CN102068604A - 一种加味当归补血制剂及其应用和制造方法 - Google Patents

Abstract

一种加味当归补血制剂，该加味当归补血制剂的活性成分是以黄芪、当归、熟地黄和麦冬为原料配制而成，所述黄芪、当归、熟地黄和麦冬的重量百分比为：黄芪30-65％；当归6-13％；熟地黄15-32.5％；麦冬12-26％。具有明显的补气养血，健脾益肾，填精生髓、增强身体机能等作用，特别是能抑制肿瘤细胞生长，克服放化疗引的毒副反应。及该加味当归补血制剂的应用和制造方法。

Description

一种加味当归补血制剂及其应用和制造方法

技术领域

本发明涉及一种加味当归补血制剂，特别是一种可减轻肿瘤化疗的毒副作用，增强机体对化疗敏感性的加味当归补血制剂。

背景技术

放、化疗是治疗恶性肿瘤的重要手段，由于肿瘤细胞与正常细胞缺少根本性的代谢差异，几乎临床使用的所有放、化疗药物均存在选择性不高的问题，即在杀伤肿瘤细胞的同时，也杀伤正常的组织细胞，尤其是增殖旺盛的骨髓造血细胞、胃肠道细胞，对肝肾功能以及免疫功能也有明显的损伤，使放、化疗的治疗方案难以圆满完成。

中医学一致认为，肿瘤患者在放、化疗后出现的众多不良反应主要是因为气血两虚而引起的。因此现在临床研究已经偏重于用中医进行放、化疗辅助治疗，从而消除放、化疗后的毒、副作用。金元四大家之一李东垣所创“当归补血汤”是一首补气生血、治疗劳倦内伤、气弱血虚，阳浮外越的名方，其黄芪与当归的用量之比为5∶1。在此基础上，现已开发出一部分中药产品应用于临床。在这一部分中药产品中，可以举出的例子有“十一味参芪胶囊”，其主要成份有：人参、黄芪、当归、天麻、熟地黄、泽泻、决明子、鹿角、菟丝子、细辛、枸杞等，具有补气养血，健脾益肾，填精生髓、恢复造血功能、增强免疫力、促进白细胞生成等功效，用于治疗气血两亏引起的头晕、倦怠乏力、消瘦、恶心、呕吐等症、治疗白细胞、红细胞、血小板减少症等，特别是能抑制癌症细胞生产，克服放放、化疗引的毒副反应，促进并恢复造血功能。但深入探索中医理论，寻找新的消除放、化疗毒、副作用的中药制剂是永无止境的。

发明内容

本发明的主要目的是提供一种新的用于肿瘤放、化疗辅助治疗的中药制剂。

为实现上述目的，本发明提供技术方案一方面涉及一种加味当归补血制剂，该加味当归补血制剂的活性成分是以黄芪、当归、熟地黄和麦冬为原料配制而成，黄芪、当归、熟地黄和麦冬的重量百分比为：黄芪30-65％；当归6-13％；熟地黄15-32.5％；麦冬12-26％。

本发明加味当归补血制剂重用健脾益气之黄芪，以资气血生化之源，取“有形之血，不能自生，生于无形之气”之意；当归补血活血和营，使得阳生阴长，气旺血生；熟地黄清热生津，助当归之力；麦冬养阴生津。本发明加味当归补血制剂组方简单，只需四味中药，即奏补气生血，益肾滋阴之功，可达扶正固本以祛邪之效。具有明显的补气养血，健脾益肾，填精生髓、增强身体机能等作用，特别是能抑制肿瘤细胞生长，克服放放、化疗引的毒副反应。

本发明加味当归补血制剂优选各原料的重量百分比为：黄芪40-55％、当归8-11％、熟地黄18-27.5、麦冬16-22％，最优选各原料的重量百分比为：黄芪47.6％、当归9.5％、熟地黄23.8％和麦冬19.1％。上述加味当归补血制剂可以是丸剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、散剂、口服液、糖浆剂或其它临床上可接受的剂型。

本发明当归补血制剂的制备可通过现有中药制剂的常归方法制备。如将各原料按配比准备好后，加入适当量的水煎煮，取煎液直接饮用，或进一步加工制成丸剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、散剂、口服液、糖浆剂或其它临床上可接受的剂型。为原料中的有效成份更容易被煎煮出来，可在煎煮前适当浸泡一段时间，如半小时左右。

