CN109512925A - 防治过敏性疾病的组合物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种防治过敏性疾病的组合物及其应用，其特征在于含有西洋参、灵芝、发酵虫草菌粉、玫瑰花、知母等原料制备而成，具有补气养阴，益肾补肺，理气化瘀，清热润肺，祛邪扶正，调节免疫之功效。临床研究表明，本发明中药组合物对过敏性疾病包括过敏性鼻炎、过敏性哮喘、过敏性皮炎、荨麻疹，病毒性疾病包括乙型肝炎、艾滋病具有明显疗效，并可升高白细胞，防治辐射损伤，减缓化疗引起的毒副作用，还可改善男性性功能。

Description

防治过敏性疾病的组合物及其应用
本申请是原申请（发明名称：一种调节免疫的中药组合物及其制备方法；申请号：201210336446.2；申请日：2012/9/13）的分案申请。
技术领域
本发明涉及一种防治过敏性疾病的组合物及其应用。
背景技术
免疫系统（immune system）是机体保护自身的防御性结构，在疾病的发生发展和预防中起重要作用。现代免疫学认为，人体的免疫功能有防御传染、自身稳定和免疫监视三大作用，在正常情况下，机体保持平衡状态，并依靠免疫功能，抵抗各种感染，清除体内有害物质，即“自我识别”、“排除异己”，达到自身稳定的生理保护作用。但当免疫功能异常时，自身的稳态就会被打破，而导致多种自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、红斑狼疮、硬皮病、白塞氏病、艾滋病及其它疾病的发生，而且与肿瘤、高血压、糖尿病等疾病的发生均有密切联系。
中医把维护人体正常功能，抗御与清除各种有害因子的作用称为“正气”，那些有害因子则称为“邪气”。“正气”相当于人体免疫功能，“邪气”又分“外邪”与“内邪”，即各种致病因素。“正气内存，邪不可干”，说明体内免疫功能正常就可以抵挡外界致病因子，即使侵犯人体，也可抵御消灭。“邪之所凑，其气必虚”，如果免疫功能低下，则正常生理功能可受破坏而发病。中医认为疾病的发生、发展和转归取决于正邪的消长，与机体的免疫功能密切相关，从而提出了“扶正祛邪”的主要治病原则。中药多为天然药物，药性温和，不良反应少，在协调机体整体平衡、增强机体抗病能力方面具有独特的药效。现代科学研究证明人参、黄芪、灵芝、枸杞、板蓝根、金银花等200多种具有扶正或祛邪功效的中药均有良好的免疫调节作用，可调节机体免疫功能的各环节。
本发明中药组合物（含有西洋参、灵芝、发酵虫草菌粉、玫瑰花、知母、百合等原料）是在临床经验的基础上，结合现代研究成果，经临床和实验研究优化组方而成，具有补气养阴，益肾补肺，理气化瘀，清热润肺，祛邪扶正，调节免疫之功效。临床研究表明，本发明中药组合物可增强机体免疫力，对过敏性疾病包括过敏性鼻炎、过敏性哮喘、过敏性皮炎、荨麻疹，病毒性疾病包括乙型肝炎、艾滋病具有明显疗效，并可升高白细胞，防治辐射损伤，减缓化疗引起的毒副作用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种调节免疫的中药组合物及其制备方法，具有补气养阴，益肾补肺，理气化瘀，清热润肺，祛邪扶正，调节免疫之功效，适用于防治过敏性疾病包括过敏性鼻炎、过敏性哮喘、过敏性皮炎、荨麻疹，病毒性疾病包括乙型肝炎、艾滋病，并可升高白细胞，防治辐射损伤，减缓化疗引起的毒副反应，还可改善男性性功能。
本发明的技术方案：
一种调节免疫的中药组合物，其特征在于以中医“扶正祛邪”治则立法，方中君药西洋参性味苦、微甘，寒，具有补气养阴、清火生津之功效，现代研究表明西洋参具有广泛的生物学活性，主要有效成分为西洋参多糖、皂甙等化合物和微量元素，可作用于多种免疫活性细胞，促进某些细胞因子的分泌来进一步发挥免疫调节作用。它对免疫抑制剂造成的免疫低下有明显的保护作用，因而对临床肿瘤放疗患者，慢性放射病患者及各种原因造成免疫低下患者可以起到很有效的辅助治疗作用。西洋参可明显延长小鼠负重游泳时间,提高小鼠的运动耐力，并有剂量反应关系；使运动后的小鼠的肝糖原消耗量明显减少,能够增加肝糖原贮备,维持运动时血糖水平；减少乳酸含量，提高小鼠的有氧代谢能力,使酵解过程中产生的乳酸不容易在肌肉中累积,从而延缓疲劳的产生；降低运动时的血清尿素氮含量，能使机体对负荷的适应性增强,并加速疲劳的消除。
臣药灵芝、冬虫夏草助君药西洋参补气养阴，益肾补肺，其中灵芝性味甘，平，具有补气养血、止咳平喘、养心安神之功效，现代研究表明灵芝的免疫调节作用主要是灵芝多糖在发挥药效。灵芝多糖能显著增强机体免疫功能，如增强小鼠迟发型过敏反应、促进淋巴细胞增殖反应、增强细胞毒细胞功能、增强巨噬细胞吞噬功能、增强NK细胞的细胞毒活性以及促进细胞因子的生成。灵芝多糖还具有抗疲劳、提高机体运动能力的功效。对小鼠灌胃灵芝多糖后可明显延长小鼠力竭游泳时间及耐缺氧时间,提高肝糖原水平,降低大强度定量负荷运动后血乳酸及血尿氮水平。冬虫夏草性味甘，温，具有益肾补肺、止血化痰之功效，现代研究冬虫夏草在增强机体免疫功能方面作用明显，此外可以显著增加经地塞米松免疫抑制作用后的胸腺和脾脏的质量，提高脏器指数的作用，并具有保护免疫性肝损伤。虫草菌丝体及其子实体提取液可以增强机体的免疫调节功能：促进Ｔ和Ｂ淋巴细胞增殖作用，降低同种异型抗原诱导的迟发型超敏反应及混合淋巴细胞反应，抗小鼠Lewis肺癌、抗辐射损伤，激活单核-巨噬细胞系统及提高机体的免疫功能特别是体液免疫水平等。虫草水提取液可以促进免疫细胞的增殖，虫草发酵液在机体免疫调节功能方面和野生虫草子实体及人工虫草菌丝体的功能相近。
佐使药玫瑰花、知母理气化瘀，滋阴润燥，祛邪扶正，助臣药抗炎和调节免疫，其中玫瑰花性味甘、微苦，温，具有行气解郁、和血散结之功效，现代药理研究表明，玫瑰花的药理作用广泛，尤其是在心血管疾病、免疫炎症的治疗与抗肿瘤、抗氧化、利胆、解毒等方面具有作用。知母性味苦、甘、寒，具有清热泻火、滋阴润燥之功效，现代药理研究表明，知母具有抗炎、抗氧化、抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等作用，其中活性成分芒果苷能增加老化红细胞数量，老化红细胞可提高T淋巴细胞IL-2的分泌水平，提高机体的免疫水平，这与红细胞增强淋巴细胞因子分泌功能结果相似。这种作用可能与芒果苷的抗脂质过氧化、稳定红细胞膜受体活性有一定的关系。
