CN103230003A - 一种具有增强免疫力功能的保健食品及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种具有增强免疫力功能的保健食品及其制备方法，该保健食品由虫草菌丝体粉30～50重量份、淫羊藿提取物30～50重量份、黄精提取物5～20重量份混合组成。其制备方法，包括用深层发酵方法制备虫草菌丝体粉，常规方法制备淫羊藿提取物、制备黄精提取物。再按重量比例称取、混合原料药粉，用常规制剂工艺制成药剂学上的药剂，如颗粒剂、片剂或胶囊剂。本发明制备时针对不同原料中的功能性成分，采用不同的制备方法，在多糖的分离纯化方面用到了膜分离技术。该工艺制得的产品不仅具有显著的保健功效，工艺易于操作，并有效的降低工业化生产成本。

Description

一种具有增强免疫力功能的保健食品及其制备方法

技术领域

本发明涉及到保健食品，尤其涉及到一种具有增强免疫力功能的保健食品及其制备方法。

背景技术

随着社会生活节奏的加快与竞争越来越激烈，由机体免疫力低下引发的亚健康状态人群越来越多，使得用于增强免疫力功能的保健食品需求越来越大。

目前国内用于增强免疫力的保健食品类型多种多样，原料种类众多：蜂王浆、蜂胶或蜂胶提取物；大豆提取物、大蒜油；胶原蛋白、核苷酸、复合氨基酸粉辅酶Q10；蛹虫草子实体、酵母提取物、破壁灵芝孢子粉、螺旋藻粉；中药类。其中以蜂王浆或蜂胶为原料，用于增强免疫力的保健食品居多。虫草类也是非常理想的保健药物，然而虫草价格的居高不下，使消费人群有限。随着人们对中药的认识，越来越多的中药类药食同源的保健食品被人们青睐。

相对于专利号为CN200910157278的发明专利“提高机体免疫力的药酒及其制备方法”，其原料中包含冬虫夏草、黄精、淫羊藿等22种中药材，处方复杂，且其中应用的冬虫夏草是名贵中药材，其价格昂贵及原料资源短缺。而且药酒不易携带，其适用人群较单一。

而本发明将虫草菌丝体、淫羊藿、黄精三味药配伍组成，运用现代化的制备技术，制成具有增强机体免疫的产品。本发明中虫草菌丝体采用深层发酵工艺制得，从青海采集的新鲜具有冬虫夏草子座的虫草蝙蝠蛾幼虫体（僵虫）上分离得到的蝙蝠蛾拟青霉，将蝙蝠蛾拟青霉深层次发酵得到虫草菌丝体，制得的虫草菌丝体各指标成分产量稳定，其多糖含量为0.08g/L～1.60g/L，甘露醇含量 0.67g/L～1.54g/L，虫草酸含量为1.44g/L～2.16g/L，腺苷含量为0.06 g/L～0.10g/L，蛋白质含量为7.5g/L～11.3g/L。

同时经深层发酵技术制得的人工虫草菌丝体价格比天然虫草低，但其组成、功效与天然虫草效果相似，能够大大降低产品的成品。本发明中的淫羊藿及黄精按其所含药效成分的性质，运用现代制备工艺进行提取分离，得到高纯度的提取物。本发明按常规制剂工艺制成药剂学上的颗粒剂、片剂或胶囊剂，服用更方便且适用人群更广。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有增强免疫力功能的保健食品配方及其制备方法。

本发明的保健品食品由虫草菌丝体粉、淫羊藿提取物、黄精提取物组成，前述成分的重量份数比例为虫草菌丝体粉30-50、淫羊藿提取物30-50、黄精提取物5-20。

本发明保健食品的成分可以在市场选购，也可以用常规提取方法自行制备。

为进一步提升本发明的保健食品的保健效果，其中的虫草菌丝体粉为应用深层发酵技术获得，其多糖含量不得少于10%，虫草酸含量不得少于10%，腺苷含量不得少于0.3%。

以下给出本发明保健食品的一种制备方法。

（1）虫草菌丝体粉的制备：

a、将蝙蝠蛾拟青霉菌株接种到无菌培养基上，27℃±1℃培养3～7天得到菌丝体备用。

b、无菌培养液配方：按重量取葡萄糖3～4份、蛋白胨 1～2份、酵母浸粉0.5～3份、KH₂PO₄0.1～0.35份、MgSO₄·7H₂O 0.1～0.5份、ZnCl₂ 0.001～0.003份、VB1 0.08～0.2份混合；

c、发酵：将菌丝体接种于液体培养液中，于27℃±1℃，转速 100rpm～400 rpm，通气量 100～150L/h，pH值自然条件下发酵3～10天，取出，低温干燥，经气流粉碎成纳米粉末，即得虫草菌丝体粉；