本发明的另一方面涉及上述加味当归补血制剂作为肿瘤化疗治疗辅助药物的应用。

本发明的还一方面涉及上述加味当归补血制剂作为治疗气血两虚证药物的应用。

本发明的另一目的在于提供上述加味当归补血制剂的制备方法。

为实现上述目的，本发明的一方面涉及加味当归补血制剂的一种制备方法，包括以下步骤：

(1)按重量百分比，取黄芪30-65％、当归6-13％、熟地黄15-32.5％和麦冬12-26％备用，黄芪、当归、熟地黄和麦冬的重量百分比总和为100％；

(2)将各种原料混合，加入以上各原料总量的6-10倍量的水，加热煎煮2-4次，每次1-2小时，分次过滤，合并滤液，浓缩至清膏状，再过滤、干燥得干膏粉；

(3)将(2)步骤中的干膏粉加入药粉总重的5-20％的纯化水合坨，制软材、制成小丸。

通过上述方法可制备浓缩水丸型的加味当归补血制剂。本发明的另一方面还涉及该加味当归补血制剂的另一制备方法，包括以下步骤：

(1)按重量百分比，取黄芪30-65％、当归6-13％、熟地黄15-32.5％和麦冬12-26％备用，黄芪、当归、熟地黄和麦冬的重量百分比总和为100％；

(2)将各种原料混合，加入以上各原料总量的6-10倍量的水，加热煎煮2-4次，每次1-2小时，分次过滤，合并滤液，浓缩，浓缩后向药液中加入药液总量0.1-1％的防腐剂、0.1-2％的矫味剂混合均匀，制成口服液型加味当归补血制剂。

本发明的还一方面涉及该加味当归补血制剂的另一制备方法，包括以下步骤：

(1)按重量百分比，取黄芪30-65％、当归6-13％、熟地黄15-32.5％和麦冬12-26％备用，黄芪、当归、熟地黄和麦冬的重量百分比总和为100％；

(2)取黄芪、当归、熟地黄、麦冬，加入以上各组分总量6-10倍量的水，加热煎煮2-4次，每次1-2小时，分次取煎液，合并煎液，浓缩至清膏状，再过滤、干燥得干膏粉；

(3)将(2)步骤中的干膏粉干燥、粉碎、过筛，装入胶囊，制得胶囊剂型加味当归补血制剂。

本发明的还一方面涉及该加味当归补血制剂的另一制备方法，包括以下步骤：

(1)按重量百分比，取黄芪30-65％、当归6-13％、熟地黄15-32.5％和麦冬12-26％备用，黄芪、当归、熟地黄和麦冬的重量百分比总和为100％；

(2)取黄芪、当归、熟地黄、麦冬，加入以上各组分总量6-10倍量的水，加热煎煮2-4次，每次1-2小时，分次过滤，合并滤液，浓缩至清膏状，再过滤、干燥得干膏粉；

(3)将(2)步骤中的干膏粉干燥、粉碎、过筛，加药学上可接受的赋形剂制成颗粒。

通过实验发现，在上述方法的步骤(2)中，煎煮次数对本发明加味当归补血制剂的药效影响显著，而加水量和煎煮时间对药效影响稍小，从缩短生产周期、降低生产成本等因素考虑，优选的用水量为各组份总量的8倍，煎煮时间为70分钟左右，煎煮次数为3次。为原料中的有效成份更容易被煎煮出来，可在煎煮前适当浸泡一段时间，如半小时左右。

本发明的上述制备方法对本发明加味当归补血制剂的组方进行了精制，不仅保证了药效，还具有服用方便等优点。

具体实施方式

实施例1

按以下方法制备本发明加味当归补血制剂的浓缩水丸。

1、按下列重量百分比配料：

黄芪47.6％

当归9.5％

熟地黄23.8％

麦冬19.1％

2、提取和浓缩

将黄芪、当归、熟地黄、麦冬，加到提取罐中，加水煎煮三次，每次加水8倍量，煮沸70分钟。合并煎液，用120目筛滤过，滤液吸入真空浓缩器内，进料量为蒸发室视镜下5cm，于真空-0.04～-0.06MPa，温度60～80℃进行浓缩，并根据蒸发速度及时补充进料。浓缩至相对密度为1.03-1.10(60℃)的清膏，过120目筛，贮于洁净的并经75％酒精消毒的密闭容器内，注明品名、批号、数量、日期，贮于冷库内，备用。

