CN102274258A - 一种增强人体免疫功能的中药组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明的目的在于提供一种具有增强人体免疫功能的中药组合物,由西洋参5~150重量份、灵芝5~160重量份、发酵虫草菌粉1~90重量份/和冬虫夏草1~120重量份,所述原料的来源是中药材或相当于上述中药材生药量的中药提取物组成,上述的组合物还可加入玫瑰花5~90重量。本发明的药物组合物可以采用中药制剂常规方法制备成任何常规剂型,加入药学上可接受的任意一种辅料,包括但不限于片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液、糖浆剂、丸剂。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药组合物,尤其涉及增强人体免疫功能的中药组合物,该组合物的组份可以是直接入药的中药材或经提取得到的中药提取物。
背景技术
目前中国专利文献已公开了许多一种增强人体免疫功能的中药组合物,其中部分产品选用了西洋参、灵芝及其提取物、冬虫夏草及其提取物或发酵虫草菌粉等为原料,如申请号为03111771.6的中国专利申请文件公开了一种以冬虫夏草提取物、灵芝提取物、
西洋参皂甙为原料的中成药;申请号为02146103.1的中国专利申请文件公开了一种玫瑰花提取物用于抗氧化,提高机体免疫力,作为延年益寿的保健品;申请号为200910033212.9的中国专利申请文件公开了一种由西洋参、虫草王、三七组成的具有提高机体免疫力、增强生命力、抗衰老功能的保健品;申请号为200810106904.7的中国专利申请文件公开了一种由西洋参、灵芝、发酵虫草菌粉三种原料和西洋参、灵芝、发酵虫草菌粉和玫瑰花此四种原料组方组成的的具有增强免疫力的保健品,上述发明,服用量大、疗效不突出等缺陷。
发明内容
本发明的目的在于提供一种疗效显著的增强人体免疫功能的中药组合物,或可以直接入药的中药材或经提取得到的中药提取物;本发明的另一目的是提供了含有该中药的组合物在制备保健食品及药品领域中的应用。
本发明选择药物西洋参和/或人参、灵芝、冬虫夏草进行组合,将这些药物组合使各药物功效产生协同作用,从而能够更加有效增强人体免疫功能;从西洋参或人参、冬虫夏草、灵芝三味药的归经可以看出,心肝脾肺肾都有,达到五脏并调;西洋参,味辛、甘、微苦、性温,最明显的功效就是行气解郁,和血,止痛;人参,甘、微苦,微温;灵芝,滋补强壮,扶正固本;冬虫夏草,甘、平,归肺、肾经,益肾补肺,同西洋参或人参一起助灵芝扶正固本。
为了获得更佳疗效,本发明的药物在上述药物的基础上可以加入玫瑰花,达到协同增效的作用;因为玫瑰花色能和血,香能行气,有疏肝解郁和活血作用,起到协调、推动和平衡的作用,为佐使药,四药合用,五脏并调、温凉互补、气血双补、补而不燥,滋而不腻,平补微调、功效平和,增强人体免疫功能功效更强,疗效更佳,为了达到更好的疗效,还可以添加发酵虫草菌粉进行组合,增强人体免疫功能功效最强,疗效最佳。
本发明所述药物的各种组合和各组分的用量在下述重量份范围具有突出的增强人体免疫功能的功效:
本发明组合物含有下述原料或者由下列原料的水和/或醇提物作活性成份和药学上可接受的附加剂组成:西洋参和/或人参5~150份、冬虫夏草1~120份和/或发酵虫草菌粉1~90份、灵芝5~160份;
优选西洋参和/或人参10~90份 、灵芝20~90份、冬虫夏草3~90份和/或发酵虫草菌粉3~60份;更优选西洋参和/或人参30份、灵芝40份、冬虫夏草6.7份/和发酵虫草菌粉20份。
本发明的药物还可以:
含有下述原料或者由下列原料的水和/或醇提物作活性成份和药学上可接受的附加剂组成:西洋参和/或人参5~150份、冬虫夏草1~120份和/或发酵虫草菌粉1~90份、灵芝5~160份、玫瑰花5~90份;
优选西洋参和/或人参10~90份 、灵芝20~90份、冬虫夏草3~90份和/或发酵虫草菌粉3~60份、玫瑰花10~60份;更优选西洋参和/或人参30份、灵芝40份、冬虫夏草6.7份/和发酵虫草菌粉20份、玫瑰花30份。
本发明组合物中还可以添加其他不减弱本发明功效的下述重量份的原料或含有下述原料或者由下列原料的水和/或醇提物作活性成份和药学上可接受的附加剂组成:如太子参3~300份、人参叶1~120份、党参3~160份、黄芪3~200份、菟丝子5~150份中的一种或其任意组合。
本发明还涉及含有上述组合物在作为制备防治人体免疫功能低下的药品中的应用。
本发明的灵芝,为担子菌类多孔菌科灵芝属植物赤芝Ganoderma lucidum(Leyss.ex Fr.)或紫芝Ganoderma sinense Zhao,Xu et Zhang的干燥子实体,性味甘、平,归心、肺、肝、肾经,具有滋补强壮、宁心安神的功能。
本发明中所述的人参为五加科植物人参Panax ginseng C. A. Mey.的干燥根和根茎,可以是各种种类的参,如园参、山参、生晒参、生晒山参、白糖参、红参;还可以选用人参叶替代西洋参或人参,所述的人参叶为五加科植物人参Panax ginseng C. A. Mey.的干燥叶。
本发明中所述的西洋参又名美国参、花旗参、洋参、广东参,系五加科植物西技洋参Panax quinquefolium L.的干燥根,性味甘、微苦,凉,归心、肺、肾经,具有补气养阴,清热生津的功能。
本发明中所述的发酵虫草菌粉可以是从以下天然冬虫夏草中分离出来的菌丝经发酵培养的产物,如蝙蝠蛾拟青霉Paecilongces hepialli Chen et Dai,sp.nov;中华被毛孢Hirsutsua sinensis Liu,Guo,Yu et Zeng,sp.nov;冬虫夏草头孢Cephalosporium sinensis Chen sp.nov;蝙蝠蛾被孢酶Mortiscrslla hepialid C.T.& B.liu;中国拟青霉Paecilomyces sinensis Chen,Xiao et Shi,sp.nov;中国弯颈霉Tolypocladium sinensis C.lan Li;中国头孢霉Cephalosporium sinens Chen sp.nov;蝙蝠蛾柱霉Scytalidium hepialii C.L.Li;中国金孢霉Chrysosporium sinens Z.Q.liang;中国轮枝孢Verticillium sinens Wamg sp.nov;顶孢头孢霉Cephalosporium acremonium Corda,Icones Fungorum;中华束丝孢Synnematium sinensis Yin & Shen;虫花棒束孢Isaria farinose(Holmsk.)Fr.Systema Mycologicum;金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae(Metsch)Sorokin;蝙蝠蛾被毛孢Hirsutella hepialid Chen et Shen;虫草簇孢Sporothrix insectorum de Hong & H.C.Evans;粉红胶霉Gliocladium roseum(link)Thom;孢霉属真菌Mortierella SP等。
本发明中所述的玫瑰花是蔷薇科植物玫瑰(Rosa rugosa Thumb)的干燥花蕾,味辛、甘、微苦、性温。
党参为桔梗科植物党参Codonopsis pilosula(Franch.)Nannf.、素花党参Codonopsis pilosula Nannf.var.modesta(Nannf.)L.T.Shen或川党参Codonopsis tangshen 01iv.的干燥根。
菟丝子为旋花科植物南方菟丝子Cuscuta australis.或菟丝子Cuscuta chinensis Lam.的干燥成熟种子;本发明中所述的黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch)Bge.var.mongholicus(Bge)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus (Fisch)Bge.的干燥根 。
本发明所述中药组合物的制备工艺,包括以下步骤:
称取下列中药材作原料:
1) 人参和/或西洋参5~150份、灵芝5~160份、冬虫夏草1~120 份/和发酵虫草菌粉1~90份、或玫瑰花5~90;
2) 用醇或水对上述药材回流提取,得到提取液做活性成份,加入附加剂,制成各种剂型。
本发明所述中药组合物的制备工艺,也可以包括以下步骤:
1)将西洋参、灵芝、冬虫夏草/和发酵虫草菌粉、玫瑰花加甲醇或乙醇进行提取,提取液回收甲醇或乙醇,得到提取物Ⅰ;
2)将上述药渣挥干醇后,加水进行提取,得到提取物Ⅱ;
3)合并提取物Ⅰ和提取物Ⅱ,过滤,滤液浓缩至适量,加入药学上常用辅料,采用药剂学上常规工艺制成所需制剂。
本发明的药物组合物可以采用中药制剂常规方法制备成任何常规剂型,加入药
学上可接受的任意一种辅料,包括但不限于片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液、糖浆剂、丸剂等;本发明药物的活性组份也可以加入制备各种剂型所需的各种常规辅料,如崩解剂、润滑、粘合剂等以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用口服剂型。
