JPS60242368A - 核酸塩基配列決定方法 - Google Patents
核酸塩基配列決定方法Info
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- JPS60242368A JPS60242368A JP59096454A JP9645484A JPS60242368A JP S60242368 A JPS60242368 A JP S60242368A JP 59096454 A JP59096454 A JP 59096454A JP 9645484 A JP9645484 A JP 9645484A JP S60242368 A JPS60242368 A JP S60242368A
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- Japan
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- dna
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- nucleic acid
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の利用分野〕
本発明はデオキシリボン核酸（ＤＮＡ）塩基配列決定方
法に係り、特にその高精度化、高速化に好適なりＮＡの
検出および分離できる核酸塩基配列決定方法に関する６ 〔発明の背景〕 ＤＮＡ断片混合物を電気泳動法により分離し、分子量の
大小順に整列させ、これを検出する際、従来は、ＤＮＡ
分子の末端を泳動前に３２ｐ、８５ｓなどの放射性同位
体や、ビオチン系の蛍光色素で標識したり、あるいは泳
動分離後、銀（蛋白質・核酸・酵素）やエチジウム・プ
ロミド、アクリジンオレンジ、プロフラビンなどの蛍光
色素（蛋白質・核酸・酵素別冊：蛍光測定の原理と生体
系への応用、ｐｐ２０６−２３１）で染色したりしてＤ
ＮＡ断片の泳動分離帯を検出したが、いずれも塩基種識
別可能な染色法ではなかった。
法に係り、特にその高精度化、高速化に好適なりＮＡの
検出および分離できる核酸塩基配列決定方法に関する６ 〔発明の背景〕 ＤＮＡ断片混合物を電気泳動法により分離し、分子量の
大小順に整列させ、これを検出する際、従来は、ＤＮＡ
分子の末端を泳動前に３２ｐ、８５ｓなどの放射性同位
体や、ビオチン系の蛍光色素で標識したり、あるいは泳
動分離後、銀（蛋白質・核酸・酵素）やエチジウム・プ
ロミド、アクリジンオレンジ、プロフラビンなどの蛍光
色素（蛋白質・核酸・酵素別冊：蛍光測定の原理と生体
系への応用、ｐｐ２０６−２３１）で染色したりしてＤ
ＮＡ断片の泳動分離帯を検出したが、いずれも塩基種識
別可能な染色法ではなかった。
それゆえ、従来のＤＮＡ塩基配列決定法（Ｍｅｔｈｏｄ
ｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｅｌｏｇｙ、６５．ｐＰ４４９
５８０ ）では、ＤＮＡ断片に４種以上の塩基特異的Ｄ
ＮＡ鎖切断反応ないしは塩基特異的相補鎖合成停止反応
を行った後でも、核酸断片の電気泳動分離に際し、反応
種ごとに泳動路を別にする必要があった。
ｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｅｌｏｇｙ、６５．ｐＰ４４９
５８０ ）では、ＤＮＡ断片に４種以上の塩基特異的Ｄ
ＮＡ鎖切断反応ないしは塩基特異的相補鎖合成停止反応
を行った後でも、核酸断片の電気泳動分離に際し、反応
種ごとに泳動路を別にする必要があった。
第１図（ａ）に従来法によるＡ、Ｃ，Ｇ、Ｔ。
４種の塩基特異的反応の反応生成物を電気泳動分離した
時の模式図を示す。この場合、標識法固有の検出法で泳
動帯を検出し、移動度の大小順にどの泳動路で検出され
たかでＤＮＡ塩基配列を決定する。本例では、ＴＧＣＡ
ＡＣＧＡＴＴＣＧＧＣＡＴＧＡＣＧである。
時の模式図を示す。この場合、標識法固有の検出法で泳
動帯を検出し、移動度の大小順にどの泳動路で検出され
たかでＤＮＡ塩基配列を決定する。本例では、ＴＧＣＡ
ＡＣＧＡＴＴＣＧＧＣＡＴＧＡＣＧである。
ところが、従来の電気泳動法による泳動分離像には、泳
動条件不適による第１図（ｂ）に示すような歪の生ずる
場合が多く、移動度の大小順の判定、すなわち塩基配列
決定に困粱があった。
動条件不適による第１図（ｂ）に示すような歪の生ずる
場合が多く、移動度の大小順の判定、すなわち塩基配列
決定に困粱があった。
本発明の目的は、多種の塩基特異的反応を施したＤＮＡ
断片を混合し、これを単一泳動路を使用した電気泳動法
、あるいは、液体クロマトグラフィー法を用いて種々の
移動度を有すＤＮＡ断片に分離することによりＤＮＡ塩
基配列決定の高精度化、簡便化、高速化を可能とする方
