JPH08240531A - 電気泳動分離検出方法及び装置 - Google Patents
電気泳動分離検出方法及び装置Info
- Publication number
- JPH08240531A JPH08240531A JP7328579A JP32857995A JPH08240531A JP H08240531 A JPH08240531 A JP H08240531A JP 7328579 A JP7328579 A JP 7328579A JP 32857995 A JP32857995 A JP 32857995A JP H08240531 A JPH08240531 A JP H08240531A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- light
- detecting
- sample fragment
- predetermined position
- electrophoretic separation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Abstract
(57)【要約】
【目的】高感度計測を可能とする電気泳動分離検出装置
を提供する。 【構成】蛍光物質により標識された試料断片群が泳動す
る複数泳動路よりなるゲル電気泳動部（１、２）、ゲル
電気泳動部にレーザー光を照射する光照射手段（４、
４’、１５、１６）、試料断片から発する光を検出する
光検出部（５〜９）を具備する装置において、光照射手
段は、複数の波長のレーザ光を複数泳動路の電気泳動開
始位置から所定の位置で直線状に照射し、光検出部は、
蛍光を集光する集光手段と、集光された光を分光する分
光手段と、分光された光を検出する２次元光検出器を具
備し、所定の位置での複数泳動路は平面状に配列され、
分光手段により分光された光の波長分散方向が、レーザ
ー光の照射により生成する直線状の蛍光像と直角な方向
であり、泳動する試料断片を検出する電気泳動分離検出
装置。 【効果】蛍光信号を時間分割する事なく同時に計測でき
受光量を増す。
を提供する。 【構成】蛍光物質により標識された試料断片群が泳動す
る複数泳動路よりなるゲル電気泳動部（１、２）、ゲル
電気泳動部にレーザー光を照射する光照射手段（４、
４’、１５、１６）、試料断片から発する光を検出する
光検出部（５〜９）を具備する装置において、光照射手
段は、複数の波長のレーザ光を複数泳動路の電気泳動開
始位置から所定の位置で直線状に照射し、光検出部は、
蛍光を集光する集光手段と、集光された光を分光する分
光手段と、分光された光を検出する２次元光検出器を具
備し、所定の位置での複数泳動路は平面状に配列され、
分光手段により分光された光の波長分散方向が、レーザ
ー光の照射により生成する直線状の蛍光像と直角な方向
であり、泳動する試料断片を検出する電気泳動分離検出
装置。 【効果】蛍光信号を時間分割する事なく同時に計測でき
受光量を増す。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は蛍光標識ＤＮＡ、ＲＮＡ
あるいは蛋白質などの分離検出装置、特にＤＮＡ塩基配
列決定装置として使用するに好適な電気泳動分離検出方
法及び装置に関するものである。
あるいは蛋白質などの分離検出装置、特にＤＮＡ塩基配
列決定装置として使用するに好適な電気泳動分離検出方
法及び装置に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】従来、ＤＮＡ上の塩基配列決定はＤＮＡ
を放射性元素で標識し、各塩基に特異な反応で断片化し
た後、ゲル電気泳動により分離し、オートラジオグラフ
イーで分離パターンを転写・読み取り行っていた。しか
し、放射性元素を用いる煩雑さから蛍光標識による方法
が提案されている。（ｎａｔｕｒｅ ３２１、６７４
（１９８６）。）この方法では、片方の末端を蛍光標識
しＤＮＡを構成している四種の塩基アデニン（Ａ）、チ
ミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）、グアニン（Ｇ）の所で、
それぞれ切断された一群の試料を作成する。この時、四
