CN109381505B - 一种中药提取物及其组合物和用于抗疲劳的用途 - Google Patents

Abstract

本发明属于中药技术领域，涉及一种中药提取物及其组合物和用于抗疲劳的用途。所述的中药提取物以西洋参与黄芪作为原料，由包括如下步骤的方法制备：(1)在所述的原料中加入水提取一次或多次；(2)将合并的水提取液浓缩后进行醇沉淀；(3)干燥醇沉淀得所述的中药提取物。利用本发明的中药提取物及其组合物，能够更好的抗疲劳。

Description

一种中药提取物及其组合物和用于抗疲劳的用途

技术领域

本发明属于中药技术领域，涉及一种中药提取物及其组合物和用于抗疲劳的用途。

背景技术

现代社会人们生活节奏加快，工作压力越来越大，疲劳作为一种慢性疾病，在逐渐侵蚀着现代社会人们的健康。疲劳是一种主观不适感觉，但客观上会在同等条件下，失去其原来从事正常活动或工作的能力，如运动员运动能力下降，一般人工作效率降低或在工作中容易犯错。因而如何延缓运动性疲劳的发生和促进疲劳的恢复成为军事医学及运动医学等学科的研究重点。

疲劳产生的原因很多，主要是能源物质耗竭，代谢产物积累，神经递质失衡和自由基产生加剧等。脑力和体力疲劳发生的同时也会伴随诸多生理生化指标的改变。运动性疲劳恢复需要快速修复体内发生的损伤或促进运动中积累的代谢产物清除。目前营养添加剂在耐力运动中消除疲劳的积极作用已被广泛认可。

黄芪为常用的补气中药，常用于治疗心血管疾病、肾脏及病毒性疾病等。随着中医药在运动医学领域中的应用不断增多，对黄芪的研究备受关注，有研究表明，黄芪具有显著地抗体力疲劳作用。

西洋参是五加科人参属多年草本植物，含有多种人参皂苷，有广泛的应用范围，中医中适用于肾虚头晕、肝虚贫血、阴虚、中气不足、体衰无力、脾胃虚弱等症。现代研究表明，西洋参有较好的抗体力疲劳作用。

发明内容

本发明的首要目的是提供一种中药提取物，以能够具有明显更好的抗疲劳效果。

为实现此目的，在基础的实施方案中，本发明提供一种中药提取物，所述的中药提取物以西洋参与黄芪作为原料，由包括如下步骤的方法制备：

(1)在所述的原料中加入水提取一次或多次；

(2)将合并的水提取液浓缩后进行醇沉淀；

(3)干燥醇沉淀得所述的中药提取物。

在一种优选的实施方案中，本发明提供一种中药提取物，其中所述的原料中西洋参与黄芪的质量配比为(10-30):(15-90)。

在一种优选的实施方案中，本发明提供一种中药提取物，其中所述的原料中西洋参与黄芪的质量配比为(15-25):(45-75)。

在一种优选的实施方案中，本发明提供一种中药提取物，其中步骤(1)中每次提取所述的原料与所述的水的质量体积比为1:60-80，提取温度为90-100℃，提取时间为1-2小时，提取次数为1-3次。

在一种优选的实施方案中，本发明提供一种中药提取物，其中步骤(2)中浓缩后使水提取液的密度为1.10-1.15g/ml。

在一种更加优选的实施方案中，本发明提供一种中药提取物，其中步骤(2)中浓缩后按所述的原料与体积百分比浓度80％-95％乙醇1:30-50的质量体积比向所述的水提取液中加入乙醇溶液进行所述的醇沉淀。

