RU2646818C2 - Применение композиции для получения изделий медицинского назначения или лекарственных средств для профилактики и лечения аллергических заболеваний - Google Patents
Применение композиции для получения изделий медицинского назначения или лекарственных средств для профилактики и лечения аллергических заболеваний Download PDFInfo
- Publication number
- RU2646818C2 RU2646818C2 RU2014151157A RU2014151157A RU2646818C2 RU 2646818 C2 RU2646818 C2 RU 2646818C2 RU 2014151157 A RU2014151157 A RU 2014151157A RU 2014151157 A RU2014151157 A RU 2014151157A RU 2646818 C2 RU2646818 C2 RU 2646818C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- composition
- parts
- weight
- radix
- group
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 491
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 101
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims abstract description 43
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 title claims abstract description 22
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 title description 45
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 361
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 302
- 241000222336 Ganoderma Species 0.000 claims abstract description 270
- 241001248610 Ophiocordyceps sinensis Species 0.000 claims abstract description 167
- 241000190633 Cordyceps Species 0.000 claims abstract description 139
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 claims abstract description 123
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 claims abstract description 122
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 claims abstract description 122
- 241000628997 Flos Species 0.000 claims abstract description 108
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 83
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 76
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 50
- 239000009636 Huang Qi Substances 0.000 claims abstract description 31
- 241000756943 Codonopsis Species 0.000 claims abstract description 30
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 28
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 claims abstract description 17
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 3
- 229940127554 medical product Drugs 0.000 claims abstract 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 352
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 170
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 159
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims description 157
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 87
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 claims description 86
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 claims description 73
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 claims description 73
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 54
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 53
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 claims description 44
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 44
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 34
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 30
- 239000012752 auxiliary agent Substances 0.000 claims description 27
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 22
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 21
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 21
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 claims description 18
- 206010012434 Dermatitis allergic Diseases 0.000 claims description 16
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 15
- 239000008298 dragée Substances 0.000 claims description 13
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 claims description 12
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 claims description 11
- 239000006188 syrup Substances 0.000 claims description 11
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 claims description 11
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 11
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 10
- 201000010435 allergic urticaria Diseases 0.000 claims description 7
- 239000012675 alcoholic extract Substances 0.000 claims description 6
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 6
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 claims description 6
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 5
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 4
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 4
- 201000009961 allergic asthma Diseases 0.000 claims description 2
- 229940126678 chinese medicines Drugs 0.000 claims description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 2
- -1 electuary Substances 0.000 claims description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 184
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 344
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 178
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 174
- 208000030603 inherited susceptibility to asthma Diseases 0.000 description 151
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 132
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 120
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 114
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 113
- 240000005373 Panax quinquefolius Species 0.000 description 111
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 80
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 80
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 72
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 72
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 70
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 66
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 64
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 63
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 60
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 57
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 57
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 56
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 55
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 55
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 54
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 52
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 52
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 51
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 50
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 50
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 50
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 49
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 48
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 46
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 45
- 210000002850 nasal mucosa Anatomy 0.000 description 45
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 44
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 44
- 235000014666 liquid concentrate Nutrition 0.000 description 42
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 41
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 41
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 40
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 36
- 210000000883 ear external Anatomy 0.000 description 36
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 36
- VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N Dinitrochlorobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(Cl)C([N+]([O-])=O)=C1 VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- ZOOGRGPOEVQQDX-UUOKFMHZSA-N 3',5'-cyclic GMP Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=C(NC2=O)N)=C2N=C1 ZOOGRGPOEVQQDX-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 32
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 31
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 30
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 30
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 30
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 27
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 26
- 229960001660 histamine phosphate Drugs 0.000 description 26
- ZHIBQGJKHVBLJJ-UHFFFAOYSA-N histamine phosphate Chemical compound OP(O)(O)=O.OP(O)(O)=O.NCCC1=CNC=N1 ZHIBQGJKHVBLJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 26
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 26
- 206010002198 Anaphylactic reaction Diseases 0.000 description 24
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 24
- 230000036783 anaphylactic response Effects 0.000 description 24
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 24
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 24
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 22
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 21
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 21
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 21
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 21
- 239000000463 material Substances 0.000 description 21
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 21
- 230000004856 capillary permeability Effects 0.000 description 20
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 19
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 19
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 19
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 19
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 description 19
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 19
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 18
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 18
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 18
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 18
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 18
- DVKJHBMWWAPEIU-UHFFFAOYSA-N toluene 2,4-diisocyanate Chemical compound CC1=CC=C(N=C=O)C=C1N=C=O DVKJHBMWWAPEIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 15
- COXVTLYNGOIATD-HVMBLDELSA-N CC1=C(C=CC(=C1)C1=CC(C)=C(C=C1)\N=N\C1=C(O)C2=C(N)C(=CC(=C2C=C1)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O)\N=N\C1=CC=C2C(=CC(=C(N)C2=C1O)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O Chemical compound CC1=C(C=CC(=C1)C1=CC(C)=C(C=C1)\N=N\C1=C(O)C2=C(N)C(=CC(=C2C=C1)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O)\N=N\C1=CC=C2C(=CC(=C(N)C2=C1O)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O COXVTLYNGOIATD-HVMBLDELSA-N 0.000 description 13
- 229960003699 evans blue Drugs 0.000 description 13
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 13
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 13
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 12
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 12
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 12
- 208000006313 Delayed Hypersensitivity Diseases 0.000 description 11
- 230000009471 action Effects 0.000 description 11
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 11
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 11
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 10
- 238000007473 univariate analysis Methods 0.000 description 10
- 210000000492 nasalseptum Anatomy 0.000 description 9
- 210000001331 nose Anatomy 0.000 description 9
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 9
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 8
- 238000002663 nebulization Methods 0.000 description 8
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 8
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 7
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 7
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 6
- 241001619326 Cephalosporium Species 0.000 description 6
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 6
- 241001236817 Paecilomyces <Clavicipitaceae> Species 0.000 description 6
- 235000011449 Rosa Nutrition 0.000 description 6
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 6
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 6
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 6
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 6
- 230000002444 effect on eosinophils Effects 0.000 description 6
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 6
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 6
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 6
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 6
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 6
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 6
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 6
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 6
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 6
- 210000000264 venule Anatomy 0.000 description 6
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 5
- 238000006748 scratching Methods 0.000 description 5
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 description 5
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 5
- 241000143459 Hirsutella Species 0.000 description 4
- 241001149472 Clonostachys rosea Species 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- 241001558147 Mortierella sp. Species 0.000 description 3
- 240000004371 Panax ginseng Species 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 3
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 3
- 241000045403 Astragalus propinquus Species 0.000 description 2
- 241000123346 Chrysosporium Species 0.000 description 2
- 241000007126 Codonopsis pilosula Species 0.000 description 2
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 2
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 2
- 241001248590 Isaria Species 0.000 description 2
- 241000422921 Polycephalomyces sinensis Species 0.000 description 2
- 241000228417 Sarocladium strictum Species 0.000 description 2
- 241000223255 Scytalidium Species 0.000 description 2
- 241001626366 Sporothrix insectorum Species 0.000 description 2
- 241001149964 Tolypocladium Species 0.000 description 2
- 241000082085 Verticillium <Phyllachorales> Species 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 235000019658 bitter taste Nutrition 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 235000011475 lollipops Nutrition 0.000 description 2
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 2
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 2
- 229940066827 pertussis vaccine Drugs 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 18beta-glycyrrhetic acid Chemical compound C([C@H]1C2=CC(=O)[C@H]34)[C@@](C)(C(O)=O)CC[C@]1(C)CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@H](O)C1(C)C MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 1
- 241000208671 Campanulaceae Species 0.000 description 1
- 241001480006 Clavicipitaceae Species 0.000 description 1
- 241000357628 Codonopsis pilosula subsp. tangshen Species 0.000 description 1
- 206010011703 Cyanosis Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000220485 Fabaceae Species 0.000 description 1
- 208000034347 Faecal incontinence Diseases 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 240000008397 Ganoderma lucidum Species 0.000 description 1
- 241001489091 Ganoderma sinense Species 0.000 description 1
- 241000130660 Hepialidae Species 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 238000012449 Kunming mouse Methods 0.000 description 1
- 241000223250 Metarhizium anisopliae Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- MXRIRQGCELJRSN-UHFFFAOYSA-N O.O.O.[Al] Chemical compound O.O.O.[Al] MXRIRQGCELJRSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000002789 Panax ginseng Nutrition 0.000 description 1
- 241000222341 Polyporaceae Species 0.000 description 1
- 241001038562 Pseudostellaria heterophylla Species 0.000 description 1
- 241000220317 Rosa Species 0.000 description 1
- 240000006066 Rosa rugosa Species 0.000 description 1
- 235000004789 Rosa xanthina Nutrition 0.000 description 1
- 241000220222 Rosaceae Species 0.000 description 1
- 206010046543 Urinary incontinence Diseases 0.000 description 1
- JUGOREOARAHOCO-UHFFFAOYSA-M acetylcholine chloride Chemical compound [Cl-].CC(=O)OCC[N+](C)(C)C JUGOREOARAHOCO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960004266 acetylcholine chloride Drugs 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000002429 anti-coagulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 1
- 210000000702 aorta abdominal Anatomy 0.000 description 1
- 230000037007 arousal Effects 0.000 description 1
- 235000006533 astragalus Nutrition 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- 239000012496 blank sample Substances 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000001914 calming effect Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N chloral hydrate Chemical compound OC(O)C(Cl)(Cl)Cl RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002327 chloral hydrate Drugs 0.000 description 1
- 230000001886 ciliary effect Effects 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 210000005081 epithelial layer Anatomy 0.000 description 1
- ZYBWTEQKHIADDQ-UHFFFAOYSA-N ethanol;methanol Chemical compound OC.CCO ZYBWTEQKHIADDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000008098 formaldehyde solution Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229920006324 polyoxymethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 210000005132 reproductive cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 1
- 206010041232 sneezing Diseases 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 235000019605 sweet taste sensations Nutrition 0.000 description 1
- 210000003813 thumb Anatomy 0.000 description 1
- 229950003937 tolonium Drugs 0.000 description 1
- HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M tolonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=C(C)C(N)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/73—Rosaceae (Rose family), e.g. strawberry, chokeberry, blackberry, pear or firethorn
- A61K36/738—Rosa (rose)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
- A61K36/062—Ascomycota
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/25—Araliaceae (Ginseng family), e.g. ivy, aralia, schefflera or tetrapanax
- A61K36/258—Panax (ginseng)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/34—Campanulaceae (Bellflower family)
- A61K36/344—Codonopsis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/36—Caryophyllaceae (Pink family), e.g. babysbreath or soapwort
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
- A61K36/481—Astragalus (milkvetch)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/73—Rosaceae (Rose family), e.g. strawberry, chokeberry, blackberry, pear or firethorn
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2121/00—Preparations for use in therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
- A61K36/062—Ascomycota
- A61K36/066—Clavicipitaceae
- A61K36/068—Cordyceps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
- A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus
- A61K36/074—Ganoderma
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
- A61K9/0056—Mouth soluble or dispersible forms; Suckable, eatable, chewable coherent forms; Forms rapidly disintegrating in the mouth; Lozenges; Lollipops; Bite capsules; Baked products; Baits or other oral forms for animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
- A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/141—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
- A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
- A61K9/28—Dragees; Coated pills or tablets, e.g. with film or compression coating
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/4841—Filling excipients; Inactive ingredients
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Physiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к применению композиции для профилактики и лечения аллергических заболеваний. Применение композиции в получении медицинской продукции или лекарственного средства для профилактики и лечения аллергических заболеваний, где активные ингредиенты указанной композиции состоят из водного и/или спиртового экстрактов следующих сырьевых материалов: i) 5-200 частей по массе Ganoderma, ii) 5-150 частей по массе Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, iii) 1-90 частей по массе порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или 1-120 частей по массе Cordyceps и iv) 5-90 частей по массе Flos Rosae Rugosae. Применение композиции в получении медицинской продукции или лекарственного средства для профилактики и лечения аллергических заболеваний, где активные ингредиенты указанной композиции состоят из водного и/или спиртового экстрактов следующих сырьевых материалов: i) 5-200 частей по массе Ganoderma, ii) 5-150 частей по массе Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, iii) 1-90 частей по массе порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или 1-120 частей по массе Cordyceps, iv) 5-90 частей по массе Flos Rosae Rugosae и v) одно или более из порошка из спор Ganoderma, масла из спор Ganoderma, Radix Pseudostellariae, Folium Ginseng, Radix Codonopsis и Radix Astragali. Вышеописанные композиции эффективны для профилактики и лечения аллергических заболеваний. 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 96 табл., 68 пр.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к композиции для профилактики и лечения аллергических заболеваний и ее применению.
Уровень техники
В заявке на выдачу патента CN № 1509760 А раскрыто лекарственное средство для профилактики и дополнительного лечения злокачественной опухоли, полученное из сырьевых материалов: порошка ферментированного Cordyceps sinensis, Ganoderma и Fructus Lycii, которое действует для усиления иммунитета и регулирования эндокринной системы, а также играет роль в очищении организма от вредных свободных радикалов и профилактики рецидива опухоли. В заявке на выдачу патента СN № 102228252 A раскрыта композиция традиционной китайской медицины, содержащая 5-150 частей по массе Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, 5-160 частей по массе Ganoderma и 1-90 частей по массе порошка ферментированного Cordyceps sinensis, которая действует для облегчения физического утомления. В заявке на выдачу патента CN № 102000129 А раскрыта фармацевтическая композиция, содержащая Cordyceps polysaccharides или порошок ферментированного Cordyceps sinensis, Ganoderma и Radix Panacis Quinquefolii, которая действует для усиления иммунитета. Вплоть до настоящего времени ни одно исследование или литературный источник не продемонстрировали, что композиция, полученная из Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, действует для профилактики и лечения аллергических заболеваний.
Раскрытие изобретения
Целью настоящего изобретения является обеспечение композиции для профилактики и лечения аллергических заболеваний и способа их получения.
Согласно настоящему изобретению авторы настоящего изобретения выбрали и скомбинировали сырьевые материалы Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, и авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что такая композиция или полученные из нее продукты были способны к обеспечению профилактики и лечения аллергических заболеваний.
Настоящее изобретение предусматривает применение композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, композиции, полученной из сырьевых материалов, предусматривающих Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, или композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергических заболеваний.
Предусмотрено применение композиции, полученной путем добавления любого одного или нескольких компонентов: Flos Rosae Rugosae, порошок из спор Ganoderma, масло из спор Ganoderma, Radix Pseudostellariae, Folium Ginseng, Radix Codonopsis и Radix Astragali к композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, или к композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, или к композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергических заболеваний.
Настоящее изобретение дополнительно предусматривает применение композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, или композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергических заболеваний.
Предусмотрено применение композиции, полученной путем добавления любого одного или нескольких компонентов: порошок из спор Ganoderma, масло из спор Ganoderma, Radix Pseudostellariae, Folium Ginseng, Radix Codonopsis и Radix Astragali, к композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, или к композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, или к композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергических заболеваний.
Настоящее изобретение дополнительно предусматривает применение композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, или композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергического ринита.
Предусмотрено применение композиции, полученной путем добавления любого одного или нескольких компонентов: Flos Rosae Rugosae, порошок из спор Ganoderma, масло из спор Ganoderma, Radix Pseudostellariae, Folium Ginseng, Radix Codonopsis и Radix Astragali, к композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, или к композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, или к композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергического ринита.
Предусмотрено применение композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, или композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергического ринита.
Предусмотрено применение композиции, полученной путем добавления любого одного или нескольких компонентов: порошок из спор Ganoderma, масло из спор Ganoderma, Radix Pseudostellariae, Folium Ginseng, Radix Codonopsis и Radix Astragali, к композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, или к композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, или к композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергического ринита.
Настоящее изобретение дополнительно предусматривает применение композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, или композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергического дерматита.
Предусмотрено применение композиции, полученной путем добавления любого одного или нескольких компонентов: Flos Rosae Rugosae, порошок из спор Ganoderma, масло из спор Ganoderma, Radix Pseudostellariae, Folium Ginseng, Radix Codonopsis и Radix Astragali, к композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, или к композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, или к композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергического дерматита.
Предусмотрено применение композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, или композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергического дерматита.
Предусмотрено применение композиции, полученной путем добавления любого одного или нескольких компонентов: порошок из спор Ganoderma, масло из спор Ganoderma, Radix Pseudostellariae, Folium Ginseng, Radix Codonopsis и Radix Astragali, к композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, или к композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, или к композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергического дерматита.
Настоящее изобретение дополнительно предусматривает применение композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, или композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения крапивницы.
Предусмотрено применение композиции, полученной путем добавления любого одного или нескольких компонентов: Flos Rosae Rugosae, порошок из спор Ganoderma, масло из спор Ganoderma, Radix Pseudostellariae, Folium Ginseng, Radix Codonopsis и Radix Astragali, к композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, или к композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, или к композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения крапивницы.
Предусмотрено применение композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, или композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения крапивницы.
Предусмотрено применение композиции, полученной путем добавления любого одного или нескольких компонентов: порошок из спор Ganoderma, масло из спор Ganoderma, Radix Pseudostellariae, Folium Ginseng, Radix Codonopsis и Radix Astragali, к композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, или к композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, или к композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения крапивницы.
Настоящее изобретение дополнительно предусматривает применение композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, или композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергической бронхиальной астмы.
Предусмотрено применение композиции, полученной путем добавления любого одного или нескольких компонентов: Flos Rosae Rugosae, порошок из спор Ganoderma, масло из спор Ganoderma, Radix Pseudostellariae, Folium Ginseng, Radix Codonopsis и Radix Astragali, к композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, или к композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, или к композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергической бронхиальной астмы.
Предусмотрено применение композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, или композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергической бронхиальной астмы.
Предусмотрено применение композиции, полученной путем добавления любого одного или нескольких компонентов: порошок из спор Ganoderma, масло из спор Ganoderma, Radix Pseudostellariae, Folium Ginseng, Radix Codonopsis и Radix Astragali, к композиции, содержащей Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, или к композиции, полученной из сырьевых материалов, включающих в себя Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, или к композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и Flos Rosae Rugosae, в получении изделий медицинского назначения, лекарственных средств или продуктов для профилактики и лечения аллергической бронхиальной астмы.
Термин "продукты" в упомянутом выше выражении "изделия медицинского назначения, лекарственные средства или продукты" включают в себя то, что не включено в "изделия медицинского назначения" или "лекарственные средства", включая в себя любые изделия, использующие композицию согласно настоящему изобретению, например эфирные масла, продукты на основе ладана и подушки.
Предпочтительно композиция для применения согласно настоящему изобретению для профилактики и лечения аллергических заболеваний получают из следующих сырьевых материалов в частях по массе: 5-200 частей Ganoderma, 5-150 частей Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, 1-90 частей порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или 1-120 частей Cordyceps.
Предпочтительными являются 20-120 частей Ganoderma, 10-90 частей Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, 3-60 частей порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или 3-90 частей Cordyceps.
Более предпочтительными являются 40 частей Ganoderma, 30 частей Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, 20 частей порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или 6,7 частей Cordyceps.
Композиция для применения согласно настоящему изобретению может дополнительно содержать следующие дополнительные материалы, которые не оказывают негативное воздействие на эффективность настоящего изобретения, или водные и/или спиртовые экстракты указанных дополнительных материалов в частях по массе: один или несколько из 5-90 частей Flos Rosae Rugosae, 5-150 частей порошка из спор Ganoderma, 1-90 частей масла из спор Ganoderma, 10-400 частей Radix Pseudostellariae, 1-120 частей Folium Ginseng, 3-400 частей Radix Codonopsis и 3-400 частей Radix Astragali, или любая их комбинация.
Предпочтительными являются один или несколько из 10-60 частей Flos Rosae Rugosae, 10-120 частей порошка из спор Ganoderma, 10-60 частей масла из спор Ganoderma, 20-200 частей Radix Pseudostellariae, 20-90 частей Folium Ginseng, 20-200 частей Radix Codonopsis и 20-200 частей Radix Astragali, или любая их комбинация.
Более предпочтительными являются один или несколько из 30 частей Flos Rosae Rugosae, 30 частей порошка из спор Ganoderma, 20 частей масла из спор Ganoderma, 40 частей Radix Pseudostellariae, 30 частей Folium Ginseng, 40 частей Radix Codonopsis и 40 частей Radix Astragali, или любая их комбинация.
Предпочтительно композиция для применения согласно настоящему изобретению представляет собой композицию из 5-200 частей Ganoderma, 5-150 частей Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, 1-90 частей порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или 1-120 частей Cordyceps и 5-90 частей Flos Rosae Rugosae.
Более предпочтительными являются 20-120 частей Ganoderma, 10-90 частей Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, 3-60 частей порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или 3-90 частей Cordyceps, и 10-60 частей Flos Rosae Rugosae.
Более предпочтительными являются 40 частей Ganoderma, 30 частей Radix Panaris Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, 20 частей порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или 6,7 частей Cordyceps и 30 частей Flos Rosae Rugosae.
Согласно настоящему изобретению Folium Ginseng, Radix Pseudostellariae, Radix Codonopsis и/или Radix Astragali можно использовать вместо Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng.
Согласно другому аспекту настоящего изобретения предусмотрены упомянутые выше композиции.
Используемый в настоящем документе термин "Ganoderma" относится к сухому спорокарпию гриба вида Ganoderma lucidum (Leyss. ex Fr.) Karst. или Ganoderma sinense Zhao, Xu et Zhang семейства Polyporaceae. Он характеризуется сладким вкусом и ровной природой, вовлечен в функционирование каналов в сердце, легких, печени и почках и характеризуется эффектами в обеспечении физической силой и уравновешивании и успокоении ума. Используемый в настоящем документе термин "Radix Et Rhizoma Ginseng" относится к сухому корню и корневищу растения вида Panax ginseng С.А. Меу. семейства Araliaceae. Он может представлять собой различные типы женьшеня, такие как садовый женьшень, дикий женьшень, высушенный свежий женьшень, высушенный свежий дикий женьшень, обработанный сахаром женьшень и красный женьшень. Термин "Folium Ginseng" относится к сухим листьям растения вида Panax ginseng С.А. Меу. семейства Araliaceae. Используемый в настоящем документе термин "Radix Panacis Quinquefolii", также известный как американский женьшень, huaqishen, yangshen или guangdongshen, относится к сухому корню растения вида Panax quinquefolium L. семейства Araliaceae. Он характеризуется сладким и слегка горьким вкусом и холодной природой, вовлечен в функционирование каналов в сердце, легких и почках и характеризуется эффектами в активизации Ци, обеспечении питания Инь, очищении сердца и стимуляции продукции жидких сред организма. Используемый в настоящем документе термин "Cordyceps" относится к сухому комплексу из мертвых тел личинок насекомых семейства Hepialidae и стромы гриба вида Cordyceps sinensis (Berk.) sace. семейства Clavicipitaceae, паразитирующего на личинке.
Используемый в настоящем документе термин "порошок ферментированного Cordyceps sinensis" относится к продукту штаммов, которые изначально были выделены из природного Cordyceps Cordyceps sinensis (Berk.) sace. и были культивированы в условиях ферментации, причем штаммы могут представлять собой один из Paecilomyces hepialli Chen et Dai, sp.nov, Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp.nov, Cephalosporium sinensis Chen sp.nov, Mortiscrslla hepialid C.T. & B. liu, Paecilomyces sinensis Chen, Xiao et Shi, sp.nov, Tolypocladium sinensis C. Ian Li, Cephalosporium sinens Chen sp.nov, Scytalidium hepialii C.L. Li, Chrysosporium sinens Z.Q. liang, Verticillium sinens Wamg sp.nov, Cephalosporium acremonium Corda, Icones Fungorum, Synnematium sinensis Yin & Shen, Isaria farinose (Holmsk.) Fr. Systema Mycologicum, Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorokin, Hirsutella hepialid Chen et Shen, Sporothrix insectorum de Hong & H.C. Evans, Gliocladium roseum (link) Thom и Mortierella sp. или любую их комбинацию.
Штамм, из которого получают порошок ферментированного Cordyceps sinensis согласно настоящему изобретению, предпочтительно представляет собой один или несколько из Paecilomyces hepialli Chen et Dai, sp.nov, Mortiscrslla hepialid C.T. & B. liu, Synnematium sinensis Yin & Shen, Gliocladium roseum (link) Thom, Mortierella sp., Cephalosporium sinensis Chen sp.nov или Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp.nov, или любую их комбинацию.
Используемый в настоящем документе термин "Flos Rosae Rugosae" относится к сухому бутону растения вида Rosa rugosa Thumb или Rose rugosacv. Plena семейства Rosaceae. Он характеризуется острым, сладким и слегка горьким вкусом и теплой природой и представляет собой лекарственное средство теплой природы. Его наиболее значительные эффекты заключаются в активации течения Ци, устранении застоя крови, гармонизации кровеносной системы и облегчении боли.
Термин "Radix Codonopsis" относится к сухому корню растения вида Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf., Codonopsis pilosula Nannf. var. modesta (Nannf.) L.T. Shen, или Codonopsis tangshen Oliv. семейства Campanulaceae.
Используемый в настоящем документе термин "Radix Pseudostellariae" относится к сухому клубневидному корню растения вида Pseudostellaria heterophylla (Miq.) Pax ex Pax et Hoffm. семейства Cargophyllaceae.
Термин "Folium Ginseng" относится к сухим листьям растения вида Panax ginseng С.А. Меу. семейства Araliaceae.
Термин "Radix Astragali" относится к сухому корню растения вида Astragalus membranaceus (Fisch) Bge. var. Mongholicus (Bge) Hsiao или Astragalus membranaceus (Fisch) Bge. семейства Fabaceae.