種の塩基で特徴づけられる四つの試料群を別々の色素で
標識する。これら試料をいっしよにして一つの泳動路上
を泳動させて分離する。泳動路上の特定箇所を光照射す
るとそこを通過するＤＮＡ断片の末端の種類Ａ、Ｔ、
Ｇ、Ｃに応じて異なる色の光がでる。これをフィルター
を通して光電子増倍管で受光し検出する。フィルターは
四つの色に対応して四枚用意し、モーターで回転させ時
分割してそれぞれの信号を検出している。報告例では泳
動部に１本のカラム状のゲル管を用いているが、複数試
料の検出では複数のカラムゲルを並べたり、平面ゲルに
複数の泳動路を設けて、レーザーおよびフォトマルをス
キャンさせて計測するなどが行われている。
を放射性元素で標識し、各塩基に特異な反応で断片化し
た後、ゲル電気泳動により分離し、オートラジオグラフ
イーで分離パターンを転写・読み取り行っていた。しか
し、放射性元素を用いる煩雑さから蛍光標識による方法
が提案されている。（ｎａｔｕｒｅ ３２１、６７４
（１９８６）。）この方法では、片方の末端を蛍光標識
しＤＮＡを構成している四種の塩基アデニン（Ａ）、チ
ミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）、グアニン（Ｇ）の所で、
それぞれ切断された一群の試料を作成する。この時、四
種の塩基で特徴づけられる四つの試料群を別々の色素で
標識する。これら試料をいっしよにして一つの泳動路上
を泳動させて分離する。泳動路上の特定箇所を光照射す
るとそこを通過するＤＮＡ断片の末端の種類Ａ、Ｔ、
Ｇ、Ｃに応じて異なる色の光がでる。これをフィルター
を通して光電子増倍管で受光し検出する。フィルターは
四つの色に対応して四枚用意し、モーターで回転させ時
分割してそれぞれの信号を検出している。報告例では泳
動部に１本のカラム状のゲル管を用いているが、複数試
料の検出では複数のカラムゲルを並べたり、平面ゲルに
複数の泳動路を設けて、レーザーおよびフォトマルをス
キャンさせて計測するなどが行われている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】一般に測定しようとす
る試料の数は複数である事が多く、この場合、平板ゲル
に複数の泳動路を設けてレーザーおよびフオトマルを一
体化して一直線上をスキャンする方法が取られている。
この蛍光測定で感度を支配する重要因子は受光量と受光
量の時間的変動の大小である。発光総量がほぼ一定の場
合、受光量は受光立体角と測定のデユーテイサイクルで
決まる。測定泳動路数を１０ケとすると、各泳動路を識
別して検出するには少なくとも１００点刻みでスキヤン
する必要がある。更にフイルターを切り換えて４色を区
別するので塩基一種あたりの計測時間は連続測定の場合
の１／４００と小さくなってしまう。また、受光量の時
間変動は主としてレーザーの変動に起因するが、この変
化も各点毎に異なるため高感度計測上の障害となる。本
発明の目的は上記難点を克服するためになされたもので
ある。
る試料の数は複数である事が多く、この場合、平板ゲル
に複数の泳動路を設けてレーザーおよびフオトマルを一
体化して一直線上をスキャンする方法が取られている。
この蛍光測定で感度を支配する重要因子は受光量と受光
量の時間的変動の大小である。発光総量がほぼ一定の場
合、受光量は受光立体角と測定のデユーテイサイクルで
決まる。測定泳動路数を１０ケとすると、各泳動路を識
別して検出するには少なくとも１００点刻みでスキヤン
する必要がある。更にフイルターを切り換えて４色を区
別するので塩基一種あたりの計測時間は連続測定の場合
の１／４００と小さくなってしまう。また、受光量の時
間変動は主としてレーザーの変動に起因するが、この変
化も各点毎に異なるため高感度計測上の障害となる。本
発明の目的は上記難点を克服するためになされたもので
ある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】上記目的は、各泳動路上
の計測部を同一のレーザー光で線状に照射し、線状部分
から出る蛍光を集光すると共にプリズムあるいは回折格
子で分光して二次元光センサー上に結像させて計測する
事により達成される。