在一种更加优选的实施方案中，本发明提供一种中药提取物，其中步骤(2)中醇沉淀温度为4-25℃，醇沉淀时间为24-72小时。

本发明的第二个目的是提供一种前述中药提取物的药物组合物，以能够具有明显更好的抗疲劳效果。

为实现此目的，在基础的实施方案中，本发明提供一种前述中药提取物的药物组合物，其含有治疗有效量的所述的中药提取物，以及适宜量的可药用辅料。

在一种优选的实施方案中，本发明提供一种前述中药提取物的药物组合物，其中所述的药物组合物的剂型为胶囊剂。

本发明的第三个目的是提供一种前述中药提取物或其药物组合物用于制备抗疲劳药物的用途，以能够具有明显更好的抗疲劳效果。

为实现此目的，在基础的实施方案中，本发明提供一种前述中药提取物或其药物组合物用于制备抗疲劳药物的用途。

本发明的有益效果在于，利用本发明的中药提取物及其药物组合物，能够具有明显更好的抗疲劳效果。

本发明的中药提取物及其药物组合物抗疲劳效果显著、组成简便、服用方便、安全性高、不良反应较少，易被患者接受。

本发明通过小鼠运动前后血乳酸值的变化以及乳酸曲线下面积、小鼠肝糖原含量、小鼠运动后血清中尿素氮和肌酸激酶的含量、负重游泳试验证明，本发明的中药提取物能够显著降低机体乳酸值，显著提高乳酸清除率，显著增加肝糖原的含量，显著降低运动后机体血清尿素氮与肌酸激酶水平，表明本发明的中药提取物具有显著的抗疲劳作用。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明的具体实施方式作出进一步的说明。

实施例1：抗疲劳中药提取物的制备(一)

采用如下方法制备抗疲劳的中药提取物。

取西洋参20g，黄芪60g，按照每100g药材加水7L，在95℃的条件下，提取2次，每次1.5小时。将水提液浓缩至相对密度为1.10-1.15，温度降至30-50℃时，按照每100g药材加入4L 95％(v/v)的乙醇，4℃醇沉48小时，取沉淀，干燥即得抗疲劳的中药组合物。

实施例2：抗疲劳中药提取物的制备(二)

采用如下方法制备抗疲劳的中药提取物。

取西洋参10g，黄芪90g，按照每100g药材加水8L，在100℃的条件下，提取3次，每次1小时。将水提液浓缩至相对密度为1.10-1.15，温度降至30-50℃时，按照每100g药材加入5L 95％(v/v)的乙醇，4℃醇沉72小时，取沉淀，干燥即得抗疲劳的中药组合物。

实施例3：抗疲劳中药提取物的制备(三)

采用如下方法制备抗疲劳的中药提取物。

取西洋参30g，黄芪15g，按照每100g药材加水6L，在90℃的条件下，提取1次共2小时。将水提液浓缩至相对密度为1.10-1.15，温度降至30-50℃时，按照每100g药材加入3L95％(v/v)的乙醇，25℃醇沉24小时，取沉淀，干燥即得抗疲劳的中药组合物。

实施例4：中药提取物的动物乳酸清除率试验

(1)实验仪器

温度计，计时器，有机玻璃缸(直径50cm，高50cm)，50mL刻度离心管(Corning公司)，动物灌胃器(北京吉安得尔科技有限公司，12号6cm)，Lactate scout便携式乳酸盐分析仪(德国EKF公司)。

(2)实验动物

雄性ICR小鼠(中国食品药品检定研究院，生产许可证号：SCXK(京)2014-0013)18～22g。

(3)实验药品

试验药物：前述实施例1-3制备的中药提取物。

阳性对照药：央科藏域牌红天胶囊(西藏央科生物科技有限公司，规格：0.3g/粒，批号：160301)。

(4)实验方法

小鼠适应性喂养1周后，随机分成5组，每组10只，分别为空白对照组、阳性对照组(给药剂量为600mg/kg)、实施例1-3组(给药剂量分别为600mg/kg、400mg/kg、800mg/kg)。阳性对照组和实施例1-3组的各小鼠每天一次连续给药30天；空白对照组的各小鼠每天正常饮食不给药。末次给药1h后，将各小鼠置于高50cm，直径50cm，水深30cm的有机玻璃缸中游泳10min，水温30±1℃。各小鼠在游泳前，游泳后即刻、休息20min后，各用尾静脉针刺采血，采血量不低于0.5μL，测定血乳酸值。通过各个时间点的血乳酸值计算血乳酸曲线下面积(血乳酸曲线下面积＝1/2*(游泳前血乳酸值+游泳后0min的血乳酸值)*10+1/2*(游泳后0min的血乳酸值+游泳后休息20min的血乳酸值)*20)。

(5)实验结果

每只小鼠在游泳前、游泳后即刻、休息20min后取血测定血液乳酸，通过这三个值计算出血乳酸曲线下面积，结果表示为平均值±标准偏差，见表1。实验结果表明：与空白对照组相比，各给药组血乳酸曲线下面积均有显著降低(P<0.05)，说明实施例1-3的中药提取物在正常状态下以及运动状态下具有显著的乳酸清除能力，且实施例1的中药提取物的效果明显优于实施例2和3的中药提取物。

