DE3382782T2 - Markierte modifizierte Nukleotide und Polynukleotide und Verfahren zu deren Herstellung, Verwendung und Detektion. - Google Patents

Markierte modifizierte Nukleotide und Polynukleotide und Verfahren zu deren Herstellung, Verwendung und Detektion.

Info

Publication number
DE3382782T2
DE3382782T2 DE3382782T DE3382782T DE3382782T2 DE 3382782 T2 DE3382782 T2 DE 3382782T2 DE 3382782 T DE3382782 T DE 3382782T DE 3382782 T DE3382782 T DE 3382782T DE 3382782 T2 DE3382782 T2 DE 3382782T2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
moiety
nucleotide
ion
sig
item
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
DE3382782T
Other languages
English (en)
Other versions
DE3382782D1 (de
Inventor
Dean Engelhardt
Dollie Kirtikar
Stanley Kline
Elazar Rabbani
Jannis G Stavrianopoulos
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Enzo Biochem Inc
Original Assignee
Enzo Biochem Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=23546604&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=DE3382782(T2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Enzo Biochem Inc filed Critical Enzo Biochem Inc
Application granted granted Critical
Publication of DE3382782D1 publication Critical patent/DE3382782D1/de
Publication of DE3382782T2 publication Critical patent/DE3382782T2/de
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B59/00—Introduction of isotopes of elements into organic compounds ; Labelled organic compounds per se
    • C07B59/008—Peptides; Proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K17/00—Carrier-bound or immobilised peptides; Preparation thereof
    • C07K17/02—Peptides being immobilised on, or in, an organic carrier
    • C07K17/06—Peptides being immobilised on, or in, an organic carrier attached to the carrier via a bridging agent
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6804—Nucleic acid analysis using immunogens

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Analysing Materials By The Use Of Radiation (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Description

