WO2014038641A1 - アミノ酸およびステリル基が導入されたヒアルロン酸誘導体 - Google Patents
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Abstract
Description
(1)式(I)
R5は、水素原子、ホルミル、またはC1-6アルキルカルボニルであり;
X1は、ヒドロキシ、C1-6アルコキシ、-O-Q+、-NR7R8、または-NR9-Z1-Z2であり;
Q+は、カウンターカチオンを表し;
R6、R7、R8、およびR9は、独立に、水素原子、およびC1-6アルキルから選択され;
Raは、水素原子、またはC1-6アルキルであり、ここで該アルキルは、独立に、ヒドロキシ、カルボキシ、カルバモイル、C1-6アルキルチオ、アリール、およびヘテロアリールから選択される1以上の基で置換されていてもよく、ここで該アリールは1以上のヒドロキシで置換されていてもよく;
Z1は、C2-30アルキレン、または-(CH2CH2O)m-CH2CH2-であり、ここで該アルキレンは、独立に、-O-、-NRg-および-S-S-から選択される1~5の基が挿入されていてもよく、mは、1~100から選択される整数であり;
Z2は、以下の式:
-NRb-Z3、
-NRb-COO-Z3、
-NRb-CO-Z3、
-NRb-CO-NRc-Z3、
-COO-Z3、
-CO-NRc-Z3、
-O-CO-NRc-Z3、
-O-COO-Z3、
-S-Z3、
-CO-Za-S-Z3、
-O-CO-Zb-S-Z3、
-NRb-CO-Zb-S-Z3、および
-S-S-Z3、
により表される基から選択され;
RbおよびRcは、独立に、水素原子、C1-20アルキル、アミノC2-20アルキルおよびヒドロキシC2-20アルキルから選択され、ここで当該基のアルキル部分は、独立に、-O-および-NRf-から選択される1~3個の基が挿入されていてもよく;
Rfは、独立に、水素原子、C1-12アルキル、アミノC2-12アルキル、およびヒドロキシC2-12アルキルから選択され、当該基のアルキル部分は-O-および-NH-から選択される1~2個の基が挿入されていてもよく;
Rgは、独立に、水素原子、C1-20アルキル、アミノC2-20アルキルまたはヒドロキシC2-20アルキルから選択され、当該基のアルキル部分は、独立に、-O-および-NH-から選択される1~3個の基が挿入されていてもよく;
Z3は、ステリル基であり;
Zaは、C1-5アルキレンであり;
Zbは、C2-8アルキレンまたはC2-8アルケニレンである]
で表される繰り返し単位を含むヒアルロン酸誘導体であって、X1が-NR9-Z1-Z2である式(I)で表される繰り返し単位が含まれない場合、さらに式(II):
R5aは、水素原子、ホルミル、またはC1-6アルキルカルボニルであり;
X2は、-NR9-Z1-Z2であり、ここで、R9、Z1、およびZ2は既に定義したとおりである];
で表される繰り返し単位を含む、ヒアルロン酸誘導体。
(2)式(IIb)
R5bは、水素原子、ホルミル、およびC1-6アルキルカルボニルから選択され;
Xbは、ヒドロキシ、および-O-Q+から選択され、ここでQ+は、カウンターカチオンを表す]
で表わされる繰り返し単位をさらに含む、上記(1)に記載のヒアルロン酸誘導体。
(3)式(I)においてX1が-NR9-Z1-Z2である、上記(1)または(2)に記載のヒアルロン酸誘導体。
(4)存在する二糖の繰り返し単位における、式(I)で表わされる二糖単位の割合が、70~100%である、上記(1)~(3)のいずれかに記載のヒアルロン酸誘導体。
(5)存在する二糖の繰り返し単位における、基-NR9-Z1-Z2を含む二糖単位の割合が、3~50%である、上記(1)~(4)のいずれかに記載のヒアルロン酸誘導体。
(6)X1が-NR9-Z1-Z2である式(I)で表される繰り返し単位が含まれない、上記(1)または(2)に記載のヒアルロン酸誘導体。
(7)存在する二糖の繰り返し単位における、(I)で表わされる繰り返し単位の割合、および式(II)で表わされる繰り返し単位の割合の和が、70~100%である、(1)、(2)、および(6)のいずれかに記載のヒアルロン酸誘導体。
(8)R1b、R2b、R3b、およびR4bの全てを水素原子とし、R5bをアセチルとし、かつ、Xbを-O-Na+とした場合の重量平均分子量が3キロダルトン~1500キロダルトンとなる、上記(2)に定義した式(IIb)で表される二糖単位のみから構成されるヒアルロン酸を用いて製造される、上記(1)~(7)のいずれかに記載のヒアルロン酸誘導体。
(9)Z1が、C2-10アルキレンであり、Z2が、-NH-COO-Z3であり、Z3が、コレステリル基である、(1)~(8)のいずれかに記載のヒアルロン酸誘導体。
(10)式(IIb)で表わされる繰り返し単位および式(Ia)
で表わされる繰り返し単位をそれぞれ含むヒアルロン酸誘導体を、以下の式
HNR9-Z1-Z2
[式中、R9、Z1、およびZ2は、上記(1)に定義した通りである]
で表わされる化合物と反応させることにより得られる、上記(1)~(9)のいずれかに記載のヒアルロン酸誘導体。
(11)上記(1)~(10)のいずれかに記載のヒアルロン酸誘導体と薬物を含む、医薬組成物。
(12)薬物がヒアルロン酸誘導体と複合体を形成することにより担持される、上記(11)に記載の医薬組成物。
-CONR9-Z1-NRbH + Hal-COOZ3、
-CONR9-Z1-NRbH + HOCO-Z3、
-CONR9-Z1-NRbH + Hal-CO-Z3、
-CONR9-Z1-COOH + HO-Z3、
-CONR9-Z1-OH + Hal-COO-Z3、
-CONR9-Z1-COOH + NRc-Z3、
-CONR9-Z1-OCO-Hal + NRc-Z3、
-CONR9-Z1-OCOOH + HO-Z3、
-CONR9-Z1-OCOOH + Hal-Z3、
-CONR9-Z1-OCO-Hal + HO-Z3、
-CONR9-Z1-SH + Hal-Z3、
-CONR9-Z1-Hal + HS-Z3、
-CONR9-Z1-CO-Ya-Hal + HS-Z3
-CONR9-Z1-CO-Ya-SH + Hal-Z3、
-CONR9-Z1-O-CO-CH=CH2 + HS-Z3、
-CONR9-Z1-NRb-CO-C(CH3)=CH2 + HS-Z3、
-CONR9-Z1-SH + HS-R、
(式中、R9、Z1、Rb、RcおよびZ3は本明細書で既に定義したとおりであり、Halは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子およびヨウ素から選択されるハロゲン原子を表す)。
で表わされる繰り返し単位をそれぞれ含むヒアルロン酸誘導体を、以下の式
HNR9-Z1-Z2
[式中、R9、Z1、およびZ2は、本明細書で既に定義されたとおりである]
で表わされる化合物と反応させることにより得られる。
R5cは、水素原子、ホルミルまたはC1-6アルキルカルボニルであり;
Reは、水素原子またはC1-6アルキルであり;
Rdは、水素原子、C1-6アルキル、-CO-C(R10)=CH2、または-CO-G4-Xcであり;
R10は、水素原子またはメチルであり;
G4は、フェニレン、C3-8シクロアルキレン、または-G5-(C1-10アルキレン)-G6-から選択され、ここでC1-10アルキレン部分は、1~3のフェニレンまたはC3-8シクロアルキレンが挿入されていてもよく;
G5およびG6は、それぞれ独立に、直接結合、フェニレン、またはC3-8シクロアルキレンから選択され;
Xcは、メルカプト、ハロゲン原子または式:
Ybは、-CH2-(CHR15)l-2-CH2-NH-、-CH2-(CHR16)p-2-CH2-O-、-(CH2)j-S-または-(CH2)a-(Y1-(CH2)b)c-G-であり;
l、p、およびjは、それぞれ独立に2~10から選択される整数であり、R15およびR16は、それぞれ独立に、水素原子またはヒドロキシであり;
aは、2~10から選択される整数であり;
bは、それぞれ独立に2~10から選択される整数であり;
cは、1~200から選択される整数であり;
Y1は、酸素原子または-NRn-であり;
Gは、酸素原子、硫黄原子または-NH-であり;
Rnは、水素原子、C1-6アルキル、-CO-(CH2)d-Ro、-(CH2)e-Rpまたは-(CH2)f-(Y2-(CH2)g)h-Rqであり;
gは、それぞれ独立に、2~10から選択される整数であり;
d、e、fおよびhは、それぞれ独立に、2~10から選択される整数であり;
Ro,RpおよびRqは、それぞれ独立に、水素原子、ヒドロキシ、カルボキシまたは-NHRrであり;
Y2は、酸素原子または-NH-であり;
Rrは、水素原子、ホルミルまたはC1-6アルキルカルボニルである]
で表される二糖単位。
-NH-CH2-(CHR15)l-2-CH2-NH2;
-NH-CH2-CH2-(Y1-CH2-CH2)c-NH2;
-NH-CH2-(CHR16)p-2-CH2-OH;
-NH-CH2-CH2-(Y1-CH2-CH2)c-OH;
-NH-(CH2)j-SH;
-NH-CH2-CH2-(Y1-CH2-CH2)c-SH;
-NH-(CH2)p-O-CO-C(R10)=CH2;
-NH-(CH2)l-NHCO-C(R10)=CH2;
-NH-CH2-(CHR15)l-2-CH2-NH-CO-CH2-SH;
-NH-CH2-CH2-(Y1-CH2-CH2)c-NH-CO-(CH2)u-SH;
-NH-(CH2)p-O-CO-CH2-CH2-SH;
-NH-(CH2)l-NHCO-(CH2)u-SH;
-NH-CH2-CH2-(Y1-CH2-CH2)c-O-CO-CH2-CH2-SH;
-NH-CH2-CH2-(Y1-CH2-CH2)c-NHCO-CH2-CH2-SH;
-NH-CH2-(CHR15)l-2-CH2-NH-CO-CH2-Br;
-NH-CH2-CH2-(Y1-CH2-CH2)c-NH-CO-CH2-I;
-NH-CH2-CH2-(Y1-CH2-CH2)c-NHCO-C(R10)=CH2;または
-NH-CH2-CH2-(Y1-CH2-CH2)c-O-CO-C(R10)=CH2
[式中、R10、R15、R16、Y1、c、j、l、およびpは、本明細書で定義されるとおりであり、uは、1~3の整数である]
で表される基が挙げられる。
-NH-(CH2)p1-O-CO-CH(R17)-CH2-S-CH2-CH(OH)-CH(OH)-CH2-SH;
-NH-(CH2)p1-NH-C(=NH)-(CH2)3-SH;
-NH-(CH2)p1-NH-CO-CH(R17)-CH2-S-CH2-CH(OH)-CH(OH)-CH2-SH;
-NH-(CH2)p1-NH-CO-CH(NH2)-CH2-SH;
-NH-(CH2)p1-NH-CO-CH(NH2)-(CH2)2-SH;
-NH-NH-CO-(CH2)4-CO-NH-NH-C(=NH)-(CH2)3-SH;
-NH-(CH2-CH2-O)q-CH2-CH2-O-CO-CH(R17)-CH2-S-CH2-CH(OH)-CH(OH)-CH2-SH;
-NH-(CH2-CH2-O)q-CH2-CH2-NH-C(=NH)-(CH2)3-SH;
-NH-(CH2-CH2-O)q-CH2-CH2-NH-CO-CH(R17)-CH2-S-CH2-CH(OH)-CH(OH)-CH2-SH;
-NH-(CH2-CH2-O)q-CH2-CH2-NH-CO-CH(NH2)-CH2-SH;
-NH-(CH2-CH2-O)q-CH2-CH2-NH-CO-CH(NH2)-(CH2)2-SH;
-NH-CH(CO2H)-(CH2)-SH;
-NH-CH(CO2H)-(CH2)2-SH;および
-NH-CH(CO2H)-(CH2)2-CONH-CH(CONH-CH2-CO2H)-CH2-SH
(ここで、R17は、水素原子またはC1-6アルキルであり、p1は2~10の整数、qは1~200の整数を、それぞれ表す。)
(式中、***は、薬物との結合部位を表し、
G1は、直接結合、-C(=O)-、-NRs-および-S-から選択され、
G2は、-(CH2)i-および-(CH2)qa-(O-CH2-CH2)k-から選択され、
G3は、直接結合、-C(=O)-NRt-(CH2)r-および-NRu-C(=O)-(CH2)ma-から選択され、
Jは、以下の式で表される基を表し、
で表されるスペーサーが挿入されていてもよい。
ヒアルロン酸誘導体のN-アセチルグルコサミン部分の6位のヒドロキシと、薬物のカルボキシまたは薬物に導入したカルボキシとの反応;
ヒアルロン酸誘導体に導入したアミノと、薬物のカルボキシまたは薬物に導入したカルボキシとの反応;
ヒアルロン酸誘導体に導入したアミノと、修飾によりイソチオシアネート、イソシアネート、アシルアジド、NHSエステルおよびエポキシドなどに変換された薬物との反応;
薬物のアミノまたは薬物に導入したアミノと、修飾によりイソチオシアネート、イソシアネート、アシルアジド、カルボニル、NHSエステルおよびエポキシドに変換されたヒアルロン酸誘導体との反応;
