CN115252698A - 一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物及其制备方法与含量控制方法 - Google Patents

Abstract

一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物及其制备方法与含量控制方法，它是由制何首乌、当归、补骨脂、枸杞子、沙苑子、茯苓、牛膝、山茱萸、杜仲、续断、短梗五加、川芎和女贞子组成；经煎煮、过滤、静置、浓缩、配液、冷沉、离心过滤、调pH值、灌装和灭菌步骤制得。采用高效液相色谱法检测何首乌中二苯乙烯苷含量。本发明的中药组合物的十三味药材合用达到由肝肾两虚引起的须发脱落、早白的最佳治疗效果。选择四川产地秋季的三年生何首乌，采用黑豆黄酒制对何首乌进行炮制，得到二苯乙烯苷含量高达4.30％的制何首乌，并获得得到最佳的二苯乙烯苷含量制备工艺。

Description

一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物及其 制备方法与含量控制方法

技术领域

本发明属于中药制剂技术领域，具体涉及一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物及其制备方法与含量控制方法。

背景技术

近年来，随着人们生活方式的改变和生活节奏的加快，头发脱落、早白现象比比皆是。提到白发，人们总会感叹衰老将至。的确，头发变白往往被视为衰老的一大特征。老年白发通常被认为是自然生理现象，但随着工作压力越来越大，不少年轻人早生华发，白发的年轻化、广泛化趋势日益明显。人们所说的“少白头”现象更有逐年上升趋势，少白头的发生原因比较复杂，既与遗传性、体质性因素有关，又与后天的各种因素有关。后天性少白头。引起的原因很多:营养不良，如缺乏蛋白质维生素以及某些微量元素等，都会使头发变白；某些慢性消耗性疾病如结核病等，因造成营养缺乏，头发也比一般人的要白得早些；一些长期发热的病人，头发会黄脆甚至变白脱落；有的内分泌疾病，如脑垂体或甲状腺疾患，可影响色素细胞产生色素颗粒的能力而导致头发过早变白；脑炎、神经系统病变等也可使头发变白；白化病病人的皮肤、头发、眉毛都是白的；皮肤变白的疾病“白癜风”，如发生在头皮上，头发也会变白；还有人认为，用脑越多导致头发白得越早；有些年青人在短时间内，头发大量变白，则与过度焦虑悲伤等严重精神创伤或精神过度疲劳有关。目前治疗该病的西药种类较多，由于少白头的各种内在原因而常常不能达到预期的治疗效果，西药治疗效果时好时坏，或反复发作，并且西药具有副作用，而根据中医理论针对具体病情进行治疗，不仅治疗效果好，而且没有毒副作用。

对于脱发中年人更是深有体会，从青年到中年发际线的不断提高，对于外在形象的不断重视，脱发成功引起人们的注意。脱发是指头发脱落的现象，包括自然脱落和由于各种原因导致的病理性脱落。病理性脱发调查结果显示其中由于肝肾阴虚导致的须发早白、头发脱落占比较大。大部分肝肾阴虚的患者通常会出现五心烦热、面部潮热盗汗、腰膝酸软、失眠多梦、口干舌燥等症状。若病情较为严重，患者可能也会伴有小便短赤、大便干结、脉象浮数、脉像沉数等现象。

市场上治疗脱发的药物种类繁多，而且，中药口服液体制剂中有大量沉淀物质，并且治疗脱发的有效成分-二苯乙烯苷含量较低，更有甚者不符合标准要求。对于患者的治疗效果可想而知，患者不但付出经济代价，而且还达不到治疗的目的。目前的中药口服液体制剂的有效成分含量检测方法，并不稳定。

发明内容

本发明针对上述技术问题，提供了一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物及其制备方法与质量控制方法，该组合物由制何首乌、当归、补骨脂(黑芝麻5g炒)、枸杞子、沙苑子、茯苓、牛膝、山茱萸、杜仲、续断、短梗五加、川芎、女贞子组成。可以用于治疗由肝肾阴虚引起的须发脱落、早白，还具有养发、护发的功效；同时可以满足人体所需营养，提高人体免疫力，阻抗细菌、病毒对人体的入侵。本发明通过一系列手段提高组合物中有效成分含量及其稳定性。有效提高口服制剂在临床治疗过程中的效果。

本发明的一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物，它按照重量份数是由制何首乌200-300份、当归40-80份、补骨脂15-45份、枸杞子40-90份、沙苑子40-80份、茯苓30-90份、牛膝30-90份、山茱萸10-30份、杜仲10-30份、续断10-30份、短梗五加10-30份、川芎10-30份和女贞子10-30份组成。

进一步地，所述的中药组合物是由制何首乌220～280份、当归50～70份、补骨脂20～40份、枸杞子50～80份、沙苑子50～70份、茯苓40～70份、牛膝40～70份、山茱萸10～20份、杜仲10～20份、续断10～20份、短梗五加15～20份、川芎15～20份和女贞子15～20份组成。

进一步地，所述的中药组合物是由制何首乌250～280份、当归55～70份、补骨脂20～35份、枸杞子50～70份、沙苑子50～70份、茯苓50～70份、牛膝50～70份、山茱萸10～20份、杜仲10～20份、续断10～20份、短梗五加15～20份、川芎15～20份和女贞子15～20份组成。

进一步地，所述的中药组合物是由制何首乌250～260份、当归55～65份、补骨脂25～35份、枸杞子55～65份、沙苑子55～65份、茯苓55～65份、牛膝55～65份、山茱萸10～18份、杜仲10～18份、续断10～18份、短梗五加15～20份、川芎15～20份和女贞子15～20份组成。

进一步地，所述的补骨脂是经黑芝麻炒制而得。

进一步地，所述的制何首乌是按照如下方式制得：

取何首乌块根并弃其中部，用黑豆汁与黄酒拌匀，置非铁质的容器内，密闭，炖至汁液吸尽，取出，晒干即得；其中，何首乌、黑豆和黄酒的质量比为10:1:2～3；

所述的黑豆汁的制法：取黑豆，加水煮3～4h，豆渣再加水煮2～3h，合并得黑豆汁。

进一步地，所述的何首乌是选自四川产地三年生秋季的何首乌块根。

一种制备用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物的方法，是按照以下步骤进行的：

一、煎煮

按照重量份数称取制何首乌200-300份、当归40-80份、补骨脂15-45份、枸杞子40-90份、沙苑子40-80份、茯苓30-90份、牛膝30-90份、山茱萸10-30份、杜仲10-30份、续断10-30份、短梗五加10-30份、川芎10-30份和女贞子10-30份，并混合后，加6倍量水煎煮，第一次煎煮2～3h，第二次煎煮1～2h；

