CN103520318A - 一种增强免疫功能的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种增强免疫功能的中药组合物及其制备方法。组合物由下述重量份数的中药制成：黄芪25-50份、葛根15-25份、西洋参2-5份、灵芝2-5份、三七2-5份、山楂15-25份。本发明将黄芪、葛根、山楂加水煎煮，保证了药物的有效性；西洋参、三七、灵芝作为名贵药材，为了保证其有效成分在制备过程中不丢失，粉碎后直接加入制剂，充分保证了三味药物的有效成分被充分吸收，各药物功效产生协同增效作用，从而能够明显增强免疫功能，保证了本品增强免疫的有效性。

Description

一种增强免疫功能的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种中药组合物及其制备方法，尤其涉及一种增强免疫功能的中药组合物及其制备方法。

背景技术

免疫力是机体抵抗外来侵袭，维护体内环境稳定性的能力。空气中充满了各种各样的微生物：细菌、病毒、支原体、衣原体、真菌等等。在人体免疫力不足的情况下，它们都可以成为感早班的病原体。虽然人体对不同的病原体会产生相应的抗体，以抵御再次感染，但抗体具有专一性和时限性，比如链球菌抗体只能在较短时期内保护机体不受链球菌的再次侵犯，也并不能抵御其他病毒的感染。免疫力低下的人根本无法抵御感冒病毒的侵袭，这才是他频繁感冒的真正原因。

各种原因使免疫系统不能正常发挥保护作用，在此情况下，极易招致细菌、病毒、真菌等感染，因此免疫力低下最直接的表现就是容易生病。因经常患病，加重了机体的消耗，所以一般有体质虚弱、营养不良、精神萎靡、疲乏无力、食欲降低、睡眠障碍等表现。当人体免疫功能失调，或者免疫系统不健全时，容易出现感冒反复发作、扁桃体炎反复发作、哮喘反复发作、支气管炎反复发作、肺炎反复发作、腹泻反复发作。

中医讲究阴平阳秘，阴阳调和，指身体具有较好的抵抗防御能力。《医略六书》：酒资湿热，得气化行，自可免于酒病焉。今气虚不能自运其湿热，故以黄芪补气，即用葛根解肌。二味成方，能使酒湿内从气化而消，外从元府而泄，安有病酒之患乎？此壮气解表之剂，为虚人伤酒恶寒之专方。该方主要用于嗜酒伤身治疗和预防。

增强免疫力传统方法是加强锻炼身体，增强体质抵抗力。西医是注射免疫疫苗，主要针对俗称的“持久免疫”的麻疹、天花、水痘等外，日常感冒是很难预防的。中医采用的是调理身体机能，使机体能够抵御外来细菌或病毒感染。

随着社会经济高速发展，人们生活节凑加快，加上人类社会对空间的不断开发，难免的带回人类无以认知的病毒和细菌；工业发展速度逐年加快，环境污染给人类体质带来难以承受的考验，因此，出现了很多疾病年轻化。安全、有效增强体质的药物和保健食品社会需求愈来愈强烈。

发明内容

本发明的目的是提供一种增强免疫功能的中药组合物及其制备方法。使用该中药组合物不仅具有强肾、润肺、益精气、理诸虚的功效，而且还能明显增强免疫功能、改善使用者的中医证候、减轻全身不适症状。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种增强免疫功能的中药组合物，组合物由下述重量份数的中药制成：黄芪25-50份、葛根15-25份、西洋参2-5份、灵芝2-5份、三七2-5份、山楂15-25份。

最优选本发明的中药组合物由下述重量份数的中药制成：黄芪30份、葛根15份、西洋参3份、灵芝2份、三七2份、山楂15份。

本发明主要有效成分可溶于水，综合考虑组合物中药物有效成分的性质以及本方在临床使用研究结果，设计了以下制备工艺流程：

（1）按本发明中药组合物各组合重量份数称取各组分；

（2）将西洋参、三七、灵芝分别在60-80℃温度下干燥灭菌后粉碎，过筛备用；

（3）将黄芪、葛根和山楂，加水提取2次，每次加水量为三味药物总重量的10倍，每次1.5-3小时；

（4）过滤，合并滤液，在57-65℃，0.03－0.1MPa条件下减压浓缩至相对密度为1.0-1.3的浸膏；

（5）浸膏加入1.5-2.2倍体积的无水乙醇，放置过夜，过滤，回收乙醇，在57-65℃，0.03－0.1MPa条件下浓缩至得到相对密度为1.25-1.45的稠膏；