诸药合用，共奏补气养阴，益肾补肺，理气化瘀，清热润肺，祛邪扶正之功效。以上诸药的现代药理研究表明，均有不同程度的抗炎及免疫调节作用，结合中医理论辨证用药，中西协同互参，相得益彰。
根据中药组方功效等同代换原则，上述中药组合物中补气药西洋参可以换成同类补气药人参、党参、太子参或黄芪中的任何一种或人参提取物、党参提取物、太子参提取物或黄芪提取物中的任何一种；补阳药发酵虫草菌粉可以换成冬虫夏草或虫草提取物。此外，在中药组合物中加入灵芝孢子粉和或灵芝孢子油，可提高灵芝免疫调节作用。
一种调节免疫的中药组合物，其特征在于包含下述原料和重量配比制备而成：西洋参1～100份，灵芝1～100份，发酵虫草菌粉1～60份，玫瑰花1～60份，知母1～60份。
如上所述的中药组合物，其特征在于原料的重量配比是：西洋参10～90份，灵芝10～90份，发酵虫草菌粉5～50份，玫瑰花5～50份，知母5～50份。
如上所述的中药组合物，其特征在于原料的重量配比是：西洋参30份，灵芝40份，发酵虫草菌粉20份，玫瑰花25份，知母16份。
如上所述的中药组合物，其特征在于在其原料配比中还可加入10～50份的百合或或相当于百合生药量的采用药学常规方法制备的百合提取物，以增强其抗疲劳、耐缺氧、抗肿瘤和免疫调节作用。百合性味甘，微寒，具有润肺止咳、清心安神之功效，现代药理研究表明，百合具有抗疲劳、耐缺氧、抗肿瘤和免疫调节等作用，其活性成分百合多糖具有多种生理功能：①抗氧化、抗疲劳功能。百合粗多糖具有抗氧化作用,可使D-半乳糖引起的衰老小鼠血液中SOD、过氧化氢酶和谷胱甘肽酶活力升高。②清除自由基、抗衰老功能。与常见抗氧化剂(硫脲、抗坏血酸、苯甲酸等)清除羟自由基能力相对照,百合提取液的清除效果明显较佳。③提高免疫力和抗肿瘤作用。百合多糖能增强免疫抑制小鼠的非特异性和特异性免疫功能。④降血糖作用。百合多糖对四氧嘧啶引起的糖尿病模型小白鼠有明显的降血糖作用。
如上所述的中药组合物，其特征在于西洋参可以换成人参、党参、太子参或黄芪中的任何一种或人参提取物、党参提取物、太子参提取物或黄芪提取物中的任何一种；发酵虫草菌粉可以换成冬虫夏草或虫草提取物。
如上所述的中药组合物，其特征在于在其原料配比中还可加入10～50份的灵芝孢子粉和或灵芝孢子油。
如上所述的中药组合物，其特征在于发酵虫草菌粉为生物发酵制备，发酵虫草菌粉所属的菌种包括蝙蝠蛾拟青霉、蝙蝠蛾被毛孢、中华束丝孢、粉红胶霉、孢霉属真菌、麦角菌科真菌冬虫夏草头孢或中华被毛孢。
如上所述的中药组合物，其特征在于所述原料的来源可以是中药材或者是相当于中药材生药量的采用药学常规方法制备的提取物，如西洋参提取物、灵芝提取物、玫瑰花提取物、知母提取物、百合提取物。
如上所述的中药组合物，其特征在于所述原料可以是相当于中药材生药量提取的有效部位，如西洋参皂甙和或西洋参多糖、灵芝多糖和或灵芝三萜类化合物、虫草多糖和或虫草氨基酸、玫瑰花黄酮和或玫瑰花油、知母皂苷和或芒果苷。
如上所述的中药组合物，其特征在于制备方法是采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制备而成。
如上所述的中药组合物，其特征在于制备方法可通过以下5种工艺路线获得：
（1）按上所述的中药组合物原料和重量配比分别取药材，60～80℃干燥、粉碎成40～100目细粉，装胶囊；或制水泛丸，在60～80℃以下干燥，包装，即得。
（2）按上所述的中药组合物原料和重量配比分别取药材，加6～12倍量水浸泡20～60分钟后，加热煎煮1～3次，每次1～2小时，合并煎煮液过滤，滤液浓缩至适量后放冷，高速离心除杂，再单独或加入药学上可接受的辅料，制备成品剂型
（3）按上所述的中药组合物原料和重量配比分别取药材，玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，备用；西洋参、知母加60～80%乙醇提取2次，合并乙醇液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.10～1.15的浓缩液备用；灵芝、发酵虫草菌粉与玫瑰花药渣及西洋参、知母药渣混合，加6～12倍量水煎煮2～3次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，与上述浓缩液混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油均匀喷洒于颗粒中，混匀，制备成品剂型。
（4）按上所述的中药组合物原料和重量配比分别取药材，玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣与灵芝、发酵虫草菌粉二味药加6～12倍量水煎煮2次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，与处方量相等的西洋参提取物，知母提取物混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油均匀喷洒于颗粒中，混匀，制备成品剂型。
（5）按上所述的中药组合物原料和重量配比分别取相当于中药材生药量的提取物或有效部位，采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制成的成品剂型
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以是采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制成的任何剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以为颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、滴丸剂、丸剂、散剂、锭剂、流浸膏剂、浸膏剂、注射剂、糖浆剂或口服液。