Порошок из спор Ganoderma согласно настоящему изобретению представляет собой предпочтительно порошок из спор Ganoderma с разрушенной спородермой.
Порошок из спор Ganoderma согласно настоящему изобретению представляет собой половые репродуктивные клетки Ganoderma, т.е. порошок из базидиоспор.
Масло из спор Ganoderma согласно настоящему изобретению представляет собой маслянистое жидкое вещество, экстрагированное из порошка из спор Ganoderma.
Способ получения композиции согласно настоящему изобретению предусматривает прямое смешивание сырьевых материалов в частях по массе; или смешивание сырьевых материалов в частях по массе и их экстрагирование водой и/или спиртом для получения композиции; или экстрагирование одного или нескольких сырьевых материалов водой и/или спиртом и применение экстракта в качестве активного ингредиента для получения композиции.
Спирт согласно настоящему изобретению представляет собой метанол или этанол; метанол может содержаться в концентрации, составляющей 5-95%, и этанол может содержаться в концентрации, составляющей 5-95%.
Способ получения водных и/или спиртовых экстрактов сырьевых материалов для композиции традиционной китайской медицины согласно настоящему изобретению предусматривает следующие стадии:
1) взвешивание традиционных китайских лекарственных средств в качестве сырьевых материалов; и
2) экстрагирование сырьевых материалов с обратным холодильником с помощью спирта или воды для получения жидкого экстракта в качестве активного ингредиента и добавление вспомогательного(ых) средства (средств) для получения различных лекарственных форм.
Способ получения водных и/или спиртовых экстрактов сырьевых материалов для композиции традиционной китайской медицины согласно настоящему изобретению может предусматривать следующие стадии:
1) взвешивание традиционных китайских лекарственных средств в качестве сырьевых материалов, добавление к ним метанола или этанола для проведения экстракции, извлечение метанола или этанола из экстракционной жидкости для получения экстракта I;
2) выпаривание спирта из остаточных лекарственных средств, добавление воды для проведения экстракции для получения экстракта II; и
3) комбинирование экстракта I и экстракта II, проведение фильтрации, концентрирование фильтрата до соответствующего количества, добавление фармацевтически принятого(ых) вспомогательного(ых) средства (средств) для получения требуемого состава с помощью фармацевтически принятого способа.
Способ получения водных и/или спиртовых экстрактов сырьевых материалов для композиции традиционной китайской медицины согласно настоящему изобретению может предусматривать следующие стадии:
1) получение сырьевого материала: взвешивание традиционных китайских лекарственных средств в качестве сырьевых материалов;
2) экстракция и концентрация: замачивание сырьевых материалов на основе китайских лекарственных средств, обработанных на стадии 1) в воде, затем отваривание несколько раз путем нагревания, комбинирование жидких экстрактов для проведения фильтрации, концентрирование фильтрата до соответствующего количества, охлаждение концентрата и воздействие на него с помощью высокоскоростного центрифугирования для удаления примесей и хранение продукта до использования;
3) получение состава: введение концентрата, полученного на стадии 2), отдельно или вместе с медицински приемлемым(и) вспомогательным(и) средством(ами), в требуемый состав с помощью фармацевтически принятого способа;
причем на стадии 2) выше сырьевые материалы замачивают в течение 20-60 мин, затем отваривают 1-3 раза путем нагревания для экстракции, причем каждое отваривание длится в течение 1-2 ч и характеризуется 6-13-кратным количеством добавленной воды.
Композиция согласно настоящему изобретению может быть получена в любой лекарственной форме путем добавления вспомогательного средства или вспомогательного вещества, приемлемого в изделиях медицинского назначения, лекарственных средствах или продуктах.
Лекарственная форма может представлять собой любую одну из следующего: таблетка, жидкость для перорального применения, гранула, капсула, электуарий, драже с повышенной биодоступностью, драже, порошок, леденец, жидкий экстракт, экстракт, инъекция и сироп.
Для обеспечения лучшего понимания сущности настоящего изобретения эксперименты на животных с применением фармацевтической композиции, полученной из Ganoderma, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps и фармацевтической композиции, полученной из Ganoderma, Flos Rosae Rugosae, Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng, порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или Cordyceps, а также их результаты, описаны ниже в настоящем документе для демонстрации эффективности композиции согласно настоящему изобретению в профилактике и лечении аллергических заболеваний, аллергического ринита, аллергического дерматита, крапивницы и аллергической бронхиальной астмы.
Аналогично, добавление любого одного или нескольких из порошка из спор Ganoderma, масла из спор Ganoderma, Ginseng, Radix Pseudostellariae, Radix Codonopsis и Radix Astragali или любой их комбинации, также может привести к таким же фармакологическим действиям.
Подробное раскрытие настоящего изобретения
Пример 1
Взвешивали 300 г Radix Panacis Quinquefolii, 400 г Ganoderma, 67 г Cordyceps, 200 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Paecilomyces hepialli Chen et Dai, sp.nov) и 300 г Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 1 ч и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; к полученному добавляли вспомогательное(ые) средство(а), часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения, и однородно перемешивали, и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 2
Взвешивали 300 г Radix Panaris Quinquefolii, 400 г Ganoderma, 200 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp.nov) и 300 г Flos Rosae Rugosae. Radix Panaris Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 20 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Каждое отваривание продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 3
Взвешивали 2 кг Ganoderma, 1,5 кг Radix Panacis Quinquefolii и 1 кг порошка ферментированного Cordyceps sinensis. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные три лекарственных средства замачивали в воде в течение 30 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 13-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали. Фильтрат концентрировали для получения прозрачной пасты, которую затем высушивали распылением для получения композиционного порошка. Полученную композицию, обозначенную как композиция 3, применяли в описанных ниже экспериментах по эффективности.
Пример 4
Взвешивали 4 кг Ganoderma, 3 кг Radix Panacis Quinquefolii, и 0,67 кг Cordyceps. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные три лекарственных средства замачивали в воде в течение 30 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 13-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали. Фильтрат концентрировали для получения прозрачной пасты, которую затем высушивали распылением для получения композиционного порошка. Полученную композицию, композицию 4, применяли в описанных ниже экспериментах по эффективности.
Пример 5
Взвешивали 4 кг Ganoderma, 3 кг Radix Panacis Quinquefolii, 0,67 кг Cordyceps и 2 кг порошка ферментированного Cordyceps sinensis. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части. Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 30 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 13-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали. Фильтрат концентрировали для получения прозрачной пасты, которую затем высушивали распылением для получения композиционного порошка. Полученную композицию, композицию 5, применяли в описанных ниже экспериментах по эффективности.
Пример 6
Взвешивали 2,0 кг Ganoderma, 1,5 кг Radix Panacis Quinquefolii, 1,0 кг порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp.nov) и 1,5 кг Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 30 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 13-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали. Фильтрат концентрировали для получения прозрачной пасты, которую затем высушивали распылением для получения композиционного порошка. Полученную композицию, композицию 6, применяли в описанных ниже экспериментах по эффективности.
Пример 7
Взвешивали 1,5 кг Radix Panacis Quinquefolii, 2,0 кг Ganoderma, 0,33 кг Cordyceps и 1,5 кг Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части. Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 30 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 13-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали. Фильтрат концентрировали для получения прозрачной пасты, которую затем высушивали распылением для получения композиционного порошка. Полученную композицию, композицию 7, применяли в описанных ниже экспериментах по эффективности.
Пример 8
Взвешивали 2,0 кг Ganoderma, 1,5 кг Radix Panacis Quinquefolii, 0,33 кг Cordyceps, 1,0 кг порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Paecilomyces hepialli Chen et Dai, sp.nov) и 1,5 кг Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части. Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок вместе с порошком ферментированного Cordyceps sinensis. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 30 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 13-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали. Фильтрат концентрировали для получения прозрачной пасты, которую затем высушивали распылением для получения композиционного порошка. Полученную композицию, композицию 8, применяли в описанных ниже экспериментах по эффективности.
Пример 9
Взвешивали 150 г Radix Panacis Quinquefolii, 90 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Hirsutella hepialid Chen et Shen), 120 г Cordyceps, 200 г Ganoderma и 90 г Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 1 ч и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч, с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 10
Взвешивали 500 г Radix Et Rhizoma Ginseng, 100 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Synnematium sinensis Yin & Shen), 500 г Ganoderma и 500 г Flos Rosae Rugosae. Radix Et Rhizoma Ginseng и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis и Flos Rosae Rugosae помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 30 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 15-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 11
Взвешивали 500 г Radix Panacis Quinquefolii, 100 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp.nov), 500 г Ganoderma и 500 г Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis и Flos Rosae Rugosae помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 20 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 12
Взвешивали 150 г Radix Panacis Quinquefolii, 120 г Cordyceps, 200 г Ganoderma и 90 г Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части. Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 40 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 13
Взвешивали 150 г Radix Et Rhizoma Ginseng, 90 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Gliocladium roseum (link) Thom), 200 г Ganoderma и 90 г Flos Rosae Rugosae. Radix Et Rhizoma Ginseng и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 1 ч и отваривали дважды путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 15-кратным количеством добавленной воды, и второе отваривание продолжающееся в течение 1,5 ч с 10-кратным количеством добавленной воды. Два жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 14
Взвешивали 150 г Radix Panacis Quinquefolii, 90 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Hirsutella hepialid Chen et Shen), 120 г Cordyceps, 200 г Ganoderma и 90 г Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 1 ч и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 15
Взвешивали 100 г Radix Panacis Quinquefolii, 30 г Cordyceps, 200 г Ganoderma и 100 г Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части. Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 30 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 16
Взвешивали 150 г Radix Panacis Quinquefolii, 30 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp.nov), 200 г Ganoderma и 100 г Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 1 ч и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 17
Взвешивали 90 г Radix Panacis Quinquefolii, 90 г Cordyceps, 120 г Ganoderma и 60 г Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части. Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 20 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Каждое отваривание продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 18
Взвешивали 90 г Radix Et Rhizoma Ginseng, 90 г Cordyceps, 120 г Ganoderma и 60 г Flos Rosae Rugosae. Radix Et Rhizoma Ginseng и Ganoderma разрезали на части. Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 30 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Каждое отваривание продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 19
Взвешивали 90 г Radix Panacis Quinquefolii, 60 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Cephalosporium sinensis Chen sp.nov), 120 г Ganoderma и 60 г Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 20 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Каждое отваривание продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 20
Взвешивали 300 г Radix Panacis Quinquefolii, 400 г Ganoderma, 67 г Cordyceps и 300 г Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части. Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 1 ч и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; к полученному добавляли часто используемые для таблеток вспомогательные средства и однородно перемешивали; и различные типы таблеток получали с помощью общепринятых способов получения таблеток.
Пример 21
Взвешивали 300 г Radix Panacis Quinquefolii, 400 г Ganoderma, 200 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Paecilomyces hepialli Chen et Dai, sp.nov) и 300 г Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 20 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Каждое отваривание продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 22
Взвешивали 500 г Radix Panacis Quinquefolii, 100 г Cordyceps, 500 г Ganoderma, 500 г Flos Rosae Rugosae и 500 г порошка из спор Ganoderma с разрушенной спородермой. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части. Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 20 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 15-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для таблеток вспомогательные средства и порошок из спор Ganoderma с разрушенной спородермой добавляли к полученному и однородно перемешивали; и различные типы таблеток получали с помощью общепринятых способов получения таблеток.
Пример 23
Взвешивали 500 г Radix Et Rhizoma Ginseng, 100 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Paecilomyces sinensis Chen, Xiao et Shi, sp.nov), 500 г Ganoderma, 500 г Flos Rosae Rugosae и 500 г порошка из спор Ganoderma с разрушенной спородермой. Radix Et Rhizoma Ginseng и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis и порошок из спор Ganoderma с разрушенной спородермой помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 20 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 15-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для гранул вспомогательные средства добавляли к полученному и однородно перемешивали; и гранулы получали с помощью общепринятых способов получения таблеток.
Пример 24
Взвешивали 150 г Radix Panacis Quinquefolii, 90 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Tolypocladium sinensis C. Ian Li), 200 г Ganoderma, 90 г Flos Rosae Rugosae и 150 г порошка из спор Ganoderma с разрушенной спородермой. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 20 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 15-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для таблеток вспомогательные средства и порошок из спор Ganoderma добавляли к полученному и однородно перемешивали; и различные типы таблеток получали с помощью общепринятых способов получения таблеток.
Пример 25
Взвешивали 500 г Radix Panacis Quinquefolii, 100 г Cordyceps, 500 г Ganoderma, 500 г Flos Rosae Rugosae и 100 г масла из спор Ganoderma. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и Cordyceps измельчали в порошок. При добавлении 80% этанола вышеперечисленные четыре лекарственных средства экстрагировали дважды с обратным холодильником, причем каждая экстракция продолжалась в течение 2 ч, и затем фильтровали. Этанол извлекали из жидкого фильтрата до тех пора, пока можно было ощутить запах этанола. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для драже с повышенной биодоступностью вспомогательные средства и масло из спор Ganoderma добавляли к полученному и однородно перемешивали; и драже с повышенной биодоступностью получали с помощью общепринятых способов получения драже с повышенной биодоступностью.
Пример 26
Взвешивали 500 г Radix Panacis Quinquefolii, 100 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Synnematium sinensis Yin & Shen), 500 г Ganoderma, 500 г Flos Rosae Rugosae, 500 г порошка из спор Ganoderma с разрушенной спородермой, 100 г масла из спор Ganoderma и 100 г Folium Ginseng. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные лекарственные средства замачивали в воде в течение 40 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для гранул вспомогательные средства, порошок из спор Ganoderma с разрушенной спородермой и масло из спор Ganoderma добавляли к полученному и однородно перемешивали; и гранулы получали с помощью общепринятых способов получения гранул.
Пример 27
Взвешивали 150 г Radix Panacis Quinquefolii, 90 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Hirsutella hepialid Chen et Shen), 200 г Ganoderma, 90 г Flos Rosae Rugosae и 400 г Radix Codonopsis. Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma и Radix Codonopsis разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 40 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для таблеток вспомогательные средства добавляли к полученному и однородно перемешивали; и различные типы таблеток получали с помощью общепринятых способов получения таблеток.
Пример 28
Взвешивали 150 г Radix Panacis Quinquefolii, 120 г Cordyceps, 200 г Ganoderma, 90 г Flos Rosae Rugosae и 400 г Radix Astragali. Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma и Radix Astragali разрезали на части. Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 20 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 14-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, часто используемое(ые) для леденцов вспомогательное(ые) средство(а) добавляли к полученному и однородно перемешивали, и леденцы получали с помощью общепринятых способов получения леденцов.
Пример 29
Взвешивали 500 г Radix Panacis Quinquefolii, 50 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Paecilomyces hepialli Chen et Dai, sp.nov), 50 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp.nov), 500 г Ganoderma, 500 г Flos Rosae Rugosae и 300 г Radix Codonopsis. Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma и Radix Codonopsis разрезали на части и порошки ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 1 ч и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемое(ые) для порошка вспомогательное(ые) средство(а) добавляли к полученному и однородно перемешивали; и порошок получали с помощью общепринятых способов получения порошка.
Пример 30
Взвешивали 500 г Radix Panacis Quinquefolii, 100 г Cordyceps, 500 г Ganoderma, 500 г Flos Rosae Rugosae и 300 г Radix Astragali. Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma и Radix Astragali разрезали на части. Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 20 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 14-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 31
Взвешивали 100 г Radix Panacis Quinquefolii, 200 г Ganoderma, 30 г Cordyceps, 3 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Cs-C-Q80 Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp.nov), 100 г Flos Rosae Rugosae и 100 г порошка из спор Ganoderma. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и Cordyceps измельчали в порошок и помещали в матерчатый мешок вместе с порошком из спор Ganoderma. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 20 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 15-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для таблеток вспомогательные средства добавляли к полученному и однородно перемешивали; и различные типы таблеток получали с помощью общепринятых способов получения таблеток.
Пример 32
Взвешивали 100 г Radix Panacis Quinquefolii, 200 г Ganoderma, 30 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Mortiscrslla hepialid C.T. & B.liu), 100 г Flos Rosae Rugosae и 100 г порошка из спор Ganoderma. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis и порошок из спор Ganoderma помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 20 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 15-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для драже вспомогательные средства добавляли к полученному и однородно перемешивали; и различные типы драже получали с помощью общепринятых способов получения драже.
Пример 33
Взвешивали 90 г Radix Panacis Quinquefolii, 120 г Ganoderma, 90 г Cordyceps, 60 г Flos Rosae Rugosae и 90 г масла из спор Ganoderma. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части. Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 30 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч, с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для гранул вспомогательные средства и масло из спор Ganoderma добавляли к полученному и однородно перемешивали; и гранулы получали с помощью общепринятых способов получения гранул.
Пример 34
Взвешивали 100 г Radix Panacis Quinquefolii, 200 г Ganoderma, 30 г Cordyceps, 100 г Flos Rosae Rugosae и 200 г Radix Pseudostellariae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 40 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 15-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, часто используемое(ые) для густых экстрактов вспомогательное(ые) средство(а) добавляли к полученному и однородно перемешивали; и густой экстракт получали с помощью общепринятых способов получения густых экстрактов.
Пример 35
Взвешивали 100 г Radix Panacis Quinquefolii, 200 г Ganoderma, 30 г Cordyceps, 100 г Flos Rosae Rugosae и 200 г Folium Ginseng. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 40 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 15-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, часто используемые для сиропов вспомогательные средства добавляли к полученному и однородно перемешивали; и сироп получали с помощью общепринятых способов получения сиропов.
Пример 36
Взвешивали 100 г Radix Panacis Quinquefolii, 200 г Ganoderma, 30 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Mortierella sp.), 100 г Flos Rosae Rugosae и 200 г Radix Codonopsis. Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma и Radix Codonopsis разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 40 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для таблеток вспомогательные средства добавляли к полученному и однородно перемешивали; и различные типы таблеток получали с помощью общепринятых способов получения таблеток.
Пример 37
Взвешивали 100 г Radix Panacis Quinquefolii, 200 г Ganoderma, 30 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Verticillium sinens Wamg sp.nov), 100 г Flos Rosae Rugosae и 200 г Radix Astragali. Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma и Radix Astragali разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 40 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; используемые для капсул вспомогательные средства часто добавляли к полученному и однородно перемешивали; и капсулы получали с помощью общепринятых способов получения капсул.
Пример 38
Взвешивали 90 г Radix Panacis Quinquefolii, 120 г Ganoderma, 30 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Cephalosporium sinensis Chen sp.nov), 30 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Synnematium sinensis Yin & Shen), 60 г Flos Rosae Rugosae и 60 г масла из спор Ganoderma. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошки ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 1 ч и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 13-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для драже вспомогательные средства и масло из спор Ganoderma добавляли к полученному и однородно перемешивали; и различные типы драже получали с помощью общепринятых способов получения драже.
Пример 39
Взвешивали 90 г Radix Panacis Quinquefolii, 120 г Ganoderma, 90 г Cordyceps, 60 г Flos Rosae Rugosae, 200 г Radix Astragali и 10 г масла из спор Ganoderma. Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma и Radix Astragali разрезали на части и Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 40 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 15-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, часто используемые для сиропов вспомогательные средства добавляли к полученному и однородно перемешивали; и сироп получали с помощью общепринятых способов получения сиропов.
Пример 40
Взвешивали 300 г Radix Panacis Quinquefolii, 400 г Ganoderma, 200 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Scytalidium hepialii C.L. Li), 300 г Flos Rosae Rugosae и 400 г порошка из спор Ganoderma. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 20 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 15-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для таблеток вспомогательные средства и порошок из спор Ganoderma добавляли к полученному и однородно перемешивали; и различные типы таблеток получали с помощью общепринятых способов получения таблеток. Жидкость для перорального применения получали путем добавления вспомогательного(ых) средства (средств) часто используемого(ых) для жидкости для перорального применения. Полученную композицию, композицию 40, применяли в описанных ниже экспериментах по эффективности.
Пример 41
Взвешивали 300 г Radix Panacis Quinquefolii, 400 г Ganoderma, 67 г Cordyceps, 300 г Flos Rosae Rugosae и 20 г масла из спор Ganoderma. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные четыре лекарственных средства замачивали в воде в течение 30 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для гранул вспомогательные средства и масло из спор Ganoderma добавляли к полученному и однородно перемешивали; и гранулы получали с помощью общепринятых способов получения гранул.
Пример 42
Взвешивали 300 г Radix Panacis Quinquefolii, 400 г Ganoderma, 200 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Cephalosporium sinens Chen sp.nov), 300 г Flos Rosae Rugosae и 400 г Radix Pseudostellariae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 40 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч, с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для таблеток вспомогательные средства добавляли к полученному и однородно перемешивали; и различные типы таблеток получали с помощью общепринятых способов получения таблеток.
Пример 43
Взвешивали 300 г Radix Panacis Quinquefolii, 400 г Ganoderma, 67 г Cordyceps, 300 г Flos Rosae Rugosae и 400 г Radix Pseudostellariae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. Вышеперечисленные пять лекарственных средств замачивали в воде в течение 40 мин и отваривали 3 раза путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч с 15-кратным количеством добавленной воды, и каждое из последующих отвариваний продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Три жидких экстракта комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать, затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, часто используемые для сиропов вспомогательные средства добавляли к полученному и однородно перемешивали; и сироп получали с помощью общепринятых способов получения сиропов.
Пример 44
Взвешивали 300 г Radix Panacis Quinquefolii, 400 г Ganoderma, 100 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Chrysosporium sinens Z.Q. liang), 100 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp.nov) и 300 г Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошки ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. При добавлении 5% метанола лекарственные средства экстрагировали дважды с обратным холодильником, причем каждая экстракция продолжалась в течение 1 ч. Затем жидкие экстракты комбинировали, и метанол извлекали для получения спиртового экстракта. Остаточные лекарственные средства дополнительно отваривали дважды в воде путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч, и последующие отваривание продолжалось в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Спиртовой экстракт и водные экстракты комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для гранул вспомогательные средства добавляли к полученному и однородно перемешивали; и гранулы получали с помощью общепринятых способов получения гранул.
Пример 45
Взвешивали 300 г Radix Panacis Quinquefolii, 400 г Ganoderma, 67 г Cordyceps, 20 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu-et Zeng, sp.nov) и 300 г Flos Rosae Rugosae. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. При добавлении 75% этанола лекарственные средства экстрагировали в течение 2 ч с обратным холодильником и этанол извлекали для получения спиртового экстракта. Остаточные лекарственные средства дополнительно отваривали три раз в воде путем нагревания, причем каждое отваривание продолжалось в течение 2 ч. Спиртовой экстракт и водные экстракты комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 46
Взвешивали 300 г Radix Et Rhizoma Ginseng, 400 г Ganoderma, 200 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Cephalosporium acremonium Corda, Icones Fungorum), 300 г Flos Rosae Rugosae и 400 г Radix Codonopsis. Radix Et Rhizoma Ginseng, Ganoderma и Radix Codonopsis разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. При добавлении 95% метанола лекарственные средства экстрагировали дважды с обратным холодильником, причем каждая экстракция продолжалась в течение 1 ч. Затем жидкие экстракты комбинировали и метанол извлекали для получения спиртового экстракта. Остаточные лекарственные средства дополнительно отваривали 3 раза в воде путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч, и последующие отваривания продолжались в течение 1 ч с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Спиртовой экстракт и водные экстракты комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для гранул вспомогательные средства добавляли к полученному и однородно перемешивали; и гранулы получали с помощью общепринятых способов получения гранул.
Пример 47
Взвешивали 300 г Radix Et Rhizoma Ginseng, 400 г Ganoderma, 200 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Sporothrix insectorum de Hong & H.C. Evans), 300 г Flos Rosae Rugosae и 400 г Radix Codonopsis. Radix Et Rhizoma Ginseng и Ganoderma разрезали на части и Cordyceps измельчали в порошок и помещали в матерчатый мешок. При добавлении 95% этанола лекарственные средства экстрагировали с обратным холодильником в течение 2 ч и этанол извлекали для получения спиртового экстракта. Остаточные лекарственные средства дополнительно отваривали 3 раза в воде путем нагревания, причем каждое отваривание продолжалось в течение 2 ч. Спиртовой экстракт и водные экстракты комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 48
Взвешивали 300 г Radix Et Rhizoma Ginseng, 400 г Ganoderma, 67 г Cordyceps, 300 г Flos Rosae Rugosae, 300 г порошка из спор Ganoderma и 400 г Radix Astragali. Radix Et Rhizoma Ginseng и Ganoderma разрезали на части и Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. При добавлении 5% этанола лекарственные средства экстрагировали с обратным холодильником в течение 2 ч и этанол извлекали для получения спиртового экстракта. Остаточные лекарственные средства дополнительно отваривали дважды в воде путем нагревания, причем каждое отваривание продолжалось в течение 2 ч. Спиртовой экстракт и водные экстракты комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 49
Взвешивали 300 г Radix Panacis Quinquefolii, 400 г Ganoderma, 200 г порошка ферментированного Cordyceps sinensis (Isaria farinose (Holmsk.) Fr. Systema Mycologicum), 300 г Flos Rosae Rugosae и 400 г Radix Astragali. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и порошок ферментированного Cordyceps sinensis помещали в матерчатый мешок. При добавлении 95% метанола лекарственные средства экстрагировали дважды с обратным холодильником в течение 2 ч, причем каждая экстракция продолжалась в течение 1 ч. Затем жидкие экстракты комбинировали и метанол извлекали для получения спиртового экстракта. Остаточные лекарственные средства дополнительно отваривали 3 раза в воде путем нагревания. Первое отваривание продолжалось в течение 2 ч, и последующие отваривания продолжались в течение 1 ч, с 10-кратным количеством добавленной воды для каждого отваривания. Спиртовой экстракт и водные экстракты комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования. Пасту получали с помощью дополнительного концентрирования при отрицательном давлении или тонкодисперсные частицы получали путем высушивания распылением; часто используемые для гранул вспомогательные средства добавляли к полученному и однородно перемешивали; и гранулы получали с помощью общепринятых способов получения гранул.
