§ против 1Ь-17КА (АМН14/АМЬ14, АМН22/АМЬ22, АМН19/АМЬ19 и АМН18/АМЬ18) способны ингибировать индуцированное 1Ь-17 обезьян циномолгус продуцирование 1Ь-6 при использовании клеток 1ТС- 12 (клеточная линия почек обезьян циномолгус). Линией (-—) изображается величина позитивного контроля 1Ь-17 обезьян циномолгус в комбинации с ΤΝΡ- альфа. Линией (-.-.-) изображается величина позитивного контроля ΤΝΡ-альфа обезьян циномолгус. Линией (....) изображается величина контроля среды.
На фиг. 13 показано изменение (вариация) в каркасных областях БЕР ГО ΝΟ: 40 (АМЪ14) относительно остатков зародышевой линии и влияние на значения 1С50.
На фиг. 14 показано, что два варианта, снова вернувшиеся к остаткам, являющимся остатками зародышевой линии (см. фиг. 13), обладают пониженной 1Ь-17А ингибирующей активностью по сравнению с АМН14/АМЪ14, указывая на то, что допускается некоторое изменение (вариация) в каркасных областях, но что некоторые остатки могут влиять на активность. Линия (----) изображает величину позитивного контроля стимуляции 1Ь-17 в отсутствие антитела (примерно, 4062 пг/мл).
На фиг. 15 показано, что два варианта, снова вернувшиеся к остаткам, являющимся остатками зародышевой линии (см. фиг. 13), обладают пониженной 1Ь-17Г (в комбинации с ΤΝΡ-альфа) ингибирующей активностью по сравнению с АМН14/АМЬ14.
На фиг. 16А и 16В показаны результаты мультиплексного связывания антител с 1Б-17КА. Выделенные значения показывают пары антител, которые могут связываться с 1Б-17КА одновременно, это означает, что эти антитела связываются с различными нейтрализующими детерминантами. Значения в рамках показывают антитела, которые образуют пары с самими собой.
На фиг. 17 показывают мышиный 1Б-17КА (БЕР ГО ΝΟ: 432) и 5 доменов, А, В, С, Ό, Е и Ρ, которые заменили эквивалентные (аналогичные) домены в последовательности человеческого 1Ь-17КА.
На фиг. 18А-18Э показаны аминокислотные последовательности человеческого и мышиного 1Ь17КА и человеческого/мышиного химерного 1Ь-17КА белков.
На фиг. 19 представлена таблица, в которой суммированы данные по способности 1Ь-17КА тАЬ§ связываться с различными химерными белками. Выделенные величины показывают, где 1Ь-17КА тАЬ§ утрачивают способность к связыванию этих конкретных химер (η.ά. означает не определяли).
На фиг. 20 показаны аминокислотные остатки, которые были заменены на аргининовые остатки в БЕР ГО ΝΟ: 431.
На фиг. 21 показаны кривые титрования связывания различных 1Ь-17КА тАЬ§ с мутантным Ό152Κ 1Б-17КА.
На фиг. 22 суммированы результаты замены остатков боковых цепей на аргинин, связывания и химер для различных 1Ь-17КА тАЬ§.
Подробное описание изобретения
Заголовки разделов в данном описании даются только с организационной целью и не предполагают ограничить описываемый предмет изобретения.
Для получения рекомбинантной ДНК, синтеза олигонуклеотидов, культивирования и трансформации тканей, очистки белков и т.д. можно использовать стандартные методы. Ферментативные реакции и очистку можно проводить в соответствии с описаниями производителя, или общепринятой в уровне техники практикой, или по данному описанию. Нижеприведённые процедуры и методики можно обычно осуществлять обычными методами, хорошо известными в уровне техники и описанными в различных общих и более конкретных ссылочных материалах, которые цитируются и обсуждаются по ходу описа
- 2 019397 ния. См., например, учебник 8атЬгоок с1 а1., 2001, Мо1еси1аг С1ошид: А ЬаЬога1огу Мапиа1., 3гб сб.. Со1б 8ргтд НагЬог ЬаЬога1огу Ргезз, Со1б 8ргшд НагЬог, Ν.Υ., который вводится в данное описание ссылкой для любых целей. Если не приводятся конкретные определения, то по данному описанию применяются связанные с этим номенклатура, лабораторные процедуры и методики аналитической химии, органической химии и медицинской и фармацевтической химии, которые общеизвестны и обычно используются в уровне техники. Стандартные методы можно использовать для химического синтеза, химического анализа, получения фармацевтических веществ, приготовления и доставки препаратов и лечения пациентов.
1Ь-17А, ΙΙ.-17Ι·' и 1Б-17КА
Биологическая активность 1Б-17А и 1Ь-17Е зависит от 1Ь-17КА, как показано в данном описании как на клетках, так и на мышах с генетической недостаточностью по 1Ь-17КА, и с помощью нейтрализующих тАЬз (моноклональных антител), специфических к 1Б-17КА (см. ниже раздел примеры).
1Ь-17 рецептор А или 1Ь-17КА (взаимозаменяемо (поочерёдно) применяемые в данном описании, также как 1Ь-17 рецептор и 1Б-17К по отношению к одному и тому же рецептору) по данному описанию обозначает рецептор клеточной поверхности и рецепторные комплексы (такие, но без ограничения, как комплекс 1Ь-17КА-1Ь-17КС), которые связывают Ш-17А и 1Ь-17Е и в результате инициируют путь сигнальной трансдукции в клетке. Белки 1Б-17КА могут включать также варианты. Белки 1Б-17КА могут также включать фрагменты, такие как внеклеточный домен, который не содержит целый трансмембранный и/или внеклеточный домен или часть его, а также фрагменты внеклеточного домена. Клонирование, характеристика и приготовление 1Б-17КА описаны, например, в патенте США №. 6072033, который вводится в данное описание ссылкой во всей полноте. Аминокислотная последовательность человеческого Ш-17К.А показана в 8ЕС Ш ΝΟ: 430. Растворимые формы йи1Ь-17КА, применимые в методах по настоящему изобретению, включают внеклеточный или зрелую форму, не содержащую сигнальный пептид, или фрагмент внеклеточного домена, который сохраняет способность связывать Ш-17А и/или Ш-17Е, или гетеромерный вариант Ш-17А и/или Ш-17Е. Другие формы 1Б-17КА включают мутеины и варианты, которые по меньшей мере на 70-99% гомологичны 1Ь-17КА, имеющему последовательность 8ЕС Ш ΝΟ: 430 и описанному в патенте США №. 6072033, до тех пор, пока 1Б-17КА сохраняет способность связывать Ш-17А и/или 1Ь-17Е, или гетеромерный вариант 1Б-17А и/или Ш-17Е. Термин 1Ь-17КА включает также посттрансляционные модификации аминокислотной последовательности Ш17КА. Посттрансляционные модификации включают, но без ограничения, Ν- и О-связанное гликозилирование.
Антигенсвязывающие белки для 1Б-17КА (Белки, связывающие 1Б-17КА антиген)
Настоящее изобретение включает антигенсвязывающие белки, которые специфически связывают 1Ь-17КА. Варианты антигенсвязывающих белков содержат пептиды и/или полипептиды (которые необязательно включают посттрансляционные модификации), которые специфически связывают 1Ь-17КА. Варианты антигенсвязывающих белков включают антитела и их фрагменты, по- разному определяемые в данном описании, которые специфически связывают 1Ь-17КА. Аспекты изобретения включают антитела, которые специфически связываются с человеческим 1Ь-17КА и ингибируют связывание Ш-17А и/или Ш17Е с 1Ь-17КА и активацию его или гетеромерного комплекса 1Ь-17КА и 1Ь-17КС. Аспекты изобретения включают антитела, которые специфически связываются с человеческим 1Ь-17КА и ингибируют связывание гетеромера 1Ь-17А/1Ь-17Е с 1Б-17КА и активацию его или гетеромерного комплекса 1Б-17КА и Ш17КС. В ходе описания, когда даётся ссылка на ингибирование Ш-17А и/или 1Ь-17Е, понятно, что оно включает также ингибирование гетеромеров Ш-17А и Ш-17Е. Аспекты изобретения включают антитела, которые специфически связываются с человеческим 1Ь-17КА и частично или полностью ингибируют образование рецептором 1Ь-17КА либо гомомерного, либо гетеромерного функционального рецепторного комплекса, например, но без ограничения, такого как комплекс 1Е-17КА-1Ь-17КС. Аспекты изобретения включают антитела, которые специфически связываются с человеческим 1Ь-17КА и частично или полностью ингибируют образование рецептором 1Ь-17КА либо гомомерного, либо гетеромерного функционального рецепторного комплекса, такого, но без ограничения, как комплекс 1Е-17КА/1Ь-17КС, и, необязательно, связывание Ш-17А и/или Ш-17Е или гетеромера 1Ь-17А/1Ь-17Е с 1Б-17КА или с 1Б-17КА гетеромерных рецепторным комплексом.
Антигенсвязывающие белки по изобретению специфически связываются с 1Ь-17КА. Выражение специфически связывается (связывает) по данному описанию означает, что антигенсвязывающий белок предпочтительно связывает 1Ь-17КА по сравнению с другими белками. В некоторых вариантах изобретения специфически связывается (связывает) означает, что антигенсвязывающие белки для 1Ь-17КА (белки, связывающие этот антиген) обладают повышенной аффинностью к 1Ь-17КА по сравнению с другими белками. Например, величина константы диссоциации составляет < 10-7-10-11 М, или <10-8-<10-10 М, или <10-9-<10-10 М.
Понятно, что когда даётся ссылка на различные варианты антител к 1Ь-17КА по данному описанию, она также относится к их 1Ь-17КА-связывающим фрагментам. 1Ь-17КА-связывающий фрагмент включает любые фрагменты или домены антител по данному описанию, которые сохраняют способность специфически связываться с 1Ь-17КА. Указанные 1Ь-17КА-связывающие фрагменты могут находиться в любом каркасе (скелете) по данному описанию. Указанные 1Ь-17К.А-связывающие фрагменты также об
- 3 019397 ладают способностью ингибировать активацию 1Ь-17КА, как представлено в ходе описания.
В вариантах изобретения, в которых 1Ь-17КА антигенсвязывающий белок применяют для терапевтических целей, одним признаком антигенсвязывающего белка для 1Ь-17КА является то, что он может ингибировать связывание 1Ь-17А и/или 1Ь-17Р с 1Ь-17КА и одну или более биологических активностей 1Ь-17КА или опосредованных 1Ь-17КА. Такие антитела считают нейтрализующими антителами вследствие их способности ингибировать связывание 1Ь-17А и/или 1Ь-17Р с 1Ь-17КА и передачу сигнала и/или биологическую активность 1Ь-17КА. В этом случае антигенсвязывающий белок специфически связывает 1Ь-17КА и ингибирует связывание 1Ь-17А и/или 1Ь-17Р с 1Ь-17КА, примерно, на 10-100%, а именно по меньшей мере примерно на 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72,73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более (например, по определению степени связывания в ίη νίΐτο конкурентном анализе связывания по данному описанию). Например, нейтрализующую способность антител к 1Ь-17КА можно тестировать, проверяя их на продуцирование 1Ь-6 в анализе фибробластов крайней плоти (НРР) человека (см. примеры 8 и 9), или в любом подходящем анализе, известном в уровне техники. Примеры, только с целью иллюстрации, дополнительной биологической активности 1Ь-17КА (например, аналитические показатели) для проверки ингибирования передачи 1Ь-17КА сигнала и/или биологической активности включают ίη νίίτο и/или ίη νίνο измерение (определение) одного или более факторов из группы: 1Ь-8, СХСЬ1, СХСЬ2, 6М-С8Р, 6-С8Р, М-С8Р, ΙΕ-1β, ΤΝΡα, НАХК-Р. Ь1Р, Р6Е2, 1Ь-12; ММР (такие, но без ограничения, как ММР3 и ММР9), ΟΚΌα, ΝΟ и/или С-(концевой) телопептид и т.п.
Варианты антигенсвязывающих белков имеют (содержат) скелетную (каркасную) структуру, различным образом определяемую в данном описании, с одной или более гипервариабельных областей (СОЯ). Варианты антигенсвязывающих белков имеют (содержат) каркасную структуру с одним или более вариабельных доменов, либо в тяжёлой, либо в лёгкой цепи. Варианты изобретения включают антитела, которые содержат вариабельную область лёгкой цепи, выбранную из группы, состоящей из последовательностей с АМЬ1 по АМЬ26 (8ЕО ΙΌ N0:27- 53, соответственно, причём АМЬ23 имеет два варианта - 8Е0 ΙΌ ΝΟ: 49 и 50), и/или вариабельную область тяжёлой цепи, выбранную из группы, состоящей из последовательностей с АМН1 по АМН26 (8Р0 ΙΌ ΝΟ: 1- 26, соответственно), и их фрагменты, производные, мутеины и варианты.
Другие примеры предусматриваемых каркасных структур включают: фибронектин, неокарзиностатин (псосаг/1по51а11п) СВМ4-2, липокалины, Т-клеточный рецептор, домен белка-А (белок Ζ), ΙιηΑ ТРЯ белки, домены цинковых пальцев, рУШ, птичий панкреатический полипептид, ССШ, \ν\ν домен, 8гсгомологичный домен 3, ΡΌΖ домены, Бета- лактамаза ТЕМ-1, тиоредоксин, нуклеаза стафилококков, домены РНО-пальцев, СЬ-2, ΒΡΤΙ, ΛΡΡΙ, НР8ТР экотин, БАСЛ-ОР ΕΌΤΙ, МТЕП, токсины скорпионов, пептид насекомых дефензин-А, ЕЕТЕП, М1П-23, СВЭ, РВР, цитохром Ь-562, домены Ь61 рецептора, гаммакристаллин, убиквитин, трансферрин и/или лектиноподобные домены С-типа.
Аспекты изобретения включают антитела, содержащие следующие вариабельные домены: АМЬ1/АМН1 (8РР) ΙΌ ΝΟ: 2ЖРС) П) ΝΟ: 1), АМ]Д/АМН2 (8РР) ΙΌ ΝΟ: 28/8РО ΙΌ ΝΟ: 2), АМ]Д/АМН3 (8РР) ΙΌ ΝΟ: 29/8ЕР ΙΌ ΝΟ: 3), АМЬ4/АМН4 (8РО ΙΌ ΝΟ: 30/8ЕР ΙΌ ΝΟ: 4), АМ]Д/АМН5 (8РО ΙΌ ΝΟ: 3 1/8РО ΙΌ ΝΟ: 5), АМЬ6/АМН6 (8РР) ΙΌ ΝΟ: 32/8РО ΙΌ ΝΟ: 6), АМЬ7/АМН7 (8РР) ΙΌ ΝΟ: 33/8ЕР ΙΌ ΝΟ: 7), АМЬ8/АМН8 (8РР) ΙΌ ΝΟ: 34/8РО ΙΌ ΝΟ: 8), АМЬ9/АМН9
АМЬ10/АМН10 АМЬ12/АМН12 АМЬ14/АМН14 АМЬ16/АМН16 АМЬ18/АМН18 АМЬ20/АМН20
АМЬ22/АМН22 (8РР) ΙΌ ΝΟ: 48/8РО ΙΌ ΝΟ: 22), АМ]Д3/АМН23 (8РР) ΙΌ ΝΟ: 49 или 8РР) ΙΌ ΝΟ: 50/8РО ΙΌ ΝΟ: 23), АМЬ24/АМН24 (8РР) ΙΌ ΝΟ: 51/НРО ΙΌ ΝΟ: 24), АМ^б/АМ^б (8РР) ΙΌ ΝΟ: 52/8РО ΙΌ ΝΟ: 25), АМ^26/ΛМН26 (8Р0 ΙΌ NΟ:53/8Е^ ΙΌ ΝΟ: 26) и их комбинации, а также их фрагменты, производ (8Ер (8Ер (8Ер (8Ер (8Ер (8Ер
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΝΟ:
N0: ΝΟ:
ΝΟ: ΝΟ: ΝΟ:
36/8Ер
38/8ЕР
40/8Ер
42/8Ер
44/8Ер
46/8Ер
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΝΟ: ΝΟ: ΝΟ:
ΝΟ: ΝΟ: ΝΟ:
10), АМЪ11/АМН11
12), АМЪ13/АМН13
14), АМЪ15/АМН15
16), АМЪ17/АМН17
18), АМЪ19/АМН19
20), АМЪ21/АМН21 (8Ер (8Ер (8Ер (8Ер (8Ер (8Ер (8Ер
ΙΌ ΙΌ ΙΌ ΙΌ ΙΌ ΙΌ ΙΌ
ΝΟ: ΝΟ: ΝΟ: ΝΟ: ΝΟ: ΝΟ: ΝΟ:
35/8Ер
37/8ЕР
39/8ЕР
41/8Ер
43/8Ер
45/8Ер
47/8Ер
ΙΌ ΝΟ: 9),
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΝΟ: ΝΟ: ΝΟ:
ΝΟ: ΝΟ:
ΝΟ:
11),
13),
15),
17),
19),
21), ные, мутеины и их варианты.
В другом варианте изобретения первая аминокислотная последовательность содержит СОЯ3, СОЯ2 и СОЯ1, и вторая аминокислотная последовательность содержит СОЯ3, СЭВ2 и СЭВ1 из табл. 1.
В другом варианте изобретения антигенсвязывающий белок содержит: А) аминокислотную последовательность тяжёлой цепи, которая включает по меньшей мере одну область из Н-СПЯР Н-СОЯ2 или Н-СЭЯ3 из последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8Р0 ΙΌ ΝΟ: 1-26; и/или Б) аминокислотную последовательность лёгкой цепи, которая включает по меньшей мере одну область из ЬСЭВР Ь-СПЯ2 или Ь-СПЯ3 из последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8Р0 ΙΌ ΝΟ: 2753.
В другом варианте антигенсвязывающий белок содержит А) аминокислотную последовательность тяжёлой цепи, которая включает Н-СЭВР Н-СОЯ2 и Н-СОЯ3 любой из 8Р0 ΙΌ ΝΟ: 1-26; и Б) амино
- 4 019397 кислотную последовательность лёгкой цепи, которая включает Ь-СЭК!, Ь-СПК.2 и Ь-СОКЗ любой из ЖО ΙΌ N0: 27- 53. В другом варианте антигенсвязывающий белок содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентична аминокислотной последовательности тяжёлой цепи, выбранной из группы, состоящей из ЖО ΙΌ N0: 1-26, или аминокислотной последовательности лёгкой цепи, выбранной из группы, состоящей из ЖО ΙΌ N0: 27- 53.
В некоторых вариантах изобретения области СОК включают не более одного (одной), двух, трёх, четырёх, пяти или шести аминокислотных добавлений, делеций или замен из Η-Ε.ΌΒ1 (т.е., СЭЕ1 тяжёлой цепи, и т.д.), Н-СОК2, Н-СОК3, Ь-СОК1 (т.е., Ε.ΌΕ1 лёгкой цепи, и т.д.), Ь-СОК2 и Ь-СОК3, и их фрагменты, производные, мутеины и варианты.
Аспекты изобретения включают антитела, содержащие вариабельную область тяжёлой цепи, выбранную из группы, состоящей из ЖО ΙΌ N0: 1-26. Аспекты изобретения включают антитела, содержащие вариабельную область тяжёлой цепи, выбранную из группы, состоящей из 8Ε0 ΙΌ N0: 27-53. Аспекты изобретения включают антитела, содержащие вариабельную область тяжёлой цепи, выбранную из группы, состоящей из 8Ε0 ГО N0: 1-26, имеющую не более одного (одной), двух, трёх, четырёх, пяти или шести аминокислотных добавлений, делеций или замен. Аспекты изобретения включают антитела, содержащие вариабельную область лёгкой цепи, выбранную из группы, состоящей из ЖО ΙΌ N0: 27-53, имеющую не более одного (одной), двух, трёх, четырёх, пяти или шести аминокислотных добавлений, делеций или замен. Аспекты изобретения включают антитела, содержащие вариабельную область тяжёлой цепи, выбранную из группы, состоящей из ЖО ΙΌ N0: 1 -26, имеющую не более одного (одной), двух, трёх, четырёх, пяти или шести аминокислотных добавлений, делеций или замен, и вариабельную область лёгкой цепи, выбранную из группы, состоящей из ЖО ΙΌ N0: 27 -53, имеющую не более одного (одной), двух, трёх, четырёх, пяти или шести аминокислотных добавлений, делеций или замен.
В других вариантах изобретения вариабельные домены (области) тяжёлой и лёгкой цепи антигенсвязывающих белков определяются тем, что они имеют определённый процент идентичности с эталонным вариабельным доменом тяжёлой и/или лёгкой цепи. Например, антигенсвязывающий белок содержит А) аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжёлой цепи, которая по меньшей мере на 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентична аминокислотной последовательности тяжёлой цепи, выбранной из группы, состоящей из ЖО ΙΌ N0: 1-26; и Б) аминокислотную последовательность вариабельного домена лёгкой цепи, которая по меньшей мере на 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентична аминокислотной последовательности лёгкой цепи, выбранной из группы, состоящей из ЖО ΙΌ N0: 27-53.
Аспекты изобретения включают: вариант изобретения 1: выделенное антитело, представляющее собой моноклональное антитело или его фрагмент, связывающий ΙΓ-17 рецептор А, которое не является полностью мышиным и которое специфически связывает ΙΓ-17 рецептор А и ингибирует связывание ЕБ17А с указанным рецептором и активацию указанного рецептора. Вариант изобретения 2: антитело по варианту изобретения 1, отличающееся тем, что указанное антитело дополнительно ингибирует связывание ΙΓ-17Γ с указанным рецептором и активацию указанного рецептора. Вариант изобретения 3: антитело по варианту изобретения 1, отличающееся тем, что указанное антитело выбирают из группы, состоящей из: а. гуманизированного антитела; б. химерного антитела; в. рекомбинантного антитела; г. одноцепочечного антитела; д. диатела; е. триатела; ж. тетратела; з. фрагмента ГаЬ; и. фрагмента Г(аЬ')2; к. Ι§Ό антитела; л. ΙβΕ антитела; м. Ι§Μ антитела; н. Ι§01 антитела; о. ΙβΟ2 антитела; п. ΙβΟ3 антитела; и р. ΙβΟ4 антитела.
Вариант изобретения 4: антитело по варианту изобретения 3, отличающееся тем, что указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
А. а) последовательности вариабельного домена лёгкой цепи по меньшей мере на 80% идентичной последовательности вариабельного домена лёгкой цепи АМЪ1- 26 (8Ε0 ΙΌ N0: 27-53, соответственно);
б) последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи по меньшей мере на 80% идентичной последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи АМн1- 26 (8Ε0 ΙΌ N0: 1-26, соответственно); или
в) вариабельного домена лёгкой цепи по п. (а) и вариабельного домена тяжёлой цепи по п. (б); и
Б. СЭКЕ СЭВ2. СЭЕ3 лёгкой цепи и СЭКЕ СЭВ2. СЭЕ3 тяжёлой цепи, которые отличаются в целом не более чем на три аминокислотные добавления, замены и/или делеции в каждом СОК от следующих последовательностей:
а) СОК 1 (ЖГ) ΙΌ N0: 185), Ε.ΌΒ2 (ЖГ) ΙΌ N0: 186), Ε.ΌΒ3 (ЖГ) ΙΌ N0: 187) лёгкой цепи и Ε.ΌΒ1 (ЖГ) ΙΌ N0: 107), Ε.ΌΒ2 (ЖГ) ΙΌ N0: 108), Ε.ΌΒ3 (ЖГ) ΙΌ N0: 109) тяжёлой цепи антитела АМ-1;
б) Ε.ΌΒ1 (ЖГ) ΙΌ N0: 188), Ε.ΌΒ2 (ЖГ) ΙΌ N0: 189), Ε.ΌΒ3 (ЖГ) ΙΌ N0: 190) лёгкой цепи и Ε.ΌΒ1 (ЖГ) ΙΌ N0: 110), С0К2 (ЖЕ) ΙΌ N0: 111), С1Ж (ЖЕ) ΙΌ N0: 112) тяжёлой цепи антитела АМ-2;
в) Ε.ΌΒ1 (ЖГ) ΙΌ N0: 191), Ε.ΌΒ2 (ЖГ) ΙΌ N0: 192), Ε.ΌΒ3 (ЖГ) ΙΌ N0: 193) лёгкой цепи и Ε.ΌΒ1 (ЖГ) ΙΌ N0: 113), С0К2 (ЖГ) ΙΌ N0: 114), С1Ж (ЖГ) ΙΌ N0: 115) тяжёлой цепи антитела АМ-3;
г) Ε.ΌΒ1 (ЖГ) ΙΌ N0: 194), Ε.ΌΒ2 (ЖГ) ΙΌ N0: 195), Ε.ΌΒ3 (ЖГ) ΙΌ N0: 196) лёгкой цепи и Ε.ΌΒ1 (ЖГ) ΙΌ N0: 116), С0К2 (ЖГ) ΙΌ N0: 117), С1Ж (ЖГ) ΙΌ N0: 118) тяжёлой цепи антитела АМ-4;
- 5 019397
д) ΟΌΚ1 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 197), (ΌΙ12 (8Ер ΙΌ N0: 198), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 199) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ΕΕ) II) N0: 119), (ΌΙ12 (^ΕΟ ΙΌ N0: 120), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 121) тяжёлой цепи антитела АМ-5;
е) ΓΙ)Ι1Ι (^ЕЕ) ΙΌ N0: 200), (ΌΙ12 (8Ер ΙΌ N0: 201), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 202) лёгкой цепи и (ΌΙ1Ι (^ΕΕ) ΙΌ N0: 122), (ΌΙ12 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 123), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 124) тяжёлой цепи антитела АМ-6;
ж) 0ΌΚ1 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 203), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 204), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 205) лёгкой цепи и (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 125), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 126), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 127) тяжёлой цепи антитела АМ-7;
з) (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 206), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 207), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 208) лёгкой цепи и (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 128), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 129), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 130) тяжёлой цепи антитела АМ-8;
и) (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 209), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 210), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 211) лёгкой цепи и (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 131), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 132), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 133) тяжёлой цепи антитела АМ-9;
к) (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 212), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 213), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 214) лёгкой цепи и (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 134), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 135), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 136) тяжёлой цепи антитела АМ-10;
л) (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 215), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 216), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 217) лёгкой цепи и (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 137), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 138), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 139) тяжёлой цепи антитела АМ-11;
м) (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 218), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 219), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 220) лёгкой цепи и (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 140), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 141), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 142) тяжёлой цепи антитела АМ-12;
н) (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 221), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 222), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 223) лёгкой цепи и (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 143), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 144), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 145) тяжёлой цепи антитела АМ-13;
о) (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 224), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 225), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 226) лёгкой цепи и (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 146), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 147), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 148) тяжёлой цепи антитела АМ-14;
п) (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 227), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 228), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 229) лёгкой цепи и (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 149), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 150), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 151) тяжёлой цепи антитела АМ-15;
р) (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 230), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 231), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 232) лёгкой цепи и (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 152), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 153), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 154) тяжёлой цепи антитела АМ-16;
с) (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 233), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 234), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 235) лёгкой цепи и (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 155), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 156), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 157) тяжёлой цепи антитела АМ-17;
т) (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 236), (‘1)112 (^ЕЕ) ΕΌ N0: 237), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 238) лёгкой цепи и (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 158), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 159), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 160) тяжёлой цепи антитела АМ-18;
у) (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 239), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 240), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 241) лёгкой цепи и (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 161), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 162), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 163) тяжёлой цепи антитела АМ-19;
ф) (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 242), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 243), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 244) лёгкой цепи и (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 164), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 165), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 166) тяжёлой цепи антитела АМ-20;
х) (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 245), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 246), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 247) лёгкой цепи и (‘1)111 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 167), (‘1)112 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 168), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 169) тяжёлой цепи антитела АМ-21;
ц) 0ΌΚ1 (8ЕР ΙΌ N0: 248), 0ΌΚ2 (8Ер ΙΌ N0: 249), 0ΌΚ3 (8Ер ΙΌ N0: 250) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ЕО ΙΌ N0: 170), 0ΌΚ2 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 171), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 172) тяжёлой цепи антитела АМ-22;
ч) 0ΌΚ1 (8ЕР ΙΌ N0: 251), 0ΌΚ2 (8Ер ΙΌ N0: 252), 0ΌΚ3 (8Ер ΙΌ N0: 253) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ЕО ΙΌ N0: 173), 0ΌΚ2 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 174), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
ш) 0ΌΚ1 (8ЕР ΙΌ N0: 254), 0ΌΚ2 (8Ер ΙΌ N0: 255), 0ΌΚ3 (8Ер ΙΌ N0: 256) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ЕО ΙΌ N0: 173), 0ΌΚ2 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 174), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
щ) 0ΌΚ1 (8ЕР ΙΌ N0: 257), 0ΌΚ2 (8Ер ΙΌ N0: 258), 0ΌΚ3 (8Ер ΙΌ N0: 259) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ЕО ΙΌ N0: 176), 0ΌΚ2 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 177), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 178) тяжёлой цепи антитела АМ-24;
э) 0ΌΚ1 (8ЕР ΙΌ N0: 260), 0ΌΚ2 (8Ер ΙΌ N0: 261), 0ΌΚ3 (8Ер ΙΌ N0: 262) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ЕО ΙΌ N0: 179), 0ΌΚ2 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 180), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 181) тяжёлой цепи антитела АМ-25; или
ю) 0ΌΚ1 (8ЕР ΙΌ N0: 263), 0ΌΚ2 (8Ер ΙΌ N0: 264), 0ΌΚ3 (8Ер ΙΌ N0: 265) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ЕО ΙΌ N0: 182), 0ΌΚ2 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 183), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 184) тяжёлой цепи антитела АМ-26; причём указанное антитело специфически связывает ΙΌ-17 рецептор А.
Вариант изобретения 5: антитело по варианту изобретения 4, отличающееся тем, что указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
а) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ1/АМН1 (5>Е0 ΙΌ N0: 27/8ЕР ΙΌ N0: 1);
б) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ2/АМН2 (8Е0 ΙΌ N0: 28/8ЕР ΙΌ N0:2);
в) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ3/АМН3 (8Е0 ΙΌ N0: 29/8ЕР ΙΌ N0: 3);
г) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ4/АМН4 (8Е0 ΙΌ N0: 30/8ЕР ΙΌ N0: 4);
д) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ5/АМН5 (8Е0 ΙΌ N0: 31/8ЕР ΙΌ N0: 5);
е) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ6/АМН6 (8Е0 ΙΌ N0: 32/8ЕР ΙΌ N0: 6)
ж) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ7/АМН7 (8Е0 ΙΌ
- 6 019397
N0: 33/δΕρ ΙΌ N0: 7);
3) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМь8/АМн8 (8Ε0 ΙΌ N0: 34/^ΕΟ ΙΌ N0: 8);
и) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ9/АМн9 (8Ε0 ΙΌ N0: 35/δΕρ ΙΌ N0: 9);
к) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ10/АМн10 (8Ε0 ΙΌ N0: 36/δΕρ ΙΌ N0: 10);
л) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ11/АМн11 (8Ε0 ΙΌ N0: 37/δΕρ ΙΌ N0: 11);
м) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМь12/АМн12 (8Ε0 ΙΌ N0: 38/δΕρ ΙΌ N0: 12);
н) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМь13/АМн13 (8Ε0 ΙΌ N0: 39/8ΕΡ ΙΌ N0: 13);
о) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМь14/АМн14 (8Ε0 ΙΌ N0: 40/^ΕΟ ΙΌ N0: 14);
п) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ15/АМн15 (8Ε0 ΙΌ N0: 41/8ΕΡ ΙΌ N0: 15);
р) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ6/АМН16 (8Ε0 ΙΌ N0: 42/^ΕΟ ΙΌ N0: 16);
с) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ17/АМн17 (8Ε0 ΙΌ N0: 43/8ΕΡ ΙΌ N0: 17);
т) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМь18/АМн18 (8Ε0 ΙΌ N0: 44/^ΕΟ ΙΌ N0: 18);
у) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМь19/АМн19 (8Ε0 ΙΌ N0: 45/^ΕΟ ΙΌ N0: 19);
ф) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ20/АМн20 (8Ε0 ΙΌ N0: 46/^ΕΟ ΙΌ N0: 20);
х) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ21/АМн21 (8Ε0 ΙΌ N0: 47/^ΕΟ ΙΌ N0: 21);
ц) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ22/АМн22 (8Ε0 ΙΌ N0: 48/^ΕΟ ΙΌ N0: 22);
4) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМь23/АМн23 (8Ε0 ΙΌ N0: 49 или ^ΕΕ) ΙΌ N0: 50/8ΕΡ ΙΌ N0: 23);
ш) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМь24/АМн24 (8Ε0 ΙΌ N0: 51/^ΕΟ ΙΌ N0: 24);
щ) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМь25/АМн25 (8Ε0 ΙΌ N0: 52/^ΕΟ ΙΌ N0: 25); и
э) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ26/АМн26 (8Ε0 ΙΌ N0: 53/8ΕΟ ΙΌ N0: 26); причём указанное антитело специфически связывает ΙΕ-17 рецептор А.
Вариант изобретения 6: антитело по варианту изобретения 4, отличающееся тем, что указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
а) СЕН 1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 185), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 186), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 187) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 107), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 108), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 109) тяжёлой цепи антитела АМ-1;
б) 0ΌΚ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 188), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 189), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 190) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 110), (ΌΕ2 (^ΕΟ ΙΌ N0: 111), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 112) тяжёлой цепи антитела АМ-2;
в) (ΌΕ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 191), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 192), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 193) лёгкой цепи и (ΌΕ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 113), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 114), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 115) тяжёлой цепи антитела АМ-3;
г) 0ΌΚ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 194), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 195), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 196) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 116), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 117), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 118) тяжёлой цепи антитела АМ-4;
д) (ΌΕ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 197), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 198), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 199) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 119), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 120), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 121) тяжёлой цепи антитела АМ-5;
е) (ΌΕ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 200), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 201), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 202) лёгкой цепи и (ΌΕ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 122), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 123), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 124) тяжёлой цепи антитела АМ-6;
ж) 0ΌΚ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 203), 0ΌΚ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 204), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 205) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 125), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 126), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 127) тяжёлой цепи антитела АМ-7;
з) (ΌΕ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 206), 0ΌΚ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 207), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 208) лёгкой цепи и (ΌΕ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 128), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 129), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 130) тяжёлой цепи антитела АМ-8;
и) (ΌΕ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 209), 0ΌΚ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 210), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 211) лёгкой цепи и (ΌΕ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 131), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 132), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 133) тяжёлой цепи антитела АМ-9;
к) (ΌΕ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 212), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 213), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 214) лёгкой цепи и (ΌΕ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 134), (ΌΕ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 135), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 136) тяжёлой цепи антитела АМ-10;
л) 0ΌΚ1 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 215), 0ΌΚ2 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 216), 0ΌΚ3 (^ΕΕ) ΙΌ N0: 217) лёгкой цепи и 0ΌΚ1
- 7 019397 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 137), 0ΌΚ2 (8Ер ΙΌ N0: 138), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 139) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-11;
м) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 218), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 219), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 220) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 140), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 141), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 142) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-12;
н) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 221), 0ΌΚ2 (8Ερ ΙΌ N0: 222), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 223) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 143), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 144), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 145) тяжёлой цепи антитела АМ-13;
о) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 224), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 225), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 226) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 146), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 147), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 148) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-14;
п) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 227), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 228), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 229) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 149), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 150), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 151) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-15;
ρ) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 230), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 231), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 232) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 152), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 153), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 154) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-16;
с) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 233), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 234), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 235) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 155), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 156), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 157) тяжёлой цепи антитела АМ-17;
т) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 236), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 237), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΕΌ N0: 238) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 158), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 159), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 160) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-18;
у) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 239), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 240), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 241) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 161), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 162), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 163) тяжёлой цепи антитела АМ-19;
ф) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 242), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 243), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 244) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 164), 0ΌΚ2 (5ΕΟ ΙΌ N0: 165), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 166) тяжёлой цепи антитела АМ-20;
х) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 245), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 246), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 247) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 167), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 168), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 169) тяжёлой цепи антитела АМ-21;
ц) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 248), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 249), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 250) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 170), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 171), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 172) тяжёлой цепи антитела АМ-22;
ч) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 251), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 252), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 253) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 173), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 174), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
ш) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 254), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 255), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 256) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 173), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 174), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
щ) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 257), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 258), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 259) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 176), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 177), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 178) тяжёлой цепи антитела АМ-24;
э) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 260), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 261), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 262) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 179), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 180), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 181) тяжёлой цепи антитела АМ-25; или
ю) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 263), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 264), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 265) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 182), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 183), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 184) тяжёлой цепи антитела АМ-26; причём указанное антитело специфически связывает ΙΌ-17 рецептор А.
Вариант изобретения 7: антитело по варианту изобретения 2, отличающееся тем, что указанное антитело выбирают из группы, состоящей из: а) гуманизированного антитела; б) химерного антитела; в) рекомбинантного антитела; г) одноцепочечного антитела; д) диатела; е) триатела; ж) тетратела; з) фрагмента ЕаЬ; и. фрагмента Е(аЬ')2; к) ΙβΌ антитела; л) ΙβΕ антитела; м) ΙβΜ антитела; н) ΙβΟ1 антитела; о) ΙβΟ2 антитела; п) ΙβΟ3 антитела; и ρ) ΙβΟ4 антитела.
Вариант изобретения 8: антитело по варианту изобретения 7, отличающееся тем, что указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
А. а) последовательности вариабельного домена лёгкой цепи, по меньшей мере на 80% идентичной последовательности вариабельного домена лёгкой цепи ΑΜΣ14,18,19 и 22 (8Ε0 ΙΌ N0: 40,44,45 и 48, соответственно);
б) последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи, по меньшей мере на 80% идентичной последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи АМН14,18,19 и 22 (8Ε0 ΙΌ N0: 14, 18, 19 и 22, соответственно); или
в) вариабельного домена лёгкой цепи по п. (а) и вариабельного домена тяжёлой цепи по п. (б); и
Б. 0ΌΚ1, 0ΌΚ2, 0ΌΚ3 лёгкой цепи и 0ΌΚ1, 0ΌΚ2, 0ΌΚ3 тяжёлой цепи, которые отличаются в целом не более чем на три аминокислотные добавления, замены и/или делеции в каждом ί'ΌΕ от следующих последовательностей:
а) СЕН 1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 224), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 225), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 226) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 146), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 147), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 148) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-14;
б) ΟΌΚ 1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 236), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 237), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 238) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 158), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 159), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 160) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-18;
в) ΟΌΚ 1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 239), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 240), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 241) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 161), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 162), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 163) тяжёлой цепи антитела АМ-19; или
г) СЕН 1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 248), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 249), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 250) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 170), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 171), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 172) тяжёлой цепи антитела ΑΜ- 22; и
В) а) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜ^4/ΑΜΗ14 (5>Ε0 ΙΌ N0: 40/5ΕΟ ΙΌ N0: 14);
б) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜΕ18/ΑΜΗ18 (8Ε0
- 8 019397
ΙΌ N0: 44/8ΕΟ ΙΌ N0: 18);
в) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ19/АМн19 (8Ε0 ГО N0: 45/8ΕΟ ГО N0: 19); или
г) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ22/АМн22 (8Ε0 ГО N0: 48/8ΕΟ ГО N0: 22); причём указанное антитело специфически связывает ГО-17 рецептор А.
Вариант изобретения 9: выделенное антитело или его фрагмент, связывающий ГО-17 рецептор А, содержащее
а) область СГОГО тяжёлой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) Х|УС18. где Х1 выбирают из группы, состоящей из В, 8 и С;
б) область СГОР2 тяжёлой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) ХУХХХХ^УТХХАОХ.-ХяОС, где Х1 выбирают из группы, состоящей из А, Х2 выбирают из группы, состоящей из N 8 и К, Х3 выбирают из группы, состоящей из N и К, Х4 выбирают из группы, состоящей из К и N и Х5 выбирают из группы, состоящей из Ь и Р;
в) область СГОГО3 тяжёлой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) Х1ОРХ2Х3ОУ, где Х1 выбирают из группы, состоящей из В и К, Х2 выбирают из группы, состоящей из Υ, V и А, и Х3 выбирают из группы, состоящей из Р и Ь;
ίί) Χ1ρΕΧ2ΡΌΥ, где Х1 выбирают из группы, состоящей из В и К, и Х2 выбирают из группы, состоящей из Υ и V;
г) область СГОВ1 лёгкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) ВА8р8Х1Х2Х3Х4ЬА, где Х1 выбирают из группы, состоящей из V и I, Х2 выбирают из группы, состоящей из I и 8, Х3 выбирают из группы, состоящей из 8 и Т, Х4 выбирают из группы, состоящей из N и 8, и Х5 выбирают из группы, состоящей из А и N и ίί) ВА8О8Х188УЕА, где Х1 выбирают из группы, состоящей из V и I;
д) область СГОР2 лёгкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) Х1Х28ТВАХ3, где Х1 выбирают из группы, состоящей из С и Ό, Х2 выбирают из группы, состоящей из А и Т, и Х3 выбирают из группы, состоящей из Т и А, и ίί) Х1А8ТВАХ2, где Х1 выбирают из группы, состоящей из С и Ό, Х2 выбирают из группы, состоящей из А и Т, и
е) область СГОРЗ лёгкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) ООУОХАУРРТ, где Х1 выбирают из группы, состоящей из N Т и I; причём указанное антитело специфически связывает ГО-17 рецептор А).
Вариант изобретения 10: антитело по варианту изобретения 9, причём указанное антитело содержит:
а) аминокислотную последовательность СГОЯ1 тяжёлой цепи, содержащую ХХСХ, где Х1 выбирают из группы, состоящей из В, 8 и С;
б) аминокислотную последовательность СГОЯ2 тяжёлой цепи, содержащую ХУХХХХ^УТХХАОХ.-ХяОС, где Х1 выбирают из группы, состоящей из А, Х2 выбирают из группы, состоящей из N 8, и К, Х3 выбирают из группы, состоящей из N и К, Х4 выбирают из группы, состоящей из К и N и Х5 выбирают из группы, состоящей из Ь и Р;
в) аминокислотную последовательность СГОРЗ тяжёлой цепи, содержащую Х1рРХ2РОУ, где Х1 выбирают из группы, состоящей из В и К, и Х2 выбирают из группы, состоящей из Υ, V;
г) аминокислотную последовательность СЭР1 лёгкой цепи, содержащую РА8О8Х188УЕА, где Х1 выбирают из группы, состоящей из V и I;
д) аминокислотную последовательность СГОР2 лёгкой цепи, содержащую Х1А8ТВАХ2, где Х1 выбирают из группы, состоящей из С и Ό, и Х2 выбирают из группы, состоящей из А и Т; и
е) аминокислотную последовательность С'ГОРЗ лёгкой цепи, содержащую ^^У^X|\VΡ^Т. где Х1 выбирают из группы, состоящей из N Т и I; причём указанное антитело специфически связывает ГО-17 рецептор А.
Вариант изобретения 11: антитело по варианту изобретения 9, причём указанное антитело содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
А. а) последовательности вариабельного домена лёгкой цепи, которая, по меньшей мере, на 80% идентична последовательности вариабельного домена лёгкой цепи АМЪ12, 14, 16, 17, 19 и 22 (8Ε0 ГО N0: 38, 40, 42, 43, 45 и 48, соответственно);
б) последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи, которая, по меньшей мере, на 80% идентична последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ12, 14, 16, 17, 19 и 22 (8Ε0 ГО N0: 12, 14, 16, 17, 19 и 22, соответственно); или
- 9 019397
в) вариабельного домена лёгкой цепи по п. (а) и вариабельного домена тяжёлой цепи по п.(б);
Б. СЭК1. СЭК2. СЭК3 лёгкой цепи и СЭК1. СЭК2. СЭК3 тяжёлой цепи, которые отличаются в целом не более чем на три аминокислотные добавления, замены и/или делеции в каждом СОЯ от следующих последовательностей:
а) СПЯ 1 (БЕР ГО N0: 218), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 219), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 220) лёгкой цепи и СПЯ1 (БЕР ГО N0: 140), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 141), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 142) тяжёлой цепи антитела АМ-12;
б) СПЯ 1 (БЕр ГО N0: 224), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 225), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 226) лёгкой цепи и СПЯ1 (БЕр ГО N0: 146), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 147), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 148) тяжёлой цепи антитела АМ-14;
в) СПЯ 1 (БЕр ГО N0: 230), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 231), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 232) лёгкой цепи и СПЯ1 (БЕр ГО N0: 152), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 153), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 154) тяжёлой цепи антитела АМ-16;
г) СПЯ 1 (БЕр ГО N0: 233), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 234), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 235) лёгкой цепи и СПЯ1 (БЕр ГО N0: 155), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 156), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 157) тяжёлой цепи антитела АМ-17;
д) СПЯ 1 (БЕр ГО N0: 239), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 240), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 241) лёгкой цепи и СПЯ1 (БЕр ГО N0: 161), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 162), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 163) тяжёлой цепи антитела АМ-19; или
е) СПЯ 1 (БЕр ГО N0: 248), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 249), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 250) лёгкой цепи и СПЯ1 (БЕр ГО N0: 170), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 171), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 172) тяжёлой цепи антитела АМ-22; и
В. а) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ12/АМН12 (БЕр ГО N0: 38/БЕр ГО N0: 12);
б) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ14/АМН14 (БЕр ГО N0: 40/БЕр ГО N0: 14);
в) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ16/АМН16 (БЕр ГО N0: 42/БЕр ГО N0: 16);
г) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ17/АМН17 (БЕр ГО N0: 43/БЕр ГО N0: 17);
д) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ19/АМН19 (БЕр ГО N0: 45/БЕр ГО N0: 19);
е) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ22/АМН22 (БЕр ГО N0: 48/БЕр ГО N0: 22); причём указанное антитело специфически связывает 1Б-17 рецептор А.
Вариант изобретения 12: фармацевтическая композиция, содержащая антитело по варианту изобретения 4).
Вариант изобретения 14: антитело по варианту изобретения 4, отличающееся тем, что указанное антитело является производным указанного антитела.
Вариант изобретения 15: полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
А) а) последовательности вариабельного домена лёгкой цепи по меньшей мере на 80% идентичной последовательности вариабельного домена лёгкой цепи АМЪ1- 26 (БЕр ГО N0: 27-53, соответственно);
б) последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи по меньшей мере на 80% идентичной последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи АМН1-26 (БЕр ГО N0: 1-26, соответственно); или
в) вариабельного домена лёгкой цепи по п. (а) и вариабельного домена тяжёлой цепи по п. (б); и
Б. СПЯ1, СПЯ2, СПЯ3 лёгкой цепи и СПЯ1, СПЯ2, СПЯ3 тяжёлой цепи, которые отличаются в целом не более чем на три аминокислотные добавления, замены и/или делеции в каждом СПЯ от следующих последовательностей:
а) СПЯ 1 (БЕр ГО N0: 185), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 186), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 187) лёгкой цепи и СПЯ1 (БЕр ГО N0: 107), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 108), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 109) тяжёлой цепи антитела АМ-1;
б) СПЯ1 (БЕр ГО N0: 188), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 189), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 190) лёгкой цепи и СПЯ1 (БЕр ГО N0: 110), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 111), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 112) тяжёлой цепи антитела АМ-2;
в) СПЯ1 (БЕр ГО N0: 191), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 192), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 193) лёгкой цепи и СПЯ1 (БЕр ГО N0: 113), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 114), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 115) тяжёлой цепи антитела АМ-3;
г) СПЯ1 (БЕр ГО N0: 194), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 195), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 196) лёгкой цепи и СПЯ1 (БЕр ГО N0: 116), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 117), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 118) тяжёлой цепи антитела АМ-4;
д) СПЯ1 (БЕр ГО N0: 197), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 198), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 199) лёгкой цепи и СПЯ1 (БЕр ГО N0: 119), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 120), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 121) тяжёлой цепи антитела АМ-5;
е) СПЯ1 (БЕр ГО N0: 200), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 201), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 202) лёгкой цепи и СПЯ1 (БЕр ГО N0: 122), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 123), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 124) тяжёлой цепи антитела АМ-6;
ж) СПЯ1 (БЕр ГО N0: 203), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 204), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 205) лёгкой цепи и СПЯ1 (БЕр ГО N0: 125), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 126), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 127) тяжёлой цепи антитела АМ-7;
з) СПЯ1 (БЕр ГО N0: 206), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 207), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 208) лёгкой цепи и СПЯ1 (БЕр ГО N0: 128), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 129), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 130) тяжёлой цепи антитела АМ-8;
и) СПЯ1 (БЕр ГО N0: 209), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 210), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 211) лёгкой цепи и СПЯ1 (БЕр ГО N0: 131), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 132), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 133) тяжёлой цепи антитела АМ-9;
к) СПЯ1 (БЕр ГО N0: 212), СПЯ2 (БЕр ГО N0: 213), СПЯ3 (БЕр ГО N0: 214) лёгкой цепи и СПЯ1
- 10 019397 (5ЕЕ) ΙΌ N0: 134), (ΌΙ12 (8Ер ΙΌ N0: 135), 0ΌΚ3 (5ЕЕ) ΙΌ N0: 136) тяжёлой цепи антитела АМ-10;
л) (‘1)111 (5ЕЕ) ΙΌ N0: 215), (‘1)112 (8Ер ΙΌ N0: 216), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 217) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 137), (‘1)112 (5ЕС) ΙΌ N0: 138), 0ΌΚ3 (5ЕС) ΙΌ N0: 139) тяжёлой цепи антитела АМ-11;
м) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 218), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 219), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 220) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 140), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 141), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 142) тяжёлой цепи антитела АМ-12;
н) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 221), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 222), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 223) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 143), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 144), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 145) тяжёлой цепи антитела АМ-13;
о) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 224), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 225), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 226) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 146), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 147), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 148) тяжёлой цепи антитела АМ-14;
п) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 227), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 228), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 229) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 149), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 150), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 151) тяжёлой цепи антитела АМ-15;
р) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 230), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 231), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 232) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 152), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 153), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 154) тяжёлой цепи антитела АМ-16;
с) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 233), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 234), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 235) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 155), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 156), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 157) тяжёлой цепи антитела АМ-17;
т) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 236), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 237), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 238) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 158), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 159), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 160) тяжёлой цепи антитела АМ-18;
у) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 239), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 240), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 241) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 161), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 162), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 163) тяжёлой цепи антитела АМ-19;
ф) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 242), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 243), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 244) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 164), 0ΌΚ2 (5ЕО ΙΌ N0: 165), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 166) тяжёлой цепи антитела АМ-20;
х) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 245), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 246), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 247) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 167), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 168), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 169) тяжёлой цепи антитела АМ-21;
ц) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 248), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 249), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 250) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 170), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 171), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 172) тяжёлой цепи антитела АМ-22;
ч) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 251), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 252), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 253) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 173), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 174), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
ш) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 254), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 255), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 256) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 173), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 174), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
щ) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 257), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 258), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 259) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 176), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 177), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 178) тяжёлой цепи антитела АМ-24;
э) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 260), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 261), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 262) лёгкой цепи и (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 179), (‘1)112 (5Е() ΙΌ N0: 180), 0ΌΚ3 (5Е() ΙΌ N0: 181) тяжёлой цепи антитела АМ-25; или
ю) (‘1)111 (5Е() ΙΌ N0: 263), 0ΌΚ2 (8Ер ΙΌ N0: 264), 0ΌΚ3 (8Ер ΙΌ N0: 265) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ЕО ΙΌ N0: 182), 0ΌΚ2 (5ЕЕ) ΙΌ N0: 183), 0ΌΚ3 (5ЕЕ) ΙΌ N0: 184) тяжёлой цепи антитела АМ-26; причём указанный полипептид специфически связывает ΙΌ-17 рецептор А.
Вариант изобретения 16: полипептид по варианту изобретения 15, причём указанный полипептид содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
а) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ1/АМН1 (5>Е0 ΙΌ N0: 27/8ЕР ΙΌ N0: 1);
б) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ2/АМН2 (8Е0 ΙΌ N0: 28/8ЕР ΙΌ N0:2);
в) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ3/АМН3 (8Е0 ΙΌ N0: 29/8ЕР ΙΌ N0: 3);
г) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ4/АМН4 (8Е0 ΙΌ N0: 30/8ЕР ΙΌ N0: 4);
д) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ5/АМН5 (8Е0 ΙΌ N0: 31/8ЕР ΙΌ N0: 5);
е) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ6/АМН6 (8Е0 ΙΌ N0: 32/8ЕР ΙΌ N0: 6)
ж) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ7/АМН7 (8Е0 ΙΌ N0: 33/8ЕР ΙΌ N0: 7);
з) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ8/АМН8 (8Е0 ΙΌ N0: 34/8ЕР ΙΌ N0: 8);
и) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ9/АМН9 (8Е0 ΙΌ N0: 35/8ЕР ΙΌ N0: 9);
к) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ10/АМН10 (8Е0 ΙΌ N0: 36/8ЕР ΙΌ N0: 10);
л) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ11/АМН11 (8Е0 ΙΌ N0: 37/8ЕР ΙΌ N0: 11);
м) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМЪ12/АМН12 (8Е0 ΙΌ N0: 38/8ЕР ΙΌ N0: 12);
- 11 019397
н) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ13/АМн13 (8ЕО ГО N0: 39/8Ер ГО N0: 13);
о) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ14/АМн14 (8Е0 ГО N0: 40/^ЕО ГО N0: 14);
п) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ15/АМн15 (8Е0 ГО N0: 41/8ЕР ГО N0: 15);
р) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ16/АМн16 (8Е0 ГО N0: 42/^ЕО ГО N0: 16);
с) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ17/АМн17 (8Е0 ГО N0: 43/8ЕР ГО N0: 17);
т) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ18/АМн18 (8Е0 ГО N0: 44/^ЕО ГО N0: 18);
у) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ19/АМн19 (8Е0 ГО N0: 45/^ЕО ГО N0: 19);
ф) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ20/АМн20 (8Е0 ГО N0: 46/^ЕО ГО N0: 20);
х) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ21/АМн21 (8Е0 ГО N0: 4ЖЕО ГО N0: 21);
ц) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ22/АМн22 (8Е0 ГО N0: 48/^ЕО ГО N0: 22);
ч) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ23/АМн23 (8Е0 ГО N0: 49 или ^ЕС) ГО N0: 50/^ЕО ГО N0: 23);
ш) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ24/АМн24 (8Е0 ГО N0: 51/^ЕО ГО N0: 24);
щ) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ25/АМн25 (8Е0 ГО N0: 52/^ЕО ГО N0: 25); и
э) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ26/АМн26 (8Е0 ГО N0: 53/8ЕО ГО N0: 26); причём указанный полипептид специфически связывает 1Ь-17 рецептор А.
Вариант изобретения 17: полипептид по варианту изобретения 15, причём указанный полипептид содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
а) СЕН 1 (^ЕС) ΙΌ N0: 185), (ΌΕ2 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 186), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 187) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 107), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 108), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 109) тяжёлой цепи антитела АМ-1;
б) (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 188), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 189), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 190) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 110), (ΌΕ2 (^ЕО ΙΌ N0: 111), 0ΌΚ3 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 112) тяжёлой цепи антитела АМ-2;
в) (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 191), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 192), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 193) лёгкой цепи и (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 113), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 114), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 115) тяжёлой цепи антитела АМ-3;
г) СЕЕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 194), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 195), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 196) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 116), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 117), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 118) тяжёлой цепи антитела АМ-4;
д) (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 197), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 198), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 199) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 119), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 120), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 121) тяжёлой цепи антитела АМ-5;
е) (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 200), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 201), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 202) лёгкой цепи и (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 122), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 123), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 124) тяжёлой цепи антитела АМ-6;
ж) СЕЕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 203), 0ΌΚ2 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 204), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 205) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 125), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 126), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 127) тяжёлой цепи антитела АМ-7;
з) (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 206), 0ΌΚ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 207), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 208) лёгкой цепи и (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 128), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 129), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 130) тяжёлой цепи антитела АМ-8;
и) (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 209), 0ΌΚ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 210), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 211) лёгкой цепи и (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 131), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 132), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 133) тяжёлой цепи антитела АМ-9;
к) (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 212), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 213), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 214) лёгкой цепи и (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 134), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 135), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 136) тяжёлой цепи антитела АМ-10;
л) СЕЕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 215), 0ΌΚ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 216), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 217) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 137), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 138), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 139) тяжёлой цепи антитела АМ-11;
м) СЕЕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 218), 0ΌΚ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 219), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 220) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 140), (ΌΕ2 (^ЕЕ) ΙΌ N0: 141), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 142) тяжёлой цепи антитела АМ-12;
н) (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 221), 0ΌΚ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 222), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 223) лёгкой цепи и (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 143), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 144), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 145) тяжёлой цепи антитела АМ-13;
о) (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 224), 0ΌΚ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 225), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 226) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 146), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 147), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 148) тяжёлой цепи антитела АМ-14;
п) (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 227), 0ΌΚ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 228), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 229) лёгкой цепи и (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 149), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 150), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 151) тяжёлой цепи антитела АМ-15;
р) (ΌΕ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 230), 0ΌΚ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 231), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 232) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (^ЕС) ΙΌ N0: 152), (ΌΕ2 (^ЕС) ΙΌ N0: 153), 0ΌΚ3 (^ЕС) ΙΌ N0: 154) тяжёлой цепи антитела АМ-16;
- 12 019397
с) С1Ж1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 233), (ΌΕ2 (8Ер ΙΌ N0: 234), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 235) лёгкой цепи и (ΌΕ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 155), (ΌΕ2 (8Ер ΙΌ N0: 156), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 157) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-17;
т) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 236), (ΌΕ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 237), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 238) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 158), (ΌΕ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 159), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 160) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-18;
у) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 239), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 240), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 241) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 161), (ΌΕ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 162), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 163) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-19;
ф) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 242), (ΌΕ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 243), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 244) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 164), 0ΌΚ2 (5ΕΟ ΙΌ N0: 165), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 166) тяжёлой цепи антитела АМ-20;
х) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 245), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 246), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 247) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 167), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 168), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 169) тяжёлой цепи антитела АМ-21;
ц) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 248), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 249), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 250) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 170), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 171), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 172) тяжёлой цепи антитела АМ-22;
ч) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 251), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 252), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 253) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 173), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 174), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
ш) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 254), (ΌΕ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 255), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 256) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 173), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 174), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
щ) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 257), (ΌΕ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 258), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 259) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 176), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 177), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 178) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-24;
э) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 260), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 261), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 262) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 179), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 180), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 181) тяжёлой цепи антитела АМ-25; или
ю) 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 263), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 264), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 265) лёгкой цепи и 0ΌΚ1 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 182), 0ΌΚ2 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 183), 0ΌΚ3 (5ΕΕ) ΙΌ N0: 184) тяжёлой цепи антитела АМ-26; причём указанный полипептид специфически связывает ΙΌ-17 рецептор А.
Вариант изобретения 18: полипептид по варианту изобретения 15, отличающийся тем, что указанный полипептид представляет собой фармацевтическую композицию.
Вариант изобретения 19: выделенное антитело, выбранное из группы, состоящей из:
а) антитела, состоящего из последовательности тяжёлой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 427 и последовательности лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 429;
б) антитела, состоящего практически (главным образом) из последовательности тяжёлой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 427 и последовательности лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 429;
в) антитела, содержащего последовательность тяжёлой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 427;
г) антитела, содержащего последовательность лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 429;
д) антитела, содержащего последовательность тяжёлой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 427 и последовательность лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 429;
е) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΌ-17 рецептор А, содержащего последовательность тяжёлой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 427;
ж) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΌ-17 рецептор А, содержащего последовательность лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 429;
з) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΌ-17 рецептор А, содержащего последовательность тяжёлой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 427 и последовательность лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 429;
и) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΌ-17 рецептор А, содержащего последовательность вариабельной области тяжёлой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 14;
к) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΌ-17 рецептор А, содержащего последовательность вариабельной области лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 40;
л) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΌ-17 рецептор А, содержащего последовательность вариабельной области лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 40 и последовательность вариабельной области тяжёлой цепи 5ΕΕ) ΙΌ N0: 14;
м) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΌ-17 рецептор А, содержащего ί.'ΌΕ1 тяжёлой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 146, 0ΌΚ2 тяжёлой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 147, 0ΌΚ3 тяжёлой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 148, 0ΌΚ1 лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 224, 0ΌΚ2 лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 225 и 0ΌΚ3 лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 226; и
н) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΌ-17 рецептор А, содержащего ΕΌΕ3 тяжёлой цепи 5ΕΕ) ΙΌ N0: 148 и 0ΌΚ3 лёгкой цепи 5ΕΕ) ΙΌ N0: 226.
Вариант изобретения 20: антитело по варианту изобретения 19, отличающееся тем, что указанное антитело представляет собой фармацевтическую композицию.
Вариант 21: антитело по варианту изобретения 19, отличающееся тем, что указанное антитело представляет собой производное указанного антитела.
Вариант изобретения 22: антитело по варианту изобретения 7, отличающееся тем, что указанное антитело содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
Α. а) последовательности вариабельного домена лёгкой цепи по меньшей мере на 80% идентичной последовательности вариабельного домена лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 40;
Б) последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи по меньшей мере на 80% идентичной последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 14; или
- 13 019397
В) вариабельного домена лёгкой цепи по п. (а) и вариабельного домена тяжёлой цепи по п. (б);
Б. СЭК1, С1Ж2, СОК3 лёгкой цепи и СЭК1, С1Ж2, СОК3 тяжёлой цепи, которые отличаются в целом не более чем на три аминокислотные добавления, замены и/или делении в каждом СЭК от следующих последовательностей: СЭК1 (8Ер ГО N0: 224), С1Ж2 (8Ер ГО N0: 225), С1Ж3 (8Ер ГО N0: 226) лёгкой цепи и СЭК1 (8Ер ГО N0: 146), С0К2 (8Ер ГО N0: 147), С1Ж3 (8Ер ГО N0: 148) тяжёлой цепи; и
В. вариабельного домена лёгкой цепи 8ЕС ГО N0: 40 и вариабельного домена тяжёлой цепи 8ЕС ГО N0: 14; причём указанное антитело специфически связывает ГО-17 рецептор А.
Вариант изобретения 23: полипептид по варианту изобретения 16, отличающийся тем, что указанный полипептид содержит вариабельный домен лёгкой цепи 8ЕС ГО N0: 40 и вариабельный домен тяжёлой цепи 8ЕР ГО N0: 14; причём указанный полипептид специфически связывает ГО-17 рецептор А. Вариант изобретения 24: полипептид по варианту изобретения 16, отличающийся тем, что указанный полипептид содержит 8ЕС ГО N0: 427 и 8ЕС ГО N0: 429, причём указанный полипептид специфически связывает ГО-17 рецептор А.
Вариант изобретения 25: полипептид по варианту изобретения 24, отличающийся тем, что указанный полипептид представляет собой фармацевтическую композицию.
Обычно структура антигенсвязывающих белков по изобретению включает (а) каркас и (б) одну или несколько областей (участков) СЭК. Гипервариабельная область или СЭК по данному описанию относится к связывающей области белка, которая образует основные точки контакта поверхности связывания антигена. Варианты изобретения включают одну или более областей СЭК, встроенных в каркасную структуру антигенсвязывающего белка. Каркасная структура антигенсвязывающих белков может представлять собой каркас антитела, или его фрагмент, или вариант, или может быть полностью синтетической по своей природе. Примеры различных каркасных структур антигенсвязывающих белков по изобретению далее подробнее представлены в данном описании.
Антигенсвязывающие белки по изобретению включают каркасные области и одну или более областей СЭК. Антигенсвязывающий белок по изобретению может содержать от одной до шести областей (участков, доменов) СЭК (что обычно наблюдается у природных антител), например одну область СЭК1 тяжёлой цепи (Н-СЭК1), и/или одну область СЭК2 тяжёлой цепи (Н-СЭК2), и/или одну область СТЖ3 тяжёлой цепи (Н- СЭК3), и/или одну область СЭК1 лёгкой цепи (Ь-СПК1), и/или одну область СТЖ2 лёгкой цепи (ГО-С0К2), и/или одну область СЭК3 лёгкой цепи ('ГО-С0К3).
Термин природный (натуральный) применяемый по ходу всего данного описания в связи с биологическими материалами, такими как пептиды, полипептиды, нуклеиновые кислоты (нуклеотиды), клетки- хозяева и т.п., относится к материалам, которые встречаются в природе. В природных антителах Н-СЭК1 обычно содержится, примерно, от пяти (5) до семи (7) аминокислот, Н-СЭК2 обычно содержит, примерно, от шестнадцати (16) до девятнадцати (19) аминокислот, а Н-СЭК3 обычно содержит, примерно, от трёх (3) до двадцати пяти (25) аминокислот. Ь-СПК1 обычно содержит, примерно, от десяти (10) до семнадцати (17) аминокислот, Ь-СПК2 обычно содержит около семи (7) аминокислот и Б-СГОКЗ обычно содержит, примерно, от (7) до десяти (10) аминокислот. Специфические СЭК различных антител по изобретению представлены в табл. 1 и списке последовательностей.
Таблица 1 Соответствующая полинуклеотидная последовательность
Аминокислот ная последовательность СЭК. 1 АМН1 УЬ ЗЕС^ГО N0: 107 ΝΥΥλΥΝ 8Е0 ГО N0: 266
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМН1 УН ЗЕС^ГО N0: 108 ϋΙΥΥδΟδΤΝΥΝ Р8ЬК8 8Е(2 ГО N0: 267
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН1 УЬ ЗЕрГО N0: 109 ϋΟΕΕΑΝΥΥΟδ 68γ(}ργγγγσ МОУ 8Е(2 ГО N0: 268
- 14 019397
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН2 УН БЕрГО ΝΟ: 110 ΟΥΥν/8 ЗЕрГО N0: 269
А минокислотная последовательность СОК 2 АМН2 УН БЕрГО N0: 111 ΕΙΝΗ8ΟΚΤΝΥΝ РБЪКБ 8Ερ ГО N0: 270
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН2 УЬ БЕр ГО N0: 112 СРУУЕОЗЗСУЪ ΥΥΥΥΟΕϋν 8Ερ ГО N0: 271
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН3 УЬ ЗЕрГО N0: ИЗ 8Υ6ΜΗ ЗЕр ГО N0: 272
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМН3 УЬ 5Εζ) ГО N0: 114 νΐ\νΥΟΟ8ΝΚΗ УАОЗУКС ЗЕр ГО N0: 273
Аминокислотная последовательность СОКЗ АМнЗУЬ ЗЕрГО N0: 115 ρτσνγ ЗЕр ΙΟ N0: 274
Аминоки сл отная последовательность СОК 1 АМН4 УЬ БЕрГО N0: 116 5Υ0ΜΗ ЗЕр ГО ΝΟ: 275
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМН4 УЬ БЕрГО N0: 117 νπνΥΟΟ8ΝΚΗ УАРЗУКС ЗЕр ГО N0: 276
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН4 УЬ БЕрГО N0: 118 ϋτσνγ ЗЕр ГО ΝΟ: 277
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН5 УЬ БЕРГО ΝΟ: 119 8ΥΥλ¥8 ЗЕр ГО N0: 278
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМН5 УЬ БЕрГО N0: 120 ΚΙΥΚ8ΟΝΤΙΥΝΡ ЗЬКЗ ЗЕр ГО N0: 279
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН5 УЬ БЕрГО ΝΟ: 121 ΕΝΥ8Ε88ΟΕΥΥ ΥΥΟΜσν ЗЕр ГО ΝΟ: 280
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН6 УЬ БЕрГО N0: 122 ΚΥΟΙ8 8ΕΡΙΟΝΟ: 281
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМН6 УЬ 8ЕрГО N0: 123 ΧνίδΑΥΝΟΝΤΝ ΥΑρκορσ ЗЕр ГО N0: 282
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН6 УЬ БЕрГО N0: 124 ΚΟΥΟΙΕΓ6ΥΥΝ СРОР ЗЕр ГО N0: 283
- 15 019397
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН7 УЬ ЗЕрГО N0: 125 КУС18 8ΕΡ ГО N0: 284
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМН7 УЬ ЗЕр ГО N0: 126 λΥΚΑΥΝΟΝΤΝ УАрКЬрС ЗЕр ГО N0: 285
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН7 УЬ 8ЕР ГО N0: 127 ΚϋΥΟΙΕΤΟΥΥΝ СЕОР 8ΕΡ ГО ΝΟ: 286
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН8 УЬ ЗЕрГО N0: 128 ογσΐ8 ЗЕр ГО N0: 287
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМН8 УЬ ЗЕрГО N0: 129 \νΐ8ΑΥΝ0ΝΤΝ ΥΑΡΝΣΡΟ ЗЕр ГО N0: 288
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН8 УЬ ЗЕр ГО N0: 130 ΚϋΥΟΙΣΤσΥΥΝ СЕОР ЗЕр ГО N0: 289
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН9 УЬ ЗЕр ГО N0: 131 ΚΥΟΙ8 ЗЕр ГО N0: 290
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМН9 УЬ ЗЕрГО ΝΟ: 132 \νΐ8ΑΥΝΟΝΤΝ УАркьрс ЗЕр ГО N0: 291
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН9 УЬ ЗЕрГО ΝΟ: 133 ΚΟΥϋΙΕΤΟΥΥΝ СЕОР ЗЕр ГО N0: 292
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМн10 УЬ ЗЕрГО N0: 134 8ΟΟΥΥλ¥8 ЗЕр ГО N0: 293
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМНЮ УЬ ЗЕрГО N0: 135 ΥΙΥΕ8Ο8ΑΥΥΝ РЗЬКЗ ЗЕр ГО ΝΟ: 294
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМНЮ УЬ ЗЕРГО ΝΟ: 136 ΕΥΥΟ88ΟΥΡϋΑ ΡΟΙ ЗЕр ГО N0: 295
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМНИ УЬ ЗЕрГО N0: 137 8ΥΟΜΗ ЗЕр ГО N0: 296
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМН11 УЬ ЗЕрГО N0: 138 νπνΥΟΟ8ΝΚΥ УАОЗУКС ЗЕр ГО ΝΟ: 297
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН11 УЬ ЗЕРГО N0: 139 ΟΤΚΟΥ ЗЕр ГО N0: 298
Аминокислотная последовательность |СОК 1 АМН12 УЬ ЗЕрГО N0: 140 8ΥΟΙ8 ЗЕр ГО N0: 299
- 16 019397
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМН12УЬ δΕζ) ГО N0: 141 λΥΙδΤΥΚΟΝΤΝ ΥΑ(2ΚΕΡΟ δΕΟ ГО ΝΟ: 300
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН12 УЬ 8Е0 ГО N0: 142 К(2ЬУР0У δΕ(2 ГО ΝΟ: 301
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН13 УЬ 8Е0ГО ΝΟ: 143 δΥΟΜΟ δΕ<2 ГО ΝΟ: 302
Аминокислотная последовательность СОК2АМН13 УЬ 8ЕрГО N0: 144 νΟΥΥΟΟΝΚΚΥ ΥΑϋδνκσ 8Εζ) ГО N0: 303
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН13 УЬ 8Е0ГО N0: 145 σκνκογγγοΜ ϋν 8Εζ) ГО ΝΟ: 304
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН14 УЬ 8ЕС ГО N0: 146 κγσΐδ 8Εζ) ΙΟ ΝΟ: 305
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМН14 УЬ 8Е0 ГО N0: 147 ΧΥΙδΤΥδΟΝΤΝΥ ΑΙ^ΚΙ^Ο 8Ε(} ГО ΝΟ: 306
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН14 УЬ 8Е(^ГО N0: 148 Κί^ΥΡΟΥ 8Εζ) ГО ΝΟ: 307
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН15 УЬ 8Εζ) ГО ΝΟ: 149 8ΥΟΜ0 δΕς ГО ΝΟ: 308
Аминокислотная последовательность СОК2АМН15 УЬ 8Е0ГО N0: 150 νίλνΥΟΟΝΚΚΥ ΥΑϋδνκσ 8Ε(2 ГО ΝΟ: 309
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН15 УЬ 8Εζ) ΙΟ N0: 151 σκνκογγγοΜ ϋν δΕΟ ΙΟ ΝΟ: 310
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН16 УЬ δΕζ)ΙΟ N0: 152 δΥΟΙδ δΕΟ ГО ΝΟ: 311
Аминокислотная последовательность СОК2АМН16 УЬ 8Е0ГО N0: 153 ΑΙδΑΥΝΟΝΤΚ ΥΛί^Ώ^Ο 8Εζ) ΙΟ ΝΟ: 312
Аминокислот- ная последовательность СОК 3 АМН16 УЬ 8Е0 ГО N0: 154 ΚρϋνΡϋΥ 8Εζ) ΙΟ ΝΟ: 313
Аминокислотная последовательность СОК 1 οί АМН17УЬ 8Е0ГО N0: 155 δΥΟΙδ δΕζ) Ю ΝΟ: 314
- 17 019397
Аминокислотная последовательность СОК2АМН17 УЬ 8Εζ)ΙΟ N0: 156 ΧνίδΑΥδΟΝΤΚΥ Аркьос δΕΟ ГО N0: 315
Аминокислотная последовательность СЭК 3 АМН17 УЬ ЗЕС^ГО ΝΟ: 157 КОЬУЕОУ 8Εζ) ГО N0: 316
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН18 УЬ ЗЕрГО N0: 158 ϋΥΥΜΗ δΕΟ ΙΟ N0: 317
Аминокислотная последовательность СОК2АМН18 УЬ 8Е0ГО N0: 159 λνΜΗΡΝδσοτϋ ΣΑζ)ΚΡζ)(} δΕΟΙΟΝΟ: 318
Аминокислотная последовательность СОКЗ АМН18 УЬ 8Е<2 ГО N0: 160 ООУСЗТЬЗСЗЕ ΥλΥΥΡΟΣ δΕΟ ГО N0:319
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН19 УЬ 8Е0 ГО N0: 161 δΥΟΙδ δΕΟ ГО N0: 320
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМН19 УЬ 8Е0ГО N0: 162 У/ΙδΑΥδΟΝΤΚΥ Αζ)ΚΡ0<3 δΕΟ ГО N0: 321
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН19 УЬ 8Е(2ГО N0: 163 ΕΙΚΑΣΟΥ δΕΟ ГО N0: 322
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМн20 УЬ 8Е0 ГО N0: 164 δΥδΜΝ δΕΟ ГО N0: 323
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМн20 УЬ 8Е(2 ГО N0: 165 ΕΙδΑΚδδΤΙΥΥΑ ϋδνκσ δΕΟ ГО N0: 324
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМн20 УЬ 8Εζ) ГО ΝΟ: 166 ρκνασσΜϋν δΕΟ ГО N0: 325
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН21 УЬ 8Е9 ГО N0: 167 δΥδΜΝ δΕΟ ГО ΝΟ: 326
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМН21 УЬ ЗЕрГО N0: 168 ΙΙδδΚδδΙΙΗΥΑϋ δνκσ δΕΟ ГО N0: 327
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН21 УЬ 8Е(2 ГО N0: 169 РКУСССМОУ δΕΟ ГО N0: 328
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН22 УЬ 8Е(^ГО N0: 170 κγσΐδ δΕΟ ГО N0: 329
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМн22 УЬ ЗЕС^ГО N0: 171 λΥΙδΑΥδΟΝΤΝΥ αι^κι^ο δΕΟ ГО N0: 330
- 18 019397
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН22 УЬ 8Εζ)ΙΟ N0: 172 ΠΙΑΤΟΥ δΕΟ ΙΟ N0:331
Аминокислотная последовательность СЭК 1 АМН23 УЬ 5ЕрЮ N0: 173 δΥΎλΥδ 8Εζ) ΙΟ N0: 332
Аминокислотная последовательность СЭК 2 АМН23 УЬ δΕςιο N0: 174 ΚΙΥΡδΟΚΤΝΥΝ Р8ЬК8 δΕΟ ΙΟ ΝΟ: 333
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН23 УЬ 8Εζ) Ю N0: 175 ЕАУЕЬОЕСЬУ ΥΥΥΟΜϋν δΕΟ Ю N0: 334
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН24 УЬ 8Е(21О N0: 176 δΥΥΧΥδ δΕΟ ГО N0: 335
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМН24 УЬ δΕζ)ΙΟ N0: 177 ΚΙΥΡδΟΚΤΝΥΝ ΡδΣΚδ δΕΟ Ю N0: 336
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН24 УЬ 8Εζ)Π3 N0: 178 ЕАУЕЬОЕСЬУ ΥΥΥΟΜϋν δΕζ) ГО ΝΟ: 337
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН25 УЬ δΕζ) ΙΟ N0: 179 δΟΟΥΥλΥδ δΕΟ ΙΟ N0: 338
А минокислотная последовательность СОК 2 АМН25 УЬ δΕ(}ΙΟ N0: 180 ΥδΟΝΤΥΥΝΡδΕ Κδ δΕΟ ΙΟ N0: 339
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН25 УЬ δΕί^ΙΟ N0: 181 ΕΑΟΟΝδΑΥΥΥ ΟΜϋν δΕΟ ГО N0: 340
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМН26 УЬ 8Ες>ΙΟ N0: 182 ϋΥΥΜδ δΕΟ ΙΟ ΝΟ: 341
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМН26 УЬ 8Е9ГО N0: 183 ΥΙδδδΟδΤΙΥΥΑ ϋδνκο δΕΟ Ю N0: 342
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМН26 УЬ δΕΟ ΙΟ ΝΟ: 184 σκτγγραδΟδΥ ЕОМОУ 8Ε0 Ю ΝΟ: 343
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМц1 VI 8Ε0ΊΟ N0: 185 ΚΑδΟΟΙΚΝΟΙΧ} δΕΟ ΙΟ N0: 345
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМЬ1 VI δΕΟ ΙΟ N0: 186 АА88Ь(28 δΕΟ Ю N0: 346
- 19 019397
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМЬ1 VI 8Е(2ГО ΝΟ: 187 ΣζΙΗΝδΝΡΕΤ 8Εζ) ГО ΝΟ: 347
Аминокислотная последовательность СЭК 1 ΑΜι 2 VI 8Е<21О ΝΟ: 188 ΚΑδΟδνδΚΝΣν δΕ(} ГО ΝΟ: 348
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМЬ2 VI 8Е(2 ГО ΝΟ: 189 ΟΑδΤΚΑΝ δΕΟ ГО ΝΟ: 349
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМЬ2 VI 8Е0 ГО N0: 190 ΟΡΥΚδλΥΚΤ 8Εζ) ГО ΝΟ: 350
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ3 VI 8Εζ) ГО N0: 191 ΚΑδΙ^δΙδδΥΣΝ δΕζ) ГО ΝΟ: 351
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМГ 3 VI 8Е(21О ΝΟ: 192 ΑΑδδΙ^δ δΕζ) ГО ΝΟ: 352
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМЬ3 VI 8Е(2ГО N0: 193 ζ)ζ)8Υ8ΤΡΡΤ 8Ε0 ГО ΝΟ: 353
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ4 VI 8Е0ГО ΝΟ: 194 ΚΑδΟδνδΚΝΕΑ δΕζ) ГО ΝΟ: 354
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМЬ4 VI 8Εζ) ГО N0: 195 ΟΑδΤΚΑΤ 8Εζ) ГО ΝΟ: 355
Аминокислотная последовательность СОК 3 ΑΜι4 VI 8Е(^ГО N0: 196 □ΟΥΝΝΥ/ΡΤΥ/Τ 8Ε(2 ГО ΝΟ: 356
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ5 VI 8Εζ) ГО N0: 197 КАБОСПКИОЬС δΕ(2 ГО ΝΟ: 357
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМ,5 VI 8Εζ) ГО N0: 198 ΑΑδδΡΟδ δΕζ) ГО ΝΟ: 358
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМ15 VI ЗЕС^ГО N0: 199 ΐχΐΗΝδΥΡΡΤ δΕ(2 ГО ΝΟ: 359
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ6 VI δΕζ) ГО N0: 200 ΚΑδΟΟΙΚΝΟΕΟ 8Εζ)ΙΟ ΝΟ: 360
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМЬ6 VI 8Е(^Ю N0: 201 ΑΑδδΕΟδ δΕς ГО ΝΟ: 361
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМЬ6 VI δΕΙ^ΙΟ ΝΟ: 202 Ι^ΗΚδΥΡϋΓ δΕΟ ГО ΝΟ: 362
- 20 019397
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ7 VI 8Εζ)ΙΟ N0: 203 ΚΑδρΟΙΚΝΟΙΌ 8Εζ) ГО N0: 363
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМЬ7 VI ЗЕрГО N0: 204 ААЗЗЬОЗ 8Ες ГО N0: 364
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМЬ7 VI 8Е(2 ГО N0: 205 ЬОНКЗУРЬТ 8Ε0 ГО ΝΟ: 365
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ8 VI 8Е(2ГО N0: 206 κΑδί^σικΝοοσ 8Ε(^ ΙΟ N0: 366
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМЬ8 VI 8Εζ) ГО N0: 207 АА88Ь(28 8Ε(2 ΙΟ N0: 367
Аминокислотная последовательность СОКЗоГАМь8 VI 8Е(2ГО N0: 208 ЬОНКЗУРЬТ 8Ε(2 ГО N0: 368
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ9 VI 8Е(^ГО N0: 209 ΚΑδί^ΟΙΚΝΟΕΟ 8Εζ) ГО ΝΟ: 369
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМЬ9 VI 8Е<2 ГО N0: 210 АА88Ь(28 8Ε(2 ΙΟ ΝΟ: 370
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМЬ9 VI 8Εζ) Ю N0: 211 Ι^ΗΚδΥΪΈΤ 8Ε(^ ГО ΝΟ: 371
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМь10 VI ЗЕрГО N0: 212 ΚΑ8ζ)(3ΙΚ8λνΕΑ 8Ε(2 ΙΟ ΝΟ: 372
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМь10 VI 8Εζ) ГО N0: 213 АА88Ь(28 8Εζ) ГО ΝΟ: 373
Аминокислотная последовательность СОКЗ ΑΜ^Ονί δΕςιο N0: 214 0(}ΑΝΝΕΡΚΤ 8Ε(2 ГО ΝΟ: 374
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ11 VI 8Εζ) ΙΟ N0: 215 ΚΑ89δνδ8ΝΕΑ 8Ε(2 ΙΟ ΝΟ: 375
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМЬ11 VI 8Εςιο N0:216 0Α8ΤΚΑΑ 8Εζ) N0:376
Аминокислотная последовательность СОКЗ АМЬ11 VI 8Е0ГО N0:217 (^ΗΥΙΝν/ΡΚν/Τ 8Ε(2 ΙΟ N0:377
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ12 VI 8Е0ГО N0: 218 КА8081888ЬА 8Ε<2 ГО N0:378
- 21 019397
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМЬ12 VI ЗЕрГО N0: 219 САЗТКАТ ЗЕр ГО ΝΟ: 379
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМЬ1.2 VI ЗЕрГО N0: 220 ΡΡΥΟΝνΊΈΤ ЗЕр ГО N0: 380
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ13 VI ЗЕрГО N0: 221 кззрзььнзос ΚΤΥΣΥ ЗЕр ГО N0: 381
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМДЗ VI ЗЕрГО N0: 222 ЕУЗТКРЗ ЗЕР ГО N0: 382
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМДЗ VI ЗЕрГО N0: 223 Мр81рЬРЬТ ЗЕр ГО N0: 383
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ14 VI ЗЕрГО N0: 224 КАЗРЗУЗЗМЬА ЗЕр ГО ΝΟ: 384
Аминокислотная последовательность СОК 2 ΑΜι.14 VI ЗЕРГО N0: 225 ОАЗТКАТ ЗЕр ГО N0: 385
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМД4 VI ЗЕрГО N0: 226 ΡΡΥϋΝν/ΡΕΤ ЗЕр ГО N0: 386
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМД5 VI ЗЕРГО N0: 227 КАЗрЗУЗЗМЬА ЗЕр ГО N0: 387
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМД5 VI ЗЕРГО N0: 228 ОАЗТКАА ЗЕр ГО N0: 388
Аминокислотная последовательность СОКЗ АМД5 VI ЗЕрГО ΝΟ: 229 ΡΡΥΟΝλΥΡΕΤ ЗЕр ГО ΝΟ: 389
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ16 VI ЗЕрГО N0: 230 КАЗрЗКТЗЬА ЗЕРГО ΝΟ: 390
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМ Д6 VI ЗЕрГО N0: 231 СТЗТКАТ ЗЕр ГО N0: 391
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМЬ16 VI ЗЕрГО N0: 232 ΡΡΥΟΓΛΊΈΤ ЗЕр ГО N0: 392
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ17 VI ЗЕрГО N0: 233 КАЗРЗУЗЗМЬА ЗЕр ГО N0: 393
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМД7 VI ЗЕрГО N0: 234 ОАЗТКАТ ЗЕр ГО N0: 394
- 22 019397
Аминокислотная последовательность СОКЗ АМЬ17 VI ЗЕрГО N0: 235 РрУОЖУРЬТ ЗЕр ГО N0: 395
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ18 VI ЗЕрГО N0: 236 КТЗрЗУЬУЗЗК ΝΚΝΕΕΑ ЗЕР ГО N0: 396
Аминокислотная последовательность СОК2АМЬ18 VI ЗЕрГО ΝΟ: 237 У7А8ТКЕ8 ЗЕР ГО ΝΟ: 397
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМЬ18 VI ЗЕрГО N0: 238 ррУУЗТРРТ ЗЕр ГО N0: 398
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ19 VI ЗЕрГО N0: 239 КАЗрЗТЗЗМЬА ЗЕр ГО N0: 399
Аминокислотная последовательность СОК2АМЬ19 VI ЗЕрГО N0: 240 СА8ТКАТ ЗЕр ГО ΝΟ: 400
Аминокислотная последовательность СОКЗ АМЬ19 VI ЗЕР 10 ΝΟ: 241 ррУОТУ/РЬТ ЗЕр ГО N0: 401
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМь20 VI ЗЕрГО N0: 242 КАЗрСКЫУЬА ЗЕр ГО ΝΟ: 402
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМь20 VI ЗЕрГО ΝΟ: 243 ААЗТЬрЗ ЗЕр ГО N0: 403
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМ, 20 VI ЗЕРГО N0: 244 ΡΚΥΝΚΑΡΡΤ ЗЕр ГО N0: 404
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ21 VI ЗЕрГО N0: 245 ΚΑ8ρσΐ8ΝΥΕΑ ЗЕр ГО ΝΟ: 405
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМЬ21 VI ЗЕРГО N0: 246 ААЗТЬрЗ ЗЕр ГО N0: 406
Аминокислотная последовательность СОКЗ АМЬ21 VI ЗЕРГО ΝΟ: 247 ΡΚΥΝΚΑΡΡΤ ЗЕр ГО ΝΟ: 407
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ22 VI ЗЕР 10 N0: 248 КАЗрЗУЗЗМЬА. ЗЕр ГО N0: 408
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМЬ22 VI ЗЕРГО N0: 249 ОАЗТКАА ЗЕР ГО N0: 409
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМ,22 VI ЗЕрГО N0: 250 ΡΡΥϋΝλνΡΕΤ ЗЕр ГО N0:410
- 23 019397
Аминокислотная последовательность СОЯ 1 АМЬ23 VI вариант 1 8Е(2 ГО N0: 251 КАЗООПТГОЬО ЗЕО ГО N0:411
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМ,23У1 вариант 1 ЗЕО Ю N0: 252 ААЗЗЬОЗ ЗЕО ГО N0:412
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМЬ23 VI вариант 1 ЗЕС^ГО N0: 253 Ε0ΗΝ8ΥΡΡΤ ЗЕО ГО N0:413
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ23 VI вариант 2 ЗЕрГО N0: 254 КЗЗОЗЬУУЗОО ΗΤΟΕΝ ЗЕО ГО N0:414
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМ[23 VI вариант 2 8Е(}ГО ΝΟ: 255 Κν8ΝλΥΟ8 ЗЕО ГО N0: 415
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМЬ23 VI вариант 2 8Е(^ ГО N0: 256 МОСТНЗУРЬСЗ ЗЕО ГО N0:416
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМЬ24 VI ЗЕО ГО N0: 257 КЗЗОЗЬУУЗОО нтсич ЗЕО ГО N0: 417
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМ, 24 VI ЗЕО ГО N0: 258 КУЗЫХУОЗ ЗЕО ГО N0:418
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМЬ24 VI ЗЕО ГО N0: 259 М0ОТН\УРЬС8 ЗЕО ГО N0: 419
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМе25 VI ЗЕО ГО N0: 260 ΚΑ80ΑΙ8ΙΥΕΑ ЗЕО ГО N0: 420
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМ] 25 VI ЗЕО ГО N0: 261 ААЗЗЬОЗ ЗЕО ГО N0: 421
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМЬ25 VI ЗЕО ГО N0: 262 00Υ88ΥΡΚΤ ЗЕО ГО N0: 422
Аминокислотная последовательность СОК 1 АМ[26 VI ЗЕО ГО N0: 263 ΚΑ808νΥ8ΝΕΑ ЗЕО ГО N0: 423
Аминокислотная последовательность СОК 2 АМЪ26 VI ЗЕО ГО N0: 264 0А8ТКАТ ЗЕО ГО ΝΟ: 424
Аминокислотная последовательность СОК 3 АМЬ26 VI ЗЕО ГО N0: 265 ΟΟΥΥΝ\νΡ\¥Τ 8Е0 ГО ΝΟ: 425
- 24 019397
Общая структура и свойства СЭЯ природных антител описана в уровне техники. Коротко говоря, в обычной каркасной структуре антитела СОЯ встроены в скелет вариабельной области тяжёлой и лёгкой цепи, где они составляют области, в значительной степени отвечающие за связывание и распознавание антигена. Вариабельная область содержит по меньшей мере три СОЯ тяжёлой или лёгкой цепи, см. выше (КаЬа! е! а1., 1991, 8сс.|испсс5 οί РгсИеиъ οί 1ттипо1ощса1 1п1сгс51. РиЫю НеаИй 8егу1се Ν.Ι.Η., ВеШекба, ΜΌ; см. также Сйо1Ыа апб Ьекк, 1987, 1. Μο1. Βίο1. 196: 901-917; Сйо1Ыа е! а1., 1989, №Щ.1ге 342: 877-883), внутри каркасной области (определены каркасные области 1- 4, РЯ1, РЯ2, РЯ3 и РЯ4, Ьу КаЬа! е! а1., 1991, см. выше; см. также С1ю11иа апб Ьекк, 1987, кирга). См. ниже. Однако СЭЯ, охватываемые настоящим изобретением, можно использовать не только для того, чтобы определять антигенсвязывающий домен антитела с обычной (традиционной) структурой, но они могут быть включены в различные другие каркасные структуры по данному описанию.
Антитела по изобретению могут содержать любую константную область, известную в уровне техники. Константная область лёгкой цепи может представлять собой, например, константную область лёгкой цепи типа каппа или лямбда, например константную область человеческой лёгкой цепи каппа-типа или лямбда-типа. Константная область тяжёлой цепи может представлять собой, например, константную область тяжёлой цепи типа альфа, дельта, эпсилон, гамма или мю, например константную область человеческой тяжёлой цепи альфа-, дельта-, эпсилон-, гамма- или мю-типа. В одном варианте изобретения константная область лёгкой или тяжёлой цепи представляет собой фрагмент, производное, вариант или мутеин природной константной области.
В другом варианте изобретение включает антигенсвязывающий белок, который специфически связывает 1Ь-17ЯА, причём указанный антигенсвязывающий белок содержит СЭЯ1, СЭЯ2, СЭЯ3 лёгкой цепи и СЭЯ1, СЭЯ2 и СЭЯ3 тяжёлой цепи, которые в целом отличаются один (одной), двумя, тремя, четырьмя, пятью или шестью аминокислотными добавлениями, заменами и/или делециями от следующих СОЯ последовательностей: ССЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 185), С1Ж2 (^ЕО Ц) N0: 186), СОЯ3 (51Υ) ΙΌ N0: 187) лёгкой цепи и СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 107), СЭЯ2 (8Ер ΙΌ N0: 108), СЭЯ3 (8Ер ΙΌ N0: 109) тяжёлой цепи антитела АМ-1; СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 188), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 189), СЭЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 190) лёгкой цепи и СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 110), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 111), СЭЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 112) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-2; СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 191), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 192), СЭЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 193) лёгкой цепи и СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 113), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 114), СОЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 115) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-3; СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 194), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 195), СОЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 196) лёгкой цепи и СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 116), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 117), СОЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 118) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-4; СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 197), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 198), СЭЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 199) лёгкой цепи и СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 119), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 120), СЭЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 121) тяжёлой цепи антитела ΑΜ- 5; СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 200), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 201), СОЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 202) лёгкой цепи и СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 122), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 123), СОЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 124) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-6; СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 203), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 204), СЭЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 205) лёгкой цепи и СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 125), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 126), СЭЯ3 (51Р) ΙΌ N0: 127) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-7; ССЯ1 (51Υ) ΙΌ N0: 206), ССЯ2 (51Р) ΙΌ N0: 207), СЭЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 208) лёгкой цепи и СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 128), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 129), СЭЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 130) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-8; СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 209), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 210), СОЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 211) лёгкой цепи и СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 131), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 132), СОЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 133) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-9; СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 212), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 213), СЭЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 214) лёгкой цепи и СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 134), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 135), СОЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 136) тяжёлой цепи антитела АМ-10; СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 215), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 216), СЭЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 217) лёгкой цепи и СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 137), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 138), СОЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 139) тяжёлой цепи антитела ΑΜ11; СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 218), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 219), СЭЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 220) лёгкой цепи и СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 140), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 141), СОЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 142) тяжёлой цепи антитела ΑΜ- 12; СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 221), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 222), СОЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 223) лёгкой цепи и СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 143), СЭЯ2 (5РО ΙΌ N0: 144), СОЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 145) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-13; ССЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 224), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 225), СЭЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 226) лёгкой цепи и СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 146), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 147), СОЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 148) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-14; СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 227), СЭЯ2 (5РС) ΙΌ N0: 228), СЭЯ3 (5РС) ΙΌ N0: 229) лёгкой цепи и СЭЯ1 (5РС) ΙΌ N0: 149), СЭЯ2 (8ЕР ΙΌ N0: 150), СОЯ3 (8Ер ΙΌ N0: 151) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-15; СОЯ1 (8Ер ΙΌ N0: 230), СЭЯ2 (8ЕР ΙΌ N0: 231), СОЯ3 (8Ер ΙΌ N0: 232) лёгкой цепи и СОЯ1 (8Ер ΙΌ N0: 152), СОЯ2 (8Ер ΙΌ N0: 153), СОЯ3 (8Ер ΙΌ N0: 154) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-16; СОЯ1 (8Ер ΙΌ N0: 233), СЭЯ2 (8Ер ΙΌ N0: 234), СОЯ3 (8Ер ΙΌ N0: 235) лёгкой цепи и СЭЯ1 (8Ер ΙΌ N0: 155), СЭЯ2 (8Ер ΙΌ N0: 156), СЭЯ3 (8ЕР ΙΌ N0: 157) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-17; СОЯ1 (8Ер ΙΌ N0: 236), СЭЯ2 (8Ер ΙΌ N0: 237), СОЯ3 (8ЕР ΙΌ N0: 238) лёгкой цепи и СОЯ1 (8Ер ΙΌ N0: 158), СОЯ2 (8Ер ΙΌ N0: 159), СОЯ3 (8ЕР ΙΌ N0: 160) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-18; СОЯ1 (8Ер ΙΌ N0: 239), СЭЯ2 (8Ер ΙΌ N0: 240), СЭЯ3 (8ЕР ΙΌ N0: 241) лёгкой цепи и СЭЯ1 (8Ер ΙΌ N0: 161), СОЯ2 (8Ер ΙΌ N0: 162), СЭЯ3 (8Ер ΙΌ N0: 163) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-19; СОЯ1 (8Ер ΙΌ N0: 242), СОЯ2 (8Ер ΙΌ N0: 243), СЭЯ3 (8Ер ΙΌ N0: 244) лёгкой цепи и СЭЯ1 (8Ер ΙΌ N0: 164), СЭЯ2 (8Ер ΙΌ N0: 165), СЭЯ3 (8Ер ΙΌ N0: 166) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-20; СЭЯ1 (8Ер ΙΌ N0: 245), СОЯ2 (8Ер ΙΌ N0: 246), СЭЯ3 (8Ер ΙΌ N0:
- 25 019397
247) лёгкой цепи и С1Ж1 (БЕС) ГО ΝΟ: 167), С1Ж2 (БЕС) ГО ΝΟ: 168), СОК3 (БЕС) ГО ΝΟ: 169) тяжёлой цепи антитела АМ-21; С1Ж1 (БЕС) ГО ΝΟ: 248), С1Ж2 (БЕС) ГО ΝΟ: 249), С1Ж (БЕС) ГО ΝΟ: 250) лёгкой цепи и С1Ж1 (БЕС) ГО ΝΟ: 170), С1Ж2 (БЕС) ГО ΝΟ: 171), СОК3 (БЕС) ГО ΝΟ: 172) тяжёлой цепи антитела АМ-22; С1Ж1 (БЕС) ГО ΝΟ: 251), С1Ж2 (БЕС) ГО ΝΟ: 252), СОК3 (БЕС) ГО ΝΟ: 253) лёгкой цепи и С1Ж1 (БЕС) ГО ΝΟ: 173), С1Ж2 (БЕС) ГО ΝΟ: 174), СОК3 (БЕС) ГО ΝΟ: 175) тяжёлой цепи антитела АМ23; С1Ж1 (БЕС) ГО ΝΟ: 254), С1Ж2 (БЕС) ГО ΝΟ: 255), СОК3 (БЕС) ГО ΝΟ: 256) лёгкой цепи и С1)Е1 (БЕС) ГО ΝΟ: 173), С1Ж2 (БЕС) ГО ΝΟ: 174), СОК3 (БЕС) ГО ΝΟ: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23; С1Ж1 (БЕС) ГО ΝΟ: 257), С1Ж2 (БЕС) ГО ΝΟ: 258), СОК3 (БЕС) ГО ΝΟ: 259) лёгкой цепи и С1)Е1 (БЕС) ГО ΝΟ: 176), СЭК2 (БЕС) ГО ΝΟ: 177), С1Ж (БЕС) ГО ΝΟ: 178) тяжёлой цепи антитела АМ-24; СЕК1 (БЕС) ГО ΝΟ: 260), С1Ж2 (БЕС) ГО ΝΟ: 261), СОК3 (БЕС) ГО ΝΟ: 262) лёгкой цепи и С1Ж1 (БЕС) ГО ΝΟ: 179), СЭК2 (БЕС) ГО ΝΟ: 180), С1Ж (БЕС) ГО ΝΟ: 181) тяжёлой цепи антитела АМ-25; или СЕК1 (БЕС) ГО ΝΟ: 263), С1Ж2 (БЕС) ГО ΝΟ: 264), СОК3 (БЕС) ГО ΝΟ: 265) лёгкой цепи и С1Ж1 (БЕС) ГО ΝΟ: 182), С1Ж2 (БЕД ГО ΝΟ: 183), СЭК3 (БЕД ГО ΝΟ: 184) тяжёлой цепи антитела АМ-26, и его фрагменты, производные, мутеины и варианты.
