UA97469C2 - Гуманізована специфічна до cd37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну - Google Patents

Гуманізована специфічна до cd37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну Download PDF

Info

Publication number
UA97469C2
UA97469C2 UAA200802255A UAA200802255A UA97469C2 UA 97469 C2 UA97469 C2 UA 97469C2 UA A200802255 A UAA200802255 A UA A200802255A UA A200802255 A UAA200802255 A UA A200802255A UA 97469 C2 UA97469 C2 UA 97469C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
specific
humanized
cells
immunoglobulin
binding
Prior art date
Application number
UAA200802255A
Other languages
English (en)
Russian (ru)
Inventor
Лаура Сью Гросмейр
Марта Сюзан Хайден-Ледбеттер
Джеффрі А. Ледбеттер
Пітер Армстронг Томпсон
Санді Алєксандер Саймон
Уільям Бред
Original Assignee
Емерджент Продакт Дівелопмент Сіетл, Елелсі
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=37683960&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=UA97469(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Емерджент Продакт Дівелопмент Сіетл, Елелсі filed Critical Емерджент Продакт Дівелопмент Сіетл, Елелсі
Publication of UA97469C2 publication Critical patent/UA97469C2/uk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2887—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD20
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3061—Blood cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/53—Hinge
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/72—Increased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/75—Agonist effect on antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Obesity (AREA)

Abstract

Винахід належить до гуманізованої специфічної до CD37 зв’язувальної молекули імуноглобуліну (одноланцюжкового SMIP поліпептиду TRU-016), виділеної молекули нуклеїнової кислоти, що її кодує. Винахід також належить до фармацевтичної композиції, що містить таку гуманізовану молекулу, а також до лікування захворювання, пов’язаного з аберантною активністю В-клітин.