ヒアルロン酸誘導体のアミノと、カルボニルを有するまたは導入された薬物(アルデヒドおよびケトンなど)とのシッフ塩基形成ならびに還元的アミノ化反応;
薬物のアミノまたは薬物に導入したアミノと、修飾によりカルボニルが導入されたヒアルロン酸誘導体とのシッフ塩基形成ならびに還元アミノ化反応;
ヒアルロン酸誘導体に導入したメルカプトと、不飽和結合を有する化合物(マレイミド、アクリルエステル、アクリルアミド、メタクリルエステル、メタクリルアミド、アリル化物、ビニルスルホンなど)、ハロゲン化物(クロロ酢酸エステル、ブロモ酢酸エステル、ヨード酢酸エステル、クロロ酢酸アミド、ブロモ酢酸アミド、ヨード酢酸アミドなど)またはチオールである薬物または修飾により当該化合物に変換された薬物との反応;および
薬物に導入したメルカプトと、修飾により、不飽和結合を有する化合物(マレイミド、アクリルエステル、アクリルアミド、メタクリルエステル、メタクリルアミド、アリル化物、ビニルスルホンなど)、ハロゲン化物(クロロ酢酸エステル、ブロモ酢酸エステル、ヨード酢酸エステル、クロロ酢酸アミド、ブロモ酢酸アミド、ヨード酢酸アミドなど)またはチオールに変換されたヒアルロン酸誘導体との反応。
(実施例1-1)コレステリル 6-アミノヘキシルカーバメート塩酸塩の調製
コレステリル クロロホルメート(3.37g、7.5mmol)の無水ジクロロメタン(20mL)の溶液に、アルゴン雰囲気下、トリエチルアミン(TEA、1.05mL)を加えて撹拌した。氷冷下で、6-(t-ブトキシカルボニル)アミノ-1-アミノヘキサン(1.12mL、5mmol)を滴下して加え、そのまま氷冷下で30分間攪拌後、室温まで昇温し、当該混合物を一晩撹拌した。反応混合物を、超純水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下で溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶離液:酢酸エチル:n-ヘキサン=1:4)で精製し、目的物のフラクションを合わせて溶媒を減圧下留去した。得られた残渣を酢酸エチル(40mL)に溶解し、4N塩酸/酢酸エチル溶液(40mL)を加えて室温で一晩撹拌した。生じた沈殿物を遠心分離により回収した。得られた固体を酢酸エチルにて4回洗浄後、減圧下で乾燥し、コレステリル 6-アミノヘキシルカーバメート(Chol-C6)の塩酸塩(1.2g)を得た。生成物の1H-NMRスペクトル(EtOH-d6)を図1-1に示す。
DOWEX(登録商標)50WX-8-400(シグマ-アルドリッチ社製)を超純水に懸濁させ、デカンテーションにより樹脂を超純水で3回程度洗浄した。40重量%テトラブチルアンモニウムヒドロキシド水溶液(TBA-OH)(シグマ-アルドリッチ社製)を樹脂のカチオン交換能に対し約1.5モル等量を加え、30分間攪拌した。余剰のTBA-OH溶液をデカンテーションにより除去した後、さらに過剰の超純水で洗浄を繰り返し、最後に0.45μmのフィルターを用いて濾過することによりTBA塩化したカチオン交換樹脂を得た。
分子量10kDa、50kDaおよび99kDaのヒアルロン酸ナトリウム塩(HA-Na、資生堂株式会社製)をそれぞれ15mg/mLの濃度で超純水に溶解させた。実施例1-2でTBA塩化したカチオン交換樹脂の懸濁液をHAユニット(ユニット分子量401.3)のモル数に対し樹脂のイオン交換能換算で5モル等量添加した。15分間撹拌した後、0.45μmのフィルターを用いて濾過を行い、濾液を凍結乾燥し、ヒアルロン酸のTBA塩(HA-TBA)を白色固体として得た。
実施例1-3で合成した、HA-Na(10kDa、50kDa、99kDa)を出発原料とするHA-TBAの無水DMSO溶液(5mg/mL)を調製した。その後、L-アラニンエチルエステル塩酸塩(アルドリッチ社製)をHAユニットに対して5モル等量添加し、次に4-(4,6-ジメトキシ-1,3,5-トリアジン-2-イル)-4-メチルモルホリニウムクロリド(DMT-MM)をHAユニットに対して6モル等量添加し、室温で一晩撹拌した。反応溶液は、0.3M NaCl水溶液、超純水の順で透析した。得られた透析液に2N NaOHを添加しpH12.5以上として、1時間攪拌してエチルエステルを加水分解し、カルボキシの脱保護を行った。その後、2N HClを用いて中和を行い、さらに透析を行った後、凍結乾燥してHA-Alaを白色固体として得た。実施例1-3に記載と同じ条件で測定したHA-Alaの1H-NMRスペクトルの代表例(99kDaのHAを出発原料として用いた生成物)を図1-3に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、アラニン中のメチル由来のピーク(-CH3、1.4ppm;3H)の積分値より、下に示す式からHAユニットにおけるアラニンの導入率(Ala導入率)を算出した(表1)。
実施例1-3で調製した、HA-Na(99kDa)を出発原料とするHA-TBAの無水DMSO溶液(10mg/mL)を調製した。その後、実施例1-1で調製したChol-C6塩酸塩をHAユニットに対して以下の表2に示す比率で各溶液に添加した。次にDMT-MMをHAユニットに対して以下の表2に示す比率で加え、さらに5-アミノメチルフルオレセイン(FL、インビトロジェン社製)塩酸塩、DMT-MMをHAユニットに対してそれぞれ0.04モル等量、0.07モル等量添加し、室温で7時間撹拌した。その後、L-スレオニンアミド塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)をHAユニットに対して3モル等量添加し、次にDMT-MMをHAユニットに対して5モル等量を添加し、室温で一晩撹拌した。反応溶液は、0.3M 酢酸アンモニア/DMSO溶液、0.15M NaCl水溶液、超純水の順で透析し、得られた透析液を凍結乾燥して目的物(HA-ThrNH2/Chol/FL)を黄色固体として得た。
L-アラニンエチルエステル塩酸塩の代わりにL-セリンエチルエステル塩酸塩(アルドリッチ社製)を用いたこと以外は、実施例1-4と同様の方法で行い、HA-Serを白色固体として得た。また、カルボキシを脱保護する前の透析溶液の一部を採り凍結乾燥して導入率算出用サンプルとした(HA-Ser-OEt)。実施例1-3の記載と同じ条件で測定した導入率算出用サンプルの1H-NMRスペクトルを図1-6に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、1.9ppm;3H)の積分値と、セリンのエチルエステル中のメチル由来のピーク(-CH3、1.2ppm;3H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるセリンの導入率を算出した(表3)。また、脱保護したサンプルを実施例1-3の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-7に示す。さらに実施例1-4の記載と同じ条件でHA-SerのTBA塩(HA-Ser-TBA)を白色固体として得た。次に、実施例1-4と同様の方法でChol-C6塩酸塩、FLと反応させ、目的物(HA-Ser-Chol/FL)を黄色固体として得た。実施例1-4の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-8に示す。実施例1-4に記載の方法によりコレステリル基の導入率を算出した(表3)。
L-アラニンエチルエステル塩酸塩の代わりにグリシンエチルエステル塩酸塩(和光純薬株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-4と同様の方法で行い、HA-Glyを白色固体として得た。また、カルボキシを脱保護する前の透析溶液の一部を採り凍結乾燥して導入率算出用サンプルとした(HA-Gly-OEt)。実施例1-3の記載と同じ条件で測定した導入率算出用サンプルの1H-NMRスペクトルを図1-9に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、グリシンのエチルエステル中のメチル由来のピーク(-CH3、1.3ppm;3H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるグリシンの導入率を算出した(表3)。また、脱保護したサンプルを実施例1-3の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-10に示す。さらに実施例1-4の記載と同じ条件でHA-GlyのTBA塩(HA-Gly-TBA)を白色固体として得た。次に、実施例1-4と同様の方法でChol-C6塩酸塩、FLと反応させ、目的物(HA-Gly-Chol/FL)を黄色固体として得た。実施例1-4の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-11に示す。実施例1-4に記載の方法によりコレステリル基の導入率を算出した(表3)。
L-アラニンエチルエステル塩酸塩の代わりにL-スレオニンメチルエステルの塩酸塩(Bachem社製)を用いたこと以外は、実施例1-4と同様の方法で行い、HA-Thrを白色固体として得た。実施例1-3の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-12に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、スレオニン中のメチル由来のピーク(-CH3、1.2ppm;3H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるスレオニンの導入率を算出した(表3)。さらに実施例1-4の記載と同じ条件でHA-ThrのTBA塩(HA-Thr-TBA)を白色固体として得た。次に、実施例1-4と同様の方法でChol-C6塩酸塩、FLと反応させ、目的物(HA-Thr-Chol/FL)を黄色固体として得た。実施例1-4の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-13に示す。実施例1-4に記載の方法によりコレステリル基の導入率を算出した(表3)。
L-アラニンエチルエステル塩酸塩の代わりにL-アスパラギンメチルエステル塩酸塩(Bachem社製)を用いたこと以外は、実施例1-4と同様の方法で行い、HA-Asnを白色固体として得た。実施例1-3の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-14に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、アスパラギンのメチレン由来のピーク(-CH2CONH2、2.7、2.8ppm;2H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるアスパラギンの導入率を算出した(表3)。さらに実施例1-4の記載と同じ条件でHA-AsnのTBA塩(HA-Asn-TBA)を白色固体として得た。次に、実施例1-4と同様の方法でChol-C6塩酸塩、FLと反応させ、目的物(HA-Asn-Chol/FL)を黄色固体として得た。実施例1-4の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-15に示す。実施例1-4に記載の方法によりコレステリル基の導入率を算出した(表3)。
L-アラニンエチルエステル塩酸塩の代わりにL-アスパラギン酸ジエチルエステル塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-4と同様の方法で行い、HA-Aspを白色固体として得た。実施例1-3の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-16に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、アスパラギン酸中のメチレン由来のピーク(-CH2COOH、2.7、2.8ppm;2H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるアスパラギン酸の導入率を算出した(表3)。さらに実施例1-4の記載と同じ条件でHA-AspのTBA塩(HA-Asp-TBA)を白色固体として得た。次に、実施例1-4と同様の方法でChol-C6塩酸塩、FLと反応させ、目的物(HA-Asp-Chol/FL)を黄色固体として得た。実施例1-4の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-17に示す。実施例1-4に記載の方法によりコレステリル基の導入率を算出した(表3)。
