TWI694837B

TWI694837B - 用於癌症治療之組合療法

Info

Publication number: TWI694837B
Application number: TW104130846A
Authority: TW
Inventors: 馬修羅伯特詹斯; 馬修彼德派翠西利; 李梁山; 任平達; 毅劉
Original assignee: 美商亞瑞克西斯製藥公司
Priority date: 2014-09-18
Filing date: 2015-09-17
Publication date: 2020-06-01
Also published as: UY36307A; WO2016044772A1; US20190262342A1; EP3193851B1; ES2835729T3; JP2017528488A; US10111874B2; TW201625305A; EP3193851A1; JO3556B1; US20160166571A1; JP2022168089A

Abstract

本發明提供用於治療與KRAS基因突變相關之癌症的組合療法。亦提供包含用於治療與KRAS基因突變相關之癌症之治療劑的組合物。

Description

用於癌症治療之組合療法

本發明之實施例大體上關於用於治療與KRAS基因突變相關之癌症的組合療法。

Ras代表一組具有189個胺基酸之密切相關的單體球狀蛋白質(21kDa分子量)，其與質膜關聯且結合GDP或GTP。Ras起分子開關之作用。當Ras含有所結合之GDP時，其處於休止或關斷位置且「無活性」。作為細胞暴露於某些生長促進刺激物的反應，Ras經誘導而使其所結合之GDP與GTP發生交換。在結合GTP的情況下，Ras「接通」且能夠與其他蛋白質(其「下游標靶」)相互作用且活化此等其他蛋白質。Ras蛋白質本身使GTP水解恢復為GDP的固有能力極低，從而使其本身轉變成關斷狀態。將Ras關斷需要外源性蛋白質，稱為GTP酶活化蛋白質(GAP)，其與Ras相互作用且大大促進GTP轉化為GDP。Ras中之影響其與GAP相互作用或使GTP轉化回至GDP之能力的任何突變將導致蛋白質活化的時間延長且因此導致信號傳導至細胞的時間延長，告訴其繼續生長及分裂。由於此等信號引起細胞生長及分裂，因此過度活化的Ras信號傳導可能最終導致癌症。

在結構上，Ras蛋白質含有負責Ras-鳥嘌呤核苷酸結合及水解之酶促活性(GTP酶反應)的G域。其亦含有C末端延伸部分，稱為CAAX匣，其可發生轉譯後修飾且負責使蛋白質靶向膜。G域的尺寸為約21- 25kDa且其含有磷酸酯結合環(P-環)。P-環代表其中核苷酸結合於蛋白質中的囊袋，且此囊袋為具有保守性胺基酸殘基之結構域的硬性部分，其為核苷酸結合及水解所必需的(甘胺酸12、蘇胺酸26及離胺酸16)。G域亦含有所謂的開關I(殘基30-40)及開關II(殘基60-76)區域，其均為蛋白質之動態部分，由於其能夠實現休止與負載狀態之間的切換，因此往往呈現為「彈性負載」機制。主要相互作用為蘇胺酸-35及甘胺酸-60與GTP之γ-磷酸酯所形成的氫鍵，其使開關1及開關2區域分別維持其活性構形。GTP水解及磷酸酯釋放之後，此兩者鬆弛為無活性GDP構形。

Ras亞家族中的最顯著成員主要為牽涉許多癌症類型的HRAS、KRAS及NRAS。然而，存在許多其他成員，包括DIRAS1；DIRAS2；DIRAS3；ERAS；GEM：MRAS；NKIRAS1；NKIRAS2；NRAS；RALA；RALB；RAP1A；RAP1B；RAP2A；RAP2B；RAP2C；RASD1；RASD2；RASL10A；RASL10B；RASL11A；RASL11B；RASL12；REM1；REM2；RERG；RERGL；RRAD；RRAS及RRAS2。

RAS(HRAS、NRAS或KRAS)基因之三種主要同功異型物中之任一者中的突變為人類腫瘤發生的最常見事件之一。所有人類癌症中超過20%發生KRAS突變，其中胰臟(約90%)、結腸直腸(約40%)及肺(約35%)中發生的程度最高，常見突變為G12C(甘胺酸-12突變為半胱胺酸)。由此造成KRAS驅動型癌症僅在美國每年新診斷之病例超過150,000例。此等患者尚無有效的治療選項且其長期存活的機率極低。

多年的努力失敗之後，直接靶向KRAS久視為不可能的。最近，已報導一種靶向特定KRAS突變G12C的方法，該KRAS突變G12C佔KRAS突變型肺癌之接近50%(Ostrem等人，Nature 2013,503：548)。吾人已改進此策略以針對KRAS G12C功能產生細胞中及活體內之相當強抑制劑。此等化合物對於治療含有KRAS G12C突變之癌症而言擁有遠大的前景。

雖然KRAS為許多癌症類型中之關鍵驅動性突變，但其在所建立腫瘤方面的確切作用為一些爭論之主題。當突變型KRAS耗乏時，KRAS突變型癌細胞顯示受到不同程度的生長抑制，其中一些株系僅顯示受到中度的作用(Singh等人，Cancer Cell 2009,15：489)。另外，即使對於生長明確依賴於突變型KRAS的株系而言，耗乏KRAS並不能穩定誘導細胞死亡或細胞凋亡(Sunaga等人，Mol Cancer Ther 2011,10：336；Young等人，Cancer Discov 2013,3：112)。因此，儘管突變型KRAS對於腫瘤發生而言起主要作用，但僅抑制KRAS對於所要臨床結果而言可能是不夠的。

因此，雖然本領域中已取得進展，但此項技術中仍需要治療KRAS突變型癌症的改良方法，例如組合療法。本發明滿足此需要且提供其他相關優勢。

簡言之，本發明提供治療癌症(例如與KRAS基因突變相關之癌症)的方法。在一個實施例中，本發明提供一種治療KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型癌症的方法，該方法包含向有需要的個體投與有效量之KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑。可藉由所揭示之方法治療的例示性癌症包括(但不限於)血液學癌症、胰臟癌、MYH相關息肉病、結腸直腸癌及/或肺癌。

在不同實施例中，本發明提供一種誘導包含KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之細胞群發生細胞凋亡的方法，該方法包含投與有效量之KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑。

在其他實施例中，本發明係關於一種抑制患有KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型癌症之個體之腫瘤轉移的方法，該方法包含投與有效量之KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑。

亦提供不同癌症之組合療法所用的醫藥組合物及套組。

本發明之此等及其他態樣將在參考以下【實施方式】之後顯而易知。

在圖中，相同元件符號標識相似元件。圖式中之元件尺寸及相對位置未必按比例繪製且此等元件中之一些經任意放大及定位以改良圖式可讀性。另外，所繪製元件之特定形狀不意欲傳達關於特定元件之實際形狀的任何資訊，且僅為了圖式之易識別而選擇。

圖1提供西方墨點用於鑑別與KRAS G12C抑制組合靶向的協同路徑。圖示為點漬墨點陣列，用於偵測經K-Ras G12C抑制劑處理之指定細胞株中的磷酸化受體酪胺酸激酶(p-RTK)及磷酸化信號傳導激酶(亦即p-ERK或P-AKT)。針對各種細胞株概述處理之後經誘導或維持的顯著信號傳導標靶及其相應路徑。

圖2描繪K-Ras信號傳導下游標靶之西方墨點分析。A)表現K-Ras G12C同功異型物的NCI-H358細胞經DMSO對照物或10μM濃度之K-Ras G12C抑制劑II-64、I-153或I-158處理(泳道1-4)。細胞接著經DMSO、II-64、I-153或I-158與5μM之EGFR抑制劑埃羅替尼(erlotinib)(泳道5-7)或2μM之PI3K抑制劑GDC0941(泳道8-12)之組合處理。太平洋紫杉醇用作陽性對照物。西方墨點係使用p-AKT、p-ERK、總ERK、p-RSK、p-S6及裂解PARP之抗體探測。裂解PARP指示細胞凋亡。B)表現K-Ras之G12S同功異型物的A549細胞用作K-Ras G12C抑制劑特異性之對照物。A549細胞如同A)中加以處理。偵測到很少的PARP裂解或未偵測到PARP裂解。

圖3描繪經單獨K-Ras G12C抑制劑、單獨埃羅替尼或組合療法處理之K-Ras G12C細胞株及對照細胞株中的卡斯蛋白酶活性。紫杉醇(0.5μM)用作陽性對照物。藉由在卡斯蛋白酶分析中量測可裂解受質之發光來評價卡斯蛋白酶活性。A)表現K-Ras G12C的細胞株NCI-H358、NCI-H2122及NCI-H2030經遞增劑量之II-64(■)、II-64+1μM埃羅替尼(▲)或II-64+5μM埃羅替尼(▼)處理。B)對照細胞株NCI-H441、HCT116、A375及A549如同A)中加以處理。C)表現K-Ras G12C的細胞株NCI-H358、NCI-H2122、NCI-H2030及NCI-H1792經遞增劑量之II-64(■)或II-64+2μM GDC0941(▲)處理。D)對照細胞株NCI-H441、HCT116、A375及A549如同C)中加以處理。

圖4描繪本文所揭示之化合物抑制Ras介導性細胞週期進程及誘導細胞凋亡的能力。A)流式細胞術資料表明經單獨II-64(5μM或10μM)、II-64+埃羅替尼(5μM)或II-64+GDC0941(2μM)處理之NCI-H358細胞的細胞週期進程。B)根據流式細胞術所產生之NCI-H358、NCI-H1792、NCI-H2122及SW1573細胞株的平均細胞凋亡反應，如A)中所述。

圖5描繪經II-64(10μM)、太平洋紫杉醇(1.5nM)或組合療法(II-64+太平洋紫杉醇)處理之NCI-H358細胞的細胞凋亡。頂排顯示經太平洋紫杉醇預處理24小時且接著經II-64處理另外48小時(總計72小時)之細胞的結果。底排顯示經II-64預處理24小時且接著經太平洋紫杉醇處理另外48小時(總計72小時)之細胞的結果。細胞凋亡經由流式細胞術量測。閘控群體=亞二倍體細胞凋亡細胞之%。

圖6描繪經II-64(10μM)、多西他賽(docetaxel)(1nM)或組合療法(II-64+多西他賽)處理之NCI-H358細胞的細胞凋亡。頂排顯示經多西他賽預處理24小時且接著經II-64處理另外48小時(總計72小時)之細胞的結果。底排顯示經II-64預處理24小時且接著經多西他賽處理另外48小時(總計72小時)之細胞的結果。細胞凋亡經由流式細胞術量測。閘控群體=亞二倍體細胞凋亡細胞之%。

圖7描繪經II-64(10μM)、SN38(5nM)或組合療法(II-64+SN38)處理之NCI-H358細胞的細胞凋亡。頂排顯示經SN38預處理24小時且接著經II-64處理另外48小時(總計72小時)之細胞的結果。底排顯示經II-64預處理24小時且接著經SN38處理另外48小時(總計72小時)之細胞的結果。細胞凋亡經由流式細胞術量測。閘控群體=亞二倍體細胞凋亡細胞之%。

圖8描繪Calu-1細胞中之酪胺酸激酶活性陣列及卡斯蛋白酶活性。A)RTK陣列用於量測NCI-H358細胞及Calu-1細胞中之酪胺酸激酶活性。偵測到Calu-1細胞中之高SRC活性。B)Calu-1細胞中的卡斯蛋白酶活性係使用卡斯蛋白酶-Glo分析來量測。細胞經遞增濃度之單獨I-272或I-272+達沙替尼(dasatinib)(SRC抑制劑；100nM)、I-272+埃羅替尼(5μM)、I-272+曲美替尼(trametinib)(20nM)或I-272+GDC0941(1μM)處理48小時。I-272+達沙替尼誘導顯著增加的細胞凋亡。

圖9為例示性KRAS G12C抑制劑與EGFR、MEK或PI3K抑制劑組合之西方墨點資料。

圖10為顯示得自例示性G12C抑制劑與PI3KPI3K抑制之組合之資料的另一西方墨點。

圖11提供G12C抑制劑與EGFR、EGFR/HER2或PI3K抑制劑之組合用於NCI-H358細胞的資料。

圖12為得自用例示性G12C抑制劑或達桑替尼(Dasunatinib)或兩者處理CALU-1細胞之實驗的西方墨點資料。

圖13呈現達沙替尼(Das)或薩卡替尼(Sarcatinib)(Sarc)與例示性 G12C抑制劑之組合用於各種細胞株的資料。

圖14為針對圖14之凝膠的密度測定法資料。

圖15為例示性G12C抑制劑與莫羅替尼(momelotinib)之組合用於各種細胞株的資料。

圖16提供例示性G12C抑制劑與莫羅替尼或蘆可替尼(ruxolitinib)之組合用於各種細胞株的西方墨點資料。

在以下描述中，闡述某些特定細節以提供對本發明之各種實施例之全面瞭解。然而，熟習此項技術者應理解，可不使用此等細節來實施本發明。

除非上下文另有要求，否則在本說明書及申請專利範圍中，「包含(comprise)」一詞及其變化形式(諸如「包含(comprises及comprising)」)應以開放、包含性含義理解，亦即「包括(但不限於)」。

在通篇本說明書中，提及「一個實施例」或「一實施例」意謂結合實施例所述的特定特徵、結構或特性包括於本發明的至少一個實施例中。因此，通篇本說明書各處之片語「在一個實施例中」或「在一實施例中」未必皆提及相同實施例。此外，在一或多個實施例中，特定特徵、結構或特性可以任何適合方式組合。

除非另外定義，否則本文所用之所有技術及科學術語具有與熟習本發明所屬技術者通常所理解相同之含義。如本說明書及申請專利範圍中所用，除非上下文另外明確規定，否則單數形式「一(a/an)」及「該」包括複數個參考物。

「脒基」係指形式-(C=NR_a)NR_bR_c之基團，其中R_a、R_b及R_c各自獨立地為H或C₁-C₆烷基。

「胺基」係指-NH₂基團。

「胺基碸」係指-S(O)₂NH₂基團。

「羧基(Carboxy或carboxyl)」係指-CO₂H基團。

「氰基」係指-CN基團。

「胍基」係指形式-NR_d(C=NR_a)NR_bR_c之基團，其中R_a、R_b、R_c及R_d各自獨立地為H或C₁-C₆烷基。

「羥基(Hydroxy或hydroxyl)」係指-OH基團。

「亞胺基」係指=NH取代基。

「硝基」係指-NO₂基團。

「側氧基」係指=O取代基。

「硫酮基」係指=S取代基。

「烷基」係指僅由碳及氫原子組成之直鏈或分支鏈烴鏈基團，其為飽和或不飽和的(亦即含有一或多個雙鍵及/或參鍵)，具有一至十二個碳原子(C₁-C₁₂烷基)，較佳為一至八個碳原子(C₁-C₈烷基)或一至六個碳原子(C₁-C₆烷基)，且其藉由單鍵與分子之其餘部分連接，例如甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基(異丙基)、正丁基、正戊基、1,1-二甲基乙基(第三丁基)、3-甲基己基、2-甲基己基、乙烯基、丙-1-烯基、丁-1-烯基、戊-1-烯基、戊-1,4-二烯基、乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基及其類似基團。烷基包括烯基(一或多個碳碳雙鍵)及炔基(一或多個碳碳參鍵，諸如乙炔基及其類似基團)。「脒基烷基」係指包含至少一個脒基取代基的烷基。「脈基烷基」係指包含至少一個胍基取代基的烷基。除非本說明書中另有特定說明，否則烷基、脒基烷基及/或脈基烷基視情況經取代。

「伸烷基」或「伸烷基鏈」係指僅由碳及氫組成之使分子之其餘部分與基團連接之直線或分支鏈二價烴鏈，其為飽和或不飽和(亦即含有一或多個雙鍵及/或參鍵)且具有一至十二個碳原子，例如亞甲基、伸乙基、伸丙基、正伸丁基、伸乙烯基、伸丙烯基、伸正丁烯基、伸丙炔基、伸正丁炔基及其類似基團。伸烷基鏈經由單鍵或雙鍵連接至分子之其餘部分且經由單鍵或雙鍵連接至基團。伸烷基鏈與分子之其餘部分之連接點及與基團之連接點可經由鏈內的一個碳或任何兩個碳達成。除非本說明書中另外特定說明，否則伸烷基鏈視情況經取代。

「烷基環烷基」係指式-R_bR_d之基團，其中R_b為如本文所定義之環烷基鏈且R_d為如上文所定義之烷基。除非本說明書中另外特定說明，否則烷基環烷基視情況經取代。

「烷氧基」係指式-OR_a之基團，其中R_a為如上文所定義之含有一至十二個碳原子的烷基。「脒基烷氧基」係指包含至少一個位於烷基上之脒基取代基的烷氧基。「脈基烷氧基」係指包含至少一個位於烷基上之胍基取代基的烷氧基。「烷基羰基胺基烷氧基」係指包含至少一個位於烷基上之烷基羰基胺基取代基的烷氧基。「雜環基烷氧基」係指包含至少一個位於烷基上之雜環基取代基的烷氧基。「雜芳基烷氧基」係指包含至少一個位於烷基上之雜芳基取代基的烷氧基。「胺基烷氧基」係指包含至少一個位於烷基上之形式-NR_aR_b之取代基的烷氧基，其中R_a及R_b各自獨立地為H或C₁-C₆烷基。除非本說明書中另有特定說明，否則烷氧基、脒基烷氧基、脈基烷氧基、烷基羰基胺基、雜環基烷氧基、雜芳基烷氧基及/或胺基烷氧基視情況經取代。

「烷氧基烷基」係指式-R_bOR_a之基團，其中R_a為含有一至十二個碳原子之如上文所定義的烷基且R_b為含有一至十二個碳原子之如上文所定義的伸烷基。除非本說明書中另有特定說明，否則烷氧基烷基視情況經取代。

「烷氧基羰基」係指式-C(=O)OR_a之基團，其中R_a為含有一至十二個碳原子之如上文所定義的烷基。除非本說明書中另有特定說明，否則烷氧基羰基視情況經取代。

「芳氧基」係指式-OR_a之基團，其中R_a為如上文所定義之芳基。除非本說明書中另有特定說明，否則芳氧基視情況經取代。

「烷基胺基」指式-NHR_a或-NR_aR_a的基團，其中各R_a獨立地為含有一至十二個碳原子之如上文所定義的烷基。「鹵烷基胺基」為包含至少一個位於烷基上之鹵基取代基的烷基胺基。「羥基烷基胺基」為包含至少一個位於烷基上之羥基取代基的烷基胺基。「脒基烷基胺基」為包含至少一個位於烷基上之脒基取代基的烷基胺基。「胍基烷基胺基」為包含至少一個位於烷基上之胍基取代基的烷基胺基。除非本說明書中另有特定說明，烷基胺基、鹵烷基胺基、羥基烷基胺基、脒基烷基胺基及/或胍基烷基胺基視情況經取代。

「胺基烷基」係指包含至少一個胺基取代基(-NR_aR_b，其中R_a及R_b各自獨立地為H或C₁-C₆烷基)的烷基。胺基取代基可位於三級、二級或一級碳上。除非本說明書中另有特定說明，否則胺基烷基視情況經取代。

「胺基烷基胺基」係指式-NR_aR_b之基團，其中R_a為H或C₁-C₆烷基且R_b為胺基烷基。除非本說明書中另有特定說明，否則胺基烷基胺基視情況經取代。

「烷基羰基胺基」係指式-NH(C=O)R_a之基團，其中R_a為含有一至十二個碳原子之如上文所定義的烷基。除非本說明書中另有特定說明，否則烷基羰基胺基視情況經取代。烯基羰基胺基為含有至少一個碳碳雙鍵的烷基羰基胺基。烯基羰基胺基視情況經取代。

「烷基胺基烷基」係指包含至少一個烷基胺基取代基的烷基。烷基胺基取代基可位於三級、二級或一級碳上。除非本說明書中另有特定說明，否則烷基胺基烷基視情況經取代。

「胺基羰基」係指式-C(=O)NH₂之基團。除非本說明書中另有特定說明，否則胺基羰基視情況經取代。

「烷基胺基羰基」係指式-C(=O)NR_aR_b之基團，其中R_a及R_b各自獨立地為H或烷基，限制條件為R_a或R_b中之至少一者為烷基。除非本說明書中另有特定說明，否則烷基胺基羰基視情況經取代。

「胺基羰基烷基」係指式-R_cC(=O)NR_aR_b之基團，其中R_a及R_b各自獨立地為H或烷基且R_c為伸烷基。除非本說明書中另有特定說明，否則胺基羰基烷基視情況經取代。

「胺基羰基環烷基烷基」係指式-R_cC(=O)NR_aR_b之基團，其中R_a及R_b各自獨立地為H或烷基且R_c為環烷基。除非本說明書中另有特定說明，否則胺基羰基環烷基視情況經取代。

「芳基」指包含氫、6至18個碳原子及至少一個芳環的烴環系基團。出於本發明之目的，芳基可為單環、雙環、三環或四環環系，其可包括稠合或橋連環系。芳基包括(但不限於)衍生自乙烯合蒽、乙烯合萘、乙烯合菲、蒽、薁、苯、

、丙二烯合茀、茀、as-二環戊二烯并苯、s-二環戊二烯并苯、茚滿、茚、萘、萉、菲、七曜烯(pleiadene)、芘及聯伸三苯的芳基。除非本說明書中另有特定說明，否則術語「芳基」或字首「芳-」(諸如「芳烷基」中)意欲包括視情況經取代之芳基。

「芳烷基」係指式-R_b-R_c的基團，其中R_b為如上文所定義的伸烷基鏈且R_c為一或多個如上文所定義的芳基，例如苯甲基、二苯甲基及其類似基團。除非本說明書中另有特定說明，否則芳烷基視情況經取代。

「羧基烷基」係指式-R_b-R_c之基團，其中R_b為如上文所定義之伸烷基鏈且R_c為如上文所定義之羧基。除非本說明書中另有特定說明，否則羧基烷基視情況經取代。

「氰基烷基」係指式-R_b-R_c之基團，其中R_b為如上文所定義之伸烷基鏈且R_c為如上文所定義之氰基。除非本說明書中另有特定說明，否則氰基烷基視情況經取代。

「環烷基」或「碳環」係指僅由碳環原子組成之穩定非芳族單環或多環烴基，其可包括稠合或橋連環系，具有三至十五個碳原子，較佳具有三至十個碳原子，且其為飽和或不飽和的且藉由單鍵連接至分子之其餘部分。單環基團包括例如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基及環辛基。多環基團包括例如金剛烷基、降

基、十氫萘基、7,7-二甲基-二環[2.2.1]庚基及其類似基團。「環烯基」為環內包含一或多個碳碳雙鍵的環烷基。除非本說明書中另有特定說明，否則環烷基(或環烯基)視情況經取代。

「氰基環烷基」係指式-R_b-R_c之基團，其中R_b為伸環烷基鏈且R_c為如上文所定義之氰基。除非本說明書中另有特定說明，否則氰基環烷基視情況經取代。

「環烷基胺基羰基」係指式-C(=O)NR_aR_b之基團，其中R_a及R_b各自獨立地為H或環烷基，限制條件為R_a或R_b中之至少一者為環烷基。除非本說明書中另有特定說明，否則環烷基胺基羰基視情況經取代。

「環烷基烷基」係指式-R_bR_d之基團，其中R_b為如上文所定義之伸烷基鏈且R_d為如上文所定義之環烷基。除非本說明書中另有特定說明，否則環烷基烷基視情況經取代。

「稠合」係指本文所述之任何環結構與本發明化合物中現有之環結構稠合。當稠合環為雜環基環或雜芳基環時，成為稠合雜環基環或稠合雜芳基環之一部分的現有環結構上之任何碳原子係經氮原子置換。

「鹵基」或「鹵素」係指溴、氯、氟或碘。

「鹵烷基」係指經一或多個如上文所定義之鹵基取代之如上文所定義之烷基，例如三氟甲基、二氟甲基、三氯甲基、2,2,2-三氟乙基、1,2-二氟乙基、3-溴-2-氟丙基、1,2-二溴乙基及其類似基團。除非本說明書中另有特定說明，否則鹵烷基視情況經取代。

「鹵烷氧基」係指式-OR_a之基團，其中R_a為如上文所定義之含有一至十二個碳原子的鹵烷基。除非本說明書中另有特定說明，否則鹵烷氧基視情況經取代。

「雜環基」或「雜環」係指由二至十二個碳原子及一至六個選自由氮、氧及硫組成之群的雜原子組成的3員至18員穩定非芳族環基團。除非本說明書中另有特定說明，否則雜環基可為單環、雙環、三環或四環環系，其可包括稠合或橋連環系；且雜環基中之氮、碳或硫原子視情況經氧化；氮原子視情況經四級銨化；且雜環基可為部分或完全飽和的。此類雜環基之實例包括(但不限於)二氧雜環戊烷基、噻吩基[1,3]二噻烷基、十氫異喹啉基、咪唑啉基、咪唑啶基、異噻唑啶基、異噁唑啶基、嗎啉基、八氫吲哚基、八氫異吲哚基、2-側氧基哌嗪基、2-側氧基哌啶基、2-側氧基吡咯啶基、噁唑啶基、哌啶基、哌嗪基、4-哌啶酮基、吡咯啶基、吡唑啶基、

啶基、噻唑啶基、四氫呋喃基、三噻烷基、四氫哌喃基、硫代嗎啉基、噻嗎啉基、1-側氧基-硫代嗎啉基及1,1-二側氧基-硫代嗎啉基。除非本說明書中另有特定說明，否則「雜環基氧基」係指雜環基經由氧鍵(-O-)結合至分子之其餘部分。「雜環基胺基」係指雜環基經由氮鍵(-NR_a-，其中R_a為H或C₁-C₆烷基)結合至分子之其餘部分。除非本說明書中另有特定說明，雜環基、雜環基氧基及/或雜環基胺基視情況經取代。

「N-雜環基」係指如上文所定義之雜環基，其含有至少一個氮且其中雜環基與分子其餘部分之連接點係經由雜環基中之氮原子達成。除非本說明書中另有特定說明，否則N-雜環基視情況經取代。

「雜環基烷基」係指式-R_bR_e之基團，其中R_b為如上文所定義之伸烷基鏈且R_e為如上文所定義之雜環基，且若雜環基為含氮雜環基，則雜環基視情況在氮原子上連接至烷基。除非本說明書中另有特定說明，否則雜環基烷基視情況經取代。

「雜芳基」指包含氫原子、一至十三個碳原子、一至六個選自由氮、氧及硫組成之群的雜原子以及至少一個芳族環的5員至14員環系基團。出於本發明之目的，雜芳基可為單環、雙環、三環或四環環系，其可包括稠合或橋連環系；且雜芳基中之氮、碳或硫原子可視情況經氧化；氮原子可視情況經四級銨化。實例包括(但不限於)氮呯基、吖啶基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并吲哚基、苯并間二氧雜環戊烯基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、苯并噻二唑基、苯并[b][1,4]二氧呯基、1,4-苯并二噁烷基、苯并萘并呋喃基、苯并噁唑基、苯并間二氧雜環戊烯基、苯并間二氧雜環己烯基、苯并哌喃基、苯并哌喃酮基、苯并呋喃基、苯并呋喃酮基、苯并噻吩基、苯并三唑基、苯并[4,6]咪唑并[1,2-a]吡啶基、咔唑基、

啉基、二苯并呋喃基、二苯并噻吩基、呋喃基、呋喃酮基、異噻唑基、咪唑基、吲唑基、吲哚基、吲唑基、異吲哚基、吲哚啉基、異吲哚啉基、異喹啉基、吲哚嗪基、異噁唑基、

啶基、噁二唑基、2-側氧基氮呯基、噁唑基、環氧乙烷基、1-氧離子基吡啶基、1-氧離子基嘧啶基、1-氧離子基吡嗪基、1-氧離子基噠嗪基、1-苯基-1H-吡咯基、啡嗪基、啡噻嗪基、啡噁嗪基、酞嗪基、喋啶基、嘌呤基、吡咯基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、喹唑啉基、喹喏啉基、喹啉基、

啶基、異喹啉基、四氫喹啉基、噻唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、三嗪基及噻吩基。「雜芳氧基」係指雜芳基經由氧鍵(-O-)結合至分子之其餘部分。「雜芳基胺基」係指雜芳基經由氮鍵(-NR_a-，其中R_a為H或C₁-C₆烷基)結合至分子之其餘部分。除非本說明書中另有特定說明，否則雜芳基、雜芳氧基及/或雜芳基胺基視情況經取代。

「N-雜芳基」係指如上文所定義之雜芳基，其含有至少一個氮且其中雜芳基與分子其餘部分之連接點係經由雜芳基中之氮原子達成。除非本說明書中另有特定說明，否則N-雜芳基視情況經取代。

「雜芳基烷基」係指式-R_bR_f之基團，其中R_b為如上文所定義之伸烷基鏈且R_f為如上文所定義之雜芳基。除非本說明書中另有特定說明，否則雜芳基烷基視情況經取代。

「羥基烷基」係指包含至少一個羥基取代基的烷基。-OH取代基可位於一級、二級或三級碳上。除非本說明書中另有特定說明，否則羥基烷基視情況經取代。

「硫烷基」係指式-SR_a之基團，其中R_a為如上文所定義之含有一至十二個碳原子的烷基。除非本說明書中另有特定說明，否則硫烷基視情況經取代。

本文所用之術語「經取代」意謂任一種上述基團(例如烷基、伸烷基、烷基環烷基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、芳氧基、烷基胺基、烷基羰基胺基、烷基胺基烷基、胺基羰基、烷基胺基羰基、胺基羰基烷基、胺基羰基環烷基烷基、硫烷基、芳基、芳烷基、羧基烷基、氰基烷基、環烷基、氰基環烷基、環烷基胺基羰基、環烷基烷基、鹵烷基、鹵烷氧基、雜環基、N-雜環基、雜環基烷基、雜芳基、N-雜芳基及/或雜芳基烷基)，其中至少一個氫原子經由一鍵置換為非氫原子，諸如(但不限於)鹵素原子，諸如F、Cl、Br及I；諸如羥基、烷氧基及酯基之基團中的氧原子；諸如硫醇基、硫烷基、碸基、磺醯基及亞碸基團之基團中的硫原子；諸如胺、醯胺、烷基胺、二烷基胺、芳基胺、烷基芳基胺、二芳基胺、N-氧化物、醯亞胺及烯胺之基團中的氮原子；諸如三烷基矽烷基、二烷基芳基矽烷基、烷基二芳基矽烷基及三芳基矽烷基之基團中的矽原子；及各種其他基團中的其他雜原子。「經取代」亦意謂任一種上述基團，其中一或多個氫原子藉由高價鍵(例如雙鍵或參鍵)置換為雜原子，諸如側氧基、羰基、羧基及酯基中之氧；及諸如亞胺、肟、腙及腈之基團中的氮。舉例而言，「經取代」包括任一種上述基團，其中一或多個氫原子經以下置換：-NR_gR_h、-NR_gC(=O)R_h、-NR_gC(=O)NR_gR_h、-NR_gC(=O)OR_h、-NR_gSO₂R_h、-OC(=O)NR_gR_h、-OR_g、-SR_g、-SOR_g、-SO₂R_g、-OSO₂R_g、-SO₂OR_g、=NSO₂R_g及-SO₂NR_gR_h。「經取代」亦意謂任一種上述基團，其中一或多個氫原子經-C(=O)R_g、-C(=O)OR_g、-C(=O)NR_gR_h、-CH₂SO₂R_g、-CH₂SO₂NR_gR_h置換。在前述內容中，R_g與R_h相同或不同且獨立地為氫、烷基、烷氧基、烷基胺基、硫烷基、芳基、芳烷基、環烷基、環烷基烷基、鹵烷基、雜環基、N-雜環基、雜環基烷基、雜芳基、N-雜芳基及/或雜芳基烷基。「經取代」進一步意謂任一種上述基團，其中一或多個氫原子經由一鍵置換為胺基、氰基、羥基、亞胺基、硝基、側氧基、硫酮基、鹵基、烷基、烷氧基、烷基胺基、硫烷基、芳基、芳烷基、環烷基、環烷基烷基、鹵烷基、雜環基、N-雜環基、雜環基烷基、雜芳基、N-雜芳基及/或雜芳基烷基。另外，上述取代基中之每一者亦可視情況經以上取代基中之一或多者取代。

「親電子劑」或「親電子部分」為能夠與親核劑(例如具有孤對電子、負電荷、部分負電荷及/或過量電子的部分，例如-SH基團)反應的任何部分。親電子劑典型地為電子稀少的或包含電子稀少的原子。在某些實施例中，親電子劑含有正電荷或部分正電荷，具有含有正電荷或部分正電荷的共振結構或為其中電子之非定域化或極化引起一或多個原子含有正電荷或部分正電荷的部分。在一些實施例中，親電子劑包含共軛雙鍵，例如α,β-不飽和羰基或α,β-不飽和硫羰基化合物。

術語「有效量」或「治療有效量」係指本文所述之化合物足以達成預定應用(包括(但不限於)如下文所定義之疾病治療)的量。治療有效量可根據以下而變化：預定的治療應用(活體內)，或所治療之個體及疾病病狀，例如個體之體重及年齡、疾病病狀之嚴重程度、投藥方式及其類似因素，其可容易由一般技術者確定。術語亦適用於誘導靶細胞發生特定反應(例如血小板黏著性及/或細胞遷移減少)的劑量。特定劑量將視以下而變化：所選特定化合物、所依循之給藥方案、其是否與其他化合物組合投與、投藥時序、其所投與之組織及載運其之實體遞送系統。

