WO2013177944A1 - 一种组合物在制备防治过敏性疾病的保健品或药品中的用途 - Google Patents

一种组合物在制备防治过敏性疾病的保健品或药品中的用途 Download PDF

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ganoderma lucidum
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钟虹光
易敏之
卢建中
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江中药业股份有限公司
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Definitions

  • compositions for preparing health care products or medicines for preventing and treating allergic diseases Use of a composition for preparing health care products or medicines for preventing and treating allergic diseases
  • the present invention relates to a composition for preventing and treating allergic diseases and a preparation method thereof.
  • the patent application file with the publication number CN1509760A discloses a medicine for preventing and assisting the treatment of cancer, which is prepared by fermenting Cordyceps powder, ganoderma lucidum and medlar, which can improve the immunity of the body and regulate the endocrine.
  • the invention has a certain effect on harmful free radicals in the body and preventing tumor recurrence;
  • the patent application file disclosed in CN102228252A discloses a traditional Chinese medicine composition for relieving physical fatigue, containing 5 ⁇ 150 parts by weight of American ginseng and/or ginseng, and Ganoderma lucidum 5 ⁇ 160 parts by weight, fermented Cordyceps powder 1 to 90 parts by weight; Publication No.
  • the present invention discloses a pharmaceutical composition having an effect of enhancing immunity, including Cordyceps polysaccharide or fermented Cordyceps powder, Ganoderma lucidum, and American ginseng. There are currently no compositions consisting or made of Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, Cordyceps sinensis and/or fermented Cordyceps powder for the prevention and treatment of allergic diseases.
  • the present invention selects a combination of raw materials Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, Cordyceps sinensis and/or fermented Cordyceps powder, and unexpectedly finds that the composition or the product made of the composition has an anti-allergic disease effect.
  • the present invention provides a composition comprising Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or a composition made of a raw material containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or by Ganoderma lucidum, Use of a composition made of American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or cordyceps sin in the preparation of a health care product or medicine or product for controlling allergic diseases.
  • compositions comprising Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or a composition made of a raw material containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or by Ganoderma lucidum, American ginseng or A composition made of ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis is added to a composition of rose, ganoderma lucidum spore powder, ganoderma lucidum spore oil, ginseng ginseng, ginseng leaf, codonopsis pilosula, and astragalus.
  • the present invention also provides a composition containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and / or Cordyceps sinensis, rose or made of raw materials containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and / or Cordyceps sinensis, rose
  • compositions comprising Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis, rose or by a composition comprising a raw material of Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis, rose or a composition made of Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis, rose flower
  • a composition comprising one or more of the components of Ganoderma Lucidum, Ganoderma lucidum spore oil, Radix Pseudostellariae, ginseng leaf, Codonopsis pilosula, and Astragalus membranaceus in the preparation of a health care product or medicine or product for controlling allergic diseases.
  • the present invention also provides a composition comprising Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or a composition made of a raw material containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or by Ganoderma lucidum
  • a composition made of American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sin in the preparation of a health care product or medicine or product for controlling allergic rhinitis are examples of a composition made of American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sin in the preparation of a health care product or medicine or product for controlling allergic rhinitis.
  • compositions comprising Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or a composition made of a raw material containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or by Ganoderma lucidum, American ginseng or A composition made of ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis is added to a composition of rose, ganoderma lucidum spore powder, ganoderma lucidum, ginseng, ginseng leaf, codonopsis, and astragalus.
  • compositions comprising Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis, rose or a composition comprising raw materials containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis, rose Or a composition made of Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis, rose flower, one or more of Ganoderma lucidum spore powder, Ganoderma lucidum spore oil, Radix Pseudostellariae, Ginseng leaf, Codonopsis pilosula, and Astragalus membranaceus
  • a composition comprising ingredients for the preparation of a health product or drug or product for the prevention and treatment of allergic rhinitis.
  • the present invention also provides a composition comprising Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or a composition made of a raw material containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or by Ganoderma lucidum
  • a composition made of American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis for the preparation of a health care product or medicine or product for controlling allergic dermatitis.
  • compositions comprising Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or a composition made of a raw material containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or by Ganoderma lucidum, American ginseng or A composition made of ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis is added to a composition consisting of rose, ganoderma lucidum ginseng powder, ganoderma lucidum spore oil, ginseng ginseng, ginseng leaf, codonopsis pilosula, and astragalus.
  • compositions consisting of rose, ganoderma lucidum ginseng powder, ganoderma lucidum spore oil, ginseng ginseng, ginseng leaf, codonopsis pilosul
  • compositions comprising Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis, rose or a composition comprising raw materials containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis, rose Or a composition made of Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis, rose flower, one or more of Ganoderma lucidum spore powder, Ganoderma lucidum spore oil, Radix Pseudostellariae, Ginseng leaf, Codonopsis pilosula, and Astragalus membranaceus
  • a composition comprising ingredients for the preparation of a health product or drug or product for the prevention and treatment of atopic dermatitis.
  • the present invention also provides a composition comprising Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or a composition made of a raw material containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or by Ganoderma lucidum
  • a composition made of American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or cordyceps sin in the preparation of a health product or medicine or product for controlling urticaria are examples of a composition made of American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or cordyceps sin in the preparation of a health product or medicine or product for controlling urticaria.
  • compositions comprising Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or a composition made of a raw material containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or by Ganoderma lucidum, American ginseng or A composition made of ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis is added to a composition of rose, ganoderma lucidum spore powder, ganoderma lucidum spore oil, ginseng ginseng, ginseng leaf, codonopsis pilosula, and astragalus.
  • compositions comprising Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis, rose flower or a composition comprising raw materials containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis, rose Or a composition made of Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis, rose flower, one or more of Ganoderma lucidum spore powder, Ganoderma lucidum spore oil, Radix Pseudostellariae, Ginseng leaf, Codonopsis pilosula, and Astragalus membranaceus
  • a composition comprising ingredients for the preparation of a health product or drug or product for controlling urticaria.
  • the present invention also provides a composition comprising Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or a composition made of a raw material containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or by Ganoderma lucidum ,oo Use of a composition made of ginseng or ginseng, fermented cordyceps powder and/or cordyceps sin in the preparation of a health product or medicine or product for controlling allergic asthma.
  • compositions comprising Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or a composition made of a raw material containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis or by Ganoderma lucidum, American ginseng or A composition made of ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis is added to a composition of rose, ganoderma lucidum spore powder, ganoderma lucidum spore oil, ginseng ginseng, ginseng leaf, codonopsis pilosula, and astragalus.
  • compositions comprising Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis, rose or a composition comprising raw materials containing Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis, rose Or a composition made of Ganoderma lucidum, American ginseng or ginseng, fermented Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis, rose flower, one or more of Ganoderma lucidum spore powder, Ganoderma lucidum spore oil, Radix Pseudostellariae, Ginseng leaf, Codonopsis pilosula, and Astragalus membranaceus
  • a composition comprising ingredients for the preparation of a health product or drug or product for the prevention and treatment of allergic asthma.
  • the "product” referred to in the above-mentioned "health products or medicines or products” includes other products not included in health care products or medicines, including any articles using the composition of the present invention, such as essential oils, incense products, pillows. Wait.
  • the composition for controlling allergic diseases used in the above-mentioned use of the present invention is prepared from the following raw materials by weight: 5 to 200 parts of Ganoderma lucidum, 5 to 150 parts of American ginseng or ginseng, 1 to 90 parts of fermented Cordyceps powder and / or Cordyceps 1 to 120 servings.
  • Ganoderma lucidum Preferably, 20 to 120 parts of Ganoderma lucidum, 10 to 90 parts of American ginseng or ginseng, 3 to 60 parts of fermented Cordyceps powder and 3 to 90 parts of I or Cordyceps sinensis.
  • composition used in the use of the present invention may further comprise other water and/or alcohol extracts added to the following parts by weight or the following raw materials which do not impair the efficacy of the present invention: 5 to 90 parts of rose, ganoderma lucidum spore Any combination of one or more of 5 to 150 parts of powder, 1 to 90 parts of Ganoderma lucidum spore oil, 10 to 400 parts of Radix Pseudostellariae, 1 to 120 parts of ginseng leaves, 3 to 400 parts of Codonopsis pilosula, and 3 to 400 parts of Astragalus.
  • 10 to 60 parts of rose Preferably, 10 to 120 parts of ganoderma lucidum spore powder, 10 to 60 parts of ganoderma spore oil, 20 to 200 parts of ginseng, 20 to 90 parts of ginseng leaves, 20 to 200 parts of codonopsis, and 20 to 200 parts of astragalus Any combination of one or several of them.
  • composition used in the use of the present invention is preferably 5 to 200 parts of Ganoderma lucidum, 5 to 150 parts of American ginseng or ginseng, 1 to 90 parts of fermented Cordyceps powder, and 1 to 120 parts of Cordyceps sinensis, and 5 to 90 parts of rose.
  • the invention can also be used to replace ginseng leaves, Radix Pseudostellariae, Codonopsis pilosula, and Astragalus membranaceus for ginseng or ginseng.
  • Another aspect of the invention is to provide the above composition.
  • the ganoderma lucidum of the present invention is a dry fruiting body of the polyporaceae genus Ganoderma lucidum, Gnodern lucidu ⁇ Leyss. ex Fr. ) Karst. or Ganoderma sinense Zhao, Xu et Zhang, sexually sweet, flat, heart, lung, liver, kidney
  • the ginseng described in the present invention is a dried root and rhizome of Panax ginseng CA Mey., which can be various kinds of ginseng, such as garden ginseng and ginseng.
  • the ginseng leaf is dried leaf of Panax ginseng CA Mey.
  • the American ginseng described in the present invention is also known as American ginseng, American ginseng , ginseng, Guangdong ginseng, the dry root of Panax quinquefolium L., a genus of the genus Araliaceae, is sweet, slightly bitter, cool, heart-to-heart, lung, kidney, has the function of tonifying qi and nourishing yin, clearing heat and fluid;
  • the Cordyceps sinensis described in the present invention is a dry complex of the larvae of the larvae of the larvae of Cordyceps sinensis (Berk.) sace.
  • the fermented Cordyceps sinensis powder described in the present invention is a product obtained by fermentation culture of a strain isolated from the natural Cordyceps sinensis (Berk.) sace., and may be, for example, the following species: Paecilomyces hepialli Chen et Dai, sp. nov; Hirsutel la sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp. nov; erion fungus Cordyceps sinensis Chen sp.
  • the strain of the fermented Cordyceps sinensis powder of the present invention is preferably Paecilomyces batii or bat moth, or the genus Bacillus sphaeroides or the genus Pseudomonas or the genus Mycorrhizal fungus, the genus Cordyceps sinensis or the genus One or any combination.
  • the rose described in the present invention is a dry flower bud of a rose (v3 ⁇ 4 ri/Thumb) of a Rosaceae plant, or a rose red rose rugosacv. Plena; a sweet, sweet, slightly bitter, warm, most obvious effect It is to relieve qi, blood, pain, and mild medicinal properties.
  • Codonopsis pilosula is Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf., Codonopsis pilosula Nannf. var. modesta (Nannf.) L. T. Shen or Codonopsis tangshen Oliv.
  • the psyllids of the present invention is a dried root of the Pseudostellaria heterophylla (Miq.) Pax ex Pax et Hoffm.
  • Ginseng leaves are dried leaves of Pangas ginseng C. A. Mey.
  • the ganoderma lucidum nut powder according to the present invention is preferably a broken wall ganoderma lucidum nut powder.
  • the ganoderma lucidum spore powder of the present invention is a sexual germ cell of the ganoderma lucidum.
  • the ganoderma lucidum spore oil of the present invention is a lipid lipid substance extracted from the ganoderma spore powder.
  • the preparation method of the composition of the present invention comprises the direct mixing of the parts by weight of the raw materials, or the mixture of the raw materials after mixing, the water extraction and I or alcohol extraction to obtain a composition, or one or more of the raw materials.
  • the water extract and the I or alcohol extract are used as active ingredients to form the composition.
  • the alcohol of the present invention is methanol or ethanol; the methanol concentration is 5-95%, and the ethanol concentration is 5-95%.
  • the preparation process of the water and/or alcohol extract of the raw material of the traditional Chinese medicine composition of the present invention comprises the following steps -
  • the preparation process of the water and/or alcohol extract of the raw material of the traditional Chinese medicine composition of the present invention may also include the following steps:
  • the preparation process of the water and/or alcohol extract of the raw material of the traditional Chinese medicine composition of the present invention may further comprise the following steps: 1) Preparation of raw materials: Weigh the raw materials of Chinese herbal medicines;
  • step 2 Extracting and concentrating: After soaking the raw materials processed in step 1 with water, heating and boiling for several times, combining the extracts to filter, and concentrating the filtrate to an appropriate amount. The concentrated liquid is cooled and centrifuged at high speed for use;
  • the soaking time is 20 minutes - 60 minutes, and then heated and boiled 1 to 3 times, each time 1 to 2 hours, and the water addition amount is 6 to 13 times.
  • compositions of the present invention may be formulated into any dosage form by incorporating an acceptable additional agent or excipient in a health care product or drug or product.
  • the dosage form may be any one of a tablet, an oral solution, a granule, a capsule, a ointment, a pill, a pill, a powder, a lozenge, a flow extract, an infiltrating agent, an injection, and a syrup.
  • a pharmaceutical composition made of Ganoderma lucidum, ginseng or American ginseng, Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis and a system made of Ganoderma lucidum, rose, ginseng or American ginseng, Cordyceps powder and/or Cordyceps sinensis will be used.
  • the animal experiments and results of the pharmaceutical composition of the present invention demonstrate that the combination and composition of the present invention have the effects of preventing and treating allergic diseases, preventing allergic inflammation, preventing and treating allergic dermatitis, preventing and treating urticaria, and preventing and treating allergic asthma.
  • the same pharmacological effects can be achieved by adding any one or a combination of Ganoderma lucidum spore powder, Ganoderma lucidum spore oil, ginseng, Radix Pseudostellariae, Codonopsis pilosulae, and Astragalus membranaceus in the above composition.
  • the Cordyceps sinensis is placed in a bag, and the above five flavors are soaked in water for 1 hour, heated and boiled for 3 times, the first time is 2 hours, and after each hour, each time 10 times of water is added, and the extracts are combined for 3 times to filter, and the filtrate is concentrated to Appropriate amount, the concentrated liquid is cooled, centrifuged at high speed, concentrated under vacuum to form a paste or spray-dried into powder, added with common excipients for oral liquid, mixed evenly, and made into 20000 ml oral liquid according to the conventional oral process.
  • the composition was Composition 3 and was used in the following pharmacodynamic experiments.
  • the composition was Composition 5 and was used in the following pharmacodynamic experiments.
  • composition 1.0kg, rose 1.5kg, American ginseng, Ganoderma lucidum slice, Cordyceps sinensis after powdering And fermented Cordyceps powder in a bag, soaked in water for five minutes with five or four flavors, heated and boiled 3 times, the first time added 13 times the amount of water, boiling for 2 hours, then add 10 times each time, decoction extraction 1 After three hours, the extracts were combined and filtered, and the filtrate was concentrated to a clear paste and spray-dried to prepare a composite powder.
  • the composition was Composition 8, which was used in the following pharmacodynamic experiments.
  • Ginseng 500g fermented Cordyceps powder (Synensis sinensis Yin & Shen) 100g, Ganoderma lucidum 500g, rose 500g, ginseng, ganoderma lucidum slice, fermented Cordyceps powder, rose flower in the bag, the above four flavors soaked in water for 30min Heat and decoct for 3 times, first add 15 times the amount of water for 2 hours, then each time for 1 hour, add 10 times of water each time, combine 3 times to extract the filtrate, concentrate the filtrate to the appropriate amount, and concentrate the solution after cooling. High-speed centrifugation and impurity removal, adding common ingredients for oral liquid, mixing evenly, and making 20,000 ml oral liquid according to the conventional process of oral liquid.
  • Ginseng l 50 g fermented Cordyceps powder (Gliocladium roseum (link) Thom) 90g, Ganoderma lucidum 200 g , rose 90g, ginseng, ganoderma lucidum slice, fermented Cordyceps powder in the bag, the above four flavors with water soak 1 Hours, heating and boiling 2 times, the first 15 times the amount of water extraction for 2 hours, the second time adding water 10 times the amount of extraction 1. 5 hours, combined with 2 times the extract was filtered, the filtrate was concentrated to the appropriate amount, the concentrated solution was allowed to cool Rapid centrifugation and impurity removal, adding common ingredients for oral liquid, mixing evenly, According to the conventional process of oral liquid, 20,000 ml of oral liquid was prepared.
  • the three extracts were combined and filtered, and the filtrate was concentrated to an appropriate amount. After the concentrated liquid was allowed to cool, the mixture was centrifuged at high speed, and the auxiliary materials for oral liquid were added and mixed uniformly.
  • the oral liquid was prepared according to the conventional procedure of oral liquid.
  • ginseng 500g fermented Cordyceps powder (Paecilomyces sinensis Chen, Xiao et Shi, sp. nov ) 100g, Ganoderma lucidum 500g, rose 500g, broken ganoderma lucidum spore powder 500g, ginseng, ganoderma lucidum slice, fermented Cordyceps powder Sprinkle with Ganoderma lucidum spore powder in a bag, soak the above 5 flavors with water for 20 minutes, heat and decoct for 3 times, add 15 times the amount of water for the first time for 2 hours, then add 1 time for each hour, add 10 times of water each time, merge The extract is filtered for 3 times, and the filtrate is concentrated to an appropriate amount.
  • the concentrated solution is cooled and centrifuged at high speed, concentrated under reduced pressure into a paste or spray-dried into a powder, added with granules, and uniformly mixed, and granulated according to the conventional process of granules. Agent.
  • the concentrated liquid is cooled and centrifuged to remove impurities, and concentrated under reduced pressure into a mash or spray-dried into powder.
  • Ganoderma lucidum spore powder and common excipients for tablets are added, mixed evenly, and various tablets are prepared according to the conventional process of tablets.
  • fermented Cordyceps powder (Paecilomyces hepialli Chen et Dai, sp. nov) 50 g; fermented Cordyceps powder (Hisutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp.
  • the concentrated solution is cooled and centrifuged at high speed, concentrated under reduced pressure into a paste or spray-dried into a powder, added to the commonly used excipients of the pills, uniformly mixed, and various pills are prepared according to the conventional process of the pills. .
  • Example 34 Take American ginseng 100g, Ganoderma lucidum 200g, Cordyceps sinensis 30g, Rose 100g, Radix Sophora 200g, American ginseng, Ganoderma lucidum slice, Cordyceps sinensis powdered in a bag, the above 5 flavors soaked in water for 40min, heated and boiled 3 times, the first time added water 15 times The amount is extracted for 2 hours, and then extracted with water for 10 times each time for 1 hour, and the extracts are combined for 3 times to be filtered, and the filtrate is concentrated to an appropriate amount, and the common auxiliary materials for the paste are added, and the mixture is mixed, and the paste is prepared according to the conventional process of the paste.
  • composition 40 for the following pharmacodynamic experiments.
  • Example 44 Take American ginseng 300g, Ganoderma lucidum 400g, fermented Cordyceps powder (Chrysosporiutn sinens ZQ liang) 100g; Fermented Cordyceps powder (Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp.
  • ginseng 300g Ganoderma lucidum 400g, fermented Cordyceps fungus (Cephalosporium acremonium Corda, Icones Fungorum) 200g, rose 300g, Codonopsis 400g, American ginseng, Ganoderma lucidum, Codonopsis pilosula, Cordyceps powder in a bag, add 95%
  • the methanol is refluxed and extracted twice, each time for 1 hour, and then the extracts are combined, and methanol is recovered to obtain an alcohol extract; the dregs are further heated and boiled 3 times with water, the first time is 2 hours, and after each hour, each time water is added 10 Multiply, combine the alcohol extract and the water extract, filter, and concentrate the filtrate to an appropriate amount.
  • the concentrated liquid is cooled and centrifuged at high speed, concentrated under reduced pressure or spray-dried into powder, and added with granules as an auxiliary material.
  • the granules are prepared according to a conventional process of granules.
  • ginseng 300g Ganoderma lucidum 400g, fermented Cordyceps powder (Sporothrix insectorum de Hong & HC Evans) 200g, rose 300g, Codonopsis 400g, ginseng, ganoderma lucidum slice, Cordyceps sinensis, put it in a bag, add 95% ethanol reflux After extracting for 2 hours, ethanol is recovered to obtain an alcohol extract; the dregs are further heated and decocted 3 times with water for 2 hours, the alcohol extract and the water extract are combined, filtered, and the filtrate is concentrated to an appropriate amount, and the concentrated solution is cooled and centrifuged at high speed.
  • the common auxiliary materials for the oral liquid are added, and the mixture is uniformly mixed, and 200000 ml of the oral liquid is prepared according to the conventional process of the oral liquid.
  • ginseng 300g Ganoderma lucidum 400g, Cordyceps sinensis 67g, rose 300g, Ganoderma lucidum spore powder 300g, Astragalus 400g, ginseng, Ganoderma lucidum slice, Cordyceps sinensis, crushed, placed in a bag, added with 5% ethanol reflux for 2 hours, recovered ethanol to obtain alcohol extraction Liquid; the dregs are heated and boiled twice with water for 2 hours, combined with alcohol extract and water extract, filtered, filtered The liquid is concentrated to an appropriate amount, and the concentrated liquid is allowed to cool, and then centrifuged to remove impurities, and the auxiliary materials for oral liquid are added, uniformly mixed, and 200000 ml of oral liquid is prepared according to the conventional process of oral liquid.
  • Example 3 Composition 3 Anti-allergy and allergic dermatitis animal test report:
  • test drug is composition 3 compound powder (American ginseng, Ganoderma lucidum, fermented Cordyceps powder) provided by Jiangzhong Pharmaceutical Co., Ltd., lg compound powder dry powder is equivalent to 11.41g of total raw medicine, recommended per person per day
  • the intake is: 24g crude drug / 60kg body weight.
  • Ovalbumin Ovalbumin
  • sigma batch number: 025K0594
  • Evans Blue EB
  • EB Evans Blue
  • Histamine Phosphate Shanghai Bioreagent Factory, Batch Number 909035
  • 2, 4-Dinitrochlorobenzene chemically pure, produced by Guangzhou Chemical Reagent Factory; Batch No.: 0703428; Qiangsong, produced by Xianju Pharmaceutical Co., Ltd., batch number: 090678.
  • Animal grouping Animals were randomly grouped according to body weight, with 10 in each group. A model control group, composition 3 low, medium and high dose groups, and a positive drug control group (prednisone) were established.
  • the daily intake of rats was: low dose group, l.Og crude drug / kg body weight: medium dose group, 2.0 g crude drug / kg body weight; high dose group, 6.0 g crude drug / kg body weight, respectively equivalent to human daily photo 2.5, 5 and 15 times the input.
  • the sample was prepared in distilled water to prepare a gavage solution of the corresponding concentration ( 8.765 mg dry powder / mL, 17.53 mg dry powder / mL, 52.59 mg dry powder / mL).
  • Rat anti-ovin serum model establishment Anti-oval protein serum was taken and diluted with physiological saline to a concentration of 1 : 4 and 1:8. 50 SD rats were randomly divided into 5 groups, namely model control group, composition 3 low, medium and high dose groups, positive drug control group.
  • Prednisone 10 per group.
  • the model group was given distilled water, and the positive drug control group was intragastrically administered with 5 mg kg of prednisone.
  • the low, medium and high dose groups of the composition 3 were intragastrically administered with different concentrations of test solution, and the administration volume was 10 mL/kg, once a day, continuously. Dosing for 14 days. On the 15th day, the back was shaved and the diluted antiserum was used for intradermal injection. Two points per side, 0.1 mL per point. After 48 hours, each rat was injected with 1.0 mL of a mixture of 1% Evans blue and 1% ovalbumin physiological saline in the tail vein.
  • the rats were sacrificed, the back skin was inverted, the diameter of the blue reaction spot was measured, and the difference between the drug-administered group and the model group was compared.
  • Tissue specimens were fixed with neutral formaldehyde, dehydrated with gradient alcohol, embedded in paraffin, and tested for degranulation of tissue mast cells [ 31] .
  • composition 3 on delayed-type hypersensitivity of mouse auricle skin induced by 2,4-dinitrobenzene: 50 mice were randomly divided into 5 groups, namely model control group, composition 3 low, medium High-dose group, positive drug control group (prednisone), 10 in each group. The mice were sensitized with 5% 2, 4-nitrochlorophenylethanol solution on the abdominal skin of the mice (hair removal). Two days before sensitization, the model control group was given equal volume of distilled water, the positive drug control group was intragastrically administered with 5 mg/kg prednisone, and the composition group 3 was intragastrically administered with the corresponding test solution, and the administration volume was O.
  • composition 3 on local pruritus in mice induced by low molecular weight dextran: 50 mice were randomly divided into 5 groups, namely model control group, composition 3 low, medium and high dose groups, positive drug control group (strong Pine), 10 per group. The mice were intragastrically administered once a day for 10 consecutive days. After 30 minutes of the last administration, 0.0125% low molecular weight dextrose solution was injected into the tail vein of O.lgAOg.
  • mice The number of itchings occurred in each group of mice within 30 minutes after the injection of the low-molecular dextran solution in the tail vein (the forepaw licking the head, the hind paws flexing the trunk, and the mouth biting all parts of the body for signs of itchiness) was recorded.
  • composition 3 has a significant inhibitory effect on passive allergic reactions in rats.
  • Model control group 0.0 10 16.90 ⁇ 2.61 10.26 ⁇ 1.31 Positive control group 5.0mg 10 12.79 ⁇ 1.88 ** 7.43 ⁇ 1.22** Low dose group of test substance 1.2 10 15.20 ⁇ 1.44 9.44 ⁇ 1.20
  • composition 3 Effect of composition 3 on delayed-type hypersensitivity of mouse auricle skin induced by 2, 4-dinitrobenzene (the) group dose (g crude drug / kg) number of animals (only) ear swelling degree (mg) model control group 0.0 10 6.98 ⁇ 0.74
  • composition 3 Effect of composition 3 on local pruritus in mice induced by low molecular weight dextrose (i ⁇ s)
  • Model control group 0.0 10 29.30 soil 6.62 positive control group 5.0mg 10 18.30 ⁇ 4.62** low dose group of test drug 2.0 10 25.52 ⁇ 7.80
  • composition 3 has obvious inhibitory effect on passive allergic reaction induced by egg albumin; composition 3 has better inhibition of 2, 4-dinitrochlorobenzene-induced delayed alopecia in mice The effect of hypersensitivity reaction; Composition 3 has a significant effect on the increase of capillary permeability induced by histamine phosphate.
  • the above results suggest that the composition 3 has a good anti-allergic effect, and has a good prevention and treatment effect on allergic diseases such as atopic dermatitis and ricin.
  • Example 52 Composition obtained in Example 3 3 Experimental report on prevention and treatment of allergic rhinitis:
  • the test substance is a composition 3.
  • the composite powder (American ginseng, Ganoderma lucidum, fermented Cordyceps powder) is provided by Jiangzhong Pharmaceutical Co., Ltd., and the dry powder of lg compound powder is equivalent to 11.41g of total raw material.
  • the recommended daily intake of the test compound composition 3 compound powder is: 24g crude drug / 60kg body weight, from which the daily intake of the rat is calculated as: low dose group, l.Og Raw drug / kg body weight; medium dose group, 2.0g crude drug / kg body weight; high dose group, 6.0g crude drug / kg body weight, which is equivalent to 2.5, 5 and 15 times of daily intake.
  • the amount of gastric juice is calculated as 1.0 ml/100 g body weight.
  • the blank control group and the allergic inflammation model group were given an equal volume of normal saline, and the rhinitis group was given 410 mg / kg. After the successful modeling, the stomach was started, and the stomach was administered once a day for 21 consecutive days.
  • OVA OJmg was used as antigen [ 1] , 30 mg of aluminum hydroxide powder was used as adjuvant, and 1 ml of physiological saline was added as a suspension, intraperitoneal injection, once every other day for 7 times. After completion, each side of the nasal cavity was locally immunized with 5% OVA ⁇ , once a day for 7 times. The blank control group was treated with the same volume of normal saline. During the application of the test drug, the nose was still dripped at 1% ⁇ 50 ⁇ 1 once every other day.
  • Evaluation criteria for modeling results According to the score method, 30 minutes after the challenge, the number of sneezing, the degree of nasal itching and the amount of nasal secretions were recorded. The scoring criteria are shown in Table 1.
  • a total score of 5 points means that the model is successful, and then the nose is maintained until the end of the treatment experiment.
  • Test indicators Blood cAMP, cGMP content determination and nasal mucosal tissue mast cell count.
  • Nasal mucosal mast cell count The skin of the upper metatarsal bone is removed, the upper frontal bone is freed from the skull, and the nasal midline is opened, the nasal septum and the bilateral nasal cavity are exposed, and the middle segment of the nasal septum is cut and fixed. After 10 hours of 10% formic acid solution, decalcification solution was decalcified for 3 days, dehydrated, transparent, paraffin embedded, routinely sliced 4 ⁇ , stained with toluidine blue, and observed under microscope, the total number of sample mast cells was measured. .
  • Evaluation criteria for modeling results The scores were evaluated by scoring. After 30 minutes of excitation, the number of sneezing, the degree of nasal itching and the amount of nasal secretions were recorded. The scoring criteria are shown in Table 1. 2.2.4 Test indicators: behavioral observation, nasal secretion eosinophil count, serum total IgE and blood histamine determination, nasal mucosal thickness determination.
  • TDI TDI was inspired by nasal drops and scored according to the criteria in Table 1.
  • Eosinophils (EOS) count Take smear of guinea pig nasal secretions, according to Loren's method [ 21 improvement, visible EOS in 40x electron microscope field, count 3 ⁇ 5 high power fields in this part The number of eosinophils within the lamina intestinal, to reflect the extent of eosinophil infiltration.
  • 2.2.4.4 Determination of nasal membrane thickness: Take the material and slice with the experiment 2.1.4.2, HE staining, quantitatively observe the thickness of the nasal mucosa under the image analyzer, with the mucosal ridges of the pseudo-stratified ciliated columnar epithelium covered by each specimen.
  • the septal cartilage (including the epithelial layer and the lamina propria) serves as the mucosal thickness.
  • composition 3 the effect of egg albumin induced allergic rhinitis in rats
  • Model control group 10 10.96 ⁇ 3.82** 14.31 ⁇ 4.57** 13.82 ⁇ 4.67**
  • Rhinitis group 10 17.30 ⁇ 3.51 9.51 ⁇ 2.32 ⁇ 5.78 ⁇ 2.18'
  • Blank control group 10 2.29 ⁇ 0.48 0.132 ⁇ 0.025
  • Model control group 10 3.16 ⁇ 0.89** 0.172 ⁇ 0.032**
  • Rhinitis group 10 0.41 2.14 ⁇ 0.54 ⁇ 0.128 ⁇ 0.025 ⁇
  • Test drug dose group 10 6.0 2.39 ⁇ 0.38 ⁇ 0.136 ⁇ 0.021 ⁇
  • EOS eosinophils
  • Test substance tincture group 6.0 10 9.54 ⁇ 2.76 ⁇ 0.207 ⁇ 0.072 ⁇
  • composition 3 is mainly as follows: 1 can significantly improve the nasal symptom scores of rats, reduce the serum cAMP content of rats with allergic rhinitis, and reduce the cGMP content. 2 reduce the number of rat nasal mucosa mast cells, reduce its local invasion of inflammation. 3 can reduce the guinea pig nasal symptom score. 4 reduce the number of eosinophils in the nasal secretions of guinea pigs and the infiltration of eosinophils in the local inflammation. 5 can significantly reduce the blood histamine concentration in guinea pigs and reduce inflammatory mediators. 6 Reduce the swelling of the nasal mucosa of the mole rats. According to the results of the experimental study, the composition 3 was considered to have an anti-allergic rhinitis effect.
  • Example 53 Composition 3 obtained in Example 3 for prevention and treatment of allergic asthma animal test report - 1. Materials and methods
  • the test substance is a composition 3.
  • the composite powder (American ginseng, Ganoderma lucidum, fermented Cordyceps powder) is provided by Jiangzhong Pharmaceutical Co., Ltd., and the dry powder of lg compound powder is equivalent to 11.41g of total raw material.
  • OVA ovalbumin
  • sigma batch number: 025K0594
  • acetylcholine chloride Shanghai Jingchun Reagent Co., Ltd., batch number: 21205
  • histamine phosphate Shanghai Jingchun Reagent Co., Ltd., batch number: 22270
  • Mi Song Zhengzhou Zhuofeng Pharmaceutical Factory, batch number 0904413; IL-4 and IFN-Y ELISA kit, Great Wall Bio.
  • Rats were divided into two groups, namely: 10 blank control groups and 70 model rats. Rats after successful modeling were randomly divided into model control group, positive drug group (dexamethasone group), and composition 3 low, medium and sputum dose groups, with 10 rats in each group.
  • Allergic asthma animal model rat 2.1.2 addition to the control group, the other animals on day 1 containing OVA 10mg, Al (OH) 3 powder 200mg, 609 inactivated pertussis vaccine saline mixed th The suspension was sensitized by intraperitoneal injection of ImL, and the sensitization was repeated once on the 8th day. On the 15th day, each group of animals except the blank control group was ultrasonically atomized with 1% OVA for excitation, about 20 min/time, 8-9 hr every morning. get on. The rats developed an asthma-like episode for 3 weeks. When nebulizing, the rats showed irritability, sneezing, incontinence, scratching ears, purpura and other symptoms, indicating that the asthma model was successfully replicated.
  • the recommended daily intake of the test compound composition 3 compound powder is: 24g crude drug / 60kg body weight, from which the daily intake of the rat is calculated as: low dose group, l.Og crude drug / Kg body weight; medium dose group, 2.0 g crude drug / kg body weight; sputum dose group, 6.0 g crude drug / kg body weight, respectively equivalent to 2.5, 5 and 15 times the daily intake of human.
  • the sample was prepared in distilled water to prepare a gavage solution of the corresponding concentration (8.76 mg dry powder/ml, 17.52 mg dry powder/ml, 52.56 mg dry powder/ml), and the gavage amount was calculated as 1.0 ml/100 g body weight.
  • the model control group was given the same volume of 0.9% normal saline 30 min before the challenge, and the positive drug group was given dexamethasone 0.5 mg kg 30 min before each challenge [21 .
  • Each of the low, medium and high dose groups of Composition 3 was administered with each dose of the test agent 30 minutes before each challenge.
  • the blank control group was intraperitoneally injected, nebulized and intragastrically administered with the same volume of 0.9% physiological saline at the same time. Each stomach was given 1 time for 21 consecutive days.
  • Rat thoracic binding ZH-100 breathing transducer (adjusting tension about 1 ⁇ 2g, so that the respiratory wave amplitude is l ⁇ 2mv), connecting the transducer to MD3000 biosignal
  • the collection and analysis system is carried out.
  • the animal is placed in a closed glass bell jar with an ultrasonic nebulizer.
  • the ultrasonic spray is sprayed with 1% OVA for 20 minutes, and the rat's asthma is continuously recorded within 30 minutes after the start of the spray. Breathing wave.
  • EOS content in lung tissue The left lung tissue was cut out, fixed in 4% paraformaldehyde for 4 ⁇ 5h, washed with water, dehydrated with gradient alcohol, dipped in wax, and embedded. Serial sectioning was performed by HE staining to observe changes in tissue inflammation and counting EOS infiltration. Each slice was randomly selected from the same observer at high magnification (O400) to select 10 fields, and the number of bronchial and perivascular EOS infiltration was calculated, and the average value was taken as the representative value of the piece.
  • O400 high magnification
  • the model of the high-dose group of the test sample was 74.07 ⁇ 17.56** 112.87 ⁇ 21.78 ⁇
  • the agent is subject to exposure
  • the content was significantly increased (P ⁇ 0.01): Compared with the model group, the total IgE content in the serum and BALF of the dexamethasone group and the high-dose group were significantly lower (P ⁇ 0.01 ⁇ P ⁇ 0.05). ), suggesting that dexamethasone and the test drug can inhibit the allergic inflammatory reaction in the lungs of guinea pigs and improve the symptoms of asthma.
  • composition 3 can significantly improve the asthmatic symptoms of the model group and prolong the gestational latency of guinea pigs; it can reduce the serum IL>4 content and IFN- ⁇ content in asthmatic rats, and correct the imbalanced IFN_Y/IL. -4 ratio; reduce the number of eosinophils in lung tissue of rats and guinea pigs, improve the infiltration of eosinophils in inflammation; reduce guinea pig serum and The total IgE content in BALF improves the symptoms of pulmonary inflammation. Composition 3 is therefore considered to have an anti-allergic asthma effect.
  • Example 54 Composition 4 obtained in Example 4 Anti-allergic and allergic dermatitis animal test report - 1. Materials and methods
  • the test drug is composition 4 compound powder (Ganoderma lucidum, American ginseng, Cordyceps sinensis). It is provided by Jiangzhong Pharmaceutical Co., Ltd., lg compound powder dry powder is equivalent to 10.97g of total raw medicine, and the recommended daily intake per person is : 24g crude drug / 60kg body weight.
  • Animal grouping Animals were randomly grouped according to body weight, with 10 in each group. A model control group, composition 4 low, medium and high dose groups, and a positive drug control group (prednisone) were established.
  • Test composition 4 The recommended daily intake per person is: 24g crude drug / 60kg body weight. From this, the daily intake of the mice was estimated as: low dose group, 2.0 g crude drug / kg body weight; medium dose group, 4.0 g crude drug / kg body weight; high dose group, 12.0 g crude drug kg body weight, respectively equivalent to human 5, 10 and 30 times the daily intake.
  • the sample was prepared in distilled water to prepare a gavage solution of the corresponding concentration (18.23 mg dry powder / mL, 36.46 mg dry powder / mL, 109.38 mg powder / mL).
  • the daily intake of rats was: low dose group, l.Og crude drug / kg body weight; middle dose group, 2.0g crude drug kg body weight; sputum dose group, 6.0g raw drug kg body weight, respectively equivalent to human daily intake 2.5, 5 and 15 times.
  • low dose group low dose group
  • middle dose group 2.0g crude drug kg body weight
  • sputum dose group 6.0g raw drug kg body weight
  • Anti-OVA serum was taken and diluted to a concentration of 1:4 and 1:8 with physiological saline.
  • Fifty rats were randomly divided into 5 groups, namely model control group, composition 4 low, medium and high dose groups, and positive drug control group (prednisone), 10 rats in each group.
  • the model group was given distilled water, and the positive drug control group was intragastrically administered with 5 mg/kg prednisone.
  • the low, medium and high dose groups of the composition 4 were intragastrically administered with different concentrations of test solution, and the drug volume was 10 mL/kg, once a day. Continuous administration for 14 days.