二、过滤、静置

煎煮后药液过滤，合并两次滤液，静置24h；

三、浓缩

取静置后药液的上清液，减压浓缩成相对密度为1.0～1.1的清膏，减压温度为50～70℃；

四、配液

清膏中加入炼蜜、糖浆和苯甲酸钠，加热煮沸15～30min，放冷，加入煮沸过的纯化水调整至所需量，搅匀；

五、冷沉

药液搅拌均匀后冷沉12～24h；

六、离心组合过滤

冷藏后药液进行离心；

七、过滤

离心后药液用5～50μm滤膜过滤；

八、调pH值

将过滤后药液用质量浓度为5％氢氧化钠调pH至5.0-6.5；

九、灌装

取调pH值后药液，灌封；

十、灭菌

灌封后口服制剂在105℃条件下灭菌30min，即得。

进一步地，步骤六中所述的离心转速为2500r/min。

一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物含量检测方法，是按照以下步骤进行的：

一、供试品溶液：量取所述的用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物成品至容量瓶中，加乙醇溶解并定容，摇匀，得到供试品溶液；

二、对照品溶液：精密称取二苯乙烯苷对照品，置容量瓶中，加乙醇溶解并定容，摇匀，得到对照品溶液；

三、采用高效液相色谱进行检测，检测条件如下：

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

流动相：以乙腈-水为流动相；其中，乙腈与水的体积比为23:77；

流速：0.8mL/min；

检测波长：320nm；

柱温：25℃；

进样量：5μL。

进一步地，所述的色谱柱型号为4.6mm×250mm，5μm。

何首乌又名多花蓼、紫乌藤、夜交藤等。是蓼科蓼族何首乌属多年生缠绕藤本植物，块根肥厚，长椭圆形，黑褐色。生山谷灌丛、山坡林下、沟边石隙。产陕西南部、甘肃南部、华东、华中、华南、四川、云南及贵州。其块根入药，可安神、养血、活络，解毒(截疟)、消痈；制首乌可补益精血、乌须发、强筋骨、补肝肾，是常见贵细中药材。

当归别名干归、秦哪、西当归、岷当归、金当归、当归身、涵归尾、当归曲、土当归，多年生草本，高0.4-1米。花期6-7月，果期7-9月。中国1957年从欧洲引种欧当归。主产甘肃东南部，以岷县产量多，质量好，其次为云南、四川、陕西、湖北等省，均为栽培。国内有些省区也已引种栽培。其根可入药，是最常用的中药之一。具有补血和血，调经止痛，润燥滑肠、抗癌、抗老防老、免疫之功效。

补骨脂又名破故纸，婆固脂，胡韭子。属蔷薇目，豆科一年生直立草本，高60～150cm。具有补肾壮阳，补脾健胃，纳气平喘之功能。用于肾阳不足，阳痿遗精，遗尿尿频，腰膝冷痛，肾虚作喘，五更泄泻等。

枸杞又称枸杞子、红耳坠，是茄科小灌木枸杞的成熟子实。《神农本草经》记载:“枸杞久服能坚筋骨、耐寒暑，轻身不老，乃中药中之上品。”《本草纲目》记载“枸杞子甘平而润，性滋补……能补肾、润肺、生精、益气，此乃平补之药”。具有滋补肝肾，益精明目。用于虚劳精亏，腰膝酸痛，眩晕耳鸣，阳萎遗精，内热消渴，血虚萎黄，目昏不明。

沙苑子为豆科一年生草本植物扁茎黄芪的成熟种子，内含脂肪油，鞣质，维生素A类物质等。沙苑子性温，有强阳作用，有肾阳虚而致性冷淡、阳痿、早泄、失眠、梦遗诸症病人，往往面色虚浮无华，或面容憔悴。如服用沙苑子，不但可改善肾阳虚症状、焕发青春活力，亦有明显的丰肌悦肤、乌发美发等作用。

茯苓又称玉灵、茯灵、万灵桂、茯菟。是拟层孔菌科真菌茯苓的干燥菌核，常寄生在松树根上，形如甘薯，球状，外皮淡棕色或黑褐色，内部粉色或白色，精制后称为白茯苓或者云苓。具有利水渗湿，健脾，宁心。用于水肿尿少，痰饮眩悸，脾虚食少，便溏泄泻，心神不安，惊悸失眠。

牛膝别名牛磕膝，苋科、牛膝属多年生草本，高70-120厘米；根圆柱形，直径5-10毫米，土黄色；茎有棱角或四方形，绿色或带紫色，有白色贴生或开展柔毛，或近无毛，分枝对生。叶片椭圆形或椭圆披针形，少数倒披针形，基部楔形或宽楔形，两面有贴生或开展柔毛；退化雄蕊顶端平圆，稍有缺刻状细锯齿。胞果矩圆形，黄褐色，光滑。种子矩圆形，黄褐色。花期7-9月，果期9-10月。根入药，具有逐瘀通经，补肝肾，强筋骨，利尿通淋，引血下行。用于经闭，痛经，腰膝酸痛，筋骨无力，淋证，水肿，头痛，眩晕，牙痛，口疮，吐血，衄血。

