BRPI0609711A2 - uso de uma solução aquosa com potencial redutivo oxidativo (orp) - Google Patents

Abstract

USO DE UMA SOLUçãO AQUOSA COM POTENCIAL REDUTIVO OXIDATIVO (ORP). é provido um método para tratar queimaduras, preferivelmente queimaduras de segundo e terceiro grau, por administração de uma solução de água com potencial oxidativo redutivo (ORP) que é estável por pelo menos vinte e quatro horas.

Description

MÉTODO PARA TRATAR UMA QUEIMADURA DE SEGUNDO E TERCEIROGRAU EM UM PACIENTE

Referência cruzada a pedidos correlatos

Esse pedido de patente reivindica o benefício dosPedidos de Patente Provisórios US números 60/760.635depositado em 20 de janeiro de 2006; 60/760.567 depositadoem 20 de janeiro de 2006; 60/760.645 depositado em 20 dejaneiro de 2006; 60/760.557 depositado em 2 0 de janeiro de2006; 60/730.743 depositado em 27 de outubro de 2005;60/676.883 depositado em 2 de maio de 2005; 60/667.101depositado em 31 de março de 2005 e 60/664.361 depositadoem 23 de março de 2005; cada um dos quais incorporado aquiem sua totalidade como referência.

Campo da invenção

Essa invenção se refere ao método para tratarqueimaduras, preferivelmente queimaduras de segundo e deterceiro grau, por administração de soluções de água compotencial oxidativo redutivo.

Histórico da invenção

Água com potencial oxidativo redutivo (ORP), tambémconhecida coo água super oxidada pode ser empregada como umdesinfetante não tóxico para erradicar microorganismos,incluindo bactérias, vírus e esporos, em váriosprocedimentos. Por exemplo, a água ORP pode ser aplicadanos campos de cuidado da saúde e dispositivos médicos paradesinfetar superfícies e equipamento médico.

Vantajosamente, a água ORP é ambientalmente segura e,assim, evita a necessidade de procedimentos de descartecaros. Água ORP também possui aplicação no cuidado deferidas, esterilização de dispositivos médicos,esterilização de alimentos, em hospitais, nos lares dosconsumidores e antibioterrorismo.

Embora a água ORP seja um desinfetante eficaz, elapossui uma vida em prateleira extremamente limitada,geralmente apenas algumas horas. Como resultado deste curtoperíodo de vida, a produção da água ORP deve acontecerpróximo de onde a mesma será usada como desinf etante. Issosignifica que uma instalação para cuidado da saúde, talcomo um hospital, deve adquirir, alojar e manter oequipamento necessário para produzir a água ORP.Adicionalmente, as técnicas de fabricação anteriores nãoeram capazes de produzir quantidades suficientes em escalacomercial de água ORP para permitir seu uso difundido comoum desinfetante nas instalações para cuidado da saúde.

Consequentemente, existe a necessidade de uma águaORP que seja estável por um período de tempo extenso e demétodos de uso de tal água ORP. Existe também umanecessidade de métodos mais baratos para o preparo dequantidades em escala comercial de água ORP. A presenteinvenção prove tal água ORP e métodos de preparação eemprego de tal ãgua ORP.

A água ORP também vem sendo usada como um promotordo crescimento de células de tecido em pacientes conformedescrito na Publicação de Pedido de Patente US 2002/0160053Al. As infecções permanecem um problema no cuidado deferidas especialmente com a emergência de bactériasresistentes aos multiantibióticos. Tais infecções incluem,por exemplo, Acínetojbacter baumannii f Staph aureus, Ps.aeruginosa, E. coli, e outros. Consequentemente, existe anecessidade de composições contendo água ORP para uso notratamento de queimaduras que impedem infecções. Essas eoutras vantagens da invenção, bem como aspectos inventivosadicionais, ficarão claros da descrição da presenteinvenção provida aqui.

Breve sumário da invenção

A presente invenção prove um método para tratamentode queimaduras em um paciente por administração de umasolução de água com potencial oxidativo redutivo (ORP),onde a solução é estável por pelo menos vinte e quatrohoras. A invenção também se dirige a um método para tratarqueimaduras em um paciente por administração de uma soluçãode água com potencial oxidativo redutivo, onde a soluçãocompreende água de ânodo e água de cátodo. Em umaconcretização, a solução de água ORP usada no método dainvenção compreende uma ou mais espécies de cloro.

A presente invenção prove, adicionalmente, ummétodo para tratar tecido danificado ou lesionado, o métodocompreendendo contato do tecido danificado ou lesionado comuma quantidade terapeuticamente eficaz de uma solução deágua ORP, onde a solução e estável por pelo menos vinte equatro horas. O método inclui tratamento do tecido, que foidanificado ou lesionado por cirurgia ou que foi danificadoou lesionado por causas que não sejam necessariamenterelacionadas à cirurgia, por exemplo, queimaduras, cortes,abrasões, arranhões, erupções, úlceras, ferida por punção,infecções e semelhantes.

A presente invenção prove, adicionalmente, ummétodo para desinfecção de uma superfície, o métodocompreendendo contato da superfície com uma quantidadeantiinfecciosa de uma solução de água ORP, onde a solução éinstável por pelo menos vinte e quatro horas. A superfíciepode ser biológica, inanimada ou uma combinação de taissuperfícies pode ser desinfetada de acordo com a presenteinvenção. Superfícies biológicas incluem, por exemplo,tecido muscular, tecido ósseo, tecido de órgãos, tecidomucosal e combinações dos mesmos, podendo ser desinfetadasde acordo com a presente invenção. Superfícies inanimadasincluem, por exemplo, dispositivos implantãveiscirurgicamente, dispositivos protéticos e dispositivosmédicos.

Outro aspecto da presente invenção inclui umaformulação para administração tópica compreendendo umasolução de água com potencial oxidativo redutivo e umagente espessante, onde a formulação é estável por pelomenos vinte e quatro horas.

A invenção também se refere a uma forma de dosagemfarmacêutica compreendendo (1) uma formulação paraadministração tópica compreendendo uma solução de água compotencial oxidativo reduzido e um agente espessante e (2)um recipiente vedado, onde a formulação é estável por pelomenos vinte e quatro horas.

Adicionalmente, a invenção se refere a um métodopara tratar uma condição em um paciente compreendendoadministração tópica a um paciente de uma quantidadeterapeuticamente eficaz de uma formulação compreendendo umasolução com potencial oxidativo redutivo e um agenteespessante, onde a formulação é estável por pelo menoscerca de vinte e quatro horas.

A invenção prove, adicionalmente, um método parapromover a cura da ferida em um paciente compreendendoaplicação a uma ferida de uma formulação compreendendo umasolução de água com potencial oxidativo redutivo e umagente espessante, onde a formulação é administrada em umaquantidade suficiente para promover a cura da ferida e ondea formulação é estável por pelo menos vinte e quatro horas.

A invenção prove adicionalmente um método paraprevenir uma condição em um paciente compreendendoadministração tópica a um paciente de uma quantidadeterapeuticamente eficaz de uma formulação compreendendo umasolução de água com potencial oxidativo redutivo e umagente espessante, onde a formulação é estável por pelomenos cerca de vinte e quatro horas.

Outro aspecto da presente invenção inclui umaparelho para produção de uma solução de água com potencialoxidativo redutivo compreendendo pelo menos duas células deeletrólise, onde cada célula compreende uma câmara deânodo, câmara de cátodo e a câmara de solução de salmouralocalizada entre as câmaras de ânodo e cátodo, onde acâmara de ânodo é separada da câmara de solução de salmourapor um eletrodo de ânodo e uma primeira membrana, e acâmara de cátodo é separada da câmara de solução desalmoura por um eletrodo de cátodo e uma segunda membrana.O aparelho pode incluir um sistema de recirculação para asolução de salmoura fornecido à câmara de solução desalmoura para permitir que a concentração de íons da salafosse controlada e mantida.

A invenção prove adicionalmente um processo paraprodução de solução de água com potencial oxidativoredutivo compreendendo provisão de pelo menos duas célulasde eletrólise, onde cada célula compreende uma câmara deânodo, câmara de cátodo e câmara de solução de salmouralocalizada entre as câmaras de ânodo e cátodo, onde acâmara de ânodo é separada da câmara de solução de salmourapor um eletrodo de ânodo e uma primeira membrana, e acâmara de cátodo é separada da câmara de solução desalmoura por um eletrodo de cátodo e uma segunda membrana,provendo um fluxo de água através da câmara de ânodo ecâmara de cátodo, provendo um fluxo de uma solução desalmoura através da câmara de solução de salmoura, provendocorrente elétrica para o eletrodo de ânodo e o eletrodo decátodo, simultaneamente com o fluxo de água através dascâmaras de ânodo e cátodo e o fluxo da solução de salmouraatravés da câmara de solução de salmoura e coleta dasolução de água com potencial oxidativo redutivo produzidapelas células de eletrólise.

A invenção também se refere a um processo paraprodução de solução de água com potencial oxidativoredutivo compreendendo provisão de pelo menos uma célula deeletrólise, onde a célula compreende uma câmara de ânodo,câmara de cátodo e câmara de solução de salmoura localizadaentre as câmaras de ânodo e cátodo, onde a câmara de ânodoé separada da câmara de solução de salmoura por um eletrododo ânodo e uma primeira membrana, e a câmara de cátodo éseparada da câmara de solução de salmoura por um eletrodode cátodo e uma segunda membrana, provendo um fluxo de águaatravés da câmara de ânodo e a câmara de cátodo, provendoum fluxo de solução de salmoura através da câmara desolução de salmoura, provendo corrente elétrica para oeletrodo de ânodo e eletrodo de cátodo, simultaneamente como fluxo de água através das câmaras de ânodo e cátodo e ofluxo de solução de salmoura através da câmara de soluçãode salmoura e coletando a água com potencial oxidativoredutivo produzida pelas células de eletrólise, onde asolução compreende água de ânodo e água de cãtodo.

Breve descrição dos desenhos

A figura 1 é um diagrama esquemãtico de uma célulade eletrólise de três câmaras, para produção de uma soluçãode água com potencial oxidativo redutivo da presenteinvenção.

A figura 2 ilustra uma célula de eletrólise de trêscâmaras e mostra espécies iônicas geradas na mesma.

A figura 3 é um fluxograma esquemãtico de umprocesso para produção de uma água com potencial oxidativoredutivo da presente invenção.

As figuras 4A-4C ilustram uma comparação gráfica daviabilidade da célula, apoptose e necrose em fibroblastosdérmicos humanos (HDFs) tratados com uma solução de águaORP exemplar (MCN) versus peróxido de hidrogênio (HP) .

A figura 5 é uma comparação gráfica dos níveis deadutos de 8-hidróxi-21-desoxiguanosina (8-OHdG) em HDFstratados com uma solução de água ORP exemplar (MNC) versus500 pM de peróxido de hidrogênio (HP).

As figuras 6A-6B ilustram a expressão de umasenescência associada a P-galactosidase em HDFs apósexposição crônica à baixas concentrações de solução de águaORP exemplar (MCN) versus peróxido de hidrogênio (HP) .

Descrição detalhada da invenção

A presente invenção prove um método para prevenirou tratar uma condição em um paciente, o métodocompreendendo administração ao paciente de uma quantidadeterapeuticamente eficaz de uma solução de água oxidativaredutiva (ORP) , onde a solução é estável por pelo menosvinte e quatro horas. A condição pode incluir, por exemplo,condições médicas, doenças, lesões, alergias e semelhantesque são tratáveis com a solução de água ORP da presenteinvenção.

A quantidade terapeuticamente eficaz administradaao paciente, por exemplo, um animal, especificamente um serhumano, no contexto da presente invenção seria suficientepara efetuar uma resposta terapêutica ou profilática nopaciente em relação a um quadro de tempo razoável. A dosepode ser prontamente determinada usando métodos que são bemconhecidos na arte. Um versado na técnica reconhecerá que onível de dosagem específico para qualquer pacienteespecífico dependerá de vários fatores. Por exemplo, a dosepode ser determinada com base na resistência da solução deágua ORP específica empregada, da gravidade da condição, dopeso corpóreo do paciente, da idade do paciente, dacondição física e mental do paciente, da saúde geral, sexo,dieta e semelhantes. O tamanho da dose também pode serdeterminado com base na existência, natureza e extensão dequaisquer efeitos colaterais adversos que possam acompanhara administração de uma solução de água ORP específica. Édesejável, sempre que possível, manter os efeitos adversosem um mínimo.

Os fatores que podem ser levados em consideraçãopara uma dosagem específica incluem, por exemplo,biodisponibilidade, perfil metabólico, tempo deadministração, via de administração, razão de excreção,farmacodinâmicas associadas à solução de água ORPespecífica em um paciente específico e semelhantes. Outrosfatores podem incluir, por exemplo, a potência ou eficáciada solução de água ORP com relação à condição específica aser tratada, a gravidade dos sintomas apresentados antes oudurante o curso da terapia e semelhantes. Em algunsexemplos, o que constitui uma quantidade terapeuticamenteeficaz também pode ser determinado, em parte, pelo uso deum ou mais dos ensaios, por exemplo, bioensaios, que sãorazoável e clinicamente previsíveis da eficácia de umasolução de água ORP específica para o tratamento ouprevenção de uma condição específica.

A solução de água ORP da presente invenção pode seradministrada terapeuticamente, sozinha ou em combinação comum ou mais outros agentes terapêuticos, a um paciente, porexemplo, um ser humano, por exemplo, para tratar umacondição existente. A solução de água ORP da presenteinvenção também pode ser administrada profilaticamente,sozinha ou em combinação com um ou mais outros agentesterapêuticos, a um paciente, por exemplo, um ser humano quefoi exposto a um ou mais agentes causativos associados àcondição. Por exemplo, a solução de água ORP da invençãopode ser administrada apropriadamente a um paciente que foiexposto a um ou mais microorganismos que causam infecção(por exemplo, vírus, bactérias e/ou fungos)

profilaticamente para inibir ou diminuir a probabilidade deinfecção em um paciente ou diminuir a gravidade de umainfecção que se desenvolve como resultado de tal exposição.

Um versado na arte apreciará que os métodosapropriados de administração da solução de água ORP dapresente invenção estão disponíveis e, embora mais de umavia de administração possa ser usada, uma rota específicapode prover uma reação imediata e mais eficaz que outravia. A quantidade terapeuticamente eficaz pode ser a dosenecessária para obter um "nível eficaz" da solução de águaORP em um. paciente individual. A quantidadeterapeuticamente eficaz pode ser definida, por exemplo,como a quantidade necessária a ser administrada a umpaciente individual para obter um nível no sangue, nível notecido e/ou nível intracelular de água ORP da presenteinvenção, de modo a prevenir ou tratar a condição nopaciente.

Quando o nível eficaz é usado como um ponto finalpreferido para a dosagem, a dose real e a programação podemvariar dependendo, por exemplo de diferençasinterindividuais nos farmacocinéticos, distribuição,metabolismo e semelhantes. O nível eficaz pode tambémvariar quando a solução de água ORP da presente invenção éusada em combinação com um ou mais agentes terapêuticos quenão a solução de água ORP da presente invenção, porexemplo, um ou mais agentes antiinf ecciosos, um ou maisagentes de "moderação", "modulação" ou "neutralização", porexemplo, conforme descrito nas Patentes US números5.334.383 e 5.622.848, um ou mais agentes antiinflamatoriose semelhantes.

Um indicador apropriado pode ser empregado paradeterminar e/ou monitorar o nível eficaz. Por exemplo, onível eficaz pode ser determinado por análise direta (porexemplo, química analítica) ou por análise indireta (porexemplo, com indicadores de química clínica) de amostrasapropriadas de pacientes (por exemplo, sangue e/outecidos). O nível eficaz também pode ser determinado, porexemplo, por observações diretas ou indiretas tais como,por exemplo, a concentração de metabólitos urinários,alterações nos marcadores associados a condição (porexemplo, contagem viral no caso de uma infecção viral),diminuição dos sintomas associados com as condições esemelhantes.

A água ORP da presente invenção pode seradministrada usando qualquer método apropriado deadministração conhecido na arte. A água ORP da presenteinvenção pode ser administrada em combinação com um ou maisveículos farmaceuticamente aceitáveis, transportadores,adjuvantes, excipientes ou diluentes que são conhecidos naarte. Um versado na arte pode facilmente determinar aformulação e método de administração apropriados paraadministração da água ORP de acordo com a presenteinvenção. Quaisquer ajustes necessários na dose podem serprontamente realizados por um praticante versado paradeterminar a natureza ou gravidade da condição sendotratada, em vista de outros fatores, tais como, porexemplo, efeitos colaterais, alterações na condição geraldo paciente e semelhantes.

A solução ORP da presente invenção pode seradministrada às vias aéreas como um vapor ou umapulverização. Além disso, a solução de água ORP da presenteinvenção pode ser administrada por aerossolizaçao,nebulização ou atomização. Quando a solução de água ORP dainvenção é administrada por aerossolizaçao, nebulização ouatomização, é preferivelmente administrada na forma degotículas possuindo um diâmetro na faixa de cerca de 1mícron a cerca de 10 micra.

Métodos e dispositivos que são úteis paraaerossolização, nebulização e atomização são bem conhecidosna arte. Nebulizadores médicos, por exemplo, vem sendousados para liberar uma dose medida de um líquidofisiologicamente ativo em uma corrente de gás de inspiraçãopara inalação por um recipiente. Vide, por exemplo, PatenteUS número 6.598.602. Os nebulizadores médicos podem operarpara gerar gotícuias de líquido, que formam um aerossol como gas de inspiração. Em outras circunstâncias,nebulizadores médicos podem ser usados para injetargotículas de água em uma corrente de gás de inspiração paraprover gás com um teor de umidade a um recipiente, que éespecificamente útil quando a corrente de gás de inspiraçãoé provida por um auxiliar mecânico de respiração, tal comoum respirador, ventilador ou sistema de liberaçãoanestésico.

Um nebulizador exemplar é descrito, por exemplo, noWO 95/01137, que descreve um dispositivo de manutençãomanual que opera para ejetar gotículas de um líquido médicoem uma corrente de ar de passagem (corrente de gas deinspiração) que é gerada por uma inalação do recipienteatravés de uma peça de boca. Outro exemplo pode serencontrado na Patente US número 5.388.571, que descreve umsistema de ventilador de pressão positiva que provecontrole e aumento da respiração de um paciente cominsuficiência respiratória e que inclui um nebulizador paraliberação de partículas de medição líquida nas vias aérease alvéolos dos pulmões de um paciente. A Patente US número5.312.281 descreve um nebulizador de ondas ultra-sônicasque atomiza agua ou líquido em temperatura baixa ereportadamente por ajustar o tamanho da névoa. Além disso,a Patente US número 5.287.847 descreve um aparelho denebulização pneumãtico com razões de fluxo escalãveis evolumes de rendimento para liberação de um aerossolmedicinal para recém nascidos, crianças e adultos.Adicionalmente, a Patente US número 5.063.922 descreve umatomizador ultra-sônico.

O método da presente invenção também pode serempregado para a prevenção ou tratamento de uma infecção,que é tratãvel com a solução de agua ORP da presenteinvenção. A inf ecção pode ser causada por um ou maisagentes patogênicos infecciosos, tais como, por exemplo,microorganismos infecciosos. Tais microorganismos podemincluir, por exemplo, vírus, bactérias e fungos. Os víruspodem incluir, por exemplo, um ou mais vírus selecionadosdo grupo consistindo em adenovírus, HIV, rinovírus, e vírusda gripe. As bactérias podem incluir, por exemplo, uma oumais bactérias selecionadas do grupo consistindo emEscherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcusaureus e Mycobaterium tuberculosis. Os fungos podemincluir, por exemplo, um ou mais fungos selecionados dogrupo consistindo em Cândida albicans, Bacillus subtilis eBacillus athrophaeus. O método da presente invenção tambémpode ser usado para a prevenção ou tratamento de condiçõesinflamatórias ou reações alérgicas, que são tratãveis com asolução de água ORP da invenção.

Além disso, os organismos que podem sercontrolados, reduzidos, mortos ou erradicados pelotratamento com a solução de água ORP usada de acordo com ainvenção incluem, por exemplo, Pseudomonas aeruginosa,Escherichia coli, Enterococcus hirae, Acinetobacterbaumannii, espécie Acinetojbacter, Bacteroides fragilis,Enterobacter aerogenes, Enterococcus faecalis, Enterococcusfaecium resistente a Vancomicina (VRE, MDR), Haemophilusinfluenzae, Klebsiella oxytoca, Klebsiella pneumoniae,Micrococcus luteust Proteus mirabilis, Serratia marcescens,Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis,Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis,Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus pneumoniae,Streptococcus pyogenes, Salmonella choleraesuis, Shigelladysenteriae e outras bactérias suscetíveis, bem como,leveduras, por exemplo, Trichophyton mentagrophytes,Cândida albicans e Cândida tropicalis. A solução de águaORP pode também ser usada de acordo com a invenção paracontrolar, reduzir, matar ou erradicar vírus incluindo, porexemplo, adenovírus, vírus da imunodeficiência humana(HIV) , rinovírus, influenza (por exemplo, influenza A),hepatite (por exemplo, hepatite A) , coronavírus(responsável, por exemplo, pela Síndrome Respiratória GraveAguda (SARS)), rotavírus, vírus da gripe aviaria, vírussincitial respiratório, vírus do herpes simples, víruszoster da varicela, vírus da rubéola e outros vírussuscetíveis.