3、喷雾干燥

取上述浓缩药液进行喷雾干燥，喷雾时控制进风温度在115℃～125℃间，出风温度90℃～110℃，塔内负压-8～-12Pa，喷雾过程中应随时观察雾化情况，并定期启动振打器振打筒身。做好记录，所收集的干粉应按喷干前后整齐排放，标明品名、批号、袋(桶)数、重量、填写日期和交接单，送检，合格后转下工序。

4、混合、制软材

将合格的喷雾干燥后得到的干膏粉加相当于药粉重量10％-15％的纯化水合坨，制软材，得到的软材转下工序。

5制丸

将合格的软材用制丸机进行制丸，得到的小丸转入下道工序。本发明对每颗小丸的大小没有严格的限制，可根据需要设定，优选的小丸大小在0.01-0.05克之间。

6干燥

将得到的小丸装入不锈钢托盘中，放入烘箱，于60-80℃进行干燥，每2小时翻动1次，直到干燥成含水量低于6％为止，合格丸转入下道工序。

7选丸、抛光

将干燥的、不圆整的小丸选出，然后对合格丸用适量的纯化水进行抛光，烘干，得到的合格的圆整的光亮的小丸，进行中间品检验，合格后转入下道工序。

8内包装

装入铝箔袋，每袋6克。包装时每隔10分钟称量10袋，检查装量差异并记录，包装完毕送中间站。

实施例2

按以下步骤制取浓缩丸型加味当归补血制剂。

1、配料：

黄芪43两、当归8两、熟地黄27两和麦冬22两；

2、提取和浓缩

将上述各种原料混合，加入80斤的水，加热煎煮3次，每次70分钟，分次过滤，合并滤液，用120目筛滤过，滤液吸入真空浓缩器内，进料量为蒸发室视镜下5cm，于真空-0.04～-0.06MPa，温度60～80℃进行浓缩，并根据蒸发速度及时补充进料。浓缩至相对密度为1.03-1.10(60℃)的清膏，过120目筛，贮于洁净的并经75％酒精消毒的密闭容器内，注明品名、批号、数量、日期，贮于冷库内，备用。

3、喷雾干燥

取上述浓缩药液进行喷雾干燥，喷雾时控制进风温度在115℃～125℃间，出风温度90℃～110℃，塔内负压-8～-12Pa，喷雾过程中应随时观察雾化情况，并定期启动振打器振打筒身。做好记录，所收集的干粉应按喷干前后整齐排放，标明品名、批号、袋(桶)数、重量、填写日期和交接单，送检，合格后转下工序。

4、混合、制软材

将合格的喷雾干燥后得到的干膏粉加相当于药粉重量10％-15％的纯化水合坨，制软材，得到的软材转下工序。

5制丸

将合格的软材用制丸机进行制丸，得到的小丸转入下道工序。本发明对每颗小丸的大小没有严格的限制，可根据需要设定，优选的小丸大小在0.01-0.05克之间。

实施例3

按以下步骤制取口服液型加味当归补血制剂。

1、配料：

黄芪43两、当归8两、熟地黄27两和麦冬22两；

2、提取和浓缩

将上述各种原料混合，加入80斤的水，加热煎煮3次，每次70分钟，分次过滤，合并滤液，浓缩，浓缩后向药液中加入药液总量0.1-1％的防腐剂、0.1-2％的矫味剂混合均匀，制成口服液型加味当归补血制剂。

实施例4

按以下步骤制取胶囊剂型加味当归补血制剂。

1、配料：

黄芪54公斤、当归11公斤、熟地黄18公斤和麦冬17公斤。

2、提取和浓缩

取黄芪、当归、熟地黄和麦冬放入提取罐中，加入1000公斤的水，加热煎煮4次，每次1.5小时，分次取煎液，合并煎液，于真空-0.04～-0.06MPa，温度60～80C°进行浓缩，至相对密度为1.03-1.10(60C°)的清膏，过120目筛，然后进行喷雾干燥，制干粉。

3、将2步骤中的干膏粉装入胶囊，制得胶囊剂型加味当归补血制剂。

本实施例中，对过滤、干燥等工序的工艺要求没有作出明确说明的，可视为对该类工艺要求没有具体地限制，可参考实施例1或者现有技术中过滤、干燥的方法。以下各实施例均同此。

