CN104666823B - 一种调节免疫力、延缓衰老的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种调节免疫力、延缓衰老的药物组合物。该药物组合物以人参、生地黄、茯苓、黄芪、天冬门为原料，添加药学上允许的辅料制成的口服制剂。本发明的药物组合物经试验证明具有显著的提高机体免疫力，延缓衰老的功效，适用于免疫力低下者、中老年人；组方精炼，使用简便，易于吸收。

Description

一种调节免疫力、延缓衰老的药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及药学领域，尤其涉及一种提高免疫力，延缓衰老的药物组合物及其制备工艺。

背景技术

世界各国科学家和医学家一直在探索衰老的原因和延缓衰老的方法，认为衰老在很大程度上受遗传控制且有一定的程序，但亦受后天、环境的影响而发生随机变化或提前或加速，从而表现出个体差异。

中医学认为人体的生长、发育和衰老与“肾”密切相关。唐代孙思邈是年过百岁的著名医家，他认为老年期的病机主要是肾精虚衰，主张用补肾添精的药物以延缓衰老。他在《养生篇》中列出了地黄、黄精、松子、柏实、茯苓、枸杞根等作为养生单方。从历代延缓衰老方剂分析，以补肾益精为主方者占70%；对中老年人群进行脏腑辨证，也观察到肾虚占80.4%，说明肾精虚衰在衰老中确占重要地位。因此，近年来应用的延缓衰老方剂以补肾居多数。中医认为，“先天之本在肾”，“后天之本在脾”。《内经》曰：“五脏皆禀气于胃，胃者，五脏之本也”，金元医家李东垣根据“脾胃为血气阴阳之根蒂”，认为“脾胃既和，其人寿；脾胃不和，其人夭”。人体的健康长寿有赖于五脏六腑功能的正常，而后者又取决于脾胃之气盛衰，脾胃健运，五脏自强；脾胃衰败，五脏则伤。可见脾胃水谷精气奉养在延年益寿中的重要性。

现代医学研究表明，中医所称的“肾”具有“下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴”和“下丘脑-垂体-甲状腺轴”的功能，即与现代医学的神经内分泌及免疫关系密切。脑下垂体是调节免疫反应的主要器官，通过分泌ACTH的作用，促使肾上腺分泌皮质类固醇而起降低或抑制过高的免疫反应，同时脑下垂体通过生长激素等作用，激发免疫，增强或提高过低的免疫反应，从而达到调整免疫平衡，维持机体免疫基本功能的相对稳定的作用。动物实验及临床观察证实，补肾阳能提高肾上腺皮质系统兴奋性，而补肾阴能稳定这种兴奋性，说明通过补肾阴、补肾阳调节人体免疫功能。祖国医学的“正气”具有免疫系统的正常功能和结构。“正气”与肾、脾、肺关系密切，肾主藏精，为先天之本；脾主运化，为气血生化之源；肺主一身之气，起敷布和资助作用。

可见历代医学家十分重视通过补肾、健脾、益肺之药的治疗，而增强机体免疫功能，以达到延年益寿的目的。

综上所述，补肾、健脾、益肺是当前增强机体免疫和延缓衰老的主要治则，目前应用的单味和复方中药也大多属上述范畴。由此可见，祖国医学对防老延寿有独特的理论和丰富的临床实践经验。

发明内容

本发明的目的是提供一种增强机体免疫力和延缓衰老的保健品。

本发明的解决方案是基于传统的中医理论，从中国医药宝库中筛选出补肾填精、健脾益肺、滋阴生津的中药，借鉴传统秘方开发成能工业化大批量生产，造福于人类的保健品。

本发明选用药材人参、生地黄、茯苓、黄芪、天门冬进行组方。

本发明的配方依据如下：

人参 目前认为人参调整衰老过程和预防早衰的主要成分是人参皂苷，重要作用是刺激功能低下的生理系统，使其生理生化反应趋于正常，而阻止由于各种原因引起的恶性循环，以达到延年益寿目的。人参的抗氧化作用是人参抗衰老的重要环节之一。人参皂苷、人参茎叶皂苷和人参多糖可抑制多种因素诱发的动物肝、脑、肺等组织的脂质过氧化，消除阴离子自由基。人参总苷、人参二醇体外可消除二甲基亚砜在有氧条件下产生的超氧离子自由基。