  • Die Herstellung von Nucleotiden und Polynucleotiden, die radioaktiv markiert sind, z.B. mit Isotopen oder Wasserstoff (³H), Phosphor (³²P), Kohlenstoff (¹&sup4;C) oder Iod (¹²&sup5;I), ist bekannt. Solche radioaktiv markierten Verbindungen sind nützlich, um Nucleinsäuren und andere Moleküle von wissenschaftlichem oder klinischem Interesse nachzuweisen, zu überwachen, zu lokalisieren und zu isolieren. Unglücklicherweise jedoch birgt die Verwendung von radioaktiv markierten Substanzen wegen der Strahlung Risiken. Auch wegen der verhältnismäßig kurzen Halbwertszeit der radioaktiven Substanzen, die zur Markierung solcher Verbindungen oder Substanzen eingesetzt werden, weisen die so erhaltenen markierten Verbindungen oder Substanzen eine entsprechende verhältnismäßig kurze Haltbarkeit auf.
  • Es wurde vorgeschlagen, Verbindungen von Interesse, wie Nucleotide und Polynucleotide, chemisch zu markieren, so daß die Risiken und Schwierigkeiten überwunden oder vermieden werden, die mit der radioaktiven Markierung solcher Verbindungen oder Substanzen verbunden sind. In dem Artikel von P.R. Langer, A.A. Waldrop und D.C. Ward, mit dem Titel "Enzymatic Synthesis of Biotin-Labeled Polynucleotides: Novel Nucleic Acid Affinity Probes", in Proc. Natl. Acad. Sci. (USA), Bd. 78, Nr. 11 (November 1981), 6633-6637, werden Analoge von dUTP und UTP beschrieben, die ein Biotin-Molekül enthalten, das über eine Alkylamin-Brücke an die C&sup5;-Position des Pyrimidinrings gebunden ist. Biotin-markierte Nucleotide sind in vitro für eine Vielzahl von DNA- und RNA-Polymerasen wirksame Substrate. Polynucleotide, die einen geringen Grad an Biotin- Substitution aufweisen (50 Moleküle oder weniger pro Kilobase), weisen ähnliche Denaturierungs-, Reassoziations- und Hybridisierungseigenschaften auf wie unsubstituierte Kontrollen. Biotin-markierte Polynucleotide, sowohl einzel- als auch doppelsträngig, werden selektiv und quantitativ auf Avidin- Sepharose zurückgehalten, sogar nach gründlichem Waschen mit 8 M Harnstoff, 6 M Guanidinhydrochlorid oder 99%igem Formamid. Ergänzend hierzu können Biotin-markierte Nucleotide in Gegenwart eines Antibiotin-Antikörpers und Protein A von Staphylococcus aureus immunpräzipitiert werden. Diese einzigartigen Merkmale Biotin-markierter Polynucleotide legen nahe, daß sie nützliche Affinitätssonden zum Nachweis und zur Isolierung von spezifischen DNA- und RNA-Sequenzen sind.
  • Der Gegenstand des Artikels ist in der EP-A2-0063879 umfaßt, in der zusätzlich offenbart ist, daß die Verbindungen die Struktur aufweisen:
  • in der B eine Purin-, Deazapurin- oder Pyrimidineinheit darstellt, die kovalent an die C1'-Position der Zuckereinheit gebunden ist, mit der Maßgabe, daß, wenn B ein Purin oder 7-Deazapurin ist, diese an die N&sup9;-Position des Purins oder Deazapurins gebunden ist, und wenn B ein Pyrimidin ist, es an die N¹-Position gebunden ist;
  • in der A eine Einheit darstellt, die aus mindestens drei Kohlenstoffatomen besteht, die einen nachweisbaren Komplex mit einem Polypeptid bilden können, wenn die Verbindung in eine doppelsträngige Ribonucleinsäure, einen Desoxyribonucleinsäureduplex oder ein DNA-RNA-Hybrid eingebaut ist;
  • in der die gestrichelte Linie eine chemische Bindung darstellt, die B und A miteinander verbindet, mit der Maßgabe, daß, wenn B ein Purin ist, die Bindung an der 8-Position des Purins erfolgt, wenn B ein 7-Deazapurin ist, die Bindung an der 7-Position des Deazapurins erfolgt, und wenn B ein Pyrimidin ist, die Bindung an der 5-Position des Pyrimidins erfolgt; und
  • in der x, y und z jeweils
  • darstellen, entweder direkt, oder wenn in Oligo- und Polynucleotide eingebaut, Sonden bereitstellen, die vielseitig verwendbar sind.
  • Die in der EP-A2-0063879 offenbarten Anwendungen umfassen den Nachweis und die Lokalisierung von Polynucleotidsequenzen in Chromosomen, fixierten Zellen, Gewebeschnitten und Zellextrakten. Spezifische Anwendungen umfassen die chromosomale Karyotypisierung, klinische Diagnose von Nucleinsäureenthaltenden Krankheitserregern, z.B. Bakterien, Viren oder Pilze, und die Diagnose von genetisciien Störungen.
  • Ergänzend zur Verwendung der Biotin-Polynucleotide des vorstehend aufgeführten Artikels von Langer et al. in Proc. Natl. Acad. Sci. (USA), beschreibt die Veröffentlichung von P.R. Langer-Safer, M. Levine und D.C. Ward in Genetics, mit dem Titel "An Immunological Method for Mapping Genes on Drosophila Polytene Chromosomes" ein Verfahren, das biotinierte Nucleotide als eine Sonde zur Lokalisierung von DNA-Sequenzen einsetzt, die in situ an Polytänchromosomen von Drosophila hybridisieren. Bei dieser Anwendung werden diese Sonden unter Verwendung eines Affinität-gereinigten Kaninchen-Antibiotin- Antikörpers als Primärantikörper und eines Fluorescein-markierten Ziegen-Antikaninchen-Antikörpers als Sekundärantikörper nachgewiesen.
  • Andere Techniken, in denen Biotin-markierte Reagenzien mit Avidin oder Enzym-markierten Avidin-Reagenzien verwendet werden, sind für den Nachweis und die Bestimmung von Liganden in einem Flüssigmedium bekannt, vgl. US-Patent 4,228,237. Es ist auch eine wirksame Genanreicherung basierend auf Avidin- Biotin-Wechselwirkungen bekannt, insbesondere wie sie bei ribosomalen RNA-Genen von Drosophila angewendet wird, vgl. die Veröffentlichung von J. Manning, M. Pellegrini und N. Davidson in Biochemistry, Bd. 16, Nr. 7 (1977), 1364-1369. Andere Veröffentlichungen, die in Hinsicht auf die erfindungsgemäßen Verfahren einen interessanten Hintergrund bieten, umfassen den Artikel von D.J. Eckermann und R.H. Symons mit dem Titel "Sequence at the Site of Attachment of an Affinity-Label Derivate of Puromycin on 23-S Ribosomal RNA of Escherichia coli Ribosomes", J. Biochem 82 (1978), 225-234; den Artikel von S.B. Zimmermann, S.R. Kornberg und A. Kornberg mit dem Titel "Glucosylation of Deoxyribonucleic Acid-II-Glucosyl Transferases from T2- und T6-Infected Escherichia coli", in The Journal of Biological Chemistry, Bd. 237, Nr. 2, Februar 1962, und der Artikel von J. Josse und A. Kornberg "III. α- and β-Glucosyl Transferases from T4-Infected Escherichia coli", ebenfalls erschienen in The Journal of Biological Chemistry, Bd. 237, Nr. 6, Juni 1962.
  • Von weiterem Interesse in Verbindung mit den erfindungsgemäßen Verfahren sind die in J. Biol. Chem., Bd. 236, Nr. 5, Mai 1961, 1487-1493; gleiche Zeitschrift, Bd. 237, Nr. 4 (1962), 1251-1259; gleiche Zeitschrift, Bd. 239, Nr. 9 (1964), 2957-2963, erschienenen Veröffentlichungen. Von besonderem Interesse ist der in The Journal of Histochemistry and Cytochemistry, Bd. 27, Nr. 8 (1979), 1131-1139, und in Nucleic Acids Research, Bd. 5, Nr. 9 (1977), 2961-2973, erschienene Artikel. Ebenfalls von Interesse ist der in Biochimica et Biophysica Acta erschienene Artikel von A. De Waard, mit dem Titel "Specificity Difference Between the Hydroxymethylcytosine β-Glucosyl-Transferases Induced by Bacteriophages T2, T4 und T6", 286-304, und auch der Artikel von T.W. North und C.K. Mathews, mit dem Titel "T4 Phage-Coded Deoxycytidylate Hydroxymethylase: Purification and Studies in Intermolecular Interactions", veröffentlicht durch Academic Press, 1977, 898- 904, und der Artikel von E.A. Bayer und M. Wilchek, mit dem Titel "The Use of Avidin-Biotin Complex as a Tool in Molecular Biology" in Methods of Biochemical Analysis, Bd. 26 (1980), 1- 45.
  • Andere für die erfindungsgemäßen Verfahren nützliche Techniken umfassen eine Nicktranslation der DNA durch eine DNA-Polymerase. Eine Technik zur wirksamen Nicktranslation wird in dem Artikel von P.W. Rigby, M. Dieckmann, C. Rhodes und P. Berg, mit dem Titel "Labeling Deoxyribonucleic Acid to High Specific Activity in vitro by Nick Translation with DNA Polymerase", in J. Mol. Biol. 113 (1977), 237-251, offenbart. Im Hinblick auf die Gewinnung von Streptavidin, z.B. aus einer Kulturbrühe von Streptomyces avidinii, offenbart der Artikel von K. Hofmann, S.W. Wood, C.C. Brinton, J.A. Montibeller und F.M. Finn, mit dem Titel "Iminobiotin Affinity Columns and their Application to Retrieval of Streptavidin", in Proc. Natl. Acad. Sci. (USA), Bd. in (1980), Nr. 8, 4666-4668, ein geeignetes Verfahren zur Gewinnung von Streptavidin aus einem Streptavidin enthaltenden Material, z.B. aus einer Kulturbrühe. Streptavidin ist in einem der erfindungsgemäßen Verahren als ein Reagenz nützlich.
  • Die vorliegende Erfindung betrifft Nucleotide, die modifiziert wurden, z.B. an der 5-Position des Pyrimidins oder der 7-Position des Purins, und die Vorbereitung für die Herstellung von Nucleotidsonden daraus, die zur Bindung an oder zum Einbau in die DNA oder ein anderes Nucleinsäurematerial geeignet sind. In den erfindungsgemäßen Verfahren werden Nucleotide, d.h. Nucleinsäuren, vorzugsweise in einer nichtdisruptiven Weise modifiziert, so daß die erhaltenen modifizierten Nucleotide in Nucleinsäuren eingebaut werden können, und die einmal in Nucleinsäuren eingebauten modifizierten Nucleotide die Bildung oder Stabilisierung der von den erhaltenen Nucleinsäuren, die die modifizierten Nucleotide enthalten, gebildeten Doppelhelix nur in geringem Maße stören. Die nicht-disruptive Modifikation von Nucleotiden und Nucleinsäuren, in die solche modifizierten Nucleotide einbaut sind, steht im Gegensatz zu solchen Nucleotidmodifikationen, die als eine disruptive Modifikation gekennzeichnet sind, da die erhaltenen disruptiv modifizierten Nucleotide und die diese enthaltenden Nucleinsäuren die richtige Doppelhelixbildung blockieren. In den erfindungsgemäßen Verfahren werden die Nucleotide bevorzugt an der 5-Position des Pyrimidins oder der 7-Position des Purins modifiziert. Die so modifizierten Nucleotide sind nicht-disruptiv modifiziert und Nucleinsäuren, die solche Nucleotide enthalten, können eine Doppelhelix-Anordnung bilden. Erfindungsgemäß werden die Nucleotide auch in den disruptiven Positionen modifiziert, wie in der nun folgenden Beschreibung dargelegt wird.
  • Die vorliegende Erfindung betrifft ein Nucleotid, an das kovalent eine Einheit gebunden ist, die mit einem Ion ein Chelat bilden kann, wobei das Nucleotid ausgewählt wird aus:
  • (i) ein Nucleotid mit der Formel
    • P-S-B-Sig
  • wobei P eine Phosphateinheit, S eine Zuckereinheit, B eine Pyrimidin-, Purin- oder 7-Deazapurineinheit ist, Sig eine Einheit umfaßt, die mit einem nachweisbaren Ion ein Chelat bilden kann, P an die 3'- oder 5'-Position von S gebunden ist, wenn das Nucleotid ein Desoxyribonucleotid ist, und an die 2'-, 3'- oder 5'-Position, wenn das Nucleotid ein Ribonucleotid ist, B über die N¹-Position an die 1'-Position von S gebunden ist, wenn B ein Pyrimidin ist, oder über die N&sup9;-Position, wenn B ein Purin oder ein 7-Deazapurin ist, und Sig direkt oder indirekt an B an eine Position gebunden ist, die nicht die C&sup5;-Position ist, wenn B ein Pyrimidin ist, die nicht die C&sup8;-Position ist, wenn B ein Purin ist, und die nicht die C&sup7;-Position ist, wenn B ein 7-Deazapurin ist;
  • (ii) ein Ribonucleotid mit der Formel
  • P - - B
  • wobei P ein Phosphateinheit, S eine Zuckereinheit, B eine Pyrimidin-, Purin- oder 7-Deazapurineinheit ist und Sig eine Einheit umfaßt, die mit einem nachweisbaren Ion ein Chelat bilden kann, P an die 2'-, 3'- oder 5'-Position von S gebunden ist, B über die N¹-Position an die 1'-Position von S gebunden ist, wenn B ein Pyrimidin ist, oder über die N&sup9;-Position, wenn B ein Purin oder 7-Deazapurin ist; und Sig direkt oder indirekt an S gebunden ist; und
  • (iii) ein Nucleotid mit der Formel
  • S - B
  • wobei P eine Phosphateinheit, S eine Zuckereinheit, B eine Pyrimidin-, Purin- oder 7-Deazapurineinheit ist, Sig eine Einheit umfaßt, die mit einem nachweisbaren Ion ein Chelat bilden kann, P an die 3'- oder die 5'-Position von S gebunden ist, wenn das Nucleotid ein Desoxyribonucleotid ist, und an die 2'-, 3'- oder 5'-Position, wenn das Nucleotid ein Ribonucleotid ist, B über die N¹-Position an die 1'-Position von S gebunden ist, wenn B ein Pyrimidin ist, oder über die N&sup9;-Position, wenn B ein Purin ist, und Sig direkt oder indirekt an P gebunden ist.
  • Bevorzugte Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung werden in der folgenden Aufzählung erläutert.
  • 1. Nucleotid mit der allgemeinen Formel P-S-B-Sig, wobei P die Phosphorsäureeinheit, S die Zucker- oder Monosaccharideinheit, B die Baseneinheit ist, die Phosphorsäureeinheit an die 3'- und/oder die 5'-Position der Zuckereinheit gebunden ist, wenn das Nucleotid ein Desoxyribonucleotid ist, und an die 2'-, 3'- und/oder 5'-Position, wenn das Nucleotid ein Ribonucleotid ist, die Base ein Purin oder Pyrimidin ist, die Base über die N¹-Position oder die N&sup9;-Position an die 1'-Position der Zuckereinheit gebunden ist, wenn die Base ein Pyrimidin oder Purin ist, und Sig eine Einheit umfaßt, die mit einem nachweisbaren Ion ein Chelat bilden kann.
  • 2. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei das Nucleotid ein Desoxyribonucleotid ist.
  • 3. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei das Nucleotid ein Ribonucleotid ist.
  • 4. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die chemische Einheit Sig chemisch an die N&sup7;-Position von B gebunden ist, wenn B ein 7-Deazapurin ist, an die C&sup5;-Position, wenn B ein Pyrimidin ist, und an die C&sup8;-Position, wenn B ein Purin ist.
  • 5. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei Sig so an eine Position von B gebunden ist, daß ein dieses Nucleotid enthaltendes Oligonucleotid oder Polynucleotid eine doppelsträngige Ribonucleinsäure, eine doppelsträngige Desoxyribonucleinsäure oder ein DNA-RNA-Hybrid bilden kann, oder wenn das Nucleotid in das Oligonucleotid oder Polypeptid eingebaut ist.
  • 6. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei Sig so an eine Position von B gebunden ist, daß das Nucleotid eingebaut werden kann oder eine doppelsträngige Ribonucleinsäure, eine doppelsträngige Desoxyribonucleinsäure oder ein doppelsträngiges Desoxyribonucleinsäure-Ribonucleinsäure-Hybrid bilden kann.