Пример 50
Взвешивали 300 г Radix Panacis Quinquefolii, 400 г Ganoderma, 67 г Cordyceps, 300 г Flos Rosae Rugosae и 90 г Folium Ginseng. Radix Panacis Quinquefolii и Ganoderma разрезали на части и Cordyceps измельчали в порошок и затем помещали в матерчатый мешок. При добавлении 5% этанола лекарственные средства экстрагировали с обратным холодильником в течение 2 ч и этанол извлекали для получения спиртового экстракта. Остаточные лекарственные средства дополнительно отваривали 3 раза в воде путем нагревания, причем каждое отваривание продолжалось в течение 2 ч. Спиртовой экстракт и водные экстракты комбинировали и фильтровали, жидкий фильтрат концентрировали до соответствующего количества, жидкий концентрат оставляли остывать и затем примеси в нем удаляли путем высокоскоростного центрифугирования, к полученному добавляли часто используемое(ые) для жидкости для перорального применения вспомогательное(ые) средство(а) и однородно перемешивали; и 20000 мл жидкости для перорального применения получали с помощью общепринятых способов получения жидкости для перорального применения.
Пример 51. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 3 композиции 3 против аллергии и аллергического дерматита
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 3 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma и порошок ферментированного Cordyceps sinensis) предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 11,41 г общих сырых лекарственных средств. Его суточная доза потребления, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела.
1.2 Лабораторные животные
Чистых высококачественных здоровых мышей Kunming, половина из которых являлись самцами и другая половина - самками, каждая массой 18-22 г, предоставляла Laboratory Animal Center, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine (сертификационный номер: SCXK (Jiangxi) 2005-0001). Чистых высококачественных здоровых крыс SD, половина из которых являлись самцами и другая половина самками, предоставляла Laboratory Animal Center, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine (сертификационный номер: SCXK (Jiangxi) 2006-0001).
1.3 Исходные реагенты
Овальбумин (OVA) (Sigma, № партии: 025K0594); Эванса голубой (ЕВ) (Sinopharm (Group) Shanghai Chemical Reagent Co., Ltd., № партии: F20030714); гистамина фосфат, произведенный Shanghai Biological Reagent Factory, № партии: 909035; 2,4-динитрохлорбензол, химически чистый, произведенный Guangzhou Chemical Reagent Factory, № партии: 0703428; преднизон, произведенный Xianju Pharmaceuticals Co. Ltd., № партии: 090678.
1.4 Исходные инструменты
Электронные весы BS110S, произведенные Sartorius Inc.; центрифуга (Anting, Shanghai); цифровая термостатическая водяная баня (Jintan, Zhejiang); перфоратор (8 мм в диаметре); микропипетка (Gilson, France). Микроскоп OLYMPUS; подающее устройство для предметных стекол с водяной баней YT-6C (Yaguang Medical Electronics Technology Inc., Xiaogan, Hubei); инкубатор/сушильный шкаф PH140A (Shanghai Yiheng Technology Co., Ltd).
2. Экспериментальные способы
2.1 Распределение животных по группам
Животных случайным образом делили на группы по 10 животных на группу на основании массы тела. Устанавливали контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 3 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона).
2.2 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиции 3, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для мыши составляла: получающая низкую дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 4,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 12,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 5, 10 и 30-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (17,53 мг сухого порошка/мл, 35,06 мг сухого порошка/мл, и 105,18 мг сухого порошка/мл) с помощью дистиллированной воды для проведения экспериментов.
Суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (8,765 мг сухого порошка/мл, 17,53 мг сухого порошка/мл, и 52,59 мг сухого порошка/мл) с помощью дистиллированной воды для проведения экспериментов.
2.3 Эффект композиции 3 на пассивную анафилаксию (РСА) у крыс, вызванную овальбумином
2.3.1 Получение антисыворотки
5% OVA в физиологическом солевом растворе вводили с помощью инъекции в заднюю конечность крыс в количестве 0,2 мл/задняя конечность, при этом противококлюшную вакцину вводили с помощью инъекции интраперитонеально в количестве 0,15 мл/крыса. После нормального кормления в течение 13 дней кровь получали из глазницы и центрифугировали при 2000 об/мин в течение 15 мин. Из нее выделяли сыворотку к OVA и хранили в холодильной камере при -20°С до использования.
2.3.2 Установление крысиных моделей сыворотки к овальбумину
Получали сыворотку к овальбумину и разводили ее в соотношении 1:4 или 1:8 физиологическим солевым раствором. 50 крыс SD случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 3 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 крыс на группу. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили с дистиллированной водой; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 3 группам внутрижелудочно вводили исследуемые растворы в различных концентрациях в объеме дозирования, составляющем 10 мл/кг; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 14 последовательных дней. На 15 день спины крыс брили и интрадермально вводили с помощью инъекции разбавленную сыворотку в две области на каждой стороне по 0,1 мл на каждую область. Через 48 часов 1,0 мл смешанного раствора 1% Эванса голубого и 1% овальбумина в физиологическом солевом растворе вводили с помощью инъекции в хвостовую вену каждой крысы. Через 30 мин производили забор артериальной крови, сыворотку отделяли от нее и содержание гистамина определяли с помощью известного способа. Крыс затем умерщвляли и кожу на их спинах выворачивали для измерения диаметра голубых реакционных пятен для определения различия между получающими дозировку группами и модельной группой. Образец ткани кожи крысы фиксировали нейтральным формальдегидом, дегидратировали с помощью спиртового градиента, заливали парафином и исследовали в отношении дегрануляции тучных клеток в ткани.
2.3.3 Эффект композиции 3 на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом
50 мышей случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 3 группы, и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 мышей на группу. 5% раствор 2,4-динитрохлорбензола в этаноле наносили на кожу (побритую) брюшной поверхности мышей для сенсибилизации. Внутрижелудочное введение проводили за два дня до сенсибилизации; контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили эквивалентный объем дистиллированной воды; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; группам, получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 3, внутрижелудочно вводили соответствующие исследуемые растворы в объеме дозирования, составляющем 0,1 мл/10 г массы тела; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 7 дней после сенсибилизации 1% раствор 2,4-динитрохлорбензола наносили на правое ухо, мышей умерщвляли через 24 часа и оба уха отрезали вдоль основания наружного уха. Диски диаметром 8 мм извлекали с помощью пункции в одинаковом положении на обоих ушах, точно взвешивали на электронных весах и различие в массе между левым и правым ушами принимали в качестве объема для гиперчувствительности замедленного типа.
2.3.4 Эффект композиции 3 на локальный зуд у мышей, вызванный низкомолекулярным декстраном
50 мышей случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, группы, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 3, и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 мышей на группу. Внутрижелудочное введение проводили мышам один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 30 мин после последнего введения 0,0125% раствора низкомолекулярного декстрана вводили с помощью инъекции в количестве 0,1 г/10 г в хвостовую вену. Число случаев зуда (случай зуда устанавливали по расчесу на голове с помощью передних лап, расчесу на теле с помощью задних лап и по укусам на различных частях по всему телу), которые происходили в течение 30 мин после инъекции раствора низкомолекулярного декстрана в хвостовые вены мышей в каждой группе, наблюдали и регистрировали.
2.3.5 Эффект композиции 3 на проницаемость капилляров у крыс
50 крыс случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, группы, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 3, и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 крыс на группу. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили дистиллированную воду; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; группам, получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 3, внутрижелудочно вводили исследуемые растворы в различных концентрациях в объеме дозирования, составляющем 10 мл/кг; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 1 час после последнего введения в побритую область (побритую перед введением) спины крыс интрадермально вводили с помощью инъекции 1 мг/мл гистамина фосфата в дозе, составляющей 0,1 мл/крыса, и затем в хвостовую вену немедленно вводили с помощью инъекции 1% водного раствора Эванса голубого в дозе, составляющей 1 мл/крыса. Через 20 минут животных умерщвляли путем смещения шейных позвонков. Области кожи с голубыми пятнами отрезали и разрезали на маленькие кусочки, замачивали в 5 мл раствора ацетона: физиологического солевого раствора (7:3) в течение 48 часов, центрифугировали и поглощение супернатанта измеряли при 610 нм.
2.4 Статистический метод
Экспериментальные данные представляли в 
. Однофакторный дисперсионный анализ использовали для сравнения различий среди контрольной модельной группы и получающих различные дозы композиции 3 групп. Р<0,05 рассматривали как значимое различие. Р<0,01 рассматривали как высокозначимое различие.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 3 на пассивную анафилаксию у крыс
Результаты исследования показаны в таблицах 1 и 2 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой получающая низкую дозу композиции 3 группа показала тенденцию к уменьшению диаметра голубых пятен у сенсибилизированных сывороткой к овальбумину в соотношении 1:4 и 1:8 крыс, к уменьшению дегрануляции тучных клеток и к уменьшению содержания сывороточного гистамина, что, тем не менее, не характеризовалось статистической значимостью; все из контрольной группы преднизона и получающих средние и высокие дозы композиции 3 групп показали эффект в значительном снижении диаметра голубых пятен у сенсибилизированных сывороткой к овальбумину в соотношении 1:4 и 1:8 крыс, уменьшении дегрануляции тучных клеток и снижении содержания сывороточного гистамина, со значимым или высокозначимым статистическим различием. Это указывает на то, что композиция 3 характеризовалась значительным ингибирующим эффектом на пассивную анафилаксию у крыс.
3.2 Эффект композиции 3 на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом
Результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой степень отека дисков наружного уха мыши значительно снижалась в группах, получающих средние и высокие дозы композиции 3, указывая на то, что композиция 3 характеризовалась существенным ингибирующим эффектом на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом.
3.3 Эффект композиции 3 на локальный зуд у мышей, вызванный низкомолекулярным декстраном
Результаты исследования показаны в таблице 4 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой Объем OD значительно снижался в группе крыс, получающих средние и высокие дозы композиции 3, указывая на то, что композиция 3 являлась значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом.
3.4 Эффект композиции 3 на проницаемость капилляров у крыс
Результаты исследования показаны в таблице 5 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой объем OD значительно снижался в группе крыс, получающих средние и высокие дозы композиции 3, указывая на то, что композиция 3 являлась значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом.
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что композиция 3 является значительно эффективной в ингибировании пассивной анафилаксии у крыс, вызванной овальбумином, что композиция 3 является эффективной в ингибировании гиперчувствительности замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванной 2,4-динитрохлорбензолом, и что композиция 3 является значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом. Вышеперечисленные результаты указывают на хорошую эффективность композиции 3 в защите от аллергии и в профилактике и лечении таких аллергических заболеваний, как аллергический дерматит и крапивница.
Пример 52. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 3 композиции 3 в профилактике и лечении аллергического ринита
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 3 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma и порошок ферментированного Cordyceps sinensis), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 11,41 г общих сырых лекарственных средств.
1.2 Лабораторные животные
Чистых, высококачественных крыс SD, половина из которых являлись самцами и другая половина - самками, каждая массой 180-220 г, предоставляла Laboratory Animal Center, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine (Сертификационный номер: SCXK (Jiangxi) 2006-0001). Морских свинок, половина из которых являлись самцами и другая половина - самками, каждая массой 250-300 г, предоставлял Dongchuang Experimental Animal Service Department, Kaifu District, Changsha.
1.3 Исходные реагенты
Толуол-2,4-диизоцианат (TDI) (Shanghai First Reagent Factory, № партии: 090301); овальбумин (OVA) (Sigma, № партии: 025K0594); таблетки Bi-yan-kang (Foshan Dezhong Pharmaceutical Co., Ltd., № партии: 090701); наборы cAMP и cGMP (Great Wall Biochemicals).
1.4 Исходные инструменты
Автоматический биохимический анализатор крови Beckman-CX7; OLYMPUS микроскоп; инвертированный флуоресцентный фазово-контрастный цифровой микроскоп TE2000-S (Nikon Inc., Japan); микротом (Leica, Germany); подающее устройство для предметных стекол с водяной баней YT-6C (Yaguang Medical Electronics Technology Inc., Xiaogan, Hubei).
2. Экспериментальные способы
2.1 Эффект на аллергический ринит у крыс, вызванный OVA
2.1.1 Распределение животных по группам
Крыс случайным образом делили на две группы, т.е. группу холостого контроля из 10 животных и группу моделирования из 70 животных. После успешного моделирования крыс распределяли случайным образом, на основании их оценки в баллах, в следующие группы: контрольная модельная группа, принимающая лекарственное средство положительная группа (группа Bi-yan-kang) и получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 3 группы, по 10 животных в каждой группе.
2.1.2 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиционного порошка композиции 3, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Объем внутрижелудочного введения рассчитывали как 1,0 мл/100 г массы тела. Группе холостого контроля и группе модели аллергического ринита внутрижелудочно вводили эквивалентный объем физиологического солевого раствора; группе Bi-yan-kang вводили лекарственное средство в дозе, составляющей 410 мг/кг. Внутрижелудочное введение начинали после успешного моделирования и проводили один раз в день в течение 21 последовательного дня.
2.1.3 Установление животных моделей аллергического ринита у крыс
1 мл физиологического солевого раствора добавляли к 0,3 мг OVA в качестве антигена и 30 мг порошка гидроксида алюминия в качестве адъюванта для получения суспензии, которую вводили интраперитонеально с помощью инъекции один раз через день всего 7 раз. После этого местную иммунизацию проводили в каждой носовой полости с помощью 10 мкл 5% OVA один раз в день в течение 7 дней. Эквивалентный объем физиологического солевого раствора вводили группе холостого контроля. Во время введения исследуемого лекарственного средства назальное введение 50 мкл 1% OVA все еще проводили через день.
Критерии оценки эффективности моделирования: эффективность оценивали путем выставления баллов; в течение 30-минутного наблюдения после сенсибилизации регистрировали число чиханий, уровень зуда в носу и количество носового секрета. Критерии выставления баллов показаны в таблице 1 (см. в графической части).
Общий балл, составляющий 5 единиц, указывал на успешное моделирование, после чего назальное введение продолжали до завершения экспериментального лечения.
2.1.4 Индикаторы исследования
Измеряли содержание сАМР и cGMP в крови и подсчитывали количество тучных клеток в тканях слизистой оболочки носа.
2.1.4.1 Измерение сАМР и cGMP крови
Кровь получали из сонной артерии и сыворотку выделяли для ELISA.
2.1.4.2 Подсчет тучных клеток в слизистой оболочке носа
Снимали кожу в носовой верхнечелюстной области, верхнюю челюсть отделяли от черепа и отрезали вдоль средней линии носа, чтобы обнажить носовую перегородку и носовые полости с обеих сторон. Переднюю и среднюю часть носовой перегородки отрезали и фиксировали в 10% растворе формальдегида в течение 72 ч, затем помещали в декальцификацирующий раствор для декальцификации в течение 3 дней, дегидратировали с помощью спиртового градиента до прозрачности и заливали парафином. Получали традиционные срезы по 4 мкм, окрашивали их с помощью толуидинового синего и проводили наблюдение под микроскопом для подсчета общего количества тучных клеток в образце.
2.2 Эффект на аллергический ринит у морских свинок, вызванный TDI
2.2.1. Так же, как в 2.1.1.
2.2.2. Так же, как в 2.1.2.
2.2.3 Установление животных моделей аллергического ринита у морских свинок
Моделирование проводили с помощью TDI. Морских свинок, отличных от морских свинок в группе холостого контроля, подвергали моделированию с применением 10% TDI. 10 мкл вводили с помощью пипетки по каплям в обе носовые полости морских свинок (5 мкл для каждой стороны) один раз в день в течение последовательных 7 дней, для установления животных моделей аллергического ринита у морских свинок. Эквивалентный объем оливкового масла вводили назально группе холостого контроля. Назальное введение продолжали до завершения экспериментального лечения.
Критерии оценки для эффективности моделирования: эффективность оценивали путем выставления баллов; в течение 30-минутного наблюдения после сенсибилизации регистрировали число чиханий, уровень зуда в носу и количество носового секрета. Критерии выставления баллов показаны в таблице 1 (см. в графической части).
2.2.4 Индикаторы исследования
Наблюдение за поведением; количество эозинофилов в носовом секрете; измерения содержания общего сывороточного IgE и гистамина крови; измерение толщины слизистой оболочки носа.
2.2.4.1 Наблюдение за поведением морских свинок
После сенсибилизации путем назального введения TDI баллы присваивали согласно критериям в таблице 1 (см. в графической части).
2.2.4.2 Количество эозинофилов (EOS) в носовом секрете
Делали мазок носового секрета от морских свинок на предметное стекло и корректировали с помощью метода Лорена. Наблюдаемые EOS обнаруживали в поле при 40× увеличении под цифровым микроскопом и количество EOS в собственной пластинке в этом месте подсчитывали в 3-5 полях зрения при большом увеличении и применяли для установления степени инфильтрации EOS.
2.2.4.3 Измерение содержания общего сывороточного IgE и гистамина в крови
Через один день после в завершения ведения морским свинкам вводили анестезию с помощью 10% хлоралгидрата и кровь получали из брюшной аорты. Общий сывороточный IgE измеряли с помощью радиоиммуноанализа. Другие 5 мл крови добавляли в антикоагулирующую пробирку и хранили при -20°С до использования. Гистамин экстрагировали и содержание гистамин определяли с помощью флуоресцентной спектрофотометрии. Уравнение для расчета являлось следующим:
Содержание гистамина в крови (мг/л)=[(объем образца-объем холостого образца)/(объем стандарта - объем холостого стандарта)]×стандартная концентрация гистамина
(Стандартная концентрация гистамина составляла 50,2 мг⋅л-1).
2.2.4.4 Измерение толщины слизистой оболочки носа
Сбор материала и получение срезов были такими же как в эксперименте 2.1.4.2. После окрашивания НЕ толщину слизистой оболочки носа количественно измеряли с помощью анализатора изображений. Расстояние от верхушки выпячивания слизистой в области слизистой, покрытой псевдомногослойным реснитчатым столбчатым эпителием, до хряща носовой перегородки (включая в себя эпителиальный слой и собственную пластинку) в каждом образце определяли в качестве толщины слизистой оболочки.
2.3 Статистический метод
Экспериментальные данные представляли в Однофакторный дисперсионный анализ использовали для сравнения различий среди группы холостого контроля, контрольной модельной группы и получающих различные дозы композиции 3 групп. Р<0,05 рассматривали как значимое различие. Р<0,01 рассматривали как высокозначимое различие.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 3 на аллергический ринит у крыс, вызванный овальбумином
3.1.1 Эффект на поведение крыс
Результаты показаны в таблице 2 (см. в графической части). После моделирования баллы для признаков крыс в каждой смоделированной группе квалифицировали без значительного различия между ними, указывая на успешное моделирование. После введения доз и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все баллы для признаков в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижалась (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.1.2 Эффект композиции 3 на содержание сАМР и cGMP в сыворотке крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля модельная группа показала значительно пониженное содержание с AMP в сыворотке (Р<0,01) и значительно увеличенное содержание cGMP в сыворотке (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой группа Bi-yan-kang и все получающие исследуемое лекарственное средство группы показали значительно увеличенное содержание сАМР в сыворотке (Р<0,01 или Р<0,05); группа Bi-yan-kang и получающие среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группы показали значительно пониженное содержание cGMP в сыворотке (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.1.3 Эффект композиции 3 на тучные клетки в слизистой оболочке носа у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). Количество тучных клеток в слизистой оболочке носа в контрольной модельной группе значительно увеличивалось с высокозначимым различием (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой количество тучных клеток в слизистой оболочке носа в группе Bi-yan-kang и во всех получающих исследуемое лекарственное средство группах лечения значительно снижалось со значимым различием (Р<0,01).
3.2 Эффект композиции 3 на аллергический ринит у морских свинок, вызванный TDI
3.2.1 Эффект на поведение морских свинок
Результаты показаны в таблице 4 (см. в графической части). После моделирования баллы для признаков морских свинок в каждой смоделированной группе квалифицировали без значимого различия между ними, указывая на успешное моделирование. После введения дозы и лечения, по сравнению с контрольной модельной группой все баллы для признаков в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.2.2 Эффект на содержание гистамина в крови и общего сывороточного IgE у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 5 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля, как гистамин в крови, так и общий сывороточный IgE у модельной группе увеличивались (Р<0,01), указывая на успешное экспериментальное моделирование. По сравнению модельной группой поглощение флуоресценции концентрации гистамина и общего сывороточного IgE в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижалось (Р<0,01 или Р<0,05), причем содержание гистамина в получающих среднюю и высокую дозы группах снижался почти до нормального содержания, указывая на то, что композиция 3 являлась эффективной в лечении аллергического ринита путем ингибирования содержания гистамина в крови и сывороточного IgE.
3.2.3 Эффект на эозинофилы (EOS) в носовом секрете морских свинок Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). Количество эозинофилов в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению с модельной группой все количества эозинофилов в группе Bi-yan-kang и в получающих лечение лекарственным средством группах значительно снижались (Р<0,05 или Р<0,01).
3.2.4 Эффект на толщину слизистой оболочки носа у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). В результате, по сравнению с группой холостого контроля в модельной группе эпителий слизистой оболочки на носовой перегородке морских свинок отслаивался в различной степени, характеризуясь неоднородной толщиной и неясной базальной структурой; венулы и капилляры в собственной пластинке показали заметное расширение, тканевое пространство расширялось, и толщина слизистой оболочки значительно увеличивалась (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой вышеперечисленные патологические изменения в группе Bi-yan-kang и в получающих лечение лекарственным средством группах снижались, и толщина слизистой оболочки значительно уменьшалась (Р<0,01).
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что эффективность композиции 3, главным образом, отражается в следующих аспектах: 1) она способна значительно уменьшить балл назального симптома смоделированных крыс, увеличить содержание сАМР в сыворотке и снизить содержание cGMP у крыс с аллергическим ринитом; 2) уменьшить количество тучных клеток в слизистой оболочке носа у крыс и уменьшить их инфильтрацию в участках воспаления; 3) она способна снизить балл назального симптома смоделированных морских свинок; 4) уменьшить количество EOS в носовом секрете морских свинок и снизить инфильтрацию EOS в участках воспаления; 5) она способна значительно уменьшить концентрацию гистамина в крови у морских свинок и снизить содержание медиаторов воспаления; 6) облегчить отек в слизистой оболочке носа морских свинок. В соответствии с результатами экспериментальных исследований, считают, что композиция 3 является эффективной в защите от аллергического ринита.
Пример 53. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 3 композиции 3 в профилактике и лечении аллергической бронхиальной астмы
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 3 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma и порошок ферментированного Cordyceps sinensis), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 11,41 г общих сырых лекарственных средств.
1.2 Лабораторные животные
Крыс SD, половина из которых являлись самцами и другая половина - самками, каждая массой 180 - 220 г, предоставляла Laboratory Animal Center, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine (SCXK (Jiangxi) 2006-0001). Морских свинок, половина из которых являлись самцами и другая половина - самками, каждая массой 180-220 г, предоставлял Dongchuang Experimental Animal Scientific Service Department, Kaifu District, Changsha, Hunan Province (Сертификационный номер: SCXK (Hunan) 2006-0001).
1.3 Исходные реагенты
Овальбумин (OVA) (Sigma, № партии: 025К0594); ацетилхолинхлорид (Shanghai Jingchun Reagent Co., Ltd., № партии: 21205); гистамина фосфат (Shanghai Jingchun Reagent Co., Ltd., № партии: 22270); дексаметазон (Zhengzhou Zhuofeng Pharmaceuticals, № партии: 0904213); наборы для ELISA IL-4 и IFN-γ (Great Wall Biochemicals).
1.4 Исходные инструменты
Система получения и анализа биологических сигналов MD3000 (Huaibeizhenghua Bioinstrumentation Co., Ltd.); респираторный преобразователь ZH-100 (Huaibeizhenghua Bioinstrumentation Co., Ltd.); ультразвуковой распылитель 402A1 (Jiangsu Juyue Medical Device Co., Ltd.); микроскоп OLYMPUS; инвертированный флуоресцентный фазово-контрастный цифровой микроскоп TE2000-S (Nikon Inc., Japan); микротом (Leica, Germany).
2. Экспериментальные способы
2.1 Эффект на аллергическую бронхиальную астму у крыс, вызванную OVA
2.1.1 Распределение животных по группам
Крыс (половина из которых являлись самцами и другая половина - самками) случайным образом делили на две группы, т.е. группу холостого контроля из 10 животных и группу моделирования из 70 животных. После успешного моделирования крыс случайным образом делили на следующие группы: контрольная модельная группа, принимающая лекарственное средство положительная группа (группа дексаметазона), и группы, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 3, по 10 животных в каждой группе.
2.1.2 Установление животных моделей аллергической бронхиальной астмы у крыс
На 1 день всех животных за исключением животных в группе холостого контроля сенсибилизировали путем интраперитонеальной инъекции с помощью 1 мл суспензии, содержащей 10 мг OVA, 200 мг сухого порошка Al(ОН)3 и 6×109 инактивированных противококлюшных вакцин в физиологическом солевом растворе, и сенсибилизировали снова на 8 день. С 15 дня все группы животных, отличные от отрицательной контрольной группы сенсибилизировали с помощью ультразвукового распыления 1% OVA в течение приблизительно 20 мин каждый раз, с 8.00 до 9.00 утром каждый день, пока крысы показывали астматические манифестации, которые продолжались в течение 3 недель. Во время сенсибилизации распылением крысы показывали такие симптомы, как тревожное возбуждение, чихание, недержание мочи и кала, почесывание ушей и цианоз, что указывало на успешное воспроизведение модели астмы.