生地黄 具有抗氧化，抗衰老的作用。生地水提取物具有明显的抗膜蛋白光氧化作用和抗膜脂质过氧化作用。能清除超氧自由基和羟自由基，减轻自由基对机体组织的破坏，达到延缓组织老化的目的。

茯苓 药理实验表明，茯苓能使玫瑰花结形成率及植物血凝素诱发淋巴细胞转化率显著上升。茯苓多糖具有抗胸腺萎缩，抗脾脏增大和抑瘤生长的功能；灌胃能增强小鼠巨噬细胞的吞噬功能，增加ANAE阳性淋巴细胞数，还可使小鼠脾脏抗体分泌细胞明显增多。

黄芪 大量研究证明黄芪具有抗衰延寿的良好效应，以其作为抗衰益寿的药物，得得高度重视和开发。

天门冬 能显著抑制溶血空斑形成，对抗体生成细胞有明显抑制功能。还有实验表明，天门冬具有升高外周白细胞、增强网状内皮系统吞噬功能、有利于抗体形成、增强体液免疫力等功能。

本发明选用人参、生地黄、茯苓、黄芩、天门冬进行组方并加工精制而成的产品，经功能学试验证明，具有增强机体免疫、延缓衰老的保健作用。

本发明提供的药材用量处方为人参1-100份，生地黄1-140份，茯苓1-60份，黄芪1-40份，天门冬1-40份；优选人参20-60份，生地黄40-80份，茯苓10-40份，黄芪5-20份，天门冬5-20份；更优选人参30份，生地黄70份，茯苓15份，黄芪10份，天门冬11份

本发明的药物组合物可以制成各种常规剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂等。

本发明提供了上述药物组合物固体口服制剂的制备方法，该方法包括以下步骤：（1）将生地黄、茯苓、黄芪、天门冬四味中药加适量水或稀醇溶液提取，提取温度25-100℃，过滤，浓缩提取液制成无菌流浸膏；（2）将人参药材灭菌，干燥，粉碎，过80目筛；（3）将步骤（1）的流浸膏和步骤（2）的药粉混合制粒，然后使用本领域常规制剂工艺制成常规的口服固体制剂，例如片剂、胶囊剂、颗粒剂等。

本发明提供了上述药物组合物固体口服制剂的制备方法，该方法包括以下步骤：（1）生地黄、茯苓、黄芪、天门冬、人参五味分别干燥粉碎，过80目筛；（2）混合。制成胶囊剂

本发明的药物组合物经功能试验证明具有显著的调节机体免疫力、延缓衰老的功能，实验结果表明本发明药物组合物能促进溶血素的形成、增强小鼠DTH及碳廓清的能力，提高血清SOD活力，降低血清MDA及大鼠肝脏组织中脂褐质的含量，延长果蝇寿命，且本发明药物组合物无毒副作用。

下面结合具体试验来说明本发明药物组合物的效果。

实验例1 本药物组合物（实施例2所制备的无菌颗粒）的免疫调节作用实验

试验动物：昆明种小鼠，体重18~21 g，随机分为4组，每组10只。

剂量分组： 250mg/kg，500mg/kg，1500mg/kg及阴性对照组，每日灌胃，连续30d后，测定以下各项指标。

迟发型变态反应（DTH）(耳肿胀法)

测定及数据处理：每鼠用剪刀将腹部毛剪去，范围约3cm×3cm，用1 %DNFB溶液50μ1均匀涂抹致敏。5日后用1 %DNFB溶液10μ1均匀涂抹于小鼠右耳(两面)进行攻击，同时用不含DNFB的溶液10μl均匀涂抹于小鼠左耳(两面)作对照。攻击后24h颈椎脱臼处死小鼠，剪下左右耳壳，用打孔器取下直径8mm耳片，称重。以左右耳重量之差表示DTH的程度，采用方差分析进行数据统计。

表1结果表明，本发明中药组合物的高剂量组DTH明显高于对照组（P<0.01）。

表1 对DNFB诱导小鼠DTH的影响

组别	剂量（mg/kg·bw）	动物数（只）	耳壳增重（mg）
				对照组	0	10	8.1±2.5
低剂量组	250	10	8.9±1.9
				中剂量组	500	10	9.2±1.9
高剂量组	1500	10	11.8±3.2**