Em outra concretização, o método da presenteinvenção compreende administração parenteral da solução deágua ORP da invenção. A administração parenteral podeincluir administração da solução de água ORP da invençãointravenosa, subcutânea, intramuscular ou

intraperitoneamente. Em uma concretização preferida, asolução de água ORP da presente invenção é administradaintravenosamente para prevenir ou tratar uma condição deacordo com o método da presente invenção. Condiçõesapropriadas podem incluir, por exemplo, miocardite viral,esclerose múltipla e AIDS. Vide, por exemplo, Patentes USnúmeros 5.334.383 e 5.622.848 que descrevem métodos paratratar miocardite viral, esclerose múltipla e AIDS atravésde administração intravenosa de soluções de água ORP.

A presente invenção prove, adicionalmente, ummétodo para tratamento de tecido danificado ou lesionado,onde o método compreende contato do tecido danificado oulesionado com uma quantidade terapeuticamente eficaz dasolução de água ORP da presente invenção. Qualquer métodoapropriado pode ser usado para contatar o tecido danificadoou lesionado, de modo a tratar o tecido danificado oulesionado de acordo com a presente invenção. Por exemplo, otecido danificado ou lesionado pode ser tratado de acordocom a invenção por irrigação do tecido com a solução deágua ORP da invenção, de modo a contatar o tecidodanificado ou lesionado com a água ORP. Alternativamente (eadicionalmente) , a solução de água ORP da presente invençãopode ser administrada como um vapor ou uma pulverização oupor a aerossolização, nebulização ou atomização, conformedescrito aqui, de modo a contatar o tecido danificado oulesionado com a água ORP.

O método da presente invenção pode ser usado notratamento de tecidos, que foram danificados ou lesionados,por exemplo, por cirurgia. Por exemplo, o método dapresente invenção pode ser usado para tratar os tecidos,que foram danificados ou lesionados por uma incisão. Alémdisso, o método da presente invenção pode ser usado paratratar os tecidos, que foram danificados ou lesionados porcirurgia oral, cirurgia de enxerto, cirurgia de implante,cirurgia de transplante, cauterização, amputação, radiação,quimioterapia e combinações dos mesmos. A cirurgia oralpode incluir, por exemplo, cirurgia dental, tal como, porexemplo, cirurgia de canal da raiz, extração dos dentes,cirurgia da gengiva e semelhantes.

O método da presente invenção também incluitratamento dos tecidos que foram prejudicados ou lesionadospor uma ou mais dentre queimaduras, cortes, abrasão,arranhões, erupções, úlceras, feridas por punção,combinações das mesmas e semelhantes que não sãonecessariamente causados por cirurgia. O método da presenteinvenção também pode ser usado para tratar tecidodanificado ou lesionado, que é infectado ou tecidodanificado ou lesionado devido à infecção. Tal infecçãopode ser causada por um ou mais agentes patogênicosinfecciosos, tais como, por exemplo, um ou maismicroorganismos selecionados do grupo consistindo em vírus,bactérias e fungos, conforme descritos aqui.

A presente invenção prove, adicionalmente, ummétodo para desinfecção da superfície, o métodocompreendendo contato da superfície com uma quantidadeantiinfecciosa da solução de água ORP da presente invenção.De acordo com o método da presente invenção, a superfíciepode ser contatada usando qualquer método apropriado. Porexemplo, a superfície pode ser contatada por irrigação damesma com a solução de água ORP da presente invenção, demodo a desinfetar a superfície de acordo com a invenção.Adicionalmente, a superfície pode ser contatada poraplicação da solução de água ORP da presente invenção àsuperfície como um vapor ou uma pulverização, ou poraerossolização, nebulização ou atomização, conformedescrito aqui, de modo a desinfetar a superfície de acordocom a invenção. Adicionalmente, a solução de água ORP dapresente invenção pode ser aplicada à superfície com umpano de limpeza, conforme descrito aqui. Por desinfecção dasuperfície de acordo com a presente invenção, a superfíciepode ser limpa de microorganismos infecciosos. Alternativa(ou adicionalmente) , a solução de água ORP da presenteinvenção pode ser aplicada à superfície para prover umabarreira à infecção, pelo que, desinfetando uma superfíciede acordo com a presente invenção.

O método da presente invenção pode ser usado paradesinfetar uma superfície, que é biológica, inanimada ouuma combinação das mesmas. As superfícies biológicas podemincluir, por exemplo, tecidos dentro de uma ou maiscavidades corpóreas, tais como, por exemplo, cavidade oral,cavidade do sino, cavidade craniana, cavidade abdominal ecavidade torãcica. Os tecidos dentro da cavidade oralincluem, por exemplo, tecido da boca, tecido da gengiva,tecido da língua e tecido da garganta. O tecido biológicotambém pode incluir tecido muscular, tecido ósseo, tecidode órgãos, tecido de mucosa e combinações dos mesmos.Superfícies inanimadas incluem, por exemplo, dispositivosimplantãveis cirurgicamente, dispositivos protéticos edispositivos médicos. De acordo com o método da presenteinvenção, as superfícies de órgãos internos, vísceras,músculos e semelhantes que podem ser expostos durante acirurgia, podem ser desinfetadas, por exemplo, para mantera esterilidade do ambiente cirúrgico.

A presente invenção também prove formulações paraadministração tópica compreendendo uma solução'de água compotencial oxidativo redutivo (ORP) e um agente espessanteque são preparados para prover eficácia e estabilidademelhoradas.

A quantidade de água presente nas formulações dainvenção e geralmente de cerca de 10% em peso a cerca de95% em peso, com base no peso da formulação.Preferivelmente, a quantidade de água presente é de cercade 50% em peso a cerca de 90% em peso.

As formulações da invenção preferivelmente incluemuma solução de água ORP compreendendo água de ânodo e águade cá todo. A água de ânodo é produzida na câmara de ânododa célula de eletrólise usada na presente invenção. A águade cátodo é produzida na câmara de cátodo da célula deeletrólise.

A formulação para administração tópica de acordocom a presente invenção compreende adicionalmente um agenteespessante. Qualquer agente espessante apropriado pode serusado para produzir uma formulação possuindo a viscosidadedesejada que é geralmente maior que a solução de água ORPsozinha. O agente espessante utilizado é compatível comasolução de água ORP e outros componentes opcionais naformulação. Agentes espessantes apropriados incluem, porémnão estão limitados aos polímeros e hidroxietilcelulose.Polímeros apropriados podem ser homopolímeros oucopolímeros e são opcionalmente reticulados. Outros agentesespessantes apropriados são geralmente conhecidos na arte(vide, por exemplo, Handbook of Cosmetic and Personal CareAdditives, 2a ed. , Ashe e outros eds. (2002), e Handbook ofPharmaceutical Excipients, 4 a ed., Rowe e outros eds.(2003)).

Agentes espessantes preferidos são polímeros à basede ácido acrílico. Mais preferivelmente, os agentesespessantes são polímeros à base de ácido acrílico,reticulados, de peso molecular alto. Esses polímerospossuem a seguinte fórmula geral:

<formula>formula see original document page 20</formula>

Tais polímeros são vendidos sob a marca registradaCarbopol(R) pela Noveon. Os polímeros Carbopol(R> sãogeralmente fornecidos como modificadores de reologia parauso como espessantes, agentes de suspensão eestabilizadores em uma variedade de produtos para cuidadopessoal, farmacêuticos e limpadores domésticos. Ospolímeros CarbopolÍR) podem ser usados na forma sólida (porexemplo, pó) ou na forma líquida.

Os polímeros à base de ácido acrílico apropriadospara uso na invenção podem ser homopolímeros oucopolímeros. Homopolímeros apropriados podem serreticulados, preferivelmente com sacarose de alila oupentaeritritol alila. Copolímeros apropriados de ácidoacrílico são modificados por acrilatos de alquila de cadeialonga (Ci0-C30) e podem ser reticulados, pref erivelmente,com pentaeritritol alila.Os polímeros CarbopolÍR) são neutralizados a fim deobter máxima viscosidade. Conforme fornecidos, os polímerosCarbopolÍR) são moléculas ácidas hermeticamente espiraladase secas, mantidas em uma estrutura espiralada por ligaçõesde hidrogênio. Uma vez dispersas em água, ou outrosolvente, elas começam a hidratar e a desenrolarparcialmente. O modo mais comum de obter um espessamentomáximo dos polímeros CarbopolÍR) é por conversão do polímeroácido em um sal. Isso é facilmente obtido por neutralizaçãocom uma base comum, tal como, hidróxido de sódio (NaOH) outrietanolamina (TEA). Essa neutralização "desenrola" opolímero de cadeia longa, intumescendo a molécula em umaforma de espessamento eficaz.

Os agentes espessantes apropriados renderão aviscosidade desejada para a formulação, bem como outrascaracterísticas, tais como, aparência, resistência aocisalhamento, resistência ao íon e estabilidade térmica.Por exemplo, o Carbopol(R) 934 é preferido para umaformulação que é tanto uma suspensão quanto emulsão (aoinvés de um gel límpido) com uma viscosidade superior a3.000 centipoise (cps) . Carbopol(R) 974P pode ser usadoalternativamente por suas propriedades bioadesivasvantajosas.

Qualquer quantidade apropriada de um agenteespessante está presente em uma formulação da invenção pararender a viscosidade desejada para a formulação. De modogeral, a quantidade de agente espessante é de cerca de 0,1%em peso a cerca de 50% em peso, com base no peso daformulação. Preferivelmente, a quantidade do agenteespessante é de cerca de 0,1% a cerca de 10% em peso.Em outros termos, a quantidade de agente espessantecom base no volume da solução de água ORP é geralmente decerca de 0,1% peso/volume (mg/mL) a cerca de 50% empeso/volume (mg/mL). Preferivelmente, a quantidade deagente espessante é de cerca de 0,1% peso/volume a cerca de10% peso/volume.

A quantidade de agente espessante geralmente é decerca de 0,1 g/250 mL a cerca de 50 mg/250 mL da solução deágua ORP. Preferivelmente, a quantidade de agenteespessante presente é de cerca de 1 mg/250 mL a cerca de 20mg/250 mL da solução de água ORP e, mais pref erivelmente,de cerca de 3 mg/250 mL a cerca de 15 mg/250 mL.

Quando os polímeros à base de ácido acrílico sãoempregados em concentrações baixas, a formulação fluifacilmente com uma sensação deslizante. Em concentraçõesmais altas, a formulação da invenção possui uma viscosidadealta e é pseudoplástica e resistente ao fluxo. Quando forçade cisalhamento é aplicada por um misturador ou bomba, aviscosidade aparente é reduzida e a formulação pode serbombeada.

A formulação da invenção pode incluir,opcionalmente, um agente neutralizante. Qualquer agenteneutralizante pode ser usado para obter o pH desejado daformulação. Agentes neutralizantes apropriados incluem, porexemplo, hidróxido de sódio, trietanolamina, amônia,hidróxido de potássio, L-arginina, AMP-95, Neutrol TE, TrisAmino, Ethomeen, di-isopropanolamina e tri-

isopropanolamina. Outros agentes neutralizantes sãogeralmente conhecidos na arte (vide, por exemplo, Handbookof Cosmetic and Personal Care Additives, 2a ed. , Ashe eoutros eds. (2002), e Handbook of PharmaceuticalExcipients, 4a ed., Rowe e outros eds. (2003)). Agentesneutralizantes apropriados podem tanto estar na formalíquida quanto sólida.

Preferivelmente, o neutralizante trietanolamina éusado quando o agente espessante é um polímero à base deácido acrílico, tal como Carbopol<R> . O agente neutralizanteconverte a formulação em um gel.

Qualquer quantidade apropriada de agenteneutralizante pode ser incluída na formulação da invenção.Geralmente, a quantidade de agente neutralizante é de cercade 0,1% em peso a cerca de 50% em peso, com base no peso daformulação. Preferivelmente, a quantidade do agenteneutralizante é de cerca de 0,1% a cerca de 10% em peso,com base no peso da formulação. Em uma base de volume, aquantidade de agente neutralizante está presente em umaquantidade de cerca de 1% a cerca de 50% em volume, combase no volume da solução de água ORP.

Quando adicionado na forma líquida, o neutralizantepode ser adicionado em uma quantidade de cerca de 1 mL/250mL a cerca de 100 mL/2 5 0 mL da solução de água ORP.Pref erivelmente, a quantidade de agente neutralizante é decerca de 10 mL/250 mL a cerca de 90 mg/250 mL da solução deágua ORP. Adicionalmente, quando na forma sólida, o agenteneutralizante pode ser adicionado em quantidades sólidasque correspondem àquelas quantidades líquidas.

A formulação pode conter também componentesadicionais tais como, corantes, fragrâncias, tampões,veículos fisiologicamente aceitáveis e/ou excipientes esemelhantes. Exemplos de corantes apropriados incluem,porém não estão limitados ao dióxido de titânio, óxidos deferro, violeta carbazol, oxido de cromo-cobalto-alumínio,copolímeros do éster 4-Bis[(2-hidroxietil)amino] -9,10-antracenodona bis(2-propenóico) e semelhantes. Qualquerfragrância apropriada pode ser usada.

A formulação da invenção pode ser preparada porqualquer dispositivo apropriado. Os componentes daformulação, tais como, solução de água ORP e agenteespessante, podem ser misturados em conjunto de qualquermodo para render uma mistura homogênea. Preferivelmente, oscomponentes são misturados em conjunto por vários minutosusando uma mistura elétrica ou outro dispositivo apropriadopara garantir uniformidade. Os componentes da formulaçãosão geralmente misturados de cerca de 4 00 rpm a cerca de1.000 rpm, pref erivelmente de cerca de 500 rpm a cerca de8 00 rpm e mais pref erivelmente de 500 rpm a cerca de 600 rpm.

A formulação é misturada por um período de temposuficiente para render uma mistura homogênea, geralmente decerca de 1 minuto a cerca de 10 minutos após todos oscomponentes terem sido combinados.

Quando o agente espessante está na forma de um pó,ele pode primeiro ser peneirado para romper os aglomeradosmaiores para permitir a preparação de uma formulaçãohomogênea.

Um agente neutralizante, tal como, trietanolamina,pode ser subseqüentemente adicionado à formulação contendoa solução de água ORP e agente espessante. Conforme citadoacima, a adição de trietanolamina pode permitir que oagente espessante, tal como, Carbopol(R) desenrole e, assim,renda uma formulação possuindo a viscosidade desejada.

O corante ou fragrância pode ser adicionada àmistura tanto antes quanto após o agente espessante, talcomo CarbopolÍR) ser dissolvido na água ORP, porém antes daetapa de neutralização.

As propriedades físicas da formulação da invençãosão tipicamente as mesmas que aquelas da solução de águaORP presente na formulação. As propriedades da solução deágua ORP permanecem mesmo após a adição do agenteespessante e do agente neutralizante opcional. Por exemplo,a estabilidade e o pH da solução de água ORP propriamente euma formulação contendo a solução de água ORP sãogeralmente as mesmas. Consequentemente, todas ascaracterísticas da solução de água ORP descritas aqui seaplicam à formulação da invenção.

Por exemplo, uma formulação da invenção égeralmente estável por pelo menos vinte e quatro horas etipicamente pelo menos dois dias. Mais tipicamente, aformulação é estável por pelo menos cerca de uma semana(por exemplo, uma semana, duas semanas, três semanas,quatro semanas, etc.) e preferivelmente pelo menos cerca dedois meses. Mais preferivelmente, a formulação é estávelpor pelo menos seis meses após sua preparação. Mesmo maispreferivelmente, a formulação é estável por pelo menos umano e mais preferivelmente por pelo menos três anos.

O pH da formulação é geralmente de cerca de 6 acerca de 8. Preferivelmente, o pH da formulação é de cercade 6,2 e cerca de 7,8, e mais pref erivelmente de cerca de7,4 e cerca de 7,6.

A formulação da invenção pode ser usada em qualquerforma apropriada para administração tópica a um paciente.Uma forma apropriada inclui, porém não é limitada ao gel,loção, creme, pasta, ungüento e semelhantes, essas formassendo conhecidas na arte (vide, por exemplo, ModernPharmaceutics, 3a ed., Banker e outros ed. (1996)). Os géissão tipicamente uma emulsão semi-sólida ou suspensão quepossui uma estrutura tridimensional. Preferivelmente, aformulação está na forma de um gel.

As pastas são suspensões geralmente semi-sólidasque contêm freqüentemente uma grande porção de sólidos (porexemplo, cerca de 20% a cerca de 50%) dispersos em umveículo aquoso ou graxo. As loções são tipicamente emulsõeslíquidas contendo um veículo à base de água e voláteis(mais de 50%) e que possuem uma viscosidade suficientementebaixa (inferior a 30.0 00 cps) a serem derramadas. Osungüentos e cremes são emulsões ou suspensões geralmentesemi-sólidas que podem conter hidrocarbonetos oupolietileno glicóis como parte do veículo juntamente comoutros componentes voláteis.

Quando uma formulação da invenção está na forma deum gel, a viscosidade do gel está na faixa de cerca de10.000 a cerca de 100.000 centipoise (cps) (por exemplo,cerca de 15.000 cps, cerca de 20.000 cps, cerca de 25.000cps, cerca de 30.000 cps, cerca de 35.000 cps, cerca de40.000 cps, cerca de 45.000 cps, cerca de 50.000 cps, cercade 55.000 cps, cerca de 60.000 cps, cerca de 65.000 cps,cerca de 70.000 cps, cerca de 75.000 cps, cerca de 80.000cps, cerca de 85.000 cps, cerca de 90.000 cps, cerca de95.000 cps, ou faixas dos mesmos) a cerca da temperaturaambiente (por exemplo, cerca de 25°C).O pH do gel é tipicamente de cerca de 6,0 a cercade 8,0. Acima desse pH, a viscosidade do agente espessante,tal como, polímero Carbopol(R) pode diminuir, conduzindo auma formulação tópica insatisfatória. Preferivelmente, o pHdo gel é de cerca de 6,4 a cerca de 7,8 e, maispreferivelmente de cerca de 7,4 a cerca de 7,6.

A formulação da invenção é apropriada paraadministração tópica a um paciente, incluindo ser humanoe/ou animal, para tratar uma variedade de condições.Especificamente, a formulação pode ser aplicada aos animais(por exemplo, camundongos, ratos, porcos, vacas, cavalos,cães, gatos, coelhos, porquinhos da índia, hamsters,pássaros) e seres humanos. A administração tópica incluiaplicação a pele, bem como oral, intranasal, intrabrônquicae vias retais de administração.

Em outra concretização, a invenção é dirigida a ummétodo para tratar uma condição em um paciente poradministração tópica da formulação compreendendo umasolução de água ORP e um agente espessante.

As condições em um paciente que pode ser tratado deacordo com a invenção incluem, por exemplo, as seguintes:agente para limpeza cirúrgica/ferida aberta; desinfecção deagente patogênico da pele (por exemplo, para bactérias,micoplasmas, virus, fungos, príons); desinfecção da ferida(por exemplo, feridas de batalha); promoção de cura daferida; promoção de cura de queimadura; tratamento defungos da pele; psoriase; pé de atleta; infecções do ouvido(por exemplo, ouvido de nadadores); feridas traumáticas;infecções agudas, subcrônicas e crônicas (por exemplo,infecções de pé de diabético sendo um exemplo da última) eoutras aplicações médicas ou no corpo de seres humanos ouanimais. As úlceras tratadas de acordo com a invenção podemou não possuir abcessos ou tecido necrosado.

Adicionalmente, a invenção é dirigida a um métodopara promover a cura de ferida em um paciente por aplicaçãoà ferida de uma formulação compreendendo uma solução deágua com potencial oxidativo redutivo e um agenteespessante. A ferida a ser tratada pode ser causada porqualquer cirurgia, úlcera ou outros meios. As úlceras quepodem ser tratadas incluem, por exemplo, úlceras de pé dediabético.

A invenção se refere, adicionalmente, a um métodopara prevenir uma condição em um paciente por administraçãotópica da formulação compreendendo uma solução de água ORPe um agente espessante. Por exemplo, a formulação (porexemplo, na forma de um gel) pode ser usada como umabarreira nas feridas abertas para prevenir infecção.Especificamente, a formulação (por exemplo, na forma de umgel) pode ser aplicada à superfície da ferida, tal como umaulceração no pé em um diabético, que está propenso àcomplicações neurológicas e vasculares. A formulaçãoaplicada verdadeiramente pode prover uma barreira ainfecção, uma vez que essas feridas são a porta principalpara infecção nos pacientes diabéticos.

A formulação pode ser usada para prevenir doençassexualmente transmissíveis em um paciente incluindo porexemplo, infecções. Tais infecções que podem ser prevenidasincluem herpes, vírus da imunodeficiência humana (HIV) einfecções vaginais. Quando a formulação está na forma de umgel, ela pode ser usada como um espermicida.A formulação da invenção pode ser usada ou aplicadaem uma quantidade terapeuticamente eficaz para prover oefeito terapêutico desejado nas bactérias, vírus e/ougermes. Conforme usado aqui, uma quantidadeterapeuticamente eficaz se refere a uma quantidade de umaformulação que resulta em um aperfeiçoamento da condiçãosendo tratada ou a ser prevenida. Por exemplo, quando usadapara tratar uma infecção, a quantidade terapeuticamenteeficaz da formulação reduz a extensão da infecção e/ouprevine infecção adicional. Como é apreciado por um versadona técnica, a eficácia da formulação da invenção resultandoda administração da formulação pode ser de curto prazo (porexemplo, alguns dias) e/ou de longo prazo (por exemplo, meses).