法を提供することにある。
断片を混合し、これを単一泳動路を使用した電気泳動法
、あるいは、液体クロマトグラフィー法を用いて種々の
移動度を有すＤＮＡ断片に分離することによりＤＮＡ塩
基配列決定の高精度化、簡便化、高速化を可能とする方
法を提供することにある。
塩基特異的反応生成物を反応ごとに独立に分離すること
に起因するＤＮＡ断片泳動帯の相対的位置関係の不確実
性をなくすため、本発明では次の手段によってＤＮＡ塩
基配列決定の高精度化、簡便化、高速化を行おうとする
ものである。
に起因するＤＮＡ断片泳動帯の相対的位置関係の不確実
性をなくすため、本発明では次の手段によってＤＮＡ塩
基配列決定の高精度化、簡便化、高速化を行おうとする
ものである。
（１）４種の塩基特異的ＤＮＡ鎖切断反応、あるいは相
補鎖合成反応工程に先立って４種の反応生成物を区別で
きるよう核酸試料を２から４種の性質の異った蛍光色素
で標識する（４種の物質を区別するためには、最低２種
の独立な標識物が必要である）。
補鎖合成反応工程に先立って４種の反応生成物を区別で
きるよう核酸試料を２から４種の性質の異った蛍光色素
で標識する（４種の物質を区別するためには、最低２種
の独立な標識物が必要である）。
（２）又は、４種の塩基特異的ＤＮＡ鎖切断反応、ある
いは、相補鎖合成反応の後に、４種の反応が区別できる
よう核酸試料を２から４種の性質の異った蛍光色素で標
識する。
いは、相補鎖合成反応の後に、４種の反応が区別できる
よう核酸試料を２から４種の性質の異った蛍光色素で標
識する。
（３）前記（１）（２）の塩基特異的反応生成物を、電
気泳動法または高速液体クロマトグラフィー法で分子量
分離する。
気泳動法または高速液体クロマトグラフィー法で分子量
分離する。
（４）前記（１） （２）の標識用蛍光色素として、励
起波長の異なる色素を用いた場合、対応する数の光源を
設ける。
起波長の異なる色素を用いた場合、対応する数の光源を
設ける。
（５）前記（１，）（２）の標識用蛍光色素として、発
光スペクトルの異なるものを使用した場合には、発光ス
ペクトルを分光するための分光装置、あるいはフィルタ
ーと受光装置を設ける。
光スペクトルの異なるものを使用した場合には、発光ス
ペクトルを分光するための分光装置、あるいはフィルタ
ーと受光装置を設ける。
以下、本発明の一実施例を第２図により説明する。第２
図（ａ）は、本発明によりエテノ化ヌクレオチドなどの
４種の蛍光色素を用いて作成された単一泳動路上の塩基
特異的反応毎のＤＮＡ断片整列像（質量スペクトル）を
示す。すなわち、本実施例によれば、ＤＮＡ鎖切断反応
ないしは。
図（ａ）は、本発明によりエテノ化ヌクレオチドなどの
４種の蛍光色素を用いて作成された単一泳動路上の塩基
特異的反応毎のＤＮＡ断片整列像（質量スペクトル）を
示す。すなわち、本実施例によれば、ＤＮＡ鎖切断反応
ないしは。
ＤＮＡ相補鎖合成反応により生成したＤＮＡ断片は、励
起波長あるいは、最大発光波長の異なる４種の蛍光色素
で標識されているので、混合物として単一泳動路で分離
しても標識法に対応する検出法（異った波長で励起する
か、発光スペクトルを分光する）を採用すると、４種の
反応生成物の質量スペクトルを個別に解析できる。単一
泳動路を用い、同一条件下で泳動しているので、第１図
（ｂ）に示したような、泳動分離像の歪が、たとえ生じ
ても、泳動帯間の相対的位置関係は正しく保たれるので
、高精度のＤＮＡ塩基配列決定が行える。
起波長あるいは、最大発光波長の異なる４種の蛍光色素
で標識されているので、混合物として単一泳動路で分離
しても標識法に対応する検出法（異った波長で励起する
か、発光スペクトルを分光する）を採用すると、４種の
反応生成物の質量スペクトルを個別に解析できる。単一
泳動路を用い、同一条件下で泳動しているので、第１図
（ｂ）に示したような、泳動分離像の歪が、たとえ生じ
ても、泳動帯間の相対的位置関係は正しく保たれるので
、高精度のＤＮＡ塩基配列決定が行える。
図２（ｂ）は、２種の蛍光色素を用いて作成された塩基
特異的反応毎のＤＮＡ断片の質量スペクトルを示す。本
実施例によれば、ＤＮＡ鎖切断反応、あるいはＤＮＡ相
補鎖合成反応により生成したＤＮＡ断片のうち、Ａ、Ｃ
反応生成物は色素１で、Ａ、Ｃ反応生成物は色素２で、
標識されているので、４種の反応生成物を混合し、同一
泳動路上で泳動分離した後標識法に対応する検出法で検
出すると、４種の検出結果が得られる。すなわち、色素
１と２により染色される泳動帯、（これを（＋、 十）
と略記）の他に、（＋、 −） 、Ｃ−ｔ＋）ｔ （＋
）となる泳動帯が存在する。本例では、それぞれがＡ
、Ｃ，Ｇ、Ｔに対応するので、質量スペクトルを解釈で
きる。また、本実施例でも、核酸断片混合物と同一泳動
路を使用し、同一条件下で泳動しているので、第１図（