如本文所用，「治療(treatment或treating)」係指就疾病、病症或醫學病狀而言獲得有益或所要結果(包括(但不限於)治療益處及/或預防益處)的途徑。治療益處意謂根除或改善所治療的潛在病症。又，經由根除或改善與潛在病症相關之一或多種生理症狀來達成治療益處，從而觀測到個體之改善，儘管該個體仍可能罹患潛在病症。在某些實施例中，就預防益處而言，將組合物投與處於產生特定疾病之風險中的個體，或投與報導疾病之一或多種生理學症狀的個體，即使可能尚未診斷出此疾病。

「治療作用」，如該術語在本文中所用，涵蓋如上文所述的治療益處及/或預防益處。預防作用包括延遲或消除疾病或病狀之出現、延遲或消除疾病或病狀之症狀發作、減緩、阻止或逆轉疾病或病狀之進展，或其任何組合。

如本文所用，術語「共投藥」、「組合給藥」及其文法等效語涵蓋向包括人類之動物投與兩種或兩種以上藥劑，使得兩種藥劑及/或其代謝物均在相同時間存在於個體中。共投藥包括以各別組合物同時投與、各別組合物在不同時間投與，或以兩種藥劑均存在於其中的組合物投與。

「醫藥學上可接受之鹽」包括酸加成鹽與鹼加成鹽。

「醫藥學上可接受之酸加成鹽」係指保持游離鹼之生物有效性及特性的彼等鹽，其在生物學或其他方面無不良反應，且由以下形成：無機酸，諸如(但不限於)鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及其類似物)；及有機酸，諸如(但不限於)乙酸、2,2-二氯乙酸、己二酸、海藻酸、抗壞血酸、天冬胺酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙醯胺基苯甲酸、樟腦酸、樟腦-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳酸、肉桂酸、檸檬酸、環己胺磺酸、十二烷基硫酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙烷磺酸、2-羥基乙烷磺酸、甲酸、反丁烯二酸、半乳糖二酸、龍膽酸、葡糖庚酸、葡萄糖酸、葡糖醛酸、麩胺酸、戊二酸、2-側氧基-戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、馬尿酸、異丁酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、順丁烯二酸、蘋果酸、丙二酸、杏仁酸、甲烷磺酸、黏液酸、萘-1,5-二磺酸、萘-2-磺酸、1-羥基-2-萘甲酸、菸鹼酸、油酸、乳清酸、草酸、棕櫚酸、雙羥萘酸、丙酸、焦麩胺酸、丙酮酸、水楊酸、4-胺基水楊酸、癸二酸、硬脂酸、丁二酸、酒石酸、硫氰酸、對甲苯磺酸、三氟乙酸、十一碳烯酸及其類似物。

「醫藥學上可接受之鹼加成鹽」係指保持游離酸之生物有效性及特性，在生物學或其他方面無不良反應之彼等鹽。此等鹽由無機鹼或有機鹼與游離酸加成而製備。衍生自無機鹼之鹽包括(但不限於)鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、銨鹽、鈣鹽、鎂鹽、鐵鹽、鋅鹽、銅鹽、錳鹽、鋁鹽及其類似鹽。較佳無機鹽為銨鹽、鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽及鎂鹽。衍生自有機鹼之鹽包括(但不限於)以下鹽：一級胺、二級胺及三級胺、經取代之胺(包括天然存在之經取代之胺)、環胺及鹼性離子交換樹脂，諸如氨、異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、二乙醇胺、乙醇胺、丹醇(deanol)、2-二甲胺基乙醇、2-二乙胺基乙醇、二環己胺、離胺酸、精胺酸、組胺酸、咖啡鹼、普魯卡因(procaine)、海卓胺(hydrabamine)、膽鹼、甜菜鹼、苄苯乙胺、苄星青黴素(benzathine)、乙二胺、葡糖胺、甲基還原葡糖胺、可可豆鹼、三乙醇胺、緩血酸胺、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、多元腔樹脂及其類似物。尤其較佳之有機鹼為異丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二環己胺、膽鹼及咖啡鹼。

術語「拮抗劑」與「抑制劑」可互換使用，且其係指具有抑制靶蛋白生物功能之能力的化合物，不論藉由抑制蛋白質(諸如KRAS、HRAS或NRAS G12C)之活性或表現。因此，術語「拮抗劑」與「抑制劑」係在靶蛋白之生物學作用之情形下定義。雖然本文中之較佳拮抗劑與標靶發生特異性相互作用(例如結合至標靶)，但藉由與靶蛋白作為其中成員之信號轉導路徑中之其他成員發生相互作用來抑制靶蛋白生物活性的化合物亦特別包括於此定義內。拮抗劑所抑制之較佳生物活性與腫瘤之發展、生長或擴散相關。

如本文所用，術語「促效劑」係指具有起始或增強靶蛋白生物功能之能力的化合物，不論是否藉由抑制靶蛋白之活性或表現。因此，術語「促效劑」係在標靶多肽之生物學作用之情形下定義。雖然本文中之較佳促效劑與標靶發生特異性相互作用(例如結合至標靶)，但藉由與標靶多肽作為其中成員之信號轉導路徑中之其他成員發生相互作用來起始或增強標靶多肽之生物活性的化合物亦特別包括於此定義內。

如本文所用，「藥劑」或「生物學活性劑」係指生物學、醫藥或化學化合物或其他部分。非限制性實例包括簡單或複雜的有機或無機分子、肽、蛋白質、寡核苷酸、抗體、抗體衍生物、抗體片段、維生素衍生物、碳水化合物、毒素或化學治療化合物。可合成各種化合物，例如小分子及寡聚物(例如寡肽及寡核苷酸)，及基於各種核心結構的合成有機化合物。另外，各種天然來源可為化合物提供篩選，諸如植物或動物萃取物及其類似物。

「信號轉導」為刺激或抑制性信號傳遞至細胞中及細胞內以誘發胞內反應的過程。信號轉導路徑調節劑係指調節與相同特定信號轉導路徑對應之一或多種細胞蛋白質之活性的化合物。調節劑可增強(促效劑)或抑制(拮抗劑)信號傳導分子活性。

「抗癌劑」、「抗腫瘤劑」或「化學治療劑」係指適用於治療贅生性病狀的任何藥劑。一類抗癌劑包含化學治療劑。「化學療法」意謂一或多種化學治療藥物及/或其他藥劑藉由各種方法(包括靜脈內、口腔、肌肉內、腹膜內、膀胱內、皮下、經皮、頰內或吸入或以栓劑形式)投與癌症患者。

術語「細胞增殖」係指細胞數目因分裂而發生變化的一種現象。此術語亦涵蓋細胞形態根據增殖信號而發生變化(例如尺寸增加)的細胞生長。

術語「選擇性抑制」或「選擇性地抑制」係指生物學活性劑，係指該藥劑能夠經由與標靶的直接或間接相互作用來優先降低標靶信號傳導活性(相較於脫靶信號傳導活性)。

「個體」係指動物，諸如哺乳動物，例如人類。本文所述方法可適用於人類治療及獸醫應用。在一些實施例中，個體為哺乳動物，且在一些實施例中，個體為人類。

「哺乳動物」包括人類，及馴養動物(諸如實驗動物及家養寵物(例如貓、犬、豬、牛、綿羊、山羊、馬、兔))與非馴養動物(諸如野生動物)，及其類似動物。

「放射療法」意謂使用從業者已知的常規方法及組合物使個體暴露於放射線發射體，諸如α粒子發射放射性核素(例如錒及釷放射性核素)、低線性能量轉移(LET)放射線發射體(亦即β發射體)、轉化電子發射體(例如鍶-89及釤-153-EDTMP，或高能放射線，包括(但不限於)x射線、γ射線及中子。

「前藥」意指一種化合物，其可在生理學條件下或藉由溶劑分解而轉化為本文所述之生物學活性化合物(例如結構(I)之化合物)。因此，術語「前藥」係指醫藥學上可接受之生物學活性化合物之前驅物。在一些態樣中，當投與個體時，前藥無活性，但在活體內轉化為活性化合物，例如水解。前藥化合物在哺乳動物生物體中往往提供溶解性、組織相容性或延遲釋放之優點(參見Bundgard,H.,Design of Prodrugs(1985)，第7-9、21-24頁(Elsevier,Amsterdam))。關於前藥之論述提供於Higuchi,T.等人，"Pro-drugs as Novel Delivery Systems," A.C.S.Symposium Series，第14卷及Bioreversible Carriers in Drug Design，編者：Edward B.Roche,American Pharmaceutical Association and Pergamon Press,1987，兩個文獻均以引用的方式併入本文中。術語「前藥」亦意欲包括任何共價鍵結的載劑，當此類前藥投與哺乳動物個體時，其釋放活性化合物於活體內。如本文所述之活性化合物之前藥典型地藉由修飾活性化合物中存在之官能基來製備，其方式為使得修飾在常規操作中或在活體內裂解為親本活性化合物。前藥包括其中羥基、胺基或巰基鍵結至任何基團的化合物，當活性化合物前藥投與哺乳動物個體時，該基團裂解而分別形成游離羥基、游離胺基或游離巰基。前藥之實例包括(但不限於)羥基官能基之乙酸酯、甲酸酯及苯甲酸酯衍生物，或活性化合物中之胺官能基之乙醯胺、甲醯胺及苯甲醯胺衍生物，及其類似物。

術語「活體內」係指發生於個體體內的事件。

本文所揭示之本發明亦意欲涵蓋經同位素標記之所有醫藥學上可接受之結構(I)之化合物，其中一或多個原子經具有不同原子質量或質量數的原子置換。可併入所揭示之化合物中之同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟、氯及碘之同位素，分別諸如²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹³N、¹⁵N、¹⁵O、¹⁷O、¹⁸O、³¹P、³²P、³⁵S、¹⁸F、³⁶Cl、¹²³I及¹²⁵I。此等放射性標記的化合物可用於幫助測定或量測化合物之有效性，其藉由表徵例如作用位點或模式或對藥理學上重要作用位點之結合親和力來進行。某些經同位素標記之結構(I)之化合物(例如併有放射性同位素的彼等化合物)可用於藥物及/或受質組織分佈研究。放射性同位素氚(亦即³H)及碳-14(亦即¹⁴C)由於其容易併入及現成偵測手段而尤其適用於此目的。

經諸如氘(亦即²H)之較重同位素取代可提供由較大代謝穩定性引起之某些治療優勢，例如活體內半衰期延長或劑量需求降低，且因此在某些情況下可為較佳的。

經正電子發射同位素(諸如¹¹C、¹⁸F、¹⁵O及¹³N)取代可適用於正電子發射斷層攝影術(PET)研究，以檢查受質受體佔用率。經同位素標記之結構(I)之化合物一般可藉由熟習此項技術者已知之習知技術或藉由類似於如下所述之製備及實例中所述之方法的方法使用適當經同位素標記之試劑代替先前使用之未標記試劑來製備。

本文中揭示的本發明亦意欲涵蓋所揭示之化合物的活體內代謝產物。此類產物可例如由所投與化合物之氧化、還原、水解、醯胺化、酯化及其類似作用產生，主要由於酶促過程產生。因此，本發明包括藉由包含向哺乳動物投與本發明化合物持續足以產生其代謝產物之時段之方法而產生的化合物。此類產物通常藉由向動物(諸如大鼠、小鼠、天竺鼠、猴)或向人類投與可偵測劑量之經放射性標記之本發明化合物，使代謝進行足夠時間且將其轉化產物自尿液、血液或其他生物樣品分離來鑑別。

「穩定化合物」及「穩定結構」意指足夠穩固能經受自反應混合物分離至適用純度且調配成有效治療劑的化合物。

結晶往往產生本發明化合物之溶劑合物。如本文所用，術語「溶劑合物」係指包含本發明化合物之一或多個分子與一或多個溶劑分子之聚集物。在一些實施例中，溶劑為水，在此情況下，溶劑合物為水合物。或者，在其他實施例中，溶劑為有機溶劑。因此，本發明化合物可以水合物(包括單水合物、二水合物、半水合物、倍半水合物、三水合物、四水合物及其類似物)以及相應溶劑化形式存在。在一些態樣中，本發明化合物為真實溶劑合物，而在其他情況下，本發明化合物僅固持偶存的水或為水與一些偶存溶劑之混合物。

「視情況(Optional)」或「視情況(optionally)」意謂隨後描述之事件或情形可能發生或可能不發生，且該描述包括該事件或情形發生之情況及不發生之情況。舉例而言，「視情況經取代之芳基」意謂芳基可能經取代或可能未經取代且該描述包括經取代之芳基及不具有取代基之芳基。

「醫藥組合物」係指本發明化合物與此項技術中普遍接受用於將生物活性化合物遞送至哺乳動物(例如人類)之介質的調配物。此類介質包括其所有醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。

「醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑」包括(但不限於)任何佐劑、載劑、賦形劑、滑動劑、甜味劑、稀釋劑、防腐劑、染料/著色劑、增香劑、界面活性劑、濕潤劑、分散劑、懸浮劑、穩定劑、等張劑、溶劑或乳化劑，其已經美國食品及藥物管理局(the United States Food and Drug Administration)核准為可接受用於人類或馴養動物。

本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽可含有一或多個不對稱中心且因此可產生對映異構體、非對映異構體及其他立體異構形式，就絕對立體化學而言，其定義為(R)-或(S)-，或就胺基酸而言，定義為(D)-或(L)-。本發明意欲包括所有此類可能異構體，以及其外消旋及光學純形式。具光學活性之(+)及(-)、(R)-及(S)-或(D)-及(L)-異構體可使用對掌性合成子(synthon)或對掌性試劑來製備，或使用習知技術(例如層析及分步結晶)來解析。用於製備/分離個別對映異構體之習知技術包括自適合光學純前驅物進行對掌性合成或使用例如對掌性高壓液相層析(HPLC)解析外消旋物(或鹽或衍生物之外消旋物)。當本文所述之化合物含有烯系雙鍵或其他幾何不對稱中心時且除非另外說明，否則希望化合物包括E與Z型幾何異構體。同樣，亦希望包括所有互變異構形式。

本發明包括本發明化合物之旋轉異構體及構形限制狀態之所有方式。

「立體異構體」係指由相同鍵所鍵結之相同原子構成但具有不同三維結構之化合物，其不可互換。本發明涵蓋各種立體異構體及其混合物且包括「對映異構體」，對映異構體係指分子彼此間為不可重疊之鏡像的兩種立體異構體。

「互變異構體」係指質子自分子之一個原子轉移至同一分子之另一原子。本發明包括任何該等化合物之互變異構體。

本文中所用之化學命名方案及結構圖為I.U.P.A.C.命名法系統之修改形式，其使用ACD/命名9.07版軟體程式及/或ChemDraw Ultra 11.0.1版軟體命名程式(CambridgeSoft)。對於本文所用的複雜化學名稱，取代基的命名典型位於其所連接之基團之前。舉例而言，環丙基乙基包含具有環丙基取代基之乙基主鏈。除非下文描述，否則本文化學結構圖中標識所有鍵，但其中一些碳原子上的所有鍵假定鍵結至足夠的氫原子以完成價數。

A. 治療方法

本發明大體上關於治療各種癌症的方法。本發明人已發現，特定突變型KRAS、NRAS或HRAS G12C抑制性分子與臨床上相關分子靶向藥物及/或化學治療劑之組合為一種有效用於治療某些癌症(例如與KRAS、NRAS或HRAS G12C突變型蛋白質相關之癌症(「KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型癌症」))的驚人方法。在各種實施例中，突變型KRAS之抑制顯著地使癌細胞對所述組合療法敏感，引起穩定的細胞死亡。此類組合方法對於患有含有KRAS、NRAS或HRAS G12C突變之腫瘤的患者而言具有大大改良結果的可能性。

實例1描述一種用於鑑別及評估將受益於組合療法之潛在標靶的策略，該組合療法包括KRAS G12C抑制劑及抑制任何細胞信號傳導路徑之第二藥劑，該信號傳導路徑在KRAS G12C抑制之後過度活化或維持。所鑑別之例示性標靶包括RTK、PI3K、mTOR、SRC及JAK/STAT。

實例2至10描述為了支持本發明之某些實施例而獲得的其他資料。在實例2中，例示性KRAS G12C抑制劑係與RTK、PI3K、mTOR、SRC或JAK抑制劑之一組合使用。藉由在單獨各藥劑存在下及在該組合之存在下監測細胞增殖之細胞凋亡來評估該組合之協同作用。此實例係針對多種突變型細胞株(H358、H1792、Calu-1、SW1463、SW1573、MiaPaca2、NCI-H23)或對照細胞株(A549)進行。將增殖資料與細胞凋亡資料組合以評估組合使用之化合物的協同作用。

在實例3中，根據在單獨KRAS G12C抑制劑存在下或在KRAS G12C抑制劑與靶向藥劑(EGFR、PI3K、IGFIR及MEK抑制劑)或化學治療劑(紫杉醇、多西他賽、SN38(伊立替康(Irinotecan)中之活性成分))之組合存在下誘導細胞凋亡的證據來評價多個KRAS G12C細胞株。以類似方式，實例4至10各顯示對KRAS G12C抑制劑與許多不同類型抑制劑(例如EGFR、PI3K、MEK、SRC、JAK)之一組合用於協同路徑抑制或誘導相關癌細胞株之細胞凋亡的評價。

在用G12C抑制劑與所選靶向劑及化學治療劑組合處理KRAS G12C突變型細胞株的情況下觀測到協同誘導細胞凋亡。在許多情況下，藉由此等組合誘導的細胞凋亡程度可與使用高劑量星形孢菌素或紫杉醇之情況下所見旗鼓相當。如同單一藥劑處理，作用因細胞類型及確切組合而異。當KRAS G12C抑制劑與EGFR抑制劑(例如埃羅替尼(erlotinib)及阿法替尼(afatinib))、PI3K抑制劑(例如GDC0941、BYL-719)或化學治療劑SN38(伊立替康中之活性成分)組合時，觀測到最大協同作用。在使用MEK抑制劑、IGF1R抑制劑、JAK抑制劑、SRC抑制劑及化學治療劑紫杉醇、多西他賽及太平洋紫杉醇(Paclitaxel)的情況下亦見到一些陽性結果。

總體而言，資料支持抑制突變型KRAS活性可顯著改變KRAS突變型細胞株對靶向癌症療法與更廣泛之活性化學療法的敏感性。在最佳組合下所觀測到之細胞凋亡程度相當於強細胞凋亡誘導劑且表明接近100%細胞殺死為可能的。在臨床配置中，此類行為應允許利用最佳治療組合來促使顯著的腫瘤消退。

不同組合之有效性因細胞株不同而不同，儘管其共有KRAS G12C突變。雖然不希望受理論束縛，然而此可能與基因背景之差異及此等株系中之每一者之癌基因成癮不同有關。圖9提供Calu-1細胞之有效組合策略之資料。Calu-1細胞通常耐受單一藥劑KRAS G12C處理以及與靶向激酶抑制劑之組合。H358與Calu-1細胞之間之酪胺酸激酶磷酸化程度比較展現Calu-1細胞的c-SRC磷酸化程度高(圖9A)。KRAS G12C抑制劑與SRC抑制劑(達沙替尼(Dasatinib))組合處理Calu-1細胞展現較強的協同誘導細胞凋亡作用(圖9B)。

鑒於KRAS為普遍導致耐治療性癌症之最重要癌基因，因此吾人預測排除致癌性KRAS信號傳導將增強對大範圍癌症療法的敏感度，超過此處所檢查之程度。

因此，在一個實施例中，提供一種治療KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型癌症的方法，該方法包含向有需要的個體投與有效量之KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑。在某些實施例中，癌症為KRAS G12C突變型癌症。KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物不受特別限制，限制條件為化合物調節(例如抑制)KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體之活性。用於此目的之例示性化合物描述於本文之標題為「化合物」的章節中。

在該方法之各種實施例中，其他治療劑為表皮生長因子受體(EGFR)抑制劑、磷脂醯肌醇激酶(PI3K)抑制劑、胰島素樣生長因子受體(IGF1R)抑制劑、傑納斯激酶(Janus kinase，JAK)抑制劑、Met(MET)激酶抑制劑、SRC家族激酶(SFK)抑制劑、有絲分裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制劑、細胞外信號調節性激酶(ERK)抑制劑、機制性雷帕黴素標靶(mechanistic target of rapamycin，mTOR)抑制劑、拓撲異構酶抑制劑(諸如伊立替康，或諸如依託泊苷(etoposide)，或諸如小紅莓(doxorubicin))、紫杉烷(諸如抗微管劑，包括太平洋紫杉醇及多西他賽)、抗代謝物藥劑(諸如5-FU或諸如吉西他濱(gemcitabine))、烷基化劑(諸如順鉑(cisplatin)或諸如環磷醯胺(cyclophosphamide))，或紫杉烷。

在該方法之一些其他實施例中，其他治療劑為表皮生長因子受體(EGFR)抑制劑、磷脂醯肌醇激酶(PI3K)抑制劑、胰島素樣生長因子受體(IGF1R)抑制劑、傑納斯激酶(JAK)抑制劑、Met(MET)激醇抑制劑、SRC家族激酶(SFK)抑制劑、有絲分裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制劑、細胞外信號調節性激酶(ERK)抑制劑、拓撲異構酶抑制劑(諸如伊立替康，或諸如依託泊苷，或諸如小紅莓)、紫杉烷(諸如抗微管劑，包括太平洋紫杉醇及多西他賽)、抗代謝物藥劑(諸如5-FU或諸如吉西他濱)、烷基化劑(諸如順鉑或諸如環磷醯胺)，或紫杉烷。

在一些實施例中，其他治療劑為表皮生長因子受體(EGFR)抑制劑，諸如埃羅替尼或諸如阿法替尼。在一些實施例中，其他治療劑為易瑞沙(Iressa)。在一些實施例中，其他治療劑為單株抗體，諸如西妥昔單抗(cetuximab)(艾必妥(Erbitux))或帕尼單抗(panitumumab)(維克替比(Vectibix))。在一些實施例中，GFR抑制劑為雙重或泛HER抑制劑。在其他實施例中，其他治療劑為磷脂醯肌醇-3激酶(PI3K)抑制劑，諸如GDC0941、MLN1117、BYL719(艾培昔布(Alpelisib))或BKM120(布帕昔布(Buparlisib))。GDC0941係指2-(1H-吲唑-4-基)-6-(4-甲烷磺醯基-哌嗪-1-基甲基)-4-嗎啉-4-基-噻吩并[3,2-d]嘧啶或其鹽(例如雙甲磺酸鹽)。

在不同實施例中，其他治療劑為胰島素樣生長因子受體(IGF1R)抑制劑。舉例而言，在一些實施例中，胰島素樣生長因子受體(IGF1R)抑制劑為NVP-AEW541。在其他實施例中，其他治療劑為IGOSI-906(林斯替尼(Linsitinib))、BMS-754807，或在其他實施例中，其他治療劑為特異性針對IGF1R的中和性單株抗體，諸如AMG-479(加尼圖單抗)、CP-751,871(非吉單抗(figitumumab))、IMC-A12(西妥木單抗)、MK-0646(達洛圖單抗(dalotuzumab))及R-1507(羅妥木單抗(robatumumab))。

在一些其他實施例中，其他治療劑為傑納斯激酶(JAK)抑制劑。在一些實施例中，其他治療劑為CYT387、GLPG0634、巴瑞替尼(Baricitinib)、來他替尼(Lestaurtinib)、莫羅替尼(momelotinib)、帕瑞替尼(Pacritinib)、蘆可替尼(Ruxolitinib)或TG101348。

在一些其他實施例中，其他治療劑為MET激酶抑制劑，諸如克卓替尼(Crizotinib)、提瓦替尼(tivantinib)、AMG337、卡博替尼(cabozantinib)、弗雷替尼(foretinib)。在其他實施例中，其他治療劑為針對MET的中和性單株抗體，諸如奧那組單抗(onartuzumab)。

在更多實施例中，其他治療劑為SRC家族非受體酪胺酸激酶抑制劑。舉例而言，在一些實施例中，其他治療劑為SRC家族非受體酪胺酸激酶亞家族之抑制劑。就此而言，例示性抑制劑包括達沙替尼。就此而言，其他實例包括普納替尼(Ponatinib)、薩卡替尼(sarcatinib)及伯舒替尼(bosutinib)。

在然而不同的實施例中，其他治療劑為有絲分裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制劑。在一些此等實施例中，有絲分裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制劑為曲美替尼(trametinib)、司美替尼(selumetinib)、考比替尼(cobimetinib)、PD0325901或RO5126766。在其他實施例中，MEK抑制劑為GSK-1120212，亦稱為曲美替尼。

在然而不同的實施例中，其他治療劑為細胞外信號調節性激酶(ERK)抑制劑。在一些此等實施例中，細胞外信號調節性激酶(ERK)抑制劑為SCH722984或GDC-0994。

在其他實施例中，其他治療劑為蛋白激酶抑制劑，諸如星形孢菌素(Staurosporine)或米哚妥林(Midostaurin)。在其他實施例中，蛋白激酶抑制劑為阿法替尼(Afatinib)、阿西替尼(Axitinib)、貝伐單抗(Bevacizumab)、博斯替尼(Bostutinib)、西妥昔單抗(Cetuximab)、克卓替尼(Crizotinib)、達沙替尼、埃羅替尼、福他替尼(Fostamatinib)、吉非替尼(Gefitinib)、伊馬替尼(Imatinib)、拉帕替尼(Lapatinib)、樂伐替尼(Lenvatinib)、依魯替尼(Ibrutinib)、尼羅替尼(Nilotinib)、帕尼單抗(Panitumumab)、帕唑帕尼(Pazopanib)、派加替尼(Pegaptanib)、蘭尼單抗(Ranibizumab)、蘆可替尼(Ruxolitinib)、索拉非尼(Sorafenib)、舒尼替尼(Sunitinib)、SU6656、曲妥珠單抗(Trastuzumab)、托法替尼(Tofacitinib)、凡德他尼(Vandetanib)或維羅非尼(Vemurafenib)。在仍然更多實施例中，其他治療劑為拓撲異構酶抑制劑。在一些此等實施例中，拓撲異構酶抑制劑為伊立替康。在一些更多實施例中，其他治療劑為紫杉烷。例示性紫杉烷包括紫杉醇及多西他賽。

在仍然不同的實施例中，其中其他治療劑為mTOR抑制劑，諸如雷帕黴素或MLN0128。

用於投與化合物及其他治療劑的確切方法對於一般技術者而言將為顯而易見的。在一些例示性實施例中，化合物與其他治療劑係共同投與。在其他實施例中，化合物與其他治療劑係分開投與。

在一些實施例中，化合物及其他治療劑係與第二藥劑同時或分開投與。此組合投藥可包括兩種藥劑以同一劑型同時投與、以各別劑型同時投與，及分開投與。亦即，化合物及本文所述之任一種其他治療劑可一起調配成同一劑型且同時投與。或者，化合物及本文所述之任一種其他治療劑可同時投與，其中兩種藥劑存在於各別調配物中。在另一替代方案中，可投與化合物，緊隨其後投與本文所述之任一種其他治療劑，或反之亦然。在各別投藥方案之一些實施例中，化合物及本文所述之任一種其他治療劑相隔幾分鐘投與，或相隔幾小時或相隔幾天投與。

雖然不希望受理論束縛，但咸信當前所述組合療法之有效性至少部分地與個別組分誘導包含KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之細胞發生細胞凋亡的協同能力相關。因此，在某些實施例中，提供一種誘導包含KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之細胞群發生細胞凋亡的方法，該方法包含投與有效量之KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑。適用於此類方法中的化合物及其他治療劑包括本文所述此等物中之任一者。

所述方法亦適用於抑制腫瘤轉移，且在一些實施例中，提供一種抑制患有KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型癌症之個體之腫瘤轉移的方法，該方法包含投與有效量之KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑。適用於抑制腫瘤轉移的化合物及其他治療劑包括本文所述此等物中之任一者。

所述方法通常適用於任何類型之癌症。在某些實施例中，癌症與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質相關。在一些更特定的實施例中，癌症與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質相關。雖然許多癌症可根據所揭示之方法治療，但一些實施例係關於治療血液學癌症、胰臟癌、MYH相關息肉病、結腸直腸癌或肺癌。

亦已鑑別出血液學惡性疾病(例如影響血液、骨髓及/或淋巴結的癌症)中的KRAS、HRAS或NRAS G12C突變。因此，方法之某些實施例係關於治療血液學惡性疾病。此類惡性疾病包括(但不限於)白血病及淋巴瘤。舉例而言，本發明所揭示之組合療法可用於治療諸如以下之疾病：急性淋巴母細胞白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、小淋巴細胞性淋巴瘤(SLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、急性單核細胞性白血病(AMoL)及/或其他白血病。在其他實施例中，方法適用於治療淋巴瘤，諸如霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)或非霍奇金氏淋巴瘤之所有亞型。

確定腫瘤或癌症是否包含G12C KRAS、HRAS或NRAS突變可藉由評估編碼KRAS、HRAS或NRAS蛋白質之核苷酸序列、藉由評估KRAS、HRAS或NRAS蛋白質之胺基酸序列或藉由評估推定KRAS、HRAS或NRAS突變型蛋白質之特徵來進行。野生型人類KRAS、HRAS或NRAS之序列在此項技術中已知(例如寄存編號NP203524)。

偵測KRAS、HRAS或NRAS核苷酸序列突變的方法已為熟習此項技術者所知。此等方法包括(但不限於)聚合酶鏈反應-限制性片段長度多形性(PCR-RFLP)分析、聚合酶鏈反應-單股構形多形性(PCR-SSCP)分析、即時PCR分析、PCR測序、突變型對偶基因特異性PCR擴增 (MASA)分析、直接測序、引子延伸反應、電泳、寡核苷酸連接分析、雜交分析、塔克曼分析(TaqMan assays)、SNP基因分型分析、高解析度解鏈分析及微陣列分析。在一些實施例中，藉由即時PCR評價樣品中的G12C KRAS、HRAS或NRAS突變。在即時PCR中，使用特異性針對KRAS、HRAS或NRAS G12C突變的螢光探針。存在突變時，探針結合且偵測到螢光。在一些實施例中，使用直接測序方法，鑑別KRAS、HRAS或NRAS基因之特定區域(例如外顯子2及/或外顯子3)中的KRAS、HRAS或NRAS G12C突變。此技術將鑑別所測序區域中的所有可能突變。

偵測KRAS、HRAS或NRAS蛋白質突變的方法已為熟習此項技術者所知。此等方法包括(但不限於)使用特異性針對突變型蛋白質的結合劑(例如抗體)偵測KRAS、HRAS或NRAS突變體、蛋白質電泳及西方墨點法，及直接肽測序法。

確定腫瘤或癌症是否包含G12C KRAS、HRAS或NRAS突變的方法可使用多種樣品。在一些實施例中，樣品獲自患有腫瘤或癌症的個體。在一些實施例中，樣品獲自患有癌症或腫瘤的個體。在一些實施例中，樣品為新鮮的腫瘤/癌症樣品。在一些實施例中，樣品為冷凍的腫瘤/癌症樣品。在一些實施例中，樣品為經福馬林(formalin)固定、經石蠟包埋的樣品。在一些實施例中，樣品處理為細胞溶胞物。在一些實施例中，樣品處理為DNA或RNA。

在一些實施例中，所揭示之方法用於治療個體之過度增生性病症，包含向該個體、向有需要的個體投與治療有效量之KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑。就此而言適用的化合物及其他治療試劑包括本文所述彼等物中的任一者。在一些實施例中，該方法係關於治療癌症，諸如急性骨髓性白血病、青少年癌症、兒童期腎上腺皮質癌、AIDS相關癌症(例如淋巴瘤及卡波西氏肉瘤(Kaposi's Sarcoma))、肛門癌、附件癌、星形細胞瘤、非典型性畸胎樣、基底細胞癌、膽管癌、膀胱癌、骨癌、腦幹神經膠質瘤、腦腫瘤、乳癌、支氣管腫瘤、伯基特淋巴瘤(burkitt lymphoma)、類癌瘤、非典型性畸胎樣、胚胎腫瘤、生殖細胞腫瘤、原發淋巴瘤、子宮頸癌、兒童期癌症、脊索瘤、心臟腫瘤、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、慢性骨髓增生性病症、結腸癌、結腸直腸癌、顱咽管瘤、皮膚T細胞淋巴瘤、肝外導管原位癌(DCIS)、胚胎腫瘤、CNS癌症、子宮內膜癌、室管膜瘤、食道癌、敏感性神經胚細胞瘤、尤文氏肉瘤(ewing sarcoma)、顱外生殖細胞腫瘤、性腺外生殖細胞腫瘤、眼癌、骨纖維組織細胞瘤、膽囊癌、胃癌、胃腸類癌瘤、胃腸基質腫瘤(GIST)、生殖細胞腫瘤、妊娠期滋養層腫瘤、毛細胞白血病、頭頸癌、心臟癌、肝癌、霍奇金氏淋巴瘤、下咽癌、眼內黑色素瘤、胰島細胞瘤、胰臟神經內分泌腫瘤、腎癌、喉癌、唇及口腔癌、肝癌、小葉原位癌(LCIS)、肺癌、淋巴瘤、轉移性鱗狀頸癌伴隱性原發中線道癌、口癌多發性內分泌贅瘤症候群、多發性骨髓瘤/漿細胞贅瘤、蕈樣肉芽腫病、骨髓發育不良症候群、骨髓發育不良/骨髓增生性贅瘤、多發性骨髓瘤、梅克爾細胞癌(merkel cell carcinoma)、惡性間皮瘤、骨惡性纖維組織細胞瘤及骨肉瘤、鼻腔及鼻旁竇癌症、鼻咽癌、神經母細胞瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、非小細胞肺癌(NSCLC)、口腔癌、唇及口腔癌症、口咽癌、卵巢癌、胰臟癌、乳頭狀瘤症、副神經節瘤、鼻旁竇及鼻腔癌症、甲狀旁腺癌、陰莖癌、咽癌、胸膜肺母細胞瘤、原發中樞神經系統(CNS)淋巴瘤、前列腺癌、直腸癌、移行細胞癌、視網膜母細胞瘤、橫紋肌肉瘤、唾液腺癌、皮膚癌、胃癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟組織肉瘤、T細胞淋巴瘤、睪丸癌、咽喉癌、胸腺瘤及胸腺癌、甲狀腺癌、腎盂及輸尿管之移行細胞癌、滋養層腫瘤、兒童期異常癌症、尿道癌、子宮肉瘤、陰道癌、外陰癌或病毒誘導性癌症。在一些實施例中，該方法係關於治療非癌性過度增生性病症，諸如皮膚(例如牛皮癬)、再狹窄或前列腺(例如良性前列腺肥大(BPH))之良性增生。