如上所述的中药组合物，其特征在于制备防治过敏性疾病的保健食品或药品中的应用，其中过敏性疾病包括过敏性鼻炎、过敏性哮喘、过敏性皮炎、荨麻疹。
如上所述的中药组合物，其特征在于制备防治病毒性疾病的保健食品或药品中的应用，其中病毒性疾病包括乙型肝炎、艾滋病。
如上所述的中药组合物，其特征在于制备具有升高白细胞作用的保健食品或药品中的应用。
如上所述的中药组合物，其特征在于制备具有防治辐射损伤的保健食品或药品中的应用。
如上所述的中药组合物，其特征在于制备减缓放化疗引起的毒副反应的保健食品或药品中的应用。
如上所述的中药组合物，其特征在于制备改善男性性功能的保健食品或药品中的应用。
如上所述的中药组合物，其特征在于制备增强人体免疫功能的保健食品或药品中的应用。
如上所述的中药组合物，其特征在于制备缓解体力疲劳的保健食品或药品中的应用。
本发明的优点在于提供一种调节免疫的中药组合物及其制备方法，具有补气养阴，益肾补肺，理气化瘀，清热润肺，祛邪扶正，调节免疫之功效，适用于防治过敏性疾病包括过敏性鼻炎、过敏性哮喘、过敏性皮炎、荨麻疹，病毒性疾病包括乙型肝炎、艾滋病，并可升高白细胞，缓解疲劳，防治辐射损伤，减缓化疗引起的毒副反应，还可改善男性性功能。
本发明调节免疫与抗过敏研究
实验一 本发明免疫调节作用研究
1. 材料与方法
1.1实验动物
昆明种小鼠，体重18～22g，雌性，清洁级，购自江西中医学院实验动物中心，许可证号：SCXK(赣）2010－001。
实验用药
本发明中药组合物（西洋参、灵芝、发酵虫草菌粉、玫瑰花、知母）取玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，备用；西洋参、知母加60～80%乙醇提取2次，合并乙醇液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.10～1.15的浓缩液备用；灵芝、发酵虫草菌粉与玫瑰花药渣及西洋参、知母药渣混合，加6～12倍量水煎煮2～3次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，与上述浓缩液混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油均匀喷洒于颗粒中，混匀，制备成品剂型。
实验方法
1.3.1 动物分组：小鼠按体重随机分为二组，分别为空白对照组（Control，C）、受试药组（本发明中药组合物组，ZY），每组10只。
剂量设计：本发明中药组合物组小鼠给药量为1.65g生药/kg体重，给药前，将药物配成相应浓度再灌胃给药，给药体积为0.1ml/10g体重。对照组给予等体积蒸馏水。每日灌胃1次，连续30天。各组小鼠均饲以普通饲料，自由进食、饮水。
检验指标：小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能；小鼠胸腺系数和脾脏指数；碳粒廓清功能；ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和NK细胞活性测定；血清溶血素的测定和抗体生成细胞检测。
统计方法：
计量数据以表示，采用SPSS10.0软件分析。
结果
2.1 对小鼠胸腺系数和脾脏指数的影响
与空白对照组（C）比较，本发明中药组合物组（ZY）对小鼠胸腺系统、脾脏指数无显著性差异（P>0.05）。结果见表1。
对小鼠脾淋巴细胞增殖能力和小鼠迟发型变态反应的影响
与空白对照组（C）比较，本发明中药组合物组（ZY）可显著增强ConA诱导的脾淋巴细胞增殖和小鼠对DNFB诱发的DTH反应(p<0.05或p<0.01)，实验结果见表2。
对小鼠血清溶血素水平的影响
与空白对照组（C）比较，本发明中药组合物组（ZY）有显著提高小鼠血清溶血素水平的作用(p<0.05)。结果见表3。
对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响：
与空白对照组（C）比较，本发明中药组合物组（ZY）有显著提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率的作用(p <0.01)。结果见表4。
对小鼠碳粒廓清功能的影响：
与空白对照组（C）比较，本发明中药组合物组（ZY）有显著提高吞噬指数的作用(p<0.05或p<0.01)。结果见表5。
对小鼠抗体生成细胞功能的影响
与空白对照组（C）比较，本发明中药组合物组（ZY）有显著提高溶血空斑数的作用(p<0.05，p<0.01)。结果见表6。
对小鼠NK细胞活性的影响
与空白对照组（C）比较，本发明中药组合物组（ZY）对小鼠NK细胞活性无显著性差异（p>0.05），结果见表7。
结论
动物实验研究表明：本发明中药组合物组（ZY）可提高小鼠ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力，增强小鼠对DNFB诱发的DTH反应，有显著提高小鼠血清溶血素水平、提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和小鼠碳粒廓清功能的作用，并可显著增加溶血空斑数。根据《保健食品检验与评价技术规范（2003）》中增强免疫功能的结果判定标准，认为本发明中药组合物组（ZY）具有增强免疫功能的作用。
实验二 本发明对抗过敏作用研究
1 材料与方法
1.1 实验动物
动物雄性ICR小鼠，体重18～22 g，雄性SD大鼠，体重180～200g，购自江西中医学院实验动物中心,许可证号：SCXK(赣）2010－001。
实验试剂
卵白蛋白(ovalbumin) 和compound 48/80，Sigma公司产品；灭活百日咳杆菌(Bordetella pertussis)、Ficoll和邻苯甲醛( o-phthala ldehyde，OPT)， Wako公司产品；色甘酸二钠( disodium cromogly cate，DSCG)，Biomol公司产品。
实验用药
同“实验一”。
动物分组与给药