本发明组合物具有较强的增强人体免疫功能的作用。
本发明西洋参和/或人参、灵芝、冬虫夏草组成的药物组合物比西洋参、灵芝、发酵虫草菌组成的组合物增强人体免疫功能疗效更好。
本发明西洋参和/或人参、灵芝、冬虫夏草、玫瑰花组成的药物组合物比西洋参、灵芝、发酵虫草菌、玫瑰花组成的组合物增强人体免疫功能的疗效更好。
本发明西洋参和/或人参、灵芝、冬虫夏草、发酵虫草菌粉组成的药物组合物比西洋参、灵芝、发酵虫草菌组成的组合物增强人体免疫功能的疗效更好。
本发明西洋参和/或人参、灵芝、冬虫夏草、发酵虫草菌粉、玫瑰花组成的药物组合物比西洋参、灵芝、发酵虫草菌、玫瑰花组成的组合物增强人体免疫功能的疗效更显著增加。
以下通过动物实验及结果来进一步来说明本发明药物西洋参、灵芝、冬虫夏草、发酵虫草菌粉、玫瑰花的疗效明显优于已有的增强人体免疫功能的组合物西洋参、灵芝、发酵虫草菌粉、玫瑰花的疗效。
同样地加入人参、太子参、党参、黄芪、菟丝子等任一种或其任意组合均能达到有同样的药理作用,区别在于使用量不同。
1. 材料与方法
1.1 样品来源及处理:受试药为本发明中药组合物Ⅰ按下列方法制成的的口服液(西洋参300g、灵芝400g,发酵虫草菌粉 200g、玫瑰花300g、冬虫夏草67 g)由江中药业股份有限公司提供,取西洋参、灵芝切片,发酵虫草菌粉置于布袋中,以上五味加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料调配成20000ml,灌装灭菌即得成品。人群推荐日摄入量为200ml/60kg BW(约0.21g生药/kg BW)。
对照药为中药组合物Ⅱ口服液(西洋参300g、灵芝400g,发酵虫草菌粉200g、玫瑰花300g)由江中药业股份有限公司提供,制法同受试药,加入口服液常用辅料调配成20000ml,灌装灭菌即得成品。人群推荐日摄入量为200ml/60kg BW(即0.2g生药/kg BW)。
考虑到动物试验药物的配制,将上述口服液浓缩10倍,受试药口服液为1267g生药/2000ml,即0.6335 g生药/ml。对照药亦同法处理,为1200g生药/2000ml,即0.6g生药/ml。
1.2实验动物:清洁级健康雌性昆明种小鼠,体重18-22g,江西中医学院实验动物中心提供,许可证号:SCXK(赣)2006-0001。动物饲养于江西中医学院动物室,环境许可证:SYXK(赣)2004-0001,饲养环境温度21~23℃,相对湿度50~60%。
1.3 实验方法
1.3.1 动物分组:
共分四个实验大组, 每实验大组包括空白对照组、中药组合物Ⅱ口服液对照组、受试药中药组合物Ⅰ口服液低、中、高剂量组,各剂量组实验动物数为10只。
1.3.2 剂量设计:受试药中药组合物Ⅰ,人群推荐日摄入量为200ml/60kg BW,换算得到每人每日推荐摄入量为12.67g生药/60kg BW即0.21g生药/kg BW)。按人群推荐日摄入量0.21g生药/kg BW扩大10、20、30倍设置低、中、高三个剂量组,由此推算出小鼠每日摄入量为:低剂量组,2.1g生药/kg体重;中剂量组,4.2g生药/kg体重;高剂量组,6.3g生药/kg体重,将已浓缩的样品(0.6335 g生药/ml)以蒸馏水配制成相应浓度。高剂量:取99.44ml浓缩液加蒸馏水至200ml;中剂量:取66.29ml 浓缩液加蒸馏水至200ml;低剂量:取33.315ml浓缩液加蒸馏水至200ml;小鼠灌胃量按0.2ml/10g体重计算。中药组合物Ⅱ口服液给予中剂量4.2g生药/kg体重,将样品取70.0ml加蒸馏水至200ml,灌胃量按0.2ml/10g体重计算。空白对照组给予等体积蒸馏水灌胃。每日灌胃1次,连续30天。各组小鼠均饲以普通饲料,自由进食、饮水。
1.3.3 检验指标:免疫实验一组进行迟发型变态反应和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验;免疫实验二组进行淋巴器官/体重比值测定和碳廓清实验;免疫实验三组进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和NK细胞活性测定;免疫实验四组进行血清溶血素的测定和抗体生成细胞检测。
2 结果
2.1 动物体重增长情况:与空白对照组比较,中药组合物Ⅰ各剂量组及中药组合物Ⅱ小鼠体重无显著性差异(P>0.05),两组比较,中药组合物Ⅰ各剂量组小鼠体重无显著性差异(P>0.05),结果见表1。
2.2 对小鼠胸腺系数和脾脏指数的影响:与空白对照组比较,中药组合物Ⅰ各剂量组及中药组合物Ⅱ小鼠胸腺系统、脾脏指数无显著性差异(P>0.05),与原方组比较,中药组合物Ⅰ各剂量组胸腺系统、脾脏指数小鼠体重无显著性差异(P>0.05),结果见表2。
2.3 对小鼠脾淋巴细胞增殖能力和小鼠迟发型变态反应的影响:与空白对照组比较, 中药组合物Ⅰ中、高剂量组及中药组合物Ⅱ中剂量组均有显著性增强ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力和小鼠对DNFB诱发的DTH反应(P<0.05,P<0.01) 。与中药组合物Ⅱ对照相比,中药组合物Ⅰ中、高剂量组均有显著性增强ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力和小鼠对DNFB诱发的DTH反应(P<0.05) 。实验结果见表3。
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与中药组合物Ⅱ相比,▲ P<0.05,▲▲ P<0.05。
2.4 对小鼠血清溶血素水平的影响:与空白对照组比较, 中药组合物Ⅰ中、高剂量组及中药组合物Ⅱ中剂量组均有显著提高小鼠血清溶血素水平的作用(P<0.05) 。与中药组合物Ⅱ对照相比,中药组合物Ⅰ中、高剂量组均有显著性显著提高小鼠血清溶血素水平的作用(P<0.05) 。实验结果见表4。
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与中药组合物Ⅱ相比,▲ P<0.05,▲▲ P<0.05。
2.5 对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响:与空白对照组比较, 中药组合物Ⅰ中、高剂量组及中药组合物Ⅱ中剂量组均有显著提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率的作用(P<0.01) 。与中药组合物Ⅱ对照相比,中药组合物Ⅰ中、高剂量组有显均有显著性显著提高腹腔巨噬细胞吞噬百分率的作用(P<0.05) ,中药组合物Ⅰ中剂量组有提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率的趋势(P=0.087)。实验结果见表5。
表5 中药组合物Ⅰ对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响()
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与中药组合物Ⅱ相比,▲ P<0.05,▲▲ P<0.05。
2.6 对小鼠碳粒廓清功能的影响:与空白对照组比较, 中药组合物Ⅰ中、高剂量组及原方中剂量组均有显著提高吞噬指数的作用(P<0.05,P<0.01) 。与中药组合物Ⅱ对照相比,中药组合物Ⅰ中、高剂量组有显著性提高吞噬指数的作用(P<0.05,P<0.01)。实验结果见表6。
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与中药组合物Ⅱ相比,▲ P<0.05,▲▲ P<0.05。
2.7 对小鼠抗体生成细胞功能的影响:与空白对照组比较, 中药组合物Ⅰ中、高剂量组及中药组合物Ⅱ中剂量组均有显著提高溶血空斑数的作用(P<0.05,P<0.01) 。与中药组合物Ⅱ对照相比,中药组合物Ⅰ中、高剂量组有显著性提高溶血空斑数的作用(P<0.05)。实验结果见表7。
表7 中药组合物Ⅰ对小鼠抗体生成细胞功能的影响()
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与中药组合物Ⅱ相比,▲ P<0.05,▲▲ P<0.05。
2.8 对小鼠NK细胞活性的影响:与空白对照组比较,中药组合物Ⅰ各剂量组及中药组合物Ⅱ小鼠NK细胞活性无显著性差异(P>0.05),与中药组合物Ⅱ组比较,中药组合物Ⅰ各剂量组小鼠NK细胞活性无显著性差异(P>0.05),结果见表8。
表8 中药组合物Ⅰ对小鼠NK细胞活性的影响()
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与中药组合物Ⅱ相比,▲ P<0.05,▲▲ P<0.05。
3. 结论:
根据中药组合物Ⅰ人群推荐日摄入量12.0g生/60kg体重扩大10、20和30倍设置低、中、高三个剂量组,即2.0g生药、4.0g生药、6.0g生药/kg体重,另设空白对照组、模型对照组和中药组合物Ⅱ(4.0g生药/kg体重)。采用清洁级健康雌性昆明种小鼠连续灌胃给予受试物,30天后进行检测相关指标。实验结果以P<0.05,P<0.01判断为差异具有显著性和极显著性。经动物实验研究表明:中药组合物Ⅰ中、高剂量组均可提高小鼠ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力和小鼠对DNFB诱发的DTH反应,有显著提高小鼠血清溶血素水平的作用,有显著提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和小鼠碳粒廓清功能的作用,中药组合物Ⅰ中、高剂量组均有显著提高溶血空斑数的作用。且中药组合物Ⅰ中、高剂量组对经上指标的影响均优于中药组合物Ⅱ对照组,认为中药组合物Ⅰ具有增强免疫功能,且增强免疫效果优于中药组合物Ⅱ组。
