CN106389788B - 一种用于增强畜禽免疫功能和抗病毒能力的药物提取物、制剂和制备方法 - Google Patents

一种用于增强畜禽免疫功能和抗病毒能力的药物提取物、制剂和制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种用于增强畜禽免疫功能和抗病毒能力的药物提取物、制剂和制备方法，药物提取物包括以下重量份数的原料药材：黄芪300‑900份、板蓝根100‑300份、防风100‑300份、炒白术100‑300份、黄芩100‑400份和紫锥菊100‑500份；以及公开了制剂和制备方法。本发明采用提取、在线高速离心、减压浓缩、喷雾干燥技术，技术能达到省时省力，高效低耗，有效成分得以充分保留；并且科学的药材搭配，实现对畜禽免疫和抗病毒的增强；进一步地，将制备的这种用于增强畜禽免疫功能和抗病毒的药物提取物制成可溶性粉、颗粒剂、口服液、片剂等制剂，实现对畜禽的临床应用，提高禽畜免疫功能和抗病毒能力，达到较好的效果。

Description

一种用于增强畜禽免疫功能和抗病毒能力的药物提取物、制 剂和制备方法
技术领域
本发明涉及药物技术领域，特别涉及一种用于增强畜禽免疫功能和抗病毒能力的药物提取物、制剂和制备方法。
背景技术
对于动物来说，饲养环境是十分重要的因素，忽略其中的任何一项，动物本身就会产生应激状态，造成不良影响，特别是直接影响免疫系统功能的正常发挥，以致于对疫病的自然抵抗力减退，或发生免疫抑制性疾病，并更容易遭受病原微生物的攻击，一旦疾病爆发，可对肉质、繁殖等性能产生抑制作用，影响正常或潜在的生产性能。由此可见，动物的免疫系统制约着其健康状况、发育过程和生长性能。动物机体的免疫预防机能和动物机体的免疫系统直接影响着动物的生产性能，维护动物机体正常的免疫预防功能，是使动物达到正常生产水平或发挥潜在最佳生产性能的前提。
免疫增强剂又称免疫佐剂，是一类通过非特异性途径提高动物机体对抗原或微生物特异性反应的物质，能够加强机体免疫系统功能，改善免疫应答能力，缓解环境应激造成的免疫功能紊乱，增强机体免疫水平，使畜禽得到最佳的生长和繁殖效果。免疫增强剂的研究进展也是免疫生物学，中药免疫药理学，微生物学，分子生物学，动物营养学，动物生产学和人类健康学相互融合促进的过程，代表着药物开发的发展趋势，一旦养殖业不再像今天这样顾及抗生素的存在所带来的报酬，抗生素将完全被新剂型所取代。
目前使用的一些成方制剂也存在种种缺陷，给药不方便，动物吸收利用有限，防治效果不确切。
发明内容
为了达到上述目的，本发明提供了用于增强畜禽免疫功能和抗病毒的药物提取物、制剂和制备方法。
为了达到上述目的，本发明提供了一种用于增强畜禽免疫功能和抗病毒的药物提取物，其中，包括以下重量份数的原料药材：黄芪300-900份、板蓝根100-300份、防风100-300份、炒白术100-300份、黄芩100-400份和紫锥菊100-500份。其中，优选的，原料药材包含黄芪600份、板蓝根200份、防风200份、炒白术200份、黄芩150份、紫锥菊200份。
其中进一步优化的，还包括佛耳草、半边莲、七叶一枝花、南烛叶、紫背天葵、巨胜子；包括以下重量份数的原料药材：黄芪300-900份、板蓝根100-300份、防风100-300份、炒白术100-300份、黄芩100-400份、紫锥菊100-500份、佛耳草100-200份、半边莲100-200份、七叶一枝花50-100份、南烛叶200-300份、紫背天葵200-300份和巨胜子100-200份。其中，优选的，原料药材包含黄芪600份、板蓝根200份、防风200份、炒白术200份、黄芩150份、紫锥菊200份、佛耳草100份、半边莲150份、七叶一枝花70份、南烛叶250份、紫背天葵250份和巨胜子150份。
其中，药物提取物的处理方式包括下述步骤：
第一步，将紫锥菊粉碎过70-80目筛，加入1倍量的脱脂溶剂，脱脂溶剂为石油醚、1,2-环氧丙烷、正丁烷的混合，其质量份数比为：2:0.5:1，脱脂后，将脱脂溶剂于50-90℃条件下挥干，将处理得到的药材，加入药材10-15倍量的水，调pH为2-4，预热至40℃-60℃后，加入药材0.04-0.06倍量的酶制剂果胶酶，酶解时间60min-65min，90℃灭酶15min，在90℃条件下继续搅拌保温1h；将酶解之后的物质过滤，滤液以8000～12000rpm的速度在线高速离心，药液减压浓缩至生药量1:1.2的浓缩液，紫锥菊药渣备用；
第二步、将第一步提取后得到的紫锥菊药渣与其余药材混合，加入5-15倍量的水或者10％～80％乙醇溶液，浸泡30-90min，进行加热提取，提取温度为20-100℃，每一次的提取时间为30-180min，提取次数为1-3次，同时收集蒸馏液，60-200目过滤，合并滤液，减压浓缩，在50～80℃，-0.06～-0.11MPa条件下减压浓缩至60℃时相对密度为1.05～1.20；
第三步、将第一步、第二步获得的药材提取液混合；
第四步、将第二步获得的蒸馏液加入氯化钠使终浓度达到5-20％盐析5-180min，取挥发油备用；
第五步、将步骤三得到的药材提取液进行喷雾干燥，所述喷雾干燥的进风温度为130-190℃，出风温度为65-90℃，雾化压力为30-50MPa，将喷雾干燥后获得的提取物粉碎过80-200目筛，并喷入第四步所得挥发油，密闭2-24小时，获得粉状药材提取物。
药物提取物的各药材的药理如下：
黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根。春、秋二季采挖，除去须根及根头，晒干。性味甘，温。归肺、脾经。主治补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌。用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，痈疽难溃，久溃不敛，血虚痿黄，内热消渴。含黄酮、皂甙类成分.黄酮类成分如芒柄花黄素、3'-羟基芒柄花黄素(毛蕊异黄酮)及其葡萄糖甙、2',3'-二羟基-7,4'-二甲氧基异黄酮、7,2'-二羟基-3',4'-二甲氧基异黄芪黄烷及其葡萄糖甙、7,3'-二羟基-4',5'-二甲氧基异黄烷、3-羟基-9,10-二甲氧基紫檀烷及其葡萄糖甙等.其中有些成分具较强的抗氧化活性.皂甙类成分有黄芪皂甙Ⅰ～Ⅷ及大豆皂甙Ⅰ；黄芪甲甙(即黄芪皂甙Ⅳ)与黄芪乙甙。