A formulação pode adicionalmente ser aplicada porum período de tempo suficiente, por exemplo, um, dois ouvários dias, cerca de uma semana ou várias semanas, até oefeito desejado no paciente ser observado.

A formulação pode ser aplicada de qualquer modoapropriado. Por exemplo, a quantidade da formulação podeser aplicada à superfície do paciente a ser tratado e entãopulverizada uniformemente usando os próprios dedos dopaciente. Alternativamente, um(a) cuidador(a) pode aplicara formulação ao tecido do paciente. Um implementoapropriado, por exemplo, um lenço ou pano descartável podeser usado para aplicar a formulação.

A água ORP da presente invenção é produzida por umprocesso de oxidação-redução, que pode ser referido comouma reação eletrolítica ou redox, onde a energia elétrica éusada para produzir alteração química em uma soluçãoaquosa. A energia elétrica é introduzida e transportadaatravés da água pela condução da carga elétrica de um pontoa outro na forma de uma corrente elétrica. A fim de que acorrente elétrica surja e subsista devem haver veículos decarga na água e pode haver uma força que faça com que osveículos se movam. Os veículos de carga podem ser elétrons,como no caso de metal e semicondutores ou eles podem seríons positivos e negativos no caso das soluções.

Uma reação de redução ocorre no cátodo, enquantouma reação de oxidação ocorre no ânodo, no processo parapreparação de uma solução de água ORP de acordo com ainvenção. As reações redutiva e oxidativa específicas queocorrem são descritas no Pedido Internacional WO 03/048421Al.

Conforme usada aqui, a água produzida em um ânodo éreferida como água de ânodo e a água produzida em um cátodoé referida como água de cátodo. A água de ânodo contémespécies oxidadas produzidas da reação eletrolítica,enquanto a água do cátodo contém espécies reduzidas dareação.

A água de ânodo geralmente possui um pH tipicamentebaixo de cerca de 1 a cerca de 6,8. A água de ânodogeralmente contém cloro em várias formas incluindo, porexemplo, gás cloro, íons cloro, ácido clorídrico e/ou ácidohipocloroso. Oxigênio nas várias, formas pode também estarpresente incluindo, opcionalmente, por exemplo, gásoxigênio, peróxidos, e/ou ozônio. A água de cátodogeralmente possui um pH alto, tipicamente de cerca de 7,2 acerca de 11. A água de cátodo geralmente contém gáshidrogênio, radicais hidroxila e/ou íons sódio.A solução de água ORP da invenção pode ser ácida,neutra ou básica e geralmente possui um pH de cerca de 1 acerca de 14. Nesse pH, a solução de água ORP pode serseguramente aplicada em quantidades apropriadas àssuperfícies rígidas, sem danificar as superfícies ouprejudicar objetos, tais como, pele humana, que entram emcontato com a solução de água ORP. Tipicamente, o pH dasolução de água ORP é de cerca de 3 a cerca de 8. Maispreferivelmente, o pH da solução de água ORP é de cerca de6,4 a cerca de 7,8 e, mais pref erivelmente, o pH é de cercade 7,4 a cerca de 7,6.

A solução de água ORP da presente invençãogeralmente possui um potencial de oxidaçao-redução de cercade -1.000 milivolts (mV) a cerca de +1.350 milivolts (mV).Esse potencial é uma medida da tendência (isto é, dopotencial) de uma solução tanto para aceitar ou transferirelétrons, que é sentida por um eletrodo de metal ecomparada com um eletrodo de referência na mesma solução.Esse potencial pode ser medido por técnicas padrãoincluindo, por exemplo, por medição do potencial elétricoem milivolts da solução de água ORP em relação ao eletrodode prata/cloreto de prata padrão. A água ORP geralmentepossui um potencial de cerca de -400 mV a cerca de +1.300mV ou cerca de + 1.150 mV. Pref erivelmente, a solução deágua ORP possui um potencial de cerca de 0 mV a cerca de+ 1.250 mV, e mais pref erivelmente de cerca de +500 mV acerca de +1.250 mV. Mesmo mais pref erivelmente, a água ORPda presente invenção possui um potencial de cerca de +800mV a cerca de +1.100 mV e mais pref erivelmente de cerca de+800 mV a cerca de +1.000 mV.Varias espécies iônicas e outras podem estarpresentes na solução de água ORP da invenção. Por exemplo,a solução de água ORP pode conter cloro (por exemplo, clorolivre e cloro ligado) e opcionalmente, ozônio e peróxidos(por exemplo, peróxido de hidrogênio). Acredita-se que apresença de uma ou mais dessas espécies contribua para acapacidade desinfetante da solução de agua ORP deexterminar vários microorganismos, tais como, bactérias efungos, bem como vírus.

Cloro livre tipicamente inclui, porém não estálimitado ao ácido hipocloroso (HC10), íons hipoclorito(CIO") , hipoclorito de sódio (NaOCl) , íon cloreto (Cl") ,íons clorito (C102~) , gás cloro dissolvido (Cl2) e outrasespécies de radical cloro. A razão do ácido hipoclorosopara íon hipoclorito depende do pH. Em um pH de 7,4, osníveis de ácido hipocloroso são de cerca de 25 ppm a cercade 75 ppm. A temperatura também impacta a razão docomponente de cloro livre.

O cloro ligado é cloro em combinação química comamônia ou aminas orgânicas (por exemplo, cloroaminas). Ocloro ligado está geralmente presente em uma quantidade deaté cerca de 20 ppm.

Cloro e, opcionalmente ozônio e peróxido dehidrogênio podem estar presentes na solução de água ORP dainvenção em uma quantidade apropriada. Os níveis dessescomponentes podem ser medidos por métodos conhecidos na arte.

Tipicamente, o teor de cloro total, que incluiambos cloro livre e cloro ligado é de cerca de 50 partespor milhão (ppm) a cerca de 200 ppm. Pref erivelmente, oteor de cloro total é de cerca de 80 ppm a cerca de 150ppm.

O teor de cloro pode ser medido pelos métodosconhecidos na arte, tais como, método colorimetro DPD(Lamotte Company, Chestertown, Maryland) ou outros métodosconhecidos estabelecidos pela Agência de ProteçãoAmbiental. No método colorimetro DPD, uma cor amarela éformada por reação do cloro livre com N,N-dietil-p-fenilenodiamina (DPD) e a intensidade é medida com umcolorimetro calibrado que prove o rendimento em partes pormilhão. A adição a mais de iode to de potássio torna a corda solução rosa para prover o valor de cloro total. Aquantidade de cloro ligado presente é então determinada porsubtração de cloro livre do cloro total.

O ozônio está opcionalmente presente em umaquantidade de 0,03 ppm a cerca de 0,2 ppm e preferivelmentede cerca de 0,10 ppm a cerca de 0,16 ppm.

Peróxido de hidrogênio está opcionalmente presenteem níveis na solução de água ORP na faixa de 0,01 ppm acerca de 200 ppm e pref erivelmente de cerca de 0,05 ppm acerca de 100 ppm. Mais pref erivelmente, peróxido dehidrogênio esta presente em uma quantidade de cerca de 0,1ppm e a cerca de 4 0 ppm e mais pref erivelmente de cerca de

1 ppm a 4 ppm. Os peróxidos estão opcionalmente presentes(por exemplo, H202, H202~ e H02") em uma concentraçãoinferior a 0,12 milimolar (mM) .

A quantidade total de espécies químicas de oxidaçãopresentes na solução de água ORP está na faixa de cerca de

2 milimolar (mM) o que inclui as espécies de cloromencionadas anteriormente, espécies de oxigênio e espéciesadicionais que podem ser difíceis de serem medidas, taiscomo, Cl", C103, Cl2" e C10x. O nível de espécies químicasde oxidação presentes pode também ser medido porespectroscopia ESR (usando Tempona H como a molécula delaço de giro).

A solução de água ORP da invenção é geralmenteestável por pelo menos cerca de vinte e quatro horas etipicamente pelo menos cerca de dois dias. Maistipicamente, a solução de água é estável por pelo ' menoscerca de uma semana (por exemplo, uma semana, duas semanas,três semanas, quatro semanas, etc. ) e preferivelmente porpelo menos cerca de dois meses. Mais preferivelmente, asolução de água ORP é estável por pelo menos cerca de seismeses após sua preparação. Mesmo mais preferivelmente, asolução de água ORP é estável por pelo menos um ano e maispreferivelmente por pelo menos cerca de três anos.

Conforme usado aqui, o termo estável geralmente serefere à capacidade da solução de água ORP de permanecerapropriada para seu uso pretendido, por exemplo, nadescontaminação, desinfecção, esterilização, limpezaantimicrobiana e limpeza de feridas, por um período detempo específico, após sua preparação sob condições dearmazenamento normais (isto é, a temperatura ambiente).

A solução de água ORP da invenção é também estávelquando armazenada sob condições aceleradas, tipicamentecerca de 30°C a cerca de 60°C, por pelo menos cerca de 90dias e preferivelmente cerca de 180 dias.

As concentrações de espécies iônicas e outraspresentes na solução são geralmente mantidas durante a vidaem prateleira da solução de água ORP. Tipicamente, asconcentrações de cloro livre e, opcionalmente ozônio eperóxidos de hidrogênio são mantidas a cerca de 70% ou maisde sua concentração inicial, por pelo menos cerca de doismeses após a preparação da solução de água ORP.Preferivelmente, essas concentrações são mantidas a cercade 8 0% ou mais de sua concentração inicial por pelo menoscerca de dois meses após preparação da solução de água ORP.Mais preferivelmente, essas concentrações estão em torno de90% ou mais de sua concentração inicial por pelo menoscerca de dois meses após a preparação da solução de águaORP e, mais preferivelmente, cerca de 95% ou mais.

A estabilidade da solução de água ORP da invençãopode ser determinada com base na redução da quantidade deorganismos presentes em uma amostra seguindo-se a exposiçãoà solução de água ORP. A medição da redução da concentraçãode organismo pode ser realizada usando qualquer organismoestável incluindo bactérias, fungos, leveduras ou vírus.Organismos apropriados incluem, porém não estão limitadosao Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Cândidaalbicans, e Bacillus athrophaeus (anteriormente B.subtilis) . A solução de água ORP é útil como ambos umdesinfetante de nível baixo de uma redução de cerca dequatro log (IO4) na concentração de microorganismos vivos eum desinfetante de nível alto, capaz de uma redução decerca de seis log (IO6) na concentração de microorganismosvivos.

Em um aspecto da invenção, a solução de água ORP écapaz de render uma redução de pelo menos cerca de quatrolog (IO4) na concentração de organismo total seguindo-seexposição por um minuto, quando medida pelo menos doismeses após preparação da solução. Preferivelmente, asolução de água ORP é capaz de tal redução da concentraçãode organismo quando medida pelo menos seis meses após apreparação da solução. Mais preferivelmente, a solução deágua ORP é capaz de tal redução da concentração deorganismos quando medida pelo menos cerca de um ano após apreparação da solução de água ORP e, mais preferivelmente,quando medida pelo menos cerca de três anos após apreparação da solução de água ORP.

Em outro aspecto da invenção, a solução de agua ORPé capaz de uma redução de pelo menos seis log (IO6) naconcentração de uma amostra de microorganismos vivosselecionada do grupo consistindo em Escherichia coli,Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus e Cândidaalbicans em uma exposição de um minuto, quando medida pelomenos dois meses após a preparação da solução de água ORP.Pref erivelmente, a solução de água ORP é capaz de obteressa redução dos organismos Escherichia coli, Pseudomonasaeruginosa, Staphylococcus aureus ou Cândida albicansquando medida pelo menos seis meses após a preparação e,mais preferivelmente, pelo menos um ano após a preparação.Pref erivelmente, a solução de agua ORP é capaz de umaredução de pelo menos sete log (IO7) na concentração de talmicroorganismo vivo em uma exposição de um minuto, quandomedida pelo menos dois meses após a preparação.

A solução de água ORP da invenção é geralmentecapaz de reduzir uma amostra de microorganismos vivosincluindo, porém não limitada ao Escherichia coli,Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus e Cândidaalbicans, a partir de uma concentração inicial de cerca de1 x IO6 a cerca de 1 x IO8 organismos/mL a uma concentraçãofinal de cerca de zero organismos/mL em um minuto deexposição, quando medida pelo menos dois meses apóspreparação da solução de água ORP. Isso é uma redução entrecerca de seis log (IO6) a cerca de oito log (IO8) naconcentração do organismo. Preferivelmente, a solução deágua ORP é capaz de obter essa redução dos organismos deEscherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcusaureus ou Cândida albicans quando medida pelo menos seismeses após a preparação e mais pref erivelmente, pelo menosum ano após a preparação.

Alternativamente, a solução de água ORP é capaz deuma redução de cerca de seis log (IO6) na concentração deuma suspensão de esporos de Bacillus athrophaeus dentro decerca de cinco minutos de exposição, quando medida pelomenos dois meses após preparação da solução de água ORP.Pref erivelmente, a solução de água ORP é capaz de obteressa redução na concentração dos esporos de Bacillusathrophaeus quando medida pelo menos seis meses apóspreparação e mais pref erivelmente pelo menos um ano apóspreparação.

A solução de água ORP é adicionalmente capaz de umaredução de cerca de quatro log (IO4) na concentração de umasuspensão de esporos de Bacillus athrophaeus dentro decerca de trinta (30) segundos de exposição, quando medidapelo menos dois meses após preparação da solução de águaORP. Pref erivelmente, a solução de água ORP é capaz deobter essa redução na concentração de esporos de Bacillusathrophaeus quando medida pelo menos seis meses após apreparação e mais pref erivelmente pelo menos um ano apóspreparação.

A solução de água ORP é também capaz de redução decerca de seis log (IO6) na concentração de esporos defungos, tais como, esporos de Aspergillis niger, dentro decerca de cinco a cerca de dez minutos de exposição, guandomedida pelo menos dois meses após preparação da solução deágua ORP. Preferivelmente, a solução de água ORP é capazde obter essa redução na concentração de esporos de fungosquando medida pelo menos cerca de seis meses apóspreparação, e mais preferivelmente pelo menos cerca de umano após a preparação.

Em uma concretização, a solução de água ORP dainvenção compreende, opcionalmente, peróxido de hidrogênio(H202) e uma ou mais espécies de cloro. Pref erivelmente, asespécies de cloro presentes são espécies de cloro livre. Asespécies de cloro livre podem ser selecionadas do grupoconsistindo em ácido hipocloroso (H0C1), íons hipoclorito(0C1") , hipoclorito de sódio (NaOCl) , ions clorito (C102~) ,íon cloreto (Cl") , gás cloro dissolvido (Cl2) , e misturasdos mesmos.

Peróxido de hidrogênio esta opcionalmente presentena solução de água ORP geralmente na faixa de cerca de 0,01ppm a cerca de 200 ppm, e pref erivelmente de cerca de 0,05ppm a cerca de 100 ppm. Mais pref erivelmente, o peróxido dehidrogênio está presente em uma quantidade de cerca de 0,1ppm a cerca de 4 0 ppm e mais pref erivelmente de cerca de 1ppm a cerca de 4 ppm.

A quantidade total das espécies de cloro livre égeralmente de cerca de 10 ppm a cerca de 4 00 ppm,pref erivelmente de cerca de 50 ppm a cerca de 200 ppm emais preferivelmente de cerca de 50 ppm a cerca de 80 ppm.A quantidade de ácido hipocloroso é geralmente de cerca de15 ppm a cerca de 3 5 ppm. A quantidade de hipoclorito desódio está geralmente na faixa de cerca de 25 ppm a cercade 50 ppm. Os níveis de dióxido de cloro são geralmenteinferiores a cerca de 5 ppm.

Geralmente, a solução de água ORP é estável porpelo menos cerca de uma semana. Preferivelmente, a soluçãode água ORP é estável por pelo menos cerca de dois meses,mais pref erivelmente, a solução de água ORP é estável porpelo menos cerca de seis meses após sua preparação. Mesmomais pref erivelmente, a solução de água ORP é estável porpelo menos cerca de um ano e mais pref erivelmente por pelomenos cerca de três anos.

O pH da solução de água ORP nessa concretização égeralmente de cerca de 6 a cerca de 8. Preferivelmente, opH da solução de água ORP é de cerca de 6,2 a cerca de 7,8e mais pref erivelmente de cerca de 7,4 a cerca de 7,6.

Embora de forma alguma limitando a presenteinvenção, acredita-se que o controle do pH permita umasolução de água ORP estável, onde as espécies de cloro,tais como, por exemplo, ácido hipocloroso e íonshipoclorito coexistam.

Seguindo-se sua preparação, a solução de água ORPou a formulação da invenção pode ser transferida para umrecipiente vedado para distribuição e venda aos usuáriosfinais, tais como, instalações para cuidado de saúdeincluindo hospitais, casas de repouso, consultóriosmédicos, centros cirúrgicos extra-paciente, consultóriosdentários e semelhantes, A Forma de dosagem farmacêutica deacordo com a presente invenção compreende uma formulaçãopara administração tópica, conforme descrita aqui e umrecipiente vedado onde é colocada uma formulação.

Qualquer recipiente apropriadamente vedado por serusado, de modo a manter a esterilidade e estabilidade dasolução de água ORP ou formulação contida no recipiente. 0recipiente pode ser construído de qualquer material queseja compatível com a solução de água ORP ou os componentesda formulação, por exemplo, a solução de água ORP e oagente espessante. O recipiente seria geralmente nãoreativo, de modo que os íons presentes na solução de águaORP não reaj am com o recipiente de qualquer modoapreciável.

Preferivelmente, o recipiente é construído deplástico ou vidro. O plástico pode ser rígido, de modo queo recipiente seja capaz de ser armazenado em umaprateleira. Alternativamente, o plástico pode ser flexível,tal como uma sacola flexível.

Plásticos apropriados incluem polipropileno,tereftalato de poliéster (PET), poliolefina, cicloolefina,policarbonato, resina ABAS, polietileno, cloreto depolivinila e misturas dos mesmos. Preferivelmente, orecipiente compreende polietileno selecionado do grupoconsistindo em polietileno de alta densidade (HDPE),polietileno de baixa densidade (LDPE) e polietileno debaixa densidade linear (LLDPE). Mais preferivelmente, orecipiente é polietileno de alta densidade.

O recipiente possui uma abertura para permitirdispensa da solução de água ORP ou formulação paraadministração a um paciente. A abertura do recipiente podeser vedada de qualquer forma apropriada. Por exemplo, orecipiente pode ser vedado com uma tampa de torcer oubatente. Opcionalmente, a abertura pode ser adicionalmentevedada com uma camada de lâmina metálica.

O gás no espaço aéreo do recipiente vedado por serar ou outro gás apropriado que não reaja com a solução deágua ORP ou outros componentes de uma formulação contendouma solução de água ORP. Gases no espaço aéreo apropriadosincluem nitrogênio, oxigênio e misturas dos mesmos.

A invenção prove, adicionalmente, uma solução deágua ORP compreendendo água de ânodo e água de cátodo. Aágua de ânodo é produzida na câmara de ânodo da célula deeletrólise usada na presente invenção. A água de cátodo éproduzida na câmara de cátodo da célula de eletrólise.

A água de cátodo está geralmente presente nasolução de água ORP da solução em uma quantidade de cercade 10% em volume a cerca de 9 0% em volume da solução.Preferivelmente, a água de cátodo está presente na soluçãode água ORP em uma quantidade de cerca de 10% em volume acerca de 50% em volume, mais pref erivelmente de cerca de20% em volume a cerca de 40% em volume da solução, e maispreferivelmente de cerca de 20% em volume a cerca de 30% emvolume da solução. Adicionalmente, a água de ânodo podeestar presente na solução de água ORP em uma quantidade decerca de 50% em volume a cerca de 90% em volume da solução.

Conforme observado aqui, a solução de água ORPcontendo ambas, água de ânodo e água de cátodo, pode serácida, neutra ou básica e geralmente possui um pH de cercade 1 a cerca de 14. Tipicamente, o pH da solução de águaORP é de cerca de 3 a cerca de 8. Pref erivelmente, o pH éde cerca de 6,4 a cerca de 7,8 e mais preferivelmente decerca de 7,4 a cerca de 7,6.

A solução de água ORP da invenção possui uma amplavariedade de usos como desinfetante, detergente, limpador,anti-séptico e semelhante, para controlar a atividade desubstâncias indesejadas e prejudiciais ao meio ambiente. Assubstâncias que podem ser tratadas com a solução de águaORP incluem, por exemplo, organismos e alergenos.

A solução de água ORP pode ser usada como umdesinfetante, agente de esterilização, descontaminante,anti-séptico e/ou limpador. A solução de água ORP dainvenção é apropriada para uso nas seguintes aplicaçõesrepresentativas: equipamento e dispositivos médicos,dentários e/ou veterinários; indústria alimentícia (porexemplo, superfícies rígidas, frutas, vegetais, carnes);hospitais/instalações de cuidado de saúde (por exemplo,superfícies rígidas); indústria de cosméticos (por exemplo,para limpar a pele) ; para fins domésticos (por exemplo,pisos, balcões, superfícies rígidas); indústria deeletrônicos (por exemplo, limpeza de circuitos, drivesrígidos); e bioterrorismo (por exemplo, antrax, micróbiosinfecciosos).