山茱萸(学名：Cornus officinalis Sieb.et Zucc.)落叶乔木或灌木；树皮灰褐色；小枝细圆柱形，无毛。叶对生，纸质，上面绿色，无毛，下面浅绿色；叶柄细圆柱形，上面有浅沟，下面圆形。伞形花序生于枝侧，总苞片卵形，带紫色；总花梗粗壮，微被灰色短柔毛；花小，两性，先叶开放；花萼阔三角形，无毛；花瓣舌状披针形，黄色，向外反卷；雄蕊与花瓣互生，花丝钻形，花药椭圆形；花盘无毛；花梗纤细。核果长椭圆形，红色至紫红色；核骨质，狭椭圆形，有几条不整齐的肋纹。花期3-4月；果期9-10月。产中国山西、陕西、甘肃、山东、江苏、浙江、安徽、江西、河南、湖南等省。朝鲜、日本也有分布。生于海拔400-1500米，稀达2100米的林缘或森林中。在四川有引种栽培。该种(包括川鄂山茱萸)的果实称“萸肉”，俗名枣皮，供药用，味酸涩，性微温，为收敛性强壮药，具有补益肝肾，收涩固脱。用于眩晕耳鸣，腰膝酸痛，阳痿遗精，遗尿尿频，崩漏带下，大汗虚脱，内热消渴。

杜仲又名胶木，为杜仲科植物。杜仲游离氨基酸极少，含有的少量蛋白质，是和绝大多数食品类似的完全蛋白，即能够水解检出对人体必需的8种氨基酸。测定了杜仲所含的15种矿物元素，其中有锌、铜、铁等微量元素，及钙、磷、钾、镁等宏量元素。药用杜仲，即为杜仲科植物杜仲的干燥树皮，是中国名贵滋补药材。其味甘，性温。有补益肝肾、强筋壮骨、调理冲任、固经安胎的功效。可治疗肾阳虚引起的腰腿痛或酸软无力，肝气虚引起的胞胎不固，阴囊湿痒等症。在《神农本草经》中被列为上品。

续断又名和尚头。为川续断科多年生草本植物川续断的干燥根，因能"续折接骨"而得名。秋季采挖，除去根头及须根，用微火烘至半干，堆置"发汗"至内部变绿色时，再烘干。用于肝肾不足，腰膝酸软，风湿痹痛，跌扑损伤，筋伤骨折，崩漏，胎漏。酒续断多用于风湿痹痛，跌扑损伤，筋伤骨折。

短梗五加又名五加参，落叶灌木或小乔木植物，明代著名医药学家李时珍在《本草纲目》中已有论述"宁得五加一把，不要金玉满车"。短梗五加有很好的食用价值和药用价值,其根、皮、茎、果实中都含有黄酮和皂苷，嫩叶中含有强心苷，可降血脂，可祛风化湿、活血化瘀、健胃利尿等功效。能够起到抗风湿和活血化瘀的作用,同时还能够及时满足人体所需要的营养。

川芎具有祛风、活血、润肤、止痒之功效，有利于头发营养改善。现代药理证明，川芎能扩张头部毛细血管，促进血液循环，增加头发营养，并使头发有良好的柔韧性和不易变脆的功能，且能延缓白发生长，保持头发润滑光泽。

女贞子，本品为木犀科植物女贞的果实。冬季果实成熟时采摘，除去枝叶晒干，或将果实略熏后，晒干；或置热水中烫过后晒干。具有补肝肾，强腰膝。治阴虚内热，头晕，目花，耳鸣，腰膝酸软，须发早白。滋补肝肾，明目乌发。用于眩晕耳鸣，腰膝酸软、须发早白、目暗不明。

中药的成方是在辨证立法的基础上，按照组方的原则分为“君、臣、佐、使”四个部分。本发明的中药组合物中君药为制何首乌、补骨脂，具有补肝益肾、乌须发的作用；臣药为当归、枸杞子、沙苑子、牛膝、山茱萸、断续、女贞子，辅助君药增强对肝肾的滋补并预防须发早白；佐药为茯苓、杜仲，有补血活血，调经止痛、润肤之功效，同时可以补充人体所需微量元素和宏量元素，扩张头部毛细血管，促进头发生长；使药为川芎、短梗五加，促进血液循环，增加头发营养，且能延缓白发生长，保持头发润滑光泽，能够及时满足人体所需要的营养，提高人体免疫力。十三味药材合用达到由肝肾两虚引起的须发脱落、早白的最佳治疗效果。

本发明包含以下有益效果：

1.本发明的中药组合物中君药为制何首乌、补骨脂，具有补肝益肾、乌须发的作用；臣药为当归、枸杞子、沙苑子、牛膝、山茱萸、断续、女贞子，辅助君药增强对肝肾的滋补并预防须发早白；佐药为茯苓、杜仲，有补血活血，调经止痛、润肤之功效，同时可以补充人体所需微量元素和宏量元素，扩张头部毛细血管，促进头发生长；使药为川芎、短梗五加，促进血液循环，增加头发营养，且能延缓白发生长，保持头发润滑光泽，能够及时满足人体所需要的营养，提高人体免疫力。十三味药材合用达到由肝肾两虚引起的须发脱落、早白的最佳治疗效果。

2.本发明中：选择四川产地秋季的三年生何首乌，并取其弃去中部的块根作为制何首乌的原材料，优选砂锅容器，采用黑豆黄酒制对何首乌进行炮制，得到二苯乙烯苷含量高达4.30％的制何首乌。

3.本发明中：采用脱脂棉滤芯组合离心机的方式进行除杂。脱脂棉滤芯是指以脱脂棉线按特定工艺、紧密的缠绕在多孔骨架上，形成外疏内密的蜂窝结构的过滤芯，具有十分优良的过滤特性，有效的去除流体中的悬浮物、颗粒杂质等。将两者相结合，不但可以减少过滤和离心次数、节省制备时间、降低去除杂质费用，而且有效去除口服制剂中脂肪油类有害物质，使其临床应用安全性大大提升。

4.本发明中：制备工艺增加冷沉设备对药液的处理，一定程度上提高有效成分的浸出。最终确定药材的提取时间为4h，浓缩温度为60℃，冷沉时间为24h，灭菌条件为105℃、30min，最佳制备条件可有效提高组合物中二苯乙烯苷含量。

5.本发明中：在灌封前使用5％氢氧化钠调节pH至5.0-6.5，使口服制剂中有效成分(二苯乙烯苷)含量相对稳定。可有效提高口服制剂在临床治疗过程中的效果。

6.本发明中：一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物的制备，通过从原材料筛选、制备过程优化、提高有效成分稳定性等有效手段，提高中药组合物中二苯乙烯苷含量，并保证其二苯乙烯苷含量稳定，达到治疗由肝脏阴虚引起的脱发、早白的效果。