の計測部を同一のレーザー光で線状に照射し、線状部分
から出る蛍光を集光すると共にプリズムあるいは回折格
子で分光して二次元光センサー上に結像させて計測する
事により達成される。
【０００５】
【作用】励起光で各部を同時に照射する事により、レー
ザーの変動による泳動路上からの蛍光量の変化を補正す
る事ができる。また、二次元光検出器の使用により、時
間分割する事なく各測定点からの蛍光を受光できるので
受光量を大きくする事ができる。
ザーの変動による泳動路上からの蛍光量の変化を補正す
る事ができる。また、二次元光検出器の使用により、時
間分割する事なく各測定点からの蛍光を受光できるので
受光量を大きくする事ができる。
【０００６】
【実施例】以下、本発明の一実施例を図１により説明す
る。装置はレーザー光源４、４′、泳動ゲル１、保持板
２、バツフアー槽３からる電気泳動部、集光レンズ５、
回転フイルター１４、回転シヤツター１７からなる集光
および分光部、イメージ増巾器７、結合レンズ８、二次
元検出器９からなる二次元検出部、フレームメモリ１０
および計算機１１より成る。レーザー光は色素、励
起用と色素、励起用の２つがあり、回転ミラー１５
で交互に電気泳動板１の下部側面からゲルを線状に照射
する。試料Ａ、Ｂ、Ｃ…は電気泳動板の上部に設けられ
たバツファー槽３から注入され下方に泳動するが、光照
射部を通過する時に蛍光を発する。試料の流れる泳動路
はこの例では１０本ある。従って照射路を見ると泳動路
と背景光だけを発する部分とが交互に並ぶ事になる。こ
の線状の発光部の光量および発光波長は時間と共に変化
するがこれを分光すると共に位置検出して塩基配列を決
定する。
る。装置はレーザー光源４、４′、泳動ゲル１、保持板
２、バツフアー槽３からる電気泳動部、集光レンズ５、
回転フイルター１４、回転シヤツター１７からなる集光
および分光部、イメージ増巾器７、結合レンズ８、二次
元検出器９からなる二次元検出部、フレームメモリ１０
および計算機１１より成る。レーザー光は色素、励
起用と色素、励起用の２つがあり、回転ミラー１５
で交互に電気泳動板１の下部側面からゲルを線状に照射
する。試料Ａ、Ｂ、Ｃ…は電気泳動板の上部に設けられ
たバツファー槽３から注入され下方に泳動するが、光照
射部を通過する時に蛍光を発する。試料の流れる泳動路
はこの例では１０本ある。従って照射路を見ると泳動路
と背景光だけを発する部分とが交互に並ぶ事になる。こ
の線状の発光部の光量および発光波長は時間と共に変化
するがこれを分光すると共に位置検出して塩基配列を決
定する。
【０００７】発光像は結像レンズ５で集光され、プリズ
ムあるいは回折格子６で分光された像をイメージ増幅器
７上に結ぶ。波長の異なる光は図中あるいはイメージ増
幅器上で上下方向に分散されるので４色の光に対応して
位置がずれて結合レンズ８を介して二次元検出器９上に
あらわれる事になる。この様子はモニター１３上の画像
で見る事ができる。上下方向が波長分散で蛍光は幅の広
いバンドとして観測できる。横方向は試料の種（Ａ、
Ｂ、Ｃ…）である。ＴＶカメラなどの二次元出器９を用
いる時は垂直方向が光の分散方向とするのが便利であ
る。これら二次元検出器９の代わりに４本のダイオード
アレイからなるラインセンサーをそのままあるいはイメ
ージ増幅器と組み合わせて用いる事もできる。
ムあるいは回折格子６で分光された像をイメージ増幅器
７上に結ぶ。波長の異なる光は図中あるいはイメージ増
幅器上で上下方向に分散されるので４色の光に対応して
位置がずれて結合レンズ８を介して二次元検出器９上に
あらわれる事になる。この様子はモニター１３上の画像
で見る事ができる。上下方向が波長分散で蛍光は幅の広
いバンドとして観測できる。横方向は試料の種（Ａ、
Ｂ、Ｃ…）である。ＴＶカメラなどの二次元出器９を用
いる時は垂直方向が光の分散方向とするのが便利であ
る。これら二次元検出器９の代わりに４本のダイオード
アレイからなるラインセンサーをそのままあるいはイメ
ージ増幅器と組み合わせて用いる事もできる。
【０００８】以下試料の調整から蛍光検出および配列決
定の様子を図２を用いて具体的に説明する。測定しよう
とするＤＮＡ試料（図１でＡ、Ｂ、Ｃ…としたもの）を
化学反応などにより片方の末端を蛍光標識し、他端がア