  • 7. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei Sig so an eine Position von B gebunden ist, daß, wenn das Nucleotid in eine doppelsträngige Desoxyribonucleinsäure oder doppelsträngige Ribonucleinsäure oder ein DNA-RNA-Hybrid eingebaut oder daran gebunden oder damit verbunden ist, die chemische Einheit Sig selbst ein Signal aus senden kann oder sich selbst nachweisen kann oder ihre Anwesenheit bekannt machen kann.
  • 8. Oligonucleotid oder Polydesoxyribonucleotid, uuifassend ein oder mehrere Nucleotide gemäß Punkt 1.
  • 9. Oligonucleotid oder Polyribonucleotid, umfassend ein oder mehrere Nucleotide gemäß Punkt 1.
  • 10. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei Sig an die Base B an die C&sup5;- Position gebunden ist, wenn die Base B ein Pyrimidin ist, oder an die C&sup7;-Position, wenn die Base B ein Deazapurin ist.
  • 11. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B ein Pyrimidin ist und die chemische Einheit Sig an das Pyrimidin an die N³-Position gebunden ist.
  • 12. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B ein Pyrimidin ist und die chemische Einheit Sig an das Pyrimidin an die C&sup5;-Position gebunden ist.
  • 13. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B ein Pyrimidin ist und die chemische Einheit Sig an das Pyrimidin an die C&sup6;-Position gebunden ist.
  • 14. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B ein Purin ist und die chemische Einheit Sig an das Purin an die N¹-Position gebunden ist.
  • 15. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B ein Purin ist und die chemische Einheit Sig an das Purin an die C²-Position gebunden ist.
  • 16. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B ein Purin ist und die chemische Einheit Sig an das Purin an die N³-Position gebunden ist.
  • 17. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B ein Purin ist und die chemische Einheit Sig an das Purin an die N&sup7;-Position gebunden ist.
  • 18. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B ein Purin ist und die chemische Einheit Sig an das Purin an die C&sup8;-Position gebunden ist.
  • 19. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei der Zucker S eine Pentose ist.
  • 20. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B ein 7-Deazapurin ist und die chemische Einheit Sig an das 7-Deazapurin an die Ca-Position gebunden ist.
  • 21. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die chemische Einheit Sig ein radioaktives Isotop einschließt oder umfaßt.
  • 22. Nucleotid gemäß Punkt 21, wobei das radioaktive Isotop radioaktives Kobalt ist.
  • 23. Einzelsträngiges Polynucleotid, umfassend ein oder mehrere Nucleotide gemäß Punkt 1.
  • 24. Einzelsträngiges Polynucleotid gemäß Punkt 23, wobei das einzel strängige Polynucleot id ein Polydesoxyribonucleotid ist.
  • 25. Einzelsträngiges Polynucleotid gemäß Punkt 23, wobei das einzelsträngige Polynucleotid ein Polyribonucleotid ist.
  • 26. Doppelsträngiges Polynucleotid, umfassend ein oder mehrere Nucleotide gemäß Punkt 1.
  • 27. Doppelsträngiges Polynucleotid gemäß Punkt 26, wobei das doppelsträngige Polynucleotid eine doppelsträngige Desoxyribonucleinsäure ist.
  • 28. Doppelsträngiges Polynucleotid gemäß Punkt 26, wobei das doppelsträngige Polynucleotid eine doppelsträngige Ribonucleinsäure ist.
  • 29. Doppelsträngiges Polynucleotid gemäß Punkt 26, wobei das doppelsträngige Polynucleotid ein doppelsträngiges Desoxyribonucleinsäure-Ribonucleinsäure-Hybrid ist.
  • 30. Einzelsträngiges Polynucleotid, umfassend mindestens 12 Nucleotide, wobei mindestens eines dieser Nucleotide ein Nucleotid gemäß Punkt 1 ist.
  • 31. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B Cytosin ist.
  • 32. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B Uracil ist.
  • 33. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B Thymin ist.
  • 34. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B Adenin ist.
  • 35. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B Guanin ist.
  • 36. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B 2-Methyladenin ist.
  • 37. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B 1-Methylguanin ist.
  • 38. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B 5-Methylcytosin ist.
  • 39. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B 5-Hydroxymethylcytosin ist.
  • 40. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die chemische Einheit Sig einen Chelatbildner umfaßt.
  • 41. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B Deazaadenin ist.
  • 42. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B Deazaguanin ist.
  • 43. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die chemische Einheit Sig über eine chemische Bindung an die Base B gebunden ist.
  • 44. Nucleotid gemäß Punkt 43, wobei die chemische Bindung eine olefinische Bindung an der α-Position relativ zur Base B umfaßt.
  • 45. Nucleotid gemäß Punkt 43, wobei die chemische Bindung die Einheit -CH&sub2;-NH- umfaßt.
  • 46. Nucleotid gemäß Punkt 43, wobei die chemische Bindung -CH=CH-CH&sub2;-NH- ist.
  • 47. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die chemische Einheit -CH=CH-CH&sub2;-O-CH&sub2;- -CH&sub2;-NH- ist.
  • 48. Nucleotid gemäß Punkt 46, wobei die chemische Einheit Sig an die -NH-Gruppe der chemischen Bindung gebunden ist.
  • 49. Ribonucleotid der allgemeinen Formel
  • P - B
  • wobei P eine Phosphateinheit, S eine Zuckereinheit, B eine Pyrimidin-, Purin- oder 7-Deazapurineinheit ist, und Sig eine Einheit umfaßt, die mit einem nachweisbaren Ion ein Chelat bilden kann, P an die 2'-, 3'- oder 5'-Position von S gebunden ist, B über die N¹-Position an die 1'-Position von S gebunden ist, wenn B ein Pyrimidin ist, oder über die N&sup9;-Position, wenn B ein Purin oder 7-Deazapurin ist, und Sig direkt oder indirekt an S gebunden ist.
  • 50. Ribonucleotid gemäß Punkt 49, wobei die chemische Einheit Sig an die C2'-Position der Zuckereinheit gebunden ist.
  • 51. Ribonucleotid gemäß Punkt 49, wobei die chemische Einheit Sig an die C3'-Position der Zuckereinheit gebunden ist.
  • 52. Ribonucleotid gemäß Punkt 49, wobei die chemische Einheit Sig an die Zuckereinheit S gebunden ist, so daß ein Oligoribonucleotid oder Polyribonucleotid, das dieses Ribonucleotid enthält, eine doppelsträngige Ribonucleinsäure oder ein DNA-RNA-Hybrid bilden kann, wenn das Ribonucleotid in das Gligonucleotid oder Polynucleotid eingebaut ist.
  • 53. Polyribonucleotid, umfassend mindestens ein Ribonucleotid gemäß Punkt 49.
  • 54. Ribonucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Base B ein Pyrimidin ist.
  • 55. Ribonucleotid gemäß Punkt 49, wobei die Base B ein Purin ist.
  • 56. Ribonucleotid gemäß Punkt 49, wobei die Base B Uracil ist.
  • 57. Ribonucleotid gemäß Punkt 49, wobei die Base B Adenin ist.
  • 58. Ribonucleotid gemäß Punkt 49, wobei die Base B Guanin ist.
  • 59. Ribonucleotid gemäß Punkt 49, wobei die Base B Cytosin ist.
  • 60. Ribonucleotid gemäß Punkt 49, wobei die Base B ein 7-Deazapurin ist.
  • 61. Ribonucleotid gemäß Punkt 49, wobei die chemische Einheit Sig eine radioaktive Isotopenkomponente einschließt oder umfaßt.
  • 62. Ribonucleotid gemäß Punkt 61, wobei die radioaktive Isotopenkomponente radioaktives Kobalt ist.
  • 63. Einzelsträngiges Polyribonucleotid, umfassend ein oder mehrere Ribonucleotide gemäß Punkt 49, wobei das einzelsträngige Polyribonucleotid mindestens drei Ribonucleotide umfaßt.
  • 64. Einzelsträngiges Polyribonucleotid, umfassend mindestens zwölf Ribonucleotide, davon mindestens ein Ribonucleotid gemäß Punkt 49.
  • 65. Nucleotid der allgemeinen Formel
  • - S - B
  • wobei P eine Phosphateinheit, S eine Zuckereinheit, B eine Pyrimidin-, Purin- oder 7-Deazapurineinheit ist, Sig eine Einheit umfaßt, die mit einem nachweisbaren Ion ein Chelat bilden kann, P an die 3'- oder die 5'-Position von S gebunden ist, wenn das Nucleotid ein Desoxyribonucleotid ist, und an die 2'-, 3'- oder 5'-Position, wenn das Nucleotid ein Ribonucleotid ist, B über die N¹-Position an die 1'-Position von S gebunden ist, wenn B ein Pyrimidin ist, oder über die N&sup9;-Position, wenn B ein Purin ist, und Sig direkt oder indirekt an P gebunden ist.
  • 66. Nucleotid gemäß einem der vorstehenden Punkte, wobei der Chelatbildner die chemische Einheit
  • umfaßt, wobei M ein Wasserstoffatom oder ein substituierbares Metall ist.
  • 67. Nucleotid gemäß Punkt 6, wobei das Metall Magnesium ist oder ein Metall, das durch Kobalt ersetzbar ist.
  • 68. Polynucleotid, das ein oder mehrere Nucleotide gemäß Punkt 1 oder Punkt 49 oder Punkt 65 enthält, wobei die chemische Einheit Sig einen Chelatbildner umfaßt.
  • 69. Polynucleotid, das ein Nucleotid gemäß Punkt 1 oder Punkt 49 oder Punkt 65 enthält, wobei die chemische Einheit Sig einen Chelatbildner gemäß Punkt 66 umfaßt.
  • 70. Nucleotid gemäß Punkt 66, wobei das Metall ein katalytisch aktives Metall ist.
  • 71. Nucleotid gemäß Punkt 66, wobei das Metall ein Schwermetall ist.
  • 72. Nucleotid gemäß Punkt 66, wobei das Metall radioaktives Kobalt ist.
  • 73. Nucleotid gemäß Punkt 66, wobei das Metall Magnesium ist.
  • 74. Ribonucleotid gemäß Punkt 1 oder Punkt 49 oder Punkt 65, wobei die chemische Einheit Sig einen Chelatbildner umfaßt.
  • 75. Desoxyribonucleotid gemäß Punkt 1 oder Punkt 49 oder Punkt 65, wobei die chemische Einheit Sig einen Chelatbildner umfaßt.
  • 76. Nucleotid gemäß Punkt 66, wobei das Metall M ein radioaktives Isotop ist.
  • 77. Nucleotid gemäß Punkt 66, wobei das Metall Platin ist.
  • 78. Nucleotid gemäß Punkt 66, wobei M ein Wasserstoffatom oder ein substituierbares Metall oder eine radioaktives Element ist.
  • 79. Die Verbindung
  • wobei M ein Wasserstoffatom oder ein Metall ist.
  • 80. Die Verbindung
  • wobei M ein Wasserstoffatom oder ein Metall ist.
  • 81. Verbindung gemäß Punkt 80, wobei das Nucleotid ein Desoxyribonucleotid ist.
  • 82. Verbindung gemäß Punkt 80, wobei das Nucleotid ein Ribonucleotid ist.
  • 83. Die Verbindung
  • wobei M ein Wasserstoffatom oder ein Metall ist.
  • 84. Nucleotid gemäß den Punkten 1, 49 oder 65, wobei die chemische Einheit Sig die chemische Einheit
  • umfaßt.
  • 85. Polynucleotid, das ein oder mehrere Nucleotide gemäß Punkt 84 enthält.
  • 86. Polynucleotid gemäß Punkt 85, wobei das Polynucleotid ein einzelsträngiges Desoxyribonucleotid oder ein einzelsträngiges Ribonucleotid oder eine doppelsträngige DNA, RNA oder ein DNA-RNA-Hybrid ist.
  • 87. Nucleotid gemäß Punkt 1, wobei die Sig-Komponente einen radioaktiven Bestandteil umfaßt.
  • 88. Einzelsträngiges Polynucleotid, umfassend ein oder mehrere Nucleotide gemäß Punkt 1, wobei die Sig-Komponente radioaktiv ist.
  • 89. Doppelsträngiges Polynucleotid, umfassend ein oder mehrere Nucleotide gemäß Punkt 1, wobei die Sig-Komponente radioaktiv ist.
  • 90. Nucleotid gemäß Punkt 49, wobei die Sig-Komponente eine radioaktive Einheit umfaßt.
  • 91. Polynucleotid, umfassend ein Ribonucleotid gemäß Punkt 49, wobei die Sig-Einheit radioaktiv markiert ist.
  • 92. Nucleotid gemäß Punkt 65, wobei die Sig-Einheit radioaktiv markiert ist.
  • 93. Polynucleotid, umfassend ein oder mehrere Nucleotide gemäß Punkt 65, wobei die Sig-Einheit radioaktiv markiert ist.
  • Von besonderer Wichtigkeit und Bedeutung bei den erfindungsgemäßen Verfahren ist die Verwendung von selbst ein Signal aussendenden oder selbst anzeigenden oder selbst nachweisenden Nucleinsäuren, insbesondere von solchen Nucleinsäuren, die in doppelsträngige DNA oder ähnliches eingebaut werden können. Solche selbst ein Signal aussendenden oder selbst nachweisenden Nucleinsäuren können durch kovalente Bindung eines Moleküls, das mit spezifischen Ionen, z.B. Schwermetallen, Seltenen Erden, etc., ein Chelat bilden kann, an einen Allylamin-Substituenten, der ein erfindungsgemäßes modifiziertes Nucleotid darstellt, erzeugt werden. Im allgemeinen kann das im Chelat gebundene Ion entweder (a) durch radioaktive Emission oder (b) durch die Verwendung des Ions zur Katalyse einer chromogenen oder fluorogenen Reaktion nachgewiesen werden.
  • Beispielsweise wird eine Lösung von 3,4-Dinitrophenol zu 3,4-Diaminocyclohexan reduziert.
  • Diese Substanz wird dann bromiert,
  • wobei 3,4-Diaminobromcyclohexan (dABCH) erzeugt wird. Diese Verbindung wird mit einer mit einem Halogenid (Cl, Br, I) substituierten Carboxymethyl-Verbindung umgesetzt, wobei ein Tetracarboxylmethylderivat oder dABCH (TCM-dABCH) hergestellt wird:
  • Das Brom wird durch eine Aminogruppe unter Verwendung von Iöslichem Ammoniak substituiert:
  • Diese Verbindung wird dann mit Chlorthiophosgen umgesetzt, wobei das Isothiocyanatderivat von (TCM-dANCH) hergestellt wird.
  • Schließlich wird diese Verbindung mit dem dUTP-Allylaminderivat umgesetzt, wobei das modifizierte dUTP hergestellt wird.
  • Kobalt- oder andere Schwermetallionen oder andere Seltene Erden-Ionen können nach dem vorstehenden Schritt 3 mit der Verbindung ein Chelat bilden. Oder die Nucleinsäure kann mit diesem Addukt substituiert und dann das Ion zugesetzt werden (zum Beispiel wird Kobalt bei ph 6 zugegeben, wo die Bindungskonstante 10&supmin;¹&sup9;M beträgt).
  • Kobalt kann durch Radioaktivität nachgewiesen werden. Es kann auch durch seine Fähigkeit nachgewiesen werden, in Gegenwart von molekularem Sauerstoff Methylenblau zur farblosen Form zu oxidieren. Es kann dazu verwendet werden, lösliche Sulfhydrylgruppen wieder in Gegenwart von molekularem Sauerstoff zu Disulfidbrücken zu oxidieren.
  • Diese Art eines selbst ein Signal aussendenden Moleküls kann dazu verwendet werden, jede Nucleinsäure-Hybridisierungsreaktion zu überwachen. Es ist insbesondere wichtig zur Nachweis von Nucleinsäuren in Gelen (zum Beispiel Sequenzierungsgele).
  • In Hinblick auf seine radioaktive Verwendung, kann es zur Herstellung des benötigten Isotops verwendet werden, d.h., wenn ein schwacher oder starker β- oder γ-Strahler benötigt wird, kann dieses Isotop mit einem Chelatbildner umgesetzt werden. Beispiele verwendbarer Isotope sind unmittelbar nachstehend aufgeführt.
  • Antimon-124
  • Antimon-125
  • Arsen-74
  • Barium-133
  • Barium-140
  • Beryllium-7
  • Wismut-206
  • Wismut-207