附图说明

图1为二苯乙烯苷对照品1-1谱图；

图2为二苯乙烯苷对照品1-2谱图；

图3为二苯乙烯苷对照品2-1谱图；

图4为二苯乙烯苷对照品2-2谱图；

图5为pH为5.5口服制剂0天检测图谱；

图6为pH为6.0口服制剂0天检测图谱；

图7为pH为6.2口服制剂0天检测图谱；

图8为pH为6.5口服制剂0天检测图谱；

图9为pH为5.5口服制剂加速3个月检测图谱；

图10为pH为6.0口服制剂加速3个月检测图谱；

图11为pH为6.2口服制剂加速3个月检测图谱；

图12为pH为6.5口服制剂加速3个月检测图谱。

具体实施方式

本领域的普通技术人员可以理解，上述各实施方式是实现本发明的具体实施例，而在实际应用中，可以在形式上和细节上对其作各种改变，而不偏离本发明的精神和范围。

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面将详细叙述清楚说明本发明所揭示内容的精神，任何所属技术领域技术人员在了解本发明内容的实施例后，当可由本发明内容所教示的技术，加以改变及修饰，其并不脱离本发明内容的精神与范围。

本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，但并不作为对本发明的限定。

实施例1

为了比较本组合物中辅助治疗药材的疗效，分别按以下组方制备口服液体制剂并进行疗效对比。

组方1：制何首乌250～260份、补骨脂(黑芝麻5g炒)25～35份、枸杞子55～65份、茯苓55～65份、牛膝55～65份、山茱萸10～18份、杜仲10～18份、续断10～18份、短梗五加15～20份、川芎15～20份。

组方2：制何首乌250～260份、当归55～65份、补骨脂(黑芝麻5g炒)25～35份、沙苑子55～65份、牛膝55～65份、山茱萸10～18份、杜仲10～18份、续断10～18份、女贞子15～20份。

组方3(本发明组方)：制何首乌250～260份、当归55～65份、补骨脂(黑芝麻5g炒)25～35份、枸杞子55～65份、沙苑子55～65份、茯苓55～65份、牛膝55～65份、山茱萸10～18份、杜仲10～18份、续断10～18份、短梗五加15～20份、川芎15～20份、女贞子15～20份。

临床试验

1、选取标准：①中医辨证属肝肾不足症；②年龄20～50岁；③无糖尿病、恶性肿瘤、血液病、心脑血管疾病等病史；④选取患者30例，随机分为对照组1、对照组2与实验组，每组各10例。

2、实验方法

对照组1：服用组方1口服液体制剂10mL/支。每次1支(10mL)，每日早、晚各服1次，口服。

对照组2：服用组方2口服液体制剂10mL/支。每次1支(10mL)，每日早、晚各服1次，口服。

实验组：服用组方3(本发明组方)口服液体制剂10mL/支。每次1支(10mL)，每日早、晚各服1次，口服。

两组每月为一疗程，观察3个疗程。治疗期间饮食以清淡为主，保持心情舒畅，起居有规律。治疗期间不使用其它任何生发产品。

3、治愈评判标准

治愈:毛发停止脱落，乌黑有光泽，无头屑，无瘙痒，发质有明显改善，有新发或毳毛长出；显效：毛发脱落减少50％，部分毛囊损伤处有新发生长，头屑明显减少，瘙痒明显减轻，发质有部分改善；有效：毛发脱落减少30％，少部分毛囊损处有新发生长，头屑有部分减少，瘙痒有减轻，发质无改善；无效：毛发依旧脱落严重，无新发生长，头屑无减少，瘙痒无减轻，发质无改善。

4、结果

三组试验治疗脱发、早白效果如下表1所示：

表1两组治疗前后有效率比较

组别	例数	治愈	显效	有效	无效	有效率
							对照组1	10	2	1	7	0	30％
对照组2	10	1	1	8	0	20％
							实验组	10	4	1	5	0	50％

实验组与对照组1、对照组2相比，治愈有效率远高于其他两组。并且实验组患者新生发的发质优于对照组1、对照组2。

实施例2

本实施例提供一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物的制备方法：

1、煎煮

将以上十三味药材按处方量称定，加6倍量水煎煮，第一次煎煮2～3小时，第二次煎煮1～2小时(两次均沸腾后开始计时)。

2、过滤、静置

煎煮后药液用100目绢布过滤，合并两次滤液，静置24小时。

3、浓缩

取静置后药液的上清液，减压浓缩成相对密度约为1.10的清膏，减压温度为50～70℃。

4、配液

清膏中加入炼蜜、糖浆、苯甲酸钠适量，加热煮沸15～30min，放冷，加入煮沸过的纯化水调整总量至1000mL，搅匀。

5、冷沉

药液搅拌均匀后冷沉12～24小时。

6、离心组合过滤

冷藏后药液用加入5μm脱脂棉滤芯的离心机进行离心(2500r/min)。

7、过滤

离心后药液用5～50μm滤膜过滤。

8、调pH值

将过滤后药液用5％氢氧化钠调pH至5.0-6.5。

9、灌装

取调pH值后药液，采用棕色瓶灌封。

10、灭菌

灌封后口服制剂采用105℃蒸汽灭菌30min即得。

实施例3

中药组合物中沉淀物去除及解析

现有口服液体制剂放置一定时间会有大量沉淀物产生，为解决此现象本发明采用一种离心组合脱脂棉滤芯的方法可将大部分沉淀去除。

1、具体实验比对方法

按照实施例2所述方法制备至冷沉步骤完成，将冷沉后药液等分成5份，分别采用以下不同方法进行除杂：①采用5μm滤膜过滤3次；②采用离心机离心2次(2500r/min)；③先使用离心机进行离心2次(2500r/min)，再使用5μm滤膜过滤2次；④先使用离心机进行离心处理(2500r/min)2次，再使用5μm脱脂棉滤芯进行过滤2次；⑤先用加入5μm脱脂棉滤芯离心机离心(2500r/min)1次，离心后药液再使用5μm滤膜进行过滤1次。检测各药液的澄清度，检测结果如下表2