在某些特定實施例中，本發明係關於治療肺癌的方法，該等方法包含向有需要的個體投與有效量之KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑。在某些實施例中，肺癌為非小細胞肺癌(NSCLC)，例如腺癌、鱗狀細胞肺癌或大細胞肺癌。在其他實施例中，肺癌為小細胞肺癌。可用所揭示之化合物治療的其他肺癌包括(但不限於)腺腫瘤、類癌瘤及未分化癌瘤。

可用本發明方法治療的個體包括例如已診斷患有以下之個體：急性骨髓性白血病、青少年癌症、兒童期腎上腺皮質癌、AIDS相關癌症(例如淋巴瘤及卡波西氏肉瘤)、肛門癌、附件癌、星形細胞瘤、非典型性畸胎樣、基底細胞癌、膽管癌、膀胱癌、骨癌、腦幹神經膠質瘤、腦腫瘤、乳癌、支氣管腫瘤、伯基特淋巴瘤、類癌瘤、非典型性畸胎樣、胚胎腫瘤、生殖細胞腫瘤、原發淋巴瘤、子宮頸癌、兒童期癌症、脊索瘤、心臟腫瘤、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、慢性骨髓增生性病症、結腸癌、結腸直腸癌、顱咽管瘤、皮膚T細胞淋巴瘤、肝外導管原位癌(DCIS)、胚胎腫瘤、CNS癌症、子宮內膜癌、室管膜瘤、食道癌、敏感性神經胚細胞瘤、尤文氏肉瘤、顱外生殖細胞腫瘤、性腺外生殖細胞腫瘤、眼癌、骨纖維組織細胞瘤、膽囊癌、胃癌、胃腸類癌瘤、胃腸基質腫瘤(GIST)、生殖細胞腫瘤、妊娠期滋養層腫瘤、毛細胞白血病、頭頸癌、心臟癌、肝癌、霍奇金氏淋巴瘤、下咽癌、眼內黑色素瘤、胰島細胞瘤、胰臟神經內分泌腫瘤、腎癌、喉癌、唇及口腔癌、肝癌、小葉原位癌(LCIS)、肺癌、淋巴瘤、轉移性鱗狀頸癌伴隱性原發中線道癌、口癌多發性內分泌贅瘤症候群、多發性骨髓瘤/漿細胞贅瘤、蕈樣肉芽腫病、骨髓發育不良症候群、骨髓發育不良/骨髓增生性贅瘤、多發性骨髓瘤、梅克爾細胞癌、惡性間皮瘤、骨惡性纖維組織細胞瘤及骨肉瘤、鼻腔及鼻旁竇癌症、鼻咽癌、神經母細胞瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、非小細胞肺癌(NSCLC)、口腔癌、唇及口腔癌症、口咽癌、卵巢癌、胰臟癌、乳頭狀瘤症、副神經節瘤、鼻旁竇及鼻腔癌症、甲狀旁腺癌、陰莖癌、咽癌、胸膜肺母細胞瘤、原發中樞神經系統(CNS)淋巴瘤、前列腺癌、直腸癌、移行細胞癌、視網膜母細胞瘤、橫紋肌肉瘤、唾液腺癌、皮膚癌、胃癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟組織肉瘤、T細胞淋巴瘤、睪丸癌、咽喉癌、胸腺瘤及胸腺癌、甲狀腺癌、腎盂及輸尿管之移行細胞癌、滋養層腫瘤、兒童期異常癌症、尿道癌、子宮肉瘤、陰道癌、外陰癌或病毒誘導性癌症。在一些實施例中，根據本發明之方法治療的個體包括已診斷為患有非癌性過度增生性病症的個體，諸如皮膚(例如牛皮癬)、再狹窄或前列腺(例如良性前列腺肥大(BPH))之良性增生。

本發明進一步提供藉由使蛋白質與有效量之KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑接觸來調節G12C突變型KRAS、HRAS或NRAS蛋白質活性的方法。調節可為抑制或活化蛋白質活性。在一些實施例中，本發明提供藉由使G12C突變型KRAS、HRAS或NRAS蛋白質與有效量之KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑在溶液中接觸來抑制蛋白質活性的方法。在一些實施例中，本發明提供藉由使表現所關注之蛋白質的細胞、組織、器官與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑接觸來抑制G12C突變型KRAS、HRAS或NRAS蛋白質活性的方法。在一些實施例中，本發明提供抑制個體(包括(但不限於)嚙齒動物及哺乳動物(例如人類))中之蛋白質活性的方法，其係藉由向該個體投與有效量之KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑。在一些實施例中，調節百分比超過25%、30%、40%、50%、60%、70%、80%或90%。在一些實施例中，抑制百分比超過25%、30%、40%、50%、60%、70%、80%或90%。

在一些實施例中，本發明提供藉由使細胞與足以抑制該細胞中之KRAS、HRAS或NRAS G12C活性之量的KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑接觸來抑制該細胞中之KRAS、HRAS或NRAS G12C活性的方法。在一些實施例中，本發明提供藉由使組織與足以抑制該組織中之KRAS、HRAS或NRAS G12C活性之量的KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑接觸來抑制該組織中之KRAS、HRAS或NRAS G12C活性的方法。在一些實施例中，本發明提供藉由使生物體與足以抑制該生物體中之KRAS、HRAS或NRAS G12C活性之量的KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑接觸來抑制該生物體中之KRAS、HRAS或NRAS G12C活性的方法。在一些實施例中，本發明提供藉由使動物與足以抑制該動物中之KRAS、HRAS或NRAS G12C活性之量的KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑接觸來抑制該動物中之KRAS、HRAS或NRAS G12C活性的方法。在一些實施例中，本發明提供藉由使個體與足以抑制該個體中之KRAS、HRAS或NRAS G12C活性之量的KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑接觸來抑制該個體中之KRAS、HRAS或NRAS G12C活性的方法。在一些實施例中，本發明提供藉由使人類與足以抑制該人類中之KRAS、HRAS或NRAS G12C活性之量的KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑接觸來抑制該人類中之KRAS、HRAS或NRAS G12C活性的方法。本發明提供治療由KRAS、HRAS或NRAS G12C活性介導之疾病於需要此類治療之個體的方法。

其他治療劑可選自適用於治療癌症的多種治療劑。此類治療劑可核准用於人類或實驗。在一些實施例中，其他治療劑選自由以下組成之群：有絲分裂抑制劑、烷基化劑、抗代謝物、嵌入型抗生素、生長因子抑制劑、細胞週期抑制劑、酵素、拓撲異構酶抑制劑、生物反應調節劑、抗激素、血管生成抑制劑及抗雄激素。

除上文之實例之外，適用於所述方法中之其他治療劑之其他非限制性實例為化學治療劑、細胞毒性劑及非肽小分子，諸如Gleevec®(甲磺酸伊馬替尼)、Velcade®(硼替佐米)、Casodex(比卡魯胺)、Iressa®(吉非替尼)及阿黴素，以及大量化學治療劑。化學治療劑之非限制性實例包括烷基化劑，諸如噻替派(thiotepa)及環磷醯胺(CYTOXANTM)；烷基磺酸鹽，諸如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)及哌泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶(aziridines)，諸如苯唑多巴(benzodopa)、卡波醌(carboquone)、米特多巴(meturedopa)及尤利多巴(uredopa)；乙烯亞胺(ethylenimines)及甲基三聚氰胺(methylamelamines)，包括六甲蜜胺(altretamine)、三伸乙基蜜胺(triethylenemelamine)、三伸乙基磷醯胺、三伸乙基硫代磷醯胺及三甲密胺(trimethylolomelamine)；氮芥，諸如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、萘氮芥(chlornaphazine)、氯磷醯胺(cholophosphamide)、雌氮芥(estramustine)、異環磷醯胺(ifosfamide)、二氯甲二乙胺(mechlorethamine)、二氯甲二乙胺氧化物鹽酸鹽、美法侖(melphalan)、新氮芥(novembichin)、芬司特瑞(phenesterine)、潑尼氮芥(prednimustine)、曲洛磷胺(trofosfamide)、尿嘧啶氮芥(uracil mustard)；亞硝基脲，諸如卡莫司汀(carmustine)、氯脲菌素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫司汀(nimustine)、雷莫司汀(ranimustine)；抗生素，諸如阿克拉黴素(aclacinomysins)、放線菌素(actinomycin)、安麯黴素(authramycin)、偶氮絲胺酸(azaserine)、博來黴素(bleomycins)、放線菌素C(cactinomycin)、卡奇黴素(calicheamicin)、卡拉比辛(carabicin)、洋紅黴素(carminomycin)、嗜癌菌素(carzinophilin)、CasodexTM、色黴素(chromomycins)、放線菌素d、道諾黴素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6-重氮-5-側氧基-L-正白胺酸、小紅莓(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、艾達黴素(idarubicin)、麻西羅黴素(marcellomycin)、絲裂黴素(mitomycins)、黴酚酸(mycophenolic acid)、諾加黴素(nogalamycin)、橄欖黴素(olivomycins)、培洛黴素(peplomycin)、潑非黴素(potfiromycin)、嘌呤黴素(puromycin)、奎那黴素(quelamycin)、羅多比星(rodorubicin)、鏈黑黴素(streptonigrin)、鏈脲菌素(streptozocin)、殺結核菌素(tubercidin)、烏苯美司(ubenimex)、淨司他丁(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代謝物，諸如甲胺喋呤及5-氟尿嘧啶(5-FU)；葉酸類似物，諸如迪諾特寧(denopterin)、甲胺喋昤(methotrexate)、蝶羅呤(pteropterin)、曲美沙特(trimetrexate)；嘌呤類似物，諸如氟達拉賓(fludarabine)、6-巰基嘌呤(6-mercaptopurine)、硫米嘌呤(thiamiprine)、硫鳥嘌呤(thioguanine)；嘧啶類似物，諸如安西他濱(ancitabine)、阿紮胞苷(azacitidine)、6-氮尿苷(6-azauridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、雙去氧尿苷(dideoxyuridine)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、依諾他濱(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)；雄激素，諸如卡魯睾酮(calusterone)、屈他雄酮丙酸酯(dromostanolone propionate)、環硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睾內酯(testolactone)；抗腎上腺，諸如胺魯米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；葉酸補充劑，諸如亞葉酸(frolinic acid)；乙醯葡醛酯(aceglatone)；醛磷醯胺糖苷(aldophosphamide glycoside)；胺基乙醯丙酸；安吖啶 (amsacrine)；貝斯布西(bestrabucil)；比生群(bisantrene)；艾達曲克(edatraxate)；得弗伐胺(defofamine)；秋水仙胺(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；依洛尼塞(elfomithine)；依利醋銨(elliptinium acetate)；依託格魯(etoglucid)；硝酸鎵；羥脲(hydroxyurea)；蘑菇多醣(lentinan)；氯尼達明(lonidamine)；丙脒腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；莫哌達醇(mopidamol)；二胺硝吖啶(nitracrine)；噴司他汀(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；鬼臼酸(podophyllinic acid)；2-乙基醯肼；丙卡巴肼(procarbazine)；PSK.RTM.；雷佐生(razoxane)；西索菲蘭(sizofiran)；螺旋鍺(spirogermanium)；細交鏈孢菌酮酸(tenuazonic acid)；三亞胺醌(triaziquone)；2,2',2"-三氯三乙胺；烏拉坦(urethan)；長春地辛(vindesine)；達卡巴嗪(dacarbazine)；甘露氮芥(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴衛矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；加西托星(gacytosine)；阿拉伯糖苷(「Ara-C」)；環磷醯胺；噻替派(thiotepa)；紫杉烷(taxanes)，例如太平洋紫杉醇(TAXOLTM,Bristol-Myers Squibb Oncology,Princeton,N.J.)及多西他賽(TAXOTERETM,Rhone-Poulenc Rorer,Antony,France)；視黃酸(retinoic acid)；埃斯波黴素(esperamicins)；卡培他濱(capecitabine)；及上述任一者之醫藥學上可接受之鹽、酸或衍生物。

作為適合的化學治療細胞調節劑，亦包括用來調節或抑制激素對腫瘤之作用的抗激素藥劑，諸如抗雌激素，包括例如他莫昔芬(tamoxifen)(NolvadexTM)、雷諾昔酚(raloxifene)、芳香酶抑制性4(5)-咪唑、4-羥基他莫昔芬、曲沃昔芬(trioxifene)、雷洛昔芬(keoxifene)、LY 117018、奧那司酮(onapristone)及托瑞米芬(toremifene)(法樂通(Fareston))；及抗雄激素，諸如氟他胺(flutamide)、尼魯胺(nilutamide)、比卡魯胺(bicalutamide)、亮丙立德 (leuprolide)及戈舍瑞林(goserelin)；苯丁酸氮芥；吉西他濱(gemcitabine)；6-硫鳥嘌呤；巰基嘌呤；甲胺喋呤；鉑類似物，諸如順鉑及卡鉑；長春鹼(vinblastine)；鉑；依託泊苷(etoposide)(VP-16)；異環磷醯胺；絲裂黴素C；米托蒽醌(mitoxantrone)；長春新鹼(vincristine)；長春瑞賓(vinorelbine)；溫諾平(navelbine)；諾凡特龍(novantrone)；替尼泊甙(teniposide)；柔紅黴素(daunomycin)；胺基喋呤(aminopterin)；希羅達(xeloda)；伊班膦酸鹽(ibandronate)；喜樹鹼-11(CPT-11)；拓撲異構酶抑制劑RFS 2000；二氟甲基鳥胺酸(DMFO)。需要時，本發明的化合物或醫藥組合物可與常見處方抗癌藥物組合使用，諸如Herceptin®、Avastin®、Erbitux®、Rituxan®、Taxol®、Arimidex®、Taxotere®、ABVD、AVICINE、阿巴伏單抗(Abagovomab)、吖啶甲醯胺(Acridine carboxamide)、阿達木單抗(Adecatumumab)、17-N-烯丙基胺基-17-去甲氧基格爾德黴素(17-N-Allylamino-17-demethoxygeldanamycin)、艾法雷啶(Alpharadin)、阿昔迪布(Alvocidib)、3-胺基吡啶-2-甲醛硫半卡巴腙(3-Aminopyridine-2-carboxaldehyde thiosemicarbazone)、胺萘非特(Amonafide)、蒽醌、抗CD22免疫毒素、抗贅生劑、抗致瘤草本植物、阿帕茲酮(Apaziquone)、阿替莫德(Atiprimod)、硫唑嘌呤、貝洛替康(Belotecan)、苯達莫司汀(Bendamustine)、BIBW 2992、比立考達(Biricodar)、布洛利辛(Brostallicin)、苔蘚蟲素(Bryostatin)、丁硫胺酸磺醯亞胺(Buthionine sulfoximine)、CBV(化學療法)、花萼海綿誘癌素(Calyculin)、細胞週期非特異性抗腫瘤劑、二氯乙酸、迪斯德莫來(Discodermolide)、依沙黴素(Elsamitrucin)、依諾他濱(Enocitabine)、埃坡黴素(Epothilone)、艾日布林(Eribulin)、依維莫司(Everolimus)、依喜替康(Exatecan)、依昔舒林(Exisulind)、氟魯吉喏(Ferruginol)、佛羅得辛(Forodesine)、磷雌酚(Fosfestrol)、ICE化學療法、IT-101、伊美克(Imexon)、咪喹莫特(Imiquimod)、吲哚并咔唑、伊洛福芬(Irofulven)、拉尼喹達(Laniquidar)、拉洛他賽(Larotaxel)、來那度胺(Lenalidomide)、硫蒽酮(Lucanthone)、勒托替康(Lurtotecan)、馬磷醯胺(Mafosfamide)、米托唑胺(Mitozolomide)、萘氧啶(Nafoxidine)、奈達鉑(Nedaplatin)、奧拉帕尼(Olaparib)、奧他賽(Ortataxel)、PAC-1、木瓜、匹蒽醌(Pixantrone)、蛋白酶體抑制劑、蝴蝶黴素(Rebeccamycin)、雷西莫特(Resiquimod)、盧比替康(Rubitecan)、SN-38、鹽孢菌素A(Salinosporamide A)、沙帕他濱(Sapacitabine)、斯坦福V(Stanford V)、苦馬豆素(Swainsonine)、他拉泊芬(Talaporfin)、塔利奎達(Tariquidar)、喃氟啶-尿嘧啶(Tegafur-uracil)、特莫多(Temodar)、替司他賽(Tesetaxel)、四硝酸三鉑(Triplatin tetranitrate)、參(2-氯乙基)胺、曲沙他濱(Troxacitabine)、烏拉莫司汀(Uramustine)、瓦迪美占(Vadimezan)、長春氟寧(Vinflunine)、ZD6126或唑蘇達(Zosuquidar)。

本發明進一步關於一種使用KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑與放射療法之組合來抑制個體之異常細胞生長或治療個體之過度增生性病症的方法。投與放射療法的技術在此項技術中已知，且此等技術可用於本文所述之組合療法。KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物與其他治療劑以此組合療法投與可如本文所述確定。

放射療法可經由若干方法之一或方法組合投與，包括(但不限於)外射束療法、內放射療法、植入物放射、立體定向放射外科手術、全身性放射療法、放射療法及永久或暫時間質性近接療法。如本文所用，術語「近接療法」係指藉由在或靠近腫瘤或其他增生性組織疾病部位插入體內之空間圍束放射性材料所遞送的放射療法。該術語意欲包括(不限於)暴露於放射性同位素(例如At-211、I-131、I-125、Y- 90、Re-186、Re-188、Sm-153、Bi-212、P-32，及Lu之放射性同位素)。適用作本發明之細胞調節劑之放射源包括固體與液體。作為非限制性實例，放射源可為放射性核素，諸如作為固體源之I-125、I-131、Yb-169、Ir-192、作為固體源之I-125，或發射光子、β粒子、γ放射線或其他治療射線之其他放射性核素。放射性材料亦可為由放射性核素之任何溶液(例如I-125或I-131之溶液)製備的流體，或放射性流體可使用含有較小固體放射性核素(諸如Au-198、Y-90)粒子之適合流體的漿液製備。此外，放射性核素可包含於凝膠或放射性微球體中。

在不受任何理論限制的情況下，本發明的方法可使得異常細胞對放射療法更敏感用於殺死及/或抑制此類細胞生長之目的。因此，本發明進一步關於一種使個體之異常細胞對放射療法敏感的方法，包含向該個體投與一定量的KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑，該量有效地使異常細胞對放射療法敏感。KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑在此方法中的用量可根據此項技術中已知之確定有效量的方式來確定。

在其他實施例中，其他治療劑係選自抗血管生成藥劑、信號轉導抑制劑、抗增生性藥劑、醣解抑制劑或自體吞噬抑制劑。

抗血管生成藥劑，諸如MMP-2(基質金屬蛋白酶2)抑制劑、MMP-9(基質金屬蛋白酶9)抑制劑及COX-11(環加氧酶11)抑制劑，可作為其他治療劑用於本文所述方法中。抗血管生成藥劑包括例如雷帕黴素(rapamycin)、坦羅莫司(temsirolimus)(CCI-779)、依維莫司(everolimus)(RAD001)、索拉非尼(sorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)及貝伐單抗(bevacizumab)。適用COX-II抑制劑之實例包括CELEBREXTM(阿萊昔布(alecoxib))、伐地昔布(valdecoxib)及羅非昔布(rofecoxib)。適用基質金屬蛋白酶抑制劑之實例描述於WO 96/33172(1996年10月24日公開)、WO 96/27583(1996年3月7日公開)、歐洲專利申請案第97304971.1號(1997年7月8日申請)、歐洲專利申請案第99308617.2號(1999年10月29日申請)、WO 98/07697(1998年2月26日公開)、WO 98/03516(1998年1月29日公開)、WO 98/34918(1998年8月13日公開)、WO 98/34915(1998年8月13日公開)、WO 98/33768(1998年8月6日公開)、WO 98/30566(1998年7月16日公開)、歐洲專利公開案606,046(1994年7月13日公開)、歐洲專利公開案931,788(1999年7月28日公開)、WO 90/05719(1990年5月31日公開)、WO 99/52910(1999年10月21日公開)、WO 99/52889(1999年10月21日公開)、WO 99/29667(1999年6月17日公開)、PCT國際申請案第PCT/IB98/01113號(1998年7月21日申請)、歐洲專利申請案第99302232.1號(1999年3月25日申請)、英國專利申請案第9912961.1號(1999年6月3日申請)、美國臨時申請案第60/148,464號(1999年8月12日申請)、美國專利5,863,949(1999年1月26日頒予)、美國專利5,861,510(1999年1月19日頒予)及歐洲專利公開案780,386(1997年6月25日公開)，以上所有文獻均以全文引用之方式併入本文中。較佳MMP-2及MMP-9抑制劑為具有極小或無抑制MMP-1之活性的彼等物。更佳為相對於其他基質金屬蛋白酶(亦即MAP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-11、MMP-12及MMP-13)選擇性地抑制MMP-2及/或MMP-9的彼等物。適用於本發明之MMP抑制劑之一些特定實例為AG-3340、RO 32-3555及RS 13-0830。

自體吞噬抑制劑包括(但不限於)氯喹(chloroquine)、3-甲基腺嘌呤、羥氯喹(hydroxychloroquine)(Plaquenil^TM)、巴弗洛黴素A1(bafilomycin A1)、5-胺基-4-咪唑甲醯胺核苷(AICAR)、岡田井酸(okadaic acid)、抑制2A型或1型蛋白質磷酸酶之自體吞噬抑制性藻類毒素、cAMP類似物，及提高cAMP含量的藥物，諸如腺苷、LY204002、N6-巰基嘌呤核苷及長春鹼。另外，亦可使用抑制蛋白質表現的反義或siRNA，包括(但不限於)ATG5(其涉及自體吞噬)。

B. 化合物

如上文所指出，本發明方法之實施例包括投與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物(「化合物」)。化合物具有KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質活性之調節劑活性。在一些實施例中，化合物為KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物。在一態樣中，化合物能夠選擇性地結合至及/或調節G12C突變型KRAS、HRAS或NRAS蛋白質。化合物可藉由與胺基酸反應來調節G12C突變型KRAS、HRAS或NRAS蛋白質。雖然不希望被理論束縛，但本申請人咸信，在一些實施例中，化合物藉由與G12C突變型KRAS、HRAS或NRAS蛋白質之位置12處之半胱胺酸形成共價鍵而選擇性地與G12C突變型KRAS、HRAS或NRAS蛋白質發生反應。化合物藉由結合至胱胺酸12可將G12C突變型KRAS、HRAS或NRAS之開關II鎖定為無活性階段。此無活性階段可不同於針對GTP及GDP所結合之KRAS、HRAS或NRAS所觀測到的無活性階段。一些化合物亦能夠干擾開關I構形。一些化合物可促進所結合之KRAS、HRAS或NRAS結合至GDP，而非GTP，且因此將KRAS、HRAS或NRAS隔離成無活性KRAS、HRAS或NRAS GDP狀態。由於結合至KRAS、HRAS或NRAS的效應子對開關I及II之構形高度敏感，因此此等化合物之不可逆結合可能中斷KRAS、HRAS或NRAS下游信號傳導。

本發明方法不受KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物之確切結構限制，限制條件為其具有上述官能基(例如調節KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質活性)。適用於方法之某些實施例中的化合物實例提供於PCT公開案第WO 2013/155223號中，該案之化合物及方法以全文引用的方式併入本文中。適用於方法之不同實施例中的其他化合物提供於下文中。

1. 結構(I)之化合物

如上文所指出，在本發明之一個實施例中，提供具有G12C突變型KRAS、HRAS或NRAS蛋白質之調節劑活性的化合物，該等化合物具有以下結構(I)：

或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體、前藥或立體異構體，其中：A為CR¹、CR^2b、NR⁵或S；B為一鍵、CR¹或CR^2c G¹及G²各自獨立地為N或CH；W、X及Y各自獨立地為N、NR⁵或CR⁶；Z為一鍵、N或CR⁶；L¹為一鍵或NR⁷；L²為一鍵或伸烷基；R¹為H、氰基、鹵基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷基胺基、C₃-C₈環烷基、C₁-C₆烯基或C₃-C₈環烯基、雜環基、雜芳基、芳氧基或芳基；R^2a、R^2b及R^2C各自獨立地為H、鹵基、羥基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆鹵烷基、C₁-C₆烷氧基、C₃-C₈環烷基或芳基；R^3a及R^3b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基；或R^3a與R^3b連接而形成碳環或雜環；或R^3a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基，且R^3b與R^4b連接而形成碳環或雜環；R^4a及R^4b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基；或R^4a與R^4b連接而形成碳環或雜環；或R^4a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基，且R^4b與R^3b連接而形成碳環或雜環；R⁵在每次出現時獨立地為H、C₁-C₆烷基或連至L¹之一鍵；R⁶在每次出現時獨立地為H、側氧基、氰基、氰基烷基、胺基、胺基烷基、胺基烷基胺基、胺基羰基、烷基胺基、鹵烷基胺基、羥基烷基胺基、脒基烷基、脒基烷氧基、脒基烷基胺基、胍基烷基、胍基烷氧基、胍基烷基胺基、C₁-C₆烷氧基、胺基烷氧基、烷基羰基胺基烷氧基、C₁-C₆烷基、雜環基、雜環基氧基、雜環基烷氧基、雜環基胺基、雜環基烷基胺基、雜芳基、雜芳氧基、雜芳基烷氧基、雜芳基胺基、雜芳基烷基胺基、芳基、芳氧基、芳胺基、芳基烷基胺基、芳基烷氧基或連至L¹之一鍵；R⁷為H或C₁-C₆烷基；m¹及m²各自獨立地為1、2或3；

表示單鍵或雙鍵以便滿足所有價數；及E為能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處之半胱胺酸殘基形成共價鍵的親電子部分，其中W、X、Y或Z中之至少一者為CR⁶，其中R⁶為連至L¹之一鍵。

在一些實施例中，若R¹、R^2a、R^2b及R^2c皆獨立地選自H及鹵基，則X與Z均為N且R^3a、R^3b、R^4a或R^4b中之至少一者不為H，且限制條件為當R¹為吡啶基時，R^2a、R^2b或R^2c中之至少一者不為H。

在其他實施例中，化合物具有以下結構(I)：

或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體、前藥或立體異構體，其中：A為CR¹、CR^2b、NR⁷或S；B為一鍵、CR¹或CR^2c G¹及G²各自獨立地為N或CH；W、X及Y各自獨立地為N、NR⁵或CR⁶；Z為一鍵、N或CR^6a或當Y為C=O時，Z為NH；L¹為一鍵或NR⁷；L²為一鍵或伸烷基；R¹為H、氰基、鹵基、雜環基、雜芳基、芳氧基或芳基；R^2a、R^2b及R^2C各自獨立地為H、鹵基、羥基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆鹵烷基、C₁-C₆烷氧基、C₃-C₈環烷基或芳基；R^3a及R^3b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基；或R^3a與R^3b連接而形成碳環或雜環；或R^3a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基，且R^3b與R^4b連接而形成碳環或雜環；R^4a及R^4b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基；或R^4a與R^4b連接而形成碳環或雜環；或R^4a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基，且R^4b與R^3b連接而形成碳環或雜環；R⁵在每次出現時獨立地為H、C₁-C₆烷基或連至L¹之一鍵；R⁶在每次出現時獨立地為H、側氧基、氰基、氰基烷基、胺基、胺基烷基、胺基烷基胺基、胺基羰基、烷基胺基、鹵烷胺基、羥基烷基胺基、脒基烷基、脒基烷氧基、脒基烷基胺基、胍基烷基、胍基烷氧基、胍基烷基胺基、C₁-C₆烷氧基、胺基烷氧基、烷基羰基胺基烷氧基、C₁-C₆烷基、雜環基、雜環基氧基、雜環基烷氧基、雜環基胺基、雜環基烷基胺基、雜芳基、雜芳氧基、雜芳基烷氧基、雜芳基胺基、雜芳基烷基胺基、芳基、芳氧基、芳胺基、芳基烷基胺基、芳基烷氧基或連至L¹之一鍵；R^6a為H、烷基或連至L¹之一鍵；R⁷為H或C₁-C₆烷基m¹及m²各自獨立地為1、2或3；

表示單鍵或雙鍵以便滿足所有價數；及E為能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處之半胱胺酸殘基形成共價鍵的親電子部分，其中W、X、Y或Z中之至少一者為CR⁶，其中R⁶為連至L¹之一鍵，或W、X或Y中之至少一者為NR⁵，其中R⁵為連至L¹之一鍵。

在結構(I)之化合物之一些實施例中，W與X之間的鍵為雙鍵。在其他實施例中，Y與Z之間的鍵為雙鍵。在更多實施例中，A與B之間的鍵為雙鍵。在仍然更多實施例中，W與X、Y與Z及A與B之間的鍵各自為雙鍵。

在結構(I)之前述化合物之一些更多實施例中：A為CR¹、CR^2b、NR⁷或S；B為一鍵、CR¹或CR^2c G¹及G²各自獨立地為N或CH；W、X及Y各自獨立地為N、NR⁵或CR⁶；Z為一鍵、N或CR⁶；L¹為一鍵或NR⁷；L²為一鍵或伸烷基；R¹為H、氰基、鹵基、雜環基、雜芳基、芳氧基或芳基；R^2a、R^2b及R^2C各自獨立地為H、鹵基、羥基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆鹵烷基C₃-C₈環烷基或芳基；R^3a及R^3b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基；或R^3a與R^3b連接而形成碳環或雜環；或R^3a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基，且R^3b與R^4b連接而形成碳環或雜環；R^4a及R^4b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基；或R^4a與R^4b連接而形成碳環或雜環；或R^4a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基，且R^4b與R^3b連接而形成碳環或雜環；R⁵及R⁷各自獨立地為H或C₁-C₆烷基；R⁶在每次出現時獨立地為H、側氧基、氰基、氰基烷基、胺基、胺基羰基、烷基胺基、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₆烷基或連至L¹之一鍵；m¹及m²各自獨立地為1、2或3；

表示單鍵或雙鍵以便滿足所有價數；及E為能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處之半胱胺酸殘基形成共價鍵的親電子部分，其中W、X、Y或Z中之至少一者為CR⁶，其中R⁶為連至L¹之一鍵，及限制條件為，若R¹、R^2a、R^2b及R^2c皆獨立地選自H及鹵基，則X與Z均為N且R^3a、R^3b、R^4a或R^4b中之至少一者不為H，且限制條件為當R¹為吡啶基時，R^2a、R^2b或R^2c中之至少一者不為H。

在結構(I)之前述化合物之一些其他實施例中：A為CR^2b、NR⁷或S；B為一鍵或CR^2c G¹及G²各自獨立地為N或CH；W、X及Y各自獨立地為N、NR⁵或CR⁶；Z為一鍵、N或CR⁶；L¹為一鍵或NR⁷；L²為一鍵或伸烷基；R¹為氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷基胺基、C₃-C₈環烷基、C₁-C₆烯基或C₃-C₈環烯基、雜環基或芳基；R^2a、R^2b及R^2C各自獨立地為H、鹵基、C₁-C₆烷基或C₃-C₈環烷基；R^3a及R^3b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、羥基烷基、胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^3a與R^3b連接而形成碳環或雜環；或R^3a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、羥基烷基、胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^3b與R^4b連接而形成碳環或雜環；R^4a及R^4b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、羥基烷基、胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^4a與R^4b連接而形成碳環或雜環；或R^4a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、羥基烷基、胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^4b與R^3b連接而形成碳環或雜環；R⁵及R⁷各自獨立地為H或C₁-C₆烷基；R⁶在每次出現時獨立地為H、氰基、胺基、烷基胺基、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₆烷基或連至L¹之一鍵；m¹及m²各自獨立地為1、2或3；

表示單鍵或雙鍵以便滿足所有價數；及E為能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處之半胱胺酸殘基形成共價鍵的親電子部分，其中W、X或Y中之至少一者為CR⁶，其中R⁶為連至L¹之一鍵。