  • Cadmium-109
  • Cadmium-115m
  • Calcium-15
  • Kohlenstoff-14
  • Cerium-139
  • Cerium-141
  • Cerium-144
  • Cäsium-134
  • Cäsium-137
  • Chlor-36
  • Chrom-51
  • Kobalt-56
  • Kobalt-57
  • Kobalt-58
  • Kobalt-60
  • Erbium-169
  • Europium-152
  • Gadolinium-153
  • Gold-195
  • Gold-199
  • Hafnium-175
  • Hafnium-175 + 181
  • Hafnium-181
  • Wasserstoff-3, vgl.
  • Tritium
  • Iod-125
  • Iod-131
  • Iod-132
  • Iridium-192
  • Eisen-55
  • Eisen-59
  • Krypton-85
  • Blei-210
  • Lutecium-177
  • Mangan-54
  • Quecksilber-197
  • Quecksilber-203
  • Molybdän-99
  • Neodymium-147
  • Neptunium-237
  • Nickel-63
  • Niobium-95
  • Osmium-185+191
  • Palladium-103
  • Platin-195m
  • Praseodynium-143
  • Promethium-147
  • Protactinium-233
  • Radium-226
  • Rhenium-186
  • Rubidium-86
  • Ruthenium-103
  • Ruthenium-106
  • Scandium-44
  • Scandium-46
  • Selen-75
  • Silber-110m
  • Silber-111
  • Natrium-22
  • Strontium-85
  • Strontium-89
  • Strontium-90
  • Schwefel-35
  • Tantal-182
  • Technetium-99
  • Tellur-125m
  • Tellur-132
  • Terbium-160
  • Thallium-204
  • Thorium-228
  • Thorium-232
  • Thulium-170
  • Zinn-113
  • Titan-44
  • Tritium
  • Wolfram-185
  • Vanadium-48
  • Vanadium-49
  • Ytterbium-169
  • Yttrium-88
  • Yttrium-90
  • Yttrium-91
  • Zink-65
  • Zirkon-95
  • Ein anderer Gesichtspunkt der erfindungsgemäßen Verfahren, der insbesondere vorteilhaft ist, ist die Durchführung des Nachweises oder der Hybridisierung zwischen der gesuchten DNA, die nachgewiesen werden soll, und der DNA-Nachweisonde in der flüssigen Phase. In diesem Flüssigphasen-System sind das nachzuweisende DNA-Molekül und die geeignete DNA-Nachweissonde nicht an ein unlösliches Substrat oder eine unlösliche chemische Einheit gebunden. Die Vorteile des Flüssigphasen-Nachweissystems liegen in der Geschwindigkeit der Hybridisierung oder Hybridbildung zwischen der nachzuweisenden DNA und der dafür geeigneten DNA-Sonde. Beispielsweise ist in einem Fest- Flüssig-System der Zeitraum, der für eine wirksame Erkennung und eine Hybridisierungsbildung benötigt wird, etwa zehnmal größer, als wenn dies in einem vollständigen Flüssig-System durchgeführt wird, d.h. die nachzuweisende DNA und die Nachweis-DNA sind nicht an eine unlösliche Einheit gebunden.
  • Die Sonden, die gemäß den erfindungsgemäßen Verfahren hergestellt wurden, sind für die Verwendung beim Nachweis von Viren und Bakterien in Flüssigkeiten, wie vorstehend angedeutet, adaptierbar. Wenn die zu untersuchenden Flüssigkeiten keine großen Proteinmengen enthalten, können die Viren darin durch Absorption an Hydroxyapatit konzentriert und in einer kleinen Menge Phosphatpuffer eluiert werden. Enthält die zu untersuchende Flüssigkeit große Proteinmengen, können die Viren durch Hochgeschwindigkeitszentrifugation konzentriert werden. Wenn Antikörper verfügbar sind, ist eine Absorption an eine Affinitätssäule und eine Elution mit Säure vorzuziehen, da es möglich wäre, viele Sonden gemäß der erfindungsgemäßen Verfahren gleichzeitig einzusetzen. Die zu untersuchenden Bakterien werden üblicherweise leicht durch Zentrifugation konzentriert.
  • Erfindungsgemäß wird die Identifizierung oder Charakterisierung der isolierten Partikel, Viren und Bakterien durch Hybridisierung der charakterisierenden oder identifizierenden DNA dafür mit einer einzelsträngigen DNA-Sonde erfolgen, die erfindungsgemäß hergestellt wurde. Nach der Hybridisierung wird der Überschuß nicht-hybridisierter Sonden-DNA mit der S&sub1;-Nuclease und Exonuclease I aus E. coli bei einem hohen Salzgehalt gespalten, wobei die Einzelstrangbruchaktivität der S&sub1;-Nuclease unterdrückt wird, vgl. Vogt, Methods in Enzymology, Bd. 65 (1980), 248-255. Diese Nucleasebehandlung stellt aus der überschüssigen nicht-hybridisierten einzelsträngigen DNA-Sonde Mononucleotide her, läßt aber die doppelsträngige hybridisierte DNA intakt. Diese wird dann bei einem hohem Salzgehalt an einen Dowex-Anionenaustauscher absorbiert (bei einer hohen Salzkonzentration binden die Nucleotide und die geringe Menge der Oligonucleotide nicht an das Harz). Die so erhaltene hybridisierte DNA wird dann durch verschiedene, auf die erfindungsgemäßen Verfahren anwendbare, Verfahren identifiziert oder charakterisiert.
  • Die besonderen erfindungsgemäßen Nucleotide umfassen eine Phosphorsäureeinheit P, eine Zucker- oder Monosaccharideinheit S, eine Baseneinheit B, ein Purin oder Pyrimidin, und eine Signal aussendende chemische Einheit Sig, die daran kovalent gebunden ist, entweder an die P-, S- oder B-Einheit. Nachfolgend sind Strukturformeln verschiedener Baseneinheiten B und Nucleotide aufgeführt, die gemäß der erfindungsgemäßen Verfahren modifiziert wurden. Die wichtigsten Purine Adenin (6 -Aminopurin) Guanin (2-Amino-6-oxypurin) Zwei weitere Purine 2-Methyladenin 1-Methylguanin Die wichtigsten Pyrimidine Cytosin (2-Oxy-4-Aminopyrimidin) Uracil (2, 4-Dioxypyrimidin) Thymin (5-Methyl-2,4-dioxypyrimidin) Zwei weitere Pyrimidine 5-Methylcytosin 5-Hydroxymethylcytosin PYRIMIDIN PURIN
  • Die wichtigsten Ribonucleotide und Desoxyribonucleotide Ribonucleosid-5'-monophosphate 2'-Desoxyribonucleosid-5'-monophosphate Base Allgemeine Struktur Allgemeine Struktur Bezeichnungen Adenosin-5'-phosphorsäure (Adenylsäure, AMP) Guanosin-5'-phosphorsäure (Guanylsäure, GMP) Cytidin-5'-phosphorsäure (Cytidylsäure, CMP) Uridin-5'-phosphorsäure (Uridylsäure, UMP) Desoxyadenosin-5'-phosphorsäure (Desoxyadenylsäure, dAMP) Desoxyadenosin-5'-phosphorsäure (Desoxyadenylsäure, dGMP) Desoxyadenosin-5'-phosphorsäure (Desoxyadenylsäure, dCMP) Desoxyadenosin-5'-phosphorsäure (Desoxyadenylsäure, dTMP)
  • Die besonderen erfindungsgemäßen Nucleotide, wie vorstehend aufgeführt, umfassen zusätzlich zu den P-, S- und B-Einheiten eine chemische Einheit Sig, die kovalent an die P-, S- und/oder B-Einheiten gebunden ist. Erfindungsgemäß von besonderem Interesse sind solche Nucleotide, die die allgemeine Formel
  • P-S-B-Sig
  • aufweisen, wobei P die Phosphorsäureeinheit, einschließlich Mono-, Di-, Tri- oder Tetraphosphat, S die Zuckermonosaccharideinheit und B die Baseneinheit ist, entweder ein Purin oder ein Pyrimidin. Die Phosphorsäureeinheit P ist kovalent an die 3'- und/oder 5'-Position der S-Einheit gebunden, wenn das Nucleotid ein Desoxyribonucleotid ist, und an die 2'-, 3'- und/oder 5'-Position, wenn das Nucleotid ein Ribonucleotid ist. Die Baseneinheit B ist über die N¹-Position oder die N&sup9;-Position an die 1'-Position der S-Einheit gebunden, wenn die Baseneinheit ein Pyrimidin oder Purin ist. Die Sig-Einheit ist kovalent an die B-Einheit des Nucleotids gebunden, und wenn sie so gebunden ist, kann sie selbst Signale aussendenoder ihren eigenen Nachweis selbst durchführen oder ihre Gegenwart bekannt machen. Wünschenswerterweise oder vorzugsweise erlaubt sie den Einbau des erhaltenen Nucleotids P-S-B-Sig in oder die Bildung einer doppelsträngigen helikalen DNA oder RNA oder eines DNA-RNA-Hybrids und/oder den Nachweis darin.
  • Ein anderes besonderes erfindungsgemäßes Nucleotid ist gekennzeichnet durch die allgemeine Formel:
    • P - - B
  • Solche erfindungsgemäßen Nucleotide werden als Ribonucleotide charakterisiert. Die Phosphorsäureeinheit ist an die 2'-, 3'- und/oder 5'-Position der Zuckereinheit S gebunden, und die Base B ist über die N¹-Position oder die N&sup9;-Position an die 1'-Position der Zuckereinheit S gebunden, wenn die Base ein Pyrimidin oder Purin ist. Die chemische Einheit Sig ist kovalent an die Zuckereinheit S gebunden, und die chemische Einheit Sig kann, wenn sie an die S-Einheit gebunden ist, selbst Signale aussenden oder ihren eigenen Nachweis selbst durchführen oder ihre Gegenwart bekannt machen. Sie erlaubt insbesondere den Einbau des Ribonucleotids in seine entsprechende doppelsträngige RNA oder ein DNA-RNA-Hybrid.
  • Solche Nucleotide P - - B haben bevorzugt die chemische Einheit Sig an die C2'-Position der S-Einheit oder an die C3'-Position der S-Einheit gebunden.
  • Ferner umfassen die Nucleotide gemäß der erfindungsgemäßen Verfahren Nucleotide mit der Formel:
  • - S - B
  • wobei P die Phosphorsäureeinheit, S die Zuckereinheit und B die Baseneinheit ist. In diesen besonderen Nucleotiden ist die P-Einheit an die 3'- und/oder die 5'-Position der S-Einheit gebunden, wenn das Nucleotid ein Desoxyribonucleotid ist, und an die 2'-, 3'- und/oder 5'-Position, wenn das Nucleotid ein Ribonucleotid ist. Die Base B ist entweder ein Purin oder ein Pyrimidin, und die B-Einheit ist über die N¹- oder die N&sup9;-Position an die 1'-Position der Zuckereinheit gebunden, wenn die B-Einheit ein Pyrimidin oder Purin ist. Die chemische Einheit Sig ist kovalent über die chemische Bindung
  • an die Phosphorsäureeinheit P gebunden. Sig kann, wenn es an die P-Einheit gebunden ist, selbst Signale aussenden oder seinen eigenen Nachweis selbst durchführen oder seine Gegenwart bekannt machen. Es ist erwünscht, daß das Nucleotid in ein doppelsträngiges Polynucleotid, wie DNA, RNA oder ein DNA-RNA- Hybrid, eingebaut werden kann, und daß es, wenn es darin eingebaut ist, es sich immer noch selbst nachweisen kann.
  • Es wird darauf hingewiesen, daß die beschriebenen oder vorstehend durch die allgemeine Formel P-S-B-Sig definierten besonderen erfindungsgemäßen Nucleotide auch Nucleotide umfassen, bei denen die chemische Einheit Sig kovalent an die B-Einheit an die N&sup6;- oder die Position der 6-Aminogruppe gebunden ist, wenn die B-Einheit Adenin ist, oder an die N²- oder die Position der 2-Aminogruppe, wenn die B-Einheit Guanin ist, oder an die N&sup4;- oder die Position der 4-Aminogruppe, wenn die B-Einheit Cytosin ist. Die so erhaltenen Nucleotide, die die daran gebundene Sig-Einheit enthalten, können selbst Signale aus senden oder ihren eigenen Nachweis selbst durchführen oder ihre Gegenwart bekannt machen, und sie sind als doppelsträngige DNA oder RNA oder als ein DNA-RNA-Hybrid nachweisbar.
  • Zusammenfassend, im Hinblick auf die vorstehend aufgeführten verschiedenen besonderen erfindungsgemäßen Nucleotide, umfassen die besonderen Nucleotide eine Phosphorsäureeinheit P, eine Zuckereinheit S und eine Baseneinheit B, ein Purin oder Pyrimidin, deren Kombination P-S-B im Hinblick auf Nucleotide gut bekannt ist und Nucleotide definiert, sowohl Desoxyribonucleotide als auch Ribonucleotide. Die Nucleotide werden dann erfindungsgemäß durch die kovalente Bindung einer chemischen Einheit Sig an die P-Einheit und/oder die S-Einheit und/oder die B-Einheit modifiziert. Die so an das Nucleotid P-S-B gebundene chemische Einheit Sig kann dem so erhaltenen Nucleotid, das nun P-S-B mit der Sig-Einheit gebunden an eine oder mehrere der anderen Einheiten umfaßt, die Eigenschaft verleihen, seinen eigenen Nachweis selbst durchzuführen oder selbst Signale auszusenden oder seine Gegenwart per se bekannt zu machen, wenn es in ein Polynucleotid, insbesondere ein doppelsträngiges Polynucleotid, wie eine doppelsträngige DNA, doppelsträngige RNA oder ein doppelsträngiges DNA-RNA-Hybrid, eingebaut wird. Die Sig-Einheit sollte vorzugsweise die Fähigkeit des Nucleotids nicht beeinträchtigen, ein doppelsträngiges Polynucleotid zu bilden, das das besondere Sig-enthaltende erfindungsgemäße Nucleotid enthält, und das Sig-enthaltende Nucleotid kann, wenn es so darin eingebaut ist, nachgewiesen, lokalisiert oder beobachtet werden.
  • Die Sig-Komponente der erfindungsgemäßen Nucleotide und die Nucleotide und Polynucleotide, in die die erfindungsgemäßen die Sig-Komponente enthaltenden Nucleotide eingebaut sind, sind äquivalent zu und sind für die gleichen Zwecke nützlich, wie die in der EP-A2-0063879 beschriebenen Nucleotide.
  • Insbesondere entspricht die in der EP-A2-0063879 beschriebene chemische Einheit A funktionell der Sig-Komponente oder der chemischen Einheit der besonderen erfindungsgemäßen Nucleotide. Demgemäß kann die Sig-Komponente oder die chemische Einheit der erfindungsgemäßen Nucleotide, wie in der EP-A2-0063879 beschrieben, direkt an die P-, S- oder B-Einheiten gebunden werden oder daran über eine chemische Bindung oder Brücke gebunden werden, wie durch die gestrichelte Linie, die B und A verbindet, der Nucleotide der EP-A2-0063879 angezeigt wird. Die verschiedenen in der EP-A2-0063879 identifizierten Brücken oder Bindungen sind bei der Herstellung der besonderen erfindungsgemäßen Nucleotide anwendbar und nützlich.
  • Ein besonders wichtiger und nützlicher Gesichtspunkt der besonderen erfindungsgemäßen Nucleotide ist die Verwendung solcher Nucleotide bei der Herstellung von DNA- oder RNA-Sonden. Solche Sonden enthalten eine Nucleotidsequenz, die im wesentlichen komplementär zu der DNA- oder RNA-Sequenz des zu lokalisierenden und/oder zu identifizierenden genetischen Materials ist. Die Sonde enthält ein oder mehrere der besonderen erfindungsgemäßen Nucleotide. Eine Sonde, die eine gewünschte Nucleotidsequenz aufweist, wie ein einzelsträngiges Polynucleotid, entweder eine DNA- oder RNA-Sonde, wird dann mit dem zu identifizierenden genetischen DNA- oder RNA-Material in Kontakt gebracht. Nach der Lokalisierung der Sonde und der Bildung eines doppelsträngigen Polynucleotids, das die Sonde und das zu identifizierende passende DNA- oder RNA-Material enthält, wird das erhaltene gebildete doppelsträngige DNA- oder RNA-enthaltende Material dann beobachtbar und identifiziert. Eine erfindungsgemäße Sonde kann im wesentlichen jede Anzahl von Nucleotideinheiten enthalten, die benötigt wird, von etwa 5 Nucleotiden bis zu etwa 500 oder mehr. Zwölf passende, vorzugsweise aufeinanderfolgende Nucleotideinheiten sind ausreichend, um eine Identifizierung des größten Teils des zu untersuchenden oder identifizierenden DNA- oder RNA- Materials zu bewirken, wenn die Sequenz aus 12 Nucleotiden der Sonde zu einer entsprechenden kooperativen Sequenz im zu untersuchenden oder zu identifizierenden DNA- oder RNA-Material paßt. Wie aufgeführt, können solche Sonden eine oder mehrere besondere Sig-enthaltende erfindungsgemäße Nucleotide enthalten, vorzugsweise mindestens ein besonderes Nucleotid pro 5-10 der Nucleotide in der Sonde.