Description

Дана заявка заявляє пріоритет згідно 5119 35 Ш.5.С. заявки на патент США Ме 60/702499, поданої 25 липня 2005 р., заявки на патент США Ме 60/798344, поданої 16 травня 2006 р., кожна з яких в повному об'ємі включена посиланням.
Даний винахід в основному належить до способів зниження кількості В-клітин у індивідуума з використанням СО37-специфічних зв'язувальних молекул. Зокрема, винахід належить до способів зниження кількості В-клітин з використанням тільки одних СО37-специфічних зв'язувальних молекул або комбінації
СО37-специфічних зв'язувальних молекул і СО20-специфічних зв'язувальних молекул, у деяких випадках синергічної комбінації. Винахід додатково належить до речовин і способів лікування захворювань, що включають аномальну активність В-клітин.
У звичайній ролі імунна система людини захищає організм від пошкоджень в результаті впливу чужорідних речовин і патогенів. Один шлях, за допомогою якого імунна система захищає організм, полягає в продукуванні спеціалізованих клітин, які називаються В-лімфоцитами або В-клітинами. В-клітини продукують антитіла, які зв'язуються з чужерідною речовиною або патогеном і в деяких випадках опосередковують їх руйнування.
У той же час в деяких випадках імунна система людини і, зокрема, В-лімфоцити імунної системи людини, стають пошкодженими і приводять до розвитку захворювання. Існують численні злоякісні пухлини, патогенез яких включає неконтрольовану проліферацію В-клітин. Також є численні аутоїмунні захворювання, в розвитку яких бере участь продукування В-клітинами антитіл, які замість зв'язування з чужерідними речовинами і патогенами зв'язуються з системами організму. Такі антитіла в деяких випадках називають аутоантитілами.
Крім того, є численні аутоімунні і запальні захворювання, які включають патологію В-клітин, наприклад, у вигляді неадекватної презентації антигену В-клітинами для Т-клітин, або інших шляхів, в яких беруть участь
В-клітини.
Наприклад, у мишей, схильних до аутоїмунних захворювань з дефіцитом В-клітин, не відбувається розвитку аутоїмунного захворювання нирок, васкуліту або продукування аутоантитіл. Дивись Зпіотеніс еї аї.,.).
Ехр. Мед., 180: 1295-306 (1994). Цікаво, що у тих же мишей, схильних до аутоіїмунних захворювань, які мають
В-клітини, але з недостатністю продукування імуноглобулінів, відбувається розвиток захворювань в експерименті, як описано Спап еї аї., 9). Ехр. Мед., 189: 1639-48 (1999), цей факт вказує на те, що В-клітини відіграють істотну роль в розвитку аутоїмунних захворювань.
В-клітини можна ідентифікувати по молекулах на їх клітинній поверхні. СО2О була першою людською диференціювальною, специфічною для В-клітин поверхневою молекулою, ідентифікованою за допомогою моноклональних антитіл. Вона являє собою неглікозильований, гідрофобний В-клітинний трансмембранний фосфопротеїн масою 35 кДа, у якого обидва - аміно- і карбоксикінці - розташовані всередині клітини. Дивись
ЕїпгеїЇа еї аї., ЕМВО 9., 7: 711-17 (1998). СО2О експресується всіма нормальними зрілими В-клітинами, але не експресується попередниками В-клітин або плазматичними клітинами. Природні ліганди для СО20 не встановлені, і повністю ще не зрозуміла функція СО2О в біології В-клітин.
Іншою диференціювальною, специфічною для В-клітин поверхневою молекулою є СО37. СО37 представляє сильно глікозильований білок масою 40-52 кДа, який належить до чотиривимірного трансмембранного сімейства клітинних поверхневих антигенів. Він перетинає клітинну мембрану чотири рази, утворюючи дві позаклітинні петлі і розташовуючи свої аміно- і карбоксикінці в цитоплазмі. СО37 інтенсивно експресується на нормальних продукуючих антитіла (5Ід--) В-клітинах, але не експресується на попередниках
В-клітин або плазматичних клітинах. Експресія СО37 на спочиваючих і активованих Т-клітинах, моноцитах і гранулоцитах є низькою, і відсутня скільки-небудь детектована експресія СО37 на природних клітинах-кілерах, тромбоцитах або еритроцитах. Дивись Веїом еї а!., Сапсег Нев, 61(11): 4483-4489 (2001); Зспмуап-А!ріє? вї аї.,
У. Іттипої, 140(3): 905-914 (1988) і ГіпК еї аї, у. Іттипої!, 137(9): 3013-3018 (1988). Крім нормальних В-клітин, майже всі злоякісні клітини, похідні В-клітин, є позитивними на експресію СО37, включаючи СІ, МНІ і волосатоклітинної лейкемії (Мооге еї аї. доцгтта! ої РаШоіоду, 152: 13-21 (1987); Мегзоп апа Вгоснієвг,
Іттипоіоду І ецегв, 19: 269-272 (1988) і Рацге єї а), Атепсап уошигпаї! ої Оегпптаїораййооду, 12(3) (1990)). СО37 бере участь в регуляції функції В-клітин, оскільки було встановлено, що у мишей з відсутністю СО37 є низькі рівні да в сироватці крові і порушення у них гуморальної відповіді на вірусні антигенні і модельні антигени.
Виявилося, що він функціонує як некласична костимуляторна молекула або при безпосередньому впливі на презентацію антигену за допомогою утворення комплексу з молекулами МНС класу ІІ. Дивись Кпобеїйосн еї аї.,
Мої. Сеї! Віоі., 20(15): 5363-5369 (2000). Також ймовірно, що СОЗ37 відіграє роль в передачі сигналів ТОВ.
Дивись Мап 5ргтівї! евї а!., У. Іттипої., 172: 2953-2961 (2004).
Проводили дослідження і розробляли лікарські препарати на основі концепції, що диференціювальні, специфічні для В-клітин поверхневі молекули, такі як СО37 або СО20, можуть самі представляти мішені для антитіл, які будуть зв'язуватися з ними і опосередковувати руйнування В-клітин, що приводять до розвитку злоякісних або аутоїмунних захворювань, які мають на їх поверхні СО37 або СО20. Названі засобами «імунотерапії» антитіла, отримані (або на основі отриманих антитіл) на тваринах, відмінних від людини, які зв'язуються з СОЗ37 або СО20, вводили пацієнтам для виснаження В-клітин, що приводять до розвитку злоякісних або аутоїмунних захворювань.
Одне антитіло проти СО37 мітили "35 і проводили його тестування в клінічних випробуваннях для лікування МНІ.. Дивись Ргезз еї аї., 9. Сіїп. Опсої., 7(3): 1027-1038 (1989); Вегпвівїп єї аі., Сапсег Нев. (З!иррі.), 50: 1017-1021 (1990); Ргезз єї аї., Егопі. Вадіаї. Тег. Опсої., 24: 204-213 (1990); Ргезз еї аї., Адм. Ехр. Меа. Віої, 303: 91-96 (1991) і Вгомуп єї аІї, Мисі. Меа. Віої, 24: 657-663 (1997). Антитіло, МВ-1, являє собою мишаче моноклональне Ідсі-антитіло, у якого відсутні опосередковані Ес ефекторні функції, такі як антитілозалежна клітинна цитотоксичність (АОСС), і МВ-1 не придушує зростання пухлин на моделі ксенотрансплантатів в умовах іп мімо, якщо тільки в нього не введена ізотопна мітка (Висизрацт еї аії. Сапсег Вез, 52(83): 6476-6481 (1992). Спостерігали сприятливий розподіл 1351-МВ-1 у пацієнтів з лімфомою при низькому пухлинному навантаженні («1 кг), і лікування даних пацієнтів приводило до повної ремісії пухлин протягом 4-11 місяців (Ргез5 евї аї, 1989 і Вегпзівїп єї аї, 1990).
Крім того, досліджували імунокон'югат, що складається з лікарського препарату адріаміцину, пов'язаного з
(і28-1, іншим антитілом проти СО37, на мишах і спостерігали ефекти, що виявляються через інтерналізацію і внутрішньоклітинне вивільнення препарату. Дивись ВгазіамеКку єї аїЇ., Сапсег Іттипої. ІттипоїНег., З39(6): 367-374 (1991).
Різні науково-дослідні групи застосовували антитіла проти СО20 для лікування пов'язаних з В-клітинами захворювань. Один спосіб лікування складається із застосування антитіл проти СО20, отриманих у вигляді радіонуклідів, для лікування В-клітинної лімфоми (наприклад, антитіл проти СО20, мічених "З'І), а також у вигляді мічених 895г для полегшення болів в кістках, викликаних метастазами злоякісної пухлини простати і молочної залози (Епдо, Сап То Кадаки Вуопо, 26: 744-748 (1999)).
Інша група дослідників розробила химерне моноклональне антитіло проти СО20, що складається з варіабельних областей важкого і легкого ланцюгів мишачого походження, злитих з константними областями важкого ланцюга людського ІДС і людського легкого ланцюга каппа. Повідомлялося, що химерне антитіло зберігало здатність до зв'язування з СО20 і здатність опосередковувати АОСС і фіксувати комплемент. Дивись
Ши еї аї., 9У. Іттипо!ї., 139: 3521-26 (1987). Ще одне химерне анти-СО20-антитіло було отримане з ІЕС гібридоми С2В8, і воно було назване ритуксимабом. Вважають, що механізм протипухлинної дії ритуксимабу полягає в комбінації декількох активності, включаючи АЮСС, фіксацію комплементу і «запуск» сигналів, які сприяють апоптозу злоякісних В-клітин, хоч великий розмір химерного антитіла перешкоджає оптимальній дифузії молекули в лімфоїдні тканини, які містять злоякісні В-клітини, що обмежує його протипухлинну активність. АОСС являє собою опосередковану клітинами реакцію, в якій неспецифічні цитотоксичні клітини, які експресують Ес-рецептори (ЕСА) (наприклад, природні клітини-кілери (МК), нейтрофіли і макрофаги) розпізнають пов'язане антитіло на клітині-мішені і потім викликають лізис клітини-мішені. Фіксація комплементу або комплемент-залежна цитотоксичність (СОС) представляє здатність молекули лізувати мішень в присутності комплементу. Шлях активації комплементу ініціюється зв'язуванням спочатку першого компонента системи комплементу (Сід) з молекулою (наприклад, антитілом), пов'язаним зі «своїм» антигеном. Великий розмір молекули ритуксимабу перешкоджає оптимальній дифузії молекули в лімфоїдні тканини, які містять злоякісні В-клітини, що обмежує його протипухлинну активність.
Як правило, ритуксимаб, що вводиться у вигляді курсу інфузій раз на 4 тижні, в цей час застосовують для лікування низьких стадій лімфоми або фолікулярної неходжкінської лімфоми (Ме! ацоніїп еї а!., Опсоіоду, 12: 1763-1777 (1998); Гедеї еї аї., Си. Оріп. Опсої!., 10: 548-551 (1998)| і на стадіях рецидивування Ш/М фолікулярної лімфоми |МУніїе еї аї., Рпагпт. сі. Тесппої. Тодау, 2: 95-101 (1999)). Інші захворювання, що піддаються лікуванню ритуксимабом, включають фолікулярну центральноклітинну лімфому (ЕСС), покривноклітинну лімфому (МСІ), дифузну великоклітинну лімфому (0І СІ) і дрібноклітинну лімфоцитарну лімфому (5І І) |Моцуеп еї аї., Єиг. у). Наєтай)і., 62: 76-82 (1999)). Ритуксимаб, що вводиться курсом інфуз разів на тиждень, також застосовують для лікування СІ ГІ | п єї аі., ЗХет. Опсої., 30: 4683-92 (2003).
Також антитіла проти СО20 використовували для лікування пацієнтів, які страждають на аутоімунні захворювання, асоційовані з продукуванням В-клітинами аутоантитіл. Наприклад, було показано, що ритуксимаб володіє високою лікувальною ефективністю в зниженні кількості СО20- В-клітин у пацієнтів з аутоїмунними/запальними захворюваннями, включаючи НА |(Едмжагав, М. Епаді. У. Меа, 350: 2546-2548 (2004);
Сатрбгідде еї аї., Аппгйв Апейт., 48: 2146-54 (2003)). Пацієнти з ВА протягом тривалого часу отримували метотрексат (МТУ) і курс інфузій ритуксимабу з 4 введень (Едмагав, дивись вище). У даних пацієнтів відмічали підвищені реакції по оцінній шкалі Атегісап СоПеде ої Апешйтайіоду (АСВ) в порівнянні з контрольними групами.
У випробуваннях за оцінкою лікування системного червоного вовчака (51 Е) |І єапаго еї а!., Айппів Анеит., 46: 2673-2677 (2002)| пацієнтам вводили дві інфузії з високою дозою ритуксимабу, і було показане зниження числа В-клітин і поліпшення стану пацієнтів. У другому дослідженні для зменшення числа В-клітин при 5 Е оопеу еї аї., Апппїів Апейт., 50: 2580-2589 (2004)| пацієнтам вводили одну інфузію в дозі 100 мг/м? (низька доза), одну інфузію в дозі 375 мг/м? (проміжна доза) або у вигляді 4 інфузій (з інтервалом в 1 тиждень) в дозі ритуксимабу 375 мг/м? (висока доза). У даних пацієнтів спостерігали зниження кількості В-клітин і поліпшену оцінку стану в балах, але лікування не приводило до зміни рівня аутоантитіл. Були проведені випробування ритуксимабу при макроглобулінемії Вальденстрема |Тгеоп еї аї., Іттипоїпегар., 24: 272-279 (2000)), і у пацієнтів спостерігали підвищення рівня гематокриту (НСТ) і кількості тромбоцитів (РІ Т) після 4 інфузій ритуксимабу.
Недавні повідомлення за оцінкою лікування ритуксимабу у пацієнтів, які страждають розсіяним склерозом, аутоїмунним захворюванням, що уражає центральну нервову систему, показали, що курс лікування приводить до виснаження периферичних В-клітин, але надає слабу дію на рівень В-клітин в спинномозковій рідині.
Дивись Мопзоп еї а!., Агоп. Меийго!., 62: 258-264 (2005).
Додаткові публікації, що стосуються застосування ритуксимабу, включають: біавні еї а). «Ейихітар спітетйс апі-СО20 топосіопа! апіїроду ігеайтепі ог адийе5 м/йп спгопіс іаіїораїйіс (готросуюрепіс ригрига»
Віоса 98: 952-957 (2001); Майпему5, К. «Медіса! Негеїїсв» Мем Зсіепіїві (7 Арг., 2001); Геапаго еї аї. «Сііпіса! оцсоте іп 22 раїепів мйй "пеитайоіа апнтйіз (геагеа м/п В І утрпосуїе деріебоп» Апп. Кпешйт. Оі5. 61: 833-888 (2002); Геапаго еї аІ. «Гутрпосуїе дерієїоп іп гпепитаїйоїй агінгйів: еапу емідепсе (ог заїеїу, ейісасу апа дозе гезропзе. Ап апа Апештаїївт 44(9): 5370 (2001); І еапаго еї а). «Ап ореп 5щшау ої В Іїутрпосуїе дерієйоп іп зузіетіс Іри егуїпетайозив5», Агіпгйіз Кпецт. 46: 2673-2677 (2002); Едмагаз еї а). «5ивіаіпей ітргометепі іп
Шешитаїйосій апніийів оПоміпуд а ргоїюсої! аезідпей юю дерієїе В ІМтрпосуїез» КПпешптаїйоІоду 40: 205-211 (2001);
Еамжагаз еї аї. «В--Уутрпосуїте деріейоп іп пештаїйоій аппгйі5 апа ошШтег ашоіїттипе аізогаег5» Віоспет. 5об.
Тгапев. З0(4): 824-828 (2002); Едулагаз еї аї. «Ейпісасу апа загїеїу ої гпихітабр, В-сеї! гагдеїей спітепйс топосіопаї апіїбоду: а гапдотізей, ріасеро сопігоїеа їгіаІ іп райепіб м/йп гпештаїйоїай апйгйів» Агпійгйі5 Кпейт. 46: 5197 (2002); Геміпе еї аї. «ІДМ апіроау-геіагй роіупеигораїШієв: В-сеї!! аеріейоп спетоїпегару изіпд гіихітар»
Мецйгоіюду 52: 1701-1704 (1999); Оеміа еї аї. «ЕПісасу ої зеІесіїме В-сеї! ріосКаде іп їгєаїтепі ої пПешитайтюій аппгйів» Апйгйі5 КПпепт. 46: 2029-2033 (2002); Нідазпіда єї аІ. «Ттеайтепі ої ОМАНО-геїгасіюгу пПештайоій апп м/йп гіихітар». Ргезепівей аї Аппиа! Зсіепійіс Мееїйіпд ої Ше Атегісап СоПеде ої КпештасоіІоду; Осіорег
24-29; Мем Опієапв, Га. 2002; Тивзса Ме еї а). «Зиссезвіці ігеаїтепі ої іпйїхітар-геїгасюгу пештаїйсій аппгйів мкл гпихітар». Ргезепієй аї Аппиа! бсієпійс Мееїїіпд ої Ше Атегісап СоПеде ої Апеитайоіоду; Осіорег 24-29; Мем
ОпПеапзв, Іа. 2002.
Проблеми, пов'язані з лікуванням ритуксимабом, залишаються. Наприклад, у більшості пацієнтів зі злоякісними пухлинами після лікування ритуксимабом виникають рецидиви, як правило, протягом 6-12 місяців, і повідомлялося про реакції на інфузії препарату зі смертельним кінцем. Дані фатальні реакції розвивалися після прояву комплексу реакцій на інфузію, що включає гіпоксію, інфільтрати в легенях, гострий респіраторний дистрес-синдром, інфаркт міокарда, фібриляцію шлуночків або кардіогенний шок. Також повідомлялося про гостру ниркову недостатність, для купірування якої був потрібен діаліз, з випадками смертельного кінця при використанні синдрому лізису пухлини після лікування ритуксимабом, з мукошкірними реакціями, в деяких випадках з фатальним кінцем. Крім того, для внутрішньовенної ін'єкції потрібні високі дози ритуксимабу, оскільки молекула є великою, приблизно 150 кДа, і, як вже відмічалося вище, проникнення в лімфоїдні тканини, де знаходиться велика кількість пухлинних клітин, обмежене.
В результаті того, що нормальні зрілі В-клітини також експресують СО37 і СО20, кількість нормальних
В-клітин знижується під дією лікування антитілами проти СОЗ37 (Ргез5 вї а), 1989) або антитілами проти СО20
ІВей еї аї., Віоса, 83: 435-445 (19943). Однак після закінчення лікування нормальні В-клітини можуть регенеруватися з попередників В-клітин, негативних на СО37 і СО20; отже, у пацієнтів після лікування антитілами проти СО37 і СО20, відсутня значна імуносупресія.
Технологія моноклональних антитіл і методи генної інженерії дозволили отримувати молекули імуноглобулінів для діагностики і лікування захворювань у людини. Інженерію білків застосовували для підвищення афінності антитіла для «свого» антигену зі зведенням до мінімуму проблем, пов'язаних з імуногенністю, і для зміни ефекторних функцій антитіл. Структура домену імуноглобулінів зазнає методів генної інженерії в тому плані, що антигензв'язувальні домени і домени, відповідальні за ефекторні функції, можна міняти між імуноглобулінами різних класів і підкласів. Огляд по структурі і функціях імуноглобулінів приведений, наприклад, у Напому єї аї., Едв., Апіїродієв: а Іарогаїогу тапицаї, спарієг 14, Соїй бріпд Нагбог
І арогаїогу, Соїа бргіпд Натог (1988). Глибоке введення в цю проблему, а також докладну інформацію майже про всі аспекти рекомбінантної технології антитіл можна знайти в книзі «Несотрбіпапі Апіїбодієв» (Чопп УМ/ієу 5
Боп5, МУ, 1999). Вичерпне узагальнення докладних лабораторних протоколів генної інженерії антитіл можна знайти у А. Копієптапп апа 5. ЮОШире! (едв5.) «Те апіїрбоду епдіпеегіпд Іїар тапиа!» (Зргіпдег Мепад,
НеїдеІрего/Мем могКк, 2000).
Недавно були сконструйовані більш дрібні молекули імуноглобулінів для подолання проблем, пов'язаних з терапією цілими молекулами імуноглобулінів. Одноланцюжкові фрагменти Ем (зсЕм) містять варіабельну область важкого ланцюга антитіла, пов'язаного коротким пептидом-лінкером з варіабельною областю легкого ланцюга антитіла (Нивіоп еї аї., Рос. Май. Асай. сі. ОБА, 85: 5879-5883 (1988) В доповнення до варіабельних областей кожен з ланцюгів антитіла має одну або більше константних областей. Легкі ланцюги мають одну константну область. Таким чином, легкі ланцюги мають одну варіабельну область і одну константну область. Важкі ланцюги мають декілька константних областей. Важкі ланцюги в Ідс-, ІдА- і
ІдО-антитілах мають три константні області, що позначаються СНІ, СН2 і СНЗ, і важкі ланцюги в ІдмМ- і
ІдЕ-антитілах мають чотири константні області, що позначаються СНІ, СН2, СНЗ їі СНА. Таким чином, важкі ланцюги мають одну варіабельну область і три або чотири константні області.
Також важкі ланцюги імуноглобулінів можна розділити на три функціональні області: Ба-область (фрагмент, що включає МН і СНІ, тобто два М-кінцевих домени важкого ланцюга), шарнірну область і
Ес-область («кристалізований фрагмент», отриманий з константних областей і що утворився після розщеплення пепсином). Бд-область в комбінації з легсим ланцюгом утворює Раб («антигензв'язувальний фрагмент»). Оскільки антиген буде стереохімічно взаємодіяти з антигензв'язувальною областю на аміноконці кожного Рар, молекула Ідсї є двовалентною, тобто вона може зв'язуватися з двома молекулами антигену. Ес містить домени, які взаємодіють з рецепторами імуноглобуліну на клітинах і з первинними елементами каскаду комплементу. Таким чином, як правило, вважається, що Ес-фрагмент відповідальний за ефекторні функції імуноглобуліну, такі як зв'язування комплементу і зв'язування з Ес-рецепторами.
За рахунок невеликого розміру молекул 5сЕм вони мають дуже високий кліренс з плазми крові і тканин і володіють більш ефективним проникненням в тканини в порівнянні з цілими молекулами імуноглобулінів. У 5СЕм з протипухлинною дією мало місце більш швидке проникнення в пухлину і більш рівномірний розподіл в масі пухлини в порівнянні з відповідним химерним антитілом (ХокКоїа еї а!., Сапсег Везв., 52, 3402-3408 (1992).
Злиття 5сЕм з іншою молекулою, такою як токсин, володіє перевагою здатності до специфічного зв'язування з антигеном, а невеликий розмір зсЕм сприяє доставці токсину в тканину-мішень (Спацаагу еї аї., Майшге, 339: 394 (1989); Ваїга єї а!., Мої. Се. Вісі, 11:2200(1991)).
Незважаючи на переваги молекул 5сЕм існує декілька недоліків при їх застосуванні Незважаючи на те, що високий кліренс зсСЕМ може привести до зниження токсичних ефектів в нормальних клітинах, такий високий кліренс може перешкоджати доставці мінімально ефективної дози в тканину-мішень. Ставиться під сумнів виробництво адекватних кількостей 5сЕм для введення пацієнтам за рахунок труднощів, виникаючих при експресії і виділенні 5сРм, які впливають негативний чином на вихід продукту. Під час експресії молекули зсЕм втрачають стабільність і часто піддаються агрегації за рахунок зв'язування варіабельних областей з різних молекул. Крім того, рівні отримання молекул зсЕм в експресуючих системах ссавців є низькими, що обмежує ефективне отримання молекул 5сЕм для застосування в терапії (Оаміз еї аїЇ., 9У. Віоспет. Спет., 256: 10410-10418 (1990); Тгашпескег єї аі., ЕМВО 9., 10: 3655-3659 (1991)). Розробляли стратегії для підвищення продукування, включаючи введення сайтів глікозилювання у варіабельні області ові, С.А., патент СІЛА Мо 5888773; 9о51 еї а/., у. Віої. Снет., 69: 26267-26273 (1994).
Іншим недоліком застосування зсЕм для терапії є відсутність у них ежекторної функції. 5сЕмМ без вияву цитолітичних функцій, АОСС і комплемент-залежної цитотоксичності (СОС), пов'язаних з константною областю імуноглобуліну, можуть бути не ефективними для лікування захворювань. Незважаючи на те, що розробка технології застосування 5сЕм почалася більш ніж 12 років тому, в цей час відсутні продукти на основі 5сгЕм, дозволені для лікування.
Альтернативно було висловлене припущення, що злиття зсЕм з іншою молекулою, такою як токсин, може мати перевагу специфічної антигензв'язувальної активності, а невеликого розміру 5сЕм сприяє доставці токсину до тканини-мішені. Спацдагу єї а!., Майшге, 339: 394 (1989); Ваїга еї а!., Мої. СеїІ. Віої, 11: 2200 (1991).
Таким чином, кон'югація або злиття токсинів з 5сЕм були запропоновані як альтернативна стратегія для забезпечення ефективних, антигенспецифічних молекул, але введення таких кон'югатів або химерних молекул може обмежуватися в зв'язку з наявністю високої і/або неспецифічної токсичності за рахунок наявності групи токсину в таких препаратах. Токсичні ефекти можуть включати підвищення активності ферментів печінки вище фізіологічного рівня і судинний синдром, а також вияв інших небажаних ефектів. Крім того, імунотоксини самі по собі є імуногенними при введенні хазяю, і антитіла хазяя, продуковані проти імунотоксинів, також будуть обмежувати потенційну застосовність при повторних терапевтичних курсах лікування.
Інші генно-інженерні рекомбінантні білки, які називаються малими модуляторними імунофармацевтичними (ЗМІР"М) продуктами, описані в спільних патентних публікаціях США 2003/133939, 2003/0118592 і 2005/0136049 і спільних міжнародних патентних публікаціях М/О02/056910, УУО2005/037989 ії М/О2005/017148, які включені тут посиланням. Продукти З5МІР"М являють собою нові, на основі зв'язувального домену імуноглобулінів рекомбінантні білки, які містять зв'язувальний домен для «своєї» структури, такої як антиген, протирецептор або тому подібне; шарнірну область поліпептиду ІДС, (ДА або (ДЕ або мутантну шарнірну область поліпептиду да, що містить нуль, один або два залишки цистеїну; і області СН2 і СНЗ імуноглобуліну.
Продукти З5МІР "М здатні до вияву АЮСС і/або СОС.
Незважаючи на те, що проводилися інтенсивні дослідження по терапії, основаній на застосуванні антитіл, в даній галузі залишається потреба у вдосконалених способах лікування захворювань, асоційованих з аномальною активністю В-клітин. Описані і заявлені тут способи за даним винаходом забезпечують такі вдосконалені способи, а також їх переваги.
Суть винаходу
Даний винахід належить до способів зниження кількості В-клітин з використанням СОЗ37-специфічних зв'язувальних молекул. У деяких способах за винаходом застосування комбінацій СО37-специфічних зв'язувальних молекул (однієї або білоше СО37-специфічних зв'язувальних молекул) і СО20-специфічних зв'язувальних молекул (однієї або більше СО20-специфічних зв'язувальних молекул) приводить до підвищеного зниження кількості В-клітин. У деяких з даних способів комбінації є синергічними. У близькому аспекті винахід належить до способу лікування індивідуума, що має захворювання або з підозрою на наявність захворювання, асоційованого з аномальною активністю В-клітин.
Також даний винахід належить до гуманізованих СО37-специфічних зв'язувальних молекул (наприклад, гуманізованих конструкцій ТАШО-016) і способів зниження кількості В-клітин з використанням таких молекул. У деяких варіантах здійснення способів за винаходом передбачається застосування комбінацій гуманізованих конструкцій ТАШ-016 з однією або білоше СО37-специфічними зв'язувальними молекулами. У іншому аспекті винахід належить до способів лікування індивідуумів, що мають захворювання або з підозрою на наявність захворювання, асоційованого з аномальною активністю В-клітин. Пов'язані аспекти винаходу належать до способів профілактики будь-якого такого захворювання і способів ослаблення симптому, пов'язаного із захворюванням, що включає введення дози гуманізованої СО37-специфічної зв'язувальної молекули, ефективної для лікування і профілактики такого захворювання або ослаблення симптому такого захворювання. «Аномальна активність В-клітин» належить до активності В-клітин, яка відрізняється від нормального, правильного або передбачуваного характеру. Наприклад, аномальна активність В-клітин може включати неадекватну проліферацію клітин, ДНК або інші клітинні компоненти яких стали пошкодженими або дефектними. Аномальна активність В-клітин може включати проліферацію клітин, характеристики якої пов'язані із захворюванням, викликаним, опосередкованим або що виник внаслідок неадекватно високих рівнів розподілу клітин, неадекватно низьких рівнів апоптозу або обох факторів разом. Для таких захворювань може бути характерна, наприклад, одинична або множинна локальна аномальна проліферація клітин, груп клітин або тканини(ин), незалежно від того, є вони раковими або не раковими, доброякісними або злоякісними.
Аномальна активність В-клітин також може включати аномальне продукування антитіл, таке як продукування аутоантитіл, або дуже підвищене продукування антитіл, як правило, бажаних при нормальних рівнях.
Передбачається, що аномальна активність В-клітин може мати місце в деяких субпопуляціях В-клітин і бути відсутнім в інших субпопуляціях. Також аномальна активність В-клітин може включати неадекватну стимуляцію Т-клітин, виникаючу внаслідок неадекватної презентації В-клітинами антигену для Т-клітин, або здійснювану іншими шляхами з участю В-клітин. «Лікування» або «проведення лікування» належить до терапевтичного лікування або профілактичного/лревентивного лікування. Внаслідок терапевтичного лікування може ослабитися щонайменше один симптом захворювання у індивідуума, який отримує лікування, або може сповільнитися прогресування захворювання у індивідуума, або воно може привести до попередження початку розвитку додаткових пов'язаних захворювань. «Терапевтично ефективна доза» або «ефективна доза» СО20-специфічної зв'язувальної молекули належить до кількості сполуки, достатньої для того, щоб привести до ослаблення одного або більше симптомів захворювання, яке лікується. По відношенню до окремого активного інгредієнта, що вводиться одному, терапевтично ефективна доза належить до даного одного інгредієнта. По відношенню до комбінації терапевтично ефективна доза належить до об'єднаних кількостей активних інгредієнтів, які приводять до вияву терапевтичного ефекту, незалежно від того, вводять їх послідовно або одночасно. У винаході, зокрема, передбачається, що одну або більше специфічних зв'язувальних молекул можна вводити згідно з способами за винаходом, кожну в ефективній дозі. «Індивідуум, що має захворювання або з підозрою на наявність захворювання, асоційованого з аномальною активністю В-клітин», являє собою індивідуума, у якого захворювання або симптом порушення можуть бути викликані аномальною активністю В-клітин, можуть загостритися внаслідок аномальної активності
В-клітин або можуть послабитися при відповідній регуляції активності В-клітин. Прикладами таких захворювань є В-клітинне злоякісне захворювання (наприклад, В-клітинна лімфома, В-клітинна лейкемія або
В-клітинна мієлома), захворювання, для якого характерне продукування аутоантитіл, або захворювання, що характеризується невідповідною презентацією антигену В-клітинами для Т-клітин, або викликане іншими шляхами з участю В-клітин.
У одному зразковому аспекті у індивідуума, який піддається лікуванню способами за винаходом, відмічається реакція у відповідь на лікування, яка сильніша або вища в порівнянні з реакцією у відповідь на лікування ритуксимабом. Реакція, яка є сильніша в порівнянні з такою, що спостерігається при лікуванні ритуксимабом, належить до вияву клінічної реакції у відповідь, коли лікування способом за винаходом приводить до клінічної реакції у відповідь у пацієнта, яка сильніша в порівнянні з клінічної реакцією у відповідь у пацієнта, який отримує лікування ритуксимабом, таким як ритуксан. Більш висока реакцію у відповідь оцінюється при порівнянні клінічних показників, добре відомих в даній галузі і описаних тут. Зразкові показники включають, але не обмежуються цим, тривалість зниження кількості В-клітин, зниження кількості В-клітин в цілому, зниження кількості В-клітин в біологічній пробі, зменшення розміру пухлин, зменшення кількості пухлин вже наявних і/або які з'являються після лікування, і більш висока реакція у відповідь за оцінкою самих пацієнтів і лікарів, наприклад, з використанням міжнародного прогностичного індексу. Поліпшення може мати місце по одному або більше ніж одному клінічному показнику. Більш сильна реакція при застосуванні способу за винаходом може бути за рахунок неадекватної реакції на попереднє або дане лікування ритуксимабом, наприклад, внаслідок вияву токсичності і/або неадекватної ефективності лікування ритуксимабом.
В-клітинні злоякісні захворювання включають В-клітинні лімфоми (такі як різні форми хвороби Ходжкіна, неходжкінськая лімфома (МНІ) або лімфоми центральної нервової системи), лейкемія (такі як гостра лімфобластна лейкемія (АГ), хронічна лімфоцитарна лейкемія (СІ), волосатоклітинна лейкемія і хронічна мієлобластна лейкемія) і мієломи (такі як множинна мієлома). Додаткові В-клітинні злоякісні захворювання включають дрібноклітинну лімфоцитарну лімфому, В-клітинну пролімфоцитарну лейкемію, лімфоплазмоцитарну лімфому, лімфому маргінальної зони селезінки, плазмоцитарну мієлому, солітарну плазмоцитому кісток, позакісткову плазмоцитому, екстранодулярну В-клітинну лімфому маргінальної зони, пов'язану зі слизовою лімфоїдної тканини (МАТ), нодулярну В-клітинну лімфому маргінальної зони, фолікулярну лімфому, покривноклітинну лімфому, дифузну великоклітинну В-клітинну лімфому, великоклітинну В-клітинну лімфому середостіння (тимусу), внутрішньосудинну великоклітинну В-клітинну лімфому, первинну ефузійну лімфому, лімфому Беркітта/лейкемії, проліферації В-клітин невизначеного злоякісного значення, лімфоматоїдний грануломатоз і лімфопроліферативне порушення після трансплантації.
Порушення, що характеризуються продукцією аутоантитіл, часто розцінюють як аутоїмунних захворювання. Аутоїмунні захворювання включають, але не обмежуються цим: артрит, ревматоїдний артрит, юнацький ревматоїдний артрит, остеоартрит, поліхондрит, псоріатичний артрит, псоріаз, дерматит, поліміозит/дерматоміозит, міозит з включеннями, запальний міозит, токсичний епідермальний некроліз, системну склеродерму і склероз, синдром САЕЗ5Т, реакції, пов'язаний із запальним захворюванням кишечнику, хвороба Крона, виразковий коліт, респіраторний дистрес-синдром, респіраторний дистрес-синдром дорослих (АВО5), менінгіт, енцефаліт, увеїт, коліт, гломерулонефрит, алергічні стани, екзему, астму, стан з інфільтрацією Т-клітин і хронічні запальні реакції, атеросклероз, аутоїмунний міокардит, недостатність адгезії лейкоцитів, системний червоний вовчак (5 Е), підлітковий шкірний червоний вовчак, дискоїдний вовчак, мієлітний вовчак, енцефалітний вовчак, діабет з початком в юнацькому віці, розсіяний склероз, алергічний енцефаломієліт, нейромієліт зорового нерва, ревматичну лихоманку, хорею Сиденгама, імунні реакції, пов'язані з гіперчутливістю негайного або уповільненого типу, опосередковані цитокінами і Т-лімфоцитами, туберкульоз, саркоїдоз, грануломатоз, включаючи грануломатоз Вегенера і хвороба Хуга-Штраусса, агранулоцитоз, васкуліт (включаючи васкуліт/ангіїт при гіперчутливості, АМСА і ревматоїдний васкуліт), апластичну анемію, анемію Діамонда-Блекфана, імунну гемолітичну анемію, включаючи аутоіїмунну гемолітичну анемію (АІНА), перніціозну анемію, чисту аплазію еритроцитів (РАСА), недостатність фактора МІП, гемофілію А, аутоїмунну нейтропенію, панцитопенію, лейкопенію, захворювання с діапедезом лейкоцитів, запалювальні захворювання центральної нервової системи (ЦНС), синдром множинного ушкодження органів, тяжку псевдопаралітичну міастенію, захворювання, опосередковані комплексом антиген-антитіло, антигломерулярне базальне мембранне захворювання, синдром антитіл проти фосфоліпідів, алергічний нейрит, хвороба Бехчета, синдром Кастельмана, синдром Гудпасчера, міастенічний синдром Ламберта-ітона, синдром Рейно, синдром Шегрена, синдром Стівенса-Джонсона, відторгнення трансплантата солідного органу, хвороба трансплантат проти хазяїна (4УНО), пемфігоїд бульозний, пухирчатку, аутоїмунні поліендокринопатії, серонегативні спондилоартропатії хвороба Рейтера, синдром людини, яка не гнеться, гігантоклітинний артеріїт, імунний комплексний нефрит, опосередковані ІдА нефропатії, опосередковані ІДМ полінейропатії або опосередковану ІМ нейропатію, ідіопатичну тромбоцитопеничну пурпуру (ІГР), тромбоцитопеничну тромбогемолітичну пурпуру (ТТР), пурпуру Геноха-Шенлейна, аутоїмунну тромбоцитопенію, аутоіїмунне захворювання сім'яників і яєчників, включаючи аутоїмунний орхіт і оофорит, первинний гіпотиреоїдизм, аутоїмунні ендокринні захворювання, включаючи аутоїмунний тиреоїдит, хронічний тиреоїдит (тиреоїдит
Хашимото), підгострий тиреоїдит, хвороба Аддісона, хвороба Граве, аутоімунні полізалозові синдроми (або полізалозові ендокринопатичні синдроми), діабет типу І, який також називається цукровим інсулінозалежним діабетом (І0ОМ) і синдром Шихана, аутоїмунний гепатит, лімфоїдну інтерстиціальну пневмонію (НІМ), бронхоліт (нетрансплантантний) проти МІР, синдром Гійєна-Барре, васкуліт великих судин (включаючи ревматичну поліміалгию і гігантоклітинний артеріїт (Такасу), васкуліт середніх судин (включаючи хворобу
Кавасакі і поліартеритнодозний), поліартерит (РАМ), анкілозуючий спондабот, хвороба Бергера (опосередковувана ІДА нефропатія), швидкопрогресуючий гломерулонефрит, первинний цироз жовчних протоків, черевинну спру (глютенову ентеропатію), кріоглобулінемію, кріоглобулінемію, пов'язана з гепатитом,
аміотрофічний бічний склероз (АГ 5), захворювання коронарної артерії, сімейну середземноморську лихоманку, мікроскопічний поліангіїт, синдром Когана, синдром Вискотта-Олдріча і облітеруючий тромбоангіїт.
Ревматоїдний артрит (НА) являє собою хронічне захворювання, що характеризується запаленням суглобів, що приводить до розвитку набряку, болю і втрат функції. У пацієнтів з ВА, як правило, протягом тривалого періоду часу має місце прогресуюча деструкція суглобів, деформація, відсутність працездатності і передчасна смерть.
Хвороба Крона і близьке захворювання, виразковий коліт, представляють два основних види захворювань, які належать до групи захворювань, які називаються запальним захворюванням кишечнику (ІВО). Хвороба
Крона представляє хронічне захворювання, яке спричиняє запалення травного або шлунково-кишкового тракту (ШКТ). Незважаючи на те, що воно може охоплювати площу ШКТ від ротової порожнини до анусу, частіше за все воно вражає тонкий кишечник і/або ободову кишку. При виразковому коліті ураження ШКТ обмежується ободовою кишкою.
Для хвороби Крона можуть бути характерні антитіла проти антигенів нейтрофілів, тобто «перинуклеарні антитіла проти нейтрофілів» (рАМСА), і Засспаготусев сегмізвіає, тобто «антитіла проти Засспаготусев сегуізіає» (АЗСА). У багатьох пацієнтів з виразковим колітом є антитіла рАМСА в крові, але не антитіла АБСА, в той час як у багатьох інших пацієнтів з хворобою Крона є антитіла А5СА, але антитіла рАМСА відсутні.
Одним методом оцінки хвороби Крона є індекс активності хвороби Крона (СОАЇ), оснований на 18 змінних балах, зібраних лікарями. Значення СОАЇ, рівні 150 і нижче, асоційовані із захворюванням на стадії спокою; значення вище вказують на активну форму захворювання, і значення вище за 450 мають місце при важкій формі захворювання |Везі єї а!., «ОемеІортепі ої а Стопп' дізеазе асіїміу іпдех», Сазігоепіегоіоду 70: 439-444 (1976). Однак в первинному дослідженні деякі дослідники застосовують «суб'єктивний показник», що дорівнює 200-250, як показник стану здоров'я.
Системний червоний вовчак (5ІЕ) являє собою аутоїмунне захворювання, викликане рецидивуючими пошкодженнями кровоносних судин в багатьох органах, включаючи нирки, шкіру і суглоби. У пацієнтів з 5І Е порушена взаємодія Т-клітин і В-клітин приводить до продукування аутоантитіл, які атакують клітинне ядро.
Існує загальна думка, що аутоантитіла відповідальні за розвиток 5ІЕ, і таким чином, нові види лікування, що приводять до зниження кількості В-клітин, що дозволяють імунній системі відновлювати нові В-клітини з попередників, будуть давати надію на забезпечення тривалої лікувальної дії у пацієнтів з 5І Е.
Розсіяний склероз (М5) також являє собою аутоімунне захворювання. Воно характеризується запаленням центральної нервової системи і руйнуванням мієліну, що приводить до ізоляції нервових волокон в головному мозку, спинному мозку і організмі в цілому. Незважаючи на те, що причина М5 залишається невідомою, існує широко поширена думка, що аутоімунні Т-клітини є основними клітинами, що вносять свій внесок в патогенез захворювання. Однак у пацієнтів з М5 антитіла присутні у високих концентраціях в спинномозковій рідині, і завдяки деяким теоріям передбачається, що реакція у відповідь В-клітин, що приводить до продукування антитіл, є важливою для опосередкування захворювання.
Аутоїмунне захворювання щитовидної залози виникає внаслідок продукування аутоантитіл, які стимулюють щитовидну залозу з розвитком гіпертиреоїдизму (хвороба Граве) або руйнують щитовидну залозу з розвитком гіпотиреоїдизму (тиреоїдит Хашимото). Стимуляція щитовидної залози викликається антитілами, які зв'язуються і активують рецептор стимулюючого гормону щитовидної залози (ТЗН). Причиною руйнування щитовидної залози є аутоантитіла, які взаємодіють з іншими антигенами щитовидної залози.
Синдром Шегрена являє собою аутоїмунне захворювання, що характеризується руйнуванням продукуючих вологу залоз організму.
Причиною імунної тромбоцитопенічної пурпури (ІТР) є аутоантитіла, які зв'язуються з тромбоцитами крові і спричиняють їх руйнування.
Тяжка псевдопаралітична міастенія (МО) являє собою хронічне аутоїмунне нейром'язеве захворювання, що характеризується аутоантитілами, які зв'язуються з ацетилхоліновими рецепторами в нейром'язевих з'єднаннях, приводячи до слабості довільних груп м'язів.
Псоріаз характеризується аутоїмунним запаленням в шкірі і також пов'язаний з артритом у 3095 випадків, склеродермою, запальним захворюванням кишечнику, включаючи хворобу Крона і виразковий коліт.
Також передбачається лікування ідіопатичної запальної міопатії (ТІМ), включаючи дерматоміозит (ОМ) і поліміозит (РМ). Запальні міопатії поділяють на категорії з використанням ряду класифікаційних систем. Згідно з системою класифікації МіПШег (МіШег, Апешит. Оів. Сіїп. Мопйй Ат., 20: 811-826, 1994) ідентифікується 2 ідіопатичні запальні міопатії (ПМ), поліміозит (РМ) і дерматоміозит (ОМ).
Поліміозит і дерматоміозит є хронічними, руйнівними запальними захворюваннями, при яких уражаються м'язи і у випадку ОМ шкіра. Дані захворювання є рідкими, за деяким повідомленнями, їх частота в США становить приблизно 5-10 випадків на мільйон дорослих і 0,6-3,2 випадків на мільйон дітей (Тагооїї, Сигт. Ргобі.
Оептай)|. 1991, 3: 131-180). Для ідіопатичної запальної міопатії характерна тяжке протікання і смертність, при тому, що у половини хворих дорослих є істотні пошкодження (Сойаїепег еї аі., Ат. У. Сагайо!. 1978, 41: 1141-49). Міпег (АЯпешт. Оів. Сп. Мойй Ат., 1994, 20: 811-826 і Ап апа АйПШей Сопацшопе, Си. 75, Едв.
Коортап апа Могеїапа, І ірріпсой УМіПатве апа УЛіїКіпв, 2005) виділяє п'ять груп критеріїв, що використовуються для діагностики ІМ, тобто критеріїв оцінки ідіопатичної запальної міопатії (ІМ), які включають м'язеву слабкість, докази наявності дегенерації м'язів, отримані при біопсії, підвищену активність в сироватці крові пов'язаних з м'язами ферментів, наявність електромагнітної тріади міопатії шкірні висипання при дерматоміозиті, і також включаються дані про наявність аутоантитіл як повторний критерій.
Асоційовані з ІЇМ чинники, в тому числі пов'язані з м'язами ферменти і аутоімунні антитіла, включають, але не обмежуються цим, креатининкіназу (СК), лактатдегідрогеназу, альдолазу, С-реактивний білок, аспартатамінотрансферазу (АСТ), аланінамінотрансферазу (АЛТ) і антинуклерні антитіла (АМА), специфічні для міозиту антитіла (М5А) і антитіла проти екстрагованих нуклеарних антигенів. «Зв'язувальна молекула» за винаходом може представляти, наприклад, білок («білок» може бути поліпептидом або пептидом), нуклеїнову кислоту, вуглевод, ліпід або сполуки з малою молекулою, яке зв'язується з мішенню. Тип білкової зв'язувальної молекули, яка мається на увазі у винаході, являє собою антитіло або фрагмент антитіла, який зберігає здатність до зв'язування. Зв'язувальну молекулу можна модифікувати за винаходом стандартними в даній галузі способами для підвищення її афінності зв'язування, зниження імуногенності, зміни її ефекторних функцій і/або підвищення її доступності в організмі індивідуума.
Такі модифікації - молекул можуть включати, наприклад, модифікації амінокислотної послідовності або експресії у вигляді рекомбінантного білка. Такі рекомбінантні білки також є зв'язувальними молекулами за винаходом. Прикладом зв'язувальної молекули за винаходом є малий модуляторний імунофармацевтичний препарат (ЗМІР 7М),
Зв'язувальна молекула, яка є «специфічною» для мішені, зв'язується з такою мішенню з більш високою афінністю в порівнянні з будь-якою іншою мішенню.
Наприклад, СО37-специфічна зв'язувальна молекула зв'язується з СОЗ37 з більшою афінністю в порівнянні з будь-якою іншою мішенню, і СО20-специфічна зв'язувальна молекула зв'язується з СО20 з більшою афінністю в порівнянні з будь-якою іншою мішенню. Зв'язувальні молекули за винаходом можуть володіти афінністю для їх мішеней зі значеннями Ка вище ніж або на рівні приблизно 107 М", переважно вище ніж або на рівні приблизно 105 М", більш переважно вище ніж або на рівні приблизно 106 М" і ще більш переважно вище ніж або на рівні приблизно 107 М". Значення афінності навіть вище ніж приблизно 107 М" більш переважні, такі як афінності на рівні або вище ніж приблизно 107 М", приблизно 108 М" і приблизно 109 М", і приблизно 1079 М". Афінність зв'язувальних молекул за даним винаходом можна легко визначити з використанням звичайних методик, наприклад, описаних 5саїспага єї а!., Апп. М.У. Асай. 5сі. 51: 660 (1949).
Деякі СО37-специфічні зв'язувальні молекули, передбачені винаходом, володіють афінністю по відношенню до СОЗ37 на рівні приблизно від 0,5 до приблизно 10 нМ. Деякі СО20О-специфічні зв'язувальні молекули, передбачені винаходом, володіють афінністю по відношенню до СОЗ37 на рівні приблизно від 1 до приблизно 30 нМ.
Іншою властивістю деяких СОЗ37-специфічних зв'язувальних молекул, передбачених винаходом, є те, що вони мають період напіврозпад в межах приблизно від 7 до приблизно 30 діб.
Антитілами, специфічними до СОЗ37, за допомогою яких характеризували антиген СО37 на семінарі Типа
НІ ОА УуУоїк5Ппор, були НО28, (28-1, ННІ, ВІ14, М/А17 і г93026. Дивись І іпд апа Масі еппап, рр. 302-335 в
Ї еисосуїє Туріпд І. УУніїє Сеї! Оіїбегепіайоп Апіїдепе, Охіога Опімегейу Ргев5 (1987). Інші описані антитіла, специфічні по відношенню до СО37, включають НЕВ-7, 29/55, МВ-1, М-8371, М-8372 і ІРО-24. Дивись
МоїІаепнаигег, 9. Віоі., НедиЇ. Нотеозі. Адепів, 14: 281-283 (2000), який затверджує, що всі дані антитіла розпізнають тільки один епітоп СОЗ37. ЗоПпулапа-АІреї: еї а, 14: 905-914 (1988) вказують, що епітоп розташований у вуглеводній групі СО37. Ще одним СО37-специфічним антитілом є 5-83 (Віозув).
Патенти і публікації патентів, в яких описуються антитіла проти СО20, включають патенти США Ме 5776456, 5736137, 6399061 і 5843439, а також заявки на патент США Ме 05 2002/0197255А1 і 05 2003/0021781А1 (Апаегзоп єї аІ.) патент США Мо 645504381 і УУО00/0960 (СипПШо-І оре, А.); УУО00/27428 (спПо-І оре2 апа м/п); УУО00/27428 (Спо-І оре апа Геопага); М/О00/44788 (Вгазіамуеку еї аі.); УУО01/10462 (Бавіейег МУ.); УМО01/10461 (Навіецег апа М/піе); УУО01/10460 (М/не апа Спліо-І орег); заявку на патент США
Ме 05 2002/0006404 і М/О02/04021 (Наша апа Напнагап); заявку на патент США Ме 05 2002/0012665А1 і
М/О001/74388 (Наппа М.); заявку на патент США Ме 05 2002/0009444А1 і М/001/80884. (С1пПо-І орел, А.);
МО001/97858 (МУ/пі(е 3.); заявку на патент США Ме 05 2002/0128488А1 і М/ОО02/34790 (Вей, М.); УХО02/060955 (Вгазіамуеку сеї аі.); УУМО02/096948 (ВгазіамекКу єї а1І.); УУХО02/079255 (Неї апа Оамієз); патент США Ме 617158681 і МУО98/56418 (ат еї аї.); УУ/О98/58964 (На)чм, 5.); УУО99/22764 (Наш, 5.); МО99/51642; патент США Ме 619455181, патент США Мо 624219581, патент США Мо 6528624В81 і патент США Мо 6538124 (Ідиходіє еї аї.);
МО00/42072 (Ргезіа, І.); МУО00/67796 (Сита еї аІ.); УУСО 1/03734 (СпіІІо-І оре? єї аІ.); заявку на патент США Мо 05 2002/0004587А1 і МУО01/77342 (МіЇІег апа Ргевіа); заявку на патент США Ме 05 2002/0197256 (Стемаї, І; патенти США Мо 609036581, 628753781, 6015542, 5843398 і 5595721 (КатіпекКкі еї аІ.); патенти США Ме 5500362, 5677180, 5721108 і 6120767 (Робіпзоп еї аіІ.); патент США Ме 641039181 (Нашбіївснек еї аї.); патент
США Мо 622486681 і У/О00/20864 (Вагрега-сиШет, Е.); УМ/001/13945 (Вагрега-сийет, Е.); М/О00/67795 (СоІдепрего); УУО00/74718 (СюІдепрегд апа Напзеп); УУО00/76542 (Соїіау еї аї.); МУО01/72333 (УМоїїп апа
Возепріай); патент США Мо 636859681 (Стпейє еї а!.); заявку на патент США Ме 05 2002/0041847А1 (СоІдепрегд, О.); заявку на патент США Ме 5 2003/0026801А1 (М/єїпег апа Напйтапп); М/О02/102312 (Епдієтап, Е.); кожний з цих джерел включений тут у вигляді посилання. Дивись також патент США Ме 5849898 і заявку на європейський патент Мо 330191 (5ееа еї аІ.); патент США Ме 4861579 і ЕРЗ332865А2 (Меуеєг апа М/вїзв); і М/О95/03770 (Внаї єї а1.).
Ритуксимаб був дозволений для застосування в клініці у людей у вигляді ритуксану?б. РитуксанФ вважається специфічною відносно СО20 зв'язувальної молекули за винаходом.
Малі модуляторні імунофармацевтичні препарати (ЗМІР) розглядаються як один тип зв'язувальних молекул за винаходом. Способи отримання 5МІР були описані раніше в спільній заявці на патент СІЛА Мо 10/627556 і публікації заявки на патент США 2003/0133939,2003/0118592 і 2005/0136049, які в повному об'ємі включені тут у вигляді посилання. ЗМІР є новими рекомбінантними білками зі зв'язувальним доменом імуноглобулінів, які, як правило, мають зв'язувальну домен для «своєї» структури, такої як антиген, протирецептор або тому подібне, поліпептид шарнірної області Ідаї, ІСА і ІСЕ або мутантний поліпептид шарнірної області ІдсіІ, що містить нуль, один або два залишки цистеїну, і області СН2 і СНЗ імуноглобуліну. У одному варіанті здійснення молекула зв'язувального домена має один або два залишки цистеїну (Суз) в шарнірній області. У близькому варіанті здійснення, коли молекула зв'язувального домену містить два залишки Сух, першого Суз, який бере участь в зв'язуванні важкого і легкого ланцюгів, не піддається делеції або заміні на іншу амінокислоту.
Зв'язувальні домени молекул, придатних в способах за винаходом, передбачені як такі, що мають одну або більше зв'язувальних областей, таких як варіабельна зв'язувальна область легкого ланцюга і варіабельна зв'язувальна область важкого ланцюга, отримані з одного або більше представників надсімейства імуноглобулінів, таких як імуноглобулін. Крім того, дані області, як правило, розділені пептидами-лінкерами, які можуть являти собою будь-який пептид-лінкер, відомий в даній галузі, сумісний із з'єднувальним доменом або областю в зв'язувальній молекулі. Прикладами лінкерів є лінкер на основі мотиву-лінкер Сіу«бег, такого як (Сіу«бег)іпї, де п-1-5. Молекули для застосування в способах за винаходом також включають достатню амінокислотну послідовність, отриману з константної області імуноглобуліну для забезпечення ежекторної функції, переважно АОСС і/або СОС. Таким чином, молекули будуть містити послідовність, отриману з області
СНІ імуноглобуліну, або областей СН2 і СНЗ, отриманої з одного або більше імуноглобулінів. МІР здатні до вияву АЮСС і/або СОС, але не володіють здатністю до утворення пов'язаних дисульфідними зв'язками мультимерів.
Винахід включає гуманізовані СО37-специфічні поліпептиди 5МІР, які володіють щонайменше 8095-ною ідентичністю по відношенню до поліпептиду з послідовністю 5ЕО ІЮ МО:2, де гуманізовані СО37-специфічні поліпептиди 5МІР зв'язуються з СО37. У одному аспекті гуманізовані СОЗ37-специфічні поліпептиди ЗМІР містять будь-яку амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО 10 МО:6, 8,10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38,40, 42,44,46,48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 80, 82, 84, 86 і 88.
У іншому аспекті гуманізовані СО37-специфічні поліпептиди 5МТР містять щонайменше одну амінокислотну модифікацію в гіперваріабельній ділянці (СОР), вибрану з групи, яка складається з: СОВІ легкого ланцюга,
СОВА! важкого ланцюга, СОН2 легкого ланцюга, СОН2 важкого ланцюга, СОНЗ легкого ланцюга і СОВЗ важкого ланцюга.
У одному варіанті здійснення винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид ЗМІР, в якому
СОВА легкого ланцюга має амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО:61 (ВАБЕММУ5БУІ А). Винахід також включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид ЗМІР, в якому СОН! легкого ланцюга має амінокислотну послідовність 5ЕО 10 МО:6б2 (АТ5ЕММУБ5МУЇГА). Винахід також включає гуманізований
СО37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому СОВНІ важкого ланцюга має амінокислотну послідовність БЕО ІЮ
МО:6З3 (ЯЖМММ).
У іншому варіанті здійснення винахід включає гуманізований СЮО37-специфічний поліпептид ЗМІР, в якому
СОВ2 легкого ланцюга має амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО:64 (БАКТІ АЕ). Винахід також включає гуманізований СОЗ37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому СОН2 важкого ланцюга має амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:65 (МГОРУУСИатТТтУМАКЕКИ).
У додатковому варіанті здійснення винахід включає гуманізований СОЗ37-специфічний поліпептид З5МІР, в якому СОНАЗ легкого ланцюга має амінокислотну послідовність 5ЕО 0 МО:66 (ОННЗОМРМУТ). Винахід додатково включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому СОВЗ важкого ланцюга має амінокислотну послідовність 5ЕСО 10 МО:67 (5МОаРЕЮОМУ). Винахід додатково включає гуманізований
СО37-специфічний поліпептид 5МТР, в якому СОВЗ важкого ланцюга має амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ
МО:68 (БМОРЕЮО5). Винахід також включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому СОНЗ важкого ланцюга має амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:69 (БМОРМОМ).
У ще одному аспекті винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид ЗМІР, що містить щонайменше одну щонайменше дві або щонайменше три послідовності з амінокислотних послідовностей СОН легкого ланцюга, вибраних з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:61, 62, 64 і 66. У ще одному варіанті здійснення винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР, що містить амінокислотну послідовність СОНІ легкого ланцюга 5ЕО ІО МО:61 або 62 або їх варіант, в яких одна або дві амінокислоти 5ЕО ІЮ МО:61 або 62 замінені; амінокислотну послідовність СОНВ2 легкого ланцюга 5ЕО І
МО:64 або її варіант, в якій одна або дві амінокислоти 5ЕО ІЮ МО:64 замінені; і амінокислотну послідовність
СОВЗ легкого ланцюга 5ЕО ІЮ МО:66 або її варіант, в якій одна або дві амінокислоти 5ЕО ІЮ МО:66 замінені.
У ще одному аспекті винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид ЗМІР, що містить щонайменше одну щонайменше дві або щонайменше три амінокислотні послідовності СОВА важкого ланцюга, вибрані з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:63, 65, 67-69. У додатковому варіанті здійснення винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид ЗМІР, що містить амінокислотну послідовність
СОН важкого ланцюга 5ЕО ІЮ МО:63 або її варіант, в якій одна або дві амінокислоти 5ЕО ІЮО МО:63 замінені; амінокислотну послідовність СОН2 важкого ланцюга 5ЕО ІЮО МО:65 або її варіант, в якій одна або дві амінокислоти 5ЕО ІЮ МО:65 замінені; і амінокислотну послідовність СОНЗ важкого ланцюга, вибрану з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:67-69 або їх варіанту, в яких одна або дві амінокислоти будь-яких з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:67-69 замінені.
Винахід включає гуманізовані СЮОЗ7-специфічні поліпептиди 5МІР, що мають щонайменше одну амінокислотну модифікацію в каркасної області (ЕР), вибрану з групи, яка складається з: ЕВ1 легкого ланцюга,
ЕВ1 важкого ланцюга, ЕН2 легкого ланцюга, ЕН2 важкого ланцюга, ЕВЗ легкого ланцюга, ЕВЗ важкого ланцюга,
ЕВА4 легкого ланцюга, ЕНА4 важкого ланцюга. У одному варіанті здійснення винахід включає гуманізований
СО37-специфічний поліпептид ЗМІР, в якому перша каркасна область (ЕН!) легкого ланцюга має амінокислотну послідовність 5ЕСО 0 МО:70 (ЕІМІ ТОЗРАТІ ЗІ 5РОЕВАТІ 50). У іншому варіанті здійснення винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому ЕН! важкого ланцюга має амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО:71 (ЕМОЇ МОБЕАЕМККРОЕБІ КІЗСКОа5СОУ5ЕТ). У ще одному варіанті здійснення винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид ЗМІР, в якому ЕВ2 легкого ланцюга має амінокислотну послідовність 5БЕО ІЮ МО:72 (МІМООКРООАРВІ ІМ). У додатковому варіанті здійснення винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому ЕН2 важкого ланцюга має амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:73 (МУМАОМРИаКагЕММИ). У ще одному варіанті здійснення винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид ЗМІР, в якому ЕВЗ легкого ланцюга має амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО:74 (СІРАНЕЗОаЗаБатоОвТІ ТІ ЕРЕОРАМУУС). У ще одному варіанті здійснення винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому ЕНЗ важкого ланцюга має амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО:75 (ОМТІЗАОЮОКБІЗТАМІ ОМУЗБІ КАБОТАМУУСАН). У ще одному варіанті здійснення винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид ЗМІР, в якому ЕНА легкого ланцюга має амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО:76 (РБОСТКМЕЇК). У ще одному варіанті здійснення винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому ЕНА важкого ланцюга має амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО:77 (М/СОСТІ МТМ55). У ще одному варіанті здійснення винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид З5МІР, в якому ЕВА важкого ланцюга має амінокислотну послідовність «ФЕО ІЮ МО:78 (МО ВИаті МмТтУ55).
Винахід додатково включає гуманізовані СО37-специфічні поліпептиди 5МІР, що містять щонайменше одну щонайменше дві або щонайменше три послідовності з амінокислотних послідовностей ЕА легкого ланцюга, вибраних з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:70, 72, 74 і 76. У ще одному варіанті здійснення винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид З5МІР, що містить амінокислотну послідовність ЕВТ легкого ланцюга 5ЕО ІЮ МО:70 або її варіант, в якій одна або дві амінокислоти 5ЕО ІЮ
МО:70 замінені; амінокислотну послідовність ЕН2 легкого ланцюга 5ЕО ІЮ МО:72 або її варіант, в якій одна або дві амінокислоти 5ЕО ІО МО:72 замінені; амінокислотну послідовність ЕНЗ легкого ланцюга 5ЕО ІО МО:74 або її варіант, в якій одна або дві амінокислоти 5ЕО ІЮ МО:74 замінені; і амінокислотну послідовність ЕНА легкого ланцюга 5ЕО ІЮО МО:76 або її варіант, в якій одна або дві амінокислоти 5ЕО ІЮ МО:76 замінені.
Крім того, винахід додатково включає гуманізовані СОЗ37-специфічні поліпептиди 5МІР, що містять щонайменше одну щонайменше дві або щонайменше три послідовності з амінокислотних послідовностей ЕВ важкого ланцюга, вибраних з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:71, 73, 75, 77 і 78. У одному варіанті здійснення винахід включає гуманізований СОЗ37-специфічний поліпептид 5МІР, що містить амінокислотну послідовність ЕНТ важкого ланцюга 5ЕО ІЮ МО:71 або її варіант, в якій одна або дві амінокислоти 5ЕО ІЮО МО:71 замінені; амінокислотну послідовність ЕН2 важкого ланцюга 5ЕО ІО МО:73 або її варіант, в якій одна або дві амінокислоти 5ЕО ІЮ МО:73 замінені; амінокислотну послідовність ЕНЗ важкого ланцюга 5ЕО ІО МО:75 або її варіант, в якій одна або дві амінокислоти 5ЕО ІЮО МО:75 замінені; і амінокислотну послідовність ЕНА важкого ланцюга 5ЕО ІО МО:77 або 78 або їх варіант, в яких одна або дві амінокислоти 5ЕО
ІО МО:77 або 78 замінені.
Винахід також включає виділену молекулу нуклеїнової кислоти, утримуючу нуклеотидну послідовність, що кодує гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР, який володіє щонайменше 8095-ний ідентичністю по відношенню до поліпептиду з послідовністю 5ЕО ІЮО МО:2, де гуманізований СО37-специфічний поліпептид
ЗМІР зв'язується з СО37. Така виділена молекула нуклеїнової кислоти може містити нуклеотидну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25,27, 29, 31, 33, 37, 39, 41, 43, 45, 47, 49, 51, 53, 55, 57, 59, 79, 81, 83, 85 і 87. У одному варіанті здійснення винахід включає вектори, які містять дані молекули нуклеїнової кислоти, і клітини-хазяї, що містять вектори.
Винахід також включає способи отримання поліпептидів, описаних тут, що включають культивування клітин-хазяїв у відповідних умовах для експресії поліпептидів, і необов'язкове виділення поліпептидів з культури.
У ще одному аспекті винахід включає композиції, що містять гуманізовані СО37-специфічні поліпептиди
ЗМІР за винаходом і фармацевтично прийнятний носій.
Винахід додатково включає застосування СО37-специфічних 5МІР ії СОЗ37-специфічних зв'язувальних молекул, описаних тут, в будь-якому зі способів за винаходом. Такі способи включають застосування будь-якого з СО37-специфічних ЗМІР ії СО37-специфічних зв'язувальних молекул, що містять амінокислотну послідовність, вибрану з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, З6, 38, 40, 42, 44, Аб, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 80, 82, 84, 86 і 88.
У ще одному аспекті винахід включає набори для зниження кількості В-клітин, що містять композиції за винаходом; і протоколи по застосуванню наборів для зниження кількості В-клітин. Такі набори можуть додатково містити одну або більше СО20О-специфічних зв'язувальних молекул. У винаході передбачається, що такою СО20-специфічною зв'язувальною молекулою є ТАШ-015.
Винахід також включає СО37-специфічні поліпептиди 5МІР, що містять СОН, СОНВ2 і СОВЗ, які володіють щонайменше 8095-ний ідентичністю по відношенню до поліпептиду з послідовністю 5ЕО ІЮ МО:2. Такі
СО37-специфічні поліпептиди ЗМІР можуть додатково включати людську каркасну область, що розділяє кожний з СОАІ, СОВ2 і СОВЗ.
У іншому аспекті винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР, який володіє щонайменше 8095-ною ідентичністю по відношенню до поліпептиду з послідовністю 5ЕО ІЮ МО:2, де гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР зв'язується з СОЗ37 і містить поліпептид шарнірної області, що має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:90, 92, 94, 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108, 110, 112, 114, 115, 116, 118, 120, 122, 124, 126 і 127.
У винаході також передбачається гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР, який володіє щонайменше 8095-ною ідентичністю по відношенню до поліпептиду з послідовністю 5ЕО ІЮ МО:2, де гуманізований СО37-специфічний поліпептид ЗМІР зв'язується з СОЗ37 і містить лінкер, що містить (Спіу«5егп, де п дорівнює 1, 2, 3, 4, 5 або 6.
У ще одному аспекті винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому СОН! легкого ланцюга має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ
МОп128 (АТБОММУБМА), 129 (ВАТ5ЕБМУБМУГА) 130 (ВАБОБМУБЗМТА) 131 (ВАБОБМ5БМІА) і 132 (ВНАБОБУЗУЧІ А). У іншому варіанті здійснення винахід включає гуманізований СЮОЗ37-специфічний поліпептид
ЗМІР, в якому СОВІ важкого ланцюга має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей БЕО ІЮ МО:133 (5БУМММ) і 134 (5МУІС). У додатковому варіанті здійснення винахід включає гуманізований СОЗ7-специфічний поліпептид ЗМІР, в якому СОНВ2 легкого ланцюга має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:135 (ААБЗБІ О5), 136 (ЗАЗТВАТ) і 137 (ОАБМААТ). У ще одному варіанті здійснення винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому СОН2 важкого ланцюга має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:138 (ПІМРЕЮ5БОТАМ5РБЗЕОС) і 139 (ВІОРООБУТМУРБЗЕОС).
У додатковому варіанті здійснення винахід включає гуманізований СОЗ37-специфічний поліпептид З5МІР, в якому СОВЗ легкого ланцюга має амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО:220 (ОННБОМРУМТ). У іншому варіанті здійснення винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому СОВЗ важкого ланцюга має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ
МО:211 (БМОаРМОУ), 212 (БМОаРЕЮОХ), 213 (ЗМОРМОМ), 214 (БМОРЕОБ), 215 (БМОРЕОР), 217 (МОРЕОМ), 218 (БМОРЕБІ) і 219(56МОаРЕОІ.
У ще одному аспекті винахід включає гуманізовані СО37-специфічні поліпептиди 5МІР з альтернативними каркасними областями. У одному аспекті винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид ЗМІР, в якому ЕН легкого ланцюга має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:170-181. В іншому аспекті винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому ЕНЇ важкого ланцюга має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:140-146. В ще одному аспекті винахід включає гуманізований
СО37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому ЕН2 легкого ланцюга має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:182-193. В ще одному аспекті винахід включає гуманізований СОЗ37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому ЕН2 важкого ланцюга має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:147-153. В додатковому аспекті винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому ЕКЗ легкого ланцюга має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:194-205. В ще одному аспекті винахід включає гуманізований СОЗ37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому ЕНЗ важкого ланцюга має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ
МО:154-160. В додатковому аспекті винахід включає гуманізований СО37-специфічний поліпептид МІР, в якому ЕН4 легкого ланцюга має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей ЗЕО ІЮ МО:206-210. В ще одному аспекті винахід включає гуманізований СІ)37-специфічний поліпептид 5МІР, в якому ЕНА важкого ланцюга має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з послідовностей 5ЕО ІЮ МО:161-169.
Приклади СО37-специфічних 5МІР, придатних у винаході, включають, але не обмежуються цим, с28-1 5сЕм (555-538. МУСН2 М/СНЗ, який складається з одноланцюжкового Ем-фрагмента (28-1, в якому всі три залишки цистеїну в з'єднанні або шарнірних областях зазнавали мутації в залишки серину, і області СН2 і СНЗ диких типи; (328-1 зсбм ІДАН М/СН2г М/СНЗ, що містить шарнірну область ІдА і області МТ ІдСсІ; б28-1 в5сЕм
МНІл115 (555-5)Н М/СНаО СНЗ, в якому всі три залишки цистеїну в з'єднанні або шарнірних областях зазнавали мутації в залишки серину і лейцин в положенні 11 варіабельної області важкого ланцюга заміщений на серин; (28-1 5сбм МНІ115 (055-538 МУСН2 СНЗ, в якому залишки цистеїну заміщені у другому і третьому положеннях на серин; 28-1 зсЕм МНІ1 ІЗ (С50-5)Н МСНаІ2 СНУЗ, в якому залишки цистеїну заміщені у другому положенні на серин; 228-1 зсбм МНІ115 (550-Р)Н М/СН2 М/СНЗ (званий тут ТАО-016), в якому перший і другий залишки цистеїну в з'єднанні або шарнірних областях зазнавали мутації із заміною залишків серину і лейцину в положенні 11 варіабельної області важкого ланцюга на серин; 228-1 всбм МНІ115 (5025-53Н МСН2 МСНЗ, в якому перший і третій залишки цистеїну в шарнірних областях зазнавали мутації в залишки серину; с28-1 5сЕм МНІ115 (СС5-Р)Н М/СН2 М/СНЗ, в якому третій залишок цистеїну в шарнірній області заміщений на серин; (28-1 зсбм МНІ 115 (5С20-Р)Н МУСН2 М/СНЗ, в якому перший залишок цистеїну заміщений на серин; с28-1 5сЕмМ МНІ115 тідЕ СН2 СНЗ СНА, що містить області СН 2-4 мишачого ІДЕ, в якому лейцин в положенні 11 варіабельної області важкого ланцюга заміщений на серин; (28-1 зсбм МНІ 115 тідА У/ІДАСН2 Т4СНЗ, що містить шарнірну область мишачого ІдА з СНІ ІдДА дикого типу і зрізану область СНЗ ІдА без 4 амінокислот на карбоксильному кінці ТС; (328-1 всем МНІ 115 ПІДЕ СН2 СНЗ СНА, що містить області СН ІДЕ, в яких лейцин в положенні 11 варіабельної області важкого ланцюга заміщений на серин; і б28-1 всбм МНІ 115 ПІДАН
МЛЯАСНа ТОНУ, що містить шарнірну область ІдА, СНаІ ІдА диких типи і зрізану СНІ ІдДА, і зрізану область СНЗ
ІдА без 4 амінокислот на карбоксильному кінці ССТСУ.
Приклади СО20-специфічних ЗМІР, придатних у винаході, включають ЗМІР, отримані з моноклонального антитіла проти С20 2Н7, описаного в публікації патенту США МоеМо 2003/133939 і 2003/0118592. 5МІР включають 2187 в5сЕм-ІЩ або його похідне. Похідні включають СуїхвВ-МНУУТОа1С, який має Ес-область людського ІдСі і мутантну шарнірну область ІдаІ; Суюхв-МНМО1С, який містить мутантну Ес-область; мМатн/мат1с, який містить Ес-рецептор із залишком, що зазнав мутації лейцину 234; СуюхвВ-ІЧДАНУТНИ1с, який містить дільницю шарнірної області людського ІдА, гібридизований з людською Ес-областю дикого типу; 2Н7 звсгЕм-ІдДаІ лами, що містить шарнірну область і області СН2СНЗ ІдСІ лами; 2Н7 5сЕх-Ід2а2 лами, що містить шарнірну область і області СН2СНЗ ІдС2 лами; 2Н7 всЕх-ІдОаЗ лами, що містить шарнірну область і області СН2СНЗ ІдОЗ лами. 2Н7 зсбм МТН (555) МУТСН2СНЗ, в якому всі три залишки цистеїну в з'єднанні або шарнірних областях зазнали мутації в залишки серину, і області СН2 і СНЗ диких типи; 2Н7 зсЕм МТН (550), в якому перші два залишки цистеїну заміщені на залишки серину; 2Н7 зсЕм МТН (505), в якому перший і третій залишки цистеїну заміщені на залишки серину; 2Н7 зсЕм МТН (С55), МТСН2СНУЗ, в якому залишки цистеїну заміщені у другому і третьому положеннях на серин; 2Н7 зсЕм МНІ115ЕВ Іда МТН (555) МУТСН2СНЗ, в якому лейцин в положенні 11 у варіабельної області важкого ланцюга заміщений на серин; 2Н7 5сЕм ІдА шарнірна область-ІдаІ СН2-СНЗ, що містить шарнірну область ІдА і області М/Т ІдСсІ; 2Н7 зсЕм ІДА шарнірна область-СН2-СНЗ, що містить шарнірну область ІдА і області СН2-3; 2Н7 ІДАМ/Н ІдДАСН2-Т4СНЗ, що містить шарнірну область ІдДА, СН2 ІДА диких типи і зрізану область СНЗЗ ІдДА без 4 амінокислот на карбоксильному кінці ТСУ.
Похідні з мутаціями в області СНЗ Ід включають 2Н7 зсЕм МТН МУТСН2 МТСНЗ У405, в якому залишок фенілаланіну в положенні 405 (система нумерації по Кабвбаї єї а!., вище) заміщений на тирозин; 2Н7 зсЕм МТН
МТСН2 МТСНЗ А405, в якому фенілаланін в положенні 405 заміщений на аланін; зсЕм МТН М/ТСН2 МТОНЗ
А407, в якому залишок тирозину в положенні 407 заміщений на аланін; зхсЕм МТН УУТСН2 МТСНЗ У405А407, що містить дві мутації; і зєсЕм МТН МУТСН2 МТСНЗ А405А407, що містить дві мутації. 2Н7 зем МТН (055) М/ТСН2СНЗ представляє конструкцію з третім залишком цистеїну в шарнірній області
ІдСсІ, заміщеним на залишок серину. 2Н7 зсЕм їІдДа МТН (555) МТ'СН2М/ТСНЗ 5МІР містить мутантну шарнірну область (МН (555)) і мутантну область СНЕ, в якої пролін в положенні 238 (по Уага єї а.) заміщений на серин.
Похідні 2Н75сЕм-Ід також включають мутанти 2Н7 зсЕм з крапковими мутаціями у варіабельної області важкого ланцюга. Всі подальші конструкції включають мутації, в яких лейцин в положенні 11 у варіабельної області важкого ланцюга заміщений на серин: 2Н7 всбм МНІ15ЕАВ Іда МТН (555-5) МТСН2СНЗ, 2Н7 5сЕм
МНІЛ15ЕА (С55-5) Н МУТСН2 М/СНЗ, що містять шарнірну область, що зазнала мутації, представлену вище; 2Н7 всЕм МНІЛІ15ЕВН (С050-5) НН М/ТСН2 МУСНЗ, що містить шарнірну область, що зазнала мутації, представлену вище; 2Н7 зсЕм УНІ 115 ІДАН ІдАСНа2 Т4СНЗ, що містить шарнірну область ІДА, МТ ІДА СН? і зрізану СНЗ ІдА; 2Н7 зсЕм МНІ-115 ІЗЕСН2 СНЗ СНЯ, що містить області СН 2-4 ІДЕ; 2Н7 зсЕм УНІ 1 І5 (555-5)
ІЧЕСНЗСНА, що містить мутантну шарнірну область і області СНЗ і СНА ІДд4Е; 2Н7 зсЕм МНІ115 тідЕ СН2 СНЗ
СНА, що містить області мишачого ІДЕ; 2Н7 зсЕм МНІ 115 тідАН М/ІСАСНАІа Т4СНЗ, що містить мутації, описані вище, і константну область мишачого ІдА, що складається з області СН2 дикого типу і мутантну область СНЗ; 2Н7 всбм МНІ 115 (555-5) Н КЗ225 СН2 М/СНЗ, що містить мутацію в області СН2 людського Ідаї в залишку 322, де лізин заміщений на серин; 2Н7 зсбм МНІ 115 (055-5) Н КЗ3225 СН2 М/СНЗ, що містить мутантну шарнірну область, представлену вище, і мутантну область СН2, описану раніше; 2Н7 зсЕм МНІ 115 (555-5) Н
РЗЗ15 СН2 Му СНЗ, що містить мутантну шарнірну область, представлену вище, і мутантну область СНІ, в якої пролін в залишку 331 заміщений на серин; 2Н7 5сЕбм МНІ1 І5 (Сб55-5) Н РЗЗ15 СН2 М/СНЗ, що містить мутантну шарнірну область і мутацію із заміною проліну на серин в положенні 331 в області СН2; 2Н7 5сЕм
МНнІлт15 (555-5) Н Т256М СН2 М/СНЗ, що містить мутантну шарнірну область і мутацію із заміною треоніна на аспарагін в положенні 256 в області СН2; 2Н7 зсЕм МНІ 115 (555-5) Н АТРЕ/ОМАК (255-258) СН2 МСНЗ, що містить мутантну шарнірну область і ряд мутацій, в яких залишки 255-258 зазнали мутації із заміною аргініну, треоніну, проліну, глутамінової кислоти відповідно на глутамін, аспарагін, аланін і лізин; 287 зсЕм МНІ 115 (555-5) Н К2900 СН2 М/сСНЗ, що містить мутантні шарнірні області і заміну лізину на глутамін в положенні 290; 2Н7 зсЕм МНІ 115 (555-5) Н АЗ39Р СН2 МСНЗ, що містить мутантну шарнірну область і заміну аланіну на пролін в положенні 339; 5МІР 2Н7 зсЕм (555-5) Н Р2г385 СН2 М/СНЗ, що містить мутантну шарнірну область і заміну проліну на серин в положенні 238 в області СН2, яка є такою ж, як в 2Н7 зсЕм да МтТН (555) МТСНа2
М/ТСНЗ. 2Н7 5сЕм ІДаАН ІСАНСНАО Т18СНЗ містить шарнірну область ІДдА дикого типу і область СНІ і область
СНЗ з усіченою дільницею довжиною 18 амінокислот на карбоксильному кінці.
Зв'язувальна молекула за винаходом може містити нативний і рекомбінантний позаклітинний домен з іншого білка, який приводить до підвищення зв'язувальної здатності молекули. У одному варіанті здійснення позаклітинний домен вибраний з групи, яка складається з СО 154 і СТІ А4. «Синергічна комбінація». СОЗ37-специфічних зв'язувальних молекул і СО20-специфічних зв'язувальних молекул представляє комбінацію, яка володіє ефектом, який вищий в порівнянні з сумою ефектів зв'язувальних молекул при введенні їх одних.
У одному аспекті винаходу зв'язувальні молекули вводять в одній або більше фармацевтичних композиціях. Для введення зв'язувальних молекул людині або підослідній тварині переважно формулювати зв'язувальні молекули в композиції, що містить один або більше фармацевтично прийнятних носіїв. Вираз «Ффармацевтично або фармакологічно прийнятний» належить до молекул або композицій, які не приводять до розвитку алергічних або інших побічних реакцій при введенні з використанням шляхів, відомих в даній галузі, описаних нижче. «Фармацевтично прийнятні носії» включають будь-які або всі придатні для застосування в клініці розчинники, дисперсійні середовища, оболонки, антибактерійні і протигрибкові препарати, ізотонічні речовини і речовини для сповільнення всмоктування і тому подібне.
Крім того, сполуки можуть утворювати сольвати з водою або звичайними органічними розчинниками. Такі сольвати також передбачаються.
Композиції зв'язувальних молекул можна вводити перорально, місцево, трансдермально, парентерально, інгаляційно, інтравагінально, ректально або внутрішньочерепною ін'єкцією. Термін парентарально, в тому значенні, в якому він тут використовується, включає підшкірні ін'єкції, внутрішньовенну, внутрішньом'язову, інтрацістенальну ін'єкцію або інфузії. Також передбачається введення внутрішньовенною, внутрішньошкірною, внутрішньом'язовою ін'єкцією, ін'єкцією в молочну залозу, внутрішньочеревинною, внутрішньооболонковою, ретробульбарною, внутрішньолегеневою ін'єкцією або хірургічною імплантацією в певне місце. Як правило, композиції в основному вільні від пірогенів, а також інших забруднювачів, які можуть бути небезпечними для реципієнта. Переважною є ін'єкція, зокрема, внутрішньовенна.
Фармацевтичні композиції за даним винаходом, які містять зв'язувальні молекули, що застосовуються в способі за винаходом, можуть містити фармацевтично прийнятні носії або добавки в залежності від шляху введення. Приклади таких носіїв або добавок включають воду, фармацевтично прийнятний органічний розчинник, колаген, полівініловий спирт, полівінілпіролідон, карбоксивініловий полімер, натрієву сіль карбоксиметилцелюлози, поліакрилат натрію, альгінат натрію, водорозчинний декстран, карбоксиметил-крохмаль натрій, пектин, метилцелюлозу, етилцелюлозу, ксантанову камедь, аравійська камедь, казеїн, желатин, агар, дигліцерин, гліцерин, пропіленгліколь, поліетиленгліколь, вазелін, парафін, стеариловий спирт, стеаринову кислоту, людський сироватковий альбумін (НА5), маніт, сорбіт, лактозу, фармацевтично прийнятна поверхнево-активна речовина і тому подібне. Використовувані добавки вибрані, але не обмежуються цим, з вищезгаданих добавок або їх комбінацій, там, де що підходить, в залежності від лікарської форми за даним винаходом.
Склад фармацевтичної композиції буде варіювати в залежності від вибраного шляху введення (наприклад, розчин, емульсія). Прийнятну композицію, що містить антитіло для введення, можна приготувати в фізіологічно прийнятному розчиннику або носії. Для розчинів або емульсій відповідні носії включають, наприклад, водні або спиртові/водні розчини, емульсії або суспензії, що включають фізіологічний розчин або забуферене середовище. Розчинники для парентерального введення можуть включати розчин хлориду натрію, розчин декстрози Рінгера, декстрозу або хлорид натрію, розчин Рінгера з лактозою або нелеткі жирні масла. Розчини для внутрішньовенного введення можуть включати різні добавки, консерванти або рідину, поживну речовину або заповнювач електролітів.
Різноманітні водні носії, наприклад, вода, забуферена вода, 0,495-ний сольовий розчин, 0,395-ний гліцин,
або водні суспензії можуть містити активну сполуки в суміші з наповнювачами, прийнятними для отримання водних суспензій. Такі наповнювачі являють собою суспендуючі речовини, наприклад, натрієву сіль карбоксиметилцелюлози, метилцелюлозу, гідроксипропилметилцелюлозу, альгінат натрію, полівінілпіролідон, трагакантову камедь або аравійську камедь; диспергуючі або змочувальні речовини можуть являти собою природний фосфатид, наприклад, лецитин, або продукти конденсації оксиду алкілену з жирними кислотами, наприклад, поліоксіетиленстеарат, або продукти конденсації оксиду етилену з довголанцюжковими аліфатичними спиртами, наприклад, гептадекаетиленоксицетанол, або продукти конденсації оксиду етилену з неповним ефіром, отриманим з жирних кислот, і гекситу, таких як поліоксіетиленсорбіт моноолеат, або продукти конденсації оксиду етилену з неповним ефіром, отриманим з жирних кислот, і ангідридами гекситу, наприклад, поліетиленсорбітан моноолеат. Водні суспензії можуть також містити один або більше консервантів, наприклад, етил- або н-пропіл-, п-гідроксибензоат.
Композиції зв'язувальних молекул можна ліофілізувати для зберігання або відновлення у відповідному носії перед застосуванням. Було показано, що даний метод є ефективним для звичайних імуноглобулінів.
Можна використати будь-які методи ліофілізування і відновлення. Фахівці в даній галузі, очевидно, розуміють, що ліофілізування і відновлення можуть привести до втрати активності антитіла в різній мірі і що дані рівні застосування можуть бути компенсовані.
Дисперговані порошки і гранули, відповідні для приготування водної суспензії доданням води, забезпечують активну сполуки в суміші з диспергючою або змочувальною речовиною, суспендуючою речовиною або одним або більше консервантами. Прикладами прийнятних диспергуючих або змочувальних речовин і суспендуючих речовин є вже вказані вище.
Концентрація зв'язувальної молекули в даних композиціях може варіювати в широких межах, наприклад, від менш ніж приблизно 0,595, як правило, приблизно на рівні або щонайменше приблизно від 195 до 15 або 2090 по масі, і вона буде вибрана в основному з урахуванням об'ємів рідин, в'язкості і т.д., в залежності від вибраного способу введення. Так, типова фармацевтична композиція для парентеральної ін'єкції може бути приготована із вмістом 71 мл стерильної забуференої води і 50 мг антитіла. Типова композиція для внутрішньовенної інфузії може бути приготована із вмістом 250 мл стерильного розчину Рінгера і 150 мг антитіла. Фактичні способи отримання композицій для парентерального введення відомі і очевидні фахівцям в даній галузі і більш детально вони описані, наприклад, в Ветіпдіоп'є Рпаптасеціїса! Зсієпсе, 15Іп єд., Маск
Рибіїзпіпда Сотрапу, Еазіюп, Ра. (1980). Ефективна доза антитіла знаходиться в межах від 0,01 мг до 1000 мг на кг масу тіла на введення.
Фармацевтичні композиції можуть знаходитися в формі стерильної ін'єкційної водної, масляної суспензії, дисперсій або стерильних порошків для приготування стерильних ін'єкційних розчинів або дисперсій екстемпоро. Суспензію можна готувати відомими в даній галузі методами з використанням відповідних диспергуючих або змочувальних речовин, і суспендуючих речовин, вказаних вище. Також стерильний ін'єкційний препарат може являти собою стерильний ін'єкційний розчин або суспензію в нетоксичному, прийнятному для парентерального введення розріджувачі або розчиннику, наприклад, у вигляді розчину в 1,3-бутандіолі. Носій може представляти розчинник або дисперсійне середовище, що містить, наприклад, воду, етанол, поліол (наприклад, гліцерин, пропіленгліколь і рідкий поліетиленгліколь і тому подібне), їх відповідні суміші, рослинні олії, розчин Рінгера і ізотонічний розчин хлориду натрію. Крім того, як розчинник або суспендуюче середовище звичайно застосовують нелеткі жирні масла. Для даної мети можна використовувати будь-яке чисте, нелетке жирне масло, включаючи синтетичні моно- або дигліцериди. У доповнення, при отриманні ін'єкційних препаратів знаходять своє застосування жирні кислоти, такі як олеїновая кислота.
У всіх випадках форма повинна бути стерильною і повинна бути рідкою до такої міри, щоб вона легко набиралася шприцом. Необхідну текучість можна зберегти, наприклад, при використанні оболонки, такої як лецитин, при збереженні необхідного розміру частинок у разі дисперсії і при використанні поверхнево -активної речовини. Форма повинна бути стабільною в умовах виробництва і зберігання і повинна бути стійкою до забруднюючого впливу мікроорганізмів, таких як бактерії і гриби. Попередити дію мікроорганізмів можна при використанні різних антибактерійних і протигрибкових препаратів, наприклад, парабенів, хлорбутанолу, фенолу, сорбінової кислоти, тримерозалу і тому подібне. У багатьох випадках буде бажаним включити ізотонічні речовини, наприклад, цукор або хлорид натрію. Пролонгованого всмоктування ін'єкційних композицій можна досягнути при використанні в композиціях речовин, що забезпечують уповільнене всмоктування, наприклад, моностеарату алюмінію і желатину.
Композиції, придатні для введення, можна готувати разом з речовинами, що посилюють поглинання або всмоктування, з метою підвищення їх ефективності. Такі підсилювачі включають, наприклад, саліцилат, глікохолат/лінолеат, глихолат, апротиніин, бацитрацин, 505, капрат і тому подібне. Дивись, наприклад, Ріх (у.
РНагт. з5сі., 85: 1282-1285, 1996) і Оїїуаї апа 5іеїІа (Апп. Неу. РНнаптасої. Тохісо!., 32: 521-544, 1993).
Крім того, передбачається баланс гідрофільних і гідрофобних властивостей композицій, передбачені для використання у винаході, за допомогою чого підвищується їх застосовність в умовах іп міо і особливо в умовах іп мімо, в той час як інші композиції з відсутністю такого балансу мають меншу застосовність. Зокрема, композиції, передбачені для застосування у винаході, володіють відповідною мірою розчинності у водному середовищі, що дозволяє їм всмоктуватися і бути біодоступними в організмі, в той же час вони певною мірою розчиняються в ліпидах, що дозволяє сполукам проникати через клітинну мембрану до передбачуваного місця дії. Таким чином, композиції, що передбачаються, є максимально ефективними, коли їх можна доставити в місце вияву активності антигену-мішені.
У одному аспекті способи за винаходом включають стадію введення композиції зв'язувальної молекули.
Способи за винаходом здійснюють з використанням будь-яких медичних прийнятних засобів для введення терапевтичного препарату прямо або опосередковано окремому ссавцеві, включаючи, але не обмежуючись цим, прийом всередину, інтраназальне, місцеве, трансдермальне, парентеральне, інгаляційне за допомогою спрею, інтравагінальне або ректальне введення. Термін парентеральне, в тому значенні, в якому він тут використовується, включає підшкірну, внутрішньовенну, внутрішньом'язову і внутрішньочеревинну ін'єкції, а також введення за допомогою катетера і інфузії. Також передбачається внутрішньошкірна ін'єкція, ін'єкція в молочну залозу, внутрішньочеревинна, внутрішньооболонкова, ретробульбарна, внутрішньолегенева ін'єкція або хірургічна імплантація в певне місце.