（6）按配方比例将西洋参粉、三七粉、灵芝粉与黄芪、葛根及山楂的提取浸膏投入混合器内，搅拌混合均匀；

（7）将混合后的物料在干燥器中干燥，干燥温度控制在55-80℃；

（8）将干燥后的物料粉碎，过80目筛；将粉碎后的细粉置混合器内混合均匀，以85%浓度的乙醇制粒，干燥；加入颗粒重量2-8%的硅胶，混合均匀，得到所述组合物成品。

可以将上述步骤制成的组合物成品用胶囊填充机填装胶囊，每粒胶囊组合物成品0.4克。填充胶囊后用抛光机清除粘附在胶囊表面的细粉，筛选去不合格品，并经检验合格后包装。

本发明药物的活性组分可以加入制备不同剂型时所需的各种常规辅料，如崩解剂、润滑剂、粘合剂等以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用口服剂型，如丸剂、散剂、片剂、胶囊剂、口服液等。

本品以黄芪葛根汤为基础，加上西洋参、三七、灵芝和山楂，组成复方制剂。黄芪补气托表，葛根生津解肌，合用能益气解表，为补气升气药对。灵芝、西洋参补气生津，止咳定喘，与黄芪、葛根配伍，增强机体免疫力。山楂消食健胃，行气散瘀，化浊降脂，与三七搭配，降低血液粘稠，增强三七化瘀功能，与黄芪、葛根搭配，一补一行气。人参皂苷具有增强免疫力的功效，葛根素具有提高免疫，增强心肌收缩力，保护心肌细胞，降低血压，抗血小板聚集等作用。将这些药物组合使得各药物功效产生协同增效作用，从而能够明显增强免疫功能、改善使用者的中医证候，实现强肾、润肺、益精气、理诸虚的功效。

黄芪-葛根：属于中医理论配伍中君药，《证治汇补》中收载的黄芪葛根汤，黄芪补气托表，葛根生津解肌，合用能益气解表，为补气升气药对。原方黄芪1两，葛根5钱，主要用于酒郁，内热恶寒。《医略六书》：酒资湿热，得气化行，自可免于酒病焉。今气虚不能自运其湿热，故以黄耆补气，即用葛根解肌。二味成方，能使酒湿内从气化而消，外从元府而泄，安有病酒之患乎？此壮气解表之剂，为虚人伤酒恶寒之专方。因本品属于复方，进过加工制成胶囊等剂型，服用较方便，开发成保健品，长期食用，黄芪参照药典用量下限的1/3。《中国药典》2010年版一部规定成人黄芪一日用量为9-30g；本品配方750g，制成1000粒，每日4粒，折合生药为3g，为药典用量的1/3.根据药对，葛根药量为黄芪的1/2，即一日用量为1.5g。

山楂：性微温，味酸、甘。归脾、胃、肝经。山楂中含有熊果酸、黄酮类、皂苷、糖类、有机酸类、色素等多种活性成分，消食健胃，行气散瘀，化浊降脂。

山楂及山楂黄酮能显著降低血清和肝脏丙二醛(MDA)含量，增强红细胞和肝脏超氧化物歧化酶(SOD)的活性，同时可增加全血谷胱甘肽还原酶(GSH—Px)的活性，并对实验性动脉粥样硬化有治疗作用。山楂及山楂黄酮还能显著升高大鼠低密度脂蛋白受体(LDLR)蛋白水平，显著增加大鼠肝脏LDLR数目。说明山楂及山楂黄酮可通过调节大鼠肝脏LDLR转录水平和提高抗氧化能力，从而抑制脂质过氧化物，预防脂质代谢紊乱。

三七：三七味甘、微苦，性温，归肝、胃、心、小肠经，具有止血、散瘀、消肿、止痛、补虚、强壮等功效，主治咯血、衄血、外伤出血、跌打肿痛等，近年来用于治疗冠心病、糖尿病、抗心绞痛、抗血栓等。皂苷类成分是三七主要的生理活性成分。三七具有在血液系统、心血管系统、神经系统、免疫系统、物质代谢系统，以及抗炎、抗衰老、抗肿瘤等多方面的生理活性。