Claims (20)

1. Nucleotid, an das kovalent eine Einheit gebunden ist, die mit einem Ion ein Chelat bilden kann.
2. Nucleotid nach Anspruch 1, das
(i) ein Nucleotid init der Formel
P-S-B-Sig
ist, wobei P eine Phosphateinheit, S eine Zuckereinheit, B eine Pyrimidin-, Purin- oder 7- Deazapurineinheit ist, Sig eine Einheit umfaßt, die mit einem nachweisbaren Ion ein Chelat bilden kann, P an die 3'- oder 5'-Position von S gebunden ist, wenn das Nucleotid ein Desoxyribonucleotid ist und an die 2'-, 3'- oder 5'-Position, wenn das Nucleotid ein Ribonucleotid ist, B über die N¹-Position an die 1'-Position von S gebunden ist, wenn B ein Pyrimidin ist und über die N&sup9;-Position, wenn B ein Purin oder ein 7-Deazapurin ist, und Sig direkt oder indirekt an B an eine Position gebunden ist, die nicht die C&sup5;-Position ist, wenn B ein Pyrimidin ist, die nicht die C&sup8;-Position ist, wenn B ein Purin ist, und die nicht die C&sup7;-Position ist, wenn B ein 7-Deazapurin ist;
(ii) ein Ribonucleotid mit der Formel
ist, wobei P eine Phosphateinheit, S eine Zuckereinheit, B eine Pyrimidin-, Purin- oder 7- Deazapurineinheit ist und Sig eine Einheit umfaßt, die mit einem nachweisbaren Ion ein Chelat bilden kann, P an die 2'-, 3'- oder 5'-Position von S gebunden ist, B über die N¹-Position an die 1'-Position von S gebunden ist, wenn B ein Pyrimidin ist, oder über die N&sup9;-Position, wenn B ein Purin oder 7-Deazapurin ist; und Sig direkt oder indirekt an S gebunden ist; oder
(iii) ein Nucleotid mit der Formel
ist, wobei P eine Phosphateinheit, S eine Zuckereinheit, B eine Pyrimidin-, Purin- oder 7- Deazapurineinheit ist, Sig eine Einheit umfaßt, die mit einem nachweisbaren Ion ein Chelat bilden kann, P an die 3'- oder die 5'-Position von S gebunden ist, wenn das Nucleotid ein Desoxyribonucleotid ist, und an die 2'-, 3'- oder 5'-Position, wenn das Nucleotid ein Ribonucleotid ist, B über die N¹-Position an die 1'-Position von S gebunden ist, wenn B ein Pyrimidin ist, oder über die N&sup9;-Position, wenn B ein Purin ist, und Sig direkt oder indirekt an P gebunden ist.
3. Nucleotid nach Anspruch 2, wobei die Einheit, die mit Ionen Chelate bilden kann, zwei Stickstoffe und vier carboxylhaltige Gruppen umfaßt, und wobei zwei der carboxylhaltigen Gruppen an jeden der Stickstoffe gebunden sind.
4. Nucleotid nach Anspruch 3, wobei die Einheit, die mit Ionen Chelate bilden kann, ein carboxyl-substituiertes Diamin ist.
5. Nucleotid nach Anspruch 4, wobei die Einheit, die mit Ionen Chelate bilden kann, die folgende Strukturformel aufweist:
wobei M ein Wasserstoffatom oder ein geeignetes Kation ist.
6. Nucleotid nach Anspruch 5, wobei die Einheit, die mit Ionen Chelate bilden kann, die folgende Strukturformel aufweist:
wobei M ein Wasserstoffatom oder ein geeignetes Kation ist.
7. Nucleotid nach Anspruch 6, wobei die Einheit, die mit Ionen Chelate bilden kann, die folgende Strukturformel aufweist
wobei M ein Wasserstoffatom oder ein geeignetes Kation ist.
8. Nucleotid nach Anspruch 1, wobei das Ion ein Ion eines radioaktiven Metalls, ein Ion eines Metalls, das eine chromogene oder fluorogene Reaktion katalysieren kann, oder ein Ion eines Metalls ist, das allein oder, wenn es in Kombination mit einem anderen Stoff vorliegt, fluoreszieren oder chemilumineszieren kann.
9. Nucleotid nach Anspruch 1, wobei die Einheit, die mit Ionen Chelate bilden kann, mit der Baseneinheit, Zuckereinheit oder Phosphor-enthaltenden Einheit kovalent über eine Brückengruppe gebunden ist, die Brückengruppe eine olefinische Bindung an der α-Position relativ zur Bindungsstelle an das Nucleotid und/oder eine -CH&sub2;NH-Einheit enthält, die die kennzeichnende Fähigkeit der Einheit, mit Ionen Chelate zu bilden, nicht wesentlich stört.
10. Nucleotid nach Anspruch 1, das ferner ein Schwermetall- oder Seltene Erden-Ion umfaßt, wobei das Ion mit der Einheit ein Chelat bildet, die mit Ionen Chelate bilden kann.
11. Nucleotid nach Anspruch 9, wobei die Brückengruppe eine Allylaminogruppe umfaßt.
12. Verbindung
in der M ein Wasserstoffatom oder ein geeignetes Kation ist.
13. Verbindung
in der M ein Wasserstoffatom oder ein geeignetes Kation ist.
14. Oligo- oder Polynucleotid, gekennzeichnet durch mindestens eine Einheit, die mit Ionen Chelate bilden kann, wobei die Einheit an mindestens ein Nucleotid des Oligo- oder Polynucleotids gebunden ist.
15. Oligo- oder Polynucleotid nach Anspruch 14, wobei die Einheit, die mit Ionen Chelate bilden kann, zwei Stickstoffe und vier carboxylhaltige Gruppen umfaßt und zwei der vier carboxylhaltigen Gruppen an jeden der Stickstoffe gebunden sind.
16. Nucleotid nach Anspruch 10, wobei das Ion ein Ion eines radioaktiven Metalls, ein Ion eines Metalls, das eine chromogene oder fluorogene Reaktion katalysieren kann oder ein Ion eines Metalls ist, das allein oder, wenn es in Kombination mit einem anderen Stoff vorliegt, fluoreszieren oder chemilumineszieren kann.
17. Nucleotid nach Anspruch 16, wobei das radioaktive Metall ein Wismut-, Nickel, Zinn-, Technetium-, Quecksilber- oder Kobaltisotop ist.
18. Nucleotid nach Anspruch 16, wobei das katalysierende Metall Kobalt ist.
19. Nucleotid nach Anspruch 1, wobei die Phosphor-enthaltende Einheit ein Mono-, Di- oder Triphosphat ist und die chemische Einheit über einen Sauerstoff des Phosphats kovalent an die Phosphor-enthaltende Einheit gebunden ist.
20. Nucleotid nach Anspruch 1, wobei das Ion ein nachweisbares Ion umfaßt.
DE3382782T 1982-06-23 1983-06-22 Markierte modifizierte Nukleotide und Polynukleotide und Verfahren zu deren Herstellung, Verwendung und Detektion. Expired - Lifetime DE3382782T2 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US39144082A 1982-06-23 1982-06-23

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE3382782D1 DE3382782D1 (de) 1995-04-06
DE3382782T2 true DE3382782T2 (de) 1995-10-19

Family

ID=23546604

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE8383106112T Expired - Lifetime DE3382626T2 (de) 1982-06-23 1983-06-22 Markierte modifizierte nucleotide und polynucleotide, verfahren zu ihrer herstellung, verwendung und aufspuerung.
DE3382822T Expired - Lifetime DE3382822T2 (de) 1982-06-23 1983-06-22 Markierte modifizierte Nucleotide und Polynucleotide und Verfahren zu deren Herstellung, Verwendung und Nachweis
DE3382782T Expired - Lifetime DE3382782T2 (de) 1982-06-23 1983-06-22 Markierte modifizierte Nukleotide und Polynukleotide und Verfahren zu deren Herstellung, Verwendung und Detektion.