小鼠按体重随机分为二组，分别为空白对照组（Control，C）、受试药组（本发明中药组合物组，ZY），每组10只。本发明中药组合物组小鼠给药量为1.65g生药/kg体重，给药前，将药物配成相应浓度。灌胃给药，给药体积为0.1ml/10g 体重。对照组给予等体积蒸馏水。每日灌胃1次，连续10天。各组小鼠均饲以普通饲料，自由进食、饮水。
小鼠异种被动皮肤过敏反应
按文献方法制备大鼠抗卵白蛋白抗血清。在小鼠左、右耳廓内注入经生理盐水5倍稀释的大鼠抗血清10μl，48h后静脉注射1% Evans蓝生理盐水溶液( 内含卵白蛋白1mg/ml )10ml/kg，30min后放血处死小鼠，取两侧耳廓，分别置于1N KOH溶液中消化过夜，以0.6NH3PO4中和，经丙酮抽提，610nm处测定吸收值，由标准曲线计算每耳Evans蓝渗出量，各鼠的数据以左、右耳廓的均值表示。末次给药后1h，实验组用卵白蛋白进行攻击。
诱导大鼠腹腔肥大细胞释放组胺
将大鼠放血处死，腹腔注射Hanks'液20ml 轻轻按摩2min，收集腹腔液，以Ficoll梯度离心法分离肥大细胞，经磷酸缓冲液洗涤4次，肥大细胞的纯度约为91%，调整细胞浓度至。取肥大细胞悬液0.9ml 在37℃预温孵10min，加入受试样品50 μl温孵5min后，试管中加入compound 48/80 50μl (终浓度为)，自发释放管中加入磷酸缓冲液50μl温孵10min后，将试管转移至冰浴冷却，终止反应。3 000r/min离心10min，以荧光法测定上清液(释放量)及沉淀中(残留量)的组胺含量。组胺释放率按下式计算：释放率(%)=(释放量-自发释放量)/(释放量+残留量)×100%。
统计学处理
实验结果以表示，组间差异以t 检验作统计学处理。
结果
2.1 对小鼠异种被动皮肤过敏反应的影响
由表1可见，本发明中药组合物组（ZY）可显著减轻小鼠耳异种被动皮肤过敏反应，结果见表1。
对Compound 48/80诱导大鼠腹腔肥大细胞释放组胺的影响
与空白对照组（C）比较，本发明中药组合物组（ZY）对Compound 48 /80诱导的大鼠腹腔肥大细胞释放组胺有显著的抑制作用。结果见表2。
综上所述，过敏的病理生理机制为速发型过敏反应，即患者血清中免疫球蛋白E(IgE)水平异常升高，以致对花粉、霉菌、尘螨及动物皮屑等抗原出现高敏感性。本发明中药组合物组（ZY）能明显减轻小鼠异种被动皮肤过敏反应；体外实验中，本发明中药组合物组（ZY）对compound 48/80诱导大鼠腹腔肥大细胞释放组胺亦呈现显著的抑制作用，表明其抗过敏活性可能与稳定肥大细胞膜、减少组胺等过敏介质的释放有关。
实验三 本发明抗辐射作用研究
1 材料
1.1实验动物
昆明种小鼠，体重18～22g，雄性，清洁级，购自江西中医学院实验动物中心，许可证号：SCXK(赣）2010－001。实验动物饲养适应环境3d后进行实验,饲养环境温度为,正常昼夜节律,无强光、噪音刺激,动物可自由地进食和饮水。
实验用药
本发明中药组合物（西洋参、灵芝、发酵虫草菌粉、玫瑰花、知母）取玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，备用；西洋参、知母加60～80%乙醇提取2次，合并乙醇液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.10～1.15的浓缩液备用；灵芝、发酵虫草菌粉与玫瑰花药渣及西洋参、知母药渣混合，加6～12倍量水煎煮2～3次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，与上述浓缩液混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油均匀喷洒于颗粒中，混匀，制备成品剂型。小鼠给药量为1.65g生药/kg体重。给药前，将药物配成相应浓度。灌胃给药，给药体积为0.1ml/10g 体重。各组小鼠均饲以普通饲料，自由进食、饮水。
实验仪器
Olympus显微镜(日本奥林巴斯公司),全自动生化分析仪(日本岛津),离心机(北京产),紫外光分光光度计(UV-2401PC,日本产)。
方法
2.1 30d存活率、存活天数测定
取小鼠30只,随机分成正常对照组、模型组、中药组合物（中药组）3组,每组10只。正常组不予任何处理,模型组给予蒸馏水，中药组合物组灌胃给予相应药物,每天1次,给药体积均为0.1ml/10g体重,各组小鼠连续给药21d。末次给药后3h,除正常组外,其余2组均进行全身一次性60Coγ射线照射,照射距离为1.0m,照射剂量为7.5Gy,照射后观察记录各组小鼠的生存状况、体重变化,计算各组小鼠的平均生存时间、30d存活率等。
外周血白细胞计数、骨髓细胞DNA含量测定、胸腺、脾脏指数测定
取60只小鼠,按照体重随机分成正常对照组、模型组、中药组合物组各2组,共10组,每组10只,其中3组用于检测骨髓细胞DNA含量。除正常组不予任何处理,模型组给予蒸馏水,其他2组灌胃给予相应药物,给药方法和容量同前,连续给药14d。除正常对照组外,其余4组均进行全身一次性60Coγ射线照射,照射距离为1.0m,总照射剂量为3Gy。小鼠于照射前和照射后3、10d,眼底采血20μl ,加入WBC稀释液混匀,倒入血球计数板中,显微镜下进行白细胞计数；同时取出脾脏和胸腺称量,计算胸腺、脾脏指数。照射后第3d,颈椎脱臼处死小鼠,取完整股骨,除净软组织,参照文献方法取出骨髓细胞,提取,用紫外分光光度计在260nm处测定紫外吸收值。
统计方法
实验数据以SPSS软件进行单因素方差分析。照射前后白细胞水平自身比较应用配对资料t检验方法进行统计分析。
结果
3.1 小鼠一般状况和30d存活率小鼠受到照射后食欲下降,体重减轻,蜷缩,活动减少,但皮肤毛发未见粪便和分泌物等污秽的表现,耳廓及尾部苍白,体表温度较正常组低；中药组合物给药组小鼠活动和进食量好于模型组。每日2次统计各组小鼠存活数。结果见表1。
表1可见，中药组合物组可以明显提高受7.5Gy射线照射小鼠30d存活率,延长受照射小鼠的生存时间,与模型组比较有统计学意义(P<0.01)。
对小鼠外周血白细胞计数、骨髓细胞DNA含量测定、胸腺、脾脏指数的影响，结果见表2、表3。