デニン塩基Ａで終わる試料群、チミン塩基Ｔで終わる試
料群、シトシン塩基Ｃで終わる試料群およびグアニン塩
基Ｇで終わる試料群の４種の試料群を作成する。もちろ
ん、作成する際、十数塩基からなる蛍光標識付プライマ
ーを用いて目的ＤＮＡ中の各塩基種まで相補ＤＮＡ鎖を
伸長しても良い。図には作成された蛍光ラベル付ＤＮＡ
断片群の様子を示してある。ＤＮＡの化学切断で作成し
た場合には蛍光標識されていないＤＮＡ断片が多数生ず
るが蛍光検出で検知でないので図示してない。断片群
｛Ａ｝、｛Ｔ｝、｛Ｃ｝、｛Ｇ｝はそれぞれ異なった色
素〜で標識されている。図中２３は蛍光ラベルプラ
イマーあるいは蛍光ラベル末端を示す。色素として使用
可能な例には、ＦＩＴＣ（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ
ｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ；吸収波長４８９ｎｍ、
発光波長５１５ｎｍ）、ＮＢＤ−Ｆ（４−ｆｌｕｏｒ
ｏ−７−ｎｉｔｒｏ−ｂｅｎｚｏｆｕｒａｚａｎ；吸収
波長４７５ｎｍ、発光波長５４０ｎｍ）、ＴＲＩＴＣ
（ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌ ｒｈｏｄａｍｉｎｅ ｉｓ
ｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ；吸収波長５５０ｎｍ、発光
波長５８０ｎｍ）、Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ（ｓｕｌｆｏ
ｒｈｏｄａｍｉｎｅ １０１；吸収波長５９０ｎｍ）、
発光波長６０５ｎｍ）などがある。
定の様子を図２を用いて具体的に説明する。測定しよう
とするＤＮＡ試料（図１でＡ、Ｂ、Ｃ…としたもの）を
化学反応などにより片方の末端を蛍光標識し、他端がア
デニン塩基Ａで終わる試料群、チミン塩基Ｔで終わる試
料群、シトシン塩基Ｃで終わる試料群およびグアニン塩
基Ｇで終わる試料群の４種の試料群を作成する。もちろ
ん、作成する際、十数塩基からなる蛍光標識付プライマ
ーを用いて目的ＤＮＡ中の各塩基種まで相補ＤＮＡ鎖を
伸長しても良い。図には作成された蛍光ラベル付ＤＮＡ
断片群の様子を示してある。ＤＮＡの化学切断で作成し
た場合には蛍光標識されていないＤＮＡ断片が多数生ず
るが蛍光検出で検知でないので図示してない。断片群
｛Ａ｝、｛Ｔ｝、｛Ｃ｝、｛Ｇ｝はそれぞれ異なった色
素〜で標識されている。図中２３は蛍光ラベルプラ
イマーあるいは蛍光ラベル末端を示す。色素として使用
可能な例には、ＦＩＴＣ（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ
ｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ；吸収波長４８９ｎｍ、
発光波長５１５ｎｍ）、ＮＢＤ−Ｆ（４−ｆｌｕｏｒ
ｏ−７−ｎｉｔｒｏ−ｂｅｎｚｏｆｕｒａｚａｎ；吸収
波長４７５ｎｍ、発光波長５４０ｎｍ）、ＴＲＩＴＣ
（ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌ ｒｈｏｄａｍｉｎｅ ｉｓ
ｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ；吸収波長５５０ｎｍ、発光
波長５８０ｎｍ）、Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ（ｓｕｌｆｏ
ｒｈｏｄａｍｉｎｅ １０１；吸収波長５９０ｎｍ）、
発光波長６０５ｎｍ）などがある。
【０００９】標識ＤＮＡ断片を１つにまとめ同一泳動路
上を泳動させる。すなわち１つの試料について従来４つ
の泳動路を使用していたが、４色標識により１つの泳動
路で済む。ＤＮＡ断片は長さに応じて分離されるが、短
いもの程早く泳動する。Ａｒレーザー４８８ｎｍをＦＩ
ＴＣおよびＮＢＤ−Ｆ励起用に使用し、Ｈｅ−Ｎｅレー
ザー５４３ｎｍをＴＲＩＴＣおよびＴｅｘａｓ Ｒｅｄ
励起用に用いた。これらレーザー光２１は交互に励起領
域ａ、ａ′を照射し、そこに到達してくるＤＮＡ断片を