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE8383106112T Expired - Lifetime DE3382626T2 (de) 1982-06-23 1983-06-22 Markierte modifizierte nucleotide und polynucleotide, verfahren zu ihrer herstellung, verwendung und aufspuerung.
DE3382822T Expired - Lifetime DE3382822T2 (de) 1982-06-23 1983-06-22 Markierte modifizierte Nucleotide und Polynucleotide und Verfahren zu deren Herstellung, Verwendung und Nachweis

Country Status (11)

Country Link
US (2) US8097405B1 (de)
EP (7) EP0618228A1 (de)
JP (4) JP2625095B2 (de)
AT (3) ATE119164T1 (de)
AU (2) AU585199B2 (de)
CA (1) CA1223831A (de)
DE (3) DE3382626T2 (de)
DK (1) DK291183A (de)
ES (4) ES8700270A1 (de)
IL (1) IL69051A (de)
NO (1) NO832292L (de)

Families Citing this family (207)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL70765A (en) * 1983-01-27 1988-07-31 Enzo Biochem Inc Substrates containing non-radioactive chemically-labeled polynucleotides and methods using them
FR2540122B1 (fr) * 1983-01-27 1985-11-29 Centre Nat Rech Scient Nouveaux composes comportant une sequence d'oligonucleotide liee a un agent d'intercalation, leur procede de synthese et leur application
US4994373A (en) 1983-01-27 1991-02-19 Enzo Biochem, Inc. Method and structures employing chemically-labelled polynucleotide probes
US4948882A (en) * 1983-02-22 1990-08-14 Syngene, Inc. Single-stranded labelled oligonucleotides, reactive monomers and methods of synthesis
CA1254525A (en) * 1983-04-13 1989-05-23 Christine L. Brakel Kit for terminally chemically labeling dna
IL71699A0 (en) * 1983-05-02 1984-07-31 Enzo Biochem Inc Methods and kits for the analysis and detection of biological or genetic material
CA1228811A (en) * 1983-05-05 1987-11-03 Robert G. Pergolizzi Assay method utilizing polynucleotide sequences
ATE78301T1 (de) * 1983-05-31 1992-08-15 Orgenics Ltd Molekulare genetische sonde und verfahren zu ihrer herstellung, testmethode und satz in denen diese molekulare genetische sonde gebraucht wird.
CA1338856C (en) * 1983-07-05 1997-01-21 Jannis Stavrianopoulos In vivo labelling of polynucleotide sequences
EP0146039A3 (de) * 1983-12-12 1986-08-27 Miles Inc. Hybridisierungstest mit Immobilisierung von Hybriden mittels Antihybridbindung
IL73578A (en) * 1983-12-12 1989-09-28 Miles Lab Method and reagent for the detection of polynucleotide sequence in sample of dna or rna by using a nucleic acid probe and contact of duplexes with immobilizing antibody
EP0144914A3 (de) * 1983-12-12 1986-08-13 Miles Inc. Hybridisierungstest mittels markierter Paare von hybridbindenden Reagenzien
US4724202A (en) * 1983-12-12 1988-02-09 Molecular Diagnostics, Inc. Use of non-hybridizable nucleic acids for the detection of nucleic acid hybridization
US4777129A (en) * 1983-12-12 1988-10-11 Molecular Diagnostics, Inc. Nucleic acid probe detectable by specific nucleic acid binding protein
USRE43096E1 (en) 1984-01-16 2012-01-10 California Institute Of Technology Tagged extendable primers and extension products
US4707440A (en) * 1984-01-30 1987-11-17 Enzo Biochem, Inc. Nucleic acid hybridization assay and detectable molecules useful in such assay
US4748111A (en) * 1984-03-12 1988-05-31 Molecular Diagnostics, Inc. Nucleic acid-protein conjugate used in immunoassay
CA1260372A (en) * 1984-04-27 1989-09-26 Elazar Rabbani Hybridization method for the detection of genetic materials
US4766062A (en) * 1984-05-07 1988-08-23 Allied Corporation Displacement polynucleotide assay method and polynucleotide complex reagent therefor
US4766064A (en) * 1984-05-07 1988-08-23 Allied Corporation Displacement polynucleotide assay employing polyether and diagnostic kit
US4670380A (en) * 1984-05-23 1987-06-02 Molecular Diagnostics, Inc. Assays utilizing labeled nucleic acid probes
CA1264451A (en) * 1984-05-23 1990-01-16 Nanibhushan Dattagupta Nucleic acid probe coupled to radioactive label
US4957858A (en) * 1986-04-16 1990-09-18 The Salk Instute For Biological Studies Replicative RNA reporter systems
IL71947A (en) * 1984-05-29 1987-10-30 Yeda Research And Dev Comp Ltd Enzyme hydrazides and method for detection and determination of glycoconjugates
FR2565996B1 (fr) * 1984-06-15 1988-01-22 Inst Nat Sante Rech Med Acides nucleiques marques chimiquement, leur utilisation et necessaire pour sa mise en oeuvre
DE3431536A1 (de) * 1984-08-28 1986-03-13 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Derivatisierte nucleinsaeure-sequenz, verfahren zu deren herstellung sowie deren verwendung zum nachweis von nucleinsaeuren
US4692509A (en) * 1984-11-27 1987-09-08 Molecular Diagnostics, Inc. Radioactive labeling of proteins with nucleosides or nucleotides
US4670379A (en) * 1984-12-19 1987-06-02 E. I. Du Pont De Nemours And Company Polynucleotide hydridization assays employing catalyzed luminescence
ATE43348T1 (de) * 1985-01-24 1989-06-15 Neopharmed Spa Acylierte cytidin-diphosphat-choline, verfahren zu ihrer herstellung und ihre therapeutische verwendung.
ATE48850T1 (de) * 1985-03-21 1990-01-15 Molecular Diagnostics Inc Spezifische jodierung von nukleinsaeure.
US4767699A (en) * 1985-05-02 1988-08-30 Allied Corporation Diagnostic reagent, kit and method employing polynucleotide displacement, separation, enzymatic cleavage and adenosine phosphate detection
US5273882A (en) * 1985-06-13 1993-12-28 Amgen Method and kit for performing nucleic acid hybridization assays
US4833251A (en) * 1985-06-25 1989-05-23 Siska Diagnostics, Inc. Compounds for tagging nucleic acid probes
JPS622164A (ja) * 1985-06-25 1987-01-08 シスカ・ダイアグノステイツクス・インコ−ポレ−テツド Ｎ４−（置換アミノ）シチジンを含む核酸プロ−ブ
US4780405A (en) * 1985-06-25 1988-10-25 Siska Diagnostics, Inc. Carbonic anhydrase inhibitor-tagged nucleic acid probes
CA1295559C (en) * 1985-08-13 1992-02-11 Jannis Stavrianopoulos Method for labeling polynucleotide sequences
JP2509574B2 (ja) * 1985-08-15 1996-06-19 アモコ・コーポレーション 標識付けした核酸
JP3293820B2 (ja) * 1985-12-13 2002-06-17 エンゾ− バイオケム インコ−ポレイテツド 標的ポリヌクレオチドにハイブリツド形成するための新規な一工程方法とポリヌクレオチド化合物
JPS638396A (ja) * 1986-06-30 1988-01-14 Wakunaga Pharmaceut Co Ltd ポリ標識化オリゴヌクレオチド誘導体
US6013772A (en) * 1986-08-13 2000-01-11 Bayer Corporation Antibody preparations specifically binding to unique determinants of CEA antigens or fragments thereof and use of the antibody preparations in immunoassays
GB8621337D0 (en) * 1986-09-04 1986-10-15 Agricultural Genetics Co Non-radioactive nucleic acid hybridization probes
SE454781B (sv) * 1986-10-17 1988-05-30 Wallac Oy Hybridiseringsforfarande for detektion av polynukleotidsekvens
AU619170B2 (en) * 1987-01-09 1992-01-23 Abbott Laboratories Diagnostic assays using nucleic acid probes
US5057302A (en) * 1987-02-13 1991-10-15 Abbott Laboratories Bifunctional chelating agents
US5227474A (en) * 1987-02-13 1993-07-13 Abbott Laboratories Bifunctional chelating agents
AU622104B2 (en) * 1987-03-11 1992-04-02 Sangtec Molecular Diagnostics Ab Method of assaying of nucleic acids, a reagent combination and kit therefore
EP0304184B1 (de) * 1987-07-31 1994-10-12 Gen-Probe Incorporated Polynukleotidentest unter Benutzung von Oligonukleotiden zur Eliminierung von unerwünschten Kreuzreaktionen
GB2209754A (en) * 1987-09-17 1989-05-24 Thomas Lee Mattson Polyaldehydic polynucleotides in use as probes,their preparation and use
US5245026A (en) * 1987-09-24 1993-09-14 Abbott Laboratories Metal containing 8-hydroxyquinoline chelating agents
US5021567A (en) * 1987-09-24 1991-06-04 Abbott Laboratories 8-hydroxyquinoline chelating agents
EP0972779A3 (de) * 1987-10-28 2004-10-20 Howard Florey Institute Of Experimental Physiology And Medicine Oligonucleotid-Polyamid Konjugate
US5525465A (en) * 1987-10-28 1996-06-11 Howard Florey Institute Of Experimental Physiology And Medicine Oligonucleotide-polyamide conjugates and methods of production and applications of the same
US4886741A (en) * 1987-12-09 1989-12-12 Microprobe Corporation Use of volume exclusion agents for the enhancement of in situ hybridization
US5109124A (en) * 1988-06-01 1992-04-28 Biogen, Inc. Nucleic acid probe linked to a label having a terminal cysteine
US5047523A (en) * 1988-08-02 1991-09-10 Ortho Diagnostic Systems Inc. Nucleic acid probe for detection of neisseria gonorrhoea
US5185243A (en) * 1988-08-25 1993-02-09 Syntex (U.S.A.) Inc. Method for detection of specific nucleic acid sequences
US5858652A (en) * 1988-08-30 1999-01-12 Abbott Laboratories Detection and amplification of target nucleic acid sequences
KR910700348A (ko) * 1988-12-07 1991-03-14 원본미기재 삽입을 함유하는 또는 결실에 해당하는 dna의 풍부화 및 클로닝 방법
US5324829A (en) * 1988-12-16 1994-06-28 Ortho Diagnostic Systems, Inc. High specific activity nucleic acid probes having target recognition and signal generating moieties
GR1000347B (el) * 1988-12-21 1992-06-25 Ortho Diagnostic Systems Inc Μεθοδος παραγωγης νουκλεοτιδικων ανιχνευτων χρησιμοποιωντας ενα συμπληρωμα γεφυρωσεως.
US5998135A (en) 1989-02-24 1999-12-07 Enzo Diagnostics, Inc. Energy transfer hybridization assay using intercalators and lanthanide metals
DE69028725T2 (de) * 1989-02-28 1997-03-13 Canon Kk Partiell doppelsträngiges Oligonukleotid und Verfahren zu seiner Bildung
CA2012982A1 (en) * 1989-03-27 1990-09-27 Frank W. Hobbs Process for rapid nucleic acid detection by incorporating a reporter moiety into amplified target nucleic acid
DE3916871A1 (de) * 1989-05-24 1990-11-29 Boehringer Mannheim Gmbh Modifiziertes phosphoramidit-verfahren zur herstellung von modifizierten nukleinsaeuren
EP0407816A3 (en) * 1989-07-14 1993-01-27 Abbott Laboratories Base modified nucleosides
DE4020529A1 (de) * 1989-09-12 1991-03-21 Roxana Vasiloiu Multifunktionelle(s) enzym(e) mit nucleosid-didesoxyribosyltransferase(n) und/oder nucleoside-desoxyribosyltransferasen(n) und/oder kinease- und/oder reduktase- und/oder desaminase- und/oder polymerase-aktivitaet
EP0422861B1 (de) * 1989-10-13 2000-05-17 Zeneca Limited Sonden
WO1993024511A1 (en) * 1992-05-29 1993-12-09 Howard Florey Institute Of Experimental Physiology And Medicine Oligonucleotide-polyamide conjugates
WO1991011533A1 (en) * 1990-01-26 1991-08-08 E.I. Du Pont De Nemours And Company Method for isolating primer extension products from template-directed dna polymerase reactions
EP0537299A1 (de) * 1990-03-29 1993-04-21 Gilead Sciences, Inc. Disulfidkonjugate von oligonukleotid-transportagenten
US5677440A (en) * 1990-07-16 1997-10-14 Howard Florey Institute Of Experimental Physiology And Medicine Oligonucleotide-polyamide conjugates
US5612199A (en) * 1991-10-11 1997-03-18 Behringwerke Ag Method for producing a polynucleotide for use in single primer amplification
US5292938A (en) * 1992-04-13 1994-03-08 Associated Universities, Inc. Synthesis of 4-substituted-trans-1, 2-diaminocyclohexyl polyaminocarboxylate metal chelating agents for the preparation of stable radiometal antibody immunoconjugates for therapy and spect and pet imaging
CA2141450A1 (en) * 1992-07-31 1994-02-17 Maureen Laney Method for introducing defined sequences at the 3' end of polynucleotides
US5312527A (en) * 1992-10-06 1994-05-17 Concordia University Voltammetric sequence-selective sensor for target polynucleotide sequences
US5616464A (en) * 1994-12-27 1997-04-01 Naxcor Nucleic acid sequence detection employing amplification probes
US5767259A (en) * 1994-12-27 1998-06-16 Naxcor Oligonucleotides containing base-free linking groups with photoactivatable side chains
US6495676B1 (en) 1993-04-13 2002-12-17 Naxcor Nucleic acid sequence detection employing probes comprising non-nucleosidic coumarin derivatives as polynucleotide-crosslinking agents
US6294323B1 (en) 1993-04-14 2001-09-25 Behringwerke Ag Self initiating single primer amplification of nucleic acids
US5925517A (en) * 1993-11-12 1999-07-20 The Public Health Research Institute Of The City Of New York, Inc. Detectably labeled dual conformation oligonucleotide probes, assays and kits
US5446137B1 (en) * 1993-12-09 1998-10-06 Behringwerke Ag Oligonucleotides containing 4'-substituted nucleotides
CA2140081C (en) * 1994-01-13 2008-04-01 Dean L. Engelhardt Process, construct and conjugate for producing multiple nucleic acid copies
US5731153A (en) * 1996-08-26 1998-03-24 The Regents Of The University Of California Identification of random nucleic acid sequence aberrations using dual capture probes which hybridize to different chromosome regions
US5783387A (en) * 1995-02-06 1998-07-21 The Regents Of The University Of California Method for identifying and quantifying nucleic acid sequence aberrations
US6027879A (en) * 1995-08-09 2000-02-22 The Regents Of The University Of California Detection and isolation of nucleic acid sequences using a bifunctional hybridization probe
US5616465A (en) 1995-08-09 1997-04-01 The Regents Of The University Of California Detection and isolation of nucleic acid sequences using competitive hybridization probes
CA2190304A1 (en) 1995-12-15 1997-06-16 Elazar Rabbani Property effecting and/or property exhibiting compositions for therapeutic and diagnostic uses
GB9602028D0 (en) * 1996-02-01 1996-04-03 Amersham Int Plc Nucleoside analogues
DE69738687D1 (de) * 1996-04-12 2008-06-26 Phri Properties Inc Sonden, kits und assays
CA2259493A1 (en) * 1996-07-03 1998-01-08 President And Fellows Of Harvard College Oligonucleotide linker and techniques involving immobilized and linked oligonucleotides
JP4211948B2 (ja) 1996-08-02 2009-01-21 ベーイーオー・メリュー 標的核酸配列の増幅方法
JP4236812B2 (ja) * 1997-09-12 2009-03-11 エクシコン エ／エス オリゴヌクレオチド類似体
DE19741715A1 (de) * 1997-09-22 1999-03-25 Hoechst Ag Pentopyranosyl-Nucleosid, seine Herstellung und Verwendung
FR2780059B1 (fr) 1998-06-17 2002-10-11 Bio Merieux Procede de marquage d'un acide ribonucleique et fragments d'arn marques ainsi obtenus
US6037130A (en) * 1998-07-28 2000-03-14 The Public Health Institute Of The City Of New York, Inc. Wavelength-shifting probes and primers and their use in assays and kits
DE19850594A1 (de) * 1998-11-03 2000-05-04 Biochip Technologies Gmbh Verfahren zur Markierung von Nukleinsäuren
US6613516B1 (en) 1999-10-30 2003-09-02 Affymetrix, Inc. Preparation of nucleic acid samples
US6902891B2 (en) 1999-12-17 2005-06-07 Bio Merieux Process for labeling a nucleic acid
US6489114B2 (en) 1999-12-17 2002-12-03 Bio Merieux Process for labeling a ribonucleic acid, and labeled RNA fragments which are obtained thereby
AU782912B2 (en) 1999-12-28 2005-09-08 Association Francaise Contre Les Myopathies Use of lithium (Li+) for the preparation of a composition for transfection of a polynucleotide into a cell and compositions useful in gene therapy
EP2226330B1 (de) * 2000-06-07 2013-09-18 Pacific Biosciences of California, Inc. Ladeschaltungs-Nukleotide
US7060441B2 (en) 2001-05-04 2006-06-13 Biomerieux Method for fragmenting and labeling DNA involving abasic sites and phosphate labeling
US7338805B2 (en) 2001-05-04 2008-03-04 Bio Merieux Labeling reagents, methods for synthesizing such reagents and methods for detecting biological molecules
FR2827304B1 (fr) 2001-07-16 2004-05-21 Commissariat Energie Atomique Procede et support d'analyse biologique utilisant des oligonucleotides comportant un marqueur activable enzymatiquement
EP1427856B1 (de) 2001-09-18 2011-05-11 Carnegie Institution Of Washington Fusionsproteine zur detektion von analyten
DE602004026173D1 (de) 2003-04-29 2010-05-06 Gen Hospital Corp Verfahren und vorrichtungen für die verzögerte freisetzung von mehreren arzneimitteln
WO2005014642A2 (en) 2003-07-21 2005-02-17 Transgene S.A. Novel multifunctional cytokines
AU2004269196B2 (en) 2003-09-03 2010-03-04 Shmuel Bukshpan Methods and apparatus for rapid crystallization of biomolecules
JP3615752B1 (ja) 2003-11-18 2005-02-02 淳 高橋 細径樹脂捩じりブラシ
US7022492B2 (en) 2003-12-15 2006-04-04 Dade Behring Inc. Ecstasy haptens and immunogens
US6991911B2 (en) 2003-12-15 2006-01-31 Dade Behring Inc. Assay for entactogens
FR2868071B1 (fr) 2004-03-26 2006-06-09 Biomerieux Sa Reactifs de marquage, procedes de synthese de tels reactifs et procedes de detection de molecules biologiques
EP1793847A2 (de) 2004-09-21 2007-06-13 NascaCell IP GmbH Verwendung von mikroproteinen als tryptasehemmer
US7541144B2 (en) * 2005-01-31 2009-06-02 Agilent Technologies, Inc. RNA labeling method
US20090258348A1 (en) 2005-02-02 2009-10-15 Universität Bayreuth Esterases for monitoring protein biosynthesis in vitro
FR2886735B1 (fr) 2005-06-01 2015-09-11 Biomerieux Sa Procede de marquage ou de traitement d'un echantillon biologique contenant des molecules biologiques d'interet, notamment des acides nucleiques
US8076064B2 (en) * 2005-07-09 2011-12-13 Agilent Technologies, Inc. Method of treatment of RNA sample
US7718365B2 (en) * 2005-07-09 2010-05-18 Agilent Technologies, Inc. Microarray analysis of RNA
US7544471B2 (en) * 2005-07-30 2009-06-09 Agilent Technologies, Inc. Preparing RNA from a wax-embedded tissue specimen
US8067391B2 (en) 2005-10-03 2011-11-29 University Health Network ODCase inhibitors for the treatment of malaria
US7700289B2 (en) * 2006-04-03 2010-04-20 Agilent Technologies, Inc. Method for labeling RNA
US8647119B1 (en) 2006-04-18 2014-02-11 President And Fellows Of Harvard College Methods and kits with fluorescent probes for caries detection
US20080038686A1 (en) * 2006-04-18 2008-02-14 Shigemi Nagai Methods and kits for early stage caries detection
US8129115B2 (en) 2006-06-06 2012-03-06 Panasonic Corporation Method of modifying nucleotide chain
US7772390B1 (en) 2006-07-18 2010-08-10 The Regents Of The University Of California Lipid mediated nucleic acid synthesis
US20080091005A1 (en) * 2006-07-20 2008-04-17 Visigen Biotechnologies, Inc. Modified nucleotides, methods for making and using same
BRPI0806350A2 (pt) 2007-01-30 2011-09-06 Transgene Sa uso de uma molécula de ácido nucléico, uso de um vetor, uso de um particula viral infecciosa, vetores, particula viral infecciosa e composição
FR2917090B1 (fr) 2007-06-11 2012-06-15 Biomerieux Sa Reactifs de marquage portant des fonctions diazo et nitro, procedes de synthese de tels reactifs et procedes de detection de molecules biologiques
CN103992406A (zh) 2007-08-24 2014-08-20 乌利班-马克西姆利安大学 抑制β1-肾上腺素受体抗体的突变双环化受体肽
FR2934595B1 (fr) 2008-07-29 2013-04-05 Biomerieux Sa Reactifs de marquage ayant un noyau pyridine portant une fonction diazomethyle, procedes de synthese de tels reactifs et procedes de detection de molecules biologiques
GB0815968D0 (en) * 2008-09-03 2008-10-08 Angeletti P Ist Richerche Bio Antiviral agents
EP2382235B1 (de) 2008-12-19 2016-02-24 Christiane Hilger Neues caviidae-allergen und anwendungen davon
EP2367564A1 (de) 2008-12-22 2011-09-28 Universität Regensburg Norrin bei der behandlung von erkrankungen im zusammenhang mit erhöhter tgf-beta-aktivität
KR20110118811A (ko) 2009-02-13 2011-11-01 노파르티스 아게 비-리보좀 펩티드 합성효소를 코딩하는 생합성 클러스터의 핵산 분자 및 그의 용도
DE102010018878B4 (de) 2009-04-30 2013-09-26 Julius-Maximilians-Universität Würzburg Neue Zell-Linie zur Fluoreszenz-basierten Detektion von funktionell aktiven Antikörpern und Autoantikörpern gegen den Beta1-adrenergen Rezeptor
CA2770075C (en) 2009-08-07 2021-08-24 Perrine Martin Composition for treating hbv infection
US20130012471A1 (en) 2009-08-26 2013-01-10 Rita Gerardy-Schahn Means and methods for producing artificial capsular polysaccharides of neisseria meningitidis
CN102782156A (zh) * 2009-12-31 2012-11-14 文塔纳医疗系统公司 用于生成独特特异性核酸探针的方法
WO2011138457A1 (en) 2010-05-07 2011-11-10 Technische Universität Graz Ucp1 (thermogenin) - inducing agents for use in the treatment of a disorder of the energy homeostasis
US20130108687A1 (en) 2010-05-21 2013-05-02 Universitat Fur Bodenkultur Wien Compositions for use in treating or diagnosing bone disorders and/or cardiovascular disorders
EP2576617B1 (de) 2010-06-04 2016-04-27 Georg-August-Universität Göttingen Stiftung Öffentlichen Rechts Universitätsmedizin MONOKLONALE ANTIKÖRPER, DIE AUF Aß-OLIGOMERE ZIELEN
CA2802635A1 (en) 2010-06-18 2011-12-22 Xiberscience Gmbh Peptides as active agents to stabilize biologic barriers
EP2609430A1 (de) 2010-08-26 2013-07-03 F.Hoffmann-La Roche Ag Rekombinantes fc-fusionsprotein der fünften fibronectin-typ-iii-domäne von dcc
FR2968302B1 (fr) 2010-12-06 2012-11-30 Biomerieux Sa Procedes de fonctionalisation et reactifs utilises dans de tels procedes utilisant un anhydride isatoique ou un de ses derives, molecules biologiques ainsi traitees et kits
WO2012095841A1 (en) 2011-01-10 2012-07-19 State Of Israel, Ministry Of Agriculture And Rural Development, A.R.O. - Volcani Center Improved tomato plants
WO2012113779A1 (en) 2011-02-21 2012-08-30 Medizinische Universität Wien Means and methods for treating a disease or disorder related to lymphangiogenesis or preventing metastasis
EP2522689A1 (de) 2011-05-13 2012-11-14 Universität Bayreuth Nicht virale Transfektionssysteme
EP2523002A1 (de) 2011-05-13 2012-11-14 Universität Bayreuth Verwendung von magnetischen Nanoteilchen als intrazelluläre Liftsysteme
WO2013017656A1 (en) 2011-08-02 2013-02-07 Medizinische Universität Wien Antagonists of ribonucleases for treating obesity
WO2013024175A2 (en) 2011-08-17 2013-02-21 Technische Universität München Diagnostic means and methods for type 2 diabetes
EP3431095B1 (de) 2011-12-22 2023-11-01 Medizinische Universität Wien Cyclotide als immunsuppressive wirkstoffe
EP2626066A1 (de) 2012-02-10 2013-08-14 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Kombinationstherapie mit selektiven VEGFR-2-Inhibitoren und MEK-Inhibitoren
EP2820037B1 (de) 2012-02-29 2020-02-19 Syngenta Participations AG Modulation der wüchsigkeit von saatgut
US9944685B2 (en) 2012-07-02 2018-04-17 Medizinische Universität Wien Complement split product C4d for the treatment of inflammatory conditions
US20150152453A1 (en) 2012-07-04 2015-06-04 Basf Se Genetically modified microorganisms capable of producing beta-glucans and methods for producing beta-glucans
FR2994184B1 (fr) 2012-08-02 2017-12-08 Biomerieux Sa Procedes de fonctionalisation et reactifs utilises dans de tels procedes utilisant un anhydride aza-isatoique ou un de ses derives, molecules biologiques ainsi traitees et kits
EP2695950A1 (de) 2012-08-10 2014-02-12 Blackfield AG Marker für die Empfindlichkeit auf einen Hemmer des Fibroblastenwachstumsrezeptors
EP2708241A1 (de) 2012-09-12 2014-03-19 Netris Pharma Rekombinantes Fc-Fusionsprotein der zwei Immunoglobulin-Domänen von UNC5
WO2014043140A1 (en) * 2012-09-12 2014-03-20 The Regents Of The University Of California Accurate genome sequencing of single cells by single-stranded amplification and sequencing
EP2708231A1 (de) 2012-09-12 2014-03-19 Netris Pharma Kombinierte Behandlung mit Netrin-1-Störwirkstoff und chemotherapeutischem Wirkstoff
US10203338B2 (en) 2013-05-14 2019-02-12 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Stabilized liquid formulations containing receptors
CA2916800C (en) 2013-06-28 2022-10-25 Ethris Gmbh Compositions comprising a component with oligo(alkylene amine) moieties
WO2015022326A1 (en) 2013-08-12 2015-02-19 Xiber Science Gmbh Peptides as active agents for treating primary graft dysfunction
DK2808338T3 (da) 2013-09-16 2016-06-06 Cemm - Forschungszentrum Für Molekulare Medizin Gmbh Mutant calreticulin til diagnose af myeloide maligniteter
CA2931547A1 (en) 2013-12-09 2015-06-18 Durect Corporation Pharmaceutically active agent complexes, polymer complexes, and compositions and methods involving the same
WO2015121457A1 (en) 2014-02-13 2015-08-20 Westphal Sören Fgf-8 for use in treating diseases or disorders of energy homeostasis
JP2017507946A (ja) 2014-02-26 2017-03-23 エスリス ゲーエムベーハーｅｔｈｒｉｓ ＧｍｂＨ Ｒｎａを胃腸内投与するための組成物
EP3131576B1 (de) 2014-04-17 2021-06-30 Medizinische Hochschule Hannover Mittel und verfahren zur herstellung von neisseria meningitidis kapsel-polysacchariden mit geringer dispersität
WO2016050819A1 (en) 2014-09-30 2016-04-07 Basf Se Method for preparing an acrylamide solution having a low acrylic acid concentration
US10227621B2 (en) 2014-09-30 2019-03-12 Basf Se Method for preparing an aqueous acrylamide solution having a low acrylic acid concentration
EP3201349A2 (de) 2014-09-30 2017-08-09 Basf Se Mittel und verfahren zur herstellung von amidverbindungen mit weniger acrylsäure
EP3034539A1 (de) 2014-12-19 2016-06-22 Ethris GmbH Zusammensetzungen zur Einführung von Nukleinsäure in Zellen
EP3225693A1 (de) 2016-03-29 2017-10-04 Basf Se Verfahren zur herstellung von wässrigen acrylamidlösungen
EP3225694A1 (de) 2016-03-29 2017-10-04 Basf Se Verfahren zur herstellung von acrylamid durch definierte zugabe des biokatalysators
JP7094222B2 (ja) 2016-03-29 2022-07-01 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 増加した粘度を有するポリアクリルアミド溶液の製造方法
WO2017178193A1 (en) 2016-04-14 2017-10-19 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Method for the identification of random polynucleotide or polypeptide sequences with biological activity
EP3448898A1 (de) 2016-04-26 2019-03-06 Basf Se Verfahren zur herstellung einer wässrigen polyacrylamidlösung
WO2017186685A1 (en) 2016-04-26 2017-11-02 Basf Se Method for preparing an aqueous polyacrylamide solution
CA3019652A1 (en) 2016-04-26 2017-11-02 Basf Se Method for preparing an aqueous polyacrylamide solution
MA45496A (fr) 2016-06-17 2019-04-24 Hoffmann La Roche Molécules d'acide nucléique pour la réduction de l'arnm de padd5 ou pad7 pour le traitement d'une infection par l'hépatite b
WO2018185222A1 (en) 2017-04-05 2018-10-11 Acib Gmbh - Austrian Centre Of Industrial Biotechnology Aminoacyl trna synthetases and orthogonal trnas
EP3658176A1 (de) 2017-07-26 2020-06-03 Medizinische Universität Wien Superaktive mutante thymidinkinase zur verwendung in der krebstherapie
KR102585898B1 (ko) 2017-10-16 2023-10-10 에프. 호프만-라 로슈 아게 B형 간염 감염을 치료하기 위한 PAPD5 및 PAPD7 mRNA의 감소용 핵산 분자
EP3740491A1 (de) * 2018-01-18 2020-11-25 Array Biopharma, Inc. Substituierte pyrrolo[2,3-d]pyrimidinverbindungen als ret-kinase-inhibitoren
AU2019258679A1 (en) 2018-04-25 2020-10-15 Ethris Gmbh Cryoprotective agents for particulate formulations
EP3807415A1 (de) 2018-06-13 2021-04-21 Engenes Biotech GmbH Synthese eines methionin-analogons
CN112567033A (zh) 2018-07-03 2021-03-26 豪夫迈·罗氏有限公司 用于调节Tau表达之寡核苷酸
AU2019328501A1 (en) 2018-08-31 2021-03-04 Leibniz-Institut Für Pflanzenbiochemie Calcium dependent protein kinase constructs and uses thereof
CN112654705B (zh) 2018-09-11 2024-07-02 德国亥姆霍兹慕尼黑中心健康与环境研究中心（有限公司） 用在治疗代谢疾病中的微小rna抑制剂
EP3775277A1 (de) 2018-10-05 2021-02-17 MultiplexDX, s.r.o. Verfahren zur diagnose von krankheiten mittels multiplexfluoreszenz und sequenzierung
RU2734941C2 (ru) * 2018-12-19 2020-10-26 Общество с ограниченной ответственностью "ИБМХ-ЭкоБиоФарм" (ООО "ИБМХ-ЭкоБиоФарм") Способ получения модифицированных комбинаторных ДНК библиотек методом твердофазной реакции удлинения праймера на ПЭТ-микрочастицах
EP4031658A1 (de) 2019-08-07 2022-07-27 DB Biotech, AS Verbesserte meerrettichperoxidase-polypeptide
US20220332799A1 (en) 2019-09-04 2022-10-20 Deutsches Zentrum Für Neurodegenerative Erkrankungen E.V. (Dzne) Herv inhibitors for use in treating tauopathies
US20220333120A1 (en) 2019-09-11 2022-10-20 Helmholtz Zentrum München Deutsches Forschungszentrum Für Gesundheit Und Umwelt (Gmbh) Bactericidal phage vectors
AR120393A1 (es) 2019-11-05 2022-02-09 Basf Se Método de almacenamiento de un biocatalizador
CN115697371A (zh) 2020-03-20 2023-02-03 维也纳医科大学 大环寡肽与κ阿片样物质受体配体组合用于MS疗法
JP2023523850A (ja) 2020-05-04 2023-06-07 マルチプレックスディーエックス エス．アール．オー． 新型コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）を検出するための手段および方法
WO2022003142A1 (en) 2020-07-03 2022-01-06 Engenes Biotech Gmbh PYRROLYSYL-tRNA SYNTHETASE VARIANTS AND USES THEREOF
BR112023005318A2 (pt) 2020-09-24 2023-04-25 Medigene Immunotherapies Gmbh Receptores de célula t específicos de prame e uso dos mesmos
EP4119581A1 (de) 2021-07-14 2023-01-18 Helmholtz Zentrum München Deutsches Forschungszentrum für Gesundheit und Umwelt GmbH Neuartige fab-dimere
EP4215042A1 (de) 2022-01-21 2023-07-26 Max-Delbrück-Centrum für Molekulare Medizin Nicht-menschliches säugetier mit mindestens zwei menschlichen leukozytenantigenen (hla) der klasse i allele in seinem genom, verfahren zur herstellung eines solchen säugetiers und dessen verwendungen
JP7386271B2 (ja) 2022-01-21 2023-11-24 本田技研工業株式会社 カムシャフト製造装置
EP4299753A1 (de) 2022-06-29 2024-01-03 enGenes Biotech GmbH Verfahren zum produzieren extrachromosomaler nukleinsäuren
WO2024003799A1 (en) 2022-06-29 2024-01-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Method for producing extrachromosomal nucleic acids
WO2024047155A1 (en) 2022-08-31 2024-03-07 Dsm Ip Assets B.V. Bifidobacterium adolescentis strains, methods and uses thereof for starch degradation and modifying gut flora in non-human mammals
WO2024089180A1 (en) 2022-10-26 2024-05-02 Eximmium Biotechnologies Gmbh Method to determine extracellular vesicle recovery
WO2024115430A1 (en) 2022-11-28 2024-06-06 Helmholtz Zentrum München - Deutsches Forschungszentrum für Gesundheit und Umwelt (GmbH) Acinetobacter baumannii phages