意外地,发现本发明药物组合物西洋参和/或人参、冬虫夏草和/或发酵虫草菌粉、灵芝/和玫瑰花还对辐射危害有保护功能,各药物组合只是使用量的不同,下面将用西洋参、灵芝、冬虫夏草/和玫瑰花组合物的药理试验及结果来说明其在辐射危害有保护功能:
1. 材料与方法
1.1样品来源及处理:受试药为中药组合物口服液复合粉(西洋参、灵芝、冬虫夏草)由江中药业股份有限公司提供,样品为棕色固体粉末状,1g复合粉干粉相当于总生药材11.41g,临用前用蒸馏水配制成所需浓度。
1.2实验动物及环境:清洁级健康昆明种小鼠,雄性,体重18-22g,江西中医学院实验动物中心提供,许可证号:SCXK(赣)2006-0001。动物饲养于江西中医学院动物室,环境许可证:SYXK(赣)2004-0001,饲养环境温度21~23℃,相对湿度50~60%。
1.3 实验方法
1.3.1 动物分组:小鼠根据体重随机分组,每组12只。设立空白对照组、模型对照组、中药组合物口服液低、中、高剂量组。
1.3.2 剂量设计:受试药中药组合物口服液每人每日推荐摄入量为:200mL/60kg体重,120g总生药材配制成1000mL中药组合物口服液,1g复合粉干粉相当于总生药材11.41g,换算得到中药组合物口服液复合粉每人每日推荐摄入量为:24g生药/60kg体重。由此推算出小鼠每日摄入量为:低剂量组,2.0g生药/kg体重;中剂量组,4.0g生药/kg体重;高剂量组,8.0g生药/kg体重,分别相当于人每日摄入量的5、10和20倍。将样品以蒸馏水配制成相应浓度(0.0175g干粉/mL、0.0350g干粉/mL、0.070g干粉/mL)的灌胃液进行实验。
1.3.3 中药组合物对辐射引起白细胞减少的影响:取小鼠60只,按体重随机分成5组,空白对照组、模型对照组,中药组合物口服液低、中、高剂量组,每组12只。实验前各组小鼠眼眶取血20μL,血液分析仪计算每只小鼠白细胞数目。空白组和模型组灌胃蒸馏水,中药组合物口服液各组动物灌胃给予相应试液0.1mL/10g体重,每日1次,连续30天。除空白对照组外,所有动物于第16天进行60Co照射,辐照剂量为5Gy。各组小鼠于辐照后第3天、第14天眼眶取血20μL,血液分析仪计算每只小鼠白细胞数目。
1.3.4中药组合物对辐射引起骨髓有核细胞数减少和骨髓细胞DNA含量降低的影响:取小鼠60只,按体重随机分成5组,空白对照组、模型对照组,中药组合物口服液低、中、高剂量组,每组12只。空白组和模型组灌胃蒸馏水,中药组合物口服液各组动物灌胃给予相应试液0.1mL/10g体重,每日1次,连续30天。除空白对照组外,所有动物均于第27天进行60Co照射,辐照剂量为5Gy。各组小鼠于辐照后第3天脱颈椎处死动物,剥离出股骨,用1mL注射器(6.5号针头)吸取一定体积的Hank’s液,冲出股骨中的全部骨髓细胞,然后让细胞悬液通过4号针头的注射器,让细胞在悬液中充分分散,镜下计数每mL骨髓细胞悬液中的有核细胞数。另取骨髓细胞液用紫外分光光度计于260nm处测定,计算DNA含量。
1.3.5 中药组合物对辐射引起血清和肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性下降的影响:取小鼠60只,按体重随机分成5组,空白对照组、模型对照组,中药组合物口服液低、中、高剂量组,每组12只。空白组和模型组灌胃蒸馏水,中药组合物口服液各组动物灌胃给予相应试液0.1mL/10g体重,每日1次,连续30天。除空白对照组外,所有动物均于第23天进行60Co照射,辐照剂量为7Gy。各组小鼠于辐照后第7天取血分离血清,尔后脱颈椎处死动物,取肝脏,SOD试剂盒检测各组小鼠红细胞及肝组织SOD活性。
1.3.6 中药组合物对辐射小鼠免疫功能的影响:取小鼠60只,按体重随机分成5组,空白对照组、模型对照组,中药组合物口服液低、中、高剂量组,每组12只。空白组和模型组灌胃蒸馏水,中药组合物口服液各组动物灌胃给予相应试液0.1mL/10g体重,每日1次,连续30天。除空白对照组外,所有动物均于第15天进行60Co照射,辐照剂量为2Gy。各组小鼠于辐照后第15天进行血清溶血素的测定,血清溶血素的测定采用血凝法,计算抗体体积数。
2 结果
2.1 中药组合物对辐射引起白细胞减少的影响
试验结果见表1。与空白对照组比较,模型对照组在辐照后第3、14天WBC值明显下降,提示造模成功。中药组合物口服液中、高剂量组小鼠在辐照后第3天WBC值较辐照前减少,但与模型对照组比较,其WBC值明显升高,提示中药组合物口服液预防给药有抑制辐射引起的WBC减少的作用。与模型对照组相比,中药组合物口服液中、高剂量组小鼠在辐照后第14天对小鼠WBC值明显升高且有统计学意义,低剂量组小鼠WBC值有升高的趋势,但无统计学意义,提示中药组合物口服液给药有对抗辐射引起的WBC减少的作用。
与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与模型对照组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01。
2.2 中药组合物对辐射引起骨髓有核细胞数减少和骨髓细胞DNA含量降低的影响
试验结果见表2。与空白对照组相比,模型对照组小鼠骨髓有核细胞数明显减少,骨髓细胞DNA含量明显降低;与模型对照组比较,中药组合物口服液中、高剂量组小鼠骨髓有核细胞数明显增加,骨髓细胞DNA含量明显升高,提示中药组合物口服液有较好的对抗辐照所致的骨髓损伤作用。
与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与模型对照组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01。
2.3中药组合物对辐射引起超氧化物歧化酶(SOD)活性下降的影响
试验结果见表3。与空白对照组相比,模型对照组小鼠血清和肝组织SOD活性明显降低;与模型对照组比较,中药组合物口服液中、高剂量组小鼠血清和肝组织SOD活性明显升高,提示中药组合物口服液能较好的对抗辐照所致的机体氧化还原反应的受损。
与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与模型对照组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01。
2.4 中药组合物口服液对辐射小鼠血中溶血素水平的影响
试验结果见表4。与空白对照组相比,模型对照组小鼠血清溶血素水平明显降低;与模型对照组比较,中药组合物口服液中、高剂量组小鼠血清溶血素水平明显升高,提示中药组合物口服液能较好的对抗辐照所致的机体免疫系统的损伤。
表4 中药组合物对辐射引起血清和肝组织SOD活性下降的影响()
与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与模型对照组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01。
3. 结论:
经动物实验研究表明:中药组合物口服液中、高剂量能明显升高辐照后小鼠WBC值;中药组合物口服液中、高剂量组能升高辐照后小鼠骨髓有核细胞数和骨髓细胞DNA含量;中药组合物口服液中、高剂量组能升高小鼠血清和肝组织SOD活性,中药组合物口服液中、高剂量能明显升高辐照后小鼠血清溶血素水平。根据《保健食品检验与评价技术规范(2003)》中辐射危害的辅助保护功能的结果判定标准,认为中药组合物口服液对辐射危害有辅助保护功能。
本发明药物组合物西洋参、冬虫夏草、灵芝,加入玫瑰花后,还对辐射危害有保护功能有协同增效的作用,下面将用西洋参、灵芝、冬虫夏草、玫瑰花组合物的药理试验及结果来说明其在辐射危害保护功能的协同增效作用:
1. 材料与方法
1.1 样品来源及处理:受试药为中药组合物2口服液复合粉(西洋参、灵芝、冬虫夏草、玫瑰花)由江中药业股份有限公司提供,样品为棕色固体粉末状,1g复合粉干粉相当于总生药材12.56g,临用前用蒸馏水配制成所需浓度。中药组合物1复合粉(西洋参、灵芝、冬虫夏草)由江中药业股份有限公司提供,样品为棕色固体粉末状,1g复合粉干粉相当于总生药材11.41g,临用前用蒸馏水配制成所需浓度。
1.2 实验动物及环境:清洁级健康昆明种小鼠,雄性,体重18-22g,江西中医学院实验动物中心提供,许可证号:SCXK(赣)2006-0001。动物饲养于江西中医学院动物室,环境许可证:SYXK(赣)2004-0001,饲养环境温度21~23℃,相对湿度50~60%。
1.3 实验方法
1.3.1 动物分组:小鼠根据体重随机分组,每组12只。设立空白对照组、模型对照组,中药组合物2口服液低、中、高剂量组及中药组合物1对照组。