ｂ）に示すような、泳動分離像の歪が生じても質量スペ
クトルの解釈に困難は生じない。そのため、高精度のＤ
ＮＡ塩基配列決定が行える。
特異的反応毎のＤＮＡ断片の質量スペクトルを示す。本
実施例によれば、ＤＮＡ鎖切断反応、あるいはＤＮＡ相
補鎖合成反応により生成したＤＮＡ断片のうち、Ａ、Ｃ
反応生成物は色素１で、Ａ、Ｃ反応生成物は色素２で、
標識されているので、４種の反応生成物を混合し、同一
泳動路上で泳動分離した後標識法に対応する検出法で検
出すると、４種の検出結果が得られる。すなわち、色素
１と２により染色される泳動帯、（これを（＋、 十）
と略記）の他に、（＋、 −） 、Ｃ−ｔ＋）ｔ （＋
）となる泳動帯が存在する。本例では、それぞれがＡ
、Ｃ，Ｇ、Ｔに対応するので、質量スペクトルを解釈で
きる。また、本実施例でも、核酸断片混合物と同一泳動
路を使用し、同一条件下で泳動しているので、第１図（
ｂ）に示すような、泳動分離像の歪が生じても質量スペ
クトルの解釈に困難は生じない。そのため、高精度のＤ
ＮＡ塩基配列決定が行える。
以上、２実施例より、３種の蛍光色素を用いた場合でも
、４種の反応生成物の識別が可能であることは自明であ
る。
、４種の反応生成物の識別が可能であることは自明であ
る。
第３図は、２通りの蛍光標識方（（Ｉ）励起波長の違い
を利用、（１１）蛍光スペクトルの違いを利用）と、２
通りの質量スペクトル作成法（（■）電気泳動法、（＋
＋）液体クロマトグラフィー）との組合せによる４通り
の装置を示す。第３図（ａ）は、４通の塩基特異的反応
生成物を識別するために、それらを個別に励起波長の異
なる蛍光色素で標識し１２、混合し１、単一泳動路２、
で分離１した後、泳動分離帯３を異なる波長（λ、〜λ
４）で順次励起し放出される蛍光を検出７する。励起信
号と発光との時間関係を解析すれば、蛍光を分光しなく
てもいかなる塩基特異的反応の結果化じたＤＮＡ断片で
あるのか容易に判定できるので、この方法により、順次
現われる泳動帯を同定して行き、ＤＮＡ塩基配列を決定
できる。第３図（ｂ）は、ＤＮＡ断片の質量スペクトル
作成法として、電気泳動法のかわりに液体クロマトグラ
フィーを利用した場合の実施例である。効果は（ａ）に
同じである。第３図（ｃ）は、４種の塩基特異的反応生
成物を識別するために、それらを個別に連続光あるいは
単一波長による励起に対し発光スペクトルの異なる４種
の蛍光色素で標識し１３、混合して１、単一泳動路２、
で分離した後、特定波長で色素を励起し、泳動分離帯を
分光８し、検出７する。
を利用、（１１）蛍光スペクトルの違いを利用）と、２
通りの質量スペクトル作成法（（■）電気泳動法、（＋
＋）液体クロマトグラフィー）との組合せによる４通り
の装置を示す。第３図（ａ）は、４通の塩基特異的反応
生成物を識別するために、それらを個別に励起波長の異
なる蛍光色素で標識し１２、混合し１、単一泳動路２、
で分離１した後、泳動分離帯３を異なる波長（λ、〜λ
４）で順次励起し放出される蛍光を検出７する。励起信
号と発光との時間関係を解析すれば、蛍光を分光しなく
てもいかなる塩基特異的反応の結果化じたＤＮＡ断片で
あるのか容易に判定できるので、この方法により、順次
現われる泳動帯を同定して行き、ＤＮＡ塩基配列を決定
できる。第３図（ｂ）は、ＤＮＡ断片の質量スペクトル
作成法として、電気泳動法のかわりに液体クロマトグラ
フィーを利用した場合の実施例である。効果は（ａ）に
同じである。第３図（ｃ）は、４種の塩基特異的反応生
成物を識別するために、それらを個別に連続光あるいは
単一波長による励起に対し発光スペクトルの異なる４種
の蛍光色素で標識し１３、混合して１、単一泳動路２、
で分離した後、特定波長で色素を励起し、泳動分離帯を
分光８し、検出７する。
分光するかわりにフィルターを用いても良い。本方式で
は、上記の２実施例に比べ励起光源部が単純になる。第
２図（ｄ）は、ＤＮＡ断片の質量スペクトル作成法とし
て液体クロマトグラフィーを利用した場合の実施例であ
る。効果は（ｃ）に同じである。
は、上記の２実施例に比べ励起光源部が単純になる。第
２図（ｄ）は、ＤＮＡ断片の質量スペクトル作成法とし
て液体クロマトグラフィーを利用した場合の実施例であ
る。効果は（ｃ）に同じである。
以上述べた実施例では、いずれもＤＮＡ断片は、電気泳
動分離前に、すでに蛍光色素により標識されているもの
とし、それ以前に終了しておく可き標識反応工程と、塩
基特異的反応工程の時間的前後関係、及び蛍光色素が有
すべき性質についてはふれなかったので、以下、それら
の関係について述べる。まず、標識反応を塩基特異的反
応に先立って行う場合には、本発明は常に適用可能であ
るが、このとき蛍光色素は、ＤＮＡ断片に共有結合で結
合し、塩基特異的反応に対し耐性でなければならない。
動分離前に、すでに蛍光色素により標識されているもの