У одному варіанті здійснення проводять введення в місце локалізації злоякісної пухлини або уражену тканину, коли потрібне лікування прямою ін'єкцією в місце поразки за допомогою уповільненої доставки або за допомогою механізму уповільненої доставки, які приводять до доставки композиції всередину. Наприклад, біодеградовані мікросфери або капсули, або інші конструкції з біодеградованих полімерів, які здатні уповільнено вивільняти композицію (наприклад, розчинний поліпептид, антитіло або малу молекулу) можна включити в композиції за винаходом, імплантовані біля місця локалізації злоякісної пухлини.
Терапевтичні композиції також можна доставляти пацієнту у багато які місця. Множинне введення можна провести одночасно або вводити протягом певного періоду часу. У деяких випадках корисно забезпечити безперервний потік терапевтичної композиції. Можна провести додаткову терапію на періодичній основі, наприклад, що виражається в годинах, добах, тижнях або місяцях.
Композиції зв'язувальних молекул за винаходом можуть містити один вигляд або можуть містити більш ніж один вигляд зв'язувальних молекул. Також в даному винаході передбачається введення композицій зв'язувальних молекул в поєднанні з другим засобом. Другі засоби, передбачені для застосування у винаході, приведені в абзацах нижче.
Другий засіб може представляти пов'язану з В-клітинами молекулу. Інші пов'язані з В-клітинами молекули, передбачені для застосування у винаході, включають зв'язувальні молекули, які зв'язуються з поверхневими молекулами В-клітин, які не є СО37 або СО20. Пов'язані з В-клітинами молекули включають, але не обмежуються цим, СО 19 (антиген В-лімфоцитів СО 19, який також називається поверхневим антигеном
В-лімфоцитів В4 або Гецш-12), СбО21, 0022 (рецептор СО22 В-клітин, який також називається Іеш-14, молекулою клітинної адгезії В-лімфоцитів або ВІ-САМ), СО23, СО040 (поверхневий антиген В-клітин СО40, який також називається членом 5 надсімейства рецепторів фактора некрозу пухлин, рецептор СО40ІЇ або
Вр50), СО80 (антиген активації Т-лімфоцитів СО80, який також називається антигеном активації В7-1, В7, В7-1 або ВВ), СО86 (антиген активації Т-лімфоцитів СО86, який також називається антигеном активації В7-2, В70,
РИМ-1 або ВИб63), СО 137 (який також називається членом 9 надсімейства рецепторів фактора некрозу пухлин), СО 152 (який також називається цитотоксичним білком 4 Т-лімфоцитів або СТІ А-4), І 6 (асоційований з пухлинами антиген 16, який також називається членом 1 трансмембранного надсімейства 4, поверхневим маркером 1 мембранного компонента або М351), СО30 (антиген активації лімфоцитів СОЗО, який також називається членом 8 надсімейства рецепторів фактора некрозу пухлин, рецептором СОЗОЇ або Кі-1), СОБ5О (який також називається молекулою-3 міжклітинної адгезії (САМ3) або ІСАМ-Н), СО54 (який також називається молекулою-1 міжклітинної адгезії (ІСАМІ!І) або рецептором головної групи риновіруса), В7-Н1 (ліганд імуноінгібуючого рецептора, експресований активованими Т-клітинами, В-клітинами і мієлоїдними клітинами, який також називається РО-І1 1; дивись опа еї аї., «В7-НІ, а їШіга тетрбег ої В7 Татіїу, со-5ійтиаев
Т-сеї! ргоїїГегайоп апа іпіепеикіп-10 зесгейоп», Маї. Мед., 5: 1365-1369 (1999), СО134 (який також називається членом 4 надсімейства рецепторів фактора некрозу пухлин, ОХ40, рецептором ОХ401І, антигеном АСТЗ5 або рецептором активованого транскрипцією ТАХ глікопротеїну 1), 4188 (рецептор ліганду 4-188, антиген Т-клітин 4-188 або антиген Т-клітин І А), СО 153 (який також називається членом 8 надсімейства рецепторів фактора некрозу пухлин, лігандом СО30О або СО 30-), СО 154 (який також називається членом 5 надсімейства рецепторів фактора некрозу пухлин, білком активації, асоційованим з ТМЕ, ТААР або антигеном Т-клітин
Ср39) і рецептори ТоїІЇ. Приведений вище перелік конструкцій-мішеней і/або антигенів-мішеней є тільки зразковим і не претендує на те, щоб бути вичерпним.
Цитокіни і фактори росту являють собою другі засоби, передбачені винаходом, і вони включають, без обмеження, одне або більш з ТМЕ, 1-1, 1-2, 1-3, 1-4, 1-5, 1-6, 1-7, 1-8, 1-9, 1-10, 11-11, 11-12, 11-13, 11-14,
І-15, 11-16, 11-17, 11-18, ІМ, (3-С5Е, Мед9-С5Е, (М-С5Е, тромбопоетин, фактор стовбурих клітин і еритропоетин. Фармацевтичні композиції за винаходом можуть також включати інші відомі ангіопоетини, наприклад, Апд-1, Апд-2, Апд-4, Апд-У і/або людський ангіопоетин-подібний поліпептид і/або васкулярний ендотеліальний фактор росту (МЕСЕ). Фактори росту для застосування в фармацевтичних композиціях за винаходом включають ангіогенін, кістковий морфогенний білок-1, кістковий морфогенний білок-2, кістковий морфогенний білок-3, кістковий морфогенний білок-4, кістковий морфогенний білок-5, кістковий морфогенний білок-6, кістковий морфогенний білок-7, кістковий морфогенний білок-8, кістковий морфогенний білок-9, кістковий морфогенний білок-10, кістковий морфогенний білок-11, кістковий морфогенний білок-12, кістковий морфогенний білок-13, кістковий морфогенний білок-14, кістковий морфогенний білок-15, рецептор ІА кісткового морфогенного білка, рецептор ІВ кісткового морфогенного білка, нейротрофічний фактор мозку, циліарний нейротрофічний фактор росту, рецептор є циліарного нейротрофічного фактора росту, індукований цитокінами хемотаксичний фактор 1 нейтрофілів, індукований цитокінами хемотаксичний фактор 25 нейтрофілів, індукований цитокінами хемотаксичний фактор 2рД нейтрофілів, ендотеліальний клітинний фактор росту р, ендотелій 1, епідермальний фактор росту, епітеліальний аттрактант нейтрофілів, фактор росту фібробластів 4, фактор росту фібробластів 5, фактор росту фібробластів 6, фактор росту фібробластів 7, фактор росту фібробластів 8, фактор росту фібробластів 85, фактор росту фібробластів 8с, фактор росту фібробластів 9, фактор росту фібробластів 10, кислий фактор росту фібробластів, основний фактор росту фібробластів, рецептор нейротрофічного фактора росту 0 1 гліальної клітинної лінії, рецептор нейротрофічного фактора росту о; 2 гліальної клітинної лінії, пов'язаний із ростом білок, пов'язаний з ростом білок с, пов'язаний с ростом білок р, пов'язаний с ростом білок у, який зв'язує гепарин епідермальний фактор росту, фактор росту гепатоцитів, рецептор фактора росту гепатоцитів, інсуліноподібний фактор росту І, рецептор інсуліноподібного фактора росту, інсуліноподібний фактор росту І, зв'язувальний білок інсуліноподібного фактора росту, фактор росту кератиноцитів, інгібуючий фактор лейкемії, рецептор с інгібуючого фактора лейкемії, фактор росту нервів, рецептор фактора росту нервів, нейротрофін-3, нейротрофін-4, плацентарний фактор росту, плацентарний фактор росту 2, ендотеліальний клітинний фактор росту тромбоцитів, фактор росту тромбоцитів, ланцюг А фактора росту тромбоцитів, фактор росту АА тромбоцитів, фактор росту АВ тромбоцитів, ланцюг В фактора росту тромбоцитів, фактор росту ВВ тромбоцитів, рецептор о фактора росту тромбоцитів, рецептор о фактора росту тромбоцитів, стимулюючий фактор росту попередників В-клітин, фактор росту стовбурих клітин, рецептор фактора росту стовбурих клітин, трансформуючий фактор росту сх, трансформуючий фактор росту ВД, трансформуючий фактор росту Д1, трансформуючий фактор росту р2, трансформуючий фактор росту р2, трансформуючий фактор росту ДЗ, трансформуючий фактор росту рВ5, пізній трансформуючий фактор росту ДІ, зв'язувальний білок трансформуючого фактора росту р, зв'язувальний білок Ії трансформуючого фактора росту Д, зв'язувальний білок І трансформуючого фактора росту р, рецептор типу | фактора некрозу пухлин, рецептор типу ІЇ фактора некрозу пухлин, рецептор активатора плазміногену урокіназного типу, васкулярний ендотеліальний фактор росту і химерні білки і їх біологічно або імунологічно активні фрагменти.
Приклади хіміотерапевтичних препаратів, передбачених як другі засоби, включають, але не обмежуються цим, алкілуючі агенти, такі як азотистий іприт (наприклад, меклоретамін, циклофосфамід, іфосфамід, мелфалан і хлорамбуцил); нітрозосечовини (наприклад, кармустин (ВСМО), ломустин (ССМІ) і семустин (метил-ССМИ)); етиленіміни і метилмеламіни (наприклад, триетиленмеламін (ТЕМ), триетилентіофосфорамід (тіотепа) і гексаметилмеламін (НММ, алтретамін)); алкилсульфонати (наприклад, буслфан) і триазини (наприклад, дакабазин (ОТІС)); антиметаболіти, такі як аналоги фолієвої кислоти (наприклад, метотрексат, триметрексат і пеметрексат (антифолат з множинними мішенями)); аналоги піримідинів (такі як 5-фторурацил (5-0), фтордезоксиуридин, гемцитабін, цитозин арабінозид (АраС, цитарабін), 5-азацитидин ( 2,2-дифтордезоксицитидин); і аналоги пуринів (наприклад, б-меркаптопурин, б-тиоуанин, азатіоприн, г'-дезоксикоформіцин (пентостатин), еритрогідроксиноніладенін (ЕНМА), флударабін фосфат, г2-хлордезоксіаденозин (кладрибін, 2-СаА)); інгібітори топоізомерази типу І, такі як камптотецин (СРТ), топотекан і іринотекан; природні продукти, такі як епіподофілотоксини (наприклад, етопозид і теніпозид); і алкалоїди рослин барвінок рожевий (наприклад, вінбластин, вінкристин і вінорелбін); протипухлинні антибіотики, такі як актиноміцин ОО, доксорубіцин і блеоміцин; радіосенсибілізатори, такі як
Б-бромдезоксиуридин, 5-йододезоксиуридин і бромдезоксицитидин; координаційні комплекси платини, такі як цисплатин, карбоплатин і оксаліплатин; заміщені сечовини, такі як гідроксисечовина; і похідні метилгідразину, такі як М-метилгідразин (МІН) і прокарбазин.
Не обмежуючі приклади хіміотерапевтичних препаратів, радіоактивних терапевтичних препаратів і інших активних і допоміжних засобів також приведені в таблиці 1.
Таблиця 1
Алкілуючі агенти Природні продукти
Азотисті іприти Препарати з антимітотичною дією
Меклоретамін циклофосфамід Таксани
Іфосфамід Паклітаксел
Мелфалан Алкалоїди рослин барвінок рожевий
Хлорамбуцил вінбластин (МІ В)
Вінкристин
Нітрозосечовини Вінорелбін кармустин (ВСМИ) Таксотере ((доцетаксель))
Ломустин (ССМИ) Екстрамустин
Семустин (метил-ССМИ) екстрамустин фосфат
Етиленамін/метилмеламін Епіподофілотоксини триетиленмеламін (ТЕМ) Етопозид триетилентиофосфорамід Теніпозид (тіотепа) гексаметилмеламін (НММ, алтретамін)
Антибіотики
Акілсульфонати актиноміцин Ю
Бусульфан дауноміцин (рубидоміцин) доксорубіцин (адриаміцин)
Триазини Мітоксантронідарубіцин дакарбазин (ОТІС) Блеоміцин спликаміцин (митраміцин)
Антиметаболіти мітоміцин С
Аналоги фолієвої кислоти Актиноміцин
Метотрексат Афідиколін
Триметрексат
Пеметрексед Ферменти (антифолат для багатьох мішеней)
І -аспарагіназа
Аналоги піримідинів І -аргіназа
Б-фторурацил
Фтордезоксиуридин Радіосенсибілізатори
Гемцитабін Метронідазол цитозин арабінозид Мізонідазол (Агас, цитарабин) 5-азацитидин Десметилмізонідазол 2,2-дифтордезоксицитидин Пімонідазол
Етанідазол
Аналоги пуринів Німоразол б-меркаптопурин Би 1069 б-тіогуанін ЕОЗ9
Азатіоприн вв6145 2г'-дезоксикоформіцин ЗзН4233 (пентостатин) еритрогідроксиноніладенін Нікотинамід (ЕНМА) флударабін фосфат 5-бромдезоксиуридин 2г-хлордезоксіаденозин Б-пйододезоксиуридин (кладрибін, 2-СаА) бромдезоксицитидин
Інгібітори топоізомерази типу
Камптотецин Різні засоби
Топотекан Координаційні комплекси платини
Іринотекан Цисплатин
Карбоплатин
Модифікатори біологічних Оксаліплатин реакцій у відповідь а-с5Е Антрацендіон аМ-С5Е Мітоксантрон
Засоби, що впливають на диференціацію
Заміщена сечовина похідні ретиноєвої кислоти Гідроксисечовина
Гормони і антагоністи Похідні метилгідразину
Адренокортікостероїди/антагоністи М-метилгідразин (МІН)
Преднізон і аналоги Прокарбазин
Дексаметазон
Аїноглутетімід Адренокортікальні суп ресори мітотан (0, р- 000)
Прогестини Айиноглутетимид гідроксипрогестерон капроат медроксипрогестерон Цитокіни
Ацетат мегестрол ацетат інтерферон (ор, у) інтерлейкін-2
Естрогени діетилстилбестрол Фотосенсибілізатори етиніл естрадіол/аналог похідні гематопорфірину фотофрине
Антіестрогени похідні бензопорфірину
Тамоксифен Мреб етиопорфирин олова (5пЕТ2)
Андрогени феоборид-а тестостерон пропіонат Бактериохлорфілл-а флуоксиместерон/аналог На фталоціаніни
Фталоціаніни фталоціаніни цинку
Антіандрогени
Флутамід Променева терапія аналоги гонадотропін- рентгенівські промені вивільняючих гормонів
Лейпролід Уф-світло гамма-опромінення
Нестероїдні антиандрогени видиме світло
Флутамід інфрачервоне опромінення мікрохвильове опромінення
Другі засоби, передбачені винаходом для лікування аутошунних захворювань, включають імуносупресори, які функціонують з придушенням або «маскуванням» імунної системи індивідуума, який піддається лікуванню.
Імуносупресори включають, наприклад, нестероїдні протизапальні засоби (НПЗС), анальгетики, глюкокортикоїди, протиревматичні препарати, що модифікують захворювання (ОМАН), для лікування артриту або модифікатори біологічних реакцій у відповідь. Композиції при описі ОМАНВО також є придатними для лікування багатьох інших аутоіїмунних захворювань крім ВА.
Приклади НПЗС вибрані з групи, яка складається з ібупрофену, напроксену, натрієвої солі напроксену, інгібіторів Сох-2, таких як Міохх і Сеенгех, і сіалілатів. Зразкові анальгетики вибрані з групи, яка складається з ацетамінофену, оксикодону, трамадола або пропоксифену гідрохлориду. Зразкові глюкокортикоїди вибрані з групи, яка складається з кортизону, дексаметазону, гідрокортизону, метилпреднізолону, преднізолону або преднізону. Приклади модифікаторів біологічних реакцій у відповідь включають, але не обмежуються цим, молекули з направленою дією проти клітинних поверхневих маркерів (наприклад, СО4, СО5 і т.д.), інгібітори цитокінів, такі як антагоністи ТМЕ (наприклад, етанерцепт (Епогеї)), адалімумаб (Нитіга) і інфликсимаб (Бетісаде)), інгібітори хемокінів і інгібітори молекул адгезії. Модифікатори біологічних реакцій у відповідь включають моноклональні антитіла, а також рекомбінантні форми молекул. Зразкові ОМАНВО включають, але не обмежуються цим, азатіоприн, циклофосфамід, циклоспорин, метотрексат, пеницилламін, лефлуномід, сульфасалазин, гідроксихлорхин, золото |для перорального (ауранофін) і внутрішньом'язового введення) і міноциклін.
Передбачається, що композицію зв'язувальної молекули і другий засіб можна вводити одночасно в одній лікарській формі. Альтернативно препарати можна вводити в окремих лікарських формах, але одночасно, при тому, що одночасно означає, що препарати вводять протягом 30 хв. по відношенню один до одного.
У іншому аспекті другий засіб вводять перед введенням композиції зв'язувальної молекули. "Перед введенням" означає, що другий засіб вводять в період, що обчислюється від одного тижня перед лікуванням антитілом до 30 хв. перед введенням антитіла. Також передбачається, що другий засіб вводять після введення композиції зв'язувальної молекули. Подальше введення означає, що введення проводять в період від ЗО хв. після лікування антитілом до одного тижня після введення антитіла.
Додатково передбачається, що, коли зв'язувальну молекулу вводять в комбінації з другим засобом, де другий засіб представляє цитокін або фактор росту, або хіміотерапевтичний препарат, введення також може включати застосування радіоактивного терапевтичного препарату або променевої терапії. Променеву терапію, призначену в комбінації з композицією антитіла, проводять згідно з вказівками лікуючого лікаря і в дозах, як правило, тих, що призначаються для лікування пацієнтів зі злоякісними пухлинами.
Кількості зв'язувальної молекули в даній дозі будуть варіювати в залежності від розмірів індивідуума, якому проводять терапію, а також характеристик захворювання, яке піддається лікуванню. У прикладах лікування може бути необхідним вводити приблизно 1 мг/добу, приблизно 5 мг/добу, приблизно 10 мг/добу, приблизно 20 мг/добу, приблизно 50 мг/добу, приблизно 75 мг/добу, приблизно 100 мг/добу, приблизно 150 мг/добу, приблизно 200 мг/добу, приблизно 250 мг/добу, приблизно 500 мг/добу або приблизно 1000 мг/добу.
Можна також вводити дози, основуючись на масі пацієнта, в дозі від приблизно 0,01 до приблизно 50 мг/кг. У близькому варіанті здійснення зв'язувальну молекулу можна вводити в дозі в межах від приблизно 0,015 до приблизно 30 мг/кг. У додатковому варіанті здійснення зв'язувальну молекулу вводять в дозі приблизно 0,015, приблизно 0,05, приблизно 0,15, приблизно 0,5, приблизно 1,5, приблизно 5, приблизно 15 або приблизно 30 мг/кг.
Дані композиції можна вводити в одній дозі або в багатьох дозах. У звичайних дослідженнях залежності доза-ефект, що спочатку проводяться на моделях тварин, а потім в клінічних випробуваннях, встановлюють оптимальні дози для конкретних захворювань і груп пацієнтів.
Введення композиції зв'язувальної молекули знижує популяцію В-клітин щонайменше на 2095 після однієї дози лікування. У одному варіанті здійснення популяція В-клітин знижується щонайменше приблизно на 20, приблизно на 30, приблизно на 40, приблизно на 50, приблизно на 60, приблизно на 70, приблизно на 80, приблизно на 90 або приблизно на 10095. Зниження кількості В-клітин визначається як зменшення абсолютної кількості В-клітин нижче нижньої межі норми. Відновлення В-клітин визначається як відновлення абсолютної кількості В-клітин до одного з наступних значень: 7095 від нормального значення або нормальних меж у суб'єкта.
Введення СО20-специфічних зв'язувальних молекул також приводить до посиленого апоптозу певних субпопуляцій В-клітин. Апоптоз означає індукцію запрограмованої загибелі клітин, що виражається і оцінюється по фрагментації ДНК, зморщуванню клітин, утворенню мембранних везикул або зміні ліпідного складу мембран, що визначають фарбуванням анексином У.
Крім того, введення композицій зв'язувальних молекул за винаходом приводить до бажаних клінічних ефектів відносно захворювання або порушення, яке піддається лікуванню. Наприклад, у пацієнтів з ревматоїдним артритом, в одному аспекті, введення приводить до поліпшення стани пацієнта, що оцінюється в клінічних балах (наприклад, досягає показника Атегісап СоПеде ої Апештаїйоіоду Ргеїїтіпагу Оеєїесійоп ої
Іпргометепі (АСНА20))| і/або поліпшенню на 2095 стани зв'язок і набряклого суглоба і поліпшенню на 2095 у 3/5 випадках по іншим АСВ (Ее!зоп евї аї., Апйгйїів Апейт., 1995, 38: 828-35). Біологічні показники поліпшення стану пацієнтів з НА після введення СОЗ37-специфічних і СО20-специфічних зв'язувальних молекул включають оцінку змін концентрації цитокінів по визначенню рівня білка або РНК. Цікавлячі цитокіни включають, але не обмежуються цим, ТМЕ-о., І--1, інтерферони, Віуз і АРНІЇ.. Зміни цитокінів можуть бути результатом зниження кількості В-клітин або зменшення кількості активованих Т-клітин. У пацієнтів з ВА визначають відповідні маркери обміну в кістковій тканині (резорбція або ерозія кісток) до і після введення СО20О-специфічних зв'язувальних молекул. Відповідні маркери включають, але не обмежуються цим, лужну фосфатазу, остеокальцин, фрагменти руйнування колагену, оксипролін, кислу фосфатазу, стійку до тартрату, і ліганд
ВАМК (ВАМКІ). Інші показники, пов'язані з поліпшенням стану пацієнтів з НА, включають визначення концентрації С-реактивного білка (САР), швидкості осідання еритроцитів (СОЕ), ревматоїдного фактора, антитіл проти ССР (циклічний, який містить цитрулін пептид) і оцінку кількості В-клітин в кров і кількості лімфоцитів проточною цитометрією. Можна також визначити специфічні фактори в синовіальній рідині у пацієнтів 3 ВА, включаючи оцінку рівня В-клітин в синовіальній рідині при її біопсії, рівнів ВАМКІ і інших факторів кісткової тканини і цитокінів, приведених вище.
У близькому аспекті ефекти комбінованого введення відносно інших захворювань оцінюють по показниках,
відомих в даній галузі. Наприклад, передбачається, що у пацієнтів з хворобою Крона після лікування за винаходом має місце поліпшення значення індексу активності хвороби Крона (СОАЇ) в межах від приблизно 50 до приблизно 70 одиниць, в той час як ремісія оцінюється 150 одиницями (5бітопів єї аїЇ, сапа. у. Савіноепі, 1998, 33: 283-868). Число балів 150 або 200 означає норму, в той час як значення 450 відповідає тяжкій формі захворювання. Також бажано, щоб введення СО7-специфічних і СО20-специфічних зв'язувальних молекул приводило до зниження рівня перинуклеарних антитіл проти нейтрофілів (рАМСА) і антитіл проти
Зассаготусез сегмізіає (АЗСА) у індивідуумів із запальним захворюванням кишечнику.
Додатково передбачається, що у дорослих пацієнтів і пацієнтів юнацького віку з міозитом, що піддались лікуванню за винаходом, наступає поліпшення основних показників при оцінці, наприклад, для З з 6, що означає поліпшення приблизно на 20905, при оцінці не більш ніж 2 поліпшення оцінюється приблизно на 2595 по основних показниках (дивись Віаег еї аї., АПА Апейт., 2004, 50: 2281-90).
Додатково передбачається, що у пацієнтів з 5ІЕ, які піддались лікуванню за винаходом, наступає поліпшення по шкалі оцінки активності системного червоного вовчака (ЗАМ) або індексу активності системного червоного вовчака (5ІЕВАЇ) щонайменше на 1 значення (Сіадтап еї аї., )У. Впеитаїй). 1994, 21: 1468-71) (Тап еї аї., Апйпгййв АПейт., 1982, 25: 1271-7). Число балів по 5БІАМ »5 або по 5ІЕБВАЇ 52 розглядається як показник клінічно активного захворювання. Реакцію у відповідь на лікування можна трактувати у вигляді поліпшення або стабілізації по 2 показниках активності захворювання (індексу активності системного червоного вовчака (5 ЕВАЇ| і шкалі активності системного червоного вовчака і по 2 показниках якості життя (оцінка пацієнта загалом і шкала Кгирр Раїїдне бемепу 5саїє) (Реїгі єї аі., Апппів Апейт., 2004, 50: 2858-68). Також передбачається, що введення зв'язувальної молекули пацієнтам з 5 Е приводить до зниження рівня антитіл проти дволанцюжкової ДНК. Альтернативно про поліпшення можна судити по критеріях оцінної системи ВпїїзНи Аззеззтепі Стор Спіепа (ВІГ АС).
Також передбачається, що у пацієнтів з розсіяним склерозом, які піддались лікуванню за винаходом, наступає поліпшення по значенню клінічних балів оцінної шкали Кигіаке Ехрапаєа Оізабійу (ЕОББ) (Кипаке, Е.,
Мешйгоіоду 1983, 33: 1444-52) щонайменше на 0,5 або сповільнення клінічного прогресування захворювання щонайменше на 1,0 по шкалі Кипаке (Ридіск еї аї., Меигоіоду 1997, 49: 358-633).
Додатково передбачається, що у пацієнтів з ПМ, які одержують СОЗ37-специфічні і СО20-специфічні зв'язувальні молекули, має місце зниження одного з п'яти критеріїв по оцінній системі Ідіораїйіс Іпїаттаюгу
Муораїпу Спіепа (ПМС) (Міїег Р., вище). Також передбачається, що введення пацієнтам з ІМ приводить до зниження пов'язаних з М факторів, вибраних з групи, яка складається з креатинкінази (СК), лактатдегідрогенази, альдолази, С-реактивного білка, аспартатамінотрансферази (АСТ), аланінамінотрансферази (АЛТ) і антинуклерного аутоантитіла (АМА), специфічних для міозиту антитіл (М5А) і антитіл проти ядерних антигенів, що екстрагуються. Альтернативно, у пацієнтів є З з б критеріїв, приведених
Відег еї аї., Апппв Апейт., 50(7): 2281-2290 (2004), без погіршення не більш ніж по 2 критеріях.
У деяких варіантах здійснення у пацієнтів з В-клітинною злоякісною пухлиною, які отримують лікування за винаходом, має місце позитивна загалом реакція на лікування при її оцінці по клінічних показниках, добре відомих і звичайно використовуваних в даній галузі, і описаних нижче, таких як зменшення розмірів пухлин, зниження числа пухлин і/або ослаблення симптомів захворювання.
Зразкові клінічні критерії приведені Національним інститутом рака (МС), який поділяє деякі види групи злоякісних пухлин на клінічні категорії «повільно протікаючі» і «агресивні» лімфоми. «Повільно протікаючі» лімфоми включають фолікулярні клітинні лімфоми, що поділяються по їх цитології на «категорії», дифузну дрібноклітинну лімфоцитарну лімфому/хронічну ліфоцитарну лейкемію (СІ, лімфоплазмоцитоїдную/макроглобулінемію Вальденстрема, лімфому маргінальної зони і волосатоклітинну лейкемію. «Агресивні» лімфоми включають дифузну змішану і великоклітинну лімфому, лімфому
Беркітта/дифузну дрібноклітинну лімфому, лімфобластну лімфому, покривноклітинну лімфому і пов'язану зі
СНІДом лімфому. У деяких випадках застосовують міжнародний прогностичний індекс (ІРІ) для агресивної і фолікулярної лімфоми. Фактори, які потрібно враховувати при використанні ІРІ, включають вік (вік «60 років проти віку 260 років), активність лактатдегідрогенази в сироватці крові (нормальні рівні проти підвищених), стан активності (0 або 1 проти 2-4) (дивись визначення нижче), стадію захворювання (І або ІІ проти І! або ІМ) і ураження областей крім лімфатичних вузлів (0 або 1 проти 2-4). Пацієнти з наявністю 2 або більше факторів ризику мають 5095-ний шанс відсутності рецидивів або виживання загалом протягом 5 років.
Стан активності ІРІ при агресивній лімфомі визначають таким чином: опис категорії: 0 - повністю активний, здатний до активності, схожої з такою до початку захворювання, без обмежень; 1 - обмежений в фізичній, яка вимагає зусиль активності, але жвавий і здатний виконувати легку або сидячу, наприклад, легеу домашню роботу, роботу в офісі; 2 - жвавий і здатний доглядати за собою, але не здатний до якої-небудь діяльності, до і приблизно більш ніж 5095 часу не спить; З -здатний тільки до обмеженого догляду за собою, в 5095 часу проводить в ліжку або кріслі; 4 - повністю безпорадний, не здатний доглядати за собою, повністю обмежений постіллю або кріслом; і 5 - смерть. (Дивись Те Іпіегпайопа! Моп-Нодокіп'5 Гутрпота Ргодпозіїс Расіогв Рго|есі.
А ргедісіїме тоде! ог аддгезвіме поп-Нодакіп'є ІМтрпота. М. Епа|. У. Меа. 329: 987-94, 1993).
Як правило, категорію лімфоми клінічно оцінюють з використанням положення про те, що лімфоми низької категорії, як правило, виявляються у вигляді захворювання лімфатичних вузлів і часто є в'ялопротікаючий або повільно зростаючими. Звичайно лімфоми проміжної або високої категорії протікають у вигляді значно більш агресивного захворювання з великим пухлинним навантаженням крім лімфатичних вузлів.
Класифікаційна система Апп Агбог також використовується для оцінки прогресування пухлин, зокрема, неходжкінських лімфом. Згідно з даною системою лімфоми стадій І, ІІ, ПІ ї ІМ у дорослих пацієнтів з МНІ. можна класифікувати в категорії А і В в залежності від того, чи є у пацієнта добре виражені, генералізовані симптоми (В) або ні (А). Позначення В дається пацієнтам з наступними симптомами: втрата, що не піддається поясненню більш ніж 1095 маси тіла протягом 6 місяців до встановлення діагнозу, нез'ясовна лихоманка з підвищенням температури тіла вище 38"С і інтенсивне потовиділення вночі. Визначення стадій є наступним: стадія | ураження одного лімфатичного вузла або локалізоване ураження одного органу або області поза лімфатичним вузлом. Стадія Ії ураження двох або більше лімфатичних вузлів з одного боку діафрагми або локалізоване ураження одного органу або області поза лімфатичним вузлом і його регіональними лімфатичними вузлами з або без інших лімфатичних вузлів з одного боку діафрагми. Стадія Ії ураження лімфатичних вузлів з обох сторін діафрагми, що можливо супроводжується локалізованим ураженням органу або області поза лімфатичними вузлами, ураженням селезінки або обома видами уражень. Стадія ІМ дисеміноване (мультифокальне) ураження однієї або більше області поза лімфатичними вузлами з або без асоційованого ураження лімфатичних вузлів або окреме ураження органу поза лімфатичними вузлами з ураженням віддалених (нерегіональних) лімфатичних вузлів. Додаткові деталі дивись в "Пе Іпіегпайопаї
Моп-НодокКіп'з Гутрпота Ргодпозіїс Расіюгв Ргоіесі: А ргедісіїме тоае! юг аддгеввіме поп-НодаокКіп'5 ІМтрпота",
Мем Епдіапа .). Меад., (1993) 329: 987-994.
У одному аспекті терапевтичний ефект способів за винаходом визначається по рівню реакції у відповідь, наприклад, часткова реакція у відповідь визначається як зменшення пухлини до розміру, що складає менше за половину від її первинного розміру. Повна реакція визначається як повна елімінація захворювання, підтверджена при клінічному або радіологічному обстеженні. У одному варіанті здійснення у індивідуума, який піддався лікуванню за винаходом, є щонайменше часткова реакцію у відповідь на лікування.
Згідно з критеріями Спезоп, що використовуються для оцінки МНІ., розробленими спільно з Національним інститутом рака (Спезоп еї аї., у). Сіїп. Опсої. 1999, 17: 1244; СиПШо-І оре? єї аї., Апп. Опсої. 2000, 11: 399-408), повну реакцію у відповідь отримують, коли є повне зникнення всіх детектованих клінічних ознак, ознак захворювання, що виявляються радіографічними методами, і пов'язаних із захворюванням симптомів, всі лімфатичні вузли повертаються до свого нормального розміру, селезінка меншає в розмірі і в кістковому мозку відсутня лімфома.
Непідтверджену повну реакцію у відповідь отримують, коли у пацієнта спостерігають повне зникнення захворювання і зменшення розміру селезінки, і лімфатичні вузли зазнають регресії більш ніж на 7595, і не визначений стан кісткового мозку. Непідтверджена повна реакція у відповідь відповідає і перевищує критерії для часткову реакцію у відповідь. Загалом, реакцію оцінюють як зниження пухлинного навантаження щонайменше на 50905.
Аналогічні критерії були розроблені для різних інших форм злоякісних захворювань або гіперпроліферативних захворювань, і їх можуть легко знайти фахівці в даній галузі. Дивись, наприклад,
Спезоп еї аї., Сіїп. Аду. Нетаїйоі!. Опсо!. 2006, 4: 4-5, де описуються критерії для оцінки СІ; Спевзоп еї аї|., .).
Сіїп. Опсої. 2003, 21: 4642-9, де описуються критерії для оцінки АМІ; Спезоп еї аї., Віоса 2000, 96: 3671-4, де описуються критерії для оцінки мієлодиспластичних синдромів.
У іншому аспекті реакція у відповідь на лікування у пацієнтів з В-клітинним злоякісним захворюванням виражається у вигляді сповільнення прогресування захворювання в порівнянні з пацієнтами, які не одержують терапію. Визначення уповільненого прогресування захворювання або будь-якого з вказаних вище чинників можна провести з використанням методів, добре відомих в даній галузі, включаючи сканування кісток,
СТ-сканування, сканування з використанням галію, лімфангіограму, МЕНІ, РЕТ-сканування, ультразвукове дослідження і тому подібне.
Також, очевидно зрозуміло, що схему лікування можна змінювати, якщо застосовуються традиційні лікарські препарати в комбінації з препаратами за винаходом.
Як додатковий аспект винахід включає набори, які містять одну або більше сполук або композиції, придатних для способів за винаходом, упакованих таким чином, щоб полегшити їх застосування в практиці способів за винаходом. У найпростішому варіанті здійснення такий набір містить сполуки або композицію, описані тут, як придатні для практичного застосування способу за винаходом, упаковані в контейнері, такому як запаяний бутель або резервуар, з етикеткою, прикріпленою до контейнера або вкладеною в упаковку, на якій описане застосування сполуки або композиції для практичного використання способу за винаходом.
Переважно сполуки або композиція вміщені в разову лікарську форму. Набір може додатково містити пристрій, відповідний для введення композиції переважним шляхом введення або для постановки скринінгового тесту.
Набір може включати етикетку, на якій описане застосування композиції(й) зв'язувальної молекули в способі за винаходом.
Даний винахід також включає промислові вироби. Такі вироби включають СОЗ37-специфічні зв'язувальні молекули і СО20-специфічні зв'язувальні молекули, необов'язково разом з фармацевтичним носієм або розріджувачем і щонайменше одну етикетку, на якій описаний спосіб застосування зв'язувальних молекул за винаходом. Такі промислові вироби можуть необов'язково включати щонайменше один другий засіб для введення разом із зв'язувальними молекулами.
Даний винахід також належить до застосування композиції, що містить СО37-специфічну зв'язувальну молекулу або СОЗ37-специфічну і СО20-специфічну зв'язувальні молекули у виробництві лікарського препарату для лікування або профілактики захворювання, пов'язаного з аномальною активністю В-клітин.
Короткий опис фігур
На фігурі ТА схематично приведена структура молекули ТАШ-016; на фігурі 18 представлені результати аналізу 505-РАСЕ, які показують, що експресований білок мігрує відповідно до молекулярної маси, яка дорівнює приблизно 110 кДа в невідновлюваних умовах і приблизно 52 кДа в відновлювальних умовах; і на фігурі 1С показано, що молекула ТАО-016 виявляє високий рівень специфічного зв'язування з В-клітинами периферичної крові людини і істотно більш низький рівень зв'язування з іншими клітинними субпопуляціями серед клітин, відмінних від В-клітин (СО 19 негативних популяції), при аналізі проточною цитометрією.
На фігурі 2А-Е показане інгібування зв'язування під дією різних реагентів з направленою дією проти СОЗ37.
На фігурі ЗА показано зв'язування РІТС Сід з молекулами ТАШ-016 при інкубації з В-клітинами Натов в нормальній сироватці людини з і без фактора з отрути кобри (СМЕ); на фігурі ЗВ показана СОС активність молекул ТАШ-016 при інкубації з В-клітинами Натоз в нормальній сироватці людини з і без СМЕ; і на фігурі ЗС показана СОС активність молекул ТАИ-016 при інкубації з В-клітинами НКатов і людським або кролячим комплементом.
На фігурі 4 показані хроматограми гель-фільтрації (ЗЕС) при високому тиску (ВЕРХ), отримані при СРС очищенні ТАО-016, при побудові графіка залежності поглинання проти часу втримання для різних зібраних фракцій.
На фігурі БА показані зв'язувальні властивості фракцій, отриманих при 5ЕС; на фігурі 5В приведені дані по
СОС активності фракцій, отриманих при 5ЕС; і на фігурі 5С показана АОСС активність фракцій, отриманих при
ЗЕС.
На фігурі 6 приведені дані по СОС активності ТАО-015, ритуксану, ТВО-016 або їх комбінацій на В-клітинах
Ватозв.
На фігурі 7 показаний вплив ТАО-016 на СОС активність ТАО-015 на В-клітинах ОНІ -4.
На фігурі 8 показаний вплив ТАО-016 на СОС активність ТАО-015 і ритуксану.
На фігурі 9 показаний вплив ТВО-016 на ТА0Ш-015 в тесті визначення СОС активності.
На фігурі 10 показаний вплив ТАШО-016 на ритуксан в тесті визначення СОС активності.
На фігурі 11 показана взаємодія ТАШ-015 і ТА0-016 в тесті визначення АОСС активності з використанням клітин ВОАВ.
На фігурі 12 показана взаємодія ТАШ-015 і ТА0-016 в тесті визначення АОСС активності з використанням клітин Оацаї.
На фігурі 13 показана взаємодія ТАШ-015 і ТА0-016 в тесті визначення АОСС активності з використанням клітин Натозв.
На фігурі 14 показаний вплив ритуксану, ТАИ-О16 і їх комбінації на специфічну загибель клітин ВОАВ.
На фігурі 15 показаний вплив ритуксану, ТАИ-О16 і їх комбінації на специфічну загибель клітин ВОАВ.
На фігурі 16 показаний вплив ТАО-015, ТАО-016 і їх комбінації на специфічну загибель клітин ВОАВ.
На фігурі 17 показаний вплив ТАО-015, ТАО-016 і їх комбінації на специфічну загибель клітин ВОАВ.
На фігурах 18А-О показано, що димери ТАО-016 не опосередковують одну СОС, але посилюють СОС активність ритуксимабу в умовах іп міо.
На фігурах 19А-В показано, що очищений на протеїні А ТА0О-016 індукує апоптоз клітин Натоз і бацаї, в той час як для димерів необхідне перехресне зв'язування.
На фігурі 20 показано, що ТАО-016 переважно знижує кількість нормальних В-клітин з культур РВМО.
На фігурі 21 показана ефективність ТАО-016 в порівнянні з пидсе, ритуксаном і комбінованою обробкою
ТАО-016 і ритуксану відносно об'єму пухлин у тварин.
На фігурах 22А і В показано, що димери ТАШ-016 виявляють високу протипухлинну активність за даними визначення об'єму пухлин і процента виживаності на моделі ксенотрансплантатів пухлин.
На фігурі 23 показано, що димери ТАО-01б6 не посилюють СОС активність за результатами обробки специфічними реагентами для МН, СО 19, СО80/86 або СО45.
На фігурі 24 представлені дані по проценту виживаності мишей з пухлинами Натоз (період спостережень до 90 діб) після обробки ТАШ-016, ритуксимабом і їх комбінацією.
На фігурах 25 і 26 представлений процент загибелі мишей з пухлинами Оацаї (період спостережень до 90 діб) після обробки ТАИ-016 або ритуксимабом.
На фігурі 27 показано, що ТАИ-016 ефективно знижував відносну життєздатність клітин, оброблених флударабіном, тим самим, потенціюючи цитотоксичну дію одного флударабіну.
На фігурі 28 показано, що ТАИ-016 індукував більш високу токсичність для клітин в порівнянні з герцептином або ритуксимабом на резистентних до ритуксимабу клітинних лініях.
На фігурі 29 показано, що ТАО-016 індукував фосфорилювання тирозину в СО 19-- В-клітинах первинної
СІ.
На фігурі ЗОА приведена консенсусна амінокислотна послідовність гуманізованої конструкції ТАШ-016
Мо.019001 (5ЕО І МО:6) ії ТА!А0О-016 (5ЕО І МО:2) за системою нумерації Караї; на фігурі ЗОВ показані зіставлення амінокислотних послідовностей трьох гуманізованих конструкцій ТАО-016 (019001, 019008 і 109009).
На фігурі 31 приведені зіставлення ДНК- і амінокислотних послідовностей трьох гуманізованих конструкцій тТАО-016 (019001, 019041 і 019044).
На фігурі 32 представлені зіставлення послідовностей в форматі ЕАБТА тих же трьох гуманізованих конструкцій ТАО-016 (019001, 019041 і 019044).
Приклади
Додаткові аспекти і докладні деталі винаходу стануть очевидними з подальших прикладів, які призначаються для ілюстрації а не обмеження. У прикладі 1 описане отримання СО37-специфічної зв'язувальної молекули; в прикладі 2 показано, що ТАШ-016 і різні СО37-специфічні антитіла розпізнають одні і ті ж або епітопи, що перекриваються; в прикладі З показано, що ТА0-016 мало активний в зв'язуванні Сід і активуванні класичного шляху активації комплементу; в прикладі 4 показана активність і зв'язування мультимерів ТАШ-016; в прикладі 5 описане отримання СО20-специфічної зв'язувальної молекули; в прикладі б показано, що комбінації ТАО-016 з ТА0О-015 або ритуксаном синергічно посилюють апоптоз В-клітин; в прикладі 7 показано, що комбінації Т8О-016 з СО20-специфічними антитілами або 5МІР синергічно посилюють СОС; в прикладі 8 показано, що ТАО-016 посилює АЮОСС і СОС активність СО2О-специфічних антитіл і ЗМІР; в прикладі 9 показано, що ТА!ШИ-016 індукує апоптоз В-клітин; в прикладі 10 показано, що комбінації СБ37-специфічних 5МІР з СО20-специфічним антитілом синергічно зменшують об'єм пухлин на моделі пухлинних ксенотрансплантатів на мишах; в прикладі 11 показано, що СО37-специфічні 5МІР. одні також зменшують об'єм пухлин на моделі пухлинних ксенотрансплантатів на мишах; в прикладі 12 показано, що ТАШ-016 не надає впливу на СОС активність відносно інших поверхневих рецепторів В-клітин; в прикладі 13 показано, що ТАО-016 не посилює СОС активність відносно різних рецепторів-мішеней, включаючи МНС,
СО 19, Сб080/86 і СО40; в прикладі 14 представлені додаткові дані, що показують, що ТАШ-016 підвищує виживаність мишей з пухлинами в умовах іп мімо; в прикладі 15 показано, що ТАИ-016 потенціює індуковану флударабіном загибель клітин СІ! в умовах іп мйго; в прикладі 16 показано, що ТАИ-016 індукує прямий цитотоксичний ефект відносно резистентних до ритуксимабу клітин; в прикладі 17 показано, що ТА!АО-016 індукує фосфорилювання тирозину в СО 19-- В-клітинах первинної Сі; і в прикладі 18 приведені молекули гуманізованих ТАШ-016.
Приклад 1
Отримання СО37-специфічної зв'язувальної молекули
СО037-специфічні 5МІР описані в спільній заявці на патент США Ме 10/627556 і патентних публікаціях США
Мо 2003/133939, 2003/0118592 і 2005/0136049. Отримували зразковий МІР, ТАО-016, як описано нижче. тАи-016 (й28-1 всбм МНІ115 (550-Р)Н М/СН2 М/СНЗІ представляє рекомбінантний одноланцюжковий білок, який зв'язується з антигеном СО37. Зв'язувальний домен оснований на послідовності антитіла 28-1, раніше розкритій в патентних публікаціях, перерахованих в попередньому абзаці, розкриття яких включене тут посиланням. Зв'язувальний домен пов'язаний з ефекторним доменом, СНаІ і СНЗ областями людського Ідаі за допомогою модифікованої шарнірної області. ТАО-016 в розчині знаходиться у вигляді димера, і димер має теоретичну молекулярну масу, яка дорівнює приблизно 106000 дальтон.
Виділяли загальну фракцію РНК з гібридоми, яка продукує Сс28-1, з використанням реагенту на РНК Тііагої (сірсо), слідуючи інструкціям виготовлювача. Отримували кКДНК з використанням 5 мкг РНК, довільних праймерів і зворотної транскриптази Бирегзогірі І (Сірсо ВА). Варіабельні області клонували з використанням пулів вироджених праймерів для сімейств генів різних мишачих МІ або МН. Варіабельні області з гібридоми (28-1 клонували в клонуючі вектори РСА 2.1 ТОРО (Іпмігодеп) і секвенували ДНК з трансформантів з вставками потрібного розміру. Потім варіабельні області важкого і легкого ланцюгів з потрібних клонів використовували як матрицю для ампліфікації ПЛР (5328-1 5сЕм, сполученого разом в орієнтації МІ-МН, з лінкер 15 аа (діу4зег3). зсЕмМ проти СО37 приєднували до модифікованої шарнірної області людського Ід, областей СН2 і СНЗ (дивись фігуру 1А). Для гарантії адекватної експресії клітинами ссавців відбирали модифікації варіабельних областей, що дозволяють забезпечити істотне посилення експресії в клітинах ссавців. Зокрема, лейцин замінювали на серин в положенні 11 зсЕм. Передбачуваний зрілий пептид був довжиною 473 амінокислоти.
Полінуклеотидна послідовність, що кодує ТАШ-016, і амінокислотна послідовність ТАИ-016 відповідно представляють 5ЕО ІЮ МО: 1 і 2.
ТАО-016 отримували технологією рекомбінантної ДНК в експресуючій системі клітин ссавців, клітинах яєчників золотистого хом'яка (СНО). Трансфіковані клітини СНО, які продукують ЗМІР, культивували в біореакторі з використанням прийнятного середовища.
ТАО-016 5МІР виділяли з культуральних супернатантів СНО афінною хроматографією на протеїні А. С використанням ЯРВО колонку з 50 мл "Протеїн А/сефароза ЕЕ (СЕ НеаїїШсаге гРгоїєїп А Зернагозе ЕЕ,
Саїаіюдеае 17-0974-04) врівноважували з швидкістю потоку 5,0 мл/хв. (150 см/год.) 1,5 об'ємами колонки (СМ).
Культуральний супернатант наносили на колонку з "Протеїн А/сефароза ЕЕ з швидкістю проточної рідини 1,7 мл/хв. з використанням повітряного зонда АКТА 100 (СЕ Неайнсаге АКТА Ехріогег 100 Аїг, номер по каталогу й18-1403-00), із захопленням рекомбінантного ТАО-016. Колонку промивали аРВЗ5 в кількості 5 об'ємів колонки (СМ), потім 1,0 М Масі, 20 мМ фосфатом натрію, рН 6,0, і потім 25 мМ масі, 25 мМ МабАс, рН 5,0. Дані стадії промивання приводили до видалення неспецифічно зв'язаних білків клітин-хазяїв СНО з колонки з "Протеїном
А, які вносять свій внесок в осадження продукту після елюювання.
Рекомбінантний ТАШ-016 елюювали з колонки 100 мМ гліцину, рН 3,5. Отримували фракції елюйованого продукту об'ємом 10 мл |і потім елюйований продукт доводили до рн 50 Щ 05мМ 2-(М-морфоліно)детансульфоновою кислотою (МЕ5), рН 6,0 в кількості 2095 від елюйованого об'єму. Даний елюйований продукт отримували для очищення СРС концентруванням проби приблизно до 25 мг/мл ТАИО-016 і потім стерилізували пропусканням через фільтр для очищення СРО.
Потім очищений білок піддавали СРС гель-фільтрації (ЗЕС) для додаткового очищення молекули
ТАО-016 (димера) від агрегатів з більш високою молекулярною масою. При використанні ОРВ5 колонку ХК 50/100 (пуста хроматографічна колонка СЕ Неаїїпсаге ХК 50/100, номер по каталогу 418-8753-01), що містить 1 л сефарози Зирегаєх 200 ЕЕ, врівноважували з швидкістю потоку 12,6 мл/хв. (38 см/година) 1,5 об'ємами колонки. Максимальний об'єм 54 мл (395 СМ) проби наносили на колонку. Колонку продовжували елюювати з швидкістю 12,6 мл/хв., і елюйований білок фракціонували на фракції по 40 мл. Кожну фракцію аналізували на якість продукту з використанням аналітичної ВЕРХ, і елюйовані фракції ТАЮ-016 з 29595 РОЇ (які не піддались агрегації) об'єднували. Дану отриману об'єднану фракцію стерилізували пропусканням через фільтр з розміром пор 0,22 мкм. Потім речовину концентрували і переводили в розчин 20 мМ фосфату натрію і 240 мМ сахарози з отриманим рН 6,0. Композицію фільтрували перед перенесенням в скляні флакони з концентрацією 10 мг/мл.
Кожний скляний флакон містив 5 мл ТАШ-016 (50 мг/флакон).
Білок ТАШ-016 також піддавали аналізу 505-РАСЕ на гелях з 4-2095 Тріс-гліцином Момех (Іпийгодеп, Зап
Оієдо, СА). Проби наносили з використанням буфера для зразків 505 Тріс-гліцин Момех (2х) в відновлювальних умовах (додання 1/10 об'єму відновника для проб МИРАСЕ) або невідновлювальних умовах після нагрівання при 957С протягом З хв. з подальшим проведенням електрофорезу при 150 В протягом 90 хв.
Електрофорез проводили з використанням буфера для електрофорезу їх Тріс-гліцин Момех 505 (Іпмігодеп).
Гелі після електрофорезу забарвлювали фарбою Кумассі 505-РАСЕ В-250 протягом 30 хв. при струшуванні, і фарбу видаляли щонайменше протягом 1 год. Передбачуване значення молекулярної маси зрілого пептиду становить 51,5 кДа. У відновлювальних умовах рекомбінантний білок мігрує відповідно передбачуваній молекулярній масі. У невідновлюваних умовах молекула мігрує відповідно масі, що становить приблизно 150 кДа (фігура 18).
Також проводили досліди з метою визначення того, що специфічність зв'язування вихідного антитіла з клітинним поверхневим рецептором СО37 зберігається у ТАО-016. Людські РВМС виділяли в градієнті щільності середовища для розділення лімфоцитів і інкубували з некон'югованим ТАШ-016 і РЕ-кон'югованими антитілами проти людського СО 19. Клітини промивали і інкубували з РІТС САН Ідс 1:100 (Рс-специфічним)
протягом 45 хв. на льоду. Клітини промивали і аналізували двоколірною проточною цитометрією на цитометрі
ЕАСзсСаїїриг з використанням програмного забезпечення СеПОпцеві. Клітини аналізували з вікном збудження на
В-лімфоцити або відмінні від В-лімфоцитів при фарбуванні СО 19.
При збільшенні концентрацій ТАО-016 сигнал РІТС на В-лімфоцитах (СО 19 позитивне вікно) швидко зростав від 0,01-1,0 мкг/мл доти, поки він не досягав насичення приблизно при 1 мкг/мл або середнього значення інтенсивності флуоресценції (МЕ), що дорівнює 1000. У протилежність фарбування популяції клітин, відмінних від В-лімфоцитів, зазнавало детектування, але було дуже слабким і повільно зростало з підвищенням концентрації зсЕмІд. Таким чином, характер фарбування мишачим моноклональним антитілом (х28-1 зберігається у ТАО-016 (фігура 1С).
СО37-зв'язувальні молекули за винаходом мають структури (зв'язувальні області з антитіла, варіанти шарнірної області, де СН2СНЗ області є такими ж або іншими, і різних ізотипів).
Приклад 2
ТАО-016 і різні СО37-специфічні антитіла зв'язуються з одними і тими ж або епітопами, що перекриваються, в СО37
Проводили досліди з метою ідентифікації епітопу СО37, що зв'язується з ТАИ-016 і іншими описаними раніше СВ37-специфічними антитілами.
Некон'юговані МВ371 (2555457) і ЕІТО-кон'юговані МВ371 (Ж555456) отримували від ВО Ріаптіпдеп (Зап
Чозе, СА), РІТО-кон'юговані ВІ 14 (20457) - від Іттипоїесп/Весктап Соцшіег (Ешепоп, СА), РІТО-кон'юговані
МмММм46 (2АОІ-СВІ 1367) і некон'юговані МММА4б6 (2ЖА0І-СВІ 136) - від ВО (Ріапаєтв, МУ), РІТО-кон'юговані
ІРО24 (186-040) і некон'юговані ІРО24 (Ж186-020) - від Апсеї! Согрогайоп (Ваурогї, ММ), РІТО-кон'юговані ННІ (23081) і некон'юговані ННІ (23080) - від ОіаТес. Сот. (О5іІо, Могмау) і ЕІТС-кон'юговані М/817 (У5АТМСА48ЗЕ) і некон'юговані М/А17 (М5АТМСА4835) - від Ассигаїє СПпетіса! 5 Зсієепійс (Ууезіригу, ММ). Білок ТАО-016 отримували, як описано в прикладі 1.
ТАО-016 кон'югували з РІТС в Тгпиріоп з використанням набору для введення мітки МоіІесшаг Ргоревз
Ріногогеропег РІТС (Е6434), слідуючи інструкціям виготовлювача, таким чином: цікавлячий пік білюка ТАО-016 (РОЇ) з концентрацією 13,5 мг/мл доводили до 5 мг/мл з використанням РВ5Б. 1 мг (200 мкл) вносили в пробірки, що є в наборі, з перемішуючим стержнем і додавали 1М Мансоз (доводили до рН 8,5 6Н розчином Маон) до кінцевої концентрації 0,1 М. Додавали 50 мкл ДМСО до 370 мкг РІТС і вносили в пробірки при молярному співвідношенні РІТС:бийокК, що дорівнює 15, 20, ЗО і 40, з використанням наступної формули для визначення мкл РІТС для додання: |мкл розчину РІТС для внесення - 5 мг/мл білках 0,2 мл х 389 х 100 х бажане молярне співвідношення/молекулярна маса ТАШ-016 (110000).
Реакційні суміші ставили в темряву і безперервно перемішували протягом 75 хв. при кімнатній температурі.
Реакційні суміші наносили на обертові колонки, приготовані, як описано в інструкції до набору, і центрифугували при 1100 9 протягом 5 хв. із заміною буфера на РВ5 з азидом і видаленням некон'югованого
РІТО. Визначали оптичну густину при 280 нм і 494 нм при доданні 2 крапель Мапоадгор; експериментально встановлювали для даного приладу коефіцієнт екстинкції для ТА0О-016 при вимірі показника для розведення вихідного некон'югованого 5МІР, концентрація кожного з кон'югатів становила 4,25 мг/мл, і визначали значення при наступних співвідношеннях РІТС:білок: 2,7 РІТС:ТА!А0О-016 при співвідношенні 15; 3,7
РІТС:ТАШО-016 при співвідношенні 20; 4,4 РІТС:ТА0О-016 при співвідношенні 30 і 5,1 РІТС:ТАО-016 при співвідношенні 40.
Додавали В5А до концентрації З мг/мл для стабілізації білка. Зв'язування кожної фракції оцінювали при розведенні від 100-24300х на клітинах Натовз і 3200-25600 на людських РВМО. Всі зв'язувалися, але співвідношення МАЗ30О було вибране для подальшого використання, оскільки воно давало високе значення МРЇ, яке добре зберігалося у використовуваних межах титрування, вказуючи на те, що в даній реакції виявлявся мінімальний вплив на авідність зв'язування.
У первинному дослідженні зв'язування кон'югати міченого РІТС антитіла титрули в межах від 10 нг/мл до мкг/мл з метою встановлення оптимальних кількостей для використання в дослідах з блокуванням.
Вибрана концентрація була дещо нижча насичуючих кількостей, і її зберігали сталою в подальших дослідах, в той час як концентрації блокуючого антитіла збільшували в 10-кратних межах. За даними будували графік залежності процента максимального зв'язування від концентрації блокуючого антитіла, при тому, що більш високі концентрації вказували на менш ефективне блокування, в той час як більш низькі концентрації вказували на більш високу активність блокування, що є. Всі тестовані антитіла виявили блокуючу активність при максимальному зв'язуванні, що спостерігається без не мічених реагентів (фігура 2).
Потім клітини ВОАВ, В-лімфобластоїдна лінія В-клітин (люб'язно надана Еа. Сіагк, Опімегейу ої УМазпіпдіоп), забарвлювали панеллю різних клонів МАЄ проти СО37, включаючи МВ371, ВІ 14, МММ46, ІРО24, ННІ, М/А17 і
ТАО-016 5МІР.
Для постановки дослідів по конкурентному зв'язування 2,5х105 клітин ВАВ інкубували в 96-ямкових планшетах з -подібним дном в середовищі для фарбування (РВ5 з 295 мишачої сироватки) з
РІТО-кон'югованими МАЬ проти СО37 в концентрації 1,25 мкг/мл в присутності некон'югованих МАБ проти
СО37 у вказаних концентраціях (2,5, 1,25, 0,6 або 0,3 мкг/мл) або в середовищі для фарбування протягом 45 хв. на льоду в темряві. Блокуючі антитіла і РІТОС-мічені кон'югати антитіл вносили в реакційні суміші перед доданням клітин. Потім клітини промивали 2,5 рази РВ5 і фіксували в 195 параформальдегіді (2419943, ОВ,
СіІєемеіапа, ОпПіо). Клітини аналізували проточною цитометрією з використанням цитометра ЕАсСзсСаїриг і програмного забезпечення СеїОиезі (ВО Віозсіепсев, Зап уове, СА).
Для постановки дослідів по перехресному блокуванню з ЕАСв 2,5х107 клітин ВУОАВ інкубували в 96-ямкових планшетах з О-подібним дном в середовищі для фарбування (РВ5 з 295 мишачої сироватки) в присутності некон'югованих МАБ проти СО37 в концентрації 5 мкг/мл середовища для фарбування протягом хв. при кімнатній температурі на льоду в темряві. Потім БІТО-кон'юговані МАЮ проти СО37 вносили в кінцевій концентрації 2 мкг/мл з розведенням не мічених реагентів до концентрації 3,3 мкг/мл. Потім реакційні суміші додатково інкубували протягом 45 хв. при кімнатній температурі в темряві. Реакційні суміші промивали
2,5 рази РВ5 і фіксували в 195 параформальдегіді (219943, БВ, Сіємеіапа, Опіо). Клітини аналізували проточною цитометрією з використанням цитометра ЕРАСзсСаїїйриг і програмного забезпечення СеПОиезі (ВО
Віозсіепсез, Зап дове, СА).
Для постановки клітинних тестів по зв'язування клітини суспендували в РВ5 (2414040-133, Сірсо/Іпийгодеп,
Стапа Івіапа, МУ), що містить 295 ЕВ5 (Я16140-071, Сірсо/пуйгодеп, Стгапа ІвіІапа, МУ) (Середовище для фарбування) з отриманням титру приблизно 4х105 клітин/мл. Потім клітини висівали в планшети і потім вносили тестовані проби, розведені в середовищі для фарбування, в співвідношенні 1:1 до кінцевих вказаних концентрацій. Реакційні суміші інкубували протягом 45 хв. на льоду. Проби центрифугували і промивали 2 рази РВ5. Додавали мічений РІТС козячий антилюдський Ідс (2НІ10О501, СаІТад, Випіпдате СА) до кінцевого розведення 1:50 і інкубували протягом 45 хв. на льоду. Проби центрифугували, промивали РВ5, потім фіксували в 195 параформальдегіді в РВ5 (2419943, ОВ, СіІеємеЇапа, ОпПіо). Клітини аналізували проточною цитометрією з використанням цитометра ЕАСзСаїїриг і програмного забезпечення СеПОиеві (ВО Віозсієпсез,
Зап дове, СА).
Було показано, що кожне антитіло виявляло залежне від дози інгібування зв'язування, цей факт вказує на те, що всі тестовані молекули зв'язуються з одним і тим же або дуже близьким епітетом. Для кожного антитіла спостерігали різну активність в інгібуванні зв'язування. ТВО-016 5МІР володіли найбільш високою блокуючою активністю з всіх тестованих молекул, в той час як ННІ виявляли проміжний рівень блокуючої активності, і
М/В17, ІРО24 блокували сильніше, ніж МВ371, але були менш ефективними в блокуванні, ніж дві інші не мічені молекули (фігура 2).
У доповнення до аналізу блокуючої активності проводили аналогічну серію експериментів, в яких різні антитіла проти СО37 тестували на їх здатність конкурувати один з одним за зв'язування з рецептором СОЗ37.
Результати даних дослідів, як і результати, отримані в експериментах по блокуванню для всіх тестованих молекул, вказували, що різні антитіла проти СОЗ37 і ТАО-016 мають одні і ті ж або епітопи, що перекриваються.
Приклад З
ТАО-016 мало активний в зв'язуванні Сід і активуванні класичного шляху активації комплементу
Проводили експерименти для дослідження того, чому димер ТА0О-016 не здатний опосередковувати високу залежну від комплементу загибель В-клітин-мішеней. Однією можливістю є те, що димер ТАО-016 виявляє низьке зв'язування з компонентами каскаду комплементу в порівнянні з нормальним людським
ІдСІ-антитілом. Таким чином, проводили досліди з метою визначення того, чи активує ТАО-016 класичний шлях активації комплементу при оцінці зв'язування ТАИ-016 з Сід. Сід являє собою субодиницю ферментного комплексу СІ, який активує сироваткову комплементну систему і є компонентом розпізнавання класичного шляху активації комплементу.
Досліди по зв'язуванню з Сід проводили, як описано раніше (Стадо еї а!., Віоса 2004, 103: 2738-2743).
Коротко, В-клітини Натозх в середовищі Ізсоме (2412440-053, Сірсо/Іпийгодеп, Стапа Ізіапа, МУ) без сироватки висівали в 96-ямкові планшети з О-подібним дном з титром 5х10? клітин/ямку в 100 мкл. Клітини інкубували з реагентами протягом 15 хв. при 37"С і потім вносили нормальну людську сироватку (МН, 2А113, Омшіає! Согр.,
Зап Оіедо, СА), розведену в середовищі Ізсоме, в об'ємі 50 мкл в кожну ямку до кінцевої концентрації 10, 5, 2,5 або 1,2595 людської сироватки. 50 мкл середовища вносили в контрольну ямку. Для дослідів з чинником з отрути кобри СУЕ додавали до проб комплементу людської сироватки з розрахунку 20 Од. СМЕ/мл сироватки на 90 хв. при 37"С перед внесенням сироватки до проб комплементу і з урахуванням розведення сироватки
СМЕ при приготуванні розведення проб.
Клітини плюс джерело комплементу інкубували ще протягом 5 хв. при 37"С і промивали 2 рази холодним
РВБ5 (2414040-133, Сірсо/пмийгодеп, Стапа Ізіапа, МУ) при центрифугуванні, і ресуспендували в 100 мкл РВ5. 50 мкл з кожної ямки переносили у другий планшет для проведення другої стадії контрольного фарбування.
Обидва планшети забарвлювали протягом 15 хв. в темряві на льоду або міченому РІТС анти-НО Сід (2С7850-06А, 5 Віоіодіса!, Зматресоїї, Мавг5), або міченим РІТСО овечим Ідс: (411904-56Р, 05 Віоіодісаї,
Зматрзсоїї, Маз5). Проби промивали, ресуспендували в холодному РВ5 і відразу ж знімали показники на проточному цитометрі ЕАСзСаїрит, і їх обробляли з використанням програмного забезпечення СеПОиезі (ВО
Віозсіепсев, Зап чЧове, СА).
РІТО Сід не зв'язувався значною мірою ні з однією субфракцією очищеного БЗЕС ТАШ-016, незважаючи на те, що фракція з більш високою молекулярною масою (НМУУ) або агрегати А2 зв'язувалися сильніше в порівнянні з іншими формами (фігура ЗА). У протилежність ритуксан виявляв більш високий рівень зв'язування з Сід, зокрема, при більш низьких концентраціях МН5. Присутність СУМЕ не могла повністю блокувати дане зв'язування, хоч, значення МРЕЇ достовірно меншали в порівнянні з одним середовищем.
Потім ставили тести за оцінкою СОС для порівняння здатності різних субфракцій очищеного ТАШ-016 і ритуксану опосередковувати загибель клітин в присутності або за відсутності СУЕ і людського сироваткового комплементу (фігура ЗВ). Тести по СОС проводили з використанням фарбування пропідієм йодидом для диференціації рухомих і мертвих клітин після інкубації клітин-мішеней з антитілом, рекомбінантними білками, асцитною рідиною, молекулами ТАИ-016 або середовищем і джерелом комплементу, таким як людська сироватка. Коротко, З х 105 В-клітин Ватоз попередньо інкубували з тестованими реагентами протягом 30-45 хв. при 37"С перед внесенням комплементу. Попередньо зв'язані проби центрифугували, промивали і ресуспендували в середовищі Ізсоме (ЖА113, Оцідеі, Зап Оієдо, СА) у вказаних концентраціях, потім інкубували протягом 90 хв. при 37"С. Проби промивали і додавали пропідій йодид (ЖР-16063, МоїІесшаг Ргобез,
Ецпдепе, ОР) до кінцевої концентрації 0,5 мкг/мл в РВ5. Клітини інкубували з пропідієм йодидом протягом 15 хв. при кімнатній температурі в темряві і потім аналізували проточною цитометрією на цитометрі РАСзсСаїїриг з використанням програмного забезпечення СеїОиезі (ВО Віозсіепсев, Зап уове, СА).
Загибель клітин, опосередкована фракцією А2 ТАШ-016 і ритуксаном, була достовірно нижча в присутності
СМЕ, незважаючи на його нездатність повністю блокувати зв'язування Сід (фігура 3В).
Потім проводили порівняння людського і кролячого комплементу по їх здатності до СОС в присутності
ТАИ-016. Оцінювали активність до СОС молекул ТАШ-016, інкубованих з В-клітинами Натоз і людським або кролячим комплементом (фігура ЗС). В-клітини Натоз вносили в ямку з безсироватковим середовищем.
Ритуксан або димер, НМУУ А2 або рА фракції ТАО-016 додавали до клітин з отриманням кінцевої концентрації мкг/мл і інкубували протягом 15 хв. при 37"С перед промиванням 1,5х в безсироватковому середовищі і доданням нормальної людської сироватки (МН5) або кролячого комплементу (Реїїгеєег) при концентрації 10, 5 або 2,595. Клітини плюс джерело комплементу інкубували протягом 90 хв. при 37"С. Клітини промивали один раз холодним РВ5 і вносили пропідій йодид (МоіІесшаг Ргобез, 2Р3566) до кінцевої концентрації 0,5 мкг/мл в холодному РВО5. Клітини інкубували з РІ в темряві при кімнатній температурі протягом 15 хв. і потім аналізували проточною цитометрією.
Походження фракції комплементу впливає на отримані результати по СОС (фігура ЗС). Кролячий комплемент опосередковував більш високу СОС в порівнянні з людським комплементом в присутності молекул ТАИ-016. Цікаво зазначити, що димерна форма ТАО-016 опосередковувала високу СОС з використанням кролячого комплементу, але дуже низьку активність СОС ов присутності людського комплементу.
Приклад 4
Активність і зв'язування мультимерів ТАШ-016
Проводили експерименти з метою оцінки біологічної активності мультимерних форм ТАШ-016 (мультимери
ТАО-016) в розчині. Перше, для встановлення розміру рекомбінантного білюа ТАО-016 очищену на протеїні А речовину аналізували 5ЕС при високому тиску (ВЕРХ) і встановили, що в розчині ТАО-016 знаходиться у вигляді мультимерів.
Хроматограми гель-фільтрації (ЗЕС) при високому тиску (ВЕРХ) отримували очищенням СРС ТАИ-016, побудувавши графік залежності поглинання від часу втримання для різних зібраних фракцій (фігура 4).
ТАО-016 виділяли з клітинних культуральних супернатантів спочатку афінною хроматографією з використанням протеїн А/сефароза. Рекомбінантну молекулу елюювали з колонки 100 мМ гліцином, рН 3,5.
Збирали фракції елюйованого продукту об'ємом 10 мл і потім рН елюйованого продукту доводили до 5,0 0,5М 2-(М-морфоліно)етансульфонової кислоти (МЕ5), рН 6,0, в кількості 2095 від елюйованого об'єму. Елюат отримували для очищення СРС концентруванням проби приблизно до концентрації 25 мг/мл ТА!Ш-016 і потім стерилізували фільтруванням при приготуванні для очищення (РОС. Проводили гель-фільтрацію з використанням повітряного зонда (СЕ Неаййсаге АКТА Ехріогег 100 на колонці СЕ Неєаййсаге ХК і препаративної Зирегаєх 200 (СЕ Неайнсагє).
Фракції НММУ або А2 показували час втримання, який дорівнює приблизно 6,23 хв., в той час як найбільш виражена форма мала час втримання, що становить 8,38 хв. Використовуваною в даному випадку як референс-стандарт була (рА стандарт або вій) очищена на протеїні А речовина, що містить димери і мультимери НМУУ, як представлено на першій панелі на фігурі 4. Найбільш виражена форма, мігруюча з часом втримання 8,38 хв., найбільш ймовірно відповідала молекулі димера в невідновлюваних умовах 5О5-РАСЕ і декілька мінорних форм найбільш ймовірно відповідали мультимерам, які утворювалися за допомогою нековалентних взаємодій, оскільки їх не виявляли при 505-РАСЕ в невідновлюваних умовах. Для розділення даних різних форм ТАИ-016 речовина, отримана афінною хроматографією культуральних супернатантів на протеїн А/сефароза, піддавали додатковому очищенню СРС і фракціонуванню ВЕРХ для відділення димера (позначеного як «димери» або «пік димерів») від мультимерів з більш високою молекулярною масою (позначених як фракція НМУ або А2 адо). Потім кожну з даних трьох субфракцій аналізували окремо на функціональну активність в умовах іп міо з використанням тестів оцінки зв'язування,
Арсс і соб.
Для дослідження того, наскільки фракції, виділені ЗЕС, виявляють різні зв'язувальні властивості, кожну фракцію ТАО-016 5ЕС аналізували на здатність зв'язуватися з клітинами Натоз. Для оцінки зв'язувальних властивостей фракцій, отриманих з використанням 5ЕС, клітини суспендували в середовищі для фарбування з титром 4х109 клітин/мл і потім висівали в планшети з розрахунку 50 мкл/ямку (2Х107 клітин/ямку) в середовищі для фарбування. Потім серійне розведення фракцій 5ЕС вносило в послідовну ямку, інкубували протягом 45 хв., промивали і активність зв'язування визначали з використанням РІТС козячого антилюдського
Іда. Проби фіксували в 200 мкл 195 параформальдегіду в РВ5. Клітини аналізували проточною цитометрією на цитометрі ЕАСзвСаїїриг з використанням програмного забезпечення СеПОпевзі (ВО Віозсієпсе5, Зап 9озе,
СА).
Для оцінки активності фракцій, отриманих 5ЕС, в тесті СОС клітини суспендували при титрі 5х109 клітин/'ямку в 75 мкл ІМОМ. Фракції ТАО-016 5ЕС (75 мкл) додавали до клітин в подвійній вказаній концентрації. Давали можливість протікати реакціям зв'язування протягом 45 хв. перед центрифугуванням і промиванням в безсироватковому середовищі Ізсоме. Клітини ресуспендували в середовищі Ізсоме з людською сироваткою (ЖА113, Оціаєї, Зап Оієдо, СА) у вказаних концентраціях. Клітини інкубували протягом 60 хв. при 37"С, промивали і ресуспендували в середовищі для фарбування з 0,5 мкг/мл пропідію йодиду (РІ,
ЯР-16063, МоїІесшаг Ргобе5, Еидепе ОН). Проби інкубували протягом 15 хв. при кімнатній температурі в темряві перед аналізом проточною цитометрією з використанням цитометра ЕАСзСаїїриг і програмного забезпечення СеПОиезі (Весіоп Віскішопфігура 58).)
Для оцінки активності фракцій, отриманих 5ЕС, в тесті АОСС лімфобластоїдні В-клітини ВУАВ, ВНатоз і рашцаї (107) мітили 500 мккюрі/мл "'Сг-хромату натрію протягом 2 год. при 37"С в середовищі ІМОМ/1095 ЕВ5.
Виділяли РВМСО з гепанізованої людської крові фракціонуванням в градієнті середовища для розділення лімфоцитів (І ЗМ, ІСМ Віотеадаісаї). Проби реагентів додавали до середовища АРМІ з 1095 ЕВ5 і готували п'ять серійного розведення для кожного реагенту. Для отримання комбінацій реагенти попередньо змішували і розводили перед внесенням в ямку. Мічені "Сг ВОАВ вносили з титром 2х107 клітин/ямку. Потім додавали
РВМС (5Х105 клітин/ямку) з кінцевим співвідношенням ефекторні клітини (РВМС):клітини мішеней (ВОАВ), що дорівнює 25:1. Реакційні суміші вносили в чотири паралельні ямки 96-ямкового планшета. Фракції ТАО-016
ЗЕС вносили в ямку з кінцевою концентрацією в межах від 10 нг/мл до 20 мкг/мл, як указано на графіках.
Кожний ряд даних представляє графік для різної фракції, отриманої ЕС, при описаних межах титрування.
Реакціям давали протікати протягом 6 год. при 37"С в атмосфері 596 СО» перед збором і підрахунком.
Визначали вивільнену кількість імп/хв на лічильнику Раскагі ТорСоцйпіМХтТ з 50 мкл висушеного культурального супернатанту. Процент специфічної загибелі клітин розраховували відніманням (імп/хв
Ісереднє значення чотирьох паралельних проб| проб імп/хв спонтанне вивільнення)/(імп/хв максимальне вивільнення -імп/хв спонтанне вивільнення)х 100 (фігура 5С).
На фігурі БА представлені криві титрування зв'язування різних фракцій 5ЕС з клітинами Натоз. Всі фракціоновані молекули зв'язувалися з СО37 при наявності аналогічних кривих зв'язування, за винятком варіанту тестування при найвищій концентрації коли в цьому випадку речовина НММУ показувала краще зв'язування (більш висока інтенсивність флуоресценції) в порівнянні з рА стандартом і піком димерних форм.
Також проводили експерименти з метою визначення того, чи виявляють фракції ТАО-016 5ЕС різну функціональну активність, таку як опосередкована СОС і АОСС направлена загибель клітин. На графіку, представленому на фігурі 5В, показано, що тільки очищена фракція мультимерів НМУ/У опосередковувала високу СОС активність відносно В-клітин Натов при використанні людського комплементу. Стандарт рА виявляв деяку СОС активність в більш високих концентраціях, в той час як пік димера показував дуже низьку активність або відсутність СОС активності при всіх тестованих концентраціях.
Проводили тести за оцінкою АОСС з серійним розведенням фракцій ТАШ-016 різної маси з використанням мічених В-клітин ВУАВ як мішень і людських РВМС як ефекторних клітини. Фракції ТАО-016 5ЕС знаходилися в ямку в кінцевій концентрації в межах від 10 нг/мл до 20 мкг/мл, як указано на графіку на фігурі 50. Кожний ряд даних представляє графік для різних фракцій, отриманих 5ЕС, при описаних межах титрування. Будували графік у вигляді функції 96 специфічної загибелі від концентрації білка. Все субфракції ЕС, включаючи рА стандарт, фракцію НМУУ або А2 і пік димера, опосередковували високу, залежну від дози АЮСС відносно клітин-мішеней ВОАВ. Також аналогічні результати отримували з використанням клітин Натоз як мічені мішені (дані не представлені).
Приклад 5
Отримання СВ20-специфічної зв'язувальної молекули
СО20-специфічні 5МІР описані в спільних патентних публікаціях США Мо 2003/133939, 2003/0118592 і 2005/0136049. Отримання зразкового СО2О-специфічного ЗМІР, ТАШ-015, описане нижче.
ТАО-015 представляє рекомбінантний (мишачий/людський) одноланцюжковий білок, який зв'язується з антигеном СО20. Зв'язувальний домен оснований на відомій послідовності людського антитіла проти СО20.
Зв'язувальний домен пов'язаний з ефекторним доменом, СН2 і СНЗ областями людського да! за допомогою модифікованої шарнірної області С55. ТАИО-015 в розчині знаходиться у вигляді димера, і димер має теоретичну молекулярну масу, яка дорівнює приблизно 106000 дальтон. Нуклеотидна послідовність, що кодує
ТАИ-016, і амінокислотна послідовність ТАИ-015 відповідно представляють 5ЕО ІЮ МО: і 4.
Відносно амінокислотної послідовності, представленої в 5ЕО ІЮ МО:4, ТАШ-015 містить лідерний пептид 2е12, клоновану послідовність з амінокислот 1-23; варіабельну область легкого ланцюга мишачого антитіла 2Н7 проти людського СО20 із заміною лізину на серин (УНІ 115) в залишку 11 у варіабельній області, який вказаний в положенні 34; лінкер азр-діуЗз-вег-(діу«5зег)2, що починається в залишку 129, при тому, що лінкер має додатковий серин в кінці з включенням сайта рестрикції Засі для касетної перестановки; варіабельну область важкого ланцюга мишачого антитіла 2387 проти людського СО20О, в якій відсутній залишок серину в кінці області важкого ланцюга, тобто зміненої з МТМ55 на МТМ5; Есо-область людського ІДСІ, що включає модифіковану шарнірну область, що містить послідовність (С55), і області СН2 і СНЗ диких типи.
Клітини СНО, які продукують ТАИ-015, культивували в біореакторі з використанням відповідного середовища. ТАО-015 очищали з використанням ряду стадій хроматографії і фільтрування, включаючи фільтрування для елімінації вірусів. Потім речовину концентрували і готували розчин 20 мМ фосфату натрію і 240 мМ сахарози з отриманням рн, що дорівнює 6,0. Композицію фільтрували перед перенесенням в скляні флакони з концентрацією 10 мг/мл. Кожний скляний флакон містив 5 мл ТАШ-015 (50 мг/флакон).
Приклад 6
Комбінації ТАО-016 з ТАО-015 або ритуксаном синергічно посилюють апоптоз В-клітин
Проводили досліди з метою дослідження впливу 5МІР з направленою дією проти В-клітин на апоптоз
В-клітин. Кожний 5МІР тестували індивідуально і потім в комбінації. Проби аналізували через 24 і 48 год. після початку реакцій інкубації. Аналіз з використанням анексину/Р! Проводили таким чином: клітини ВОАВ (люб'язно представлені Ей. Сіагк, Опімегейу ої Уу/азпіпаїоп), Натоз (АТССЯ СВІ -1596) і Оацаї інкубували протягом 24 і 48 год. при 37"С в атмосфері 595 СО» в повному середовищі Івсоме ((зірсо) з 1095 ЕВ5 при титрі
Зх 105 клітин/мл і концентрації білка МІР 20 мкг/мл. Крім того, в реакційні суміші додавали 20 мкг/мл козячого антилюдського Ідс для перехресного зв'язування реагентів на клітинній поверхні. Потім клітини забарвлювали анексином М-РІТС і пропідієм йодидом з використанням набору І для детектування апоптоза ВО РНаптідеп (Ж556547) і обробляли, слідуючи інструкціям, що є в наборі. Коротко, клітини промивали двічі холодним РВЕ і ресуспендували в «зв'язувальному буфері» при титрі їх 109 клітин/мл. Потім 100 мкл клітин в «зв'язувальному буфері» забарвлювали 5 мкл суміші анексину М-РІТС і 5 мкл пропідію йодиду. Клітини м'яко обробляли на вортексі і інкубували в темряві при кімнатній температурі протягом 15 хв. До кожної проби додавали 400 мкл «зв'язувальних буфера». Потім знімали показники і аналізували на цитометрі ЕАСзСаїїриг з використанням програмного забезпечення СепОпцеві (Весіоп Оіскіпзоп).)
У таблиці 2, нижче, показано, що в присутності реагенту для перехресного зв'язування обробка ТАО-016 впливала більш істотний чином відносно вияву апоптозу на клітинні лінії в порівнянні з одним ТАШ-015, хоч обидві молекули при використанні їх одних не індукували який-небудь апоптоз. Посилення апоптозу було різним в залежності від клітинної лінії.
Таблиця 2
Мо ЗМІГ | 175 | щ ср2го5МІР | 27 2 ЮДЩ
Со3З75МІР | 306 2 щЩ | " соя 5МІР | 29141 0 Щ (| щ( сСо2г0-со375МІР| 41717771 сргосріз МІР | 371 соз7-сріз5МІР| 353 | С б нини НИ В
Ватов Позитивні на Позитивні анексин У на анексин МУ
Приклад 7
Комбінації ТАО-016 з СО20-специфічними антитілами або 5МІР синергічно посилюють СОС
Проводили експерименти з метою оцінки СОС активності комбінацій ТАО-016 з СО20-специфічними антитілами або 5МІР відносно В-клітин. Концентрації реагентів, вибрані для дослідів з комбінаціями, становили 0,5 мкг/мл для ТАИ-016, для ТА0-015 воно також дорівнювало 0,5 мкг/мл. Як правило, концентрація ритуксану становила 0,04-0,06 мкг/мл в зв'язку з його більш високою активністю в дослідах по
СОС з одним цим реагентом. У деяких дослідах концентрацію реагенту проти СО20 зберігали постійної на субоптимальном рівні, в той час як концентрацію ТАО-016 змінювали для встановлення мінімальних рівнів реагенту проти СО20, необхідних для посилення СОС.
Клітини суспендували в середовищі Ізсоме (412440-053, (зірсо/Іпмігодеп, Сстгапа Івіапа, МУ) при титрі 5х105 клітин/ямку в 75 мкл. ТАО-016 (75 мкл), ТАО-015, ритуксан або комбінації даних реагентів додавали до клітин в подвійних вказаних концентраціях. Давали можливість протікати реакціям зв'язування протягом 45 хв. перед центрифугуванням і промиванням в безсироватковому середовищі Ізсоме. Клітини ресуспендували в середовищі Ізсоме з людською сироваткою (ЖА113, Оціаєї, Зап Оієдо, СА) у вказаних концентраціях. Клітини інкубували протягом 60 хв. при 37"С. Клітини промивали і ресуспендували в 125 мкл РВ5 з 295 ЕВ5 (216140-071, Сірсо, Іпмігодеп, Стапа Ізіапа, МУ), середовищі для фарбування. Клітини переносили в пробірки для РАСО5 (54410, Соєіаг, Соптіпо, МУ) і вносили 125 мкл середовища для фарбування з 5 мкл пропідію йодиду (РІ, ЖР-16063, МоїІесшаг Ргорез, Ейдепе ОН). Проби інкубували протягом 15 хв. при кімнатній температурі в темряві перед аналізом проточною цитометрією з використанням цитометра ЕАСсСзсСаїйриг і програмного забезпечення СеПОиеві (Весіоп Оіскіпвоп).
На фігурі 6 показано, що в субоптимальних концентраціях, що забезпечують загибель клітин при використанні одних цих реагентів, ТА0О-015 і ритуксан виявляли більш високу активність в СОС в комбінації з
ТАО-016. Один ТАО-016 не міг опосередковувати СОС, якщо тільки не були присутнім агрегати. Видалення
Сід з реакційних сумішей приводило до повної елімінації активності СОС.
На фігурі 7 показані результати дослідів по комбінуванню реагентів, проведених на В-клітинах ОНІ -4.
Внесення ТАШ-016 в реакційні суміші для оцінки СОС приводило до зміщення вниз до кривої загибелі клітин під дією ТАИ-015, що вказує на більш високу загибель в кожній тестованій концентрації, хоч, один ТАШ-016 виявляв низьку активність або мало місце відсутність активності.
На фігурі 8 приведені дані іншого досліду за оцінкою СОС, в якому реагенти змішували в наступних кількостях: 0,5 мкг/мл ТАШ-015, 0,5 мкг/мл ТА0О-016 і 0,06 мкг/мл ритуксану. Знову одні реагенти застосовували в субоптимальних концентраціях для того, щоб детектувати ефект посилення в присутності ТВО-016. ТАО-016 для обох, ТАИ-015 і ритуксану, підвищував загибель клітин внаслідок вияву СОС при його внесенні в тестах.
На фігурах 9 і 10 приведені графіки за даними тестів оцінки СОС, в яких концентрацію ТАШ-015 або ритуксану зберігали сталою, а концентрацію ТАШ-016 збільшували. Знову активність СОС підвищувалася при доданні в реакційні суміші ТВО-016, але збільшення концентрації ТА0О-016 в межах від 0,5 мкг/мл до 2,5 мкг/мл достовірно не збільшувало опосередковану СОС загибель клітин в даних дослідах.
Приклад 8
ТАО-016 посилює АОСС і СОС активність СО2О-специфічних антитіл і ЗМІР
Проводили досліди з метою визначення того, наскільки комбінації ТВО-016 5МІР з СО37-специфічними антитілами або 5МІР можуть посилювати АОСС і СОС активність відносно В-клітин-мішеней.
Лімфобластоїдні В-клітини ВУАВ, Ватоз і Оацаї (107) мітили 500 мккюрі/мл У'Сг-хромату натрію протягом 2 год. при 37"С в середовищі ІМОМ/1095 ЕВ5. Мічені клітини ВУОАВ промивали три рази в середовищі
ВРМІ/1095 ЕВ5 і ресуспендували при титрі 4х105 клітин/мл в середовищі ВРМІ. Гепаринізовану людську цільну кров отримували від анонімних донорів і РВМОС виділяли фракціонуванням в градієнті середовища для розділення лімфоцитів (І 5М, ІСМ Віотеаіса!). Збирали світлий шар кров'яного згустку і двічі промивали в середовищі ВРМІ/1095 ЕВ5 перед ресуспендуванням в АРМІ/1095 ЕВ5 з кінцевим титром Зх106 клітин/мл.
Підраховували кількість клітин по витісненню трипанового синього з використанням гемацитометру перед використанням в подальших тестах. До середовища АРМІ з 1095 ЕВ5 додавали проби реагентів в чотирикратній кінцевій концентрації і готували п'ять серійних розведення для кожного реагенту. Для приготування комбінацій реагенти змішували і розбавляли перед внесенням в ямку. Потім дані реагенти вносили в 9б-ямкові планшети з О-подібним дном з розрахунку 50 мкл/ямку для вказаних кінцевих концентрацій. Мічені УС клітини ВУОАВ вносили в планшети з розрахунку 50 мкл/ямку (2х107 клітин/ямку).
Потім додавали РВМС в планшети з розрахунку 100 мкл/ямку (3х105 клітин/ямку) до кінцевого співвідношення ефекторні клітини (РВМО)(ВОАВ) клітини-мішені, що дорівнює 15:1.
Ефекторні клітини і клітини-мішені вносили в одне середовище для визначення рівня фонової загибелі.
Мічені 7'Сг клітини ВУАВ додавали до одного середовища для визначення спонтанного вивільнення "Сі і до середовища з 595 МРАО (228324, Рієтгсе, Воскоога, І) для визначення максимального вивільнення Сг. Реакції проводили в чотирьох паралельних ямках в 9б-ямковому планшеті. 5МІР вносили в ямку в кінцевій концентрації в межах від 12 нг/мл до 10 мкг/мл, як указано на графіках. Для приготування комбінацій 5МІР реагенти змішували перед внесенням в ямку. Кожний ряд даних представляє графік для різних одних З5МІР або їх комбінацій при описаних межах титрування. Реакціям давали протікати протягом 6 год. при 37"С в атмосфері 595 СО» перед збором і підрахунком. 50 мкл супернатанту з кожної ямки переносили в планшет
Гита Ріаїе 96 (26006633, Реїкіп ЕІтег, Возіоп, Мав5) і висушували протягом ночі при кімнатній температурі.
Визначали значення вивільненої кількості імп/хв на лічильнику РасКкага ТорСоипіМХтТ. Процент специфічної загибелі клітин розраховували відніманням (імп/хв (середнє значення для чотирьох паралельних проб| проби імп/хв спонтанне вивільнення)/Лімп/хв максимальне вивільнення - імп/хв спонтанне вивільнення)х100.
Будували графік у вигляді функції 90 загибелі клітин від концентрації МІР. На кожній фігурі вказане співвідношення ефекторні клітини:клітини-мішені, і також вказана клітинна лінія-мішень. На фігурах 11, 12 і 13 приведені результати дослідів, проведених на різних клітинних лініях (ВУАВ, Натовз і Бацаї), при використовували одного і того ж донора.
На фігурах 14 їі 15 (ритуксан-ТтА0-016) і на фігурах 16 і 17 (ТА0О-015-7180О-016) приведені дані експериментів, в яких як клітинна лінія-мішень використовували ВОАВ. Специфічна загибель клітин, що спостерігається для кожної комбінації була вища в порівнянні з кожним одним реагентом в такій же концентрації, цей факт вказує на те, що направлені проти СО20 і СО37 5МІР посилюють загибель, опосередковану кожним іншим реагентом, хоч ефект підвищення не був повністю адитивний.
Таким чином, ТА0О-016 може підвищувати опосередковану АОСС загибель В-клітин під дією
СО20-специфічних 5МІР або СО20-специфічних антитіл.
Первинні досліди, мета яких полягала в дослідженні дії комбінацій ТАИ-016 і антитіл проти СО20, планували провести для визначення відносних кількостей кожного реагенту для застосування таким чином, щоб детектувався синергічний ефект в СОС. Клітини Натов суспендували в середовищі ІМОМ і ТА0О-016, ритуксан або комбінації даних реагентів додавали до клітин до кінцевих концентрацій, вказаних на фігурі 18.
Реакціям зв'язування давали протікати протягом 45 хв. перед центрифугуванням і промиванням в безсироватковому середовищі Ізсоме. Клітини ресуспендували в середовищі Ізсоме з 1095 МН5. Клітини інкубували протягом 60 хв. при 37"С. У дослідах, представлених на фігурах 18А-3, клітини промивали центрифугуванням і ресуспендували в середовищі для фарбування, що містить 0,5 мкг/мл пропідію йодиду (РІ,
ЯР-16063, МоїІесшаг Ргобе5, Еидепе ОН). Проби інкубували протягом 15 хв. при кімнатній температурі в темряві перед аналізом проточною цитометрією з використанням цитометра ЕАСзСаїїриг і програмного забезпечення СеПпОиезі (Весіоп Оіскіпзоп).
Більше високоочищений пік димера ТАШО-016 є слабким медіатором СОС, коли використовується один, що показано на фігурі 18А рівним характером кривої залежності доза-ефект навіть у високих концентраціях. В результаті того, що реагенти з дією проти СО20 являють собою ефективні індуктори активності СОС, в дослідах з комбінаціями бажаними були ненасичуючі кількості реагентів проти СО20, так, щоб в результаті було можливим детектувати у реагентів синергізм. За даними цих первинних дослідів звичайна концентрація реагенту, вибрана для дослідів з комбінаціями, становила 0,5 мкг/мл або 2 мкг/мл ТАИ-016. Як правило, концентрація ритуксану становила 0,04-0,06 мкг/мл в зв'язку з його більш високою активністю, виявленою в дослідах по СОС з використанням одного реагенту. У деяких експериментах концентрацію реагенту СО2О зберігали сталою на рівні субоптимальної концентрації, в той час як концентрацію ТА0-016 змінювали для встановлення мінімальних кількостей реагенту з дією проти СОЗ37, необхідних для посилення СОС. Таким чином, один ТАШ-016 не міг опосередковувати СОС, якщо тільки не були присутніми агрегати.
На фігурі 188 приведений графік процента рухомих клітин (РІ негативних), встановленого у вказаних межах титрування (0,06-0,5 мкг/мл), при використанні одного ритуксану або в комбінації з ТАО-016 в концентрації 2,5 мкг/мл. Ритуксан при використанні в межах субоптимальних концентрацій для забезпечення загибелі як один реагент виявляв більш високу активність до СОС в будь-якій концентрації в комбінації з
ТтАО-016 (фігура 188). Видалення Сід з реакційних сумішей приводило до повної елімінації активності СОС (фігура ЗВ).
Як показано на фігурі 18С, проби також інкубували з РІТС анти-СІд протягом 45 хв. на льоду перед аналізом проточною цитометрією. Вікно збудження для лімфоцитів було на компрометованих клітинах.
