DD146461A5 - Verfahren zur herstellung von vindesinsulfat - Google Patents

Abstract

Vindesin kann als 4-Desacetyl-VLB-C-3-carboxamid bezeichnet werden. Es wird gegen bestimmte Leukaemien, Lymphome und Lungenkarzinome eingesetzt. Ziel der Erfindung ist die Schaffung eines Verfahrens zur Herstellung von Vindesinsulfat, das zu einem Produkt mit guter Lagerbestaendigkeit, das sich leicht zu handhaben laeszt, fuehrt. Erfindungsgemaesz wird praktisch reine Vindesinbase in Acetonitril oder Aceton in einer Konzentration von etwa 1% geloest und dann unter Ruehren mit 1 Mol einer 1n waeszrigen Schwefelsaeure bei einer Geschwindigkeit versetzt, bei der praktisch keine Bildung von Vindesindisulfat erfolgen kann. Es bildet sich praktisch reines Vindesinmonosulfat.

Description

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-i-

Verfahren zur Herstellung von Vindesinsulfat Charakteristik der bekannten technischen Lösungen:

In der BE-PS 813 168 wird Vindesin beschrieben und als 4-Desacetyl-VLB-C-3-carboxamid bezeichnet. Die Verbindung hat folgende Struktur

12' 13'

6'

CHs-O-

\ C H

3

14

1 O 1 1

\ l

17

CH

07

¹J=

-CHa-CHs

- OH

3 C-NH

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Vindesin kann auch als ^Desacetyl-S-descarbomethoxy-VLB-3-carboxamid oder als 23-Amino-O -desacetyl-23-demethoxyvincaleukoblastin bezeichnet werden. Ein Sulfat von Vindesin ist gleichfalls in BE-PS 813 168 genannt.

Bei auf Tiere transplantierten Tumor sy steinen hat Vindesin eine Wirksamkeit gezeigt, die der von Vincristin nahe kommt, wobei ihm offenbar einige der neurologischen Nebenwirkungen fehlen, die bei der klinischen Anwendung von Vincristin auftreten. Vindesin wird z.Zt. in der ganzen Welt klinischen Prüfungen unterworfen, und ist dabei bereits mit Erfolg gegen bestimmte Leukämien, Lymphome und Lungenkarzinome eingesetzt worden.

Die beiden nun als oncolytische Mittel im Handel befindlichen verwandten Vincaalkaloide Vinblastin und Vincristin werden zur intravenösen Verabreichung an Patienten, die an verschiedenen Tumoren leiden, als Sulfate für Zubereitungen verwendet. Es hat sich jedoch gezeigt, daß Vindesinsulfat, das durch einfaches Vermischen einer Lösung der Vindesinbase in verschiedenen Lösungsmitteln mit zwei Äquivalenten verdünnter Schwefelsäure und Eindampfen zur Trockne hergestellt worden ist, elektrostastisches Verhalten zeigt (schwierig handzuhaben) und daß seine Beständigkeit für die Lagerung nicht genügt. Ziel der Erfindung:

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Vindesinsulfat, das zu einem Produkt mit guter Lagerbeständigkeit, das sich leicht handhaben läßt, führt. des Wesens der Erfindung:_

Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung von Vindesinsulfat, dadurch gekennzeichnet, daß praktisch reine Vindesinbase in Acetonitril oder Aceton in einer Konzentration von etwa 1 % gelöst und dann unter Rühren mit

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1 Mol einer 1n wäßrigen Schwefelsäure in einer Geschwindigkeit versetzt wird, bei der praktisch keine Bildung von Vindesindisulfat erfolgen kann. Dadurch wird ein Produkt erhalten, das praktisch reines Vindesinmonosulfat darstellt. Zugabegeschwindigkeit und Stärke des Mischens werden um so bedeutsamer, je mehr sich die Neutralisation der Vindesinbase der Vollständigkeit nähert.

Bei dem erfindungsgemäßen Verfahren wird die Herstellung des Sulfats des Vindesins vorzugsweise in zwei Stufen durchgeführt. Zuerst wird ein Äquivalent 1n wäßrige Schwefelsäure langsam (tropfenweise unter Rühren) zu einer 1-prozentigen Vindesinlösung in Acetonitril gegeben. Nach vollständiger Zugabe wird die gebildete Suspension etwa 1/2 Stunde gerührt, worauf die langsame Zugabe des übrigen Äquivalents von 1n wäßriger Schwefelsäure unter Rühren vorgenommen wird. Das Rühren wird dann noch eine weitere halbe Stunde fortgesetzt, und danach wird das ausgefallene Vindesinsulfat abfiltriert. Der Filterrückstand wird mit dem gleichen organischen Lösungsmittel gewaschen, das zum Lösen der Vindesinbase verwendet worden ist, und wird dann bis zur Gewichtskonstanz getrocknet. Die Ausbeute an Sulfat beläuft sich, bezogen auf Base, auf 94 bis 96 %.

Die 1n wäßrige Schwefelsäure wird zu der 1-prozentigen Lösung von Vindesin in Acetonitril mit einer Geschwindigkeit gegeben, bei der die Geschwindigkeit der Zugabe von Schwefelsäure zu der Vindesinlösung in Verbindung mit der Rührgeschwindigkeit oder Stärke des Mischens dazu führt, daß die Bildung von Vindesindisulfat vermieden wird. Eine Geschwindigkeit von etwa 1 ml/Min. hat sich als zufriedenstellend erwiesen, insbesondere gegen Ende der Neutralisation. Für die Zugabe wird zweckmäßigerweise eine Bürette eingesetzt.

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Bei der Durchführung des obigen Verfahrens entsteht als Hauptprodukt der Umsetzung zwischen Vindesinbase und dem ersten Äquivalent Schwefelsäure das Hemisulfat (2 Mol Vindesin je Mol Schwefelsäure). Durch das zweite Äquivalent Schwefelsäure, das in der gleichen Geschwindigkeit zugegeben wird, wird das Hemisulfat in das Monosulfat (1 Mol Vindesin je Mol Schwefelsäure) übergeführt. Wird die Zugabe, insbesondere gegen Ende seiner Neutralisation, zu rasch vorgenommen oder überschüssige Schwefelsäure verwendet, dann bildet .sich Disulfat (1 Mol Vindesin je 2 Mol Schwefelsäure). Wird die zu dem Vindesin gegebene Schwefelsäuremenge als zwei Äquivalente, bezogen auf das Gewicht von als zu 97 % reinem Vindesin (reines Alkaloid enthaltend Lösungsmittel etc.) berechnet, dann hinterläßt eine als Disulfat gebundene Schwefelsäure notwendigerweise etwas von dem vorhandenem Vindesin als Hemisulfat, da für die Bildung eines Monosulfats aus der gesamten Vindesinmenge zu wenig Schwefelsäure zur Verfügung steht. Das Hemisulfat ist weniger beständig als Vindesinmonosulfat. Beispielsweise hat nach 1 Monat bei 25 ⁰C Vindesinhemisulfat nur noch 85,2 % seiner anfänglichen Wirkungsstärke gegenüber 97,4 % im Fall des Vindesinmonosulfats. Somit wird durch die erfindungsgemäße langsame Zugabe die Bildung von Disulfat und die Gegenwart von Hemisulfat im Produkt vermieden und ein Vindesinmonosulfat ausreichender Beständigkeit gebildet, dessen Hantierbarkeit für pharmazeutische Zubereitungen keine Schwierigkeiten bereitet. Das so erzeugte Vindesinmonosulfat weist außerdem physikalische Eigenschaften auf, die seine Verwendung als analytischer Standard ermöglichen.

Eine Titrationskurve für die wie oben beschrieben durchgeführte Neutralisation von Vindesinbase mit 1n wäßriger Schwefelsäure zeigt einen Inflektionspunkt bei pH = -6,5, der der Bildung von Vindesinhemisulfat entspricht. Durch

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Zugabe des zweiten Äquivalens von 1n Schwefelsäure wird ein Abfall des pH-Werts der Lösung auf einen pH-Wert im Bereich von 4,5 bis 5,0 verursacht.

Es ist zwar möglich, die obige Umsetzung mit einem pH-Wert-Meßgerät zu verfolgen, doch hat sich gezeigt, daß der Endpunkt schwankt (4,5 bis-5,0). Es ist bevorzugt, die Menge zugesetzter Schwefelsäure auf der Grundlage einer Bestimmung der Vindesinbase durch Hochdruckflüssigchromatographie zu berechnen und sich nicht auf eine .Endpunk tbeStimmung zu verlassen. Für die Beständigkeit des durch das erfindungsgemäße Verfahren hergestellten Vindesinmonosulfats ist es von großer Bedeutung, daß Vindesinbase hoher Reinheit verwendet wird.

Die Zugabe überschüssiger Schwefelsäure verursacht einen weiteren Abfall des pH-Werts, da das Monosulfat in das Disulfat übergeführt wird. Die Gegenwart von Disulfat im Monosulfat führt nach dem Lösen in Wasser (10 mg/ml) zu einem stärker sauren pH-Wert als er sich bei einer reinen Vindesinmonosulfatlösung einstellt (pH = 4,5). Eine Lösung von Vindesindisulfat in Wasser (10 mg/ml) hat einen pH-Wert von 2,0. Die Mikroanalyse des festen Sulfats ergibt für Schwefel einen höheren Prozentsatz als 3,76 %, die für Vindesinmonosulfat berechnete Menge.

Nach der obigen Arbeitsweise erhaltenes Vindesinsulfat ist hydratisiert und enthält nach einer Karl Fischer-Bestimmung 4 bis 5 % Wasser (etwa 2 Mol). Somit enthält Vindesinsulfat je Molekül 1 Mol Vindesin, 1 Mol Schwefelsäure und 2 Mol Wasser.

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Bei der Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens hat sich Acetonitril als das Lösungsmittel der Wahl zum Lösen von Vindesin für seine Neutralisation mit wäßriger Schwefelsäure erwiesen. Aceton kann zwar gleichfalls verwendet werden, doch wird Acetonitril bevorzugt, weil das in diesem Lösungsmittel hergestellte Vindesinmonosulfat eine bessere Beständigkeit aufweist. Die Verwendung von 1n Schwefelsäure und einer 1-prozentigen Lösung von Vindesin in Acetonitril (oder Aceton) ist deshalb angegeben worden, weil sich diese Konzentrationen als bevorzugt aber nicht notwendig erwiesen haben. Wie ohne weiteres ersichtlich, kann auch bei Abwandlungen der obigen Konzentrationen Vindesinmonosulfat mit befriedigenden Eigenschaften erhalten werden, weshalb sie gleichfalls im Rahmen der Erfindung liegen. Aasführtingsbeispiel;

Die Erfindung wird durch das folgende Beispiel weiter erläutert.

Beispiel

32,84 g Vindesinbase werden in 3284 ml Acetonitril gelöst. Diese Lösung wird unter Rühren mit 1 Äquivalent 1n wäßrige Schwefelsäure in einer Geschwindigkeit von etwa 1 ml/Min. versetzt (1 g Vindesin als freie Base mit einer Reinheit von 97 % erfordert 1,25 ml 1,On wäßrige Schwefelsäure). Nach der Zugabe des ersten Äquivalents Schwefelsäure wird die gebildete Suspension bei Zimmertemperatur 20 bis 30 Minuten gerührt, worauf das zweite Äquivalent der 1n wäßrigen Schwefelsäure in gleicher Geschwindigkeit unter Rühren zugegeben wird. Während der Zugabe des zweiten Äquivalents Schwefelsäure geht das durch Zugabe des ersten Äquivalents Schwefelsäure gebildete Hemisulfats in Vindesinmonosulfat über. Anschließend an die Zugabe des zweiten Äquivalents Schwefelsäure

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wird die gebildete Suspension weitere 30 Minuten bei Zimmertemperatur gerührt. Das so erzeugte Vindesinsulfat wird dann abfiltriert, und der Filterrückstand wird mit 100 ml Acetonitril gewaschen. Der Niederschlag wird im Vakuum bei einer 35 ⁰C nicht übersteigenden Temperatur bis zur Gewichtskonstants getrocknet. Ausbeute = 34,8 bis 35,6 g (94 bis 96 %).

Bei dem vorstehenden Beispiel beträgt die Geschwindigkeit der Zugabe der verdünnten Schwefelsäure zu der Vindesinbase oder dem Vindesinhemisulfat 1 ml/Min. Bei niedrigeren Zugabegeschwindigkeiten werden praktisch die gleichen Ergebnisse erhalten. Höhere Zugabegeschwindigkeiten können angewandt werden, solange die Stärke des Rührens ausreicht, die Bildung des Disulfats sicher zu verhindern. Worauf es wesentlich ankommt, ist nicht die absolute Geschwindigkeit der Zugabe der verdünnten wäßrigen Schwefelsäure, sondern daß die Zugabegeschwindigkeit unrl das Rühren in der Weise aufeinander abgestimmt werden, daß die Disulfatbildung, insbesondere gegen Ende der Neutralisation, soweit wie möglich herabgesetzt und praktisch ausgeschlossen wird.

Die obige Arbeitsweise kann in zwei Stufen durchgeführt werden. So kann das Hemisulfat, eine wohldefinierte Verbindung, isoliert und getrocknet und dann nach erneuter Suspension in einem organischen Lösungsmittel mit dem zweiten Äquivalent Schwefelsäure versetzt werden. .

Claims (4)

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   Erfindungsanspruch.

   1. Verfahren zur Herstellung von Vindesinsulfat, dadurch gekennzeichnet, daß praktisch reine Vindesinbase in Acetonitril oder Aceton in einer Konzentration von etwa 1 % gelöst und dann unter Rühren mit 1 Mol einer 1n wäßrigen Schwefelsäure in einer Geschwindigkeit versetzt wird, bei der praktisch keine Bildung von Vindesindisulfat erfolgen kann, und das gebildete, praktisch reine Vxndesinmonosulfat gewonnen wird.
2. 2. Verfahren nach Punkt 1, dadurch gekennzeichnet , daß als Lösungsmittel Acetonitril verwendet wird.
3. 3. Verfahren nach Punkt 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß die 1n wäßrige Schwefelsäure in einer Geschwindigkeit von 1 ml/Minute oder darunter zugegeben wird.
4. 4. Verfahren nach Punkt 1, . dadurch gekennzeichnet, daß Vindesinbase in einer Konzentration von etwa 1 % in Acetonitril oder Aceton gelöst und unter Rühren mit einem Äquivalent 1n wäßriger Schwefelsäure versetzt wird und dann das gebildete Vindesinhemisulfat unter Rühren mit dem zweiten Äquivalent 1n Schwefersäure zur Überführung in das Vindesinmonosulfat in einer

   2UfS

   Geschwindigkeit versetzt wird, bei der praktisch keine Bildung von Vindesindisulfat erfolgt, worauf das gebildete praktisch reine Vindesinmonosulfat in Form des Dihydrats gewonnen wird.