A solução de água ORP também pode ser aplicada emseres humanos e/ou animais para tratar várias condiçõesincluindo, por exemplo, as seguintes: agente para limpezade feridas/cirúrgico; desinfecção de agente patogênico napele (por exemplo, para bactérias, micoplasmas, vírus,fungos, príons); desinfecção de feridas de batalha;promoção de cura da ferida; promoção de cura de queimadura;tratamento de úlceras do estômago; irrigação da ferida;fungos da pele; psoríase; pé de atleta; conjuntivite agudae outras infecções dos olhos; infecções do ouvido (porexemplo, ouvido de nadador); infecções pulmonar/nasal/sino;e outras aplicações médicas ou no corpo humano ou animal. Ouso das soluções de água ORP como um promotor docrescimento da célula de tecido é adicionalmente descritona Publicação de Pedido de Patente US 2002/0160053 Al.

Embora de modo algum limitando a presente invenção,acreditaOse que a solução de água ORP erradique asbactérias com as quais contata, bem como destrua oscomponentes celulares bacterianos incluindo proteínas eDNA.

Por exemplo, a solução de água ORP é capaz de umaredução de pelo menos cerca de cinco log (IO5) naconcentração de uma amostra de microorganismo vivoselecionada do grupo consistindo em Pseudomonas aeruginosa,Escherichia coli, Enterococcus hirae, Acinetobacterbaumannii, Acinetobacter species, Bacteroides fragilis,Enterobacter aerogenes, Enterococcus faecalis, Enterococcusfaecium resistente a Vancomicina (VRE, MDR), Haemophilusinfluenzae, Klebsiella oxytoca, Klebsiella pneumoniae fMicrococcus luteus, Proteus mirabilis, Serratia marcescens,Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis,Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis,Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus pneumoniae,Streptococcus pyogenes, Cândida albicans e Cândidatropicalis, dentro de 30 segundos de exposição, quandomedida pelo menos dois meses após preparação da solução deágua ORP.

Em uma concretização, uma solução de água ORPadministrada de acordo com a invenção pode reduzir umaamostra de microorganismos vivos incluindo, porém nãolimitado a Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa,Staphylococcus aureus e Cândida albicans, a partir de umaconcentração inicial de cerca de 1 x IO6 a cerca de 1 x IO8organismos/mL a uma concentração final de cerca de zeroorganismos/mL dentro de cerca de um minuto de exposiçãoquando medida pelo menos cerca de dois meses apóspreparação da solução de água ORP. Isso corresponde a umaredução de cerca de seis log (IO6) a cerca de oito log(IO8) na concentração do organismo. Preferivelmente, asolução de água é capaz de obter uma redução de cerca deIO6 a cerca de IO8 dos organismos Escherichia coli,Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus ou Cândidaalbicans quando medida pelo menos seis meses apóspreparação, e mais preferivelmente quando medida pelo menoscerca de um ano após preparação.

Alternativamente, a solução de água ORPadministrada de acordo com a presente invenção podeproduzir uma redução de cerca de seis log (IO6) naconcentração de uma suspensão de esporos de Bacillusathrophaeus dentro de cerca de cinco minutos de exposiçãoquando medida pelo menos cerca de dois meses apóspreparação da solução de água ORP. Pref erivelmente, asolução de água ORP administrada de acordo com a invençãopode obter uma redução de cerca de IO6 na concentração deesporos de Bacillus athrophaeus, quando medida pelo menoscerca de seis meses após preparação, e mais pref erivelmentequando medida pelo menos cerca de um ano após preparação. Asolução de água ORP é adicionalmente capaz de uma reduçãode cerca de quatro (IO4) na concentração de uma suspensãode esporos de Bacillus athrophaeus dentro de cerca detrinta (3 0) segundos de exposição, quando medida pelo menosdois meses após preparação da solução de água ORP.Pref erivelmente, a solução de água ORP é capaz de obteressa redução na concentração dos esporos de Bacillusathrophaeus quando medida pelo menos cerca de seis mesesapós preparação, e mais preferivelmente pelo menos um anoapós a preparação.

A solução de água ORP é também capaz de uma reduçãode cerca de seis log (IO6) na concentração de esporos defungos, tal como, esporos de Aspergillis niger, dentro decerca de cinco a cerca de dez minutos de exposição, quandomedida pelo menos dois meses após preparação da solução deágua ORP. Pref erivelmente, a solução de água ORP é capazde obter essa redução na concentração de esporos de fungosquando medida pelo menos seis meses após preparação, e maispreferivelmente pelo menos um ano após preparação.

A solução de água ORP administrada de acordo com ainvenção adicionalmente pode produzir uma redução de maisde 3 log (IO3) na concentração dos vírus, tal como, Vírusda Imunodeficiência Humana (HIV) e adenovírus, após cercade cinco a cerca de dez minutos de exposição, quando medidapelo menos cerca de dois meses após preparação da soluçãode água ORP. Pref erivelmente, a solução de água ORP podeobter uma redução > IO3 na concentração de vírus, quandomedida pelo menos cerca de seis meses após preparação, emais preferivelmente quando medida pelo menos cerca de umano após preparação.

A solução de água ORP administrada de acordo com ainvenção adicionalmente pode inibir completamente ocrescimento da MycoJbacteriu/77 bovis com uma exposição decerca de cinco minutos, quando medida pelo menos cerca dedois meses apôs preparação da solução de água ORP.

Preferivelmente, a solução de água ORP pode obter ainibição total na concentração de Mycobacteria quandomedida pelo menos cerca de seis meses após preparação, emais preferivelmente quando medida pelo menos cerca de umano após preparação.

Consequentemente, os organismos que podem sercontrolados, reduzidos, exterminados ou erradicados portratamento com a solução de água ORP incluem, porém nãoestão limitados às bactérias, fungos, leveduras e virus.Bactérias suscetíveis incluem, porém não estão limitadas aEscherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillusathrophaeus, Streptococcus pyogenes, Salmonellacholeraesuis, Pseudomonas aeruginosa, Shingella dysenteriaee outras bactérias suscetíveis. Os fungos e leveduras quepodem ser tratados com uma solução de água ORP incluem, porexemplo, Cândida albicans e Trichophyton mentagrophytes. Asolução de água ORP pode também ser aplicada aos vírusincluindo, por exemplo, adenovírus, vírus daimunodeficiência humana (HIV), rinovírus, influenza (porexemplo, influenza A) , hepatite (por exemplo, hepatite A) ,coronavírus (responsável pela Síndrome Respiratória GraveAguda (SARS)), rotavírus, vírus sincitial respiratório,vírus do herpes simples, vírus zoster da varicela, vírus darubéola e outros vírus suscetíveis.

Em uma concretização preferida, a solução de águaORP da invenção pode ser administrada para tratar pacientescom queimaduras de primeiro, segundo ou terceiro grau. Ospacientes possuindo uma combinação de queimaduras, talcomo, queimaduras de segundo e de terceiro grau podemtambém ser tratados com uma solução de água ORP. Asqueimaduras de primeiro grau afetam a epiderme ousuperfície da pele. As queimaduras de segundo grau afetam aepiderme e a derme subjacente. As queimaduras de terceirograu afetam a epiderme, derme e hipoderme. Maispreferivelmente, a solução de água ORP é administrada paratratar pacientes com queimaduras de segundo ou terceirograu. As queimaduras que são apropriadas para tratamento deacordo com a invenção são causadas por várias lesões,incluindo por exemplo, contato com o fogo, líquidos emebulição (por exemplo, água, leite, etc.) ou eletricidade egeralmente se estendem a cerca de 0% a cerca de 69% dotecido do paciente.

A solução de água ORP pode ser administrada aospacientes com queimaduras de qualquer modo apropriado. Asolução de água ORP pode ser administrada topicamente porpulverização, banho, encharcamento, limpeza com lenço ou deoutra forma umedecendo a queimadura. A solução de água ORPé administrada em uma quantidade suficiente para tratar aqueimadura. A solução de água ORP é administrada pelo menosuma vez ao dia e pref erivelmente mais de uma vez ao dia.

Mais pref erivelmente, a solução de água ORP é administradaa queimadura três vezes ao dia.

A solução de água ORP pode ser aplicada diretamenteà área da queimadura, por exemplo, por derramamento apartir de um recipiente ou pulverização a partir de umreservatório. A queimadura pode ser pulverizada usandoqualquer dispositivo apropriado. Preferivelmente, é usadoum dispositivo de irrigação de alta pressão para aspergir asolução de água ORP sobre a queimadura.

A queimadura pode ser encharcada por submersão daqueimadura tanto parcial quanto completamente em umasolução de água ORP. A queimadura pode ser encharcada porqualquer período de tempo apropriado. Geralmente, aqueimadura é encharcada na solução de água ORP por pelomenos cerca de um minuto. Preferivelmente, a queimadura éencharcada por cerca de 5 minutos a cerca de 15 minutos.

Alternativamente, a solução de água ORP pode seraplicada à queimadura usando um substrato, tal como, porexemplo, gaze, que tenha sido saturado com a água ORP.Pref erivelmente, a solução de água ORP é aplicada porvários métodos incluindo pulverização e a queimadura éambos pulverizada e encharcada.

A queimadura pode opcionalmente ser revestida comuma bandagem, por aplicação de uma bandagem para feridaúmida, saturada com uma solução de ORP. Além da bandagempara ferida úmida, a queimadura pode opcionalmente serrevestida com gaze seca e um revestimento adesivo. Qualquercreme, gel e/ou ungüento suave e apropriado pode também seraplicado a superfície da queimadura após a administração dasolução de água ORP.

Em uma concretização, um paciente possuindo umaqueimadura que requeira tratamento é submetido a umprocedimento de lavagem usando uma solução de água ORP dainvenção. A solução de água ORP é primeiro pulverizadasobre a ferida usando um dispositivo de irrigação depressão alta. Em seguida, a queimadura é encharcada em umasolução de água ORP por um período de tempo apropriado.Após o encharcamento, a queimadura é pulverizada novamentecom uma solução de água ORP. A queimadura é então deixadadescansar em um estado umedecido por pelo menos cerca decinco minutos. Esse procedimento é realizado pelo menos umavez ao dia na queimadura do paciente, preferivelmente duasvezes ao dia e mais pref erivelmente três vezes ao dia.Nessa concretização, a superfície da queimadurapreferivelmente não é revestida com bandagem entre asadministrações da solução de água ORP.

Antes da administração da solução de água ORP, aqueimadura é preferivelmente submetida a terapia de limpezade fragmentos para remover tecido hiperceratinizado,necrótico e de outra forma não saudável abaixo do tecido deaparência saudável. Na limpeza de fragmentos da ferida, asbordas da ferida são excisadas para permanência de tecidosaudável. A queimadura pode então ser limpa dos fragmentos.A solução de água ORP administrada de acordo com a presenteinvenção também pode ser usada como solução de irrigaçãopara dispositivos de hidrocirurgia que são usados paralimpar fragmentos de úlceras da pele. Dispositivos dehidrocirurgia apropriados podem incluir, por exemplo, osdispositivos VersaJet vendidos nos Estados Unidos daAmérica pela Smith and Nephew, Debritom na Europa pelaMedaxis, JetOx nos Estados Unidos da América e Europa pelaDeRoyal ou PulsaVac na Itália. Acredita-se que a solução deágua ORP possa atuar sinergisticamente com o dispositivopara reduzir a carga microbiana na ferida e evitando aformação de névoas infecciosas durante o procedimento delimpeza de fragmentos. Assim, o dispositivo pode ser usadopara limpeza de fragmentos da ferida com irrigaçãocontinua, reduzindo o processo de infeção e evitando aformação de névoas infecciosa de acordo com a presenteinvenção.

A solução de água ORP administrada de acordo com apresente invenção ode também ser usada como solução deirrigação para dispositivos de pressão negativa que sãousados para reduzir o edema e aumentar o fluxo sangüíneo.Os dispositivos de pressão negativa apropriados podemincluir, por exemplo, um ou mais dispositivos de fechamentode ferida auxiliados por vácuo, tais como, por exemplo,dispositivos V.A.C.0 e V.A.C.' Instill™ devices vendidosnos Estados Unidos da América pela Kinetic Concepts, Inc.Acredita-se que uma solução de água ORP possa atuarsinergisticamente com o dispositivo para controlar oprocesso inflamatório-alérgico, enquanto reduzindo a cargamicrobiana. Assim, o dispositivo pode ser aplicado a umaferida de queimadura aberta com irrigação intermitente oucontínua para tratar ou prevenir a infecção do tecido ounecrose de acordo com a presente invenção.

Opcionalmente, várias terapias coadjuvantes podemtambém ser aplicadas de acordo com a invenção incluindopele produzida por bioengenharia (Apligraf, Organogenesis,Inc., Canton), substitutos de pele acelulares (Oásis WoundMatrix, Healthpoint), aplicação ultra-sônica de soluções deágua ORP e substituição de oxigênio local ou tratamento comoxigênio hiperbárico (tais como, por exemplo, botashiperbáricas, Vem-Ox System).

Caso necessário, a administração da solução de águaORP pode ser realizada em combinação com enxertos de pelepara promover a cura da ferida.

A administração da solução ORP opcionalmente podeser combinada com a administração de antibióticos tópicose/ou sistêmicos. Antibióticos apropriados podem incluir,sem limitação, penicilina, cefalosporinas ou outras 0-lactamas, macrolidos (por exemplo, eritromicina, 6-0-metileritromicina e azitromicina), fluorquinolonas,sulfonamidas, tetraciclinas, aminoglicosídeos,

clindamicina, quinolonas, metronidazol, vancomicina,cloranfenicol, derivados antibacterialmente eficazes ecombinações dos mesmos. Agentes antiinfecciosos apropriadostambém podem incluir agentes antifungos, tais como, porexemplo, anfotericina B, fluconazol, flucitosina,cetoconazol, miconazol, derivados dos mesmos e combinaçõesdos mesmos. Agentes antiinflamatórios apropriados podemincluir, por exemplo, um ou mais medicamentosantiinflamatórios, por exemplo, um ou mais esteróidesantiinf lamatórios ou um ou mais medicamentosantiinflamatórios não esteróides (NSAIDS). Medicamentosantiinflamatórios exemplares podem incluir, por exemplo,ciclofilinas, proteínas de ligação FK, anticorposanticitocina (por exemplo, antiTNF), esteróides e NSAIDs.

Em outra concretização da invenção, uma queimadurade segundo e/ou terceiro grau em um paciente é inicialmentelimpa de fragmentos e então pulverizada com uma solução deágua ORP com um dispositivo de irrigação de pressão alta. Aquantidade de solução de água ORP usada para lavar aqueimadura é preferivelmente suficiente para remover osfragmentos. A queimadura é então encharcada com uma soluçãode água ORP por um período de tempo apropriado. Aqueimadura do paciente é em seguida pulverizada com umasolução de água ORP e a solução é deixada umedecer aqueimadura por um período de tempo suficiente,preferivelmente de cerca de 5 minutos a cerca de 15minutos. A pulverização e o umedecimento são repetidoscerca de três vezes ao dia. Entre as administrações dasolução de água ORP, a superfície da queimadura não érevestida com bandagem.

O processo de pulverização com pressão alta,opcionalmente encharcamento, pulverização e umectação daqueimadura pode ser repetido em intervalos apropriados.Preferivelmente, o procedimento no qual a queimadura épulverizada com pressão alta, opcionalmente encharcada eumectada é repetido cerca de uma vez por semana e maispreferivelmente, cerca de uma vez por dia. O tratamento daqueimadura usando uma solução de água ORP pode continuaraté a queimadura sarar suficientemente, o que tipicamenterequer repetição do procedimento por vários dias. De modogeral, a solução de água ORP é aplicada a cada dia por pelomenos cerca de três dias. Tipicamente, a solução de águaORP é aplicada a cada dia, por pelo menos cerca de cincodias, preferivelmente por pelo menos cerca de sete dias e,mais preferivelmente, por pelo menos cerca de dez dias. Acura da queimadura é tipicamente medida pela razão decontração de cicatriz e epitelização.

A água POR da invenção é também apropriada para usono controle da atividade de alergenos presentes noambiente. Conforme usados aqui, os alergenos incluemqualquer substância diferente de bactérias, fungos,leveduras ou vírus que podem desencadear uma resposta imuneadversa ou alergia, em pessoas ou animais suscetíveis. Aasma é uma resposta fisiológica comum seguindo-se aexposição a um ou mais alergenos. Os alergenos podem sertanto viáveis (isto é, de organismos vivos ou mortos) ounão viáveis (por exemplo, não vivos, tais como, têxteis) epodem estar presentes no ambiente, por exemplo, nos larese/ou locais de trabalho.

Os alergenos domésticos à base de proteína quepodem ser tratados com a água ORP incluem, por exemplo,peles de animais, pele e fezes, poeira doméstica, ervasdaninhas, gramas, árvores, ácaros e pólens. Os alergenos deanimais incluem, por exemplo, epitélio de gato, epitélio decão, descamação da epiderme de cavalos, gado e cães,epitélio de porquinho da índia, penas de ganso, epitélio decamundongo, urina de camundongo, epitélio de rato e urinade rato.

Alergenos ocupacionais incluem, por exemplo,agentes de peso molecular alto, tais como, proteínasnaturais geralmente derivadas de plantas ou proteínasanimais e substâncias químicas de peso molecular baixo,tais como, diisocianatos e outros materiais encontrados emalguns têxteis. Outros alergenos químicos que podem estarpresentes no local de trabalho incluem, por exemplo,anidridos, antibióticos, serragem e corantes. Váriasproteínas podem ser alergenos ocupacionais incluindo gomas,enzimas, proteínas animais, insetos, proteínas de plantas elegumes.

Alergenos adicionais apropriados para o tratamentopor uma solução de água ORP são descritos em Korenblat andWedner, Allergy Theory and Practice (1992) e Middleton,Jr., Allergy Principies and Practice (1993).

Foi verificado que uma solução de água ORPadministrada de acordo com a invenção é virtualmente isentade toxicidade para tecidos normais e células de mamíferosnormais. A solução de água ORP administrada de acordo com ainvenção não causa aumento significativo na viabilidade dascélulas eucarióticas, nenhum aumento significativo naapoptose, nenhuma aceleração significativa no

envelhecimento celular e/ou nenhuma lesão de DNA oxidativasignificativa nas células de mamíferos. A não toxicidade éespecificamente vantaj osa e, talvez, mesmo surpreendente,dado que a força de desinf ecção da solução de água ORPadministrada de acordo com a invenção é grosseiramenteequivalente aquela do peróxido de hidrogênio, sendo aindasignificativamente menos tóxica que o peróxido dehidrogênio é para os tecidos normais e células de mamíferosnormais. Essas verificações demonstram que a solução deágua ORP administrada de acordo com a presente invenção ésegura para uso, por exemplo, nos mamíferos, incluindoseres humano s.

Para uma solução de água ORP administrada de acordocom a invenção, a razão de viabilidade da célula épref erivelmente de pelo menos cerca de 65%, maispreferivelmente pelo menos cerca de 70%, e ainda maispreferivelmente de pelo menos cerca de 75% após um períodode exposição de 3 0 minutos a uma solução de água ORP. Alémdisso, a solução de água ORP administrada de acordo com ainvenção preferivelmente causa até cerca de 10% dascélulas, mais preferivelmente apenas até cerca de 5% dascélulas e ainda mais pref erivelmente até cerca de 3% dascélulas expostas a Anexina-V em suas superfícies celulares,quando contatadas com uma solução de água ORP por até cercade trinta minutos ou menos (por exemplo, após cerca detrinta minutos ou após cerca de cinco minutos de contatocom a solução de água ORP) . Adicionalmente, a solução deágua ORP administrada de acordo com a invençãopref erivelmente faz com que menos de cerca de 15% dascélulas, mais preferivelmente menos de cerca de 10% dascélulas e ainda mais preferivelmente menos de cerca de 5%das células expressem a enzima SA-(3-galactosidade apósexposição crônica à solução de água ORP. A solução de águaORP administrada de acordo com a invenção preferivelmenteforma a mesma fração de formação de aduto de DNA oxidativoformado pela solução de salmoura, por exemplo, menos decerca de 2 0% da formação de aduto de DNA oxidativo, menosde cerca de 10% da formação de aduto de DNA oxidativo, oucerca de 5% ou menos da formação de aduto de DNA oxidativo,normalmente formada por peróxido de hidrogênio nas célulastratadas sob condições equivalentes.

A solução de água ORP administrada de acordo com ainvenção não produz degradação de RNA significativa.Consequentemente, o RNA extraído das culturas de célulahumana após um período de exposição de 3 0 minutos a umasolução de água ORP ou cerca de 3 horas após uma exposiçãode cerca de 3 0 minutos e analisado por desnaturação deeletroforese de gel, tipicamente não mostrará degradação deRNA significativa e exibirá tipicamente duas faixasseparadas correspondendo aos RNAs eucariõticos ribossomicos(isto é, 28S e 18S) , indicando que a solução de água ORPadministrada de acordo com a invenção deixa o RNAsubstancialmente intacto. De modo semelhante, o RNAextraído das culturas de célula humana após 3 0 minutos deexposição a uma solução de água ORP ou após cerca de 3horas de exposição, pode ser submetido a transcriçãoinversa e amplificação (RT-PCR) do gene GAPDH humanoconstitutivo (gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase) eresulta em uma faixa de GAPDH forte em eletroforese de geldos produtos de RT-PCR. Em contraste, as células tratadascom HP por um período semelhante mostram degradação de RNAsignificativa e pouco, se algum, produto de GAPDH RT-PCR.