实施例5

按以下步骤制取胶囊剂型加味当归补血制剂。

1、配料：

黄芪40公斤、当归8公斤、熟地黄28公斤和麦冬24公穴。

2、提取和浓缩

取黄芪、当归、熟地黄和麦冬放入提取罐中，加入1000公斤的水，加热煎煮4次，每次2小时，分次取煎液，合并煎液，于真空-0.04～-0.06MPa，温度60～80C°进行浓缩，至相对密度为1.03-1.10(60C°)的清膏，过120目筛，然后进行喷雾干燥，制干粉。

3、将2步骤中的干膏粉干燥，加药学上可接受的赋形剂，按常规的压片方法，制成当归补血片。

实施例6

按以下方法制备颗料剂型的加味当归补血制剂。

1、配料：

黄芪47.6公斤

当归9.5公斤

地黄23.8公斤

麦冬19.1公斤

2、取黄芪、当归、熟地黄、麦冬，加入600公斤的水，加热煎煮2次，每次1小时，分次过滤，合并滤液，浓缩至清膏状，再过滤、干燥得干膏粉；

3、将2步骤中的干膏粉加药学上可接受的赋形剂制成当归补血颗粒。

实施例7

对本发明对加味当归补血制剂进行补血、增强身体机能的动物学实验。

实验目的：观察浓缩丸型加味当归补血制剂的补血作用和增强机能作用。

方法：制备小鼠药物性贫血模型观察加味当归补血制剂的补血作用，制备小鼠免疫低下模型观察加味当归补血制剂增强免疫作用，同时观察加味当归补血制剂对正常小鼠游泳时间、耐常压乏氧时间的影响。

1、试验用材料

1.1材料

本发明实施1、实施例2的浓缩丸型加味当归补血制剂。供对比用的十一味参芪胶囊为大连汉方药液有限公司生产，批号为20080807。

1.2试剂

注射用环磷酰胺，山西普德药业有限公司，批号20080104。钠石灰，广州化学试剂厂，20060601-1。2，4-二硝基氯苯，上海试剂一厂，060412。

1.3仪器

BS224S电子天平(1/万)，德国SARTORIUS产品。KX-21全自动血球计数仪，日本东芝产品。LBY-BX2红细胞变形聚集仪，北京普利生公司产品。小鼠游泳装置，自制。8mm口径金属打孔器，广州正宏医学器械公司产品。

1.4动物

SPF级NIH小鼠，雌雄各半，由广东省医学实验动物中心提供，实验设施合格证号和动物合格证号分别为SCXK(粤)2008-0002和粤监证字2008A021。本实验使用SPF级动物实验室，实验设施使用许可证号为SYXK(粤)

1.5统计字处理

计量资料以均值加减标准差表示，多组间均数的比较采用One-Way ANOVA S-N-K法，由SPSS15.0统计软件完成。

2、方法

2.1加味当归补血制剂对小鼠药物性贫血模型的影响

84只SPF级NI H小鼠按体重随机分为7组，分别为正常对照组、模型对照组、参芪胶囊组、实施例1加味当归补血制剂的高、中、低剂量组(以下分别简称为例1高剂量组、例1中剂量组、例1低剂量组)、实施例2加味当归补血制剂组(以下简称例2组)，每组12只，雌雄各半。各给药组按剂量灌胃给药，给药体积为20mL·kg-1，每天1次，连续10d，正常对照组及模型对照组给予蒸馏水20mL·kg-1。同时，除正常对照组外，其余各组小鼠均于给药期的第1、3、5、7d腹腔注射环磷酰胺100mg/kg造模。末次给药后1h采血测定小鼠红细胞数、血红蛋白含量、红细胞压积和红细胞松弛系数、变形系数、取向系数。

2.2加味当归补血制剂对免疫功能低下小鼠迟发型超敏反应的影响

取84只SPF级NI H小鼠同实验2.1分组给药，每天1次，连续10d，正常对照组、模型对照组同法灌胃给予蒸馏水20mL·kg-1。除正常对照组外，其余各组小鼠均腹腔注射环磷酰胺100mg/kg，正常对照组腹腔注射等体积生理盐水，隔天1次，连续5次。给药第1d各组小鼠均腹部脱毛2cm ×2cm，用5％2，4-二硝基氯苯丙酮溶液50μL于脱毛处均匀涂抹致敏。末次给药后1h，用1％2，4-二硝基氯苯丙酮溶液20μL均匀涂抹于小鼠右耳两面进行攻击，24h后脱颈椎处死小鼠，用8mm金属打孔器打下小鼠左、右耳片，称重，以右耳减去左耳重量差值作为迟发型超敏反应值(耳肿胀度)。同时解剖小鼠，取胸腺、脾脏称重，计算脏器系数。