板蓝根为十字花科植物菘蓝的干燥根，通常在秋季进行采挖，炮制后可入药。在中国各地均产。板蓝根分为北板蓝根和南板蓝根，北板蓝根来源为十字花科植物菘蓝的根；南板蓝根为爵床科植物马蓝的根茎及根。其性寒，味先微甜后苦涩，具有清热解毒、预防感冒、利咽之功效。含靛蓝，靛玉红，蒽醌类、β-谷甾醇，γ-谷甾醇以及多种氨基酸：精氨酸，谷氨酸，酪氨酸，脯氨酸，缬氨酸，γ-氨基丁酸。还含黑芥子甙，靛甙，色胺酮，1-硫氰酸-2-羟基丁-3-烯，表告伊春，腺甙，棕榈酸，蔗糖和含有12％氨基酸的蛋白多糖。还含有抗革兰氏阳性和阴性细菌的抑菌物质及动力精。
防风是一种药草的名字，多年生草本植物，其喜凉爽气候，耐寒，耐干旱，主产于河北、黑龙江、四川、内蒙古等地。防风的根可生用。味辛、甘，性微温。有祛风解表，胜湿止痛，止痉的功效。性味味辛、甘，性微温。归经归膀胱、肺、脾、肝经。祛风解表，胜湿止痛，止痉。用于外感表证，风疹瘙痒，风湿痹痛，破伤风正，脾虚湿盛。防风含挥发油、甘露醇、苦味甙等。根含3-O-当归酰亥茅酚、5-O-甲基齿阿密醇、β-谷甾醇、甘露醇以及木蜡酸为主的长链脂肪。尚含挥发油、前胡素和色原酮甙。
炒白术是一种补虚药，根茎具有一种挥发性的油类化合物，具有健脾利水等多种用处。白术具有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎的功效。用于脾虚食少，腹胀泄泻，痰饮眩悸，水肿，自汗，胎动不安。《医学启源》记载：“除湿益燥，和中益气，温中，去脾胃中湿，除胃热，强脾胃，进饮食，止渴，安胎。”根茎含挥发油，油中主要含苍术酮、白术内酯A、B、3-β-乙酰氧基苍术酮、3-β-羟基苍术酮、倍半萜等。
黄芩为唇形科植物黄芩，以根入药。有清热燥湿，凉血安胎，解毒功效。主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症。黄芩的临床应用抗菌比黄连还好，而且不产生抗药性。产于河北、辽宁、陕西、山西、山东、内蒙古、黑龙江等省、自治区。主要有效成分：黄酮类化合物。
紫锥菊为菊科紫锥花属植物，是多年生草本植物，别名紫松果菊，又名紫锥花，是一种菊科野生花卉，因头状花序很像松果而得名。许多在紫锥菊中植物化学物质是积极参与其作用：多糖、黄酮、咖啡酸的衍生物、精油、多炔、烷基胺和生物碱。
佛耳草为菊科、鼠曲草属植物，一年生草本。茎直立或基部发出的枝下部斜升，高10-40厘米或更高，基部径约3毫米，上部不分枝，有沟纹，被白色厚棉毛，节间长8-20毫米，上部节间罕有达5厘米。全草含挥发油、木犀草素-4'-葡萄糖甙、豆甾醇、氯化钾、硝酸钾、木犀草素；花含鼠曲草素。性味归经甘，平。止咳平喘，降血压，祛风湿，祛痰。用于感冒咳嗽，支气管炎，哮喘，高血压，蚕豆病，风湿腰腿痛、痰喘、风湿痹痛。
半边莲属多年生小草本植物，高约20cm。茎为圆形状，全株光滑无毛，呈平卧，长约5～15cm。叶互生无柄狭窄、全缘或有疏齿、呈披针形或条长形。气味:辛、平、无毒。花瓣5片类如莲花瓣，长8～10mm，因花瓣均偏向一侧而得名。果实倒锥状。全草含生物碱，主要为L-山梗菜碱，山梗菜酮石破天惊，山梗菜醇碱，异山梗菜酮碱即去甲山梗菜酮碱，黄酮甙，皂甙，打官司基酸，多糖。又有报道含菊糖，对-羟基苯甲酸，延胡索酸和琥珀酸。根茎含半边莲果聚糖。
七叶一枝花为百合科重楼属的植物。其特征是由一圈轮生的叶子中冒出一朵花，花的形状像极了它的叶子，它可以分成两个部分，外轮花及内轮花，外轮花与叶子很像，约有6片，而内轮花约有8片，七叶一枝花的叶序属轮生叶，。根茎含七叶一枝花皂苷，蚤休甾酮，甲基原薯蓣皂苷，以及丙氨酸，天冬酰胺等多种氨基酸。
南烛叶为常绿灌木或小乔木，高2-6(9)m。多分枝，幼枝被短柔毛，老枝紫褐色。叶柄长2-8mm，通常无毛或被微毛。叶片薄革质，椭圆形、菱状椭圆形、披针状椭圆形，长4-9cm，宽2-4cm，先端锐尖，渐尖，基部楔形，宽楔形，边缘有细锯齿，表面平坦有光泽，侧脉5-7对，斜伸至边缘以内网结。枝叶酸涩，常入药。叶含三十一烷，无羁萜(酮)，表无羁萜醇，槲皮素，异荭草素，对-羟基桂皮酸，内消旋肌醇。叶和嫩枝含微量元素钡、溴、硼、铁、锰、铅、锡、镓、钛、镍、铋、钼、矾、锆、铜、银、锌、钻、锶。性味酸；涩；性平归经心；脾；肾经。益肠胃；养肝肾。
紫背天葵侧膜胎座目，秋海棠科多年生无茎草本。根状茎球状，叶均基生，花粉红色，花期5月，果期6月开始。主要分布于中国，生长于海拔700米至1120米的地区。因嫩茎叶富含钙、铁等，营养价值较高，含有吡咯里西啶类生物碱，又有止血抗病毒等药用价值。每100g叶片中含水分92.79g、粗脂肪0.18g、粗蛋白2.11g、粗纤维0.94g、维生素A5644国际单位、维生素B10.01mg、维生素B20.13mg、维生素C0.78mg、钾136.41mg、钙89.66mg、铁1.61mg、磷18.73mg、烟酸0.59mg。鲜嫩茎叶和嫩梢的维生素C含量较高，还含有黄酮苷等。据测定，每100g干物质中含钙1.4～3.0g、磷0.17～0.39g、铜1.34～2.52mg、铁20.97mg、锌2.60～7.22mg、锰0.47～14.87mg。
巨胜子含脂肪油，为油酸、亚油酸、棕榈酸、硬脂酸、花生酸等甘油脂，并含芝麻素、芝麻林酚素、芝麻酚、胡麻甙、车前糖、芝麻糖等。性味归经：甘，平。归肝、肾、大肠经。
通过上述原料药材的科学搭配，相互协调，实现对提高畜禽免疫功能以及抗病毒性能的增强。