A solução de água ORP da invenção pode ser usada ouaplicada em qualquer quantidade apropriada para prover oefeito bactericida, virucida, germicida e/ou antialergênicodesejado.

A solução de água ORP pode ser aplicada paradesinfetar e esterilizar de qualquer modo apropriado. Porexemplo, para desinfetar e esterilizar equipamento médicoou dentário, o equipamento é mantido em contato com umasolução de água ORP por um período de tempo suficiente parareduzir o nível de organismos presentes no equipamento a umnível desejado.

Para desinfecção e esterilização de superfíciesrígidas, a solução de água ORP pode ser aplicada àsuperfície rígida diretamente de um recipiente no qual asolução de água ORP é armazenada. Por exemplo, a solução deágua ORP pode ser derramada, pulverizada ou de outra formadiretamente aplicada à superfície rígida. A solução de águaORP pode então ser distribuída sobre a superfície rígidausando um substrato apropriado, tal como, por exemplo,pano, tecido ou papel toalha. Em aplicações hospitalares, osubstrato é preferivelmente estéril. Alternativamente, asolução de água ORP pode primeiro ser aplicada a umsubstrato, tal como um pano, tecido ou papel toalha. Osubstrato umectado é então conectado à superfície rígida.Alternativamente, a solução de água ORP pode ser aplicadaàs superfícies rígidas por dispersão da solução no ar,conforme descrito aqui. A solução de água ORP pode seraplicada de modo semelhante aos seres humanos e animais.

A invenção prove, adicionalmente, um lenço paralimpeza compreendendo um substrato insolúvel em água e umasolução de água ORP conforme descrito aqui, onde a soluçãode água ORP é dispensada sobre o substrato. A solução deágua ORP pode ser impregnada, revestida, coberta ou deoutra forma aplicada ao substrato. Preferivelmente, osubstrato é pré-tratado com uma solução de água ORP antesda distribuição dos lenços de limpeza aos usuários finais.

O substrato para o lenço de limpeza pode serqualquer absorvente insolúvel em água ou materialabsorvente. Vários materiais podem ser usados como osubstrato. Eles devem ter resistência a umidade suficiente,abrasividade, maciez e porosidade. Adicionalmente, osubstrato não deve impactar adversamente a estabilidade dasolução de água ORP. Exemplos incluem substratos nãotramados, substratos tramados, substratos hidroemaranhadose esponjas.

O substrato pode ter uma ou mais camadas. Cadacamada pode ter a mesma textura e abrasividade oudiferentes. Texturas diferentes podem resultar do uso dediferentes combinações de materiais ou do uso de processosde fabricação diferentes ou uma combinação dos mesmos. Osubstrato não se dissolveria ou romperia em água. Osubstrato prove o veículo para liberação da solução de águaORP para o substrato a ser tratado.

O substrato pode ser uma folha simples não tramadaou múltiplas folhas não tramadas. A folha não tramada podeser fabricada de polpa de madeira, fibras sintéticas,fibras naturais e combinações das mesmas. Fibras sintéticasapropriadas para uso no substrato incluem, sem limitação,poliéster, raiora, náilon, polipropileno, polietileno,outros polímeros de celulose e misturas de tais fibras. Osnão tramados podem incluir materiais de folha fibrosos nãotramados que incluem materiais fundidos por sopro,coformados, depostos por ar, ligados por fiação, depostospor umectação, trama ligada-cardada, hidroemaranhados(também conhecidos como laçada fiada) e combinações dosmesmos. Esses materiais podem compreender fibras sintéticasou naturais ou combinações das mesmas. Um liganteopcionalmente pode estar presente no substrato.

Exemplos de substratos não tramados, insolúveis emágua incluem Wadding Grade 1804 celulose a 100% da LittleRapids Corporation, material perfurado por agulha depolipropileno NB 701-2.8-W/R da American Non-wovensCorporation, uma combinação de fibras celulósicas esintéticas-Hydraspun 8579 da Ahlstrom Fibre Composites eViscose a 70%/PES a 30% Código 9881 da PGI NonwovensPolymer Corp. Exemplos adicionais de substratos nãotramados para uso nos lenços de limpeza são descritos nasPatentes US números 4.781.974, 4.615.937, 4.666.621 e5.908.707 e Publicações de Pedido de Patente InternacionalWO 98/03713, WO 97/40814, e WO 96/14835.O substrato também pode ser fabricado de materiaistramados, tais como, fibras de algodão, combinações dealgodão/náilon ou outros têxteis. A celulose regenerada,espumas de poliuretano e semelhantes, que são usadas nafabricação de esponjas, podem também ser apropriadas para uso.

A capacidade de carga líquida do substrato seria depelo menos cerca de 50%-1.000% do peso seco do mesmo, maispreferivelmente pelo menos cerca de 200-800%. Isso éexpresso como carga de M a 10 vezes o peso do substrato. Opeso do substrato varia sem limitação de cerca de 0,01 acerca de 1.000 g/m2, mais pref erivelmente 25 a 120 g/m2(referido como "peso base") ou de outra forma dimensionadona forma e tamanho apropriados. Os lenços de limpeza terãoapropriadamente uma resistência a tensão a úmido que é, semlimitação, de cerca de 25 a cerca de 250 Newtons/m, maispreferivelmente cerca de 75-170 Newtons/m.

A solução de água ORP pode ser dispensada,impregnada, revestida, coberta ou de outra forma aplicadaao substrato por qualquer método apropriado. Por exemplo,as porções individuais do substrato podem ser tratadas comuma quantidade separada da solução de água ORP.Preferivelmente, é realizado um tratamento de massa de umatrama contínua de um material de substrato com uma soluçãode água ORP. Toda a trama do material de substrato pode serencharcada na solução de água ORP. Alternativamente,conforme a trama do substrato é enrolada ou mesmo durante acriação de um substrato não tramado, a solução de água ORPé pulverizada ou medida na trama. Uma pilha de porçõescortadas individualmente e dimensionadas do substrato podeser impregnada ou revestida com uma solução de água ORP emseu próprio recipiente pelo fabricante.

Os lenços de limpeza podem conter, opcionalmente,componentes adicionais para aperfeiçoar as propriedades doslenços. Por exemplo, os lenços de limpeza podem compreenderadicionalmente, polímeros, agentes tensoativos,polissacarídeos, policarboxilatos, ãlcoois polivinilicos,solventes, agentes quelantes, tampões, espessantes,tinturas, corantes, fragrâncias e misturas dos mesmos paraaperfeiçoar as propriedades dos lenços. Esses componentesopcionais não impactariam adversamente a estabilidade dasolução de água ORP. Exemplos de vários componentes quepodem opcionalmente ser incluídos nos lenços de limpeza sãodescritos nas Patentes US números 6.340.663, 6.649.584 e6.624.135.

Os lenços de limpeza da invenção podem serindividualmente selados com um envoltório termoplãsticoselãvel por calor ou aglutinãvel (tal como, polietileno,Mylar e semelhantes). Os lenços também podem ser embaladoscomo varias folhas individuais para dispensa maiseconômica. Os lenços de limpeza podem ser preparadosprimeiro por colocação de múltiplas folhas do substrato emum dispensador e então contatando as folhas de substratocom uma solução de água ORP da invenção. Alternativamente,os lenços de limpeza podem ser formados como uma tramacontínua por aplicação da solução de água ORP ao substratodurante o processo de fabricação e então carregando osubstrato umectado a um dispensador.

O dispensador inclui, porém não está limitado a umacaixa com um fechamento ou um tubo com fechamento. Ofechamento do dispensador é para vedar os lenços umectadosdo ambiente externo e para prevenir volatilização prematurados ingredientes líquidos.

O dispensador também pode ser de qualquer materialapropriado que seja compatível com ambos o substratos e asolução de água ORP. Por exemplo, o dispensador pode serfabricado de plástico, tal como, polietileno de altadensidade, polipropileno, policarbonato, tereftalato depolietileno (PET), cloreto de polivinila (PVC) ou outrosplásticos rígidos.

A trama contínua dos lenços pode ser roscadaatravés de uma abertura fina na parte superior dodispensador, mais preferivelmente, através do fechamento.Um dispositivo para dimensionamento do comprimento outamanho desejado do lenço da trama seria então necessário.Uma lâmina de faca, borda serrilhada ou outro dispositivode corte da trama a um tamanho desejado pode ser provido naparte superior do dispensador, como um exemplo nãolimitante, com a abertura fina realmente dobrando suafunção como uma borda de corte. Alternativamente, a tramacontínua dos lenços pode ser classificada, dobrada,segmentada, perfurada ou parcialmente cortada em tamanhosuniformes ou não uniformes ou comprimentos, o que entãoaliviaria a necessidade da borda de corte afiada.Adicionalmente, os lenços podem ser interfoliares, de modoque a remoção de um lenço avança o próximo.

A solução de água ORP da invenção podealternativamente ser dispersada no ambiente através de ummeio gasoso, tal como ar. A solução de água ORP pode serdispersada no ar por qualquer dispositivo apropriado. Porexemplo, a solução de água ORP pode ser formada emgotículas de qualquer tamanho apropriado e dispersada noambiente.

Para aplicações de pequena escala, a solução deágua ORP pode ser dispensada através de uma garrafa depulverização que inclui um tubo vertical e bomba.Alternativamente, a solução de água ORP pode ser embaladaem recipientes de aerossol. Os recipientes de aerossolincluem geralmente o produto a ser dispensado, propelente,recipiente e válvula. A válvula inclui ambos um tuboacionador e tubo de imersão. 0 conteúdo do recipiente édispensado por pressão do acionador para baixo. Os várioscomponentes do recipiente de aerossol são compatíveis com asolução de água ORP. Propelentes apropriados podem incluirum halocarboneto liqüefeito, hidrocarboneto ou combinaçãode halocarboneto-hidrocarboneto ou um gás comprimido, talcomo, dióxido de carbono, nitrogênio ou oxido nitroso.Sistemas em aerossol tipicamente rendem gotículas quevariam em tamanho de cerca de 0,15 um a cerca de 5 |^m.

A solução de água ORP pode ser dispensada na formade aerossol como parte de um sistema inalador paratratamento de infecções nos pulmões e/ou vias de ar ou paraa cura de feridas em tais partes do corpo.

Para aplicações em larga escala, qualquerdispositivo apropriado pode ser usado para dispersar asolução de água ORP ao ar incluindo, porém não limitado aosumidificadores, formadores de bruma, enevoadores,vaporizadores, atomizadores, aspersores de água e outrosdispositivos de pulverização. Tais dispositivos permitem adispensa da solução de água ORP em uma base contínua. Umejetor que mistura diretamente ar e água em um bocal podeser empregado. A solução de água ORP pode ser convertida emvapor, tal como vapor de baixa pressão e liberada em umacorrente de ar. Vários tipos de umidificadores podem serusados, tais como, umidificadores ultra-sônicos,umidificadores de corrente ou vaporizadores eumidificadores evaporativos.

O dispositivo especifico usado para dispersar asolução de água ORP pode ser incorporado a um sistema deventilação para prover aplicação de dispersão da solução deORP através de toda a casa ou instalação de cuidado desaúde (por exemplo, hospital, casa de repouso, etc.).

A presente invenção prove adicionalmente umprocesso para produção de uma solução de água ORP usandopelo menos uma célula de eletrólise compreendendo umacâmara de ânodo, câmara de cãtodo e câmara de solução desal localizada entre as câmaras de ânodo e cãtodo, onde asolução de água ORP compreende água de ânodo e água decãtodo. Um diagrama de uma célula de eletrólise de trêscâmaras típica útil na invenção é mostrada na figura 1.

A célula de eletrólise 100 possui uma câmara deânodo 102, uma câmara de cãtodo 104 e câmara de solução desal 106. A câmara de solução de sal está localizada entre acâmara de ânodo 102 e a câmara de cãtodo 104. A câmara deânodo 102 possui uma entrada 108 e uma saída 110 parapermitir o fluxo de água através da câmara de ânodo 102. Acâmara de cãtodo 104 possui, similarmente, uma entrada 112e uma saída 114 para permitir o fluxo de água através dacâmara de cãtodo 104. A câmara de solução de sal 106 possuiuma entrada 116 e uma saída 118. A célula de eletrólise 100preferivelraente inclui um alojamento para manter todos oscomponentes juntos.

A câmara de ânodo 102 é separada da câmara desolução de sal por um eletrodo de ânodo 120 e uma membranade troca de íon de ânion 122. O eletrodo de ânodo 120 podeser posicionado adjacente à câmara de ânodo 102 com amembrana 122 localizada entre o eletrodo de ânodo 120 e acâmara de solução de sal 106. Alternativamente, a membrana122 pode ser posicionada adjacente à câmara de ânodo 102com o eletrodo de ânodo 120 localizado entre a membrana 122e a câmara de solução de sal 106.

A câmara de cãtodo 104 é separada da câmara desolução de sal por um eletrodo de cátodo 124 e uma membranade troca de íon de cátodo 126. O eletrodo de cátodo 124pode ser posicionado adjacente à câmara de cátodo 104 com amembrana 126 localizada entre o eletrodo de cátodo 124 e acâmara de solução de sal 106. Alternativamente, a membrana126 pode ser posicionada adjacente à câmara de cátodo 104com o eletrodo de cátodo 124 localizado entre a membrana126 e a câmara de solução de sal 106.

Os eletrodos são geralmente construídos de metalpara que o potencial de tensão seja aplicado entre a câmarade ânodo e a câmara de cátodo. Os eletrodos de metal sãogeralmente planos e possuem dimensões semelhantes e área desuperfície transversa em relação aquela das membranas detroca de íon. Os eletrodos são configurados para expor umaporção substancial da superfície dos membros de troca deíon a água em suas respectivas câmara de ânodo e câmara decátodo. Isso permite a migração de espécies iônicas entre acâmara de solução de sal, câmara de ânodo e câmara decatodo. Preferivelmente, os eletrodos possuem váriaspassagens ou aberturas igualmente espaçadas entre asuperfície dos eletrodos.

A fonte de potencial elétrico é conectada aoeletrodo de ânodo 120 e o eletrodo de catodo 124, de modo ainduzir uma reação de oxidação na câmara de ânodo 102 e umareação de redução na câmara de catodo 104.

As membranas de troca de íon 122 e 126 usadas nacélula de eletrolise 100 podem ser construídas de qualquermaterial apropriado para permitir a troca de íons entre acâmara de solução de salmoura 106 e a câmara de ânodo 102,tal como, íons cloreto (Cl") e entre a solução de salmoura,câmara de solução de salmoura 106 e câmara de catodo 104,tal como, íons de sódio (Na+) . A membrana de troca de íonde ânodo 122 e a membrana de troca de íon de catodo 12 6pode ser fabricada do mesmo material de construção oudiferente. Preferivelmente, a membrana de troca de íon deânodo compreende um polímero fluorado. Polímeros fluoradosapropriados incluem, por exemplo, polímeros de ácidoperfluorsulfônicos e copolímeros, tais como, ácidoperflúorsulfônico/copolímeros PTFE e ácidoperfluorsulfônico/copolímeros de TFE. A membrana de trocade íon pode ser construída de uma camada simples dematerial ou múltiplas camadas.

A fonte de água para a câmara de ânodo 102 e câmarade cátodo 104 da célula de eletrolise 100 pode ser qualquerfornecimento de água apropriado. A água pode ser de umfornecimento de água municipal ou alternativamente pré-tratada para uso na célula de eletrolise. Preferivelmente,a água pré-tratada é selecionada do grupo consistindo emágua mole, água purificada, água destilada e águadeionizada. Mais pref erivelmente, a fonte de água pré-tratada é água ultra pura obtida usando equipamento depurificação de osmose inversa.

A solução de água salgada para uso na câmara desolução de salmoura 106 pode ser qualquer solução desalmoura aquosa que contenha espécies iônicas apropriadaspara produzir a solução de água ORP. Pref erivelmente, asolução de água salgada é uma solução de sal cloreto desódio aquosa (NaCl), também geralmente referida como umasolução de salmoura. Outras soluções de salmouraapropriadas incluem outros sais de cloreto, tais como,cloreto de potássio, cloreto de amônio e cloreto demagnésio, bem como outros sais de halogênio, tais como,sais de potássio e bromo. A solução de salmoura pode conteruma mistura de sais.

A solução de salmoura pode ter qualquerconcentração apropriada. A solução de salmoura pode sersaturada ou concentrada. Preferivelmente, a solução desalmoura é uma solução de cloreto de sódio saturada.

As várias espécies iônicas produzidas na célula deeletrólise em três câmaras úteis na invenção são ilustradasna figura 2. A célula de eletrólise de três camadas 200inclui uma câmara de ânodo 202, uma câmara de cátodo 204 euma câmara de solução de salmoura 205. Mediante aplicaçãode uma corrente elétrica apropriada ao ânodo 208 e cátodo210, os íons presentes na solução de salmoura fluindoatravés da câmara de solução de salmoura 2 06 migram atravésda membrana de troca de íon de ânodo 212 e membrana detroca de íon de cátodo 214 para a água fluindo através dacâmara de ânodo 202 e câmara de cátodo 204,respectivamente.

Os íons positivos migram da solução de salmoura 216fluindo através da câmara de solução de salmoura 206 para aágua de cátodo 218 fluindo através da câmara de cátodo 204.Os íons negativos migram da solução de salmoura 216 fluindoatravés da câmara de solução de salmoura 2 06 para a água deânodo 220 fluindo através da câmara de ânodo 202.

Preferivelmente, a solução de salmoura 216 écloreto de sódio aquoso (NaCl) que contém ambos íons desódio (Na+) e íons cloreto (Cl") . Os íons Na+ positivosmigram da solução de salmoura 216 para a água de cátodo218. íons Cl" negativos migram da solução de salmoura 216para a água de ânodo 22 0.

Os íons sódio e íons cloreto podem sofrer reaçãoadicional na câmara de ânodo 202 e câmara de cátodo 204.Por exemplo, íons cloreto reagem com vários íons deoxigênio e outras espécies (por exemplo, radicais isentosde oxigênio, 02, 03) presentes na água de ânodo 220 paraproduzir ClOn" e CIO". Outras reações podem tambémacontecer na câmara de ânodo 2 02 incluindo a formação deradiais isentos de oxigênio, íons hidrogênio (H+) , oxigênio(como 02) , ozônio (03) e peróxidos. Na câmara de cátodo204, gás hidrogênio (H2) , hidróxido de sódio (NaOH), íonshidróxido (OH") , íons ClOn" e outros radicais podem serformados.

A invenção prove adicionalmente um processo eaparelho para produção de uma solução de água ORP usandopelo menos duas células de eletrólise de três câmaras. Umdiagrama de um processo para produção da solução de águaORP suando duas células de eletrólise é mostrado na figura 3.

O processo 300 inclui duas células eletrolíticas detrês camadas, especificamente uma primeira célulaeletrolítica 302 e uma segunda célula eletrolítica 304. Aágua é transferida, bombeada ou de outra forma dispensadada fonte de água 305 para a câmara de ânodo 306 e câmara decátodo 308 da primeira célula eletrolítica 302 e para acâmara de ânodo 310 e câmara de cátodo 312 da segundacélula eletrolítica 304. Tipicamente, o processo dainvenção pode produzir cerca de 1 litro/minuto a cerca de50 litros/minuto de solução de água ORP. A capacidade deprodução pode ser aumentada por emprego de célulaseletrolíticas adicionais. Por exemplo, três, quatro, cinco,seis, sete, oito, nove, dez ou mais células eletrolíticasde três câmaras podem ser usadas para aumentar aprodutividade da solução de água ORP da invenção.

A água de ânodo produzida na câmara de ânodo 306 ecâmara de ânodo 310 é coletada no tanque de mistura 314.Uma porção da água de cátodo produzida na câmara de cátodo308 e câmara de cátodo 312 é coletada no tanque de mistura314 e combinada com a água do ânodo. A porção restante daágua de cátodo produzida no processo é descartada. A águade cátodo pode opcionalmente ser submetida ao separador degás 316 e/ou separador 318 antes da adição ao tanque demistura 314. Os separadores de gás removem os gases, taiscomo, gás de hidrogênio, que são formados na água de cátododurante o processo de produção.

O tanque de mistura 314 pode opcionalmente serconectado à bomba de recirculação 315 para permitir misturahomogênea da água de ânodo e porção da água de cátodo dascélulas de eletrólise 302 e 304. Adicionalmente, o tanquede mistura 314 pode incluir opcionalmente dispositivosapropriados para monitoramento do nível e pH da solução deágua ORP. A solução de água ORP pode ser transferida dotanque de mistura 314 através da bomba 317 por aplicação nadesinfecção ou esterilização em ou próximo ao local dotanque de mistura. Alternativamente, a solução de água ORPpode ser dispensada em recipientes apropriados paraembarque para um local afastado (por exemplo, armazém,hospital, etc.).

O processo 3 00 inclui, adicionalmente, um sistemade recirculação de solução de salmoura para prover asolução de salmoura à câmara de solução de salmoura 322 daprimeira célula eletrolítica 3 02 da câmara de solução desalmoura 324 da segunda célula eletrolítica 304. A soluçãode salmoura é preparada no tanque de salmoura 32 0. Asolução de salmoura é transferida através da bomba 321 paraas câmaras de solução de salmoura 322 e 324.Preferivelmente, a solução de salmoura flui em sérieatravés da câmara de solução de salmoura 322 seguidoprimeiro pela câmara de solução de salmoura 324.Alternativamente, a solução de salmoura pode ser bombeadapara ambas as câmaras de solução de salmourasimultaneamente.