Процент клітин в даному каналі збільшувався з підвищенням концентрації ритуксану, і графічно представлене відносне значення МРЇ для даної популяції клітин. На фігурі 18С приведені результати експерименту по СОС, в якому реагенти змішували в наступних кількостях: 0,5 мкг/мл ТА0О-016 і концентрації ритуксану знаходилися в межах від 0,06 мкг/мл до 0,5 мкг/мл, і клітини забарвлювали РІ перед проведенням проточної цитометрії.
Результати показують залежне від дози збільшення значення МЕРЕ! з підвищенням концентрацій ритуксану.
Додання димера ТАИ-016 приводило до додаткового збільшення МЕЇ при кожній концентрації ритуксану.
Проводили аналогічну серію дослідів, зберігаючи концентрацію ритуксану постійної і збільшуючи концентрацію
ТАО-016. Знову СОС активність була вища при внесенні ТА0-016 в реакційні суміші з ритуксаном, але збільшення концентрації ТАШ-016 до 2,5 мкг/мл з 0,5 мкг/мл не приводило до достовірного підвищення опосередкованої СОС загибелі клітин в даних дослідах (дані не представлені).
Білки ритуксану і ТАО-016, використані одні і в комбінації один з одним, порівнювали по їх АОСС активності в умовах іп міїго з використанням таких же меж концентрацій, які були в дослідах по СОС. На фігурі 180 показані результати тесту оцінки АОСС з міченими клітинами-мішенями Натоз і людськими ефекторними клітинами РВМС при співвідношенні ефекторних клітин і клітин-мішеней, що складає 25:71, з використанням
ТАО-016 або ритуксану одних або в комбінації один з одним у вказаних межах концентрацій. Аналогічні дані отримували при співвідношенні ефекторних клітин і клітин-мішеней, складаючому 12,5:1. Обидва, димер
ТАО-016 і ритуксан, опосередковували високу АЮОСС відносно клітин Натов5, які експресують антигенних-мішені СО20О0 і СО37; однак об'єднання двох реагентів не приводило до достовірного посилення загибелі клітин.
Приклад 9
ТАИ-016 індукує апоптоз В-клітин
Проводили досліди з метою вивчення впливу ТАО-016 на апоптоз В-клітин. Проводили первинні тести з метою оцінки впливу молекул ТАШ-016 на різні рецептори В-клітин з використанням очищеної на протеїні А речовини, яка як і раніше містила агрегати більш високого порядку. Після обробки протягом 24 год. антитілами проти СО37 або рекомбінантними молекулами ТА!АШ-016 спостерігали аналогічну картину посиленого апоптозу в багатьох дослідах з використанням як показника активності апоптозу процент позитивних на анексин МУ клітин і при їх проведенні на клітинах Натоз і ВОАВ як зв'язувальні мішені (дані не представлені).
На фігурі 19А показано, що апоптоз достовірно підвищувався після інкубації
В-клітин з нефракціонованим ТАШ-016. На фігурі 19А приведений крапковий графік розподілу фарбування клітин КНатозх анексином У-РіІ після інкубації протягом 24 год. з ТАО-016 (10 мкг/мл). Процент двічі позитивних клітин на анексин М-РІ підвищувався з 11,395 від загальної популяції до 32,8905, і процент негативних на анексин МУ-РІ клітин збільшувався з 8,595 до 19,7906, вказуючи на те, що апоптоз індукується після впливу
ТАО-016. Аналогічні дані отримували незалежно від того, використовували клітини Натоз або ВОУАВ як зв'язувальні мішені в даних тестах.
Проводили подальші досліди з метою вивчення впливу ТАО-016 на апоптоз В-клітин з використанням більше за високоочищеного дим ера ТАШИ-016 (фігура 198). Проби аналізували через 24 і 48 год. після початку реакцій інкубації. Аналіз фарбування анексином/РІ Проводили на декількох типах клітин з використанням 20 мкг/мл білка ТАИО-016. Внаслідок того, що апоптоз знижувався при використанні димера ТАШ-016, в реакційні суміші вносили 20 мкг/мл козячого антилюдського Ід для перехресного зв'язування реагентів на клітинній поверхні. Потім клітини забарвлювали анексином М-РІТС і пропідієм йодидом. Дані, приведені на фігурі 198, показують, що пік димера ТАИ-016 індукує апоптоз клітин ЮОацаії через 24-48 год., але присутність перехресно-зшивного реагенту, такого як антилюдський ІдС, приводить до достовірного підвищення інтенсивність опосередкованого СО37 апоптозу.
Також проводили досліди з метою визначення впливу ТАИ-016 на нормальні людські В-клітини в культурі з використанням РВМСО. На фігурах 20А і 208 приведені результати одного такого експерименту, на них представлені графіки в колонках, що відображають процент СО19 і 2О40 позитивних лімфоцитів (В-клітин) в культурах РВМС, оброблених протягом 48-72 год. одним середовищем, ТАО-016 або ритуксаном.
Людські РВМС виділяли з цільної крові центрифугуванням в градієнті щільності середовища для розділення лімфоцитів. Клітини інкубували протягом 48 або 72 год. з ритуксаном або ТАШ-016 в концентрації 1 мкг/мл. Порцію інкубаційного середовища відбирали через 48 год. і знову через 72 год. після початку досліду.
РВМС промивали і інкубували з міченими РІТС антитілами проти СО 19, міченими РІТС антитілами проти
СО40 або міченими РІТС антитілами проти СОЗ протягом 45 хв. на льоду. Потім реєстрували процент загального фарбування лімфоцитів даними реагентами і порівнювали з пробами РВМС, що зазнали інкубації в аналогічних умовах, але без реагентів, що тестуються, і забарвленими як випробувані проби. На фігурах 20А і 208 приведені графіки в колонках, що показують фракцію від загальної популяції лімфоцитів (95), яка давала позитивний ЕАС сигнал через 48 і 72 год. інкубації з вказаними реагентами. На фігурі 20С представлені дані аналогічного досліду в графічній формі, що показують процентне зменшення вихідної кількості лімфоцитів, які експресують вказаний антиген СО (тобто позитивних на СО 19, 2040 або СОЗ3) після інкубації РВМС з
ТАО-016 (при концентрації 1 мкг/мл) протягом 24 і 72 год.
У присутності перехресно-зшивного реагенту обробка димером ТАИ-016 або ритуксаном приводила до зменшення процента В-лімфоцитів в культурах РВМСО за даними позитивного фарбування на СО 19 і СО40.
Незважаючи на те, що процент В-лімфоцитів в культурі був низьким на початку експерименту, спільне культивування з ритуксаном або ТАШО-016 приводило до зниження кількості СО 19 ії СО40 позитивних лімфоцитів в культурі РВМС приблизно в 1,5-2 рази через 48 год. і більш ніж в З рази через 72 год. Дана загальна тенденція до виснаження В-клітин через 48-72 год. була такою, що відтворюється у всіх нормальних тестованих культурах РВМС, незалежно від вихідного первинного процента В-лімфоцитів в даних культурах, який знаходився в межах приблизно від 3905 до 790 від загальної кількості лімфоцитів, в залежності від проби.
На фігурі 20С приведений графік в колонках, що показує процентне зниження В-лімфоцитів в порівнянні з
Т-лімфоцитами в короткоживучих культурах РВМС, інкубованих з ТАО-016 протягом 24-72 год. Ці дані свідчать про те, що ТАИ-016 здатний приводити до специфічного виснаження СОЗ37-позитивних В-лімфоцитів з нормальних культур периферичної крові, і що низький рівень зв'язування ТА!АШ-016 з клітинами, відмінними від
В-лімфоцитів (фігура 1С), недостатній для опосередкування ефективного виснаження даних лімфоцитів з клітинної популяції.
Приклад 10
Комбінації ТАШО-016 і ритуксимабу синергічно зменшують об'єм пухлин на моделі пухлинних ксенотрансплантатів на мишах
Проводили досліди на моделі ксенотрансплантатів пухлин на мишах з метою оцінки впливу комбінованої терапії з використанням голих мишей (Напап) або клітин людських пухлинних ліній Натоз і ЮОацаї. Пухлинні клітини Натовз і Юацаї культивували в матрацах Т150 на середовищі ІМОМ/1095 ЕВ5 доти, поки вони не досягали 8095 злиття. Використовували 5 млн (5х1024) клітин на мишу як дозу при щепленні пухлин. Клітини вводили підшкірно в правий бік з використанням РВО в загальному об'ємі 0,1 мл або 5х107 клітин/мл.
Пухлинам давали вирости у голих мишей, і тварин розділяли на групи, основуючись на розмірі/об'ємі пухлин.
Для кожної піддослідної групи використовували 12 мишей зі середнім об'ємом пухлин, рівним приблизно 222 мм (межі х 152-296 мм3). Також використовували мишей зі значеннями середнього об'єму пухлин в межах 237-251 мм3. На 0, 2, 4, 6 і 8 доби тваринам вводили внутрішньовенно (в/в) один з наступних реагентів:
ТАО-016 СРС РОЇ (цікавлячий пік), 200 мкг/миша; ритуксан, 200 мкг/миша; або людський Ідс (контроль), 200 або 400 мкг/миша, у вигляді одних реагентів або у вигляді наступних комбінацій реагентів: ритуксан-ТА!А0О-016 в дозі 100 мкг на мишу або ритуксан-ТАШ-016 в дозі 200 мкг на мишу. Щодня визначали об'єм пухлин з використанням штангенциркуля до закінчення експерименту (забою тварин або регресії захворювання).
Будували графік залежності об'єму пухлин у вигляді функції часу обробки для кожної тварини і також обчислювали середнє значення для кожної групи.
Аналогічні досліди також проводили з використанням пухлин меншого розміру на мишах, розподілених на групи, з меншим середнім об'ємом пухлин в межах 153-158 мм3 і з пухлинами більшого розміру, але з використанням в основному клітин Юацаі), а не Натов5. Дані дослідження проводили в акредитованій лабораторії АААГ АС і в рамках правил роботи на тваринах згідно з вказівками Іпеійшіопа! Апіта! Саге апа Озе
Соттіцеє АСИС).
На фігурі 21 приведені графіки з даними по ефективності ТА0-016 в порівнянні з пида, ритуксаном і комбінаціями в дозах 100 і 200 мкг на мишу, представленими у вигляді середніх значень по групі з 12 тварин.
Будували графік залежності об'єму пухлин у вигляді функції часу після обробки в/в ін'єкцією(ями). Середнє значення об'єму пухлин після обробки ТАИ-016 було нижчим в порівнянні з тим, що спостерігається в групі негативного контролю (пиЇдс). У разі побудови графіка 95 виживаності або 95 тварин без пухлин комбінована терапія в більш високій дозі виявляла більш високу протипухлинну активність на даній моделі пухлин в умовах іп мімо. Однак комбінована терапія в більш низькій дозі (100 мкг на мишу) не була так ефективною, як кожний один реагент в більш високій дозі.
Ці дані свідчать про те, що лікування ТАО-016 при використанні в комбінації з ритуксаном у відповідних дозах буде більш ефективним при лікуванні пацієнтів з пухлинами в порівнянні з терапій одним ритуксаном.
Приклад 11
ТАО-016 зменшує об'єм пухлин і підвищує виживаність на моделі пухлинних ксенотрансплантатів на мишах
Проводили досліди на моделі ксенотрансплантатів пухлин з використанням голих мишей (Напап) або клітин людських пухлинних ліній Натоз і Юацаї. Проводили три різних досліди, основуючись на типі пухлин і розмірі пухлин на час обробки ТАШ-016 або іншим тестованим реагентом. Пухлинні клітини Натоз і Юацаї культивували, і 5х10924 клітин вводили підшкірно в правий бік для щеплення пухлин кожної піддослідної миші.
Пухлинам давали вирости у голих мишей, і тварин розділяли на групи, основуючись на розмірі/об'ємі пухлин. У першому досліді для кожної піддослідної групи використовували 12 мишей зі середнім об'ємом пухлин, рівним 155-237 мм3. На 0, 2, 4, 6 і 8 доби тваринам вводили внутрішньовенно (в/в) один з наступних реагентів: ритуксимаб, 200 мкг/миша; ТАО-016 СРС піків димера, 200 мкг/миша; або людський ІдсСї (контроль), 400 мкг/миша. Щодня визначали об'єм пухлин з використанням штангенциркуля до закінчення експерименту (забою тварин або регресії захворювання). Будували графік залежності об'єму пухлин у вигляді функції часу обробки для кожної тварини і також обчислювали середнє значення для кожної групи. Середні значення по групі приведені на фігурі 22А, в той час як на фігурі 228 приведений порівняльний аналіз даних по проценту виживаності для кожної групи мишей у вигляді функції часу.
На фігурі 22А приведені дані по ефективності ТАО-016 в порівнянні з пиЇда і ритуксаном на моделі пухлин
Ватоз у вигляді середніх значень по кожній групі з 12 тварин. Будували графік залежності об'єму пухлин у вигляді функції часу після обробки в/в ін'єкцією(ями). Середнє значення об'єму пухлин після обробки ТАО-016 було нижчим в порівнянні з тим, що спостерігається в групі негативного контролю (пиЇдс). На фігурі 228 приведені графічні дані у вигляді кривих виживаності для різних піддослідних груп при порівнянні пида, ритуксану і ТАШ-016. Введення ТАИ-016, при використанні більш агресивної моделі пухлин Натов з підвищеним фоновим об'ємом пухлин, приводило до придушення швидкості зростання пухлин в порівнянні з людським ІдсСї (дані не представлені) Введення ТАИ-016 мишам з більш дрібними пухлинами Натовз приводило до придушення зростання пухлин і підвищеної середньої виживаності мишей.
Приклад 12
ТАО-016 не надає впливу на СОС активність відносно інших поверхневих рецепторів В-клітин
Для визначення того, чи посилює молекула ТАИ-016 активність СОС після обробки антитілами до інших поверхневих рецепторам В-клітин, в доповнення до СО20О, таких як МНС, СО 19, СО80/86 і СО40, Проводили серію експериментів, аналогічну щойно описаної для комбінацій з дією проти СО2О-СО37.
Клітини Катов вносили в ямку з повним середовищем Ізсоме з 1095 ЕВ5. Додавали МАБ (реагент В: антитіла проти СО 19 НОЗ7, реагент С: антитіла проти СО45 9.4), рекомбінантний білок (реагент О: СТІ А-4 ти!д-Ідага, Апсеї! 2501-8200) і асцитну рідина (реагент А: антитіла проти МНСЇІІ НВІба) у вказаному розведенні (дивись фігуру 23) і Проводили дві паралельні реакції з і без ритуксимабу (в концентрації 0,05 мкг/мл) або
ТАО-016 (в концентрації 2 мкг/мл). Реакційні суміші інкубували протягом 30 хв. при 37"С. Клітини промивали і вносили МН5 до кінцевої концентрації 1095 в безсироватковому середовищі. Клітини інкубували протягом 90 хв. при 37"С з джерелом комплементу. Клітини промивали, додавали пропідій йодид до кінцевої концентрації 0,5 мкг/мл в РВ5; клітини інкубували в темряві при кімнатній температурі протягом 15 хв.; і потім клітини аналізували проточною цитометрією. Кожний графік на панелі А-О фігури 23 відображає 9о позитивних на Рі клітин у вказаних межах титрування.
В цілому, дані свідчать про те, що достовірна відмінність в рівні СОС активності була відсутньою як при використанні одних антитіл проти даних рецепторів, так і в комбінації з ТАО-016 (фігура 23А-О). Можливо,
було невелике підвищення рівня СОС для реагентів з дією проти СО 19 ії СО45 при використанні ТАО-016 в субоптимальних концентраціях. Однак відмінності в значеннях показників СОС не були достовірними, як такі, що спостерігаються у випадку СО20-СОЗ7комбінації. У доповнення до посилення СОС при використанні реагентів проти СО20 і СО37 в комбінації, мало місце посилення загибелі клітин при використанні комбінацій антитіла проти сіазві! (НВ1ба), антитіла проти СО 19, антитіла проти СО45 (9.4) або СТІ А41Ід з ритуксаном в субоптимальній концентрації.
Приклад 13
ТАО-016 не посилює СОС активність відносно інших рецепторів-мішеней, включаючи МНОЇЇ, СО19, сСов80/86 і 2040
Для визначення того, чи посилює молекула ТАИ-016 активність СОС після обробки антитілами до інших поверхневих рецепторам В-клітин, в доповнення до СО20, проводили серію експериментів, аналогічну описаній для комбінацій з дією проти СО20-СО037 (дивись приклад 8). Результати даних дослідів представлені на фігурі 23. Загалом, достовірна відмінність в СОС активності була відсутньою при використанні одних антитіл проти даних рецепторів або в комбінації з ТАО-016. Рівень СОС збільшувався у відповідь на реагенти з направленою дією проти СО 19 і СО45 при використанні ТВО-016 в субоптимальних концентраціях. Однак відмінності в значеннях показників СОС не були достовірними, як комбінації, що спостерігаються у випадку
СО20-С2037 (дивись приклад 8). У доповнення до посилення СОС при використанні реагентів проти СО20 і
СО37 в комбінації, мало місце посилення загибелі клітин при використанні комбінацій антитіла проти МНС! (НВіІСа), антитіла проти СО19, антитіла проти СО45 (9.4) або СТІ А41ід з ритуксаном в субоптимальній концентрації.
Приклад 14
ТАО-016 збільшує виживаність на моделі пухлинних ксенотрансплантатів на мишах
Крім дослідів на моделі ксенотрансплантатів пухлин, описаних в прикладі 11, проводили дослідження з метою оцінки ефективності ТАО-016 в тривалому збільшенні виживаності голих мишей (Напап) або клітин людських пухлинних ліній Натоз і ЮОацаї.
Пухлинні клітини Ватоз і Оацаї культивували, і 5х 1092 клітин вводили підшкірно в правий бік мишей для ініціація розвитку пухлинних ксенотрансплантатів у мишей. Після розвитку пухлин мишей розділяли на групи, основуючись на розмірі/об'ємі пухлин (0 доби). На 0, 2, 4, 6 і 8 доби тваринам вводили внутрішньовенно (в/в) один з наступних реагентів: ритуксимаб, 200 мкг/миша; ТАШ-016, 200 мкг/миша; ритуксимаб-ТА0-016 в дозах 100 або 200 мкг/миша; або людський Іда (контроль), 400 мкг/миша. Об'єм пухлин визначали «наосліп» три рази на тиждень за допомогою штангенциркуля до закінчення експерименту (забою тварин або регресії захворювання). Будували графік залежності об'єму пухлин у вигляді функції часу обробки для кожної тварини і також обчислювали середнє значення для кожної групи. На фігурі 24 показаний процент виживаності мишей з пухлинами Натоз (період спостережень до 90 діб) після обробки ТАШ-016, ритуксимабом або їх комбінацією.
Комбінована обробка ТАШ-016б--ритуксимаб приводила до збільшення середнього значення часу виживання в порівнянні з обробкою одним реагентом. На фігурах 25 і 26 представлений процент виживання мишей з пухлинами Юацшаії (період спостережень до 90 діб) після обробки ТАО-016 або ритуксимабом. Обробка
ТАО-016 збільшувала середній час виживання мишей з розвиненими пухлинами Оацаї (фігура 25). ТАО-016 був більш ефективним в порівнянні з ритуксимабом відносно збільшення виживаності мишей з пухлинами
Бацаї (фігура 26).
При введенні ТАИО-016 у вигляді одного реагенту мишам з розвиненими пухлинами Натоз спостерігали придушення зростання пухлин і збільшення часу виживаності, аналогічні показники відмічали при введенні одного ритуксимабу, і вони були вищі в порівнянні з контрольними мишами, обробленими ПпиЇда. Об'єднані дані З дослідів показали, що комбінована терапія ТАШО-016 і ритуксимабом приводила до статистично достовірного збільшення виживаності в порівнянні з монотерапією ТАШ-016 (р-0,028) або ритуксимабом (р-0,045)3. Повну регресію пухлин також спостерігали в групах з комбінованим введенням ТАО-016 і ритуксимабу. У 4595 мишей в групі, що отримувала комбіноване лікування ТАО-016б-нкритуксимаб в дозі 200 мкг, спостерігали тривалу повну регресію пухлин в порівнянні з показником 2095 регресії пухлин у мишей, оброблених одними ТАИ-016 або ритуксимабом (дивись таблиця З і фігура 24).
Виживаність після лікування розвинених пухлин Натов
Таблиця З для доби
Ннида 11111101
Придушення зростання пухлин і збільшення виживаності було встановлене після обробки ТАШ-016 на моделі пухлинних ксенотрансплантатів Юацаі (дивись таблицю 4 і фігури 25 і 26). Введення ТАО-016 достовірно збільшувало виживаність в порівнянні з контрольною групою. При лікуванні «МІР ТА0-016 також спостерігали підвищення процента мишей без пухлин на даній моделі в порівнянні з тваринами контрольної групи і обробленими ритуксимабом.
Таблиця 4
Виживаність після лікування розвинених пухлин Юацаї
Процент мишей без пухлин на Середній час виживаності 90 доби (доби) пустот 07701751
СБС ПОН ОН КОН
Лікування ЗМІР з дією проти СО37 (ТАИ-016) було таким же ефективним, як і мототерапія ритуксимабом відносно зменшення об'єму пухлин і збільшення виживаності на моделі пухлинних ксенотрансплантатів Натов.
Було показано, що комбінована обробка ТАО-016б-ритуксимаб надавала підвищений лікувальний ефект, що виражається в зменшенні об'єму пухлин і достовірному збільшенні виживаності в порівнянні з монотерапією ритуксимабом або ТАИ-016 на моделі пухлинних ксенотрансплантатів Натоб5. На моделі пухлинних ксенотрансплантатів Юацаї у мишей, оброблених ТАШ-016, спостерігали статистично достовірне збільшення середнього часу виживання в порівнянні з контрольними тваринами після обробки Ниїдса. Обробка ритуксимабом не підвищувала показник виживаності в порівнянні з контрольними мишами. Ці дані підкреслюють ефективність терапії з направленою дією проти СО37 на моделі даних ксенотрансплантатів
МН...
Приклад 15
ТАО-016 посилює індуковану флударабіном клітинну загибель на клітинах СІ Ї. в умовах іп уйго
Флударабін являє собою хіміотерапевтичний препарат, що використовується для лікування злоякісних захворювань крові. Флударабін являє собою аналог пуринів, який придушує синтез ДНК, впливаючи негативний чином на рибонуклеотидредуктазу і ДНК-полімеразу. Флударабін є активним відносно і клітин, що покояться, що діляться. Флударабін є високоефективним для лікування хронічної лімфоцитарної лейкемії (СГ У), приводячи до прояву більш сильних реакції у відповідь в порівнянні з алкілуючими агентами, такими як один хлорамбуцил (Наї еї аЇ., М. Епді. У. Мей. 343: 1750-1757, 2000). Флударабін застосовується в різних комбінаціях з циклофосфамідом, мітоксантроном, дексаметазоном і ритуксимабом при лікуванні в'ялопротікаючої лімфоми і неходжкінської лімфоми. Однак при лікуванні флударабіном спостерігається розвиток резистентності. Флударабін викликає залежний від каспази апоптоз клітин СіЇ, і виявилося, що апоптоз, опосередковуваний ТАШ-016, не залежить від активації каспази. Дане дослідження було зроблене з метою вивчення впливу ТАО-016 в поєднанні з флударабіном на клітини СІ |.
Клітини обробляли ТАШ-016 в концентраціях в межах 0,1-100 мкг/мл і флударабіном в концентраціях в межах 0-20 мкМ (дивись фігуру 27). ТАО-016 був наданий Тгибіоп Рпаптасешісаї!з (Зеаціє, МА). Флударабін (Р-агаА) отримували від бідта (51. І оїз, МО). Середовище АРМІ 1640 була виробництва Іпмігодеп (Сагзбрай,
СА). Мічений флуоресцеїном ізотіоціанатом (РІТС) анексин М і пропідій йодид (РІ) отримували від ВО
Рпагтіпдеп, Зап Оієдо, СА. І3-(4,5-Диметилтіазол-2-іл)2,5-дифенілтетразолій бромід| (МТТ) отримували від
Зідта (5ї. Іої5, МО). Клітини В-СІЇ виділяли відразу ж після відбору з використанням центрифугування в градієнті щільності фіколу (РісоІ-Радне Рів, АтегзПпат Віозсієеєпсез, Різсагажау, МУ). Виділені мононуклеарні клітини інкубували в середовищі АРМІ 1640 з доданням 1095 інактивованої нагріванням фетальної бичачої сироватки (ЕВ5, Нусідпе І арогафтієв, І одап, ОТ), 2 мМ І-глутаміну (Іпмігодеп, Сапізбрай, СА) і пеніциліну (100
Од./мл)устрептоміцину (100 мкг/мл; Зідта-Аїагісн, 5. І оців) при 37"С в атмосфері 595 СО». Щойно виділені клітини В-СІ І. використовували у всіх описаних тут дослідах за винятком поверхневого фарбування. Для проб із вмістом менше ніж 9095 В-клітин застосовували негативний відбір з виснаженням клітин, відмінних від
В-клітин, з використанням набору для виділення В-клітин І (Мійепуї Віоїес, Ацригп, СА) або набору «Нозеце-Зер» виробництва бієт Се! ТесПппоіодіеєє (Мапсоцмег, ВійїБи СоІштбріа, Сапада), слідуючи запропонованому виготовлювачем протоколу. Клітинну лінію Ваї і (лінія клітин людської лімфоми Беркіта) отримували з АТСС і підтримували в середовищі АРМІ 1640, що містить 1095 ЕВ5, з доданням пеніциліну, стрептоміцину і глутаміну. Клітини піддавались розщепленню в співвідношенні 1:3, коли щільність клітин досягала значення 1х109 клітин/мл. Середовище замінювали за ніч до кожного дослідження для гарантії використання свіжих клітин.
Клітини обробляли в умовах іп міо, як тут описано. Готували серійне розведення флударабіну 1:4 (44, 11, 2,8, 0,7, 0,17 і 0,04 мкМ) в б-ямковому планшеті при перенесенні 2 мл середовища, що містить препарат, в кожну наступну ямку, що містить 6 мл одного середовища. У окремому б-ямковому планшеті готували серійне розведення ТАШ-016 1:4 (44, 11, 2,8, 0,7, 0,17 і 0,04 мкг/мл) на середовищі з використанням того ж методу розведення. З кожного планшета переносили по 0,45 мл середовища у відповідну ямку в 48-ямковому планшеті для отримання змішаного розчину препаратів в середовищі (в цілому 0,9 мл в кожній ямці). Потім до 0,9 мл середовища в кожній ямці додавали клітини СІ з титром Іх10" клітин/мл (0,1 мл) з отриманням кінцевого титру, рівного 1х105 клітин/мл. Для клітин Ва) і кінцевий титр становив 5х10" клітин/мл. Таким чином, використовувана клітинна суспензія мала титр 5х105 клітин/мл. Для постановки МТТ тестів готували серійне розведення в 96-ямкових планшетах і переносили в інші 96-ямкові планшети для інкубації з клітинами.
Загальний об'єм при інкубації становив 200 мкл (90 мкл розчину флударабіну, 90 мкл розчину ТАШ-016 і 20 мкл клітинних суспензії). Життєздатність клітин оцінювали з використанням МТТ тесту при експозиції 48 год., і апоптоз оцінювали з використанням фарбування анексином У/РІ на 24 год.
МТТ тест проводили для оцінки життєздатності клітин, як тут описано. Коротко, 105 клітин СІ І. висівали в 96-ямкові планшети. Клітини інкубували протягом 48 год. У кожну ямку вносили 50 мкл робочих розчини для постановки МТТ тесту (2 мг/мл, приготований з реагенту для МТТ з концентрацією 5 мг/мл при змішуванні зі середовищем АРМІ 1640 в співвідношенні 2:3 об./06б.) і клітини шкубували протягом 8 год. Планшети центрифугували і супернатант видаляли, і залишок розчиняли в 100 мкл лізуючого розчини. Визначали поглинання проб на рідері для планшетів при 540 нм. Життєздатність клітин виражали у вигляді процента життєздатності в порівнянні з контрольним середовищем.
Апоптоз клітин СіЇ після інкубації з антитілами оцінювали з використанням фарбування анексином
М-ЕІТС/пропідієм йодидом (РІ) при аналізі ЕАСЯ. 5х105 клітин в 200 мкл їх буфера для зв'язування (ВО
Рінагтіпдеп) забарвлювали 5 мкл анексину М (ВО РНагтіпдеп) і 5 мкл РІ (ВО РІагтіподеп) і витримували в темряві при кімнатній температурі протягом 15 хв. перед приготуванням суспензії в 300 мкл їх буфера і аналізували проточною цитометрією. Готували клітини без фарбування, клітини, забарвлені тільки анексином
М, і клітини, забарвлені тільки РІ. При проведенні всіх експериментів з проточною цитометрією проводили аналіз ЕАСз» з використанням цитометра Весктап-Соцег ЕРІС5 ХІІ. (Весктап-Соцег, Міаті, РЕ). Флуорофори піддавались збудженню при 488 нм. Інтенсивність ЕІТО-флуоресценції визначали з БІ1, в той час як флуоресценцію Рі і РЕ визначали з РІЗ. Використовували програмне забезпечення системи І (Весктап-Сошег) для обробки даних. Певну кількість клітин виражали в перерахунку на 10000 для кожної проби.
Синергічну дію визначали при використанні ізоболограмного методу. Для встановлення синергічного ефекту проводили порівняння дії комбінації препаратів з дією кожного одного препарату. У цих цілях використовували рівняння: Са/Са, Б-СБ/Ср, а-Сі, де Са і Со представляють, відповідно, концентрації лікарського препарату А і лікарського препарату В, при яких відтворюється бажаний ефект (наприклад, 5095 загибель клітин). Са, Б і СЮ, а представляють, відповідно, концентрації лікарського препарату А і лікарського препарату В в комбінації, при яких відтворюється бажаний ефект. СІ представляє індекс комбінації. Визначали концентрації флударабіну і ТА0О-016, які викликали 5095 загибель клітин. (ІС50), і вони приведені на фігурі 270
ПС5О флударабіну (І) і 1250 ТА0-016 (1І)). Пряма лінія між двома даними точками на осях являє собою лінію адитивного ефекту.
Потім були визначені різні комбінації рлударабшу і 180-016, які забезпечували 5095 загибель клітин, за оцінкою життєздатності, і будували такий же графік залежності. У тому випадку, коли точки були нижчими за лінію адитивної дії, це вказувало на наявність синергічного ефекту. Коли точки знаходилися вище за лінію, то це вказувало на наявність антагонізму. Коли точки знаходилися на лінії, це вказувало на адитивну дію.
На фігурі 27 показано, що ТАШО-016 ефективно знижує відносну життєздатність клітин, оброблених флударабіном, тобто потенціює цитотоксичну дію одного флударабіну. Таким чином, результати даного досліду свідчать, що ТАИ-016 можна вводити спільно з флударабіном, приводячи до підвищення ефективність (тобто синергічного зниження клітин СІ І) при лікуванні злоякісних захворювань крові.
Приклад 16
ТАО-016 індукує прямий цитотоксичний ефект для резистентних до ритуксимабу клітин
Як тут вже вказувалося, ритуксимаб являє собою моноклональне антитіло, що використовується для лікування МНІ, ЕСС, МС, ОІ СІ, 5 ії СІ. Дане дослідження було проведене з метою оцінки ефективності
ТАО-016 в індукції прямого цитотоксичного ефекту для клітин, резистентних до ритуксимабу.
Резистентні до ритуксимабу клітини (їХЮюЮ» клітин) (Ва) 4ВН ВІ. 4ВН, люб'язно надані Ог. 5. Сгислтап,
Возмеї! Рак Сапсег Іпзійше, Вийаю, МУ), обробляли герцептином (10 мкг/мл), ритуксимабом (10 мкг/мл) або
ТАО-016 (5 мкг/мл) в присутності 5-кратного надлишку козячого антилюдського Ідс протягом 24 год. Прямий цитотоксичний ефект оцінювали фарбуванням анексином/Рі і визначали життєздатність (в процентах) по відношенню до контрольних клітин (клітин, оброблених герцептином).
ТАО-016 індукував більш високу токсичність для клітин в порівнянні з ритуксимабом на резистентних до ритуксимабу клітинних лініях (дивись фігуру 28). Таким чином, ТАО-016 являє собою ефективний засіб для індукції цитотоксичності для резистентних до ритуксимабу клітин, що робить його придатним для застосування як лікарського препарату для лікування захворювань, для яких характерні або які пов'язані з резистентними до ритуксимабу клітинами, такими як В-клітини.
Приклад 17
ТАО-016 індукує фосфорилювання тирозину в СО19-- В-клітин первинної СІ |.
Для визначення того, як ТАО-016 індукує передачу сигналів в В-клітинах, проводили експерименти з метою дослідження впливу ТАО-016 на фосфорилювання тирозину.
Щойно виділені СО19-- клітини (х50-100х106) від пацієнтів з СІ суспендували при титрі 5х109 клітин/мл
РВ5. Потім клітини інкубували протягом 10 хв. при 37"С в атмосфері 595 СО» з контролем, трастузумабом (герцептином) або ТАО-016 з кінцевою концентрацією 5 мкг/мл. Клітини центрифугували, супернатант видаляли і клітини ресуспендували в свіжій порції РВ5 в первинному об'ємі. Додавали перехресно-зв'язувальний лінкер козячого антилюдського Ес-фрагмента (25 мкг/мл), і клітини інкубували ще протягом 5 хв. Клітини знову центрифугували, супернатант видаляли і клітини лізували в 1 мл лізуючого буферу ВІРА з інгібіторами протеази і фосфатази (10 мМ Тріс, рН 7,4, 150 мМ Масі, 195 Тритони Х-100, 195 дезоксихолевої кислоти, 0,196 505 і 5 мМ ЕДТА, всі реагенти - в кінцевих концентраціях. Використовували суміш інгібіторів протеази виробництва бідта, номер по каталогу ЖР-8340; суміш інгібіторів фосфатази виробництва бідта: суміш інгібіторів серин/треонінфосфатази, номер по каталогу ЖР-2850; і інгібітор тирозинфосфатази, номер по каталогу ЯР-5726; РМОЕ (100 мМ). Інгібітори додавали в лізуючий буфер безпосередньо перед застосуванням в розведенні 1:100. Концентрацію білка в лізатах кількісно визначали методом з біцинхоніновою кислотою (ВСА) (Рієгсє, Носкога, І). Контрольні і піддослідні проби білків (50 мкг загальних білки) розділяли двовимірним електрофорезом в гелі (рН в межах 3-10) (1 напрямок) і 1095 5О5-РАСЕ (2 напрямок). Білок переносили на нітроцелюлозні мембрани 0,2 Мт (5сПіеіснег 5 сп!цеїЇ, Кеепе,
МН) і піддавали імуноблотингу з використанням клону 40310 антитіл проти фосфотирозину (Орвіаїеє
Віоїесппоіоду), слідуючи стандартному протоколу. Як повторні антитіла використовували код'юсований з пероксидазою з хріну (НАР) козячий антикролячий Ід. Детектування фосфорильованого білка проводили з використанням хемілюмінесцентного субстрату (Зирегзідпаї, Рієгсе Іпс. Воскгога, І).
ТАО-016 індукував фосфорилювання тирозину в СО 19-- В-клітинах первинної СІ, як це було показано двовимірним електрофоретичним аналізом в гелі (дивись фігуру 29). Таким чином, дані досліди показують, що на одному шляху ТАИ-016 функціонує за допомогою фосфорилювання тирозину.
Приклад 18
Гуманізовані молекули ТАШ-016
Як представлено в прикладі 1, СО37-специфічні ЗМІР (такі як ТВО-016) описані в спільній заявці на патент
США Ме 10/627556 і публікаціях заявок на патенти США МоМе 2003/133939, 2003/0118592 і 2005/0136049. Ці документи включені тут посиланням. Зразковий СО37-специфічний 5МІР, поліпептид ТАО-016 (5ЕО 10 МО:2) отриманий і описаний тут. У даному прикладі описується гуманізований ТАО-016 5МІР.
Гуманізовані антитіла відомі в даній галузі, Її вони обговорюються в публікації заявки на патент США Мо 2006/0153837. У даній заявці застосовуються способи, використані при отриманні гуманізованого антитіла (обговорюється нижче) для гуманізації МІР, і зокрема, для гуманізації ТАО-016.
Передбачається, що «гуманізація» забезпечує антитіло, яке в меншій мірі є імуногенним, з повним збереженням антигензв'язувальних властивостей вихідної молекули. Для збереження всіх антигензв'язувальних властивостей вихідного антитіла структура його антигензв'язувальнего сайта повинна бути відтворена в «гуманізованому» варіанті. Цього можна досягнути «пересадкою» тільки СОН, відмінних від людських, в людські варіабельні каркасні області і константні області, з або без збереження критичних залишків каркасної області (допез еї а!., Майшге 321: 522 (1986); Метоеуеєп еї а!., 5сієпсе 239: 1539 (1988) або рекомбінацією цілих варіабельних областей, відмінних від людських (для збереження ліганд-зв'язувальних властивостей), але «маскуванням» їх поверхнею, подібною до людської, за допомогою розумної заміни залишків, що зазнають впливу (для зниження антигенності) Радіап, Моїес. Іттипої. 28: 489 (1991).
У основному гуманізація «пересадкою» СОВА включає рекомбінацію тільки СОВА антитіла, відмінного від людського, в людську варіабельну каркасну область і людську константну область. Теоретично це повинно привести до істотного зниження або елімінації імуногенності (за винятком випадків, коли є алотипічні або ідіотипічні відмінності). Однак повідомлялося, що також може бути необхідним зберегти деякі залишки каркасної області вихідного антитіла (Неісптапп еї а!., Машге, 332: 323 (1988); Оцеєп еї аї., Ргос. Маї). Асад.
Зсі. ОБА, 86: 10029 (1989)).
Залишки каркасної області, які необхідно зберегти, можна встановити при використанні комп'ютерного моделювання. Альтернативно критичні залишки каркасної області можна потенційно ідентифікувати при порівнянні структур відомих антигензв'язувальних сайтів (Радіап, Моїес. Іттипої. 31(3): 169-217 (1994)), це джерело включене тут посиланням.
Залишки, які потенційно впливають на зв'язування антигену, можна поділити на декілька груп. У першу групу входять залишки, розташовані суміжно з поверхнею сайта антигену, які, отже, можуть прямо контактувати з антигенами. Дані залишки включають амінокінцеві залишки і суміжні з СОВА. Друга група включає залишки, які можуть змінювати структуру або відносне розташування СОВА за допомогою контактування з СОВА або іншим пептидним ланцюгом в антитілі. Третя група включає амінокислоти з «прихованими» бічними ланцюгами, які можуть впливати на структурну цілісність варіабельних областей.
Залишки в даних групах, як правило, знаходяться в одних і тих же положеннях (Радіап, 1994, вище), хоч їх положення при ідентифікації можуть розрізнюватися в залежності від системи нумерації (дивись КарБвбаї еї аї., «Зедиепсев ої ргоївїп5 ої іттипоіодіса! іпіегеві, Бій ей., Риб. Мо. 91-3242, 05 Оері. Неайй 5 Нитап 5егмісев,
МІН, ВешШезаа, Ма., 1991).
Незважаючи на те, що даний винахід належить до гуманізації МІР, а не антитіл, відомості про гуманізовані антитіла в даній галузі застосовні до 5МІР за винаходом. Деякі приклади гуманізованих молекул
ТАОИ-016 представлені в таблиці 5 нижче.
Для отримання гуманізованих конструкцій ТАО-016 за винаходом мишачі каркасні області ТАО-016 зіставляли із залишками людських УНІ і УН5 каркасної рбласті важкого ланцюга і МК! і МКЗ легкого ланцюга.
Найкращі збіги аналізували на сумісність каркасної області з СОВА мишачих варіабельних областей.
Незважаючи на наявність декількох в рівній мірі сумісних комбінацій, з яких можна було зробити вибір, автори з успіхом використовували раніше комбінацію МКЗ (Х01668), МН5-5(2712373), і таким чином гуманізовані анти-СО37-5МІР конструювали з використанням даних людських каркасних областей, з'єднаних лінкером 15аа
Спу«5ег(д453) зсЕм. Конструкцію МКЗ конструювали з УК1 як переважний збіг ЕН4, і МН5 конструювали з УНІ, що кодує ЕН4, у вигляді раніше описаних конструкцій. З5МІР конструювали де помо з використанням перекривної олігонуклеотидної ПЛР. Повнорозмірні продукти клону вали в експресуючий 5МІР вектор в рамці зчитування з шарнірною областю людського ІДС, СНО і СНЗ. Дані клони секвенували, переносили в клітини
СО5-7, і 3-добове кондиціоноване середовище тестували на зв'язування з В-клітинами лімфоми Натоз. З метою підвищення ефективності гуманізації були введені зміни в СОВІ легкого ланцюга в положеннях 125, 127 і128, і вони добре переносилися, виявляючи однакову зв'язувальну активність з вихідною гуманізованої молекулою 019001. Були отримані додаткові конструкції ДНК аналогічним способом із зміною СОВЗ області
МН включенням амінокислот зародкової лінії, Н100-Н102, кодованої різними людськими областями УН.
Конструкції тестували відносно рівня експресії і мірі зв'язування з СО37 на клітинах Натоз.
Таблиця 5
Гуманізовані конструкнії ТЕОХИВ м м рми . МКЗУНЕВІ Фуївег
ГоТ9002 1 УКЗНО-ОЇ їбав 858017 В твввхн ПКа ТВО діуеет ден 1919008 МКЗАНАВї ї5аз 850-Р В 15 й -- Я УНН У і віудвег. | ши
ГОЯЇ8О04 1 МКЗУНЬЇ |їбаа 855 2 дитя ша ! І -щ ши і ди гО18005 | УкКаллне-яї ЯБаа ББСР КЕ 14
Уква (М - | віудвег !
Готевов УКЕУНЕВІ ріБаа БЕБІ 7
УК (ГТ - | іуєває і Ї й А Н бібоо їбва,ї 85 ІЯЙ 000001 В І 1ПУКУНБ-ба іудеї і отв Гохвимн їбЗаа 15 р. їх з ін: лі. я: | Лусв 4 - . ми - -- - - Ко й я | Бендієднко у ве і
ГЕТЕ ГУК УНЕ УНОУ Тї5ва БОР ІЯ 129
ЕМ піуаваг і й
От5018. | і158а ве 173 ее ім Ук діуаеаг і отеота | МктУН їбай ЗЗР 125 26 і
Фбібліз 0 віуавег ідером 27) й і : 195021 і 1бав зЗвО-в 127 28 тм: Ук ауд. Й 019023 МКтМН Таз ВБР 28 СВО іст діуавех ! 015554 савть Гібва (8506 ДЕ ЗНИ іднкслвачи Я | ціудеег | і св Тк тя п пи ни ЗО бібосв С ТУКУМНЕ УКВ Т'Еса ТЕБЕР Е: сет
СЕМИ | віуавег . . 019026 | УкиУнУ УНЗ | т1Баг 50-35
Ед лізег
ГПЯ8о35 Ук МНУ | ібаа 1581537 5
ПИМИИННИ Пт ШИН Кк: В НИЙ АН о (о19055 Мк ун УНЗ-|ї5аа | 5558 З 40 син ВЕ двувеі 1
Го395034 УКОМУНЬ МН» | ї5аа За ОС Фф 42 і
ЗІБ |діуйвет | . і ко39035 Ууканв МнІ- | 5аа ЗВО | 43 48
Я зт ЕМ. | дімавег
ПО5О37И ОО ГМКСВНЯЯ |їбаа БОР 45 146
Со ----- лопапревмне |дяват| н гОт9041 1. 015006 - ї5аа зо Що 148 Я
М ОСОБ-НЗУМЯ бує осот 019045 | 019006- 1бва 1850-62 148 7 ! СОВ-НЗІНО Гоудвегі|. і 1019044 015906 » ії53ва. БО |В 52 і СОВ-НЗУНнКа | сіуйвег ! гО185085 19006 ібаа 15ББО-Р | 53 Бі і
Ге нЗНее осіудвег| й :
ОТ9ОаБ 00 О19008 У 1зда. 15506 155 БЕ :
СОН УНІ 1уйвег : : і бтаОяи 8006 - | їЗаа ВВЕ о? НЕ о. 1Є08-Н3 Унів | уза | 2-4 Я
Ото048: /бі150в6 - СО. іб5аа І1Б8СРІБВ (9 З
З Уа сіулвег і і 019049 01800808 1баа | 58052 79 І ВО
НН ес кк ИЙ ПУЕТ однин он о одн тя 019050 018006.-СОВ-|їбаа 1550 В ї82
І На спапдеє сіуавек
ТО19054 МГ О19044 ва | ОСРРОР ВУ. І 84
Сонет 11711111
ОТО; 85 ве і
ВС ЗСС ВИВИХ ВИН 18 донні
Амінокислотні консенсусні послідовностігуманізованої конструкції ТАО-016 Мо.019001 (5ЕБО ІЮ МО:6;
НО16-019001) і негуманізованого ТАО-016 (5ЕО ІЮ МО:2; 016- (328-1) представлені з використанням системи нумерації Кабраї на фігурі ЗОА. На фігурі ЗОВ приведене зіставлення амінокислотних послідовностей гуманізованої конструкції ТВО-016 Мо.019001 (5ЕО ІО МО:6), 019008 (5ЕО І МО:86) і 019009 (5ЕО ІЮ МО:88).
Зіставлення послідовностей ДНК і амінокислотних послідовностей трьох гуманізованих конструкцій ТАО-016 (019001, 019041 ії 019044) з демонстрацією високого СО37-специфічного зв'язування з В-клітинами Натов приведене на фігурі 31.
Зіставлення послідовностей ДНК і амінокислотних послідовностей в форматі БАБТА тих же трьох гуманізованих конструкцій ТАО-016 (019001, 019041 і 019044) приведене на фігурі 32.
Додаткові шарнірні області (таблиця 6) і каркасні області (таблиця 7), які можна використати в гуманізованих молекулах ТАШО-016 за винаходом, приведені нижче.
Таблиця 6
Шарнірні області для гуманізованих ТЕО-О16 МИР
Описшарнюни: 1000 Послідовність ДНК або амінокислотеа С Ведастдоя тобласт: послідовність пост
І вефрі- задсосвавісноасанавсївасасвідієсассвюосов 89 пас і : ( пНК ) Но нн й й ! обов). ЕРКЗСІЖТНТСРРСВ Ів;
С НЮСі(АА І і зесіру / Чадсосчавісноїдасававсісасасадіюєассцідосса | 91 - у пюсі !
ІС дню | і
Во | ЕРКОВБОКТНТСРРСР. 82
ПОСТАХ тт ши і-всс(8)- Баадсбовзавістсюасаааасісасасвіціссаосоїчсса | 93 Ї
І пдем ! | !
ДНЮ
І всб(8 ТЕРКВБОКТНТСРРОБ5 і паст(АА) 1 зс8(8)- дадсссаааіснодідасаааасісасасаїдіссассдадсіс: | 95 під | а
ДНК
ПІ9ОС1 (АА вв8(р)- дадсссаааіснсідасаааасісасасаїсіссассдадссс 97 пІЗ9О1 а дНиК
Шл еснени и
НІ9С1 (АА 555(5)- дадсссаааїснсідасаазасісасасаїсіссассодадсіса підОС1
ДНК '
НОСІ (АХА сее(р)- дадсссаааіснощасаааасісасасаїсіссассоїдссса 101 пІдДО1
ДНК
ОС (АА сзс(5)- дадсссааагсідідасаааасісасасаїсіссассдідсіса | 103 т
ДНК
ЕРКЗСОКТНТОРРОЗ
ПІ9ЗС1 (АА ззе(р)- дадсссаааіснсідасаааасісасасаїсіссассоуїдссса 105 під 1
ДНК І
ЕРКЗЗОКТНТОЗРРСР 106
НПЧО1 (АА 5с5(5)- дадсссаааіснсідасаааасісасасаїсіссассоідсіса | 107 підС1
ДНК
ЕРКЗЗОКТНТОРРСВ 108
ПСО (АА сз85(р)- ЧдадсссааагснНоаїасаааасісасасаїсіссассдадссс 109 піоС1 а
ДН
ПОС (АА с85(5)- Чдадсссаааісноїдасаааасісасасаїсіссассдадсіса 111 тасі1
ДНК с88(8)- ЕРКЗСОКТНТОРРО5
ОСІ (АА по а
(дню 17000001 5со8(8)- ЕРКЗБЗОКТНТСРРБЗБ 114 пІ9О1 (АА
ПІЗАТ МРУЗТРРТРЗРОТРРТРУР5 пічА2 МРРРРР підоЗ Чдадсісаааасіссісісддодагасдасссаїасдіціссссос | 117 (ДНК) тдсстюаассодааціссіосоаіасоссіссоссаюіссасооії дсссададсссаааїсадсоагасосссссассдідіссссдс
Ідіссідаассааадісасодаїассссассассаїдіссаада їдссса
НОСЗ (АА) | БЕ КТРГСОТТНТОРКСРЕРКЗСОТРРРСОРЕКСР 118
ЕРКЗСОТРРРСРКСРЕРКЗСОТРРРСОРКСР
Ідо315Н8сс ) дадсосаавіснсідасасассісссссадсссасодідсссс
ДНК
Ідо315н5сс | ЕРКОЗОТРРРОРЕСР
АА
ІЧО315Нсв55 | дадсссааасндідасасассісссссаїссссасодісссса
ДНК
І9О315Нс55 | ЕРКОСОТРРРОРВОР
АА
Ід63156555 ) дадсссаааіснсідасасассісссссаїссссасодісссса
ДНК
І9О315й555 | ЕРК5ЗЗОТРРРОРЕ5Р
АА
ІдОЗпібсвс | дадсссавзайспдідасасассісссссаіссссасудаоссса
ДНК
ІЧОЗпібсвс | ЕРКЗСОТРРРОРАСР
АА
Яе1В) ЕБРКАОА5БЗУРТАОРОАЕСЗБІ АКАТТАРАТТЕ | 127
МТОКОСЕЕКККЕКЕКЕЕОЄЕЕКЕТКТР
Таблиця 7
Каркасні області для гуманізованих ІКО-016 5МІР антитіл ПОСЛІДОВНОСТІ
ГЕВИ ши
УНІ ОМОЇ МОЗОАЕМККРОАБУКУЗСКАВОУТЕТ
МНІ 0001 ОМОЇМО5БАЕУККРОЗБ5УКУЗСКАЗООТЕ5
ОМНІ 00/00 ОМОЇМОЗОАЄМККРОЗЗУКУЗСКАЗОСТЕЗ
ЕМО МОЗСАЕМККРОАТУКІЗСКУЗОУТЕТ
МН 0/0 ЕМОГМОЗОАЕМККРОЕБІ КІЗСКОЗОМ5ЕТ
ІМН5 0/0 ЕМОЇМОЗСАЕМККРОЕЗБІВІЗСКОЗОУЗЕТ
ОМОГМО5О5ЕККРОАЗУКУЗСКАВОХУТЕТ 04111111
УУКОДРОСОСІ ЕМУМО
УНІ УМВОАРООСІ ЕМУМО
03 11111111
УНІ
УНІ уні ли ит я -еЕ- 17 дДУМОВетІМТУ55 21 фмсостМмутУ55 77777771 1164 111 д0УмбОостТІМту55 777777777771717171717171111111165 1 |Ммвоспуту5 77777777 р1166 1111110 1МмоеКеттУТУ5 77777777717171717171711111111411698 нн ноя ПОЛОН В іа ПИ антитіл
ЕВ ши
РОЇ. ТОРБУ 5АЗУСОВМТІТС п: Ин ПОЛА
УГУВОКРОКАРКЦЇМ
/УкІ1 МУУООКРОКАРКЦ М 1950 3
УКЗ СІРАКЕЗОЗСО8СТОГТІТЗЗСЕРЕОБАМУХС
Ук
Ук
ГУКА 201 вв 1 твбостКУК 77771717 1206 00 ТЕОРОТКУВІК 208
РОЗООТКМБїК 209
Фахівцям в даній галузі очевидно зрозуміло, що передбачаються численні модифікації і варіації у винаході, як приведені вище в ілюстративних прикладах. Отже, відносно виноходу можуть бути поставлені тільки обмеження, приведені в прикладеній формулі.
Послідовності ДНК і амінокислотні послідовності ЗО ІЮ МО:79-88 в Номер Послі й уконструкші ВНОСТІ ПОСЛІДОВНІСТЬ 019049 79 агдсноссосса(доазадссссадсосадсисіснесісстосіастідосісссад аїассассддачааайцідидасасацісіссадссасссіцісіндісіссадосоа аададссасссісіссідссдадсаацдідагааідщасаосіаснадссюдіасса асадааассідодссаддсіссіадосіссісаєсаносавааасстарсадааза аанссадссаосусадідосавіддаїссоддасадасисасісісассаїсадса дссіададссідаавчаніосадщшанасідісаасаісанссоагассодасаї іІсдоссаадодассааддюдаааїсааадоідосодіддсісддоасавідаюдаї сіддадоговідодассодічададсадсюаювсадісюваосадаодідаваа адсссодадацдісісідаадашссідіааодовіссодоНасісайсасіддсіасаа тагоаасідадіососсадаюсссодоааадоссісоадіддаїдадсавіаноас сЧапаювдіодіасіассіасаассддааднсааддодссадоісасіавістссоуссоа саадіссаїсадсассоссіассісааіддадсадссідааддссісддасассос саюацЧасідідсасосісадісддесстсодассісіддадоасададдсассосіддціс асісісіссісідаїсаддаосссаааісисідасаааасісасасаїсіссассоосс садсассідаасіссіддоодассдісадісНсосісносссссаааасссаадцдас асссісаїдаїсісссуддассссідадцісаса(дсоіддіодіодассідадссасда адасссідаодісааонсаасіодіасціддасоосціддадоаіюсагваюссаад асааадссосдддасдадсадіасаасадсасогассоідіддісадсціссісасс діссідсассаддасіддсічавідосаваодадіасаадідсааоддцісіссвасааа усссісссадссоссаїсдадаааассаїсіссагадссавадодсадссссодава ассасаддідасасссідсссссаїсссодоаідадсідассаадаассаздоцісад ссідассідссіддісааадосуисіаіссавдссасаісдссоїюдатодуачадса аїддосадссодоздаасаасіасаадассасоссісссоідсідасіссдасадсї ! сснсцссісіасадсаадсісассоіддасаададсаддаіюдсадсадаодаасяї сИсісаіосіссої даюсагдадосісідсасаассасіасасдсадаададссісіс ссіцісіссдодіава аїсіада
019049 во | МЕАРАСМЦ ЕЛ УМ РОТТОЕЇМСТОБРАТІ Б5РОЕКАТІ 5СК
АЗЕМУУЗУ ДАМ УООКРОСАРКЦУБАКТІ АЕОСІРАКЕЗОЗО5
СТОЕТІЛІЗБГЕЕРЕОЕАУУ У«СОННЗОМРУ/УТЕСОСТКМЕКОСО
БОБ ОТОЕМОЇ МОЗОАЕЄМККРОЕБІ КІЗЄСКОБОУ5
ЕТОУМММУУУМОМРОКОЇ ЕУУМОМІОРУУОТТУМАКЕКВО
МТ ЗАЮКВІЗТАМІ СОУ 5БІКАБОТАМУХСАКБУОРЕО М ОКОТ
ГУТУЗЗроЕРКЗЗОКТНТЗРРОРАРЕЇЇ ЗОРЗМЕСЕРРКРКОТ
І МІЗЕТРЕУТСУУМОУЗНЕОРЕУКЕМУ УМОБМЕМНМАКТКРАК
ЕЕСУМЗТУВММЗУІ ТМ НОРУМ МОКЕУКСКУЗМКАГРАРІЕКТ
ІЗКАКОСОРЕЕРОМУХУТІ РРОКОЕСТКМОМ ІТС МКОБУРЗОІАДУ
ЕМЕБМОСОРЕММУКТТРРМ Ю5ООБ5ЕРІ УК. УрОКВАУЧОС
ММЕЗС5УМНЕАСНМНУТОКВІ І РОК 019050 81 авадсидссоссаддаадссссадсісаосксісносіссідсіасісідосісссад агассассодадааанцідідасасадісіссадссасссідісінасіссаддсода аададссасссісіссідссдадсавоідаааающтасадсіаснадссіддіасса асадагвассіддссадосіссіадосіссісвістайщосагавасстадсадчааоо аанссадссадойсадідосадіддаїссоддасадасксасісісассаїсадса дссівдадссідаачаццосадщацасіцісаасасаносодаавіссодіддасаї (сддссаадодассааодіддаагвісаааодіоосодіддсісодосовідвідоаї стпааодаоцсідддасівосоадоюсадсіооіосацісодадсададоюгвава адсссодадоацісісюааданіссюіаадддаіссоднасісайсасіадсіасаа
Ідідвасідавідсдссадаюсссдодааадчоссіодадіодаюдасааанода! ссчанавідоіасівасіасосссадевонссаддоссадоісасіасіссоссо асаадіссаєсадсассоссіассіюсаатюдадсадссідаадоссісодасассяо ссаціацасіідсасосісадісддсссадзцасасододссосодсасссідо іІсасідісіссісідаїсаддадсссаваєсйцсідасаваасісасасаї сіссассою сссадсассідавсіссіддаюдассоісадісносісносссссаваасссяадо асасссісвідаї(сісссодассссідаддісасаювсоддвіюєтоадасоюдадссас уаадасссіюадоісааднсаасіооіасоіддасдосоюдадоювсаїааюьсса адасавадссосоодадчогосаціасвасадсасогассоі дгодісадсоіссіс ассцссісассаддасюдсідавідосааддадіасагоїдсааоддісіссаас ааадсссісссарссоссаїсроадаааассаїсіссааадссааводосадссссо адаассасаддіціасасссідсссосаїсссодддададсідассаадаассадої садссідассідссідісааадодсисіаіссаадсоасвісоссоюдавчододаса осгаддосадссодадаасаасіасаардассасоссісссотіосюдасіссдас посісспонссісіасадсаадсісассоддасаададсададсаосадодоа асоіснсісасіссдідадсаюдадосісюсасаассасіасасоасадаададс сісісссідісіссодоіаааюа
019050 82 МЕАРАОСЕ ЛУ РОТТОЕЇМСТО5РАТІ БІ 5РОЕБКАТІ СК
АЗЕМУУБУ АМУООКРООАРКСІУРАКТІ АЕСІРАВЕ5О5О5
СТОЕТІ ТІЗБ ЕРЕОРАУУ УСОННЗОМРУТЕЗОСТКМвЇКОСО оБОСОСЗОСОСАЗЕМОЇ МОБОАЕУККРОЕЗІ КІБСКОВОУ5
ЕТБУМММУУУКОМРОКОЇ ЕУУМОМІОРУУООСТМУАОКРОСО
МТІЗАРКВІЗТАМІ ОУУЗБВІКАЗОТАМУУСАКЗУОРМОУМСКО
ТЕМТУЗБОСЕРКЗЗОКТНТЗРРОРАРЕЇ | ООРБМЕСЕРРКРКО
ТЕМІЗКТРЕМТСУММОУЗНЕОРЕМКЕММ УУООУЄМНМАКТКР
КЕЕОУМБТУАУМБМ ТМ НОВУ. МОКЕУКСКМЗМКАГРАРІЕК
ТІЗКАКСОРКЕРОУУТСРРОКОЕТКМОМБІТСІ МКОБЕМУРЗОІА
МЕМЕБЗМСОРЕММУКТТРРМІ.ОБООБЕР У5КОТУрКВАМОО
ОМУЕБСВУМНЕАСНМНУТОКВІ БІ 5РОК 019051 83 авосндссоссаєфоазадссссадсусадснсісносіссідсіасісіддсісссад аіассассодадвааноісноасасадісіссадссасссіцістщосіссадусада аададссасссісіссідссдадсаазідачавіднасадсіаснадссіодіасса асадавассіддссадосіссіадосіссісаїсіанносааааасснадсадавод сайссадссадайсадідвосадідднссодоасадасисасісісассаїсарсад ссіададссідааданносаощанасіцісаасаісанссоаіааіссоїдчасан сдоссааддоассвадчіюдаааісааводідосодідосісодосодіочоюодаї сіддаосадвіювваосавазвадоаосіадсововіюсадсіювідсавісювдва одсадаодідааагадсссодадацісістаадашессідівадддаїссоонасіс ансасіддсіасааіа(даасіддаосодссадаюсссодоааадоссісоваа аідддсавіайдаїєсснанаююдовіасіассіасаассодаадісаадодссаздао їсасівісіссдссоасааціосвісадсассоссіассідсазоададсадссюаау одссісддасассоссаїдіаНасіоїдсасосісадієддссстедасіссіодосс зддосасссіддісасідісісдадндіссассоідсссадсассюдаасіссіддаю дассцісаціснессісносссссаваасссавддасасссісаюаїсісссоддассс січадоаїсасадсдідд оводасоюадссасоаадасссідаддісавоєсаа сідагасоіодасоосоюдадогдсагаадссаадасааадссосододадаас адіасаасадсасогассоіісовісадсоіссісассоіссісассаодасіасід авіддсагодадіасаадідсаадцісіссаасааадсссісссадсссссвіссад агваасса(сіссаавоссваводосаососсдадавссасадощіасасссідсс сесаїсссодда дадсідассаадаассаддісадссічассідссіддісаза9о сНсіаіссаассоасаїсоссоюдавіддоадаосааіддосадссоддадесасав сіасаздассасоссісссцідсіддасіссдасодсіссценссістасадсааосіс ассо(дасаададсаосідосаосададдаассіснсісаєсіссодаюсад адосісідсасаассасіасасодсадаададссісісссідісіссоодіаагвідасіс їада
019051 84 | МЕАРАОСГЕСП УМ РОТ ТОЕЇМСТОБРАТІ ВІ. 5РОЕВБАТІ СА
АЗЕМУУЗУГАМУООКРООАРВШІУВАКТІ АЕСІРАВЕБОВО5
СТОЕТТІЗ5ІЕРЕОБАУУ УСОННООМРУТЕЗОСТКМУвІКООС вве С5555АБЕМОЇ МОЗСАЄМККРОЕВІКІЗСКО
ЗОУБЕТОУМММУУКОМРОКОСЕУМОМІОРЖУвОТТИМАКЕ
КСОМТІБАЮКВІЗТАМЦ ОМ ЗБІ КАБОТАМУУСАНВУСРЕЮВБУУ
СОТ УТУВВСРРОРАРЕЦ ООРБЗМУРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАКТРЕ
МТОМУМОМ5НЕОРЕУКЕМУ УУОБМЕМНМАКТКРЕЕЕОУМЗТУ . | ЕМУЗМІ ТУ НОРІ МОКЕУКСКУВМКАРАРІЕКТІЗКАКСОР
КЕРОУМТІ РРІВОЕСТКМОМЗІ ТС УКОСЕМРБРІАМЕМЕЗМОСО
РЕММУКТТРРМІОБОСЕР С УБКОТМОКВАУМОДОММЕЗОУМ
НЕАГНМНУТОКОІ ЗІ 5РОК 019008 85 авадскоссдссаддаадссссвосісадснсісносіссідсіасісіосісссад агассассодачазаноюйдасасасісіссадсосасссідієсцдісіссасосода аададссасссісіссідссовзасаадідаавгаюдікасадсіасцадссіддіасса асадааассіддссаддсісссіадосіссісаіссіакосааазасснадсадааоо аацссадссадойсадіюодсадідраєссодддасадаснсасісісассаєавоса ассіадчадссідаадгі щосадщацасідісавсаїсайссоавіавіссоювасаї ісодссаадддассааодіддаааєсаавасідасосідосісддососівоюваї сіддаддадоідадассодюаооюсадсювдіосадісідадсадчадоюааава адсссддадасісісізаадайссід(ваодовіссоднасісансасіодсіасаа
Тадаасіддаіосодссарагюсссодагавддссідаадідоаводсаавіанааї ссНаНаїдоюдіасіасстасаассддааднсааддодссадцісасіаісіссоссо асаадіссаісадсассодссіассідсавіддадсадссідааддссісодасассо ссащіанасідідсасосісадісоддсссіагдсасіасідоддассосодсасссід ісасідісіссісідаєссаддадсссаааїснсідасаааасісасасаїсіссассоїй сесадсассідаасіссідддіодассоісадіснссісносссссагваасссаацча / асасосісаідаісісссодасоссідаддісасвіосоідсідіддасоюадосас ; звадасссідаодісааонсаасіодіасоюдасодсоюваостосаааюдсса адасаааоассосодоводадсадціасаасадсасоассоііодісадсоіссіс ассціссюсассаддасідасідагвіодсааддатасаадіосгаддісіссвас у аавадссосісссадсссссаїсоадаааассаісіссаваадссааводосадсссса І адаассасаддідіасассстсссоссаісссудддададсідассвадаассводі садссідассідссіддісааадуснсівіссвадсовсаїсассаіддаціоодазча дсааїддосадссодадаасвасіасаздассасоссісссціосіддасіссдас дуосісснеНесістесадсвадсісасссюдасаададсадоюдсадсводдода асдіснсісаюсіссоідаюсаюадосісюсасаассасіасасосадаададс сісісссідісіссадоівагоюа
019008 86 МЕАРАОЦ ЕЦП ЛУГ РОТТОБЕІМТОБРАТІ БІ 5РОЕКАТІ СК
ТЗЕМУУЗУ АМУУООКРООАРКИЇ ПУРАКТЕАЕСІРАКЕЗО5О05
ОТОРТІТІЗЕРЕОРАУУУСОННЗОМРУУТЕСОСТКМУЕЇКОСО вВОБОб5ОООБАБЕМОЇ МОБОАДЕУККРОЕВІ КІВСКОЗОУ
ЕТОСУМММУУУКОМРОКОГЕММОМІОРУУОСТТУМЕКЕКВОМ
ТІЗАРКБІЗТАМ ОУУЗБІКАЗБОТАМУУСАКЗУОРМОМУСКОТ
ГМТУЗБООЕРКЗЗОКТНТЗРРОРАРЕЇЇ СОРБМУРІЕРРКРКОТ
СМІЗКТРЕМТСУУУЮУЗНЕОРЕУКЕМУ УМО БУЕМНМАКТКРК
ЕЄОХМЗТУКММ МІ ТМІНОВУУЛ.МОКЕХУКОСКМ5МКАСРАРІЕКТ
ІЗКАКСОРКЕЕРОУМПТ РРІКОЕСТКМОМУІТСІ УКОЕУРБОТАМ
ЕМЕБМОСОРЕММУКТТРРМІ.ЮБОСЗЕРІ ЗК УЮКБАМООВ
МУЕБСЗУМНЕАЕНМНУТОКВІ 5І.БРОК 019009 87 аадсчдссосса(фддаадссссадсісадсисіспсосіссідсіасісіддсісссад агассассддідаааноідНодасасацісіссадссасссіцісщшоісіссадосда аададссасссісіссідссдаасаадідааааютшасадсіаснадссюдасса асадааассіддссадосіссіаддсіссісаісіаціосааавзассіадсадаада занссадссадуксадчіддсаціодаїссодоасадасисасісісассавісзаса ассіададссідаачанносадінацасідісаасаїісанссоа ааїсстовдасаї
І Ісодссаадодассааодіодаваїсавадоідосодічосісодосовіооіюва! сіддадоаодоіводосіаосогодідсадсіддіосацісіювдадсададоюваага ! адсссодадаціссідаддашессіоаадодаїссооцасісайсасідостасаа їадаасідаодідсоссададсссододааадоссіддадіодаюцаосагвіаноаї ссенанаддаовасіассіасаассодавансгадодссадацісасіаєсіссоссо / асаадіссвісадсассоссіасстосваїдадсадссідаадоссісодасассо !
Ї ссагєіанасідіосасосісацісддасссіа(одасіасідддоссосодсассстда
Ісасідісіссісідаїссаддадсссаааісісідасаааасісасасаїсіссассоід сссадсассідаасіссіддчіодассоісадісносісцйссссссаваасссавдо асасссіса(уаїсісссодассссідаддсасацсодідоювдідасодадссас чаадасссідзадоісааонсаасідасасцюовдасодсоддадоіюсаїаадсса адасааадссдсдодадоадсаціасаасадсасо ассоідіддісадсоїссіс ассдіссюсассаодасіддсюагвіддсаадоадіасаацідсагводісіссаас ааадсссісссадсссссвісдадаааассаїсіссаагдссааадддсадссссд адаассасаддідіасасссідсссссвісссддоаїдаосідассаадаассазої садссідассідссісцісавадосисіаіссавосдасаїсоссоіюсвадіодоача дсавіддосадссодадаасаасіасаадассасоссісссоїдсюдасіссдас дусіссісНесісіасадсазосісассоїддасавоадсаддідосадсадодода асдіснсісаі|дсіссцідасаюдадосісідсасаассасіасасосадаададс сісісссіцісіссодаааащда "019009 88 МЕАРАСГ РОЛУ РОТТОЕЇМСТО5РАТІ БІ ЗРОЕРАТІ СК
ТЗЕММУУЗУЦАМУЙОКРОВАРКСІТУРАКТІАЕСІРАКЕВОВО5
ЗТОЕТІТІ88ІЕРЕОРАУУУСОННЗОМРУТЕСОСТКУВІКОСО ввбо6О505ОСАБЕМОЇ МаЗОАЕУККРОЕВІ ВІЗСКОЗВУВ
ЕТСУМММУУМКОМРОКСЇ ЕМ/МОМІОРУУОСТТУМеКЕКООМ
ТІЗАОКБІЗТАМ Оу ЗБКАБОТАМУХУСАКВУСРМОУУОКОТ 1МТУ58РОЕРКЗЗОКТНТЗРРОРАРЕЦ ОСРОЗМУБІ ЕРРКРКОТ
ІМІБЕТРЕУТСУУУЮУВНЕОРЕМКЕМУ УУОБУЄМНМАКТКРА
ЕЕОУМОТУВКУУВУ ТМ НОВОМ.МОКЕХКСКУЗМКАКРАРІЕКТ
ІЗКАКООРВЕРОМУТІ РРОВОБСТКМОУВІ-ТСІ УКОЕУРБОЇАМ
ЕЖМЕЗМООРЕММУКТТРРМІОБОСБРРІ УВК ТОК ООВ
МУЄВСВУМНЕАСНМНУТОКВІ ВІ ЗРОК
Змінений список послідовностей «110» бтовтаіге, ейб а1. «1205 Зниження кількості В-клітин з використанням СО37 - спецефічних і
СО20 - специфічних зв'язуючих молекул «1305 30906/41324РСТ «1505 05 60/702,459 «1512 2005-07-25 «150» 085 60/798,344 «151» 2006-05-05 «150» 05 60/800,595 «1515 2006-05-16 «160» 220 «170» Расепсїп сегб5іоп 3,3 «2105 Ж 1 «211» 1510 «2125 ДНК «213» Штучна послідовність «220» «223» Полінуклеотид ТВО016 «3005 1 аздссбоссу ссакодасЕє Есазаутодсад акссссадсї гсстуставау садеостікса бо
Ччесаєаассд ссадчаодаді судасаєссау асдасссасо сбссадссвс сссаєссдса 120 хссдедодад адчасссоссас сассасасуає суаасвзадчсу газасоєєсса садссаєсту 180 дсссдобасс адсадчаааса дадааваєстї ссосадоссс содсссоєЕї содсавааасс 240 їсадсадаад деЕдсоссасс аадосссачі уусадрддає сазддсасаса дес 300 аадаєсадса дсстдсачсс Єдаадаєсся удоаацесаєс сссуєсзаса ссаєстссуає 360 аасссоагтоцдча саЯдбЕсасіод аддсассудаа седуачаєса азддсдасду єЄддсессодос 420
ЗдасассадЧЕ саадсоддсяа соддаєсуєса дсадіссавадс єдсадсачес Єддасоєзчад 480
Есудаазадс сгоддсасесс аздбсдаачасі хсстосавадуд стсстодсса сесаттсасєсі 540 ддссасваса сдаастоудї дчаацсазвасє аасосааача дссссдачсо дасєсодазає 60о агбєдаєсстє астаєдасад сассасстас аасссодааці Єсаададсаа дассасаєсєд 650 аскдіачаса аасссстссад сасадсстас агоасадчстса адзвдЕссдас асссдадчас 720 кседсадесь асбассосодс аадассодіс ддсссстаєдд асстассодод Єсаадуудавсс 780 011 ЕЄсацесасся сстстрсада Ессддадссс авасссєсто асаааасєса сасахстсса 840 ссубдсссазуд сассєдаасі сесаддєдда ссаєсадесї ЕссесвбЕссс сссаавгасос 300 аадоасассс ссасдаєстс ссодасссст дададссасає дсугдасуос ддасосдаде 960 сасааадасс ссдачуєсва діссаасєоу сасустадаєса дсосачадає дсасаасоес 1029 аадасааадс сасчдоададца дсаусасаас адсасусасс чіогдадєсад сасссісассо 1080
ЧдЕСсСсідсасс асцчассоадсе даасдасаас даусасазаї дсаацасссс саасаавассо 11680 сЕсссадссс ссаєсудадаа аассаїсссс аавдссазазд ддсадсссся задаассасач 1200 чЧчеЕдсасассс гдссоссаїтс ссодддаєуад сєдассаада ассадуєсад сседасстос 1260 стадісааад десскссассс ааддсдасаєс дссосддачі доадададсаа сдддсаассд 1320 чадаасаасї зсаддассас дссісссово сбддасссся асодсьсссЕ секссєстас 1380 адсаадсіса ссдгддасаа додадсадусєдоа садсадддда асадєстястс асдсессуЧьа 1410 асдсаєдада ссссдсасаа ссассасасу садаадаусс бссссссяасс Сосодусааа 1500
ЄдачЕссада 1510 «210» 12 «211» 496 «2122 РЕТ «2135 Птучна послідовність «220» «223» Полінуклеотид ТВЦШО16 «4005 2
Мес Авр Ре біп Уа1ї біг І1е Рне бек Ре Пес Пеп 112 бегт А1а Бех 1 5 10 15
Уа1ї Іі І11е діа Ак біу Уа! Авр Т1е біп Мес ТБж Сіп бек Рго Аа бет Пец бек Аїа бег уа1 Сіу Сбіц Тпг Уаї Таг І1е ТВг Суб Агд Тік
Зек бін Авп о Уа! Тут Зек Тук Тео Аза Тгр Тут біп б1п Пуз с1вб5 б1у
Зо 55 бо
Гуз Бек Рхо біп Пен Тен Уа) бех Рре А1їа Цуз Тіт Ге Аза бій біу 65 7 75 во
Ууаї Рго Бех Ак Рпе бек бСіу бек біу Бек б51у Тіг бСіп Рпе бек Гей 85 90 35
ТПув І12е бех Бех Гей біп Рго Сі Авр бек біу бех Тук Рпе Сув сіп 100 105 110 -- Нів Нів бех Двр Ап о Рго Тер ТіК Рбе біу біу б1у ТВ бій без 61300000 115 120 125
І1е цуз бі1у бі1у сіу б1іу бек с1у Сіу біу б)1у бек сбіу б1у б1у б1у 130 135 140
Бек Бех Аза Уаі біп без біп біп бек сіу Рко бі бек бій Гуз Рго 145 150 155 160 біу Авіа бЗех Уа1ї Пув І1е бех Сув Гуз Аза бек біу Тук Бек Ріе Ттіг 165 170 175 сіу Тук Азп Меє АБп Тгр Уаі Губ5 біп Авп Авп с1іу пуб бек Пецй сій 180 185 1950
Тгр Т1е б1у Авп І1е А5р Ркго Тух Тут біу біу Тпх Трг о Тук Азп Агд 195 200 205
Гуз Рпе цуз Сіу Був Аїа Трк Ге Тк Маї Азр Пув беї БбБег бек Тіг 210 215 220
Аїа Туг Мес біп Пен Пув бек Ге) Тк Бек бій Авр бБег А1а Уа1ї Туг 225 230 235 240
Тук Сув Аза Аг Бек Ма1ї біу Рко Мебє Авр Тує Ткгр б1у Ссіп с1у ТЕГ 245 250 255 бек Уа! Тих Уаї бек бек Азр Пец бій Ркго Був бег Бех Авр Пув ТВг 260 265 270
Нів ТПгобБет Рго Рго Су5 Рго А1їа Рго бій Гей Гви біу біу Ркго бег 275 280 285
Уаї Рпе Пеп Ріе Рко Рго Пух Рко Пув Авр Трг Пец Меї ї1е бег Агд 230 295 оо
ТЕ Рго 510 Ма) Тік Сув Уаї Уа1ї Уаї Авр Маї бек Нів піц Авр Рго 305 310 315 320 біп Маї Пув Рпе Акп Тір Тут Маї Азр б1у Уаї біц Уаї Ніз Азп Аза 325 330 335
Гуз Тіг оГув Рго Аку бій бій біп Тух Ап бек Тік Туг Агу Маії Уаї 340 345 350 бек Уаі Пес ТіПт Уаї Пес Нів біп АвБр Тгр Пейп АБп о Сіу Буз сій Туг 355 360 365
Пуз Сув Туз Маї бек Азп Пув Азїа Пе Рко АТа Рко Іїіе с1із3 Пуз Таг
Й з7о 375 Й 380 Й
І1е Бег Пузв АтТа Був біу піп Рго Агу бід Рго біп Уа1 Ту ТПг Гей 385 390 395 400
Рто Рко Бех Агу Авр с13 Іеєц ТБх Гуз Азп о біп Уаї Зег Гей Трх Суз 405 410 415
Тєп Маі був С1у Ре Тух Рко бек Азр І1е Аіа Уаї сій Тер біц 5ег 420 425 430
Авпобіу біп Ро Сіц Авп о Авп о Тухк Гуз Тпт Тбт Рго Рго Маї Гем Авр 435 440 445
Бех Авр біу Бек Рре Рпе Пец Туг бег Туз Гей ТПїІ Уаі Ар Буз Бех 450 455 460
Ага Ттр біп біп Сіу Аз» Маі Рре бек Сувз Зек Уві Мес Нів Сік А1їа 465 470 475 480
Гей нів Аєп Нів Тут Тк обіп Буз бек ей бек Пец Зек Рто б1у тув5 4185 130 495 «2105 З «2112 1518 «212» ДНК «213» Штучна послідовність «220» «223» Полінуклеотид ТКО015 «4002 З аадсєсодссд ссатадчафЕс ссазодсосад астсєсадсї Ссссдссаваає садсусьєсса 50 чісасаасає ссачаудаса ааєтуюесьс ксссадсссс садсаассстї дЕсбодсаєоє 120 ссадддчатуа асдуєЄсасаає дастсосаду дссадстісвза ссдіаадеьта сасудсассчза 180 бассассача адссаудаєс сеЕсссссааа ссстодатіс асудссссаєс саассвдась 240 гскададесс ссдсеєсасеї савосудсаує дадессддда ссістбасьс Єсссасаватс зво ачсадаусод адусьдаада содссуссасо сассассусс адсадссдая ссссаассса зво сосасаїєсу стдссудудас саадеєддад ссдааадасд осоддсоассс ЯдадсодосадеЕ 420 ччаєссачач чаздусодаддау сссосасусє Сабєссасадс адсстоддаддс сдачьсдаа 480 азасстдадду ссеЕсадедаа дасаєсссдс аадусьссвЯа дссасасаве сСассадетас 5АО засасдсасі дадтааадсз дасасстада саддасстдд аасддаєсдд адсраєссає 6об ссаддаааця дссатассосс ссасазссад аадсссаздд дсазддесас астдассдка 6бо часазаєссї ссадсасаудс стасаєдсад сссадсадсс Сдасаєссда адасссідсд 720 аїстаєЕссї дсудсаачачу доєовасьає азутаасестьс астадбасьв ссаєдесссо 730
Здсасаддда ссасудуусас суєсісвЕдає садугдссса ааєссвуєда саазасссас 820 асабсіссас сдідсЕсадс ассідаасес стадаєддас сассауєссс ссессссссс 00 пи .
ссаааассса аддасассся сасдаєстсс содассссова аздагозсасд сесдссзаса зво дасуїдадсс ассоаадассс гдадоїсаву Кусвасьуук асосадасуд сутоасачоата 1020 сабаасасса асасааадсс дсудчаддад садусасааса дсасабасся єЧчкЕдуссадс 1080 дЕсстсасесу Єсескдсасса здастддссо засоусавоао адсасавоєа свазуєсьсся 1140 аасагвгадссос Ссссадссосо сабсуєдааа ассаїсссса азуссадацчо дсадссссуа 1200 заассасадад кобасасссі дссосссаєсс сододдаєдадс сдассавдаа ссадчєсаде 12560 содассідсс Есдїсазаду сеЕсстаєсса адсузасаєсу ссусодадво оддададсеват 1320 даусагоссдд адаасаасса саадассасу ссісссобос єдчастсосда соддсссссте 1380
Есссесбаса дсаадсісас содбодасазва адсачасодс асосасуддсав суєстсссса 1440 тосіссуєда сасабуачус сссусасаас састасасос адаададсся стссстуєсе 1500 ссодддсааає дасстаса 1518 «210» 4 «211» 1499 «2122 РВТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Полінуклеотид ТВО0О15 «490» 4
Мес Азр оРпе біз Уаі біп 11е Рпе беї Ре Пцеч ей І1е бег Аза бек 1 З 10 15
Ууаї І1е Меє Зех Аку біу біп 116 Маї Пе бек біп Бек Рко Аза І3е 0
Пец бек Аїа Бек Рро с1іу біо Пуз Уаі Тпт Мей ТрІ Суз Акоу Аза бег бЗег Зег Уаї Зек Тук Мек Нів Тгр Туг Сбіп біп ув Рко С1у Зек бех 60
Рго Був Рго ТІр т12 Туг Аїа Рго бек Авп Пец Аа Бех б1іу Уаі1і Рго 65 70 175 во
Аіа вта4 Ріпе Бек біу бЗег біу Бех б1у ТБгі Зег Тук Бек Гей Тлг І1е 85 зо 35
Бек Агсо Маї біш Аза 51йп Агро Аза Аза ТВгоТуг Туг Суз біп біп Тгр 100 105 110 Й
Зет Ре Ап о Рто Рго Трг Рпе З1у А1їа біу Трг Пув Бей бі рей Був 115 120 125
Азр зіу біу біу бек біу біу біу б1у бек біу сіу біу б1у Вех бег 130 135 140 бій А1їа Тук Преп 5з1іп Сіп бек б1іу А1а бі бек Угі Агу Рго сіу А1а 145 150 155 160
Зег Уаі Буз МеєЄ 5ех Суз цу А1а Зег біу Туг ТЬх Рпе Тпг Зех Тук 165 170 175
Авп оМеє Ніз Ткр Уаї Пув біп Тіт Рго Аку біп біу ен біо Тгр Т1е 180 185 180 біу діа ЇІ1е Тук Рко СсСіу Авп б1у Авр Тс бБег Тук А5п біп Дув Ре 1935 200 205 уз біу Пуз Аіа Тійг Ге Тпт Уаї АБр Пуз бег бек Бек Тік Аза Тує 210 215 220
Мес Сіп Тед бек бег Пес Тру бег біш Азр бек А1а Уа1ії Тук Рпе Сув 225 230 235 240
А1їа вга4 Уаї Уаї Туг Тукг бет Азп Бег Тук Тгр Туг Рпе Авр Уа1ї Тгр 245 259 255 с1у ТБг біу Тпг ТбгоУа1і ТБї Уа1ї бек Авр б1іп бі Рго Пув бек Суз 260 265 270
Авр Пув ТІ Нів ТВг оБег Рго Рго Сув бек Аза Рго б1п Геп Те» біу 275 280 285 б1у Рго Бех Уа! Рпе Гей РрБе Рго Рго Був Рко Гуз Авр Таг Бе Меє 280 295 зо 11е Бек Агкд ТПх Ркго бій Ма1і Тпт Сув Уаїі Уа1ї Уаї Авр Ма1 бег Ніз 305 зо 315 320 с1і1ш Авр Рго б1іш Уа1і Гуз Рре Авп Тур Туг УМаї АБр біу Маї бій Уві 325 330 535
Нів Авп Аза Був Тах Гу Рго Акгу 51 бій біп Тут Авппобес ТЕ Туг 340 345 350
Акад Ма! Уаї Бек уаі Пец ТВт Уа! Пе Ніз біп Азр Ткр Гец Авп сбіу о. 355 Й 60 нин 365 Й
Був Сі Тук пПув Сув Був Уаії Бетг А5п Гуз Аїа цей Рго А1їа ГРго І1е 370 375 зво бі Пув ТБг о ТТ1е Бех Пузв Аза Пув біу 51п Рго Акд бій Рго бІоп Уаї. 385 390 355 400
Тухк ТВі Пеп Ркго Ркго бек Акд АБр бі лей ТЬгоБув Авп о біп Маї бег 405 110 415
Гей ТБ о Суз пед Уа1ї Був 5зіу Рпе Туг Рго Бех Азр І12 А1їа Уа1ї сій 420 425 430
ТтІр біц бек Азп о біу біп Рго бій Авоп АвпоТук Бу5 Тк ТБ о Рго Рго 435 440 445
Ууаї реп Азр Бех Авр біу бек Рібе Ре Пец Тук бек Гуз Пец Тіпг Уаз1 450 455 460
Авр Туз Зег Агуд Тер біп біл б1у Азп Уа) Рпе бек Сув бек Уаї Меє 465 ато 475 480
Нів біз Аїа Бей Ніз Авп Ніз Тук ТІ біп Гуз бек Тей бек Ге; бек 485 490 435
Рко біу ГУБ «2102 15 «211» 1482 «2122» ДНК «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований творо16 «4005 5 ассдаадссс садсеЕсадеє ЕсесеЕсссєс ссяастассст дасісссача їассассод чаааєсасосї гдасасадіс сСссадссасс стассгсСос ссссадусда аздадссасє сісесстоосс даасаадеіда заасуєсвас асстастбад сссбдстасса асадааасс чассаддссс стаддстссї саїстаєесс ссавадассї гздсадаадчу ааєсссадс адчієсассЯа дсадссздаєс содсасадас ЕсастсЕса ссассадсад сстададсс чагчзаєсЕку садсссбаєса стуссаасає саєсссуаєта ассесуєодас асссддсса
Ччодассааду Сддаааєсаа адасоддсЯаді дасісаддасоя адсадсадаєс ЕдозддачЧу
ЧадассадЕд аддлтосвосі доєдсадссі одадсадача соавзааадес суздададчіс стдаачассс ссссгаачдд ахтссоддссас ссасєсасся дссасаасає давассодое сдссадасодс ссудозавад сстсдасяд асодудсааса ссдаєсстса ссасдасад ассасстаса ассдсаадсї саасодудссау чссастаєсї ссадссуасва дессаєсає ассдсстассо гасвасддадч садуссоєдаад дссесдддаса ссоссаєста ЕсСассздбодса 720 сасісадісу дссстасдда стастодуддс сдсдосассс ддеЕсастдб сЕсстсодає 780 саоддадссса ааєсеєссіда саваасесас асассоссас сасдсссадс асссазасес 840 сеЕдачсоадас суссадессв ссссстссссо ссазадсосса адчасассстї саєдаєссссс 00 счдасссссд аддісасату сасоддсосто дасосдадес асувасассос Єдаддадассгзад зво їссаассууєЄ асобдддасод сусодчадааєд сасааєосса гдасгавусєсс дсдададдад 1020 садіасааса дсасодбассу бзгоуссадс асссссассу Ессстдсасса аддчаседасто 1080 ааєддсаасчу адтасаазіо сагдудсстісс аасеаадссс сссадсссс саєссдадааа 1150 ассассісса задссавадчу дсадссссда даассасадд сдіасасссі дсссссаєсс 1200 садчаєдадс сдассаадаа ссаодїсадс стідасстдсс сддссавзадо сЕсстассса 1260 здсудасаєся ссугЯадачьоа здадчадсааї доддсагдссуд адаасааста саадассаса 1320 сессссасус бадастссяда судскссвІс СЕсСсестаса дсааусісає сдсддасвач 1380 ачдсачудсдудс адсачаддаа саяссьсстса бдсіссодбда гдсаєсудачас Естдсасаасєс 1540 сассасасус адавчадссяї сессстдісї ссадЧєааає да 1482 «2105 5 «211» 493 «21225 РЕТ «213» |Цтучна послідовність «220» «223» Гуманізований твоО016 «1002 Щ 6
Меє 51 Аіа Ркго діа СсСіп Пе Пец Рре їецй Тей Пе Сей Тгр о уей Рго 1 5 10 15
Азр Таг Тк об1іу біз І1е Уа) Ге Тік обіп бек Рго А1їа Тбгоїей бег зо
Пе бек Рго сіу бій Аго Аїа ТБгоПей бек Сув Ах ТБх бек б1ч Авд
Уаї Тук Бех Тук Геп АТа Ттр Тух біп біп Пув Рхо б1у біп А1їа Рхо 60
Ага Пес Пе І1е Тук Рбе ДАіа Гуз ТПх Пеп Аза біс с1іу Іч1І1е Рго Аа 65 70 75 80
Втд Ре Бек Ссіу Бег біу Бек біу ТБтх Авр Рбе ТБт Пец Трг о ї11е бег 85 0 35 ек Пец бі Рго біц Азр Ре діа Уаї Туг Тук Суз біп Ніб5 Нів БбБег 100 105 110
Авр Авпорго Тер ТБг Ре Сіу біп б1іу ТПг Пув Ма! Сі Т1е був сіу 115 120 125 б1і1у б1у бі1іу Бек біу сіу б1у б1у бБег сіу б1іу 51у С1у Тк сіу б1 130 135 140 уаї біп Гей Уаї Сіп бек біу Аза б1п Маї ШЦув ГТув Рхо сіу стій бБег 145 150 155 160
Пе Пув І1еє бЗег Сув Був 51у Бех б1у Тук Бех Рпе Тік біу Туг Авп 165 170 175
Меї АвпоТгр Уаі Аг біп Меб Рго б1у Туз с1іу Тем біо Ткгр Мес с1у 180 185 190
Авп ч11е Авр Рго Туг Тугк Сіу б1у ТЬг Тру Тухк Аво Ага Пув Ре Пцуз 195 200 205 біу б1п Уаї тТлг І12е бек Аїа Ар пуб бек І12 бетї Тру А1а Тух Івий 210 215 220 біп Ткр Зег Бек Печ Пух А1а Бех Авр Трт Аїа Мес Тук Туг Сув Аза 225 230 235 240
Ага Бех уаї с1у Рго Мес Азр Тух ТЕр б1у Ак біу Так Гей уаії Тік 245 250 255
Уа1ї1 бек бег Авр біп сі Рго Гуз бег бет Авр ПЦуз Так Нів Тлг бег 260 265 2179
Его Рго Сув Рко АтТа Рко бій Пец Пец біу біу Ргто бек Уаі1і РПпев Ге 275 280 285
Рпе Рго Рго Пув Рхо Пув Авр ТБх Без МабЄ 1312 бет Ак ТВу Рго б13 290 295 300 уаї Те оСув Уаї Ма! Уа1ї Аво УМаії бек Нів біз Авр Рго б)10 Узі Був 305 510 315 320
Ре АБп о ТгроТуг о Уа1і Авр о Сіу Уа1ї бій Уа1 Ні Азп Аза Був Тру Був 325 330 335
Рго Ага біз 0124 біп Тух Авп бек ТК Тук Акуд Уа1 Маї Бег Уа1ї Сей 345 350
Трг Уаї рес Ні біп Азр Ттр Тец Авп біу Був бі Тук Пув Суз Був 355 360 365 уаї бек Авп Пув Аіа Гец Рго Аїа Рго Х1е бі Був ТПг о т11е Бек Був 370 375 380
А1іа їув сі1у б1п Рго АкЧ біц Рго б1іп Маї Тут Тигр Гей Рго Рго 5ег 385 399 395 400
Ака Ар 511 Тез Три Гу АБп обіп Уа! Бек Теч Трг оСуз Пец Уа1ї Був 405 410 415 біу Рпе тТук Рго бек Авр І1е А1їа Уа1ї бій Тгр б1з5 бБег Азп Ссі1у біп 420 425 430
Рго біш Азп Авп о Туг Туз ТІ ТБт Рго Рго Уаї1і Гей АБр Бек Азр 51у 435 440 445 бек Рпе Рпе Ге Тут бет Був Гєп ТПг Уа)! Ар Пув бБетг Акд Трр сіп 450 455 460 сіп б1іу Азп о Уаі Ре сег Суз бек Уаіїі Меє Ніз 51 Аї4 Пеп Нів Ап 465 470 275 480
Вів Туг Тпх біп Був Бех Пе бех Пецшп Бек Рто б1у Буз 485 430 «2105 7 «211» 1482 «2122» ДНК «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твО016 «4002 7 аєадаадссс садсесадсї Естсссссвс седстасісе ддсесссача бассассуда 60 оаавеєєастоЧє Сдасасадес Єссадчссасс стдЕстстудЕ сіссвзудсуа аасадессассо 120 сеЕсесссусс даасаауєда зааєсдсвсас вустасссач ссрдастасса асадааассуї 180 чассаддсєс стаддсстсстї сакстассїс адсааваассї гадсадазуд аагсосадсс 240 ачддеєссадсд дсадеудаєс саддасадас єЕсасєстса ссаєсвзусво сстададессї 00 чаачаєтсссЧ сачьссасса седЕсаасає саєсссдаєа асссогоауас асссодссва 360 ----- доадвссаадуд Сддваассаа асччгдусадЕ оЧсьсадчосо ЧчеЕдуєсдаєс сасвадаччє 420 чачачссссд адчгусадсої дссдсадесе ддадусачаєу сдагазаусс соуадаЧчесе 480 ссчаачаєтє ссідіаадуз аєсссодесас ссасссассо дссбтасаасаї даастдочсд 540 сдссадаєдс ссуддоудааачо ссісдачдсоу асудудсааса ссзабоссса стаєодсаде 6оо ассассбаса ассудаадеЕї саачддссад дссассаїсо ссодссдасав одсссаєсадсе 6 ассядсссасс Сасааєудас садссідава здссісудаса ссодссаєдта сбасесдедса 720 сдсосадьсу дссстіаєдда ссастддачдс сасодусасссо соодссасьудє ссссессдає 780 саддадссса аасссїстда саааастсас асасссссас сусадсссадо ассіозасьс 840 седдаєадас саєсадеьсьу сессткссос ссаавассса гуддасасесо саєсдаєстсе з00 сууасоссто асдссасаєу сусудсЯдсу дасоєоддадсс асааасассс сдадаєсаад 960
Ессаассцує асосадасад счбддадцід саєзаєдсса адасааацссо дсоаддадчачад 1020 садіасааса дсасосассоа єЧкодссадс дЕссєсассу Есссусасса ддаседдссд 1080 ааєдчасаачдд аздсасааатд сааудєсссс аасааадссс Єсссадсссс сассовдава 1140 ассаєсісса задссааадуд дсадсосода даассасаду Бдсасассст дсоссссаїсс 1200 саддаєдадс Сдассазудаа ссаддссадс сідассвдсс гадеісаавдд ствстбассса 1260 аусчасаєсд ссачсоддадсо дсасагодсааї додсадссодд здаасаасса саадассасд 13720 ссгсссусос гадасессда соддссссєсс гессссвбаса дсаачдсьсас сдсоадасагвд 1380 азсадуєадодс адсазадуаа суєссєсіса сассссочода сосаєуадудєс сссудсасаас 1440 сасстасасос адаададссс сессстдЯссо ссодуєрааає зда 1482 «2102 8 «211» 453 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» , «223» Гуманізований ТВО016 «4002 8
Меє біц А1їа Рго Аза бі Гбей цем Рпе плей Бпеп Тей Тей Тгр Із Рго 1 5 То 15
Авзр Тпг Твпх біу біз І1е Уаї Бе Тпкг оСіп бех Рко Азїа Трг Тео бек 23 30
Тви ех Рго б1у біц Агу Аїа ТІ Гео б5еїг Сув Ат ТІ Бек бій АБп
Уг1 Тук бек Ту Ге А1їа Тур Туг біп біп Пув Рго Сіу б1п Ала Ркго 60
АхкЯ пе пей І1е Тук Рпе Аза Пув Тіт Теп А1а Сі б1у І1е Рхто А1а 65 7о 75 во
Ак Ре Бег біу Бек біу бек біу Тр Авр Ре Тпк їм ТБбг о І1їе 5ег 950 з5
Бех Гва біп Рко бі АБр Рбе Аза Ма) Тук Туг Сув Сіп Нів Нів 5ег 100 105 110
Азр Авп о Рко Тгр ТПх Рпе біу 5іп б1у ТВйжЕ Туз Уаі1і 510 ч112е Був б1у 115 120 125 сіу 5іу біу Бех 51у біу біу б1у Бек біу СсСіу Сіу біу Бек Бех б1й 130 135 140
Уа1ї Сіп Гей Уаї біп бег біу Атїа бі Уаі Тув Був Рго С1іу Сіц бег 145 150 155 160 пед цу І1е Зег Сув Пуз біу Бек біу Тук бек Рпе ТПк біу Туг АБ 165 170 175
Мер А5поТгтроуві Аго біп о Меє Рго С1у Був 51у Пе бій Тур Меє б1у 180 185 190
Авпот11е Авр Рго Тух Тук біу біу Тпг ТБ оТук Абзп Агу Був РБе Буг 195 200 205 сіу біп Уаї Тс о І1е бек Азїа Авр Гув бек Іїе бетг Тік А1а Туг ГТец 210 215 220 б1іп Тгр Бек Бек плей Ппув Аза бЗеїг Азр ТіПг Аїа Меє Тух Туг Суз А1їа 225 230 235 240
Аг Зег Уаї Сіу Рко Мебє Авр Тук Тур с1у АкФ4 біу Тпг Бей Уа1ї ТП 245 250 255
Уаї бек Зег Авр біп б1іц Рго Туз Бек Бех Авр Пув ТІПг Нівз Тк бег 260 265 270
Рко Ртхо Сув Рко А1їа Рго бід Гей ГПей сС1у б1у Рго Бех Ма1ї Ре Гей 275 280 285
Рпе Рго Рго Іїув Рко Пуз Авр ТПг Пец Меї І1в бег Агд Тс Ркго сій 230 295 Зоо
Уаї Тпх Сув Уаї Уаї Уаї Авр Уаії бег Нів біц АБр Рго бій Уа1ї Був 305 310 315 320
Рпе Азп Тгр Туг Уа! Азр сіу Уаї Сі) Уа1ї Нів Авзп Аза Пцув Трпх Був 325 330 335
Рго АгЯ сій 51 б1іп Тух Азп о беї ТпгоТуг Агу Уа1! Уаї Бех Уаї Тецй 340 345 350
Твх Уа1ї Гей Нів біп Азр Тгтр пес Авп о біу Пцуз 619 Туг Пув Сув Туз 355 360 365 уаї Бек Авп о Пув Аза Геп Рго діа Рго І1їе сіо Пує Трх І1е бег Був 370 375 З80
Аза пуз сб1у біп Ркго Ахад біш Рко біп уаї Туд Тйх Пец Рго Рго бег 385 350 395 400
Ага АБр б1ім ГПец ТВт Ппув Азп о біп Уаї бех Пе ТвгоСув Бей Ууаї Гуз 405 410 415 б1іу Рре Туг Рго Зег Авр І1е А1а Уаї Сі Ткгр біз Зег Авп біу сіп 420 425 430
Рго С10 Азп Азп о Туг Був ТАх ТбгоРго Рго уаі! Гец АБр бЗег Азр сіу 435 2240 445 бек Ріре Рре Пецп Тух Бех Гуз Гей Тік оУа1і Азр о Буз бег Ак Тгр Сіп 450 455 460 біп б)іу Ап оУаї Рре бек Сув бБеїх Уаї Меї Ніз 510 А1їа їецп Ні Авп 465 470 475 480
Ні Тук Тих 51п Був бек Пец бек Пец бег Рто б1у Гуз 485 490 І «2105 59 «211» 1482 «212» ДНК «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твоОб16 «4005 8 асаддаадссс садсьсадсо ЕсеЕСЬЕсссс седстасесо досесссада сассассода чазаєсасЯЕ єдасасадіс сссадссасс седссстсоєЄ сеЕссаудусда аздадссасс сЕСЕсссдсс давзсазссЧа авасдсєсас адстасеєтач сссдусасса асадаавасст садссводсес стададсессї сасстасс(с дсаззаассі садсадааду аасьосадесс ачасссазіуд дсазеодаєс сусуасадас сссастссса ссаєсадсад сстазадчесь чаадаствїка сассєсасса ссодссаасає саєсссдаєа зіссагодас асссудссаа
Чдадассаадая сддаваєсаа ачосодсоЧчЕ сдсєсучуса дбав дсаєс гочадовадЧе чЧчачассоддса годосдсадсеї досадасадьсЕ ддадсададї сдаазаадсс содчачадчьсь 480 стідчаацаєсс ссідсаадуд аєссудісас Єсасесасьо дсіасааєтає даассочаєа 540 сачссачаєдс ссудчаааса ссссуадесвуд асудасааста ссдаєссєта сСсасодвсддяе во астасссвса ассддаааєї сзачоддссау десаставсе ссуссдасаа дЕссаєсадас 660 ассадоссасс сдсааєудад садссідаач дссісудаса ссдссаєдта єЕассдсдса 720 содсссавдєсд одссстаєода стасідоддос сасодусассс гдоєсасьЯє сесстседає т7во садчадссса заєсссссда сазаасєсас асвісєіссас счсососачс асстчаасес 840 стчучЕдоас суєсадеьсьє ссоссфесссс ссаааассса адудасаєсст саєсдаєсьсс зо судасссстд задссасаєо суєдЧчєодаєЯ сасуєсадсс асдаадассс соадуєсаад З60 їсісаасєдує асодсодасоуд суєдоаадєо саєаатдоса адасааадсс дсуудасозу 1020 садстасваса дсасдрассу сасадсадс дсссеєсасся ссстдсасса дзассддсьо 1080 аакдодсавод адсасазуєу сааудссссс аасаааудссс Ссссадсссс сатсдадава 1140 ассаєсссса авудссаааду дсадссссуа даассасаду судхтасассстї дсссссаїтсс 1200 счодаєсачс бдассаадаа ссаддєсадсе седассьдсс содссазаву стсстаєсса 1260 адссасассуд ссосдсадед досададсаає доддсадссодд адаасааста савдассасу 1320 ссіссспрдс єддастссда сдасбссьєс вЕсстстаса сосаадсссас сдсддасаза 1380 ачсаддссадс адсадсддаа суєстєсіса Едсіссдєда Едсасоаддс Естусасаас 1440 састасасодс адаададсст сосессусст ссдодсавес да 1482 «2105 10 «211» 433 «2125 РВТ «2135 Штучна посліДОВНІСТЬ «920» «223» Гуманізований ткО0016 «00» 10
Меє 5іш А1а Рко А1їа біп Пейп пез Рбе Бец Бей Пец Пед Тр о бе Рго 1 5 10 15
АвроТіг оту сСі1іу сій Тіе Уаї реч Трг обіп бек Рго Аза Тбг Тей б5ег зо
Пеи бек Рко біу бій Агу Аїа ТПк Пей бек Суз Ак Трх бек бій А5п маї Тук бег Тук Пец Аза Тур Туг Сіп біп Гув Рго Сіу біп А1а Рго зо 55 бо
Аха Гей реп І1е Тук Ріе Аза Гуз ТК Преп Аза Сі біу ї1е Ркго А1а 70 75 80
Ако Рбе Бек б1у бег біу Бек 51у ТЬг Абр Рбе Так Те Тру Ізе Зег 85 50 95
Бек Пец 510 Рко Сі А5р Ре А1Та Уа! Тук Ту Суз Сіп Нів Нів бег 100 105 110
Ар Вап о Рго Тер Так Рпе сіу біп б1іу Трх Пув Уаї 514 Т1е був 1у 115 120 125 б1у біу б1іу Бех біу Ссіу с1у сб1у бек б1іу біу біу сіу Тпг б3у б1ц 130 135 140
Уаї біп рес Маї Сіп бЗех б1у діа 010 бек Пуз уз Рко біу бій 5ег 145 150 155 160
Гео Ппуз І1е бБетгт Сув Ппув біу бек біу Тук Бек Рре Тік б1у Туг Авп 165 170 175
Мес Авп о ТгроУаї Аку біп мех Рго бі1у Гув сіу Пез біц Тур Меє б51у 180 185 190
Азп о Іїе Авр Рго Туг Тух сіу б1у ТБт Трг о Тук Авп оАкЯ Гуз Рпе Су 1985 200 205 сіу біп Уаї ТіПг І1е Зег дїа Авр Був бех І1е бек Тлк Аза Туг Тей 210 215 22 біп Ткгр Бег Бек Пе Тув Аїа Бех Авр Тпг Азїа Мек Тук Тук Сув Аза 225 230 235 240
Аг бек Уа1ї біу Рго Меє Авр Тук Ттр бі1у Ахд біу Тік Гей Маї Тіг 2415 250 255
Ууаії Бех Бех Авр біп біз Рхго ПувБ бек Бек Авр цЦув Тапх Нів Ту бег 2560 -55 270
Рго Рто Субз Рко А1іа Рхо сій Гей Гемч с1у біу Рго Бек Уа1і Ре Гей 275 280 285
Рпе Рко Рго Був Рго Пув Авор Тпг оПеи Меб І12е бек Аго ТІ Рго 51 290 - 235 БІС) - -
Уаї Тк о Суз уаї Уаї Уаї Авр Уа1ї бег Нів бід АБр Рго біш Уаї Був 305 310 315 320
Рпе Авп оТгр о Тук Уа1 Аєр б1у Уа1 біо Уаї Нів Авп АтТа Був Тк оПув 325 азо аза
Рхто Ак бій бій біп Тук Авп беїг ТПг Тук Акуд Маї а.ї бБетг Маї Тецй 345 350
Тпк оУаї рез Нів б1іп Азр Тер Гес Ап обіу Бу бій Тук Пув Сув Гув 355 360 365 маї Бех Авп Пув А1їа Пед Рхо А1їа Ріо І1е Сід Пуз ТпПк ЇІ1е бехг Був зло 315 380
Аїв Гуз біу біп Рго Атуд бій Рко біп Уаії Тук Так Те Рго Рхго бЗег заз 390 395 400
Ак Азр о сій Гей Тк Був Ази о біп Уг1і бек пемп Тіг о Суз Бецп Уаї Гу 405 410 415 б1іу Рпе Туг Рго Зег Авр І1е Аіїа Уаї б15 Тгр бій бет Авп сіу біп 420 425 430
Рхо бій АвпоАбп Тух Тув Тийг ТВт Рго Рго Уаї Геч Азр Бек Авр б1у 435 440 445
Зех РВе Рпе Гей Туг Бех Пуз Те ТПх Уаї Азр Туз бет Ага Ттр б1п 450 455 460 біп с1у двп Узі Ре бек Сув Бек Уа1ї Ме Нів 515 А1а Печ Нів Азп 465 470 475 480
Нів Тук Трг біп Пубв Бек Ге бек це бег Рго б51у Гув 185 490 «210» 11 «211» 1482 к212з ДНК «213» Штучна послідовність «220» «923» Гуманізований твОро16 «400» 11 акєдодаадсссо садстсадссо ЕсесЕбсскс сідссасссї додсссссада сассассдда 60 чааассодсас Єдасасадсс сссадссасе сідЕсескої сессаддседа ааогдссасо 120 що сЕсСтсстусс Заасааціса азасчсссас зоссасісад сссддсасса асадавассїх 1850 сдссадасес стадастсст саєстаєссє дсазваадассї гддсадавад аассссадсс 240 адчЕєсадео осачіодаєс судуасачас Єссассссса ссассадсад сссададсос 300 чаачаєсіту садсссасба сеЕдссаасає сасеіссуаса аєссатддас асссодссаа 360 додассвада судудзааєсаа адасоадсдаї досссадсася дЕсоєЯдаєс єодаадааЧчайє 420 чоачассядід адодсасасся чобосадссс ддадсададя Єдазаавцсєс соадададесе 480 сеЕдаздаєкс сстдбаадд асссодівїас їсаєксассо дсівсааєаяЕ дзвасеудсва 540 сдссадаєсодс ссудудавзаду ссісдадеєоу аєдддсааса ссдаєссіса ссассуєоаді бо астасстаса ассоадазуєс сазаддуссад десассаєсє ссассдасав сессзгсавоас 660 ассусстасс бдсаасоддад садсссдаад дссісддаса ссодссаєдса ссассоасуса 720 саядсісачесЯя сссстраебода стастодадс сосддсассс гддссастЯє стссссєдає 780 сазудадссса аасстсссда саааасссас асарсєссас субдессаудс асссдаастс 840 стдадсадас собсачісье ссбсгсбсссо ссаазассса аудасассостї саєчатстсс 00 сдоасессід адотсасато сосуатодбса дасоїдадсс асдаадассо бдаддєсазд 960
Сбсаасідує асуєадасодд сдсоддадуєо сасаасдсса адасааадсс дсоадазоадад 1020 саціасааса дсасдсассуд діоді садс дссстсассу состдсасса досастдаегад 1080 ааєодосааоду адсасаазуєч саадуєсксс аасааадсссо Есссадссосс сассдздааа 1140 ассаєсісса аадссааасд дсадссссда даассасаду сстасасссї дсссосаєсс 1200 сзачаєдчачс сдассаадаа ссасодїсадс ссдассідссос сддаїсаавод сесстсаєбоса 1260 здсдасаєсу ссдбоуадід дудададсаає сдосадссуд адаасаасьа саадассасу 1320 ссесссатос годдастіссуа садстсстсс Сессссвбаса здсаачсьсас садсоудчасаад 1380 адсаддЕдадс аздсачадудаа соссвЕЕсСЕса Єдссссуєда сдсаєдадудс єссдсасаасєс 1440 сасіасасдс адаададсстї стсссідЕсе ссадодавааає да 1482 «210» 12 «211» 493 «2122 РТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований творо16 «4005 12
Меє бід А1їа Рко А1їа Сіп без Пец Рце Пей Геч Пемш Ппей Ткр беш Рго 1 2 19 15
Авр Таг от обіу сід І1е Уаї реп ТБ сіп бег Рго А1а Тіг їви бех 29 25 зо
Ге бек Рго біу біз Агд А1а ТПпгоТецй бег Суз Агу Тпг обек Сіп Авп
Уаі1 Тук Бек Тук Пец Аїа Тер Тухг біп сіп Пуз Рго біу С1іп Аіа Рго за 55 во
Акгу цей Теп І1е Тук Ре А1а Пув ТБг о Тео А1іа сі С1іу І1е Рго А1а 65 70 75 80
АхЯ Рпе Бех біу бек біу Бек біу Тік Авр Рбе тТПх Печ тру Т1е 5ег 85 90 95
Бех Ппеч бі Рго бій Авр Рпе АзЗа Уаї Туг Туг Суз біп Нів Ніз бег 100 105 110
Авр Авп оРго Тер Трх РБе б1у біп біу ТБг Гуз Маї сій ч11е ув с1у 115 120 125 сіу біу б1у Бех Сі1у біу Сіу б1іу бег Ссіу Сіу біу б1іу Трг сіу б1и 130 135 140
Уаї біп Пец Уа1ї Сіп Бек біу Азїа б1й Уаї Пуз Пуз Рго б1іу бій бек 145 150 155 160
Тївеи цув І1е Бег Сув Пув С1у бек біу Тух бек Рне Трк біу Тук Авп 165 170 175
Меє Азп Тур Уа)! Аку біп Меє Рго С1у Гу Сіу Ппеш СІ Ткр Меє біу 180 185 190
Депо І1в Азр Рко Тут Туг б1у с1у Тпк ТбПгоТуг Авп о Агуд Був Ре був 195 200 205 біу біп Уаї Тих І1е Зег А1їа Авр Пув бех І1е бЗег ТЬх А1а Туг Іей 210 215 220 сіп Тер бек Бех Пеп Пув Аїа Бек Авр ТВк Аїа Меї Тут Туг Сув Аїа 225 230 235 240
Вт бБег Уаї 51у Ркго Меє Авзр Туг Тгр Сі1у Аку Сіу ТЬх Пец Уа1 Так 245 250 255 аї 5Зех бек Авр о біп бій Рхко Гуз Бек Бек Авр Пуб ТПх Нів Трк бек 260 255 270
Рко Рко Сув Рко Ліа Рко 5314 Ге реп біу С1і1у Рго бБег Уа1 РрБе Гез 275 280 285
Рпе Рго Рго Пуз Рко Пуз Авр Так Ге Меє І1е Бек Ага ТНкг Рго бій 290 295 300
Уаї Тнг Сув Маї Ууаї УМаї Азр Уаї бек Ніз бі Авр Рго Сіц МУаї Був 395 316 315 320
Рпе Азп Тгр Туг Уаї Авр біу Маї біц Маї Нів Авп Аїа Пув ТНг Тув 325 330 335
Рго Аг4 біц біш біп Туг Авп бак тах Туг Агу Чаї Хаї бек Уві їєц 340 345 350 тТвЕ уУаї Тез Нів біп Авзр Тер Печ Авп о біу Буз с1і4 Тух був Сув Буз з5ь 36 365
Маї Зех Азп цув Аза Гей Рго Аза Рто Іі бій Пуз ТП І1їе Бек Був 370 375 380
Аза був б1у біп Рго Агу біб Рго біп Уаї Тух ТНК оГез Рго Рго бек 385 390 395 460
Ата Ар о51ій Гей трх Пуз Азп о біп Уаії бек пе) Тпк Суз Теп Ма1ї Ббуз 05 410 415 с1у Рпе Тух Рго Бек Авзр І1е А1а Уаї бій Тур Сі бех Авп біу сіп 420 425 430
Рго бів А5зп Ап оТух Був Тпт ТОК о Рго Рко Уа! Тез Авр бег Азр с1у 435 440 145
Бек Риіе Ре Печ Тут Бех Був Гео Тйг Уаї АБр руз Бех Ага Тгр біп 450 355 460 бсіп біу АвпоМаіїі Рпре Зег Сук бет Маї Мес Нів бі Аїа цей Ні Авп 465 470 475 480
Нів Тух ТНх біп Ппув бет Тец бек Пей бег Рго біу Гуз 485 130 «210» 13 Й «221» 1482 «2и2» ДЕК -2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твОб16 «4005 13 авагодаацессс садстссадесс Есесссссєс седсЕасестї досссссада сассассодда заваєсдсдє сдасасадес сссвдссасс седссстесді ссссадасуа аададсесасс сесЕсссЯдсс даасааусда аздєдуїсас адстасотад сссудсасса асададаесся
Чуссадуєсс стадусессЕ саєстасьсї дсазавзвассі Садсадазду вассссадсс 210 аддсїседЧЕд здсадсдсаєс соддасадас сЕсасістса ссаєсадсад сссададссе 300 чдзаачаєсссЯ садсостасса ссдєсаавасає саєєссдата аєссубоддас асесадесва 360