  • each rat was injected with 1.0 mL of a mixture of 1% Evans blue and 1% ovalbumin physiological saline in the tail vein. 30 min arterial blood was collected, serum was separated, and histamine content was determined according to the method [ 21] . The rats were sacrificed, the back skin was inverted, the diameter of the blue reaction spot was measured, and the difference between the drug-administered group and the model group was compared.
  • the model control group was given equal volume of distilled water, the positive drug control group was intragastrically administered with 5 mg/kg prednisone, and the composition group 4 was intragastrically administered with the corresponding test solution, and the administration volume was O. lmL/lOg body weight, once a day for 10 consecutive days; the right ear was coated with 1% 2, 4-dinitrochlorobenzene on the 7th day after sensitization, and the mice were sacrificed 24 hours later, along the auricle baseline The lower two ears, the same part of the disc was cut with a diameter of 8 mm, and the balance of the electronic analytical balance was accurately weighed. The difference between the left and right ear weights was used as the delayed type hypersensitivity reaction value.
  • composition 4 on local pruritus in mice induced by low molecular weight dextran [5] : The mice were randomly divided into 5 groups, namely model control group, composition 4 low, medium and high dose groups, positive drug control group (strong Pine), 10 per group. The mice were intragastrically administered once a day for 10 consecutive days. After 30 minutes of the last administration, 0.0125% of a low molecular weight dextrose solution was injected into 0.1 g of 10 g of the tail vein.
  • mice The number of itchings occurred in the mice within 30 minutes after the injection of the low-molecular dextran solution in the tail vein (the forepaw licking the head, the hind paws flexing the trunk, and the mouth biting all parts of the body were indicative of itching) was observed.
  • composition 4 has a significant inhibitory effect on passive allergic reactions in rats.
  • composition 4 Effect of composition 4 on local pruritus in mice induced by low molecular weight dextrose
  • composition 4 has obvious inhibitory effect on passive allergic reaction induced by egg albumin in rats; composition 4 has better inhibition of delayed alopecia of mouse auricle caused by 2, 4-dinitrochlorobenzene The effect of hypersensitivity reaction; Composition 4 has a significant effect on the increase of capillary permeability induced by histamine phosphate.
  • the above results suggest that the composition 4 has a good anti-allergic effect and has a good preventive effect on allergic diseases such as atopic dermatitis and urticaria.
  • Example 55 Composition obtained in Example 4 4 Experimental report on prevention and treatment of allergic rhinitis:
  • the test substance is a composition 4 Compound powder (American ginseng, Ganoderma lucidum, Cordyceps sinensis) is provided by Jiangzhong Pharmaceutical Co., Ltd., and the dry powder of lg compound powder is equivalent to 10.97g of total raw medicine.
  • the recommended daily intake of the test compound composition 4 compound powder is: 24g crude drug / 60kg body weight, from which the daily intake of the rat is calculated as: low dose group, l.Og Raw drug / kg body weight; medium dose group, 2.0g crude drug / kg body weight; sputum dose group, 6.0g crude drug / kg body weight, respectively equivalent to 2.5, 5 and 15 times the daily intake of human.
  • the amount of gastric juice is calculated as 1.0 ml/100 g body weight.
  • the blank control group and the allergic rhinitis model group were given an equal volume of normal saline, and the rhinitis group was given 410 mg / kg. After the successful modeling, the stomach was started, and the stomach was administered once a day for 21 consecutive days.
  • composition 4 The effect of egg protein-induced allergic rhinitis in rats
  • composition 4 Effects on rat nasal mask mast cells: The experimental results are shown in Table 3. The number of nasal mucosal mast cells in the model control group was significantly increased, and there was a significant difference (P ⁇ 0.01). Compared with the model group, the number of nasal mucosa mast cells in the rhinitis group and the test drug group were significantly decreased, and the difference was significant (P ⁇ 0.01). Table 3 Effect of composition 4 on serum cAMP, cGMP content and nasal mucosal mast cells in rats (X ⁇ S)
  • Blank control group 10 20.05 ⁇ 4.97 9.80 ⁇ 2.66 1.70 ⁇ 1.39
  • Model control group 10 10.30 ⁇ 3.88** 14.85 ⁇ 4.86* 14.29 ⁇ 4.73**
  • the drug dose group 2.0 10 15.85 ⁇ 5.24 ⁇ 10.60 ⁇ 2.82' i 7.77 ⁇ 3.21 ⁇
  • Model control group 10 3.15 ⁇ 0.90** 0.162 ⁇ 0.034**
  • Rhinitis group 10 0.41 2.13 ⁇ 0.47 ⁇ 0.122 ⁇ 0.024 ⁇
  • Dosage group 10 2.0 2.32 ⁇ 0.42 ⁇ 0.128 ⁇ 0.025 ⁇
  • Test drug dose group 10 6.0 2.12 ⁇ 0.38 ⁇ 0.120 ⁇ 0.010 ⁇
  • EOS eosinophils
  • Model control group - 10 18.67 ⁇ 4.18** 0.285 ⁇ 0.072**
  • Rhinitis group 0.41 10 9.29 ⁇ 3.80 ⁇ 0.198 ⁇ 0.049 ⁇
  • composition 4 is mainly as follows: 1 It can significantly improve the score of axillary symptoms in rats, reduce the serum cAMP content and decrease the cGMP content in rats with allergic rhinitis. 2 reduce the number of rat nasal mucosa mast cells, reduce its local invasion of inflammation. 3 can reduce the guinea pig nasal symptom score. 4 reduce the number of eosinophils in the nasal secretions of guinea pigs and the infiltration of eosinophils in the local inflammation. 5 can significantly reduce the blood histamine concentration in guinea pigs and reduce inflammatory mediators. 6 Reduce the swelling of the nasal mucosa of guinea pig animals. According to the experimental results, the composition 4 was considered to have an anti-allergic rhinitis effect.
  • Example 56 Composition 4 obtained in Example 4: Experimental report on prevention and treatment of allergic asthma animals:
  • the test substance is a composition 4.
  • the composite powder (American ginseng, Ganoderma lucidum, Cordyceps sinensis) is provided by Jiangzhong Pharmaceutical Co., Ltd., and the dry powder of lg compound powder is equivalent to 10.97g of total raw medicine.
  • Rats were divided into two groups, namely: 10 blank control groups and 70 model rats. Rats after successful modeling were randomly divided into model control group, positive drug group (dexamethasone group), and composition 4 low, medium and high dose groups, with 10 rats in each group.
  • the recommended daily intake of the test compound composition 4 compound powder is: 24g crude drug/60kg body weight, from which the daily intake of the rat is calculated as: low dose group, l.Og crude drug / Kg body weight; medium dose group, 2.0 g crude drug / kg body weight; sputum dose group, 6.0 g crude drug / kg body weight, respectively equivalent to 2.5, 5 and 15 times the daily intake of human.
  • the sample was prepared in distilled water to prepare a corresponding concentration (9.12 mg dry powder / ml, 18.23 mg dry powder / ml, 54.69 mg dry powder / ml) of the gavage solution, and the gavage amount was calculated according to 1.0 ml / lOOg body weight.
  • the model control group was given the same volume of 0.9% normal saline 30 min before the challenge, and the positive drug group was given dexamethasone 0.5 mg kg ⁇ 2 ⁇ 30 min before each challenge.
  • Each of the low, medium and high dose groups of Composition 4 was administered with each dose of the test agent 30 minutes before each challenge.
  • the blank control group was intraperitoneally injected, nebulized and intragastrically administered with the same volume of 0.9% physiological saline at the same time. Gavage once a day for 21 consecutive days.
  • the model drug is a white drug.
  • the positive control group and the test drug the sputum dose group
  • the asthmatic incubation period of the rats was prolonged by illumination (? ⁇ 0.05 or ⁇ 0.01).
  • Pairwise low high middle note Compare with blank group. ** ⁇ 0.01: Compared with the model group, ⁇ ⁇ 0.01.
  • Tip Composition 4 has a significant improvement in asthma symptoms in guinea pigs. Table 4 Effect of composition 4 on the incubation period of guinea pigs (X ⁇ S)
  • composition 4 can significantly improve the asthma symptoms in the model group and prolong the latency of the mice. It can reduce the serum IL-4 content and increase the IFN- ⁇ content in asthmatic rats, and correct the imbalanced IFN. - Y / IL-4 ratio; reduce the number of eosinophils in the lung tissue of rats and guinea pigs, improve the infiltration of eosinophils in the inflammation; reduce the total IgE content in guinea pig serum and BALF, and improve the symptoms of pulmonary inflammation. Composition 4 is therefore considered to have an anti-allergic asthma effect.
  • Example 57 Composition 5 obtained in Example 5: Anti-allergy and allergic dermatitis animal test report:
  • the test drug is composition 5 compound powder (American ginseng, Ganoderma lucidum, Cordyceps powder, Cordyceps sinensis) provided by Jiangzhong Pharmaceutical Co., Ltd., lg compound powder dry powder is equivalent to 12.39g of total raw medicine, recommended per person per day
  • the intake is: 24g crude drug / 60kg body weight.
  • Animal grouping Animals were randomly grouped according to body weight, with 10 in each group. A model control group, composition 5 low, medium and high dose groups, and a positive drug control group (prednisone) were established.
  • mice were estimated as: low dose group, 2.0 g crude drug weight; medium dose group, 4.0 g crude drug weight; high dose group, 12.0 g crude drug / kg body weight, equivalent to human daily 5, 10 and 30 times the intake.
  • the sample was prepared in distilled water to prepare a gavage solution of the corresponding concentration (16.14 mg dry powder / mL, 32.28 mg dry powder / mL, %. 84 mg thousand powder / mL).
  • the daily intake of rats was: low dose group, l.Og crude drug / kg body weight; medium dose group, 2.0g crude drug / kg body weight: high dose group, 6.0g crude drug weight, equivalent to human daily intake
  • the amount is 2.5, 5 and 15 times.
  • the sample was prepared in distilled water to prepare a gavage solution of the corresponding concentration (8.08 mg dry powder / mL, 16.14 mg dry powder / mL, 48.42 mg dry powder / mL).
  • each rat was injected with 1.0 mL of a mixture of 1% Evans blue and 1% ovalbumin physiological saline in the tail vein. 30 min arterial blood was collected, serum was separated, and histamine content was determined according to Method 121. The rats were sacrificed, the back skin was inverted, the diameter of the blue reaction spot was measured, and the difference between the drug-administered group and the model group was compared. It was fixed by neutral formaldehyde, dehydrated by gradient alcohol, embedded in paraffin, and detected by degranulation of tissue mast cells [3I .
  • mice were randomly divided into 5 groups, namely model control group, composition 5 low, medium , sputum dose group, positive drug control group (prednisone), 10 in each group. 5% 2, 4-nitrochlorobenzene ethanol solution was applied to the abdomen skin of the mice (hair removal) sensitization.
  • the model control group was given equal volume of distilled water, the positive drug control group was intragastrically administered with 5 mg/kg prednisone, and the composition group 5 was intragastrically administered with the corresponding test solution, and the administration volume was 0.1 mL.
  • mice were sacrificed and cut along the auricle baseline. Both ears, the same part of the disc was cut with a diameter of 8 mm, and the balance of the electronic analytical balance was accurately weighed. The difference between the weight of the left and right ears was used as the delayed type hypersensitivity.
  • composition 5 on local pruritus in mice induced by low molecular weight dextrose [ 5 ]: Mice were randomly divided into 5 groups, namely model control group, composition 5 low, medium and high dose groups, positive drug control Group (prednisone), 10 in each group. The mice were intragastrically administered once a day for 10 consecutive days. After 30 minutes of the last administration, 0.0125% of a low molecular weight dextrose Sf solution was injected into the tail vein at 0.1 g/10 g.
  • mice The number of itching occurred in the mice within 30 minutes after the injection of the low-molecular dextran solution in the tail vein (the forepaw licking the head, the hind paws flexing the trunk, and the mouth biting all parts of the body for signs of itchiness) was observed.
  • Rats were randomly divided into 5 groups, namely model control group, composition 5 low, medium and high dose groups, positive drug control group (prednisone). , 10 in each group.
  • the model control group was given distilled water, the positive control group was intragastrically administered with 5 mg/kg prednisone, and the composition 5 low, medium and sputum dose groups were intragastrically administered with different concentrations of test solution, the drug volume was 10 mL/kg, once a day. , continuous administration for 10 days.
  • the rats were intradermally injected with 1 mg mL of histamine phosphate O.lmL/head, and immediately injected with 1% Evans blue aqueous solution 1 ml J, 20 minutes later.
  • the animals were sacrificed by cervical dislocation, the skin of the blue spot was cut, cut, and immersed in 5 mL of B. sylvestris physiological saline solution (7:3) for 48 hours. The supernatant was centrifuged, and the absorbance was measured at a wavelength of 610 nm.
  • the test results are shown in Table 1, 2 .
  • the low dose of the composition 5 decreased by 1:4, 1:8 decreased the diameter of the blue spot of the serum sensitized rat, decreased the number of degranulation of mast cells and decreased the serum histamine content, but no significant sexual differences;
  • Prednisone control group and composition 5 sputum dose group significantly reduced 1:4, 1:8 anti-o-protein serum sensitized rat blue spot diameter, reduced mast cell degranulation number and decreased serum group
  • the composition 5 has a significant inhibitory effect on passive allergic reactions in rats.
  • Table 2 Composition 5 Effect on mast cell degranulation and serum histamine content in PCA rats ( ⁇ s) Dose (g raw drug number of animals Histamine fluorescence value group Degranulation number
  • composition 5 on local pruritus in mice induced by low molecular weight dextrose (i ⁇ s) group dose (g crude drug kg) number of animals (only) number of itching (30min)
  • composition 5 significantly inhibited the passive allergic reaction induced by egg albumin in rats; Composition 5 had better inhibition of 2, 4-dinitrochlorobenzene-induced delayed alopecia in mice The effect of the sensitizing reaction; Composition 5 has a significant effect on the increase in capillary permeability of rat induced by histamine phosphate. The above results suggest that the composition 5 has a good anti-allergic effect and has a good preventive effect on allergic diseases such as atopic dermatitis and urticaria.
  • Example 58 Composition of Example 5 5 5 Experimental report on prevention and treatment of allergic rhinitis:
  • the test substance is composition 5 compound powder (American ginseng, Ganoderma lucidum, Cordyceps powder, Cordyceps sinensis) by Jiang Chinese medicine Provided by the company, lg compound powder dry powder is equivalent to 12.39g of total raw medicine.
  • Rats were randomly divided into two groups, namely: 10 blank control groups and 70 model rats. Rats after successful modeling were randomly divided into model control group, positive drug group (Nayankang group), and composition 5 high, medium and low dose groups, with 10 rats in each group.
  • the recommended daily intake of the test compound composition 5 compound powder is: 24g crude drug / 60kg body weight, from which the daily intake of the rat is calculated as: low dose group, l.Og Raw drug / kg body weight; middle dose group, 2,0g crude drug weight; high dose group, 6.0g crude drug weight, equivalent to 2.5, 5 and 15 times the daily intake of human.
  • the blank control group and the allergic rhinitis model group were given an equal volume of normal saline, and the rhinitis group was given 410 mg / kg.
  • the amount of gastric juice is calculated as 1.0 ml/100 g body weight. After the successful modeling, the stomach was started, and the stomach was administered once a day for 21 consecutive days.
  • Rhinitis group 10 0.41 6.58 ⁇ 1.21 ** 3.21 ⁇ 0.97 ⁇ 3.68 ⁇ lW 2.95 ⁇ 1.02
  • Low dose group 10 1.0 6.75 ⁇ 1.18** 5.82 ⁇ 0.87 5.89 ⁇ 1.42 5.63 ⁇ 1.08
  • Medium dose group 10 2.0 6.54 ⁇ 1.29** 5.40 ⁇ 1.24 ⁇ 5.31 ⁇ 1.45 ⁇ 4.57 ⁇ 1.43 ⁇
  • Model control group 10 10.27 ⁇ 3.85** 14.83 ⁇ 4.88** 14.33 ⁇ 4.75**
  • Blank control group 10 2.13 ⁇ 0.34 0.125 ⁇ 0.021
  • Model control group 10 3.17 ⁇ 0. 88** 0.160 ⁇ 0.033**
  • Rhinitis group 10 0.41 2.15 ⁇ 0.46 ⁇ 0.121 ⁇ 0.025 ⁇
  • EOS eosinophils
  • Blank control group - 10 2.68 ⁇ 1.36 0.157 ⁇ 0.050
  • Model control group - 10 18.64 ⁇ 4.14** 0.283 ⁇ 0.071 **
  • Rhinitis group 0.41 10 9.27 ⁇ 3.75 ⁇ 0.19 ⁇ 0.047 ⁇
  • composition 5 is mainly as follows: 1 It can significantly improve the nasal symptom score of rats in the model, reduce the serum cAMP content and reduce the cGMP content in rats with allergic rhinitis. 2 reduce the number of mast cells in the nasal mucosa of rats, and reduce their infiltration in the local inflammation. 3 can reduce the guinea pig nasal symptom score. 4 Reduce the number of eosinophils in the nasal secretions of guinea pigs and the infiltration of eosinophils in the inflammation. 5 can significantly reduce blood histamine concentration in guinea pigs and reduce inflammatory mediators. 6 Reduce the swelling of the nasal mucosa of guinea pig animals. According to the results of the experimental study, the composition 5 was considered to have an antiallergic rhinitis effect.
  • Example 59 Composition obtained in Example 5 5 5 Experimental report on prevention and treatment of allergic asthma animals:
  • the test substance is a composition.
  • 5 Composite powder (American ginseng, Ganoderma lucidum, Cordyceps powder, Cordyceps sinensis) is provided by Jiangzhong Pharmaceutical Co., Ltd., and lg compound powder dry powder is equivalent to 12.39g of total raw medicine.
  • Rats were divided into two groups, namely: 10 blank control groups and 70 model rats. Rats after successful modeling were randomly divided into model control group, positive drug group (dexamethasone group), and composition 5 low, medium and high dose groups, with 10 rats in each group.
  • the recommended daily intake of the test compound composition 5 compound powder is: 24g crude drug / 60kg body weight, from which the daily intake of the rat is calculated as: low dose group, l.Og Raw drug / kg body weight; middle dose group, 2.0g crude drug / kg body weight: high dose group, 6.0g raw drug kg body weight, which is equivalent to 2.5, 5 and 15 times of human daily intake.
  • the sample was prepared in distilled water to prepare a gavage solution of the corresponding concentration (8.07 mg dry powder/ml, 16.14 mg powder/m 48.43 mg dry powder/ml), and the gavage amount was calculated as 1.0 ml/100 g body weight.
  • the model control group was given the same volume of 0.9% normal saline 30 min before the challenge, and the positive drug group was given dexamethasone 0.5 mg/kg 30 min before each challenge [ 21] .
  • Each of the low, medium and high doses of Composition 5 was administered with each dose of the test agent 30 minutes before each challenge.
  • the blank control group was intraperitoneally injected, nebulized and intragastrically administered with the same volume of 0.9% physiological saline at the same time. Gavage once a day for 21 consecutive days.
  • the prescription drug is a white mold test, and **P ⁇ 0.01 ; compared with the model group, ⁇ ⁇ 0.05 ⁇ ⁇ 0.01
  • Phototherapy agent 10 2.01 ⁇ 0.85 3.60 ⁇ 0.81, ** ⁇ ⁇ 0.01;
  • Type drug medicine white 1.0 10 5. 13 ⁇ 2.17 4.18 ⁇ 1.59 ⁇ ,
  • composition 5 can significantly improve the symptoms of asthma model rats and guinea pigs prolonged latent period of asthma; can reduce the asthmatic rats and serum IFN- ⁇ content Gao L, correcting the imbalance of IFN- Y IL-4 Ratio; reduce the number of eosinophils in lung tissue of rats and moles, improve the infiltration of eosinophils in inflammation; reduce the total IgE content in guinea pig serum and BALF, and improve the symptoms of pulmonary inflammation.
  • Composition 5 is therefore considered to have an anti-allergic asthma effect.
  • Example 60 Composition 6 obtained in Example 6
  • test drug is composition 6 compound powder (American ginseng, Ganoderma lucidum, fermented Cordyceps powder, rose) provided by Jiangzhong Pharmaceutical Co., Ltd., lg compound powder dry powder is equivalent to 12.56g of total raw medicine, per person per The recommended daily intake is: 24g crude drug / 60kg body weight.
  • Animal grouping Animals were randomly grouped according to body weight, with 10 in each group. A model control group was established, composition 6 low, medium and high dose groups, and positive drug control group (prednisone).
  • the recommended daily intake per person is: 24g crude drug / 60kg body weight. From this, the daily intake of the mice was estimated as: low dose group, 2.0 g crude drug / kg body weight; medium dose group, 4.0 g crude drug / kg body weight; high dose group, 12.0 g crude drug kg body weight, respectively equivalent to human 5, 10 and 30 times the daily intake.
  • the sample was prepared into distilled liquid with a concentration of U5.925 mg dry powder / mL, 31.85 mg dry powder / mL, 95.55 mg dry powder / mL).
  • the daily intake of rats was: low dose group, l.Og crude drug / kg body weight; middle dose group, 2.0 g crude drug / kg body weight; sputum dose group, 6.0 g crude drug kg body weight, respectively equivalent to human daily intake
  • the amount is 2.5, 5 and 15 times.
  • the sample was prepared in distilled water to prepare a gavage solution of the corresponding concentration (7.96 mg dry powder / mL, 15.92 mg dry powder / mL, 47.76 mg dry powder / mL).
  • Anti-OVA serum was taken and diluted with physiological saline to a concentration of 1:4, 1:8.
  • Fifty rats were randomly divided into 5 groups, namely model control group, composition 6 low, medium and high dose groups, and positive drug control group (prednisone), 10 rats in each group.
  • the model group was given distilled water, and the positive drug control group was intragastrically administered with 5 mg/kg prednisone.
  • the low, medium and high dose groups of the composition 6 were intragastrically administered with different concentrations of test solution, and the drug volume was 10 mL/kg, once a day. Continuous administration for 14 days.
  • the back was shaved and the diluted antiserum was used for intradermal injection. Two points per side, 0.1 mL per point.
  • the rats were intravenously injected with 10% mixture of 1% Evans blue and 1% ovalbumin physiological saline. 30 min arterial blood was collected, serum was separated, and histamine content was determined according to the method [ 21] .
  • the rats were sacrificed, the back skin was inverted, the diameter of the blue reaction spot was measured, and the difference between the drug-administered group and the model group was compared. Specimens were fixed with neutral formaldehyde, dehydrated with gradient alcohol, embedded in paraffin, and tested for degranulation of tissue mast cells.
  • mice were randomly divided into 5 groups, namely model control group, composition 6 low, medium High-dose group, positive drug control group (prednisone), 10 in each group.
  • mice 5% 2, 4-nitrochlorobenzene ethanol solution was applied to the abdomen skin of the mice (hair removal) sensitization.
  • the model control group was given equal volume of distilled water, the positive drug control group was intragastrically administered with 5 mg kg of prednisone, and the composition group 6 was intragastrically administered with the corresponding test solution, and the administration volume was 0.1 mL/ 10 g body weight, once a day for 10 consecutive days; on the 7th day after sensitization, the right ear was coated with 1% 2,4 ⁇ dinitrochlorobenzene, and the mice were sacrificed 24 hours later, and two were cut along the auricle baseline. Ears, the same part of the disc was cut with a diameter of 8 mm, and the balance of the electronic analytical balance was accurately weighed. The difference between the left and right ear weights was used as the delayed type hypersensitivity.
  • mice were randomly divided into 5 groups, namely model control group, composition 6 low, medium and sputum dose groups, positive drug control group (prednisone). , 10 per group. The mice were intragastrically administered once a day for 10 consecutive days. After 30 minutes of the last administration, 0.0125% of a low molecular weight dextran solution was injected into 0.1 g of 10 g of the tail vein.
  • mice Observing the itching of the mice in each group within 30 minutes after the injection of the low molecular weight dextrose solution in the tail vein (the forepaw licking the head, The number of times the hind paw flexes the trunk and the mouth bites all parts of the body for the rash itching.
  • Rats were randomly divided into 5 groups, namely model control group, composition 6 low, medium and high dose groups, and positive drug control group (prednisone). 10 per group.
  • the model control group was given distilled water, and the positive drug control group was intragastrically administered with 5 mg/kg prednisone.
  • the low, medium and high dose groups of composition 6 were intragastrically administered with different concentrations of test solution, and the administration volume was 10 ml J kg once a day. Continuous administration for 10 days. One hour after the last administration, intradermal injection of 1 mg mL of histamine phosphate 0.
  • composition 6 has a significant inhibitory effect on passive allergic reactions in rats.
  • the medium dose group of the test drug is 2.4 10 43.26 ⁇ 11.42* 2.84 ⁇ 0.80*
  • the high dose group of the test drug was 7.2 ⁇ 33.60 ⁇ 10.67** 2.21 ⁇ 0.67** compared with the model control group, *P ⁇ 0.05, **P ⁇ 0.01 o
  • composition 6 Effect of composition 6 on local pruritus in mice induced by low molecular weight dextran (the)
  • T dose (g crude drug / kg) ⁇ ⁇ number of animals (only) OD3 ⁇ 4 model control group 0.0 10 1.037 soil 0.108 positive control group 5.0mg 10 0.773 ⁇ 0.109** test drug low dose group 1.2 10 0.96 ⁇ 0.136
  • the medium dose group of the test drug was 2.4 10 0.924 ⁇ 0.121 *
  • the high dose group of the test drug was 7.2 10 0.860 ⁇ 0.090** compared with the model control group, *P ⁇ 0.05, **P ⁇ 0.01.
  • composition 6 has obvious inhibitory effect on passive allergic reaction induced by egg albumin in rats; composition 6 has better inhibition of delayed alopecia of mouse auricle caused by 2, 4-dinitrochlorobenzene The effect of hypersensitivity reaction; Composition 6 has a significant effect on the increase of capillary permeability induced by histamine phosphate.
  • the above results suggest that the composition 6 has a good anti-allergic effect and has a good preventive effect on allergic diseases such as atopic dermatitis and ricin.
  • Example 61 Composition obtained in Example 6 6 6 Experimental report on prevention and treatment of allergic rhinitis:
  • the test substance is a composition.
  • 6 Composite powder (American ginseng, Ganoderma lucidum, fermented Cordyceps powder, rose) is provided by Jiangzhong Pharmaceutical Co., Ltd., and lg compound powder dry powder is equivalent to 12.56g of total raw material.
  • Rats were randomly divided into two groups, namely: 10 blank control groups and 70 model rats. The rats after successful modeling were randomly divided into model control group, positive drug group (Nayankang group), and composition 6 high, medium and low dose groups, with 10 rats in each group.
  • the recommended daily intake of the test compound composition 6 compound powder is: 24g crude drug / 60kg body weight, from which the daily intake of the rat is calculated as: low dose group, l.Og Raw drug / kg body weight; medium dose group, 2.0g crude drug kg body weight; sputum dose group, 6.0g crude drug / kg body weight, respectively equivalent to 2.5, 5 and 15 times the daily intake of human.
  • the blank control group and the allergic rhinitis model group were given an equal volume of normal saline, and the rhinitis group was given 410 mg / kg.
  • the amount of gastric juice is calculated as 1.0 ml/100 g body weight. After the successful modeling, the stomach was started, and the stomach was administered once a day for 21 consecutive days.
  • Model control group 10 10.27 ⁇ 3.85** 14.83 ⁇ 4.88** 14.33 ⁇ 4.75**
  • the drug dose group 2.0 10 15.86 ⁇ 5.23 ⁇ 10.58 ⁇ 2.84 ⁇ 7.7 ⁇ 3,18 ⁇
  • composition 6 Effect of composition 6 on histamine and serum total IgE in guinea pig blood (soil S) group number of animals dose (g crude drug / kg) histamine fluorescence value (mg L) IgE (IU mL-l)
  • Model control group 10 3.14 ⁇ 0.91 ** 0.163 ⁇ 0.037**
  • EOS eosinophils
  • Model control group - 10 18.66 ⁇ 4.17** 0.286 ⁇ 0.071**
  • Rhinitis group 0.41 10 10.30 ⁇ 3.81 ⁇ 0.199 ⁇ 0.048 ⁇
  • Dosing group of the test drug 2.0 10 12.41 ⁇ 3.54 ⁇ 0.195 ⁇ 0.068 ⁇
  • composition 6 mainly showed the following aspects: 1 It can significantly improve the nasal symptom scores of rats in the model, reduce the serum cAMP content and reduce the cGMP content in rats with allergic rhinitis. 2 reduce the number of mast cells in the nasal mucosa of rats, and reduce their infiltration in the local inflammation. 3 can reduce the guinea pig nasal symptom score. 4 Reduce the number of eosinophils in the nasal secretions of guinea pigs and the infiltration of eosinophils in the inflammation. 5 can significantly reduce blood histamine concentration in guinea pigs and reduce inflammatory mediators. 6 Reduce the swelling of the nasal mucosa of guinea pig animals. According to the experimental results, the composition 6 was considered to have an anti-allergic rhinitis effect.
  • Example 62 Composition of Example 6 6 Experimental report on prevention and treatment of allergic asthma animals;
  • the test substance is a composition.
  • 6 Composite powder (American ginseng, Ganoderma lucidum, fermented Cordyceps powder, rose) is provided by Jiangzhong Pharmaceutical Co., Ltd., and the dry powder of lg compound powder is equivalent to 12.56g of total raw material.
  • Rats were divided into two groups, namely, 10 blank control groups and 70 model rats. Rats after successful modeling were randomly divided into model control group, positive drug group (dexamethasone group), and composition 6 low, medium and high dose groups, with 10 rats in each group.
  • the recommended daily intake of the test compound composition 6 compound powder is: 24g crude drug / 60kg body weight, from which the daily intake of the rat is calculated as: low dose group, l.Og Raw drug / kg body weight; medium dose group, 2.0g crude drug / kg body weight; sputum dose group, 6.0g crude drug / kg body weight, respectively equivalent to 2.5, 5 and 15 times the daily intake of human.
  • the sample was prepared in distilled water to prepare the corresponding concentration (7.96 mg dry powder/ml, 15.92 mg dry powder/ml, 47.77 mg dry powder/ml) for the gavage, and the gavage amount was calculated according to 1.0 ml/100 g body weight.
  • composition 6 low, medium and high dose groups were given prior to each shot, respectively 30min Each dose was tested.
  • the blank control group was intraperitoneally injected, nebulized and intragastrically administered with the same volume of 0.9% normal saline at the same time.
  • the stomach was administered once a day for 21 consecutive days.
  • the high-dose group of the test sample was tested by the model empty test 10 _6 78.58 ⁇ 17.14** 112.30 ⁇ 25.8647 ⁇ -type drug drug white
  • the amount of IFN- ⁇ in the model group was significantly lower (PO.01), while the serum IL-4 level was significantly higher (P ⁇ 0.01), suggesting asthma.