励起する。発する蛍光は集光されプリズムあるいは回折
格子６で分光されてイメージ増幅器７上に結像する。こ
の像は増幅されて４本のラインセンサーあるいはＴＶカ
メラで検出される。図１に示すモニタ画像１３にイメー
ジ増幅器上の像を模式的に示した。あらわれている点は
５つの試料に対応している。波長のちがいは図中上下位
置の変化としてあらわれる。１つの試料に着目すると位
置と強度が時間と共に変化することになる。４つの色素
に対応した信号の時間変化を検出する事により配列を決
定する事ができる。実施例ではＮＢＤ−Ｆの発光波長と
励起光の１つであるＨｅ−Ｎｅレーザー５４３ｎｍとが
ほとんど重なってしまい、Ｈｅ−Ｎｅレーザー光のゲル
による散乱が測定の障害となる。そこでイメージ増幅器
の前にレーザーの交互照射と同期して動くシャッター１
７を取りつけ、障害となる背景光を取り除いた。すなわ
ちＡｒレーザー照射中はＦＩＴＣとＮＢＤ−Ｆの計測に
用いられる光電面だけ受光し、Ｈｅ−Ｎｅレーザー照射
時にはＴＲＩＴＣとＴｅｘａｓ Ｒｅｄの計測に用いら
れる光電面だけ受光するようにした。蛍光の発光波長は
幅が広く実施例で用いたＦＩＴＣとＮＢＤ−ＦおよびＴ
ＲＩＴＣとＴｅｘａｓ Ｒｅｄからの発光を完全に分離
する事はできない。そこでそれぞれ両者の差を取り他の
蛍光体からの寄与を取除くようデータを補正して用い
た。図３は補正後のデータでピークの位置から塩基配列
を図示したように決定できる。
上を泳動させる。すなわち１つの試料について従来４つ
の泳動路を使用していたが、４色標識により１つの泳動
路で済む。ＤＮＡ断片は長さに応じて分離されるが、短
いもの程早く泳動する。Ａｒレーザー４８８ｎｍをＦＩ
ＴＣおよびＮＢＤ−Ｆ励起用に使用し、Ｈｅ−Ｎｅレー
ザー５４３ｎｍをＴＲＩＴＣおよびＴｅｘａｓ Ｒｅｄ
励起用に用いた。これらレーザー光２１は交互に励起領
域ａ、ａ′を照射し、そこに到達してくるＤＮＡ断片を
励起する。発する蛍光は集光されプリズムあるいは回折
格子６で分光されてイメージ増幅器７上に結像する。こ
の像は増幅されて４本のラインセンサーあるいはＴＶカ
メラで検出される。図１に示すモニタ画像１３にイメー
ジ増幅器上の像を模式的に示した。あらわれている点は
５つの試料に対応している。波長のちがいは図中上下位
置の変化としてあらわれる。１つの試料に着目すると位
置と強度が時間と共に変化することになる。４つの色素
に対応した信号の時間変化を検出する事により配列を決
定する事ができる。実施例ではＮＢＤ−Ｆの発光波長と
励起光の１つであるＨｅ−Ｎｅレーザー５４３ｎｍとが
ほとんど重なってしまい、Ｈｅ−Ｎｅレーザー光のゲル
による散乱が測定の障害となる。そこでイメージ増幅器
の前にレーザーの交互照射と同期して動くシャッター１
７を取りつけ、障害となる背景光を取り除いた。すなわ
ちＡｒレーザー照射中はＦＩＴＣとＮＢＤ−Ｆの計測に
用いられる光電面だけ受光し、Ｈｅ−Ｎｅレーザー照射
時にはＴＲＩＴＣとＴｅｘａｓ Ｒｅｄの計測に用いら
れる光電面だけ受光するようにした。蛍光の発光波長は
幅が広く実施例で用いたＦＩＴＣとＮＢＤ−ＦおよびＴ
ＲＩＴＣとＴｅｘａｓ Ｒｅｄからの発光を完全に分離
する事はできない。そこでそれぞれ両者の差を取り他の
蛍光体からの寄与を取除くようデータを補正して用い
た。図３は補正後のデータでピークの位置から塩基配列
を図示したように決定できる。
【００１０】なお本実施例ではシヤツターを用いてレー
ザー光の切り換えに対応して計測受光面を切り換えた
が、プリズムあるいは回折格子をレーザー光の切り換え
に同期して回転させ像の結像位置を変化させ、Ｈｅ−Ｎ
ｅ５４３ｎｍからの散乱光がＮＢＤ−Ｆからの蛍光受光
部に入らないようにし必要な光だけをスリットから取り
出すようにしても良い。本発明はここで用いた標識色お
よびその数に限定されたり、ＤＮＡ塩基配列決定に限定
されるものでない。
ザー光の切り換えに対応して計測受光面を切り換えた
が、プリズムあるいは回折格子をレーザー光の切り換え
に同期して回転させ像の結像位置を変化させ、Ｈｅ−Ｎ
ｅ５４３ｎｍからの散乱光がＮＢＤ−Ｆからの蛍光受光
部に入らないようにし必要な光だけをスリットから取り
出すようにしても良い。本発明はここで用いた標識色お
