JPH1054800A - 電気泳動分離検出装置 - Google Patents
電気泳動分離検出装置Info
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- JPH1054800A JPH1054800A JP9130667A JP13066797A JPH1054800A JP H1054800 A JPH1054800 A JP H1054800A JP 9130667 A JP9130667 A JP 9130667A JP 13066797 A JP13066797 A JP 13066797A JP H1054800 A JPH1054800 A JP H1054800A
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- fluorescence
- light
- predetermined position
- electrophoresis
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Abstract
(57)【要約】
【目的】高感度計測を可能とする電気泳動分離検出装置
を提供する。 【構成】複数種類の標識で標識された試料が泳動する複
数泳動路１を有する電気泳動部と、複数泳動路１の電気
泳動開始点から離れた所定の位置にレーザー光を照射す
る光照射手段（４、４’、１５、１６）と、レーザー光
の照射により標識から発する蛍光を検出する蛍光検出部
（５〜９）とを具備する電気泳動分離検出装置におい
て、光照射手段はレーザー光を所定の位置に照射し、蛍
光検出部は、所定の位置からの蛍光を分光する分光手段
６と、分光された蛍光を光検出器９に結像する手段８と
を具備し、光検出器が二次元光検出器又は複数のライン
センサからなる。 【効果】蛍光信号を時間分割することなく同時に計測で
き受光量を増す。
を提供する。 【構成】複数種類の標識で標識された試料が泳動する複
数泳動路１を有する電気泳動部と、複数泳動路１の電気
泳動開始点から離れた所定の位置にレーザー光を照射す
る光照射手段（４、４’、１５、１６）と、レーザー光
の照射により標識から発する蛍光を検出する蛍光検出部
（５〜９）とを具備する電気泳動分離検出装置におい
て、光照射手段はレーザー光を所定の位置に照射し、蛍
光検出部は、所定の位置からの蛍光を分光する分光手段
６と、分光された蛍光を光検出器９に結像する手段８と
を具備し、光検出器が二次元光検出器又は複数のライン
センサからなる。 【効果】蛍光信号を時間分割することなく同時に計測で
き受光量を増す。
Description
【産業上の利用分野】本発明は蛍光標識ＤＮＡ、ＲＮＡ
あるいは蛋白質などの分離検出装置、特にＤＮＡ塩基配
列決定装置として使用するに好適な、塩基配列決定方
法、電気泳動分離検出方法、及び装置に関するものであ
る。
あるいは蛋白質などの分離検出装置、特にＤＮＡ塩基配
列決定装置として使用するに好適な、塩基配列決定方
法、電気泳動分離検出方法、及び装置に関するものであ
る。
【従来の技術】従来、ＤＮＡ上の塩基配列決定はＤＮＡ
を放射性元素で標識し、各塩基に特異な反応で断片化し
た後、ゲル電気泳動により分離し、オートラジオグラフ
イーで分離パターンを転写・読み取り行っていた。しか
し、放射性元素を用いる煩雑さから蛍光標識による方法
が提案されている。（Ｎａｔｕｒｅ ３２１、６７４
（１９８６）。）この方法では、片方の末端を蛍光標識
しＤＮＡを構成している四種の塩基アデニン（Ａ）、チ
ミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）、グアニン（Ｇ）の所で、
それぞれ切断された一群の試料を作成する。この時、四
種の塩基で特徴づけられる四つの試料群を別々の色素で