  • the illuminating agent is subject to 0 76.17 ⁇ 10.81 ** 77.01 ⁇ 10.95**

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Abstract

一种组合物在制备防治过敏性疾病的保健品或药品中的用途。所述组合物由含有下述重量份的原料制成：灵芝5-200份、西洋参或人参5-150份、发酵虫草菌粉1-90份和/或冬虫夏草1-120份，或者由上述原料的水和/或醇提取物作活性成分组成的组合物。所述过敏性疾病包括过敏性鼻炎、过敏性皮炎、荨麻疹、过敏性哮喘。

Description

一种组合物在制备防治过敏性疾病的保健品或药品中的用途 技术领域
本发明涉及一种防治过敏性疾病的组合物及其制备方法。
背景技术
公开号为 CN1509760A的专利申请文件公开了一种预防和辅助治疗癌症的药物， 是以发 酵虫草菌粉、 灵芝、 枸杞子为原料制成， 能提高机体免疫力， 对内分泌有调节作用，对清除体 内有害自由基及预防肿瘤复发等均有一定的作用； 公开号为 CN102228252A的专利申请文件 公开了一种具有缓解体力疲劳的中药组合物，含有西洋参和 /或人参 5〜150重量份、灵芝 5〜 160重量份、 发酵虫草菌粉 1〜90重量份； 公开号为 CN102000129A本发明公开了一种具有 增强免疫力作用的药物组合物， 包括虫草多糖或者发酵虫草菌粉， 灵芝， 西洋参。 目前没有 由灵芝、 西洋参或人参、 冬虫夏草和 /或发酵虫草菌粉组成或制成的组合物具有防治过敏性 疾病的报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种防治过敏性疾病的组合物及其制备方法。
本发明选择原料灵芝、 西洋参或人参、 冬虫夏草和 /或发酵虫草菌粉进行组合， 意外地 发现该组合物或者该组合物制成的产品具有防治过敏性疾病作用。
本发明提供了含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的组合物或者由含 有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的原料制成的组合物或者由灵芝、西洋 参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草制成的组合物在制备防治过敏性疾病的保健品或药品 或产品中的用途。
提供了含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的组合物或者由含有灵芝、 西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的原料制成的组合物或者由灵芝、西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草制成的组合物加入玫瑰花、 灵芝孢子粉、 灵芝孢子油、 太子参、 人参叶、 党参、 黄芪中的一种或几种任意成份组成的组合物在制备防治过敏性疾病的保健品 或药品或产品中的用途。
本发明还提供了含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的组合 物或者由含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的原料制成的组合 物或者由灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花制成的组合物在制备防 治过敏性疾病的保健品或药品或产品中的用途。
提供了含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的组合物或者由 含有灵芝、 西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的原料制成的组合物或者由 灵芝、 西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、 玫瑰花制成的组合物加入灵芝抱子粉、 灵芝孢子油、 太子参、 人参叶、 党参、 黄芪中的一种或几种任意成份组成的组合物在制备防 治过敏性疾病的保健品或药品或产品中的用途。
本发明还提供了含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的组合物或者由 含有灵芝、西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的原料制成的组合物或者由灵芝、 西 洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草制成的组合物在制备防治过敏性鼻炎的保健品或药 品或产品中的用途。
提供了含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的组合物或者由含有灵芝、 西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的原料制成的组合物或者由灵芝、西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草制成的组合物加入玫瑰花、 灵芝孢子粉、 灵芝抱子油、 太子参、 人参叶、 党参、 黄芪中的一种或几种任意成份组成的组合物在制备防治过敏性鼻炎的保健品 或药品或产品中的用途。
提供了含有灵芝、西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的组合物或者由 含有灵芝、西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的原料制成的组合物或者由 灵芝、西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花制成的组合物在制备防治过敏性 鼻炎的保健品或药品或产品中的用途。
提供了含有灵芝、 西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的组合物或者由 含有灵芝、 西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的原料制成的组合物或者由 灵芝、 西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、 玫瑰花制成的组合物加入灵芝孢子粉、 灵芝孢子油、 太子参、 人参叶、 党参、 黄芪中的一种或几种任意成份组成的组合物在制备防 治过敏性鼻炎的保健品或药品或产品中的用途。
本发明还提供了含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的组合物或者由 含有灵芝、 西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的原料制成的组合物或者由灵芝、西 洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草制成的组合物在制备防治过敏性皮炎的保健品或药 品或产品中的用途。
提供了含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的组合物或者由含有灵芝、 西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的原料制成的组合物或者由灵芝、西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草制成的组合物加入玫瑰花、 灵芝抱子粉、 灵芝孢子油、 太子参、 人参叶、 党参、 黄芪中的一种或几种任意成份组成的组合物在制备防治过敏性皮炎的保健品 或药品或产品中的用途。
提供了含有灵芝、 西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的组合物或者由 含有灵芝、西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的原料制成的组合物或者由 灵芝、西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花制成的组合物在制备防治过敏性 皮炎的保健品或药品或产品中的用途。
提供了含有灵芝、 西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的组合物或者由 含有灵芝、 西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的原料制成的组合物或者由 灵芝、 西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、 玫瑰花制成的组合物加入灵芝孢子粉、 灵芝孢子油、 太子参、 人参叶、 党参、 黄芪中的一种或几种任意成份组成的组合物在制备防 治过敏性皮炎的保健品或药品或产品中的用途。
本发明还提供了含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的组合物或者由 含有灵芝、 西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的原料制成的组合物或者由灵芝、 西 洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草制成的组合物在制备防治荨麻疹的保健品或药品或 产品中的用途。
提供了含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的组合物或者由含有灵芝、 西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的原料制成的组合物或者由灵芝、西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草制成的组合物加入玫瑰花、 灵芝孢子粉、 灵芝孢子油、 太子参、 人参叶、 党参、 黄芪中的一种或几种任意成份组成的组合物在制备防治荨麻瘆的保健品或药 品或产品中的用途。
提供了含有灵芝、 西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的组合物或者由 含有灵芝、 西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的原料制成的组合物或者由 灵芝、西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花制成的组合物在制备防治荨麻疹 的保健品或药品或产品中的用途。
提供了含有灵芝、 西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的组合物或者由 含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的原料制成的组合物或者由 灵芝、 西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、 玫瑰花制成的组合物加入灵芝孢子粉、 灵芝孢子油、 太子参、 人参叶、 党参、 黄芪中的一种或几种任意成份组成的组合物在制备防 治荨麻疹的保健品或药品或产品中的用途。
本发明还提供了含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的组合物或者由 含有灵芝、西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的原料制成的组合物或者由灵芝、西 洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草制成的组合物在制备防治过敏性哮喘的保健品或药 品或产品中的用途。
提供了含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的组合物或者由含有灵芝、 西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草的原料制成的组合物或者由灵芝、西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草制成的组合物加入玫瑰花、 灵芝孢子粉、 灵芝孢子油、 太子参、 人参叶、 党参、 黄芪中的一种或几种任意成份组成的组合物在制备防治过敏性哮喘的保健品 或药品或产品中的用途。
提供了含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的组合物或者由 含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的原料制成的组合物或者由 灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花制成的组合物在制备防治过敏性 哮喘的保健品或药品或产品中的用途。
提供了含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的组合物或者由 含有灵芝、西洋参或人参、发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、玫瑰花的原料制成的组合物或者由 灵芝、 西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草、 玫瑰花制成的组合物加入灵芝孢子粉、 灵芝孢子油、 太子参、 人参叶、 党参、 黄芪中的一种或几种任意成份组成的组合物在制备防 治过敏性哮喘的保健品或药品或产品中的用途。
上述所述 "保健品或药品或产品"中所指 "产品"包括没有包括在保健品或药品中的其 它产品， 包括使用所述本发明组合物的任何物品,例如精油、 熏香制品、 抱枕等。
优选地， 本发明上述用途中使用的防治过敏性疾病的组合物由下述重量份的原料制成： 灵芝 5~200份、 西洋参或人参 5〜150份、 发酵虫草菌粉 1〜90份和 /或冬虫夏草 1〜120 份。
优选灵芝 20〜120份、西洋参或人参 10〜90份、发酵虫草菌粉 3〜60份和 I或冬虫夏草 3-90份。
更优选灵芝 40份、 西洋参或人参 30份、 发酵虫草菌粉 20份和 /或冬虫夏草 6.7份。 本发明所述用途中使用的组合物中还可以进一步包含添加其他不减弱本发明功效的下述 重量份的原料或者下列原料的水和 /或醇提物： 玫瑰花 5〜90份、 灵芝孢子粉 5~ 150份、 灵 芝孢子油 1〜90份、太子参 10〜400份、人参叶 1〜120份、党参 3〜400份、黄芪 3〜400份 中的一种或几种的任意组合。
优选玫瑰花 10~60份、灵芝孢子粉 10〜120份、灵芝孢子油 10〜60份、太子参 20〜200 份、 人参叶 20〜90份、 党参 20〜200份、 黄芪 20〜200份中的一种或几种的任意组合。
更优选玫瑰花 30份、 灵芝、 孢子粉 30份、 灵芝孢子油 20份、 太子参 40份、 人参叶 30 份、 党参 40份、 黄芪 40份中的一种或几种的任意组合。
本发明所述用途中使用的组合物优选灵芝 5〜200份、 西洋参或人参 5〜150份、 发酵虫 草菌粉 1〜90份和 /或冬虫夏草 1〜120份、 玫瑰花 5〜90份。
更优选灵芝 20〜120份、西洋参或人参 10~90份、发酵虫草菌粉 3〜60份和 I或冬虫夏 草 3~90份、 玫瑰花 10〜60份。
更优选灵芝 40份、 西洋参或人参 30份、 发酵虫草菌粉 20份和 /或冬虫夏草 6.7份、玫 瑰花 30份。
本发明还可以选用人参叶、 太子参、 党参、 黄芪替代西洋参或人参。
本发明的另一方面是提供上述组合物。
本发明的灵芝， 为多孔菌科灵真菌赤芝 Ganodern lucidu {Leyss. ex Fr. ) Karst.或紫 芝 Ganoderma sinense Zhao, Xu et Zhang的干燥子实体， 性味甘、 平， 归心、 肺、 肝、 肾 经， 具有滋补强壮、 宁心安神的功能； 本发明中所述的人参为五加科植物人参 Panax ginseng C. A. Mey.的干燥根和根茎， 可以是各种种类的参， 如园参、 山参、 生晒参、 生晒山参、 白 糖参、 红参； 所述的人参叶为五加科植物人参 Panax ginseng C. A. Mey.的干燥叶； 本发明 中所述的西洋参又名美国参、 花旗参、 洋参、 广东参， 系五加科植物西技洋参 Panax quinquefoliumL. 的干燥根， 性味甘、 微苦， 凉， 归心、 肺、 肾经， 具有补气养阴， 清热生 津的功能； 本发明中所述的冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草菌 Cordyceps sinensis (Berk. ) sace. 寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体。
本发明中所述的发酵虫草菌粉是从天然冬虫夏草 Cordyceps sinensis (Berk. ) sace.中分 离出来的菌种经发酵培养的产物,可以是如以下菌种:蝙蝠蛾拟青霉 Paecilomyces hepialli Chen et Dai, sp. nov; 中华被毛孢 Hirsutel la sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp. nov; 麦 角菌科真菌冬虫夏草头孢 Cephalosporium sinensis Chen sp. nov； 蝙蝠蛾被孢酶 Mortiscrslla hepial id C. T. & Β· l iu; 中国拟青霉 Paecilomyces sinensis Chen, Xiao et Shi, sp. nov; 中国弯颈霉 Tolypocladium sinensis C. Ian Li ; 中国头孢§ Cephalosporium sinens Chen sp. nov; 蝙蝠娥柱霉 Scytal idium hepial i i C. L. Li ; 中国金抱霉 Chrysosporium sinens Z. Q. liang； 中国轮枝抱 Vertici l lium sinens amg sp. nov； 顶孢头孢霉 Cephalosporium acremonium Corda, Icones Fungorum;中华束丝抱 Synnematium sinensis Yin & Shen; 虫花棒束抱 Isaria farinose (Holmsk. ) Fr. Systema Mycologicum; 金龟子绿僵菌 Metarhizium anisopl iae (Metsch) Sorokin; 蝙蝠蛾被毛孢 Hirsutella hepialid Chen et Shen ; 虫草簇孢 Sporothrix insectorum de Hong & H. C. Evans ; 粉红胶霉 Gliocladium roseum (link) Thorn; 孢霉属真菌 Mortierella SP中的一种或任意组合。 本发明发酵虫草菌粉所属的菌种优选蝙蝠蛾拟青霉或蝙蝠蛾被毛孢或中华束丝孢或粉 红胶霉或抱霉属真菌或麦角菌科真菌冬虫夏草头抱或中华被毛孢中的一种或任意组合。
本发明中所述的玫瑰花是蔷薇科植物玫瑰（v¾ ri/ Thumb)的干燥花蕾， 也可以是 重瓣红玫瑰 Rose rugosacv. Plena; 味辛、 甘、 微苦、 性温， 最明显的功效就是行气解郁， 和血， 止痛， 药性温和。
党参为梧梗科植物党参 Codonopsis pilosula(Franch. ) Nannf. , 素花党参 Codonopsis pilosula Nannf. var. modesta(Nannf. ) L. T. Shen或川党参 Codonopsis tangshen Oliv.的干 燥根。
本发明所述的太子参为石竹科植物孩儿参 Pseudostellaria heterophylla (Miq. ) Pax ex Pax et Hoffm.的干燥块根。
人参叶为五加科植物人参 Panar ginseng C. A. Mey.的干燥叶。
黄 为豆科植物蒙古黄 Astragalus membranaceus (Fi sch) Bge. var. mongholicus (Bge) Hsiao或膜荚黄 Astragalus membranaceus (Fisch) Bge.的干燥根。
本发明所述的灵芝抱子粉优选破壁灵芝抱子粉。
本发明的灵芝孢子粉是灵芝的有性生殖细胞一一担孢子粉。
本发明的灵芝孢子油是从灵芝孢子粉中萃取出的油脂脂质物质。
本发明所述组合物的制备方法包括所述重量份的原料直接混合， 或者所述重量份的原料 混合后水提和 I或醇提得到组合物， 或者所述原料中的一种或几种水提和 I或醇提提取物作 活性成份组成所述组合物。
本发明所述的醇是甲醇或乙醇； 甲醇浓度 5— 95%, 乙醇浓度为 5— 95%。
本发明所述中药组合物的原料的水和 /或醇提取物的制备工艺， 包括以下步骤-
1) 称取中药材原料；
2) 用醇或水对上述药材回流提取， 得到提取液做活性成份， 加入附加剂， 制成各种剂 型。
本发明所述中药组合物的原料的水和 /或醇提取物的制备工艺， 也可以包括以下步骤：
1 )称取中药材原料， 将原料药材加甲醇或乙醇进行提取， 提取液回收甲醉或乙醇， 得到 提取物 I；
2)将上述药渣挥干醇后， 加水进行提取， 得到提取物 Π ;
3)合并提取物 I和提取物 II， 过滤， 滤液浓缩至适量， 加入药学上常用辅料， 采用药剂 学上常规工艺制成所需制剂。
本发明所述中药组合物的原料的水和 /或醇提取物的制备工艺， 还可以包括以下步骤： 1) 原料准备： 称取中药材原料；
2) 提取浓缩： 将步骤 1中处理好的原料加水浸泡后， 加热煎煮多次， 合并提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后高速离心除杂， 备用；
3) 制备制剂： 将步骤 2中所得的浓缩液单独或加入医学上可接受的辅料， 采用药剂学 上常规工艺制成所需制剂；
上述步骤 2) 中浸泡时间为 20分钟- 60分钟， 后加热煎煮 1〜3次， 每次 1〜2小时， 加水量 6〜13倍。
本发明组合物可以加入保健品或药品或产品中可接受的附加剂或赋形剂制备成任意剂 型。
该剂型可以是片剂、 口服液、 颗粒剂、 胶囊剂、 煎膏剂、 滴丸剂、 丸剂、 散剂、 锭剂、 流浸膏剂、 浸育剂、 注射剂、 糖浆剂中的任意一种。
为了更好地理解本发明， 下面将用由灵芝、 人参或西洋参、 虫草菌粉和 /或冬虫夏草制 成的药物组合物以及由灵芝、 玫瑰花、 人参或西洋参、 虫草菌粉和 /或冬虫夏草制成的药物 组合物的动物实验及结果来说明本发明组合以及组合物具有防治过敏性疾病、 防治过敏性募 炎、 防治过敏性皮炎、 防治荨麻疹、 防治过敏性哮喘的作用。
同样地上述组合物中加入灵芝孢子粉、 灵芝孢子油、 人参、 太子参、 党参、 黄芪等任一 种或几种任意组合均能达到有同样的药理作用。 具体实施方式
实施例 1
取西洋参 300g、灵芝 400g、冬虫夏草 67g、发酵虫草菌粉（蝙蝠蛾拟青霉 Paecilomyces hepialli Chen et Dai, sp. nov ) 200g、 玫瑰花 300g， 西洋参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉置 于布袋中， 冬虫夏草打粉后置于布袋中， 以上五味加水浸泡 1小时， 加热煎煮 3次， 第一次 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩 液放冷后高速离心除杂， 减压浓缩成膏或喷雾干燥成粉， 加入口服液常用辅料， 混合均匀， 按口服常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 2
取西洋参 300g、 灵芝 400g、 发酵虫草菌粉 （中华被毛孢 Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp. nov) 200g、 玫瑰花 300g, 西洋参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉置于 布袋中， 以上四味加水浸泡 20min, 加热煎煮 3次， 每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3 次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓縮液放冷后髙速离心除杂， 加入口服液常用辅料， 混合 均匀， 按口服液常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 3
灵芝 2kg、 西洋参 1.5kg、 发酵虫草菌粉 lkg, 西洋参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉置于布 袋中， 以上 3味加水浸泡 30min, 加热煎煮 3次， 第一次加 13倍量水， 煎煮 2小时， 以后每 次加水 10倍量， 煎煮提取 1小时， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩成清膏， 喷雾干燥制成复 合粉。 该组合物是组合物 3， 用于下面的药效实验。
实施例 4
灵芝 4kg、 西洋参 3kg、 冬虫夏草 0.67kg， 西洋参、 灵芝切片， 冬虫夏草打粉后置于布袋 子中， 以上 3味加水浸泡 30rain, 加热煎煮 3次， 第一次加 13倍量水， 煎煮 2小时， 以后每 次加水 10倍量， 煎煮提取 1小时， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩成清膏， 喷雾干燥制成复 合粉。 该组合物是组合物 4， 用于下面的药效实验。
实施例 5
灵芝 4kg、 西洋参 3kg、 冬虫夏草 0.67kg、 发酵虫草菌粉 2kg， 西洋参、 灵芝切片， 冬虫 夏草打粉后置于布袋子中， 发酵虫草菌粉置于布袋子中， 以上 4味加水浸泡 30min， 加热煎 煮 3次， 第一次加 13倍量水， 煎煮 2小时， 以后每次加水 10倍量， 煎煮提取 1小时， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩成清膏， 喷雾干燥制成复合粉。 该组合物是组合物 5, 用于下面的 药效实验。
实施例 6
取西洋参 1.5kg、 灵芝 2.0kg、 发酵虫草菌粉 （中华被毛孢 Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp. nov ) 1.0kg, 玫瑰花 1.5kg， 西洋参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉置 于布袋中， 以上四味加水浸泡 30min， 加热煎煮 3次， 第一次加 13倍量水， 煎煮 2小时， 以 后每次加水 10倍量， 煎煮提取 1小时， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩成清膏， 喷雾干燥制 成复合粉。 该组合物是组合物 6， 用于下面的药理效果实验。
实施例 7
取西洋参 1.5kg、 灵芝 2.0kg、 冬虫夏草 0.33kg、 玫瑰花 1.5kg, 西洋参、 灵芝切片， 冬虫 夏草打粉置于布袋中， 以上四味加水浸泡 30min， 加热煎煮 3次， 第一次加 13倍量水， 煎煮 2小时， 以后每次加水 10倍量， 煎煮提取 1小时， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩成清膏， 喷雾干燥制成复合粉。 该组合物是组合物 7， 用于下面的药理效果实验。
实施例 8
取灵芝 2.0kg、西洋参 1.5kg、冬虫夏草 0.33kg、发酵虫草菌粉 (蝙蝠蛾拟青霉 Paecilomyces hepialli Chen et Dai, sp. nov) 1.0kg, 玫瑰花 1.5kg, 西洋参、 灵芝切片， 冬虫夏草打粉后 和发酵虫草菌粉置于布袋中， 以五四味加水浸泡 30min,加热煎煮 3次，第一次加 13倍量水， 煎煮 2小时， 以后每次加水 10倍量， 煎煮提取 1小时， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩成清 膏， 喷雾干燥制成复合粉。 该组合物是组合物 8, 用于下面的药效实验。
实施例 9
西洋参 150g、 发酵虫草菌粉 （蝙蝠蛾被毛孢 Hirsutella hepialid Chen et Shen) 90g、 冬虫夏草 120g、 灵芝 200g、 玫瑰花 90g， 西洋参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉置于布袋中， 以 上四味加水浸泡 1小时，加热煎煮 3次，第一次 2小时， 以后每次 1小时，每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后高速离心除杂， 加入口服液常用辅料， 混合均匀， 按口服液常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 10
人参 500g、 发酵虫草菌粉 (中华束丝孢 Synnematium sinensis Yin & Shen) 100g、 灵 芝 500g、 玫瑰花 500g, 人参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉、 玫瑰花置于布袋中， 以上四味加水 浸泡 30min, 加热煎煮 3次， 第一次加 15倍量水煎煮 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10 倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后高速离心除杂， 加入口服液常 用辅料， 混合均匀， 按口服液常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 11
西洋参 500g、 发酵虫草菌粉 （中华被毛孢 Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp. nov) 100g、 灵芝 500g、 玫瑰花 500g, 西洋参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉、 玫瑰花 置于布袋中， 以上四味加水浸泡 20min, 加热煎煮 3次， 第一次 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓縮液放冷后高速离心除杂， 加 入口服液常用辅料， 混合均匀， 按口服液常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 12
西洋参 150g、 冬虫夏草 120g、 灵芝 200g、 玫瑰花 90g, 西洋参、 灵芝切片， 冬虫夏草打 粉后置于布袋中， 以上四味加水浸泡 40min, 加热煎煮 3次， 第一次 2小时， 以后每次 1小 时，每次加水 10倍量，合并 3次提取液过滤，滤液浓縮至适量，浓缩液放冷后髙速离心除杂， 加入口服液常用辅料， 混合均匀， 按口服液常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 13
人参 l50g、发酵虫草菌粉（粉红胶霉 Gliocladium roseum(link) Thom ) 90g、灵芝 200g、 玫瑰花 90g， 人参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉置于布袋中， 以上四味加水浸泡 1小时， 加热 煎煮 2次， 第一次 15倍量水提取 2小时， 第二次加水 10倍量提取 1. 5小时， 合并 2次提取 液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后髙速离心除杂， 加入口服液常用辅料， 混合均匀， 按口服液常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 14
西洋参 150g、 发酵虫草菌粉 （蝙蝠蛾被毛孢 Hirsutella hepial id Chen et Shen) 90g、 冬虫夏草 120g、 灵芝 200g、 玫瑰花 90g， 西洋参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉置于布袋中， 以 上四味加水浸泡 1小时，加热煎煮 3次，第一次 2小时， 以后每次 1小时，每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后髙速离心除杂， 加入口服液常用辅料， 混合均匀， 按口服液常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 15
西洋参 100g、 冬虫夏草 30g、 灵芝 200g、 玫瑰花 100g, 西洋参、 灵芝切片， 冬虫夏草打 粉后置于布袋中， 以上四味加水浸泡 30min， 加热煎煮 3次， 第一次 2小时， 以后每次 1小 时，每次加水 10倍量，合并 3次提取液过滤，滤液浓縮至适量，浓缩液放冷后高速离心除杂， 加入口服液常用辅料， 混合均匀， 按口服液常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 16
西洋参 150g、 发酵虫草菌粉 （中华被毛孢 Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp. nov ) 30g、 灵芝 200g、 玫瑰花 lOOg, 西洋参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉置于布袋 中， 以上四味加水浸泡 1小时， 加热煎煮 3次， 第一次 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓縮至适量， 浓缩液放冷后髙速离心除杂， 加入口服液 常用辅料， 混合均匀， 按口服液常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 17
西洋参 90g、 冬虫夏草 90g、 灵芝 120g、 玫瑰花 60g, 西洋参、 灵芝切片， 冬虫夏草打粉 后置于布袋中， 以上四味加水浸泡 20min, 加热煎煮 3次， 每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓縮至适量， 浓縮液放冷后髙速离心除杂， 加入口服液常用辅料， 混合均匀， 按口服液常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 18
人参 90g、 冬虫夏草 90g、 灵芝 120g、 玫瑰花 60g， 人参、 灵芝切片， 冬虫夏草打粉后置 于布袋中， 以上四味加水浸泡 30min， 加热煎煮 3次， 每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3 次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓縮液放冷后高速离心除杂， 加入口服液常用辅料， 混 合均匀， 按口服液常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 19
西洋参 90g、发酵虫草菌粉（麦角菌科真菌冬虫夏草头孢 C印 halosporium sinensis Chen sp. nov ) 60g、 灵芝 120g、 玫瑰花 60g, 西洋参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉置于布袋中， 以 上四味加水浸泡 20min， 加热煎煮 3次， 每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过 滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后高速离心除杂， 加入口服液常用辅料， 混合均匀， 按口 服液常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 20
取西洋参 300g、 灵芝 400g、 冬虫夏草 67g、 玫瑰花 300g， 西洋参、 灵芝切片， 冬虫夏草 打粉后置于布袋中， 以上四味加水浸泡 1小时， 加热煎煮 3次， 第一次 2小时， 以后每次 1 小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后髙速离心除 杂， 减压浓縮成青或喷雾干燥成粉， 加入片剂常用辅料， 混合均匀， 按片剂常规工艺制成各 种片剂。
实施例 21
取西洋参 300g、灵芝 400g、发酵虫草菌粉（蝙蝠蛾拟青霉 Paecilorayces hepialli Chen et Dai, sp. nov ) 200g、 玫瑰花 300g, 西洋参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉置于布袋中， 以上 四味加水浸泡 20min, 加热煎煮 3次， 每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后髙速离心除杂， 加入口服液常用辅料， 混合均匀， 按口服液 常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 22
取西洋参 500g、 冬虫夏草 100g、 灵芝 500g、 玫瑰花 500g、 破壁灵芝孢子粉 500g, 西洋 参、 灵芝切片， 冬虫夏草打粉后置于布袋中， 以上四味加水浸泡 20min, 加热煎煮 3次， 第 —次加 15倍量水提取 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓縮至适量， 浓缩液放冷后高速离心除杂， 减压浓缩成裔或喷雾干燥成粉， 加入破壁灵 芝孢子粉与片剂常用辅料， 混合均匀， 按片剂常规工艺制成各种片剂。
实施例 23
取人参 500g、 发酵虫草菌粉 （中国拟青霉 Paecilomyces sinensis Chen, Xiao et Shi, sp. nov ) 100g、 灵芝 500g、 玫瑰花 500g、 破壁灵芝孢子粉 500g, 人参、 灵芝切片， 发 酵虫草菌粉与破壁灵芝孢子粉置于布袋中， 以上 5味加水浸泡 20min， 加热煎煮 3次， 第一 次加 15倍量水提取 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤 液浓縮至适量， 浓缩液放冷后高速离心除杂， 减压浓缩成膏或喷雾干燥成粉， 加入颗粒剂常 用辅料， 混合均匀， 按颗粒剂常规工艺制成颗粒剂。
实施例 24
取西洋参 150g、 发酵虫草菌粉 （中国弯颈霉 Tolypocladium sinensis C. Ian Li ) 90g、 灵芝 200g、 玫瑰花 90g、 破壁灵芝孢子粉 150g， 西洋参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉置于布袋 中， 以上四味加水浸泡 20ηήη， 加热煎煮 3次， 第一次加 15倍量水提取 2小时， 以后每次 1 小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后髙速离心除 杂， 减压浓缩成胥或喷雾干燥成粉， 加入灵芝孢子粉与片剂常用辅料， 混合均匀， 按片剂常 规工艺制成各种片剂。
实施例 25
取西洋参 500g、 冬虫夏草 100g、 灵芝 500g、 玫瑰花 500g、 灵芝孢子油 100g, 西洋参、 灵芝切片， 冬虫夏草打粉， 以上四味加 80%乙醇回流提取 2次， 每次两小时， 滤过， 滤液回 收乙醇至无醇味， 减压浓缩成膏或喷雾千燥成粉， 加入灵芝孢子油与滴丸剂常用辅料， 混合 均匀， 按滴丸剂常规工艺制成滴丸。
实施例 26
取西洋参 500g、 发酵虫草菌粉（中华束丝孢 Synnematium sinensis Yin & Shen ) 100g、 灵芝 500g、 玫瑰花 500g、 破壁灵芝孢子粉 500g、 灵芝孢子油 100g、 人参叶 100g, 西洋参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉置于布袋中， 以上药材加水浸泡 40min, 加热煎煮 3次， 第一次 2 小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液 放冷后高速离心除杂， 减压浓缩成膏或喷雾干燥成粉， 加入破壁灵芝孢子粉、 灵芝孢子油与 颗粒剂常用辅料， 混合均匀， 按颗粒剂常规工艺制成颗粒剂。
实施例 27
取西洋参 I50g、 发酵虫草菌粉（蝙蝠蛾被毛孢 Hirsutella hepialid Chen et Shen ) 90g、 灵芝 200g、 玫瑰花 90g、 党参 400g, 西洋参、 灵芝、 党参切片， 发酵虫草菌粉置于布袋中， 以上 5味加水浸泡 40min, 加热煎煮 3次， 第一次 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍 量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓縮至适量， 浓縮液放冷后高速离心除杂， 减压浓縮成裔或 喷雾干燥成粉， 加入片剂常用辅料， 混合均匀， 按片剂常规工艺制成各种片剂。
实施例 28
取西洋参 150g、 冬虫夏草 120g、 灵芝 200g、 玫瑰花 90g、 黄芪 400g, 西洋参、 灵芝、 黄芪切片， 冬虫夏草打粉后置于布袋中， 以上 5味加水浸泡 20min, 加热煎煮 3次， 第一次 2 小时， 以后每次 1小时， 每次加水 14倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓縮至适量， 浓缩液 放冷后高速离心除杂， 加入锭剂常用辅料， 混合均匀， 按锭剂常规工艺制成锭剂。
实施例 29
取西洋参 500g、 发酵虫草菌粉（蝙蝠蛾拟青霉 Paecilomyces hepialli Chen et Dai, sp. nov) 50 g ; 发酵虫草菌粉 （中华被毛孢 Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp. nov ) 50g、 灵芝 500g、 玫瑰花 500g、 党参 300g, 西洋参、 灵芝、 党参切片， 发酵 虫草菌粉置于布袋中， 以上 5味加水浸泡 1小时， 加热煎煮 3次， 第一次 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓縮至适量， 浓缩液放冷后高速离心 除杂， 减压浓缩成膏或喷雾干燥成粉， 加入散剂常用辅料， 混合均匀， 按散剂常规工艺制成 散剂。
实施例 30
取西洋参 500g、 冬虫夏草 100g、 灵芝 500g、 玫瑰花 500g、 黄芪 300g， 西洋参、 灵芝、 黄芪切片， 冬虫夏草打粉后置于布袋中， 以上 5味加水浸泡 20πήη, 加热煎煮 3次， 第一次 2 小时， 以后每次 1小时， 每次加水 14倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液 放冷后髙速离心除杂， 加入口服液常用辅料， 混合均匀， 按口服液常规工艺制成 20000ml 口 服液。
实施例 31
取西洋参 100g、灵芝 200g、冬虫夏草 30g、发酵虫草菌粉 (Cs-C-Q80 Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp. nov) 3 g、 玫瑰花 100g、 灵芝孢子粉 100g， 西洋参、 灵芝切片， 冬 虫夏草打粉后与灵芝孢子粉置于布袋中， 以上五味加水浸泡 20min， 加热煎煮 3次， 第一次 加 15倍量水提取 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液 浓缩至适量， 浓縮液放冷后高速离心除杂， 减压浓缩成青或喷雾干燥成粉， 加入片剂常用辅 料， 混合均匀， 按片剂常规工艺制成各种片剂。
实施例 32
取西洋参 100g、 灵芝 200g、 发酵虫草菌粉（蝙蝠蛾被孢酶 Mortiscrslla hepialid C. T. & B. liu)30g、 玫瑰花 100g、 灵芝孢子粉 100g, 西洋参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉与灵芝孢子 粉置于布袋中， 以上 5味加水浸泡 20min， 加热煎煮 3次， 第一次加 15倍量水提取 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 滤液浓缩至适 量， 浓縮液放冷后高速离心除杂， 减压浓縮成膏或喷雾干燥成粉， 加入丸剂常用辅料， 混合 均匀， 按丸剂常规工艺制成各种丸剂。
实施例 33
取西洋参 90g、 灵芝 120g、 冬虫夏草 90g、 玫瑰花 60g、 灵芝孢子油 90g, 洋参、 灵芝切 片， 冬虫夏草打粉后置于布袋中， 以上四味加水浸泡 30min， 加热煎煮 3次， 第一次 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓縮至适量， 浓缩液放冷后 高速离心除杂， 减压浓縮成膏或喷雾干燥成粉， 加入灵芝抱子油与颗粒剂常用辅料， 混合均 勾， 按颗粒剂常规工艺制成颗粒剂。
实施例 34 取西洋参 100g、 灵芝 200g、 冬虫夏草 30g、 玫瑰花 100g、 太子参 200g， 西洋参、 灵芝 切片， 冬虫夏草打粉后置于布袋中， 以上 5味加水浸泡 40min, 加热煎煮 3次， 第一次加水 15倍量提取 2小时， 以后每次加水 10倍量提取 1小时， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至 适量， 加入膏滋常用辅料， 混合均勾， 按膏滋常规工艺制成膏滋。
实施例 35
取西洋参 100g、 灵芝 200g、 冬虫夏草 30g、 玫瑰花 100g、 人参叶 200g, 西洋参、 灵芝 切片， 冬虫夏草打粉后置于布袋中， 以上 5味加水浸泡 40min， 加热煎煮 3次， 第一次加水 15倍量提取 2小时， 以后每次加水 10倍量提取 1小时， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至 适量， 浓缩液放冷后高速离心除杂， 加入糖桨剂常用辅料， 混合均匀， 按糖浆剂常规工艺制 成糖浆剂。
实施例 36
取西洋参 100g、灵芝 200g、发酵虫草菌粉 (抱霉属真菌 Mort ierel la SP ) 30g、玫瑰花 100g、 党参 200g, 西洋参、 灵芝、 党参切片， 发酵虫草菌粉置于布袋中， 以上 5味加水浸泡 40min， 加热煎煮 3次， 第一次 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后髙速离心除杂， 减压浓缩成脔或喷雾干燥成粉， 加入片剂常 用辅料， 混合均匀， 按片剂常规工艺制成各种片剂。
实施例 37
取西洋参 100g、 灵芝 200g、 发酵虫草菌粉（中国轮枝孢 Verticillium sinens Warag sp. nov) 30g,玫瑰花 100g、黄芪 200g, 西洋参、灵芝、黄芪切片， 发酵虫草菌粉置于布袋中， 以上 5味加水浸泡 40min, 加热煎煮 3次， 第一次 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍 量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后高速离心除杂， 减压浓縮成膏或 喷雾干燥成粉， 加入胶囊剂常用辅料， 混合均匀， 按胶囊剂常规工艺制成胶嚢。
实施例 38
取西洋参 90g、 灵芝 120g、 发酵虫草菌粉 (麦角菌科真菌冬虫夏草头孢 Cephalosporium sinensis Chen sp. nov ) 30g, 发酵虫草菌粉 (中华束丝孢 Synnematium sinensis Yin & Shen) 30g、 玫瑰花 60g、 灵芝孢子油 60g, 西洋参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉置于布袋中， 以上四 味加水浸泡 1小时， 加热煎煮 3次， 第一次 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 13倍量， 合 并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后髙速离心除杂， 减压浓缩成裔或喷雾干 燥成粉， 加入灵芝孢子油与丸剂常用辅料， 混合均匀， 按丸剂常规工艺制成各种丸剂。
实施例 39
取西洋参 90g、 灵芝 120g、 冬虫夏草 90g、 玫瑰花 60g、 黄芪 200g、 灵芝孢子油 10g, 西 洋参、 灵芝、 黄芪切片， 冬虫夏草打粉后置于布袋中， 以上 5味加水浸泡 40miri, 加热煎煮 3 次， 第一次加水 15倍量提取 2小时， 以后每次加水 10倍量提取 1小时， 合并 3次提取液过 滤， 滤液浓缩至适量， 浓縮液放冷后髙速离心除杂， 加入糖浆剂常用辅料， 混合均匀， 按糖 浆剂常规工艺制成糖浆剂。
实施例 40
取西洋参 300g、 灵芝 400g、 发酵虫草菌粉 （蝙蝠蛾柱霉 Scytalidium hepialii C. L. Li ) 200g 、 玫瑰花 300g、 灵芝孢子粉 400g， 西洋参、 灵芝切片， 冬虫夏草打粉后置于布袋中， 以上四味加水浸泡 20min,加热煎煮 3次，第一次加 15倍量水提取 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后高速离心除杂， 减 压浓缩成膏或喷雾干燥成粉， 加入灵芝孢子粉与片剂常用辅料， 混合均匀， 按片剂常规工艺 制成各种片剂。 加入口服液常用辅料制成口服液。 得到的组合物是组合物 40, 用于下面的药 效实验。
实施例 41
取西洋参 300g、 灵芝 400g、 冬虫夏草 67g 、 玫瑰花 300g、 灵芝孢子油 20g， 洋参、 灵 芝切片， 冬虫夏草打粉后置于布袋中， 以上四味加水浸泡 30min, 加热煎煮 3次， 第一次 2 小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓縮至适量， 浓缩液 放冷后高速离心除杂， 减压浓缩成膏或喷雾干燥成粉， 加入灵芝孢子油与颗粒剂常用辅料， 混合均匀， 按颗粒剂常规工艺制成颗粒剂。
实施例 42
取西洋参 300g、 灵芝 400g、 发酵虫草菌粉 (中国头孢霉 Cephalosporium sinens Chen sp. nov)200g, 玫瑰花 300g、 太子参 400g， 西洋参、 灵芝切片， 发酵虫草菌粉置于布袋中， 以上 5味加水浸泡 40min, 加热煎煮 3次， 第一次 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍 量， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后高速离心除杂， 减压浓缩成膏或 喷雾干燥成粉， 加入片剂常用辅料， 混合均匀， 按片剂常规工艺制成各种片剂。
实施例 43
取西洋参 300g、 灵芝 400g、 冬虫夏草 67g、 玫瑰花 300g、 太子参 400g, 西洋参、 灵芝 切片， 冬虫夏草打粉后置于布袋中， 以上 5味加水浸泡 40min, 加热煎煮 3次， 第一次加水 15倍量提取 2小时， 以后每次加水 10倍量提取 1小时， 合并 3次提取液过滤， 滤液浓縮至 适量， 浓缩液放冷后髙速离心除杂， 加入糖浆剂常用辅料， 混合均匀， 按糖桨剂常规工艺制 成糖浆剂。
实施例 44 取西洋参 300g、灵芝 400g，发酵虫草菌粉（中国金孢霉 Chrysosporiutn sinens Z. Q. liang) 100g; 发酵虫草菌粉 (中华被毛孢 Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng，sp. nov) I00g、 玫瑰花 300g, 西洋参、 灵芝切片， 虫草菌粉置于布袋中， 加入 5%甲醇回流提取 2次， 每次 1 小时， 然后合并提取液， 回收甲醇后得到醇提取液； 药渣再加水加热煎煮 2次， 第一次 2小 时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍量， 合并醇提取液和水提取液， 过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后髙速离心除杂， 减压浓缩成膏或喷雾干燥成粉， 加入颗粒剂常用辅料， 混合均 匀， 按颗粒剂常规工艺制成颗粒剂。
实施例 45
取西洋参 300g、 灵芝 400g、 冬虫夏草 67g、 发酵虫草菌粉 （中华被毛孢 Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp. nov) 20g、 玫瑰花 300g, 西洋参、 灵芝切片， 冬虫夏草 粉碎后置于布袋中， 加入 75%乙醇回流提取 小时， 回收乙醇后得到醇提取液； 药渣再加水 加热煎煮 3次， 每次 2小时， 合并醇提取液和水提取液， 过滤， 滤液浓縮至适量， 浓缩液放 冷后高速离心除杂过滤， 加入口服液常用辅料， 混合均匀， 按口服液常规工艺制成 20000ml 口服液。
实施例 46
取人参 300g、 灵芝 400g、 发酵虫草菌粉 （顶孢头孢霉 Cephalosporium acremonium Corda, Icones Fungorum) 200g、 玫瑰花 300g、 党参 400g， 西洋参、 灵芝、 党参切片， 虫草 菌粉置于布袋中， 加入 95%甲醇回流提取 2次， 每次 1小时， 然后合并提取液， 回收甲醇后 得到醇提取液； 药渣再加水加热煎煮 3次， 第一次 2小时， 以后每次 1小时， 每次加水 10倍 量， 合并醇提取液和水提取液， 过滤， 滤液浓縮至适量， 浓缩液放冷后高速离心除杂， 减压 浓缩成裔或喷雾干燥成粉， 加入颗粒剂常用辅料， 混合均匀， 按颗粒剂常规工艺制成颗粒剂。 实施例 47
取人参 300g、 灵芝 400g、 发酵虫草菌粉 （虫草簇孢 Sporothrix insectorum de Hong & H. C. Evans) 200g、 玫瑰花 300g、 党参 400g， 人参、 灵芝切片， 冬虫夏草粉碎后置于布袋中， 加入 95%乙醇回流提取 2小时， 回收乙醇后得到醇提取液； 药渣再加水加热煎煮 3次， 每次 2 小时， 合并醇提取液和水提取液， 过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后高速离心除杂过滤， 加入口服液常用辅料， 混合均匀， 按口服液常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 48
取人参 300g、 灵芝 400g、 冬虫夏草 67g、 玫瑰花 300g、 灵芝孢子粉 300g、 黄芪 400g, 人参、 灵芝切片， 冬虫夏草粉碎后置于布袋中， 加入 5%乙醇回流提取 2小时， 回收乙醇后得 到醇提取液； 药渣再加水加热煎煮 2次， 每次 2小时， 合并醇提取液和水提取液， 过滤， 滤 液浓縮至适量， 浓缩液放冷后髙速离心除杂过滤， 加入口服液常用辅料， 混合均匀， 按口服 液常规工艺制成 20000ml口服液。
实施例 49
取西洋参 300g、 灵芝 400g、 发酵虫草菌粉 （ 虫花棒束孢 Isaria farinose (Holmsk. ) Fr. Systema Mycologicum) 200g、 玫瑰花 300g、 黄芪 400g, 西洋参、 灵 芝切片， 虫草菌粉置于布袋中， 加入 95%甲醇回流提取 2次， 每次 1小时， 然后合并提取液， 回收甲醇后得到醇提取液； 药渣再加水加热煎煮 3次， 第一次 2小时， 以后每次 1小时， 每 次加水 10倍量， 合并醇提取液和水提取液， 过滤， 滤液浓缩至适量， 浓縮液放冷后髙速离心 除杂， 减压浓缩成膏或喷雾干燥成粉， 加入颗粒剂常用辅料， 混合均匀， 按颗粒剂常规工艺 制成颗粒剂。
实施例 50
取西洋参 300g、 灵芝 400g、 冬虫夏草 67g、 玫瑰花 300g、 人参叶 90g, 西洋参、 灵芝切 片， 冬虫夏草粉碎后置于布袋中， 加入 5%乙醇回流提取 2小时， 回收乙醇后得到醇提取液； 药渣再加水加热煎煮 3次， 每次 2小时， 合并醇提取液和水提取液， 过滤， 滤液浓缩至适量， 浓缩液放冷后高速离心除杂过滤， 加入口服液常用辅料， 混合均匀， 按口服液常规工艺制成 20000ml口服液。 实施例 51 : 实施例 3得到的组合物 3抗过敏及过敏性皮炎动物试验报告：
1.材料与方法
1.1样品来源： 受试药为组合物 3复合粉（西洋参、 灵芝、 发酵虫草菌粉） 由江中药业股份 有限公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 11.41g,每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg 体重。
1.2实验动物： 清洁级健康昆明种小鼠， 雌雄各半， 体重 18~22g， 江西中医学院实验动物中 心提供， 许可证号： SCXK (赣） 2005-0001。 清洁级健康 SD大鼠， 雌雄各半， 江西中医学院 实验动物中心提供， 许可证号： SCX (赣） 2006-0001„
1 主要试剂：卵清蛋白 (OVA), sigma公司，批号： 025K0594;伊文思蓝（EB): 中国医药（集 团）上海化学试剂公司， 批号： F20030714; 磷酸组胺： 上海生物试剂厂生产，批号 909035; 2, 4-二硝基氯苯， 化学纯， 广州化学试剂厂生产； 批号: 0703428; 强的松，仙居制药股份有 限公司出品， 批号: 090678。
1.4主要仪器： BS110S 电子天平， Sartorius公司生产； 离心机， 上海安亭； 电子恒温水浴 锅， 浙江金坛； 打孔器（直径 8mm); 微量加样器， 法国 Gilson。 OLYMPUS显微镜； YT-6C 生物组织摊烤片机， 湖北省孝感市亚光医用电子技术公司； PH140A型培养箱 /干燥箱， 上海 一恒科技有限公司。
2实验方法
2.1动物分组： 动物根据体重随机分组， 每组 10只。 设立模型对照组， 组合物 3低、 中、 高 剂量组、 阳性药对照组（强的松）。
2.2剂量设计： 受试药组合物 3每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重。 由此推算出小 鼠每日摄入量为： 低剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 中剂量组， 4.0g生药 kg体重； 高剂量组， 12.0g生药 /kg体重，分别相当于人毎日摄入量的 5、 10和 30倍。将样品以蒸馏水配制成相应 浓度（17.53mg干粉 /mL、 35.06mg干粉 /mL、 105.18mg干粉 /mL) 的灌胃液进行实验。 大鼠 每日摄入量为： 低剂量组， l .Og生药/ kg体重： 中剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 高剂量组， 6.0g 生药/ kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。将样品以蒸馏水配制成相应浓度 ( 8.765mg干粉 /mL、 17.53mg干粉 /mL、 52.59mg干粉 /mL) 的灌胃液进行实验。
2.3组合物 3对卵蛋白所致大鼠被动过敏反应 (PCA) 的影响
2.3.1抗血清制备： 大鼠后肢注入 5 % OVA生理盐水溶液 0.2mL/只后肢， 同时腹腔注入百日 咳疫苗 0.15mIJ只， 正常饲养 13 日后，眼眶取血。 2000rpm离心 15分钟 ， 分离抗 OVA血清， 置 - 20 'C冰箱保存备用。
2.3.2大鼠抗卵蛋白血清模型建立： 取抗卵蛋白血清， 用生理盐水稀释成 1 : 4 、 1 : 8浓度。 取 SD大鼠 50只， 随机分 5 组， 即模型对照组、 组合物 3低、 中、 高剂量组， 阳性药对照组
(强的松）， 每组 10 只。 模型组灌胃蒸馏水， 阳性药对照组灌胃 5mg kg强的松， 组合物 3低、 中、 高剂量组分别灌胃不同浓度的试液， 给药容量 lOmL/ kg ， 每日 1次， 连续给药 14天。 第 15天背部剃毛，用稀释的抗血清作背部皮内注射。每侧两点， 每点注射 0.1 mL。 48小时后， 每 只大鼠尾静脉注射 1%伊文思蓝、 1%卵清蛋白生理盐水的混合液 1.0 mL。 30 min动脉采血， 分离血清， 按方法【2】进行组胺含量的测定； 后处死大白鼠， 翻转背部皮肤， 测量蓝色反应斑 直径， 比较给药组与模型组的差异； 取大鼠皮肤组织标本经中性甲醛固定， 梯度酒精脱水， 石蜡包埋， 进行组织肥大细胞脱颗粒的检测【31。
2.33 组合物 3对 2，4-二硝基氣苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响： 小鼠 50只， 随 机分成 5组， 即模型对照组、组合物 3低、中、高剂量组， 阳性药对照组（强的松），每组 10只。 用 5%的 2， 4-硝基氯苯乙醇液涂布于小鼠腹部皮肤（去毛）致敏。致敏前两天灌胃给药， 模型 对照组给予等容积蒸馏水，阳性药对照组灌胃 5mg/kg强的松，组合物 3各组动物灌胃给予相应 试液， 给药容积为 O.lmL/lOg体重， 每天给药 1次， 连续 10天； 致敏后第 7天用 1% 的 2， 4-二 硝基氯苯涂右耳， 24小时后处死小鼠， 沿耳廓基线剪下两耳， 用直径 8 mm打下双耳同一部 位圆片， 电子分析天平精密称重， 以左、 右耳片重量之差作为迟发型超敏反应值。
2.3.4 组合物 3对低分子右旋糖酐致小鼠局部瘙痒的影响： 小鼠 50只， 随机分成 5组， 即模型 对照组、组合物 3低、 中、高剂量组， 阳性药对照组（强的松）， 每组 10 只。给小鼠灌胃给药， 每天 1次，连续 10天。末次给药 30分钟之后， 按 O.lgAOg尾静脉注射 0.0125%低分子右旋糖酑溶 液。观察记录各组小鼠在尾静脉注射低分子右旋糖酐溶液后 30分钟内出现的瘙痒 (前爪搔抓头 部、 后爪挠躯干、 嘴咬全身各部位为疹痒指征)次数。
2.3.5 组合物 3对大鼠毛细血管通透性的影响： 大鼠 50 只， 随机分 5组， 即模型对照组、 组 合物 3低、 中、 高剂量组， 阳性药对照组（强的松）， 每组 10 只。 模型对照组灌胃蒸馏水， 阳 性药对照组灌胃 5mg kg强的松， 组合物 3低、 中、髙剂量组分别灌胃不同浓度的试液， 给药容 量 10mL/ kg ， 每日 1次， 连续给药 10天。 末次给药后 1 小时， 于大鼠背部脱毛区（药前先脱 毛）皮内注射 lmg mL磷酸组胺 0. lmL/只， 并立即尾静脉注射 1%伊文思蓝水溶液 lmL/只， 20分钟后断颈处死动物，剪下兰斑皮肤， 剪碎，浸泡于丙爾生理盐水溶液（7:3) 5mL中 48小 时， 离心取上清液， 在 610nm波长测定吸收度。
2.4 统计方法： 实验数据以 ¾hS表示， 采用单因素方差分析， 比较模型对照组、 组合物 3 各组之间的差异， PO.05判断为差异具有显著性， PO.01判断为差异具有极显著性。
3结果
3.1组合物 3对大鼠被动过敏反应的影响
试验结果见表 1 , 2。 与模型对照组比较， 组合物 3低剂量有降低 1:4、 1:8减少卵蛋白血清 致敏大鼠蓝斑直径、 减少肥大细胞脱颗粒数及降低血清组胺含量的趋势， 但无显著性差异； 强的松对照组和组合物 3中、髙剂量组均有明显降低 1:4、 1:8抗卵蛋白血清致敏大鼠蓝斑直径、 减少肥大细胞脱颗粒数及降低血清组胺含量的作用， 有显著或非常显著统计学差异。 提示组 合物 3对大鼠被动过敏反应有明显抑制作用。
表 1 组合物 3对 FCA大鼠蓝斑直径的影响 （ its)
剂量 动物数 蓝斑直径 （mm)
组别
(g生药 kg) (只） 1 :4 1 :8
模型对照组 0.0 10 16.90 ±2.61 10.26 ±1.31 阳性对照组 5.0mg 10 12.79 ±1.88 ** 7.43 ±1.22** 受试药低剂量组 1.2 10 15.20 ±1.44 9.44±1.20
受试药中剂量组 2.4 10 14.15±2.08* 8.97±1.33*
受试药高剂量组 7.2 10 13.32 ±2.17 ** 8.34 ±1.15 ** 与模型对照组比较， *P<0.05， **P<0.01。
表 2 组合物 3对 PCA大鼠肥大细胞脱颗粒和血清组胺含量的影响 （ i±s) 剂量 生药 动物数 组胺荧光值 组别 脱颗粒数
/kg) (只） (mg L) 模型对照组 0.0 10 60.80±15.64 4.08±0.93 阳性对照组 5.0mg 10 22.54±11.25** 2.35±0.65** 受试药低剂量组 10
1.2 48.42± 13.90 3.39±0.86 受试药中剂量组 10
2.4 42.65±16.27* 2.97±0.88* 受试药高剂量组 7.2 10 35.52士 13.28** 2.62±0.40** 与模型对照组比较， *P<0.05, **P<0.01 .