表1ICR小鼠抗疲劳试验乳酸曲线下面积结果

注：给药组与空白组动物乳酸曲线下面积比较，*P<0.05，**P<0.01。实施例5：中药提取物的动物运动后血清中尿素氮(BUN)和肌酸激酶(CK)含量试验

(1)实验仪器

温度计，计时器，有机玻璃缸(直径50cm，高50cm)，50mL刻度离心管(Corning公司)，动物灌胃器(北京吉安得尔科技有限公司，12号6cm)，Konelab PRIME 30全自动生化分析仪(美国Thermo Fisher公司)。

(2)实验动物

雄性ICR小鼠(中国食品药品检定研究院，生产许可证号：SCXK(京)2014-0013)18～22g。

(3)实验药品

试验药物：前述实施例1-3制备的中药提取物。

阳性对照药：央科藏域牌红天胶囊(西藏央科生物科技有限公司，规格：0.3g/粒，批号：160301)。

(4)实验方法

小鼠适应性喂养1周后，随机分成5组，每组10只，分别为空白对照组、阳性对照组(给药剂量为600mg/kg)、实施例1-3组(给药剂量分别为600mg/kg、400mg/kg、800mg/kg)。阳性对照组和实施例1-3组的各小鼠每天一次连续给药30天；空白对照组的各小鼠每天正常饮食不给药。末次给药1h后，将各小鼠置于高50cm，直径50cm，水深30cm的有机玻璃缸中游泳，水温30±1℃。各小鼠游泳90min，休息60min后，摘眼球取血，通过血液生化仪测定血清尿素氮(BUN)和肌酸激酶(CK)。

(5)实验结果

每只小鼠在游泳90min，休息60min后取血，通过血液生化仪测定BUN和CK，结果表示为平均值±标准偏差，见表2。实验结果表明：各给药组的血清BUN和CK均显著低于空白对照组

(P<0.05)；剧烈运动后机体血清尿素氮的含量会升高，肌酸激酶活性增强，抗疲劳药物会降低这两项指标。由此说明实施例1-3的中药提取物均有较好的抗体力疲劳作用，且实施例1的中药提取物的效果明显优于实施例2和3的中药提取物。

表2ICR小鼠抗疲劳试验BUN和CK结果

注：给药组与空白组动物血液BUN和CK比较，*P<0.05，**P<0.01。实施例6：中药提取物的动物肝糖原含量试验

(1)实验仪器与试剂

动物灌胃器(北京吉安得尔科技有限公司，12号6cm)；KonelabPRIME 30全自动生化分析仪(美国Thermo Fisher公司)；infiniteM200Pro多功能酶标仪(瑞士Tecan公司)；肝糖原测定试剂盒购买于南京建成生物技术研究所，货号A043。

(2)实验动物

雄性ICR小鼠(中国食品药品检定研究院，生产许可证号：SCXK(京)2014-0013)18～22g。

(3)实验药品

试验药物：前述实施例1-3制备的中药提取物。

阳性对照药：央科藏域牌红天胶囊(西藏央科生物科技有限公司，规格：0.3g/粒，批号：160301)。

(4)实验方法

小鼠适应性喂养1周后，随机分成5组，每组10只，分别为空白对照组、阳性对照组(给药剂量为600mg/kg)、实施例1-3组(给药剂量分别为600mg/kg、400mg/kg、800mg/kg)。阳性对照组和实施例1-3组的各小鼠每天一次连续给药30天；空白对照组的各小鼠每天正常饮食不给药。末次给药1h后，将各组各小鼠安乐死。取各小鼠肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，每只肝脏重约100mg左右。计算：准确称取肝脏的重量，计算测试过程中各试剂的用量；水解：按照肝脏样本(mg)：碱液体积(微升)＝1:3将肝脏样本与碱液(肝糖原测定试剂盒中含有)一起加入试管中，沸水煮沸20min，流水冷却；将糖原水解液进一步制备成糖原检测液。

(5)实验结果

每只小鼠在给药1h后安乐死取肝脏，测定肝糖原含量，结果表示为平均值±标准偏差，见表3。实验结果表明：与空白对照组相比，各给药组均能显著增加肝糖原含量(P<0.05)。肝糖原是运动时提供能量的主要来源，上述实验结果说明实施例1-3的中药提取物均可以显著增加能量供应，且实施例1的中药提取物的增加效果明显优于实施例2和3的中药提取物。