1.3.2 剂量设计:受试药中药组合物2口服液每人每日推荐摄入量为:200mL/60kg体重,120g总生药材配制成1000mL中药组合物2口服液,1g复合粉干粉相当于总生药材12.56g,换算得到中药组合物2口服液复合粉每人每日推荐摄入量为:24g生药/60kg体重。由此推算出小鼠每日摄入量为:低剂量组,2.0g生药/kg体重;中剂量组,4.0g生药/kg体重;高剂量组,8.0g生药/kg体重,分别相当于人每日摄入量的5、10和20倍。将样品以蒸馏水配制成相应浓度(0.0159g干粉/mL、0.0318g干粉/mL、0.0636g干粉/mL)的灌胃液进行实验,小鼠灌胃量按0.1mL/10g体重计算。中药组合物1每人每日推荐摄入量为:200mL/60kg体重,120g总生药材配制成1000mL中药组合物2口服液,1g中药组合物1复合粉干粉相当于总生药材11.41g,中药组合物1组给予中剂量4.0g生药/kg体重(相当于人每日摄入量的10倍),将样品以蒸馏水配制成0.0350g干粉/mL灌胃液进行实验,小鼠灌胃量按0.1mL/10g体重计算。
1.3.3 中药组合物2口服液对辐射引起白细胞减少的影响:小鼠72只,按体重随机分成6组,空白对照组、模型对照组,中药组合物2口服液低、中、高剂量组,及中药组合物1复合粉组,每组12只。实验前各组小鼠眼眶取血20μL,血液分析仪计算每只小鼠白细胞数目。空白组和模型组灌胃蒸馏水,中药组合物2口服液高、中、低剂量各组动物及中药组合物1复合粉组动物灌胃给予相应试液0.1mL/10g体重,每日1次,连续30天。除空白对照组外,所有动物于第16天进行60Co照射,辐照剂量为5Gy。各组小鼠于辐照后第3天、第14天眼眶取血20μL,血液分析仪计算每只小鼠白细胞数目。
1.3.4中药组合物2口服液对辐射引起骨髓有核细胞数减少和骨髓细胞DNA含量降低的影响:小鼠72只,按体重随机分成6组,即空白对照组、模型对照组,中药组合物2口服液低、中、高剂量组,及中药组合物1复合粉组,每组12只。空白组和模型组灌胃蒸馏水,中药组合物2口服液高、中、低剂量各组动物及中药组合物1复合粉组动物灌胃给予相应试液0.1mL/10g体重,每日1次,连续30天。除空白对照组外,所有动物均于第27天进行60Co照射,辐照剂量为5Gy。各组小鼠于辐照后第3天脱颈椎处死动物,剥离出股骨,用1mL注射器(6.5号针头)吸取一定体积的Hank’s液,冲出股骨中的全部骨髓细胞,然后让细胞悬液通过4号针头的注射器,让细胞在悬液中充分分散,镜下计数每mL骨髓细胞悬液中的有核细胞数。另取骨髓细胞液用紫外分光光度计于260nm处测定,计算DNA含量。
1.3.5 中药组合物2口服液对辐射引起血清和肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性下降的影响:小鼠72只,按体重随机分成6组,空白对照组、模型对照组,中药组合物2口服液低、中、高剂量组,及中药组合物1复合粉组,每组12只。空白组和模型组灌胃蒸馏水,中药组合物2口服液高、中、低剂量各组动物及中药组合物1复合粉组动物灌胃给予相应试液0.1mL/10g体重,每日1次,连续30天。除空白对照组外,所有动物均于第23天进行60Co照射,辐照剂量为7Gy。各组小鼠于辐照后第7天取血分离血清,尔后脱颈椎处死动物,取肝脏,SOD试剂盒检测各组小鼠红细胞及肝组织SOD活性。
1.3.6 中药组合物2口服液对辐射小鼠免疫功能的影响:小鼠72只,按体重随机分成6组,空白对照组、模型对照组,中药组合物2口服液低、中、高剂量组,及中药组合物1复合粉组,每组12只。空白组和模型组灌胃蒸馏水,中药组合物2口服液高、中、低剂量各组动物及中药组合物1复合粉组动物灌胃给予相应试液0.1mL/10g体重,每日1次,连续30天。除空白对照组外,所有动物均于第15天进行60Co照射,辐照剂量为2Gy。各组小鼠于辐照后第15天进行血清溶血素的测定,血清溶血素的测定采用血凝法,计算抗体体积数。
2 结果
2.1 中药组合物2口服液对辐射引起白细胞减少的影响
试验结果见表1。与空白对照组比较,模型对照组在辐照后第3、14天WBC值明显下降,提示造模成功。中药组合物2口服液中、高剂量组、中药组合物1组小鼠在辐照后第3天WBC值较辐照前减少,但与模型对照组比较,其WBC值明显升高,提示中药组合物2口服液、中药组合物1组预防给药有抑制辐射引起的WBC减少的作用。与模型对照组相比,中药组合物2口服液中、高剂量组、中药组合物1组小鼠在辐照后第14天对小鼠WBC值明显升高且有统计学意义,低剂量组小鼠WBC值有升高的趋势,但无统计学意义,提示中药组合物2口服液给药有对抗辐射引起的WBC减少的作用。与中药组合物1组比较,中药组合物2口服液给药中、高剂量组小鼠WBC在辐照后第3、14天均有明显增加,提示中药组合物2口服液对辐射引起的WBC减少的对抗作用较中药组合物1作用强。
与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与模型对照组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01;与中药组合物1组比较,◆P<0.05,◆◆P<0.01。
2.2中药组合物2口服液对辐射引起骨髓有核细胞数减少和骨髓细胞DNA含量降低的影响
试验结果见表2。与空白对照组相比,模型对照组小鼠骨髓有核细胞数明显减少,骨髓细胞DNA含量明显降低;与模型对照组比较,中药组合物2口服液中、高剂量组、中药组合物1组小鼠骨髓有核细胞数明显增加,骨髓细胞DNA含量明显升高,提示中药组合物2口服液有较好的对抗辐照所致的骨髓损伤作用。与中药组合物1组比较,中药组合物2口服液中、高剂量组骨髓有核细胞数明显增加,骨髓细胞DNA含量明显升高,提示中药组合物2口服液对抗辐照所致的骨髓损伤作用优于中药组合物1。
表2 中药组合物2口服液对辐射引起骨髓有核细胞数减少和骨髓细胞DNA含量降低的影响()
与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与模型对照组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01;与中药组合物1组比较,◆P<0.05,◆◆P<0.01。
2.3中药组合物2口服液对辐射引起超氧化物歧化酶(SOD)活性下降的影响
试验结果见表3。与空白对照组相比,模型对照组小鼠血清和肝组织SOD活性明显降低;与模型对照组比较,中药组合物2口服液中、高剂量组、中药组合物1组小鼠血清和肝组织SOD活性明显升高,提示中药组合物2口服液及中药组合物1均能较好的对抗辐照所致的机体氧化还原反应的受损。与中药组合物1组比较,中药组合物2口服液中、高剂量组血清、肝组织SOD活性明显升高,提示中药组合物2口服液对抗辐照所致的骨髓损伤作用优于中药组合物1。
与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与模型对照组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01;与中药组合物1组比较,◆P<0.05,◆◆P<0.01。
2.4 中药组合物2口服液对辐射小鼠血中溶血素水平的影响
试验结果见表4。与空白对照组相比,模型对照组小鼠血清溶血素水平明显降低;与模型对照组比较,中药组合物2口服液中、高剂量组、中药组合物1组小鼠血清溶血素水平明显升高,提示中药组合物2口服液、中药组合物1能较好的对抗辐照所致的机体免疫系统的损伤。与中药组合物1对照组比较,中药组合物2口服液中、高剂量对血清溶血性水平的增加作用优于中药组合物1组。
与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与模型对照组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01;与中药组合物1组比较,◆P<0.05,◆◆P<0.01。
3. 结论:
经动物实验研究表明:中药组合物2口服液中、高剂量、中药组合物1能明显升高辐照后小鼠WBC值;中药组合物2口服液中、高剂量及中药组合物1能升高辐照后小鼠骨髓有核细胞数和骨髓细胞DNA含量;中药组合物2口服液中、高剂量组、中药组合物1能升高小鼠血清和肝组织SOD活性,中药组合物2口服液中、高剂量及中药组合物2能明显升高辐照后小鼠血清溶血素水平。与中药组合物1对照组相比,中药组合物2口服液给药中、高剂量组小鼠WBC在辐照后第3、14天均有明显增加;中药组合物2口服液中、高剂量组骨髓有核细胞数明显增加,骨髓细胞DNA含量明显升高;灵草口服液中、高剂量组血清、肝组织SOD活性明显升高;中药组合物2口服液中、高剂量对血清溶血性水平的增加作用优于中药组合物1组。根据《保健食品检验与评价技术规范(2003)》中辐射危害的辅助保护功能的结果判定标准,认为中药组合物2口服液对辐射危害有辅助保护功能,且其对辐射危害的辅助保护功能优于中药组合物1。
具体实施方式
实施例1
1. 材料与方法
1.1 样品来源:受试物为中药组合物Ⅲ口服液复合粉(西洋参、灵芝、冬虫夏草)由江中药业股份有限公司提供,1g复合粉干粉相当于总生药材11.41g,每人每日推荐摄入量为:24g生药/60kg体重。对照物为中药组合物Ⅳ复合粉(西洋参、灵芝、发酵虫草菌粉)由江中药业股份有限公司提供,1g复合粉干粉相当于总生药材10.97g,每人每日推荐摄入量为:24g生药/60kg体重。
1.2 实验动物:清洁级健康雌性昆明种小鼠,体重18-22g,江西中医学院实验动物中心提供,许可证号:SCXK(赣)2006-0001。动物饲养于江西中医学院动物室,环境许可证:SYXK(赣)2004-0001,饲养环境温度21~23℃,相对湿度50~60%。
1.3 实验方法