3.2 组合物 3对 2， 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响
试验结果见表 3。 与模型对照组相比， 组合物 3中、 高剂量组小鼠耳片肿胀度明显减轻, 提示组合物 3有较好抑制 2, 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的作用。
表 3 组合物 3对 2， 4-二硝基氣苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响 （ its) 组别 剂量 (g生药/ kg) 动物数（只） 耳片肿胀度 （mg) 模型对照组 0.0 10 6.98±0.74
阳性对照组 5.0mg 10 5.07±0.59** 受试药低剂量组 2.0 10 6.30±0.90
受试药中剂量组 4.0 10 6.16±0.64*
受试药髙剂量组 12.0 10 5.42±0.80**
与模型对照组比较， *P<0.05， *叩<0.01。
3.3 组合物 3对低分子右旋糖酑致小鼠局部瘙痒的影响
试验结果见表 4。 与模型对照组相比， 组合物 3中、 髙剂量组大鼠 OD值明显下降， 提示组 合物 3对磷酸组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。
组合物 3对低分子右旋糖軒致小鼠局部瘙痒的影响 （ i±s)
组别 剂量 (g生药 kg) 动物数 （只） 瘙痒次数 （30min)
模型对照组 0.0 10 29.30土 6.62 阳性对照组 5.0mg 10 18.30± 4.62** 受试药低剂量组 2.0 10 25.52±7.80
受试药中剂量组 4.0 10 23.34±5.24*
受试药髙剂量组 12.0 10 20.10±4.47**
与模型对照组比较， *P<0.05, **P<0.01。
3.4 组合物 3对大鼠毛细血管通透性的影响
试验结果见表 5。 与模型对照组相比， 组合物 3中、 高剂量组大鼠 OD值明显下降， 提示组 合物 3对磷酸组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。
表 S 组合物 3对大鼠毛细血管通透性的影响 （ its) 组别 剂量 (g生药/ kg) 动物数（只） OD值
模型对照组 0.0 10 0.994± 0.142 阳性对照组 5.0mg 10 0.750± 0.116** 受试药低剂量组 1.2 10 0.960±0.142
受试药中剂量组 2.4 10 0.857±0.135*
受试药髙剂量组 7.2 10 0.780±0.127**
与模型对照组比较， *P<0.05, **P<0.01.
4. 结论：
经动物实验研宄表明： 组合物 3对卵蛋白所致大鼠被动过敏反应有明显抑制作用； 组合 物 3有较好抑制 2, 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的作用； 组合物 3对磷酸 组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。 以上结果提示组合物 3有较好的抗过 敏作用， 对于过敏性皮炎、 荨麻瘆等过敏性疾病有较好的防治作用。 实施例 52: 实施例 3获得的组合物 3防治过敏性鼻炎动物实验报告：
1.材料与方法
1.1样品来源： 受试物为组合物 3复合粉（西洋参、 灵芝、 发酵虫草菌粉） 由江中药业股份 有限公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 11.41g。
1.2实验动物： 清洁级 SD大鼠， 雌雄各半， 体重 180〜220g， 由江西中医学院实验动物中心提 供， SCXK (赣) 2006-0001。 豚鼠， 雌雄各半， 体重 250〜300g， 长沙市开福区东创实验动物科 技服务部。
1.3主要试剂： 甲苯 -2, 4-二异银酸酯 (TDI)， 上海试剂一厂， 批号 090301 ; 卵清蛋白 (OVA), sigma公司， 批号： 025K0594; 鼻炎康片， 佛山德众药业有限公司， 批号： 090701 ; cAMP, cGMP测试盒， 长城生物。
1.4主要仪器： Beckman-CX7全自动血液生化仪； OLYMPUS 显微镜。 TE2000-S倒置荧光相 差数码照相显微镜， 日本尼康公司； 切片机， 德国 Ldca; YT-6C生物组织摊烤片机， 湖北省 孝感市亚光医用电子技术公司。
2实验方法
2.1 对 OVA所致大鼠过敏性鼻炎的影响
2.1.1 动物分组： 大鼠随机分为两组， 即： 空白对照组 10只及造模组 70只。 成功造模后的 大鼠按评分随机分为模型对照组、 阳性药组（鼻炎康组） 、 组合物 3高、 中、 低剂量组，每 组 10只。 2.1.2 剂量设计： 受试药组合物 3复合粉每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重， 由此 推算出大鼠每日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药/ kg体重； 中剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 高 剂量组， 6.0g生药/ kg体重，分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。灌胃量按 1.0ml/100g 体重计算。 空白对照组和过敏性募炎模型组给予等体积生理盐水灌胃， 鼻炎康组给予 410 mg /kg。 于造模成功后开始灌胃， 每日灌胃 1次， 连续 21天。
2Λ3 大鼠过敏性鼻炎动物模型的建立： 以 OVA OJmg作抗原【1],氢氧化铝粉末 30mg作佐剂, 加 lml生理盐水成混悬液， 腹腔内注射， 隔日 1次， 共 7次。 完成后每侧鼻腔均以 5% OVA ΙΟμΙ 局部免疫， 日 1次，共 7次。空白对照组用同容量生理盐水。受试药应用期间仍以 1% θνΑ 50μ1 滴鼻， 隔日 1次。
造模效果评定标准： 以记分方式评定， 激发后观察 30分钟， 记录喷嚏数、 鼻痒程度和鼻 分泌物量， 计分标准如表 1。
表 1 过敏性舁炎症状计分标准
症状计分 /分 喷嚏数 /个 鼻痒程度 鼻涕
1 卜 3 轻度抓鼻 流到鼻前孔
2 4〜10 频繁抓鼻 超过鼻前孔
3 10以上 抓鼻不止 流涕满面
总积分达到 5分即造模成功， 之后继续滴鼻维持直至治疗实验结束。
2.1.4 检测指标： 进行血液 cAMP、 cGMP含量测定和鼻黏膜组织肥大细胞计数。
2.1.4.1 血清 cAMP、 cGMP测定： 颈动脉取血， 分离血清用酶联免疫法检测。
2.1.4.2 鼻黏膜肥大细胞计数： 剥除鼻部上颔骨部皮肤， 将上额骨从颅骨中游离出来， 沿鼻 中线剖开， 暴露鼻中隔及双侧鼻腔， 将鼻中隔前中段剪下， 固定于 10%甲酸溶液 72小时， 再 放入脱钙液脱钙 3天， 逐级酒精脱水、透明， 石蜡包埋， 常规切片 4 μτη, 甲苯胺蓝染色， 显微 镜下观察， 测量样本肥大细胞的总数。
2.2 对 TDI所致豚鼠过敏性鼻炎的影响
2.2.1 同 2.1.1。
2.2.2 同 2.1.2。
2.2 豚鼠过敏性鼻炎动物模型的建立： 采用 TDI造模。 除空白对照组外， 其余豚鼠用 10% TDI造模， 用加样器取 ΙΟμΙ滴入豚鼠双侧舁腔（每侧 5μ1)， 每日 1次， 连续 7日， 造成豚鼠 过敏性鼻炎模型【u, 空白对照组以同容量橄榄油滴鼻。 滴鼻维持直至治疗实验结束。
造模效果评定标准： 以记分方式评定， 激发后观察 30 min， 记录喷嚏数、 鼻痒程度和鼻 分泌物量， 计分标准如表 1。 2.2.4 检测指标： 行为学观察、 鼻分泌物嗜酸性粒细胞计数、 血清总 IgE和血液组胺测定、 鼻 黏膜厚度的测定。
2.2.4.1 豚鼠行为学观察： TDI滴鼻激发， 按表 1的标准进行计分。
2.2.4.2 鼻分泌物嗜酸性粒细胞 (EOS)计数：取豚鼠鼻分泌物涂片，根据 Loren氏法【21改进，于 40倍电子显微镜视野可见明显 EOS, 计数该部位 3〜5个高倍视野固有层内的嗜酸性粒细胞数 目， 以反映嗜酸性粒细胞浸润程度。
2.2.4.3 血清总 IgE和血液组胺测定： 给药结束后， 次日以 10%水合氯醛麻醉豚鼠进行腹主动 脉采血， 放免检测血淸总 IgE。 另取血 5mL至抗凝管， -20Ό保存备用。 提取组胺， 用荧光分 光光度法测定组胺含量【3】， 计算公式：
Figure imgf000024_0001
2.2.4.4鼻 膜厚度的测定： 取材、 切片同实验 2.1.4.2, HE染色， 图像分析仪下定量观察鼻黏 膜厚度， 以每份标本假复层纤毛柱状上皮被覆的黏膜处， 黏膜隆起顶点至鼻中隔软骨 (包括上 皮层和固有膜)作为黏膜厚度。
2 统计方法： 实验数据以 S表示， 单因素方差分析， 比较空白对照组、模型对照组、组 合物 3各组之间的差异， PO.05判断为差异具有显著性， P<0.01判断为差异具有极显著性。 3结果
3.1 组合物 3对卵蛋白所致大鼠过敏性鼻炎的影响
3.1.1 对大鼠行为学的影响： 见表 2。造模后， 造模各组大鼠体征计数积分达标， 相互之间无 显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 受试药物中、 髙组和鼻炎康 组的体征积分均有明显降低 (PO.01或 P<0.05), 低剂量组亦有降低的趋势。
表 2组合物 3对大鼠过敏性鼻炎给药前后症状积分的影响 （X ±S) 动物 剂量 (g 给药后
组别 给药前 - 数 生药 kg) 7天 14天 21天 空白对照组 10 - 0.28±0.31 0.39±0.30 0.37±0.25 0.35±0.21 模型对照组 10 - 6.9U1.80** 6.73±1.49** 7.04±1.72** 6.96±1.49** 鼻炎康组 10 0.41 7.20±1.47** 3.49±1.03ΔΔ 3.81±1.20ΔΔ 3.41±1.20ΛΑ 受试药低剂量组 10 1.0 6.91±1.25** 5.79±1.02 6.28±1.39 5.87±1.30 受试药中剂量组 10 2.0 7.26±1.68** 5.36±1.19Λ 5.51±1.40Δ 3.97±1.35ΑΔ 受试药高剂量组 10 6.0 7.05±1.50** 4.09±1.07ΔΔ 3.85±1.29ΔΔ 3.55±1.13ΔΔ 与空白组比较， **1 ><0.01： 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01.
3.1.2 组合物 3对大鼠血清 cAMP、 cGMP的含量变化的影响： 实验结果见表 3。 与空白对照 组比较， 模型组血清 cAMP含量明显下降 （PO.01) ， 血清 cGMP含量明显上升（P<0.01)。 与 模型对照组相比较， 鼻炎康组和各受试药物组血清 cAMP的含量明显上升 （PO.01或 P<0.05); 鼻炎康组和受试药物中、高剂量组 cGMP含量明显下降 （PO.01或 PO.05),低剂量组也有降低 的趋势。
3.1.2 组合物 3对大鼠鼻黏膜肥大细胞的影响： 实验结果见表 3。 模型对照组鼻黏膜肥大细胞 数目明显增多， 有极显著差异 (P<0.01)。与模型组比较， 鼻炎康组和受试药物治疗组鼻黏膜肥 大细胞数目均明显减少， 其差异有显著意义 (P<0.01)。 表 3 组合物 3对大鼠血清 cAMP、 cGMP的含量及鼻黏膜肥大细胞的影响 （X ±S) 剂量 (g
动物 cAMP cGMP 肥大细胞计数
组别 生药
数 (pmol/ml) (pmol/ml) (个）
/kg)
空白对照组 10 20.85±4.87 9.45±2.31 1.59±1.25
模型对照组 10 10.96±3.82** 14.31±4.57** 13.82±4.67**
厶 Δ
鼻炎康组 10 17.30±3.51 9.51±2.32ΔΛ 5.78±2.18'
,Δ厶
受试药低剂量组 10 14.45±3.79 12.98±3.81 8.56±3.22'
受试药中剂量组 10 15.37±5.21 10.56±2.72Δ 7.87±3.45'
受试药高剂量组
Figure imgf000025_0001
10 17.81±4.22Δ 9.22±3.76ΛΛ 6.14±2.23'
注： 与空白组比较， *Ρ<0.05，**Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01。
3.2 组合物 3对 TDI所致豚鼠过敏性鼻炎的影响
3.2.1 对豚鼠行为学的影响： 见表 4。 造模后， 造模各组豚鼠体征计数积分达标， 相互之间无 显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 受试药物中、 髙组和鼻炎康 组的体征积分均有明显降低 (P<0.01或 P<0.05)， 低剂量组亦有降低的趋势。 表 4组合物 3对豚鼠过敏性鼻炎给药前后症状积分的影响 （X ±S) 动物 剂量 (g 给药后
组别 给药前
数 生药 kg) 7天 14天 21天 空白对照组 10 - 0.45±0.28 0.47±0.29 0.42±0.21 0.35±0.24 模型对照组 10 - 6.78±1.72** 6.67±1.27** 6.73±1.12** 6.4( i0.96** 鼻炎康组 10 0.41 6.53±1.59** 5.64±0.96Δ 5.48±0.82Δ 4.87±1.28Δ 受试药低剂量组 10 1.0 6.34±1.60** 6.20±1.25 6.15±0.98 5.33±1.22 受试药中剂量组 10 2.0 6.82±1.87** 5.83±1.38Δ 5.76±1.32ΔΔ 4.90±0.76ΔΔ 受试药高剂量组 10 6.0 6.79±1.73** 5.76±1,17ΔΔ 5.53±0.84ΔΔ 4.89±0.93ΔΔ 注： 与空白组比较， "PO.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.0
3.2.2 对豚鼠血液组胺及血清总 IgE的影响： 实验结果见表 5。 与空白对照组比较， 模型组血 液中组胺及血清总 IgE均有增髙 (P<0.01), 表明实验造模成功； 与模型组相比， 受试药中剂量 组、 髙剂量组、 鼻炎康组的组胺荧光吸收度及血清总 IgE浓度明显下降 (?<0.01或?<0.05)， 其 中中、 高剂量组组胺降至接近正常水平， 提示组合物 3可通过抑制血中组胺水平和血清中 IgE 起到治疗过敏性鼻炎的作用
表 5 组合物 3对豚鼠血中组胺及血清总 IgE的影响 （X ±S) 组别 动物数 剂量 (g生药 kg) 组胺荧光值 (mg L) IgE(IU mL-l)
空白对照组 10 - 2.29±0.48 0.132±0.025
模型对照组 10 - 3.16±0.89** 0.172±0.032**
鼻炎康组 10 0.41 2.14±0.54ΔΔ 0.128±0.025ΔΔ
受试药低剂量组 10 1.0 3.04±0.44 0.165±0.027
受试药中剂量组 10 2.0 2.62±0.42Λ 0.143±0.027Δ
受试药髙剂量组 10 6.0 2.39±0.38ΛΑ 0.136±0.021ΔΛ
注： 与空白组比较， *Ρ<0.05,**Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
3.2.3对豚鼠募分泌物嗜酸性粒细胞 (EOS)的影响： 实验结果见表 6。 模型组嗜酸性粒细胞计 数显著增加 (P<0.01)。 鼻炎康组和药物治疗组与模型组比较， 嗜酸性粒细胞计数均显著降低 (P<0.05或 P<0.01)。
3.2.4 对豚鼠鼻黏膜厚度的影响： 结果见表 6。 结果显示， 与空白对照组比较， 模型组豚鼠鼻 中隔黏膜上皮有不同程度脱离， 厚度不均， 基底结构不清， 固有膜内小静脉、 毛细血管明显 扩张， 组织间隙扩大， 黏膜厚度明显增加 (P<0.01)。 与模型对照组比较， 鼻炎康组及药物治疗 组上述病理改变减轻， 黏膜厚度明显降低 (P<0.01)。 表 6组合物 3对豚鼠鼻分泌物 EOS及鼻黏膜厚度的影响 （X±S)
剂量 (g生药 EOS计数 鼻黏膜厚度 组别 动物数
/kg) ( x lO"9 L) (mm) 空白对照组 - 10 2.77±1.27 0.162±0.054
模型对照组 - 10 17.67±4.08** 0.295±0.069**
*炎康组 0.41 10 9.30±3.67ΔΔ 0.196士 0.051 ΔΔ
受试药低剂量组 1.0 10 11.08±4.01ΛΔ Ο.235±Ο.052ΔΔ
受试药中剂量组 2.0 10 10.42±3.46ΔΔ 0.216±0.056ΔΔ
受试药髙剂暈组 6.0 10 9.54±2.76ΛΔ 0.207±0.072ΔΔ
注： 与 S白组比较， *Ρ<0.05,**Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΛΡ<0.05, ώΔΡ<0·01。
4.结论：
经动物实验研究表明： 组合物 3作用主要表现为以下几个方面： ①能显著模型大鼠鼻部 症状分值， 减少提髙过敏性鼻炎大鼠血清 cAMP含量， 降低 cGMP含量。 ②减少大鼠鼻黏膜 肥大细胞数量， 降低其在炎症局部的浸润。 ③能减少模型豚鼠鼻部症状分值。 ④降低豚鼠鼻 分泌物嗜酸性粒细胞个数及嗜酸性粒细胞在炎症局部的浸润。 ⑤能明显降低豚鼠血液组胺浓 度， 减少炎性介质。 ⑥减轻啄鼠动物鼻部黏膜的肿胀情况。 根据实验研宄结果认为组合物 3 具有抗过敏性鼻炎的作用。 实施例 53: 实施例 3获得的组合物 3防治过敏性哮喘动物实验报告- 1.材料与方法
1.1样品来源： 受试物为组合物 3复合粉（西洋参、 灵芝、 发酵虫草菌粉） 由江中药业股份 有限公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 11.41g。
1.2 实验动物： SD大鼠， 雌雄各半， 体重 180〜220g, 由江西中医学院实验动物中心提供， SCXK (赣) 2006-0001。 豚鼠， 雌雄各半， 体重 180〜220g， 湖南省长沙市开福区东创实验动物 科技服务部， 合格证号： SCXK (湘) 2006- 0001。
13主要试剂： 卵清蛋白 (OVA), sigma公司， 批号： 025K0594; 氯化乙酰胆碱， 上海晶纯试 剂有限公司， 批号： 21205; 磷酸组胺， 上海晶纯试剂有限公司， 批号： 22270; 地塞米松， 郑州卓峰制药厂， 批号 0904213; IL- 4和 IFN-YELISA试剂盒， 长城生物。
1.4主要仪器： MD3000生物信号采集分析系统，淮北正华生物仪器设备有限公司； ZH— 100 呼吸换能器， 淮北正华生物仪器设备有限公司） ； 402A1超声雾化器（江苏巨跃医疗设备股 份有限公司）； OLYMPUS 显微镜； TE2000-S倒置荧光相差数码照相显微镜， 日本尼康公司； 切片机， 德国 Leica。
2实验方法
2.1 对 OVA所致大鼠过敏性哮喘的影响
2.1.1 动物分组： 大鼠雌雄各半， 随机分为两组， 即： 空白对照组 10只及造模组 70只。 成 功造模后的大鼠随机分为模型对照组、 阳性药组（地塞米松组） 、 组合物 3低、 中、 髙剂量 组，每组 10只。
2.1.2 大鼠过敏性哮喘动物模型的建立： 除空白对照组外， 其他动物第 1天用含 OVA 10mg、 Al (OH) 3干粉 200mg、 灭活百日咳菌苗 6 09个的生理盐水混悬液 ImL腹腔注射致敏， 第 8天 重复致敏 1次，第 15天开始除空白对照组外各组动物超声雾化 1% OVA进行激发，约 20min/次， 于每天早上 8〜9时进行。直至大鼠出现哮喘样发作， 共 3周。雾化时见大鼠出现烦躁不安、打 喷嚏、 大小便失禁、 抓耳朵、 紫绀等症状， 说明哮喘模型复制成功。
2.1 剂量设计： 受试药组合物 3复合粉每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重， 由此推 算出大鼠每日摄入量为： 低剂量组， l .Og生药/ kg体重； 中剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 髙剂量 组， 6.0g生药/ kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。 将样品以蒸馏水配制成相 应浓度（8.76mg干粉 /ml、 17.52mg干粉 /ml、 52.56mg干粉 /ml) 的灌胃液进行实验， 灌胃量按 1.0ml/100g体重计算。模型对照组于激发前 30min灌胃同体积 0.9%生理盐水， 阳性药组于每次 激发前 30min给予地塞米松 0.5mg kg[21。 组合物 3低、 中、 高剂量各组于每次激发前 30min分别 给予各剂量受试药。 空白对照组在相同时间腹腔注射、 雾化及灌胃同体积 0.9%生理盐水。 每 曰灌胃 1次， 连续 21天。 2.1.4 大鼠引喘潜伏期的记录： 大鼠胸廓绑定 ZH-100呼吸换能器（调节张力约 l〜2g, 使呼吸 波幅度在 l~2mv), 将换能器连于 MD3000生物信号采集分析系统， 动物置于连有超声雾化器 的密闭玻璃钟罩内， 开启采集系统记录一段正常呼吸波后， 超声喷雾 1% OVA20分钟， 连续 记录喷雾开始后 30分钟内大鼠的引喘呼吸波。 同时肉眼观察、 记录喷雾开始至症状出现的时 间 （以首次抽搐为准）作为哮喘潜伏期。
2.1.5 lL- 4、 IFN 的含量测定：末次激发 24h以后， 3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠（30mg / kg) , 抽血 5〜10mL, ELISA法测定血清中 IL- 4、 IFN-γ的含量。
2.1.6肺组织中 EOS的含量测定： 切取左侧肺组织， 4%多聚甲醛内固定 4〜5h, 水洗、梯度酒 精脱水、 浸蜡、 包埋。 连续切片的方法行 HE染色， 观察组织炎症变化， 计数 EOS浸润。 每张 切片由同一名观察者在高倍镜下 O400)随机选择 10个视野，分别计算支气管、血管周围 EOS 浸润的数量， 平均值作为该片的代表值。
2.2 对 Adi和 His混合气体所致豚鼠过敏性哮喘的影响
2.2.1 同 2.1.1。
2.2.2 豚鼠过敏性哮喘动物模型的建立：第 1天将豚鼠放在 4L密闭的玻璃钟罩内，超声雾化喷 A2%Ach和 0.4%His的等量混合液 15s， 喷雾停止后记录豚鼠引发哮喘的潜伏期（即从喷雾结 束开始计时到哮喘发作， 呼吸极度困难直到抽搐、 跌到的时间） 。 引喘潜伏期大于 120s者， 不予选用。
2.2.3 剂量设计： 同 2.1.3。
2.2.4 引喘潜伏期的记录： 同 2.1.4.1。
2.2.5血清和 BALF中 IgE的测定： 免疫放射双抗夹心法。
2.3统计方法： 实验数据以 ¾tS表示， 采用单因素方差分析， 比较各组之间的差异， P<0.05 判断为差异具有显著性， PO.01判断为差异具有极显著性。
3结果
3.1 组合物 3对 OVA所致大鼠过敏性哮喘的影响
3.1.1对大鼠引喘潜伏期的影响： 见表 1。 造模各组大鼠引喘潜伏期达标， 相互之间无显著性 差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 阳性对照组和受试药中、 高剂量组 大鼠的引喘潜伏期均有明显延长 (PO.05或 P<0.01)。 表 1 组合物 3对大鼠引喘潜伏期的影响 （ ±S)
组别 动物数 剂量 (g生药/ kg) 给药前 给药后 空白对照组 10 - 360 360
模型对照组 10 - 76.03±13.23** 75.62±11.65** 阳性对照组 10 0.5mg kg 75.84±12.36** 162.61±17.88ΔΔ 受试药低剂量组 76.42±14.42** 87.15±19.82 受受受受试药中剂量组 75.4^15.38** 93.56±21.75£
受模试试空阳试试药高剂量组 74.07±17.56** 112.87±21.78Δ
性型药药药白
注： 与空白组比对对对低高中较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01 ,
受受受
剂照照照剂剂模试试试空阳
3.1.2 对大鼠血清性药药药型白中 IL4、 IFN 的含量变化的影响： 实验结果见表 2。与空白对照组相比较,
低对对对高中
模型组血清中 IFN -γ的照剂照照剂剂含量明显降低 (P<0.01),而血清中 IL-4含量明显升高 (P<0.01),提示哮喘
量量组组组量
发作期存在着严重的 IFNT ¾R/IL4比例的失衡； 与模型组相比较， 地塞米松组与受试药中、高剂 量组的 IL-4含量均有明显降低 (P<0.05¾P<0.01)， IFN-γ含量也有明显升髙 (P<0.05或 P<0.01)， 提示受试药物可纠正失衡的 IFN-Y/IL4比值。
表 2组合物 3对大鼠血清 IL- 4、 IFN-γ的含量变化的影响 （X ±S)
··. ο ο o
组: 剂量 (g生药/ kg) 动物数 IL- 4 (pg ml) IFN-y(pg ml)
10 12.33±2.43 26.35±4.56
10 23.06±3.29** 11.52±3.24**
0.5mg/kg 10 12.88±4.13ΛΔ 20.51±4.65ΔΔ
1.0 10 21.07±3.08 12.83±3.68
2.0 10 18.64±3.81Δ 15.24±3.78Δ
6.0 10 15.94士 3·26ΔΔ 18.58±4.67ΔΔ 注： 与空白组比较， **P<0.01 : 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡΟ.01。
3. 对大鼠肺组织中 EOS含量的影响：实验结果见表 3。模型对照组大鼠嗜酸性粒细胞计数 显著增加 (P<0.01); 与模型组比较， 阳性对照组及受试药中、 高剂量药组 EOS含量明显减少 (Ρ<0.01 ) , 提示组合物 3可能通过降低大鼠肺组织中 EOS含量起到治疗过敏性哮喘的作用。
表 3 组合物 3对大鼠肺组织中 EOS含量的影响 （X ±S)
剂量 (g生药/ kg) 动物数 EOS (个/ HP)
1.0
2.0
6.0
注： 与空白组比较， **P<0.01 : 与模型组比较， ΔΔΡ<0.01。
3.2 组合物 3对 Ach和 His混合气体所致豚鼠过敏性哮喘的影响
3.2.1 对豚鼠引喘潜伏期的影响： 见表 4。造模后， 造模各组豚鼠引喘潜伏期达标， 相互之间 无显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 阳性对照组和受试药中、 髙剂量组豚鼠的引喘潜伏期均有明显延长 (PO.05或 PO.01)。 提示组合物 3对豚鼠的哮喘症状 有明显改善。
表 4组合物 3对豚鼠引喘潜伏期的影响 （X ±S)
组别 动物数 剂量 (g生药/ kg) 给药前 给药后 受受受
空模试试试阳 0 360 360
性药药药型白 0 74.84±14.6** 77.23±11.61**
对对低对髙中 ΛΔ
0 0.5mg kg 77.32±13.95** 160.92±19.72
剂剂照照照剂受受受
量组组组量量 0 1.0 76.52±14.86** 90.31±19.23 模空试阳试试受受受 Δ 性型药药药白 0 2.0 75.58il5.37** 94.74±21.68
HH模试试空试阳 ΔΔ
对对对低髙中药型药白 0 6.0 75.18±1534** 113.73±21.91
性药
照照照剂剂剂
注： 与空白组比较， *对低对对髙中*组组组量量量P<0.01 : 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01。
照照剂照剂剂
喘豚鼠血清组组量量量组 HH ττΗ
3.2.2 对哮 和 BALF中总 IgE的影响：实验结果见表 5。模型组血清和 BALF中总 IgE o o & o
含量明显升高 (P<0. 01): 与模型组相比较， 地塞米松组与受试药中、 高剂量组血清和 BALF中 总 IgE含量均有明显降低 ( P<0.01^ P<0.05), 提示地塞米松与受试药均可抑制豚鼠肺部过敏性 炎症反应， 改善哮喘症状。
表 5 组合物 3对豚鼠血清和 BALF中总 IgE的影响 （ 士 S)
, 注： 与空白组比 组别 剂量 (g生药/ kg) 动物数 血清（U/L) BALF (U L)
10 3.02±0.93 3.55i0.87 较， "Ρ<0.01 ;
10 5.47±1.33** 5.32±1.71**
0 10 3.58±1.19ΔΔ 3. 49±0.82ΔΔ 与模型组比较，
10 5. 24±2.27 4.28±1.44
Ρ<0.05,
10 4.15±1.14Δ 3.84±1.42Δ
10 3.85±1.12ΔΔ 3.12±0.82ΛΔ ΑΔΡ<0.01 <
3.2.3 对豚鼠肺组织中 EOS含量的影响： 实验结果见表 6。 与空白对照组比较，模型组豚鼠嗜 酸性粒细胞计数水平明显升髙（PO.01); 与模型组比较， 阳性对照组和受试药中、 高剂量组 豚鼠嗜酸性粒细胞计数水平显著下降 （P<0.01),提示组合物 3可能通过降低豚鼠肺组织中 EOS 含量起到治疗过敏性哮喘的作用。
表 6 组合物 3对豚鼠肺组织中 EOS含量的影响 （X ±S)
\ 剂量 (g生药 kg) ~~动物数 EOS (个 /HP)
- 10 4.24±2.49
- 10 97.61±14.82**
0.5mg kg 10 31.78±7.55ΔΔ
1.0 10 88. 28±12.18
2.0 10 77.25±12.14ΔΔ
6.0 10 61.24±11.68ΔΔ
注： 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΔΡ<0.01。
4.结论''
经动物实验研究表明，组合物 3能显著改善模型组大鼠哮喘症状及延长豚鼠引喘潜伏期; 能降低哮喘大鼠血清中 IL>4含量及升髙 IFN-γ含量， 纠正失衡的 IFN_Y/IL-4比值； 降低大鼠 和豚鼠肺组织中嗜酸性粒细胞个数， 改善嗜酸性粒细胞在炎症局部的浸润； 降低豚鼠血清和 BALF中总 IgE含量， 改善肺部炎症症状。 因此认为组合物 3具有抗过敏性哮喘的作用。 实施例 54: 实施例 4获得的组合物 4抗过敏及过敏性皮炎动物试验报告- 1.材料与方法
1.1样品来源： 受试药为组合物 4复合粉（灵芝、 西洋参、 冬虫夏草） 由江中药业股份有限 公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 10.97g， 每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体 重。
1.2实验动物： 同实施例 51。
1 主要试剂： 同实施例 51。
1.4主要仪器： 同实施例 51。
2实验方法
2.1动物分组： 动物根据体重随机分组， 每组 10只。 设立模型对照组， 组合物 4低、 中、 高 剂量组、 阳性药对照组（强的松）。
2.2剂量设计： 受试药组合物 4每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重。 由此推算出小 鼠每日摄入量为： 低剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 中剂量组， 4.0g生药/ kg体重； 高剂量组， 12.0g生药 kg体重，分别相当于人每日摄入量的 5、 10和 30倍。将样品以蒸馏水配制成相应 浓度（18.23mg干粉 /mL、 36.46mg干粉 /mL、 109.38mg千粉 /mL) 的灌胃液进行实验。 大鼠 每日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药/ kg体重； 中剂量组， 2.0g生药 kg体重； 髙剂量组， 6.0g 生药 kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。将样品以蒸馏水配制成相应浓度
(9.12mg干粉 /mL、 18.23mg干粉 /mL、 54.69mg干粉 /mL) 的灌胃液进行实验。
2.3组合物 4对 OVA所致大鼠被动过敏反应 (PCA) 的影响
23Λ抗血清制备： 同实施例 51。
2.3.2大鼠抗 OVA血清模型建立： 取抗 OVA血清， 用生理盐水稀释成 1 : 4 、 1 : 8浓度。 大 鼠 50 只， 随机分 5 组， 即模型对照组、组合物 4低、 中、高剂量组， 阳性药对照组（强的松）, 每组 10 只。 模型组灌胃蒸馏水， 阳性药对照组灌胃 5mg/kg强的松， 组合物 4低、 中、 高剂量 组分别灌胃不同浓度的试液， 给药容量 10mL/ kg ， 每日 1次， 连续给药 14天。 第 15天背部剃 毛，用稀释的抗血清作背部皮内注射。每侧两点， 每点注射 0.1 mL。 48小时后， 每只大鼠尾静 脉注射 1%伊文思蓝、 1%卵清蛋白生理盐水的混合液 1.0 mL。 30 min动脉采血， 分离血清， 按方法【21进行组胺含量的测定； 后处死大白鼠， 翻转背部皮肤， 测量蓝色反应斑直径， 比较 给药组与模型组的差异； 取大鼠皮肤组织标本经中性甲醛固定， 梯度酒精脱水， 石蜡包埋， 进行组织肥大细胞脱颗粒的检测 [3】。 233 组合物 4对 2， 4-二硝基氣苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响【41 :小鼠 5随机分成 5组， 即模型对照组、 组合物 4低、 中、 高剂量组， 阳性药对照组 （强的松）， 每组 10 只。 用 5%的 2, 4-硝基氯苯乙醇液涂布于小鼠腹部皮肤（去毛）致敏。致敏前两天灌胃给药， 模型对 照组给予等容积蒸馏水，阳性药对照组灌胃 5mg/kg强的松，组合物 4各组动物灌胃给予相应试 液， 给药容积为 O.lmL/lOg体重， 每天给药 1次， 连续 10天； 致敏后第 7天用 1% 的 2, 4-二硝 基氯苯涂右耳， 24小时后处死小鼠， 沿耳廓基线剪下两耳， 用直径 8 mm打下双耳同一部位 圆片， 电子分析天平精密称重， 以左、 右耳片重量之差作为迟发型超敏反应值。
2.3.4 组合物 4对低分子右旋糖酐致小鼠局部瘙痒的影响 [5]： 小鼠随机分成 5组， 即模型对照 组、 组合物 4低、 中、 高剂量组， 阳性药对照组（强的松）， 每组 10 只。 给小鼠灌胃给药， 每 天 1次，连续 10天。末次给药 30分钟之后，按 0.1g 10g尾静脉注射 0.0125%低分子右旋糖酑溶液。 观察记录各组小鼠在尾静脉注射低分子右旋糖酐溶液后 30分钟内出现的瘙痒 (前爪搔抓头部、 后爪挠躯干、 嘴咬全身各部位为瘆痒指征)次数。
2.3.5 组合物 4对大鼠毛细血管通透性的影响[ 大鼠随机分 5组， 即模型对照组、 组合物 4 低、 中、 高剂量组， 阳性药对照组（强的松）， 每组 10 只。 模型对照组灌胃蒸馏水， 阳性药 对照组灌胃 5mg kg强的松， 组合物 4低、 中、 高剂量组分别灌胃不同浓度的试液， 给药容量 lOmL/ kg ， 每日 1次， 连续给药 10天。末次给药后 1 小时， 于大鼠背部脱毛区（药前先脱毛) 皮内注射 lmg/ mL磷酸组胺 0. lmlJ只， 并立即尾静脉注射 1%伊文思蓝水溶液 lmL 只， 20 分钟后断颈处死动物， 剪下兰斑皮肤， 剪碎， 浸泡于丙酮生理盐水溶液 ( 7:3) 5mL中 48 小 时， 离心取上清液， 在 610nm波长测定吸收度。
2.4 统计方法： 实验数据以 ¾tS表示， 采用单因素方差分析， 比较模型对照组、 组合物 4 各组之间的差异， PO.05判断为差异具有显著性， PO.01判断为差异具有极显著性。
3结果
3.1组合物 4对大鼠被动过敏反应的影响
试验结果见表 1， 2。 与模型对照组比较， 组合物 4低剂量有降低 1:4、 1 :8减少卵蛋白血清 致敏大鼠蓝斑直径、 减少肥大细胞脱颗粒数及降低血清组胺含量的趋势， 但无显著性差异； 强的松对照组和组合物 4中、髙剂量组均有明显降低 1:4、 1:8抗卵蛋白血清致敏大鼠蓝斑直径、 减少肥大细胞脱颗粒数及降低血清组胺含量的作用， 有显著或非常显著统计学差异。 提示组 合物 4对大鼠被动过敏反应有明显抑制作用。
表 1 组合物 4对 PCA大鼠蓝斑直径的影响 （ ±s)
Mi 动物数 蓝斑直径 （mm)
组别
(g生药 kg) (只） Π4 ^8 模型对照组 0.0 10 17.22 ±2.57 10.62 ±2.12 阳性对照组 5.0mg 10 1 1.94 ±1.90** 7.23 ±1.60** 受试药低剂量组 1.0 10 15.68 ±1.58 9.36±1.48
受试药中剂量组 2.0 10 14.80±2.10* 8.50±1.62*
受试药高剂量组 6.0 10 13.62 ±2.07 ** 7.56 ±1.70 **
与模型对照组比较， *P<0.05, **P<0.01 o
表 2 组合物 4对 PCA大鼠肥大细胞脱颗粒和血清组胺含量的影响 （ its) 剂量 (g生药 动物数 组胺荧光值 组别 脱颗粒数
(只） (mg L) 模型对照组 0.0 10 57.92±9.65 4.17±0.79
阳性对照组 5,0mg 10 19.46±8.72** 1.92±0.61**
受试药低剂量组 1.0 10 49.27±9.05 3.58±0.88
受试药中剂量组 2.0 10 46.48±8.27* 3.10±0.92*
受试药高剂量组 6.0 10 29.31± 7.99** 2.62±0.76**
与模型对照组比较， *P<0.05, **P<0.01.