2.1.3 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиционного порошка композиции 3, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (8,76 мг сухого порошка/мл, 17,52 мг сухого порошка/мл, 52,56 мг сухого порошка/мл) для проведения экспериментов. Объем внутрижелудочного введения рассчитывали как 1,0 мл/100 г массы тела. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили эквивалентный объем 0,9% физиологического солевого раствора за 30 минут до сенсибилизации; и получающей лекарственное средство положительной группе вводили дексаметазон в дозе, составляющей 0,5 мг/кг за 30 мин до каждой сенсибилизации. Каждой из групп, получающих низкую, среднюю и высокую дозы композиции 3, внутрижелудочно вводили соответствующую дозу исследуемого лекарственного средства за 30 мин до каждой сенсибилизации. Наряду с этим группе холостого контроля интраперитонеально вводили с помощью инъекции эквивалентный объем 0,9% физиологического солевого раствора, сенсибилизировали путем его распыления или вводили его внутрижелудочно. Внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 21 последовательного дня.
2.1.4 Регистрация латентного периода астмы, вызванной у крыс
Респираторный преобразователь ZH-100 привязывали вокруг грудной клетки каждой крысы (натяжение доводили до приблизительно 1-2 г так, чтобы амплитуда респираторной волны составляла 1-2 мВ). Преобразователь соединяли с системой получения и анализа биологических сигналов MD3000. Животных помещали в закрытый стеклянный колпак, соединенный с ультразвуковым распылителем. Систему включали и записывали сегмент нормальной респираторной волны. Затем ультразвуковое распыление с помощью 1% OVA проводили в течение 20 мин и респираторные волны индуцированной бронхиальной астмы у крыс непрерывно регистрировали в течение 30 мин после начала распыления. При этом, период от начала распыления до появления симптомов (на которое указывает первое судорожное движение) визуально наблюдали и регистрировали в качестве латентного периода бронхиальной астмы.
2.1.5 Измерения содержания IL-4 и IFN-γ
Через 24 ч после последней сенсибилизации крысам вводили анестезию с помощью интраперитонеальной инъекции 3% пентобарбитала натрия (30 мг/кг). Производили забор 5-10 мл крови и содержание сывороточного IL-4 и IFN-γ измеряли с помощью ELISA.
2.1.6 Измерение содержание EOS в тканях легких
Ткани левого легкого отрезали и фиксировали в 4% полиформальдегиде в течение 4-5 ч, затем отмывали водой, дегидратировали с помощью спиртового градиента и погружали и заливали парафином. Окрашивание НЕ проводили с последующей обработкой срезов, наблюдали воспалительные изменения в тканях и подсчитывали инфильтрацию EOS. Для каждого среза один и тот же наблюдатель выбирал 10 полей случайным образом под микроскопом при большом увеличении (×400) и количества инфильтрации EOS вокруг бронха и сосудов рассчитывали и усредняли в качестве репрезентативного объема для указанного среза.
2.2 Эффект на аллергическую бронхиальную астму у морских свинок, вызванную газовой смесью Ach и His
2.2.1 Так же, как в 2.1.1.
2.2.2 Установление животных моделей аллергической бронхиальной астмы у морских свинок
На 1 день морских свинок помещали в закрытый 4 л стеклянный колпак, в который раствор смеси 1:1 2% Ach и 0,4% His распыляли с помощью ультразвукового распыления в течение 15 с. После завершения распыления регистрировали латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок (т.е. период от окончания распыления до астматических манифестаций, чрезвычайной трудности дыхания до судорожного движения и падения). Животных, характеризующихся латентным периодом бронхиальной астмы больше чем 120 с, исключали.
2.2.3 Режим дозирования
Так же, как в 2.1.3.
2.2.4 Регистрация латентного периода бронхиальной астмы
Так же, как в 2.1.4.1.
2.2.5 Измерение IgE в сыворотке и BALF
Использовали сэндвич-радиоиммуноанализ с двойным антителом.
2.3 Статистический метод
Экспериментальные данные представляли в 
Однофакторный дисперсионный анализ использовали для сравнения различий среди групп. Р<0,05 рассматривали как значимое различие. Р<0,01 рассматривали как высокозначимое различие.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 3 на аллергическую бронхиальную астму у крыс, вызванную OVA
3.1.1 Эффект на латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у крыс
Результаты показаны в таблице 1 (см. в графической части). Латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у крыс из каждой смоделированной группы, квалифицировали без значимого различия между ними, что указывает на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у крыс в положительной контрольной группе и в получающих среднюю и высокую дозу исследуемого лекарственного средства группах являлись значительно пролонгированными (Р<0,05 или Р<0,01).
3.1.2 Эффект на содержание сывороточного IL-4 и IFN-γ у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 2 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля модельная группа показала значительно пониженное содержание сывороточного IFN-γ (Р<0,01), но значительно увеличенное содержание сывороточного IL-4 (Р<0,01), указывая на тяжелый дисбаланс соотношения IFN-γ/IL-4 во время манифестации бронхиальной астмы. По сравнению с модельной группой все из получающей дексаметазон группы и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства групп показали значительно пониженное содержание IL-4 (Р<0,05 или Р<0,01) и значительно увеличенное содержание IFN-γ (Р<0,05 или Р<0,01), указывая на то, что исследуемое лекарственное средство может корректировать несбалансированное соотношение IFN-γ/IL-4.
3.1.3 Эффект на содержание EOS в тканях легких у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). Количество EOS у крыс в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению модельной группой положительная контрольная группа и получающие среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группы показали значительно пониженное количество EOS (Р<0,01), указывая на то, что композиция 3 является эффективной в лечении аллергической бронхиальной астмы, вероятно, за счет снижения содержания EOS в тканях легких у крыс.
3.2 Эффект композиции 3 на аллергическую бронхиальную астму у морских свинок, вызванную газовой смесью Ach и His
3.2.1 Эффект на латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок
Результаты показаны в таблице 4 (см. в графической части). После моделирования латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок из каждой смоделированной группы, квалифицировали без значимого различия между ними, что указывает на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок в положительной контрольной группе и в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах, являлись значительно пролонгированными (Р<0,05 или Р<0,01), указывая на то, что композиция 3 существенно улучшает симптомы бронхиальной астмы у морских свинок.
3.2.2 Эффект на общий IgE в сыворотке и BALF у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 5 (см. в графической части). Содержание общего IgE в сыворотке и BALF в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению модельной группой все содержания общего IgE в сыворотке и BALF в группе дексаметазона и в получающих средние и высокие дозы исследуемого лекарственного средства группах значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), указывая на то, что как дексаметазон, так и исследуемое лекарственное средство могут ингибировать аллергический воспалительный ответ в легких у морских свинок и облегчать симптомы бронхиальной астмы.
3.2.3 Эффект на содержание EOS в тканях легких у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля содержание EOS у морских свинок в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению с модельной группой содержание EOS в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах значительно снижалось (Р<0,01), указывая на то, что композиция 3 является эффективной в лечении аллергической бронхиальной астмы, вероятно, за счет уменьшения содержания EOS в тканях легких у морских свинок.
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что композиция 3 способна значительно облегчать симптомы бронхиальной астмы у крыс и пролонгировать латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок в модельных группах; уменьшать содержание сывороточного IL-4, увеличивать содержание сывороточного IFN-γ и корректировать несбалансированное соотношение IFN-γ/IL-4 у крыс с бронхиальной астмой; уменьшать количества EOS в тканях легких у крыс и морских свинок и ослаблять инфильтрацию EOS в участках воспаления; уменьшать содержание общего IgE в сыворотке и BALF у морских свинок и облегчать легочные воспалительные симптомы. Таким образом, считают, что композиция 3 является эффективной в защите от аллергической бронхиальной астмы.
Пример 54. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 4 композиции 4 против аллергии и аллергического дерматита
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 4 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma и Cordyceps), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 10,97 г общих сырых лекарственных средств. Его суточная доза потребления, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела.
1.2 Лабораторные животные
Так же, как в примере 51.
1.3 Исходные реагенты
Так же, как в примере 51.
1.4 Исходные инструменты
Так же, как в примере 51.
2. Экспериментальные способы
2.1 Распределение животных по группам
Животные случайным образом делили на группы по 10 животных на группу на основании масс тела. Устанавливали следующие группы: контрольная модельная группа, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 4 группы и группа положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона).
2.2 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиции 4, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для мыши составляла: получающая низкую дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 4,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 12,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 5, 10 и 30-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (18,23 мг сухого порошка/мл, 36,46 мг сухого порошка/мл, и 109,38 мг сухого порошка/мл) с помощью дистиллированной воды для проведения экспериментов.
Суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (9,12 мг сухого порошка/мл, 18,23 мг сухого порошка/мл, и 54,69 мг сухого порошка/мл) с помощью дистиллированной воды для проведения экспериментов.
2.3 Эффект композиции 4 на пассивную анафилаксию (PCA) у крыс, вызванную овальбумином
2.3.1 Получение антисыворотки
Так же, как в примере 51.
2.3.2 Установление крысиных моделей сыворотки к овальбумину
Получали сыворотку к овальбумину и разводили ее в соотношении 1:4 или 1:8 физиологическим солевым раствором. 50 крыс случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 4 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 крыс на группу. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили дистиллированную воду; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 4 группам внутрижелудочно вводили исследуемые растворы в различных концентрациях в объеме дозирования, составляющем 10 мл/кг; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 14 последовательных дней. На 15 день спины крысы брили и интрадермально вводили с помощью инъекции разбавленную сыворотку в две области на каждой стороне по 0,1 мл на каждую область. Через 48 часов 1,0 мл смешанного раствора 1% Эванса голубого и 1% овальбумина в физиологическом солевом растворе вводили с помощью инъекции в хвостовую вену каждой крысы. Через 30 мин производили забор артериальной крови, из нее выделяли сыворотку и содержание гистамина определяли с помощью способа и. Крыс затем умерщвляли и кожу на их спинах выворачивали для измерения диаметра голубых реакционных пятен для определения различия между получающими дозировку группами и модельной группой. Образец ткани кожи крысы фиксировали нейтральным формальдегидом, дегидратировали с помощью спиртового градиента, заливали парафином и исследовали в отношении дегрануляции тучных клеток в ткани.
2.3.3 Эффект композиции 4 на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом
50 мышей случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 4 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 мышей на группу. 5% раствор 2,4-динитрохлорбензола в этаноле наносили на кожу брюшной поверхности (побритую) мышей для сенсибилизации. Внутрижелудочное введение проводили за два дня до сенсибилизации; контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили эквивалентный объем дистиллированной воды; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 4 группам внутрижелудочно вводили соответствующие исследуемые растворы в объеме дозирования, составляющем 0,1 мл/10 г массы тела; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 7 дней после сенсибилизации 1% раствор 2,4-динитрохлорбензола наносили на правое ухо, мышей умерщвляли через 24 часа и оба уха отрезали вдоль основания наружного уха. Диски диаметром 8 мм извлекали с помощью пункции в одинаковом положении на обоих ушах, точно взвешивали на электронных весах и различие в массе между левым и правым ушами принимали в качестве объема для гиперчувствительности замедленного типа.
2.3.4 Эффект композиции 4 на локальный зуд у мышей, вызванный низкомолекулярным декстраном
Мышей случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 4 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 мышей на группу. Внутрижелудочное введение проводили мышам один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 30 мин после последнего введения 0,0125% раствор низкомолекулярного декстрана вводили с помощью инъекции по 0,1 г/10 г в хвостовую вену. Число случаев зуда (случаи зуда устанавливали по расчесу на голове с помощью передних лап, расчесу на теле с помощью задних лап и по укусам на различных частях по всему телу), которые происходили в течение 30 мин после инъекции раствора низкомолекулярного декстраны в хвостовые вены мышей в каждой группе, наблюдали и регистрировали.
2.3.5 Эффект композиции 4 на проницаемость капилляров у крыс
Крыс случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 4 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 крыс на группу. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили дистиллированную воду; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 4 группам внутрижелудочно вводили исследуемые растворы в различных концентрациях в объеме дозирования, составляющем 10 мл/кг; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 1 час после последнего введения в побритую область (побритую перед введением) на спинах крыс интрадермально вводили с помощью инъекции 1 мг/мл гистамина фосфат в дозе, составляющей 0,1 мл/крыса, и затем в хвостовую вену немедленно вводили инъекцию 1% водного раствора Эванса голубого в дозе, составляющей 1 мл/крыса. Через 20 минут животных умерщвляли путем смещения шейных позвонков. Области кожи с голубыми пятнами отрезали и разрезали на маленькие кусочки, замачивали в 5 мл раствора ацетона: физиологического солевого раствора (7:3) в течение 48 часов, центрифугировали и поглощение супернатанта измеряли при 610 нм.
2.4 Статистический метод
Экспериментальные данные представляли в Однофакторный дисперсионный анализ использовали для сравнения различий среди контрольной модельной группы и групп, получающих различные дозы композиции 4. Р<0,05 рассматривали как значимое различие. Р<0,01 рассматривали как высокозначимое различие.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 4 на пассивную анафилаксию у крыс
Результаты исследования показаны в таблицах 1 и 2 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой получающая низкую дозу композиции 4 группа показала тенденцию к уменьшению диаметра голубых пятен у сенсибилизированных сывороткой к овальбумину в соотношении 1:4 и 1:8 крыс, к уменьшению дегрануляции тучных клеток и к уменьшению содержания сывороточного гистамина, что, тем не менее, не характеризовалось статистической значимостью; все из контрольной группы преднизона и получающих средние и высокие дозы композиции 4 групп показали эффект в значительном уменьшении диаметра голубых пятен у сенсибилизированных сывороткой к овальбумину в соотношении 1:4 и 1:8 крыс, уменьшении дегрануляции тучных клеток и уменьшении содержания сывороточного гистамина со значимым или высокозначимым статистическим различием. Это указывает на то, что композиция 4 характеризовалась значительным ингибирующим эффектом на пассивную анафилаксию у крыс.
3.2 Эффект композиции 4 на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом
Результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой степень отека дисков наружного уха мыши значительно снижалась в получающих средние и высокие дозы композиции 4 группах, указывая на то, что композиция 4 характеризовалась существенным ингибирующим эффектом на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом.
3.3 Эффект композиции 4 на локальный зуд у мышей, вызванный низкомолекулярным декстраном
Результаты исследования показаны в таблице 4 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой объем OD значительно снижался в группе крыс, получающих средние и высокие дозы композиции 4, указывая на то, что композиция 4 являлась значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом.
3.4 Эффект композиции 4 на проницаемость капилляров у крыс
Результаты исследования показаны в таблице 5 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой объем OD значительно снижался в группе крыс, получающих средние и высокие дозы композиции 4, указывая на то, что композиция 4 являлась значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом.
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что композиция 4 является значительно эффективной в ингибировании пассивной анафилаксии у крыс, вызванной овальбумином, что композиция 4 является эффективной в ингибировании гиперчувствительности замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванной 2,4-динитрохлорбензолом, и что композиция 4 является значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом. Вышеперечисленные результаты указывают на хорошую эффективность композиции 4 в защите от аллергии и в профилактике и лечении таких аллергических заболеваний, как аллергический дерматит и крапивница.
Пример 55. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 4 композиции 4 в профилактике и лечении аллергического ринита
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 4 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma и Cordyceps), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 10,97 г общих сырых лекарственных средств.
1.2 Лабораторные животные
Так же, как в примере 52.
1.3 Исходные реагенты
Так же, как в примере 52.
1.4 Исходные инструменты
Так же, как в примере 52.
2. Экспериментальные способы
2.1 Эффект на аллергический ринит у крыс, вызванный OVA
2.1.1 Распределение животных по группам
Крыс случайным образом делили на две группы, т.е. группу холостого контроля из 10 животных и группу моделирования из 70 животных. После успешного моделирования крыс распределяли случайным образом, на основании их оценки в баллах, в следующие группы: контрольная модельная группа, принимающая лекарственное средство положительная группа (группа Bi-yan-kang) и получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 4 группы, по 10 животных в каждой группе.
2.1.2 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиционного порошка композиции 4, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека соответственно. Объем внутрижелудочного введения рассчитывали как 1,0 мл/100 г массы тела. Группе холостого контроля и модельной группе аллергического ринита внутрижелудочно вводили эквивалентный объем физиологического солевого раствора; группе Bi-yan-kang вводили лекарственное средство в дозе, составляющей 410 мг /кг.Внутрижелудочное введение начинали после успешного моделирования и проводили один раз в день в течение 21 последовательного дня.
2.1.3 Установление животных моделей аллергического ринита у крыс
Так же, как в примере 52.
2.1.4 Индикаторы исследования
Так же, как в примере 52.
2.1.4.1 Измерение сАМР и cGMP в крови
Так же, как в примере 52.
2.1.4.2 Подсчет тучных клеток в слизистой оболочке носа
Так же, как в примере 52.
2.2 Эффект на аллергический ринит у морских свинок, вызванный TDI
2.2.1. Так же, как в 2.1.1.
2.2.2. Так же, как в 2.1.2.
2.2.3 Установление животных моделей аллергического ринита у морских свинок
Так же, как в примере 52.
2.2.4 Индикаторы исследования
Так же, как в примере 52.
2.2.4.1 Наблюдение за поведением морских свинок
Так же, как в примере 52.
2.2.4.2 Подсчет эозинофилов (EOS) в носовом секрете
Так же, как в примере 52.
2.2.4.3 Измерение содержания общего сывороточного IgE и гистамина в крови
Так же, как в примере 52.
2.2.4.4 Измерение толщины слизистой оболочки носа
Так же, как в примере 52.
2.3 Статистический метод
Экспериментальные данные представляли в Однофакторный дисперсионный анализ использовали для сравнения различий среди группы холостого контроля, контрольной модельной группы и получающих различные дозы композиции 4 групп. Р<0,05 рассматривали как значимое различие. Р<0,01 рассматривали как высокозначимое различие.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 4 на аллергический ринит у крыс, вызванный овальбумином
3.1.1 Эффект на поведение крыс
Результаты показаны в таблице 2 (см. в графической части). После моделирования баллы для признаков крыс в каждой смоделированной группе квалифицировали без значимого различия между ними, указывая на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все баллы для признаков в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.1.2 Эффект композиции 4 на содержание сАМР и cGMP в сыворотке крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля модельная группа показала значительно пониженное содержание с AMP в сыворотке (Р<0,01) и значительно увеличенное содержание cGMP в сыворотке (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой группа Bi-yan-kang и все получающие исследуемое лекарственное средство группы показали значительно увеличенное содержание сАМР в сыворотке (Р<0,01 или Р<0,05); группа Bi-yan-kang и получающие среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группы показали значительно пониженное содержание cGMP в сыворотке (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.1.3 Эффект композиции 4 на тучные клетки в слизистой оболочке носа у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). Количество тучных клеток в слизистой оболочке носа в контрольной модельной группе значительно увеличивалось с высокозначимым различием (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой все количества тучных клеток в слизистой оболочке носа в группе Bi-yan-kang и группах лечения исследуемым лекарственным средством значительно снижались со значимым различием (Р<0,01).
3.2 Эффект композиции 4 на аллергический ринит у морских свинок, вызванный TDI
3.2.1 Эффект на поведение морских свинок
Результаты показаны в таблице 4 (см. в графической части). После моделирования баллы для признаков морских свинок в каждой смоделированной группе квалифицировали без значимого различия между ними, указывая на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все баллы для признаков в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.2.2 Эффект на содержание гистамина в крови и общего сывороточного IgE у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 5 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля содержания как гистамина в крови, так и общего сывороточного IgE в модельной группе увеличивались (Р<0,01), указывая на успешное экспериментальное моделирование. По сравнению модельной группой поглощение флуоресценции концентрации гистамина и общего сывороточного IgE в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижалась (Р<0,01 или Р<0,05), причем количество гистамина в получающих среднюю и высокую дозы группах уменьшалось почти до нормального содержания, указывая на то, что композиция 4 являлась эффективной в лечении аллергического ринита путем ингибирования содержания гистамина в крови и сывороточного IgE.
3.2.3 Эффект на эозинофилы (EOS) в носовом секрете морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). Количество эозинофилов в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению модельной группой все количества эозинофилов в группе Bi-yan-kang и получающих лечение лекарственным средством группах значительно снижались (Р<0,05 или Р<0,01).
3.2.4 Эффект на толщину слизистой оболочки носа у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). В результате по сравнению с группой холостого контроля в модельной группе эпителий слизистой оболочки на носовой перегородке морских свинок отслаивался в различной степени, характеризуясь неоднородной толщиной и неясной базальной структурой; венулы и капилляры в собственной пластинке демонстрировали заметное расширение, тканевое пространство расширялось, и толщина слизистой оболочки значительно увеличивалась (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой вышеперечисленные патологические изменения в группе Bi-yan-kang и в получающих лечение лекарственным средством группах снижались, и толщина слизистой оболочки значительно уменьшалась (Р<0,01).
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что эффективность композиции 4, главным образом, отражается в следующих аспектах: 1) она способна значительно уменьшить балл назального симптома смоделированных крыс, увеличить содержание сАМР в сыворотке и уменьшить содержание cGMP у крыс с аллергическим ринитом; 2) уменьшить количества тучных клеток в слизистой оболочке носа у крыс и уменьшить их инфильтрацию в участках воспаления; 3) она способна уменьшить балл назального симптома смоделированных морских свинок; 4) уменьшить количество EOS в носовом секрете морских свинок и снизить инфильтрацию EOS в участках воспаления; 5) она способна значительно уменьшить концентрацию гистамина в крови у морских свинок и снизить содержание медиаторов воспаления; 6) облегчить отек в слизистой оболочке носа морских свинок. В соответствии с результатами экспериментальных исследований считают, что композиция 4 является эффективной в защите от аллергического ринита.
Пример 56. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 4 композиции 4 в профилактике и лечении аллергической бронхиальной астмы
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 4 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma и Cordyceps), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 10,97 г общих сырых лекарственных средств.
1.2 Лабораторные животные
Так же, как в примере 53.
1.3 Исходные реагенты
Так же, как в примере 53.
1.4 Исходные инструменты
Так же, как в примере 53.
2. Экспериментальные способы
2.1 Эффект на аллергическую бронхиальную астму у крыс, вызванную OVA
2.1.1 Распределение животных по группам
Крысы (половина из которых являлись самцами и другая половина - самками) случайным образом делили на две группы, т.е. группу холостого контроля из 10 животных и группу моделирования из 70 животных. После успешного моделирования крыс случайным образом делили на следующие группы: контрольная модельная группа, принимающая лекарственное средство, положительная группа (группа дексаметазона) и получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 4 группы, по 10 животных в каждой группе.
2.1.2 Установление животных моделей аллергической бронхиальной астмы у крыс
Так же, как в примере 53.
2.1.3 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиционного порошка композиции 4, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (9,12 мг сухого порошка/мл, 18,23 мг сухого порошка/мл, 54,69 мг сухого порошка/мл) для проведения экспериментов. Объем внутрижелудочного введения рассчитывали как 1,0 мл/100 г массы тела. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили эквивалентный объем 0,9% физиологического солевого раствора за 30 минут до сенсибилизации; и получающей лекарственное средство положительной группе вводили дексаметазон в дозе, составляющей 0,5 мг/кг за 30 мин до каждой сенсибилизации. Каждой из получающих низкую, среднюю и высокую дозы композиции 4 групп внутрижелудочно вводили соответствующую дозу исследуемого лекарственного средства за 30 мин до каждой сенсибилизации. При этом группе холостого контроля интраперитонеально вводили с помощью инъекции эквивалентный объем 0,9% физиологического солевого раствора, сенсибилизировали путем его распыления или вводили его внутрижелудочно. Внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 21 последовательного дня.
2.1.4 Регистрация латентного периода бронхиальной астмы у крыс
Так же, как в примере 53.
2.1.5 Измерения содержаний IL-4 и IFN-γ
Так же, как в примере 53.
2.1.6 Измерение содержания EOS в тканях легких
Так же, как в примере 53.
2.2 Эффект на аллергическую бронхиальную астму у морских свинок, вызванную газовой смесью Ach и His
2.2.1. Так же, как в 2.1.1.
2.2.2 Установление животных моделей аллергической бронхиальной астмы у морских свинок
Так же, как в примере 53.
2.2.3 Режим дозирования
Так же, как в 2.1.3.
2.2.4 Регистрация латентного периода бронхиальной астмы
Так же, как в 2.1.4.1.
2.2.5 Измерение IgE в сыворотке и BALF
Так же, как в примере 53.
2.3 Статистический метод
Так же, как в примере 53.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 4 на аллергическую бронхиальную астму у крыс, вызванную OVA
3.1.1 Эффект на латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у крыс
Результаты показаны в таблице 1 (см. в графической части). Латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у крыс из каждой смоделированной группы, квалифицировали без значимого различия между ними, что указывает на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у крыс в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах, являлись значительно пролонгированными (Р<0,05 или Р<0,01).
3.1.2 Эффект на содержание сывороточного IL-4 и IFN-γ у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 2 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля модельная группа показала значительно пониженное содержание сывороточного IFN-γ (Р<0,01), но значительно увеличенное содержание сывороточного IL-4 (Р<0,01), указывая на тяжелый дисбаланс соотношения IFN-γ/IL-4 во время манифестаций бронхиальной астмы. По сравнению с модельной группой все из группы дексаметазона и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства групп показали значительно пониженное содержание IL-4 (Р<0,05 или Р<0,01) и значительно увеличенное содержание IFN-γ (Р<0,05 или Р<0,01), указывая на то, что исследуемое лекарственное средство может корректировать несбалансированное соотношение IFN-γ/IL-4.