（2）淫羊藿提取物制备：取淫羊藿药材，加水或乙醇提取，提取液浓缩至在70℃时相对密度1.01～1.10，滤液用聚酰胺吸附法精制，即得淫羊藿提取物； 

（3）黄精提取物的制备：                                                

取黄精饮片适量，粉碎，加8～12倍水提取2次，每次1～2小时，合并提取液，滤过，滤液高速离心，取上清液，通过分子截留量5000～40000滤膜，梯度超滤纯化，收集滤液，减压浓缩，真空冷冻干燥，即得黄精提取物；

（4）将所述步骤（1）（2）（3）制得的粉末，按重量比例，用常规制剂工艺制成药剂学上的药剂。

本发明是从祖国医药宝库中，优选出纯天然药物，参考现代药理研究成果，按中医理论科学组方而成，并经动物试验表明，本发明能明显提高淋巴细胞增殖能力，具有增强机体免疫力的功能。 

冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordyceps sinensis (BerK.)Sacc. 寄生在蝙蝠娥科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体。具有补肺益肾，止血化痰的作用。用于久咳虚喘，劳嗽咯血，阳痿遗精，腰膝酸痛。

人工培养的冬虫夏草菌丝体是从天然冬虫夏草中分离出的虫草真菌，经培养、发酵而得到的菌丝体。人工虫草菌丝体经大量研究证明：在化学、药理、临床方面与天然虫草十分相似，且毒性比天然虫草小。实验证明，虫草菌丝粉能促进免疫功能，增强机体抵抗力，改善机体功能，有助于延缓衰老（中外健康文摘,2011,8:71）。用人工虫草菌粉对小鼠实验表明，能显著抑制小鼠外周白细胞吞噬功能及脾淋巴细胞的增殖反应，且能促进鸡红细胞免疫小鼠血清溶血素抗体的生成及促进淋巴细胞的转化（辽宁中医学院学报,2002,4:311）。

淫羊藿，又名仙灵脾、三枝九叶草等，为小檗科多年生草本植物（心叶）淫羊藿、箭叶淫羊藿、茅毛淫羊藿、巫山淫羊藿或朝鲜淫羊藿的干燥地上部分。淫羊藿味辛、甘，性温，归肝、肾二经，具有补肝肾、强筋骨、祛风湿的功效，具有多方面的药理作用可用于肾阳虚衰、阳痿尿频、女子不孕、腰膝无力、风湿痹痛、筋骨不利及肢体麻木等症。早在 《神农本草经》中就将其列为中品， 被认为有 “利小便，益气力，强志”等功效。

淫羊藿含有黄酮类、多糖、木脂素、生物碱、绿原酸、萜类化合物及微量元素等多种活性成分。淫羊藿及其提取物可以通过影响巨噬细胞因子的分泌而调节免疫功能，对巨噬细胞分泌白细胞介素-1和肿瘤坏死因子具有双向调节作用（中国药师,2005,8:462）。淫羊藿总黄酮（TFE）是从淫羊藿茎叶中提取的总黄酮成分，其中，淫羊藿苷（ICA）为主要有效成分。ICA能提增强小鼠腹腔MΦ吞噬中性红细胞的功能，TFE明显增强免疫功能低下模型小鼠MΦ和NK细胞活性，对免疫功能低下小鼠有良好免疫促进作用。淫羊藿及其提取物对免疫器官、免疫细胞、免疫因子等均具有调节作用（中成药,2005,27:719）。该药物将有望作为新型免疫增强剂（陕西中医学院学报,2010,33:91）。

黄精始载于《名医别录》, 又名老虎姜、太阳草、鸡头参等,属于百合科 (liliaceae) 黄精属 (polygonatum)多年生草本植物的干燥根茎, 是我国传统的中药。黄精味甘、性平, 具有补中益气、润心肺、补肾益精、强筋骨、安五脏、止寒热、填精髓等功效。黄精含有黄精多糖、甾体皂苷、蒽醌类化合物、生物碱、强心苷、木质素、维生素和多种氨基酸等化合物, 其中黄精多糖是黄精化学组成的一个重要组成部分，经现在药理研究表明黄精具有免疫激发、增强免疫、延缓衰老、抗病毒等作用。张庭廷等研究黄精多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、小鼠溶血素生成和迟发型超敏反应的影响。黄精多糖不但能增强小鼠体液免疫功能，还可以增强小鼠细胞免疫功能。实验表明，黄精多糖直接作用于红细胞，增强红细胞膜C3b受体活性，使红细胞免疫黏附功能增强，并且在一定浓度范围内存在量效关系（中药新药与临床药理,2010,21:328）。