为了达到上述目的，本发明还提供了由上述药物提取物得到的制剂，其中，所述制剂为可溶性粉，其原料由药物提取物10-100份、稀释剂0-88份、抗结剂0-3份和助溶剂0-2份制成；将所述原料混合并干燥，然后粉碎，通过80目筛得到可溶性粉。
其中，所述稀释剂由2-3份可溶性淀粉、1-2份葡萄糖、0.5-1份乳糖、1-2份甘露醇、0.5-1份木糖醇、1-1.5份甲壳胺、1-2份双歧糖、0.5-1份蔗糖和1-1.5份麦芽糊精的混合得到；所述拮抗剂由75％硫酸钠和25％硫酸镁混合得到；所述助溶剂为硼酸钾和水杨酸钠以1:1比例混合。
其中，所述药物为口服液剂，其原料由药物提取物5-50份、抗氧化剂0.01-3 份、矫味剂0-5份、pH调节剂0-2份、防腐剂0.1-2份和纯化水40-95份混合，并且经过灭菌得到口服液剂；其中，所述抗氧化剂为25％亚硫酸氢钠、35％焦亚硫酸钠和40％亚硫酸钠的组合；所述矫味剂为25％山梨糖、22％木糖、20％木糖醇和33％香草醛的混合；所述ph调节剂为15％盐酸、25％乳酸和60％磷酸混合物；所述的防腐剂为45％苯甲酸、46％苯甲酸钠、4.5％尼泊金乙酯、4.5％尼泊金丙酯混合物，或55％苯甲酸和45％山梨酸混合物或70％卡松溶液。
其中，所述制剂为颗粒剂；其原料由药物提取物5-50份、稀释剂10-91份、润湿剂与粘合剂2-20份、崩解剂2-20份、包合剂0-5份和矫味剂0-5份制成，将各原料在槽型混合机内混合，混合时间为35min，摇摆制粒机14目制粒，在沸腾制粒机中干燥，以进风温度60℃，物料温度40℃，风机频率40Hz，干燥20min至水分含量低于3％，出料；筛选10目-60目之间的干燥颗粒，装袋，即得颗粒剂制剂；
其中，所述稀释剂为30％可溶性淀粉、30％辅美粉、20％甲壳胺和20％双歧糖的混合；所述润湿剂与粘合剂为25％微晶纤维素、75％聚乙烯吡咯烷酮的混合物，或者为10-95％的乙醇溶液；所述崩解剂为羟甲基淀粉钠；所述包合剂为30％α-环糊精、30％β-环糊精和40％IN-LOK变性淀粉的混合；所述矫味剂为36％甘露醇、32％甜菊糖甙、22％柠檬香精和10％桉叶油的混合。
其中，所述制剂为片剂，其原料由药物提取物5-70份、填充剂8-91.8份、润湿剂与粘合剂2-20份、崩解剂1-10份和润滑剂0.2-2份制成，将原料在槽型混合机内混合，混合时间为30min，经过摇摆制粒机16目制粒，在沸腾制粒机中干燥，以进风温度60℃，物料温度40℃，风机频率40Hz，干燥20min至水分含量低于3％，出料；压片机压片，装袋，即得片剂制剂；
其中，填充剂含有50％淀粉、24％微晶纤维素和26％药用碳酸钙；润湿剂与粘合剂为35％聚乙烯吡咯烷酮、40％甲基纤维素和25％乙基纤维素的混合物，或者10-70％乙醇溶液；崩解剂含有50％羧甲基淀粉钠和50％交联聚乙烯吡咯烷酮；润滑剂含有30％硬脂酸镁、25％滑石粉、25％氢化植物油和20％月桂醇硫酸镁。
本发明的有益效果是：本发明采用提取、在线高速离心、减压浓缩、喷雾干燥技术，技术能达到省时省力，高效低耗，有效成分得以充分保留；本发明完全可以作为免疫增强剂或免疫调节，用于预防动物疫病的发生，配合其他药物治疗疾病，疗效可达到或超过常用抗菌药的水平，且不产生抗药性，增强畜禽免疫功能，抗病毒具有显见的优越性，并且科学的药材搭配，实现对畜禽免疫和抗病毒的增强；进一步地，将制备的这种用于增强畜禽免疫功能和抗病毒的药物提取物制成可溶性粉、颗粒剂、口服液、片剂等制剂，实现对畜禽的临床应用，提高免疫和抗病毒，达到较好的效果。
具体实施方式
为了进一步说明，下面列举具体的实施例进行说明。
实施例1药物提取物①
原料药材包含黄芪600g、板蓝根200g、防风200g、炒白术200g、黄芩150g、紫锥菊200g。
药物提取物的处理方式包括下述步骤：
第一步，将紫锥菊粉碎过80目筛，加入1倍量的脱脂溶剂，脱脂溶剂为石油醚、1,2-环氧丙烷、正丁烷的混合，其质量份数比为：2:0.5:1，脱脂后，将脱脂溶剂于60℃条件下挥干，将处理得到的药材，加入药材15倍量的水，调pH为3，预热至40℃后，加入药材0.05倍量的酶制剂果胶酶，酶解时间60min，90℃灭酶15min，在90℃条件下继续搅拌保温1h；将酶解之后的物质过滤，滤液以12000rpm的速度在线高速离心，药液减压浓缩至生药量1:1.2的浓缩液，紫锥菊药渣备用；
第二步、将第一步提取后得到的紫锥菊药渣与其余药材混合，加入12倍量的水，浸泡60min，进行加热提取，提取温度为100℃，每一次的提取时间为120min，提取次数为3次，同时收集蒸馏液，药液200目过滤，合并滤液，减压浓缩，在65℃，-0.08MPa条件下减压浓缩至60℃时相对密度为1.20；
第三步、将第一步、第二步获得的药材提取液混合；
第四步、将第二步获得的蒸馏液加入10％的氯化钠盐析60min，取挥发油备用；
第五步、将步骤三得到的药材提取液进行喷雾干燥，所述喷雾干燥的进风温度为180℃，出风温度为90℃，雾化压力为40MPa，将喷雾干燥后获得的提取物粉碎过100目筛，并喷入第四步所得挥发油，密闭2-24小时，获得粉状药物提取物①。
实施例2药物提取物②
原料药材包含黄芪600g、板蓝根200g、防风200g、炒白术200g、黄芩150g、紫锥菊200g、佛耳草100g、半边莲150g、七叶一枝花70g、南烛叶250g、紫背天葵250g和巨胜子150g。
药物提取物的处理方式包括下述步骤：
第一步，将紫锥菊粉碎过70目筛，加入1倍量的脱脂溶剂，脱脂溶剂为石油醚、1,2-环氧丙烷、正丁烷的混合，其质量份数比为：2:0.5:1，脱脂后，将脱脂溶剂于70℃条件下挥干，将处理得到的药材，加入药材20倍量的水，调pH为2，预热至50℃后，加入药材0.05倍量的酶制剂果胶酶，酶解时间60min，90℃灭酶15min，在90℃条件下继续搅拌保温1h；将酶解之后的物质过滤，滤液以12000rpm的速度在线高速离心，药液减压浓缩至生药量1:1.2的浓缩液，紫锥菊药渣备用；