1.3.1 动物分组:共分四个实验大组, 每实验大组包括空白对照组、中药组合物Ⅳ口服液对照组、中药组合物Ⅲ口服液低、中、高剂量组,各剂量组实验动物数为10只。
1.3.2 剂量设计:受试药中药组合物Ⅲ每人每日推荐摄入量为:200mL/60kg体重,120g总生药材配制成1000mL中药组合物Ⅲ口服液,每人每日推荐摄入量为:24g生药/60kg体重,由此推算出小鼠每日摄入量为:低剂量组,2.0g生药/kg体重;中剂量组,4.0g生药/kg体重;高剂量组,12g生药/kg体重,分别相当于人每日摄入量的5、10和30倍。将样品以蒸馏水配制成相应浓度(0.0175g干粉/mL、0.0350g干粉/mL、0.1050g干粉/mL)的灌胃液进行实验,小鼠灌胃量按0.1mL/10g体重计算。中药组合物Ⅳ每人每日推荐摄入量为:24g生药/60kg体重,换算为小鼠的剂量为4.0g生药/kg体重(相当于人每日摄入量的10倍),将样品以蒸馏水配制成0.0365g干粉/mL灌胃液进行实验,灌胃量按0.1mL/10g体重计算。空白对照组给予等体积蒸馏水灌胃。每日灌胃1次,连续30天。各组小鼠均饲以普通饲料,自由进食、饮水。
1.3.3 检验指标:免疫实验一组进行迟发型变态反应和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验;免疫实验二组进行淋巴器官/体重比值测定和碳廓清实验;免疫实验三组进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和NK细胞活性测定;免疫实验四组进行血清溶血素的测定和抗体生成细胞检测。
1.3.4 统计方法:实验数据以表示,采用单因素方差分析,比较受试物各剂量组检测指标与空白对照组之间的差异;并比较受试物各剂量组检测指标与中药组合物Ⅳ之间的差异,P<0.05判断为差异具有显著性。
2 结果
2.1 动物体重增长情况:实验结果见表1。与空白对照组比较,中药组合物Ⅲ口服液各剂量组及中药组合物Ⅳ组小鼠体重无显著性差异,与中药组合物Ⅳ比较,中药组合物Ⅲ口服液各剂量组小鼠体重无显著性差异。
2.2 对小鼠胸腺系数和脾脏指数的影响:实验结果见表2。与空白对照组比较,中药组合物Ⅲ口服液各剂量组及中药组合物Ⅳ口服液组小鼠胸腺系统、脾脏指数无显著性差异,与中药组合物Ⅳ口服液比较,中药组合物Ⅲ口服液各剂量组胸腺系统、脾脏指数小鼠体重无显著性差异。
表2 中药组合物Ⅲ口服液对小鼠胸腺系数和脾脏指数的影响()
组别 | 剂量 (g生药/kg) | 动物数(只) | 胸腺系数(mg/g) | 脾脏指数(mg/g) |
空白对照组 | 0.0 | 10 | 2. 66±0.40 | 3.62±0.40 |
中药组合物Ⅳ组 | 4.0 | 10 | 2.72±0.50 | 3.70±0.42 |
受试药低剂量组 | 2.0 | 10 | 2.57±0.38 | 3.60±0.40 |
受试药中剂量组 | 4.0 | 10 | 2.69±0.36 | 3.59±0.34 |
受试药高剂量组 | 12.0 | 10 | 2.73±0.44 | 3.70±0.48 |
2.3 对小鼠脾淋巴细胞增殖能力和小鼠迟发型变态反应的影响:实验结果见表3。与空白对照组比较, 中药组合物Ⅲ口服液中、高剂量组及中药组合物Ⅳ口服液中剂量组均有显著性增强ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力和小鼠对DNFB诱发的DTH反应。与中药组合物Ⅳ口服液对照相比,中药组合物Ⅲ口服液中、高剂量组均有显著性增强ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力和小鼠对DNFB诱发的DTH反应。
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与中药组合物Ⅳ口服液组相比,▲ P<0.05,▲▲ P<0.01。
2.4 对小鼠血清溶血素水平的影响:实验结果见表4。与空白对照组比较, 中药组合物Ⅲ口服液中、高剂量组及原方中剂量组均有显著提高小鼠血清溶血素水平的作用。与中药组合物Ⅳ口服液对照相比,中药组合物Ⅲ口服液中、高剂量组均有显著性显著提高小鼠血清溶血素水平的作用。
组别 | 剂量 (g生药/kg) | 动物数(只) | 血清溶血素 (抗体积数) |
空白对照组 | 0.0 | 10 | 54.7±7.66 |
中药组合物Ⅳ组 | 4.0 | 10 | 62.1±8.24* |
受试药低剂量组 | 2.0 | 10 | 58.5±7.96 |
受试药中剂量组 | 4.0 | 10 | 72.7±9.33**▲ |
受试药高剂量组 | 12.0 | 10 | 73.6±8.96**▲ |
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与中药组合物Ⅳ口服液组相比,▲ P<0.05,▲▲ P<0.01。
2.5 对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响:实验结果见表5。与空白对照组比较, 中药组合物Ⅲ口服液中、高剂量组及中药组合物Ⅳ口服液中剂量组均有显著提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率的作用。与中药组合物Ⅳ口服液对照相比,中药组合物Ⅲ口服液中、高剂量组有显均有显著性显著提高腹腔巨噬细胞吞噬百分率的作用。
组别 | 剂量 (g生药/kg) | 动物数(只) | 吞噬百分率(%) |
空白对照组 | 0.0 | 10 | 30.58±2.07 |
中药组合物Ⅳ组 | 4.0 | 10 | 32.90±1.66* |
受试药低剂量组 | 2.0 | 10 | 31.87±1.52 |
受试药中剂量组 | 4.0 | 10 | 35.60±2.03**▲ |
受试药高剂量组 | 12.0 | 10 | 36.61±2.67**▲ |
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与中药组合物Ⅳ口服液组相比,▲ P<0.05,
▲▲ P<0.01。
2.6 对小鼠碳粒廓清功能的影响:实验结果见表6。与空白对照组比较, 中药组合物Ⅲ口服液中、高剂量组及原方中剂量组均有显著提高吞噬指数的作用。与中药组合物Ⅳ口服液对照相比,中药组合物Ⅲ口服液中、高剂量组有显著性提高吞噬指数的作用。
组别 | 剂量 (g生药/kg) | 动物数(只) | 吞噬指数 |
空白对照组 | 0.0 | 10 | 5.22±0.26 |
中药组合物Ⅳ组 | 4.0 | 10 | 5.48±0.27* |
受试药低剂量组 | 2.0 | 10 | 5.29±0.26 |
受试药中剂量组 | 4.0 | 10 | 5.67±0.21**▲ |
受试药高剂量组 | 12.0 | 10 | 5.75±0.23**▲▲ |
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与中药组合物Ⅳ口服液组相比,▲ P<0.05,▲▲ P<0.01。
2.7 对小鼠抗体生成细胞功能的影响:实验结果见表7。与空白对照组比较, 中药组合物Ⅲ口服液中、高剂量组及原方中剂量组均有显著提高溶血空斑数的作用。与中药组合物Ⅳ口服液对照相比,中药组合物Ⅲ口服液中、高剂量组有显著性提高溶血空斑数的作用。
组别 | 剂量 (g生药/kg) | 动物数(只) | 溶血空斑数 (/106脾细胞) |
空白对照组 | 0.0 | 10 | 244.6±22.8 |
中药组合物Ⅳ组 | 4.0 | 10 | 260.7±21.0* |
受试药低剂量组 | 2.0 | 10 | 255.6±19.5 |
受试药中剂量组 | 4.0 | 10 | 280.9±19.6**▲ |
受试药高剂量组 | 12.0 | 10 | 286.7±16.9**▲ |
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与中药组合物Ⅳ口服液组相比,▲ P<0.05,▲▲ P<0.01。
2.9 对小鼠NK细胞活性的影响:实验结果见表8。与空白对照组比较,中药组合物Ⅲ口服液各剂量组及中药组合物Ⅳ口服液组小鼠NK细胞活性无显著性差异,与中药组合物Ⅳ口服液比较,中药组合物Ⅲ口服液各剂量组小鼠NK细胞活性无显著性差异。
组别 | 剂量 (g生药/kg) | 动物数(只) | 细胞活性( % ) |
空白对照组 | 0.0 | 10 | 9.88±2.48 |
中药组合物Ⅳ组 | 4.0 | 10 | 9.59±2.32 |
受试药低剂量组 | 2.0 | 10 | 9.60±2.76 |
受试药中剂量组 | 4.0 | 10 | 9.86±2.45 |
受试药高剂量组 | 12.0 | 10 | 9.33±2.69 |
3. 结论:
根据中药组合物Ⅲ口服液人群推荐日摄入量24.0g生/60kg体重扩大5、10和30倍设置低、中、高三个剂量组,即2.0g生药、4.0g生药、12.0g生药/kg体重,另设空白对照组、模型对照组和中药组合物Ⅳ口服液组。采用清洁级健康雌性昆明种小鼠连续灌胃给予受试物,30天后进行检测相关指标。实验结果以P<0.05,P<0.01判断为差异具有显著性和极显著性。经动物实验研究表明:中药组合物Ⅲ口服液中、高剂量组均可提高小鼠ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力和小鼠对DNFB诱发的DTH反应,有显著提高小鼠血清溶血素水平和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和小鼠碳粒廓清功能的作用,中药组合物Ⅲ口服液中、高剂量组均有显著提高溶血空斑数的作用。且中药组合物Ⅲ口服液中、高剂量组对经上指标的影响均优于中药组合物Ⅳ口服液对照组,认为中药组合物Ⅲ口服液具有增强免疫功能,且增强免疫效果优于中药组合物Ⅳ口服液。