Family Cites Families (115)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1617886A1 (de) 1967-03-06 1971-01-28 Dr Med Karl Theurer Verfahren zur Herstellung von Arzneimitteln mit selektivem Tropismus gegen Krebs und bestimmte Organe
DE1814134A1 (de) 1968-12-12 1970-09-10 Theurer Dr Med Karl Zusatzverfahren zur Herstellung von arzneimitteln mit selektivem Tropismus
US3906031A (en) 1971-03-15 1975-09-16 Research Corp Novel 9-fluorenylmethoxycarbonyl compounds
US4124702A (en) 1971-07-06 1978-11-07 Merck & Co., Inc. Polynucleotides active as inducers of interferon production in living animal cells
US3931397A (en) 1971-11-05 1976-01-06 Beecham Group Limited Biologically active material
US3960840A (en) * 1972-12-29 1976-06-01 University Of Illinois Foundaton Fluorescent derivatives of adenine-containing compounds
JPS49126395A (de) 1973-04-04 1974-12-03
US4038480A (en) 1973-09-17 1977-07-26 Icn Pharmaceuticals, Inc. 6-aminocarbonyl purine 3',5'-cyclic nucleotides
GB1446536A (en) 1975-02-21 1976-08-18 Yeda Res & Dev Pharmaceutically active compositions
IN142734B (de) * 1975-04-28 1977-08-20 Miles Lab
US4230797A (en) * 1975-04-28 1980-10-28 Miles Laboratories, Inc. Heterogenous specific binding assay employing a coenzyme as label
JPS53133283A (en) 1977-04-25 1978-11-20 Agency Of Ind Science & Technol High polymers bonded to adenine nucleotide derivatives
US4119521A (en) 1977-04-25 1978-10-10 Stephen Turner Fluorescent derivatives of activated polysaccharides
SU659573A1 (ru) * 1977-05-31 1979-04-30 Институт биологической физики АН СССР Спин-меченые производные олигорибонуклеотидов как спиновые зонды дл исследовани механизма действи ферментов и способ их получени
US4847240A (en) 1978-01-16 1989-07-11 The Trustees Of Boston University Method of effecting cellular uptake of molecules
US4151065A (en) 1978-01-30 1979-04-24 The Regents Of The University Of California Horizontal slab gel electrophoresis
FR2422956A1 (fr) 1978-04-13 1979-11-09 Pasteur Institut Procede de detection et de caracterisation d'un acide nucleique ou d'une sequence de celui-ci, et reactif enzymatique pour la mise en oeuvre de ce procede
IL57571A (en) * 1978-06-22 1983-03-31 Miles Lab Flavin adenine dinucleotide-labeled conjugates and their use in a homogeneous immunoassay method for determining haptens
US4213893A (en) 1978-10-12 1980-07-22 Miles Laboratories, Inc. Flavin adenine dinucleotide-labeled conjugates for use in specific binding assays
JPS5519239A (en) 1978-07-28 1980-02-09 Green Cross Corp:The Interferon-producing attractant
DE2841414C2 (de) 1978-09-22 1980-04-03 Gesellschaft Fuer Biotechnologische Forschung Mbh (Gbf), 3300 Braunschweig Verfahren zur Herstellung von an Makromoleküle gebundenen, ein Adeninringsystem enthaltenden Koenzymen
US4305922A (en) * 1978-10-04 1981-12-15 University Patents, Inc. Labeling proteins with 99m-Tc by ligand exchange
JPS5564599A (en) 1978-11-08 1980-05-15 Unitika Ltd Adenosine triphosphate derivative
US4224408A (en) * 1978-11-22 1980-09-23 Abbott Laboratories Deoxyribonucleic acid synthesis using binding protein
US4260737A (en) * 1979-03-16 1981-04-07 University Patents, Inc. Radioiodine labeling during protein synthesis
DE3060377D1 (en) * 1979-08-29 1982-07-01 Nihon Mediphysics Co Ltd 2-oxopropionaldehyde bis(thiosemicarbazone)derivatives and their production and use
US4318846A (en) 1979-09-07 1982-03-09 Syva Company Novel ether substituted fluorescein polyamino acid compounds as fluorescers and quenchers
US4259232A (en) 1979-10-23 1981-03-31 Miles Laboratories, Inc. Flavin adenine dinucleotide-labeled protein and polypeptide conjugates
US4310662A (en) * 1979-12-26 1982-01-12 Genentech, Inc. Nucleosidic phosphorylating agent and methods
US4255566A (en) * 1980-02-19 1981-03-10 Miles Laboratories Flavin adenine dinucleotide derivatives and labeled conjugates prepared therefrom
US4500707A (en) 1980-02-29 1985-02-19 University Patents, Inc. Nucleosides useful in the preparation of polynucleotides
US4293310A (en) 1980-03-14 1981-10-06 University Of Pittsburgh Photoelectrochemical immunoassay
US4421735A (en) * 1980-04-17 1983-12-20 The Massachusetts General Hospital Radiolabeled diagnostic compositions and method for making the same
JPS5711999A (en) 1980-06-26 1982-01-21 Chugai Pharmaceut Co Ltd Novel adenosine phosphate compound containing introduced iodine and its preparation
JPS5742632A (en) 1980-08-29 1982-03-10 Takeshi Sasaki Double-chain dna bonded to d-glutamic acid-d-lysine copolymer, its preparation and medicine containing the same
US4358535A (en) * 1980-12-08 1982-11-09 Board Of Regents Of The University Of Washington Specific DNA probes in diagnostic microbiology
DE3152738C2 (de) 1981-02-23 1986-06-19 Institut botaniki AN Kazachskoj SSR, Alma-Ata K}vette für die photometrische Abtastung von Gelsa{ulen
US4415732A (en) 1981-03-27 1983-11-15 University Patents, Inc. Phosphoramidite compounds and processes
US4668777A (en) 1981-03-27 1987-05-26 University Patents, Inc. Phosphoramidite nucleoside compounds
US4529796A (en) * 1981-03-30 1985-07-16 Baker Instruments Corporation Method for making chromogenic and/or fluorogenic substrates for use in monitoring catalytic or enzymatic activity
US4378458A (en) * 1981-03-30 1983-03-29 Baker Instruments Corporation Novel chromogenic and/or fluorogenic substrates for monitoring catalytic or enzymatic activity
CA1194862A (en) * 1981-03-30 1985-10-08 Jemo Kang Method for making chromogenic and/or fluorogenic substrates for use in monitoring catalytic or enzymatic activity
US4708935A (en) 1981-04-10 1987-11-24 Research Corporation (2-5')-Oligo (3'-deoxyadenylate) and derivatives thereof
CA1219824A (en) * 1981-04-17 1987-03-31 David C. Ward Modified nucleotides and methods of preparing and using same
US4711955A (en) * 1981-04-17 1987-12-08 Yale University Modified nucleotides and methods of preparing and using same
US4373071A (en) 1981-04-30 1983-02-08 City Of Hope Research Institute Solid-phase synthesis of polynucleotides
US4401796A (en) 1981-04-30 1983-08-30 City Of Hope Research Institute Solid-phase synthesis of polynucleotides
US4375401A (en) 1981-05-20 1983-03-01 Nicholas Catsimpoolas Electrophoresis system
CA1205028A (en) 1981-07-01 1986-05-27 Jerald C. Hinshaw Fluorescent chelates and labeled specific binding reagents prepared therefrom
CA1180647A (en) 1981-07-17 1985-01-08 Cavit Akin Light-emitting polynucleotide hybridization diagnostic method
US4460772A (en) 1981-08-27 1984-07-17 Miles Laboratories, Inc. 6-[N-(ω-Carboxyalkyl)amino]-1,3-dimethyl-5-formamidouracils
FR2519004B1 (fr) * 1981-12-29 1985-09-27 Pasteur Institut Acide adenosine 5'-triphosphorique modifie et procede de dosage de substances biologiques susceptibles de fixer des produits de degradation de l'acide adenosine 5'-triphosphorique
CA1222691A (en) * 1981-12-29 1987-06-09 Wilhelmus T. Goedemans Method of preparing radionuclide-labelled proteins, in particular antibodies or antibody fragments
FR2519005B1 (fr) * 1981-12-29 1985-10-25 Pasteur Institut Fragments d'adn marques a l'une au moins de leurs extremites par des ribonucleotides modifies reconnaissables par des molecules affines et procede pour realiser une analyse de tels fragments d'adn
DE3381518D1 (de) * 1982-01-22 1990-06-07 Cetus Corp Verfahren zur charakterisierung von hla und die darin benutzten cdns-testmittel.
EP0090789A1 (de) 1982-03-26 1983-10-05 Monsanto Company Chemische DNA-Synthese
US4474948A (en) 1982-04-08 1984-10-02 Biosearch Benzazolides and their employment in phosphite ester oligonucleotide synthesis processes
US4490472A (en) * 1982-06-17 1984-12-25 Imreg, Inc. Sensitive tests for malignancies based on DNA detection
US5241060A (en) * 1982-06-23 1993-08-31 Enzo Diagnostics, Inc. Base moiety-labeled detectable nucleatide
US5260433A (en) * 1982-06-23 1993-11-09 Enzo Diagnostics, Inc. Saccharide specific binding system labeled nucleotides
US4880918A (en) 1982-07-13 1989-11-14 Eliezer Rapaport Arrest and killing of tumor cells by adenosine 5-diphosphate and adenosine-5-triphosphate
JPS5927900A (ja) 1982-08-09 1984-02-14 Wakunaga Seiyaku Kk 固定化オリゴヌクレオチド
JPS5944648A (ja) 1982-09-07 1984-03-13 Sansou Seisakusho:Kk デオキシリボ核酸の塩基配列決定方法
JPS59126252A (ja) 1983-01-08 1984-07-20 Fuji Photo Film Co Ltd Ｄｎａもしくはｄｎａ部分分解物の塩基配列決定法
US4605735A (en) 1983-02-14 1986-08-12 Wakunaga Seiyaku Kabushiki Kaisha Oligonucleotide derivatives
US4948882A (en) * 1983-02-22 1990-08-14 Syngene, Inc. Single-stranded labelled oligonucleotides, reactive monomers and methods of synthesis
US4517338A (en) 1983-06-20 1985-05-14 Chiron Corporation Multiple reactor system and method for polynucleotide synthesis
US4483964A (en) 1983-06-20 1984-11-20 Chiron Corporation Reactor system and method for polynucleotide synthesis
US4598049A (en) 1983-08-31 1986-07-01 Systec Inc. General purpose gene synthesizer
JPS5993100A (ja) 1983-10-31 1984-05-29 Wakunaga Seiyaku Kk オリゴヌクレオチド誘導体
JPS6096610A (ja) 1983-10-31 1985-05-30 Agency Of Ind Science & Technol ニコチンアミド−アデニン−ジヌクレオチドホスフエ−トを結合した高分子物質
US5118800A (en) 1983-12-20 1992-06-02 California Institute Of Technology Oligonucleotides possessing a primary amino group in the terminal nucleotide
US5118802A (en) 1983-12-20 1992-06-02 California Institute Of Technology DNA-reporter conjugates linked via the 2' or 5'-primary amino group of the 5'-terminal nucleoside
FR2556726B1 (fr) 1983-12-20 1987-02-20 California Inst Of Techn Compositions a base d'oligonucleotides monocatenaires et procede pour leur preparation
US5015733A (en) 1983-12-20 1991-05-14 California Institute Of Technology Nucleosides possessing blocked aliphatic amino groups
US4849513A (en) 1983-12-20 1989-07-18 California Institute Of Technology Deoxyribonucleoside phosphoramidites in which an aliphatic amino group is attached to the sugar ring and their use for the preparation of oligonucleotides containing aliphatic amino groups
US5171534A (en) 1984-01-16 1992-12-15 California Institute Of Technology Automated DNA sequencing technique
US4707440A (en) 1984-01-30 1987-11-17 Enzo Biochem, Inc. Nucleic acid hybridization assay and detectable molecules useful in such assay
JPH0610665B2 (ja) 1984-02-01 1994-02-09 株式会社日立製作所 核酸の塩基配列決定装置
JPS60169495A (ja) 1984-02-15 1985-09-02 Takeda Chem Ind Ltd 変性されたｄνａおよびその用途
JPS60242368A (ja) 1984-05-16 1985-12-02 Hitachi Ltd 核酸塩基配列決定方法
FR2568254B1 (fr) 1984-07-25 1988-04-29 Centre Nat Rech Scient Application d'oligonucleotides lies a un agent intercalant, notamment a titre de medicament
JPS61103824A (ja) 1984-10-27 1986-05-22 Nippon Kayaku Co Ltd ポリリボイノシン酸・ポリリボシチヂル酸・ポリ−レ−リジン複合体の注射用製剤の新規調製法
US4828979A (en) 1984-11-08 1989-05-09 Life Technologies, Inc. Nucleotide analogs for nucleic acid labeling and detection
US4833251A (en) 1985-06-25 1989-05-23 Siska Diagnostics, Inc. Compounds for tagging nucleic acid probes
US4757141A (en) 1985-08-26 1988-07-12 Applied Biosystems, Incorporated Amino-derivatized phosphite and phosphate linking agents, phosphoramidite precursors, and useful conjugates thereof
US5258538A (en) 1985-08-26 1993-11-02 Applied Biosystems, Inc. 2,3-disubstituted-1,3,2-oxazaphosphacycloalkanes as nucleic acid linking agents
US4868105A (en) 1985-12-11 1989-09-19 Chiron Corporation Solution phase nucleic acid sandwich assay
US4855225A (en) 1986-02-07 1989-08-08 Applied Biosystems, Inc. Method of detecting electrophoretically separated oligonucleotides
US5212059A (en) 1988-01-11 1993-05-18 Microprobe Corporation Oligonucleotide probes for the detection of periodontal pathogens
US5366860A (en) 1989-09-29 1994-11-22 Applied Biosystems, Inc. Spectrally resolvable rhodamine dyes for nucleic acid sequence determination
US5811232A (en) 1989-12-04 1998-09-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides for Papillomavirus
AU7662091A (en) 1990-03-21 1991-10-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Reagents and methods for modulating gene expression through rna mimicry
US5874564A (en) 1990-03-21 1999-02-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Reagents and methods for modulating gene expression through RNA mimicry
US5665710A (en) 1990-04-30 1997-09-09 Georgetown University Method of making liposomal oligodeoxynucleotide compositions
US5166195A (en) 1990-05-11 1992-11-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense inhibitors of the human immunodeficiency virus phosphorothioate oligonucleotides
BR9106702A (pt) 1990-07-27 1993-06-08 Isis Pharmaceuticals Inc Analogo de oligonucleotideos e processos para modular a producao de uma proteina por um organismo e para tratar um organismo
AU649717B2 (en) 1990-08-16 1994-06-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides for modulating the effects of cytomegalovirus infections
US5162654A (en) 1991-02-01 1992-11-10 Wisconsin Alumni Research Foundation Detection apparatus for electrophoretic gels
US5242906A (en) 1991-04-22 1993-09-07 University Of North Carolina At Chapel Hill Antisense oligonucleotides against Epstein-Barr virus
ATE143700T1 (de) 1991-09-23 1996-10-15 Pfizer Verfahren für die detektion von spezifische mrns und dns in zellen
US5652094A (en) 1992-01-31 1997-07-29 University Of Montreal Nucleozymes
US5643780A (en) 1992-04-03 1997-07-01 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for modulating RNA activity through modification of the 5' cap structure of RNA
US6303297B1 (en) 1992-07-17 2001-10-16 Incyte Pharmaceuticals, Inc. Database for storage and analysis of full-length sequences
US5541311A (en) 1992-12-07 1996-07-30 Third Wave Technologies, Inc. Nucleic acid encoding synthesis-deficient thermostable DNA polymerase
JPH0793370A (ja) 1993-09-27 1995-04-07 Hitachi Device Eng Co Ltd 遺伝子データベース検索システム
US5980096A (en) 1995-01-17 1999-11-09 Intertech Ventures, Ltd. Computer-based system, methods and graphical interface for information storage, modeling and stimulation of complex systems
DE19508366C2 (de) 1995-03-10 1998-01-29 Evotec Biosystems Gmbh Verfahren zum direkten Nachweisen weniger Nucleinsäurestränge
WO1997023647A1 (en) 1995-12-22 1997-07-03 Behringwerke Aktiengesellschaft Homogeneous amplification and detection of nucleic acids
US5998383A (en) 1996-08-02 1999-12-07 Wright; Jim A. Antitumor antisense sequences directed against ribonucleotide reductase
US6189013B1 (en) 1996-12-12 2001-02-13 Incyte Genomics, Inc. Project-based full length biomolecular sequence database
US5953727A (en) 1996-10-10 1999-09-14 Incyte Pharmaceuticals, Inc. Project-based full-length biomolecular sequence database
TW520297B (en) 1996-10-11 2003-02-11 Sequus Pharm Inc Fusogenic liposome composition and method
US5966712A (en) 1996-12-12 1999-10-12 Incyte Pharmaceuticals, Inc. Database and system for storing, comparing and displaying genomic information
WO1999005324A1 (en) 1997-07-25 1999-02-04 Affymetrix, Inc. System for providing a polymorphism database