注：“^**”与对照组比较，P<0.01。

血清溶血素测定

测定及数据处理：每鼠腹腔注射2%SRBC悬液0.2ml，4d后摘除眼球取血，分离血清。血清200倍稀释后，按检验方法测定样品管及SRBC半数溶血时的光密度值。溶血素的量以半数溶血值(HC₅₀)表示，用方差分析进行数据统计。

表2结果可见，高、中剂量组血清溶血素值明显高于对照组（P<0.05或P<0.01）。

表2 对小鼠血清溶血素形成的影响

组别	剂量（mg/kg·bw）	动物数（只）	HC50
				对照组	0	10	73±52
低剂量组	250	10	114±72
				中剂量组	500	10	143±65*
高剂量组	1500	10	163±49**

注：“^*”与对照组比较，P<0.05；“^**”与对照组比较，P<0.01。

碳廓清试验

测定及数据处理：每鼠尾静脉注入3倍稀释的印度墨汁(0.1ml/10g体重)，注入2min及10min分别从内眦静脉丛取血20μl，并将其加到2ml 0.1%Na₂C0₃溶液中，用分光光度计在600nm波长处测光密度值。同时将小鼠处死，取肝脏、脾脏、胸腺称重。用校正的吞噬指数a表示小鼠碳廓清能力，用方差分析比较各组间脏器与体重之比的差别。

表3结果显示，高、中剂量组吞噬指数高于对照组（P<0.01），表明本发明提供的药物组合物能提高小鼠碳廓清能力。

表3 对小鼠碳廓清作用的影响

组别	剂量（mg/kg·bw）	动物数（只）	耳壳增重（mg）
				对照组	0	10	5.71±0.74
低剂量组	250	10	6.26±0.71
				中剂量组	500	10	7.11±0.73**
高剂量组	1500	10	7.48±0.64**

注：“^**”与对照组比较，P<0.01。

实验例2 本药物组合物（实施例2所制备的无菌颗粒）的延缓衰老作用实验

试验动物：SD雌性大鼠，20月龄，随机分为四组，每组8只。

剂量分组：250mg/kg，500mg/kg，1500mg/kg·bw，并设对照组，经口灌胃，连续30d。

试验步骤：连续30天后，取大鼠心脏血，分别测定其SOD、MDA，GSH-Px；然后处死动物，取肝脏进行匀浆，测定肝脏组织中脂褐质。

数据处理：采用SPSS10.0 for windows软件对数据进行方差分析(LSD法)。

各项数据结果如下：

体重影响

由表4可见，在试验前、中、后期各组大鼠间体重无明显差异((P>0.05)，故本组方对大鼠体重无明显影响。

表4 对大鼠体重的影响

组别	动物数（只）	初始体重(g)	中期体重(g)	结束体重（g）
					对照组	8	387±36	415±50	424±50
低剂量	8	389±34	414±36	422±38
					中剂量	8	390±33	414±35	413±49
高剂量	8	389±34	416±32	419±35

MAD的测定

由表5可见，高、中剂量组大鼠血清MDA含量明显低于对照组(P<0.01或P<0.05)。表明本药物组合物具有降低大鼠血清MDA水平的作用。

表5 对大鼠血清MDA水平的影响

组别	剂量（mg/kg）	动物数	血清MDA(nmol/ml)
				对照组	0	8	7.30±0.70
低剂量组	250	8	6.84±0.61
				中剂量组	500	8	6.35±0.94*
高剂量组	1500	8	6.03±0.93**

注：“^*”与对照组比较，P<0.05，“^**”与对照组比较，P<0.01。

肝脏脂褐质测定

由表6中可以看出，高、中剂量组大鼠肝脏中脂褐质含量明显低于对照组(P<0.01)。说明本药物组合物具有降低大鼠肝脏中脂褐质水平的作用。

表6 对大鼠肝组织脂褐质水平的影响

组别	剂量（mg/kg）	动物数（只）	脂褐质(μg/g组织)
				对照组	0	8	1.11±0.32
低剂量组	250	8	1.05±0.30
				中剂量组	500	8	0.51±0.26**
高剂量组	1500	8	0.58±0.33**