Области СОК по изобретению включают также консенсусные последовательности, полученные из групп родственных моноклональных антител. Антитела могут быть родственными как по гомологии, так и по функции последовательностей, как показано в разделе Примеры. Консенсусная последовательность по данному описанию относится к аминокислотным последовательностям, имеющим консервативные аминокислоты, общие для ряда последовательностей, и вариабельные аминокислоты, которые меняются в данных аминокислотных последовательностях. Консенсусные последовательности СОК по изобретению включают СОК, соответствующие каждой из областей Н-СЭК1. Н-СЭК2. Н-СЭК3. ЬС1ЖЕ Е-С1Ж2 и Е-СПЕР
Консенсусные последовательности определяли стандартным филогенетическим анализом СОК, соответствующих УН (т.е. вариабельной области тяжёлой цепи) & УЬ антител против 1Ь-17КА. Применяли два различных способа. По первому способу консенсусные последовательности определяют, сохраняя ближайшее окружение СОК в той же самой последовательности, соответствующей УН или УЬ. По второму способу консенсусные последовательности определяют выравниванием различных типов СОК, т.е. последовательностей Н-СГОКЕ Н-СОК2, Н-СОК3, Ь-СОК1, Ь-СОК2 и Ь-СОК3 белков, связывающих антиген 1Ь-17КА, независимо раскрываемых в данном описании.
Короче говоря, по первому способу аминокислотные последовательности, соответствующие целому вариабельному домену либо УН, либо УЬ, переводят в формат ΕАБΤА для большей простоты проведения сравнительного выравнивания и филогенетического прогнозирования. Затем каркасные области этих последовательностей заменяют на искусственную линкерную последовательность (СССАААСССААА, БЕД ГО ΝΟ: 448), так что можно проводить изучение одних СОК, не вводя никаких ошибок взвешивания аминокислотного положения, вызванных совпадающими событиями (например, такими как неродственные антитела, которые по счастливой случайности имеют наследуемый каркас общей зародышевой линии), всё ещё сохраняя ближайшее окружение СОК в той же самой последовательности, соответствующей УН или УЬ. Затем запрашивают выравнивание с оптимизацией сходства последовательностей УН или УЬ в этом формате затем, используя программу, которая использует стандартный С1и81а1\У- подобный алгоритм (см. Пютрюп с( а1., 1994, Νιιοίοίο Λοίάδ Кек. 22: 4673-4680). Применяют величину штрафной функции за создание гэпа 8.0, а штрафной функции за расширение гэпа 2.0. Подобным же образом эта программа позволяет получать филограммы (иллюстрации в виде филогенетической схемы) с учётом выравнивания с оптимизацией сходства последовательностей, используя либо метод ИРСМА (невзвешенный парногрупповой метод с арифметическим усреднением), либо метод ближайших соседей (№1дйЬог-.1о1шпд) (см. Байои анй №ί, 1987, Мо1еси1аг Вю1оду анй ЕуойПюп 4: 406-425) для создания и иллюстрации сходства и различия групп последовательностей путём сравнения длины боковых цепей и объединения в группы. Оба метода дают сходные результаты, но в конечном счёте схемы, полученные методом ИРСМА, применяют в качестве метода, который использует более простой и более консервативный набор допущений. Схемы, полученные методом ИРСМА, показаны на фиг. 1, где сходные группы последовательностей определяют как имеющие менее 15 замен на 100 остатков (масштаб см. подпись под схемой) в индивидуальных последовательностях в группе и используют для определения совокупностей консенсусных последовательностей. Первичное выравнивание последовательностей используют для эмпирического изучения и фиксирования частоты встречаемости аминокислот, допустимых в каждом положении с консенсусной группой показанных на фиг. 2 и 3. Затем получают консенсусные последовательности для групп сходных последовательностей в каждой СОК. Аминокислоты, которые меняются в пределах одной группы, обозначаются как Χη в каждой консенсусной последовательности.
Н-СЭЮ консенсусные последовательности включают аминокислотные последовательности, выбранные из группы, состоящей из: а) Х1УС1Б (БЕД ГО ΝΟ: 453), где Х1 выбирают из группы, состоящей из К, Б и С; б) Х1УХ2МХ3 (БЕД ГО ΝΟ: 454), где Х1 выбирают из группы, состоящей из Ό и Б; Х2 выбирают из группы, состоящей из Υ и Б; и Х3 выбирают из группы, состоящей из Б и Ν; и в) БУСМХ1 (БЕД ГО ΝΟ: 455), где Х1 выбирают из группы, состоящей из Н и О;
Н-СИК2 консенсусные последовательности включают аминокислотную последовательность, вы
- 26 019397 бранную из группы, состоящей из: а) \У18Х|УХ2СНТХ3,УА ОХ4Х5ОС (8ЕО Ш N0: 456), где Х1 выбирают из группы, состоящей из А и Т; Х2 выбирают из группы, состоящей из N 8 и К; Х3 выбирают из группы, состоящей из N и К; Х4 выбирают из группы, состоящей из К и N и Х5 выбирают из группы, состоящей из Ь и Р; б) Х1Х28ХзХ4Х58Х61Х7¥АВ8УК6 (8Е0 Ш N0: 457), где Х1 выбирают из группы, состоящей из Υ, I и Р; Х2 выбирают из группы, состоящей из I и 8; Х3 выбирают из группы, состоящей из 8 и А; Х4 выбирают из группы, состоящей из 8 и К; и Х5 выбирают из группы, состоящей из С, 8 и отсутствия какой-либо кислоты; Х6 выбирают из группы, состоящей из Т и I; и Х7 выбирают из группы, состоящей из Υ и Н; и в) У1^УО6Х1Х2КХ^АВ8УК6 (8Е0 Ш N0: 458), где Х1 выбирают из группы, состоящей из 8 и N Х2 выбирают из группы, состоящей из N и К; и где Х3 выбирают из группы, состоящей из Н и Υ.
Н-СЭКЗ консенсусные последовательности включают аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из: а) Х^ЕХзХОУ (8Е0 Ш N0: 459), где Х1 выбирают из группы, состоящей из К и К, Х2 выбирают из группы, состоящей из Υ, V и А, и Х3 выбирают из группы, состоящей из Р и Ь, и б) X1^^X2Р^Υ (8Е0 Ш N0: 460), где Х1 выбирают из группы, состоящей из К и К, а Х2 выбирают из группы, состоящей из Υ и V.
Ь-СОК1 консенсусные последовательности включают аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из: а) КА80Х11Х2Х3Х4ЬХ5 (8Е0 Ш N0: 461), где Х1 выбирают из группы, состоящей из С, 8 и А; где Х2 выбирают из группы, состоящей из К и 8; Х3 выбирают из группы, состоящей из 8, I и N Х4 выбирают из группы, состоящей из и Υ; и Х5 выбирают из группы, состоящей из А и N б) КА8О8Х1Х2ХзХ4ЬА (8Е0 Ю N0: 462), где Х1 выбирают из группы, состоящей из V и I; Х2 выбирают из группы, состоящей из I и 8; Х3 выбирают из группы, состоящей из 8 и Т; Х4 выбирают из группы, состоящей из N и 8; и Х5 выбирают из группы, состоящей из А и N и в) КА8р8'УХ1Х2ЫЬХ3 (8Е0 Ш N0: 463), где Х1 выбирают из группы, состоящей из Υ и 8; Х2 выбирают из группы, состоящей из 8 и К; и Х3 выбирают из группы, состоящей из А и V.
Ь-СОК2 консенсусные последовательности включают аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из: а) АА88Х1О8 (8Е0 Ю N0: 464), где Х1 выбирают из группы, состоящей из Ь и Р; б) АА8Х1О8 (8Е0 Ю N0: 465), где Х1 выбирают из группы, состоящей из 8 и Т; в) Х1Х28ТКАХз, где Х1 выбирают из группы, состоящей из С и Ό; Х2 выбирают из группы, состоящей из А и Т; и Х3 выбирают из группы, состоящей из Т и А; и г) СА8ТКАХ1 (8Е0 Ю N0: 466), где Х1 выбирают из группы, состоящей из А, Т и N.
Ь-СОКЗ консенсусные последовательности включают аминокислотные последовательности, выбранные из группы, состоящей из: а) ^^НX18ΥX2X3Т (8Е0 Ю N0: 467), где Х1 выбирают из группы, состоящей из К и N Х2 выбирают из группы, состоящей из Р и N и Х3 выбирают из группы, состоящей из Ь, Р и Р; б) ОХ1Х2Х3Х4Х5РХ6Т (8Е0 Ю N0: 468), где Х1 выбирают из группы, состоящей из О и К; Х2 выбирают из группы, состоящей из А, 8 и Υ; Х3 выбирают из группы, состоящей из N Υ и 8; Х4 выбирают из группы, состоящей из N 8 и К; Х5 выбирают из группы, состоящей из Р, Т, Υ и А; и где Х5 выбирают из группы, состоящей из К и Р; в) ^^У^X|\VΡ^Т (8Е0 Ю N0: 469), где Х1 выбирают из группы, состоящей из N Т и I; и г) ОХ^Х^^Х^ХД (8Е0 Ю N0: 470), где Х1 выбирают из группы, состоящей из Н и О; Х2 выбирают из группы, состоящей из I, Υ, N и К; Х3 выбирают из группы, состоящей из N и 8; Х4 выбирают из группы, состоящей из Р и К; Х5 выбирают из группы, состоящей из К, отсутствия аминокислоты и Т; и Х6 выбирают из группы, состоящей из и отсутствия аминокислоты.
На фиг. 1, 2, 3, 16А, 16В, 19 и 22 показано, что в данных наблюдается чёткая закономерность между гомологией последовательностей в СОК доменах и функцией антитела, определённой конкурентным перекрёстным связыванием и детерминацией, где антитела связаны с ГЕ-17КА. Таким образом, установлена зависимость структура/функция для классов антител для антител к ГЕ-17КА по данному описанию.
По второму способу консенсусные последовательности СОК определяют для каждой отдельной области СОК, независимо от их ближайшего окружения в той же самой последовательности, соответствующей ΥΉ или УЪ. По этому способу консенсусные последовательности определяют выравниванием каждой области Н-СЭКЕ Н-СОК2, Н-СОКЗ. Ь-СОК1, Ь-СОК2 и Ь-СОКЗ в группах, т.е. выравниванием отдельных последовательностей Н-СОК1 белков, связывающих антиген Ш-17КА (антигенсвязывающих белков для ЕЬ-17КА), раскрываемых в данном описании, для определения Н-СОК1 консенсусной последовательности, выравниванием отдельных последовательностей Н-СОК2 белков, связывающих антиген Ш-17КА, раскрываемых в данном описании, для определения Н-СОК2 консенсусной последовательности, выравниванием отдельных последовательностей Н-СОКЗ белков, связывающих антиген ЕЕ-17КА, раскрываемых в данном описании, для определения Н-СОКЗ консенсусной последовательности, выравниванием отдельных последовательностей Ь-СОК1 белков, связывающих антиген Ш-17КА, раскрываемых в данном описании, для определения Ь-СОК1 консенсусной последовательности, выравниванием отдельных последовательностей Ь-СОК2 белков, связывающих антиген Ш-17КА, раскрываемых в данном описании, для определения Ь-СОК2 консенсусной последовательности, выравниванием отдельных последовательностей Ь-СОКЗ белков, связывающих антиген ЕЕ-17КА, раскрываемых в данном описании, для определения Ь-СОКЗ консенсусной последовательности. Определяют сходство (подобие) между последовательностями в каждой отдельной СОК последовательности. Затем получают (готовят) консенсус
- 27 019397 ные последовательности для групп подобных последовательностей в каждой СОЯ. Аминокислоты, которые варьируются в каждой группе, обозначают символом Хп в каждой консенсусной последовательности.
В другом варианте изобретение включает антигенсвязывающий белок, который специфически связывает 1Б-17ЯА, причём указанный антигенсвязывающий белок содержит по меньшей мере одну область Н-СЭЕ любой из БЕР ГО N0: 107-184. Другие варианты изобретения включают антигенсвязывающие белки, которые специфически связываются с 1Ь-17ЯА, причём указанный антигенсвязывающий белок содержит по меньшей мере одну область Ь-СЭЯ любой из БЕР ГО N0: 185-265. Другие варианты изобретения включают антигенсвязывающие белки, которые специфически связываются с 1Ь-17ЯА, причём указанный антигенсвязывающий белок содержит по меньшей мере одну область Н-СЭЯ любой из БЕР ГО N0: 107- 184 и по меньшей мере одну область Ь-СЭЯ любой из БЕР ГО N0: 185-265.
В другом варианте изобретение включает антигенсвязывающий белок, который специфически связывает 1Ь-17ЯА, причём указанный антигенсвязывающий белок содержит по меньшей мере две области Н-СЭЕ любой из БЕР ГО N0: 107-184. Другие варианты изобретения включают антигенсвязывающие белки, которые специфически связываются с 1Ь-17ЯА, причём указанный антигенсвязывающий белок содержит по меньшей мере две области Б-СЭЕ любой из БЕР ГО N0: 185-265. Другие варианты изобретения включают антигенсвязывающие белки, которые специфически связываются с 1Ь-17ЯА, причём указанный антигенсвязывающий белок содержит по меньшей мере две области Н-СЭЕ любой из БЕР ГО N0: 107-184 и по меньшей мере две области Б-СЭЕ любой из БЕР ГО N0: 185-265.
В другом варианте изобретение включает антигенсвязывающий белок, который специфически связывает 1Ь-17ЯА, причём указанный антигенсвязывающий белок содержит по меньшей мере три области Н-СЭЕ любой из БЕР ГО N0: 107-184. Другие варианты изобретения включают антигенсвязывающие белки, которые специфически связываются с 1Ь-17ЯА, причём указанный антигенсвязывающий белок содержит по меньшей мере три области Б-СЭЕ любой из БЕР ГО N0: 185-265. Другие варианты изобретения включают антигенсвязывающие белки, которые специфически связываются с 1Ь-17ЯА, причём указанный антигенсвязывающий белок содержит по меньшей мере три области Н-СЭЯ любой из БЕР ГО N0: 107-184 и по меньшей мере три области Б-СЭЕ любой из БЕР ГО N0: 185-265.
В другом варианте изобретение включает антигенсвязывающий белок, который специфически связывает 1Ь-17ЯА, причём указанный антигенсвязывающий белок содержит по меньшей мере одну, две или три области Н-СЭЕ любой из БЕР ГО N0: 107-184, где указанные области Н-СОЯ, по меньшей мере на 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичны соответствующей Н-СЭЯ Другие варианты изобретение включают антигенсвязывающие белки, которые специфически связывают 1Я-17ЯА, причём указанный антигенсвязывающий белок содержит, по меньшей мере одну, две или три области Ь-СЭЯ любой из БЕР ГО N0: 185-265, где указанные области Ь-СЭЯ, по меньшей мере на 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичны соответствующей Б-СЭЯ Другие варианты изобретение включают антигенсвязывающие белки, которые специфически связывают 1Ь-17ЯА, причём указанный антигенсвязывающий белок содержит, по меньшей мере одну, две или три области Н-СЭЕ любой из БЕР ГО N0: 107- 184, где указанные области Н-СЭЯ, по меньшей мере на 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичны соответствующей Н-СЭЯ и содержит по меньшей мере одну две или три области Ь-СЭЯ любой из БЕР ГО N0: 185-265, где указанные области Б-СЭЕ по меньшей мере на 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичны соответствующей Б-СЭЯ
В другом варианте изобретение включает антигенсвязывающий белок, который специфически связывает 1Ь-17ЯА, причём указанный антигенсвязывающий белок содержит по меньшей мере одну область Н-СЭЯ имеющую не более одного (одной), двух, трёх, четырёх, пяти или шести аминокислотных добавлений, делеций или замен в любой из БЕР ГО N0: 107-184, и/или по меньшей мере одну область Ь-СЭЯ, имеющую не более одного (одной), двух, трёх, четырёх, пяти или шести аминокислотных добавлений, делеций или замен в любой из БЕР ГО N0: 185-265.
В другом варианте изобретение включает антигенсвязывающий белок, который специфически связывает 1Я-17ЯА, причём указанный антигенсвязывающий белок содержит одну, две или три области НСЭЯ имеющие не более одного (одной), двух, трёх, четырёх, пяти или шести аминокислотных добавлений, делеций или замен в любой из БЕР ГО N0: 107-184, и/или одну, две или три области Ь-СЭЯ, имеющие не более одного (одной), двух, трёх, четырёх, пяти или шести аминокислотных добавлений, делеций или замен в любой из БЕР ГО N0: 185-265.
В дополнительных вариантах изобретения используются антигенсвязывающие белки, содержащие одну область СОЯ, имеющую не более одного (одной), двух, трёх, четырёх, пяти или шести аминокислотных добавлений, делеций или замен в последовательности, выбранной из Н-СЭЯ областей любой из БЕР ГО N0: 107-184, и одну область Ь-СЭЯ, имеющую не более одного (одной), двух, трёх, четырёх, пяти или шести аминокислотных добавлений, делеций или замен в любой из БЕР ГО N0: 185-265 (например, антигенсвязывающий белок имеет две СОЯ области, одну Н-СЭЯ и одну Ь-СЭЯ. Специфический вариант изобретения включает антигенсвязывающие белки, содержащие как область Н-СЭЯ3, так и область Б-СПЯ3.
- 28 019397
Как очевидно для специалистов в данной области техники, для любого антигенсвязывающего белка, содержащего более одной области СОК из последовательностей, представленных в данном описании, применима любая комбинация СОК, независимо выбранная из последовательностей в табл. 1. Так можно получать антигенсвязывающие белки, содержащие одну, две, три, четыре, пять или шесть независимо выбранных СОК. Однако, как понятно специалистам в данной области техники, в конкретных изобретениях обычно используют комбинации СОК, которые не являются повторяющимися, например, обычно не получают антигенсвязывающие белки с двумя Н-СОК2 областями, и т.д.
В некоторых вариантах изобретения получают антигенсвязывающие белки, которые содержат не более одного (одной), двух, трёх, четырёх, пяти или шести аминокислотных добавлений, делений или замен в Н-СОК3 области и Ь-СОК3 области, в частности, в Н-СОК3 области, выбранной из последовательности, имеющей не более одного (одной), двух, трёх, четырёх, пяти или шести аминокислотных добавлений, делеций или замен в Н-СОК3 области любой из 8ЕО ГО ИО: 107-184, и в случае Ь-СОК3 области, выбранной из Ь-СОК3 консенсусной последовательности, имеющей не более одного (одной), двух, трёх, четырёх, пяти или шести аминокислотных добавлений, делеций или замен в Ь-СОК3 области любой из 8ЕС ГО ИО: 185-265.
Как отмечается в данном описании, антигенсвязывающие белки по настоящему изобретению содержат каркасную структуру, к которому могут быть привиты СОК по изобретению. Вид антигенсвязывающих белков для ЕБ-17КА включает подвид антител, различным образом определяемых в данном описании. Аспекты включают варианты изобретения, в которых каркасная структура представляет собой обычную тетрамерную структуру антитела. Так, комбинации антигенсвязывающих белков по данному описанию включают дополнительные компоненты (каркас, 1 и О области, константные области и т.д.), которые составляют тяжёлую и/или лёгкую цепь.
Варианты изобретения включают применение человеческих каркасных компонентов. Типичный вариант УН вариабельной области, привитой к обычной каркасной структуре антитела, изображён в 8ЕС ГО ИО: 427, а типичный вариант УЪ вариабельной области, привитой к обычной каркасной структуре антитела, изображён в 8ЕО ГО ИО: 429. Само собой разумеется, что можно применять любой каркас антитела, известный в уровне техники.
В одном аспекте настоящее изобретение охватывает антитела, которые содержат вариабельную область лёгкой цепи, выбранную из группы, состоящей из АМ^1-ЛМ^26, и/или вариабельную область тяжёлой цепи, выбранную из группы, состоящей из АМН1-АМн26, и их фрагменты, производные, мутеины и их варианты. Антитела по изобретению включают, но без ограничения: антитела, содержащие АМ^/АМ^ (8ЕС ГО ИО: 27/8ЕО ГО ИО: 1), АМ]^/АМН2 (8ЕС ГО ИО: 28/8ЕО ГО ИО: 2), АМ]А/АМН3 (8ЕЕ) ГО ИО: 29/8ЕО ГО ИО: 3), АМЬ4/АМН4 (8ЕЕ) ГО ИО: 3Е8ЕО ГО ИО: 4), АМ]А/АМН5 (8ЕЕ) ГО ИО: 31/8ЕО ГО ИО: 5), АМЬ6/АМН6 (8ЕЕ) ГО ИО: 32/8ЕО ГО ИО: 6), АМЬ7/АМН7 (8ЕЕ) ГО ИО: 33/8ЕО ГО ИО: 7), АМЬ8/АМН8 (8ЕЕ) ГО ИО: 34/8ЕО ГО ИО: 8), АМЬ9/АМН9 АМьЮ/АМ^ АМЬ12/АМН12 АМЬ14/АМН14 АМЬ16/АМН16 АМЬ18/АМН18 АМЬ20/АМН20
АМ, 22/АМЦ22 (8ЕЕ) ГО ИО: 48/8ЕО ГО ИО: 22), АМ]^3/АМН23 (8ЕЕ) ГО ИО: 49 или 8ЕЕ) ГО ИО: 50/8ЕО ГО ИО: 23), АМЬ24/АМН24 (8ЕС ГО ИО: 51/8ЕО ГО ИО: 24), АМ^б/АМ^б (8ЕС ГО ИО: 52/8ЕО ГО ИО: 25), ЛМ^26/ЛМН26 (8ЕС ГО ИО: 53/8ЕО ГО ИО: 26), а также их ГО-КА-связывающие фрагменты и их комбинации.
(8Е0 (8Е0 (8Е0 (8Е0 (8Е0 (8Е0
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ИО: ИО: ИО:
ИО: ИО:
ИО:
36/8ЕО
38/8ЕО
40/8ЕО
42/8ЕО
44/8ЕО
46/8ЕО
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ИО: ИО: ИО:
ИО: ИО:
ИО:
10), АМьИ/АМ^
12), АМЬ13/АМН13
14), АМЬ15/АМН15
16), АМЬ17/АМН17
18), АМЬ19/АМН19
20), АМЬ21/АМН21 (8ЕО (8ЕО (8ЕО (8ЕО (8ЕО (8ЕО (8ЕО
ΙΌ ΙΌ ΙΌ ΙΌ ΙΌ ΙΌ ΙΌ
ИО: ИО: ИО: ИО: ИО: ИО: ИО:
35/8ЕО ГО ИО: 9),
37/8ЕО
39/8ЕО
41/8ЕО
43/8ЕО
45/8ЕО
47/8ЕО
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ΙΌ
ИО: ИО: ИО:
ИО: ИО:
ИО:
11),
13),
15),
17),
19),
21),
В одном варианте настоящее изобретение включает антитело, содержащее вариабельный домен лёгкой цепи, охватывающий последовательность аминокислот, которая отличается от последовательности вариабельного домена лёгкой цепи, выбранной из группы, состоящей из АМ^-АМ! 26, только 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 остатками, причём каждое такое отличие последовательности, независимо, представляет собой либо делецию, инсерцию, либо замену одного аминокислотного остатка. В другом варианте изобретения вариабельный домен лёгкой цепи содержит последовательность аминокислот, которая по меньшей мере на 70, 75, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентична последовательности вариабельного домена лёгкой цепи, выбранной из группы, состоящей из АМ^-АМ, 26. В другом варианте изобретения вариабельный домен лёгкой цепи содержит последовательность аминокислот, которая кодируется нуклеотидной последовательностью по меньшей мере на 70, 75, 80, 85, 90, 95, 97 или 99% идентичной нуклеотидной последовательности, которая кодирует последовательность вариабельного домена лёгкой цепи, выбранную из группы, состоящей из АМЪ1АМЪ26. В другом варианте изобретения вариабельный домен лёгкой цепи содержит последовательность аминокислот, которая кодируется полинуклеотидом, гибридизующимся в условиях умеренной жёсткости с комплементом полинуклеотида, который кодирует вариабельный домен лёгкой цепи, выбранный из группы, состоящей из АМЪ1-АМЬ26. В другом варианте изобретения вариабельный домен лёгкой цепи содержит последовательность аминокислот, которая кодируется полинуклеотидом, гибридизующимся в
- 29 019397 условиях умеренной жёсткости с комплементом полинуклеотида, который кодирует вариабельный домен лёгкой цепи, выбранный из группы, состоящей из АМ|,1-АМ| 26. В другом варианте изобретения вариабельный домен лёгкой цепи содержит последовательность аминокислот, которая кодируется полинуклеотидом, гибридизующимся в условиях умеренной жёсткости с комплементом полинуклеотида для лёгкой цепи, предусматриваемым в любой из полинуклеотидных последовательностей АМЪ1-АМЬ26 (8Е0 ГО ΝΟ: 80-106).
В другом варианте настоящее изобретение включает антитело, содержащее вариабельный домен тяжёлой цепи, охватывающий последовательность аминокислот, которая отличается от последовательности вариабельного домена лёгкой цепи, выбранной из группы, состоящей из АМН1-АМН26, только 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 остатком (остатками), причём каждое такое отличие последовательности, независимо, представляет собой либо делецию, инсерцию, либо замену одного аминокислотного остатка. В другом варианте изобретения вариабельный домен тяжёлой цепи содержит последовательность аминокислот, которая по меньшей мере на 70, 75, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентична последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи, выбранной из группы, состоящей из АМН1-АМН26. В другом варианте изобретения вариабельный домен тяжёлой цепи содержит последовательность аминокислот, которая кодируется нуклеотидной последовательностью по меньшей мере на 70, 75, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97%, 98 или 99% идентичной нуклеотидной последовательности, которая кодирует последовательность вариабельного домена тяжёлой цепи, выбранную из группы, состоящей из АМН1-АМН26. В другом варианте изобретения вариабельный домен тяжёлой цепи содержит последовательность аминокислот, которая кодируется полинуклеотидом, гибридизующимся в умеренно жёстких или жёстких условиях с комплементом полинуклеотида, который кодирует вариабельный домен тяжёлой цепи, выбранный из группы, состоящей из АМН1-АМН26. В другом варианте изобретения вариабельный домен тяжёлой цепи содержит последовательность аминокислот, которая кодируется полинуклеотидом, гибридизующимся в условиях умеренной жёсткости с комплементом полинуклеотида, который кодирует вариабельный домен тяжёлой цепи, выбранный из группы, состоящей из АМН1-АМН26. В другом варианте изобретения вариабельный домен тяжёлой цепи содержит последовательность аминокислот, которая кодируется полинуклеотидом, гибридизующимся в умеренно жёстких или жёстких условиях с комплементом полинуклеотида для тяжёлой цепи, предусматриваемым в любой из полинуклеотидных последовательностей АМН1-АМН26 (8Е6) ГО ΝΟ: 54-79).
Соответственно, в различных вариантах изобретения антигенсвязывающие белки по изобретению содержат каркасы обычных (традиционных) антител, включая человеческие и моноклональные антитела, биспецифические антитела, диатела, миниантитела, доменные антитела, синтетические антитела (иногда называемые в данном описании миметики антител), химерные антитела, слияния антител (иногда называемые конъюгаты антител) и фрагменты каждых из них, соответственно. Вышеописанные СОЯ и комбинации СОЯ можно привить (ввести) на любой из приведённых ниже каркасов.
Термин антитело по данному описанию относится к различным формам мономерных или мультимерных белков, содержащих одну или более полипептидных цепей, которые специфически связываются с антигеном, различным образом представленных в данном описании. В некоторых вариантах изобретения антитела получают методами рекомбинантной ДНК. В других вариантах изобретения антитела получают ферментативным или химическим расщеплением природных антител. В другом аспекте антитело выбирают из группы, состоящей из: а) человеческого антитела; б) гуманизированного антитела; в) химерного антитела; г) моноклонапъного антитела; д) поликлонального антитела; е) рекомбинантного антитела; ж) антигенсвязывающего фрагмента антитела; з) одноцепочечного антитела; и) диатела; к) триатела; л) тетратела; м) фрагмента ЕаЬ; н) фрагмента Е(аЬ')2; о) Ι§ϋ антитела; п) 1дЕ антитела; р) 1дМ антитела; с) 1дА антитела; т) 1дС1 антитела; у) 1дС2 антитела; ф) 1дС3 антитела; и х) 1дС4 антитела.
Вариабельная область содержит по меньшей мере три участка СОЯ тяжёлой или лёгкой цепи (см. выше КаЬа! е! а1., 1991, 8ес.|иепсе5 о£ РгоЮпъ о£ 1ттипо1одюа1 [ШегекЕ РиЬ11с НеаПП 8егуюе Ν.Ι.Η., ВеШекба, МГО.; см. также СЬо1Ыа аиб Ьекк, 1987, 1. Мо1. Вю1. 196: 901- 917; СЬо1Ыа е! а1., 1989, №11иге 342: 877-883), заключённой в каркасную область (обозначенную как каркасные области 1-4, ЕЯ1, ЕЯ2, ЕЯ3 и ЕЯ4, КаЬа! е! а1., 1991, кцрга; см. также С1ю11па аиб Ьекк, 1987, кцрга). См. ниже.
Структурные единицы традиционных антител представляют собой тетрамер. Каждый тетрамер обычно состоит из двух идентичных пар полипептидных цепей, причём каждая пара содержит одну лёгкую (обычно имеющую молекулярную массу около 25 кДа) и одну тяжёлую цепь (обычно имеющую молекулярную массу около 50-70 кДа). Амино-концевой участок каждой цепи включает вариабельную область, примерно, из 100-110 или более аминокислот, в первую очередь отвечающих за распознавание антигена. Карбокси-концевой участок каждой цепи определяет константную область, прежде всего отвечающий за эффекторную функцию. Человеческие лёгкие цепи классифицируются как каппа и лямбда лёгкие цепи. Тяжёлые цепи классифицируются как мю, дельта, гамма, альфа или эпсилон и определяют изотип антитела как 1дМ, Ι§Ό, 1дС, 1дА и 1дЕ, соответственно. 1дС имеет несколько подклассов, включая, но без ограничения 1дС1, 1дС2, 1дС3 и 1дС4. 1дМ имеет подклассы, включая, но без ограничения, 1дМ1 и 1дМ2. Варианты изобретения охватывают все такие классы антител, которые включают вариабельные
- 30 019397 домены СЭК антигенсвязывающих белков по данному описанию.
Внутри лёгкой и тяжёлой цепей вариабельная и константная области соединяются с помощью 1 участка, примерно, из двенадцати (12) или более аминокислот, причём тяжёлая цепь также включает Ό участок, примерно, из десяти (10) или более аминокислот. См. в целом Раи1, ей., 1989, Гцийатеи1а1 Ιιηιηιιποίοβν СИ. 7, 2ий ей. Кауеи Ргезз, КУ. Вариабельные области каждой пары лёгкой/тяжёлой цепи образуют сайт связывания антитела. Каркасы по изобретению включают такие области.
Некоторые природные антитела, например, обнаруженные в организме верблюдов и лам, представляют собой димеры, состоящие из двух тяжёлых цепей и не включающие лёгких цепей. Миу1йегтапв е! а1., 2001, 1. Бю1есЬио1. 74: 277-302; Эезту1ег е! а1., 2001, 1. Βίο1. СИет, 276: 26285-26290. Кристаллографические исследования антитела верблюда показало, что СЭК3 области образуют поверхность, которая взаимодействует с антигеном и поэтому является крайне важной для связывания антигена, подобно более типичным тетрамерным антителам. Изобретение охватывает димерные антитела, состоящие из двух тяжёлых цепей или их фрагментов, которые могут связываться с и/или ингибировать биологическую активность ΙΕ-17Κ.Ά.
Вариабельные области тяжёлой и лёгкой цепей обычно имеют одинаковую общую структуру относительно консервативных каркасных областей (ГК), соединённых тремя гипервариабельными областями, а именно, областями, определяющими комплементарность, или СЭК. СЭК представляют собой гипервариабельные области (участки) антитела (или антигенсвязывающего белка, охарактеризованного в данном описании), которые отвечают за распознавание и связывание антигена. СЭК из двух цепей каждой пары выравнивают с помощью каркасных областей, содействующих связыванию со специфическим эпитопом. От №конца до С-конца как лёгкая, так и тяжёлая цепи содержат домены ГК1, СЭК1, ГК2, СЭК2. ГК3, СЭК3 и ГК4. Отнесение аминокислот к каждому домену осуществляют в соответствии с определениями КаЬа! 8едиеисез ο£ Рго1етз о£ Iттииο1ο§^са1 ИЛегезЕ С1ю11на е! а1., 1987, 1. Мо1. Βίο1 196: 901-917; С1ю11на е! а1., 1989, №11иге 342: 878-883. Каркасы по изобретению включают такие области. СЭК образуют основные точки контакта поверхности для связывания антигена. См., например, Οιοίΐιίη аий Ьезк, 1987, 1. Мο1. Βίο1. 196: 901-917. кроме того, СЭК3 лёгкой цепи и, в особенности, СЭК3 тяжёлой цепи могут предоставлять наиболее важные детерминанты при связывании антигена в вариабельных областях лёгкой и тяжёлой цепей. См., например, ΟΗοίΜπ аий Ьезк, 1987, зирга; ЭезШегю е! а1., 2001, 1. Мο1. Βίο1. 310: 603615; Хи аий Пау1з, 2000, Iттишίу 13: 37-45; Эезту1ег е! а1., 2001, 1. Βίο1 СИет. 276: 26285-26290; и Миу1йегтаиз, 2001, 1. Β^ο!есЬηο1 14: 277-302. В некоторых антителах СЭК3 тяжёлой цепи, по-видимому, составляют основную площадь контакта между антигеном и антителом. Эезту1ег е! а1., 2001, зирга. Схемы 1и νί!το селекции, в которых изменяется только СЭК3, можно использовать для изменения связывающих свойств антитела. МцуИеттаиз, 2001, зирга; ОезМегю е! а1., 2001, зирга.
Природные антитела обычно включают сигнальную последовательность, которая направляет антитело по клеточному пути секреции белка и которая отсутствует у зрелого антитела. Полинуклеотид, кодирующий антитело по изобретению, может кодировать природную сигнальную последовательность или гетерологичную сигнальную последовательность, описанную ниже.
В одном варианте изобретения антигенсвязывающий белок представляет собой моноклональное антитело, содержащее от одного (1) до шести (6) описанных СЭК, охарактеризованных в данном описании (см. табл. 1). Антитела по изобретению могут быть любого типа, включая Ι§Ο (включая Ι§Ο1, Ι§Ο2, ΙβΟ3, Ι§Ο4), Ι§Ό, или Ι§Ξ антитела. В конкретном варианте изобретения антигенсвязывающий белок представляет собой антитело ΙβΟ типа. В ещё одном специфическом варианте изобретения антигенсвязывающий белок представляет антитело ΙβΟ2 типа.
В некоторых вариантах изобретения, например, когда антигенсвязывающий белок представляет собой с целыми тяжёлой и лёгкой цепями, все СЭК относятся к одному и тому же виду, например к человеческому. Или же, например, в вариантах изобретения, в которых антигенсвязывающий белок содержит менее шести СЭК из последовательностей, представленных ниже, дополнительные СЭК могут относиться либо к другому виду (например, мышиные СЭК) или могут быть человеческими СЭК, отличными от СЭК, показанных в последовательностях. Например, могут быть использованы человеческие н-СЭК.3 и Ь-СЭК3 участки соответствующих последовательностей, идентифицированных в данном описании, причём, необязательно выбирают н-СЭК1, н-СОК2, Ь-СЭК1 и Ь-СПК2 другого вида, или из друтих последовательностей человеческих антител, или из их комбинаций. Например, СЭК по изобретению может заменять участки СЭК соответствующих продажных химерных или гуманизированных антител.
В специфических вариантах изобретения используют компоненты каркаса антигенсвязывающих белков, которые являются составными элементами человеческих последовательностей.
Однако, в некоторых вариантах изобретения составные элементы каркаса могут представлять собой совокупность из различных видов. В силу этого, если антигенсвязывающий белок представляет собой антитело, такое антитело может являться химерным антителом и/или гуманизированным антителом. В общем как термин химерные антитела, так и термин гуманизированные антитела относятся к антителам, в которых объединены участки из более чем одного вида. Например, химерные антитела обычно содержат вариабельную (вариабельные) область (области) мыши (или, в некоторых случаях, крысы), а константную (константные) область (области) человека.
- 31 019397
Термин гуманизированные антитела обычно относится к антителам нечеловеческого происхождения, которые содержали каркасные области вариабельного домена, заменённые на последовательности, имеющиеся в человеческих антителах. Обычно в гуманизированных антителах целое антитело, за исключением СЭР, кодируется полинуклеотидом человеческого происхождения или идентично такому антителу, за исключением СОЯ в нём. Участки СОЯ, некоторые из которых или все кодируются нуклеиновыми кислотами, происходящими из организма, отличного от человеческого, прививают к бетаскладчатой каркасной структуре вариабельной области человеческого антитела, получая антитело, специфичность которого определяется привитыми СОЯ. Получение таких антител описано, например, в Международной патентной заявке \¥0 92/11018, 1опек, 1986, №1иге 321: 522-525, УегРоеуеп е! а1., 1988, 8с1еисе 239: 1534-1536. Можно также получать гуманизированные антитела, используя мышей с иммунной системой, подвергшейся генно-инженерной модификации. Восще е! а1., 2004, Вю!есЬпо1. Ргод. 20: 639-654. В настоящем изобретении идентифицированные СОЯ являются человеческими, и поэтому как гуманизированные, так и химерные антитела в данном случае включают некоторые СОЯ нечеловеческого происхождения; например, можно получать гуманизированные антитела, которые содержат участки СПЯИ3 и СПЯЬ3, при этом один или более участков СОЯ является СОЯ другого особого происхождения.
В одном варианте изобретения антигенсвязывающий белок для ГЕ-ПЯА представляет собой мультиспецифическое антитело, в особенности биспецифическое антитело, которое иногда называют диателом (б1аЬобу). Такие антитела связываются с двумя (или более) различными антигенами. Диатела можно получать различными способами, известными в уровне техники (ноШдег апб ^У1п(ег, 1993, Сиггеп! 0р1июи Вю!есЬпо1. 4: 446-449), например, получать химическими методами или при использовании гибридом.
В одном варианте изобретения антигенсвязывающий белок для ГЕ-ПЯА представляет собой миниантитело. Миниантитела представляют собой минимизированные (минимальные) антителоподобные белки, содержащие ксРу, связанный с СН3 доменом. ни е! а1., 1996, Сапсег Яек. 56: 3055-3061.
В одном варианте изобретения антигенсвязывающий белок для ГЕ-ПЯА представляет собой доменное антитело; см., например, патент США №. 6248516. Доменные антитела (бАЬк) представляют собой функциональные связывающие домены антител, соответствующие вариабельным областям либо тяжёлой (УИ), либо лёгкой (УЬ) цепей человеческих антител. Молекулярная масса бАВк равна примерно 13 кДа или менее одной десятой величины полного антитела. бАВк хорошо экспрессируются в различных хозяевах, включая бактериальные клетки, клетки дрожжей и млекопитающих. Кроме того, бАЬк являются в высокоустойчивыми и сохраняют активность даже после воздействия жёстких условий, таких как в процессе лиофилизации или термоденатурации. См., например, патенты США 6291158; 6582915; 6593081; 6172197; США регистрационный №. 2004/0110941; Европейский патент 0368684; патент США 6696245, международные заявки на патент \У0 04/058821, \У0 04/003019 и \У0 03/002609.
В одном варианте изобретения антигенсвязывающий белок для I^-17ЯЛ представляет собой фрагмент антитела, который является фрагментом любого из антител, указанных в данном описании, который сохраняет специфичность к I^-17ЯЛ. В различных вариантах изобретения белки, связывающие антитело, содержат, но без ограничения, фрагменты Р(аЬ), Р(аЬ'), Р(аЬ')2, Ρν или одноцепочечный Ρν. Как минимум, антитело, предполагаемое по данному описанию, содержит полипептид, который может специфически связываться с I^-17ЯЛ, включающий всю вариабельную область лёгкой или тяжёлой цепи или её часть, такую как один или более СОЯ участков.
Другие примеры фрагментов антитела, связывающих I^-17ЯЛ, включают, но без ограничения, (1) фрагмент РаЬ, состоящий из УЬ, Ун, СЬ и СН1 доменов, (и) фрагмент Рб, состоящий из Ун и СН1 доменов, (ш) Ρν фрагмент, состоящий из УЬ и Ун доменов единичного антитела; (ίν) фрагмент бАЬ Ггадтеп! (^агб е! а1., 1989, №1иге 341: 544-546), который состоит из единичной вариабельной области; (ν) выделенные СОЯ области (участки); (νί) Р(аЬ')2 фрагменты, бивалентные фрагменты, содержащие два связанных РаЬ фрагмента, (νίί) одноцепочечные Ρν молекулы (ксРу), в которых Ун домен и УЬ домен связаны пептидным линкером, который способствует ассоциации двух доменов с образованием сайта связывания антигена (Впб е! а1., 1988, 8с1епсе 242: 423-426, ник!оп е! а1., 1988, Ргос. №11. Асаб. 8сР и.8.А. 85: 58795883), (νίίί) биспецифические димеры одноцепочечного Ру б1тегк (опубликованная заявка РСТ/И892/09965) и (1х) диатела или триатела, мультивалентные (поливалентные) или мультиспецифические фрагменты, созданные с помощью слияния генов (ТотШъоп е!. а1., 2000, МеЛобк Рпхуто1 326: 461-479; международная заявка \¥0 94/13804; ноШдег е! а1., 1993, Ргос. №11 Асаб. 8сР и.8.А. 90: 64446448). Фрагменты антител могут быть модифицированы. Например, молекулы можно стабилизировать включением дисульфидных мостиков, связывающих Ун и УЬ домены (ЯеДег е! а1., 1996, №!иге Вю!есР. 14: 1239-1245). Аспекты изобретения включают варианты, в которых не-СЭР компоненты этих фрагментов представляют собой последовательности человеческого происхождения.
В одном варианте изобретения антигенсвязывающий белок для ГЕ-ПЯА является полностью человеческим антителом. В данном варианте изобретения, как указывается выше, специфические структуры содержат полные изображённые тяжёлые и лёгкие цепи, содержащие СОЯ участки. В других вариантах изобретения используется один или более СОЯ участков по изобретению, наряду с другими СОЯ, кар- 32 019397 касными областями, 1 и Ό областями, константными областями и т.д. из других человеческих антител. Например, СГОВ участки по изобретению могут заменять СОВ участки многих человеческих антител, в (8Ε0 (8Ε0 (8Ε0 (8Ε0 (8Ε0 (8Ε0
ГО ГО ГО
ГО го го
N0:
N0:
N0:
N0:
N0:
N0:
37/8ΕΟ
39/8ΕΟ
41/8ΕΟ
43/8ΕΟ
45/8ΕΟ
47/8ΕΟ
ГО
ГО
ГО
ГО
ГО
ГО
N0:
N0:
N0:
N0:
N0:
N0:
11), АМъ12/АМн12
13), АМъ14/АМн14
15), АМъ16/АМн16
17), АМъ18/АМн18
19), АМъ20/АМн20
21), АМъ22/АМн22 (8Ε0 (8Ε0 (8Ε0 (8Ε0 (8Ε0 (8Ε0 (8Ε0
ГО ГО ГО ГО го го го
N0:
N0:
N0:
N0:
N0:
N0:
N0:
36/8ΕΟ
38/8ΕΟ
40/8ΕΟ
42/8ΕΟ
44/8ΕΟ
46/8ΕΟ
48/8ΕΟ
ГО ГО ГО ГО ГО ГО ГО
N0:
N0:
N0:
N0:
N0:
N0:
N0:
10),
12),
14),
16),
18),
20),
22), частности, соответствующих продажных антител.
Одноцепочечные антитела можно получать, связывая фрагменты вариабельных доменов (Ρν область) тяжёлой и лёгкой цепи аминокислотным мостиком (коротким пептидным линкером), в результате образуется единая (единичная) полипептидная цепь. Такие одноцепочечные Ρν (8ϋΡν8) получают при слиянии ДНК, кодирующей пептидный линкер, между ДНК, кодирующими полипептиды двух вариабельных доменов (V и Уд). Образующиеся полипептиды могут конъюгировать друг с другом с образованием антигенсвязывающих мономеров или они могут образовывать мультимеры (например, димеры, триммеры или тетрамеры), в зависимости от длины гибкого линкера между двумя вариабельными доменами (Когй е! а1., 1997, Рго!. Επ§. 10 : 423; Когй е! а1., 2001, Бюшо1. Εη§. 18: 95-108). Объединяя различные У|. и ^-содержащие полипептиды, можно получать мультимерные βοΡν, которые связываются с различными эпитопами (Кпапдкит е! а1., 2001, Вюто1. Εη§. 18: 31-40). Методы, разработанные для получения одноцепочечных антител, включают методы, описанные в патенте США N0. 4946778; В1гй, 1988, 8с1епсе 242: 423; низ!оп е! а1., 1988, Ргос. №11. Асай. 8с1. И8А 85: 5879; \Уагй е! а1., 1989, №!иге 334: 544, йе СгааГ е! а1., 2002, Ме11юЙ8 Мо1 Βίο1. 178: 379-87. В настоящем изобретении охватываются одноцепочечные антитела, полученные из антител по данному описанию (включая, но без ограничения, 8сΡν, содержащие комбинации вариабельных доменов АМъ1/АМн1 (8Ε0 ГО N0: 27/8ΕΟ ГО N0: 1), АМъ2/АМн2 (8ΕΟ 10 N0: 28/8ΕΟ 10 N0: 2), АМъ3/АМн3 (8ΕΟ 10 N0: 29/8НО 10 N0: 3), АМъ4/АМн4 (8ΕΟ 10 N0: 30/8ΕΟ 10 N0: 4), АМъ5/АМн5 (8ΕΟ 10 N0: 3 1/800 10 N0: 5), АМъ6/АМн6 (800 10 N0: 32/8ΕΟ 10 N0: 6), АМъ7/АМн7 (8ΕΟ 10 N0: 33/8ΕΟ 10 N0: 7), АМъ8/АМн8 (8ΕΟ 10 N0: 34/8ΕΟ 10 N0: 8), АМъ9/АМн9 (8ΕΟ ГО N0: 35/8ΕΟ ГО N0: 9), АМъ10/АМн10 АМъ11/АМн11 АМъ13/АМн13 АМъ15/АМн15 АМъ17/АМн17 АМъ19/АМн19 АМъ21/АМн21
АМъ23/АМн23 (8ΕΟ 10 N0: 49 или 8ΕΟ 10 N0: 50/8ΕΟ 10 N0: 23), АМъ24/АМн24 (8ΕΟ 10 N0: 51/8ΕΟ ГО N0: 24), АМъ25/АМн25 (8ΕΟ ГО N0: 52/8ΕΟ ГО N0: 25), АМъ26/АМн26 (8ΕΟ ГО N0:53^0 ГО N0: 26)), и их комбинации.
В одном варианте изобретения антигенсвязывающий белок для ГО-17ВА представляет собой слитый белок антитела (иногда в данном описании называемый конъюгат антитела). Конъюгатный партнёр может быть белковым или небелковым; последний обычно получают, используя функциональные группы на антигенсвязывающем белке (см. обсуждение ковалентных модификаций антигенсвязанных белков) и на конъюгатном партнёре. Например, линкеры известны в уровне техники; например, общеизвестны гомо- или гетеробифункциональные линкеры (см., 1994 каталог Р1егсе С11епнса1 Сотрапу, технический раздел о сшивающих агентах (кросс-линкерах), стр. 155-200, вводимый в данное описание в качестве ссылки).
В одном варианте изобретения антигенсвязывающий белок для ГО-17ВА представляет собой аналог антитела, иногда называемый синтетическим антителом. Например, в ряде последних работ используют либо альтернативные каркасные структуры белков, либо искусственные скелеты (каркасные структуры) с привитыми участками СЭВ. Такие скелеты (каркасы) включают, но без ограничения, мутации, введённые для стабилизации трёхмерной структуры связывающего белка, а также полностью синтетические скелеты, состоящие, например, из биосовместимых полимеров. См., например, КогпйогГег е! а1., 2003, Рго!е1пз: 81гис!иге, Рипс!юп, апй Вю1пГогтайс8, Уо1ите 53, Еще 1: 121-129. Воцне е! а1., 2004, Вю!есЬпо1. Ргод. 20: 639-654. Кроме того, можно использовать пептидные миметики антител (РАМ), а также миметики антител, в которых в качестве скелета используются компоненты фибронектина.
Как известно в уровне техники, для определения степени идентичности или подобия (сходства) последовательностей белка или нуклеотида с известной последовательностью можно использовать ряд раз личных программ.
Под термином белок по данному описанию понимают по меньшей мере две связанные ковалентной связью аминокислоты, которые включают белки, полипептиды, олигопептиды и пептиды. В некоторых вариантах изобретения две или более ковалентно связанных аминокислоты связаны пептидной связью. Белок может состоять из природных аминокислот и пептидных связей, например, когда белок получают методом рекомбинантной ДНК, используя экспрессионные системы и клетки-хозяева, указанные ниже. Или же белок может включать синтетические аминокислоты (например, гомофенилаланин, цитруллин, орнитин и норлейцин) или пептидомиметические структуры, а именно аналоги пептидов или белков, такие как пептоиды (см. 81топ е! а1., 1992, Ргос. ИаИ. Асай. 8с0 И.8.А. 89: 9367, статья вводится в данное описание в качестве ссылки), которые могут быть устойчивы к протеазам или другим физиологическим условиям и/или условиям хранения. Такие синтетические аминокислоты можно включать, в частности, когда антигенсвязывающий белок синтезируют ш νίΙΐΌ обычными методами, хорошо извест
- 33 019397 ными в уровне техники. Кроме того, можно использовать любую комбинацию пептидомиметических, синтетических и природных остатков/структур. Термин аминокислота включает также иминокислотные остатки, такие как пролин и гидроксипролин. К группа или боковая цепь аминокислоты могут иметь либо (Ь)-, либо (8)-конфигурацию. В конкретном варианте изобретения аминокислоты имеют (Ь)или (^-конфигурацию.
В некоторых аспектах изобретение включает рекомбинантные антигенсвязывающие белки, которые связывают ΙΕ-17ΗΑ, в некоторых вариантах изобретения рекомбинантный человеческий ΙΕ-17ΗΑ или его участок. В этом контексте рекомбинантный белок представляет собой белок, полученный методом рекомбинантной ДНК с применением любых способов и методик, известных в уровне техники, а именно, экспрессией рекомбинантной нуклеиновой кислоты по данному описанию. Способы и методики получения рекомбинантных белков хорошо известны в уровне техники. Варианты изобретения включают рекомбинантные антигенсвязывающие белки, которые связывают ГЕ-17КА дикого типа и его варианты.
Выражение состоящий преимущественно (главным образом, практически) из означает, что аминокислотная последовательность может изменяться на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15% по сравнению с указанной 8ЕО ΙΌ N0: последовательностью и всё ещё сохранять биологическую активность по данному описанию.
В некоторых вариантах изобретения антигенсвязывающие белки по изобретению представляют собой выделенные белки или практически чистые белки. Выделенный белок представляет собой белок, которому не сопутствует, по меньшей мере, некоторая часть материала, с которым он обычно связан в естественном состоянии, например, составляющий по меньшей мере около 5% или по меньшей мере около 50 вес.% от веса тотального белка в данном образце. Понятно, что выделенный белок может составлять от 5 до 99,9 вес.% от содержания тотального белка в зависимости от условий. Например, белок может быть получен в значительно более высокой концентрации за счёт использования индуцибельного промотора или промотора, обладающего высокой экспрессией, так что получают повышенные уровни белка. Определение включает продуцирование антигенсвязывающего белка в различных организмах и/или клетках-хозяевах, известных в уровне техники.
Для аминокислотных последовательностей идентичность и/или подобие (сходство) определяют, используя стандартные методы, известные в уровне техники, включая, но без ограничения, алгоритм локальных идентичности последовательностей Смита и Ватермана (8тйЕ апй \Уа1еппап, 1981, Αάν. Арр1. Ма111. 2: 482), алгоритм выравнивания последовательностей Нидельмана-Вунша (Яеей1етап апй ХУипксй 1970, I. Мо1. Вю1. 48: 443), поиск подобия по методу Пирсона и Липмана (Реагкоп апй Пртап, 1988, Ргос. №11: Асай. 8сГ И.8.А. 85: 2444), компьютерные программы для этих алгоритмов (САР, ΒΕ8ΤΡΙΤ, РА8ТА и ТРА8ТА в ХУЕсопып Сепейск 8ой\хаге Раскаде, Сепейск Сотри!ег Сгоир, 575 8с1епсе ЭгЕе, Майкоп, \У15.), программу Век! Рй кедиепсе, описанную Ое\'егеих е! а1., 1984, №с1. Ас1й Кек. 12: 387-395, предпочтительно используя настройку по умолчанию или методом подбора. Предпочтительно, процент идентичности рассчитывают с помощью РакГЭВ с учётом следующих параметров: штрафная функция за несоответствие (мисмэтч) 1; штраф за гэп 1; штраф за размер гэпа 0.33; и штраф за соединение 30, Сиггеп! Мейюйк 1п 8едиепсе Сотрапкоп апй Апа1ук1к, Масгото1еси1е 8едиепстд апй 8уп!йек1к, 8е1ес!ей Мейюйк апй Аррйсайопк, рр 127-149 (1988), А1ап К. Е1кк, Шс.
Примером применяемого (полезного) алгоритма является РГЕЕИР. РГЕЕИР позволяет проводить выравнивание множества последовательностей из группы родственных последовательностей с применением прогрессивных попарных выравниваний. Он также позволяет построить дерево (схему), показывающее родство, позволяющее объединять в группы, которое используется для построения выравнивания. РГЕЕИР использует упрощение метода прогрессивного выравнивания, предложенное Фенгом и Дулиттлом (Репд & Иоойй1е, 1987, I. Мо1. Ενо1. 35: 351-360); этот метод аналогичен методу, описанному Хиггинсом и Шарпом (Шддтк апй 8Нагр, 1989, САВЮ8 5: 151-153. Применяемые РШЕИР параметры включают штраф по умолчанию за вес гэпа 3.00, штраф по умолчанию за длину гэпа 0.10, и взвешенные концевые гэпы.
Другим примером применяемого алгоритма является ВЙА8Т алгоритм, описанный в: А11кс1ш1 е! а1., 1990, I. Мо1. Вю1. 215: 403-410; А11кс11и1 е! а1., 1997, №с1ею Аайк Кек. 25: 3389- 3402; и Капп е! а1., 1993, Ргос. Ка!1. Асай. 8сГ И.8.А. 90: 5873- 5787. Особенно полезной программой ВЙА8Т является программа ^И-ВЕАЗТ-2, полученная из А11кс1ш1 е! а1., 1996, МеФойк ш Епхуто1оду 266: 460-480. ^И-ВЕАЗТ-2 использует некоторые параметры поиска, большинство из которых устанавливаются в соответствии со значениями по умолчанию. Уточняемые параметры устанавливаются с применением следующих величин: интервал перекрывания = 1, коэффициент перекрывания = 0,125, пороговая величина слова (Τ)=ΙΙ. Параметры Н8Р 8 и Н8Р 82 являются динамическими величинами и устанавливаются самой программой в зависимости от конкретной последовательности и состава конкретной базы данных, относительно которой идёт поиск интересующей последовательности; однако, величины можно корректировать для повышения чувствительности.
Другим применимым алгоритмом является даррей (содержащий гэпы) ВЙА8Т, описанный А1!ксНи1 е! а1., 1993, №с1. Ас1йк Кек. 25: 3389-3402. Саррей ВЙА8Т использует данные из матрицы Вй08ИМ-62; пороговый Т параметр установлен 9; двухсобытийный метод запуска расширений без гэпов
- 34 019397 устанавливает при длине гэпа к стоимость 10+к; Хи устанавливают 16, а Хд устанавливают 40 на стадии поиска в базе данных и 67 на стадии получения данных алгоритма. Выравнивание с гэпами запускают с показателем, соответствующим примерно 22 битам.
Обычно гомология, подобие или идентичность аминокислот между отдельными вариантными СЭВ составляют по меньшей мере 80% относительно изображённых в данном описании последовательностей, и, более типично, с предпочтительно увеличивающейся гомологией или идентичностью по меньшей мере 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 и почти 100%. Аналогично, процент (%) идентичности нуклеотидных последовательностей относительно нуклеотидной последовательности связывающих белков, идентифицированных в данном описании, определяют в виде процентного содержания нуклеотидных остатков в кандидатной последовательности, идентичных нуклеотидным остаткам в кодирующей последовательности антигенсвязывающего белка. В специфическом методе используют ΒΕΑδΤΧ модуль программы ^υ-ΒΕΑ§Τ-2 для параметров по умолчанию, причём интервал перекрывания и коэффициент перекрывания устанавливают 1 и 0.125, соответственно.
Обычно гомология, подобие или идентичность нуклеотидов между нуклеотидными последовательностями, кодирующими отдельные вариантные СОВ, и нуклеотидными последовательностями, приведёнными в данном описании, составляют по меньшей мере 80% и, более типично, с предпочтительно увеличивающейся гомологией или идентичностью по меньшей мере составляют 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99 и почти 100%.
Так вариантный (участок) СОВ представляет собой участок СОВ с точно определённой(ым) гомологией, подобием или идентичностью с исходным участком СОВ по изобретению и имеет общую с ним биологическую функцию, включая, но без ограничения 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% специфичности и/или активности исходного СОВ.
Хотя сайт или область введения варианта аминокислотной последовательности задан, непосредственно мутацию не обязательно задавать. Например, чтобы оптимизировать осуществление мутации в данном сайте, можно провести случайный мутагенез в целевом кодоне или в целевой области и провести скрининг экспрессированных СОВ вариантов антигенсвязывающего белка на оптимальное сочетание заданное активности. Методы получения мутаций-замен в заданных сайтах ДНК с известной последовательностью хорошо известны, например мутагенез с применением М13 праймера и ПЦР мутагенез. Скрининг мутантов проводят, используя анализы активностей антигенсвязывающих белков, такие как связывание Β-ΗΒΑ.
Аминокислотные замены обычно состоят из единичных остатков; инсерции обычно бывают порядка от одного (1), примерно, до двадцати (20) аминокислотных остатков, хотя могут допускаться значительно более длинные инсерции. Интервал делеций составляет примерно от одного (1) до примерно двадцати (20) аминокислотных остатков, хотя в некоторых случаях делеции могут быть значительно больше.
Замены, делеции, инсерции или их любая комбинация могут применяться, чтобы появиться в конечном производном или варианте. Обычно эти изменения проводят на малом количестве аминокислот, чтобы свести к минимуму изменения молекулы, в особенности иммуногенность и специфичность антигенсвязывающего белка. Однако в некоторых условиях могут быть допустимы более значительные изменения. Консервативные замены делают обычно в соответствии с нижеприведённого списка, представленного в виде табл. 2.
Таблица 2
- 35 019397
Исходный остаток
А1а Аг§ Αδη Αδρ Су8 σΐη С1и С1у ΗΪ8 Не
Ьеи
Ьу8 Ме1 РЬе 8ег ТЬг Тгр Туг Уа1
Типичные замены
8ег
Ьу8
С1п, Η18
С1и
8ег
Αδη
Азр
Рго
Αδη, О1п
Ьеи, Уа1
Не, Уа1
Аг§, О1п, С1и Ьеи, Не
Ме1, Ьеи, Туг Тйг
Зег
Туг
Тгр, РЬе
Не, Ьеи
Значительные изменения функции или иммунологической идентичности осуществляют отбором замен, менее консервативных, чем показанные в табл. 2. Например, можно делать замены, которые оказывают более значительное влияние на структуру полипептидного скелета в области изменения, например на альфа-спиральную или бета-складчатую структуру; на заряд или на гидрофобность молекулы в целевом сайте; или на объём боковой цепи. Замены, которые обычно, как предполагается, вызывают наиболее значительные изменения свойств полипептида, представляют собой такие замены, при которых (а) гидрофильный остаток, например серил или треонил, заменяются на гидрофобный остаток (или гидрофобным остатком), например лейцил, изолейцил, фенилаланил, валил или аланил; (б) цистеин или пролин заменяются на любой другой остаток; (в) остаток, имеющий электроположительную боковую цепь, например лизил, аргинил или гистидил, заменяется на электроотрицательный остаток, например, глутамил или аспартил; или (г) остаток, имеющий объёмную боковую цепь, например фенилаланин заменяется на остаток, не имеющий боковой цепи, например глицин.
Варианты обычно проявляют такую же качественную биологическую активность и вызывают такой же иммунный ответ, что и природный аналог, даже если варианты также выбирают таким образом, чтобы модифицировать характеристики антигенсвязывающих белков. Или же вариант может быть создан таким образом, что изменяется биологическая активность антигенсвязывающего белка. Например, сайты гликозилирования могут изменяться или удаляться, как обсуждается в данном описании. Такая модификация I^-17ΒЛ антигенсвязывающих белков, включая антитела, является примером производного. Производное полипептида представляет собой полипептид (например, антитело), который был модифицирован химическими методами, например конъюгацией с другим химическим агентом, например, с полиэтиленгликолем, с альбумином (например, человеческим сывороточным альбумином), фосфорилированием и гликозилированием.
Другие производные антител к Ι^17ΚΑ в объёме настоящего изобретения включают ковалентные или агрегированные конъюгаты антител к I^-17ΒЛ или их фрагментов, с другими белками или полипептидами, например, с помощью экспрессии рекомбинантных слитых белков, содержащих гетерологичные полипептиды, слитые с ^концом или С-концом полипептида антитела к I^-17ΒЛ. Например, конъюгированный пептид может представлять собой гетерологичный сигнальный (или лидерный) полипептид, например лидер альфа-фактора дрожжей, или пептид, такой как эпитопная метка. Слитые белки, содержащие антитело к I^-17ΒЛ, могут содержать пептиды, добавленные для того, чтобы способствовать очистке или идентификации антитела к I^-17ΒЛ (например, поли-Ηίδ). Полипептид антитела к I^-17ΒЛ может быть связан также с ΡΈΑΟ пептидом ΟΥΚΩΩΟΩΚ (8ΕΡ ΙΏ N0: 447), описанным в Норр е! а1., В1о/Теейпо1о§у 6: 1204, 1988, и в патенте США 5011912. Пептид ΡΈΑΟ является высокоантигенным и включает эпитоп, обратимо связанный специфическим моноклональным антителом (ητΑΒ), что позволяет быстро анализировать и легко очищать экспрессированный рекомбинантный белок. Реагенты, пригодные для приготовления слитых белок, в которых пептид ΡΓΑΟ слит с данным полипептидом, являются продажными (81§ша, 8ΐ. Ι.οιιΐδ, МО).
Олигомеры, которые содержат один или более полипептидов антител к Ι^^ΚΑ, можно использовать в качестве антагонистов I^-17ΒЛ. Олигомеры могут быть в виде связанных ковалентной или нековалентной связью димеров, триммеров или высших олигомеров. Рассматривается применение олигомеров, содержащих два или более полипептидов антител I^-17ΒΑ, причём один пример является гомодимером. Другие олигомеры включают гетеродимеры, гомотримеры, гетеротримеры, гомотетрамеры, гете
- 36 019397 ротетрамеры и т.д.
Один вариант изобретения относится к олигомерам, содержащим несколько полипептидов антитела к 1Ь-17ЯА, связанных за счёт ковалентных и нековалентных взаимодействий между пептидными частицами, слитыми с полипептидами антитела к 1Ь-17ЯА. Такие пептиды могут представлять собой пептидные линкеры (спейсеры) или пептиды, обладающие свойством промотировать олигомеризацию. Среди пептидов, которые могут промотировать олигомеризацию связанных с ними полипептидов антител к 1Ь17ЯА, лейциновые застёжки-молнии и некоторые полипептиды, образованные из антител, как ниже описано подробнее.
В конкретных вариантах изобретения олигомеры содержат от двух до четырёх полипептидов антитела к 1Ь-17ЯА. Фрагменты олигомера из полипептидов антитела к 1Ь-17ЯА могут находиться в любой из описанных выше форм, например, в виде вариантов или фрагментов. Предпочтительно, олигомеры содержат полипептиды антитела к 1Ь-17ЯА, которые обладают 1Ь-17ЯА связывающей активностью.
В одном варианте изобретения олигомер получают, используя пептиды иммуноглобулинов. Получение слитых белков, содержащих некоторые гетерологичные полипептиды, слитые с различными участками полипептидов, образованных из антител (включая Ес домен), описано, например, ΛδΙιΚοηαζί е! а1., 1991, ΡNΛБ ИБА 88: 10535; Вугп е! а1., 1990, №11иге 344: 677; и НоПепЬапдН е! а1., 1992 Соп§!гис!юп о£ 1ттипод1оЬи1т Еикюп Рго!е1п8, ΐη Сиггеп! Рго!осо1§ ίη 1ттипо1о§у, Бирр1. 4, радек 10.19.1-10.19.11.
Один вариант настоящего изобретения относится к димеру, содержащему два слитых белка, образующихся при слиянии 1Ь-17ЯА-связывающего фрагмента антитела к 1Ь-17ЯА с Ес областью антитела. Димер можно получать, например, встраивая генное слияние, кодирующее слитый белок, в подходящий вектор экспрессии, экспрессирующий генное слияние в клетках-хозяевах, трансформированных с помощью рекомбинантного вектора экспрессии, и позволяя слитому белку собираться в антителоподобные молекулы, при этом между Ес фрагментами образуются межцепные дисульфидные связи, давая димер.
Термин Ес полипептид по данному описанию включает нативную и мутеиновую формы полипептидов, образованные из Ес области антитела. Также включаются усечённые (процессированные) формы таких полипептидов, содержащие шарнирную область, которая промотирует димеризацию. Слитые белки, содержащие Ес фрагменты (и образованные из них олигомеры), предпочтительны, они обеспечивают простую очистку аффинной хроматографией на колонках с Белком А или Белком О.
Один подходящий Ес полипептид, описанный в опубликованной Международной заявке РСТ \У0 93/10151 (вводимой в данное описание в качестве ссылки), представляет собой одноцепочечный полипептид, простирающийся от ^концевой шарнирной области до нативного С-конца Ес области человеческого 1дС антитела. Другой применимый Ес полипептид представляет собой Ес мутеин, описанный в патенте США 5457035 и в Вайт е! а1., 1994, ЕМВ0 1. 13: 3992-4001. Аминокислотная последовательность этого мутеина идентична аминокислотной последовательности нативной Ес последовательности, представленной в Международной заявке \¥0 93/10151, за исключением того, что в положении 19 аминокислота Ьеи заменена на А1а, в положении 20 аминокислота Ьеи заменена на О1и и в положении 22 аминокислота О1у заменена на А1а. Мутеин проявляет пониженную аффинность к Ес рецепторам.
В других вариантах изобретения вариабельный участок тяжёлой и/или лёгкой цепей антитела к Ш17ЯА может быть заменён на вариабельный участок тяжёлой и/или лёгкой цепи некоего антитела.
Или же олигомер представляет собой слитый белок, содержащий несколько полипептидов антитела к 1Ь-17ЯА с пептидными линкерами (спейсерными пептидами) или без них. Среди подходящих пептидных линкеров пептидные линкеры, описанных в патентах США 4751180 и 4935233.
Другой метод получения олигомерных производных антитела к Ш-17ЯА включает лейциновую застёжку-молнию. Домены лейциновой молнии представляют собой пептиды, которые промотируют (инициируют) олигомеризацию белков, в которых они находятся. Лейциновые молнии первоначально были идентифицированы в нескольких ДНК-связанных белках (ЬапйксЕик е! а1., 1988, Баепсе 240: 1759), и с тех пор обнаружены в ряде различных белков. Среди известных лейциновых застёжек-молний природные пептиды и их производные, которые димеризуются или тримеризуются. Примеры доменов лейциновых застёжек-молний, пригодных для получения растворимых олигомерных белков, описаны в опубликованной Международной заявке РСТ \У0 94/10308, а лейциновая застёжка-молния из белка Ό лёгочного сурфактанта (БРИ) описана в статье Норре е! а1., 1994, ЕЕВБ Ье!!ег8 344: 191, которая вводится в данное описание в качестве ссылки. Применение модифицированной лейциновой молнии для стабильной тримеризации слитого с ней гетерологичного белка описано Еапк1оте е! а1., 1994, Бетт. 1ттипо1. 6: 267-78. В одном методе рекомбинантные слитые белки, содержащие фрагмент или производное антитела к 1Ь-17ЯА, слитые с пептидом лейциновой молнии, экспрессируются в подходящих клетках-хозяевах, а образующиеся растворимые олигомерные фрагменты или производные антитела к 1Ь-17ЯА выделяют из культурального супернатанта.
Ковалентные модификации также рассматривают при получении производных антигенсвязывающих белков для 1Ь-17ЯА и входят в объём данного изобретения и обычно, но не всегда, осуществляются после трансляции. Например, некоторые типы ковалентных модификаций антигенсвязывающего белка вводят в молекулу реакцией специфических аминокислотных остатков антигенсвязывающего белка с органическим дериватизирующим агентом, который способен реагировать с выбранными боковыми це
- 37 019397 пями или с N или С-концевыми остатками.
Чаще всего цистеинильные остатки реагируют с α-галогенацетатами (и соответствующими аминами), такими как хлоруксусная кислота или хлорацетамид, давая карбоксиметильные или карбоксиамидометильные производные. Цистеинильные остатки также дериватизируются по реакции с бромтрифторацетоном, а-бром-в-(5-имидозоил)пропионовой кислотой, хлорацетилфосфатом, №алкилмалеимидами, 3-нитро-2-пиридилдисульфидом, метил 2-пиридилдисульфидом, п-хлормекурибензоатом, 2-хлормеркури-4-нитрофенолом или хлор-7-нитробензо-2-окса-1,3-диазолом.
Гистидильные остатки дериватизируются по реакции с диэтилпирокарбонатом при рН 5,5-7,0, так как этот агент является сравнительно специфическим в отношении боковой цепи гистидила. Также применим парабромфенацилбромид; реакцию проводят, предпочтительно, в 0,1 М растворе какодилата натрия при рН 6,0.
Лизинильные и аминоконцевые остатки реагируют с ангидридами янтарной или других карбоновых кислот. Дериватизация с помощью этих агентов вызывает эффект обращения заряда лизинильных остатков. Другие подходящие реагенты для дериватизации альфа-аминосодержащих остатков включает имидоэфиры, такие как метил пиколинимидат; пиридоксаль фосфат; пиридоксаль; хлорборогидрид; тринитробензолсульфокислоту; О-метилизомочевину; 2,4-пентандион; и катализируемую трансаминазой реакцию с глиоксилатом.
Аргинильные остатки модифицируют по реакции с одним или несколькими обычными реагентами, среди которых фенилглиоксаль, 2,3-бутандион, 1,2-циклогександион и нингидрин. Для дериватизации остатков аргинина требуется, чтобы реакция проводилась в щелочной среде вследствие высокого значения рКа гуанидиновой функциональной группы. Кроме того, эти реагенты могут реагировать с группами лизина, а также с эпсилон-аминогруппой аргинина.
Можно проводить специфическую модификацию тирозильных остатков, при этом особенно интересно введение спектральных меток в тирозильные остатки по реакции с ароматическими диазониевыми соединениями или тетранитрометаном. Чаще всего применяют №ацетилимидазол и тетранитрометан, при этом образуются О-ацетильные тирозильные производные и 3-нитропроизводные, соответственно. Тирозильные остатки йодируют, используя 125Ι или 131Ι для получения меченых белков для применения в радиоиммуноанализе, применим описанный выше метод с использованием хлорамина Т.
Карбоксильные боковые группы (аспартил или глутамил) селективно модифицируют по реакции с карбодиимидами (Я-К=С=К-Я'), где Я и Я' обозначают необязательно различные алкильные группы, таке как 1-циклогексил-3-(2-морфолинил-4-этил)карбодиимид или 1-этил-3-(4-азониа-4,4-диметилпентил) карбодиимид. Кроме того, аспартильный и глутамильный остатки превращают в аспарагинильный и глутаминильный остатки по реакции с ионами аммония.
Дериватизация с помощью бифункциональных агентов применима для сшивания (перекрёстного связывания) антигенсвязывающих белков с нерастворимой в воде подложкой матрицы или поверхностью подложки для применения в различных методах. Обычно применяемые сшивающие агенты включают, например, 1,1-бис(диазоацетил)-2-фенилэтан, глутаральдегид, эфиры №гидроксисукцинимида, например эфиры 4-азидосалициловой кислоты, гомобифункциональные имидоэфиры, включая дисукцинимидил эфиры, такие как 3,3'-дитиобис(сукцинимидилпропионат), и бифункциональные мале(ин) имиды, такие как бис-Ы-малеимидо-1,8-октан. Дериватизирующие агенты, такие как метил-3-[(пазидофенил)дитио]пропиоимидат, дают фотоактивируемые интермедиаты, которые способны образовывать сшивки (поперечные связи) на свету. Или же для иммобилизации белка используют реактивные нерастворимые в воде матрицы, такие как углеводы, активированные цианогенбромидом, и реактивные субстраты, описанные в патентах США 3969286; 3691016; 4195128; 4247642; 4229537 и 4330440.
Глутаминильный и аспарагинильный остатки часто деамидируют в соответствующий глутамильный или аспартильный остатки, соответственно. Или же эти остатки деамидируют в слабокислой среде. Любая форма этих остатков входит в объём данного изобретения.
Другие модификации включают гидроксилирование пролина и лизина, фосфорилирование гидроксильных групп серильного или треонильного остатков, метилирование α-аминогрупп боковых цепей лизина, аргинина и гистидина (Т.Е. СгсщЫоп. РгсИеиъ: 81гис1игс аиб Мо1еси1аг Ргорегйек, \У.Н. Ргеетаи & Со., 8аи Егаис18со, 1983, рр. 79-86), ацетилирование ^концевого амина и амидирование любой Сконцевой карбоксильной группы.
Другой тип ковалентной модификации антигенсвязывающего белка, включённый в объём настоящего изобретения, охватывает изменение паттерна гликозилирования белка. Как известно в уровне техники, паттерны гликозилирования могут зависеть как от последовательности белка (например, присутствия или отсутствия конкретных аминокислотных остатков для гликозилирования, обсуждаемое ниже), так и от клетки-хозяина или организма, в котором продуцируется белок. Конкретные экспрессионные системы (системы экспрессии) обсуждаются ниже.
Гликозилирование полипептидов обычно является ^связанным или 0-связанным. ^связанное гликозилирование (гликозилирование по азоту) относится к присоединению углеводного фрагмента к боковой цепи остатка аспарагина. Три-пептидные последовательности аспарагин-Х-серин и аспарагин-Х
- 38 019397 треонин, где Х обозначает любую аминокислоту, кроме пролина, представляют собой последовательности узнавания (распознавания) для ферментативного связывания углеводного фрагмента с боковой цепью аспарагина. Таким образом, присутствие любой из этих три- пептидных последовательностей в полипептиде создаёт потенциальный сайт гликозилирования. О-связанное гликозилирование относится к связыванию одного из сахаров Ν-ацетилгалактозамина, галактозы или ксилозы с гидроксиламинокислотой, чаще всего серином или треонином, хотя можно также использовать 5-гидроксипролин или 5-гидроксилизин.
Добавление сайтов гликозилирования к антигенсвязывающему белку обычно проводят, изменяя аминокислотную последовательность таким образом, чтобы она содержала одну или более вышеописанных три-пептидных последовательностей (для Ν-связанных сайтов гликозилирования). Изменения можно делать с помощью добавления одного или более остатков серина или треонина к исходной последовательности или замены на один или более остатков серина или треонина в исходной последовательности (для О-связанных сайтов гликозилирования). Для простоты аминокислотную последовательность антигенсвязывающего белка, предпочтительно, меняют с помощью изменений на уровне ДНК, в частности с помощью мутаций в ДНК, кодирующей целевой белок, в предварительно выбранных основаниях, так что образуются такие кодоны, которые транслируются в заданные аминокислоты.
Другим способом повышения числа углеводных частиц на антигенсвязывающем белке является химическая или ферментативная конденсация гликозидов с белком. Эти процедуры являются предпочтительными, так как они не требуют получения белка в клетке-хозяине, которая потенциально способна к Ν- или О-гликозилированию. В зависимости от способа конденсации сахар(а) могут связываться с (а) аргинином и гистидином, (б) свободными гидроксильными группами, (в) свободными сульфгидрильными группами, такими как сульфгидрильные группы цистеина, (г) свободными гидроксильными группами, такими как гидроксильные группы серина, треонина или гидроксипролина, (д) ароматическими остатками, такими как ароматические остатки фенилаланина, тирозина или триптофана, или (е) амидными группами глутамина. Эти методы описаны в международной патентной заявке νΟ 87/05330, опубликованной 11 сентября 1987 года, и в статье АрИп апб \νπ5ΐοη, 1981, СЯС С’гЦ. Яеν. Вюсйет., рр. 259-306.
Удаление углеводных фрагментов (частиц), имеющихся в исходном антигенсвязывающем белке, можно осуществлять химическими или ферментативными методами. При химическом дегликозилировании требуется обработка белка трифторметансульфокислотой или аналогичным соединением. Эта обработка приводит к расщеплению большей части или всех сахаров, за исключением связывающего сахара (Ν-ацетилглюкозамина или Ν-ацетилгалактозамина), при этом полипептид не затрагивается (остаётся интактным). Химическое гликозилирование описано в Нактиййш с1 а1., 1987, Агсй. ВюсНст. ВюрНуъ. 259: 52 и Ебде с1 а1., 1981, Апа1. ВюсНст. 118: 131. Ферментативное отщепление углеводных фрагментов на полипептиде можно осуществлять с использованием различных эндо- и экзо-гликозидаз, как описано Т1ю1акига е1 а1., 1987, Ме111. Еηζутο1 138: 350. Гликозилирование в потенциальных сайтах гликозилирования можно предупредить, используя туникамицин, как описано Ииккт е1 а1., 1982, 1. Βίο1 С1ет. 257: 3105. Туникамицин блокирует образование связей белок-№гликозид.
Другой тип ковалентной модификации антигенсвязывающего белка включает связывание антигенсвязывающего белка с различными небелковыми полимерами, включая, но без ограничения, различные полиолы, такие как полиэтиленгликоль, полипропиленгликоль или полиоксиалкилены, таким образом, как представлено в патентах США Νο. 4640835; 4496689; 4301144; 4670417; 4791192 или 4179337. Кроме того, как известно в уровне техники, аминокислотные замены можно осуществлять в различных положениях в антигенсвязывающем белке, чтобы способствовать добавлению полимеров, таких как ПЭГ.
В некоторых вариантах изобретения ковалентная модификация антигенсвязывающих белков по изобретению включает добавление одной или более меток.
Термин группа для мечения (введения метки), группа, вводящая метку означает любую детектируемую метку. Примеры подходящих групп для мечения включают, но без ограничения, следующие: радиоизотопы или радионуклиды (например, 3Н, 14С, 15Ν; 35δ, 90Υ, 99Тс, 111Ιη, 125Ι, 131Ι), флуоресцентные группы (например, РЧТС, родамин, люминофоры, содержащие лантаниды), группы ферментов (например, пероксидаза хрена, β-галактозидаза, люцифераза, щелочная фосфатаза), хемилюминесцентные группы, биотинильные группы или заданные эпитопы полипептидов, распознаваемые вторичным репортёром (например, пары последовательностей лейциновой молнии, сайты связывания вторичных антител, металл-связывающие домены, эпитопные метки). В некоторых вариантах изобретения группы для мечения связываются с антигенсвязывающим белком с помощью спейсеров различной длины, чтобы уменьшить возможные пространственные затруднения. Различные методы введения метки в белки известны в уровне техники и могут использоваться при воплощении настоящего изобретения.
В целом метки относятся к различным классам в зависимости от анализа, с помощью которого их надо детектировать: а) изотопные метки, которые могут быть радиоактивными или тяжёлыми изотопами;
б) магнитные метки (например, магнитные частицы); в) активные редокс-частицы; г) оптические красители; ферментные группы (например, пероксидаза хрена, β-галактозидаза, люцифераза, щелочная фосфатаза); д) биотинилированные группы; и е) заданные полипептидные эпитопы, распознаваемые вторичньм
- 39 019397 репортёром (например, пары последовательностей лейциновой молнии, сайты связывания вторичных антител, металл-связывающие домены, эпитопные метки и т.д.). В некоторых вариантах изобретения группа, вводящая метку, связывается с антигенсвязывающим белком с помощью спейсеров различной длины, чтобы снизить возможные пространственные затруднения. Различные методы введения метки в белки известны в уровне техники и могут использоваться при воплощении настоящего изобретения.
Специфические метки включают оптические красители, в том числе, но без ограничения, хромофоры, люминофоры и флуорофоры, причём последние являются специфическими во многих случаях. Флуорофоры могут быть либо низкомолекулярными флуорофорами, либо белковыми флуорофорами.
Под флуоресцентной меткой понимают любую молекулу, которую можно детектировать, используя присущие ей свойства. Подходящие флуоресцентные метки включают, но без ограничения, флуоресцеин, родамин, тетраметилродамин, эозин, эритозин, кумарин, метилкумарины, пирен, Малахитовый зелёный, стильбен, Ьисйет Ус11о\у. Саксабе В1ие1, Техак Веб (Техас красный), [ЛЕОАЖ. ЕОАЛЗ, Β0ΌΙΡΥ РЬ, ЬС Веб 640, Су 5, Су 5.5, ЬС Веб 705, 0гедоп дгееп (Орегон зелёный), красители А1еха-Р1иот (А1еха Р1иог 350, А1еха Р1иог 430, А1еха Р1иог 488, А1еха Р1иог 546, А1еха Р1иог 568, А1еха Р1иог 594, А1еха Р1иог 633, А1еха Р1иог 660, А1еха Р1иог 680), Саксабе В1ие, Саксабе Υе11ο\ν и В-фикоэритрин (РЕ) (Мо1еси1аг РгоЬек, Еидепе, 0В), ЕПС, Родамин и Техак Веб (Техас красный) (Р1егсе, ВоскГогб. Ш), Су5, Су5.5, Су7 (АтеткЕат Ь1Ге 8с1епсе, Р111кЬигдН, РА). Применимые оптические красители, включая флуорофоры, описаны в справочнике Мо1еси1аг РгоЬек НапбЬоок Ьу ВВЕатб Р. Наид1апб, специально вводимом в данное описание в качестве ссылки.
Подходящие белковые флуоресцентные метки включают также, но без ограничения, зелёный флуоресцентный белок, в том числе Веш11а, РШокатсик или Аецпогеа виды СЕР (СЕа1йе е1 а1., 1994, 8аепсе 263: 802-805), ЕСЕР (С1оп(есЕ БаЬогаЮпек. Шс., СепЬапк инвентарный номер И55762), синий флуоресцентный белок (ВЕР, ОиапЦнп Вю1есЕпо1офек. Ечс. 1801 бе Ма1коппецуе В1уб. \Уек1, 8(Н Р1оог, МопЦеак, ОпеЬес, Сапаба Н3Н П9; 81апЬег, 1998, Вю1есЕпк|иек 24: 462-471; Нет е1 а1., 1996, Сигг. Вю1. 6: 178-182), усиленный жёлтый флуоресцентный белок (ΕΥРΡ, С1оп1есЕ БаЬогаЮпек. Шс.), люциферазу (ΒΕί1<ί е1 а1., 1993, I. Iттиηο1. 150: 5408-5417), β галактозидазу (№1ап е1 а1., 1988, Ргос. №111 Асаб. 8сЕ и.8.А. 85: 26032607) и Веш11а (Международные патентные заявки \У0 92/15673, \У0 95/07463, \У0 98/14605, \У0 98/26277, №0 99/49019, патенты США N0. 5292658, 5418155, 5683888, 5741668, 5777079, 5804387, 5874304, 5876995, 5925558). Все вышеперечисленные ссылочные материалы однозначно вводятся в данное описание в качестве ссылки.
Полинуклеотиды, кодирующие антигенсвязывающие белки для 1Ь-17КА
Изобретение охватывает нуклеиновые кислоты, кодирующие антигенсвязывающие белки для Ш17ВА, включая антитела по данному описанию. Полинуклеотидные последовательности для вариабельных областей тяжёлой цепи АМН1-26 представлены в 8ЕО ΙΌ N0: 54-79, соответственно, а полинуклеотидные последовательности для вариабельных областей лёгкой цепи АМъ1-26 представлены в 8ЕО Ш N0: 80-106, соответственно, причём АМЬ23 имеет два варианта, показанных в 8ЕО ΙΌ N0: 102 и 103. 8Е0 ΙΌ N0 для полинуклеотидных последовательностей, кодирующих Н-СЭВ1, Н-СЭВ2, Н-СИВ3, ЬСИВ1, Ь-СОВ2 и Ь-СОВ3 представлены в табл. 1.
Аспекты изобретения включают полинуклеотидные варианты (например, вследствие вырожденности), которые кодируют аминокислотные последовательности по данному описанию.
Аспекты изобретения включают различные варианты изобретения, включая, но без ограничения, следующие типичные варианты: вариант изобретения 51: выделенный полинуклеотид, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид кодирует полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
А. а) последовательности вариабельного домена лёгкой цепи, по меньшей мере на 80% идентичной последовательности вариабельного домена лёгкой цепи АМъ1-26 (8Е0 ΙΌ N0: 27-53, соответственно);
б) . последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи, по меньшей мере на 80% идентичной последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи АМН1- 26 (8Е0 ΙΌ N0: 1-26, соответственно); или
в) вариабельного домена лёгкой цепи по п. (а) и вариабельного домена тяжёлой цепи по п. (б); и
Б. СИВ1, СЭВ2, СИВ3 лёгкой цепи и СИВ1, СЭВ2, СЭВ3 тяжёлой цепи, которые отличаются в целом не более чем на три аминокислотные добавления, замены и/или делеции в каждом СИВ от следующих последовательностей:
а) СИВ 1 (8ЕО ΙΌ N0: 185), СИВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 186), СИВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 187) лёгкой цепи и СИВ1 (8ЕО ΙΌ N0: 107), СИВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 108), СИВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 109) тяжёлой цепи антитела АМ-1;
б) СИВ1 (8ЕО ΙΌ N0: 188), СИВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 189), СИВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 190) лёгкой цепи и СИВ1 (8ЕО ΙΌ N0: 110), СИВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 111), СИВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 112) тяжёлой цепи антитела АМ-2;
в) СИВ1 (8ЕО ΙΌ N0: 191), СИВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 192), СИВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 193) лёгкой цепи и СИВ1 (8ЕО ΙΌ N0: 113), СИВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 114), СИВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 115) тяжёлой цепи антитела АМ-3;
г) СИВ1 (8ЕО ΙΌ N0: 194), СИВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 195), СИВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 196) лёгкой цепи и СИВ1 (8ЕО ΙΌ N0: 116), СИВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 117), СИВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 118) тяжёлой цепи антитела АМ-4;
д) СИВ1 (8ЕО ΙΌ N0: 197), СИВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 198), СИВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 199) лёгкой цепи и СИВ1
- 40 019397 (8ЕО ΙΌ ΝΟ: 119), СЕЯ2 (8ЕО ΙΌ ΝΟ: 120), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 121) тяжёлой цепи антитела АМ-5;
е) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 200), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 201), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 202) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 122), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 123), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 124) тяжёлой цепи антитела АМ-6;
ж) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 203), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 204), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 205) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 125), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 126), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 127) тяжёлой цепи антитела АМ-7;
з) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 206), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 207), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 208) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 128), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 129), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 130) тяжёлой цепи антитела АМ-8;
и) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 209), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 210), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 211) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 131), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 132), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 133) тяжёлой цепи антитела АМ-9;
к) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 212), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 213), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 214) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 134), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 135), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 136) тяжёлой цепи антитела АМ-10;
л) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 215), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 216), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 217) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 137), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 138), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 139) тяжёлой цепи антитела АМ-11;
м) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 218), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 219), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 220) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 140), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 141), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 142) тяжёлой цепи антитела АМ-12;
н) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 221), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 222), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 223) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 143), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 144), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 145) тяжёлой цепи антитела АМ-13;
о) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 224), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 225), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 226) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 146), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 147), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 148) тяжёлой цепи антитела АМ-14;
п) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 227), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 228), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 229) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 149), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 150), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 151) тяжёлой цепи антитела АМ-15;
р) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 230), СОЯ2 (8ЕЕ) ЕЕ ΝΟ: 231), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 232) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 152), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 153), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 154) тяжёлой цепи антитела АМ-16;
с) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 233), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 234), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 235) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 155), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 156), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 157) тяжёлой цепи антитела АМ-17;
т) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 236), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 237), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 238) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 158), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 159), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 160) тяжёлой цепи антитела АМ-18;
у) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 239), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 240), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 241) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 161), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 162), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 163) тяжёлой цепи антитела АМ-19;
ф) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 242), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 243), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 244) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 164), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 165), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 166) тяжёлой цепи антитела АМ-20;
х) СОЯ1 (8ЕЕ) ЕЕ ΝΟ: 245), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 246), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 247) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ЕЕ ΝΟ: 167), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 168), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 169) тяжёлой цепи антитела АМ-21;
ц) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 248), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 249), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 250) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 170), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 171), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 172) тяжёлой цепи антитела АМ-22;
ч) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 251), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 252), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 253) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 173), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 174), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
ш) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 254), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 255), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 256) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 173), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 174), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
щ) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 257), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 258), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 259) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 176), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 177), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 178) тяжёлой цепи антитела АМ-24;
э) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 260), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 261), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 262) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 179), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 180), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 181) тяжёлой цепи антитела АМ-25; или
ю) СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 263), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 264), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 265) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 182), СОЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 183), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ ΝΟ: 184) тяжёлой цепи антитела АМ-26;
причём указанное антитело специфически связывает ΙΌ-17 рецептор А) вариант изобретения 52: полинуклеотид по п.51, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид гибридизуется в жёстких условиях с полноразмерным комплементом полинуклеотида, выбранного из группы, состоящей из:
а) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ1/АМН1 (8Е0 ΙΌ ΝΟ: 80/8ЕО ΙΌ ΝΟ: 54);
б) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ2/АМН2 (8ЕО ΙΌ ΝΟ: 81/8ЕО ΙΌ ΝΟ: 55);
в) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ3/АМН3 (8ЕО ΙΌ ΝΟ: 82/8ЕО ΙΌ ΝΟ: 56);
г) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМЬ4/АМН4 (8ЕО ΙΌ ΝΟ: 83/8ЕО ΙΌ ΝΟ: 57);
д) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМЬ5/АМН5 (8ЕО ΙΌ ΝΟ: 84/8ЕО ΙΌ ΝΟ: 58);
е) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМЬ6/АМН6 (8ЕО ΙΌ ΝΟ: 85/8ЕО ΙΌ ΝΟ: 59);
ж) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ7/АМН7 (8ЕО ΙΌ ΝΟ: 86/8ЕО ΙΌ ΝΟ: 60);
- 41 019397
3) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь8/АМн8 (8ЕО ΙΌ N0: 87/8ЕО ΙΌ N0: 61);
и) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ9/АМн9 (8Е0 ΙΌ N0: 88/8ЕО ΙΌ N0: 62);
к) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ10/АМн10 (8Е0 ΙΌ N0: 89/8ЕО ΙΌ N0: 63);
л) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ11/АМН11 (8Е0 ΙΌ N0: 90/8ЕО ΙΌ N0: 64);
м) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь12/АМн12 (8Е0 ΙΌ N0: 91/8ЕО ΙΌ N0: 65);
н) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь13/АМн13 (8Е0 ΙΌ N0: 92/8ЕО ΙΌ N0: 66);
о) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь14/АМн14 (8Е0 ΙΌ N0: 93/8ЕО ΙΌ N0: 67);
п) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ15/АМн15 (8Е0 ΙΌ N0: 94/8ЕО ΙΌ N0: 68);
р) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ16/АМн16 (8Е0 ΙΌ N0: 95/8ЕО ΙΌ N0: 69);
с) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ17/АМн17 (8Е0 ΙΌ N0: 96/8ЕО ΙΌ N0: 70);
т) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь18/АМн18 (8Е0 ΙΌ N0: 97/8ЕО ΙΌ N0: 71);
у) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь19/АМн19 (8Е0 ΙΌ N0: 98/8ЕО ΙΌ N0: 72);
ф) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ20/АМн20 (8Е0 ΙΌ N0: 99/8ЕО ΙΌ N0: 73);
х) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ21/АМн21 (8Е0 ΙΌ N0: 100/8Е0 ΙΌ N0: 74);
ц) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ22/АМн22 (8Е0 ΙΌ N0: 101/8Е0 ΙΌ N0: 75);
4) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь23/АМн23 (8Е0 ΙΌ N0: 102 или 8Е0 ΙΌ N0: 103/8ЕО ΙΌ N0: 76);
ш) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь24/АМн24 (8Е0 ΙΌ N0: 104/8ЕО ΙΌ N0: 77);
щ) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь25/АМн25 (8Е0 ΙΌ N0: 105/8ЕО ΙΌ N0: 78); и
э) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ26/АМн26 (8Е0 ΙΌ N0: 106/8ЕО ΙΌ N0: 79).
Вариант изобретения 53: полинуклеотид по варианту изобретения 51, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид гибридизуется в жёстких условиях с полноразмерным комплементом полинуклеотида, выбранного из группы, состоящей из:
а) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 345, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 346, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 347, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 266, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 267, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 268, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-1;
б) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 348, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 349, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 350, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 269, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 270, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0; 271, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-2;
в) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 351, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 352, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 353, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 272, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 273, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 274, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-3;
г) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 354, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 355, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеоти
- 42 019397 да с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 356, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 275, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 276, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 277, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-4;
д) полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 357, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 358, кодирующего СОК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 359, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 278, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 279, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 280, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-5;
е) полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 360, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 361, кодирующего СОК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 362, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 281, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 282, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 283, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-6;
ж) полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 363, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 364, кодирующего СОК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 365, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 284, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 285, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 286, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-7;
з) полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 366, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 367, кодирующего СОК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 368, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 287, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 288, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 289, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-8;
и) полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 369, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 370, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 371, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 290, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 291, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 292, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-9;
к) полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 372, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 373, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 374, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 293, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 294, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 295, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-10;
л) полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 375, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 376, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 377, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 296, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 297, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 298, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-11;
м) полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 378, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 379, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 380, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 299, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 300, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 301, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-12;
н) полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 381, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 382, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 383, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 302, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 303, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 304, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-13;
о) полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 384, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 385, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 386, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕД ΙΌ ΝΟ: 305, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последователь
- 43 019397 ностью 8ЕО Ш N0: 306, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ю N0: 307, кодирующего СЭЕЗ тяжёлой цепи антитела АМ-14;
п) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 387, кодирующего СОК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 388, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 389, кодирующего СЭКЗ лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 309, кодирующего СОК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 310, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ю N0: 311, кодирующего СЭКЗ тяжёлой цепи антитела АМ-15;
р) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 390, кодирующего СОК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 391, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 392, кодирующего СЭКЗ лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 311, кодирующего СОК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 312, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ю N0: 313, кодирующего СЭКЗ тяжёлой цепи антитела АМ-16;
с) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 393, кодирующего СОК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 394, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 395, кодирующего СЭЕЗ лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 314, кодирующего СОК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 315, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ю N0: 316, кодирующего СЭЕЗ тяжёлой цепи антитела АМ-17;
т) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 396, кодирующего СОК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 397, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 398, кодирующего СЭЕЗ лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 317, кодирующего СОК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 318, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ю N0: 319, кодирующего СЭКЗ тяжёлой цепи антитела АМ-18;
у) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 399, кодирующего СОК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 400, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 401, кодирующего СЭЕЗ лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 320, кодирующего СОК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 321, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ю N0: 322, кодирующего СЭЕЗ тяжёлой цепи антитела АМ-19;
ф) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 402, кодирующего СОК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 403, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 404, кодирующего СЭЕЗ лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 323, кодирующего СОК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 324, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ю N0: 325, кодирующего СЭКЗ тяжёлой цепи антитела АМ-20;
х) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 405, кодирующего СОК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 406, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 407, кодирующего СЭЕЗ лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 326, кодирующего СОК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 327, кодирующего СОК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ю N0: 328, кодирующего СЭЕЗ тяжёлой цепи антитела АМ-21;
ц) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 408, кодирующего СОК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 409, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 410, кодирующего СЭЕЗ лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 329, кодирующего СОК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 330, кодирующего СОК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ю N0: 331, кодирующего СЭКЗ тяжёлой цепи антитела АМ-22;
ч) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 411, кодирующего СОК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 412, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 413, кодирующего СЭЕЗ лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 332, кодирующего СОК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 333, кодирующего СОК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ю N0: 334, кодирующего СЭЕЗ тяжёлой цепи антитела АМ-23;
ш) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 414, кодирующего СОК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 415, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 416, кодирующего СЭЕЗ лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 332, кодирующего СОК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ш N0: 333, кодирующего СОК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 Ю N0: 334, кодирующего СЭКЗ тяжёлой цепи антитела АМ-23;
- 44 019397
щ) полинуклеотида с последовательностью 8ΕΟ ΙΌ N0: 417, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 418, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 419, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 335, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 336, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 337, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-24;
э) полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 420, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 421, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 422, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 338, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 339, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 340, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-25; или
ю) полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 423, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 424, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 425, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 341, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 342, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Ε0 ΙΌ N0: 343, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-26.
Вариант изобретения 54: полинуклеотид по варианту изобретения 51, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид кодирует полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
а) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΛΜ21/ΛΜΗ1 (8Ε0 ΙΌ N0: 2ЖНО ΙΌ N0: 1);
б) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜβ2/ΑΜη2 (8Ε0 ΙΌ N0: 28/δΕΟ ΙΌ N0:2);
в) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜΕ3/ΑΜΗ3 (8Ε0 ΙΌ N0: 29/δΕΟ ΙΌ N0: 3);
г) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜΕ4/ΑΜΗ4 (8Ε0 ΙΌ N0: 30/δΕΟ ΙΌ N0: 4);
д) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜΕ5/ΑΜΗ5 (8Ε0 ΙΌ N0: 31/δΕΟ ΙΌ N0: 5);
е) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜ^/ΑΜ^ (8Ε0 ΙΌ N0: 32/8ΕΡ ΙΌ N0: 6)
ж) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜ^7/ΑΜΗ7 (8Ε0 ΙΌ N0: 33/8ΕΡ ΙΌ N0: 7);
з) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜ^8/ΑΜΗ8 (8Ε0 ΙΌ N0: 34/8ΕΡ ΙΌ N0: 8);
и) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜΕ9/ΑΜΗ9 (8Ε0 ΙΌ N0: 35/8ΕΡ ΙΌ N0: 9);
к) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜΕ10/ΑΜΗ10 (8Ε0 ΙΌ N0: 36/δΕΟ ΙΌ N0: 10);
л) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜΕ11/ΑΜΗ11 (8Ε0 ΙΌ N0: 37/δΕΟ ΙΌ N0: 11);
м) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜ^Σ/ΑΜι^Σ (8Ε0 ΙΌ N0: 38/8ΕΡ ΙΌ N0: 12);
н) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜ^Η/ΑΙ^Π (8Ε0 ΙΌ N0: 39/8ΕΡ ΙΌ N0: 13);
о) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜ^14/ΑΜΗ14 (8Ε0 ΙΌ N0: 40/δΕΟ ΙΌ N0: 14);
п) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜΕ15/ΑΜΗ15 (8Ε0 ΙΌ N0: 41/8ΕΡ ΙΌ N0: 15);
ρ) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜΕ16/ΑΜΗ16 (8Ε0 ΙΌ N0: 42/δΕΟ ΙΌ N0: 16);
с) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜΕ17/ΑΜΗ17 (8Ε0 ΙΌ N0: 43/8ΕΡ ΙΌ N0: 17);
т) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜβ18/ΑΜη18 (8Ε0 ΙΌ N0: 44/δΕΟ ΙΌ N0: 18);
у) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜ^ΕΙ/ΑΜμΕΙ (8Ε0 ΙΌ N0: 45/δΕΟ ΙΌ N0: 19);
ф) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜ^20/ΑΜΗ20 (8Ε0 ΙΌ N0: 46/δΕΟ ΙΌ N0: 20);
х) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи ΑΜΕ21/ΑΜΗ21 (8Ε0
- 45 019397
ΙΌ N0: 47/8ΕΟ ΙΌ N0: 21);
ц) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМь22/АМн22 (8Ε0 ГО N0: 48/8ΕΟ ГО N0: 22);
ч) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ23/АМн23 (8Ε0 ГО N0: 49 или 8ΕΕ) ГО N0: 50/8ΕΡ ГО N0: 23);
ш) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ24/АМн24 (8Ε0 ГО N0: 51/8ΕΡ ГО N0: 24);
щ) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМъ25/АМн25 (8Ε0 ГО N0: 52/8ΕΟ ГО N0: 25); и
э) вариабельного домена лёгкой цепи и вариабельного домена тяжёлой цепи АМь26/АМн26 (8Ε0 ГО N0: 53/8ΕΡ ГО N0: 26).
Вариант изобретения 55. Полинуклеотид по варианту изобретения 51, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид кодирует полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
а) СОЯ 1 (8ΕΕ) ГО N0: 185), (Ί№2 (8ΕΕ) ГО N0: 186), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 187) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 107), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 108), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 109) тяжёлой цепи антитела АМ-1;
б) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 188), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 189), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 190) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 110), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 111), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 112) тяжёлой цепи антитела АМ-2;
в) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 191), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 192), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 193) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 113), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 114), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 115) тяжёлой цепи антитела АМ-3;
г) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 194), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 195), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 196) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 116), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 117), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 118) тяжёлой цепи антитела АМ-4;
д) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 197), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 198), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 199) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 119), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 120), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 121) тяжёлой цепи антитела АМ-5;
е) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 200), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 201), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 202) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 122), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 123), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 124) тяжёлой цепи антитела АМ-6;
ж) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 203), С0Я2 (8ΕΕ) ГО N0: 204), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 205) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 125), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 126), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 127) тяжёлой цепи антитела АМ-7;
з) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 206), С0Я2 (8ΕΕ) ГО N0: 207), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 208) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 128), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 129), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 130) тяжёлой цепи антитела АМ-8;
и) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 209), С0Я2 (8ΕΕ) ГО N0: 210), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 211) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 131), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 132), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 133) тяжёлой цепи антитела АМ-9;
к) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 212), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 213), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 214) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 134), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 135), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 136) тяжёлой цепи антитела АМ-10;
л) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 215), С0Я2 (8ΕΕ) ГО N0: 216), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 217) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 137), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 138), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 139) тяжёлой цепи антитела АМ-11;
м) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 218), С0Я2 (8ΕΕ) ГО N0: 219), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 220) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 140), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 141), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 142) тяжёлой цепи антитела АМ-12;
н) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 221), С0Я2 (8ΕΕ) ГО N0: 222), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 223) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 143), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 144), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 145) тяжёлой цепи антитела АМ-13;
о) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 224), С0Я2 (8ΕΕ) ГО N0: 225), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 226) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 146), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 147), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 148) тяжёлой цепи антитела АМ-14;
п) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 227), С0Я2 (8ΕΕ) ГО N0: 228), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 229) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 149), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 150), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 151) тяжёлой цепи антитела АМ-15;
р) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 230), С0Я2 (8ΕΕ) ГО N0: 231), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 232) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 152), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 153), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 154) тяжёлой цепи антитела АМ-16;
с) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 233), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 234), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 235) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 155), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 156), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 157) тяжёлой цепи антитела АМ-17;
т) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 236), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 237), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 238) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 158), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 159), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 160) тяжёлой цепи антитела АМ-18;
у) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 239), С0Я2 (8ΕΕ) ГО N0: 240), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 241) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 161), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 162), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 163) тяжёлой цепи антитела АМ-19;
ф) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 242), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 243), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 244) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 164), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 165), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 166) тяжёлой цепи антитела АМ-20;
х) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 245), С0Я2 (8ΕΕ) ГО N0: 246), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 247) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 167), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 168), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 169) тяжёлой цепи антитела АМ-21;
ц) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 248), С0Я2 (8ΕΕ) ГО N0: 249), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 250) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 170), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 171), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 172) тяжёлой цепи антитела АМ-22;
ч) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 251), С0Я2 (8ΕΕ) ГО N0: 252), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 253) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 173), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 174), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
ш) СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 254), (Ί№2 (8ΕΕ) ГО N0: 255), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 256) лёгкой цепи и СОЯ1 (8ΕΕ) ГО N0: 173), СОЯ2 (8ΕΕ) ГО N0: 174), СОЯ3 (8ΕΕ) ГО N0: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
- 46 019397
щ) СГОЮ (8ΕΟ ГО N0: 257), СОЮ (8ΕΟ ГО N0: 258), СЭВ3 (8ΕΟ ГО N0: 259) лёгкой цепи и СЭВ1 (8ΕΟ 10 N0: 176), СОЮ (800 Ю N0: 177), СОЮ (8ΕΟ 10 N0: 178) тяжёлой цепи антитела АМ-24;
э) СОВ1 (8ΕΟ ГО N0: 260), СОЮ (8ΕΟ ГО N0: 261), СГОЮ (8ΕΟ ГО N0: 262) лёгкой цепи и СГОЮ (8ΕΟ 10 N0: 179), СОЮ (8ΕΟ 10 N0: 180), СОЮ (8ΕΟ 10 N0: 181) тяжёлой цепи антитела АМ-25; или
ю) СГОЮ (8ΕΟ ГО N0: 263), СГОЮ (8ΕΟ ГО N0: 264), СГОЮ (8ΕΟ ГО N0: 265) лёгкой цепи и СГОЮ (8ΕΟ 10 N0: 182), СОЮ (8ΕΟ 10 N0: 183), СОЮ (8ΕΟ 10 N0: 184) тяжёлой цепи антитела АМ-26.
Вариант изобретения 6: полинуклеотид по варианту изобретения 2, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид выбирают из группы, состоящей из:
а) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь1/АМн1 (8Ε0 ГО N0: 80/8ΕΟ ГО N0: 54);
б) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь2/АМн2 (8Ε0 ГО N0: 81/8ΕΟ ГО N0: 55);
в) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь3/АМн3 (8Ε0 ГО N0: 82/8ΕΟ ГО N0: 56);
г) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ4/АМн4 (8Ε0 ГО N0: 83/8ΕΟ ГО N0: 57);
д) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ5/АМн5 (8Ε0 ГО N0: 84/8ΕΟ ГО N0: 58);
е) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ6/АМн6 (8Ε0 ГО N0: 85/8ΕΟ ГО N0: 59);
ж) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь7/АМн7 (8Ε0 ГО N0: 86/8ΕΟ ГО N0: 60);
з) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь8/АМн8 (8Ε0 ГО N0: 87/8ΕΟ ГО N0: 61);
и) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ9/АМн9 (8Ε0 ГО N0: 88/8ΕΟ ГО N0: 62);
к) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ10/АМн10 (8Ε0 ГО N0: 89/8ΕΟ ГО N0: 63);
л) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ11/АМн11 (8Ε0 ГО N0: 90/8ΕΟ ГО N0: 64);
м) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь12/АМн12 (8Ε0 ГО N0: 91/8ΕΟ ГО N0: 65);
н) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь13/АМн13 (8Ε0 ГО N0: 92/8ΕΟ ГО N0: 66);
о) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь14/АМн14 (8Ε0 ГО N0: 93/8ΕΟ ГО N0: 67);
п) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ15/АМн15 (8Ε0 ГО N0: 94/8ΕΟ ГО N0: 68);
р) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ16/АМн16 (8Ε0 ГО N0: 95/8ΕΟ ГО N0: 69);
с) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ17/АМн17 (8Ε0 ГО N0: 96/8ΕΟ ГО N0: 70);
т) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь18/АМн18 (8Ε0 ГО N0: 97/8ΕΟ ГО N0: 71);
у) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь19/АМн19 (8Ε0 ГО N0: 98/8ΕΟ ГО N0: 72);
ф) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь20/АМн20 (8Ε0 ГО N0: 99/8ΕΟ ГО N0: 73);
х) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ21/АМн21 (8Ε0 ГО N0: 100/8Ε0 ГО N0: 74);
ц) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ22/АМн22 (8Ε0 ГО N0: 101/8Ε0 ГО N0: 75);
ч) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ23/АМн23 (8Ε0 ГО N0: 102 или 8Ε0 ГО N0: 103/8ΕΟ ГО N0: 76);
ш) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь24/АМн24 (8Ε0 ГО N0: 104/8ΕΟ ГО N0: 77);
щ) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМь25/АМн25 (8Ε0 ГО N0: 105/8ΕΟ ГО N0: 78); и
э) полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен лёгкой цепи, и полинуклеотида, кодирующего вариабельный домен тяжёлой цепи АМъ26/ЛМн26 (8Ε0 ГО N0: 106/8ΕΟ ГО N0: 79).
Вариант изобретения 57: полинуклеотид по варианту изобретения 53, отличающийся тем, что ука
- 47 019397 занный полинуклеотид выбирают из группы, состоящей из:
а) полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ N0: 345, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 346, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 347, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 266, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 267, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 268, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-1;
б) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 348, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 349, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 350, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 269, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 270, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 271, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-2;
в) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 351, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 352, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 353, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 272, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 273, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 274, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-3;
г) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 354, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 355, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 356, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 275, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 276, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 277, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-4;
д) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 357, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 358, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 359, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 278, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 279, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 280, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-5;
е) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 360, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 361, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 362, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 281, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 282, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ГО N0: 283, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-6;
ж) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 363, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 364, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 365, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 284, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 285, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 286, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-7;
з) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 366, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 367, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 368, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 287, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 288, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 289, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-8;
и) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 369, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 370, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 371, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 290, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 291, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 292, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-9;
к) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 372, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 373, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 374, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 293, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 294, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 295, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-10;
л) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0: 375, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, по
- 48 019397 линуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 376, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ ИО: 377, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ ИО: 296, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ ИО: 297, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ ИО: 298, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-11;
м) полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ ИО: 378, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ ИО: 379, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8Е0 ΙΌ ИО: 380, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 299, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 300, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 301, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-12;
н) полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 381, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 382, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 383, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 302, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 303, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 304, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-13;
о) полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 384, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 385, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 386, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 305, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 306, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 307, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-14;
п) полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 387, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 388, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 389, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 309, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 310, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 311, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-15;
р) полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 390, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 391, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 392, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 311, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 312, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 313, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-16;
с) полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 393, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 394, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 395, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 314, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 315, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 316, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-17;
т) полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 396, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 397, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 398, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 317, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 318, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 319, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-18;
у) полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 399, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 400, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 401, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 320, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 321, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 322, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-19;
ф) полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 402, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 403, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 404, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 323, кодирующего СЭК1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 324, кодирующего СЭК2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 325, кодирующего СЭК3 тяжёлой цепи антитела АМ-20;
х) полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 405, кодирующего СЭК1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 406, кодирующего СЭК2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью 8ЕО ΙΌ ИО: 407, кодирующего СЭК3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с после
- 49 019397 довательностью БЕР ΙΌ N0: 326, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕр ΙΌ N0: 327, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 328, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-21;
ц) полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 408, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 409, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 410, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕр ΙΌ N0: 329, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕр ΙΌ N0: 330, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 331, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-22;
ч) полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 411, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 412, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 413, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕр ΙΌ N0: 332, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕр ΙΌ N0: 333, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 334, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-23;
ш) полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 414, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 415, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 416, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕр ΙΌ N0: 332, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕр ΙΌ N0: 333, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 334, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-23;
щ) полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 417, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 418, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 419, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕр ΙΌ N0: 335, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕр ΙΌ N0: 336, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 337, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-24;
э) полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 420, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 421, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 422, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕр ΙΌ N0: 338, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕр ΙΌ N0: 339, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 340, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-25; или
ю) полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 423, кодирующего СЭЕ1 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 424, кодирующего СЭЕ2 лёгкой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 425, кодирующего СЭЕ3 лёгкой цепи, и полинуклеотида с последовательностью БЕр ΙΌ N0: 341, кодирующего СЭЕ1 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕр ΙΌ N0: 342, кодирующего СЭЕ2 тяжёлой цепи, полинуклеотида с последовательностью БЕР ΙΌ N0: 343, кодирующего СЭЕ3 тяжёлой цепи антитела АМ-26.
Вариант изобретения 58: выделенный полинуклеотид, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид кодирует полипептид, содержащий
а) область СЭЕ1 тяжёлой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) ΧιΥΟΚ, где Х1 выбирают из группы, состоящей из Я, Б и О;
б) область ί.ΌΕ2 тяжёлой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) ^IБX1ΥX26NΤXзΥΛ^X4X5^6, где Х1 выбирают из группы, состоящей из А, Х2 выбирают из группы, состоящей из N Б и К, Х3 выбирают из группы, состоящей из N и К, Х4 выбирают из группы, состоящей из К и N и Х5 выбирают из группы, состоящей из Ь и Е;
в) область СЭЕ3 тяжёлой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) ΧιΡΕΧ2Χ3ΌΥ, где Х1 выбирают из группы, состоящей из Я и К, Х2 выбирают из группы, состоящей из Υ, V и А, и Х3 выбирают из группы, состоящей из Е и Ь;
ίί) Χ1ρΕΧ2ΕΌΥ, где Х1 выбирают из группы, состоящей из Я и К, и Х2 выбирают из группы, состоящей из Υ и V;
г) область СЭЕ1 лёгкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) КАБОБХ^^зХ^А, где Х1 выбирают из группы, состоящей из V и Ι, Х2 выбирают из группы, состоящей из Ι и Б, Х3 выбирают из группы, состоящей из Б и Т, Х4 выбирают из группы, состоящей из N и Б, и Х5 выбирают из группы, состоящей из А и N и ίί) ЕАБОБХ^Б^А, где Х1 выбирают из группы, состоящей из V и Ι;
д) область СЭЕ2 лёгкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из
- 50 019397 группы, состоящей из:
ί) X1X28ΤΒΑXз, где Х1 выбирают из группы, состоящей из С и Ό, Х2 выбирают из группы, состоящей из А и Т, и Х3 выбирают из группы, состоящей из Т и А, и ίί) X1Α8ΤΒΑX2, где Х1 выбирают из группы, состоящей из С и Ό, Х2 выбирают из группы, состоящей из А и Т, и Х3 выбирают из группы, состоящей из А и Т; и
е) область СЭВ3 лёгкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) ΟΟΥΌΧΛνΡΕΤ. где Х1 выбирают из группы, состоящей из N Т и Ι; причём указанное антитело специфически связывает ΙΕ-17 рецептор А.
Вариант изобретения 59: полинуклеотид по п.58, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид кодирует полипептид, причём указанный полипептид содержит:
а) аминокислотную последовательность СЭВ1 тяжёлой цепи, содержащую Х^СК, где Х1 выбирают из группы, состоящей из В, 8 и С;
б) аминокислотную последовательность СЭВ2 тяжёлой цепи, содержащую VI8X1ΥX2СNΤXз ΥЛ^X.|X5^^. где Х1 выбирают из группы, состоящей из А, Х2 выбирают из группы, состоящей из N 8, и К, Х3 выбирают из группы, состоящей из N и Κ, Х4 выбирают из группы, состоящей из Κ и N и Х5 выбирают из группы, состоящей из Б и Е;
в) аминокислотную последовательность СЭВ3 тяжёлой цепи, содержащую X1^^X2Xз^Υ, где Х1 выбирают из группы, состоящей из В и Κ, и Х2 выбирают из группы, состоящей из Υ и V;
г) аминокислотную последовательность СЭВ1 лёгкой цепи, содержащую ΚЛ8^8X188N^Л. где Х1 выбирают из группы, состоящей из V и Ι;
д) аминокислотную последовательность СЭВ2 лёгкой цепи, содержащую X1Α8ΤΒΑX2, где Х1 выбирают из группы, состоящей из С и Ό, и Х2 выбирают из группы, состоящей из А и Т; и
е) аминокислотную последовательность СЭВ3 лёгкой цепи, содержащую ^^Υ^X1VΡ^Τ. где Х1 выбирают из группы, состоящей из N Т и Ι; причём указанное антитело специфически связывает ГБ-17 рецептор А.
Вариант изобретения 60: плазмида, содержащая указанный полинуклеотид по варианту изобретения 51. Вариант изобретения 61: плазмида по варианту изобретения 60, отличающаяся тем, что указанная плазмида представляет собой экспрессирующий (экспрессионный вектор (вектор экспрессии). Вариант изобретения 62: выделенная клетка, содержащая указанную плазмиду по варианту изобретения 60. Вариант изобретения 63: выделенная клетка по варианту изобретения 62, отличающаяся тем, что указанная клетка содержит указанный полинуклеотид. Вариант изобретения 64: выделенная клетка по варианту изобретения 62, отличающаяся тем, что указанная клетка представляет собой гибридому. Вариант изобретения 65: выделенная клетка по варианту изобретения 62, отличающаяся тем, что указанная клетка содержит экспрессирующий вектор по варианту изобретения 61. Вариант изобретения 66: выделенная клетка по варианту изобретения 65, отличающаяся тем, что указанную клетку выбирают из группы, состоящей из: а) прокариотический клетки; эукариотической клетки; в) клетки млекопитающего; г. клетки насекомого; и д) клетки СНО. Вариант изобретения 67: способ получения полипептида, который специфически связывает ΙΕ-17 рецептор А, заключающийся в инкубации выделенной клетки по варианту изобретения 65 в условиях, способствующих экспрессии указанного полипептида. Вариант изобретения 68: полинуклеотид по варианту изобретения 51, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид кодирует указанный полипептид, и тем, что указанный полипептид представляет собой антитело, которое специфически связывает ΙΕ-17 рецептор А, при этом указанное антитело выбирают из группы, состоящей из: а) гуманизированного антитела; б) химерного антитела; в) рекомбинантного антитела; г) одноцепочечного антитела; д) диатела; е) триатела; ж) тетратела; з) фрагмента ЕаЬ; и) фрагмента Е(аЬ')2; к) Ι§0 антитела; л) Ι§Ε антитела; м) Ι§Μ антитела; н) ΙβΟ1 антитела; о) антитела; п) ΙβΟ3 антитела; и р) ΙβΟ4 антитела.
Вариант изобретения 69: полинуклеотид по варианту изобретения 68, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид кодирует указанное антитело, а указанное антитело выбирают из группы, состоящей из:
а) антитела, состоящего из последовательности тяжёлой цепи 8ΕΟ ΙΌ N0: 427 и последовательности лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 429;
б) антитела, состоящего практически (главным образом) из последовательности тяжёлой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 427 и последовательности лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 429;
в) антитела, содержащего последовательность тяжёлой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 427;
г) антитела, содержащего последовательность лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 429;
д) антитела, содержащего последовательность тяжёлой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 427 и последовательность лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 429;
е) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΕ-17 рецептор А, содержащего последовательность тяжёлой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 427;
ж) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΕ-17 рецептор А, содержащего последовательность лёгкой цепи 8Ε0 ΙΌ N0: 429;
з) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΕ-17 рецептор А, содержащего последовательность
- 51 019397 тяжёлой цепи 8ЕО ΙΌ N0: 427 и последовательность лёгкой цепи 8ЕЦ ΙΌ N0: 429;
и) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΌ-17 рецептор А, содержащего последовательность вариабельной области тяжёлой цепи 8ЕЦ ΙΌ N0: 14;
к) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΌ-17 рецептор А, содержащего последовательность вариабельной области лёгкой цепи 8ЕЦ ΙΌ N0: 40;
л) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΌ-17 рецептор А, содержащего последовательность вариабельной области лёгкой цепи 8ЕЦ ΙΌ N0: 40 и последовательность вариабельной области тяжёлой цепи 8ЕЕ) ΙΌ N0: 14;
м) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΌ-17 рецептор А, содержащего ί.'ΌΕ1 тяжёлой цепи БЕЦ ΙΌ N0: 146, ί’ΌΕ2 тяжёлой цепи 8ЕЦ ΙΌ N0: 147, ί’ΌΕ3 тяжёлой цепи 8ЕЦ ΙΌ N0: 148, ί’ΌΕ1 лёгкой цепи 8ЕЦ ΙΌ N0: 224, ί’ΌΕ2 лёгкой цепи 8ЕЦ ΙΌ N0: 225 и ί’ΌΕ3 лёгкой цепи 8ЕЦ ΙΌ N0: 226; и
н) антитела или его фрагмента, связывающего ΙΌ-17 рецептор А, содержащего ί.'ΌΕ3 тяжёлой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 148 и ί’ΌΕ3 лёгкой цепи 8ЕЦ ΙΌ N0: 226; причём указанное антитело специфически связывает ΙΌ-17 рецептор А.
Вариант изобретения 70: полинуклеотид по варианту изобретения 69, отличающийся тем, что указанное антитело кодируется полинуклеотидом, выбранным из группы, состоящей из:
а) полинуклеотидной последовательности, кодирующей тяжёлую цепь, состоящей из 8ЕЦ ΙΌ N0: 426, и полинуклеотидной последовательности, кодирующей лёгкую цепь, состоящей из 8Е0 ΙΌ N0: 428;
б) полинуклеотидной последовательности, кодирующей тяжёлую цепь, состоящей практически (главным образом) из 8Е0 ΙΌ N0: 426, и полинуклеотидной последовательности, кодирующей лёгкую цепь, состоящей практически (главным образом) из 8Е0 ΙΌ N0: 428;
в) полинуклеотидной последовательности, кодирующей тяжёлую цепь, содержащей 8Е0 ΙΌ N0: 426;
г) полинуклеотидной последовательности, кодирующей лёгкую цепь, содержащей 8Е0 ΙΌ N0: 428;
д) полинуклеотидной последовательности, кодирующей тяжёлую цепь, содержащей 8Е0 ΙΌ N0: 426, и полинуклеотидной последовательности, кодирующей лёгкую цепь, содержащей 8Е0 ΙΌ N0: 428;
е) полинуклеотидной последовательности, кодирующей тяжёлую цепь или её фрагмент, связывающий ΙΌ-17 рецептор А, содержащей 8ЕЦ ΙΌ N0: 426;
ж) полинуклеотидной последовательности, кодирующей лёгкую цепь или её фрагмент, связывающий ΙΌ-17 рецептор А, содержащей 8ЕЦ ΙΌ N0: 428;
з) полинуклеотидной последовательности, кодирующей тяжёлую цепь или её фрагмент, связывающий ΙΌ-17 рецептор А, содержащей 8ЕЦ ΙΌ N0: 426, и полинуклеотидной последовательности, кодирующей лёгкую цепь или её фрагмент, связывающий ΙΌ-17 рецептор А, содержащей 8ЕЦ ΙΌ N0: 428;
и) полинуклеотидной последовательности, кодирующей вариабельную область тяжёлой цепи или её фрагмент, связывающий ΙΌ-17 рецептор А, содержащей 8ЕЦ ΙΌ N0: 67;
к) полинуклеотидной последовательности, кодирующей вариабельную область лёгкой цепи или её фрагмент, связывающий ΙΌ-17 рецептор А, содержащей 8ЕЦ ΙΌ N0: 93;
л) полинуклеотидной последовательности, кодирующей вариабельную область тяжёлой цепи или её фрагмент, связывающий ΙΌ-17 рецептор А, содержащей 8ЕЦ ΙΌ N0: 67, и полинуклеотидной последовательности, кодирующей вариабельную область лёгкой цепи или её фрагмент, связывающий ΙΌ-17 рецептор А, содержащей 8Е0 ΙΌ N0: 93;
м) полинуклеотида, кодирующего ί.'ΌΕ1 лёгкой цепи, содержащего 8ЕЦ ΙΌ N0: 384, полинуклеотида, кодирующего ί.'ΌΕ2 лёгкой цепи, содержащего 8ЕЦ ΙΌ N0: 385, полинуклеотида, кодирующего ί.'ΌΕ3 лёгкой цепи, содержащего 8ЕЦ ΙΌ N0: 386, и полинуклеотида, кодирующего ί.'ΌΕ1 тяжёлой цепи, содержащего 8Е0 ΙΌ N0: 305, полинуклеотида, кодирующего ί.'ΌΕ2 тяжёлой цепи, содержащего 8ЕЦ ΙΌ N0: 306, полинуклеотида, кодирующего ί.'ΌΕ3 тяжёлой цепи, содержащего 8ЕЦ ΙΌ N0: 307, и
н) полинуклеотида, кодирующего ί.'ΌΕ3 тяжёлой цепи, содержащего 8ЕЦ ΙΌ N0: 307, и полинуклеотида, кодирующего ί’ΌΕ3 лёгкой цепи, содержащего 8ЕЦ ΙΌ N0: 386.
Вариант изобретения 71: плазмида по варианту изобретения 60, отличающаяся тем, что полинуклеотид является полинуклеотидом по варианту изобретения 69. Вариант изобретения 72: выделенная клетка по варианту изобретения 62, отличающаяся тем, что полинуклеотид является полинуклеотидом по варианту изобретения 69. Вариант изобретения 73: выделенная клетка по варианту изобретения 65, отличающаяся тем, что указанный экспрессирующий вектор содержит полинуклеотид по варианту изобретения 69. Вариант изобретения 74: выделенная клетка по варианту изобретения 66, отличающаяся тем, что указанная клетка представляет собой СНО клетку и указанная СНО клетка содержит полинуклеотид по варианту изобретения 69. Вариант изобретения 75: способ по варианту изобретения 67, отличающийся тем, что полинуклеотид представляет собой полинуклеотид по варианту изобретения 69.
Нуклеотидные последовательности, соответствующие аминокислотным последовательностям по данному описанию, для применения в качестве зондов или праймеров с целью выделения нуклеиновых кислот или в качестве запрашиваемых последовательностей при поиске в базе данных, можно получать обратной трансляцией при использовании аминокислотных последовательностей или определением областей идентичности аминокислот с полипептидами, для которых идентифицирована последователь
- 52 019397 ность кодирующей ДНК. Хорошо известный метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) можно применять для выделения и амплификации последовательности ДНК, кодирующей белки, связывающие антиген Ш-ПРА (антигенсвязывающие белки для I^-17ЯΛ) или заданную комбинацию полипептидных фрагментов антигенсвязывающего белка для Ш-ПЯА. Олигонуклеотиды, которые определяют заданные концы комбинации фрагментов ДНК, применяют в качестве 5' и 3' праймеров. Помимо этого, олигонуклеотиды могут содержать сайты узнавания (распознавания) для рестриктаз, чтобы содействовать инсерции амплифицированной комбинации фрагментов ДНК в экспрессирующий вектор. Методы ПЦР описаны в 8а1к1 е1 а1., 8с1епсе 239: 487 (1988); ЯесοтЬ^ηаηΐ ^NΛ МеЛойо1оду, \νιι е1 а1., ей§., Асайетк Ргекк, Ичс., 8ап Окдо (1989), рр. 189-196; и РСЯ Ргоксок: А Сшйе ΐο Ме11юЙ5 апб Арр^аНо^, Ιηηίδ е1. а1., ей§., Асайетк Ргс55, Шс. (1990).
Нуклеотидные молекулы по изобретению включают ДНК и РНК как в однонитевой (однотяжевой), так и в двухнитевой форме, а также соответствующие комплементарные последовательности. ДНК включает, например, кДНК, геномную ДНК, синтезированную химическими методами ДНК, ДНК, амплифицированную методом ПЦР, и их комбинации. Нуклеотидные молекулы по изобретению включают полноразмерные гены или молекулы кДНК, а также комбинацию их фрагментов. Нуклеотиды по изобретению, предпочтительно, получают из источников человеческого происхождения, но изобретение также включает нуклеотиды видов, отличных от человека.
Выделенная нуклеиновая кислота (выделенный нуклеотид) представляет собой нуклеиновую кислоту (нуклеотид), отделенную от прилегающих (соседних) генетических последовательностей, имеющихся в геноме организма, из которого выделена нуклеиновая кислота, в том случае, если нуклеиновые кислоты выделяют из природных источников. Понятно, что если нуклеиновые кислоты синтезированы ферментативным синтезом на матрице или химическим синтезом, например продукты ПЦР, молекулы кДНК или олигонуклеотиды, то полученные такими способами нуклеиновые кислоты представляют собой выделенные нуклеиновые кислоты (нуклеотиды). Выражение выделенная нуклеотидная молекула относится к нуклеотидной молекуле в виде отдельного фрагмента или в виде компонента большей по размеру нуклеотидной конструкции. В одном предпочтительном варианте изобретения нуклеиновые кислоты практически не содержат примесей эндогенного материала. Нуклеотидную молекулу, предпочтительно, получают из ДНК или РНК, выделенных, по меньшей мере, однажды в практически чистом виде и в количестве или в концентрации, позволяющем(ей) идентифицировать, обрабатывать и выделять составляющие нуклеотидные последовательности стандартными биохимическими методами (такими, как описанные в 8атЬгоок е1 а1., Мо1еси1аг Οοηίηβ: А ЬаЬогаРогу Маηиа1., 2'1 ей., Со1й 8ргтд НагЬог ЬаЬогаЮгу, Со1й 8ргтд НагЬог, ΝΥ (1989)). Такие последовательности, предпочтительно, получают и/или конструируют в виде открытой рамки считывания, не прерываемой внутренними нетранслируемыми последовательностями или интронами, которые обычно присутствуют в эукариотических генах. Последовательности нетранслируемой ДНК могут находиться 5' или 3' от открытой рамки считывания, где они не препятствуют обработке или экспрессии кодирующей области.
Настоящее изобретение включает также нуклеотиды, которые гибридизуются в условиях умеренной жёсткости и более предпочтительно в условиях высокой жёсткости с нуклеотидами, кодирующими антигенсвязывающие белки для Ш-ПРА по данному описанию. Основные критерии, влияющие на выбор условий гибридизации и служащие руководством для определения подходящих условий, представлены в 8атЬгоок, РпксЬ, амй МашаРк (1989, Мо1еси1аг Οοηίηβ: А ЬаЬогаРогу Маша!, Со1й 8ргтд НагЬог ЬаЬогаРогу Ргезз, Со1й 8ргтд НагЬог, Ν.Υ., скар1ег5 9 амй 11); и в Сиггей РгоЮсок ίη Мо1еси1аг Вю1оду, 1995, Λи8иЬе1 е1 а1., ей§., ίοΐιη ^11еу & δοηκ, Ичс., 5ссРоп5 2.10 амй 6.3-6.4, и их легко могут определить рядовые специалисты в данной области техники на основании, например, длины и/или нуклеотидного состава ДНК. Один способ обеспечить умеренно жёсткие условия включает применение раствора для предварительной про(от)мывки (гибридизационного), содержащего 5х88С, 0.5% 8Ό8, 1.0 мМ РЭТА (рН 8.0), буфера для гибридизации, содержащего около 50% формамида, 6х88С, и при температуре гибридизации около 55°С (или с применением других аналогичных растворов для гибридизации, таких как раствор, содержащий около 50% формамида, при температуре гибридизации около 42°С), и с промывкой, примерно, при 60°С в 0.5х88С, 0.1% 8Ό8. Обычно условия высокой жёсткости определяются как условия гибридизации, представленные выше, но с про(от)мывкой, примерно, при 68°С, 0.2х88С, 0.1% 8Ό8. 88РЕ (1х88РЕ содержит 0.15 М №С1, 10 мМ NаН2ΡΟ4 и 1.25 мМ РЭТА, рН 7.4) можно заменить на 88С (1х88С содержит 0.15 М №С1 и 15 мМ цитрата натрия) в гибридизационном и про(от)мывочном буферах; отмывают в течение 15 мин после окончания гибридизации. Следует отдавать отчёт, что температуру и концентрацию солей при промывке можно при необходимости корректировать, чтобы достичь заданной степени жёсткости, применяя основные принципы, которые влияют на реакции гибридизации и стабильность дуплекса, известные специалистам в данной области техники и подробнее описанные ниже (см., например, 8атЬгоок е1 а1., 1989). При гибридизации нуклеиновой кислоты с целевой нуклеиновой кислотой неизвестной последовательности, полагают, что длина гибрида представляет собой длину гибридизующейся нуклеиновой кислоты. Если гибридизуются нуклеиновые кислоты с известной последовательностью, длину гибрида можно определить выравниванием нуклеотидных последовательностей и
- 53 019397 идентификацией области или областей последовательностей с оптимальной комплементарностью. Температура гибридизации для гибридов длиной, предположительно, менее 50 пар оснований должна быть на 5-10°С ниже температуры плавления (Тпл, Тт) гибрида, где Тпл определяют по нижеприведённым уравнениям. Для гибридов протяжённостью менее 18 пар оснований Тпл (°С) = 2(#А + Т оснований) + 4(#6 + С оснований). Для гибридов протяжённостью менее 18 пар оснований Т пл (°С) = 81.5 + 16.6(1ο§!0 |№1'|) + 0.41(% 6 + С) - (600/^, где N обозначает число оснований в гибриде, а |№1'| обозначает концентрацию ионов натрия в гибридизационном буфере (|№1'| для 1[88С = 0.165 М). Предпочтительно, длина (протяжённость) каждой такой гибридизующейся нуклеиновой кислоты составляет по меньшей мере 15 нуклеотидов (или более предпочтительно по меньшей мере 18 нуклеотидов, или по меньшей мере 20 нуклеотидов, или по меньшей мере 25 нуклеотидов, или по меньшей мере 30 нуклеотидов, или по меньшей мере 40 нуклеотидов, или наиболее предпочтительно по меньшей мере 50 нуклеотидов), или по меньшей мере 25% (более предпочтительно по меньшей мере 50%, или по меньшей мере 60%, или по меньшей мере 70%, и наиболее предпочтительно по меньшей мере 80%) длины нуклеиновой кислоты, с которой она гибридизуется и имеет идентичность последовательностей по меньшей мере 60% (более предпочтительно по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 81%, по меньшей мере 82%, по меньшей мере 83%, по меньшей мере 84%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 86%, по меньшей мере 87%, по меньшей мере 88%, по меньшей мере 89%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%, и наиболее предпочтительно по меньшей мере 99,5%) с нуклеиновой кислотой по настоящему изобретению, с которой она гибридизуется, причём идентичность последовательностей определяют, сравнивая последовательности гибридизующихся нуклеиновых кислот при выравнивании таким образов, чтобы перекрывание и идентичность были максимальными при минимуме гэпов в последовательностях, как более подробно описано выше.
Варианты по изобретению обычно получают сайт-специфический мутагенез нуклеотидов в ДНК, кодирующей антигенсвязывающий белок, используя кассетный или ПЦР-мутагенез или другие методы, хорошо известные в уровне технике, для получения ДНК, кодирующей вариант, а затем экспрессируя рекомбинантную ДНК в клеточной культуре, как указано в данном описании. Однако фрагменты антигенсвязывающих белков, содержащие вариантные СОК, имеющие примерно 100-150 остатков, можно получать 1и νί!το синтезом известными методами. Варианты обычно проявляют такую же биологическую активность, что и природный аналог, например связывание с ГО-ПКА и ингибирование передачи сигнала, хотя можно выбирать варианты, которые с модифицированными характеристиками, как более подробно описано ниже.
Специалисты в данной области техники понимают, что вследствие вырожденности генетического кода можно получить чрезвычайно большое число нуклеиновых кислот, каждая из которых кодирует СЭК (и тяжёлые и лёгкие цепи или другие компоненты антигенсвязывающего белка) по настоящему изобретению. Таким образом, идентифицировав аминокислотную последовательность, специалисты в данной области техники могут получить множество различных нуклеиновых кислот, просто модифицируя последовательность одного или более кодонов таким образом, который не изменяет аминокислотную последовательность кодированного белка.
Настоящее изобретение включает также экспрессионные системы и конструкции в виде плазмид, экспрессирующих векторов, кассет транскрипции или экспрессии, которые содержат по меньшей мере один полинуклеотид по вышесказанному. Кроме того, изобретение включает клетки-хозяева, содержащие такие системы или конструкции экспрессии.
Обычно экспрессирующие векторы, используемые в любых клетках-хозяевах, должны содержать последовательности для поддержания плазмид и для клонирования и экспрессии экзогенных нуклеотидных последовательностей. Такие последовательности, в общем называемые фланкирующие последовательности, в некоторых вариантах изобретения включают обычно одну или более следующих нуклеотидных последовательностей: промотор, одну или более энхансерных последовательностей, последовательность терминации транскрипции, полную последовательность интрона, содержащую донорный и акцепторный сайт сплайсинга, последовательность, кодирующую лидерную последовательность для секреции полипептида, сайт связывания рибосом, последовательность полиаденилирования, полилинкерную область для вставки нуклеиновой кислоты, кодирующей экспрессируемый полипептид, и селективный маркерный элемент. Каждая из этих последовательностей обсуждается ниже.
Необязательно вектор может содержать последовательность, кодирующую тэг (метку), а именно, олигонуклеотидную молекулу, локализованную на 5' или 3' конце последовательности, кодирующей антигенсвязывающий белок для ГЬ-17КА; олигонуклеотидная последовательность кодирует поли-Илз метку (такую как гекса-Шз) или другую метку, такую как РЬАС, НА (гемагглютинин вируса гриппа) или тус, для которых имеются продажные антитела. Эта метка обычно сливается с полипептидом при экспрессии полипептида и может служить в качестве средства для обнаружения или аффинной очистки антигенсвязывающего белка для ГЬ-КА от клетки-хозяина. Аффинную очистку можно осуществлять, например, колоночной хроматографией, используя антитела против метки в качестве аффинной матри
- 54 019397 цы. При желании метку можно затем удалить из очищенного антигенсвязывающего белка для ГГ-17КА различными способами, такими как применение некоторых пептидаз для отщепления.
Фланкирующие последовательности могут быть гомологичными (т.е. из того же самого вида и/или штамма, что и клетка-хозяин), гетерологичными (т.е. из вида, отличного от вида или штамма клеткихозяина), гибридными (т.е. комбинацией фланкирующих последовательностей более чем из одного источника), синтетическими или нативными. В силу этого источник фланкирующей последовательности может представлять собой любой прокариотический или эукариотический организм, любой организм позвоночного или беспозвоночного, или любое растение при условии, что фланкирующая последовательность является функциональной в системе клетки-хозяина и может ею активироваться.
Фланкирующие последовательности, применимые в векторах по данному изобретению, можно получать любым из нескольких методов, хорошо известных в уровне техники. Обычно фланкирующие последовательности, применимые в данном описании, предварительно идентифицированы картированием и/или расщеплением рестриктазами, и поэтому их можно выделить из соответствующей ткани с помощью рестриктаз. В некоторых случаях может быть известна полная нуклеотидная последовательность фланкирующей последовательности. В этом случае фланкирующие последовательности можно синтезировать методами, представленными в данном описании для синтеза или клонирования нуклеиновых кислот.
Вне зависимости от того, известна ли вся фланкирующая последовательность или её часть, её можно получать полимеразной цепной реакцией (ПЦР) и/или скринингом геномной библиотеки с применением подходящего зонда, такого как фрагмент олигонуклеотидной и/или фланкирующей последовательности из того же самого или другого вида. Если фланкирующая последовательность неизвестна, фрагмент ДНК, содержащий фланкирующую последовательность, можно выделить из большего по размеру участка ДНК, который может содержать, например, кодирующую последовательность или даже другой ген или гены. Выделение можно осуществлять расщеплением рестриктазами, получая подходящий ДНКфрагмент, с последующим выделением, используя очистку на агарозном геле, хроматографию на колонке Ошадеп (СНа15^ог1Н, СА) или другие методы, известные специалистам в данной области техники. Селекция ферментов, подходящих для достижения этой цели, хорошо известна рядовому специалисту в данной области техники.
Ориджин репликации, как правило, является участком продажных прокариотических векторов экспрессии и способствует амплификации вектора в клетке-хозяине. Если выбранный вектор не содержит сайт ориджина репликации, его можно синтезировать химическим методом исходя из известной последовательности и лигировать в вектор. Например, ориджин репликации из плазмиды рВК322 (№ν Епд1апй В1о1аЬ§, Веуег1у, МА) применим для большинства грамотрицательных бактерий, а различные вирусные ориджины (например, БУ40, полиомы, аденовируса, вируса везикулярного стоматита (УБУ) или папилломавирусов, таких как НРУ или ВРУ) применимы для клонирования векторов в клетках млекопитающих. Обычно компонент ориджина репликации не требуется для экспрессирующих векторов млекопитающих (например, ориджин БУ40 часто используют только потому, что он также содержит ранний промотор вируса).
Последовательность терминации транскрипции, как правило, расположена 3' к концу кодирующей полипептид области и служит для терминации транскрипции. Обычно последовательность терминации транскрипции в прокариотических клетках представляет собой С-С обогащенный фрагмент, за которым следует поли-Т последовательность. Хотя последовательность просто клонировать, используя библиотеку, или даже приобрести выпускаемую промышленностью как часть вектора, её можно также легко синтезировать, используя методы синтеза нуклеиновых кислот, такие как методы по данному описанию.
Селективный маркерный ген кодирует белок, необходимый для выживания и роста клетки-хозяина, выращенной в селективной культуральной среде. Типичные селективные маркерные гены кодируют белки, которые (а) придают резистентность к антибиотикам или другим токсинам, например, ампициллину, тетрациклину или канамицину, прокариотическим клеткам-хозяевам; (б) восполняют ауксотрофный дефицит клетки; или (в) снабжают важными питательными веществами, не поступающими из комплексной среду или из среды определённого состава. Специфическими селективными маркерами являются ген устойчивости к канамицину, ген устойчивости к ампициллину и ген устойчивости к тетрациклину. Ген устойчивости к неомицину можно также использовать преимущественно для селекции как в прокариотических, так и в эукариотических клетках-хозяевах.
Для амплификации экспрессируемого гена можно использовать другие селективные гены. Амплификация представляет собой процесс, при котором гены, требующиеся для продуцирования белка, необходимого для роста или выживания клетки, повторяются в виде тандема в хромосомах последующих поколений рекомбинантных клеток. Примеры подходящих селективных маркеров для клеток млекопитающих включают ген дигидрофолат редуктазы (ОНГК) или беспромоторный ген тимидинкиназы. Трансформанты клеток млекопитающих помещают в условия давления отбора, когда только трансформанты однозначно адаптируются к выживанию благодаря присутствию в гене селективного гена. Давление отбора диктуется культивированием трансформированных клеток в условиях, при которых концентрация селективного агента в среде последовательно повышается, приводя тем самым к амплификации
- 55 019397 как селективного гена, так и ДНК, которая кодирует другой ген, такой как ген антителаантигенсвязывающего белка, который связывается с ΙΕ-17ΚΑ полипептидом. В результате с помощью амплифицированной ДНК синтезируются повышенные количества полипептида, такого как антигенсвязывающий белок для ΙΕ-17ΚΑ.
Обычно сайт связывания рибосом требуется для инициации трансляции мРНК и характеризуется последовательностью Шайна-Дальгарно (прокариоты) или последовательностью Козака (эукариоты). Этот элемент, как правило, локализован 3' к промотору и 5' к последовательности, кодирующей экспрессируемый полипептид.
В некоторых случаях, например, когда желательно гликозилирование в экспрессионной системе эукариотических клеток-хозяев, можно обрабатывать различные пре- или пропоследовательности с целью увеличения гликозилирования или повышения выхода. Например, можно изменять сайт расщепления пептидазами конкретного сигнального пептида или добавлять пропоследовательности, которые также могут влиять на гликозилирование. Конечный белковый продукт может иметь, в положении-1 (относительно первой аминокислоты зрелого белка) одну или более дополнительных аминокислот, случайных для экспрессии, которые могут быть не полностью удалены. Например, конечный белковый продукт может содержать один или два аминокислотных остатка в сайте расщепления пептидазами, прилегающем к аминоконцу. Или же использование некоторых сайтов расщепления ферментами может привести к немного усечённой форме заданного полипептида, если фермент разрезает в такой области зрелого полипептида.
Векторы экспрессии и клонирования по изобретению обычно содержат промотор, который узнаётся организмом-хозяином и функционально связывается с молекулой, кодирующей антигенсвязывающий белок для ΙΕ-17ΚΑ. Промоторы представляют собой нетранскрибируемые последовательности, локализованные цр81геат (т.е. 5') к стартовому кодону структурного гена (обычно, примерно, между 100 и 1000 п.о.), которые контролируют транскрипцию структурного гена. Промоторы обычно делятся на два класса: индуцибельные промоторы и конститутивные промоторы. Индуцибельные промоторы вызывают повышенную (повышенные уровни) транскрипцию при использовании ДНК под их контролем в ответ на некоторое изменение условий культивирования, таких как присутствие или отсутствие питательного вещества или изменение температуры. С другой стороны, конститутивные промоторы постоянно транскрибируют ген, с которым они функционально связаны, то есть при малой регуляции (контроле) или при отсутствии регуляции генной экспрессии. Общеизвестно большое число промоторов, узнаваемых различными потенциальными клетками-хозяевами. Подходящий промотор функционально связывают с ДНК, кодирующей антигенсвязывающий белок для ΙΕ-17ΚΑ, содержащий тяжёлую цепь или лёгкую цепь по изобретению, выделяя промотор из источника ДНК путём расщепления рестриктазами и включения заданной промоторной последовательности в вектор.
Подходящие промоторы для применения с клетками хозяев-дрожжей хорошо известны в уровне техники. Энхансеры дрожжей применяются преимущественно с дрожжевыми промоторами. Подходящие промоторы для применения с клетками хозяев-млекопитающих хорошо известны и включают, но без ограничения, промоторы, полученные из геномов вирусов, таких как вирус полиомы, вирус оспы птиц, аденовирус (такой как аденовирус 2), вирус бычьей папилломы, вирус саркомы птиц, ретровирусы, вирус гепатита В и, более предпочтительно, вирус зелёной мартышки 8У40. Другие подходящие промоторы включают гетерологичные промоторы млекопитающих, например промоторы генов теплового шока и промотор гена актина.
Другие промоторы, которые могут представлять интерес, включают, но без ограничения: 8У40 ранний промотор (Веио181 апй СйатЬоп, 1981, №1иге 290: 304-310); ΟΜν промотор (Тйоткеп е1 а1., 1984, Ргос. №11. Λсаά. υ.δ.Α. 81: 659-663); промотор, содержащийся в 3' длинном концевом повторе вируса саркомы Рауса (УататоЮ е1 а1., 1980, Се11 22: 787-797); промотор тимидинкиназного гена вируса герпеса (^адпет е1 а1., 1981, Ргос. №11. Λсаά. 8с1. υ.δ.Α. 78: 1444-1445); промотор и регуляторные последовательности гена металлотионина (Рттйет е1 а1., 1982, №1иге 296: 39-42); и прокариотические промоторы, такие как промотор гена бета-лактамазы (УШа-КатагоГГ е1 а1., 1978, Ргос. №11. Λсаά. 8с1. υ.δ.Α. 75: 37273731); или промотор 1ас (ИеВоет е1 а1., 1983, Ргос. №11 Λсаά. 8ск υ.δ.Α. 80: 21-25). Также представляют интерес следующие области контроля транскрипции у животных: область контроля гена эластазы Ι, активная в гроздевидных (ацинарных) клетках (8\νίΠ е1 а1., 1984, Се11 38: 639- 646; 0ιηί1ζ е1 а1., 1986, Со1й 8ρτίη§ НагЬог δутρ. ОнапЕ Вю1. 50: 399-409; УасОопаи. 1987, Нера1о1о§у 7: 425- 515); область контроля гена инсулина, активная в панкреатических бета-клетках (Напайап, 1985, №1иге 315: 115-122); область контроля гена иммуноглобулина, активная в лимфоидных клетках (ОтокксйеШ е1 а1., 1984, Се11 38: 647658; Λάате5 е1 а1., 1985, №1иге 318: 533-538; Α1еxаηάе^ е1 а1., 1987, Μо1 Се11. Вю1. 7: 1436-1444); контрольная область мышиного вируса, вызывающего опухоли у млекопитающих, активная в клетках яичек, молочной железы, лимфоидных и тучных клетках (Ьейег е1 а1., 1986, Се11 45: 485-495); контрольная область гена альбумина, активная в печени (Ршкей е1 а1., 1987, Оепек апй Эете1 1 : 268- 276); область контроля гена альфа-фетопротеина, активная в печени (Кгит1аиГ е1 а1., 1985, Μо1 Се11. Вю1 5: 1639-1648; Наттег е1 а1., 1987, 8с1епсе 253: 53-58); область контроля гена альфа 1-антитрипсина, активную в печени (КеИеу е1 а1., 1987, Оепек апй Эете1 1: 161-171); область контроля гена бета-глобина, активная в миело
- 56 019397 идных клетках (Μод^ат е! а1., 1985, №1Шге 315: 338-340; Κοί^δ е! а1., 1986, Се11 46: 89-94); область контроля гена основного белка миелина, активная в олигодендроцитных клетках мозга (Веаййеаб е! а1., 1987, Се11 48: 703-712); область контроля гена лёгкой цепи-2 миозина, активная в скелетных мышцах (8аш, 1985, №|1иге 314: 283-286); область контроля гена гонадотропин-рилизинг фактора, активную в гипоталамусе (Μаδοη е! а1., 1986, 8с1епсе 234: 1372-1378).
Энхансерную последовательность можно включать в вектор для усиления транскрипции ДНК, кодирующей антигенсвязывающий белок для I^-17ΒΑ по изобретению, содержащий лёгкую и тяжёлую цепь, в высших эукариотах. Энхансеры представляют собой цис-действующие элементы ДНК, длиной обычно около 10-300 п.о., которые действуют на промотор, повышая транскрипцию. Энхансеры относительно независимы от ориентации и положения, обнаружены как в положении 5', так и в 3' к элементу транскрипции. Известны некоторые энхансерные последовательности генов млекопитающих (например, генов глобина, эластазы, альбумина, альфа-фетопротеина и инсулина). Однако обычно используют вирусный энхансер. 8ν40 энхансер, ранний энхансер-промотор цитомегаловируса, энхансер вируса полиомы и энхансер аденовируса представляют собой известные в уровне техники типичные усиливающие элементы для активации эукариотических промоторов. Хотя энхансер может располагаться в векторе либо 5', либо 3' к кодирующей последовательности, обычно он находится в сайте 5' от промотора. В экспрессирующий вектор можно включать последовательность, кодирующую подходящую нативную или гетерологичную сигнальную последовательность (лидерную последовательность или сигнальный пептид), с целью стимулировать внеклеточную секрецию антитела. Выбор сигнального пептида или лидера зависит от типа клеток-хозяев, в которых должно продуцироваться антитело, а нативную сигнальную последовательность можно заменить на гетерологичную сигнальную последовательность. Примеры сигнальных пептидов, функциональных в клетках хозяев-млекопитающих, включают следующие: сигнальную последовательность для интерлейкина-7 (ΙΕ-7), описанную в патенте США N0. 4965195; сигнальную последовательность для рецептора интерлейкина-2, описанную в Сοδтаη е! а1., 1984, №1иге 312-768; сигнальный пептид рецептора интерлейкина-4, описанный в европейском патенте ЕР N0. 0367566; сигнальный пептид рецептора типа Ι интерлейкина-1, описанный в патенте США N0. 4968607; сигнальный пептид рецептора типа ΙΙ интерлейкина-1, описанный в европейском патенте ЕР N0. 0460846.
Экспрессирующие векторы по изобретению можно конструировать из исходного вектора, такого как продажный вектор. Такие векторы могут или не могут содержать все заданные фланкирующие последовательности. Если одна или более фланкирующих последовательностей ещё отсутствуют в векторе, их можно получать индивидуально и лигировать в вектор. Методы получения каждой из фланкирующих последовательностей хорошо известны специалистам в данной области техники.
После того как сконструирован вектор, а нуклеотидная молекула, кодирующая содержащую лёгкую цепь, или тяжёлую цепь, или лёгкую и тяжёлую цепи, последовательность антигена, связывающую ΙΕ17ΒΑ, включена в соответствующий сайт вектора, готовый вектор можно ввести в подходящую клеткухозяина для амплификации и/или экспрессии полипептида. Трансформацию экспрессирующего вектора для I^-17ΒΑ антигенсвязывающего белка в выбранную клетку-хозяина можно осуществлять общеизвестными методами, включая трансфекцию, инфицирование, копреципитацию с фосфатом кальция, электропорацию, микроинжекцию, липофекцию, трансфекцию, опосредованную ΌΕΑΕ-декстраном, или другой известный метод. Выбранный метод отчасти зависит от типа используемой клетки-хозяина. Эти и другие подходящие методы общеизвестны специалистам в данной области техники и представлены, например, в книге 8атЬгоок е! а1., 2001, см. выше.
Клетка-хозяин, при культивировании в подходящих условиях, синтезирует антигенсвязывающий белок для I^-17ΒΑ, который затем собирают с культуральной среды (если клетка-хозяин секретирует её в среду) или непосредственно из продуцирующей его клетки-хозяина (если она не секретирует белок). Выбор подходящей клетки-хозяина зависит от различных факторов, таких как заданные уровни экспрессии, модификации полипептида, желательные или необходимые для активности (такие как полученные гликозилированием или фосфорилированием) и лёгкость скручивания в биологически активную молекулу. Клетка-хозяин может быть эукариотической или прокариотической.
Линии клеток млекопитающих, пригодных в качестве хозяев для экспрессии, хорошо известны в уровне техники и включают, но без ограничения, иммортализованные линии клеток, имеющиеся в Американской коллекции типовых культур (АТСС), и для получения рекомбинантных полипептидов по изобретению можно использовать любые известных в уровне техники линии клеток, применимых в экспрессионной системе. В целом клетки-хозяева трансформируются с помощью рекомбинантного вектора экспрессии, который содержит ДНК, кодирующую заданный антитела против I^-17ΒΑ. Среди клетокхозяев, которые можно использовать, клетки прокариот, дрожжей и высшие эукариотические клетки. Прокариоты включают высшие грамотрицательные или грамположительные организмы, например, Е. со11 или бациллы. Высшие эукариотические клетки включают клетки насекомых и известные линии клеток млекопитающих. Примеры подходящих клеточных линий млекопитающих включают С08-7 линию почечных клеток обезьян (АТСС СВЬ 1651) (С1ихтап е! а1., 1981, Се11 23: 175), Ь клетки, 293 клетки, С127 клетки, 3Т3 клетки (АТСС ССЬ 163), клетки яичников китайского хомячка (СНО) или их производные, такие как Vедд^е СН0 (овощей), и родственные клеточные линии, которые выращивают в бес
- 57 019397 сывороточных средах (Яактиккеп е! а1., 1998, Су!о!есНпо1оду 28: 31), клетки НеЬа, ВНК (АТСС СЯЬ 10) клеточные линии и линия клеток СVI/ЕВNΛ, образованная из линии почечных клеток африканской зелёной мартышки СУ! (АТСС ССЬ 70), как описано МсМаНап е! а1., 1991, ЕМВ0 1. 10: 2821, человеческие эмбриональные почечные клетки, такие как 293, 293 ЕВNΛ или МБЯ 293, человеческие эпидермальные А431 клетки, человеческие Со1о205 клетки, другие трансформированные клетки приматов, нормальные диплоидные клетки, клеточные штаммы, полученные при т νίΙΐΌ культивировании первичной ткани, первичные эксплантаты, клетки НЬ-60, И937, НаК или 1игка1. Кроме того, линии клеток млекопитающих, такие как, например, НерО2/3В, КВ, МН 3Т3 или Б49, можно использовать для экспрессии полипептида, когда требуется использовать полипептид в различных анализах сигнальной трансдукции или в репортёрном анализе. Или же можно продуцировать полипептид в низших эукариотах, таких как дрожжи, или в прокариотах, таких как бактерии. Подходящие дрожжи включают БассНаготусек сегеуЫае, Бс1токассНаготусек ротЬе, штаммы К1иууеготусек, СапШйа или любой штамм дрожжей, способный экспрессировать гетерологичные полипептиды. Подходящие бактериальные штаммы включают ЕксНепсЫа сой, ВасШик киЬййк, Ба1топе11а (урЫтигшт или любой бактериальный штамм, способный экспрессировать гетерологичные полипептиды. Если полипептид получают в дрожжах или в бактериях, может потребоваться модифицировать продуцируемый в них полипептид, например, фосфорилированием или гликозилированием соответствующих сайтов, для получения функционального полипептида. Такое ковалентное связывание можно осуществлять известными химическими или ферментативными методами. Полипептид можно также получать функциональным связыванием выделенной нуклеиновой кислоты по изобретению с подходящими контрольными последовательностями в одном или более экспрессирующих (экспрессионных) векторов насекомых и используя экспрессионную систему насекомых. Материалы и методы для экспрессионных систем бакуловирусов/насекомых выпускаются промышленностью в виде наборов, например, фирмой Шуйгодеп, Бап П1едо, СаНЕ, и.Б.А. (набор МахВас®), а такие методы хорошо известны в уровне техники, как описано в Биттегк апй Бтйй, Техак Адгюи1!ига1 Ехрептеп! Б1а11оп Ви11е!т №. 1555 (1987), и Ьискоте апй Биттегк, Вю/ТесЬпо1оду 6: 47 (1988). Для получения полипептидов можно также применять трансляцию в бесклеточных системах, используя РНК, полученные из нуклеотидных конструкций по данному описанию. Клонирующие и экспрессирующие векторы, подходящие для применения с бактериальными, грибковыми клетками- хозяевами, клетками хозяев-дрожжей и хозяев-млекопитающих описаны Рои\\е1к е! а1., (С1ошпд ХесЮгк: А ЬаЬога!огу Мапиа1., Е1кеу1ег, №\ν Уогк, 1985). Клетка-хозяин, которая содержит выделенную нуклеиновую кислоту по изобретению, предпочтительно, функционально связанная по меньшей мере с одной последовательностью контроля экспрессии, является рекомбинантной клеткой-хозяином.
В некоторых вариантах изобретения линии клеток можно выбирать, определяя, какие линии клеток имеют высокие уровни экспрессии и конститутивно (постоянно) продуцируют антигенсвязывающие белки, обладающие свойствами связывания с ЕЕ-17ЯА. В другом варианте изобретения можно выбрать линию клеток из В клеточной линии дифференцировки, которая не даёт своего собственного антитела, но обладает способностью вырабатывать и секретировать гетерологичное антитело.
Идентификация доменов на человеческом 1Б-17КА, с которыми связаны нейтрализующие антитела
В примерах 14-17 описываются различные исследования, выявляющие домены на человеческом ГЬ17ЯА, которые нейтрализуют тАЬк, связанные с ЕЕ-ПКА. Эти домены называют нейтрализующими детерминантами. Нейтрализующая детерминанта представляет собой непрерывный участок кЕ-ПЯА, который, будучи мутантным, отрицательно влияет на связывание по меньшей мере одного из нейтрализующих антител по данному описанию. Нейтрализующие детерминанты могут иметь особенности первичной, вторичной, третичной и/или четвертичной структур. Нейтрализующее антитело представляет собой одно из антител по данному описанию, которое специфически связывает человеческий кЕ-17ЯА и ингибирует связывание Ш-ПА и/или Ш-17Е и тем самым ингибирует передачу сигнала и/или биологическую активность кЕ-17ЯА. Примеры нейтрализующих антител включают антитела, содержащие ΛМ^1/ΛМН1 (БЕР ΙΌ N0: 27/БЕО ΙΌ N0: 1), АМ 2^41..2 (БЕС) ΙΌ N0: 28/БЕО ΙΌ N0: 2), АМЬ3/АМН3 (БЕС) ΙΌ N0: 29/БЕС) ΙΌ N0: 3), АМ]Д/АМН4 (БЕС ΙΌ N0: 30/БЕО ΙΌ N0: 4), АМЬ5/АМН5 (БЕС ΙΌ N0: 31/БЕО ΙΌ N0: 5), АМЬ6/АМН6 (БЕО ΙΌ N0: 32/БЕО ΙΌ N0: 6), АМЬ7/АМН7 (БЕС ΙΌ N0: 33/БЕО ΙΌ N0: 7), АМЬ8/АМН8 (БЕС ΙΌ N0: 34/БЕО ΙΌ N0: 8), АМ 2X^,9 (БЕС ΙΌ N0: 35/БЕО ΙΌ N0: 9), АМьЮ/АМнЮ (БЕС ΙΌ N0: 36/БЕО ΙΌ N0: 10), АМ^ЕАМ^ (БЕС ΙΌ N0: 37/БЕО ΙΌ N0: 11), АМЪ12/АМН12 (БЕС ΙΌ N0: 38/БЕО ΙΌ N0: 12), АМЪ13/АМН13 (БЕС ΙΌ N0: 39/БЕО ΙΌ N0: 13), АМ^/АМ^ (БЕС ΙΌ N0: 40/БЕС) ΙΌ N0: 14), АМЬ15/АМН15 (БЕС ΙΌ N0: 41/БЕО ΙΌ N0: 15), АМЬ16/АМН16 (БЕС ΙΌ N0: 42/БЕО ΙΌ N0: 16), АМЬ17/АМН17 (БЕС ΙΌ N0: 43/БЕО ΙΌ N0: 17), ΛМ^18/ΛМН18 (БЕС ΙΌ N0: 44/БЕО ΙΌ N0: 18), АМЬ19/АМН19 (БЕС ΙΌ N0: 45/БЕО ΙΌ N0: 19), ΛМ^20/ΛМН20 (БЕС ΙΌ N0: 46/БЕО ΙΌ N0: 20), АМЬ21/АМН21 (БЕС ΙΌ N0: 47/БЕО ΙΌ N0: 21), АМЬ22/АМН22 (БЕС ΙΌ N0: 48/БЕО ΙΌ N0: 22), АМЬ23/АМН23 (БЕС ΙΌ N0: 49 или БЕС ΙΌ N0: 50/БЕО ΙΌ N0: 23), АМ] Д4/АМН24 (БЕС ΙΌ N0: 51/БЕО ΙΌ N0: 24), АМ^б/АМ^б (БЕС ΙΌ N0: 52/БЕО ΙΌ N0: 25), АМ^/АМ^ (БЕС ΙΌ N0:53^0 ΙΌ N0: 26), а также их фрагменты, связывающие Ш- 17ЯА, и их комбинации.
Другие варианты нейтрализующих антител включают антитела, которые специфически связывают
- 58 019397 ся с человеческим ГО-17ВА и ингибируют связывание ГО-ИА и ΣΕ-17Ρ с ГО-17ВА или гетеромерным комплексом [Е-ПРА и ГО-17ВС и активирование ими ГО-17ВА или гетеромерного комплекса ГО-17ВА и ГО-17ВС. Другие варианты изобретения включают антитела, которые специфически связываются с человеческим ГО-17ВА и ингибируют связывание гетеромера I^-17Л/I^-17Ρ с ГО-17ВА или гетеромерным комплексом I^-17ВЛ и ГО-17ВС и активирование им ГО-17ВА или гетеромерного комплекса I^-17ВЛ и ГО-17ВС. Другие варианты изобретения включают антитела, которые специфически связываются с человеческим ГО-17ВА и частично или полностью ингибируют образование ГО-17ВА гомомерного или гетеродимерного функционального рецепторного комплекса, такого как, но без ограничения, как комплекс I^-17ВЛ-I^-17ВС. Другие варианты изобретения включают антитела, которые специфически связываются с человеческим ГО-17ВА и частично или полностью ингибируют образование ГО-17ВА гомомерного или гетеродимерного функционального рецепторного комплекса, такого как, но без ограничения, как комплекс I^-17ВЛ/I^-17ВС, и необязательно ингибируют связывание I^-17Л и/или ГО-17Р или гетеромера I^-17А/I^-17Ρ с ГО-17ВА или с гетеромерным комплексом ГО-17ВА.
Другие примеры нейтрализующих антител включают антитела, содержащие по меньшей мере один СОВ участок из антител, содержащих АМД/АМД (8Ε0 ГО N0: 27/8ΕΟ ГО N0: 1), ЛМ^2/ЛМн2 (8Ε0 ГО N0: 28/8ΕΟ ГО N0: 2), АМь3/АМн3 (8ΕΟ ГО N0: 29/8ΕΟ ГО N0: 3), АМ 4^41..4 (8ΕΟ ГО N0: 30/8ΕΟ ГО N0: 4), АМь5/АМн5 (8ΕΟ ГО N0: 31/8ΕΟ ГО N0: 5), АМь6/АМн6 (8ΕΟ ГО N0: 32/8ΕΟ ГО N0: 6), АМь7/АМн7 (8Ε6) ГО N0: 33/8ΕΟ ГО N0: 7), АМь8/АМн8 (8ΕΟ ГО N0: 34/8ΕΟ ГО N0: 8), АМ 9^41..9 (8Ε6) ГО N0: 35/8ΕΟ ГО N0: 9), ЛМ^10/ЛМн10 (8Ε6) ГО N0: 36/8ΕΟ ГО N0: 10), АМ^ГОАМ^ (8Ε6) ГО N0: 37/8ΕΟ ГО N0: 11), АМь12/АМн12 (8Ε6) ГО N0: 38/8ΕΟ ГО N0: 12), ЛМ^13/ЛМн13 (8Ε6) ГО N0: 39/8ΕΟ ГО N0: 13), АМь14/АМн14 (8Ε6) ГО N0: 40/8ΕΟ ГО N0: 14), АМь15/АМн15 (8Ε6) ГО N0: 41/8ΕΟ ГО N0: 15), АМ^ЬЕГО/АМ^ (8Ε6) ГО N0: 42/8ΕΟ ГО N0: 16), АМьИ/АМнИ (8Ε6) ГО N0: 43/8ΕΟ ГО N0: 17), АМь18/АМн18 (8Ε6) ГО N0: 44/8ΕΟ ГО N0: 18), АМ^/АМ^ (8Ε6) ГО N0: 45/8ΕΟ ГО N0: 19), АМь20/АМн20 (8Ε6) ГО N0: 46/8ΕΟ ГО N0: 20), АМь21/АМн21 (8ΕΟ ГО N0: 47/8ΕΟ ГО N0: 21), АМь22/АМн22 (8ΕΟ ГО N0: 48/8ΕΟ ГО N0: 22), АМь23/АМн23 (8ΕΟ ГО N0: 49 или 8ΕΟ ΕΌ N0: 50/8ΕΟ ГО N0: 23), АМь24/АМн24 (8Ε6) ГО N0: 51/8ΕΟ ГО N0: 24), АМ^б/АМ^б (8Ε6) ГО N0: 52/8ΕΟ ГО N0: 25), АМъ26/АМн26 (8Ε0 ГО N0:53/8Ε^ ГО N0: 26), а также их фрагменты, связывающие ГО-ИВА, и их комбинации. См. табл. 1.
На фиг. 16А и 16В показано, что антитела А: ЛМ^11/АМн11, В: ЛМ^4/ЛМн4, С: ЛМ^8/ЛМн8, Ό: АМ| Ε: ЛМ^6/ЛМн6, Р: ЛМ^10/ЛМн10 и С: АМ^И/АМнИ конкурируют одно с другим за связывание с человеческим ГО-ИВА и попадают в заданную группу (Вт (совокупность) 1). Как правило, антитела I: АМ^/АМ^, ί: АМ^23/ЛМн23, К: ЛМ^14/ЛМн14, Ь: АМ^/АМ^, М: АМЪ12/ АМн12, 0: АМь^/АМ^ГО конкурируют одно с другим за связывание с человеческим ГО- 17ВА и поэтому попадают в заданную группу (Вт (совокупность) 3). Вообще говоря, антитела из группы (совокупности, Вт) 1 не конкурируют с антителами из Вт (совокупности) 3. Антитело Н: АМн1/ЛМ^1 является уникальным по характеру конкурентности и образует Вт 2, но более всего похож на Вт (совокупность) 3. Антитело Р: АМПЕРАМ! 26 образует Вт (совокупность) 4 и проявляет слабую перекрёстную конкурентность с любым другим антителом, это заставляет предположить, что нейтрализующая детерминанта уникальна для этого антитела. Антитела О: АМн21/ АМЪ21 и В: ЛМн20/ЛМ^20 ПО отдельности проявляют уникальный характер конкурентности, но со значительным сходством с антителами Вт 3, и образуют Вт 5 и 6, соответственно. Этот метод позволяет идентифицировать группы антител, связывающихся с различными нейтрализующими детерминантами, и свидетельствует о наличии нескольких видов в подроде перекрёстно конкурентных антител.
В примере 16 описано применение человеческих/мышиных ГО-ИВА химерных белков для определения нейтрализующих детерминант на человеческом ГО-ИВА. На фиг. 19 показано, что по меньшей мере три нейтрализующих детерминанты были определены на основании областей, влияющих на связывание нейтрализующих ГО-ИВА антител, а именно, перекрывающих Домен В аминокислот 75-96 человеческого ГО-17ВА (8Ε0 ГО N0: 431), перекрывающих Домен С аминокислот 128-154 человеческого ГОНВА (8Ε0 ГО N0: 431), и перекрывающих Домен Ό аминокислот 176-197 человеческого ГО- 17ВА (8Ε0 ГО N0: 431). Перекрывающие Домен В аминокислот 75-96 человеческого ГО-17ВА (8Ε0 ГО N0: 431) отрицательно влияют на связывание нейтрализующих антител АМн1/ЛМ^1 и ЛМн23/ЛМ^23. Перекрывающие Домен С аминокислоты 128-154 человеческого ГО-17ВА (8Ε0 ГО N0: 431) отрицательно влияют на связывание нейтрализующих антител АМн22/ЛМ^22 и ЛМн23/ЛМ^23. Перекрывающие Домен Ό аминокислоты 176-197 человеческого ГО-ИВА (8Ε0 ГО N0: 431) отрицательно влияют на связывание нейтрализующих антител АМн1/АМь1, АМн22/ЛМ^22, ЛМн14/ЛМ^14, ЛМн19/ЛМ^19, АМн23/АМь23, АМн21/АМь21 и ЛМн20/АМ^20. Таким образом, Домены В, С и Ό считают нейтрализующими детерминантами.
В Примере 17 описывается применение методов замены на аргинин (сканирование с помощью аргинина) для дальнейшего определения доменов на человеческом ГО-17В, которые связаны с нейтрализующими антителами к ГО-ИВА. Методология замены на аргинин позволяет идентифицировать несколько нейтрализующих детерминант: перекрывающие домен, связанный с ЛМн18/ЛМ^18, аминокислоты 220- 284 человеческого ГО-17ВА (8Ε0 ГО N0: 431); связанный с ЛМн1/ЛМ^1 домен, сфокусирован
- 59 019397 ный на аминокислотном остатке 152 человеческого ΙΡ-17ΒΑ (5>Е0 ΙΌ N0: 431); перекрывающие домен, связанный с ΑΜ||22/ΑΜ| 22, аминокислоты 152-198 человеческого ΙΕ-17ΒΑ (5>Е0 ΙΌ N0: 431); перекрывающие домен, связанный с ΑΜΗ14/ΑΜΣ14, аминокислоты 152- 297 человеческого ΙΕ-17ΕΑ (5>Е0 ΙΌ N0: 431); перекрывающие домен, связанный с ΑΜΗ19/ΑΜΣ19, аминокислоты 152-186 человеческого ΙΕ-17ΕΑ (5>Е0 ΙΌ N0: 431); перекрывающие домен, связанный с ΑΜΗ23/ΑΜΣ23, аминокислоты 97-297 человеческого ГЬ-17ЯЛ (5>Е0 ΙΌ N0: 431); перекрывающие домен, связанный с ΑΜΗ26/ΑΜΣ26, аминокислоты 138-270 человеческого ΙΕ-17ΚΑ (5>Е0 ΙΌ N0: 431); перекрывающие домен, связанный с ΑΜΗ21/ΑΜΣ21, аминокислоты 113-98 человеческого ΙΕ-ΠΕΑ (5>Е0 ΙΌ N0: 431); и перекрывающие домен, связанный с ΑΜη20/ΑΜε20, аминокислоты 152-270 человеческого I^-17ЯЛ (5>Е0 ΙΌ N0: 431).
Показано, что все остатки, приведённые на фиг. 22, значительно снижают или практически исключают связывание нейтрализующего человеческого моноклонального антитела, которое специфически связывается с человеческим I^-17ЯЛ.
Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывается с ΙΕ-ΗΒΑ и конкурирует за связывание с любым из антител ΑΜΗ3/ΑΜ^3, ΑΜη20/ΑΜς20, ΑΜη22/ΑΜς22, ΑΜη23/ΑΜς23, ΑΜη14/ΑΜς14, ΑΜη21/ΑΜς21, ΑΜη19/ΑΜς19, ΑΜη12/ΑΜς12, ΑΜη17/ΑΜς17 или ΑΜΗ16/ΑΜΣ16, или любое их подмножество.
Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывается с ΙΕ-Π^Α и конкурирует за связывание с любым из антител ΑΜΗ22/ΑΜΕ22, ΑΜη23/ΑΜς23, ΑΜη14/ΑΜς14, ΑΜη19/ΑΜς19, ΑΜη12/ΑΜς12, ΑΜη17/ΑΜς17 или ΑΜΗ16/ΑΜΣ16, или любое их подмножество.
Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, которое специфически связывается с человеческим ΙΕ-Π^Α 5>Е0 ΙΌ N0: 431, но не связывается специфически с химерным полипептидом, состоящим из 5>Е0 ЕЭ N0: 434. Варианты изобретения включают антитело или его ΙΕ-Π^Α- связывающий фрагмент, которое специфически связывается с человеческим I^-17ЯЛ 5>Е0 ΙΌ N0: 431, но не связывается специфически с химерным полипептидом, состоящим из 5>Е0 ΙΌ N0: 435. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, которое специфически связывается с человеческим ΙΕ-Π^Α 5>Е0 ΙΌ N0: 431, но не связывается специфически с химерным полипептидом, состоящим из 5>Е0 ΙΌ N0: 436.
Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает нейтрализующую детерминанту, содержащую аминокислоты 75-96 5>Е0 ΙΌ N0: 431 человеческого ΙΕ-Π^Α. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает нейтрализующую детерминанту, содержащую аминокислоты 75-96 5>Е0 ΙΌ N0: 431 человеческого I^-17ЯЛ. Варианты изобретения включают антитело или его Ш17ЯЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает нейтрализующую детерминанту, содержащую аминокислоты 128-154 5>Е0 ΙΌ N0: 431 человеческого I^-17ЯЛ. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает нейтрализующую детерминанту, содержащую аминокислоты 176-197 5>Е0 ΙΌ N0: 431 человеческого I^-17ЯЛ. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает нейтрализующую детерминанту, содержащую аминокислоты 152-297 5>Е0 ΙΌ N0: 431 человеческого ΙΕ-Π^Α. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает нейтрализующую детерминанту, содержащую аминокислоты 220-284 5>Е0 ΙΌ N0: 431 человеческого I^-17ЯЛ. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает нейтрализующую детерминанту, содержащую аминокислоты 152-198 5>Е0 ΙΌ N0: 431 человеческого I^-17ЯЛ. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает нейтрализующую детерминанту, содержащую аминокислоты 152-186 5>Е0 ΙΌ N0: 431 человеческого I^-17ЯЛ. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает нейтрализующую детерминанту, содержащую аминокислоты 92-297 5>Е0 ΙΌ N0: 431 человеческого ΙΕ-Π^Α. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает нейтрализующую детерминанту, содержащую аминокислоты 138-270 5>Е0 ΙΌ N0: 431 человеческого I^-17ЯЛ. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает нейтрализующую детерминанту, содержащую аминокислоты 113-198 5>Е0 ΙΌ N0: 431 человеческого I^-17ЯЛ. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает нейтрализующую детерминанту, содержащую аминокислоты 152-270 5>Е0 ΙΌ N0: 431 человеческого I^-17ЯЛ.
Другие варианты изобретения включают антитело или его I^-17ЯЛ-связывающий фрагмент, которое связывает человеческий ΙΕ-Π^Α 5>Е0 ΙΌ N0: 431, но не связывает указанный I^-17ЯЛ, содержащий аминокислоту, заменённую на аргинин, в одном из положений Е97Я, Е113Я, 8115Я, Н138Я, О152Я, О154Я, Е156Я, К166Я, Р176Я, 8177Я, П184Я, Е186Я, 8198Я, Н215Я, 8220Я, Т228Я, Т235Я, Е241Я, Н243Я, Ь270Я, О284Я, Н297Я 5>Е0 ΙΌ N0: 431. Варианты изобретения включают антитело или его Ш17ЯЛ-связывающий фрагмент, которое связывает человеческий I^-17ЯЛ 5>Е0 ΙΌ N0: 431, но не связывает указанный I^-17ЯЛ, содержащий аминокислоту, заменённую на аргинин, в одном из положений
- 60 019397
Э152В. О154В, Е156В, О184В, Е186В, Н297В 8Е0 ΙΌ N0: 431. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ВЛ-связывающий фрагмент, которое связывает человеческий Ш-ИВА 8Е0 ΙΌ N0: 431, но не связывает указанный I^-17ВЛ, содержащий аминокислоту, заменённую на аргинин, в положении О152В 8ЕО ΙΌ N0:431.
Другие варианты изобретения включают антитело или его I^-17ВЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает эпитоп, определяемый любой из аминокислот Ό152, Ό154, Е156, Ό184, Е186, Н297 8Е0 ΙΌ N0: 431. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ВЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает эпитоп, определяемый по меньшей мере двумя аминокислотами, выбранными из группы, состоящей из Ό152, Ό154, Е156, Ό184, Е186, Н297 8Е0 ΙΌ N0: 431. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ВЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает эпитоп, определяемый по меньшей мере тремя аминокислотами, выбранными из группы, состоящей из: Ό152, Ό154, Е156, Ό184, Е186, Н297 8Е0 ΙΌ N0: 431. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ВЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает эпитоп, определяемый, по меньшей мере, четырьмя аминокислотами, выбранными из группы, состоящей из: Ό152, Ό154, Е156, Ό184, Е186, Н297 8Е0 ΙΌ N0: 431. Варианты изобретения включают антитело или его ^-17^^связывающий фрагмент, который специфически связывает эпитоп, определяемый по меньшей мере пятью аминокислотами, выбранными из группы, состоящей из Ό152, Ό154, Е156, Ό184, Е186, Н297 8Е0 ΙΌ N0: 431. Варианты изобретения включают антитело или его I^-17ВЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывает эпитоп, определяемый аминокислотами Ό152, Ό154, Е156, Ό184, Е186, Н297 8ЕО ΙΌ N0: 431.
Аспекты изобретения включают ряд вариантов изобретения, в том числе, но без ограничения, следующие типичные варианты изобретения: Вариант изобретения 101: выделенное моноклональное антитело или его I^-17ВЛ-связывающий фрагмент, который специфически связывается с ЕЕ-ИВА и конкурирует за связывание с антителом, выбранным из группы, состоящей из:
А) выделенного антитела или его I^-17ВЛ-связывающего фрагмента, содержащего
а) последовательность вариабельного домена лёгкой цепи по меньшей мере на 80% идентичную последовательности вариабельного домена лёгкой цепи АМН2, 3, 5, 9, 10, 12, 14-17 и 19-25 (8Е0 ΙΌ N0: 28, 29, 31, 35, 36, 38, 40- 43 и 45-53, соответственно);
б) последовательность вариабельного домена тяжёлой цепи по меньшей мере на 80% идентичную последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи АМН2, 3, 5, 9, 10, 12, 14-17 и 19-25 (8Е0 ΙΌ N0: 2, 3, 5, 9, 10, 12, 14-17 и 19-25, соответственно);
в) вариабельный домен лёгкой цепи по (а) и вариабельный домен тяжёлой цепи по (б); причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ЕЕ-ИВА;
Б) выделенного антитела или его ЕЕ-ИВА-связывающего фрагмента, содержащего:
а) СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 188), СОВ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 189), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 190) лёгкой цепи и СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 110), СОВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 111), СОВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 112) тяжёлой цепи антитела АМ-2;
б) СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 191), СОВ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 192), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 193) лёгкой цепи и СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 113), СОВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 114), СОВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 115) тяжёлой цепи антитела АМ-3;
в) СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 197), СОВ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 198), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 199) лёгкой цепи и СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 119), СОВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 120), СОВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 121) тяжёлой цепи антитела АМ-5;
г) СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 209), СОВ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 210), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 211) лёгкой цепи и СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 131), СОВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 132), СОВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 133) тяжёлой цепи антитела АМ-9;
д) СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 212), СОВ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 213), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 214) лёгкой цепи и СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 134), СОВ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 135), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 136) тяжёлой цепи антитела АМ-10;
е) СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 218), СОВ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 219), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 220) лёгкой цепи и СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 140), СОВ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 141), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 142) тяжёлой цепи антитела АМ-12;
ж) СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 224), С0В2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 225), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 226) лёгкой цепи и СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 146), СОВ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 147), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 148) тяжёлой цепи антитела АМ-14;
з) СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 227), С0В2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 228), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 229) лёгкой цепи и СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 149), СОВ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 150), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 151) тяжёлой цепи антитела АМ-15;
и) СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 230), С0В2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 231), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 232) лёгкой цепи и СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 152), СОВ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 153), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 154) тяжёлой цепи антитела АМ-16;
к) СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 233), СОВ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 234), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 235) лёгкой цепи и СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 155), СОВ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 156), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 157) тяжёлой цепи антитела АМ-17;
л) СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 239), С0В2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 240), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 241) лёгкой цепи и СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 161), СОВ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 162), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 163) тяжёлой цепи антитела АМ-19;
м) СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 242), С0В2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 243), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 244) лёгкой цепи и СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 164), СОВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 165), СОВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 166) тяжёлой цепи антитела АМ-20;
н) СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 245), С0В2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 246), СОВ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 247) лёгкой цепи и СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 167), СОВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 168), СОВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 169) тяжёлой цепи антитела АМ-21;
о) СОВ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 248), СОВ2 (8Ер ΙΌ N0: 249), СОВ3 (8Ер ΙΌ N0: 250) лёгкой цепи и СОВ1 (8ЕО ΙΌ N0: 170), СОВ2 (8ЕО ΙΌ N0: 171), СОВ3 (8ЕО ΙΌ N0: 172) тяжёлой цепи антитела АМ-22;
- 61 019397
п) ί’ΌΚ1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 251), СЕК2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 252), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 253) лёгкой цепи и СЕК1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 173), СЕК2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 174), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
р) СЕК1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 254), СЕК2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 255), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 256) лёгкой цепи и СЕК1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 173), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 174), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
с) С1Ж1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 257), СЕК2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 258), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 259) лёгкой цепи и СЕК1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 176), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 177), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 178) тяжёлой цепи антитела АМ-24;
т) СЕК1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 260), СЕК2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 261), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 262) лёгкой цепи и СЕК1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 179), СЕЯ2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 180), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 181) тяжёлой цепи антитела АМ-25; причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ΙΕ-17ΚΛ; и
В) выделенного антитела или его Ш-ПКА-связывающего фрагмента, содержащего:
а) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЬ2/АМН2 (8ЕР ΙΌ N0: 28/8ЕО ΙΌ N0:2);
б) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ3/АМН3 (8ЕР ΙΌ N0: 29/8ЕО ΙΌ N0: 3);
в) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ5/АМН5 (8ЕР ΙΌ N0: 3 1/8ЕО ΙΌ N0: 5);
г) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ9/АМН9 (8ЕР ΙΌ N0: 35/8ЕР ΙΌ N0: 9);
д) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ10/АМН10 (8ЕР ΙΌ N0: 36/8ЕО ΙΌ N0: 10);
е) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ12/АМН12 (8ЕР ΙΌ N0: 38/8ЕР ΙΌ N0: 12);
ж) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^М/АМ^Н (8ЕР ΙΌ N0: 40/8ЕО ΙΌ N0: 14);
з) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ15/АМН15 (8ЕР ΙΌ N0: 41/8ЕР ΙΌ N0: 15);
и) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ16/АМН16 (8ЕР ΙΌ N0: 42/8ЕО ΙΌ N0: 16);
к) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ17/АМН17 (8ЕР ΙΌ N0: 43/8ЕР ΙΌ N0: 17);
л) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ19/АМН19 (8ЕР ΙΌ N0: 45/8ЕО ΙΌ N0: 19);
м) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ0/АМН20 (8ЕР ΙΌ N0: 46/8ЕО ΙΌ N0: 20);
н) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЬ21/АМН21 (8ЕР ΙΌ N0: 47/8ЕО ΙΌ N0: 21);
о) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЬ22/АМН22 (8ЕР ΙΌ N0: 48/8ЕО ΙΌ N0: 22);
п) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ23/АМН23 (8ЕР ΙΌ N0: 49 или 8ЕЕ) ΙΌ N0: 50/8ЕО ΙΌ N0: 23);
р) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ24/АМН24 (8ЕР ΙΌ N0: 51/8ЕО ΙΌ N0: 24);
с) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЬ25/АМН25 (8ЕР ΙΌ N0: 52/8ЕЦ ΙΌ N0: 25); причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ΙΕ-17ΕΛ.
Вариант изобретения 102: антитело по варианту изобретения 101, отличающееся тем, что указанное антитело выбирают из группы, состоящей из:
А) выделенного антитела или его ГЕ-ПКА-связывающего фрагмента, содержащего
а) последовательность вариабельного домена лёгкой цепи по меньшей мере на 80% идентичную последовательности вариабельного домена лёгкой цепи АМЪ 9, 14, 16, 17, 19-23 и 26 (8ЕР ΙΌ N0: 35, 40, 42, 43, 45-50 и 53, соответственно);
б) последовательность вариабельного домена тяжёлой цепи по меньшей мере на 80% идентичную последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи АМН 9, 14, 16, 17, 19-23 и 26 (8ЕР ΙΌ N0: 9, 14, 16, 17, 19-23 и 26, соответственно);
в) вариабельный домен лёгкой цепи по (а) и вариабельный домен тяжёлой цепи по (б); причём указанное антитело специфически связывается с человеческим I^-17КА;
Б) выделенного антитела или его ЕБ-ПКА-связывающего фрагмента, содержащего:
а) С1Ж1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 209), СЕК2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 210), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 211) лёгкой цепи и СЕК1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 131), СЕК2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 132), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 133) тяжёлой цепи антитела АМ-9;
б) СЕК1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 224), СЕК2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 225), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 226) лёгкой цепи и СЕК1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 146), СЕК2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 147), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 148) тяжёлой цепи антитела АМ-14;
в) СЕК1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 230), СЕК2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 231), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 232) лёгкой цепи и СЕК1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 152), СЕК2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 153), СОЯ3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 154) тяжёлой цепи антитела АМ-16;
- 62 019397
г) СОК1 (8Е() ГО N0: 233), СОК2 (8ЕО ГО N0: 234), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 235) лёгкой цепи и СОК1 (8Е() ГО N0: 155), СОК2 (8ЕО ГО N0: 156), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 157) тяжёлой цепи антитела АМ-17;
д) СОК1 (8Е() ГО N0: 239), СОК2 (8ЕО ГО N0: 240), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 241) лёгкой цепи и СОК1 (8Е() ГО N0: 161), СОК2 (8ЕО ГО N0: 162), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 163) тяжёлой цепи антитела АМ-19;
е) СОК1 (8Е() ГО N0: 242), СОК2 (8ЕО ГО N0: 243), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 244) лёгкой цепи и СОК1 (8Е() II) N0: 164), С1)К2 (8ЕО II) N0: 165), С1Ж (8ЕО II) N0: 166) тяжёлой цепи антитела АМ-20;
ж) СОК1 (8Е() ГО N0: 245), СЭЕ2 (8ЕО ГО N0: 246), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 247) лёгкой цепи и СОК1 (8Е() II) N0: 167), С1)К2 (81 ίθ II) N0: 168), С1Ж (8ЕО II) N0: 169) тяжёлой цепи антитела АМ-21;
з) СОК1 (8Е() ГО N0: 248), СЭЕ2 (8ЕО ГО N0: 249), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 250) лёгкой цепи и СОК1 (8Е() II) N0: 170), С1)К2 (81 ίθ II) N0: 171), С1Ж (8ЕО II) N0: 172) тяжёлой цепи антитела АМ-22;
и) СОК1 (8Е() ГО N0: 251), СЭЕ2 (8ЕО ГО N0: 252), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 253) лёгкой цепи и СОК1 (8Е() II) N0: 173), С1)К2 (81 ίθ II) N0: 174), С1Ж (8ЕО II) N0: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
к) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ25/АМН25 (8ЕР Ш N0: 52/8Ер Ш N0: 25); причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ГЕ-17КА. СОК1 (8Е() ГО N0: 254), СЭЕ2 (8ЕО ГО N0: 255), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 256) лёгкой цепи и СОК1 (8ЕО ГО N0: 173), СЭЕ2 (8ЕО ГО N0: 174), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23; или
л) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ26/АМН26 (8ЕР Ш N0: 53/8ЕР Ш N0: 26); причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ГЕ-17КА; и
В) выделенного антитела или его Ш-ПКА-связывающего фрагмента, содержащего:
а) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ9/АМН9 (8ЕР Ш N0: 35/8ЕО ГО N0: 9);
б) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ14/АМН14 (8ЕР Ш N0: 40/8ЕО ГО N0: 14);
в) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ16/АМН16 (8ЕР Ш N0: 42/8ЕО ГО N0: 16);
г) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ17/АМН17 (8ЕР Ш N0: 43/8ЕО ГО N0: 17);
д) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ19/АМН19 (8ЕР Ш N0: 45/8ЕО ГО N0: 19);
е) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ20/АМН20 (8ЕР Ш N0: 46/8ЕО ГО N0: 20);
ж) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ21/АМН21 (8ЕР Ш N0: 47/81:0 ГО N0: 21);
з) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ22/АМН22 (8ЕР Ш N0: 48/8ЕО ГО N0: 22);
и) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ23/АМН23 (8ЕР Ш N0: 49 или 8Е(') ГО N0: 50/8ЕО ГО N0: 23);
к) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ26/АМН26 (8ЕР Ш N0: 53/8ЕР Ш N0: 26); причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ГЕ-17КА.
Вариант изобретения 103: антитело по варианту изобретения 101, отличающееся тем, что указанное антитело выбирают из группы, состоящей из:
А) выделенного антитела или его Ш-ПКА-связывающего фрагмента, содержащего
а) последовательность вариабельного домена лёгкой цепи, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности вариабельного домена лёгкой цепи АМЬ 12, 14, 16, 17, 19 и 22 (8ЕР Ю N0: 38, 40, 42, 43, 45 и 48, соответственно);
б) последовательность вариабельного домена тяжёлой цепи, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи АМН 12, 14, 16, 17, 19 22 (8ЕР Ш N0: 12, 14, 16, 17, 19 и 22, соответственно);
в) вариабельный домен лёгкой цепи по (а) и вариабельный домен тяжёлой цепи по (б); причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ГЕ-17КА;
Б) выделенного антитела или его Ш-ПКА-связывающего фрагмента, содержащего:
а) СОК1 (8Е() ГО N0: 218), СОК2 (8ЕО ГО N0: 219), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 220) лёгкой цепи и СОК1 (8Е() ГО N0: 140), СОК2 (8ЕО ГО N0: 141), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 142) тяжёлой цепи антитела АМ-12;
б) СОК1 (81:0 ГО N0: 224), СОК2 (8ЕО ГО N0: 225), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 226) лёгкой цепи и СОК1 (8Е() ГО N0: 146), СОК2 (8ЕО ГО N0: 147), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 148) тяжёлой цепи антитела АМ-14;
в) СОК1 (8Е() ГО N0: 230), СОК2 (8ЕО ГО N0: 231), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 232) лёгкой цепи и СОК1 (8Е() ГО N0: 152), СОК2 (8ЕО ГО N0: 153), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 154) тяжёлой цепи антитела АМ-16;
г) СОК1 (8Е() ГО N0: 233), СОК2 (8ЕО ГО N0: 234), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 235) лёгкой цепи и СОК1 (8Е() ГО N0: 155), СОК2 (8ЕО ГО N0: 156), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 157) тяжёлой цепи антитела АМ-17;
д) СОК1 (8Е() ГО N0: 239), СОК2 (8ЕО ГО N0: 240), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 241) лёгкой цепи и СОК1 (8Е() ГО N0: 161), СОК2 (8ЕО ГО N0: 162), СЭКЗ (8ЕО ГО N0: 163) тяжёлой цепи антитела АМ-19;
- 63 019397
е) СОК1 (БЕД ΙΌ ΝΟ: 248), СОК2 (БЕД ΙΌ ΝΟ: 249), СОК3 (БЕД ΙΌ ΝΟ: 250) лёгкой цепи и СОК1 (БЕД ΙΌ ΝΟ: 170), СОК2 (БЕС) ΙΌ ΝΟ: 171), СОК3 (БЕС) ΙΌ ΝΟ: 172) тяжёлой цепи антитела АМ-22; причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ГЕ-17КА и
В) выделенного антитела или его ГО-17КА-связывающего фрагмента, содержащего:
а) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ΛМ^12/ΛМН12 (БЕД ΙΌ ΝΟ: 38/БЕД ΙΌ ΝΟ: 12);
б) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ΛМ^14/ΛМН14 (БЕД ΙΌ ΝΟ: 40/БЕД ΙΌ ΝΟ: 14);
в) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ΛМ^16/ΛМН16 (БЕД ΙΌ ΝΟ: 42/БЕД ΙΌ ΝΟ: 16);
г) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМьИ/АМ^П (БЕД ΙΌ ΝΟ: 43/БЕД ΙΌ ΝΟ: 17);
д) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ΛМ^19/ΛМН19 (БЕД ΙΌ ΝΟ: 45/БЕД ΙΌ ΝΟ: 19);
е) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ, 22/АМЦ22 (БЕД ΙΌ ΝΟ: 48/БЕД ΙΌ ΝΟ: 22); причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ГО-17КА.
Вариант изобретения 104: антитело по варианту изобретения 102, отличающееся тем, что указанное антитело выбирают из группы, состоящей из:
A) выделенного антитела или его ЕЕ-17КА-связывающего фрагмента, содержащего
а) последовательность вариабельного домена лёгкой цепи, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности вариабельного домена лёгкой цепи БЕД ΙΌ ΝΟ: 40;
б) последовательность вариабельного домена тяжёлой цепи, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи БЕД ΙΌ ΝΟ: 14;
в) вариабельный домен лёгкой цепи по (а) и вариабельный домен тяжёлой цепи по (б); причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ЕЕ-17КА;
Б) выделенного антитела или его ЕЕ-17КА-связывающего фрагмента, содержащего ΟΌΕ1 (БЕД ΙΌ ΝΟ: 224), СОК2 (БЕД ΙΌ ΝΟ: 225), СОК3 (БЕД ΙΌ ΝΟ: 226) лёгкой цепи и СОК1 (БЕД ΙΌ ΝΟ: 146), ΟΌΕ2 (БЕД ΙΌ ΝΟ: 147), СОК3 (БЕД ΙΌ ΝΟ: 148); причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ЕЕ-17КА; и
B) выделенного антитела или его ЕЕ-17КА-связывающего фрагмента, содержащего вариабельный домен лёгкой цепи БЕД ΙΌ ΝΟ: 40 и вариабельный домен тяжёлой цепи БЕД ΙΌ ΝΟ: 14; причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ЕЕ-17КА.
Вариант изобретения 105: антитело по варианту изобретения 101, отличающееся тем, что указанное антитело выбирают из группы, состоящей из: а) гуманизированного антитела; б) химерного антитела; в) рекомбинантного антитела; г) одноцепочечного антитела; д) диатела; е) триатела; ж) тетратела; з) фрагмента ЕаЬ; и) фрагмента Р(аЬ')2; к) Ι§Ό антитела; л) ДЕ антитела; м) ДМ антитела; н) !дС1 антитела; о) ДС2 антитела; п) ДС3 антитела; и р) ДС4 антитела. Вариант изобретения 106: антитело по п)105, отличающееся тем, что указанное антитело ингибирует связывание человеческого ГО-17А с человеческим ΙΌ17КА. Вариант 107: антитело по варианту изобретения 106, отличающееся тем, что указанное антитело ингибирует связывание человеческих ГО-17А и ГО-17Е с человеческим ГО-17КА. Вариант изобретения 108: антитело по варианту изобретения 106, отличающееся тем, что указанное антитело ингибирует связывание человеческого ГО-17А или ГО-17Е с человеческим ГО-17КА.
Вариант изобретения 109: выделенное моноклональное антитело или его ГО-17КА-связывающий фрагмент, выбранный из группы, состоящей из:
а) моноклонального антитела, которое специфически связывает человеческий ГО-17КА БЕД ΙΌ ΝΟ: 431, но не связывается специфически с химерным полипептидом, состоящим из БЕД ΙΌ ΝΟ: 434;
б) моноклонального антитела, которое специфически связывает человеческий ГО-17КА БЕД ΙΌ ΝΟ: 431, но не связывается специфически с химерным полипептидом, состоящим из БЕД ΙΌ ΝΟ: 435; и
в) моноклонального антитела, которое специфически связывает человеческий ГО-17КА БЕД ΙΌ ΝΟ: 431, но не связывается специфически с химерным полипептидом, состоящим из БЕД ΙΌ ΝΟ: 436.
Вариант изобретения 110: выделенное моноклональное антитело или его ГО-17КА-связывающий фрагмент, которое специфически связывает нейтрализующую детерминанту, выбранную из группы, состоящей из:
а) полипептида, содержащего аминокислоты 75-96 БЕД ΙΌ ΝΟ: 431 человеческого ГО-17КА;
б) полипептида, содержащего аминокислоты 128-154 БЕД ΙΌ ΝΟ: 431 человеческого ГО-17КА;
в) полипептида, содержащего аминокислоты 176-197 БЕД ΙΌ ΝΟ: 431 человеческого ГО-17КА;
г) полипептида, содержащего аминокислоты 152-297 БЕД ΙΌ ΝΟ: 431 человеческого ГО-17КА;
д) полипептида, содержащего аминокислоты 220-284 БЕД ΙΌ ΝΟ: 431 человеческого ГО-17КА:
е) полипептида, содержащего аминокислоты 152-198 БЕД ΙΌ ΝΟ: 431 человеческого ГО-17КА;
ж) полипептида, содержащего аминокислоты 152-186 БЕД ΙΌ ΝΟ: 431 человеческого ГО-17КА;
з) полипептида, содержащего аминокислоты 97-297 БЕД ΙΌ ΝΟ: 431 человеческого ГО-17КА;
и) полипептида, содержащего аминокислоты 138-270 БЕД ΙΌ ΝΟ: 431 человеческого ГО-17КА;
- 64 019397
к) полипептида, содержащего аминокислоты 113-198 8ЕО ΙΌ ИО: 431 человеческого ГО-ПКА; и
л) полипептида, содержащего аминокислоты 152-270 8ЕО ΙΌ ИО: 431 человеческого ГО-ПКА
Вариант изобретения 111: выделенное моноклональное антитело или его ГБ-ПКА-связывающий фрагмент, которое специфически связывает I^-17КЛ 8ЕО ΙΌ ИО: 431, но не связывает специфически указанный I^-17КЛ, имеющий любую из следующих аминокислотных замен Е97К, Е113К, 8115К, Н138К, Ό152Η, Ό154Η, Е156К, К166К, 0176К, 8177К, Ό184Η, Е186К, 8198К, Н215К, 8220К, Т228К, Т235К, Е241К, Н243К, Б270К, О284К или Н297К в 8ЕО ΙΌ ИО: 431. Вариант изобретения 112: антитело по варианту изобретения 111 или его I^-17КЛ-связывающий фрагмент, отличающееся тем, что указанное антитело специфически связывает человеческий I^-17КЛ 8ЕО ΙΌ ИО: 431, но не связывает специфически указанный I^-17КЛ, имеющий любую из следующих аминокислотных замен Ό152Η, Ό154Η, Е156К, Ό184Η, Е186К, Н297К 8ЕО ΙΌ ИО: 431. Вариант изобретения 113: антитело по варианту изобретения 111 или его I^-17КЛ-связывающий фрагмент, отличающееся тем, что указанное антитело специфически связывает человеческий I^-17КЛ 8ЕО ΙΌ ИО: 431, но не связывает специфически указанный I^-17КЛ, в котором остаток аспарагиновой кислоты в положении 152 в 8ЕО ΙΌ ИО: 431 заменён на аргинин. Вариант изобретения 114: антитело по варианту изобретения 111, отличающееся тем, что указанное антитело специфически связывает эпитоп, определяемый любой из аминокислот Ό152, Ό154, Е156, Ό184, Е186, Н297 8ЕО ΙΌ ИО: 431. Вариант изобретения 115: антитело по варианту изобретения 114, отличающееся тем, что указанное антитело специфически связывает эпитоп, определяемый, по меньшей мере, двумя следующими аминокислотами Ό152, Ό154, Е156, Ό184, Е186, Н297 8ЕО ΙΌ ИО: 431. Вариант изобретения 116: антитело по варианту изобретения 114, отличающееся тем, что указанное антитело специфически связывает эпитоп, определяемый по меньшей мере тремя следующими аминокислотами Ό152, Ό154, Е156, Ό184, Е186, Н297 8ЕО ΙΌ ИО: 431. Вариант изобретения 117: антитело по варианту изобретения 114, отличающееся тем, что указанное антитело специфически связывает эпитоп, определяемый по меньшей мере четырьмя следующими аминокислотами Ό152, Ό154, Е156, Ό184, Е186, Н297 8ЕО ΙΌ ИО: 431. Вариант изобретения 118: антитело по варианту изобретения 114, отличающееся тем, что указанное антитело специфически связывает эпитоп, определяемый по меньшей мере пятью следующими аминокислотами Ό152, Ό154, Е156, Ό184, Е186, Н297 8ЕО ΙΌ ИО: 431. Вариант изобретения 119: антитело по варианту изобретения 114, отличающееся тем, что указанное антитело специфически связывает эпитоп, определяемый аминокислотами Ό152, Ό154, Е156, Ό184, Е186, Н297 8ЕО ΙΌ ИО:431.
Вариант изобретения 120: выделенное моноклональное антитело или его I^-17КЛ-связывающий фрагмент, которое специфически связывается с I^-17КЛ и конкурирует за связывание с антителом, содержащим:
а) область ί'ΌΡ1 тяжёлой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) Χ1ΥΟΙ8, где Х1 выбирают из группы, состоящей из К, 8 и С;
б) область ί'ΌΡ2 тяжёлой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) ^I8X1ΥX2СИТXзΥЛ^X4X5^С, где Х1 выбирают из группы, состоящей из А, Х2 выбирают из группы, состоящей из И, 8 и К, Х3 выбирают из группы, состоящей из И и К, Х4 выбирают из группы, состоящей из К и И, и Х5 выбирают из группы, состоящей из Б и Р;
в) область ί'ΌΡ3 тяжёлой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) Х10БХ2ХзОУ, где Х1 выбирают из группы, состоящей из К и К, Х2 выбирают из группы, состоящей из Υ, У и А, и Х3 выбирают из группы, состоящей из Р и Б;
ίί) Х|ОБХ2БОУ, где Х1 выбирают из группы, состоящей из К и К, и Х2, выбирают из группы, состоящей из Υ и У;
г) область ί'ΌΡ1 лёгкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) КЛ.8^8X1X2XзX4^Л, где Х1 выбирают из группы, состоящей из У и Ι, Х2, выбирают из группы, состоящей из Ι и 8, Х3 выбирают из группы, состоящей из 8 и Т, Х4 выбирают из группы, состоящей из И и 8, и Х5 выбирают из группы, состоящей из А и И;
ίί) КЛ8^8X|88N^Л. где Х1 выбирают из группы, состоящей из У и Ι;
д) область ί'ΌΡ2 лёгкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) Х1Х28ТКАХ3, где Х1 выбирают из группы, состоящей из С и Ό, Х2 выбирают из группы, состоящей из А и Т, и Х3 выбирают из группы, состоящей из Т и А, и ίί) X1Л8ТКЛX2, где Х1 выбирают из группы, состоящей из С и Ό, и Х2 выбирают из группы, состоящей из А и Т; и
е) область ί'ΌΡ3 лёгкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
ί) ООУОХДХРБТ, где Х1 выбирают из группы, состоящей из И, Т и Ι.
Вариант изобретения 121: антитело по варианту изобретения 120, причём указанное антитело со- 65 019397 держит:
а) аминокислотную последовательность ί.ΌΕ1 тяжёлой цепи, содержащую Х^СК, где Х1 выбирают из группы, состоящей из К, 8 и С;
б) аминокислотную последовательность СЭЕ2 тяжёлой цепи, содержащую ^КХ^Х^КТХэ УАОХ4Х5ОС, где Х1 выбирают из группы, состоящей из А, Х2 выбирают из группы, состоящей из N 8, и К, Х3 выбирают из группы, состоящей из N и К, Х4 выбирают из группы, состоящей из К и N и Х5 выбирают из группы, состоящей из Ь и Р;
в) аминокислотную последовательность ί.ΌΕ3 тяжёлой цепи, содержащую Х1ОЬХ2Х3ПУ, где Х1 выбирают из группы, состоящей из К и К, и Х2 выбирают из группы, состоящей из Υ и V;
г) аминокислотную последовательность ί.ΌΕ1 лёгкой цепи, содержащую ЯА8О8Х188ХЪА, где Х1 выбирают из группы, состоящей из V и Ι;
д) аминокислотную последовательность СЭЕ2 лёгкой цепи, содержащую Х1А8ТКАХ2, где Х1 выбирают из группы, состоящей из С и Ό, и Х2 выбирают из группы, состоящей из А и Т; и
е) аминокислотную последовательность СЭЕ3 лёгкой цепи, содержащую ^^Υ^X1^Р^Τ, где Х1 выбирают из группы, состоящей из N Т и Ι.
Вариант изобретения 122: антитело по варианту изобретения 120, отличающееся тем, что указанное антитело выбирают из группы, состоящей из: а) гуманизированного антитела; б) химерного антитела; в) рекомбинантного антитела; г) одноцепочечного антитела; д) диатела; е. триатела; ж) тетратела; з) фрагмента РаЬ; и) фрагмента Р(аЬ')2; к) антитела; л) Ι^Ε антитела; м) IдΜ антитела; н) ^С1 антитела; о) ^С2 антитела; п) ^С3 антитела; и р) ^С4 антитела. Вариант изобретения 123: антитело по п.122, отличающееся тем, что указанное антитело ингибирует связывание человеческого Ш-ПА с человеческим Ш17КА. Вариант 124: антитело по варианту изобретения 122, отличающееся тем, что указанное антитело ингибирует связывание человеческих ΙΕ-17Λ и ΙΕ-17Ρ с человеческим Ш-ПЕА. Вариант изобретения 125: антитело по варианту изобретения 122, отличающееся тем, что указанное антитело ингибирует связывание человеческого Ш-ПА или ΙΕ-17Ρ с человеческим Ш-ПЕА.
Применение белков, связывающих антиген 1Ь-17КА, для диагностических и терапевтических целей
Антигенсвязывающие белки для I^-17КΑ по изобретению можно использовать в анализах для диагностики, например в анализах связывания для обнаружения и/или количественного определения Ш17КА, экспрессируемого в ткани или клетке. Антигенсвязывающие белки для I^-17КΑ можно использовать для дальнейшего изучения роли I^-17КΑ в заболевании. Антигенсвязывающие белки для I^-17КΑ можно использовать для дальнейшего изучения роли I^-17КΑ в образовании гомомерных и/или гетеромерных рецепторных комплексов и роли этих комплексов в заболевании. Антигенсвязывающие белки для I^-17КΑ можно использовать для дальнейшего изучения роли I^-17КΑ активации с образованием гомомерных и/или гетеромерных комплексов Ш-17 лиганда. Антигенсвязывающие белки для I^-17КΑ можно использовать для дальнейшего изучения роли Ш-ПКА активации с образованием гомомерных и/или гетеромерных комплексов ΙΕ-17 лиганда и того, как указанные гомомерные и/или гетеромерные комплексы ΙΕ-17 лиганда связаны с заболеванием.