实施例2
1. 材料与方法
1.1 样品来源:受试物为组合物II复合粉(西洋参、灵芝、冬虫夏草、玫瑰花)由江中药业股份有限公司提供,1g复合粉干粉相当于总生药材12.19g,每人每日推荐摄入量为:24g生药/60kg体重。对照物为组合物I复合粉(西洋参、灵芝、发酵虫草菌粉、玫瑰花)由江中药业股份有限公司提供,1g复合粉干粉相当于总生药材12.56g,每人每日推荐摄入量为:24g生药/60kg体重。
1.2 实验动物:清洁级健康雌性昆明种小鼠,体重18-22g,江西中医学院实验动物中心提供,许可证号:SCXK(赣)2006-0001。动物饲养于江西中医学院动物室,环境许可证:SYXK(赣)2004-0001,饲养环境温度21~23℃,相对湿度50~60%。
1.3 实验方法
1.3.1 动物分组:共分四个实验大组, 每实验大组包括空白对照组、组合物I对照组、组合物II低、中、高剂量组,各剂量组实验动物数为10只。
1.3.2 剂量设计:受试药组合物II复合粉每人每日推荐摄入量为:200mL/60kg体重,120g总生药材配制成1000mL组合物II,每人每日推荐摄入量为:24g生药/60kg体重,由此推算出小鼠每日摄入量为:低剂量组,2.0g生药/kg体重;中剂量组,4.0g生药/kg体重;高剂量组,12g生药/kg体重,分别相当于人每日摄入量的5、10和30倍。将样品以蒸馏水配制成相应浓度(0.0164g干粉/mL、0.0328g干粉/mL、0.0984g干粉/mL)的灌胃液进行实验,小鼠灌胃量按0.1mL/10g体重计算。组合物I每人每日推荐摄入量为:24g生药/60kg体重,换算为小鼠的剂量为4.0g生药/kg体重(相当于人每日摄入量的10倍),将样品以蒸馏水配制成0.0318g干粉/mL灌胃液进行实验,灌胃量按0.1mL/10g体重计算。空白对照组给予等体积蒸馏水灌胃。每日灌胃1次,连续30天。各组小鼠均饲以普通饲料,自由进食、饮水。
1.3.3 检验指标:免疫实验一组进行迟发型变态反应和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验;免疫实验二组进行淋巴器官/体重比值测定和碳廓清实验;免疫实验三组进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和NK细胞活性测定;免疫实验四组进行血清溶血素的测定和抗体生成细胞检测。
1.3.4 统计方法:实验数据以`X±S 表示,采用单因素方差分析,比较受试物各剂量组检测指标与空白对照组之间的差异;并比较受试物各剂量组检测指标与原方组之间的差异,P<0.05判断为差异具有显著性。
2 结果
2.1动物体重增长情况:实验结果见表1。与空白对照组比较,组合物II各剂量组及组合物I组小鼠体重无显著性差异,与原方组比较,组合物II各剂量组小鼠体重无显著性差异。
表1 组合物II对小鼠体重增长的影响(g, `x±s)
2.2 对小鼠胸腺系数和脾脏指数的影响:实验结果见表2。与空白对照组比较,组合物II各剂量组及组合物I组小鼠胸腺系统、脾脏指数无显著性差异,与原方组比较,组合物II各剂量组胸腺系统、脾脏指数小鼠体重无显著性差异。
表2 组合物II对小鼠胸腺系数和脾脏指数的影响(`x±s)
组别 | 剂量 (g生药/kg) | 动物数(只) | 胸腺系数(mg/g) | 脾脏指数(mg/g) |
空白对照组 | 0.0 | 10 | 2. 53±0.60 | 3.60±0.46 |
组合物I组 | 4.0 | 10 | 2.66±0.58 | 3.71±0.48 |
受试药低剂量组 | 2.0 | 10 | 2. 60±0.36 | 3.68±0.44 |
受试药中剂量组 | 4.0 | 10 | 2.48±0.39 | 3.54±0.39 |
受试药高剂量组 | 12.0 | 10 | 2.50±0.47 | 3.72±0.42 |
2.3 对小鼠脾淋巴细胞增殖能力和小鼠迟发型变态反应的影响:实验结果见表3。与空白对照组比较, 组合物II中、高剂量组及原方中剂量组均有显著性增强ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力和小鼠对DNFB诱发的DTH反应。与原方对照相比,组合物II中、高剂量组均有显著性增强ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力和小鼠对DNFB诱发的DTH反应。
表3 组合物II对小鼠细胞免疫功能的影响(`x±s)
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与组合物I组相比,▲ P<0.05,▲▲ P<0.01。
2.4 对小鼠血清溶血素水平的影响:实验结果见表4。与空白对照组比较, 组合物II中、高剂量组及原方中剂量组均有显著提高小鼠血清溶血素水平的作用。与原方对照相比,组合物II中、高剂量组均有显著性显著提高小鼠血清溶血素水平的作用。
表4 组合物II对小鼠血清溶血素水平的影响(`x±s)
组别 | 剂量 (g生药/kg) | 动物数(只) | 血清溶血素 (抗体积数) |
空白对照组 | 0.0 | 10 | 50.20±7.40 |
组合物I组 | 4.0 | 10 | 61.90±8.46* |
受试药低剂量组 | 2.0 | 10 | 58.20±9.20 |
受试药中剂量组 | 4.0 | 10 | 73.50±9.40**▲ |
受试药高剂量组 | 12.0 | 10 | 75.80±10.20**▲▲ |
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与组合物I组相比,▲ P<0.05,▲▲ P<0.01。
2.5 对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响:实验结果见表5。与空白对照组比较, 组合物II低、中、高剂量组及原方中剂量组均有显著提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率的作用。与原方对照相比,组合物II中、高剂量组有显均有显著性显著提高腹腔巨噬细胞吞噬百分率的作用。
表5 组合物II对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响(`x±s)
组别 | 剂量 (g生药/kg) | 动物数(只) | 吞噬百分率(%) |
空白对照组 | 0.0 | 10 | 29.77±2.48 |
组合物I组 | 4.0 | 10 | 31.92±1.92* |
受试药低剂量组 | 2.0 | 10 | 31.86±1.40* |
受试药中剂量组 | 4.0 | 10 | 35.88±2.80**▲ |
受试药高剂量组 | 12.0 | 10 | 36.72±2.90**▲▲ |
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与组合物I组相比,▲ P<0.05,▲▲ P<0.01。
2.6 对小鼠碳粒廓清功能的影响:实验结果见表6。与空白对照组比较, 组合物II中、高剂量组及原方中剂量组均有显著提高吞噬指数的作用。与原方对照相比,组合物II中、高剂量组有显著性提高吞噬指数的作用。
表6 组合物II对小鼠碳粒廓清功能的影响(`x±s)
组别 | 剂量 (g生药/kg) | 动物数(只) | 吞噬指数 |
空白对照组 | 0.0 | 10 | 5.80±0.46 |
组合物I组 | 4.0 | 10 | 6.28±0.37* |
受试药低剂量组 | 2.0 | 10 | 5.99±0.56 |
受试药中剂量组 | 4.0 | 10 | 6.77±0.28**▲ |
受试药高剂量组 | 12.0 | 10 | 7.08±0.20**▲▲ |
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与组合物I组相比,▲ P<0.05,▲▲ P<0.01。
2.7 对小鼠抗体生成细胞功能的影响:实验结果见表7。与空白对照组比较, 组合物II中、高剂量组及原方中剂量组均有显著提高溶血空斑数的作用。与原方对照相比,组合物II中、高剂量组有显著性提高溶血空斑数的作用。
表7 组合物II对小鼠抗体生成细胞功能的影响(`x±s)
组别 | 剂量 (g生药/kg) | 动物数(只) | 溶血空斑数 (/106脾细胞) |
空白对照组 | 0.0 | 10 | 240.3±25.1 |
组合物I组 | 4.0 | 10 | 259.8±22.3* |
受试药低剂量组 | 2.0 | 10 | 252.7±19.8 |
受试药中剂量组 | 4.0 | 10 | 284.7±20.6**▲ |
受试药高剂量组 | 12.0 | 10 | 289.8±17.2**▲ |
与空白对照组相比,* P<0.05, ** P<0.05;与组合物I组相比,▲ P<0.05,▲▲ P<0.01。