Antes de retornar para o tanque de salmoura 32 0, asolução de salmoura pode fluir através do trocador de calor3 26 no tanque de mistura 314 para controlar a temperaturada solução de água ORP conforme necessário.

Os íons presentes na solução de salmoura sãoesgotados com o tempo na primeira célula eletrolítica 302 ena segunda célula eletrolítica 304. Uma fonte de íonsadicionais pode periodicamente ser adicionada ao tanque demistura 320 para substituir os íons que são transferidospara a água de ânodo e água de cãtodo. A fonte de íonsadicionais pode ser usada para manter um pH constante dasolução de salmoura que tende a cair (isto é, tornar-seácido) com o tempo. A fonte de íons adicionais pode serqualquer composto apropriado, incluindo, por exemplo, sais,tais como, cloreto de sódio. Preferivelmente, o hidróxidode sódio é adicionado ao tanque de mistura 320 parasubstituir os íons de sódio (Na+) que são transferidos paraa água de ânodo e água de cãtodo.

Em outra concretização, a invenção prove umaparelho para produção de uma solução de água com potencialoxidativo redutivo compreendendo pelo menos duas célulaseletrolíticas com três câmaras. Cada uma das célulaseletrolíticas inclui uma câmara de ânodo, uma câmara decãtodo e câmara de solução de salmoura separando as câmarasde ânodo e de cãtodo. O aparelho inclui um tanque demistura para coleta de água de ânodo produzida pelascélulas eletrolíticas e uma porção da água de cãtodoproduzida por uma ou mais das células eletrolíticas.Preferivelmente, o aparelho inclui, adicionalmente, umsistema de recirculação de sal para permitir a reciclagemda solução de salmoura fornecida às câmaras de salmoura dascélulas eletrolíticas.

Os exemplos que se seguem ilustram adicionalmente ainvenção, porém, naturalmente, não devem ser tidos comolimitando de que forma for o escopo da mesma.EXEMPLOS 1-3

Esses exemplos demonstram os aspectos únicos dasolução de água ORP da invenção. As amostras da solução deágua ORP nos Exemplos 1-3 foram analisadas de acordo com osmétodos descritos aqui, para determinar as propriedadesfísicas e níveis de espécies iônicas e outras espéciesquímicas presentes em cada amostra. Os resultados obtidospara dióxido de cloro, ozônio e peróxido de hidrogênio sebaseiam nos testes padrão usados para medir tais espécies;contudo, os resultados podem ser indicativos de espéciesdiferentes, que podem também gerar resultados de testepositivos. Adicionalmente, foi reportado que o dióxido decloro, ozônio e peróxido de hidrogênio podem reagir comhipoclorito resultando em seu consumo e produção de outrasespécies (por exemplo, HC1 e 02) • O pH, potencial oxidativoredutivo (ORP) e espécies iônicas presentes sãoestabelecidos na Tabela 1 para cada amostra da solução deágua ORP.

Tabela 1. Características e Espécies de íonPresentes para a Amostra da Solução de Água ORP

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A solução de água ORP possui característicasfísicas apropriadas para uso na desinfecção, esterilizaçãoe/ou limpeza.

EXEMPLOS 4-10

Esses exemplos demonstram a adição de um agentealvejante a uma solução de água ORP de acordo com ainvenção em várias quantidades. Especificamente, essesexemplos demonstram a atividade antimicrobiana e capacidadede alvejamento de tecido das composições.

Uma solução alve jante de CloroxÍR) a 10% foipreparada usando água destilada. As soluções que se seguemforam então preparadas usando a solução alvejante a 10%:solução de água ORP a 80%/alvejante a 2 0% (Exemplo 4) ;solução de água ORP a 60%/alvejante a 40% (Exemplo 5) ;solução de água ORP a 40%/alvejante a 50% (Exemplo 6) ;solução de água ORP a 20%/alve j ante a 80% (Exemplo 7) esolução de água ORP a 0%/alvejante a 100% (Exemplo 8) . Duassoluções de controle foram também empregadas paracomparação incluindo solução de água ORP a 100%/alvejante a0% (Exemplo 9) e uma solução de água OR com 0,01% dedetergente Tween 20 (Exemplo 10). As característicasfísicas dessas amostras foram determinadas, especificamentepH, potencial oxidativo-redutivo (ORP), teor de cloro total(Cl"), teor de ácido hipocloroso (HC10") , teor de dióxidode cloro e teor de peróxido e são estabelecidos na Tabela 2.

Tabela 2. Características Físicas da Solução deÁgua ORP/Composições Alvejantes

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O bolo grande de íons de cloro adicionado comoparte do agente alvej ante impediu a medição acurada dosníveis de dióxido de cloro e peróxido conforme indicado nasdesignações n.d. Também, os resultados obtidos para dióxidode cloro e peróxido se baseiam nos testes padrões usadospara medir tais espécies; contudo, os resultados podem serindicativos de espécies diferentes que podem também gerarresultados de teste positivos. Adicionalmente, foireportado que dióxido de cloro, ozônio e peróxido dehidrogênio podem reagir com hipoclorito resultando em seuconsumo e na produção de outras espécies (por exemplo, HCle 02) . Conforme esses exemplos demonstram, os níveis deácido hipocloroso da solução de água ORP com e sem a adiçãode agente alvejante são semelhantes.

As amostras dos Exemplos 4-10 foram submetidas a umteste de contagem de esporos alta usando esporos deBacillus subtilis variedade niger (ATCC #9372 obtido no SPSMedicai of Rush, New York). Suspensões de esporo foramconcentradas (por evaporação em uma capela estéril) para 4x IO6 esporos por 100 microlitros. Uma amostra de 100microlitros da suspensão de esporos foi misturada com 900microlitros de cada uma das amostras nos Exemplos 4-10. Asamostras foram incubadas a temperatura ambiente porperíodos de 1 a 5 minutos conforme estabelecido na Tabela3. Nos períodos indicados, 100 microlitros das amostrasincubadas foram colocados em placas em placas TSAindividuais e incubados por 24 horas a 35°C ± 2°C, após oque o número de colônias resultantes em cada placa foideterminado. As placas de controle demonstraram que asconcentrações de esporo de partida eram > 1 x IO6esporos/100 microlitros. A concentração de esporos deBacillus para as várias amostras nos vários períodos deincubação (como a média de duas determinações) éestabelecida na Tabela 3.

Tabela 3. Concentrações de Esporos de Bacillus(esporos/100 microlitros)

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Como esses resultados demonstram, conforme aconcentração de alvejante (solução alvejante aquosa a 10%)aumenta, a quantidade de esporos de Bacillus mortos éreduzida para as amostras incubadas por 2-3 minutos.Contudo, para amostras incubadas por 5 minutos, aconcentração de alvejante não impacta a morte do esporo doBacillus. Adicionalmente, os resultados demonstram que aadição de detergente a 0,01% à solução de água ORP nãoreduz a morte dos esporos.

As amostras dos Exemplos 4-10 foram submetidas a umteste de alvejamento de tecido. O tecido no qual asamostras foram testadas era uma camiseta de criança 100raiom com manchas de corante azul escuro. Peças de 5,08 cmde tecido tingido foram colocadas em tubos de plástico de50 mL. Cada peça de tecido foi revestida por uma amostra dasolução nos Exemplos 4-10. O tempo decorrido até oalvejamento completo ter sido obtido, conforme determinadopela brancura do tecido, é estabelecido na Tabela 4.

Tabela 4. Tempo Até Alvejamento Completo da Amostrade Tecido

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De acordo com o demonstrado por esses exemplos,conforme a concentração da solução de água ORP aumenta nacomposição, o tempo até o alvejamento completo ser obtidoaumenta.

EXEMPLO 11

Esse exemplo se refere ao perfil toxicológico deuma solução de água ORP da presente invenção. Microcina 6 0(ou M60) , uma solução de água ORP exemplar da invenção, foiusada nesses estudos.

Em termos de segurança, M60 não irritou à pele ouconjuntiva dos coelhos conforme testados de acordo com opadrão internacional (AAMI 1997; NV SOP 16G-44; PFEUM2000) . Adicionalmente, um estudo de toxicidade aguda porinalação em ratos demonstrou que a administração deMicrocina 60 por essa via é segura.

Os efeitos irritantes em potencial da Microcina 60foram avaliados em um estudo de irritação ocular primáriaem coelhos. Um volume de 0,1 mL da Microcina 60 foiinstilado no olho direito de três coelhos brancos da NovaZelândia. O olho esquerdo de cada animal foi deixado semtratamento como um controle. Os olhos foram observados eclassificados em 1, 24, 48 e 72 horas quanto a ulceração dacórnea ou opacidade, inflamação da íris e vermelhidão ouquemose da conjuntiva. Todos os animais foram tambémobservados uma vez ao dia quanto a mortalidade e sinais dedoença.

Nenhum sinal de irritação ocular foi observado emqualquer um dos olhos tratados ou de controle em qualquertempo durante o estudo. Todos os animais pareceramclinicamente saudáveis pela duração do estudo. Essasverificações indicam que Microcina 60 não causa umaresposta de irritação positiva.

Um estudo de toxicidade aguda por inalação foitambém realizado em ratos par determinar a toxicidade deinalação em potencial da Microcina 60. Dez ratos albinosSprague-Dawley foram expostos a um aerossol gerado daMicrocina 60 não diluída por 4 horas. A concentração daMicrocina 60 foi determinada como sendo de 2,16 mg/L. Todosos animais foram observados freqüentemente no dia daexposição e uma vez ao dia por 14 dias após isso quanto amortalidade e sinais clínicos/comportamentais detoxicidade. Todos os animais foram sacrificados no dia 14 enecrópsias grosseiras foram realizadas.

Todos os animais mostraram piloereção muito ligeirae ligeira e atividade muito ligeiramente diminuída em 4horas e meia e 6 horas após a exposição começar, porémforam assintomáticos o dia seguinte e pareceramclinicamente normais pela duração do estudo. Um macho nãoganhou peso entre os dias 0 e 7. Não houve mortalidade e asnecrópsias grosseiras não revelaram anormalidades. Ainalação aguda estimada LD50 desse estudo é superior a 2,16 mg/L.

Estudos toxicológicos adicionais foram realizadosem coelho. Água superoxidada em aerossol (1 mL) seráliberada para a narina direita através de um dispositivo depressão positiva para 2 0 coelhos da Nova Zelândia, trêsvezes ao dia por 15, 30, 45 e 60 dias. A narina esquerda decontrole será deixada sem qualquer tratamento. Biópsias denasomucosa de narinas não tratadas e narinas tratadas comM6 0 serão obtidas de cinco animais em cada ponto de tempo.Esses tecidos serão observados em microscopia óptica e deelétron. Um exame médico completo será conduzido em cadaanimal, em dias alternados para documentar à obstruçãonasal, dor facial, pressão, rinorreia mucopurolenta eindisposição. Os efeitos colaterais serão reportados comonão freqüentes, brandos e transitórios.

Alterações na mucosa nasal apareceram apósaplicação de M60 intranasal por 60 dias. Houve destruiçãobranda dos epitélios, infiltração inflamatória separada daregião subepitelial e hiperplasia das glândulas e vasossangüíneos em todas as amostras no dia 60. Em observaçãoultraestrutural, nós verificamos que apareceram alteraçõessemelhantes a cisto variadas dentro das células epiteliais;as mitocôndrias foram condensadas e deformadas e parte damembrana foi dissolvida. Algumas células epiteliais foramdestacadas; os cílios epiteliais quase desapareceram e suamembrana foi dissolvida e espaços intercelulares foramalargados. Algumas células foram destacadas da membrana debase. A túnica própria era brandamente edematosa.

Esse estudo demonstra que M60 pode irritarbrandamente a mucosa nasal após administração intransal porsessenta dias. Contudo, essa lesão foi mínima e reversível,de modo que a via intranasal de administração de M6 0 seriaconsiderada segura. Isto se baseia no fato de que embora amucosa nasal possa ser seriamente lesionada após aplicaçãode vasoconstritores por vários anos, ela ainda pode serrestaurada ao normal após a parada desses medicamentos.Isso é possível devido ao processo de regeneração na mucosanasal que depende se as células basais e membrana de basepermanecem intactas após a lesão. As células basaisvizinhas podem se mover para a lesão ao longo da membranade base e cobrir a lesão. Após isso, mesmo na presença dedestaque brando das células epiteliais em algumas regiõesapós tratamento com M60, a membrana de base sobreviveu e ascélulas epiteliais sobreviventes próximas a regiãopatológica cresceram na direção da região sem os epitélios.Adicionalmente, os esteróides tópicos podem ter sidoaplicados para promover recuperação da estrutura e funçãoda mucosa nasal.

Na conclusão, a administração intranasal de M60 porcinco dias foi segura nesse coorte. Alterações patológicasna mucosa foram brandas e reversíveis. Portanto, aadministração intranasal de M60 poderia ser amplamenteempregada.

EXEMPLO 12

Esse exemplo ilustra a atividade, estabilidade efalta de toxicidade de uma água ORP exemplar.Tal solução de água ORP para uso nesse estudo éconhecida como "Microcina", recentemente introduzida nomercado mexicano como um anti-séptico. A microcina é umasolução superoxidada de pH neutro com atividade germicida,esterilizante e anti-séptica de ferida de acordo com ascertificações obtidas da Secretaria de Saúde do México. Amicrocina é preparada de água pura e sal (NaCl), possui umaconcentração de sódio pequena (<55 ppm) e cloro (<80 ppm),um pH na faixa de 7,2 a 7,8, um potencial de reduçãooxidativa na faixa de 84 0 mV a 96 0 mV. A microcina éproduzida apenas em uma concentração e não precisa serativada ou diluída.

Essa solução é produzida da água obtida por osmoseinversa, que é então submetida a um gradiente eletroquímicogerado por alta tensão e cloreto de sódio. Dessa forma, asespécies reativas que se formam nas múltiplas câmaras ondeo gradiente eletroquímico é gerado são selecionadas em ummodo controlado para criar a Microcina. O resultado é umasolução com um teor controlado de radicais livres queconfere um potencial de redução oxidativa alto (+84 0 mV a+960 mV) e consequentemente atividade antimicrobiana alta.

Ácido hipocloroso e hipoclorito de sódio são oselementos mais abundantes contidos na Microcina, com outrosem menor concentração, tais como, peróxido de hidrogênio,ozônio, íons cloreto, hidreto e hidróxido de sódio, entreoutros. Embora os depositantes não desejem estar ligados aqualquer teoria específica, acredita-se que o desinfetantenão dependa necessariamente da quantidade de cloro, porémao invés disso, do teor de radicais livres, uma vez que osníveis de sódio e cloro na Microcina são inferiores a 50 e60 partes por milhão, respectivamente. Também e emcontraste com outras soluções superoxidadas que foramreportadas na literatura, a Microcina possui um pH neutro(6,4-7,8), não é corrosiva e estável em armazenamento poraté 2 anos. Todas essas características tornaram possível aprodução de uma solução superoxidada que é eficaz como umdesinfetante de alto nível e compatível para uso em ambasas superfícies inanimadas e em tecidos.

Testes de estabilidade acelerada demonstraram que aMicrocina pode ser armazenada em condições de temperaturavariadas de 4 a 65°C, sem perder sua atividade desinfetantepor um período de 2 anos. Essa propriedade de estabilidadeprolongada em prateleira é também a diferença das soluçõessuperoxidadas reportadas anteriormente que são apenaseficazes se empregadas imediatamente após serem produzidas.Em outras palavras, embora a Microcina possa ser armazenadae distribuída mesmo em condições extremas, sem perder suaatividade antimicrobiana, outras soluções teriam de serproduzidas por uma máquina especial e cara em cada hospitalque tentasse usar aquela solução. Não obstante, ofabricante recomenda que, uma vez que o recipiente deMicrocina tenha sido aberto, ela deva ser usada dentro de30 dias para a finalidade de garantir atividade uniforme eresultados consistentes.

Uma vez que a Microcina é produzida apenas em umaconcentração, a dose de Microcina pode ser alterada apenaspor mudanças no volume aplicado por área unitária da pele.Nos estudos toxicológicos, as doses de Microcina aplicadatopicamente à pele intacta variaram entre 0,05 e 0,07mL/cm2/ no estudo de toxicidade dermatológica aguda e nainvestigação de irritação da pele, elas foram de até 8,0mL/cm2 e naqueles que investigaram sua aplicação em feridasprofundas, a Microcina foi aplicada em uma dose de 0,09mL/cm2.

Estudos toxicológicos foram realizados os quaisaplicaram Microcina topicamente à área intacta da pele,usando uma aplicação simples com exposição de 4 a 24 horas.Múltiplas aplicações de Microcina, uma ou duas vezes aodia, durante um período de 7 dias foram avaliadas paraferidas profundas em ratos.

Dois estudos foram realizados na pele intacta decoelhos para avaliar o efeito da Microcina como nairritação aguda e toxicidade dérmica. Nenhum sinal clínico,irritação dérmica ou anormalidades na pele na autópsiaforam encontrados em qualquer um dos animais expostos àMicrocina.

A caracterização da toxicidade local e sistêmica daMicrocina aplicada topicamente a uma ferida profunda foiavaliada em ratos. Nenhuma anormalidade, diferençassignificativas nos parâmetros da química do sangue oucitologia hemãtica foram observadas, nem anormalidades naautópsia. As classificações de irritação da pele ehistopatologia das feridas e tecidos ao redor do local deaplicação não revelaram qualquer diferença entre as feridastratadas com Microcina e aquelas do grupo de controletratado com solução de salmoura.

A toxicidade sistêmica da Microcina foi tambémavaliada por meio de uma injeção intraperitoneal noscamundongos. Para isso, cinco camundongos foram injetadoscom uma dose simples (50 mL/kg) de Microcina pela viaintraperitoneal. Da mesma forma, cinco camundongos decontrole receberam uma dose simples (50 mL/kg) de soluçãode salmoura (cloreto de sódio a 0,9%). Nessa investigação,nem mortalidade nem qualquer evidência de toxicidadesistêmica foram observadas em qualquer um dos animais quereceberam a dose intraperitoneal simples de Microcina, peloque LD50 esta acima de 5 0 mL/kg.

A microcina foi administrada por via oral aos ratospara permitir sua absorção e caracterizar qualquer efeitotóxico inerente do produto. Para isso, uma dose simples(4,98 mL/kg) foi administrada por tubo esofageano aos trêsratos albinos da cepa Sprague-Dawley. Não houvemortalidade, nem havia sinais clínicos ou anormalidades nasautópsias de qualquer um dos animais exposto à dose oralsimples de Microcina.

O potencial da Microcina aplicada topicamente parairritação ocular foi também avaliado nos coelhos. Airritação ocular não foi observada nem qualquer sinalclínico em qualquer animal exposto a Microcina poradministração tópica através da via ocular.

A microcina foi aplicada por via inalatória aosratos para determinar toxicidade aguda em potencial porinalação. Todos os animais mostraram uma redução leve oumuito leve na atividade e piloereção após a exposição,porém eles todos foram assintomãticos no dia seguinte.Mortalidade ou anormalidades não foram observadas naautópsia dos animais expostos à Microcina por inalação.

A avaliação do potencial para sensibilidade da pelecom Microcina foi realizada em porquinhos da índia usandoum método de emplastro por oclusão modificado (Buehler). Airritação não foi observada nos animais do grupo decontrole após um desafio de tratamento simples, nem nosanimais avaliados (tratados por indução) após desafio com otratamento. Portanto, a Microcina não provoca uma reação desensibilização.

Assim, quando foi aplicada à pele intacta, feridasdérmicas abertas profundas, no saco conjuntival, por viasorais e inalação ou por meio de injeção intraperitoneal, aMicrocina não mostrou efeitos adversos relacionados aoproduto. Existe também experiência em ter-se tratado maisde 500 pacientes com feridas de natureza muito diversa napele e mucosas, com excelentes resultados anti-sépticos ecosméticos. Consequentemente, a Microcina aplicadatopicamente seria eficaz e bem tolerada nesses experimentosclínicos.

A microcina é embalada em garrafas PET de 24 0 mLtransparentes. Esse produto é armazenado em temperaturaambiente e permanece estável por até 2 anos na prateleirase a garrafa não for aberta. Quando aberto, é recomendadoque todo o produto seja usado em menos de 90 dias. A partirdesse perfil de segurança biológica alta, a Microcina podeser esvaziada na pia, sem risco de contaminação oucorrosão.

Múltiplas experiências microbianas foram operadascom a Microcina, nos Estados Unidos da América e no México.A erradicação de mais de 90% da bactéria ocorre nosprimeiros segundos de exposição. A atividade antibacterianae antimicótica que a Microcina exibe de acordo com essepadrão é resumida na Tabela 5.

Tabela 5. Atividade Antibacteriana e Antimicótica<table>table see original document page 84</column></row><table>

A experiência de atividade esporicida foi realizadade acordo com protocolo PAHO [Pan-American HealthOrganization]/WHO.

Como para atividade virucida, foi verificado que aMicrocina reduz a carga viral do vírus da imunodeficiênciahumana (cepa SF33) em mais de 3 logaritmos em cincominutos. Isso foi verificado por ausência do efeitocitopático e do antígeno Agp24 nos experimentos de vírustratados com Microcina. Esses experimentos foram entendidosde acordo com os protocolos virucidas da Agência deProteção Ambiental dos Estados Unidos (DIS/TSS-7/12 denovembro de 1981).