L-アラニンエチルエステル塩酸塩の代わりにL-イソロイシンメチルエステル塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-4と同様の方法で行い、HA-Ileを白色固体として得た。実施例1-3の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-18に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、イソロイシン中の2つのメチル由来のピーク(-CH(CH3)CH2CH3、0.9ppm;6H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるイソロイシンの導入率を算出した(表3)。なお、グルコサミンのアセチル由来のピークには、イソロイシンの3位の水素のピーク(-CH(CH3)CH2CH3、1.9ppm;1H)が重なっているため、1.8~2.2ppmのピークの積分値から0.9ppmのピークの積分値に1/6を乗じた値を差し引いた値をグルコサミンのアセチル由来のピークとして、導入率の算出に使用した。さらに実施例1-4の記載と同じ条件でHA-IleのTBA塩(HA-Ile-TBA)を白色固体として得た。次に、実施例1-4と同様の方法でChol-C6塩酸塩、FLと反応させ、目的物(HA-Ile-Chol/FL)を黄色固体として得た。実施例1-4の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-19に示す。実施例1-4に記載の方法によりコレステリル基の導入率を算出した(表3)。
L-アラニンエチルエステル塩酸塩の代わりにL-ロイシンエチルエステル塩酸塩(東京化成工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-4と同様の方法で行い、HA-Leuを白色固体として得た。実施例1-3の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-20に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、ロイシン中の2つのメチル由来のピーク(-CH(CH3)2、0.9ppm;6H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるロイシンの導入率を算出した(表3)。さらに実施例1-4の記載と同じ条件でHA-LeuのTBA塩(HA-Leu-TBA)を白色固体として得た。次に、実施例1-4と同様の方法でChol-C6塩酸塩、FLと反応させ、目的物(HA-Leu-Chol/FL)を黄色固体として得た。実施例1-4の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-21に示す。実施例1-4に記載の方法によりコレステリル基の導入率を算出した(表3)。
L-アラニンエチルエステル塩酸塩の代わりにL-バリンエチルエステル塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-4と同様の方法で行い、HA-Valを白色固体として得た。実施例1-3の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-22に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、バリン中の2つのメチル由来のピーク(-CH(CH3)2、0.9ppm;6H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるバリンの導入率を算出した(表3)。なお、グルコサミンのアセチル由来のピークには、バリンの3位の水素のピーク(-CH(CH3)2、2.1ppm;1H)が重なっているため、1.8~2.2ppmのピークの積分値から0.9ppmのピークの積分値に1/6を乗じた値を差し引いた値をグルコサミンのアセチル由来のピークとして、導入率の算出に使用した。さらに実施例1-4の記載と同じ条件でHA-ValのTBA塩(HA-Val-TBA)を白色固体として得た。次に、実施例1-4と同様の方法でChol-C6塩酸塩、FLと反応させ、目的物(HA-Val-Chol/FL)を黄色固体として得た。実施例1-4の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-23に示す。実施例1-4に記載の方法によりコレステリル基の導入率を算出した(表3)。
L-アラニンエチルエステル塩酸塩の代わりにL-フェニルアラニンエチルエステル塩酸塩(アルドリッチ社製)を用いたこと以外は、実施例1-4と同様の方法で行い、HA-Pheを白色固体として得た。実施例1-3の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-24に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、フェニルアラニン中のフェニル由来のピーク(-C6H5、7.2~7.4ppm;5H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるフェニルアラニンの導入率を算出した(表3)。さらに実施例1-4の記載と同じ条件でHA-PheのTBA塩(HA-Phe-TBA)を白色固体として得た。次に、実施例1-4と同様の方法でChol-C6塩酸塩、FLと反応させ、目的物(HA-Phe-Chol/FL)を黄色固体として得た。実施例1-4の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-25に示す。実施例1-4に記載の方法によりコレステリル基の導入率を算出した(表3)。
L-スレオニンアミド塩酸塩の代わりにL-セリンアミド塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-5と同様の方法で行い、HA-SerNH2-Chol/FLを黄色固体として得た。実施例1-5の記載と同じ条件で測定した生成物の1H-NMRスペクトルを図1-26に示す。実施例1-5の記載と同じ方法でHAユニットに対するコレステリル基の導入率を算出した(表4)。また、実施例1-3の記載と同じ条件で測定した生成物の1H-NMRスペクトルを図1-27に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、セリンアミドのメチレン由来のピーク(-CH2-、3.9ppm;2H)の積分値より、実施例1-5と同様にしてHAユニットにおけるセリンアミドの導入率を算出した(表4)。なお、セリンアミドのメチレン由来のピークには、グルクロン酸の2~5位のピーク(4H)、グルコサミンの2~6位のピーク(6H)が重なっているため、3.2~4.2ppmのピークの積分値から、2.0ppmのピークの積分値に10/3を乗じた値を差し引いた値をセリンアミドのメチレン由来のピークとして、導入率の算出に使用した。
L-スレオニンアミド塩酸塩の代わりにグリシンアミド塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-5と同様の方法で行い、HA-GlyNH2/Chol/FLを黄色固体として得た。
L-スレオニンアミド塩酸塩の代わりにL-ロイシンアミド塩酸塩(東京化成工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-5と同様の方法で行い、HA-LeuNH2/Chol/FLを黄色固体として得た。
L-スレオニンアミド塩酸塩の代わりにL-バリンアミド塩酸塩(東京化成工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-5と同様の方法で行い、HA-ValNH2/Chol/FLを黄色固体として得た。
L-スレオニンアミド塩酸塩の代わりにL-アラニンエチルエステル塩酸塩(アルドリッチ社製)を用い、超純水透析中に透析液を一度取り出して2N NaOHにてカルボキシの脱保護を行った以外は、実施例1-5と同様の方法で行い、HA-Ala/Chol/FLを黄色固体として得た。実施例1-5の記載と同じ条件で測定した生成物の1H-NMRスペクトルを図1-32に示す。実施例1-5の記載と同じ方法でHAユニットに対するコレステリル基の導入率を算出した(表5)。また、グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、1.9ppm;3H)の積分値と、アラニン中のメチル由来のピーク(-CH3、1.3ppm;3H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるアラニンの導入率を算出した(表5)。なお、アラニンのメチル由来のピークにはコレステリル 6-アミノヘキシルカーバメート由来のピーク(0.8~1.6ppm、41H)が重なっているため、0.8~1.6ppmのピークの積分値から0.7ppmのピークの積分値に41/3を乗じた値を差し引いた値をアラニンのメチル由来のピークとして、導入率の算出に使用した。
L-スレオニンアミド塩酸塩の代わりにL-セリンエチルエステル塩酸塩(アルドリッチ社製)を用い、超純水透析中に透析液を一度取り出して2N NaOHにてカルボキシの脱保護を行った以外は、実施例1-5と同様の方法で行い、HA-Ser/Chol/FLを黄色固体として得た。また、カルボキシを脱保護する前の透析溶液の一部を採り凍結乾燥して導入率算出用サンプルとした(HA-Ser-OEt/Chol/FL)。実施例1-3の記載と同じ条件で測定した導入率算出用サンプルの1H-NMRスペクトルを図1-33に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.3ppm;3H)の積分値と、セリンのエチルエステル中のメチル由来のピーク(-CH3、1.6ppm;3H)の積分値より、実施例1-6と同様にしてHAユニットにおけるセリンの導入率を算出した(表5)。また、脱保護したサンプルを実施例1-5の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-34に示す。実施例1-5に記載の方法によりコレステリル基の導入率を算出した(表5)
5-アミノメチルフルオレセインを加えていないこと以外は実施例1-4(Ala)、実施例1-5(ThrNH2)、実施例1-15(SerNH2)、実施例1-18(ValNH2)に記載の方法によりHA-Ala-Chol、HA-ThrNH2/Chol、HA-SerNH2/Chol、HA-ValNH2/Cholを白色固体として得た。対応する実施例の記載と同じ方法によりコレステリル基の導入率ならびにアミノ酸およびアミノ酸アミドの導入率を算出した(表6)。
実施例1-3で調製した、HA-Na(10k、50k、99kDa)を出発原料とするHA-TBAの、無水DMSO溶液(10mg/mL)を調製した。その後、実施例1-1で調製したChol-C6塩酸塩をHAユニットに対して以下の表7に示す比率で各溶液に添加した。次にDMT-MMをHAユニットに対して以下の表7に示す比率で加え、さらに5-アミノメチルフルオレセイン(FL、インビトロジェン社製)塩酸塩、DMT-MMをHAユニットに対してそれぞれ0.04モル等量、0.07モル等量添加し、室温で一晩撹拌した。反応溶液は、0.3M 酢酸アンモニア/DMSO溶液、0.15M NaCl水溶液、超純水の順で透析し、得られた透析液を凍結乾燥して目的物(HA-Chol/FL)を黄色固体として得た。
実施例1-3で合成した、HA-Na(99kDa)を出発原料とするHA-TBAの無水DMSO溶液(5mg/mL)を調製した。その後、HAユニット/BOP(和光純薬株株式会社製)/2,2’-(エチレンジオキシ)ビス(エチルアミン)(EDOBEA、シグマ-アルドリッチ社製)=1/2.5/50(mol/mol/mol)の等量比でEDOBEA、BOPの順で添加し、室温で一晩攪拌した。反応溶液は、0.3M NaCl水溶液、超純水の順で透析した後、凍結乾燥して高導入率のHA-EDOBEAを得た。
L-アラニンエチルエステル塩酸塩の代わりにL-チロシンエチルエステル塩酸塩(和光純薬株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-4と同様の方法で行い、HA-Tyrを白色固体として得た。実施例1-3の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-38に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、チロシン中のヒドロキシフェニル由来のピーク(-C6H4OH、6.8、7.2ppm;4H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるチロシンの導入率を算出した(表8)。さらに実施例1-4の記載と同じ条件でHA-TyrのTBA塩(HA-Tyr-TBA)を白色固体として得た。次に、実施例1-4と同様の方法でChol-C6塩酸塩、FLを反応させ、目的物(HA-Tyr-Chol/FL)を黄色固体として得た。実施例1-4の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図1-39に示す。実施例1-4に記載の方法によりコレステリル基の導入率を算出した(表8)