3.1.3 Эффект на содержание EOS в тканях легких у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). Количество EOS у крыс в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению с модельной группой положительная контрольная группа и получающие среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группы показали значительно пониженное количество EOS (Р<0,01), указывая на то, что композиция 4 является эффективной в лечении аллергической бронхиальной астмы, вероятно, за счет снижения содержания EOS в тканях легких у крыс.
3.2 Эффект композиции 4 на аллергическую бронхиальную астму у морских свинок, вызванную газовой смесью Ach и His
3.2.1 Эффект на латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок
Результаты показаны в таблице 4 (см. в графической части). После моделирования латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок из каждой смоделированной группы, квалифицировали без значимого различия между ними, что указывает на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах, являлись значительно пролонгированными (Р<0,05 или Р<0,01), указывая на то, что композиция 4 существенно улучшает симптомы бронхиальной астмы у морских свинок.
3.2.2 Эффект на общий IgE в сыворотке и BALF у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 5 (см. в графической части). Содержание общего IgE в сыворотке и BALF в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению с модельной группой все содержания общего IgE в сыворотке и BALF в группе дексаметазона и в получающих средние и высокие дозы исследуемого лекарственного средства группах значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), указывая на то, что как дексаметазон, так и исследуемое лекарственное средство могут ингибировать аллергический воспалительный ответ в легких морских свинок и облегчать симптомы бронхиальной астмы.
3.2.3 Эффект на содержание EOS в тканях легких у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля количества EOS у морских свинок в модельной группе значительно увеличивались (Р<0,01). По сравнению модельной группой количества EOS в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах значительно уменьшались (Р<0,01), указывая на то, что композиция 4 является эффективной в лечении аллергической бронхиальной астмы, вероятно, за счет уменьшения содержания EOS в тканях легких у морских свинок.
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что композиция 4 способна значительно облегчать симптомы бронхиальной астмы у крыс и пролонгировать латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок в модельных группах; уменьшать содержание сывороточного IL-4, увеличивать содержание сывороточного IFN-γ и корректировать несбалансированное соотношение IFN-γ/IL-4 у крыс с бронхиальной астмой; уменьшать количества EOS в тканях легких крыс и морских свинок, и ослаблять инфильтрацию EOS в участках воспаления; уменьшать содержание общего IgE в сыворотке и BALF у морских свинок и облегчать легочные воспалительные симптомы. Таким образом, композиция 4 считается эффективной в защите от аллергической бронхиальной астмы.
Пример 57. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 5 композиции 5 против аллергии и аллергического дерматита
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 5 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и Cordyceps), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 12,39 г общих сырых лекарственных средств. Его суточная доза потребления, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела.
1.2 Лабораторные животные
Так же, как в примере 51.
1.3 Исходные реагенты
Так же, как в примере 51.
1.4 Исходные инструменты
Так же, как в примере 51.
2. Экспериментальные способы
2.1 Распределение животных по группам
Животные случайным образом делили на группы по 10 животных на группу на основании масс тела. Устанавливали такие группы, как: контрольная модельная группа, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 5 группы и группа положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона).
2.2 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиции 5, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для мыши составляла: получающая низкую дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 4,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 12,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 5, 10 и 30-кратную суточную дозу потребления для человека соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (16,14 мг сухого порошка/мл, 32,28 мг сухого порошка/мл, и 96,84 мг сухого порошка/мл) с помощью дистиллированной воды для проведения экспериментов.
Суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (8,08 мг сухого порошка/мл, 16,14 мг сухого порошка/мл, и 48,42 мг сухого порошка/мл) с помощью дистиллированной воды для проведения экспериментов.
2.3 Эффект композиции 5 на пассивную анафилаксию (РСА) у крыс, вызванную овальбумином
2.3.1 Получение антисыворотки
Так же, как в примере 51.
2.3.2 Установление крысиной модели сыворотки к овальбумину
Получали сыворотку к овальбумину и ее разводили в соотношении 1:4 или 1:8 физиологическим солевым раствором. 50 крыс случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 5 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 крыс на группу. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили дистиллированную воду; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 5 группам внутрижелудочно вводили исследуемые растворы в различных концентрациях в объеме дозирования, составляющем 10 мл/кг; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 14 последовательных дней. На 15 день спины крыс брили и интрадермально вводили с помощью инъекции разбавленную сыворотку в две области на каждой стороне по 0,1 мл на каждую область. Через 48 часов 1,0 мл смешанного раствора 1% Эванса голубого и 1% овальбумина в физиологическом солевом растворе вводили с помощью инъекции в хвостовую вену каждой крысы. Через 30 мин производили забор артериальной крови, из нее выделяли сыворотку и содержание гистамина определяли с помощью известного способа. Затем крыс умерщвляли и кожу на их спинах выворачивали для измерения диаметра голубых реакционных пятен для определения различия между получающими дозировку группами и модельной группой. Образец ткани кожи крысы фиксировали нейтральным формальдегидом, дегидратировали с помощью спиртового градиента, заливали парафином и исследовали в отношении дегрануляции тучных клеток в ткани.
2.3.3 Эффект композиции 5 на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом
Мышей случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 5 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 мышей на группу. 5% раствор 2,4-динитрохлорбензола в этаноле наносили на кожу брюшной поверхности (побритую) мышей для сенсибилизации. Внутрижелудочное введение проводили за два дня до сенсибилизации; контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили эквивалентный объем дистиллированной воды; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 5 группам внутрижелудочно вводили соответствующие исследуемые растворы в объеме дозирования, составляющем 0,1 мл/10 г массы тела; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 7 дней после сенсибилизации 1% раствор 2,4-динитрохлорбензола наносили на правое ухо, мышей умерщвляли через 24 часа, и оба уха отрезали вдоль основания наружного уха. Диски диаметром 8 мм извлекали с помощью пункции в одинаковом положении на обоих ушах, точно взвешивали на электронных весах и различие в массе между левым и правым ушами принимали в качестве объема для гиперчувствительности замедленного типа.
2.3.4 Эффект композиции 5 на локальный зуд у мышей, вызванный низкомолекулярным декстраном
Мышей случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 5 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 мышей на группу. Внутрижелудочное введение проводили мышам один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 30 мин после последнего введения 0,0125% раствор низкомолекулярного декстрана вводили с помощью инъекции в дозе 0,1 г/10 г в хвостовую вену. Число случаев зуда (случаи зуда устанавливали по расчесу на голове с помощью передних лап, расчесу на теле с помощью задних лап и по укусам на различных частях по всему телу), которые происходили в пределах 30 мин после инъекции раствора низкомолекулярного декстрана в хвостовые вены мышей в каждой группе, наблюдали и регистрировали.
2.3.5 Эффект композиции 5 на проницаемость капилляров у крыс
Крыс случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 5 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 крыс на группу. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили дистиллированную воду; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 5 группам внутрижелудочно вводили исследуемые растворы в различных концентрациях в объеме дозирования, составляющем 10 мл/кг; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 1 час после последнего введения в побритую область (побритую перед введением) на спинах крыс интрадермально вводили с помощью инъекции 1 мг/мл гистамина фосфата в дозе, составляющей 0,1 мл/крыса, и затем в хвостовую вену немедленно вводили инъекцию 1% водного раствора Эванса голубого в дозе, составляющей 1 мл/крыса. Через 20 минут животных умерщвляли путем смещения шейных позвонков. Области кожи с голубыми пятнами отрезали и разрезали на маленькие кусочки, замачивали в 5 мл раствора ацетона: физиологического солевого раствора (7:3) в течение 48 часов, центрифугировали и поглощение супернатанта измеряли при 610 нм.
2.4 Статистический метод
Экспериментальные данные представляли в Однофакторный дисперсионный анализ использовали для сравнения различий среди контрольной модельной группы и получающих различные дозы композиции 5 групп. Р<0,05 рассматривали как значимое различие. Р<0,01 рассматривали как высокозначимое различие.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 5 на пассивную анафилаксию у крыс
Результаты исследования показаны в таблицах 1 и 2 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой получающая низкую дозу композиции 5 группа показала тенденцию к уменьшению диаметра голубых пятен у сенсибилизированных сывороткой к овальбумину в соотношении 1:4 и 1:8 крыс, к уменьшению дегрануляции тучных клеток и к уменьшению содержания сывороточного гистамина, что, тем не менее, не характеризовалось статистической значимостью; все из контрольной группы преднизона и получающих средние и высокие дозы композиции 5 групп показали эффект в значительном уменьшении диаметра голубых пятен у сенсибилизированных сывороткой к овальбумину в соотношении 1:4 и 1:8 крыс, уменьшении дегрануляции тучных клеток и уменьшении содержания сывороточного гистамина, со значимым или высокозначимым статистическим различием. Это указывает на то, что композиция 5 характеризовалась значительным ингибирующим эффектом на пассивную анафилаксию у крыс.
3.2 Эффект композиции 5 на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом
Результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой степень отека дисков наружного уха мыши значительно снижалась в группах, получающих средние и высокие дозы композиции 5, указывая на то, что композиция 5 характеризовалась существенным ингибирующим эффектом на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом.
3.3 Эффект композиции 5 на локальный зуд у мышей, вызванный низкомолекулярным декстраном
Результаты исследования показаны в таблице 4 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой объем OD значительно снижался в группе крыс, получающих средние и высокие дозы композиции 5, указывая на то, что композиция 5 являлась значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом.
3.4 Эффект композиции 5 на проницаемость капилляров у крыс
Результаты исследования показаны в таблице 5 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой объем OD значительно снижался в группе крыс, получающих средние и высокие дозы композиции 5, указывая на то, что композиция 5 являлась значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом.
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что композиция 5 является значительно эффективной в ингибировании пассивной анафилаксии у крыс, вызванной овальбумином, что композиция 5 является эффективной в ингибировании гиперчувствительности замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванной 2,4-динитрохлорбензолом, и что композиция 5 является значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом. Вышеперечисленные результаты указывают на хорошую эффективность композиции 5 в защите от аллергии и в профилактике и лечении таких аллергических заболеваний, как аллергический дерматит и крапивница.
Пример 58. Отчет об эксперименте на животных в отношении полученной в примере 5 композиции 5 в профилактике и лечении аллергического ринита
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 5 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и Cordyceps), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 12,39 г общих сырых лекарственных средств.
1.2 Лабораторные животные
Так же, как в примере 52.
1.3 Исходные реагенты
Так же, как в примере 52.
1.4 Исходные инструменты
Так же, как в примере 52.
2. Экспериментальные способы
2.1 Эффект на аллергический ринит у крыс, вызванный OVA
2.1.1 Распределение животных по группам
Крыс случайным образом делили на две группы, т.е. группу холостого контроля из 10 животных и группу моделирования из 70 животных. После успешного моделирования крыс распределяли случайным образом, на основании их оценки в баллах, в следующие группы: контрольная модельная группа, принимающая лекарственное средство положительная группа (группа Bi-yan-kang) и получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 5 группы, по 10 животных в каждой группе.
2.1.2 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиционного порошка композиции 5, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека соответственно. Группе холостого контроля и модельной группе аллергического ринита внутрижелудочно вводили эквивалентный объем физиологического солевого раствора; группе Bi-yan-kang вводили лекарственное средство в дозе, составляющей 410 мг/кг. Объем внутрижелудочного введения рассчитывали как 1,0 мл/100 г массы тела. Внутрижелудочное введение начинали после успешного моделирования и проводили один раз в день в течение 21 последовательного дня.
2.1.3 Установление животных моделей аллергического ринита у крыс
Так же, как в примере 52.
2.1.4 Индикаторы исследования
Так же, как в примере 52.
2.1.4.1 Измерение сАМР и cGMP в крови
Так же, как в примере 52.
2.1.4.2 Подсчет тучных клеток в слизистой оболочке носа
Так же, как в примере 52.
2.2 Эффект на аллергический ринит у морских свинок, вызванный TDI
2.2.1. Так же, как в 2.1.1.
2.2.2. Так же, как в 2.1.2.
2.2.3 Установление животных моделей аллергического ринита у морских свинок
Так же, как в примере 52.
2.2.4 Индикаторы исследования
Так же, как в примере 52.
2.2.4.1 Наблюдение за поведением морских свинок
Так же, как в примере 52.
2.2.4.2 Количества эозинофилов (EOS) в носовом секрете
Так же, как в примере 52.
2.2.4.3 Измерение содержания общего сывороточного IgE и гистамина в крови
Так же, как в примере 52.
2.2.4.4 Измерение толщины слизистой оболочки носа
Так же, как в примере 52.
2.3 Статистический метод
Экспериментальные данные представляли в Однофакторный дисперсионный анализ использовали для сравнения различий среди группы холостого контроля, контрольной модельной группы и получающих различные дозы композиции 5 групп. Р<0,05 рассматривали как значимое различие. Р<0,01 рассматривали как высокозначимое различие.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 5 на аллергический ринит у крыс, вызванный овальбумином
3.1.1 Эффект на поведение крыс
Результаты показаны в таблице 2 (см. в графической части). После моделирования баллы для признаков крыс в каждой смоделированной группе квалифицировали без значимого различия между ними, указывая на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все баллы для признаков в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.1.2 Эффект композиции 5 на содержание сАМР и cGMP в сыворотке крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля модельная группа показала значительно пониженное содержание сАМР в сыворотке (Р<0,01) и значительно увеличенное содержание cGMP в сыворотке (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой группа Bi-yan-kang и все получающие исследуемое лекарственное средство группы показали значительно увеличенное содержание с AMP в сыворотке (Р<0,01 или Р<0,05); группа Bi-yan-kang и получающие среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группы показали значительно пониженное содержание cGMP в сыворотке (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.1.3 Эффект композиции 5 на тучные клетки в слизистой оболочке носа у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). Количество тучных клеток в слизистой оболочке носа в контрольной модельной группе значительно увеличивалось с высокозначимым различием (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой все количества тучных клеток в слизистой оболочке носа в группе Bi-yan-kang и группах лечения исследуемым лекарственным средством значительно снижались со значимым различием (Р<0,01).
3.2 Эффект композиции 5 на аллергический ринит у морских свинок, вызванный TDI
3.2.1 Эффект на поведение морских свинок
Результаты показаны в таблице 4 (см. в графической части). После моделирования баллы для признаков морских свинок в каждой смоделированной группе квалифицировали без значимого различия между ними, указывая на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все баллы для признаков в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.2.2 Эффект на содержание гистамина в крови и общего сывороточного IgE у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 5 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля содержания как гистамина в крови, так и общего сывороточного IgE в модельной группе увеличивались (Р<0,01), указывая на успешное экспериментальное моделирование. По сравнению модельной группой поглощение флуоресценции концентрации гистамина и общего сывороточного IgE в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижалось (Р<0,01 или Р<0,05), причем содержание гистамина в получающих среднюю и высокую дозы группах уменьшалось почти до нормального содержания, указывая на то, что композиция 5 являлась эффективной в лечении аллергического ринита путем ингибирования содержания гистамина в крови и сывороточного IgE.
3.2.3 Эффект на эозинофилы (EOS) в носовом секрете морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). Количество эозинофилов в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению модельной группой все количества эозинофилов в группе Bi-yan-kang и в получающих лечение лекарственным средством группах значительно снижались (Р<0,05 или Р<0,01).
3.2.4 Эффект на толщину слизистой оболочки носа у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). В результате по сравнению с группой холостого контроля в модельной группе эпителий слизистой оболочки на носовой перегородке морских свинок отслаивался в различной степени, характеризуясь неоднородной толщиной и неясной базальной структурой; венулы и капилляры в собственной пластинке демонстрировали заметное расширение, тканевое пространство расширялось, и толщина слизистой оболочки значительно увеличивалась (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой вышеперечисленные патологические изменения в группе Bi-yan-kang и в получающих лечение лекарственным средством группах снижались и толщина слизистой оболочки значительно уменьшалась (Р<0,01).
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что эффективность композиции 5, главным образом, отражается в следующих аспектах: 1) она способна значительно уменьшить балл назального симптома смоделированных крыс, увеличить содержание сАМР в сыворотке и уменьшить содержание cGMP у крыс с аллергическим ринитом; 2) уменьшить количество тучных клеток в слизистой оболочке носа у крыс и уменьшить их инфильтрацию в участках воспаления; 3) она способна уменьшить балл назального симптома смоделированных морских свинок; 4) уменьшить количество EOS в носовом секрете морских свинок и снизить инфильтрацию EOS в участках воспаления; 5) она способна значительно уменьшить концентрацию гистамина в крови у морских свинок и снизить содержание медиаторов воспаления; 6) облегчить отек в слизистой оболочке носа морских свинок. В соответствии с результатами экспериментальных исследований считают, что композиция 5 является эффективной в защите от аллергического ринита.
Пример 59. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 5 композиции 5 в профилактике и лечении аллергической бронхиальной астмы
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 5 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и Cordyceps), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 12,39 г общих сырых лекарственных средств.
1.2 Лабораторные животные
Так же, как в примере 53.
1.3 Исходные реагенты
Так же, как в примере 53.
1.4 Исходные инструменты
Так же, как в примере 53.
2. Экспериментальные способы
2.1 Эффект на аллергическую бронхиальную астму у крыс, вызванную OVA
2.1.1 Распределение животных по группам
Крысы (половина из которых являлись самцами и другая половина - самками) случайным образом делили на две группы, т.е. группу холостого контроля из 10 животных и группу моделирования из 70 животных. После успешного моделирования крыс случайным образом делили на следующие группы: контрольная модельная группа, принимающая лекарственное средство положительная группа (группа дексаметазона) и получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 5 группы, по 10 животных в каждой группе.
2.1.2 Установление животных моделей аллергической бронхиальной астмы у крыс
Так же, как в примере 53.
2.1.3 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиционного порошка композиции 5, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (8,07 мг сухого порошка/мл, 16,14 мг сухого порошка/мл, 48,43 мг сухого порошка/мл) для проведения экспериментов. Объем внутрижелудочного введения рассчитывали как 1,0 мл/100 г массы тела. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили эквивалентный объем 0,9% физиологического солевого раствора за 30 минут до сенсибилизации; и получающей лекарственное средство положительной группе вводили дексаметазон в дозе, составляющей 0,5 мг/кг за 30 мин до каждой сенсибилизации. Каждой из получающих низкую, среднюю и высокую дозы композиции 5 групп внутрижелудочно вводили соответствующую дозу исследуемого лекарственного средства за 30 мин до каждой сенсибилизации. При этом группе холостого контроля интраперитонеально вводили с помощью инъекции эквивалентный объем 0,9% физиологического солевого раствора, сенсибилизировали путем его распыления или вводили его внутрижелудочно. Внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 21 последовательного дня.
2.1.4 Регистрация латентного периода бронхиальной астмы у крыс
Так же, как в примере 53.
2.1.5 Измерения содержаний IL-4 и IFN-γ
Так же, как в примере 53.
2.1.6 Измерение содержания EOS в тканях легких
Так же, как в примере 53.
2.2 Эффект на аллергическую бронхиальную астму у морских свинок, вызванную газовой смесью Ach и His
2.2.1. Так же, как в 2.1.1.
2.2.2 Установление животных моделей аллергической бронхиальной астмы у морских свинок
Так же, как в примере 53.
2.2.3 Режим дозирования
Так же, как в 2.1.3.
2.2.4 Регистрация латентного периода бронхиальной астмы
Так же, как в 2.1.4.1.
2.2.5 Измерение IgE в сыворотке и BALF
Использовали сэндвич-радиоиммуноанализ с двойным антителом.
2.3 Статистический метод
Так же, как в примере 53.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 5 на аллергическую бронхиальную астму у крыс, вызванную OVA
3.1.1 Эффект на латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у крыс
Результаты показаны в таблице 1 (см. в графической части). Латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у крыс из каждой смоделированной группы, квалифицировали без значимого различия между ними, что указывает на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у крыс в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах, являлись значительно пролонгированными (Р<0,05 или Р<0,01).
3.1.2 Эффект на содержание сывороточного IL-4 и IFN-γ у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 2 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля модельная группа показала значительно пониженное содержание сывороточного IFN-γ (Р<0,01), но значительно увеличенное содержание сывороточного IL-4 (Р<0,01), указывая на тяжелый дисбаланс соотношения IFN-γ/IL-4 во время манифестаций бронхиальной астмы. По сравнению модельной группой все из группы дексаметазона и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства групп показали значительно пониженное содержание IL-4 (Р<0,05 или Р<0,01) и значительно увеличенное содержание IFN-γ (Р<0,05 или Р<0,01), указывая на то, что исследуемое лекарственное средство может корректировать несбалансированное соотношение IFN-γ/IL-4.
3.1.3 Эффект на содержание EOS в тканях легких у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). Количество EOS у крыс в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению модельной группой положительная контрольная группа и получающие среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группы показали значительно пониженное количество EOS (Р<0,01), указывая на то, что композиция 5 является эффективной в лечении аллергической бронхиальной астмы, вероятно, за счет снижения содержания EOS в тканях легких у крыс.
3.2 Эффект композиции 5 на аллергическую бронхиальную астму у морских свинок, вызванную газовой смесью Ach и His
3.2.1 Эффект на латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок
Результаты показаны в таблице 4 (см. в графической части). После моделирования латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок из каждой смоделированной группы, квалифицировали без значимого различия между ними, что указывает на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах, являлись значительно пролонгированными (Р<0,05 или Р<0,01), указывая на то, что композиция 5 существенно улучшает симптомы бронхиальной астмы у морских свинок.
3.2.2 Эффект на общий IgE в сыворотке и BALF у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 5 (см. в графической части). Содержание общего IgE в сыворотке и BALF в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению с модельной группой все содержания общего IgE в сыворотке и BALF в группе дексаметазона и в получающих средние и высокие дозы исследуемого лекарственного средства группах значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), указывая на то, что как дексаметазон, так и исследуемое лекарственное средство могут ингибировать аллергический воспалительный ответ в легких морских свинок и облегчать симптомы бронхиальной астмы.
3.2.3 Эффект на содержание EOS в тканях легких у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля количества EOS у морских свинок в модельной группе значительно увеличивались (Р<0,01). По сравнению модельной группой количества EOS в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах значительно уменьшались (Р<0,01), указывая на то, что композиция 5 является эффективной в лечении аллергической бронхиальной астмы, вероятно, за счет уменьшения содержания EOS в тканях легких у морских свинок.
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что композиция 5 способна значительно облегчать симптомы бронхиальной астмы у крыс и пролонгировать латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок в модельных группах; уменьшать содержания сывороточного IL-4, увеличивать содержание сывороточного IFN-γ, и корректировать несбалансированное соотношение IFN-γ/IL-4 у крыс с бронхиальной астмой; уменьшать количества EOS в тканях легких крыс и морских свинок, и ослаблять инфильтрацию EOS в участках воспаления; уменьшать содержания общего IgE в сыворотке и BALF у морских свинок и облегчать легочные воспалительные симптомы. Таким образом, композиция 5 считается эффективной в защите от аллергической бронхиальной астмы.
Пример 60. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 6 композиции 6 против аллергии и аллергического дерматита
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 6 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и Flos Rosae Rugosae), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 12,56 г общих сырых лекарственных средств. Его суточная доза потребления, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела.
1.2 Лабораторные животные
Так же, как в примере 51.
1.3 Исходные реагенты
Так же, как в примере 51.
1.4 Исходные инструменты
Так же, как в примере 51.
2. Экспериментальные способы
2.1 Распределение животных по группам
Животные случайным образом делили на группы по 10 животных на группу на основании масс тела. Устанавливали такие группы, как: контрольная модельная группа, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 6 группы и группа положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона).
2.2 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиции 6, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для мыши составляла: получающая низкую дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 4,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 12,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 5, 10 и 30-кратную суточную дозу потребления для человека соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (15,925 мг сухого порошка/мл, 31,85 мг сухого порошка/мл, и 95,55 мг сухого порошка/мл) с помощью дистиллированной воды для проведения экспериментов.
Суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (7,96 мг сухого порошка/мл, 15,92 мг сухого порошка/мл, и 47,76 мг сухого порошка/мл) с помощью дистиллированной воды для проведения экспериментов.
2.3 Эффект композиции 6 на пассивную анафилаксию (РСА) у крыс, вызванную овальбумином
2.3.1 Получение антисыворотки
Так же, как в примере 51.
2.3.2 Установление крысиной модели сыворотки к овальбумину
Получали сыворотку к овальбумину и ее разводили в соотношении 1:4 или 1:8 физиологическим солевым раствором. 50 крыс случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 6 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 крыс на группу. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили дистиллированную воду; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 6 группам внутрижелудочно вводили исследуемые растворы в различных концентрациях в объеме дозирования, составляющем 10 мл/кг; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 14 последовательных дней. На 15 день спины крыс брили и интрадермально вводили с помощью инъекции разбавленную сыворотку в две области на каждой стороне по 0,1 мл на каждую область. Через 48 часов 1,0 мл смешанного раствора 1% Эванса голубого и 1% овальбумина в физиологическом солевом растворе вводили с помощью инъекции в хвостовую вену каждой крысы. Через 30 мин производили забор артериальной крови, из нее выделяли сыворотку и содержание гистамина определяли с помощью известного способа. Затем крыс умерщвляли и кожу на их спинах выворачивали для измерения диаметра голубых реакционных пятен для определения различия между получающими дозировку группами и модельной группой. Образец ткани кожи крысы фиксировали нейтральным формальдегидом, дегидратировали с помощью спиртового градиента, заливали парафином и исследовали в отношении дегрануляции тучных клеток в ткани.