標識する。これら試料をいっしよにして一つの泳動路上
を泳動させて分離する。泳動路上の特定箇所を光照射す
るとそこを通過するＤＮＡ断片の末端の種類Ａ、Ｔ、
Ｇ、Ｃに応じて異なる色の光がでる。これをフィルター
を通して光電子増倍管で受光し検出する。フィルターは
四つの色に対応して四枚用意し、モーターで回転させ時
分割してそれぞれの信号を検出している。報告例では泳
動部に１本のカラム状のゲル管を用いているが、複数試
料の検出では複数のカラムゲルを並べたり、平面ゲルに
複数の泳動路を設けて、レーザーおよびフォトマルをス
キャンさせて計測するなどが行われている。
を放射性元素で標識し、各塩基に特異な反応で断片化し
た後、ゲル電気泳動により分離し、オートラジオグラフ
イーで分離パターンを転写・読み取り行っていた。しか
し、放射性元素を用いる煩雑さから蛍光標識による方法
が提案されている。（Ｎａｔｕｒｅ ３２１、６７４
（１９８６）。）この方法では、片方の末端を蛍光標識
しＤＮＡを構成している四種の塩基アデニン（Ａ）、チ
ミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）、グアニン（Ｇ）の所で、
それぞれ切断された一群の試料を作成する。この時、四
種の塩基で特徴づけられる四つの試料群を別々の色素で
標識する。これら試料をいっしよにして一つの泳動路上
を泳動させて分離する。泳動路上の特定箇所を光照射す
るとそこを通過するＤＮＡ断片の末端の種類Ａ、Ｔ、
Ｇ、Ｃに応じて異なる色の光がでる。これをフィルター
を通して光電子増倍管で受光し検出する。フィルターは
四つの色に対応して四枚用意し、モーターで回転させ時
分割してそれぞれの信号を検出している。報告例では泳
動部に１本のカラム状のゲル管を用いているが、複数試
料の検出では複数のカラムゲルを並べたり、平面ゲルに
複数の泳動路を設けて、レーザーおよびフォトマルをス
キャンさせて計測するなどが行われている。
【発明が解決しようとする課題】一般に測定しようとす
る試料の数は複数であることが多く、この場合、平板ゲ
ルに複数の泳動路を設けてレーザーおよびフオトマルを
一体化して一直線上をスキャンする方法が取られてい
る。この蛍光測定で感度を支配する重要因子は受光量と
受光量の時間的変動の大小である。発光総量がほぼ一定
の場合、受光量は受光立体角と測定のデユーテイサイク
ルで決まる。測定泳動路数を１０ケとすると、各泳動路
を識別して検出するには少なくとも１００点刻みでスキ
ヤンする必要がある。更にフイルターを切り換えて４色
を区別するので塩基一種あたりの計測時間は連続測定の
場合の１／４００と小さくなってしまう。また、受光量
の時間変動は主としてレーザーの変動に起因するが、こ
の変化も各点毎に異なるため高感度計測上の障害とな
る。本発明の目的は上記難点を克服するためになされた
ものである。
る試料の数は複数であることが多く、この場合、平板ゲ
ルに複数の泳動路を設けてレーザーおよびフオトマルを
一体化して一直線上をスキャンする方法が取られてい
る。この蛍光測定で感度を支配する重要因子は受光量と
受光量の時間的変動の大小である。発光総量がほぼ一定
の場合、受光量は受光立体角と測定のデユーテイサイク
ルで決まる。測定泳動路数を１０ケとすると、各泳動路
を識別して検出するには少なくとも１００点刻みでスキ
ヤンする必要がある。更にフイルターを切り換えて４色
を区別するので塩基一種あたりの計測時間は連続測定の
場合の１／４００と小さくなってしまう。また、受光量
の時間変動は主としてレーザーの変動に起因するが、こ
の変化も各点毎に異なるため高感度計測上の障害とな
る。本発明の目的は上記難点を克服するためになされた
ものである。
【課題を解決するための手段】上記目的は、各泳動路上
の計測部を同一のレーザー光で線状に照射し、線状部分
から出る蛍光を集光すると共にプリズムあるいは回折格