在結構(I)之前述化合物之仍然其他實施例中，R¹為H、氰基、鹵基、雜環基、雜芳基、芳氧基或芳基。

E之結構不受特別限制，條件為其能夠與親核劑(諸如KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處的半胱胺酸殘基)形成共價鍵。因此，較佳為能夠與親核劑發生反應(例如藉由形成共價鍵)的部分。在某些實施例中，E能夠與適當反應性親核劑以共軛加成方式(例如1.4-共軛加成)發生反應。在一些實施例中，E包含共軛π鍵，以便電子之非定域化使得至少一個原子(例如碳原子)具有正電荷、部分正電荷或極化鍵。在其他實施例中，E包含一或多個鍵，其中形成鍵之兩個原子具有足夠不同的電負性，以便原子之一(例如碳原子)上存在部分正電荷(例如藉由鍵極化)。包含碳鹵素鍵、碳氧鍵或連至此項技術中已知之各種離去基之碳鍵的E部分為此類E部分之實例。

在前述某些實施例中，E具有以下結構：

其中：

表示雙鍵或參鍵；Q為-C(=O)-、-C(=NR^8')-、-NR⁸C(=O)-、-S(=O)₂-或-NR⁸S(=O)₂-；R⁸為H、C₁-C₆烷基或羥基烷基；R^8'為H、-OH、-CN或C₁-C₆烷基；及若

為雙鍵，則R⁹及R¹⁰各自獨立地為H、氰基、羧基、C₁-C₆烷基、烷氧基羰基、胺基烷基、烷基胺基烷基或羥基烷基，或R⁹與R¹⁰連接而形成碳環或雜環；若

為參鍵，則R⁹不存在且R¹⁰為H、C₁-C₆烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基或羥基烷基。

在某些實施例中，若

為雙鍵，則R⁹及R¹⁰各自獨立地為H、氰基、C₁-C₆烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基或羥基烷基，或R⁹與R¹⁰連接而形成碳環或雜環。

在一些前述實施例中，Q為-C(=O)-、-NR⁸C(=O)-、-S(=O)₂-或-NR⁸S(=O)₂-。

在一些其他前述實施例中，Q為-C(=NR^8')-，其中R^8'為H、-OH、-CN或C₁-C₆烷基。舉例而言，在一些實施例中，R^8'為H。在其他實施例中，R^8'為-CN。在其他實施例中，R^8'為-OH。

在一些實施例中，化合物具有以下結構(I')：

其中R'為R¹且R"為R^2c或R'為H且R"為R¹。

在其他實施例中，化合物具有以下結構(I'a)：

其中：

表示雙鍵或參鍵；Q為-C(=O)-、-C(=NR^8')-、-NR⁸C(=O)-、-S(=O)₂-或-NR⁸S(=O)₂-；R⁸為H、C₁-C₆烷基或羥基烷基；R^8'為H、-OH、-CN或C₁-C₆胺基；若

為雙鍵，則R⁹及R¹⁰各自獨立地為H、氰基、羧基、C₁-C₆烷基、烷氧基羰基、胺基烷基、烷基胺基烷基、雜芳基或羥基烷基，或R⁹與R¹⁰連接而形成碳環或雜環；若

為參鍵，則R⁹不存在且R¹⁰為H、C₁-C₆烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基或羥基烷基；及R'為R¹且R"為R^2c或R'為H且R"為R¹。

在化合物(I'a)之一些前述實施例中，Q為-C(=O)-、-NR⁸C(=O)-、-S(=O)₂-或-NR⁸S(=O)₂-。

在化合物(I'a)之一些其他前述實施例中，Q為-C(=NR^8')-，其中R^8'為H、-OH、-CN或C₁-C₆烷基。舉例而言，在一些實施例中，R^8'為H。在其他實施例中，R^8'為-CN。在其他實施例中，R^8'為-OH。

在前述化合物之仍然更多實施例中，化合物具有以下結構(I'b)、(I'c)、(I'd)或(I'e)之一：

在仍然更多實施例中，化合物具有以下結構(I'f)、(I'g)、(I'h)或(I'i)之一：

在結構(I'f)、(I'g)、(I'h)或(I'i)之化合物的一些實施例中，R¹為芳基且R^2c及R^2b獨立地選自H及鹵基，例如在一些其他實施例中，R¹為芳基且R^2c及R^2b獨立地選自鹵基。

在不同實施例中，化合物具有以下結構(I'j)、(I'k)、(I'l)或(I'm)之一：

在結構(I'j)、(I'k)、(I'l)或(I'm)之化合物的一些實施例中，R¹為芳基且R^2a及R^2b獨立地選自H及鹵基，例如在一些其他實施例中，R¹為芳基且R^2a及R^2b獨立地選自鹵基。

在其他實施例中，化合物具有以下結構(I")：

其中R'為R¹且R"為R^2c或R'為H且R"為R¹。舉例而言，在一些實施例中，化合物具有以下結構(I"a)：

其中：

在化合物(I"a)之一些前述實施例中，Q為-C(=O)-、-NR⁸C(=O)-、-S(=O)₂-或-NR⁸S(=O)₂-。

在化合物(I"a)之一些其他前述實施例中，Q為-C(=NR^8')-，其中R^8'為H、-OH、-CN或C₁-C₆烷基。舉例而言，在一些實施例中，R^8'為 H。在其他實施例中，R^8'為-CN。在其他實施例中，R^8'為-OH。

在其他實施例中，化合物具有以下結構(I"b)、(I"c)、(I"d)或(I"e)之一：

在其他實施例中，化合物具有以下結構(I"f)、(I"g)、(I"h)或(I"i)之一：

在一些不同實施例中，化合物具有以下結構(I"j)、(I"k)、(I"l)或 (I"m)之一：

在其他各種實施例中，化合物具有以下結構(I"')：

其中A為NH或S。

舉例而言，在一些實施例中，化合物具有以下結構(I"'a)：

其中：

表示雙鍵或參鍵； Q為-C(=O)-、-C(=NR^8')-、-NR⁸C(=O)-、-S(=O)₂-或-NR⁸S(=O)₂-；R⁸為H、C₁-C₆烷基或羥基烷基；R^8'為H、-OH、-CN或C₁-C₆烷基；及若

為參鍵，則R⁹不存在且R¹⁰為H、C₁-C₆烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基或羥基烷基；及A為NH或S。

在化合物(I"'a)之一些前述實施例中，Q為-C(=O)-、-NR⁸C(=O)-、-S(=O)₂-或-NR⁸S(=O)₂-。

在化合物(I"'a)之一些其他前述實施例中，Q為-C(=NR^8')-，其中R^8'為H、-OH、-CN或C₁-C₆烷基。舉例而言，在一些實施例中，R^8'為H。在其他實施例中，R^8'為-CN。在其他實施例中，R^8'為-OH。

在其他實施例中，化合物具有以下結構(I"'b)、(I"'c)、(I"'d)或(I"'e)之一：

在仍然更多實施例中，化合物具有以下結構(I"'f)、(I"'g)、(I"'h)或(I"'i)之一：

在前述任一者之某些實施例中，G¹或G²中之至少一者為N。在其他實施例中，W、X或Y中之至少一者為N或NR⁵。在其他實施例中，W、X或Y中之至少一者為N且W、X或Y中之至少一者為CR⁶。舉例而言，在一些實施例中，W、X及Y中之兩者為N且W、X及Y之一為CR⁶。

在一些實施例中，W、X或Y中之至少一者為N或NR⁵，其中R⁵為連至L¹之一鍵。在一些其他實施例中，W、X或Y中之至少一者為N或CR⁶，其中R⁶為連至L¹之一鍵。

舉例而言，在一些不同實施例中，化合物具有以下結構之一：

其中：

為雙鍵，則R⁹及R¹⁰各自獨立地為H、氰基、羧基、C₁-C₆烷基、烷氧基羰基、胺基烷基、烷基胺基烷基、雜芳基或羥基烷基，或R⁹與R¹⁰連接而形成碳環或雜環；及若

在結構(I'n)、(I'o)或(I'p)之化合物之一些實施例中，R¹為芳基或雜芳基且R^2a及R^2b獨立地選自H及鹵基，例如在一些其他實施例中，R¹為芳基或雜芳基且R^2a及R^2b獨立地選自鹵基，諸如氯及氟。在一些實施例中，R¹為芳基或雜芳基，R^2a為氯且R^2b為氟。在其他實施例中，R¹為芳基或雜芳基，R^2a或R^2b之一為鹵基，諸如氯或氟，且R^2a或R^2b中之另一者為H。在前述者之其他實施例中，R⁶為H、氰基、氰基烷基、胺基或C₁-C₆烷基。

在其他不同實施例中，W與X、Y與Z之間的鍵均為單鍵。舉例而言，在一些實施例中，化合物具有以下結構(I""'a)或(I""'b)之一：

其中：

在結構(I""'a)或(I""'b)之化合物的一些實施例中，R¹為芳基或雜芳基且R^2a及R^2b獨立地選自H及鹵基，例如在一些其他實施例中，R¹為芳基或雜芳基且R^2a及R^2b獨立地選自鹵基，諸如氯及氟。在一些實施例中，R¹為芳基或雜芳基，R^2a為氯且R^2b為氟。在其他實施例中，R¹為芳基或雜芳基，R^2a或R^2b之一為鹵基，諸如氯或氟，且R^2a或R^2b中之另一者為H。在前述者之其他實施例中，R⁶為H、氰基、氰基烷基、胺基或C₁-C₆烷基。

在然而更多之任何前述實施例中，E具有以下結構：

其中： Q為-C(=O)-、-C(=NR^8')-、-NR⁸C(=O)-、-S(=O)₂-或-NR⁸S(=O)₂-；R⁸為H、C₁-C₆烷基或羥基烷基；R^8'為H、-OH、-CN或C₁-C₆烷基；及R⁹及R¹⁰各自獨立地為H、氰基、C₁-C₆烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基或羥基烷基，或R⁹與R¹⁰連接而形成碳環或雜環。

在其他任何前述實施例中，E具有以下結構：

其中：Q為-C(=O)-、-NR⁸C(=O)-、-S(=O)₂-或-NR⁸S(=O)₂-；R⁸為H、C₁-C₆烷基或羥基烷基；及R¹⁰為H、C₁-C₆烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基或羥基烷基。

在一些實施例中，m¹為1。在其他實施例中，m¹為2。在仍然更多實施例中，m¹為3。在不同實施例中，m²為1。在一些其他實施例中，m²為2。在然而更多實施例中，m²為3。

在前述化合物中任一者之一些其他特定實施例中，m¹為1，且m²為1。在其他實施例中，m¹為1且m²為2。在其他實施例中，m¹為2，且m²為2。在更多實施例中，m¹為1，且m²為3。

在任何前述實施例中，G¹及G²各自獨立地選自N及CH。在一些實施例中，G¹或G²中之至少一者為N。在一些實施例中，G¹及G²中之每一者為N。在一些實施例中，G¹及G²中之每一者為N且m¹及m²各自為2。在一些其他實施例中，G¹或G²中之至少一者為CH。在其他實施例中，G¹及G²中之每一者為CH。

不希望被理論束縛，申請人咸信正確選擇R¹取代基可在化合物抑制活性(例如針對KRAS、HRAS或NRAS G12C)方面起作用。在一些實施例中，R¹為芳基或雜環基(例如雜芳基或脂族雜環基)，其中之每一者視情況經一或多個取代基取代。在一些實施例中，R¹能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質發生可逆的相互作用。在一些實施例中，R¹具有針對KRAS、HRAS或NRAS之高親和力且高度特異性針對G12C KRAS、HRAS或NRAS。在一些實施例中，R¹能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C發生疏水性相互作用。在一些實施例中，R¹能夠與G12C KRAS、HRAS或NRAS蛋白質之各種殘基形成氫鍵。

在其他前述實施例中，R¹為雜環基、雜芳基或芳基。

在前述任一者之某些實施例中，R¹為芳基。舉例而言，在一些實施例中，R¹為苯基。在其他實施例中，R¹為萘基。在一些此等實施例中，R¹為未經取代之芳基，諸如未經取代之苯基或未經取代之萘基。在其他實施例中，R¹經一或多個取代基取代。在一些此等實施例中，取代基係選自鹵基、氰基、羥基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基及C₃-C₈環烷基。在其他更特定實施例中，取代基係選自氟、氯、溴、羥基、甲氧基及環丙基。

在其他實施例中，R¹取代基係選自鹵基、氰基、氰基C₁-C₆烷基、氰基C₃-C₈環烷基、羥基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷基環烷基、C₂-C₆炔基、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₆鹵烷氧基、C₁-C₆烷基胺基、C₁-C₆烷基羰基胺基、C₁-C₆羥基烷基、C₁-C₆鹵烷基、C₁-C₆烷氧基烷基、胺基碸、胺基羰基、胺基羰基C₁-C₆烷基、胺基羰基C₃-C₈環烷基、C₁-C₆烷基胺基羰基、C₃-C₈環烷基胺基羰基、C₃-C₈環烷基烷基及C₃-C₈環烷基、C₃-C₈稠合環烷基及雜芳基。

在其他實施例中，R¹取代基係選自氟、氯、溴、氰基、羥基、羥基甲基、甲氧基、甲氧基甲基、乙基、異丙基、三氟甲基、胺基羰基及環丙基。

在仍然更多實施例中，R¹取代基係選自氟、氯、溴、氰基、羥基、羥基甲基、甲氧基、甲氧基甲基、甲基、乙基、異丙基、二氟甲基、三氟甲基、胺基羰基及環丙基。

在某些實施例中，R¹具有以下結構之一：

在其他前述實施例中，R¹具有以下結構之一：

在其他實施例中，R¹具有以下結構之一：

在前述任一者之一些不同實施例中，R¹為雜芳基。在某些實施例中，R¹包含氧、硫、氮或其組合。在一些此等實施例中，R¹包含硫或氮。在某些實施例中，R¹為噻吩基、吡啶基、吡啶酮基、嘧啶基、苯并噁唑基、苯并異噁唑基、苯并二噁唑基、苯并咪唑基、喹啉基、喹啉酮基、二氫喹啉酮基、四氫喹啉基、喹唑啉基、吲唑基、吲哚啉酮基、苯并噻吩基或二氫苯并二氧雜環己烯基。

在一些實施例中，R¹為經取代或未經取代之吲唑基。在一些此等實施例中，吲唑基經一或多個C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基及/或鹵基取代。舉例而言，在一些實施例中，吲唑基經一或多個甲基、甲氧基、氯及/或氟基取代。

舉例而言，在一些實施例中，R¹為吡啶基。在一些實施例中，R¹為未經取代之吡啶基，例如未經取代之吡啶-4-基或未經取代之吡啶-3-基。在其他實施例中，R¹為噻吩基。在一些實施例中，R¹為未經取代之噻吩基，例如未經取代之噻吩-2-基。

在其他實施例中，R¹經一或多個取代基取代。舉例而言，在一些實施例中，取代基係選自鹵基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基或C₂-C₆烯基羰基胺基。在一些此等實施例中，取代基係選自鹵基及C₁-C₆烷基。在其他實施例中，取代基係選自氟、氯、胺基及甲基。舉例而言，在更特定的實施例中，取代基係選自氯及甲基。在其他實施例中，至少一個R¹取代基為氟。

在某些實施例中，R¹具有以下結構之一：

在某些實施例中，R¹具有以下結構之一：

在一些前述實施例中，R¹具有以下結構之一：

在其他實施例中，R¹為脂族雜環基。在一些實施例中，脂族雜環基包含氧及/或氮。在一些其他實施例中，R¹為嗎啉基。舉例而言，在一些實施例中，R¹具有以下結構：

在前述者之各種實施例中，R¹未經取代。

在一些前述實施例中，R^2a為H。在其他實施例中，R^2a為鹵基，例如在一些實施例中，R^2a為氯或氟。在前述者之其他實施例中，R^2a 為C₁-C₆烷基。舉例而言，在一些實施例中，R^2a為C₃-C₈環烷基，諸如環丙基。

在前述化合物之其他實施例中，R^2b及R^2c存在時為H。在不同實施例中，R^2b及R^2c存在時各自獨立地為鹵基。在其他實施例中，R^2b存在時為鹵基。在更多實施例中，R^2c存在時為鹵基。在某些前述實施例中，鹵基為氯或氟。

典型地選擇使E之反應性(亦即親電子性)最佳化的Q部分。在某些前述實施例中，Q為-C(=O)-。在其他實施例中，Q為-S(=O)₂-。在仍然更多實施例中，Q為-NR⁸C(=O)-。在仍然更多的不同實施例中，Q為-NR⁸S(=O)₂-。

在剛剛前述的一些實施例中，R⁸為H。在其他此等實施例中，R⁸為羥基烷基，例如在一些實施例中，羥基烷基為2-羥基烷基。

在一些實施例中，Q為-C(=NR^8')-，其中R^8'為H、-OH、-CN或C₁-C₆烷基。舉例而言，在一些實施例中，R^8'為H。在其他實施例中，R^8'為-CN。在其他實施例中，R^8'為-OH。

在任一前述實施例之一些實施例中，R⁹或R¹⁰中之至少一者為H。舉例而言，在一些實施例中，R⁹及R¹⁰中之每一者為H。

在其他前述實施例中，R¹⁰為烷基胺基烷基。在一些此等實施例中，R¹⁰具有以下結構：

在其他實施例中，R¹⁰為羥基烷基，諸如2-羥基烷基。

在前述實施例之一些其他不同實施例中，R⁹與R¹⁰連接而形成碳環。舉例而言，在一些此等實施例中，碳環為環戊烯、環己烯或苯環。在其他實施例中，碳環為環戊烯或環己烯環。在其他實施例中，碳環為苯環，例如具有以下結構之苯環：

在任一前述實施例之一些實施例中，E為能夠與包含G12C突變之KRAS、HRAS或NRAS蛋白質鍵結的親電子劑。在一些實施例中，親電子劑E能夠與G12C突變型KRAS、HRAS或NRAS蛋白質形成不可逆的共價鍵。在一些情況下，親電子劑E可與G12C突變型KRAS、HRAS或NRAS蛋白質之位置12處的半胱胺酸殘基結合。在前述任一者之各種實施例中，E具有以下結構之一：

在前述任一者之其他實施例中，E具有以下結構之一：

在不同實施例中，E具有以下結構之一：

在一些情況下，E具有以下結構之一：

其中：R⁸為H或C₁-C₆烷基；R⁹為H、氰基或C₁-C₆烷基，或R⁹與R¹⁰連接而形成碳環；R¹⁰為H或C₁-C₆烷基或R¹⁰與R⁹連接而形成碳環且R^10a為H或C₁-C₆烷基。

在一些實施例中，E為

。在一些實施例中，E為

在一些實施例中，E為

在前述實施例任一者之一些實施例中，L¹為一鍵。在其他實施例中，L¹為NR⁷。舉例而言，在一些此等實施例中，R⁷為C₁-C₆烷基。在其他實施例中，L¹為NH。

可選擇L²以向E基團提供適當間距及/或取向以與KRAS、HRAS或NRAS蛋白質形成一鍵。在一些前述實施例中，L²為一鍵。在其他前述實施例中，L²為伸烷基。在一些實施例中，伸烷基經取代。在其他實施例中，伸烷基未經取代。舉例而言，在一些實施例中，L²為 CH₂或CH₂CH₂。

在某些實施例中，R^3a及R^3b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、羥基烷基、胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^4a及R^4b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、羥基烷基、胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基或胺基羰基。

在其他前述實施例中，R^3a及R^4a在每次出現時獨立地為H、-OH、羥基烷基、氰基或胺基羰基且R^3b及R^4b為H。

在某些其他實施例中，R^3a及R^4a為H且R^3b及R^4b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、羥基烷基、胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基或胺基羰基。

在任一前述實施例中，R^3a、R^3b、R^4a或R^4b中之至少一者為H。在一些實施例中，R^3a、R^3b、R^4a及R^4b中之每一者為H。

在一些實施例中，R^3a為-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、羥基烷基、胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^3b、R^4a及R^4b為H。

在其他實施例中，R^4a為-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、羥基烷基、胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^3a、R^3b及R^4b為H。

在其他實施例中，R^3a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、羥基烷基、胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^3b與R^4b連接而形成碳環或雜環。

在仍然更多的實施例中，R^4a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、羥基烷基、胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^4b與R^3b連接而形成碳環或雜環。

在其他實施例中，R^3a與R^3b連接而形成碳環或雜環。在其他實施例中，R^4a與R^4b連接而形成碳環或雜環。

在其他實施例中，R^3a或R^4a為胺基羰基。舉例而言，在某些實施例中，胺基羰基為

。在其他實施例中，R^3a或R^4a為氰基。在其他實施例中，R^3a或R^4a為-OH。在其他實施例中，R^3a或R^4a為羥基烷基，例如羥基甲基。

在一些實施例中，R⁶在每次出現時獨立地為H、側氧基、氰基、氰基烷基、胺基、胺基烷基、胺基烷基胺基、胺基羰基、烷基胺基、鹵烷基胺基、羥基烷基胺基、脒基烷基、脒基烷氧基、脒基烷基胺基、胍基烷基、胍基烷氧基、胍基烷基胺基、C₁-C₆烷氧基、胺基烷氧基、烷基羰基胺基烷氧基、C₁-C₆烷基、雜環基、雜環基氧基、雜環基烷氧基、雜環基胺基、雜環基烷基胺基、雜芳基、雜芳氧基、雜芳基烷氧基、雜芳基胺基、雜芳基烷基胺基、芳基、芳氧基、芳胺基、芳基烷基胺基、芳基烷氧基或連至L¹之一鍵。

前述R⁶部分中之每一者可經一或多個取代基取代。舉例而言，在一些實施例中，一或多個取代基為胺基(例如未經取代或經取代)、烷基羰基胺基、羥基、鹵烷基或雜環基(例如未經取代或經取代之脂族雜環，或未經取代或經取代之雜芳基)。舉例而言，在一些實施例中，R⁶部分為C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基或烷基胺基，其進一步經烷基羰基胺基、羥基、-CN或鹵烷基取代。舉例而言，在一些實施例中，R⁶具有以下結構之一：

其中X為一鍵、-O-或-NR；各R獨立地為H或C₁-C₆烷基且n為整數0至6。

各種不同的R⁶部分包括於化合物範疇內。舉例而言，在各種實施例中，R⁶為H。在其他實施例中，R⁶為-CN。在更多實施例中，R⁶為甲氧基。

在各種其他實施例中，R⁶為胺基烷基、胺基烷氧基或胺基烷基胺基。舉例而言，在一些實施例中，R⁶具有以下結構：

在其他實施例中，R⁶為脒基烷基、脒基烷氧基、脒基烷基胺基、胍基烷基、胍基烷氧基或胍基烷基胺基。舉例而言，在一些實施例中，R⁶具有以下結構之一：

其中X為一鍵、-O-或-NR-；各R獨立地為H或C₁-C₆烷基且n為整數0至6。

在其他實施例中，R⁶為雜環基、雜環基氧基、雜環基烷氧基、雜環基胺基、雜環基烷基胺基、雜芳基、雜芳氧基、雜芳基烷氧基、雜芳基胺基或雜芳基烷基胺基。舉例而言，在一些實施例中，R⁶具有以下結構之一：

在一些前述實施例中，X為N。在其他前述實施例中，X為N。在其他前述實施例中，Z為N。在仍然更多的實施例中，X為N且Z為N。

在一些實施例中，Z為N且Y為N。在其他實施例中，X為N，Z為N，Y為CR⁶，其中R⁶為H且W為CR⁶，其中R⁶為連至L¹之一鍵。在不同實施例中，Z為N且Y為CR⁶，其中R⁶為H，W為CR⁶，其中R⁶為連至L¹之一鍵且X為CR⁶，其中R⁶為氰基、甲氧基或胺基。

在其他實施例中，Z為N，X為CR⁶且R⁶為氰基，Y為CR⁶，其中R⁶為H且W為CR⁶，其中R⁶為連至L¹之一鍵。

在其他實施例中，Y為N，Z為N，W為CR⁶，其中R⁶為連至L¹之一鍵且X為CR⁶，其中R⁶為H。

在其他前述實施例中，Z為一鍵。

在某些實施例中，Y為NR⁵。在一些此等實施例中，R⁵為C₁-C₆烷基。在其他實施例中，R⁵為H。

在其他實施例中，X或Y為CR⁶。在一些此等實施例中，R⁶在每次出現時獨立地為H、氰基、胺基、C₁-C₆烷氧基或連至L¹之一鍵。在此等實施例之一些其他實施例中，R⁶為H。在其他實施例中，R⁶為C₁-C₆烷氧基。在其他實施例中，R⁶為氰基。在更多實施例中，R⁶為甲氧基。在其他實施例中，R⁶為胺基。

在各種不同實施例中，化合物具有下表1中所述之結構之一：表1

* [M+Na]⁺

+ [M-H]^-

# [M]

€ 根據類似於本文所說明的方法製備

表1中之化合物分別製備且藉由質譜及/或¹H NMR分析。實驗質譜資料包括於上表1中。例示性合成程序更詳細地描述於下文及實例中。可藉以製備化合物的通用方法提供於下文且指示於上表1中。

應瞭解，在本說明書中，所繪式的取代基及/或變數之組合僅當此類作用產生穩定化合物時才容許。

熟習此項技術者亦瞭解，在製備本文所述化合物的方法中，中間化合物之官能基可能需要藉由適合保護基團保護。此類官能基包括(但不限於)羥基、胺基、巰基及羧酸。適用於羥基之保護基包括三烷基矽烷基或二芳基烷基矽烷基(例如第三丁基二甲基矽烷基、第三丁基二苯基矽烷基或三甲基矽烷基)、四氫哌喃基、苯甲基及其類似基團。適用於胺基、甲脒基及胍基的保護基包括第三丁氧羰基、苯甲氧羰基及其類似保護基團。適用於巰基的保護基包括-C(O)-R"(其中R"為烷基、芳基或芳基烷基)、對甲氧基苯甲基、三苯甲基及其類似基團。適用於羧酸的保護基包括烷基、芳基或芳基烷基酯。保護基團視情況根據熟習此項技術者已知的標準技術及如本文所述添加或移除。保護基團之用途詳細描述於Green,T.W.及P.G.M.Wutz,Protective Groups in Organic Synthesis(1999)，第3版，Wiley。如熟習此項技術者將瞭解，保護基亦可為聚合物樹脂，如王樹脂(Wang resin)、林克樹脂(Rink resin)或2-氯三苯甲基氯化物樹脂。

熟習此項技術者亦應瞭解，雖然本發明化合物之此類受保護衍生物可能本身不具有藥理學活性，但其可投與個體且隨後在體內代謝而形成具有藥理學活性之本發明化合物。因此，此類衍生物可描述為「前藥」。本發明化合物之所有前藥包括在本發明之範疇內。

此外，以游離鹼或酸形式存在之所有本發明化合物可藉由熟習此項技術者已知的方法用適當無機或有機鹼或酸處理而轉化成其醫藥學上可接受之鹽。本發明化合物之鹽可藉由標準技術轉化成其游離鹼或酸形式。

以下通用反應流程說明製備結構(I)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體或立體異構體的例示性方法：

其中R¹、R^2a、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、G¹、G²、L¹、L²、m¹、m²、A、B、W、X、Y、Z及E如上文所定義。為了易於說明，下文多個流程說明「R²」部分。R²部分意欲包括R^2a、R^2b或R^2c中之任一者。應瞭解，熟習此項技術者能夠藉由類似方法或藉由將熟習此項技術者已知的其他方法組合來製造此等化合物。亦應瞭解，熟習此項技術者能夠以與下文所述類似的方式，藉由使用適當起始組分且根據需要修改合成參數來製造下文未特定說明之結構(I)之其他化合物。一般而言，起始組分可獲自諸如Sigma Aldrich、Lancaster Synthesis,Inc.、Maybridge、Matrix Scientific、TCI及Fluorochem USA等來源或根據熟習此項技術者已知之來源合成(參見例如Advanced Organic Chemistry：Reactions,Mechanisms,and Structure，第5版(Wiley,2000年12月))或如本發明中所述製備。

通用反應流程1

結構(I)之化合物(例如化合物A-7)之實施例可根據通用反應流程1(「方法A」)製備，其中R¹、R²、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。如通用反應流程1中所示，結構A-1之化合物可購自商業來源或根據一般技術者熟悉的方法製備。A-1在鈴木條件下反應產生A-2。結構A-2之化合物與甲醯胺或其他適合試劑(諸如甲脒乙酸酯或原甲酸三甲酯)反應產生結構A-3之喹唑啉。A-3在適當條件(例如SOCl₂、POCl₃/PCl₅或POCl₃)下氯化而產生氯喹唑啉A-4。A-4與經適當保護之雜環在鹼性條件下反應產生A-5。適當保護基團包括如通用反應流程1中所描繪的丁氧羰基(BOC)，以及此項技術中已知的其他保護基團。脫除A-5之保護基，隨後使用醯氯(或磺醯氯)或酸及適當活化試劑進行醯化，產生A-7。

通用反應流程2

或者，結構(I)之化合物(例如化合物A-7)之實施例可根據通用反應流程2(「方法B」)製備，其中R¹、R²、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。結構A-1之化合物如上文所述製備或購買。用甲醯胺或其他適合試劑(諸如甲脒乙酸酯或原甲酸三甲酯)處理A-1，產生結構B-1之喹唑啉。B-1接著可氯化而產生B-2且如上文針對方法A所述，與經適當保護之雜環在鹼性條件下反應而產生B-3。接著鈴木偶合(Suzuki coupling)，產生A-5，其可如上文在方法A中所述轉化成A-7。

結構(I)之化合物(例如化合物C-6)之其他實施例可根據通用反應流程3(「方法C」)製備，其中R¹、R²、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、 R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。如通用反應流程3中所示，可購自商業來源或根據熟知程序製備的結構C-1之化合物與甲苯磺醯肼反應而產生C-2。接著，用適當試劑(諸如亞硫醯氯)使C-2發生氯化，產生C-3，其可與經適當保護之雜環(PG=保護基或C₁-C₆烷基)在鹼性條件下反應而產生吲唑C-4。藉由在THF/H₂O中用氫氧化鈉處理而自C-4中移除甲苯磺醯基以產生C-5。接著，移除氮保護基且如方法A中所述進行醯化或硫醯化，產生所需化合物C-6。

結構(I)之化合物(例如化合物D-9)之其他實施例可根據通用反應流程4(「方法D」)製備，其中R¹、R²、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。如通用反應流程4中所示，苯甲醛D-1在還原性胺化條件下處理以產生D-2。形成經甲苯磺醯基保護之胺(D-3)，隨後用適當的路易斯酸(Lewis acid)(例如AlCl₃)處理，產生異喹啉D-4。用間氯過苯甲酸(mCPBA)使D-4發生氧化，產生D-5，其可藉由適當試劑(諸如POCl₃)處理而發生氯化。接著以類似於針對方法B 所述的方式處理氯化物D-6，以產生D-9。

結構(I)之化合物(例如化合物E-9)之其他實施例可根據通用反應流程5(「方法E」)製備，其中R¹、R²、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。如通用反應流程5中所示，可使可購自商業來源或經由熟知程序製備的苯胺E-1與2-(乙氧基亞甲基)丙二酸二乙酯反應而產生E-2。E-2接著可藉由在適當高沸點溶劑(例如Ph₂O)中加熱而發生環化以產生喹諾酮E-3。使E-3發生皂化，隨後脫除羧基，分別產生E-4及E-5。接著以類似於針對方法B所述的方式處理E-5，以產生E-9。

通用反應流程6

結構(I)之化合物(例如化合物F-6)之其他實施例可根據通用反應流程6(「方法F」)製備，其中R¹、R²、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。如通用反應流程6中所示，藉由脲處理而使A-1發生環化而變為喹唑啉二酮F-1。藉由POCl₃處理而使F-1發生氯化，隨後與經保護之雜環反應，分別產生F-2及F-3。藉由G-3與LG-R6之S_NAr反應而安裝R⁶取代基，其中LG為適當離去基。舉例而言，在R⁶為氰基或烷氧基的情況下，LG為鈉或另起適當作用。接著可使用上文關於方法B所述之通用程序產生F-6。

通用反應流程7

結構(I)之化合物(例如化合物G-4)之其他實施例可根據通用反應流程7(「方法G」)製備，其中R¹、R²、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。如通用反應流程7中所示，在鈴木條件下處理苯胺E-1以安裝R-1取代基。G-1接著在具有經適當取代之不飽和酯的甲苯中加熱以產生G-2。藉由在高沸點溶劑(例如Ph₂O)中加熱適量時間來使G-2達成環化而變為羥基喹啉G-3。接著依循方法A中所概述之通用程序，產生G-4。

結構(I)之化合物(例如化合物H-3)之其他實施例可根據通用反應流程8(「方法H」)製備，其中R¹、R²、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。參看通用反應流程8，噻吩并嘧啶H-1可根據熟知程序製備或購自商業來源。H-1在鹼性條件下用經適當保護之雜環處理以產生H-2。接著脫除保護基，隨後根據上文所述之程序進行醯化或硫醯化，產生H-3。

結構(I)之化合物(例如化合物I-4)之其他實施例可根據通用反應流程9(「方法I」)製備，其中R¹、R²、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。參看通用反應流程9，喹唑啉I-1可根據熟知程序製備或購自商業來源。I-1在鹼性條件下用經適當保護之雜環處理以產生I-2。I-2與適當試劑發生鈴木反應以安裝R¹部分，產生I-3。接著將I-3脫除保護基且根據上文所述之程序進行醯化(或硫醯化)以產生I-4。