3.2 组合物 4对 2， 4-二硝基氣苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响
试验结果见表 3。 与模型对照组相比， 组合物 4中、 高剂量组小鼠耳片肿胀度明显减轻, 提示组合物 4有较好抑制 2, 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的作用。
表 3 组合物 4对 2， 4-二硝基氣苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响 （ its) 组别 剂量 (g生药 kg) 动物数 （只） 耳片肿胀度 （mg) 模型对照组 0.0 10 6.20±0.90
阳性对照组 5.0mg 10 4.22±0.96** 受试药低剂量组 2.0 10 5.62±0.87
受试药中剂量组 4.0 10 5.08±0.94*
受试药高剂量组 12.0 10 4.60±0.80**
与模型对照组比较， *P<0.05, **P<0.01。
33 组合物 4对低分子右旋糖酑致小鼠局部瘙痒的影响
试验结果见表 4。 与模型对照组相比， 组合物 4中、 高剂量组大鼠 OD值明显下降， 提示组 合物 4对磷酸组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。
表 4 组合物 4对低分子右旋糖肝致小鼠局部瘙痒的影响 （ its)
组别 剂量 (g生药/ kg) 动物数 （只） 瘙痒次数 （30min〉
模型对照组 0.0 10 34.12± 9.54 阳性对照组 5.0mg 10 14.25± 6.72** 受试药低剂量组 2.0 10 29.46±8.03 受试药中剂量组 4.0 10 22.53±9.50* 受试药髙剂量组 12.0 10 18.12±8.26**
与模型对照组比较， *P<0.05， **P<0.01。
3.4 组合物 4对大鼠毛细血管通透性的影响
试验结果见表 5。 与模型对照组相比， 组合物 4中、 高剂量组大鼠 OD值明显下降， 提示组 合物 4对磷酸组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。
组合物 4对大鼠毛细血管通透性的影响 （ i±s)
组别 剂量 (g生药 kg) 动物数（只） OD值 模型对照组 0.0 10 0.978士 0.104 阳性对照组 5.0mg 10 0.656± 0.088** 受试药低剂量组 1.0 10 0.924±0.096
受试药中剂量组 2.0 10 0.851±0.108* 受试药髙剂量组 6.0 10 0.776±0.122** 与模型对照组比较， *P<0.05， **P<0.01 o
4. 结论：
经动物实验研宄表明： 组合物 4对卵蛋白所致大鼠被动过敏反应有明显抑制作用； 组合 物 4有较好抑制 2， 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的作用； 组合物 4对磷酸 组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。 以上结果提示组合物 4有较好的抗过 敏作用， 对于过敏性皮炎、 荨麻疹等过敏性疾病有较好的防治作用。 实施例 55: 实施例 4获得的组合物 4防治过敏性鼻炎动物实验报告：
1.材料与方法
1.1样品来源： 受试物为组合物 4复合粉 （西洋参、 灵芝、 冬虫夏草） 由江中药业股份有限 公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 10.97g。
1.2实验动物： 同实施例 52。
1.3主要试剂： 同实施例 52。
1.4主要仪器： 同实施例 52。
2实验方法
2.1 对 OVA所致大鼠过敏性鼻炎的影响
2.1.1 动物分组： 大鼠随机分为两组， 即： 空白对照组 10只及造模组 70只。 成功造模后的 大鼠按评分随机分为模型对照组、 阳性药组（鼻炎康组） 、 组合物 4髙、 中、 低剂量组，每 组 10只。 2.1.2 剂量设计： 受试药组合物 4复合粉每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重， 由此 推算出大鼠每日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药/ kg体重； 中剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 髙 剂量组， 6.0g生药/ kg体重，分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。灌胃量按 1.0ml/100g 体重计算。 空白对照组和过敏性鼻炎模型组给予等体积生理盐水灌胃， 鼻炎康组给予 410 mg /kg。 于造模成功后开始灌胃， 每日灌胃 1次， 连续 21天。
2.1.3 大鼠过敏性鼻炎动物模型的建立： 同实施例 52。
2.1.4 检测指标： 同实施例 52。
2.1.4.1 血清 cAMP、 cGMP測定： 同实施例 52。
2.1.4.2 鼻黏膜肥大细胞计数： 同实施例 52。
2.2 对 TD1所致豚鼠过敏性鼻炎的影响
2.2.1 同 2.1.1。
2.2.2 同 2.1.2。
2.2.3 豚鼠过敏性鼻炎动物模型的建立： 同实施例 52。
2.2.4 检测指标： 同实施例 52。
2.2.4.1 豚鼠行为学观察： 同实施例 52。
2.2.4.2 鼻分泌物嗜酸性粒细胞 (EOS)计数： 同实施例 52。
2.2.4.3 血清总 IgE和血液组胺测定： 同实施例 52。
2.2.4.4鼻黏膜厚度的测定： 同实施例 52。
2.3统计方法： 实验数据以 ¾tS表示， 单因素方差分析， 比较空白对照组、模型对照组、组 合物 4各组之间的差异， PO.05判断为差异具有显著性， P<0.01判断为差异具有极显著性。
3结果
3.1 组合物 4对卵蛋白所致大鼠过敏性鼻炎的影响
3.1.1 对大鼠行为学的影响： 见表 2。造模后， 造模各组大鼠体征计数积分达标， 相互之间无 显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 受试药物中、 高组和鼻炎康 组的体征积分均有明显降低 (PO.01或 PO.05), 低剂量组亦有降低的趋势。
表 2组合物 4对大鼠过敏性鼻炎给药前后症状积分的影响 （X ±S) 动物 剂量 (g 给药后 组别 给药前
数 生药 kg) 7天 14天 21天 空白对照组 10 - 0.35±0.31 0.40±0.22 0.37±0.19 0.33±0.14 模型对照组 10 - 6.68±1.52** 6.60±1.27** 6.90±1.32** 6.54±1.16** 鼻炎康组 10 0.41 6.63±1.24** 3.24±0.96ΔΔ 3.67±1.24ΔΔ 2.96±0.98ΔΛ 受试药低剂量组 10 1.0 6.74±1.15** 5.80±0.85 5.76±1.39 5.61 ±1.06 受试药中剂量组 10 2.0 6.52±1.34** 5.27±1.23Λ 5.29±1.43Δ 4.56±1.45ΛΔ 受试药高剂量组 10 6.0 6.6 ±1.08** 4.66*0.82 4.40±1.36 4.24±1.33 注： 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01。
3.1.2 组合物 4对大鼠血清 cAMP、 cGMP 的含量变化的影响： 实验结果见表 3。 与空白对照 组比较， 模型组血清 cAMP含量明显下降 （P<0.01) ， 血清 cGMP含量明显上升（P<0.01)。 与 模型对照组相比较， 鼻炎康组和各受试药物组血清 cAMP的含量明显上升 （Ρ<0.01¾Ρ<0.05); 鼻炎康组和受试药物中、高剂量组 cGMP含量明显下降 （PO.01或 P<0.05)，低剂量组也有降低 的趋势。
3.1.2 组合物 4对大鼠鼻點膜肥大细胞的影响： 实验结果见表 3。 模型对照组鼻黏膜肥大细胞 数目明显增多， 有极显著差异 (P<0.01)。与模型组比较， 鼻炎康组和受试药物治疗组鼻黏膜肥 大细胞数目均明显减少， 其差异有显著意义 (P<0.01)。 表 3 组合物 4对大鼠血清 cAMP、 cGMP的含量及鼻黏膜肥大细胞的影响 （X±S)
剂量 (g
动物 cAMP cGMP 肥大细胞计数
组别 生药
数 (pmol/ml) (pmol ml) (个）
/kg)
空白对照组 10 20.05±4.97 9.80±2.66 1.70±1.39
模型对照组 10 10.30±3.88** 14.85±4.86* 14.29±4.73**
鼻炎康组 0.41 10 18.30±3.59ΔΛ 9.0( 2.46Δ' 5.86±2.19ΔΔ
受试药低剂量组 1.0 10 14.15±3.90Δ 12.45±3.95 8.91±3.47ΔΔ
受试药中剂量组 2.0 10 15.85±5.24Δ 10.60±2.82'i 7.77±3.21ΛΔ
受试药高剂暈组 6.0 10 16.75±4.09ΔΛ 9.20±3.96A^ 6.54±2.06ΛΑ
注： 与空白组比较， *Ρ<0.05，**Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01。
3.2 组合物 4对 TDI所致豚鼠过敏性鼻炎的影响
3.2.1 对豚鼠行为学的影响： 见表 4。 造模后， 造模各组豚鼠体征计数积分达标， 相互之间无 显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 受试药物中、 高组和鼻炎康 组的体征积分均有明显降低 (?<0.01或?<0.05)， 低剂量组亦有降低的趋势。
表 4组合物 4对豚鼠过敏性鼻炎给药前后症状积分的影响 （X ±S) 动物 剂量 (g 给药后
组别 给药前 - 数 生药 kg) 7天 14天 21天 空白对照组 10 - 0.55±0.71 0.49±0.32 0.37±0.29 0.43±0.64 模型对照组 10 - 6.28±1.22** 6.47±1.17** 6.54±1.02** 6.00±0.96** 鼻炎康组 10 0.41 6.63±1.09** 5.34±0.86Δ 5.34±0.92Δ 4.77±1.28Δ 受试药低剂量组 10 1.0 6.54±1.30** 5.30±1.35 5.69±0.98 5.03±1.32 受试药中剂量组 10 2.0 6.42±1.07** 5.03±1.28Α 4.76±1.32ΑΔ 4.50±0.77ΔΔ 受试药高剂量组 10 6.0 6.69±1.13** 4.56±1.07ΔΔ 3.93±0.84ΛΔ 3.67±0.93ΛΔ 与空白组比较， **P<0.01 : 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
3.2.2 对豚鼠血液组胺及血清总 IgE的影响： 实验结果见表 5。 与空白对照组比较， 模型组血 液中组胺及血清总 IgE均有增髙 (PO.01), 表明实验造模成功； 与模型组相比， 受试药中剂量 组、 高剂量组、 鼻炎康组的组胺荧光吸收度及血清总 IgE浓度明显下降 (PO.01或 PO.05), 其 中中、 高剂量组组胺降至接近正常水平， 提示组合物 4可通过抑制血中组胺水平和血清中 IgE 起到治疗过敏性鼻炎的作用。
表 5 组合物 4对豚鼠血中组胺及血清总 IgE的影响 （X±S) 组别 动物数 剂量 (g生药 kg) 组胺荧光值 (mg-L) IgE(IU mL-l)
空白对照组 10 - 2.09±0.40 0.123±0.022
模型对照组 10 - 3.15±0.90** 0.162±0.034**
鼻炎康组 10 0.41 2.13±0.47ΔΔ 0.122±0.024ΔΔ
受试药低剂量组 10 1.0 3.00±0.45 0.136±0.028
受试药中剂量组 10 2.0 2.32±0.42Δ 0.128±0.025Δ
受试药髙剂量组 10 6.0 2.12±0.38ΔΔ 0.120±0.010ΔΔ
注： 与空白组比较， *P<0.05，**P<0.01 : 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔώΡ<0.01。
3.2J对豚鼠鼻分泌物嗜酸性粒细胞 (EOS)的影响： 实验结果见表 6。 模型组嗜酸性粒细胞计 数显著增加 (P<0.01)。 鼻炎康组和药物治疗组与模型组比较， 嗜酸性粒细胞计数均显著降低 (P<0.05或 P<0.01)。
3.2. 对豚鼠鼻黏膜厚度的影响： 结果见表 6。 结果显示， 与空白对照组比较， 模型组豚鼠鼻 中隔黏膜上皮有不同程度脱离， 厚度不均， 基底结构不清， 固有膜内小静脉、 毛细血管明显 扩张， 组织间隙扩大， 黏膜厚度明显增加 (P<0.01)。 与模型对照组比较， 鼻炎康组及药物治疗 组上述病理改变减轻， 黏膜厚度明显降低 (P<0.01)。
表 6组合物 4对豚鼠鼻分泌物 EOS及鼻黏膜厚度的影响 （X±S)
剂量 EOS计数 *黏膜厚度 组别 (g生药
动物数
/kg) ( x lO-9 L) (mm) 空白对照组 - 10 2.67±1.37 0.158±0.051
模型对照组 - 10 18.67±4.18** 0.285±0.072**
鼻炎康组 0.41 10 9.29±3.80ΔΔ 0.198±0.049ΔΔ
受试药低剂量组 1.0 10 13.28±4.11ΔΑ 0.215±0.048ΔΛ
受试药中剂量组 2.0 10 11.42±3.56ΔΔ 0.196±0.069ΔΔ
受试药高剂量组 6.0 10 10.14±2.86ΔΔ 0.187±0.061ΔΔ
注： 与空白组比较， *Ρ<0.05，**Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
4. 结论：
经动物实验研究表明： 组合物 4作用主要表现为以下几个方面： ①能显著模型大鼠舁部 症状分值， 减少提高过敏性鼻炎大鼠血清 cAMP含量， 降低 cGMP含量。 ②减少大鼠鼻黏膜 肥大细胞数量， 降低其在炎症局部的浸润。 ③能减少模型豚鼠鼻部症状分值。 ④降低豚鼠鼻 分泌物嗜酸性粒细胞个数及嗜酸性粒细胞在炎症局部的浸润。 ⑤能明显降低豚鼠血液组胺浓 度， 减少炎性介质。 ⑥减轻豚鼠动物鼻部黏膜的肿胀情况。 根据实验研究结果认为组合物 4 具有抗过敏性鼻炎的作用。 实施例 56: 实施例 4获得的组合物 4防治过敏性哮喘动物实验报告：
1.材料与方法
1.1样品来源： 受试物为组合物 4复合粉（西洋参、 灵芝、 冬虫夏草） 由江中药业股份有限 公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 10.97g。
1.2实验动物： 同实施例 53。
1.3主要试剂： 同实施例 53。
1.4主要仪器： 同实施例 53。
2实验方法
2.1 对 OVA所致大鼠过敏性哮喘的影响
2.1.1 动物分组： 大鼠雌雄各半， 随机分为两组， 即： 空白对照组 10只及造模组 70只。 成 功造模后的大鼠随机分为模型对照组、 阳性药组（地塞米松组） 、 组合物 4低、 中、 高剂量 组，每组 10只。
2.1.2 大鼠过敏性哮喘动物模型的建立： 同实施例 53。
2Λ3 剂量设计： 受试药组合物 4复合粉每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重， 由此 推算出大鼠每日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药/ kg体重； 中剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 髙剂 量组， 6.0g生药/ kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。 将样品以蒸馏水配制成 相应浓度（9.12mg干粉 /ml、 18.23mg干粉 /ml、 54.69mg干粉 /ml) 的灌胃液进行实验， 灌胃量 按 l.Oml/lOOg体重计算。模型对照组于激发前 30min灌胃同体积 0.9%生理盐水， 阳性药组于每 次激发前 30min给予地塞米松 0.5mg kg〖2〗。 组合物 4低、 中、 高剂量各组于每次激发前 30min分 别给予各剂量受试药。 空白对照组在相同时间腹腔注射、 雾化及灌胃同体积 0.9%生理盐水。 每日灌胃 1次， 连续 21天。
2.1.4 大鼠引喘潜伏期的记录： 同实施例 53。
2.1.5 IL- 4、 IFN 的含量测定： 同实施例 53。
2.1.6肺组织中 EOS的含量测定： 同实施例 53。
2.2 对 Ach和 His混合气体所致豚鼠过敏性哮喘的影响
2.2.1 同 2.1.1。
2.2.2 豚鼠过敏性哮喘动物模型的建立： 同实施例 53。
2.2.3 剂量设计： 同 2.1.3。
2.2.4 引喘潜伏期的记录： 同 2.1.4.1。
2.2.5血清和 BALF中 IgE的测定： 同实施例 53。
2.3统计方法： 同实施例 53。 3结果
受受受
3.1 组合受受受模空试试试阳物 4对 OVA所致大鼠过敏性哮喘的影响
模试试空试阳性型药药药白
3.1.1对大鼠性药型药药对对对低白高中引受受喘潜伏期的影响： 见表 1。 造模各组大鼠引喘潜伏期达标， 相互之间无显著性
对低对对高中照照照剂剂剂空模试试阳照照剂剂剂照
差异， 提示造模成性药型药白功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 阳性对照组和受试药中、 髙剂量组
对对低对中组组组
大鼠的引喘潜伏期均有照剂剂照照明显延长 (?<0.05或?<0.01)。
组组量量组
表 1 组合物 4对大鼠引喘潜伏期的影响 （X ±S)
组别 动物数¾ o o c 剂量 (g生药 kg) 给药前 给药后
0 360 360
0 77.24±13.82** 75.54±12.86**
0 0.5mg kg 74.66±11.09** 159.77±20.28Δ
0 1.0 75.63±15.30** 85.03±21.32
0 2.0 78.52±14.07** 96.50±23.65Δ
0 6.0 78.59±17.13** 102.67±23.87Δ,! 注： 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01。
3.1.2 对大鼠血清中 IL-4、 IFN 的含量变化的影响： 实验结果见表 2。 与空 对照组相比较， 模型组血清中 IFN -γ的含量明显降低 (P<0.01),而血清中 IL-4含量明显升高 (P<0.01),提示哮喘 发作期存在着严重的 IFN-Y/IL"4比例的失衡； 与模型组相比较， 地塞米松组与受试药中、 高剂 量组的 IL-4含量均有明显降低 (？<0.05或？<0.01), IFN-γ含量也有明显升高 (P<0.05或 PO.01), 提示受试药物可纠正失衡的 IFN-y/IL-4比值。 表 2 组合物 4对大鼠血清 IL- 4、 IFN-γ的含量变化的影响 （X ±S ) 组; 剂量 (g生药/ kg) 动物数 IL- 4 (pg/ml) IFN-y(pg ml)
10 12.72±2.53 24.31 ±4.17
10 22.45±3.58** 11.85±3.46**
0 10 13.51±4.31ΔΔ 20.26±4.86ΔΔ
10 20. 57±3.18 13.78±3.77
10 18.25±4.14Δ 15.60±3.82厶
10 厶厶
16.12±3.37ΔΔ 17.36±4.96 注： 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
3.1 对大鼠肺组织中 EOS含量的影响：实验结果见表 3。模型对照组大鼠嗜酸性粒细胞计数 显著增加 (P<0.01); 与模型组比较， 阳性对照组及受试药中、 髙剂量药组 EOS含量明显减少 (P<0.01 ) ， 提示组合物 4可能通过降低大鼠肺组织中 EOS含量起到治疗过敏性哮喘的作用。 表 3 组合物 4对大鼠肺组织中 EOS含量的影响 （X ±S )
剂量 (g生药 kg) 动物数 EOS (个/ HP)
- 10 2.24±0.85
- 10 103.60±13.94**
0.5mg kg 10 28.39±4.26ΔΛ
1.0 10 93. 21±11.29
2.0 10 78.13±10.34ΔΔ 受受受
模空试试阳试 ― ~受试药髙剂量组 6.0 10 65.22±8.49ΔΔ
性药型药药白
对对对低高中 注： 与空白组比较. **Ρ<0.01 : 与模型组比较， ΔΔΡ<0.01。
照照剂剂照剂受受受
3.2 组合物 4模试试空试阳对 Ach和 His混合气体所致豚鼠过敏性哮喘的影响
性型药药药白
3.2.1 对豚鼠引喘对对对低髙中潜伏期的影响： 见表 4。 造模后， 造模各组豚鼠引喘潜伏期达标， 相互之间
照剂剂照照剂
无显著性差异， 提示组组组量量量造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 阳性对照组和受试药中、 髙剂量组豚鼠的引喘潜伏期均有明显延长 (PO.05或 P<0.01)。 提示组合物 4对豚鼠的哮喘症状 有明显改善。 表 4 组合物 4对豚鼠引喘潜伏期的影响 （X ±S)
组别 动物数 剂量 (g生药/ kg) 给药后
10 360 360
10 76.18±10.82** 77.00±10.96**
10 0.5mg kg 75.63±9.09** 155.77±16.28Δ'
10 1.0 76.54±14.30** 83.03±21.32
10 2.0 77.82±15.07** 97.50±24.77Δ
10 6.0 79.69±19.13** 110.67±24.93ΔΖ 注： 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01。
3.2.2 对哮喘豚鼠血清和 BALF中总 IgE的影响：实验结果见表 5。模型组血清和 BALF中总 IgE 含量明显升高 (P<0. 01); 与模型组相比较， 地塞米松组与受试药中、 高剂量组血清和 BALF中 总 IgE含量均有明显降低 ( PO.01或 PO.05), 提示地塞米松与受试药均可抑制豚鼠肺部过敏性 炎症反应， 改善哮喘症状。 表 5 组合物 4对啄鼠血清和 BALF中总 IgE的影响 （X ±S) 剂量 (g生药 kg) 动物数 血淸 （U L) BALF (U L)
10 2.04±0.83 3.61±0.84 较， **P<0.01 ; 10 5.62±1.37** 5.32±1.24**
0.5mg/kg Δ厶
10 3.75±1.31ΔΔ 3. 72±0.72 与模型组比较， 1.0 10 5. 11±2.18 4.15±1.57
2.0 -Δ ?<0.05,
10 4.25±1.14Δ 3.92±1.45
6.0 10 4.01±1.09ΔΔ 3.89±0.96^ Δ厶
PO.01 ,
3.2.3 对豚鼠肺组织中 EOS含量的影响： 实验结果见表 6。 与空白对照组比较，模型组豚鼠嗜 酸性粒细胞计数水平明显升高（P<0.01); 与模型组比较， 阳性对照组和受试药中、 高剂量组 豚鼠嗜酸性粒细胞计数水平显著下降（P<0.01),提示组合物 4可能通过降低豚鼠肺组织中 EOS 含量起到治疗过敏性哮喘的作用。 表 6组合物 4对豚鼠肺组织中 EOS含量的影响 （X ±S)
H 剂量 (g生药/ kg) ~动物数 EOS (个/ HP) - 10 5.24±2.85
- 10 93.60±14.94**
0.5mg kg 10 30.79±7.25ΔΔ
1.0 10 82. 28±12.19
受受受 2.0 10 70.25±12.04ΔΔ
模试试空试阳
6.0 10 59.22±11.69ΔΔ
性药药型药白
注对低对对髙中- 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΔΡ<0.01。
照剂剂照照剂
4.结论：
Hd
经动物实验研宄表明，组合物 4能显著改善模型组大鼠哮喘症状及延长啄鼠引喘潜伏期; 能降低哮喘大鼠血清中 IL-4含量及升高 IFN-γ含量， 纠正失衡的 IFN-Y/IL-4比值； 降低大鼠 和豚鼠肺组织中嗜酸性粒细胞个数， 改善嗜酸性粒细胞在炎症局部的浸润； 降低豚鼠血清和 BALF中总 IgE含量， 改善肺部炎症症状。 因此认为组合物 4具有抗过敏性哮喘的作用。 实施例 57: 实施例 5获得的组合物 5抗过敏及过敏性皮炎动物试验报告：
1.材料与方法
1.1样品来源： 受试药为组合物 5复合粉（西洋参、 灵芝、 虫草菌粉、 冬虫夏草） 由江中药 业股份有限公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 12.39g, 每人每日推荐摄入量为： 24g 生药 /60kg体重。
1.2实验动物： 同实施例 51。
1.3主要试剂： 同实施例 51。
1.4主要仪器： 同实施例 51。
2实验方法
2.1动物分组： 动物根据体重随机分组， 每组 10只。 设立模型对照组， 组合物 5低、 中、 高 剂量组、 阳性药对照组（强的松）。
2.2剂量设计： 受试药组合物 5每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重。 由此推算出小 鼠每日摄入量为： 低剂量组， 2.0g生药 kg体重； 中剂量组， 4.0g生药 kg体重； 高剂量组， 12.0g生药/ kg体重，分别相当于人每日摄入量的 5、 10和 30倍。将样品以蒸馏水配制成相应 浓度（16.14mg干粉 /mL、 32.28mg干粉 /mL、％.84mg千粉 /mL)的灌胃液进行实验。 大鼠每 日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药/ kg体重； 中剂量组， 2.0g生药/ kg体重： 高剂量组， 6.0g 生药 kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。将样品以蒸馏水配制成相应浓度 (8.08mg干粉 /mL、 16.14mg干粉 /mL、 48.42mg干粉 /mL) 的灌胃液进行实验。
2.3组合物 5对卵蛋白所致大鼠被动过敏反应 (PCA) 的影响
2.3.1抗血清制备： 同实施例 51。 2.3.2大鼠抗卵蛋白血清模型建立【1]: 取抗 OVA血清， 用生理盐水稀释成 1 : 4 、 1 : 8浓度。 大鼠 50 只， 随机分 5 组， 即模型对照组、 组合物 5低、 中、 髙剂量组， 阳性药对照组（强的 松)， 每组 10 只。模型组灌胃蒸馏水， 阳性药对照组灌胃 5mg kg强的松， 组合物 5低、 中、 高 剂量组分别灌胃不同浓度的试液， 给药容量 10mL/ kg , 每日 1次， 连续给药 14天。 第 15天背 部剃毛，用稀释的抗血清作背部皮内注射。每侧两点， 每点注射 0.1 mL。 48小时后， 每只大鼠 尾静脉注射 1%伊文思蓝、 1%卵清蛋白生理盐水的混合液 1.0 mL。 30 min动脉采血， 分离 血清， 按方法 121进行组胺含量的测定； 后处死大白鼠， 翻转背部皮肤， 测量蓝色反应斑直径， 比较给药组与模型组的差异； 取大鼠皮肤组织标本经中性甲醛固定， 梯度酒精脱水， 石蜡包 埋， 进行组织肥大细胞脱颗粒的检测 [3I。
23.3 组合物 5对 2， 4-二硝基氣苯所致小鼠耳麻皮肤迟发型超敏反应的影响 [4】：小鼠随机分成 5 组， 即模型对照组、组合物 5低、 中、髙剂量组， 阳性药对照组（强的松）， 每组 10 只。 5% 2， 4-硝基氯苯乙醇液涂布于小鼠腹部皮肤（去毛）致敏。致敏前两天灌胃给药，模型对照组给予 等容积蒸馏水， 阳性药对照组灌胃 5mg/kg强的松， 组合物 5各组动物灌胃给予相应试液，给药 容积为 0.1mL/10g体重， 每天给药 1次， 连续 10天； 致敏后第 7天用 1%的 2， 4-二硝基氯苯涂 右耳， 24小时后处死小鼠， 沿耳廓基线剪下两耳， 用直径 8 mm打下双耳同一部位圆片， 电 子分析天平精密称重， 以左、 右耳片重量之差作为迟发型超敏反应值。
2.3.4 组合物 5对低分子右旋糖酑致小鼠局部瘙痒的影响【5】： 小鼠随机分成 5组， 即模型对照 组、 组合物 5低、 中、 高剂量组， 阳性药对照组（强的松）， 每组 10只。 给小鼠灌胃给药， 每 天 1次，连续 10天。末次给药 30分钟之后，按 0.1g/10g尾静脉注射 0.0125%低分子右旋糖 Sf溶液。 观察记录各组小鼠在尾静脉注射低分子右旋糖酐溶液后 30分钟内出现的瘙痒 (前爪搔抓头部、 后爪挠躯干、 嘴咬全身各部位为疹痒指征)次数。
23.5 组合物 5对大鼠毛细血管通透性的影响【6]： 大鼠随机分 5 组， 即模型对照组、 组合物 5 低、 中、 高剂量组， 阳性药对照组（强的松）， 每组 10只。 模型对照组灌胃蒸馏水， 阳性药 对照组灌胃 5mg/kg强的松， 组合物 5低、 中、 髙剂量组分别灌胃不同浓度的试液， 给药容量 10mL/ kg , 每日 1次， 连续给药 10天。末次给药后 1 小时， 于大鼠背部脱毛区（药前先脱毛) 皮内注射 lmg mL磷酸组胺 O. lmL/只， 并立即尾静脉注射 1%伊文思蓝水溶液 lmlJ只， 20 分钟后断颈处死动物， 剪下兰斑皮肤， 剪碎， 浸泡于丙醑生理盐水溶液（7:3) 5mL中 48 小 时， 离心取上清液， 在 610nm波长测定吸收度。
2.4 统计方法： 实验数据以 ¾tS表示， 采用单因素方差分析， 比较模型对照组、 组合物 5 各组之间的差异， PO.05判断为差异具有显著性， PO.01判断为差异具有极显著性。
3结果 3.1组合物 5对大鼠被动过敏反应的影响
试验结果见表 1 , 2。 与模型对照组比较， 组合物 5低剂量有降低 1:4、 1:8减少卵蛋白血清 致敏大鼠蓝斑直径、 减少肥大细胞脱颗粒数及降低血清组胺含量的趋势， 但无显著性差异； 强的松对照组和组合物 5中、髙剂量组均有明显降低 1 :4、 1:8抗卵蛋白血清致敏大鼠蓝斑直径、 减少肥大细胞脱颗粒数及降低血清组胺含量的作用， 有显著或非常显著统计学差异。 提示组 合物 5对大鼠被动过敏反应有明显抑制作用。
表 1 组合物 5对 PCA大鼠蓝斑直径的影响 （ i±s)
剂量 动物数 蓝斑直径 （mm)
组别
(g生药/ kg) (只） 1 :4 1 :8
模型对照组 0.0 10 15.66 ±2.28 9.54 ±1.52 阳性对照组 5.0mg 10 1 1.35 ±1.74 ** 6.72 ±1.31 ** 受试药低剂量组 1.2 10 13.92 ±1.95 8.53±1.28
受试药中剂量组 2.4 10 12.77±2.24* 8.07±1.30*
受试药髙剂量组 7.2 10 12.10 ±2.30 ** 7.32 ±1.17 **
与模型对照组比较， *P<0.05, **P<0.01.