子で分光して二次元光センサー上に結像させて計測する
ことにより達成される。
の計測部を同一のレーザー光で線状に照射し、線状部分
から出る蛍光を集光すると共にプリズムあるいは回折格
子で分光して二次元光センサー上に結像させて計測する
ことにより達成される。
【作用】励起光で各部を同時に照射することにより、レ
ーザーの変動による泳動路上からの蛍光量の変化を補正
することができる。また、二次元光検出器の使用によ
り、時間分割することなく各測定点からの蛍光を受光で
きるので受光量を大きくすることができる。
ーザーの変動による泳動路上からの蛍光量の変化を補正
することができる。また、二次元光検出器の使用によ
り、時間分割することなく各測定点からの蛍光を受光で
きるので受光量を大きくすることができる。
【実施例】以下、本発明の一実施例を図１により説明す
る。装置はレーザー光源４、４′、泳動ゲル１、保持板
２、バツフアー槽３からる電気泳動部、集光レンズ５、
回転フイルター１４、回転シヤツター１７からなる集光
および分光部、イメージ増巾器７、結合レンズ８、二次
元検出器９からなる二次元検出部、フレームメモリ１０
および計算機１１より成る。レーザー光は色素、励
起用と色素、励起用の２つがあり、回転ミラー１５
で交互に電気泳動板１の下部側面からゲルを線状に照射
する。試料Ａ、Ｂ、Ｃ、…は電気泳動板の上部に設けら
れたバツファー槽３から注入され下方に泳動するが、光
照射部を通過する時に蛍光を発する。試料の流れる泳動
路はこの例では１０本ある。従って照射路を見ると泳動
路と背景光だけを発する部分とが交互に並ぶことにな
る。この線状の発光部の光量および発光波長は時間と共
に変化するがこれを分光すると共に位置検出して塩基配
列を決定する。発光像は結像レンズ５で集光され、プリ
ズムあるいは回折格子６で分光された像をイメージ増幅
器７上に結ぶ。波長の異なる光は図中あるいはイメージ
増幅器上で上下方向に分散されるので４色の光に対応し
て位置がずれて結合レンズ８を介して二次元検出器９上
にあらわれることになる。この様子はモニター１３上の
画像で見ることができる。上下方向が波長分散で蛍光は
幅の広いバンドとして観測できる。横方向は試料の種
（Ａ、Ｂ、Ｃ、…）である。ＴＶカメラなどの二次元出
器９を用いる時は垂直方向が光の分散方向とするのが便
利である。これら二次元検出器９の代わりに４本のダイ
オードアレイからなるラインセンサーをそのままあるい
はイメージ増幅器と組み合わせて用いることもできる。
以下試料の調整から蛍光検出および配列決定の様子を図
２を用いて具体的に説明する。測定しようとするＤＮＡ
試料（図１でＡ、Ｂ、Ｃ…としたもの）を化学反応など
により片方の末端を蛍光標識し、他端がアデニン塩基Ａ
で終わる試料群、チミン塩基Ｔで終わる試料群、シトシ
ン塩基Ｃで終わる試料群およびグアニン塩基Ｇで終わる
試料群の４種の試料群を作成する。もちろん、作成する
際、十数塩基からなる蛍光標識付プライマーを用いて目
的ＤＮＡ中の各塩基種まで相補ＤＮＡ鎖を伸長しても良
い。図には作成された蛍光ラベル付ＤＮＡ断片群の様子
を示してある。ＤＮＡの化学切断で作成した場合には蛍
光標識されていないＤＮＡ断片が多数生ずるが蛍光検出
で検知でないので図示してない。断片群｛Ａ｝、
｛Ｔ｝、｛Ｃ｝、｛Ｇ｝はそれぞれ異なった色素〜
で標識されている。図中２３は蛍光ラベルプライマーあ
るいは蛍光ラベル末端を示す。色素として使用可能な例
には、ＦＩＴＣ（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ ｉｓｏｔ
ｈｉｏｃｙａｎａｔｅ；吸収波長４８９ｎｍ、発光波長
５１５ｎｍ）、ＮＢＤ−Ｆ（４−ｆｌｕｏｒｏ−７−
ｎｉｔｒｏ−ｂｅｎｚｏｆｕｒａｚａｎ；吸収波長４７
５ｎｍ、発光波長５４０ｎｍ）、ＴＲＩＴＣ（ｔｅｔ