結構(I)之化合物(例如化合物J-6)之其他實施例可根據通用反應流程10(「方法J」)製備，其中R¹、R²、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。參看通用反應流程10，比咯并嘧啶酮J-1可根據熟知程序製備或購自商業來源。用適當試劑(例如POCl₃)使J-1發生氯化以產生J-2，接著用適當試劑(諸如N-碘丁二醯亞胺(NIS))進行碘化以產生J-3。對J-3進行保護，隨後進行鈴木反應以產生J-5。接著根據上文所述之程序處理J-5以產生J-6。

結構(I)之化合物(例如化合物K-5)之其他實施例可根據通用反應流程11(「方法K」)製備，其中R¹、R²、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。參看通用反應流程11，喹唑啉K-1可根據熟知程序製備或購自商業來源。K-1與適當酯在鹼性條件下反應而形成必需的碳碳鍵。接著將K-2脫除羧基以產生K-3。接著如上述流程中所述進行鈴木反應、脫除保護基及醯化或硫醯化以產生K-5。

通用反應流程12

結構(I)之化合物(例如化合物L-2)之其他實施例可根據通用反應流程12(「方法L」)製備，其中R¹、R²、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。特定言之，其中R¹為N-雜環的化合物可根據方法L有效製備。參看通用反應流程12，化合物B-3根據方法B製備且在布赫瓦爾德條件(Buchwald conditions)下處理(其中R¹-H為N-雜環或烷基胺基)以產生L-1。布赫瓦爾德反應方法在此項技術中熟知。接著根據上述通用程序將L-1轉化成L-2。

結構(I)之化合物(例如化合物M-3)之其他實施例可根據通用反應流程13(「方法M」)製備，其中R¹、R²、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁶、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。參看通用反應流程13，化合物A-1與適當腈(R6CN)反應而形成化合物M-1。就此而言，R⁶可為本文所述之R⁶部分中的任一者，例如烷基。藉由與適當試劑(諸如亞硫醯氯)反應而使M-1發生氯化。接著根據本文中概述的通用程序(例如通用反應流程2之程序)製備化合物M-3。

結構(I)之化合物(例如化合物N-7)之實施例可根據通用反應流程14(「方法N」)製備，其中R¹、R²、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。如通用反應流程14中所示，結構N-1之化合物可購自商業來源或根據一般技術者熟悉的方法製備。使化合物N-1與甲基腈反應而形成化合物N-2。使N-2與亞硝酸鈉在酸性條件下反應，產生結構N-3之

啉。使N-3在適當條件(例如SOCl₂、POCl₃/PCl₅或POCl₃)下發生氯化，以產生氯

啉N-4。使N-4與經適當保護之雜環在鹼性條件下反應產生N-5。適當保護基團包括如通用反應流程1中所描繪的丁氧羰基(BOC)，以及此項技術中已知的其他保護基團。使N-5與適當試劑發生鈴木反應以安裝R¹部分，產生N-6。脫除N-6之保護基，隨後使用醯氯(或磺醯氯)或酸及適當活化試劑進行醯化，產生N-7。

通用反應流程15

結構(I)之化合物(例如化合物O-11)之實施例可根據通用反應流程15(「方法O」)製備，其中R¹、R^2b、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。如通用反應流程15中所示，結構O-1之化合物可購自商業來源或根據一般技術者熟悉的方法製備。化合物O-1經還原而形成化合物O-2。使O-2與2,2,2-三氯乙烷-1,1-二醇在酸性條件下發生反應，接著與羥胺鹽酸鹽反應，產生O-3。使O-3在酸存在下環化而產生O-4。使O-4在H₂O₂存在下、在鹼性條件下反應而產生O-5。使用N-氯丁二醯亞胺使O-5發生氯化而產生O-6。使O-6與甲醯胺或其他適合試劑(諸如甲脒乙酸酯或原甲酸三甲酯)發生反應，產生喹唑啉-4(3H)-酮O-7。使O-7在適當條件(例如SOCl₂、POCl₃/PCl₅或POCl₃)下發生氯化，以產生氯喹唑啉O-8。使O-8與經適當保護之雜環在鹼性條件下反應產生O-9。適當保護基團包括如通用反應流程1中所描繪的丁氧羰基(BOC)，以及此項技術中已知的其他保護基團。使O-9與適當試劑發生鈴木反應以安裝R¹部分，產生O-10。脫除O-10之保護基，隨後使用醯氯(或磺醯氯)或酸及適當活化試劑進行醯化，產生O-11。

結構(I)之化合物(例如化合物P-10)之實施例可根據通用反應流程16(「方法P」)製備，其中R¹、R^2b、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。如通用反應流程16中所示，使用N-氯丁二醯亞胺使化合物O-2發生氯化以產生P-1。使P-1與2-(乙氧基亞甲基)丙二酸二乙酯發生反應，產生P-2。P-2接著藉由在適當高沸點溶劑(例如Ph₂O)中加熱而發生環化以產生喹諾酮P-3。使P-3在適當條件(例如SOCl₂、POCl₃/PCl₅或POCl₃)下發生氯化以產生氯喹諾酮P-4。使P-4與經適當保護之雜環在鹼性條件下反應產生P-5。適當保護基團包括如通用反應流程1中所描繪的丁氧羰基(BOC)，以及此項技術中已知的其他保護基團。使P-5發生皂化，隨後進行醯胺化，分別產生P-6及P-7。使P-7與適當試劑發生鈴木反應以安裝R¹部分，產生P-8。脫除P-8之保護基，隨後使用醯氯(或磺醯氯)或酸及適當活化試劑進行醯化，產生P-9。使P-9在酸存在下反應，產生P-10。

結構(I)之化合物(例如化合物Q-2)之實施例可根據通用反應流程16(「方法Q」)製備，其中R¹、R^2b、R^3a、R^3b、R^4a、R^4b、R⁹、R¹⁰、Q、m¹及m²如上文所定義。如通用反應流程17中所示，將化合物O-9脫除保護基，隨後使用醯氯(或磺醯氯)或酸及適當活化試劑進行醯化，產生Q-1。使Q-1與適當試劑發生鈴木反應以安裝R¹部分，產生Q-2。

熟習此項技術者將認識到，可對上述流程進行某些修改以製備結構(I)之化合物的不同實施例。舉例而言，為了易於說明，上述流程中大部分描繪其中L¹為一鍵之結構(I)之化合物的製備。然而，一般技術者將容易認識到，其中L¹為NR⁷的化合物可藉由用具有以下結構之雜環取代來製備(參見例如方法C)：

其中R為H、保護基或C₁-C₆烷基。

2. 結構(II)之化合物

在其他實施例中，與一或多種其他治療劑組合使用的化合物具有以下結構(II)：

或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體、立體異構體或前藥，其中：R¹為芳基或雜芳基；R^30a及R^30b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^30a與R^30b連接而形成碳環或雜環；或R^30a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^30b與R^31b連接而形成碳環或雜環；R^31a及R^31b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^31a與R^31b連接而形成碳環或雜環；或R^31a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基且R^31b與R^30b連接而形成碳環或雜環；R^32a及R^32b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^32a與R^32b連接而形成碳環或雜環；或R^32a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^32b與R^33b連接而形成碳環或雜環；R^33a及R^33b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^33a與R^33b連接而形成碳環或雜環；或R^33a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^33b與R^32b連接而形成碳環或雜環；L¹為羰基、-NHC(=O)-、伸烷基、伸烯基、伸雜烷基、伸雜環烷基、伸雜芳基、伸烷基羰基、伸烯基羰基、伸雜烷基羰基、伸雜環烷基羰基或伸雜芳基羰基；L²為一鍵或伸烷基；G¹、G²、G³及G⁴各自獨立地為N或CR，其中R為H、氰基、鹵基或C₁-C₆烷基；n¹、n²、n³及n⁴各自獨立地為1、2或3；及E為能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處之半胱胺酸殘基形成共價鍵的親電子部分。

在結構II之化合物的一些實施例中，L¹為羰基、-NHC(=O)-、伸烷基、伸雜烷基、伸烷基羰基或伸雜烷基羰基。

在一些其他實施例中，化合物具有以下結構(IIa)：

其中：L^1a為一鍵、-NH-、伸烷基、伸烯基、伸雜烷基、伸雜環烷基或伸雜芳基。

在化合物(IIa)之其他實施例中，L^1a為一鍵、-NH-、伸烷基或伸雜烷基。

在一些更多實施例中，化合物具有以下結構(IIb)：

其中：Q為-C(=O)-、-NR³⁴C(=O)-、-S(=O)₂-或-NR³⁴S(=O)₂-；R³⁴為H、C₁-C₆烷基或羥基烷基；

為碳碳雙鍵或碳碳參鍵；及當

為雙鍵時，R³⁵及R³⁶各自獨立地為H、氰基、C₁-C₆烷基、胺基烷基、烷胺基烷基或羥基烷基，或R³⁵與R³⁶連接而形成碳環或雜環；或當

為參鍵時，R³⁵不存在且R³⁶為、C₁-C₆烷基、胺基烷基、烷胺基烷基或羥基烷基。

在一些不同實施例中，化合物具有以下結構(IIc)、(IId)、(IIe)或(IIf)之一：

在其他實施例中，其中化合物具有以下結構(IIg)、(IIh)、(IIi)或(IIj)之一：

在一些其他實施例中，化合物具有以下結構(IIk)、(IIl)、(IIm)、(IIn)、(IIo)或(IIp)之一：

在多種其他實施例中，R¹為芳基。舉例而言，在一些實施例中，芳基為雙環，諸如稠合之雙環芳基。在一些更特定的實施例中，芳基為萘基。

在多種其他實施例中，芳基為單環。舉例而言，在一些實施例中，芳基為苯基。

在一些前述實施例中，芳基未經取代。在其他前述實施例中，芳基經一或多個取代基取代。舉例而言，在一些實施例中，取代基係選自鹵基、羥基、氰基、胺基羰基、甲醯基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷基磺醯基、C₁-C₆鹵烷基、C₃-C₈環烷基、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₆羥基烷基、C₁-C₆烷氧基烷基、C₁-C₆胺基烷基、脂族雜環基、雜芳基及芳基。

在其他實施例中，芳基取代基係選自氟、氯、溴、碘、羥基、氰基、甲基、乙基、異丙基、甲基磺醯基、甲氧基、胺基羰基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、環丁基、環丙基及苯基，其中環丙基及苯基視情況經一或多個選自C₁-C₆烷基、鹵基、羥基及氰基之取代基取代。

在一些不同實施例中，取代基係選自氟、氯、溴、碘、羥基、氰基、甲基、乙基、甲基磺醯基、甲氧基、胺基羰基、三氟甲基、環丙基及苯基，其中環丙基及苯基視情況經一或多個選自鹵基、羥基及氰基之取代基取代。

在其他例示性實施例中，芳基取代基係選自氟、氯、溴、碘基、羥基、甲基、乙基、環丁基及環丙基，其中環丙基視情況經一或多個選自C₁-C₆烷基、鹵基、羥基及氰基的取代基取代。

在一些更多實施例中，取代基係選自氟、氯、溴、碘、羥基、甲基、乙基及環丙基，其中環丙基視情況經一或多個選自鹵基、羥基及氰基的取代基取代。

在仍然更多的實施例中，取代基係選自氟、氯、溴、羥基及環丙基，其中環丙基視情況經一或多個選自C₁-C₆烷基、鹵基、羥基及氰基的取代基取代。

在一些更特定的實施例中，取代基係選自氟、氯、溴、羥基及環丙基，其中環丙基視情況經一或多個選自鹵基、羥基及氰基的取代基取代。舉例而言，在一些實施例中，環丙基包含偕位二氟取代。

在其他實施例中，R¹具有以下結構之一：

在其他實施例中，R¹具有以下結構之一：

在其他實施例中，R¹為雜芳基。舉例而言，在一些實施例中，雜芳基為雙環，諸如稠合之雙環雜芳基。

在一些更多實施例中，雜芳基為單環。

在一些前述實施例中，雜芳基包含氮、硫或其組合。舉例而言，在一些實施例中，雜芳基為二氫喹喏啉基、吲哚基、苯并咪唑基、吡啶基或噻唑基。

在一些實施例中，雜芳基為未經取代。在一些其他實施例中，雜芳基經一或多個取代基取代。在一些實施例中，取代基係選自C₁-C₆烷基、鹵基及側氧基。舉例而言，在一些實施例中，取代基係選自鹵基及側氧基。在其他實施例中，取代基係選自乙基及氯。在一些更特定的實施例中，取代基為氯。

在結構(II)之前述化合物的一些實施例中，R¹具有以下結構之一：

其中R^1a在每次出現時獨立地為H、C₁-C₆烷基或鹵基。

在各種其他實施例中，R¹具有以下結構之一：

其中R^1a在每次出現時獨立地為H或鹵基。

在結構(II)之其他實施例中，R¹具有以下結構之一：

在一些實施例中，Q為-C(=O)-。在一些其他實施例中，Q為-S(=O)₂-。在其他實施例中，Q為-NR³⁴C(=O)-。在仍然更多個其他實施例中，Q為-NR³⁴S(=O)₂-。

在一些更特定的實施例中，R³⁴為H。舉例而言，在一些實施例中，R³⁴為羥基烷基，諸如2-羥基烷基。

在其他前述實施例中，R³⁵或R³⁶中之至少一者為H。舉例而言，在一些實施例中，R³⁵及R³⁶之檢索為H。

在各種其他實施例中，R³⁶為烷胺基烷基。舉例而言，在一些實施例中，R³⁶具有以下結構：

在一些不同實施例中，R³⁶為羥基烷基，例如2-羥基烷基。

在各種其他實施例中，R³⁵與R³⁶連接而形成環。在一些此等實施例中，環為環戊烯、環己烯或苯環。

在其他前述實施例中，E具有以下結構之一：

在一些實施例中，E為

在一些更多的前述實施例中，L¹為伸雜烷基。在一些更多的實施例中，伸雜烷基未經取代。在一些不同實施例中，伸雜烷基經取代。

在各種其他實施例中，L¹為胺基伸烷基。舉例而言，在一些實施例中，L¹為-CH₂CH₂NH-。

在前述其他實施例中，L¹為伸雜環烷基或伸雜芳基。在一些實施例中，伸雜環烷基或伸雜芳基未經取代。在其他實施例中，伸雜環烷基或伸雜芳基經取代。在一些其他實施例中，L¹具有以下結構之一：

在一些不同實施例中，L^1a為一鍵。

在一些實施例中，L^1a為伸烷基、伸烯基、伸雜烷基或伸雜環烷基。在一些其他實施例中，L^1a為伸烷基或伸雜烷基。在一些此等實施例中，L^1a為經取代之伸烷基。在各種其他實施例中，L^1a為未經取代之伸烷基。在一些實施例中，L^1a為

或

在一些不同實施例中，L^1a為經取代之伸雜烷基。在一些其他實施例中，L^1a為未經取代之伸雜烷基。在一些前述實施例中，L^1a為胺基伸烷基或硫代伸烷基，例如胺基伸烷基。舉例而言，在一些實施例中，L^1a具有以下結構之一：

在一些實施例中，L^1a為

在其他實施例中，L^1a為經取代之伸烯基。在不同實施例中，L^1a為未經取代之伸烯基。在一些更特定實施例中，L^1a具有以下結構：

在其他實施例中，L^1a為經取代之伸雜環烷基。在一些其他實施例中，L^1a為未經取代之伸雜環烷基。舉例而言，在一些實施例中，L^1a具有以下結構：

在一些前述實施例中，L²為一鍵。

在各種其他實施例中，L²為經取代之伸烷基。在其他實施例中，L²為未經取代之伸烷基。

在結構(II)之前述化合物中任一者之各種實施例中：R^30a及R^30b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基； R^31a及R^31b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；R^32a及R^32b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；及R^33a及R^33b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基。

在其他實施例中，R^30a、R^30b、R^31a、R^31b、R^32a、R^32b、R^33a及R^33b係選自H、C₁-C₆烷基、羥基烷基、氰基、氰基烷基及胺基羰基，例如H、C₁-C₆烷基、羥基烷基、氰基及胺基羰基，或在其他實施例中，選自H、C₁-C₆烷基及羥基烷基。

在一些前述實施例中，R^30a、R^30b、R^31a、R^31b、R^32a、R^32b、R^33a或R^33b中之至少一者為H。舉例而言，在一些實施例中，R^30a、R^30b、R^31a、R^31b、R^32a、R^32b、R^33a或R^33b中之每一者為H。

在一些其他前述實施例中，R^30a、R^30b、R^31a、R^31b、R^32a、R^32b、R^33a或R^33b中之至少一者為羥基烷基。

在其他前述實施例中，R^30a、R^30b、R^31a、R^31b、R^32a、R^32b、R^33a或R^33b中之至少一者為氰基。

在化合物(II)之更多前述實施例中，R^30a、R^30b、R^31a、R^31b、R^32a、R^32b、R^33a或R^33b中之至少一者為胺基羰基。

在其他實施例中，R^30a、R^30b、R^31a、R^31b、R^32a、R^32b、R^33a或R^33b中之至少一者為C₁-C₆烷基。

在一些實施例中，R^30a與R^30b連接而形成碳環或雜環。在不同實施例中，R^31a與R^31b連接而形成碳環或雜環。在更多實施例中，R^32a與 R^32b連接而形成碳環或雜環。在其他實施例中，R^33a與R^33b連接而形成碳環或雜環。

在甚至其他實施例中，R^30a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基且R^30b與R^31b連接而形成碳環或雜環。

在更多實施例中，R^31a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基且R^31b與R^30b連接而形成碳環或雜環。

在其他實施例中，R^32a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基且R^32b與R^33b連接而形成碳環或雜環。

在仍然更多的實施例中，R^33a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基且R^33b與R^32b連接而形成碳環或雜環。

在一些其他實施例中，該化合物係選自表2中之化合物。

結構II之化合物係根據一般技術者熟知或可推導出的程序製備，例如藉由類似於下文所提供之實例中說明的程序。表2a中之各種化合物以此方式製備且藉由質譜及/或¹H NMR分析。發現質譜([M+H⁺]或[M+Na⁺])及/或NMR譜符合表2a中之結構。表2a中之化合物的質譜資料提供於表2b中。

*[M+Na]⁺

+[M-H]^-

通用反應流程18說明製備結構(II)之化合物的例示性程序。

參看通用反應流程I，(II')及(II")獲自商業來源且/或容易地根據此項技術中已知的程序製備。(II')及(II")上的所有變數除M¹之外，均如上文所定義。在一些程序中，M¹為NH。簡言之，使經適當取代之酸(II')活化且與經適當取代之雜環(II")在適當偶合條件下反應。L²-E部分如所說明可存在於(II")上或可在偶合之後安裝。舉例而言，L²-E可在使用諸如醯氯或亞硫醯氯之試劑、經由醯化(或硫醯化)發生偶合之前或之後安裝。

應注意上述程序可存在變化形式，其中一些舉例說明於實例中。舉例而言，在一些程序中，(II")為單環且第二環狀部分在偶合步驟之後添加。在其他程序中，酸部分存在於環狀部分(II")上且R¹適當地經親核性部分取代以能夠發生偶合而形成(IIa)。

一般技術者可利用各種其他選項來添加各種取代基且/或修改或重排上述步驟以達成結構II之化合物之實施例。亦應注意，(II')及/或(II")上的各種取代可在偶合步驟期間存在(以經保護或無保護之形式)或可在(II')與(II")偶合之後添加取代基。此等取代基之包含方法在此項技術中已知。

應瞭解，雖然上文提供製備(IIa)的例示性程序，但結構(II)之其他化合物可藉由類似方法製備。舉例而言，(IIa)之羰基可經還原而形成結構(II)之化合物，其中L¹不包含羰基。其中L¹為伸雜環烷基或伸雜芳基的實施例可利用類似方法製備，例如使用布赫瓦爾德化學技術(Buchwald chemistry)以包括伸雜環烷基或伸雜芳基部分。用於製備結構(II)之不同化合物的其他方法在此項技術中已知。

簡言之，使經適當取代之酸與經適當取代之雜環在醯胺偶合條件下反應。使用諸如醯氯或亞硫醯氯之試劑進行醯化(或硫醯化)，產生結構(II)之化合物。一般技術者可利用各種選項來添加各種取代基且/或修改或重排上述步驟以達成結構II之化合物之不同實施例。適當酸可市購或根據熟知程序製備。

3. 結構(III)之化合物

在其他實施例中，與一或多種其他治療劑組合使用的化合物具有以下結構(III)：

或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體、立體異構體或前藥，其中：A為CR^37b、N或NR^38a；B為CR^37c、N、NR^38b或S C為CR^37d、N、NR^38c或S G³及G⁴各自獨立地為N或CR，其中R為H、氰基、鹵基或C₁-C₆烷基；L^1a為一鍵、-NH-、伸烷基或伸雜烷基L²為一鍵或伸烷基； R^32a及R^32b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^32a與R^32b連接而形成碳環或雜環；或R^32a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^32b與R^33b連接而形成碳環或雜環；R^33a及R^33b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^33a與R^33b連接而形成碳環或雜環；或R^33a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^33b與R^32b連接而形成碳環或雜環；R^37a、R^37b、R^37c、R^37d及R^37e各自獨立地為H、鹵基、側氧基、羥基、氰基、胺基羰基、甲醯基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷基磺醯基、C₁-C₆鹵烷基、C₃-C₈環烷基、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₆羥基烷基、C₁-C₆烷氧基烷基、C₁-C₆胺基烷基、雜環基或芳基；R^38a、R^38b及R^38c各自獨立地為H、C₁-C₆烷基或芳基；n³及n⁴各自獨立地為1、2或3m為0或1；

為單鍵或雙鍵以便滿足所有價數；及E為能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處之半胱胺酸殘基形成共價鍵的親電子部分。

在各種其他實施例中，化合物具有以下結構(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(IIId)、(IIIe)、(IIIf)或(IIIg)之一：

在一些不同實施例中，化合物具有以下結構(IIIa')、(IIIb')、(IIIc')、(IIId')、(IIIe')、(IIIf')或(IIIg')之一：

為碳碳雙鍵或碳碳參鍵；及當

為雙鍵時，R³⁵及R³⁶各自獨立地為H、氰基、C₁-C₆烷基、胺基烷基、烷胺基烷基或羥基烷基或R³⁵與R³⁶連接而形成碳環或雜環；或當

為參鍵時，R³⁵不存在且R³⁶為H、C₁-C₆烷基、胺基烷基、烷胺基烷基或羥基烷基。

在結構(III)及其子結構之前述化合物的一些特定實施例中，R^37a為鹵基、芳基或雜芳基。在其他此類實施例中，R³⁵及R³⁶各自為H。

在各種其他實施例中，G³為N且G⁴為CR，例如CH。

在一些不同實施例中，G³為CR，例如CH，且G⁴為N。

在其他實施例中，G³為N且G⁴為N。

在各種其他實施例中，n³為2且n⁴為2。在其他實施例中，n³為1且n⁴為1。在一些更多實施例中，n³為2且n⁴為1。

在其他前述實施例中，R^37a、R^37b、R^37c、R^37d及R^37e各自獨立地為H、-OH、鹵基、側氧基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、雜環基或芳基。

在其他實施例中，R^37a、R^37b、R^37c、R^37d及R^37e各自獨立地為H、-OH、氟、氯、溴、碘、側氧基、甲基、甲氧基、雜芳基或芳基。

在一些實施例中，R^37a或R^37e為芳基。在一些更特定實施例中，R^37a為芳基，諸如苯基。

在一些不同實施例中，芳基未經取代。在一些其他實施例中，芳基經取代。舉例而言，在一些實施例中，芳基經一或多個鹵基取代基取代。在一些此等實施例中，鹵基取代基係選自氟及氯。

在其他實施例中，R^37a為雜芳基。在一些此等實施例中，雜芳基未經取代。在各種其他實施例中，雜芳基經取代。在一些更多實施例中，雜芳基包含氮、硫或其組合。

在一些更特定實施例中，雜芳基為噻吩基。

在其他前述實施例中，R^37a為鹵基。舉例而言，在一些實施例中，鹵基為氯、溴或碘。

在一些實施例中，R^37a或R^37e具有以下結構之一：

在其他實施例中，R^37a具有以下結構之一：

在各種不同實施例中，R^38a、R^38b及R^38c各自獨立地為H或芳基。在其他實施例中，R^38a、R^38b及R^38c各自獨立地為H。

在一些其他不同實施例中，R^38c為芳基。舉例而言，在一些實施例中，芳基經一或多個鹵基取代基取代。在一些此等實施例中，鹵基為氯。

在結構(III)之化合物的一些其他實施例中，Q為-C(=O)-。在一些其他實施例中，Q為-S(=O)₂-。在其他實施例中，Q為-NR³⁴C(=O)-。在仍然更多個其他實施例中，Q為-NR³⁴S(=O)₂-。

在一些不同實施例中，R³⁶為羥基烷基，例如2-羥基烷基。

在其他前述實施例中，E具有以下結構之一：

在一些實施例中，E為

在一些不同實施例中，L^1a為一鍵。

在一些實施例中，L^1a為伸烷基、伸烯基、伸雜烷基或伸雜環烷基。在一些其他實施例中，L^1a為伸烷基或伸雜烷基。在一些此等實施例中，L^1a為經取代之伸烷基。在各種其他實施例中，L^1a為未經取代之伸烷基。舉例而言，在一些實施例中，L^1a為

或

在其他實施例中，L^1a為

在一些前述實施例中，L²為一鍵。

在結構(III)之前述化合物中任一者之一些實施例中：R^32a及R^32b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；及R^33a及R^33b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基。

在其他實施例中，R^32a、R^32b、R^33a或R^33b係選自H、C₁-C₅烷基、羥基烷基、氰基、氰基烷基及胺基羰基，例如H、羥基烷基及氰基。

在其他前述實施例中，R^32a、R^32b、R^33a或R^33b中之至少一者為H。舉例而言，在一些實施例中，R^32a、R^32b、R^33a或R^33b中之每一者為H。

在其他前述實施例中，R^32a、R^32b、R^33a或R^33b中之至少一者為羥基烷基。

在其他實施例中，R^32a、R^32b、R^33a或R^33b中之至少一者為氰基。

在一些其他不同實施例中，R^32a、R^32b、R^33a或R^33b中之至少一者為胺基羰基。

在一些實施例中，R^32a與R^32b連接而形成碳環或雜環。在其他實施例中，R^33a與R^33b連接而形成碳環或雜環。

在不同實施例中，R^32a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基且R^32b與R^33b連接而形成碳環或雜環。

在其他實施例中，R^33a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基且R^33b與R^32b連接而形成碳環或雜環。

在一些更特定實施例中，結構(III)之化合物係選自表3中之化合物。

*[M+Na]⁺

+[M-H]^-

#[M]

結構III之化合物係根據一般技術者熟知或可推導出的程序製備，例如藉由類似於下文所提供之實例中說明的程序。表3中之各種化合物以此方式製備且藉由質譜及/或¹H NMR分析。發現質譜([M+H⁺]或[M+Na⁺])及/或NMR譜符合表3中之結構。

通用反應流程19說明製備結構(III)之化合物的例示性程序。

參看通用反應流程19，(III')及(III")獲自商業來源且/或容易地根據此項技術中已知的程序製備。(III')及(III")上的所有變數除M¹及M²之外，均如上文針對結構(III)之化合物所定義。在一些程序中，M¹為NH且M²不存在。在其他程序中，M¹為N或CH且M²為與活化酸反應之L^1a的前驅物。舉例而言，在各種程序中，M²為NH₂、胺基烷基或其他雜取代烷基。亦涵蓋其中M²包含碳陰離子(或M¹為碳陰離子)的實施例，使得L¹為伸烷基。簡言之，使經適當取代之酸(III')活化且與經適當取代之雜環(III")在適當偶合條件下反應。L²-E部分可如所說明存在於(III")中或可在偶合之後安裝。舉例而言，L²-E可在使用諸如醯氯或亞硫醯氯之試劑經由醯化(或硫醯化)發生偶合之前或之後安裝。

應注意上述程序可存在變化形式，其中一些舉例說明於實例中。舉例而言，在一些程序中，酸部分存在於環狀部分(III')上且(III')適當地經親核性部分取代以能夠偶合而形成(III)。不需要活化酸發生反應的其他鍵形成方法亦可用於製備化合物。亦應注意，(III')及/或(III")上的各種取代可在偶合步驟期間存在(以經保護或無保護之形式)或可在(III')與(III")偶合之後添加取代基。此等取代基之包含方法在此項技術中已知。

一般技術者可利用各種其他選項來添加各種取代基且/或修改或重排上述步驟以達成結構III之化合物之實施例。適當酸可市購或根據熟知程序製備。

熟習此項技術者亦將瞭解，在本文所述之方法(例如通用反應流程I及II及下文實例)中，中間化合物之官能基可能需要藉由適合保護基團保護。此類官能團包括羥基、胺基、巰基及羧酸。適用於羥基之保護基包括三烷基矽烷基或二芳基烷基矽烷基(例如第三丁基二甲基矽烷基、第三丁基二苯基矽烷基或三甲基矽烷基)、四氫哌喃基、苯甲基及其類似基團。適用於胺基、甲脒基及胍基的保護基包括第三丁氧羰基、苯甲氧羰基及其類似保護基團。適用於巰基的保護基包括-C(O)-R"(其中R"為烷基、芳基或芳基烷基)、對甲氧基苯甲基、三苯甲基及其類似基團。適用於羧酸的保護基包括烷基、芳基或芳基烷基酯。保護基團可根據熟習此項技術者已知的標準技術及如本文所述添加或移除。保護基團之用途詳細描述於Green,T.W.及P.G.M.Wutz,Protective Groups in Organic Synthesis(1999)，第3版，Wiley。如熟習此項技術者將瞭解，保護基亦可為聚合物樹脂，如王樹脂(Wang resin)、林克樹脂(Rink resin)或2-氯三苯甲基氯化物樹脂。

亦應瞭解，熟習此項技術者能夠藉由類似方法或藉由將熟習此項技術者已知的其他方法組合來製造此等化合物。進一步瞭解，熟習此項技術者能夠以與下文所述類似的方式，藉由使用適當起始組分且根據需要修改合成參數來製造下文未特定說明其他本發明化合物。一般而言，起始組分可獲自諸如以下來源：Sigma Aldrich,Lancaster Synthesis,Inc.,Maybridge,Matrix Scientific,TCI,and Fluorochem USA等，或根據熟習此項技術者已知之來源合成(參見例如Advanced Organic Chemistry：Reactions,Mechanisms,and Structure，第5版(Wiley,2000年12月))或如本發明中所述製備。

在一些其他實施例中，化合物具有以下結構之一：

C.醫藥組合物

其他實施例係關於醫藥組合物。醫藥組合物包含前述化合物之任一者(或多者)、前述添加治療劑中之任一者及醫藥學上可接受之載劑。在一些實施例中，醫藥組合物經調配以經口投與。在其他實施例中，醫藥組合物經調配以便注射。

適合之投藥途徑包括(但不限於)經口、靜脈內、直腸、氣溶膠、非經腸、眼科、肺部、經黏膜、經皮、陰道、眼、鼻及局部投藥。另外，僅舉例而言，非經腸遞送包括肌肉內、皮下、靜脈內、髓內注射以及鞘內、直接室內、腹膜內、淋巴管內及鼻內注射。

在某些實施例中，如本文所述的化合物及/或其他治療劑係以局部而非全身性方式投與，例如經由將化合物及/或其他治療劑(往往呈儲槽式製劑或持續釋放調配物形式)直接注射至器官內。在特定實施例中，長效調配物藉由植入(例如皮下或肌肉內)或藉由肌肉內注射投與。此外，在其他實施例中，化合物及其他治療劑係以靶向藥物遞送系統(例如經器官特異性抗體塗佈之脂質體)遞送。在此類實施例中，脂質體靶向器官且被器官選擇性吸收。在其他實施例中，化合物及/或其他治療劑係以快速釋放調配物形式、緩釋調配物形式或中間釋放調配物形式提供。在其他實施例中，本文所述之化合物及/或其他治療劑係局部投與。

根據本發明的化合物及其他治療劑在寬劑量範圍內為有效的。舉例而言，治療成人時，每天0.01至1000mg、0.5至100mg、1至50mg之劑量及每天5至40mg之劑量為一些實施例中所用之劑量實例。例示性劑量為每天10至30mg。確切劑量將視以下而定：投藥途徑、其中化合物及其他治療劑所投與之形式、所治療之個體、所治療之個體之體重，及主治醫師之偏好及經驗。

在一些實施例中，化合物及/或其他治療劑以單一劑量投與。典型地，此類投藥將藉由注射進行，例如靜脈內注射，以便快速引入藥劑。然而，適當時使用其他途徑。單一劑量之本發明化合物及/或其他治療劑亦可用於治療急性病狀。

在一些實施例中，本發明之化合物及/或其他治療劑以多次劑量投與。在一些實施例中，，每天給藥約一次、兩次、三次、四次、五次、六次或超過六次。在其他實施例中，給藥為約一月一次、每兩週一次、一週一次或每隔一天一次。在另一個實施例中，化合物與其他治療劑一起投與，每天約每天一次至約6次。在另一個實施例中，化合物與其他治療劑之投藥持續少於約7天。在又另一個實施例中，投藥持續超過約6天、10天、14天、28天、兩個月、六個月或一年。在一些情況下，達成且維持連續給藥，只要需要。

可繼續投與化合物與其他治療劑，只要需要。在一些實施例中，化合物及/或其他治療劑投與超過1、2、3、4、5、6、7、14或28天。在一些實施例中，化合物及其他治療劑投與少於28、14、7、6、5、4、3、2或1天。在一些實施例中，化合物及其他治療劑長期持續投與，例如用於治療慢性效應。