とし、それ以前に終了しておく可き標識反応工程と、塩
基特異的反応工程の時間的前後関係、及び蛍光色素が有
すべき性質についてはふれなかったので、以下、それら
の関係について述べる。まず、標識反応を塩基特異的反
応に先立って行う場合には、本発明は常に適用可能であ
るが、このとき蛍光色素は、ＤＮＡ断片に共有結合で結
合し、塩基特異的反応に対し耐性でなければならない。
エテノアデノシン等エテノ化塩基は、この性質を有する
。一方、標識反応を塩基特異的反応後行う場合には、塩
基特異的反応の種類によっては、本発明が適用できない
場合がある。すなわち、塩基特異的反応として相補鎖合
成反応（Ｍｅｔｈｏｄｓｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、
６５．ｐｐ、 ５６０−５８０ ）を採用した場合には
、反応後生成するＤＮＡ断片は、いずれもが、ＤＮＡ塩
基配列決定に対し、有意義な情報を担っているので、こ
れらを蛍光色素によりＳａｔ、、質量スペクトルを作成
できる。この場合１色素にめられる要件はＤＮＡの特異
的結合のみで共有結合を形成させる必要はないので上記
要件より条件は緩い。しかし、塩基特異的ＤＮＡ鎖切断
反応（Ｍｅｔｈｏｄｇ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙｒ
６５ ＃ＰＰ。
。一方、標識反応を塩基特異的反応後行う場合には、塩
基特異的反応の種類によっては、本発明が適用できない
場合がある。すなわち、塩基特異的反応として相補鎖合
成反応（Ｍｅｔｈｏｄｓｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、
６５．ｐｐ、 ５６０−５８０ ）を採用した場合には
、反応後生成するＤＮＡ断片は、いずれもが、ＤＮＡ塩
基配列決定に対し、有意義な情報を担っているので、こ
れらを蛍光色素によりＳａｔ、、質量スペクトルを作成
できる。この場合１色素にめられる要件はＤＮＡの特異
的結合のみで共有結合を形成させる必要はないので上記
要件より条件は緩い。しかし、塩基特異的ＤＮＡ鎖切断
反応（Ｍｅｔｈｏｄｇ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙｒ
６５ ＃ＰＰ。
４９９−５６０）を採用した場合には、生成するＤＮＡ
断片中、ＤＮＡ塩基配列決定しこ対し有意義な情報を担
ったものは全体の１／４以下で、これのみを選択的に標
識することは不可能なので本発明は適用できない。
断片中、ＤＮＡ塩基配列決定しこ対し有意義な情報を担
ったものは全体の１／４以下で、これのみを選択的に標
識することは不可能なので本発明は適用できない。
本発明によれば、ＤＮＡ断片の分子量分離による質量ス
ペクトルを作成する際、いくつか反応生成物を、同時に
、同一条件下で分離できるので、スペクトルの高精度解
析が可能となる。その結果、ＤＮＡ塩基配列決定の自動
化、高精度化が可能となる。
ペクトルを作成する際、いくつか反応生成物を、同時に
、同一条件下で分離できるので、スペクトルの高精度解
析が可能となる。その結果、ＤＮＡ塩基配列決定の自動
化、高精度化が可能となる。
第１図および第２図は本発明の一実施例の有効性を示す
説明図、第３図は本発・明の４通りの実施例を示す説明
図である。 ■・・・標識済ＤＮＡ断片混合物、２・・・電気泳動支
持体、３・・・泳動分離帯、４・・・高圧直流電源、５
・・・励起光源、６・・・光導ケーブル、７・・・光検
出器、８・・・分光器、またはフィルター、９・・・送
液ポンプ、１０・・・液体クロマトグラフィー用カラム
、１１・・・検出用セル、１２・・・励起波長の異なる
蛍光色素による染色槽、１３・・・発光スペクトルの異
なる蛍光波長を有する蛍光色素による染色槽、１４・・
・泳動路。 Ｚ ｌ 口 （α）（ｂ） ４ 第 Ｚ 図 （の） （ｂ） 第１頁の続き ［相］Ｉｎｔ、ＣＩ、４ 識別記号 庁内整理番号０発
明 者 鴇 １） 二 部 国分寺市東恋ケ窪央研究
所内
説明図、第３図は本発・明の４通りの実施例を示す説明
図である。 ■・・・標識済ＤＮＡ断片混合物、２・・・電気泳動支
持体、３・・・泳動分離帯、４・・・高圧直流電源、５
・・・励起光源、６・・・光導ケーブル、７・・・光検
出器、８・・・分光器、またはフィルター、９・・・送
液ポンプ、１０・・・液体クロマトグラフィー用カラム
、１１・・・検出用セル、１２・・・励起波長の異なる
蛍光色素による染色槽、１３・・・発光スペクトルの異
なる蛍光波長を有する蛍光色素による染色槽、１４・・
・泳動路。 Ｚ ｌ 口 （α）（ｂ） ４ 第 Ｚ 図 （の） （ｂ） 第１頁の続き ［相］Ｉｎｔ、ＣＩ、４ 識別記号 庁内整理番号０発
明 者 鴇 １） 二 部 国分寺市東恋ケ窪央研究
所内