ｒａｍｅｔｈｙｌ ｒｈｏｄａｍｉｎｅ ｉｓｏｔｈｉ
ｏｃｙａｎａｔｅ；吸収波長５５０ｎｍ、発光波長５８
０ｎｍ）、Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ（ｓｕｌｆｏｒｈｏｄ
ａｍｉｎｅ １０１；吸収波長５９０ｎｍ）、発光波長
６０５ｎｍ）などがある。標識ＤＮＡ断片を１つにまと
め同一泳動路上を泳動させる。すなわち１つの試料につ
いて従来４つの泳動路を使用していたが、４色標識によ
り１つの泳動路で済む。ＤＮＡ断片は長さに応じて分離
されるが、短いもの程早く泳動する。Ａｒレーザー４８
８ｎｍをＦＩＴＣおよびＮＢＤ−Ｆ励起用に使用し、Ｈ
ｅ−Ｎｅレーザー５４３ｎｍをＴＲＩＴＣおよびＴｅｘ
ａｓ Ｒｅｄ励起用に用いた。これらレーザー光２１は
交互に励起領域ａ、ａ′を照射し、そこに到達してくる
ＤＮＡ断片を励起する。発する蛍光は集光されプリズム
あるいは回折格子６で分光されてイメージ増幅器７上に
結像する。この像は増幅されて４本のラインセンサーあ
るいはＴＶカメラで検出される。図１に示すモニタ画像
１３にイメージ増幅器上の像を模式的に示した。あらわ
れている点は５つの試料に対応している。波長のちがい
は図中上下位置の変化としてあらわれる。１つの試料に
着目すると位置と強度が時間と共に変化することにな
る。４つの色素に対応した信号の時間変化を検出するこ
とにより配列を決定することができる。実施例ではＮＢ
Ｄ−Ｆの発光波長と励起光の１つであるＨｅ−Ｎｅレー
ザー５４３ｎｍとがほとんど重なってしまい、Ｈｅ−Ｎ
ｅレーザー光のゲルによる散乱が測定の障害となる。そ
こでイメージ増幅器の前にレーザーの交互照射と同期し
て動くシャッター１７を取りつけ、障害となる背景光を
取り除いた。すなわちＡｒレーザー照射中はＦＩＴＣと
ＮＢＤ−Ｆの計測に用いられる光電面だけ受光し、Ｈｅ
−Ｎｅレーザー照射時にはＴＲＩＴＣとＴｅｘａｓ Ｒ
ｅｄの計測に用いられる光電面だけ受光するようにし
た。蛍光の発光波長は幅が広く実施例で用いたＦＩＴＣ
とＮＢＤ−ＦおよびＴＲＩＴＣとＴｅｘａｓ Ｒｅｄか
らの発光を完全に分離することはできない。そこでそれ
ぞれ両者の差を取り他の蛍光体からの寄与を取除くよう
データを補正して用いた。図３は補正後のデータでピー
クの位置から塩基配列を図示したように決定できる。な
お本実施例ではシヤツターを用いてレーザー光の切り換
えに対応して計測受光面を切り換えたが、プリズムある
いは回折格子をレーザー光の切り換えに同期して回転さ
せ像の結像位置を変化させ、Ｈｅ−Ｎｅ５４３ｎｍから
の散乱光がＮＢＤ−Ｆからの蛍光受光部に入らないよう
にし必要な光だけをスリットから取り出すようにしても
良い。本発明はここで用いた標識色およびその数に限定
されたり、ＤＮＡ塩基配列決定に限定されるものでな
い。
る。装置はレーザー光源４、４′、泳動ゲル１、保持板
２、バツフアー槽３からる電気泳動部、集光レンズ５、
回転フイルター１４、回転シヤツター１７からなる集光
および分光部、イメージ増巾器７、結合レンズ８、二次
元検出器９からなる二次元検出部、フレームメモリ１０
および計算機１１より成る。レーザー光は色素、励
起用と色素、励起用の２つがあり、回転ミラー１５
で交互に電気泳動板１の下部側面からゲルを線状に照射
する。試料Ａ、Ｂ、Ｃ、…は電気泳動板の上部に設けら
れたバツファー槽３から注入され下方に泳動するが、光
照射部を通過する時に蛍光を発する。試料の流れる泳動
路はこの例では１０本ある。従って照射路を見ると泳動
路と背景光だけを発する部分とが交互に並ぶことにな
る。この線状の発光部の光量および発光波長は時間と共
に変化するがこれを分光すると共に位置検出して塩基配
列を決定する。発光像は結像レンズ５で集光され、プリ
ズムあるいは回折格子６で分光された像をイメージ増幅
器７上に結ぶ。波長の異なる光は図中あるいはイメージ