2.3.3 Эффект композиции 6 на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом
50 мышей случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 6 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 мышей на группу. 5% раствор 2,4-динитрохлорбензола в этаноле наносили на кожу брюшной поверхности (побритую) мышей для сенсибилизации. Внутрижелудочное введение проводили за два дня до сенсибилизации; контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили эквивалентный объем дистиллированной воды; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 6 группам внутрижелудочно вводили соответствующие исследуемые растворы в объеме дозирования, составляющем 0,1 мл/10 г массы тела; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 7 дней после сенсибилизации 1% раствор 2,4-динитрохлорбензола наносили на правое ухо, мышей умерщвляли через 24 часа и оба уха отрезали вдоль основания наружного уха. Диски диаметром 8 мм извлекали с помощью пункции в одинаковом положении на обоих ушах, точно взвешивали на электронных весах и различие в массе между левым и правым ушами принимали в качестве объема для гиперчувствительности замедленного типа.
2.3.4 Эффект композиции 6 на локальный зуд у мышей, вызванный низкомолекулярным декстраном
Мышей случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 6 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 мышей на группу. Внутрижелудочное введение проводили мышам один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 30 мин после последнего введения 0,0125% раствор низкомолекулярного декстрана вводили с помощью инъекции в дозе 0,1 г/10 г в хвостовую вену. Число случаев зуда (случаи зуда устанавливали по расчесу на голове с помощью передних лап, расчесу на теле с помощью задних лап и по укусам на различных частях по всему телу), которые происходили в пределах 30 мин после инъекции раствора низкомолекулярного декстрана в хвостовые вены мышей в каждой группе, наблюдали и регистрировали.
2.3.5 Эффект композиции 6 на проницаемость капилляров у крыс
Крыс случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 6 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 крыс на группу. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили дистиллированную воду; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 6 группам внутрижелудочно вводили исследуемые растворы в различных концентрациях в объеме дозирования, составляющем 10 мл/кг; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 1 час после последнего введения в побритую область (побритую перед введением) на спинах крыс интрадермально вводили с помощью инъекции 1 мг/мл гистамина фосфата в дозе, составляющей 0,1 мл/крыса, и затем в хвостовую вену немедленно вводили инъекцию 1% водного раствора Эванса голубого в дозе, составляющей 1 мл/крыса. Через 20 минут животных умерщвляли путем смещения шейных позвонков. Области кожи с голубыми пятнами отрезали и разрезали на маленькие кусочки, замачивали в 5 мл раствора ацетона : физиологического солевого раствора (7:3) в течение 48 часов, центрифугировали и поглощение супернатанта измеряли при 610 нм.
2.4 Статистический метод
Экспериментальные данные представляли в . Однофакторный дисперсионный анализ использовали для сравнения различий среди контрольной модельной группы и получающих различные дозы композиции 6 групп. Р<0,05 рассматривали как значимое различие. Р<0,01 рассматривали как высокозначимое различие.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 6 на пассивную анафилаксию у крыс
Результаты исследования показаны в таблицах 1 и 2 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой получающая низкую дозу композиции 6 группа показала тенденцию к уменьшению диаметра голубых пятен у сенсибилизированных сывороткой к овальбумину в соотношении 1:4 и 1:8 крыс, к снижению дегрануляции тучных клеток и к уменьшению содержания сывороточного гистамина, что, тем не менее, не характеризовалось статистической значимостью; все из контрольной группы преднизона и групп, получающих средние и высокие дозы композиции 6, показали эффект в значительном уменьшении диаметра голубых пятен у сенсибилизированных сывороткой к овальбумину в соотношении 1:4 и 1:8 крыс, уменьшении дегрануляции тучных клеток и уменьшении содержания сывороточного гистамина, со значимым или высокозначимым статистическим различием. Это указывает на то, что композиция 6 характеризовалась значительным ингибирующим эффектом на пассивную анафилаксию у крыс.
3.2 Эффект композиции 6 на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом
Результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой степень отека дисков наружного уха мыши значительно снижалась в группах, получающих средние и высокие дозы композиции 6, указывая на то, что композиция 6 характеризовалась существенным ингибирующим эффектом на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом.
3.3 Эффект композиции 6 на локальный зуд у мышей, вызванный низкомолекулярным декстраном
Результаты исследования показаны в таблице 4 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой объем OD значительно снижался в группе крыс, получающих средние и высокие дозы композиции 6, указывая на то, что композиция 6 являлась значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом.
3.4 Эффект композиции 6 на проницаемость капилляров у крыс
Результаты исследования показаны в таблице 5 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой объем OD значительно снижался в группе крыс, получающих средние и высокие дозы композиции 6, указывая на то, что композиция 6 являлась значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом.
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что композиция 6 является значительно эффективной в ингибировании пассивной анафилаксии у крыс, вызванной овальбумином, что композиция 6 является эффективной в ингибировании гиперчувствительности замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванной 2,4-динитрохлорбензолом, и что композиция 6 является значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом. Вышеперечисленные результаты указывают на хорошую эффективность композиции 6 в защите от аллергии и в профилактике и лечении таких аллергических заболеваний, как аллергический дерматит и крапивница.
Пример 61. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 6 композиции 6 в профилактике и лечении аллергического ринита
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 6 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и Flos Rosae Rugosae), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 12,56 г общих сырых лекарственных средств.
1.2 Лабораторные животные
Так же, как в примере 52.
1.3 Исходные реагенты
Так же, как в примере 52.
1.4 Исходные инструменты
Так же, как в примере 52.
2. Экспериментальные способы
2.1 Эффект на аллергический ринит у крыс, вызванный OVA
2.1.1 Распределение животных по группам
Крыс случайным образом делили на две группы, т.е. группу холостого контроля из 10 животных и группу моделирования из 70 животных. После успешного моделирования крыс распределяли случайным образом, на основании их оценки в баллах, в следующие группы: контрольная модельная группа, принимающая лекарственное средство положительная группа (группа Bi-yan-kang) и получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 6 группы, по 10 животных в каждой группе.
2.1.2 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиционного порошка композиции 6, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Группе холостого контроля и модельной группе аллергического ринита внутрижелудочно вводили эквивалентный объем физиологического солевого раствора; группе Bi-yan-kang вводили лекарственное средство в дозе, составляющей 410 мг /кг. Объем внутрижелудочного введения рассчитывали как 1,0 мл/100 г массы тела. Внутрижелудочное введение начинали после успешного моделирования и проводили один раз в день в течение 21 последовательного дня.
2.1.3 Установление животных моделей аллергического ринита у крыс
Так же, как в примере 52.
2.1.4 Индикаторы исследования
Так же, как в примере 52.
2.1.4.1 Измерение сАМР и cGMP в крови
Так же, как в примере 52.
2.1.4.2 Подсчет тучных клеток в слизистой оболочке носа
Так же, как в примере 52.
2.2 Эффект на аллергический ринит у морских свинок, вызванный TDI
2.2.1. Так же, как в 2.1.1.
2.2.2. Так же, как в 2.1.2.
2.2.3 Установление животных моделей аллергического ринита у морских свинок
Так же, как в примере 52.
2.2.4 Индикаторы исследования
Так же, как в примере 52.
2.2.4.1 Наблюдение за поведением морских свинок
Так же, как в примере 52.
2.2.4.2 Количества эозинофилов (EOS) в носовом секрете
Так же, как в примере 52.
2.2.4.3 Измерение содержания общего сывороточного IgE и гистамина в крови
Так же, как в примере 52.
2.2.4.4 Измерение толщины слизистой оболочки носа
Так же, как в примере 52.
2.3 Статистический метод
Экспериментальные данные представляли в . Однофакторный дисперсионный анализ использовали для сравнения различий среди группы холостого контроля, контрольной модельной группы и получающих различные дозы композиции 6 групп. Р<0,05 рассматривали как значимое различие. Р<0,01 рассматривали как высокозначимое различие.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 6 на аллергический ринит у крыс, вызванный овальбумином
3.1.1 Эффект на поведение крыс
Результаты показаны в таблице 2 (см. в графической части). После моделирования баллы для признаков крыс в каждой смоделированной группе квалифицировали без значимого различия между ними, указывая на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все баллы для признаков в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижалась (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.1.2 Эффект композиции 6 на содержание сАМР и cGMP в сыворотке крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля модельная группа показала значительно пониженное содержание сАМР в сыворотке (Р<0,01) и значительно увеличенное содержание cGMP в сыворотке (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой группа Bi-yan-kang и все получающие исследуемое лекарственное средство группы показали значительно увеличенное содержание сАМР в сыворотке (Р<0,01 или Р<0,05); группа Bi-yan-kang и получающие среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группы показали значительно пониженное содержание cGMP в сыворотке (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.1.3 Эффект композиции 6 на тучные клетки в слизистой оболочке носа у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). Количество тучных клеток в слизистой оболочке носа в контрольной модельной группе значительно увеличивалось с высокозначимым различием (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой все количества тучных клеток в слизистой оболочке носа в группе Bi-yan-kang и группах лечения исследуемым лекарственным средством значительно снижались со значимым различием (Р<0,01).
3.2 Эффект композиции 6 на аллергический ринит у морских свинок, вызванный TDI
3.2.1 Эффект на поведение морских свинок
Результаты показаны в таблице 4 (см. в графической части). После моделирования баллы для признаков морских свинок в каждой смоделированной группе квалифицировали без значимого различия между ними, указывая на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все баллы для признаков в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.2.2 Эффект на содержание гистамина в крови и общего сывороточного IgE у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 5 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля содержания как гистамина в крови, так и общего сывороточного IgE в модельной группе увеличивались (Р<0,01), указывая на успешное экспериментальное моделирование. По сравнению модельной группой поглощение флуоресценции концентрации гистамина и общего сывороточного IgE в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижалось (Р<0,01 или Р<0,05), причем содержание гистамина в получающих среднюю и высокую дозы группах уменьшалось почти до нормального содержания, указывая на то, что композиция 6 являлась эффективной в лечении аллергического ринита за счет ингибирования содержания гистамина в крови и сывороточного IgE.
3.2.3 Эффект на эозинофилы (EOS) в носовом секрете морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). Количество эозинофилов в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению модельной группой все количества эозинофилов в группе Bi-yan-kang и в получающих лечение лекарственным средством группах значительно снижались (Р<0,05 или Р<0,01).
3.2.4 Эффект на толщину слизистой оболочки носа у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). В результате по сравнению с группой холостого контроля в модельной группе эпителий слизистой оболочки на носовой перегородке морских свинок отслаивался в различной степени, характеризуясь неоднородной толщиной и неясной базальной структурой; венулы и капилляры в собственной пластинке демонстрировали заметное расширение, тканевое пространство расширялось и толщина слизистой оболочки значительно увеличивалась (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой вышеперечисленные патологические изменения в группе Bi-yan-kang и в получающих лечение лекарственным средством группах снижались и толщина слизистой оболочки значительно уменьшалась (Р<0,01).
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что эффективность композиции 6, главным образом, отражается в следующих аспектах: 1) она способна значительно уменьшить балл назального симптома смоделированных крыс, увеличить содержание сАМР в сыворотке и уменьшить содержание cGMP у крыс с аллергическим ринитом; 2) уменьшить количество тучных клеток в слизистой оболочке носа у крыс и уменьшить их инфильтрацию в участках воспаления; 3) она способна уменьшить балл назального симптома смоделированных морских свинок; 4) уменьшить количество EOS в носовом секрете морских свинок и снизить инфильтрацию EOS в участках воспаления; 5) она способна значительно уменьшить концентрацию гистамина в крови у морских свинок и снизить содержание медиаторов воспаления; 6) облегчить отек в слизистой оболочке носа морских свинок. В соответствии с результатами экспериментальных исследований считают, что композиция 6 является эффективной в защите от аллергического ринита.
Пример 62. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 6 композиции 6 в профилактике и лечении аллергической бронхиальной астмы
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 6 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma, порошок ферментированного Cordyceps sinensis и Flos Rosae Rugosae), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 12,56 г общих сырых лекарственных средств.
1.2 Лабораторные животные
Так же, как в примере 53.
1.3 Исходные реагенты
Так же, как в примере 53.
1.4 Исходные инструменты
Так же, как в примере 53.
2. Экспериментальные способы
2.1 Эффект на аллергическую бронхиальную астму у крыс, вызванную OVA
2.1.1 Распределение животных по группам
Крысы (половина из которых являлись самцами и другая половина - самками) случайным образом делили на две группы, т.е. группу холостого контроля из 10 животных и группу моделирования из 70 животных. После успешного моделирования крыс случайным образом делили на следующие группы: контрольная модельная группа, принимающая лекарственное средство положительная группа (группа дексаметазона) и получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 6 группы, по 10 животных в каждой группе.
2.1.2 Установление животных моделей аллергической бронхиальной астмы у крыс
Так же, как в примере 53.
2.1.3 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиционного порошка композиции 6, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (7,96 мг сухого порошка/мл, 15,92 мг сухого порошка/мл, 47,77 мг сухого порошка/мл) для проведения экспериментов. Объем внутрижелудочного введения рассчитывали как 1,0 мл/100 г массы тела. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили эквивалентный объем 0,9% физиологического солевого раствора за 30 минут до сенсибилизации; и получающей лекарственное средство положительной группе вводили дексаметазон в дозе, составляющей 0,5 мг/кг за 30 мин до каждой сенсибилизации. Каждой из получающих низкую, среднюю и высокую дозы композиции 6 групп внутрижелудочно вводили соответствующую дозу исследуемого лекарственного средства за 30 мин до каждой сенсибилизации. При этом группе холостого контроля интраперитонеально вводили с помощью инъекции эквивалентный объем 0,9% физиологического солевого раствора, сенсибилизировали путем его распыления или вводили его внутрижелудочно. Внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 21 последовательного дня.
2.1.4 Регистрация латентного периода бронхиальной астмы у крыс
Так же, как в примере 53.
2.1.5 Измерения содержаний IL-4 и IFN-γ
Так же, как в примере 53.
2.1.6 Измерение содержания EOS в тканях легких
Так же, как в примере 53.
2.2 Эффект на аллергическую бронхиальную астму у морских свинок, вызванную газовой смесью Ach и His
2.2.1. Так же, как в 2.1.1.
2.2.2 Установление животных моделей аллергической бронхиальной астмы у морских свинок
Так же, как в примере 53.
2.2.3 Режим дозирования
Так же, как в 2.1.3.
2.2.4 Регистрация латентного периода бронхиальной астмы
Так же, как в 2.1.4.1.
2.2.5 Измерение IgE в сыворотке и BALF
Так же, как в примере 53.
2.3 Статистический метод
Так же, как в примере 53.
3 Результаты
3.1 Эффект композиции 6 на аллергическую бронхиальную астму у крыс, вызванную OVA
3.1.1 Эффект на латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у крыс
Результаты показаны в таблице 1 (см. в графической части). Латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у крыс из каждой смоделированной группы, квалифицировали без значимого различия между ними, что указывает на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у крыс в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах, являлись значительно пролонгированными (Р<0,05 или Р<0,01).
3.1.2 Эффект на содержание сывороточного IL-4 и IFN-γ у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 2 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля модельная группа показала значительно пониженное содержание сывороточного IFN-γ (Р<0,01), но значительно увеличенное содержание сывороточного IL-4 (Р<0,01), указывая на тяжелый дисбаланс соотношения IFN-γ/IL-4 во время манифестаций бронхиальной астмы. По сравнению с модельной группой все из группы дексаметазона и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства групп показали значительно пониженное содержание IL-4 (Р<0,05 или Р<0,01) и значительно увеличенное содержание IFN-γ (Р<0,05 или Р<0,01), указывая на то, что исследуемое лекарственное средство может корректировать несбалансированное соотношение IFN-γ/IL-4.
3.1.3 Эффект на содержание EOS в тканях легких у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). Количество EOS у крыс в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению модельной группой положительная контрольная группа и получающие среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группы показали значительно пониженное количество EOS (Р<0,01), указывая на то, что композиция 6 является эффективной в лечении аллергической бронхиальной астмы, вероятно, за счет снижения содержания EOS в тканях легких у крыс.
3.2 Эффект композиции 6 на аллергическую бронхиальную астму у морских свинок, вызванную газовой смесью Ach и His
3.2.1 Эффект на латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок
Результаты показаны в таблице 4 (см. в графической части). После моделирования латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок из каждой смоделированной группы, квалифицировали без значимого различия между ними, что указывает на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах, являлись значительно пролонгированными (Р<0,05 или Р<0,01), указывая на то, что композиция 6 существенно улучшает симптомы бронхиальной астмы у морских свинок.
3.2.2 Эффект на общий IgE в сыворотке и BALF у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 5 (см. в графической части). Содержание общего IgE в сыворотке и BALF в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению модельной группой все содержания общего IgE в сыворотке и BALF в группе дексаметазона и в получающих средние и высокие дозы исследуемого лекарственного средства группах значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), указывая на то, что как дексаметазон, так и исследуемое лекарственное средство могут ингибировать аллергический воспалительный ответ в легких морских свинок и облегчать симптомы бронхиальной астмы.
3.2.3 Эффект на содержание EOS в тканях легких у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля количества EOS у морских свинок в модельной группе значительно увеличивались (Р<0,01). По сравнению модельной группой количества EOS в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах значительно уменьшались (Р<0,01), указывая на то, что композиция 6 является эффективной в лечении аллергической бронхиальной астмы, вероятно, за счет уменьшения содержания EOS в тканях легких у морских свинок.
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что композиция 6 способна значительно облегчать симптомы бронхиальной астмы у крыс и пролонгировать латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок в модельных группах; уменьшать содержание сывороточного IL-4, увеличивать содержание сывороточного IFN-γ и корректировать несбалансированное соотношение IFN-γ/IL-4 у крыс с бронхиальной астмой; уменьшать количество EOS в тканях легких крыс и морских свинок и ослаблять инфильтрацию EOS в участках воспаления; уменьшать содержание общего IgE в сыворотке и BALF у морских свинок и облегчать легочные воспалительные симптомы. Таким образом, композиция 6 считается эффективной в защите от аллергической бронхиальной астмы.
Пример 63. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 7 композиции 7 против аллергии и аллергического дерматита
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 7 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma, Cordyceps и Flos Rosae Rugosae), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 12,19 г общих сырых лекарственных средств. Его суточная доза потребления, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела.
1.2 Лабораторные животные
Так же, как в примере 51.
1.3 Исходные реагенты
Так же, как в примере 51.
1.4 Исходные инструменты
Так же, как в примере 51.
2. Экспериментальные способы
2.1 Распределение животных по группам
Животные случайным образом делили на группы по 10 животных на группу на основании масс тела. Устанавливали такие группы, как контрольная модельная группа, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 7 группы и группа положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона).
2.2 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиции 7, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для мыши составляла: получающая низкую дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 4,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 12,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 5, 10 и 30-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (16,405 мг сухого порошка/мл, 32,81 мг сухого порошка/мл, и 98,43 мг сухого порошка/мл) с помощью дистиллированной воды для проведения экспериментов.
Суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (8,205 мг сухого порошка/мл, 16,41 мг сухого порошка/мл, и 49,23 мг сухого порошка/мл) с помощью дистиллированной воды для проведения экспериментов.
2.3 Эффект композиции 7 на пассивную анафилаксию (РСА) у крыс, вызванную овальбумином
2.3.1 Получение антисыворотки
Так же, как в примере 51.
2.3.2 Установление крысиных моделей сыворотки к овальбумину
Получали сыворотка к овальбумину и ее разводили в соотношении 1:4 или 1:8 физиологическим солевым раствором. 50 крыс случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 7 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 крыс на группу. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили дистиллированную воду; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 7 группам внутрижелудочно вводили исследуемые растворы в различных концентрациях в объеме дозирования, составляющем 10 мл/кг; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 14 последовательных дней. На 15 день спины крыс брили и интрадермально вводили с помощью инъекции разбавленную сыворотку в две области на каждой стороне по 0,1 мл на каждую область. Через 48 часов 1,0 мл смешанного раствора 1% Эванса голубого и 1% овальбумина в физиологическом солевом растворе вводили с помощью инъекции в хвостовую вену каждой крысы. Через 30 мин производили забор артериальной крови, из нее выделяли сыворотку и содержание гистамина определяли с помощью способа Затем крыс умерщвляли и кожу на их спинах выворачивали для измерения диаметра голубых реакционных пятен для определения различия между получающими дозировку группами и модельной группой. Образец ткани кожи крысы фиксировали нейтральным формальдегидом, дегидратировали с помощью спиртового градиента, заливали парафином и исследовали в отношении дегрануляции тучных клеток в ткани.
2.3.3 Эффект композиции 7 на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом
50 мышей случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 7 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 мышей на группу. 5% раствор 2,4-динитрохлорбензола в этаноле наносили на кожу брюшной поверхности (побритую) мышей для сенсибилизации. Внутрижелудочное введение проводили за два дня до сенсибилизации; контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили эквивалентный объем дистиллированной воды; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 7 группам внутрижелудочно вводили соответствующие исследуемые растворы в объеме дозирования, составляющем 0,1 мл/10 г массы тела; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 7 дней после сенсибилизации 1% раствор 2,4-динитрохлорбензола наносили на правое ухо, мышей умерщвляли через 24 часа и оба уха отрезали вдоль основания наружного уха. Диски диаметром 8 мм извлекали с помощью пункции в одинаковом положении на обоих ушах, точно взвешивали на электронных весах и различие в массе между левым и правым ушами принимали в качестве объема для гиперчувствительности замедленного типа.
2.3.4 Эффект композиции 7 на локальный зуд у мышей, вызванный низкомолекулярным декстраном
Мышей случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 7 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 мышей на группу. Внутрижелудочное введение проводили мышам один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 30 мин после последнего введения 0,0125% раствор низкомолекулярного декстрана вводили с помощью инъекции в дозе 0,1 г/10 г в хвостовую вену. Число случаев зуда (случаи зуда устанавливали по расчесу на голове с помощью передних лап, расчесу на теле с помощью задних лап и по укусам на различных частях по всему телу), которые происходили в пределах 30 мин после инъекции раствора низкомолекулярного декстрана в хвостовые вены мышей в каждой группе, наблюдали и регистрировали.
2.3.5 Эффект композиции 7 на проницаемость капилляров у крыс
Крыс случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 7 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 крыс на группу. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили дистиллированную воду; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 7 группам внутрижелудочно вводили исследуемые растворы в различных концентрациях в объеме дозирования, составляющем 10 мл/кг; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 1 час после последнего введения в побритую область (побритую перед введением) на спинах крыс интрадермально вводили с помощью инъекции 1 мг/мл гистамина фосфата в дозе, составляющей 0,1 мл/крыса, и затем в хвостовую вену немедленно вводили инъекцию 1% водного раствора Эванса голубого в дозе, составляющей 1 мл/крыса. Через 20 минут животных умерщвляли путем смещения шейных позвонков. Области кожи с голубыми пятнами отрезали и разрезали на маленькие кусочки, замачивали в 5 мл раствора ацетона: физиологического солевого раствора (7:3) в течение 48 часов, центрифугировали и поглощение супернатанта измеряли при 610 нм.
2.4 Статистический метод
Экспериментальные данные представляли в . Однофакторный дисперсионный анализ использовали для сравнения различий среди контрольной модельной группы и получающих различные дозы композиции 7 групп. Р<0,05 рассматривали как значимое различие. Р<0,01 рассматривали как высокозначимое различие.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 7 на пассивную анафилаксию у крыс
Результаты исследования показаны в таблицах 1 и 2 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой получающая низкую дозу композиции 7 группа показала тенденцию к уменьшению диаметра голубых пятен у сенсибилизированных сывороткой к овальбумину в соотношении 1:4 и 1:8 крыс, к снижению дегрануляции тучных клеток и к уменьшению содержания сывороточного гистамина, что, тем не менее, не характеризовалось статистической значимостью; все из контрольной группы преднизона и получающих средние и высокие дозы композиции 7 групп показали эффект в значительном уменьшении диаметра голубых пятен у сенсибилизированных сывороткой к овальбумину в соотношении 1:4 и 1:8 крыс, уменьшении дегрануляции тучных клеток и уменьшении содержания сывороточного гистамина, со значимым или высокозначимым статистическим различием. Это указывает на то, что композиция 7 характеризовалась значительным ингибирующим эффектом на пассивную анафилаксию у крыс.
3.2 Эффект композиции 7 на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом
Результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой степень отека дисков наружного уха мыши значительно снижалась в группах, получающих средние и высокие дозы композиции 7, указывая на то, что композиция 7 характеризовалась существенным ингибирующим эффектом на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом.
3.3 Эффект композиции 7 на локальный зуд у мышей, вызванный низкомолекулярным декстраном
Результаты исследования показаны в таблице 4 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой объем OD значительно снижался в группе крыс, получающих средние и высокие дозы композиции 7, указывая на то, что композиция 7 являлась значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом.
3.4 Эффект композиции 7 на проницаемость капилляров у крыс
Результаты исследования показаны в таблице 5 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой объем OD значительно снижался в группе крыс, получающих средние и высокие дозы композиции 7, указывая на то, что композиция 7 являлась значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом.
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что композиция 7 является значительно эффективной в ингибировании пассивной анафилаксии у крыс, вызванной овальбумином, что композиция 7 является эффективной в ингибировании гиперчувствительности замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванной 2,4-динитрохлорбензолом, и что композиция 7 является значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом. Вышеперечисленные результаты указывают на хорошую эффективность композиции 7 в защите от аллергии и в профилактике и лечении таких аллергических заболеваний, как аллергический дерматит и крапивница.
Пример 64. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 7 композиции 7 в профилактике и лечении аллергического ринита
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 7 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma, Cordyceps и Flos Rosae Rugosae), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 12,19 г общих сырых лекарственных средств.
1.2 Лабораторные животные
Так же, как в примере 52.