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）試料を４分割し、それ
ぞれに異なる励起波長を有するけい光色前を結合し、そ
の後、塩基特異的化学反応を行ない、単一の泳動路によ
る電気泳動法で解析することを特徴とする核酸塩基配列
決定方法２、前記けい光色前が異なる発光スペクトルを
有することを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の核
酸塩基配列決定方法。 ３、前記けい光色前の結合処理を前記化学反応の後に行
なうことを特徴とする第１項又は第２項記載の核酸塩基
配列決定方法。 ４、解析を液体クロマトグラフィーで行なうことを特徴
とする第１項ないし第３項記載の核酸塩基配列決定方法
。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59096454A JPS60242368A (ja) | 1984-05-16 | 1984-05-16 | 核酸塩基配列決定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59096454A JPS60242368A (ja) | 1984-05-16 | 1984-05-16 | 核酸塩基配列決定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60242368A true JPS60242368A (ja) | 1985-12-02 |
Family
ID=14165467
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59096454A Pending JPS60242368A (ja) | 1984-05-16 | 1984-05-16 | 核酸塩基配列決定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60242368A (ja) |
Cited By (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61173158A (ja) * | 1985-01-02 | 1986-08-04 | カリフオルニア・インステイテユ−ト・オブ・テクノロジ− | Ｄｎａ配列決定法 |
| JPS6273138A (ja) * | 1985-09-18 | 1987-04-03 | ザ ボ−ド オブ トラステイズ オブ ザ リ−ランド スタンフオ−ド ジユニア ユニバ−シテイ | 螢光検出及び界面動電分離の方法及び装置 |
| EP0233053A2 (en) * | 1986-02-07 | 1987-08-19 | Applied Biosystems, Inc. | Method of detecting electrophoretically separated oligonucleotides |
| JPS63231533A (ja) * | 1987-03-20 | 1988-09-27 | Hitachi Ltd | ジヨブ・スケジユ−ル方式 |
| JPS63231247A (ja) * | 1987-03-20 | 1988-09-27 | Hitachi Ltd | 電気泳動分離検出方法及び装置 |
| JPS63243874A (ja) * | 1987-03-31 | 1988-10-11 | Shimadzu Corp | 塩基配列決定装置 |
| JPH01209351A (ja) * | 1988-02-17 | 1989-08-23 | Shimadzu Corp | 塩基配列決定装置 |
| FR2636739A1 (fr) * | 1988-09-20 | 1990-03-23 | Commissariat Energie Atomique | Procede et installation d'identification des bases d'un adn |
| FR2636738A1 (fr) * | 1988-09-20 | 1990-03-23 | Commissariat Energie Atomique | Procede et installation de sequencage de l'adn |
| JPH05505850A (ja) * | 1990-11-05 | 1993-08-26 | ザ、セロテックス、コーポレーション | ポリエステルポリオールおよび発泡剤としてのクロロジフルオロメタンを使用して作られたポリイソシアヌレートフォーム |
| US5242796A (en) * | 1986-07-02 | 1993-09-07 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Method, system and reagents for DNA sequencing |