増幅器上で上下方向に分散されるので４色の光に対応し
て位置がずれて結合レンズ８を介して二次元検出器９上
にあらわれることになる。この様子はモニター１３上の
画像で見ることができる。上下方向が波長分散で蛍光は
幅の広いバンドとして観測できる。横方向は試料の種
（Ａ、Ｂ、Ｃ、…）である。ＴＶカメラなどの二次元出
器９を用いる時は垂直方向が光の分散方向とするのが便
利である。これら二次元検出器９の代わりに４本のダイ
オードアレイからなるラインセンサーをそのままあるい
はイメージ増幅器と組み合わせて用いることもできる。
以下試料の調整から蛍光検出および配列決定の様子を図
２を用いて具体的に説明する。測定しようとするＤＮＡ
試料（図１でＡ、Ｂ、Ｃ…としたもの）を化学反応など
により片方の末端を蛍光標識し、他端がアデニン塩基Ａ
で終わる試料群、チミン塩基Ｔで終わる試料群、シトシ
ン塩基Ｃで終わる試料群およびグアニン塩基Ｇで終わる
試料群の４種の試料群を作成する。もちろん、作成する
際、十数塩基からなる蛍光標識付プライマーを用いて目
的ＤＮＡ中の各塩基種まで相補ＤＮＡ鎖を伸長しても良
い。図には作成された蛍光ラベル付ＤＮＡ断片群の様子
を示してある。ＤＮＡの化学切断で作成した場合には蛍
光標識されていないＤＮＡ断片が多数生ずるが蛍光検出
で検知でないので図示してない。断片群｛Ａ｝、
｛Ｔ｝、｛Ｃ｝、｛Ｇ｝はそれぞれ異なった色素〜
で標識されている。図中２３は蛍光ラベルプライマーあ
るいは蛍光ラベル末端を示す。色素として使用可能な例
には、ＦＩＴＣ（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ ｉｓｏｔ
ｈｉｏｃｙａｎａｔｅ；吸収波長４８９ｎｍ、発光波長
５１５ｎｍ）、ＮＢＤ−Ｆ（４−ｆｌｕｏｒｏ−７−
ｎｉｔｒｏ−ｂｅｎｚｏｆｕｒａｚａｎ；吸収波長４７
５ｎｍ、発光波長５４０ｎｍ）、ＴＲＩＴＣ（ｔｅｔ
ｒａｍｅｔｈｙｌ ｒｈｏｄａｍｉｎｅ ｉｓｏｔｈｉ
ｏｃｙａｎａｔｅ；吸収波長５５０ｎｍ、発光波長５８
０ｎｍ）、Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ（ｓｕｌｆｏｒｈｏｄ
ａｍｉｎｅ １０１；吸収波長５９０ｎｍ）、発光波長
６０５ｎｍ）などがある。標識ＤＮＡ断片を１つにまと
め同一泳動路上を泳動させる。すなわち１つの試料につ
いて従来４つの泳動路を使用していたが、４色標識によ
り１つの泳動路で済む。ＤＮＡ断片は長さに応じて分離
されるが、短いもの程早く泳動する。Ａｒレーザー４８
８ｎｍをＦＩＴＣおよびＮＢＤ−Ｆ励起用に使用し、Ｈ
ｅ−Ｎｅレーザー５４３ｎｍをＴＲＩＴＣおよびＴｅｘ
ａｓ Ｒｅｄ励起用に用いた。これらレーザー光２１は
交互に励起領域ａ、ａ′を照射し、そこに到達してくる
ＤＮＡ断片を励起する。発する蛍光は集光されプリズム
あるいは回折格子６で分光されてイメージ増幅器７上に
結像する。この像は増幅されて４本のラインセンサーあ
るいはＴＶカメラで検出される。図１に示すモニタ画像
１３にイメージ増幅器上の像を模式的に示した。あらわ
れている点は５つの試料に対応している。波長のちがい
は図中上下位置の変化としてあらわれる。１つの試料に
着目すると位置と強度が時間と共に変化することにな
る。４つの色素に対応した信号の時間変化を検出するこ
とにより配列を決定することができる。実施例ではＮＢ
Ｄ−Ｆの発光波長と励起光の１つであるＨｅ−Ｎｅレー
ザー５４３ｎｍとがほとんど重なってしまい、Ｈｅ−Ｎ
ｅレーザー光のゲルによる散乱が測定の障害となる。そ
こでイメージ増幅器の前にレーザーの交互照射と同期し
て動くシャッター１７を取りつけ、障害となる背景光を
取り除いた。すなわちＡｒレーザー照射中はＦＩＴＣと
ＮＢＤ−Ｆの計測に用いられる光電面だけ受光し、Ｈｅ
−Ｎｅレーザー照射時にはＴＲＩＴＣとＴｅｘａｓ Ｒ