表2可见,照射前,各组小鼠的外周血白细胞数无统计学差异;照射后3d,中药组合物组给药组小鼠外周血白细胞数明显高于模型组(给予蒸馏水)小鼠,与模型组比较有统计学意义。说明中药组合物组对受到低剂量辐射动物有一定的保护作用。
表3可以看出，中药组合物组可以提高照射小鼠的胸腺指数和脾脏指数,并能提高受照射小鼠骨髓细胞DNA含量,说明中药组合物组对60Coγ射线造成脾脏和胸腺放射损伤和骨髓有修复或保护作用。
综上所述，中药组合物组可提高急性大剂量受照射小鼠的30d存活率;提高低剂量照射小鼠外周血白细胞数、胸腺指数和脾脏指数,使受照射小鼠骨髓细胞DNA含量增加,说明中药组合物组对60Coγ射线造成脾脏和胸腺放射损伤和骨髓有修复或保护作用。
实验四 本发明临床研究
本发明作为江西中医学院附属医院协定方，在临床以颗粒剂配方使用多年。通过对2009年1月至2012年1月267例患者使用后回顾性分析，结果如下：
1、病例分布：过敏性鼻炎41例、过敏性哮喘28例、过敏性皮炎27例、荨麻疹21例，乙型肝炎35例，艾滋病13例，乳腺癌化疗29例，白细胞降低23例，男性性功能减退29例、慢性疲劳综合症21例。
2、年龄分布：年龄21～68岁
3、性别分布：男143例，女124例
4、病程分布：3月～20年
5、治疗方法：口服6g，一日3次，1个月为1疗程。
6、疗效评定：分三级：（1）显效：临床症状基本消失或完全消失，化验指标基本正常或完全正常。（2）有效：临床症状减轻，化验指标减轻。（4）无效：临床症状无明改善，化验指标减轻。
具体实施方式
下面以具体实施例对本发明作详细说明：
实施例1
按照下列配比称取原料：西洋参90份，灵芝90份，发酵虫草菌粉20份，玫瑰花20份，知母20份。
制备方法：按处方量称取原料，玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，备用；西洋参、知母加60～80%乙醇提取2次，合并乙醇液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.10～1.15的浓缩液备用；灵芝、发酵虫草菌粉与玫瑰花药渣及西洋参、知母药渣混合，加6～12倍量水煎煮2～3次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，与上述浓缩液混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油均匀喷洒于颗粒中，混匀，制备成品剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以是采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制成的任何剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以为颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、滴丸剂、丸剂、散剂、锭剂、流浸膏剂、浸膏剂、注射剂、糖浆剂或口服液。
实施例2
按照下列配比称取原料：西洋参10份，灵芝10份，发酵虫草菌粉5份，玫瑰花5份，知母5份。
制备方法：同实施例1
实施例3
按照下列配比称取原料：西洋参30份，灵芝40份，发酵虫草菌粉20份，玫瑰花25份，知母16份。
制备方法：同实施例1
实施例4
按照下列配比称取原料：西洋参10份，灵芝10份，发酵虫草菌粉5份，玫瑰花5份，知母5份，百合5份。
制备方法：按处方量称取原料，玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，备用；西洋参、知母、百合加60～80%乙醇提取2次，合并乙醇液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.10～1.15的浓缩液备用；灵芝、发酵虫草菌粉与玫瑰花药渣及西洋参、知母、百合药渣混合，加6～12倍量水煎煮2～3次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，与上述浓缩液混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油均匀喷洒于颗粒中，混匀，制备成品剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以是采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制成的任何剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以为颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、滴丸剂、丸剂、散剂、锭剂、流浸膏剂、浸膏剂、注射剂、糖浆剂或口服液。
实施例5
按照下列配比称取原料：西洋参30份，灵芝40份，发酵虫草菌粉20份，玫瑰花15份，知母6份。
制备方法：按处方量称取原料，60～80℃干燥、粉碎成40～100目细粉，装胶囊；或制水泛丸，在60～80℃以下干燥，包装，即得。
实施例6
按照下列配比称取原料：西洋参30份，灵芝40份，发酵虫草菌粉20份，玫瑰花15份，知母16份。
制备方法：按处方量称取原料，玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣与灵芝、发酵虫草菌粉二味药加6～12倍量水煎煮2次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，与处方量相等的西洋参提取物、知母提取物混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油均匀喷洒于颗粒中，混匀，制备成品剂型。
实施例7
按照下列配比称取原料：西洋参30份，灵芝40份，发酵虫草菌粉20份，玫瑰花22份，知母14份。
制备方法：按处方量称取相当于中药材生药量的提取物，采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制成的成品剂型。