よびその数に限定されたり、ＤＮＡ塩基配列決定に限定
されるものでない。
【００１１】
【発明の効果】以上述べたように本発明によれば、複数
泳動路からの蛍光信号を時間分割する事なく同時に計測
できるので全体として受光量を増し、感度を上げる事が
できる。
泳動路からの蛍光信号を時間分割する事なく同時に計測
できるので全体として受光量を増し、感度を上げる事が
できる。
【００１２】
【図１】本発明の一実施例の模式図。
【図２】試料調製の説明および配列決定原理図。
【図３】測定データの一例を示す図。
１…泳動ゲル、２…保持板、３…バツファー槽、４、
４′…レーザー光源、５…集光レンズ、６…回折格子、
７…イメージ増幅器、８…結合レンズ、９…ＴＶカメラ
又は二次元センサー、１０…フレームメモリ、１１…計
算機、１２…出力機器、１３…モニター画像、１４…回
転フイルター、１５…回転又は振動ミラー、１６…ミラ
ー、１７…回転シヤツター、１８…被測定ＤＮＡ試料、
１９…調整済試料、２０…泳動板、２１…レーザー光、
２２…分離された蛍光標識ＤＮＡフラグメント。
４′…レーザー光源、５…集光レンズ、６…回折格子、
７…イメージ増幅器、８…結合レンズ、９…ＴＶカメラ
又は二次元センサー、１０…フレームメモリ、１１…計
算機、１２…出力機器、１３…モニター画像、１４…回
転フイルター、１５…回転又は振動ミラー、１６…ミラ
ー、１７…回転シヤツター、１８…被測定ＤＮＡ試料、
１９…調整済試料、２０…泳動板、２１…レーザー光、
２２…分離された蛍光標識ＤＮＡフラグメント。
Claims (9)
- 【請求項１】試料断片群ごとに異なる種類の蛍光標識に
より標識された複数の試料断片群が泳動する複数泳動路
よりなるゲル電気泳動部と、該ゲル電気泳動部にレーザ
ー光を照射する光照射手段、前記レーザー光の照射によ
り前記蛍光標識から発する蛍光を検出する光検出部を具
備する電気泳動分離検出装置において、前記光照射手段
は、複数の波長のレーザ光を前記複数泳動路の電気泳動
開始位置から所定の位置で直線状に照射し、前記光検出
部は、前記蛍光を集光する集光手段と、集光された光を
分光する分光手段と、分光された光を検出する２次元光
検出器を具備し、前記所定の位置での前記複数泳動路は
平面状に配列され、前記分光手段により分光された光の
波長分散方向が、前記レーザー光の照射により生成する
直線状の蛍光像と直角な方向であり、泳動する試料断片
を検出することを特徴とする電気泳動分離検出装置。 - 【請求項２】請求項１に記載の装置において、前記分光
手段はプリズムまたは回折格子であることを特徴とする
電気泳動分離検出装置。 - 【請求項３】請求項１に記載の装置において、前記２次
元光検出手段はＴＶカメラを具備することを特徴とする
電気泳動分離検出装置。 - 【請求項４】請求項１に記載の装置において、前記２次
元光検出器はラインセンサから構成されることを特徴と
する電気泳動分離検出装置。 - 【請求項５】請求項１に記載の装置において、前記光照
射手段は、前記複数の波長のレーザー光はそれぞれ異な
る種類の前記蛍光標識を励起することを特徴とする電気
泳動分離検出装置。 - 【請求項６】試料断片群ごとに異なる種類の蛍光標識に
より標識された複数の試料断片群が泳動する複数泳動路
と、該複数泳動路にレーザ光を照射する光照射手段と、
前記レーザ光の照射により前記蛍光標識から発する蛍光
を検出する光検出手段とを有する電気泳動分離検出装置
において、前記光照射手段は複数の波長のレーザ光を前
記複数泳動路の所定の位置に照射し、前記光検出手段
は、前記蛍光を集光する集光手段と、集光された光を分
光する分光手段と、分光された光を検出する２次元光検
出器を具備し、前記複数の波長のレーザ光が交互に前記
所定の位置に照射され泳動する試料断片を検出すること
を特徴とする電気泳動分離検出装置。 - 【請求項７】試料断片群ごとに異なる種類の蛍光標識に
より標識された複数の試料断片群が泳動する複数泳動路
と、該複数泳動路にレーザ光を照射する光照射手段と、
前記レーザ光の照射により前記蛍光標識から発する蛍光
を検出する光検出手段とを有し、前記光照射手段は複数
の波長のレーザ光を前記複数泳動路の所定の位置に照射