三七具有止血、活血的作用同时还具有补血作用。三七可增加机体单核巨噬细胞系统功能，促进免疫器官胸腺和脾增重，增强机体的细胞免疫及体液免疫功能。三七可增加机体单核巨噬细胞系统功能，促进免疫器官胸腺和脾增重，增强机体的细胞免疫及体液免疫功能。三七具有免疫调节剂的作用。

机体在有氧代谢过程中，不断产生氧自由基，促使细胞膜脂质中的不饱和脂肪酸过氧化，生成过氧化物LPO，导致生物膜功能障碍，促进多种疾病的发生及衰老。三七皂苷Rg1通过抗氧化作用和抑制胞内钙超载，从而抑制神经细胞凋亡和前炎因子增多，延缓衰老。

灵芝：《神农本草经》把灵芝列为上品，谓紫芝“主耳聋，利关节，保神益精，坚筋骨，好颜色，久服轻身不老延年”，谓赤芝“主胸中结，益心气，补中增智慧不忘，久食轻身不老，延年成仙”。灵芝作为拥有数千年药用历史的中国传统珍贵药材,具备很高的药用价值，以具有抗肿瘤、调节免疫、抗衰老、保肝、降血糖、保护心脏、改善血液循环、抗炎镇痛等广泛的药理作用，且无明显不良反应等优势被广泛地应用于临床医学。

灵芝能提高红细胞的变形能力和降低血小板的聚集性能。灵芝对提高机体免疫功能有着十分良好的效果。灵芝能促进淋巴细胞增殖，提高巨噬细胞、NK细胞、T细胞的吞噬能力和杀伤力，灵芝发酵浓缩液显著抑制卵蛋白和破伤风类毒素对脉鼠肺组织的致敏作用。

灵芝可提高机体耐缺氧能力、提高血液供氧能力、提高动筋脉氧差和降低机体静止状态下的耗氧量。

西洋参：西洋参具有滋阴补气，宁神益智及清热生津，降火消暑的双重功效。古语云:“西洋参性凉而补，凡欲用人参而不受人参之温者皆可用之”。故补而不燥是西洋参的特别之处。其主要作用有：强化心肌及增强心脏之活动能力；强壮中枢神经，安定身心并恢复疲劳，有镇静及解酒作用，增强记忆能力，对老人痴呆症有显著功效；对血压有调整作用，使暂时性或持久性血压下降.抑制动脉硬化并促进红血球生长，增加血色素的份量；能调节胰岛之分泌，因此对糖尿病有功效；对肝脏有调节副肾上腺素之分泌，促进新陈代谢的作用；能增强体力并对运动员具极大助益；抑制癌细胞生长，增加免疫功能；助长消化，对慢性胃病和肠胃衰弱有助效。

三七灵芝胶囊含有人体所需的21种氨基酸及蛋白质，人参皂苷，灵芝多糖，三七多糖，三七皂苷，黄铜类化合物，三萜类化合物，维生素Bl、B2、Bl2、E、K，稀有矿物质，必需脂肪酸及固醇类。这些综合性的营养素使三七灵芝胶囊具有抗疲劳、增强体能、增加免疫力等功效。

本发明组合物采用三七、灵芝、西洋参、黄芪、山楂、葛根为原料，将黄芪、葛根和山楂以水提取除杂，将西洋参、三七、灵芝直接干燥粉碎利用，并加入适量的二氧化硅作助流剂制成胶囊等剂型。其原药材与辅料对功效成分无影响，制成胶囊囊壳对组合物起保护作用。对产品安全性、功能性无影响。

黄芪葛根汤主要用过煎服，将黄芪、葛根、山楂加水煎煮，忠实于原汤药的制备方法，保证了药物的有效性。西洋参、三七、灵芝作为名贵药材，为了保证其有效成分在制备过程中不丢失，故打粉直接加入制剂，充分保证了三味药物的有效成分被充分吸收，各药物功效产生协同增效作用，从而能够明显增强免疫功能，保证了本品增强免疫的有效性。