Антигенсвязывающие белки для Ш-ПЕА по изобретению можно использовать для предупреждения или лечения заболеваний или состояний, ассоциированных с Ш-ПА и/или ΙΕ-17Ρ активностью. Заболевание или патологическое состояние, ассоциированное с Ш-17А и/или ΙΕ-17Ρ активностью, означает любое заболевание, состояние или патологию у пациента, которые вызваны взаимодействием Ш-17А и/или ΙΕ-17Ρ с I^-17КΑ. Тяжесть заболевания, состояния или патологии может усиливаться или ослабляться за счёт модуляции взаимодействия Ш-ПА и/или ΙΕ-17Ρ с I^-17КΑ или гетерологичным комплексом, содержащим Ш-ПКА и Ш-ПКС.
Антигенсвязывающие белки по изобретению, которые специфически связываются с I^-17КΑ, можно использовать при лечении заболеваний, опосредованных Ш-ПКА, у нуждающегося в этом пациента. Все аспекты, касающиеся антигенсвязывающих белков для I^-17КΑ по изобретению, представленные в данном описании, можно использовать для приготовления лекарственного препарата для лечения различных состояний и заболеваний по данному описанию. Кроме того, антигенсвязывающий белок для Ш17КА по изобретению можно использовать для ингибирования образования комплекса Ш-ПКА с его лигандом, например, Ш-ПА и/или ΙΕ-17Ρ или любым другим ΙΕ-17 лигандом, членом семейства, которое связывает Ш-ПЕА или гетерологичный комплекс, содержащий I^-17КΑ и Ш-ПКС, тем самым модулируя биологическую активность Ш-ПЕА в клетке или ткани. Антигенсвязывающие белки, которые связываются с Ш-ПКА, могут тем самым модулировать и/или ингибировать взаимодействие с другими связывающими соединениями и в силу этого могут иметь терапевтическое применение для уменьшения интенсивности (ослабления) заболеваний, опосредованных Ш-ПЕА. В конкретных вариантах изобретения антигенсвязывающие белки могут ингибировать связывание Ш-ПА и/или ΙΕ-17Ρ с I^-17КΑ, что может привести к нарушению индуцированного Ш-ПЕА каскада сигнальной трансдукции.
Повышенные уровни Ш-ПА и/или участие сигналов, опосредованных Ш-ПА, в патогенезе заболевания наблюдаются при различных состояниях и заболеваниях. Ко11к апй Ппйеп, 2004, кирга; Мюккес, 2003, Р. АгйгШк КНеит. 48: 594-601); Международная патентная заявка ^02005/063290; СаппеШ е! а1.,
- 66 019397
2003, 1. Iттииο1. 171: 1009- 1015; СЬаг1ез е! а1., 1999, 1. Iттииο1. 163: 1521-1528; Сиииаие е! а1., 2000, 0и1те 1. КИеита&к 27: 58- 63; ΥοзЬ^тο!ο, 1998, 1. ^тигок 161: 3400-3407), (международная патентная заявка \¥0 2005/063290), (Мейегаи, 1997, 0111теНкМ), (Международная патентная заявка \¥0 2004/002519), (Тзи!зш е! а1., 2000, зирга), (Κοι^ΐιί е! а1., 2002, Ргос. №!1. Асай. 8е! И.8.А. 99: 1134011345), Ζ^^ολί^η е! а1., 2000, зирга). (СИаЬаий, 2001, АйИ & КИеитайзт, 44: 1293). Поэтому говорят, что ГО-ПКА влияет на патологию этих и других заболеваний или состояний по данному описанию.
Суррогатное антитело крысы против мышиного ГО-ПКА препятствует течению заболевания и уменьшает разрушение костей и хрящей как на профилактической, так и на терапевтической модели индуцированного коллагеном артрита у грызунов (раздел Примеры см. ниже). Дополнительным доказательством эффективности прерывания пути кЕ-17А/кЕ-17КА, является то, что нокаутированные по ΙΕ17КА мыши резистентны к индуцированному коллагеном артриту, и то, что лечение антителом к ΙΕ17КА является эффективным у нокаутированных по ТИЕК мышей, что говорит о независимом от ТИР эффекте (см. пример 6).
Ингибирование ГО-ПКА с помощью антигенсвязывающих белков по данному описанию представляет собой новый и эффективный механизм ингибирования симптомов и патологии воспалительных и аутоиммунных заболеваний и, в частности, воспаления и разрушения суставов, наблюдаемое при ревматоидном артрите (РА, КА). Преклинические данные и результаты, полученные на основании изучения тканей больных КА, говорят о том, что возможно добиться эффекта у больных, которым не помогла Т№'-ингибирующая терапия, и добиться большего эффекта с помощью комбинации с ингибиторами ТЫР, ингибиторами ΙΕ-6 и ингибиторами ΙΕ-1.
Антигенсвязывающие белки по данному описанию можно использовать в комбинации (до, после лечения или одновременно с лечением) с одним или более ингибиторов Т№ для лечения или предупреждения заболеваний и расстройств, перечисленных в данном описании, например, но без ограничения, с такими как все формы растворимых Т№ рецепторов, включая Этанерцепт (такой как ВПЕКЕЕ®), а также все формы мономерных или мультимерных р75 и/или р55 ТНР рецепторных молекул и их фрагменты; антитела против человеческого ТМР, такие, но без ограничения, как Инфликсимаб (такой как КЕМкСАОЕ®), и О2Е7 (такой как нИМЖА®), и т.п. Такие ингибиторы Т> включают соединения и белки, которые блокируют ш νίνο синтез или внеклеточное высвобождение ТНР. В конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязывающего белка для Ж-ПКА в комбинации (до, после лечения или одновременно с лечением) с любым из одного или более из следующих ингибиторов Т№: Т№- связывающие белки (растворимый ТНР рецептор типа Ι и растворимый Т> рецептор типа ΙΙ (зТНРКз), по данному описанию), антитела против ТНР, гранулоцитарный колониестимулирующий фактор; талидомид; ΒN 50730; тенидап; Е 5531; тиапафант РСА 4248; нимесулид; панавио; ролипрам; КР 73401; пептид Т; МОЕ 201449А; (1К,38)-цис-1-[9-(2,6-диаминопуринил)]-3-гидрокси-4-цикопентена гидрохлорид; (1К,3К)-транс-1-[9-(2,6-диамино)пурин]-3-ацетоксициклопентан; (1К,3К)-транс-1(9-аденил)-3-азидоциклопентана гидрохлорид и (1К,3К)-транс-1-(6-гидроксипурин-9-ил)-3-азидоциклопентан. ТНР-связывающие белки раскрываются в уровне техники (Европейские патенты ЕР 308378, ЕР 422339, английский патент 6Β 2218101, Европейский патент ЕР 393 438, Международная патентная заявка \¥0 90/13575, Европейский патент ЕР 398327, Европейский патент ЕР 412 486, \У0 91/03553, Европейский патент ЕР 418014, японский патент Ж 127,800/1991, Европейский патент ЕР 433 900, патент США №. 5136021, английский патент 6Β 2246569, Европейский патент ЕР 464533, Международные патентные заявки \У0 92/01002, \У0 92/13095, \У0 92/16221, Европейские патенты ЕР 512528, ЕР 526905, Международная патентная заявка \¥0 93/07863, Европейский патент ЕР 568928, Международные патентные заявки \У0 93/21946, \У0 93/19777, Европейский патент ЕР 417 563, Международная патентная заявка \¥0 94/06476 и Международная патентная заявка РСТ №. РСТ/И897/12244).
Например, в Европейских патентах ЕР 393438 и ЕР 422339 раскрываются аминокислотные и нуклеотидные последовательности растворимого Т№ рецептора типа Ι (также известного как зТНРК- Ι или 30 кДа Т№ ингибитор) и растворимого ТНР рецептора типа ΙΙ (также известного как зТ№К.-П или 40 кДа Т№ ингибитор), совместно называемых зТ№К.з, а также их модифицированные формы (например, фрагменты, функциональные производные и варианты). В ЕР 393438 и ЕР 422339 также раскрываются методы выделения генов, отвечающих за кодирование ингибиторов, клонирование гена в подходящие векторы и типы клеток и экспрессия гена с целью продуцировать ингибиторы. Кроме того, также раскрываются поливалентные формы (т.е. молекулы, содержащие более одного активного фрагмента) зТNРК-I и зТНРК-П. В одном варианте изобретения поливалентную форму можно создать химической конденсацией по меньшей мере одного ингибитора Т№ и другой частицы с любым клинически приемлемым линкером, например полиэтиленгликолем (\У0 92/16221 и \У0 95/34326), с помощью пептидного линкера (№уе е! а1. (1996), СуЮкте, 8(5): 365-370, химической конденсацией с биотином с последующим связыванием с авидином (\У0 91/03553), и наконец, объединяя молекулы химерных антител (патент США 5116964, Международные патентные заявки \У0 89/09622, \У0 91/16437 и Европейский патент ЕР 315062.
Антитела против ТНР включают антитело МАК 195Р РаЬ а^^йу (№1^γ е! а1. (1993), 1з! Ийегиа
- 67 019397
Ιίοη·ι1 Зутрокшт οη Сукктек ίη Вопс Магготе Τ^аηκр1аηίаί^οη, 147); моноклональное антитело против Т№ СОР 571 (Яаηк^η е! а1. (1995), ВгЕкЕ 1оита1 οί ЯЕеита1о1оду, 34: 334-342); мышиное моноклональное антитело против фактора некроза опухолей ΒΛΥ X 1351 (Клей е! а1. (1995), 7!Е Еи^οреаη Соидге^ οί Сйшса1 МюгоЬю1оду амй МесЕоик О|кеакек, раде 9); моноклональное антитело против Т№ СеиЮТ сА2 (ЕШой с1 а1. (1994), Ба11сеГ 344: 1125-1127 и ЕШой с! а1. (1994), Ба11сеГ 344: 1105- 1110).
Антигенсвязывающие белки по данному описанию можно применять в комбинации со всеми формами ингибиторов ГБ-1, с такими, но без ограничения, как кинерет (например, ΛNАΚINКΛ®). Антагонист рецептора интерлейкина-1 (ББ-1га) представляет собой человеческий белок, который ведёт себя как природный ингибитор интерлейкина-1. Антагонисты рецептора интерлейкина-1, а также методы их получения и применения описаны в патенте США Νο. 5075222; международных патентных заявках νΟ 91/08285; νΟ 91/17184; австралийском патенте АБ 9173636; международных патентных заявках νΟ 92/16221; νΟ 93/21946; νΟ 94/06457; νΟ 94/21275; французском патенте РЯ 2706772; международной патентной заявке νΟ 94/21235; немецком патенте ЭР 4219626; международных патентных заявках νΟ 94/20517; νΟ 96/22793 и νΟ 97/28828. Белки включают гликозилированные, а также негликозилированные антагонисты ББ-1 рецептора. Конкретно, три предпочтительные формы ББ-1га (ББ-1гаа, ББ-1гав и ББ-1гах), каждая из которых кодируется одной и той же ДНК- кодирующей последовательностью и её вариантами, раскрываются и описываются в патенте США Νο. 5075222. В патенте 5075222 раскрываются также методы получения ингибиторов ББ-1, в частности ББ-1га8. Другой класс ингибиторов интерлейкина-1 включает соединения, способные специфически предупреждать активацию клеточных рецепторов к Ш-Е Такие соединения включают ΙΕ-1-связывающие белки, такие как растворимые рецепторы и моноклональные антитела. Такие соединения также включают моноклональные антитела к рецепторам. Другой класс ингибиторов интерлейкина-1 включает соединения и белки, которые блокируют ίη νίνο синтез и/или внеклеточное высвобождение Ш-Б Такие соединения включают агенты, которые влияют на транскрипцию генов ΙΠ-1 генов или процессирование ЭБ-1 пребелков.
Антигенсвязывающие белки по данному описанию можно применять в комбинации со всеми формами ингибиторов СЭ28, такими, но без ограничения, как абатацепт (например, ΟКЕNСIΛ®).
Антигенсвязывающие белки по данному описанию можно применять в комбинации со всеми формами ингибиторов ΙΕ-6 и/или Ш-6 рецепторов, такими, но без ограничения, как абатацепт (например, АСТЕМЯА®).
Антигенсвязывающие белки можно применять в комбинации с одним или более агентов из ряда: цитокины, лимфокины, гемапоэтический(е) фактор(ы) и/или противовоспалительный агент.
Лечение заболеваний и расстройств, перечисленных в данном описании, может включать применение лекарств первой линии для регуляции боли и воспаления в сочетании (до лечения, после лечения и одновременно с лечением) с лечением одним или более антигенсвязывающих белков по данному описанию. Эти лекарства относят к классу нестероидных противовоспалительных средств (НСПВС, ЖАЮ). Вторичные (второй линии) лекарственные препараты включают кортикостероиды, медленнодействующие противоревматические препараты (МПРП, ЗААКЭ) или препараты, модифицирующие заболевание (БМАРП, ОМ). Сведения о нижеприведённых соединениях можно найти в ТЕе Мегск Маηиа1 οί Οί3βηοκίκ ηηά ТЕегару, 8|х1еегиЕ Рйй1оп, Мегск, ЗЕагр & ЭоНте ЯекеагсЕ БаЬогаЮпек, Мегск & Со., ЯаЕтау, Ν.Ε (1992) и в РЕагтарго)ес1к, РБВ ΡиЬ1^саι^0κ БЛй.
В конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязывающего белка и любого из одного или более НПВС для лечения заболеваний и расстройств, перечисленных в данном описании. НСПВС обязаны своим противовоспалительным действием, по меньшей мере частично, ингибированию синтеза простагландина (Όοοώικιη амй СПтам в РЕагтасо1одюа1 Вакк οί ТЕегареиЕск, МасМШаг! 711' ЕйЕюп (1985). НСПВС можно разделить по меньшей мере на девять групп: (1) производные салициловой кислоты; (2) производные пропионовой кислоты; (3) производные уксусной кислоты; (4) производные фенаминовой кислоты; (5) производные карбоновых кислот; (6) производные масляной кислоты; (7) оксикамы; (8) пиразолы и (9) пиразолоны.
В другом конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязывающего белка в комбинации (до лечения, после лечения или одновременно с лечением) с любым из одного или более производных салициловой кислоты, пролекарственных форм-сложных эфиров или их фармацевтически приемлемых солей. Такие производные салициловой кислоты, про лекарственные формысложные эфиры и их фармацевтически приемлемые соли включают: ацетаминосалол, алоксиприн, аспирин, бенорилат, бромосалигенин, ацетилсалицилат кальция, холина магния трисалицилат, салицилат магния, холина салицилат, дифлузинал, этерсалат, фендозал, гентизиновую кислоту, гликоль-салицилат, имидазола салицилат, лизина ацетилсалицилат, месаламин, морфолина салицилат, 1-нафтила салицилат, олсалазин, парсалмид, фенилацетилсалицилат, фенилсалицилат, салацетамид, салициламид О-уксусная кислота, салсалат, салицилат натрия и сульфасалазин. Предполагается, что родственные по структуре производные салициловой кислоты, обладающие сходными аналитическими и противовоспалительными свойствами, также входят в данную группу.
В другом конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязываю
- 68 019397 щего белка в комбинации (до лечения, после лечения или одновременно с лечением) с любым из одного или более производных пропионовой кислоты, пролекарственных форм-сложных эфиров или их фармацевтически приемлемых солей. Производные пропионовой кислоты, пролекарственные формы - сложные эфиры и их фармацевтически приемлемые соли включают: альминопрофен, беноксапрофен, буклоксиновую кислоту, карпрофен, дексиндопрофен, фенопрофен, флуноксапрофен, флупрофен, фурклопрофен, ибупрофен, ибупрофен алюминий, ибупроксам, индопрофен, изопрофен, кетопрофен, локспрофен, миропрофен, напроксен, напроксен натрий, оксапрозин, пикетопрофен, пимепрофен, пирпрофен, пранопрофен, протизиновую кислоту, пиридоксипрофен, супрофен, тиапрофеновую кислоту и тиоксапрофен. Предполагается, что родственные по структуре производные пропионовой кислоты, обладающие сходными аналгетическими и противовоспалительными свойствами, также входят в данную группу.
Ещё в одном конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязывающего белка в комбинации (до лечения, после лечения или одновременно с лечением) с любым из одного или более производных уксусной кислоты, пролекарственных форм-сложных эфиров или их фармацевтически приемлемых солей. Производные уксусной кислоты, пролекарственные формы - сложные эфиры и их фармацевтически приемлемые соли включают: ацеметацин, ал(ь)клофенак, амфенак, буфексамак, цинметацин, клопирак, дел(ь)метацин, диклофенак калий, диклофенак натрий, этодолак, фенклофенак, фенклорак, фенклозиновую кислоту, фентиазак, фурофенак, глутаметацин, ибуфенак, индометацин, изофезолак, изоксепак, лоназолак, метиазиновую кислоту, оксаметацин, окспинак, пиметацин, проглуметацин, сулиндак, талметацин, тиарамид, тиопинак, толметин, толметин натрий, зидометацин и зомепирак. Предполагается, что родственные по структуре производные уксусной кислоты, обладающие сходными аналгетическими и противовоспалительными свойствами, также входят в данную группу.
Ещё в одном конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязывающего белка в комбинации (до лечения, после лечения или одновременно с лечением) с любым из одного или более производных фенаминовой кислоты, пролекарственных форм - сложных эфиров или их фармацевтически приемлемых солей. Производные фенаминовой кислоты, пролекарственные формысложные эфиры и их фармацевтически приемлемые соли включают: энфенаминовую кислоту, этофенамат, флуфенаминовую кислоту, изониксин, меклофенаминовую кислоту, меклофенамат натрий, медофенаминовую кислоту, нифлуминовую кислоту, талнифлумат, терофенамат, толфенаминовую кислоту и уфенамат. Предполагается, что родственные по структуре производные фенаминовой кислоты, обладающие сходными аналгетическими и противовоспалительными свойствами, также входят в данную группу.
В другом конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязывающего белка в комбинации (до лечения, после лечения или одновременно с лечением) с любым из одного или более производных карбоновых кислот, пролекарственных форм - сложных эфиров или их фармацевтически приемлемых солей. Производные карбоновых кислот, пролекарственные формы - сложные эфиры и их фармацевтически приемлемые соли, которые можно применять, включают: клиданак, дифлунисал, флуфенисал, иноридин, кеторолак и тиноридин. Предполагается, что родственные по структуре производные карбоновых кислот, обладающие сходными аналитическими и противовоспалительными свойствами, также входят в данную группу.
Ещё в одном конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязывающего белка в комбинации (до лечения, после лечения или одновременно с лечением) с любым из одного или более производных масляной кислоты, пролекарственных форм - сложных эфиров или их фармацевтически приемлемых солей. Производные масляной кислоты, пролекарственные формы - сложные эфиры и их фармацевтически приемлемые соли включают: бумадизон, бутибуфен, фенбуфен и ксенбуцин. Предполагается, что родственные по структуре производные масляной кислоты, обладающие сходными аналгетическими и противовоспалительными свойствами, также входят в данную группу.
В другом конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязывающего белка в комбинации (до лечения, после лечения или одновременно с лечением) с любым из одного или более оксикамов, пролекарственных форм - сложных эфиров или их фармацевтически приемлемых солей. Оксикамы, пролекарственные формы - сложные эфиры и их фармацевтически приемлемые соли включают: дроксикам, эноликам, изоксикам, пироксикам, судоксикам, теноксикам и 4-гидрокси-1,2бензотиазин 1,1-диоксид 4-(№фенил)-карбоксамид. Предполагается, что родственные по структуре оксикамы, обладающие сходными аналгетическими и противовоспалительными свойствами, также входят в данную группу.
Ещё в одном конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязывающего белка в комбинации (до лечения, после лечения или одновременно с лечением) с любым из одного или более пиразолов, пролекарственных форм - сложных эфиров или их фармацевтически приемлемых солей. Пиразолы, пролекарственные формы - сложные эфиры и их фармацевтически приемлемые соли, которые можно применять, включают: дифенамизол и эпиризол. Предполагается, что родственные по структуре пиразолы, обладающие сходными аналгетическими и противовоспалительными свойствами, также входят в данную группу.
Ещё в одном конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязы
- 69 019397 вающего белка в комбинации (до лечения, после лечения или одновременно с лечением) с любым из одного или более пиразолонов, пролекарственных форм - сложных эфиров или их фармацевтически приемлемых солей. Пиразолоны, пролекарственные формы - сложные эфиры и их фармацевтически приемлемые соли, которые можно использовать, включают: апазон, азапропазон, бензпиперилон, фепразон, мофебутазон, моразон, оксифенбутазон, фенилбутазон, пипебузон, пропилфеназон, рамифеназон, суксибузон и тиазолинобутазон. Предполагается, что родственные по структуре пиразолоны, обладающие сходными аналгетическими и противовоспалительными свойствами, также входят в данную группу.
В другом конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязывающего белка в комбинации (до лечения, после лечения или одновременно с лечением) с любым из одного или более НСПВС из следующего списка: ε-ацедамидокапроновая кислота, 8-аденозилметионин, 3амино-4-гидроксимасляная кислота, амиксетрин, анитразафен, антрафенин, бендазак, бендазака лизинат, бензидамин, бепрозин, броперамол, буколом, буфезолак, ципроквазон, клоксимат, дазидамин, дебоксамет, детомидин, дифенпирамид, дифисаламин, дитазол, эморфазон, фанетизол мезилат, фенфумизол, флоктафенин, флумизол, флуниксин, флупроквазон, фопиртолина, фосфозала, гвамезала, гвайазолена, изониксима, лефетамина НС1, лефлюномид, лофемизол, лотифазол, лизина клониксинат, мезеклазон, набуметон, никтиндол, немисулид, орготеин, орпаноксин, оксацепрол, оксападол, паранилин, перизоксал, перизоксала цитрат, пифоксим, пипроксен, пиразолак, пирфенидон, проквазон, проксазол, тиелавин В, тифламизол, толектин, толпадол, триптамид и НСПВС, обозначенных компаниями кодовыми номерами, таких как 4801568, АА861, ΑΌ1590, ΛΡР802, ΑΡР860, ΑI77В, АР504, Αυ8001, ВРРС, В№540С, СШN0^ 127, С№00, ЕВ382, ΕΕ508, Е1044, ЕК-506, 6ν3658, ΙΤΕ182, КСNТΕI6090, КМЕ4, ΕΑ2851, ΜΚ714, ΜΚ897, ΜΥ309, 0Ы03144, РК823, РV102, РV108, К830, К82131, 8СК152, 8Н440, 8ΙΚ133, 8РΛ8510, 8Р27239, 8Т281, 8Υ6001, ТА60, ΤΑΙ-901 (4-бензоил-1-инданкарбоновая кислота), ΤνΧ2706, υ60257, ЦЕ2301 и \νΥ41770. Предполагается, что родственные по структуре НСПВС, обладающие сходными аналгетическими и противовоспалительными свойствами, также входят в данную группу.
Ещё в одном конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязывающего белка в комбинации (до лечения, после лечения или одновременно с лечением) с любым из одного или более кортикостероидов, пролекарственных форм - сложных эфиров или их фармацевтически приемлемых солей для лечения заболеваний и расстройств, перечисленных в данном описании, включая острое и хроническое воспаление, такое как ревматические заболевания, болезнь трансплантат-противхозяина и рассеянный склероз. Кортикостероиды, их пролекарственные формы - сложные эфиры и их фармацевтически приемлемые соли включают: гидрокортизон и соединения, образованные из гидрокортизона, такие как 21-ацетоксипрегненолон, алклометазон, алгестон, амцинонид, беклометазон, бетаметазон, бетаметазона валерат, будесонид (будезонид), хлорпреднизон, клобетазол, клобетазола пропионат, клобетазон, клобетазона бутират, клокортолон, клопреднол, кортикостерон, кортизон, кортивазол, дефлазакон, дезонид, дезоксимеразон, дезоксиметазон, дифлоразон, дифлукортолон, дифлупреднат, эноксолон, флуазакорт, флуклоронид, флуметазон, флуметазона пивалат, флуцинолона ацетонид, флунизолид, флуцинонид, фторцинолона ацетонид, бутилфлуокортин, флуокортолон, флуокортолона гексаноат, дифлуокортолона валерат, фторметолон, флуперолона ацетат, флупреднидена ацетат, флупреднизолон, флураденолид, формокортал, хальцинонид, галометазон, галопредона ацетат, гидрокортамат, гидрокортизон, гидрокортизона ацетат, гидрокортизона бутират, гидрокортизона фосфат, гидрокортизона 21натрия фосфат, гидрокортизона тебутат, мазипредон, медризон, мепреднизон, метилпреднизолон, мометазона фуроат, параметазон, предникарбат, преднизолон, преднизолона 21-диэтиламиноацетат, преднизолона натрия фосфат, преднизолона натрия сукцинат, преднизолона натрия 21-м-сульфобензоат, преднизолона натрия 21-стеарогликолят, преднизолона тебутат, преднизолона 21-триметилацетат, преднизон, преднивал, преднилиден, преднилидена 21-диэтиламиноацетат, тиксокортол, триамцинолон, триамцинолона ацетонид, триамцинолона бенетонид и триамцинолона гексацетонид. Предполагается, что родственные по структуре кортикостероиды, обладающие сходными аналгетическими и противовоспалительными свойствами, также входят в данную группу.
В другом конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязывающего белка в комбинации (до лечения, после лечения или одновременно с лечением) с любым из одного или более медленнодействующих противоревматических препаратов (МПРП, 8ΛΑΚ^) или препаратов, модифицирующих заболевание (БМАРП, ΌΜΑΚΌ8), пролекарственных форм - сложных эфиров или их фармацевтически приемлемых солей для лечения заболеваний и расстройств, перечисленных в данном описании, включая острое и хроническое воспаление, такое как ревматические заболевания, болезнь трансплантат-против-хозяина и рассеянный склероз. МПРП или БМАРП, их пролекарственные формы сложные эфиры и их фармацевтически приемлемые соли включают: аллокупреид натрия, ауранофин, ауротиоглюкозу, ауротиогликанид, азатиоприн, бреквинар натрия, буцилламин, кальция 3-ауротио-2пропанол-1-сульфонат, хлорамбуцил, хлорокин, клобузарит, купроксолин, циклофосфамид, циклоспорин, дапсон, 15-дезоксиспергуалин, диацереин, глюкозамин, соли золота (например, циклохин золота соль, золота и натрия тималат, золота и натрия тиосульфат), гидроксихлорохин, гидроксихлорохина сульфат, гидроксимочевину, кебузон, левамизоль, лобензарит, мелиттин, 6-меркаптопурин, метотрексат, мизорибин, микофенолята мофетил, миорал, азотный мустин, Ό-пеницилламин, пиридинол имидазолы,
- 70 019397 такие как БК№86002 и БВ203580, рапамицин, тиолы, тимопоэтин и винкристин. Предполагается, что родственные по структуре МПРП или БМАРП, обладающие сходными аналитическими и противовоспалительными свойствами, также входят в данную группу.
В другом конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязывающего белка в комбинации (до лечения, после лечения или одновременно с лечением) с любым из одного или более СОХ2 ингибиторов, пролекарственных форм - сложных эфиров или их фармацевтически приемлемых солей для лечения заболеваний и расстройств, перечисленных в данном описании, включая острое и хроническое воспаление. Примеры СОХ2 ингибиторов, их пролекарственных форм - сложных эфиров и их фармацевтически приемлемых солей включают, например, целексоксиб. Предполагается, что родственные по структуре СОХ2 ингибиторы, обладающие сходными аналгетическими и противовоспалительными свойствами, также входят в данную группу. Примеры селективных ингибиторов СОХ2 включают, но без ограничения, эторикоксиб, вальдекоксиб, целекоксиб, ликофелон, рофекоксиб и т.п.
Ещё в одном конкретном варианте настоящее изобретение относится к применению антигенсвязывающего белка в комбинации (до лечения, после лечения или одновременно с лечением) с любым из одного или более противомикробных препаратов, пролекарственных форм - сложных эфиров или их фармацевтически приемлемых солей для лечения заболеваний и расстройств, перечисленных в данном описании, включая острое и хроническое воспаление. Противомикробные препараты включают, например, широкий ряд пенициллинов, цефалоспорины и другие бета-лактамы, аминогликозиды, азолы, хинолоны, макролиды, рифамицины, тетрациклины, сульфонамиды, линкозамиды и полимиксины. Пенициллины включают, но без ограничения, пенициллин С, пенициллин У, метициллин, нафциллин, оксациллин, клоксациллин, диклоксациллин, флоксациллин, ампициллин, ампициллин/сульбактам, амоксициллин, амоксициллин/клавуналат, гетациллин, циклациллин, бакампициллин, карбенициллин, карбенициллин инданил, тикарциллин, тикарциллин/клавуналат, азлоциллин, пеперациллин и мециллинам. Цефалоспорины и другие бета-лактамы включают, но без ограничения, цефалотин, цефапирин, цефалексин, цефрадин, цефазолин, цефадроксил, цефаклор, цефамандол, цефотетан, цефокситин, церуроксим, цефоницид, цефорадин, цефиксим, цефотаксим, моксалактам, цефтизоксим, цетриаксон, цефоперазон, цефтазидим, имипрем и азтреонам. Аминогликозиды включают, но без ограничения, стрептомицин, гентамицин, тобрамицин, амикацин, нетилмицин, канамицин и неомицин. Азолы включают, но без ограничения, флуконазол. Хинолоны включают, но без ограничения, налидиксиновую кислоту, норфлоксацин, ципрофлоксацин, офлоксацин, спарфлоксацин и темафлоксацин. Макролиды включают, но без ограничения, эритромицин, спирамицин и азитромицин. Рифамицин включает, но без ограничения, рифампин. Тетрациклины включают, но без ограничения, спициклин, хлортетрациклин, кломоциклин, демеклоциклин, деоксициклин, гуамециклин, лимециклин, меклоциклин, метациклин, миноциклин, окситетрациклин, пенимепициклин, пипациклин, ролитетрациклин, санциклин, сеноциклин и тетрациклин. Сульфонамиды включают, но без ограничения, сульфаниламид, сульфаметоксазол, сульфацетамид, сульфацетамид, сульфадиазин, сульфизоксазол и котримоксазол (триметоприм/сульфаметоксазол). Линкозамиды включают, но без ограничения, клиндамицин и линкомицин. Полимиксины (полипептиды) включают, но без ограничения, полимиксин В и колистин.
Наиболее часто упоминаемой активностью [0-17А ίη νίΙΐΌ является индукция мобилизующих нейтрофилы цитокинов и хемокинов стромальными клетками (например, СМ-СБЕ, ΙΕ6, ΙΕ8). Эта активность эффективно усиливаются в присутствии ΤΝΕ (Киббу е! а1., 2004). Сходным образом биологическая активность ГО-17Е также усиливается с помощью ΤΝΕ костимула. Особо следует отметить патогенную роль ГО- 17А в разрушении хрящей и эрозии костей, обусловленных ревматоидным артритом, [И-17А индуцирует экспрессию ΝΟ, ММР, РСЕ2 и КАМКЕ и участвует в антигенспецифической активации Т и В клеток (Ко11к апб Ыпбеп, 2004, кирга; ЬиЬЬейк е! а1., 2005, Λ^ι11^^ι^к. Кек. ТЕег. 7: 29-37). Следовательно, антигенсвязывающие белки можно использовать для ингибирования [И-17А и/или ГО-17Е/ГО-17КА пути и последующего продуцирования ΝΟ, ММР, РСЕ2 и/или КАЫКЕ и лечения заболеваний, ассоциированных с вызванной ГО-ПА и/или ГО-17Е позитивной регуляцией ΝΟ, ММР, РСЕ2 и/или КАЯКЕ, а также других провоспалительных медиаторов по данному описанию.
Помимо присутствия повышенных уровней ГО-17А в синовиальной жидкости больных ревматоидным артритом, ряд экспериментальных данных наводит на мысль, что [И-17А является главным, основным патогенным цитокином при артрите. Во-первых, введение ГО-17А в суставы мышей усиливает симптомы коллаген-индуцированного артрита (ЬиЬЬейк е! а1., 2003, 1. Iттиηο1. 170: 2655-2662). Во-вторых, растворимый ГО-17КА.Ес ингибирует расщепление коллагена в культурах человеческих КА синовиальных клеток и костных эксплантатов и уменьшает симптомы коллаген-индуцированного артрита у мышей (СЕаЬаиб апб Мюккес, 2001, АгГЬтПлк КЕеит. 44: 1293- 1303) (ЬиЬЬейк е! а1., 2001, 1. Iттиηο1. 167: 10041013)). Как и предсказывалось на основании низкоаффинного взаимодействия между ГО-17Е и ГО-17К, ГО-17К-Ес не нейтрализует активность ГО-17Е, и поэтому эти эффекты являются специфическими для ГОПА антагонизма. В третьих, мыши, дефектные по ГО-17А, устойчивы к артриту, вызываемому ΙΠ-1 артриту, и у них наблюдается ослабленный коллаген-индуцированный артрит (№1кае е! а1., 2003а, 1. Iттиηο1. 171: 6173-6177; Nакае е! а1., 2003Ь, кирга). Эти данные показывают, что ГО-17А передача сигнала через ГО-17КА является важным медиатором воспаления и поражения суставов при артрите. Антиген
- 71 019397 связывающие белки можно использовать для ингибирования ГО-17А и/или I^-17ΡА^-17ЯЛ активности и тем самым для уменьшения воспаления и повреждения костей при артрите.
При ревматоидном артрите повышенные уровни зрелого [ГО-17А обнаружены в сыворотке и синовиальной жидкости пациентов. В некоторых работах было показано, что уровни ГО-17А коррелируют с активностью заболевания и реакцией на модифицирующее болезнь лечение. Чрезвычайно высокие уровни сывороточного ГО-17А постоянно определяются при системном ювенильном идиопатическом артрите (ЮИА) и очень близкой к нему болезни Стилла у взрослых. Международная патентная заявка \¥0 2005/063290; Саппе!!1 е! а1., 2003, 1. ]ттипо1. 171: 1009- 1015; СйаЧек е! а1., 1999, 1. ]ттипо1. 163: 15211528; Сиппапе е! а1., 2000, 0п1те 1. Я1еита!о1 27 : 58-63; УокЫто!о, 1998, 1. Iттиηо1. 161: 3400- 3407. Антигенсвязывающие белки можно применять для ингибирования [ГО-17А и/или ГО-17Р/ГО-17ЯА активности и, следовательно, для лечения ювенильного идиопатического артрита и болезни Стилла у взрослых.
С повышенными уровнями ГО-17А либо в больной ткани, либо в сыворотке ассоциированы различные другие аутоиммунные заболевания. Эти заболевания включают системную красную волчанку, атопический дерматит, тяжёлую псевдопаралитическую миастению, типа Ι диабет и саркоидоз. [ГО-17А может также вызывать астму и Ο\ΉΌ. Антигенсвязывающие белки по данному описанию можно использовать для уменьшения эффектов ГО-17А и/или ГО-17Р/ГО-17ЯА пути при этих заболеваниях.
Антигенсвязывающие белки можно использовать для уменьшения ГО-17ЯА активности, включающей введение антигенсвязывающего белка. Настоящее изобретение также относится к методам ингибирования связывания [П-17А и/или ГО-17Е с рецептором и/или передачи сигнала [ГО-17А и/или ГО-17Е рецептору ГО-17ЯА, включающим предоставление антигенсвязывающего белка рецептору ГО-17ЯА. В некоторых вариантах изобретения антигенсвязывающий белок ингибирует связывание ГО-17А и ΙΌ-17Η с рецептором и/или передачу сигнала ГО-17А и ГО-17Е рецептору ГО-17ЯА. В дополнительных вариантах изобретения антигенсвязывающий белок ингибирует связывание ГО-17А, но не ГО-17Е, с рецептором и/или передачу сигнала ГО-17А, но не ГО-17Е, рецептору ГО-17ЯА. В других вариантах изобретения антигенсвязывающий белок ингибирует связывание ГО-17Р, но не ГО-ПА, с рецептором и/или передачу сигнала ГО-17Р, но не ГО-ПА, рецептору ГО-17ЯА. Антигенсвязывающие белки можно применять при лечении последствий, симптомов и/или патологии, ассоциированных с ГО-17ЯА активностью, которая включает введение антигенсвязывающего белка. Антигенсвязывающие белки можно использовать для получения одного или более членов из ряда: воспалительный цитокин, хемокин, матриксная металлопротеиназа или другая молекула, ассоциированная с ГО-17ЯА активацией, что включает введение антигенсвязывающего белка. Антигенсвязывающие белки можно использовать в методах ингибирования продуцирования молекул, таких, но без ограничения, как: ГО-6, ГО-8, СХСЬ1, СХСЬ2, 6М-С8Р, 6-С8Р, М-С8Р, ГО-13, ТЫРа, ЯАЫК-Ь, ЫР, Р6Б2, ГО-13, ММР (таких, но без ограничения, как ММР3 и ММР9), 6Я0а, N0 и/или С-телопептид и т.п., включающих введение антигенсвязывающего белка. Антигенсвязывающие белки ингибируют провоспалительные и проаутоиммунные реакции и могут применяться для лечения заболеваний, ассоциированных с активностью пути ГО-17А и/или ГО-17Р/ГО-17ЯА.
Аспекты изобретения включают антитела, которые специфически связываются с человеческим ГОНКА и частично или полностью ингибируют образование рецептором ГО-17ЯА либо гомомерного, либо гетеромерного функционального рецепторного комплекса, такого, но без ограничения, как комплекс ГО17ЯА/ГО-17ЯС, и не обязательно ингибирует связывание ГО-17А и/или ΙΌ-17Ε или гетеромера ГО-17А/ГО17Р с ГО-17ЯА или с гетеромерным рецепторным комплексом ГО-17ЯА. Таким образом, болезненные состояния, ассоциированные с ГО-17ЯС, также ассоциированы с ГО-17ЯА вследствие того, что ΙΕ-17Π0 не может передавать сигнал без ГО-17ЯА. См., например, Уои, Ζ., е! а1., Сапсег Яек., 2006 1ап 1; 66(1): 175-83 и Уои, Ζ. е! а1., Кеор1аяа, 2007 ГОп;9(6): 464-70.
Антигенсвязывающие белки для ГО-17ЯА можно применять в методах лечения заболевания, ассоциированного с ГО-17ЯА, включающего введение антигенсвязывающего белка для ГО-17ЯА. Антигенсвязывающие белки для ГО-17ЯА можно применять в методах лечения заболеваний, включая, но без ограничения: воспалительное, аутоиммунное заболевание, воспаление хряща и/или разрушение кости, артрит, ревматоидный артрит, ювенильный артрит, ювенильный ревматоидный артрит, пауциартикулярный ювенильный ревматоидный артрит, полиартикулярный ювенильный ревматоидный артрит, системный ювенильный ревматоидный артрит, ювенильный анкилозирующий спондилит, ювенильный энтеропатический артрит, ювенильный реактивный артрит, ювенильный синдром Рейтера, (ювенильный) синдром 8БА (синдром серонегативной энтезопатии и артропатии), ювенильный дерматомиозит, ювенильный псориатический артрит, ювенильную склеродермию, ювенильную системную красную волчанку, ювенильный васкулит, пауциартикулярный ревматоидный артрит, полиартикулярный ревматоидный артрит, системный ревматоидный артрит, анкилозирующий спондилит, энтеропатический артрит, реактивный артрит, синдром Рейтера, синдром 8БА (синдром серонегативной энтезопатии и артропатии), дерматомиозит, псориатический артрит, склеродермию, васкулит, миелит, полимиелит, дерматомиозит, остеоартрит, нодозный полиартериит, гранулёматоз Вегенера, артериит, ревматическую полимиалгию, саркоидоз, склероз, первичный билиарный склероз, склерозирующий холангит, синдром Шёгрена, псориаз, бляшечный (пятнистый) псориаз, каплевидный псориаз, обратный псориаз, пустулёзный псориаз, эрит
- 72 019397 родермический псориаз, дерматит, атопический дерматит, атеросклероз, волчанку, болезнь Стилла, системную красную волчанку (8ΌΕ), тяжёлую псевдопаралитическую миастению, воспалительное заболевание кишечника (ΙΒΌ), болезнь Крона, язвенный колит, глютеновую болезнь, рассеянный склероз (Μ8), астму, ί'ΌΡΌ (хроническую препятствующую лёгочную болезнь), болезнь Гийена-Барре, сахарный диабет типа ΙΙ, болезнь Грейвса, болезнь Аддисона, феномен Рейно, аутоиммунный гепатит, ΟνΗΌ (трансплантат-против хозяина) и т.п.
Аспекты изобретения включают различные варианты изобретения, в том числе, но без ограничения, следующие типичные варианты изобретения: вариант изобретения 151: способ лечения болезненного состояния, ассоциированного с активацией Ш-е 17ΒΑ, у нуждающегося в этом пациента, заключающийся во введении указанному пациенту композиции, содержащей антитело, которое специфически связывает человеческий Ш-е 17 Рецептор А и ингибирует связывание ГО-е 17Α, причём указанное антитело выбирают из группы, состоящей из:
А) выделенного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего
а) последовательность вариабельного домена лёгкой цепи, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности вариабельного домена лёгкой цепи ΑΜΕ1- 26 (8Ε0 ΙΌ N0: 27-53, соответственно);
б) последовательность вариабельного домена тяжёлой цепи, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи АМН1- 26 (8Ε0 ΙΌ N0: 1-26, соответственно);
в) вариабельный домен лёгкой цепи по п) (а) и вариабельный домен тяжёлой цепи по п) (б); причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ΙΕ^Α;
Б) выделенного антитела или его I^-ΒЛ-связывающего фрагмента, содержащего:
а) СОВ 1 (8ΕΟ ГО N0: 185), СОВ2 (81Е) ГО N0: 186), СОВ3 (81Е) ГО N0: 187) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 107), СОВ2 (81Е) ГО N0: 108), СОВ3 (81Е) ГО N0: 109) тяжёлой цепи антитела АМ-1;
б) СОВ1 (81Е) ГО N0: 188), СОВ2 (81Е) ГО N0: 189), СОВ3 (81Е) ГО N0: 190) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 110), СОВ2 (81Е) ГО N0: 111), СОВ3 (81Е) ГО N0: 112) тяжёлой цепи антитела АМ-2;
в) СОВ1 (81Е) ГО N0: 191), СОВ2 (81Е) ГО N0: 192), СОВ3 (81Е) ГО N0: 193) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 113), СОВ2 (81Е) ГО N0: 114), СОВ3 (81Е) ГО N0: 115) тяжёлой цепи антитела АМ-3;
г) СОВ1 (81Е) ГО N0: 194), СОВ2 (81Е) ГО N0: 195), СОВ3 (81Е) ГО N0: 196) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 116), СОВ2 (81Е) ГО N0: 117), СОВ3 (81Е) ГО N0: 118) тяжёлой цепи антитела АМ-4;
д) СОВ1 (81Е) ГО N0: 197), СОВ2 (81Е) ГО N0: 198), СОВ3 (81Е) ГО N0: 199) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 119), СОВ2 (81Е) ГО N0: 120), СОВ3 (81Е) ГО N0: 121) тяжёлой цепи антитела АМ-5;
е) СОВ1 (81Е) ГО N0: 200), СОВ2 (81Е) ГО N0: 201), СОВ3 (81Е) ГО N0: 202) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 122), СОВ2 (81Е) ГО N0: 123), СОВ3 (81Е) ГО N0: 124) тяжёлой цепи антитела АМ-6;
ж) СОВ1 (81Е) ГО N0: 203), С0В2 (81Е) ГО N0: 204), СОВ3 (81Е) ГО N0: 205) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 125), СОВ2 (81Е) ГО N0: 126), СОВ3 (81Е) ГО N0: 127) тяжёлой цепи антитела АМ-7;
з) СОВ1 (81Е) ГО N0: 206), СОВ2 (81Е) 1ГО N0: 207), СОВ3 (81Е) ГО N0: 208) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 128), СОВ2 (81Е) ГО N0: 129), СОВ3 (81Е) ГО N0: 130) тяжёлой цепи антитела АМ-8;
и) СОВ1 (81Е) ГО N0: 209), (2)132 (81Е) ГО N0: 210), СОВ3 (81Е) ГО N0: 211) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 131), СОВ2 (81Е) ГО N0: 132), СОВ3 (81Е) ГО N0: 133) тяжёлой цепи антитела АМ-9;
к) СОВ1 (81Е) ГО N0: 212), СОВ2 (81Е) ГО N0: 213), СОВ3 (81Е) ГО N0: 214) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 134), СОВ2 (81Е) ГО N0: 135), СОВ3 (81Е) ГО N0: 136) тяжёлой цепи антитела АМ-10;
л) СОВ1 (81Е) ГО N0: 215), С1Ж2 (81Е) ГО N0: 216), СОВ3 (81Е) ГО N0: 217) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 137), СОВ2 (81Е) ГО N0: 138), СОВ3 (81Е) ГО N0: 139) тяжёлой цепи антитела АМ-11;
м) СОВ1 (81Е) ГО N0: 218), С1Ж2 (81Е) ГО N0: 219), СОВ3 (81Е) ГО N0: 220) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 140), СОВ2 (81Е) ГО N0: 141), СОВ3 (81Е) ГО N0: 142) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-12;
н) СОВ1 (81Е) ГО N0: 221), С1Ж2 (81Е) ГО N0: 222), СОВ3 (81Е) ГО N0: 223) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 143), СОВ2 (81Е) ГО N0: 144), СОВ3 (81Е) ГО N0: 145) тяжёлой цепи антитела АМ-13;
о) СОВ1 (81Е) ГО N0: 224), (2)132 (81Е) ГО N0: 225), СОВ3 (81Е) ГО N0: 226) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 146), СОВ2 (81Е) ГО N0: 147), СОВ3 (81Е) ГО N0: 148) тяжёлой цепи антитела АМ-14;
п) СОВ1 (81Е) ГО N0: 227), (2)132 (81Е) ГО N0: 228), СОВ3 (81Е) ГО N0: 229) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 149), СОВ2 (81Е) ГО N0: 150), СОВ3 (81Е) ГО N0: 151) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-15;
р) СОВ1 (81Е) ГО N0: 230), (2)132 (81Е) ГО N0: 231), СОВ3 (81Е) ГО N0: 232) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 152), СОВ2 (81Е) ГО N0: 153), СОВ3 (81Е) ГО N0: 154) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-16;
с) СОВ1 (81Е) ГО N0: 233), СОВ2 (81Е) ГО N0: 234), СОВ3 (81Е) ГО N0: 235) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 155), СОВ2 (81Е) ГО N0: 156), СОВ3 (81Е) ГО N0: 157) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-17;
т) СОВ1 (81Е) ГО N0: 236), СОВ2 (81Е) ГО N0: 237), СОВ3 (81Е) ГО N0: 238) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 158), СОВ2 (81Е) ГО N0: 159), СОВ3 (81Е) ГО N0: 160) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-18;
у) СОВ1 (81Е) ГО N0: 239), (2)132 (81Е) ГО N0: 240), СОВ3 (81Е) ГО N0: 241) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 161), СОВ2 (81Е) ГО N0: 162), СОВ3 (81Е) ГО N0: 163) тяжёлой цепи антитела АМ-19;
ф) СОВ1 (81Е) ГО N0: 242), СОВ2 (81Е) ГО N0: 243), СОВ3 (81Е) ГО N0: 244) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 164), СОВ2 (81Е) ГО N0: 165), СОВ3 (81Е) ГО N0: 166) тяжёлой цепи антитела АМ-20;
х) СОВ1 (81Е) ГО N0: 245), (2)132 (81Е) ГО N0: 246), СОВ3 (81Е) ГО N0: 247) лёгкой цепи и СОВ1 (81Е) ГО N0: 167), СОВ2 (81Е) ГО N0: 168), СОВ3 (81Е) ГО N0: 169) тяжёлой цепи антитела АМ-21;
- 73 019397
ц) СЕЕ1 (8ЕЕ) ΙΌ ИО: 248), СЕЕ2 (8ЕЕ) ГО ИО: 249), СОК3 (8ЕЕ) ГО ИО: 250) лёгкой цепи и СЕЕ1 (8ЕЕ) ГО ИО: 170), СЕЕ2 (8ЕЕ) ГО ИО: 171), СОК3 (8ЕЕ) ГО ИО: 172) тяжёлой цепи антитела АМ-22;
ч) С1Ж1 (8ЕЕ) ГО ИО: 251), СЕЕ2 (8ЕЕ) ГО ИО: 252), СОК3 (8ЕЕ) ГО ИО: 253) лёгкой цепи и СЕЕ1 (8ЕЕ) ГО ИО: 173), СЕЕ2 (8ЕЕ) ГО ИО: 174), СОК3 (8ЕЕ) ГО ИО: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
ш) СЕЕ1 (8ЕЕ) ГО ИО: 254), СЕЕ2 (8ЕЕ) ГО ИО: 255), СОК3 (8ЕЕ) ГО ИО: 256) лёгкой цепи и СЕЕ1 (8ЕЕ) ГО ИО: 173), СЕЕ2 (8ЕЕ) ГО ИО: 174), СОК3 (8ЕЕ) ГО ИО: 175) тяжёлой цепи антитела АМ-23;
щ) СЕЕ1 (8ЕЕ) ГО ИО: 257), СЕЕ2 (8ЕЕ) ГО ИО: 258), СОК3 (8ЕЕ) ГО ИО: 259) лёгкой цепи и СЕЕ1 (8ЕЕ) ГО ИО: 176), СЕЕ2 (8ЕЕ) ГО ИО: 177), СОК3 (8ЕЕ) ГО ИО: 178) тяжёлой цепи антитела АМ-24;
э) СЕЕ1 (8ЕЕ) ГО ИО: 260), СЕЕ2 (8ЕЕ) ГО ИО: 261), СОК3 (8ЕЕ) ГО ИО: 262) лёгкой цепи и СЕЕ1 (8ЕЕ) ГО ИО: 179), СЕЕ2 (8ЕЕ) ГО ИО: 180), СОК3 (8ЕЕ) ГО ИО: 181) тяжёлой цепи антитела АМ-25; или
ю) СЕЕ1 (8ЕЕ) ГО ИО: 263), СЕЕ2 (8ЕЕ) ГО ИО: 264), СОК3 (8ЕЕ) ГО ИО: 265) лёгкой цепи и СЕЕ1 (8ЕЕ) ГО ИО: 182), СЕЕ2 (8ЕЕ) ГО ИО: 183), СОК3 (8ЕЕ) ГО ИО: 184) тяжёлой цепи антитела АМ-26; причём указанное антитело специфически связывает ΙΌ-17 рецептор А; и
Б) выделенного антитела или его ГО-ПКА-связывающего фрагмента, содержащего:
а) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^1/ЛМН1 (8ЕО ГО ИО: 27/8ЕО ГО ИО: 1);
б) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^/АМ^ (8ЕО ГО ИО: 28/8ЕО ГО ИО:2);
в) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^/АМ^ (8ЕО ГО ИО: 29/8ЕО ГО ИО: 3);
г) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ЛМ^4/АМН4 (8ЕО ГО ИО: 30/8ЕО ГО ИО: 4);
д) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^5/ЛМН5 (8ЕО ГО ИО: 31/8ЕО ГО ИО: 5);
е) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^/АМнй) (8ЕО ГО ИО: 32/8ЕО ГО ИО: 6)
ж) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^7/ЛМН7 (8ЕО ГО ИО: 33/8ЕО ГО ИО: 7);
з) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМЪ8/АМН8 (8ЕО ГО ИО: 34/8ЕО ГО ИО: 8);
и) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^9/ЛМН9 (8ЕО ГО ИО: 35/8ЕО ГО ИО: 9);
к) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^Ю/АМнЮ (8ЕО ГО ИО: 36/8ЕО ГО ИО: 10);
л) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^И/АМнИ (8ЕО ГО ИО: 37/8ЕО ГО ИО: 11);
м) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ЛМ^12/ЛМН12 (8ЕО ГО ИО: 38/8ЕО ГО ИО: 12);
н) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^13/ЛМН13 (8ЕО ГО ИО: 39/8ЕО ГО ИО: 13);
о) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^14/ЛМН14 (8ЕО ГО ИО: 40/8ЕО ГО ИО: 14);
п) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^15/ЛМН15 (8ЕО ГО ИО: 41/8ЕО ГО ИО: 15);
р) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^16/ЛМН16 (8ЕО ГО ИО: 42/8ЕО ГО ИО: 16);
с) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ЛМ^17/ЛМН17 (8ЕО ГО ИО: 43/8ЕО ГО ИО: 17);
т) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ЛМ^18/ЛМН18 (8ЕО ГО ИО: 44/8ЕО ГО ИО: 18);
у) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^19/ЛМН19 (8ЕО ГО ИО: 45/8ЕО ГО ИО: 19);
ф) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^20/ЛМН20 (8ЕО ГО ИО: 46/8ЕО ГО ИО: 20);
х) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^21/ЛМН21 (8ЕО ГО ИО: 47/8ЕО ГО ИО: 21);
ц) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ| 22/АМЦ22 (8ЕО ГО ИО: 48/8ЕО ГО ИО: 22);
ч) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^23/ЛМН23 (8ЕО ГО ИО: 49 или 8ЕЕ) ГО ИО: 50/8ЕО ГО ИО: 23);
ш) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ЛМ^24/ЛМН24 (8ЕО ГО ИО: 51/8ЕО ГО ИО: 24);
- 74 019397
щ) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ΛМ^25/ΛМН25 (БЕР ГО N0: 52/БЕО ГО N0: 25); и
э) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи АМ^26/ΛМН26 (БЕР ГО N0: 53/БЕО ГО N0: 26);
причём указанное антитело специфически связывает ΙΕ-17 рецептор А.
Вариант изобретения 152: способ по п.1, отличающийся тем, что болезненное состояние выбирают из группы, включающей: воспаление, аутоиммунное заболевание, воспаление хряща и/или разрушение кости, артрит, ревматоидный артрит, ювенильный артрит, ювенильный ревматоидный артрит, пауциартикулярный ювенильный ревматоидный артрит, полиартикулярный ювенильный ревматоидный артрит, системный ювенильный ревматоидный артрит, ювенильный анкилозирующий спондилит, ювенильный энтеропатический артрит, ювенильный реактивный артрит, ювенильный синдром Рейтера, (ювенильный) синдром БЕА (синдром серонегативной энтезопатии и артропатии), ювенильный дерматомиозит, ювенильный псориатический артрит, ювенильную склеродермию, ювенильную системную красную волчанку, ювенильный васкулит, пауциартикулярный ревматоидный артрит, полиартикулярный ревматоидный артрит, системный ревматоидный артрит, анкилозирующий спондилит, энтеропатический артрит, реактивный артрит, синдром Рейтера, синдром БЕА (синдром серонегативной энтезопатии и артропатии), дерматомиозит, псориатический артрит, склеродермию, васкулит, миелит, полимиелит, дерматомиозит, остеоартрит, нодозный полиартериит, гранулёматоз Вегенера, артериит, ревматическую полимиалгию, саркоидоз, склеродермию, склероз, первичный билиарный склероз, склерозирующий холангит, синдром Шёгрена, псориаз, бляшечный (пятнистый) псориаз, каплевидный псориаз, обратный псориаз, пустулёзный псориаз, эритродермический псориаз, дерматит, атопический дерматит, атеросклероз, волчанку, болезнь Стилла, системную красную волчанку (БЬЕ), тяжёлую псевдопаралитическую миастению, воспалительное заболевание кишечника (ΙθΌ), болезнь Крона, язвенный колит, глютеновую болезнь, рассеянный склероз (МБ), астму, С0Р0 (хроническую препятствующую лёгочную болезнь), болезнь ГийенаБарре, сахарный диабет типа ΙΙ, болезнь Грейвса, болезнь Аддисона, феномен Рейно, аутоиммунный гепатит и болезнь трансплантат-против-хозяина (ССНЭ).
Вариант изобретения 153: способ по варианту изобретения 151, дополнительно включающий введение указанному субъекту второго лекарственного препарата, представляющего собой фармацевтическую композицию. Вариант изобретения 154: способ по п.153, отличающийся тем, что указанную вторую фармацевтическую композицию выбирают из группы, включающей: ингибиторы Т№, растворимые Т№ рецепторы, Этанерцепт, ЕХВЕЕЕ®, растворимый ТЫЕ рецептор типа Ι и растворимый ТУЕ рецептор типа ΙΙ, мономерные или мультимерные р75 и/или р55 ТИЕ рецепторные молекулы и их фрагменты, антитела против Т№, Инфликсимаб, ИЕМ^АСЕ®, Э2Е7, НЕМКА®, ингибиторы ΙΕ-1, ингибиторы рецепторов ББ-1, ингибиторы СЭ28, нестероидные противовоспалительные средства (НСПВС), медленнодействующие противоревматические препараты (МПРП, БААЯВ) или модифицирующие заболевание противоревматические препараты (БМАРП, ОМАЯОБ). Вариант изобретения 155: способ ингибирования продуцирования по меньшей мере одного из соединений: цитокина, хемокина, матриксной протеиназы или другой молекулы, ассоциированной с активацией I^-17ЯΛ, заключающийся во введении антитела по варианту изобретения 151 нуждающемуся в этом пациенту. Вариант изобретения 156: способ по варианту изобретения 155, отличающийся тем, что указанный цитокин, хемокин, указанную металлопротеиназу или другую молекулу выбирают из группы, состоящей из: ΙΕ-6, ΙΕ-8, СХСЬ1, СХСЬ2, ОМ-СБЕ, О-СБЕ, М-СБЕ, Κ-1β, ТЫЕа, ЯΛNК-^, КЕ, РОЕ2, ΙΕ-12, ММР3, ММР9, ОЯ0а, N0 и С-телопептид. Вариант изобретения 157: способ лечения болезненного состояния, ассоциированного с активацией I^-17ЯΛ, у нуждающегося в этом субъекта, заключающийся во введении указанному субъекту композиции, содержащей антитело, которое специфически связывает человеческий ОБ-17 Рецептор А и ингибирует связывание [Б-ПА и ББ-17Е или ингибирует связывание [Е-17А или ББ-17Е.
Вариант изобретения 158: способ по варианту изобретения 157, отличающийся тем, что указанное антитело выбирают из группы, состоящей из:
А) выделенного антитела или его I^-17ЯΛ-связывающего фрагмента, содержащего:
а) последовательность вариабельного домена лёгкой цепи, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности вариабельного домена лёгкой цепи АМЬ14,18,19 и 22 (БЕР ГО N0: 40, 44, 45 и 48, соответственно);
б) последовательность вариабельного домена тяжёлой цепи, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи АМН14,18,19 и 22 (БЕР ГО N0: 14, 18, 19 и 22, соответственно);
в) вариабельный домен лёгкой цепи по п. (а) и вариабельный домен тяжёлой цепи по п. (б); причём указанное антитело специфически связывается с человеческим I^-17ЯΛ;
Б) выделенного антитела или его I^-17ЯΛ-связывающего фрагмента, содержащего:
а) СОЯ 1 (БЕС) ГО N0: 224), С0Е2 (БЕС) ГО N0: 225), СОЯ3 (БЕС) ГО N0: 226) лёгкой цепи и СОЯ1 (БЕС) ГО N0: 146), СОЯ2 (БЕС) ГО N0: 147), СОЯ3 (БЕС) ГО N0: 148) тяжёлой цепи антитела АМ-14;
б) СОЯ 1 (БЕС) ГО N0: 236), СОЯ2 (БЕС) ГО N0: 237), СОЯ3 (БЕС) ГО N0: 238) лёгкой цепи и СОЯ1
- 75 019397 (5ЕС ΙΌ N0: 158), С0Я2 (5ЕС ΙΌ N0: 159), СОЯ3 (5ЕС ΙΌ N0: 160) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-18;
в) СОЯ 1 (5ЕС ГО N0: 239), СОЯ2 (5ЕС ГО N0: 240), СОЯ3 (5ЕС ГО N0: 241) лёгкой цепи и СОЯ1 (5ЕС ГО N0: 161), СОЯ2 (5ЕС ГО N0: 162), СОЯ3 (5ЕС ГО N0: 163) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-19;
г) СОЯ 1 (5ЕС ГО N0: 248), ССЯ2 (5ЕС ГО N0: 249), СОЯ3 (5ЕС ГО N0: 250) лёгкой цепи и СОЯ1 (5ЕС ГО N0: 170), СОЯ2 (5ЕС ГО N0: 171), СОЯ3 (5ЕС ГО N0: 172) тяжёлой цепи антитела АМ-22; причём указанное антитело специфически связывается с человеческим I^-17ЯЛ; и
С) выделенного антитела или его I^-17ЯЛ-связывающего фрагмента, содержащего:
а) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ΑΜΕ14/ΑΜΗ14 (8Е0 ГО N0: 40/5ЕС ГО N0: 14);
б) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ΑΜ]Π8/ΑΜΗ18 (5>Е0 ГО N0: 44/5ЕС ГО N0: 18);
в) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ΑΜ]Π9/ΑΜΗ19 (5>Е0 ГО N0: 45/5ЕС ГО N0: 19);
г) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ΑΜ^ΣΣ/ΑΜμΣΣ (5>Е0 ГО N0: 48/8ЕО ГО N0: 22); причём указанное антитело специфически связывает ΙΌ-17 рецептор А.
Вариант изобретения 159: способ по варианту изобретения 157, отличающийся тем, что указанное болезненное состояние представляет собой болезненное состояние по п.152. Вариант изобретения 160: способ ингибирования продуцирования, по меньшей мере одного из соединений: цитокина, хемокина, матрикеной протеиназы или другой молекулы, ассоциированной с активацией I^-17ЯЛ, заключающийся во введении антитела по варианту изобретения 157 нуждающемуся в этом пациенту. Вариант изобретения 161: способ по варианту изобретения 160, отличающийся тем, что указанный цитокин, хемокин, указанную металлопротеиназу или другую молекулу выбирают из группы, состоящей из: ΙΌ-6, ΙΌ-8, СХСЬ1, СХСБ2, СЫ-СЗР, С-С8Р, М-С8Р, ΙΌ-1β, ЮТо, ЯЛNК-^, МР, РСЕ2, ΙΌ-12, ММР3, ММР9, СЯ0а, N0 и С-телопептид.
Вариант изобретения 162: способ лечения воспалительного и аутоиммунного заболевания у нуждающегося в этом пациента, заключающийся во введении указанному пациенту композиции, содержащей антитело, выбранное из группы, состоящей из:
А) выделенного антитела или его I^-17ЯЛ-связывающего фрагмента, содержащего:
а) последовательность вариабельного домена лёгкой цепи, по меньшей мере, на 80% идентичную последовательности вариабельного домена лёгкой цепи ΑΜΣ14,18,19 и 22 (8Е0 ГО N0: 40, 44, 45 и 48, соответственно);
б) последовательность вариабельного домена тяжёлой цепи, по меньшей мере, на 80% идентичную последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи АМН14,18,19 и 22 (8Е0 ГО N0: 14, 18, 19 и 22, соответственно);
в) вариабельный домен лёгкой цепи по п. (а) и вариабельный домен тяжёлой цепи по п. (б); причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ΙΕ-Π^Α;
Б) выделенного антитела или его I^-17ЯЛ-связывающего фрагмента, содержащего:
а) СОЯ 1 (5ЕС ГО N0: 224), С1Ш2 (5ЕС ГО N0: 225), СОЯ3 (5ЕС ГО N0: 226) лёгкой цепи и СОЯ1 (5ЕС ГО N0: 146), СОЯ2 (5ЕС ГО N0: 147), СОЯ3 (5ЕС ГО N0: 148) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-14;
б) СОЯ 1 (5ЕС ГО N0: 236), СОЯ2 (5ЕС ГО N0: 237), СОЯ3 (5ЕС ГО N0: 238) лёгкой цепи и СОЯ1 (5ЕС ГО N0: 158), СОЯ2 (5ЕС ГО N0: 159), СОЯ3 (5ЕС ГО N0: 160) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-18;
в) СОЯ 1 (5ЕС ГО N0: 239), СОЯ2 (5ЕС ГО N0: 240), СОЯ3 (5ЕС ГО N0: 241) лёгкой цепи и СОЯ1 (5ЕС ГО N0: 161), СОЯ2 (5ЕС ГО N0: 162), СОЯ3 (5ЕС ГО N0: 163) тяжёлой цепи антитела ΑΜ-19;
г) СОЯ 1 (5ЕС ГО N0: 248), ССЯ2 (5ЕС ГО N0: 249), СОЯ3 (5ЕС ГО N0: 250) лёгкой цепи и СОЯ1 (5ЕС ГО N0: 170), СОЯ2 (5ЕС ГО N0: 171), СОЯ3 (5ЕС ГО N0: 172) тяжёлой цепи антитела АМ-22; причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ΙΕ-Π^Α; и
В. выделенного антитела или его I^-17ЯЛ-связывающего фрагмента, содержащего:
а) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ΑΜ^4/ΑΜΗ14 (8Е0 ΙΌ N0: 40/5ЕС ΙΌ N0: 14);
б) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ΑΜ]Π8/ΑΜΗ18 (8Е0 ΙΌ N0: 44/5ЕС ΙΌ N0: 18);
в) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ΑΜΕ19/ΑΜΗ19 (8Е0 ΙΌ N0: 45/5ЕС ГО N0: 19);
г) вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи ΑΜΕ22/ΑΜΗ22 (8Е0 ГО N0: 48/8ЕО ГО N0: 22); причём указанное антитело специфически связывает ΙΌ-17 рецептор А.
Вариант изобретения 163: способ по варианту изобретения 162, отличающийся тем, что указанное воспалительное или аутоиммунное заболевание выбирают из группы, состоящей из: артрита, ревматоидного артрита, анкилозирующего спондилита, псориатического артрита, псориаза, бляшечного псориаза, дерматита, атопического дерматита, системной красной волчанки, воспалительного заболевания кишечника, болезни Крона, язвенного колита, глютеновой болезни, рассеянного склероза и хронического обструктивного заболевания лёгких. Вариант изобретения 164: способ по варианту изобретения 151, отличающийся тем, что указанное антитело выбирают из группы, состоящей из: а) гуманизированного анти- 76 019397 тела; б) химерного антитела; в) рекомбинантного антитела; г) одноцепочечного антитела; д) диатела; е) триатела; ж) тетратела; з) фрагмента РаЬ; и) фрагмента Р(аЬ')2; к) антитела; л) ^Е антитела; м) IдΜ антитела; н) ^С1 антитела; о) ^С2 антитела; п) ^С3 антитела; и р) ^С4 антитела. Вариант изобретения 165: способ по варианту изобретения 158, отличающееся тем, что указанное антитело выбирают из группы, состоящей из: а) гуманизированного антитела; б) химерного антитела; в) рекомбинантного антитела;
г) одноцепочечного антитела; д) диатела; е) триатела; ж) тетратела; з) фрагмента РаЬ; и) фрагмента Р(аЬ')2; к) антитела; л) ^Е антитела; м) ^М антитела; н) ^С1 антитела; о) ^С2 антитела; п) ^С3 антитела и р) ^С4 антитела.
Вариант изобретения 166: способ по варианту изобретения 151, отличающийся тем, что указанное антитело выбирают из группы, состоящей из:
A) выделенного антитела или его Ш-ПКА-связывающего фрагмента, содержащего
а) последовательность вариабельного домена лёгкой цепи, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности вариабельного домена лёгкой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 40;
б) последовательность вариабельного домена тяжёлой цепи, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 14;
в) вариабельный домен лёгкой цепи по (а) и вариабельный домен тяжёлой цепи по (б); причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ЙЕ-17КА;
Б) выделенного антитела или его Ш-ПКА-связывающего фрагмента, содержащего СЭК1 (8Е0 ΙΌ N0: 224), СЭК2 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 225), СЭК3 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 226) лёгкой цепи и СЭК1 (8ЕЕ) ΙΌ N0: 146), СЭК2 (8Е0 ΙΌ N0: 147), СЭК3 (8Е0 ΙΌ N0: 148); причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ЙЕ-17КА; и
B) выделенного антитела или его Ш-ПКА-связывающего фрагмента, содержащего вариабельный домен лёгкой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 40 и вариабельный домен тяжёлой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 14; причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ЙЕ-17КА.
Вариант изобретения 167: способ по варианту изобретения 166, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой ревматоидный артрит. Вариант изобретения 168: способ по варианту изобретения 166, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой псориаз. Вариант изобретения 169: способ по варианту изобретения 166, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой воспалительное заболевание кишечника. Вариант изобретения 170: способ по варианту изобретения 166, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой астму. Вариант изобретения 171: способ по варианту изобретения 166, отличающийся тем, что указанное антитело содержит вариабельный домен лёгкой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 40 и вариабельный домен тяжёлой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 14; причём указанное антитело специфически связывается с человеческим ЙЕ-17КА. Вариант изобретения 171: способ по варианту изобретения 166, отличающийся тем, что указанное антитело выбирают из группы, состоящей из: а) гуманизированного антитела; б) химерного антитела; в) рекомбинантного антитела; г) одноцепочечного антитела; д) диатела; е) триатела; ж) тетратела; з) фрагмента РаЬ; и) фрагмента Р(аЬ')2; к) Ι§ρ антитела; л) IдΕ антитела; м) IдΜ антитела; н) ^С1 антитела; о) ^С2 антитела; п) ^С3 антитела; и р) ^С4 антитела. Вариант изобретения 173: способ по варианту изобретения 171, отличающийся тем, что указанное антитело выбирают из группы, состоящей из: а) гуманизированного антитела; б) химерного антитела; в) рекомбинантного антитела; г) одноцепочечного антитела; д) диатела; е) триатела; ж) тетратела; з) фрагмента РаЬ; и) фрагмента Р(аЬ')2; к) антитела; л) ^Е антитела; м) IдΜ антитела; н) ^С1 антитела; о) ^С2 антитела; п) ^С3 антитела; и р) ^С4 антитела. Вариант изобретения 174: способ по варианту изобретения 167, отличающийся тем, что указанное антитело содержит последовательность лёгкой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 429 и последовательность тяжёлой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 427. Вариант изобретения 175: способ по варианту изобретения 168, отличающийся тем, что указанное антитело содержит последовательность лёгкой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 429 и последовательность тяжёлой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 427.
Понятно, что вышеописанные методы также охватывают аналогичные методы применения первого и второго лекарства и относящиеся к ним пункты формулы изобретения, представленные в другом месте данного описания.
Хроническим вирусным гепатитом поражено более 500 миллионов человек по всему миру, включая около 10 миллионов человек в США и Европе, инфицированных хроническим гепатитом С. У значительной части больных хроническим гепатитом развивается прогрессирующий фиброз печени и/или гепатоцеллюлярная карцинома. Хотя вакцины против вирусного гепатита имеются или разрабатываются, современное лечение инфицированных индивидуумов основано на длительном применении комбинации антивирусных лекарств и интерферона-альфа (ЮТ-α). Полагают, что ЮТ- а оказывает благотворное действие при лечении вирусного гепатита благодаря своей установленной антивирусной иммунологической активности и антипролиферативному воздействию на фибробласты, но продолжительность его применения и применяемые количества ограничивают тяжёлые побочные эффекты.
В последних работах описано, почему ЮТ- а может быть явно апоптотическим в отношении клеток ТН17 (Атепсап Аккоаа!юп йог Iттипо1од^к!к, аЬк!гас! по. 42.8, Мау 12- 16, 2006, Вок!оп). Клетки ТН17
- 77 019397 представляют собой отдельную субпопуляцию СЭ4+ Т-клеток, ответственных за продуцирование БЬ17А и ГО-17Р в ответ на ГО-23 (натпд!оп, е! а1., №!иге Iтт, 2005 νο1. 6, по. 11, 1123- 132 и Рагк, е! а1., №11иге Iтт, 2005 νο1. 6, по. 11, 1133-1141). Мы полагаем, что это позволяет предположить новый механизм действия ЮТ- α при хроническом вирусном гепатите, который включает не непосредственное действие ЮТ- α на вирус или фибробласты, а опосредованное воздействие на клетки ТЫ7. Далее, недавно было обнаружено, что фактор роста опухолей(? трансформирующий)- бета (ТСР- Р) и/или ГО-6, (см., например, К1тега, А., е! а1., РNЛ8 и.8.А., 2007 1и1 17; 104(29): 12099-104), оба профибротических цитокина, также индуцирует развитие клеток ТЫ7, позитивно регулируя экспрессию ГО-23 рецептора и тем самым сообщая ГО-23 восприимчивость (реактивность) (Мапдап, е! а1., №!иге, 2006 νο1. 441 по. 11, 231234). Восприимчивость к ГО-23 индуцирует дифференцировку наивных СЭ4+ Т-клеток в ТН17 клетки. Как указывалось выше, ТН17 клетки ответственны за высвобождение ГО-17А и ГО-17Р, а известно, что ГО-17А оказывает различное стимулирующее действие на фибробласты в ряде тканей и органов. Всё это вместе позволяет предположить, что ингибирование пути ГО-ИВА-ГО-ПА/ГО-ПР может дать терапевтическую пользу при прогрессирующем фиброзе в случае хронического вирусного гепатита.
Дополнительное преимущество ингибирования пути I^-17ВЛ-I^-17Л/I^-17Ρ при лечении вирусного гепатита заключается в том, что можно уменьшить дозу ЮТ-α, вводимую пациенту, и следовательно, ограничить вредные побочные эффекты, обусловленные ЮТ-α. Ещё одним преимуществом ингибирования пути I^-17ВЛ-I^-17А/I^-17Ρ при лечении вирусного гепатита является возможность достижения синергического терапевтического эффекта с помощью ЮТ- α терапии в комбинации с терапией антагонистами I^-17ВЛ-I^-17Л/I^-17Ρ или другими агонистами, более подробно описанными ниже.
Следовательно, аспекты изобретения относятся к методам лечения патологии, ассоциированной с вирусным гепатитом, с помощью ингибирования взаимодействия между ГО-17ВА и ГО-17А и/или ГО-17Р. Другие аспекты изобретения относятся к методам ингибирования фиброза путём ингибирования взаимодействия между ГО-17ВА и ГО-17А и/или ГО-17Р. Другие аспекты изобретения относятся к методам лечения фиброза, ассоциированного с вирусным гепатитом, с помощью ингибирования взаимодействия между ГО-17ВА и ГО-17А и/или ГО-17Р. Антагонисты пути I^-17ВЛ-I^-17А/I^-17Ρ пути можно использовать для ингибирования взаимодействия между ГО-17ВА и ГО-17А и/или ГО-17Р. Антагонисты пути ГО-ИВАI^-17Л включают антигенсвязывающие белки для ГО-17ВА по данному описанию, а также ГО-17ВА белки (а также их биологически активные фрагменты и их слитые белки, такие как слитые белки ГО-ИВАРс), а также антигенсвязывающие белки, такие как антитела и их биологически активные фрагменты, которые связываются с ГО-17А и ингибируют активирование рецептора ГО-17ВА с помощью ГО-ГОА, а также антигенсвязывающие белки, такие как антитела и их биологически активные фрагменты, которые связываются с ГО-17Р и ингибируют активирование рецептора ГО-17ВА с помощью ГО-17Р.
Дополнительные аспекты относятся к методам лечения патологии, ассоциированной с вирусным гепатитом, противостоя (с помощью антагонистов) ГО-23-ГО-23 рецепторному (ГО-23В) пути. Другие аспекты изобретения относятся к методам ингибирования фиброза с помощью антагонистов ГО-23- ГО-23В пути. Другие аспекты изобретения относятся к методам лечения фиброза, ассоциированного с вирусным гепатитом, противостоя (с помощью антагонистов) ГО-23-ГО-23 рецепторному (ГО-23В) пути. Противостоя (с помощью антагонистов) пути ГО-23-ГО-23В, можно предупредить индуцируемую ГО-23 дифференцировку ТН17 клеток и тем самым в конце концов ограничить количество циркулирующих ГО-17А и ГО-17Р, что может уменьшить патологию, ассоциированную с вирусным гепатитом. Антагонисты пути ГО-23-ГО-23В включают антигенсвязывающие белки, такие как антитела и их биологически активные фрагменты, которые связываются с ГО-23 и блокируют активацию интерлейкином ГО-23 рецептора ГО23В. Другие антагонисты ГО-23-ГО-23В пути включают антигенсвязывающие белки, такие как антитела и их биологически активные фрагменты, которые связываются с ГО-23В и блокируют активацию ГО-23В с помощью ГО-23. Другие антагонисты ГО-23-ГО-23В пути включают ГО-23В белки, а также их биологически активные фрагменты и их слитые белки, такие как слитые белки ГО-23В-Рс, которые связывают ГО-23 и блокируют активацию ГО-23В с помощью ГО-23.
Дополнительные аспекты относятся к методам лечения патологии, ассоциированной с вирусным гепатитом, с помощью антагонистов (противостоя, вызывая противодействие) пути ТСР-в-ТСРЗШ/ТСР-вВП. Другие аспекты изобретения относятся к методам ингибирования фиброза с помощью антагонистов (противостоя, вызывая противодействие) пути ТСР-в-ТСР-вШ/ТСР-вКГО Другие аспекты изобретения относятся к методам лечения фиброза с использованием антагонистов (противостоя, вызывая противодействие) пути ТСΡ-β-ТСΡ-βВI/ТСΡ-βВII. Используя антагонисты пути ТСР-Р-ТСРвШ/ТСР-вВП, предупреждают индуцированное ТСР-в-индуцированное развитие ТН17 клеток и тем самым в конце концов ограничить количество циркулирующих ГО-17А и ГО-17Р, что может уменьшить патологию, ассоциированную с вирусным гепатитом. Антагонисты пути ТСР-в-ТСР-вШ/ТСР-вКЛ включают антигенсвязывающие белки, такие как антитела и их биологически активные фрагменты, которые связываются с ТСР-β и блокируют активацию ТСΡ-βВI и/или ТСР-вВП с помощью ТСР-β. Другие антагонисты пути ТСΡ-β-ТСΡ-βВI/ТСΡ-βВII пути включают антигенсвязывающие белки, такие как антитела и их биологически активные фрагменты, которые связываются с ТСΡ-βВI или ТСЕ-βΡΠ и блокируют
- 78 019397 активацию ТСЕ-βΚΙ и/или ТСЕ-βΡΙΙ с помощью ΤΟΕ-β.
Дополнительные аспекты относятся к методам лечения патологии, ассоциированной с вирусным гепатитом, с помощью антагонистов (противостоя, вызывая противодействие) пути ΙΕ-6-ΙΕ-6Ε. Другие аспекты изобретения относятся к методам ингибирования фиброза с помощью антагонистов (противостоя, вызывая противодействие) пути ΙΕ-6-ΙΕ-6Ε. Другие аспекты изобретения относятся к методам лечения фиброза с помощью антагонистов (противостоя, вызывая противодействие) пути ΙΕ-6-ΙΕ-6Ε. Используя антагонисты пути №6-^-6^, можно уменьшить патологию, ассоциированную с вирусным гепатитом. Антагонисты пути ΙΕ-6-ΙΕ-6Ε включают антигенсвязывающие белки, такие как антитела и их биологически активные фрагменты, которые связываются с ΙΌ-6 и блокируют активацию ГЕ-6Я с помощью ΙΕ-6. Другие антагонисты пути ΙΕ-6-ΙΕ-6Ε включают антигенсвязывающие белки, такие как антитела и их биологически активные фрагменты, которые связываются с Ш-6Я и блокируют активацию Ш-6Я с помощью ГЬ-6.
Другие аспекты включают комбинированную терапию с применением антагонистов ГЬ-ПЯАЧЬ17АЛЬ-17Е пути, ΙΕ-23-ΙΕ-23Ε пути, ΤΟΕ-β-ΤΟΕ-βΚΙ/ΤΟΕ-βΡΚΙΙ пути и/или ΙΕ-6-ΙΕ-6Ε пути, указанных выше, в комбинации друг с другом, а также в комбинации с признанными в уровне техники средствами лечения гепатита, такими, но без ограничения, как интерферон и в частности ΙΝΕ-α. Предусматриваются все перестановки этих комбинаций.
Другие аспекты включают комбинированную терапию с применением антагонистов ГЬ-ПЯАЧЬ17АЛЬ-17Е пути, ΙΕ-23-ΙΕ-23Ε пути, ТСЕ β-ΤΟΕ-βΡΙ/ΤΟΕ-βΡΡΙΙ пути и/или ΙΕ-6-ΙΕ-6Ε пути, указанных выше, в комбинации друг с другом, а также в комбинации с признанными в уровне техники средствами лечения гепатита, такими, но без ограничения, как интерферон и в частности ΙΝΡ-α, а также с антивирусными агентами, такими, но без ограничения, как адефовира дипивоксил, ациклические аналоги дезоксиаденозина монофосфата (адефовир, тенофовир дизопроксилфумарат), (-)энантиомер аналога дезоксицитидина 2'-дезокси-3'-тиацитидина (ламивудин), карбоциклические аналоги дезоксигуанозина (энтекавир), Ь-нуклеозиды (β-^-2'-дезокситимидин, β-^-2'-дезоксицитидин и β-^-2'-дезоксиаденозин), [(-)-β-2',3'-дидезокси-5-фтор-3'-тиацитидин] (эмтрицитабин), 1-β-2,6-диаминопурин диоксалан (ПАРИ, амдоксовир), 2'-фтор-5-метил-β-^-арабинофуранозилуридин (Ь-ЕМАИ, клевудин), фамцикловир и/или пенцикловир. Предусматриваются все перестановки этих комбинаций.
Методы диагностики
Антигенсвязывающие белки по изобретению можно применять для диагностики с целью обнаружения, установления диагноза или мониторинга заболеваний и/или состояний, ассоциированных с ΙΡ-17Λ или ГЕ-17ЯА. Изобретение включает обнаружение присутствия ГЕ-17ЯА в образце с применением классических иммунопатологических методов, известных специалистам в данной области техники (например, П^еи, 1993, Ргасбсе аиб ^еоту о£ Епхуте Иптипоа^аух, уо1 15 (Еб§ Я.Н. Вигбоп аиб Р.Н. уаи КшрреиЬегд, Е18еу1ег, Ат§!егбат); 2о1а, 1987, Моиос1оиа1 АибЬобхек: А Маииа1 о£ ΤесЬи^^ие8, рр. 147158 (СЯС Рге88, ]ис.); 1а1каиеи е! а1., 1985, 1. Се11. Вю1. 101: 976-985; 1а1каиеи е! а1., 1987, 1. Се11 Вю1. 105: 3087-3096). Обнаружение Ш-ПЯА можно проводить т у1уо или т уйго.
Применение для диагностики по данному описанию включает применение антигенсвязывающих белков для детекции (обнаружения) экспрессии ГЕ-17ЯА и связывания лигандов с ГЕ-17ЯА. Примеры методов, применимых для детекции присутствия ГЕ-17ЯА, включают иммуноанализы, такие как твердофазный иммуноферментный анализ (ЕЫЗА) и радиоиммуноанализ (ША).
При применении с целью диагностики антигенсвязывающий белок метят детектируемой группой для мечения (меткой). Подходящие группы для мечения (метки) включают, но без ограничения, следующие: радиоизотопы или радионуклиды (например, 3Н, 14С, 15Ν, 35δ, 90Υ, 99Τα 111Тп, 125Ι, 131Ι), флуоресцентные группы (например, ΕΙΤΕ, родамин, люминофоры, содержащие лантаниды), группы ферментов (например, пероксидаза хрена, β-галактозидаза, люцифераза, щелочная фосфатаза), хемилюминесцентные группы, биотинильные группы или заданные эпитопы полипептидов, распознаваемые вторичным репортёром (например, пары последовательностей лейциновой молнии, сайты связывания вторичных антител, металл-связывающие домены, эпитопные метки). В некоторых вариантах изобретения группы для мечения связываются с антигенсвязывающим белком с помощью спейсеров различной длины, чтобы уменьшить возможные пространственные затруднения. Различные методы введения метки в белки известны в уровне техники и могут использоваться при воплощении настоящего изобретения.
Один аспект изобретения включает идентификацию клетки или клеток, которые экспрессируют ЕЬ17ЯА. В конкретном варианте изобретения антигенсвязывающий белок метят группой для мечения и детектируют связывание меченого антигенсвязывающего белка с ГЕ-17ЯА. В другом конкретном варианте изобретения связывание меченого антигенсвязывающего белка с ГЕ-17ЯА детектируют т у1уо. В другом конкретном варианте изобретения антигенсвязывающий белок - ГЕ-17ЯА выделяют и определяют (количество) методами, известными в уровне техники. См., например, Наг1оте аиб Ьаие, 1988, АиНЬобхек: А ЬаЬога!огу Маииа1., №\ν Υо^к: Со1б 8рпид НагЬог (еб. 1991 аиб репобю 5ирр1етеп15); 1оНп Е. СоНдап, еб., 1993, Сиггеи! Рго!осо1§ Ш Ептипо^ду №\ν Υо^к: До11п ^11еу & 8ои§.
Другой аспект изобретения включает обнаружение (детекцию) присутствия тестируемой молекулы,
- 79 019397 которая конкурирует за связывание с ГО-17КА с антигенсвязывающими белками по изобретению. Пример такого анализа включает определение количества свободного антигенсвязывающего белка в растворе, содержащем некое количество ГО-17КА, в присутствии или в отсутствие тестируемой молекулы. Повышение количества свободного антигенсвязывающего белка (т.е. антигенсвязывающего белка, не связанного с ГО-17КА) будет указывать на то, что тестируемая молекула способна конкурировать за связывание с ГО-17КА с антигенсвязывающим белком. В одном варианте изобретения антигенсвязывающий белок метят группой для мечения. Или же метят тестируемую молекулу и проверяют количество свободной тестируемой молекулы в присутствии и в отсутствие антигенсвязывающего белка.
Аспекты изобретения включают применение антигенсвязывающих белков для ГО-17КА в 1и νίΐτο анализах с исследовательской целью, такой как ингибирование продуцирования молекул, таких как: ΙΕ-6, Ш-8, СХСБ1, СХСЕ2, 6М-С8Р, 6-С8Р, М-С8Р, ΙΕ-1β, 'ЖРа, КАХК-Р, БЖ, Р6Е2, Ш-12, ММР (таких, но без ограничения, как ММР3 и ММР9), СК0а, N0 и/или С-телопептид и т.п. Антитела, специфические к Ш-17КА, можно применять, например, для очистки ГО-17КА белков иммуноаффинной хроматографией.
Методы лечения. Фармацевтические препараты, способы применения
В некоторых вариантах изобретение включает фармацевтические композиции, содержащие терапевтически эффективное количество одного или нескольких антигенсвязывающих белков по изобретению вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем, носителем, солюбилизирующим агентом, эмульгатором, консервантом и/или адъювантом. Кроме того, изобретение включает методы лечения пациента путём введения фармацевтической композиции. Термин пациент включает человека и животных.
Фармацевтические композиции, содержащие один или более антигенсвязывающих белков, можно применять для снижения активности Ш-17КА Фармацевтические композиции, содержащие один или более антигенсвязывающих белков, можно применять при лечении последствий, симптомов и/или патологии, ассоциированных с активностью Ш-17КА Фармацевтические композиции, содержащие один или более антигенсвязывающих белков, можно применять в методах ингибирования связывания и/или передачи сигнала Ш-17А и/или ΙΌ-17Ε рецептору ГО-17КА, заключающихся в предоставлении антигенсвязывающего белка по изобретению рецептору Ш-17КА В некоторых вариантах изобретения антигенсвязывающий белок ингибирует связывание Ш-17А и/или ΙΌ-17Ε с рецептором ГО-17КА и/или передачу сигнала Ш-17А и/или ΙΌ-17Ε рецептору ГО-17КА. В дополнительных вариантах изобретения фармацевтические композиции, содержащие один или более антигенсвязывающих белков, можно применять в методах ингибирования связывания ГО-17А, но не ΙΌ-17Ε с рецептором ГО-17КА и/или передачи сигнала ГО-17А, но не Ш-17Р, рецептору ГО-17КА. В других вариантах изобретения фармацевтические композиции, содержащие один или более антигенсвязывающих белков, можно применять в методах ингибирования связывания ΙΌ-17Ε, но не ГО-17А, с рецептором Ш-17КА и/или передачу сигнала ГО-17Р, но не ГО-НА, рецептору Ш-17КА Аспекты изобретения включают антитела, которые специфически связываются с человеческим Ш-17КА и ингибируют связывание и активирование ГО-17КА или гетеромерного комплекса ГОНКА и ГО-17КС с помощью ГО-17А и/или ΙΌ-17Ε. Аспекты изобретения включают антитела, которые специфически связываются с человеческим ГО-17КА и ингибируют связывание ГО-17КА или гетеромерного комплекса ГО-17КА и ГО-17КС с гетеромером ГО-17А/ГО-17Р. Понятно, что когда в ходе описания даётся ссылка на ингибирование ГО-17А и/или ΙΌ-17Ε, оно (ингибирование) также включает ингибирование гетеромеров ГО-17А и ΙΌ-17Ε. Аспекты изобретения включают антитела, которые специфически связываются с человеческим ГО-17КА и частично или полностью ингибируют образование рецептором ГО17КА либо гомомерного, либо гетеромерного функционального рецепторного комплекса, такого, но без ограничения, как комплекс ГО-НКА- ГО-17КС. Аспекты изобретения включают антитела, которые специфически связываются с человеческим ГО-17КА и частично или полностью ингибируют образование рецептором ГО-17КА либо гомомерного, либо гетеромерного функционального рецепторного комплекса, такого, но без ограничения, как комплекс ГО-17КА/ГО-17КС, и необязательно ингибируют связывание ГОНА и/или ΙΗ-17Ε или гетеромера ГО-17А/Ш-17Р с ГО-17КА или с гетеромерным рецепторным комплексом ГО-17КА.
Фармацевтические композиции, содержащие один или более антигенсвязывающих белков, можно применять в методах лечения последствий, симптомов и/или патологии, ассоциированных с активностью ГО-17КА. Фармацевтические композиции, содержащие один или более антигенсвязывающих белков, можно применять в методах ингибирования продуцирования одного или более соединений из группы, состоящей из цитокина, хемокина, матриксной металлопротеиназы или другой молекулы, ассоциированной с активацией ГО-КА, заключающихся во введении антигенсвязывающего белка для ГО-КА. Фармацевтические композиции, содержащие один или более антигенсвязывающих белков, можно применять в методах ингибирования продуцирования ГО-6, ГО-8, 6М-С8Р, N0, ММР, Р6Е2 КАМКЕ и/или Стелопептида и т.п.
Фармацевтические композиции, содержащие один или более антигенсвязывающих белков, можно применять для лечения заболеваний и состояний, включая но без ограничения, воспалительное, аутоиммунное заболевание, воспаление хряща и/или разрушение кости, артрит, ревматоидный артрит, юве
- 80 019397 нильный артрит, ювенильный ревматоидный артрит, пауциартикулярный ювенильный ревматоидный артрит, полиартикулярный ювенильный ревматоидный артрит, системный ювенильный ревматоидный артрит, ювенильный анкилозирующий спондилит, ювенильный энтеропатический артрит, ювенильный реактивный артрит, ювенильный синдром Рейтера, синдром 8ΕΑ (синдром серонегативной энтезопатии и артропатии), ювенильный дерматомиозит, ювенильный псориатический артрит, ювенильную склеродермию, ювенильную системную красную волчанку, ювенильный васкулит, пауциартикулярный ревматоидный артрит, полиартикулярный ревматоидный артрит, системный ревматоидный артрит, анкилозирующий спондилит, энтеропатический артрит, реактивный артрит, синдром Рейтера, синдром 8ΕΑ (синдром серонегативной энтезопатии и артропатии), дерматомиозит, псориатический артрит, склеродермию, васкулит, миелит, полимиелит, дерматомиозит, остеоартрит, нодозный полиартериит, гранулёматоз Вегенера, артериит, ревматическую полимиалгию, саркоидоз, склероз, первичный билиарный склероз, склерозирующий холангит, синдром Шёгрена, псориаз, бляшечный (пятнистый) псориаз, каплевидный псориаз, обратный псориаз, пустулёзный псориаз, эритродермический псориаз, дерматит, атопический дерматит, атеросклероз, волчанку, болезнь Стилла, системную красную волчанку (8ΕΕ), тяжёлую псевдопаралитическую миастению, воспалительное заболевание кишечника (ΙβΌ). болезнь Крона, язвенный колит, глютеновую болезнь, рассеянный склероз (Μ8), астму, С0РЭ (хроническую препятствующую лёгочную болезнь), болезнь Гийена- Барре, сахарный диабет типа ΙΙ, болезнь Грейвса, болезнь Аддисона, феномен Рейно, аутоиммунный гепатит, ΟνΗΌ (трансплантат-против хозяина) и т.п.
Предпочтительно приемлемые материалы рецептуры являются нетоксическими для реципиентов в применяемых дозах и концентрациях. В конкретных вариантах изобретения предусмотрены фармацевтические композиции, содержащие терапевтически эффективное количество антигенсвязывающих белков для ΙΕ-17ΚΑ.
В некоторых вариантах изобретения приемлемые составляющие материалы (рецептуры) предпочтительно являются нетоксическими для реципиентов в применяемых дозах и концентрациях. В конкретных вариантах изобретения фармацевтическая композиция может содержать составляющие материалы для модификации, поддержания или сохранения, например, рН, осмолярности, вязкости, прозрачности, цвета, изотоничности, запаха, стерильности, стабильности, скорости растворения или высвобождения, всасывания или проникновения композиции. В таких вариантах изобретения подходящие составляющие рецептуру материалы включают, но без ограничения, аминокислоты (такие как глицин, глутамин, аспарагин, аргинин или лизин); противомикробные агенты; антиоксиданты (такие как аскорбиновая кислота, сульфит натрия или гидросульфит натрия); буферы (такие как борат, бикарбонат, Трис-НС1, цитраты, фосфаты или другие органические кислоты); наполнители (такие как маннит или глицин); хелатирующие агенты (такие как этилендиаминтетрауксусная кислота (ΕΌΤΑ)), комплексообразующие агенты (такие как кофеин, поливинилпирролидон, бета-циклодекстрин или гидроксипропил-бета-циклодекстрин); моносахариды; дисахариды; и другие углеводы (такие как глюкоза, манноза или декстрины); белки (такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины); красители, корригенты и разбавители; эмульгаторы; гидрофильные полимеры (такие как поливинилпирролидон); низкомолекулярные полипептиды; солеобразующие противоионы (такие как натрий); консерванты (такие как бензалкония хлорид, бензойная кислота, салициловая кислота, тимеросал, фенетиловый спирт, метилпарабен, пропилпарабен, хлоргексидин, сорбиновая кислота или пероксид водорода); растворители (такие как глицерин, пропиленгликоль или полиэтиленгликоль); сахара (углеводы, такие как маннит или сорбит); суспендирующие агенты; поверхностно-активные или увлажняющие агенты (такие как плуроникс, ПЭГ, сложные эфиры сорбитана, полисорбаты, такие как полисорбат 20, полисорбат, тритон, трометамин, лецитин, холестерин, тилоксапал); агенты, повышающие стабильность (такие как сахароза или сорбит); агенты, повышающие тоничность раствора (такие как галогениды щелочных металлов, предпочтительно, хлориды натрия или калия, маннит, сорбит); носители для доставки; разбавители; эксципиенты и/или фармацевтические адъюванты. См., КеттдФп'к ρйа^тасеиΐ^са1 каепсек, 18 ГЙ1Цоп (Α.Κ Сепгто, ей.), 1990, Μаск РиЬйкЫпд Сотρаηу.
В некоторых вариантах изобретения оптимальную фармацевтическую композицию определяет специалист в данной области техники в зависимости, например, от предполагаемого пути введения, формата доставки и заданной дозы. См., Кеттд1оп'8 ρйа^тасеи1^са1 каепсек, ыфга. В некоторых вариантах изобретения такие композиции могут влиять на физическое состояние, стабильность, скорость ш у1уо клиренса антигенсвязывающих белков по изобретению. В некоторых вариантах изобретения первичный переносчик или носитель в фармацевтической композиции может быть либо водным, либо неводным по природе. Например, подходящий переносчик или носитель может представлять собой воду для инъекций, физиологический солевой раствор или искусственную спинномозговую жидкость, возможно, дополненные другими материалами, обычными в композициях для парентерального введения. Нейтральный буферный солевой (физиологический) раствор или физиологический раствор в смеси с сывороточным альбумином являются другими примерами носителей. В специфических вариантах изобретения фармацевтические композиции содержат Трис буфер с рН около 7.0-8.5 или ацетатный буфер с рН около 4.0-5.5 и, кроме того, могут включать сорбитол или его подходящий заместитель. В некоторых вариантах изобретения композиции антигенсвязывающих белков для ΙΕ-17Κ можно приготовить для хранения,
- 81 019397 смешивая выбранную композицию нужной степени чистоты с дополнительными агентами, входящими в рецептуру (КеттдЮп'к рйагтасеийса1 каепсек, кирга) в виде лиофилизированного порошка или водного раствора. Помимо этого, в некоторых вариантах изобретения продукт антигенсвязывающего белка для Ш-17КА можно приготовить в виде лиофилизата, используя подходящие эксципиенты, такие как сахароза.
Фармацевтические композиции по изобретению можно выбирать для парентеральной доставки. Или же композиции можно выбирать для ингаляции или для доставки через пищеварительный тракт, а именно, перорально. Приготовление таких фармацевтически приемлемых композиций известно специалисту в данной области техники.
Предпочтительно компоненты препарата (рецептуры) присутствуют в концентрациях, подходящих для места введения. В некоторых вариантах изобретения используют буферы для поддержания физиологического значения рН композиции или значения рН композиции немного ниже физиологического, обычно в интервале рН около 5-8.
Если рассматривается парентеральное введение, терапевтические композиции для применения по настоящему изобретению могут предусматриваться в виде апирогенного парентерально приемлемого водного раствора, содержащего нужный антигенсвязывающий белок для Ш-17КА в фармацевтически приемлемом носителе. Особенно подходящим носителем для парентеральной инъекции является стерильная дистиллированная вода, в которой антигенсвязывающий белок для Ш-17КА готовят в виде соответствующим образом стабилизированного изотонического раствора. В некоторых вариантах изобретения препарат может включать состав заданной молекулы с агентом, таким как инъецируемые микросферы, биорасщепляемые частицы, полимерные соединения (такие как полимолочная или полигликолевая кислота), гранулы (шарики, бусины) или липосомы, могущие обеспечить регулируемое или пролонгированное высвобождение продукта, который можно доставлять с помощью депо-инъекции. В некоторых вариантах изобретения можно использовать гиалуроновую кислоту, вызывающую эффект стимулирования пролонгированного действия при циркуляции. В некоторых вариантах изобретения для введения заданного антигенсвязывающего белка можно использовать имплантируемые средства доставки лекарств.
Фармацевтические композиции по изобретению можно приготовить для ингаляции. В этих вариантах изобретения антигенсвязывающие белки для Ш-17КА преимущественно готовят в виде сухого порошка для ингаляций. В специфических вариантах изобретения ингаляционные растворы антигенсвязывающего белка для Ш-17КА можно приготовить также с газом-вытеснителем для доставки в виде аэрозоля. В некоторых вариантах изобретения можно распылять растворы. Введение в лёгкие и методы приготовления соответствующих препаратов подробнее описаны в уеждународной патентной заявке №. РСТ/ИБ94/001875, которая вводится в данное описание в качестве ссылки и описывает доставку в лёгкие химически модифицированных белков. Также рассматривается пероральное введение препаратов. Антигенсвязывающие белки для Ш-17КА, которые вводятся таким образом, можно приготовить с носителями или без носителей, которые обычно применяются при составлении твёрдых лекарственных форм, таких как таблетки и капсулы. В некоторых вариантах изобретения можно приготовить капсулу для высвобождении активной части препарата в той точке желудочно-кишечного тракта, где биодоступность максимальна, а пресистемный метаболизм минимален. Можно включать добавки, содействующие всасыванию антигенсвязывающего белка для Ш-17КА. Можно применять также разбавители, корригенты, низкоплавкие воски, растительные масла, смазки, суспендирующие агенты, агенты, измельчающие таблетки, и связующие.
Фармацевтическую композицию по изобретению предпочтительно готовят таким образом, чтобы она содержала эффективное количество одного или нескольких антигенсвязывающих белков для Ш17КА в смеси с нетоксическими эксципиентами, пригодными для выпуска в виде таблеток. Растворяя таблетки в стерильной воде или другом подходящем носителе, можно приготовить растворы в виде разовой дозы. Подходящие эксципиенты включают, но без ограничения, инертные разбавители, такие как карбонат кальция, карбонат или бикарбонат натрия, лактозу или фосфат кальция; или связующие, такие как крахмал, желатин или аравийскую камедь; или смазки, такие как стеарат магния, стеариновая кислота или тальк.
Дополнительные фармацевтические композиции очевидны для специалистов в данной области техники, включая препараты, содержащие антигенсвязывающие белки для Ш-17КА в препаратах с пролонгированной или контролируемой доставкой. Методы приготовления различных других средств для пролонгированной или контролируемой доставки, такие как липосомные носители, биоразрушаемые микрочастицы или пористые гранулы (бусины) и депо-инъекции, также известны специалистам в данной области техники. См., например, международную патентную заявку №. РСТ/ИБ93/00829, которая вводится в данное описание в качестве ссылки и в которой описываются контролируемое высвобождение из пористых полимерных микрочастиц для доставки фармацевтических композиций. Препараты пролонгированного действия могут включать полупроницаемые полимерные матрицы в виде профилированных изделий, например, плёнок или микрокапсул. Матрицы для пролонгированного высвобождения могут включать полиэфиры, гидрогели, полилактиды (раскрываемые в патенте США №. 3773919 и в опубли
- 82 019397 кованной Европейской патентной заявке ЕР 058481, каждая из этих заявок вводится в данное описание в качестве ссылки), сополимеры Ь-глутаминовой кислоты и гамма-этил-Ь-глутамата (8^йтаη е! а1., 1983, В1оро1утегк 2: 547- 556), поли (2- гидроксиэтилэтакрилат) (^аηде^ е! а1., 1981, Б. Вютей. МаБег. Яек. 15: 167-277 и ^аηде^ еБ а1., 1982, СЕет. ТесЕ. 12: 98- 105), этиленвинилацетат (^аηде^ еБ а1., 1981, см. выше) или поли-(О)(-)-3-гидроксимасляную кислоту (опубликованная Европейская патентная заявка Νο. ЕР 133988). Композиции с пролонгированным высвобождением могут также включать липосомы, которые можно приготовить любым из некоторых методов, известных в уровне техники. См., например, ЕрркБет еБ а1., 1985, Ргос. №111. Асай. 8сБ ИЗА 82: 3688-3692; опубликованные Европейские патентные заявки Νο. ЕР 036676; ЕР 088046 и ЕР 143949, вводимые в данное описание в качестве ссылок.
Фармацевтические композиции, применяемые для ίη νίνο введения, обычно применяют в виде стерильных препаратов. Стерилизацию можно осуществлять фильтрацией через стерильные фильтрационные мембраны. Если композиция является лиофилизированной, стерилизацию этим методом можно проводить либо до, либо после лиофилизации и реконституции. Композиции для парентерального введения могут храниться в лиофилизированном виде или в виде раствора. Парентеральные композиции обычно помещают в контейнер, имеющий стерильное входное отверстие, например пакет для раствора для внутривенного вливания или виала с пробкой, проницаемой для гиподермической инъекционной иглы.
Аспекты изобретения включают самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающих белков для I^-17ЯΛ, которые можно использовать в виде фармацевтических композиций, описанных в Международной патентной заявке νΟ 016138181А2 (РСТ/и82006/022599), которая вводится в данное описание ссылкой во всей полноте. В одном варианте изобретения предусматриваются самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающих белков для I^-17ЯΛ с общей концентрацией соли менее 150 мМ.
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для I^-17ЯΛ и один или более полно лов и/или одно или более поверхностно-активных веществ. Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для ΙΕ17ЯА с общей концентрацией соли менее 150 мМ, который дополнительно содержит один или более эксципиентов, включая, но без ограничения, фармацевтически приемлемые соли; агенты, регулирующие осмотическое давление (агенты, регулирующие тоничность); поверхностно- активные вещества, полиолы, антиоксиданты; антибиотики; противогрибковые вещества; наполнители; лиопротекторы; пеногасители; хелатирующие агенты; консерванты; красители и анал(ь)гетики. Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для ΙΕ- 17ЯА, содержащие антигенсвязывающий белок для Б^-17ЯΛ и один или более фармацевтически активных агентов.
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Б^-17ЯΛ, содержащие антигенсвязывающий белок для Б^-17ЯΛ, отличающиеся тем, что величина буферной ёмкости антигенсвязывающего белка для Б^-17ЯΛ на единицу объёма на единицу рН равна буферной ёмкости по меньшей мере примерно: 2.0, или 3.0, или 4.0, или 5.0, или 6.50, или 8.00, или 10.0, или 15.0, или 20.0, или 30.0, или 40.0, или 50.0, или 75.0, или 100, или 125, или 150, или 200, или 250, или 300, или 350, или 400, или 500, или 700, или 1000, или 1500, или 2000, или 2500, или 3000, или 4000, или 5000 мМ натрий-ацетатного буфера в чистой воде в интервале рН 5.0-4.0 или рН 5.0-5.5, или по меньшей мере 2.0 мМ, или по меньшей мере 3.0 мМ, или по меньшей мере 4.0 мМ, или по меньшей мере 5.0 мМ, или по меньшей мере 7.5 мМ, или по меньшей мере 10 мМ, или по меньшей мере 20 мМ.
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Б^-17ЯΛ, отличающиеся тем, что за вычетом буферной ёмкости белка буферная ёмкость препарата на единицу объёма на единицу рН равна или менее буферной ёмкости 1.0, или 1.5, или 2.0, или 3.0, или 4.0, или 5.0 мМ натрий-ацетатного буфера в чистой воде в интервале рН 5.0-4.0 или рН 5.0-5.5, или при необходимости менее буферной ёмкости рН 1.0 мМ, при необходимости менее буферной ёмкости 2.0 мМ, при необходимости менее буферной ёмкости 2.5 мМ, при необходимости менее буферной ёмкости 3.0 мМ, при необходимости менее буферной ёмкости 5.0 мМ.
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Б^-17ЯΛ, содержащие антигенсвязывающий белок для Б^-17ЯΛ, отличающиеся тем, что в интервале плюс-минус 1 единица от рН препарата буферная ёмкость антигенсвязывающего белка для Б^-17ЯΛ равна примерно: 1.00, или 1.50, или 1.63, или 2.00, или 3.00, или 4.00, или 5.00, или 6.50, или 8.00, или 10.0, или 15.0, или 20.0, или 30.0, или 40.0, или 50.0, или 75.0, или 100, или 125, или 150, или 200, или 250, или 300, или 350, или 400, или 500, или 700, или 1000, или 1500, или 2000, или 2500, или 3000, или 4000, или 5000 мэкв на литр на единицу рН, при необходимости по меньшей мерепримерно 1.00, при необходимости по меньшей мере примерно 1.50, при необходимости по меньшей мере примерно 1.63, при необходимости по меньшей мере примерно 2.00, при необходимости по меньшей мере примерно, 3.00, при необходимости по меньшей мере примерно 5.0 при необходимости по меньшей мере примерно 10.0 и при необходимости по меньшей мере примерно 20.0. Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Б^-17ЯΛ, содержащие антигенсвязывающий белок для Б^-17ЯΛ, отличающиеся тем, что в интервале плюс-минус 1 единица от рН препарата, за вычетом антигенсвязывающего белка для Б^-17ЯΛ, буферная ёмкость препарата на единицу объёма на единицу рН равна или менее буферной ёмкости 0.50, или 1.00, или 1.50, или 2.00, или 3.00, или 4.00, или
- 83 019397
5.00, или 6.50, или 8.00, или 10.0 или 20.0, или 25.0 мМ натрий-ацетатного буфера в чистой воде в интервале рН 5.0-4.0 или рН 5.0-5.5.
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА, содержащие антигенсвязывающий белок для I^-17КΛ. отличающиеся тем, что в интервале плюс-минус 1 единица от нужного рН белок обеспечивает по меньшей мере примерно, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 97, 98, 99 или 99.5% буферной ёмкости препарата при необходимости по меньшей мере примерно 75%, при необходимости по меньшей мере примерно 85%, при необходимости по меньшей мере примерно 90%, при необходимости по меньшей мере примерно 95%, при необходимости по меньшей мере примерно, 99% буферной ёмкости препарата.
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА, содержащие антигенсвязывающий белок для I^-17КΛ. отличающиеся тем, что концентрация антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА находится, примерно, между 20 и 400, или 20 и 300, или 20 и 250, или 20 и 200, или 20 и 150 мг/мл, при необходимости, примерно, между 20 и 400 мг/мл, при необходимости, примерно, между 20 и 250 мг/мл и при необходимости примерно между 20 и 150 мг/мл.
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА, содержащие антигенсвязывающий белок для ^-17^^, отличающиеся тем, что рН поддерживается за счёт буферного действия антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА, примерно между: 3.5 и 8.0, или 4.0 и 6.0, или 4.0 и 5.0, необязательно (при необходимости), примерно между 3.5 и 8.0, и необязательно (при необходимости), примерно между 4.0 и 5.5.
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА, содержащие антигенсвязывающий белок для I^-17КΛ. отличающиеся тем, что концентрация соли составляет менее: 150 мМ, или 125 мМ, или 100 мМ, или 75 мМ, или 50 мМ, или 25 мМ, необязательно (при необходимости), 150 мМ, при необходимости 100 мМ, при необходимости 75 мМ, при необходимости 50 мМ и при необходимости 25 мМ.
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА, содержащие антигенсвязывающий белок для Ш-ПКА и одну или более фармацевтически приемлемых эксципиентов: фармацевтически приемлемые соли; полиолы; поверхностно-активные вещества; агенты, регулирующие осмотическое давление; агенты, регулирующие тоничность; антиоксиданты; антибиотики; противогрибковые вещества; наполнители; лиопротекторы; пеногасители; хелатирующие агенты; консерванты; красители; анал(ь)гетики или фармацевтические добавки.
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА, содержащие антигенсвязывающий белок для Ш-ПКА и один или более фармацевтически приемлемых полиолов в количестве, которое обеспечивает гипотоничность, изотоничность или гипертоничность раствора, предпочтительно, изотоничность, таких, но без ограничения, как один или более из полиолов: сорбита, маннита, сахарозы, трегалозы или глицерина, необязательно примерно 5% сорбита, 5% маннита, 9% сахарозы, 9% трегалозы или 2.5% глицерина.
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА, содержащие антигенсвязывающий белок для ^-17^^, дополнительно содержащие поверхностно-активное вещество, предпочтительно, один или более из полисорбата 20, полисорбата 80, других сложных эфиров жирных кислот и сорбитана, полиэтоксилатов и полоксамера 188, предпочтительно полисорбат 20 или полисорбат 80, необязательно, около 0.001-0.1% полисорбата 20 или полисорбата 80, необязательно, около 0.002-0.02% полисорбата 20 или полисорбата 80 или, необязательно, 0.0020.2% полисорбата 20 или полисорбата 80.
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА, содержащие антигенсвязывающий белок для ^-17^^, отличающиеся тем, что препараты являются стерильными и пригодными для лечения человека или иного (нечеловеческого) субъекта.
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА, содержащие антигенсвязывающий белок для Ш-ПКА и растворитель, причём антигенсвязывающий белок для Ш-ПКА имеет буферную ёмкость на единицу объёма на единицу рН, по меньшей мере, такую как буферная ёмкость 4.0 мМ раствора ацетата натрия в воде в интервале рН 5.0-4.0 или рН 5.0-5.5, причём буферная ёмкость на единицу объёма препарата за вычетом антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА равна или менее буферной ёмкости 2.0 мМ раствора ацетата натрия в тех же интервалах, предпочтительно определяемых тем же способом.
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА, содержащие антигенсвязывающий белок для Ш-ПКА и растворитель, причём при рН препарата буферная ёмкость белка составляет по меньшей мере 1.63 мэкв на литр при изменении рН на плюс-минус 1 единицу рН, при этом буферная ёмкость препарата, за вычетом белка, равна или менее 0.81 мэкв на литр при рН препарата, изменяющемся на плюс-минус 1 единица рН.
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА, содержащие антигенсвязывающий белок для I^-17КΛ. отличающиеся тем, что препарат находится в виде лиофилизата, который при реконституции даёт препарат по любому из выше- или нижеприведённых вариантов изобретения.
- 84 019397
Один вариант изобретения включает самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для №17^ в наборе, включающем одну или более виал, содержащих самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для I^-17ЯΛ по любому из выше- или нижеприведённых вариантов изобретения и инструкции, относящиеся к их применению.
Один вариант изобретения включает способ приготовления самобуферизующегося препарата антигенсвязывающего белка для I^-17ЯΛ или его лиофилизата по любому из выше- или нижеприведённых вариантов изобретения, содержащий удаление остаточного буфера с применением противоиона.
Один вариант изобретения включает способ приготовления самобуферизующегося препарата антигенсвязывающего белка для I^-17ЯΛ или его лиофилизата по любому из выше- или нижеприведённых вариантов изобретения, содержащий удаление остаточного буфера в присутствии противоиона с применением одного или более следующих методов: хроматография, диализ и/или тангенциальная (проточная) фильтрация.
Один вариант изобретения включает способ приготовления самобуферизующегося препарата антигенсвязывающего белка для I^-17ЯΛ или его лиофилизата по любому из выше- или нижеприведённых вариантов изобретения, содержащий удаление остаточного буфера с применением проточной (тангенциальной) фильтрации.
Один вариант изобретения включает способ приготовления самобуферизующегося препарата антигенсвязывающего белка для I^-17ЯΛ или его лиофилизата по любому из выше- или нижеприведённых вариантов изобретения, содержащий стадию диализа против раствора с рН ниже или выше рН препарата и, при необходимости, последующую корректировку рН добавлением разбавленной кислоты или разбавленного основания.
Как обсуждается выше, некоторые варианты изобретения включают самобуферизующиеся композиции антигенсвязывающего белка для I^-17ЯΛ, в частности, фармацевтические композиции антигенсвязывающего белка для I^-17КΛ, которые содержат, помимо антигенсвязывающего белка для I^-17ЯΛ, один или более эксципиентов, таких как эксципиенты, наглядно описанные в данном разделе и в другом месте данного описания. Эксципиенты можно использовать в данном изобретении для весьма различных задач, таких как корректировка физических, химических или биологических свойств препаратов, такая как корректировка вязкости, и/или в способах по изобретению для улучшения эффективности и/или для стабилизации таких препаратов и процессов к расщеплению и порче вследствие, например, стрессов, воздействий в процессе производства, при перевозке, хранении, подготовке к употреблению, введении и после этого.
Имеются различные описания материалов и методов стабилизации и приготовления препаратов белков, применимые в данном случае, такие как Агаката е! а1., Бокеп! т!егас!юпк т рйагтасеийса1 Гогтц1айопк, РНагт Яек. 8(3): 285-91 (1991); Кепйпск е! а1., Рйукюа1 к1аЫГОа1юп оГ рго!етк ш асщеоик ко1ийоп, 1п: Яа!юпа1 йейдп оГ к!аЬ1е рго!ет Гогтц1а!юпк: Кеогу апй ргасйсе, Сагреп!ег апй Маптпд, ейк. РНагтасеи!1са1 Вю!есйпо1оду. 13: 61-84 (2002), и Яапйо1рй е! а1., БигГас1ап!-рго!ет 1п(егас(1опк, РНагт Вю!есНпо1. 13: 159- 75 (2002), каждый из этих материалов вводится в данное описание ссылкой во всей полноте, в частности, в части, относящейся к эксципиентам и их применению в приготовлении самобуферизующихся препаратов белков по настоящему изобретению, в особенности фармацевтических продуктов белков, и к способам применения в ветеринарии и/или для лечения людей.
Различные эксципиенты, применимые по изобретению, приводятся в табл. 3 и подробнее описываются ниже.
Таблица 3. Типы эксципиентов и их функции
- 85 019397
Тип Функция
Жидкости Лиофилизаты
Агенты, регулирующие тоничность/ стабилизаторы Сообщают изотоничность препарату, так что он становится готов для инъецирования Примеры включают полиолы, соли и аминокислоты Способствуют сохранению белка в более компактном состоянии (полиолы) Минимизируют электростатические, белок- белковые взаимодействия в растворе (соли) Стабилизаторы включают крио и лиопротекторы Примеры включают полиолы, сахара и полимеры Криопротекторы защищают белки от стрессов при замораживании Лиопротекторы стабилизируют белки в лиофилизированном состоянии
Наполнители Не применимы Применяют для улучшения внешнего вида продукта и для предупреждения выброса Сообщают прочность структуре лиофилизированного порошка Примеры включают маннит и глицин
Поверхностно- активные вещества Предупреждают/контролируют агрегацию, образование частиц и адсорбцию на поверхности лекарства Примеры включают полисорбат 20 и 80 Применяют, если агрегация в процессе лиофилизации становится проблемой Могут способствовать уменьшению времени реконституции Примеры включают полисорбат 20 и 80
Антиоксидан ты Контролируют окисление белка Обычно не используются, молекулярные реакции в лиофилизированном порошке очень замедленны
Ионы металлов/ хелатирующие агенты Специфический ион металла включают в жидкий препарат только в качестве кофактора Катионы разбавителей используют в суспензионных препаратах Хелатирующие агенты применяют для ингибирования реакций, катализируемых ионами металлов Могут включаться, если специфический иона металла входит в состав только в качестве кофактора Хелатирующие агенты обычно не требуются в лиофилизированных препаратах
Консерванты Особенно важны для препаратов многократного приёма Предупреждают рост микробов Пример: бензиловый спирт Только для препаратов многократного приёма Обеспечивают защиту препарата от роста микробов Обычно входит в состав разбавителя для реконституции (например, Ь\¥Р1, бактериостатической воды для инъекций)
Соли могут применяться в соответствии с некоторыми вариантами изобретения, например, для корректировки ионной силы и/или изотоничности самобуферизующегося препарата и/или для повышения растворимости и/или физической устойчивости самобуферизующегося белка или другого ингредиента композиции самобуферизующегося белка по изобретению. Как хорошо известно, ионы могут стабилизировать нативное состояние белков за счёт связывания с заряженными остатками на поверхности белков и за счёт экранирования заряженных и полярных групп в белке и уменьшения силы их электростатических взаимодействий, взаимодействий за счёт сил притяжения и отталкивания. Ионы также могут стабилизировать состояние белка, связываясь, в частности, с пептидными связями (-С0NΗ) денатурированными белка. Кроме того, ионное взаимодействие с заряженными и полярными группами в белке может также уменьшить межмолекулярные электростатические взаимодействия и тем самым предотвратить или уменьшить агрегацию и нерастворимость белка.
Ионные частицы заметно различаются по своему действию на белки. Разработано несколько чётких классификаций ионов и их действия на белки, которые можно использовать при приготовлении самобуферизующихся композиций белков по изобретению. Одним из примеров являются ряды Гофмейстера, в которых ионные и полярные неионные растворённые вещества расположены по их влиянию на конформационную стабильность белков в растворе. Стабилизирующие растворённые вещества называются космотропными. Дестабилизирующие растворённые вещества называются хаотропными. Космотропы обычно применяют в высоких концентрациях (например, >1 молярный раствор сульфата аммония) для осаждения белков из раствора (высаливания). Хаотропы обычно используют для улучшения растворимости и/или стабилизации белков (всаливание). Относительная эффективность ионов в процессах всаливания и высаливания определяет их положение в рядах Гофмейстера.
Помимо их полезности и их недостатков (обсуждаемых выше), соли также эффективно уменьшают вязкость белковых препаратов и могут применяться в изобретении с этой целью.
Для сохранения изотоничности препарата для парентерального введения по предпочтительным вариантам изобретения, повышения растворимости и/или стабильности белков и предупреждения опосредованной солями деградации белков, концентрация соли в самобуферизующихся препаратах по различным предпочтительным вариантам изобретения составляет менее 150 мМ (для одновалентных ионов) и 150 мэкв/л для поливалентных ионов. Для этого в некоторых особенно предпочтительных вариантах изобретения общая концентрация соли составляет примерно 75-140 мэкв/л.
- 86 019397
Свободные аминокислоты можно применять в самобуферизующихся препаратах антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА в соответствии с различными вариантами изобретения в качестве наполнителей, стабилизаторов и антиоксидантов, а также для других обычных целей. Однако аминокислоты, входящие в состав самобуферизующихся препаратов антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА, не обеспечивают буферного действия. Поэтому аминокислоты со значительной буферной ёмкостью либо не применяются, не применяются при любом рН, близ которого они имеют значительную буферную активность, либо используются при низкой концентрации, так что в результате их буферная ёмкость в препарате незначительна. Это особенно применимо для гистидина и других аминокислот, которые обычно используют в качестве буферов в фармацевтических препаратах.