Чучсассавад тддаваєсяаа ачасодсуду сасєсоддасо аечдсадаєс сададчачас 420 чосассоддеЧ аддіасачссї ддЕдсадіст сдадсададоа Сдааааацсс сдддадауєсс 480 сеісаадаєсЕ сседеЕзадчод вгсссуєтас єсасесасьо дссасаакає даассто9аєу 340 сассачаєдс ссоддосааачу ссеЕсозоаєод асдазсааєа єЕдаєссята Єсасоучт дує бо астассіаса ассудозаацчЕьє савааядуссад десасктаєстї ссодссдасаа дсссахсадс обо ассудсстасс сусаасузад садсссдаву дсоссодаса ссдссабсута сСтассдсоса 720 садсісадсся дссстабдда стасеуддоддс сасудсасес тадЕсассдЕ ссоссеістдаає 780 саддадссса аайсткссда саазасссас асабссссас собудсссадо асссдгаастс 840 сгдсасддас сдєсасьсьє ссбссесоссо ссаазассса ададасассстї сасцдаєстсс з00 саоуассссса адудссасасоа сзсдзсауід Засосовусо асдаацдасссо сдадодєсаад збо стЕсаастодЕ асчєдсоасоу сугоддадаєд сатавсдсса адасааадчсс дсдодасазва 1020 садсасазса дсасутассоу сабодесаддсо дссстсассо Есстдсасса одассодссод 1080 засдадсаадд адсасаадеєу сааддустсс аасааадссс Ссссадсссо саєсдадаза 1140 ассаєстсса аадссаавуу удсадесссза даавссасабо хкудсасасссї дессссатесо 1200 сдуддасчадс Едассегадаа ссаудісадс седассєдос гудассааачу сесстаєсса 1250 адсуасаєсу ссубодадео ддададсвзає уддсадссод адаасааста сазачассаєч 1320 ссЕСсССсСЯсЯс бодассссда сдастісстьєс ссссістаса дсаадсьсас сусддасаад 1380 азчсадуєддс адсадчодудуаа сусстсссса кодсоссосда годсасдадос сссдсасаас 13130 састасасудс адаацадесся сіссстдссеі ссудддтааає да 1482 к210» 14 «211» 493 «2122 РЕТ х213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твО016 «800» 14 І
Меє сій Ата Рко А1їа сС1іп Без Гео Ре Пец Тей рез Ге Тгр Бей Рго 1 2 й 10 й 15 й ше й
Азр Тк Тих біу бі ї1е Уа1ї цей ТБ біп бек Рко А!їа Трг Гей бег
Тей Бек Рко біу бі Ахад Аіїа ТЬБІ Те бег Суз Ак Тайт бек бій Зег
Уаї Тут бек Тук Пец Аіїа Тур Тук б)п 5'7п Був Рхо біу біп Аїа Рхто 60
АгЯд Пе еп І1їе Тук Рпе Аїа Пуз Тк їеч Аїа біз 51у І1е Рко А1а 65 7о 15 во
Агу Ре Зеїх сіу бек Сіу Бек с1іу ТБг АвБр Ре Тбт Гей Тпк І1е Бех 85 80 35
Зег їв біц Рго біз Авр Рпе Аїа Уа1і Туг Тур Сув біп Ніз Нів бег 100 105 110
Авр Азп о Рго Тер Тс Рпе біу сбіп б1у Тег Був Уві бі Т1е Буз С1у 115 120 125 сіу біу б1у бек б1у б1у б1іу сіу бек сіу б1у б1у біу тб с1у с1цй 130 135 140
Ууаі1 біп Пе Уаї біп бек біу Аїа сій Уа) Туб5 Ппу5 Ркго біу бій бБег 145 150 155 160
Тїеч Пуз І1е бек Сув Пув б1у бек б01у Тух бек Ріе ТПг біу Тук Авп 165 170 175
Мес Азп Тгр Уаї Ак біп Меє Рко б1іу буз бБіу цес сі Тер Меїє біу 180 185 190
Аєп І1е Авр о Рко Тук Тух бСіу б1у Тіг ТнІ Тук Авп Ахд Був Рпе Гуз 1955 200 205 сіу б1іп Ма! Трг о І1е бек Аза Дзр Був бег І16є бег Тіг А)ча Туг Іец 210 215 220 сіп Тер бБеїг Бек Гей Був А1Та Бест Авр Тут Аїа Меє Тук Туг Суб Аіа 225 230 235 240
Ага Бех Уаї біу Рго Меє Авр Туг Ткр біу Акуд 5іу тТБкКк Геї Уаї Тапг 245 250 255
Чаї бек Бек Авр біп біз Рго був бек бег Авр Буз Тпк Нівз Тік Бех 260 255 270
Рго Рхго Суб Рго Ала Рго біц ре реп біу біу Рго бег Уаї Ре Пец 275 289 285
Ре Ркго Рго Був Рко Пуз Авр Тік о Пе Меє І1е Бех Ако Тпх Рго 51 259 295 00
Уа1ї Тих Сув Уаї Уа! Уаї Азр Уаї бБет Ніз біп Азр Рхо бі Уаї Був 395 310 315 320
Рпе Авзп Ткгр Тут Уа1і Авр с1у Уаї бій Уа1ї Ніз Азп Азїа Буз Тк обув 325 ззо 335
Рхто Акгд бій біз біп о Туг АБпоЗег ТБт Тух Агуд уаї Уаї 5ек Уаї Івц за 345 350
ТЕГ оМаі! бе Нів біп Авр о Тгср без Авп о біу Був біз Тук Мув Сув Гуз 355 360 3655 чаї Бек Авп Буз Аіїа Пеш Рко Аза Рхо І1е сіц Гув ТІ Т1е Бех Буз 370 375 380
Аіа пуз біу біп Рго Акад бій Рто біп Ма1ї Тухк ТВг о Ббецд Рго Рго 5ег 385 390 395 400
Аку Авр біз ГПез Так о Буз Авп о біп Маї бек Пєю Тпкг о Сув Гей Уа1ї! Був 405 110 515 біу РБе Тук Рко Бек Авр І1е А1їа Уаї бі Тгр бі бБет Авп обіу біп 420 425 430
Рго біз Авп оАвгпоТук Пув Тйх Тк о Рго Рго Уаії Гей Авр о бЗеї Авр б1у 435 440 445 бек Рпе Рре Гей Тут бек Пуз Пей ТВ Уаі Авр Гуз бег Агд Тгр Сс1іп 450 455 460 біл б1у Азоп Уаі Ріе бек Суз бЗех Ма1ї Меб Нівз б1и Аїа Гец Нів Авп 165 470 475 4180
Ні Тук ТПх 510 Губ5 бег Те Бег Гей Бек Рго 51у Гуз 485 190 «21025 15 «211» 1482 «212» ДНК «2135 Щртучна послідовність «2205 І 7 «223» Гуманізований тВО016 «4005 15 асодаадссс садсеєсаусь СсесЕбсостс стостасесе сдсссссача бассассуда І здаааєєсдсуї Едасасадес сссадссасс ссЯдассЕЕбасЄ сетссадосуда аададссасс 120 сЕстсссудсс дадсвзадіда ааабудсєссас адссасєсау ссіуутасса асадааассь 180 суссадодсес ссадудссось сасссаврссо дсааааассо сСассадаауд аассссвоасс 250 ачаєїсадсд дсадіддаєс соддоасадас Сссасеісеса ссаєсводсад сстададссе Зоо
Чгачассссд сачіссаста сеуссаасає сасєссуаста аїссувоздас асссоадссаа 360 з9дассаадо бодаавєсаа адчссосядь досссзоася зс99саЗасс ходаоаачає 420 чоадассуудсд ададбоасаусі одгідсадіст здадсададу гдазазадсесс содасадчест «80 сЕдаадессс сстдтіазооду аєссдаєтаєс ссаєєссастд дссасаасає озастоадуєа 540 сдссадаєдс ссоддавааду сстісодадедс асуодсаата їсоавсстта ссвессасоде 600 астасстаса ассодаауь: сзададдссад здісасстассї ссудссцдасаа дсссаєссадс 66о ассусстасс сдсаасддач саассодаас дссосодаса ссодссаєзба ссасстусуса 720 сасссадісу дссстабода ссастздудс садсадсассс бууєсасест сссосєсвдає 780 саддадссса ваєстЕстда саааасєсас асасстсосас сугрдссессадоо асстдаасес 840 сеЕсодЧдЕддас соєсадссте ссестєЄсссс ссаавассса адуасассстї саєдаєсьсс збо соддасссосід аддєсасася сддсодсадсо сасосоадсс асузачассос сдадуєсзад зво сссаассддЕ асадєддасся сасоддачасу сабазсдсса адасааадсс дсодуадоад 1020 садсасааса дсасубассу -дсоддссадс деЕосссассу Есссдсасса дсасссастд 1980 ааєчдсвзадцу адсасеація саадуссссс аасааадссс сссосадсссс сассдчадава 1140 ассаєсссса ааудссазадчоа ссвзуссссда даассасауу сдбасасостї доссссаїсс 1200 счдздаєдадс гдассгадаа ссаддссадс ссдасссусс гудудссааадд сттстассса 1260 адсдасаєся ссасодадсд ддададсзає доддсадссод здаасаасся саздассасу 1320 сессссугус содастосда содсссссесс Єсссессаса дсааустсас сасодасгад 1380 ачсаддсадс адсадоддаа сусстєссса гсасессдєда сдсаєдачас Естосасвас 1440 састасасус адаададсся стсостдсся ссодаатазає да 1482 к«210» 16 «211» 493 «2122 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тТвО016 «а0о» 16
Мес бі А1а Ркто Аза біп Меч Ппеп Рпре Беп ІТей Тезш теп Тр зец Ртго 1 5 10 15
Авр оТвкЕ тВг обіу бій І1е Уаїії Гей Тих біп бег Рко А1а Тлк Теч бег
Твз Бек Рго біу 510 Агд А1а ТБх БГец бек Сув Акд Віа Бех б1цп Авп 15
Уаї Тук Бек Тук еп Аза Тур Тухк біп біп Пуз Рко біу б1п Віа Рко бо
АкЯ цеп Іец І1е Тук Ріе Аїа Пу5з Тс Гей А1їа б10 б1іу І1е Рго Аза 65 т7о 75 80
Аг Ре бек біу Бек б1у бах біу Тпж Ар Рре ТіК Печ ТіК о Т1е бег 85 90 35 бер Пец бій Рхто Січ Авр Рпе Аїа Уаї Туг Тут Сув біп Ніб5 Ні бек 100 105 110
АБвр АБп о Рго ТгроТпк Ре біу бів б1у Тр о Ббуз Уа! бій І1е Пуз б1Уу 115 120 125 біу сіу біу бек б1у біу б1у біУу бек б1іу СсС1і1у біу б1у ТБк с1іу бій 130 135 140
Уаї сіп рац Уа1ї сіп бек 51у АхТа сі Уа! Був їув Ркго біу сій бек 145 150 155 169
Тез Пцуз 11е Бегт Сув Гув біу Бек с1у Тут бек Рре Тпг біу Тух Авп 165 170 175
Меє Авп Ткр УМаі Аку біп Мес Рко біу Був б1іу Пей бі) Ткр Меє 01у 180 185 130
Азп І12е АБр Рго Тух Туг біу біу Так Тк о Туг Авп Агуд Пуз Рбе Пув 195 200 205 б1у біп Маї! Тс І1е бег Аїа Авр Буз бБег Іїеє ВЗетх ТЬБх Аїа Тук Гво 210 215 220 біп Тгр Зех Бех Тер Був А3За бек Азр Твх Аза Мес Тухк Тух Сув Аа 225 230 235 240
Ахка Бех Маї біу Ркго Мес Азр Туг Тгр біу Аку б1у Тк Ппей Уаї Тих - - 245 Й 259 255
Уаї бек бБег Авр біп бій Ргро Пув бек Бес Азр Був Таг Нів ТБг бег 260 2655 270
Рго Рго Сув Рго АЗїа Рго бій Пец мен біу біу Рго бек Уа1ї Рпе Іги 275 280 285
Рпе Рго Рго пуб Ркго ПуБ Авр ТіК Пец Меб І1в бек Акуд ТПкг Рко бій 239 295 00 уаї Тих Суз Уаї Уаї Уа1ї Азр Уа! Бек Ні бли АБр Рко бій Уа1! ув 305 310 315 320
Рпе АвпоТгроТуг Уаї Азр біу Ма1ї бів Уаї Ніз Азп А1їа Пуз ТВг Іув 325 330 335
Рго Аку бл біо біп Тухг Або Зех Тіт Туг Агу Ма1і Уаї бек Уа1ї Гей 340 345 350
Тс о Уаї Пе» Ніз біп Авр Тгр Гез Авп о б5іу Туз 613 Тух Пуз Сув ГЦув 355 зе 365
Уа1 Бек Авп Гуз Аіїа Те Рго Аїа Рго ІчІ1е біш Пувз ТПг о Іїе Бек Був 370 375 380
А1а Пцув б1у сіб Ргро Ах бі Рко біп Уа1і Тук ТВх Пе Рго Рго бБег 385 390 395 400
Ах Авроб)а Гей Тпг о Ббуз Азп біл оМаї бек Геї Тпї Сув Гео Уві пуб 405 410 415 біу Рпе Тух Рко бек Авзр І1е Аза Уа1 Сіп Тгтр бі бек АбБп сіу Ссіп 420 425 430
Рто бі Авп о Авп о Тут Був ТВкг о ТБ о Рго Рго Уаії Те Азр бет Азр с1у 435 440 445 бек Ре Ріпе Пеп Тук бек Пуз реп Тйк Уа1ї Авр Був Бех Агд Ттр СІп 450 1455 450 біп б1у Авп Уаії РрБе бег Суз Бек Маї Ме Ніз біз А1їа Пемз Віз Азп 465 470 475 480
Ніз Тут тійг біп Пуз Бек Пе бек Меп бет Ркго б1у Був 485 490 «2105 17 «2115 14793 «212» ДНК «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований творо16 згадааосас садсдсадсьї ЕсЕсСЕссстс стостасься удсесссада бассассодє бо часаєссацча хуасссадес їссадсссос ссабсєдсає сбдсдодача дассдссасс 120 ассасатуїс даасаачіда аааєсуєссас адссасєсду сЕбоадсаєса ссадааасад 180
Ччдааааєстс сісадчстсст сдесЕсесьс одсазавассї тадсадаацу Єдсассаєса 240 адасесадсЯ усачеддаєсс аддсасасад ЕСЕссеєстда адаєссадсад сссдсадесе зсо даачаєтссд увадесаєсюь ссдебсаасає сассссяаса асссдадєддає ЧчЕссоддвуча 360 дасассдаас сададаєсаа адоссосозас даасссодадся чЕЧасодасс оаласоавсоас 120 чаадсіздсу аддєдсадсо досдсадісї доадсададу туааваааусес содачасься 189 стдадчаєсс ссодсааада асссудссас Есаєєсасьд дссасаасає даассоччсд 540 соссадесас ссддчсаааду сседсачьод абодосааса їсСдаєссьта ЄвагсдовоадЧе 600 ассасстаса ассодаацсс саадучссад деЕсассаєсії ссдссдасаа дессаєсадс 6во ассадссбасс гдсаасоддад садсстдаау досесудаса ссдосаєдста Есассдедса 720 сусесадісу дессстаєдда ссассдодвас сосодсассс садссассдї сіссеєсчадс 780 чзачсссаааї стсссасав дасссасаса Сссссассує дсосадсасо Єдгасссостд 840 чабоадассдї садеЕссЕсстї сессосссса ааасссгадд асасссєсахє даєсссосоуд 300 ассосєдада Есасаєосає чддсадсддас дідадссасд аадасссіда сухсаваєте з60 азссдосасч гадасадсує удадчєсзсає аасдосаада сааадссусо сдаддадсад 1020 тасаасадса субасеоіоу одссадсуєс сісассуєсс єдсассадда сбдастдаає 1080 часаадчдаде асаадідсаа чдубсЕссаас ааадсссісс садсосссає суаЧаазассо 1140 ахсіссааач ссаазоддса досссдадаа ссасаоддсдс асассстдсс сосассссяЯд 1200 часозадсіда ссаачаасса удссадосьуд асседсссод гсазаддсьї ссаєссазас 1260 дасаєсуядссу содсауслода задсааєууу садссуудада асаассасаа дассасоассї 1320 сссабсдсскод асеЕссцдасод сессЕвсьЕсС сесбасадса адсісассоує одасаададсе 1380 зазасддсацо адчадаасує сстсьсаєдс Ессадабдасас аєсадосЕсюе ссасаассасєс 1440 тасасусада ададсстсьс ссеЕцеЕссссо здсазаєса 1479 «2105» 18 «211» 492 «212» РВТ -2135 Штучна послідовність «2207 «223» Гуманізований тТви016 «4005 19
Меб Сіц А1а Рхо Аза біп тей Без Рпе Бей Івм Пер Пе Тгр Гей Рго 1 5 10 15
Авр Тпс о Тако сіу Авр Т1е сСіп Меб Тк біо бек о Рго Аа Бех Тем бек зо
А1їа Бех Уаї б1у 010 Тк УМаї Тік Т1е Ттпт Суб Агу Тс бек 01 Авп чуа1ї1 Ту бек Тут лей Аза Тгр Тук бій б1п Був б1і0 сіу Буз Бек Ртго 5 бо бсіп Без) Пец Уаї бек Рле Аїа Гуз Твг Пе Аза біц сіу Уа1і Рго бек 65 70 75 во
Аку Ре бек біу Бек Ссіу Бех б1іу Тпг 51п Рпе бег реч Гув І1е бег 85 50 35 бек Преп сія Рхто біц Азр бек біу бек Тук рРре Сув Сіп Нів Ніз Бех 100 105 110
Азр АвпоРго Ттр Тіт Рре біу сіу біу Тпк біц Те бі Т1е Гуз б1у 115 120 125 біу сіу біу Бек біу біу біу біу Бек С1іу біу біу б1у Аха Бек бій 130 135 140
Уаі біп Пес Уаї Сіп бек біу Аїа 015 Уа1і Гув Був Рго біу біз бек 145 150 155 160
Бїец Агу т11е Бех Сув Пув б1іу Бег б1у Тух бек Рпе ТПк біу Тух Азп 165 170 175
Мес Азп Тгр о Уаї Акд біп Ме Рго с1у Бубв біу Геч Сів Тер Меє б1уУ 180 185 190
Авпої1є Авр о Рго Тух Тук біу біу ТПг ТВтІ Тух Авп Агу Буз Рре Гуз 195 200 205 б1іу біп Уаї Тлг Іїе бек Аза Авр Пцуз бек т11е Бех ТВк А1їа Тух Гей 2710 215 220 б1іп Тгр бек Беїг Тец Гуз Аза бЗег Авр Тік Аіа Меї Тук Тук Сув Віа 225 230 235 240
Ах бек Уа1і С1іу Бкго Мес Авр Тук Тгр Сіу Ахд б1іу ТБг Пец Уаї Тк 245 250 255
Уа1ії бехг бех бек бій Рко Гув бек бег Вер Був Тк Ні Тниг Бег Рго 250 265 270
Рго Суз Рго Аіїа Рко сій Пе Тецп б1іу б1іу Рко бех УМаї Рре Гей Ріе 275 280 285
Рго Рко Був Рго Був АБр Тіт Пе Мес І1е Бек Атд Тк Рко 51 Уаї 290 295 зро
ТвЕ Сув Уа1! Уаї Уаі Авр Ма! бЗех Нів 510 Азр Рго біз Угі Пуз РГБе зо5 310 315 320
Авзп о Тко Тук Ма1 Азр б1у Уаї бі Уаї Нів Азп Аза ПЦув Тр Був Рхо 325 330 335
Ага 513 610 біп Тух Авп Бех Тут Тух Агу Маї Уаї бехт Маї Пез ті 340 345 350 уаї гоп Ніз б1іп АвроТгроПпей Аєп о б3іу Гуз б1й Тук о рух Субв Пувз Маї 355 360 365
Бех Авп Пув Аза Пец Рго Аза Рго І1а бі) Був Трх ї1е Бех цу5 А1а 370 375 380
Був біу біп Рко Ага бі) Рго біп Уаї Туг Тбх Гео Рго Рго Бех АкгкдФ 385 390 395 100.
Азр о біц Гей ТБгоГБувз Авпобіп Уаї Бех Гей Тпх Сув Пеп Маї Ббуз сіу 405 410 415
Рпе Тук Рко бек Авр ч112е АТа Ууа1 бі) Тгр бід бек АБп біу біп Рхго 429 425 430 бій Азп Азп оТуг о Буя Тк Так Рго Рко Ма1ї цей Авр бек Азр с1іу бег 435 440 445
Ріе Рбе ем Туг бБет Буз Пе) Так Уаї Авр був бек Аху Тгр біп біп 459 455 460 біу Азп УМаї Рре бек Суз Бег Маї Меї Ніз бі Аза Тв Нів Авп оНів 165 470 а75 480
Тут Тк осіп Гуз бег Те бек Гец бек Рго 01у Гу5 - 485 180 «210» 19 «211» 1479 «2125 ДНК
- «213» Штучна послідовність «к«22й» «223» Гуманізований тВ0016 «00» 19 аєдчазосас садсдсадсв ЕсЕсессестс сьдстассст ддоєсссада бассассаді 60 дазаєЕдеоє сдасасадес єссадссасс ссдссескуєЄ ссссадудсда аададссасс 120 стсесстдсс даасаадеда азасуєєстас адссасісад сссддвасса асадааавссяї 180
Чассадудстс ссаудсссся саєстастс осагзазассї садсадзадуд аассссадсс 240 аддсЕсачся зсачсоддаєс сддуасадас сСЕсасесьса ссабсадсад сстададссс зора дЧаадаєєссо садіссаєса седссвасає сассссуаса аєссободдас астсодссаа збо оддассвзаачя суддаааєсаа аоусадсддас одсссоддоася зсадсуааєс бодадчоаваучє 424 дсеаостачсу содіссаусє дсадсачесс адзассьдачі судузааадес соадсасьєса 480
Ччедаадаєту сстусавудс БЕсбдуїсас єсаєссасіу устасаатає давстсадід 540 аадсадчааса абудазадад ссісдадеуу аєсодаааса Еєдаєссєта єсасодсоучє 600 асстасстаса ассодвадіс саачоусаау доссасасєсїіда ссдстачасаа абсссссадо 660 асгадсстаса Едсадсісаза чадіссдаса Єстдадуасі сстдсадеста стастоєсса 720 асатсддесо досстаєдса ссассоаудоаї саадчаассі саубсассЯє стссссзчаде 780
Чадсссавааає ссібссдасаа аасесасаса їссссассяЯяї дсосадсасс Єдаастсссд вао чоїддассдв садбсвгосо сгЕбссоссоса авасссааду асассстсає чаєсссссод Зоо ассссєсадо Єсасаєдсує соєдоасодас Чдедадссасу аадассссда доссаадеес зво аассддсасу Содасаосує одаздуєосає аасдссавса савздадссоясуу удаддадсад 1020 жасаасадса сосассоєус дассадсуєс стсассоєссо сосассадчда стсодсеідааії 1050 додсааддачі асаачіусаа додєсЕссаас давудссоєсс садсосссає сдадаааасс 1149 аєсєссааад ссааводуса дссссдадаа ссасадуєдє асасссєудсс сссаєсссод 1200 авідадсєда ссаадаасса дадссадсстд асссдсссду Есаазоадськ стаєссааваоаес 1260 дасаєсассд соддадсодоа дадсаасодду садссудада асагастасаа дассасоссо 1320 сессдсдссад асіссдасояд сеЕссежсссс состасадса адсссассує дсасаададс 13850 ачосаддсадс ададдаасує сстбсьсаєас сссоєдасос аєдаддсестї дсасавассас 1440 басасусада ададсстстс сесдсссосо дусазаєоа 1479 «210» 20 «211» 492 й ши й й «212» РАТ «213» Штучна послідовність
«223» Гуманізований тво016 «4005 20
Меє сій А1їа Рко А1їа Сіп Теп Геп рре Пей Беп Гео Ге Тгр тей Рго 1 5 10 15
Авр о ТВс Тахо біу 513 І1є Уаі цей тпх біп бек Рхо Аїа Тву Пеп бек зо
Тїеп о бег Рго біу Сі Агу Аза ТВг оТей бБег о Суз Аку Тпх бек бій Азо
Уаї Тух бек Тук їеви Аа Тгр Тух б1іп б1іп був Руго Ф1у Сіп Аза Ркго 5о 55 бо
Ага Пей пе) Ї1е Тут Рпе Аїа Пув Тк Пе Аза сі: біу Т1е Рго А1а 65 70 75 80
Ат Рпе бех біу бек біу бек б1у Трг Авр Рьє Тпг оГПей ТБт ї11е бек 85 20 95 бег цей біц Рко б13 Ар Ре Аїа Уа1ї Тук Тух Сбуз біп Ніз Нів 5бгї 100 105 110
АвроАво Рго Тгр о ТЬБг о РБе біу б1іп Сбіу Тпх Пуз Уаї 5138 ч116е уз б1у 115 120 125 сіу біу біу Бек біу сСіу бет Сіу Бек б1у біу Сіу с1у Ала Бек А1а 130 135 110
Ууаї сбіп Тип зіп біп Зеїх біу Ргто 514 Бек бід Пув Рхо б1іу Аза Зетг 195 150 155 160 уа1ї туз Т1є Бех Сує Гув Аза бег б1у Туг бек Рпе Тік б1іу Тукг Авп 165 170 175
Меє АвпоТкр о уаї ГПув сСіп АвпоАвп с1у Був бек ви бій Тер І1е б1у 180 185 130
Азп І1е Авр Рго Тут Тук сіу сіу ТБІг Таг оТуг Авп о Агу Ппуз Рпе Гуз 135 200 205 біу Був Віа Так Темп ТБгоУа1ї Ар Був бек бек Зег Тік Аїа Тугє Меє 210 215 220 Й біп плей Гуз бек Гей ТАгобег Сів Азр о беє Аїа Уаї Тук Туг Суз Аїа 225 230 235 240
Аг бек мМаї сСіу Рко Мес Авзр Тухк Тер біу біп б1у Тпг Бек Уві Тбг 245 250 255
Уаї бБет Зег бет бій Рко Був Бек Бек Авр Туз Тпг Нів Тих Бетг Рго 260 2655 270
Рго Сув Рхто А1їа Рго бій дей Бей с1іу сіу Рго бек Уа1ї Рпе Тец Рре 275 280 285
Рто Рко Пув Рхо Туз Авр Тпх Без Меї І1їе Бех Агд Тк Ркго бій Уаї 230 235 300
Твпг Сув УМа1ї Уаї Уаї Авр Ма) Бег Нів бій Азр Рго бі Уві бує РНе 305 310 315 320
АвпоТегр Тут Уа! Авр сіу Уаї біц Уаї Нів Азп А1ї1а Був ТПг Гуз Рго 325 330 335
Вк біо біз бів Тук Авп Бех Тпк о Тух Аху Уві Уаі! бех Уаї Че) ТЬг 340 385 350
Уаї цей Ніз біп Азр Ткройец Авп с1у Був 01 Тук Був Суз Буз Уа1! 355 зво 365
Бег Ап о ГБуз Аза Теп Рко Ала Рго І1е с)п Д,ув Тйх Т1е бек Пуз А1а 376 375 зво
Був б1у бій Рко Акуд бі) Рго біп Уа! Тут Так Бей Рко Ркго Бег Ага 385 30 395 400
Авр біч Ге ТвВг Туз АБп обіп УМаії Бек Теп ТБг о Сув цей Уа1ї муз Б1У 405 410 415
Впе Тут Ркго бек Азр І1ее Аіїа Уаї б10 Тгр б14 бек Авп б1іу Сіп Рго 420 425 430 біц Азп АвпоТук Був ТБх ТпгоБго Рко Маі цей Авр Бех Азр б1у 5ег 435 440 445
Рпе Рпе тез Туг бег Гуз Іем Тлг Уаі Авр Бу5 беї Агу ТІр сб1п біп 450 «55 460 бі1у Ап Уаії Рпе бех Суб бБег Уа) Меж Нівз Сію Аїа Ге Нів Азп Ні 465 470 475 480
Тук Тік сіп пуб бЗег Гей Зек Мей бех Рго б1у ПУБ 485 490
«2102 21 «2112 1479 «212» ДНК 52137 Штучна послідовність «2207 кг23» Гуманізований тТВ0016 «4902 21 аєддаадсас сачсусадсь Сбесствсоєс сбдстассст досЕсссада Сассассацсе бо давааєтстас сдасасадіс ссадссасс ссдєстсос сєссадосда аададссасс 120 сесеЕсстдсс даасзадіча аааєсдЕєсас адстастісад сстоддкасса асадавассї 180 ддссаддссс ссрадусьсстї саєстаєссї дсазазассі гадсадаадуд ааєсссадсс 240 аддсссадкд ссадссдаєс судддасадас сосассстса ссаєбсадсад сссададесо 300 чЧчазчзастєсу садестасста ссдссвзасає сассссоаса абссободас асссодссаа 360
Зд9чассаада сдаааассаа заддсадсЯаді достсоддооса чдсдаєдаасс сададдачає 420 чзчадстадсс адатодсадеЕ датосауесо ссбодачасо садесссадсс сдададоєсс 480 стдачастсс ссідкосадс сестддаєсс асстксадсд дстасаастах даассдачдес 540 садссазаєос ссадоддазачя ссгтдсачсод аєдоддсааєа сдаєсстта стасадьдчут бо астасссваса ассодавоаєс саадодосво дссастаєсь ссодссдасаа діссазссаде 660 ассасстасс гбосазсддадч саассвовад дсстісодуаса сссоссаєста Єбастдідса 72а - сасЕсадесу дссстаєзда ссассооуудс сдсудсассс сдоссастЯдє соссгсдадо 780 задсссаааї сЕссвдасаа аастсасаса Єстссассує дссосадсасс Єдаасесстд 840
Ччассдассує сасссссссо сесссссосса ааасссвзасу асассстсат дассососоу зо асссстдада Есасаєссує часоадеодас дедадссасоа аачасссєда адссвадьсс 60 гассудсасд гадасодосЯсє сдаддєусає аагдссаада сазачссосЯя довададздсад 1020 жасаасадса сдсбассоубдс доассадсдїс сссассоєсс єдсассадаа сЕЧчастдузає 1080 часаадуачі асаассіусаа Ззуїссіссаас ааадссстісс садсссссаї сдадаагзасс 1140 асссссааад ссавадодса дссосдадаа ссасаддіудї асасссбдсс ссосассссдуд 1200 чаєзадссда ссазддаасса додаєсадсоссту асстдсстод Есазадасьє севЕссзадс 1260 часаєссудуссЯ сздачеддда дЧассазсдод садссодада асаастасаа дассасоассі 1320 сссдбодссдд астссдасод сессеєсесс состасадса адсісассояє суасаададс 1380 ачсхсддсадс аддодаассої ссссісабудс сссдгдаєус асдаддсссї дсасаассас 1440
Сасасдсача ададссеЕссс ссессогсіссу ддбазаєоа 1479 «2105 С22 «211» 432 «212» РЕТ
-- «213» Штучна послідовність «223» Гуманізований тво016 «4005 Щ 22
Меє бі Аза Рго АзЗа біп Бей Ге Ре Пеп Тем Цей Гей Тхр ІТви Рго 1 5 10 15
Авр о Тах Тахо б1іу бі Іїе УМаї їец ТІ біп бег Рго Аза Трх Тео 8ех 29 25 зо
Тем бехт Рко с1у біз Агд Аза Тпг Пец бег Сув Вху Тбгобек біз АБИ
Уаії Тух Бех Тух паз Аза Тур Туг біп біп Пув Рхо б1іу біп Аза Ро 60
АхЯя Пе бе) І1е Тук Рпе Аза Гуз Тк оГеп Аза біц Сіу І131е Ркго ДІа 65 70 75 80
Агу Рпе бек біу Бех Сі1у Зех 51у Тр бер Рпе Таг Тей Трх І12е бек 85 зо 95
Бех Без бі Рко бі А5р Ра А1а Уаї Тук Туг Су Сіп Вів Біб5 бек 100 105 110
Авродзп о Рго Тгр Тих Рпе біу біп б1у Трг Гуз Уа! Сі Ізїе Був б1у 115 120 125 сіу с1у біу Бек Сіу біу біу біу бек біу с1у С1у б1у А1їа бек Сіп 130 135 140
Уа1і біп Пес Уаї Сі) бек біу б1у б1у Уаі Уа1 б15 Рго біу Агд бег 145 150 155 160 їец Аку Гез бек Суз А1а Аза бет б1у Рбе Тк Рпе бег біу Туг Авп 165 176 175
Меб Аза Тур уаі Ак о біп Мес Рго с1у Пув біу Тєш бі Тгр Меє сСіу 180 185 180
Авт от11іе Ар Рхо Тук Тук біу Сіу ТЬх ТБтї Тук Азп АхЯ Пуз Рре Гуз 195 200 205 біу біп Мазі ТНк Ії бек Аїа Авр Пув Бет І1є бег ТПг А1їа Туг тей 210 215 220
-т біг Тер бек Бек Бей Пуб Діа Бех Авр ТІ Аїа Меї Туї Тук Сув АІа 225 230 235 240
Ак Бех Уа1 Сбіу Рко Меє Авзр Тут Ттр біу Агуд б1у Тік Тез уві ТЬг 245 250 255
Уаї Бек Бек Бек біц Рго Гув бек Бек Двр уз Тіг Зі5 ТВк бек Рго 260 255 210
Рко Сув Рго Аїа Рхо 012 Тец Пец Сіу б1іу Рко Бех Угі Рпе Гей Ре 275 280 285
Рго Рго Пуз Рго Був Авр Так Гей Мес І1е Бех Ату Трт Рго сіз Уаї 290 295 Зоо
Тих Суз Уаі1! Маії Уаї Азр Уаї Бек Нів б1іч Азр Рхо біц Уаї Гуз рРре 305 310 315 320
Авп о ТгроТуг Ма) Авр о біу Ма! бі Ма) Нів Азп Аїа Гуз ТпЕк о Був Рхо 325 330 335
Ах біз біз біп Тук Ап бек Тпх Тухк Ак Маї Уаві беї Ма1ї їез ТЬх 340 345 350
Маї пен Нів Сіп Авр о Тгр їешп Азп б1у Гуз бій Тук Був Сув Пув Уаї 255 360 365 бек Абп о Пувз Ала Гей Рто Аза Рто І11е біш Був Трбг оІ1е 5ек Був А1а 370 375 ЗВО цуз біу біп Рго Ак бій Рхо б1іп Маї Тук ТЕБг Гей Рхо Рко бег Аг4д 385 390 395 100
Авр бій Пец ТБгоТув Абзпобіп Уаї бек Меп Ту Сув Пе Уаї Гув Ф01у 405 410 415
Рпе Туг Рко Бех Азр І12 Аїа Чаї бій Тер бій бек Аєп біу б1п го 420 425 430 бій АвгоАвп оТуг Гуз Тако Те о Рго Рго Уа! Гей Авор обег Ар о біу бег 435 440 445
Рпе Рпе Геш Туг бек Пув Ген ТпгоУаї АБр Гув бБеїг Аго ТтІр біп біб 450 455 460 бі1у Авп Уаї Ре бех Суз бех Уаї Меє Ні біц Аза Гей Ніз Азп Нів 465 470 475 480
Тут Тлх біп Був Бех ГПей Бех Пеб бех Рко біу Буз 485 490 «210» 23 «2115 1503 «212» ДНК х2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тко0016 «4005 23 ахддааосас садсодсадчес Сстсстсссс стостасосї ддсісссада сассассоді 60 чсддіссадо Сссадсадес Содасссосау Ссоадаааадс ссоддсасієс адсуаачаєсї 120
Есссдсаадая СЕєсСтууста сесаєтссасі оудстасааса сзаастдудді даадсацчаат 189 аахсодагада сссссдачео даєсудааає ассдаєсссяє асбаєсосоу састасотас 240 аассддааці ссаасодсаа сдссасаєтіуд асеЕдтадаса аабсссссад сасадсстас 300 асдсадссса адазуєссзас асссдачаас ссідсадссї ассассабас аадаєссдіс 36 чдссстакду ассасьсуду Єсааддаасс ссадесассу ссістєсвадя єдасадеоас 420 сСсдадсоздс9 дссодесосд сдосоусуда ссаодаддад дсоздадоядс садсдаваатї 480
Ччеоссдасас адоссссадс сассстд:ст Ед Есіссад дсдавададс сасссісьсс 5 госсудавасаа дісаазаєді сСсасадссас Егтадсссудді ассаасадаа асстдуссед 590 дессосадає соесесасєста ссссосаава асссосассва ааддааєссо адссадуттс 660 адсадсачід даєссодудас адасьссаст сісассаєса дсазасстзда асссуаачає 720 кссдсадсск ассассуєса асабсаєтсс датаасссуї ддасасєсоу ссаадддасєс 780 азддіадава Ссаааддссс даусдадоссо зваассксссд асаадастса сасаєсьсса 840 ссдбдсссад сасссдаасе сссдадсдда ссотсадссє бесссбсссс сссаавассс зса ааддасассс ссаєдаєстс ссоддасссстї даддісасаї адсосадсзЯє дзасооєдаде 360 сасдаадасс ссуачаєсаа Ззсссаассдд сасоїсоддасо дсосддадує ссагазесдсс 1020 аадасааадс сасододадда дсадктасаас адсасубасс дЕдсдуєсау сабсссосасо 1050 дссссосасс зддастдуосс дааєдосаау дадстасаадї одсаздудссес саасавадес 1140 сеЕсссадссс ссассдауаа аассаєстсс ааадссаагу ддсадссссу адаассасаєд 1200
ЧчЕдвасассос гадсоссссаєс ссудуддаєдад сідассаада ассаддєсад сседасст дес 1260 стіуддЕсааая осттстаєсс агдсдасаєс сссусуддачі доддадчадсаа гсдасадсеса 1320 дадаасаасі асаадассас дссєсссуєд ссадассосу асудсссссє сесссестас 1380 адсвадсуса ссссудоасаа осаадсадууєоо садсадоудаав асассєєсьс аїдсессоєд 1440 аєссаєдача сістдсасаг ссасіасасд садаададсс ссЕсСсесоєс Єссудуєааа 1500 да «21025. 24 «211» 500 «2122 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «2235 Гуманізований твО016 «40025 24
Мес бій Авіа Рко АтТа Сіл Тей Пес Ре Геш Тем еп Ге Тгр ей Рхо 1 5 19 15
Авр ТрПг ТВг о біу Атїа Уа! біп це біс б1іп бек Сб1у Ргто Сіц бек Сс1іц зо
Був Рко сСіу А1аз бек Уа! Пув І1е Бег Суб5 Гуз Азїа бетх біу Тухк Сех
Рпе Тих Сіу Тук Авп о Мес Авп о Ткр оМаї Ббуз біп Ап Азап с1у Пув бег бо їеш біч Ттр Т1е Ссіу Авп о Т1іе Авр Рхо Тук Тук біу біу ТБк Тк Туг 65 7о 75 80
Азп Ахад цу Рае був бу Був А1а ТБгоГеч Того УМаї Авр оПпув бег бек 85 90 95 бег тТрг Аїа Тухт Меб біп рей Гуз бет Гєю ТІ Зек бім Авр бег Аза 100 105 110 уаї Тух Тук Суз Аїа Аг Зег Уві біу Рко Меє Авр Туг Ттр біу сіп 115 120 125 сіу ТВг бек Уа1! Тит Уаї бек бек біу біу біу б1у бег біу слу С1у 130 135 140 біу Зехт біу бБіу біу біу Зег б1у Сіу 01у 01у бек Аза Бек б31и 112 115 150 155 160 уаї еп Таг біп бег Рго Аїа Тпк Ге бег Бей бек Рко б1іу 610 Аг 165 170 175
А1а Твг опе) бет Суз Аго ТБг о Зег біо АБо о Маї Туг бег Тут Тева Віа 180 185 190
Тгр Тук Сіп біп о Буз Рко бсіу Сіп Віа Рго Агд Пе теп Т1є Туг Рре 195 200 205
А1а Бу5 ТВг о Гео Аза бій біу І1е Рко А1а Ахд Рпе бек біу Бег п1у 210 215 220
Бех біу ТпПг Азр Ре Тпх Тецп Тах І1їе Зек Бек Те бій Ркго бій Ар 225 230 235 240
Рре А1Т1а уаії Тут Туг Сувз біп Нів Нів Бег Авр Авп Рго Тго Так Ре 245 250 255 біу біп біу Тйх Ббуз Ма1ї сій Ії Пу5 біу бех Зек 615 Рго Був бЗеї 260 265 270 дек Авр Гу Трт Нів ТБт о бех Рко Рго Сув Рко Аїа Ргто біц Гей Тем 2715 280 285 б1у 51у Рго бек Ма! РБе Пей РірБе Ртго Рго Гув Рго Гуз Авр Тіг Те 290 295 300
Мек І12е Зек Аку Тпг Рго бі Уаї Тпг Сув Хаї Уаї Уа1ї Авр уаї Ббег 305 310 315 320
Ніз 012 Авр Рго бі Маії Пув Рре Ап Тгр Тух Ма1 Азр сіу Уаї сій 325 330 335
Уа) Нів Авп Ата був Так о пув Рко Аху бів біб біп Туг Авпобех ТВг 340 345 350
Ту Агд Уаї Ма1ї бек Уа1ї Бей ТпЕх Уа! Пец Ніз С1іп Азр Тгр Гей Ап 355 360 365 біу Був бій Тук Пув Сув Пув Уаі беїт Авп ув Аіа Пеп Рко А1а Рго 370 375 зво
І1е бій Був Тпк Іле бег Гуз Аза Був біу бій Рго Агу бід Рео б1п 385 390 395 400 чаї Тут ТИЖ Пец Рго Рго Заг Аго Авробіш Гей ТВго Був АвпоСіп Уаї 405 410 415 бех Тем ТБх Сузв Пед Маї був б01у Рре Ту Рго бек Агвр І1е Ала чаї 420 425 430
Сі Тгр бій Бех Авп обіу біп Рко бій Авп Абп Тут був Тр ТК о рРго 435 440 445
Рго Ма1і Гец Азр бек Азр біу Бех Рре Рпе Тец Туг Зег лув їеч ТЕГ 450 455 460
Ууа1ї Авр Пув бег Ага Тгр біп біл 51у Або Узі РБе бек Суз бЗекг Уаї 465 470 415 480
Меє Ні сій А1їа Пе Нів Авп Нів Туг Трг Сіп лу Бет Пец бех їй 485 490 495
Беї Рхо біу Був 500 «2105 25 «7211» 1488 и «2125 ДНК -2у35 Штучна послідовність «2205 «223» Гуманізований тАпО16 «400» 25 аєсадаєЕсЕс аадсдсачає Єсссаодссєс сідссааєса дсдсексаде саєааєсасс во здаазачесо азаєсудсасї дасасадьст ссадссасос каст суєс босадосуаа 129 ададссассс їсессеідссЯя аасааусдаа ааєдоєтаса дстасічадс стдодсассаа 180 сачааассєу дссаддсеьсе бадустсстс аєстаєстгсуд сааааасссє адсасдавода 240 аєстссадсса дуЕєсассоуу садеддаєсс дадасадасі Єсасесссас саєсадсадс 500 стадацсста авуаєсстос авзасттаєсас суссаасатс векссдакаа хссубудаса 360
Ессодссаад ддассагоує дудаваєсааа оосодсоабсЯ ЯдсеЕсяддасдд садсадаєся 220 чсасдасуєуд чадсєассус Ядуєссауссуд садсацістя дассєдадсс додаааадсст 480
Часудсьїсад сдаадассяс седсвачдсь Естодотаст саїссассод ссасзаєаєу 540 авссдддсда адсадавсаа сддааздадс сстсадтуда содааатає сласссткає 600
Еасддєсодта стасстасаа ссдддаауєєс ааддодсааоу ссасаєїдчас сосадасава бо
Ессессадса садсстасає дсадсісаад адістдасає седадчассс содсадесстає 720
Каскстодсаа зассоддссЯад ссстаєддас гастсодЧіс заддаассяс адебсовссобс 7зо хссесуадсо адсссаваєс ссссдасава асссасасає сіссассобу сосвусассє 840 чаасссстуу окддассуєс адсстєссіс сКссссссза аасссазуодда сассстсасуд зо0о акстсссуда сссстуадеає сасасосова здсодсоадассо сдадссасча зазосссдад 960 дссаацісса асбдосасої ддасодсоєо дадосусата асоссаадас ааадссосод 1020 чадзадсаду асавасаддсас стассябдасу десадсоаїтсс Есассдвссо дсассаосас 1080 хдассдсааку дсаадсаука саадедсаза дісьссааса аадсостбсосс адсссссаєс 1120 дадааазсса Ессссааадс сазацудсад ссссдздаас сасаддедта сассссдесс 1200 гсаєсссодд асаасстдас саздаассад дісадссіса ссбдсстдає сагадддссіс 1260 їтасссазадсу асаєсадссуї сдассодсад адсазтідодде адссудздаа саастесаає ассасзсстс ссзсустода соссдасадс босбессвсо Естасадсаа дсесассоєд засазовадса д9дсдусасса доддавсодєс єЕсссаєосі ссяасуаєдса сдаддсссьд сасаваассасе асасосадаа дадссєстсс сеідссеіссад отаааєда «2105 96 «2112» 495 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» Гумавізований т80016 «4005 26
Меї Авзр Ре біп Уаії 01п І11е Рре Бех Рпе Те Ген Ізїе бег Аза бег 1 З 10 15
Уаї т11е Ії Аза Акуд біу уаї б) ї1е Ма) Тео Тпгоб1іп о бег Рго Аза
Зо
ТіК Пец бек Пец Бех Рго біу 510 Аку Аїа ТргоПбеш бек Суз Агд Тнг бек бій Ази Уаї Тук Зек Тук Без Аїа Ткр Тук біг біп Тцув Рго біу 60 біп Азїа Рго Ак4 Ппейп Пец ї11а Тугт Рпе Ала Гу Тих Тез Аза бій б1у 65 70 75 80
Т1іе Рго Аза Агд Рпе Бек біу бег Сіу Бех Сіу ТЬк Авр Ррбе ТіК Пец 85 зо 35
Тк І1Т1е Бек бег Ге бій Рго Сі Авзр Рпе А1а Уа1ї тук Тук Сув Сбіп 190 105 110
Нів Нів Бек Авр Авп о Рхо Ткр ТртІ Рпе б1у біп б1у ТпКк Ппуз Уаї біз 115 120 125
І1е Буз Сіу біу біу біу бек біу сіу б1іу біу бег Ссіу с31у біу б1іу 130 135 140 віа бет Аїа Уаі! біп Пей Сіп біп бек біу Рхо бій Бек б1іи руз Ркго 145 150 155 160 біу Аїа бек Уа! цув Ііе бБег Сув ув АТа бек с1у Тук бек Рре ТЕ 165 170 175
С1у Туг Азп Меє Ап Тер Уа! Гуз Сіп Авзп Ап біу Пуз Зехг Тец б1п 180 185 190
Ткр І1е 51у Авп І1е АвБр Рхо Туг Тут біу б1у ТБк ТБх Тухг Авп Ахд 195 27500 205
Туз Рпе Пув біу Ппув А1а Тіг Гей Трт Уаї Ар Пув Бех бех бек ТЕГ 215 215 220
Віа Тук Мес біп Пец був бек Пемз Тпх бех 515 Авр бек Віа Уві Тух 225 230 . 235 240
Туг Сув А1а Агу Бек Маї біу Рго Меє Авр Тух Ткгр біу Сіп СсС1у Тнг 245 250 255
Бех Ма! Тих Уаї бек Бек бек бі Рго Пуз бек бег Авр Був Тркг рів 260 265 270
ТигоЗег Рго Рко Суб Рго Аза Ркго бій Гей теп біу б1іу Ркго Зет Уві 215 280 285
Ейе їй Рпе Рго Рго МуБ Рго Гуз АБр о ТпПг Гео Ме 116 бег Агуд Тпх 296 295 300
Рхто бій Уа1 ТБг Сух Уаї Уаї Уа1 Авр Маї Бек Нів сі АДвр Рго бій 305 310 315 320
Уаі1! був Ре Аєп Ттр Тук Маї Авр біу Уаї біо Уаї Ніє Авп А1їа Тув 325 33 335
ТЕт Був Рко Аг б1з бій б2п Тур Авп о бех Твг о Тук Аку Уаї Уа1ї Зехг 340 345 350 чаї рем Тйх Уаї без Ні б1п Авр Тгр Тен АБп о б1у Пуз біс Тук Гув 355 360 365
Суз Пув УМаі бБет Авп Пуз Аїа Ге) Рго Аза Рго Іїе бій Пуз Торг Іїе 310 375 380
Зех Пух Ата пу Сіу біп Рго Акуд сі Рко бій Уаї Тух ТБг цей Рхо 385 390 395 400
Рго бек Агд Авр 51 Гей Тік Пув АБообіп Уаї бек Кеш Тк Сук Гей 405 410 115
Уаї був біу Рре Туг Рго Бек Авр ч112е Аї1а Уа1! бій Тгр біз бек Авп 420 425 430 біу бій Рго б) Авп АвпоТух Буз Тк о ТБЕ Рго Рго Маії Пец Авор бек 435 440 445
Азр біу бек Рре РБе Пец Туг Бек Гув Гей Тпг Уа! Авр Буз бек Ага 450 455 460
Тер Сбіп б1іп б1іу Авп о Маіїі Реве Бек Суз 5Зек Уаї Ме Нів бі) А1а їги 465 470 475 480
Ніз Азп Нів Тухк ТБгобіп ув бек Те бек Гец Векг Рко біу Гуз 485 4190 495 «2105 27 «211» 1503 «212» ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Гуманізований тТВибО16 «400» 27 аєддаадсас садсусадстї Єстссесстс сеЕдстастсє додстоссада тассассое 60 чсадіссадс сдсадсадес сочассвдад Ссадазаадс ссаддсоасіїс адечавдаєх 120 сстдсаацдя сЕєссдуєта сісаєссаст доссасаєта єдаасьдоаує счазасвдавс 180 аасудазада асесссдасео застдодазвахє астдаєсссє аєсасузсду састасстас 240 аассддавоє ссаадуссаа дудссасаєсуд асідстадаса авсссіссад сасадсстас 300 асасацстса адаусссдас ассідаддас сседсаваєсе астассєдєус аасаєсддеос 360 дассстасдя астастоодуд єсааддаасс Есадссассу ссбссссгуд єЕдасаді дос 420
ЕсадссоЧчеЯЧ дідо соЗ9 Єдасуусода Єсаодвадад дсаададсяс Свдсоагатс 489 дбасудасас адістссвдс сассстассі ссдссєссад асудааададс сасссесьсс 540
Гассуаасва дсдааваєас Есасадстас ЕсадссЕддс ассаасадаа асстадссад бо дсссстадус кссссаєстса сСссгдсааза ассісадсад ааодааєссс адссавадде с бо ачгдачсадсд часссдудас азастссасї сосассабса дсадоставча доссдгеадає 720
Ессосадееє аєсасідтса асаєсаєтсос дабааєссдї ддасасісдд ссаадодасс 780 ааччідддаза ссазаддсес дадсодадссс аааєсесста асавааастіса сасаєсссса ве сесуєбдсссад сасстдаавсе сстододадїЯдда ссобсадесе сосєстєсос сссаааассс 980 заддасассо Єсаєдаєстіс ссддассссті здасоєсасає дсобаЯдаєоЧЕ дчасоєдадс з60 сасдаачасс ссдадаєсаа зд єсаастод басоєддасу дсасодадчоає дсаєваєоасс 1020 заадасавадс сосдоддадца дсадеасаас аусасутасс деосадовсау сутсстсасс 1080 дсссідсасс аддассоддсе зааєодсвас дадсасааує дсгадуєссс саасааазесс 1140 сесссадссс ссассдадаз аассаєсссос авадссааауч дасадссссд адаассасад 1200
ЧЕдЕасассс судсссссаєс ссдодаєдац седассадда ассвддісад сседассвдс 1260 ссадссааад дсскстассо авдсдасаєс дссоїодаче зозададсва сдодсадссу 1320 дадаасаасЕ асаауассас дсстсссдуд седдасьссоу асоддсьсств сеЕбссьстас 1380 адсаадссса ссдсдоасаа дассадусєод садсаддоча асуєсьтсьс аєдсіссдуєа 1440 асадсасдаду ссстдсасва ссастасасо садаададсс ссссоссбдус сссдоддбсава 1500 сда 1563 «210» 28 «211» 500 «2122 РЕТ «2135 Штучна послідовність «р20» «223» Гуманізований твОп016 «а» 28
Ме бій Аїа Рко А1їа біп Пец Пец Рпе Пец Гей Геп тва Тгр Тез Рго 1 З 10 15
Авзр Тс Тлпх біу Аїа Маї бів Пе біп біп Бек б5іу Рхо бі Бех 01ц 270 25 30
Вуз Рко біу А1а бег Уаії Пув І1е бег Сув Гуз А1а бег біу Туг бег
Рпе Ту с1і1у Тук Авп Месє Азп Тер Уаї Був біо Аза Агп о біу Гу бекг з5 бо
Без Сі Тур ї1е біу Авзоп І1е АБр Рго Туг Тук сіу б1у ТБх ТВпг о тТуг 65 70 75 80
Азп Ага Гуз Рпе Буз Сіу Гуз АЗ1а Тбг Пе Тік Уа! Азр губ бехг бБег 85 зо 95 бЗеї Тлх Аїа Тук Мес с1п без Пуб5 бБес Пец ТВг бек біз АвБо Бех А1а 100 105 110
Уа1ї Тух Тук Суз Азїа Агу бек Уа! б1іу Рко Мебє Азр Тук Тур сСіу біп 115 120 125 біу Тпг бек Ууаї ТпПк Уаї бех Звук біу б1іу сіу біу бек бі1у біу 01у 130 135 140 с1у бек біу сіу біу біу бек Сіу сіу б1іу біу бек А1їа Бек січ І1е 145 150 155 160
Ууаї пей ТЬх біп Бех Рко А1їа ТБк Гей бег Ге бех Рго Су бі Ахд 165 170 175
А1а ТЬг Ге бБег о Суз Ага ТБробег Сіц Азп Уа! Тук бег Тує Ббеч Аза 180 185 190
Тгр Тук біп біп ув Рко б1іу біп А1іа Рто Агд Тей цем Ті1е Туг Ре 195 200 225
А1а ру ТВг оре Аза Сі с1іу І1е Рго А1іа Аку РБе бех біу бек біу 210 215 Й 220 бек біу Тр Авр Ріпе ТргоТец ТК Ті бег Зех Ппейп бі Рго біц двр 225 230 235 240
Рре вів Маії Тух Тук Сув бі Нів Нів бех Авр Вп Рхо Тур Ту Ре 245 250 255 5іу біг сіу Тнх Буз Уаї біп ї1е Пуз Сіу бек бек бі) Рко пуб бег 260 265 270 бек Авр пу Тпх Нів ТІ Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рко б1іп Пец їеч 275 280 285 біу біу Рго бек Уа! Рбе Пеип Рпе Рхто Рго Муз Рго Був Азр Тік Гец 2930 295 Зоо
Меє Ііе Бек Акуд ТПг Рго бій Уаї Тпк Сук Уаї Маї Уаї Авр Уа1ї 5ег 305 310 315 320
Нів б1ц Авр Рго біз чаї Пузв Рбе Авп о Тср Тут Уаї Авр С1у Чаї сіц 325 330 335 уаї Нів Авп Аза ГЦув ТіБг о Пув Рко Акад бі бій біп Тух Авп о бЗег ТЕГ 340 345 350
Ту Дкд маї Маї Зехк УМаї тен Тіт Уаі Пец Ніз біп Авр Тгр Гей Ап 355 збо 365 с1у Буз бій Тук Пув Сув Пув Ма1ї Бех АзпоГув Аза Пеш Рго А1а Рго 370 375 380
І11е 615 Був ТпІ Т1їе Бек ПцЦуз А1їа Суз біу біп Рго Акгу б)4 Рсо б1п 385 390 395 400 уа1ї Тук Тпг Пец Рго Рго бБег Ат Авр Сіц Те Тпг Гуз Авпобіп Уа1ї 1405 410 415
Бек Пес ТЬкЕ Сув цеп Уаї Був б1у Рпе Тук Рго бек Акр І1е АТа Уаї 420 425 430 бій Тер бій бек Авп о біу С1іп Ркго біп Або Авп о Тук о Був ТВх о тТНг Рго 435 440 445
Рко Ма! цей Ар Бег Авзр С1іу Бек Рре РБе Тец Туг бек Гуз Гей Тнх 450 455 460
Уаеї Авр Тув Зег Ак Тгр біп біп біу Азп Уаї Ре бег Сув Бек Уві) 465 473 475 480
Ме Нів біо А1їа Пес нів Авп Нів Тук ТЬг о Сіп пуз бех пец 8ехг Ів 485 450 495
Бек Рго біу Гуз 500 «2102 29 «211» 1479 «2122 ДНК -213» Штучна послідовність «270» «223» Гуманізований ТвПО16 - «4005 29 асддаадсас садсадсадстї бсестсссвс сбдсвасесї дустісссада гассассочЧчЕ 60 дазаскдіаї сдасасаціс пссадосасс седтстестуї соссвгодсуа зададссасе 120 сесЕсссдсс даасаадчсда азасдієсас адсіасієсау ссєдусасса асадааассс 180 дассачассс сбададсвбсос сацесастсо дсазааассо сзусадзаауд ааєбссадесс 240 ачасссачьу дсачідчдасс соддасацчас бЕсассссса ссаїсадсад сссадачесЕ 300 чаадаєссту саусусасса сідссаасає сассссудаса асссугудас асессууссаа 3З6о аддассааду судазаєсва адосоудсодає судсссодасо зсоддсосаєс содадчадоє 420 зддасстачсу содіссацсе осадсауєсс дуассідаЧчеі содаазачсс бдасост са 480 чсуавдаєсї сстдсзаддс сссстадстас ссастсассо адстасаватає даасьсодеу 540 зассадчааса асоддааачач ссессаутад асбсодааакта едаєсська стаєодддєоує 600 асеасстаса ассддаачієЄ сзадодсаау дссасаєсда ссдтадасва ахєссессавзде єбо асадсстаса сдсачсісав дадсстдаса ссссвзадасі ссддсачіста Есассдбсоса та ачаєсядісд дссстаєудда ссассдуд3аудс сааодаасся садссассує сессеЕсдадео 780 чадсссаааєї стсссдасаа аасссасаса Есессассус дсссадсасс годаасьсста 840 ачасддассду садьстсссь сесосососа азасссаадуд асасссісає дассєсссад 990
-- асссседада ссасасусої датозсодас ссдадссвсу заадассссда доссавзачесс 960 аасссдтасу садасадсує дададоєдсає забоссагда сваадссосяа сддадудзасад 1020
Сасаасадса сдтассдсЯдєЄ даєсадсдєс сеісассдксес бдсассаода ссддссоває 1080 дусааддазї асаадсдсава одохссссаас авадсесьсс садсссссає суадазаасс 1140 ассіссавац ссааадудудса дссссуадза ссасадоаєдє: асассстідсс сссовессссад 1200 дчассадсєса ссаадаасса сдісадсескд асссдсстдд ссаазддсст стаєссаадо 1260 дЧасаєссодссу сддаздсоддда дадсазаєдод садссоддада асаастасаа дассасасст 1320 сссдсосвсд ассосдасуд сбссєєсссо сестасадса адсєсассує доасаададс 1380 аддсодсадс адодоодзасає сессосасдс єссуєуаєдс асзаддссосє дсасаассає 1440
Басасусада зададссьссс сстдусіссу дубазасода 1479 «2105 30 «211» 4972 «2122 РАТ «213» Штучна послідовність «220» «223 Гуманізований твпб16 «4005 30
Мет сій Аза Рго Аїа біп Беп Гей Рпе Гео рез Зеч Тео Тгр Гей ко 1 5 10 15
Ар ТБгоТЬх о бзіу бі т11е Уаї Тец ТІ біп бет Рто Віа ТБйх Ппеп бег 33
Те бек Рго Зз1іу Сі Ага Аіа Тбт Гей Бех Сув Ага ТпгоБек сіб Азп
Чаї Тук Зег Тук Пе Атїа Ткр туг біп біп Був Рго б1у біп Аїа рРхо 60
Ак Пец пец ї11е Туг РбБе Аза цуз Тах Тею Аза біш біу І1е Рто Аа е5 10 75 80
Ак оре бек біу бег біу бек біу Тих Акр Рпе Тит Тєп ТПг І1е Бег 85 зо з5
Бег Пей біц Рго б1з Авр Ре Ала Уа1ї Туг Тух Суз 5іп Ніз Нів бег 109 105 110
Авр Азп о Рго Тгр Тах Ре сіу Сіп біу Таг Буз Уаї бІім І1е Пуз 51у 115 120 125
Сб1у б1у б1іу Бех біу б1у С1у б1іу Бег Сіу Сіу сС1іу біу діа бек А1а 130 135 140 уаї віп цей біп біп Зег біу Рхо сій бек б1й Пуз Рго біу А1а бек 145 150 155 160 чуаї Пцуз І1е Зек Сув Пув А1їа бек б1іу Туг Бег Не Тіг б1іу Тук Авп 165 170 175
Мек АвпоТкр о Уаії Був біп АБп Аза б1у Був бек Тео бій Тер І1е С1у 189 185 180
Авп о І1е Авр Рго Тук Тук біу біу ТВг Тис Туг Авп о Акд Бу Рпе Був 135 200 205
Сіу буз Аїа Тпх Без ТпПЕ Уві Аво Був Зек Зет Зеїх Тпх Аїа Тук Мех 210 215 220 біп рей Був бек Пец Так бек бі Азр бех А1а Уа! Туг Туг Сув А1а 225 230 235 240
Агу бет Уаії біу Рко Мебс Авр Туг Тер біу біп 51у ТБЕ Бекг Уаї Трх 245 250 255
Уаї бек бЗех бек Сі Рго Пув Бек Бех Авзр Туз ТрІ Нів ТіК бек Рго 260 265 210
Рго Сув Рго Аіїа Рко сій Тер Тез» біу б1у Рхо Бех Уаі Рпе Тез Ре 275 280 285
Рко Рго ув Рго Гуз Авр Тіх Геп Ме І1їе бЗет Аку Тіг Рго біц Уаї 230 2955 зо
Трг оСув Уаї уаї УМаї Авр Уаї бек Нів бі Авр Рго б10 Уаї Пув Ре 305 310 315 320
Азп Тер о Тук Уа1ї1 Авр обіу Маї 5зіц Маї Нів Авп Аза Був ТЕБг о Пуз ро 325 3зо 335
Вгу бі біс біп Тур Азп обех Тпг о Тук АгЯ Уа1ї Хаії бек Ма1ї Тей ТиПг 340 345 350
Чаї без Нів біп Авр о Ткр о Гец Авлоб5іу Буз бі Туг був Сув цув Уаї 355 зе 365
Зег Авп Пув А1а Гей Рхто АТа Рго І1е Сб1ц Гуз Тпх І1еє бБег Гув А1та 370 375 зво
Був біу біп Рго Агу б51іц Рко біп Уаї Туг Тіх Гей Ркго Рго бех Агд 385 390 395 400
Азр бій Пцем ТВг оПув Ап о біп Уа1! бек Грей ТЬг Сув теп уаї Був сб1у 405 410 415
Рпе Туг Рко Бек Авр І1е Аза Уаї 514 Тгр бій бЗех АвБп біу біп Рто 420 425 430 б1ч Авп оАзп о Туг Був ТЬБт о ТБгоРкго Рго 7ба1ї ТІви дер бехт Авр сіу бЗег 435 440 445
Ре Рре Гей Тук Бех Був Пес Тіг Уа1і Авр Гуз бек Агу Тер біп біп 450 455 460 с1у Аєп Уаії Ре бес Суз бег Уаї Месє Ніз сій Аза цей Бів Авп Нів 465 470 475 480
Тук ТАх бій Пуз Зег Плед бек Тїєп бЗет Рго біу Був 185 450 «210» 31 «2115 1479 «212» ДНК «2135 Штучна послідовність «2202 «223» Гуманізований твО016 «414005 31 асддаадсас садсусадсб СсеЕСтЄсстс седссасЕстї доасеісссада бассассаче 60
Чаааєєоасує сдасасачсс уссадссасс стдЕсстЕсуї сіссаудсуа аададессасе 120 сесЕсссдсс даасаадіда заасдтстстас адсстасісад сссддсасса асадааасся 189 чассачоасЕсС стаддсьсстї сасотаєссс дсааааассяї садсадаазуд аабсссадесс 240 ачоїєсадуса осадбадаєс суадасадас сссасеєстса ссассадсау сстадуадеся 300 чаадаєссс сачдссвасса сіудссаасає саєсссуаїа агсссідодас атссоадссаа зво дадассавзуу Судааассаа адогодсоуї адсссудчодсо збєдасадаєс бозчадуачах 429 ачадстадчся соодсссадсї дсадсадісеє ддассєудадо содсазаадсс садсодсссса а80 асдазвчаєсо сстдсаачас жЕстодстсас бсастсастд дссасаатає саассодоЧчсу 540 аадсадааса асодаваадад ссесдачсду аєєсодааата ссоаєсстта ссаєдаєоЧе 600 асстасссаса ассудооаадЕс саачудсаау сссасастда ссодгіадасаа аєссессадс 660 асадсстаса сосадсссаа дазсстудаса сссудадчдась стосадеьста єтастоагдса 720 здассуддісЯ осссбасдда стасододдує сааусаассї садеЕсассЯяї сессесдадс 780 чадсссааає сієссдасаа аасссасаса гбудсссассЯяї дсссадсасс єдаасьсстд 840 часодассоє садесЕесссі ссбсссссса азасссааду асасссісає даєстоссад з00 асссстсаду ссасасдсуї чосддєодас ЧчЕдадссася аадасссьда дуєсааздесс 350 зассуосасу бддасоддсає одасоаєдсає аасудссаада сааадссоасоя ддадсадсад 1020 тасзасадса сусассусає удсєсздсусс сісассдісс сасассадда ссодстдгвах 1080 зчасааддазді асаадЕдсав здсіссссазс ааадсессісс садсссссає судадаваавсс 1140 аєссссаавоа ссазаадуддса дссссдадаа ссасадубає асасостдсс ссесаєсссоад 1200 часєдадссда ссаадаасса дуєсадссьс асссдссб9у Есавачоаєстє сгаєссаадс 1260
Часаєсдсеся содадіодда дадсзаєдду садссдоада асаастасаа дассасдссе 1320 сссабасрдЯ асессзасоуд сбссстстєс сесбасадса адсбсассуї дздасвададс 1380 аддсддсадс адчоддаасує ссссссасдс сссуєдаєсудє аєдаддсеся доасаассас 1440 жбасасдсада ададссєссс ссідЕссссу ддсазасда т479 «2105 32 «2112 492 «2125 РВТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твО016 й «00» 32
Ме Сі Аза Ргто Аїа біп Тем Гей Ре ГПей Гез Гея Тед Ттр о Ова Ркго 1 5 10 15
Авр Тіт Тахо со1у бій ї1е Уаї Пем Тпх біл бБег Рхо Аза Тпх Гей бех зо
Тей Зет Рго сіу Сі Акту Аза ТпПх о Бей бех Суз Ак Тпх бек бі Авп
Уаї Тук бек Туг Бей Аза Тер Тух біп біп Буз Рго біу біп Аїа Рко о зо во
Ак Тем тез т1і2е Тух Рре Аіїа Пуз ТптІ Теп А1іа біз біу 1186 Рго ліва 65 70 15 80
Агз Ре бек Сіу Бек Сіу бег біу Тпт Авр Ре ТПт Гей ТВт ІЗїе Бек 85 за 95 бек Пеп біп Рго Сі Авр Ре А1їа Уаї тус Тух Суз біп Ніз Нів бБег 100 105 110
Азвр Азп оРко Тгтр Так РБа бСіу біп біу Трг Буз Уа1ї бій І1е Був біу 115 120 125 б1іу сіу сіу Бек б1у біу біу біу бех біу біу бі1іу біу А1а Зех діа 130 135 140 чаї біп Пез біп б1п бЗетх бпіу Рго біз бек бій пуз Ркго б3у Аза бек 145 150 155 160
Уаі Пуз І11е бек Сув Був Аїа бегт біу Тук Бек Рпе ТЕ біу Тук Авп 165 170 175
Ме Ап о Тгр оУаїі Гув 51п АвпоАвзоп б1у Туз бек Пец бі Тер Ізе б1іу 180 185 1980
Авп о т11е Авр Рго Туг Туг біу б)іу ТБг Тік Туг Авп Агу Був Рре Був 195 200 205
Сіу Пуз Аза ТБПг опе ТБх Ма1 Азр бує бБет бет бек ТБх Ала Тух Меб 210 215 220 біп Гечп Був беї Пе Ту бек б1іц Азр бБегт Аїа Уаі Тук Тук Сувз діа 225 230 235 240
Акад бек Ма1ї б1у Рхко Меєсє Авр Тух Тетр б1у біп бі1у ТПг бБег Уаї Тік 245 250 255 уаї бек Бек бБег бій Рго Пуз бек Бек Авр Гув Тік Ніз ТПк Сув Рго 250 255 270
Рго Сув Рго Аїа Рко б3іц Тем цес біу біу Рхто Бек Уа) Рпе їец Ре 275 280 285
Рко Рко Був Рго Був Авр Тих Пе Меб І1е бег Ако Тбпх Рко біц Уаї 230 295 300
ТЕ Сув Маї Уа1ї Уаї Авр УМаї бет Ніз сіц Авр Рго сів Уаї Пуз Рре 05 310 315 320
Авп о Тгр Тук Уаі Авр біу Ма1ї біз Маі Нів Азп А1а Гу5 Тк оПувз Рго 325 330 335
Ага біо бі б51іп Ту Азпобег ТІ Туг Аку Уаї Уаї Бех Уаї Тед Трг 340 345 350
Ууаї Пе» Нів біп Авр Тгр ем Азпобіу Гув 010 Тух Був був Гуз Уаї 355 360 365
Бек Ап Буз А1а Пец Рго А1а Ргсо ї11е 510 Пуз Тс Ї1е бег пуб А1а 370 375 380
Тув біу біп Рхо Акуд Сій Рго біп Ма1ї Тук Так еп Рго Рго Зех АгдФ 385 390 335 400
Авр о біч це ТВі Гуз Азп біл уаї Бек еп Так оСуз цей Уаї уз б1у 405 410 415
Рпе Туг Ркго бек Азр І1є А1їа Уа! бі Тер Сі бек Авп о сіу Сіай Рко 420 425 430 бій Авп о Азп оТукоПув ТВг ТВ о Рго Ркго Уаії лей Азр бек Авр біу бек 435 440 445
Рре Рпе Пец Тукг Бех Пуз Тей ТВПг Уа! Азр обуз бек Акд Тгр Сіп Сіп 450 455 460 с1у А5п Уа1 ЕРре бек Сув Зех Уаї Мес лів біп Аіа Пец Ні Азп Ніз 465 479 875 480
Тух тах біп Пув Бег Геш бек Бец Бек Рго С1у Пув5 485 4950 «рі10» 33 «2115 1479 «212» ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 . «223» Гуманізований ТВО016 «400» 33 асддагосас садсдсадстї ссеЕсьЕссєс седстассосї ддсєЕсссада Сассассоді 60 даааєтсодсає сдасасадсс сосадссасс стдїссстох стосадосса аздадссассо 120 сеЕстсстдсс даасагоєЄда ааатдсЕсас адскасссад сседцсасса асадагасся 180 дудссадудскс ссаддссссє саєстаєесє дсааваассу сСадсадаздоа азбсссадсс 240 асадсссадсу осадіуддаєс содддасадас сссасЕссса ссабсадсад ссеасауссе 300 дааздаєсьсо садсссаєсса ссуєсєсаасав саєсссодвєа асссоєддас асссддсосаа 360 додассааод соддааассаа ачасодсоаді досєсоддася дсадсдааєс Еддадоааачає 420 ддасесадсс адсоєодсадсс сатодадестї дасодзадасо содессадсс содааазєсо 480 ссдадассось сскдсосадсе сесгодасес асстїсаутя дсгасвгатає даастодоїс 540 сассазазяс ссдуддавадод сссодадояо асооодсааса сСедаєсстта ссасоаасаЧче бо астасстаса ассудаадсс саводдесву аєссастаєсо ссудссдасаа дессаєсадас Бо ассасстасо єудсаасддадч садссьдаад досбсддаса ссдосаєдта бЄкассдтоса 720 састсадссд дссстаєуда свастддодс сусддсассс годісасьоє ссссоссдзас 780 чзадсосааає стїссбдасаа аасесасаса сСусссассоє дсссадсасс єдаасьссса 840 аугддассоє садсстбосЕ сЕЕсссосса ааасссазду асассстсає чавсьсссад з00 асссстдаду ссасатодсує дабодіЯадас дсдадссасу задасссіда даєсаачьсс 60 аасеодсасу соддасодсоїє одзадуєдсаї автоссвада сазадссаясЯ аачодадсад 1020 сасаасадса сзбассобоас Чдассадсуєс стсассуєсс сасассадда сбдостоває 1080 сдсааддаєі асазубусаа ддгссссавас азвадссстісс саусссосає счадаааасс 1140 ассіссгаад ссааазудуса усссодадаа ссасадасуєю асассстуос сссаєсссоо 1200 часдадссуда ссаадваасса уассадсстя асстдссідо Есааадоссї стасссавас 1260
Ччасаєсоссд содадсдоддда дадсааєдуд садссуддаса асаастасаа дассасассє 1320 сссдбдстдд асоссздасод сесстсстіїс сссстасадса адсісассдї ддасвадвос 1380 ачасуоасасс аддодаасуї стссісабас сссобдаєдс аєдаддсссії дсасавссас 1240 басасосада ададссестс сседЕстсссо зобаааєса 1479 «2105 34 «2115 592 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «320» «223» Гуманізований твО016 «100» 34
Ме: біш Аза Рго Віа біп Геш Гей пе Гей Тео є Тео ТтТгроТєо Рго 1 З 10 15
Авр Тік о Тпгобсіу бід т11е Маї Тео Ту біп бег Рко Азїа Тпг Бей беїг
БПейп бег Рко б1у сбіц Агу Аза Тк Тей Бек Сув Агу Тпсх бБег б1іч Ап
Уа1 Туг Бех Ттух Пец Аїа Тур Туг біп біп Гуз Рко сіу бІіп діа Рго во
Вгд Тез Тез І1е Тух Ре А1їа Бу ТВбт Тецп А1їа бій біу Ії11е Рхо Аза бо 19 15 во
Акад Рре Бег біу Бек Сіу бек сіу ТБг Авзр РбБе Тайг Пец Тс І12е бек 85 30 55 бек Пе бі Рго бій Авр Рре Аза Ма1 Тук Тук Сув сіп Нія Нів Бегї 100 105 110
Авр АзпоРко То ТВх Ре 51у сіп біу Тк Гуз Уа1і біо Іїе Гуз С1у 115 120 125 біу сіу біу Бех б1іу сС1у б1у б1у Зеїх біу сіу біу сіу А1з Бех С1п 130 135 140 уаї бій Пец Уаї бі ех б1у сіу б1у Уа1ї Уаї біп Рто 51у Ак Вег 145 150 155 160
Бецш Агу еп бек Сув Аїа Аза бек сіу Рбе Сбрк Рпе бек біу Туг Авп 165 170 115
Меє А5поТкр Уаї Агуд біп Ме Рго б1іу Гуз С1у Пеш біс Тгр Меї сі1у 180 185 130
Авп о І12а Авзр Рго Тук Тук сіу 51у Тк ТБх Тук Авзп Аку Був Рпе ПЦуз 195 200 205 біу біп Уаї Тиг Іїе Бек Ата Авзр Пув бБеї І12 бек тТаг Ала Тук Тей 210 215 229
Сіп Тер Бек бек Пейп Пув Аза Бек Авр Трг Аза Мес Туг Туг Сув А1а 225 230 235 240
Ат4 бБег Маї біу Рко Меб Авр Тут Ттр біу Ака 51у ТБк Пец Уа1ї Тк 245 250 255
Маі бек Бек Бек Сі Рго Пув бЗег бек Авр Гу ТБ Нів ТПг Сув Рго 250 265 270
Рхо Суз Рго А1а Рго біц Пес пес сС1іу б1у Рго Бек Уа) Рпе їез РБе 275 280 285
Рго Рго Був Рко Пув Вер Тит Ге Мебє І1е бек Аха4 Тпг Рго б1с; МУаї 290 295 зоо
ТВк Сув Уаї Ма1ї Уаі Авр Маї Бек Ніз Сі Авр Рго біш уаї Був Рре 305 310 315 320
АзпоТкроТуг Ма1 Азр біу Маії Сід Уаї Нів Азп Аза пуз ТпкоПує Рго 325 339 335
Агу біш біз Сіп Туг Азп бек Тік о Тук Аку Ма1 Уаї бек УМаї Бец Твх 340 345 350 аї реш Нів біп Авр Ткр Тез Азго біу уз бід Тух Був Суз Пув чаї 355 360 365 бек Авп Був А1а Пе Рго Аза Рго Т1е бій Гув ТБг о І1е Бег Був А1а 370 315 зво
ГПув біу біп Рко Акад Сід Рго б1іп Уа1ї Тух ТБйї Пец Рко Рго бек Ак4д 385 3930 395 400
Агро бі Грей ТВг о Пув Авп о біп о Уа1ї бек Пец Тпг о Сув Те Ма1і Був С1У 405 410 415
Рпе Тусх Рго Бег Ар І1е А1їа Ув1 514 Тер 510 бек Авп біу б1іп Рго 420 425 430 бів АвбоАзпоТут Буз ТВІ Тпх Рго Рго Уаі Пер Авр бех Авр б1у Бек 435 440 445
Рпе Рпе Гей Тут Бех Був Пец ТпПх Уаї Авр Пув Бек Агку Тгтр біп біп 450 455 460 біу вп Уа1 Ре бек Сув Бек Маії Меє Нів біз А1а Пецп Нів Ахп Ніз 465 470 415 АБО
Тут Твпх 51п Туз бБег Гец бег Пец бек Рго Сіу Тув 485 490 «210» 35 «211» 1479 «2122 ДНК «213» Штучна послідовність «2205 . «223» Гуманізований твоб16 «400» 35 асудаадсас садсусадсь сСсєссвсссс сбдстассосі дасссссада сассассаде 50 чагаєсядєур ссасасадес ссадссасс стдбссссог ссссаддсоа авдадссасс 120 сестсссдсс даасазуєда ааатаЯастсвас адстастсау сстдуврасса асадааасся 180 зоссачустс стаддсессе саєсктасьсс дсааааассї їтаусадаачо аабсссачес 240 ачаєссадсу дсадсодаєс сдоддасадас тїсасіссса ссассадсад сстадачосяе 00 чЧаасаєсїсо садсїсвсса седссаасаї сасессзата асссЯябоддас агссадссаав 360
Чоадассаауу суддавзвасоза адасадсаЧі часЕсЯдосу дсадеддасс гсаозадааєЧє 420 чЧаазадстадсс асосдсадес сабачачіст Ччусодадосу СдЧсссадсс содоадассс «480 стадачасссї сстдтадсадс ссстоддавєес ассессадтд дссасватає даасєдадєс 540 сдссачаєдс ссуддавача сстіодадсду аєдоддсааса Ссдчаєссьта свасоссадч 600 ассасссраса ассоасваціс сзадодссад стсастабс ссоссдасаа ссссаєсадсе 66о0 ассдсстасс сдсааєадад садссссаац оссссодаса ссдссаєдта сасьдедса 720 сасєЕсадеся дсссеабода сіассододдс соасадсассс єддссассоє сессесдаде 780 зчдадсссазаїє ссссгоасаа засссасвса сдсссассдє дсссадсасс бдавзстісстд 840 часадассує садеєсесесе сегсссссса агасссавоад асасссеЕсає дасстсссоу ІН) ассссєдадд Есасасасуї досадчеудас дедауссасу аадасссіса ддссаачєьєс 960 аасісдасбасч гддасдудсує дсаздурасає аагодссавда сааадссосЯя довададсга 1020
Гасаасадса сугассуєуї дуєсвасуєс сеЕсассуїсс сосассадда седсостдаає 1080 досаауддассь асаадсусаа ддіссосаас авадсссісс садсссссає суадаааасс 1140 ахєсессгаад ссавададса дссосдчадаа ссасадусЯї асасссєдсес сссайсссод 1200 чзаєдадсіда ссаадаасса даїсадсстд ассвоссраду Єсааауусьс стаєссзаче 1260 часасєсзсся соададсддда сзодсавааєсодо садссодада асаассасаа здассасдсся 1320 сссчсасбдЯа асессддасуд ссссьсстієсс сестасадсава адсссассоє ддасаададс 1380 ачасадсадс ададдаасдЕ ссксссасодс їссдєдасдс аєсадусссо дсасаассаєс 1440
Касасдсаса ададссїсто сстаїсесссу доасазаєда 1479 «210» 36 «2112» 1492 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» й «223» Гуманізований твО016 «1002 36
Мес біц Аїа Рко Аїа біп Пей сей Рче Гец Тем Пец беч Ткр Пей Рго 1 в) 10 15
Азр Тпї Тбгобіу бі І16є Уа1і цес ТБгобіп бек Ркго Аїа ТБг їПец Зег зо
Тем бек Рко б1у бій Акуд Аза Тапх Пес бег Сув Акд ТІ Бех біцп Ап
Уаї Тук Бех Тут Бей Аза Тгр Тук 51 біп буз Рго с1у сіп А1а Рто во
АхЯд Геч рез І1е Тук Рпе А1їа Гуз ТБг їем Аза б1п б1у 112 Рго Аза 65 70 75 80
Аху Рпе бек сіу бек біу бек б1у ТВх Авр Рпе ТБк Гео Так о Т1е бег 85 зо 95 бех Гей біц Рко бід Авр Рпе А1іа Уа! Туг Туг Сув біп Нівз Нів бек 100 105 110
АБр о Азп Рто ТкЕр Тах Рпе сіу біп Сіу Тпк Пув Уа1! бій Іїе пуз б1у 115 120 125 с1у с1іу бі1у бег біу біу біу б1у бек біу біу сіу с1у А1їа бБег сіп 130 135 140
Уаі біп Бей уал бі Бек біу сіу біу УМаі Уаїі біп Рго біу Агд Бек 145 150 155 160 їез Агу Гез Бех Суз Аіїа Аїа бех Сіу Ре ТПЕ Рпе беїг Сіу Ту Авп 1565 170 175
Мес Абп ТгроУаї Аку сіл Меє Рго б1у пуб с1у їв б1д Тгр Меє б1у 180 135 190
Азп о І1е Азр Рго Тук Тук б1у біу ТБбх Тпг Тух Ава Акзд Був Рпе Ту 195 200 205 б1у сіп Уаї Тпг о І1е бехт А)а Ар цу бег І1е беї ТіПг Аза Тук Тец 210 215 2720 біп Ткр бек бех Гей пу Аїа бБеї Авр тах Аза Мес Туг Тук Сув А1а 225 230 235 240
Аго бек Уаії б1у Рго Меє Авр Тут Тгр бІ1у Аг біу Тк Пе Уаї Тбг 245 259 285
Уаі бек бек бек 014 Рго Ппуз бек бБетг Азр Був Тит Нів Тпкг бек Рто 260 265 270
Рго Суз Рго Аза Рго бі Гей Те С1іу біу Рго Бек Уаїі Рпе Тв Ре 275 280 285
Рго Рго Був Рго Пув Авр Тіт Іеч Мес І1е бек Ака ТБбг Рко бій Уа1. 290 295 00
ТП о Сув Уаі Уа) Уа1і Авзр Ма1! Бех Нів бій Азр Рко біц Уаї Був Ріе 305 10 315 320
Авіп Ттр Тут Маі Авр с51у Чаї бі Уаї Біз Авп Аза Пув Тих Був Руо з25 330 335
Ага зі Сі) біп Тук Авп о бет ТБ Тук Аку Ууаї Угі бек Уггі цей Тис 340 345 350
Уаї Пеа Нів біп Азр о Ттр рез Авпобіу був бі) Тує пуб Суз Круз Маї 355 зво 365
Бек Ап Гуз Аїа цем Рго Аїа Рго 112 Сі Тув ТК Т16 бек Пув А1їа зт70 375 зво
Був б1іу б)іп Рго Акд бін Рго біп Уа) Тухк Таг теп Рко Рго бег Агу 385 390 395 400
Ввр обі пес Тато Туз Азп о біп Уаї Зег зей Тк оСуз Бей Маї Був біу 405 410 415
Рпе Туг Рго Зет АБр І1е Аза Уаї бід Тгр бі Зег Азп б1у сІп Рго 420 425 430 біз Азп Ап о Тук був ТВх Тлг о Рго Рго Уа) Ген Авр бах Ар Сіу Бек 435 440 4415
Ва Рре Тез Тут бек Пув Тей Тахо Уаї Авр Пув Бех Аго Тгр б1п біп 450 455 46о сбіу Авп оУаї Ре бБег Сув бег Ма) Мет Нів С1ій А1їа Ге Ніз А5п Нів 465 470 475 280
Тух Тих біп цуз Бек цец Бек Пес бек Рго Сіу був 485 190 «2105 37 «2115 14765 «2125 ДЕК 2135 Штучна послідовність «2205 Й «223» Гуманізований твО016 «8005 37 акосаадсас садсосаусе сстстбесво ссудстасесстї дусєсссада сассассоде 60 даазеЕєавдс Едасасадіьс сссадссасс седЕсСтьвсСдї соссадуддсуда аададссасо 120 сессссгЯдсс даасаадеіуа аааєссссас адссассісау ссєудстасса асадазассяе 132 дадссаддссс стаддстсстї саєстаєсєє дсааааассяї садсадаауу зассссадсос 240 аддсїсадіуд дсадсддаєс сдддасадас тЕсасесеса ссассассву ссбададссс 300 даадаєекка садієваєра сідссаасаю сагіссдава аєссдєдоас абЕсодссва З6о
Задассааад Єддааассаа адоїдоасаді дасісодася дЕдЗсодасо сазаавдадає 4120
Чаадассадсо адасасадсеї остсодадесь чдтоаодадчоасї Сддісосадсс годадодісс 480 стдадасесї сссдсдсадс стстддаєсс асстєсадея дстасааває даассоозіс 5АО садссвуаєас ссоудаазуд сссоддадсод ассодсваса сСссаєссьта стасучачЕдає 600 асбасстіаса ассяудаацчес саасддссад десастаєсої ссяссдасаа усссаєсвас ве ассдсстасс тодсаасдчад садсссдаву досссучаса ссуссаїєуста Свасьдедса 720 сдсссадесо дсессссатодда стассдаддус сусдасассс боддссасьує стосесдадс 7ва садсссаває ссбссдасав аасісасаса Ссіссассос чдссосадсасс сдаассссьо 840 дасадассдчє садісссссє сссессссса азасссааодуд асасссісає даєсесссдоуд зо асссстідадо їсасасадсЯї сдгоатадас ЧеЧадссасу аадассстда здєсвадекс з60 звастадсасо сддасодсує чддадасадсає аабдссаада сазауссосд ддсачдаадсазд 1020
Сасаасасса собассЯсуєЄ дуЕсадсуєс стсассуєссо гдсассздча стадседаає 1080 дасааддаде асзачідсаа сдЕсіссавс аазоссстсс садсссссас сдадаааасс 1140 асссссавау ссааачудса дссссуадаа ссасаодсдб асассстодсс сссаєсссод 1209 часчдадссда ссаадаасса додєсадсссд асссдсссоч Ссааачзустє ссаєссавос 1260 дасаєсасся єсодчассдода чдадсаасдод садссуддада асаастасаа дассасоцссе 1320 сссдідстдд асессдасос стссвесеіс стстасауса адсссассудє ддоасаацаздс 1380 зачеЕЧддсадс ачадодаасоє стїстсаєдс Ессяагдаєсдс аєдадудсьст дсасаассас 1440 тасасусада ададссьсяс сседеЕсессу дудхагза 1-76 «2105 38 «2117 492 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність кр20» «223» Гуманізований твоб16 «1005 38
Мес бій діа Рго Аза сіп Ге пеп Рре Гей Мей Пец лей Тгр о Гей Рко 1 З 19 15
Азр ТВйт Тік біу бій 11е Уаї Пец ТБх біп бек Рко Аіїа Тік Гец бек 23 25 30 цеч бег Рго сіу бій Агу А1їа Тк опе бек о Сув Аго ТБпг о бех бій Авп
Чаї Тух бек Тук Пех Ала Ткр Тук б1іп С!іп бує Ркго біу с1п Аїа Рко 5 6о0
Ага Тем цей 112 Туг Рпе АТа Пуз Тбт Тец Аза Сб12 біу ч11е Рко Аза 65 70 75 80
Ак Ре бек біу бек сіу бек б1іу ТЕЮт АБр Ре Тк Печ Тіг о ї1е бег 85 90 35 бек рем біз Рго січ Авр Ріе Аїа маї Тух Тут Суз біп Нівз Нів бег 100 105 110
Авзр о Авп о Рго Тгр ТВгоРре біу біп біу Тит Буг Уаї 51: І1їе ув сіу 115 120 125 5іу б1у с1у Бек сіу біу біу біу Бек сбіу б1у біу біу А1їа Бек бій 130 135 140
Ууаї біп реч Уаї бій Зег сіу б1у б1у Гео Уаї біп Рко 51у Сіу Бег 145 150 155 160
Тез Аг Гей Зек Сув Аза Аза бек біу Ре Три Ріре Зет Сбіу Тук Азп 165 170 175
Ме Авп о Ткр Маї Аг б1іп Меє Рго біу Пув б1у Пец біч Тер Меє с1У 180 185 190
Азп т11е Авр Рго Тук Тук Сіу біу ТПг о ТБг Тух Авп Агд Був Ре Був 195 200 205
Сіу Сіп Маї Тру Іїе Зег А1їа Авр Був бек І1е Бек ТПх Аза Тук Тец 210 215 220 б1іп Тгр Зек Бех Тецп Пув Аза бБет Авр Тк Аза Меє Тух Тух Сув Віа 225 230 235 240
АгЯ бек УМаї б1у Рго Меє Азр Туг Ттр 51у Ага б1іу ТП Пец хМаї Тс 245 250 255
Уаї Бек Бех Зех 51) Рго Пуз Зег дет Лвр Був Тапг Нів Тпх бетх Рто 260 265 270
Рго Сув Рко А1а Рко біц еп тем 5З1іу біу Рко бек Уа) Рпе їви Рре 275 280 285
Рго Рхо Пув Рхо Пуз Авр ТртІ Гей Меї І1е бек Агд ТБг Рко Ссіц Уа1ї 290 295 зоо
Тік Сув уаї Уаї Маї Авзр Ууаї бек Нів бій Авр Рго бі Уаії Пув Рре 05 310 315 320
Авп о Ткр Тукг Уаії Азр сіу Ма1! 510 Уа1ї Ніз Авп А1а уз ТВбг о Пуб Ркго 325 ззо 335
Ата бій біз біп Тук Авп бек Тру Тух Акуд Уаї Уаї бек Ма! Пец Тіг 340 345 а50
Маї Теи Нів біп Азр Тктр лем Ап С1у Був бій Тух рув Сув Гуз Маї 355 збо 365
Зек Ап оБув Аза Пе Рго Аза Рхо 71е бій Гцуз Тпк І1е Бек Був Віа 370 375 380
Туз сіу біп Рко Ака4 біш Рко біп Уа! Тук Тр оГеп Рко Рко Бех Ак4дФ 385 зза 395 400
Авр бі реа Тк Був Авпобіп Маї Бех Тец ТЕ Сув те Уаї Ппуз б1у 405 410 415
Ре тТук Рко бек А5р І1е А1а Уа1 біц Ткр С1й Бех Азп біу біп Рего 420 425 430 біз Ап Азп о Тут ГПуз Тс о Тбг Рго Рго Уаії Пе Авр бек Авр біу Зег 435 440 445
Рпе Ре Пец Туїг бек Був Печ ТПї Уаї А5зр Був беї Ак Тер біп сід 450 45зо 460 б1у Азп Уа1 Епе Бек Суз Бек Маї Мебс Ніз 5іш А1а Без Чіз Авп Нів 465 470 475 180
Тут Трт сіп Був бек Гей бек Пец бег Рко біу Був 485 490 «2105 39 «9115 1476 к212з ДНК х2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твОб16 «400» 39 зєдудаадсас садсясадсії ЕсЕСтсссес сесстастсс дадсксссада Бассассоде Бо чаваєтасуї бдасасадсс сссадссасс седїсссвдс сессадосда асудачссасе 120 стсбессдсс дазсаауєда азаєдісстас зодстасссад ссбддіасса асадааассє 180 зассаудсвс стаддссісст саєстаєесі дсааааассо садсачаадд аассссадсс 240 адасесадід дсачсддаєс судуасачас бЕсасесєса ссабсадсад сссададесї 300 чаадаєєсву садсстаєса ссдтісаасає сассссудата аєссоусддас асссадссаа збо чодассааду содаааєсаа асосодусодс досєсодадос дсостіодаєс єодадовачає 420
Чвадсвадсо адосадсадсеЕ дагададчься сусодчаддст бдоаєссадос Еддададесс 480 ссдадасест сстдсосадс состодаєьс ассостсадеу дстасаасає даассдадіс 540 сдссадасус ссддаааадо ссідоадчіду асоздсааса Есоаєссстта тає здсдЧч 60 астасссаса ассудааусї саадодссагу дісастаєся ссассуасаа деЕссаєсадс 560 ассосстасс сусазсудад садссідазу дссссудаса ссодссаєсдбта стассдбуса 720 сасісадесд дессгаєдса скаскдаадеє сдсодсассс содЕсассдЕ сіссесдадчео 780 чадсссааає сссстдасаа засссасаса сосссассує усссадсасс сдаастссту 840 . одасадассдє садбсьсссі сЕссосссса ааасссаадуд асасссєсаї даєсссссод з00 асссстдадуо ссасаєусає чдссосодас дсдадссасу аадассстда дуєсаачєсс зеб заскдуєзсод судасудсЯє зддадаєдсає аасоссаада сзаадссосо ддаддгедса4д 1020 тїасаасзоаса сукассуєді дадєсадсоуєс сесассуєїсс сасассадда ссддседааває 1080 дасаадудаді асаадтдсаз дуссєсссвгас агадссстсс садсссссає саадаавасс 1140 агстссавзад ссааводуса дсосссдачаа ссасадубєдс асасостусс сесаєсссоу 1200 часдадседа ссаадаасса ддссасссвд ассєдссєідчу ссаааддссє стаєссавос 1260 часаєсяссу суЧадсзчада дадсзваєсуу садссддчада асаассасаа дассасосся 1320 ссесдсдссод ассссдасяд сесссссссо сссгасауса зудсссассу адасаададс 1380 асогоддсаус задудаасяє сеєстсасас сссобсоаєдс аєчадусьсь дсасаассас 1440
Басасасача ачадсстсьсс сстдссссс9у доєбааа 1476 «210» 40 «211» 492 «2122 РВТ «273» Штучна послідовність «2205 Й «223» Гуманізований твоОб16 «40025 40
Меб Сі А1а Рго Аїа біп Бей Тєш Ре Тєш Бей Теш ей Ттгр о Бей Рко 1 5 10 15
Взр ТІ ТВк о сіу бі І1е Уаї рем Тпт бій бех Рго Аза Тс обеп Зег зо
ТГец бек Рко біу бій Агд Аіа Тік Тецп бет Суз Акд Трг Бек бін Авп чаї Туг Зек Тук Пе А1їа Тго Тук біп б1іп Гув Рхо Сс1у біп А1їа Рко 5о0 55 во
Ака пемш цей ІЗе Туг Ре Аза БуБ ТБ Пе Аїа 510 б1у ІчІ1е Рко А1а 63 70 75 80
Аху Рпе Бек С1іу Зег б1іу Бег С1іу Трг Авр Рпе Ту Пец ТІ ї11е Бех 85 зо з5
Бек пцеш бід Ркго бід Авр Рів А1їа Уа1 Тук Тук Сув біп Ніз Нів бег 100 105 110
Авр АвпоРго Ттр Тр Ре б1іу біп б1у Так Пув Уаї сів І1е Пув 51у 115 120 125 б1у біу б1у бБег біу біу біу Сіу бек біу біу Сіу б1у А13 бек б1ц 130 135 140 уаї біп реп Уаї Сіц бЗек біу біу б1у Пеш Уа) біп Рго Ссі1у б1іу б5ег 145 150 155 160
Пец Аху Бей бег Суз Аїа Аїа Бех с1і1іу Рре ТіК Ре Бех Сіу Тук Ап 165 170 175
Мес Азп Тер оуаї Ахо біп Меє Рго сі1у уз біу рей 074 Тгр Меє с1у 180 185 190
Авп Іт11е Азр о Рго Тук Тук сіу біу ТВ ТБг о Тухг Азп о Аку Пуз Ре Туз 195 200 205
Сіу біп Уа! ТБх І1їе бек Аїа Ар Був5 бег І1е бБехт Тік А1їа бух Тез 210 215 220 б1іп Тер Бех бек Гео Пув Аза Бех Авр ТБт А1а Меї Тук Тук Сув Аїа 225 230 235 240
Ака бет Уаї С1у Рго Меї Ар Туг ТтТгр біу Агу б1іу Тик Тез МУМаї Тіг 245 250 255
Уаї бБетг бек Зек біц Рго Гув Бех бек Азр Пув Тік Нів ТБІї Сузв Рго 260 265 270
Ркго Сув Рго А1а Рго бій Пец Пец біу Сіу Рго бек Маї Рбе Пец Ре 275 280 285
Рго Рго Був Рго ПБуз Авр Тк Гей Меб І1е Бех Аку Тік Рго Сіц Маї 280 235 Зоо
Тих Суз Уаї Уаі Уа! Азр Уа! Зек Нів сій Авр гРго 511 Ма1 Пуз Рле 305 310 315 320
Азп оТгр о Тух Уа1 Авр біу Уаї біц Уаї Ніз Азп А1а Пув ТПпг Був Рго 325 330 335
Аказ біз біз біп Тут Авп о бег Тк Туг Аку Уаі! Уа1! бек Уаї рез Тлх 340 345 350
Уаї реа ців біп Азр Тгр Тен Авпобіу був б1п Туг Гуз Суз Ппцув Маї 355 зво 365 бек Азп уз А18а Тем Рго Аза Рко І1е б10 Був Тпг ІЗе Зег Іуз А1а 370 375 80 уз біу біп Рго Акту бфш Рко біп Уаі Туг Тк Гей Рхто Рхо бег Ага 385 390 395 400
Аввр о б1іч Тез ТБ о Буз Азп бій Маї Бет Сецп ТБг о Сув пецш Уа1ї Пувз С1у 405 410 4315
Рпе Тух Рго Бек Азр І1є А1а Уаї бій Тур Сі беї Авп біу Сіп Ркго 420 425 430 біо Ап о АвпоТуг цуз ТвВт Того Рго Рго Уаї Пец Авр о беїх Азр біу бек 435 440 445
Ріе Рре Ієцп Тук Беїг Буз Тем Тк Уа1 В5р Пуз бег Акго Ткр С)іп біп 450 455 460 біу АБп Ма! Рре Зек Суз бек Уаї Меб Ніз сіц Аза Пед Нівз Авп Ні 465 470 475 490
Тук Тих біп Був беєг ГПеп бЗет Теп Бек Рго біу Буз 485 490 «210» 41 «211» 1476 «2127 ДНК «213» Штучна послідовність «220» Й . «223» Гуманізований тВОо16 «00» 41 асддаадсас садсусадеє ссястсссес седссасісї досісссада ассассудєе 69 здазаєссадсЯає сдасасадес сссадссасс стдссЕссує ссссадуєсча аададссасс 120 сесесссасс даасаадсда азаєусстас адсктассвад сссдуєасса асадаавассє 180 дассаддстіс ссадосесся саєсстаєстє дсааааассі бадсадаадо авассссадес 240 аадЕссзЧЕд чдсадсддаєс содудасадас сЕсасісьса ссаїсадсад сстацдадесї зо чаачасеєєсу садсссаєта ссдссаасає сабіссдара асссдбодас асссодссаа 360 аддассаау бодазаєсаа зодосододсоді дусссодусу чедаєсаддасс гадачоадає 42 задастадсу зддєдсачсе уасозацЕсс доасодачасу ссдєссвусс садададеьсс 490 стідасассся сседсдсадс сетстадаєсс асссссадід усбтасааєає даассдадес 5 садссасасдс ссаддаазач сстдудчазбос ассадсааса сЕдаєссиіса сеаєдаєдоє 600 ассасстаса ассдддаачіс сезуддссву дссастаєся ссалссдасаа чссосассаде ва ассусссасс сдсааєсдуад садсстідагу дссксудаса ссуссаєоата єсастуєдса 720 саясесадісу десстабада ссасьрадодс сусудсассс тодуссастує ссссссдаде 780 чадсссааахї сгсстдасаа аасссасаса Єстссассоє удсссадсасс созвасссстід 840 часуддассуї садьсесссос сеЕбЄсссссса ааасссааду асассстсає дассьссосоч 00 ассссесаду єсасаєдсує дабодадвдоас дедадссасу аадассстда даєсзвзадесс 26 азссдосасо сдоасоддсує ддадуєусає аасдсесааца саазоссосу одадоавоасад 1020
Касаасадса судтассЯєдЕ даоєсадсаєс сісассуєсс Едсассадада ссоодссдває 1080
Чдсааоадачь асаадросаа удЕссссазс ааадсссісс садсосссаї сдадаааасс 1140 аєстссавач ссазадуддса дссссоадаа ссасадоєуї асасссідсс сосассссоду 1209 чаєдадсіда ссаадаасса ддесадсстд асстосстду ЕсазачдсовЕ стаєссавоас 1250 дасаєсодсся садчадідада садсаасддд садссудада асаастасаа дассасоссе 1320 сссуєосЕдуд асессуасуд стссесестїс сесстасадса адсссассдї ддасаасадес 1380 адогтоддсадс адодудаасує сессссасдс сссдєдаєос асуасосеся дсасаассас 1440 басасусада ададссєстс ссідїсіссу одсааа 1476 «210» 42 І «2115» 492 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тКО016 «400» 42
Меє бір Аза Рго Аїа біп лец цей Рпе лем Пеп Бей Геп Тер Пец Рго 1 З 10 15
Азр Тих Тк обіу бій І1е баї це Твк біп бек Рко А1їа то Тез Баг
Те Зек Ркго б1у біз Аг Аза ТВх Тей бек Суз Ах Тих Бек бій Авп
Уаї Туп Бек Тух цем А1їа Тгр Тут біп біп Гуз Рго біу біп Аза Уго зо 55 60
Агу рей Бец Іїе Тут Рре Ала Буз Тік Темп Аза 6010 С1у І18а Рго Аза 65 70 15 80
Аку Ре Бек біу Бек біу Бек біу Тих Азр Рбе Тбг Пец Тпх І1е Бек 85 "80 95
Бек пе бі Рко б1іш Азр Рре А1а Узі Туг Тух Суб біп Ніє Нів бег 100 -105 110
Авр Авоп Рто Ткр Тк Рпе б1у біп біу Так пуб Ма1! б1з І1е уз сС1у 115 120 125 сіу б1іу б1іу бек біу 51у б1іу біу бег б1іу с1іу Сіу б1у Віа бек бій 130 135 110
Ууаї б1іп Без Уаї бі) бек біу біу біу Бех Уа1ї біп Ргто сіу біу бек 145 150 155 1650
Тео Акад рез бБег Сув А1а А1їа бБеї біу Ріе Тік Рпе бек біу Тук Авп 155 170 175
Мес дп Тер о Уаї Ага іп Мес Рго с1у Гуз б1у їеш бій Тгр Мебє с1у 180 185 190
Авп о І1е Авр о Рхо Тук Туг 51у біу Тиг Тпх Тук Авп Аг Пуз Ре ув 135 200 205
СІіу біп Уаї Тк І1е Бек Аїа Азр Туз бег ІЗе 5ег Торг А1а Туг ей 210 215 220 біп Ттр бег бек Тем Пув Аза бек Авр Тих А1а Меб Туг Тух Сув Аїа 225 230 235 240
Вк бег Маї 51у Рго Меє Азр Туг Тгр Сіу Агд біу Твг Теип Уаї Тбг 24145 250 255
Уа1ї Бет Бех бек бі Рго Ццув бег бек Авр Гуз Тіг Ніз Так Беї Рго 260 265 270
Рко Сув Рко Аїа Рго бій рец пен С1іу Сіу Рго бек Уа1 Рре Гей Ріг 215 280 285
Рго Рго Був Рко Буз Авзр ТП Пемп Меє І1е бег Ака Ту Рго б1з Уаї 290 295 й 300
Тпг Сув Уа1ї Уаї Уаі АБр Маї Бек Нів бій Авр Рхто 510 Уаї Пув Ре 305 310 315 320
Авп оТур о Туг УМаї Авр о біу Уаї бі) Ууаї Нів АБп АтТа Пуб5 Тпт ув Рго 325 330 335
Ага біц 514 біп Туг АБп обЗеї ТрПг Тут Агу Уаї Уаї Бек Уаї Пец Тог 345 350
Ууаї цей Нів біп Азр Ткр бей Азп біу Пув бі Туг Гуз Сув Був Уаї1ї 355 360 365 бек Авп о Гув А1а Теп Рго Аїа Ркго І1е біо Пув Тпх Іїе Бех Гуз А18 370 375 зво
Тув б1у біп Рго Агруд біц Рго біп Уаїі Тук Тк Пви Рго Рго бек Агу 385 390 395 400
Азр Сів Пец ТВі Пуз Авпобіп Уаї Бех цей Тіх Суз Тео Уаї Гуз 01Уу 405 410 415
Рре Тух Рго Бех Авр І1е А1а Уаї Сі Тер б1іц бек Авп біу сС1іп Рго 420 425 430 бій АвгоАзпоТуг Був Тс о ТвБг о Рго Рко Уаї Бей Азр Бех Азр сб1іу Бек 435 440 445
Рпе Рпе Пей Тук Бек Пув печ ТВк Уа1 Азр Був бег Акд Тур біп б10 450 455 460 біу Авп Уаї Рпе Зет Сув бег Уаї Меж Нів біч Аїа Пей Нів Авп о Нів 4165 470 475 480
Ту Тіг біп Гуз бек Геп Бег це Бех Рго б1у Муз 485 450 «2105 43 «2115 1476 «212» ДЕК «213» Штучна послідовність «2205 «223» Гуманізований твоО016 «400» 43 асодаадсас садсусадсї Ссестссссос стідссасься одудсЕсссада Єассассадче во
ЗзаааєєодсуЧу єдасасадіс Ессадссасс седсстбсді стссаддсда аададссасс 120 сЕСЕСосусс даасааціда аааєдсєсас адссассєау ссідуєасса асадазасся 180
Чодссадосіс ссадустссї саєстаєьвсє дсавадаасстя садсадаауду аассссадсс 240 адуєєсзоаїЯ дсацчіддаєс сддудасадас Ессасьстса ссагсадсау сстададссї Зоо чаздасєтсса сазуссстасса ссдесаасаї сасіссдаєа асссоєдчас астссддсесаа 360 чЧоадассвада сддагаєсаа аддсодсодду ддсісдоддсоа ассасодаєс содадачаздуає 420 чддастадся адчідсадсє дасоадасістї дусдвадусь сЕбЕссадсс содаоадісс 480
Й сЕдадасіся сседбдсадо сессддаєсс асстсадед дстасааєає даассдуес з410 содссадаєдс ссоддааадя сссоддасьоо абодосаата сеЕдЧаєссста Єбасочс дає 00: ассасссаса ассддаадсї саасодссад дісассаєсь ссоссуасаа доссаєсаде 650 ассдсстасс їдсаацодад садссосуаазу дсосісудаса ссдссаєудса ссасєдсдса 720 сдсісадссо асестаєуда стіасіодадес содсодсассос судесассує сессесдаде 780 чадсссааає срсссдасаа аасссасаса соасссассдї дсссадсасс сдаасьсстд 840 часдсассяє садесьссосі сеЕсосссса авасссаадуд асасссісає даєсісссдуд 00 асссстдадоа ссасатусодє адсадссдуас дсдадссасу азадасссбуа доассааЧчсьс 950 аастічдЧчвася гЕддасодасоає здадсоєасат азсдссавда саавачдссасоа адазчачсач 1020 басаасадса субассдбдє адссгедсуєс сссассдєсс сдсассводада стадсєдаає 1080 Й адсвачдадЕ асавоаєдсаа дасссссавас аавосссосс садссоссає сздадаваасс 1140 ассіссааагд ссагадудсса дссссдадаа ссасадаєої асасссвдес ссосавгссосдд 1200 й часуадсіда ссазвдаасса удісадсстдя асстдсстьодд ссазвадасеюї стаєссаадс 1260 засассоссу содадсодда дадсавсодуд садссодада асаассасаа дассасасся 1320 сссубодсісЯ ассссудасод сссстєссво сіссасадса адсісассуї дддасаададс 1380 ачадсддсадс адудддаасує стсстсасус сссусчаєас аєдадусісь дсасвассас 1420 сасасудсада ададосьсвс ссідЕссссод дугаза 1476 «2105» 44 Й «211» 492 й . «2122 РЕТ 2135 Штучна послідовність - І І «220» шо : «223» Гуманізований тво016 І «1005 144
Мек бі діа Рко А1а біп Бец Геш Рбе Пец Бей Гей Пец Тгр Тей Рго ї 1 З 10 І5
Азр Тіт ТБк біу бій І1е Уа1ї реп Тпгобіп бек Рго Віа ТБх їец бег
Бей бек Рго с1іу б1ш Агу Аїа Тпг реп Зег Суз Акад ТК бек бій Авзп
Уаї Тух Бех Туг Пес Аза Ткр Тук біп біп Пуз Рко Зіу біп Аїа Рго 60
Ак реп Пед Іїе Тук Ріе А1За Туз Тр Тв Аза Сі біу ч11е Рго Аза 65 70 - 75 во
Ак9у Ре беї с1у Бех б1іу бетї Сі1у ТБі Азр Рпе Тптх Тем ТПх 112 Бег 85 90 35
Бех їей Сід Рко бій Авр Рпе діа Уаї Тук Тут Суз зіп Ніз Ні Зег 100 105 110
Авр Авп оРхо Ткр Твх Рре Сіу біп біу Тк Пузв Уаї 010 ї11е цуз біу 115 120 125 сіу с1у с1у бЗех біу біу сіу Сс1у бек біу біу біу Сіу А1а бег бій 130 135 140
Уаї біп Бей уаї бі бек біу біу біу бек маї сіп Рго б1у б1у Зег 145 150 155 160
Без Агуд Пец бекс Сув Ата Аза Бек біу Ріє Тпх РбБе Бек 01у Тух АБп 165 170 175
Меб Ап о Ттроуаі Агд бСіп Меє Рго біу Пуз біу Гей біш Тгр Меб сіу 180 185 190
Авп тіе Ар Рго Тук Туг біу б1у Таг Тпг Туг Авп Агу Туз Ре Буз 195 200 205 б1іу Сіп уз) Тпх І1е Бек А1а Авр Гуз Зек І1е Бек ТПг А1іа Туг Ів 210 215 220 біп Тхр бек Бех Тем Був А1а бек Авр ТБг Аза Меє Тук Тук Сув Ата 225 230 235 240
Аг бег о Маї б1іу Рго Мес Азр Тук Ткр Сіу Ату біу Тпх Тео Уа) Ті 245 253 255
Уа1ї бек бек бБег біш Рго ЦПуз бек бек Авр цуз ТІПх Нів ТПє Суб РІО 260 265 270
Рто Суз Рго Аза Рго біц Гей Гей біу біу Рго беї Уаї Риіе їец Рне 275 280 285
Рто Рко Пув Рго Пув Ввр ТПтІ Бей Меб Іїе Бех дгу Тпх Рго біз Уаї 290 295 300
Тахо Сув Уаї Уаї Чаї Авр Уаї бек Нів сій Авр Рго біз Уаї Бук рРце 305 310 315 20
АзпоТгроТук Уаї Азр сіу Уггі біц Уа) Нів АБпоАза Пув Так оБує Рго 325 330 335
Аха біз біц біп Туг Авп о беї ТОг Туг Ага Уа)! Уа1ї Бех Уаі Ге Тіх 340 345 350 уаї Пец Нів Сіп Авр Тгр Пец Авп біу Туз біцш Тут Пуз Сув Був мМаї 355 360 365 бек А5п о цуз Аїа Пец Рго Ала Рго Ії11е Сі був ТБг І1е Бек ПцЦу5з Аїа 370 375 зво
Іувз біу б1п Рго Агуд біз Рго біп Маї Тух ТБг Пе Рго Рго бЗег Агд 385 330 395 43400
Ар бій Пцей ТБг о Був Авпобіп Уаї бек Тез Тпк Суз цем уаї Туз С1у 205 410 415
Рпе Тук Рго бек Авр ІТ1є А1а Маї бій Тгр біо бБег Авп с1у біп Ркео 420 425 430 бій два Авп Тут Гуз ТагоТпх Рго Рто УМаї реп Авр бБег Авр Сбіу бек 435 2440 445
Ебе Рре Пез Туг бек Був Пей ТІ Уа! Азр цуз Бех Акад Тер Ссіп біп 450 455 460 сіу Азп Маї Рбе Бег Сув бБег Уаї Мес Нів сСіц Аіїа Пе Ніз Азп Нів 465 470 475 480
Туг Тіг біп Буз Бех їєю бет Тем бех Рго б1у Гуз 485 490 «210» 45 «2115» 1482 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «220» Й о «223» Гуманізований твО016
«4002 45 асддаадссс садсЕсадся ЕсссеЕкссес сеустасься доасісссада сассассода 50 7 чаааєєуєдс сдасасадсс сссадссасс седессссодє ссссадосуа азададссасс 120 ' сегсЕсстдсс дадсаадєса задгасстас адстасесад сстддіасса асасавасся 180
Чадссаддсєс ссадастссо сатсстаєтвь дсааааассє Садсадааду аассссадесс 240 адасссадсд усадсодаєс соудоасадаєс бЕсасісьса ссаєсадсад сстадачеосії Зоо чаздаєсьсо садусєтаєса седЕсаасає саєгосоаєа асссадсодчас абсодоссаа 360 сдоассаздд содаазісаа ачусочдсуді сасіЕсЯдсасу деЕоабосасо єодадсадчоє 420 чадассуЧчез заЧЕдсадсї чободсаціьсі дчадсадачу єЄдаваазадсс содададесе 480 стдаачаєсє ссгдсаазоад аєссоддівбас Есаєсєсастя дстасаасає даастодчуєд 5аО сссачаєдс ссоддаааачу ссісоачеод ассдудсааєа сЕдаєсства свасадчеавЕ воо0 астасстаса ассздзацеЕс саасчоддсса дісастаєсЕ ссдссдасаа деЕссаєсвас бо ассадсстасс їасвасодад садостуаву дссєсоддаса ссдссаєоата стаседсдса 720 сдсеЕсадісу дссстаєдаа стастодддс сдсудсассс бодЕсасьдє сеЕссєседває 780 саддадссса аассссстда сазаастсас асаєссссас сдсдсссадс ассосдавассс 540 сЕсдаєоацас сдєсадеЕсьє ссесссссос ссаааассса адчдасассстя сабчассссс збо содуассссід асоїсасасу собобсоуса дасасдадсс асзаадаєссс сдадаєсагвд 60 тЕсаастдЧчї асозсддасодч саячсодааадудєо сасааєдсса адасааадсс осадавддад 1020 садіасааса дсасубассд сдсоддЕсадс дЕсссосассу їсссасасса дсастдоаста 1080 аасдудсаадуо адсасаацеєу сааддчістсс аасааадссс єсссадсссс саєссадава 1140 ассаєстсса аауссаваду ссадсссосда даассасада4 Сосбасасссе дсссссаєсе 1200 счадаєдадс бдассаадаа ссадуєсадс седасстосс гоцдссаааду сссстаєсса 1260 адсчасаєсз ссдбсодадід одададсаає дддсадссуд адаасаасса саадассасд 1320 ссіоссссосдс содассссда сядсіссЕсс вЕсСсестаса дсаадсісас суєдддасаау 1380 зчдсаучсдас адсачаддаа сабстєсеЕса єЄдсессуєча сдсасдадудс гсгдсасаає 1440 састасасдс адаададсстї ссссстдєЕСЕ ссоддовбадає да 1582 «210» 46 «211» 493 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твоб16 «400» 46
Меє 013 Атїа Рго Аїа Суп Бец Пей Рпе цей лем це пей Тгр Бей Рко
1 5 10 15
Азр Тк ТВх о Сіу Сі І1іе Уаї цей Трг о біп бек Рго А1а Тпг Без бег зо
Тей бек Рко б1у біц Ага Аза Трг лец Бек Суз Ах Аза Бех сіп бег чаї Тухг Бех Тук рес Аїа Тір Туг біп біп Гув Рго а1у бід діа Рго ос
Агад Пец Тео І1е Тук Рпе Аїа Пух ТВг Те Аїа сіц б1іу 11е Рко Аза 65 70 75 80
Ага Ріпа бек біу Бек біу Бек біу Тау Ар Рбе Тіт Тео Тк І1е Бек 85 о 95 бек Печ 610 Рто б14 Авр Рпе А1їа Уа! Тус Тух Суз б5іп Нів Нів бек 100 105 110
Авр о Авп о Рко Ттр ТБг о Рбе біу біп б1у Трг Туз Уаї1ї біз т11е цуз сіу 115 120 125 біу біу сіу бек б1іу біу Сіу С1іу бехг сіу біу б1у сіу Тк б1у біч 130 135 140 й
Уаї Сіп йпеп Маї сіп бек с1іу Аза 010 Маї1! Цуз Був Рго біу бі. бек 145 150 155 160
Теч Ппув І1е бек Сув Був біу Бек б1у Туг бек Ре Тпк с1іу Тут Аза 155 170 175
Мес Авп о Тгтр о Уг1і Акд біп Меє Ркго біу Пуз б1іу Гей бій Тгр Меє б1У 180 185 190
Авп чІ1е Авр Рго Тук Туг біу сіу Тк Тпг Туг Ап Аху Гуз Ре Туз 195 200 205 '
Сіу біп Маї Твг о І1е Бег А1їа Авр Пуз бег І1е Бех Тіг Аїа Тук Пец 210 215 220 сій Тгр Зек бек їец Пув Аїа бБег АвБр Тпг Аза Мес Тух Туг Сув Аїа 225 230 235 240
Ага бек Уаі Сіу Рко Меї Авр Тук Тур С1іу Ах біу Тпх Леш Уаї Тік 245 250 253
Уаії бЗег бек Авр біп бій Рго Тув бБег бек Авр Був Тіт Нів тах бег 250 255 270
Рго Рго Сув Рко Аїа Рго бі Пцеш Пец б1у б1у Рто бег Уа1ї Рре Іец 2175 280 285
Рпе Рго Рго Бує Рго Пує АБр ТБг Гей Мер І1е бек Ак ТЬг Рхо б1и 290 295 300
Ууаї Тіт Сув Ма1ї Маї уаї Азр Уаї Бех Нів бій Авр Рго бій Уа1ї Буг 305 310 315 320
Рпе Авп Тгр Тукх Маї Авр сіу Уа1! біц УМа1ї Нів Авп Аза Був ТПт Був 325 30 335
Рко Акд бід біш біп Тух АвпобБег ТЬг о Тук Аг Уаі Маї Бех Уа1ї Тей 340 345 350
Тік Уаї Беш Ніз сіп Авр о Тгр оПей Авзп о б1у Пув бій Тук пув Сув Гу 355 360 365
Уаї бек АБп оПуз А1їа Пец Ркго Аїа Рго І1е бій Гуз ТЕбт ІТїе Бег Був 370 375 зво
Аза цпув сі1у біп Рго Акуд сій Рко біп Уаї Тух ТК Тїеп Рго Рго Зек 385 390 395 1400
Ага А5р бій теп ТВгоПпув Авпобіп Маї бек Пен Тахо Сув цем УМаї Гуз 405 410 415 біу Ре Тук Рго бек Авр І12е Аїа Маї 010 Тгр бі бек Аво б1у біп - 420 425 430
Его біц Авп о Абп о Туг о Буз Тпг о Тато Рго Ргро Уа! Гей Авр бЗег Акр б1у 435 440 445 бек Рре Рйе Гей Тук бег Був Пец Тих Уаї Авр їувз бег Акд Тгр біп 450 455 460 біп біу Ап Уаї Рпе Бек Сув Бек Уа1 Меє Нів біц Аїа тей Нів Авп 465 470 475 480
Ніз Тук ТЕ сСіп рув Бек Гез бег Іец Зек Рго біу Був 85 490 «210» 47 «211» 1500 «212» ДНК
«213» Штучна послідовність
«223» Гуманізований твОб16 «414005 47 аадсЕсдссо ссасудаадс сссадсдсву севсьськос Єсседссасе ссдустссса бо часассассу дауааасьтодс дЕссасасау ЄсЕссадсса ссоседбсься достссаддс 120 чазачадсса ссосссссстд ссозосаадбс давааєуєЕєс асадссастї адсседчвас 180 савсасааас ссддссадус Соссадосьс сесаєстаєс ссосавадаас сттадсадаа 240 догаєєссад ссадчьссатч Содсаусуда єссоддуасад асексастсо сассаєсаде 300 адсстададс стдаадастеє Сдсадьїсає єассоссзас ассаєсссуа сааєсссобад 360 асасссудсс аадодассаа даєЄддаааєс азаддсодсу деодсЕСЯЧач содсоадсодча 420 єссодадоад дсодуассооа сдадооєосад сідусдсаує сЕддадсадча дуасдзазаавд 480 сссодадаче сЕссдзадає ссосєссаад удаєссоадеє асісаєссас соддсвасзваї 540 асдаастддуо сасуссадає сдсссдсдааа адссісцдаді ддасгоддасаа бакеєсаєсся 6О0 хаєсаєдуєу дсассассса саассодаауд Сбсааддудсс асодссасває сеЕссдссоаас 660 аадсссаєса дсассясста ссбудсаабсду адсадсстда аддссісдда сасосдссаєд 720 тасбассдбуа сасдсссаді соддссссссс зассассоддоа дссаддодсас ссврддесасе 780 десвссЕссо агсаддадсс саааєстьссь дасадаасьс асасаєстсс ассдеєдосса 810 чсассідаас сссесодраа асстсадіс стососсссо соссааваасо саавддасасе за0 сесаєчатєтсЕ сессуддасссс Сдадсссаса сдсабодідд соаддасоєдад ссассаазадас збо сстдадасса адсссаассу дсасуєддас дасасададу сдсасазасос саадасааза 1020 ссдсудодачоа адсастасаа садсасастас сосоїоадЕса дсдбсссосас сассстодсас 1080 саддастуддс Едаабддсеаа дасадрасаау єдсаададєся ссаасагадс ссссссвосс 1150 сссаєсуауда ааассаєстс сазадссааа суддсадсссс дадаассаса дуєдтасасс 1200 сідсссссає сссуудаєда дссдассаач аассадоєса оосссасссу сстудуїсава 1250 чдасссстаєс саадсуасає соссубадауд содуддададса аєгаддудсадесс дуадгасдас 1320 їасаацасса суссссссяє дсбддасетсс дасддсьсст єсЕсСссєста садсвадесто 1380 ассдсддаса ададсаддід дсадсадудуа засяєсстсті сасдсеЕссує часдсаєуаа 1440 дссссдсаса ассастасас дсадаададе сіссссстув ссосодоасаа асдатєсосаса 15560 «2105 48 «211» 493 «2122 РТ «213» Штучна послідовність «220» й гр ватні
«223» Гуманізований твоб16 «1005 48
Мес бі Аза Рго Аза б)п Геп Бей Ре цей рей це Пе Тер о Пеи Ркго 1 З 10 15
Авор Тйх Тк осіу С10 І1е Уа1ї Пец ТБгобіп Бек Рго Аза ТК Кей бек
Грец Бех Рко б1у біш АтЯ4 Аїа Так Пец бех Суб Агд А1їа бег Ссіц Авп
Маії Тут Бек Тук Гей Аза Тер Тут біп с1іп Пуз Рго біу біп Ала Рго 35 60
Агу Тез Тей І1є Тує Рпе Аїа Туз ТБбхк Те Аїа бі біу І1їє Рго Аза 65 то 75 80
Вк Рбе Зехг біу Бетг С1іу Зех Сіу ТПпх Авр Рпе Тпх їй ТВ Ії Бек 85 0 95 бек реп бій Рго біш Ар РБе Аза Уаї Туг Тух Су біп Нів Нів Зег 100 105 110
Авр о АвпоРтго Тер ТБт Рре б1у біп біу Тпг П0уз Уа! бій 112 гуз С1у 115 120 125 сіу біу б1і1у Бех Сбіу Сіу С1у Сіу Зек біу с1іу біу Фіу Трк б1у сІ1Ш 130 135 140 уві біп Тез Уаї біп бег Ссіу Аїа біз Уаї Гуз Гув Рго біу сі бет 145 150 155 160 їеп Пув 112 бек Сув Пуз біу Бек біу Тут Бег РіБе Трпг б1у Тук АБп 165 170 175
Мес Азп Тгр о Уа! Акд біп Меб Рго біу Пув С1у теп бій Тгр Меє 01у 180 185 190
Авп І11е Авр Рго Тут Туг біу біу Трк ТпПг о Туг Абвп Агу уз Ре Туз 195 290 205 біу Сіп Уві тах І1е бег А1а Авр Був Бех І1еє бек Тпг Аза Туг Те 210 215 220 бій Ткр бек бех Пец пув А1їа бег А5р Тлг А1їа Меє Туг Тук Сув А1та 225 230 235 240 хо .
Кк бек Маї сіу Рго Ре Авр Тук Тер біу біп біу Так Гей Уаї ТЬг 745 250 255
Уаі бБет Бек Авр біп біб Рко Пув Бег бек Авр Буз Тік Нів ТПк Зех 260 265 270
Рго Рго Сув Рго А1а Ркго бі Пеш Пец біу Сіу Рко Бек Уаї Ре Гео 275 280 285
Ре Рго Рго Тув Рго Пув Ар Тік Гей Меб Т1є Бек Агд Тк Рго 51 290 295 300
Уаї Трг Суз Чаї Чаї Ууаї А5р Ма1! бек Нів біц Ар Рго біц Ууаі1і1 Був 305 310 315 320
Рпе Азп о Тгр оТуг Уаї Авр Сіу Уа1ї бі Уаї Ніз Або Аїа Пув Трк о Був 325 330 335
Рго Акд бі бій біл Тук Азп обет Тк Тут Аг Уа! Уа1ї Бек Уаї Тец 340 345 350
Трг уаї Гео Нів біп Азр Тгтр їєй Аво біу Бпуз бій Туг Пув Сув уз 355 зво 365 уаї Бек АБо Гув Аїа Пец Рго Аза Рко 11е б5іч Тув Тпг І1е Бек Гуз 370 375 зво
А1а пув біу біп Рко Агу 010 Рго біп Ууаї Туг ТБт Пец Рго Рко бег 385 зо 395 400
Агу Авр осі Бей ТгоБубв АБд о біп Уа1ї бек Пей Тбх Суз Тєп Маї Був 405 410 415
Сіу Ре Тук Рко Бек Ар 112 А1а Уа! Сіц Тгр біц бех Ашп біу біп 4120 425 430
Ркго бі АвпоАвпоТуг Був ТВпт ТВЬг о Рго Рго Уаї Тец Авр Бех АБр біу 435 440 445
Чет Рре Ре Бей Тук бех пуб рей Тік оУа1ї Агро оТуз бех Ахку Ттр іп 450 455 460 біп біу Азп о Уаї Рпе бЗет Суз Зет Маї Меї пів бій Аїа цем пів ВАзп 465 470 415 480
Нів Тук Так біп Був Бек Пе бек Бец бек Рго біу Був 485 490 с а ха» 49 «211» 356 «2122 ДНК 2135. Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тво016 «4002 49
Ястіадсдадад сосазстдає дсадестодда дсададаєда азазосссод ададісьсгаЯ 60 аачаїєстссї дсааоодаєс содісасоіса гісассодудсї асаасаєдаа ссдауєдсос 120 сачаєдсссо ддааадудссє дсадіодаєд досаавсаєєд аєссєсаєста содедчтася 180 асстасавасс ддааасЕссаа додссадуєс асеаєстссу ссуасаадес саєссадсасс 240 дссвассвдс аасодадсау сстоуаадусєсс Есоддасасся ссаєдсаєвса сьдсдсдсас 00
Есадссддос статузасує соуддадссаа дусассастд Есасбдсстьс сєсдад 356 «2105 50 «2112 143 «2125 РЕВТ «2135 Штучна послідовність «220» «2232 Гуманізований ТвП016 «400» 50
Мес бі дія Рко Аіа біп Те Тео Рпе Тез Гец їез Бед Тур Тез РІО 1 5 10 15
Авр Тах Тих біу бі ІЗе Маї Цем Тк біп Бек Рго А1їа Тк Пеп бег зо їец бЗет Рго біу сі Агд Аза Тах Пей бек Сув Ахд Аїа Бех Сі Азп
Й
Уаї Тух Бек Тук Тецш А1а Ттр Туг біп б)іп Гуз Рго б1у біп А1а Рго 60
Акд о пез Пец Ізе Тух Рбе А1їа Був Тпг їей Аза Сі б1у 116 Рго А1а 65 то 75 80
Агд Рнеєе бек біу Бех сіу Бек сіу Тпг Авр Рре Тах пез Тік І1е бек 85 зо 95
Зег пйеч біш Рго біш Авр Ре А1їа Уаї Туг Туг Суз біп Нів Нів 5ег 100 105 110
Авр АБИ Рго Тур ТБх Ре б1іу бів біу Тйх Був Маі1 біз Іїе Був С1у 115 120 125 слі м біу б5іу 51у Бек б1іу біу б1у с1у Бех с1і1у сі1іу с1у сіу ТУ с1у 130 155 140 «2105 51 «2112» 1381 «2122 ДНК «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тко016 «4005 51 задсссоссд ссасддааадс сссадсосад сеесесвбсс єсевдстасі стддсессса бо часассассоя дадаааєсає оссдасасач сссссадсса сосесаїевее Ччессосавуде 120 чааачадсса сссеєсссостд ссдадсааді даааасусєтс асадсвассї адсссдусас 180 саасадааас сіддссадас ЕссваддсЕс сссаєстаєс єЕдсадааас ськадсаздав 240
Ччаваєсєссад ссадсіссад гсдсадеодда сссдддасад асеєсастстї сассаєссадо 00 адсстададс сбдзачастс Єдсадсссає васідбсаас абсассссцча Евзаєссзасауу 360 асасссддсс аадуддассаа дасодаваєс авапаусдасо чЕЧсостсЯяда сачсдосада 4720
ЕсЕддадчад зссодуассяа счадоаєдсад стос дсадо студдадсада дудсдаазаау 480 сесдаададе сестдаадає гЕєсстідстаад дчдаєссоддсе асссасесас гддастасаає 542 аєдаасідча гасдссадає доссууддааа дассісдаці дчасаддасаа баседаєсся 600 бассасдуєоо дсассасста саассддаау Сссааддодсс аддесастає сессуссдас 60 азціссасса здсассусста сстдсаасоад адсадсстса аддсстсодда сассоассаїд 720 бастасеубуд сасдсісваЯї судссосебЕс сасісссдоу дссададусас сседуєсасе 780 чЕсЕссеЕсвЯ абсаддадсс саааєськссї уасаазастіс асасаєстсс ассоатасоса 840