Also Published As

Publication number Publication date
EP0285058A2 (de) 1988-10-05
EP0286898B1 (de) 1998-04-29
EP0286898A2 (de) 1988-10-19
EP0285057A3 (en) 1990-10-31
JP2760466B2 (ja) 1998-05-28
NO832292L (no) 1983-12-27
AU1617983A (en) 1984-01-05
IL69051A0 (en) 1983-10-31
JPH10158294A (ja) 1998-06-16
JPH06234787A (ja) 1994-08-23
ES547320A0 (es) 1986-03-16
EP0618228A1 (de) 1994-10-05
DK291183A (da) 1983-12-24
IL69051A (en) 1988-02-29
ES8802257A1 (es) 1988-04-16
EP0285057A2 (de) 1988-10-05
EP0097373A2 (de) 1984-01-04
EP0285057B1 (de) 1995-03-01
DE3382626T2 (de) 1993-05-06
ES8700324A1 (es) 1986-10-01
DE3382822D1 (de) 1998-06-04
ES8700270A1 (es) 1986-09-16
DK291183D0 (da) 1983-06-23
EP0285058A3 (de) 1990-09-26
ATE81342T1 (de) 1992-10-15
US6992180B1 (en) 2006-01-31
DE3382626D1 (de) 1992-11-12
EP0097373B1 (de) 1992-10-07
EP0097373A3 (en) 1984-06-06
EP0302175A3 (de) 1990-10-31
ATE165605T1 (de) 1998-05-15
JP3170235B2 (ja) 2001-05-28
ATE119164T1 (de) 1995-03-15
US8097405B1 (en) 2012-01-17
JPH11292892A (ja) 1999-10-26
EP0302175A2 (de) 1989-02-08
EP0285950A2 (de) 1988-10-12
EP0285950A3 (de) 1990-11-07
DE3382822T2 (de) 1998-11-19
EP0286898A3 (de) 1990-08-08
JP2625095B2 (ja) 1997-06-25
ES8606903A1 (es) 1986-03-16
AU585199B2 (en) 1989-06-15
DE3382782D1 (de) 1995-04-06
CA1223831A (en) 1987-07-07
AU4149389A (en) 1990-01-04
JPS5962600A (ja) 1984-04-10
ES523503A0 (es) 1986-09-16
ES547319A0 (es) 1988-04-16
ES539316A0 (es) 1986-10-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE3382782T2 (de) Markierte modifizierte Nukleotide und Polynukleotide und Verfahren zu deren Herstellung, Verwendung und Detektion.
DE3586629T2 (de) Nukleotidanaloga zur markierung von nukleinsaeuren und nachweis.
DE68927373T2 (de) Verfahren und mittel zum nachweis von nukleinsäuresequenzen
DE3486400T2 (de) Bestimmungsmethode unter Verwendung von Polynucleotidsequenzen.
DE69433811T2 (de) Dns - sequenzierung durch massenspektronomie
EP1725572B1 (de) Makromolekulare nukleotidverbindungen und methoden zu deren anwendung
DE3854969T2 (de) Polynukleotid-Bestimmung mit selektierbaren Spaltstellen
DE60310532T2 (de) Bestimmung von nukleinsäuren
JP2705914B2 (ja) 新規ポリヌクレオチド
DE3750080T2 (de) Deoxyribonucleosid-phosphoramidite und deren verwendung zur hertellung von oligonukleotiden.
JP3514679B2 (ja) ポリヌクレオチド配列検出のための改変されたプライマー伸長反応
US5260433A (en) Saccharide specific binding system labeled nucleotides
EP0608737A1 (de) Sulfocumarinhaltige Nukleotide und deren Verwendung in Nachweisverfahren für Nukleinsäuren
JPS61109797A (ja) 標識化ヌクレオチドおよび標識化ポリヌクレオチド
EP1018007B1 (de) Adressierbares modulares erkennungssystem, seine herstellung und verwendung
JPH02245663A (ja) 高度な特異的活性を有するヌクレオチドプローブの化学的製造方法
EP1425417B1 (de) Detektion von wechselwirkungen auf sonden-arrays
Sojka et al. Evaluating the quality of oligonucleotides that are immobilized on glass supports for biosensor development
DE60123056T2 (de) Basenanaloge
WO1994012518A2 (de) Reagenz zur kupplung veschiedener substanzen an nukleinsäuren sowie verfahren zu dessen herstellung
EP0324468A2 (de) Verfahren zum hochspezifischen Nachweis von Nukleinsäuren in Lösung
US20070009889A1 (en) Nucleoside derivative, modifed oligonucleotide, method for their syntesis and applicantions thereof
Marzilli et al. Osmium-labeled Polynucleotides: Reaction of Osmium Tetraoxide, with Poly-1, N6-Ethenoadenylic Acid
DE19627032C2 (de) Verfahren zum Abbau von potentiell veränderten Nukleinsäuren
JPS6157595A (ja) ポリデオキシリボヌクレオチドまたはポリリボヌクレオチドの酵素標識化法

Legal Events

Date Code Title Description
8363 Opposition against the patent