表2药液的澄清度

试验结果表明，采用脱脂棉滤芯组合离心机的方式可以有效去除口服制剂中沉淀物质。

2、剩余沉淀物解析

采用上述去除沉淀物的方法后，仍有少量摇之易散的沉淀，为确定其主要成分，将沉淀物吸出进行研究。根据各药材可能提取出的物质进行分析，脂溶性物质可能为：黄酮类、脂肪油类、蒽醌类、维生素A、卵磷脂，上述五种药液中沉淀物采用薄层色谱法对五种物质进行鉴别，检测结果如下。

1)TLC法鉴别

a.黄酮类物质鉴别：取沉淀溶液2mL，加甲醇5mL，超声处理30min，滤过，作为供试品溶液。五份样品同步处理。取黄酮苷对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。点样照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取供试品溶液4～6μL、对照品溶液2～4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯—甲酸—水(65：15：20)溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视。五份供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，均显相同颜色的荧光斑点。

b.脂肪油类物质鉴别：取沉淀溶液2mL，加石油醚5mL，超声处理30分钟，滤过，作为供试品溶液。五份样品同步处理。取脂肪酸对照品，加石油醚制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。点样照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取供试品溶液4～6μL、对照品溶液2～4μL,分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚—乙酸乙酯(75：25)溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视。供试品①～④中，在与对照品色谱相应的位置上，均显相同颜色的荧光斑点。供试品⑤无对应荧光斑点。

c.蒽醌类物质鉴别：取沉淀溶液2mL，加乙醇5mL,超声处理30分钟，滤过，作为供试品溶液。五份样品同步处理。对照品另取大黄酚对照品、大黄素甲醚对照品，加乙醇制成每1mL各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。点样照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取供试品溶液4～6μL、对照品溶液2～4μL,分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚—甲酸乙酯—甲酸(75:20:5)上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视。五份供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，均显相同颜色的荧光斑点。

d.维生素A物质鉴别：取沉淀溶液2mL，加甲醇5mL，超声处理30分钟，滤过，作为供试品溶液。五份样品同步处理。取维生素A对照品，加甲醇制成每1mL各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。点样照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取供试品溶液4～6μL、对照品溶液2～4μL,分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙醚(80:20)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视。五份供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，无相同颜色的荧光斑点。

e.卵磷脂类物质鉴别：取沉淀溶液2mL，加乙醇5mL,超声处理30分钟，滤过，作为供试品溶液。五份样品同步处理。取脂肪酸对照品，加石油醚制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。点样照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取供试品溶液4～6μL、对照品溶液2～4μL,分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿—甲醇—醋酸—水(70：20：8：2)溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视。五份供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，均显相同颜色的荧光斑点。

检测结果显示药液①～④中沉淀主要物质有黄酮类、脂肪油类、蒽醌类、卵磷脂，药液⑤中沉淀主要物质有黄酮类、蒽醌类、卵磷脂，无脂肪油类。

黄酮类物质的作用与功效有：1.抗衰老，黄酮是一种很强的抗氧剂，可有效清除体内的氧自由基，如花青素、花色素可以抑制油脂性过氧化物的全阶段溢出，这种阻止氧化的能力是维生素E的十倍以上，这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老，也可阻止癌症的发生。2。改善血液循环，黄酮可以改善血液循环，可以降低胆固醇，黄酮还含有一种PAF抗凝因子，这些作用大大降低了心脑血管疾病的发病率，也可改善心脑血管疾病的症状。3.抗炎，黄酮还可以抑制炎性生物酶的渗出，可以增进伤口愈合和止疼，可以用于各类的敏感症。

蒽醌类物质的作用与功效有：1、止血作用：蒽醌类化合物能促进血小板生成，明显增加纤维蛋白原，使凝血时间缩短，降低毛细血管通透性，改善血管脆性，使血管的收缩活性增加，因此能促进血液凝固。2、抗菌作用：蒽醌类化合物对多种细菌均有不同程度的抑制作用，其中以葡萄球菌、链球菌最敏感，痢疾杆菌、白喉杆菌、枯草杆菌及伤寒杆菌等也较敏感。抑菌机理主要是抑制菌体糖及代谢中间产物的氧化和脱氢，并能抑制蛋白和核酸的合成，因此可避免临床上某些抗菌素的毒副反应及耐药性。3、泻下作用：结合型蒽醌甙类因由糖基的保护，大部分未经吸收直接到达大肠，在肠内被细菌酶分解成甙元和糖。甙元刺激大肠粘膜，并抑制钠离子从肠腔吸收，使大肠内水分增加，蠕动亢进而致泻。4、利尿作用：蒽醌类化合物能使尿量增加，并促进输尿管的蠕动，尿中钠钾亦明显增加，而产生利尿降压作用。其作用是通过减少肠道氨基酸的重吸收，抑制肝肾组织中尿素的合成，提高血中游离必需氨基酸浓度，利用体内尿素氮合成体蛋白和抑制肌蛋白的分解，以及增加尿素和肌酐的排泄来完成的。

卵磷脂的作用与功效有：1、降血脂、卵磷脂具有乳化、分解油脂的作用，可增进血液循环，改善血清脂质，清除过氧化物，使血液中胆固醇及中性脂肪含量降低，减少脂肪在血管内壁的滞留时间，促进粥样硬化斑的消散，防止由胆固醇引起的血管内膜损伤。2、健脑益智，脑神经细胞中卵磷脂的含量约占其细胞质量的17％～20％，卵磷脂能为脑神经细胞提供充足的养料，使脑神经之间的信息传递速度加快，从而提高大脑活力，消除大脑疲劳，使大脑思维敏捷，提高学习和工作效率。3、美容养颜，如果缺乏卵磷脂，皮肤细胞的再生能力会降低，导致皮肤粗糙，出现皱纹，而适当摄取卵磷脂，可以让皮肤相对有光泽，起到美容养颜的作用。