С учётом вышеизложенных соображений для стабилизации белков в препарате можно применять лизин, пролин, серин и аланин. Глицин применяют для того, чтобы гарантировать корректную структуру и свойства лиофилизированного порошка. Аргинин можно применять для ингибирования агрегации белка как в жидком, так и в лиофилизированном препарате. Метионин применяют в качестве антиоксиданта.
Полиолы включают сахара (углеводы), например маннит, сахарозу и сорбит и многоатомные спирты, например, такие как глицерин и пропиленгликоль, и для обсуждаемых в данном описании целей, полиэтиленгликоль (ПЭГ) и родственные вещества. Полиолы являются космотропными. Они являются полезными стабилизаторами как в жидких, так и в лиофилизированных препаратах, применяемыми для защиты белков от физического и химического разложения. Полиолы применяются для корректировки тоничности препаратов.
Среди полиолов, применимых в выбранных вариантах изобретения, маннит, обычно применяемый для гарантии структурной стабильности порошка в лиофилизированном препарате. Он гарантирует структурную устойчивость порошка. Обычно его применяют с лиопротектором, например сахарозой. Сорбит и сахароза представляют собой одни из предпочтительных агентов для корректировки тоничности и в качестве стабилизаторов для защиты против стрессов в процессе замораживания-оттаивания при транспортировке или приготовлении наполнителей в процессе производства. Сахара-восстановители (которые содержат свободную альдегидную или кетогруппу), такие как глюкоза и лактоза, могут гликозилировать поверхностные остатки лизина и аргинина. Поэтому они не являются предпочтительными полиолами для применения по изобретению. Кроме того, сахара, которые образуют такие реакционноспособные частицы, такие как сахароза, которая в кислой среде гидролизуется до фруктозы и глюкозы, а затем вызывает гликозилирование, и по этой причине также не является предпочтительной аминокислотой по изобретению. ПЭГ применим для стабилизации белков и в качестве криопротектора и может применяться в изобретении для этой цели, как в Рекомбинант®.
Варианты самобуферизующихся препаратов антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА по изобретению дополнительно содержат поверхностно-активные вещества. Молекулы белка могут быть чувствительны к адсорбции на поверхности и к денатурации и последующей агрегации на разделе поверхностей (интерфейс) воздух-жидкость, твёрдое тело-жидкость и жидкость-жидкость. Эти эффекты обычно увеличиваются обратно пропорционально концентрации белка. Эти неблагоприятные воздействия обычно увеличиваются обратно пропорционально концентрации белка и усиливаются при физическом взбалтывании, например, во время перевозки и хранения продукта.
Поверхностно-активные вещества применяются для предотвращения, минимизации или уменьшения поверхностной адсорбции. В связи с этим применимые в данном изобретении поверхностноактивные вещества включают полисорбат 20, полисорбат 80, полиэтоксилаты сорбитановых эфиров других жирных кислот и полоксамер 188.
Поверхностно-активные вещества обычно применяют для регуляции конформационной устойчивости белков. В силу этого применение поверхностно-активных веществ является специфическим к белку, так как данное поверхностно-активное вещество стабилизирует одни белки и дестабилизирует другие.
Полисорбаты чувствительны к окислительному расщеплению, и часто поставляемые полисорбаты содержат достаточные количества пероксидов, вызывая окисление боковых цепей остатков в белке, в особенности метионина. Следовательно, полисорбаты следует применять с осторожностью, а в случае применения их следует использовать в самой низкой эффективной концентрации. В этом смысле на примере полисорбатов подтверждается правило, что эксципиенты следует применять в их самых низких эффективных концентрациях.
Варианты самобуферизующихся препаратов антигенсвязывающего белка для Ш-ПКА по изобретению дополнительно содержат один или более антиоксидантов. Вредное окисление белков в фармацевтических препаратах до некоторой степени можно предотвратить, поддерживая соответствующее содержание атмосферного кислорода и комнатную температуру и избегая воздействия света. Эксципиентыантиоксиданты можно также использовать для предупреждения окислительного расщепления белков. В силу этого среди применимых антиоксидантов восстановители, поглотители кислорода/свободных радикалов и хелатирующие агенты. Антиоксиданты для применения в терапевтических белковых препаратах по изобретению, предпочтительно, являются водорастворимыми и сохраняют свою активность во время хранения продукта. Для этой цели предпочтительным антиоксидантом по изобретению является ЕЭТА (этилендиаминтетрауксусная кислота), и её можно использовать в изобретении точно так, как она ис
- 87 019397 пользуется в препаратах кислого фактора роста фибробластов и в продуктах, таких как Кинерет® и Онтак®.
Антиоксиданты могут расщеплять белки. Например, восстановители, такие как, в частности, глутатион, могут разрывать внутримолекулярные дисульфидные связи. Так, антиоксиданты для применения по изобретению выбирают среди прочего, так чтобы избежать или значительно уменьшить возможность расщепления ими белков в препаратах.
Препараты по изобретению могут включать ионы металлов, которые являются кофакторами белков и необходимы для образования координационных комплексов белков, так цинк необходим для образования суспензий инсулина. Ионы металлов также могут ингибировать некоторые процессы, в которых расщепляются белки. Однако ионы металлов могут также катализировать физические и химические процессы с расщеплением белков.
Ионы магния (10-120 мМ) можно применять для того, чтобы ингибировать изомеризацию аспарагиновой кислоты а изоаспарагиновую кислоту. Ионы Са+2 (до 100 мМ) могут повышать стабильность человеческой дезоксирибонуклеазы (гИ-ДНКазы, (^й^Nазе), пульмозим, Ри1тοζуте®). Однако ионы Мд+2, Ми+2 и Ζΐ'ΐ'2 могут дестабилизировать гИ-ДНКазу. Аналогично, Са+2 и 8г+2 могут стабилизировать Фактор УШ, он может дестабилизироваться под действием Мд+2, Ми+2 и Ζΐ'ΐ'2, Си+2 и Ре+2, а его агрегация увеличивается под действием ионов А1+3.
Варианты самобуферизующихся препаратов антигенсвязывающего белка для I^-17КΛ по изобретению дополнительно содержат один или более консервантов. Консерванты необходимы при разработке парентеральных препаратов для многоразового приёма, которые включают более одного извлечения из одного и того же контейнера. Их основной функцией является ингибирование роста микробов и гарантия стерильности продукта при хранении или за время применения лекарственного продукта. Обычно применяемые консерванты включают бензиловый спирт, фенол и м-крезол. Хотя консерванты давно применяются в парентеральных препаратах низкомолекулярных веществ, разработка белковых препаратов, которые включают консерванты, может быть трудной. Консерванты почти всегда оказывают дестабилизирующее действие (агрегация) на белки, и это стало основным фактором, ограничивающим их применение в белковых препаратах для многократного введения. До настоящего времени большинство белковых лекарств создано только для разового применения. Однако, когда возможны препараты для многократного применения, их дополнительным преимуществом является удобство для пациента и повышенная конкурентоспособность. Хорошим примером является человеческий гормон роста (ИСн), разработка препаратов которого с консервантами привела к выпуску более удобного устройства - многоразового шприца-ручки для инъекций. По меньшей мере четыре таких устройства в виде шприца-ручки, содержащих препараты ИСн с консервантом, имеются сейчас на рынке. Нордитропин (Nο^й^ΐ^οр^и® (жидкость, ^νο Nο^й^зк)), нутропин (Nи!^οр^и Ар® (жидкость, 6еиеи!есИ) и генотропин (Сем^рт (лиофилизированный - двухкамерный картридж, РИагтааа & ир^Ии)) содержат фенол, тогда как соматроп (8οта!^οре® (Е11 Ы11у)) приготовлен с м- крезолом.
При приготовлении и разработке лекарственных форм с консервантами следует принять во внимание несколько аспектов. Эффективную концентрацию консерванта в лекарственном продукте следует оптимизировать. Это требует тестирования данного консерванта в лекарственной форме в интервале концентраций, которые сообщают эффективность противомикробного действия, не нарушая устойчивость (стабильность) белка. Например, при разработке жидкого препарата рецептора интерлейкина-1 (Типа Ι) был проведён успешный скрининг трёх консервантов с применением дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК, Ό80'). Консерванты оценивали в зависимости от их влияния на устойчивость в концентрациях, применяемых обычно в выпускаемых продуктах.
Как можно было ожидать, разработка жидких препаратов, содержащих консерванты, более трудна, чем лиофилизированньгх препаратов. Обезвожено-замороженные продукты можно лиофилизировать без консервантов, а восстанавливать (проводить реконституцию) с разбавителем, содержащим консервант, во время употребления. Это снижает время контакта консерванта с белком, значительно уменьшая связанные с устойчивостью риски. В случае жидких препаратов эффективность и стабильность консерванта следует сохранять в течение всего периода хранения продукта (18-24 месяца). Важно отметить, что эффективность консерванта следует продемонстрировать в конечной рецептуре, содержащей активное лекарство и все эксципиенты.
Самобуферизующиеся препараты антигенсвязывающего белка для Ш-17КА по изобретению обычно создают для конкретных путей и методов введения, для конкретных вводимых доз и конкретной частоты введения, для конкретного лечения конкретных заболеваний, с интервалами биодоступности и устойчивости, среди прочего.
Так, препараты по изобретению можно создавать для доставки любым подходящим способом, включая, но без ограничения, пероральный, ушной, глазной, ректальный и вагинальный, и парентеральные способы, включая внутривенную и внутриартериальную инъекцию, внутримышечную инъекцию и подкожную инъекцию.
Композиции по изобретению можно получать общеизвестными рутинными методами получения,
- 88 019397 приготовления препаратов и применения белков, в частности, фармацевтических белков. В некоторых предпочтительных вариантах ряда аспектов изобретения методы приготовления композиций включают применение противоионов для удаления остаточных буферных агентов. В данном описании термин противоион обозначает любую полярную или заряженную частицу, которая вытесняет буфер из композиции при её приготовлении. Противоионы, применимые для этой цели, включают, например, глицин, хлорид, сульфат и фосфат. В данном описании термин противоион обозначает практически то же, что и вытесняющий ион.
Остаточные буферные агенты можно удалить, используя для этой цели противоионы, применяя различные хорошо известные методы, включая, но без ограничения, стандартные методы диализа и высокоэффективные методы диффузии через мембрану, такие как тангенциальная проточная диафильтрация. Удаление остаточного буфера с применением противоиона по данному описанию в ряде случаев можно осуществлять эксклюзионной хроматографией.
В этой связи в некоторых родственных предпочтительных вариантах изобретения композиции по изобретению готовят способом, который включает диализ против безбуферного раствора при рН ниже рН препарата, содержащего самобуферизующийся белок. В особенно предпочтительных вариантах изобретения безбуферный раствор содержит противоионы, в частности, такие противоионы, которые способствуют удалению остаточного буфера и не оказывают вредного воздействия на самобуферизующийся белок или его препарат. При этом в других особенно предпочтительных препаратах изобретения после диализа рН препарата доводят до нужного рН разбавленной кислотой или разбавленньм основанием.
В некоторых родственных особенно предпочтительных вариантах изобретения композиции по изобретению готовят способом, который включает тангенциальную проточную диафильтрацию против безбуферного раствора при рН ниже рН препарата, содержащего самобуферизующийся белок. В особенно предпочтительных вариантах изобретения безбуферный раствор содержит противоионы, в частности, такие противоионы, которые способствуют удалению остаточного буфера и не оказывают вредного воздействия на самобуферизующийся белок или его препарат. При этом в других особенно предпочтительных препаратах изобретения после диафильтрации рН препарата доводят до нужного рН разбавленной кислотой или разбавленным основанием.
После приготовления фармацевтической композиции она может храниться в стерильных виалах в виде раствора, суспензии, геля, эмульсии, твёрдого вещества, кристаллического вещества или в виде дегидратированного или лиофилизированного порошка. Такие препараты могут храниться либо в готовом виде, либо в форме (например, лиофилизированной), которую восстанавливают (реконституируют) перед употреблением. Изобретение также включает наборы для получения однократной (разовой) дозы. Каждый набор по изобретению может содержать как первый контейнер с высушенным белком, так и второй контейнер с водным препаратом. В некоторых вариантах данного изобретения предусматриваются наборы, содержащие одно- и многокамерные предварительно заполненные шприцы (например, шприцы с жидкостью или лиофилизатом).
Терапевтически эффективное количество фармацевтической композиции, содержащей антигенсвязывающий белок для ΙΕ-17ΚΑ, для применения зависит, например, от терапевтического контекста (ситуации) и целей. Специалист в данной области техники понимает, что подходящие уровни доз для лечения меняются в зависимости, частично, от доставляемой молекулы, показания для применения антигенсвязывающего белка для ΙΕ-17ΚΑ, способа введения, размера (массы тела, поверхности тела или размера органа) и/или состояния (возраста и общего состояния здоровья) пациента. В некоторых вариантах изобретения клиницист может титровать дозу и модифицировать способ введения для получения оптимального терапевтического эффекта. Интервал типичной дозы может быть, примерно, от 0.1 мкг/кг, примерно, до 30 мг/кг или более, в зависимости от факторов, указанных выше. В конкретных вариантах изобретения доза интервал дозы может составлять примерно от 0.1 мкг/кг, примерно до 30 мг/кг, необязательно от 1 мкг/кг, примерно до 30 мг/кг или от 10 мкг/кг, примерно до 5 мг/кг.
Частота введения доз зависит от фармакокинетических показателей конкретного антигенсвязывающего белка для ΙΕ-17ΚΑ в применяемой рецептуре. Обычно врач назначает введение композиции до тех пор, пока доза не даст нужного эффекта. Следовательно, композицию можно вводить в виде разовой дозы или в виде двух или более доз (которые могут содержать или могут не содержать одинаковое количество заданной молекулы) во времени, или в виде непрерывной инфузии с помощью устройства для имплантации или катетера. Дальнейшее уточнение подходящей дозировки обычно делают специалисты в данной области техники, и это входит в сферу их обычной деятельности. Подходящие дозы можно подтвердить соответствующими данными зависимости доза-эффект. В некоторых вариантах изобретения антигенсвязывающие белки по изобретению можно вводить пациенту в продолжение длительного времени. Постоянный приём антигенсвязывающего белка по изобретению минимизирует побочные иммунные или аллергические реакции, ассоциируемые обычно с антигенсвязывающими белками, которые являются не полностью человеческими, например антитело, специфическое к человеческому антигену, продуцированное в отличном от человека животном, например не полностью человеческое антитело или нечеловеческое антитело, продуцированное в отличном от человека виде.
Путь введения фармацевтической композиции находится в соответствии с известными методами,
- 89 019397 например пероральный, с помощью внутривенной, интраперитонеальной (внутрибрюшинной), интрацеребральной (интрапаренхимной), интрацеребровентрикулярной, внутримышечной, внутриглазной, внутриартериальной, интрапортальной инъекции или инъекции в поражённую ткань; с помощью систем с пролонгируемым высвобождением или имплантационньгх устройств. В некоторых вариантах изобретения композиции можно вводить болюсной инъекцией или непрерывно с помощью инфузии или имплантационных устройств.
Композицию можно также вводить местно (локально), имплантируя мембрану, губку или другой подходящий материал, на котором абсорбирована или в который инкапсулирована заданная молекула. В некоторых вариантах изобретения, в которых используется имплантационное устройство, устройство можно имплантировать в любую подходящую ткань или в любой подходящий орган, а доставка заданной молекулы может осуществляться диффузией, болюсом с регулируемым во времени высвобождением или непрерывным введением.
Может быть целесообразным применять фармацевтические композиции антигенсвязывающего белка для ГО-17КА по изобретению ех у1уо. В таких случаях клетки, ткани или органы, взятые у пациента, экспонируют с фармацевтическими композициями антигенсвязывающего белка для ГО-17КА, после чего клетки, ткани и/или органы последовательно снова имплантируют пациенту.
В частности, антигенсвязывающие белки для ГО-17КА можно доставлять, имплантируя определённые клетки, полученные генетической инженерией, такими методами, как представленные в данном описании, для экспрессии и секреции полипептида. В некоторых вариантах изобретения такие клетки могут быть животными или человеческими клетками и могут быть аутологичными, гетерологичными или ксеногенными. В некоторых вариантах изобретения клетки могут быть иммортализованными. В других вариантах изобретения для уменьшения вероятности иммунологического ответа клетки можно инкапсулировать с целью избежать инфильтрации соседних тканей. В других вариантах изобретения материалами для инкапсулирования, как правило, являются биосовместимые, полупроницаемые полимерные оболочки или мембраны, которые способствуют высвобождению белкового (белковых) продукта (продуктов), но предупреждают разрушение клеток иммунной системой пациента или вредными факторами из соседних тканей.
Все ссылочные материалы, цитируемые в настоящем описании, вводятся однозначно ссылкой во всей полноте.
Примеры
Нижеприведённые примеры, включающие проведённые эксперименты и полученные результаты, приводятся только для иллюстрации и не предполагаются как ограничивающие изобретение.
Пример 1.
Мышей, нокаутированных по ГО-17КА, получают как описано в Υе е! а1., 2001, 1. Ехр. Меб. 194: 519-527 и проверяют на стандартной модели коллаген-индуцированного артрита (ОА). Коротко говоря, клоны геномной ДНК, кодирующей мышиный ГО-17К, выделяют из фаговой библиотеки лямбда фага 129, используя зонд кДНК мышиного ГО-17К, и картируют, применяя сочетание ПЦР, расщепления рестриктазами и анализ последовательностей с помощью депонированных геномных последовательностей, соответствующих ГО-17К локусу на мышиной хромосоме 6 (СепВапк/ЕМВЬ/ППВ1 инвентарный по. АС018559). Вектор, нацеливающий ген, конструируют, заменяя фрагмент 5.7 т.о. геномной последовательности, содержащий экзоны 4-11 (соответствующие нуклеотидам 445-1172 кДНК мышиного ГО-17К), на кассету РСКпео. Кассету тимидинкиназы (МС-ТК) встраивают в 5' конец вектора. 129 эмбриональные стволовые (ЕБ) клетки подвергают электропорации при использовании нацеливающего вектора и отбирают в присутствии С418 и ганцикловира как описано. ЕБ клоны, несущие нацеленную мутацию в ГОПК, идентифицируют, комбинируя ПЦР и геномный Саузерн-блоттинг, и инъецируют в С57ВЬ/6 бластоцисты. Полученные мужские химеры скрещивают с С57ВЬ/6 женскими, получают мышей, гетерозиготных по ГО-17К мутации (ГО-17К+/-), которые затем скрещивают, получая мышей, дефицитных по ГОПК (I^-17ККΟ). Этих мышей превращают в исходные С57ВЬ/6 с помощью пяти последовательных обратных скрещиваний (бэккроссирований) с мышами С57ВЬ/6. У мышей, нокаутированных по ГО-7КА, наблюдается пониженная средняя клиническая оценка (средний клинический показатель) на модели ОА, как показано на фиг. 4 (см. также Ко11к е! а1., 2001, 1. Ех. Меб. 194: 519- 527; ЬиЬЬейк а! а1., 2005, кирга). Кроме того, у мышей, нокаутированных по ГО-17КА, наблюдаемая частота заболевания (заболеваемость) составляет только 5%, тогда как у мышей дикого типа эта величина составляет 71%.
Пример 2.
Сравнивают гистопатологию ОА-индуцированных I^-17КΛ-/-мышей и мышей, экспрессирующих ГО-17КА, для нахождения корреляции между индуцированным артритом и отсутствием ГО-17КА передачи сигнала. Мышей получают как описано в примере 1. Животных умерщвляют в возрасте пятнадцатьдвадцать недель, а затем изучают гистопатологию суставов умерщвлённых животных. Гистопатология кости и хряща ГО-17КА-/-нокаутированных мышей и мышей, экспрессирующих I^-17Λ/I^-17К (^Т С57/ВЬ6 (Но. 2-18)), показывает субхондральную эрозию таранной кости и заметное нарушение архитектуры сустава предплюсневых-плюсневых суставов (эрозия субхондральной кости и суставного хряща), а также реактивное периостальное образование кости (остеопороз). Гистопатология голеностопных суста
- 90 019397 вов мышей, дефицитных по ГЬ-17КА-/-, на модели экспериметально вызванного СЧА показала небольшое воспаление сустава и небольшую эрозию суставного хряща и кости. Однако, гистопатологический анализ голеностопного сустава задней лапы мышей, экспрессирующих ГЕ-17КЛ, показала заметное хроническое активное воспаление. Значительно реже встречающиеся воспаление суставов и эрозия суставов и костей по сравнению с \¥Т мышами дополнительно связывает Ш-ПКА и передачу сигнала ЮПКА с воспалением и эрозией.
Пример 3.
На мышиной модели индуцированного пептидом М0С (миелиновым гликопротеином олигодендроцитов) ЕАЕ (мыши, дефицитные по ГЕ-17КА) показана задержка начала артрита, а также общее снижение клинических показателей по сравнению с \¥Т мышами. Мышей, нокаутированных по ГЕ-17КА, получают как описано в примере 1. На фиг. 5 показаны заболеваемость и среднее (медианное) начало артрита как функция времени как для мышей ГЕ-17КА-/-, так и для мышей ГЕ-17КА дикого типа. У 15 из 15 экспрессирующих ГЕ-17КА мышей дикого типа наблюдаются симптомы дикого типа, причём в среднем болезнь начинается через 13 дней. Напротив, у 14 из 15 ГЬ-ПКА-Амышей симптомы артрита появляются в среднем через 22 дня (р<0.0001 по сравнению с мышами дикого типа). Средние клинические показатели мышей Ш-ПКА -/- (нокаутированных) ниже, болезнь начинается позднее, чем у мышей дикого типа. На фиг.6 показаны пониженные клинические показатели I^-17КЛ-/-(нокаутированных) мышей по сравнению с мышами дикого типа на М0С- индуцированной модели. У [Е-ПКА-/нокаутированной популяции наблюдается значительно более позднее начало артрита, чем у экспрессирующей ЕЬ-ПКА популяции дикого типа. Кроме того, у I^-17КЛ-/-нокаутированной популяции пониженный средний клинический показатель во всех временных точках начала артрита. Более продолжительное время до начала заболевания и пониженный клинический показатель для артрита, наблюдаемые у I^-17КЛ-/-мутантов по сравнению с I^-17КЛ-экспрессирующих животных дикого типа дополнительно связывает I^-17КЛ и передачу сигнала I^-17КЛ с воспалением и эрозией.
Пример 4.
У активированных и сенсибилизированных овальбумином мышей I^-17КЛ К0 наблюдается значительное уменьшение воспалительных клеток в ВАЬ (бронхоальвеолярном лаваже) жидкости по сравнению с мышами дикого типа. Мышей I^-17КЛ КО получают как описано в примере 1, а затем интраназально сенсибилизируют овальбумином. Число воспалительных клеток в популяции I^-17КЛ КО сравнивают с показателем популяции дикого типа, экспрессирующей I^-17КЛ. На фиг. 7 показано, что у мышей I^-17КЛ КО наблюдается более низкое общее число воспалительных клеток в ВАЬ жидкости, чем у мышей дикого типа, экспрессирующих I^-17КЛ, при овальбуцин-индуцированной астме после третьего заражения. Сравнивают число эозинофилов (А), нейтрофилов (В), лимфоцитов (С) и макрофагов (Ό) популяции мышей I^-17КЛ КО мышей и мышей дикого типа, экспрессирующих I^-17КЛ в ВАЬ жидкости на овальбумин-индуцированной модели астмы. На фиг. 8А-8Э показано, что у мышей I^-17КЛ КО пониженное число эозинофилов (8А), нейтрофилов (8В) и лимфоцитов (8С) в ВАЬ жидкости по сравнению в I^-17КЛ КО популяции по сравнению с популяцией дикого типа, экспрессирующей ^17КА. Никаких изменений числа макрофагов (8Ό) в ВАЬ жидкости не наблюдается ни у мышей дикого типа, ни у мышей I^-17КЛ КО (наивных и ΟVЛ-сенсибилизированных). Эти данные показывают, что передача сигнала I^-17КЛ играет важную роль в регуляции иммуноопосредованных воспалительных реакций.
Пример 5.
Показано, что антитела к I^-17КЛ снижают заболеваемость артритом у мышиной модели СЧА (коллаген-индуцированного артрита), если их вводить для профилактики и для терапии. Ингибирование ΣΕ17КА снижает клинические проявления артрита как при профилактическом, так и при терапевтическом его применении к нескольким моделям СЧА. Суррогатное нейтрализующее мышиное I^-17КЛ тАЬ. введённое с профилактической целью, снижает средние клинические показатели на дикого типа СЧА модели в зависимости от дозы. На фиг. 9 показано зависящее от дозы ингибирование с помощью СЕ-ПКА тАЬ у дикого типа СЧА модели. Мышам вводят либо Ш-ПКА тАЬ, либо контрольный по схеме: понедельник, среда, пятница в течение 2.5 недель после бустерной инъекции (стимуляции). Введение 100 мкг и 300 мкг антител к Ш-ПКА даёт более низкий клинический показатель в течение 18 после бустеринъекции по сравнению с изотипом контрольным ^. Уменьшение рарефикации кости и эрозии суставного хряща ассоциируется с уменьшением средних клинических показателей при дозе Ш-ПКА тАЬ 300 мкг. Данные гистопатологического анализа и рентгеновские изображения сравнивают с соответствующими данными для контрольного ^С. Результаты обоих анализов показывают, что голеностопный сустав левой лапы СВА/1 самца мыши, пролеченного с помощью Ш-18К тАЬ (изотип контроль), заметно воспалён, наблюдают: субхондральную эрозию таранной кости и заметное нарушение архитектуры сустава предплюсневых-плюсневых суставов (эрозия субхондральной кости и суставного хряща), а также реактивное периостальное образование кости (остеопороз). Напротив, в коленном суставе задней лапы мыши ЭВА/Е получавшей 300 мкг антитела (тАЬ) против I^-17КЛ, наблюдаются чётко выраженные бсПпсй суставные щели, отсутствие отёка и отсутствие периостального реактивного образования кости или лизирующих поражений, что указывает на ослабленную степень остеопороза и эрозии хряща.
- 91 019397
Пример 6.
Показано также, что ингибирование I^-17ВЛ является эффективным на СПА модели, когда введение доз начинают после появления клинических признаков (т.е. протокол введения лечебных доз) у дикого типа и ТАЕВ р55/р75 КО модели. Лечение начинают, примерно, через 6-7 дней после введения коллагена в обе модели. На фиг. 10 показано, что терапевтическое лечение с помощью тАЬ против Ш-ИВА стабилизирует средние клинические показатели (оценки) также у мышей дикого типа. Фиг. 11 показано, что терапевтическое лечение с помощью тАЬ против ^-17;^ стабилизирует средние клинические показатели (оценки) у ТАЕВ р55/р75 К0 моделей. Мышам вводят либо тАЬ против Ш-ИВА, либо тАЬ против Ш-1В, либо контрольный Ι§ по схеме: понедельник, среда, пятница в течение 2 недель после произвольного распределения по экспериментальным терапевтическим группам. Эти данные являются характерными для 2 независимых экспериментов, осуществлённых как на №Т, так и на ТНЕВ р55/р75 КО СПА моделях. Введение тАЬ против I^-17ВЛ даёт пониженный клинический показатель (клиническую оценку) по сравнению с контрольным ^С у СПА индуцированных дикого типа мышей. К нашему удивлению аналогичная эффективность тАЬ против I^-17ВЛ на ТНЕ р55/р75 КО модели стабилизировала СПА независимо от ТАЕ передачи сигнала. Эти данные наводят на мысль, что терапия с помощью антигенсвязывающих белков для ЕЕ-ИВА может подействовать на пациентов, не отвечающих на лечение, направленное против ТАЕ. Комбинированная терапия с помощью антигенсвязывающего белка для I^-17ВЛ и средств против ТНЕ может быть более действенной, чем любой из них в отдельности.
Пример 7.
Создание полностью человеческих моноклональных антител, специфических к человеческому ΙΕ17ВА, осуществляют, используя технологию АЬдешх (в настоящее время Атдеп ЕгетопЕ ^с.) Хеп оМоике® (патенты США N0. 6114598; 6162963; 6833268; 7049426; 7064244, которые вводятся в данное описание ссылкой во всей полноте; Сгееп е! а1., 1994, №Ц|ге Сепейск 7: 13- 21; Мепбе/ е! а1., 1997, №1иге Сепейск 15: 146-156; Сгееп апб 1акоЬоу1йк, 1998, I. Ех. Меб. 188: 483- 495)). В табл. 4 показаны участки I^-17ВЛ белка, используемого в качестве иммуногена, и линии клеток, используемые для получения и скрининга антител против I^-17ВЛ.
Реагент ______Таблица 4 Описание
1Ь- 17К.А..РС
Щ- 17КА- РЬАО- ροΙγΗίδ (8Εζ)ΙϋΝ0: 431)
Щ-17КА в СНО клетках
Внеклеточный домен человеческого 1Ь-17КА с С- концевым человеческим Рс доменом. Экспрессируется в СНО клеточной линии.____________________________________________________
Внеклеточный домен человеческого Ш- 17К.А с С- концевым РЕАО- ро1уН18 тэгом. Экспрессируется с помощью транзиторной трансфекции в СО8 РКВ клетках._____________
Человеческий ΙΣ-17ΚΑ полной длины, экспрессирующийся на поверхности СНО клеток.
Мышей Ι^2 ХепоМоике® иммунизируют/реиммунизируют с помощью I^-17ВЛ-Ес (группа 1) и I^-17ВЛ-Е^ЛС-рο1уН^к (группа 2). Мониторинг сывороток проводят с помощью ЕОЗА и клетки мышей с наилучшим титрами сливают, чтобы получить гибридомы. Полученные поликлональные супернатанты подвергают скринингу на связывание с I^-17ВЛ с помощью ЕОЗА, и проводят скрининг позитивных супернатантов на связывание с I^-17ВЛ СНО клетками с помощью ЕМАТ. Позитивные супернатанты подвергают дополнительному скринингу. Ι^2 ХепоМоике® мышей иммунизируют с помощью следующих иммуногенов: I^-17ВЛ-Ес (группа 3) и I^-17ВЛ-Е^ЛС-рН^к (группа 4) и тестируют после дополнительных иммунизации.
Пример 8.
Антитела против I^-17ВЛ характеризуют. Супернатанты гибридом неклональных антител (неклональных гибридом) готовят в объёмах 1-2 мл (концентрации Ι§ для этих супернатантов не определяют). Супернатанты неклональных гибридом антител против I^-17ВЛ сначала с помощью ЕАС8 подвергают скринингу на способность ингибировать связывание биотинилированного человеческого I^-17Л с СНО клетками, сверхэкспрессирующими I^-17ВЛ, и другой СНО клеточной линией, сверхэкспрессирующей I^-17ВЛ обезьяны циномолгус. Неклональные супернатанты, которые способны полностью или почти полностью ингибировать связывание человеческого I^-17Л с СНΟ-йиI^-17ВЛ и СНΟ-супοI^-17ВЛ, затем подвергают скринингу в нескольких разведениях в анализе I^-17Л- индуцированной секреции цитокина/хемокина, используя линию клеток фибробластов крайней плоти (НЕЕ). Неклональные супернатанты антител против I^-17ВЛ инкубируют с НЕЕ клетками (5000 клеток/лунка в 96-луночном планшете) в течение 30 мин при 36°С, а затем стимулируют в течение ночи либо с одним I^-17Л (5 нг/мл), либо с ΙΣ17Е (20 нг/мл) и ТНЕ-альфа (5 нг/мл). Затем супернатанты культур фибробластов методом ЕОЗА проверяют на присутствие либо ΙΕ-6, либо СВ0-альфа. Неклональные гибридомы антител против I^-17ВЛ отбирают для субклонирования с учётом их превращения в СНΟ-I^-17ВЛ ЕАС8 анализе и НЕЕ биоанализе. Пример селекции показан в табл. 5, 6 и 7.
Таблица 5
- 92 019397
% позитив. % позитив МП НЕЕ Биоанализ
Нег. Кнтрл. 1.09 1.57 10 Повтори, анализы
ΙΙ.-17 биот. (500
нг/мл). 8.85 10.22 77 1:4 разе. 1: 32 1:4 1:32 1:128
% ингибирования 1Ь-6 продукции
Супернатант Ι.Ώ.
1 1.34 1.78 9 56 14
2 (вкл. АМН15/АМЬ15) 0.60 3.77 6 80 72 98 91 81
3 1.04 1.60 8 46 -5
4 (вкл. АМН14/АМЬ14) 1.72 0.79 10 90 82 99 92 84
5 1.59 1.43 11 76 52
6 1.45 1.93 14 82 79
7 1.00 1.28 8 71 58
8 1.43 1.60 14 69 31
9 1.34 2.28 18 59 20
10 0.79 1.96 И 58 -2
11 1.93 1.69 И 72 21
12 2.23 1.69 8 69 7
13 (вкл. АМн21/АМь21) 1.49 0.49 6 82 53
14 1.01 1.25 8 63 23
15 1.31 1.45 9 74 45
16 1.39 0.72 8 58 4
17 0.91 0.94 7 73 38
18 1.37 2.85 13 49 6
19 1.47 1.15 8 74 61
20 1.60 1.20 7 72 46
21 1.30 1.65 8 47 4
22 0.93 1.02 8 54 16
23 1.08 1.12 7 72 59
В табл. 5 показан скрининг супернатантов гибридом неклональных антител против I^-17ВЛ на связывание с I^-17ВЛ. В первой половине табл. 5 показан % позитива и средняя интенсивность флуоресценции (МИ) по данным проточной цитометрии (т.е. РАС8). % позитива показывает ингибирование связывания биотин-ΗиI^-17Л с ΗиI^-17ВЛ+ Сн0 клетками при использовании супернатантов гибридом неклональных антител. В столбце МИ показано ингибирование связывания биотинилированного ΗиI^-17Л с супо I^-17ВЛ+ Сн0 клетками при использовании супернатантов гибридом неклональных антител. Во второй половине табл. 5 показана интенсивность нРР для неклональных и тАЬ§ (моноклональных антител), определяемая % интенсивности !Р-6 продукции. В первых 2 столбцах представлен I^-17А/ΗΡΡ биоанализ с супернатантами гибридом неклональных антител, а в последних 4 столбцах даны результаты повторного !Р-17А/нРР биоанализа с супернатантами гибридом неклональных антител.
Таблица 6
- 93 019397
В табл. 6 показаны данные скрининга супернатантов гибридом неклональных антител против ΙΕ17КА. В столбцах % позитива и МΕI представлены данные проточной цитометрии (т.е. ЕАС8). В столбцах % позитива показано ингибирование связывания биотин- йиI^-17Λ с йиI^-17ЯΛ+ СНС клетками при использовании супернатантов гибридом неклональных антител. В столбцах МΕI показано ингибирование связывания биотинилированного йиI^-17Λ с супо I^-17ЯΛ+ СНС клетками при использовании супернатантов гибридом неклональных антител. В первых 2 столбцах НЕЕ представлен I^-17А/ΗΕΕ биоанализ с супернатантами гибридом неклональных антител, а в последних 4 столбцах биоанализа даны результаты повторного ^-ПА/НЕЕ биоанализа с выбранными супернатантами гибридом неклональных антител. Несколько супернатантов выбирают для субклонирования.
Таблица 7
- 94 019397
% позитива МП
Нег. Кнтрл 1.09 1.57 10
1Ь-17биот.(500 нг/мл) 8.85 10.22 77 НЕГ биоанализ
1: 4 1:32
Супернатант Ι.ϋ. % ингибирования продукции 1Ь- 6
1.85 1.33 10 29 9 21
2 1.08 1.46 16 90 61 50
3 1.29 1.39 22 33 10 4
4 1.55 1.33 18 53 66 58
5 1.69 0.7 8 76 46 30
6 (вкл. АМН13/АМЬ13) 1.52 0.89 6 73 78 75
7 1.54 0.98 7 79 71 45
8 1.78 3.44 34 73 63 30
9 6.34 8.45 53 57 48 34
10 1.23 1.58 10 82 71 31
И 1.62 2.1 28 -10 -6 -10
12 1.15 1.04 16 71 63 37
13 2.43 1.67 12 58 23 -4
14 1.43 1.03 13 42 17 18
15 1.62 1.59 18 67 59 31
16 1.79 2.2 25 61 57 45
17 0.91 1.85 10 49 54 23
18(вкл.АМн12/АМь12) 1 1.36 6 75 82 61
19(вкл.АМн17/АМь17) 1.75 1.23 8 90 81 73
20 2.31 0.49 9 35 20 38
21 (вкл. АМН16/АМЬ16) 1.84 0.76 6 86 90 71
В табл. 7 показаны данные скрининга супернатантов гибридом неклональных антител против ΙΙ .17КА. В первых двух столбцах представлены данные проточной цитометрии (РАС8). В столбцах % позитива показано ингибирование связывания биотин-ЬиI^-17Л с ЬиI^-17КЛ+ СНО клетками при использовании супернатантов гибридом неклональных антител. В столбцах МРI показано ингибирование связывания биотинилированного ЬиI^-17Л с I^-17КЛ+ СНО клетками обезьяны циномолгус при использовании супернатантов гибридом неклональных антител. В последних трёх столбцах представлены результаты I^-17Л/НРР биоанализа с применением супернатантов гибридом неклональных антител. Супернатанты 6, 18, 19 и 21 выбирают для субклонирования.
Таблица 8
Субклон 10 Ш- 17А/НРР биоанализ 1С50 (нМ) ВГАсоге низкого разрешения Ко(нМ)
1. Субклон (АМН14/АМь 14) 0.12 0.69
2. Субклон (АМН14/АМЬ14)2 0.20 Νϋ
3. Субклон (АМН14/АМ]Д4)3 0.075 Νϋ
4. Субклон (АМН21/АМЬ21) 2.3 Νϋ
5. Субклон (АМН21/АМЬ21) 3.1 Νϋ
6. Субклон (АМН21/АМЬ21) 3.3 16.7
7. Субклон (АМн20/АМь20) 8.1 Νϋ
8. Субклон (АМн20/АМь20) 6.6 Νϋ
9. Субклон (АМн20/АМ[20) 6.7 11.6
10. Субклон (АМН19/АМЬ19) 0.22 3.1
11. Субклон (АМН19/АМЬ19) 1.1 Νϋ
12. Субклон (АМН19/АМЬ19) 0.50 Νϋ
13. Субклон (АМН13/АМЬ13) >10 7.6
14. Субклон (АМН18/АМЬ18) 0.44 Νϋ
15. Субклон (АМН18/АМь18) 0.40 Νϋ
16. Субклон (АМН18/АМЬ18) 0.17 14.9
17. Субклон (АМн12/АМь12) 3.5 Νϋ
18. Субклон (АМН12/АМЬ12) 3.7 8.2
20. Субклон (АМН12/АМЬ12) 5.5 Νϋ
21. Субклон (АМН17/АМЬ17) 2.5 8.2
22. Субклон (АМН17/АМЬ17) 5.3 Νϋ
23. Суб клон (АМн17/АМь17) 0.57 Νϋ
24. Субклон (АМН16/АМЬ16) 1.6 Νϋ
25. Субклон (АМН16/АМЬ16) 2.3 6.2
26. Субклон (АМН16/АМЬ16) 1.4 Νϋ
27. Субклон (АМН22/АМЬ22) 0.046 1.5
28. Субклон (АМН22/АМЬ22) 0.09 Νϋ
29. Субклон (АМН22/АМЬ22) 0.07 Νϋ
ИО = не определена.
В табл. 8 представлены значения ΙΟ50, полученные с помощью I^-17Л/НРР биоанализа, и значения Ко, полученные методом поверхностного плазмонного резонанса (ВРАсого®) низкого разрешения для субклонированных гибридом. Более низкие значения ΙΟ50 и Ко В I^-17Л/НРР анализах связывания ΙΡ17КА показывают, что I^-17КЛ тАЬ ингибируют связывание I^-17Л !о ΙΡ-17 рецептором А. Для даль- 95 019397 нейшего исследования отбирают антитела с низкими значениями К для ингибирования связывания ΙΕ17А с человеческим I^-17ЯΛ.
Пример 9.
Клоны человеческих тАЬ против I^-17ЯΛ, имеющие последовательности тяжёлой и лёгкой цепи (АМН22ММЪ22), (АМН19/ΛМ^19), (АМ^З/АМЦЕ) и (ΛМН14/ΛМ^14), отбирают для определения характеристик с помощью биоанализа. В табл. 9, приведённой ниже, показаны значения ГС50 для отобранных антител (АЬк), полученные с помощью НЕЕ биоанализа и первичного биоанализа лёгочных фибробластов, в отношении как I^-17Λ, так и 1Е-17Е.
Таблица 9
пи- 17ЯА гпАЬ П_- 17А/НЕР 1С50 (нМ) Ш- 17Р/НРР 1С50 (нМ) Ш- 17А/лёгочные фибробласты 1С50 (нМ)
(АМН14/АМЬ14) 0.13 0.067 0.04
(АМН22/АМЬ22) 0.10 0.033 0.14
(АМН19/АМЬ19) 0.20 0.087 0.22
(АМН18/АМЬ18). 0.33 0.073 0.081
Выбранные человеческие тАЬк ингибируют связывание ^-^А с I^-17ЯΛ. Помимо низких значений ГС50, наблюдаемых для связывания ΙΕ-17Ά с I^-17ЯΛ, для выбранных человеческих тАЬ получены пониженные значения ГС50, что показывает ингибирование связывания 1Е-17Е с I^-17ЯΛ (второй столбец). Следовательно, выбранные человеческие тАЬ ингибируют связывание I^-17Λ-I^-17ЯΛ и связывание ^-17^-^-17^.
Пример 10.
Примеры человеческих тАЬ против I^-17ЯΛ тестируют с помощью биоанализа на макаках циномолгус, используя линию почечных эпителиальных клеток макаков циномолгус 1ТС-12, стимулированных с помощью ^-^А макаков циномолгус. На фиг. 12 показаны результаты, полученные на I^-17ЯΛ тАЬк, имеющих последовательности тяжёлой и лёгкой цепей (ΛМН22/ΛМ^22), (АМН19/АМ]Ч9), (АМ^З/АМ^З) И (А^М/АМ^М), в ингибировании индуцированного ^-^А макак циномолгус продуцирования (продукции) ΙΕ-6 при использовании 1ТС-12 клеток. Линия (—) показывает значение позитивного контроля ΙΕ-17 макаков циномолгус в сочетании с ТНЕ- альфа. Линия (-.-.-) показывает значение позитивного контроля ТНЕ-альфа макаков циномолгус. Линия (....) показывает среднее контрольное значение. Клетки 1ТС-12 в течение 30 мин преинкубируют с тАЬк против I^-17ЯΛ, а затем в течение ночи стимулируют с помощью ^-^А макаков-циномолгус (5 нг/мл) и человеческого ТМЕ-альфа (5 нг/мл). На фиг. 12 показано, что каждое антитело способно ингибировать связывание ^-^А с I^-17ЯΛ и активацию I^-17ЯΛ, как определено с помощью продуцирования ΙΕ-6 при использовании клеток ЕГС-12. Антитело против I^-17ЯΛ (ΛМН14/АМ^14) способно противостоять индуцированному I^-17Λ продуцированию ΙΕ-6 при использовании ЕГС-12 клеток с величиной ГС50, примерно, 1.2 нМ.
Пример 11.
Было проанализировано т νί!ΐΌ связывание I^-17ЯΛ тАЬк. Аффинность связывания антител против I^-17ЯΛ определяют методом поверхностного плазмонного резонанса на приборе В1асоге 3000® стандартными методами, известными в уровне техники. Антитела-кандидаты иммобилизуют на чипах СМ4, дериватизированных с помощью антитела козы против человеческого Еб (Н + Ь) антитела (1асккоп ^типо ЯекеагсЕ, Ваг НагЬог, МЕ). Чип СМ4, покрытый антителом козы против человеческого ЕС) (Н + Ь) антитела, но без иммобилизованного антитела, используют в качестве эталона. Растворимый ЬиI^-17ЯΛ-Е^ΛО-ро1уН^к (БЕ^ ΙΌ N0: 431) с концентрацией в диапазоне 0.46-1000 нМ пропускают через чипы в течение 2 мин (фаза ассоциации) с последующей 15-30-минутной фазой диссоциации. ЕЕАО пептид, Λкр-Ту^-^ук-Λкр-Λкр-Λкр-Λкр-^ук (^УК^^^^К) (БЕ^ ΙΌ N0: 447), описанный в Норр е! а1., Вю/ТесЕпо1оду 6: 1204, 1988, и в патенте США 5011912, позволяет быстро проанализировать и легко очистить экспрессированный рекомбинантный белок. Реагенты, применимые для получения слитых белков, в которых ЕЕАО слит с данным полипептидом, выпускаются промышленно (Б1дта, Б!. Еошк, МО).
Эксперименты проводят при 25°С и скорости потока 50 мкл/мин. Данные подгоняют к 1:1 Модель + Локальный Ятах, используя программу ВIΛеνа1 коГМаге® (ν4.1).
Таблица 10
Человеческое антитело ка (1/М8) Кр (1/8) КА(1/М) КВ(М)
(АМН14/АМЬ14) 2.60 х Ю5 6.22 х 10’5 4.18 хЮ9 2.39 хЮ'10
(АМН22/АМЬ22) 2.35 х 105 1.17 х 10'4 2.01 х 109 4.98 х 10‘10
(АМн19/АМь19) 1.42 х 105 1.14 хЮ'4 1.25Х109 8.02 х Ю'10
(АМН18/АМЬ18) 1.02 х 105 1.01 х 10'3 1.01 х 108 9.88 х 10’9
В табл. 10 показано, что порядок значений К для клонов человеческих тАЬ составляет 10-9-10-10, причём клон, имеющий последовательности тяжёлой и лёгкой цепей (АМН14/ΛМ^14), проявляет наивысшую аффинность. Кинетические показатели каждого из человеческих моноклональных антител со
- 96 019397 гласуются с равновесными данными. Антитело с вариабельными последовательностями тяжёлой и лёгкой цепей (ΑΜΗ14/ΑΜΕ14; 5>ЕО ΙΌ N0: 14 и 5>Е0 ГО N0: 40, соответственно) обладает наивысшей аффинностью к I^-17ЯЛ, а также самой медленной скоростью диссоциации (οΓΓ-πι^).
Пример 12.
Агонистический потенциал человеческого тЛЬ против I^-17ЯЛ, имеющего вариабельные последовательности тяжёлой и лёгкой цепей (ΑΜΗ14/ΑΜΣ14), оценивают ίη νίΐτο. Действие тЛЬ против I^-17ЯЛ (ΑΜη14/ΑΜς14) в качестве агониста проверяют на НРР се11з. тЛЬ против I^-17ЯЛ, имеющее вариабельные последовательности тяжёлой и лёгкой цепей (ΑΜΗ14/ΑΜΕ14), проверяют также в условиях перекрёстного связывания с антителом козы против человеческого Р(аЬ')2, с антителом козы против человеческого ΙβΟ и мышиным антителом против человеческого ΙβΟ перед инкубацией на НРР клетках. Рекомбинантное тЛЬ к I^-17ЯЛ ΑΜΗ14/ΑΜΕ14 в концентрации 0, 0.1, 0.5. 1, 1.5 и 10 мкг/мл, индивидуальное или предварительно сшитое (перекрёстно связанное) с мышиным антителом против человеческого ΙβΟ ^утебЛ^бгодеп 8ап Охе^, ΟΑ), антителом козы против человеческого Р(аЬ')2 (Сοаΐ (козье) а-Ь-РаЬ) и антителом козы против человеческого ΙβΟ (Όο;·ιΙ (козье) а-ΐι ΙβΟ) инкубируют в течение ночи с НРР клетками. СЯ0-альфа определяют методом ΒΌΙδΑ. В этом эксперименте ГО-17А, индивидуально, служит в качестве позитивного контроля продуцирования СЯ0-альфа. Эти данные показывают результаты двух независимых экспериментов. Одно (индивидуальное) тЛЬ к I^-17ЯЛ (ΑΜΗ14/ΑΜΕ14) не оказывает действия на НРР клетки. Предварительное сшивание тЛЬ против I^-17ЯЛ (ΑΜΗ14/ΑΜΣ14) не влияет на продуцирование СЯ0-альфа при использовании НРР клеток. Эти данные показывают, что тЛЬ против ΙΕ-Π^Α (ΑΜη14/ΑΜς14), самостоятельно или предварительно сшитое и инкубированное с НРР клетками, не способно индуцировать СЯ0-альфа ответ и, следовательно, не является тЛЬ-агонистом к ΙΌ17ΚΑ.
Пример 13.
В биоанализе на клетках НРР проверяют влияние изменений в зародышевой линии (СЬ) на I^-17ЯЛ тЛЬ ΑΜη14/ΑΜε14. На фиг. 13 показаны варианты последовательности в каркасных областях ЗЕО ГО N0: 40 (ΑΜς14) по сравнению с остатками зародышевой линии и влияние на величину ΙΕ50. ЗЕО ГО N0: 40 (ΑΜε14) содержит в каркасной области четыре остатка, отсутствующих в зародышевой линии, два в РЯ2 и два в РЯ3. Для получения вариантов А и В ΑΜΗ14/ΑΜΕ14 зародышевой линии используют стандартные методы сайт-направленного мутагенеза. Эти варианты проверяют в ΙΌ-17Α и ГО-17Р НРР биоанализе: клетки НРР преинкубируют 30 мин с различными тЛЬ8 антителами против I^-17ЯЛ, а затем стимулируют в течение ночи с помощью ΙΌ-17 (5нг/мл).
На фиг. 14 показано, что два варианта, которые снова содержат остатки зародышевой линии (см. Фигуру 13), проявляют пониженную ΙΌ-17Α ингибирующую активность по отношению к ΑΜΗ14/ΑΜ]Π4, это указывает на то, что некоторые изменения в каркасных областях допустимо, но некоторые остатки могут влиять на активность. Линия (-—) показывает позитивное контрольное значение стимуляции ΙΌ-17 в отсутствие антитела (около 4062 пг/мл). Если для контроля берут только среду, получают значение около 71 пг/мл.
На фиг. 15 показано, что два варианта, которые снова содержат остатки зародышевой линии (см. фиг. 13), проявляют пониженную ΙΕ-17Α ингибирующую активность по отношению к ΑΜΗ14/ΑΜΕ14, это указывает на то, что некоторые изменения в каркасных областях допустимо, но некоторые остатки могут влиять на активность. Позитивное контрольное значение ГО-17Р в комбинации со стимуляцией с помощью Т№-альфа в отсутствие антитела составляет около 10994 пг/мл, значение для одного Т№альфа равно примерно 1534 пг/мл, а только среда в качестве контроля даёт значение около 55 пг/мл.
Пример 14.
Проводят исследования для того, чтобы определить, действительно ли различные антигенсвязывающие белки для I^-17ЯЛ (в виде человеческих антител) связаны с человеческим I^-17ЯЛ. Ρο^ιеΒ^ο™ 0с1е1 ЗуЛет представляет собой одну из нескольких систем и один из методов, пригодных для определения связывания антитела. Методы, применяемые для скрининга связывания антитела, практически соответствуют рекомендациям производителя. Дополнительная информация дана на сайте \ν\ν\ν.ΓοΓ^Είο^οιη. Коротко говоря, сенсоры со стрептавидином ^Γ^Βώ™) предварительно в течение 10 мин пропитывают РВЗДТ (1% Β8Α/ΡΒ8 + 0.05% Т\\ееп20® (Твин20, полиоксиэтилен сорбитан монолаурат). Биотинилированный ΑΜΗ14/ΑΜΕ14 с концентрацией 10 мкг/мл в ΡΒ§ЛТ в течение 900 с наносят на сенсоры. Новую нулевую (фоновую) линию устанавливают в течение 600 с в ΡΒίδΑΈ Затем дикого типа I^-17ЯЛ-Ρ^ЛС-рο1уΗ^8 (ЗЕО ГО N0: 431) с концентрацией 10 мкг/мл в ΡΒ§ЛТ связывают с сенсорами в течение 900 с. Новую нулевую (фоновую) линию устанавливают в течение 600 с в ΡΒδΑΕ 200 нМ следующих тЛЬ8 ΑΜΗ22/ΑΜΕ22, ΑΜΗ19/ΑΜΕ19 и ΑΜΗ18/ΑΜΕ18 ассоциируют в течение 900 с с последующей диссоциацией в течение 900 с в ΡΒδΑΕ Результаты показывают, что ΑΜΗ18/ΑΜ]Π8 не конкурирует с ΑΜΗ14/ΑΜΕ14 за связывание, это свидетельствует о том, что ΑΜΗ14/ΑΜΕ14 и ΑΜΗ18/ΑΜ]Π8 связываются с различными нейтрализующими детерминантами. ΑΜμΣΣ/ΑΜ^ΣΣ и ΑΜΗ19/ΑΜ]Π9 не связываются в присутствии ΑΜΗ14/ΑΜ]Π4, это наводит на мысль, что все три эти антитела связываются с одной и той же или с аналогичной детерминантой и поэтому полагают, что они относятся к одной группе.
- 97 019397
Пример 15.
Для определения показателей связывания Ш-ПКА с типичными антителами против I^-17КΛ проводят перекрёстно-конкурентное исследование. Используют мультиплексный метод биннинга, описанный Ла, е1 а1. (см. Ла, е1 а1., Л Ιιηιηιιπ. Ме1Л, 2004, 288: 91-98). В методе используют рабочую станцию и программное оборудование Вю- Р1ех (ВюКаб, Негси1е§, СА), а также реагенты от Ьиттех® Согр. (Αιΐδΐίη, ТХ). 3а исключением отмеченного ниже, следуют основным протоколам производителя (дополнительная информация на сайте те^ет.Ыо-габ.сот и те^ет.1ит1иехсогр.сот). Покрытые стрептавидином гранулы (частицы)/метки Ьиттех® с каждым кодом (Ьиттех®, #Ь100- Ь1ХХ- 01, где XX определяет код частиц/меток (гранул, бус)) инкубируют в 150 мкл иммобилизованного биотинилированного моновалентного мышиного антитела против человеческого ЦС с концентрацией 50 мкг/мл (ΒΌ РЬатттдеи, ВесЕои О|ск|п5оп, РтаикЬи Ьакез, N1, продукт #555785) в течение 1 ч в темноте, а затем отмывают 3 раза с помощью РВ8АТ. Оценивают сенсибилизацию (напыление) мышиным антителом против человеческого ЦС и количественно определяют гранулы(частицы)/метки методом РАС8. Гранулы (частицы)/метки с каждым кодом по отдельности инкубируют с 10 мкл антитела против ХЬ-ПКА в течение 1 ч при комнатной температуре, а затем отмывают. Гранулы собирают, а затем распределяют в 96-луночном фильтрационном планшете (МЛЛроте, ВШепса, МА, продукт #М8ВУЮ250). В половину лунок добавляют 80 мкл I^-17КА (8ЕР ΙΌ N0: 431) с концентрацией 2 мкг/мл, а в другую половину добавляют буфер и инкубируют 1 ч при комнатной температуре, затем отмывают с помощью РВ8АТ. В одну лунку с I^-17ЯΛ (8ЕР ΙΌ N0: 431) и в одну лунку без I^-17КΛ прибавляют по 10 мкл антитела против I^-17КΛ (8ЕР ΙΌ N0: 431) и инкубируют 1 ч при комнатной температуре, затем отмывают с помощью РВ8АТ. В качестве негативного контроля используют нерелевантный человеческий ЦС (Еасккои ЬаЬ§., Ваг НагЬот, МЕ, продукт #009-000-003). В каждую лунку добавляют 50 мкл РЕ-конъюгированного моновалентного мышиного антитела против человеческого ЦС (ВО РЬатттдеи, ВесЕои Пюкткои, РтаикЛи Ьакез, N1, #555787) и инкубируют 1 ч при комнатной температуре, затем отмывают с помощью РВ8АТ. Моновалентное антитело с РЕ тэгом детектирует присутствие тАЬ, добавленного в лунку, но не первого тАЬ, уловленного моновалентным мышиным антителом против человеческого ЦС. Частицы/метки (гранулы) ресуспендируют в 120 мкл РВ8АТ и по меньшей мере 100 событий/гранулы/метки с определённым кодом собирают на рабочей станции Вю-Р1ех в соответствии с протоколом, рекомендуемым производителем.
Среднюю (медианную) интенсивность флуоресценции (МИ) пары антител без I^-17ЯΛ вычитают из МРI сигнала соответствующей реакционной смеси, содержащей ^-17^^, чтобы нормализовать по фоновому шуму. Критерием для определения, действительно ли два антитела перекрёстно конкурируют друг с другом и, следовательно, хранятся (сортируются) вместе, является предмет определения, в какой степени второе антитело является детектируемым. Если нормализованная МРI выше, чем наивысшее из трёх последующих значений, тогда можно считать, что антитела против I^-17КА одновременно связаны с I^-17КА и находятся в различных совокупностях (т.е. антитела не конкурируют перекрёстно): нормализованная МРI больше 3-кратной величины МРI антитела, спаренного с самим собой, или в 3 раза больше величины МРI антитела, спаренного с контрольным ШдС соиЛо1, или МРI 300. Вообще говоря, антитела, отнесённые к различным совокупностям (бункерам), связывают различные участки I^-17КА, а антитела, отнесённые к одной и той же совокупности (бину) (одним и тем же совокупностям (бункерам)), связывают одинаковые участки I^-17ЯΛ.
На фиг. 16А и 16В показаны результаты мультиплексного метода биннинга антител против ΙΕ17КА Оттенённые значения показывают пары антител, которые связываются с I^-17ЯΛ одновременно, это наводит на мысль, что эти антитела связываются с различными нейтрализующими детерминантами. Заключённые в рамку значения показывают антитела, соединённые (спаренные) с самими собой и перекрёстно конкурирующие. Тестируют следующие моноклональные человеческие антитела, содержащие приписанные вариабельные домены тяжёлой и лёгкой цепей: А: АМН11/АМЬ11, В: АМН4/АМЬ4, С: АМН8/АМЪ8, Ό: АМН7/АМЪ7, Е: АМН6/АМЪ6, Р: АМН10/АМЪ10, С: АМН18/АМЪ18, Н: АМН1/АМЪ1, Ι: АМН22/АМЪ22, Ь АМН23/АМЪ23, К: АМН14/АМЪ14, Ь: АМН19/АМЪ19, М: АМН12/АМЪ12, N АМН17/АМЪ17, 0: АМН16/АМЪ16, Р: АМН26/АМЪ26, Р: АМН21/АМЪ21 и К: АМН20/АМЪ20.
На фиг. 16А и 16В показаны также антитела А: АМН11/АМЬ11, В: АМН4/АМЬ4, С: АМН8/АМЬ8, Ό: АМН7/АМЪ7, Е: АМН6/АМЪ6, Р: АМН10/АМЪ10 и С: АМН18/АМЪ18, конкурирующие друг с другом за связывание с человеческим I^-17ЯΛ и в результате попадают в определённую группу (Вт (бункер, совокупность) 1). Вообще говоря, антитела Ι: АМН22/АМЪ22, I: АМН23/АМЪ23, К: АМН14/АМЪ14, Ь: АМН19/АМЪ19, М: АМН12/АМЪ12, N АМН17/АМЪ17, 0: АМН16/АМЪ16 конкурируют друг с другом за связывание с человеческим I^-17ЯΛ и в результате попадают в определённую группу (Вт (бункер, совокупность) 3). В сущности говоря, антитела Вт 1 не конкурируют с антителам Вт 3.
Антитело Н: АМН1/АМЪ1 является уникальным в этом конкурентном паттерне и образует Вт 2, но он больше всего похож на Вт 3. Антитело Р: АМН26/АМЬ26 образует Вт 4 и показывает слабую перекрёстную конкурентность с любым другим антителом, это предполагает, что нейтрализующая детерминанта уникальна для этого антитела. Антитела Р: АМН21/АМЪ21 И К: АМН20/АМЬ20, показывают, инди
- 98 019397 видуально, уникальные конкурентные паттерны, но с но со значительным сходством с антителами Вт 3, и образуют Вт 5 и 6, соответственно. Эти результаты являются доказательством наличия нескольких видов в подроде перекрёстно конкурентных антител.
Пример 16.
Как описано выше, получены и охарактеризованы антитела, которые связывают человеческий !Ь17ЯА и ингибируют или нейтрализуют, связывание I^-17Λ и/или ΙΙ.-17Ι7. Чтобы определить нейтрализующие детерминанты на человеческом I^-17ЯΛ, который связывают различные антитела к I^-17ЯΛ, конструируют ряд химерных человеческих/мышиных I^-17ЯΛ белков. Этот метод имеет преимущество, заключающееся в отсутствии перекрёстной реактивности различных I^-17ЯΛ антител с мышиным ΙΡ17ЯА. Для каждого химерного белка одна или две области внеклеточного домена человеческого I^-17ЯΛ (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 431) заменяют на соответствующую(ие) область(и) мышиного I^-17ЯΛ (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 432). На фиг. 17 показаны мышиный I^-17ЯΛ (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 432) и 5 доменов, А, В, С, Ό, Е и Р, которые заменили эквивалентные домены в последовательности человеческого I^-17ЯΛ. Такие методы известны в уровне техники, см., например, ЗБеттег, ν/Р.С. еБ а1., 1995 Оспс 164: 49- 53.
Шесть химер с одной (заменённой) областью и 8 химер с двумя (заменёнными) областями конструируют в рТТ5 векторах. Химерные конструкции А-Р (однообластные) синтезируют с помощью ПЦР отжига 65-мерных смыслового и антисмыслового олигонуклеотидов, которые охватывают белок от сайта 8а11 5' от инициирующего ко дона до сайта ^Б1, расположенного 3' от терминирующего кодона. Матрица, которую используют в первом цикле ПЦР, представляет собой смесь олигонуклеотидов (смысловых и антисмысловых), охватывающих область от сайта 8а11 до сайта ^Б1. ПЦР проводят в две стадии слеРСК ргойис! ν/аз Й1дез1ей χνίώ 8а11 апй Νοίΐ апй с1опей ίηίο рТТ5 уес1ог Гог БгатшепБ ехргеззюп.
дующим образом:
95С
95С
42С 72С 95С 56С 72С 72С
95С
95С
42С
72С
95С
56С
72С
Зх ргойисБ изей аз г Бетр1аГе ίη 2η<ι РСК. геасНоп 10х | продукт, используемый в качестве матрицы во 2ой ПЦР реакции
ПЦР продукт расщепляют с помощью8а11 и Νοίΐ и клонируют в вектор рТТ5 для транзиторной экспрессии
Двойные химерные конструкции получают расщеплением одиночных химер А-Ό рестриктазами 8а11 и 8ас1 и трёхсторонним лигированием к химерам Е и Р, расщеплённым с помощью 8ас1 и ^Б1, используя рТТ5 в качестве экспрессионного вектора. Химеры ЕиI^-17ЯΛ-Р^ΛО-рο1уН^к (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 431) и тиI^-17ЯΛ- РРАО-ро^Нш (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 432) транзиторно экспрессируют, используя клетки 2936-Е (от NаБ^οηа1 ЯекеагсЕ СоипсИ οί Сатйа (КЯСС); дополнительную информацию см. КЯСС документ Ь-11565) в качестве клеток-хозяев в роллерных бутылях. Методы такой транзиторной экспрессии хорошо известны в уровне техники, см., например, кее Рэг БигосЕег, Υ. еБ а1., 2002 Νιιο1(πο АсМк Яек. .Ιπη 15; 30(2): Е9. Супернатанты очищают на колонке Н1кТгар™ НР в соответствии с общими указаниями производителя (ОЕ Неа1БЕсаге, РшсаБатеау ΝΙ) и элюируют в стандартном градиенте имидазоле (см. рекомендованные протоколы производителя). Очищенный белок высаливают в РВ8, рН 7.2.
Химеры выравнивают, используя стандартные аналитические программы, такие как С1ик1а!Ш (^МВЬ-ЕВ^. Полученные химерные белки показаны на фиг. 18А-18Б. Что касается фиг. 17 и
Химера А (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 433) представляет собой внеклеточный домен человеческого I^-17ЯΛ с мышиным доменом А; Химера В (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 434) представляет собой внеклеточный домен человеческого ΙΡ17ЯА с мышиным доменом В; Химера С (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 435) представляет собой внеклеточный домен человеческого I^-17ЯΛ с мышиным доменом С; Химера Ό (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 436) представляет собой внеклеточный домен человеческого I^-17ЯΛ с мышиным доменом Ό; Химера Е (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 437) представляет собой внеклеточный домен человеческого I^-17ЯΛ с мышиным доменом Е; Химера Р (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 438) представляет собой внеклеточный домен человеческого I^-17ЯΛ с мышиным доменом Р; Химера О (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 439) представляет собой внеклеточный домен человеческого I^-17ЯΛ с мышиными доменами А и Е; Химера Н (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 440) представляет собой внеклеточный домен человеческого I^-17ЯΛ с мышиными доменами В и Е; Химера Ι (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 441) представляет собой внеклеточный домен человеческого I^-17ЯΛ с мышиными доменами С и Е; Химера I (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 442) представляет собой внеклеточный домен человеческого I^-17ЯΛ с мышиными доменами Ό и Е; Химера К (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 443) представляет собой внеклеточный домен человеческого I^-17ЯΛ с мышиными доменами А и Р; Химера Р (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 444) представляет собой внеклеточный домен человеческого I^-17ЯΛ с мышиными доменами А и Р; Химера М (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 445) представляет собой внеклеточный домен человеческого I^-17ЯΛ с мышиными доменами С и Р; и Химера Ν (8Е^ ΙΌ ΝΟ: 446) представляет собой внеклеточный домен человеческого I^-17ЯΛ с мышиными доменами Ό и Р.
Используя методы, аналогичные методам, описанным в примере 15, проводят мультиплексный анализ с помощью рабочей станции ^ог^аБю^ и программы Вю-Р1ех (ВюЯай, Негси1ек, С А) с целью оп
- 99 019397 ределения нейтрализующих детерминант на человеческом I^-17ЯЛ, анализируя примеры различного связывания Щ-ЩЯА тАЬз с химерными белками по сравнению с белками дикого типа Щ-ЩЯА. Для иммобилизации белка с гистидиновым хвостом (тэгом) используют двенадцать кодов гистидиновых ме!окЬеаб собез (кодов гранул), покрытых пентана (Отцеп, Уа1епс1а, СА; см. \\-\\-\\1.с|1ацеп.сот). 12 Ьеаб собез позволяют провести мультиплексный анализ 11 химерных и дикого типа человеческих ГЬ- 17ЯА.
Для приготовления гранул 100 мкл супернатанта дикого типа I^-17ЯЛ из культуры после транзиторной экспрессии и 100 мкл химерного белка с концентрацией 2.5 мкг/мл связывают с частицами(гранулами)/метками с разными кодами, покрытыми пента-н!з, в течение ночи при 4°С или в течение 2 часов при комнатной температуре при интенсивном встряхивании. Гранулы(частицы)/метки отмывают в соответствии с протоколом производителя и собирают партию из частиц(гранул)/меток с 12 кодами и аликвоты помещают в 2 или 3 колонки 96-луночного фильтрационного планшета (МаШроге, ВШепса, МА, продукт #М8ВVN1250), чтобы получить аналитические точки в двойном или в тройном повторе, соответственно. В лунки добавляют 100 мкл антител против I^-17ЯЛ в 4-кратном разведении, инкубируют 1 ч при комнатной температуре и отмывают. В каждую лунку добавляют по 100 мкл конъюгированного с РЕ Рс против человеческого ΙΑ'ΐ (баскзоп ЬаЬз., Ваг ЫагЬог, МБ, продукт #109-116-170) в разведении 1:100, инкубируют 1 ч при комнатной температуре и отмывают. Гранулы (частицы/метки) ресуспендируют в 1% В8А, встряхивают 3 мин и считывают Вю-Р1ех рабочей станции. Связывание антитела с химерным белком I^-17ЯЛ сравнивают со связыванием антитела с человеческим I^-17ЯЛ дикого типа из того же пула. Проводят титрование антитела по 5 1од шкале. На графике среднюю (медианную) интенсивность флуоресценции (МИ) химерных белков выражают как процент от максимального сигнала дикого типа человеческого I^-17ЯЛ. Считают, что мутации (т.е. мышиные домены), которые повышают ЕС50 (выраженную в нМ) I^-17ЯЛ тАЬ в 3 раза или выше (рассчитывают с помощью программы ОгарйРаб Рпзт®), оказывают отрицательное (негативное) воздействие на связывание I^-17ЯЛ тАЬ. Этими методами определяют нейтрализующие детерминанты для различных антител против I^-17ЯЛ.
На фиг. 19 представлена таблица, в которой суммируется способность ^-^ЯА тАЬз связывать различные химерные белки. Выделенные значения показывают, где I^-17ЯЛ тАЬ не отвечает критериям связывания с этим конкретным химерным белком (п.б., т.е. не определяли означает, что химеру не анализировали). Как сказано выше, даются значения ЕС50. Значение ноль показывает, что связывание антитела отсутствует. Подчёркнутое значение включено как значение ЕС50 с помощью СгарйРаб Рпзт®, хотя кривая титрования практически плоская. В табл. 11 даны контрольные для анализа значения в нМ.
тАЬ ΓηυλνΤ ЬиХУТ кнтрл Зх ννί кнтрл 2х ννί кнтрл
АМн18/АМь18 0.000 0.061 0.182 0.121
АМН1/АМЬ1 1.879 0.134 0.403 0.269
АМН22/АМЬ22 0.000 0.043 0.128 0.085
АМн14/АМь14 3416.000 0.027 0.082 0.055
АМн19/АМь19 770.100 0.062 0.187 0.125
АМН23/АМЬ23 0.000 0.053 0.158 0.106
АМН26/АМЬ26 0.000 0.281 0.843 0.562
АМН21/АМЬ21 0.196 0.018 0.055 0.037
АМн20/АМь20 1.333 0.022 0.066 0.044
Как можно видеть на фиг. 19, по меньшей мере три нейтрализующих детерминанты идентифицировано с учётом областей, влияющих на связывание нейтрализующих антител против I^-17ЯЛ, а именно, Домен В, охватывающий аминокислоты 75-96 человеческого I^-17ЯЛ (8Ε0 ΙΌ N0: 431), Домен С, охватывающий аминокислоты 128-154 человеческого I^-17ЯЛ (8Ε0 ΙΌ N0: 431), и Домен Ό, охватывающий аминокислоты 176-197 человеческого I^-17ЯЛ (8Ε0 ΙΌ N0: 431). Домен В, охватывающий аминокислоты 75-96 человеческого I^-17ЯЛ (8Ε0 ΙΌ N0: 431), оказывает негативное (отрицательное) влияние на связывание нейтрализующих антител АМЩ/АМО и ЛМн23/ЛМ^23. Домен С, охватывающий аминокислоты 128-154 человеческого I^-17ЯЛ (8Ε0 ΙΌ N0: 431), оказывает негативное (отрицательное) влияние на связывание нейтрализующих антител ЛМн22/ЛМ^22 и ЛМн23/ЛМ^23. Домен Ό, охватывающий аминокислоты 176-197 человеческого I^-17ЯЛ (8Ε0 ΙΌ N0: 431), оказывает негативное (отрицательное) влияние на связывание нейтрализующих антител АМЩ/АМО, ЛМн22/ЛМ^22, ЛМн14/ЛМ^14, ЛМн19/ЛМ^19, ЛМн23/ЛМ^23, /ХМ] 121/А.М11.2! и ЛМн20/ЛМ^20. Характеристики связывания антител против I^-17ЯЛ в соответствии с тем, где антитела связываются на человеческом I^-17ЯЛ, подтверждаются двойными химерами. Таким образом, полагают, что Домены В, С и Ό являются нейтрализующими детерминантами.
Пример 17.
Как описано выше, созданы и охарактеризованы антитела, которые связывают человеческий Щ17ЯА и ингибируют или нейтрализуют связывание I^-17Л и/или ХЬ-17Р. Чтобы определить нейтрализующие детерминанты на человеческом I^-17ЯЛ, которые связывают эти различные антитела к I^-17ЯЛ,
- 100 019397 конструируют ряд мутантных ГЕ-17ЯА белков, содержащих замены на аргинин выбранных аминокислотных остатков ГЕ-ПЯА. Замена на аргинин (сканирование аргинином) представляет собой признанный в технике метод определения, где антитела или другие белки связываются с другим белком, см., например, Мшсую/, Т., е! а1., 1995, I. Вю1. СЬет., 270: 37, 21619-21625 и 2иршск, А., е! а1., 2006, I. Вю1. СЬет., 281: 29, 20464-20473. Вообще боковая цепь аргинина положительно заряжена и относительно объёмна по сравнению с другими аминокислотами, что может нарушить связывание антитела с областью антигена, где вводится мутация. Сканирование аргинином является методом, который позволяет определить, действительно ли остаток является частью нейтрализующей детерминанты и/или эпитопа.
аминокислот, распределённых по всему внеклеточному домену человеческого ГЕ-7ЯА, выбирают для замены на аргинин. Селекция смещается в сторону заряженных или полярных аминокислот с целью сделать максимальной возможность для остатка, находящегося на поверхности, и уменьшить вероятность образования неправильно скрученного белка. На фиг. 20 изображены аминокислотные остатки, которые заменены на остаток аргинина в 8ЕЭ ΙΌ ΝΟ: 431. Используя стандартные методы, известные в уровне техники, создают смысловые и антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие мутантные остатки, с учётом критериев, предусматриваемых набором по протоколу 8!га!адеие ОшсксЬаиде® ΙΙ (8!га1адеие/Ад11еи!, 8аи!а С1ага, СА). Мутагенез дикого типа (ЭДГ) ΗиI^-17ЯА-Ε1ад-рΗ^к осуществляют, используя набор ОшсксЬаиде® ΙΙ (81га1адепе). Все химерные конструкции создают таким образом, чтобы они кодировали ЕЬАС-гистидиновый тэг (шесть остатков гистидина) на карбоксильном конце внеклеточного домена с тем, чтобы способствовать очистке при посредстве тэга ро1у-Н1к.
Проводят мультиплексный анализ с применением рабочей станции \Уогкк1аЬоп и программы ВюР1ех (ВюЯаб, Негси1ек, СА), чтобы определить нейтрализующие детерминанты на человеческом ГЬ17ЯА путём анализа различного связывания типичных человеческих тАЬк против Ш^ЯА с аргининовыми мутантами по сравнению с дикого типа кЕ-17ЯА белками. Двенадцать кодов частиц(гранул)/меток (Ьеаб собек) для улавливания пента-Ηίκ (О1адеи, Уа1еис1а, СА; см. \\л\л\!.с.|1адеп.сот) используют для иммобилизации белка с гистидиновым тэгом. 12 кодов частиц(гранул)/меток (Ьеаб собек) позволяют провести мультиплексный анализ 11 I^-17ЯА аргининовых мутантов и дикого типа человеческого I^-17ЯА (8Е6) ΙΌ ΝΟ: 431).
Для приготовления гранул (частиц/меток) 100 мкл супернатантов дикого типа кЕ-17ЯА и I^-17ЯА аргининового мутанта из культур транзиторной экспрессии связывают с гранулами, покрытыми пентаН18, в течение ночи при 4°С или в течение 2 ч при комнатной температуре при интенсивном встряхивании. Гранулы отмывают в соответствии с протоколом производителя и собирают партию из 12 Ьеаб собек и аликвоты помещают в 2 или 3 колонки 96-луночного фильтрационного планшета (М1Шроге, В111епса, МА, продукт #М8ВУЫ1250), чтобы получить аналитические точки в двойном или в тройном повторе, соответственно. В лунки добавляют 100 мкл антител против I^-17ЯА в 4-кратном разведении, инкубируют 1 ч при комнатной температуре и отмывают. В каждую лунку добавляют по 100 мкл конъюгированного с РЕ Ес против человеческого ^С (Засккоп ЬаЬк., Ваг НагЬог, МЕ, продукт #109-116-170) в разведении 1:100, инкубируют 1 ч при комнатной температуре и отмывают. Гранулы ресуспендируют в 1% В8А, встряхивают 3 минуты и считывают Вю-Р1ех рабочей станции. Связывание антитела с аргининовым мутантом I^-17ЯА сравнивают со связыванием антитела с человеческим кЕ-ПЯА дикого типа из того же пула. Проводят титрование антитела по, примерно, 5 1од шкале. На графике среднюю (медианную) интенсивность флуоресценции (МЕО аргининовых мутантных белков выражают как процент от максимального сигнала дикого типа человеческого I^-17ЯА. Полагают, что те мутанты, для которых сигнал всех антител ниже 30% сигнала дикого типа I^-17ЯА, либо имеют слишком низкую концентрацию белка на грануле вследствие слабой экспрессии в транзиторной культуре, либо, возможно, неправильно скручены, и их исключают из анализа: это мутанты Τ51Ε, К53Я, 855Я, Н64Я, Ό75Ε, Е110Я, 0118Я, Τ121, Е123Я, 8147Я, Н148Я, Е158Я, Τ160Κ, Н163Я, К191Я, Τ193Κ, Е213Я, Н251Я, Τ269Κ, Н279Я и Э293Я Считают, что мутации (т.е. замены на аргинин), которые повышают ЕС50 для кЕ-ПЯА тАЬ в 3 раза или выше (рассчитывают с помощью программы СгарЬРаб Рпкт®), оказывают отрицательное (негативное) воздействие на связывание I^-17ЯА тАЬ. Этими методами определяют нейтрализующие детерминанты и эпитопы для различных антител против I^-17ЯА.
На фиг. 21 показаны кривые титрования связывания различных I^-17ЯА тАЬк с мутантом Э152Я I^-17ЯА (т.е. аспарагиновая кислота в положении 152 в 8ЕЭ ΙΌ ΝΟ: 431 мутирует в аргинин). Антитела АМ^/АМьЕ, АМ^/АМ^, АМн14/АМ1,14, АМН19/АМ1,19, АМ^Э/АМ],23, АМ^Е/АМ],21 и ΛМΗ20/ΛМ^20 теряют способность связывать мутант ^152ЯI^-17ЯА. На антитела ΛМΗ18/ΛМ^18 и АМН126/АМ126 ЭТО слабо повлияло, но эти антитела не отвечают пороговым критериям.
Обобщённые результаты сканирования аргинином (замены на аргинин), биннинга и изучения химерных белков представлены на фиг. 22. Методология сканирования аргинином (замены на аргинин) позволила идентифицировать несколько нейтрализующих детерминант: связанный с АМнШАМ,.^ домен, охватывающий аминокислоты 220-284 человеческого I^-17ЯА (8ЕЭ ΙΌ ΝΟ: 431); связанный с АМЛ/АМьЕ домен, сфокусированный на аминокислотном остатке 152 человеческого Ш^ЯА (8ЕО ΙΌ ΝΟ: 431); связанный с ΛМΗ22/ΛМ^22 домен, охватывающий аминокислоты 152-198 человеческого ΙΕ
- 101 019397
17КА (8Ε^ ΙΌ N0:431); связанный с АМН14/АМЬ14, домен, охватывающий аминокислоты 152-297 человеческого I^-17КΑ (8Ε^ ΙΌ N0: 431); связанный с АМН19/АМЬ19, домен, охватывающий аминокислоты 152-186 человеческого I^-17КΑ (8Ε^ ΙΌ N0: 431); связанный с АМН23/АМЬ23 домен, охватывающий аминокислоты 97-297 человеческого I^-17КΑ (8Ε^ ΙΌ N0: 431); связанный с АМН26/АМЬ26 домен, охватывающий аминокислоты 138-270 человеческого I^-17КΑ (8Ε^ ΙΌ N0: 431); связанный с АМН21/АМЬ21, домен, охватывающий аминокислоты 113-198 человеческого I^-17КΑ (8Ε^ ΙΌ N0:431); и связанный с АМН20/АМЬ20 домен, охватывающий аминокислоты 152-270 человеческого I^-17КΑ (8Ε^ ΙΌ N0: 431).
Показано, что все остатки, приведённые на фиг. 22, вызывают абляцию связывания нейтрализующего человеческого моноклонального антитела, которое специфически связывается с человеческим ΙΌ17КА.
Список последовательностей <110> АМГЕН ИНК.
<120> АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЕ БЕЛКИ ДЛЯ 1Б-17 РЕЦЕПТОРА А <130> А-1116-И0-РСТ <140> РСТи320721174 <141> 2007-10-01 <150> 60/969,895 <151> 2007-09-04 <150> 60/873,072 <151> 2006-12-05 <150> 60/827,882 <151> 2006-10-02 <160> 470 <170> РаЬепЫп νεΓείοη 3.3 <210> 1 <211> 131 <212> БЕЛОК <213> Ното заръепз <400> 1
С1п 1 Уа1 С1п Ьеи Θΐη С1и Зег <31у 5 Рго С1у 10 Ьеи Уа1 Ьуз Рго Зег 15 С1и
Тйг Ьеи Зег Ьеи ТЬг Суз ТНг Уа1 Зег С1у С1у Зег Не Зег Азп Туг
20 25 30
Туг Тгр Азп Тгр Не Агд С1п Зег Рго С1у Ьуз С1у Ьеи О1и Тгр Не
35 40 45
С1у Азр Не Туг Туг Зег С1у Зег ТЬг Азп Туг Азп Рго Зег Ьеи Ьуз
50 55 60
Зег Агд Уа1 ТЬг Не Зег Уа1 Азр ТНг Зег Ьуз Азп С1п РЬе Зег Ьеи
65 70 75 80
Ьуз Ьеи Зег Зег Уа1 ТЬг ТЬг А1а Азр ТЬг А1а \7а1 Туг Туг Суз А1а
85 90 95
Агд Азр С1у С1и Ьеи А1а Азп Туг Туг С1у Зег С1у Зег Туг С1п РЬе
100 105 НО
Туг Туг Туг Туг С1у МеЬ Азр Уа1 Тгр С1у С1п С1у ТИг ТИг Уа1 ТЬг
115 120 125
Уа1 Зег Зег
130 <210> 2 <211> 127 <212> БЕЛОК <213> Ното зарьепз
- 102 019397
<400> 2
С1п 1 \7а1 С1п Ьеи С1п С1п Тгр 5 С1у А1а С1у 10 Ьеи Ьеи Ьуз Рго Зег 15 С1и
ТИг Леи Зег Ьеи ТИг Суз А1а Уа1 Зег С1у С1у Зег Рйе Зег С1у Туг
20 25 30
Туг Тгр Зег Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр 11е
35 40 45
С1у С1и Не Азп ΗΪ5 Зег С1у Агд ТИг Азп Туг Азп Рго Зег Ьеи Ьуз
50 55 60
Зег Агд Уа1 ТИг 11е Зег 27а 1 Азр ТИг Зег Ьуз Азп 61п РИе Зег Ьеи
65 70 75 80
Ьуз Ьеи Зег Зег Уа1 Ткг А1а А1а Азр ТИг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а
85 90 95
Агд С1у Рго Туг Туг РИ.е Азр Зег Зег С1у Туг Ьеи Туг Туг Туг Туг
100 105 110
(31у Ьеи Азр Уа1 Тгр С1у С1п С1у ТЙГ Ткг Уа1 ТИг Уа1 Зег Зег
115 120 125 <210> 3 <211> 114 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 3
С1п 1 \7а1 С1п Ьеи Уа1 5 С1и Зег С1у С1у С1у Уа1 10 Уа1 С1п Рго С1у 15 Агд
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег <31у Не Азп РИе Зег Зег Туг
20 25 30
С1у МеЬ Н13 Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Уа1
35 40 45
А1а Уа1 11е Тгр Туг Азр С1у Зег Азп Ьуз ΗΪ8 Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз С1у Агд Рке ТИг 11е Зег Агд Азр Азп Зег Ьуз Азп Ткг Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи С1п МеС Азп Зег Ьеи Агд А1а С1и Азр Ткг А1а 7а1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Азр ТЬг С1у Уа1 Туг Тгр С1у С1п С1у ТЬг Ьеи Уа1 ТИг Уа1
100 105 но
Зег Зег <210> 4 <211> 114 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз
- 103 019397
<400> 4 Ьеи \7а1 5 С1и Зег С1у С1у С1у Уа1 10 Уа1 С1п Рго С1у 15 Агд
С1п 1 Уа1 С1п
5ег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег С1у 11е Азп Рке Зег Зег Туг
20 25 30
61у МеЕ ΗΪ3 Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Уа1
35 40 45
А1а Уа1 Не Тгр Туг Азр С1у Зег Азп Ьуз Н13 Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз С1у Агд Рке Ткг 11е Зег Агд Азр Азп Зег Ьуз Азп Ткг Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи С1п Мер Азп Зег Ьеи Агд А1а <31и Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Азр Ткг О1у Уа1 Туг Тгр С1у С1п С1у Ткг Ьеи Уа1 Ткг Уа1
100 105 но
Зег Зег
<210> 5 <211> 125 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
<400> 5
С1п 1 Уа1 С1п Ьеи С1п С1и 5 Зег С1у Рго С1у 10 Ьеи Уа1 Ьуз Рго Зег 15 С1и
Ткг Ьеи Рго Ьеи Ткг Суз Ткг Уа1 Зег С1у С1у Зег Не Агд Зег Туг
20 25 30
Туг Тгр Зег Тгр Не Агд С1п Рго А1а С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Не
35 40 45
С1у Агд 11е Туг Агд Зег С1у Азп Ткг 11е Туг Азп Рго Зег Ьеи Ьуз
50 55 60
Зег Агд Уа1 Ткг Мек Зег Не Азр Ткг Зег Ьуз Азп С1п Рке Зег Ьеи
65 70 75 80
Ткг Ьеи Зег Зег Уа1 Ткг А1а А1а Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а
85 90 95
Агд С1и Азп Туг Зег С1и Зег Зег С1у Ьеи Туг Туг Туг Туг С1у МеЬ
100 105 110
Азр Уа1 Тгр С1у С1п С1у Ткг Ткг Уа1 Ткг Уа1 Зег Зег
115 120 125
<210> 6 <211> 124 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз
- 104 019397 <400> б
С1п 1 Уа1 С1п Ьеи Уа1 5 С1п Бег С1у А1а 61и 10 Уа1 Буз Ьуз Рго С1у 15 А1а
Бег Уа1 Ьуз Уа1 Бег Суз Буз А1а Бег С1у Туг Тйг Беи ТЙГ Агд Туг
20 25 30
С1у Не Бег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго О1у С1п С1у Беи С1и Тгр Мей
35 40 45
С1у Тгр 11е Бег А1а Туг Азп С1у Азп Ткг Азп Туг А1а С1п Ьуз Беи
50 55 60
С1п С1у Агд Х7а1 Тйг Мер Тйг Тйг Азр Ткг Бег Тйг Бег ТЙГ А1а Туг
65 70 75 80
Мей С1и Беи Агд Бег Беи Агд Бег Азр Азр ТЙГ А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Агд Азр Туг Азр 11е Беи Тйг 61у Туг Туг Азп С1у Рйе Азр
100 105 110
Рго Тгр С1у С1п С1у Тйг Беи Уа1 Тйг Уа1 Бег Бег
115 120 <210> 7 <211> 124 <212> БЕЛОК <213> Ното зар1епз <400> 7
С1п 1 Уа1 С1п Беи Уа1 5 С1п Бег С1у А1а С1и 10 Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у 15 А1а
Бег Уа1 Ьуз Уа1 Бег Суз Буз А1а Бег С1у Туг ТЙГ Беи ТЙГ Агд Туг
20 25 30
С1у 11е Бег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Беи С1и Тгр Мей
35 40 45
С1у Тгр 11е Бег А1а Туг Азп С1у Азп ТЙГ Азп Туг А1а С1п Ьуз Беи
50 55 60
С1п С1у Агд Уа1 Тйг Мей Тйг Тйг Азр Тйг Бег ТЙГ Бег ТЙГ А1а Туг
65 70 75 80
Мей С1и Беи Агд Бег Беи Агд Бег Азр Азр Тйг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Агд Азр Туг Азр 11е Беи ТЙГ С1у Туг Туг Азп С1у Рйе Азр
100 105 110
Рго Тгр С1у С1п О1у ТЙГ Беи Уа1 ТЙГ Уа1 Бег Бег
115 120 <210> 8 <211> 124 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
- 105 019397 <400> 8
С1п 1 Уа1 С1п Беи Уа1 5 С1п Зег С1у А1а С1и 10 Уа1 Буз Буз Рго С1у 15 А1а
Зег Уа1 Буз \7а1 Зег Суз Буз А1а Зег С1у Азп Ткг Рке Ткг С1у Туг
20 25 30
С1у Не Зег Тгр νβΐ Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Беи С1и Тгр Мек
35 40 45
С1у Тгр 11е Зег А1а Туг Азп С1у Азп Ткг Азп Туг А1а С1п Азп Беи
50 55 60
Θΐη С1у Агд Уа1 Ткг Мек Ткг Ткг Азр Ткг Зег Ткг Зег Ткг А1а Туг
65 70 75 80
Мек С1и Беи Агд Зег Беи Агд Зег Азр Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Агд Азр Туг Азр 11е Беи Ткг С1у Туг Туг Азп С1у Рке Азр
100 105 но
Рго Тгр С1у С1п С1у Ткг Беи Уа1 Ткг Уа1 Зег Зег
115 120 <210> 9 <211> 124 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз <400> 9
С1п 1 Уа1 С1п Беи Уа1 5 С1п Зег С1у Уа1 С1и Уа1 10 Буз Буз Рго С1у 15 А1а
Зег Уа1 Буз Уа1 Зег Суз Буз А1а Зег С1у Туг Ткг Беи Ткг Агд Туг
20 25 30
С1у 11е Зег Тгр Уа1 Агд 61п А1а Рго С1у С1п С1у Беи С1и Тгр Мек
35 40 45
С1у Тгр 11е Зег А1а Туг Азп С1у Азп Ткг Азп Туг А1а С1п Буз Беи
50 55 60
С1п С1у Агд Уа1 Ткг Мек Ткг Ткг Азр Ткг Зег Ткг Зег Ткг А1а Туг
65 70 75 80
Мек 61и Беи Агд Зег Беи Агд Зег Азр Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Агд Азр Туг Азр 11е Беи Ткг С1у Туг Туг Азп С1у Рке Азр
100 105 но
Рго Тгр С1у С1п С1у Ткг Беи Уа1 Ткг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 10 <211> 124 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
106 019397
<400> 10
С1п 1 Уа1 Θΐη Ьеи <31п С1и 5 Зег С1у Рго С1у 10 Ьеи Уа1 Ьуз Рго Зег 15 С1п
ТИг Ьеи Зег Ьеи ТИг Суз ТИг Уа1 Зег С1у С1у Зег Не Зег Зег С1у
20 25 30
С1у Туг Туг Тгр Зег Тгр Не Агд С1п ΗΪ3 Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и
35 40 45
Тгр Не С1у Туг Не Туг РНе Зег С1у Зег А1а Туг Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Ьеи Ьуз Зег Агд Уа1 А1а Не Зег Уа1 Азр ТИг Зег Ьуз Азп С1п РНе
65 70 75 80
Зег Ьеи Ьуз Ьеи Зег Зег Уа1 ТИг А1а А1а Азр ТИг А1а Уа1 Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд С1и Туг Туг Азр Зег Зег С1у Туг Рго Азр А1а РНе Азр
100 105 110
Не Тгр С1у С1п С1у ТИг МеС Уа1 ТИг Уа1 Зег Зег
115 120 <210> 11 <211> 114 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз
<400> 11 С1п Уа1 С1п 1 Ьеи Уа1 С1и Зег С1у С1у С1у Уа1 Уа1 С1п Рго С1у 15 Агд
5 10
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а ТИг Зег С1у Не ТИг РНе Зег Зег Туг
20 25 30
С1у Мер Н1з Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Уа1
35 40 45
А1а Уа1 11е Тгр Туг Азр С1у Зег Азп Ьуз Туг Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз С1у Агд РНе ТИг Не Зег Агд Азр Азп Зег Ьуз Азп ТИг Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи С1п Мер Азп Зег Ьеи Агд А1а С1и Азр ТИг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Азр ТИг Ьуз Азр Туг Тгр С1у С1п С1у ТИг Ьеи Уа1 ТИг Уа1
100 105 110
Зег Зег <210> 12 <211> 116 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
- 107 019397
<400> 12 Зег С1у А1а 61и 10 Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у 15 А1а
С1п 1 Уа1 С1п Ьеи \7а1 5 С1п
Зег Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Зег С1у Туг ТИг Ьеи ТЬг Зег Туг
20 25 30
С1у Не Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи С1и Тгр МеЬ
35 40 45
С1у Тгр 11е Зег Ткг Туг Ьуз С1у Азп ТЬг Азп Туг А1а С1п Ьуз Ьеи
50 55 60
С1п С1у Агд Уа1 ТЬг Мек ТЬг ТИг Азр ТИг Зег ТИг Зег ТИг А1а Туг
65 70 75 80
МеЬ С1и Ьеи Агд Зег Ьеи Агд Зег Азр Азр ТИг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Ьуз С1п Ьеи Уа1 Рке Азр Туг Тгр С1у С1п С1у ТИг Ьеи \7а1
100 105 110
Ткг Уа1 Зег Зег
115 <210> 13 <211> 121 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 13
61п 1 Уа1 С1п Ьеи Уа1 5 С1и Зег С1у О1у С1у Уа1 10 Уа1 С1п Рго СЯу 15 Агд
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег С1у РНе ТЬг РНе Зег Зег Туг
20 25 30
С1у Меи С1п Тгр Х7а1 Агд <31п А1а Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр \7а1
35 40 45
А1а Уа1 11е Тгр Туг Азр С1у Азп Ьуз Ьуз Туг Туг А1а Азр Зег νβΐ
50 55 60
Ьуз С1у Агд РНе ТИг 11е Зег Агд Азр Азп Зег Ьуз Азп ТИг Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи С1п Мер Азп Зег Ьеи Агд А1а 61и Азр ТИг А1а уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд С1у Агд Уа1 Агд Азр Туг Туг Туг С1у Мек Азр Уа1 Тгр С1у
100 105 110
Θΐη С1у ТЬг ТПг 37а1 ТИг Уа1 5ег Зег
115 120 <210> 14 <211> 116 <212> БЕЛОК <213> Ното зардепз
- 108 019397
<400> 14 С1у 15 А1а
С1п Уа1 1 С1п Беи Уа1 5 Θΐη Зег С1у А1а С1и 10 Уа1 Ьуз Ьуз Рго
Зег Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Зег С1у Туг ТИг РНе ТИг Агд Туг
20 25 30
С1у Не Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи С1и Тгр МеЕ
35 40 45
С1у Тгр 11е Зег ТИг Туг Зег С1у Азп ТИг Азп Туг А1а С1п Ьуз Ьеи
50 55 60
С1п С1у Агд Уа1 ТИг МеЬ ТИг ТИг Азр Ткг Зег ТИг Зег ТИг А1а Туг
65 70 75 80
Мер С1и Ьеи Агд Зег Ьеи Агд Зег Азр Азр ТИг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Агд С1п Ьеи Туг РИе Азр Туг Тгр С1у С1п С1у ТИг Ьеи Уа1
100 105 110
ТИг \7а1 5ег Зег
115 <210> 15 <211> 121 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз
<400> 15
С1п \7а1 1 С1п Ьеи Уа1 5 С1и Зег С1у С1у С1у Уа1 10 (7а 1 С1п Рго С1у 15 Агд
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег С1у РНе ТИг РНе Зег Зег Туг
20 25 30
С1у Мер С1п Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр \7а1
35 40 45
А1а Уа1 11е Тгр Туг Азр С1у Азп Ьуз Ьуз Туг Туг А1а Азр Зег \7а1
50 55 60
Ьуз С1у Агд РНе ТИг 11е Зег Агд Азр Азп Зег Ьуз Азп ТИг Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи С1п Мек Азп Зег Ьеи Агд А1а С1и Азр ТИг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд С1у Агд Уа1 Агд Азр Туг Туг Туг С1у МеЬ Азр Уа1 Тгр С1у
100 105 но
С1п С1у ТИг ТИг Уа1 ТИг Уа1 Зег Зег
115 120 <210> 16 <211> 116 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз
- 109 019397
<400> 16 Θΐη Зег С1у А1а С1и Уа1 10 Ьуз Ьуз Рго С1у 15 А1а
Θΐη \7а1 1 С1п Ьеи \7а1 5
Зег Уа1 Буе Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Зег С1у Туг Ткг Рке Ткг Зег Туг
20 25 30
С1у Не Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи С1и Тгр Мек
35 40 45
С1у Тгр 11е Зег А1а Туг Азп С1у Азп Ткг Ьуз Туг А1а С1п Ьуз Ьеи
50 55 60
С1п С1у Агд Уа1 Ткг МеЬ Ткг Ткг Азр Ткг Зег Ткг Зег Ткг Уа1 Туг
65 70 75 80
Мек С1и Ьеи Агд Зег Ьеи Агд Зег Азр Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Ьуз Θΐη Ьеи Уа1 Рке Азр Туг Тгр С1у <31п С1у Ткг Ьеи Уа1
100 105 110
Ткг Уа1 Зег Зег
115
<210> 17 <211> 116 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
<400> 17 Ьеи Уа1 5 С1п Зег С1у А1а С1и 10 Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у 15 А1а
С1п Уа1 1 С1п
А1а Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Ткг С1у Туг Ткг Ьеи Ткг Зег Туг
20 25 30
С1у 11е Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи С1и Тгр Мер
35 40 45
С1у Тгр 11е Зег А1а Туг Зег С1у Азп Ткг Ьуз Туг А1а С1п Ьуз Ьеи
50 55 60
С1п С1у Агд Уа1 Ткг МеЕ Ткг Ткг Азр Ткг Зег Ткг Зег Ткг А1а Туг
65 70 75 80
Мер С1и Ьеи Агд Зег Ьеи Агд Зег Азр Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Ьуз С1п Ьеи Уа1 Рке Азр Туг Тгр С1у С1п С1у Ткг Ьеи Уа1
100 105 110
Ткг Уа1 Зег Зег
115 <210> 18 <211> 126
- 110 019397 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз
<400> 18
С1п Уа1 1 С1п Ьеи \7а1 5 С1п Бег С1у А1а С1и 10 Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у 15 А1а
Бег Уа1 Ьуз Уа1 Бег Суз Ьуз А1а Бег С1у Туг Бег РНе ТИг Азр Туг
20 25 30
Туг Мер ΗΪ8 Тгр νβΐ Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи С1и Тгр Мер
35 40 45
С1у Тгр Мер ΗΪ3 Рго Азп Бег С1у С1у ТИг Азр Ьеи А1а С1п Агд РНе
50 55 60
С1п С1у Агд Уа1 ТИг Мер ТИг Агд Азр ТИг Бег Пе Бег ТИг А1а Туг
65 70 75 80
Мер С1и Ьеи Бег Агд Ьеи Агд Бег Азр Азр ТИг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд С1у С1у Туг Суз Бег ТИг Ьеи Бег Суз Бег РНе Туг Тгр Туг
100 105 110
РНе Азр Ьеи Тгр С1у Агд С1у ТИг Ьеи Уа1 ТИг Уа1 Бег Бег
115 120 125
<210> 19 <211> 116 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
<400> 19
С1п Уа1 1 С1п Ьеи \7а1 5 С1п Бег С1у А1а С1и 10 Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у 15 А1а
Бег Уа1 Ьуз Уа1 Бег Суз Ьуз А1а Бег С1у Туг ТИг Ьеи ТИг Бег Туг
20 25 30
С1у 11е Бег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи С1и Тгр МеР
35 40 45
С1у Тгр 11е Бег А1а Туг Бег С1у Азп ТИг Ьуз Туг А1а С1п Ьуз РНе
50 55 60
С1п С1у Агд Уа1 ТИг Мер ТИг ТИг Азр ТИг Бег ТИг Бег ТИг А1а Туг
65 70 75 80
Мер С1и Ьеи Агд Бег Ьеи Агд Бег Азр Азр ТИг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Агд С1п Ьеи А1а Ьеи Азр Туг Тгр С1у Θΐη С1у ТИг Ьеи Уа1
100 105 110
ТИг Уа1 Бег Бег
115
- 111 019397 <210> 20 <211> 118 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 20
С1и 1 \7а1 С1п Ьеи 17а 1 5 С1и Бег С1у С1у С1у Ьеи \7а1 10 С1п Рго С1у 15 С1у
Бег Ьеи Агд Ьеи Бег Суз А1а А1а Бег С1у Рйе Тйг Рйе Бег Бег Туг
20 25 30
Бег Мей Азп Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у Ьуз О1у Ьеи С1и Тгр Уа1
35 40 45
Бег Рйе 11е Бег А1а Агд Бег Бег Тйг 11е Туг Туг А1а Азр Бег Уа1
50 55 60
Ьуз С1у Агд Рйе Тйг 11е Бег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Бег Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи С1п Мей Азп Бег Ьеи Агд Азр С1и Азр Тйг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Рго Ьуз Уа1 С1у С1у С1у Мей Азр Уа1 Тгр С1у С1п С1у ТЙГ
100 105 110
Тйг Уа1 Тйг Уа1 Бег Бег
115 <210> 21 <211> 118 <212> БЕЛОК <213> Ното зар1епз <400> 21
С1и 1 Уа1 С1п Ьеи Уа1 5 С1и Бег С1у С1у С1у Бег 10 Уа1 С1п Рго С1у 15 С1у
Бег Ьеи Агд Ьеи Бег Суз А1а А1а Бег С1у Рйе Тйг Рйе Бег Бег Туг
20 25 30
Бег Мей Азп Тгр νβΐ Агд С1п А1а Рго С1у Ьуз С1у Ьеи 61и Тгр \7а1
35 40 45
Бег 11е 11е Бег Бег Агд Бег Бег 11е 11е ΗΪ3 Туг А1а Азр Бег Уа1
50 55 60
Ьуз С1у Агд Рйе Тйг 11е Бег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Бег Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи С1п Мей Азп Бег Ьеи Агд Азр С1и Азр Тйг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Рго Ьуз Уа1 С1у С1у С1у Мей Азр Уа1 Тгр С1у С1п С1у ТЙГ
100 105 но
Тйг Уа1 Тйг Уа1 Бег Бег
115
- 112 019397 <210> 22 <211> 116 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 22
С1п 1 \7а1 Θΐη Ьеи \7а1 5 Θΐη Зег С1у А1а С1и Уа1 10 Ьуз Ьуз Рго С1у 15 А1а
Зег Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Зег С1у Туг Ткг Рке Ткг Агд Туг
20 25 30
61у Не Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи С1и Тгр Мер
35 40 45
С1у Тгр 11е Зег А1а Туг Зег С1у Азп Ткг Азп Туг А1а С1п Ьуз Ьеи
50 55 60
С1п С1у Агд 17а1 Ткг Мер Ткг Ткг Азр Ткг Зег Ткг Зег Ткг А1а Туг
65 70 75 80
Мер С1и Ьеи Агд Зег Ьеи Агд Зег Азр Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Агд С1п Ьеи Туг Рке Азр Туг Тгр С1у С1п С1у Ткг Ьеи Уа1
100 105 110
Ткг Уа1 Зег Зег
115
<210> 23 <211> 125 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз
<400> 23
С1п Уа1 С1п Ьеи С1п б1и Зег С1у Рго С1у Ьеи Х7а1 Ьуз Рго Зег С1и
1 5 10 15
Ткг Ьеи Зег Ьеи Ткг Суз Ткг Уа1 Зег С1у <31у Зег 11е Зег Зег Туг
20 25 30
Туг Тгр Зег Тгр 11е Агд С1п Рго А1а С1у Ьуз Агд Ьеи 61и Тгр 11е
35 40 45
С1у Агд 11е Туг Рго Зег С1у Агд Ткг Азп Туг Азп Рго Зег Ьеи Ьуз
50 55 60
Зег Агд Уа1 Ткг Мер Зег Уа1 Азр Ткг Зег Ьуз Азп С1п Рке Зег Ьеи
65 70 75 80
Ьуз Ьеи Зег Зег Уа1 Ткг А1а А1а Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а
85 90 95
Агд С1и А1а Туг С1и Ьеи С1п Ьеи С1у Ьеи Туг Туг Туг Туг С1у Мер
100 105 110
Азр Уа1 Тгр С1у С1п С1у Ткг Рго Уа1 Ткг Уа1 Зег Зег
115 120 125
- 113 019397 <210> 24 <211> 125 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 24
С1п 1 Уа1 С1п Ьеи С1п 5 С1и Бег С1у Рго С1у 10 Ьеи Уа1 Ьуз Рго Бег 15 С1и
Ткг Ьеи Бег Ьеи Тйг Суз Ткг Уа1 Бег С1у С1у Бег 11е Бег Бег Туг
20 25 30
Туг Тгр Бег Тгр 11е Агд С1п А1а А1а С1у Ьуз Агд Ьеи С1и Тгр 11е
35 40 45
С1у Агд Не Туг Рго Бег С1у Агд ТЬг Азп Туг Азп Рго Бег Ьеи Ьуз
50 55 60
5ег Агд Уа1 ТИг Мек Бег Уа1 Азр ТЬг Бег Ьуз Азп С1п РИе Бег Ьеи
65 70 75 80
Ьуз Ьеи Бег Бег Уа1 ТЙГ А1а А1а Азр ТИг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а
85 90 95
Агд С1и А1а Туг С1и Ьеи С1п Ьеи С1у Ьеи Туг Туг Туг Туг С1у Мек
100 105 110
Азр Уа1 Тгр С1у С1п С1у ТЬг Рго Уа1 ТИг Уа1 Бег Бег
115 120 125 <210> 25 <211> 124 <212> БЕЛОК <213> Ното зар1епз <400> 25
С1п 1 Уа1 С1п Ьеи С1п 5 С1и Бег С1у Рго С1у 10 Ьеи Уа1 Ьуз Рго Бег 15 С1п
ТЬг Ьеи Бег Ьеи ТЙГ Суз ТЬг Уа1 Бег С1у С1у Бег 11е Бег Бег С1у
20 25 30
С1у Туг Туг Тгр Бег Тгр 11е Агд С1п Н13 Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и
35 40 45
Тгр 11е С1у Туг 11е Туг Туг Бег 61у Азп Ткг Туг Туг Азп Рго Бег
50 55 60
Ьеи Агд Бег Агд Уа1 ТИг 11е Бег Уа1 Азр ТЬг Бег Ьуэ Азп 61п РИе
65 70 75 80
Бег Ьеи Ьуз Ьеи Азп Бег Уа1 Тйг А1а А1а Азр ТЪг А1а \7а1 Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд С1и А1а С1у С1у Азп Бег А1а Туг Туг Туг С1у МеЕ Азр
100 105 110
Уа1 Тгр С1у С1п С1у Тйг ТИг Уа1 Ткг Уа1 Бег Бег
115 120
- 114 019397 <210> 26 <211> 125 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз
<400> 26 Беи Уа1 5 С1и Зег С1у С1у С1у 10 Беи
С1п 1 Уа1 С1п
Зег Беи Агд Беи Зег Суз А1а А1а Зег 61у РЬе
20 25
Туг Мер Зег Тгр 11е Агд С1п А1а Рго С1у Буз
35 40
Зег Туг Не Зег Зег Зег С1у Зег Ткг 11е Туг
50 55
Буз С1у Агд РЬе Ткг 11е Зег Агд Азр Азп А1а
65 70 75
Беи С1п Мер Азп Зег Беи Агд А1а С1и Азр ТИг
85 90
А1а Агд Азр Агд ТИг Туг Туг РЬе С1у Зег С1у
100 105
Азр Уа1 Тгр С1у С1п С1у ТИг Ткг Уа1 ТИг Уа1
115 120
5ег Зег
125
Уа1 Буз Рго С1у 15 С1у
ТЬг РИе Зег 30 Азр Туг
С1у Беи 45 С1и Тгр \7а1
Туг 60 А1а Азр Зег Уа1
Буз Азп Зег Беи Туг 80
А1а 17а 1 Туг Туг 95 Суз
Зег Туг С1и 110 С1у МеВ
<210> 27 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното заръепз <400> 27
Азр 1 11е Беи МеБ ТИг 5 С1п Зег Рго Зег Зег Беи 10 Зег А1а Зег Уа1 15 С1у
Азр Агд Уа1 Ткг 11е ТНг Суз Агд А1а Зег С1п С1у 11е Агд Азп Азр
20 25 30
Беи С1у Тгр Туг О1п С1п Буз Рго С1у Буз А1а Рго Буз Агд Веи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Зег Зег Беи С1п Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РЬе Зег С1у
50 55 60
Зег С1у Зег С1у ТЬг С1и РИе Ткг Беи ТИг 11е Зег Зег Веи С1п Рго
65 70 75 80
С1и Азр РИе А1а Ткг Туг Туг Суз Беи С1п ΗΪ3 Азп Зег Азп Рго Рке
85 90 95
ТЬг Рке С1у Рго С1у ТЬг Вуз Уа1 Азр 11е Вуз
100 105 <210> 28
- 115 019397 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Ното зарлепз
<400> 28 Зег Рго
С1и 1 11е Уа1 МеЪ Ткг 5 С1п
С1и Агд А1а ТНг 20 Ьеи Зег Сув Агд
Ьеи νβΐ Тгр 35 Туг С1п С1п Агд Рго 40
Туг С1у 50 А1а Зег ТЪг Агд А1а 55 Азп
Зег 65 С1у Зег С1у Ткг С1и 70 Рке Ткг
С1и Азр Рке А1а Уа1 85 Туг Туг Суз
РЬе С1у С1п С1у 100 Зег Ьуз Уа1 С1и
А1а ТЬг 10 Ьеи Зег Уа1 Зег Рго 15 С1у
А1а 25 Зег С1п Зег Уа1 Зег 30 Агд Азп
С1у С1п А1а Рго Агд 45 Ьеи Ьеи 11е
С1у 11е Рго А1а 60 Агд РЬе Зег С1у
Ьеи Тйг 11е 75 Зег Зег Ьеи С1п Зег 80
Θΐη С1п 90 Туг Ьуз Зег Тгр Агд 95 Т11Г
11е 105 Ьуз
<210> 29 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното зарлепз
<400> 29 Зег А1а Зег Уа1 15 С1у
Авр 1 11е С1п Мек ТИг 01п 5 Зег Рго Зег Зег Ьеи 10
Азр Агд \7а1 Ткг 11е ТИг Суз Агд А1а Зег С1п С1у 11е Агд Азп Азр
20 25 30
Ьеи С1у Тгр Туг (31п С1п Ьуз Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Агд Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Зег Зег Ьеи С1п Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у
50 55 60
Зег С1у Зег С1у ТИг С1и РНе ТИг Ьеи Ткг 11е Зег Зег Ьеи С1п Рго
65 70 75 80
С1и Азр РИе А1а ТИг Туг Туг Суз Ьеи С1п ΗΪ5 Ьуз Зег Туг Рго Ьеи
85 90 95
Ткг РИе С1у С1у С1у ТИг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100 105
<210> 30 <211> 108 <212> БЕЛОК <213> Ното зарлепз <400> 30
С1и Не Уа1 Мек Тйг С1п Зег Рго А1а ТИг Ьеи Зег Уа1 Зег Рго С1у
- 116 019397
1 5 10 15
С1и Агд А1а Ткг Ьеи Бег Суз Агд А1а Бег Θΐη Бег Уа1 Бег Агд Азп
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг С1п Θΐη Ьуз Рго 61у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг С1у А1а Бег ТЬг Агд А1а ΤΪ1Γ С1у 11е Рго А1а Агд РНе Бег С1у
50 55 60
Бег С1у 5ег С1у ТИг С1и РНе ΤΪ1Γ Ьеи ТЬг 11е Бег Бег Ьеи С1п Бег
65 70 75 80
С1и Азр РИе А1а Уа1 Туг Туг Суз С1п С1п Туг Азп Азп Тгр Рго ТИг
85 90 95
Тгр ТИг РНе С1у С1п С1у Ткг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100 105 <210> 31 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
<400> 31 Ткг 5 С1п Бег Рго
Азр 1 11е С1п МеЕ
Азр Агд Уа1 Ткг 20 11е ТИг Суз Агд
Ьеи С1у Тгр 35 Туг С1п С1п Ьуз Рго 40
Туг А1а 50 А1а Бег Бег Рке С1п 55 Бег
Бег 65 С1у Бег С1у Ткг С1у 70 РНе ТИг
С1и Азр РНе А1а ТНг 85 Туг Туг Суз
ТИг РИе С1у С1п 100 С1у ТЬг Ьуз Уа1
Бег Бег 10 Ьеи Бег А1а Бег Уа1 15 С1у
А1а 25 Бег С1п С1у 11е Агд 30 Азп Азр
С1у Ьуз А1а Рго Ьуз 45 Агд Ьеи 11е
С1у Уа1 Рго Бег 60 Агд РИе Бег С1у
Ьеи ТЬг 11е 75 Бег Бег Ьеи С1п Рго 80
Ьеи С1п 90 Н13 Азп Бег Туг Рго 95 Рго
С1и 105 11е Ьуз
<210> 32 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното зарлепз <400> 32
Азр 1 11е С1п МеС Ткг 5 С1п Бег Рго Бег Бег 10 Ьеи Бег А1а Зег Уа1 15 С1у
Азр Агд Уа1 Ткг 20 11е ТЬг Суз Агд А1а 25 Бег С1п С1у 11е Агд 30 Азп Азр
Ьеи С1у Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Агд Ьеи 11е
- 117 019397
35 40 45
Туг А1а А1а Бег Бег Беи С1п Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд Рке Бег С1у
50 55 60
Бег С1у Бег С1у Ткг С1и Рке Ткг Беи Ткг 11е Бег Бег Беи С1п Рго
65 70 75 80
61и Азр Рке А1а Ткг Туг Туг Суз Беи С1п ΗΪ5 Буз Бег Туг Рго Беи
85 90 95
Ткг Рке С1у С1у С1у Ткг Буз Уа1 С1и Не Буз
100 105 <210> 33 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз
<400> 33 С1п Бег Рго Бег Бег Беи 10 Бег А1а Бег Уа1 15 С1у
Азр 1 11е С1п МеБ Ткг 5
Азр Агд Уа1 Ткг 11е Ткг Суз Агд А1а Бег С1п С1у 11е Агд Азп Азр
20 25 30
Беи С1у Тгр Туг С1п С1п Буз Рго С1у Буз А1а Рго Буз Агд Беи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Бег Бег Беи С1п Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд Рке Бег С1у
50 55 60
Бег С1у Бег С1у Ткг С1и Рке Ткг Беи Ткг 11е Бег Бег Беи С1п Рго
65 70 75 80
С1и Азр Рке А1а Ткг Туг Туг Суз Беи С1п Η15 Буз Бег Туг Рго Беи
85 90 95
Ткг Рке С1у С1у С1у Ткг Буз Уа1 С1и 11е Буз
100 105 <210> 34 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз
<400> 34 Рго Бег Бег 10 Беи Бег А1а Бег Уа1 15 С1у
Азр 1 11е С1п Мер Ткг 5 С1п Бег
Азр Агд \7а1 Ткг 11е Ткг Суз Агд А1а Бег С1п С1у Не Агд Азп Азр
20 25 30
Беи С1у Тгр Туг С1п С1п Буз Рго С1у Буз А1а Рго Буз Агд Беи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Бег Бег Беи 61п Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд Рке Бег С1у
50 55 60
Бег С1у Бег С1у Ткг С1и Рке Τϊιγ Беи Ткг 11е Бег Бег Беи С1п Рго
- 118 019397
65 70 75 80
С1и Азр Рке А1а Ткг Туг Туг Суз Ьеи С1п ΗΪ3 Ьуз Зег Туг Рго Ьеи
85 90 95
Ткг Рке С1у С1у С1у Ткг Ьуз Ча1 С1и 11е Ьуз
100 , 105 <210> 35 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
<400> 35
Азр 1 11е С1п МеЬ Ткг С1п 5 Зег Рго Зег Зег 10 Ьеи Зег А1а Зег 17а 1 15 С1у
Азр Агд Уа1 Ткг 11е Ткг Суз Агд А1а Зег С1п С1у Не Агд Азп Азр
20 25 30
Ьеи С1у Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Агд Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Зег Зег Ьеи С1п Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд Рке Зег С1у
50 55 60
Зег С1у Зег С1у Ткг С1и Рке Ткг Ьеи Ткг 11е Зег Зег Ьеи С1п Рго
65 70 75 80
С1и Азр Рке А1а Ткг Туг Туг Суз Ьеи С1п ΗΪ3 Ьуз Зег Туг Рго Ьеи
85 90 95
Ткг Рке С1у С1у С1у Ткг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100 105
<210> 36 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното зарйепз <400> 36
Азр 1 11е С1п МеЬ Ткг 5 С1п Зег Рго Зег Зег 10 Уа1 Зег А1а Зег Уа1 15 С1у
Азр Агд Уа1 Ткг Не Ткг Суз Агд А1а Зег С1п С1у 11е Агд Зег Тгр
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи Не
35 40 45
Рке А1а А1а Зег Зег Ьеи С1п Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд Рке Зег С1у
50 55 60
Зег С1у Зег С1у Ткг О1и Рке Ткг Ьеи Ткг 11е Зег Зег Ьеи С1п Рго
65 70 75 80
С1и Азр Рке А1а Ткг Туг Туг Суз С1п С1п А1а Азп Азп Рке Рго Агд
85 90 95
Ткг Рке С1у С1п С1у Ткг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
- 119 019397
100 105 <210> 37 <211> 108 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз <400> 37
С1и 1 Не Уа1 МеБ ТИг 5 Οίη Зег Рго А1а ТНг 10 Ьеи Зег νβΐ Зег Рго 15 О1у
С1и Агд А1а Тйг Ьеи Зег Сун Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Зег Зег Азп
20 25 30
Беи А1а Тгр Туг С1п 31η Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг С1у А1а Зег тйг Агд А1а А1а О1у 11е Рго А1а Агд РИе Зег С1у
50 55 60
С1у С1у Зег С1у ТЙГ А1а РИе ТНг Ьеи Τ1ΊΓ 11е Зег Азп Ьеи С1п Зег
65 70 75 80
С1и Азр Рйе А1а Уа1 Туг Туг Суз О1п Н1з Туг 11е Азп Тгр Рго Ьуз
85 90 95
Тгр ΤΪ1Γ Рйе С1у Θΐη С1у Ткг Ьуз νβΐ Азр 11е Ьуз
100 105 <210> 38 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз <400> 38
С1и 1 11е Уа1 МеЬ ТИг 5 С1п Зег Рго А1а ТИг Ьеи Зег Уа1 10 Зег Рго 15 С1у
С1и Агд А1а ТИг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег 11е Зег Зег Зег
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг С1п О1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг С1у А1а Зег Тйг Агд А1а ТИг О1у 11е Рго А1а Агд Рке Зег С1у
50 55 60
Зег С1у Зег С1у ТЙГ С1и РЬе ТИг Ьеи ТИг 11е Зег Зег Ьеи С1п Зег
65 70 75 80
С1и Азп РИе А1а Уа1 Туг Туг Суз С1п С1п Туг Азр Азп Тгр Рго Ьеи
85 90 95
ТИг РИе С1у О1у С1у Ткг Ьуз Уа1 С1и Не Ьуз
100 105 <210> 39 <211> 112 <212> БЕЛОК
- 120 019397 <213> Ното зарЬепз <400> 39
Азр 1 11е Уа1 Мер Ткг 5 Θΐη Ткг Рго Ьеи Зег 10 Ьеи Зег Уа1 Ткг Рго 15 С1у
С1п Рго А1а Зег 11е А1а Суз Ьуз Зег Зег С1п Зег Ьеи Ьеи ΗΪ3 Зег
20 25 30
Азр С1у Ьуз Ткг Туг Ьеи Туг Тгр Туг Ьеи С1п Ьуз Рго С1у С1п Рго
35 40 45
Рго С1п Ьеи Ьеи 11е Туг С1и Уа1 Зег Ткг Агд Рке Зег С1у 57а 1 Рго
50 55 60
Азр Агд Рке Зег С1у Зег С1у Зег С1у Ткг Азр Рке Ткг Ьеи Ьуз 11е
65 70 75 80
Зег Агд Уа1 С1и А1а 61и Азр Уа1 С1у Уа1 Рке Туг Суз Мер С1п Зег
85 90 95
11е С1п Ьеи Рго Ьеи Ткг Рке С1у С1у С1у Ткг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100 105 но
<210> 40
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Ното 1 5ар1еп8
<400> 40
С1и 11е Уа1 Мек Ткг С1п Зег Рго А1а Ткг Ьеи Зег Х7а1 Зег Рго С1у
1 5 10 15
С1и Агд А1а Ткг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег 17а 1 Зег Зег Азп
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Рке С1п Θΐη Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Рго Ьеи 11е
35 40 45
Туг Азр А1а Зег Ткг Агд А1а Ткг С1у Уа1 Рго А1а Агд Рке Зег <31у
50 55 60
Зег С1у Зег С1у Ткг Азр Рке Ткг Ьеи Ткг 11е Зег Зег Ьеи С1п Зег
65 70 75 80
С1и Азр Рке А1а Уа1 Туг Туг Суз С1п С1п Туг Азр Азп Тгр Рго Ьеи
85 90 95
Ткг Рке С1у С1у С1у Ткг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100 105
<210> 41
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Ното 1 эаргепБ
<400> 41
С1и 11е \7а1 Мек Ткг С1п Зег Рго А1а Ткг Ьеи Зег 17а 1 Зег Рго С1у
1 5 10 15
- 121 019397
С1и Агд Уа1 ТНг 20 Ьеи Бег Суз Агд А1а 25 Бег С1п Бег Уа1 Бег 30 Бег Азп
Ьеи А1а Тгр РНе С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Рго Ьеи 11е
35 40 45
Туг Азр А1а Бег ТНг Агд А1а А1а С1у 11е Рго А1а Агд РНе Бег С1у
50 55 60
Бег С1у Бег С1у ТНг Азр РНе ТНг Ьеи ТНг 11е Бег Бег Ьеи С1п Бег
65 70 75 80
С1и Азр РНе А1а Уа1 Туг Туг Суз С1п С1п Туг Азр Азп Тгр Рго Ьеи
85 90 95
ТИг РНе С1у С1у С1у ТНг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100 105 <210> 42 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
<400> 42
С1и 1 11е Уа1 МеЬ ТНг 5 С1п Бег Рго
О1и Агд А1а ТНг 20 Ьеи Бег Суз Агд
Ьеи А1а Тгр 35 Туг С1п С1п Ьуз Рго 40
Туг С1у 50 ТНг Бег ТНг Агд А1а 55 ТНг
Бег 65 С1у Бег С1у ТНг С1и 70 РНе ТНг
С1и Азр РНе А1а Уа1 85 Туг РНе Суз
ТНг РНе С1у С1у 100 С1у ТНг Ьуз Уа1
А1а ТНг 10 Ьеи Бег Уа1 Бег Рго 15 С1у
А1а 25 Бег С1п Бег 11е Бег 30 ТНг Бег
С1у С1п А1а Рго Агд 45 Ьеи Ьеи 11е
С1у Не Рго А1а 60 Агд РНе Бег О1у
Ьеи ТНг 11е 75 Бег Бег Ьеи С1п Бег 80
С1п С1п 90 Туг Азр 11е Тгр Рго 95 Ьеи
С1и 105 11е Ьуз
<210> 43 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз
<400> 43 Мер ТНг 5 С1п Бег Рго
С1и 1 Не Уа1
С1и Агд А1а ТНг 20 Ьеи Бег Суз Агд
Ьеи А1а Тгр 35 Туг С1п С1п Ьуз Рго 40
А1а ТНг 10 Ьеи Бег Уа1 Бег Рго 15 С1у
А1а 25 Бег С1п Бег Уа1 Бег 30 Бег Азп
С1у С1п А1а Рго Агд 45 Ьеи Ьеи 11е
- 122 019397
Туг С1у 50 А1а Зег Тйг Агд А1а 55 Тйг С1у Не Рго А1а Агд 60 Рйе Зег С1у
Зег С1у 5ег С1у Тйг С1и Рйе Тйг Ьеи Тйг Не Зег Зег Ьеи 61п Зег
65 70 75 80
С1и Азр Рйе А1а Уа1 Туг Зег Суз С1п С1п Туг Азр Азп Тгр Рго Ьеи
85 90 95
Тйг Рйе С1у С1у С1у Тйг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100 105 <210> 44 <211> 113 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 44
Азр 1 11е Уа1 МеЬ Тйг С1п 5 Зег Рго Азр Зег 10 Ьеи А1а Уа1 Зег Ьеи 15 С1у
С1и Агд А1а Тйг Не Азп Суз Ьуз Тйг Зег С1п Зег Уа1 Ьеи Туг Зег
20 25 30
Зег Ьуз Азп Ьуз Азп Рйе Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п
35 40 45
Рго Ьеи Азп Ьеи Ьеи Не Туг Тгр А1а Зег Тйг Агд С1и Зег С1у Уа1
50 55 60
Рго Азр Агд Рйе Зег С1у Зег С1у Зег С1у Тйг Азр Рйе Тйг Ьеи Тйг
65 70 75 80
Не Зег Зег Ьеи С1п А1а С1и Азр Уа1 А1а Уа1 Туг Туг Суз С1п С1п
85 90 95
Туг Туг Зег ТЙГ Рго Рйе Тйг Рйе 61у Рго С1у Тйг Ьуз Уа1 Азр Не
100 105 но
Ьуз
<210> 45 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз
<400> 45
С1и 1 Не Уа1 МеО Тйг 5 С1п Зег Рго
С1и Агд А1а ТЙГ 20 Ьеи Зег Суз Агд
Ьеи А1а Тгр 35 Туг С1п С1п Ьуз Рго 40
Туг С1у 50 А1а Зег Тйг Агд А1а 55 ТЙГ
А1а ТЙГ 10 Ьеи Зег Уа1 Зег Рго 15 С1у
А1а 25 Зег 61п Зег Не Зег 30 Зег Азп
С1у С1п А1а Рго Агд 45 Ьеи Ьеи Не
С1у Не Рго А1а 60 Агд Рйе Зег Азр
- 123 019397
Азп С1у Бег С1у Ткг С1и Рке Ткг Ьеи Ткг 11е Бег Бег Ьеи С1п Бег
65 70 75 80
С1и Азр Рке А1а Уа1 Туг Рке Суз С1п С1п Туг Азр Ткг Тгр Рго Ьеи
85 90 95
Ткг Рке С1у С1у С1у Ткг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100 105 <210> 46 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
<400> 46
Азр 1 11е С1п Мек Ткг 5 С1п Бег Рго Бег Бег 10 Ьеи Бег А1а Бег Уа1 15 С1у
Азр Агд Уа1 Ткг 11е Ткг Суз Агд А1а Бег С1п С1у 11е Бег Азп Туг
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг С1п О1п Ьуз Рго С1у Ьуз Рке Рго О1и Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Бег Ткг Ьеи С1п Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд Рке Бег С1у
50 55 60
Бег С1у Бег С1у Ткг Азр Рке Ткг Ьеи Ткг 11е Бег Бег Ьеи С1п Рго
65 70 75 80
С1и Азр Уа1 А1а Ткг Туг Туг Суз С1п Ьуз Туг Азп Агд А1а Рго Рке
85 90 95
Ткг Рке С1у Рго С1у Ткг Ьуз Уа1 Азр 11е Ьуз
100 105
<210> 47 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното зар1епз
<400> 47
Азр 1 11е С1п Мек Ткг 5 С1п Бег Рго Бег Бег 10 Ьеи Бег А1а Бег Уа1 15 С1у
Азр Агд Уа1 Ткг 11е Ткг Суз Агд А1а Бег 61п <31у 11е Бег Азп Туг
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у Ьуз Рке Рго С1и Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Бег Ткг Ьеи С1п Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд Рке Бег С1у
50 55 60
Бег С1у Бег С1у Ткг Азр Рке Ткг Ьеи Ткг 11е Бег Бег Ьеи С1п Рго
65 70 75 80
С1и Азр Уа1 А1а Ткг Туг Туг Суз С1п Ьуз Туг Азп Агд А1а Рго Рке
85 90 95
- 124 019397
ТИг РНе С1у Рго 100 С1у ТИг Буз Уа1 Азр 11е 105 Ьуз
<210> 48
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Ното : заргепз
<400> 48
С1и 11е Уа1 Мер ТИг С1п Бег Рго А1а ТИг Ьеи Бег Уа1 Бег Рго С1у
1 5 10 15
С1и Агд Уа1 ТИг Беи Бег Суз Агд А1а Бег С1п Бег Уа1 Зег Зег Азп
20 25 30
Беи А1а Тгр РНе С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Рго Ьеи 11е
35 40 45
Туг Азр А1а Бег ТИг Агд А1а А1а С1у 11е Рго А1а Агд РНе Зег С1у
50 55 60
Бег С1у Бег С1у ТИг Азр РНе ТИг Беи ТИг 11е Бег Бег Ьеи С1п Зег
65 70 75 80
С1и Азр РНе А1а Уа1 Туг Туг Суз С1п Θΐη Туг Азр Азп Тгр Рго Ьеи
85 90 95
ТИг РНе С1у С1у С1у ТИг Ьуз Уа1 С1и Не Ьуз
100 105 <210> 49 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
<400> 49 С1п Зег Рго Зег Зег Ьеи 10 Зег А1а Зег Уа1 15 С1у
Азр 1 11е С1п МеС ТИг 5
Азр Агд Уа1 ТИг 11е Зег Суз Агд А1а Зег С1п С1у 11е 11е Азп Азр
20 25 30
Ней С1у Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Агд Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Зег Зег Беи 61п Зег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Зег С1у
50 55 60
Зег С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг РНе ТНг 11е Бег Бег Ьеи С1п Рго
65 70 75 80
С1и Азр РНе А1а ТИг Туг Туг Суз Ьеи С1п ΗΪ8 Азп Бег Туг Рго Рго
85 90 95
ТИг РНе С1у 61п С1у ТНг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100 105 <210> 50 <211> 113
- 125 019397 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
<400> 50 МеЬ Тйг С1п 5 Зег Рго Ьеи Зег 10 Ьеи Рго Уа1 Тйг Ьеи 15 С1у
Азр 1 11е Уа1
С1п Рго А1а Зег 11е Зег Суз Агд Зег Зег С1п Зег Ьеи Уа1 Туг Зег
20 25 30
Азр С1у Н1з Тйг Суз Ьеи Азп Тгр Рйе С1п 61п Агд Рго С1у С1п Зег
35 40 45
Рго Агд Агд Ьеи 11е Туг Ьуз Уа1 Зег Азп Тгр Азр Зег С1у νβΐ Рго
50 55 60
Азр Агд Рйе Зег С1у Зег С1у Зег С1у Тйг Азр Рйе Тйг Ьеи Ьуз 11е
65 70 75 80
Зег Агд Уа1 С1и А1а Азр Азр Уа1 С1у Уа1 Туг Туг Суз МеЬ С1п С1у
85 90 95
Тйг ΗΪ3 Тгр Рго Ьеи Суз Зег Рйе С1у С1п С1у Тйг Ьуз Ьеи С1и 11е
100 105 110
Ьуз <210> 51 <211> 113 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз
<400> 51 С1п Зег Рго Ьеи Зег 10 Ьеи Рго Уа1 Тйг Ьеи 15 С1у
Азр 1 11е \7а1 Мек Тйг 5
С1п Рго А1а Зег 11е Зег Суз Агд Зег Зег С1п Зег Ьеи \7а1 Туг Зег
20 25 30
Азр С1у ΗΪ8 ТЙГ Суз Ьеи Азп Тгр Рйе С1п С1п Агд Рго С1у С1п Зег
35 40 45
Рго Агд Агд Ьеи 11е Туг Ьуз Уа1 Зег Азп Тгр Азр Зег С1у Уа1 Рго
50 55 60
Азр Агд Рйе Зег С1у Зег С1у Зег С1у ТЬг Азр Рйе Тйг Ьеи Ьуз 11е
65 70 75 80
Зег Агд Уа1 С1и А1а Азр Азр Уа1 С1у Уа1 Туг Туг Суз Мер С1п С1у
85 90 95
Тйг ΗΪ3 Тгр Рго Ьеи Суз Зег РИе С1у С1п С1у Тйг Ьуз Ьеи С1и 11е
100 105 110
Ьуз <210> 52 <211> 107
- 126 019397 <212> БЕЛОК <213> Ното зарЬепз
<400> 52 Θΐη Зег Рго Зег Зег Ьеи 10 Зег А1а Зег Уа1 15 С1у
Азр 1 11е О1п Мер ТИг 5
Азр Агд Уа1 ТИг 11е ТИг Суз Агд А1а Зег С1п А1а Не Зег 11е Туг
20 25 30
Ьеи А1а Тгр РНе С1п С1п Ьуз Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Зег Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Зег Зег Ьеи С1п Зег С1у Уа1 Рго Зег Ьуз РНе Зег С1у
50 55 60
Зег \7а1 Зег С1у ТИг Азр РНе ТИг Ьеи ТИг Не Зег Зег Ьеи Θΐη Рго
65 70 75 80
С1и Азр РНе А1а ТИг Туг Туг Суз С1п С1п Туг Зег Зег Туг Рго Агд
85 90 95
ТИг РНе С1у С1п С1у ТИг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100 105 <210> 53 <211> 107 <212> БЕЛОК <213> Ното зарЬепз <400> 53
С1и 1 11е Ьеи Мер ТНг 5 С1п Зег Рго А1а ТНг 10 Ьеи Зег \7а1 Зег Рго 15 С1у
С1и Агд А1а ТИг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Туг Зег Азп
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг С1п Θΐη Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Зег С1у А1а Зег ТНг Агд А1а ТНг С1у 11е Рго А1а Агд РНе Зег С1у
50 55 60
Зег С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ьеи ТНг 11е Зег Зег Ьеи С1п Зег
65 70 75 80
С1и Азр РНе А1а Уа1 Туг Туг Суз С1п Θΐη Туг Туг Азп Тгр Рго Тгр
85 90 95
ТИг РНе С1у Θΐη С1у ТИг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100 105 <210> 54 <211> 393 <212> ДНК <213> Ното зартепз <400> 54 саддкдсадс ЬдсаддадЕс дддсссадда сЬддЬдаадс сЬЬсддадас ссЬдЬсссЬс
- 127 019397
ассРдсасРд РсРсаддРдд сРссаРсадР ааРРасРасР ддаасРддаР ссддсадРсс 120
ссадддаадд дасРддадРд даРРддддаР аРсРаРРаса дрдддадсас саасРасаас 180
сссРсссРса ададРсдадР сассаРаРса дРадасасдР ссаадаасса дРРсРсссРд 240
аадсРдадсР сРдРдассас Рдсддасасд дссдРдРаРР асрдрдсдад адаРддддаа 300
сРсдссааРР асРаРддРРс ддддадРРаР садРРсРасР асРасРасдд РаРддасдРс 360
Рддддссаад ддассасддр сассдРсРсс Рса 393
<210> 55 <211> 381 <212> ДНК <213> Ното зар1епз
<400> 55 саддРдсадс РасадсадРд дддсдсадда сРдРРдаадс сРРсддадас ссРдРсссРс 60
ассРдсдсРд РсРсРддРдд дРссРРсадР ддРРасРасР ддадсРддаР ссдссадссс 120
ссадддаадд ддсРддааРд даРРддддаа аРсааРсаРа дрддасдсас сааРРасаас 180
ссдРсссРса ададрсдадр сассаРаРса дРадасасдР ссаадаасса дРРсРсссРд 240
аадсРдадсР срдрдассдс сдсддасасд дсРдРРРаРР асрдрдсдад аддсссРРаР 300
РасРРРдаРа драдрддрра ссРРРасРас РасРасддРР РддасдРсРд дддссааддд 360
ассасддрса ссдРсРссРс а 381
<210> 56 <211> 342 <212> ДНК <213> Ното зар1епз
<400> 56 саддРдсадс РддРддадРс рдддддаддс дрддрссадс сРдддаддРс ссРдадасРс 60
РссРдРдсад сдРсРддааР саасРРсадР адсРаРддса РдсасРдддР ссдссаддсР 120
ссаддсаадд ддсРддадРд ддрддсадрр аРаРддРаРд аРддаадРаа РааасасРаР 180
дсадасРссд Рдаадддссд аРРсассаРс Рссададаса аРРссаадаа сасдсРдРаР 240
сРдсаааРда асадссРдад адссдаддас асддсРдРдР аРРасРдРдс дададаРасР 300
ддддРсРасР ддддссаддд аасссРддРс ассдРсРссР са 342
<210> 57 <211> 342 <212> ДНК <213> Ното заргепз
<400> 57 саддРдсадс РддРддадРс рдддддаддс дрддрссадс сРдддаддРс ссРдадасРс 60
РссРдРдсад сдРсРддааР саасРРсадР адсРаРддса РдсасРдддР ссдссаддсР 120
- 128 019397
ссаддсаадд ддсрддадрд ддрддсадрр аРаРддРаРд аРддаадРаа РааасасРаР 180
дсадасРссд Рдаадддссд аРРсассаРс Рссададаса аРРссаадаа сасдсРдРаР 240
сРдсаааРда асадссРдад адссдаддас асддсРдРдР аРРасРдРдс дададаРасР 300
ддддРсРасР ддддссаддд аасссРддРс ассдРсРссР са 342
<210> 58 <211> 375 <212> ДНК <213> Ното заргепз
<400> 58 саддРдсадс РдсаддадРс дддсссадда сРддРдаадс сРРсддадас ссРдссссРс 60
ассРдсасРд РсРсРддРдд сРссаРсада адРРасРасР ддадсРддаР ссддсадссс 120
дссдддаадд дасРддадРд даРРдддсдР аРсРаРсдса дрдддаасас саРсРасаас 180
сссРсссРса ададРсдадР сассаРдРса аРадасасдР ссаадаасса дРРсРсссРд 240
асдсРдадРР сРдРдассдс сдсддасасд дссдРдРаРР асРдРдсдад ададааРРас 300
РсРдададРа дРддРсРсРа сРасРасРас ддРаРддасд РсРддддсса адддассасд 360
дРсассдРсР ссРса 375
<210> 59 <211> 372 <212> ДНК <213> Ното зарБепз
<400> 59 саддРРсадс РддРдсадРс РддадсРдад дрдаадаадс сРддддссРс адРдааддРс 60
РссРдсаадд сРРсРддРРа сассРРаасс адаРаРддРа РсадсРдддР дсдасаддсс 120
ссРддасаад ддсРРдадРд дардддррдд аРсадсдсРР асааРддРаа сасааасРаР 180
дсасадаадс Рссадддсад адРсассаРд ассасадаса сдРссасдад сасадссРас 240
аРддадсРда ддадссРдад аРсРдасдас асддссдрдр аРРасРдРдс дадаадддаР 300
РасдаРаРРР РдасРддРРа РРаРаасддд РРсдассссР ддддссаддд аасссРддРс 360
ассдРсРссР са 372
<210> 60 <211> 372 <212> ДНК <213> Ното зар1епз
<400> 60 саддРРсадс РддРдсадРс РддадсРдад дрдаадаадс сРддддссРс адРдааддРс 60
РссРдсаадд сРРсРддРРа сассРРаасс адаРаРддРа РсадсРдддР дсдасаддсс 120
- 129 019397
ссРддасаад ддсРРдадРд даРдддРРдд аРсадсдсРР асаарддраа сасааасРаР 180
дсасадаадс Рссадддсад адРсассаРд ассасадаса сдРссасдад сасадссРас 240
аРддадсРда ддадссРдад аРсРдасдас асддссдрдр аРРасРдРдс дадаадддар 300
РасдаРаРРР РдасРддРРа РРаРаасддд РРсдассссР ддддссаддд аасссРддРс 360
ассдРсРссР са 372
<210> 61 <211> 372 <212> ДНК <213> Ното зардепз
<400> 61 саддРРсадс РддРдсадРс РддадсРдад дрдаадаадс сРддддссРс адРдааддРс 60
РссРдсаадд сРРсРддРаа сассРРРасс ддсРаРддРа РсадсРдддР дсдасаддсс 120
ссРддасаад ддсРРдадРд даРдддаРдд аРсадсдсРР асаарддраа сасааасРаР 180
дсасадаасс Рссадддсад адРсассаРд ассасадаса саРссасдад сасадссРас 240
аРддадсРда ддадссРдад аРсРдасдас асддссдрдр аРРасРдРдс дадаадддар 300
РасдаРаРРР РдасРддРРа РРаРаасддд РРсдассссР ддддссаддд аасссРддРс 360
ассдРсРссР са 372