实施例8
按照下列配比称取原料：人参30份，灵芝40份，发酵虫草菌粉20份，玫瑰花22份，知母15份。
制备方法：按处方量称取原料，玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，备用；人参、知母加60～80%乙醇提取2次，合并乙醇液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.10～1.15的浓缩液备用；灵芝、发酵虫草菌粉与玫瑰花药渣及人参、知母药渣混合，加6～12倍量水煎煮2～3次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，与上述浓缩液混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油均匀喷洒于颗粒中，混匀，制备成品剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以是采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制成的任何剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以为颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、滴丸剂、丸剂、散剂、锭剂、流浸膏剂、浸膏剂、注射剂、糖浆剂或口服液。
实施例9
按照下列配比称取原料：西洋参30份，灵芝40份，发酵虫草菌粉20份，玫瑰花25份，知母16份。
制备方法：按处方量称取原料，加水浸泡40分钟后，加热煎煮3次，每次2小时，每次加水10倍量，合并3次煎煮液过滤，滤液浓缩至适量后放冷，高速离心除杂，加入口服液常用辅料，混合均匀，制备成口服液。
实施例10
按照下列配比称取原料：党参30份，灵芝40份，发酵虫草菌粉20份，玫瑰花15份，知母6份。
制备方法：按处方量称取原料，玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，备用；党参、知母加60～80%乙醇提取2次，合并乙醇液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.10～1.15的浓缩液备用；灵芝、发酵虫草菌粉与玫瑰花药渣及党参、知母药渣混合，加6～12倍量水煎煮2～3次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，与上述浓缩液混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油均匀喷洒于颗粒中，混匀，制备成品剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以是采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制成的任何剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以为颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、滴丸剂、丸剂、散剂、锭剂、流浸膏剂、浸膏剂、注射剂、糖浆剂或口服液。
实施例11
按照下列配比称取原料：太子参30份，灵芝40份，发酵虫草菌粉20份，玫瑰花15份，知母6份。
制备方法：按处方量取原料，玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，备用；太子参、知母加60～80%乙醇提取2次，合并乙醇液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.10～1.15的浓缩液备用；灵芝、发酵虫草菌粉与玫瑰花药渣及太子参、知母药渣混合，加6～12倍量水煎煮2～3次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，与上述浓缩液混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油均匀喷洒于颗粒中，混匀，制备成品剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以是采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制成的任何剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以为颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、滴丸剂、丸剂、散剂、锭剂、流浸膏剂、浸膏剂、注射剂、糖浆剂或口服液。
实施例12
按照下列配比称取原料：黄芪30份，灵芝40份，发酵虫草菌粉20份，玫瑰花15份，知母16份。
制备方法：按处方量称取原料，玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，备用；黄芪、知母加60～80%乙醇提取2次，合并乙醇液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.10～1.15的浓缩液备用；灵芝、发酵虫草菌粉与玫瑰花药渣及黄芪、知母药渣混合，加6～12倍量水煎煮2～3次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，与上述浓缩液混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油均匀喷洒于颗粒中，混匀，制备成品剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以是采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制成的任何剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以为颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、滴丸剂、丸剂、散剂、锭剂、流浸膏剂、浸膏剂、注射剂、糖浆剂或口服液。