脂肪油类物质堆积会出现以下症状：1、肥胖：体内油脂高可导致躯体脂肪堆积，从而引发超重或肥胖的危害，超重或肥胖人群进行许多活动并不方便，从而降低生活质量，超重或肥胖也是患糖尿病等基础疾病的危险因素，不利于身体健康；2、动脉粥样硬化：体内油脂高可造成血脂高，有导致动脉粥样硬化的风险，引起动脉管腔狭窄或闭塞，有造成心脑血管系统相关疾病的危害，如脑卒中、冠状动脉粥样硬化性心脏病等，当眼部动脉发生粥样硬化时，还会影响视力；3、胰腺受损：油脂高到一定程度可引发高脂血症，而高脂血症是引起继发性胰腺炎的常见病因之一。胰腺由大量细小动脉组织构成，血液中油脂高会损伤胰腺，容易导致胰腺动脉发生血液循环障碍、并使胰腺受损，从而并发炎症性改变；4、肝功能不全：肝脏是代谢体内胆固醇等脂类物质的重要场所，体内长期油脂高，会增加肝脏组织的代谢负担，增加肝脏的工作负荷，并容易引起肝损伤以及肝功能不全，甚至造成脂肪肝等不良情况。

实验结果表明本发明中脱脂棉滤芯组合离心机的方法可去除脂肪油类有害物质，沉淀中剩余三种物质均对人体有益，无需去除。

实施例4提高何首乌中二苯乙烯苷含量及其稳定性

1、一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物含量检测，色谱条件如下：

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm×250mm，5μm或效能相当的色谱柱)

流动相：以乙腈-水(23:77)为流动相

流速：0.8mL/min

检测波长：320nm

柱温：25℃

进样量：5μL

对照品溶液：精密称取二苯乙烯苷(2,3,5,4’-四羟基二苯乙-2-O-β-D-葡萄糖苷)对照品适量，置容量瓶中，加稀乙醇溶解并定容至刻度，摇匀，得到对照品溶液

供试品溶液：量取口服制剂2mL至容量瓶中，加稀乙醇稀释至刻度，摇匀，得到供试品溶液。

2、治疗脱发的口服液体制剂分析

口服液体制剂中治疗脱发的主要有效成分为二苯乙烯苷，根据市场上现有治疗脱发的口服液体制剂进行稳定性试验。调查结果显示不同生产厂家的液体制剂稳定性差异较大，在长期放置6个月内含量最高下降为0.5％，其药液中二苯乙烯苷含量不符合标准要求。据推算其它三个厂家在有效期内其二苯乙烯苷含量趋于不合格(见下表3)。因此提高何首乌中二苯乙烯苷含量及其稳定性成为治疗脱发、早白的关键。

表3不同生产厂家液体制剂放入二苯乙烯苷含量

3、提高一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物中二苯乙烯苷含量实验1：何首乌的选取

何首乌是治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物中发挥药效的主要中药材，其主要成分为二苯乙烯苷，药材的选取决定中药组合物中有效成分含量的高低，本发明选取7个产地不同批次的何首乌作为原材料备选，分别对其二苯乙烯苷含量进行检测，结果见4；为从源头提高何首乌中二苯乙烯苷的提取率，针对同一产地不同季节、不同年份的何首乌进行对比，见表5、表6；同时对何首乌不同部位的二苯乙烯苷含量进行检测，检测结果见表7。

表4不同产地何首乌中二苯乙烯苷含量

表5四川何首乌不同季节的二苯乙烯苷含量

表6四川秋季何首乌不同年份的二苯乙烯苷含量

表7四川秋季何首乌(三年生)不同部位的二苯乙烯苷含量

结论：根据表4、表5、表6、表7结果所示，本发明选用四川产地三年生秋季的何首乌块根并弃其中部作为原材料。

实验2：何首乌炮制方法的选择

1.何首乌炮制方法的选取

方法一：黑豆制

取何首乌块根并弃其中部(四川产地三年生秋季)，用黑豆汁拌匀，置非铁质的适宜容器内，密闭，炖至汁液吸尽，取出，晒干即得。黑豆汁制法：取黑豆10kg，加水适量煮约4小时，熬汁约15kg，豆渣再加水煮约3小时，敖汁约10kg，合并得黑豆汁约25kg。

方法二：黑豆黄酒制

取何首乌块根并弃其中部(四川产地三年生秋季)，用黑豆汁与黄酒拌匀，置非铁质的适宜容器内，密闭，炖至汁液吸尽，取出，晒干即得。每何首乌100kg，用黑豆10kg，黄酒25kg。黑豆汁的制法：取黑豆10kg，加水适量煮约4小时，熬汁约15kg，豆渣再加水煮约3小时，熬汁约10kg，合并得黑豆汁约25kg。

通过两种炮制方法所获得的制何首乌，进行二苯乙烯苷含量检测得出黑豆黄酒制的何首乌二苯乙烯苷含量高于黑豆制的何首乌二苯乙烯苷含量，因此选择黑豆黄酒制的炮制方法。实验结果见下表8。

表8两种炮制方法所获得的制何首乌二苯乙烯苷含量

2.何首乌黑豆黄酒制方法的优化

制何首乌的炮制过程选用的容器对二苯乙烯苷含量有一定影响，所以选用砂锅、陶瓷、不锈钢材质的容器使用上述方法二进行炮制。对炮制后的制何首乌进行含量检测，检测结果见下表9。

表9不同容器获得的制何首乌二苯乙烯苷含量

根据检测结果可以看出，采用砂锅炮制的制何首乌中二苯乙烯苷含量最高，且三次炮制结果相对稳定，所以首选砂锅对何首乌进行炮制。

实验3、中药组合物的制备工艺的确定

1、提取时间的确定

分别称取制何首乌252g、当归63g、补骨脂(黑芝麻5g炒)32g、枸杞子63g、沙苑子63g、茯苓63g、牛膝63g、山茱萸12g、杜仲12g、续断15g、短梗五加15g、川芎15g、女贞子15g，加4100g水；分别按以下方案进行煎煮：①第一次煎煮2小时，第二次煎煮1小时(两次均沸腾后开始计时)；②第一次煎煮2.5小时，第二次煎煮1小时(两次均沸腾后开始计时)③第一次煎煮3小时，第二次煎煮1小时(两次均沸腾后开始计时)，④第一次煎煮4小时，第二次煎煮1小时(两次均沸腾后开始计时)；煎煮后药液用100目绢布过滤，合并两次滤液并定容至相同体积，搅拌均匀，静置24小时；检测各药液中二苯乙烯苷含量，检测结果如下表10：