2.3加味当归补血制剂对小鼠负重游泳时间的影响

72只SPF级NIH小鼠按体重随机分为6组，分别为对照组、参芪胶囊组、例1高剂量组、例1中剂量组、例1低剂量组、例2组，每组12只，雌雄各半。各给药组按剂量灌胃给药，给药体积为20mL·kg-1，每天1次，连续7d，对照组灌胃给予蒸馏水20mL·kg-1。末次给药1h后，在小鼠尾部束1g的重物，放入水深20cm、水温20±0.5℃的玻璃缸内游泳。以小鼠头部沉入水中10秒钟不能浮出水面者为体力耗竭，即为小鼠游泳时间。

2.4加味当归补血制剂对小鼠耐常压缺氧的影响

同实验2.3方法取72只SPF级NIH小鼠分组给药。末次给药1h后，逐只将小鼠放入盛有15g钠石灰的250mL广口瓶内，每瓶单独放1只小鼠，用凡士林涂抹瓶口盖严，使之不漏气，立即计时，以呼吸停止为指标，观察记录小鼠因缺氧而死亡的时间。

3、结果

3.1加味当归补血制剂对小鼠药物性贫血模型的影响

表1加味当归补血制剂对小鼠药物性贫血模型的影响(n＝12)

注：①参芪胶囊剂量单位为g粉·kg-1。②与正常对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01。与模型对照组相比，#P＜0.05，##P＜0.01。(下同)

表2加味当归补血制剂对小鼠红细胞特性的影响(n＝12)

表1显示，与正常对照组比较，模型对照组小鼠红细胞数、血红蛋白含量、红细胞压积均显著减少(P＜0.01)；与模型对照组相比，例1高剂量组、例1中剂量组、例1低剂量组、例2组均能明显提高贫血小鼠红细胞数、血红蛋白含量和红细胞压积(P＜0.01或P＜0.05)。

表2说明，与正常对照组比较，模型对照组小鼠红细胞变形系数和取向系数均明显增大(P＜0.01)；与模型对照组相比，本发明的例1高剂量组、例1中剂量组、例1低剂量组、例2组均能显著减小贫血小鼠红细胞松弛系数、变形系数和取向系数(P＜0.01或P＜0.05)。

3.2加味当归补血制剂对免疫功能低下小鼠迟发型超敏反应的影响

表3加味当归补血制剂对小鼠迟发型超敏反应的影响(

n＝12)

表3表明，与正常对照组比较，模型对照组小鼠耳肿胀度、胸腺系数、脾脏系数均显著减小(P＜0.05或P＜0.01)。与模型对照组相比，例1高剂量组、例1中剂量组、例1低剂量组、例2组小鼠耳肿胀度均明显增大(P＜0.01或P＜0.05)，胸腺系数、脾脏系数也有增大的趋势，但均无统计学显著性差异(P＞0.05)。

3.3加味当归补血制剂对小鼠负重游泳时间的影响

表4表明，与对照组比较，例1高剂量组、例1中剂量组、例1低剂量组、例2组小鼠负重游泳时间均显著延长(P＜0.01或P＜0.05)。

表4加味当归补血制剂对小鼠负重游泳时间的影(

n＝12)

注：①参芪胶囊剂量单位为g粉·kg-1。②与对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01。(下同)

3.4加味当归补血制剂对小鼠耐常压缺氧的影响

从表5可看出，与对照组比较，例1高剂量组、例1中剂量组、例1低剂量组、例2组小鼠耐常压缺氧时间均显著延长(P＜0.01或P＜0.05)。

表5加味当归补血制剂对小鼠耐常压缺氧时间的影响(

n＝12)

4、结论

本发明当归补血制剂能明显提高贫血小鼠红细胞数、血红蛋白含量和红细胞压积，显著减小贫血小鼠红细胞松弛系数、变形系数和取向系数，促进免疫抑制小鼠迟发型超敏反应，明显延长小鼠游泳时间和耐常压乏氧时间。实验结果证实本发明加味当归补血制剂具有明显补血作用和增强机体机能作用，效果相当于或者优于目前临床上普遍使用参芪胶囊。此外，在浓缩型丸的重量相当的情况下，实施例1的浓缩型丸比实施例2的浓缩型丸效果更好。