在一些實施例中，化合物及/或其他治療劑係依劑量投與。此項技術中已知由於個體間在化合物藥物動力學上的變化性，因此最佳療法需要給藥方案之個性化。本發明化合物之給予可藉由常規實驗、根據本發明發現。

在一些實施例中，本文所述之化合物及/或其他治療劑調配成醫藥組合物。在特定實施例中，醫藥組合物係使用一或多種生理學上可接受之載劑、以習知方式調配，該等載劑包含促進活性化合物加工成醫藥學上可使用之製劑的賦形劑及助劑。適當調配物視所選投藥途徑而定。任何醫藥學上可接受之技術、載劑及賦形劑適用於調配本文所述之醫藥組合物：Remington：The Science and Practice of Pharmacy,第19版(Easton,Pa.：Mack Publishing Company,1995)；Hoover,John E.,Remington's Pharmaceutical Sciences,Mack Publishing Co.,Easton,Pennsylvania 1975；Liberman,H.A.及Lachman,L.，編，Pharmaceutical Dosage Forms,Marcel Decker,New York,N.Y.,1980；及Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems，第17版(Lippincott Williams & Wilkins1999)。

如本文所用，醫藥組合物係指化合物及/或其他治療劑與其他化學組分(諸如載劑、穩定劑、稀釋劑、分散劑、懸浮劑、增稠劑及/或賦形劑)之混合物。在某些實施例中，醫藥組合物促進化合物投與生物體。在一些實施例中，實施本文提供之治療或使用方法，將治療有效量之本文所提供化合物及/或其他治療劑之化合物以醫藥組合物形式投與患有所治療之疾病、病症或醫學病狀的個體。在特定實施例中，個體為人類。在一些實施例中，治療有效量視以下而變：疾病之嚴重程度、個體之年齡及相對健康狀況、所用化合物之效能及其他因素。

在一個實施例中，化合物及/或其他治療劑調配成水溶液。在特定實施例中，水溶液係選自(僅舉例而言)生理學上相容性緩衝液，諸如漢克氏溶液(Hank's solution)、林格氏溶液(Ringer's solution)或生理學鹽水緩衝液。在其他實施例中，化合物及/或其他治療劑經調配以便經黏膜投與。在特定實施例中，經黏膜調配物包括適於滲透障壁的滲透劑。在其中本文所述之化合物及/或其他治療劑調配成其他非經腸注射劑的其他實施例中，適當調配物包括水溶液或非水溶液。在特定實施例中，此類溶液包括生理學上相容性緩衝劑及/或賦形劑。

在另一個實施例中，本文所述之化合物及/或其他治療劑經調配以便經口投與。本文所述之化合物及/或其他治療劑係藉由將各組分與例如醫藥學上可接受之載劑或賦形劑合併來調配。在各種實施例中，本文所述之化合物及/或其他治療劑調配成口服劑型，包括(僅舉例而言)錠劑、散劑、丸劑、糖衣藥丸、膠囊、液體、凝膠、糖漿、酏劑、漿液、懸浮液及其類似劑型。

在某些實施例中，口服使用的醫藥製劑如下獲得；將一或多種固體賦形劑與本文所述之化合物及/或其他治療劑混合，視情況研磨所得混合物，且必要時添加適合助劑之後，加工顆粒混合物，以獲得錠劑或糖衣藥丸核心。詳言之，適合賦形劑為填充劑，諸如糖(包括乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨糖醇)；纖維素製劑，諸如：玉米澱粉、小麥澱粉、稻穀澱粉、馬鈴薯澱粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、微晶纖維素、羥基丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉；或其他賦形劑，諸如：聚乙烯吡咯啶酮(PVP或聚維酮(povidone))或磷酸鈣。在特定實施例中，視情況添加崩解劑。崩解劑包括(僅舉例而言)交聯交聯羧甲纖維素鈉、聚乙烯吡咯啶酮、瓊脂，或海藻酸或其鹽，諸如海藻酸鈉。

在一個實施例中，諸如糖衣藥丸核心及錠劑之劑型具有一或多層適合包衣。在特定實施例中，使用濃縮的糖類溶液包覆劑型。糖類溶液視情況含有其他組分，諸如(僅舉例而言)阿拉伯膠(gum arabic)、滑石、聚乙烯吡咯啶酮、卡波莫凝膠(carbopol gel)、聚乙二醇及/或二氧化鈦、漆溶液及適合有機溶劑或溶劑混合物。染料及/或顏料亦視情況添加至塗料中用於鑑別目的。另外，視情況使用染料及/或顏料表徵活性化合物劑量之不同組合。

在某些實施例中，將治療有效量之本文所述之化合物及/或其他治療劑調配成其他口服劑型。口服劑型包括由明膠製成的配合插入式膠囊，以及由明膠及塑化劑(諸如甘油或山梨糖醇)製成的軟密封膠囊。在特定實施例中，配合插入式膠囊含有活性成分與一或多種填充劑的混合物。填充劑包括(僅舉例而言)乳糖、黏合劑(諸如澱粉)及/或潤滑劑(諸如滑石或硬脂酸鎂)及視情況存在之穩定劑。在其他實施例中，軟膠囊含有一或多種溶解或懸浮於適合液體中的活性化合物。適合液體包括(僅舉例而言)一或多種油脂、液體石蠟或液體聚乙二醇。另外，視情況添加穩定劑。

在其他實施例中，治療有效量之本文所述之化合物及/或其他治療劑經調配以便頰內或舌下投與。適於頰內或舌下投與的調配物包括(僅舉例而言)錠劑、口含錠或凝膠。在其他實施例中，本文所述之化合物及/或其他治療劑經調配以便非經腸注射，包括適於快速注射或連續輸注的調配物。在特定實施例中，用於注射的調配物係以單位劑型(例如安瓿)或以多劑量容器呈遞。視情況添加防腐劑至注射調配物中。在其他實施例中，醫藥組合物調配成適於非經腸注射的形式，如油性或水性媒劑中之無菌懸浮液、溶液或乳液。非經腸注射調配物視情況含有調配劑，諸如懸浮劑、穩定劑及/或分散劑。在特定實施例中，非經腸投與的醫藥調配物包括呈水溶性形式之化合物及/或其他治療劑之水溶液。在其他實施例中，化合物及/或其他治療劑之懸浮液適當時製備為油性注射懸浮液。適用於本文所述醫藥組合物中之親脂性溶劑或媒劑包括(僅舉例而言)油脂，諸如芝麻油，或合成脂肪酸酯，諸如油酸乙酯或甘油三酯，或脂質體。在某些特定實施例中，水性注射懸浮液含有使懸浮液之黏度提高的物質，諸如羧甲基纖維素鈉、山梨糖醇或聚葡萄糖。視情況，懸浮液含有提高化合物及/或其他治療劑之溶解度以便製備高度濃縮溶液的適合穩定劑或藥劑。或者，在其他實施例中，活性成分呈粉末形式，其在使用之前用適合媒劑(例如無菌無熱原質水)復原。

在其他實施例中，化合物及/或其他治療劑局部投與。將本文所述之化合物及/或其他治療劑調配成多種可局部投與之組合物，諸如溶液、懸浮液、洗劑、凝膠、糊劑、藥棒、香膏、乳膏或軟膏。此類醫藥組合物視情況含有增溶劑、穩定劑、張力增強劑、緩衝劑及/或防腐劑。

在其他實施例中，化合物及/或其他治療劑經調配以便經皮投與。在特定實施例中，經皮調配物係使用經皮遞送裝置及經皮遞送貼片且可為親脂性乳液或經緩衝之水溶液，可溶解及/或分散於聚合物或黏著劑中。在各種實施例中，構建此類貼片以便連續、脈衝式或按需遞送醫藥劑。在其他實施例中，化合物及/或其他治療劑之經皮遞送係藉助於離子導入貼片及其類似方式來完成。在某些實施例中，經皮貼片提供化合物及/或其他治療劑之控制遞送。在特定實施例中，吸收速率藉由使用速率控制膜或藉由將化合物截留於聚合物基質或凝膠內而減緩。在替代實施例中，使吸收增強劑增強吸收。吸收增強劑或載劑包括有助於通過皮膚的醫藥學上可接受之可吸收溶劑。舉例而言，在一個實施例中，經皮裝置呈繃帶形式，其包含襯底部件、含有化合物及視情況存在之載劑的儲集層、視情況存在之速率控制障壁以在延長時間段內以控制及預定速率將化合物遞送至宿主皮膚，及使裝置緊固於皮膚之構件。

在其他實施例中，化合物及/或其他治療劑經調配以便藉由吸入投與。適於藉由吸入投與的各種形式包括(但不限於)氣溶膠、噴霧劑或散劑。化合物及/或其他治療劑之醫藥組合物宜以加壓包或噴霧器呈遞之氣溶膠噴霧劑形式遞送，其中使用適合推進劑(例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他適合氣體)。在特定實施例中，加壓氣溶膠之單位劑量係藉由提供遞送定量之閥來確定。在某些實施例中，用於吸入器或吹入器之諸如明膠之膠囊及藥筒經調配含有化合物與適合粉末基質(諸如乳糖或澱粉)之粉末混合物。

在其他實施例中，化合物及/或其他治療劑調配成直腸組合物，諸如灌腸劑、直腸凝膠、直腸發泡體、直腸氣溶膠、栓劑、膠凍栓劑或保留灌腸劑，其含有習知栓劑基質，諸如可可脂或其他甘油酯，以及合成聚合物，諸如聚乙烯吡咯啶酮、PEG及其類似物。在組合物之栓劑形式中，首先熔融低熔點蠟，諸如(但不限於)脂肪酸甘油酯視情況與可可脂組合之混合物。

在某些實施例中，醫藥組合物係使用一或多種生理學上可接受之載劑、以任何習知方式調配，該等載劑包含促進活性化合物加工成醫藥學上可使用之製劑的賦形劑及助劑。適當調配物視所選投藥途徑而定。適合時，視情況使用醫藥學上可接受之任何技術、載劑及賦形劑。包含化合物及/或其他治療劑的醫藥組合物係以習知方式製造，諸如(僅舉例而言)藉助於習知混合、溶解、造粒、糖衣藥丸製法、水磨、乳化、囊封、截留或壓製方法。

醫藥組合物包括至少一種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑及至少在本文中描述為活性成分的化合物及/或其他治療劑。活性成分呈游離酸或游離鹼形式或呈醫藥學上可接受之鹽形式。另外，本文所述之方法及醫藥組合物包括使用N-氧化物、結晶形式(亦稱為多晶型物)以及具有相同類型活性之此等化合物的活性代謝物。本文所述之化合物及/或其他治療劑之所有互變異構體均包括於本文所呈現之化合物範疇內。另外，本文所述之化合物及/或其他治療劑涵蓋與醫藥學上可接受之溶劑(諸如水、乙醇及其類似物)所形成的非溶劑化以及溶劑化形式。本文中所呈現之化合物及/或其他治療劑之溶劑化形式亦視為本文中所揭示者。另外，醫藥組合物視情況包括其他醫學或醫藥劑、載劑、佐劑(諸如防腐劑、穩定劑、濕潤劑或乳化劑)、促溶劑、用於調節滲透壓的用於、緩衝劑，及/或治療上有價值的其他物質。

製備包含本文所述之化合物及/或其他治療劑之組合物的方法包括使用一或多種醫藥學上可接受之惰性賦形劑或載劑調配化合物及/或其他治療劑以形成固體、半固體或液體。固體組合物包括(但不限於)散劑、錠劑、分散性顆粒劑、膠囊、扁囊劑及栓劑。液體組合物包括溶解有化合物之溶液、包含化合物之乳液或含有包含如本文所揭示之化合物的脂質體、微胞或奈米粒子之溶液。半固體組合物包括(但不限於)凝膠、懸浮液及乳膏。本文所述之醫藥組合物形式包括液體溶液或懸浮液、適於溶於或懸浮於液體中之後使用的固體形式，或乳液。此等組合物亦視情況含有少量無毒助劑物質，諸如濕潤劑或乳化劑、pH緩衝劑等。

在一些實施例中，包含化合物及/或其他治療劑之醫藥組合物說明性地採取液體形式，其中藥劑存在於溶液、懸浮液或兩者中。典型地，當投與呈溶液或懸浮液形式之組合物時，藥劑之第一部分以溶液形式存在，且藥劑之第二部分以微粒形式懸浮存在於液體基質中。在一些實施例中，液體組合物包括凝膠調配物。在其他實施例中，液體組合物為水溶液。

在某些實施例中，適用的水性懸浮液含有一或多種聚合物作為懸浮劑。適用聚合物包括水溶性聚合物，諸如纖維素聚合物，例如羥丙基甲基纖維素，及水不溶性聚合物，諸如交聯含羧基聚合物。本文所述之某些醫藥組合物包含黏膜黏著性聚合物，其選自例如羧甲基纖維素、卡波姆(carbomer)(丙烯酸聚合物)、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚丙烯醯胺、聚卡波非(polycarbophil)、丙烯酸/丙烯酸丁酯共聚物、海藻酸鈉及聚葡萄糖。

適用的醫藥組合物視情況亦包括增溶劑以有助於化合物及/或其他治療劑之溶解性。術語「助溶劑」一般包括促使微胞溶液或藥劑真溶液形成的藥劑。某些可接受之非離子界面活性劑(例如聚山梨醇酯80)適用作助溶劑，眼科上可接受之二醇、聚乙二醇(例如聚乙二醇400)及二醇醚亦可用作助溶劑。

此外，適用的醫藥組合物視情況包括一或多種pH調節劑或緩衝劑，包括酸，諸如乙酸、硼酸、檸檬酸、乳酸、磷酸及鹽酸；鹼，諸如氫氧化鈉、磷酸鈉、硼酸鈉、檸檬酸鈉、乙酸鈉、乳酸鈉及參羥基甲胺基甲烷；及緩衝劑，諸如檸檬酸鹽/右旋糖、碳酸氫鈉及氯化銨。此類酸、鹼及緩衝劑以維持組合物之pH在可接受範圍內所需之量包括在內。

另外，適用組合物視情況亦包括一或多種使得組合物之滲透壓度在可接受範圍內所需之量的鹽。此類鹽包括具有鈉、鉀或銨陽離子及氯離子、檸檬酸根、抗壞血酸根、硼酸根、磷酸根、碳酸氫根、硫酸根、硫代硫酸根或亞硫酸氫根陰離子之鹽；適合鹽包括氯化鈉、氯化鉀、硫代硫酸鈉、亞硫酸氫鈉及硫酸銨。

某些適用醫藥組合物視情況包括一或多種防腐劑以抑制微生物活性。適合防腐劑包括含汞物質，諸如硝酸苯汞(merfen)及硫柳汞(thiomersal)；穩定化二氧化氯；及四級銨化合物，諸如苯紮氯銨(benzalkonium chloride)、溴化十六烷基三甲基銨及氯化十六烷基吡錠。

其他適用組合物包括一或多種界面活性劑以增強物理穩定性或用於其他目的。適合之非離子型界面活性劑包括聚氧化乙烯脂肪酸甘油酯及植物油，例如聚氧化乙烯(60)氫化蓖麻油；及聚氧化乙烯烷基醚及烷基苯基醚，例如辛苯聚醇10(octoxynol 10)、辛苯聚醇40。

其他適用組合物必要時包括一或多種抗氧化劑以增強化學穩定性。適合抗氧化劑包括(僅舉例而言)抗壞血酸及偏亞硫酸氫鈉。

在某些實施例中，水性懸浮液組合物封裝於不可再封閉之單次劑量容器中。或者，使用多劑量可再封閉容器，在此情況下，組合物中典型地包括防腐劑。

在替代實施例中，使用供疏水性醫藥化合物用的其他遞送系統。脂質體及乳液為本文中適用之遞送媒劑或載劑之實例。在某些實施例中，亦使用有機溶劑，諸如N-甲基吡咯啶酮。在其他實施例中，本文所述化合物使用持續釋放型系統遞送，諸如含有治療劑之固體疏水性聚合物之半滲透基質。各種持續釋放性材料在本文中為適用的。在一些實施例中，持續釋放性膠囊釋放化合物持續幾週直至逾100天。視治療劑之化學性質及生物學穩定性而定，可採用其他策略使蛋白質穩定化。

在某些實施例中，本文所述之調配物包含一或多種抗氧化劑、金屬螯合劑、含硫醇化合物及/或其他通用穩定劑。此類穩定劑之實例包括(但不限於)：(a)約0.5%至約2% w/v甘油；(b)約0.1%至約1% w/v甲硫胺酸；(c)約0.1%至約2% w/v單硫代甘油；(d)約1mM至約10mM EDTA；(e)約0.01%至約2% w/v抗壞血酸；(f)0.003%至約0.02% w/v聚山梨醇酯80；(g)0.001%至約0.05% w/v聚山梨醇酯20；(h)精胺酸；(i)肝素；(j)硫酸葡聚糖；(k)環糊精；(l)戊聚糖聚硫酸鹽及其他類肝素；(m)二價陽離子，諸如鎂及鋅；或(n)其組合。

在一些實施例中，本發明醫藥組合物中所提供之化合物及/或其他治療劑的濃度小於100%、90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、19%、18%、17%、16%、15%,14%、13%、12%、11%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%、0.5%、0.4%、0.3%、0.2%、0.1%、0.09%、0.08%、0.07%、0.06%、0.05%、0.04%、0.03%、0.02%、0.01%、0.009%、0.008%、0.007%、0.006%、0.005%、0.004%、0.003%、0.002%、0.001%、0.0009%、0.0008%、0.0007%、0.0006%、0.0005%、0.0004%、0.0003%、0.0002%或0.0001% w/w、w/v或v/v。

在一些實施例中，化合物及/或其他治療劑之濃度大於90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、19.75%、19.50%、19.25%、19%、18.75%、18.50%、18.25%、18%、17.75%、17.50%、17.25%、17%、16.75%、16.50%、16.25%、16%、15.75%、15.50%、15.25%、15%、14.75%、14.50%、14.25%、14%、13.75%、13.50%、 13.25%、13%、12.75%、12.50%、12.25%、12%、11.75%、11.50%、11.25%、11%、10.75%、10.50%、10.25%、10%、9.75%、9.50%、9.25%9%、8.75%、8.50%、8.25%、8%、7.75%、7.50%、7.25%、7%、6.75%、6.50%、6.25%、6%、5.75%、5.50%、5.25%、5%、4.75%、4.50%、4.25%、4%、3.75%、3.50%、3.25%、3%、2.75%、2.50%、2.25%、2%、1.75%、1.50%、125%、1%、0.5%、0.4%、0.3%、0.2%、0.1%、0.09%、0.08%、0.07%、0.06%、0.05%、0.04%、0.03%、0.02%、0.01%、0.009%、0.008%、0.007%、0.006%、0.005%、0.004%、0.003%、0.002%、0.001%、0.0009%、0.0008%、0.0007%、0.0006%、0.0005%、0.0004%、0.0003%、0.0002%或0.0001% w/w、w/v或v/v。

在一些實施例中，化合物及/或其他治療劑之濃度係在以下範圍內：約0.0001%至約50%、約0.001%至約40%、約0.01%至約30%、約0.02%至約29%、約0.03%至約28%、約0.04%至約27%、約0.05%至約26%、約0.06%至約25%、約0.07%至約24%、約0.08%至約23%、約0.09%至約22%、約0.1%至約21%、約0.2%至約20%、約0.3%至約19%、約0.4%至約18%、約0.5%至約17%、約0.6%至約16%、約0.7%至約15%、約0.8%至約14%、約0.9%至約12%、約1%至約10% w/w、w/v或v/v。

在一些實施例中，化合物及/或其他治療劑之濃度在以下範圍內：約0.001%至約10%、約0.01%至約5%、約0.02%至約4.5%、約0.03%至約4%、約0.04%至約3.5%、約0.05%至約3%、約0.06%至約2.5%、約0.07%至約2%、約0.08%至約1.5%、約0.09%至約1%、約0.1%至約0.9% w/w、w/v或v/v。

在一些實施例中，化合物及/或其他治療劑之量等於或小於10g、9.5g、9.0g、8.5g、8.0g、7.5g、7.0g、6.5g、6.0g、5.5g、 5.0g、4.5g、4.0g、3.5g、3.0g、2.5g、2.0g、1.5g、1.0g、0.95g、0.9g、0.85g、0.8g、0.75g、0.7g、0.65g、0.6g、055g、0.5g、0.45g、0.4g、0.35g、0.3g、0.25g、0.2g、0.15g、0.1g、0.09g、0.08g、0.07g、0.06g、0.05g、0.04g、0.03g、0.02g、0.01g、0.009g、0.008g、0.007g、0.006g、0.005g、0.004g、0.003g、0.002g、0.001g、0.0009g、0.0008g、0.0007g、0.0006g、0.0005g、0.0004g、0.0003g、0.0002g或0.0001g。

在一些實施例中，化合物及/或其他治療劑之量大於0.0001g、0.0002g、0.0003g、0.0004g、0.0005g、0.0006g、0.0007g、0.0008g、0.0009g、0.001g、0.0015g、0.002g、0.0025g、0.003g、0.0035g、0.004g、0.0045g、0.005g、0.0055g、0.006g、0.0065g、0.007g、0.0075g、0.008g、0.0085g、0.009g、0.0095g、0.01g、0.015g、0.02g、0.025g、0.03g、0.035g、0.04g、0.045g、0.05g、0.055g、0.06g、0.065g、0.07g、0.075g、0.08g、0.085g、0.09g、0.095g、0.1g、0.15g、0.2g、0.25g、0.3g、0.35g、0.4g、0.45g、0.5g、0.55g、0.6g、0.65g、0.7g、0.75g、0.8g、0.85g、0.9g、0.95g、1g、1.5g、2g、2.5、3g、3.5、4g、4.5g、5g、5.5g、6g、6.5g、7g、7.5g、8g、8.5g、9g、9.5g或10g。

在一些實施例中，化合物及/或其他治療劑之量在0.0001-10g、0.0005-9g、0.001-8g、0.005-7g、0.01-6g、0.05-5g、0.1-4g、0.5-4g或1-3g範圍內。

D. 套組/製品

亦提供用於本文所述之治療應用中的套組及製品。在一些實施例中，提供一種套組，其包含KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物、其他治療劑，及該化合物及該其他治療劑用於治療癌症的使用說明書。化合物及其他治療劑可選自本文所述彼等物中的任一者。

在一些實施例中，此類套組包含載劑、封裝，或經分隔以接收一或多個容器(諸如小瓶、導管及其類似物)的容器，容器中之每一者包含本文所述方法中所用的各別元件之一。適合容器包括例如瓶子、小瓶、注射器及試管。容器由諸如玻璃或塑膠之多種材料形成。

本文所提供之製品含有封裝材料。用於封裝醫藥產物的封裝材料包括例如美國專利第5,323,907號、第5,052,558號及第5,033,252號中所發現的彼等物。醫藥封裝材料之實例包括(但不限於)泡殼包裝、瓶子、管、吸入器、泵、袋、小瓶、容器、注射器、瓶子及適於所選調配物及預定投藥及治療模式的任何封裝材料。舉例而言，容器包括本文所述之化合物及/或其他治療劑，其視情況存在於各別組合物或合併之組合物中。容器視情況具有無菌接取口(例如容器為靜脈內溶液袋或具有可藉由皮下注射針頭刺穿之塞子之小瓶)。此類套組視情況包含化合物及/或其他治療劑及與其在本文所述方法中之使用相關之鑑別性說明或標籤或說明書。

舉例而言，套組典型地包括一或多個其他容器，其各自具有就商業及使用者觀點而言使用本文所述化合物所需之多種物質(諸如試劑，視情況呈濃縮形式，及/或裝置)中之一或多者。此類物質之非限制性實例包括(但不限於)緩衝劑、稀釋劑、過濾器、針、注射器；載劑、封裝、容器、小瓶及/或管、列舉含量之標籤及/或使用說明書，及具有使用說明之藥品說明書。典型地亦包括一組說明書。標籤視情況位於容器上或與容器關聯。舉例而言，當形成標籤之字母、數字或其他字符附著、成型或蝕刻於容器本身中時，標籤位於容器上；當標籤存在於亦裝有容器之接收器或運載器內時，標籤與容器關聯，例如呈藥品說明書形式。另外，標籤用於指示內容物用於特定治療應用。另外，標籤指示內容物使用說明，諸如本文所述之方法。在某些實施例中，醫藥組合物係以藥包或分配器裝置呈遞，其含有一或多個包含化合物及/或其他治療劑的單位劑型。藥包例如含有金屬或塑膠箔，諸如泡殼包裝。或者，藥包或分配器裝置附有投藥說明書。或者，藥包或分配器附有與容器關聯之通知，其呈管制醫藥品之製造、使用或銷售之政府機構指定的形式，該通知反映該機構批准該藥物形式用於人類或獸醫學投藥。此類通知例如為經美國食品及藥物管理局(U.S.Food and Drug Administration)核准用於處方藥物的標籤，或核准之藥品說明書。在一些實施例中，製備含有本文所提供化合物於相容醫藥載劑中所調配之組合物，置放於適當容器中，且針對所指定病狀的治療加以標記。

實例實例1 用於鑑別在KRAS G12C抑制之後維持或超活化之信號傳導路徑的策略

如下評估表明KRAS G12C靶向化合物與其他癌症療法之組合之需要的路徑。使用西方墨點法分析下游KRAS信號傳導節點(AKT、ERK、S6、EGFR/HER2、SRC、MET)及轉錄因子(STAT3)。用例示性KRAS G12C抑制劑(化合物I-272)處理突變型細胞(H358、Calu-1、MiaPaca2、NCI-H23、SW1463、H1792)48小時之後進行的評估顯示，所維持或經誘導的路徑表明RTK、PI3K、mTOR、SRC及JAK/STAT抑制劑之靶向作用(圖1)。藉由比較未處理細胞株與經化合物I-272處理之細胞株來評估所維持或經誘導之路徑。

特定言之，H358細胞株顯示EGFR及HER2誘導，表明RTK抑制劑具有額外的靶向作用。Calu-1及MiaPaca2細胞株顯示均具有誘導作用的難治性PI3K及STAT3、高SRC含量及c-MET誘導作用，表明RTK、PI3K、SRC或JAK/STAT抑制劑具有額外的靶向作用。NCI- H23、SW1463及H1792細胞株顯示具有誘導作用之難治性PI3K、難治性ERK、S6及STAT3、高SRC含量、c-MET誘導作用、EGFR誘導作用及其他所維持RTK，表明RTK、PI3K、SRC、mTOR或JAK/STAT額外的靶向作用。

實例2 例示性KRAS G12C抑制劑與RTK、PI3K、MTOR、SRC或JAK/STAT抑制劑之一的組合

如下評估且證明靶向特定路徑的癌症治療劑，該等特定路徑因例示性KRAS G12C抑制劑(化合物I-272)處理KRAS G12C細胞而誘導或維持。作為RTK、PI3K、mTOR、SRC或JAK/STAT抑制劑的治療劑係根據自實例1中所述之測試獲得的資料選擇。癌症治療劑係根據其對所靶向之細胞株具有協同作用的潛力來選擇。如下評估且證明其協同作用。對突變型細胞株(H358、H1792、Calu-1、SW1463、SW1573、MiaPaca2、NCI-H23)進行全面的生長抑制組合測試，或使用單獨的例示性G12C抑制劑(化合物I-272，劑量範圍為0.063μM-2.0μM)或使用化合物I-272(劑量範圍為0.063μM-2.0μM)與以下之組合測試對照細胞株(A549)：埃羅替尼(EGFR抑制劑，劑量範圍為0.16μM-5.0μM)、GDC0941(PI3K抑制劑，劑量範圍為0.16μM-5.0μM)、達沙替尼(SRC抑制劑，劑量範圍為9.3nM-300nM)、莫羅替尼(JAK抑制劑，劑量範圍為0.16μM-5.0μM)或曲美替尼(MEK抑制劑，劑量範圍為1.5nM-50nM)之一。根據發光(n=3)來評估3天增殖分析所產生的資料且對生長抑制百分比作圖以產生生長抑制指數。接著對生長抑制指數進行顏色編碼以顯示其中組合傾向於使得生長抑制百分比增加的區域。接著使用BLISS協同作用指數換算該資料集以顯示協同組合處理。

使用單獨的例示性G12C抑制劑(化合物I-272，劑量範圍為0.063 μM-2.0μM)或化合物I-272(劑量範圍為0.063μM-2.0μM)與以下之組合來測試多種KRAS G12C突變型細胞株(H358、H2122、H1792、Calu-1、SW1453、SW1573、MiaPaca2、NCI-H23)或對照細胞株(A549)中的卡斯蛋白酶活性：埃羅替尼(EGFR抑制劑，劑量範圍為0.16μM-5.0μM)、GDC0941(PI3K抑制劑，劑量範圍為0.16μM-5.0μM)、達沙替尼(SRC抑制劑，劑量範圍9.3nM-300nM)、莫羅替尼(JAK抑制劑，劑量範圍為0.16μM-5.0μM)或曲美替尼(MEK抑制劑，劑量範圍為1.5nM-50nM)之一。在第6、24及48小時，使用標準卡斯蛋白酶活性發光分析(Capase-Glo,Promega)量測卡斯蛋白酶活性(n>7)。

報導各細胞株中在6至48小時之間所達成的最大卡斯蛋白酶活性且作圖。接著對圖進行顏色編碼以顯示具有協同作用的組合。顏色編碼產生用於評估組合療法的細胞凋亡誘導指數。在H358細胞株中，誘導細胞凋亡優於單一化合物或藥劑處理的組合包括化合物I-272與以下之組合：EGFR抑制劑、PI3K抑制劑、JAK/TBK1抑制劑或IGF1R抑制劑之一。在H2122細胞株中，誘導細胞凋亡優於單一化合物或藥劑處理的組合包括化合物I-272與以下之組合：EGFR抑制劑、MEK抑制劑、PI3K抑制劑或IGF1R抑制劑。在H1792細胞株中，誘導細胞凋亡優於單一化合物或藥劑處理的組合包括化合物I-272與以下之組合：JAK/TBK1抑制劑、SRC抑制劑、EGFR抑制劑或IGF1R抑制劑之一。在Calu-1細胞株中，誘導細胞凋亡優於單一化合物或藥劑處理的組合包括化合物I-272與SRC抑制劑之組合。在SW1453細胞株中，誘導細胞凋亡優於單一化合物或藥劑處理的組合包括化合物I-272與EGFR抑制劑或MEK抑制劑之一的組合。在SW1573細胞株中，誘導細胞凋亡優於單一化合物或藥劑處理的組合包括化合物I-272與SRC抑制劑之組合。在MiaPaca2細胞株中，誘導細胞凋亡優於單一化合物或藥劑處理的組合包括化合物I-272與以下之組合：PI3K抑制劑、JAK/TBK1抑制劑或SRC抑制劑之一。

對於KRAS抑制劑與對A549所測試之任一種化學治療劑之任何組合而言，未觀測到細胞凋亡誘導程度。雖然不希望被理論束縛，但咸信此資料指示，對H358、H2122、H1792、Calu-1、SW1453、SW1573、MiaPaca2及NCI-H23細胞株的協同作用係藉由KRAS G12C特異性抑制來介導。

協調使用BLISS協同作用指數資料及細胞凋亡誘導指數資料，針對各細胞株選擇例示性G12C抑制劑(化合物I-272)與一種其他化學治療劑之最佳組合。對於H358細胞株，選擇I-272與埃羅替尼(EGFR抑制劑)或GDC0941(PI3K抑制劑)之一的組合。對於H1792細胞株，選擇I-272與達沙替尼(SRC抑制劑)或莫羅替尼(JAK抑制劑)之一的組合。對於細胞株Calu-1，選擇I-272與達沙替尼(SRC抑制劑)的組合。對於細胞株SW1463，選擇I-272與埃羅替尼(EGFR抑制劑)或GDC0941(PI3K抑制劑)之一的組合。對於細胞株SW1573，選擇I-272與GDC0941(PI3K抑制劑)或達沙替尼(SRC抑制劑)之一的組合。對於細胞株MiaPaca2，選擇I-272與GDC0941(PI3K抑制劑)或莫羅替尼(JAK抑制劑)之一的組合。對於細胞株NCI-H23，選擇I-272與達沙替尼(SRC抑制劑)或莫羅替尼(JAK抑制劑)之一的組合。對於各細胞株，最常觀測到協同作用的成對組合為I-272與PI3K抑制劑、SRC抑制劑或EGFR抑制劑之一的組合。

實例3 例示性KRAS G12C抑制劑與EGFR抑制劑或PI3K抑制劑之一的組合用於協同性誘導細胞凋亡

如下評估且證明KRAS G12C靶向化合物與其他癌症治療劑組合的有效性。使用西方墨點法分析下游KRAS信號傳導節點(AKT、 ERK、RSK、S6)與細胞凋亡標記物(裂解之PARP)。單獨的例示性KRAS G12C抑制劑(化合物II-64、I-153及I-158)處理H358細胞(KRAS G12C)24小時，使得p-ERK、p-RSK及p-S6受到明顯且接近完全的抑制、p-AKT受到部分抑制(圖2A)。然而見到所裂解的PARP最少，表示細胞凋亡程度低(圖2A，泳道2-4相較於泳道1)。同樣，根據所裂解之PARP含量，單獨的埃羅替尼(EGFR抑制劑。泳道5)或GDC0941(I類PI3K抑制劑，圖2A，泳道9)處理並未誘導穩定的細胞凋亡(圖2A，泳道5及9相較於泳道1)。根據所裂解之PARP含量，KRAS G12C抑制劑與埃羅替尼(圖2A，泳道6-8)或GDC0941(圖2A，泳道9-11)之組合處理使得細胞凋亡大幅增強。