し、前記光検出手段は泳動する試料断片を検出すること
を特徴とする電気泳動分離検出装置。 - 【請求項８】試料断片群ごとに異なる種類の蛍光標識に
より標識された複数の試料断片群を調製する工程と、前
記複数の試料断片群を混合して、電気泳動開始位置に注
入しゲル泳動路で電気泳動して前記試料断片群を分離す
る工程と、前記ゲル泳動路の前記電気泳動開始位置から
所定の位置で平面状に配列される複数のゲル泳動路に光
を照射して、前記蛍光標識から発する蛍光を検出する工
程とを有する電気泳動分離検出方法において、前記所定
の位置に照射される光は前記所定の位置で直線状に照射
される複数の波長のレーザ光であり、前記蛍光を検出す
る工程は、前記蛍光を集光する工程と、集光された光を
分光する工程と、分光された光を２次元光検出器により
検出する工程とを有し、前記分光された光の波長分散方
向が、前記レーザー光の照射により生成する直線状の蛍
光像と直角な方向であり、泳動する試料断片を検出する
ことを特徴とする電気泳動分離検出方法。 - 【請求項９】試料断片群ごとに異なる種類の蛍光標識に
より標識された複数の試料断片群を調製する工程と、前
記複数の試料断片群を混合して、電気泳動開始位置に注
入しゲル泳動路で電気泳動して前記試料断片群を分離す
る工程と、前記ゲル泳動路の前記電気泳動開始位置から
所定の位置で複数のゲル泳動路に光を照射して、前記蛍
光標識から発する蛍光を検出する工程とを有する電気泳
動分離検出方法において、前記所定の位置に照射される
光は前記所定の位置に照射される複数の波長のレーザ光
であり、前記蛍光を検出する工程は、前記蛍光を集光す
る工程と、集光された光を分光する工程と、分光された
光を２次元光検出器により検出する工程とを有し、前記
複数の波長のレーザ光が交互に前記所定の位置に照射さ
れ泳動する試料断片を検出することを特徴とする電気泳
動分離検出方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7328579A JP2697719B2 (ja) | 1995-12-18 | 1995-12-18 | 電気泳動分離検出方法及び装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7328579A JP2697719B2 (ja) | 1995-12-18 | 1995-12-18 | 電気泳動分離検出方法及び装置 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62063780A Division JP2702920B2 (ja) | 1987-03-20 | 1987-03-20 | 電気泳動分離検出方法及び装置 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9047575A Division JP2692679B2 (ja) | 1997-03-03 | 1997-03-03 | 電気泳動分離検出方法及び装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08240531A true JPH08240531A (ja) | 1996-09-17 |
| JP2697719B2 JP2697719B2 (ja) | 1998-01-14 |
Family
ID=18211860
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7328579A Expired - Lifetime JP2697719B2 (ja) | 1995-12-18 | 1995-12-18 | 電気泳動分離検出方法及び装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2697719B2 (ja) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60242368A (ja) * | 1984-05-16 | 1985-12-02 | Hitachi Ltd | 核酸塩基配列決定方法 |