(実施例2-1)HA誘導体を投与したラットからの生体サンプル採取
実施例1-4~1-20および比較例1-1および1-3で得られた化合物を10mg/kgの用量でラット静脈内に単回投与し、投与後5分、2、7、24、48、72、168、240および336時間でヘパリンナトリウム処理したシリンジを用いて頸静脈採血し、遠心分離により血漿を得た。比較例のサンプルの中には投与後96時間においても採血したものもある。この血漿サンプルは測定まで-20℃以下で凍結保存した。また、投与後0~24時間、24~48時間、48~72時間、72~96時間、168~192時間、240~264時間、および336~360時間で代謝ケージを用いて採尿し、測定まで-20℃以下で凍結保存した。さらに、投与15日後に肝臓を摘出し、測定まで-20℃以下で凍結保存した。比較例1-2で得られた化合物は20mg/kgの用量でラット静脈内に単回投与し、採尿ならびに肝臓摘出を行った。
血漿サンプルを融解後、HP-β-CD(100mM)/トリス緩衝液(500mM、pH9.0)溶液にて2倍希釈し、37℃にて1時間インキュベート後、96穴プレートリーダー(ARVO)にて蛍光標識HA誘導体濃度を測定した(定量限界:0.4μg/mL)。蛍光標識HA誘導体の血漿中濃度推移を図2-1-1~図2-1-26に示した。また、薬物動態パラメーター(血漿中濃度-時間曲線下面積外挿値(AUC∞))をWinNonlin Ver.6.1(Pharsight社製)によって解析し、その値を表9に示した。また、以下の式により算出される、同程度にコレステロールが導入された比較サンプルに対するAUC∞の比率を表10に示した。
約1gの肝臓サンプルにトリスバッファー(10mM、pH9.0)を添加し、ビーズを用いてホモジネートした。4mg/mLプロナーゼ溶液を添加し、37℃にて一晩インキュベートした。遠心分離後、HP-β-CD(100mM)/トリス緩衝液(500mM、pH9.0)溶液にて2倍希釈し、さらに37℃にて1時間インキュベート後、フィルターろ過し、以下の条件にてサイズ排除クロマトグラフィー分析を行った。なお、サンプル非投与ラットの肝臓も同様の処理を行い、投与前サンプルと混合したものを、スタンダードとして同様に分析を行った。
分析カラム:TSKgel G5000PWXL(東ソー株式会社)
カラム温度:25℃
移動相:HP-β-CD(10mM)/トリス緩衝液(500mM、pH9.0)
流速:0.5mL/min
検出:Ex 494nm/Em 515nm
注入量:50μL
尿サンプルを0.22μmのフィルターでろ過し、HP-β-CD(100mM)/トリス緩衝液(500mM、pH9.0)溶液にて2倍希釈した。37℃にて1時間インキュベート後、フィルターろ過し、実施例2-3に記載の条件にてサイズ排除クロマトグラフィー分析を行った。なお、サンプル非投与ラットの尿サンプルも同様の処理を行い、投与前サンプルと混合したものを、スタンダードとして同様に分析を行った。
(実施例3-1)L-グルタミン(Gln)ならびにコレステリル 6-アミノヘキシルカーバメートにより修飾した蛍光標識HA誘導体(HA-Gln-Chol/FL)の合成
L-アラニンエチルエステル塩酸塩の代わりにL-グルタミンメチルエステル塩酸塩(和光純薬株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-4と同様の方法で行い、HA-Glnを白色固体として得た。実施例1-3の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図3-1に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、グルタミンのメチレン由来のピーク(-CH2CH2CONH2、2.3、2.4ppm;2H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるグルタミンの導入率を算出した(表11)。なお、グルコサミンのアセチル由来のピークには、グルタミンの別のメチレンのピーク(-CH2CH2CONH2、2.1ppm;2H)が重なっているため、1.8~2.2ppmのピークの積分値から2.3、2.4ppmのピークの積分値を差し引いた値をグルコサミンのアセチル由来のピークとして、修飾率の算出に使用した。さらに実施例1-4の記載と同じ条件でHA-GlnのTBA塩(HA-Gln-TBA)を白色固体として得た。次に、実施例1-4と同様の方法でChol-C6塩酸塩、FLと反応させ、目的物(HA-Gln-Chol/FL)を黄色固体として得た。実施例1-4の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図3-2に示す。実施例1-4に記載の方法によりコレステリル基の導入率を算出した(表11)。
L-アラニンエチルエステル塩酸塩の代わりにL-メチオニンエチルエステル塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-4と同様の方法で行い、HA-Metを白色固体として得た。実施例1-3の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図3-3に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、メチオニンのメチレン由来のピーク(-CH2SCH3、2.6ppm;2H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるメチオニンの導入率を算出した(表11)。なお、グルコサミンのアセチル由来のピークには、メチオニンの別のメチレンとメチル由来のピーク(-CH2CH2SCH3、2.1ppm;5H)が重なっているため、1.8~2.2ppmのピークの積分値から2.6ppmのピークの積分値に5/2を乗じた値を差し引いた値をグルコサミンのアセチル由来のピークとして、導入率の算出に使用した。
L-スレオニンアミド塩酸塩の代わりにL-アラニンアミド塩酸塩(東京化成工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-5と同様の方法で行い、HA-AlaNH2-Chol/FLを黄色固体として得た。実施例1-5の記載と同じ条件で測定した生成物の1H-NMRスペクトルを図3-5に示す。実施例1-5の記載と同じ方法でHAユニットに対するコレステリル基の導入率を算出した(表12)。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、1.8ppm;3H)の積分値と、アラニンアミドのメチル由来のピーク(-CH2-、1.3ppm;3H)の積分値より、実施例1-5と同様にしてHAユニットにおけるアラニンアミドの導入率を算出した(表12)。なお、アラニンアミドのメチル由来のピークには、コレステリル由来のピーク(41H)が重なっているため、0.8~1.6ppmのピークの積分値から、0.7ppmのピークの積分値に41/3を乗じた値を差し引いた値をアラニンアミドのメチレン由来のピークとして、導入率の算出に使用した。
L-スレオニンアミド塩酸塩の代わりにL-アスパラギンアミド塩酸塩(国産化学株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-5と同様の方法で行い、HA-AsnNH2-Chol/FLを黄色固体として得た。実施例1-5の記載と同じ条件で測定した生成物の1H-NMRスペクトルを図3-6に示す。実施例1-5の記載と同じ方法でHAユニットに対するコレステリル基の導入率を算出した(表12)。また、実施例1-3の記載と同じ条件で測定した生成物の1H-NMRスペクトルを図3-7に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、アスパラギンアミドのメチレン由来のピーク(-CH2CONH2、2.7、2.8ppm;2H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるアスパラギンアミドの導入率を算出した(表12)
L-スレオニンアミド塩酸塩の代わりにL-イソロイシンアミド塩酸塩(東京化成工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-5と同様の方法で行い、HA-IleNH2-Chol/FLを黄色固体として得た。実施例1-5の記載と同じ条件で測定した生成物の1H-NMRスペクトルを図3-8に示す。実施例1-5の記載と同じ方法でHAユニットに対するコレステリル基の導入率を算出した(表12)。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、1.8ppm;3H)の積分値と、イソロイシンアミド中のメチレンならびに2つのメチル由来のピーク(-CH(CH3)CH2CH3、0.9ppm;8H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるイソロイシンアミドの導入率を算出した(表3)。なお、イソロイシンアミドのメチル由来のピークには、コレステリル由来のピーク(41H)が重なっているため、0.8~1.6ppmのピークの積分値から、0.7ppmのピークの積分値に41/3を乗じた値を差し引いた値をイソロイシンアミドのメチレン由来のピークとして、導入率の算出に使用した。また、グルコサミンのアセチル由来のピークには、イソロイシンの3位の水素のピーク(-CH(CH3)CH2CH3、1.9ppm;1H)が重なっているため、1.8~2.2ppmのピークの積分値から0.8~1.6ppmのピークの積分値に1/8を乗じた値を差し引いた値をグルコサミンのアセチル由来のピークとして、導入率の算出に使用した。
L-スレオニンアミド塩酸塩の代わりにL-グルタミンアミド塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-5と同様の方法で行い、HA-GlnNH2-Chol/FLを黄色固体として得た。実施例1-5の記載と同じ条件で測定した生成物の1H-NMRスペクトルを図3-9に示す。実施例1-5の記載と同じ方法でHAユニットに対するコレステリル基の導入率を算出した(表12)。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、1.8ppm;3H)の積分値と、グルタミンアミド中のメチレン由来のピーク(-CH 2 CH2CONH2、2.1ppm;2H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるグルタミンアミドの導入率を算出した(表12)。なお、グルタミンアミドのメチル由来のピークには、コレステリル由来のピーク(2H)が重なっているため、0.7ppmのピークの積分値に2/3を乗じた値を差し引いた値をグルタミンアミドのメチレン由来のピークとして、導入率の算出に使用した。また、グルコサミンのアセチル由来のピークには、グルタミンアミド中のメチレン由来のピーク(-CH2CH 2 CONH2、1.9ppm;2H)が重なっているため、1.8~2.0ppmのピークの積分値から2.1ppmのピークの積分値に2/2を乗じた値を差し引いた値をグルコサミンのアセチル由来のピークとして、導入率の算出に使用した。
L-スレオニンアミド塩酸塩の代わりにL-メチオニンアミド塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-5と同様の方法で行い、HA-MetNH2-Chol/FLを黄色固体として得た。実施例1-5の記載と同じ条件で測定した生成物の1H-NMRスペクトルを図3-10に示す。実施例1-5の記載と同じ方法でHAユニットに対するコレステリル基の導入率を算出した(表12)。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、1.8ppm;3H)の積分値と、メチオニンアミド中のメチル由来のピーク(-SCH3、2.1ppm;3H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるメチオニンアミドの導入率を算出した(表12)。グルコサミンのアセチル由来のピークには、メチオニンアミド中のメチレン由来のピーク(-CH2SCH3、1.9ppm;2H)が重なっているため、1.8~2.0ppmのピークの積分値から2.1ppmのピークの積分値に2/3を乗じた値を差し引いた値をグルコサミンのアセチル由来のピークとして、導入率の算出に使用した。