<210> 62 <211> 372 <212> ДНК <213> Ното Бар1епз
<400> 62 саддРРсадс РддРдсадРс РддадРРдад дрдаадаадс сРддддссРс адРдааддРс 60
РссРдсаадд сРРсРддРРа сассРРаасс адаРаРддРа РсадсРдддР дсдасаддсс 120
ссРддасаад ддсРРдадРд даРдддРРдд аРсадсдсРР асаарддраа сасааасРаР 180
дсасадаадс Рссадддсад адРсассаРд ассасадаса саРссасдад сасадссРас 240
аРддадсРда ддадссРдад аРсРдасдас асддссдрдр аРРасРдРдс дадаадддар 300
РасдаРаРРР РдасРддРРа РРаРаасддд РРсдассссР ддддссаддд аасссРддРс 360
ассдРсРссР са 372
<210> 63 <211> 372 <212> ДНК <213> Ното зар1епз
<400> 63 саддрдсадс РдсаддадРс дддсссадда сРддРдаадс сРРсасадас ссРдРсссРс 60
ассРдсасРд РсРсРддРдд сРссаРсадс адрддрддрр асРасРддад сРддаРссдс 120
- 130 019397
садсассссд ддаадддссО ддадОддаОЕ дддЕасаОсЕ аЕОЕсадСдд дадсдссЬас 180
ОасаасссдС сссЪсаадад ЪсдадСсдсс аЬаЬсадЕдд асасдОсЬаа даассадОЕс 240
ЕсссЕдаадс ЬдадсСсСдС дасОдссдсд дасасддссд СаОаЪЕасЕд Едсдададаа 300
ЕасЕаЬдаОа деадеддЪ^а ссссдакдсЕ ЫХдаЬаЕсЕ ддддссаадд дасааСддСс 360
ассдйсЬссО са 372
<210> 64 <211> 342 <212> ДНК <213> Ното зар1епз
<400> 64 саддОдсаас ОддОддадСс лдддддаддс дСддСссадс сОдддаддйс ссОдадасОс 60
ОссСдОдсаа сдОссддааС сассЬЕсадО адсОаОддса СдсасОдддЕ ссдссаддсС 120
ссаддсаадд ддсЬддадкд ддОддсадОО аЕаЕддЪаОд арддаадкаа ОаааОаЕОаЕ 180
дсадаскссд Едаадддссд аЬЕсассаСс Ьссададаса аЪЕссаадаа сасдсЕдкаЕ 240
сЬдсаааЬда асадсскдад адссдаддас асддсОдЕдО аЬСасЕдОдс дададакасд 300
ааддасОасЪ ддддссаддд аасссСддОс ассдЬсСссЕ са 342
<210> 65 <211> 348 <212> ДНК <213> Ното зарйепз
<400> 65 саддЕЬсадс ЛддйдсадЕс ЕддадсЬдад дОдаадаадс сЬддддссЬс адЬдааддрс 60
ЕссСдсаадд сССсОддСОа сасссОсасс адсСаСддОа СсадсОдддС дсдасаддсс 120
ссСддасаад дасСОдадОд даЬдддаОдд аксадсасОО асаааддЕаа сасааасОак 180
дсасадаадс Сссадддсад адСсассаСд ассасадаса сакссасдад сасадссОас 240
аОддаасОда ддадссОдад аОсСдасдас асддссдСдО аООасОдОдс дадааадсад 300
сОсдЕсЪООд асСасСдддд Осадддаасс сОддОсассд ОсОссОса 348
<210> 66 <211> 363 <212> ДНК <213> Ното зардепз
<400> 66 саддйдсадс ОддОддадЕс Одддддаддс дЬддйссадс сЬдддаддЕс ссЬдадаскс 60
СссОдОдсад сдйсОддаОЬ сассЕОсадО адсСаЬддса ЬдсадЬдддЬ ссдссаддсС 120
ссаддсаадд ддсЬддадОд ддЬддсадЬО аСайддОаОд аЪддаааОаа даааОасОаС 180
- 131 019397
дсадасОссд Одаадддссд аООсассаОс Оссададаса аООссаадаа сасдсОдОаО 240
сОдсаааОда асадссОдад адссдаддас асддсОдОдО аООасОдОдс дададдасдО 300
дООадддасО асОасОасдд ОаОддасдОс Оддддссаад ддассасддо сассдОсОсс 360
Оса 363
<210> 67 <211> 350 <212> ДНК <213> Ното зархепз
<400> 67 саддООсадс ОддОдсадОс ОддадсОдад дОдаадаадс сОддддссОс адОдааддОс 60
ОссОдсаадд сООсОддООа сассОООасс адаОаОддОа ОсадсОдддО дсдасаддсс 120
ссОддасаад ддсООдадОд даОдддаОдд аОсадсасОО асадОддОаа сасааасОаО 180
дсасадаадс Оссадддсад адОсассаОд ассасадаса саОссасдад сасадссОас 240
аОддадсОда ддадссОдад аОсОдасдас асддссдОдО аООасОдОдс дадасддсад 300
сОООасОООд асОасОдддд ссадддаасс сОддОсассд ОсОссОсадс 350
<210> 68 <211> 363 <212> ДНК <213> Ното заргепз
<400> 68 саддОдсадс ОддОддадОс Одддддаддс дОддОссадс сОдддаддОс ссОдадасОс 60
ОссОдОдсад сдОсОддаОО сассООсадО адсОаОддса ОдсадОдддО ссдссаддсо 120
ссаддсаадд ддсОддадОд ддОддсадОО аОаОддОаОд аОддаааОаа даааОасОаО 180
дсадасОссд Одаадддссд аООсассаОс Оссададаса аООссаадаа сасдсОдОаО 240
сОдсаааОда асадссОдад адссдаддас асддсОдОдО аООасОдОдс дададдасдО 300
дООадддасО асОасОасдд ОаОддасдОс Оддддссаад ддассасддо сассдОсОсс 360
Оса 363
<210> 69
<211> 348
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 69
саддООсадс ОддОдсадОс ОддадсОдад дОдаадаадс сОддддссОс адОдааддОс 60
ОссОдсаадд сООсОддООа сассОООасс адсОаОддОа ОсадсОдддО дсдасаддсс 120
- 132 019397
ссЕддасаад ддсРРдадРд даРдддаРдд аРсадсдсРР асааРддРаа сасааадРаР 180
дсасадаадс Рссадддсад адрсассард ассасадаса саРссасдад сасадРсРас 240
аРддадсРда ддадссРдад аРсРдасдас асддссдрдр аРРасРдРдс дадааадсад 300
сЕсдРсЕЕЕд асРасРдддд ссадддаасс сРддРсассд РсРссРса 348
<210> 70 <211> 348 <212> ДНК <213> Ното заргепз
<400> 70 саддРРсадс РддРдсадРс РддадсРдад дрдаадаадс сРддддссдс адРдааддРс 60
РссРдсаадд сРасРддРРа сассРРдасс адсРаРддРа РсадсРдддР дсдасаддсс 120
ссРддасаад ддсРРдадРд даРдддаРдд аРсадсдсРР асадРддРаа РасааадРаР 180
дсасадаадс Рссадддсад адрсассард ассасадаса саРссасдад сасадссРас 240
аЬддадсРда ддадссРдад аРсРдасдас асддссдрдр аРРасРдРдс дадааадсад 300
сРсдРсРЬРд асРасРдддд ссадддаасс сРддРсассд РсРссРса 348
<210> 71 <211> 378 <212> ДНК <213> Ното зар1епз
<400> 71 саддРдсадс РддРдсадРс РддддсРдад дрдаадаадс сРддддссРс адРдааддРс 60
РссЪдсаадд сРРсРддаРа сРссРРсасс дасРасРаса РдсасРдддР дсдасаддсс 120
ссРддасаад дасРРдадРд даРдддаРдд аРдсасссРа асадрддрдд сасадасРРа 180
дсасададдр РРсадддсад ддРсассаРд ассадддаса сдРссаРсад сасадссРас 240
арддадсрда дсаддсрдад аРсРдасдас асддссдрдр аРРасРдРдс дададдддда 300
РаРРдРадРа сРРРдадсРд сРссРРсРас РддРасРРсд аРсРсРдддд ссдрддсасс 360
сРддГсасРд РсРссРса 378
<210> 72 <211> 348 <212> ДНК <213> Ното зар1епз
<400> 72 саддРЬсадс РддРдсадРс РддадсРдад дрдаадаадс сРддддссРс адРдааддРс 60
РссРдсаадд сРРсРддРРа сассРРдасс адсРаРддаа РсадРРдддР дсдасаддсс 120
ссРддасаад ддсРРдадРд даРдддаРдд аРсадсдсРР асадРддРаа сасааадРаР 180
дсасадаадр Рссадддсад адрсассард ассасадаса саРссасдад сасадссРас 240
- 133 019397
аОддадсйда ддадссРдад аОсйдасдас асддссдкдО аЪйасЕдйдс дадааддсад 300
сйсдсдййдд асйасйдддд ссадддаасс сЪддОсассд СсОссОса 348
<210> 73 <211> 354 <212> ДНК <213> Ното заргепз
<400> 73 даддДдсадс йддЕддадйс Ьдддддаддс Дйддйасадс сЕддддддйс ссйдадасЕс 60
ЕссйдЕдсад ссЕсЕддаЪЕ сассРЕсадс адсРайадса Едаасйдддр ссдссаддсй 120
ссадддаадд ддсйддадЬд ддОЬйсаОЬс аООадОдсйа даадйадОас саОаОасйас 180
дсадасйсйд Ддаадддссд аОЬсассаДс Ъссададаса айдссаадаа сЕсасРдйаР 240
сОдсааайда асадссйдад адасдаддас асддсйдйдй аООасйдОдс дадассйааа 300
дйддддддсд дДаЪддасдО сОддддссаа ддаассасдд ОсассдОсйс сйса 354
<210> 74 <211> 354 <212> ДНК <213> Ното заргепз
<400> 74 даддйдсадО ОддОддадДс Едддддаддс ОсддЬасадс сйддддддйс ссйдадасОс 60
йссйдЬдсад ссДсОддаДД сассЬДсадй адсДайадса Одаасйдддй ссдссаддсй 120
ссадддаадд ддсОддадЕд ддОСДсааОс аЕСадйадйа даадйадОаО сайасасйас 180
дсадасйсДд Ьдаадддссд аЕЕсассаРс Ессададаса айдссаадаа сйсасЬдДай 240
сОдсаааОда асадссОдад адасдаддас асддсОдйдО аОСасОдйдс дадассОааа 300
дйддддддсд дйайддасдй сйддддссаа дддассасдд ОсассдОсйс сйса 354
<210> 75 <211> 348 <212> ДНК < 213 > Ното заргепз
<400> 75 саддйОсадс ОддОдсадйс ОддадсОдад дОдаадаадс сОддддссОс адйдааддйс 60
Дссйдсаадд сЕЕсДддййа сассЕЕйасс адайаЕддйа Есадсйдддй дсдасаддсс 120
ссОддасаад ддсйОдадйд дайдддайдд айсадсдсЕЕ асадйддйаа сасааасйаО 180
дсасадаадс Оссадддсад адОсассаОд ассасадаса сайссасдад сасадссйас 240
айддадсСда ддадссодад аОсОдасдас асддссдодй аООасйдйдс дадасддсад 300
сЬООасДЬДд асйасОдддд ссадддаасс сйддЪсассд Рсйссйса 348
- 134 019397 <210> 76 <211> 375 <212> ДНК <213> Ното зараепз <400> 76
саддкдсадс кдсаддадкс дддсссадда скддкдаадс скксддадас сскдкссскс 60
асскдсаскд ксаскддкдд скссаксадд адккаскаск ддадскддак ссддсадссс 120
дссдддаада даскддадкд даккдддедк акскакссса дкдддадаас сааскасаас 180
ссскссскса ададксдадк сассакдкса дкадасасдк ссаадаасса дккскссскд 240
аадскдадск скдкдассдс сдсддасасд деедкдкакк аскдкдсдад ададдсакак 300
дадскдсаас кдддсскска скаскаскас ддкакддасд кскддддсса адддассссд 360
дксассдкск секса 375
<210> 77 <211> 375 <212> ДНК <213> Ното зархепз
<400> 77 саддкдсадс кдсаддадкс дддсссадда скддкдаадс скксддадас сскдкссскс 60
асскдсаскд ксаскддкдд скссаксадд адккаскаск ддадскддак ссддсаддсс 120
дссдддаада даскддадкд даккдддедк акскакссса дкдддадаас сааскасаас 180
ссскссскса ададксдадк сассакдкса дкадасасдк ссаадаасса дккскссскд 240
аадскдадск скдкдассдс сдсддасасд деедкдкакк аскдкдсдад ададдсакак 300
дадскдсаас кдддсскска скаскаскас ддкакддасд кскддддсса адддассссд 360
дксассдкск секса 375
<210> 78 <211> 372 <212> ДНК <213> Ното зархепз
<400> 78 саддкдсадс кдеаддадке дддсссадда скддкдаадс скксасадас сскдкссскс 60
асскдсаскд кскскддкдд скссаксадс адкддкддкк аскаскддад скддакссдс 120
садсасссад ддаадддсск ддадкддакк дддкасакск аккасадкдд даасасскас 180
касаасссдк сссксаддад ксдадккасс акаксадккд асасдкскаа даассадккс 240
кссскдаадс кдааскскдк даскдссдсд дасасддссд кдкаккаскд кдедададад 300
дссддкддка аскссдсска скаскасддк акддаедкек ддддссаадд дассасддкс 360
ассдксксск са 372
- 135 019397 <210> 79 <211> 375 <212> ДНК <213> Ното зар1еп5 <400> 79
саддРдсадс РддРддадРс Рдддддаддс РРддРсаадс сРддадддРс ссРдадасРс 60
РссРдРдсад ссРсРддаРР сассРРсадР дасРасРаса РдадсРддаР ссдссаддср 120
ссадддаадд ддсРддадРд ддРРРсаРас аРРадРадРа дрддрадрас саРаРасРас 180
дсадасРсРд Рдаадддссд аРРсассаРс Рссадддаса асдссаадаа сРсасРдРаР 240
сРдсаааРда асадссРдад адссдаддас асддссдрдр аРРасРдРдс дададаРсдс 300
асдРаРРасР РРддРРсддд дадРРаРдаа дддарддасд РсРддддсса адддассасд 360
дРсассдРсР ссРса 375
<210> 80 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното зар1епз <400> 80
дасаРссРда РдасссадРс РссаРссРсс сРдРсРдсаР сРдРсддада сададРсасс 60
аРсасРРдсс дддсаадРса дддсаРРада ааРдаРРРад дсРддРаРса дсадааасса 120
дддааадссс сРаадсдссР даРсРаРдсР дсаРссадРР рдсааадрдд ддРсссаРсс 180
аддРРсадсд дсадРддсРс Рдддасадаа РРсасРсРса сааРсадсад ссРдсадссР 240
даадаРРРРд саасРРаРРа сРдРсРасад саРааРадРа асссаРРсас РРРсддсссР 300
дддассааад РддаРаРсаа а 321
<210> 81 <211> 318 <212> ДНК <213> Ното зартепз <400> 81
даааРадРда РдасдсадРс Рссадссасс сРдРсРдРдР сРссадддда аададссасс 60
сРсРссРдса дддссадРса дадРдРРадс адааасРРад РсРддРасса дсададассР 120
ддссаддсРс ссаддсРссР саРсРаРддд дсаРссасРа дддссааРдд РаРсссадсс 180
аддРРсадРд дсадРдддРс адддасадаа РРсасРсРса ссаРсадсад ссРдсадРсР 240
даадаРРРРд садРРРаРРа сРдРсадсад РаРаааадсР ддсддасдРР сддссааддд 300
РссааддРдд аааРсааа 318
<210> 82
- 136 019397 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното зарлепз <400> 82
дасаБссада БдасссадБс БссаБссЕсс сЬдБсСдсаЬ сБдЕаддада сададЬсасс 60
аРсасСБдсс дддсаадЬса дадсаЬБадс адсОаЬРБаа аББддРаБса дсадааасса 120
дддааадссс сИаадсБссР даРсСаРдсЪ дсаЬссадЬР РдсааадБдд ддРсссаСса 180
аддСБсадОд дсадкддаОс ЪдддасадаБ РБсасБсЬса ссаБсадсад РсБдсаассБ 240
даадаООРЕд саасББасРа сЬдБсаасад адОРасадРа ссссаБХсас РЬСсддсссЬ 300
дддассааад ЬддаРаксаа а 321
<210> 83 <211> 324 <212> ДНК <213> Ното зарБепз
<400> 83 даааОадБда БдасдсадБс Ъссадссасс сБдРсОдЬдБ сЬссадддда аададссасс 60
сРсСссБдса дддссадкса дадСдОБадР аддааРБОад ссРддкасса дсадааассБ 120
ддссаддсСс ссаддсБссБ саБсБаРддО дсаРссасса дддссасБдд РаРсссадсс 180
аддСРсадБд дсадОдддБс Бдддасадад РРсасЬсЬса ссаксадсад ссБдсадБсИ 240
даадаБСРРд садЕЕИаЕРа сЬдСсадсад БаРаакаасР ддсссасдкд дасдСИсддс 300
саадддасса аддкддаааЪ сааа 324
<210> 84 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното зарлепз
<400> 84 дасакссада ЕдасссадРс ЬссаЕссЕсс сЕдЕсЬдсаЕ сЕдЕаддада сададЬсасс 60
аРсасББдсс дддсаадБса дддсаЫзада ааРдаРЕБад дсСддРаБса дсадаадсса 120
дддааадссс сРааасдсск даРсБаРдсБ дсаБссадСР ЬссааадБдд ддИсссаБса 180
аддБРсадсд дсадкддаБс Рдддасадда БРсасРсБса сааРсадсад ссРдсадссР 240
даадаИОБРд саасББаБРа сБдБсРасад сакааОадРР асссЬссдас дРРсддссаа 300
дддассаадд РддаааСсаа а 321
<210> 85
<211> 321
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 85
- 137 019397
дасаРссада РдасссадРс РссаРссРсс сРдРсРдсаР сРдРаддада сададРсасс 60
аРсасРРдсс дддсаадрса дддсаРРада ааРдаРРРад дсРддРаРса дсадааасса 120
дддааадссс сРаадсдссР даРсРаРдсР дсаРссадРР РдсааадРдд ддРсссаРса 180
аддРРсадсд дсадРддаРс Рдддасадаа РРсасРсРса сааРсадсад ссРдсадссР 240
даадаРРРРд саасРРаРРа сРдРсРасад саРаааадРР асссдсРсас РРРсддсдда 300
дддассаадд РддадаРсаа а 321
<210> 86 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното зархепз
<400> 86 дасаРссада РдасссадРс РссаРссРсс сРдРсРдсаР сРдРаддада сададРсасс 60
аРсасРРдсс дддсаадрса дддсаРРада ааРдаРРРад дсРддРаРса дсадааасса 120
дддааадссс сРаадсдссР даРсРаРдсР дсаРссадРР РдсааадРдд ддРсссаРса 180
аддРРсадсд дсадРддаРс Рдддасадаа РРсасРсРса сааРсадсад ссРдсадссР 240
даадаРРРРд саасРРаРРа сРдРсРасад саРаааадРР асссдсРсас РРРсддсдда 300
дддассаадд РддадаРсаа а 321
<210> 87 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното заръепз
<400> 87 дасаРссада РдасссадРс РссаРссРсс сРдРсРдсаР сРдРаддада сададРсасс 60
аРсасРРдсс дддсаадрса дддсаРРада ааРдаРРРад дсРддРаРса дсадааасса 120
дддааадссс сРаадсдссР даРсРаРдсР дсаРссадРР РдсааадРдд ддРсссаРса 180
аддРРсадсд дсадРддаРс Рдддасадаа РРсасРсРса сааРсадсад ссРдсадссР 240
даадаРРРРд саасРРаРРа сРдРсРасад саРаададРР асссдсРсас РРРсддсдда 300
дддассаадд РддадаРсаа а 321
<210> 88 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното зарлепз
<400> 88 дасаРссада РдасссадРс РссаРссРсс сРдРсРдсаР сРдРаддада сададРсасс 60
аРсасРРдсс дддсаадрса дддсаРРада ааРдаРРРад дсРддРаРса дсадааасса 120
дддааадссс сРаадсдссР даРсРасдсР дсаРссадРР РдсааадРдд ддРсссаРса 180
- 138 019397
аддЕЕсадсд дсадЕддаСс Едддасадаа ЕЕсасЕсЕса сааЕсадсад ссЕдсадссЕ 240
даадаСЕЕСд саасЕЬаСЕа сСдСсСасад саЬаааадЕЕ асссдсЕсас ЕЕЕсддсдда 300
дддассаадд ЕддадаЕсаа а 321
<210> 89 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното заргепз
<400> 89 дасаСссада ЕдасссадСс СссаСсССсс дЕдСсСдсаС сЕдЕаддада сададЕсасс 60
айсасЕЕдкс дддсдадйса дддйаЕЕадд адсЬддСЕад ссЕддЕаЕса дсадааасса 120
дддааадссс сСаадсСссС даСсЕСЕдсС дсаЕссадСЕ ЕдсааадЕдд ддЕсссаЕса 180
аддСЕсадсд дсадЬддаЕс Сдддасадаа ССсасСсЕса ссаЕсадсад ссЕдсадссЕ 240
даадаЕЕЕЕд саасЕСасЬа ССдСсаасад дсЕаасааСЕ ЕсссЕсддас дЕЕсддссаа 300
дддассаадд ЕддаааЕсаа а 321
<210> 90 <211> 324 <212> ДНК <213> Ното заръепз
<400> 90 даааСадЕда ЕдасдсадЕс Сссадссасс сСдЕсЕдСдЕ сЕссадддда аададссасс 60
сСсСссСдса дддссадрса дадЕдССадс адсаасССад ссЕддЕасса дсадааассЕ 120
ддссаддсСс ссаддсЕссС саСсЕаЕддС дсаЕссасса дддссдсЕдд ЕаЕсссадсс 180
аддСЬсадЕд дсддЕдддСс Едддасадсд ЬЕсасЬсЬса ссаЕсадсаа ссЕасадЕсЕ 240
даадаССЕСд садСССаСЕа сСдСсадсас СаЕаСааасЕ ддссЕаадЕд дасдЕЕсддс 300
саадддасса аддкддасай сааа 324
<210> 91 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното зар1епз
<400> 91 дааайадЕаа ЕдасдсадСс Ьссадссасс сЕдйсЕдЕдЬ сЕссадддда аададссасс 60
сСсСссСдса дддссадСса дадРаСЕадс адсадсЕЕад ссЕддЕасса дсадааассЕ 120
ддссаддсЕс ссаддсСссЕ саСсСаЕддЕ дсаЕссасса дддссасЕдд ЕаЕсссадсс 180
аддЬСсадСд дсадйдддЬс Рдддасадад ЕЕсасЕсЕса ссаЕсадсад ссЕдсадЕсЕ 240
дааааСЕЕСд садСЕЕаЕЕа сСдСсадсаа ЕаЕдаЕаасЕ ддссдсЕсас ЕЕЕсддсдда 300
- 139 019397 дддассаадд РддадаРсаа а
321 <210> 92 <211> 336 <212> ДНК <213> Ното зарБепз <400> 92
даРаРРдРда Рдасссадас РссасРсРсР сРдРссдРса ссссРддаса дссддссРсс 60
аРсдссРдса адРсРадРса дадссРссРд саРадРдаРд дааадассРа РРРдРаРРдд 120
РассРдсада адссаддсса дссРссасад сРссРдаРсР аРдаадРРРс сасссддРРс 180
РсРддадРдс садаРаддРР садрддсадс дддрсаддда садаРРРсас асРдааааРс 240
адссдддрдд аддсРдадда РдРРддддРР РРРРасРдса РдсааадРаР асадсРРссд 300
сРсасРРРсд дсддадддас сааддрддад аРсааа 336
<210> 93 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното зархепз
<400> 93 даааРадРда РдасдсадРс Рссадссасс сРдРсРдРдР сРссРдддда аададссасс 60
сРсРссРдса дддссадРса дадрдррадс адсаасРРад ссРддРРсса дсадааассР 120
ддссаддсРс ссаддссссР саРсРаРдаР дсаРссасса дддссасРдд РдРсссадсс 180
аддРРсадРд дсадрдддрс Рдддасадас РРсасРсРса ссаРсадсад ссРдсадРсР 240
даадаРРРРд садРРРаРРа сРдРсадсад РаРдаРаасР ддссдсРсас РРРсддсдда 300
дддассаадд РддадаРсаа а 321
<210> 94 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното зарБепз
<400> 94 даааРадРда РдасдсадРс Рссадссасс сРдРсРдРдР сРссадддда аададрсасс 60
сРсРссРдса дддссадРса дадрдррадс адсаасРРад ссРддРРсса дсадааассР 120
ддссаддсРс ссаддссссР саРсРаРдаР дсаРссасса дддссдсРдд РаРсссадсс 180
аддРРсадРд дсадрдддрс Рдддасадас РРсасРсРса ссаРсадсад ссРдсадРсР 240
даадаРРРРд садРРРаРРа сРдРсадсад РаРдаРаасР ддссдсРсас РРРсддсдда 300
дддассаадд РддадаРсаа а 321
<210> 95 <211> 324
- 140 019397 <212> ДНК <213> Ното зар1епз <400> 95
даааРадРда РдасдсадРс Рссадссасс сРдРсРдРдР сРссадддда аададссасс 60
сРсРссРдса дддссадрса дадРаРРадс ассадсРРад ссРддРасса дсадааассР 120
ддссаддсРс ссаддсРссР саРсРаРддР асаРссасса дддссасРдд РаРсссадсс 180
аддРРсадРд дсадРдддРс Рдддасадад РРсасРсРса ссаРсадсад ссРдсадРсР 240
даадаРРРРд садРРРаРРР сРдРсаасад РаРдаРаРсР ддссдсРсас РРРсддсдда 300
дддассаадд РддадаРсаа асда 324
<210> 96 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното зархепз <400> 96
даааРадРда РдасдсадРс Рссадссасс срдрсрдрдр сРссадддда аададссасс 60
сРсРссРдса дддссадРса дадРдРРадс адсаасРРад ссРддРасса дсадааассР 120
ддссаддсРс ссаддсРссР саРсРаРддР дсаРссасса дддссасРдд РаРсссадсс 180
аддРРсадРд дсадРдддРс Рдддасадад РРсасРсРса ссаРсадсад ссРдсадРсР 240
даадаРРРРд садРРРаРРс сРдРсадсад РаРдаРаасР ддссдсРсас РРРсддсдда 300
дддассаадд РддадаРсаа а 321
<210> 97 <211> 339 <212> ДНК <213> Ното зар1епз <400> 97
дасаРсдРда РдасссадРс РссадасРсс срддсрдрдр сРсРдддсда дадддссасс 60
аРсаасРдса адассадсса дадРдРРРРа РасадсРсса аааасаадаа сРРсРРадсР 120
РддРаРсадс адааассадд асадссРсРР аассРдсРса РРРасРдддс аРсРасссдд 180
дааРссдддд РсссРдассд аРРсадРддс адсдддРсРд ддасадаРРР сасРсРсасс 240
аРсадсадсс РдсаддсРда адардрддса дРРРаРРасР дРсадсааРа РРаРадРасР 300
ссаРРсасРР РсддсссРдд дассааадрд даРаРсааа 339
<210> 98 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното зар1епз <400> 98 даааРадРда РдасдсадРс Рссадссасс сРдРсРдРдР сРссадддда аададссасс
- 141 019397
сЕсЕссЕдса дддссадСса дадСаЕЕадс адсаасЕЕад ссЬддЕасса дсадааасск 120
ддссаддсЕс ссаддсЕссЕ саРсЬаЕддР дсаЕссасса дддссасрдд СаЕсссадсс 180
аддСЬсадСд асааЬдддРс Едддасадад РЕсасРсЕса ссаЕсадсад сскдсадЕсЕ 240
даадаЕССЕд садЕРЕаРРС сЬдЕсадсад ЪаЕдаНассЕ ддссЪсНсас ЕЕЕсддсддс 300
дддассаадд РддадаЪсаа а 321
<210> 99 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното заргепз
<400> 99 дасаСссада СдасссадЕс СссаЬссЪсс сЬдЬсЕдсаЬ сЕдЕаддада сададЕсасс 60
аЕсасЕСдсс дддсдадСса дддсаЕЕадс ааСЬаСССад сскддЕаСса дсадааасса 120
дддаааРЕЕс сРдадсЕссЬ даЕсЕакдсЬ дсаЬссасСЕ ЕасааЕсадд ддЬсссаЕсЬ 180
сддССсадСд дсадрддакс ЬдддасадаЕ ССсасЬсЕса ссаСсадсад ссНдсадссЕ 240
даадаЕдООд саасСНаССа сЕдЕсаааад СаРаассдЕд ссссаЕЕсас ОССсддсссЬ 300
дддассааад ЕддаЕаСсаа а 321
<210> 100 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното зар1еп8
<400> 100 дасаЕссада ЕдасссадЕс ЕссаЕссЕсс сЕдксРдсаЪ сЕдЬаддада сададРсасс 60
аЪсасСРдсс дддсдадСса дддсаССадс ааСРаРРЕад ссСддЕаСса дсадааасса 120
дддаааРЕСс сСдадсЕссЕ даЪсРаЬдсЕ дсаСссасРН СдсааРсадд ддРсссаСсЬ 180
сддНЕсадЕд дсадРддаСс ЕдддасадаЕ ЕЕсасНсЕса ссаЕсадсад ссЕдсадссЬ 240
даадаСдЕСд саасООаНСа сСдЬсаааад СаЪаассдСд ссссаЪЕсас СРЕсддсссС 300
дддассааад ЕддаЬаЕсаа а 321
<210> 101 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното зартепз
<400> 101 дааакадЬда СдасдсадЕс Ьссадссасс сЕдЕсЕдЬдЕ скссадддда аададНсасс 60
сЕсЬссРдса дддссадЕса дадкдЬРадс адсаасЕРад ссЬддЕЕсса дсадааасса 120
ддссаддсРс ссаддссссЕ саЕсЕакдаН дсаЕссасса дддссдсЕдд ЕаЕсссадсс 180
- 142 019397
аддРРсадРд дсадРдддРс Рдддасадас РРсасРсРса ссаРсадсад ссРдсадРсР 240
даадаРРРРд садРРРаРРа сРдРсадсад РаРдаРаасР ддссдсРсас РРРсддсдда 300
дддассаадд РддадаРсаа а 321
<210> 102
<211> 321 <212> ДНК <213> Ното зар1епз
<400> 102 дасаРссада РдасссадРс РссаРссРсс сРдРсРдсаР сРдРРддада сададРсасс 60
аРсРсРРдсс дддсаадРса дддсаРРаРа ааРдаРРРад дсРддРаРса дсадааасса 120
дддааадссс сРаадсдссР даРсРаРдсР дсаРссадРР рдсааадрдд ддРсссаРса 180
аддРРсадсд дсадРддаРс Рдддасадаа РРсасРРРса сааРсадсад ссРдсадссР 240
даадаРРРРд саасРРаРРа сРдРсРасад саРааРадРР асссРссдас дррсддссаа 300
дддассаадд РддаааРсаа а 321
<210> 103 <211> 339 <212> ДНК <213> Ното заргепз
<400> 103 даРаРРдРда РдасРсадРс РссасРсРсс сРдсссдРса сссРРддаса дссддссРсс 60
аРсРссРдса ддРсРадРса аадссРсдРа РаРадРдаРд дасасассРд сРРдааРРдд 120
РРРсадсада ддссаддсса аРсРссаадд сдссРааРРР аРааддРРРс РаасРдддас 180
РсРддддРсс садасадаРР садсддсадр дддрсаддса сРдаРРРсас асРдааааРс 240
адсадддРдд аддсРдасда рдррддддрр РаРРасРдса РдсааддРас асасРддссР 300
сРдРдсадРР РРддссаддд дассаадсРд дадаРсааа 339
<210> 104 <211> 339 <212> ДНК <213> Ното зардепз
<400> 104 даРаРРдРда РдасРсадРс РссасРсРсс сРдсссдРса сссРРддаса дссддссРсс 60
аРсРссРдса ддРсРадРса аадссРсдРа РаРадРдаРд дасасассРд сРРдааРРдд 120
РРРсадсада ддссаддсса аРсРссаадд сдссРааРРР аРааддРРРс РаасРдддас 180
РсРддддРсс садасадаРР садсддсадр дддрсаддса сРдаРРРсас асРдааааРс 240
адсадддРдд аддсРдасда рдррддддрр РаРРасРдса РдсааддРас асасРддссР 300
- 143 019397 сРдРдсадРР РРддссаддд дассаадсРд дадаРсааа
339 <210> 105 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното зарьепз <400> 105
дасаРссада РдасссадРс РссаРссРса сРдРсРдсаР сРдРаддада сададРсасс 60
аРсасРРдРс дддсдадрса ддссаРРадс аРРРаРРРад ссРддРРРса дсадааасса 120
дддааадссс сРаадРсссР даРсРаРдсР дсаРссадРР РдсааадРдд ддРсссаРса 180
аадРРсадсд дсадРдРаРс РдддасадаР РРсасРсРса ссаРсадсад ссРдсадссР 240
даадаРРРРд саасРРаРРа сРдссаасад РаРадРадРР асссРсддас дРРсддссаа 300
дддассаадд РддаааРсаа а 321
<210> 106 <211> 321 <212> ДНК <213> Ното зарлепз
<400> 106 даааРаРРда РдасдсадРс Рссадссасс сРдРсРдРдР сРссадддда аададссасс 60
сРсРссРдса дддссадРса дадРдРРРас адсаасРРад ссРддРасса дсадааассР 120
ддссаддсРс ссадасРссР саРсРсРддР дсРРссасса дддссасРдд РаРсссадсс 180
аддРРсадРд дсадРдддРс Рдддасадад РРсасРсРса ссаРсадсад ссРдсадРсР 240
даадаРРРРд садРРРаРРа сРдРсадсад РаРРаРаасР ддссдрддас дРРсддссаа 300
дддассаадд РддаааРсаа а 321
<210> 107 <211> 5 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 107
Азп Туг Туг Тгр Азп
5 <210> 108 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Ното заръепз <400> 108
Азр 11е Туг Туг Зег С1у Зег ТИг Азп Туг Азп Рго Зег Ьеи Ьуз Зег
10 15
- 144 019397 <210>
<211>
<212>
<213>
109
БЕЛОК
Ното зарБепз
109 <400>
Азр С1у С1и
Ьеи А1а
Азп
Туг
Туг
С1у
Зег
С1у
Зег
Туг
С1п
РНе
Туг
Туг Туг Туг
С1у Мер
Азр
Уа1 <210>
<211>
<212>
<213>
110
БЕЛОК
Ното зартепз но <400>
С1у Туг Туг Тгр Зег <210>
<211>
<212>
<213>
111
БЕЛОК
Ното зартепз
111 <400>
С1и 11е Азп ΗΪ5 Зег
С1у
Агд
ТИг
Азп
Туг
Азп
Рго
Зег
Ьеи
Ьуз
Зег <210>
<211>
<212>
<213>
112
БЕЛОК
Ното зарБепз <400>
О1у Рго Туг Туг РИе
5
112
Азр
Зег
Зег
С1у
Туг
Ьеи
Туг
Туг
Туг
Туг
61у
Ьеи Азр \7а1 <210> 113 <211> 5 <212> БЕЛОК <213> Ното зарБепз <400> 113
Зег Туг С1у Мер ΗΪ8
1 5
<210> 114
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Ното зархепз
<400> 114
- 145 019397
Уа1 11е Тгр Туг Азр О1у Бег Азп Буз
Ηίε Туг А1а Азр Бег \Га1 Буз
15
С1у <210>
<211>
<212>
<213>
115
БЕЛОК
Ното зарБепз
115 <400>
Азр Ткг О1у Уа1 Туг <210>
<211>
<212>
<213>
116
БЕЛОК
Ното зархепз
116 <400>
Бег Туг С1у Мек ΗΪ3 <210>
<211>
<212>
<213>
117
БЕЛОК
Ното зарЬепз
117 <400>
Уа1 11е Тгр Туг Азр С1у Бег Азп Ьуз
Ηίε Туг А1а Азр Бег Уа1 Ьуз
15
С1у <210>
<211>
<212>
<213>
118
БЕЛОК
Ното зарЬепз
118 <400>
Азр Ткг С1у Уа1 Туг <210>
<211>
<212>
<213>
119
БЕЛОК
Ното зарЬепз
119 <400>
Бег Туг Туг Тгр Бег
5 <210> 120 <211> 16
- 146 019397 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 120
Агд 11е Туг Агд Бег (31у Азп Ткг
1 5
<210> 121
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Ното зар1епз
<400> 121
С1и Азп Туг Бег С1и Бег Бег 61у
1 5
Уа1
<210> 122
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
<400> 122
Агд Туг С1у 11е Бег
1 5
<210> 123
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Ното зарБепз
<400> 123
Тгр 11е Бег А1а Туг Азп С1у Азп
1 5
С1у
<210> 124
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Ното зархепз
<400> 124
Агд Азр Туг Азр Х1е Ьеи Ткг С1у
1 5
11е Туг Азп Рго Бег Ьеи Ьуз Бег
10 15
Ьеи Туг Туг Туг Туг С1у Мек Азр
10 15
Ткг Азп Туг А1а С1п Ьуз Ьеи С1п
10 15
Туг Туг Азп С1у Рке Азр Рго
10 15
<210> 125 <211> 5 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 125
Агд Туг С1у 11е Бег
5
- 147 019397
<210> 126 <211> 17 <212> БЕЛОК <213> Ното заръепз
<400> 126 Тгр 11е 5ег А1а Туг Азп С1у Азп
1 С1у 5
ТНг Азп Туг А1а О1п Ьуз Ьеи С1п
15 <210> 127 <211> 15 <212> БЕЛОК <213> Ното зариепз
<400> 127
Агд Азр Туг Азр 11е Ьеи ТНг С1у
1 5
<210> 128
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
<400> 128
С1у Туг С1у 11е Бег
1 5
<210> 129
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Ното заръепз
<400> 129
Тгр 11е Бег А1а Туг Азп <31у Азп
1 5
С1у
<210> 130
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Ното зариепз
<400> 130
Агд Азр Туг Азр 11е Ьеи ТНг С1у
1 5
Туг Туг Азп <31у РНе Азр Рго
15
ТНг Азп Туг А1а С1п Азп Ьеи С1п
15
Туг Туг Азп С1у РНе Азр Рго
15 <210> 131 <211> 5 <212> БЕЛОК <213> Ното зарлепз
- 148 019397 <400> 131
Агд Туг С1у 11е Зег
5 <210> 132 <211> 17 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз <400> 132
Тгр 11е Зег А1а Туг Азп С1у Азп ТИг Азп Туг А1а С1п Ьуз Ьеи С1п
1 5 10 15
61у
<210> 133 <211> 15 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
<400> 133
Агд Азр Туг Азр Не Ьеи ТНг С1у
1 5
<210> 134
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Ното зар1епз
<400> 134
Зег С1у С1у Туг Туг Тгр Зег
1 5
<210> 135
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Ното зардепз
<400> 135
Туг 11е Туг РНе Зег С1у Зег А1а
1 5
<210> 136
<211> 14
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
<400> 136
С1и Туг Туг Азр Зег Зег С1у Туг
1 5
Туг Туг Азп О1у РНе Азр Рго
15
Туг Туг Азп Рго Зег Ьеи Ьуз Зег
15
Рго Азр А1а РНе Азр 11е <210> 137 <211> 5 <212> БЕЛОК
- 149 019397 <213> Ното зарйепз <400> 137
Зег Туг С1у МеЬ Ηίβ
5 <210> 138 <211> 17 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз <400> 138 \7а1 11е Тгр Туг Азр С1у Зег Азп Ьуз
5
Туг Туг А1а Азр Зег \7а1 Ьуз
15
С1у <210> 139 <211> 5 <212> БЕЛОК <213> Ното зарйепз <400> 139
Азр Ткг Ьуз Азр Туг
5
<210> <211> <212> <213> 140 5 БЕЛОК Ното зарйепз
<400> 140
Зег Туг С1у 11е Зег
5 <210> 141 <211> 17 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз <400> 141
Тгр 11е Зег Ткг Туг Ьуз
5
С1у Азп Ткг
Азп Туг А1а С1п Ьуз Ьеи С1п
15
С1у <210> 142 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Ното заръепз <400> 142
Ьуз С1п Ьеи Уа1 Рке Азр Туг
5
- 150 019397 <210> 143 <211> 5 <212> БЕЛОК <213> Ното заръепз <400> 143
Зег Туг С1у Мер С1п
5 <210> 144 <211> 17 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз <400> 144 \7а1 11е Тгр Туг Азр О1у Азп Ьуз Ьуз
5
О1у
Туг Туг А1а Азр
Зег νβΐ Ьуз <210> 145 <211> 12 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз <400> 145
О1у Агд Х7а1 Агд Азр Туг Туг Туг С1у МеО Азр Х7а1
10 <210> 146 <211> 5 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 146
Агд Туг О1у 11е Зег
5 <210> 147 <211> 17 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз <400> 147
Тгр 11е Зег Ткг Туг Зег С1у Азп ТНг Азп Туг А1а С1п Ьуз Ьеи <31п
10 15
С1у <210> 148 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
- 151 019397 <400> 148
Агд С1п Ьеи Туг Рйе 1
Азр
Туг <210>
<211>
<212>
<213>
149
БЕЛОК
Ното заргепз
149 <400>
Бег Туг С1у Мей 61п <210>
<211>
<212>
<213>
150
БЕЛОК
Ното заргепз
150 <400>
\7а1 11е Тгр Туг Азр
С1у
Азп
Ьуз
Ьуз
Туг
Туг
А1а Азр
Бег Уа1 Ьуз
С1у <210>
<211>
<212>
<213>
151
БЕЛОК
Ното зархепз
151 <400>
С1у Агд \7а1 Агд Азр
Туг
Туг
Туг
С1у
Мей
Азр
Уа1 <210>
<211>
<212>
<213>
152
БЕЛОК
Ното заргепз
152 <400>
Бег Туг С1у 11е Бег <210>
<211>
<212>
<213>
153
БЕЛОК
Ното заргепз
153 <400>
Тгр 11е Бег А1а Туг
5
Азп
С1у
Азп
Тйг
Ьуз
Туг
А1а С1п
Ьуз Ьеи О1п
С1у
- 152 019397 <210> 154 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз <400> 154
Ьуз С1п Ьеи 17а1 Рке Азр Туг
1 5
<210> 155 <211> 5 <212> БЕЛОК <213> Ното ; зархепз
<400> 155 Зег Туг С1у 11е Зег
1 5
<210> 156
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Ното зар!епз
<400> 156
Тгр 11е Зег А1а Туг Зег С1у Азп Ткг Ьуз Туг А1а С1п Ьуз Ьеи С1п
1 5 10 15
С1у <210> 157 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 157
Ьуз С1п Ьеи Уа1 Рке Азр Туг
5 <210> 158 <211> 5 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз <400> 158
Азр Туг Туг Мер ΗΪ8
5 <210> 159 <211> 17 <212> БЕЛОК <213> Ното зар1епз <400> 159
Тгр Мер ΗΪ3 Рго Азп Зег С1у С1у Ткг Азр Ьеи А1а С1п Агд Рке С1п
1 5 10 15
- 153 019397
С1у <210>
<211>
<212>
<213>
160
БЕЛОК
Ното заргепз
160 <400>
С1у С1у Туг Суз Зег
Тйг
Ьеи
Зег Суз
Зег Рйе Туг Тгр Туг Рйе Азр
15
Ьеи <210>
<211>
<212>
<213>
161
БЕЛОК
Ното заргепз
161 <400>
Зег Туг С1у 11е Зег <210>
<211>
<212>
<213>
162
БЕЛОК
Ното зартепз
162 <400>
Тгр 11е Зег А1а Туг
Зег
С1у
Азп Тйг
Ьуз Туг А1а С1п Ьуз Рйе С1п
15
С1у <210>
<211>
<212>
<213>
163
БЕЛОК
Ното заргепз
163 <400>
Агд С1п Ьеи А1а Ьеи
Азр
Туг <210>
<211>
<212>
<213>
164
БЕЛОК
Ното заргепз
164 <400>
Зег Туг Зег МеЕ Азп
5 <210> 165
- 154 019397 <211> 17 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
<400> 165
Рке 11е Зег А1а Агд Зег Зег Ткг
1 5
С1у
<210> 166
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Ното зархепз
<400> 166
Рго Ьуз \7а1 С1у С1у С1у Мек Азр
1 5
<210> 167
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
<400> 167
Зег Туг Зег Мер Азп
1 5
<210> 168
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Ното зардепз
<400> 168
11е 11е Зег Зег Агд Зег Зег 11е
1 5
С1у
<210> 169
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
<400> 169
Рго Ьуз 7а1 С1у С1у С1у Мек Азр
1 5
<210> 170
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
Уа1
Уа1
11е Туг Туг А1а Азр Зег \7а1 Ьуз
15
11е ΗΪ8 Туг А1а Азр Зег Уа1 Ьуз
15 <400> 170
Агд Туг С1у 11е Зег
- 155 019397 <210>
<211>
<212>
<213>
171
БЕЛОК
Ното зарБепз
171 <400>
Тгр 11е Зег А1а Туг
Зег (31у
Азп
ТИг
Азп
Туг
А1а (31η
Ьуз
Ьеи (31η (31у <210>
<211>
<212>
<213>
172
БЕЛОК
Ното зархепз
172 <400>
Агд С1п Ьеи Туг РЬе <210>
<211>
<212>
<213>
173
БЕЛОК
Ното зарБепз
173
Азр
Туг <400>
Зег Туг Туг Тгр Зег <210>
<211>
<212>
<213>
174
БЕЛОК
Ното зарБепз
174 <400>
Агд 11е Туг Рго Зег (31у
Агд
ТИг
Азп
Туг
Азп
Рго
Зег
Ьеи
Ьуз
Зег <210>
<211>
<212>
<213>
175
БЕЛОК
Ното зарБепе
175 <400>
(31и А1а Туг (31и Ьеи (31п
Ьеи (31у
Ьеи
Туг
Туг
Туг
Туг (31у
Мер
Азр
Уа1 <210>
<211>
<212>
176
БЕЛОК
- 156 019397 <213> Ното зариепз <400> 176
Зег Туг Туг Тгр Зег
5 <210> 177 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Ното заръепз <400> 177
Агд 11е Туг Рго Зег 01у Агд ТЬг Азп Туг Азп Рго Зег Беи Буз Зег
1 5 10 15
<210> 178
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Ното заръепз
<400> 178
С1и А1а Туг С1и Беи С1п Беи С1у Беи Туг Туг Туг Туг С1у Мер Азр
1 5 10 15
Уа1 <210> 179 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Ното зар1епз <400> 179
Зег С1у С1у Туг Туг Тгр Зег
5 <210> 180 <211> 13 <212> БЕЛОК <213> Ното зарБепз <400> 180
Туг Зег С1у Азп ТЬг Туг Туг Азп Рго
5
Зег Леи Агд Зег <210> 181 <211> 14 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз <400> 181
С1и А1а С1у С1у Азп Зег А1а Туг Туг Туг С1у Мер Азр Уа1
10 <210> 182 <211> 5
- 157 019397
<212> БЕЛОК <213> Ното зарьепз <400> 182 Азр Туг Туг МеР Зег
1 5
<210> <211> <212> <213> 183 17 БЕЛОК Ното заргепз
<400> 183 Туг 11е Зег Зег Зег С1у Зег ТИг
1 О1у 5
11е Туг Туг А1а Азр Зег Уа1 Ьуз
15 <210> 184 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
<400> 184
Азр Агд ТИг Туг Туг РНе С1у Зег
1 5
<210> 185
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Ното зарьепз
<400> 185
Агд А1а Зег С1п С1у 11е Агд Азп
1 5
<210> 186
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
<400> 186
А1а А1а Зег Зег Ьеи С1п Зег
1 5
<210> 187
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Ното зархепз
<400> 187
Ьеи С1п Н1з Азп Зег Азп Рго РНе
1 5
<210> 188
Азр Ьеи С1у
ТИг
С1у Зег Туг С1и О1у Мер Азр А7а1
15
- 158 019397 <211> 11 <212> БЕЛОК <213> Ното зарлепз <400> 188
Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Зег Агд Азп Ьеи \7а1
10 <210> 189 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Ното зарлепз <400> 189
С1у А1а Зег ТИг Агд А1а Азп
5 <210> 190 <211> 8 <212> БЕЛОК <213> Ното зарлепз <400> 190
Θΐη С1п Туг Ьуз Зег Тгр Агд ТИг
5 <210> 191 <211> 11 <212> БЕЛОК <213> Ното зарлепз <400> 191
Агд А1а Зег С1п Зег 11е Зег Зег Туг Ьеи Азп
10 <210> 192 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Ното зарлепз <400> 192
А1а А1а Зег Зег Ьеи С1п Зег
5 <210> 193 <211> 9 <212> БЕЛОК <213> Ното зарлепз <400> 193
С1п С1п Зег Туг Зег ТИг Рго РНе ТИг
5 <210> 194 <211> 11
- 159 019397 <212> БЕЛОК <213> Ното заръепз <400> 194
Агд А1а Зег С1п Зег \7а1 Зег Агд Азп
1 5
<210> 195
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Ното зар1епз
<400> 195
С1у А1а Зег Ткг Агд А1а Ткг
1 5
<210> 196
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
<400> 196
С1п С1п Туг Азп Азп Тгр Рго Ткг Тгр
1 5
<210> 197
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
<400> 197
Агд А1а Зег С1п С1у 11е Агд Азп Азр
1 5
<210> 198
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Ното зарйепз
<400> 198
А1а А1а Зег Зег Рке С1п Зег
1 5
<210> 199
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Ното зарйепз
<400> 199
Беи С1п ΗΪ5 Азп Зег Туг Рго Рго Ткг
1 5
<210> 200
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Ното зар!епз
- 160 019397 <400> 200
Агд А1а Зег С1п С1у
11е
Агд
Азп
Азр
Ьеи <31у <210>
<211>
<212>
<213>
201
БЕЛОК
Ното зархепз
201 <400>
А1а А1а Зег Зег Ьеи
С1п
Зег <210>
<211>
<212>
<213>
202
БЕЛОК
Ното зархепз
202 <400>
Ьеи С1п Нхз Ьуз Зег
Туг
Рго
Ьеи
Тйг <210>
<211>
<212>
<213>
203
БЕЛОК
Ното зархепз
203 <400>
Агд А1а Зег С1п С1у
11е
Агд
Азп
Азр
Ьеи С1у <210>
<211>
<212>
<213>
204
БЕЛОК
Ното зархепз
204 <400>
А1а А1а Зег Зег Ьеи
С1п
Зег <210>
<211>
<212>
<213>
205
БЕЛОК
Ното зархепз
205 <400>
Ьеи С1п Нхз Ьуз Зег
Туг
Рго
Ьеи
Тйг
<210> 206
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Ното зархепз
<400> 206
- 161 019397
Агд А1а Зег <31п С1у Не Агд Азп Азр Ьеи О1у 10
1 5
<210> 207
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Ното зариепз
<400> 207
А1а А1а Зег Зег Ьеи С1п Зег
1 5
<210> 208
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Ното заръепз
<400> 208
Ьеи С1п ΗΪ8 Ьуз Зег Туг Рго Ьеи ТИг
1 5
<210> 209
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Ното зархепз
<400> 209
Агд А1а Зег С1п О1у Не Агд Азп Азр Ьеи С1у
1 5 10
<210> 210
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
<400> 210
А1а А1а Зег Зег Ьеи С1п Зег
5 <210> 211 <211> 9 <212> БЕЛОК <213> Ното зарЬепз <400> 211
Ьеи С1п ΗΪ8 Ьуз Зег Туг Рго Ьеи ТНг
1 5
<210> 212 <211> 11 <212> БЕЛОК <213> Ното заръепз <400> 212 Агд А1а Зег С1п О1у 11е Агд Зег Тгр Ьеи А1а
- 162 019397
1 5 10
<210> <211> <212> <213> 213 7 БЕЛОК Ното заргепз
<400> 213 А1а А1а Бег Бег Ьеи С1п Бег
5 <210> 214 <211> 9 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 214
С1п С1п А1а Азп Азп Рйе Рго Агд Тйг
1 5
<210> 215
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Ното зар1епз
<400> 215
Агд А1а Бег О1п Бег Уа1 Бег Бег Азп Ьеи А1а
1 5 10
<210> 216 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 216
С1у А1а Бег Тйг Агд А1а А1а
5 <210> 217 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Ното зарбепз <400> 217
С1п Ηίβ Туг Не Азп Тгр Рго Ьуз Тгр Тйг
1 5 10
<210> 218
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
<400> 218
Агд А1а Бег С1п Бег 11е Бег Бег Бег Ьеи А1а
1 5 10
- 163 019397 <210> 219 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Ното зараепз
<400> 219 С1у А1а Зег Ткг Агд А1а Ткг
1 5
<210> 220
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Ното заръепз
<400> 220
С1п С1п Туг Азр Азп Тгр Рго Ьеи
1 5
<210> 221
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Ното зарбепз
<400> 221
Ьуз Зег Зег С1п Зег Ьеи Ьеи ΗΪ3
1 5
<210> 222
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
<400> 222
С1и Х7а1 Зег Ткг Агд Рке Зег
1 5
<210> 223
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Ното зартепз
<400> 223
Мек 61п Зег 11е С1п Ьеи Рго Ьеи
1 5
<210> 224
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Ното заръепз
<400> 224
Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Зег Зег
1 5
<210> 225
Ткг
Ткг
Азп Ьеи А1а
Зег Азр С1у Ьуз Ткг Туг Ьеи Туг
15
- 164 019397 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз <400> 225
Азр А1а Зег ТЬг Агд А1а ТНг
1 5
<210> 226
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Ното зархепз
<400> 226
<31п С1п Туг Азр Азп Тгр Рго Ьеи ТЬг
1 5
<210> 227 <211> 11 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
<400> 227
Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Зег Зег Азп Ьеи А1а
1 5 10
<210> 228 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Ното зар1епз <400> 228
Азр А1а Зег ТЪг Агд А1а А1а
5 <210> 229 <211> 9 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз <400> 229
С1п С1п Туг Азр Азп Тгр Рго Ьеи ТНг
1 5
<210> 230
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Ното зар1епз
<400> 230
Агд А1а Зег С1п Зег 11е Зег ТНг Зег Ьеи А1а
1 5 10
<210> 231
<211> 7
- 165 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз
<400> 231 С1у Ткг Зег Ткг Агд А1а Ткг
1 5
<210> 232
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Ното зардепз
<400> 232
С1п С1п Туг Азр 11е Тгр Рго Ьеи
1 5
<210> 233
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
<400> 233
Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Зег Зег
1 5
<210> 234
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
<400> 234
С1у А1а Зег Ткг Агд А1а Ткг
1 5
<210> 235
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Ното зардепз
<400> 235
С1п С1п Туг Азр Азп Тгр Рго Ьеи
1 5
<210> 236
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Ното зар1епз
<400> 236
Ьуз Ткг Зег С1п Зег Уа1 Ьеи Туг
1 5
А1а
Ткг
Азп Ьеи А1а
Ткг
8ег 5ег Ьуз Азп Ьуз Азп Рке Ьеи
15 <210> 237
- 166 019397 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 237
Тгр А1а Бег Ткг Агд С1и Бег
5 <210> 238 <211> 9 <212> БЕЛОК <213> Ното зарцепз <400> 238
С1п С1п Туг Туг Бег Ткг Рго Рке Ткг
5 <210> 239 <211> 11 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 239
Агд А1а Бег Θΐη Бег 11е Бег Бег Азп Беи А1а
10 <210> 240 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 240
С1у А1а Бег Ткг Агд А1а Ткг
5 <210> 241 <211> 9 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 241
О1п С1п Туг Азр Ткг Тгр Рго Беи Ткг
1 5
<210> 242
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
<400> 242
Агд А1а Бег С1п С1у 11е Бег Азп Туг Беи А1а
1 5 10
<210> 243
<211> 7
<212> БЕЛОК
- 167 019397
- 168 019397
<400> 249 Азр А1а 5ег ТНг Агд А1а А1а
1 5
<210> 250
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Ното зарлепз
<400> 250
С1п С1п Туг Азр Азп Тгр Рго Ьеи
1 5
<210> 251
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Ното зар1епз
<400> 251
Агд А1а 5ег С1п С1у 11е 11е Азп
1 5
<210> 252
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Ното заръепз
<400> 252
А1а А1а Зег Зег Ьеи О1п Зег
1 5
<210> 253
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Ното зартепз
<400> 253
Ьеи С1п ΗΪ8 Азп Зег Туг Рго Рго
1 5
<210> 254
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Ното зариепз
<400> 254
Агд 5ег Зег С1п Зег Ьеи Уа1 Туг
1 5
<210> 255
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
<400> 255
ТИг
Азр Ьеи С1у
ТНг
Зег Азр С1у ΗΪ8 ТНг Суз Ьеи Азп
15
- 169 019397
Ьуз Уа1 Зег Азп Тгр Азр Зег
1 5
<210> 256
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Ното зарБепз
<400> 256
Мер С1п С1у Тпг ΗΪ3 Тгр Рго Ьеи Суз Зег
1 5 10
<210> 257
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Ното зарБепз
<400> 257
Агд Зег Зег О1п Зег Ьеи ν31 Туг Зег Азр С1у НБз Ткг Суз Ьеи Азп
1 5 10 15
<210> 258
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Ното зартепз
<400> 258
Ьуз Уа1 Зег Азп Тгр Азр Зег
1 5
<210> 259
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Ното зарБепз
<400> 259
Мер С1п С1у ТИг ΗΪ8 Тгр Рго Ьеи Суз Зег
1 5 10
<210> 260
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Ното зарБепз
<400> 260
Агд А1а Зег С1п А1а 11е Зег 11е Туг Ьеи А1а
1 5 10
<210> 261
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Ното зарБепз
<400> 261
А1а А1а Зег Зег Ьеи С1п Зег
1 5
- 170 019397 <210> 262 <211> 9 <212> БЕЛОК <213> Ното зарлепз <400> 262
Θΐη С1п Туг 5ег Зег Туг Рго Агд Ткг
5 <210> 263 <211> 11 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 263
Агд А1а Зег <31п Зег Уа1 Туг Зег Азп Ьеи А1а
10 <210> 264 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Ното зар1епз <400> 264
01у А1а Зег Ткг Агд А1а Ткг
5 <210> 265 <211> 9 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <400> 265
С1п С1п Туг Туг Азп Тгр Рго Тгр Ткг
1 5
<210> 266
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното зар1епз
<400> 266
ааккаскасЬ ддаас 15
<210> 267
<211> 75
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 267 ссадддаадд даскддадкд даккддддак акскаккаса дкдддадсас сааскасаас 60 ссскссскса ададк 75
- 171 019397 <210> 268 <211> 69 <212> ДНК <213> Ното зархепз <400> 268
даЕддддаас ЕсдссааЕЕа аЕддасдЕс сЕаЕддЕЕсд дддадЕЕаЕс адЕЕсЕасЕа сЕасЕасддЕ 60 69
<210> 269
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
<400> 269
ддЕЕасЕасЕ ддадс 15
<210> 270
<211> 48
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
<400> 270
даааЕсааЕс аЕадЕддасд сассааЕЕас аасссдЕссс ЕсаададЕ 48
<210> 271
<211> 57
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
<400> 271
ддсссЕЕаЕЕ асЕЕЕдаЕад ЕадЕддЕЕас сЕЕЕасЕасЕ асЕасддЕЕЕ ддасдЕс 57
<210> 272
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
<400> 272
адсЕаЕддса Едсас 15
<210> 273
<211> 51
<212> днк
<213> Ното зархепз
<400> 273
дЕЕаЕаЕддЕ аЕдаЕддаад ЕааЕааасас ЕаЕдсадасЕ ссдЕдааддд с 51
<210> 274
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
- 172 019397
<400> 274
дакасЪдддд ЕсЕас 15
<210> 275
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
<400> 275
адсЕаЕддса £дсас 15
<210> 276 <211> 51 <212> ДНК <213> Ното зархепз <400> 276 дЕНаДаДддЕ аДдаЕддаад ЕааЬааасас ЕаЕдсадасЕ ссдЕдааддд с 51 <210> 277 <211> 15 <212> ДНК <213> Ното заргепз <400> 277 дакасРдддд ЕсЕас 15
<210> 278
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното бар1епэ
<400> 278
адЬЕасЕасЬ ддадс 15
<210> 279 <211> 48 <212> ДНК
<213> Ното <400> 279 сдЬаЕсЕаЕс заргепз дсадЕдддаа сассаЕсНас аассссРссс ЕсаададЕ 48
<210> 280
<211> 51
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 280
дадааЕЕасС сЕдададкад ЕддЕсЕсЕас ЕасДасДасд дЬаДддасдД с 51
<210> 281
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
- 173 019397 <400> 281
адаОаОддОа Осадс 15
<210> 282
<211> 51
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
<400> 282
ОддаОсадсд сООасааОдд Оаасасааас ОаОдсасада адсЬссаддд с 51
<210> 283
<211> 45
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 283
адддаООасд аОаООООдас ОддООаООаО аасдддООсд асссс 45
<210> 284
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
<400> 284
адаОаОддОа Ос аде 15
<210> 285
<211> 51
<212> ДНК
<213> Ното еараепз
<400> 285
ОддаОсадсд сООасааОдд Оаасасааас ОаОдсасада адсЪссаддд с 51
<210> 286
<211> 45
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 286
адддаООасд аОаООООдас ОддООаООаО аасдддООсд асссс 45
<210> 287
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното зарбепз
<400> 287
ддсОаОддОа Осаде 15
<210> 288 <211> 51 <212> ДНК
- 174 019397
< 213 > Ното <400> 288 РддаРсадсд зартепз 51
сРРасааРдд Раасасааас РаРдсасада ассРссаддд с
<210> 289
<211> 45
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 289
адддаРРасд аРаРРРРдас РддРРаРРаР аасдддРРсд асссс 45
<210> 290
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 290
адаРаРддРа Роадс 15
<210> 291
<211> 50
<212> Днк
<213> Ното заргепз
<400> 291
РддаРсадсд сРРасааРдд Раасасааас РаРдсасада адсРссаддд 50
<210> 292
<211> 45
<212> ДНК
<213> Ното заръепз
<400> 292
адддаРРасд аРаРРРРдас РддРРаРРаР аасдддРРсд асссс 45
<210> 293
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зар1епз
<400> 293
адРддРддРР асРасРддад с 21
<210> 294
<211> 48
<212> ДНК
<213> Ното зар1епз
<400> 294
РасаРсРаРР РсадРдддад сдссРасРас аасссдРссс РсаададР 48
<210> 295 <211> 42
- 175 019397
<212> ДНК <213> Ното <400> 295 дааРасРаРд зар1епз
арадрадрдд РРассссдаР дсРРРРдаРа Рс 42
<210> 296
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното зартепз
<400> 296
адсРаРддса Рдсас 15
<210> 297
<211> 51
<212> ДНК
<213> Ното заръепз
<400> 297
дРРаРаРддР аРдаРддаад РааРаааРаР РаРдсадасР ссдрдааддд с 51
<210> 298
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 298
даРасдаадд асРас 15
<210> 299
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 299
адсРаРддРа Рсадс 15
<210> 300
<211> 51
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
<400> 300
РддаРсадса сРРасааадд Раасасааас РаРдсасада адсРссаддд с 51
<210> 301
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
<400> 301
аадсадсРсд РсРРРдасРа с 21
<210> 302
- 176 019397
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 302
адсРаРддса £дсад 15
<210> 303 <211> 51 <212> ДНК <213> Ното зархепз <400> 303 дРРаРаРддР аРдаРддааа РаадаааРас РаРдсадасР ссдРдааддд с <210> 304 <211> 36 <212> ДНК <213> Ното зартепз <400> 304 ддасдРдРРа дддасРасРа сРасддРаРд дасдРс
<210> 305
<211> 15
<212> днк
<213> Ното зар!епз
<400> 305
адаРаРддРа £садс 15
<210> 306 <211> 51 <212> ДНК <213> Ното зартепз <400> 306
РддаРсадса сРРасадРдд Раасасааас РаРдсасада адсРссаддд с
<210> 307
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 307
сддсадсРРР ас£££дас£а с
<210> 308
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното зар^епз
<400> 308
адсРаРддса Ьдсад
- 177 019397 <210> 309 <211> 51 <212> ДНК <213> Ното зарлепз <400> 309
дРБаРаЕддЬ аОдаЬддааа ЕаадаааРас ЪаЕдсадасО ссдРдааддд С 51
<210> 310
<211> 36
<212> днк
<213> Ното зарлепз
<400> 310
ддасдРдРЬа дддаскасРа сЪасддРаБд дасдРс 36
<210> 311
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното зарлепз
<400> 311
адсБаРддРа Есадс 15
<210> 312
<211> 51
<212> ДНК
<213> Ното зарлепз
<400> 312
БддаЬсадсд сБРасааЕдд Баасасааад ОаИдсасада адскссаддд с 51
<210> 313
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
<400> 313
аадсадсЪсд БсРБРдасРа с 21
<210> 314
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното зарлепз
<400> 314
адсОаРддОа Б с аде 15
<210> 315
<211> 51
<212> ДНК
<213> Ното зарлепз
<400> 315
БддаРсадсд сБРасадБдд ЕааОасааад РаЕдсасада адсРссаддд с 51
- 178 019397
<210> 316
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зартепз
<400> 316
аадсадсОсд £с£££дас£а с 21
<210> 317
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното зар1епз
<400> 317
дасЬасйаса £дсас 15
<210> 318 <211> 51 <212> ДНК <213> Ното зарйепе <400> 318
ОддаЪдсасс сОаасадОдд Ъддсасадас ОЪадсасада ддЬОЕсаддд с 51 <210> 319 <211> 51 <212> ДНК <213> Ното зарйепз <400> 319 дддддаЬаОО дОадОасЬЕЕ дадсЬдсЬсс ЬЬсОасЬддЬ асЬЕсдаЕсО с 51 <210> 320 <211> 15 <212> ДНК
<213> Ното зар1епз
<400> 320
адсЕаОддаа ЕсадО 15
<210> 321
<211> 51
<212> ДНК
<213> Ното заръепз
<400> 321
ЬддаЬсадсд сЬЕасадЕдд Ъаасасааад ЬаЪдсасада ад££ссаддд с 51
<210> 322
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зарйепз
<400> 322
аддсадсЬсд сдЬЬддасЬа с 21
- 179 019397
<210> 323
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 323
адсОаОадса Одаас 15
<210> 324
<211> 51
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 324
ООсаООадЪд
<210> 325
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 325
ссОааадОдд
<210> 326
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното зар1еп8
<400> 326
адсОаОадса Ъдаас 15
<210> 327
<211> 51
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 327
аЪсаООадОа
<210> 328
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 328
ссОааадОдд
<210> 329
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 329
- 180 019397
адакакддка ксадс 15
<210> 330
<211> 51
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 330
Ъддаксадсд сккасадкдд каасасааас Оакдсасада адскссаддд с 51
<210> 331
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 331
сддсадсккк аскккдаска с 21
<210> 332
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното зарлепз
<400> 332
адккаскаск ддадс 15
<210> 333
<211> 48
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 333
сдОакскакс ссадкдддад аассааскас аасссскссс ксаададк 48
<210> 334
<211> 51
<212> ДНК
<213> Ното зартепз
<400> 334
даддсакакд адскдсааск дддсскскас Ьаскаскасд дкакддасдк с 51
<210> 335
<211> 15
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 335
адккаскаск ддадс 15
<210> 336
<211> 48
<212> ДНК
<213> Ното зарлепз
- 181 019397
336 сдкакскакс
ссадкдддад аассааскас аасссскссс ксаададк
<210> 337
<211> 51
<212> днк
<213> Ното
<400> 337
даддсакакд
адскдсааск
дддсскскас каскаскасд дкакддасдк
<210> 338
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зарбепз
<400> 338
адкддкддкк аскаскддад с 21
<210> 339 <211> 39 <212> ДНК <213> Ното зарбепз <400> 339 касадкддда асасскаска саасссдксс сксаддадк <210> 340 <211> 42 <212> ДНК <213> Ното зарбепз <400> 340 даддссддкд дкааскссдс скаскаскас ддкакддасд кс <210> 341 <211> 15 <212> ДНК <213> Ното зархепз <400> 341 даскаскаса кдадс <210> 342 <211> 51 <212> ДНК <213> Ното зартепз <400> 342 касаккадка дкадксдкад кассакакас касдсадаск скдкдааддд с <210> 343 <211> 48 <212> ДНК <213> Ното зарбепз
- 182 019397 <400> 343 даРсдсасдР аРРасРРРдд РРсддддадР РаРдааддда РддасдРс 48 <210> 344 <211> 88 <212> БЕЛОК <213> Ното зархепз <400> 344
С1и 1 11е Уа1 Мер Ткг 5 С1п Бег Рго А1а Ткг Ьеи 10 Бег Уа1 Бег Рго 15 С1у
С1и Агд А1а Ткг Ьеи Бег Суз Агд А1а Бег С1п Бег Уа1 Бег Бег Азп
20 25 30
Беи А1а Тгр Рке С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Рго Беи 11е
35 40 45
Туг Азр А1а Бег Ткг Агд А1а Ткг С1у Уа1 Рго А1а Агд Рке Бег С1у
50 55 60
Бег С1у Бег С1у Ткг Азр Рке Ткг Ьеи Ткг 11е Бег Бег Ьеи Θΐη Бег
65 70 75 80
С1и Азр Рке А1а Уа1 Туг Туг Суз
85
<210> 345
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
<400> 345
сдддсаадРс адддсаРРад аааРдаРРРа ддс 33
<210> 346
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зар1епз
<400> 346
дсРдсаРсса дРРРдсааад Р 21
<210> 347
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното зар1епз
<400> 347
сРасадсаРа аРадРаассс аРРсасР 27
<210> 348
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното зардепз
- 183 019397 <400> 348 адддссадРс ададрдррад садааасРРа дРс 33
<210> 349
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зарБепз
<400> 349
ддддсаРсса сРадддссаа Р 21
<210> 350
<211> 24
<212> ДНК
<213> Ното зарБепз
<400> 350
садсадРаРа ааадсРддсд дасд 24
<210> 351
<211> 33
<212> днк
<213> Ното зарБепз
<400> 351
сдддсаадРс ададсаРРад садсРаРРРа ааР 33
<210> 352
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зарБепз
<400> 352
дсРдсаРсса дРРРдсааад Р 21
<210> 353
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното зарБепз
<400> 353
саасададРР асадРасссс аРРсасР 27
<210> 354
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното зарБепз
<400> 354
адддссадРс ададРдРРад РаддааРРРа дсс 33
<210> 355
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зарБепз
- 184 019397
<400> 355 ддЕдсаОсса ссадддссас 21
<210> 356
<211> 30
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 356
садсадЕаЕа а^аас^ддсс сасдЕддасд 30
<210> 357
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 357
сдддсаадйс адддсаЪЪад аааОдаЕЕЕа ддс 33
<210> 358
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 358
дскдсаЕсса д£££ссааад Е 21
<210> 359
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 359
сЕасадсаЕа аЬад^Ъассс Ессдасд 27
<210> 360
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 360
сдддсаадЕс адддсаИСад аааОдаЕЕЕа ддс 33
<210> 361
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зар1епз
<400> 361
дсЕдсаЬсса д^ЪЬдсааад О 21
<210> 362 <211> 27 <212> ДНК
- 185 019397
<213> Ното <400> 362 сОасадсаОа 8ар1епз
ааадООассс дсОсасО 27
<210> 363
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното зарбепе
<400> 363
сдддсаадОс адддсаООад аааОдаОООа ддс 33
<210> 364
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 364
дсОдсаОсса дОООдсааад О 21
<210> 365
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 365
сОасадсаОа ааадООассс дсОсасО 27
<210> 366
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното заръепз
<400> 366
сдддсаадОс адддсаООад аааОдаОООа ддс 33
<210> 367
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 367
дсОдсаОсса дОСОдсааад О 21
<210> 368
<211> 27
<212> Днк
<213> Ното зарбепз
<400> 368
сОасадсаОа ададООассс дсОсасО 27
<210> 369
<211> 30
- 186 019397 <212> ДНК <213> Ното зарлепз <400> 369 сдддсаадкс адддсаккад ааакдаккка <210> 370 <211> 21 <212> ДНК <213> Ното зархепз <400> 370 дскдсаксса дкккдсааад к
<210> 371 <211> 27 <212> ДНК <213> Ното зартепз <400> 371 скасадсака ааадккассс дсксаск <210> 372 <211> 33 <212> ДНК <213> Ното зартепз <400> 372 сдддсдадкс адддкаккад дадскддкка дсс
<210> 373 <211> 21 <212> ДНК <213> Ното зархепз <400> 373 дскдсаксса дкккдсааад к
<210> 374 <211> 27 <212> ДНК <213> Ното заргепз <400> 374 саасаддска асаакккссс ксддасд
<210> 375 <211> 33 <212> ДНК <213> Ното заргепз <400> 375 адддссадкс ададкдккад садсааскка дсс
- 187 019397
<210> 376
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зар!епз
<400> 376
ддОдсаОсса ссадддссдс ϋ 21
<210> 377
<211> 30
<212> ДНК
<213> Ното заръепз
<400> 377
садсасОаОа ОааасОддсс ОаадОддасд 30
<210> 378
<211> 33
<212> днк
<213> Ното
<400> 378
адддссадОс
<210> 379
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зар1епз
<400> 379
ддОдсаОсса ссадддссас Р 21
<210> 380
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 380
садсааОаОд
<210> 381
<211> 48
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 381
аадОсОадОс
<210> 382
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 382
- 188 019397
даадЕЬЕсса сссддРРсРс е 21
<210> 383
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното заръепз
<400> 383
аНдсааадНа РасадсРРсс дсРсасР 27
<210> 384
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното зар1епз
<400> 384
адддссадРс ададРдРРад садсаасРРа дес 33
<210> 385
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното заръепз
<400> 385
даЬдсаЕсса ссадддссас Р 21
<210> 386
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното заръепз
<400> 386
садсадРаРд аРаасРддсс дсРсасР 27
<210> 387
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното зар1епз
<400> 387
адддссадЕс ададРдРРад садсаасРРа дсс 33
<210> 388
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
<400> 388
даНдсаРсса ссадддссдс И 21
<210> 389
<211> 27
- 189 019397 <212 <213>
ДНК
Ното зардепз
389 <400> садсадСаЕд акаасОддсс дсЕсасЕ
<210> 390
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 390
адддссадЕс
ададЕаЬЪад
сассадсООа дсс
<210> 391
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 391
ддЪасаСсса ссадддссас ϋ 21
<210> 392
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 392
саасадЬаЪд
заргепз аЕаОсОддсс дсЬсасС
<210> 393
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 393
адддссадОс
зарйепз
садсаасССа
<210> 394
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зарйепз
<400> 394
ддОдсаЕсса ссадддссас О 21
<210> 395 <211> 27 <212> ДНК <213> Ното зарйепз <400> 395 садсадОаЬд айаасЬддсс дсЬсасЬ <210> 396
- 190 019397 <211> 51 <212> ДНК <213> Ното зархепз <400> 396 аадассадсс ададСдОДСО аСасадсЕсс ааааасаада асООсСДадс к
<210> 397
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 397
ОдддсаЬсЕа сссдддаа^с с 21
<210> 398
<211> 27
<212> днк
<213> Ното зархепз
<400> 398
садсааЕаДД аЪадЪас^сс а££сас£ 27
<210> 399
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
<400> 399
адддссадСс адад£ай£ад садсаасй^а дсс 33
<210> 400
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зар1епз
<400> 400
ддЕдсаДсса ссадддссас ύ 21
<210> 401
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
<400> 401
садсадОаДд аДассЕддсс СсДсасЕ 27
<210> 402
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 402
сдддсдадДс адддсаОЕад сааЬДаДДНа дсс 33
- 191 019397
<210> 403
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 403
дсРдсаРсса сЫЛасаа^с а 21
<210> 404
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното зартепз
<400> 404
саааадРаРа ассдРдсссс аРРсасР 27
<210> 405
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното зар^епз
<400> 405
сдддсдадрс адддса^Сад саа££а££Ха дсс 33
<210> 406 <211> 21 <212> ДНК <213> Ното <400> 406 дсРдсаРсса зар1епз сРРРдсааРс а 21
<210> 407
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното зар1епз
<400> 407
саааадРаРа ассдРдсссс аРРсасР 27
<210> 408
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното зартепз
<400> 408
адддссадРс ададрдррад садсаасРРа дсс 33
<210> 409
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
- 192 019397 <400> 409 даРдсаРсса ссадддссдс Р
<210> 410
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното зар1епз
<400> 410
садсадРаРд аЪаасЪддсс дсЬсасЬ 27
<210> 411
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 411
сдддсаадРс
заръепз адддсаРРаР аааРдаРРРа
<210> 412
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното зар^епз
<400> 412
дсРдсаРсса дРЬСдсааад Ь 21
<210> 413
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 413
сРасадсаРа
заръепз аРадРРассс
Рссдасд
<210> 414
<211> 48
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 414
аддРсРадРс
заргепз ааадссРсдР аРаРадРдаР ддасасассР дсРРдааР
<210> 415 <211> 21 <212> ДНК <213> Ното заргепз <400> 415 ааддРРРсРа асРдддасРс Р <210> 416 <211> 30 <212> ДНК <213> Ното заръепз
- 193 019397
<400> 416
акдсааддка сасаскддсс кскдкдсадк 30
<210> 417
<211> 48
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 417
аддкскадкс ааадссксдк акакадкдак ддасасасск дсккдаак 48
<210> 418
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 418
ааддкккска
зарбепз
<210> 419
<211> 30
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 419
акдсааддка
зарбепз сасаскддсс кскдкдсадк
<210> 420
<211> 33
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 420
сдддсдадкс
аддссаккад
<210> 421
<211> 21
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 421
дскдсаксса
зархепз дкккдсааад
<210> 422
<211> 27
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 422
саасадкака
<210> 423 <211> 33 <212> ДНК
- 194 019397 <213> Ното зар1епз <400> 423 адддссадРс ададРдРРРа садсаасРРа дсс <210> 424 <211> 21 <212> ДНК <213> Ното зартепз <400> 424 ддРдсРРсса ссадддссас Р <210> 425 <211> 27 <212> ДНК <213> Ното зартепз <400> 425 садсадРаРР аРаасРддсс дрддасд <210> 426 <211> 1409 <212> ДНК <213> Ното зартепз <220>
<221> Кодирующая последовательность <222> (16)..(1398) <400> 426 дрсдасдссд ссасс аРд дад Рдд асе Рдд адд дрс сРР РРс РРд дРд дса 51
Мер С1и Тгр ТИг Тгр Агд Уа1 Ьеи РНе Ьеи Уа1 А1а
10
дса дса аса ддр ТНг С1у 15 дсс А1а сас ΗΪ8 Рсс Зег сад дрр сад С1п сРд Ьеи дрд Уа1 сад 61п 25 рср Зег дда С1у дсР А1а 99
А1а А1а С1п 20 Уа1
дад дьд аад аад ССР ддд дсс Рса дрд аад дРс Рсс Рдс аад дсР РсР 147
С1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у А1а Зег Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Зег
30 35 40
ддр Рас асе РРР асе ада РаР ддр аРс аде Рдд дрд еда сад дсс сер 195
С1у Туг ТНг РНе ТНг Агд Туг С1у Не Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго
45 50 55 60
дда саа ддд сРР дад Рдд аРд дда ьдд аРс аде асР Рас адР ддй аас 243
61у С1п С1у Ьеи С1и Тгр Мер С1у Тгр 11е Зег ТНг Туг Зег С1у Азп
65 70 75
аса аас РаР дса сад аад сРс сад ддс ада дрс асе аРд асе аса дас 291
ТНг Азп Туг А1а С1п Ьуз Ьеи С1п С1у Агд Уа1 ТНг Мер ТНг ТНг Азр
80 85 90
аса Рсс асд аде аса дсс Рас аРд дад сРд адд аде сРд ада РсР дас 339
- 195 019397
ТИг Зег ТНг 95 Зег ТНг А1а Туг Мер 100 С1и Ьеи Агд Зег Ьеи 105 Агд Зег Азр
дас асд дес дЕд РаР Рас РдР дед ада едд сад СРР Рас РРР дас Рас 387
Азр ТНг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а Агд Агд С1п Ьеи Туг РНе Азр Туг
110 115 120
Едд ддс сад дда асе еРд дРс асе дрс Рее Рса дсР аде асе аад ддс 435
Тгр С1у С1п С1у ТНг Ьеи Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег А1а Зег ТНг Ьуз С1у
125 130 135 140
сса Есд дЕс РРс ссс еРд дед ссс Рдс Рее адд аде асе Рее дад аде 483
Рго Зег Уа1 РНе Рго Ьеи А1а Рго Суз Зег Агд Зег ТНг Зег С1и Зег
145 150 155
аса дед дес еРд ддс рдс еРд дрс аад дас Рас РРс ссс даа сед дЕд 531
ТНг А1а А1а Ьеи С1у Суз Ьеи Уа1 Ьуз Азр Туг РНе Рго С1и Рго Уа1
160 165 170
асд дед Сед Едд аас Рса ддс дсР еРд асе аде ддс дЕд сас асе РРс 579
ТНг Уа1 Зег Тгр Азп Зег С1у А1а Ьеи ТИг Зег С1у Уа1 ΗΪ3 ТНг РНе
175 180 185
сса дсР дЕс сРа сад Рее Рса дда сРс Рас Рее сРс аде аде дед дед 627
Рго А1а Уа1 Ьеи С1п Зег Зег С1у Ьеи Туг Зег Ьеи Зег Зег Уа1 Уа1
190 195 200
асе дЕд ссс Рее аде аас РРс ддс асе сад асе Рас асе Рдс аас дра 675
ТНг Уа1 Рго Зег Зег Азп РНе С1у ТИг С1п ТНг Туг ТНг Суз Азп Уа1
205 210 215 220
дар Азр сас Н13 аад Ьуз ссс Рго аде Зег 225 аас Азп асе ТНг аад Ьуз дЕд Уа1 дас Азр 230 аад аса дЕЕ Уа1 дад С1и еде Агд 235 ааа Ьуз 723
Ьуз ТИг
РдР РдР дрс дад Рдс сса сед Еде сса дса сса ссР дЕд дса дда сед 771
Суз Суз Уа1 С1и Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго Рго Уа1 А1а С1у Рго
240 245 250
Рса дрс РРс сРс РРс ссс сса ааа ссс аад дас асе сРс аЕд аЕс Рее 819
Зег Уа1 РНе Ьеи РНе Рго Рго Ьуз Рго Ьуз Азр ТНг Ьеи Мер 11е Зег
255 260 265
едд асе ссР дад дРс асд Рдс дЕд дЕд дЕд дас дЕд аде сас даа дас 867
Агд ТНг Рго С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Ηίβ С1и Азр
270 275 280
ссс дад дрс сад РРс аас Едд Рас дЕд дас ддс дЕд дад дЕд саЕ ааЕ 915
Рго С1и \7а1 С1п РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Н1з Азп
285 290 295 300
дес аад аса аад сса едд дад дад сад РРс аас аде асд РРс сдЕ дЕд 963
А1а Ьуз ТНг Ьуз Рго Агд С1и С1и С1п РНе Азп Зег ТНг РНе Агд Уа1
305 310 315
дрс аде дрс сРс асе дрр дЕд сас сад дас Едд еРд аас ддс аад дад 1011
Уа1 Зег Уа1 Ьеи ТНг Уа1 Уа1 ΗΪ5 61п Азр Тгр Ьеи Азп С1у Ьуз (31и
320 325 330
Рас аад Еде аад дрс Рее аас ааа ддс сРс сса дес ссс аЕс дад ааа 1059
Туг Ьуз Суз Ьуз Уа1 Зег Азп Ьуз С1у Ьеи Рго А1а Рго Не С1и Ьуз
- 196 019397
335 340 345
асе акс Ссс ааа асе ааа ддд сад ссс еда даа сса сад дкд кас асе 1107
Ткг 11е Зег Ьуз Ткг Ьуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг Ткг
350 355 360
скд ссс сса Осс едд дад дад акд асе аад аас сад дке аде скд асе 1155
Ьеи Рго Рго Зег Агд С1и С1и Мек Ткг Ьуз Азп 61п Уа1 Зег Ьеи Ткг
365 370 375 380
кде скд дке ааа ддс Оке кас ссс аде дас акс дес д£д дад кдд дад 1203
Суз Ьеи Уа1 Ьуз С1у Рке Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр С1и
385 390 395
аде аак ддд сад сед дад аас аас кас аад асе аса сек ссс акд скд 1251
Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Ьуз Ткг Ткг Рго Рго Мек Ьеи
400 405 410
дас Ссс дас ддс ксс Оке ккс скс кас аде аад скс асе дкд дас аад 1299
Азр Зег Азр С1у Зег Рке Рке Ьеи Туг Зег Ьуз Ьеи Ткг Уа1 Азр Ьуз
415 420 425
аде адд Ьдд сад сад ддд аас дке ккс кеа кде ксс д£д акд сак дад 1347
Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 Рке Зег Суз Зег Уа1 Мек Η13 С1и
430 435 440
дек скд сас аас сас кас асд сад аад аде скс ксс скд ЬсЬ сед ддЕ 1395
А1а Ьеи НЬз Азп Н1з Туг Ткг С1п Ьуз Зег Ьеи Зег Ьеи Зег Рго С1у
445 450 455 460
ааа кдадсддссд с 1409
Ьуз <210> 427 <211> 461 <212> БЕЛОК <213> Ното зарЬепз
<400> 427 Ьеи Рке Ьеи 10 Уа1 А1а А1а А1а Ткг 15 С1у
Мек 1 С1и Тгр Ткг Тгр 5 Агд Уа1
А1а Н1з Зег С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1п Зег С1у А1а С1и Уа1 Ьуз Ьуз
20 25 30
Рго С1у А1а Зег Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Зег С1у Туг Ткг Рке
35 40 45
Ткг Агд Туг С1у 11е Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи
50 55 60
61и Тгр Мек С1у Тгр 11е Зег Ткг Туг Зег С1у Азп Ткг Азп Туг А1а
65 70 75 80
С1п Ьуз Ьеи С1п С1у Агд Уа1 Ткг Мек Ткг Ткг Азр Ткг Зег Ткг Зег
85 90 95
Ткг А1а Туг Мек С1и Ьеи Агд Зег Ьеи Агд Зег Азр Азр Ткг А1а Уа1
100 105 но
- 197 019397
Туг Туг Суз 115 А1а Агд Агд 61п Ьеи 120 Туг Рйе Азр Туг Тгр 125 С1у С1п С1у
Тйг Ьеи \7а1 Тйг Уа1 Бег Бег А1а Бег Тйг Ьуз С1у Рго Бег Уа1 Рйе
130 135 140
Рго Ьеи А1а Рго Суз Бег Агд Бег Тйг Бег С1и Бег Тйг А1а А1а Ьеи
145 150 155 160
С1у Суз Ьеи Уа1 Ьуз Азр Туг Рйе Рго С1и Рго \7а1 Тйг Уа1 Бег Тгр
165 170 175
Азп Бег С1у А1а Ьеи тйг Бег 61у Уа1 ΗΪ3 Тйг Рйе Рго А1а Уа1 Ьеи
180 185 190
С1п Бег Бег С1у Ьеи Туг Бег Ьеи Бег Бег Уа1 Уа1 Тйг Уа1 Рго Бег
195 200 205
Бег Азп Рйе С1у Тйг С1п ТЙГ Туг ТЙГ Суз Азп Уа1 Азр ΗΪ3 Ьуз Рго
210 215 220
Бег Азп Тйг Ьуз Уа1 Азр Ьуз Тйг Уа1 С1и Агд Ьуз Суз Суз Уа1 С1и
225 230 235 240
Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго Рго Уа1 А1а С1у Рго Бег Уа1 Рйе Ьеи
245 250 255
Рйе Рго Рго Ьуз Рго Ьуз Азр Тйг Ьеи МеЕ 11е Бег Агд Тйг Рго С1и
260 265 270
Уа1 Тйг Суз \7а1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Бег ΗΪ8 С1и Азр Рго 61и Уа1 С1п
275 280 285
Рйе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 ΗΪ3 Азп А1а Ьуз Тйг Ьуз
290 295 300
Рго Агд С1и С1и С1п Рйе Азп Бег Тйг Рйе Агд Уа1 Уа1 Бег Уа1 Ьеи
305 310 315 320
Тйг Уа1 \7а1 ΗΪ3 С1п Азр Тгр Ьеи Азп С1у Ьуз С1и Туг Ьуз Суз Ьуз
325 330 335
Уа1 Бег Азп Ьуз С1у Ьеи Рго А1а Рго 11е С1и Ьуз Тйг 11е Бег Ьуз
340 345 350
Тйг Ьуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг Тйг Ьеи Рго Рго Бег
355 360 365
Агд С1и С1и Мей ТЙГ Ьуз Азп С1п Уа1 Бег Ьеи Тйг Суз Ьеи Уа1 Ьуз
370 375 380
С1у Рйе Туг Рго Бег Азр Не А1а Уа1 С1и Тгр С1и Бег АЗП С1у С1п
385 390 395 400
Рго С1и Азп Азп Туг Ьуз Тйг Тйг Рго Рго Мей Ьеи Азр Бег Азр С1у
405 410 415
Бег Рйе Рйе Ьеи Туг Бег Ьуз Ьеи ТЙГ Уа1 Азр Ьуз Бег Агд Тгр С1п
420 425 430
С1п С1у Азп Уа1 Рйе Бег Суз Бег Уа1 Мей ΗΪ8 С1и А1а Ьеи Н13 Азп
- 198 019397
435 440 445
Ηίε Туг Тйг Θΐη Ьуз Бег Ьеи Бег Ьеи Бег Рго С1у Ьуз
450 455 460 <210> 428 <211> 741 <212> ДНК <213> Ното заргепз <220>
<221> Кодирующая последовательность <222> (24) .. (725) <400> 428 дОсдасдООО ааасдссдсс асе аОд даа дед ссд дед сад сОО сОс 00с сОс 53 МеО 61и А1а Рго А1а С1п Ьеи Ьеи Рйе Ьеи 15 10
сОд Ьеи сОа Ьеи сОс Ьеи Одд Тгр сОс Ьеи 15 сса Рго дао Азр асе Тйг асО Тйг дда С1у 20 даа С1и аОа 11е дОд Уа1 айд Мей асд Тйг 25 сад С1п 101
ОсО сса дес асе сОд ОсО дОд ОсО ссй ддд даа ада дсс асе сОс Осс 149
Бег Рго А1а Тйг Ьеи Бег Уа1 Бег Рго С1у С1и Агд А1а Тйг Ьеи Бег
30 35 40
Оде адд дес адО сад адО дОО аде аде аас 00а дсс одд ООс сад сад 197
Суз Агд А1а Бег С1п Бег Уа1 Бег Бег Азп Ьеи А1а Тгр Рйе С1п С1п
45 50 55
ааа ссО ддс сад дсо ссс адд ссс сОс аОс ОаО даО дса Осс асе адд 245
Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Рго Ьеи Не Туг Азр А1а Бег Тйг Агд
60 65 70
дес асО ддо дОс сса. дсс адд ООс адО ддс ад О ддд ОсО ддд аса дас 293
А1а ТЙГ О1у \7а1 Рго А1а Агд Рйе Бег С1у Бег С1у Бег С1у Тйг Азр
75 80 85 90
00с асО сОс асе аОс аде аде сОд сад ОсО даа дай 000 дса доо ОаО 341
Рйе ТЙГ Ьеи ТЙГ 11е Бег Бег Ьеи С1п Бег С1и Азр Рйе А1а Уа1 Туг
95 100 105
Оас ОдО сад сад ОаО даО аас Одд ссд сОс асО ООс ддс дда ддд асе 389
Туг Суз С1п С1п Туг Азр Азп Тгр Рго Ьеи Тйг Рйе С1у С1у С1у тйг
110 115 120
аад дОд дад аОс ааа сдО асд дОд дсО дса сса ОсО дОс ООс аОс ООс 437
Ьуз Уа1 <31и Не Ьуз Агд Тйг Уа1 А1а А1а Рго Бег Уа1 Рйе 11е Рйе
125 130 135
ссд сса ОсО дай дад сад Ойд ааа ОсО дда асО дсс ОсО доо дОд Оде 485
Рго Рго Бег Азр С1и С1п Ьеи Ьуз Бег С1у Тйг А1а Бег Уа1 Уа1 Суз
140 145 150
сОд сОд ааО аас ООс ОаО ссс ада дад дсс ааа дОа сад Одд аад дОд 533
Ьеи Ьеи Азп Азп Рйе Туг Рго Агд С1и А1а Ьуз Уа1 С1п Тгр Ьуз Уа1
155 160 165 170
дао аас дсс сОс саа Осд ддй аас Осс сад дад адО дос аса дад сад 581
- 199 019397
Азр Азп А1а Ьеи С1п 175 Зег С1у Азп Зег С1п 180 С1и Зег Уа1 Ткг С1и С1п 185
дас аде аад дас аде асе Рас аде сСс аде аде асе скд асд сЬд аде
Азр Зег Ьуз Азр Зег Ткг Туг Зег Ьеи Зег Зег Ткг Ьеи Ткг Ьеи Зег
190 195 200
ааа дса дас Нас дад ааа сас ааа дЬс Сас дес Ьдс даа дЬс асе саС
Ьуз А1а Азр Туг С1и Ьуз Η15 Ьуз Уа1 Туг А1а Суз С1и Уа1 Ткг ΗΪ3
205 210 215
сад ддс сед аде Ьсд ссс дСс аса аад аде ккс аас адд дда дад ЬдЬ
С1п С1у Ьеи Зег Зег Рго Уа1 Ткг Ьуз Зег Рке Азп Агд С1у С1и Суз
220 225 230
Саддакссдс ддссдс
741 <210> 429 <211> 234 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз
<400> 429 Рго А1а 5 С1п Ьеи Ьеи Рке Ьеи Ьеи 10 Ьеи Ьеи Тгр Ьеи 15 Рго
Мек 1 С1и А1а
Азр Ткг Ткг С1у С1и 11е Уа1 Мек Ткг С1п Зег Рго А1а Ткг Ьеи Зег
20 25 30
Уа1 Зег Рго С1у С1и Агд А1а Ткг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег
35 40 45
Уа1 Зег Зег Азп Ьеи А1а Тгр Рке С1п О1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго
50 55 60
Агд Рго Ьеи 11е Туг Азр А1а Зег Ткг Агд А1а Ткг С1у Уа1 Рго А1а
65 70 75 80
Агд Рке Зег С1у Зег <31у Зег <31у Ткг Азр Рке Ткг Ьеи Ткг 11е Зег
85 90 95
Зег Ьеи С1п Зег С1и Азр Рке А1а Уа1 Туг Туг Суз С1п С1п Туг Азр
100 105 110
Азп Тгр Рго Ьеи Ткг Рке С1у С1у С1у Ткг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз Агд
115 120 125
Ткг Уа1 А1а А1а Рго Зег Уа1 Рке Х1е Рке Рго Рго Зег Азр С1и С1п
130 135 140
Ьеи Ьуз Зег С1у Ткг А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Ьеи Ьеи Азп Азп Рке Туг
145 150 155 160
Рго Агд С1и А1а Ьуз Уа1 С1п Тгр Ьуз Уа1 Азр Азп А1а Ьеи С1п Зег
165 170 175
С1у Азп Зег С1п С1и Зег Уа1 Ткг С1и 61п Азр Зег Ьуз Азр Зег Ткг
180 185 190
Туг Зег Ьеи Зег Зег Ткг Ьеи Ткг Ьеи Зег Ьуз А1а Азр Туг С1и Ьуз
195 200 205
- 200 019397
Ηίε Ьуз Уа1 Туг А1а Суз С1и Уа1 Ткг Н13 С1п С1у Ьеи Зег Зег Рго
210 215 220
Уа1 Ткг Ьуз Зег Рке Азп Агд С1у С1и Суз
225 230 <210> 430 <211> 866 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз
<400> 430 Рго Зег А1а Уа1 10 Рго С1у Рго Ьеи 15 Ьеи
Мек С1у 1 А1а А1а Агд 5 Зег Рго
С1у Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи С1у Уа1 Ьеи А1а Рго С1у С1у А1а Зег
20 25 30
Ьеи Агд Ьеи Ьеи Азр Ηίε Агд А1а Ьеи Уа1 Суг Зег 61п Рго С1у Ьеи
35 40 45
Азп Суз Ткг Уа1 Ьуз Азп Зег Ткг Суе Ьеи Азр Азр Зег Тгр 11е Ηίε
50 55 60
Рго Агд Азп Ьеи Ткг Рго Зег Зег Рго Ьуз Азр Ьеи С1п 11е С1п Ьеи
65 70 75 80
Ηίε Рке А1а Ηίε Ткг С1п С1п С1у Аер Ьеи Рке Рго Уа1 А1а Ηίε 11е
85 90 95
С1и Тгр Ткг Ьеи С1п Ткг Азр А1а Зег 11е Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 но
С1и Ьеи Зег Уа1 Ьеи С1п Ьеи Азп Ткг Азп С1и Агд Ьеи Суз Уа1 Агд
115 120 125
Рке С1и Рке Ьеи Зег Ьуз Ьеи Агд Ηίε Ηίε ΗΪ5 Агд Агд Тгр Агд Рке
130 135 140
Ткг Рке Зег ΗΪ3 Рке Уа1 Уа1 Азр Рго Азр С1п С1и Туг С1и Уа1 Ткг
145 150 155 160
Уа1 Н13 ΗΪ5 Ьеи Рго Ьуз Рго 11е Рго Азр С1у Азр Рго Азп Ηίε С1п
165 170 175
Зег Ьуз Азп Рке Ьеи Уа1 Рго Азр Суз С1и Н13 А1а Агд Мек Ьуз Уа1
180 185 190
Ткг Ткг Рго Суз Мек Зег Зег С1у Зег Ьеи Тгр Азр Рго Азп 11е Ткг
195 200 205
Уа1 С1и Ткг Ьеи С1и А1а Н13 С1п Ьеи Агд Уа1 Зег Рке Ткг Ьеи Тгр
210 215 220
Азп С1и Зег Ткг ΗΪ3 Туг С1п 11е Ьеи Ьеи Ткг Зег Рке Рго Ηίε Мек
225 230 235 240
С1и Азп Η13 Зег Суз Рке С1и Ηίε Мек Ηίε ΗΪ8 11е Рго А1а Рго Агд
245 250 255
- 201 019397
Рго С1и С1и РНе 260 Н13 С1п Агд Зег Азп Уа1 265 ТНг Ьеи ТНг Ьеи 270 Агд Авп
Ьеи Ьуз С1у Суз Суз Агд ΗΪ3 С1п Уа1 С1п Не С1п Рго РНе РНе Зег
275 280 285
Зег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд ΗΪΒ Зег А1а ТНг Уа1 Зег Сув Рго
290 295 300
С1и МеЬ Рго Азр ТИг Рго С1и Рго Не Рго Азр Туг Мер Рго Ьеи Тгр
305 310 315 320
Уа1 Туг Тгр РНе 11е ТНг С1у 11е Зег 11е Ьеи Ьеи Уа1 С1у Зег Уа1
325 330 335
Не Ьеи Ьеи 11е Уа1 Суз МеЬ ТНг Тгр Агд Ьеи А1а С1у Рго С1у Зег
340 345 350
<31и Ьуз Туг Зег Азр Азр ТНг Ьуз Туг ТНг Азр С1у Ьеи Рго А1а А1а
355 360 365
Азр Ьеи 11е Рго Рго Рго Ьеи Ьуз Рго Агд Ьуз Уа1 Тгр 11е Не Туг
370 375 380
Зег А1а Азр Н18 Рго Ьеи Туг Уа1 Азр Уа1 Уа1 Ьеи Ьуз РНе А1а С1п
385 390 395 400
РНе Ьеи Ьеи ТИг А1а Суз С1у ТНг С1и \7а1 А1а Ьеи Азр Ьеи Ьеи С1и
405 410 415
С1и С1п А1а 11е Зег С1и А1а С1у Уа1 Мек ТНг Тгр νβΐ С1у Агд С1п
420 425 430
Ьуз Θ1Π С1и МеЬ Уа1 С1и Зег Азп Зег Ьув 11е 11е Уа1 Ьеи Суз Зег
435 440 445
Агд С1у ТИг Агд А1а Ьуз Тгр С1п А1а Ьеи Ьеи О1у Агд С1у А1а Рго
450 455 460
Уа1 Агд Ьеи Агд Суз Азр Ηί3 С1у Ьуз Рго Уа1 С1у Азр Ьеи РНе ТНг
465 470 475 480
А1а А1а Мер Азп Мер 11е Ьеи Рго Авр РНе Ьуз Агд Рго А1а Сув РНе
485 490 495
С1у ТИг Туг Уа1 Уа1 Суз Туг РНе Зег С1и \7а1 Зег Суз Азр С1у Авр
500 505 510
Уа1 Рго Азр Ьеи РНе С1у А1а А1а Рго Агд Туг Рго Ьеи МеП Азр Агд
515 520 525
РНе С1и С1и Уа1 Туг РНе Агд 11е С1п Азр Ьеи С1и МеЬ РНе С1п Рго
530 535 540
С1у Агд Мер Н13 Агд Уа1 С1у С1и Ьеи Зег С1у Азр АЗП Туг Ьеи Агд
545 550 555 560
Зег Рго С1у С1у Агд С1п Ьеи Агд А1а А1а Ьеи Авр Агд РНе Агд Азр
565 570 575
Тгр С1п Уа1 Агд Суз Рго Азр Тгр РНе С1и Суз С1и Азп Ьеи Туг Зег
580 585 590
- 202 019397
А1а Азр Азр Θΐη 595 Азр А1а Рго Бег 600 Ьеи Азр С1и С1и \7а1 605 РНе С1и С1и
Рго Ьеи Ьеи Рго Рго С1у ТИг С1у 11е Уа1 Ьуз Агд А1а Рго Ьеи Уа1
610 615 620
Агд С1и Рго С1у Бег С1п А1а Суз Ьеи А1а Не Азр Рго Ьеи Уа1 С1у
625 630 635 640
С1и С1и С1у 61у А1а А1а \7а1 А1а Ьуз Ьеи С1и Рго Н1з Ьеи С1п Рго
645 650 655
Агд С1у С1п Рго А1а Рго С1п Рго Ьеи Н13 ТНг Ьеи Уа1 Ьеи А1а А1а
660 665 670
С1и С1и С1у А1а Ьеи Уа1 А1а А1а Уа1 С1и Рго С1у Рго Ьеи А1а Азр
675 680 685
С1у А1а А1а Уа1 Агд Ьеи А1а Ьеи А1а С1у С1и 61у 61и А1а Суз Рго
690 695 700
Ьеи Ьеи С1у Бег Рго С1у А1а С1у Агд Азп Бег Уа1 Ьеи РНе Ьеи Рго
705 710 715 • 720
Уа1 Азр Рго С1и Азр Бег Рго Ьеи С1у Бег Бег ТНг Рго МеР А1а Бег
725 730 735
Рго Азр Ьеи Ьеи Рго С1и Азр νβΐ Агд С1и Н1з Ьеи С1и С1у Ьеи МеР
740 745 750
Ьеи Бег Ьеи РНе С1и С1п Бег Ьеи Бег Суз С1п А1а С1п С1у С1у Суз
755 760 765
Бег Агд Рго А1а Мер Уа1 Ьеи ТИг Азр Рго ΗΪ8 ТНг Рго Туг С1и С1и
770 775 780
С1и С1п Агд С1п Бег Уа1 С1п Бег Азр С1п 61у Туг 11е Бег Агд Бег
785 790 795 800
Бег Рго С1п Рго Рго С1и С1у Ьеи ТНг С1и МеР С1и С1и С1и С1и С1и
805 810 815
С1и С1и С1п Азр Рго С1у Ьуз Рго А1а Ьеи Рго Ьеи Бег Рго С1и Азр
820 825 830
Ьеи С1и Бег Ьеи Агд Бег Ьеи С1п Агд С1п Ьеи Ьеи РНе Агд С1п Ьеи
835 840 845
С1п Ьуз Азп Бег С1у Тгр Азр ТНг Мер С1у Бег С1и Бег С1и С1у Рго
850 855 860
Бег А1а
865 <210> 431 <211> 344 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
- 203 019397 <223> Синтетическая конструкция
<400> 431 А1а Агд 5 Зег Рго Рго Зег А1а \7а1 10 Рго С1у Рго Ьеи 15 Ьеи
МеЬ 1 С1у А1а
С1у Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи С1у Уа1 Ьеи А1а Рго С1у С1у А1а Зег
20 25 30
Ьеи Агд Ьеи Ьеи Азр ΗΪ8 Агд А1а Ьеи Уа1 Суз Зег С1п Рго С1у Ьеи
35 40 45
Азп Суз Ткг Уа1 Ьуз Азп Зег Ткг Суз Ьеи Азр Азр Зег Тгр 11е ΗΪ3
50 55 60
Рго Агд Азп Ьеи Ткг Рго Зег Зег Рго Ьуз Азр Ьеи С1п 11е С1п Ьеи
65 70 75 80
ΗΪ3 Рке А1а ΗΪ3 Ткг С1п С1п С1у Азр Ьеи Рке Рго Уа1 А1а ΗΪ8 11е
85 90 95
С1и Тгр Ткг Ьеи С1п Ткг Азр А1а Зег 11е Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 110
С1и Ьеи Зег Уа1 Ьеи С1п Ьеи Азп Ткг Азп С1и Агд Ьеи Суз Уа1 Агд
115 120 125
Рке С1и Рке Ьеи Зег Ьуз Ьеи Агд ΗΪ8 ΗΪ3 Н13 Агд Агд Тгр Агд Рке
130 135 140
Ткг Рке Зег ΗΪ3 Рке Уа1 Уа1 Азр Рго Азр С1п 61и Туг С1и Уа1 Ткг
145 150 155 160
Уа1 ΗΪ3 Н13 Ьеи Рго Ьуз Рго 11е Рго Азр С1у Азр Рго Азп ΗΪ3 С1п
165 170 175
5ег Ьуз Азп Рке Ьеи Уа1 Рго Азр Суз С1и ΗΪ8 А1а Агд Мек Ьуз Ча1
180 185 190
Ткг Ткг Рго Суз МеЬ Зег Зег С1у Зег Ьеи Тгр Азр Рго Азп 11е Ткг
195 200 205
Уа1 С1и Ткг Ьеи С1и А1а Низ С1п Ьеи Агд Уа1 Зег Рке Ткг Ьеи Тгр
210 215 220
Азп С1и Зег Ткг Н13 Туг С1п 11е Ьеи Ьеи Ткг Зег Рке Рго ΗΪ8 Мер
225 230 235 240
С1и Азп ΗΪ8 Зег Суз Рке С1и Н13 МеО ΗΪ8 ΗΪ8 11е Рго А1а Рго Агд
245 250 255
Рго С1и С1и Рке ΗΪ3 С1п Агд Зег Азп Уа1 Ткг Ьеи Ткг Ьеи Агд Азп
260 265 270
Ьеи Ьуз С1у Суз Суз Агд ΗΪ8 С1п Уа1 С1п 11е С1п Рго Рке Рке Зег
275 280 285
Зег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд Н18 Зег А1а Ткг \7а1 Зег Суз Рго
290 295 300
- 204 019397
С1и 305 Мек Рго Азр Ткг Рго 310 С1и Рго 11е Рго Азр 315 Туг Мек Рго Ьеи Тгр 320
С1и Рго Агд Бег С1у Бег Бег Азр Туг Ьуз Азр Азр Азр Азр Ьуз С1у
325 330 335
Бег Бег ΗΪ8 ΗΪ3 ΗΪ3 Н13 ΗΪ3 Н1з
340 <210> 432 <211> 322 <212> БЕЛОК <213> Домовая мышь <400> 432
Мек А1а 1 11е Агд Агд 5 Суз Тгр Рго Агд Уа1 10 Уа1 Рго С1у Рго А1а 15 Ьеи
С1у Тгр Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Азп Уа1 Ьеи А1а Рго С1у Агд А1а Бег
20 25 30
Рго Агд Ьеи Ьеи Азр Рке Рго А1а Рго Уа1 Суз А1а С1п С1и С1у Ьеи
35 40 45
Бег Суз Агд Уа1 Ьуз Азп Бег Ткг Суз Ьеи Азр Азр Бег Тгр 11е ΗΪ3
50 55 60
Рго Ьуз Азп Ьеи Ткг Рго Бег Бег Рго Ьуз Азп 11е Туг 11е Азп Ьеи
65 70 75 80
Бег Уа1 Бег Бег Ткг С1п Н13 С1у С1и Ьеи Уа1 Рго Уа1 Ьеи ΗΪ8 Уа1
85 90 95
С1и Тгр Ткг Ьеи С1п Ткг Азр А1а Бег 11е Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 110
С1и Ьеи Бег Уа1 Ьеи С1п Ьеи Азп Ткг Азп С1и Агд Ьеи Суз Уа1 Ьуз
115 120 125
Рке С1п Рке Ьеи Бег Мек Ьеи С1п ΗΪ3 ΗΪ8 Агд Ьуз Агд Тгр Агд Рке
130 135 140
Бег Рке Бег ΗΪ8 Рке Уа1 Уа1 Азр Рго С1у С1п С1и Туг С1и Уа1 Ткг
145 150 155 160
Уа1 Н1з Н1з Ьеи Рго Ьуз Рго 11е Рго Азр С1у Азр Рго Азп ΗΪ8 Ьуз
165 170 175
Бег Ьуз 11е 11е Рке Уа1 Рго Азр Суз С1и Азр Бег Ьуз Мек Ьуз Мек
180 185 190
Ткг Ткг Бег Суз Уа1 Бег Бег С1у Бег Ьеи Тгр Азр Рго Азп 11е Ткг
195 200 205
Уа1 С1и Ткг Ьеи Азр Ткг С1п Н13 Ьеи Агд Уа1 Азр Рке Ткг Ьеи Тгр
210 215 220
Азп С1и Бег Ткг Рго Туг С1п Уа1 Ьеи Ьеи С1и Бег Рке Бег Азр Бег
225 230 235 240
С1и Азп ΗΪ8 Бег Суз Рке Азр Уа1 Уа1 Ьуз С1п Не Рке А1а Рго Агд
- 205 019397
245 250 255
С1п С1и С1и Рке Н13 С1п Агд А1а Азп Уа1 Ткг Рке Ткг Ьеи Бег Ьуз
260 265 270
Рке Н13 Тгр Суз Суз ΗΪ8 Н13 Н13 Уа1 С1п Уа1 С1п Рго Рке Рке Бег
275 280 285
Бег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд ΗΪ3 А1а Уа1 Ткг Уа1 Рго Суз Рго
290 295 300
Уа1 Не Бег Азп Ткг Ткг Уа1 Рго Ьуз Рго Уа1 А1а Азр Туг 11е Рго
305 310 315 320
Беи Тгр
<210> 433 <211> 344 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 433 Рго С1у Рго Ьеи 15 Ьеи
МеБ 1 С1у А1а А1а Агд 5 Бег Рго Рго Бег А1а 10 Уа1
С1у Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи С1у Уа1 Ьеи А1а Рго С1у С1у А1а Бег
20 25 30
Ьеи Агд Беи Ьеи Азр Рке Рго А1а Рго Уа1 Суз А1а С1п С1и С1у Ьеи
35 40 45
Бег Суз Агд Уа1 Ьуз Азп Бег Ткг Суз Беи Азр Азр Бег Тгр 11е Н13
50 55 60
Рго Агд Азп Ьеи Ткг Рго Бег Бег Рго Ьуз Азр Ьеи С1п 11е С1п Ьеи
65 70 75 80
ΗΪ8 Рке А1а Н1з Ткг С1п С1п С1у Азр Ьеи Рке Рго Уа1 А1а ΗΪ8 11е
85 90 95
С1и Тгр Ткг Ьеи С1п Ткг Азр А1а Бег 11е Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 110
С1и Ьеи Бег Уа1 Ьеи С1п Ьеи Азп Ткг Азп С1и Агд Ьеи Суз Уа1 Агд
115 120 125
Рке С1и Рке Ьеи Бег Ьуз Ьеи Агд Н13 ΗΪ5 Н13 Агд Агд Тгр Агд Рке
130 135 140
Ткг Рке Бег ΗΪ8 Рке Уа1 Уа1 Азр Рго Азр С1п С1и Туг С1и Уа1 Ткг
145 150 155 160
Уа1 ΗΪ3 ΗΪ3 Ьеи Рго Ьуз Рго 11е Рго Азр С1у Азр Рго Азп ΗΪ5 О1п
165 170 175
Бег Ьуз Азп Рке Ьеи Уа1 Рго Азр Суз С1и Н1з А1а Агд Мек Ьуз Уа1
180 185 190
- 206 019397
ТИг ТИг Рго 195 Суз МеЬ Зег Зег С1у 200 Зег Ьеи Тгр Азр Рго 205 Азп 11е ТНг
Уа1 С1и ТНг Ьеи С1и А1а Н13 С1п Ьеи Агд Уа1 Зег РНе ТНг Ьеи Тгр
210 215 220
Азп С1и Зег ТНг ΗΪ5 Туг С1п Не Ьеи Ьеи ТНг Зег РНе Рго ΗΪ8 МеЬ
225 230 235 240
С1и Азп Н13 Зег Суз РНе С1и Низ МеС ΗΪ8 ΗΪ8 11е Рго А1а Рго Агд
245 250 255
Рго С1и С1и РНе Н1з С1п Агд Зег Азп Уа1 ТНг Ьеи ТНг Ьеи Агд Азп
260 265 270
Ьеи Ьуз С1у Суз Суз Агд Н13 С1п Уа1 С1п 11е С1п Рго РНе РНе Зег
275 280 285
5ег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд ΗΪ5 Зег А1а ТНг Уа1 Зег Суз Рго
290 295 300
С1и МеС Рго Азр ТНг Рго С1и Рго 11е Рго Азр Туг МеЬ Рго Ьеи Тгр
305 310 315 320
С1и Рго Агд Зег С1у Зег Зег Азр Туг Ьуз Азр Азр Азр Азр Ьуз С1у
325 330 335
5ег 5ег ΗΪ8 ΗΪ8 ΗΪ8 ΗΪ8 Н1з ΗΪ8
340 <210> 434 <211> 344 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая конструкция <400> 434
МеЬ 1 С1у А1а А1а Агд Зег 5 Рго Рго Зег А1а Уа1 10 Рго С1у Рго Ьеи Ьеи 15
С1у Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи С1у Уа1 Ьеи А1а Рго С1у С1у А1а Зег
20 25 30
Ьеи Агд Ьеи Ьеи Азр ΗΪ8 Агд А1а Ьеи Уа1 Суз Зег С1п Рго С1у Ьеи
35 40 45
Азп Суз ТНг Уа1 Ьуз Азп Зег ТНг Суз Ьеи Азр Азр Зег Тгр 11е ΗΪ3
50 55 60
Рго Агд Азп Ьеи ТНг Рго Зег Зег Рго Ьуз Азп 11е Туг 11е Азп Ьеи
65 70 75 80
Зег νβΐ Зег Зег ТНг С1п Н13 С1у С1и Ьеи νβΐ Рго Уа1 Ьеи ΗΪ8 Уа1
85 90 95
С1и Тгр ТНг Ьеи С1п ТНг Азр А1а Зег Не Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 110
- 207 019397
С1и Беи Зег 115 Ча1 Беи С1п Беи Азп ТНг Азп С1и Агд Веи Суз \7а1 Агд
120 125
РНе С1и РНе Беи Зег Буз Веи Агд ΗΪ3 Н1з ΗΪ8 Агд Агд Тгр Агд РНе
130 135 140
ТИг РНе Зег ΗΪ8 РНе 17а 1 Х7а1 Азр Рго Азр С1п С1и Туг С1и νβΐ ТИг
145 150 155 160
Уа1 Η13 ΗΪ8 Беи Рго Вуз Рго 11е Рго Азр С1у Азр Рго Азп ΗΪ3 С1п
165 170 175
Зег Буз Азп РНе Беи Уа1 Рго Азр Суз С1и Η18 А1а Агд Мер Вуз \7а1
180 185 190
ТНг ТИг Рго Суз Мер Зег Зег С1у Зег Веи Тгр Азр Рго Азп 11е ТИг
195 200 205
Уа1 С1и ТНг Беи С1и А1а ΗΪ3 С1п Веи Агд \7а1 Зег РНе ТИг Веи Тгр
210 215 220
Азп С1и Зег ТНг Н13 Туг С1п 11е Веи Веи ТНг Зег РНе Рго Низ Мер
225 230 235 240
С1и Азп Ηίβ Зег Суз РНе С1и Η13 Мер Н13 ΗΪ8 11е Рго А1а Рго Агд
245 250 255
Рго С1и С1и РНе Н13 С1п Агд Зег Азп νβΐ ТНг Веи ТИг Веи Агд Азп
260 265 270
Беи Буз С1у Суз Суз Агд Н1з С1п \7а1 Θΐη 11е С1п Рго РНе РНе Зег
275 280 285
Зег Суз Беи Азп Азр Суз Веи Агд ΗΪ8 Зег А1а ТНг \7а1 Зег Суз Рго
290 295 300
С1и Мер Рго Азр ТНг Рго С1и Рго 11е Рго Азр Туг Мер Рго Веи Тгр
305 310 315 320
С1и Рго Агд Зег С1у Зег Зег Азр Туг Вуз Азр Азр Азр Азр Вуз С1у
325 330 335
Зег Зег ΗΪ8 ΗΪ8 Н13 Н13 ΗΪ3 ΗΪ8
340 <210> 435 <211> 344 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая конструкция <400> 435
Мер 1 С1у А1а А1а Агд 5 Зег Рго Рго Зег А1а 10 νβΐ Рго С1у Рго Веи 15 Веи
С1у Веи Веи Веи 20 Веи Веи Веи С1у 17а 1 25 Веи А1а Рго С1у С1у 30 А1а Зег
Веи Агд Веи Веи Азр ΗΪ8 Агд А1а Веи 17а 1 Суз Зег С1п Рго С1у Веи
- 208 019397
40 45
Азп Суз ТНг Уа1 Ьуз Азп Зег ТНг 55 Суз Ьеи Азр Азр 60 Зег Тгр 11е ΗΪ3
50
Рго Агд Азп Ьеи ТНг Рго Зег Зег Рго Ьуз Азр Ьеи С1п Не С1п Ьеи
65 70 75 80
Ηίε РНе А1а Ηίε ТНг С1п С1п С1у Азр Ьеи РНе Рго Уа1 А1а ΗΪ8 11е
85 90 95
С1и Тгр ТНг Ьеи С1п ТНг Азр А1а Зег 11е Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 110
С1и Ьеи Зег Уа1 Ьеи С1п Ьеи Азп ТНг Азп С1и Агд Ьеи Суз Уа1 Ьуз
115 120 125
РНе С1п РНе Ьеи Зег Мер Ьеи С1п Ηίε ΗΪ8 Агд Ьуз Агд Тгр Агд РНе
130 135 140
Зег РНе Зег Ηίε РНе Уа1 Уа1 Азр Рго С1у С1п О1и Туг 61и Уа1 ТНг
145 150 155 160
Уа1 Н13 Ηίε Ьеи Рго Ьуз Рго 11е Рго Азр С1у Азр Рго Азп Н13 С1п
165 170 175
Зег Ьуз Азп РНе Ьеи Уа1 Рго Азр Суз С1и Ηίε А1а Агд Мер Ьуз Уа1
180 185 190
ТНг ТИг Рго Суз Мер Зег Зег С1у Зег Ьеи Тгр Азр Рго Азп 11е ТНг
195 200 205
Уа1 С1и ТНг Ьеи С1и А1а ΗΪ3 С1п Ьеи Агд Уа1 Зег РНе ТНг Ьеи Тгр
210 215 220
Азп С1и Зег ТНг ΗΪ8 Туг С1п 11е Ьеи Ьеи ТНг Зег РНе Рго Н1з Мер
225 230 235 240
С1и Азп Ηίε Зег Суз РНе С1и Ηίε Мер Ηίε Ηίε 11е Рго А1а Рго Агд
245 250 255
Рго С1и С1и РНе Ηίε С1п Агд Зег Азп Уа1 ТНг Ьеи ТНг Ьеи Агд Азп
260 265 270
Ьеи Ьуз С1у Суз Суз Агд ΗΪ8 С1п Уа1 С1п 11е С1п Рго РНе РНе Зег
275 280 285
Зег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд Ηίε Зег А1а ТИг Уа1 Зег Суз Рго
290 295 300
С1и Мер Рго Азр ТНг Рго С1и Рго 11е Рго Азр Туг Мер Рго Ьеи Тгр
305 310 315 320
С1и Рго Агд Зег С1у Зег Зег Азр Туг Ьуз Азр Азр Азр Азр Ьуз С1у
325 330 335
Зег Зег Ηίε Ηίε Ηίβ Ηίε Ηίε Ηίε
340 <210> 436 <211> 344
- 209 019397 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 436 Агд 5 Бег Рго Рго Бег А1а \7а1 10 Рго С1у Рго Ьеи 15 Ьеи
Мер 1 С1у А1а А1а
С1у Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи С1у А7а1 Ьеи А1а Рго С1у С1у А1а Бег
20 25 30
Беи Агд Ьеи Ьеи Азр ΗΪ8 Агд А1а Ьеи Уа1 Суз Бег С1п Рго С1у Ьеи
35 40 45
Азп Суз ТНг Уа1 Ьуз Азп Бег ТНг Суз Ьеи Азр Азр Бег Тгр 11е Н13
50 55 60
Рго Агд Азп Ьеи ТНг Рго Бег Бег Рго Ьуз Азр Ьеи Θΐη 11е С1п Ьеи
65 70 75 80
ΗΪ8 РНе А1а ΗΪ8 ТНг С1п С1п 61у Азр Ьеи РНе Рго Уа1 А1а Н1з 11е
85 90 95
С1и Тгр ТНг Ьеи С1п ТНг Азр А1а Бег 11е Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 но
С1и Ьеи Бег Уа1 Ьеи С1п Ьеи Азп ТНг Азп 61и Агд Ьеи Суз Уа1 Агд
115 120 125
РНе С1и РНе Ьеи Бег Ьуз Ьеи Агд Н13 Нхз Н13 Агд Агд Тгр Агд РНе
130 135 140
ТНг РНе Бег Η13 РНе Уа1 Уа1 Азр Рго Азр С1п С1и Туг С1и Уа1 ТНг
145 150 155 160
Уа1 ΗΪ3 Ηίβ Ьеи Рго Ьуз Рго 11е Рго Азр С1у Азр Рго Азп Н13 Ьуз
165 170 175
Бег Ьуз Не 11е РНе Уа1 Рго Азр Суз С1и Азр Бег Ьуз МеР Ьуз МеР
180 185 190
ТНг ТИг Бег Суз Уа1 Бег Бег С1у Бег Ьеи Тгр Азр Рго Азп 11е ТНг
195 200 205
Уа1 С1и ТНг Ьеи С1и А1а Н13 С1п Ьеи Агд Уа1 Бег РНе ТНг Ьеи Тгр
210 215 220
Азп С1и Бег ТНг ΗΪ8 Туг С1п 11е Ьеи Ьеи ТНг Бег РНе Рго ΗΪ8 Мер
225 230 235 240
С1и Азп ΗΪ3 Бег Суз РНе С1и ΗΪ8 МеР Н1з ΗΪ8 11е Рго А1а Рго Агд
245 250 255
Рго С1и С1и РНе ΗΪ8 С1п Агд Бег Азп Йа1 ТНг Ьеи ТНг Ьеи Агд Азп
260 265 270
Ьеи Ьуз С1у Суз Суз Агд ΗΪ3 С1п Уа1 С1п 11е С1п Рго РНе РНе Бег
275 280 285
Бег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд ΗΪ8 Бег А1а ТНг Уа1 Бег Суз Рго
- 210 019397
290 295 300
С1и Мей Рго Азр Тйг Рго С1и Рго 11е Рго Азр Туг Мей Рго Ьеи Тгр
305 310 315 320
С1и Рго Агд Зег С1у Зег Зег Азр Туг Ьуз Азр Азр Азр Азр Ьуз С1у
325 330 335
Зег Зег Ηίε ΗΪ5 ΗΪ3 Н13 Ηίε ΗΪ3
340 <210>
<211>
<212>
<213>
437
344
БЕЛОК
Искусственная последовательность <220>
<223>
Синтетическая конструкция <400> 437
Мей 1 С1у А1а А1а Агд 5 Зег Рго Рго Зег А1а Уа1 10 Рго С1у Рго Ьеи 15 Ьеи
С1у Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи С1у Уа1 Ьеи А1а Рго С1у <31у А1а Зег
20 25 30
Ьеи Агд Ьеи Ьеи Азр ΗΪ8 Агд А1а Ьеи \7а1 Суз Зег С1п Рго С1у Ьеи
35 40 45
Азп Суз Тйг Уа1 Ьуз Азп Зег Тйг Суз Ьеи Азр Αερ Зег Тгр 11е Ηίε
50 55 60
Рго Агд Азп Ьеи ТЙГ Рго Зег Зег Рго Ьуз Азр Ьеи С1п 11е С1п Ьеи
65 70 75 80
ΗΪ8 Рйе А1а Ηίε Тйг С1п С1п С1у Азр Ьеи Рйе Рго Уа1 А1а Ηίε 11е
85 90 95
С1и Тгр ТЙг Ьеи С1п ТЙГ Азр А1а Зег 11е Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 110
С1и Ьеи Зег 17а 1 Ьеи С1п Ьеи Азп Тйг Азп С1и Агд Ьеи Суз Уа1 Агд
115 120 125
Рйе С1и Рйе Ьеи Зег Ьуз Ьеи Агд Ηίε Ηίε ΗΪ5 Агд Агд Тгр Агд Рйе
130 135 140
Тйг Рйе Зег ΗΪ3 Рйе Уа1 Уа1 Азр Рго Азр С1п С1и Туг С1и Уа1 Тйг
145 150 155 160
Уа1 ΗΪ3 ΗΪ8 Ьеи Рго Ьуз Рго 11е Рго Азр С1у Азр Рго Азп ΗΪ8 С1п
165 170 175
Зег Ьуз Азп Рйе Ьеи Уа1 Рго Азр Суз С1и Ηίε А1а Агд Мей Ьуз Уа1
180 185 190
Тйг Тйг Рго Суз Мер Зег Зег С1у Зег Ьеи Тгр Азр Рго АЗП Не Тйг
195 200 205
- 211 019397
Уа1 С1и 210 ТИг Ьеи Азр ТНг С1п 215 ΗΪ8 Ьеи Агд Уа1 Азр 220 РНе ТНг Ьеи Тгр
Азп С1и Зег ТИг Ηί3 Туг С1п Не Ьеи Ьеи ТНг Зег РНе Рго ΗΪ8 МеЕ
225 230 235 240
С1и Азп Н1з Зег Суз РНе С1и ΗΪ8 Мер нБз ΗΪ5 Не Рго А1а Рго Агд
245 250 255
Рго С1и С1и РНе ΗΪ8 С1п Агд Зег Азп Уа1 ТНг Ьеи ТНг Ьеи Агд Азп
260 265 270
Ьеи Ьуз С1у Суз Суз Агд ΗΪ8 С1п Уа1 С1п Не С1п Рго РНе РНе Зег
275 280 285
Зег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд Н18 Зег А1а ТНг Уа1 Зег Суз Рго
290 295 300
С1и МеЕ Рго Азр ТНг Рго С1и Рго Не Рго Азр Туг МеЕ Рго Ьеи Тгр
305 310 315 320
С1и Рго Агд Зег С1у Зег Зег Азр Туг Ьуз Азр Азр Азр Азр Ьуз С1у
325 330 335
Зег Зег ΗΪ8 ΗΪ8 ΗΪ3 Η18 ΗΪ8 ΗΪ8
340 <210> 438 <211> 346 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая конструкция <400> 438
Мер 1 С1у А1а А1а Агд 5 Зег Рго Рго Зег А1а Уа1 10 Рго С1у Рго Ьеи 15 Ьеи
С1у Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи С1у Уа1 Ьеи А1а Рго С1у С1у А1а Зег
20 25 30
Ьеи Агд Ьеи Ьеи Азр ΗΪ8 Агд А1а Ьеи Уа1 Суз Зег С1п Рго <31у Ьеи
35 40 45
Азп Суз ТНг Уа1 Ьуз Азп Зег ТНг Суз Ьеи Азр Азр Зег Тгр Не ΗΪ3
50 55 60
Рго Агд Азп Ьеи ТНг Рго Зег Зег Рго Ьуз Азр Ьеи 61п Не С1п Ьеи
65 70 75 80
Н15 РНе А1а ΗΪ8 ТНг С1п С1п С1у Азр Ьеи РНе Рго Уа1 А1а ΗΪ8 Не
85 90 95
С1и Тгр ТНг Ьеи С1п ТНг Азр А1а Зег 11е Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 110
С1и Ьеи Зег Уа1 Ьеи С1п Ьеи Азп ТНг Азп С1и Агд Ьеи Суз Уа1 Агд
115 120 125
РНе С1и РНе Ьеи Зег Ьуз Ьеи Агд Н13 ΗΪ3 Н13 Агд Агд Тгр Агд РНе
- 212 019397
130 135 140
Ткг Рке Зег ΗΪ3 Рке Уа1 Уа1 Азр Рго Азр С1п <31и Туг С1и Уа1 Ткг
145 150 155 160
Уа1 Н13 ΗΪ8 Ьеи Рго Ьуз Рго 11е Рго Азр С1у Азр Рго Азп Ηίβ С1п
165 170 175
Зег Ьуз Азп Рке Ьеи Уа1 Рго Азр Суз С1и Н1з А1а Агд Мек Ьуз Уа1
180 185 190
Ткг Ткг Рго Суз Мек Зег Зег С1у Зег Ьеи Тгр Азр Рго Азп 11е Ткг
195 200 205
Уа1 С1и Ткг Ьеи С1и А1а Н13 С1п Ьеи Агд Уа1 Зег Рке Ткг Ьеи Тгр
210 215 220
Азп С1и Зег Ткг Рго Туг С1п Уа1 Ьеи Ьеи С1и Зег Рке Зег Азр Зег
225 230 235 240
С1и Азп ΗΪ8 Зег Суз Рке Азр Уа1 Уа1 Ьуз С1п 11е Рке А1а Рго Агд
245 250 255
61п С1и С1и Рке Н13 С1п Агд А1а Азп Уа1 Ткг Рке Ткг Ьеи Зег Ьуз
260 265 270
Рке ΗΪ8 Тгр Суз Суз ΗΪ8 Н13 ΗΪ8 Уа1 С1п Уа1 С1п Рго Рке Рке Зег
275 280 285
Зег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд ΗΪ8 А1а Уа1 Ткг Уа1 Рго Суз Рго
290 295 300
Уа1 11е Зег Азп Ткг Ткг Уа1 Рго Ьуз Рго Уа1 А1а Азр Туг 11е Рго
305 310 315 320
Ьеи Тгр С1и Рго Агд Зег С1у Зег Зег Азр Туг Ьуз Азр Азр Азр Азр
325 330 335
Ьуз С1у Зег Зег Н1з ΗΪ8 Н1з ΗΪ3 Н1з ΗΪ8
340 345 <210> 439 <211> 344 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 439
Мек 1 С1у А1а А1а Агд 5 Зег Рго Рго
С1у Ьеи Ьеи Ьеи 20 Ьеи Ьеи Ьеи С1у
Ьеи Агд Ьеи 35 Ьеи Азр Рке Рго А1а 40
Зег Суз 50 Агд Уа1 Ьуз Азп Зег 55 Ткг
Зег А1а 10 Уа1 Рго С1у Рго Ьеи 15 Ьеи
Уа1 25 Ьеи А1а Рго С1у С1у 30 А1а Зег
Рго Уа1 Суз А1а С1п 45 С1и 61у Ьеи
Суз Ьеи Азр Азр 60 Зег Тгр 11е Η18
- 213 019397
Рго 65 Агд Азп Ьеи ТНг Рго 70 Бег Бег Рго Ьуз Азр 75 Ьеи С1п Не С1п Ьеи 80
Ηίε РНе А1а Н13 ТНг С1п С1п С1у Азр Ьеи РНе Рго νβΐ А1а ΗΪ8 11е
85 90 95
С1и Тгр ТНг Ьеи С1п ТНг Азр А1а Бег Не Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 но
С1и Ьеи Бег Уа1 Ьеи С1п Ьеи Азп ТНг Азп С1и Агд Ьеи Суз Уа1 Агд
115 120 125
РНе С1и РНе Ьеи Бег Ьуз Ьеи Агд ΗΪ8 ΗΪ3 Н1з Агд Агд Тгр Агд РНе
130 135 140
ТИг РНе Бег Н18 РНе νβΐ Уа1 Азр Рго Азр С1п С1и Туг С1и Уа1 ТНг
145 150 155 160
νβΐ ΗΪ8 ΗΪ8 Ьеи Рго Ьуз Рго Не Рго Азр С1у Азр Рго Азп Н18 С1п
165 170 175
Бег Ьуз Азп РНе Ьеи Уа1 Рго Азр Суз С1и Η18 А1а Агд МеР Ьуз Уа1
180 185 190
ТНг ТНг Рго Суз МеР Бег Бег С1у Бег Ьеи Тгр Азр Рго Азп Не ТНг
195 200 205
Уа1 С1и ТНг Ьеи Азр ТНг С1п ΗΪ8 Ьеи Агд Уа1 Азр РНе ТНг Ьеи Тгр
210 215 220
Азп С1и Бег ТНг ΗΪ3 Туг С1п Не Ьеи Ьеи ТНг Бег РНе Рго ΗΪ3 Мер
225 230 235 240
С1и Азп ΗΪ8 Бег Суз РНе С1и ΗΪ3 МеР ΗΪ8 ΗΪ8 Не Рго А1а Рго Агд
245 250 255
Рго С1и С1и РНе Η18 С1п Агд Бег Азп Уа1 ТНг Ьеи ТНг Ьеи Агд Азп
260 265 270
Ьеи Ьуз С1у Суз Суз Агд Нтз С1п Уа1 С1п 11е С1п Рго РНе РНе Бег
275 280 285
Бег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд ΗΪ3 Бег А1а ТНг Уа1 Бег Суз Рго
290 295 300
С1и МеР Рго Азр ТНг Рго С1и Рго Не Рго Азр Туг МеР Рго Ьеи Тгр
305 310 315 320
С1и Рго Агд Бег С1у Бег Бег Азр Туг Ьуз Азр Азр Азр Азр Ьуз С1у
325 330 335
Бег Бег Ηϊδ ΗΪ8 Нхз Ηίε НЬз НЬз
340 <210> 440 <211> 344 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
- 214 019397 <223> Синтетическая конструкция
<400> 440 Бег Рго Рго Бег А1а Уа1 10 Рго С1у Рго Ьеи 15 Ьеи
МеЬ 1 С1у А1а А1а Агд 5
С1у Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи С1у Уа1 Ьеи А1а Рго С1у С1у А1а Бег
20 25 30
Ьеи Агд Ьеи Ьеи Азр Н13 Агд А1а Ьеи Уа1 Суз Бег С1п Рго С1у Ьеи
35 40 45
Аз η Суз ТЙГ Уа1 Ьуз Азп Бег Тйг Суз Ьеи Азр Азр Бег Тгр 11е ΗΪ3
50 55 60
Рго Агд Азп Ьеи ТЙГ Рго Бег Бег Рго Ьуз Азп 11е Туг 11е Азп Ьеи
65 70 75 80
5ег Уа1 Бег Бег Тйг С1п Нхз С1у С1и Ьеи Уа1 Рго 57а 1 Ьеи ΗΪ8 Уа1
85 90 95
С1и Тгр Тйг Ьеи С1п Тйг Азр А1а Бег 11е Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 но
С1и Ьеи Бег Уа1 Ьеи С1п Ьеи Азп ТЙГ Азп С1и Агд Ьеи Суз 57а1 Агд
115 120 125
Рйе С1и Рйе Ьеи Бег Ьуз Ьеи Агд ΗΪ8 ΗΪ8 Нхз Агд Агд Тгр Агд Рйе
130 135 140
Тйг Рйе Бег ΗΪ8 Рйе Уа1 Уа1 Азр Рго Азр С1п С1и Туг С1и Уа1 Тйг
145 150 155 160
Уа1 ΗΪ5 ΗΪ8 Ьеи Рго Ьуз Рго 11е Рго Азр С1у Азр Рго Азп ΗΪ3 С1п
165 170 175
Бег Ьуз Азп Рйе Ьеи Уа1 Рго Азр Суз С1и Н13 А1а Агд МеЕ Ьуз 57а1
180 185 190
Тйг Тйг Рго Суз Мер Бег Бег С1у Бег Ьеи Тгр Азр Рго Азп 11е Тйг
195 200 205
Уа1 С1и Тйг Ьеи Азр Тйг С1п ΗΪ8 Ьеи Агд Уа1 Азр Рйе Тйг Ьеи Тгр
210 215 220
Айп С1и Бег Тйг ΗΪ8 Туг С1п 11е Ьеи Ьеи Тйг Бег Рйе Рго Нхз Мей
225 230 235 240
С1и Азп ΗΪ3 Бег Суз Рйе С1и ΗΪ8 Мер ΗΪ3 Нхз 11е Рго А1а Рго Агд
245 250 255
Рго С1и С1и Рйе ΗΪ8 С1п Агд Бег Азп Уа1 Тйг Ьеи Тйг Ьеи Агд Азп
260 265 270
Ьеи Ьуз С1у Суз Суз Агд ΗΪ8 С1п Уа1 С1п 11е С1п Рго Рйе Рйе Бег
275 280 285
Бег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд Ηίε Бег А1а ТЙГ Уа1 Бег Суз Рго
290 295 300
С1и Мей Рго Азр Тйг Рго С1и Рго 11е Рго Азр Туг Мей Рго Ьеи Тгр
305 310 315 320
- 215 019397
С1и Рго Агд Зег С1у 325 Зег Зег Азр Туг Ьуг Αερ Αερ Азр Азр 330 Ьуз С1у 335
Зег Зег Ηίε Ηίε 340 ΗΪ8 ΗΪ3 ΗΪ8 ΗΪ8
<210> 441 <211> 344 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 441 Рго Зег А1а \7а1 10 Рго С1у Рго Ьеи 15 Ьеи
МеЬ 1 С1у А1а А1а Агд 5 Зег Рго
С1у Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи С1у \7а1 Ьеи А1а Рго С1у С1у А1а Зег
20 25 30
Ьеи Агд Ьеи Ьеи Азр Ηίε Агд А1а Ьеи Ча1 Суз Зег С1п Рго С1у Ьеи
35 40 45
Азп Суз Ткг Уа1 Ьуз Азп Зег Ткг Суз Ьеи Азр Азр Зег Тгр 11е Ηίε
50 55 60
Рго Агд Азп Ьеи Ткг Рго Зег Зег Рго Ьуз Азр Ьеи С1п 11е С1п Ьеи
65 70 75 80
Н13 Рке А1а Ηίε Ткг С1п С1п С1у Азр Ьеи Рке РГО Уа1 А1а Ηίε 11е
85 90 95
С1и Тгр Ткг Ьеи С1п Ткг Азр А1а Зег 11е Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 но
С1и Ьеи Зег Уа1 Ьеи С1п Ьеи Азп Ткг Азп С1и Агд Ьеи Суз νθΐ Ьуз
115 120 125
Рке С1п Рке Ьеи Зег Мер Ьеи С1п Ηίε Н13 Агд Ьуз Агд Тгр Агд Рке
130 135 140
Зег Рке Зег Ηίε Рке Уа1 Уа1 Азр Рго С1у С1п С1и Туг С1и Уа1 Ткг
145 150 155 160
Уа1 Ηίε Ηίε Ьеи Рго Ьуз Рго 11е Рго Азр С1у Азр Рго Азп Ηίε С1п
165 170 175
Зег Ьуз Азп Рке Ьеи Уа1 Рго Азр Суз С1и Н13 А1а Агд МеЬ Ьу8 Ча1
180 185 190
Ткг Ткг Рго Суз МеЬ Зег Зег С1у Зег Ьеи Тгр Азр Рго Азп 11е Ткг
195 200 205
\7а1 С1и Ткг Ьеи Азр Ткг С1п Ηίε Ьеи Агд Уа1 Азр Рке Ткг Ьеи Тгр
210 215 220
Азп С1и Зег Ткг Ηίε Туг С1п 11е Ьеи Ьеи Ткг Зег Рке Рго Ηίε МеЬ
225 230 235 240
- 216 019397
С1и Азп Н1з Зег Суз 245 Рке С1и ΗΪ3 Мек ΗΪ8 250 Нтз 11е Рго А1а Рго 255 Агд
Рго С1и С1и Рке ΗΪ3 С1п Агд Зег Азп Уа1 Ткг Ьеи Ткг Ьеи Агд Азп
260 265 270
Ьеи Ьуз С1у Суз Суз Агд ΗΪ8 С1п Уа1 С1п Не С1п Рго Рке Рке Зег
275 280 285
Зег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд Н13 Зег А1а Ткг Уа1 Зег Суз Рго
290 295 300
С1и МеЬ Рго Азр Ткг Рго С1и Рго Не Рго Азр Туг Мек Рго Ьеи Тгр
305 310 315 320
С1и Рго Агд Зег С1у Зег Зег Азр Туг Ьуз Азр Азр Азр Азр Ьуз С1у
325 330 335
Зег Зег ΗΪ5 ΗΪ3 Н13 Н1з Н13 ΗΪ3
340 <210> 442 <211> 344 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая конструкция <400> 442
Мек 1 С1у А1а А1а Агд 5 Зег Рго Рго Зег А1а 27а1 10 Рго С1у Рго Ьеи 15 Ьеи
С1у Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи С1у Уа1 Ьеи А1а Рго С1у С1у А1а Зег
20 25 30
Ьеи Агд Ьеи Ьеи Азр Н13 Агд А1а Ьеи Уа1 Суз Зег С1п Рго С1у Ьеи
35 40 45
Азп Суз Ткг Уа1 Ьуз Азп Зег Ткг Суз Ьеи Азр Азр Зег Тгр 11е ΗΪ8
50 55 60
Рго Агд Азп Ьеи Ткг Рго Зег Зег Рго Ьуз Азр Ьеи С1п 11е С1п Ьеи
65 70 75 80
ΗΪ8 Рке А1а Н13 Ткг С1п С1п <31у Азр Ьеи Рке Рго Уа1 А1а ΗΪ3 11е
85 90 95
С1и Тгр Ткг Ьеи С1п Ткг Азр А1а Зег 11е Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 110
С1и Ьеи Зег Уа1 Ьеи С1п Ьеи Азп Ткг Азп С1и Агд Ьеи Суз Уа1 Агд
115 120 125
Рке С1и Рке Ьеи Зег Ьуз Ьеи Агд ΗΪ3 ΗΪ3 ΗΪ8 Агд Агд Тгр Агд Рке
130 135 140
Ткг Рке Зег ΗΪ3 Рке Уа1 Уа1 Азр Рго Азр С1п С1и Туг С1и Уа1 Ткг
145 150 155 160
νβΐ Н13 ΗΪ3 Ьеи Рго Ьуз Рго 11е Рго Азр С1у Азр Рго Азп ΗΪ3 Ьуз
- 217 019397
165 170 175
Зег Ьуз 11е 11е Рке Уа1 Рго Αερ Суз С1и Азр Зег Ьуз Мек Ьуз Мек
180 185 190
Ткг Ткг Зег Суз Уа1 Зег Зег С1у Зег Ьеи Тгр Азр Рго Азп 11е Ткг
195 200 205
Уа1 С1и Ткг Ьеи Азр Ткг С1п Ηίε Ьеи Агд Уа1 Азр Рке Ткг Ьеи Тгр
210 215 220
Азп <31и Зег Ткг ΗΪ3 Туг С1п 11е Ьеи Ьеи Ткг Зег Рке Рго Нъз Мек
225 230 235 240
С1и Азп ΗΪ3 Зег Суз Рке С1и Ηίε Мек Ηίε Ηίε 11е Рго А1а Рго Агд
245 250 255
Рго С1и С1и Рке Н13 С1п Агд Зег Азп Уа1 Ткг Ьеи Ткг Ьеи Агд Азп
260 265 270
Ьеи Ьуз С1у Суз Суз Агд Ηίε С1п Уа1 С1п 11е С1п Рго Рке Рке Зег
275 280 285
Зег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд Ηίε Зег А1а Ткг Уа1 Зег Суз Рго
290 295 300
С1и Мек Рго Азр Ткг Рго С1и Рго 11е Рго Азр Туг Мек Рго Ьеи Тгр
305 310 315 320
С1и Рго Агд Зег С1у Зег Зег Αερ Туг Ьуз Азр Азр Азр Азр Ьуз С1у
325 330 335
Зег Зег Ηίε ΗΪ8 Н1з ΗΪ3 Ηίε Ηίε
340 <210> 443 <211> 346 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая конструкция <400> 443
Мек 1 С1у А1а А1а Агд 5 Зег Рго Рго Зег А1а Уа1 10 Рго С1у Рго Ьеи Ьеи 15
С1у Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи <31у Уа1 Ьеи А1а Рго С1у С1у А1а Зег
20 25 30
Ьеи Агд Ьеи Ьеи Азр Рке Рго А1а Рго Уа1 Суз А1а С1п С1и С1у Ьеи
35 40 45
Зег Суз Агд Уа1 Ьуз Азп Зег Ткг Суз Ьеи Азр Αερ Зег Тгр 11е Ηίε
50 55 60
Рго Агд Азп Ьеи Ткг Рго Зег Зег Рго Ьуз Азр Ьеи С1п Не С1п Ьеи
65 70 75 80
- 218 019397
Н18 Рке А1а Низ Ткг 85 С1п С1п С1у Азр Ьеи 90 Рке Рго Уа1 А1а Н13 95 11е
С1и Тгр Ткг Ьеи С1п Ткг Азр А1а Бег 11е Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 но
С1и Ьеи Бег Уа1 Ьеи С1п Ьеи Азп Ткг Азп С1и Агд Ьеи Суз Уа1 Агд
115 120 125
Рке С1и Рке Ьеи Бег Ьуз Ьеи Агд ΗΪ8 ΗΪ8 ΗΪ8 Агд Агд Тгр Агд Рке
130 135 140
Ткг Рке Бег Ηίβ Рке Уа1 Уа1 Азр Рго Азр С1п С1и Туг С1и Уа1 Ткг
145 150 155 160
Уа1 ΗΪ8 ΗΪ8 Ьеи Рго Ьуз Рго 11е Рго Азр С1у Азр Рго Азп ΗΪ8 С1п
165 170 175
Бег Ьуз Азп Рке Ьеи Уа1 Рго Азр Суз С1и ΗΪ8 А1а Агд Мек Ьуз Уа1
180 185 190
Ткг Ткг Рго Суз Мер Бег Бег С1у Бег Ьеи Тгр Азр Рго Азп 11е Ткг
195 200 205
Уа1 С1и Ткг Ьеи С1и А1а ΗΪ8 С1п Ьеи Агд Уа1 Бег Рке Ткг Ьеи Тгр
210 215 220
Азп С1и Бег Ткг Рго Туг С1п Уа1 Ьеи Ьеи <31и Бег Рке Бег Азр Бег
225 230 235 240
С1и Азп Н18 Бег Суз Рке Азр Уа1 Уа1 Ьуз С1п 11е Рке А1а Рго Агд
245 250 255
С1п С1и С1и Рке ΗΪ8 С1п Агд А1а Азп Уа1 Ткг Рке Ткг Ьеи Бег Ьуз
260 265 270
Рке ΗΪ8 Тгр Суз Суз Н13 ΗΪ3 Н13 Уа1 С1п Уа1 С1п Рго Рке Рке Бег
275 280 285
Бег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд ΗΪ3 А1а Уа1 Ткг Уа1 Рго Суз Рго
290 295 300
Уа1 11е Бег Азп Ткг Ткг Уа1 Рго Ьуз Рго Уа1 А1а Азр Туг 11е Рго
305 310 315 320
Ьеи Тгр С1и Рго Агд Бег С1у Бег Зег Азр Туг Ьуз Азр Азр Азр Азр
325 330 335
Ьуз С1у Бег Бег ΗΪ8 Н13 Н18 ΗΪ8 Н13 ΗΪ3
340 345
<210> 444 <211> 346 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая конструкция <400> 444
Мер С1у А1а А1а Агд Бег Рго Рго Бег А1а Уа1 Рго С1у Рго Ьеи Ьеи
- 219 019397
10 15
С1у Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи 20 Ьеи Ьеи С1у Уа1 25 Ьеи А1а Рго С1у С1у 30 А1а Зег
Ьеи Агд Ьеи Ьеи Азр Низ Агд А1а Ьеи Уа1 Суз Зег С1п Рго С1у Ьеи
35 40 45
Азп Суз ТНг Уа1 Ьуз Азп Зег ТНг Суз Ьеи Азр Азр Зег Тгр 11е Низ
50 55 60
Рго Агд Азп Ьеи ТНг Рго Зег Зег Рго Ьуз Азп 11е Туг 11е Азп Ьеи
65 70 75 80
Зег Уа1 5ег Зег ТНг С1П Низ С1у С1и Ьеи Уа1 Рго (7а 1 Ьеи Низ Уа1
85 90 95
С1и Тгр ТНг Ьеи С1п ТНг Азр А1а Зег 11е Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 110
С1и Ьеи Зег Уа1 Ьеи С1п Ьеи Азп ТНг Азп С1и Агд Ьеи Суз \7а1 Агд
115 120 125
РНе С1и РНе Ьеи Зег Ьуз Ьеи Агд Низ Низ Низ Агд Агд Тгр Агд РНе
130 135 140
ТИг РНе Зег Низ РНе Уа1 Уа1 Азр Рго Азр С1п 61и Туг С1и \7а1 ТНг
145 150 155 160
Уа1 Низ Низ Ьеи Рго Ьуз Рго Не Рго Азр С1у Азр Рго Азп Низ С1п
165 170 175
5ег Ьуз Азп РНе Ьеи Уа1 Рго Азр Суз С1и Низ А1а Агд МеС Ьуз Уа1
180 185 190
ТНг ТНг Рго Суз МеС Зег Зег С1у Зег Ьеи Тгр Азр Рго Азп 11е ТНг
195 200 205
Уа1 С1и ТНг Ьеи С1и А1а Низ С1п Ьеи Агд Уа1 Зег РНе ТНг Ьеи Тгр
210 215 220
Азп С1и Зег ТНг Рго Туг С1п Уа1 Ьеи Ьеи С1и Зег РНе Зег Азр Зег
225 230 235 240
С1и Азп Низ Зег Суз РНе Азр Уа1 Уа1 Ьуз С1п 11е РНе А1а Рго Агд
245 250 255
С1п С1и С1и РНе Низ С1п Агд А1а Азп Уа1 ТНг РНе ТНг Ьеи Зег Ьуз
260 265 270
РНе Низ Тгр Суз Суз Низ Н1з Низ Уа1 С1п Уа1 С1п Рго РНе РНе Зег
275 280 285
Зег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд Низ А1а Уа1 ТНг \7а1 Рго Суз Рго
290 295 300
Уа1 11е Зег Азп ТНг ТНг Уа1 Рго Ьуз Рго 57а 1 А1а Азр Туг 11е Рго
305 310 315 320
Ьеи Тгр С1и Рго Агд Зег С1у Зег Зег Азр Туг Ьуз Азр Азр Азр Азр
325 330 335
- 220 019397
Ьуз С1у Бег Бег Нтз Ηϊβ Ηΐε Ηϊε ΗΪ8 ΗΪ3
340 345 <210> 445 <211> 346 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 445 Рго Бег А1а 10 Уа1 Рго С1у Рго Ьеи 15 Ьеи
МеЬ 1 С1у А1а А1а Агд 5 Бег Рго
С1у Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи С1у Уа1 Ьеи А1а Рго 61у С1у А1а Бег
20 25 30
Ьеи Агд Ьеи Ьеи Азр ΗΪ3 Агд А1а Ьеи Уа1 Суз Бег С1п Рго С1у Ьеи
35 40 45
Азп Суз Ткг Уа1 Ьуз Азп Бег Ткг Суз Ьеи Азр Азр Бег Тгр 11е ΗΪ8
50 55 60
Рго Агд Азп Ьеи Ткг Рго Бег Бег Рго Ьуз Азр Ьеи С1п 11е С1п Ьеи
65 70 75 80
ΗΪ3 Рке А1а ΗΪ3 Ткг С1п С1п С1у Азр Ьеи Рке Рго Уа1 А1а Н13 11е
85 90 95
С1и Тгр Ткг Ьеи С1п Ткг Азр А1а Бег 11е Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 110
С1и Ьеи Бег Уа1 Ьеи С1п Ьеи Азп Ткг Азп С1и Агд Ьеи Суз Уа1 Ьуз
115 120 125
Рке С1п Рке Ьеи Бег Мек Ьеи С1п ΗΪ8 ΗΪ8 Агд Ьуз Агд Тгр Агд Рке
130 135 140
Бег Рке Бег Η18 Рке Уа1 Уа1 Азр Рго С1у 61п С1и Туг С1и Уа1 Ткг
145 150 155 160
Уа1 ΗΪ3 ΗΪ5 Ьеи Рго Ьуз Рго 11е Рго Азр С1у Азр Рго Азп Н13 С1п
165 170 175
Бег Ьуз Азп Рке Ьеи Уа1 Рго Азр Суз С1и ΗΪ8 А1а Агд Мек Ьуз Уа1
180 185 190
Ткг Ткг Рго Суз Мек Бег Бег С1у Бег Ьеи Тгр Азр Рго Азп 11е Ткг
195 200 205
Уа1 С1и Ткг Ьеи С1и А1а ΗΪ8 С1п Ьеи Агд Уа1 Бег Рке Ткг Ьеи Тгр
210 215 220
Азп С1и Бег Ткг Рго Туг С1п Уа1 Ьеи Ьеи С1и Бег Рке Бег Азр Бег
225 230 235 240
С1и Азп ΗΪ3 Бег Суз Рке Азр Уа1 Уа1 Ьуз С1п 11е Рке А1а Рго Агд
245 250 255
С1п С1и С1и Рке ΗΪ8 Θΐη Агд А1а Азп Уа1 Ткг Рке Ткг Ьеи Бег Ьуз
- 221 019397
260 265 270
Рйе ΗΪ8 Тгр Суз Суз Ηίε ΗΪ8 ΗΪ5 Уа1 С1п Уа1 С1п Рго Рйе Рйе Зег
275 280 285
Зег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд ΗΪ8 А1а \7а1 ТЙГ Уа1 Рго Суз Рго
290 295 300
Уа1 11е Зег Азп Тйг Тйг Уа1 Рго Ьуз Рго Уа1 А1а Азр Туг 11е Рго
305 310 315 320
Ьеи Тгр С1и Рго Агд Зег С1у Зег Зег Азр Туг Ьуз Азр Азр Азр Азр
325 330 335
Ьуз С1у Зег Зег Н13 Ηίε ΗΪ8 ΗΪ5 ΗΪ8 ΗΪ8
340 345 <210> 446 <211> 346 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая конструкция <400> 446
Мей 1 С1у А1а А1а Агд 5 Зег Рго Рго Зег А1а 10 Уа1 Рго С1у Рго Ьеи 15 Ьеи
С1у Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи С1у Уа1 Ьеи А1а Рго С1у С1у А1а Зег
20 25 30
Ьеи Агд Ьеи Ьеи Азр ΗΪ8 Агд А1а Ьеи Уа1 Суз Зег С1п Рго С1у Ьеи
35 40 45
Азп Суз ТЙГ Уа1 Ьуз Азп Зег Тйг Суз Ьеи Азр Азр Зег Тгр 11е Ηίε
50 55 60
Рго Агд Азп Ьеи Тйг Рго Зег Зег Рго Ьуз Азр Ьеи С1п 11е С1п Ьеи
65 70 75 80
ΗΪ3 Рйе А1а ΗΪ8 ТЙГ С1п С1п С1у Азр Ьеи Рйе Рго Уа1 А1а Ηίε 11е
85 90 95
С1и Тгр ТЙГ Ьеи С1п Тйг Азр А1а Зег 11е Ьеи Туг Ьеи С1и С1у А1а
100 105 110
С1и Ьеи Зег Уа1 Ьеи С1п Ьеи Азп Тйг Азп С1и Агд Ьеи Суз Уа1 Агд
115 120 125
Рйе С1и Рйе Ьеи Зег Ьуз Ьеи Агд Ηίε Ηίε Ηίε Агд Агд Тгр Агд Рйе
130 135 140
Тйг Рйе Зег Н13 Рйе \7а1 Уа1 Азр Рго Азр С1п С1и Туг С1и Уа1 Тйг
145 150 155 160
Уа1 ΗΪ8 ΗΪ8 Ьеи Рго Ьуз Рго 11е Рго Азр С1у Азр Рго Азп Ηίε Ьуз
165 170 175
Зег Ьуз 11е 11е Рйе Уа1 Рго Азр Суз С1и Азр Зег Ьуз Мей Ьуз Мей
180 185 190
- 222 019397
ТИг ТНг Зег 195 Суз Уа1 Зег Зег С1у 200 Зег Ьеи Тгр Азр Рго 205 Азп 11е ТНг
Уа1 С1и ТНг Ьеи С1и А1а ΗΪ8 С1п Ьеи Агд Уа1 Зег РНе ТНг Ьеи Тгр
210 215 220
Азп С1и Зег ТНг Рго Туг С1п Уа1 Ьеи Ьеи С1и Зег РНе Зег Азр Зег
225 230 235 240
С1и Азп ΗΪ5 Зег Суз РНе Азр Уа1 Уа1 Ьуз С1п 11е РНе А1а Рго Агд
245 250 255
С1п С1и С1и РНе ΗΪ8 С1п Агд А1а Азп Уа1 ТНг РНе ТНг Ьеи Зег Ьуз
260 265 270
РНе ΗΪ3 Тгр Суз Суз ΗΪ8 Н1Б Н13 Уа1 С1п Уа1 С1п Рго РНе РНе Зег
275 280 285
Зег Суз Ьеи Азп Азр Суз Ьеи Агд ΗΪ8 А1а Уа1 ТНг Уа1 Рго Суз Рго
290 295 300
Уа1 Не Зег Азп ТНг ТНг Уа1 Рго Ьуз Рго Уа1 А1а Азр Туг 11е Рго
305 310 315 320
Ьеи Тгр С1и Рго Агд Зег С1у Зег Зег Азр Туг Ьуз Азр Азр Азр Азр
325 330 335
Ьуз С1у Зег Зег ΗΪ3 ΗΪ8 Н13 Шз ΗΪ5 ΗΪ3
340 345 <210> 447 <211> 8 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <400> 447
Азр Туг Ьуз Азр Азр Азр Азр Ьуз
5 <210> 448 <211> 12 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <400> 448
С1у С1у С1у А1а А1а А1а С1у С1у С1у А1а А1а А1а
10 <210> 449 <211> 88 <212> БЕЛОК
- 223 019397 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 449 С1п Зег Рго А1а ТНг Ьеи 10 Зег Уа1 Зег Рго 15 С1у
С1и 1 11е Уа1 Мер ТИг 5
С1и Агд А1а ТНг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Зег Зег Азп
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг Азр А1а Зег ТНг Агд А1а ТНг С1у 11е Рго А1а Агд РНе Зег С1у
50 55 60
Зег С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ьеи ТНг 11е Зег Зег Ьеи С1п Зег
65 70 75 80
С1и Азр РНе А1а Уа1 Туг Туг Суз
85
<210> 450 <211> 88 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 450 С1п Зег Рго А1а ТНг 10 Ьеи Зег Ьеи Зег Рго 15 С1у
С1и 1 11е Уа1 Мер ТНг 5
С1и Агд А1а ТНг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег \7а1 Зег Зег Азп
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг Азр А1а Зег ТНг Агд А1а ТНг С1у Не Рго А1а Агд РНе Зег С1у
50 55 60
Зег С1у Зег С1у ТНг Азр РНе ТНг Ьеи ТНг Не Зег Зег Ьеи С1п Рго
65 70 75 80
С1и Азр РНе А1а Уа1 Туг Туг Суз
85
<210> <211> <212> <213> 451 88 БЕЛОК Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 451
- 224 019397
С1и 1 Не Уа1 Ьеи ТНг 5 С1п Бег Рго А1а ТНг 10 Ьеи Бег Ьеи Бег Рго 15 С1у
С1и Агд А1а ТНг Ьеи Бег Суз Агд А1а Бег С1п Бег Уа1 Бег Бег Азп
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг Азр А1а Бег ТНг Агд А1а ТНг С1у 11е Рго А1а Агд РНе Бег С1у
50 55 60
5ег С1у Бег С1у ТНг Азр РНе ТНг Ьеи ТНг 11е Бег Бег Ьеи С1и Рго
65 70 75 80
С1и Азр РНе А1а Ча1 Туг Туг Суз
<210> 452 <211> 88 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетическая конструкция
<400> 452 С1и Не Уа1 1 Ьеи ТНг 5 С1п Бег Рго А1а ТНг 10 Ьеи Бег Ьеи Бег Рго 15 С1у
С1и Агд А1а ТНг 20 Ьеи Бег Суз Агд А1а 25 Бег С1п Бег Уа1 Бег 30 Бег Азп
Ьеи А1а Тгр 35 Туг С1п С1п Ьуз Рго 40 С1у С1п А1а Рго Агд 45 Ьеи Ьеи Не
Туг Азр А1а 50 Бег ТНг Агд А1а 55 ТНг 61у Не Рго А1а 60 Агд РНе Бег С1у
Бег С1у Рго 65 С1у ТНг Азр 70 РНе ТНг Ьеи ТНг Не 75 Бег Бег Ьеи 61и Рго 80
С1и Азр РНе А1а Уа1 85 Туг Туг Суз
<210> 453 <211> 5 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (1) .. (1) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 453
- 225 019397
Хаа Туг С1у Не Зег
5 <210> 454 <211> 5 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (1) . . (1) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (3)..(3) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (5)..(5) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 454
Хаа Туг Хаа Мер Хаа
5 <210> 455 <211> 5 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (5)..(5) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 455
Зег Туг С1у Меб Хаа
5 <210> 456 <211> 17 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид
- 226 019397 <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (4)..(4) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (6)..(6) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (10)..(10) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (14)..(15) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 456
Тгр 11е Зег Хаа Туг Хаа (31у Азп ТИг Хаа Туг А1а С1п Хаа Хаа С1п 15 10 15
С1у <210> 457 <211> 17 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (1) . . (2) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (4)..(6) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (8)..(8) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (10)..(10) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 457
Хаа Хаа Зег Хаа Хаа Хаа Зег Хаа Не Хаа Туг А1а Азр Зег \7а1 Ьуз
10 15
С1у
- 227 019397 <210> 458 <211> 17 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (7) . . (8) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (10)..(10) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 458 \7а1 Не Тгр Туг Азр С1у Хаа Хаа Ьуз Хаа Туг А1а Азр Зег Уа1 Ьуз 15 10 15
С1у <210> 459 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (1)..(1) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (4) .. (5) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 459
Хаа С1п Ьеи Хаа Хаа Азр Туг
5 <210> 460 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
- 228 019397 <223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (1)..(1) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (4)..(4) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 460
Хаа С1п Ьеи Хаа Рке Азр Туг
5 <210> 461 <211> 11 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (5)..(5) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (7)..(9) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (11)..(11) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 461
Агд А1а 5ег Θΐη Хаа Не Хаа Хаа Хаа Ьеи Хаа 15 10 <210> 462 <211> 11 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (6)..(9) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность
- 229 019397 <400> 462
Агд А1а 5ег С1п 5ег Хаа Хаа Хаа Хаа Ьеи А1а
10 <210> 463 <211> 11 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (7)..(8) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (11)..(11) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 463
Агд А1а Бег С1п Бег Уа1 Хаа Хаа Азп Ьеи Хаа 15 10 <210> 464 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (5) .. (5) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 464
А1а А1а Бег Бег Хаа С1п Бег
5 <210> 465 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (4)..(4) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность
- 230 019397 <400> 465
А1а А1а Бег Хаа Ьеи С1п Бег
5 <210> 466 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (1)..(2) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (7)..(7) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 466
Хаа Хаа 5ег Тйг Агд А1а Хаа
5 <210> 467 <211> 9 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (4)..(4) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (7)..(8) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 467
Ьеи 01η Ηίε Хаа Бег Туг Хаа Хаа ТИг
5
<210> <211> <212> <213> 468 9 БЕЛОК Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
- 231 019397 <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (2)..(6) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (8)..(8) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 468
Θΐη Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Рго Хаа Ткг
5 <210> 469 <2Н> 9 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (5)..(5) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 469
С1п Θΐη Туг Азр Хаа Тгр Рго Ьеи Ткг
5 <210> 470 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Синтетический пептид <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (2)..(2) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (4)..(5) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <220>
<221> Модифицированный остаток <222> (7)..(9) <223> Вариабельная аминокислотная последовательность <400> 470
С1п Хаа Туг Хаа Хаа Тгр Хаа Хаа Хаа Ткг
10
- 232 019397