实施例13
按照下列配比称取原料：人参30份，灵芝40份，发酵虫草菌粉20份，玫瑰花15份，知母6份，灵芝孢子粉10份。
制备方法：按处方量取原料，玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，备用；人参、知母加60～80%乙醇提取2次，合并乙醇液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.10～1.15的浓缩液备用；灵芝、发酵虫草菌粉与玫瑰花药渣及人参、知母药渣混合，加6～12倍量水煎煮2～3次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，加入灵芝孢子粉，与上述浓缩液混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油均匀喷洒于颗粒中，混匀，制备成品剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以是采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制成的任何剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以为颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、滴丸剂、丸剂、散剂、锭剂、流浸膏剂、浸膏剂、注射剂、糖浆剂或口服液。
实施例14
按照下列配比称取原料：人参30份，灵芝40份，发酵虫草菌粉20份，玫瑰花15份，知母10份，灵芝孢子油10～50份。
制备方法：按处方量取原料，玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，备用；人参、知母加60～80%乙醇提取2次，合并乙醇液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.10～1.15的浓缩液备用；灵芝、发酵虫草菌粉与玫瑰花药渣及人参、知母药渣混合，加6～12倍量水煎煮2～3次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，与上述浓缩液混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油和灵芝孢子油混匀，均匀喷洒于颗粒中，制备成品剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以是采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制成的任何剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以为颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、滴丸剂、丸剂、散剂、锭剂、流浸膏剂、浸膏剂、注射剂、糖浆剂或口服液。
实施例15
按照下列配比称取原料：人参30份，灵芝40份，发酵虫草菌粉20份，玫瑰花15份，知母6份，灵芝孢子粉10份，灵芝孢子油10份。
制备方法：按处方量取原料，按处方量取原料，玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，备用；人参、知母加60～80%乙醇提取2次，合并乙醇液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.10～1.15的浓缩液备用；灵芝、发酵虫草菌粉与玫瑰花药渣及人参、知母药渣混合，加6～12倍量水煎煮2～3次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，加入灵芝孢子粉，与上述浓缩液混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油和灵芝孢子油混匀，均匀喷洒于颗粒中，制备成品剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以是采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制成的任何剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以为颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、滴丸剂、丸剂、散剂、锭剂、流浸膏剂、浸膏剂、注射剂、糖浆剂或口服液。
实施例16
按照下列配比称取原料：西洋参30份，灵芝40份，冬虫夏草20份，玫瑰花25份，知母16份。
制备方法：按处方量取原料，玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，备用；西洋参、知母加60～80%乙醇提取2次，合并乙醇液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.10～1.15的浓缩液备用；灵芝、冬虫夏草与玫瑰花药渣及西洋参、知母药渣混合，加6～12倍量水煎煮2～3次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，与上述浓缩液混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油均匀喷洒于颗粒中，混匀，制备成品剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以是采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制成的任何剂型。