L-アラニンエチルエステル塩酸塩の代わりにL-グルタミン酸ジエチルエステル塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-4と同様の方法で行い、HA-Gluを白色固体として得た。実施例1-3の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図3-11に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、グルタミン酸のメチレン由来のピーク(-CH2CH2COOH、2.4ppm;2H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるグルタミン酸の導入率を算出した(表13)。なお、グルコサミンのアセチル由来のピークには、グルタミン酸の別のメチレン由来のピーク(-CH2CH2COOH、2.1ppm;2H)が重なっているため、1.8~2.2ppmのピークの積分値から2.4ppmのピークの積分値を差し引いた値をグルコサミンのアセチル由来のピークとして、修飾率の算出に使用した。さらに実施例1-4の記載と同じ条件でHA-GluのTBA塩(HA-Glu-TBA)を白色固体として得た。次に、実施例1-4と同様の方法でChol-C6塩酸塩、FLと反応させ、目的物(HA-Glu-Chol/FL)を黄色固体として得た。実施例1-4の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図3-12に示す。実施例1-4に記載の方法によりコレステリル基の導入率を算出した(表13)。
L-アラニンエチルエステル塩酸塩の代わりにL-トリプトファンエチルエステル塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-4と同様の方法で行い、HA-Trpを白色固体として得た。実施例1-3の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図3-13に示す。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、2.0ppm;3H)の積分値と、トリプトファンのインドール環由来のピーク(-C8H6N、7.8ppm;1H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるトリプトファンの導入率を算出した(表13)。さらに実施例1-4の記載と同じ条件でHA-TrpのTBA塩(HA-Trp-TBA)を白色固体として得た。次に、実施例1-4と同様の方法でChol-C6塩酸塩、FLと反応させ、目的物(HA-Trp-Chol/FL)を黄色固体として得た。実施例1-4の記載と同じ条件で測定した1H-NMRスペクトルを図3-14に示す。実施例1-4に記載の方法によりコレステリル基の導入率を算出した(表13)。
10kDaのHA-Naを出発原料とするHA-TBAを用いたこと以外は、比較例1-3と同様の方法で行い、10kのHA-Tyr-Chol/FLを黄色固体として得た。チロシンならびにコレステリル基の導入率も比較例1-3と同様の方法で算出した(表13)。
5-アミノメチルフルオレセインを加えていないこと、ならびに出発原料として用いたHA-Naの分子量が異なること以外は実施例1-4~実施例1-18ならびに実施例3-1~実施例3-7ならびに比較例3-1~比較例3-3に記載の方法により各種ヒアルロン酸誘導体を白色固体として得た。対応する実施例の記載と同じ方法によりコレステリル基の導入率ならびにアミノ酸およびアミノ酸アミドの導入率を算出した(表14-1、表14-2)。原料のヒアルロン酸は、5kDaのみR&Dシステム社製を用い、それ以外は資生堂社製のものを用いた。
(実施例4-1)HA誘導体を投与したラットからの生体サンプル採取
実施例3-1~3-7および比較例3-1~3-3で得られた化合物を10mg/kgの用量でラット静脈内に単回投与し、投与後5分、2、7、24、48、72および168時間でヘパリンナトリウム処理したシリンジを用いて頸静脈採血し、遠心分離により血漿を得た。比較例のサンプルの中には投与後96時間においても採血したものもある。この血漿サンプルは測定まで-20℃以下で凍結保存した。また、投与7日後に肝臓を摘出し、測定まで-20℃以下で凍結保存した。
血漿サンプルを融解後、HP-β-CD(100mM)/トリス緩衝液(500mM、pH9.0)溶液にて2倍希釈し、37℃にて1時間インキュベート後、96穴プレートリーダー(ARVO)にて蛍光標識HA誘導体濃度を測定した(定量限界:0.4μg/mL)。蛍光標識HA誘導体の血漿中濃度推移を図4-1-1~図4-1-10に示した。また、薬物動態パラメーター(血漿中濃度-時間曲線下面積外挿値(AUC∞))をWinNonlin Ver.6.1(Pharsight社製)によって解析し、その値を表15に示した。また、以下の式により算出される、同程度にコレステロールが導入された比較サンプルに対するAUC∞の比率を表16に示した。
約1gの肝臓サンプルにトリスバッファー(10mM、pH9.0)を添加し、ビーズを用いてホモジネートした。4mg/mLプロナーゼ溶液を添加し、37℃にて一晩インキュベートした。遠心分離後、HP-β-CD(100mM)/トリス緩衝液(500mM、pH9.0)溶液にて2倍希釈し、さらに37℃にて1時間インキュベート後、フィルターろ過し、以下の条件にてサイズ排除クロマトグラフィー分析を行った。なお、サンプル非投与ラットの肝臓も同様の処理を行い、投与前サンプルと混合したものを、スタンダードとして同様に分析を行った。
分析カラム:TSKgel G5000PWXL(東ソー株式会社)
カラム温度:25℃
移動相:HP-β-CD(10mM)/トリス緩衝液(50mM、pH9.0)
流速:0.5mL/min
検出:Ex 494nm/Em 515nm
注入量:50μL
(実施例5-1)L-チロシンアミド(TyrNH2)ならびにコレステリル 6-アミノヘキシルカーバメートにより修飾した蛍光標識HA誘導体(HA-TyrNH2/Chol/FL)の合成
L-スレオニンアミド塩酸塩の代わりにL-チロシンアミド塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-5と同様の方法で行い、HA-TyrNH2-Chol/FLを黄色水溶液として得た。凍結乾燥品を実施例1-5の記載と同じ条件で測定した生成物の1H-NMRスペクトルを図5-1に示す。実施例1-5の記載と同じ方法でHAユニットに対するコレステリル基の導入率を算出した(表17)。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、1.8ppm;3H)の積分値と、チロシン中のヒドロキシフェニル由来のピーク(-C6H4OH、6.8、7.2ppm;4H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるチロシンアミドの導入率を算出した(表17)
L-スレオニンアミド塩酸塩の代わりにL-トリプトファンアミド塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-5と同様の方法で行い、HA-TrpNH2-Chol/FLを黄色水溶液として得た。凍結乾燥品を実施例1-5の記載と同じ条件で測定した生成物の1H-NMRスペクトルを図5-2に示す。実施例1-5の記載と同じ方法でHAユニットに対するコレステリル基の導入率を算出した(表17)。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、1.8ppm;3H)の積分値と、トリプトファンアミド中のインドール環由来のピーク(-C8H6N、7.6ppm;1H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるトリプトファンアミドの導入率を算出した(表17)。
L-スレオニンアミド塩酸塩の代わりにL-フェニルアラニンアミド塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)を用いたこと以外は、実施例1-5と同様の方法で行い、HA-PheNH2-Chol/FLを黄色水溶液として得た。凍結乾燥品を実施例1-5の記載と同じ条件で測定した生成物の1H-NMRスペクトルを図5-3に示す。実施例1-5の記載と同じ方法でHAユニットに対するコレステリル基の導入率を算出した(表17)。グルコサミンのアセチル由来のピーク(-COCH3、1.8ppm;3H)の積分値と、フェニルアラニン中のフェニル由来のピーク(-C6H5、7.2~7.4ppm;5H)の積分値より、実施例1-4と同様にしてHAユニットにおけるフェニルアラニンアミドの導入率を算出した(表17)
実施例1-3で合成した、HA-Naを出発原料とするHA-TBA(99kDa)の無水DMSO溶液を調製した。その後、L-チロシンアミド塩酸塩(渡辺化学株式会社製)をHAユニットに対して5モル等量添加し、次に4-(4,6-ジメトキシ-1,3,5-トリアジン-2-イル)-4-メチルモルホリニウムクロリド(DMT-MM)をHAユニットに対して3モル等量添加し、室温で一晩撹拌した。反応溶液は、0.15M NaCl水溶液、超純水の順で透析した。透析中に沈殿が生じ、目的物を水溶液として回収できなかった。
L-チロシンアミド塩酸塩の代わりにL-トリプトファンアミド塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)を用いたこと以外は、比較例5-1と同様の方法でおこなった。透析中に沈殿が生じ、目的物を水溶液として回収できなかった。
L-チロシンアミド塩酸塩の代わりにL-フェニルアラニンアミド塩酸塩(渡辺化学工業株式会社製)を用いたこと以外は、比較例5-1と同様の方法でおこなった。HA-PheNH2を白色固体として得た。
実施例5-1、実施例5-2、比較例5-1、比較例5-2で合成したHA誘導体の水への透析後の溶解性状を表18に示す。
実施例5-1、実施例5-2、実施例5-3、実施例3-3で得られたHA誘導体(99k HA-TyrNH2/Chol―6%/FL、99k HA-TrpNH2/Chol―6%/FL、99k HA-PheNH2/Chol―6%/FL、99k HA-AlaNH2/Chol―6%/FL)の水溶液(超純水)に対し、最終緩衝液組成が10mM PB、150mM NaClとなるように濃縮緩衝液を加え、HA誘導体濃度を4.5mg/mLとした。37℃にて20分間インキュベート後、2000Gにて1分間遠心し、上澄みを96穴プレートリーダー(ARVO)にて蛍光強度を測定した。スタンダードを用いて蛍光標識HA誘導体濃度を算出し、当初使用量に対する残存率を算出した(表19)。同様の操作を比較例1-1で得られた99k HA-Chol-6%/FL(比較サンプル5-3)に対しても行った。比較サンプル5-1、5-2の結果はWO2010/053140に記載の結果である。
実施例5-1、実施例5-2、実施例5-3で得られた蛍光標識HA誘導体(99k HA-TyrNH2/Chol―6%/FL、99k HA-TrpNH2/Chol―6%/FL、99k HA-PheNH2/Chol―6%/FL)で得られた化合物を10mg/kgの用量(スクロース溶液)でラット皮下に単回投与した。投与7日後、投与部位を確認したところ、確かに蛍光標識HA誘導体が沈殿し、存在していることが確認された。
5-アミノメチルフルオレセインを加えていないこと、ならびに出発原料として用いたHA-Naの分子量が異なること以外は実施例5-1~実施例5-3に記載の方法により各種ヒアルロン酸誘導体を白色固体として得た。対応する実施例の記載と同じ方法によりコレステリル基の導入率ならびにアミノ酸およびアミノ酸アミドの導入率を算出した(表20)。
(実施例6-1)パクリタキセル(PTX)の封入
実施例1-4ならびに実施例1-21ならびに実施例3-8ならびに実施例5-7で得られたHA誘導体の水溶液(超純水)に対し、パクリタキセル(10mg/ml、メタノール溶液)を加え、最終パクリタキセル濃度を100μg/mL、HA誘導体濃度を1.0mg/mLとした。4℃にて一晩静置後、4700Gにて10分間遠心し、上澄み100μLに対し、50%アセトニトリル100μL、100mM HP-β-CD 50μLを加え、以下の条件にて逆相クロマトグラフィー分析を行った。
分析カラム:PLRP-S 1000Å(Agilent社) カラム温度:40℃
移動相A:0.1%TFA水溶液、移動相B:0.1%TFAアセトニトリル溶液
グラジエント:B5%→B95%(3.4分)
流速:2mL/min
検出:UV254nm
注入量:30μL