作為對照，對非G12C細胞株(亦即A549)進行相同單一藥劑處理及組合處理(圖2B)。KRAS G12C抑制劑對此細胞株未顯示單一藥劑或相加/協同作用。雖然不希望被理論束縛，但咸信此資料指示，對H358細胞的協同作用係藉由KRAS G12C特異性抑制來介導。

如下評估且證明KRAS G12C靶向化合物與其他癌症治療劑組合用於誘導細胞凋亡的能力。使用單獨化合物II-64或化合物II-64與以下之組合來測試多種KRAS G12C突變型細胞株(H358、H2122、H2030、H1792、Calu-1、MiaPaca2及NCI-H23)或對照細胞株(A549 G12S、A375 KRAS WT、NCI-H411 KRAS G12V及HCT115 G13D)中的卡斯蛋白酶活性：埃羅替尼、阿法替尼、PI3K(GDC0941)、多西他賽、SN38(伊立替康之活性代謝物)、紫杉醇、IGFIRi(NVP-AEW541)或MEKi(曲美替尼)之一。使用標準卡斯蛋白酶活性發光分析(Capase-Glo,Promega)量測卡斯蛋白酶活性。紫杉醇(太平洋紫杉醇)用作陽性對照物。

當KRAS G12C抑制劑與EGFR抑制劑(埃羅替尼，圖3A)組合時，七種所測試KRAS G12C突變型細胞株中有三者展現細胞凋亡之協同誘導作用。當KRAS G12C抑制劑與PI3K抑制劑(GDC0941，圖3C)組合時，七種所測試KRAS G12C突變型細胞株中有四者展現細胞凋亡之協同誘導作用。未觀測到KRAS G12C抑制劑對不具有KRAS G12C突變之細胞株的作用(圖3B、3D)。單獨的化合物II-64、埃羅替尼或GDC0941不誘導顯著的卡斯蛋白酶活性。

如下評估且證明KRAS G12C靶向化合物與其他癌症治療劑組合用於抑制Ras介導性細胞週期進程及誘導性細胞凋亡的能力。使用流式細胞術評價KRAS G12C抑制劑組合處理。化合物II-64、埃羅替尼或GDC0941作為單一藥劑處理H358細胞引起G1停滯，且低至中度地誘導細胞凋亡(圖4A，亞二倍體細胞群8.5-17.8%)。組合處理使細胞凋亡細胞的分率顯著增加(亞二倍體細胞群40-65%)。對於其他KRAS G12C細胞株(H1792、H2122、SW1573；圖4B)觀測到類似結果。

接著，使用流式細胞術評價KRAS G12C抑制劑與化學治療劑太平洋紫杉醇或多西他賽的組合。當化合物II-64與太平洋紫杉醇(圖5)、多西他賽(圖6)及SN38(伊立替康之活性形式，圖7)組合時，觀測到對細胞凋亡(亞二倍體)H358細胞的協同作用增強。

如下評估且證明KRAS G12C靶向化合物與其他癌症治療劑組合的能力。Calu-1細胞對於單一藥劑KRAS G12C抑制劑以及與本文所揭示之先前研究中所測試之靶向藥劑(EGFRi、MEKi、PI3Ki、IGF1Ri；圖7B)的組合通常具有耐藥性。對一組酪胺酸激酶之磷酸化酪胺酸含量的評價展現Calu-1細胞中的SRC磷酸化程度相對較高(圖8A)。用KRAS G12C抑制劑(化合物I-272)與SRC抑制劑(達沙替尼)處理Calu-1細胞產生較高的細胞凋亡誘導程度(圖8B)。

實例4 例示性KRAS G12C抑制劑與EGFR、MEK或I類PI3K抑制劑之組合用於協同誘導細胞凋亡

如下評估且證明KRAS G12C靶向化合物與其他癌症治療劑組合的有效性。使用西方墨點法分析下游KRAS信號傳導節點(AKT、ERK、RSK、S6)細胞凋亡標記物(所裂解PARP)。用濃度為15μM之單獨例示性KRAS G12C抑制劑(化合物I-74)處理H358細胞(KRAS G12C)24小時使得p-ERK、p-RSK及p-S6受到明顯且接近完全的抑制(圖9，左圖)。然而見到所裂解的PARP最少，表明細胞凋亡程度低(圖9，左圖，泳道2相較於泳道9)。同樣，根據所裂解的PARP含量，用單獨的埃羅替尼(EGFR抑制劑，5μM，圖9，左圖，泳道3)、PD0325901(MEK抑制劑，100nM，圖9，左圖，泳道5)、GDC0941(I類PI3K抑制劑，1μM，圖9，左圖，泳道7)處理未誘導穩定的細胞凋亡(圖9，左圖，泳道3、5及7相較於泳道9)。根據所裂解的PARP含量，用15μM濃度之化合物I-74與埃羅替尼(EGFR抑制劑，5μM，圖9，左圖，泳道4)組合處理H358細胞使得細胞凋亡大大增強。當化合物I-74(15μM)與PD0325901(MEK抑制劑，100nM，圖9，左圖，泳道6)或GDC0941(PI3K抑制劑，1μM，圖9，左圖，泳道8)組合使用來處理H358細胞時，亦觀測到細胞凋亡增強(根據所裂解之PARP含量)。紫杉醇(太平洋紫杉醇)用作陽性對照物。

作為對照，對非G12C細胞株(A549)進行相同單一藥劑處理及組合處理(圖9，右圖)。KRAS G12C抑制劑對此細胞株未顯示單一藥劑或相加/協同作用。雖然不希望被理論束縛，但咸信此資料指示，對H358細胞的協同作用係藉由KRAS G12C特異性抑制來介導。

化合物II-74、埃羅替尼、PD0325901或GDC0941作為單一藥劑處理H358細胞引起G1停滯，產生低至中度的細胞凋亡誘導作用(圖9，左圖)，而組合處理使細胞凋亡細胞的分率顯著增加。

實例5 例示性KRAS G12C抑制劑與泛PI3K及選擇性PI3KA之組合用於協同誘導細胞凋亡

使用西方墨點法分析下游KRAS信號傳導節點(AKT、ERK、RSK、S6)細胞凋亡標記物(所裂解PARP)。用單獨的例示性KRAS G12C抑制劑(化合物II-64)處理SW1573細胞24小時使得p-ERK、p-RSK及KRAS-GTP受到抑制(圖10)。然而見到所裂解的PARP最少，表明細胞凋亡程度低(圖10，泳道2-3相較於泳道1)。同樣，根據所裂解的PARP含量，單獨GDC0941(I類PI3K抑制劑，圖10，泳道4)及BYL-719(選擇性PI3Kα抑制劑，圖10，泳道7)處理未誘導穩定的細胞凋亡(圖10，泳道7相較於泳道1)。根據所裂解的PARP含量，KRAS G12C抑制劑與GDC0941(I類PI3K抑制劑，泳道5-6)或BYL-719(選擇性PI3Kα抑制劑，圖10，泳道8-9)組合處理使得細胞凋亡大大增強。紫杉醇(太平洋紫杉醇)用作陽性對照物。泛PI3K與選擇性PI3Kα抑制劑當一者與選擇性KRAS-G12C抑制劑組合使用時，誘導等效的協同性細胞凋亡，如根據PARP之裂解所量測。

實例6 例示性KRAS G12C抑制劑與EGFR、EGFR/HER2或PI3K抑制劑之一的組合用於協同作用細胞凋亡及路徑抑制

使用西方墨點法分析下游KRAS信號傳導節點(AKT、ERK、RSK、S6)細胞凋亡標記物(所裂解PARP)。2.5μM單獨的例示性G12C抑制劑(化合物II-64)處理H358細胞(KRAS G12C)24小時使得p-ERK及p-S6受到明顯且接近完全的抑制、使p-AKT受到部分抑制(圖11)。然而見到的c-卡斯蛋白酶最少，表明細胞凋亡程度低(圖11，泳道2相較於泳道1)。同樣，根據c-卡斯蛋白酶3含量，單獨的埃羅替尼(EGFR抑制劑，泳道3)、阿法替尼(MEK抑制劑，圖11，泳道5)、GDC0941(I類PI3K抑制劑，圖11，泳道7)及司美替尼(MEK抑制劑，圖11，泳道9)處理未誘導穩定的細胞凋亡(圖11，泳道3、5、7及9相較於泳道1)。然而，根據c-卡斯蛋白酶3含量，化合物I-64與埃羅替尼(EGFR抑制劑，圖11，泳道4)、阿法替尼(MEK抑制劑，圖11，泳道6)、GDC0941(I類PI3K抑制劑，圖11，泳道8)或司美替尼(MEK抑制劑，圖11，泳道10)組合處理使得細胞凋亡大大增強。使用標準卡斯蛋白酶活性發光分析(Capase-Glo,Promega)量測卡斯蛋白酶活性。

實例7 例示性KRAS G12C抑制劑與SRC抑制劑組合用於協同性誘導CALU-1細胞發生細胞凋亡

使用西方墨點法分析下游KRAS信號傳導節點(AKT、ERK、RSK、S6)細胞凋亡標記物(所裂解PARP)。單獨的例示性KRAS G12C抑制劑(化合物I-272)在30nM、100nM、300nM及1000nM濃度下處理Calu-1細胞24小時使得p-ERK及p-RSK受到明顯且在較高濃度下接近完全的抑制(圖12)。然而見到所裂解的PARP最少，表明細胞凋亡程度低(圖12，泳道2-5相較於泳道1)。同樣，根據所裂解的PARP含量，單獨的達沙替尼(SRC抑制劑，圖12，泳道6)處理未誘導穩定的細胞凋亡(圖12，泳道6相較於泳道1)。

相比之下，根據所裂解的PARP含量，化合物I-272(以30、100、300及1000nM給予，圖12，分別為泳道7-10)與達沙替尼(SRC抑制劑，以150nM給予，圖12，泳道7-10)組合處理使得細胞凋亡大大增強。另外，組合處理顯示p-SRC、p-AKT、p-ERK、p-RSK及p-S6受到明顯且接近完全的抑制。

實例8 例示性KRAS G12C抑制劑與SRC抑制劑組合用於協同性誘導細胞凋亡

使用西方墨點法分析下游KRAS信號傳導節點(AKT、ERK、RSK、S6)細胞凋亡標記物(所裂解PARP)。對單獨的例示性KRAS G12C抑制劑(化合物I-272，1μM)或與達沙替尼(「Das」，SRC抑制劑，100nM)或塞卡替尼(「Sarc」，SRC抑制劑，2μM)組合處理突變型細胞株(H358、NCI-H23、SW1463、H1792、Calu-1、SW1573)或對照細胞株(A549)進行測試。單獨KRAS G12C抑制劑化合物I-272處理突變型細胞株使得p-ERK受到明顯且在一些情況下(H358、SW1463、Calu-1)接近完全的抑制。相同處理亦顯示H358、SW1463、H1792及Calu-1細胞株中的p-S6受到抑制(圖13)。

然而見到所裂解的PARP最少，表明細胞凋亡程度低。同樣，根據所裂解的PARP含量，單獨的達沙替尼或薩卡替尼處理未誘導穩定的細胞凋亡。相比之下，根據所裂解之PARP含量，KRAS G12C抑制劑(化合物I-272)與達沙替尼或薩卡替尼組合處理使得細胞凋亡大大增強。另外，化合物I-272(1μM)與達沙替尼組合使得Calu-1及SW1573細胞株中的p-S6完全減少。作為對照，對非G12C細胞株(A549)進行相同的單一藥劑處理及組合處理。KRAS G12C抑制劑對此細胞株未顯示單一藥劑或相加/協同作用。雖然不希望被理論束縛，咸信此資料指示對突變型細胞株(亦即H358、NCI-H23、SW1463、H1792、Calu-1、SW1573)產生的協同作用係藉由KRAS G12C特異性抑制來介導。

圖14提供圖13之凝膠的密度測定資料。

實例9 評估且證明例示性KRAS G12C抑制劑與JAK抑制劑組合使用對多種突變型細胞株產生細胞凋亡協同性誘導作用的作用機制

使用西方墨點法分析下游KRAS信號傳導節點(AKT、ERK、S6)、轉錄因子(STAT3)及細胞凋亡標記物(所裂解之PARP)。凝膠資料提供於圖15中。對例示性KRAS G12C抑制劑(化合物I-272，0.3及1μM)單獨或與莫羅替尼(JAK抑制劑，5μM)組合處理突變型細胞株(H358、H1792、MiaPaca2)或對照細胞株(A549)進行測試。單獨KRAS G12C抑制劑化合物I-272處理突變型細胞株24小時使得p-ERK(分別為H1792及H358中)受到一些且接近完全的抑制、使p-ANK(H358中)受到一些抑制、使S6(H358中)受到一些至接近完全的抑制且對細胞凋亡產生一些誘導作用，如根據所裂解之PARP(H358及MiaPaca2中)的存在所觀測。單獨I-272處理亦誘導某些細胞株中的STAT3(在H358及H1792中較弱，在MiaPaca2及A549中較強)。化合物I-272(0.3μM及1μM)與莫羅替尼(JAK抑制劑，5μM)組合誘導大範圍的G12C陽性細胞株發生細胞凋亡且增強對p-AKT及p-S6的抑制作用。特定言之，當化合物I-272與莫羅替尼(JAK抑制劑)組合使用時，偵測到H358、H1792及MiaPaca2中的PARP。

作為對照，對非G12C細胞株(A549)進行相同的單一藥劑處理及組合處理。KRAS G12C抑制劑對此細胞株未顯示單一藥劑或相加/協同作用。雖然不希望被理論束縛，但咸信此資料指示對H358、H1792及MiaPaca2細胞株產生的協同作用係藉由KRAS G12C特異性抑制來介導。

實例10 評估且證明例示性KRAS G12C抑制劑與JAK抑制劑組合使用對突變型細胞株產生細胞凋亡協同性誘導作用的作用機制

使用西方墨點法分析下游KRAS信號傳導節點(AKT、ERK、S6)、轉錄因子(STAT3、I κ Bα)、蛋白質標記物(TBK1)及細胞凋亡標記物(所裂解之PARP)。對例示性KRAS G12C抑制劑(化合物I-272，1μM)單獨或與蘆可替尼(JAK 1/2抑制劑，1及5μM)或莫羅替尼(JAK1/2，TBK1，IKKe抑制劑，1及5μM)之一組合處理突變型細胞株(NCI-H23，SW1573)進行測試。單獨KRAS G12C抑制劑化合物I-272處理突變型細胞株24小時使得p-ERK受到明顯且接近完全的抑制。相同處理亦顯示NCI-H23中的p-S6及p-AKT受到抑制。然而見到所裂解的PARP最少，表明細胞凋亡程度低(圖16)。同樣，根據所裂解的PARP含量，單獨的蘆可替尼(JAK1/2抑制劑，圖16，泳道2-3)或莫羅替尼(JAK1/2，TBK1，IKKe抑制劑，圖16，泳道7-8)處理未誘導穩定的細胞凋亡(圖16，泳道2-3及7-8相較於泳道1)。根據PARP含量，蘆可替尼(JAK1/2，TBK1，IKKe抑制劑，圖16，泳道5-6)或莫羅替尼(JAK1/2，TBK1，IKKe抑制劑，圖16，泳道9-10)組合處理使得細胞凋亡大大增強。另外，各組合均存在協同性p-S6抑制作用。當TBK1及非典型NF κ B信號傳導受到抑制時，發生強烈的協同作用細胞凋亡。此作用表明，此等組合處理的細胞凋亡作用機制與JAK/STAT無關。

提供以下合成實例用於例示性目的。結構(I)、(II)及(III)之其他化合物根據類似程序製備。

實例11 合成1-(4-(7-氯-6-(2-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-1)

化合物I-1根據如下文所述的方法A製備：

2-胺基-5-(2-氯苯基)-4-氯苯甲酸甲酯

2-胺基-5-溴-4-氯苯甲酸甲酯(1.2g，4.54mmol)、2-氯苯基

酸(0.85g，5.44mmol)、Na₂CO₃(1.44g，13.61mmol)及Pd(PPh₃)₄(0.52g，0.45mmol)於1,4-二噁烷(30mL)及水(6mL)中之混合物在75℃、在氬氣下攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫(RT)且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(乙酸乙酯/石油醚=8：1)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之所要產物(1.22g，91%產率)。

7-氯-6-(2-氯苯基)喹唑啉-4-醇

2-胺基-5-(2-氯苯基)-4-氯苯甲酸甲酯(342mg，1.16mmol)、CH(OMe)₃(306mg，2.89mmol)及NH₄OAc(223mg，2.89mmol)於MeOH(1mL)中之混合物在密封管中、在130℃攪拌4.5小時。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮。用DCM及MeOH(40：1)溶離、藉由矽膠急驟管柱層析來純化殘餘物，產生呈白色固體狀之所要產物(277mg，82%產率)。ESI-MS m/z：289.2[M-H]^-。

4,7-二氯-6-(2-氯苯基)喹唑啉

7-氯-6-(2-氯苯基)喹唑啉-4-醇(277mg，0.95mmol)、PCl₅(397mg，1.90mmol)及POCl₃(16mL)之混合物在回流下攪拌20小時。允許混合物冷卻至室溫，接著真空濃縮，產生呈深色油狀之粗產物(1.19g)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。

4-(7-氯-6-(2-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

上述所得粗4,7-二氯-6-(2-氯苯基)喹唑啉(1.19g)在0℃添加至哌嗪-1-甲酸第三丁酯(5g，26.9mmol)與Et₃N(7.76g，76.8mmol)於DCM(200mL)中之混合物中且所得混合物在相同溫度下攪拌1小時。將混合物傾入水(500mL)及鹽水(100mL)中，接著添加二氯甲烷(DCM)(200mL)。經由濾紙過濾混合物。分離有機層，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。用DCM及MeOH(30：1)溶離、藉由矽膠急驟管柱層析來純化殘餘物，產生呈淡黃色油狀之所要產物(184mg，42%產率，2個步驟)。ESI-MS m/z：459.3[M+H]⁺。

1-(4-(7-氯-6-(2-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

4-(7-氯-6-(2-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(184mg，0.40mmol)與HCl於MeOH(20mL)中之混合物在室溫下攪拌1小時。真空濃縮混合物，產生呈黃色固體狀之粗產物(176mg)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。

1-(4-(7-氯-6-(2-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(1)

將上述所得粗1-(4-(7-氯-6-(2-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(176mg)溶解於Et₃N(450mg，4.45mmol)及DCM(30mL)中且冷卻至0℃，向混合物中添加含有丙烯醯氯(44mg，0.49mmol)的 DCM(50mL)。允許所得混合物升溫至室溫且在室溫下攪拌1.5小時。反應混合物用飽和NaHCO₃水溶液淬滅，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。用DCM及MeOH(30：1)溶離、藉由矽膠急驟管柱層析來純化殘餘物，產生呈黃色固體狀之所要產物(82mg，50%產率，2個步驟)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.75(s,1H),8.03(s,1H),7.96(s,1H),7.62-7.49(m,4H),6.81(dd,J=10.4,16.4Hz,1H),6.15(dd,J=16.4,2.4Hz,1H),5.71(dd,J=10.4,2.0Hz,1H),3.87-3.72(m,8H).ESI-MS m/z：413.2[M+H]⁺。

實例12 合成1-(4-(7-氯-6-苯基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-18)

化合物I-18根據如下文所述的方法B製備：

6-溴-7-氯喹唑啉-4-醇

2-胺基-5-溴-4-氯苯甲酸甲酯(1g，3.95mmol)與NH₂CHO(20mL)之混合物在200℃攪拌3小時。允許混合物冷卻至室溫且用水淬滅。藉由過濾來收集固體沈澱物且真空乾燥，產生呈褐色固體狀之所要產物(669mg，66%產率)。

6-溴-4,7-二氯喹唑啉

6-溴-7-氯喹唑啉-4-醇(669mg，2.59mmol)、PCl₅(1.6g，7.78mmol)及POCl₃(15mL)之混合物在回流下攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫，接著真空濃縮，產生呈深色油狀之所要產物，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。

4-(6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

上述所得粗6-溴-4,7-二氯喹唑啉添加至哌嗪-1-甲酸第三丁酯(4.82g，25.9mmol)與Et₃N(2.62g，25.9mmol)於DCM(70mL)中之混合物中。所得混合物在室溫下攪拌2小時，接著用飽和NaHCO₃水溶液淬滅。混合物用DCM萃取，用飽和NaHCO₃水溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。用乙酸乙酯及石油醚(4：1)溶離、藉由矽膠急驟管柱層析來純化殘餘物，產生呈黃色固體狀之所要產物(631mg，57%產率，2個步驟)。ESI-MS m/z：429.3[M+H]⁺。

4-(7-氯-6-苯基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

4-(6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(200mg，0.47mmol)、苯基

酸(115mg，0.94mmol)、Na₂CO₃溶液(2.0M，0.71mL，1.41mmol)、Pd(PPh₃)₄(109g，0.094mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在回流下、在氬氣下攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋，接著用H₂O及鹽水洗滌。有機層經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。用乙酸乙酯及石油醚(1：4)溶離、藉由矽膠急驟管柱層析來純化殘餘物，產生呈黃色油狀之所要產物(120mg，60%產率)。ESI-MS m/z：425.4[M+H]⁺。

1-(4-(7-氯-6-苯基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

依循實例2中所述之程序，以兩個步驟，自4-(7-氯-6-苯基喹唑啉 -4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,CDCl₃)δ：8.74(s,1H),8.15(s,1H),7.83(s,1H),7.50-7.45(m,5H),6.58(dd,J=16.8,10.4Hz,1H),6.36(dd,J=16.4,1.6Hz,1H),5.77(dd,J=10.4,2.0Hz,1H),3.92-3.81(m,8H).ESI-MS m/z：379.3[M+H]⁺。

實例13 合成1-(4-(6-氯-5-(2-氯苯基)-1H-吲唑-3-基胺基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-31)

化合物I-31根據如下文所述的方法C製備：

4-甲基-N'-(2',4,6-三氯聯苯羰基)苯磺醯肼

在室溫下，向2',4,6-三氯聯苯-3-羰基氯化物(5.5g)於甲苯中之攪拌溶液中添加NH₂NHTs(3.8g，20.3mmol)且所得混合物在75℃攪拌隔夜。允許混合物冷卻至室溫。藉由過濾來收集固體且真空乾燥，得到呈白色固體狀之所要產物(6g，75%產率)。

2',4,6-三氯-N'-甲苯磺醯基聯苯-3-甲腙醯氯

4-甲基-N'-(2',4,6-三氯聯苯羰基)苯磺醯肼(2.3g，4.5mmol)於SOCl₂(5.8g，45mmol)中之溶液在75℃攪拌4小時。允許混合物冷卻至室溫，接著添加石油醚。所得混合物在0℃攪拌1小時。藉由過濾來收集沈澱物且真空乾燥，得到呈白色固體狀之所要產物(1.6g，67%產率)。

4-((6-氯-5-(2-氯苯基)-1-甲苯磺醯基-1H-吲唑-3-基)(4-甲氧基苯甲基)胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯

在室溫下，向2',4,6-三氯-N'-甲苯磺醯基聯苯-3-甲腙醯氯(1.6g，3.4mmol)於100mL NMP中之攪拌溶液中添加4-(4-甲氧基苯甲基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.1g，3.4mmol)，隨後添加K₂CO₃(1.4g，10.2mmol)。在40℃攪拌反應混合物隔夜。允許混合物冷卻至室溫且分配於水與乙酸乙酯之間。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(1-20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(550mg，23%產率)。

4-((6-氯-5-(2-氯苯基)-1H-吲唑-3-基)(4-甲氧基苯甲基)胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯

在室溫下，向4-((6-氯-5-(2-氯苯基)-1-甲苯磺醯基-1H-吲唑-3-基)(4-甲氧基苯甲基)胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(550mg，0.75mmol)於THF(20mL)及水(5mL)中之攪拌溶液中添加NaOH(75mg，1.87mmol)，且所得混合物在回流下攪拌隔夜。將反應混合物冷卻至室溫且分配於水與乙酸乙酯之間。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(1-10%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(100mg，23%產率)。ESI-MS m/z：581.5[M+H]⁺。

6-氯-5-(2-氯苯基)-N-(哌啶-4-基)-1H-吲唑-3-胺

4-((6-氯-5-(2-氯苯基)-1H-吲唑-3-基)(4-甲氧基苯甲基)胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(100mg，0.17mmol)於5mL TFA中之溶液在回流下攪拌2小時。允許反應混合物冷卻至室溫，接著分配於飽和NaHCO₃水溶液與乙酸乙酯之間。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈黃色固體狀之所要產物(62mg)。粗產物不經進一步純化即直接用於下一步驟中。

1-(4-(6-氯-5-(2-氯苯基)-1H-吲唑-3-基胺基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

在室溫下，向丙烯酸(12.4mg，0.17mmol)於5mL DMF中之攪拌溶液中依序添加6-氯-5-(2-氯苯基)-N-(哌啶-4-基)-1H-吲唑-3-胺(62mg，0.17mmol)、HOBT(30mg，0.22mmol)、EDCI(42mg，0.22mmol)及TEA(52mg，0.51mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜。將混合物分配於鹽水與乙酸乙酯之間。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(2mg，3%產率)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：11.67(s,1H),7.73(s,1H),7.56-7.58(m,1H),7.41-7.47(m,2H),7.42(s,1H),7.36-7.39(m,1H),6.80-6.87(m,1H),6.07(dd,J=2.5,16.7Hz,1H),6.04(d,J=7.3Hz,1H),5.65(dd,J=2.4,10.4Hz,1H),4.23(d,J=12.3Hz,1H),3.98(d,J=13.6Hz,1H),3.76-3.80(m,1H),3.26(t,J=13.0Hz,1H),2.97(t,J=10.2Hz,1H),2.06(m,2H),1.38(m,2H).ESI-MS m/z：415.1[M+H]⁺。

實例14 合成1-(4-(6-氯-7-(2-氯苯基)異喹啉-1-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-24)

化合物I-24根據如下文所述的方法D製備：

N-(3-溴-4-氯苯甲基)-2,2-二乙氧基乙胺

在室溫下，向3-溴-4-氯苯甲醛(10.0g，45mmol)及2,2-二乙氧基乙胺(6.68g，50mmol)於200mL DCM中之溶液中添加0.5mL AcOH且所得混合物在室溫下攪拌30分鐘。向此混合物中分數份添加NaCNBH₃(8.1g，135mmol)，接著在室溫下攪拌隔夜。將反應混合物分配於水與DCM之間。有機層用水(80mL×2)及鹽水洗滌，經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到所要產物(11g，72%產率)。所得粗產物不經進一步純化即直接用於下一步驟中。

N-(3-溴-4-氯苯甲基)-2,2-二乙氧基-N-甲苯磺醯基乙胺

向N-(3-溴-4-氯苯甲基)-2,2-二乙氧基乙胺(11g，33mmol)於100mL DCM中之溶液中添加吡啶(10mL)且將所得混合物冷卻至0℃。向此混合物中逐滴添加4-甲苯-1-磺醯氯(6.8g，36mmol)於50mL DCM 中之溶液。允許反應混合物升溫至室溫且持續攪拌直至轉化完成。反應混合物用HCl水溶液(2M)、碳酸氫鈉溶液及鹽水洗滌兩次。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(5-20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到所要產物(12.5g，78%產率)。ESI-MS m/z：490.2[M+H]⁺。

7-溴-6-氯異喹啉

在室溫下將AlCl₃(14.9g)懸浮於DCM中，添加N-(3-溴-4-氯苯甲基)-2,2-二乙氧基-N-甲苯磺醯基乙胺(11.0g，22.5mmol)於75mL DCM中之溶液且所得混合物攪拌隔夜。將混合物傾入冰水中且用DCM萃取。合併之有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(10-40%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(5g，92.5%產率)。ESI-MS m/z：242[M+H]⁺。

7-溴-6-氯異喹啉2-氧化物

在室溫下，向7-溴-6-氯異喹啉(5.5g，22.8mmol)於100mL DCM中之溶液中添加間氯過苯甲酸(70%，5.88g，34.2mmol)且所得混合物在室溫下攪拌隔夜。濾出沈澱物且用DCM沖洗。用碳酸氫鈉溶液洗滌濾液。分離各層且用DCM萃取水層。合併之有機層經無水Na₂SO₄乾燥且真空濃縮，得到所要產物(4.6g，79%產率)。粗產物不經進一步純化即直接用於下一步驟中。ESI-MS m/z：258.2[M+H]⁺。

1-(4-(6-氯-7-(2-氯苯基)異喹啉-1-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

依循實例2中所述之程序，以五個步驟，自7-溴-6-氯異喹啉2-氧化物製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.22-8.21(m,2H),8.00(s,1H),7.65-7.47(m,5H),6.87(dd,J=16.9,10.5Hz,1H),6.16(dd,J=16.7,1.7Hz,1H),5.72(dd,J=10.3,2.1Hz,1H),3.83(m,4H),3.37(m,4H).ESI-MS m/z：412.2[M+H]⁺。

實例15 合成1-(4-(7-氯-6-(2-氯苯基)喹啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-27)

化合物I-27根據如下文所述的方法E製備：

2-((3-氯-4-碘苯基胺基)亞甲基)丙二酸二乙酯

將3-氯-4-碘苯胺(3.0g，11.8mmol)與2-(乙氧基亞甲基)丙二酸二乙酯(12.78g，59.2mmol)混合於100mL單頸燒瓶中，且所得混合物加熱至120℃且攪拌2.5小時。允許混合物冷卻至室溫且藉由矽膠急驟管柱層析(10-20%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈白色固體狀之所要產物(3.93g)。ESI-MS m/z：422.1[M-H]^-。

7-氯-4-羥基-6-碘喹啉-3-甲酸乙酯

將(E)-2-(((3-氯-4-碘苯基)亞胺基)甲基)丙二酸二乙酯(2.0g，4.73mmol)懸浮於30mL Ph₂O中。混合物在250℃攪拌4小時。允許混合物冷卻至室溫，接著添加100mL石油醚。藉由過濾來收集白色固體且用石油醚(100mL)沖洗，得到呈白色固體狀之所要產物(1.20g)。

7-氯-4-羥基-6-碘喹啉-3-甲酸

將7-氯-4-羥基-6-碘喹啉-3-甲酸乙酯(1.2g，3.18mmol)懸浮於10% NaOH水溶液(50mL)中。在回流下攪拌混合物3.5小時。將白色固體緩慢溶解於NaOH溶液中。混合物轉變為無色相之後，持續加熱另外1小時。允許混合物冷卻至室溫，且分離出白色固體。混合物用濃HCl酸化以將pH調節至2。藉由過濾來收集白色沈澱物且用石油醚沖洗，得到呈白色固體狀之所要產物(1.13g)。

7-氯-6-碘喹啉-4-醇

將7-氯-4-羥基-6-碘喹啉-3-甲酸(1.134g，3.25mmol)懸浮於40mL Ph₂O中。混合物在250℃攪拌3.5小時。允許混合物冷卻至室溫，且添加100mL石油醚。藉由過濾來收集固體且用石油醚沖洗，得到呈白色固體狀之所要產物(0.92g)。

4,7-二氯-6-碘喹啉

將7-氯-6-碘喹啉-4-醇(591mg，1.94mmol)溶解於40mL POCl₃中且混合物在回流下攪拌3小時。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮。在0℃，將殘餘物傾入Et₃N(2.93g，29.03mmol，15eq.)於40mL DCM中之溶液中。將混合物分配於乙酸乙酯與鹽水之間。將有機層乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(40%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈固體狀之所要產物(895mg)。ESI-MS m/z：323.9[M+H]⁺。

4-(7-氯-6-碘喹啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

將4,7-二氯-6-碘喹啉(200mg，0.62mmol)與哌嗪-1-甲酸第三丁酯(172mg，0.93mmol)及Et₃N(250mg，2.47mmol)混合於15mL DMSO中。所得混合物在80℃、在氬氣下攪拌16小時。將混合物傾入250mL水及50mL鹽水中，接著用乙酸乙酯萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(20-30% 乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到所要產物(132mg)。ESI-MS m/z：374.2[M+H]⁺。

4-(7-氯-6-(2-氯苯基)喹啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

將4-(7-氯-6-碘喹啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(130mg，0.28mmol)與(2-氯苯基)

酸(109mg，0.33mmol)、Pd(PPh₃)₄(32mg，0.028mmol)及Na₂CO₃(88mg，0.83mmol)混合於1,4-二噁烷(20mL)及水(4mL)中。混合物在70℃、在氬氣下攪拌4小時。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(30-40%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到所要產物(100mg)。ESI-MS m/z：458.3[M+H]⁺。