A atividade virucida da Microcina foi recentementeconfirmada nos estudos realizados nos Estados Unidos contraHIV e vírus da pólio, e sua atividade contra Listeriamonocitogenes, MRSA e Mycobacterium toberculosis tambémdocumentada. Assim, foi demonstrado que a Microcina, quandoadministrada conforme recomendado, pode erradicarbactérias, fungos, vírus e esporos de um a quinze minutosde exposição.

EXEMPLO 13

Esse exemplo demonstra o uso de uma solução de águaORP exemplar, Microcina, como uma solução antimicrobianaeficaz.

Uma avaliação de Tempo de Extermínio in vitro foirealizada usando água com potencial oxidativo redutivo,Microcina. A microcina foi avaliada versus suspensões dedesafio de cinqüenta cepas de microorganismos diferentes,vinte e cinco cepas da American Type Culture Collection(ATC) e vinte e cinco Isolados Clínicos daquelas mesmasespécies, conforme descrito na Tentative Final Monograph,Federal Register, 17 de Junho de 1994, vol. 5 9:116, pg.31444. As reduções percentuais e as reduções de LoglO dapopulação inicial de cada cepa de desafio foramdeterminadas seguindo-se exposições a Microcina por trinta(30) segundos, um (1) minuto, três (3) minutos, cinco (5)minutos, sete (7) minutos, nove (9) minutos, onze (11)minutos, treze (13) minutos, quinze (15) minutos e vinte(20) minutos. Todas as colocações em placas de ãgar foramrealizadas em duplicata e a Microcina foi avaliada a umaconcentração de 99% (volume/volume). Todos os testes foramrealizados de acordo com Good Laboratory Practices,conforme especificado na 21 C.F.R. Parte 58.

A tabela que se segue resume os resultados daavaliação de Tempo de Extermínio in vitro mencionados acimana marca de exposição de trinta segundos para todas aspopulações testadas que foram reduzidas em mais de 5,0Log10 :

Tabela 6. Extermínio In Vitro em 30 segundos<table>table see original document page 86</column></row><table><table>table see original document page 87</column></row><table><table>table see original document page 88</column></row><table><table>table see original document page 89</column></row><table><table>table see original document page 90</column></row><table>

Embora suas reduções microbianas fossem medidas emmenos de 5,0 Logi0, a Microcina também demonstrou atividadeantimicrobiana contra as três espécies restantes nãoincluídas na Tabela 6. Mais especificamente, uma exposiçãode trinta segundos à Microcina reduziu a população deStreptococcus pneumoniae (Isolado Clínico; BSLI#072605Spnl) em mais de 4,5 Logi0/ que foi o limite dedetecção versus essas espécies. Adicionalmente, quandodesafiada com Cândida tropicalis (ATCC #750), Microcinademonstrou uma redução microbiana superior a 3,0 Logioseguindo uma exposição de trinta segundos. Adicionalmente,quando desafiada com Cândida tropicalis (BSLI #042905Ct), aMicrocina demonstrou uma redução microbiana superior a 3,0Logio seguindo uma exposição de vinte minutos.

Os resultados exemplares dessa avaliação de Tempode Extermínio in vitro demonstram que a água com potencialoxidativo redutivo, Microcina, exibe atividade

antimicrobiana rápida (isto é, inferior a 3 0 segundos namaioria dos casos) versus um amplo espectro demicroorganismos desafiantes. Populações microbianas dequarenta e sete das cinqüenta gram-positiva, gram-negativae espécies de levedura avaliadas foram reduzidas em mais de5, 0 Logi0 dentro de trinta segundos de exposição aoproduto.

EXEMPLO 14

Esse exemplo demonstra uma comparação da atividadeantimicrobiana de uma solução de água ORP exemplar,Microcina, versus solução de gliconato de clorhexidinaHIBICLENS(R) 4,0% (peso/volume) e 0,9% de irrigação decloreto de sódio (USP).

Uma avaliação de Tempo de Extermínio in vitro foirealizada conforme descrito no Exemplo 13 usando solução degliconato de clorhexidina HIBICLENSÍR) 4,0% (peso/volume) euma solução de irrigação de cloreto de sódio estéril a 0,9%(USP) como produtos de referência. Cada produto dereferência foi avaliado versus suspensões de dez cepas daAmerican Type Culture Collection (ATCC) especificadaindicadas na Tentative Final Monograph. Os dados coletadosforam então analisados contra a atividade de reduçãomicrobiana da Microcina registrada no Exemplo 13.

A água com potencial oxidativo redutivo, Microcina,reduziu as populações microbianas de cinco das cepas dedesafio a um nivel comparável aquele observado para asolução de gliconato de clorhexidina HIBICLENSÍR> . AmbosMicrocina e HIBICLENS(R> forneceram uma redução microbianade mais de 5,0 Log10/ seguindo uma exposição de trintasegundos às espécies: Escherichia coli (ATCC #11229 e ATCC#25922), Pseudomonas aeruginosa (ATCC #15442 e ATCC #27853)e Serratia marcescens (ATCC #14756) . Adicionalmente,conforme mostrado acima na Tabela 5, a Microcina demonstrouexcelente atividade antimicrobiana contra Micrococcusluteus (ATCC #7468) pela provisão de uma redução de 5,8420Logio após uma exposição de trinta segundos. Contudo, umaatividade direta do Micrococcus luteus (ATCC #74 68) emcomparação ao HIBICLENS0 não foi possível em razão de que,após uma exposição de trinta segundos, HIBICLENSÍR) reduziua população ao limite de detecção do teste (nesse casoespecífico, mais de 4,8 Logio). É observado que a soluçãode irrigação de cloreto de sódio a 0,9% estéril reduziu aspopulações microbianas de cada uma das seis cepasdesafiantes acima, em menos de 0,3 Logio seguindo-se umaexposição de vinte minutos plena.A água com potencial oxidativo redutivo, Microcina,forneceu atividade antimicrobiana superior a ambos oHIBICLENS(R) e a irrigação com cloreto de sódio para quatrodas cepas de desafio testadas: Enterococcus faecalis (ATCC#29212), Staphylococcus aureus (ATCC #6538 e ATCC #29213),e Staphylococcus epidermidis (ATCC #12228) . A tabela que sesegue resume os resultados de redução microbiana daavaliação de Tempo de Extermínio in vitro para essas quatroespécies:

Tabela 7. Resultados Comparativos de ExtermínioEspécies de microorganismos <table>table see original document page 93</column></row><table><table>table see original document page 94</column></row><table>

Os resultados dessa avaliação comparativa de Tempode Extermínio in vitro demonstram que a água com potencialoxidativo redutivo, Microcina, não apenas exibe atividadeantimicrobiana comparável ao HIBICLENS(R> contra Escherichiacoli (ATCC #1122 9 e ATCC #25922), Pseudomonas aeruginosa(ATCC #15442 e ATCC #27853), Serratia marcesçens (ATCC#14756) e Micrococcus luteus (ATCC #7468), porém provetratamento mais eficaz contra Enterococcus faecalis (ATCC#29212), Staphylococcus aureus (ATCC #6538 e ATCC #29213),e Staphylococcus epidermidis (ATCC #12228). Conformemostrado na Tabela 7, a Microcina exemplifica uma respostaantimicrobiana mais rápida (isto é, menos de 3 0 segundos)em algumas espécies. Além disso, a exposição à Microcinaresulta em uma redução microbiana total maior em todas asespécies listadas na Tabela 7.

EXEMPLO 15

Esse exemplo prove uma formulação da invençãoapropriada para administração tópica a um paciente. Aformulação contém o que se segue:

Componente QuantidadeSolução de água ORP 25 0 mL

Polímero Carbopol® em pó (agenteespessante) 15 g

Trietanolamina (agente neutralizante) 80 mLEXEMPLO 16

Esse exemplo prove uma formulação da invençãoapropriada para administração tópica a um paciente. Aformulação contém o que se segue:

Componente QuantidadeSolução de água ORP 1.000 mL

Polímero Carbopol® em pó (agenteespessante) 15 g

Trietanolamina (agente neutralizante) 80 mL

EXEMPLO 17

Esse exemplo prove uma formulação da invençãoapropriada para administração tópica a um paciente. Aformulação contém o que se segue:

Componente Quantidade

Solução de água ORP 250 mL

Polímero Carbopol® em pó (agenteespessante) 7 g

Trietanolamina (agente neutralizante) 12 mL

EXEMPLO 18

Esse exemplo demonstra a fabricação de umaformulação da invenção compreendendo uma solução de águaORP e um agente espessante.

Uma solução de água ORP é colocada em um recipienteapropriado, tal como, béquer ou jarra de vidro. O polímeroCarbopol(R) 974P é passado através de uma peneira grossa (oufiltrador) que permite difusão rápida, enquanto ao mesmotempo quebrando quaisquer aglomerados grandes. O polímeroCarbopol<R) 974P é então adicionado como agente espessante.O polímero Carbopol<R) é adicionado lentamente para impedira formação de grumos e, assim, evitar um ciclo de misturaexcessivamente longo.

A solução é misturada rapidamente durante a adiçãodo polímero de Carbopol(R), de modo que o pó se dissolve emtemperatura ambiente. O agente de neutralizaçãotrietanolamina é então adicionado â solução e misturado pormeio de um misturador elétrico ou outro dispositivoapropriado, até o gel homogêneo ser obtido. A adição doagente neutralização ã composição de polímero Carbopol<R)converte a formulação em um gel.

EXEMPLO 19

Esse exemplo descreve o uso da solução de água ORPde acordo com a presente invenção para o tratamento dequeimaduras, especificamente queimaduras de segundo eterceiro grau, em pacientes com queimadura pediátrica.

Um total de 64 pacientes humanos com queimadurapediátrica foi tratado com uma solução de água ORP. O grupode estudo foi comparado ao grupo de controle tambémconsistindo em 64 pacientes tratados com terapia paraqueimadura convencional. O grupo de estudo consistiu noseguinte: 1 paciente com queimaduras de primeiro grau, 6pacientes com uma combinação de queimaduras de primeiro esegundo grau, 3 8 pacientes com queimaduras de segundo grau,4 pacientes com queimadura de terceiro grau e 15 pacientescom uma combinação de queimaduras de segundo e terceirograu. Além disso, o grupo de estudo consistiu em pacientespossuindo queimaduras nas seguintes porcentagens de seuscorpos (isto é, extensão da queimadura); 10 pacientes com 0a 9% de extensão de queimadura, 27 pacientes com 10 a 19%de extensão de queimadura, 11 pacientes com 20 a 29% deextensão de queimadura, 8 pacientes com 3 0 a 3 9% deextensão de queimadura, 4 pacientes com 4 0 a 4 9% deextensão de queimadura, 1 paciente com 50 a 59% de extensãode queimadura e 3 pacientes com 60 a 69% de extensão dequeimadura. Cada queimadura teve os fragmentos retirados. Asolução foi aplicada por pulverização com dispositivo deirrigação de pressão alta. Em seguida, a solução foiaplicada por pulverização e deixada umectar a queimadurapor 5 a 15 minutos, o que foi repetido três vezes ao dia.As queimaduras não foram revestidas com bandagem entre asadministrações da solução.

Nas culturas tomadas para determinar a presença demicroorganismos na superfície da queimadura, apenas 6pacientes tratados com uma solução de ORP tiveram umacultura positiva após 7-15 dias no hospital, em comparaçãoaos 22 pacientes no grupo de controle. O restante dospacientes no grupo de estudo (58) e grupo de controle (42)tiveram culturas negativas. Os microorganismos presentesnas culturas positivas dos grupos de estudo e controle sãoestabelecidos na Tabela 8.

Tabela 8. Microbiologia da Queimadura

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A freqüência da aplicação da solução de água ORPvariou de acordo com a natureza de cada queimadura dopaciente. A estadia em hospital média por classificação dequeimadura para cada grupo de estudo e grupo de controlefoi colocada em tabela. Para as queimaduras de primeirograu, a estadia média em hospital foi de 4,6 dias para ogrupo de estudo (6 pacientes) em comparação aos 19,2 diaspara o grupo de controle (45 pacientes) . Para asqueimaduras de segundo grau, a estadia média em hospitalfoi de 10,6 dias para o grupo de estudo (44 pacientes) emcomparação a 2 6,9 dias para o grupo de controle (9pacientes). Para queimaduras de terceiro grau, a estadiamédia em hospital foi de 29,5 dias para o grupo de estudo(14 pacientes) em comparação aos 39,8 dias para o grupo decontrole (10 pacientes). No total, o período de estadiamédio em hospital foi reduzido em 48% de 28,6 dias para14, 9 dias com a administração da solução de água ORP dainvenção aos pacientes com queimadura pediátrica. A estadiamédia no hospital em número de dias para o grupo decontrole versus o grupo de estudo com base na extensão daqueimadura é estabelecida na Tabela 9.

Tabela 9. Estadia no Hospital

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Como pode ser visto desse exemplo, a solução deágua ORP da presente invenção pode ser vantajosamenteadministrada aos pacientes com queimadura pediátricaresultando em estadias no hospital reduzidas.

EXEMPLO 20

Esse exemplo descreve a administração da solução deágua ORP da presente invenção aos pacientes com queimaduraspediátricas, sem administração de antibióticos.

Nenhum dos 58 pacientes no grupo de estudo quetinham culturas de microorganismo negativas medidas após 7-15 dias no hospital descritos no Exemplo 19 acima foitratado com antibióticos. A estadia média no hospital paraesse grupo de pacientes foi de 12,3 dias. No grupo decontrole, os antibióticos foram usados em 46 pacientes alémda administração da solução de água ORP. Culturas positivaspara microorganismos foram observadas em 22 dessespacientes com uma estadia média no hospital de 28,6 diaspara os pacientes usando antibióticos.

Como é aparente desse exemplo, a solução de águaORP da presente invenção pode ser vantajosamenteadministrada aos pacientes com queimadura pediátrica sem ouso de antibióticos rotineiro.

EXEMPLO 21

Esse exemplo demonstra o efeito de uma solução deágua ORP exemplar versus peróxido de hidrogênio (HP) naviabilidade dos fibroblastos diplóides humanos (HDFs). Paraestudar essa toxicidade em potencial, HDFs foram expostosin vitro à solução de água ORP e peróxido de hidrogênio(HP) . HP é conhecido como sendo tóxico às célulaseucarióticas, aumentando a apoptose e necrose e reduzindo aviabilidade celular. Nesse exemplo, a viabilidade celular,apoptose e necrose foram medidas em HDFs expostos à soluçãode água ORP pura e 880 mM HP (uma concentração empregadapara usos anti-sépticos de HP) por 5 a 30 minutos.

Culturas de HDF foram obtidas de três prepúciosdiferentes, que foram agrupados e criopreservados emconjunto para a finalidade desse estudo. Apenas célulasdiplóides foram usadas para todos os experimentos. Naanálise do ciclo celular, DNA diplóide foi definido napresença de uma máxima G0-G1 simples com CV < 7% e umamáxima G2/M correspondente coletada de pelo menos um totalde 20.000 eventos. As figuras 4A-4C revelam os resultadoscom tempos de exposição de 5 e 3 0 minutos que sãoilustrados nas barras brancas e pretas, respectivamente. Aanalise simultânea desses parâmetros foi realizada nasmesmas populações de células por citometria de fluxousando: A) 7-aminoactinomicina D (7AAD); B) Anexina V-FITCe C) Iodeto de propídio. As figuras 8A-8C revelam valoresem porcentagem expressos como média ± SD (n=3).

A viabilidade celular foi de 75% e 55% após umaexposição de 5 minutos à solução de água ORP e HP,respectivamente (figura 4A) . Se a exposição tivesse sidoprolongada por 3 0 minutos, a viabilidade celularadicionalmente teria diminuído para 60% e 5%respectivamente. Aparentemente, a solução de água ORPinduziu a morte celular através de necrose, uma vez que 15%das células incorporaram iodeto de propídio na análise decitometria de fluxo em ambos os tempos (Figura 4C). Emboranão desejando estar ligado a qualquer teoria, esseresultado seria devido a um efeito osmótico induzido pelahipotonicidade da Microcina (13mOsm) uma vez que as célulasforam mantidas apenas em uma solução de água ORP, semfatores de crescimento ou íons adicionados. A apoptose nãoé vista como sendo o mecanismo pelo qual a solução de águaORP induz a morte celular, uma vez que apenas 3% dascélulas tratadas com solução de água ORP expuseram Anexina-V na superfície celular (um marcador de apoptose) (figura4B). Essa porcentagem foi realmente semelhante a uma medidano grupo de controle. Ao contrário, HP induz necrose em 20%e 75% das células tratadas e apoptose em 15% e 20% após 5 e30 minutos de exposição, respectivamente. Em conjunto essesresultados mostram que a solução de água ORP (não diluída)é menos tóxica para HDFs que uma concentração anti-sépticade HP.

EXEMPLO 22

Esse exemplo demonstra o efeito de uma solução deágua ORP exemplar, em relação ao peróxido de hidrogênio(HP) na lesão de DNA oxidativa e formação de aduto de DNA8-hidróxi-21-desoxiguanosina (8-OHdG) em HDFs. Sabe-se quea produção de adutos de 8-OHdG em uma célula é um marcadorde dano oxidativo em resíduos específicos de DNA. Alémdisso, níveis celulares altos desse aduto correlacionam-seà mutagênese, carcinogênese e envelhecimento celular.

A figura 5 mostra os níveis de adutos de 8-OHdGpresentes nas amostras de DNA de HDFs após tratamentos decontrole, tratamentos com solução de água ORP e tratamentoscom HP por 30 minutos. O DNA foi extraído justamente após aexposição (TO, barras brancas) ou três horas após o períodode desafio (T3, barras pretas) . O DNA foi digerido e osadutos de 8-OHdG foram medidos por kit ELISA de acordo comas instruções do fabricante. Os valores são mostrados(ng/mL) como média ±SD (n=3). A exposição à solução de águaORP por 30 minutos não aumentou a formação de adutos nascélulas tratadas em comparação às células de controle apósincubação por 30 minutos. Em contraste, o tratamento com HPaltamente diluído - abaixo das concentrações subletais enão terapêuticas de HP (500 HP) - o tratamento com 500de HP por 30 minutos aumentou o número de adutos 8-OHdG emcerca de 25 vezes em relação às células tratadas decontrole ou tratadas com água ORP.As células tratadas com solução de água POR foramcapazes de diminuir os níveis de adutos de 8-OHdG sedeixadas em DMEM suplementado por 3 horas após a exposiçãoa uma solução de água ORP. A despeito de serem deixadas omesmo período de recuperação de 3 horas, as célulastratadas com HP ainda apresentaram cerca de cinco vezesmais adutos que as células tratadas com solução de água ORPou tratadas com controle. Em conjunto esses resultadosdemonstram que a exposição aguda a uma solução de água ORPnão induz lesão oxidativa de DNA significativa. Essesresultados também indicam que a solução de água ORP damesma forma não induzirá mutagênese ou carcinogênese invitro ou in vivo.

EXEMPLO 2 3

Esse exemplo demonstra os efeitos de HDFs deexposição crônica às concentrações baixas de uma solução deágua ORP exemplar versus HP. Sabe-se que a tensão oxidativacrônica induz envelhecimento prematuro das células. A fimde imitar uma lesão oxidativa prolongada, culturas de HDFprimarias foram cronicamente expostas a uma baixaconcentração da solução de água ORP (10%) ou umaconcentração não letal-HP (5 jaM) durante 20 duplicações dapopulação. A expressão e atividade da enzima SA-p-galactosidade vem sendo anteriormente associada ao processode senescência in vivo e in vi tro. Nesse exemplo, aexpressão da enzima SA-P-galactosidade foi analisada apósum mês de exposição contínua de HDF a uma solução de águaORP ou HP. Os resultados são ilustrados na figura 6, Aexpressão da enzima SA-p-galactosidase foi analisada porcontagem do número de células azuis em 20 camposmicroscópicos. (Para um exemplo de padrão de manchamento,vide Painel A) . O painel B mostra que apenas o tratamentocom HP acelerou o envelhecimento das células conformeindicado pelo número de células super expressando SA-P~galactosidase (n = 3) . O tratamento crônico com uma dosebaixa de HP aumentou a expressão de SA-P~Gal em 86% dascélulas enquanto o tratamento com uma solução de água ORPnão induziu a super expressão da proteína. Pode serconcluído desse exemplo que a solução de água ORP não sejaum indutor de envelhecimento celular prematuro.

EXEMPLO 24

Esse exemplo demonstra os resultados de um estudode toxicidade usando uma solução de água ORP exemplar.

Um estudo de toxicidade sistêmica aguda foirealizado em caraundongos para determinar a toxicidadesistêmica em potencial de Microcina 60, uma solução de águaORP exemplar. Uma dose simples (50 mL/kg) de Microcina 60foi injetada intraperitoneamerite em cinco camundongos.Cinco camundongos de controle foram injetados com uma dosesimples (50 mL/kg) de salmoura (0,9% de cloreto de sódio).Todos os animais foram observados quanto a mortalidade ereações adversas imediatamente seguindo-se a injeção, em 4horas após a injeção e então uma vez diariamente por 7dias. Todos os animais foram também pesados antes dainjeção e novamente no dia 7. Não houve mortalidade duranteo estudo. Todos os animais pareceram clinicamente normaisatravés de todo o estudo. Todos os animais ganharam peso. ALD50 intraperitoneal aguda de Microcina 60 estimada desseestudo é maior que 5 0 mL/Kg. Esse exemplo demonstra que aMicrocina 60 perda toxicidade significativa e seria segurapara uso terapêutico de acordo com a invenção.