第二步、将第一步提取后得到的紫锥菊药渣与其余药材混合，加入12倍量的30％乙醇溶液，浸泡60min，进行加热提取，提取温度为100℃，每一次的提取时间为90min，提取次数为3次，药液200目过滤，合并滤液，减压浓缩，在65℃，-0.08～-0.09MPa条件下减压浓缩至60℃时相对密度为1.20；
第三步、将第一步、第二步获得的药材提取液混合。
第四步、将步骤三得到的药材提取液进行喷雾干燥，所述喷雾干燥的进风温度为180℃，出风温度为90℃，雾化压力为40MPa，将喷雾干燥后获得的提取物粉碎过100目筛，获得粉状药材提取物②。
实施例3可溶性粉制剂
其原料由药物提取物360g、稀释剂600g、抗结剂20g和助溶剂20g制成；将原料混合并干燥，然后粉碎，通过100目筛得到可溶性粉。
其中，稀释剂由163.8g可溶性淀粉、109.2g葡萄糖、54.6g乳糖、54.6g甘露醇、27g木糖醇、54.6g甲壳胺、54.6g双歧糖、2g蔗糖和54.6g麦芽糊精的混合得到；拮抗剂由75％硫酸钠和25％硫酸镁混合得到；助溶剂为硼酸钾和水杨酸钠以1:1比例混合。
一、毒性试验
①药物提取物急性毒性试验
实验对象：实施例3得到可溶性粉制剂①
取5周龄、体重18～22g ICR健康小鼠20只，将可溶性粉溶解为12.5％的水溶液，按0.8ml/20g体重的给药体积给小鼠1次灌胃，单次给药剂量达到5.0g/kg，不能引起小鼠死亡，未能测出其LD50；最大给药量试验，将可溶性粉溶解为20％的水溶液，按0.8ml/20g体重的给药体积给小鼠1次灌胃，单次给药剂量为8.0g/kg，以及24h内给药3次，累计最大给药剂量达24g/kg时，仍未出现明显的毒性反应，表明该制剂具有较高的临床用药安全性。
②药物提取物亚慢性毒性试验
实验对象：实施例3得到的可溶性粉制剂①
为观察口服液的亚慢性毒性，将80只Wistar大鼠随机分均为4组，分别以口服液高剂量12.5ml/kg(相当于靶动物可能摄入量100倍)、中剂量2.5ml/kg(相当于靶动物可能摄入量20倍)、低剂量1.25ml/kg(相当于靶动物可能摄入量10倍)灌胃，对照组灌胃等体积纯净水，连续灌药42d，在此期间至停药后14天内详细观察各组大鼠的临床表现、体增重、血常规、血清生化指标以及肝、肾、心、脾、肺、睾丸、子宫卵巢等脏器指数及其组织学变化。结果表明，给药期间和停药后，各试验组及对照组均无大鼠发病与死亡，全体实验动物生长发育正常，精神、行为、饮食、粪便没有出现异常反应。试验组动物体重、血常规、血清生化指标和脏器指数正常，其肝、肾、心、脾、肺、睾丸、子宫及卵巢组织学观察没有出现病理变化。试验证明口服液中长期大剂量重复应用无亚慢性毒性。
二、临床试验
用于增强畜禽免疫功能和抗病毒的制剂药效学试验
1.受试药物 实施例3得到的可溶性粉①，每袋100g，每1g相当于原生药0.93g。阳性对照药芪芍增免口服液，保定翼农动物药业有限公司生产，500ml/瓶。
2.试剂 鸡新城疫低毒力活疫苗(LaSota株)，武汉中博生物科技股份有限公司出品；新城疫抗体效价测定(血凝抑制)抗原，哈尔滨生物制品国家工程研究中心有限公司出品；IL-2鼠抗鸡单克隆抗体(Mouse anti-Chicken Monoclonal Antibody，一抗)，LifeSpanBioSciences出品；Goat Anti-Mouse IgG,HRP conjugated(二抗)，北京博奥森生物技术有限公司出品；IFN-γ兔抗鸡多克隆抗体(Rabbit anti-Chicken Polyclonal Antibody，一抗)，LifeSpan BioSciences出品；Goat anti-Rabbit IgG(H+L),HRP conjugated(二抗)，北京博奥森生物技术有限公司出品；RPMI1640培养液，Gibco公司产品；刀豆球蛋白A(ConA)：Sigma公司产品；胎牛血清：杭州四季青生物材料公司；青链霉素：Sigma产品；淋巴细胞分离液：Solarbio公司产品；四唑盐(MTT)：Solarbio公司产品；二甲基亚砜(DMSO)：天津市科密欧化学试剂有限公司；其他相关试剂均为分析纯试剂。
3.试验动物 1日龄新苏草鸡公雏，购自中国农业科学院家禽研究所。
4.试验方法 根据试验需要选定120只健康7日龄雏鸡，称重、随机分为4组，具体分组及处理办法见表1-1：
表1-1临床分组及给药情况
所有试验鸡均给予无药物添加的全价饲料，自由采食。
新城疫抗体效价测定 分别于免疫后第7、14、21、28d，各试验组随机抽取10只，颈静脉采血，分离血清，用血凝抑制法测定新城疫抗体效价的动态变化。首先测得抗原血凝价(HA)为1:28。其次用4单位(1:26即64倍稀释的)病毒测各时间点血清中新城疫抗体的红细胞凝集抑制效价(HI)，用-log2表示。
细胞因子含量测定 分别于免疫后第7、14、21、28d，各试验组随机抽取10只鸡，同上采血分离血清，采用IL-2、IFN-γ的ELISA方法检测。
外周血淋巴细胞增殖测定 分别于免疫后第7、14、21、28d，每组随机抽取6只鸡，颈静脉无菌采血(肝素钠抗凝)1.5mL，用淋巴细胞分离液分离外周血淋巴细胞，采用MTT法测定外周血淋巴细胞增殖。
免疫器官指数测定 分别于免疫后第7、14、21、28d，每组随机抽取6只，称重，扑杀，分离胸腺、脾脏和法氏囊、称重，计算免疫器官指数。免疫器官指数＝免疫器官(g)/体重(g)×100。
生长性能测定 分别于免疫后第7、14、21、28d，各组称重，并记录每组鸡的饲料消耗量，计算每周的日均增重、总耗料量、总增重、饲料消耗量，计算日均采食量。
数据用平均数±标准差表示，用SPSS17.0统计软件各组抗体效价、淋巴细胞增殖和生长性能进行单因素方差分析和Duncan’s多重比较，以P<0.05为显著水平，比较各试验组间差异显著性；用卡方检验比较各组发病率、死亡率、保护率的差异。
5.结果