実施例1-4ならびに実施例1-21ならびに実施例3-8ならびに実施例5-7で得られたHA誘導体の水溶液(超純水)に対し、シクロスポリン(10mg/ml、メタノール溶液)を加え、最終シクロスポリン濃度を300μg/mL、HA誘導体濃度を1.0mg/mLとした。4℃にて一晩静置後、4700Gにて30分間遠心し、上澄み100μLに対し、50%アセトニトリル100μL、100mM HP-β-CD 50μLを加え、実施例6-1に記載の条件にて逆相クロマトグラフィー分析を行った。検出はUV210nmを用いた。スタンダードを用いて算出した上清中シクロスポリン濃度を図6-2-1~図6-2-4に示す。HA誘導体が存在しない場合のシクロスポリンの溶解度は28μg/mLであるのに対し、HA誘導体の存在下において優位にシクロスポリンの溶解度の向上が確認された。これは、シクロスポリンなどの難溶性ペプチドがHA誘導体に封入されることを示唆している。
(実施例7-1)パクリタキセルリリース試験
実施例1-21で得られた10k HA-Ala-Chol-41%の水溶液(超純水)に対し、パクリタキセル(10mg/ml、メタノール溶液)を加え、最終パクリタキセル濃度を100μg/mL、HA誘導体濃度を1.0mg/mLとした。4℃にて一晩静置後、フリーのパクリタキセルを透析膜(3,000MWCO)にて4℃にて精製した。得られたHA誘導体/パクリタキセル複合体を透析膜(3,000MWCO)に入れ、PBSに対して、37℃にてインキュベートした。経時的に透析膜内のパクリタキセル濃度を逆相クロマトグラフィー分析にて定量し、リリースを確認した。透析膜内のパクリタキセルの残存量を図7-1に示す。この結果はHA誘導体が徐放担体として使用し得ることを示している。
パクリタキセルの代わりにシクロスポリンAを用いたこと以外は実施例7-1に記載の方法で実施し、シクロスポリンのリリースを確認した。透析膜内のシクロスポリンの残存量を図7-2に示す。この結果はHA誘導体が徐放担体として使用し得ることを示している。
コレステリル 6-アミノヘキシルカーバメート(Chol-C6)の代わりにコレステリル 2-アミノエチルカーバメート(Chol-C2)、コレステリル 12-ドデシルアミノヘキシルカーバメート(Chol-C12)、コレステリル 8-アミノ-3,6-ジオキサオクチルカーバメート(Chol-EO2)を用いたこと以外は実施例1-4と同様の方法で行い、リンカーの異なるHA-AA-Cholを固体として得た(表20)。コレステリル 2-アミノエチルカーバメート、コレステリル 12-ドデシルアミノヘキシルカーバメート、コレステリル 8-アミノ-3,6-ジオキサオクチルカーバメートはWO2010/053140に記載の方法にて合成した。実施例1-5の記載と同じ条件で測定した生成物の1H-NMRスペクトルを図8-1~図8-6に示す。実施例1-5の記載と同じ方法でHAユニットに対するコレステリル基の導入率を算出した(表21)。
(実施例9-1)N-(2-アミノエチル)5βコラン酸アミド(N-(2-aminoethyl)5β-cholanoamide)の合成
5βコラン酸メチルエステル(steraloids社、100μg)をエチレンジアミン(6mL)に溶解し、130℃、4時間、還流した。減圧留去後、ジクロロメタンに溶解し、超純水にて洗浄した。減圧下で溶媒を留去し、アミノエチル5βコラン酸アミドを得た。1H-NMR(CDCl3):δ=0.64(3H、s、CH3)、0.91(3H、s、CH3)、0.92(3H、d、CH3)2.0-2.3(2H、m、COCH2)、2.8(2H、m、CH 2 CH2NHCO)、3.3(2H、m、CH2CH 2 NHCO)、5.9(1H、br、NHCO)。
実施例1-4と同様の方法で合成されたHA-Ala-TBAの無水DMSO溶液(10mg/mL)を調製し、その後、実施例9-1で調製したアミノエチル5βコラン酸アミドをHA-Ala-TBAユニットに対して以下の表22に示す比率で各溶液に添加した。次に、DMT-MMをHA-Ala-TBAに対して以下の表22に示す比率で加えた。反応溶液は、メタノール/水 1/1混液、0.15M NaCl水溶液、超純水の順で透析し、得られた透析液を凍結乾燥して目的物(HA-Ala-CA)を白色固体として得た。
Claims (12)
- 式(I)
R5は、水素原子、ホルミル、またはC1-6アルキルカルボニルであり;
X1は、ヒドロキシ、-O-Q+、C1-6アルコキシ、-NR7R8、または-NR9-Z1-Z2であり;
Q+は、カウンターカチオンを表し;
R6、R7、R8、およびR9は、独立に、水素原子、およびC1-6アルキルから選択され;
Raは、水素原子、またはC1-6アルキルであり、ここで該アルキルは、独立に、ヒドロキシ、カルボキシ、カルバモイル、C1-6アルキルチオ、アリール、およびヘテロアリールから選択される1以上の基で置換されていてもよく、ここで該アリールは1以上のヒドロキシで置換されていてもよく;
Z1は、C2-30アルキレン、または-(CH2CH2O)m-CH2CH2-であり、ここで、該アルキレンは、独立に、-O-、-NRg-および-S-S-から選択される1~5の基が挿入されていてもよく、mは、1~100から選択される整数であり;
Z2は、以下の式:
-NRb-Z3、
-NRb-COO-Z3、
-NRb-CO-Z3、
-NRb-CO-NRc-Z3、
-COO-Z3、
-CO-NRc-Z3、
-O-CO-NRc-Z3、
-O-COO-Z3、
-S-Z3、
-CO-Za-S-Z3、
-O-CO-Zb-S-Z3、
-NRb-CO-Zb-S-Z3、および
-S-S-Z3、
により表される基から選択され;
RbおよびRcは、独立に、水素原子、C1-20アルキル、アミノC2-20アルキルおよびヒドロキシC2-20アルキルから選択され、ここで当該基のアルキル部分は、独立に、-O-および-NRf-から選択される1~3個の基が挿入されていてもよく;
Rfは、独立に、水素原子、C1-12アルキル、アミノC2-12アルキルおよびヒドロキシC2-12アルキルから選択され、当該基のアルキル部分は、独立に、-O-および-NH-から選択される1~2個の基が挿入されていてもよく;
Rgは、独立に、水素原子、C1-20アルキル、アミノC2-20アルキルまたはヒドロキシC2-20アルキルから選択され、当該基のアルキル部分は、独立に、-O-および-NH-から選択される1~3個の基が挿入されていてもよく;
Z3は、ステリル基であり;
Zaは、C1-5アルキレンであり;
Zbは、C2-8アルキレンまたはC2-8アルケニレンである]
で表される繰り返し単位を含むヒアルロン酸誘導体であって、X1が-NR9-Z1-Z2である式(I)で表される繰り返し単位が含まれない場合、さらに式(II):
R5aは、水素原子、ホルミル、またはC1-6アルキルカルボニルであり;
X2は、-NR9-Z1-Z2であり、ここで、R9、Z1、およびZ2は既に定義したとおりである];
で表される繰り返し単位を含む、ヒアルロン酸誘導体。 - 式(I)においてX1が-NR9-Z1-Z2である、請求項1または2に記載のヒアルロン酸誘導体。
- 存在する二糖の繰り返し単位における、式(I)で表わされる二糖単位の割合が、70~100%である、請求項1~3のいずれか1項に記載のヒアルロン酸誘導体。
- 存在する二糖の繰り返し単位における、基-NR9-Z1-Z2を含む二糖単位の割合が、3~50%である、請求項1~4のいずれか1項に記載のヒアルロン酸誘導体。
- X1が-NR9-Z1-Z2である式(I)で表される繰り返し単位が含まれない、請求項1または2に記載のヒアルロン酸誘導体。
- 存在する二糖の繰り返し単位における、(I)で表わされる繰り返し単位の割合、および式(II)で表わされる繰り返し単位の割合の和が、70~100%である、請求項1、2および6のいずれか1項に記載のヒアルロン酸誘導体。
- R1b、R2b、R3b、およびR4bの全てを水素原子とし、R5bをアセチルとし、かつ、Xbを-O-Na+とした場合の重量平均分子量が3キロダルトン~1500キロダルトンとなる、請求項2に定義した式(IIb)で表される二糖単位のみから構成されるヒアルロン酸を用いて製造される、請求項1~7のいずれか1項に記載のヒアルロン酸誘導体。
- Z1が、C2-10アルキレンであり、Z2が、-NH-COO-Z3であり、Z3が、コレステリル基である、請求項1~8のいずれか1項に記載のヒアルロン酸誘導体。
- 請求項1~10のいずれか1項に記載のヒアルロン酸誘導体と薬物を含む、医薬組成物。
- 薬物がヒアルロン酸誘導体と複合体を形成することにより担持される、請求項11に記載の医薬組成物。
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BR112015004501-4A BR112015004501B1 (pt) | 2012-09-05 | 2013-09-05 | Derivado de ácido hialurônico tendo aminoácidos e grupos esterila introduzidos no mesmo e composição farmacêutica que o compreende |
MX2015002847A MX359884B (es) | 2012-09-05 | 2013-09-05 | Derivado del acido hialuronico con aminoacido y grupo esterilo introducido en este. |
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CN201380046295.XA CN104603156B (zh) | 2012-09-05 | 2013-09-05 | 引入有氨基酸和甾基的透明质酸衍生物 |
RU2015112219A RU2674003C2 (ru) | 2012-09-05 | 2013-09-05 | Производное гиалуроновой кислоты, содержащее аминокислотную и стерильную группы, введенные в него |
JP2014534410A JP6275044B2 (ja) | 2012-09-05 | 2013-09-05 | アミノ酸およびステリル基が導入されたヒアルロン酸誘導体 |
US14/426,485 US11564971B2 (en) | 2012-09-05 | 2013-09-05 | Hyaluronic acid derivative having amino acid and steryl group introduced thereinto |
KR1020157008082A KR102130864B1 (ko) | 2012-09-05 | 2013-09-05 | 아미노산 및 스테릴기가 도입된 히알루론산 유도체 |
EP13836138.1A EP2894173B1 (en) | 2012-09-05 | 2013-09-05 | Hyaluronic acid derivative having amino acid and steryl group introduced thereinto |
HK15106154.2A HK1205525A1 (en) | 2012-09-05 | 2015-06-29 | Hyaluronic acid derivative having amino acid and steryl group introduced thereinto |
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---|---|
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Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2017195880A1 (ja) * | 2016-05-11 | 2017-11-16 | 中外製薬株式会社 | カチオン性基および疎水性基が導入されたヒアルロン酸誘導体 |
JPWO2016159159A1 (ja) * | 2015-03-31 | 2018-01-25 | キユーピー株式会社 | ヒアルロン酸誘導体およびその製造方法、ならびにヒアルロン酸誘導体を含む化粧料、食品組成物および医薬組成物 |
WO2019098393A1 (ja) | 2017-11-15 | 2019-05-23 | 中外製薬株式会社 | ポリエチレングリコールにより修飾されたヒアルロン酸誘導体 |
WO2020158771A1 (ja) | 2019-01-29 | 2020-08-06 | 国立大学法人三重大学 | がんワクチン製剤 |
JP2021500436A (ja) * | 2017-10-26 | 2021-01-07 | ジョインセラピュイティクス エッセ.エッレ.エッレ. | 炎症症状の治療における官能化ヒアルロン酸またはその誘導体 |
WO2021157665A1 (ja) * | 2020-02-07 | 2021-08-12 | 旭化成株式会社 | ヒアルロン酸誘導体、医薬組成物及びヒアルロン酸誘導体-薬物結合体 |
WO2021157677A1 (ja) * | 2020-02-05 | 2021-08-12 | 旭化成株式会社 | ヒアルロン酸誘導体組成物、医薬組成物及びヒアルロン酸誘導体-薬物結合体組成物 |