表10不同提取时间的二苯乙烯苷含量

试验结果表明，提取时间为4h的二苯乙烯苷含量最高，因此提取时间确定为4h。

2、浓缩温度的确定

分别称取制何首乌252g、当归63g、补骨脂(黑芝麻5g炒)32g、枸杞子63g、沙苑子63g、茯苓63g、牛膝63g、山茱萸12g、杜仲12g、续断15g、短梗五加15g、川芎15g、女贞子15g，加4100g水，第一次煎煮3小时，第二次煎煮1小时(两次均沸腾后开始计时)；煎煮后药液用100目绢布过滤，合并两次滤液，静置24小时；取静置后药液的上清液，减压浓缩成相对密度约为1.10的清膏，减压温度分别为50℃、60℃、70℃、80℃。检测各清膏中二苯乙烯苷含量，检测结果如下表11：

表11不同浓缩温度的二苯乙烯苷含量

试验结果表明，浓缩温度为60℃时二苯乙烯苷含量最高，因此浓缩温度为确定为60℃。

3、冷沉时间的确定

分别称取制何首乌252g、当归63g、补骨脂(黑芝麻5g炒)32g、枸杞子63g、沙苑子63g、茯苓63g、牛膝63g、山茱萸12g、杜仲12g、续断15g、短梗五加15g、川芎15g、女贞子15g，加4100g水，第一次煎煮3小时，第二次煎煮1小时(两次均沸腾后开始计时)；煎煮后药液用100目绢布过滤，合并两次滤液，静置24小时；取静置后药液的上清液，减压浓缩成相对密度约为1.10的清膏，减压温度为60℃。清膏中加入炼蜜250g、糖浆150g、苯甲酸钠3g，加热煮沸15min，放冷，加入煮沸过的纯化水调整总量至1000mL，搅匀；将药液等分4份，使用冷沉设备分别冷沉8h、16h、24h、32h。检测各药液中二苯乙烯苷含量，检测结果如下表12：

表12不同冷沉时间的二苯乙烯苷含量

试验结果表明，冷沉时间为24h的二苯乙烯苷含量最高，因此冷沉时间确定为24h。

4、灭菌条件的确定

分别称取制何首乌252g、当归63g、补骨脂(黑芝麻5g炒)32g、枸杞子63g、沙苑子63g、茯苓63g、牛膝63g、山茱萸12g、杜仲12g、续断15g、短梗五加15g、川芎15g、女贞子15g，加4100g水，第一次煎煮3小时，第二次煎煮1小时(两次均沸腾后开始计时)；煎煮后药液用100目绢布过滤，合并两次滤液，静置24小时；取静置后药液的上清液，减压浓缩成相对密度约为1.10的清膏，减压温度为60℃。清膏中加入炼蜜250g、糖浆150g、苯甲酸钠3g，加热煮沸15min，放冷，加入煮沸过的纯化水调整总量至1000mL，搅匀；药液冷藏24h；使用5μm滤膜过滤；灌装；灌装后口服制剂分为4等份，采用以下条件分别灭菌：①105℃灭菌15min；②105℃灭菌30min；③115℃灭菌15min；④115℃灭菌30min；检测各药液中二苯乙烯苷含量，检测结果如下表13：

表13不同冷沉时间的二苯乙烯苷含量

试验结果表明，灭菌条件为105℃、30min的二苯乙烯苷含量较高，且灭菌时间较为严苛，因此灭菌条件确定为105℃、30min。

3、二苯乙烯苷含量稳定性研究

1)调节pH值使口服制剂中二苯乙烯苷含量稳定

称取制何首乌252g、当归63g、补骨脂(黑芝麻5g炒)32g、枸杞子63g、沙苑子63g、茯苓63g、牛膝63g、山茱萸12g、杜仲12g、续断15g、短梗五加15g、川芎15g、女贞子15g，加4100g水煎煮，第一次煎煮3小时，第二次煎煮1小时(两次均沸腾后开始计时)；煎煮后药液用100目绢布过滤，合并两次滤液，静置24小时；取静置后药液的上清液，减压浓缩成相对密度约为1.10的清膏，减压温度为60℃。清膏中加入炼蜜250g、糖浆150g、苯甲酸钠3g，加热煮沸15min，放冷，加入煮沸过的纯化水调整总量至1000mL，冷藏24h；冷藏后药液用加入5μm脱脂棉滤芯的离心机离心(2500r/mn)，离心后药液再使用5μm滤膜进行过滤；将过滤后药液分成4等份，用5％氢氧化钠调pH分别至5.5、6.0、6.2、6.5；取调pH值后药液，采用棕色瓶灌封；灌封后口服液采用105℃蒸汽灭菌30min即得。

2)稳定性考察

考察在加速条件对产品的影响，设计实验方案如下：

取不同pH值的口服制剂各50支，放置于40℃稳定试验箱中，分别于0天、3个月检测其澄清度和二苯乙烯苷浓度。检测结果见下表14(检测谱图见图1-图12)：

表13稳定性考察

结论：根据口服制剂在加速条件(40℃)下，0天、3个月取样检测结果可以得出二苯乙烯苷含量随加速时间延长而逐渐降低。其中pH值为6.2的口服制剂在加速3个月后二苯乙烯苷含量最高，且远高于标准(≥0.5％)中对于二苯乙烯苷含量的要求。所以该制备工艺可以保证二苯乙烯苷含量符合药用要求，且长期质量稳定。

实施例5临床试验

1、病例选择

选取标准①中医辨证属肝肾不足症；②年龄20～50岁；③无糖尿病、恶性肿瘤、血液病、心脑血管疾病等病史；④选取患者75例，随机分为对照组1、对照组2与实验组各25例。对照组1男13例，女12例；对照组2男11例，女14例；实验组男15例，女10例。

2、实验方法

实验组：服用本发明中药组合物口服液体制剂(选取四川产地三年生秋季的何首乌块根)10mL/支。每次1支(10mL)，每日早、晚各服1次，口服。前2周为每日1次，2周后改为每周2次。