实施例8

对本发明对加味当归补血制剂进行了补血、增强身体机能的动物学实验。

实验目的：观察本发明加味当归补血制剂对环磷酰胺化疗肿瘤的减毒增效作用。方法：裸鼠皮下接种S180肉瘤，环磷酰胺腹腔注射给药，合用实施例1加味当归补血制剂高、中、低剂量和实施例2加味当归补血制剂，给药10d后观察裸鼠红细胞数、红细胞压积、瘤重、瘤系数等。

1材料

1.1供试品实施例1、实施例2加味当归补血制剂。十一味参芪胶囊，大连汉方药液有限公司，批号20080807。

1.2 S180肉瘤株，购自中山大学。

1.3试剂注射用环磷酰胺，山西普德药业有限公司，批号20080104。

1.4仪器BS 224S电子天平(1/万)，德国SARTORIUS产品。KX-21全自动血球计数仪，日本东芝产品。

1.5动物SPF级BALB/c-nu/nu裸鼠，雌雄各半，由广东省医学实验动物中心提供，实验设施合格证号和动物合格证号分别为SCXK(粤)2008-0002和粤监证字2008A053。本实验使用SPF级动物实验室，实验设施使用许可证号为SYXK(粤)2005-0059。

1.6统计学处理计量资料以均值加减标准差表示，多组间均数的比较采用One-Way ANOVA S-N-K法，由SPSS15.0统计软件完成。

2方法

2.1 S180荷瘤裸鼠模型的建立

无菌条件下抽取6～7d生长良好的S180小鼠的腹水，按1∶3用生理盐水稀释，反复冲打，充分混匀，在显微镜下计数，用生理盐水调整细胞数为1.5×107个·ml-1。取BALB/c-nu/nu裸鼠28只，雌雄各半，每只小鼠背部碘酊消毒后皮下接种S180瘤细胞液0.2ml。瘤株接种前均用0.2％台盼蓝染色，计算活细胞数为95％～98％。从抽取腹水时开始，到移植完最后1只小鼠的总时间控制在1h内。

2.2分组及给药

接种7d后，裸鼠背部肉瘤已生长形成块状物。取上述接种肉瘤细胞的BALB/c-nu/nu裸鼠按体重随机分为7组，分别为荷瘤对照组、环磷酰胺(CTX)组、CTX+参芪胶囊组、CTX+实施例1加味当归补血制剂高剂量组(以下简称CTX+例1高剂量组)、CTX+实施例1加味当归补血制剂中剂量组(以下简称CTX+例1中剂量组)、CTX+实施例1加味当归补血制剂低剂量组(以下简称CTX+例1低剂量组)、CTX+实施例2浓缩丸组(以下简称CTX+例2组)，每组4只，雌雄各半。另取4只未接种肉瘤细胞BALB/c-nu/nu裸鼠作为正常对照组，雌雄各半。

环磷酰胺腹腔注射给药，注射体积为10mL·kg-1，每天1次，连续10d，正常对照组、荷瘤对照组及其余各给药组同法腹腔注射生理盐水10mL·kg-1。本发明加味当归补血制剂各剂量、各型号组及阳性对照药参芪胶囊组按剂量灌胃给药，给药体积为20mL·kg-1，每天1次，连续10d，正常对照组、荷瘤对照组及CTX组同法灌胃给予蒸馏水20mL·kg-1。

2.3检测指标

外周血常规：于给药后第10天，将各组裸鼠摘眼球采血于肝素抗凝管中，血细胞自动分析仪检测血常规。

抑瘤率计算：将各组裸鼠脱颈椎处死，依次用碘酊酒精消毒操作部位皮肤，于超净工作台上，以无菌操作从背部皮下完整剥取肿瘤组织，剥离干净后于电子天平称瘤体质量，按公式计算肉瘤系数和抑瘤率。肉瘤系数＝瘤体质量/体重。抑瘤率(％)＝(1-治疗组平均瘤质量/荷瘤对照组平均瘤质量)×100％

脾脏、肝脏、肾脏系数：无菌操作取下脾脏、肝脏、肾脏，电子天平称质量并计算脏器系数。

3结果

3.1加味当归补血制剂对环磷酰胺化疗S180肉瘤裸鼠模型瘤块外观的影响

各组裸鼠外观观察表明，各组裸鼠接种S180肉瘤7d后(给药前)皮下瘤块明显触及，各组间瘤块大小无明显差异。给药5d后荷瘤对照组瘤块生长迅速，瘤块显著增大，各给药组裸鼠与荷瘤对照组相比瘤块明显增长减慢，瘤块较小。给药10d后荷瘤对照组瘤块生长更加迅速，瘤块显著增大，瘤组织扩散增生，各给药组裸鼠与荷瘤对照组相比瘤块增长显著减缓，瘤块较小。