Ччсассідаас сссгддодсад ассуєсадес єсссссбЕсс ссссаааасс сагодасасс зо0 стсаєдаєсьі сссудасссс Едадуєсаса єдсубуддсад сддасадсдад ссасуаадає 360 сссдадсіса адсєсаасту стасосодас досусддаду Єдсаєаасдс саадасаагд 1020 ссасочдазад ассадбасаа саздсасчрас саєдсдаєса дсуєссісас сяЯясссвдсас 1080 саадастяддс сдаасадсаа дададчіасаад Єдсаадцєстї ссаасааадс ссісссадсо 1150 сссаєсдада азассасстіс сададссааа дадсадсссс дадаассаса ддєдсасасс 1200 сеідсссссає сссудчдаєда дсеідассаад аассаддєса дсстдасстд ссгддесаав 1250 чЧчасссссассе саадсудасає содссосадад содддададса аєудудсадсс ддадаасаас 1320
Сасаздасса судсстсссЯаїє дсєддасісс дасадасьсої СсвЕсссста садсазадсес 1380 а 1381 «2105 57 еру є,
«211» 295 «2122 РАТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Гуманізований тви016 «41005 52
Меє біц діа Рко Аза біп Тешп реп Рбе Бей Бей Пцеп Гей Тгробез Рко 1 5 10 15
Вар ТВі ТВх біу б1ц І)е Уа) Пе Тргобіп бехт Рго А1а ТБх Гей Зек зо
Те Зег Рго біу бій Агд А1їа Тпгорей бек Сув Акд А1а бек біц Двп
Уаї Тух бекх Тугк Іейп А1а Тгр Тут біп біп Був Рго біу біп Аза Ркго 60
Ак Гей Пец І1е Тук Рпе А1ї1а Цуз ТПх рец А1а бі б1іу 112 Рго А1їа 65 76 15 80
Ака Ре Бек біу Бек Сіу бег біу Тіх Авр Рпе Трх рез Тк І1є 5екг 85 90. 95
Бек реп бій Рго біз Авр Рвйе А1іа Ма1ї Тух Тук Сув сіп нів Нів Вех 100 105 110
Авр о Авзп Рхто Тер Тбг о РБе біу біп біу Ттрх Гуз Маї бі І18 Цузв біу 115 179 125 сіу біу бі1у бег б1у б)у б1іу С1іу бег сіу б1у біу б1у ТПх с1у січ 130 135 140
Уаї біп Іец Уаії біп бек б1іу Аіїа бій Уаї Пцуз Пуз Рго біу біш бег 145 150 155 150
Теца пув Ізе Бетг Сув Пув біу Зег біу Тук бег Ре Тйх Сіу Тук Азп 165 170 175
Меє Азп о Тгр оуаї Агуд біп Меб Рго біу цув біу рец біз Ткр Меє біу 180 185 1950
Авп 112 Авр Рго Туг Тук біу с1іу ТВг Тис Туг Авп Ага Пуз Рне уз 195 200 205 біу сіп Уаї біг І1е бег Аїа Авр Був Бек І1е Зег Трк А1їа Тук Те 210 215 220 ваги .
біп Тур Зех Бех Гей Туз А)а беї Азр Тіт А1а Меє Туг Тук Сузв А1а 225 230 233 240
Ак Бех Уаї біу Рго Рпе Азр бег Тгр біу біп сіу Тіг рец Уа1ї Так 245 250 255
Уаї Бех Бек Авр біп бій Рго цув бег бек Авр уз Тих Ні Тік бЗег 260 265 270
РЕсо Рго Сув Рго Аза Ркго бі Цей Пеш біу б1у Рко бек Уа1ї Ре їец 215 280 - 285
Рпе Рго Рго Пуз Рко Пу5 Авзр ТІ цей Меє І1е Бех Агуд тТрк Рко бій 290 295 зо
Уаї Тіп Сув Уа1 МУаї Уаі Азр Уві бЗег ців біц Авр Рго бій Уаї Був 305 310 315 320
Рпе Азп о Тгр Тут Уаї Авр С1іу Уа! біз Уаї Нів Азп Аїа Гуз Трг Гу заг5 330 335
Рго Акад бій сСіц біп Ту Авп о Бег Тр о Тух Аго Уа! Уа1і Бек Уаї1ї цей 340 345 з5о
Тнг Уаї теп Нів біп Авр Тгр Гей Азп о біу Туз бій Тук Гує Сув Був 355 зво 365
Уаї бех АвпоПуз А1їа цем Рхо Аїа Рхо Ії1е біз Цу5 ТПт Ізїе бек уз 370 375 380
А1ї1а цув біу Сіп Рго Агд Сі) Рго С1іп Маї Тук ТІ Геї Рго Рго Бек 385 390 395 400
Агуд Азр бій Гец ТБеоПпуз Абп о біп Уа! бехг беп ТВпх Суз Ббец Ууа1і Гуз 405 410 415 біу Рре Тугт Рго Зег Авр І1е Аза Уа! біо Тгр бід бех Авп с1у б1іп 420 425 430
Рго бБіц Ап о Авп Тук Був ТІ Тйх Рго Рго Маї Пец Авр бех АБр біу 435 440 4415
Бег Рпе Рпе Гец Туг Бех Гув Те Ті Уаї Авзр Був Бек Аку Тгр біп 450 455 460 біп сіу АБп Уа! Рпе бек Суз бек Ма1ї Меб Нів Сі А1їа Тем Нів Азп 465 470 475 480
Нів Тук Тс біп Пув Бех Гей бех Пец бек Рго сіу Був 485 430 «2105 53 «211» 356 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований ТВО016 «4005 53 -
Чссадсузад сдсаусвбадс дсаздссєдда дсададдіда аааадсссяд ачачссьста бо аадаєтЕсся дсзачоадаєс сздєсасеса гссастоддсї асаасаєдаа сесодЕдсос 120 сачаєдсссу ддааадуєстї содадсудаєу додсааїаєту асссесаєса Єодчеаднасе 180 асстасаасс дчаацієсаа доддссавададес астаєсіссу ссудасаадуєс саєсадсасс 240
Чдсстасссас ааєддачсвау сстдаадчоасс Єсоддасассу ссаєотаєта ссдсасдсдс Зоо ксадесодсс секЕскдассс стадоадссаа ддсасссвяд ксасбуєссо сссдад 356 «21025 54 «211» 143 2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» І «223» Гуманізований твО016 «вро» 54
Ме Сі Аза Рго Аїа біп Пе Ге Ре Пец Те Пец Гей Тер Бей Рко 1 2 10 15
Авр Тайг о ТВтІ с1у бі) І1е Уа1ї реп ТБх біп бек Рго Аза ТрІ Гей 5ег 20 25 30
Тем бЗвг Рко біу Сі Ат АТла Ту Пеп бех Сув Аку А1а Бех бій Авп
Уаї Тук Бех Тук Гей Аза Ткр Тук біп біп ПЦуз Рго біу сіп Аїа Рго зо 25 І210)
Акад пеп пес 11е Туг Рбе Аза Гуз Трк Те Аза бі б1у І1їе Ркго А1а 65 70 75 80
Агкд Ррпе бек біу бек біу бех біу Тік Авр Рпе Тйт Теп ТБг 118 Бех 85 90 5 бех Пец біч Рко бій Ар Рпе А1а Уа! Тух тТуг Су біп Нів Нів бехг 100 105 110 хі .
Авр о Авп Рто Ткр ТВх Рпе с1іу біп С1у ТВг Пуз Ха біо І1е Був біу 115 120 125 біу біу С1іу Зех б1у біу біу Сіу бЗех б1у біу с1у біу Тнк б1у 130 135 150 «21025 55 «2115 356 «212» ДНК «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тво016 «4005 55 дссадсдаду ЄосадсєЯає дсадессодда дсадзддеда ааазосссту ададіссста во аачзассссост огагододасс содссассса сссассдусс асаабаєдаа ссуоуєдсус 120 садаєудссся ддааасасстї одачіодаєд ддсаасаєсу аєссєсавва соддедосась 180 асстасазсс дадазадьєсаа дддссадуєс астаєстссо ссудасаадіс саєсадсасс 240 дсссрассідс аасодадсад сстдаадудсс їсоудасассо ссаєдкаєта сксдтдсосус 300 їсачьсудсс соссссадса ссдодддссаа удсасссісу ссастдеєссо сесуау 356 «2105 56 «2115 143 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «22075 «223» Гуманізований тво016 «400» 56
Месб бій А1а Рко А1ї1а біп Преп цем Рпе Пец Пей Гей Бец Тгр їв Рго 1 З 10 15
Авр Тік ТВгобіу бій І1е Маї Пеюш Тр б1іп бек Рго Аза Тих Гей бег зо
Тей бер Рго біу біз Ага Аза Тк Пец бек Суз Ака Азїа Бет б) Ап
Уа) Туг бек Тук Гей А1а Тер Туг Ссіп Сіп Пує Рко б1у біп Аїа Рко 60
Ак рей Пец І1е Туг Ре Аїа Пуз Тіг Пец Віа 013 б1у І18 Рго Аїа 65 70 75 80
Ага Рпе бег біу Бек біу бЗег біу Трг Авр Ріе Трг Теп ТБг І1е 5ег 85 зо 95
Зек Беш біо Рго бій Авзр Рпе діа Уа1ї Тухг Тут Сув б1іп Ні Ніз Бег 100 105 110
АБр о АБп о Рго Тгр Тк Рре біу біп бі1у Тс Пузв Ма1ї б10 І1е Був біу 115 120 125 б1у б1у Сіу Бех біу біу біу біу Бек б1у сіу Сіу біу Тк 6б1у 130 135 140 «2105. 57 «211» 356 «21225 ДНК «2135 Штучна послідовність «2202 «223» Гуманізований тТВО016 «00» 57
Ччссазсдада ЄдсадсєЯЧі одсадсссода дсадчаудїда азааусссод адчадеЕссстья бо аадаєсєссі отазодуаєс соудссасіса сссасгдадасс асзасаєоаа сгдадабусас 120 садаєдсссу ддагадудсст одачсодаєд ддасаастаєтоа аєсстбаєва ссоосодвась 180 асстасаасс ддаадєссвза додссадоїс астайссссу ссдасаадус сассадсасс 240 здсстассєодс ааєдаадсад ссєдааддес ссодасассо ссаєдбаєса седЕдсосдс зо
Есачісдасс сісЕсдасуїє стіудадссаа дадсассаєуд Есассдєсьс сессдад 356 «210» 58 «2112 143 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» . й «223» Гуманізований твОо016 «005 58
Меє 510 Аїа Рхо Аіа біп цей цем» Рпе Твц Бецш Бей їецй Тгтр теп Рго 1 5 10 15
Азр ТВх ТВг обіу біш 112 Уаї рез Т»г о Сіп Бек Рго Віа Трх Гей 5ег зо
Тез бБег Рго б1іу бі Агу А1а ТйтІ Це бвг Суз Акд іа бек бі Авп чаї Тук бек Тух Пе А1ї1а Ткр Тут біп біп був Рго б1у сіп Аза Рго зо 55 бо
Аг йеш Пе І1е Туг Рпе діа Гуз ТБг Пез Аза 015 б1у 116 Рко Аза 65 70 15 во
Аку Рпе бек біу Бек С1у бек с1іу Тру Авр Ріе Тлх Кеш ТПтг І1е бег 35 90 а5
Зек Пеп біш Рко бійп Авр Рре Аза Уа1ї Туг Туг Сузв біп Ніз Нів ек . 100 105 110
Авр о Авзп о Рго Ткр ТБк Ре с1іу біп біу Трг Пув Уа! бі тї11е Гуз С1Уу 115 120 125
З1у б1у б1у Бек б1у біу б1у сіу Бек б1у б1у біу сіу ТЕ 01у Й 130 й 135 140 Я «2102 59 «2115 356 «212» ДНК й «213» Штучна послідовність «2205 Ії «223» Гуманізований тВО016 «40025 59 . Ччстачсдадуоа єдсадссоадс дсадесіода дсададчєда аазадсссодд ададесссьд 62 задаєтсоск дгааддуаєс содсвбастса єссастддсЕ асаасаєдаа сЕдодЧчЕдсос 120 садаєдссся ддаазадассо ддадсаддаєд ддсзаєаєту аєссттаєса єчоєуасась 180 ассрасаасс сдаадсссаа оддссваоусс ассарссссу ссдасвауус саєсадсасо 240 дссіассідс аасодацчсад ссідааудсс ссддасассу ссаєціаєса стдгдсосас 300
Есадесдадсс сесЕсдасає сеододссаа досассаєчо Есастасссо стсова 356 «2105 60 : І «119 143 Й «2127 РЕТ . Й «213» Штучна посліДОВНІСТЬ «920» й «223» Гуманізований ткО016 «400» 60 ме біц діа Рго діа біп Гей Бецд РБе Тей Без Бец Гей Тгр о Тен Рго Й 1 5 10 15 .
Ввр о Тпх Тпх біу бій 11 Уаї їєсд Тру б)п Бех Рго Аїа Тпг їец Бех зо Й
Тви бВег о Рго біу біз Акд Аза Тс оБеш бЗег Суз Агу А1а бек сій Ап І уаї Тух Бех Тук Тез Аза Ткр Тук б5Біп біл БДуз Рго біу біп А1а Рхо з бо
АкЯ Ппем пеп І1е Тук Рне А1а Ццув ТНЕ Пец Аза сіц сіу І1е Рхо Аза 65 7о 75 во
Ага Рпе Бех с1іу Бек с1у Бек с1у ТБг Авр Рре Тр Пей Ту ї1е бег 85 90 95 бех бемс с1и Руо С1ц Авр Рбе А1а Уаї Тук Тух Сув Сіп Нів Нів Бех 100 105 110
Авр Ап оРко Тур ТБу Рпе с1у біп сіу ТБх Цув Маї січ І1е цув сіу 115 120 125 -
Ф1у сіу сіу Бех біу сіу сіу сіу Бех сіу біу сіу біу Тк с1іу І 130 135 140 «2105» 61 «211» 11 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність . «220» «223» Гуманізований твОоб016 «200» 61 І
АкЧч діа бек Сіц Авп Уа1і Тук Бек Тух їез А1а 1 5 10 . «210» 62 «211» 11 «21225 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований ТВО016 «400» 62 Й
Ак Тіт Бек бій АвпоУа1 Тух Бех Тук Тез Аза 1 5 10 «210» 63 «2115 5 «2125 РЕВТ «213» Штучна послідовність «220» й «223» Гуманізований тЕпо16 «400» 63 о1у Тух Авп Меє АБп 1 5 «210» 64
«2115 7 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тви016 «49005» 64
Рре Аза був тах Ппеш А1а січ 1 5 «210» 65 «2112 18 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність й «220» «223» Гуманізований твО016 «400» 65
Авп о І12е Авр Рко Тук Тук бсіу біу ТБх Тік Тут Авп Акд Пув РБе 1 5 10 15 цув 1У «210» 66 «211» 9 г «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» І «223» Гуманізований твО016 «400» 66 сСіп Нів Нів бет Авр АБвп Рго Тер ТБк 1 5 - «210» 67 «2112 7 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тТвО016 «4005 67 бех Маї б1у Рко Ріе Авр Тухг 1 Б «2105» 68 «21125 7 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність
«223» Гуманізований тТВус16 «4002 68
Бек Ма1 сіу Рго Рье Авр бех 1 5 «210» 69 «2115 7 «2122 РТ «2135 Штучна послідовність «2207 І «2235 Гуманізований тво016 «4005 63
Бек Мах Сіу Рго Мес Азр Туг 1 З «2105 70 «2115 23 «2122 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» Й «223» Гуманізований тво016 «300» 70 б1ч І1е Уаї Пец Тпг біп Зег Рго Аїа Тк Те бег Пец бек Рко 01уУ 1 5 10 15 біз Агу АТа Твк Гей Бек Суз «21025 71 «211» 30 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» Й «223» Гуманізований твоб016 «1005 71
Сіц Уаї біп їешп Уаї біп бек біу А1ї1а біц Уаї буз Був Рко біу сій 1 5 10 15 бЗег їецш Пуз І1е Бек Суз Був Сіу Бех біу Тук бек Ре Так 20 25 Зо «2102 72 «2112 15
«2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» . «223» Гуманізований тТЕоО16 «4002 72
ТЕр Тук біп біл Ббуз Рко сС1і1у біп Діа Рко Ахтуд Ге Тем Т1є Туг 1 5 10 15 «21072 73 «2112 14 « «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «22025 «223» Гуманізований ТтВО016 : «4002 73
Тер Маї Ахд біп Меє Рхо біу Буз с1у Гей б1з Тгр Меї б1У 1 З 10 «2139 74 «211» 32 «2127 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» , «223» Гуманізований ТВО016 «4005 74 біу Ії Рко Аїа Ак Рре Зег біу Бех С1і1у бех біу ТрІ АБвр Ре ТЬг 1 З 10 15 тей Тіт І1е бек бег Гей бій Рго б1и Азр РБе А1їа Уа1ї Тук Тух Сув 28 25 зо «2105 75 «2115 32 «2122 РАТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твоО016 «40025 75 біп уаї тп о тТіеє бБег Аіїа Авр ув бек Т1є Бех ТК Аів Тук Іви біл 1 5 10 15 тур Бех Бех Преп пув А1а бег Авр ТБх Аза Мес Тук Тух Сув А1їа Аг4д зо «2105 76
«9112 10 «21225 РВТ «2135 Штучна послідовність к2г20» Й «223» Гуманізований ТВО016 «4005 76 й
Рпе Сіу біп біу ТЬрх Пув Маї бі І1е Був 1 З 10 «2105 77 " «211» 11 «21722 РЕТ . х213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тво016 «4005 77
Тгр сіу біп б1іу ТНї Пец Уаї Тапг о Уаї бех бек 1 5 10 «2102 78 «211» 11 «212» РЕВТ . «2135 Штучна послідовність Й . «220» І . «223» Гуманізований тво016 «2005 78
Ттр Сіу Вк9 б51у ТБг Пец Уаї Трг Маї бек бек й 1 5 10 «210» 79 «211» 1500 «2122 ДНК «2135 Штучна послідовність «Р20» «223» Гуманізований тво016 «4005 79 аачсЕєссесд ссаєдудаадс сссадсдсад севсвстссс ссссдстаст ссддсессса 6о даїассасса дадазассдї уссдасасад ссіссадсса ссседесесє дЕСЕссаддес 120 дааададсса сссеєсіссвд ссдадсаауї даавааєусї асадстасеє авдсстадсас 180 саасадааас ссддссадудо бсстадуссс сесаєссаєс ссусагаадас сссаудсадаа 240
Ччааєєссад ссаддсссад сСоссадсдда боссоддасач астесасссь сассаєсаче зо0о0 адсссададс ссдаадаєтс Єдсадсесаї стассудссаас ассассссда єааєссовод 360 асаєссдодсс азоддассаа дасддаваєс вааводсадсу дсдосєсоад сядсодЧсдда 420 бриз ра сссасгодаб ссдодассяд Єдадотосад седусосаде стодадчсада засдаазаза 480 сссудадаче сессссоаздає соІсссдбаач одаєссодсс асссаєтсас соддстасавт 540 аєдчаассдаддч басоссачає одсссддуааа одссісчаді даасуддасаа саєбЄдаєсс 600 бассасодеч одсасвассіава саассддавад гЕсаадуддсс задссастає сеЕссдссдас ебо задеЕссаєса дсассдсста сссдсааєдчу аусадссєда асдссссдда сассуссаєд 720 сасвассдєуд сасасеісаче содсссеЕїсс дассіссоуод дсацдадсосас ссіддєсасе 780 сЕстосесбо аєсаддачсс саааєстьссс дасаааасьс дсасаєстьсс ассоєсдссса 840 чЧсассідаас костадабоо ассдбсадіо Есссіссссс ссосаааасс саадцчасасо 900 сссасдавстї сссддасссс сдаддеєсаса соссєдусуд содасуєдад ссасдаздас з60 сседаддіса адсссаваста дсасоєодас дасосддаду єдсаєсагідс саадасазад 1020 ссасдаваду адсадеіасаа садсасодбас собдбЯдЕса дсдвсстсас сдссссдсас 1080 садчастддс сдааєдасаа доадіасаад содсаадуїсс ссаасададс ссісссавдсс 1150 сссаксудада ааассаєбссс сааадссааа додсадсссс уадаассаса ддеЕдтасасе 1200 сеЕдсссссає сссуддаєда чдссдассаауд аассадуєса дссідассід сседуєсава 1260
Часесстасс саадсдасає сяссдбддаад соддададса габддусадсс ддадаасвас 1320 тасзадасса сусстсссдї дссодасьсс дасодссссі бсфеєссеста садсазвдсіс 1380 ассуєддаса адаусадуєд дсадсачоду аасаасстьєст саєусєссяЯяє даєдсаєчад 1440
Ччессстодсаса ассастасас дсадаададс сісессстЧі ссбссууусаа асуаєстача 15600 «2105 80 «211» 493 «212» РВТ 213» Штучна послідовність «2205» «223» Гуманізований ТВЦЧо16 «400» 80
Меє сіц А1іа Рго Аїта сіп ГПеп Бей Рре ей Геї Гей Бей Ткр Гей Рго 1 5 10 15
Авр Тпт Тпгобіу Сі тіє Уаї Пей Трек біл бек Ркго Аїа Тйх Гей бек
Тїес Бех Рго б1у біц Ак А1їа ТБ Гей бег Суз Агу А1а Бер бір Авп
Уаї Тух Зех Тук Гей Аїа Тер Тук біп біп Цуз Рго б1у біп Аїа Рго 35 (39)
Ася без бед Т1еє Ту Рпйе Аза Бу Тік Без Аза біц б1у Т1їе Рго А1а
65 70 15 80
ВАгу РБе бБег біу бек Сіу бЗех біу Тпг Авр Ріре Трг Гей ТП о І1їе бег 85 0 35
Бек Пей біц Рхто бій Азгр Рре Аза уаї Туг Тухк Сув біп Ніз Нів бег 100 165 110
Авзр Азп о Рго Тер ТБх Рре сіу біп б1у Тех Гуз Ма) бій 11е Гуз б1у 115 120 125 біу біу шіу бек б1у Сіу Сіу бІіу бБеї с1у б1у біу біу Тпг біу 51и 130 135 1410
Уаї біп Гей Уаї біп Зек с1іу Аїа біш Уаї Пуз Був Рко біу біц бег 145 150 155 160 їем цув І1е Бех Сув Гув 51у Бек б1у Тук Бех Ре Тіх біу Тук Авзп 165 170 175
Меє Ап Тур маі Акуд біп Меє Рхо біу Гуз С1у Пес бій Тер Меє с1у 180 185 190
Авзпо11е Азр о Рго Туг Тут біу б1у Тіт ТПт Туг Авп Ах Був Рре Був 1955 200 205 сіу біп Маї ТНК І1е беж Аїа Авр пуб бег І1е Ббег ТВк А1їа Тухк Гей 210 215 220 біп Тур бек бек лей Ппув Аза бБехт Авзр ТПг А1а Мес Тут Туг Сув А1а 225 230 235 240
Ага бек Уа1 Сіу Рко Рпе Авр Бей Тгр 51у Аку Ссіу Тр леп Уа1! ТЬг 245 259 255
Чаї бек бБет Авр біп бі Рко уз бек бЗег Азр о Буз Тбг оНіов ТК бЗехг 260 265 270
Рго Рго Суз Рхо Аїа Рко 515 Іей Ге» сіу Сс)у Рго бек Уа! Ре Ієй 275 280 285
Рпе Рго Рго МПув Рго Пув Авр Тік лем Меє І1е бег Агуд ТПхг Рко бій 290 295 300
Уаї тик Суб уаї Уаї Уаї Авр Уві бех Ніз бій Авр Рго бі Маї цув 305 310 315 320
Рре Авзп Тер Тук Уаі1ї Авр біу уаї біч Уаії Нів Аєп Аза був ТБт Гуг
325 330 335
Рго Аг бій бій біо Туг Авп бег Тпх Тух Аку уаї Уа1ї бек Уаї Тез 340 345 350
Так Уаї реп Нів біп Авзр Тер ув Авп о біу уз біц Тук Буз Сув Гуз 355 зво 365
Маї Бех Аво Був А1їа Тем Рго Аіа Рхо Ії11е Сін Цуз Трк Іїе бек Гуз 370 375 380 віа Буз біу біп Рго Аг Січ Рго біп Уа1 Туг Тпг Пец Рго Рко 5ег 385 390 за5 400
Ага Авробій Гей ТПх Гуз Азо біп Уа! Зег Тез ТБ Суз цей Уаї Гу 405 410 415 с1у РБе Тук Рго бек Авр І1е Аза Уаї сі) Тер Сі беї Азп б1у біп 420 425 430
Рго бів Авп Авп о Тут був ТОт Тк Рго Рго Уа1! цей Азр бег Авр біу 435 4і4а 445
Бек Ре Рпе Пец Тук бек Пуз Преп ТБг Уаі Авр ГЦуз бВех Агд Тгр б1п 450 455 460 сі сіу Азп Уа1 Ре бЗег Су бек Маї Меб Нів Сіц Аїа Пец Ні Авп 465 470 475 180
Нів Тук ТіПхг біп Пуз бБеї Гей бет еп бек Рго б1у Гуз 485 490 «210» 81 «2112 1494 «2122 ДАК «2135 Штучна посліДОВНІСТЬ «2207 «223» Гуманізований твО016 «400» 81 агвадсісдсся ссагдоааадсе сссадсісау стбсЕсткес єсскасвась стадсесссса Бо часассассо садаааєссоає Чісдасасад ЄсЕссадсса ссссдЕсссе дососсауде 120 дагададсса сссестсоссд ссдадсааді дазааєавЕс асадскаств адсстодкас 180 саасадваас седудссаддс сестададсьс сесаєставс ссссазавас сесадсадаа 240 чозаєсссад ссаудтссач годсадсада Сссаддасад ассесастстї сассаєсачео зос ассстададс сідгвадаєсс гасадетєтає сасіуссаас ассатєссуа сааєссобсдд збо асаєссодсс аздудассва дЧідовааєс ааачядусдудсо усадсєсод9 содсоЧЕдда 420
Есєдоадодад сдсдадоастад счадчатодсад ссдобосаде стддадсача оуєдгааааад 480 сесодададс ссссдаадає сСісссдЕаад дудаєссЯядії асссаєссас Єадстасаає 540 аєЄдаасєдуд сдсоссадає дсссоддоааа сдссєддаде дазгедоадсза тасевсаєссх 600 жЖаєтакодчіо дбастзасса сасссачаау ссссадоадсес адуєсастає сессодссдас 6во аадєссасса дсассдядссса ссстодсааєдоа адсадссєда аддесссоуода сассдссаєд 720 таєсастдву сасусісацчі садсесстаєа часьассдад ассодсоддсас сстадісасе 780
Чдесессотсвоо абсаудадсс саааєстеся дасаавасьс асасаєсссс ассубєдсосса 840 дсасседаас СссрдодЕду аседісадес Еєссестссс осссаааасс сазуддасасо зоо сісасцдассї сссудассос Єдаддісаса єдсосддбо саЯдасуєдад ссасдаздає 9360 сесЕЗадчоєса аусссаасту дсасуєодас досчсддаду сдсасаасдс саадасазад 1020 ссдсодчаду адсаустасаа садсасдсас субдсддєса дсдєссьсас суссстдсас 1080 сзоддасьдадс їдааєдасаа ддадстасаад бдсаачдєстї ссаасаааче ссесссадсс 1140 сссаєсдада аазссаєссс сазааудссааа додсозодссос дадаассаса дадсугасасс 1200 седсссссаї сссдуддаєса дсідассаау аассвддеса дссідассвд сссддссава 1260 часЕсстаєс сазадсдасає суссдіддад сддуададса асадосадсс удадаасаас 1320 їасаасасса суссссссуї одстоддасссс дасаядсссс Естсссссва садсавусєсеіс 1360 ассдєддаса ададсадусд Чдсадсачода аасоесьссї сасосессЯЄ засдсасдад 1440 дсссЕдсаса ассастасас дсадзададс сессссстує стссоддєаа абсоа 1494 «210» 82 «211» 493 «2125 РВТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тКО016 «4005 82
Меє біз Атїа Рко Аїа Сіп Ге Тео Рпе Пеп Тей ГБелп Гецп Тер Гец Рго 1 5 10 15
Азр Трпг о ТБтх біу біш Ізїе Уаіїі цей Тпгобіп Бек Рго А1а ТПї Тєш 5ек
Пеп бехг Рко біу б1ш Акс Аза Так о Пеп бег Сув Акд А1іа Бех бій Авп
Мма1ї Тук бек Тук ви Аїа Тгр Тух С1іп біл Туз Рго біу біп Ата Рго во
Вхя Пем опе Ї1е Тух Рпе А1їа Пув Тру Тем Аза С1у С1у І1Те Рко Аїа 65 70 75 зо
ВхЯ Рпе Бек б1у Бек Сіу бег біу ТПІ Авр Ре ТПпг цей ТПх ї1е бек 85 з0 95 бек це» бій Рго біц Авр Рпе А1а Уа1 Тук Тук Суз біп Ніз Нів бег 100 105 110
Авр АвпоРго Тгр о ТвБх Рпе Сіу біп біу ТБг Туз Уаї Сі І1е Буз біу 115 120 125 сіу б1і1у б1у бек біу СсСіу біу Сіу бек сіу біу сі1у С1у Аза Бех біц 130 135 140
Уа1 сіп бец уаї біл бБег б1іу А1а б1іц Уаї Туз Пує Рто біу бій Бек 125 150 155 160 їви Був І11е бег Сув Був Сіу Бех б)іу Туг Зег Рне Тік бЗеї Тук Авп 165 170 115
Мес Азп Тгр Уа1і Агуд біп Ме Рго б1іу Пуз ббіу Тем 01 Тгтр Меє С1у 180 185 190
ВАзп о т1іе Авр о Рго Ту Тут б1іу біу ТП Авп о Тут Аза біп Пуз Рпе біп 195 200 205 сіу Сіп Маї ТЬх І1є Бех А1а Азр Пув бех І/е бег Твг Атїа Туг Геч 210 215 220
С1іп Тер бБегх бек Теп Гуз А1а бек Азр Тіг Аза Меб Тут Тук Суз Аа 225 230 235 . 240
Аху Бек Уаї біу Рго Меб Азр Туг Ттр Сб1у Агд Сіу ТК пе Ууаї Те 245 250 255
Ма! Вех Зет Азр сіп Сі) Рго Буз бЗег бек Азр цуз ТПг Ні Тих бег 260 2655 270
Ріо Рго Суз Рго Аза Рго Сі Пец Гемш сіу б1іу Рхо Бек Маї Ре їй 215 280 285
Рпе Рго Рго Пуз Рко Був Авр ТпІ Бец Меб І1їе бБег Агуд ТК Рго бій 290 295 оо
Маї ТВх Суз Маї Маї Уві Авр Уаї Бех Нів біб АБр Рко біз Ууаї Туз 305 310 315 320
Рпе Авзп Тгр Тук Уа1 Ар біу Маї біз Уаї Вів Азп Аза Був ТБ Гув 325 330 335
Рго Аха бі бі біп Тут Авпп обех Тпх Тухк Вгу Уаї Уаї Бек Маї Тез 340 345 350
ТвгоУаї Гец Нів 51п Авр Тгр Гей Азп о біу Пув бі Тух Був Суз Був 355 360 365 уа1і1 бЗег Авп о Пувз А1їа Теп Рко Аза Рго І1є біо Був ТПх І1є6 бек Гуз 370 375 380
Аїа пув біу біп Рто Ах бій Рто сіп Уаї Тух Трх Пер» Руо Рхо бех з85 390 395 400
Ага АБр бій пеп ТпгоБув АБпобіп Уа1і бек ГПеп ТБІ Суз Гей Ууаї Був 405 410 415 білу Ре Тух Ркго Зеї Азр 116 Аза Маї біц Тгтр біс бек Авп с1іу сій 420 425 4з0
Рго біз АвпоАвп о Туг Пуз ТВБх ТВ ого Рхо Уаї Пе) АБр бег АвБр б1У 435 440 145 бек Ріпе РНе Тео Туг бег Пув Тецп ТВт Уа1ї Авр Цув бег Ага Тгр о сіп 450 455 460 біп біу Авп уаї Рпре Бек Сув ВЗек Маї Меє Ні Сі Аїа Брец Нів Аби 465 470 475 4890 нів Туг Тржх біп Був бек Пе) Бет Пез бех Рго біу Гуз 485 190 «210» 83 «2112» 1476 «212» ДНК «2135 Цтучна послідовність «220» «223» Гуманізований тву016 «400» 83 аадссїдссд ссаєддавудс сссадсодсас стестсвссс ссстдссаст стдддсьссса бо часассассд дадчазассої чдчссодасасад сссссарсоса ссстдсссіс дісєссадде 120 дгаадацеса ссосестсстд ссдадсаачі дадазаєцетєс асаадстастс адсстддсас 180 саасадагас спгддссадус сссіаддсвс сесаєстаєЕ сЕдсаааває сттадсадаа 240 чоадассссад ссадасссад гдасадсдує сссоддасад асстсасусь сассатсвос Зоо адсстадзус ссдаадавєсс Сосадусссає бассдісаас ассаєссосода їааєссоєду зво асасєсддес аздоддассаа дусодаааєс ааазясодсо одсуссєсуду сочеоотдда 420
Ессддадчад дсдададсод адчачдаусс адсуадоаєудс адстодьдса деЕссудадса 480 дадасдаааа годсссоадада діссседаау аєсеєсстьота адудзіссодд стасссабьс 540 ассдадстаса абасдзассуд дососдссад аєдсссоддоа авддссісчда асодаєсадас 600 аасаєсдаєо ссстаєссасуд сдосассасс стасаассодда адсссааддада ссаддесасо 660 ассіссдсосу асзачіссаї садсассосс басссдсазу дадсауссто аадодсстісод 7209 асассудссає дтаєтасьує дсасусссад ссудусссіїї сдасссссо9д дассадодса 780 сссіддссас суєстсдадс содсссассуї дсоссадсасс сСдаасьссту ддсадассує 840 садісЕєссЕ сбссссссса ааасссагду асассстсає дассєсссдд асессстдадд 900
Есасасдсуї ддгдасоддас дсдадссязся аадассстіда одісаадссс аассодсасу 960 сддасадсЯс одаодзоадедсає аасодссаада сааздссоса ддаддадсад басзвзасадса 1020 суєассусдб дуссадсуєс сосассуссс сдсассаодда ссддстдаає досааддадче 1080 асаадсдсаа дуєсЕссаас ааадсссьсс садсососсає сдадавааасс аєсссссаваад 1140 ссазадодса дссссдадаа ссасадоєдс асасссідсс сссассссод дассадесда 1200 ссаадаасса дуєсадссосо ассесссв9у гсааадусь: ссабссаадс дасаєсодссд 1260 кодадсоуда уадсааєсдод сауссудада асаассасаа дассасясст сссоцоаскод 1320 ассссудасдд ссссстсеєс сстссасадса адсісассує одасаададс аддєдасадес 1380 асдадуаасує сЕсстсабаяс Сссоєсаєдсе асдаддсссь дсасаассас сасасасада 1440 ададссісьс сставссссд ддсазаєдас їстача 1476 «210» 84 «211» 485 «2122 РЕВТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тТВо016 «400» 84
Меє сі» АТа Рко Аза біп Пеп Пец Рре Бе Тей реп Тец Тгр Тез Ркго 1 З 10 15
Авр Тіг о тТбгобіу бі ч11е Уа1ії рем Тр Сіп бех Рго Аїа ТБтг Пец бег зо
Теза бек Рго б1у С)1ц Агу Аза Тпгопей бек Суз Акд Аіїа Бех бій Авп
Маї Тук бек Тух Тїеш Аза Тер Тук біп сіп Гуз Рго б1у б1іп Аза Рго віп, ве бо
Атс о йей рез Т1є Тук Рпе А1а Пуз Тс о Без Аїа бі біу І1їе Рко Аза е5 70 75 во
Аг Рпе бек зіу Бех біу Бек б1іу Тих Авр РПпе Тпг Бей Тр оІ1е бег 85 90 35 бек Тез бій Ргро бі Авр рРле А1та Уаї Туг Тук Суз біп Нів Ніз бек 100 105 110
Авр Ап оРко Тгросбпх Рпе біу біп біу ТК Туз Ма! сій І1е Пув біу 115 129 125 б1у біу б1у бек біу біу біу Сіу Бех біу Сіу біу б1у бек сіу б1іу 130 135 140
Ссіу діа Бех Сіп Уаї Сіп пес Уаї біп бег б1іу А1їа бій Уаї був Пуз 145 150 155 160
Рго біу бі бек Теп Пув І11е бек Сув цув Сіу бек біу Тук бек Ре 165 170 175
Тк обіу Туг Ап Меє Авп Тгр Уаі Агу біп Мес Рго біу Гув біу їеч 180 185 190 б1іп Тгр Меїє Сіу Азп І1е АБр Рхо Туг Туг Сіу сб1іу ТБІ Тік Туг Азп 195 200 205
Аку Пув РБе Пув с1у біп Ма1ї ТПх І1їе Зег Аіїа Азр Гуз Бек І1е Бек 210 215 220
ТЕ оАза Тук Пец біп Тгр Бех Бек цей Був Азїа бег Азр ТПІ А1а Меє 225 230 235 240
Тук тТуг Сув Аза Агд Бек Уаї біу Рго Рпе Ар БбБег Тер б1іу 5іп б1у 245 250 255
Твг реп Маї Тр Уа) бек бег Суз Рго Рго Сув Рко Аза Рго б) Тем 260 265 27 їецд біу біу Рхо Зеї Уаї РБе Гей Ре Рко Ркго уз Рко Дуз Аво Тит 275 280 285 їеи Меж тТ1е бек Ак Ту Рко бій Уа! Тих Сувз Уаї Уа1і уаї Авр Узі 230 295 00 - бег Ніз біз Авр Рко біо Уаї Був Рье Азп Тур Тух Уа1 Ар біу Уаї1ї
05 310 315 з20 сів Маї Нів Авп Аїа Пув ТогоГув Рго Ага біш 510 біп Туг Авп Бех 325 330 335
ТЬг Тук Агуд Уаї Маї Бек Уаї Пеп ТПг УМаї їец Ніз Сіп Авр Тгр Гец 320 345 з5о
Авп біу цув 51іп Туг Пуз Сув Пуз Уаї Бек АБп Буз Аза Пемз Рко Аза 355 360 365
Рго І1е бі Пув Трг оТ1є бек Буз Аіїа Гув біу біп Рго Акд 510 Рго 370 375 380 біп Уаї Тук ТБх Пец Рго Рго бек Агкуд Авр б1ш Тей ТВк Був АвпоСіп 385 590 395 400 уаії Бех Пес Тат Суз Бецш Уаі Пуз Сіу Рпе Туг Рхо бек Авр І1е Аїа 405 410 415
Уві біц Тгр біп Зех Авпобіу біп Рго с1іц Азп о Азп Тут Пув ТНІ ТЕ 420 425 430
Рго Ркго Уаї Пеш Авр бек Авр б1у бБег Рпе Рпе Пец Тук бБег Пуз Гей 435 440 445
Тьк о Ма1! Авр Гуз бет Ак Ттр біп біл біу Абвл Маї Ре беї Сув бек 450 41455 460
Уаї Мес нів біч Аза Тео НіБ Авп Ні Тух Тах біп Був бБег Тез бег 465 470 475 480
Іец Беї Ркго б1у Був 485 «210» 85 «2115 1494 «212» ДНК «23» Штучна послідовність «220» , «223» Гуманізований твОб16 «1005 85 заадсссудссу ссабддаадє сссадсєсау сесстсброс ссстастасо стодсссоса бо часассассу дадааассує дЕсдасасад сСсЕссадсоса соседбсвьЕЕ дЕстссачдчас 120 зааададсса сссосісссд ссдаасааусо сазаасуєсс асадссастї ассстоддтас 180 саасадааас сстзоассаудс сссеваудсес сесаєстаєе бЄсдсааааас сссадсадаа 210 такти ТЕ ддаасєссад ссадчдієсад єдосадсода сосудддасад асессасісї сассаєсадс зо задсстададе ссозадаєть тосадсбтат баседссвас аєсасеЕссса баакссовад 360 асакссддсс аадодассав задсочдавасс аагадсодсо чЕсаЯсьсода содедасода 422
Еседдадудаз дедадассод Єдаддєдсад ссдобосаде ссодадсача чд-давааваач 480 сесодададі ссісЕдаадавє Сссосбдсаву ддаєссудсь асусабісас сдассасаве 54ас асовасіЯао99 Сдсоссадає дсосддазаз ддссєдааді доаєодудсаа баставессь воо0 каєваєсодсу дсастасста саассудаад Еїсааодддсс аодєсасстає сЕссдссцдас 660 аадчессаєса дсассдоста сстдсааєдд аусзодсстда ацуссєсдуа сассцдосаса 720
Басіастдтд сасусісаус судссссато дастаседда дссдсудсас сстоуєсасе 180 аЕссссЕсвЯ аєсаддадсс саааєсстстї дасаааасес асасаєсєсс ассябассса 840 дсасседаас ссстоддусуд ассдєсацчєс сбсосбсрісс ссссаавасс сааудасасс 900 сІсаєдаєся сссддасссс бдадуссаса сдсуєдодсоад сддасяасдад ссасуаадає 960 ссєдаудуєса адсссзассд дсасуєддас досодсдуадуд сдсаєааєус саадасаавд 1020 ссдсдодаду адсадсасаза садсасадтас сусуєоадіса десубссісас сусостдсас 1080 садчасьдодс савзасудсва ддадсасаау содсвзадодєст ссвасавадс ссосссадес 1140 сссаєсудада ааассацскс сааацссаваада додсадсоссс дадаассаса дадгдбасасес 1200 сЕдсссссає сссодддчасда дссдассвзад аассадоєса десідасссЯя ссідоуїсава 1260 дсессестаєс сазусуасає содссугудад сдддададса агудоддсадсс ддадаасаас 1320 тасаачасса сдссєсссуї дсеодасесс дасояддсеєсся ЄссЕсстісса садсзачсьс 1380 ассуєодсаса ададсасачіо дсадсадуду аасуєссьсссе саєдсьссдє дасосаєчач 1440 дсЕссдсаса ассастасас дсадаададс ссстссссос сеіссоддусаа аєсда 1494 «210» 86 «2115 493 «212 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» Гуманізований тво016 «400» 86
Меє бі Аїа Рго Аза біп Те Пе Рпе еп Без Грей бе Ткр Бе Рхго 1 5 10 15
Авр Тк Тах біу бій ї11е Уа1ї Цей тТрІ Сіп бЗег Рго Аїа Тк Цей бек зо їеп Бег Рго сі1іу біз Ахд Аза Тпг о Пем Бек Сув Аку Тпг Бек бій Авп
Ууаї Тух бек Тук Тем Атїа Тур Тук біп біп Буз Рко біу біп А1а Рго зо 55 60
АгЯ4 Тез Гпез Т1е Тук Рре Аїа ПЦувз Трху Без Аза бі) б1у І1е Рго А1Та 65 70 15 80
Агкч о Рре Бек біу бБетх б1у бех біу Тк Авр Рпе Тк Гей ТпПг І1е 5ег 85 90 95
Бек Без бі Рго біц Авр Рпе Аза Уа1ї Тук Тук Суз біл Нів Нів бек 100 105 110
Авр Авп о Рго Тгр Тк Рпе б1іу біп б1іу Тбг Пув Уа) біз ІчІ1е Був б1Уу 115 120 125 с1у біу біу бек біу б1іу с1у б1у Бек с51у біу біу біу Аїа Бег бі 130 135 140 уаї сіп Пешп Маї біп Бек біу Аїа сі Уаї Буб5 Пцувз Рко біу біц бех 145 150 155 160
Теч пув І1е бег Сузв Пув біу бег біу Тук Зех Рпе Тих б1іу Тук Азп 165 170 175
Меє Аво Тгр оМаії Аку біп Мес Рко біу пу біу цей бі Тур Мех б1уУ 180 185 190
Азп ої118в Авр Ргро Тук Тук біу б1у ТБг ТБг Тук Азп Акд Пуз Рпе Був 1935 200 205 біу біп Ма1ї Трх І1е бек А1Та АБр Пув Бек І1е Бек ТБг Азїа Тук Гечц 210 215 220 біп Ткр Бек бБет Геи Пув А1а Бек Авр Так А1їа Меб Туг Тук Сувз АтТа 225 230 235 240
Ака бек Уаї біу Рго Мебс Ар Тут Тгр б1у Агуд біу ТБг Тез Уа1ї ТОг 245 250 255
Уаї бек Бег Азр біп бій Рхо пуб Бех Зекг Авр Був Тіт Нів ТБг Бег 260 265 270
Рго Рго Сув Рго Аза Рко бі Тед Гей Сіу б1у Рко бБеї Уаї Рне Геч 275 280 285
Рпе Ркго Рго Пув Ркго Шпук Авр Трг о Тец Меб І1е бек Агу ТОт Рго 615 290 295 зо уаії Трг Суз уаї уаї Ма1 Авєр Уаї бЗекг Ніз си Авр Рго Сій Уаії Був 305 310 315 320
Ре АБп оТгр о Туг Уаї Абр о біу уа1і 010 Уаї Нів Азп Аза Був5 ТПг Був 325 330 335
Рго Аг 510 бід біп Тук Авп бек Тк Тук Агуд Уаї Уаї бек Уаї Гей 3Зао 345 350
ТагоМаії Тїей Нів біп Авр о Тгр ей Азп о сСіу Пув біз Тух Пцув Сув Туз 355 360 й 365 уаї бег Аєп о цув АТа Те Рго Аза Рго І1е біш був Тс Ії1е Бег Був 370 375 зво
А1їа пув б1у біп Рго Акд бій Рко біп Уа1! Туг Тік Бей Рго Рго бек 385 3980 395 400
Ах Авр бій Пе Тк о Був Авп о біп Хаї бек Геш ТБх Сув Теп Уаї Був 405 410 415 сіу РБе Тук Рго бек АБр І1е Аїа Уа1ї бі Тгр бій бег А5хп б1у сів) 420 425 430
Рго біз Абп о Азп о Тут Був ТВг о ТБт Рко Рко Уа1 Гей Азр бек Азр б1у 435 440 445
Зек Рпе Рце Ппей Тух бек Туз Гей Трї Ма1 Азр Гуз бек Агуд Ткгр сСіп 450 455 460 біп біу Азп Уаї Робе бег Суз Бек Уа1 Меє Ніб5 біз Азїа Тез Ніз Авп 165 470 475 480
Нів Тух Тих біп Був Бек Ген Зет Пеп бек Рко біу Був 485 490 «210» 87 «7115 1294 «212» ДНК «213» Штучна послідовність «222» «223» Гуманізований твро16 «4005 87 аадсеєсдсесу ссаєдддаадс сссадсєсау ссвсесетсєсс Есседссася ссддсессса 60 дахтассассд зідЗааваєсоє усєдасасад сСстссадсса состоуєськє дЕсСЕсСсадос 120 чааацдадсса сссістосід ссдаасаадї чзааааєдЕвє асаостассс асссєддсас 180 савсадааас стдуссадоаас ссстададссс сьсаєсстасс сстасаазазас сссадсадаа 240 чдаассссач ссадаєєсад Сддасадсода сссосцдасад асессассст сассаєсаде 300 азчссрададс сідаачцаєсс бдсадсесає сасоуссаас аєсавьссда свабсссосФау 360 асаєєсдудсс аадоддассаа дусадаааєс азасоєудося дсддсісуду садсдаєада 420
Ескададозу сосадоддссад судзаадедсад стіддсдсаде ссддадсада додсдаазаад аво сссудадчаці сестодаддає ЕЕсседсаад ддаєссудЕє асесаєєсас гадссасаає 50 аєааассода сасуссадає дссссаддаза дудсстадачу ддасудоасаа саєєдаєсся во кассаєудеЕд дсастасста савассддаау є ссазадасес аддссастає сессодссдас 6ео аадеЕссаєса одсассдсста сстдсаасуу зодсадссіда асуссєсуда сассдссаєа 720 таєсассдво сасосссаує сдуссссасу дассасссуд дссадсодсаєс ссеудісасе 780 дФЕссссостд ассаддадсс саааєссссї дасаааассс асасаєсьсс ассуєдесса 840 дсассєдаас ссстдачесдЧч ассдісадьс сЕссессЕсс ссссаааассо савдузсассо 900 стсабдаєсі сссудассссо сдаддісаса сасоєодЧчЕда єодасуєдад ссасуазадає 960 сседаддєса аасісаассу драсосодас дасосддаду сдсаєваєос саадасзаад 1920 ссадсдддадоа адсадсасаа садсасубас суєдєдуаєса дедЕссвсас сдЕсседсас 1080 садудасіддс сдааєдоасаа оддадсасаау Єдсзадусєсї ссаасааадс ссісссадос 1140 сссаєсдада ааассаєстс сааадосава додсадсссс дадаассаса дугутасасс 1200 седсссссає сссуддаєда дссодассзад аассадуєса чдсстдасстд сстоддаєсаза 1260 зчУсеєстаєс сааусдасає соссуєудад сододадауса асдудсадсес удадаасаас 1320 тасаадасса сдссесссої десддасєсс аасадссесе сЄсЕсссесва садсзадсьс 1380 ассдсадаса адзосадчуєо усачсазодуду засаасссєст саєсуссссує даєдсаєдад 1440 дсессдсаса ассасстасас одсадаацадс суссссстдЕ ссссдддсаа аєча 14584 «210» 88 «211» 493 «212» РЕТ х213» Штучна послідовність «220» І «223» Гуманізований тКО0016 «200» 88
Мес біш діа Рго А1іа Сіп лей їей Рбе Гец Тем пей Бей Тгр реп Рго 1 5 10 15
Авр Тіт Тпг о бСіу сій І1е Уа)! Гез Тк біп бег Рго Аіїа ТІ Гец бег 29 25 зо
Теп бек Рко біу бі Ага Аза Тпх Тв Бех Сув Акд ТНг бек бій Ап
Уа1і Тух бБеї Туг їеш А1а Ткр Тух б1іп біп уз Рго Сіу біп Аза Рхго 90 59 во
Ага Пей Бей І1е Тух Рбе А1а Бу5 ТЬх Геп Аза 0ійп біу Ізе Рго А1а 65 70 78 80
Аг Рпе бБет с1у бех біу Зек біу Тік Азр Рбе Тпх Тем Тлу І1е Бех 85 зо 95 бег Ппеп бій Рко С1іш Авр Рле Аїа Уа1ї Тук Тук Суз біп Нів Нів бег 100 105 110
Азр Авп Рко Тур ТБк РБе біу біп біу Тьї Був Маї сіш т11е Був б1у 115 120 125 біу с1у б1у Бек б1у біу б1у Сіу Бек біу сіу б1у біу Аза Бек біц 130 135 140
Уаї біп Ггец Уаї С1п бек бі1у А1а біс Уаї Буз Буз Рто біу бій бек 145 150 155 160
Пец Агуд ч11е бек Суз пуб біу бек б1у Тук ет Рпе ТБ біу Тук Азп 165 170 175
Меє Аво Тер о Ма1 Агу Сіп Меб Рго б1іу Був б1у Те» бі Ттр Меє б1у 180 185 150
Авп о І1е Ар Рхто Туї Туг б1у сіу Трї Тпг о Тук Азлп о Агу Ппуз Рпе Був 195 200 205
Ссі1у біп Уаїі ТЬІ І1їе бБег Віа АБр руз беї І1е бБег Тпг А1а Тут Геч 210 215 229 біп Тер бек Бек Пец Був А1їа бек Ар Тіг Аза Меє Тук Тук Сув Аза 225 230 235 240
Ако Зег Уаі біу Рхо Меб Авр Тух Тгр бзіу Агд4 сіу Трх Тец Уаї Трх 245 250 255
Уаї Бек Бек Авр біп біп Рко Пув беї бек Авр Був Тіг Ніє Тіг Бек 260 265 270
Рго Рко Сув Рго А1а Рго бій Пец Пец біу сіу Рко бек Уаї Рре Ггец 275 280 285
Рпе Рго Рго Ппуз Рго Гуз Авр Тпх цей Мес І1е бег Агу ТП Рко б1и с ват,
290 295 - 300 чаї тТВх Сув Маї Уаї Уаї Авр Маі бек дів біз Авр Рсо біс чаї уз 305 310 315 з20
Рпе Азп о Тгр Тут Маї двр біу Уа1ї б1п Хаії Нів АБоп А1а Пув Трх Був 325 330 335
Рго Ага бі бій біп Тух Авп Зек Тпг Туг Агу Уаі Уаї Зек Маї Те 340 заз 350
Тпг Ууаї реп Нів б5іп Авр Тер Бецш Азп о 5іу Був біо Тух Буз Суз Був 355 360 365 чаї бет Азп Гуз Азїа Ген Рго БА1а Рко І1е бій пуз Так І1е бек Гуз 370 315 зво
Аза пуз біу Сіп Рго Акуд б1з Рго біп Уаї Тук Трх Бе Рго Рго Бег 385 390 85 400
Аху АБр обі Гец Ті Пув Авп біп Уаії бехт Печ ТП Сув Пец Маї Гуз 405 410 415 біу Рбе Тух Рко Бек Азр І1їе Аїа Уаї бі Тер біш бек Авп біу сіп 420 425 430
Рхо 51п Авп Авп оТуг Був Тпк ТВг Рго Рхо Уаї Темп Авр бек АБр Сс1у 435 440 445 бек Рпе Ріе Пе Тут бек Гуз Ме Тпг Маі1 Авр Був бБег Аку Тгр біп 450 455 460 біп біу Авп Уа1 РБе бег Сув Бех мМаї Меє Ні5 Сі) А1а Пец Нів Ап 165 470 ат15 480
Нів Ту Тпх біп Пув бек Ге бек Мей Бек Ркго 01у Гуз 485 490 «2105 89 «211» 45 «212» ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «323» Гуманізований ТВО016 «41005 89 чадсссваає сЕбдЕдасаа застсасаса сЧсссассдїє дссса 45 «210» 20
«211» 15
«2125 РТ
213» Штучна послідовність
«?20»
«223» Гуманізований тврб16
«4005 з0 біц Рго Пуз Бек Сув Азр ГЦув Ті Нів Трг оСув Рго Рго Сув Ріо 1 5 10 15 «2105 391 І Щі «211» 45
«212» ДНК
«2135 Штучна послідовність
«220»
«223» Гуманізований тВо016
«4ро» 921 дадсссааай сссстдасаа аасісасаса содбссассдявє дсоса 45 «2105 392
«211» 15
«2125 РЕТ
«2135 Штучна послідовність
-220» й
«223» Гуманізований ТВОб16
«4005 32 бій Рто Пу5 Бег бек АБр Пув ТІ Ні ТБтї Суб Рго Рго Сувз Рго 1 І) 10 15 «210» 393
«2115 45
«2125 ДНК
5213» Штучна послідовність
«2207 ,
«923» Гуманізований тТВ0016
400» 93 дадсссваає сЕєссдасаа аасссасаса хдЕссассує дсеса 45 «2105 94
«211» 15
«2122 РЕАТ
«213» Штучна послідовність
«220» Й
«223» Гуманізований твп016
«4002 94 біз Ркго Пуз бег Зех Авр Буз ТБжх Ніз Тих Суз Рго Рко Суз вег 1 5 10 15
«210» 95
«211» 45
«212» ДЕК
«2135 Штучна послідовність
«220»
«223» Гуманізований твро16
«1005 95 чЧчадсосаває сібусдасаа аасссасаса сдессассуа дсбса 45 «210» 96 «211» 15
«2122 РЕЇ
«2135 Штучна послідовність
«220» І
«223» Гуманізований твО016
«100» 96 біш Рко Був бег Бек Авр пу ТІ Нів Тйг Суз Рго Рго бек бег 1 5 10 15 «210» 97
«211» 45
«212» ДНК «2135 Штучна послідовність
«220»
«223» Гуманізований ТВО016
«4005 37 чадсссааає сісстддасаа аастсасаса сссссассуа одсоса 45 «210» 98
«2112 15
«2122 РЕТ
«2135 Штучна послідовність
«220» І
«223» Гуманізований тво016
«4005 98 біз Рго Буз Бек бек Авзр Пцуз ТПЕ Нів ТПт Бек Его Рго бек РКО 1 5 10 15 «2102 939
«211» 45
«2122 ДНК
«2135 Штучна послідовність
«2202 й
«223» Гуманізований ТВО016
«41005 889 дадсссваас стЕссдасаа аастсасаса Бстссассда дсіса 45
«210» 100
«211» 15
«2122 РЕТ
«213» Штучна послідовність
«220»
«2235 Гуманізований твО016
«400» 100 бій Рго Гуз бек о бБег АБр Був Тих Нів 7пПгобег Рго Рго Бех Зег 1 5 10 15 «210» 101
«211» 45
«21722» ДИиК
«2135 Штучна послідовність
«220»
«223» Гуманізований ТВО016
«400» 101 чадсссааає сісдсоасаа аасссасаса їссссассдї дссса 15 «2105 102
«2115 15
«2125 РВТ
«2135 ІДтучна послідовність
«2205
«223» Гуманізований твоб16
«4005 192 біз Рко Буз бек Сув Авр оПув Тпк Нів ТпПгобег Его Рко Сув Рго 1 5 10 15 «2105 103
«211» 45
«212» ДНК
52135 Штучна послідовність
«2205
«223» Гуманізований твоб16
«400» 103 дадсссаааї сткдссасаа аасссасаса ЕсЕссасссюї дсеса 45 «210» 104
«211» 15
«2125 РЕТ
«213» Штучна послідовність
«220» й й
«223у Гуманізований тВО016
«400» 104 бій Рго пуб бек Сув Авр Гуз Тіт Нів Тіт бек о Рго Рго Суб 5ег
1 5 10 15 «210» 105 «211» 45 «2127» ДНК «213» Штучна послідовність «220» І «223» Гуманізований твоО016 «400» 105 чадсссааає сібстдасаа аасссасаса СсбссассЯає дсеоса 15 «210» 106 «211» 15 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твО016 к00» 106 біз Рго цувз бек Бек Азр Ппув ТПх Нів Тік бек Рго Рго Сув РІо 1 5 10 15 «2102 107 «211» 45 «212» ДНК и «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твО016 «400» 107 чадсссааає стібстдасаа аасісасаса сстссассуї дссса 45 «210» 108 «211» 15 «2122 РЕ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тво016 «400» 108 бій Рко Пув Бех Бех Авр Буз Тіх Нів ТИх бек Рго Рко Сув Зег 1 5 10 15 «2105 109 «211» 45 к212» ДНК «213» Штучна послідовність «22095 й «223» Гуманізований ткОб16 «400» 109 її, б дадсссааає сесбдсдасаа аасісасаса Сстссассча дссса 45 «2105 110
«211» 15 -
«212» РВЕ
«213» Штучна послідовність
«220»
«223» Гуманізований ТВО016
«400» 110 біб Рго цув Бех Сув Авр Був Тіт Ніз ТБгобетг Рго Ркго бег Рето 1 З 10 15 «210» 111
«211» а45
«21225 ДЕК
«2135 Штучна послідовність
«220»
«223» Гуманізований твО016
«400» 111 дадсссазає сЕЕдЕдасаз авасісасаса Есгссассда дсіса 45 «2105 112
«211» 15 -
«2122 РВТ .
«2135 Штучна послідовність
«272»
«2235 Гуманізований ткО016
«40025 112 бій Рко Пув Бег Суз Азр Гуз ТПх Нів ТЬг Бек Рко Рго бек Бег 1 5 10 15 «210» 113
«211» 45
«2122» ДНК
«213» Штучна послідовність
«220»
«223» Гуманізований тво016
«100» 113 чаздсссаває стсодєЄдасаа аастсасаса бусСссавассда дстса 45 «2105 114
«2112 15
«Р122 РКТ
«213» Штучна послідовність
«220»
«223» Гуманізований тво016
«400» 114 б1а Рко ПЦув Зег Бак Авр Гуз ТЕ Ніє Тпг оСув Рго Рго бег 5еє 1 З 10 15 «210» 115 «211» 19 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тво016 «4002 115
Ммазї Рто беї Тпг Рго Рко Тпх Рко бек Рко бек Тік Рто Рко Трх Рго 1 5 10 15 бек Рго Зег «210» 116 «2115» 6 «2125 РЕТ х2135 Штучна послідовність «2205 «223» Гуманізований твоб16 «4005 116
Маї Рхо Рко Рго Рго Рго 1 5 «2102» 117 . «211» 166 «21225 ДНК «213» Штучна послідовність «2202 «223» Гуманізований твоо16 «4005 117 дазчсєсаава сессісєсод сзавасоасс сабасуєдес ссосояссуссс сдаассоазу бо ксстдсдава садсссосдсс асуєссасуд сдсосададс ссаааєсаєд сзасасодссс 120 ссассдєдеЕс сссосьаєсс СЄдаассазад Есаєдсудаєа ссссассасс аєдсссаада 180 сассоса 186 «210» 118 «211» 62 «2122 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твпб16 «400» 118 бі печ Пув ТЛІ Рко Бец біу Авр Тіт Трбг о Нів Тк о Сув Рго Ак Сув 1 З 10 15
Рто біш Рхо Пубв Бех Су Авр ТБт Рко Рко Рто Суз Рго Ату Сув Рго зо сі Рхо цув бек Суз АБр ТБ о Рго Рго Рго Сув Рко Акуд Сув Ркго сій
Ріо Бу5 Бек Суб Авр Тібг о Рго Рго Рко Сув Рго Аху Суз Рго 20 55 (219) «2105 118 «211» 45 «72125 ДНК «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твО016 «4100» 119 садсссаааї сссстдасас асстссссса бадсоссасоаддб деоссс 45 «210» 120 «2115 15 «212» РВТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твО016 400» 120 біц Рко Був бек бек Ар ТНг Рго Рго Рго Сув Рго Ага Сув Рхто 1 5 10 15 «210» 121 «211» 45 «212» ДЕК «213» Штучна послідовність «220» Й «223» Гуманізований твВро16 «400» 121 чадсссазає сеЕбсдісасас ассрсосссса Сссссасудбе ссоса 45 «210» 122 «211» 15 2122» РЕТ «213» Штучва послідовність «2202 «223» Гуманізований ТВО0016 «8002 122 біс Рго Пуз бек Сув Авр Так Ртго Рго Рго Бех Рто Агу бег Рго 1 5 10 15 «2105 123 «2112 45 «2122 ДНК «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твО016 «1005 123
Чдадсссадає сеїстідасас ассессссса Кссссасаддб сссса 45 «210» 124 «211» 15 «212» РЕ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований творо16 «4002» 124 бій Рко пуб баг Бек Авр ТВг о Рго Рго Рго беїх Ркго Агуд Бех Рго 1 З 10 15 «210» 125 7 «?112 45 «212» ДНК «2135 Штучна послідовність «220» й «223» Гуманізований твОб16 «4005 125 чадсосааат ссбосдасас асстіссссоса Сссссасодї одссса 45 «2105 126 «21123 15 «212» РЕ «2132» Штучна послідовність «220» , . «223» Гуманізований твВО016 «а0о» 126 бій Рхо пуб бек Су Авр о ТВг Рго Рго Рто Бек Рко Агу Суз Рго 1 5 10 15 ч «210» 127 «2112» 58 Й «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «22025 «223» Гуманізований твоб1є
«00» 127
Сі Бех Рго Цув А1а Сіп А1їа бег бек Уаї Рго ТБх А18а біп Рго с1іп 1 Й З 10 15
Аїа сій біу Вес Ппею діа Пуз Азїа Тіт Тк Аза Рго А1а Тпх тах Агд зо
Авп Тих біу дк біу б1у бі бі Гуз Буз Пуз бій Пуз бзч Був бій з5 40 15 бій бів біз бій Ага біз ТБт Гуз Так Ро зо 55 «2105» 128 «2112 11 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тво016 «500» 128
Аг Тпгобег біп Авп Уа1і Туг бек Туг реч йіа 1 5 10 «210» 129 «2115 11 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 . «223» Гуманізований і ТВО016 «00» 129
Аку ТБх беїх біз бек Уаї Туг Бех Туг Пей Аїа 1 5 10 «210» 130 «21125 11 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» й «223» Гуманізований твсо16 «400» 130
Втз Аїа бек Сіп бЗеїх Уаї Туг БбБег Тук Геч А1а 1 З 10 «210» 131 «211» 11 . «2122 РТ .
«213» Штучна послідовність «223» Гуманізований твО016 «4005 131
Ах Аіа Бег біп бет Маії бег бек Тух Пес А1а 1 5 ут) «2105 132 «2115 11 «2122 РАТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твоо016 «100» 132
Аг Аїа бег біп бет Уа1їі Бех Туг Тухг Гей А1а 1 5 10 «210» 133 «21125 5 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тРоб16 «1005» 133
Бех Тук Меї Асп Меє 1 2 «210» 134 «2115 5 «2122 РВТ «2135 Штучна послідовність «220» . «223» Гуманізований тво016 «400» 134
Бек Тухк Ткр І1е 51у 1 5 «210» 135 «211» 7 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» . «7223» Гуманізований т0016 «400» 135
Аіа Аіїа бег беї цем сіп бек
1 5 «210» 136 «21123 1 «2122 РВТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твО016 «400» 136 б1у Аза бек Таг Агу Аїа тТЬг І 1 5 «210» 137 «2115 7 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» й «223» Гуманізований твоОб16 «4005 137
Азр діа бек Азп Аку Аїа ТОК 1 5 «210» 138 . «2112 17 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» Гуманізований твО016 «400» 138
І1е ї1е Тух Рко сіу Азр бек Авр ТПг Агуд Туг бех Рго Бек Ре біп 1 5 10 15 с1у «210» 139 «2115 17 «2125 РАтТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тво016 «00» 139
Аг4 Т1е Авр Рго бег Ар бек Туї ТВг Авп Туг бек Рко Бек РПпе віп 1 5 10 15 51у
«210» 140 «2112 30 «2122 РЕТ 213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тво016 «400» 140 біп Уа) біп рез Уаї біп бек біу Аза Сій Уаї Буз Пуз Рко сіу діа 1 5 10 15 бек Уаї Муз Уаї Бет Суз цув А1їа бек біу Тут Трт Ре Трх зо «2105 141 «2112 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твО016 «1005 141 біл Уа) біп Пеп Уаї біп бек біу А1а бій Уаї руз Буз Рко біу Зег 1 5 10 15 бег Ма) Буз Уаї бек Суз Був Віа бехг б01у б1у Трг Рпе Бех 20 25 30 «3105 142 «2112 30 «2125 РЕ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований ТтВ0016 «1002» 142 біп уаї біп реп Уаї біп бек сіу А1їа сій Ма1 Був буз Рхго б1у Бек 1 5 10 15 бетх Уаї був уаї Бех Сув Пуз Аїа бек сіу біу Тр РБе Бех 20 23 зо «2102 143 «211» 30 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тТВО016
«400» 143 біц Уаї біп Пец уаї Сіп бек біу Аїа сі Уаї.Був ув Рго б51у А1а 1 5 10 15
Твх уаї Пув І12 бек Суз ув Маї бек сіу Тук Тпг Рпе Трг зо «2105 144 «211» 30 «2122 РВТ «213» Штучна послідовність . «2202 «223» Гуманізований твоо16 «400» 144 біч Маї бід Пец Уаї Сіл Зег біу А1їа біп Уа! Гуз Пуз Ркго біу біч 1 5 10 15 бек Пец Буз т1е Бек Суз Пу5 біу Зек Сіу Тухт бет Ре Торг 20 25 0 «210» 145 «2115 30 2122 РВТ х2г13» Штучна послідовність 220» «223» Гуманізований твО016 «100» 145 біц Уаі біп Пец Уаі1ї біп бек біу А1ї1а бій Уаі Буз Був Рго б1у бій 1 5 10 15 бек цей Акд І1е бБег Суз Буз С1у Бек б1у Тус 5еу Ре Трг 20 29 зо «210» 146 «211» 30 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «2202 «?23» Гуманізований твоб16 «4002 145 біп Уаї біп рез Уаї Сіп бек С1іу бек Сі Теп Пув цув Рго біу Аза 1 5 10 15 бек уаї Буз Уаї бек Сув Був А1іа Бек Сіу Туг Тпг Рре Тбг 20 25 30
«2105 147 «211» 14 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твО016 «4005 147
Ттр Уаії Агу біп А1а Рго С1у біп біу ей Сі Тгр Меє С1іу 1 5 10 «210» 148 «211ї» 14 «212» РВІ «213» Штучна послідовність к220» т «223» Гуманізований твОб16 «00» 148
Тер уаї Ахуд сіп Аза Рко Сіу біп сіу цем біо Тер Мебє б1у 1 5 10 «210» 149 «2115 14 «2125 РУТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тВО016 «400» 149
Тгр Маї Агуд біп Азїа Рко сб1у Сіп С1у Тед біз Ттр Меє б1у 1 5 10 «210» 150 «2112 14 «21272 РЕТ «213» Штучна послідовність 2202 «223» Гуманізований твоб16 «4100» 150
Тгр Уаї біп біп А1їа Рко біу уз сСіу цем б1іц Тгр меє С1у 1 5 10 «2105 151 «9211» 14 «2122 РЕТ «213» Искусственная последовательность к?20» «223» Гуманізований твО016
«4007 151
ТЕр Маі Акд біп Меє Рго Сіу Гуз біу їец біш Тер Меє б1Уу 1 5 10 «210» 152 «211» 139 «2125 РЕТ «218» Штучна послідовність «2202 «223» Гуманізований тТЕО016 «4002 152
Ттр Уа! Акад біп Меє Рхо Сіу Буз біу Бей сій Тгтр Меї б1У 1 З и, «2105 153 «211» 14 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» й «223» Гуманізований твоб16 «400» 153
Тго Уаї дка біп А1їа Рго б1у Сіп біу Пец біуй Тгр Меє С1Уу 1 2 10 «210» 154 «21172 32 «2122 РЕТ «2193» Штучна послідовність «220» й Й «223» Гуманізований твОб16 «4002 154
Аг Ма! Тк оМес тТпх ТБтг АБроТВі бег Тих бег Тк А1а Тут Меє 51) 1 5 10 15
Темп Аку Бек Пец Аг беїг Ар Авр ТЬг Аза Уа)! Туг Тут Сув Аза Аг зо «21025 155 «211» 357 «2122 РВТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Гуманізований ТВО016 «1005 155
Ага уаї ТЕ тТ1е Тк Аїа Авр Сі бет ТВх Бех Так Аїа Тух Меє 51
1 5 10 15
Тез бек беїх Темп Агу Бех бій Авр Тпх Аза Уа1і Тух Тук Су А1їа Аг4д зо «2105 156 «2112 32 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 Й «223» Гуманізований твоО016 «00» 156
Ак Маї ТЕ І1е Тйг Аза Ар Був бек ТБйтх бек ТрЕ А1а Туг Меє бій 1 5 10 15
Тез бБег Бек цей Агу Бек Сіш Азр ТБг о А1Та Уа1! Тук Тук Субз Аза Аг4д 20 23 30 «?10» 157 «211» 32 «2122 РВТ «2135 Штучна послідовність «229» й «223» Гуманізований с тВОб16 . «400» 157
Акад Ма1і ТВ І1е ТК А1їа Авр ТБгобех ТБх АвроТБх Ата Тук Меє сій 1 5 10 15 еп бек бек Тец Акд бег бід АБр ТйтІ Аза Уа1! Туг Туг Сув Ата тТрЕг 20 25 зо «2105 158 «2112 22 «2122 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» о «223» Гуманізований твО016 «400» 158
Сіп Уаз Тпг тТ1іе бек Аза Авр Тув Бек І1е бек ТрПт А1їа Тух ей біп 1 5 10 15
Тко Зетх Зег Пец руз А1їа бек Авр Трх Віа Меє Туг Ту Суз Аїа Ак9 20 25 30 «2105 159 . «2115 32 «21225 РЕВТ
«213» Штучна послідовність «2207 й «223» Гуманізований тВО016 «4100» 159
Ніз уа1! ТпхІ Іїє бек Аїа Азр ПЦуз бек І1е Зег Тік Аїа Туг Геци Ссіп 1 5 10 15
Ттр Зек Зак Пец Пув дДіа бег Авзр ТПт Аза Мес Тут Тук Сув А1а Агд «210» 160 «211» 32 «2122 РВТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твоО016 «400» 160
Ага Рпе Уаї Рпе Бек Пец Азр ТБк Ббег Уа1ї бек ТВх Аза Тут тей сіп 1 З 10 15
Іїе Бег Бех Гец Пув Азїа бій Авр Тіх А1їа Уаї Тук Туг Суз Аіа АгФ 20 25 за «2105 161 І «2112 11 «212» РВЕ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тво016 «1005 161
Тер б1у біп біу Тпх Тез Уа1ї ТВг оУаі Бек бек 1 5 10 «21025 162 «21125 11 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твО0156 «400» 162
Тгр біу Аг б1іу Так Пец Уа! Тк Маї Зех 5ех . 1 З 10 «210» 163 «2112 11 «2122 РЕТ
«2135 Штучна послідовність «223» Гуманізований ТтВО016 «400» 1653
Тер б1у біп бСіу Трї Меє Уаї Тіт Уаї Бех Бех 1 З 10 «210» 164 «2112 11 «2122 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2202 «223» Гуманізований твО016 «4002 164
Ткр біу бСіп біу Тайг оМеб Маї ТВг о Маї Бек бек 1 5 10 «210» 165 «2115 11 «2122 РЕ 52135 Штучна послідовність к?20» «223» Гуманізований твО016 «00» 165
Тгр Сіу Сіп біу Тік Гео Уаї ТБх Уаї Бег Бех 1 З 10 «210» 166 «2112 11 «2122 РВТ «213» Штучна послідовність «2207 «223» Гуманізований твО016 «100» 166
Тгр біу біп біу Тих Ге Уаї Тру Маї Зек Бех 1 5 10 «210» 167 «2112 11 «2122 РЕТ «2132 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твО016 «400» 167
Тгр біу біп біу Трг Гей Уаї Тпг о Уаї бег бек
1 5 10 «210» 168 «2112 11 «21225 РЕТ «2135 Штучна послідовність «20» «223» Гуманізований твО016 «100» 168
Ттр біу біп б1іу ТБх Тік оУаї Тік Уаії б5ех 5ехг 1 5 10 «2105 169 «2115 11 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» І «223» Гуманізований ткО016 «4005 169
Тер б1іу Пув б1у Трг Тпх о Уаї Тк оУа1ї Бек бек 1 5 10 «2105» 170 «211» 23 Й . «2122 РКТ «213» Штучна послідовність «220» І «223» Гуманізований тВО016 «200» 170 біц Ітїе Уа1ї Мек Трг оСіп бек Рго А1а Тк Ге бек Уа! Бек Рго сіу 1 5 10 15 с1з Агу Аза ТБгт Тїей бек Суз «210» 171 «2115 23 «2122 РЕАТ 213» Штучна послідовність «20» , «223» Гуманізований твоО016 «400» 171 біо 116 Уаї Тїец тТрж Сіп беїт Ркго Аз1а Тпг Пец бес Пем бек Рго б1у 1 5 10 15 бі Аху Аїа ТБх їем бек Сув
«210» 172 «211» 23 «9122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220х «2232 Гуманізований твОо16 «400» 172
Авр І1а біп Мес Тпх Сів бех Рго Бех бек Тїев Зег А1їа бек Уві п1Уу 1 5 10 15
Авр Акгу уаї Тіт І1є Тлк Сув 20 «210» 173 «211» 23 «8122 РВТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тТВОб16 «4005 173 І Й
Авр І1е біп Меб ТВгобіп бЗег Рго Зег бех Пец Бек А1а Бех Уаї1ї С1У 1 З и 10 15
Ар Аго Уаї ТБ І1їе Тіг Суз 20 «210» 174 «211» 23 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «20» «223» Гуманізований ТРШО16 «400» 174
Авр І1е Сіп Меб Тпх бів бек Рхо бБег Бех Пе) бек А1їа бек Маї б1у 1 5 10 15
Азр Ага Уаї Тік о І1е Тркг Суз 20 «210» 175 «2112: 23 й «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» Гуманізований твО016 рату пиши
«4005 175
Азп Ізїе біп Меє Трх біп бек Рко бех Аїа Меє бек Аїа Бек Уаї Сб1у 1 5 10 15
Авр Ахо чаї Тпг І1е Так Суз «2105 176 «21155 23 «2122 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Гуманізований твоб1іб «4002 176
Азр І1е сіп Меб ТБг о Сіп Зег Рго бек бегт Пе бек Аїа бек Уаї біу 1 З 10 15
Ар Аго Уаї Тбпт Т1е Тк Сув 20 «2105 177 «21173 23 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» Й - -223» Гуманізований твВо016 «1005 177
А1ї1а 11є біп цер ТЬПх Сів бек Рго бЗег бег Бей Бек Аза Зех Маї біу 1 5 10 15
Авзр Аг Уаї Трг Ї12а Таг Сув 20 «10» 178 «211» 23 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований ТВО016 «4002 178
Авр 112 біл Бем Тбх о Сбіп бек о Рто бег Рре Пеп Бех А1їа бек Уа1 біу 1 5 10 15
Авр Ага Ма1 ТпІх І1е Тіт Сув
«9210» 179 «2112 23 «2172 РВІ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тво016 «4002 179 -
А1їа І1їє Агу Меє Тк о Сіп бетх Рго Рпе бек Бей бех Аза Бек Уаі с1у 1 З 10 15
АБр Ат Маї ТБт І1е Тпг Су «210» 180 «211» 23 «2122 РВТ «213» Штучна послідовність Я «2205 «223» Гуманізований тТВО016 «400» 180
Аїа І1е Сіл Меє ТБк біп беї Рго Бег бег Тед бег Аза Беї Уа1і б1уУ 1 5 10 15
ВБор Ат Уаї ТВх І1е ТВг Суз І 20 «210» 181 «2112» 23 «2122 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тво016 «400» 181
Азр Іїе біп Меє ТЬг біп Зег Рко Бех Трх Гей бек Аіа бек Уа1 біу 1 5 10 15
Авр Ага Маї Тах 112 Так Сув І І 20 «910» 182 «2112 15 «2122 РВТ «213» Штучна послідовність «2202 «223» Гуманізований твиб016 «4005 182 | .
Ттр Тук біп біп Гув Рто біу біп діа Рго Ату Тез Теп І1е Туг 1 5 10 15 «210» 183 «211» 15 «212» РЕТ «2713» Штучна послідовність «2202 «223» Гуманізований твоб16 «400» 183
Тгр Тук б1іп біп Пув Рхго б1у 51п Аїа Рго Аху Тец Пецйп Іїе Тух 1 5 10 15 «210» 184 «211 15 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «?20» й «223» Гуманізований твоо16 «400» 184
Тхр Тук біп о біп обуз Рго біу Гуз А1а Рго МПувз лей Пеп т1е Тук 1 5 10 15 «210» 185 «211» 15 «2125 РВТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований ТВО016 «400» 185
Ткр Тух сіп біп Пув Рхо біу Був Уа! Рго Пуз Пец їй Т1е Туг 1 5 10 15 «210» 186 «2115 15 «2125 РАТ х2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тву016 «1400» 186
Ттр Тут біп біп Буз Рко сСіу цПуз Аза Рто Пу5 Атд Тед Ї1е ТУуг 1 5 10 15 «210» 187 2115 15 «2127 РКЕТ
«2132 Штучна послідовність «223» Гуманізований твСо16 «4005 187
Тгр Рпе сіп біп уз Рго біу ГЦув Уаї Рко Шцув Нів Пец І1е Туг 1 5 10 | 15 «210» 188 «2115 15 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Гуманізований твО016 «100» 188
Тгр Рпе Сіп біп був Рго С1у Пув Аїа Рко Муз бЗег ТГєй Іїе Туг 1 З 10 15 «2105» 189 «211» 15 «2122 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований ТВИ016 «400» 189
Тер Туг біп біп був Рго б1у Буз Аза Рко Шу5 ПЦез без І)е Туг 1 Б. 10 15 «210» 190 «2112 15 «2122 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твоО016 «4002 199
Ттр Туг біп біп Був Рхо б1у Був Аза хо Тув Пе Івйп І1е Тук 1 5 10 15 -210» 191 «2112» 15 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» Гуманізований тко016 «1005 191 й
Тгр Тук біп сіп Пув Рго А1їа Пувзв А1їа Рхо Шуб5 Пец Рбе І1е Тук
1 5 10 15 «210» 192 «211з3 15 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 Й «223» Гуманізований тво016 «100» 192
Тер Тук Сів біп Гуз Рко С1у Буз Аіїа Рхо Пуз ем Геч І1е Туг 1 5 10 15 «2105 193 «211» 15 «2122 РЕТ 2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тВо016 «00» 193
Тгр Тук біп біп Пуз Рго біу цув Аза Рго Іуз Іей Пец 118 Тук 1 5 10 15 «2105 194 . І «2112 32 «2122 РТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тво016 «4002 194 сіу І12е Рго А1а АгЯд Рре бек біу бЗех сіу бБег біу ТПг Сіш Ре ТіК 1 5 10 15 їец ТБ ліе Зет Бек Пец біп Бек Сіп Авр Рре А13 Уві Тук Тук Сув зо «210» 185 «211» 372 «2122 РЕТ 5213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тво016 «4002 195 біу І1е Рго Аїа Акд Рне бек Сіу Зек біу бек С1у ТБт Авр Рйе ТНК й 1 5 10 15 їй ТОК Іїе Зет бег Ццеп біп Рко бі АДвр Рпе Аза Уаї Тук Ту Суз
«210» 1965 «2112 32 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2202 . . «223» Гуманізований тво016 «400» 196 сіу Ха1 Рго бетх Агуд Ріпе Бек біу Бех б1у бек б1у ТП Авр Ре Тіх 1 5 10 15 реп ТВі ІЗ4е Бек Бех їейп біп Рго С1у Азр Рре А1ї1а Тіг Тух Туг Сув 20 25 30 «210» 197 «2112 32 «2125 РВТ «213» Щтучна послідовність «2207 Й «223» Гуманізований ТВО016 «100» 197 сіу уаії Рго беїх Агку Рпіе бег Сіу бек біу бег б1іу Так Авр Рпе ТБх 1 5 10 15
Тем Тис Ізїе бек бек Гей біп Рго біз Азвр Уа1і А1їа ТЬБг оТуг Тук Суз 20 25 зо «2102 198 «2115 32 «2122 РВТ 213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тв0016 «400» 198 біу Уаї Рго Бех Ах Рпе бЗет біу Бег біу Зег біу ТпПг бій Ре ТВг 1 З 10 15 рец Тік оІ11е бек бек їєш Сіп Рго сб1ц Ар Рбе Аза ТЬс Тух Тук Суз 28 25 зо «210» 199 «2112 32 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2207 «223» Гуманізований твО016
«400» 199 біу Уаї Рго бек Ага Ре Збех Сіу бет біу бек біу ТПг бій Рае Тпх 1 5 10 15
Тен Тапх І1е бек бек Тви б1іп Рко біш Авр Ре Аза Тпг Тук Тук Сув зо «210» 200 «2115 32 «212» РВТ «2135 Штучна послідовність «223» Й «223» Гуманізований твОб16 «400» 200 біу Уаї Ркго бек Агу Ріпе бЗет Ссіу бек Сіу Бек Сбіу Тйк Азр Рбе ТЕХ 1 5 10 15
Тец Тіпк І1е бек бЗех Гей Сіп Рго бішп Ар Рпе А1їа Тіг Туг Тук Сув 29 25 зо к2105 201 «211» 32 «2125 РВТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твшо16 «400» 201 біу Уаї Рко Бег Агуд Рпе бег біу бек біу Зехт б1іу ТВг Авр Рле ТБг 1 5 10 15
Теи Твг о Ізе Бек бег Пец біп Рго біч Аб5р Рае Аза ТіПг Туг Туг Сув 20 25 за «7105» 207 «211» 32 «212» РТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тво016 «00» 202 біу Маї Рго Зек Аку Ріпе бег сСіу бек біу бек біу Тк бій Ре Тпг 1 5 10 15
Тївц Тахо І1е беб Бек теп біп Рго бір Авр Рпе А1їа ТВк Тук Тух Сув 20 25 зо
«2105 203 «2115 32 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «2202 «223» Гуманізований твОб16 «100» 203 б1у Уаї Рко бек Агу РіПе бех б1іу бек Сіу Бек б1у ТПг Авр Тук Тбг 1 5 10 15 пцец Тс о ї1е бек бек Пей б1іп Рхо б1іц Азр Рпе А1їа Тіт Тухк Тук СуБ зо «2105 204 «2112» 32 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» Гуманізований твО016 «400» 204 біу Уаі Рго бег Агу Рле Бек біу бек біу Бех біу ТрЕ Азр Ре Так 1 З 10 15
Тева Тк І1їе Бек Бек Теп Сіп Рго сСіш Авр Ре АТа ТПх Туг Тук Сув 70 25 зо «2105 205 «211» 32 «2122 т «2132 Штучна послідовність «2205 Й «223» Гуманізований тво016 «4002 205 сіу чаї Рго бБег Агу Рпе бех С1у беї біу бек б1у Тік бій Рре Таг 1 З 10 15 її Так І1е Бех Бет пе Сіп Рко Авр Авр Ре Аїа ТПг Тут Тук Сув 20 25 зо «210» 206 «21125 10 «2122 РВТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твпо16 «41002. 206
Рпе біу біп біу ТБбг Тув Маї січ І1їе уз 1 9 10 «210» 207 «2115 10 «2122 РЕ «213» Штучна послідовність «220» Й «223» Гуманізований тВО016 «400» 207
РБе біу біп б2у Твт Бу цез б)и Т1е Туз 1 5 10 «2105 208 «211» 10 - «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» , «223» Гуманізований твОо16 «4005 208
Ре б1іу Рго б1іу ТПг руб Уа! Азр І11е Був 1 З 10 «210» 203 «211» 10 «2122 РВТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований ТвО016 «1005 209
Рпе біу б1у біу Так Ппув Уаї 513 її Був 1 5 10 «210» 210 «?112 10 «2125 РЕ «213» Штучна послідовність «2202 Й «223» Гуманізований тво016 «100» 210
Ріе біу біп с1у Тпг Ака Геї бій І11е Гуз 1 5 10 «21025 211 «21172 7 «2122 РВтТ
«213» Штучна послідовність «223» Гуманізований твО016 «4005 211 бек Уаі біу Рго Меї Авр Тух 1 5 «210» 212 «2115 7 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» , . «223» Гуманізований ТтВО016 «4005 212 бек Уа1ї Сіу Рго Рбе Авр Тухг 1 5 «210» 213 «2112 7 «2122 РАТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований ТВО016 й «4005 213 бек Ма1 сіу Рго Меє Азр Уа! 1 5 «210» 214 «21155 7 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тТВи016 «4005 214
Бек УМаі1і б1у Рго Рпе Авр 5ег 1 5 «210» 215 «2115 7 «2122 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» Гуманізований ТВО016 «400» 215 бек Маії б1у Рко РіПе Азр Рко
1 5 «2105 216 «2115 7 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 , . «223» Гуманізований тв0016 «400» 216
Бех Уа! бі1у Рко Рпе бСіп Нів 1 5 «210» 217 «21123 7 «21225 РВТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Гуманізований ТВО016 «400» 217
Бек Уаї б1у Рко Рпе Азр Уаї 1 5 «2105 218 «2115 7 «212» РВТ «2132 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований тВО016 «4005 218
Зек Уаї б1у Рго Рпе АБр І1е 1 5 «210» 219 «2115» 7 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований твО016 «400» 219 бек Маіїі біу Рко РБе Азр Ге 1 5 «210» 220 «2115 8 «2122 Рв «213» Штучна послідовність
«220» І
«223» Гуманізований ТВОи016 «400» 220 бсіп Нів Ніз бет АБр Авп Рго Тгр ТОПг 1 5 ши
МІ -лі -МН Шарнірн шк облать СНЗ
Фіг. ІА
Невідновлювальні умови Відновлювальні умови 12345678 250кДа 7 250 кДа 98 , 98 в4 --. 164
БО 50 36 36
Фіг. ІВ 1200 - 1000 ; оо
Ж 600 9 нн 400 55 го
ЗБ о
І 0.001 0.01 01 1 10
Концентрація білка (мкг/мл) - - 2оФоФ» СО19: лімфоцити -- --ал СРІ9" лімфоцити
Фіг. ІС
---- 0 Концентрація неміченого анти-СО 37-реагенту (мкг/мл) /я---ТЬ 80 з я 50 як ко ч а У чи 40 ле 40 «т Янв 20 т» 201 лілсзА
ТАШИ6 РІТО МВ371- 0 0 ; 0,5 1 15 2 2.5 3 9 05 1 15 2 25 3 00 100 хо щ вві Ко чн во 89 ; чу 80 як в печу аск Очні щ т ех -к й.
Зо Зоптзнттт-ф 0 Сеть ш Ши 20 ? к | втова. ЕІТС РО2А- 0 0 о 05 1 1.5 2 25 3 0 0.5 1 15 2 2.5 З 400 Немічений анти-СІ) -реагент
Фі дют тт Ф----- ТВОЇ ких бо «По п- - МВІ? ти 20
ЕТО ННІ- 0 0 05 1 15 2 25 З
Фіг. 2
Середовище - СУЕ ет в
З то 01 ЖК 111111 60 ! щ
З І
81177
Е- 50185 х 5 5 5. 17777777
ШИ 5 я - С Я -- р- - Шк щ БЖ ми ша ш ш ші ЕЩЕеЕ ШЕ ЕС
СередовищевтХМ ПІК орд НМУ 00 СередовищевтхМ ЛІК орд ід НММ димера до димера до 1,25595 сироватки С 2,895 сироватки І 5 У; сироватки
Фіг. ЗА
Середовище
Р СМЕ й -ш сх ; щ - х Е д - щ-й Е-ез -Е щ - - ЕЕ Бе Е--.-6225 ---З - 50 2 пор ЕЕрЯ в БВ ЩЕНЯ ЩЕ Ер в 5 нд Я ШЕ Ще ЧО ДЯ -щ 2 ЕЕ ЕЕ а ЕЕРЯ --Ш-- ЕЕ БЕ в ЕАЯ БЕ ЕНЕЯ в Б ЩЕ Б ШЕ Б
Е -- ЕЕ я -ЕШЕЕ ша Я ОО 40 ЕЕ Ед ЕЕ ОН роя ВО БрЯ
ЕЕ НЯ НЯ ЕН Я БЕТА -- 2 -Е БЕР БЖ 6 ОБ ШЕ Б ШЕ Б
Я ша де 2852 ЕН Ши рН Я а ЕВИЯ БЕЯ Сея ОБ БО в ОБЩАЯ щ 30 РЕЯ БЕрЯ Я ЕЕ ББЯА- ЩЕ ЯЗ єЕШЕЄ
Ж ЕЕ Ер БЕ ОБРА ШЕ БА ШЕ Б-
ЕЕЯ ЕБЕЯ ЕЕ БО ОБЯ ЩЕ ЕБЯ ЕЕ ООЕНЯ
2 ЕБЕЯ ЕЯ ЕЕЕНЯЯ Я Бра Ше ЕООЕНЯ ри ЕЕ дя БЕЯЯ ЕОБЕНЯ Я ООЕБрЯ ря
ЕІОЯ - ях БЕШЄЄ Ше Я ООЕБЕЯ 20 Я ТЯ ЕЕ Я ОББрОЯ Ба БЕ БЕ ве а Ше» Ей Бе Б ШЕ Б ШЕ БЖ
ЖЕ Р ШЕ ве ря ШЕ Б ШЕ ОБСЄ
ЕБЕЯ Ера. ШЕ Б Ер НЯЯ. - ЩЕ Ер З ШЕЯ СЯ
ГТ ОБЕБЯ З ОЕЕРЯ БЕ ЕЕ Я ОЕЯЯ БЕН: --Щ БЕН БЕООЕЕрЯ ЕЕ ООБЯ в Я ЕВООЕрЯ ве ОБ ШЕ ОБ ЩЕ в ОБЯ ШЕ Б ШЕ Я в сш: ши ее ЕЕ Я ШЕ ЕБЗ ШЕ ЛЕ
Бо 2.595 1.259596 Був 2. 1.2595
Мне МН5 мно МА МН Мне
ШІ Середовище КтТХМ
ОТО НМУ А2 ТАКОЇ рА ІЗ
ТАЦОТ6 Пік димера
Фіг. 3В
Людська сироватка Кроляча сироватка т 0202 2 ЛЕ - - 80 -Е я ЕН БЕЗ
ЕВ В ти ЕВ во Е Е ЕІ 5 дЕЕ Я У ВЕ ЕЕ
БЕ Е шЕ -Е Б то ТЕ Е ТЕ ІЕЕ
ЕЕ ЕК БЕ ЕЕ БЕ ра тав са ра ТЕКЕ бо ЕЕ ЕЕ же Сена -Е
ЕЕ ше -Е ЕЕ) -- в- 50 я ЕЕ ЕЕ ве Н- ге ЕН хх их а па дп 40 СУ ЕК БЕН -Е ЕЕ ЕЕ
ЕЕ - ЕЕ ЕВ ЕЕ я
ЕВ -- ЕЕ БЕК -Е ГЕ -- 30 ЕЕ ША ЕЕ ше в р І- щ- З т- СЕ СЕ ЕКЗ 20 З - ЕЕ я, - ня ЕЕ 10 с се і я -Е Бач и ЕЕ ЕВ ЕЕ СЕ 0 ше ШЕ сні КУ ЕЕ ЕЕ шЕ БЕ ЕЕ нЕ о о ве ве я де в. Ф т ЕЇ дк в. Ф У ак 5 во А 5.2? в
Я МА ск Бех а - о) З ва ' З «Ж «Ж ня -
ШИ Середовище 2,595 сироватки ЕВ 5 Об сироватки СО 4095 сироватки
Фіг. ЗС
ЕС: фракції /ТКЦО16 ---01040929 7аб ем рів ЗЕСТО011ОСОРУ. Іпва --о040929 7аб єм ро ЗЕС1О01ЛОСОРУ ІЛ ВОМ -Щья«-040929 726 вм рів ЗЕСТО01ЛОСОРУ ІМ. 280нм(фФО1, ВАБЕМ мПоглинання в. 200 150 41 Очищений на протеїні А стандарт
І
100 І 1
І
І
!
І і 1
І 7.34 і ! 5.65 сних а іл» о 20 4.0 бо 80 100 120 мл
Фіг. 4А поко 10.40 нм, яму взво дедтннунаьх Ї 150 шо І я зво й Пік димера. Е
Е лоо ни ЩІ В. 100 5 5о т2в0 во
Я.
А
Я
У НИ НИ ПИ НБН М ше
Фіг. 48
Хвилини і 2 4 б З 10 12 14 д2 40 Час утримування 20
ЗО Зо - М1НММ ті Я в. (фракція А2) Е з в 2о 20 в 2 г з
І ШО І І
0 я наван ши 0) 0 2 4 б 8 10 12 14
Хвилини
Фіг. 4С в 220 Ак о ота ще ку 1200.00 ДАЕ о 800.00 Уа є ; шип лиш о 0.001 0 01 01 1 10
Концентрація білка (мкг/мл) 100 г ю 00020
Ше за во 5 ев 0010ИиИи - в 40
НАШИ пс сх пи, (ик СЕ рон Криту 0 бл 1 10 100
Процент комлементу щ 100
Е во ; є
З си ШИ во бо ше іш о
ГІ , я 40-53 тя 00 о 5 20 каш 5 о 0 1 10 100
Концентрація білка (мкг/мл)
Ф--- Стандарт ТКОО16, очищений на протеїні А (стандарт рА)
ПЕРЕ Пікдимера ТКШОО16
А - ТВОО16 НММУ А? (299)
Х--- Середовище
Фіг. 5
400 (1 Середовище - с- шишааний
Е БЕЗ Б т ТКЦОО1вФ З момл --- ЕН З тео). 5 мкпмл
БЕ ше Б З 77 евтхМмемов мюомл
Е Ге ЗБ. АХ автхмо).Обмкімл ТЕЦО 160). 5 мкгімл ї Е-2-- ШЕННЯ МАХ
Я є БЕЗ - в ТЕЦО15(Ф. б мктмл ТЕОО16С). 5 мкгймл
М -еВ- : Й я
Шк БЖ. --
ЕЕ.
Е зап ЩЕ: Ще.
ЩЕ Ще й БЕН ЕМ
МН (1095) Ста виснажені МН (1095)
Фіг. 6 100 платті
АБ Є Ж Ж Ж - 2. - - Б 6 / ж - - 5 «и - Б Й Я -2 2 Я -яйх 803 А- -- - - - - - - - - - - - -- - -- д | --твцої5 рон че НИ хо 70 ь. --й- ТАО1БКТАЦОЇв щ їв ль з ЗЗ8- мо
Е ва ню - х 30 в
З
-25:.5 51 2 24
Фіг. 7
ВО р-н 1 о т оп о оо 1 п опт ото З 2 2 (Н З З 2 ПН то - - во -
Е 51. ЩІ Середовище . ю ЮІ 2096 Ни5 5 830 о «5 ПНО о х ж 20 10 о втхм тов то втхМ тв
Є 06 мкм (0 5 мксмл 5 мкмл Кен ен (25 мкомл 5 мкомл
Фіг. 8 120 ст 100 - г т аюентиво сне
З -й-ТЕО0155ТРОО 1 2. 5мкомл тво пт т я 2 40 о й 75 5 1 2 мкгімл ТКОО15
Фіг. 9
120 ниви 100 шт АТМ --ЕТХМАТКЦЮОТ6 (Ф..5 мкг/мл -й- ВТХМКТАЦОЇТВ (Ф 2. Б мкг/мл щ 80 -о-- Середовище ; во ен х гу 40----------------- 20 сте» о дет 0 .06 125 -25 -5 мкг/мл ВТХМ
Фіг. 10 70 15:11
От 13 50 --тТКО015 --ткцОїв --тТеЕцої5БАТвО016 в 50 -«-Сереловище г : в 40 в а
В
Е 30 20 4- 10 - " Є -Ь т тет х 0 -- - - : - 2 - 2 5 -- -- 5 -- --- 10 1 4 .05 025 -012 мкг/мл
Фіг. 11 70 й 1571
Опг 13 бо. ух 5 дня --Т0015 --тТООї6
Е --твО155ТвШ016
Із 50 о -к-- Середовище р.
З 40. однин г.
Ей - зо : -Ж 23-А--- ж 2 - й тй яй ((6(«565 5 66.дЖФЖФЖжяБ-6«"66Ш2ШИХВШВИ-- Ф - - - х 10. о сти 1 А -05 .025 12 мкг/мл
Фіг. 12
15:.1
Ф з А Опг 13 5о --ТЦОї5 й --твув
Е о --ткПо15ТАЦОї
Е дО. мл --кх-- Сереловите 2 30 Ин -я-к
З
2 : 10 х о 10 1 А 05 025 -012 мкг/мл
Фіг. ІЗ во, 251 80 ій --ВІХМ 70 іа а М -я- тВО0І6 о а ---ВТхмеитти0іЄ
Ех о Фо Сереловище
Е 60 Зк - 40 и
Ж зо 10 - -- 3-6. -2..4 о сп 10 1 А 05 1 -005 мкг/мл
Фіг. 14 80 12.51 о 70 о ки у --ЕїХМ що 60 о --КТХМАТКЦО6 а с --4-- Середовище й в : я- : ша б 40 є А
Е
30 ш
Е
20 .
Ф - 10 1 4 -05 й 005 мкг/мл
Фіг. 15 во то а я дно с во ТА --ТЕШ015
Е ів КО -к- ТВЦФІБеТЕЦОТЄ в КА се В
Б 50 Шо вв ш «0 о» г ї нн ще Й
З 4 в 30 -4 В полинйиййьь 2 20 : - й 19 шт «'«АВ о . 1 4 05 025 12 мкг/мл
Фіг. 16 80 5; 125 70 5-6.
Е 6о «у тТАЦО16
У 50 й У Середовище 5 40 : нн й ж но зо йо «МИ І 5 й Ту ?0 з. 10 7
Н) 2-2-- '- - 4 :« . А - -« Ш5- - - Б - КК- . ХХ -ь 10 1 А -05 -025 .012 мкг/мл
Фіг. 17
" Піамлининиий щ
Е і у) а
В п я я 49
І
" т (0) 0.1 1,0 19.0 109,0 мкг/мл ТАЦО187
Фіг. ІВА ! ' 100 ті х : 80 6;
Й . в ни: ОДИН ж
ОО тн-- | (юЗ 000. 0 0 1 02 03 04 0.5 05
Ритуксан (МКГ/МЛ) -0- Ритуксан я ТЕОО16 (0 2.5 мюг/мля. Ритуксан щих
Фіг. 188 зе нн 0000000 --
Е 300 ка в о: я Го 7 х о 0 0.2 03 0.4 0.5 06
Концеквтрація ритуксану (мкг/мл) --- Середовище ---ТЕШО16 (д 0.5 мкпмл
Фіг. ІС
Е
Е Ге) х
Є й Ф,
Е 40 й -- ря 0 0.001 0.01 0.1 1 10
Концентрація білка (мкг/мл) --АВТХМ з- ТКШОЇ6 -- БІХМкТвЦО1е Є Оередовище
Фіг. 180
Стандарт рА
Одне середовище ТВ М о 1 6 т ПЕД е ЕР . 016359 004 - , ЩА в по МЕР
ТЯ тв, сум Ні 205 ЗЛИМ 328
Й Й ТАМ, за. ті КИ. 78.8 ВИ 8.5....49.0 ПРЕ. 19.7 са ОБЕРИ з сш щ г- ЗАЙ іх де НИ бю! юс м м паші зд лише еп амп
Фіг. ІЗА 0001177
З
БЕ
РЕШИЄВ) 0 Цос--- 1 Ш. 5 5О | СУ. Середовище и е нини
Ж е 40 ж ТКЦОТ6 І 0 -- Б 5юСющ фо щ в пиши шш Ш ва 5 РвРщ ТИ - х "ши шт -- | й ж :
Ей 0 24 48 24 48
Середовище - Козячі антилюдські антитіла
Фіг. 198 зві ве 000000
К | 0172 год ж 2.5 1 нн 05 Щ - ет ши ши ші пі й Шшке Шше нео
Середовище ткПО16 втхМ
Фіг. 20А
Я що 2303 - 35
Е 2
А і з о ЩІ 1 що 1 шк шк ШІ
Середовище тео ВТХМ
Фіг. 208 о ОПО що 100 1 171 г и І м
ІН ТИ
Й що й жо 40
ЩІ ЩІ. й
Ши ши о 2дагод 72 глд ФАсгод о тргод ФАгод т72год
Сор19 сп40 соз
ГО Середовище ВК ТЕІО16 (Ф 1 мкг/мл
Фіг. 20С
-- 1500 о -- Нидо ша -к- ТЕЦО164 ритуксан (200 мкг/мита) о; й -- ТАИО164-витуксан (100 мкг/миша)у
В 1000 ся А А х я А пн д --- ТВОО16 со мемиша) в з ден а -0- Різуксан (200 мкі/мищша) . 500 а в) 9) п 5 10 15 20 25
Доба
Фіг. 21 1600.00 вві 1020-0200 я 1200.00
Я юю 0-0 ект екю
В . вся Ж
ОЇ нйжньн 00203003
Е 800.00 М Х в 80000 --К 400.00 Іс зві ИШЗШН96 А 0.00 в 20 40 во 8о 100
Доба - Ншдо -к- ТВОО18 200мхг/миша 0/7 Ритуксан 200 мкг/миша
Фіг. 22А 0 Гвтдшпотто 100 й т 4 нт пукевн б мктнтв) 80 ши? ра том СИТО . і
Кк 80 х ф-ь г 8 480 ЕВ -Е й ІН ПО 0 Ф Куна устя сутанннсу у 0 5 10 15 20 25 Зо
Доба
Фіг. 228
Фіг. 23А Фіг. 238
Анти-група П-антитіла Анти-СО 19-антитіла 80 7 8 - 0 "
Е 50 га т во що 507 50 3 я 8. - 403 - в глини о в- жо сен 204 10 М1А----енх ТТН 0 1 0 20000 35000 10000 5000 ди Що і 10
Розведення анти-група П-антитіл Концентрація анти-СО 19-антитіл або одного реагенту
С, днти-Со 45-антитіла 0. СТАВІ 80 80 703 70 - ки 21000207 во во 2 ув жи ли
Кз киш ИН
І вО0- м но о ро 001 ви 4 40 НІ 0 1 10
Концентрація анти-СО 45-антитіл або одного Концентрація СТІ. А41р8 або одного реагенту реагенту
Фіг. 23С т у А, В, С, або 0 Середовище Фіг. 2400 -- А, В, С, або О я Ритуксан (0,05 мг/мл)
Й А, В, С, або О 3 ТВІСО16 (2 мкг/мл)
А-Х Одне середовище ру Одни рипуксан (21.05 мкгіна) -Я Один ТВО016 (210,5 мкг/мя)
УЗ снаро 100 щ -5--ТВО-016 200 мкг/миша . яке фе "ритуксимаб 200 мкг/миша ' в 75 ' д « й ТКО-016/ритуксимаб
Е 100 мкг/миша
І-І - 5 ' о 5 - - 0 -ТКО-016/ритуксимаб щі 50 є га М т ' уз о 200 мкг/миша : ета я и 5 ' 5-3
В У М флірт -А 254 1 9 іа ' б'я чн 7-х сао укнй нь кову з з з 0-- з 0 25 50 15 100 -- 2 Доба
Обробка ж Комбінація ТЕОО16--ритуксимаб віДрІЗНЯЄТЬСЯ СТатистично достовВІДНО від монотерапи ТКОО16 (Р--0,028) або ритуксимабом (Р--0,045)
Фіг. 24
100-т 5-67 цк ше Меч, ах, б. т -ТКО-016 100 мкг/миша - 75 з. т !, , - 2у- "гритуксимаб 100 мкг/миша г пу
Е На ко 50 шт - 5 г) м з
Ж ' ьЯ і Ф: в ' ' 8 25 Вже фл 8 ТВИ-016(Р - 0 0034) д ' філ ит я я ж 4-х ритуксимаб (Р--0 1151) к 0 о 25 доба 50 75
Обробка Ж |ор, балів (в поріВНяННІ З ЛЮДСЬКИМ
Ів)
Фіг. 25 100 ге --- ншеб - й -- ритуксимаб (100 мкг/"миша) 75
Ко) ! І - 2-- .Т1К0-016 (Юбмкг/миша)
З в г 5 50 є щу. о І)
З 25 сб ро -- 0 2) 25 50 75 100 ши
Обробка Доба ов балів
ТКОО16 проти контрольного людського
ІРО Р-0,003
Ритуксимаб проти контрольного людського
ІВСР-0,115
Фіг. 26
100957 в --пи0 -- Ми 0.02 мкм а 9095 кх ---РибовмкмМ 7-0 32 МКМ об ЗУ и го мМ " ТО ж М, бою о Соя ак
Е БО -ї ХУ ту тивно х 409 у Давня « о чит три
Ж З096
Е Е 2095 ово 010967 оо 0.01 01 1 10 100
Концентрація ТКО-016 (мкг/мл) ; 10095 во в К
Б й днину - Кк тА 6095 Шіслин сист вел А я 409 ЩЕ т Сб
Ж --тТКЦ0-0160 8 в 20954 -й--ТВО-016 0.08 --т8Ц-016 0.02
ЕЕ --ТКО-016 1.3 --ТКИО-016 0.32 дм о --к-- ТКО-016 20 -- 150-016 5 о 0.01 0.1 1 10
Концентрація флударабіну (МКМ) с 2596
І воріт 2, ги - 1595 щ а
А 1090 н е
Бо ра оо 0 10 20 Зо
Концентрація ТКО-016 (мкг/мл)
Фіг. 27
12095 Ї Середовище ЕЕ Герцептин ЕВ Ритуксимаб || тЕи-016 ш
Ж о, І Ре
Е 10095 Б Е пе в - шк ВИЙ ШЕ ГО аку а Мк З з во | ря ще Б, : ше ше З х Я пом рий шк.
КІ о --к вл в наши 60 Я ки ря
Е наши ИЙ ши чи ий а ши Ше в аре | ЕЯ ве ЕЕЯ 2 зак й щачиди З в тот --к що
Е ЕЕ ш-Е ж в о в-нх ще кий 2095 ший ша рий ЩА яки Й -щ ий
Ж ж Ж п кала пита нина
Каї АК вк АК Каїї
Фіг. 28
Фарбування кумасі синім , Вестернблотинг єї «фосфотирозин щ п сн а, Я. сдЕНЕ 0. зей НИ монах - ї шк НН гне ши НЕ.
БОоДа - . ЩЕ. 0045 ен ай І вне: 00, 3 и ше Шия 4 життю ро ес 0 свой ж | осли | ан
ООН дп ВО ненутенстстсті пикани сек ПЕН тх кН Дни ! твда, З - дек НЕ ННІ. «ВИ щи шо не ен; Ше же Е плн а 7 ше: тя В ЩЕ «нн. Ся, тю в ' е г. педа Я о ТОН ПЕ, '
Фіг. 29 й 1-21 сові. т 016 -,528-1 ОІФМТО5РАБІЗАЄУСЕТУТІТС КТ5ЕКМУ5МА КУООКОБК5РОМ МУ нот6 7 019001 ЕТМІТО5РАТЗІ5РСЕВАТЬЯС КТОЕНУТЗУТА МУДОКРОДАРКОСТУ постідовисть І ТОбРА 15 5 БЕ Т С РТ5ЕНУЄСУТА МК Є Р. пог 1 1-ЕЗ і-соз 016 -.б28-1 ЕАКТАЄ СМРУКЕ565650ТОЕ5ІКІ5ІОРЕО5СЗУЕС ОННУОМРИТ
НОї6.-.019001 АКТА ЄТРАКРУОЗ5СТОКТТ59СЕРЕОРАУТУС ЧННБОНРИТ послідовність ЕАКТІАЕ Є Р ЖРЄ5С5СТ ЕІ ІбІ РЕО У С ОНН5ОКРАТ в (645)3 Т1пкеє і н-Які ю 016. -.628-1 РООСТЕЦЕІК пО09596655055555 АМЦО956РЕСЕКРСАБУКТУСКАЗСУЗЕТ ної6.7. 019001 БоДСТКУКІК Себо5ооевавовте ЕМОГУЦСАЕУККРОЕУЦКІЗСКООВУ5ЕТ поскдовить б ЄТ БІК сбоб55о6696055 МИ 055 Е КР 5 КІЗСК 56У5ЕТ ножі нове? в-сок? й 016---628-1 СТІ МУКОННСКІ МТС КІОРУУЗСТТУЧЕКЕКЄ КАТІ ТИС ної6 7.019001 СУМЯМ МУКОМРСКСІЕННЄ МІОРУЧТОСТТУМККЕКЄ ОУТІЄАСК5Т послдвнить ЄУМММ МУ 0 ЄК ЕМ Є КІОРУТОСТТУМЕКЕК То ОК5 5 дет Нез НЕ 016.-.628-1 ТАМИЦКБІ Т5ЕО5АМУУСАК ЗМЕРИРУ кедат5УТУ5
Но16 7 БІБ ТАІОНОБІКАБОТАМУУСАЄ ЗУЕРИОУ МЕКОТИУТУЗ послідовність ТАУ 4 5 0 А УУСАК 5УОРМОУ б СТ УТУ55
Фіг. ЗОА і 50 216, - 019001 ЕТМЦТО5РАТІ 5Д5РОЄКАТЗСКТЗЕМУУ ОМ ЛИМОДКРОДАРКТУЕ
НО16..--019008 ЕРУСТО5РАТІ 51.5РОЕКАТЬ САТ МУЗ ЛИМЦОКРОДАРЕМТУЕ
НО16..-.019009 ЕТМІТО5РАТІ.5Г5РОЕКАТ.5СКТЗЕММУ ХО ДАУУОДКРООАРЕСЦСІТХЕ 51 300
МНО16.-.919001 АКТЛЕСІРАКЕ5О5О5ОТОП ТІ55ЦЕРЕОКАУУЧУСОННООМРАИТЕОВ
НО16.-.019008 АКП.АЄОІРАКЕ5056559 ЕТ ТІ551 ЕРЕОЕАМУУСОННІОМРИТЕОЙ
НО16. -.0195009 АКТ АЄСІРАКЕ5о5555 106 ТІ551 ЕРЕРЕДУУУСОННЗОНРУТЕСО 11 150
НО1ї16 - 019001 БТКУКІКОопОо5Ообоб5Оа( ТЗЕМУОЇ УО5ОАЕМККРОЕ5І КІЗСКО ЗВУ
НО16.-.019008 ОТКУБІКОСОО50600590О5АБЕМОЇ МО5БАЕЗККРОБ5ЬКІКОЗОМ
НО16 -.019009 бБТКМЕІКОобааЗооо5ООбАБЕМОЇМО5ЗАЕЗККРаЕЗЦКІКОоСУ ж ж 151 200
НО16..-.019001 5ЕТеУМИКАУКОМРОКОЇ ЕМО МІОРУУООТТУМЕКАКООМТІЗАЮКІ5
НО16 -.059008 5ЕТОУМИМАИУКОМРОКОЇ ЕМИОМІЮРУТааТТУМККАКООМТІЗАТК5І5
НО16. -.019009 5ЕТеТМИНИМКОМРОКОІ ЕУМОНТОРУУСЄТТУМЕКЕКОНУТЕБАОКЬІВ 201 239
ЯО16.-019001 ТАТО КАЗОТАМУУСАКУМОРМОТУАКОП УТУВІ
НО16.-.019008 ТАМ ОМ55ІКАЗОТАИУУСАКЗУВ РИМОМ АКОТ УТ .
НО16.-.019009 ТАТІ КА5ЮТАМУХУСАКУУуаРМОУчЧОКат Туз
Фіг. ЗОВ
Номер конструкції | Опис Пларнірна Послідовність ДНК ' 019001 УкЗ:МНЬ-ві 550-Р аддаадесосадсісадсисістосюсієсасістдсісссад 049041 МУкЗ:МН-ВІ - З8С-Р о ааоснкоссдссаіддавоссссадсосаодсисісносіссювєіа й 019044 Мк УН5-Ві З50-Р аадсндссоссадавоссссадсосадсисіснесіссюєа І
Амінокислотна послідовність шк теарадітмрнаємидеранзієрдеганзстізепчузуамудакродаргійуакнаєдірагізовдв аа извіереахуусаппзаприйодоікуейкоочоз9999599ч919е» теарадійдімранаємиозрайзізрдегацеставепмувуамудакрочарпїуаківецірагі: дозво Іередіаууусапизапраянодоікекдодозоваовадовіе теарадійівмроандемноврайзізрдегайзстазепуузуамудакродарніїмакдаедіранзозазаюнквіередіачуусдпнеапринодакмеіквовозодвавадоціде «дімазааеккраевікізскозаувпдуптптатрокдіємтвовідруудавупкодуєвааквістау дмезІказататуусатзидрптау мому адеркозакнвррерар мамаздаеуккроевікізскозаув Пдупттамгаптрокоїемтапідруудануппйкодмізадквівіауюивзіказаатуусавдрвучадімуззідеркззакіівррорарі удіхосдаєуккровеїкізсковвуз Пдулитучатрокдіемтопідрууданупкікадлівадквівтауюивзвіказ дкатуусагзморіаву аа мивзадерква ак (вррераре епоадреміврркркойтівпремісиучізпедремкіттуайомемнпакікргевдупзіуплммадмілокеукскувпкаїраріекізкакодргерамуйррегдейкп ув йскоїу еподремірркркайтівпремісуучімепедречкітчучаеУпаккргеедупвіугви м пампокеукскиапкаіраріекізкакодргераууйррзгаенкпаузнсімкову ейдоромірркркайтівпремісууімепеареукіпау іде пакікрееедупв упо кіпокеукскувпкараріеікізкакодргеромуВвррагейкпдувксікоїу /рздіамемезподреппукерруїазаоз ув ким кепі зсзмтеанплу г квівівроК ' "рзаїахежехподреппукирриюзадвніувкимкапудадимсзмтеайуквіроки ' /рздіахемезподреппукнррукіздоз уз кім кептаддлУз степу квівізроки й
Фіг. 31
ЛЕГКИЙ ЛАНЦЮГ 2-4 ЕВ... 0 СВІ «и. ЕВ3....:. 019041 ЕТМОТОБ5РАТІОЗЬУРОЕВАТОЗС ВАБЕМУУВУЦА МУООКРООАРВІЛІУ 019044 ЕІМПТОБРАТІЗЬБОРСЕКАТЬОС ВАБЕМУТБЖОМ МУООКРСОАРВІТІУ 015001 ЕІУЬТОЗРАТІЗІЯРСЕВАТЬОС ВТЕЕМУУВУЦА МУООКРООАРВІІУ
ШЄОЕ)У. ос. КВЗ істини... і 0383 000....ЕКМ,., 019041 БАКТОАЕ СЕРАКЕЗСЗСЗСТРЕТЬТІЗЗЦБЕРЕОКАМУТТС ОНЕБОМРИТ ЕСОСТКУВІК 019044 ТАКТІАЕ бІРАКЕБОБОБСТОЕТІТІЗЗІЕРЕОЕАУХУС ОННВОМРИТ ЕСОСТЕУВІК 019001 ЕАКТОАЕ СІРАВЕ5СБО5СТОЕТІТХОВОЕРЕОБАМУУУС ОННБОМРИТ ЕСОСТКУВІК
ВАЖКИЙЛАНЦЮГ 09, ВВА... СВІ... ЕВ2.. 019041 ЕМОГМОЗСАЕУКИРОБСЬКІЗСКОЗСУВЕТ СУМММ УУКОМРОКСГВМИО 019044 ЕМОСУОБ5САЕУККРОЕСЬКІБЗСКОБСУбЕТ СУМММ ШУКОМРОКСГЕНМО 019001 ЕМОБУОЗСАБУККРОЕЗІЖІЗСКОЗОУВРТ СУМММ МУКОМРОКССЕММО сок2 баню ВВ 019041 МІРРХХССТТУМВКЕКС ОУТІВАРКВІВТАЖІОМЗЗІКАВОТАМУУСАВ 019044 МІРРУТОСТТУМВКЕКО ОУТІЗАРКВІЗТАХІОМЗЗОКАВОТАМУТСАВ 019001 МІОРУУССТТУНЕКЕКО ОУТІЗАОКЗІВТАХІОЙЗВОКАВОТАМУХСАВ ---СО83, ....-ЕВ4... 019041 БМОРЕРУ йоОстіУТМ85 019044 5МОРЕОВ йсОСТОУТМУ 595 019001 БУСРМОУ ЖсВСТЬУТУО
МНОЖИННЕ ЗІСТАВЛЕННЯ ПОСЛІДОВНОСТЕЙ СІШБТАЇ, М (1,83) 019041 яння н-АТОЗААОССССАССОСАОСТТСТОТІССТОСТОСТАСТСТосСТоСсА 48 019044 яння АТССААСССССАСОССАССТІСТОТТОСТОСТОСТАСТСТОСОТоССА 48 019001 ААССОТТСССОССАТОСААОССССАССТСАССТІСТСТТОСТОСТоСТАСТОТСОСТОССА 60
Фіг. 32А и хпкІчУйккхіУжкнАхХ хухжининикиазчкаканькакинанкнкхукЕхих 0193041 САТАССАССССРСАААТТОТОТТОАСАСАСТСТОСАСССАСССТоТоТТТОТСТосСАСоС 108 019054 САТАССАССОСАСАААТТОТОТТОАСАСАСТОТССАВССАСССТОТСТТІоТСТоСАВОС 108 019001 САТАССАССОСАСАКАТТОТОТТСАСАСАСТОТОСАОССАСССТОТСТТІсТСТосАСОоС 120 пікніку икіачккокикккиучкуйкуіхжккиваийжкакижкажжкижикиажжжи 019041 САДАСАСССАСССТСТССТОСССАОСААОТОСАААВТСТТТАСАССТАСТРАСССТоСТАС 168 019044 САЛАСАСССАСССТОТОСТОСССАССААСТСАКААТСТТТАСАОСТАСТТАСССТОСТАС 168 018501 САЛАЗАСССАСССТСТОСТОСССААСААОТОААААТОТТТАСАОСТАСТТАСССТОСТАС 180 хкнкикунинкикккинк»каі жк каиайихикяккхйнихнихккккакхикиужикжж 019041 СААСАСАДАССТООССАЗОСТОСТАВОСТОСТСАТСТАТТТТОСАВАЛАССТТАССАОДА 228 с195024 СВАСАСАДАССТОСОСАВОСТОСТАСОСТОСТСАТСТАТТТТОСАВАААССТІВССАЗАА 228, 019001 СААСАСАЛАССТОСССАСОСТОСТАСССТОСТСАТСТАТТТТОСАААААССТТАССАСАА 240 ккіккиункнаникнккпанкнижаннинтякнийхккжкккекийжкинкижкиАЖЖАЖКА ж ж 019041 ОБААТТССАСОСАССТТСАСТООСАСТОСАТОССОСАСАСАСТТСАСТСТОАССАТСАВС 288 019044 ССААТТССАСССАОСТТСАСТОССАСТОСАТСССОСАСАСАСТТСАСТСТСАССАТСАСС 288 019001 ССААТТССАСССАССТТСАСТОССАСТОСАТССОСОСАСАСАСТТСАСТСТСАССАТСАСС. 300 хкхукхакунькхнкУухккАвикккикиккЕикуУКУУкукнижакЕКкНЖнЯКУжчжжинКК 0193041 АСССТАСАОССТОААСЬТТТТОСАСТТТАТТАСТОТСААСАТСАТТОСССАТААТССоТов ЗАВ 015042 АСССТАСАБСОТОААСАТТТТОСАСТІТАТТАСТОТСААСАТСАТТОСОАТААтТосСОоТас 348 019001 АСССТАСАСССТОААСАТТТТОСАСТТТАТТАСТОТСЛАСАТСАТТССЯаАТААТСССТОВ 3650 зіУукінккайнккккажкикиникиккккАввникаиюикикжиижАКАЖ Ж ж жи ж ж ж 019041 АСАТТССОССААСОСАССААОСТОСАЛАТСАААССТОСССоСооСТоСсоососТОстТосА 408 019044 АСАТТОССССААБОСАССААОСТОСАААТСАААССТасосСсТосстТосСоосостТестосА 408 019001 АСАТТОССССААСССАССААОСТОСЛААТСАЛАССТоССОоСтТоССстТоссосостТОастоСА 420 кхкихкихккикихкккиккикххкіхаАккакакккихки жипкккийчк»кикКкажи 019041 ТСТОСАССАСОТООСАССОСТОАСОТОСАССТОСТОСАСТСТОСАОСАСАСОТОДААААС 468 019044 , ТСТОСАССАССТОСОАССОСТОДОСТОСАОСТОИТОСАСТОТССАССАСАССТОААААдС 468 019001 ТСТОССАССАССТООСАССОСТОАСОТОСАССТОСТОСАСТСТООАОСАСАССТОАААААС 480 чикхкукизхкаукинникекінихкнажихкххікккиккуУкихнЕккххаАікжякаАжКАЖА 019041 СССОСАСАСТСТСТОААСАТТТОСТСТААСОСОАТОСООТТАСТСАТТСАСТООСТАСААТ 528 019044 СССОБАСАСТСТСТОААСАТТТОСТОТААСОСАТОСООГТАСТСАТТСАСТООСТАСААТ 528 013001 СССОСАСАСТСТСТОААСАТТТОСТОТААОССАТОСССТТАСТСАТТСАСТСОСТАСААТ 540 ккекнникккикккнккккіннчккиккиккаккикккиникикіжиккикиканкихих 0193041 АТОААСТОСОТОСОССАСАТОСССОСОЛАДОСССТССАСТОСАТОСОСЛАТАТТСАТОСТ 588 019044 АТСААСТОСОТООЗССАСАТОСССОСОАААОООСТОСАЗТОСАТОСССААТАТТСАТССТ 588 0195001 ДТСААСТОССТОСОССАСАТОСССССОАААССССТОСАСТООАТОСССААТАТТСАТОСТ 600 ?"каикАкиИкккикхчниКниКккиаккникиикхккиккниниийиихкиньккАЖиЖУЄВВИй 0199541 ТАТТАТОСТОСТАСТАССТАСААССССААСТТСАВССОССАССТСАСТАТСТОСОоССсАС 648
Фіг. 328
019044 ТАТТАТССТОСТАСТАССТАСААССОСААСТТСААСОСОСАСОТСАСТАТСТоСОСССАС 648 019001 ТАТТАТОСТОСТАСТАССТАСААССОСААСТТСЛАССОССАСОТСАСТАТСТоСОосСссьС 660 кикхизккикинкиникикаАйчхкхакплччянчкихииккпххикитанхнижникажжииж 019041 ААСТОСАТСАССАССОССТАССТОСАВТОСАССАСССТОААСОССТОССАСАСССССАТО 708 013044 ВАСТССАТСАССАССОССТАОСТОСААТОСАССАОССТаВАСОССТОСОАСАССОССАТО 708 018001 ААСТССАТСАОСАСССССТАССТОСААТОСАССАСССТОААСОССТоСОАсСАССВССАТО 720
УуткзкакУякикхкакихкнтйччниучикхкикивккжнвайкукижийхжживижи 019051 ТАТТАСТОТОСАСССТОАСТССОССОТТТСОАСТАСТОССОССАОСОСАСССТООТСАСТ 768 0190544 ТАТТАСТОТОСАСОСТОАСТОООСОСТТТСОАСТССТОСССССАОСОСАСоСТОоСТСАСТ 768 015001 ТАТТАСТОТССАСОСТОСАСТОСОСССТАТОСАСТАСТОВОССССССОСАСОСТООТСАСТ 780 узакхкзкикнизкінахкиакуУКакА х ках дикаізкаж хвічжккккииаи 019041 ОТСТОСТСТСАТСАССАССОСАААТСТТСТОАСАЛААСТОВСАСАТОТОСАССотТОоСссСА 828 019024 СТСТОСТСТОАТСАССАССССАААТСТТСТОАСААААСТОАСАСАТСТОСАСССТОСССА 829 018001 СТСТССТОТОАТСАССАОСССАААТСТТСТСАСААВАСТСАСАСАТСТОСАСССТОСССА 840 сажки хнукккижижижкаккжкжжиккижижж й ж ж ж жи ж ож жо ж ж ж ж ж 015041 ССАССТОСААСТССТОСОТОСАССОТСАСТСТТОСТСТТОСССССВАЛАСССААОСАСАСС 858 019045 ССАССТОААСТОСТООСТОСАССОТСАОТСТТССТСТТССССССААЛАСССЛАССАСАСС 888 019001 ССАССТОААСТОСТСССТОСАСССТСАСТСТТССТОТТССССССААААСССААССАСАСС 900 хін кУунатитяукткенкиннийкккпткиктккиккхккккажи кий жити жжж ж 019041 СТСАТОАТСТОССООАСОССТОАСОТСАСАТОССТОСТОСТОСАСОТОАСССАСВААСАС 948 0195044 СТСАТСАТСТСССООАССССТОАСОТСАСАТОССТОСТОСТОСАСОТСАСССАССААсАС 948 9019001 СТСАТОАТСТОССОСАССССТОАСОТСАСАТОССТОСТОСТОСАСОТОАВССАССААсАС 960 купку кинникаіккккаАхнНуУКкКкаАххйикукякиккиКЕкиКкИкжкжиичкж 019041 ОССТОАСОТСААСТТСААСТОСТАСОТОСАСООСОТОБАССТОСАТААТОССААСАСАААо 1008 0193044 ССТОАСОТСААСТТСААСТОСТАССТОСАССССОТСОАОСТОСАТААТОССААСАСАВАсС 1008 0183001 ССТОАСОТСААСТТСААСТОСТАССТОСАСООССТОСАССТОСАТААТОССААСАСАВАО 1020 «сіє кзжкукхкниькукаєккьжакакикикиижккежккижикккиижжкииивУх 019041 ССОСССОСАЗСАССАСТАСААСАССАССТАСССТОТОСТСАССоТоСТСАСССТОСТОСАС 10658 019044 СОССООСАСОАССАСТАСААСАССАСОТАСССТОо ТасСтТоАСсстТостоАсостТостТосАС 1069 6195001 СССССООДССАОСАСТАСАВСАОСАССТАССОТОТООТСАСССТОСТСАСССТОоСстТОосСАС 1080 зихилканкліткаккакхитхачаннуххвнкижаукюкакаьииьчайакивихи 019041 САССАСТООСТОААТОССААССАСТАСААСТОСААСОТСТОСААСАААССССТооСАсСС 1128 019044 САССАСТСОСТОААТООССААОСАСТАСААСТОСААССТСТОСААСАААОСССТоССАССо 1128 019001 СВОБАСТООСТОААТОССАВОСАСТАСААОТОСВАССТСТССААСЬААЗСССТОССАССС 1140 зихккахкинка хв кикиу»в кави никьвиикикивкихажижкиаквкивкжжж ж 0195041 СССАТСОДСААДАССАТОТОСАААОССАААОСОСАОСОСССЗАСАЛОСАСАСОТСТАСАСС 1188 019044 СССАТССАСАДААССАТСТОСАААСССАААССССАСССССОАСААССАСВОСТОТАСАСС 1188 019003 СССАТСОАСААААССАТСТОСАААССТАААСОССАССССССАСААССАСАОСТОТАСАСС 1200 пиккаиклнижккнуккихкокккікаітнітнккнеікктаккьхкихииккаткхииняже
Фіг. 320
019041 СТОСССССАТОСОСОСАТОАССТЗАССААСААССАОСТСАСССТСАССТОССТОСТСААА 1348 019044 СТОСССОСАТССОСОСАТОСАОСТОАССААОААССАСОТСАОССТСАССТОССТОСТСААА 1248 0195001 СТОСССССАТООСОБСАТОДОСТОАССААОААССАССТСАСССТОАОСТОССТООТОВАА 1260 кинутих кпиитникевуииикукхчиканиккиккихжикивиикхажкии 019041 СОСТТСТАТОСАЛОСВАСАТООСССТОСАСТСОСАСАССААТСООСАССССОЛОДАСААС 1308 018044 ОСССТТСТАТССААОСОАСАТСССССТОСАСТОСОСАСАССААТОСССАССССОАСААСААС 1308 019001 ОССТТСТАТОСААОССАСАТСОССОТОСАСТОСОСАСАССААТОВОСАСССОВАСААСААС 1320 «ік"пкзчхякикизкивункикакютиИхикккиккиикккквихиикжкиккиктийх 015041 ТАСААСАССАСОССТОССОТОСТОСАСТОСОАСООСТОСТТСТТССТСТАСАОСАЛОСТО 1368 019944 ТАСЛАВАССАСОССТОСССТОСТОСАСТОСОАСООСТОСТТСОТТССТСТАСАССАвОоСТС 1368 2195991 ТАСЛАЗАССАСОССТОССОТОСТОЗАСТОССАСОССТОСТТСТІССТОТАСАССААССТС 13 80
ЖЖ жк ж й ж Ж віє й ЖЖ й БОМ ж жов жо ж Ж жов жк жо жо ж ож ж ж 019041 АСССТОСАСААСАССАССТОССАССАОСССААСОТСТІСТСАТОСТОСотТОАТОоСЬТОАс 1228 019044 АССОТОСАСААСЛССАОСТООСАССАСОССЛАСОТСТІСТСАТОСТОССТСАТОСАТСАЄС 1438 919091 АОССТОЗАСААСАССАССТООСАССАСОССААСОТСТТСТСАТОСТОССТСАТОСАТОАС 1440 скпизжиуУЖижахкУиИКкЕйжнкикик книжки кажи жжкжкихайижижжж 019041 ССТСТОСАСААССАСТАСАСОСАСААСАСССТСТОССТОТСТОСОССТАААТСА------ 1482 019044 ЄСТСТОСАСААССАСТАСАСССАСААСАСССТСТОССТОТСТОССОСТАААТСА------ 1482 013001 ССТСТОСАСАВССАСТАСАСОСАСААСАСССТСТСССТОТСТСОСССТАААТОАТСТАСА 1500 пккУуюєкинуккихкУйіікиказачкакактнататйктижкижежжжжжижиужиж
Фіг. 320)