对照组1：服用实施例4中厂家1的口服液体制剂10mL/支。每次1支(10mL)，每日早、晚各服1次，口服。

对照组2：服用实施例4中口服液体制剂(选取贵州产地三年生秋季的何首乌块根)10mL/支。每次1支(10mL)，每日早、晚各服1次，口服。

三组每月为一疗程，观察3个疗程。治疗期间饮食以清淡为主，保持心情舒畅，起居有规律。治疗期间不使用其它任何生发产品。

3、治愈评判标准

治愈:毛发停止脱落，乌黑有光泽，无头屑，无瘙痒，发质有明显改善，有新发或毳毛长出；显效：毛发脱落减少50％，部分毛囊损伤处有新发生长，头屑明显减少，瘙痒明显减轻，发质有部分改善；有效：毛发脱落减少30％，少部分毛囊损处有新发生长，头屑有部分减少，瘙痒有减轻，发质无改善；无效：毛发依旧脱落严重，无新发生长，头屑无减少，瘙痒无减轻，发质无改善。

4、结果

三组试验治疗脱发、早白效果如下表15所示：

表15三组治疗前后有效率比较

组别	例数	治愈	显效	有效	无效	有效率
							实验组	25	9	10	6	0	76％
对照组1	25	5	7	13	0	48％
							对照组2	25	7	8	10	0	60％

咨询患者得知实验组中10例女性患者，其中8位有痛经情况，在此治疗期间的中后期有6名患者痛经情况得以改善，更有痛经轻者不再痛经，缓解女性痛经问题高达75％；对照组1中12例女性患者，其中9位有痛经情况，在此治疗期间的有轻微改善的有3例，其他患者无明显变化；对照组2中14例女性患者，其中12位有痛经情况，在此治疗期间的中后期有8名患者痛经情况得以改善，缓解女性痛经问题高达67％。75位患者中出现感冒症状的为10人，其中7人为对照组1患者，2人为对照组2患者，1人为实验组患者，实验组、对照组2对于易感冒体质有显著的改善。

结论：实验组临床治疗脱发、早白有效率远高于对照组1，略高于对照组2。因此提高二苯乙烯苷含量对于治疗由于肝肾阴虚所致脱发、早白有明显增益效果；与此同时实验组、对照组2还具有明显的补益精血、调经止痛、提高人体免疫力的疗效；两组试验人员共75人均无不良反应情况。

Claims (10)

1.一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物，其特征在于它按照重量份数是由制何首乌200-300份、当归40-80份、补骨脂15-45份、枸杞子40-90份、沙苑子40-80份、茯苓30-90份、牛膝30-90份、山茱萸10-30份、杜仲10-30份、续断10-30份、短梗五加10-30份、川芎10-30份和女贞子10-30份组成。

2.根据权利要求1所述的一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物，其特征在于所述的中药组合物是由制何首乌220～280份、当归50～70份、补骨脂20～40份、枸杞子50～80份、沙苑子50～70份、茯苓40～70份、牛膝40～70份、山茱萸10～20份、杜仲10～20份、续断10～20份、短梗五加15～20份、川芎15～20份和女贞子15～20份组成。

3.根据权利要求2所述的一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物，其特征在于所述的中药组合物是由制何首乌250～280份、当归55～70份、补骨脂20～35份、枸杞子50～70份、沙苑子50～70份、茯苓50～70份、牛膝50～70份、山茱萸10～20份、杜仲10～20份、续断10～20份、短梗五加15～20份、川芎15～20份和女贞子15～20份组成。

4.根据权利要求1至3任意一项所述的一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物，其特征在于所述的补骨脂是经黑芝麻炒制而得。

5.根据权利要求1至3任意一项所述的一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物，其特征在于所述的制何首乌是按照如下方式制得：

取何首乌块根并弃其中部，用黑豆汁与黄酒拌匀，置非铁质的容器内，密闭，炖至汁液吸尽，取出，晒干即得；其中，何首乌、黑豆和黄酒的质量比为10:1:2～3；

所述的黑豆汁的制法：取黑豆，加水煮3～4h，豆渣再加水煮2～3h，合并得黑豆汁。

6.根据权利要求5所述的一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物，其特征在于所述的何首乌是选自四川产地三年生秋季的何首乌块根。

7.制备权利要求1所述的用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物的方法，其特征在于该方法是按照以下步骤进行的：

一、煎煮

按照重量份数称取制何首乌200-300份、当归40-80份、补骨脂15-45份、枸杞子40-90份、沙苑子40-80份、茯苓30-90份、牛膝30-90份、山茱萸10-30份、杜仲10-30份、续断10-30份、短梗五加10-30份、川芎10-30份和女贞子10-30份，并混合后，加6倍量水煎煮，第一次煎煮2～3h，第二次煎煮1～2h；

二、过滤、静置

煎煮后药液过滤，合并两次滤液，静置24h；

三、浓缩

取静置后药液的上清液，减压浓缩成相对密度为1.0～1.1的清膏，减压温度为50～70℃；

四、配液

清膏中加入炼蜜、糖浆和苯甲酸钠，加热煮沸15～30min，放冷，加入煮沸过的纯化水调整至所需量，搅匀；

五、冷沉

药液搅拌均匀后冷沉12～24h；

六、离心组合过滤

冷藏后药液进行离心；

七、过滤

离心后药液用5～50μm滤膜过滤；

八、调pH值

将过滤后药液用质量浓度为5％氢氧化钠调pH至5.0-6.5；

九、灌装

取调pH值后药液，灌封；

十、灭菌

灌封后口服制剂在105℃条件下灭菌30min，即得。

8.根据权利要求7所述的一种制备用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物的方法，其特征在于步骤六中所述的离心转速为2500r/min。

9.如权利要求1所述的一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物有效成分含量检测方法，其特征在于它是按照以下步骤进行的：

一、供试品溶液：量取所述的用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物成品至容量瓶中，加乙醇溶解并定容，摇匀，得到供试品溶液；

二、对照品溶液：精密称取二苯乙烯苷对照品，置容量瓶中，加乙醇溶解并定容，摇匀，得到对照品溶液；

三、采用高效液相色谱进行检测，检测条件如下：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

流动相：以乙腈-水为流动相；其中，乙腈与水的体积比为23:77；

流速：0.8mL/min；

检测波长：320nm；

柱温：25℃；

进样量：5μL。

10.根据权利要求9所述的一种用于治疗肝肾两虚所致的脱发、早白的中药组合物含量检测方法，其特征在于所述的色谱柱型号为4.6mm×250mm，5μm。

Images