ｅｄの計測に用いられる光電面だけ受光するようにし
た。蛍光の発光波長は幅が広く実施例で用いたＦＩＴＣ
とＮＢＤ−ＦおよびＴＲＩＴＣとＴｅｘａｓ Ｒｅｄか
らの発光を完全に分離することはできない。そこでそれ
ぞれ両者の差を取り他の蛍光体からの寄与を取除くよう
データを補正して用いた。図３は補正後のデータでピー
クの位置から塩基配列を図示したように決定できる。な
お本実施例ではシヤツターを用いてレーザー光の切り換
えに対応して計測受光面を切り換えたが、プリズムある
いは回折格子をレーザー光の切り換えに同期して回転さ
せ像の結像位置を変化させ、Ｈｅ−Ｎｅ５４３ｎｍから
の散乱光がＮＢＤ−Ｆからの蛍光受光部に入らないよう
にし必要な光だけをスリットから取り出すようにしても
良い。本発明はここで用いた標識色およびその数に限定
されたり、ＤＮＡ塩基配列決定に限定されるものでな
い。
【発明の効果】以上述べたように本発明によれば、複数
泳動路からの蛍光信号を時間分割することなく同時に計
測できるので全体として受光量を増し、感度を上げるこ
とができる。
泳動路からの蛍光信号を時間分割することなく同時に計
測できるので全体として受光量を増し、感度を上げるこ
とができる。
【図１】本発明の一実施例の模式図。
【図２】試料調製の説明および配列決定原理図。
【図３】測定データの一例を示す図。
１…泳動ゲル、２…保持板、３…バツファー槽、４、
４′…レーザー光源、５…集光レンズ、６…回折格子、
７…イメージ増幅器、８…結合レンズ、９…ＴＶカメラ
又は二次元センサー、１０…フレームメモリ、１１…計
算機、１２…出力機器、１３…モニター画像、１４…回
転フイルター、１５…回転又は振動ミラー、１６…ミラ
ー、１７…回転シヤツター、１８…被測定ＤＮＡ試料、
１９…調整済試料、２０…泳動板、２１…レーザー光、
２２…分離された蛍光標識ＤＮＡフラグメント。
４′…レーザー光源、５…集光レンズ、６…回折格子、
７…イメージ増幅器、８…結合レンズ、９…ＴＶカメラ
又は二次元センサー、１０…フレームメモリ、１１…計
算機、１２…出力機器、１３…モニター画像、１４…回
転フイルター、１５…回転又は振動ミラー、１６…ミラ
ー、１７…回転シヤツター、１８…被測定ＤＮＡ試料、
１９…調整済試料、２０…泳動板、２１…レーザー光、
２２…分離された蛍光標識ＤＮＡフラグメント。
Claims (8)
- 【請求項１】複数種類の標識で標識された試料が泳動す
る複数の泳動路を有する電気泳動部と、前記複数の泳動
路の電気泳動開始点から離れた所定の位置にレーザー光
を照射する光照射手段と、前記レーザー光の照射により
前記標識から発する蛍光を検出する蛍光検出部とを具備
する電気泳動分離検出装置において、前記蛍光検出部
は、前記所定の位置から前記蛍光を集光する集光手段
と、集光された前記蛍光を分光する分光手段と、分光さ
れた前記蛍光を検出する二次元光検出器又は複数のライ
ンセンサとを具備し、前記光照射手段により前記所定の
位置に照射される前記レーザー光の方向と異なる方向か
ら、前記集光手段により前記蛍光が集光され、前記分光
手段により分光された前記蛍光を、前記蛍光の波長に対
応して前記二次元光検出器の異なる位置又は異なる前記
ラインセンサで検出することを特徴とする電気泳動分離
検出装置。 - 【請求項２】複数種類の標識で標識された試料が泳動す
る複数の泳動路を有する電気泳動部と、前記複数の泳動
路の電気泳動開始点から離れた所定の位置にレーザー光
を照射する光照射手段と、前記レーザー光の照射により
前記標識から発する蛍光を検出する蛍光検出部とを具備
する電気泳動分離検出装置において、前記蛍光検出部
は、前記所定の位置から前記蛍光を集光する集光手段
と、集光された前記蛍光を分光する分光手段と、分光さ
れた前記蛍光を検出する二次元光検出器又は複数のライ
ンセンサとを具備し、前記光照射手段により前記所定の