WO2022255384A1 (ja) | 2021-05-31 | 2022-12-08 | 国立大学法人三重大学 | 医薬組成物 |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10047172B2 (en) * | 2013-09-30 | 2018-08-14 | Galderma S.A. | Single step functionalization and cross-linking of hyaluronic acid |
CN108069867A (zh) * | 2016-11-17 | 2018-05-25 | 常州百凯生物科技有限公司 | 一种l-丙氨酰胺盐酸盐的制备方法 |
IT201800003841A1 (it) | 2018-03-21 | 2019-09-21 | Acme Drugs S R L | Coniugati di stanozololo e acido ialuronico |
US20220213233A1 (en) * | 2019-04-19 | 2022-07-07 | Jointherapeutics S.R.L. | Crosslinked polymer of functionalized hyaluronic acid and its use in the treatment of inflammatory states |
BR112021019113A2 (pt) * | 2019-06-03 | 2021-12-14 | Aihol Corp | Conjugados de hialuronano e usos dos mesmos |
KR20210102602A (ko) | 2020-02-12 | 2021-08-20 | (주)아모레퍼시픽 | 생체 활성 물질을 안정화하는 히알루론산 하이드로겔 및 이의 제조 방법 |
JP2023533679A (ja) * | 2020-07-15 | 2023-08-04 | コヴァル バイオファーマ (シャンハイ) カンパニー,リミテッド | 治療剤を局所的に送達するための薬物送達システムおよびその使用 |
CN114931563A (zh) * | 2022-03-17 | 2022-08-23 | 吉林大学 | 一种透明质酸纳米颗粒/维替泊芬复合物的制备方法 |
CN114685696B (zh) * | 2022-05-13 | 2022-11-08 | 北美生命科学(上海)有限公司 | 生物安全注射用改性透明质酸、制备方法及应用 |
CN115850534B (zh) * | 2022-12-16 | 2024-03-12 | 浙江大学 | 一种透明质酸-胆酸衍生物及其合成方法和应用 |
CN116763725B (zh) * | 2023-08-16 | 2023-11-24 | 四川大学华西医院 | 一种智能响应型可注射水凝胶及其制备方法和应用 |
Citations (26)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH02273176A (ja) | 1989-04-13 | 1990-11-07 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | グリコサミノグリカンで修飾されたスーパーオキシドジスムターゼ及びその製造法 |
JPH0388802A (ja) * | 1989-08-01 | 1991-04-15 | Univ New York State | ヒアルロン酸のn―アシル尿素及びo―アシルイソ尿素誘導体 |
WO1992006714A1 (en) | 1990-10-18 | 1992-04-30 | Shiseido Co., Ltd. | Combination of hyaluronic acid with medicinal ingredient and production thereof |
WO1992020349A1 (en) | 1991-05-20 | 1992-11-26 | Genzyme Corporation | Water insoluble derivatives of polyanionic polysaccharides |
JPH0585942A (ja) | 1991-02-26 | 1993-04-06 | Denki Kagaku Kogyo Kk | インターフエロン−ヒアルロン酸及び/又はその塩の結合体 |
WO2001005434A2 (en) | 1999-07-20 | 2001-01-25 | Amgen Inc. | Hyaluronic acid-protein conjugates |
JP2001081103A (ja) | 1999-09-13 | 2001-03-27 | Denki Kagaku Kogyo Kk | ヒアルロン酸結合薬剤 |
WO2001060412A2 (en) | 2000-02-15 | 2001-08-23 | Genzyme Corporation | Modification of biopolymers for improved drug delivery |
JP2002022154A (ja) | 2000-07-13 | 2002-01-23 | Yamaha Livingtec Corp | 液体燃料燃焼装置 |
JP2002519481A (ja) * | 1998-07-06 | 2002-07-02 | フィディア・アドバンスト・バイオポリマーズ・ソシエタ・ア・レスポンサビリタ・リミタータ | ヒアルロン酸アミドおよびそれらの誘導体、並びにそれらの製造法 |
WO2002090209A1 (en) | 2001-05-07 | 2002-11-14 | Australian Postal Corporation | Packaging system |
JP2004035629A (ja) | 2002-07-01 | 2004-02-05 | Kansai Paint Co Ltd | 水性光輝性塗料および複層塗膜形成方法 |
WO2005095464A1 (ja) | 2004-04-02 | 2005-10-13 | Denki Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | ヒアルロン酸-メトトレキサート結合体 |
JP2006028110A (ja) | 2004-07-20 | 2006-02-02 | Daiso Co Ltd | 1−アミド−3−(2−ヒドロキシフェノキシ)−2−プロパノール誘導体、ならびに2−アミドメチル−1,4−ベンゾジオキサン誘導体の製造法 |
JP2007535607A (ja) * | 2004-04-30 | 2007-12-06 | アドヴァンスド カーディオヴァスキュラー システムズ, インコーポレイテッド | ヒアルロン酸系コポリマー |
JP2008136536A (ja) | 2006-11-30 | 2008-06-19 | Roiyaru:Kk | 陳列棚 |
WO2009026274A1 (en) | 2007-08-22 | 2009-02-26 | Medarex, Inc. | Site-specific attachment of drugs or other agents to engineered antibodies with c-terminal extensions |
JP2009074678A (ja) | 2007-08-31 | 2009-04-09 | Nippon Densan Corp | スラストプレートの製造方法、軸受装置、軸受装置の製造方法、およびスピンドルモータ |
WO2009074678A2 (en) | 2007-12-12 | 2009-06-18 | Eurand Pharmaceuticals Limited | Anticancer conjugates of camptothecin to hyaluronic acid |
JP2010053140A (ja) | 2001-11-27 | 2010-03-11 | Schering Corp | 腫瘍由来樹状細胞阻害因子アンタゴニストおよびToll様レセプターアゴニストの併用を使用する、癌を処置するための方法 |
WO2010053140A1 (ja) | 2008-11-05 | 2010-05-14 | 国立大学法人 東京医科歯科大学 | ヒアルロン酸誘導体、およびその医薬組成物 |
WO2010119994A1 (ja) * | 2009-04-17 | 2010-10-21 | 帝人株式会社 | 多糖類誘導体およびそのハイドロゲル |
JP2011148116A (ja) | 2010-01-19 | 2011-08-04 | Kawakami Sangyo Co Ltd | 吸湿発熱保温シート |
JP2012504697A (ja) * | 2008-10-06 | 2012-02-23 | アドシア | 疎水性アルコール誘導体により置換されたカルボキシル官能基を含有する多糖類 |
JP2012118189A (ja) | 2010-11-30 | 2012-06-21 | Brother Ind Ltd | 現像装置 |
WO2012118189A1 (ja) * | 2011-03-03 | 2012-09-07 | 中外製薬株式会社 | アミノ-カルボン酸により修飾されたヒアルロン酸誘導体 |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5356883A (en) * | 1989-08-01 | 1994-10-18 | Research Foundation Of State University Of N.Y. | Water-insoluble derivatives of hyaluronic acid and their methods of preparation and use |
IT1281876B1 (it) * | 1995-05-10 | 1998-03-03 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Acido ialuronico e suoi derivati esterei per la preparazione di matrici per il rilascio controllato di farmaci. |
ATE552859T1 (de) | 2000-09-13 | 2012-04-15 | Praecis Pharm Inc | Pharmazeutische formulierungen zur kontinuierlichen abgabe von peptiden |
ITPD20020271A1 (it) | 2002-10-18 | 2004-04-19 | Fidia Farmaceutici | Composti chimico-farmaceutici costituiti da derivati dei taxani legati covalentemente all'acido ialuronico o ai suoi derivati. |
WO2005066214A1 (ja) * | 2004-01-07 | 2005-07-21 | Seikagaku Corporation | ヒアルロン酸誘導体及びそれを含む薬剤 |
US8143391B2 (en) * | 2004-09-07 | 2012-03-27 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Process for producing water-soluble hyaluronic acid modification |
US8987230B2 (en) | 2007-05-01 | 2015-03-24 | National University Corporation Tokyo Medical And Dental University | Hybrid gel comprising chemically crosslinked hyaluronic acid derivative and pharmaceutical composition comprising the same |
US8426382B2 (en) | 2008-10-06 | 2013-04-23 | Adocia | Polysaccharides comprising carboxyl functional groups substituted by a hydrophobic alcohol derivative |
WO2011148116A2 (fr) | 2010-05-27 | 2011-12-01 | Laboratoire Idenov | Acide hyaluronique modifie, procede de fabrication et utilisations |