抗体效价变化 免疫后7d～28d(即14日龄至35日龄)，所有免疫组抗体效价均在渐渐升高，但免疫后的前14d抗体效价升高较快，之后趋于缓慢上升。其中可溶性粉制剂组在免疫后7～28d抗体效价均显著高于免疫对照组(P<0.05或P<0.01)；至免后28d时可溶性粉制剂组显著高于免疫对照组(P<0.05)；空白对照组由于没有免疫，其测得的抗体效价为残留的母源抗体，详细结果见表1-2。
注：同列数据上标字母相邻者差异显著(P<0.05)，相间者差异极显著(P<0.01)，以下类同。
细胞因子含量的变化 分别于免疫后第7、14、21、28d，各试验组10只鸡血清IFN-γ的ELISA检测结果显示：免疫后第7d、14d、21d和28d可溶性粉制剂组的IFN-γOD值显著高于药物对照组和免疫对照组(P<0.05)，极显著高于空白对照组(P<0.01)；详细结果见表1-3。同期10只鸡血清IL-2的组间差异性与IFN-γ基本一致；血清IL-2含量在免疫后21d上升至最高值，之后各组均有下降趋势。详细结果见表1-4。
淋巴细胞增殖的变化 免后7d～28d(即14日龄至35日龄)各时间点测定的淋巴细胞增殖活性的A570OD值均呈现：可溶性粉制剂组的A570OD值极显著高于免疫对照组(P<0.01)。表明可溶性粉制剂能提高鸡外周血淋巴细胞增殖活性，且可溶性粉制剂组作用效果好。与空白对照组相比，所有试验组各时间的淋巴细胞增殖都显著高于同期空白对照组(P<0.05,P<0.01)，表明新城疫LaSota苗的免疫对鸡外周血淋巴细胞增殖亦具有显著促进作用。详细结果见表1-5。
表1-5各组淋巴细胞增殖的变化(A570值) n＝6
组别 7d 14d 21d 28d
试药组 2.74±0.287<sup>c</sup> 3.22±0.154<sup>c</sup> 2.94±0.313<sup>c</sup> 2.83±0.371<sup>cd</sup>
药物对照组 2.33±0.015<sup>bc</sup> 2.74±0.150<sup>bc</sup> 2.62±0.376<sup>c</sup> 2.51±0.209<sup>c</sup>
免疫对照组 1.98±0.333<sup>ab</sup> 2.08±0.138<sup>ab</sup> 2.05±0.176<sup>ab</sup> 2.04±0.261<sup>ab</sup>
空白对照组 1.81±0.330<sup>a</sup> 1.83±0.276<sup>a</sup> 1.84±0.156<sup>a</sup> 1.89±0.158<sup>a</sup>
免疫器官指数测定结果 分别于免疫后第7、14、21、28d，每组随机抽取6只鸡测定的胸腺、脾脏和法氏囊指数分别如下：
胸腺指数见表1-6，从表中可以看出，各时间点测得的胸腺指数均呈现：可溶性粉制剂组显著高于免疫对照组和空白对照组(P<0.05)。表明可溶性粉制剂能提高鸡的胸腺指数。
脾指数见表1-7，从表中可以看出，免疫后第7、14d测得的脾指数均呈现：可溶性粉制剂显著高于免疫对照组和空白对照组(P<0.05)，免疫后第21d可溶性粉制剂组的脾指数均显著或极显著高于药物对照组(P＞0.05)；免疫后第21d、28d可溶性粉制剂组的脾指数均显著高于疫苗对照组和空白对照组(P<0.05)。表明可溶性粉制剂从免疫后7～28均能协助疫苗免疫刺激而显著提高鸡的脾指数。
法氏囊指数见表1-8。从表中可以看出，免疫后第7～28d测得的法氏囊指数均呈现：可溶性粉制剂组的法氏囊指数均显著高于药物对照组和免疫对照组(P<0.05)，极显著高于空白对照组(P<0.01)；免疫后第7、14d可溶性粉制剂组和药物对照组的法氏囊指数均显著高于免疫对照组和空白对照组(P<0.05)；免疫后第21、28d可溶性粉制剂组、药物对照组和免疫对照组的法氏囊指数均显著高于空白对照组(P<0.05)。表明可溶性粉制剂从免疫后7～28均能提高鸡的法氏囊指数。
生长性能测定结果 分别于免疫7，14，21，28d，各组鸡只称重，记录每组鸡的饲料消耗量，分别计算7～14、15～21、22～28、29～35日龄4个时间段的日均增重、日均采食量和料重比，具体见表1-9。从表中可以看出，除7～14日龄时间段各试验组的日均增重无差异外，其他3个时间段在日均采食量基本相近的情况下，可溶性粉制剂组和阳性药物对照组的日均增重均显著高于疫苗免疫对照和空白组(P<0.05)；可溶性粉制剂组的料重比最低。表明可溶性粉制剂更能提高试验期试验鸡的生产性能。
表1-9各组生长性能情况
注：同行数据上标无相同字母者差异显著(P<0.05)。
增强免疫效果试验结果显示：首先试药组的抗体效价在免疫后的前期能迅速上升，其中试药组在免疫后14～28d抗体效价显著高于免疫对照组(P<0.05)；其次，免疫后第7～28d试药的IFN-γ和IL-2含量均显著高于药物对照组和免疫对照组(P<0.05)，极显著高于空白对照组(P<0.01)。第三，免疫后7～28d，可溶性粉制剂组的外周血淋巴细胞增殖活性显著高于药物对照组(P<0.05)，显著或极显著高于免疫对照组(P<0.05，P<0.01)。第四，免疫后7～28d，可溶性粉制剂组的胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数均显著高于免疫对照组(P<0.05)。表明可溶性粉制剂可以明显提高鸡新城疫苗的免疫抗体效价，即特异性体液免疫；并同时又能显著提高鸡血清IFN-γ和IL-2含量、外周血淋巴细胞增殖活性和胸腺、脾脏及法氏囊免疫器官指数等非特异性细胞免疫的功能。
另外，在生长性能方面，免疫后15～28d，可溶性粉制剂组和阳性药物对照组的日均增重均显著高于疫苗免疫对照和空白组(P<0.05)；而料重比则明显低于疫苗免疫对照和空白组，尤以可溶性粉制剂作用效果更佳。表明可溶性粉制剂更能提高试验期试验鸡的生产性能。
实施例4可溶性制剂②
其原料由药物提取物500g、稀释剂174g、抗结剂20g和助溶剂20g制成；将原料混合并干燥，然后粉碎，通过100目筛得到可溶性粉②。