2.8 对小鼠NK细胞活性的影响:实验结果见表8。与空白对照组比较,组合物II各剂量组及组合物I组小鼠NK细胞活性无显著性差异,与原方组比较,组合物II各剂量组小鼠NK细胞活性无显著性差异。
表8 组合物II对小鼠NK细胞活性的影响(`x±s)
组别 | 剂量 (g生药/kg) | 动物数(只) | 细胞活性( % ) |
空白对照组 | 0.0 | 10 | 9.20±2. 52 |
组合物I组 | 4.0 | 10 | 9.44±2.60 |
受试药低剂量组 | 2.0 | 10 | 9.27±2.69 |
受试药中剂量组 | 4.0 | 10 | 9.30±2.80 |
受试药高剂量组 | 12.0 | 10 | 9.32±2.78 |
3. 结论:
根据组合物II人群推荐日摄入量24.0g生/60kg体重扩大5、10和30倍设置低、中、高三个剂量组,即2.0g生药、4.0g生药、12.0g生药/kg体重,另设空白对照组、模型对照组和组合物I组。采用清洁级健康雌性昆明种小鼠连续灌胃给予受试物,30天后进行检测相关指标。实验结果以P<0.05,P<0.01判断为差异具有显著性和极显著性。经动物实验研究表明:组合物II中、高剂量组均可提高小鼠ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力和小鼠对DNFB诱发的DTH反应,有显著提高小鼠血清溶血素水平和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和小鼠碳粒廓清功能的作用,组合物II中、高剂量组均有显著提高溶血空斑数的作用。且组合物II中、高剂量组对经上指标的影响均优于组合物I对照组;认为组合物II具有增强免疫功能,且增强免疫效果优于原方组。
实施例3
取西洋参和/或人参300g、灵芝400g,冬虫夏草67g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加10倍量水,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例4
取人参500g、灵芝200g,冬虫夏草90g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加10倍量水,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例5
取西洋参100g、灵芝900g,冬虫夏草30g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例6
取人参叶250g、灵芝300g,冬虫夏草80g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例7
取白参50g、灵芝1600g,冬虫夏草70g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例8
取西洋参1500g或人参果300g、灵芝200g,冬虫夏草10g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例9
取红参150g、灵芝160g,冬虫夏草120g和/或发酵虫草菌粉(蝙蝠蛾拟青霉Paecilongces hepialli Chen et Dai,sp.nov)90g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后和/或发酵虫草菌粉布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例10
取西洋参300g和/或太子参300g、灵芝400g,冬虫夏草67g和/或发酵虫草菌粉(中华被毛孢Hirsutsua sinensis Liu,Guo,Yu et Zeng,sp.nov ) 200g,玫瑰花300g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后和/或发酵虫草菌粉布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加10倍量水,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例11
取西洋参50g、灵芝50g,冬虫夏草10g,玫瑰花50g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加10倍量水,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例12
取人参100g、灵芝200g,冬虫夏草30g和/或发酵虫草菌粉(中华束丝孢Synnematium sinensis Yin & Shen)30g,玫瑰花100g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例13
取西洋参250g、灵芝300g,冬虫夏草80g,玫瑰花300g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例14
取西洋参50g、灵芝1600g,冬虫夏草70g,玫瑰花900g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例15
取人参1500g、灵芝200g,冬虫夏草10g,玫瑰花50g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例15
取西洋参300g、灵芝400g,冬虫夏草67g,虫草菌粉(蝙蝠蛾拟青霉Paecilongces hepialli Chen et Dai,sp.nov)200g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后与虫草菌粉布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加10倍量水,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例16
取西洋参450g、灵芝200g,冬虫夏草90g,虫草菌粉(中华被毛孢Hirsutsua sinensis Liu,Guo,Yu et Zeng,sp.nov)600g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后与虫草菌粉布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加10倍量水,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例17
取人参100g、灵芝800g,冬虫夏草30g,虫草菌粉(粉红胶霉Gliocladium roseum(link)Thom)300g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后与虫草菌粉布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例18
取西洋参250g、灵芝300g,冬虫夏草80g,虫草菌粉(孢霉属真菌Mortierella SP)900g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后与虫草菌粉布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例19
取西洋参50g、灵芝1600g,冬虫夏草70g,虫草菌粉(中华束丝孢Synnematium sinensis Yin & Shen)100g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后与虫草菌粉布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例20
取人参1500g或党参300g、灵芝200g,冬虫夏草10g,虫草菌粉(冬虫夏草头孢Cephalosporium sinensis Chen sp.nov)33g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后与虫草菌粉布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例21
取西洋参500g、灵芝200g,冬虫夏草30g,虫草菌粉(蝙蝠蛾被毛孢Hirsutella hepialid Chen et Shen) 100g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后与虫草菌粉布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例22
取西洋参300g、灵芝400g,冬虫夏草67g,虫草菌粉(蝙蝠蛾被毛孢Hirsutella hepialid Chen et Shen)200g,玫瑰花300g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后与虫草菌粉布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加10倍量水,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例23