-
2013
- 2013-09-05 US US14/426,485 patent/US11564971B2/en active Active
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-
2015
- 2015-06-29 HK HK15106154.2A patent/HK1205525A1/xx unknown
Patent Citations (26)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH02273176A (ja) | 1989-04-13 | 1990-11-07 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | グリコサミノグリカンで修飾されたスーパーオキシドジスムターゼ及びその製造法 |
JPH0388802A (ja) * | 1989-08-01 | 1991-04-15 | Univ New York State | ヒアルロン酸のn―アシル尿素及びo―アシルイソ尿素誘導体 |
WO1992006714A1 (en) | 1990-10-18 | 1992-04-30 | Shiseido Co., Ltd. | Combination of hyaluronic acid with medicinal ingredient and production thereof |
JPH0585942A (ja) | 1991-02-26 | 1993-04-06 | Denki Kagaku Kogyo Kk | インターフエロン−ヒアルロン酸及び/又はその塩の結合体 |
WO1992020349A1 (en) | 1991-05-20 | 1992-11-26 | Genzyme Corporation | Water insoluble derivatives of polyanionic polysaccharides |
JP2002519481A (ja) * | 1998-07-06 | 2002-07-02 | フィディア・アドバンスト・バイオポリマーズ・ソシエタ・ア・レスポンサビリタ・リミタータ | ヒアルロン酸アミドおよびそれらの誘導体、並びにそれらの製造法 |
WO2001005434A2 (en) | 1999-07-20 | 2001-01-25 | Amgen Inc. | Hyaluronic acid-protein conjugates |
JP2001081103A (ja) | 1999-09-13 | 2001-03-27 | Denki Kagaku Kogyo Kk | ヒアルロン酸結合薬剤 |
WO2001060412A2 (en) | 2000-02-15 | 2001-08-23 | Genzyme Corporation | Modification of biopolymers for improved drug delivery |
JP2002022154A (ja) | 2000-07-13 | 2002-01-23 | Yamaha Livingtec Corp | 液体燃料燃焼装置 |
WO2002090209A1 (en) | 2001-05-07 | 2002-11-14 | Australian Postal Corporation | Packaging system |
JP2010053140A (ja) | 2001-11-27 | 2010-03-11 | Schering Corp | 腫瘍由来樹状細胞阻害因子アンタゴニストおよびToll様レセプターアゴニストの併用を使用する、癌を処置するための方法 |
JP2004035629A (ja) | 2002-07-01 | 2004-02-05 | Kansai Paint Co Ltd | 水性光輝性塗料および複層塗膜形成方法 |
WO2005095464A1 (ja) | 2004-04-02 | 2005-10-13 | Denki Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | ヒアルロン酸-メトトレキサート結合体 |
JP2007535607A (ja) * | 2004-04-30 | 2007-12-06 | アドヴァンスド カーディオヴァスキュラー システムズ, インコーポレイテッド | ヒアルロン酸系コポリマー |
JP2006028110A (ja) | 2004-07-20 | 2006-02-02 | Daiso Co Ltd | 1−アミド−3−(2−ヒドロキシフェノキシ)−2−プロパノール誘導体、ならびに2−アミドメチル−1,4−ベンゾジオキサン誘導体の製造法 |
JP2008136536A (ja) | 2006-11-30 | 2008-06-19 | Roiyaru:Kk | 陳列棚 |
WO2009026274A1 (en) | 2007-08-22 | 2009-02-26 | Medarex, Inc. | Site-specific attachment of drugs or other agents to engineered antibodies with c-terminal extensions |
JP2009074678A (ja) | 2007-08-31 | 2009-04-09 | Nippon Densan Corp | スラストプレートの製造方法、軸受装置、軸受装置の製造方法、およびスピンドルモータ |
WO2009074678A2 (en) | 2007-12-12 | 2009-06-18 | Eurand Pharmaceuticals Limited | Anticancer conjugates of camptothecin to hyaluronic acid |
JP2012504697A (ja) * | 2008-10-06 | 2012-02-23 | アドシア | 疎水性アルコール誘導体により置換されたカルボキシル官能基を含有する多糖類 |
WO2010053140A1 (ja) | 2008-11-05 | 2010-05-14 | 国立大学法人 東京医科歯科大学 | ヒアルロン酸誘導体、およびその医薬組成物 |
WO2010119994A1 (ja) * | 2009-04-17 | 2010-10-21 | 帝人株式会社 | 多糖類誘導体およびそのハイドロゲル |
JP2011148116A (ja) | 2010-01-19 | 2011-08-04 | Kawakami Sangyo Co Ltd | 吸湿発熱保温シート |
JP2012118189A (ja) | 2010-11-30 | 2012-06-21 | Brother Ind Ltd | 現像装置 |
WO2012118189A1 (ja) * | 2011-03-03 | 2012-09-07 | 中外製薬株式会社 | アミノ-カルボン酸により修飾されたヒアルロン酸誘導体 |
Non-Patent Citations (29)
Title |
---|
BERNHARD STUMP ET AL., ANTIBODY-DRUG CONJUGATES: LINKING CYTOTOXIC PAYLOADS TO MONOCLONAL ANTIBODIES |
BIOCONJUGATE CHEM. |
BIOCONJUGATE CHEM., vol. 10, 1999, pages 755 - 763 |
BIOCONJUGATE CHEM., vol. 19, 2008, pages 1319 - 1325 |
BIOCONJUGATE CHEM., vol. 19, 2008, pages 1960 - 1963 |
BIOCONJUGATE, vol. 19, 2008, pages 1319 - 1325 |
BIOMACROMOLECULES, vol. 8, 2007, pages 2190 - 2195 |
CARBOHYDRATE POLYMERS, vol. 62, 2005, pages 293 - 298 |
CARBOHYDRATE POLYMERS, vol. 86, 2011, pages 747 - 752 |
CARBOHYDRATE POLYMERS, vol. 87, 2012, pages 2211 - 2216 |
CELL AND TISSUE RESEARCH, vol. 243, 1985, pages 505 - 510 |
CLINICAL CANCER RESEARCH, vol. 10, 2004, pages 4822 - 4830 |
CLINICAL CANCER RESEARCH, vol. 14, 2008, pages 3598 - 3606 |
COLLOIDS AND SURFACES, vol. 112, 1996, pages 91 - 95 |
EUROPIAN JOURNAL OF CANCER, vol. 31, 1995, pages 766 - 770 |
EXPERT OPINION, vol. 15, 2005, pages 1087 - 1103 |
JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE, vol. 119, 2007, pages 245 - 252 |
JOURNAL OF DRUG TARGETING, vol. 16, 2008, pages 91 - 107 |
JOURNAL OF MATERIALS CHEMISTRY, vol. 19, 2009, pages 4102 - 4107 |
MACROMOLECULES, vol. 26, 1993, pages 3062 - 3068 |
MOLECULAR PHARMACEUTICS, vol. 5, 2008, pages 474 - 486 |
NANOMEDICINE: NANOTECHNOLOGY, BIOLOGY, AND MEDICINE, vol. 3, 2007, pages 246 - 257 |
NEOPLASIA, vol. 6, 2004, pages 343 - 353 |
PHARMACEUTICAL RESEARCH, vol. 19, 2002, pages 396 - 402 |
See also references of EP2894173A4 |
SEIICHI NAKAHAMA ET AL.: "Essential Polymer Science", KODANSHA LTD. |
T.W. GREENE; P.G.M. WUTS: "Protective Groups in Organic Synthesis", 1999, JOHN WILEY SONS, INC. |
THE BIOCHEMICAL JOURNAL, vol. 200, 1981, pages 415 - 424 |
THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, vol. 275, 2000, pages 37733 - 37741 |
Cited By (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPWO2016159159A1 (ja) * | 2015-03-31 | 2018-01-25 | キユーピー株式会社 | ヒアルロン酸誘導体およびその製造方法、ならびにヒアルロン酸誘導体を含む化粧料、食品組成物および医薬組成物 |
US11389539B2 (en) | 2016-05-11 | 2022-07-19 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Hyaluronic acid derivatives into which cationic and hydrophobic groups are introduced |
JPWO2017195880A1 (ja) * | 2016-05-11 | 2019-03-22 | 中外製薬株式会社 | カチオン性基および疎水性基が導入されたヒアルロン酸誘導体 |
WO2017195880A1 (ja) * | 2016-05-11 | 2017-11-16 | 中外製薬株式会社 | カチオン性基および疎水性基が導入されたヒアルロン酸誘導体 |
JP2021500436A (ja) * | 2017-10-26 | 2021-01-07 | ジョインセラピュイティクス エッセ.エッレ.エッレ. | 炎症症状の治療における官能化ヒアルロン酸またはその誘導体 |
JP7277452B2 (ja) | 2017-10-26 | 2023-05-19 | ジョインセラピュイティクス エッセ.エッレ.エッレ. | 炎症症状の治療における官能化ヒアルロン酸またはその誘導体 |
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