注：“^**”与对照组比较，P<0.01

超氧化物歧化酶（SOD）活力测定

由表7可以看出，高、中、低剂型组大鼠血清SOD活力明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)。说明本药物组方具有升高大鼠血清SOD活力的作用。

表7 对大鼠血清SOD活力的影响

组别	剂量（mg/kg）	动物数（只）	血清SOD(NU/ml)
				对照组	0	8	350±91
低剂量组	250	8	436±52*
				中剂量组	500	8	519±149*
高剂量组	1500	8	548±169**

注：“^*”表示与对照组比较，P<0.05，“^**”表示与对照组比较，P<0.01。

谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性测定

由表8可得，各剂量组大鼠血清GSH-Px活力与对照组无显著性差异(P>0.05)。

表8 对大鼠血清GSH-Px活力的影响

组别	剂量（mg/kg）	动物数（只）	GSH-Px（活力单位）
				对照组	0	8	426±2
低剂量组	250	8	429±3
				中剂量组	500	8	428±4
高剂量组	1500	8	424±5

实验例3 果蝇生存试验

试验物质：实施例3所制备的无菌颗粒

试验动物：Oregon K野生型黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)

剂量分组：设1个空白对照组和4个剂量组，各剂量组培养基含本药物组合物的浓度分别为：0.03%、0.08%、0.24%和0.72%。

试验方法：收集8小时内新羽化的果蝇成虫，乙醚麻醉下区分雌雄随机分组、分别称重后进行试验。每组用果蝇400只，雌雄各半。对照组给予普通玉米粉培养基;试验组分别给予含0.03%, 0.08%, 0.24%和0.72%药物组合物的培养基。

实验条件:气温25±10℃，相对湿度45~75%。每四天更换新鲜培养基一次。每天观察记录果蝇生存数和死亡数，直到果蝇全部死亡为止。计算出半数死亡天数、平均寿命和平均最高寿命等三个指标。

试验结果见下表9。

表9 对果蝇生存试验统计表

注：“^a”由寿命最长的20只果蝇计算得出。

“^*”试验组与对照组相比寿命延长，统计学检验有显著性（P<0.05）。

“^**”试验组与对照组相比寿命延长，统计学检验有非常显著意义（P<0.01）。

由上表可见，在本实验条件下，0.24%和0.72%浓度组雌蝇与对照组比较见到延长平均寿命2. 96~3. 55天；0.24%浓度组雌蝇与对照组比较见到延长平均最高寿命3.45天；0.08%浓度组雄蝇与对照组比较见到延长平均寿2.97天，统计学检验均有显著意义（P<0.05或P<0.01）。

实验例4 果蝇生存试验

试验物质：实施例1～12所制备的无菌颗粒

试验动物：Oregon K野生型黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)

剂量分组：设1个空白对照组和实施例1，8~12所制备的无菌颗粒的试验组，培养基含本药物组合物的浓度分别为0.24%。

试验方法：收集8小时内新羽化的果蝇成虫，乙醚麻醉下区分雌雄随机分组、分别称重后进行试验。每组用果蝇400只，雌雄各半。对照组给予普通玉米粉培养基;试验组分别给予含0.24%药物组合物的培养基。

实验条件:气温25±10℃，相对湿度45~75%。每四天更换新鲜培养基一次。每天观察记录果蝇生存数和死亡数，直到果蝇全部死亡为止。计算出半数死亡天数、平均寿命和平均最高寿命等三个指标。

试验结果见下表10。

表10 对果蝇生存试验统计表

注：“^a”由寿命最长的20只果蝇计算得出。

“^*”试验组与对照组相比寿命延长，统计学检验有显著性（P<0.05）。

“^**”试验组与对照组相比寿命延长，统计学检验有非常显著意义（P<0.01）。

由上表可见，在本实验条件下，实施例10和实施例11组雌蝇与对照组比较见到延长平均寿命4.47~4.83天；实施例10组雌蝇与对照组比较见到延长平均最高寿命3.17天；实施例10组雄蝇与对照组比较见到延长平均寿3.63天，统计学检验均有显著意义（P<0.05或P<0.01）。