位置に照射される前記レーザー光の方向と異なる方向か
ら、前記集光手段により前記蛍光が集光され、前記分光
手段により分光された前記蛍光の波長分散方向と前記所
定の位置に照射される前記レーザー光の照射方向とが異
なり、前記分光手段により分光された前記蛍光を、前記
蛍光の波長に対応して前記二次元光検出器の異なる位置
又は異なる前記ラインセンサで検出することを特徴とす
る電気泳動分離検出装置。 - 【請求項３】末端塩基の種類毎に異なる標識により標識
された核酸断片群を対象試料毎に調整する工程と、前記
対象試料毎に前記核酸断片群を混合して電気泳動開始点
に注入し泳動路で電気泳動して前記核酸断片群を分離す
る工程と、前記電気泳動開始点から離れた所定の位置に
レーザー光を照射して前記標識から発する蛍光を検出す
る工程と、前記対象試料の塩基配列を決定する工程とを
有する塩基配列決定方法において、前記蛍光を検出する
工程は、前記所定の位置から発する前記蛍光を、前記所
定の位置に照射される前記レーザー光の方向と異なる方
向から集光する工程と、集光された前記蛍光を分光する
工程と、分光された前記蛍光を、前記蛍光の波長に対応
して二次元光検出器の異なる位置又は異なるラインセン
サで検出する工程とを有することを特徴とする塩基配列
決定方法。 - 【請求項４】複数種類の標識で標識された試料が泳動す
る複数の泳動路を有する電気泳動部と、前記複数の泳動
路の電気泳動開始点から離れた所定の位置にレーザー光
を照射する光照射手段と、前記レーザー光の照射により
前記標識から発する蛍光を検出する蛍光検出部とを具備
する電気泳動分離検出装置において、前記光照射手段は
複数の波長のレーザー光を前記所定の位置に照射し、前
記蛍光検出部は、前記所定の位置から前記蛍光を集光す
る集光手段と、集光された前記蛍光を分光する分光手段
と、分光された前記蛍光を検出する光検出器とを具備
し、前記光検出器が複数のラインセンサからなることを
特徴とする電気泳動分離検出装置。 - 【請求項５】複数種類の標識で標識された試料が泳動す
る複数の泳動路を有する電気泳動部と、前記複数の泳動
路の電気泳動開始点から離れた所定の位置にレーザー光
を照射する光照射手段と、前記レーザー光の照射により
前記標識から発する蛍光を検出する蛍光検出部とを具備
する電気泳動分離検出装置において、前記光照射手段は
レーザー光を前記所定の位置に照射し、前記蛍光検出部
は、前記所定の位置からの前記蛍光を分光する分光手段
と、分光された前記蛍光を光検出器に結像する手段とを
具備し、前記光検出器が二次元光検出器又は複数のライ
ンセンサからなることを特徴とする電気泳動分離検出装
置。 - 【請求項６】複数種類の標識で標識された試料が泳動す
る複数の泳動路を有する電気泳動部と、前記複数の泳動
路の電気泳動開始点から離れた所定の位置にレーザー光
を照射する光照射手段と、前記レーザー光の照射により
前記標識から発する蛍光を検出する蛍光検出部とを具備
する電気泳動分離検出装置において、前記光照射手段は
レーザー光を前記所定の位置に照射し、前記蛍光検出部
は、前記所定の位置からの前記蛍光を分光して光検出器
に結像する手段とを具備し、前記光検出器が二次元光検
出器又は複数のラインセンサからなることを特徴とする
電気泳動分離検出装置。 - 【請求項７】請求項６に記載の電気泳動分離検出装置に
おいて、前記試料が泳動する複数の泳動路の数が少なく
とも１０であることを特徴とする電気泳動分離検出装
置。 - 【請求項８】複数種類の標識で標識された試料が泳動す
る泳動路を有する電気泳動部と、前記泳動路の電気泳動
開始点から離れた所定の位置にレーザー光を照射する光
照射手段と、前記レーザー光の照射により前記標識から
発する蛍光を検出する蛍光検出部とを具備する電気泳動
分離検出装置において、前記光照射手段は複数の波長の
レーザー光を前記所定の位置に照射し、前記蛍光検出部
は、前記所定の位置から前記蛍光を集光する集光手段
と、集光された前記蛍光を分光する分光手段と、分光さ
れた前記蛍光を検出する光検出器とを具備し、前記光検
出器が二次元光検出器又は複数のラインセンサからなる
ことを特徴とする電気泳動分離検出装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9130667A JP2795276B2 (ja) | 1997-05-21 | 1997-05-21 | 電気泳動分離検出装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9130667A JP2795276B2 (ja) | 1997-05-21 | 1997-05-21 | 電気泳動分離検出装置 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62063780A Division JP2702920B2 (ja) | 1987-03-20 | 1987-03-20 | 電気泳動分離検出方法及び装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1054800A true JPH1054800A (ja) | 1998-02-24 |
| JP2795276B2 JP2795276B2 (ja) | 1998-09-10 |
Family
ID=15039741
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9130667A Expired - Lifetime JP2795276B2 (ja) | 1997-05-21 | 1997-05-21 | 電気泳動分離検出装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2795276B2 (ja) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60242368A (ja) * | 1984-05-16 | 1985-12-02 | Hitachi Ltd | 核酸塩基配列決定方法 |
| JPS6162843A (ja) * | 1984-08-13 | 1986-03-31 | Hitachi Ltd | 螢光検出型電気泳動装置 |
| JPS61213974A (ja) * | 1985-03-19 | 1986-09-22 | Mitsui Mining & Smelting Co Ltd | 光散乱画像解析装置 |
-
1997
- 1997-05-21 JP JP9130667A patent/JP2795276B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60242368A (ja) * | 1984-05-16 | 1985-12-02 | Hitachi Ltd | 核酸塩基配列決定方法 |
| JPS6162843A (ja) * | 1984-08-13 | 1986-03-31 | Hitachi Ltd | 螢光検出型電気泳動装置 |
| JPS61213974A (ja) * | 1985-03-19 | 1986-09-22 | Mitsui Mining & Smelting Co Ltd | 光散乱画像解析装置 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2795276B2 (ja) | 1998-09-10 |
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| EXPY | Cancellation because of completion of term |