Claims (41)

1. Гуманізована специфічна до СІ37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну, що містить варіабельну ділянку легкого ланцюга й варіабельну ділянку важкого ланцюга, де (1) гуманізована специфічна до СЮ37 зв'язувальна молекула зв'язує СІО37 людини, 1 (11) (а) варіабельна ділянка легкого ланцюга включає СЮОКІ легкого ланцюга, наведену в 5ЕО ІЮ МО:61 або 62, СОК2О легкого ланцюга, наведену в 5ХЕО ІЮ МО:64, 1 СОКЗ легкого ланцюга, наведену в 5ЕО ІЮ МО:66, 1 (5) варіабельна ділянка важкого ланцюга включає СІОКІ важкого ланцюга, наведену в БЕО ІЮ МО:63, СОКО важкого ланцюга, наведену в 5ЕО ІЮ МО:65, 1 СОКЗ важкого ланцюга, наведену в 5ЕО ІЮ МО:67, 68, 213 або 219.
2. Гуманізована специфічна до СІ37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. І, де варіабельна ділянка легкого ланцюга включає амінокислоти 211-127 5БО І МО:48.
3. Гуманізована специфічна до СЮ37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. І, де варіабельна ділянка важкого ланцюга включає амінокислоти 144-259 5ЕО І МО:48 або 52.
4. Гуманізована специфічна до СЮО37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. І, де варіабельна ділянка легкого ланцюга включає амінокислоти 21-127 5БО І МО:6, 1 СОКЗ важкого ланцюга являє собою наведену в 5ЕО ІЮ МО:67.
5. Гуманізована специфічна до СЮ37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. І, де варіабельна ділянка легкого ланцюга включає амінокислоти 21-127 5БО І МО:48, 1 СОКЗ важкого ланцюга являє собою наведену в 5ЕО І МО:67.
6. Гуманізована специфічна до СЮ37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. І, де варіабельна ділянка легкого ланцюга включає амінокислоти 211-127 5БО І МО:6, 1 СОКЗ важкого ланцюга являє собою наведену в 5ЕО І МО:68.
7. Гуманізована специфічна до СЮ37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. І, де варіабельна ділянка легкого ланцюга включає амінокислоти 21-127 5БО І МО:48, 1 СОКЗ важкого ланцюга являє собою наведену в 5ЕО І МО:68.
8. Гуманізована специфічна до СО37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. І, де СОКІ легкого ланцюга являє собою наведену в 5ЕО І МО:62, 1 варіабельна ділянка важкого ланцюга включає амінокислоти 144-259 5ЕО ІЮ МО:48.
9. Гуманізована специфічна до СЮ37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. І, де СОКІ легкого ланцюга являє собою наведену в 5ЕО І МО:61, 1 варіабельна ділянка важкого ланцюга включає амінокислоти 144-259 5ЕО ІЮ МО:48.
10. Гуманізована специфічна до СЮ37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. 1, де СОКІ легкого ланцюга являє собою наведену в 5ЕО ІЮ МО:62, 1 варіабельна ділянка важкого ланцюга включає амінокислоти 144-259 5ЕО ІЮ МО:52.
11. Гуманізована специфічна до СЮ37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. 1, де СОКІ легкого ланцюга являє собою наведену в 5ЕО ІЮ МО:61, 1 варіабельна ділянка важкого ланцюга включає амінокислоти 144-259 5ЕО ІЮ МО:52.
12. Гуманізована специфічна до СЮ37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. 1, де варіабельна ділянка легкого ланцюга включає амінокислоти 21-127 5ЕО І МО:6, 1 варіабельна ділянка важкого ланцюга включає амінокислоти 144-259 5ЕО І МО:48.
13. Гуманізована специфічна до СЮ37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. 1, де варіабельна ділянка легкого ланцюга включає амінокислоти 21-127 5ЕО І МО:48, 1 варіабельна ділянка важкого ланцюга включає амінокислоти 144-259 5БО І МО:48.
14. Гуманізована специфічна до СЮО37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. 1, де варіабельна ділянка легкого ланцюга включає амінокислоти 21-127 5ЕО І МО:6, 1 варіабельна ділянка важкого ланцюга включає амінокислоти 144-259 5ЕО І МО:52.
15. Гуманізована специфічна до СЮ37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. 1, де варіабельна ділянка легкого ланцюга включає амінокислоти 21-127 5ЕО І МО:48, 1 варіабельна ділянка важкого ланцюга включає амінокислоти 144-259 5БО І МО:52.
16. Гуманізована специфічна до СЮ37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. 1, де гуманізована специфічна до СІО37 зв'язувальна молекула являє собою одноланцюжковий поліпептид Еу (5сЕу), антитіло або його зв'язувальний фрагмент або одноланцюжковий поліпептид, який містить від аміно- до карбоксикінця: специфічний до СО37 5сЕу, шарнірну область імуноглобуліну і ефекторний домен, який містить домен СНО, та домен СНЗ.
17. Гуманізована специфічна до СІ37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. 16, де специфічна до СО37 зв'язувальна молекула є химерною або гуманізованою.
18. Гуманізована специфічна до СЮО37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. 1, де гуманізована специфічна до СІ237 зв'язувальна молекула являє собою одноланцюжковий поліпептид, який містить від оаміно- до карбоксикінця:
специфічний до СІ37 5сЕу, шарнірну область імуноглобуліну 1 ефекторний домен, який містить домен СНО та домен СНЗ, 1 де варіабельна ділянка легкого ланцюга приєднана до варіабельної ділянки важкого ланцюга за допомогою лінкерного пептиду, що містить (ОСІу45ег)», де п дорівнює 1, 2, 3, 4, 5 або 6.
19. Гуманізована специфічна до СО37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. 18, де зв'язані варіабельні ділянки легкого й важкого ланцюгів приєднані до ефекторного домену за допомогою шарнірної області імуноглобуліну, що складається з амінокислотної послідовності, вибраної з групи, яка складається з БЕО І МО:90, 92, 94, 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108, 110, 112, 115, 116, 118, 120, 122, 124, 1261 127.
20. Гуманізована специфічна до СО37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. 19, де шарнірна область імуноглобуліну включає амінокислотну послідовність 5БЕО ІО МО:92 або 5ЕО ІЮ МО:106.
21. Гуманізована специфічна до СО37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. 19, де ефекторний домен містить домени СНО та СНЗ ІебІ1.
22. Гуманізована специфічна до СО37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. 1, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 80 або 84.
23. Гуманізована специфічна до СО37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за п. 1, яка містить амінокислотну послідовність 5Е0О ТОЮ МО:48 або 5ЕО ІО МО:52.
24. Гуманізована специфічна до СО37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну за будь-яким з пп. 1-23, де гуманізована специфічна до СЮ37 зв'язувальна молекула має спорідненість зв'язування до СЮ37 людини від приблизно 0,5 нМ до приблизно 10
НМ.
25. Виділена молекула нуклеїнової кислоти, яка містить нуклеотидну послідовність, що кодує специфічну до СІ37 зв'язувальну молекулу імуноглобуліну за будь-яким з пп. 1-24.
26. Фармацевтична композиція, що містить специфічну до СЮО37 зв'язувальну молекулу імуноглобуліну за будь-яким з пп. 1-24 1 фармацевтично прийнятний носій.
27. Спосіб лікування захворювання, пов'язаного з аберантною активністю В- клітин, що включає введення пацієнту-людині, що потребує цього, ефективної кількості гуманізованої специфічної до СЮО37 зв'язувальної молекули імуноглобуліну за будь-яким з пп. 1-24.
28. Спосіб за п. 27, де захворювання, пов'язане з аберантною активністю В- клітин, являє собою В-клітинний рак або аутоімунне захворювання.
29. Спосіб за п. 28, де аутоімунне захворювання являє собою ревматоїдний артрит, розсіяний склероз, системний червоний вовчак, хворобу Крона, синдром Шегрена, хворобу Граве, цукровий діабет типу І, псоріаз, імунну тромбоцитопенічну пурпуру, пухирчатку, ідіопатичну запальну міопатію або макроглобулінемію Вальденстрема.
30. Спосію за п. 28, де В-клітинний рак являє собою неходжкінську лімфому, хронічну лімфоцитарну лейкемію, хворобу Ходжкіна, лімфоми центральної нервової системи, гостру лімфобластну лейкемію, волосатоклітинну лейкемію, хронічну лімфоцитарну лейкемію, множинну мієлому, дрібноклітинну лімфоцитарну лімфому, В-клітинну пролімфоцитарну лейкемію, лімфоплазмоцитарну лімфому, лімфому маргінальної зони селезінки, плазмоцитарну мієлому, солітарну плазмоцитому кісток, позакісткову плазмоцитому, екстранодулярну В-клітинну лімфому маргінальної зони, пов'язану зі слизовою лімфоїдної тканини, нодулярну В- клітинну лімфому маргінальної зони, фолікулярну лімфому, покривноклітинну лімфому, дифузну великоклітинну В-клітинну лімфому, великоклітинну В-клітинну лімфому середостіння (тимусу), внутрішньосудинну великоклітинну В-клітинну лімфому, первинну ефузійну лімфому, лімфому Беркітта/лейкемію, проліферації В- клітин невизначеного злоякісного значення, лімфоматоїдний грануломато3, і1 лімфопроліферативне порушення після трансплантації.
31. Спосіб за п. 27, де гуманізовану специфічну до СЮ37 зв'язувальну молекулу імуноглобуліну вводять у дозовому діапазоні від приблизно 0,01 мг/кг до приблизно мг/кг.
32. Спосіб за п. 27, де гуманізовану специфічну до СІ37 зв'язувальну молекулу імуноглобуліну вводять у дозовому діапазоні від приблизно 5 мг/кг до приблизно 15 мг/кг.
33. Спосіб за будь-яким з пп. 27-32, що додатково включає введення пацієнту- людині ефективної кількості специфічної до СІ20О зв'язувальної молекули.
34. Спосіб за п. 33, де специфічна до СЮО20О зв'язувальна молекула являє собою антитіло або його зв'язувальний фрагмент, або одноланцюжковий поліпептид, який містить від аміно- до карбоксикінця: специфічний до СО37 5сЕу, шарнірну область імуноглобуліну 1 ефекторний домен, який містить домен СНО та домен СНЗ.
35. Спосіб за п. 34, де специфічна до СЮО20О зв'язувальна молекула являє собою моноклональне антитіло ритуксимаб або одноланцюжковий поліпептид, який містить від аміно- до карбоксикінця: специфічний до СІ20 в8сЕу, шарнірну область імуноглобуліну 1 ефекторний домен, який містить домен СНО та домен СНЗ, як наведено в 5ЕО ІЮ МО:4.
36. Спосіб за будь-яким з пп. 27-32, що додатково включає введення пацієнту- людині ефективної кількості специфічного до СЮО37 антитіла або його зв'язувального фрагмента.
37. Спосіб за п. 36, де специфічне до СІО37 антитіло має гуманізований зв'язувальний домен антитіла, вибраного з 028-1, МВ371, ВІ14, МММ46, ІРО24, ННІ 1 МКІ17.
38. Спосіб за будь-яким з пп. 27-32, що додатково включає введення пацієнту- людині ефективної кількості цитокіну, хемокіну, фактора росту, хіміотерапевтичного засобу, радіотерапевтичного засобу, модифікатора біологічних реакцій у відповідь, адренокортикостероїду/антагоністу або імуносупресивного засобу.
39. Спосіб за п. 38, де пацієнту-людині вводять хіміотерапевтичний засіб, 1 де хіміотерапевтичний засіб являє собою алкілуючий агент, аналог піримідину або аналог пурину.
40. Спосіб за п. 38, де пацієнту-людині вводять хіміотерапевтичний засіб, 1 де хіміотерапевтичний засіб являє собою флударабін або хлорамбуцил.
41. Спосіб за п. 38, де пацієнту-людині вводять модифікатор біологічних реакцій у відповідь, де модифікатор біологічних реакцій у відповідь являє собою О-С5Е або ОСМ-С5Е.
UAA200802255A 2005-07-25 2006-07-25 Гуманізована специфічна до cd37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну UA97469C2 (uk)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US70249905P 2005-07-25 2005-07-25
US80059506P 2006-05-16 2006-05-16
PCT/US2006/029038 WO2007014278A2 (en) 2005-07-25 2006-07-25 B-cell reduction using cd37-specific and cd20-specific binding molecules