本发明的特点：

本发明制备时针对不同药材的功效成分采用不同的制备方法，冬虫夏草提取物采用低成本高收率的深层液体发酵技术制得，其化学成分、药理作用与天然虫草基本一致，可替代天然虫草，不但解决了天然虫草资源紧缺的问题，还降低了生产成本；淫羊藿提取物采用水提醇沉聚酰胺树脂纯化专利技术制得，制得的药效成分淫羊藿总黄酮含量高达50%～80%；黄精提取物采用水煎煮梯度超滤纯化技术，有效提高了其多糖含量。本发明按常规制剂工艺制成颗粒剂、片剂或胶囊剂，其服用更加方便。

具体实施方式

实施例1 

配方：虫草菌丝体粉40g 、淫羊藿提取物40g、黄精提取物20g。

方法：

（1）虫草菌丝体粉的制备：

a、将蝙蝠蛾拟青霉菌株接种到无菌培养基上，27℃±1℃培养5天得到菌丝体备用。

b、无菌培养液配方（质量份数）：葡萄糖3.56%，蛋白胨1.50%，酵母浸粉2.25%，KH₂PO₄ 0.22%，MgSO₄·7H₂O 0.32%，ZnCl₂ 0.002%和VB₁ 0.10%。

c、发酵条件为：将菌丝体接种于液体培养液中，于27℃±1℃，转速 300rpm，通气量150L/h，pH值自然条件下发酵10天，取出，低温干燥，经气流粉碎成纳米粉末，即得虫草菌丝体粉。

（2）淫羊藿提取物制备：取淫羊藿药材，加水或乙醇提取，提取液浓缩至在70℃时相对密度1.01～1.10，滤液用聚酰胺吸附法精制，即得淫羊藿提取物。

（3）黄精提取物的制备：

取黄精饮片适量，粉碎，加8～12倍水提取2次，每次1～2小时，合并提取液，滤过，滤液高速离心，取上清液，依次通过分子截留量5000、20000、40000滤膜，梯度超滤纯化，收集滤液，减压浓缩，真空冷冻干燥，即得黄精提取物。

（4）将所述步骤（1）（2）（3）制得的粉末按上述配方比例混合，加入蔗糖600g，与糊精适量混合均匀，制成颗粒剂，干燥，即得。 

实施例2 

配方：虫草菌丝体粉30g、淫羊藿提取物30g、黄精提取物10g。

方法：各提取物制备依据实施例1方法制成。将按实施例1制得的粉末按上述配方比例混合，加入淀粉800g，与糊精适量混合均匀，制粒，干燥，装入胶囊即得。

实施例3 

配方：虫草菌丝体粉45g 、淫羊藿提取物45g、黄精提取物10g。

方法：各提取物制备依据实施例1方法制成。将按实施例1制得的粉末按上述配方比例混合，加入蔗糖600g，与糊精适量混合均匀，制成颗粒，干燥，即得。 

实施例4 

配方：虫草菌丝体粉50g 、淫羊藿提取物50g、黄精提取物20g。

方法：各提取物制备依据实施例1方法制成。将按实施例1制得的粉末按上述配方比例混合，加入淀粉500g，与硬脂酸镁适量混合均匀，压制成片，即得。 

本发明功效评价实验：

分别采用脏器/体重比值测定、迟发性变态反应、ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验、抗体生成细胞、小鼠碳廓清试验、NK细胞活性试验，测试了该产品对小鼠的增强免疫力作用。以下为本产品的主要功效评价试验。

受试样品：实施例3所述的颗粒，规格为5g/袋。人体推荐摄入量为3袋/日，即0.25g/kg BW/d（成人体重以60kg计）。取实施例3所述的颗粒用蒸馏水配置成所需浓度的溶液，即为受试样品。

对照样品:蒸馏水。

实验动物：吉林大学基础医学部实验动物研究中心提供的清洁级雄性小鼠240只，体重18-22g，合格证号：SCXK(吉) 2010-0001。

试验方法：按照中华人民共和国卫生部《保健食品功能学评价程序和检验方法规范》，增强免疫力功能试验方法中的脏器/体重比值测定、迟发性变态反应、ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验、抗体生成细胞、小鼠碳廓清试验、NK细胞活性试验的规定方法进行。灌胃容量20ml/kg/d；每天一次，连续30天。

实验统计及结果：

1、本发明保健食品颗粒剂对小鼠脏器/体重比值的影响，见表1.