| US5306618A (en) * | 1986-07-02 | 1994-04-26 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Method systems and reagents for DNA sequencing |
| JPH08233739A (ja) * | 1996-04-03 | 1996-09-13 | Hitachi Ltd | 蛍光検出型電気泳動装置における蛍光検出方法 |
| JPH08240531A (ja) * | 1995-12-18 | 1996-09-17 | Hitachi Ltd | 電気泳動分離検出方法及び装置 |
| JPH1054800A (ja) * | 1997-05-21 | 1998-02-24 | Hitachi Ltd | 電気泳動分離検出装置 |
| JPH1068694A (ja) * | 1997-06-30 | 1998-03-10 | Hitachi Ltd | 核酸の塩基配列決定方法 |
| US5821058A (en) * | 1984-01-16 | 1998-10-13 | California Institute Of Technology | Automated DNA sequencing technique |
| JP2006307218A (ja) * | 1996-04-01 | 2006-11-09 | Applera Corp | 非対称ベンゾキサンテン染料 |
| USRE43096E1 (en) * | 1984-01-16 | 2012-01-10 | California Institute Of Technology | Tagged extendable primers and extension products |
| US8097405B1 (en) | 1982-06-23 | 2012-01-17 | Enzo Biochem, Inc. | Nucleic acid sequencing processes using non-radioactive detectable modified or labeled nucleotides or nucleotide analogs, and other processes for nucleic acid detection and chromosomal characterization using such non-radioactive detectable modified or labeled nucleotides or nucleotide analogs |
-
1984
- 1984-05-16 JP JP59096454A patent/JPS60242368A/ja active Pending
Cited By (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8097405B1 (en) | 1982-06-23 | 2012-01-17 | Enzo Biochem, Inc. | Nucleic acid sequencing processes using non-radioactive detectable modified or labeled nucleotides or nucleotide analogs, and other processes for nucleic acid detection and chromosomal characterization using such non-radioactive detectable modified or labeled nucleotides or nucleotide analogs |
| USRE43096E1 (en) * | 1984-01-16 | 2012-01-10 | California Institute Of Technology | Tagged extendable primers and extension products |
| US6200748B1 (en) | 1984-01-16 | 2001-03-13 | California Institute Of Technology | Tagged extendable primers and extension products |
| US5821058A (en) * | 1984-01-16 | 1998-10-13 | California Institute Of Technology | Automated DNA sequencing technique |