1.3 Исходные реагенты
Так же, как в примере 52.
1.4 Исходные инструменты
Так же, как в примере 52.
2. Экспериментальные способы
2.1 Эффект на аллергический ринит у крыс, вызванный OVA
2.1.1 Распределение животных по группам
Крыс случайным образом делили на две группы, т.е. группу холостого контроля из 10 животных и группу моделирования из 70 животных. После успешного моделирования крыс распределяли случайным образом, на основании их оценки в баллах, в следующие группы: контрольная модельная группа, принимающая лекарственное средство положительная группа (группа Bi-yan-kang) и получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 7 группы, по 10 животных в каждой группе.
2.1.2 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиционного порошка композиции 7, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Группе холостого контроля и модельной группе аллергического ринита внутрижелудочно вводили эквивалентный объем физиологического солевого раствора; группе Bi-yan-kang вводили лекарственное средство в дозе, составляющей 410 мг/кг. Объем внутрижелудочного введения рассчитывали как 1,0 мл/100 г массы тела. Внутрижелудочное введение начинали после успешного моделирования и проводили один раз в день в течение 21 последовательного дня.
2.1.3 Установление животных моделей аллергического ринита у крыс
Так же, как в примере 52.
2.1.4 Индикаторы исследования
Так же, как в примере 52.
2.1.4.1 Измерение сАМР и cGMP в крови
Так же, как в примере 52.
2.1.4.2 Подсчет тучных клеток в слизистой оболочке носа
Так же, как в примере 52.
2.2 Эффект на аллергический ринит у морских свинок, вызванный TDI
2.2.1. Так же, как в 2.1.1.
2.2.2. Так же, как в 2.1.2.
2.2.3 Установление животных моделей аллергического ринита у морских свинок
Так же, как в примере 52.
2.2.4 Индикаторы исследования
Так же, как в примере 52.
2.2.4.1 Наблюдение за поведением морских свинок
Так же, как в примере 52.
2.2.4.2 Количества эозинофилов (EOS) в носовом секрете
Так же, как в примере 52.
2.2.4.3 Измерение содержания общего сывороточного IgE и гистамина в крови
Так же, как в примере 52.
2.2.4.4 Измерение толщины слизистой оболочки носа
Так же, как в примере 52.
2.3 Статистический метод
Экспериментальные данные представляли в . Однофакторный дисперсионный анализ использовали для сравнения различий среди группы холостого контроля, контрольной модельной группы и получающих различные дозы композиции 7 групп. Р<0,05 рассматривали как значимое различие. Р<0,01 рассматривали как высокозначимое различие.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 7 на аллергический ринит у крыс, вызванный овальбумином
3.1.1 Эффект на поведение крыс
Результаты показаны в таблице 2 (см. в графической части). После моделирования баллы для признаков крыс в каждой смоделированной группе квалифицировали без значимого различия между ними, указывая на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все баллы для признаков в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.1.2 Эффект композиции 7 на содержание сАМР и cGMP в сыворотке крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля модельная группа показала значительно пониженное содержание сАМР в сыворотке (Р<0,01) и значительно увеличенное содержание cGMP в сыворотке (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой группа Bi-yan-kang и все получающие исследуемое лекарственное средство группы показали значительно увеличенное содержание сАМР в сыворотке (Р<0,01 или Р<0,05); группа Bi-yan-kang и получающие среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группы показали значительно пониженное содержание cGMP в сыворотке (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.1.3 Эффект композиции 7 на тучные клетки в слизистой оболочке носа у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). Количество тучных клеток в слизистой оболочке носа в контрольной модельной группе значительно увеличивалось с высокозначимым различием (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой все количества тучных клеток в слизистой оболочке носа в группе Bi-yan-kang и группах лечения исследуемым лекарственным средством значительно снижались со значимым различием (Р<0,01)
3.2 Эффект композиции 7 на аллергический ринит у морских свинок, вызванный TDI
3.2.1 Эффект на поведение морских свинок
Результаты показаны в таблице 4 (см. в графической части). После моделирования баллы для признаков морских свинок в каждой смоделированной группе квалифицировали без значимого различия между ними, указывая на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все баллы для признаков в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.2.2 Эффект на содержание гистамина в крови и общего сывороточного IgE у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 5 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля содержания как гистамина в крови, так и общего сывороточного IgE в модельной группе увеличивались (Р<0,01), указывая на успешное экспериментальное моделирование. По сравнению модельной группой поглощение флуоресценции концентрации гистамина и общего сывороточного IgE в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижалось (Р<0,01 или Р<0,05), причем содержание гистамина в получающих среднюю и высокую дозы группах уменьшалось почти до нормального содержания, указывая на то, что композиция 7 являлась эффективной в лечении аллергического ринита за счет ингибирования содержания гистамина в крови и сывороточного IgE.
3.2.3 Эффект на эозинофилы (EOS) в носовом секрете морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). Количество эозинофилов в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению модельной группой все количества эозинофилов в группе Bi-yan-kang и в получающих лечение лекарственным средством группах значительно снижались (Р<0,05 или Р<0,01).
3.2.4 Эффект на толщину слизистой оболочки носа у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). В результате по сравнению с группой холостого контроля в модельной группе эпителий слизистой оболочки на носовой перегородке морских свинок отслаивался в различной степени, характеризуясь неоднородной толщиной и неясной базальной структурой; венулы и капилляры в собственной пластинке демонстрировали заметное расширение, тканевое пространство расширялось, и толщина слизистой оболочки значительно увеличивалась (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой вышеперечисленные патологические изменения в группе Bi-yan-kang и в получающих лечение лекарственным средством группах снижались и толщина слизистой оболочки значительно уменьшалась (Р<0,01).
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что эффективность композиции 7, главным образом, отражается в следующих аспектах: 1) она способна значительно уменьшить балл назального симптома смоделированных крыс, увеличить содержание сАМР в сыворотке и уменьшить содержание cGMP у крыс с аллергическим ринитом; 2) уменьшить количество тучных клеток в слизистой оболочке носа у крыс и уменьшить их инфильтрацию в участках воспаления; 3) она способна уменьшить балл назального симптома смоделированных морских свинок; 4) уменьшить количество EOS в носовом секрете морских свинок и снизить инфильтрацию EOS в участках воспаления; 5) она способна значительно уменьшить концентрацию гистамина в крови у морских свинок и снизить содержание медиаторов воспаления; 6) облегчить отек в слизистой оболочке носа морских свинок. В соответствии с результатами экспериментальных исследований считают, что композиция 7 является эффективной в защите от аллергического ринита.
Пример 65. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 7 композиции 7 в профилактике и лечении аллергической бронхиальной астмы
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 7 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma, Cordyceps и Flos Rosae Rugosae), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 12,19 г общих сырых лекарственных средств.
1.2 Лабораторные животные
Так же, как в примере 53.
1.3 Исходные реагенты
Так же, как в примере 53.
1.4 Исходные инструменты
Так же, как в примере 53.
2. Экспериментальные способы
2.1 Эффект на аллергическую бронхиальную астму у крыс, вызванную OVA
2.1.1 Распределение животных по группам
Крысы (половина из которых являлись самцами и другая половина - самками) случайным образом делили на две группы, т.е. группу холостого контроля из 10 животных и группу моделирования из 70 животных. После успешного моделирования крыс случайным образом делили на следующие группы: контрольная модельная группа, принимающая лекарственное средство положительная группа (группа дексаметазона) и получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 7, по 10 животных в каждой группе.
2.1.2 Установление животных моделей аллергической бронхиальной астмы у крыс
Так же, как в примере 53.
2.1.3 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиционного порошка композиции 7, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (8,20 мг сухого порошка/мл, 16,41 мг сухого порошка/мл, 49,22 мг сухого порошка/мл) для проведения экспериментов. Объем внутрижелудочного введения рассчитывали как 1,0 мл/100 г массы тела. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили эквивалентный объем 0,9% физиологического солевого раствора за 30 минут до сенсибилизации; и получающей лекарственное средство положительной группе вводили дексаметазон в дозе, составляющей 0,5 мг/кг за 30 мин до каждой сенсибилизации. Каждой из получающих низкую, среднюю и высокую дозы композиции 7 групп внутрижелудочно вводили соответствующую дозу исследуемого лекарственного средства за 30 мин до каждой сенсибилизации. При этом группе холостого контроля интраперитонеально вводили с помощью инъекции эквивалентный объем 0,9% физиологического солевого раствора, сенсибилизировали путем его распыления или вводили его внутрижелудочно. Внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 21 последовательного дня.
2.1.4 Регистрация латентного периода бронхиальной астмы у крыс
Так же, как в примере 53.
2.1.5 Измерения содержаний IL-4 и IFN-γ
Так же, как в примере 53.
2.1.6 Измерение содержания EOS в тканях легких
Так же, как в примере 53.
2.2 Эффект на аллергическую бронхиальную астму у морских свинок, вызванную газовой смесью Ach и His
2.2.1. Так же, как в 2.1.1.
2.2.2 Установление животных моделей аллергической бронхиальной астмы у морских свинок
Так же, как в примере 53.
2.2.3 Режим дозирования
Так же, как в 2.1.3.
2.2.4 Регистрация латентного периода бронхиальной астмы
Так же, как в 2.1.4.1.
2.2.5 Измерение IgE в сыворотке и BALF
Так же, как в примере 53.
2.3 Статистический метод
Так же, как в примере 53.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 7 на аллергическую бронхиальную астму у крыс, вызванную OVA
3.1.1 Эффект на латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у крыс
Результаты показаны в таблице 1 (см. в графической части). Латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у крыс из каждой смоделированной группы, квалифицировали без значимого различия между ними, что указывает на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у крыс в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах, являлись значительно пролонгированными (Р<0,05 или Р<0,01).
3.1.2 Эффект на содержание сывороточного IL-4 и IFN-γ у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 2 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля модельная группа показала значительно пониженное содержание сывороточного IFN-γ (Р<0,01), но значительно увеличенное содержание сывороточного IL-4 (Р<0,01), указывая на тяжелый дисбаланс соотношения IFN-γ/IL-4 во время манифестаций бронхиальной астмы. По сравнению модельной группой все из группы дексаметазона и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства групп показали значительно пониженное содержание IL-4 (Р<0,05 или Р<0,01) и значительно увеличивалось содержание IFN-γ (Р<0,05 или Р<0,01), указывая на то, что исследуемое лекарственное средство может корректировать несбалансированное соотношение IFN-γ/IL-4.
3.1.3 Эффект на содержание EOS в тканях легких у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). Количество EOS у крыс в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению модельной группой положительная контрольная группа и получающие среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группы показали значительно пониженное количество EOS (Р<0,01), указывая на то, что композиция 7 является эффективной в лечении аллергической бронхиальной астмы, вероятно, за счет снижения содержания EOS в тканях легких у крыс.
3.2 Эффект композиции 7 на аллергическую бронхиальную астму у морских свинок, вызванную газовой смесью Ach и His
3.2.1 Эффект на латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок
Результаты показаны в таблице 4 (см. в графической части). После моделирования латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок из каждой смоделированной группы, квалифицировали без значимого различия между ними, что указывает на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах, являлись значительно пролонгированными (Р<0,05 или Р<0,01), указывая на то, что композиция 7 существенно улучшает симптомы бронхиальной астмы у морской свинки.
3.2.2 Эффект на общий IgE в сыворотке и BALF у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 5 (см. в графической части). Содержание общего IgE в сыворотке и BALF в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению модельной группой все содержания общего IgE в сыворотке и BALF в группе дексаметазона и в получающих средние и высокие дозы исследуемого лекарственного средства группах значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), указывая на то, что как дексаметазон, так и исследуемое лекарственное средство могут ингибировать аллергический воспалительный ответ в легких морских свинок и облегчать симптомы бронхиальной астмы.
3.2.3 Эффект на содержание EOS в тканях легких у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля количества EOS у морских свинок в модельной группе значительно увеличивались (Р<0,01). По сравнению модельной группой количества EOS в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах значительно уменьшались (Р<0,01), указывая на то, что композиция 7 является эффективной в лечении аллергической бронхиальной астмы, вероятно, за счет уменьшения содержания EOS в тканях легких у морских свинок.
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что композиция 7 способна значительно облегчать симптомы бронхиальной астмы у крыс и пролонгировать латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок в модельных группах; уменьшать содержание сывороточного IL-4, увеличивать содержание сывороточного IFN-γ и корректировать несбалансированное соотношение IFN-γ/IL-4 у крыс с бронхиальной астмой; уменьшать количество EOS в тканях легких крыс и морских свинок и ослаблять инфильтрацию EOS в участках воспаления; уменьшать содержание общего IgE в сыворотке и BALF у морских свинок и облегчать легочные воспалительные симптомы. Таким образом, композиция 7 считается эффективной в защите от аллергической бронхиальной астмы.
Пример 66. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 8 композиции 8 против аллергии и аллергического дерматита
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 8 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma, порошок ферментированного Cordyceps sinensis, Flos Rosae Rugosae и Cordyceps), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 13,78 г общих сырых лекарственных средств. Его суточная доза потребления, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела.
1.2 Лабораторные животные
Так же, как в примере 51.
1.3 Исходные реагенты
Так же, как в примере 51.
1.4 Исходные инструменты
Так же, как в примере 51.
2. Экспериментальные способы
2.1 Распределение животных по группам
Животные случайным образом делили на группы по 10 животных на группу на основании масс тела. Устанавливали такие группы, как контрольная модельная группа, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 8 группы и группа положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона).
2.2 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиции 8, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для мыши составляла: получающая низкую дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 4,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 12,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 5, 10 и 30-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (14,515 мг сухого порошка/мл, 29,03 мг сухого порошка/мл, и 87,09 мг сухого порошка/мл) с помощью дистиллированной воды для проведения экспериментов.
Суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (7,255 мг сухого порошка/мл, 14,51 мг сухого порошка/мл, и 43,53 мг сухого порошка/мл) с помощью дистиллированной воды для проведения экспериментов.
2.3 Эффект композиции 8 на пассивную анафилаксию (РСА) у крыс, вызванную овальбумином
2.3.1 Получение антисыворотки
Так же, как в примере 51.
2.3.2 Установление крысиных моделей сыворотки к овальбумину
Получали сыворотка к овальбумину и ее разводили в соотношении 1:4 или 1:8 физиологическим солевым раствором. 50 крыс случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 8 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 крыс на группу. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили дистиллированную воду; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 8 группам внутрижелудочно вводили исследуемые растворы в различных концентрациях в объеме дозирования, составляющем 10 мл/кг; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 14 последовательных дней. На 15 день спины крыс брили и интрадермально вводили с помощью инъекции разбавленную сыворотку в две области на каждой стороне по 0,1 мл на каждую область. Через 48 часов 1,0 мл смешанного раствора 1% Эванса голубого и 1% овальбумина в физиологическом солевом растворе вводили с помощью инъекции в хвостовую вену каждой крысы. Через 30 мин производили забор артериальной крови, из нее выделяли сыворотку и содержание гистамина определяли с помощью известного способа. Затем крыс умерщвляли и кожу на их спинах выворачивали для измерения диаметра голубых реакционных пятен для определения различия между получающими дозировку группами и модельной группой. Образец ткани кожи крысы фиксировали нейтральным формальдегидом, дегидратировали с помощью спиртового градиента, заливали парафином и исследовали в отношении дегрануляции тучных клеток в ткани.
2.3.3 Эффект композиции 8 на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом
50 мышей случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 8 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 мышей на группу. 5% раствор 2,4-динитрохлорбензола в этаноле наносили на кожу брюшной поверхности (побритую) мышей для сенсибилизации. Внутрижелудочное введение проводили за два дня до сенсибилизации; контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили эквивалентный объем дистиллированной воды; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 8 группам внутрижелудочно вводили соответствующие исследуемые растворы в объеме дозирования, составляющем 0,1 мл/10 г массы тела; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 7 дней после сенсибилизации 1% раствор 2,4-динитрохлорбензола наносили на правое ухо, мышей умерщвляли через 24 часа и оба уха отрезали вдоль основания наружного уха. Диски диаметром 8 мм извлекали с помощью пункции в одинаковом положении на обоих ушах, точно взвешивали на электронных весах и различие в массе между левым и правым ушами принимали в качестве объема для гиперчувствительности замедленного типа.
2.3.4 Эффект композиции 8 на локальный зуд у мышей, вызванный низкомолекулярным декстраном
Мышей случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 8 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 мышей на группу. Внутрижелудочное введение проводили мышам один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 30 мин после последнего введения 0,0125% раствор низкомолекулярного декстрана вводили с помощью инъекции в дозе 0,1 г/10 г в хвостовую вену. Число случаев зуда (случаи зуда устанавливали по расчесу на голове с помощью передних лап, расчесу на теле с помощью задних лап и по укусам на различных частях по всему телу), которые происходили в пределах 30 мин после инъекции раствора низкомолекулярного декстрана в хвостовые вены мышей в каждой группе, наблюдали и регистрировали.
2.3.5 Эффект композиции 8 на проницаемость капилляров у крыс
Крыс случайным образом делили на 5 групп, т.е. контрольную модельную группу, получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 8 группы и группу положительного контроля с использованием лекарственного средства (преднизона), по 10 крыс на группу. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили дистиллированную воду; группе положительного контроля с использованием лекарственного средства внутрижелудочно вводили преднизон в дозе, составляющей 5 мг/кг; получающим низкую, среднюю и высокую дозы композиции 8 группам внутрижелудочно вводили исследуемые растворы в различных концентрациях в объеме дозирования, составляющем 10 мл/кг; внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 10 последовательных дней. Через 1 час после последнего введения в побритую область (побритую перед введением) на спинах крыс интрадермально вводили с помощью инъекции 1 мг/мл гистамина фосфата в дозе, составляющей 0,1 мл/крыса, и затем в хвостовую вену немедленно вводили инъекцию 1% водного раствора Эванса голубого в дозе, составляющей 1 мл/крыса. Через 20 минут животных умерщвляли путем смещения шейных позвонков. Области кожи с голубыми пятнами отрезали и разрезали на маленькие кусочки, замачивали в 5 мл раствора ацетона: физиологического солевого раствора (7:3) в течение 48 часов, центрифугировали и поглощение супернатанта измеряли при 610 нм.
2.4 Статистический метод
Так же, как в примере 51.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 8 на пассивную анафилаксию у крыс
Результаты исследования показаны в таблицах 1 и 2 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой получающая низкую дозу композиции 8 группа показала тенденцию к уменьшению диаметра голубых пятен у сенсибилизированных сывороткой к овальбумину в соотношении 1:4 и 1:8 крыс, к уменьшению дегрануляции тучных клеток и к уменьшению содержания сывороточного гистамина, что, тем не менее, не характеризовалось статистической значимостью; все из контрольной группы преднизона и получающих средние и высокие дозы композиции 8 групп показали эффект в значительном уменьшении диаметра голубых пятен у сенсибилизированных сывороткой к овальбумину в соотношении 1:4 и 1:8 крыс, уменьшении дегрануляции тучных клеток и уменьшении содержания сывороточного гистамина, со значимым или высокозначимым статистическим различием. Это указывает на то, что композиция 8 характеризовалась значительным ингибирующим эффектом на пассивную анафилаксию у крыс.
3.2 Эффект композиции 8 на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом
Результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой степень отека дисков наружного уха мыши значительно снижалась в получающих средние и высокие дозы композиции 8 группах, указывая на то, что композиция 8 характеризовалась существенным ингибирующим эффектом на гиперчувствительность замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванную 2,4-динитрохлорбензолом.
3.3 Эффект композиции 8 на локальный зуд у мышей, вызванный низкомолекулярным декстраном
Результаты исследования показаны в таблице 4 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой объем OD значительно снижался в группе крыс, получающих средние и высокие дозы композиции 8, указывая на то, что композиция 8 являлась значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом.
3.4 Эффект композиции 8 на проницаемость капилляров у крыс
Результаты исследования показаны в таблице 5 (см. в графической части). По сравнению с контрольной модельной группой объем OD значительно снижался в группе крыс, получающих средние и высокие дозы композиции 8, указывая на то, что композиция 8 являлась значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом.
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что композиция 8 является значительно эффективной в ингибировании пассивной анафилаксии у крыс, вызванной овальбумином, что композиция 8 является эффективной в ингибировании гиперчувствительности замедленного типа на коже наружного уха мыши, вызванной 2,4-динитрохлорбензолом, и что композиция 8 является значительно эффективной в снижении увеличения проницаемости капилляров у крыс, вызванного гистамина фосфатом. Вышеперечисленные результаты указывают на хорошую эффективность композиции 8 в защите от аллергии и в профилактике и лечении таких аллергических заболеваний, как аллергический дерматит и крапивница.
Пример 67. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 8 композиции 8 в профилактике и лечении аллергического ринита
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 8 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma, порошок ферментированного Cordyceps sinensis, Flos Rosae Rugosae и Cordyceps), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 13,78 г общих сырых лекарственных средств.
1.2 Лабораторные животные
Так же, как в примере 52.
1.3 Исходные реагенты
Так же, как в примере 52.
1.4 Исходные инструменты
Так же, как в примере 52.
2. Экспериментальные способы
2.1 Эффект на аллергический ринит у крыс, вызванный OVA
2.1.1 Распределение животных по группам
Крыс случайным образом делили на две группы, т.е. группу холостого контроля из 10 животных и группу моделирования из 70 животных. После успешного моделирования крыс распределяли случайным образом, на основании их оценки в баллах, в следующие группы: контрольная модельная группа, принимающая лекарственное средство положительная группа (группа Bi-yan-kang) и получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 8 группы, по 10 животных в каждой группе.
2.1.2 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиционного порошка композиции 8, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (7,26 мг сухого порошка/мл, 14,51 мг сухого порошка/мл, и 43,54 мг сухого порошка/мл) с помощью дистиллированной воды для проведения экспериментов. Объем внутрижелудочного введения рассчитывали как 1,0 мл/100 г массы тела. Группе холостого контроля и модельной группе аллергического ринита внутрижелудочно вводили эквивалентный объем физиологического солевого раствора; группе Bi-yan-kang вводили лекарственное средство в дозе, составляющей 410 мг/кг. Внутрижелудочное введение начинали после успешного моделирования и проводили один раз в день в течение 21 последовательного дня.
2.1.3 Установление животных моделей аллергического ринита у крыс
Так же, как в примере 52.
2.1.4 Индикаторы исследования
Так же, как в примере 52.
2.1.4.1 Измерение сАМР и cGMP в крови
Так же, как в примере 52.
2.1.4.2 Подсчет тучных клеток в слизистой оболочке носа
Так же, как в примере 52.
2.2 Эффект на аллергический ринит у морских свинок, вызванный TDI
2.2.1. Так же, как в 2.1.1.
2.2.2. Так же, как в 2.1.2.
2.2.3 Установление животных моделей аллергического ринита у морских свинок
Так же, как в примере 52.
2.2.4 Индикаторы исследования
Так же, как в примере 52.
2.2.4.1 Наблюдение за поведением морских свинок
Так же, как в примере 52.
2.2.4.2 Количества эозинофилов (EOS) в носовом секрете
Так же, как в примере 52.
2.2.4.3 Измерение содержания общего сывороточного IgE и гистамина в крови
Так же, как в примере 52.
2.2.4.4 Измерение толщины слизистой оболочки носа
Так же, как в примере 52.
2.3 Статистический метод
Экспериментальные данные представляли в . Однофакторный дисперсионный анализ использовали для сравнения различий среди группы холостого контроля, контрольной модельной группы и получающих различные дозы композиции 8 групп. Р<0,05 рассматривали как значимое различие. Р<0,01 рассматривали как высокозначимое различие.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 8 на аллергический ринит у крыс, вызванный овальбумином
3.1.1 Эффект на поведение крыс
Результаты показаны в таблице 2 (см. в графической части). После моделирования баллы для признаков крыс в каждой смоделированной группе квалифицировали без значимого различия между ними, указывая на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все баллы для признаков в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.1.2 Эффект композиции 8 на содержание с AMP и cGMP в сыворотке крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля модельная группа показала значительно пониженное содержание с AMP в сыворотке (Р<0,01) и значительно увеличенное содержание cGMP в сыворотке (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой группа Bi-yan-kang и все получающие исследуемое лекарственное средство группы показали значительно увеличенное содержание сАМР в сыворотке (Р<0,01 или Р<0,05); группа Bi-yan-kang и получающие среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группы показали значительно пониженное содержание cGMP в сыворотке (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.1.3 Эффект композиции 8 на тучные клетки в слизистой оболочке носа у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). Количество тучных клеток в слизистой оболочке носа в контрольной модельной группе значительно увеличивалось с высокозначимым различием (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой все количества тучных клеток в слизистой оболочке носа в группе Bi-yan-kang и группах лечения исследуемым лекарственным средством значительно снижались со значимым различием (Р<0,01).
3.2 Эффект композиции 8 на аллергический ринит у морских свинок, вызванный TDI
3.2.1 Эффект на поведение морских свинок
Результаты показаны в таблице 4 (см. в графической части). После моделирования баллы для признаков морских свинок в каждой смоделированной группе квалифицировали без значимого различия между ними, указывая на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все баллы для признаков в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), и получающая низкую дозу группа также показала тенденцию к снижению.
3.2.2 Эффект на содержание гистамина в крови и общего сывороточного IgE у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 5 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля содержания как гистамина в крови, так и общего сывороточного IgE в модельной группе увеличивались (Р<0,01), указывая на успешное экспериментальное моделирование. По сравнению модельной группой поглощение флуоресценции концентрации гистамина и общего сывороточного IgE в получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах и в группе Bi-yan-kang значительно снижалось (Р<0,01 или Р<0,05), причем содержание гистамина в получающих среднюю и высокую дозы группах уменьшалось почти до нормального содержания, указывая на то, что композиция 8 являлась эффективной в лечении аллергического ринита за счет ингибирования содержания гистамина в крови и сывороточного IgE.