表3ICR小鼠抗疲劳试验肝糖原含量结果

注：给药组与空白组动物肝糖原含量比较，*P<0.05，**P<0.01。实施例7：中药提取物的动物负重游泳试验

(1)实验仪器

温度计，计时器，铅线，有机玻璃缸(直径50cm，高50cm)，50mL刻度离心管(Corning公司)，动物灌胃器(北京吉安得尔科技有限公司，12号6cm)。

(2)实验动物

雄性ICR小鼠(中国食品药品检定研究院，生产许可证号：SCXK(京)2014-0013)18～22g。

(3)实验药品

试验药物：前述实施例1-3制备的中药提取物。

阳性对照药：央科藏域牌红天胶囊(西藏央科生物科技有限公司，规格：0.3g/粒，批号：160301)。

(4)实验方法

小鼠适应性喂养1周后，随机分成5组，每组10只，分别为空白对照组、阳性对照组(给药剂量为600mg/kg)、实施例1-3组(给药剂量分别为600mg/kg、400mg/kg、800mg/kg)。阳性对照组和实施例1-3组的各小鼠每天一次连续给药30天；空白对照组的各小鼠每天正常饮食不给药。末次给药1h后，将各组各小鼠置于高50cm，直径50cm，水深30cm的有机玻璃缸中游泳，水温25±1℃，小鼠尾根部负载5％体重的铅丝。以小鼠沉入水底8s内不再浮出水面视为力竭标准。记录每只小鼠从游泳开始到力竭的时间即为小鼠游泳时间。

(5)实验结果

每只小鼠负重5％的铅丝游泳试验中，记录每只小鼠的力竭时间，结果表示为平均值±标准偏差，见表4。实验结果表明：各给药组的力竭时间均显著高于空白对照组(P<0.01)。负重游泳试验的力竭时间是判断抗体力疲劳作用的精指标，上述实验结果说明实施例1-3的中药提取物均有显著地抗体力疲劳作用，且实施例1的中药提取物的效果明显优于实施例2和3的中药提取物。

表4ICR小鼠抗疲劳试验力竭时间结果

注：给药组与空白组动物力竭时间比较，*P<0.05，**P<0.01。

上述实施例4-7的结果表明：ICR小鼠连续灌胃实施例1-3的中药提取物30天后，能够显著降低机体乳酸值，显著提高乳酸清除率，显著增加肝糖原的含量，显著降低运动后机体血清BUN与CK水平，显著增加力竭时间，综上试验结果说明实施例1-3的中药提取物，尤其是实施例1的中药提取物有显著的抗体力疲劳作用。

实施例8：中药提取物胶囊剂的制备

各取由实施例1-3制得的中药提取物15g，各加入适量10％淀粉浆，分别混合均匀，用适量乙醇润湿，制软材，过30目筛制粒，于70-80℃干燥，过60目筛，整粒，装入胶囊，外包装，分别制得胶囊剂。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若对本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其同等技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。上述实施例或实施方式只是对本发明的举例说明，本发明也可以以其它的特定方式或其它的特定形式实施，而不偏离本发明的要旨或本质特征。因此，描述的实施方式从任何方面来看均应视为说明性而非限定性的。本发明的范围应由附加的权利要求说明，任何与权利要求的意图和范围等效的变化也应包含在本发明的范围内。

Claims (4)

1.一种中药提取物，其特征在于，所述的中药提取物的提取方法为：

取西洋参20g，黄芪60g，按照每100g药材加水7L，在95℃的条件下，提取2次，每次1.5小时，将水提液浓缩至相对密度为1.10-1.15，温度降至30-50℃时，按照每100g药材加入4L体积百分比浓度95％的乙醇，4℃醇沉48小时，取沉淀，干燥即得抗疲劳的中药组合物。

2.根据权利要求1所述的中药提取物的药物组合物，其特征在于：所述的药物组合物含有治疗有效量的所述的中药提取物，以及适宜量的可药用辅料。

3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于：所述的药物组合物的剂型为胶囊剂。

4.根据权利要求1所述的中药提取物或根据权利要求2-3中任意一项所述的中药提取物的药物组合物用于制备抗疲劳药物的用途。