如上所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型可以为颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、滴丸剂、丸剂、散剂、锭剂、流浸膏剂、浸膏剂、注射剂、糖浆剂或口服液。
实施例17
按照下列配比称取原料：西洋参提取物10份，灵芝提取物14份，虫草提取物12份，玫瑰花提取物10份，知母提取物11份。
制备方法：按处方量称取原料，60～80℃干燥后过40～100目筛，将细粉装胶囊，即得。
实施例18
按照下列配比称取原料：西洋参皂甙15份，灵芝多糖18份，虫草多糖13份，玫瑰花黄酮15份，知母皂苷18份。
制备方法：按处方量称取原料，60～80℃干燥后过40～100目筛，将细粉装胶囊，即得。
实施例19
按照下列配比称取原料：西洋参皂甙15份，西洋参多糖10份，灵芝三萜类化合物28份，虫草多糖13份，虫草氨基酸10份，玫瑰花黄酮17份，知母皂苷11份，芒果苷8份。
制备方法：按处方量称取原料，60～80℃干燥后过40～100目筛，将细粉装胶囊，即得。

Claims (13)

1.一种防治过敏性疾病的中药组合物，其特征在于包含下述重量份的原料：西洋参1～100份，灵芝1～100份，发酵虫草菌粉1～60份，玫瑰花1～60份，知母1～60份。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于原料的重量配比是：西洋参10～90份，灵芝10～90份，发酵虫草菌粉5～50份，玫瑰花5～50份，知母5～50份。
3.根据权利要求2所述的中药组合物，其特征在于原料的重量配比是：西洋参30份，灵芝40份，发酵虫草菌粉20份，玫瑰花25份，知母16份。
4.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于：原料中进一步加入10～50份的百合或者是相当于百合生药量的采用药学常规方法制备的提取物。
5.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于：原料中进一步加入10～50份的灵芝孢子粉和或灵芝孢子油。
6.根据权利要求1～3任一所述的中药组合物，其特征在于：将西洋参换成人参、党参、太子参或黄芪中的任何一种或人参提取物、党参提取物、太子参提取物或黄芪提取物中的任何一种；将发酵虫草菌粉换成冬虫夏草或虫草提取物。
7.根据权利要求1～3任一所述的中药组合物，其特征在于：发酵虫草菌粉为生物发酵制备，发酵虫草菌粉所属的菌种包括蝙蝠蛾拟青霉、蝙蝠蛾被毛孢、中华束丝孢、粉红胶霉、孢霉属真菌、麦角菌科真菌冬虫夏草头孢或中华被毛孢。
8.根据权利要求1～3任一所述的中药组合物，其特征在于所述原料的来源是中药材或者是相当于中药材生药量的采用药学常规方法制备的提取物：西洋参提取物、灵芝提取物、玫瑰花提取物、知母提取物。
9.根据权利要求1～3任一所述的中药组合物，其特征在于所述原料是相当于中药材生药量提取的有效部位，如西洋参皂甙和或西洋参多糖、灵芝多糖和或灵芝三萜类化合物、虫草多糖和或虫草氨基酸、玫瑰花黄酮和或玫瑰花油、知母皂苷和或芒果苷。
10.权利要求1～5任一所述的中药组合物，其特征在于：制备方法是以下5种工艺路线之一：
（1）按所述中药组合物原料和重量配比分别取药材，60～80℃干燥、粉碎成40～100目细粉，装胶囊；或制水泛丸，在60～80℃以下干燥，包装，即得；
（2）按所述中药组合物原料和重量配比分别取药材，加6～12倍量水浸泡20～60分钟后，加热煎煮1～3次，每次1～2小时，合并煎煮液过滤，滤液浓缩至适量后放冷，高速离心除杂，再单独或加入药学上可接受的辅料，制备成品剂型；
（3）按所述中药组合物原料和重量配比分别取药材，玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，备用；西洋参、知母加60～80%乙醇提取2次，合并乙醇液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.10～1.15的浓缩液备用；灵芝、发酵虫草菌粉与玫瑰花药渣及西洋参、知母药渣混合，加6～12倍量水煎煮2～3次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15-1.20，与上述浓缩液混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油均匀喷洒于颗粒中，混匀，制备成品剂型；
（4）按所述中药组合物原料和重量配比分别取药材，玫瑰花提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣与灵芝、发酵虫草菌粉二味药加6～12倍量水煎煮2次，合并煎液与上述水溶液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度1.15～1.20，与处方量相等的西洋参提取物，知母提取物混匀，制粒，干燥，将玫瑰花挥发油均匀喷洒于颗粒中，混匀，制备成品剂型；
（5）按中药组合物原料和重量配比分别取相当于中药材生药量的提取物或有效部位，采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制成的成品剂型。
11.根据权利要求10所述的中药组合物的制备方法，其特征在于成品剂型采用药学上可接受的载体或赋形剂按药剂学常规工艺制成的颗粒剂、片剂、胶囊剂、浸膏剂、丸剂、散剂、锭剂或口服液。
12.根据权利要求1～5任一所述的中药组合物在制备防治过敏性疾病的药品中的应用。
13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于：过敏性疾病是过敏性鼻炎或过敏性哮喘或过敏性皮炎或荨麻疹。
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