其中，稀释剂由47.4g可溶性淀粉、31.7g葡萄糖、15.8g乳糖、15.8g甘露醇、8.0g木糖醇、15.8g甲壳胺、15.8g双歧糖、8.0g蔗糖和15.8g麦芽糊精的混合得到；拮抗剂由75％硫酸钠和25％硫酸镁混合得到；助溶剂为硼酸钾和水杨酸钠以1:1比例混合。
毒性试验
①药物提取物急性毒性试验
实验对象：实施例3得到可溶性粉制剂②
取5周龄、体重18～22g ICR健康小鼠20只，将可溶性粉溶解为12.5％的水溶液，按0.8ml/20g体重的给药体积给小鼠1次灌胃，单次给药剂量达到5.0g/kg，不能引起小鼠死亡，未能测出其LD50；最大给药量试验，将可溶性粉溶解为20％的水溶液，按0.8ml/20g体重的给药体积给小鼠1次灌胃，单次给药剂量为8.0g/kg，以及24h内给药3次，累计最大给药剂量达24g/kg时，仍未出现明显的毒性反应，表明该制剂具有较高的临床用药安全性。
②药物提取物亚慢性毒性试验
实验对象：实施例3得到的可溶性粉制剂②
为观察口服液的亚慢性毒性，将80只Wistar大鼠随机分均为4组，分别以口服液高剂量12.5ml/kg(相当于靶动物可能摄入量100倍)、中剂量2.5ml/kg(相当于靶动物可能摄入量20倍)、低剂量1.25ml/kg(相当于靶动物可能摄入量10倍)灌胃，对照组灌胃等体积纯净水，连续灌药42d，在此期间至停药后14天内详细观察各组大鼠的临床表现、体增重、血常规、血清生化指标以及肝、肾、心、脾、肺、睾丸、子宫卵巢等脏器指数及其组织学变化。结果表明，给药期间和停药后，各试验组及对照组均无大鼠发病与死亡，全体实验动物生长发育正常，精神、行为、饮食、粪便没有出现异常反应。试验组动物体重、血常规、血清生化指标和脏器指数正常，其肝、肾、心、脾、肺、睾丸、子宫及卵巢组织学观察没有出现病理变化。试验证明口服液中长期大剂量重复应用无亚慢性毒性。
二、临床试验
用于增强畜禽免疫功能和抗病毒的制剂药效学试验
1.受试药物 实施例3得到的可溶性粉②，每袋100g，每1g相当于原生药0.93g。阳性对照药芪芍增免口服液，保定翼农动物药业有限公司生产，500ml/瓶。
2.试剂 鸡新城疫低毒力活疫苗(LaSota株)，武汉中博生物科技股份有限公司出品；新城疫抗体效价测定(血凝抑制)抗原，哈尔滨生物制品国家工程研究中心有限公司出品；IL-2鼠抗鸡单克隆抗体(Mouse anti-Chicken Monoclonal Antibody，一抗)，LifeSpanBioSciences出品；Goat Anti-Mouse IgG,HRP conjugated(二抗)，北京博奥森生物技术有限公司出品；IFN-γ兔抗鸡多克隆抗体(Rabbit anti-Chicken Polyclonal Antibody，一抗)，LifeSpan BioSciences出品；Goat anti-Rabbit IgG(H+L),HRP conjugated(二抗)，北京博奥森生物技术有限公司出品；RPMI1640培养液，Gibco公司产品；刀豆球蛋白A(ConA)：Sigma公司产品；胎牛血清：杭州四季青生物材料公司；青链霉素：Sigma产品；淋巴细胞分离液：Solarbio公司产品；四唑盐(MTT)：Solarbio公司产品；二甲基亚砜(DMSO)：天津市科密欧化学试剂有限公司；其他相关试剂均为分析纯试剂。
3.试验动物 1日龄新苏草鸡公雏，购自中国农业科学院家禽研究所。
4.试验方法 根据试验需要选定120只健康7日龄雏鸡，称重、随机分为4组，具体分组及处理办法见表2-1：
表2-1临床分组及给药情况
所有试验鸡均给予无药物添加的全价饲料，自由采食。
新城疫抗体效价测定 分别于免疫后第7、14、21、28d，各试验组随机抽取10只，颈静脉采血，分离血清，用血凝抑制法测定新城疫抗体效价的动态变化。首先测得抗原血凝价(HA)为1:28。其次用4单位(1:26即64倍稀释的)病毒测各时间点血清中新城疫抗体的红细胞凝集抑制效价(HI)，用-log2表示。
细胞因子含量测定 分别于免疫后第7、14、21、28d，各试验组随机抽取10只鸡，同上采血分离血清，采用IL-2、IFN-γ的ELISA方法检测。
外周血淋巴细胞增殖测定 分别于免疫后第7、14、21、28d，每组随机抽取6只鸡，颈静脉无菌采血(肝素钠抗凝)1.5mL，用淋巴细胞分离液分离外周血淋巴细胞，采用MTT法测定外周血淋巴细胞增殖。
免疫器官指数测定 分别于免疫后第7、14、21、28d，每组随机抽取6只，称重，扑杀，分离胸腺、脾脏和法氏囊、称重，计算免疫器官指数。免疫器官指数＝免疫器官(g)/体重(g)×100。
生长性能测定 分别于免疫后第7、14、21、28d，各组称重，并记录每组鸡的饲料消耗量，计算每周的日均增重、总耗料量、总增重、饲料消耗量，计算日均采食量。
数据用平均数±标准差表示，用SPSS17.0统计软件各组抗体效价、淋巴细胞增殖和生长性能进行单因素方差分析和Duncan’s多重比较，以P<0.05为显著水平，比较各试验组间差异显著性；用卡方检验比较各组发病率、死亡率、保护率的差异。
5.结果
抗体效价变化 免疫后7d～28d(即14日龄至35日龄)，所有免疫组抗体效价均在渐渐升高，但免疫后的前14d抗体效价升高较快，之后趋于缓慢上升。其中可溶性粉制剂组在免疫后7～28d抗体效价均显著高于免疫对照组(P<0.05或P<0.01)；至免后28d时可溶性粉制剂组和药物对照组的抗体效价显著高于试药低剂量组和免疫对照组(P<0.05)；空白对照组由于没有免疫，其测得的抗体效价为残留的母源抗体，详细结果见表2-2。
注：同列数据上标字母相邻者差异显著(P<0.05)，相间者差异极显著(P<0.01)，以下类同。
细胞因子含量的变化 分别于免疫后第7、14、21、28d，各试验组10只鸡血清IFN-γ的ELISA检测结果显示：免疫后第7d、14d、21d和28d可溶性粉制剂组的IFN-γOD值显著高于药物对照组和免疫对照组(P<0.05)，极显著高于空白对照组(P<0.01)。详细结果见表2-3。同期10只鸡血清IL-2的组间差异性与IFN-γ基本一致；血清IL-2含量在免疫后21d上升至最高值，之后各组均有下降趋势，但可溶性粉制剂组下降较其他组缓慢。详细结果见表2-4。