表 2 组合物 5对 PCA大鼠肥大细胞脱颗粒和血清组胺含量的影响 （ ±s) 剂量 (g生药 动物数 组胺荧光值 组别 脱颗粒数
/kg) (只） (mg L) 模型对照组 0.0 10 59.42±12.16 3.95±0.87 阳性对照组 10
5.0mg 21.33±10.48** 2.12±0.72** 受试药低剂量组 10
1.2 48.05±12.54 3.21±0.80 受试药中剂量组 2.4 10 44.29±12.66* 2.85±0.84*
10
受试药高剂量组 7.2 34.80± 12.07** 2.43±0.62** 与模型对照组比较， *P<0.05， **P<0.01 o
3.2 组合物 5对 2， 4-二硝基氣苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响
试验结果见表 3« 与模型对照组相比， 组合物 5中、 高剂量组小鼠耳片肿胀度明显减轻， 提示组合物 5有较好抑制 2, 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的作用。
表 3 组合物 5对 2, 4-二硝基氣苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响 （ i±s) 组别 剂量 (g生药 kg) 动物数（只） 耳片肿胀度 （mg) 模型对照组 0.0 10 6.82±0.86
阳性对照组 5.0mg 10 4.80±0.73** 受试药低剂量组 2.0 10 6.21 ±0.69
受试药中剂量组 4.0 10 5.86±0.76*
受试药高剂量组 12.0 10 5.21±0.85** 与模型对照组比较， *P<0.05, **P<0.01。
3.3 组合物 5对低分子右旋糖酑致小鼠局部瘙痒的影响
试验结果见表 4。 与模型对照组相比， 组合物 5中、 高剂量组大鼠 OD值明显下降， 提示组 合物 5对磷酸组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。
组合物 5对低分子右旋糖酑致小鼠局部瘙痒的影响 （ i±s) 组别 剂量 (g生药 kg) 动物数（只） 瘙痒次数 （30min)
模型对照组 0.0 10 28.66± 6.70 阳性对照组 5.0mg 10 17.20± 4.08" 受试药低剂量组 2.0 10 23.21±5.90
受试药中剂量组 4.0 10 20.42±6.34*
受试药高剂量组 12.0 10 18.55±4.92**
与模型对照组比较， *P<0.05, **P<0.01。
3. 组合物 5对大鼠毛细血管通透性的影响
试验结果见表 5。 与模型对照组相比， 组合物 5中、 高剂量组大鼠 OD值明显下降， 提示组 合物 5对磷酸组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。
组合物 S对大鼠毛细血管通透性的影响 （ ts)
组别 剂量 (g生药/ kg) 动物数（只） OD值 模型对照组 0.0 10 1.020± 0.130 阳性对照组 5.0mg 10 0.756± 0.102** 受试药低剂量组 1.2 10 0.953±0.133
受试药中剂量组 2.4 10 0.908±0.105* 受试药高剂量组 7.2 10 0.842±0.094** 与模型对照组比较， *P<0.05, **P<0.01。
4. 结论：
经动物实验研究表明： 组合物 5对卵蛋白所致大鼠被动过敏反应有明显抑制作用； 组合 物 5有较好抑制 2， 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的作用； 组合物 5对磷酸 组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。 以上结果提示组合物 5有较好的抗过 敏作用， 对于过敏性皮炎、 荨麻疹等过敏性疾病有较好的防治作用。 实施例 58: 实施例 5的组合物 5防治过敏性鼻炎动物实验报告：
1.材料与方法
1.1样品来源： 受试物为组合物 5复合粉（西洋参、 灵芝、 虫草菌粉、 冬虫夏草） 由江中药 业股份有限公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 12.39g。
1.2实验动物： 同实施例 52。
1.3主要试剂： 同实施例 52。
1. 主要仪器： 同实施例 52。
2实验方法
2.1 对 OVA所致大鼠过敏性鼻炎的影响
2.1.1 动物分组： 大鼠随机分为两组， 即： 空白对照组 10只及造模组 70只。 成功造模后的 大鼠按评分随机分为模型对照组、 阳性药组（鼻炎康组） 、 组合物 5高、 中、 低剂量组，每 组 10只。
2.1.2 剂量设计： 受试药组合物 5复合粉每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重， 由此 推算出大鼠每日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药/ kg体重； 中剂量组， 2,0g生药 kg体重； 高 剂量组， 6.0g生药 kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。 空白对照组和过敏 性鼻炎模型组给予等体积生理盐水灌胃， 鼻炎康组给予 410 mg /kg。 灌胃量按 1.0ml/100g体 重计算。 于造模成功后开始灌胃， 每日灌胃 1次， 连续 21天。
2.1 大鼠过敏性鼻炎动物模型的建立： 同实施例 52。
2.1.4 检测指标： 同实施例 52。
2.1.4.1 血清 cAMP、 cGMP测定： 同实施例 52。
2.1.4.2 鼻黏膜肥大细胞计数： 同实施例 52。
2.2 对 TDI所致豚鼠过敏性鼻炎的影响
2.2.1 同 2.1.1。
2.2.2 同 2,1.2。
2.2.3 豚鼠过敏性鼻炎动物模型的建立： 同实施例 52。
2.2. 检测指标： 同实施例 52。
2.2.4.1 豚鼠行为学观察： 同实施例 52。
2.2.4.2 鼻分泌物嗜酸性粒细胞 (EOS)计数： 同实施例 52。
2.2.4.3 血清总 IgE和血液组胺测定： 同实施例 52。
2.2.4.4鼻黏膜厚度的测定： 同实施例 52。
2.3统计方法： 实验数据以 ¾tS表示， 单因素方差分析， 比较空白对照组、模型对照组、组 合物 5各组之间的差异， PO.05判断为差异具有显著性， PO.01判断为差异具有极显著性。 3结果
3.1 组合物 5对卵蛋白所致大鼠过敏性鼻炎的影响 3.1.1 对大鼠行为学的影响： 见表 2。造模后， 造模各组大鼠体征计数积分达标， 相互之间无 显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 受试药物中、 高组和鼻炎康 组的体征积分均有明显降低 (P<0.01或 P<0.05), 低剂量组亦有降低的趋势。
表 2组合物 5对大鼠过敏性鼻炎给药前后症状积分的影响 （X ±S) 动物 剂量 (g 给药后
组别 给药前
数 生药/ kg)
7天 14天 21天 空白对照组 10 - 0.33±0.29 0.44±0.26 0.39±0.21 0.35±0.19 模型对照组 10 - 6.71±1.49** 6.57±1.24** 7.10±1.35** 6.51±1.18**
ΛΔ
鼻炎康组 10 0.41 6.58±1.21 ** 3.21±0.97ΔΔ 3.68±lW 2.95±1.02 受试药低剂量组 10 1.0 6.75±1.18** 5.82±0.87 5.89±1.42 5.63±1.08 受试药中剂量组 10 2.0 6.54±1.29** 5.40±1.24Δ 5.31±1.45Δ 4.57±1.43Δ
ΔΔ
受试药高剂量组 10 6.0 6.75±1.14** 4.68±0.84 4.45±1.38Δ^ 4.26±1.31Δ 注： 与空白组比较， **Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.0Ι。
3.1.2 组合物 5对大鼠血清 cAMP、 cGMP 的含量变化的影响： 实验结果见表 3。 与空白对照 组比较， 模型组血清 cAMP含量明显下降（P<0.01) ， 血清 eGMP含量明显上升（P<0.01)。 与 模型对照组相比较， 鼻炎康组和各受试药物组血清 cAMP的含量明显上升（PO.01或 PO.05); 鼻炎康组和受试药物中、高剂量组 cGMP含量明显下降（PO.01或 P<0.05)，低剂量组也有降低 的趋势。
3.1.2 组合物 5对大鼠鼻黏膜肥大细胞的影响： 实验结果见表 3。 模型对照组鼻黏膜肥大细胞 数目明显增多，有极显著差异 (P<0.01)。与模型组比较， 鼻炎康组和受试药物治疗组鼻黏膜肥 大细胞数目均明显减少， 其差异有显著意义 (P<0.01)。
表 3组合物 5对大鼠血清 cAMP、 cGMP的含量及鼻黏膜肥大细胞的影响 （X ±S)
剂量 (g
动物 cAMP cGMP 肥大细胞计数
组别 生药
数 (pmol ml) (pmol/ml) (个）
/kg)
空白对照组 10 19.98±4.96 9.72±2.64 1.69±1.41
模型对照组 10 10.27±3.85** 14.83±4.88** 14.33±4.75**
鼻炎康组 0.41 10 18.25±3.62ΔΔ 9.03±2.52ΔΔ 5.87±2.23ΔΔ
受试药低剂量组 1.0 10 14.13±3.91Λ 12.40±4.01 8.64±3.51ΛΑ
受试药中剂量组 2.0 10 15.86±5.23Δ 10.58±2.84A 7.79±3,18ΛΔ
受试药髙剂量组 6.0 10 17.74±4.12ΔΔ 9.25±4.05ΔΔ 6.56±2.17ΑΔ
注： 与空白组比较， *Ρ<0.05,**Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01。
3.2 组合物 5对 TDI所致豚鼠过敏性鼻炎的影响
3.2.1 对豚鼠行为学的影响： 见表 4。造模后， 造模各组豚鼠体征计数积分达标， 相互之间无 显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 受试药物中、 高组和鼻炎康 组的体征积分均有明显降低 (P<0.01或 P<0.05)， 低剂量组亦有降低的趋势。 表 4 组合物 5对豚鼠过敏性鼻炎给药前后症状积分的影响 （X±S) 动物 给药后
剂量 (g
组别 给药前 - 数 生药/ kg)
7天 14天 21天 空白对照组 10 - 0.57±0.73 0.48±0.35 0.36±0.30 0.41±0.66 模型对照组 10 - 6.27±1.24** 6.51±1.18** 6.51±1.04** 5.91±0.92** 鼻炎康组 10 0.41 6.65±1.13** 5.31±0.87Δ 5.364±0.91Δ 4.79±1.31Δ 受试药低剂量组 10 1.0 6.56±1.28** 5.37±1.35 5.72±0.99 5.08±1.35 受试药中剂量组 10 2.0 6.44±1.05** 5.35±1.26Δ 4.75±1.30ΔΔ 4.54±0.79ΔΔ 受试药髙剂量组 10 6.0 6.71±1.15** 4.57±1.08ΔΔ 3.94±0.87ΔΔ 3.66±0.95ΔΔ 与空白组比较， **P<0.01 : 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01.
3.2.2 对豚鼠血液组胺及血淸总 IgE的影响： 实验结果见表 5。 与空白对照组比较， 模型组血 液中组胺及血清总 IgE均有增髙 (P<0.01)， 表明实验造模成功； 与模型组相比， 受试药中剂量 组、 高剂量组、 鼻炎康组的组胺荧光吸收度及血清总 IgE浓度明显下降 ^^(^(^或？^ ， 其 中中、 高剂量组组胺降至接近正常水平. 提示组合物 5可通过抑制血中组胺水平和血清中 IgE 起到治疗过敏性鼻炎的作用。 表 5 组合物 5对豚鼠血中组胺及血清总 IgE的影响 （X±S) 组别 动物数 剂量 (g生药/ kg) 组胺荧光值 (mg L) IgE(IU mL-l)
空白对照组 10 - 2.13±0.34 0.125±0.021
模型对照组 10 - 3.17±0. 88** 0.160±0.033**
鼻炎康组 10 0.41 2.15±0.46ΔΔ 0.121±0.025ΔΔ
受试药低剂量组 10 1.0 2.94±0.46 0.135±0.029
受试药中剂量组 10 2.0 2.33±0.41Δ 0.124±0.026Δ
受试药高剂量组 10 6.0 2.15±0.37ΔΔ 0.118±0.009ΑΑ
注： 与空白组比较， *Ρ<0.05，**Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01.
3.2 对豚鼠鼻分泌物嗜酸性粒细胞 (EOS)的影响： 实验结果见表 6。 模型组嗜酸性粒细胞计 数显著增加 (P<0.01)。 鼻炎康组和药物治疗组与模型组比较， 嗜酸性粒细胞计数均显著降低 (PO.05或 P<0.01)。
3.2.4 对脎鼠鼻黏膜厚度的影响： 结果见表 6。 结果显示， 与空白对照组比较， 模型组豚鼠鼻 中隔黏膜上皮有不同程度脱离， 厚度不均， 基底结构不清， 固有膜内小静脉、 毛细血管明显 扩张， 组织间隙扩大， 黏膜厚度明显增加 (P<0.01)。 与模型对照组比较， 鼻炎康组及药物治疗 组上述病理改变减轻， 黏膜厚度明显降低 (P<0,01)。 表 6 组合物 5对豚鼠鼻分泌物 EOS及鼻黏膜厚度的影响 （X±S)
Figure imgf000047_0001
空白对照组 - 10 2.68±1.36 0.157±0.050
模型对照组 - 10 18.64±4.14** 0.283±0.071 **
鼻炎康组 0.41 10 9.27±3.75ΔΔ 0.19 ±0.047ΔΔ 受试药低剂量组 θ Ϊ0 11.27±4.13ΔΔ 0.214±0.049ΔΔ 受试药中剂量组 2.0 10 9.44±3.55ΔΔ 0.191±0.067ΛΔ
受试药高剂量组 6.0 10 7.12±2.76ΔΔ 0.186±0.059ΔΔ
注： 与空白组比较， *Ρ<0.05,**Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01.
4. 结论：
经动物实验研宄表明： 组合物 5作用主要表现为以下几个方面： ①能显著模型大鼠鼻部 症状分值， 减少提髙过敏性鼻炎大鼠血清 cAMP含量， 降低 cGMP含量。 ②减少大鼠鼻黏膜 肥大细胞数量， 降低其在炎症局部的浸润。 ③能减少模型豚鼠鼻部症状分值。 ④降低豚鼠鼻 分泌物嗜酸性粒细胞个数及嗜酸性粒细胞在炎症局部的浸润。 ⑤能明显降低豚鼠血液组胺浓 度， 减少炎性介质。 ⑥减轻豚鼠动物鼻部黏膜的肿胀情况。 根据实验研宄结果认为组合物 5 具有抗过敏性鼻炎的作用。 实施例 59: 实施例 5获得的组合物 5防治过敏性哮喘动物实验报告：
1.材料与方法
1.1样品来源： 受试物为组合物 5复合粉（西洋参、 灵芝、 虫草菌粉、 冬虫夏草） 由江中药 业股份有限公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 12.39g。
1.2实验动物： 同实施例 53。
1.3主要试剂： 同实施例 53。
1.4主要仪器： 同实施例 53。
2实验方法
2.1 对 OVA所致大鼠过敏性哮喘的影响
2.1.1 动物分组： 大鼠雌雄各半， 随机分为两组， 即： 空白对照组 10只及造模组 70只。 成 功造模后的大鼠随机分为模型对照组、 阳性药组（地塞米松组） 、 组合物 5低、 中、 高剂量 组，每组 10只。
2.1.2 大鼠过敏性哮喘动物模型的建立： 同实施例 53。
2.1.3 剂量设计： 受试药组合物 5复合粉每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重， 由此 推算出大鼠每日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药/ kg体重； 中剂量组， 2.0g生药/ kg体重： 高剂 量组， 6.0g生药 kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。 将样品以蒸馏水配制成 相应浓度（8.07mg干粉 /ml、 16.14mg千粉 /m 48.43mg干粉 /ml) 的灌胃液进行实验， 灌胃量 按 1.0ml/100g体重计算。模型对照组于激发前 30min灌胃同体积 0.9%生理盐水， 阳性药组于每 次激发前 30min给予地塞米松 0.5mg/kg【21。 组合物 5低、 中、 高剂量各组于每次激发前 30min分 别给予各剂量受试药。 空白对照组在相同时间腹腔注射、 雾化及灌胃同体积 0.9%生理盐水。 每日灌胃 1次， 连续 21天。
2.1.4 大受受受鼠引喘潜伏期的记录： 同实施例 53。
模试试试空阳
2.1.5 IL- 4、性型药药药白 IFN^的含量测定： 同实施例 53。
对对低对高中
照照剂剂剂照
2.1.6肺组织中 EOS的含量测定： 同实施例 53。
2.2 对 Ach和 His混合气体所致豚鼠过敏性哮喘的影响
2.2.1 同 2.1.1。
2.2.2 豚鼠过敏性哮喘动物模型的建立： 同实施例 53。
2.2.3 剂量设计： 同 2.1.3。
2.2.4 引喘潜伏期的记录： 同 2丄 4.1。
2.2.5血清和 BALF中 IgE的测定： 免疫放射双抗夹心法。
2.3统计方法： 同实施例 53。
3结果
3.1 组合物 5对 OVA所致大鼠过敏性哮喘的影响
3.1.1对大鼠引喘潜伏期的影响： 见表 1。 造模各组大鼠引喘潜伏期达标， 相互之间无显著性 差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 阳性对照组和受试药中、 高剂量组 大鼠的引喘潜伏期均有明显延长 (P<0.05或 P<0.01)。
表 1 组合物 5对大鼠引喘潜伏期的影响 （X ±S)
动物数 剂量 (g生药/ kg) 给药前 给药后
10 - 360 360
10 - 77.31±13.84** 75.61±12.89**
10 0.5mg/kg 74.64±11.03** 160.21±20.32Δ
10 1.0 75.62±15.28** 85.04±21.35
10 2.0 78.49±14.08** 96.48±23.61Λ
10 6.0 77.84±17.43** 102.68±23.85Δ 注： 与空白组比较， **P<0.01 : 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
3.1.2 对大鼠血清中 IL-4、 IFN>y的含量变化的影响： 实验结果见表 2。与空白对照组相比较， 模型组血清中 IFN -γ的含量明显降低 (P<0.01)，而血清中 IL-4含量明显升高 (P<0.01),提示哮喘 发作期存在着严重的 IFN-Y IL-4比例的失衡； 与模型组相比较， 地塞米松组与受试药中、高剂 量组的 IL-4含量均有明显降低 (PO.05或 PO.01), IFN-γ含量也有明显升高 (?<0.05或？<0.01), 提示受试药物可纠正失衡的 IFN-Y/IL-4比值。
表 2组合物 5对大鼠血清 IL- 4、 IFN-γ的含量变化的影响 （X ±S)
M ~~剂量 (g生药/ kg) 动物数 IL- 4 (pg/ml) IFN-y(pg ml) 空白对照组 - 10 12.70±2.55 24. 29±4.18 模型对照组 - 10 22.46±3.57** 11.81±3.42** 0 10 13.50±4.28 20.27±4.88α 受受受 10 20. 59±3.15 13.79±3.71
试试阳试 10 18.26±4.13Δ 15.58±3.802
性受药受受药药 10 16.14±3.32ΔΔ 17.32±4.98Δ 模对低空试试阳试高中受受受
注： 与空白组比较性剂药药照剂剂型药白模试试试空阳， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05 ΔΔΡ<0.01
对对对低髙中性药药型药白
3.1.3 对大鼠肺组¾照照剂 ¾¾¾¾¾照剂剂织对对低对髙中中 EOS含量的影响：实验结果见表 3。模型对照组大鼠嗜酸性粒细胞计数
剂剂照照照剂
显著增加 (PO.01); 与模量组组组量量型组比较， 阳性对照组及受试药中、 高剂量药组 EOS含量明显减少 (PO.01 ) , 提示组合物 5可能通过降低大鼠肺组织中 EOS含量起到治疗过敏性哮喘的作用。
' & o o o
表 3 组合物 5对大鼠肺组织中 EOS含量的影响 （X ±S)
剂量 (g生药/ kg) 动物数 EOS (个/ HP)
I
1.0
2.0
6.0
注： 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΔΡ<0.01
3.2 组合物 5对 Ach和 His混合气体所致豚鼠过敏性哮喘的影响
3.2.1 对豚鼠引喘潜伏期的影响： 见表 4。造模后， 造模各组豚鼠引喘潜伏期达标， 相互之间 无显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 阳性对照组和受试药中、 髙剂量组豚鼠的引喘潜伏期均有明显延长 (PO.05或 P<0.01)。 提示组合物 5对豚鼠的哮喘症状 有明显改善。
表 4组合物 5对豚鼠引喘潜伏期的影响 （ Ϊ土 S)
S 动物数 ~剂量 (g生药/ kg) 给药前 给药后
10 360 360
10 77.18±10.82** 78.03± 10.94**
10 0 75.65±9.10** 155.78±16.24Δ
10 76.51±14.32 83.01±21.35
10 77.83±15,08** 97.4¾±24.75Δ
10 79.64±19.14** Π0.64±24.91Δ^ 注： 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01
3.2.2 对哮喘豚鼠血清和 BALF中总 IgE的影响：实验结果见表 5。模型组血清和 BALF中总 IgE 含量明显升髙 (P<0. 01); 与模型组相比较， 地塞米松组与受试药中、 高剂量组血清和 BALF中 总 IgE含量均有明显降低 ( PO.01或 P<0.05), 提示地塞米松与受试药均可抑制豚鼠肺部过敏性 炎症反应， 改善哮喘症状。
表 5 组合物 5对豚鼠血清和 BALF中总 IgE的影响 （ 土 S) 受受受
模空试阳试试 注： 与空白组比 性型药药药白 剂量 (g生药 kg) 动物数 血清（U L) BALF (U L)
对对对低髙中
照照照剂剂剂 10 2.01±0.85 3.60±0.81 较， **Ρ<0.01 ;
10 5.63±1.36** 5.30±1.25**
受受受 0.5mg kg 10 3.74±1.32ΔΔ 3. 70±0.73厶厶 与模型组比较， 模空阳试试试
型性药药药白 1.0 10 5. 13±2.17 4.18±1.59 厶,
对对对高中 2.0 Δ PO.05' 低 10 4.27±1.11Δ 3.90±1.46
照照剂剂照剂 6.0 10 3.98±1.13厶厶 3.88±0.94厶厶 ΔΔ
Ρ<0.01 , 组组量量组量
3.2.3 对豚鼠肺组织中 EOS含量的影响： 实验结果见表 6。 与空白对照组比较,模型组豚鼠嗜 酸性粒细胞计数水平明显升高（PO.01); 与模型组比较， 阳性对照组和受试药中、 髙剂量组 豚鼠嗜酸性粒细胞计数水平显著下降（P<0.01)，提示组合物 5可能通过降低豚鼠肺组织中 EOS 含量起到治疗过敏性哮喘的作用。
表 6组合物 5对豚鼠肺组织中 EOS含量的影响 （X±S)
剂量 (g生药/ kg) 动物数 EOS (个/ HP)
Figure imgf000051_0001
1.0
2.0
6.0
注： 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΔΡ<0.01。
4.结论：
经动物实验研究表明，组合物 5能显著改善模型组大鼠哮喘症状及延长豚鼠引喘潜伏期; 能降低哮喘大鼠血清中 含量及升髙 IFN- γ含量， 纠正失衡的 IFN-Y IL-4比值； 降低大鼠 和啄鼠肺组织中嗜酸性粒细胞个数， 改善嗜酸性粒细胞在炎症局部的浸润； 降低豚鼠血清和 BALF中总 IgE含量， 改善肺部炎症症状。 因此认为组合物 5具有抗过敏性哮喘的作用。 实施例 60: 实施例 6获得的组合物 6抗过敏及过敏性皮炎动物试验报告：
1.材料与方法
1.1样品来源： 受试药为组合物 6复合粉（西洋参、 灵芝、 发酵虫草菌粉、 玫瑰花） 由江中 药业股份有限公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 12.56g，每人每日推荐摄入量为： 24g 生药 /60kg体重。
1.2实验动物： 同实施例 51。
1.3主要试剂： 同实施例 51。
1.4主要仪器： 同实施例 51。
2实验方法 2.1动物分组： 动物根据体重随机分组， 每组 10只。 设立模型对照组， 组合物 6低、 中、 高 剂量组、 阳性药对照组（强的松）。
2.2剂量设计： 受试药组合物 6每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重。 由此推算出小 鼠每日摄入量为： 低剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 中剂量组， 4.0g生药/ kg体重； 高剂量组， 12.0g生药 kg体重，分别相当于人每日摄入量的 5、 10和 30倍。将样品以蒸馏水配制成相应 浓度 U5.925mg干粉 /mL、 31.85mg干粉 /mL、 95.55mg干粉 /mL) 的灌胃液进行实验。 大鼠 每日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药/ kg体重； 中剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 髙剂量组， 6.0g 生药 kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。将样品以蒸馏水配制成相应浓度 (7.96mg干粉 /mL、 15.92mg干粉 /mL、 47.76mg干粉 /mL) 的灌胃液进行实验。
2.3组合物 6对卵蛋白所致大鼠被动过敏反应（PCA) 的影响
2.3.1抗血清制备： 同实施例 51。
2.3.2大鼠抗卵蛋白血清模型建立： 取抗 OVA血清， 用生理盐水稀释成 1 : 4 、 1 : 8浓度。大 鼠 50 只， 随机分 5 组， 即模型对照组、组合物 6低、 中、高剂量组， 阳性药对照组（强的松）, 每组 10 只。 模型组灌胃蒸馏水， 阳性药对照组灌胃 5mg/kg强的松， 组合物 6低、 中、 高剂量 组分别灌胃不同浓度的试液， 给药容量 10mL/ kg， 每日 1次， 连续给药 14天。 第 15天背部剃 毛，用稀释的抗血清作背部皮内注射。每侧两点， 每点注射 0.1 mL。 48小时后， 大鼠尾静脉注 射 1%伊文思蓝、 1%卵清蛋白生理盐水的混合液 l.O mlJ只。 30 min动脉采血， 分离血清， 按方法【21进行组胺含量的测定； 后处死大白鼠， 翻转背部皮肤， 测量蓝色反应斑直径， 比较 给药组与模型组的差异； 取大鼠皮肤组织标本经中性甲醛固定， 梯度酒精脱水， 石蜡包埋， 进行组织肥大细胞脱颗粒的检测 ί3]。
23.3 组合物 6对 2， 4-二硝基氣苯所致小鼠耳麻皮肤迟发型超敏反应的影响： 小鼠 50只， 随 机分成 5组，即模型对照组、组合物 6低、中、高剂量组，阳性药对照组（强的松），每组 10只。
5% 2, 4-硝基氯苯乙醇液涂布于小鼠腹部皮肤（去毛）致敏。 致敏前两天灌胃给药， 模型对照 组给予等容积蒸馏水，阳性药对照组灌胃 5mg kg强的松，组合物 6各组动物灌胃给予相应试液， 给药容积为 0.1mL/10g体重， 每天给药 1次， 连续 10天； 致敏后第 7天用 1%的 2， 4·二硝基氯 苯涂右耳， 24小时后处死小鼠， 沿耳廓基线剪下两耳， 用直径 8 mm打下双耳同一部位圆片， 电子分析天平精密称重， 以左、 右耳片重量之差作为迟发型超敏反应值。
2.3.4 组合物 6对低分子右旋糖酐致小鼠局部瘙痒的影响：小鼠随机分成 5组， 即模型对照组、 组合物 6低、 中、 髙剂量组， 阳性药对照组（强的松）， 每组 10 只。 给小鼠灌胃给药， 每天 1 次， 连续 10天。 末次给药 30分钟之后， 按 0.1g 10g尾静脉注射 0.0125%低分子右旋糖酐溶液。 观察记录各组小鼠在尾静脉注射低分子右旋糖酑溶液后 30分钟内出现的瘙痒 (前爪搔抓头部、 后爪挠躯干、 嘴咬全身各部位为疹痒指征)次数。
2.3.5 组合物 6对大鼠毛细血管通透性的影响： 大鼠随机分 5组， 即模型对照组、组合物 6低、 中、 高剂量组， 阳性药对照组（强的松）， 每组 10只。 模型对照组灌胃蒸馏水， 阳性药对照 组灌胃 5mg/kg强的松， 组合物 6低、 中、 高剂量组分别灌胃不同浓度的试液， 给药容量 lOmlJ kg ， 每日 1次， 连续给药 10天。 末次给药后 1 小时， 于大鼠背部脱毛区（药前先脱毛）皮内 注射 lmg mL磷酸组胺 0. lmL/只， 并立即尾静脉注射 1%伊文思蓝水溶液 lmlJ只， 20分钟 后断颈处死动物， 剪下兰斑皮肤， 剪碎， 浸泡于丙酮生理盐水溶液（7:3) 5mL中 48 小时， 离心取上清液， 在 610nm波长测定吸收度。
2.4 统计方法： 实验数据以 ¾tS表示， 采用单因素方差分析， 比较模型对照组、 组合物 6 各组之间的差异， PO.05判断为差异具有显著性， PO.01判断为差异具有极显著性。
3结果
3.1组合物 6对大鼠被动过敏反应的影响
试验结果见表 1 , 2。 与模型对照组比较， 组合物 6低剂量有降低 1:4、 1:8减少卵蛋白血清 致敏大鼠蓝斑直径、 减少肥大细胞脱颗粒数及降低血清组胺含量的趋势， 但无显著性差异： 强的松对照组和组合物 6中、高剂量组均有明显降低 1:4、 1:8抗卵蛋白血清致敏大鼠蓝斑直径、 减少肥大细胞脱颗粒数及降低血清组胺含量的作用， 有显著或非常显著统计学差异。 提示组 合物 6对大鼠被动过敏反应有明显抑制作用。
表 1 组合物 6对 PCA大鼠蓝斑直径的影响（ ±s)
剂量 动物数 蓝斑直径 （mm)
组别
(g生药 kg) (只） 1 :4 1 :8
模型对照组 0.0 10 17.34 ±2.35 1 1.32 ±1.64 阳性对照组 5.0mg 10 13.22 ±1.90 ** 8.65 ±1.52** 受试药低剂量组 1.2 10 15.78 ±2.02 10.56±1.43
受试药中剂量组 2.4 10 14.61±2.32* 9.72±1.52*
受试药髙剂量组 7.2 10 14.16 ±2.08 ** 9.10 ±1.29**
与模型对照组比较， *P<0.05, **P<0.01。
表 2 组合物 6对 PCA大鼠肥大细胞脱颗粒和血清组胺含量的影响 （ its) 剂暈 (g生药 动物数 组胺荧光值 组别 脱颗粒数
/kg) (只）
模型对照组 0.0 10 58.42±12.33 3.86±0.82 阳性对照组 10
5.0mg 19.80±10.57** 2.07±0.76** 受试药低剂量组 10
1.2 47.16±12.72 3.10±0.84 受试药中剂量组 2.4 10 43.26±11.42* 2.84±0.80* 受试药高剂量组 7.2 ^ 33.60± 10.67** 2.21±0.67** 与模型对照组比较， *P<0.05， **P<0.01 o
3.2 组合物 6对 2， 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响
试验结果见表 3。 与模型对照组相比， 组合物 6中、 高剂量组小鼠耳片肿胀度明显减轻， 提示组合物 6有较好抑制 2, 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的作用。
表 3 组合物 6对 2， 4-二硝基氣苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响 （ its)
组别 剂量 (g生药 kg) 动物数 （只） 耳片肿胀度 （mg) 模型对照组 0.0 10 6.67±0.69
阳性对照组 5.0mg 10 4.62±0.79** 受试药低剂量组 2.0 10 6.05±0.82
受试药中剂量组 4.0 10 5.72^0.84
受试药高剂量组 12.0 10 5.07±0.80**
与模型对照组比较， *P<0.05， **P<0.01。
3.3 组合物 6对低分子右旋糖酑致小鼠局部瘙痒的影响
试验结果见表 4。 与模型对照组相比， 组合物 6中、 髙剂量组大鼠 OD值明显下降， 提示组 合物 6对磷酸组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。
组合物 6对低分子右旋糖酐致小鼠局部瘙痒的影响 （ its)
组别 剂量 (g生药/ kg) 动物数 （只） 瘙痒次数 （30min)
模型对照组 0.0 10 27.38± 6.82 阳性对照组 5.0mg 10 15.43± 4.56** 受试药低剂量组 2.0 10 22.39±5.73
受试药中剂量组 4.0 10 19.54±6.02*
受试药高剂量组 12.0 10 17.27±4.22**
与模型对照组比较， 叩<0.05， **P<0.01.