本发明以黄芪葛根汤为基础，活血化瘀三七，补气养阴生津的西洋参，补气安神、止咳平喘的灵芝，增强原处方升、补功能，拓展原处方运用范围。

本品采用黄芪与葛根搭配为主药，利用黄芪补气升阳，固表止汗，行滞通痹，托毒生肌的功效，与葛根配伍，增强了痛经活络之功效，配以西洋参，补气养阴、生津，一托一补，三七活血化瘀，使机体运化功能平和。现代研究，黄芪中具有免疫活性的主要成分有黄芪多糖和皂苷。多糖的主要作用是免疫调节，皂苷以抗炎镇痛为主。灵芝多糖不仅提高抗原递呈细胞、单核-吞噬细胞系统活性，而且增加细胞免疫和体液免疫功能，作用位点涉及免疫前体细胞增生、分化到免疫细胞的各个过程。三七总皂苷壳提高腹腔巨噬细胞的吞噬活性，对补体活化具有调理和改善作用，有试验证明，三七总皂苷对小鼠非特异性免疫功能和红细胞免疫功能具有明显促进作用。

本品种所有成分系国家食品药品监督管理局公布的可用于保健食品的原料,该品种具有强肾、润肺、益精气、理诸虚的功效，经实验和临床研究证明可广泛用于预防中老年人体质虚弱，免疫功能低下等征。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进一步说明，具体实施方式是对本发明原理的进一步说明，不以任何方式限制本发明，与本发明相同或类似技术均没有超出本发明保护的范围。

实施例1

1、药材干燥粉碎：取西洋参1.5kg、三七1.5kg、灵芝1.0kg，药材采用干燥灭菌方式进行干燥灭菌，干燥温度60-80℃，将干燥后的物料置粉碎机中粉碎，过80目筛。

2、提取：称取黄芪15kg、葛根7.5kg及山楂7.5kg，用10倍重量的水提取2次，每次1.5-3小时。

3、浓缩：过滤，合并滤液，减压回收至浸膏相对密度为1.0-1.3浸膏，减压回收温度57-65℃，压力0.03－0.1MPa。

4、醇沉：浸膏加入1.5-2.2倍体积的无水乙醇，放置过夜，过滤，回收乙醇，回收温度57-65℃，压力0.03－0.1MPa，浓缩至相对密度为1.25-1.45的稠膏。

5、配料工艺：按配方比例将西洋参粉、三七粉、灵芝粉与黄芪、葛根及山楂的提取浸膏投入混合器内，混合5-15min，确保均匀。

6、干燥工艺：将混合后的物料置干燥器中干燥，温度控制在55-80℃干燥。

7、粉碎过筛：将干燥后的物料置粉碎机中粉碎，过80目筛。

8、制粒工艺：将粉碎后的细粉置混合器内，混合25-40min，确保均匀，以85%浓度的乙醇制粒。

9、颗粒总混：将干燥整粒后的颗粒，混入2-8%重量比例的微粉硅胶，混合均匀。

10、填充胶囊：用胶囊填充机填装胶囊，每粒胶囊内容物0.4克，填充期间应注意监测产品装量差异，控制在差异范围内。

11、抛光、筛选：用抛光机清除粘附在胶囊表面的细粉，筛选去不合格品。

12、检验：按照企业标准进行检验。

每批颗粒制粒完成后，加入外加物料进行总混，总混后在5个不同的部位取样，作性状、水分、粒度溶化性及主药含量的检测。验证结果如下表1：

实施例2

与实施例1各步骤相同，不同是各成分组成按下列重量份数：黄芪25份、葛根15份、西洋参2份、灵芝2份、三七2份、山楂15份。

实施例3

与实施例1各步骤相同，不同是各成分组成按下列重量份数：黄芪50份、葛根25份、西洋参5份、灵芝5份、三七5份、山楂25份。

动物实验

四川省疾病预防控制中心对该产品的功能进行了研究，取上述制备的样品连续灌胃小鼠30天，对小鼠体重、脏器/体重比值无明显影响；三个剂量组动物的足跖肿胀度与阴性对照组相比，中、高剂量组有显著性差异（P＜0.05，P＜0.01），对小鼠细胞免疫试验结果阳性；三个剂量组动物的溶血空斑数与阴性对照组相比，中、高剂量组有显著性差异（P＜0.05，P＜0.01），对小鼠体液免疫试验结果阳性；对小鼠单核—巨噬细胞吞噬功能试验结果阴性；对小鼠NK细胞活性试验结果阴性。由此可见，本发明组合物对动物具有增强免疫力的功能。