表1 本发明保健食品颗粒剂对小鼠脏器/体重比值的影响

由表1结果可见，经口给予小鼠不同剂量的本发明保健食品颗粒剂水溶液30天后，对小鼠脏器/体重比值无显著性影响（P?0.05）。

2、本发明保健食品颗粒剂对小鼠迟发性变态反应的影响

表2 本发明保健食品颗粒剂对小鼠迟发性变态反应的影响

由表2结果可见，经口给予小鼠不同剂量的本发明保健食品颗粒剂水溶液30天后，与对照组相比，剂量组小鼠足跖肿胀度有增高趋势，且中、高剂量组足跖肿胀度明显高于对照组，差异具有显著性（P?0.05）。

3、本发明保健食品颗粒剂对小鼠ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力试验的影响

表3 本发明保健食品颗粒剂对小鼠ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力试验的影响

由表3结果可见，经口给予小鼠不同剂量的本发明保健食品颗粒剂水溶液30天后，与对照组相比，高剂量组小鼠淋巴细胞转化能力明显高于对照组，差异具有显著性（P?0.01）。

4、本发明保健食品颗粒剂对小鼠抗体生成细胞数的影响

表4 本发明对小鼠抗体生成细胞数的影响

由表4结果可见，经口给予小鼠不同剂量的本发明保健食品颗粒剂水溶液30天后，与对照组相比，中、高剂量组小鼠抗体生成能力明显高于对照组，差异具有显著性（P?0.05）。

5、本发明保健食品颗粒剂对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清的影响

表5 本发明保健食品颗粒剂对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清的影响

由表5结果可见，经口给予小鼠不同剂量的本发明保健食品颗粒剂水溶液30天后，与对照组相比，中、高剂量组小鼠吞噬指数明显高于对照组，差异具有显著性（P?0.05）。

6、本发明保健食品颗粒剂对小鼠NK细胞活性的影响

表6 本发明保健食品颗粒剂对小鼠NK细胞活性的影响

由表6结果可见，经口给予小鼠不同剂量的本发明保健食品颗粒剂水溶液30天后，与对照组相比，中、高剂量组小鼠NK细胞活性明显高于对照组，差异具有显著性（P?0.05）。

试验结果表明：

灌胃给予小鼠不同剂量的本发明保健食品颗粒剂水溶液30天后，与对照组比较，本发明对剂量组的小鼠脏器/体重比值均无显著性影响；低剂量组的各项指标均无显著性差异（P?0.05）；中、高剂量组的足跖肿胀度有明显增高（P?0.05），淋巴细胞增殖能力明显提高（P?0.05）。根据《保健食品功能学评价程序和检验方法规范》中“增强免疫力功能检验方法”的判断标准，本发明保健食品具有增强免疫力功能的作用。

Claims (4)

1.一种具有增强免疫力功能的保健食品，其特征是：由虫草菌丝体粉、淫羊藿提取物、黄精提取物组成，其重量份数比例为虫草菌丝体粉30～50、淫羊藿提取物30～50、黄精提取物5～20。

2. 根据权利要求1所述的一种具有增强免疫力功能的保健食品，其特征是：所述的虫草菌丝体粉为应用深层发酵技术获得，其多糖含量不得少于10%，虫草酸含量不得少于10%，腺苷含量不得少于0.3%。

3.权利要求1所述的一种具有增强免疫力功能的保健食品的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）虫草菌丝体粉的制备：

a、将蝙蝠蛾拟青霉菌株接种到无菌培养基上，27℃±1℃培养3～7天得到菌丝体备用；

b、制备无菌培养液：按重量取葡萄糖3～4份、蛋白胨 1～2份、酵母浸粉0.5～3份、KH₂PO₄0.1～0.35份、MgSO₄·7H₂O 0.1～0.5份、ZnCl₂ 0.001～0.003份、VB1 0.08～0.2份混合；

c、发酵：将菌丝体接种于液体培养液中，于27℃±1℃，转速 100rpm～400 rpm，通气量 100～150L/h，pH值自然条件下发酵3～10天，取出，低温干燥，经气流粉碎成纳米粉末，即得虫草菌丝体粉；

（2）淫羊藿提取物制备：取淫羊藿药材，加水或乙醇提取，提取液浓缩至在70℃时相对密度1.01～1.10，滤液用聚酰胺吸附法精制，即得淫羊藿提取物，该提取物淫羊藿总黄酮含量50%～80%，其中淫羊藿苷的含量大于5%；

（3）黄精提取物的制备：                                                

取黄精饮片适量，粉碎，加8～12倍水提取2次，每次1～2小时，合并提取液，滤过，滤液高速离心，取上清液，通过分子截留量5000～40000滤膜，梯度超滤纯化，收集滤液，减压浓缩，真空冷冻干燥，即得黄精提取物；

（4）将上述步骤（1）（2）（3）制得的粉末，按重量比例，用常规制剂工艺制成药剂学上的药剂。

4.根据权利要求3所述的一种具有增强免疫力的保健食品的制备方法，其特征在于：步骤（4）中制成的药剂应为颗粒剂、片剂或胶囊剂。