3.2加味当归补血制剂对环磷酰胺化疗S180肉瘤裸鼠模型体重的影响

表1显示，与正常对照组比较，实验开始时各组裸鼠体重无明显差异(P＞0.05)。实验结束时，与正常对照组裸鼠体重相比，荷瘤对照组裸鼠体重明显增大(P＜0.05)。与荷瘤对照组裸鼠体重相比，各给药组裸鼠给药后体重均显著减小(P＜0.01)。与CTX组裸鼠相比，CTX+例1高剂量组、CTX+例1中剂量组、CTX+例1低剂量组、CTX+例2组裸鼠体重均无显著性差异(P＞0.05)。

表1对环磷酰胺化疗S 180肉瘤裸鼠模型体重的影响(

n＝4)

注：①环磷酰胺CTX剂量单位为mg·kg-1，参芪胶囊剂量单位为g粉·kg-1。②与正常对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01；与荷瘤对照组相比，#P＜0.05，##P＜0.01；与CTX组相比，△P＜0.05，△△P＜0.01。(下同)

3.3加味当归补血制剂对环磷酰胺化疗裸鼠S 180肉瘤瘤重、瘤系数的影响

表2对环磷酰胺化疗S 180肉瘤裸鼠模型瘤重、瘤系数的影响(

n＝4)

表2表明，与荷瘤对照组比较，CTX组裸鼠肉瘤重量和肉瘤系数均显著减小(P＜0.01)。与CTX组比较，CTX+例1高剂量组、CTX+例1中剂量组、CTX+例1低剂量组、CTX+例2组裸鼠肉瘤重量、肉瘤系数均有所减小，抑瘤率有所增高，但均无显著性差异(P＞0.05)。

3.4细加味当归补血制剂对环磷酰胺化疗S 180肉瘤裸鼠模型脾脏系数、肝脏系数、肾脏系数的影响

表3说明，与正常对照组相比，荷瘤对照组裸鼠脾脏系数显著增大(P＜0.01)。与荷瘤对照组比较，CTX组裸鼠脾脏系数均显著减小(P＜0.01)。与CTX组比较，CTX+例1高剂量组、CTX+例1中剂量组、CTX+例1低剂量组、CTX+例2组裸鼠脾脏系数均有所增大，但均无显著性差异(P＞0.05)。各组间肝脏系数和肾脏系数经统计学处理均无显著性差异(P＞0.05)。

表3对环磷酰胺化疗S180肉瘤裸鼠脾脏、肝脏、肾脏系数的影响(

n＝4)

3.5加味当归补血制剂对环磷酰胺化疗S180肉瘤裸鼠模型红细胞数、血红蛋白含量、红细胞压积的影响

表4显示，与正常对照组比较，荷瘤对照组裸鼠的红细胞数、血红蛋白含量和红细胞压积均无明显变化(P＞0.05)。与荷瘤对照组相比，CTX组裸鼠的红细胞数和红细胞压积均显著减少(P＜0.01)。与CTX组比较，CTX+例1高剂量组、CTX+例1中剂量组、CTX+例1低剂量组、CTX+例2组裸鼠红细胞数和红细胞压积均显著性增加(P＜0.01或P＜0.05)。

表4对环磷酰胺化疗S180肉瘤裸鼠模型红细胞数、血红蛋白含量、红细胞压积的影响(

n＝4)

3.6加味当归补血制剂对环磷酰胺化疗S180肉瘤裸鼠模型肉瘤组织病理学检查的影响

将所获取的裸鼠瘤组织甲醛固定包埋后切片，HE染色后观察其组织形态上的改变，发现CTX组裸鼠瘤细胞密度降低，瘤巨细胞减少，细胞间质显著增多，坏死严重。CTX+例1高剂量组、CTX+例1中剂量组、CTX+例1低剂量组、CTX+例2组裸鼠瘤细胞坏死较严重，有大量淋巴细胞、巨噬细胞浸润。