1.材料和方法

1.1样品：采用实施例1制备的组合物胶囊剂，成人每日推荐量为1600mg/60kg.BW，试验时用蒸馏水作溶剂配制受试物。

1.2试验动物：由成都生物制品研究所有限责任公司提供的昆明种小鼠160只，全雌，体重18－22g，生产许可证号为SCXK(川)2011－08SPF级；试验动物房为屏障系统，使用许可证号为SYXK(川)2011－043。温度20-25℃，相对湿度40—70%。饲料生产单位：四川省医学科学院四川省人民医院实验动物研究所，生产许可证号为SCXK(川)2010－001。

1.3剂量选择：受试物设267mg/kg.BW、533mg/kg.BW、800mg/kg.BW三个剂量组（分别相当于人体推荐摄入量的10倍、20倍、30倍），分别称取6.67g、13.33g、20g受试物加蒸馏水至250ml混匀，冷藏保存，用完再配，另设蒸馏水阴性对照组，每组40只动物。分为免疫一组、二组、三组、四组，其中一组用于小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验；二组用于NK细胞活性测定及淋巴细胞转化实验；三组用于抗体生成细胞实验、血清溶血素测定和迟发性变态反应实验；四组用于小鼠碳廓清实验。小鼠按10ml/kg.BW体重一次经口灌胃，至少连续给予30天，每周称一次体重，调整灌胃体积。

1.4主要仪器和试剂：100μl微量注射器、二氧化碳培养箱、电子分析天平、723分光光度仪、2010型酶标仪、离心机、手术器械、SRBC、Hank’s液、DNFB、S_A缓冲液、琼脂糖、印度墨汁、Na₂CO₃、RPMI1640等。

1.5试验方法

1.5.1脏器/体重比值测定：试验结束时称体重后处死动物，取脾脏和胸腺在电子分析天平上称重，并计算脏/体比值。

1.5.2迟发型变态反应（DTH）（足跖增厚法）：给小鼠腹腔注射2%压积SRBC（0.2ml/每鼠）致敏4天后，测量左后足跖厚度，然后在测量部位皮下注射20%（v/v）SRBC（20μl/每鼠），于注射后24h测量左后足跖厚度，同一部位测量三次，取平均值，以攻击前后足跖厚度差值（足跖肿胀度）来表示DTH的程度。

1.5.3ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验（MTT法）：无菌取脾，在装有无菌Hank’s液平皿中，用镊子将脾磨碎，制成细胞悬液，200目筛过滤，用Hank’s液洗2次，每次离心10min（1000r/min），然后取沉淀悬浮于1mL的完全培养液中，台酚兰染色计数（应在95%以上）。将细胞浓度调整为3×10⁶个/ml，然后将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1ml，一孔加75μlConA液，另一孔作对照，置5%CO₂孵箱37℃培养72h。培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液0.7ml，加入0.7ml不含小牛血清的RPMI1640培养液，同时加入MTT（5mg/ml）50μl/孔继续培养4h，培养结束后，每孔加入1ml酸性异丙醇，使结晶完全溶解，然后分装到96孔培养板中，每个孔做3个平行孔，用2010型酶标仪，以570nm波长测定光密度。

1.5.4抗体生成细胞检测（Jerne改良玻片法）：每只小鼠腹腔注射2%压积SRBC0.2ml，将免疫5天半后的小鼠颈椎脱臼处死，取出脾脏放在盛有Hank’s液的平皿内，磨碎脾脏，制成细胞悬液，经200目筛网过滤，离心（1000r/min）10min，用Hank’s液洗2遍，最后将细胞悬浮在5mlRPMI1640培养液中，台酚兰染色计数（应在95%以上），并将细胞浓度调整为5×10⁶个/ml，制成脾细胞悬液。将琼脂糖配制成1%水溶液，水浴煮30min，与等量双倍浓度Hank’s液混合，分装小试管，每管0.5ml，再向管内加10%（用SA缓冲液配制）压积SRBC50μl，脾细胞悬液各20μl做两个平行样，迅速混匀后，倾倒于琼脂糖薄层玻片上，待琼脂凝固后，将玻片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培养箱中孵育1.5h，然后将补体加入到玻片架凹槽内，继续温育1.5h，计数溶血空斑数。补体制备是采集豚鼠血，分离出血清（至少5只豚鼠的混合血清），将1ml压积SRBC加入到5ml豚鼠血清中，4℃冰箱放置30min，经常振荡，离心取上清，分装，-70℃保存。用时以SA缓冲液按1:15稀释。