淋巴细胞增殖的变化 免后7d～28d(即14日龄至35日龄)各时间点测定的淋巴细胞增殖活性的A570OD值均呈现：可溶性粉制剂组的A570OD值极显著高于免疫对照组(P<0.01)。表明可溶性粉制剂和阳性对照药物均能提高鸡外周血淋巴细胞增殖活性，且可溶性粉制剂组作用效果最好。与空白对照组相比，所有试验组各时间的淋巴细胞增殖都显著高于同期空白对照组(P<0.05,P<0.01)，表明新城疫LaSota苗的免疫对鸡外周血淋巴细胞增殖亦具有显著促进作用。详细结果见表2-5。
表2-5各组淋巴细胞增殖的变化(A570值) n＝6
免疫器官指数测定结果 分别于免疫后第7、14、21、28d，每组随机抽取6只鸡测定的胸腺、脾脏和法氏囊指数分别如下：
胸腺指数见表2-6，从表中可以看出，各时间点测得的胸腺指数均呈现：可溶性粉制剂显著高于免疫对照组和空白对照组(P<0.05)。表明可溶性粉制剂能提高鸡的胸腺指数。
脾指数见表2-7，从表中可以看出，免疫后第7、14d测得的脾指数均呈现：可溶性粉制剂显著高于免疫对照组和空白对照组(P<0.05)；免疫后第21d、28d可溶性粉制剂组的脾指数均显著高于疫苗对照组和空白对照组(P<0.05)；整个观察期免疫对照组的脾指数亦始终高于空白对照组，但差异不显著(P＞0.05)。表明可溶性粉制剂从免疫后7～28均能协助疫苗免疫刺激而显著提高鸡的脾指数。
法氏囊指数见表2-8。从表中可以看出，免疫后第7～28d测得的法氏囊指数均呈现：可溶性粉制剂组的法氏囊指数均显著高于药物对照组和免疫对照组(P<0.05)，极显著高于空白对照组(P<0.01)；免疫后第21、28d可溶性粉制剂组、药物对照组和免疫对照组的法氏囊指数均显著高于空白对照组(P<0.05)。表明可溶性粉制剂从免疫后7～28均能提高鸡的法氏囊指数。
生长性能测定结果 分别于免疫7，14，21，28d，各组鸡只称重，记录每组鸡的饲料消耗量，分别计算7～14、15～21、22～28、29～35日龄4个时间段的日均增重、日均采食量和料重比，具体见表2-9。从表中可以看出，除7～14日龄时间段各试验组的日均增重无差异外，其他3个时间段在日均采食量基本相近的情况下，可溶性粉制剂组和阳性药物对照组的日均增重均显著高于疫苗免疫对照和空白组(P<0.05)；可溶性粉制剂组的料重比最低。表明可溶性粉制剂更能提高试验期试验鸡的生产性能。
表2-9各组生长性能情况
注：同行数据上标无相同字母者差异显著(P<0.05)。
增强免疫效果试验结果显示：首先试药组的抗体效价在免疫后的前期能迅速上升，其中试药组在免疫后14～28d抗体效价显著高于免疫对照组(P<0.05)；其次，免疫后第7～28d试药的IFN-γ和IL-2含量均显著高于药物对照组和免疫对照组(P<0.05)，极显著高于空白对照组(P<0.01)。第三，免疫后7～28d，可溶性粉制剂组的外周血淋巴细胞增殖活性显著高于药物对照组(P<0.05)，显著或极显著高于免疫对照组(P<0.05，P<0.01)。第四，免疫后7～28d，可溶性粉制剂组的胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数均显著高于免疫对照组(P<0.05)。表明可溶性粉制剂可以明显提高鸡新城疫苗的免疫抗体效价，即特异性体液免疫；并同时又能显著提高鸡血清IFN-γ和IL-2含量、外周血淋巴细胞增殖活性和胸腺、脾脏及法氏囊免疫器官指数等非特异性细胞免疫的功能。
另外，在生长性能方面，免疫后15～28d，可溶性粉制剂组和阳性药物对照组的日均增重均显著高于疫苗免疫对照和空白组(P<0.05)；可溶性粉制剂组作用效果更佳。表明可溶性粉制剂更能提高试验期试验鸡的生产性能。
综合，制剂具有明显的增强免疫，提高鸡新城疫苗的免疫应答作用，推荐按2.0g/L剂量混饮给药，连用5d，为临床应用之用量用法。
实施例5口服液剂制剂
其原料由药物提取物②300g、抗氧化剂0.050g、矫味剂10g、pH调节剂10g、防腐剂0.50g和纯化水500g混合，并且经过灭菌得到口服液剂；其中，抗氧化剂为25％亚硫酸氢钠、35％焦亚硫酸钠和40％亚硫酸钠的组合；矫味剂为25％山梨糖、22％木糖、20％木糖醇和33％香草醛的混合；ph调节剂为15％盐酸、25％乳酸和60％磷酸混合物；防腐剂为45％苯甲酸、46％苯甲酸钠、4.5％尼泊金乙酯、4.5％尼泊金丙酯混合物。
实施例6颗粒剂制剂
其原料由药物提取物①100g、稀释剂100g、润湿剂与粘合剂50g、崩解剂60g、包合剂10g和矫味剂20g制成，将各原料在槽型混合机内混合，混合时间为35min，摇摆制粒机14目制粒，在沸腾制粒机中干燥，以进风温度60℃，物料温度40℃，风机频率40Hz，干燥20min至水分含量低于3％，出料；筛选10目-60目之间的干燥颗粒，装袋，即得颗粒剂制剂；
其中，稀释剂为30％可溶性淀粉、30％辅美粉、20％甲壳胺和20％双歧糖的混合；润湿剂与粘合剂为25％微晶纤维素、75％聚乙烯吡咯烷酮的混合物；崩解剂为羟甲基淀粉钠；包合剂为30％α-环糊精、30％β-环糊精和40％IN-LOK变性淀粉的混合；矫味剂为36％甘露醇、32％甜菊糖甙、22％柠檬香精和10％桉叶油的混合。
实施例7片剂制剂
其原料由药物提取物②200g、填充剂80g、润湿剂与粘合剂100g、崩解剂50g和润滑剂10g制成，将原料在槽型混合机内混合，混合时间为30min，经过摇摆制粒机16目制粒，在沸腾制粒机中干燥，以进风温度60℃，物料温度40℃，风机频率40Hz，干燥20min至水分含量低于3％，出料；压片机压片，装袋，即得片剂制剂；其中，填充剂含有50％淀粉、24％微晶纤维素和26％药用碳酸钙；润湿剂与粘合剂为35％聚乙烯吡咯烷酮、40％甲基纤维素和25％乙基纤维素的混合物；崩解剂含有50％羧甲基淀粉钠和50％交联聚乙烯吡咯烷酮；润滑剂含有30％硬脂酸镁、25％滑石粉、25％氢化植物油和20％月桂醇硫酸镁。