3.4 组合物 6对大鼠毛细血管通透性的影响
试验结果见表 5。 与模型对照组相比， 组合物 6中、 高剂量组大鼠 OD值明显下降， 提示组 合物 6对磷酸组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。
表 5 组合物 6对大鼠毛细血管通透性的影响 （ ^bs)
T 剂量 (g生药/ kg) ~~动物数（只) OD¾ 模型对照组 0.0 10 1.037土 0.108 阳性对照组 5.0mg 10 0.773± 0.109** 受试药低剂量组 1.2 10 0.96^0.136 受试药中剂量组 2.4 10 0.924±0.121 * 受试药高剂量组 7.2 10 0.860±0.090** 与模型对照组比较， *P<0.05， **P<0.01。
4.结论：
经动物实验研宄表明： 组合物 6对卵蛋白所致大鼠被动过敏反应有明显抑制作用； 组合 物 6有较好抑制 2, 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的作用； 组合物 6对磷酸 组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。 以上结果提示组合物 6有较好的抗过 敏作用， 对于过敏性皮炎、 荨麻瘆等过敏性疾病有较好的防治作用。 实施例 61： 实施例 6获得的组合物 6防治过敏性鼻炎动物实验报告：
1.材料与方法
1.1样品来源： 受试物为组合物 6复合粉（西洋参、 灵芝、 发酵虫草菌粉、 玫瑰花） 由江中 药业股份有限公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 12.56g。
1.2实验动物： 同实施例 52。
1.3主要试剂： 同实施例 52。
1. 主要仪器： 同实施例 52。
2实验方法
2.1 对 OVA所致大鼠过敏性鼻炎的影响
2.1.1 动物分组： 大鼠随机分为两组， 即： 空白对照组 10只及造模组 70只。 成功造模后的 大鼠按评分随机分为模型对照组、 阳性药组（鼻炎康组） 、 组合物 6高、 中、 低剂量组，每 组 10只。
2.1.2 剂量设计： 受试药组合物 6复合粉每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重， 由此 推算出大鼠每日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药/ kg体重； 中剂量组， 2.0g生药 kg体重； 髙 剂量组， 6.0g生药/ kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。 空白对照组和过敏 性鼻炎模型组给予等体积生理盐水灌胃， 鼻炎康组给予 410 mg /kg。 灌胃量按 1.0ml/100g体 重计算。 于造模成功后开始灌胃， 每日灌胃 1次， 连续 21天。
2.1.3 大鼠过敏性鼻炎动物模型的建立： 同实施例 52。
2.1.4 检测指标： 同实施例 52。
2.1.4.1 血清 cAMP、 cGMP测定： 同实施例 52。
2.1.4.2 鼻黏膜肥大细胞计数： 同实施例 52。
2.2 对 TDI所致豚鼠过敏性鼻炎的影响 2.2.1 同 2.1.1。
2.2.2 同 2.1.2。
2.2.3 豚鼠过敏性鼻炎动物模型的建立： 同实施例 52。
2.2.4 检測指标： 同实施例 52。
2.2.4.1 豚鼠行为学观察： 同实施例 52。
2.2.4.2 鼻分泌物嗜酸性粒细胞 (EOS)计数： 同实施例 52。
2.2.4.3 血清总 IgE和血液组胺测定： 同实施例 52。
2.2.4.4鼻黏膜厚度的测定： 同实施例 52。
2.3统计方法： 实验数据以 ¾tS表示， 单因素方差分析， 比较空白对照组、模型对照组、组 合物 6各组之间的差异， PO.05判断为差异具有显著性， P<0.01判断为差异具有极显著性。 3 结果
3.1 组合物 6对卵蛋白所致大鼠过敏性彝炎的影响
3.1.1 对大鼠行为学的影响： 见表 2。造模后， 造模各组大鼠体征计数积分达标， 相互之间无 显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 受试药物中、 髙组和鼻炎康 组的体征积分均有明显降低 (P<0.01或 PO.05), 低剂量组亦有降低的趋势。
表 2组合物 6对大鼠过敏性鼻炎给药前后症状积分的影响 （X ±S) 动物 剂量 (g 给药后 组别 给药前 - 数 生药 kg) 7天 14天 21天 空白对照组 10 - 0.33±0.29 0.44±0.26 0.39±0.21 0.3S±0.19 模型对照组 10 - 6.71±1.49** 6.57±1.24** 7.10±1.35** 6.51±1.18** 鼻炎康组 10 0.41 6.58±1.21** 3.21±0.97ΔΛ 3.68±1.23ΛΔ 2.95±1.02ΔΔ 受试药低剂量组 10 1.0 6.75±1.18** 5.82±0.87 5.89±1.42 5.63±1.08 受试药中剂量组 10 2.0 6.54±1.29** 5.40±1.24Λ 5.31±1.45Δ 4.57±1.43ΔΔ 受试药高剂量组 10 6.0 6.75±1.14** 4.68±0.84ΔΔ 4.45±1.38ΔΔ 4.26±1.31ΔΔ 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
3.1.2 组合物 6对大鼠血清 cAMP、 cGMP的含量变化的影响： 实验结果见表 3。 与空白对照 组比较， 模型组血清 cAMP含量明显下降（PO.01) , 血清 cGMP含量明显上升（P<0.01)。 与 模型对照组相比较， 鼻炎康组和各受试药物组血清 cAMP的含量明显上升（P<0.01¾P<0.05); 鼻炎康组和受试药物中、高剂量组 cGMP含量明显下降（P<0.01或 P<0.05)，低剂量组也有降低 的趋势。
3.1.2 组合物 6对大鼠鼻黏膜肥大细胞的影响： 实验结果见表 3。 模型对照组鼻黏膜肥大细胞 数目明显增多，有极显著差异 (P<0.01)。与模型组比较， 鼻炎康组和受试药物治疗组鼻黏膜肥 大细胞数目均明显减少， 其差异有显著意义 (P<0.01)。 表 3 组合物 6对大鼠血清 cAMP、 cGMP的含量及鼻黏膜肥大细胞的影响 （^±S) 剂量 (g
动物 cAMP cGMP 肥大细胞计数
组别 生药
数 (pmol/ml) (pmol/ml) (个）
/kg)
空白对照组 10 19.98±4.96 9.72±2.64 1.69±1.41
模型对照组 10 10.27±3.85** 14.83±4.88** 14.33±4.75**
鼻炎康组 0.41 10 18.25±3.62ΔΔ 9.03±2.52ΔΔ 5.87±2.23ΔΔ
受试药低剂量组 1.0 10 14.13±3.91Δ 】2.40±4.01 8.64±3.51ΔΔ
受试药中剂量组 2.0 10 15.86±5.23Α 10.58±2.84Δ 7.7^±3,18ΔΔ
受试药高剂量组 6.0 10 17.74±4.12ΔΔ 9.25±4.05ΔΔ 6.56±2.17ΔΔ
注： 与空白组比较， *Ρ<0.05，**Ρ<0.01 ^ 62:1
^-.- o o o与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
3.2 组合物 6对 TD1所致豚鼠过敏性鼻炎的影响
3.2.1 对豚鼠行为学的影响： 见表 4。 造模后， 造模各组豚鼠体征计数积分达标， 相互之间无 显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 受试药物中、 高组和鼻炎康 组的体征积分均有明显降低 (PO.01¾P<0.05), 低剂量组亦有降低的趋势。 表 4 组合物 6对豚鼠过敏性彝炎给药前后症状积分的影响 （X ±S) 剂量 (g 给药后
组别 给药前
生药/ kg)
7天 14天 21天 空白对照组 0.54±0.70 0.48±0.33 0.35±0.27 0.41±0.63 模型对照组 6.27±1.21** 6.3±1.19** 6.53±1.01** 6.01±0.97** 鼻炎康组 6.64±1.08** 5.28±0.86Δ 5.35±0.94Δ 4.79±1.25Δ 受试药低剂量组 6.56±1.31** 5.31±1.37 5.68±0.93 5.04±1.35 受试药中剂量组 6.43±1.09** 5.02±1.29Δ 4.74±1.31ΔΔ 4.51±0.79ΔΔ 受试药高剂量组
Figure imgf000057_0001
6.66±1.12** 4.53±1.08Δ' 3.93±0.82ΔΛ 3.63±0.92ΔΔ 注- 与空白组比较， **P<0.01 : 与模型组比较， ΔΡ<0.05 , ΔΔΡ<0.01 ο
3.2.2 对豚鼠血液组胺及血清总 IgE的影响： 实验结果见表 5。 与空白对照组比较， 模型组血 液中组胺及血清总 IgE均有增髙 (PO.01), 表明实验造模成功； 与模型组相比， 受试药中剂量 组、 高剂量组、 鼻炎康组的组胺荧光吸收度及血清总 IgE浓度明显下降 (?<0.01或?<0.05)， 其 中中、 高剂量组组胺降至接近正常水平， 提示组合物 6可通过抑制血中组胺水平和血清中 IgE 起到治疗过敏性鼻炎的作用。
表 5 组合物 6对豚鼠血中组胺及血清总 IgE的影响 （ 土 S) 组别 动物数 剂量 (g生药/ kg) 组胺荧光值 (mg L) IgE(IU mL-l)
空白对照组 10 2.08^0.41 0.124±0.023
模型对照组 10 3.14±0.91 ** 0.163±0.037**
#炎康组 10 2.14±0.48ΔΔ 0.121±0.020ΔΔ
受试药低剂量组 10 3.01 ±0.46 0.137±0.026
受试药中剂量组 10 2.31±0.45Δ 0.127±0.024Δ
受试药高剂量组 10 2.10±0.39ΔΔ 0.121±0.019ΔΔ
注： 与空白组比较， *P<0.05,**P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01。 3.2.3对豚鼠鼻分泌物嗜酸性粒细胞 (EOS)的影响： 实验结果见表 6。 模型组嗜酸性粒细胞计 数显著增加 (P<0.01)。 鼻炎康组和药物治疗组与模型组比较， 嗜酸性粒细胞计数均显著降低
Figure imgf000058_0001
3.2.4 对豚鼠鼻黏膜厚度的影响： 结果见表 6。 结果显示， 与空白对照组比较， 模型组豚鼠鼻 中隔黏膜上皮有不同程度脱离， 厚度不均， 基底结构不清， 固有膜内小静脉、 毛细血管明显 扩张， 组织间隙扩大， 黏膜厚度明显增加 (P<0.01)。 与模型对照组比较， 鼻炎康组及药物治疗 组上述病理改变减轻， 黏膜厚度明显降低 (P<0.01)。 表 6 组合物 6对豚鼠鼻分泌物 EOS及鼻黏膜厚度的影响 （又土 S)
剂量 (g生药 EOS计数 鼻黏膜厚度 组别 动物数
/kg) ( x l0.9/L) (mm) 空白对照组 - 10 2.68±1.39 0.159±0.050
模型对照组 - 10 18.66±4.17** 0.286±0.071**
鼻炎康组 0.41 10 10.30±3.81ΑΛ 0.199±0.048ΔΔ
受试药低剂量组 1.0 10 13.2^±4.12ΔΔ 0.216±0.047ΔΔ
受试药中剂量组 2.0 10 12.41±3.54ΔΔ 0.195±0.068ΔΛ
受试药高剂量组 6.0 10 11.13±2.87ΔΔ 0.196±0.063ΔΔ
注： 与空白组比较， *ΡΟ.05,**Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
4. 结论：
经动物实验研宄表明： 组合物 6作用主要表现为以下几个方面： ①能显著模型大鼠鼻部 症状分值， 减少提髙过敏性鼻炎大鼠血清 cAMP含量， 降低 cGMP含量。 ②减少大鼠鼻黏膜 肥大细胞数量， 降低其在炎症局部的浸润。 ③能减少模型豚鼠鼻部症状分值。 ④降低豚鼠鼻 分泌物嗜酸性粒细胞个数及嗜酸性粒细胞在炎症局部的浸润。 ⑤能明显降低豚鼠血液组胺浓 度， 减少炎性介质。 ⑥减轻豚鼠动物鼻部黏膜的肿胀情况。 根据实验研究结果认为组合物 6 具有抗过敏性鼻炎的作用。 实施例 62: 实施例 6的组合物 6防治过敏性哮喘动物实验报告；
1.材料与方法
1.1样品来源： 受试物为组合物 6复合粉 （西洋参、 灵芝、 发酵虫草菌粉、 玫瑰花） 由江中 药业股份有限公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 12.56g。
1.2实验动物： 同实施例 53。
1.3主要试剂： 同实施例 53。
1.4主要仪器： 同实施例 53。
2实验方法
2.1 对 OVA所致大鼠过敏性哮喘的影响 2.1.1 动物分组： 大鼠雌雄各半， 随机分为两组， 即： 空白对照组 10只及造模组 70只。 成 功造模后的大鼠随机分为模型对照组、 阳性药组（地塞米松组） 、 组合物 6低、 中、 高剂量 组，每组 10只。
2.1.2 大鼠过敏性哮喘动物模型的建立： 同实施例 53。
2.1.3 剂量设计： 受试药组合物 6复合粉每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重， 由此推 算出大鼠每日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药/ kg体重； 中剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 髙剂量 组， 6.0g生药/ kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。 将样品以蒸馏水配制成相 应浓度（（7.96mg干粉 /ml、 15.92mg干粉 /ml、 47.77mg干粉 /ml)的灌胃液进行实验， 灌胃量按 1.0ml/100g体重计算。模型对照组于激发前 30min灌胃同体积 0.9%生理盐水， 阳性药组于每次 激发前 30min给予地塞米松 0.5mg kg〖2】。 组合物 6低、 中、 高剂量各组于每次激发前 30min分别 给予各剂量受试药。 空白对照组在相同时间腹腔注射、 雾化及灌胃同体积 0.9%生理盐水。 每 日灌胃 1次， 连续 21天。
2.1.4 大鼠引喘潜伏期的记录： 同实施例 53。
2.1.5 IL- 4、 IFN 的含量测定： 同实施例 53。
2.1.6肺组织中 EOS的含量测定： 同实施例 53。
2.2 对 Ach和 His混合气体所致豚鼠过敏性哮喘的影响
2.2.1 同 2.1.1。
2.2.2 豚鼠过敏性哮喘动物模型的建立： 同实施例 53。
2.2.3 剂量设计： 同 2.1.3。
2.2.4 引喘潜伏期的记录： 同 2.1.4.1。
2.2.5血清和 BALF中 IgE的测定： 同实施例 53。
2.3统计方法： 同实施例 53。
3结果
3.1 组合物 6对 OVA所致大鼠过敏性哮喘的影响
3.1.1对大鼠引喘潜伏期的影响： 见表 1。 造模各组大鼠引喘潜伏期达标， 相互之间无显著性 差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 阳性对照组和受试药中、 髙剂量组 大鼠的引喘潜伏期均有明显延长 (P<0.05¾P<0.01)。
表 1 组合物 6对大鼠引喘潜伏期的影响 （X ±S) 组别 动物数 剂量 (g生药 kg) 给药前 给药后 空白对照组 10 - 360 360
模型对照组 10 - 77.23±13.81** 75.52±12.88** 阳性对照组 10 0.5mg kg 74.67土 11.10** 159.78±20.27ΔΛ 受试药低剂量组 Ϊ0 θ 75.62±15.31 ** 85.01±21.33 受受受受试药中剂量组 10 2.0 78.51±14.09** 96.52±23.67Λ
受模空试试试阳试药高剂量组 10 _6 78.58士 17.14** 112.30±25.8647ΔΔ 性型药药药白
注： 与空白组组比对对对低高中较， **Ρ<0.01 : 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
受受受
照照照剂剂剂模空试试试阳
3.1.2 对大鼠血清组组组量量量型性药药药白中 Π^4、 IFTN y的含量变化的影响： 实验结果见表 2。与空白对照组相比较，
对对对低髙中 Γ1
模型组血清中 IFN -γ的照照照剂剂剂含量明显降低 (PO.01),而血清中 IL-4含量明显升高 (P<0.01)，提示哮喘
量量组组量组
发作期存在着严重的 IFN-Y组组组/IL-4比例的失衡； 与模型组相比较， 地塞米松组与受试药中、高剂 量组的 IL-4含量均有明显降低 (PO.05或 P<0.01), IFN-γ含量也有明显升高 (PO.05或 P<0.01), 提示受试药物可纠正失衡的 IFN-Y/IL-4比值。
o o
表 2组合物 6对大鼠血清 IL- 4、 IFN-γ的含量变化的影响 （ ±S)
剂量 (g生药/ kg) 动物数 IL- 4 (pg ml) IFN^y(pg/ml)
10 12.71±2.52 24.31±4.19
10 22.43±3.57** 11.83±3.48**
0.5mg kg 10 13.50±4.32ΔΔ 20.27±4.89ΔΔ
1.0 10 20. 56±3.19 13.79±3.75
2.0 10 18.23±4.12Δ 15.61±3.81Δ
6.0 10 16.11±3.38ΛΛ 17.35±4.92ΔΔ 注： 与空白组比较， **P<0.01 : 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01。
3.1.3 对大鼠肺组织中 EOS含量的影响：实验结果见表 3。模型对照组大鼠嗜酸性粒细胞计数 显著增加 (PO.01); 与模型组比较， 阳性对照组及受试药中、 高剂量药组 EOS含量明显减少 (PO.01 ) , 提示组合物 6可能通过降低大鼠肺组织中 EOS含量起到治疗过敏性哮喘的作用。 表 3 组合物 6对大鼠肺组织中 EOS含量的影响 （X ±S)
剂量 (g生药 kg) ~动物数 EOS (个 HP)
10 2.22±0.86
10 103.61±13.93**
o 10 28.40±4.25ΔΔ
10 93. 22±11.28
10 78.11±10.36ΔΔ
10 65.20±8.47ΑΔ
注： 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΔΡ<0.01。 3.2 组合物 6对 Ach和 His混合气体所致豚鼠过敏性哮喘的影响
3.2.1 对豚鼠引喘潜伏期的影响： 见表 4。造模后， 造模各组豚鼠引喘潜伏期达标， 相互之间 无显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 阳性对照组和受试药中、 髙剂量组豚鼠的引喘潜伏期均有明显延长 (PO.05或 P<0.01)。 提示组合物 6对豚鼠的哮喘症状 有明显改善。
表 4组合物 6对豚鼠引喘潜伏期的影响 （ Ϊ士 S) 受受受
模试空阳试试 Ε¾ϋ 动物数 ~剂量 (g生药/ kg) 给药前 给^后
性型药药药白
对对对低高中 0 360 360
照照照剂剂剂受受受 0 76.17±10.81 ** 77.01±10.95**
ΔΔ
模试试试空阳 0 0.5mg kg 75.62±9.10** 155.78±16.29 受受受
性型药药药白模试试试空阳 0 1.0 76.52±14.31 ** 83.02±21.31
对对对低离中 Δ
性型药药药白 0 2.0 77.80±15.09** 97.51±24.78
照照剂剂照剂
低对对对髙中组组组量量量 0 6.0 79.71±19.12** 110.68±24.91
照照照剂剂剂
注： 与空白组比较， **P<组组量组量量01.01 : 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
3.2.2 对哮喘豚鼠血清和 BALF中总 IgE的影响：实验结果见表 5。模型组血清和 BALF中总 IgE 含量明显升髙 (P<0. 01); 与模型组相比较， 地塞米松组与受试药中、 高剂量组血清和 BALF中 总 IgE含量均有明显降低（ P<0.01或 P<0.05)， 提示地塞米松与受试药均可抑制豚鼠肺部过敏性 炎症反应， 改善哮喘症状。
表 5 组合物 6对豚鼠血清和 BALF中总 IgE的影响 （X ±S) 注： 与空白组比 组别 剂量 (g生药/ kg) 动物数 血清 （U/L) BALF (U/L)
10 2.08±0.81 3.60±0.85 较， **Ρ<0.01 ;
10 5.61±1.38** 5.30±1.26**
0.5mg/kg 10 3.74±1.30ΛΛ 3. 71±0.70ΔΔ 与模型组比较, 1.0 10 5. 10±2.19 4.13±1.56 Δ
Ρ<0·05, 2.0 10 4.24±1.12Δ 3.91±1.47Δ
6.0 10 4.03±1.04ΔΔ 3.87±0.91ΔΔ Ρ<0.01 <
3.2.3 对豚鼠肺组织中 EOS含量的影响： 实验结果见表 6。 与空白对照组比较，模型组豚鼠嗜 酸性粒细胞计数水平明显升髙 （PO.01); 与模型组比较， 阳性对照组和受试药中、 高剂量组 豚鼠嗜酸性粒细胞计数水平显著下降 （P<0.01)，提示组合物 6可能通过降低豚鼠肺组织中 EOS 含量起到治疗过敏性哮喘的作用。
表 6 组合物 6对豚鼠肺组织中 EOS含量的影响 （X ±S)
剂量 (g生药 kg) 动物数 EOS (个/ HP)
- 10 5.22±2.86
- 10 93.61±14.95**
0.5mg/Tcg 10 30.80±7.23ΔΔ
1.0 10 82. 29±12.21
2.0 10 66.26±12.02ΔΔ
6.0 10 59.2137±10.66Δ
注： 与空白组比较， **P<0.01 : 与模型组比较， ΔΔΡ<0.01。
4. 结论：
经动物实验研究表明，组合物 6能显著改善模型组大鼠哮喘症状及延长豚鼠引喘潜伏期; 能降低哮喘大鼠血清中 含量及升高 IFN-γ含量， 纠正失衡的 IFN-Y IL-4比值； 降低大鼠 和豚鼠肺组织中嗜酸性粒细胞个数， 改善嗜酸性粒细胞在炎症局部的浸润； 降低豚鼠血清和 BALF中总 IgE含量， 改善肺部炎症症状。 因此认为组合物 6具有抗过敏性哮喘的作用。 实施例 63: 实施例 7获得的组合物 7抗过敏及过敏性皮炎动物试验报告：
1.材料与方法
1.1样品来源： 受试药为组合物 7复合粉（西洋参、 灵芝、 冬虫夏草、 玫瑰花） 由江中药业 股份有限公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 12.19g， 每人每日推荐摄入量为： 24g生 药 /60kg体重。
1.2实验动物： 同实施例 51。
1.3主要试剂： 同实施例 51。
1.4主要仪器： 同实施例 51。
2实验方法
2.1动物分组： 动物根据体重随机分组， 每组 10只。 设立模型对照组， 组合物 7低、 中、 高 剂量组、 阳性药对照组（强的松）。
2.2剂量设计： 受试药组合物 7每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重。 由此推算出小 鼠每日摄入量为： 低剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 中剂量组， 4.0g生药 kg体重； 高剂量组， 12.0g生药/ kg体重，分别相当于人每日摄入量的 5、 10和 30倍。将样品以蒸馏水配制成相应 浓度（16.405mg干粉 /mL、 32.81mg干粉 /mL、 98.43mg干粉 /mL) 的灌胃液进行实验。 大鼠 每日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药/ kg体重； 中剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 高剂量组， 6.0g 生药/ kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。将样品以蒸馏水配制成相应浓度
(8.205mg干粉 /mL、 16.41mg干粉 /mL、 49.23mg干粉 /mL ) 的灌胃液进行实验。
2.3组合物 7对卵蛋白所致大鼠被动过敏反应 (PCA) 的影响
2.3.1抗血清制备： 同实施例 51。
2.3.2大鼠抗卵蛋白血清模型建立： 取抗 OVA血清， 用生理盐水稀释成 1 : 4 、 1 : 8浓度。大 鼠 50只， 随机分 5 组， 即模型对照组、组合物 7低、 中、高剂量组， 阳性药对照组（强的松）， 每组 10 只。 模型组灌胃蒸馏水， 阳性药对照组灌胃 5mg/kg强的松， 组合物 7低、 中、 高剂量 组分别灌胃不同浓度的试液， 给药容量 lOmL kg , 每日 1次， 连续给药 14天。 第 15天背部剃 毛，用稀释的抗血清作背部皮内注射。每侧两点， 每点注射 0.1 mL。 48小时后， 大鼠尾静脉注 射 1%伊文思蓝、 1%卵清蛋白生理盐水的混合液 l.O m 只。 30 min动脉采血， 分离血清， 按方法【2】进行组胺含量的测定； 后处死大白鼠， 翻转背部皮肤， 测量蓝色反应斑直径， 比较 给药组与模型组的差异； 取大鼠皮肤组织标本经中性甲醛固定， 梯度酒精脱水， 石蜡包埋， 进行组织肥大细胞脱颗粒的检测【31。 2.3.3 组合物 7对 2， 4-二销基氣苯所致小鼠耳糜皮肤迟发型超敏反应的影响 [4〗：小鼠 50 只，随 机分成 5组， 即模型对照组、组合物 7低、中、高剂量组， 阳性药对照组（强的松），每组 10 只。
5% 2， 4-硝基氯苯乙醇液涂布于小鼠腹部皮肤（去毛）致敏。 致敏前两天灌胃给药， 模型对照 组给予等容积蒸馏水，阳性药对照组灌胃 5mg/kg强的松,组合物 7各组动物灌胃给予相应试液， 给药容积为 0.1mL/10g体重， 每天给药 1次， 连续 10天； 致敏后第 7天用 1%的 2, 4-二硝基氯 苯涂右耳， 24小时后处死小鼠， 沿耳廓基线剪下两耳， 用直径 8 mm打下双耳同一部位圆片， 电子分析天平精密称重， 以左、 右耳片重量之差作为迟发型超敏反应值。
2.3.4 组合物 7对低分子右旋糖酐致小鼠局部瘙痒的影响 [5〗： 小鼠随机分成 5组， 即模型对照 组、 组合物 7低、 中、 高剂量组， 阳性药对照组（强的松）， 每组 10 只。 给小鼠灌胃给药， 每 天 1次，连续 10天。末次给药 30分钟之后，按 0.1g/10g尾静脉注射 0.0125%低分子右旋糖酐溶液„ 观察记录各组小鼠在尾静脉注射低分子右旋糖酑溶液后 30分钟内出现的瘙痒 (前爪搔抓头部、 后爪烧躯干、 嘴咬全身各部位为疹痒指征)次数。
2.3.5 组合物 7对大鼠毛细血管通透性的影响【61 : 大鼠随机分 5组， 即模型对照组、 组合物 7 低、 中、 高剂量组， 阳性药对照组（强的松）， 每组 10 只。 模型对照组灌胃蒸馏水， 阳性药 对照组灌胃 5mg kg强的松， 组合物 7低、 中、 高剂量组分别灌胃不同浓度的试液， 给药容量 lOmL/ kg , 每日 1次， 连续给药 10天。末次给药后 1 小时， 于大鼠背部脱毛区（药前先脱毛) 皮内注射 lmg/ mL磷酸组胺 0. lm!J只， 并立即尾静脉注射 1%伊文思蓝水溶液 lmL/只， 20 分钟后断颈处死动物， 剪下兰斑皮肤， 剪碎， 浸泡于丙酮生理盐水溶液（7:3) 5mL中 48 小 时， 离心取上清液， 在 610nm波长测定吸收度。
2.4 统计方法： 实验数据以 ¾tS表示， 釆用单因素方差分析， 比较模型对照组、 组合物 7 各组之间的差异， PO.05判断为差异具有显著性， PO.01判断为差异具有极显著性。
3结果
3.1组合物 7对大鼠被动过敏反应的影响
试验结果见表 1 , 2。 与模型对照组比较， 组合物 7低剂量有降低 1:4、 1:8减少卵蛋白血清 致敏大鼠蓝斑直径、 减少肥大细胞脱颗粒数及降低血清组胺含量的趋势， 但无显著性差异； 强的松对照组和组合物 7中、高剂量组均有明显降低 1:4、 1:8抗卵蛋白血清致敏大鼠蓝斑直径、 减少肥大细胞脱颗粒数及降低血清组胺含量的作用， 有显著或非常显著统计学差异。 提示组 合物 7对大鼠被动过敏反应有明显抑制作用。
表 1 组合物 7对 PCA大鼠蓝斑直径的影响 （ ±s)
M 动物数 蓝斑直径（mm)
组别
(g生药/ kg) (只） 1 :4 1 :8 模型对照组 0.0 10 17.50 ±2.27 11.66 ±1.92 阳性对照组 5.0mg 10 12.48 ±2.16 ** 8.32 ±1.63** 受试药低剂量组 1.2 10 15.65 ±2.44 10.55±1.78
受试药中剂量组 2.4 10 14.80±2.02* 9.70±1.39*
受试药高剂量组 7.2 10 13.68 ±2.50 ** 9.02 ±1.56**
与模型对照组比较， *P<0.05， **P<0.01. 组合物 7对 PCA大鼠肥大细胞脱颗粒和血清组胺含量的影响 （ its)
剂量 (g生药 动物数 组胺荧光值 组别 脱颗粒数
(只）
模型对照组 0.0 10 59.60±12.88 3.95±0.95 阳性对照组 5.0mg 10 17.54±11.23** 2.11±0.70** 受试药低剂量组 10
1.2 48.20±12.54 3.24±0.82 受试药中剂量组 2.4 10 44.17±11.96* 2.96±0.77* 受试药高剂量组 10
7.2 32.54± 10.03** 2.32±0.69** 与模型对照组比较， *P<0.05， **P<0.01 .
3.2 组合物 7对 2， 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响
试验结果见表 3。 与模型对照组相比， 组合物 7中、 高剂量组小鼠耳片肿胀度明显减轻， 提示组合物 7有较好抑制 2， 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的作用。
表 3 组合物 7对 2, 4-二硝基氣苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响 （ its) 组别 剂量 (g生药 kg) 动物数（只） 耳片肿胀度 （mg) 模型对照组 0.0 10 6.95±0.77
阳性对照组 5.0mg 10 4.84±0.70** 受试药低剂量组 2.0 10 6.23±0.89
受试药中剂量组 4.0 10 5.90±0.80*
受试药髙剂量组 12.0 10 5.21±0.85**
与模型对照组比较， *P<0.05， **P<0.01 o
3.3 组合物 7对低分子右旋糖酐致小鼠局部瘙痒的影响
试验结果见表 4。 与模型对照组相比， 组合物 7中、 高剂量组大鼠 OD值明显下降， 提示组 合物 7对磷酸组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。
表 4 组合物 7对低分子右旋糖酐致小鼠局部瘙痒的影响 （ i±s)
组别 剂量 (g生药 kg) 动物数 （只） 瘙痒次数 （30min)
模型对照组 0.0 10 28.42± 6.08 阳性对照组 5.0mg 10 15.57± 5.33** 受试药低剂量组 2.0 10 23.44±6.21 受试药中剂量组 4.0 10 20.38±6.92*
受试药高剂量组 12.0 10 17.62±5.06**
与模型对照组比较， *P<0.05, **P<0.01 o
3.4 组合物 7对大鼠毛细血管通透性的影响
试验结果见表 5。 与模型对照组相比， 组合物 7中、 髙剂量组大鼠 OD值明显下降， 提示组 合物 7对磷酸组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。
表 5 组合物 7对大鼠毛细血管通透性的影响 （ ts)
组别 剂量 (g生药/ kg) 动物数（只） OD值 模型对照组 0.0 10 0.943± 0.086 阳性对照组 5.0mg 10 0.662± 0.090** 受试药低剂量组 1.2 10 0.885±0.102
受试药中剂量组 2.4 10 0.832±0.088* 受试药高剂量组 7.2 10 0.724±0.095** 与模型对照组比较， *P<0.05, **P<0.01.
4. 结论：
经动物实验研究表明： 组合物 7对卵蛋白所致大鼠被动过敏反应有明显抑制作用； 组合 物 7有较好抑制 2， 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的作用； 组合物 7对磷酸 组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。 以上结果提示组合物 7有较好的抗过 敏作用， 对于过敏性皮炎、 荨麻疹等过敏性疾病有较好的防治作用。 实施例 64： 实施例 7获得的组合物 7防治过敏性鼻炎动物实验报告- 1.材料与方法
1.1样品来源： 受试物为组合物 7复合粉（西洋参、 灵芝、 冬虫夏草、 玫瑰花） 由江中药业 股份有限公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 12.19g。
1.2实验动物： 同实施例 52。
13主要试剂： 同实施例 52。
1.4主要仪器： 同实施例 52。
2实验方法
2.1 对 OVA所致大鼠过敏性鼻炎的影响
2.1.1 动物分组： 大鼠随机分为两组， 即： 空白对照组 10只及造模组 70只。 成功造模后的 大鼠按评分随机分为模型对照组、 阳性药组（鼻炎康组） 、 组合物 7髙、 中、 低剂量组，每 组 10只。
2.1.2 剂量设计： 受试药组合物 7复合粉每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重， 由此 推算出大鼠每日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药/ kg体重； 中剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 高 剂量组， 6.0g生药 kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。 空白对照组和过敏 性鼻炎模型组给予等体积生理盐水灌胃， 鼻炎康组给予 410 mg /kg。 灌胃量按 1.0ml/100g体 重计算。 于造模成功后开始灌胃， 每日灌胃 1次， 连续 21天。
2.1.3 大鼠过敏性彝炎动物模型的建立： 同实施例 52。
2.1. 检测指标： 同实施例 52。
2.1.4.1 血清 cAMP、 cGMP测定： 同实施例 52。
2.1.4.2 鼻黏膜肥大细胞计数: 同实施例 52。
2.2 对 TDI所致豚鼠过敏性鼻炎的影响
2.2.1 同 2.1.1。
2.2.2 同 2.1.2。
2.2.3 豚鼠过敏性鼻炎动物模型的建立： 同实施例 52。
2.2.4 检测指标： 同实施例 52。
2.2.4.1 豚鼠行为学观察： 同实施例 52。
2.2.4.2 鼻分泌物嗜酸性粒细胞 (EOS)计数： 同实施例 52。
2.2.4.3 血清总 IgE和血液组胺测定： 同实施例 52。
2.2.4.4鼻黏膜厚度的测定： 同实施例 52。
2.3统计方法： 实验数据以 ¾tS表示， 单因素方差分析， 比较空白对照组、模型对照组、组 合物 7各组之间的差异， PO.05判断为差异具有显著性， PO.01判断为差异具有极显著性。 3 结果
3.1 组合物 7对卵蛋白所致大鼠过敏性鼻炎的影响
3.1.1 对大鼠行为学的影响： 见表 2。造模后， 造模各组大鼠体征计数积分达标， 相互之间无 显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 受试药物中、 髙组和鼻炎康 组的体征积分均有明显降低 (PO.01或 P<0.05)， 低剂量组亦有降低的趋势。
表 2组合物 7对大鼠过敏性鼻炎给药前后症状积分的影响 （ Ϊ士 S) 动物 剂量 (g 给药后
组别 给药前
数 生药 kg) 7天 14天 21天 空白对照组 10 - 0.34±0.30 0.41±0.23 0.38±0.21 0.32±0.15 模型对照组 10 - 6.69±1.51** 6.61±1.28** 6.91±1.31** 6.51±1.18** 鼻炎康组 10 0.41 6.62±1.23** 3.22±0.97ΛΔ 3.68±1.22ΔΔ 2.93±1.01ΛΔ 受试药低剂量组 10 6.72±1.16** 5.81±0.86 5.75±1.41 5.60±1.07 受试药中剂量组 10 6.51±1.32** 5.28±1.21^ 5.31±1.44 4.54±1.46Λ 受试药髙剂量组 10 6.71±1.09** 4.68±0.81Λ 4.41±1.37Λ' 4.22±1.36Δ 注： 与空白组比较， **Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01。
3.1.2 组合物 7对大鼠血清 cAMP、 cGMP的含量变化的影响： 实验结果见表 3。 与空白对照 组比较， 模型组血清 cAMP含量明显下降（PO.01) , 血清 cGMP含量明显上升（P<0.01)。 与 模型对照组相比较， 鼻炎康组和各受试药物组血清 cAMP的含量明显上升（?<0.01或?<0.05); 鼻炎康组和受试药物中、髙剂量组 cGMP含量明显下降（PO.01或 P<0.05)，低剂量组也有降低 的趋势。
3.1.2 组合物 7对大鼠鼻點膜肥大细胞的影响： 实验结果见表 3。 模型对照组鼻黏膜肥大细胞 数目明显增多， 有极显著差异 (P<0.01)。与模型组比较， 鼻炎康组和受试药物治疗组鼻黏膜肥 大细胞数目均明显减少， 其差异有显著意义 (P<0.01)。
表 3组合物 7对大鼠血清 cAMP、 cGMP的含量及鼻黏膜肥大细胞的影响 （X±S)
剂量（g
动物 cAMP cGMP 肥大细胞计数
组别 生药
数 (pmol/ml) (pmol/ml) (个）
/kg)
空白对照组 10 20.06±4.99 9.81±2.67 1.70±1.39
模型对照组 10 10.31±3.89** 14.84±4.88** 14.28±4.71**
鼻炎康组 0.41 10 18.31±3.62ΔΔ 9.01±2.49ΔΔ 5.87±2.21 ΛΛ
受试药低剂量组 1.0 10 14.01±3.99 12.43±3.94 9.83±3.54ΛΔ
受试药中剂量组 2.0 10 15.84±5.22Δ 10.61±2.83Δ 8.75±3,20ΔΛ
受试药高剂量组 6.0 10 17.73±4.10ΔΛ 9.21±3.97ΑΔ 6.53±2.08ΔΔ
注： 与空白组比较， *Ρ<0.05,**Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05 , ΛΛΡ<0.01 ,
3.2 组合物 7对 TDI所致豚鼠过敏性鼻炎的影响
3.2.1 对豚鼠行为学的影响： 见表 4。造模后， 造模各组豚鼠体征计数积分达标， 相互之间无 显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 受试药物中、 高组和鼻炎康 组的体征积分均有明显降低 (PO.01或 PO.05), 低剂量组亦有降低的趋势。
表 4组合物 7对豚鼠过敏性鼻炎给药前后症状积分的影响 （X±S) 动物 剂量 (g 给药后
组别 给药前 - 数 生药/ kg) 7天 14天 21天 空白对照组 10 - 0.50±0.62 0.43±0.31 0.38±0.20 0.42±0.65 模型对照组 10 - 6.29±1.21 ** 6.48±1.16** 6.53±1.01 ** 6.02±0.98** 鼻炎康组 10 0.41 6.62±1.11** 5.32±0.89Δ 5.31±0.93Δ 4.78±1.29Δ 受试药低剂量组 10 1.0 6.53±1.30** 5.31±1.36 5.71±0.99 5.02±1.31 受试药中剂量组 10 2.0 6.41±1.09** 5.02±1.29Δ 4.77±1.31ΔΔ 4.51±0.79ΔΔ 受试药髙剂量组 10 6.0 6.71±1.12** 4.57±1.08ΔΔ 3.92±0.82ΔΔ 3.69±0.91ΔΔ 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01。
3.2.2 对豚鼠血液组胺及血清总 IgE的影响： 实验结果见表 5。 与空白对照组比较， 模型组血 液中组胺及血清总 IgE均有增高 (P<0.01), 表明实验造模成功； 与模型组相比， 受试药中剂量 组、 高剂量组、 鼻炎康组的组胺荧光吸收度及血清总 IgE浓度明显下降 (PO.01或 PO.05), 其 中中、 高剂量组组胺降至接近正常水平， 提示组合物 7可通过抑制血中组胺水平和血清中 IgE 起到治疗过敏性鼻炎的作用。 表 5 组合物 7对豚鼠血中组胺及血清总 IgE的影响 （X±S) 组别 动物数 剂量 (g生药 kg) 组胺荧光值 (mg-L) IgE(IU mL-l)
空白对照组 10 - 2.15±0.41 0.122±0.021
模型对照组 10 - 3.16±0.91** 0.161±0.035**
晷炎康组 10 0.41 2.14±0.48ΔΔ 0.120±0.025ΔΔ
受试药低剂量组 10 1.0 3.02±0.47 0.137±0.029
受试药中剂量组 10 2.0 2.31±0.44Α 0.127±0.026Δ
受试药髙剂量组 10 6.0 2.12±0.39ΔΔ 0.120±0.010ΔΔ
与空白组比较， *Ρ<0.05,**Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01 ο
3.2.3对豚鼠鼻分泌物嗜酸性粒细胞 (EOS)的影响： 实验结果见表 6。 模型组嗜酸性粒细胞计 数显著增加 (P<0.01)。 鼻炎康组和药物治疗组与模型组比较， 嗜酸性粒细胞计数均显著降低 (?<0.05或？<0.01)。
3.2.4 对豚鼠鼻黏膜厚度的影响： 结果见表 6。 结果显示， 与空白对照组比较， 模型组豚鼠鼻 中隔黏膜上皮有不同程度脱离， 厚度不均， 基底结构不清， 固有膜内小静脉、 毛细血管明显 扩张， 组织间隙扩大， 黏膜厚度明显增加 (P<0.01)。 与模型对照组比较， 鼻炎康组及药物治疗 组上述病理改变减轻， 黏膜厚度明显降低 (P<0.01)。 表 6 组合物 7对豚鼠鼻分泌物 EOS及鼻黏膜厚度的影响 （X±S)
Figure imgf000068_0001
空白对照组 - 10 2.60±1.36 0.157±0.052
模型对照组 - 10 17.52±4.21** 0.284±0.070**
募炎康组 0.41 10 12.28±3.81ΔΔ 0.197±0.045ΑΔ
受试药低剂量组 1.0 10 12.29±4.13ΔΑ 0.204±0.049ΔΔ
受试药中剂量组 2.0 10 11.41±3.57ΔΔ 0.184±0.066ΔΑ
受试药髙剂量组 6.0 10 10.13±2.86ΔΛ 0.166±0.068ΛΔ
注： 与空白组比较， *Ρ<0.05，**Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
4.结论：
经动物实验研究表明： 组合物 7作用主要表现为以下几个方面： ①能显著模型大鼠鼻部 症状分值， 减少提高过敏性鼻炎大鼠血清 cAMP含量， 降低 cGMP含量。 ②减少大鼠鼻黏膜 肥大细胞数量， 降低其在炎症局部的浸润。 ③能减少模型豚鼠鼻部症状分值。 ④降低豚鼠鼻 分泌物嗜酸性粒细胞个数及嗜酸性粒细胞在炎症局部的浸润。 ⑤能明显降低豚鼠血液组胺浓 度， 减少炎性介质。 ⑥减轻豚鼠动物鼻部黏膜的肿胀情况。 根据实验研宄结果认为组合物 7 具有抗过敏性鼻炎的作用。 实施例 65: 实施例 7获得的组合物 7防治过敏性哮喘动物实验报告：
1.材料与方法
1.1样品来源： 受试物为组合物 7复合粉（西洋参、 灵芝、 冬虫夏草、 玫瑰花） 由江中药业 股份有限公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 12.19g。
1.2实验动物： 同实施例 53。
1.3主要试剂： 同实施例 53。
1.4主要仪器： 同实施例 53。
2实验方法
2.1 对 OVA所致大鼠过敏性哮喘的影响
2.1.1 动物分组： 大鼠雌雄各半， 随机分为两组， 即： 空白对照组 10只及造模组 70只。 成 功造模后的大鼠随机分为模型对照组、 阳性药组（地塞米松组） 、 组合物 7低、 中、 髙剂量 组，每组 10只。
2.1.2 大鼠过敏性哮喘动物模型的建立： 同实施例 53。
2.1.3 剂量设计： 受试药组合物 7复合粉每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重， 由此 推算出大鼠每日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药 kg体重； 中剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 高剂 量组， 6.0g生药/ kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。 将样品以蒸馏水配制成 相应浓度 （8.20mg干粉 /ml、 16.41mg干粉 /ml、 49.22mg干粉 /ml) 的灌胃液进行实验， 灌胃量 按 1.0ml/100g体重计算。模型对照组于激发前 30min灌胃同体积 0.9%生理盐水， 阳性药组于每 次激发前 30min给予地塞米松 0.5mg/kg[2】。 组合物 7低、 中、 髙剂量各组于每次激发前 30min分 别给予各剂量受试药。 空白对照组在相同时间腹腔注射、 雾化及灌胃同体积 0.9%生理盐水。 每日灌胃 1次， 连续 21天。
2.1.4 大鼠引喘潜伏期的记录： 同实施例 53。
2.1.5 IL- 4、 IFN>7的含量测定： 同实施例 53。
2.1.6肺组织中 EOS的含量测定： 同实施例 53。
2.2 对 Ach和 His混合气体所致豚鼠过敏性哮喘的影响
2.2.1 同 2.1.1。
2.2.2 豚鼠过敏性哮喘动物模型的建立： 同实施例 53。
2.2.3 剂量设计： 同 2.1.3。 2.2.4 引喘潜伏期的记录： 同 2.1.4.1。
受受受
2.2.5血清模试空试试阳和 BALF中 IgE的测定： 同实施例 53。
性型药药药白
2.3统计方法对对对低高中： 同实施例 53。
照照照剂剂剂
3结果
3.1 组合物 7对 OVA所致大鼠过敏性哮喘的影响
3.1.1对大鼠引喘潜伏期的影响： 见表 1。 造模各组大鼠引喘潜伏期达标， 相互之间无显著性 差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 阳性对照组和受试药中、 高剂量组 大鼠的引喘潜伏期均有明显延长 (PO.05或 P<0.01)。
表 1 组合物 7对大鼠引喘潜伏期的影响 （ Ϊ土 S)
组别 动物数 剂量 (g生药 kg) 给药前 给药后 空白对照组 10 - 360 360
模型对照组 10 - 75.46±13.57** 76.92±12.05** 阳性对照组 10 0.5mg kg 72. 88±10.96** 156.30±21.44Δ 受试药低剂量组 10 1.0 73.72±14.20** 86.27±20.88 受试药中剂量组 10 2.0 72.65±14.33** 95.64±22.62Λ 受试药髙剂量组 10 6.0 73.19±13.36** 102.68±23.89ΛΔ 空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01。
3.1.2 对大鼠血清中 Π^4、 IFTSPy的含量变化的影响： 实验结果见表 2。与空白对照组相比较, 模型组血清中 11^ _了的含量明显降低 (PO.01),而血清中 IL-4含量明显升高 (PO.01),提示哮喘 发作期存在着严重的 IFN /IL-4比例的失衡； 与模型组相比较， 地塞米松组与受试药中、高剂 量组的 IL-4含量均有明显降低 (P<0.05或 P<0.01)， IFN-γ含量也有明显升高 (PO.05或 P<0.01)， 提示受试药物可纠正失衡的 IFN-Y/IL-4比值。 表 2组合物 7对大鼠血清 IL- 4、 IFN-γ的含量变化的影响 （ Ϊ土 S) 组别 剂量 (g生药 kg) 动物数 IL- 4 (pg/ml) lFN-y(pg/ml)
10 12. 84±2.66 23.87±4.26
10 22.18±3.09** 12.45±3.35**
0.5mg kg 10 12.90±4.67ΔΔ 19.29±4.04 ΔΔ
1.0 10 20. 21±3.56 13.66±3.21
2.0 10 18.90±4.06Δ 15.87±3.26 Δ
6.0 10 16.97±3.54ΔΔ ΔΔ
18.92±4.24 注： 与空白组比较， **P<0.01 : 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01 ο
3.1.3 对大鼠肺组织中 EOS含量的影响：实验结果见表 3。模型对照组大鼠嗜酸性粒细胞计数 显著增加 (P<0.01); 与模型组比较， 阳性对照组及受试药中、 高剂量药组 EOS含量明显减少 (PO.01 ) , 提示组合物 7可能通过降低大鼠肺组织中 EOS含量起到治疗过敏性哮喘的作用。
表 3 组合物 7对大鼠肺组织中 EOS含量的影响 （ ±S )
Sj 剂量 (g生药 kg) ~~动物数 EOS (个/ HP) 受受受
- 10 2.60±0.92
模空试试试阳
性药型药药白 - 10 105.72±14.56**
对对对低髙中 0.5mg/kg 10 35.64±6.18ΔΔ
照照照剂剂剂 1.0 10 93. 76±11.90
组组组量量量
受受受 2.0 10 79.47±12.08ΛΔ
模试试试空阳 6.0 10 68.56±8.32ΛΔ 型性药药药白
对对对低髙中注： 与空白组比较， **Ρ<0.01 : 与模型组比较， ΔΔΡ<0.01 ο
照照照剂剂剂
3.2 组合物 7对 Ach和 H组量组组量量is混合气体所致豚鼠过敏性哮喘的影响
3.2.1 对膝鼠引喘潜伏期的影响： 见表 4。造模后， 造模各组豚鼠引喘潜伏期达标， 相互之间 无显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 阳性对照组和受试药中、 高剂量组豚鼠的引喘潜伏期均有明显延长 (?<0.05或?<0.01)。 提示组合物 7对豚鼠的哮喘症状 有明显改善。 表 4组合物 7对豚鼠引喘潜伏期的影响 （ ±S)
组别 动物数 剂量 (g生药/ kg) 给药前 给药后 空白对照组 10 - 360 360
模型对照组 10 - 74.33±11.26** 72.87±11.21** 阳性对照组 10 0.5mg kg 70.68±9.65** 150.46±16.80ΔΔ 受试药低剂量组 10 1.0 72.92±10.65** 82.96±21.65 受试药中剂量组 10 2.0 73.67±11.86** 96.44±20.27Δ 受试药髙剂量组 10 6.0 75.42±10. 45** 113.35±25.92ΔΔ 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
3.2.2 对哮喘豚鼠血清和 BALF中总 IgE的影响：实验结果见表 5。模型组血清和 BALF中总 IgE 含量明显升高 (PO. 01); 与模型组相比较， 地塞米松组与受试药中、 高剂量组血清和 BALF中 总 IgE含量均有明显降低（ PO.01或 P<0.05)， 提示地塞米松与受试药均可抑制豚鼠肺部过敏性 炎症反应， 改善哮喘症状。 表 5组合物 7对豚鼠血清和 BALF中总 IgE的影响 （X±S) 剂量 (g生药/ kg) 动物数 血清（U/L) BALF (U L)
10 2.04±0.83 3.72±0.76 较， **Ρ<0.01 ; 10 5.69±1.22** 5.41±1.38**
0.5mg kg ,ΔΔ
10 3.70±1.26ΔΔ 3. 50±0.782 与模型组比较， 1.0 10 5.24±2.45 4.36±1.21 Δ
Ρ<0.05， 2.0 10 厶
4.28±1.02 3.88±1.49^
6.0 厶 Δ
10 3.95±1.34 3.65±0.91Δ PO.01 ,
3.2.3 对豚鼠肺组织中 EOS含量的影响： 实验结果见表 6。 与空白对照组比较，模型组豚鼠嗜 酸性粒细胞计数水平明显升高（PO.01); 与模型组比较， 阳性对照组和受试药中、 高剂量组 豚鼠嗜酸性粒细胞计数水平显著下降（P<0.01),提示组合物 7可能通过降低豚鼠肺组织中 EOS 含量起到治疗过敏性哮喘的作用。 表 6组合物 7对豚鼠肺组织中 EOS含量的影响 （ ±S)
组别 剂量 (g生药 kg) 动物数 EOS (个 HP) 空白对照组 - 10 5.40^2.67
模型对照组 - 10 90.613±13.25** 阳性对照组 0.5mg kg 10 31.70±9.52ΔΔ 受试药低剂量组 1.0 10 86. 80±11.93
受试药中剂量组 2.0 10 75.60±13.41Δ
受试药高剂量组 6.0 10 55.72±15.54ΔΔ
注： 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΔΡ<0.01。
4.结论：
经动物实验研宄表明，组合物 7能显著改善模型组大鼠哮喘症状及延长豚鼠引喘潜伏期； 能降低哮喘大鼠血清中 IL-4含量及升高 IFN-γ含量， 纠正失衡的 IFN-Y/IL-4比值； 降低大鼠 和豚鼠肺组织中嗜酸性粒细胞个数， 改善嗜酸性粒细胞在炎症局部的浸润； 降低豚鼠血清和 BALF中总 IgE含量， 改善肺部炎症症状。 因此认为组合物 7具有抗过敏性哮喘的作用。 实施例 66: 实施例 8获得的组合物 8抗过敏及过敏性皮炎动物试验报告：
1.材料与方法
1.1样品来源： 受试药为组合物 8复合粉（西洋参、 灵芝、 发酵虫草菌粉、 玫瑰花、 冬虫夏 草） 由江中药业股份有限公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 13.78g， 每人每日推荐摄 入量为： 24g生药 /60kg体重。
1.2实验动物： 同实施例 51。
1.3主要试剂： 同实施例 51。
1.4主要仪器： 同实施例 51。
2实验方法
2.1动物分组： 动物根据体重随机分组， 每组 10只。 设立模型对照组， 组合物 8低、 中、 高 剂量组、 阳性药对照组（强的松)。
2.2剂量设计： 受试药组合物 8每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重。 由此推算出小 鼠每日摄入量为： 低剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 中剂量组， 4.0g生药/ kg体重； 高剂量组， 12.0g生药/ kg体重，分别相当于人每日摄入量的 5、 10和 30倍。将样品以蒸馏水配制成相应 浓度（14.515mg干粉 /mL、 29.03mg干粉 /mL、 87.09mg干粉 /mL) 的灌胃液进行实验。 大鼠 每日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药/ kg体重； 中剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 高剂量组， 6.0g 生药/ kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。将样品以蒸馏水配制成相应浓度 (7.255mg干粉 /mL、 14.51mg干粉 /mL、 43.53mg干粉 /mL) 的灌胃液进行实验。 2.3组合物 8对卵蛋白所致大鼠被动过敏反应 (PCA) 的影响
2.3.1抗血清制备： 同实施例 51。
2.3.2大鼠抗卵蛋白血清模型建立【1]： 取抗 OVA血清， 用生理盐水稀释成 1 : 4 、 1 : 8浓度。 大鼠 50 只， 随机分 5 组， 即模型对照组、 组合物 8低、 中、 高剂量组， 阳性药对照组（强的 松)， 每组 10只。模型组灌胃蒸馏水， 阳性药对照组灌胃 5mg/kg强的松， 组合物 8低、 中、 高 剂量组分别灌胃不同浓度的试液， 给药容量 10mL/ kg , 每日 1次， 连续给药 14天。 第 15天背 部剃毛，用稀释的抗血清作背部皮内注射。每侧两点， 每点注射 0.1 mL。 48小时后， 大鼠尾静 脉注射 1%伊文思蓝、 1%卵清蛋白生理盐水的混合液 l.O mlJ只。 30 min动脉采血， 分离血 清， 按方法 [2]进行组胺含量的测定； 后处死大白鼠， 翻转背部皮肤， 测量蓝色反应斑直径， 比较给药组与模型组的差异； 取大鼠皮肤组织标本经中性甲醛固定， 梯度酒精脱水， 石蜡包 埋， 进行组织肥大细胞脱颗粒的检测 [3]。
2.3.3 组合物 8对 2， 4-二硝基氮苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响 [4〗：小鼠 50 只，随 机分成 5组，即模型对照组、组合物 8低、中、高剂量组，阳性药对照组（强的松），每组 10只。
5% 2, 4-硝基氯苯乙醇液涂布于小鼠腹部皮肤（去毛）致敏。 致敏前两天灌胃给药， 模型对照 组给予等容积蒸馏水，阳性药对照组灌胃 5mg/kg强的松，组合物 8各组动物灌胃给予相应试液， 给药容积为 O.lmL/lOg体重， 每天给药 1次， 连续 10天； 致敏后第 7天用 1% 的 2， 4-二硝基氯 笨涂右耳， 24小时后处死小鼠， 沿耳廓基线剪下两耳， 用直径 8 mm打下双耳同一部位圆片， 电子分析天平精密称重， 以左、 右耳片重量之差作为迟发型超敏反应值。
2.3.4 组合物 8对低分子右旋糖酐致小鼠局部瘙痒的影响 [5〗： 小鼠随机分成 5组， 即模型对照 组、 组合物 8低、 中、 髙剂量组， 阳性药对照组（强的松）， 每组 10只。 给小鼠灌胃给药， 每 天 1次，连续 10天。末次给药 30分钟之后，按 0.1g/10g尾静脉注射 0.0125%低分子右旋糖酐溶液。 观察记录各组小鼠在尾静脉注射低分子右旋糖酐溶液后 30分钟内出现的瘙痒 (前爪搔抓头部、 后爪挠躯干、 嘴咬全身各部位为疹痒指征)次数。
2.3.5 组合物 8对大鼠毛细血管通透性的影响 [6]： 大鼠随机分 5 组， 即模型对照组、 组合物 8 低、 中、 高剂量组， 阳性药对照组（强的松）， 每组 10 只。 模型对照组灌胃蒸馏水， 阳性药 对照组灌胃 5mg kg强的松， 组合物 8低、 中、 高剂量组分别灌胃不同浓度的试液， 给药容量 lOmL/ kg , 每日 1次， 连续给药 10天。末次给药后 1 小时， 于大鼠背部脱毛区（药前先脱毛) 皮内注射 lmg/ mL磷酸组胺 O. lmL/只， 并立即尾静脉注射 1%伊文思蓝水溶液 lmL/只， 20 分钟后断颈处死动物， 剪下兰斑皮肤， 剪碎， 浸泡于丙酮生理盐水溶液（7:3) 5mL中 48 小 时， 离心取上清液， 在 610nm波长测定吸收度。
2.4 统计方法： 同实施例 51。 3结果
3.1组合物 8对大鼠被动过敏反应的影响
试验结果见表 1， 2。 与模型对照组比较， 组合物 8低剂量有降低 1 :4、 1:8减少卵蛋白血清 致敏大鼠蓝斑直径、 减少肥大细胞脱颗粒数及降低血清组胺含量的趋势， 但无显著性差异； 强的松对照组和组合物 8中、高剂量组均有明显降低 1 :4、 1 :8抗卵蛋白血清致敏大鼠蓝斑直径、 减少肥大细胞脱颗粒数及降低血清组胺含量的作用， 有显著或非常显著统计学差异。 提示组 合物 8对大鼠被动过敏反应有明显抑制作用。
表 1 组合物 8对 PCA大鼠蓝斑直径的影响 （ ts)
剂量 动物数 蓝斑直径 （mm)
组别
(g生药/ kg) (只） 1:4 1 :8
模型对照组 0.0 10 18.14 ±3.08 11.93 ±2.17 阳性对照组 5.0mg 10 12.82 ±2.62 ** 8.54 ±1.82** 受试药低剂量组 1.2 10 16.27 ±2.75 10.81±1.64
受试药中剂量组 2.4 10 15.04±2.80* 9.94±1.47*
受试药髙剂量组 7.2 10 13.89 ±2.62 ** 9.36 ±1.80**
与模型对照组比较， *P<0.05， **P<0.01„
表 2 组合物 8对 PCA大鼠肥大细胞脱颗粒和血清组胺含量的影响 （ its) 剂量 (g生药 动物数 组胺荧光值 组别 脱颗粒数
/kg) (只） (mg L)
模型对照组 0.0 10 60.24±12.47 4.28±0.87
阳性对照组 5.0mg 10 17.95±11.82** 2.25±0.76**
受试药低剂量组 1.2 10 49.72± 10.98 3.52±0.80
受试药中剂量组 2.4 10 45.90±11.04* 3.30±0.69*
受试药高剂量组 7.2 10 33.16± 10.56** 2.54±0.83**
与模型对照组比较， *P<0.05, **P<0.01.