1.5.5血清溶血素测定（血凝法）：每只小鼠腹腔注射2%SRBC0.2ml免疫，继续灌胃5天后，摘除眼球取血于离心管内，放置1小时，剥离，2000r/min离心10分钟，收集血清，用生理盐水将血清作倍比稀释，每份稀释12孔，将不同稀释度的血清置于血凝板中，每孔100μl，再加入0.5%SRBC悬液100μl，混匀，置湿盒37℃3小时后观察结果，记录每孔的凝集程度。计算抗体积数。

1.5.6小鼠碳廓清试验：于小鼠尾静脉注射用5倍生理盐水稀释的印度墨汁，按0.1ml/10g墨汁注入后立即计时，于注入墨汁后第2、10min分别从内眦静脉丛取血20μl，加到2mlNa₂CO₃溶液中，以Na₂CO₃溶液作空白对照，用723分光光度计在600nm处测定光密度值。取血后将小鼠处死，取肝、脾称重，计算吞噬指数。

1.5.7小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验（半体内法）：每只小鼠腹腔注射用NS洗涤3次后的20%鸡红细胞悬液1ml，30分钟后，颈椎脱臼处死，将其固定在鼠板上，正中剪开腹壁皮肤，经腹腔注入生理盐水2ml，转动鼠板1分钟，吸出腹腔洗液1ml，平均滴于2张载玻片上，置湿盒37℃30分钟，取出在生理盐水漂洗、晾干、固定，4%GiemsaPBS染色3分钟，蒸馏水漂洗凉干，镜检。计算吞噬百分率及吞噬指数。

1.5.8NK细胞活性测定（乳酸脱氢酶LDH测定法）：颈椎脱臼处死动物，取出脾脏，撕碎，过200目筛网后，用Hank，s液洗3次，每次1000r/min离心10min，取细胞浆，灭菌水裂解红细胞，台酚兰染色计数（应在95%以上），用完全1640培养液配成2×10⁷个/ml细胞悬液。将各只小鼠的细胞悬液取300μl分置于96孔培养板中，每孔100μl，每孔加靶细胞（YAC-1细胞，4×10⁵个/ml）100μl，同时做靶细胞自然释放孔（靶细胞100μl+培养液100μl）及最大释放孔（靶细胞100μl+2.5%Triton100μl）各3孔，37℃5%CO₂培养4小时，取出1500r/min离心5min。将各孔上清液100μl置于另一培养板中，每孔再加入100μl基质液，10分钟后加1mol/LHCL30μl终止反应，在490nm处测定OD值，计算NK细胞活性率。

1.6试验数据统计：试验数据采用SPSS10.0forWindows软件包处理。对照组与剂量组的数据经方差齐性检验，方差齐，进行方差分析，如P值小于0.05，则用Dunnett法进行两两比较；若方差不齐，则进行数据转换，仍不齐，改用秩和检验，如P值小于0.05，则用Dunnett’sT3法进行两两比较。

2.结果

2.1本发明组合物对小鼠体重的影响

表2各组小鼠的初始体重

表3各组小鼠的中期体重

表4各组小鼠的结束体重

表5本发明组合物对小鼠体重增重的影响

由表2-5可见，免疫一组、免疫二组、免疫三组及免疫四组动物的初始体重与阴性对照组相比，经方差齐性检验，方差齐（P>0.05），且方差分析结果（P>0.05），说明各组动物与阴性对照组之间的初始体重是均衡的。免疫一、二、三、四组各剂量组动物试验中期、末期的体重以及试验期间小鼠体重的增长与阴性对照组相比较均无显著性差异（P>0.05）。