| JPS61173158A (ja) * | 1985-01-02 | 1986-08-04 | カリフオルニア・インステイテユ−ト・オブ・テクノロジ− | Ｄｎａ配列決定法 |
| JPS6273138A (ja) * | 1985-09-18 | 1987-04-03 | ザ ボ−ド オブ トラステイズ オブ ザ リ−ランド スタンフオ−ド ジユニア ユニバ−シテイ | 螢光検出及び界面動電分離の方法及び装置 |
| EP0233053A2 (en) * | 1986-02-07 | 1987-08-19 | Applied Biosystems, Inc. | Method of detecting electrophoretically separated oligonucleotides |
| JPS62249049A (ja) * | 1986-02-07 | 1987-10-30 | アプライド バイオシステムズ インコ−ポレイテツド | 分離されたオリゴヌクレオチド類を電気泳動的に検出する方法 |
| US5242796A (en) * | 1986-07-02 | 1993-09-07 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Method, system and reagents for DNA sequencing |
| US5608063A (en) * | 1986-07-02 | 1997-03-04 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Method, system and reagents for DNA sequencing |
| US5306618A (en) * | 1986-07-02 | 1994-04-26 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Method systems and reagents for DNA sequencing |
| JPS63231247A (ja) * | 1987-03-20 | 1988-09-27 | Hitachi Ltd | 電気泳動分離検出方法及び装置 |
| JPS63231533A (ja) * | 1987-03-20 | 1988-09-27 | Hitachi Ltd | ジヨブ・スケジユ−ル方式 |
| JPS63243874A (ja) * | 1987-03-31 | 1988-10-11 | Shimadzu Corp | 塩基配列決定装置 |
| JPH01209351A (ja) * | 1988-02-17 | 1989-08-23 | Shimadzu Corp | 塩基配列決定装置 |
| FR2636738A1 (fr) * | 1988-09-20 | 1990-03-23 | Commissariat Energie Atomique | Procede et installation de sequencage de l'adn |
| FR2636739A1 (fr) * | 1988-09-20 | 1990-03-23 | Commissariat Energie Atomique | Procede et installation d'identification des bases d'un adn |
| JPH05505850A (ja) * | 1990-11-05 | 1993-08-26 | ザ、セロテックス、コーポレーション | ポリエステルポリオールおよび発泡剤としてのクロロジフルオロメタンを使用して作られたポリイソシアヌレートフォーム |
| JPH08240531A (ja) * | 1995-12-18 | 1996-09-17 | Hitachi Ltd | 電気泳動分離検出方法及び装置 |
| JP2006307218A (ja) * | 1996-04-01 | 2006-11-09 | Applera Corp | 非対称ベンゾキサンテン染料 |
| JPH08233739A (ja) * | 1996-04-03 | 1996-09-13 | Hitachi Ltd | 蛍光検出型電気泳動装置における蛍光検出方法 |
| JPH1054800A (ja) * | 1997-05-21 | 1998-02-24 | Hitachi Ltd | 電気泳動分離検出装置 |
| JPH1068694A (ja) * | 1997-06-30 | 1998-03-10 | Hitachi Ltd | 核酸の塩基配列決定方法 |
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