3.2 组合物 8对 2， 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响
试验结果见表 3。 与模型对照组相比， 组合物 8中、 高剂量组小鼠耳片肿胀度明显减轻， 提示组合物 8有较好抑制 2， 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的作用。
表 3 组合物 8对 2， 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响（ ^fas)
剂量 (g生药/ kg) 动物数 （只） 耳片肿胀度 （mg)
模型对照组 0.0 10 6.73±0.65
阳性对照组 5.0mg 10 4.60±0.82** 受试药低剂量组 2.0 10 6.04±0.97
受试药中剂量组 4,0 10 5.82±0.83* 受试药髙剂量组 12.0 10 5.08±0.64** 与模型对照组比较， *Ρ<0.05, **Ρ<0.01 β
3.3 组合物 8对低分子右旋糖酐致小鼠局部瘙痒的影响
试验结果见表 4。 与模型对照组相比， 组合物 8中、 高剂量组大鼠 OD值明显下降， 提示组 合物 8对磯酸组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。
组合物 8对低分子右旋糖酑致小鼠局部瘙痒的影响 （ its) 组别 剂量 (g生药 kg) 动物数（只） 瘙痒次数 （30min)
模型对照组 0.0 10 26.60土 6.22 阳性对照组 5.0mg 10 14.88土 5.08** 受试药低剂量组 2.0 10 21.53±5.21
受试药中剂量组 4.0 10 18.94±6.04*
受试药高剂量组 12.0 10 15.62±4.78**
与模型对照组比较， *P<0.05, **P<0.01 o
3.4 组合物 8对大鼠毛细血管通透性的影响
试验结果见表 5。 与模型对照组相比， 组合物 8中、 高剂量组大鼠 OD值明显下降， 提示组 合物 8对磷酸组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。
表 5 组合物 8对大鼠毛细血管通透性的影响 （ Lts)
组别 剂量 (g生药 kg) 动物数（只） OD值 模型对照组 0.0 10 0.962± 0.069 阳性对照组 5.0mg 10 0.662± 0.073** 受试药低剂量组 1.2 10 0.890±0.084
受试药中剂量组 2.4 10 0.856±0.089* 受试药高剂量组 7.2 10 0.724±0.097** 与模型对照组比较， *P<0.05， **P<0.01.
4.结论：
经动物实验研宄表明： 组合物 8对卵蛋白所致大鼠被动过敏反应有明显抑制作用； 组合 物 8有较好抑制 2， 4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的作用； 组合物 8对磷酸 组胺引起的大鼠毛细血管通透性增加有显著降低作用。 以上结果提示组合物 8有较好的抗过 敏作用， 对于过敏性皮炎、 荨麻疹等过敏性疾病有较好的防治作用。 实施例 67: 实施例 8获得的组合物 8防治过敏性鼻炎动物实验报告：
1.材料与方法 1.1样品来源： 受试物为组合物 8复合粉（西洋参、 灵芝、 发酵虫草菌粉、 玫瑰花、 冬虫夏 草） 由江中药业股份有限公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 13.78g。
1.2实验动物： 同实施例 52。
1.3主要试剂： 同实施例 52。
1.4主要仪器： 同实施例 52。
2实验方法
2.1 对 OVA所致大鼠过敏性鼻炎的影响
2.1.1 动物分组： 大鼠随机分为两组， 即： 空白对照组 10只及造模组 70只。 成功造模后的 大鼠按评分随机分为模型对照组、 阳性药组（鼻炎康组） 、 组合物 8高、 中、 低剂量组，每 组 10只。
2.1.2 剂量设计： 受试药组合物 8复合粉每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重， 由此 推算出大鼠每日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药/ kg体重； 中剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 高 剂量组， 6.0g生药/ kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。 将样品以蒸馏水配 制成相应浓度（7.26mg干粉 /ml、 14.51mg干粉 /ml、 43.54mg干粉 /ml) 的灌胃液进行实验， 灌胃量按 1.0ml/100g体重计算。 空白对照组和过敏性鼻炎模型组给予等体积生理盐水灌胃， 鼻炎康组给予 410 mg /kg。 于造模成功后开始灌胃， 每日灌胃 1次， 连续 21天。
2.1.3 大鼠过敏性鼻炎动物模型的建立： 同实施例 52。
2.1.4 检测指标： 同实施例 52。
2.1.4.1 血清 cAMP、 cGMP测定： 同实施例 52。
2.1.4.2 鼻黏膜肥大细胞计数： 同实施例 52。
2.2 对 TDI所致豚鼠过敏性鼻炎的影响
2.2.1 同 2丄1。
2.2.2 同 2.1.2。
2.2.3 豚鼠过敏性身炎动物模型的建立： 同实施例 52。
2.2.4 检测指标： 同实施例 52。
2.2.4.1 豚鼠行为学观察： 同实施例 52。
2.2.4.2 鼻分泌物嗜酸性粒细胞 (EOS)计数： 同实施例 52。
2.2.4.3 血清总 IgE和血液组胺测定： 同实施例 52。
2.2.4.4鼻黏膜厚度的测定： 同实施例 52。
2.3统计方法： 实验数据以 5C±S表示， 单因素方差分析， 比较空白对照组、模型对照组、组 合物 8各组之间的差异， P<0.05判断为差异具有显著性， P<0.01判断为差异具有极显著性。 3 结果
3.1 组合物 8对卵蛋白所致大鼠过敏性鼻炎的影响
3.1.1 对大鼠行为学的影响： 见表 2。造模后， 造模各组大鼠体征计数积分达标， 相互之间无 显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 受试药物中、 高组和鼻炎康 组的体征积分均有明显降低 (P<0.01或 P<0.05)， 低剂量组亦有降低的趋势。 表 2组合物 8对大鼠过敏性鼻炎给药前后症状积分的影响 （X ±S) 剂量 (g 给药后
组别 给药前
生药 kg) 7天 14天 21天 空白对照组 10 - 0.36±0.38 0.44±0.23 0.35±0.29 0.35±0.16 模型对照组 10 - 6.78±1.62** 6.70±1.37** 6.98±1.42** 6.64±1.06** 彝 厶厶
炎康组 10 0.41 6.53±1.14** 3.14±0.98 3.77±1.14ΔΔ 2.76±0.98ΔΔ 受试药低剂量组 10 1.0 6.84±1.25** 5.90±0.75 5.72±1.29 5.78±1.16 受试药中剂量组 10 2.0 6.42±1.44** 5.37±1.33' 5.23±1.53Δ 4.26±1.35ΔΔ 受试药髙剂量组 10 6.0 6.79±1.18** 4.76±0.92 4.3( 1.26 Δ 4.34±1.23 注： 与空白组比较， **Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
3.1.2 组合物 8对大鼠血清 cAMP、 cGMP的含量变化的影响： 实验结果见表 3。 与空白对照 组比较， 模型组血清 cAMP含量明显下降（PO.01) ， 血清 cGMP含量明显上升（P<0.01)。 与 模型对照组相比较， 鼻炎康组和各受试药物组血清 cAMP的含量明显上升（PO.01或 PO.05); 鼻炎康组和受试药物中、髙剂量组 cGMP含量明显下降（PO.01或 P<0.05),低剂量组也有降低 的趋势。
3.1.2 组合物 8对大鼠鼻黏膜肥大细胞的影响： 实验结果见表 3。 模型对照组鼻黏膜肥大细胞 数目明显增多，有极显著差异 (P<0.01)。与模型组比较， 鼻炎康组和受试药物治疗组鼻黏膜肥 大细胞数目均明显减少， 其差异有显著意义 (P<0.01)。
表 3组合物 8对大鼠血清 cAMP、 cGMP的含量及鼻黏膜肥大细胞的影响 （X±S)
剂量（g
动物 cAMP cGMP 肥大细胞计数
组别 生药
数 (pmol/ml) (pmol/ml) (个）
/kg)
空白对照组 10 20.24±4.87 9.88±2.56 1.74±1.38
模型对照组 10 10.20±3.90** 14.95±4.96** 14.39±4.83**
鼻炎康组 0.41 10 18.40±3.49ΛΔ 9.08±2.36ΔΔ 5.76±2.09ΔΑ
受试药低剂量组 1.0 10 14.25±3.80Δ 12.55±3.85 9.71±3.57ΑΔ
受试药中剂量组 2.0 10 15.95±5.34Δ 10.70±2.72Δ 8.87±3.11ΔΛ
受试药髙剂量组 6.0 10 16.85±4.19ΑΔ 9.10±3.86ΔΔ 6.64±2.16ΑΛ
注： 与空白组比较， *Ρ<0.05，**Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
3.2 组合物 8对 TDI所致豚鼠过敏性鼻炎的影响
3.2.1 对豚鼠行为学的影响： 见表 4。造模后， 造模各组豚鼠体征计数积分达标， 相互之间无 显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 受试药物中、 高组和鼻炎康 组的体征积分均有明显降低 (？^^或？^)^)， 低剂量组亦有降低的趋势。
表 4组合物 8对豚鼠过敏性鼻炎给药前后症状积分的影响 （X±S) 动物 剂量 (g 给药后
组别 给药前
数 生药 kg) 7天 14天 21天 空白对照组 10 - 0.55±0.71 0.41±0.42 0.31±0.39 0.45±0.61 模型对照组 10 - 6.18±1.32** 6.57±1.27** 6.64±1.12** 6.10±0.86** 鼻炎康组 10 0.41 6.73±1.07** 5.24±0.60Δ 5.72±0.82Δ 4.98±1.18Δ 受试药低剂量组 10 1.0 6.64±1.20** 5.46±1.25 5.59±0.88 5.13±1.42 受试药中剂量组 10 2.0 6.52±1.17** 5.13±1.38Δ 4.66±1.42ΔΔ 4.20±0.87ΔΛ 受试药高剂量组 10 6.0 6.79±1.23** 4.46±1.17ΔΔ 3.83±0.74ΔΔ 3.77±0.83ΔΔ 注： 与空白组比较， **Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01 β
3.2.2 对豚鼠血液组胺及血清总 IgE的影响： 实验结果见表 5。 与空白对照组比较， 模型组血 液中组胺及血清总 IgE均有增高 (P<0.01)， 表明实验造模成功； 与模型组相比， 受试药中剂量 组、 高剂量组、 鼻炎康组的组胺荧光吸收度及血清总 IgE浓度明显下降 (P<0.01或 P<0.05)， 其 中中、 高剂量组组胺降至接近正常水平， 提示组合物 8可通过抑制血中组胺水平和血清中 IgE 起到治疗过敏性鼻炎的作用。
表 5 组合物 8对豚鼠血中组胺及血清总 IgE的影响 （X±S) 组别 动物数 剂量 (g生药 kg) 组胺荧光值 (mg-L) IgE(IU mL-l)
空白对照组 10 - 2.04±0.45 0.128±0.032
模型对照组 10 - 3.25±0.98** 0.172±0.044**
鼻炎康组 10 0.41 2.03±0.37ΔΛ 0.112±0.014ΛΛ
受试药低剂量组 10 1.0 3.10±0.55 0.146±0.038
受试药中剂量组 10 2.0 2.42±0.32Δ 0.138±0.015Δ
受试药高剂量组 10 6.0 2.1½:0.28ΔΔ 0.130±0.020ΛΑ
注： 与空白组比较， *Ρ<0.05，**Ρ<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01。
3.2.3对豚鼠鼻分泌物嗜酸性粒细胞 (EOS)的影响： 实验结果见表 6。 模型组嗜酸性粒细胞计 数显著增加 (P<0.01)。 鼻炎康组和药物治疗组与模型组比较， 嗜酸性粒细胞计数均显著降低 (?<0.05或？<0.01)。
3.2.4 对豚鼠鼻黏膜厚度的影响： 结果见表 6。结果显示， 与空白对照组比较， 模型组豚鼠鼻 中隔黏膜上皮有不同程度脱离， 厚度不均， 基底结构不清， 固有膜内小静脉、 毛细血管明显 扩张， 组织间隙扩大， 黏膜厚度明显增加 (P<0.01)。与模型对照组比较， 鼻炎康组及药物治疗 组上述病理改变减轻， 黏膜厚度明显降低 (P<0.01)。
表 6组合物 8对豚鼠鼻分泌物 EOS及鼻黏膜厚度的影响 （X±S)
Figure imgf000078_0001
空白对照组 10 2.63±1.02 0.151±0.055
模型对照组 10 18.77±4.28** 0.28 9±0.082** ~鼻炎康组 0Λ\ 10 13.19±3.70' 0.188 ±0.0 39'
受试药低剂量组 1.0 10 13.38±4.21' 0.188±0.0 58'
受试药中剂量组 2.0 10 13.52±3.46' 0.182±0.079£
受试药高剂量组 6.0 10 12.24±2.70' 0.177 ±0.071'
注： 与空白组比较， 叩 <0.05，**Ρ<0.01 : 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
4.结论：
经动物实验研宄表明： 组合物 8作用主要表现为以下几个方面： ①能显著模型大鼠鼻部 症状分值， 减少提髙过敏性鼻炎大鼠血清 cAMP含量， 降低 cGMP含量。 ②减少大鼠鼻黏膜 肥大细胞数量， 降低其在炎症局部的浸润。 ③能减少模型豚鼠鼻部症状分值。 ④降低豚鼠鼻 分泌物嗜酸性粒细胞个数及嗜酸性粒细胞在炎症局部的浸润。 ⑤能明显降低豚鼠血液组胺浓 度， 减少炎性介质。 ⑥减轻豚鼠动物鼻部黏膜的肿胀情况。 根据实验研究结果认为组合物 8 具有抗过敏性鼻炎的作用。 实施例 68: 实施例 8获得的组合物 8抗组合物 8防治过敏性哮喘动物实验报告：
1.材料与方法
1.1样品来源： 受试物为组合物 8复合粉（西洋参、 灵芝、 发酵虫草菌粉、 玫瑰花、 冬虫夏 草） 由江中药业股份有限公司提供， lg复合粉干粉相当于总生药材 13.78g。
1.2实验动物： 同实施例 53。
1.3主要试剂： 同实施例 53。
1.4主要仪器： 同实施例 53。
2实验方法
2.1 对 OVA所致大鼠过敏性哮喘的影响
2.1.1 动物分组： 大鼠雌雄各半， 随机分为两组， 即： 空白对照组 10只及造模组 70只。 成 功造模后的大鼠随机分为模型对照组、 阳性药组（地塞米松组） 、 组合物 8低、 中、 高剂量 组，每组 10只。
2.1.2 大鼠过敏性哮喘动物模型的建立： 同实施例 53。
2.1.3 剂量设计： 受试药组合物 8复合粉每人每日推荐摄入量为： 24g生药 /60kg体重， 由此 推算出大鼠每日摄入量为： 低剂量组， l.Og生药 kg体重； 中剂量组， 2.0g生药/ kg体重； 高剂 量组， 6.0g生药/ kg体重， 分别相当于人每日摄入量的 2.5、 5和 15倍。 将样品以蒸馏水配制成 相应浓度（7.26mg干粉 /ml、 14.51mg干粉 /ml、 43.54mg干粉 /ml) 的灌胃液进行实验， 灌胃量 按 1.0ml/100g体重计算。模型对照组于激发前 30min灌胃同体积 0.9%生理盐水， 阳性药组于每 次激发前 30min给予地塞米松 0.5mg kg[2〗。 组合物 8低、 中、 高剂量各组于每次激发前 30min分 别给予各剂量受试药。 空白对照组在相同时间腹腔注射、 雾化及灌胃同体积 0.9%生理盐水。 每曰灌胃受受受 1次， 连续 21天。
模试空试试阳
2.1.4 大鼠引性型药药药白喘潜伏期的记录： 同实施例 53。
对对低对高中
2.1.5 IL- 4、 IF照剂N照照剂剂"Y
量组组量量组的含量测定： 同实施例 53。
2.1.6肺组织中 EOS的含量测定： 同实施例 53。
2.2 对 Ach和 His混合气体所致豚鼠过敏性哮喘的影响
2.2.1 同 2.1.1。
2.2.2 豚鼠过敏性哮喘动物模型的建立： 同实施例 53。
2.2.3 剂量设计： 同 2.1.3。
2.2.4引喘潜伏期的记录： 同 2.1.4.1。
2.2.5血清和 BALF中 IgE的测定： 同实施例 53。
2.3统计方法： 同实施例 53。
3结果
3.1 组合物 8对 OVA所致大鼠过敏性哮喘的影响
3.1.1对大鼠引喘潜伏期的影响： 见表 1。 造模各组大鼠引喘潜伏期达标， 相互之间无显著性 差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 阳性对照组和受试药中、 高剂量组 大鼠的引喘潜伏期均有明显延长 (P<0.05¾P<0.01)。 表 1 组合物 8对大鼠引喘潜伏期的影响 （X ±S )
H 1¾ ~~剂量 (g生药/ kg) ¾l ^ffi
0 360 360
0 78.24±13.92** 75.44±12.76**
0 0.5mg kg 73.66±11.19** 159.87±20.38Δ
0 1.0 76.63±15.20** 85.13±21.42
0 2.0 78.42±14.17** 96.6Ot20.75A
0 6.0 78.49±17.23** 106.54±20.97Δ 注： 与空白组比较， "PO.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
3.1.2 对大鼠血清中 I 4、 IFN"Y的含量变化的影响： 实验结果见表 2。与空白对照组相比较, 模型组血清中 IFN -γ的含量明显降低 (P<0.01)，而血清中 IL-4含量明显升高 (P<0.01)，提示哮喘 发作期存在着严重的 IFN-Y/IL-4比例的失衡； 与模型组相比较， 地塞米松组与受试药中、髙剂 量组的 IL-4含量均有明显降低 (P<0.05或 P<0.01)， IFN-γ含量也有明显升高 (？<0.05或？<0.01)， 提示受试药物可纠正失衡的 IFN-Y/IL-4比值。 表 2组合物 8对大鼠血清 IL- 4、 IFN-γ的含量变化的影响 （X ±S) ffl 剂量 (g生药 kg) 动物数 IL- 4 (pg ml) IFN-Y(pg ml) 空白对照组 - 10 12.75±2.63 24.41±4.27 - 10 22.55±3.68** 11.95±3.36** 受受受 0.5mg kg 10 13.41±4.21ΔΔ 20.16±4.96ΛΔ 模试试试阳 1.0 10 20. 67±3.28 13.88±3.87
性药型药药 2.0 10 18.35±4.24Δ 15.70±3.92Δ 对对低髙中受受受 6.0 10 16.22±3.47ΔΔ 17.46±4.86ΔΔ 照剂剂照剂试模试试空阳
注： 与空白组比较，组量量量组性药型药药白 **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05, ΔΔΡ<0.01。
组组组低对对对髙中
3.1.3 对大鼠肺组织中剂剂照照照剂 EOS含量的影响： 实验结果见表 3。模型对照组大鼠嗜酸性粒细胞计数
量组量量组组
显著增加 (PO.01); 与模型组组组组比较， 阳性对照组及受试药中、 高剂量药组 EOS含量明显减少 (P<0.01 ) ， 提示组合物 8可能通过降低大鼠肺组织中 EOS含量起到治疗过敏性哮喘的作用。
表 3 组合物 8对大鼠肺组织中 EOS含量的影响 （X ±S)
剂量 (g生药/ kg) ~~动物数 EOS (个 HP)
- 10 2.24±0.85
- 10 103.60±13.94**
0.5mg kg 10 28.39±4.26ΔΔ
1.0 10 93. 21±11.29
2.0 10 72.13±10.34ΔΔ
6.0 10 65.22±8.49ΔΔ
注- 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΔΡ<0.01。
3.2 组合物 8对 Ach和 His混合气体所致豚鼠过敏性哮喘的影响
3.2.1 对豚鼠引喘潜伏期的影响： 见表 4。造模后， 造模各组豚鼠引喘潜伏期达标， 相互之间 无显著性差异， 提示造模成功。 给药治疗后， 与模型对照组比较， 阳性对照组和受试药中、 高剂量组豚鼠的引喘潜伏期均有明显延长 (PO.05或 P<0.01)。 提示组合物 8对豚鼠的哮喘症状 有明显改善。
表 4组合物 8对豚鼠引喘潜伏期的影响 （X ±S)
组别 动物数 剂量 (g生药 kg) 给药前 给药后 空白对照组 10 - 360 360
模型对照组 10 - 77.18±10.92** 78.00±10.76** 阳性对照组 10 0.5mg kg 74.63±9.04** 156.77±16.18ΔΔ 受试药低剂量组 10 1.0 76.64±14.20** 84.03±21.42 受试药中剂量组 10 2.0 77.92±15.17** 97.40±24.67Δ 受试药髙剂量组 10 6.0 79.79±19.23** 110.87±24.53ΔΛ 与空白组比较， **P<0.01 ; 与模型组比较， ΔΡ<0.05， ΔΔΡ<0.01。
3.2.2 对哮喘豚鼠血清和 BALF中总 IgE的影响：实验结果见表 5。模型组血清和 BALF中总 IgE 含量明显升高 (P<0. 01); 与模型组相比较， 地塞米松组与受试药中、 高剂量组血清和 BALF中 总 IgE含量均有明显降低（ PO.01或 P<0.05)， 提示地塞米松与受试药均可抑制豚鼠肺部过敏性 炎症反应， 改善哮喘症状。
表 5 组合物 8对豚鼠血清和 BALF中总 IgE的影响 （X ±S) 受受受
模试试试空阳 注： 与空白组比 性型药药药白组别 剂量 (g生药/ kg) 动物数 血清（U/L) BALF (U/L)
对对对低髙中
照照照剂剂剂 10 2.10±0.87 3.69±0.86 较， **Ρ<0.01 ;
10 5.72±1.47** 5.42±1.34**
0.5mg kg 10 Δ厶
3.65±1.21ΔΔ 3. 62±0.62 与模型组比较, 1.0 10 5. 21±2.08 4.25±1.67
2.0 Δ
10 4.35±1.24 3.82±1.55厶 ΡΟ.05, 6.0 厶 Δ
10 3.98±1.19 3.79±0.86^ ΔΔΡ<0.01 <
3.2.3 对豚鼠肺组织中 EOS含量的影响： 实验结果见表 6。 与空白对照组比较,模型组豚鼠嗜 酸性粒细胞计数水平明显升高 （PO.01); 与模型组比较， 阳性对照组和受试药中、 髙剂量组 豚鼠嗜酸性粒细胞计数水平显著下降 （P<0.01)，提示组合物 8可能通过降低豚鼠肺组织中 EOS
Λ o o
含量起到治疗过敏性哮喘的作用。
表 6组合物 8对豚鼠肺组织中 EOS含量的影响 （X ±S)
剂量 (g生药/ kg) ~~动物数 EOS (个/ HP)
空白对照组 10 5.26±2.85
模型对照组 10 94.60il4.98** 阳性对照组 ο 10 30.69±7.35ΔΔ 受试药低剂量组 10 82. 38±12.29
受试药中剂量组 10 67.35±12.05ΔΔ
受试药髙剂量组 10 59.32±11.79ΔΔ
注- 与空白组比较， **P<0.01 : 与模型组比较， ΔΛΡ<0.01。
4.结论：
经动物实验研宄表明，组合物 8能显著改菩模型组大鼠哮喘症状及延长豚鼠引喘潜伏期; 能降低哮喘大鼠血清中 IL-4含量及升高 IFN-γ含量， 纠正失衡的 IFN-Y/IL-4比值； 降低大鼠 和豚鼠肺组织中嗜酸性粒细胞个数， 改善嗜酸性粒细胞在炎症局部的浸润： 降低脬鼠血清和 BALF中总 IgE含量， 改善肺部炎症症状。 因此认为组合物 8具有抗过敏性哮喘的作用。

Claims

权 利 要 求 书
1. 由含有下面成份的原料制成的组合物在制备防治过敏性疾病的保健品或药品或产品中的 用途： 灵芝、 西洋参或人参、 发酵虫草菌粉和 /或冬虫夏草。
2. 权利要求 1的用途， 其特征在于， 其中所述组合物进一步含有玫瑰花、灵芝孢子粉、 灵芝 孢子油、 太子参、 人参叶、 党参、 黄芪中的一种或几种。
3. 权利要求 1的用途， 其特征在于， 其中所述组合物是由含有下述重量份的原料制成的： 灵 芝 5〜200份、 西洋参或人参 5〜150份、 发酵虫草菌粉 1〜90份和 I或冬虫夏草 1〜120 份。
4. 权利要求 3的用途，其特征在于，其中所述组合物是由下述重量份的原料制成的：灵芝 5〜
200份、 西洋参或人参 5〜150份、 发酵虫草菌粉 1~90份和 /或冬虫夏草 1〜120份。
5. 权利要求 3或 4的用途， 其特征在于， 其中灵芝 20〜120份、 西洋参或人参 10〜90份、 发酵虫草菌粉 3〜60份和 I或冬虫夏草 3~90份。
6. 权利要求 5的用途， 其特征在于， 其中灵芝 40份、 西洋参或人参 30份、 发酵虫草菌粉
20份和 /或冬虫夏草 6.7份。
7. 权利要求 3— 6任一项的用途， 其特征在于， 所述用途中使用的组合物还可以进一步包含 下述重量份的原料或者下列原料的水和 /或醇提物： 玫瑰花 5〜90份、 灵芝孢子粉 5〜150 份、 灵芝孢子油 1〜90份、 太子参 10〜400份、 人参叶 1〜120份、 党参 3~400份、黄芪 3〜400份中的一种或几种的任意组合。
8. 权利要求 7的用途， 其特征在于， 其中玫瑰花 10~60份、 灵芝孢子粉 10〜120份、 灵芝 孢子油 10~60份、 太子参 20〜200份、 人参叶 20~90份、 党参 20〜200份、 黄芪 20〜 200份中的一种或几种的任意组合。
9. 权利要求 8的用途， 其特征在于， 其中玫瑰花 30份、 灵芝、 抱子粉 30份、 灵芝孢子油
20份、 太子参 40份、 人参叶 30份、 党参 40份、 黄芪 40份中的一种或几种的任意组合。
10.权利要求 7的用途， 其特征在于， 其中所述组合物是由含有下述重量份的原料制成的： 灵芝 5〜200份、玫瑰花 5〜90份、西洋参或人参 5~150份、发酵虫草菌粉 1〜90份和 / 或冬虫夏草 1〜120份。
11.权利要求 8的用途,其特征在于,其中所述组合物是由下述重量份的原料制成的：灵芝 5〜
200份、 玫瑰花 5〜90份、 西洋参或人参 5〜150份、 发酵虫草菌粉 1〜90份和 /或冬虫 夏草 1〜120份。
12.权利要求 10—11的用途， 其特征在于， 其中灵芝 20〜120份、 玫瑰花 10〜60份、 西洋 参或人参 10〜90份、 发酵虫草菌粉 3〜60份和 /或冬虫夏草 3〜90份。
13.权利要求 12的用途， 其特征在于， 其中灵芝 40份、 玫瑰花 30份、 西洋参或人参 30份、 发酵虫草菌粉 20份和 I或冬虫夏草 6.7份。
权利要求 1一 13任一项的用途， 其特征在于， 所述过敏性疾病是过敏性募炎、 过敏性皮 炎、 过敏性哮喘、 荨麻疹。
权利要求 1一 13任一项的用途， 其特征在于， 其中所述组合物是通过下面的方法制成的： 将所述原料混合，或者所述原料混合后水提和 /或醇提得到组合物，或者所述原料中的一 种或几种经水提和 I或醇提提取物作活性成份组成所述组合物。
权利要求 15的用途,其特征在于， 其中所述组合物是通过下面的方法制成的：
1) 称取中药材原料；
2) 用醇或水对上述药材回流提取， 得到提取液做活性成份， 加入附加剂， 制成各种剂 型。
权利要求 15的用途,其特征在于， 其中所述组合物是通过下面的方法制成的：
1 )称取中药材原料， 将原料药材加甲醇或乙醇进行提取， 提取液回收甲醇或乙醇， 得到 提取物 I；
2)将上述药渣挥干醇后， 加水进行提取， 得到提取物 II；
3)合并提取物 I和提取物 II， 过滤， 滤液浓縮至适量， 加入药学上常用辅料， 采用药剂 学上常规工艺制成所需制剂。
权利要求 15的用途,其特征在于， 其中所述组合物是通过下面的方法制成的；
1) 原料准备： 称取中药材原料；
2) 提取浓缩： 将步骤 1中处理好的原料加水浸泡后， 加热煎煮多次， 合并提取液过滤， 滤液浓缩至适量， 浓縮液放冷后高速离心除杂， 备用；
3) 制备制剂： 将步骤 2中所得的浓缩液单独或加入医学上可接受的辅料， 采用药剂学 上常规工艺制成所需制剂；
4) 上述步骤 2)中浸泡时间为 20分钟〜 60分钟，后加热煎煮 1〜3次，每次 1〜2小时， 加水量 6〜13倍。
权利要求 1—13任一项所述的用途， 其特征在于： 其中所述组合物可以加入保健品或药 品或产品中可接受的附加剂或赋形剂制备成任意剂型。
权利要求 17所述的用途， 其特征在于： 其中所述剂型是片剂、 口服液、颗粒剂、胶襄剂、 煎膏剂、 滴丸剂、 丸剂、 散剂、 锭剂、 流浸裔剂、 浸膏剂、 注射剂、 糖浆剂中的任意一 种。
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