3.2.3 Эффект на эозинофилы (EOS) в носовом секрете морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). Количество эозинофилов в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению модельной группой все количества эозинофилов в группе Bi-yan-kang и в получающих лечение лекарственным средством группах значительно снижались (Р<0,05 или Р<0,01).
3.2.4 Эффект на толщину слизистой оболочки носа у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). В результате по сравнению с группой холостого контроля в модельной группе эпителий слизистой оболочки на носовой перегородке морских свинок отслаивался в различной степени, характеризуясь неоднородной толщиной и неясной базальной структурой; венулы и капилляры в собственной пластинке демонстрировали заметное расширение, тканевое пространство расширялось, и толщина слизистой оболочки значительно увеличивалась (Р<0,01). По сравнению с контрольной модельной группой вышеперечисленные патологические изменения в группе Bi-yan-kang и в получающих лечение лекарственным средством группах снижались и толщина слизистой оболочки значительно уменьшалась (Р<0,01).
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что эффективность композиции 8, главным образом, отражается в следующих аспектах: 1) она способна значительно уменьшить балл назального симптома смоделированных крыс, увеличить содержание сАМР в сыворотке и уменьшить содержание cGMP у крыс с аллергическим ринитом; 2) уменьшить количество тучных клеток в слизистой оболочке носа у крыс и уменьшить их инфильтрацию в участках воспаления; 3) она способна уменьшить балл назального симптома смоделированных морских свинок; 4) уменьшить количество EOS в носовом секрете морских свинок и снизить инфильтрацию EOS в участках воспаления; 5) она способна значительно уменьшить концентрацию гистамина в крови у морских свинок и снизить содержание медиаторов воспаления; 6) облегчить отек в слизистой оболочке носа морских свинок. В соответствии с результатами экспериментальных исследований считают, что композиция 8 является эффективной в защите от аллергического ринита.
Пример 68. Отчет об эксперименте на животных в отношении действия полученной в примере 8 композиции 8 в профилактике и лечении аллергической бронхиальной астмы
1. Материалы и способы
1.1 Источники образцов
Исследуемое лекарственное средство представляло собой композицию 8 (Radix Panacis Quinquefolii, Ganoderma, порошок ферментированного Cordyceps sinensis, Flos Rosae Rugosae и Cordyceps), предоставленную Jiangzhong Pharmaceutical Co. Ltd. в виде композиционного порошка. 1 г сухого композиционного порошка являлся эквивалентным 13,78 г общих сырых лекарственных средств.
1.2 Лабораторные животные
Так же, как в примере 53.
1.3 Исходные реагенты
Так же, как в примере 53.
1.4 Исходные инструменты
Так же, как в примере 53.
2. Экспериментальные способы
2.1 Эффект на аллергическую бронхиальную астму у крыс, вызванную OVA
2.1.1 Распределение животных по группам
Крысы (половина из которых являлись самцами и другая половина - самками) случайным образом делили на две группы, т.е. группу холостого контроля из 10 животных и группу моделирования из 70 животных. После успешного моделирования крыс случайным образом делили на следующие группы: контрольная модельная группа, принимающая лекарственное средство положительная группа (группа дексаметазона) и получающие низкую, среднюю и высокую дозы композиции 8 группы, по 10 животных в каждой группе.
2.1.2 Установление животных моделей аллергической бронхиальной астмы у крыс
Так же, как в примере 53.
2.1.3 Режим дозирования
Суточная доза потребления исследуемого лекарственного средства, композиционного порошка композиции 8, рекомендованная для одного индивидуума, составляла 24 г сырого лекарственного средства/60 кг массы тела. Исходя из этого, расчетная суточная доза потребления для крысы составляла: получающая низкую дозу группа: 1,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая среднюю дозу группа: 2,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела; получающая высокую дозу группа: 6,0 г сырого лекарственного средства/кг массы тела, что составляло 2,5, 5 и 15-кратную суточную дозу потребления для человека, соответственно. Образцы получали в виде внутрижелудочных растворов в соответствующих концентрациях (7,26 мг сухого порошка/мл, 14,51 мг сухого порошка/мл, 43,54 мг сухого порошка/мл) для проведения экспериментов. Объем внутрижелудочного введения рассчитывали как 1,0 мл/100 г массы тела. Контрольной модельной группе внутрижелудочно вводили эквивалентный объем 0,9% физиологического солевого раствора за 30 минут до сенсибилизации; и получающей лекарственное средство положительной группе вводили дексаметазон в дозе, составляющей 0,5 мг/кг за 30 мин до каждой сенсибилизации. Каждой из получающих низкую, среднюю и высокую дозы композиции 8 групп внутрижелудочно вводили соответствующую дозу исследуемого лекарственного средства за 30 мин до каждой сенсибилизации. При этом группе холостого контроля интраперитонеально вводили с помощью инъекции эквивалентный объем 0,9% физиологического солевого раствора, сенсибилизировали путем его распыления или вводили его внутрижелудочно. Внутрижелудочное введение проводили один раз в день в течение 21 последовательного дня.
2.1.4 Регистрация латентного периода бронхиальной астмы у крыс
Так же, как в примере 53.
2.1.5 Измерения содержаний IL-4 и IFN-γ
Так же, как в примере 53.
2.1.6 Измерение содержания EOS в тканях легких
Так же, как в примере 53.
2.2 Эффект на аллергическую бронхиальную астму у морских свинок, вызванную газовой смесью Ach и His
2.2.1. Так же, как в 2.1.1.
2.2.2 Установление животных моделей аллергической бронхиальной астмы у морских свинок
Так же, как в примере 53.
2.2.3 Режим дозирования
Так же, как в 2.1.3.
2.2.4 Регистрация латентного периода бронхиальной астмы
Так же, как в 2.1.4.1.
2.2.5 Измерение IgE в сыворотке и BALF
Так же, как в примере 53.
2.3 Статистический метод
Так же, как в примере 53.
3. Результаты
3.1 Эффект композиции 8 на аллергическую бронхиальную астму у крысы, вызванную OVA
3.1.1 Эффект на латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у крыс
Результаты показаны в таблице 1 (см. в графической части). Латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у крыс из каждой смоделированной группы, квалифицировали без значимого различия между ними, что указывает на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у крыс в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах, являлись значительно пролонгированными (Р<0,05 или Р<0,01).
3.1.2 Эффект на содержание сывороточного IL-4 и IFN-γ у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 2 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля модельная группа показала значительно пониженное содержание сывороточного IFN-γ (Р<0,01), но значительно увеличенное содержание сывороточного IL-4 (Р<0,01), указывая на тяжелый дисбаланс соотношения IFN-γ/IL-4 во время манифестаций бронхиальной астмы. По сравнению с модельной группой все из группы дексаметазона и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства групп показали значительно пониженное содержание IL-4 (Р<0,05 или Р<0,01) и значительно увеличенное содержание IFN-γ (Р<0,05 или Р<0,01), указывая на то, что исследуемое лекарственное средство может корректировать несбалансированное соотношение IFN-γ/IL-4.
3.1.3 Эффект на содержание EOS в тканях легких у крыс
Экспериментальные результаты показаны в таблице 3 (см. в графической части). Количество EOS у крыс в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению модельной группой положительная контрольная группа и получающие среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группы показали значительно пониженное количество EOS (Р<0,01), указывая на то, что композиция 8 является эффективной в лечении аллергической бронхиальной астмы, вероятно, за счет снижения содержания EOS в тканях легких у крыс.
3.2 Эффект композиции 8 на аллергическую бронхиальную астму у морских свинок, вызванную газовой смесью Ach и His
3.2.1 Эффект на латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок
Результаты показаны в таблице 4 (см. в графической части). После моделирования латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок из каждой смоделированной группы, квалифицировали без значимого различия между ними, что указывает на успешное моделирование. После введения дозы и лечения по сравнению с контрольной модельной группой все латентные периоды бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах, являлись значительно пролонгированными (Р<0,05 или Р<0,01), указывая на то, что композиция 8 существенно улучшает симптомы бронхиальной астмы у морской свинки.
3.2.2 Эффект на общий IgE в сыворотке и BALF у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 5 (см. в графической части). Содержание общего IgE в сыворотке и BALF в модельной группе значительно увеличивалось (Р<0,01). По сравнению модельной группой все содержания общего IgE в сыворотке и BALF в группе дексаметазона и в получающих средние и высокие дозы исследуемого лекарственного средства группах значительно снижались (Р<0,01 или Р<0,05), указывая на то, что как дексаметазон, так и исследуемое лекарственное средство могут ингибировать аллергический воспалительный ответ в легких морских свинок и облегчать симптомы бронхиальной астмы.
3.2.3 Эффект на содержание EOS в тканях легких у морских свинок
Экспериментальные результаты показаны в таблице 6 (см. в графической части). По сравнению с группой холостого контроля количества EOS у морских свинок в модельной группе значительно увеличивались (Р<0,01). По сравнению модельной группой количества EOS в положительной контрольной группе и получающих среднюю и высокую дозы исследуемого лекарственного средства группах значительно уменьшались (Р<0,01), указывая на то, что композиция 8 является эффективной в лечении аллергической бронхиальной астмы, вероятно, за счет уменьшения содержания EOS в тканях легких у морских свинок.
4. Вывод
Экспериментальные исследования на животных демонстрируют, что композиция 8 способна значительно облегчать симптомы бронхиальной астмы у крыс и пролонгировать латентный период бронхиальной астмы, индуцированной у морских свинок в модельных группах; уменьшать содержание сывороточного IL-4, увеличивать содержание сывороточного IFN-γ и корректировать несбалансированное соотношение IFN-γ/IL-4 у крыс с бронхиальной астмой; уменьшать количество EOS в тканях легких крыс и морских свинок и ослаблять инфильтрацию EOS в участках воспаления; уменьшать содержание общего IgE в сыворотке и BALF у морских свинок и облегчать легочные воспалительные симптомы. Таким образом, композиция 8 считается эффективной в защите от аллергической бронхиальной астмы.
Claims (49)
1. Применение композиции в получении медицинской продукции или лекарственного средства для профилактики и лечения аллергических заболеваний, где активные ингредиенты указанной композиции состоят из водного и/или спиртового экстрактов следующих сырьевых материалов:
i) 5-200 частей по массе Ganoderma,
ii) 5-150 частей по массе Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng,
iii) 1-90 частей по массе порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или 1-120 частей по массе Cordyceps и
iv) 5-90 частей по массе Flos Rosae Rugosae.
2. Применение композиции в получении медицинской продукции или лекарственного средства для профилактики и лечения аллергических заболеваний, где активные ингредиенты указанной композиции состоят из водного и/или спиртового экстрактов следующих сырьевых материалов:
i) 5-200 частей по массе Ganoderma,
ii) 5-150 частей по массе Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng,
iii) 1-90 частей по массе порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или 1-120 частей по массе Cordyceps,
iv) 5-90 частей по массе Flos Rosae Rugosae и
v) одно или более из порошка из спор Ganoderma, масла из спор Ganoderma, Radix Pseudostellariae, Folium Ginseng, Radix Codonopsis и Radix Astragali.
3. Применение по п. 1, где сырьевые материалы представляют собой
i) 20-120 частей по массе Ganoderma,
ii) 10-90 частей по массе Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng,
iii) 3-60 частей по массе порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или 3-90 частей по массе Cordyceps и
iv) 10-60 частей по массе Flos Rosae Rugosae.
4. Применение по п. 1, где сырьевые материалы представляют собой
i) 40 частей по массе Ganoderma,
ii) 30 частей по массе Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng,
iii) 20 частей по массе порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или 6,7 частей по массе Cordyceps и
iv) 30 частей по массе Flos Rosae Rugosae.
5. Применение по п. 2, где v) представляет собой одно или более из 5-150 частей по массе порошка из спор Ganoderma, 1-90 частей по массе масла из спор Ganoderma, 10-400 частей по массе Radix Pseudostellariae, 1-120 частей по массе Folium Ginseng, 3-400 частей по массе Radix Codonopsis и 3-400 частей по массе Radix Astragali или любую их комбинацию.
6. Применение по п. 2, где v) представляет собой одно или более из 10-120 частей по массе порошка из спор Ganoderma, 10-60 частей по массе масла из спор Ganoderma, 20-200 частей по массе Radix Pseudostellariae, 20-90 частей по массе Folium Ginseng, 20-200 частей по массе Radix Codonopsis и 20-200 частей по массе Radix Astragali или любую их комбинацию.
7. Применение по п. 2, где v) представляет собой одно или более из 30 частей по массе порошка из спор Ganoderma, 20 частей по массе масла из спор Ganoderma, 40 частей по массе Radix Pseudostellariae, 30 частей по массе Folium Ginseng, 40 частей по массе Radix Codonopsis и 40 частей по массе Radix Astragali или любую их комбинацию.
8. Применение по п. 6, где сырьевые материалы i)-iv) представляют собой
i) 20-120 частей по массе Ganoderma,
ii) 10-90 частей по массе Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng,
iii) 3-60 частей по массе порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или 3-90 частей по массе Cordyceps и
iv) 10-60 частей по массе Flos Rosae Rugosae.
9. Применение по п. 7, где сырьевые материалы i)-iv) представляют собой
i) 40 частей по массе Ganoderma,
ii) 30 частей по массе Radix Panacis Quinquefolii или Radix Et Rhizoma Ginseng,
iii) 20 частей по массе порошка ферментированного Cordyceps sinensis и/или 6,7 частей по массе Cordyceps и
iv) 30 частей по массе Flos Rosae Rugosae.
10. Применение по любому из пп. 1-9, где аллергические заболевания представляют собой аллергический ринит, аллергический дерматит, аллергическую астму и/или крапивницу.
11. Применение по п. 1 или 2, где композицию получают с помощью следующих стадий:
1) взвешивание традиционных китайских лекарственных средств в качестве сырьевых материалов и
2) экстрагирование сырьевых материалов с обратным холодильником с помощью спирта или воды так, чтобы получить жидкий экстракт в качестве активного ингредиента, и добавление вспомогательного(ых) средства (средств) для получения различных лекарственных форм.
12. Применение по п. 1 или 2, где композицию получают с помощью следующих стадий:
1) взвешивание традиционных китайских лекарственных средств в качестве сырьевых материалов, добавление к ним метанола или этанола для проведения экстракции, извлечение метанола или этанола из экстракционной жидкости для получения экстракта I;
2) выпаривание метанола или этанола из остаточных лекарственных средств, добавление воды для проведения экстракции для получения экстракта II и
3) комбинирование экстракта I и экстракта II, проведение фильтрации, концентрирование фильтрата до соответствующего количества, добавление фармацевтически принятого(ых) вспомогательного(ых) средства (средств) для получения требуемого состава с помощью фармацевтически принятого способа.
13. Применение по п. 1 или 2, где композицию получают с помощью следующих стадий:
1) получение сырьевого материала: взвешивание традиционных китайских лекарственных средств в качестве сырьевых материалов;
2) экстракция и концентрация: замачивание сырьевых материалов на основе китайских лекарственных средств, обработанных на стадии 1) в воде, затем отваривание несколько раз путем нагревания, комбинирование жидких экстрактов для проведения фильтрации, концентрирование фильтрата до соответствующего количества, охлаждение концентрата и воздействие на него с помощью высокоскоростного центрифугирования для удаления примесей и хранение продукта до использования;
3) получение состава: подготовка концентрата, полученного на стадии 2), отдельно или вместе с медицински приемлемым(и) вспомогательным(и) средством(ами), в виде требуемого состава с помощью фармацевтически принятого способа;
4) в приведенной выше стадии 2) время замачивания составляет 20-60 мин, и после замачивания проводят отваривание 1-3 раза путем нагревания, причем каждое отваривание продолжается в течение 1-2 ч и оно характеризуется 6-13-кратным количеством добавленной воды.
14. Применение по любому одному из пп. 1-9, где композицию можно получить в любой лекарственной форме путем добавления к ней вспомогательного(ых) средства (средств) или вспомогательного вещества (веществ), которое(ые) является(ются) приемлемым(и) в медицинской продукции, лекарственных средствах или продуктах.
15. Применение по п. 14, где лекарственная форма представляет собой любую из таблетки, жидкости для перорального применения, гранулы, капсулы, электуария, драже с повышенной биодоступностью, драже, порошка, леденца, жидкого экстракта, экстракта, инъекции и сиропа.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210169736.2 | 2012-05-29 | ||
| CN201210169736.2A CN103446201B (zh) | 2012-05-29 | 2012-05-29 | 一种防治过敏性疾病的组合物及其制备方法 |
| PCT/CN2013/000619 WO2013177944A1 (zh) | 2012-05-29 | 2013-05-27 | 一种组合物在制备防治过敏性疾病的保健品或药品中的用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2014151157A RU2014151157A (ru) | 2016-07-20 |
| RU2646818C2 true RU2646818C2 (ru) | 2018-03-07 |
Family
ID=49672356
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014151157A RU2646818C2 (ru) | 2012-05-29 | 2013-05-27 | Применение композиции для получения изделий медицинского назначения или лекарственных средств для профилактики и лечения аллергических заболеваний |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US10086030B2 (ru) |
| EP (1) | EP2857030B1 (ru) |
| CN (1) | CN103446201B (ru) |
| ES (1) | ES2703173T3 (ru) |
| HK (1) | HK1206239A1 (ru) |
| RU (1) | RU2646818C2 (ru) |
| WO (1) | WO2013177944A1 (ru) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105560667A (zh) * | 2016-01-26 | 2016-05-11 | 于群 | 一种治疗荨麻疹的内服制剂及其制备方法 |
| CN106174513A (zh) * | 2016-07-22 | 2016-12-07 | 柳州名品科技有限公司 | 一种抗过敏保健食品 |
| CN108245490B (zh) * | 2017-12-27 | 2020-08-28 | 江西济民可信药业有限公司 | 一种含有发酵虫草菌粉(Cs-4)的固体分散体及其片剂制备方法 |
| CN114699520A (zh) * | 2022-04-14 | 2022-07-05 | 福建贝迪药业有限公司 | 一种太子参须提取物作为禽1型副黏病毒疫苗佐剂的应用 |
| CN115997833B (zh) * | 2022-12-01 | 2024-09-24 | 中国人民解放军陆军勤务学院 | 一种适用平原移居高原环境的女性冻干功能茶饮及其制备方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1539440A (zh) * | 2003-04-22 | 2004-10-27 | 黄益新 | 免疫增强药 |
| AU2007100050A4 (en) * | 2007-01-19 | 2007-02-15 | G & W Aust Pty Ltd | Herbal compositions and uses for vitality-boosting in aging and sub-optimal health |
| KR20090116873A (ko) * | 2008-05-08 | 2009-11-12 | 홍주농업양잠조합 | 기능성 분말을 이용한 어린이 놀이용 교육소재 |
| CN102205055A (zh) * | 2011-06-09 | 2011-10-05 | 王明全 | 一种肌肤修复用药物及制备方法 |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1225262A (zh) * | 1998-12-09 | 1999-08-11 | 延边香料研究所 | 一种含有紫杉醇的抗癌药物 |
| KR100933387B1 (ko) | 2000-04-24 | 2009-12-22 | 비자 인터내셔날 써비스 어쏘시에이션 | 온라인 지불인 인증 서비스 |
| CN1166384C (zh) * | 2000-12-26 | 2004-09-15 | 高守荣 | 止咳平喘药剂 |
| CN1155401C (zh) * | 2002-06-24 | 2004-06-30 | 李世臣 | 提高肾功能免疫力的饮料 |
| CN100448466C (zh) | 2002-12-25 | 2009-01-07 | 广东东方神草药业有限公司 | 预防和辅助治疗癌症的药物及其制备方法 |
| CN101292742B (zh) | 2008-06-07 | 2012-05-30 | 江中药业股份有限公司 | 一种增强人体免疫功能的保健食品及其制备工艺 |
| US8986750B2 (en) * | 2010-09-17 | 2015-03-24 | Jiangzhong Pharmaceutical Co., Ltd. | Use of a traditional chinese medicine composition for manufacturing a health food or medicament for preventing and alleviating physical fatigue |
| CN102228252A (zh) * | 2010-09-17 | 2011-11-02 | 江中药业股份有限公司 | 中药组合物在制备提高缺氧耐受力保健食品及药品中的应用 |
| CN102000129A (zh) * | 2010-11-16 | 2011-04-06 | 郭景龙 | 一种具有增强免疫力作用的药物组合物 |
| CN102205005A (zh) | 2011-05-24 | 2011-10-05 | 山东省千佛山医院 | 一种治疗糖尿病肾病的中药制剂 |
| CN102274258A (zh) * | 2011-07-25 | 2011-12-14 | 江中药业股份有限公司 | 一种增强人体免疫功能的中药组合物 |
| CN102274259A (zh) * | 2011-07-25 | 2011-12-14 | 江中药业股份有限公司 | 一种增强人体免疫功能的中药组合物 |
| CN102697868A (zh) | 2012-01-04 | 2012-10-03 | 陈玉堂 | 一种能调节免疫力治愈红斑狼疮,荨麻疹,银屑病的药物 |
| CN109512925A (zh) * | 2012-09-13 | 2019-03-26 | 江中药业股份有限公司 | 防治过敏性疾病的组合物及其应用 |
-
2012
- 2012-05-29 CN CN201210169736.2A patent/CN103446201B/zh active Active
-
2013
- 2013-05-27 RU RU2014151157A patent/RU2646818C2/ru active
- 2013-05-27 WO PCT/CN2013/000619 patent/WO2013177944A1/zh active Application Filing
- 2013-05-27 ES ES13796431T patent/ES2703173T3/es active Active
- 2013-05-27 EP EP13796431.8A patent/EP2857030B1/en active Active
- 2013-05-27 US US14/403,986 patent/US10086030B2/en active Active
-
2015
- 2015-07-15 HK HK15106762.6A patent/HK1206239A1/xx unknown
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1539440A (zh) * | 2003-04-22 | 2004-10-27 | 黄益新 | 免疫增强药 |
| AU2007100050A4 (en) * | 2007-01-19 | 2007-02-15 | G & W Aust Pty Ltd | Herbal compositions and uses for vitality-boosting in aging and sub-optimal health |
| KR20090116873A (ko) * | 2008-05-08 | 2009-11-12 | 홍주농업양잠조합 | 기능성 분말을 이용한 어린이 놀이용 교육소재 |
| CN102205055A (zh) * | 2011-06-09 | 2011-10-05 | 王明全 | 一种肌肤修复用药物及制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103446201A (zh) | 2013-12-18 |
| HK1206239A1 (en) | 2016-01-08 |
| CN103446201B (zh) | 2017-11-24 |
| EP2857030A4 (en) | 2015-11-25 |
| ES2703173T3 (es) | 2019-03-07 |
| EP2857030B1 (en) | 2018-10-10 |
| EP2857030A1 (en) | 2015-04-08 |
| WO2013177944A1 (zh) | 2013-12-05 |
| US20150147351A1 (en) | 2015-05-28 |
| US10086030B2 (en) | 2018-10-02 |
| RU2014151157A (ru) | 2016-07-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102308988B (zh) | 一种具有增强人体免疫功能的石斛保健品 | |
| CN111789918B (zh) | 一种抗冠状病毒的中药组合物及其制备方法和用途 | |
| RU2646818C2 (ru) | Применение композиции для получения изделий медицинского назначения или лекарственных средств для профилактики и лечения аллергических заболеваний | |
| CN101310751A (zh) | 一种具有益气养血作用的中药组合物及其制备方法和质量控制方法 | |
| CN103053733A (zh) | 一种具有益气补血、改善微循环、嫩肤养颜的东方美人茶及制备方法 | |
| CN104042654A (zh) | 一种组合物在制备抗hpv保健品或药品或产品中的应用 | |
| CN103479963A (zh) | 一种治疗类风湿关节炎的中药胶囊及其制备方法 | |
| CN1706463A (zh) | 一种治疗妇科习惯性流产和先兆性流产疾病的药物 | |
| CN103479693A (zh) | 一种药物组合物及用途和其制备方法 | |
| RU2643919C2 (ru) | КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ СПИДа И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ | |
| CN104189349B (zh) | 一种治疗月经量少的中药组合物 | |
| CN103520318A (zh) | 一种增强免疫功能的中药组合物及其制备方法 | |
| CN106727898B (zh) | 一种防治阿尔茨海默病的药物组合物及其制备方法 | |
| CN115252698A (zh) | 一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物及其制备方法与含量控制方法 | |
| CN110193034A (zh) | 一种杜仲叶提取物及其在缓解体力疲劳产品中的应用 | |
| RU2642256C2 (ru) | Применение композиции в получении медицинской продукции или лекарственного средства для профилактики и лечения вызванной лучевой и химиотерапией лейкопении | |
| CN104042895A (zh) | 一种治疗系统性红斑狼疮的中药组合物及其用途 | |
| CN104027389B (zh) | 一种抗过敏的中药复方提取物及其制备方法和应用 | |
| CN103816244B (zh) | 用于改善睡眠的保健品及其制备方法与应用 | |
| CN107281235B (zh) | 腊梅属植物抗流感病毒的用途 | |
| CN109157644A (zh) | 一种健脾养肝的中药组合物及其制备方法 | |
| CN103230003A (zh) | 一种具有增强免疫力功能的保健食品及其制备方法 | |
| CN114259523B (zh) | 一种中药组合物及其在制备治疗咳嗽变异性哮喘的药物中的用途 | |
| CN107927745B (zh) | 一种中药保健食品组合物，其制备方法及其制剂 | |
| KR101991914B1 (ko) | 에스트로겐 활성 효율이 우수한 다시마 경옥고 및 이의 제조방법 |