EXEMPLO 25

Esse exemplo ilustra um estudo conduzido paradeterminar a toxicidade citogenética em potencial de umasolução de água ORP exemplar.

Um teste de micronücleo foi realizado usando umasolução de ORP exemplar (Microcina a 10%) para avaliar opotencial mutagênico da injeção intraperitoneal de umasolução de água ORP em camundongos. O mamífero no teste demicronücleos in vivo é usado para a identificação desubstâncias que causam dano aos cromossomas ou ao aparelhomitótico dos eritroeitos policromáticos de murino. Essedano resulta na formação de estruturas intracelulares,"micronücleos", contendo fragmentos de cromossomas deretardo ou cromossomas integrais isolados. Um estudo desolução de água ORP incluiu 3 grupos de 10 camundongos cada(5 machos/5 fêmeas) : um grupo de teste, dosado com umasolução de água ORP; um grupo de controle negativo, dosadocom uma solução de NaCl a 0,9% e um grupo de controlepositivo, dosado com uma solução de ciclofosfamidamutagênica. O teste e os grupos de controle negativoreceberam uma injeção intraperitoneal (12,5 mL/kg) dasolução de água ORP ou uma solução de NaCl a 0,9%,respectivamente, por dois dias consecutivos (dias 1 e 2) .Os camundongos de controle positivo receberam uma injeçãointraperitoneal simples de ciclofosfamida (8 mg/mL, 12,5mL/kg) no dia 2. Todos os camundongos foram observadosimediatamente após inj eção quanto a quaisquer reaçõesadversas. Todos os animais pareceram clinicamente normaisatravés de todo o estudo e nenhum sinal de toxicidade foiobservado em qualquer grupo. No dia 3, todos os camundongosforam pesados e sacrificados.

Os fêmures dos camundongos sacrificados foramexcisados, a medula óssea foi extraída e preparações deesfregaço duplicadas foram realizadas para cada camundongo.Os slides com medula óssea de cada animal foram lidos emampliação de 40 vezes. A razão de eritrócitospolicromáticos (PCE) para eritrócitos normocromáticos(NCE), um índice de toxicidade de medula óssea, foideterminada para cada camundongo por contagem de um totalde pelo menos 200 eritrócitos. Então, um mínimo de 2.000PCE classificáveis por camundongo foram avaliados quanto aincidência de eritrócitos policromáticos micronucleares. Asanálises estatísticas dos dados foram realizadas usando oteste Mann and Whitney (em um limite de risco de 5%) apartir de um pacote de software estatístico (Statview 5.0,SAS Institute, USA).

Os camundongos de controle positivo tinham razõessignificativa e estatisticamente baixas de PCE/NCE emcomparação aos seus controles negativos (machos: 0,77 vs.0,90 e fêmeas: 0,73 vs 1,02), mostrando a toxicidade daciclofosfamida na medula óssea tratada. Contudo, não houvediferença estatisticamente significativa entre as razões dePCE/NCE para os camundongos tratados com solução de águaORP e controles negativos. De modo semelhante, oscamundongos de controle positivo tinham um númeroestatística e significativamente maior de eritrócitospolicromáticos portando micronúcleos em comparação a ambosos camundongos tratados com solução de água ORP (machos:11,0 vs. 1,4/fêmeas: 12,6 vs. 0,8) e os controles negativos(machos: 11,0 vs. 0,6/fêmeas: 12,6 vs. 1,0). Não houvediferença estatisticamente significativa entre o número deeritrócitos policromáticos portando micronúcleos noscamundongos tratados com solução de ORP e de controlenegativo.

Esse exemplo demonstra que Microcina a 10% nãoinduz toxicidade ou efeitos mutagênicos após injeçõesintraperitoneais nos camundongos.

EXEMPLO 2 6

Esse estudo demonstra a falta de toxicidade de umasolução de água ORP exemplar, Dermacina.

Esse estudo foi realizado de acordo com o padrãoISO 10993-5:1999 para determinar o potencial de uma soluçãode água ORP exemplar, Dermacina, para causarcitotoxicidade. Um disco de filtro com 0,1 mL de Dermacinafoi colocado sobre uma superfície de agarose, sobrepondodiretamente uma monocamada de células de fibroblasto decamundongo (L-929). As amostras preparadas foram observadasquanto a lesão citotóxica após 24 horas de incubação a 37°Cna presença de C02 a 5%. As observações foram comparadas àsamostras de controle positivas e negativas. As amostrascontendo Dermacina não revelaram qualquer evidência de lisecelular ou toxicidade, enquanto controle positivo enegativo teve desempenho conforme antecipado.

Com base nesse estudo, foi concluído que aDermacina não gera efeitos citotóxicos aos fibroblastos demurinos.

EXEMPLO 2 7

Este estudo foi conduzido com 16 ratos para avaliara tolerabilidade local de uma solução de água ORP exemplar,Dermacina, e seus efeitos na histopatologia dos leitos deferidas em um modelo de cura de ferida dérmica de espessuraplena. As feridas foram feitas em amos os lados de um rato.Durante o processo de cura as seções da pele foram tomadastanto do lado esquerdo quanto do lado direito (por exemplo,tratadas com Dermacina e tratadas com salmoura,respectivamente).

Seções coloridas com tricoma de Masson e as seçõescoloridas com Colãgeno do tipo II dos sítios de feridacirúrgica tratados com Dermacina e salmoura foram avaliadaspor um veterinário patologista formado. As seções foramavaliadas quanto a quantidade de expressão do Colãgeno doTipo 2 como uma manifestação da proliferação do tecidoconjuntivo, morfologia do fibroblasto e formação docolãgeno, presença de neoepiderme na seção transversal,inflamação e extensão da ulceração dérmica.

As verificações indicam que a Dermacina foi bemtolerada nos ratos. Não haviam lesões histopatológicasrelacionadas ao tratamento nas seções de pele de cada umadas feridas laterais (tratadas com Dermacina e tratadas comsalmoura, respectivamente). Não havia diferençashistopatológicas relevantes entre os sítios de feridatratados com salmoura e tratados com Dermacina, indicandoque o tratamento com Dermacina foi bem tolerado. Não haviadiferença significativas entre a expressão do Colãgeno doTipo 2 entre sítios de ferida tratados com salmoura etratados com Dermacina, indicando que a Dermacina nãopossui efeito adverso nos fibroblastos ou na elaboração docolãgeno durante a cura da ferida.

EXEMPLO 28Esse estudo pode ser realizado para demonstrar asegurança e eficácia de uma solução de água ORP exemplar,Dermacina, usada de acordo com a invenção como uma soluçãode substituição para o sistema de lavagem a jato Versajet™(Smith Sc Nephew) no tratamento de tecido necrótico(ulceras) distai ao maléolo, em comparação ao regimepadrão.

Esse será um estudo prospectivo aleatorizado, duplocego, controlado. Aproximadamente 30 paciente (cerca de 20no grupo da Dermacina/cerca de 10 no grupo de controle)serão envolvidos no estudo. A população para esse estudoserá de pacientes com ülceras de extremidade inferior (porexemplo, ulceras de pé de diabético, ülceras de estasevenosa). Todos os critérios de inclusão e exclusão doestudo devem ser satisfeitos no dia 0 para que o pacienteesteja apto a participar do estudo. Os critérios deinclusão são: paciente com 18 anos de idade ou mais velho;a úlcera da extremidade inferior do paciente possui tecidonecrótico presente e é um candidato a limpeza mecânica deresíduos por sistema de lavagem a jato; a ülcera dopaciente está localizada a distai do maléolo; a área desuperfície da úlcera do paciente é maior ou igual a 1,0cm2; a ulcera do paciente se estende através da derme epara o tecido subcutâneo (tecido de granulação pode serpresente) com possível exposição do músculo ou tendão,porém sem osso e/ou envolvimento de cápsula de articulação;e o índice de Tornozelo-Braço do paciente por Doppler é umABI superior ou igual a 0,8 ou a pressão do dedo do pé dopaciente é maior ou igual a 40 mmHg (5,3 kPa) .

Os critérios de exclusão são: paciente possuievidência clínica de gangrena em qualquer parte dos membrosem tratamento; espera-se que a ülcera do paciente se j aremovida ou amputada durante o período de estudo; opaciente possui os sinais que se seguem de uma síndrome deresposta inflamatória sistêmica (SIRS); a úlcera dopaciente possui uma área de superfície total que é inferiora 1 cm2; o paciente possui uma ou mais condições médicas(incluindo doença renal, hepãtica, hematológica,neurológica ou imune) que na opinião do investigadortornaria o paciente um candidato inapropriado para esseestudo; o paciente possui alergias conhecidas ao cloro; aúlcera do paciente é acompanhada por osteomielite; e opaciente possui qualquer condição(ões) que comprometemseriamente a capacidade do mesmo de completar esse estudo.

Após o consentimento por escrito e os critérios deinclusão e exclusão satisfeitos, o paciente serádistribuído aleatoriamente (randomização 2:1) em um dostratamentos que se seguem: Tratamento - Dermacina com osistema de lavagem por jato, mais o uso de um regime derevestimento de bandagem da ferida com hidrogel; Controle -Salmoura (tratamento padrão com os sistemas de lavagem porjato) , mais o uso de um regime de revestimento de bandagemde ferida com hidrogel.

Cada paciente distribuído aleatoriamente paraDermacina recebera aplicações do produto de estudo,Dermacina, com o sistema de lavagem por j ato Versaj etdurante limpeza mecânica dos fragmentos da ferida dopaciente. Um aj uste de pressão padrão no Versaj et seráusado para úlceras de pé diabético que será distai dosmaléolo. Após limpeza dos fragmentos, Dermacina seráaplicada à ferida em quantidades suficientes para enxaguaro leito da ferida isenta de fragmentos. A ferida serácoberta com um revestimento de bandagem com hidrogel. Emcada mudança de revestimento de bandagem, a ferida seráenxaguada com Dermacina e coberta com um novo revestimentode bandagem de hidrogel. Os revestimentos de bandagem serãomudados a cada 3 dias, a menos que de outra formaespecificado pelo investigador. Os fatores de respostaclínica (CFRs) ((1) redução de bactérias na ferida, (2)redução da área da ferida e (3) desenvolvimento do tecidode granulação) serão determinados durante visitas semanais.

Cada paciente de controle receberá aplicações doproduto de Controle (solução de salmoura) com sistema delavagem por jato Versajet durante limpeza mecânica dosfragmentos da ferida do paciente. Após a limpeza dosfragmentos, salmoura será aplicada à ferida em quantidadessuficientes para enxaguar o leito da ferida isento defragmentos. A ferida será revestida com uma atadura comhidrogel. Em cada mudança de atadura, a ferida seráenxaguada com salmoura e coberta com uma nova atadura dehidrogel. As ataduras serão mudadas a cada 3 dias, a menosque de outra forma especificado pelo investigador. Osfatores de resposta clínica serão determinados durante asvisitas semanais.

A limpeza dos fragmentos da ferida será realizadaem cada visita semanal. Qualquer tecido necrótico serálimpo dos fragmentos com lavagem com jato antes dasavaliações da ferida. Os fragmentos da úlcera serãoenxaguados tanto com Dermacina quanto salmoura (dependenteda randomização). Entre as visitas o paciente terá a feridaenxaguada com Dermacina ou salmoura (dependente darandomização) em cada mudança da atadura. Fotografias daferida serão feitas em cada visita após limpeza dosfragmentos.

Os pontos finais de eficácia primários serão: (1)redução das bactérias na ferida, (2) redução na área daferida e (3) desenvolvimento de tecido de granulação. Asegurança será avaliada em todos os pacientes que foramdistribuídos aleatoriamente nesse estudo. O tratamento deeventos emergentes e adversos sérios será registrado.

EXEMPLO 2 9

Esse estudo demonstrará a segurança e eficácia deuma solução de água ORP exemplar, Dermacina, como umasolução substituta para o sistema de lavagem Jet-Ox ND notratamento de um tecido necrótico em úlceras de extremidadeinferior quando comparada ao regime padrão usado no sistemaJet-Ox Nd.

O sistema Jet-Ox ND remove tecido necrótico dasferidas crônicas através de uma lavagem com pulverizaçãocontrolada de salmoura estéril, sem dano aos tecidossaudáveis subjacentes. Esse estudo substituirá a salmouracom, Dermacina, que se espera forneça o mesmo efeito dèlavagem por pulverização e adicionalmente reduza a cargabacteriana da ferida que pode estar inibindo o fechamentoda ferida.

Vinte pacientes serão estudados (aleatorizados pararender dez pacientes com Dermacina e dez pacientes decontrole). Os critérios de inclusão serão: o paciente temmais de 18 anos; o paciente possui uma úlcera naextremidade inferior abaixo do joelho com tecido necróticopresente e é um candidato a limpeza mecânica de fragmentoscom um sistema de lavagem Jet-Ox ND; os pacientes comúlcera estiveram presentes > 3 0 dias antes da visita declassificação; a área de superfície da úlcera é de > 1 cm2e a úlcera se estende através da derme e no tecidosubcutâneo (tecido de granulação pode estar presente) compossível exposição do músculo, tendão, porém, sem osso oucápsula exposta; os pacientes com índice de tornozelo/braçodo paciente por Doppler é > 0,8 e/ou a pressão do dedo dopé do paciente é >4 0 mmHg; e o paciente tem um pulsopalpável na artéria dorsal do pé e/ou artéria posterior datíbia.

Os seguintes critérios de exclusão se aplicam:pacientes renais, hepáticos, hematológicos, neurológicos ouimunocomprometidos, incluindo os que possuem vírus daImunodeficiência Humana (HIV) ou Síndrome daImunodeficieneia Adquirida (AIDS); o que na opinião doinvestigador tornaria o paciente um candidato inapropriadopara o estudo; feridas que tornam o paciente um candidatoinapropriado para o estudo; feridas com os seguintes sinaisclínicos: gangrena em qualquer parte dos membros emtratamento, a úlcera exibe o osso exposto (sonda positivapara osso) ou possui outra evidência de osteomielitesubjacente no sítio da úlcera; expectativa de que a úlcerainfectada sej a amputada ou removida durante o período deestudo; mal nutrição grave como evidenciado por umaalbumina de <2,0; abuso de medicamento ou álcool conhecido;pacientes recebendo corticosteróides orais ou parenterais,imunosupressor ou agentes citotóxicos, coumadina, heparinaou é antecipado que requeira tais agentes durante o cursodo estudo; e o paciente possui alergia conhecida ao cloro.

Cada indivíduo será aleatorizado em uma das duasramificações de tratamento; Dermacina ou salmoura. A úlceraalvo receberá limpeza mecânica de fragmentos; seguido porirrigação da ferida com Dermacina ou salmoura e colocaçãode bandagem com um revestimento com hidrogel. Uma biópsiade ferida central para cultura quantitativa será realizadajuntamente com estudos de laboratório (hematologia, químicasérica e testes de gravidez conforme apropriado), estudosvasculares periféricos não invasivos, histórico médico eexame físico, traços de ülceras e fotografias das úlceras.

Um sistema de lavagem Jet-Ox ND será dispensadojuntamente com Dermacina ou salmoura, hidrogel e materiaisde bandagem. São fornecidas as instruções de uso doméstico.As visitas incluirão classificação, envolvimento (dia 0)com aleatorizáção, semanas com limpeza dos fragmentos,fotografias e avaliações. A eficácia será determinada por(1) redução das bactérias na ferida, (2) redução da área daferida e (3) desenvolvimento de tecido de granulaçãodurante o curso do estudo. A segurança será avaliada emtodos os pacientes que randomizados no estudo. Tratamentoemergente e efeitos colaterais graves serão registrados.

Todas as referências, incluindo publicações,pedidos de patente e patentes, citadas aqui sãoincorporadas como referência, na mesma extensão como secada citação fosse feita individualmente e indicadaespecificamente para ser incorporada como referência eestabelecida aqui em sua totalidade.

O uso dos termos "um, uma" e "o, a" e referênciassemelhantes no contexto da descrição da invenção(especialmente no contexto das reivindicações que seseguem) devem ser tidos como cobrindo ambos o singular e opular, a menos que de outra forma indicado aqui ouclaramente contradito pelo contexto. Os termos"compreendendo", "possuindo11, "incluindo" e "contendo"devem ser tidos como termos de terminação aberta (isto é,significando "incluindo, porém não limitado a") a menos quede outra forma citado.

Citação de faixas de valores aqui são meramentedestinadas a servir como um método de abreviatura dareferência individual de cada valor separado que seencontre dentro da faixa, a menos que de outra forma aquiindicado e cada valor separado é incorporado àespecificação como se tivesse sido individualmente citadoaqui. Todos os métodos descritos aqui podem ser realizadosem qualquer ordem apropriada, a menos que de outra formaindicado aqui ou claramente contradito pelo contexto. O usode qualquer um e todos os exemplos ou linguagem exemplar(por exemplo, "tal como") providos aqui, se destinameramente a ilustrar melhor a invenção e não indica umalimitação do escopo da invenção a menos que de outra formareivindicado. Nenhuma linguagem no relatório descritivodeve ser tida como indicando qualquer elemento nãoreivindicado como essencial para a prática da invenção.

Concretizações preferidas dessa invenção sãodescritas aqui, incluindo o melhor modo dos inventores pararealizar a invenção. Variações dessas concretizaçõespreferidas podem ficar aparentes aos versados na artemediante leitura da descrição precedente. Os inventoresesperam que os versados na arte empreguem tais variaçõesconforme apropriado e os inventores pretendem que ainvenção seja praticada de outra forma que aespecificamente descrita aqui. Consequentemente, essainvenção inclui todas as modificações e equivalentes damatéria citada nas reivindicações apensas aqui, conformepermitido pela lei aplicável. Além disso, qualquercombinação os elementos descritos acima em todas asvariações possíveis é englobada pela invenção a menos quede outra forma indicado aqui ou de outra forma claramentecontradito pelo contexto.

Claims (15)

1. Uso de uma solução aquosa com potencial redutivooxidativo (ORP) caracterizado por ser para produzir ummedicamento para tratar uma queimadura de segundo outerceiro grau, no qual a solução tem um pH de cerca de 6,4a cerca de 7,8 e é estável durante pelo menos cerca de doismeses.

2. Uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato da solução ser estável durante pelo menos cercade um ano.

3. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizado pelo fato do pH ser de cerca de 7,4 acerca de 7,6.

4. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2 ou 3, caracterizado pelo fato da solução aindacompreender água como anodo e água como catodo.

5. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3 ou 4, caracterizado pelo fato da água como catodoestar presente em uma quantidade de cerca de 10% em volumea cerca de 50% em volume da solução.

6. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3 ou 4, caracterizado pelo fato da água como catodoestar presente em uma quantidade de cerca de 2 0% em volumea cerca de 4 0% em volume da solução.

7. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5 ou 6, caracterizado pelo fato da solução seradministrada ao paciente por pulverização da mesma naqueimadura.

8. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5 ou 6, caracterizado pelo fato da solução seradministrada ao paciente por pulverização da mesma naqueimadura com um dispositivo de irrigação de alta pressão.

9. Uso de uma solução aquosa com potencial redutivooxidativo (ORP) caracterizado por ser para produzir ummedicamento para tratar uma queimadura de segundo outerceiro grau, no qual a solução compreende pelo menos umaespécie de cloro livre selecionada do grupo que consiste emácido hipocloroso, ions de hipoclorito, hipoclorito desódio, íons clorito, íons cloreto, gás cloreto dissolvido,e misturas desses e em que a solução é estável por pelomenos dois meses.

10. Uso, de acordo com a reivindicação 9,caracterizado pelo fato da espécie de cloro livre ser ácidohipocloroso presente em uma quantidade de cerca de 15 ppm acerca de 75 ppm.

11. Uso, de acordo com a reivindicação 9,caracterizado pelo fato da espécie de cloro livre serhipoclorito de sódio presente em uma quantidade de cerca de-25 ppm a 50 ppm.

12. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações-9, 10 ou 11, caracterizado pelo fato da solução seradministrada ao paciente por pulverização da mesma naqueimadura.

13. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações-9, 10 ou 11, caracterizado pelo fato da solução seradministrada ao paciente por pulverização da mesma naqueimadura com um dispositivo de irrigação de alta pressão.

14. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações-1, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7, caracterizado por ser para produzirum medicamento para tratar uma queimadura de segundo outerceiro grau, no qual a solução compreende ácidohipocloroso em uma quantidade de cerca de 15 ppm a cerca de-75 ppm e hipoclorito de sódio em uma quantidade de cerca de-25 ppm a cerca de 50 ppm, e no qual a solução é estáveldurante pelo menos cerca de dois meses e o pH da solução éde cerca de 6,2 a cerca de 7,8.

15. Uso de uma solução aquosa com potencial redutivooxidativo (ORP) caracterizado por ser para produzir ummedicamento para tratar uma queimadura de segundo outerceiro grau, no qual a concentração de cloro livre nasolução aquosa com potencial redutivo oxidativo (ORP) émantida a cerca de 80% ou mais da sua concentração inicialpor pelo menos dois meses após a preparação da soluçãoaquosa com potencial redutivo oxidativo (ORP).