4讨论

环磷酰胺能明显降低裸鼠肉瘤重量和肉瘤系数，但同时显著减少裸鼠脾脏系数、红细胞数和红细胞压积。本发明加味当归补血制剂与其合用后可进一步降低荷瘤裸鼠肉瘤重量和肉瘤系数，同时增大脾脏系数，明显增加红细胞数和红细胞压积。病理检查显示，加味当归补血制剂与环磷酰胺合用后可显著促进瘤细胞坏死，降低瘤细胞密度，减少瘤细胞数。实验结果证实加味当归补血制剂对环磷酰胺化疗裸鼠S180肉瘤具有减毒增效作用。

本发明的加味当归补血制剂配方简单，在补血、增强机能、减轻肿瘤化疗毒副作用方面有显著疗效。与目前临床上使用的疗效相当的中药制剂相比，组方更为简单，因此毒副作用更小，加工生产过程中质量更容易控制。

本发明的技术构思并不仅限于上述实施例，还可以依据本明的构思得到许多不同的具体方案，如加味当归补血制剂还可制成片剂、糖浆剂等，此等微小改变以及等效变换均应包含在权利要求所述范围之内。

Claims (9)

1.一种加味当归补血制剂，其特征在于：该加味当归补血制剂的活性成分是以黄芪、当归、熟地黄和麦冬为原料配制而成，所述黄芪、当归、熟地黄和麦冬的重量百分比为：黄芪30-65％；当归6-13％；熟地黄15-32.5％；麦冬12-26％。

2.根据权利要求1所述的一种加味当归补血制剂，其特征在于：所述黄芪、当归、熟地黄和麦冬的重量百分比为：黄芪47.6％、当归9.5％、熟地黄23.8％和麦冬19.1％。

3.根据权利要求1或2任一项所述的加味当归补血制剂，其特征在于：所述加味当归补血制剂为丸剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、散剂、口服液、糖浆剂或其它临床上可接受的剂型。

4.根据权利要求1至3任一项所述的加味当归补血制剂作为肿瘤放、化疗治疗辅助药物的应用。

5.根据权利要求1至3任一项所述的加味当归补血制剂作为治疗气血两虚证药物的应用。

6.根据权利要求1至3任一项所述的加味当归补血制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)按重量百分比，取黄芪30-65％、当归6-13％、熟地黄15-32.5％和麦冬12-26％备用，所述黄芪、当归、熟地黄和麦冬的重量百分比总和为100％；

(2)将各种原料混合，加入以上各原料总量的6-10倍量的水，加热煎煮2-4次，每次1-2小时，分次过滤，合并滤液，浓缩至清膏状，再过滤、干燥得干膏粉；

(3)将(2)步骤中的干膏粉，加入药粉总重的5-20％的纯化水合坨，制软材、制小丸。

7.根据权利要求1至3任一项所述的加味当归补血制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)按重量百分比，取黄芪30-65％、当归6-13％、熟地黄15-32.5％和麦冬12-26％备用，所述黄芪、当归、熟地黄和麦冬的重量百分比总和为100％；

(2)将各种原料混合，加入以上各原料总量6-10倍量的水，加热煎煮2-4次，每次1-2小时，分次过滤，合并滤液，浓缩，浓缩后向药液中加入药液总量0.1-1％的防腐剂、0.1-2％的矫味剂混合均匀，制成口服液型加味当归补血制剂。

8.根据权利要求1至3任一项所述的加味当归补血制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)按重量百分比，取黄芪30-65％、当归6-13％、熟地黄15-32.5％和麦冬12-26％备用，所述黄芪、当归、熟地黄和麦冬的重量百分比总和为100％；

(2)将各种原料混合，加入以上各原料总量6-10倍量的水，加热煎煮2-4次，每次1-2小时，分次过滤，合并滤液，浓缩至清膏状，再过滤、干燥得干膏粉；

(3)将(2)步骤中的干膏粉，干燥、粉碎、过筛，装入胶囊，制得胶囊剂型加味当归补血制剂。

9.根据权利要求1至3任一项所述的加味当归补血制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)按重量百分比，取黄芪30-65％、当归6-13％、熟地黄15-32.5％和麦冬12-26％备用，所述黄芪、当归、熟地黄和麦冬重量百分比总和为100％；

(2)将各种原料混合，加入以上原料总量6-10倍量的水，加热煎煮2-4次，每次1-2小时，分次过滤，合并滤液，浓缩至清膏状，再过滤、干燥得干膏粉；

(3)将(2)步骤中的干膏干燥、粉碎、过筛，加药学上可接受的赋形剂制成颗粒。