取西洋参10g、灵芝20g,冬虫夏草30g和/或虫草菌粉虫草菌粉(孢霉属真菌Mortierella SP)30g,玫瑰花10g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后或/和与虫草菌粉布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加10倍量水,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例24
取人参250g、灵芝300g,冬虫夏草80g,虫草菌粉(中华被毛孢Hirsutsua sinensis Liu,Guo,Yu et Zeng,sp.nov)900g,玫瑰花50g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后与虫草菌粉布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例25
取西洋参50g、灵芝1600g,冬虫夏草70g,虫草菌粉(中华束丝孢Synnematium sinensis Yin & Shen)100g,玫瑰花900g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后与虫草菌粉布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例26
取西洋参1500g或黄芪300g、灵芝200g,冬虫夏草10g,虫草菌粉(蝙蝠蛾拟青霉Paecilongces hepialli Chen et Dai,sp.nov)33g,玫瑰花200g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后与虫草菌粉布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例27
取西洋参500g、灵芝200g,冬虫夏草30g,发酵虫草菌粉(冬虫夏草头孢Cephalosporium sinensis Chen sp.nov )100g,玫瑰花700g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草打粉后与虫草菌粉布袋分装,所有药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入口服液常用辅料,混合均匀,按口服液常规工艺制成20000ml口服液。
实施例28
取党参300g、灵芝400g和/或菟丝子120g,冬虫夏草67g,党参、灵芝切片,冬虫夏草粉碎后置于布袋中,以上药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,减压浓缩成清膏,喷雾干燥成粉,制成复合粉。
实施例29
取人参叶300g、灵芝300g,冬虫夏草67g,人参叶、灵芝切片,冬虫夏草粉碎后置于布袋中,以上药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,减压浓缩成膏或喷雾干燥成粉,加入颗粒剂常用辅料,混合均匀,按颗粒剂常规工艺制成颗粒剂。
实施例30
取党参300g、灵芝400g,冬虫夏草67g、玫瑰花300g,党参、灵芝切片,冬虫夏草粉碎后置于布袋中,以上四味加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,减压浓缩成清膏,喷雾干燥成粉,制成复合粉。
实施例31
取西洋参300g、灵芝400g,冬虫夏草67g和/或虫草菌粉(蝙蝠蛾被毛孢Hirsutella hepialid Chen et Shen) 200g、玫瑰花300g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草粉碎后与虫草菌粉一起置于布袋中,以上药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,减压浓缩成清膏,喷雾干燥成粉,制成复合粉。
实施例32
取西洋参300g、灵芝300g,冬虫夏草67g、虫草菌粉(蝙蝠蛾拟青霉Paecilongces hepialli Chen et Dai,sp.nov)200g、玫瑰花300g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草粉碎后与虫草菌粉一起置于布袋中,以上药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,减压浓缩成膏或喷雾干燥成粉,加入颗粒剂常用辅料,混合均匀,按颗粒剂常规工艺制成颗粒剂。
实施例33
取党参160g、灵芝400g,冬虫夏草30g和/或虫草菌粉200g、玫瑰花300g,党参、灵芝切片,冬虫夏草粉碎后与虫草菌粉一起置于布袋中,以上药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,减压浓缩成膏或喷雾干燥成粉,加入丸剂常用辅料,混合均匀,按丸剂常规工艺制成各种丸剂。
实施例34
取黄芪300g、灵芝400g,冬虫夏草67g、虫草菌粉100g、玫瑰花300g,黄芪、灵芝切片,冬虫夏草粉碎后与虫草菌粉一起置于布袋中,以上药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,加入糖浆剂常用辅料,混合均匀,按糖浆剂常规工艺制成糖浆剂。
实施例35
取西洋参300g、灵芝400g,冬虫夏草67g和/或发酵虫草菌粉(孢霉属真菌Mortierella SP)200g、玫瑰花200g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草粉碎后和/或与虫草菌粉一起置于布袋中,加入乙醇回流提取1-2次,每次1-2小时,然后合并提取液,回收乙醇后得到醇提取液;药渣再加水加热煎煮1~3次,每次1~2小时,合并醇提取液和水提取液,过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,备用。以上药材加水浸泡1.5小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并醇提取液与水提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,减压浓缩成膏或喷雾干燥成粉,加入胶囊剂常用辅料,混合均匀,按胶囊剂常规工艺制成胶囊剂。
实施例36
取西洋参300g、灵芝400g,冬虫夏草67g、玫瑰花200g,西洋参、灵芝切片,冬虫夏草粉碎后置于布袋中,加入甲醇或乙醇回流提取1-2次,每次1-2小时,然后合并提取液,回收甲醇或乙醇后得到醇提取液;药渣再加水加热煎煮1~3次,每次1~2小时,合并醇提取液和水提取液,过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,备用。以上药材加水浸泡1小时,加热煎煮3次,第一次2小时,以后每次1小时,每次加水10倍量,合并醇提取液与水提取液过滤,滤液浓缩至适量,浓缩液放冷后高速离心除杂,减压浓缩成清膏,喷雾干燥成粉,加入片剂常用辅料,混合均匀,按片剂常规工艺制成片剂。
Claims (11)
1. 一种具有一种增强人体免疫功能的中药组合物,其特征在于主要由下述重量份的原料组成、或者由下列原料的水和/或醇提物作活性成份和药学上可接受的附加剂组成:人参和/或西洋参5~150份、灵芝5~160份、冬虫夏草1~120 份和/或发酵虫草菌粉1~90份。
2.根据权利求1所述的中药组合物,其特征在于:西洋参和/或人参10~90份 、灵芝20~90份、冬虫夏草3~90份和/或发酵虫草菌粉3~60份。
3.根据权利求2所述的中药组合物,其特征在于:西洋参和/或人参30份、灵芝40份、冬虫夏草份6.7份和/或发酵虫草菌粉20份。
4.根据权利求1所述的中药组合物,其中原料还有玫瑰花5~90份。
5.根据权利求4所述的中药组合物,其中各组份的用量为:西洋参和/或人参10~90份 、灵芝20~90份、冬虫夏草3~90份和/或发酵虫草菌粉3~60份、玫瑰花10~60份。
6.根据权利求5所述的中药组合物,其特征在于:西洋参和/或人参30份、灵芝40份、冬虫夏草6.7份和/或发酵虫草菌粉20份、玫瑰花30份。
7.根据权利要求1-6任一所述的中药组合物,其特征在于:还可加入太子参3~300份、人参叶1~120份、党参3~160份、黄芪3~200份、菟丝子5~150份中的任一种或任意组合。
8.根据权利要求1所述的药物组合物,其中所述的醇为乙醇或甲醇。
9.根据权利要求1-6任一所述的保健食品或药品的制备方法,其特征在于包括下列步骤:
(1)、称取下列中药材作原料:
人参和/或西洋参5~150份、灵芝5~160份、冬虫夏草1~120 份和/或发酵虫草菌粉1~90份、或玫瑰花5~90;
(2)、用醇或水对上述药材回流提取,得到提取液做活性成份,加入附加剂,制成各种剂型。
10.权利要求1-6任一所述的组合物在作为制备防止辐射药品中的应用。
11.权利要求7所述的组合物在作为制备防止辐射药品中的应用。
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