| JPS6162843A (ja) * | 1984-08-13 | 1986-03-31 | Hitachi Ltd | 螢光検出型電気泳動装置 |
| JPS61213974A (ja) * | 1985-03-19 | 1986-09-22 | Mitsui Mining & Smelting Co Ltd | 光散乱画像解析装置 |
-
1995
- 1995-12-18 JP JP7328579A patent/JP2697719B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60242368A (ja) * | 1984-05-16 | 1985-12-02 | Hitachi Ltd | 核酸塩基配列決定方法 |
| JPS6162843A (ja) * | 1984-08-13 | 1986-03-31 | Hitachi Ltd | 螢光検出型電気泳動装置 |
| JPS61213974A (ja) * | 1985-03-19 | 1986-09-22 | Mitsui Mining & Smelting Co Ltd | 光散乱画像解析装置 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2697719B2 (ja) | 1998-01-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0294996B1 (en) | Scanning fluorescent detection system | |
| JP2815506B2 (ja) | 光検出型電気泳動装置 | |
| US4832815A (en) | Wavelength dispersion electrophoresis apparatus | |
| EP0823052B1 (en) | A multicapillary fluorescent detection system | |
| US6856390B2 (en) | Time-delay integration in electrophoretic detection systems | |
| JP2539172B2 (ja) | 細管列共焦蛍光スキャナ―及び方法 | |
| EP0488422B1 (en) | Apparatus for reading fluorescent-labelled gel electrophoresis patterns | |
| JP3068413B2 (ja) | Ｄｎａ塩基配列決定装置 | |
| JPH1194798A (ja) | 光検出電気泳動装置 | |
| GB2314622A (en) | Electrophoresis separation and detection | |
| JP2702920B2 (ja) | 電気泳動分離検出方法及び装置 | |
| JPH1151900A (ja) | 蛍光検出装置 | |
| JPH07174701A (ja) | 塩基配列決定装置 | |
| JPH05118991A (ja) | 塩基配列決定方法およびその装置 | |
| JP2902408B2 (ja) | 蛍光検出型電気泳動装置 | |
| JP2697719B2 (ja) | 電気泳動分離検出方法及び装置 | |
| JP2692679B2 (ja) | 電気泳動分離検出方法及び装置 | |
| JP2795276B2 (ja) | 電気泳動分離検出装置 | |
| JP2809422B2 (ja) | 多色蛍光検出型電気泳動装置 | |
| JPH08261988A (ja) | 積層型泳動媒体及び光検出電気泳動装置 | |
| JP2809227B2 (ja) | 電気泳動装置 | |
| JP2776383B2 (ja) | Ｄｎａ塩基配列決定装置 | |
| JP2666799B2 (ja) | 電気泳動装置 | |
| JP3024742B2 (ja) | 多色蛍光検出型電気泳動装置における蛍光検出方法 | |
| JP2679696B2 (ja) | Ｄｎａ塩基配列決定装置 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |