CZ235895A3 - Azacyclohexapeptide derivatives and pharmaceutical compositions containing thereof - Google Patents

Description

Vynález se týká skupiny azacyklchexape vatů s antimikrobiálním účinkem a farmaceuti s jejich obsahem.

ptidcvých derických prostředku

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoří azacyklohexapepžidové deriváty s atomem dusíku, vázaným na cyklonexapeptidový kruh na atomu uhlíku v poloze 5 na 4-hydroxyornithinové části molekuly, která je označována C-5-orn.

Tyto azacyklohexapeptidové deriváty je možno vyjádřit obecným vzorcem I

I (i) kde

R^ znamená atom vodíku nebo hydroxyskupinu,

Rg znamená vodík, methyl nebo hydroxyskupinu,

Rg znamená vodík, methyl, CHgCN, CHgCHgNHg nebo CHgCONH,,,

R¹ znamená alkyl nebo alkenyl vždy o 9 až 21 atomech uhlíku, alkoxyfenyl o 1 až 10 atomech uhlíku v alkoxylové části nebo alkoxymethyl o 1 až 10 atomech uhlíku v alkoxylové části,

R·^ znamená vodík, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, alkenyl' o 3 až .4 atomech uhlíku, (CH₂)₂_₄0H, (CH₂)₂_₄NR^IVR^V, co(ch₂)_t_₄nh₂,

R¹^ znamená vodík, alkyl o '1 až 4 atomech .uhlíku, alkenyl o 3 až 4 atomech uhlíku,' (CH ) OH, (CH^ ₂_₄NR^IVR^V nebo

R^ a R¹¹^ společně tvoří skupinu -(CHg^-,

-(CH₂)₂O(CH₂)₂- nebo -(CH₂)₂-NH-(CH₂)₂-,

IV

R znamená vodík nebo alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku,

V

R znamena vodík nebo alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku a adiční soli těchto sloučenin s kyselinami.

.....Tam' ,kde jsou uváděny alkylové nebo alkenylové zbytky nebo alkoxyskupiny, jde vždy o skupiny s přímým i rozvětveným řetězcem.

Uvedené látky se obvykle získávají jako směsi stereoisomerních forem, v nichž jedna z těchto forem obvykle převažuje. Je možno upravit podmínky při výrobě těchto látek tak, aby byl získán převážně požadovaný isomer, přičemž takovou úpravu může běžně provést každý odborník. Sloučeniny s výhodným stereoisomerním uspořádáním, které budou dále označovány jako běžná forma, jsou v příkladové části označeny přerušovanou čarou pod rovinou v poloze C-5-orn. Označení ”epi je užito pro sloučeniny, v nichž se uvedená skupina v poloze

I C-5-orn nachází nad touto rovinou.

i

Adiční soli s kyselinami, vhodné pro farmaceutické použití jsou například soli kyseliny chlorovodíkové, bromovodíkové, fosforečné, sírové, maleinové, citrónové, octové, vinné, jantarové, stavelové, jablečné, glutamové a podobně, použít je možno také další kyseliny, přijatelné z farmaceutického hlediska, tak jak jsou uvedeny například v Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2, 1977.

Složení representativních azaderivátů obecného vzorce I a řetězce pro tyto sloučeniny jsou uvedeny v následující tabulce. Vzhledem k tomu, že peptidové řetězce jsou stejné bez ohledu na význam substituentů R^, R^ nebo R¹^¹ a vzhledem k tomu, že řetězce jsou číslovány podle variací na základním řetězci, budou mít aminy a jejich soli stejné číslo řetězce.

Aza

sloučenina	Rl	R2	R3	řetězec
1-1	H	H	CH2CONH2	1
1-2	H	H	CH?CN	' 2
1-3	H	H	CH2CH2NH2	3
1-4	OH	H	CH2CONH2	4
1-5	OH	H	CH2CN	5
1-6	OH	H	CH2CH2NH2	6
1-7	OH	CH3	CH2CONH2	7
1-8	OH	CH3	CH2CN	8
1-9	ÓH	ČH3	CH2CH2NH2	9
1-10	OH	CH3	CH3	10
1-11	OH	CH3	H	11
1-12	OH	OH	CH2CONH2	12
1-13	OH	OH	CH2CN	13
1-14	OH	. OH	.CH2CH2NH2	14
1-15	H	CH3	CH3	15
Ječnou	ze sloučenin s velmi	dobrým účinkem	proti
mykotíckým infekcím je	sloučenina	1-6, v mz R	znamená
atom vodíku,	„III . , R znamena skupinu	CH2CH2NH2 a R1	znamená
9,11-dimethyltrióecyl 1	DMTD, tato '	látka je specificky ozn
čována jako sloučenina	1-6-1, řetězec č. 6.

Ve svrchu uvedeném označení je sloučenina 1-6-1 první sloučeninou, v níž' je uspořádání typu 1-6. Vzhledem k tomu, že ve všech sloučeninách podle vynálezu je substituentem v poloze C-5-orn dusíkový atom, mohou se substituenty na tomto atomu dusíku měnit a přesto všechny sloučeniny, které mají stejné substituenty R^, R₂ a R^, budou mít řetězec č. 6.

Uvedené látky jsou rozpustné v nižších alkoholech a polárních aprotických rozpouštědlech, například dimethylformamidu DMF, dimethylsulfoxidu DMSO a pyridin. Jsou nerozpustné, v některých rozpouštědlech, například diethyletheru a acetonitrilu.

Sloučeniny podle vynálezu je možno použít jako antibiotika, zejména jako antifungální látky a jako látky, účinné proti prvokům. Jako antifungální látky jsou účinné proti vláknitým houbám i proti kvasinkám. Mohou být zvláště dobře použity pro léčení mykotických infekcí u ssavců, zvláště těch, které jsou způsobeny čeledí Candida, jako C. albicans, C. tro5 picalis a C. pseuaotropicalis, čeledí Cryptococcus, jako C. neoformans a čeledí Aspergillus, jako A. fumigatus, A. flavus a A. niger. Uvedené látky je možno také použít pno léčení a/nebo prevenci pneumonie, způsobené Pneumccystis carinii, k níž dochází u nemocných s porušenou funkcí imunního systému.

Deriváty podle vynálezu je možno připravit z cyklopeptidů obecného vzorce A

OH OH

(řetězec č. 1-15) sérií reakcí, v nichž je kyslíkový atom v poloze C-5-orn (tato poloha je někdy uváděna jako hemiaminopoloha) nakonec nahrazen atomem dusíku. Výchozí látky mohou být přírodní produkty nebo modifikované přírodní produkty, jak bude dále popsáno. V případě, že R^ znamená atom vodíku, je možno azasloučeniny připravit jinou sérií reakcí, nejprve bude popsán postup pro sloučeniny, v nichž R znamená atom vodíku nebo hydroxyskupinu.

Řetězce pro výchozí látky jsou uvedeny v následující tabulce.

výchozí látka

sloučenina	Rl	R2	R3	řetězec č.
A-l	H	H	CH2CONH2	16
A-2	H	H	CH2CN	17
A-3	H	H	CH2CH2NH2	18
A-4	OH	H	CH2CONH2	19
A-5	OH	H	CH2CN	20
A-6	OH	H	CH2CH2NH2	21
A-7	OH	CH3	CH2CONH2	22
A-8	OH	CH3	CH2ČN	23
A-9	OH	CH3	CH2CH2NH2	24
A-10	OH	CH3	CH3	25
A-ll	OH	CH3	H ·	26
A-12	OH	OH	CH2CONH2	27
A-13	OH	OH	CH2CN	28
A-14	OH	OH	CH2CH2NH2	29
A-15	H	CH3	CH3	30
Sloučeniny	A-4	a A-7 byly popsány v literatuře, J, Anti-
biotics, 45, 1855 - 60, prosinec 1992 jako pneumocandin B a I 0 pneumocamdin A , v němž R = DMTD.
V případě,	že	ve sloučenině A-	1 znamenají R	Ί a R? svrchu
uvedené skupiny	a R3	je atom vodíku,	methyl nebo	skupina

-CH^CONHg (řetězce č. 16, 19, 22, 25 až 27 a 30), je tyto látky možno přímo použít k provádění prvního postupu. V případě, že R^ znamená -CH^CN nebo -CHpCH^NHg, je nutno skupinu

-CH^CONH^ nejprve převést na skupinu -CH^CN nebo -CH^HgNHg, jak bude dále uvedeno a všechny modifikované sloučeniny mohou být posloučeninu, v s obsahem atomu ₅ ve výsledném -CHgCl·’ nebo (řetězce č. 17, 18, 20, 21, 23, 24, 28 a 29) užity v prvním postupu, nebo je možno použít níž R^ znamená -CH₂CONK₂ k výrobě sloučeniny dusíku v hemiaminopoloze a skupinu -CKgCONK produktu pak převést na požadovanou skupinu

-CH₂CH NK

V případě, že významy symbolů , R₂a R^ ve výchozí látce jsou stejné jako významy těchto symbolů ve výsledném produktu, je možno použít následující reakční schéma:

H₂NCH₂CH₂SH

H* stupeň A (A) (řetězce č. 16-30)

H₂NCH₂CH₂S.

>-NH

OH

2.2 Io] stupeň B (B) (řetězce Č. 31-45) hvězdičkou je označena poloha C-5-orn, označovaná také jako hemiaminopoloha.

- 9 Η,Ν

NH

{') .OH

N₃ /DM stupeň D

H,N

(C) (řetězce č. 31-45) stupeň C běžný nebo epi

R^!l \

(řetězce č. 1-15)

R¹Ν_χ OH y~NH >

běžný nebo epi 0) (řetězce č. 1-15)

Ve stupni A se nechá výchozí látka, sloučenina A (řetězce Č. 16 - 30), alkylthiol nebo arylthiol a kyselina reagovat v aprotickém rozpouštědle v bezvodém prostředí po dobu, dostatečně dlouhou pro tvorbu sloučeniny B (řetězce č. 31 - 45), tak jak jsou uvedeny v následující tabulce. Pro tento stupeň je vhodný aminoethylthiol.

lo mez5.produkt s obsahem síry

sloučenina	Rl	R2	Ro	řetězec
B-l	H	H	CH2CONH2	31
B-2	H	H	CH?CN	32
B-3	H	H	CH?CH2NH2	33
B-4	OH	H	CH2CONH2	34
B-5	OH	H	CH2CN	35
B-6	OH	H	CH2CH2NH2	36
. B-7	OH	CHs	CH2CONH2	37
B-8	OH	CH3	CH2CN .	38
B-9	OH	CH3	CH2CH2NH2	39
B-10	OH	CH3	CH3	40
B-ll	OH	CH3	H	41
B-12	OH	OH	CH2CONH2	42
B-13	OH	OH	' CH2CN'	43'
B-14	OH	OH	CH2CH2NH2	44
B45	H	CH3	CH3	45

Ve stupni A je vhodnou kyselinou silná organická kyselina nebo anorganická kyselina. Příkladem silných organických kyselin mohou být kyselina kafrosulfonová, p-toluensulfonová nebo methansulfonová. Z anorganických kyselin je možno uvést kyselinu chlorovodíkovou a bromovodíkovou.' Výhodná je zejména kyselinakafrosulfonová.

Vhodným rozpouštědlem je DMF, DMSO, l-methyl-2-pyrrolidinin a triamid kyseliny hexamethylfosforečné, ΉΜΡΑ. Výhodným rozpouštědlem je DMF nebo DMSO.

Reakce se obvykle provádí při teplotě místnosti a trvá až 10 dnů.

Při provádění reakce se smísí cyklohexapeptidový derivát, thiolová sloučenina a kyselina ve vhodném rozpouštědle a reakce se nechá probíhat až do ukončení. Pak se reakční směs zředí vodou a podrobí rychlé chromatografií na pryskyřici v reverzní fázi, jako eluční činidlo se užije 10 až 40 % acetonitrilu ve vodě s obsahem 0,1 % kyseliny trifluoroctové, TFA. Frakce s obsahem požadovaného produktu je možno zahustit a lyofilizovat a získaný materiál pak čistit preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií, -HPLC.

Příslušné sloupce pro HPLC se běžně dodávají například pod obchodními názvy ZORBAX (DuPont), DeltaPak (Waters), Bio- -Rad (Bio-Rad), LICHROPREP RP18 (Merck). Specifické sloupce budou uvedeny v příkladové části.

Ve stupni B se získá sloučenina C (řetězce č. 31 - 45), to znamená sulfonový derivát, oxidací- sloučeniny B. Vhodnými oxidačními Činidly jsou například Oxon (KHS0_r-.KHSO. .K_nS0. v O 4 d 4 poměru 2:1:1, Aldrich Chemicals), kyselina methachlorperoxybenzoová a peroxyoctová. Řetězec pro sloučeninu C je stejný jako řetězec pro sloučeninu B vzhledem k tomu, že atomem, vázaným na uhlíkový atom v hemiaminopoloze je stále atom síry.

v

Retezce pro sulfony jsou uvedeny v následující tabulce.

*1,

- 12 sulfon

sloučenina	Rl	R2	R3 řetězec
C-l	H	H	CH2CONH2	31
C-2	H	H	CH2CN	32
C-3	H	H	CH2CH2NH2	33
C-4	OH	H	CH2CONH2	34
C-5	OH	H	CH2CN	35
C-6	OH	H	CH2CH2NH2	36
C-7	OH	CH3	CH2CONH2	37
C-8	OH	CHS	CH2CN	38
C-9	OH	CH3	CH2CH2NH2	39
C-10	OH	CH3	CHS	40
C-ll	OH	CH3	H	. 41
C-12	OH	OH	CH2CONH2	42
C-l 3	Ol	OH	CH2CN '	43
C-1'4 .	OH	OH	CH2CH2NH2	44
C-15	H	CH3	CH3 .	45

Oxidace thioetheru (sloučeniny B) na sulfon (sloučeninu C) se provádí při použití přibližně dvojnásobného mčlárního množství oxidačního činidla. V případě,, ,že se užije jeden molární ekvivalent oxidačního činidla, získá se jako produkt sulfoxid, který je pak možno převést na sulfon. Solfoxidy je rovněž možno použít jako meziprodukty pro výrobu .azasloučenin, avšak sulfony jsou výhodnější. Obvykle se' užívá o něco více než· dvojnásobek.molárního množství oxidačního Činidla.”' ’ ‘

Reakce se provádí ve vodném prostředí, s výhodou ve směsi acetonitrilu a vody. Používá se přibližně, stejné množství acetonitrilu a vody, použít je možno poměr 1 : 9 až 9 : 1. ..

Při provádění reakce se oxidační činidlo přidává k roztoku sloučeniny B (řetězce č. 31 - 45) ve směsi acetonitrilu a vody v poměru 1:1a směs se nechá stát při teplotě místnosti až do ukončení reakce za vzniku sloučeniny C, což trvá obvykle 30 minut až 1 hodinu.

Po ukončení reakce se sloučenina z reakční směsi izoluje zředěním směsi vodou a chromatografií. Obvykle se užívá chromatograf ie na sloupci v reverzní fázi (0,18). Výhodným elučním činidlem je 30 až 45 % acetonitrilu ve vodě s '0,1 % TFA, gradient se zvyšuje po 5 %. Příslušné frakce se lyofilizují, Čímž se jako meziprodukt získá požadovaný sulfon, sloučenina C (řetězce č. 31 - 45). Meziprodukt je poměrně labilní takže je vhodné jej izolovat co nejrychleji.

Sloučenina C může být převedena na sloučeninu, v níž je atom dusíku přímo vázán v poloze C-5-orn. Jak je zřejmé ze schématu, vzniká při reakci sloučeniny C s azidem .alkalického kovu v této poloze azid (sloučenina D), kdežto reakcí š amino sloučeninou (amoniakem nebo aminem) vzniká v uvedené poloze aminoskupina (sloučenina I). Sloučenina D je důležitým meziproduktem pro výrobu většiny derivátů podle vynálezu. Přesto že ve sloučenině D se dusíkový atom nachází v poloze C-5-orn, nejde o produkt a pro sloučeninu D jsou tedy uváděna jiná označení řetězce. Tyto řetězce pro jednotlivé sloučeniny D jsou uvedeny v následující tabulce.

'.ÍÍJ. ' azid

sloučenina	Rl	R2	R3 řetězec i
D-l	H	H	CHýCONH?	46
D-2	H	H	CH2CN	47
D-3	H	H	CH2CH2NH2	* 48
D-4	OH	H	CH2CONH2	49
D-5	OH	H	CH2CN	50
D-6	OH	H	CH2CH2NH2	51
D-7	OH	CH3	CH2CONH2	52
D-8	OH	CH3	CH2CN	53
D-9	OH	CH3	CH2CH2NH2	54
D-10	OH	CH3	CH3 . .	55
D-ll	OH	CH3	H	56
D-12	OH .	OH	. CH2CONH2	57
D-13	OH	OH	. CH2CN .	58
D-14	OH	OH	CH2CH2NH2	59
D-l 5	H	CH3 .	CH3	60

Azidy je možno získat tak, že se azid alkalického kovu přidá za míchání při teplotě místnosti.k roztoku sulfonu, sloučeniny C (řetězce č. 31 - 45) v aprotickém rozpouštědle po dobu, dostatečnou k ukončení reakce za tvorby azidu, jak je možno stanovit pomocí HPLC. Reakční .směs je'pak možno zředit vodnou kyselinou, například^kyselinou trifluoroctovou a pak chromatografoyat k izolaci-požadovaného azidu, sloučeniny D z re.akční >směsi. K tomuto-účelu je vhodná rychlá chromatografie na sloupci v reverzní.fázi (C18) při použití 10 až 25 % acetonitrilu ve vodě s obsahem 0,1 % TFA/ gradient se zvyšuje po 5 %. ·, 7 ;··. t ·ν' # ,·

Azid (sloučenina D). pak.může být redukován na sloučeninu s volnou aminoskupinou, která je jedním z produktů (sloučenina I, ' řetězce č .. 1 - 15) .

Redukci je možno uskutečnit tak, že se smísí azid s Pd/C v rozpouštědle, například ledové kyselině octové a pak se směs hydrogenuje 10 až 20 hodin za tlaku v baňce. Produkt je pak možno izolovat tak, že se nejprve odfiltruje katalyzátor a pak se filtrát lyofilizuje, čímž se získá aminosloučenina (řetězce-1 - 15)·, jde o primární amin.

Takto získaný amin je možno převést na substituovaný amin, jak bude dále popsáno.

Sloučenina I, v níž -NR^R¹^ znamená skupinu -NHČH^CHgNHg nebo genericky ~NH(CH2)2_4NR^^VR^ může být při-: pravena ze sulfonu postupem, při němž se sulfonem (sloučenina C , řetězec Č. 31 --45), reaguje diamin obecného vzorce h2n(ch₂)₂_₄nr^ivr^v.

Reakce se provádí v aprotickém rozpouštědle, tak jak byla tato rozpouštědla uvedena svrchu a při teplotě místnosti. Užívá se přibližně desetinásobného molárního přebytku, aminu. Reakce probíhá 1 hodinu až několik hodin.

Reakci je možno uskutečnit tak, že se příslušný amin přidá k roztoku sulfonu v bezvodém aprotickém rozpouštědle a reakční směs se míchá při teplotě místnosti do vzniku sloučeniny I (řetězce č. 1 - 15), v níž je substituentem v poloze C-5-orn skupina -NR R . Požadovanou sloučeninu je možno izolovat tak, že se směs zředí vodnou kyselinou trifluoroctovou a pak se chromatografuje. Vhodná je rychlá chromatografie na sloupci v reverzní fázi· (C18) při použití 10 až 25 % acetonitrilu ve vodě s obsahem 0,1 % TFA, gradient se zvyšuje 'po 5 %>. Příslušné frakce je možno lyofilizovat, čímž se produkt získá ve formě trifluoracetátu.

Tento trifluoracetát je možno rozpustit ve vodě a nechat roztok projít sloupcem Bio-Rad AG2-X8(C.l~)polyprep, čímž se získá produkt ve formě hydrochloridu.

V případě, že R^ ve vzorci I znamená atom vodíku, jde o sloučeninu i' (řetězce č. 1 - 3 a 15) a atom dusíku je možno zavést přímo do hemiaminopolohy reakcí, při níž se tvoří azid a pak je možno azid redukovat na amin. který je popřípadě možno alkylovat nebo acylovat na výsledný produkt. Reakce je znázorněna v následujícím schématu:

Přestože v některých’přírodních cyklóhexapeptidech znamená R^ atom vodíku, běžnější význam pro tento symbol je hyóroxyskupina. Pro celou řadu sloučenin se tedy v .prvním stupni připravuje sloučenina A* z odpovídající.sloučeniny, v níž znamená hydroxyskupinu.

Přípravu redukované sloučeniny je možno uskutečnit tak, že se míchá příslušná hydroxysloučenina ve směsi chloristanu lithného a diethyletheru při teplotě místnosti, přidá se kyselina trifluoroctová a pak ještě triethylsilan a směs se energicky míchá 4 až 10 hodin nebo tak dlouho, až již není možno prokázat výchozí hydroxysloučeninu pomocí analytické HPLC. Reakční směs se pak vlije do destilované vody, čímž se redukovaný produkt získá jako sraženina, kterou je možno izolovat běžným způsobem. Získaný redukovaný produkt je možno použít po případném Čištění pro výrobu azidu.

Produkty, v nichž R^ znamená atom vodíku, je možno získat tak, že se modifikovaný cyklohexapeptid přidá k předem připravenému roztoku HN^. Tuto látku je možno připravit z azidu sodíku a kyseliny trifluoroctové. Reakce probíhá při teplotě místnosti za vzniku azidu, který je možno izolovat běžným způsobem a čistit pomocí HPLC.

Čištěnou azídosloučeninu je možno redukovat na aminosLoučeninu hydrogenaci v přítomnosti paladia na .aktivním uhlí obdobným způsobem jako svrchu.

Aminy, připravené svrchu uvedeným způsobem a obsahují- . cí primární aminoskupinu -NH₂ je pak možno podrobit alkylaci běžným způsobem za vzniku substituované aminoskupiny. Postupuje se tak, že se příslušně substituovaný alkylhalogenid nechá reagovat s aminem (sloučenina I, NR R = NH^, řetězce 1 - 15) v aprotickém rozpouštědle v přítomnosti baze

II III za vzniku mono.substituovaného aminu (sloučenina I, NR R II II =NHR , kde R znamená alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, alkenyl o 3 až 4 atomech uhlíku, (^CH2^2-4^0H’ a (CH₂)₂_₄NR^IVR^V). Produkt je pak možno izolovat z reakční.směsi běžným způsobem.

Aminy, připravené svrchu uvedeným způsobem a obsahující primární aminoskupinu -NH₂ je možno acylovat běžným způsobem za vzniku acylované aminoskupiny. Jde o skuoinu -CO(CH-), JIHJ Vzhledem k tomu, že jde o primární aminoskupinu, je nutno aminoskupinu kyseliny, užité k acylaci chránit ve formě benzy loxykarbonylové skupiny před provedením acylace. S výhodou se užije aktivovaný ester, například pentaflucrfenylester. Acylaci je možno uskutečnit v aprotickém rozpouštědle v .přítomnosti baze, například diisopropylethyiaminu při teplotě místnosti, reakce trvá 1 hodinu až několik hodin do získání produktu acylace. Produkt je možno izolovat -tak, že se reakční směs zředí methanolem a čistí pomocí HPLC. Ochrannou skupinu je možno odštěpit běžnou hydrogenolýzou (sloučenina I, -nrⁱⁱrⁱⁱⁱ=-nhco(ch₂)₁_₄nh₂).

AminoslouČeniny, v nichž je' aminoskupina v hemiaminopolo II III ze zcela substituovaná, to znamená, v níž R a R mají význam odlišný od atomu vodíku

se s výhodou připraví reakcí sulfonu (sloučenina B, řetězec č. 31 - 45) s příslušně substituovaným aminem R^R , NH. Reakci- je možno uskutečnit tak, že se amin přidá žá míchání k roztoku- sulfonu a reakce se nechá probíhat po'dostatečnou' dobu. Produkt je možno izolovat preparativní HPLC a pak- je produkt možno lyofilizovat.

Vynález zahrnuje také adiční soli s kyselinami. V průběhu běžné izolace se produkt získává jako .adiční sůl s kyselinou Obvykle jde o sůl s.kyselinou trifluoroctovou. Takto získanou sůl je možno rozpustit ve vodě a roztok nechat projít sloupcem aniontoměničové pryskyřice s obsahem požado19 váného aniontu. Eluát, obsahující požadovanou sůl je pak možno odpařit, čímž se sůl izoluje jako pevný produkt.

Sloučeniny podle vynálezu jsou účinné proti řadě hub a zvláště proti čeledí Candida. Antifungální vlastnosti je možno vyjádřit pomocí minimální fungicidní koncentrace MFC proti organismům čeledi Candida při ředění v bujónu, zkoušky je možno provádět například v prostředí YeastNitrogen Base (Difco) s 1 % dextrosy (YNBD).

Při provádění zkoušky byly sloučeniny rozpuštěny ve 100% dimethylsulfoxidu DMSO pří počáteční koncentraci 5 mg/ml. Po rozpuštění byla koncentrace zásadního roztoku upravena na 512 mikrogramů/ml ředěním vodou, takže konečná koncentrace DMSO byla přibližně 10 %. Roztok pak-byl rozdělen pomocí vícekanálové pipety do první řady vyhloubení plotny s 96 vyhloubeními, každé vyhloubení obsahovalo 0,075 ml prostředí YNBD, takže koncentrace účinné látky byla 256 mikrogramů/ml. Sloučeniny z první řady byly po jednotlivých řadách ředěny vždy dvakrát, takže byly získány konečné koncentrace 256 až 0,12 mikrogramů/ml.

Kultury organismů v bujovu ve stáří 4 hodiny byly upraveny pomocí spektrofotometru při 600 nm na 0,5 McFarlandova standardu. Suspenze byla zředěna 1 : 100 přidáním YNBD k dosažení koncentrace buněk 1 až 5 x 10 jednotek pro tvorbu kolonií (CFU)/ml. Podíly 0,075 ml suspenze byly naočkovány do každého vyhloubení mikrotitrační plotny, takže konečný očkovací materiál měl koncentraci 5 až 25 x 10 CFU/ml a konečná koncentrace účinné látky byla 128 až 0,06 mikrogramů/ml. V každé řadě bylo ponecháno kontrolní vyhloubení bez účinné látky a kontrolní vyhloubení, prosté buněk. .

Po 24 hodinách inkubace byly mikrotitrační plotny opatrně protřepány na třépacím zařízení tak, aby buněčný materiál byl znovu uveden do suspenze. Očkovací přístroj MÍC-2000 byl použit k přenesení vzorku 1,5 mikrolitrů z každého vyhloubení mikrotitrační plotny s 95 vyhloubeními na samostatnou očkovací zásobní plotnu s obsahem Sabouraudova agaru s dextrosou, SDA. Takto naočkované plotny pak byly inkubovány 24 hodin při teplotě 35 °C. Získané výsledky jsou uvedeny v následující tabulce.

Sloučeniny podle vynálezu mají také účinnost proti houbovým onemocněním in vivo. Tuto účinnost je možno prokázat při použití týchž sloučenin, které byly použity v průběhu pokusů in vitro.

Zkoušky byly prováděny tak, že kultura Candida albicans MY 1055 na SDA byla uvedena do suspenze ve.sterilním fyziologickém roztoku chloridu sodného a koncentrace buněk byla stanovena hematocytometrem, suspenze buněk byla upravena na „ 5 množství 3,75 x 10 buněk/ml. Pak bylo 0,2 ml této suspenze podáno nitrožilně myším do ocasní žíly, konečné množství podaného materiálu bylo .7,5 x 10^ buněk/myš.

Zkoušky pak byly prováděny podáním vodných roztoků sloučenin I v různých koncentracích intraperitoneálně I.P.

2.x denně po 4 po sobě následujících dnech, k pokusu byly už.ity. .myší samice- kmene DBA/2-s hmotností 18 až 20 g·, předem infikované. Candida albicans svrchu uvedeným způsobem. Kontrolním myším, infikovaným C. albicans byla I.P. podána destilovaná voda. Po 7 dnech byly myši usmrceny oxidem uhličitým, asepticky byly .vyjmuty ledviny a uloženy -do sterilních' polyethyle- . nových sáčků s obsahem 5 ml sterilního'fyziologického roztoku chloridu sodného. Ledviny byly v sáčcíchhomogenizovány, ředěny tímtéž prostředím sériovým ředěním a podíly materiálu bylý;

v.

re o

M-)	c	o	o
CM	o	VO
		o	o
d	d	d	d

sloučenina, ý_ __ _organismus o

en

C, re l_ re cl o

wo r2 «η cm ó

tn cm *«<

d o

\C>

o d

v o

\o o

o v

o o

o *

V)

CM •

o o

VO

O en

C re o

£ re «

u oo

CM

O >

V) m

o <

tí cn tí

CM tí tí

V)

CM

O

O

O v-j d

o vo

O o

v vo

CM <

« o

o V-,	o o	UO
CM	o	CM
d		*~ι
		O
CM X	n X
Z CM X	z CM X
u CM X	u CM X
u	u
X	* *< *T	X
CM		CM
X	CM	X
z	X	z
CM	z	CM
X	o	x
o	o.	υ
CM	CM	CM
X	X	X
υ 1	o 1	u 1
X	X	X
X	X	X
	ř-Ll

O \D

O

CM

X z

CM

X υ

CM

X υ

x

CM

X z

CM

X u

CM

X υ 1

X

X o

	« 3 0 d •i-l
	H 5) cn >» tn
*	•rl . rd 0 tn Ή -c >o •rl Ό
Q	(0
	iO
2	ε t,
P	w 0
II
tí	<u
>

naočkovány na plotny SDA. Plotny byly inkubovány 48 hodin . při teplotě 35 °C a pak byly počítány kolonie kvasinek ke stanovení jednotek pro tvorbu kolonií, CFU, na 1 g ledvin. Sloučeniny 1, 2, 3 a 4 sniživaly množství izolovatelných CFU pro Candida o více než 99 % při koncentraci 0,09 a 0,375 mg/kg

I.P. při podání dvakrát denně ve Čtyřech po sobě následujících dnech.

Sloučeniny podle vynálezu je možno použít také pro potlačení nebo zrní rnění ' infekce Pneumocystis carini u nemocných s porušeným imunním systémem. Účinnost sloučeniny podle vynálezu proti infekcím tohoto typu je možno prokázat při zouškách na krysách s potlačeným imunitním systémem.

Při prováděné zkoušce byla stanovena účinnost sloučeniny

1-6-1 (R^ = OH, R₂ = H, Rg = CH₂CH₂NH₂, R¹ = DMTD/R¹¹ = H, . = CH₂CH₂NH₂) . Krysy kmene Sprague-Dawley s hmotností přibližně 250 g byly ošetřeny tak, že jejich imunitní systém byl potlačen podáním dexasonu v pitné vodě, 2,0 mg/1 a krysy byly udržovány na krmivu s nízkým obsahem bílkovin 7 týdnů, čímž došlo k vývoji zánětu plic, který byl způsoben Pneumocystis z latentní infekce. Před podáním účinné látky byly dvě krysy usmrceny k ověření pneumonie Pneumocystis carínii POP. Obě krysy byly infikovány. Pěti krysám s hmotností přibližně 150 g byly dvakrát denně ve čtyřech po sobě'následujícíchdnech-podkožně podány injekce sloučeniny 1-6-1 v 0,25 ml destilované vody. Kontrolám byla podána pouze voda. Všechna .zvířata dále dostávala dexason v pitné vodě a nízkobílkovinné krmivo v prů- běhu léčení. Po ukončeném léčení byla všechna zvířata usmrcena a jejich plíce byly mikroskopicky po zbarvení řezů sledovány, na rozsah choroby. Výsledky prokázaly, že při podání sloučeni-, ny 1-6-1 došlo ke .snížení'počtu cyst P. carínii-u pěti krys ^; . alespoň o 90 % při podání 0,075 mg/kg, přičemž všechny krysy přežívaly. ' .

Velmi dobré vlastnosti sloučenin podle vynálezu je možno nejlépe využít při zpracování na nové farmaceutické prostředky s obsahem farmaceutického nosiče při použití běžných postupů.

Nové farmaceutické prostředky obsahují alespoň účinné množství sloučeniny, která má antifungální nebo antipneumocystický účinek. Obvykle obsahuje farmaceutický prostředek nejméně 1 % hmotnostní sloučeniny I. Koncentrované prostředky, určené k ředění před použitím mohou obsahovat 90 % hmotnostních i vyšší množství účinné látky. Farmaceutické prostředky mohou být použity pro perorální, místní nebo parenterální podání včetně podání intraperitoneálního, podkožního, nitrosvalového nebo nitrožílního, dále pro podání do nosu, ve formě čípků nebo insuflací. Prostředky mohou být předem připraveny tak, že se sloučenina I smísí s dalšími složkami, vhodnými pro použití spolu s požadovaným nosičem.

Pro perorální podání mohou být určeny kapalné nebo pevné prostředky. Pro kapalné prostředky je možno použít kapalné nosiče, jako jsou voda, glykoly., oleje, alkoholy a podobně a pro pevné prostředky, jako kapsle a tablety je možno užít pevné nosiče, jako jsou škroby, cukry, kaolin, ethylcelulosa,' uhličitan vápenatý a sodný, fosforečnan vápenatý, mastek, laktosa a podobně, obvykle s kluznou látkou, jako je stearan vápenatý, popřípadě spolu s pojivý, desintegracními činidly a podobně. Vzhledem ke snadnosti podávání představují tablety a kapsle nejvýhodnější lékovou formu pro perorální podání. Zvláště vhodné jsou formy, obsahující jednotlivou dávku pro . zajištění rovnoměrnosti podávaného množství účinné látky. Ty-, to formy představují výhodné provedení vynálezu.

Účinné látky mohou být zpracovány také na prostředky pro injekční podání, může jít o suspenze, roztoky nebo emulze v olejovém nebo vodném prostředí, obsahujícím například

0,85 % chloridu sodného nebo 5 % dextrozy ve vodě a popřípadě pomocné látky, jako suspenzní, stabilizační a/nebo dispergační činidla. Je také možno přidat pufr a přísady k úpravě osmotického tlaku, jako chlorid sodný nebo glukosu. Sloučeniny je možno také rozpustit ve směsi alkoholu a propylenglykolu nebo v polyethylenglykolu k usnadnění nitrošilního podání.

Tyto prostředky mohou rovněž obsahovat jednotlivé dávky v ampulích·nebo větší počet dávek v lahvičkách, s výhodou s přísadou konzervačního prostředku. Účinná látka může být dodávána také ve formě prásku, určeného pro smísení s vhodným prostředím před podáním.

Pod pojmem forma s obsahem jednotlivé dávky se rozumí fyzikálně oddělené jednotky, z nichž’každá obsahuje předem stanovené množství účinné složky, vypočítané -pro dosažení po- '» řadovaného léčebného účinku při podání spolu s farmaceutickým nosičem. .Příkladem takových forem mohou být tablety, 'kapsle, pilulky, prášky v oplatkách, roztoky v ampulích nebo v lahvičkách s obsahem většího počtu dávek a podobně. Jednotlivá dávka sloučenin podle vynálezu bude obvykle v rozmezí 100,až 200 mg.

.V případě, že je sloučenina určena jako antifungální'látka, může být zvolen jakýkoliv způsob podání. K léčení mykotických infekcí se obvykle užívá perorální nebo nitrožilní podání,

V případe, že mají být sloučeniny použity k potlačení ' plicní infekce, je žádoucí léčit přímo plíce a průdušky'. Z' ’’’ . těchto důvodů je 'výhodné'podávání inhalací. Pro tento způsob ' podání se sloučeniny podle vynálezu zpracovávají na aerosoly, · určené pro podání z tlakového balení nebo pomocí rozprašovače. Výhodným systémem pro podávání inhalací je.aerosol s odměřený- . mi dávkami, .MDI, který je suspenzí nebo roztokem sloučeniny I ve vhodném hnacím prostředku, jako je fluorovaný uhlovodíky;·. nebo uhlovodík. .. ’· f

<t

Přesto že je možno sloučeniny podle vynálezu podávat ve formě tablet, kapslí, prostředků pro místní podání, prásků pro insuflaci, čípků a podobně, rozpustnost sloučenin podle vynálezu ve vodě a ve vodných prostředích umožňuje jejich zpracování na injekční prostředky a také na kapalné prostředky, určené pro podávání ve formě aerosolu.

Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady, které však nemají sloužit k jeho omezení.

Příklady 1 až 3 uvádějí výrobu produktů prvním popsaným způsobem, při použití sulfonu. .Tento postup je možno použít pro výrobu kterékoliv sloučeniny, avšak podmínkou je dosažení dostatečného výtěžku v případě, že R^' je hydroxyskupina.

Příklad 4 a následující popisují přípravu produktů přímou náhradou kyslíku dusíkem v poloze 5-orn. Tento postup je výhodný v případě,že R je vodík a R^ a R^^^ rovněž znamenají atomy vodíku.

Příklad 3 popisuje použití výchozí látky, v níž byla skupina ve významu R^ již redukována na CH₂CH₂NH₂ z původního produktu, v němž znamená CH^CONl·^. Podobně je možno čás tečně modifikovanou sloučeninu užít také pro sloučeniny, v nichž R^ znamená skupinu -CH₂CN.

V příkladech 9 a 10 se popisuje přeměna kyslíku v hemiaminopoloze na dusík a pak přeměna skupiny CH₂CN nebo . ch₂ch₂nh₂...

Příklady provedení vynálezu

2HCI

Část A. Způsob výroby l-/4-hydroxy-5-(epi)-aminoethylthio2

-N -(10,12-dimethy1-1-oxotetradecyl)orníthin/-5-(3~hydroxyglutamin)-6-(3-hydroxyprolin)echinocandinu B (řetězec č. 34) jako meziprodukt '

Roztok' 500 mg, 0,47 mmol pneumocandinu B_q (řetězec . .

č. 19), 5,34 g, 47 mmol 2-aminoethanthiolhydrochloridua 109 mg, 0,47 mmol kyseliny (lS)-( + )-10-ka’frosulfonové ve 40 ml' bezvodého DMF se míchá 6 dnů při teplotě 25 °C.. Pak

4· se reakční směs zředí 40 ml vody a podrobí se rychlé chromátografií při použití 15,0 g prostředku Lichroprep RP18 s ' velikostí částic 40 až 63 mikrometrů ve sloupci v rovnovážném stavu s 10 % acetonitrilu ve vodě. Sloupec se vymývá 10 až

40% roztokem acetonitrilu ve vodě a odeberou se dvě frakce po 120 ml při použití gradientu vždy 10 %, Ze dvou frakcí, odebraných při použití 40% acetonitrilu ve vodě se získá

185 mg materiálu, který se pak čistí preparativní HPLC při použití prostředku Zorbax C8 (21,2 x 250 mm), k eluci se užije 40 až 45% acetonitril ve vodě s obsahem 0,1 % TFA, čímž, se získá 128 mg l-/4-hydroxy-5-(epi)-aminoethylthio2

-N -(10,12-dimethyl-l-oxotetradecyl)-ornithin/-5-(3-hydroxyglútamin)-6-(3-hydroxyprolin)-echinocandinu B ve formě trifluoracetátu jako bílá amorfní pevná látka.

¹H-NMR (400 MHz, CD OD) ppm: 1,34 (d, J = .6,3 Hz, 3H) , 2,89 (m, 2H), 4,72 (d, J = 4,9 Hz, 1H).

FAB-hmotové spektrum (Li), m/e = 1131 (MH+Li)⁺.

Cast B. Příprava sulfonu (řetězec č. 34) jako meziproduktu

K míchanému roztoku 444 mg, 0,358 mmol thiosloučeniny, získané v části A v 15 ml směsi acetonitrilu a vody 1 : 1 se přidá Oxon (324 mg, což je ekvivalentní 1,06.mmol hydrogenpersíranu' draselného). Po 45 minutách se roztok zředí stejným objemem vody a podrobí rychlé chromatografií na sloupci v reverzní fázi (C18), k eluci se užije 35 až 43% acetonitril ve vodě s obsahem 0,1 % TFA, užije se gradientu, zvyšujícího se po 2 %. Frakce s obsahem produktu se lyofilizují, čímž se ve výtěžku 86 % získá 357 mg episulfonu.

¹H-NMR (400 MHz, CD^OD) ppm: 3,48 (m, 2H), 3,55 (m, 1H),

3,71 (m, 1H), 3,91 (dd, 1H), 4,00 (m, 1H), 5,17(dd, 1H),

6,76 (d, 2H) , 7,15 (d, 2H) .· '

Část C. Příprava produktu, sloučeniny 1-4 (řetězec č. 4)

K míchanému roztoku 1,2 g, 0,945 mmol episulfonu z časti B ve 20 ml bezvodého DMF se přidá 468 mg, 9,45 mmol ethylendiaminu. Po 1 hodině je možno prokázat pomocí HPLC (RP-C18, 40% methylkyanid ve vodě s 0,1 % TFA) úplnou přemenu na dva polární produkty v poměru 37 : 63. Rychlá chromatografie na sloupci v reverzní fázi (C18) při eluci 10 až 40% acetonitrilem ve vodě s obsahem 0,1 % TFA·při zvyšování gradientem po 5 % je pak následována lyofilizaci příslušných frakcí, čímž se ve výtěžku 21 % získá 200 mg běžného produktu ve formě (bis)-trifluoracetátu.

lH NMR (400 MHz, CD3OD) δ 1.14 (d, J=6.2 Hz, 3H), 2.72 (dd,

J=15.4 and 3.8 Hz, 1H), 4.10 (m, H), 5.04 (dd, J=8.7 and 3.2 Hz, 1H),

5.09 (dd, J=8.5 and 4.2 Hz, 1H), 5.18 (br s, 1H), 6.74 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.12 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.47 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.71 (d, J=10.0 Hz, 1H),

8.11 (d, J=8.7 Hz, 1H), 8.71 (d, J=8.7-Hz, 1H).

FAB-hmótové spektrum (Li), m/z 1113,5 (MLi)⁺.

Získaný (bis)-trifluoracetát se rozpustí ve vodě a roztok se nechá projít sloupcem Bio-Rad AG2-X8 (Cl^-) pblyprep, k eluci se užije voda. Eluát s obsahem.produktu se lyofilizuje, čímž se produkt získá ve formě bis-hydrochloridu.

. Lyofilizaci..frakcí .s obsahem hlavního -produktu se -získáepi-produkt.· , ' ' ¹H-NMR (400 MHz, CD₃0D) ppm: 3',02 /m, 1H) , 3,14 (m,· 3H) ,· 4,16 ' (m, 1H), 5,10 (dd, 1H), 6,76 (d, 2H), 7,14 (d, 2H).

FAB-hmo'tové spektrum (Li), tn/z .1113,9 (MLi) ⁺ .

Příklad 2

Cast A. Příprava sulfonu (řetězec č. 36) jako meziproduktu

Výchozí látka, sloučeniny A-6, v níž R¹ = DMTD (řetězec č. 21) se připraví způsobem, který byl popsán svrchu při výrobě výchozích látek.

Sloučenina A-6 se pak převede na epi-thio sloučeninu B-6 (řetězec Č. 36) způsobem, popsaným v části A příkladu 1.

K míchanému roztoku 285 mg, 0,241 mmol sloučeniny B-6 ve 14 ml směsi acetonitrilu a vody se přidá Oxon (162 mg, ekvivalentních 0,530 mmol hydrogenpersíránu draselného). Po 45 minutách se roztok zředí stejným objemem vody a podrobí rychlé chromatografií na sloupci v reverzní fázi (C18), k eluci se užije 30 až 45% acetonitril ve vofě s obsahem'0,1 % kyseliny trifluoroctové, množství acetonitrilu se zvyšuje gradientem po 5 % a frakce s obsahem produktu se lyoflizují, čímž se ve výtěžku 84 % získá 212 mg epi-sulfor.u (sloučenina C-ó, řetězec č. 36).

¹H-NMR (400 MHz, CD₂OD) ppm: 3,08 (m, 2H), 3,46 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 3,68 (m), 5,05 (m), 6,77 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,15 (d, J = 8,5 Hz, 2H),

FAB-hmotové spektrum (Li), m/z 1039,9.

V _f

Cast B. Příprava.produktu vzorce 2 (sloučeniny 1-6, v níž II III

R = H, R = 2-aminoethyl, řetězec č. 6)

K míchanému roztoku 418 mg, 0,305 mmol sloučeniny C-6, připravené v Části A v 10 ml bezvodého Ν,N-dimethylformamidu se přidá 183 mg, 3,05 mmol ethylendiaminu. Po jedné hodině je možno pomocí HPLC (RP-C18, 35% methylkyanid ve vodě s 0,1 %

TFA) úplnou přeměnu směsi na dva polární produkty v poměru 36 : 64. Reakční směs se pak zředí vodným roztokem kyseliny trif luoroctové.(190 ml vody, 0,4 ml TFA) a směs se chromatografuje. Po rychlé chromatografií na sloupci v reverzní- fázi (C-18) při eluci 10 až 25% acetonitrilem ve vodě s obsahem 0,1 % TFA při gradientu po 5 % se příslušné frakce lyofilizují, čímž se získá 111 mg produktu ve formě tris-trifluoracetátu, výtěžek produktu je 25 %.

1h NMR (400 MHz, CD3OD) δ 1.17 (d, J=6.2.Hz), 2.44 (dd, J=7.0 and 13.2 Hz, IH), 2,7-3,0 (m, 4H), 3.06 (t, J=7.0 Hz, 2H), 3.82 (m, 3H),

3.97 (dd, J=11.2 and 3.2 Hz, IH), 4.03 (m, 2H), 4.70 (d, J=2.3 Hz, IH),

5.00 (d, J=33 Hz, IH), 6.75 Hz (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.11 (d, 1=8.6 Hz,

2H)

FAB-hmotové spektrum (Lij, m/z 1099,9 (MLíJ⁺, 1033,9.

Získaný tris-trifluoracetát se rozpustí ve vodě a roztek se nechá projít sloupcem Bio-Rad AG2-XB (Cl ) polyprep, k eluci se užije další voda. Frakce s obsahem produktu se lyofilizují, čímž se získá 93 mg produktu ve formě tris-hydrochloridu

Příklad 3

HCI

Část A. Příprava azidu (řetězec č. 49)

K míchanému roztoku '297 mg, 0,257 mmol episulfonu z části B, případu 1, v 10 ml bezvodého dimethylformami'du se přidá 126 mg, 257 mmol azidu lithia. Po jedné hodině je možno pomocí HPLC (RP-18,'40% methylkyanid ve vodě s 0,1 % TFA) prokázat úplnou přeměnu na jediný,,méně polární produkt. Po rychlé chro matografii v reverzní fázi (CIS) při eluci 30 až 65% acetonitrilem ve vodě při gradientu po 5 % se frakce s obsahem produktu lyofilizují, čímž se získá surový azid. Preparativní HPLC (CIS, 40 až 45% methylkyanid ve vodě s obsahem 0,1 % TFA) při použití gradientu po 5 % se získá azídoslcučenina D-4, řetězec č. 49.

lH NMR (400 MHz, CD3OD) δ 1.14 (d, >6.1 Hz, 3H), 2.50 (dd, >15.6 a. 9.9 Hz, 1H), 2.84 (dd, J= 15.6 a ' 3.3 Hz, 1H), 3.95 (dd, >11.2 a . 3.1 Hz, 1H), 4.05 (m, 2H), 4.56 (m, 3H), 4.98 (dd, >8.5 a . T 3.5 Hz, 1H), 5.10 (dd, >8.3 a· 4.2 Hz, 1H), 5.26 (dd, >8.5 a

2.2 Hz, 1H), 6.74 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.12 (d, >8.6 Hz, 2H), 7.44 (d, >8.3 Hz, 1H), 7.76 (d, >9.9 Hz, 1H), 8.26 (d, >8.1 Hz, 1H), 8.83 (d, >8.7 Hz, 1H), 9.00 (d, >8.5 Hz, 1H)

FAB-hmotové spektrum (Li), m/z 1096,9 (MH+Li)⁺.

IR-spektrum (nujolový mul, cm~^) 2110. ^; ,

Část B. Příprava aminu (řetězec č. 4)

Směs azidosloučeniny D-4 (137 mg, 0,126 mmol), připravené v části A a 137 mg 10%· paladia na aktivním'uhlí v 10 ml ledové kyseliny octové se hydrogenuje celkem 14 hodin, pak se katalyzátor odfiltruje a filtrát se lyofilizuje, čímž se získá surový amin. Čištěním preparativní HPLC (C18, 35 až 41% methylkyanid ve vodě s 0,1 % TFA, gradient po 3 %) s ná-. slednou lyofilizací s příslušnou frakcí se získá azasloučenina í-l, v níž a i = H, (řetězec č. 1) ve formě trifluoracetátu, výtěžek je 48 %.

lH NMR (400 MHz, CD3OD) δ 1.13 (d, J=6.ÍHz, 3H), 2.49 (dd,

J=15.6i 9.8 Hz, 1H). 2.81 (dd, J=15.6 a 3.4 Hz, 1H), 3.97 (dd,

J=ll.l a- 3.1 Hz, 1H), 4.03 (m, 1H),4.11 (m, 1H), 4.47 (dd, J=11.7 a 5.5 Hz, 1H), 4.57 (m, 2H), 5.00 (m, 1H), 5.10 (m, 1H), 5.14 (d,

J=2.2 Hz, 1H), 6.74 (d, 1=8.6 Hz, 2H), 7.12 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.42 (d,

J=S.3 Hz, 1H), 8.89 (d, J=8.8 Hz, 1H)

FAB-hmotové spektrum (Li), m/z 1071,0 (MLí)·*.

Trifluoracetát se rozpustí ve vodě a roztok se nechá projít sloupcem Bio-Rad AG2-X8 (Cl ) polyprep, k eluci se užije voda. Eluát s obsahem produktu se lyofilizuje, čímž

č. 1) ve formě hydrochloridu.

V následujících pokusech je rozpouštědlo A směs 95 % vody, 5 % acetonitrilu a 0,1 % kyseliny trifluoroctové a rozpouštědlo B je směs 95 % acetonitrilu, 5 % vody a 0,1 % kyseliny trifluoroctové. V případě, že je užit pojem ve vakuu znamená to odpaření rozpouštědla na rotačním odpařovači.

Příklad 4

OH •HOAc H₂N h₂f c

HO

A. Příprava azidu D-l (řetězec č. 46) jako meziproduktu

5,00 g, 4,69 mmol pneumocandinu (sloučenina A-4, řetězec č. 19) se rozpustí při teplotě místnosti ve 2M roztoku chloristanu lithného v diethyletheru. Přidá se 2,50 ml kyseliny trifluoroctové a pak se za stálého míchání přidá ještě 5,00 ml triethylsilanu. Heterogenní směs se energicky míchá 6 hodin, po této době již není možno prokázat nebo je možno prokázat jen nepatrné množství výchozího pneumoxandinu Βθ analytickou HPLC (C18 Zorbax, 45'% rozpouštědla A, 55 % rozpouštědla B, 0,1 % TFA, rychlost průtoku 1,5 ml/min).

Směs se vlije do 200 ml destilované vody, zfiltruje a suší na vzduchu. Vlhká pevná látka se smísí s diethyletherem, směs se zfiltruje a produkt se suší na vzduchu, čímž se získá 5,6 g surového redukovaného pneumocandinu Βθ (sloučenina A-l, řetězec č . 16).

K roztoku ΗΝ^, připravenému rozpuštěním 3,06 g, 47,0 mmol NaNg ve 100 ml kyseliny trifluoroctové za chlazení se přidá' v pevné formě svrchu získaná surová sloučenina. Směs se míchá 30 minut při teplotě místnosti a pak se vlije do 350 ml destilované vody a směs se ještě 15 minut'míchá. Vytvořená sraženina se odfiltruje, rozpustí se v methanolu a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu. Zbývající voda se odstraní azeotropní destilací se 100% ethanolem. Výsledná pevná látka se ještě odpařuje ve vakuu' k odstranění těkavého podílu. Pak se čistí preparativní HPLC ve .dvou stejných podílech (C18 Deltapak, ml/min, frakce po 48 ml) při použití gradientově eluce.od 70 % A/30 % B až do 50 % A/50 % B. Příslušné frakce se spojí (podle stanovení- v UV světle při 220 a 277 nm) . Nečisté .frakce se spojí a znovu .zpracovávají stejným způsobem. Tímto způsobem se ve výtěžku '35 % získá celkem 1,78 g výsledného azidu D-l (řetězec č . 46).' ¹H-NMR (400 MHz, CD₃0D) ppm: 7,02 (č, 2H), 6,69 (d, 2H), 5,30 (d, IH), 5,11 (d, IH), 4,98 (d, IH), 2,74 (dd, IH), 1,13 (d, 3H)

FAB-hmotové spektrum (Li), m/z 1081 (MH+Li)⁺.

B. Příprava aminu vzorce 4, sloučenina 1-1, v níž R^ i

TTT

R = H, (řetězec č. 1)

1,5 g .čištěné azídu D-l, připraveného svrchu uvedeným způsobem se rozpustí ve 40 ml methanolu. Přidá se 15 ml 33% vodného roztoku kyseliny octové a pak ještě 0,20 g 10% paladia na aktivním uhlí·, načež se reakční nádoba propláchne dusíkem. Atmosféra uvnitř baňky se nahradí vodíkem a směs se ve vodíkové atmosféře energicky míchá 3 hodiny, .Vzniklá suspenze se zfiltruje přes fritu s průměrem otvorů 0,2 mikrometru a získaný čirý roztok se odpaří ve vakuu do sucha. Odparek se rozpustí v přibližně 20 ml destilované vody, zmrazí a lyofilizuje, čímž se ve výtěžku 95 % získá 1,47 g výsledné aminosloučeniny s řetězcem č. 1 ve formě bílé pevné látky.

^XH-NMR (400 MHz, CD OD) ppm:' 7,02 (d, 2H), 6,69 (d, 2H), 5,09 (d, IH), 5,01 (d, IH), 2,77 (dd, IH), 1,15 (d, 3H).

FAB-hmotové spektrum (Li), m/e 1055 (MH + Li)⁺.

Příklad 5

A. Příprava nemzyloxykarbonylové sloučeniny (řetězec č. 1) jako meziproduktu

200 mg, 0,180 mmol aminu vzorce 4 z příkladu 4 a penta fluorfenyl-N-benzyloxykarbonyl-3-aminopropanoát se rozpustí v 1 ml dimethylformamidu. Pak se přidá ještě 0,035 ml, 0,198 'mmol diisopropylethylaminu a' směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti. Pak še reakční směs zředí 2 ml methanolu a čistí preparativní HPLC (018 Deltapak, užije se gradientu 70 % A/30 % B až 48 % A/52 % B, frakce po 48 ml). Příslušné frakce podle stanovení v UV-světle při 220 a 277 nm se spojí zmrazí a lyofilizují, čímž se ve výtěžku 44 % získá 100 mg požadovaného meziproduktu.

¹H-NMR (400 MHz, CD OD) ppm: 7,32 (m, 5H), 7,01 (d, 2H), 6,69 (d, 2H), 5,64 (bd, 1H), 1,18 (d, 3H) .

FAB-hmotové spektrum (Li), m/z 1259 (MLi)⁺.

B. Příprava 3-aminopropanoylového derivátu vzorce 5, τ T TTT sloučenina 1-1, v níž R = H, R = C0(CH₂)₂NH₂ (řetězec č. 1) ' mg, 0,075 mmol benzyloxykarbonylové sloučeniny z části A se rozpustí ve směsi 3 ml methanolu, 1 ml vody a 0,2 ml kyseliny octové.' Přidá se 48 mg 10% paladia na aktivním uhlí a nádoba se propláchne plynným dusíkem. Pak se nádoba ještě proláchne vodíkem a směs se míchá 2 hodiny pod tlakem vodíku 0,1 MPa.. Pak se těkavý podíl odstraní ve vakuu, čímž se získá pevná látka, která se rozpustí ve 4 ml 50% acetonitrilu ve vodě, roztok se zmrazí a lyofilizuje, čímž se ve výtěžku 91 % získá 80 mg požadovaného produktu vzorce 5 ve formě bílé pevné látky.

¹H-MMR (400MHz, CD^OD) ppm: 7,01 (d, 2Ή), 6,69 (d, 2H), 6,67 (d, 1H), 5,10 (ό, 1H), 4,99 (d, 1H), 3,12 (m, 2H), 1,91 (s,

3H), 1,17 (d, 3H). . .

FAB-hmotové spektrum (Li), m/z 1125 (MLi)⁺.

Příklad 6

H₃CHN OH -K

HO

Příprava N-methylaminoderivátu vzorce 6, sloučenina 1-1, v níz.R¹¹ = H a R¹¹¹ = CH₃ (řetězec č. 1)

45,6 mg, 0,135 mmol aminu vzorce 5 zpříkladu 5 se rozpustí v 0,5 ml bezvodého dimethylformamidu. Pak se přidá 0,021 ml, 0,338 mmol jodmethanu a 0,0824 ml, 0,473 mmol díisopropylethylaminu,. Směs se míchá 24 hodin při teplotě místnosti, těkavý podíl se odpaří ve vakuu a surový produkt se analyzuje hmotovou .spektrometrií.

FAB-hmotové spektrum (Li), m/z 1068 (MLi)⁺.

Příklad 7

A. Příprava (N-kyanomethyl.)nitrilu, sloučeniny 1-1, v níž R¹^ = H a R¹^ = CH^CN (řetězec č. 1) jako meziprodukty

500 mg, 0,451 mmol aminosloučeniny, připravené podle příkladu 4 se rozpustí ve 3 ml bezvodého dimethylformamidu.

Pak se přidá 0,063 ml, 0,902 mmol bromacetonitrilu, předem čištěného průchodem malou vrstvou směsi síranu hořečnatého a hydrogenuhličitanu sodného a pak ještě 0,157 ml, 0,902 mmol diisopropylethylaminu. Čirá reakční směs se míchá 12 hodin a pak se zředí malým objemem vody. Roztok se čistí preparativní HPLC (CIS, Deltapak, gradient 70 % A/30 % B až 47 % A/53 % B, frekce po 48 ml). Příslušné frakce podle stanovení v UV-světle při 220 a 277 nm se spojí, zmrazí a lyofilizují, čímž se ve výtěžku 62 % získá 338 mg požadované kyanomethylové sloučeniny jako meziproduktu ve formě ve vodě nerozpustné pevné látky.

¹H-NMR (400 MHz, CD^D) ppm: 7,01 (d, 2H) , 6,69 (d, 2H) , 5,12 (dd, 1H), 5,01 (dd, 1H), 3,80 (s, 2H), 2,76 (dd, 1H), 1,15 (d, 3H).

FAB-hmotové spektrum (Li), m/z 1094 (MH + Li)⁺.

B. Příprava N-aminoethylderivátu, sloučeniny vzorce 7, (sloučeninu 1-1, v níž - H a R^FFF - (CH₂)₂NH₂, řetězec Č. 1)

300 mg, 0,249 mmol nitrilového (kyanomethylového) derivátu, připraveného'svrchu uvededným způsobem se rozpustí v 5,0 ml methanolu. Pak se přidá 237 mg, 0,997 mmol hexahydrátu chloridu nikelnatého. Po třech podílech se k roztoku přidá 189 mg, 4,99 mmol hydroborátu sodného. Okamžitě se vytvoří černá sraženina a směs se ještě 15 minut míchá při teplotě místnosti. Heterogenní směs se'pak zředí přibližně 20 až 40 ml vody a přidá se 10 až 15 ml 2N HCl. Směs se míchá ještě 45 minut nebo tak dlouho, až se černá sraženina rozpustí a vytvo- . ří se modrozelený roztok. Roztok se Čistí preparativní HPLC (C18 Deltapak), užije se gradientu 70'% A/30 % B až 55 % A/ /45 % B a odebírají se frakce po 48 ml. Příslušné frakce podle stanovení absorbci v Uv světle při 220 a 277 nm se spojí, zmrazí, a lyofilizují, čímž se ve výtěžku 55 % získá 180 mg produktu. Tento materiál se rozpustí ve 30 ml vody a roztok se nechá projít sloupcem íontoměniče v Cl -formě, sloupec se promývá destilovanou ..vodou . Získaný roztok se-zmrazí a lyofilizuje, čímž .se ve výtěžku 94 .% získá 189 mg požadovaného aminoethylderivátu vzorce 7, řetězec č. 1, ve formě bílé pevné látky.

¹H-NMR (400 MHz, CD₃0D) ppm: 7,01 (d, 2H) , 5,11 (dd, 1H), ·' 5,07 (dd, 1H), 1,14 (d, 3H). .

FAB-hmotové spektrum (Li), m/z 1098 (MH + Li)⁺.

Příklad 8

A. Příprava azidu jako meziproduktu (řetězec č. 47)

2,00 g, 1,91 mmol nitrilu pneumocandinu (řetězec č. 20) se rozpustí ve 24 ml 2M chloristanu lithného ve směsi s diethyletherem. Pak se přidá 2,00 ml triethylsilanu a pak ještě 1,00 ml kyseliny trifluoroctové, načež se směs energicky míchá 6 hodin při teplotě místnosti. Pak se směs vlije do 300 ml vody, 15 minut.se míchá a pak se zfiltruje. Filtrační .koláč se rozpustí v malém množství methanolu a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu. Zbytek vody se odstraní azeotropní destilací se 100% ethanolem a zbytek se uloží přes noc ve vysokém vakuu k odstranění těkavého podílu, čímž se získá požadovaný výsledný produkt (řetězec č. 17), monoredukovaný na uhlíkovém atomu benzylové skupiny.

Takto získaný surový pevný produkt a 1,26 g, 19,4 mmol azidu sodíku se uloží do baňky ε okrouhlým dnem, opatřené míchadlem a chladicí lázní. Pak se pomalu přidá 50 ml kyseliny trifluoroctové, chladicí lázeň se odstraní a směs se míchá ještě 2 hodiny. Pak se směs vlije do 300 ml vody a výsledná směs se zfiltruje. Pevný podíl -se rozpustí v methanolu, odpaří ve vakuu na rotačním odpařovači.a ve vysokém vakuu se odstraní těkavý podíl. Surový produkt se čistí preparativní HPLC (C18,Deltapak), užije se gradientu 55 % A/45 % B/ až 45 % K{ /55 % B a odebírají se frakce po 56 ml. Příslušné frakce podle absorpce v UV světle při 220 a 277 nm se spojí, zmrazí a lyofylizují, čímž se získá ve výtěžku 29 % celkem 0,59 g požadovaného azidu (řetězec č. 47) jako meziproduktu.

¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD) ppm: 7,00 (d,.2H), 6,69 (d, 2H) , '5,34 (d, IH), 5,07 (d, IH), 5,00 (m, IH), 2,88 (dd, IH), 1>17 (d, 3H) FAB-hmotové· spektrum (Li), m/z 1036 (M-N^+Li)^{1 *}.

B. Příprava sloučeniny vzorce 8 (řetězec Č. 48)

0,15 g, 0,142 mmol čištěného azidu.z části .A se rozpustí ve směsi 4 ml methanolu, 1 ml vody a 0,5 ml kyseliny octové.

Pak se k roztoku přidá 50 mg 10% paladia na aktivním uhlí. Reakční baňka se propláchne plynným dusíkem a pak vodíkem.

Směs se energicky míchá 5 hodin při teplotě místnosti pod tlakem vodíku 0,1 MPa. Pak se směs zfiltruje přes fritu s průměrem otvorů 0,2 mikrometrů a těkavý podíl se odstraní ve vakuu, čímž se ve výtěžku 80 % získá 0,124 g výsledného produktu vzorce 8, sloučeniny 1-2, v níž-R^ a R¹¹¹ = H, rI = DMTD (řetězec č, 2) ve formě bílé pevné látky. .

¹H-NMR (400 MHz, CD₃0D) ppm:' 7,00 (d, 2H), 6,69 (d, 2H). 5,04 (d, IH), 5,01 (m, IH), 2,79 (dd, IH), 1,18 (d, 3H).

FAB-hmotové spektrum (Li), m/z 1037 ,(MH + Li) ⁺ .

Příklad 9

Příprava aminu vzorce 9 (řetězec Č. 3) mg, 0,0415 mmol čištěného azidu-nitrilu z části A příkladu 8 se rozpustí v 1,5 ml methanolu a pak se přidá 59 mg, 0,25 mmol CoClg.óHgO. Pak se opatrně po jednotlivých podílech přidá 8 x 12 mg, 2,50'mmol hydroborátu sodného.

Černá heterogenní reakční směs se míchá 30 minut při teplotě místnosti. Pak se reakce zastaví přidáním 1,5 ml 2N kyseliny chlorovodíkové a dostatečného množství kyseliny octo- vé k rozpuštění sraženiny. Světlý roztok se zředí 3 ml vody a čistí se preparativní HPLC (C18, Zorbax) při použití gradien tu 70 % Á/30 % B až 60 % A/40 % B, průtok 15 ml/min, frakce po 15 ml. Příslušné frakce podle stanovení absorpcí UV-světla při 210 a 277 nm se spojí, zmrazí a lyofilizují, čímž .se ve výtěžku 72 % získá 38 mg požadované sloučeniny vzorce 9 ve formě bílé pevné látky.

¹H-HHR (400 MHz, CDgOD) ppm: 6,99 (d, 2K) , 6,70 (d, 2H) , 5,11 (d, IH), 5,0 (m, IH), 3,05 (m, 2H), 1,17 (d, 2H) .

FAB-hmotové spektrum (Li), m/z 1041 (MH-řLi)’’.

Příklad 10

A.- Příprava bis-nitrilu. jako meziproduktu. (sloučenina 1-2, ... v níž R¹¹ = -H., R^TII..= CH₂CN, R^I.-.DM.TD, řetězec č. 2) ,, .

500 mg, 0,459 mmol nitrilu-aminu z části B příkladu 8 se rozpustí .ve 3 ml bezvodého dimethylformamidu. Pak se přidá 0,064 ml, 0,917 mmol bromacetonitrilu, předem čištěného průchodem malou vrstvou směsi síranu horečnatého a hydrogenuhliČitanu sodného-a pak ještě 0,155 ml, 0,917 mmol diisopropylethylaminu .- Reakční směs se míchá 18 hodin při teplotě místnosti, pak se zředí vodou á čistí preparativní HPLC (C18,

Deltapak), průtok 60 ml/min, gradient 70 % A/30 % B až % A/50 % B, odebírají se frakce po 48 ml. Příslušné frakce podle absorpce UV světla při 220 a 277 nm se spojí, zmrazí a lyofilizují, čímž se ve výtěžku 36 % získá 198 mg požadované sloučeniny 1-2, v níž. R¹¹ = H, a R¹¹¹ = CH^CN.

¹H-NMR (400 MHz, CD^OD) ppm: 7,00 (d, 2H), 6,69 (d, 2H) , 5,08 (dd, 1H), 5,01 (dd, 1H), 3,73 (s, 2H) , 2,79 (dd, 1H), 1,18 (d, 3H) .

FAB-hmotové spektrum (Li), .m/z 1076 (MH +- Li) ⁺ .

B'. Příprava sloučeniny vzorce 10 (řetězec č. 3)

184 mg, 0,150 mmol bis-nitrilu z části A ser ozpustí ve 3 ml methanolu. 148 mg, 0,621 mmol NiClg.SH^O se rozpustí v methanolu a po třech podílech se přidá 117 mg, 3,1 mmol NaBH^. Po 5 minutách se přidá ještě 148 mg, 0,6.21 mmol 0ο01₂·6Η₂0 a směs se ještě 1 minutu míchá, pak se přidá ještě 117 mg hydroborátu sodného a směs se míchá dalších 15 minut.

Pak se přidá ještě 60 mg hydroborátu sodného k dovršení reakce. Směs se zředí vodou, okyselí se 2N kyselinou chlorovodíkovou a míchá se tak dlouho, až se rozpustí černá sraženina.

Směs se čistí preparativní HPLC (C18, Zorbax) při průtoku 15 ml/min při použití gradientu 70 % A/30 % B až 55 % A/45 % B, odebírají se frakce po 22,5 ml a spojí se frakce podle absorpce UV světla při 220 a 277 nm, po lyofilizaci těchto frakcí se získá pevný podíl, který se rozpustí ve vodě a roztok se nechá projít sloupcem iontoměniče v Cl -formě, eluát se zmrazí a lyofilizuje, čímž se ve výtěžku 44 % získá 81,1 mg požadovaného produktu vzorce 10, sloučenina 1-3 (řetězec č. 3) jako bílá pevná látka.

¹H-NMR (400 MHz, CD^D) ppm: 7,00 (d, 2H), 6,70 (d, 2H),

3,0 - 3,3 (m, 6H), 1,18 (d, 3H).

FAB-hmotové spektrum (Li), m/z 1084 (MH+Li)⁺. .

- 46 Příklady 11 až 14

Obdobným způsobem jako v příkladu se příslušné přírodní cyklopeptidy nebo modifikované přírodní produkty, získané dále popsaným způsobem rozpustí ve směsi cnicristanu lithného a diethyletheru a v průběhu míchání po dobu 5 až .10 hodin se přidá kyselina trifluoroctová a triethylsilan. Pak se směs vlije do vody, zfiltruje, pevný podíl se míchá s diethyletherem, pak se zfiltruje a suší na vzduchu, čímž se zís ká cyklopeptid, v němž byla skupina redukována na vodík.

Monoredukovaná sloučenina se pak přidá k roztoku předem vytvořenému z NaN^ a kyseliny trif luoroctové, za .chlazeni a míchání při teplotě místnosti pc dobu 30 minut až 1 ho dina, načež se směs vlije do vody, čímž vznikne jako produkt azid, který se izoluje svrchu uvedeným způsobem.

Tento azid se hydrogenuje při použití paladia na aktivním uhlí jako katalyzátoru, tak jak' bylo svrchu popsáno a po oddělení katalyzátoru se produkt z filtrátu izoluje.

Tímto způsobem je možno získat následující produkty:

příklad	Rl	R2	R3	NRn rIH	R1 řetězec
11	H	H	CH2CONH2	H	H	C6H4OC8H17	12
12	H	H	CH2CN	H	H	C6H4OC8H17	13
13	H	H	CH2CH2NH2	H	H	C6H4OCSH17	14
14	H	CH3	CH3	H	H	C6H-4OC8H17	15

b

Příklady 15 až 17

Způsobem, popsaným v příkladu 7 se sloučeniny z příkladu 11, 13 a 14 rozpustí v dimetnylformamidu a k roztoku se přidá čištěný bromacetonitril a pak diisopropyletnylamin a směs se míchá 12 až 18 hodin, čímž se získá nitril (N-kyanomethylová sloučenina). Tento produkt se pak čistí pomocí preparativní HPLC.

Tento nitril se rozpustí v methanolu a chemicky redukuje při použití chloridu nikelnatého a hydroborátu sodíku, čímž se získá aminoethylsubstituovaná sloučenina:

Slouče-	Rl	R2	R3	nrH rIH	rI · ~ ' retezec
nina'					č.
15	H	H	CH2CONH2	H CH2CH2NH2	CioH60C8Hi7 12
16	H	H	(CH2)2NH2	H CH2CH2NH2	C10H6OC8H17 14
17	H	H	CH3	H CH2CH2NH2	C10H6OC8H17 15

Příklad 18 až '21

Způsobem podle příkladů 1, 2 a 3 je možno získat také sloučeniny s následujícími substituenty:.

slouče- nina	Rl	R2	r3	NRÍIrUI ,	Rl	řetězec č.
18	OH	CH3	CH2CONH2	H CH2CH2NH2	DMTD	7
19	OH	CH3	CH2CH2NH2	H CH2CH2NH2	DMTD	8
20	OH	OH	CH2CONH2	H CH2CH2NH2	DMTD	9
21	OH	OH	CH2CH2NH2	H CH2CH2NH2	DMTD	14

Příklady 22 až 25

Způsobem, obdobným způsobu podle příkladu získat také následující produkty:

je možno s louče- *1 R-3 nina νκπ Rm

Rl řetězec

Č ·

OH CH3 OH CH3 OH H OH H

CH₃ H CH2CH2NH2

Η H CH2CH2NH2

CH2CH2NH2 H (CH2)3NH2 CH2CH2NH2 H CH2CH2NH2

C6H4OC8H17

C6H4OC8H17

DMTD

DMTD

Příklad 26

2CF₃COOH· CH₃ ^Cz^H3

řetězec č. 6

Svrchu uvedený produkt je možno připravit způsobem podle části B příkladu 2 tak, že se užije dimethylamin místo ethylendiamínu, produkt má molekulovou hmotnost 1334,^3.

Příklad 27

Svrchu uvedený produkt je možno připravit způsobem podle příkladu 26 tak, že se, užije piperidin místo dimethylaminu, výsledný produkt má molekulovou hmotnost 1374.

Příklad 28 ·

1Ů00 lisovaných tablet vždy s obsahem 500 mg sloučeniny tt TTT vzorce 2 (sloučenina 1-6, v níž R = H, R - 2-aminoethyl)· s řetězcem č. 6 je možno připravit ze směsi, uvedené v následující tabulce:

složka g sloučenina z příkladu 2 500

Škrob 750, hydratovaný hydrogenfosforečnan vápenatý 5000 stearan horečnatý 2,5

Jemně práškové složky se dobře promísí a granulují s 10% pastou ze škrobu. Granulát se suší a lisuje na tablety.

Příklad 29

1000 kapslí z tvrdé želatiny s obsahem 500 mg účinné látky se připraví z následující směsi:

složka g sloučenina z příkladu 2 500 škrob 250 laktosa 750 mastek 250 stearan hořečnatý ' '10

Důkladným promísením složek se připraví homogenní směs, která se plní do kapslí z tvrdé želatiny.

Příklad 30

Farmaceutický prostředek ve formě aerosolu je možno při pravit z následující směsi:

složka	množství v nádobce
sloučenina z příkladu 2	24 mg

kapalný koncentrovaný lecithin NF 1,2 mg

trichlorfluormethan NF	4,026 g
dichlordifluormethan NF	12,15 g

Příklad 31

250 ml injekčního roztoku je možno připravit běžným způsobem z následujících složek:

složka	množství
dextrosa	12,5 g
voda	250 ml
sloučenina z příkladu 4	400 mg

Složky se smísí a sterilizují.

Příprava výchozích látek . *'

Sloučeninu A-4, v níž. R^ = DMTD je možno získat pěstováním kmene Zalerion arboricola ATCC 20 858 v živném prostředí s mannitolem jako primárním zdrojem uhlíku podle US patentového spisu 6. 5 021 341, ze 4. června 1991.

Sloučeninu A-7, v níž R^ = DMTD je možno získat pěstováním Zalerion arboricola ATCC 20 868 v živném prostředí podle US. patentového spisu č. 4 931 352 z 5. června 1990.

Sloučeninu A-10, v níž R^ znamená líneleyl je možno připravit pěstováním Aspergillus nidulans NRRL 11 440 v řivném prostředí podle US patentového spisu č. 4 288 549 z 8. září 1981.

Sloučeninu A-ll, v níž R^ znamená ll-methyltridecyi je možno připravit pěstováním Aspergillus sydowi v živném prostředí tak, jak bylo popsáno v publikaci J. Antibiotics, XL, č. 3, str. 28, 1987.

Sloučeninu A-12 je možno připravitpěstováním kmene Zaler.ion arboricola ATCC 20 958 v živném prostředí způsobem, popsaným v US patentové přihlášce č. 07/630 457, podané 19. prosince 1990 (Atty Docket č. 18268).

Sloučeniny, v nichž R znamená atom vodíku, je možno připravit způsobem, který byl popsán v části A příkladu 4.

Sloučeniny, v nichž znamená skupinu CH^CN, například sloučeniny A-2, A-5 a A-8 je možno připravit tak, že se uvede do reakce sloučenina, která má v odpovídající poloze karboxamidovou skupinu s přebytkem chloridu kyseliny kyanurové v aprotickém rozpouštědle. Při provádění této reakce je mošno .. 'použít molekulové sít-o. Po ukončení reakce se molekulové síto v případě, že bylo použito, oddělí filtrací a filtrát se odpaří, čímž se získá výsledný nitril, tak jak je podrobněji popsáno v US patentové přihlášce č. 936 434, podané 3. září

1992.

Sloučeniny, v nichž znamená skupinu CH^CH^NH^,, například sloučeniny A-3, A-6 a A-9 je možno připravit chemickou něho katalytickou redukcí příslušného nitrílu. Tato redukce dohře probíhá při použití velkého molárního přebytku hydroborátu sodného v přítomnosti chloridu kobal.tnatého, jak je podrobněji popsáno v US patentové přihlášce Č. 936 558 z

3. září 1992.

Výchozí látky, v nichž R^ znamená odlišnou skupinu než v některém z přírodních produktů, je možno získat deacylací lipofilní skupiny v přírodním produktu tak, že se- tento přírodní produkt podrobí v živném prostředí působení deacylačního enzymu na tak dlouhou odbu, až dojde k podstatné deacylací Uvedené enzymy je možno získat pěstováním mikroorganismů z če ledi Pseudomonaceae nebo Actinoplanaceae, tak jak je popsáno v publikaci Experientia 34, 1670, 1978 nebo v US patentovém spisu č. 4 293 482, deacylovaný cyklopeptíd se izoluje .a pak se deacylovaný cyklopeptíd acyluje smísením s příslušným aktivmm esterem obecného vzorce R COX, čímž se získá požadovaná sloučenina A s příslušnou acylovou skupinou. .

Dále budou uvedeny podrobnější informace o jednotlivých svrchu popsaných řetězcích.

Informace o řetězcích

Informace o řetězci Č. 1

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č.

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 2

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: '6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi ) popis řetězce: řetězec čv

Xaa Thr Xaa- Xaa Xaa Xaa 1 5.

Informace o řetězci Č. 3:

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární

------------.--5-5--ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec S. 3

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 4

i) vlastnosti řetězce:,

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec Č. 4

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 5

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární- ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 5

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 6

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

3) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 6

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 7

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

-D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 7

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 8 . .

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina ,

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 8

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 9

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ -řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 9

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 10

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 10

Xaa Ser Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. li

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselinaC) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 11 .Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 12

i) vlastnosti řetězce:

A) délka:' 6

B) typ: aminokyselina

C) typ- řetězce : NA

D) topologie: cirkulární i i) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 12

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa ’ 5

Informace ..o řetězci č. 13.. .

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: .NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 13

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 14

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 14

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 15

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly: ·

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 15 *

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 16

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

3) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 16

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 17

i) vlastnosti řetězce:

A) délka; 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 17

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci -č. 18

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 18

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5Informace o řetězci č. 19

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 19

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 20

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Oí

Informace o řetězci č. 21

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 21

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o .řetězci č. 22

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce:' řetězec S. 22

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa '1 - 5

Informace o řetězci č. 23

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 23

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 24

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) Popis řetězce: řetězec č. 24

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci 6. 25

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 25

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa .

5

Informace o řetězci č. 26

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6 3) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec S. 26

Xaa Thr Xaa' Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 27

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) fyp molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 27

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 28

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6 .B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární

.......-......- ---------- ......- · - 65 ii) typ molekuly:

A) popis: peptid ' xi) popis řetězce: řetězec Č. 28

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 29

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) Popis řetězce: řetězec č. 29

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa

5

Informace o řetězci S. 30

i) vlastností řetězce:

A) délka: 6 t B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární f^; *

... *^ř ii) typ molekuly:

' A) popis: peptid (v ' · .

v' ..

xi) popis řetězce: řetězec Č. 30

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa S 1-5 ,

A ' ·:*'·: ' ^t·⁴·

Informace o řetězci č. 31

i) vlastnosti řetězce:

A) .délka: 6

3) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 31

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 32

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 32

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 33

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 33Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 34

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA·

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) Popis řetězce: řetězec č. 34

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 36 ¹

i) vlastnosti řetězce:

A) dél kaj 6

B) typ: aminokyselina

C) .typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 36

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa

5

Informace o řetězci č. 37

i) vlastnosti řetězce:

A; délka: 6 3 ? typ: a~inokys e1ina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 37

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. '38

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popisřetězce: řetězec č. 38

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa

5

Informace o řetězci č. 39

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární i i) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 39

Xaa 'Tor Xs.5. Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 40

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

3) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) Popis řetězce: řetězec č. 40

Xaa Ser Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 41

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec Č. 41

Xaa Thr .Xaa Xaa Xaa Xaa

5

Inf	orm	ace o řetězci č. 42
i)	vl	astnosti řetězce:
	Λ > Λ - i	délka: 6
	Z '	typ: aminokyselina
	C)	typ řetězce: NA
	D)	topologie: cirkuiá
ii )	ty	ρ molekuly: ·
	A)	popis: peptid
xi)	popis řetězce: řetěze

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci Č. 43

i) ' vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 43

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 ' 5 '

Informace o řetězci č. 44

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi',· ooois řetězce: řetězec č. 44 . Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa

5 t

, Informace o řetězci č. 45 t»

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) Popis řetězce: řetězec č. 45

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 46

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6 . B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

. .A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 46

Xaa Thr Xaa Xaa' Xaa Xaa ¹ 5 •ť*

Informace o řetězci č. 47

i) vlastnosti řetězce:

A; délka: 6

3) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 47

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa ¹ 5 ’ Informace o řetězci č. 48

i) vlastnosti řetězce:

A) ' délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 48

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa .

' '5

Informace o řetězci č. ,‘49

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6 '

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární'

ií) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec c. 49Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 50

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

3) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) Popis řetězce: řetězec č. 50

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 51

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA . D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 51

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa

5

Informace o řetězci Č. 52

i) vlastnosti řetězce:

A)	délka: 6
	typ: am inckyselina	*
3 )	typ řetězce: NA	1
D)	topologie: cirkulární

ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 52

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 53

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 53

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5 '

Informace-o řetězci č. '54

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 54

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa·

5

Informace o řetězci Č. 55

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) Popis řetězce: řetězec č. 55

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 56

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č.

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa

5

Informace o řetězci č. 57

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

3) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č. 57

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 58

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) popis řetězce: řetězec č, 58

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa ¹ -5

Informace o řetězci Č, 59

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) .typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární •ii' typ molekuly:

A; popis: peptid xi) popis řetězce: řeoězec č. 59

Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5

Informace o řetězci č. 60

i) vlastnosti řetězce:

A) délka: 6

B) typ: aminokyselina

C) typ řetězce: NA

D) topologie: cirkulární ii) typ molekuly:

A) popis: peptid xi) Popis řetězce: řetězec Č. .60

Claims (12)

1. Azacyklohexapeptidové deriváty obecného vzorce (i) kde

R^ znamená atom vodíku nebo hydroxyskupinu,

Rg znamená vodík, methyl nebo hydroxyskupinu,

R₃ znamená vodík, methyl, CH^CN, CHgCHgNHg nebo CHgCONHg,

R . . znamená alkyl nebo alkenyl vždy o ,9 až .21 atomech uhlí- . ku, alkoxyfenyl o 1 až 10 atomech uhlíku v alkoxylové části nebo alkoxymethyl o 1 až .10 atomech uhlíku-v alkoxylové části, ,

R^ znamená vodík, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, alkenyl x IV V o 3 az 4 atomech uhlíku, (CHg)g_₄0H, (CHg)₂_₄NR R , co(ch₂)₁_₄nh₂,

R·'“¹¹ znamená vodík, alkyl o 1 až 4 -atomech uhlíku, alkenyl o 3 až 4 atomech uhlíku, (CH₂)₂_₄OH, (CHg)₂_₄NR^^R^ nebo znamená vodík nebo alkyl o 1 až 4 _£t znamená vodík nebo alkyl o 1 až 4 at adiční soli těchto sloučenin s kyselinami

2. Azacyklohexapeptidové deriváty obecného vzorce I podle nároku 1, v nichž R. znamená OH, FL· znamená H, FL· znamená

I ^{1 d} II ,

CH^CONH , R znamena 9,11-dimethyltridecyl, R znamena H a R“¹ znamená -CH^CH^NH^.

3. Azacyklohexapeptidový derivát obecného vzorce I podle nároku 1, v němž R. znamená OH, R_? znamená H, R_q znamená CHgCHgNHg, ^R znamená 9,11-dimethyltridecyl, R znamená H a R^nÍ znamená -CH₂CH₂NH₂.

4. Azacyklohexapeptidový derivát obecného vzorce I podle nároku 1, v němž R. znamená OH, R„ znamená H, FL·

I ^{1 ά J} II znamena CH^CH^COtL·, R znamená 9,11-dimethyltridecyl a R a

III ^d , ^ά

R znamenají H.

ť

5. Azacyklohexapeptidový derivát obecného vzorce I podle nároku 1, v němž R. znamená H, R_ znamená H, R_ znamená ⁱI ^{ά d} II skupinu CrhCONi-L· , R znamena 9,11-dimethyltridecyl a R a

III ^ά .

R znamenají H.

6. Azacyklohexapeptidový derivát obecného vzorce I podle nároku 1, v němž R^ znamená H, R₂ znamená H, R^ znamená skupinu CH-CONH^, R^ znamená 9,11-dimethyltridecyl,

II III ^d ,

R je H a R znamená C0CH₂CH₂NH₂.

7. Azacyklohexapeptidový derivát obecného vzorce I podle nároku 1, v němž R^ znamená H, R₂ znamená H, R^ znamená skupinu CH^CONH^, R¹ znamená 9,11-dimethyltridecyl, znamená H a R¹¹¹ znamená -CH^CHgNH^.

8. Azacyklohexapeptidový derivát obecného vzorce I podle nároku 1, v. němž R znamená H, R~ znamená H, R_q znamená I ^{1 J} IT skupinu CH_CH_?NH_?, R znamena 9-, 11-dimethyltridecyl a R a

J

R znamenají H.

9. Azacyklohexapeptidový derivát obecného vzorce I podle nároku 1, v němž R. znamená Η, ’R„ Žnamena. tiý“’R znamená

I ¹ II xll

CHgCř^Nř^/R je 9,11-dimethyltridecyl, R je H a R znamená ΟΗ^Η,,ΝΗ,,.

10. Farmaceutický prostředek s antimikrobiálním účinkem, vyznačující se tím, že jako svou účinnou složku obsahuje azacyklohexapeptidový derivát obecného, vzorce I podle nároku 1 spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem.

11. Farmaceutický prostředek podle nároku 10, v y z n ačující se tím, že' jako svou účinnou složku obsahuje azacyklohexapeptidový derivát obecného vzorce I podle nároku 2 ve směsi s farmaceuticky přijatelným nosičem.

č u'j í.c í se t í m, že se podává účinné množsfvfazacyklohexapeptidového derivátu obecného vzorce''! podle nároku 1

13.. Způsob .potlačení ppsufiíonie., způs.obené organismem z čeledi Pneumocystis u^ndmocných s porušeným imunitním systémem, vyznač u4^i c i se t í m , že se podává účinné množství a^adýklohexapeptidového derivátu obecného vzorce I podle aáťoku· 1. !

IťL. Azacyklohexapeptidový derivát podle nároku 1, vzorce 1-6-1, řetězec č. 6