具体实施方案

实施例1

生地黄40份、茯苓5份、黄芪5份、天门冬5份四味中药加适量水煎煮，过滤，浓缩，得无菌流浸膏，备用。人参药材10份，经干燥，粉碎，过筛，即得无菌人参粉，备用。在洁净区内，将人参粉与流浸膏在一步制粒机内制得干燥无菌颗粒，最后待颗粒冷却至常温后出料，将制好的颗粒压片，即得片剂。

实施例2

本实施例药物的剂型以及片剂的组方同实施例1，相同之处不重述，不同之处在于：四味中药加适量20%乙醇80℃提取。

实施例3

本实施例药物的剂型以及片剂的组方同实施例2，相同之处不重述，不同之处在于：提取温度为60℃。

实施例4

本实施例药物的剂型以及片剂的组方同实施例2，相同之处不重述，不同之处在于：提取温度为25℃。

实施例5

本实施例药物的剂型以及片剂的组方同实施例2，相同之处不重述，不同之处在于：四味中药加适量40%乙醇提取。

实施例6

本实施例药物的剂型以及片剂的组方同实施例1，相同之处不重述，不同之处在于：四味中药加适量80%乙醇提取。

实施例7

本实施例药物组方同实施例1，相同之处不重述，不同之处在于：（1）生地黄、茯苓、黄芪、天门冬、人参五味分别干燥粉碎；（2）混合。制成胶囊剂

实施例8

本实施例药物的剂型以及片剂的加工方法同实施例1，相同之处不重述，不同之处在于：由以重量份为单位的下列原料药制成：人参60份、生地黄140份、茯苓30份、黄芪20份、天冬门20份。

实施例9

本实施例药物的剂型以及片剂的加工方法同实施例1，相同之处不重述，不同之处在于：由以重量份为单位的下列原料药制成：人参20份、生地黄60份、茯苓10份、黄芪5份、天冬门5份。

实施例10

本实施例药物的剂型以及片剂的加工方法同实施例1，相同之处不重述，不同之处在于：由以重量份为单位的下列原料药制成：人参30份、生地黄70份、茯苓15份、黄芪10份、天冬门11份。

实施例11

本实施例药物的剂型以及片剂的加工方法同实施例1，相同之处不重述，不同之处在于：由以重量份为单位的下列原料药制成：人参25份、生地黄100份、茯苓25份、黄芪15份、天冬门15份。

实施例12

本实施例药物的剂型以及片剂的加工方法同实施例1，相同之处不重述，不同之处在于：由以重量份为单位的下列原料药制成：人参50份、生地黄50份、茯苓10份、黄芪5份、天冬门5份。

实施例13

本实施例药物剂型的加工方法同实施例4，相同之处不重述，不同之处在于：一步制粒，冷却至常温出料后，粉碎过60目筛得半成品，备用。在洁净区，由胶囊机填充，即得胶囊剂。

实施例14

本实施例药物的剂型以及片剂的组方同实施例1，相同之处不重述，不同之处在于：四味中药加适量正丁醇提取。

Claims (9)

1.一种具有调节免疫、延缓衰老作用的药物组合物，该药物组合物由以下重量配比的原料制成：

人参30份，生地黄70份，茯苓15份，黄芪10份，天门冬11份。

2.一种制备权利要求1的药物组合物的方法，所述方法为：(1)生地黄、茯苓、黄芪、天门冬四味加有机溶液提取，提取液浓缩得浸膏；(2)人参干燥粉碎；(3)将步骤(1)的浸膏和步骤(2)的药粉混合制粒，用常规方法制成颗粒剂。

3.根据权利要求2所述药物组合物的制备方法，其特征在于，所述提取溶液为乙醇、异丙醇或正丁醇。

4.根据权利要求2所述药物组合物的制备方法，其特征在于，所述提取温度25-100℃。

5.根据权利要求4所述药物组合物的制备方法，其特征在于，所述提取温度60-80℃。

6.一种制备权利要求1的药物组合物的方法，所述方法为：(1)生地黄、茯苓、黄芪、天门冬、人参五味分别干燥粉碎；(2)混合。

7.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，将其制成常规口服制剂：片剂、胶囊剂或颗粒剂。

8.如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，将其制成胶囊剂。

9.如权利要求1所述的药物组合物在制备具有调节免疫、延缓衰老作用的药物中的应用。