2.2本发明组合物对小鼠脏器/体重比值的影响

表6对小鼠脏器/体重比值的影响

由表6可见，连续灌胃30天后，三个剂量组动物的脾脏/体重比值、胸腺/体重比值与阴性对照组相比，经统计学处理，均无显著性差异（P>0.05）。

2.3本发明组合物对小鼠细胞免疫功能的影响

2.3.1不发明组合物对小鼠迟发型变态反应（DTH）的影响

表7对小鼠迟发型变态反应（DTH）的影响

由表7可见，连续灌胃30天后，三个剂量组动物的足跖肿胀度与阴性对照组相比，经统计学处理，中、高剂量组有显著性差异（P＜0.05，P＜0.01）。

2.3.2本发明组合物对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验的影响

表8对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验的影响

由表8可见，连续灌胃小鼠30天后，三个剂量组动物的淋巴细胞增殖能力与阴性对照组相比，经统计学处理，无显著性差异（P>0.05）。

本发明组合物对小鼠细胞免疫试验结果阳性。

2.4本发明组合物对小鼠体液免疫的影响

2.4.1本发明组合物对抗体生成细胞的影响

表9对小鼠抗体生成细胞的影响

由表9可见，连续灌胃30天后，三个剂量组动物的溶血空斑数与阴性对照组相比，经统计学处理，中、高剂量组有显著性差异（P＜0.05，P＜0.01）。

2.4.2本发明组合物对小鼠血清溶血素的影响

表10对小鼠血清溶血素的影响

由表10可见，连续灌胃30天后，三个剂量组动物的抗体积数与阴性对照组10相比，经统计学处理，无显著性差异（P>0.05）。

本发明组合物对小鼠体液免疫试验结果阳性。

2.5本发明组合物对小鼠单核—巨噬细胞吞噬功能的影响

2.5.1本发明组合物对小鼠单核—巨噬细胞碳廓清功能的影响

表11对小鼠单核—巨噬细胞碳廓清功能的影响

由表11可见，连续灌胃30天后，三个剂量组动物的碳廓清能力与阴性对照组相比，经统计学处理，无显著性差异（P>0.05）。

2.5.2本发明组合物对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响

表12对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响

由表12可见，连续灌胃30天后，三个剂量组动物的吞噬率和吞噬指数与阴性对照组相比，经统计学处理，无显著性差异（P＞0.05）。

本发明组合物对小鼠单核—巨噬细胞吞噬功能试验结果阴性。

2.6本发明组合物对小鼠NK细胞活性的影响

表13对小鼠NK细胞活性的影响

由表13可见，连续灌胃30天后，三个剂量组动物NK细胞活性与阴性对照组相比，经统计学处理，无显著性差异（P＞0.05）。

本发明组合物对小鼠NK细胞活性试验结果阴性。

3.结论

本发明组合物连续灌胃小鼠30天后，对小鼠的体重、脏器/体重比值无明显影响，对小鼠的单核—巨噬细胞吞噬功能试验结果阴性，对小鼠的NK细胞活性试验结果阴性；对小鼠的细胞免疫试验结果阳性，对小鼠的体液免疫试验结果阳性。由此可见：本发明组合物对动物具有增强免疫力的功能。

Claims (4)

1.一种增强免疫功能的中药组合物，其特征在于，组合物由下述重量份数的中药制成：黄芪25-50份、葛根15-25份、西洋参2-5份、灵芝2-5份、三七2-5份、山楂15-25份。

2.根据权利要求1所述的增强免疫功能的中药组合物，其特征在于，组合物由下述重量份数的中药制成：黄芪30份、葛根15份、西洋参3份、灵芝2份、三七2份、山楂15份。

3.上述权利要求1或权利要求2中药组合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）按权利要求1或权利要求2所述组合重量份数取各组分；

（2）将西洋参、三七、灵芝分别在60-80℃温度下干燥灭菌后粉碎，过筛备用；

（3）将黄芪、葛根和山楂，加水提取2次，每次加水量为三味药物总重量的10倍，每次1.5-3小时；

（4）过滤，合并滤液，在57-65℃，0.03－0.1MPa条件下减压浓缩至相对密度为1.0-1.3的浸膏；

（5）加入1.5-2.2倍浸膏体积的无水乙醇，放置过夜，过滤，回收乙醇，在57-65℃，0.03－0.1MPa条件下浓缩至相对密度为1.25-1.45的稠膏；

（6）按配方比例将西洋参粉、三七粉、灵芝粉与黄芪、葛根及山楂的提取浸膏投入混合器内，搅拌混合均匀；

（7）将混合后的物料在干燥器中干燥，干燥温度控制在55-80℃；

（8）将干燥后的物料粉碎，过80目筛；将粉碎后的细粉置混合器内混合均匀，以85%浓度的乙醇制粒，干燥；加入颗粒重量2-8%硅胶，混合均匀，得所述组合物成品。

4.根据权利要求3所述的中药组合物制备方法制备的组合物在增强免疫功能的药物中的应用。