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA97469C2 true UA97469C2 (uk) 2012-02-27

Family

ID=37683960

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA200802255A UA97469C2 (uk) 2005-07-25 2006-07-25 Гуманізована специфічна до cd37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну

Country Status (29)

Country Link
US (7) US10307481B2 (uk)
EP (4) EP2298815B1 (uk)
JP (3) JP5740076B2 (uk)
KR (1) KR101251157B1 (uk)
CN (2) CN101282745B (uk)
AU (1) AU2006272555B2 (uk)
BR (1) BRPI0614184A8 (uk)
CA (1) CA2616395C (uk)
CO (1) CO6160337A2 (uk)
CR (1) CR9761A (uk)
DK (2) DK1912675T3 (uk)
EC (1) ECSP088133A (uk)
ES (2) ES2460517T3 (uk)
HK (3) HK1155761A1 (uk)
HR (2) HRP20140338T1 (uk)
HU (1) HUE026303T2 (uk)
IL (2) IL188345A (uk)
NI (1) NI200800032A (uk)
NO (1) NO20080217L (uk)
NZ (3) NZ564764A (uk)
PL (2) PL2298815T3 (uk)
PT (2) PT2298815E (uk)
RS (2) RS53318B (uk)
RU (1) RU2423381C2 (uk)
SG (2) SG10201403526YA (uk)
SI (2) SI2298815T1 (uk)
UA (1) UA97469C2 (uk)
WO (1) WO2007014278A2 (uk)
ZA (1) ZA200800692B (uk)

Families Citing this family (107)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6136311A (en) 1996-05-06 2000-10-24 Cornell Research Foundation, Inc. Treatment and diagnosis of cancer
US7829084B2 (en) * 2001-01-17 2010-11-09 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding constructs and methods for use thereof
US7754208B2 (en) * 2001-01-17 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
US20030133939A1 (en) 2001-01-17 2003-07-17 Genecraft, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
CA2789114C (en) 2001-11-01 2014-03-25 Spectrum Pharmaceuticals, Inc. Medical compositions for intravesical treatment of bladder cancer
US8563592B2 (en) 2001-11-01 2013-10-22 Spectrum Pharmaceuticals, Inc. Bladder cancer treatment and methods
CA2616395C (en) 2005-07-25 2016-10-04 Trubion Pharmaceuticals B-cell reduction using cd37-specific and cd20-specific binding molecules
KR101364322B1 (ko) * 2006-02-09 2014-02-18 스펙트럼 파마슈티컬즈 인크 Ｅ09 및 프로필렌 글리콜을 사용하는 방광암 치료
US8940871B2 (en) 2006-03-20 2015-01-27 The Regents Of The University Of California Engineered anti-prostate stem cell antigen (PSCA) antibodies for cancer targeting
KR101571027B1 (ko) 2006-06-12 2015-11-23 이머전트 프로덕트 디벨롭먼트 시애틀, 엘엘씨 효과기 기능을 갖는 단일쇄 다가 결합 단백질
US7846434B2 (en) 2006-10-24 2010-12-07 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Materials and methods for improved immunoglycoproteins
CN101646688A (zh) * 2006-10-24 2010-02-10 特鲁比昂药品公司 利用栗精胺提高抗体依赖性细胞毒性的方法
AU2008266952A1 (en) * 2007-06-12 2008-12-24 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Anti-CD20 therapeutic compositions and methods
PE20140196A1 (es) 2007-08-09 2014-03-19 Boehringer Ingelheim Int Anticuerpos anti-cd37
US8940298B2 (en) 2007-09-04 2015-01-27 The Regents Of The University Of California High affinity anti-prostate stem cell antigen (PSCA) antibodies for cancer targeting and detection
AU2008304756B8 (en) 2007-09-26 2015-02-12 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-IL-6 receptor antibody
EP3127921A1 (en) 2007-09-26 2017-02-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method of modifying isoelectric point of antibody via amino acid substition in cdr
JP5951929B2 (ja) * 2007-10-03 2016-07-13 コーネル ユニヴァーシティー Ｐｓｍａ抗体を用いる増殖性障害の治療
AU2008342956A1 (en) * 2007-12-21 2009-07-09 Genentech, Inc. Therapy of rituximab-refractory rheumatoid arthritis patients
AU2009234277B2 (en) 2008-04-11 2014-12-04 Aptevo Research And Development Llc CD37 immunotherapeutic and combination with bifunctional chemotherapeutic thereof
NZ623716A (en) 2008-04-11 2016-04-29 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Antigen-binding molecule capable of binding to two or more antigen molecules repeatedly
US20090269339A1 (en) * 2008-04-29 2009-10-29 Genentech, Inc. Responses to immunizations in rheumatoid arthritis patients treated with a cd20 antibody
EP2313435A4 (en) * 2008-07-01 2012-08-08 Aveo Pharmaceuticals Inc FIBROBLAST GROWTH FACTOR RECEPTOR 3 (FGFR3) BINDING PROTEINS
US20100069616A1 (en) * 2008-08-06 2010-03-18 The Regents Of The University Of California Engineered antibody-nanoparticle conjugates
MX2011004985A (es) * 2008-11-13 2011-05-31 Emergent Product Dev Seattle Terapias de combinacion inmunoterapeutica de cd37 y usos de las mismas.
WO2010075249A2 (en) 2008-12-22 2010-07-01 Genentech, Inc. A method for treating rheumatoid arthritis with b-cell antagonists
EP3495000A1 (en) * 2009-02-17 2019-06-12 Cornell Research Foundation, Inc. Methods and kits for diagnosis of cancer and prediction of therapeutic value
US9493578B2 (en) 2009-09-02 2016-11-15 Xencor, Inc. Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens
DK2496691T3 (en) 2009-11-02 2017-06-06 Univ Washington THERAPEUTIC NUCLEASE COMPOSITIONS AND PROCEDURES
CA3040276A1 (en) 2009-12-02 2011-06-09 Imaginab, Inc. J591 minibodies and cys-diabodies for targeting human prostate specific membrane antigen (psma) and methods for their use
NO331080B1 (no) 2010-01-29 2011-09-26 Nordic Nanovector As Radioimmunkonjugater, farmasøytiske sammensetninger og kit omfattende det samme og anvendelse derav
US9260529B2 (en) * 2010-02-24 2016-02-16 The University Of Washington Through Its Center For Commercialization Molecules that bind CD180, compositions and methods of use
RU2610662C9 (ru) * 2010-03-12 2017-07-24 Иммьюноджен, Инк. Cd37-связывающие молекулы и их иммуноконъюгаты
US20120189618A1 (en) * 2010-07-16 2012-07-26 Boehringer Ingelheim International Gmbh Superior efficacy of cd37 antibodies in cll blood samples
EP3029066B1 (en) 2010-07-29 2019-02-20 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points
EP2694105A4 (en) 2011-04-01 2015-04-29 Immunogen Inc CD37 BINDING MOLECULES AND IMMUNOCONJUGATES THEREOF
MX355908B (es) 2011-04-22 2018-05-04 Aptevo Res & Development Llc Proteinas que se unen al antigeno de membrana especifico de prostata y composiciones y metodos relacionados.
KR102161657B1 (ko) 2011-04-29 2020-10-06 유니버시티 오브 워싱톤 스루 이츠 센터 포 커머셜리제이션 치료적 뉴클레아제 조성물 및 방법
US10851178B2 (en) 2011-10-10 2020-12-01 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
AU2012354140B2 (en) * 2011-12-13 2017-10-12 Nordic Nanovector Asa Chimeric therapeutic anti - CD37 antibody HH1
WO2013160396A1 (en) * 2012-04-26 2013-10-31 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combination of cd37 antibodies with bendamustine
JP2015517511A (ja) * 2012-05-16 2015-06-22 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｃｄ３７抗体とｉｃｅ（イフォスファミド、カルボプラチン、エトポシド）の併用
EP2849783A1 (en) * 2012-05-16 2015-03-25 Boehringer Ingelheim International GmbH Combination of cd37 antibodies with further agents
US20160237152A1 (en) * 2012-12-21 2016-08-18 The Regents Of The University Of California Tspan 33 is a candidate for antibody targeted therapy for the treatment of b cell hodgkin lymphomas
US9605084B2 (en) 2013-03-15 2017-03-28 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10487155B2 (en) 2013-01-14 2019-11-26 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
KR102211837B1 (ko) 2013-01-14 2021-02-03 젠코어 인코포레이티드 신규한 이형이량체 단백질
US9701759B2 (en) 2013-01-14 2017-07-11 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10131710B2 (en) 2013-01-14 2018-11-20 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US10968276B2 (en) 2013-03-12 2021-04-06 Xencor, Inc. Optimized anti-CD3 variable regions
US9738722B2 (en) 2013-01-15 2017-08-22 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
WO2014145907A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Xencor, Inc. Targeting t cells with heterodimeric proteins
US10106624B2 (en) 2013-03-15 2018-10-23 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10519242B2 (en) 2013-03-15 2019-12-31 Xencor, Inc. Targeting regulatory T cells with heterodimeric proteins
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10228452B2 (en) 2013-06-07 2019-03-12 Hand Held Products, Inc. Method of error correction for 3D imaging device
CN108939065A (zh) * 2013-06-07 2018-12-07 诺帝克纳诺维科特公司 用于上调抗原表达的方法
JP6510518B2 (ja) 2013-08-01 2019-05-08 アジェンシス，インコーポレイテッド Ｃｄ３７タンパク質に結合する抗体薬物結合体（ａｄｃ）
WO2015066304A1 (en) * 2013-10-30 2015-05-07 Trans Union Llc Systems and methods for measuring effectiveness of marketing and advertising campaigns
EP3063275B1 (en) 2013-10-31 2019-09-25 Resolve Therapeutics, LLC Therapeutic nuclease-albumin fusions and methods
AP2016009475A0 (en) 2014-03-28 2016-09-30 Xencor Inc Bispecific antibodies that bind to cd38 and cd3
CN106604750B (zh) * 2014-06-16 2021-05-07 梅约医学教育与研究基金会 治疗骨髓瘤
JP2017536830A (ja) 2014-11-26 2017-12-14 ゼンコー・インコーポレイテッドＸｅｎｃｏｒ、 Ｉｎｃ． Ｃｄ３及びｃｄ３８に結合するヘテロ二量体抗体
EP3928788A1 (en) 2014-11-26 2021-12-29 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cd20
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
US10428155B2 (en) 2014-12-22 2019-10-01 Xencor, Inc. Trispecific antibodies
WO2016141387A1 (en) 2015-03-05 2016-09-09 Xencor, Inc. Modulation of t cells with bispecific antibodies and fc fusions
EA201792300A1 (ru) 2015-06-08 2018-09-28 Дебиофарм Интернэшнл, С.А. Комбинации иммуноконъюгата к cd37 и антитела к cd20
SG10201913625XA (en) 2015-08-07 2020-03-30 Imaginab Inc Antigen binding constructs to target molecules
EP3341414A4 (en) * 2015-08-28 2019-03-27 Debiopharm International SA ANTIBODIES AND ASSAYS FOR DETECTION OF CD37
MY197562A (en) 2015-09-21 2023-06-23 Aptevo Res & Development Llc Cd3 binding polypeptides
EP3387013B1 (en) 2015-12-07 2022-06-08 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and psma
AU2016378573A1 (en) * 2015-12-22 2018-07-19 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Bispecific anti-CD20/anti-CD3 antibodies to treat acute lymphoblastic leukemia
MA45255A (fr) 2016-06-14 2019-04-17 Xencor Inc Anticorps inhibiteurs de points de contrôle bispécifiques
EP3475304B1 (en) 2016-06-28 2022-03-23 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind somatostatin receptor 2
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
US10550185B2 (en) 2016-10-14 2020-02-04 Xencor, Inc. Bispecific heterodimeric fusion proteins containing IL-15-IL-15Rα Fc-fusion proteins and PD-1 antibody fragments
JP2020510608A (ja) 2016-11-02 2020-04-09 デビオファーム インターナショナル， エス． アー． 抗ｃｄ３７イムノコンジュゲート療法を改善するための方法
US10610104B2 (en) 2016-12-07 2020-04-07 Progenity, Inc. Gastrointestinal tract detection methods, devices and systems
RU2768404C2 (ru) * 2016-12-23 2022-03-24 Ремд Биотерапьютикс, Инк. Иммунотерапия с применением антител, связывающих белок 1 программируемой смерти клеток (pd-1)
WO2018132506A1 (en) 2017-01-10 2018-07-19 The General Hospital Corporation Chimeric antigen receptors based on alternative signal 1 domains
WO2018147960A1 (en) 2017-02-08 2018-08-16 Imaginab, Inc. Extension sequences for diabodies
WO2018183929A1 (en) 2017-03-30 2018-10-04 Progenity Inc. Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with an immune modulatory agent released using an ingestible device
JP7330942B2 (ja) * 2017-03-31 2023-08-22 ジェンマブ ホールディング ビー．ブイ． 二重特異性抗ｃｄ３７抗体、モノクローナル抗ｃｄ３７抗体、およびそれらの使用方法
WO2019006472A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Xencor, Inc. TARGETED HETETRODIMERIC FUSION PROTEINS CONTAINING IL-15 / IL-15RA AND ANTIGEN-BINDING DOMAINS
EP3706793A1 (en) 2017-11-08 2020-09-16 Xencor, Inc. Bispecific and monospecific antibodies using novel anti-pd-1 sequences
US10981992B2 (en) 2017-11-08 2021-04-20 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
SG11202005732XA (en) 2017-12-19 2020-07-29 Xencor Inc Engineered il-2 fc fusion proteins
AU2019247415A1 (en) 2018-04-04 2020-10-22 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind fibroblast activation protein
KR20210010862A (ko) 2018-04-18 2021-01-28 젠코어 인코포레이티드 IL-15/IL-15Rα Fc-융합 단백질 및 PD-1 항원 결합 도메인을 함유하는 PD-1 표적화 이종이량체 융합 단백질 및 이의 용도
JP2021520829A (ja) 2018-04-18 2021-08-26 ゼンコア インコーポレイテッド ＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲＡ Ｆｃ融合タンパク質およびＴＩＭ−３抗原結合ドメインを含む、ＴＩＭ−３標的化ヘテロ二量体融合タンパク質
ES2714952B2 (es) * 2018-05-18 2020-07-10 Productos Agrovin S A Procedimiento y equipo para el remontado durante la maceracion de la vendimia
WO2019246312A1 (en) 2018-06-20 2019-12-26 Progenity, Inc. Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with an immunomodulator
WO2019246317A1 (en) 2018-06-20 2019-12-26 Progenity, Inc. Treatment of a disease or condition in a tissue originating from the endoderm
CN112292140A (zh) * 2018-06-22 2021-01-29 综合医院公司 靶向cd37和cd19的嵌合抗原受体
JPWO2020004337A1 (ja) * 2018-06-27 2021-08-02 国立大学法人東海国立大学機構 Ｃｄ３７特異的キメラ抗原レセプター
MX2021003765A (es) 2018-10-03 2021-07-15 Xencor Inc Proteínas il-12 de fusión a fc heterodimérico.
CA3120619A1 (en) 2018-11-19 2020-05-28 Progenity, Inc. Methods and devices for treating a disease with biotherapeutics
US11472890B2 (en) 2019-03-01 2022-10-18 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind ENPP3 and CD3
US11707610B2 (en) 2019-12-13 2023-07-25 Biora Therapeutics, Inc. Ingestible device for delivery of therapeutic agent to the gastrointestinal tract
US11919956B2 (en) 2020-05-14 2024-03-05 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (PSMA) and CD3
CN113980130B (zh) * 2020-07-27 2023-07-21 湖南远泰生物技术有限公司 人源化cd37和双特异性cd19-人源化cd37 car-t细胞
IL305736A (en) 2021-03-09 2023-11-01 Xencor Inc Heterodimeric antibodies that bind CD3 and CLDN6
WO2022192586A1 (en) 2021-03-10 2022-09-15 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and gpc3
IL312237A (en) * 2021-10-18 2024-06-01 Daiichi Sankyo Co Ltd Anti-CD37 antibody-drug conjugate
WO2023133488A1 (en) * 2022-01-06 2023-07-13 The General Hospital Corporation Methods of cell ablation

Family Cites Families (418)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ZA737247B (en) 1972-09-29 1975-04-30 Ayerst Mckenna & Harrison Rapamycin and process of preparation
US3927193A (en) 1973-05-18 1975-12-16 Hoffmann La Roche Localization of tumors by radiolabelled antibodies
US4179337A (en) 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
JPS6023084B2 (ja) 1979-07-11 1985-06-05 味の素株式会社 代用血液
US4361544A (en) 1980-03-03 1982-11-30 Goldenberg Milton David Tumor localization and therapy with labeled antibodies specific to intracellular tumor-associated markers
US4444744A (en) 1980-03-03 1984-04-24 Goldenberg Milton David Tumor localization and therapy with labeled antibodies to cell surface antigens
US4331647A (en) 1980-03-03 1982-05-25 Goldenberg Milton David Tumor localization and therapy with labeled antibody fragments specific to tumor-associated markers
US4348376A (en) 1980-03-03 1982-09-07 Goldenberg Milton David Tumor localization and therapy with labeled anti-CEA antibody
US4460561A (en) 1980-03-03 1984-07-17 Goldenberg M David Tumor localization and therapy with labeled antibodies specific to intracellular tumor-associated markers
US4460559A (en) 1980-03-03 1984-07-17 Goldenberg Milton David Tumor localization and therapy with labeled antibodies specific to intracellular tumor-associated markers
US4316885A (en) 1980-08-25 1982-02-23 Ayerst, Mckenna And Harrison, Inc. Acyl derivatives of rapamycin
US4468457A (en) 1981-06-01 1984-08-28 David M. Goldenberg Method for producing a CSAp tryptic peptide and anti-CSAp antibodies
US4640835A (en) 1981-10-30 1987-02-03 Nippon Chemiphar Company, Ltd. Plasminogen activator derivatives
US4769330A (en) 1981-12-24 1988-09-06 Health Research, Incorporated Modified vaccinia virus and methods for making and using the same
US4818709A (en) 1983-01-21 1989-04-04 Primus Frederick J CEA-family antigens, Anti-CEA antibodies and CEA immunoassay
US4460459A (en) 1983-02-16 1984-07-17 Anschutz Mining Corporation Sequential flotation of sulfide ores
US4816567A (en) * 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4624846A (en) 1983-07-29 1986-11-25 Immunomedics, Inc. Method for enhancing target specificity of antibody localization and clearance of non-target diagnostic and therapeutic principles
US4496689A (en) 1983-12-27 1985-01-29 Miles Laboratories, Inc. Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer
US4782840A (en) 1984-03-02 1988-11-08 Neoprobe Corporation Method for locating, differentiating, and removing neoplasms
US4935495A (en) * 1984-12-21 1990-06-19 Oncogen Monoclonal antibodies to the L6 glycolipid antigenic determinant found on human non-small cell lung carcinomas
US4906562A (en) * 1984-12-21 1990-03-06 Oncogen Monocolonal antibodies and antigen for human non-small cell lung carcinomas
GB8508845D0 (en) 1985-04-04 1985-05-09 Hoffmann La Roche Vaccinia dna
EP0206448B1 (en) 1985-06-19 1990-11-14 Ajinomoto Co., Inc. Hemoglobin combined with a poly(alkylene oxide)
US5955315A (en) * 1985-11-19 1999-09-21 Schering Corporation Nucleic acids encoding human interleukin-4
US4650803A (en) 1985-12-06 1987-03-17 University Of Kansas Prodrugs of rapamycin
US5225539A (en) * 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US4791192A (en) 1986-06-26 1988-12-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified protein with polyethyleneglycol
US5869620A (en) * 1986-09-02 1999-02-09 Enzon, Inc. Multivalent antigen-binding proteins
US4704692A (en) 1986-09-02 1987-11-03 Ladner Robert C Computer based system and method for determining and displaying possible chemical structures for converting double- or multiple-chain polypeptides to single-chain polypeptides
US5260203A (en) 1986-09-02 1993-11-09 Enzon, Inc. Single polypeptide chain binding molecules
US4946778A (en) * 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
US6121424A (en) * 1991-11-25 2000-09-19 Enzon, Inc. Multivalent antigen-binding proteins
US5075109A (en) 1986-10-24 1991-12-24 Southern Research Institute Method of potentiating an immune response
US6893625B1 (en) * 1986-10-27 2005-05-17 Royalty Pharma Finance Trust Chimeric antibody with specificity to human B cell surface antigen
US4932412A (en) 1986-12-18 1990-06-12 Immunomedics, Inc. Intraoperative and endoscopic tumor detection and therapy
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
US5892019A (en) * 1987-07-15 1999-04-06 The United States Of America, As Represented By The Department Of Health And Human Services Production of a single-gene-encoded immunoglobulin
US4897268A (en) 1987-08-03 1990-01-30 Southern Research Institute Drug delivery system and method of making the same
WO1989001973A2 (en) 1987-09-02 1989-03-09 Applied Biotechnology, Inc. Recombinant pox virus for immunization against tumor-associated antigens
GB8720833D0 (en) 1987-09-04 1987-10-14 Celltech Ltd Recombinant dna product
US5677425A (en) 1987-09-04 1997-10-14 Celltech Therapeutics Limited Recombinant antibody
WO1989007142A1 (en) 1988-02-05 1989-08-10 Morrison Sherie L Domain-modified constant region antibodies
FI102355B (fi) 1988-02-11 1998-11-30 Squibb Bristol Myers Co Menetelmä yhdistävän välikappaleen omaavien antrasykliini-immunokonjug aattien valmistamiseksi
US5506126A (en) 1988-02-25 1996-04-09 The General Hospital Corporation Rapid immunoselection cloning method
WO1989008114A1 (en) 1988-02-25 1989-09-08 The General Hospital Corporation Rapid immunoselection cloning method
US4861579A (en) 1988-03-17 1989-08-29 American Cyanamid Company Suppression of B-lymphocytes in mammals by administration of anti-B-lymphocyte antibodies
US5601819A (en) 1988-08-11 1997-02-11 The General Hospital Corporation Bispecific antibodies for selective immune regulation and for selective immune cell binding
US6352694B1 (en) * 1994-06-03 2002-03-05 Genetics Institute, Inc. Methods for inducing a population of T cells to proliferate using agents which recognize TCR/CD3 and ligands which stimulate an accessory molecule on the surface of the T cells
US5217713A (en) 1988-12-27 1993-06-08 Takeda Chemical Industries, Ltd. Cytotoxic bispecific monoclonal antibody, its production and use
CA2006408A1 (en) 1988-12-27 1990-06-27 Susumu Iwasa Bispecific monoclonal antibody, its production and use
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
WO1990007936A1 (en) 1989-01-23 1990-07-26 Chiron Corporation Recombinant therapies for infection and hyperproliferative disorders
US5098833A (en) * 1989-02-23 1992-03-24 Genentech, Inc. DNA sequence encoding a functional domain of a lymphocyte homing receptor
US5225538A (en) * 1989-02-23 1993-07-06 Genentech, Inc. Lymphocyte homing receptor/immunoglobulin fusion proteins
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
US5897861A (en) 1989-06-29 1999-04-27 Medarex, Inc. Bispecific reagents for AIDS therapy
WO1991000360A1 (en) 1989-06-29 1991-01-10 Medarex, Inc. Bispecific reagents for aids therapy
US6020145A (en) 1989-06-30 2000-02-01 Bristol-Myers Squibb Company Methods for determining the presence of carcinoma using the antigen binding region of monoclonal antibody BR96
US5980896A (en) 1989-06-30 1999-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies reactive with human carcinomas
CA2066053C (en) 1989-08-18 2001-12-11 Harry E. Gruber Recombinant retroviruses delivering vector constructs to target cells
US5605690A (en) * 1989-09-05 1997-02-25 Immunex Corporation Methods of lowering active TNF-α levels in mammals using tumor necrosis factor receptor
DK0765937T3 (da) 1989-09-20 2003-03-24 Abbott Lab Fremgangsmåde til fremstilling af fusionsproteiner
US6018031A (en) 1989-10-20 2000-01-25 Trustees Of Dartmouth College Binding agents specific for IgA receptor
GB8928874D0 (en) 1989-12-21 1990-02-28 Celltech Ltd Humanised antibodies
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5314995A (en) * 1990-01-22 1994-05-24 Oncogen Therapeutic interleukin-2-antibody based fusion proteins
EP0512064B1 (en) 1990-01-23 1997-06-18 Tanox Biosystems, Inc. Extracellular segments of human ige immunoglobulin anchoring peptides and antibodies specific therefor
EP0517754A1 (en) 1990-03-02 1992-12-16 Repligen Corporation Antibody constructs with enhanced binding affinity
US5521288A (en) * 1990-03-26 1996-05-28 Bristol-Myers Squibb Company CD28IG fusion protein
US20030219446A1 (en) 1990-03-26 2003-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Ligand for CD28 receptor on B cells and methods
GB9009106D0 (en) 1990-04-23 1990-06-20 3I Res Expl Ltd Processes and intermediates for synthetic antibody derivatives
CA2086325C (en) 1990-07-02 2010-10-05 Peter S. Linsley Ligand for cd28 receptor on b cells and methods
US5023264A (en) 1990-07-16 1991-06-11 American Home Products Corporation Rapamycin oximes
US5023263A (en) 1990-08-09 1991-06-11 American Home Products Corporation 42-oxorapamycin
US5221670A (en) 1990-09-19 1993-06-22 American Home Products Corporation Rapamycin esters
US5130307A (en) 1990-09-28 1992-07-14 American Home Products Corporation Aminoesters of rapamycin
US5233036A (en) 1990-10-16 1993-08-03 American Home Products Corporation Rapamycin alkoxyesters
ATE160379T1 (de) 1990-10-29 1997-12-15 Chiron Corp Bispezifische antikörper, verfahren zu ihrer herstellung und deren verwendungen
US5709859A (en) * 1991-01-24 1998-01-20 Bristol-Myers Squibb Company Mixed specificity fusion proteins
EP0585257A4 (en) 1991-03-28 1995-02-22 Univ Minnesota DNA AND AMINO ACID SEQUENCE SPECIFIC TO NATURAL K KILLER CELLS.
US5120842A (en) 1991-04-01 1992-06-09 American Home Products Corporation Silyl ethers of rapamycin
US5100883A (en) 1991-04-08 1992-03-31 American Home Products Corporation Fluorinated esters of rapamycin
US5118678A (en) 1991-04-17 1992-06-02 American Home Products Corporation Carbamates of rapamycin
US5118677A (en) 1991-05-20 1992-06-02 American Home Products Corporation Amide esters of rapamycin
DE69226877T2 (de) 1991-05-31 1999-03-11 Genentech, Inc., South San Francisco, Calif. Behandlung der hiv-assoziierten immun-thrombopenie purpura
DE4118120A1 (de) 1991-06-03 1992-12-10 Behringwerke Ag Tetravalente bispezifische rezeptoren, ihre herstellung und verwendung
US5637481A (en) 1993-02-01 1997-06-10 Bristol-Myers Squibb Company Expression vectors encoding bispecific fusion proteins and methods of producing biologically active bispecific fusion proteins in a mammalian cell
US5844095A (en) 1991-06-27 1998-12-01 Bristol-Myers Squibb Company CTLA4 Ig fusion proteins
US6090914A (en) 1991-06-27 2000-07-18 Bristol-Myers Squibb Company CTLA4/CD28Ig hybrid fusion proteins and uses thereof
US5770197A (en) * 1991-06-27 1998-06-23 Bristol-Myers Squibb Company Methods for regulating the immune response using B7 binding molecules and IL4-binding molecules
US5851795A (en) 1991-06-27 1998-12-22 Bristol-Myers Squibb Company Soluble CTLA4 molecules and uses thereof
ATE170562T1 (de) * 1991-06-27 1998-09-15 Bristol Myers Squibb Co Ctl4a rezeptor, ihn enthaltenden fusionsproteine und deren verwendungen
JPH06510036A (ja) 1991-08-16 1994-11-10 バイカル・インコーポレイテッド 嚢胞性線維症の治療のための組成物および方法
US5162333A (en) 1991-09-11 1992-11-10 American Home Products Corporation Aminodiesters of rapamycin
US5962406A (en) * 1991-10-25 1999-10-05 Immunex Corporation Recombinant soluble CD40 ligand polypeptide and pharmaceutical composition containing the same
US5151413A (en) 1991-11-06 1992-09-29 American Home Products Corporation Rapamycin acetals as immunosuppressant and antifungal agents
ATE297465T1 (de) 1991-11-25 2005-06-15 Enzon Inc Verfahren zur herstellung von multivalenten antigenbindenden proteinen
US5885793A (en) 1991-12-02 1999-03-23 Medical Research Council Production of anti-self antibodies from antibody segment repertoires and displayed on phage
IL104684A0 (en) 1992-02-14 1993-06-10 Bristol Myers Squibb Co The cd40cr receptor and ligands therefor
US6472510B1 (en) 1992-02-14 2002-10-29 Bristol-Myers Squibb Company CD40 receptor ligands
US5177203A (en) 1992-03-05 1993-01-05 American Home Products Corporation Rapamycin 42-sulfonates and 42-(N-carboalkoxy) sulfamates useful as immunosuppressive agents
US6129914A (en) 1992-03-27 2000-10-10 Protein Design Labs, Inc. Bispecific antibody effective to treat B-cell lymphoma and cell line
JPH07507689A (ja) 1992-06-08 1995-08-31 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 特定組織のターゲティング方法及び組成物
WO1993025698A1 (en) 1992-06-10 1993-12-23 The United States Government As Represented By The Vector particles resistant to inactivation by human serum
GB2269175A (en) 1992-07-31 1994-02-02 Imperial College Retroviral vectors
US5256790A (en) 1992-08-13 1993-10-26 American Home Products Corporation 27-hydroxyrapamycin and derivatives thereof
PT586002E (pt) 1992-08-18 2000-07-31 Centro Inmunologia Molecular Anticorpos monoclonais que reconhecem o receptor do factor de crescimento epidermico, celulas e metodos para a sua producao e composicoes que os incluem
WO1994004678A1 (en) 1992-08-21 1994-03-03 Casterman Cecile Immunoglobulins devoid of light chains
ZA936260B (en) 1992-09-09 1994-03-18 Smithkline Beecham Corp Novel antibodies for conferring passive immunity against infection by a pathogen in man
US6066718A (en) 1992-09-25 2000-05-23 Novartis Corporation Reshaped monoclonal antibodies against an immunoglobulin isotype
GB9221220D0 (en) 1992-10-09 1992-11-25 Sandoz Ag Organic componds
EP0668875A4 (en) 1992-10-12 1999-05-26 Agen Ltd ANTI-COAGULAR AGENT ON BLOOD CLOTH, METHOD FOR PRODUCING THE SAME AND ITS USE.
US5302584A (en) 1992-10-13 1994-04-12 American Home Products Corporation Carbamates of rapamycin
US5480989A (en) 1992-10-13 1996-01-02 American Home Products Corporation Carbamates of rapamycin
US5434260A (en) 1992-10-13 1995-07-18 American Home Products Corporation Carbamates of rapamycin
US5411967A (en) 1992-10-13 1995-05-02 American Home Products Corporation Carbamates of rapamycin
US5480988A (en) 1992-10-13 1996-01-02 American Home Products Corporation Carbamates of rapamycin
US5489680A (en) 1992-10-13 1996-02-06 American Home Products Corporation Carbamates of rapamycin
US5262423A (en) 1992-10-29 1993-11-16 American Home Products Corporation Rapamycin arylcarbonyl and alkoxycarbonyl carbamates as immunosuppressive and antifungal agents
US5258389A (en) 1992-11-09 1993-11-02 Merck & Co., Inc. O-aryl, O-alkyl, O-alkenyl and O-alkynylrapamycin derivatives
US5736137A (en) 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
MD1367C2 (ro) 1992-11-13 2000-11-30 Idec Pharmaceuticals Corporation Metode de tratament al limfomului celulelor B, anticorpi anti-CD20, hibridom.
US5260300A (en) 1992-11-19 1993-11-09 American Home Products Corporation Rapamycin carbonate esters as immuno-suppressant agents
CA2150262C (en) 1992-12-04 2008-07-08 Kaspar-Philipp Holliger Multivalent and multispecific binding proteins, their manufacture and use
GB9225453D0 (en) 1992-12-04 1993-01-27 Medical Res Council Binding proteins
US5773253A (en) 1993-01-22 1998-06-30 Bristol-Myers Squibb Company MYPPPY variants of CTL A4 and uses thereof
US6482919B2 (en) 1993-02-01 2002-11-19 Bristol-Myers Squibb Company Expression vectors encoding bispecific fusion proteins and methods of producing biologically active bispecific fusion proteins in a mammalian cell
US5597707A (en) * 1993-04-15 1997-01-28 Bristol-Myers Squibb Company Tumor associated antigen recognized by the murine monoclonal antibody L6, its oligonucleotide sequence and methods for their use
US5504091A (en) 1993-04-23 1996-04-02 American Home Products Corporation Biotin esters of rapamycin
ATE204325T1 (de) 1993-04-29 2001-09-15 Unilever Nv Herstellung von antikörpern oder funktionstüchtig gemachten teilen davon, abgeleitet von schweren ketten von immunglobulinen von camelidae
US5795572A (en) * 1993-05-25 1998-08-18 Bristol-Myers Squibb Company Monoclonal antibodies and FV specific for CD2 antigen
US5747654A (en) 1993-06-14 1998-05-05 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Recombinant disulfide-stabilized polypeptide fragments having binding specificity
US6476198B1 (en) 1993-07-13 2002-11-05 The Scripps Research Institute Multispecific and multivalent antigen-binding polypeptide molecules
US5417972A (en) 1993-08-02 1995-05-23 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Method of killing B-cells in a complement independent and an ADCC independent manner using antibodies which specifically bind CDIM
DK0721469T3 (da) 1993-09-02 2000-05-01 Dartmouth College Anti-gp39-antistoffer og anvendelse deraf
US5869049A (en) * 1993-09-02 1999-02-09 Trustees Of Dartmouth College Methods of inducing T cell unresponsiveness to bone marrow with gp39 antagonists
US5595721A (en) 1993-09-16 1997-01-21 Coulter Pharmaceutical, Inc. Radioimmunotherapy of lymphoma using anti-CD20
DE69414870T2 (de) 1993-09-22 1999-05-12 Medical Research Council, London Antikoerper mit geaenderter zielrichtung
GB9412166D0 (en) 1993-09-22 1994-08-10 Medical Res Council Retargetting antibodies
WO1995009917A1 (en) 1993-10-07 1995-04-13 The Regents Of The University Of California Genetically engineered bispecific tetravalent antibodies
US5373014A (en) 1993-10-08 1994-12-13 American Home Products Corporation Rapamycin oximes
US5391730A (en) 1993-10-08 1995-02-21 American Home Products Corporation Phosphorylcarbamates of rapamycin and oxime derivatives thereof
US5385909A (en) 1993-11-22 1995-01-31 American Home Products Corporation Heterocyclic esters of rapamycin
US5385910A (en) 1993-11-22 1995-01-31 American Home Products Corporation Gem-distributed esters of rapamycin
US5385908A (en) 1993-11-22 1995-01-31 American Home Products Corporation Hindered esters of rapamycin
ATE191218T1 (de) 1993-12-17 2000-04-15 Novartis Ag Rapamycin-derivate als immunosuppressoren
US5389639A (en) 1993-12-29 1995-02-14 American Home Products Company Amino alkanoic esters of rapamycin
US6380369B1 (en) 1994-01-27 2002-04-30 Human Genome Sciences, Inc. Human DNA mismatch repair proteins
ATE203274T1 (de) * 1994-02-01 2001-08-15 Nasa Fusionierte proteine die antikörper-teile und nicht-antikörper-teile enthalten
EP0749325B1 (en) 1994-03-07 2002-06-12 Medarex, Inc. Bispecific molecules having clinical utilities
CZ292061B6 (cs) 1994-03-17 2003-07-16 Merck Patent Gmbh Jednořetězcové fragmenty protilátek a protilátky proti receptoru epidermálního růstového faktoru, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje
US5362718A (en) 1994-04-18 1994-11-08 American Home Products Corporation Rapamycin hydroxyesters
ATE228166T1 (de) 1994-05-02 2002-12-15 Bernd Groner Bifunktionelles protein, herstellung und verwendung
US5945273A (en) 1997-06-03 1999-08-31 Human Genome Sciences, Inc. Human oxalyl-coa decarboxylase
US5463048A (en) 1994-06-14 1995-10-31 American Home Products Corporation Rapamycin amidino carbamates
US5888773A (en) 1994-08-17 1999-03-30 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Method of producing single-chain Fv molecules
PT807183E (pt) 1994-08-26 2001-05-31 Aventis Pharma Gmbh Terapia genetica de doencas induzidas pelo sistema imunitario com auxilio de uma substancia reguladora do ciclo celular especifica das celulas
US6380169B1 (en) 1994-08-31 2002-04-30 Isis Pharmaceuticals, Inc. Metal complex containing oligonucleoside cleavage compounds and therapies
US5736524A (en) 1994-11-14 1998-04-07 Merck & Co.,. Inc. Polynucleotide tuberculosis vaccine
US5491231A (en) 1994-11-28 1996-02-13 American Home Products Corporation Hindered N-oxide esters of rapamycin
US5563145A (en) 1994-12-07 1996-10-08 American Home Products Corporation Rapamycin 42-oximes and hydroxylamines
US6383814B1 (en) 1994-12-09 2002-05-07 Genzyme Corporation Cationic amphiphiles for intracellular delivery of therapeutic molecules
US5876950A (en) * 1995-01-26 1999-03-02 Bristol-Myers Squibb Company Monoclonal antibodies specific for different epitopes of human GP39 and methods for their use in diagnosis and therapy
EP0739981A1 (en) 1995-04-25 1996-10-30 Vrije Universiteit Brussel Variable fragments of immunoglobulins - use for therapeutic or veterinary purposes
US6410690B1 (en) 1995-06-07 2002-06-25 Medarex, Inc. Therapeutic compounds comprised of anti-Fc receptor antibodies
WO1996041807A1 (en) 1995-06-09 1996-12-27 Novartis Ag Rapamycin derivatives
GB9518220D0 (en) 1995-09-06 1995-11-08 Medical Res Council Checkpoint gene
US5866330A (en) 1995-09-12 1999-02-02 The Johns Hopkins University School Of Medicine Method for serial analysis of gene expression
JPH11513669A (ja) * 1995-10-13 1999-11-24 アメリカ合衆国 ジスルフィド安定化抗体フラグメントを含む免疫毒素
US6440418B1 (en) * 1995-11-07 2002-08-27 Idec Pharmaceuticals Corporation Methods of treating autoimmune diseases with gp39-specific antibodies
US6379966B2 (en) 1999-02-26 2002-04-30 Mirus Corporation Intravascular delivery of non-viral nucleic acid
US5780462A (en) 1995-12-27 1998-07-14 American Home Products Corporation Water soluble rapamycin esters
US6750334B1 (en) 1996-02-02 2004-06-15 Repligen Corporation CTLA4-immunoglobulin fusion proteins having modified effector functions and uses therefor
GB2310894A (en) 1996-03-06 1997-09-10 Clive William Efford Multi-engine drive unit
AU710998B2 (en) * 1996-03-20 1999-10-07 Bristol-Myers Squibb Company Methods for inhibiting an immune response by blocking the GP39/CD40 and CTLA4 /CD28/B7 pathways and compositions for use therewith
EP1186300A1 (en) 1996-03-20 2002-03-13 Bristol-Myers Squibb Company Pharmaceutical compositions useful for inhibiting an immune response by blocking the GP39/CD40 and CTLA4/CD28/B7 pathways
DE19613691A1 (de) 1996-04-05 1997-10-09 Boehringer Ingelheim Int Arzneimittel für die Behandlung von Tumorerkrankungen
US5922845A (en) 1996-07-11 1999-07-13 Medarex, Inc. Therapeutic multispecific compounds comprised of anti-Fcα receptor antibodies
EP0938556B1 (en) * 1996-07-12 2005-03-09 Genentech, Inc. Gamma-heregulin
EP0937082A2 (en) 1996-07-12 1999-08-25 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Materials and method for treating or preventing pathogenic fungal infection
WO1998002462A1 (en) 1996-07-16 1998-01-22 Morphosys Gesellschaft Für Proteinoptimierung Mbh Immunoglobulin superfamily domains and fragments with increased solubility
US5846948A (en) 1996-08-30 1998-12-08 Arch Development Corporation Herpes simplex virus ORF P is a repressor of viral protein synthesis
GB9618477D0 (en) 1996-09-04 1996-10-16 Univ Leeds Gene therapy
US6368598B1 (en) 1996-09-16 2002-04-09 Jcrt Radiation Oncology Support Services, Inc. Drug complex for treatment of metastatic prostate cancer
US5972361A (en) 1996-10-25 1999-10-26 The Procter & Gamble Company Cleansing products
US5858753A (en) 1996-11-25 1999-01-12 Icos Corporation Lipid kinase
DE19651443A1 (de) 1996-12-11 1998-06-18 Hoechst Ag Selbstverstärkende, pharmakologisch kontrollierbare Expressionssysteme
KR19980066046A (ko) 1997-01-18 1998-10-15 정용훈 고역가의 CTLA4-Ig 융합단백질
EP0860445A1 (en) 1997-02-18 1998-08-26 Hoechst Aktiengesellschaft New nucleotide sequences for the cell cycle regulated expression of structural genes
US6133426A (en) 1997-02-21 2000-10-17 Genentech, Inc. Humanized anti-IL-8 monoclonal antibodies
CA2281570C (en) 1997-03-11 2003-09-23 Les Laboratoires Aeterna Inc. Composition for treating tumors containing shark cartilage extracts and anti-neoplastic agents
IL131978A0 (en) 1997-03-20 2001-03-19 Univ Washington Solvent for biopolymer synthesis solvent microdots and methods of use
US6306393B1 (en) * 1997-03-24 2001-10-23 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies
US6384203B1 (en) 1999-05-12 2002-05-07 Immunex Corporation Family of immunoregulators designated leukocyte immunoglobulin-like receptors (LIR)
US6217900B1 (en) 1997-04-30 2001-04-17 American Home Products Corporation Vesicular complexes and methods of making and using the same
US20020062010A1 (en) 1997-05-02 2002-05-23 Genentech, Inc. Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
ATE230277T1 (de) 1997-06-13 2003-01-15 Genentech Inc Stabilisierte antikörperformulierung
ES2244066T3 (es) 1997-06-24 2005-12-01 Genentech, Inc. Procedimiento y composiciones de glicoproteinas galactosiladas.
US5994511A (en) 1997-07-02 1999-11-30 Genentech, Inc. Anti-IgE antibodies and methods of improving polypeptides
WO1999002567A2 (en) 1997-07-08 1999-01-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Compositions and methods for producing homoconjugates of antibodies which induce growth arrest or apoptosis of tumor cells
US6165476A (en) 1997-07-10 2000-12-26 Beth Israel Deaconess Medical Center Fusion proteins with an immunoglobulin hinge region linker
US6342220B1 (en) 1997-08-25 2002-01-29 Genentech, Inc. Agonist antibodies
TW557297B (en) 1997-09-26 2003-10-11 Abbott Lab Rapamycin analogs having immunomodulatory activity, and pharmaceutical compositions containing same
US6383746B1 (en) 1997-10-23 2002-05-07 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Functional promoter for CCR5
AU759779B2 (en) 1997-10-31 2003-05-01 Genentech Inc. Methods and compositions comprising glycoprotein glycoforms
US6383811B2 (en) 1997-12-30 2002-05-07 Mirus Corporation Polyampholytes for delivering polyions to a cell
PT1049787E (pt) 1998-01-23 2005-04-29 Vlaams Interuniv Inst Biotech Derivados de anticorpos multipropositos
CN1316910A (zh) 1998-02-19 2001-10-10 埃克斯西特治疗公司 用于调节淋巴细胞活化的组合物及方法
US6051228A (en) * 1998-02-19 2000-04-18 Bristol-Myers Squibb Co. Antibodies against human CD40
PL199659B1 (pl) 1998-02-25 2008-10-31 Merck Patent Gmbh Białko fuzyjne przeciwciała hu-KS IL2, cząsteczka DNA kodująca białko fuzyjne przeciwciała hu-KS IL2 i sposób wytwarzania białka fuzyjnego przeciwciała hu-KS IL2
US6383481B1 (en) 1998-03-30 2002-05-07 Japan Immunoresearch Laboratories Co., Ltd. Method for transplantation of hemopoietic stem cells
PT1068241E (pt) 1998-04-02 2007-11-19 Genentech Inc Variantes de anticorpos e respectivos fragmentos
US6528624B1 (en) 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6242195B1 (en) 1998-04-02 2001-06-05 Genentech, Inc. Methods for determining binding of an analyte to a receptor
US6284536B1 (en) * 1998-04-20 2001-09-04 The Regents Of The University Of California Modified immunoglobin molecules and methods for use thereof
JP2002512361A (ja) 1998-04-22 2002-04-23 ジェンベク、インコーポレイティッド アデノウイルスの効率的精製
GB9809280D0 (en) 1998-04-30 1998-07-01 Rpms Technology Ltd Immunosupression
DE19819846B4 (de) 1998-05-05 2016-11-24 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Multivalente Antikörper-Konstrukte
WO1999061630A2 (en) 1998-05-26 1999-12-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Chimeric molecules comprising an extracellular ligand binding domain of a receptor and an ige fc or constant region, and their use in an assay system
US7052872B1 (en) 1999-06-22 2006-05-30 Immunomedics, Inc. Bi-specific antibodies for pre-targeting diagnosis and therapy
CA2331789C (en) 1998-07-13 2013-09-10 Board Of Regents, The University Of Texas System Cancer treatment methods using therapeutic conjugates that bind to aminophospholipids
US6818213B1 (en) 1998-07-13 2004-11-16 Board Of Regents, The University Of Texas System Cancer treatment compositions comprising therapeutic conjugates that bind to aminophospholipids
JP2002521053A (ja) 1998-07-28 2002-07-16 マイクロメット アーゲー ヘテロミニ体
CN100409898C (zh) 1998-08-11 2008-08-13 拜奥根Idec公司 包括施用抗-cd20抗体的b-细胞淋巴瘤联合疗法
US6383794B1 (en) 1998-08-24 2002-05-07 Uab Research Foundation Methods of producing high titer recombinant adeno-associated virus
US6472179B2 (en) 1998-09-25 2002-10-29 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Receptor based antagonists and methods of making and using
US6224866B1 (en) 1998-10-07 2001-05-01 Biocrystal Ltd. Immunotherapy of B cell involvement in progression of solid, nonlymphoid tumors
WO2000023573A2 (en) * 1998-10-20 2000-04-27 City Of Hope Cd20-specific redirected t cells and their use in cellular immunotherapy of cd20+ malignancies
US6660843B1 (en) 1998-10-23 2003-12-09 Amgen Inc. Modified peptides as therapeutic agents
US6197294B1 (en) 1998-10-26 2001-03-06 Neurotech S.A. Cell surface molecule-induced macrophage activation
WO2000027885A1 (fr) 1998-11-05 2000-05-18 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Nouveau popypeptide chimerique
CN1330554A (zh) 1998-11-09 2002-01-09 Idec药物公司 接受bmt或pbsc移植患者的抗cd20嵌合抗体治疗
EP1616572B1 (en) 1998-11-09 2010-09-01 Biogen Idec Inc. Chimeric anti-CD20 antibody, rituxan, for use in the treatment of chronic lymphocytic leukemia
US6380371B1 (en) 1998-12-10 2002-04-30 The Regents Of The University Of California Endoglycan: a novel protein having selectin ligand and chemokine presentation activity
ES2694002T3 (es) 1999-01-15 2018-12-17 Genentech, Inc. Polipéptido que comprende una región Fc de IgG1 humana variante
US6897044B1 (en) 1999-01-28 2005-05-24 Biogen Idec, Inc. Production of tetravalent antibodies
AU3475100A (en) 1999-01-29 2000-08-18 Imclone Systems Incorporated Antibodies specific to kdr and uses thereof
EP1035172A3 (en) 1999-03-12 2002-11-27 Fuji Photo Film Co., Ltd. Azomethine compound and oily magenta ink
US6383753B1 (en) 1999-03-31 2002-05-07 Regents Of The University Of Michigan Yeast mammalian regulators of cell proliferation
AU4476600A (en) 1999-04-22 2000-11-10 Vanderbilt University Polymeric encapsulation system promoting angiogenesis
GB9909925D0 (en) * 1999-04-29 1999-06-30 Pharmacia & Upjohn Spa Combined preparations comprising anthracycline derivatives
US6358596B1 (en) * 1999-04-27 2002-03-19 The Standard Register Company Multi-functional transparent secure marks
CA2904259C (en) 1999-05-07 2016-11-15 Genentech, Inc. Use of rituximab to treat vasculitis
US8119101B2 (en) 1999-05-10 2012-02-21 The Ohio State University Anti-CD74 immunoconjugates and methods of use
RU2262510C9 (ru) 1999-05-19 2006-04-20 Лексиген Фармасьютикэлс Корп. Слитый белок, обладающий биологической активностью интерферона-альфа, димерный слитый белок, фармацевтическая композиция, их содержащая, молекула днк (варианты) и способ адресования интерферона-альфа в ткани печени
DK1194167T3 (da) 1999-06-09 2009-11-16 Immunomedics Inc Immunoterapi af autoimmune sygdomme under anvendelse af B-cellespecifikke antistoffer
ITMI991299A1 (it) 1999-06-11 2000-12-11 Consiglio Nazionale Ricerche Uso di anticorpi contro antigeni di superficie per il trattamento della malattia trapianto contro ospite
US6380382B1 (en) 1999-06-30 2002-04-30 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Gene encoding a protein having diagnostic, preventive, therapeutic, and other uses
DE19930748C2 (de) 1999-07-02 2001-05-17 Infineon Technologies Ag Verfahren zur Herstellung von EEPROM- und DRAM-Grabenspeicherzellbereichen auf einem Chip
PL201086B1 (pl) 1999-07-12 2009-03-31 Genentech Inc Zastosowanie przeciwciał wiążących się z antygenem CD20
EP1210374B1 (en) 1999-07-29 2006-10-11 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to prostate specific membrane antigen
CA2380813A1 (en) 1999-07-29 2001-02-08 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to her2/neu
KR100816958B1 (ko) 1999-07-30 2008-03-26 메다렉스, 인코포레이티드 항-Ｆｃ 수용체 결합제를 포함하는 치료 화합물
US8557244B1 (en) 1999-08-11 2013-10-15 Biogen Idec Inc. Treatment of aggressive non-Hodgkins lymphoma with anti-CD20 antibody
US6451284B1 (en) 1999-08-11 2002-09-17 Idec Pharmaceuticals Corporation Clinical parameters for determining hematologic toxicity prior to radioimmunotheraphy
CN101259270A (zh) 1999-08-11 2008-09-10 拜奥根Idec公司 用抗cd20抗体治疗累及骨髓的非霍奇金淋巴瘤患者
AU6929100A (en) 1999-08-23 2001-03-19 Biocrystal Limited Methods and compositions for immunotherapy of b cell involvement in promotion ofa disease condition comprising multiple sclerosis
EP1212331B1 (en) 1999-08-24 2004-04-21 Ariad Gene Therapeutics, Inc. 28-epirapalogs
MXPA02004599A (es) 1999-11-08 2002-10-23 Idec Pharma Corp Tratamiento de tumores malignos de celula b utilizando anticuerpos anti-cd40l en combinacion con anticuerpos anti-cd20 y/o agentes quimioterapeuticos y radioterapia.
US20020028178A1 (en) 2000-07-12 2002-03-07 Nabil Hanna Treatment of B cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications
US20020006404A1 (en) 1999-11-08 2002-01-17 Idec Pharmaceuticals Corporation Treatment of cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications
US6380362B1 (en) 1999-12-23 2002-04-30 Genesis Research & Development Corporation Ltd. Polynucleotides, polypeptides expressed by the polynucleotides and methods for their use
CN1404373A (zh) 2000-02-25 2003-03-19 健康研究股份有限公司 分析物的透皮取样法
US20020009427A1 (en) 2000-03-24 2002-01-24 Wolin Maurice J. Methods of therapy for non-hodgkin's lymphoma
EP1283722A1 (en) 2000-03-31 2003-02-19 Idec Pharmaceuticals Corporation Combined use of anti-cytokine antibodies or antagonists and anti-cd20 for the treatment of b cell lymphoma
PT2857516T (pt) 2000-04-11 2017-08-28 Genentech Inc Anticorpos multivalentes e utilizações dos mesmos
KR20030016250A (ko) 2000-04-25 2003-02-26 아이덱 파마슈티칼즈 코포레이션 중추신경계 림프종 치료용 리툭시맵의 초내 투여
EP1939203B1 (en) 2000-04-25 2014-11-19 ICOS Corporation Inhibitors of human phosphatidyl-inositol 3-kinase delta isoform
US6667300B2 (en) 2000-04-25 2003-12-23 Icos Corporation Inhibitors of human phosphatidylinositol 3-kinase delta
MXPA02010618A (es) 2000-04-25 2004-05-05 Icos Corp Inhibidores de fosfatidilinositol 3-quinasa delta.
US20040180046A1 (en) 2000-04-26 2004-09-16 Jeff Himawan Bispecific molecules and uses thereof
NZ534864A (en) 2000-05-08 2006-04-28 Celldex Therapeutics Inc Human monoclonal antibodies to dentritic cells
US7560534B2 (en) 2000-05-08 2009-07-14 Celldex Research Corporation Molecular conjugates comprising human monoclonal antibodies to dendritic cells
WO2001090192A2 (en) 2000-05-24 2001-11-29 Imclone Systems Incorporated Bispecific immunoglobulin-like antigen binding proteins and method of production
JP2004512262A (ja) 2000-06-20 2004-04-22 アイデック　ファーマスーティカルズ　コーポレイション 非放射性抗ｃｄ２０抗体／放射標識抗ｃｄ２２抗体の組合せ
DE60139689D1 (de) 2000-06-22 2009-10-08 Univ Iowa Res Found Kombination von CpG und Antikörpern gegen CD19,CD20,CD22 oder CD40 zur Prävention oder Behandlung von Krebs.
IL153567A0 (en) 2000-06-29 2003-07-06 Abbott Lab Dual specificity antibodies and methods of making and using
SG136804A1 (en) 2000-07-12 2007-11-29 Idec Pharma Corp Treatment of b cell malignancies using combination of b cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications
AU2001272733A1 (en) 2000-07-19 2002-02-05 Orbotech Ltd. Apparatus and method for electrical testing of electrical circuits
US20020025317A1 (en) 2000-07-20 2002-02-28 Schering Ag Bispecific monoclonal antibodies to IL-12 and IL-18
WO2002007926A1 (en) 2000-07-24 2002-01-31 Florida State University Research Foundation Method and apparatus for removing minute particles from a surface
EP1307490B1 (de) 2000-08-11 2007-04-18 Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg Fv-konstrukte mit beeinflussbarer affinitat zu einer zu bindenden substanz
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
US20020128448A1 (en) 2000-10-20 2002-09-12 Idec Pharmaceuticals Corporation Variant IgG3 Rituxan and therapeutic use thereof
US7829084B2 (en) 2001-01-17 2010-11-09 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding constructs and methods for use thereof
PL364623A1 (en) 2001-01-17 2004-12-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
US7754208B2 (en) 2001-01-17 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
US20030133939A1 (en) 2001-01-17 2003-07-17 Genecraft, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
US7319139B2 (en) 2001-01-29 2008-01-15 Biogen Idec, Inc. TAG-72 specific CH2 domain deleted antibodies
PL372140A1 (en) 2001-01-29 2005-07-11 Idec Pharmaceuticals Corporation Modified antibodies and methods of use
JP4463475B2 (ja) 2001-01-31 2010-05-19 バイオジェン アイデック インコーポレイテッド 腫瘍疾患の治療における免疫調節性抗体の使用
CN1312181C (zh) 2001-02-12 2007-04-25 米德列斯公司 抗Fcα受体(CD89)的人单克隆抗体
US7148321B2 (en) 2001-03-07 2006-12-12 Emd Lexigen Research Center Corp. Expression technology for proteins containing a hybrid isotype antibody moiety
WO2002072141A2 (en) 2001-03-09 2002-09-19 William Herman Targeted ligands
EP1383532B1 (en) 2001-04-02 2011-05-04 Genentech, Inc. Combination therapy
EP1383800A4 (en) 2001-04-02 2004-09-22 Idec Pharma Corp RECOMBINANT ANTIBODIES CO-EXPRESSED WITH GNTIII
US20040058445A1 (en) * 2001-04-26 2004-03-25 Ledbetter Jeffrey Alan Activation of tumor-reactive lymphocytes via antibodies or genes recognizing CD3 or 4-1BB
US20030008923A1 (en) 2001-06-01 2003-01-09 Wyeth Antineoplastic combinations
NZ530212A (en) 2001-06-13 2006-09-29 Genmab As An isolated human monoclonal antibody that binds to human epidermal growth factor receptor (EGFR)
WO2002102312A2 (en) 2001-06-14 2002-12-27 Intermune, Inc. Combination therapy of gamma-interferon and b cell specific antibodies
US20020196854A1 (en) 2001-06-15 2002-12-26 Jongil Kim Fast video encoder using adaptive hierarchical video processing in a down-sampled domain
AU2002368077B2 (en) * 2001-07-12 2010-03-04 Jefferson Foote Super humanized antibodies
US20030026780A1 (en) 2001-07-18 2003-02-06 Hood Leroy E. Innate immunity mediated methods of treating pathological conditions
US20030064053A1 (en) 2001-08-31 2003-04-03 Shengjiang Liu Multivalent protein conjugate with multiple ligand-binding domains of receptors
EP1293514B1 (en) 2001-09-14 2006-11-29 Affimed Therapeutics AG Multimeric single chain tandem Fv-antibodies
US7355012B2 (en) 2001-09-26 2008-04-08 United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Mutated anti-CD22 antibodies with increased affinity to CD22-expressing leukemia cells
CA2461631A1 (en) 2001-09-28 2003-04-03 Elusys Therapeutics, Inc. Methods and compositions for prevention, diagnosis, and treatment of cancer using bispecific molecules
WO2003030835A2 (en) 2001-10-12 2003-04-17 Schering Corporation Use of bispecific antibodies to regulate immune responses
DE10156482A1 (de) 2001-11-12 2003-05-28 Gundram Jung Bispezifisches Antikörper-Molekül
ES2283368T3 (es) 2001-11-14 2007-11-01 Affimed Therapeutics Ag Anticuerpos biespecificos anti-cd19 y anti-cd16 y usos de los mismos.
BR0215403A (pt) 2001-12-26 2005-05-03 Immunomedics Inc Métodos de geração de agentes multivalentes, multiespecìficos de domìnios vh e vl
EP1519959B1 (en) 2002-02-14 2014-04-02 Immunomedics, Inc. Anti-cd20 antibodies and fusion proteins thereof and methods of use
AU2003209446B2 (en) 2002-03-01 2008-09-25 Immunomedics, Inc. Bispecific antibody point mutations for enhancing rate of clearance
US8361464B2 (en) 2002-03-01 2013-01-29 Immunomedics, Inc. Anthracycline-Antibody Conjugates for Cancer Therapy
US20030219436A1 (en) 2002-03-15 2003-11-27 Ledbetter Jeffrey A. Compositions and methods to regulate an immune response using CD83 gene expressed in tumors and using soluble CD83-Ig fusion protein
US7332585B2 (en) 2002-04-05 2008-02-19 The Regents Of The California University Bispecific single chain Fv antibody molecules and methods of use thereof
US7332580B2 (en) 2002-04-05 2008-02-19 The Regents Of The University Of California Bispecific single chain Fv antibody molecules and methods of use thereof
CA2379586A1 (en) 2002-04-10 2003-10-10 William Herman Fluid targeted ligands
DE60327199D1 (de) 2002-04-26 2009-05-28 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Verfahren zum screening auf agonistische antikörper
WO2003106622A2 (en) 2002-05-30 2003-12-24 The Children's Hospital Of Philadelphia Methods for treatment of acute lymphocytic leukemia
US8034904B2 (en) 2002-06-14 2011-10-11 Immunogen Inc. Anti-IGF-I receptor antibody
DK1517921T3 (da) 2002-06-28 2006-10-09 Domantis Ltd Immunglobulin-enkeltvariable antigen-bindende domæner og dobbeltspecifikke konstruktioner deraf
DK1534335T4 (en) 2002-08-14 2015-10-05 Macrogenics Inc FCGAMMARIIB-SPECIFIC ANTIBODIES AND PROCEDURES FOR USE THEREOF
AU2003282752A1 (en) 2002-10-08 2004-05-04 Immunomedics, Inc. Antibody therapy
KR101088661B1 (ko) 2002-10-10 2011-12-01 메르크 파텐트 게엠베하 Ｅｒｂ－ｂ１ 수용체를 표적으로 하는 약학적 조성물
DK2891666T3 (en) 2002-10-16 2017-10-02 Purdue Pharma Lp Antibodies that bind cell-associated CA 125 / O722P and methods for its use
NZ568769A (en) 2002-10-17 2010-04-30 Genmab As Human monoclonal antibodies against CD20
PT1572744E (pt) 2002-12-16 2010-09-07 Genentech Inc Variantes de imunoglobulina e utilizações destas
CA2510315C (en) 2002-12-20 2014-01-28 Protein Design Labs, Inc. Antibodies against gpr64 and uses thereof
EP1583503A4 (en) 2002-12-20 2006-08-09 Biogen Idec Inc POLYVALENT LYMPHOTOXIN BETA RECEPTOR AGONISTS AND THERAPEUTIC USE THEREOF
ES2354610T5 (es) * 2002-12-23 2020-09-14 Bristol Myers Squibb Co Mejora de la calidad del producto en procedimientos de cultivo de células de mamífero para la producción de proteína
CA2414148A1 (en) 2002-12-30 2004-06-30 William Herman Targeted ligands
US20050008625A1 (en) 2003-02-13 2005-01-13 Kalobios, Inc. Antibody affinity engineering by serial epitope-guided complementarity replacement
JP3803790B2 (ja) 2003-02-17 2006-08-02 株式会社東北テクノアーチ 新規なダイアボディ型二重特異性抗体
CA2517054C (en) 2003-02-25 2016-05-10 Medinnova As Use of nucleic acids encoding antibody-like molecules for use in medical treatment
AR044388A1 (es) 2003-05-20 2005-09-07 Applied Molecular Evolution Moleculas de union a cd20
WO2005021710A2 (en) 2003-06-02 2005-03-10 University Of Miami Chimeric molecules and methods of use
CN1279056C (zh) 2003-06-06 2006-10-11 马菁 肿瘤相关抗原sm5－1的特异性抗体及其应用
JP5068072B2 (ja) 2003-06-27 2012-11-07 バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド 連結ペプチドを含む改変された結合分子
WO2005004809A2 (en) 2003-07-01 2005-01-20 Immunomedics, Inc. Multivalent carriers of bi-specific antibodies
US6864837B2 (en) 2003-07-18 2005-03-08 Ems Technologies, Inc. Vertical electrical downtilt antenna
US7754209B2 (en) * 2003-07-26 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals Binding constructs and methods for use thereof
US20060263362A1 (en) 2003-08-21 2006-11-23 Atsushi Ochiai Cancer metastasis inhibitor
SI1673398T1 (sl) 2003-10-16 2011-05-31 Micromet Ag Multispecifiäśne deimunizirajoäśe cd3 povezovalne molekule
CN1723220A (zh) 2003-11-13 2006-01-18 韩美药品工业株式会社 含有免疫球蛋白fc区作为载体的药物组合物
RU2006126097A (ru) 2003-12-19 2008-02-20 Дженентек, Инк. (Us) Моновалентные фрагменты антител, используемые в качестве лекарственных средств
EP1697520A2 (en) 2003-12-22 2006-09-06 Xencor, Inc. Fc polypeptides with novel fc ligand binding sites
US7235641B2 (en) 2003-12-22 2007-06-26 Micromet Ag Bispecific antibodies
MXPA06007174A (es) 2003-12-22 2006-08-23 Novartis Ag Biomarcadores para determinar la sensibilidad de enfermedades proliferativas a inhibidores mtor.
DE602005027309D1 (de) 2004-01-16 2011-05-19 Regeneron Pharma Zur aktivierung von rezeptoren fähige fusionspolypeptide
DK1716178T3 (da) 2004-02-16 2010-09-20 Micromet Ag Mindre immunogene bindingsmolekyler
AR047988A1 (es) 2004-03-11 2006-03-15 Wyeth Corp Combinaciones antineoplásicas de cci-779 y rituximab
US8133485B2 (en) 2004-03-30 2012-03-13 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Bi-specific complexes for targeting cells involved in allergic-type reactions, compositions and uses thereof
JP5848861B2 (ja) 2004-04-20 2016-01-27 ジェンマブ エー／エスＧｅｎｍａｂ Ａ／Ｓ Ｃｄ２０に対するヒトモノクローナル抗体
CA2568661A1 (en) 2004-06-03 2006-01-05 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to fc gamma receptor i (cd64)
AU2005249566B2 (en) 2004-06-04 2010-11-11 Genentech, Inc. Method for treating multiple sclerosis
TW200608994A (en) 2004-06-04 2006-03-16 Genentech Inc Method for treating lupus
US20060008415A1 (en) 2004-06-25 2006-01-12 Protein Design Labs, Inc. Stable liquid and lyophilized formulation of proteins
WO2006020258A2 (en) 2004-07-17 2006-02-23 Imclone Systems Incorporated Novel tetravalent bispecific antibody
DK1864998T4 (da) 2004-07-22 2022-07-04 Univ Erasmus Med Ct Rotterdam Bindingsmolekyler
JP2008509666A (ja) 2004-08-11 2008-04-03 トルビオン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 結合ドメイン融合タンパク質
WO2006028936A2 (en) 2004-09-02 2006-03-16 Genentech, Inc. Heteromultimeric molecules
US7393662B2 (en) 2004-09-03 2008-07-01 Centocor, Inc. Human EPO mimetic hinge core mimetibodies, compositions, methods and uses
US20060110387A1 (en) 2004-10-05 2006-05-25 Genentech, Inc. Method for treating vasculitis
ATE525400T1 (de) 2004-12-01 2011-10-15 Trion Pharma Gmbh Verwendung trifunktionaler antikörper zur risikoreduzierung von gvhd in einer allogenetischen anti-tumor zelltherapie
CA2587143C (en) 2004-12-08 2017-12-05 Immunomedics, Inc. Methods and compositions for immunotherapy and detection of inflammatory and immune-dysregulatory disease, infectious disease, pathologic angiogenesis and cancer
FR2879204B1 (fr) 2004-12-15 2007-02-16 Lab Francais Du Fractionnement Anticorps cytotoxique dirige contre les proliferations hematopoietiques lymphoides de type b.
WO2006074399A2 (en) 2005-01-05 2006-07-13 Biogen Idec Ma Inc. Multispecific binding molecules comprising connecting peptides
US8436190B2 (en) 2005-01-14 2013-05-07 Cephalon, Inc. Bendamustine pharmaceutical compositions
KR100616666B1 (ko) 2005-01-27 2006-08-28 삼성전기주식회사 카본나노튜브에 구아니딘기를 형성하는 방법,구아니딘기가 형성된 카본나노튜브를 기판에 부착하는방법 및 이에 따라 제조된 카본나노튜브 및 기판
DOP2006000029A (es) 2005-02-07 2006-08-15 Genentech Inc Antibody variants and uses thereof. (variantes de un anticuerpo y usos de las mismas)
WO2006106905A1 (ja) 2005-03-31 2006-10-12 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 会合制御によるポリペプチド製造方法
AR053579A1 (es) 2005-04-15 2007-05-09 Genentech Inc Tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal (eii)
WO2006117782A2 (en) 2005-05-04 2006-11-09 Quark Pharmaceuticals, Inc. Recombinant antibodies against cd55 and cd59 and uses thereof
US20060263367A1 (en) 2005-05-23 2006-11-23 Fey Georg H Bispecific antibody devoid of Fc region and method of treatment using same
US20110129412A1 (en) 2005-06-02 2011-06-02 Astrazeneca Ab Antibodies Directed to CD20 and Uses Thereof
US20080279850A1 (en) 2005-07-25 2008-11-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. B-Cell Reduction Using CD37-Specific and CD20-Specific Binding Molecules
KR20080047540A (ko) 2005-07-25 2008-05-29 트루비온 파마슈티칼스, 인코포레이티드 Ｃｄ20 특이적 결합 분자의 단회 투여 용도
CA2616395C (en) 2005-07-25 2016-10-04 Trubion Pharmaceuticals B-cell reduction using cd37-specific and cd20-specific binding molecules
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
JP4641476B2 (ja) 2005-09-15 2011-03-02 キヤノン株式会社 プローブアレイの製造装置
KR20080080653A (ko) * 2005-12-20 2008-09-04 모르포시스 아게 Ｈｃｄｒ３ 영역들의 신규한 집합 및 그 사용
CA2638794A1 (en) 2006-02-15 2007-08-23 Imclone Systems Incorporated Functional antibodies
KR101571027B1 (ko) * 2006-06-12 2015-11-23 이머전트 프로덕트 디벨롭먼트 시애틀, 엘엘씨 효과기 기능을 갖는 단일쇄 다가 결합 단백질
US7846434B2 (en) 2006-10-24 2010-12-07 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Materials and methods for improved immunoglycoproteins
CN101646688A (zh) 2006-10-24 2010-02-10 特鲁比昂药品公司 利用栗精胺提高抗体依赖性细胞毒性的方法
EP2137325A1 (en) 2007-04-02 2009-12-30 Genentech, Inc. Biological markers predictive of rheumatoid arthritis response to b-cell antagonists
WO2008153636A1 (en) 2007-05-04 2008-12-18 Cellsignaling Technology, Inc. Phospho-specific antibodies to p13k regulatory subunit and uses thereof
US20100305113A1 (en) 2007-05-09 2010-12-02 Hans-Georg Capraro Substituted Imidazopyridazines as Lipid Kinase Inhibitors
CN101802197A (zh) 2007-05-14 2010-08-11 比奥根艾迪克Ma公司 单链FC（ScFc）区、包含其的结合多肽及与其相关的方法
WO2008152394A1 (en) 2007-06-12 2008-12-18 F.Hoffmann-La Roche Ag Pharmaceutical compounds
WO2008152387A1 (en) 2007-06-12 2008-12-18 F.Hoffmann-La Roche Ag Quinazoline derivatives as pi3 kinase inhibitors
JP5539190B2 (ja) 2007-06-12 2014-07-02 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー チアゾロピリミジン類及びホスファチジルイノシトール−３キナーゼのインヒビターとしてのそれらの使用
BRPI0814060A2 (pt) * 2007-07-06 2015-01-06 Trubion Pharmaceuticals Inc Peptídeos ligantes tendo um domínio de ligação específico disposto em c-terminal
PE20140196A1 (es) 2007-08-09 2014-03-19 Boehringer Ingelheim Int Anticuerpos anti-cd37
TWI471134B (zh) 2007-09-12 2015-02-01 Genentech Inc 肌醇磷脂３－激酶抑制劑化合物及化療劑之組合及使用方法
JP2010539239A (ja) 2007-09-17 2010-12-16 グラクソスミスクライン・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー Ｐｉ３キナーゼ阻害剤としてのピリドピリミジン誘導体
EP2207781B1 (en) 2007-09-24 2012-11-28 Genentech, Inc. Thiazolopyrimidine p13k inhibitor compounds and methods of use
HUE025976T2 (en) 2007-09-27 2016-05-30 Fund Centro Nac De Investig Oncologicas Carlos Iii Imidazolothiadiazoles for use as protein kinase inhibitors
GB2467670B (en) 2007-10-04 2012-08-01 Intellikine Inc Chemical entities and therapeutic uses thereof
WO2009045174A1 (en) 2007-10-05 2009-04-09 S*Bio Pte Ltd 2-morpholinylpurines as inhibitors of pi3k
RU2518098C2 (ru) 2007-10-05 2014-06-10 Верастэм,Инк. Пиримидинзамещенные производные пурина, фармацевтическая композиция на их основе, способ ингибирования протеинкиназ, способ лечения или профилактики заболеваний, чувствительных к ингибированию протеинкиназ и способ лечения пролиферативных заболеваний
US8129371B2 (en) 2007-10-16 2012-03-06 Wyeth Llc Thienopyrimidine and pyrazolopyrimidine compounds and their use as mTOR kinase and PI3 kinase inhibitors
EP2211615A4 (en) 2007-10-22 2010-10-13 Glaxosmithkline Llc PYRIDOSULFONAMIDE DERIVATIVES AS PI3 KINASE INHIBITORS
CA2703138A1 (en) 2007-10-26 2009-04-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Purine derivatives useful as pi3 kinase inhibitors
GB0721095D0 (en) 2007-10-26 2007-12-05 Piramed Ltd Pharmaceutical compounds
US7951832B2 (en) 2007-10-31 2011-05-31 Burnham Institute For Medical Research Pyrazole derivatives as kinase inhibitors
WO2009058361A1 (en) 2007-10-31 2009-05-07 Dynavax Technologies Corp. Inhibition of type i ifn production
JP2011503193A (ja) 2007-11-13 2011-01-27 アイコス、コーポレーション ヒトホスファチジルイノシトール３−キナーゼδの阻害剤
WO2009066084A1 (en) 2007-11-21 2009-05-28 F. Hoffmann-La Roche Ag 2 -morpholinopyrimidines and their use as pi3 kinase inhibitors
WO2009070524A1 (en) 2007-11-27 2009-06-04 Wyeth Pyrrolo[3,2-d]pyrimidine compounds and their use as pi3 kinase and mtor kinase inhibitors
AU2008328882A1 (en) 2007-11-27 2009-06-04 Cellzome Limited Amino triazoles as PI3K inhibitors
US8962803B2 (en) 2008-02-29 2015-02-24 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Antibodies against the RGM A protein and uses thereof
AU2009234277B2 (en) 2008-04-11 2014-12-04 Aptevo Research And Development Llc CD37 immunotherapeutic and combination with bifunctional chemotherapeutic thereof
MX2011004985A (es) * 2008-11-13 2011-05-31 Emergent Product Dev Seattle Terapias de combinacion inmunoterapeutica de cd37 y usos de las mismas.

Also Published As

Publication number Publication date
US20140010813A1 (en) 2014-01-09
ES2460517T3 (es) 2014-05-13
NO20080217L (no) 2008-04-16
CN101282745B (zh) 2015-04-29
EP2298815A1 (en) 2011-03-23
EP1912675A2 (en) 2008-04-23
HRP20150591T1 (hr) 2015-07-31
US20190290755A1 (en) 2019-09-26
RS54088B1 (en) 2015-10-30
RU2423381C2 (ru) 2011-07-10
ZA200800692B (en) 2011-10-26
NZ606294A (en) 2014-09-26
SI2298815T1 (sl) 2015-08-31
SI1912675T1 (sl) 2014-07-31
NI200800032A (es) 2009-03-23
RS53318B (en) 2014-10-31
NZ564764A (en) 2011-08-26
KR101251157B1 (ko) 2013-04-10
BRPI0614184A8 (pt) 2017-10-10
JP5740076B2 (ja) 2015-06-24
SG155912A1 (en) 2009-10-29
US10143748B2 (en) 2018-12-04
AU2006272555B2 (en) 2012-03-08
US20140004117A1 (en) 2014-01-02
JP2009502171A (ja) 2009-01-29
US10307481B2 (en) 2019-06-04
US20090214539A1 (en) 2009-08-27
ECSP088133A (es) 2008-02-20
CA2616395A1 (en) 2007-02-01
CN105012953A (zh) 2015-11-04
US20140072562A1 (en) 2014-03-13
EP2295080A2 (en) 2011-03-16
HRP20140338T1 (hr) 2014-06-20
CR9761A (es) 2008-05-21
CO6160337A2 (es) 2010-05-20
WO2007014278A3 (en) 2007-08-30
BRPI0614184A2 (pt) 2011-03-15
JP2014196350A (ja) 2014-10-16
IL237881A0 (en) 2015-05-31
US20070059306A1 (en) 2007-03-15
PL2298815T3 (pl) 2015-08-31
US20130266561A1 (en) 2013-10-10
EP2586798A2 (en) 2013-05-01
DK1912675T3 (en) 2014-03-24
RU2008106893A (ru) 2009-09-10
IL188345A (en) 2015-04-30
HK1125288A1 (en) 2009-08-07
HK1115820A1 (en) 2008-12-12
KR20080032192A (ko) 2008-04-14
CN105012953B (zh) 2018-06-22
CN101282745A (zh) 2008-10-08
SG10201403526YA (en) 2014-10-30
PT2298815E (pt) 2015-07-16
EP1912675B1 (en) 2014-02-12
WO2007014278A2 (en) 2007-02-01
CA2616395C (en) 2016-10-04
PT1912675E (pt) 2014-05-09
IL188345A0 (en) 2008-04-13
HK1155761A1 (en) 2012-05-25
EP2295080A3 (en) 2011-06-22
DK2298815T3 (en) 2015-06-15
AU2006272555A1 (en) 2007-02-01
EP2586798A3 (en) 2013-08-07
EP2298815B1 (en) 2015-03-11
PL1912675T3 (pl) 2014-10-31
HUE026303T2 (hu) 2016-06-28
ES2539250T3 (es) 2015-06-29
JP2012165760A (ja) 2012-09-06
NZ594275A (en) 2013-04-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA97469C2 (uk) Гуманізована специфічна до cd37 зв'язувальна молекула імуноглобуліну
ES2368700T3 (es) Agente inmunoterapéutico para cd37 y combinación con un agente quimioterapéutico bifuncional del mismo.
CN104395344B (zh) 抗b7-h6抗体、融合蛋白及其使用方法
JP5068270B2 (ja) 癌を処置するためのｉｌ−１７アンタゴニスト抗体
RU2421242C2 (ru) Применение однократной дозы cd20-специфических связывающих молекул
US8329178B2 (en) Antibodies against CXCR4 and methods of use thereof
CN104877026B (zh) 抗-bcma抗体
MX2011004985A (es) Terapias de combinacion inmunoterapeutica de cd37 y usos de las mismas.
UA118749C2 (uk) Конструкція антитіла до cdh19 і cd3
CN102659947A (zh) 新型抗cd98抗体
CN114206935A (zh) 新型cldn18.2结合分子
CN104114192A (zh) 嵌合的治疗性抗-cd37抗体hh1
CN111978402B (zh) 新型cldn18.2结合分子
JP2023071889A (ja) Ｔｉｇｉｔおよびｐｄ－１／ｔｉｇｉｔ結合分子
US20220041749A1 (en) Antibodies specific to muc18
JP2022062083A (ja) 二重特異性抗原結合ポリペプチド
US9580504B1 (en) Pidilizumab monoclonal antibody therapy following stem cell transplantation
CN114026118A (zh) 通过铰链结构域增强多肽和嵌合抗原受体
TW202120550A (zh) 雙特異性蛋白質
CN117192118A (zh) 一种抗cldn 18.2和cd47的双特异性抗体治疗疾病的用途