Claims (32)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Выделенное моноклональное антитело или его фрагмент, которые специфически связываются с человеческим 1Ь-17 рецептором А (1Ь-17КА) и выбраны из группы, состоящей из:
    А) антитела или его фрагмента, в которых вариабельный домен лёгкой цепи и вариабельный домен тяжёлой цепи по меньшей мере на 80% идентичны по меньшей мере одному из следующих доменов:
    а) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 27, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 1;
    б) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 28, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 2;
    в) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 29, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 3;
    г) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 30, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 4;
    д) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 31, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 5;
    е) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 32, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 6;
    ж) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 33, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 7;
    з) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 34, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 8;
    и) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 35, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 9;
    к) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 36, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 10;
    л) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 37, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 11;
    м) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 38, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 12;
    н) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 39, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 13;
    о) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 40, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 14;
    п) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 41, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 15;
    р) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 42, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 16;
    с) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 43, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 17;
    т) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 44, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 18;
    у) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 45, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0:19;
    ф) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 46, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 20;
    х) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 47, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 21;
    ц) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 48, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 22;
    ч) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 49, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 23;
    ш) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 51, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 24;
    щ) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 52, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 25; и
    э) вариабельному домену лёгкой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 53, и вариабельному домену тяжёлой цепи, содержащему ЗЕО ΙΌ N0: 26; и
    Б) антитела или его фрагмента, содержащих СИР1, СИР2, СИР3 лёгкой цепи и СЭРЕ СИР2, СИР3 тяжёлой цепи, которые отличаются в целом не более чем на три аминокислотных добавления, замены и/или делеции в каждом соответствующем СИР от следующих последовательностей:
    а) СЭРЕ содержащий ЗЕО ΙΌ N0: 185, СИР2, содержащий ЗЕО ΙΌ N0: 186, СЭР3. содержащий
    - 233 019397
    ЖО ΙΌ N0: 187, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 107, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 108, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 109, тяжёлой цепи антитела АМ-1, раскрытого в описании;
    б) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 188, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 189, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 190, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 110, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 111, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 112, тяжёлой цепи антитела АМ-2, раскрытого в описании;
    в) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 191, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 192, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 193, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 113, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 114, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 115, тяжёлой цепи антитела АМ-3, раскрытого в описании;
    г) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 194, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 195, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 196, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 116, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 117, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 118, тяжёлой цепи антитела АМ-4, раскрытого в описании;
    д) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 197, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 198, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 199, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 119, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 120, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 121, тяжёлой цепи антитела АМ-5, раскрытого в описании;
    е) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 200, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 201, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 202, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 122, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 123, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 124, тяжёлой цепи антитела АМ-6, раскрытого в описании;
    ж) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 203, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 204, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 205, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 125, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 126, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 127, тяжёлой цепи антитела АМ-7, раскрытого в описании;
    з) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 206, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 207, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 208, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 128, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 129, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 130, тяжёлой цепи антитела АМ-8, раскрытого в описании;
    и) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 209, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 210, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 211, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 131, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 132, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 133, тяжёлой цепи антитела АМ-9, раскрытого в описании;
    к) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 212, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 213, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 214, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 134, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 135, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 136, тяжёлой цепи антитела АМ-10, раскрытого в описании;
    л) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 215, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 216, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 217, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 137, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 138, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 139, тяжёлой цепи антитела АМ-11, раскрытого в описании;
    м) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 218, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 219, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 220, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 140, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 141, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 142, тяжёлой цепи антитела АМ-12, раскрытого в описании;
    н) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 221, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 222, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 223, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 143, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 144, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 145, тяжёлой цепи антитела АМ-13, раскрытого в описании;
    о) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 224, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 225, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 226, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 146, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 147, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 148, тяжёлой цепи антитела АМ-14, раскрытого в описании;
    п) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 227, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 228, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 229, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 149, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 150, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 151, тяжёлой цепи антитела АМ-15, раскрытого в описании;
    р) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 230, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 231, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 232, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 152, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 153, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 154, тяжёлой цепи антитела АМ-16, раскрытого в описании;
    с) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 233, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 234, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 235, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 155, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 156, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 157, тяжёлой цепи антитела АМ-17, раскрытого в описании;
    т) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 236, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 237, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 238, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 158, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 159, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 160, тяжёлой цепи антитела АМ-18, раскрытого в описании;
    у) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 239, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 240, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 241, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 161, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 162, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 163, тяжёлой цепи антитела АМ-19, раскрытого в описании;
    ф) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 242, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 243, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 244, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 164, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 165, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 166, тяжёлой цепи антитела АМ-20, раскрытого в описании;
    х) 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 245, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 246, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 247, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий ЖО ГО N0: 167, 0ΌΚ2, содержащий ЖО ГО N0: 168, 0ΌΚ3, содержащий ЖО ГО N0: 169, тяжёлой цепи антитела АМ-21, раскрытого в описании;
    - 234 019397
    ц) 0ΌΗ1. содержащий 8ЕО ΙΌ N0: 248, 0ΌΚ2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 249, 0ΌΚ3, содержащий 8Ε0 ΙΌ N0: 250, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 170, 0ΌΚ2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 171, 0ΌΚ3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 172, тяжёлой цепи антитела АМ-22, раскрытого в описании;
    ч) 0ΌΚ1, содержащий 8Е0 ГО N0: 251, 0ΌΚ2, содержащий 8Е0 ГО N0: 252, 0ΌΚ3, содержащий 8Е0 ГО N0: 253, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий 8Е0 ГО N0: 173, 0ΌΚ2, содержащий 8Е0 ГО N0: 174, 0ΌΚ3, содержащий 8Е0 ГО N0: 175, тяжёлой цепи антитела АМ-23, раскрытого в описании;
    ш) 0ΌΚ1, содержащий 8Е0 ГО N0: 254, 0ΌΚ2, содержащий 8Е0 ГО N0: 255, 0ΌΚ3, содержащий 8Е0 ГО N0: 256, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий 8Е0 ГО N0: 173, 0ΌΚ2, содержащий 8Е0 ГО N0: 174, 0ΌΚ3, содержащий 8Е0 ГО N0: 175, тяжёлой цепи антитела АМ-23, раскрытого в описании;
    щ) 0ΌΚ1, содержащий 8Е0 ГО N0: 257, 0ΌΚ2, содержащий 8Е0 ГО N0: 258, 0ΌΚ3, содержащий 8Е0 ГО N0: 259, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий 8Е0 ГО N0: 176, 0ΌΚ2, содержащий 8Е0 ГО N0: 177, 0ΌΚ3, содержащий 8Е0 ГО N0: 178, тяжёлой цепи антитела АМ-24, раскрытого в описании;
    э) 0ΌΚ1, содержащий 8Е0 ГО N0: 260, 0ΌΚ2, содержащий 8Е0 ГО N0: 261, 0ΌΚ3, содержащий 8Е0 ГО N0: 262, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий 8Е0 ГО N0: 179, 0ΌΚ2, содержащий 8Е0 ГО N0: 180, 0ΌΚ3, содержащий 8Е0 ГО N0: 181, тяжёлой цепи антитела АМ-25, раскрытого в описании; или
    ю) 0ΌΚ1, содержащий 8Е0 ГО N0: 263, 0ΌΚ2, содержащий 8Е0 ГО N0: 264, 0ΌΚ3, содержащий 8Е0 ГО N0: 265, лёгкой цепи и 0ΌΚ1, содержащий 8Е0 ГО N0: 182, 0ΌΚ2, содержащий 8Е0 ГО N0: 183, 0ΌΚ3, содержащий 8Е0 ГО N0: 184, тяжёлой цепи антитела АМ-26, раскрытого в описании.
  2. 2. Антитело или его фрагмент по п.1, отличающиеся тем, что содержат аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
    а) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 27, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 1;
    б) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 28, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 2;
    в) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 29, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0:3;
    г) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 30, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 4;
    д) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 31, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 5;
    е) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 32, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 6;
    ж) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 33, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 7;
    з) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 34, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 8;
    и) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 35, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 9;
    к) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 36, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 10;
    л) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 37, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 11;
    м) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 38, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 12;
    н) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 39, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 13;
    о) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 40, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 14;
    п) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 41, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 15;
    р) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 42, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 16;
    с) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 43, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 17;
    т) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 44, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 18;
    у) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 45, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 19;
    ф) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 46, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 20;
    х) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 47, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 21;
    - 235 019397
    ц) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ΙΌ N0: 48, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 8Е0 ΙΌ N0: 22;
    ч) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ΙΌ N0: 49 или 8Е0 ΙΌ N0: 50, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 8Е0 ΙΌ N0:23;
    ш) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ΙΌ N0: 51, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 8Е0 ΙΌ N0: 24;
    щ) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ΙΌ N0: 52, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 8Е0 ΙΌ N0: 25; и
    э) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ΙΌ N0: 53, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 8Е0 ΙΌ N0: 26.
  3. 3. Антитело или его фрагмент по п.1, отличающиеся тем, что содержат аминокислотную последовательность, выбранную из группы, включающей:
    а) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 185, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 186, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 187, лёгкой цепи и СОК1, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 107, СОК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 108, СОК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 109, тяжёлой цепи антитела АМ-1, раскрытого в описании;
    б) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 188, СОК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 189, СОК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 190, лёгкой цепи и СОК1, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 110, СОК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 111, СОК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 112, тяжёлой цепи антитела АМ-2, раскрытого в описании;
    в) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 191, СОК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 192, СОК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 193, лёгкой цепи и СОК1, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 113, 0ΌΗ2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 114, СОК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 115, тяжёлой цепи антитела АМ-3, раскрытого в описании;
    г) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 194, СОК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 195, СОК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 196, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 116, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 117, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 118, тяжёлой цепи антитела АМ-4, раскрытого в описании;
    д) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 197, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 198, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 199, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 119, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 120, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 121, тяжёлой цепи антитела АМ-5, раскрытого в описании;
    е) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 200, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 201, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 202, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 122, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 123, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 124, тяжёлой цепи антитела АМ-6, раскрытого в описании;
    ж) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 203, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 204, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 205, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 125, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 126, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 127, тяжёлой цепи антитела АМ-7, раскрытого в описании;
    з) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 206, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 207, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 208, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 128, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 129, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 130, тяжёлой цепи антитела АМ-8, раскрытого в описании;
    и) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 209, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 210, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 211, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 131, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 132, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 133, тяжёлой цепи антитела АМ-9, раскрытого в описании;
    к) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 212, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 213, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 214, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 134, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 135, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 136, тяжёлой цепи антитела АМ-10, раскрытого в описании;
    л) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 215, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 216, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 217, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 137, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 138, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 139, тяжёлой цепи антитела АМ-11, раскрытого в описании;
    м) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 218, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 219, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 220, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 140, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 141, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 142, тяжёлой цепи антитела АМ-12, раскрытого в описании;
    н) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 221, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 222, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 223, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 143, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 144, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 145, тяжёлой цепи антитела АМ-13, раскрытого в описании;
    о) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 224, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 225, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 226, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 146, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 147, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 148, тяжёлой цепи антитела АМ-14, раскрытого в описании;
    п) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 227, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 228, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 229, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 149, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 150, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 151, тяжёлой цепи антитела АМ-15, раскрытого в описании;
    р) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 230, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 231, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 232, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 152, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 153, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 154, тяжёлой цепи антитела АМ-16, раскрытого в описании;
    с) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 233, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 234, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 235, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 155, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0:
    - 236 019397
    156, 0ΌΚ3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 157, тяжёлой цепи антитела АМ-17, раскрытого в описании;
    т) СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 236, 0ΌΚ2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 237, ί.ΌΕ3. содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 238, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 158, ί'ΌΕ2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 159, ί'ΌΕ3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 160, тяжёлой цепи антитела АМ-18, раскрытого в описании;
    у) СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 239, ί'ΌΕ2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 240, ί'ΌΕ3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 241, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 161, ί'ΌΕ2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 162, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 163, тяжёлой цепи антитела АМ-19, раскрытого в описании;
    ф) СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 242, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 243, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 244, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 164, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 165, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 166, тяжёлой цепи антитела АМ-20, раскрытого в описании;
    х) СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 245, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 246, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 247, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 167, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 168, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 169, тяжёлой цепи антитела АМ-21, раскрытого в описании;
    ц) СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 248, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 249, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 250, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 170, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 171, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 172, тяжёлой цепи антитела АМ-22, раскрытого в описании;
    ч) СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 251, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 252, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 253, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 173, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 174, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 175, тяжёлой цепи антитела АМ-23, раскрытого в описании;
    ш) СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 254, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 255, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 256, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 173, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 174, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 175, тяжёлой цепи антитела АМ-23, раскрытого в описании;
    щ) СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 257, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 258, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 259, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 176, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 177, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 178, тяжёлой цепи антитела АМ-24, раскрытого в описании;
    э) СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 260, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 261, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 262, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 179, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 180, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 181, тяжёлой цепи антитела АМ-25, раскрытого в описании; и
    ю) СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 263, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 264, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 265, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 182, СЭК2, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 183, СЭК3, содержащий 8ЕД ΙΌ N0: 184, тяжёлой цепи антитела АМ-26, раскрытого в описании.
  4. 4. Антитело или его фрагмент по любому из пп.1-3, выбранные из группы, состоящей из:
    а) гуманизированного антитела;
    б) химерного антитела
    в) рекомбинантного антитела;
    г) одноцепочечного антитела;
    д) диатела;
    е) триатела;
    ж) тетратела;
    з) фрагмента ЕаЬ;
    и) фрагмента Р(аЬ’)2;
    к) ΙβΟ1 антитела;
    л) ΙβΟ2 антитела;
    м) ΙβΟ3 антитела и
    н) ΙβΟ4 антитела.
  5. 5. Антитело или его фрагмент по любому из пп.1-4, отличающиеся тем, что дополнительно содержат полиол.
  6. 6. Выделенное моноклональное антитело или его фрагмент по п.1, которые специфически связывают человеческий ΙΕ-17ΒΆ 8ЕД ΙΌ N0: 431, но не связывают химерный полипептид, состоящий из 8ЕД ΙΌ N0: 436.
  7. 7. Выделенное моноклональное антитело или его фрагмент по п.1, которые специфически связывают полипептид, содержащий аминокислоты 176-197 8ЕД ΙΌ N0: 431 человеческого ΙΕ-17ΒΆ.
  8. 8. Выделенное моноклональное антитело или его фрагмент по п.1, которые специфически связывают человеческий ΙΕ-17ΒΆ 8ЕД ΙΌ N0: 431, но не связывают указанный ΙΕ-17ΒΆ, имеющий любую из следующих аминокислотных замен Ό152Β, Ό154Β, Е156К, Ό184Β, Е186К или Н297К в 8ЕД ΙΌ N0: 431.
  9. 9. Выделенное моноклональное антитело по п.8, отличающееся тем, что оно специфически связывает эпитоп, определяемый любой из аминокислот Ό152, Ό154, Е156, Ό184, Е186 или Н297 8ЕД ΙΌ N0: 431.
  10. 10. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело или его фрагмент по любому из пп.1-4.
  11. 11. Полипептид, который специфически связывается с рецептором А ΙΕ-17 человека, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
    А) а) последовательности вариабельного домена лёгкой цепи, по меньшей мере на 80% идентичной последовательности вариабельного домена лёгкой цепи АМъ1-26 (8ЕД ΙΌ N0: 27-53 соответственно);
    - 237 019397
    б) последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи, по меньшей мере на 80% идентичной последовательности вариабельного домена тяжёлой цепи АМН1-26 (БЕР ΙΌ N0: 1-26 соответственно); или
    в) вариабельного домена лёгкой цепи, указанного в (а), и вариабельного домена тяжёлой цепи, указанного в (б); и
    Б) СЭРЕ СЭЕ2. СЭЯ3 лёгкой цепи и СЭЕ1. СЭЕ2. СЭЯ3 тяжёлой цепи, которые отличаются в целом не более чем на три аминокислотных добавления, замены и/или делеции в каждом СОЯ от следующих последовательностей:
    а) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 185, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 186, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 187, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 107, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 108, СГОЯЗ, содержащий БЕр ΙΌ N0: 109, тяжёлой цепи антитела АМ-1, раскрытого в описании;
    б) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 188, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 189, СЭЯЗ, содержащий БЕр ΙΌ N0: 190, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 110, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 111, СЭЯЗ, содержащий БЕр ΙΌ N0: 112, тяжёлой цепи антитела АМ-2, раскрытого в описании;
    в) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 191, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 192, СЭЯЗ, содержащий БЕр ΙΌ N0: 193, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 113, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 114, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 115, тяжёлой цепи антитела АМ-3, раскрытого в описании;
    г) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 194, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 195, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 196, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 116, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 117, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 118, тяжёлой цепи антитела АМ-4, раскрытого в описании;
    д) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 197, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 198, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 199, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 119, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 120, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 121, тяжёлой цепи антитела АМ-5, раскрытого в описании;
    е) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 200, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 201, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 202, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 122, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 123, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 124, тяжёлой цепи антитела АМ-6, раскрытого в описании;
    ж) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 203, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 204, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 205, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 125, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 126, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 127, тяжёлой цепи антитела АМ-7, раскрытого в описании;
    з) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 206, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 207, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 208, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 128, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 129, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 130, тяжёлой цепи антитела АМ-8, раскрытого в описании;
    и) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 209, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 210, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 211, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 131, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 132, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 133, тяжёлой цепи антитела АМ-9, раскрытого в описании;
    к) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 212, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 213, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 214, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 134, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 135, С0Я3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 136, тяжёлой цепи антитела АМ-10, раскрытого в описании;
    л) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 215, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 216, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 217, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 137, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 138, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 139, тяжёлой цепи антитела АМ-11, раскрытого в описании;
    м) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 218, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 219, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 220, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 140, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 141, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 142, тяжёлой цепи антитела АМ-12, раскрытого в описании;
    н) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 221, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 222, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 223, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 143, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 144, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 145, тяжёлой цепи антитела АМ-13, раскрытого в описании;
    о) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 224, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 225, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 226, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 146, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 147, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 148, тяжёлой цепи антитела АМ-14, раскрытого в описании;
    п) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 227, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 228, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 229, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 149, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 150, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 151, тяжёлой цепи антитела АМ-15, раскрытого в описании;
    р) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 230, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 231, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 232, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 152, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 153, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 154, тяжёлой цепи антитела АМ-16, раскрытого в описании;
    с) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 233, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 234, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 235, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 155, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 156, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 157, тяжёлой цепи антитела АМ-17, раскрытого в описании;
    т) СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 236, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 237, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 238, лёгкой цепи и СОЯ1, содержащий БЕр ΙΌ N0: 158, СОЯ2, содержащий БЕр ΙΌ N0: 159, СЭЯ3, содержащий БЕр ΙΌ N0: 160, тяжёлой цепи антитела АМ-18, раскрытого в описании;
    - 238 019397
    у) СГОКЕ содержащий 8ЕО ГО N0: 239, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 240, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 241, лёгкой цепи и СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 161, СГОЕ2. содержащий 8Е0 ГО N0: 162, СОК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 163, тяжёлой цепи антитела АМ-19, раскрытого в описании;
    ф) СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 242, СГОК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 243, СГОК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 244, лёгкой цепи и СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 164, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 165, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 166, тяжёлой цепи антитела АМ-20, раскрытого в описании;
    х) СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 245, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 246, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 247, лёгкой цепи и СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 167, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 168, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 169, тяжёлой цепи антитела АМ-21, раскрытого в описании;
    ц) СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 248, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 249, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 250, лёгкой цепи и СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 170, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 171, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 172, тяжёлой цепи антитела АМ-22, раскрытого в описании;
    ч) СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 251, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 252, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 253, лёгкой цепи и СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 173, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 174, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 175, тяжёлой цепи антитела АМ-23, раскрытого в описании;
    ш) СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 254, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 255, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 256, лёгкой цепи и СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 173, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 174, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 175, тяжёлой цепи антитела АМ-23, раскрытого в описании;
    щ) СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 257, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 258, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 259, лёгкой цепи и СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 176, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 177, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 178, тяжёлой цепи антитела АМ-24, раскрытого в описании;
    э) СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 260, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 261, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 262, лёгкой цепи и СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 179, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 180, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 181, тяжёлой цепи антитела АМ-25, раскрытого в описании; и
    ю) СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 263, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 264, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 265, лёгкой цепи и СГОКЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 182, СЭК2, содержащий 8Е0 ГО N0: 183, СЭК3, содержащий 8Е0 ГО N0: 184, тяжёлой цепи антитела АМ-26, раскрытого в описании.
  12. 12. Полипептид по п.11, отличающийся тем, что он содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
    а) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 27, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 1;
    б) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 28, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 2;
    в) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 29, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 3;
    г) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 30, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 4;
    д) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 31, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 5;
    е) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 32, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 6;
    ж) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 33, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 7;
    з) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 34, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 8;
    и) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 35, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 9;
    к) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 36, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 10;
    л) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 37, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 11;
    м) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 38, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 12;
    н) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 39, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 13;
    о) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 40, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 14;
    п) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 41, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 15;
    р) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 42, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 16;
    с) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 43, и вариабельного домена тяже
    - 239 019397 лой цепи, содержащего 8ЕС ГО N0: 17;
    т) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 44, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 18;
    у) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 45, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 19;
    ф) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 46, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 20;
    х) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 47, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 21;
    ц) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 48, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 22;
    ч) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 49 или 8Е0 ГО N0: 50, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 23;
    ш) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 51, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 24;
    щ) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 52, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 25; и
    э) вариабельного домена легкой цепи, содержащего 8Е0 ГО N0: 53, и вариабельного домена тяжелой цепи, содержащего 5Е0 ГО N0: 26.
  13. 13. Полипептид по п.11, отличающийся тем, что он содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
    а) СГОРЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 185, СЭР2. содержащий 8Е0 ГО N0: 186, СГОИ3. содержащий 8Е0 ГО N0: 187, лёгкой цепи и СГОРЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 107, СЭР2, содержащий 8Е0 ГО N0: 108, СГОРЛ, содержащий 8Е0 ГО N0: 109, тяжёлой цепи антитела АМ-1, раскрытого в описании;
    б) СЭРЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 188, СЭР2, содержащий 8Е0 ГО N0: 189, С0Р3, содержащий 8Е0 ГО N0: 190, лёгкой цепи и СЭРЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 110, СЭР2, содержащий 8Е0 ГО N0: 111, С0Р3, содержащий 8Е0 ГО N0: 112, тяжёлой цепи антитела АМ-2, раскрытого в описании;
    в) СПК.1, содержащий 8Е0 ГО N0: 191, СЭР2, содержащий 8Е0 ГО N0: 192, С0Р3, содержащий 8Е0 ГО N0: 193, лёгкой цепи и СЭРЕ содержащий 8Е0 ГО N0: 113, СЭР2, содержащий 8Е0 ГО N0: 114, С0Р3, содержащий 8Е0 ГО N0: 115, тяжёлой цепи антитела АМ-3, раскрытого в описании;
    г) СПК.1, содержащий 8ЕС ГО N0: 194, СЭК2, содержащий 8ЕС ГО N0: 195, СЭК3, содержащий 8ЕС ГО N0: 196, лёгкой цепи и СЭЯ!, содержащий 8ЕС ГО N0: 116, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 117, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 118, тяжёлой цепи антитела АМ-4, раскрытого в описании;
    д) СГОРЕ содержащий 8ЕС ГО N0: 197, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 198, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 199, лёгкой цепи и СПР1, содержащий 8ЕС ГО N0: 119, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 120, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 121, тяжёлой цепи антитела АМ-5, раскрытого в описании;
    е) СЭРЕ содержащий 8ЕС ГО N0: 200, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 201, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 202, лёгкой цепи и СПР1, содержащий 8ЕС ГО N0: 122, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 123, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 124, тяжёлой цепи антитела АМ-6, раскрытого в описании;
    ж) СГОРЕ содержащий 8ЕС ГО N0: 203, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 204, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 205, лёгкой цепи и СГОРЕ содержащий 8ЕС ГО N0: 125, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 126, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 127, тяжёлой цепи антитела АМ-7, раскрытого в описании;
    з) СГОРЕ содержащий 8ЕС ГО N0: 206, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 207, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 208, лёгкой цепи и СПР1, содержащий 8ЕС ГО N0: 128, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 129, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 130, тяжёлой цепи антитела АМ-8, раскрытого в описании;
    и) СГОРЕ содержащий 8ЕС ГО N0: 209, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 210, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 211, лёгкой цепи и СПР1, содержащий 8ЕС ГО N0: 131, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 132, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 133, тяжёлой цепи антитела АМ-9, раскрытого в описании;
    к) СГОРЕ содержащий 8ЕС ГО N0: 212, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 213, С^Р3. содержащий 8ЕС ГО N0: 214, лёгкой цепи и СГОРЕ содержащий 8ЕС ГО N0: 134, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 135, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 136, тяжёлой цепи антитела АМ-10, раскрытого в описании;
    л) СПР1, содержащий 8ЕС ГО N0: 215, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 216, С^Р3. содержащий 8ЕС ГО N0: 217, лёгкой цепи и СГОРЕ содержащий 8ЕС ГО N0: 137, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 138, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 139, тяжёлой цепи антитела АМ-11, раскрытого в описании;
    м) СГОРЕ содержащий 8ЕС ГО N0: 218, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 219, С^Р3. содержащий 8ЕС ГО N0: 220, лёгкой цепи и СПР1, содержащий 8ЕС ГО N0: 140, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 141, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 142, тяжёлой цепи антитела АМ-12, раскрытого в описании;
    н) СГОРЕ содержащий 8ЕС ГО N0: 221, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 222, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 223, лёгкой цепи и СГОРЕ содержащий 8ЕС ГО N0: 143, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 144, СПР3, содержащий 8ЕС ГО N0: 145, тяжёлой цепи антитела АМ-13, раскрытого в описании;
    о) СГОРЕ содержащий 8ЕС ГО N0: 224, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0: 225, С^Р3. содержащий 8ЕС ГО N0: 226, лёгкой цепи и СЭРТ, содержащий 8ЕС ГО N0: 146, СПР2, содержащий 8ЕС ГО N0:
    - 240 019397
    147, 0ΌΚ3, содержащий 8ЕО ΙΌ N0: 148, тяжёлой цепи антитела АМ-14, раскрытого в описании;
    п) СЭК1, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 227, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 228, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 229, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 149, ί.ΌΕ2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 150, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 151, тяжёлой цепи антитела АМ-15, раскрытого в описании;
    р) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 230, ί.ΌΕ2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 231, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 232, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 152, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 153, ί.ΌΚ3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 154, тяжёлой цепи антитела АМ-16, раскрытого в описании;
    с) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 233, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 234, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 235, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 155, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 156, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 157, тяжёлой цепи антитела АМ-17, раскрытого в описании;
    т) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 236, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 237, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 238, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 158, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 159, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 160, тяжёлой цепи антитела АМ-18, раскрытого в описании;
    у) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 239, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 240, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 241, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 161, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 162, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 163, тяжёлой цепи антитела АМ-19, раскрытого в описании;
    ф) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 242, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 243, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 244, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 164, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 165, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 166, тяжёлой цепи антитела АМ-20, раскрытого в описании;
    х) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 245, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 246, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 247, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 167, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 168, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 169, тяжёлой цепи антитела АМ-21, раскрытого в описании;
    ц) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 248, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 249, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 250, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 170, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 171, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 172, тяжёлой цепи антитела АМ-22, раскрытого в описании;
    ч) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 251, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 252, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 253, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 173, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 174, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 175, тяжёлой цепи антитела АМ-23, раскрытого в описании;
    ш) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 254, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 255, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 256, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 173, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 174, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 175, тяжёлой цепи антитела АМ-23, раскрытого в описании;
    щ) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 257, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 258, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 259, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 176, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 177, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 178, тяжёлой цепи антитела АМ-24, раскрытого в описании;
    э) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 260, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 261, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 262, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 179, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 180, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 181, тяжёлой цепи антитела АМ-25, раскрытого в описании; и
    ю) СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 263, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 264, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 265, лёгкой цепи и СЭКЕ содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 182, СЭК2, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 183, СЭК3, содержащий 8Е0 ΙΌ N0: 184, тяжёлой цепи антитела АМ-26, раскрытого в описании.
  14. 14. Фармацевтическая композиция, содержащая полипептид по любому из пп.11-13.
  15. 15. Выделенное моноклональное антитело ΙβΟ2 человека или его фрагмент, которые специфически связываются с рецептором А ΙΕ-17 человека и выбраны из группы, состоящей из:
    а) антитела или его фрагмента, содержащих тяжелую цепь, содержащую последовательность 8Е0 ΙΌ N0: 427, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот с 21 по 234 8Е0 ΙΌ N0: 429;
    б) антитела или его фрагмента, содержащих последовательность вариабельной области легкой цепи, содержащую 8Е0 ΙΌ N0: 40, и последовательность вариабельной области тяжелой цепи, содержащую 8ЕО ΙΌ N0: 14;
    в) антитела или его фрагмента, содержащих СЭК1 тяжелой цепи, СЭК2 и СЭК3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащей последовательность 8Е0 ΙΌ N0: 14, и СЭК1 легкой цепи, СЭК2 и С0К3 вариабельной области легкой цепи, содержащей последовательность 8Е0 ΙΌ N0: 40;
    г) антитела или его фрагмента, содержащих тяжелую цепь, кодирующую последовательность, содержащую 8Е0 ΙΌ N0: 426, и легкую цепь, кодирующую последовательность, содержащую 8Е0 ΙΌ N0: 428; и
    д) антитела или его фрагмента, содержащих вариабельную область тяжелой цепи, кодирующую последовательность, содержащую 8Е0 ΙΌ N0: 67, и вариабельную область легкой цепи, кодирующую последовательность, содержащую 8Е0 ΙΌ N0: 93.
  16. 16. Антитело по п.15, отличающееся тем, что дополнительно содержит полиол.
  17. 17. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело или его фрагмент по п.15.
  18. 18. Выделенный полинуклеотид, кодирующий антитело или его фрагмент по любому из пп.1-4 или 15.
  19. 19. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид по любому из пп.11-13.
    - 241 019397
  20. 20. Плазмида, содержащая полинуклеотид по п.18 или 19.
  21. 21. Плазмида по п.20, отличающаяся тем, что она представляет собой экспрессирующий вектор.
  22. 22. Выделенная клетка, содержащая плазмиду по п.20.
  23. 23. Выделенная клетка, отличающаяся тем, что хромосома указанной клетки содержит полинуклеотид по п.18 или 19.
  24. 24. Выделенная клетка по п.22, отличающаяся тем, что она представляет собой гибридому.
  25. 25. Выделенная клетка, содержащая плазмиду по п.21.
  26. 26. Выделенная клетка по п.25, отличающаяся тем, что клетка является прокариотической клеткой или эукариотической клеткой.
  27. 27. Выделенная клетка по п.26, отличающаяся тем, что эукариотическая клетка выбрана из группы, состоящей из:
    а) клетки млекопитающего;
    б) клетки насекомого и
    в) клетки СНО (яичников китайского хомячка).
  28. 28. Способ получения полипептида, который специфически связывается с рецептором А ГБ-17 человека, заключающийся в инкубации выделенной клетки по п.25 в условиях, способствующих экспрессии указанного полипептида.
  29. 29. Способ лечения болезненного состояния, ассоциированного с активацией 1Ь-17КА, у нуждающегося в этом пациента, заключающийся во введении указанному пациенту фармацевтической композиции по любому из пп.10, 14 или 17.
  30. 30. Способ по п.29, отличающийся тем, что болезненное состояние выбрано из группы, включающей воспаление, аутоиммунное заболевание, воспаление хряща и/или разрушение кости, артрит, ревматоидный артрит, ювенильный артрит, ювенильный ревматоидный артрит, пауциартикулярный ювенильный ревматоидный артрит, полиартикулярный ювенильный ревматоидный артрит, системный ювенильный ревматоидный артрит, ювенильный анкилозирующий спондилит, ювенильный энтеропатический артрит, ювенильный реактивный артрит, ювенильный дерматомиозит, ювенильный псориатический артрит, ювенильную склеродермию, ювенильную системную красную волчанку, пауциартикулярный ревматоидный артрит, полиартикулярный ревматоидный артрит, системный ревматоидный артрит, анкилозирующий спондилит, энтеропатический артрит, реактивный артрит, дерматомиозит, псориатический артрит, склеродермию, дерматомиозит, остеоартрит, саркоидоз, склеродермию, псориаз, бляшечный (пятнистый) псориаз, каплевидный псориаз, обратный псориаз, пустулезный псориаз, эритродермический псориаз, дерматит, атопический дерматит, атеросклероз, волчанку, системную красную волчанку (8БЕ), воспалительное заболевание кишечника (ΙΒΌ), болезнь Крона, язвенный колит, глютеновую болезнь, рассеянный склероз (М8), астму, хроническую обструктивную болезнь легких (СОРЭ) и болезнь трансплантат-против-хозяина (ΟνΗΌ).
  31. 31. Способ по п.29, отличающийся тем, что антитело по пп.1-3 или 15 в составе указанной композиции выбрано из группы, состоящей из:
    а) человеческого антитела;
    б) гуманизированного антитела;
    в) химерного антитела;
    г) моноклонального антитела;
    д) антигенсвязывающего фрагмента антитела;
    е) одноцепочечного антитела;
    ж) диатела;
    з) триатела;
    и) тетратела;
    к) фрагмента РаЬ;
    л) фрагмента Р(аЬ')2;
    м) ΙβΟ1 антитела;
    н) Ι§62 антитела;
    о) ΙβΟ3 антитела и
    п) Ι§64 антитела.
  32. 32. Способ по п.29, дополнительно включающий назначение указанному субъекту второй фармацевтической композиции, где вторую фармацевтическую композицию выбирают из группы, включающей композицию, содержащую ингибиторы ΤΝΡ, растворимые ΤΝΡ рецепторы, Этанерцепт, ΕΝΒΚΕΕ®, растворимый ΤΝΡ рецептор типа I и растворимый ΤΝΡ рецептор типа II, мономерные или мультимерные р75 и/или р55 ΤΝΡ рецепторные молекулы и их фрагменты, антитела против ΤΝΡ, Инфликсимаб, ΚΕΜΙСАЭЕ®, Ό2Ε7 или ΗυΜΙΚΑ®, ингибиторы ГБ-1, ингибиторы рецепторов ГБ-1, ингибиторы СЭ28. нестероидные противовоспалительные средства (НСПВС), медленно действующие противоревматические препараты (МПРП, 8ΑΑΚΌ) и модифицирующие заболевание противоревматические препараты (БМАРП, ΌΜΑΚΌ).
    - 242 019397 только УН С0К5
    АМ Η24 (ЗЕО Ю N0:24) АМ Н23 (ЗЕО Ю N0:23)
    АМН5 (ЗЕО Ю N0:5)
    АМ Н25 (ЗЕО Ю N0:25) АМН1 (ЗЕО Ю N0:1)
    АМН2 (ЗЕО Ю N0:2) АМН10 (ЗЕО Ю N0:10)
    АМН7 (ЗЕО Ю N0:7)
    АМН9 (ЗЕО 10 N0:9) АМН 6 (ЗЕО 10 N0:6)
    АМ н 14 (ЗЕО Ю N0:14) АМ μ 22 (ЗЕО Ю N0:22) АМН8 (ЗЕО Ю N0:8)
    АМН12 (ЗЕО 10 N0:12) АМН16 (ЗЕО Ю N0:16) АМН17 (ЗЕО 10 N0:17)
    АМН19 (5Е0 Ю N0:19) АМН26 (ЗЕО Ю N0:26) АМН21 (ЗЕО Ю N0:21)
    АМ н20 (ЗЕО Ю N0:20) АМН4 (ЗЕО 10 N0:4)
    АМ н 3 (ЗЕО Ю N0:3)
    АМН11 (ЗЕО Ю N0:11) АМН13 (ЗЕО 10 N0:13) АМН15 (ЗЕО Ю N0:15)
    АМН18 (ЗЕО Ю N0:18)
EA200900514A 2006-10-02 2007-10-01 Антигенсвязывающие белки il-17 рецептора а EA019397B1 (ru)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US82788206P 2006-10-02 2006-10-02
US87307206P 2006-12-05 2006-12-05
US96989507P 2007-09-04 2007-09-04
PCT/US2007/021174 WO2008054603A2 (en) 2006-10-02 2007-10-01 Il-17 receptor a antigen binding proteins