以上仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种用于增强畜禽免疫功能和抗病毒能力的药物提取物，其特征在于，所述药物提取物由以下重量份数的原料药材制成：黄芪300-900份、板蓝根100-300份、防风100-300份、炒白术100-300份、黄芩100-400份和紫锥菊100-500份；
所述药物提取物的处理方式包括下述步骤：
第一步，将紫锥菊粉碎过70-80目筛，加入1倍量的脱脂溶剂，脱脂溶剂为石油醚、1,2-环氧丙烷、正丁烷的混合，其质量份数比为：2:0.5:1，脱脂后，将脱脂溶剂于50-90℃条件下挥干，将处理得到的药材，加入药材10-15倍量的水，调pH为2-4，预热至40℃-60℃后，加入药材0.04-0.06倍量的酶制剂果胶酶，酶解时间60min-65min，90℃灭酶15min，在90℃条件下继续搅拌保温1h；将酶解之后的物质过滤，滤液以8000~12000rpm的速度在线高速离心，药液减压浓缩至生药量1:1.2的浓缩液，紫锥菊药渣备用；
第二步、将第一步提取后得到的紫锥菊药渣与其余药材混合，加入5-15倍量的水或者10%~80%乙醇溶液，浸泡30-90min，进行加热提取，提取温度为20-100℃，每一次的提取时间为30-180min，提取次数为1-3次，同时收集蒸馏液，60-200目过滤，合并滤液，减压浓缩，在50~80℃，-0.06～-0.11MPa条件下减压浓缩至60℃时相对密度为1.05～1.20；
第三步、将第一步、第二步获得的药材提取液混合；
第四步、将第二步获得的蒸馏液加入氯化钠使终浓度达到5-20%盐析5-180min，取挥发油备用；
第五步、将步骤三得到的药材提取液进行喷雾干燥，所述喷雾干燥的进风温度为130-190℃，出风温度为65-90℃，雾化压力为30-50MPa，将喷雾干燥后获得的提取物粉碎过80-200目筛，并喷入第四步所得挥发油，密闭2-24小时，获得粉状药材提取物。
2.根据权利要求1所述的药物提取物，其特征在于，所述原料药材还包括佛耳草、半边莲、七叶一枝花、南烛叶、紫背天葵、巨胜子；所述药物提取物由以下重量份数的原料药材制成：黄芪300-900份、板蓝根100-300份、防风100-300份、炒白术100-300份、黄芩100-400份、紫锥菊100-500份、佛耳草100-200份、半边莲100-200份、七叶一枝花50-100份、南烛叶200-300份、紫背天葵200-300份和巨胜子100-200份。
3.一种由权利要求1至2任一项所述的药物提取物得到的制剂，其特征在于，所述制剂为可溶性粉，其原料由药物提取物10-100份、稀释剂0-88份、抗结剂0-3份和助溶剂0-2份制成；将所述原料混合并干燥，然后粉碎，通过80目筛得到可溶性粉。
4.根据权利要求3所述的制剂，其特征在于，所述稀释剂由2-3份可溶性淀粉、1-2份葡萄糖、0.5-1份乳糖、1-2份甘露醇、0.5-1份木糖醇、1-1.5份甲壳胺、1-2份双歧糖、0.5-1份蔗糖和1-1.5份麦芽糊精的混合得到；所述拮抗剂由75%硫酸钠和25%硫酸镁混合得到；所述助溶剂为硼酸钾和水杨酸钠以1:1比例混合。
5.一种由权利要求1至2任一项所述的药物提取物得到的制剂，其特征在于，所述制剂为口服液剂，其原料由药物提取物5-50份、抗氧化剂0.01-3份、矫味剂0-5份、pH调节剂0-2份、防腐剂0.1-2份和纯化水40-95份混合，并且经过灭菌得到口服液剂；其中，所述抗氧化剂为25%亚硫酸氢钠、35%焦亚硫酸钠和40%亚硫酸钠的组合；所述矫味剂为25%山梨糖、22%木糖、20%木糖醇和33%香草醛的混合；所述pH 调节剂为15%盐酸、25%乳酸和60%磷酸混合物；所述的防腐剂为45%苯甲酸、46%苯甲酸钠、4.5%尼泊金乙酯、4.5%尼泊金丙酯混合物，或55%苯甲酸和45%山梨酸混合物或70%卡松溶液。
6.一种由权利要求1至2任一项所述的药物提取物得到的制剂，其特征在于，所述制剂为颗粒剂；其原料由药物提取物5-50份、稀释剂10-91份、润湿剂与粘合剂2-20份、崩解剂2-20份、包合剂0-5份和矫味剂0-5份制成，将各原料在槽型混合机内混合，混合时间为35min，摇摆制粒机14目制粒，在沸腾制粒机中干燥，以进风温度60℃，物料温度40℃，风机频率40Hz，干燥20min至水分含量低于3%，出料；筛选10目-60目之间的干燥颗粒，装袋，即得颗粒剂制剂；
其中，所述稀释剂为30%可溶性淀粉、30%辅美粉、20%甲壳胺和20%双歧糖的混合；所述润湿剂与粘合剂为25%微晶纤维素、75%聚乙烯吡咯烷酮的混合物，或者为10-95%的乙醇溶液；所述崩解剂为羟甲基淀粉钠；所述包合剂为30%α-环糊精、30%β-环糊精和40%IN-LOK变性淀粉的混合；所述矫味剂为36%甘露醇、32%甜菊糖甙、22%柠檬香精和10%桉叶油的混合。
7.一种由权利要求1至2任一项所述的药物提取物得到的制剂，其特征在于，所述制剂为片剂，其原料由药物提取物5-70份、填充剂8-91.8份、润湿剂与粘合剂2-20份、崩解剂1-10份和润滑剂0.2-2份制成，将原料在槽型混合机内混合，混合时间为30min，经过摇摆制粒机16目制粒，在沸腾制粒机中干燥，以进风温度60℃，物料温度40℃，风机频率40Hz，干燥20min至水分含量低于3%，出料；压片机压片，装袋，即得片剂制剂；
其中，填充剂含有50%淀粉、24%微晶纤维素和26%药用碳酸钙；润湿剂与粘合剂为35%聚乙烯吡咯烷酮、40%甲基纤维素和25%乙基纤维素的混合物，或者10-70%乙醇溶液；崩解剂含有50%羧甲基淀粉钠和50%交联聚乙烯吡咯烷酮；润滑剂含有30%硬脂酸镁、25%滑石粉、25%氢化植物油和20%月桂醇硫酸镁。
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