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200900514A1 EA200900514A1 (ru) 2009-10-30
EA019397B1 true EA019397B1 (ru) 2014-03-31

Family

ID=39344834

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200900514A EA019397B1 (ru) 2006-10-02 2007-10-01 Антигенсвязывающие белки il-17 рецептора а

Country Status (30)

Country Link
US (15) US7833527B2 (ru)
EP (4) EP2076541B1 (ru)
JP (1) JP5013383B2 (ru)
KR (2) KR20120098953A (ru)
CN (1) CN103214576B (ru)
AR (1) AR063090A1 (ru)
AU (2) AU2007314519C1 (ru)
BR (1) BRPI0719762B8 (ru)
CA (1) CA2663537C (ru)
CL (1) CL2007002800A1 (ru)
CR (1) CR10760A (ru)
CY (5) CY1116291T1 (ru)
DK (4) DK2518085T3 (ru)
EA (1) EA019397B1 (ru)
ES (4) ES2616210T3 (ru)
HU (4) HUE057611T2 (ru)
IL (3) IL197636B (ru)
LT (4) LT2487188T (ru)
LU (1) LUC00056I2 (ru)
MX (1) MX2009003511A (ru)
MY (1) MY187263A (ru)
NL (1) NL300919I2 (ru)
NO (2) NO344867B1 (ru)
NZ (1) NZ575631A (ru)
PE (2) PE20120832A1 (ru)
PL (4) PL2076541T3 (ru)
PT (4) PT2518085T (ru)
SI (4) SI2518085T1 (ru)
TW (1) TWI396694B (ru)
WO (1) WO2008054603A2 (ru)

Families Citing this family (101)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004517918A (ja) * 2000-10-18 2004-06-17 イミュネックス・コーポレーション Ｉｌ−１７アンタゴニストを使用する慢性関節リューマチの治療法
US7833527B2 (en) * 2006-10-02 2010-11-16 Amgen Inc. Methods of treating psoriasis using IL-17 Receptor A antibodies
CN101668531B (zh) * 2007-02-28 2014-05-07 默沙东公司 用于治疗免疫病症的联合治疗
EP2170958A1 (en) * 2007-06-13 2010-04-07 Amgen Inc. Il-17 heteromeric receptor complex
US20100256600A1 (en) * 2009-04-04 2010-10-07 Ferrera David A Neurovascular otw pta balloon catheter and delivery system
CN104151428B (zh) * 2008-02-21 2017-07-14 麒麟-安姆根有限公司 Il‑17ra‑il‑17rb拮抗物及其用途
WO2010041145A2 (en) * 2008-10-07 2010-04-15 Novimmune Sa Il-17-mediated transfection methods
WO2010062858A1 (en) * 2008-11-26 2010-06-03 Allergan, Inc. Il-17 antibody inhibitor for treating dry eye
US8211434B2 (en) * 2008-11-26 2012-07-03 Allergan, Inc. KLK-13 antibody inhibitor for treating dry eye
SG173705A1 (en) 2009-03-05 2011-09-29 Abbott Lab Il-17 binding proteins
WO2010108154A2 (en) 2009-03-20 2010-09-23 Amgen Inc. Selective and potent peptide inhibitors of kv1.3
US8137671B2 (en) 2009-05-05 2012-03-20 Genentech, Inc. Anti-IL-17F antibodies
WO2010142551A2 (en) * 2009-06-12 2010-12-16 Ablynx N.V. Single variable domain (vhh) antibodies to cytokines of the il-17 receptor family
US20130064788A1 (en) * 2009-10-10 2013-03-14 Eleven Biotherapeutics, Inc. Il-17 family cytokine compositions and uses
TW201117824A (en) * 2009-10-12 2011-06-01 Amgen Inc Use of IL-17 receptor a antigen binding proteins
CA2774032C (en) 2009-10-23 2019-03-26 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Anti-gcc antibody molecules and related compositions and methods
EA031209B9 (ru) * 2010-01-15 2021-11-19 Кирин-Эмджен, Инк. Фармацевтический состав антитела для лечения воспалительного заболевания и способы его применения
US8298535B2 (en) * 2010-02-24 2012-10-30 Rinat Neuroscience Corp. Anti-IL-7 receptor antibodies
AU2011254557B2 (en) 2010-05-20 2015-09-03 Ablynx Nv Biological materials related to HER3
CN103339145A (zh) * 2010-09-22 2013-10-02 安姆根有限公司 运载体免疫球蛋白及其用途
PT2625199T (pt) 2010-10-08 2018-02-28 Novartis Ag Métodos de tratamento de psoríase usando antagonistas de il-17
EP3214442A1 (en) * 2010-10-25 2017-09-06 F. Hoffmann-La Roche AG Treatment of gastrointestinal inflammation and psoriasis and asthmainflammation and psoriasis a
BR112013011176A2 (pt) 2010-11-05 2020-09-01 Novartis Ag métodos de tratamento de artrite reumatoide usando antagonistas de il-17
US10208349B2 (en) 2011-01-07 2019-02-19 Ucb Biopharma Sprl Lipocalin 2 as a biomarker for IL-17 inhibitor therapy efficacy
TR201905991T4 (tr) 2011-04-20 2019-05-21 Amgen Inc Oto enjektör aparatı.
UA117218C2 (uk) 2011-05-05 2018-07-10 Мерк Патент Гмбх Поліпептид, спрямований проти il-17a, il-17f та/або il17-a/f
CN104583415B (zh) 2011-07-19 2018-04-03 国家生物技术研究所公司 新型il‑17r‑ecd突变体
WO2013016220A1 (en) * 2011-07-22 2013-01-31 Amgen Inc. Il-17 receptor a is required for il-17c biology
UY35148A (es) 2012-11-21 2014-05-30 Amgen Inc Immunoglobulinas heterodiméricas
US9757395B2 (en) 2012-12-20 2017-09-12 Otitopic Inc. Dry powder inhaler and methods of use
US9757529B2 (en) 2012-12-20 2017-09-12 Otitopic Inc. Dry powder inhaler and methods of use
AU2014215639B2 (en) 2013-01-25 2017-03-23 Thymon, Llc Compositions for selective reduction of circulating bioactive soluble TNF and methods for treating TNF-mediated disease
US9708375B2 (en) 2013-03-15 2017-07-18 Amgen Inc. Inhibitory polypeptides specific to WNT inhibitors
TWI614041B (zh) 2013-03-15 2018-02-11 安美基公司 用於注射器之匣盒
SG11201507417RA (en) 2013-03-15 2015-10-29 Amgen Inc Body contour adaptable autoinjector device
US10092703B2 (en) 2013-03-15 2018-10-09 Amgen Inc. Drug cassette, autoinjector, and autoinjector system
KR102074421B1 (ko) * 2013-03-29 2020-02-10 삼성전자주식회사 항 c-Met/항 EGFR 이중 특이 항체
CA2910766C (en) 2013-04-30 2020-12-15 Otitopic Inc. Dry powder formulations and methods of use
US10434172B2 (en) 2013-08-15 2019-10-08 Novartis Ag Methods of treating generalized pustular psoriasis (GPP) using IL-17 antagonists
WO2015035215A1 (en) 2013-09-05 2015-03-12 Amgen Inc. Fc-containing molecules exhibiting predictable, consistent, and reproducible glycoform profiles
WO2015057906A1 (en) * 2013-10-16 2015-04-23 Janssen Biotech, Inc. Cd200 receptor 1 agonists
KR102127408B1 (ko) * 2014-01-29 2020-06-29 삼성전자주식회사 항 Her3 scFv 단편 및 이를 포함하는 항 c-Met/항 Her3 이중 특이 항체
CN106029693A (zh) 2014-02-21 2016-10-12 豪夫迈·罗氏有限公司 抗il-13/il-17双特异性抗体及其用途
MY184189A (en) 2014-03-31 2021-03-24 Amgen K A Inc Methods of treating nail and scalp psoriasis
US10156562B2 (en) 2014-05-16 2018-12-18 Amgen Inc. Assay for detecting Th1 and Th2 cell populations
WO2016031250A1 (en) 2014-08-26 2016-03-03 Kirin-Amgen, Inc. Method for treating psoriasis patient which received anti-tnf-alpha antibody therapy
SMT202400285T1 (it) 2014-09-10 2024-09-16 Novartis Ag Uso di antagonisti di il-17 per inibire la progressione del danno strutturale in pazienti affetti da artrite psoriasica
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
UY36351A (es) 2014-10-14 2016-06-01 Novartis Ag Moléculas de anticuerpo que se unen a pd-l1 y usos de las mismas
AR103173A1 (es) 2014-12-22 2017-04-19 Novarits Ag Productos farmacéuticos y composiciones líquidas estables de anticuerpos il-17
GB201500461D0 (en) * 2015-01-12 2015-02-25 Cresendo Biolog Ltd Therapeutic molecules
EP3250927B1 (en) 2015-01-28 2020-02-19 H. Hoffnabb-La Roche Ag Gene expression markers and treatment of multiple sclerosis
AU2016294332A1 (en) 2015-07-16 2017-11-30 Eli Lilly And Company Treatment of pruritus
EP3316902A1 (en) 2015-07-29 2018-05-09 Novartis AG Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
LT3317301T (lt) 2015-07-29 2021-07-26 Novartis Ag Kombinuotos terapijos, apimančios antikūno molekules prieš lag-3
CN108025051B (zh) 2015-07-29 2021-12-24 诺华股份有限公司 包含抗pd-1抗体分子的联合疗法
IL258844B2 (en) 2015-10-22 2024-03-01 Juno Therapeutics Gmbh Methods for culturing cells and kits and apparatus for same
ES2986067T3 (es) 2015-12-17 2024-11-08 Novartis Ag Moléculas de anticuerpos frente a PD-1 y usos de las mismas
BR112018014810A2 (pt) 2016-01-22 2018-12-11 Merck Sharp & Dohme Corp. anticorpos anti-fator xi de coagulação
KR102414558B1 (ko) 2016-04-18 2022-06-29 셀덱스 쎄라퓨틱스, 인크. 인간 cd40에 결합하는 효능성 항체 및 이의 용도
CN116425879A (zh) 2016-06-14 2023-07-14 默沙东有限责任公司 抗-凝血因子xi抗体
WO2017221174A1 (en) 2016-06-22 2017-12-28 Novartis Ag Methods of treating vitiligo using interleukin-17 (il-17) antibodies
AU2017294772B2 (en) 2016-07-14 2024-05-02 Scholar Rock, Inc. TGFB antibodies, methods, and uses
WO2018067198A1 (en) * 2016-10-03 2018-04-12 The Regents Of The University Of California Inhibitory antibodies and methods of use thereof
WO2018096467A1 (en) 2016-11-28 2018-05-31 Novartis Ag Methods of treating acne using interleukin-17 (il-17) antagonists
JP7672196B2 (ja) 2017-03-14 2025-05-07 アムジエン・インコーポレーテツド 細胞培養において産生される抗体の総非フコシル化グリコフォームの調節
TW201842933A (zh) 2017-05-05 2018-12-16 瑞士商諾華公司 使用il-17拮抗劑選擇性治療氣喘的方法
JP7657440B2 (ja) * 2017-06-12 2025-04-07 ブルーフィン バイオメディシン， インコーポレイテッド 抗－ｉｌ１ｒａｐ抗体および抗体薬物コンジュゲート
US10786456B2 (en) 2017-09-22 2020-09-29 Otitopic Inc. Inhaled aspirin and magnesium to treat inflammation
CA3076353A1 (en) 2017-09-22 2019-03-28 Otitopic Inc. Dry powder compositions with magnesium stearate
CA3080665A1 (en) 2017-11-02 2019-05-09 Novartis Ag Method of treating tendinopathy using interleukin-17 (il-17) antagonists
JP7747438B2 (ja) 2017-11-16 2025-10-01 アムジエン・インコーポレーテツド 失速及び終点検出を有するオートインジェクタ
CA3083949A1 (en) 2017-11-30 2020-06-06 Novartis Ag Bcma-targeting chimeric antigen receptor, and uses thereof
EP3756689A4 (en) 2018-02-22 2022-07-27 Tokai University Educational System INHIBITOR OF IL-17A ACTIVITY AND ITS USE
KR20200135781A (ko) 2018-03-26 2020-12-03 암젠 인크 세포 배양에서 생산된 항체의 총 비푸코실화 당형태
KR20210011919A (ko) 2018-04-17 2021-02-02 셀덱스 쎄라퓨틱스, 인크. 항-cd27 항체 및 항-pd-l1 항체 및 이중특이적 작제물
KR20250151605A (ko) 2018-06-01 2025-10-21 노파르티스 아게 Bcma에 대한 결합 분자 및 이의 용도
WO2020024931A1 (en) * 2018-07-31 2020-02-06 Shen Weiqun Anti-il-17a antibodies and use thereof
WO2020064702A1 (en) 2018-09-25 2020-04-02 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of antagonists of th17 cytokines for the treatment of bronchial remodeling in patients suffering from allergic asthma
EP3689907A1 (en) 2019-01-31 2020-08-05 Numab Therapeutics AG Antibodies targeting il-17a and methods of use thereof
IL320091A (en) 2019-01-31 2025-06-01 Numab Therapeutics AG Multispecific antibodies having specificity for tnfa and il-17a, antibodies targeting il-17a, and methods of use thereof
US11332546B2 (en) 2019-05-21 2022-05-17 The Regents Of The University Of California Protease inhibitory antibodies and methods of use thereof
WO2021050563A1 (en) * 2019-09-09 2021-03-18 The Rockefeller University Antibody treatment for lesional tissue of hidradenitis suppurativa
JP2022547678A (ja) * 2019-09-11 2022-11-15 ボシュ ヘルス アイルランド リミテッド Ｉｌ－１７ｒａ抗体を用いた非アルコール性脂肪性肝疾患（ｎａｆｌｄ）の治療方法
BR112022004941A2 (pt) 2019-09-20 2022-06-28 Novartis Ag Métodos para tratar doenças autoimunes com o uso de antagonistas de interleucina-17 (il-17)
JP7093940B2 (ja) 2019-09-25 2022-07-01 国立大学法人 東京大学 全身性強皮症治療用医薬組成物
MX2022003461A (es) 2019-09-26 2022-04-19 Amgen Inc Metodos de produccion de composiciones de anticuerpos.
US20220411500A1 (en) * 2019-11-18 2022-12-29 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Treatment of fibrosis with combined blockade of il-6 and immune checkpoint
WO2021247892A1 (en) 2020-06-04 2021-12-09 Amgen Inc. Assessment of cleaning procedures of a biotherapeutic manufacturing process
MX2023004364A (es) 2020-10-15 2023-05-03 Amgen Inc Glucanos no emparejados relativos en metodos de produccion de anticuerpos.
IL302569A (en) 2020-11-06 2023-07-01 Novartis Ag Cd19 binding molecules and uses thereof
AU2022289365A1 (en) 2021-06-07 2023-12-14 Amgen Inc. Using fucosidase to control afucosylation level of glycosylated proteins
AU2022353119A1 (en) * 2021-09-24 2024-04-11 Synergy Imt, Inc. Composition of recombinant antigen binding molecules and method of making and using thereof
AU2022361382A1 (en) 2021-10-05 2024-03-28 Amgen Inc. Fc-gamma receptor ii binding and glycan content
WO2023215725A1 (en) 2022-05-02 2023-11-09 Fred Hutchinson Cancer Center Compositions and methods for cellular immunotherapy
WO2023223211A1 (en) 2022-05-16 2023-11-23 Novartis Ag Methods of treating giant cell arteritis using interleukin-17 (il-17) antagonists
CA3257386A1 (en) 2022-05-18 2023-11-23 Novartis Ag METHOD FOR TREATING TENDINOPATHY USING INTERLEUKIN-17 (IL-17) ANTAGONISTS
AU2024256160A1 (en) 2023-04-20 2025-10-02 Amgen Inc. Methods of determining relative unpaired glycan content
WO2025038600A1 (en) 2023-08-14 2025-02-20 Amgen Inc. Methods for reducing yellow color
WO2025083549A1 (en) 2023-10-16 2025-04-24 Sun Pharma Advanced Research Company Limited Methods and combinations of inhibitors of il-23 pathway and modulators of s1p signaling pathway for the treatment of autoimmune disorders
WO2025101820A1 (en) 2023-11-08 2025-05-15 Fred Hutchinson Cancer Center Compositions and methods for cellular immunotherapy

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6072037A (en) * 1995-03-23 2000-06-06 Immunex Corporation Antibodies to the IL-17 receptor
US6793919B2 (en) * 2000-10-18 2004-09-21 Immunex Corporation Methods for treating rheumatoid arthritis using IL-17 antagonists
WO2006054059A1 (en) * 2004-11-19 2006-05-26 Ucb Pharma S.A. Neutralising antibody molecules having specificity for human il-17
WO2006088925A2 (en) * 2005-02-14 2006-08-24 Wyeth Use of il17-f in diagnosis and therapy of airway inflammation

Family Cites Families (166)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3197525A (en) * 1961-08-07 1965-07-27 Union Oil Co Clathration process
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US3691016A (en) 1970-04-17 1972-09-12 Monsanto Co Process for the preparation of insoluble enzymes
CA1023287A (en) 1972-12-08 1977-12-27 Boehringer Mannheim G.M.B.H. Process for the preparation of carrier-bound proteins
US4179337A (en) 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US4195128A (en) 1976-05-03 1980-03-25 Bayer Aktiengesellschaft Polymeric carrier bound ligands
US4330440A (en) 1977-02-08 1982-05-18 Development Finance Corporation Of New Zealand Activated matrix and method of activation
CA1093991A (en) 1977-02-17 1981-01-20 Hideo Hirohara Enzyme immobilization with pullulan gel
US4229537A (en) 1978-02-09 1980-10-21 New York University Preparation of trichloro-s-triazine activated supports for coupling ligands
US4263428A (en) 1978-03-24 1981-04-21 The Regents Of The University Of California Bis-anthracycline nucleic acid function inhibitors and improved method for administering the same
JPS6023084B2 (ja) 1979-07-11 1985-06-05 味の素株式会社 代用血液
IE52535B1 (en) 1981-02-16 1987-12-09 Ici Plc Continuous release pharmaceutical compositions
US4640835A (en) 1981-10-30 1987-02-03 Nippon Chemiphar Company, Ltd. Plasminogen activator derivatives
DE3374837D1 (en) 1982-02-17 1988-01-21 Ciba Geigy Ag Lipids in the aqueous phase
HUT35524A (en) 1983-08-02 1985-07-29 Hoechst Ag Process for preparing pharmaceutical compositions containing regulatory /regulative/ peptides providing for the retarded release of the active substance
DE3474511D1 (en) 1983-11-01 1988-11-17 Terumo Corp Pharmaceutical composition containing urokinase
US4496689A (en) 1983-12-27 1985-01-29 Miles Laboratories, Inc. Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer
US4751180A (en) 1985-03-28 1988-06-14 Chiron Corporation Expression using fused genes providing for protein product
EP0206448B1 (en) 1985-06-19 1990-11-14 Ajinomoto Co., Inc. Hemoglobin combined with a poly(alkylene oxide)
US4935233A (en) 1985-12-02 1990-06-19 G. D. Searle And Company Covalently linked polypeptide cell modulators
EP0272253A4 (en) 1986-03-07 1990-02-05 Massachusetts Inst Technology METHOD FOR IMPROVING GLYCOPROTE INSTABILITY.
US4791192A (en) 1986-06-26 1988-12-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified protein with polyethyleneglycol
US4946778A (en) 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
US5011912A (en) 1986-12-19 1991-04-30 Immunex Corporation Hybridoma and monoclonal antibody for use in an immunoaffinity purification system
IL98078A0 (en) 1991-05-07 1992-06-21 Yeda Res & Dev Pharmaceutical compositions comprising an anticytokyne
IL83878A (en) 1987-09-13 1995-07-31 Yeda Res & Dev Soluble protein corresponding to tnf inhibitory protein its preparation and pharmaceutical compositions containing it
US4965195A (en) 1987-10-26 1990-10-23 Immunex Corp. Interleukin-7
US5204244A (en) 1987-10-27 1993-04-20 Oncogen Production of chimeric antibodies by homologous recombination
US4968607A (en) 1987-11-25 1990-11-06 Immunex Corporation Interleukin-1 receptors
GB8807803D0 (en) 1988-03-31 1988-05-05 Glaxo Group Ltd Biochemical product
JPH02503867A (ja) 1988-04-15 1990-11-15 プロテイン　デザイン　ラブズ　インコーポレーテッド Ｉｌ‐２レセプター特異的キメラ抗体
US5075222A (en) 1988-05-27 1991-12-24 Synergen, Inc. Interleukin-1 inhibitors
IL94039A (en) 1989-08-06 2006-09-05 Yeda Res & Dev Antibodies to tbp - 1 and their use
AU643427B2 (en) 1988-10-31 1993-11-18 Immunex Corporation Interleukin-4 receptors
FI903489A0 (fi) 1988-11-11 1990-07-10 Medical Res Council Ligander med en enda sektion, receptorer innehaollande naemnda ligander, foerfaranden foer deras framstaellning samt anvaendning av liganderna och receptorerna.
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5116964A (en) 1989-02-23 1992-05-26 Genentech, Inc. Hybrid immunoglobulins
ATE289350T1 (de) 1989-04-21 2005-03-15 Amgen Inc Tnf-rezeptor, tnf bindende proteine und dafür kodierende dnas
DE3922089A1 (de) 1989-05-09 1990-12-13 Basf Ag Neue proteine und ihre herstellung
US6291158B1 (en) 1989-05-16 2001-09-18 Scripps Research Institute Method for tapping the immunological repertoire
ATE119942T1 (de) 1989-05-18 1995-04-15 Yeda Res & Dev Tumor-nekrosefaktor-bindungsprotein ii, seine reinigung und spezifische antikörper.
IL95031A (en) 1989-07-18 2007-03-08 Amgen Inc Method for the production of a human recombinant tumor necrosis factor inhibitor
US5683888A (en) 1989-07-22 1997-11-04 University Of Wales College Of Medicine Modified bioluminescent proteins and their use
US5703088A (en) 1989-08-21 1997-12-30 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Topical application of spiperone or derivatives thereof for treatment of pathological conditions associated with immune responses
AU630497B2 (en) 1989-09-05 1992-10-29 Immunex Corporation Tumor necrosis factor-alpha and -beta receptors
US5395760A (en) 1989-09-05 1995-03-07 Immunex Corporation DNA encoding tumor necrosis factor-α and -β receptors
DE10399023I2 (de) 1989-09-12 2006-11-23 Ahp Mfg B V TFN-bindende Proteine
JPH03127800A (ja) 1989-10-13 1991-05-30 Teijin Ltd 腫瘍壊死因子活性抑制物質
AU651955B2 (en) 1989-11-29 1994-08-11 Amgen, Inc. Production of recombinant human interleukin-1 inhibitor
AU642938B2 (en) 1989-12-13 1993-11-04 Yeda Research And Development Co. Ltd. Expression of the recombinant tumor necrosis factor binding protein 1 (TBP-1)
US5292658A (en) 1989-12-29 1994-03-08 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Boyd Graduate Studies Research Center Cloning and expressions of Renilla luciferase
ES2087997T3 (es) 1990-01-12 1996-08-01 Cell Genesys Inc Generacion de anticuerpos xenogenicos.
US6673986B1 (en) 1990-01-12 2004-01-06 Abgenix, Inc. Generation of xenogeneic antibodies
US5136021A (en) 1990-02-27 1992-08-04 Health Research, Inc. TNF-inhibitory protein and a method of production
US6552170B1 (en) 1990-04-06 2003-04-22 Amgen Inc. PEGylation reagents and compounds formed therewith
US6458360B1 (en) 1990-04-25 2002-10-01 The Johns Hopkins University Soluble complement regulatory molecules
DE4013159A1 (de) 1990-04-25 1991-10-31 Bosch Gmbh Robert Gehaeuseblock fuer ein hydraulisches bremssystem
WO1991017184A1 (en) 1990-04-27 1991-11-14 The Upjohn Company Modified interleukin-1 inhibitors
GB2243569A (en) 1990-05-02 1991-11-06 Andrew Langdon Brush with timer
AU651596B2 (en) 1990-06-05 1994-07-28 Immunex Corporation Type II interleukin-1 receptors
GB2246569A (en) 1990-06-15 1992-02-05 Charing Cross Sunley Research Tumour necrosis factor - alpha binding protein
DK0835939T3 (da) 1990-06-28 2006-03-13 Sanofi Aventis Deutschland Fusionsproteiner med andele af immunglobulin, deres fremstilling og anvendelse
US6172197B1 (en) 1991-07-10 2001-01-09 Medical Research Council Methods for producing members of specific binding pairs
WO1992001002A1 (en) 1990-07-11 1992-01-23 Teijin Limited Tumor necrosis factor activity inhibitor and production thereof
US5858355A (en) 1990-12-20 1999-01-12 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education IRAP gene as treatment for arthritis
CA2100329C (en) 1991-01-18 2009-09-29 David F. Carmichael Methods for treating tumor necrosis factor mediated diseases
JP3126980B2 (ja) 1991-03-11 2001-01-22 ザ・ユニバーシテイ・オブ・ジヨージア・リサーチ・フアウンデーシヨン・インコーポレーテツド レニラ（ｒｅｎｉｌｌａ）ルシフェラーゼのクローニング及び発現
US6565841B1 (en) 1991-03-15 2003-05-20 Amgen, Inc. Pulmonary administration of granulocyte colony stimulating factor
DE69233069T2 (de) 1991-03-15 2003-11-27 Amgen Inc., Thousand Oaks Pegylation von polypeptiden
IL99120A0 (en) 1991-08-07 1992-07-15 Yeda Res & Dev Multimers of the soluble forms of tnf receptors,their preparation and pharmaceutical compositions containing them
WO1993007863A1 (en) 1991-10-15 1993-04-29 Mullarkey Michael F Methods and compositions for treating allergic reactions
US5716805A (en) 1991-10-25 1998-02-10 Immunex Corporation Methods of preparing soluble, oligomeric proteins
US5262522A (en) 1991-11-22 1993-11-16 Immunex Corporation Receptor for oncostatin M and leukemia inhibitory factor
JPH07501451A (ja) 1991-11-25 1995-02-16 エンゾン・インコーポレイテッド 多価抗原結合タンパク質
ATE463573T1 (de) 1991-12-02 2010-04-15 Medimmune Ltd Herstellung von autoantikörpern auf phagenoberflächen ausgehend von antikörpersegmentbibliotheken
US5470582A (en) 1992-02-07 1995-11-28 Syntex (U.S.A.) Inc. Controlled delivery of pharmaceuticals from preformed porous polymeric microparticles
AU671116B2 (en) 1992-03-30 1996-08-15 Immunex Corporation Fusion proteins comprising tumor necrosis factor receptor
JPH07509223A (ja) 1992-04-30 1995-10-12 アムジェン インコーポレイテッド インターロイキン−１媒介疾患および腫瘍壊死因子媒介疾患の治療方法
JPH05312248A (ja) 1992-05-08 1993-11-22 Nissan Motor Co Ltd シフトレバー装置
DE4219626A1 (de) 1992-06-16 1993-12-23 Wehling Peter Priv Doz Dr Med Methode zur Einschleusung therapeutisch relevanter Gene in Körperzellen
JPH07504203A (ja) 1992-09-15 1995-05-11 イミュネックス・コーポレーション 腫瘍壊死因子アンタゴニストを用いるｔｎｆ−依存性炎症の治療方法
NZ256328A (en) 1992-09-17 1997-06-24 Amgen Boulder Inc Pharmaceutical compositions of interleukin-1 inhibitor and non-ionic surfactant or viscosity enhancer
WO1994010308A1 (en) 1992-10-23 1994-05-11 Immunex Corporation Methods of preparing soluble, oligomeric proteins
DK0672142T3 (da) 1992-12-04 2001-06-18 Medical Res Council Multivalente og multispecifikke bindingsproteiner samt fremstilling og anvendelse af disse
JPH08511507A (ja) 1993-03-08 1996-12-03 ユニバーシティー オブ ピッツバーグ オブ ザ コモンウェルス システム オブ ハイヤー エデュケーション 哺乳動物宿主の結合組織を処置するための遺伝子導入
EP0689449B1 (fr) 1993-03-19 2002-10-30 Vacsyn S.A. Compositions pour l'application en therapeutique humaine, caracterisees par l'association d'un muramyl-peptide a une cytokine
US6326353B1 (en) 1993-03-23 2001-12-04 Sequus Pharmaceuticals, Inc. Enhanced circulation effector composition and method
US6562333B1 (en) 1993-06-14 2003-05-13 Schering Corporation Purified mammalian CTLA-8 antigens and related reagents
FR2706772A1 (en) 1993-06-22 1994-12-30 Vacsyn Sa Prevention and treatment of septic syndrome with an immunosuppressant, in particular cyclosporin.
US5457035A (en) 1993-07-23 1995-10-10 Immunex Corporation Cytokine which is a ligand for OX40
AU694745B2 (en) 1993-09-10 1998-07-30 Trustees Of Columbia University In The City Of New York, The Uses of green fluorescent protein
WO1995021191A1 (en) 1994-02-04 1995-08-10 William Ward Bioluminescent indicator based upon the expression of a gene for a modified green-fluorescent protein
US5695941A (en) * 1994-06-22 1997-12-09 The General Hospital Corporation Interaction trap systems for analysis of protein networks
US5777079A (en) 1994-11-10 1998-07-07 The Regents Of The University Of California Modified green fluorescent proteins
US6680057B1 (en) 1995-03-23 2004-01-20 Immunex Corporation Methods of treating autoimmune disease by administering interleukin-17 receptor
EP0839196B1 (en) 1995-07-19 2005-05-11 Genetics Institute, LLC Human ctla-8 and uses of ctla-8-related proteins
US6074849A (en) 1995-07-19 2000-06-13 Genetics Institute, Inc. Polynucleotides encoding human CTLA-8 related proteins
US6267958B1 (en) 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
US5874304A (en) 1996-01-18 1999-02-23 University Of Florida Research Foundation, Inc. Humanized green fluorescent protein genes and methods
US5804387A (en) 1996-02-01 1998-09-08 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University FACS-optimized mutants of the green fluorescent protein (GFP)
US5876995A (en) 1996-02-06 1999-03-02 Bryan; Bruce Bioluminescent novelty items
DE69739656D1 (de) 1996-02-09 2009-12-31 Amgen Inc 1 inhibitor und hyaluronan als polymer mit verzögerter wirkstofffreigabe
TW555765B (en) 1996-07-09 2003-10-01 Amgen Inc Low molecular weight soluble tumor necrosis factor type-I and type-II proteins
US5925558A (en) 1996-07-16 1999-07-20 The Regents Of The University Of California Assays for protein kinases using fluorescent protein substrates
US6406867B1 (en) 1996-08-16 2002-06-18 Human Genome Sciences, Inc. Antibody to human endokine alpha and methods of use
US5976796A (en) 1996-10-04 1999-11-02 Loma Linda University Construction and expression of renilla luciferase and green fluorescent protein fusion genes
US5891885A (en) * 1996-10-09 1999-04-06 Algos Pharmaceutical Corporation Method for treating migraine
DE69739375D1 (de) 1996-11-27 2009-06-04 Immunex Corp Verfahren zur regulierung der stickstoffmonoxid-erzeugung
EP2305027B1 (en) 1996-12-03 2014-07-02 Amgen Fremont Inc. Transgenic mammals having human Ig loci including plural VH and Vkappa regions and antibodies produced therefrom
US6458547B1 (en) 1996-12-12 2002-10-01 Prolume, Ltd. Apparatus and method for detecting and identifying infectious agents
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
US6482923B1 (en) 1997-09-17 2002-11-19 Human Genome Sciences, Inc. Interleukin 17-like receptor protein
AU9482498A (en) 1997-09-17 1999-04-05 Human Genome Sciences, Inc. Interleukin-17 receptor-like protein
GB9722131D0 (en) 1997-10-20 1997-12-17 Medical Res Council Method
EP1064360B1 (en) 1998-03-27 2008-03-05 Prolume, Ltd. Luciferases, gfp fluorescent proteins, their nucleic acids and the use thereof in diagnostics
JP3577586B2 (ja) 1998-05-15 2004-10-13 ジェネンテック・インコーポレーテッド Ｉｌ−１７相同的ポリペプチドとその治療用途
US6833268B1 (en) 1999-06-10 2004-12-21 Abgenix, Inc. Transgenic animals for producing specific isotypes of human antibodies via non-cognate switch regions
US6144598A (en) * 1999-07-06 2000-11-07 Micron Technology, Inc. Method and apparatus for efficiently testing rambus memory devices
ATE464062T1 (de) 1999-10-04 2010-04-15 Novartis Vaccines & Diagnostic Stabilisierte flüssige pharmazeutische zusammensetzung enthaltend tfpi
JP2003526370A (ja) 2000-03-16 2003-09-09 アムジェン インコーポレーテッド Ｉｌ−１７レセプター様分子およびその使用
TWI322154B (en) 2000-03-16 2010-03-21 Amgen Inc Il-17 receptor like molecules and uses thereof
US20030180255A1 (en) 2000-08-24 2003-09-25 Genentech, Inc. IL-17 homologous polypeptides and therapeutic uses thereof
CA2447851C (en) 2001-06-28 2012-08-28 Domantis Limited Dual-specific ligand and its use
PL215168B1 (pl) 2002-02-27 2013-10-31 Immunex Corp Formulacja polipeptydowa
DE10228103A1 (de) 2002-06-24 2004-01-15 Bayer Cropscience Ag Fungizide Wirkstoffkombinationen
WO2004002519A1 (en) 2002-06-27 2004-01-08 Smithkline Beecham Corporation Methods of treating or preventing ibd with il-18
EP1517921B1 (en) 2002-06-28 2006-06-07 Domantis Limited Dual specific ligands with increased serum half-life
US20050282833A1 (en) * 2002-08-09 2005-12-22 Zehra Rowjee Pharmacological treatment of psoriasis
EP1578801A2 (en) 2002-12-27 2005-09-28 Domantis Limited Dual specific single domain antibodies specific for a ligand and for the receptor of the ligand
US7563748B2 (en) 2003-06-23 2009-07-21 Cognis Ip Management Gmbh Alcohol alkoxylate carriers for pesticide active ingredients
DE10333317A1 (de) 2003-07-22 2005-02-17 Biotecon Therapeutics Gmbh Formulierung für Proteinarzneimittel ohne Zusatz von humanem Serumalbumin (HSA)
JP2007501252A (ja) 2003-08-05 2007-01-25 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー 免疫応答調整剤を含有する製剤
EP1678195A4 (en) * 2003-10-08 2008-04-23 The Feinstein Inst Medical Res METHOD AND COMPOSITIONS FOR DIAGNOSIS AND TREATMENT OF CHRONIC LYMPHOCYTIC B-CELL LEUKEMIA
US20070184050A1 (en) 2003-12-25 2007-08-09 Kirin Beer Kabushiki Kaisha Stable water-based medicinal preparation containing antibody
IL159670A0 (en) 2003-12-31 2004-06-01 Yeda Res & Dev Use of il-18 binding protein in inflammations
KR20070008578A (ko) * 2004-02-02 2007-01-17 타녹스 인코퍼레이티드 신규한 ＩｇＥ 에피토프의 확인
RU2346996C2 (ru) 2004-06-29 2009-02-20 ЮРОПИЭН НИКЕЛЬ ПиЭлСи Усовершенствованное выщелачивание основных металлов
US20090007475A1 (en) 2004-12-16 2009-01-08 Pollock Linda R Tool and Method for Organizing a Vertically Stacked Pile of Items
ES2776657T3 (es) 2005-06-14 2020-07-31 Amgen Inc Formulaciones de proteínas autotamponantes
JP2009503105A (ja) 2005-08-03 2009-01-29 イミュノジェン・インコーポレーテッド 免疫複合体製剤
AU2006295340B2 (en) 2005-08-05 2010-11-11 Amgen Inc. Stable aqueous protein or antibody pharmaceutical formulations and their preparation
EP2322219A3 (en) 2005-09-01 2013-06-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Use of IL-23 and IL-17 antagonists to treat autoimmune ocular inflammatory disease
CA2624763A1 (en) 2005-10-18 2007-04-26 Zymogenetics, Inc. Il-17c antagonists and methods of using the same
UA97234C2 (ru) 2005-11-01 2012-01-25 Уайєт Раствор хлорида натрия для восстановления влагосодержания композиции лиофилизированного фактора ix
EP1977763A4 (en) 2005-12-28 2010-06-02 Chugai Pharmaceutical Co Ltd ANTIBODY-CONTAINING STABILIZING PREPARATION
AU2007212147A1 (en) 2006-02-03 2007-08-16 Medimmune, Llc Protein formulations
US7833527B2 (en) * 2006-10-02 2010-11-16 Amgen Inc. Methods of treating psoriasis using IL-17 Receptor A antibodies
CA2666842A1 (en) 2006-10-18 2008-04-24 Zymogenetics, Inc. Il-17c antagonists and methods of using the same
FR2910324B1 (fr) 2006-12-21 2009-03-06 Biomerieux Sa Nouveau medicament pour le traitement d'un cancer gastrique
CA2672902C (en) 2006-12-21 2012-11-27 Amgen Inc. Formulations
GB0700523D0 (en) 2007-01-11 2007-02-21 Insense Ltd The Stabilisation Of Proteins
US7790676B2 (en) 2007-03-28 2010-09-07 Zymogenetics, Inc. Soluble IL-17RA/RC fusion proteins
EP2170958A1 (en) 2007-06-13 2010-04-07 Amgen Inc. Il-17 heteromeric receptor complex
US20110014676A1 (en) 2007-06-29 2011-01-20 Battelle Memorial Institute Protein stabilization
AU2008289225A1 (en) 2007-08-17 2009-02-26 Amgen Inc. Formulations of antibodies and Fc-fusion molecules using polycations
CN104151428B (zh) 2008-02-21 2017-07-14 麒麟-安姆根有限公司 Il‑17ra‑il‑17rb拮抗物及其用途
US20130064788A1 (en) 2009-10-10 2013-03-14 Eleven Biotherapeutics, Inc. Il-17 family cytokine compositions and uses
TW201117824A (en) 2009-10-12 2011-06-01 Amgen Inc Use of IL-17 receptor a antigen binding proteins
EA031209B9 (ru) 2010-01-15 2021-11-19 Кирин-Эмджен, Инк. Фармацевтический состав антитела для лечения воспалительного заболевания и способы его применения
PT2625199T (pt) 2010-10-08 2018-02-28 Novartis Ag Métodos de tratamento de psoríase usando antagonistas de il-17
EP3214442A1 (en) 2010-10-25 2017-09-06 F. Hoffmann-La Roche AG Treatment of gastrointestinal inflammation and psoriasis and asthmainflammation and psoriasis a
WO2013016220A1 (en) 2011-07-22 2013-01-31 Amgen Inc. Il-17 receptor a is required for il-17c biology
US9413463B2 (en) 2013-08-30 2016-08-09 Google Inc. Apparatus and method for efficient two-way optical communication where transmitter may interfere with receiver
US9209965B2 (en) 2014-01-14 2015-12-08 Microsemi Semiconductor Ulc Network interface with clock recovery module on line card
MY184189A (en) 2014-03-31 2021-03-24 Amgen K A Inc Methods of treating nail and scalp psoriasis
WO2016031250A1 (en) 2014-08-26 2016-03-03 Kirin-Amgen, Inc. Method for treating psoriasis patient which received anti-tnf-alpha antibody therapy

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6072037A (en) * 1995-03-23 2000-06-06 Immunex Corporation Antibodies to the IL-17 receptor
US6793919B2 (en) * 2000-10-18 2004-09-21 Immunex Corporation Methods for treating rheumatoid arthritis using IL-17 antagonists
WO2006054059A1 (en) * 2004-11-19 2006-05-26 Ucb Pharma S.A. Neutralising antibody molecules having specificity for human il-17
WO2006088925A2 (en) * 2005-02-14 2006-08-24 Wyeth Use of il17-f in diagnosis and therapy of airway inflammation

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Monoclonal Anti-human IL-17 R Antibody", 2 April 2004 (2004-04-02), R&D SYTEMS, XP002486817, Retrieved from the Internet: URL:http://www.rndsystems.com>[retrieved on 2008-07-03], the whole document *
GAFFEN SARAH L. ET AL.: "The IL-17 cytokine family", VITAMINS AND HORMONES, ACADEMIC PRESS, NEW YORK, NY, US, 1 January 2006 (2006-01-01), pages 255-282, XP009086501, ISSN: 0083-6729, the whole document *
KOLLS J.K. ЕТ AL.: "INTERLEUKIN-17 FAMILY MEMBERS AND INFLAMMATION", IMMUNITY, CELL PRESS, US, vol. 21, no. 4, 1 October 2004 (2004-10-01), pages 467-476, XP001205649, ISSN: 1074-7613, the whole document *
MCALLISTER F. ET AL.: "Role of IL-17A, IL-17F and the IL-17 receptor in regulating growth-related oncogene-a and granulocyte colony-stimulating factor in bronchial epithelium: Implications for airway inflammation in cystic fibrosis", JOURNAL OF IMMUNOLOGY, THE WILLIAMS AND WILKINS CO. BALTIMORE, vol. 175, no. 1, 1 July 2005 (2005-07-01), pages 404-412, XP002387883, ISSN: 0022-1767, cited in the application, page 405, left-hand column, last paragraph - page 406, left-hand column, last paragraph *
YAO Z. ET AL.: "MOLECULAR CHARACTERIZATION OF THE HUMAN INTERLEUKIN (IL)-17 RECEPTOR", CYTOKINE, ACADEMIC PRESS LTD., PHILADELPHIA, PA, US, vol. 9, no. 11, 1 November 1997 (1997-11-01), pages 794-800, XP000867704, ISSN: 1043-4666, cited in the application, page 797, right-hand column, last paragraph - page 798, right-hand column, paragraph 1 page 799, left-hand column, paragraph 2 *

Also Published As

Publication number Publication date
SI3165539T1 (sl) 2022-05-31
US7833527B2 (en) 2010-11-16
US20100292442A1 (en) 2010-11-18
IL197636A0 (en) 2011-08-01
IL197636B (en) 2018-02-28
CY1118845T1 (el) 2018-01-10
AU2007314519C1 (en) 2013-06-06
EP2518085A1 (en) 2012-10-31
US20080219979A1 (en) 2008-09-11
DK2487188T3 (en) 2017-06-19
AR063090A1 (es) 2008-12-23
EP2076541B1 (en) 2015-02-18
PE20081625A1 (es) 2009-01-11
US20110081339A1 (en) 2011-04-07
LT2487188T (lt) 2017-05-10
US9073999B2 (en) 2015-07-07
IL251908A0 (en) 2017-06-29
JP2010505416A (ja) 2010-02-25
US20160251443A1 (en) 2016-09-01
CN103214576B (zh) 2015-06-03
CY1125133T1 (el) 2023-06-09
DK3165539T3 (en) 2022-02-14
US20110166331A1 (en) 2011-07-07
AU2010219370C1 (en) 2013-05-23
NO344867B1 (no) 2020-06-08
CY2018001I1 (el) 2018-09-05
DK2076541T3 (en) 2015-03-30
LTC2076541I2 (lt) 2018-09-10
NO2020036I1 (no) 2020-10-28
US20100028345A1 (en) 2010-02-04
LUC00056I2 (ru) 2018-02-21
CY2018001I2 (el) 2018-09-05
KR20120098953A (ko) 2012-09-05
US20200362045A1 (en) 2020-11-19
PL2076541T3 (pl) 2015-07-31
US11180564B2 (en) 2021-11-23
CY1116291T1 (el) 2017-02-08
US20140356355A1 (en) 2014-12-04
CA2663537C (en) 2015-02-24
ES2906774T3 (es) 2022-04-20
ES2616210T3 (es) 2017-06-09
US7939070B2 (en) 2011-05-10
BRPI0719762A2 (pt) 2014-01-28
US20240294652A1 (en) 2024-09-05
US7767206B2 (en) 2010-08-03
IL228672A0 (en) 2013-12-31
BRPI0719762B8 (pt) 2021-05-25
NL300919I2 (nl) 2018-04-11
EP2487188A3 (en) 2012-10-31
LT3165539T (lt) 2022-04-11
SI2487188T1 (sl) 2017-07-31
TW200821326A (en) 2008-05-16
AU2010219370B2 (en) 2011-01-27
US11858999B2 (en) 2024-01-02
PT3165539T (pt) 2022-03-18
AU2007314519A1 (en) 2008-05-08
EA200900514A1 (ru) 2009-10-30
US20200017591A1 (en) 2020-01-16
US20080221307A1 (en) 2008-09-11
US20110008841A1 (en) 2011-01-13
PL2518085T3 (pl) 2017-08-31
CY1118994T1 (el) 2018-01-10
US9096673B2 (en) 2015-08-04
SI2076541T1 (sl) 2015-05-29
EP3165539A1 (en) 2017-05-10
PT2076541E (pt) 2015-03-31
SI2518085T1 (sl) 2017-05-31
KR20090088870A (ko) 2009-08-20
PT2518085T (pt) 2017-03-13
HUE057611T2 (hu) 2022-05-28
US8790648B2 (en) 2014-07-29
AU2010219370A1 (en) 2010-09-30
US8545842B2 (en) 2013-10-01
PL2487188T3 (pl) 2017-09-29
US8435518B2 (en) 2013-05-07
BRPI0719762B1 (pt) 2019-08-20
CA2663537A1 (en) 2008-05-08
US20090074758A1 (en) 2009-03-19
EP2487188B1 (en) 2017-03-08
CL2007002800A1 (es) 2008-05-23
CN103214576A (zh) 2013-07-24
PL3165539T3 (pl) 2022-04-25
ES2533352T3 (es) 2015-04-09
PE20120832A1 (es) 2012-08-11
IL228672A (en) 2017-11-30
NZ575631A (en) 2012-04-27
AU2007314519B2 (en) 2012-08-16
MX2009003511A (es) 2009-06-26
HUS1800005I1 (hu) 2018-07-30
US20120251547A1 (en) 2012-10-04
EP2076541A2 (en) 2009-07-08
LTPA2018003I1 (lt) 2018-02-12
US7786284B2 (en) 2010-08-31
CR10760A (es) 2009-05-27
LT2518085T (lt) 2017-05-10
EP2518085B1 (en) 2016-12-07
WO2008054603A2 (en) 2008-05-08
HUE033216T2 (hu) 2017-11-28
EP2487188A2 (en) 2012-08-15
US10208122B2 (en) 2019-02-19
WO2008054603A9 (en) 2008-07-03
EP3165539B1 (en) 2021-12-08
PT2487188T (pt) 2017-05-04
MY187263A (en) 2021-09-16
TWI396694B (zh) 2013-05-21
JP5013383B2 (ja) 2012-08-29
HUE032421T2 (en) 2017-09-28
DK2518085T3 (en) 2017-02-13
LUC00056I1 (ru) 2017-12-20
US20080220479A1 (en) 2008-09-11
ES2624921T3 (es) 2017-07-18
NO20091736L (no) 2009-06-30
WO2008054603A3 (en) 2008-09-25
KR101240903B1 (ko) 2013-03-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA019397B1 (ru) Антигенсвязывающие белки il-17 рецептора а
EP2632951B1 (en) Dkk1 antibodies and methods of use
JP5926162B2 (ja) 炎症傷害の処置および評価
ES2895824T3 (es) Proteínas de enlace al antígeno del receptor de oncastatina M
WO2018081074A1 (en) Neutralizing anti-tl1a monoclonal antibodies
EA018756B1 (ru) Антитела к склеростину, композиции, их содержащие, и их применение
EA030436B1 (ru) АНТИТЕЛА К IL-23p19 ИЛИ ИХ АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЕ ФРАГМЕНТЫ, ИХ ПРИМЕНЕНИЕ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ ЭТИ АНТИТЕЛА, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ, ВЫДЕЛЕННЫЕ ПОЛИНУКЛЕОТИДЫ, ЭКСПРЕССИОННЫЕ ВЕКТОРЫ И КЛЕТКИ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИТЕЛ
EA016783B1 (ru) Антигенсвязывающие белки для il-18 рецептора и их применение
EA015589B1 (ru) Антитела против миостатина и их применение
EA027071B1 (ru) АНТИТЕЛО К ActRIIB И СОДЕРЖАЩАЯ ЕГО КОМПОЗИЦИЯ
JP2008544960A5 (ru)
EA015534B1 (ru) Антитела к миостатину и способы их применения
EA023555B1 (ru) АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЕ БЕЛКИ, СВЯЗЫВАЮЩИЕ c-fms ЧЕЛОВЕКА
EA027900B1 (ru) Связывающие антиген cd27l белки
KR102701695B1 (ko) 항-dkk-1 항체를 사용하여 암을 치료하기 위한 바이오마커로서의 베타-카테닌의 용도
UA123773C2 (uk) ВИДІЛЕНЕ АНТИТІЛО ПРОТИ HtrA1 ТА ЙОГО ЗАСТОСУВАННЯ ПРИ ЛІКУВАННІ ПОВ&#39;ЯЗАНОГО З HtrA1 ПОРУШЕННЯ АБО ХВОРОБИ ОКА
CN101541833B (zh) Il-17受体a抗原结合蛋白质
JP2007514414A (ja) ｃ−Ｒｅｌ依存性サイトカイン産生を調節する組成物及び方法
HK40072994B (en) Oncostatin m receptor antigen binding proteins
HK1135411B (en) Il-17 receptor a antigen binding proteins
HK1135411A (en) Il-17 receptor a antigen binding proteins
HK1203980A1 (en) Il-17ra-il-17rb antagonists and uses thereof

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): KZ