1-(4-(7-氯-6-(2-氯苯基)喹啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(7-氯-6-(2-氯苯基)喹啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(100mg，0.22mmol)溶解於20% MeOH-HCl溶液(20mL)中。在室溫下攪拌混合物1小時。真空濃縮混合物，產生黃色固體鹽(124mg)。在Et₃N(191mg，1.89mmol)存在下，將黃色鹽(124mg，0.32mmol)溶解於30mL DCM中。將混合物冷卻至0℃，接著逐滴添加丙烯醯氯(32mg，0.35mmol)於DCM(2mL)中之溶液。在0℃攪拌混合物30分鐘。真空濃縮混合物且藉由矽膠急驟管柱層析(50-100%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到所要產物(35mg)。¹ H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：8.78-8-79(m,1H),8.17(s,1H),7.96(s,1H),7.65-7.51(m,4H),7.10-7.09(m,1H),6.87(dd,J=16.4,10.4Hz,1H),6.15(d,J=16.4Hz,1H),5.71(d,J=10.4Hz,1H),3.81(brs,4H),3.22(brs,4H).ESI-MS m/z：412.2[M+H]⁺。

實例16 合成4-(4-丙烯醯基哌嗪-1-基)-7-氯-6-(4-氯苯基)喹啉-3-甲腈(I-42)

化合物I-42根據如下文所述的方法G製備：

3-氯-4-(4-氯苯基)苯胺

3-氯-4-碘苯胺(500mg，1.97mmol)、4-氯苯基

酸(324mg，2.07mmol)、Na₂CO₃(627mg，5.92mmol)及Pd(PPh₃)₄(228mg，0.20mmol)於1,4-二噁烷(21mL)及H₂O(4mL)中之混合物在80℃、在氬氣下攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(乙酸乙酯/石油醚=5/1)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之所要產物(424mg，91%產率)。

(E)-3-(3-氯-4-(4-氯苯基)-苯基胺基)-2-氰基丙烯酸乙酯

3-氯-4-(4-氯苯基)苯胺(250mg，1.05mmol)與(E)-2-氰基-3-乙氧基丙烯酸乙酯(186mg，1.10mmol)之混合物在100℃攪拌2小時，接著在130℃攪拌4小時。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮。用乙酸乙酯濕磨殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(219mg，55%產率)。ESI-MS m/z：359.1[M-H]^-。

7-氯-6-(4-氯苯基)-4-羥基喹啉-3-甲腈

(E)-3-(3-氯-4-(4-氯苯基)-苯基胺基)-2-氰基丙烯酸乙酯(219mg，0.608mmol)於Ph₂O(8mL)中之混合物在253℃攪拌4小時。將混合物冷卻至室溫且傾入石油醚(20mL)中。沈澱物藉由過濾來收集且用石油醚(50mL×2)洗滌，產生呈褐色固體狀之所要產物(65mg，34%產率)。

4-(4-丙烯醯基哌嗪-1-基)-7-氯-6-(4-氯苯基)喹啉-3-甲腈

根據實例2中所述之程序，以四個步驟，自7-氯-6-(4-氯苯基)喹啉-4-醇製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.84(s,1H),8.21(s,1H),8.05(s,1H),7.66-7.59(m,4H),6.88(dd,J=16.8,10.4Hz,1H),6.17(dd,J=16.8,2.0Hz,1H),5.74(dd,J=10.4,2.0Hz,1H),3.83-3.74(m,8H).ESI-MS m/z：437.2[M+H]⁺。

實例17 合成1-(4-(5-(4-氯苯基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-22)

化合物I-22根據如下文所述的方法H製備：

4-(5-(4-氯苯基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

4-氯-5-(4-氯苯基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(180mg，0.64mmol)、哌嗪-1-甲酸第三丁酯(119mg，0.64mmol)與二異丙基胺於THF(6mL)中之溶液在室溫下攪拌隔夜。將混合物分配於DCM與水之間。有機層經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到所要產物，其不經進一步純化即直接用於下一步驟中。

5-(4-氯苯基)-4-(哌嗪-1-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶鹽酸鹽

向獲自先前步驟之4-(5-(4-氯苯基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯於1,4-二噁烷(10mL)及MeOH(5mL)中之懸浮液中添加HCl於1,4-二噁烷(4M，1.0mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物隔夜。真空濃縮混合物且殘餘物不經進一步純化即直接用於下一步驟中。

1-(4-(5-(4-氯苯基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

在0℃，向上述所得5-(4-氯苯基)-4-(哌嗪-1-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶鹽酸鹽於DCM(10mL)中之溶液中添加Et₃N(0.2mL)，隨後添加丙烯醯氯。允許所得混合物升溫至RT且攪拌1小時。將混合物分配於DCM 與水之間。有機層經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。經由Isolera One(二氧化矽濾筒，0-60%乙酸乙酯/己烷)純化殘餘物，得到所要產物(27.5mg)。¹ H NMR(300MHz,CDCl₃),δ：8.64(s,1H),7.35-7.48(m,4H),7.30(s,1H),6.42-6.60(m,1H),6.26(d,J=24Hz,1H),5.69(d,J=10.5Hz,1H),3.10-3.35(m,8 H).ESI-MS m/z：385.0[M+H]⁺

實例18 合成1-(4-(8-(2-氯苯基)喹唑啉-2-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-35)

化合物I-35根據如下文所述的方法I製備：

4-(8-溴喹唑啉-2-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

根據實例8步驟1中所述之程序，自8-溴-2-氯喹唑啉製備標題化合物。

4-(8-(2-氯苯基)喹唑啉-2-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

4-(8-溴喹唑啉-2-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(250mg，0.64mmol)、2-氯苯基

酸(110mg，1.1mmol)與Pd(dppf)Cl₂.CH₂Cl₂(50mg)於1,4-二噁烷(6mL)與飽和NaHCO₃溶液(3mL)中之混合物在100℃攪拌1小時。允許混合物冷卻至室溫且分配於水與乙酸乙酯之間。有機層經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。經由Isolera One(二氧化矽濾筒，0-60%乙酸乙酯/己烷)純化殘餘物，得到所要產物。

1-(4-(8-(2-氯苯基)喹唑啉-2-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根據實例8之步驟2及步驟3中所述之程序，自4-(8-(2-氯苯基)喹唑啉-2-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ：9.07(s,1H),7.74(dd,J=8.0,1.6Hz,1H),7.67(dd,J=6.8,1.2Hz,1H),7.46-7.56(m,1H),7.39-7.42(m,4H),6.58(dd,J=16.8,10.8Hz,1H),6.32(dd,J=16.8,2.0Hz,1H),5.71(dd,J=10.6,1.9Hz,1H),3.8-3.9(br.,4H),3.68-3.78(br.,2H),3.55-3.62(br.,2H).ESI-MS m/z：379.1[M+H]⁺。

實例19 合成1-(4-(5-(2-氯苯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-28)

化合物I-28根據如下文所述的方法J製備：

4-氯-7H-吡咯并[2,3]嘧啶

1H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4(7H)-酮(2.5g，18.6mmol)於46mL POCl₃中之混合物在回流下攪拌5小時。允許混合物冷卻至室溫，接著真空濃縮以移除過量的POCl₃。向殘餘物中添加冰且在室溫下攪拌混合物10分鐘。用乙醚萃取水層。有機層經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈灰白色固體狀之所要產物(1.5g，54%產率)。

4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3]嘧啶

4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(1.8g，11.9mmol)與N-碘丁二醯胺(3g，13.1mmol)混合於圓底燒瓶中。燒瓶在高真空下乾燥5小時，接著用氬氣回填。向此混合物中添加無水DMF(100mL)且所得混合物在黑暗中攪拌20小時。反應物用甲醇淬滅且真空濃縮。殘餘物用150mL DCM稀釋且用水(200mL)、亞硫酸鈉飽和水溶液(200mL)及鹽水(100mL)洗滌。有機層經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(50%乙酸乙酯/己烷)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(3.1g，95%產率)。ESI-MS m/z：279.5[M+H]⁺。

4-氯-5-碘-7-苯磺醯基-吡咯并[2,3-d]嘧啶

在0℃，向4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3]嘧啶(280mg，1mmol)於DMF(5mL)中之溶液中添加NaH(60%,52mg，1.3mmol)且所得混合物在0℃攪拌30分鐘。向此混合物中添加苯磺醯氯(194mg，1.1mmol)。混合物接著在室溫下攪拌2小時。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析來純化殘餘物，得到所要產物(300mg，71.6%產率)。

4-氯-5-(2-氯苯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶

向4-氯-5-碘-7-苯磺醯基-吡咯并[2,3-d]嘧啶(300mg，0.71mmol)與2-氯苯基

酸(167mg，1.07mmol)於1,4-二噁烷(15mL)及水(3mL) 中之溶液中添加Pd(PPh₃)₄(60mg)及Na₂CO₃(227mg，2.14mmol)。在80℃攪拌混合物隔夜。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析來純化殘餘物，得到所要產物(120mg，63%產率)。ESI-MS m/z：262.2[M-H]^-。

4-(5-(2-氯苯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

向4-氯-5-(2-氯苯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(120mg，0.45mmol)及哌嗪-1-甲酸第三丁酯(254mg，1.36mmol)於1,4-二噁烷(15mL)中之溶液中添加DIEA(293mg，2.27mmol)。在100℃攪拌混合物隔夜。真空濃縮混合物，且藉由矽膠急驟管柱層析來純化殘餘物，得到所要產物(120mg，64%產率)。

1-(4-(5-(2-氯苯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根據實例2中所述之程序，以兩個步驟，自4-(5-(2-氯苯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.5(s,1H),7.5(m,1H),7.4(m,3H),7.3(s,2H),6.5(m,1H),6.3(m,1H),5.7(m,1H),3.4(m,8H).ESI-MS m/z：368.3[M+H]⁺。

實例20 合成1-(4-(2-胺基-7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-39)及1-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)-2-甲氧基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-43)

化合物I-39及I-43根據如下文所述的方法F製備：

6-溴-7-氯喹唑啉-2,4-二醇

2-胺基-5-溴-4-氯苯甲酸甲酯(3.0g，11.34mmol)與尿素(1.36g，22.68mmol，2eq.)之混合物在200℃攪拌3小時。允許混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯濕磨且乾燥，得到呈褐色固體狀之所要產物(2.39g)。

6-溴-2,4,7-三氯喹唑啉

6-溴-7-氯喹唑啉-2,4-二醇(1.1g，6.79mmol)於30mL POCl₃中之混合物在回流下攪拌2天。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮以移除POCl₃。在0℃，將殘餘物傾入Et₃N(13.7g，20eq.)於30mL DCM中之溶液中。將混合物分配於乙酸乙酯與鹽水之間。有機層經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析(5-10%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之所要產物(474mg)。

4-(6-溴-2,7-二氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

在室溫下，向哌嗪-1-甲酸第三丁酯(123mg，0.66mmol)於DMF(10mL)中之溶液中添加DIEA(94mg，0.72mmol)，隨後添加6-溴-2,4,7-三氯喹唑啉(206mg，0.66mmol)。所得混合物在50℃攪拌40分鐘。允許混合物冷卻至室溫且分配於水與乙酸乙酯之間。用鹽水洗滌有機層，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(5%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之所要產物(222mg)。ESI-MS m/z：463.2[M+H]⁺。

4-(6-溴-7-氯-2-甲氧基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

向NaOMe(26mg，0.476mmol)於MeOH(20mL)中之溶液中添加4-(6-溴-2,7-二氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(110mg，0.238mmol)。混合物在60℃、在氬氣下攪拌40分鐘。混合物藉由水(1.0mL)淬滅，接著真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(10-20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之所要產物(55mg)。ESI-MS m/z：459.2[M+H]⁺。

4-(7-氯-6-(4-氯苯基)-2-甲氧基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

4-(6-溴-7-氯-2-甲氧基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(85mg，0.19mmol)、(4-氯苯基)

酸(35mg，0.22mmol)、Pd(PPh₃)₄(22mg，0.019mmol)、Na₂CO₃(60mg，0.56mmol)於二噁烷(20mL)及水(2mL)中之混合物在80℃、在氬氣下攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮。殘餘物藉由矽膠急驟管柱層析(10-20%乙酸乙酯/石油醚)、隨後藉由製備型TLC純化，得到呈白色固體狀之所要產物(100mg)。ESI-MS m/z：489.4[M+H]⁺。

1-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)-2-甲氧基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(7-氯-6-(4-氯苯基)-2-甲氧基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(100mg，0.20mmol)溶解於20mL 20%HCl甲醇溶液中。混合物在室溫下攪拌1小時，接著真空濃縮，產生黃色固體鹽(90mg)。

將上述黃色固體(90mg，0.21mmol)與Et₃N(129mg，1.27mmol)一起溶解於30mL DCM中。將混合物冷卻至0℃，接著逐滴添加至丙烯醯氯(23mg，0.25mmol)於DCM(2mL)中之溶液中。所得混合物在0℃攪拌30分鐘。將混合物傾入H₂O(100mL)、飽和NaHCO₃(50mL)及鹽水(50mL)中，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。殘餘物藉由製備型TLC、隨後藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之所要產物(8mg)。ESI-MS m/z：443.2[M+H]⁺。

4-(2-胺基-6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

4-(6-溴-2,7-二氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯於飽和NH₃-EtOH(4mL)中之混合物在密封管中、在100℃攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(20-30%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(70mg)。

4-(2-胺基-7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

4-(2-胺基-6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(70mg，0.16mmol)、(4-氯苯基)

酸(29mg，0.19mmol)、Pd(PPh₃)₄(18mg，0.019mmol)及Na₂CO₃(50mg，0.48mmol)於二噁烷(20mL)及水(2mL)中之混合物在80℃、在氬氣下攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫，接著真空濃縮。殘餘物藉由矽膠急驟管柱層析(10-20%乙酸乙酯/石油醚)、隨後藉由製備型TLC純化，得到呈紅色固體狀之所要產物(70mg)。ESI-MS m/z：474.5[M+H]⁺。

1-(4-(2-胺基-7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(2-胺基-7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(70mg，0.15mmol)溶解於20% HCl甲醇溶液(20mL)中且所得混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮混合物，得到呈黃色固體鹽狀之所要產物(70mg)。

在0℃，向上述所得黃色固體(70mg，0.21mmol)、丙烯酸(18mg，0.25mmol)、EDCI(73mg，0.381mmol)及HOBT(52mg，0.381mmol)於10mL DMF中之混合物中逐滴添加Et₃N(120mg，1.2mmol)於DCM(2mL)中之溶液。所得混合物在0℃攪拌30分鐘且在室溫下攪拌1.5小時。將混合物傾入水(100mL)、飽和NaHCO₃(50mL)及鹽水(50mL)中，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析來純化殘餘物，產生呈灰色固體狀之所要產物(5mg)。ESI-MS m/z：428.3[M+H]⁺。

實例21 合成1-(4-(7-氯-6-(2-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-36)

化合物I-36根據如下文所述的方法K製備：

4-(6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)哌啶-1,4-二甲酸1-第三丁酯4-甲酯

在氮氣下，在0℃，向哌啶-1,4-二甲酸第三丁酯甲酯(3.3g，13.5mmol)於無水THF(30mL)中之攪拌溶液中添加LiHMDS(15mL，15mmol)且所得混合物在0℃攪拌1小時。向此混合物中添加6-溴-4,7-二氯喹唑啉(748mg，2.7mmol)於THF(5mL)中之溶液且所得混合物在室溫下攪拌4小時。混合物用冰-水淬滅且分配於水與乙酸乙酯之間。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(1-10%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(580mg，37%產率)。

4-(6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯

向4-(6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)哌啶-1,4-二甲酸1-第三丁酯4-甲酯(483mg，1.2mmol)於DMSO(10mL)中之溶液中添加LiCl(103mg，2.4mmol)及水(65mg，3.6mmol)，且所得混合物在110℃攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫且分配於水與乙酸乙酯之間。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(1-20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(170mg，33%產率)。

4-(7-氯-6-(2-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯

4-(6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(230mg，0.59mmol)、2-氯苯基

酸(138mg，0.88mmol)、Pd(PPh₃)₄(69mg，0.06mmol)及Na₂CO₃(188mg，106mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在氬氣下、在100℃攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫且分配於水與乙酸乙酯之間。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(1-20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(160mg，65%產率)。

1-(4-(7-氯-6-(2-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-36)

根據實例2之步驟5及6中所述之程序，自4-(7-氯-6-(2-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.28(s,1H),8.55(s,1H),8.27(s,1H),7.70(m,2H),7.53-7.68(m,2H),6.82-6.88(m,1H),6.10(dd,J=2.5,16.8Hz,1H),5.68(dd,J=2.3,10.3Hz,1H),4.55(d,J=12.2Hz,1H),4.09-4.16(m,2H),3.32(t,J=12.2Hz,1H),2.89(t,J=12.1Hz,1H),1.72-1.93(m,4H).ESI-MS m/z：410.35[M-H]^-。

實例22 合成7-氯-6-(4-氯苯基)-4-(4-(乙烯磺醯基)哌嗪-1-基)喹唑啉(I-45)

根據如下文所述之方法A的通用程序來製備化合物I-45：

4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

根據實例3步驟4中所述之程序，自4-(6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯及4-氯苯基

酸製備標題化合物。

4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(500mg， 1.09mmol)於HCl/MeOH(10mL，28.6mmol)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。真空濃縮混合物，得到粗產物。

7-氯-6-(4-氯苯基)-4-(4-(乙烯磺醯基)哌嗪-1-基)喹唑啉

上述所得粗產物用DCM(15mL)溶解且冷卻至0℃。向此混合物中添加2-氯乙烷磺醯氯(213.2mg，1.31mmol)及Et₃N(1.5mL，10.9mmol)且所得混合物在0℃攪拌10分鐘。混合物用冰-水淬滅且分配於水與乙酸乙酯之間。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所要產物(3mg，0.6%產率)。¹ H-NMR(400M Hz,CDCl₃)δ：8.78(s,1H),8.08(s,1H),7.75(s,1H),7.49(d,J=8.4Hz,2H),7.42(d,J=8.4Hz,2H),6.46(dd,J=10,16.8Hz,1H),6.31(d,J=16.8Hz,1H),6.11(d,J=9.6Hz,1H),3.91(t,J=4.8Hz,4H),3.35(t,J=4.8Hz,4H).ESI-MS m/z：449.25[M+H]⁺。

實例23 合成1-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-2-(羥基甲基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-46)

根據如下文所述之方法A的通用程序來製備化合物I-46：

4,7-二氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉

根據實例2之步驟1、2及3中所述之程序，自2-胺基-5-溴-4-氯苯甲酸酯製備標題化合物。

4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-2-(羥基甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

在室溫下，將上述所得粗4,7-二氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉(200mg，0.464mmol)添加至2-(羥基甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(210mg，0.968mmol)與DIEA(418mg，3.24mmol)於1,4-二噁烷(20mL)中之混合物中且所得混合物在80℃攪拌3小時。允許混合物冷卻至室溫，接著真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(DCM/MeOH=30：1)純化殘餘物，得到呈淡黃色油狀之所要產物(110mg，35%產率)。ESI-MS m/z：498.9[M+H]⁺。

(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-基)甲醇鹽酸鹽

4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-2-(羥基甲基)哌嗪-1-甲酸酯(110mg，0.225mmol)及HCl於MeOH(10mL，28.6mmol)中之混合物在室溫下攪拌1小時。真空濃縮混合物，得到呈黃色固體狀之粗產物(106mg)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。

1-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-2-(羥基甲基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

在室溫下，向上述所得黃色固體(106mg，0.225mmol)於DMF(5mL)中之攪拌溶液中添加丙烯酸(19mg，0.27mmol)、BOP(149mg，0.338mmol)及DIEA(203mg，1.58mmol)且所得混合物在室溫下攪拌30分鐘。將混合物傾入飽和NaHCO₃水溶液(50mL)中，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(DCM/MeOH=20：1)純化殘餘物，得到呈固體狀之所要產物(20mg，20%產率，2個步驟)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ： 8.7(s,1H),8.2(d,J=2.8Hz,1H),8.0(s,1H),7.5(m,4H),6.8(dd,J=10.4,16.4Hz,1H),61(d,J=17Hz,1H),5.7(dd,J=2.4,10.4Hz,1H),5.0(m,1H),4.3(m,2H),4.2(m,2H),3.6(m,3H),2.5(s,2H).ESI-MS m/z：443.30[M+H]⁺。

實例24 合成1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲腈(I-47)

根據如下文所述之方法A的通用程序來製備化合物I-47：

4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲醯胺

在室溫下將粗4,7-二氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉(310mg，1mmol)添加至哌嗪-2-甲醯胺(249mg，1.5mmol)與DIEA(645mg，5mmol)於1,4-二噁烷(20mL)中之混合物中且所得混合物在80℃攪拌2小時。允許混合物冷卻至室溫，接著真空濃縮。殘餘物不經進一步純化即用於下一步驟中。ESI-MS m/z：402.3[M+H]⁺。

2-胺甲醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

在室溫下，向上述所得粗產物4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲醯胺於DCM(20mL)中之溶液中添加Et₃N(152mg，1.5mmol)及二碳酸二第三丁酯(262mg，1.2mmol)。在室溫下攪拌混合物3小時。真空濃縮混合物且藉由矽膠急驟管柱層析(DCM/MeOH=30：1)純化殘餘物，得到呈固體狀之所要產物(60mg，12%產率)。ESI-MS m/z：502.4[M+H]⁺。

4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-2-氰基哌嗪-1-甲酸第三丁酯

在0℃，向2-胺甲醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(60mg，0.12mmol)及Et₃N(48mg，0.48mmol)於DCM(20mL)中之溶液中添加TFAA(50mg，0.24mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。反應混合物用飽和NaHCO₃溶液淬滅，接著用DCM萃取。有機層用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(DCM/MeOH=50：1)純化殘餘物，得到呈固體狀之所要產物(50mg，86%產率)。ESI-MS m/z：484.4[M+H]⁺。

1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲腈

根據實例2之步驟5及6中所述之程序，自4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-2-氰基哌嗪-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.7(s.1H),8.1(s,1H),8.0(d,J=2.0Hz,1H),7.5(m,4H),6.8(dd,J=10.4,16.8Hz,1H),6.3(dd,J=1.6,16.8Hz,1H),5.8(dd,J=1.6,10.4Hz,1H),4.6(m,1H),4.3(m,3H),3.6(m,2H),3.4(s,1H).ESI-MS m/z：438.25[M+H]⁺。

實例25 合成1-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)-2-甲基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1- 酮(I-50)

根據如下文所述之方法M的通用程序來製備化合物I-50：

6-溴-7-氯-2-甲基喹唑啉-4-醇

在室溫下，向2-胺基-5-溴-4-氯苯甲酸甲酯(1.0g，3.781mmol)於MeCN(35mL)中之溶液中連續添加無水鹽酸20分鐘。所得混合物在回流下攪拌2小時。允許混合物冷卻至室溫且傾入飽和NaHCO₃溶液中。過濾白色固體且用乙酸乙酯萃取濾液。合併濾餅與有機層且經Na₂SO₄乾燥，真空濃縮，得到呈白色固體狀之粗產物(1.62g)。ESI-MS m/z：273.3[M+H]⁺。

6-溴-4,7-二氯-2-甲基喹唑啉

6-溴-7-氯-2-甲基喹唑啉-4-醇(500mg，1.828mmol)於30mL SOCl₂中之混合物在回流下攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮。殘餘物經由二氧化矽層析(5-10%乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈黃色固體狀之所要產物(180mg，34%產率)。

4-(6-溴-7-氯-2-甲基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

在室溫下，向哌嗪-1-甲酸第三丁酯(76mg，0.410mmol)於i-PrOH(10mL)中之溶液中添加6-溴-4,7-二氯-2-甲基喹唑啉(60mg，0.205mmol)。所得混合物在回流下攪拌40分鐘。允許混合物冷卻至室溫且分配於水與乙酸乙酯之間。有機層用飽和NaHCO₃及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(5%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之所要產物(53mg，59%產率)。

1-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)-2-甲基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根據實例3中所述之程序，以三個步驟，自4-(6-溴-7-氯-2-甲基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：7.92(s,2H),7.59(m,4H),6.84-6.77(dd,J=10.4,16.8Hz,1H),6.17-6.36(m,1H),5.74-5.71(m,1H),3.85-3.72(m,8H),2.54(s,3H).ESI-MS m/z：428.3[M+H]⁺。

實例26 合成1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)-2-甲基喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲腈(I-56)

根據如下文所述之方法M的通用程序來製備化合物I-56：

4-(6-溴-7-氯-2-甲基喹唑啉-4-基)哌嗪-1,2-二甲酸1-第三丁酯2-甲酯

向6-溴-4,7-二氯-2-甲基喹唑啉(435mg，1.49mmol)及哌嗪-1,2-二甲酸1-第三丁酯2-甲酯(437mg，1.79mmol)於1,4-二噁烷(30mL)中之溶液中添加DIEA(769mg，5.96mmol)。在80℃攪拌混合物1.5小時。允許混合物冷卻至室溫且分配於水與乙酸乙酯之間。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析((5-50%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之所要產物(224mg， 30%產率)。

4-(6-溴-7-氯-2-甲基喹唑啉-4-基)-1-(第三丁氧基羰基)哌嗪-2-甲酸

向4-(6-溴-7-氯-2-甲基喹唑啉-4-基)哌嗪-1,2-二甲酸1-第三丁酯2-甲酯(224mg，0.448mmol)於THF(15mL)及H₂O(5mL)中之溶液中添加LiOH.H₂O(114mg，2.690mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用H₂O稀釋，用HCl酸化以將pH調節至4，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮，得到呈黃色固體狀之所要產物(211mg，97%產率)。

4-(6-溴-7-氯-2-甲基喹唑啉-4-基)-2-胺甲醯基哌嗪-1-甲酸第三丁酯

在-5℃，向4-(6-溴-7-氯-2-甲基喹唑啉-4-基)-1-(第三丁氧基羰基)哌嗪-2-甲酸(221mg，0.435mmol)及Et₃N(176mg，1.738mmol)於THF(35mL)中之溶液中添加氯甲酸乙酯(51mg，0.465mmol)。混合物在-5℃攪拌40分鐘且添加NH₃.H₂O(30%，507mg，4.346mmol)。所得混合物在0℃持續攪拌5分鐘。將混合物分配於水與乙酸乙酯之間。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(3%甲醇/二氯甲烷)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之所要產物(179mg，85%產率)。ESI-MS m/z：484.3[M+H]⁺。

2-胺甲醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)-2-甲基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

4-(6-溴-7-氯-2-甲基喹唑啉-4-基)-2-胺甲醯基哌嗪-1-甲酸第三丁酯(179mg，0.371mmol)、(4-氯苯基)

酸(67mg，0.426mmol)、Pd(PPh₃)₄(51mg，0.0445mmol)及Na₂CO₃(118mg，1.113mmol)於1,4-二噁烷(25mL)中之混合物在85℃、在氬氣下攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(3%甲醇/二氯甲烷)純化殘餘物，得到呈褐色固體狀之所要產物(181mg，95%產率)。ESI-MS m/z：517.4[M+H]⁺。

4-(7-氯-6-(4-氯苯基)-2-甲基喹唑啉-4-基)-2-氰基哌嗪-1-甲酸第三丁酯

在0℃，向2-胺甲醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)-2-甲基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(100mg，0.194mmol)及Et₃N(78mg，0.775mmol)於DCM(30mL)中之溶液中添加TFAA(162mg，0.776mmol)並所得混合物在室溫下攪拌1小時。反應混合物用飽和NaHCO₃溶液淬滅，接著用二氯甲烷萃取。有機層用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=2：1)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之所要產物(58mg，60%產率)。ESI-MS m/z：499.4[M+H]⁺。

1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)-2-甲基喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲腈

將4-(7-氯-6-(4-氯苯基)-2-甲基喹唑啉-4-基)-2-氰基哌嗪-1-甲酸第三丁酯(100mg，0.194mmol)溶解於20mL 20% HCl/Et₂O溶液中。混合物在室溫下攪拌30分鐘，接著真空濃縮，產生固體鹽(44mg，87%產率)。將上述固體(44mg，0.101mmol)與Et₃N(51mg，0.505mmol)一起溶解於25mL DCM中。將混合物冷卻至0℃，接著添加丙烯醯氯(10mg，0.111mmol)於二氯甲烷(2mL)中之溶液。所得混合物在0℃攪拌40分鐘。用乙酸乙酯萃取混合物。有機層用飽和NaHCO₃及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。經由二氧化矽層析(石油醚/乙酸乙酯=2：1)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(24mg，52%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.01(d,J=6.4Hz,2H),7.63(q,J=8.4,20.4Hz,4H),6.90(dd,J=10.4,16.4Hz,1H),6.30(m,1H),5.68(s,1H),4.60(m,1H),4.32(m,2H),3.57(m,2H),2.59(s,3H),3.36(m,1H).ESI-MS m/z：453.3[M+H]⁺。

實例27 合成1-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-2-(2-羥乙基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-62)

根據如下文所述之方法A的通用程序來製備化合物I-62：

2-(3-側氧基哌嗪-2-基)乙酸甲酯

在室溫下，向順丁烯二酸二甲酯(4.0g，27.78mmol)於丙-2-醇(40mL)中之溶液中添加乙烷-1,2-二胺(1.167g，27.78mmol)。所得混合物在55℃攪拌16小時且真空濃縮。用乙酸乙酯/石油醚=1：1之混合物洗滌殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(2.8g，59%產率)。

2-(哌嗪-2-基)乙醇

在0℃，向2-(3-側氧基哌嗪-2-基)乙酸甲酯(1.82g，10.58mmol)於THF(150mL)中之溶液中添加LiAlH₄(2.01g，52.9mmol)。所得混合物在回流下攪拌16小時。接著將混合物冷卻至室溫。其用10H₂O.Na₂SO₄淬滅且過濾，用乙酸乙酯洗滌。濾液經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮，得到呈黃色油狀之所要產物(674mg，49%產率)。

2-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-基)乙醇

4,7-二氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉(150mg，0.48mmol)、2-(哌嗪-2-基)乙醇(187mg，1.44mmol)、Et₃N(0.33mL，2.4mmol)於1,4-二噁烷(5mL)中之混合物在80℃攪拌30分鐘。允許混合物冷卻至室溫，用飽和NaHCO₃溶液淬滅，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(甲醇/二氯乙烷=1：30)純化殘餘物，得到呈無色油狀之所要產物(121mg，63%產率)。ESI-MS m/z：403.3[M+H]⁺。

1-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-2-(2-羥乙基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

在-30℃，向2-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-基)乙醇(123mg，0.305mmol)、丙烯酸(24mg，0.336mmol)、BOP(270mg，0.61mmol)於DMF(5mL)中之溶液中添加DIEA(157mg，1.22mmol)。所得混合物歷經1小時升溫至0℃，用飽和NaHCO₃溶液淬滅，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由Pre-HPLC純化殘餘物，得到呈淡黃色油狀之所要產物(16mg，12%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.64(s,1H),8.01(s,1H),7.99(s,1H),7.64-7.57(m,4H),6.89-6.78(m,1H),6.17-6.13(m,1H),5.72(dd,J=2.4,10.4Hz,1H),4.72-4.58(m,2H),4.38-4.29(m,4H),4.06-3.99(m,1H),3.67-3.60(m,2H),1.79-1.68(m,2H).ESI-MS m/z：457.4[M+H]⁺。

實例28 合成2-(1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(I-70)

根據如下文所述之方法A的通用程序來製備化合物I-70：

2-(2-羥乙基)哌嗪-1,4-二甲酸二苯甲酯

在0℃，向2-(哌嗪-2-基)乙醇(2.0g，15.4mmol)於THF(48mL)、H₂O(32mL)及飽和NaHCO₃(32mL)中之溶液中逐滴添加Cbz-Cl(5.5g，32.3mmol)。混合物在0℃攪拌2小時且在室溫下攪拌16小時。混合物用鹽水稀釋，用二氯甲烷萃取。用鹽水洗滌有機層，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(25%-50%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈無色油狀之所要產物(1.454g，23%產率)。ESI-MS m/z： 399.4[M+H]⁺。

2-(1,4-雙((苯甲氧基)羰基)哌嗪-2-基)乙酸

在0℃，向2-(2-羥乙基)哌嗪-1,4-二甲酸二苯甲酯(515mg，1.294mmol)於丙酮(30mL)中之溶液中逐滴添加瓊斯試劑(Jones reagent)(1.48mL，3.88mmol，2.6M)，在室溫下攪拌1小時。混合物用i-PrOH(2mL)淬滅且經由矽藻土過濾。用乙酸乙酯萃取濾液。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且濃縮，得到呈無色油狀之粗產物(545mg)。ESI-MS m/z：413.2[M+H]⁺。

2-(2-胺基-2-側氧基乙基)哌嗪-1,4-二甲酸二苯甲酯

在-10℃，向2-(1,4-雙((苯甲氧基)羰基)哌嗪-2-基)乙酸(545mg，1.323mmol)及Et₃N(535mg，5.292mmol)於THF(20mL)中之溶液中添加氯甲酸乙酯(154mg，1.415mmol)且在此溫度下攪拌40分鐘。接著在-10℃向混合物中添加NH₃.H₂O(1.984g，15.87mmol)且在-10℃攪拌20分鐘。將混合物分配於水與乙酸乙酯之間。用鹽水洗滌有機層，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(2%甲醇/二氯甲烷)純化殘餘物，得到呈無色油狀之所要產物(393mg，72%產率)。ESI-MS m/z：412.3[M+H]⁺。

2-(哌嗪-2-基)乙醯胺

2-(2-胺基-2-側氧基乙基)哌嗪-1,4-二甲酸二苯甲酯(385mg，0.937mmol)、Pd/C(10%，40mg)及MeOH(30mL)之混合物在40℃、在H₂(1atm)下攪拌2.5小時。混合物經由矽藻土過濾且濃縮，得到呈無色油狀之粗產物(188mg)。

2-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-基)乙醯胺

4,7-二氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉(313mg，1.315mmol)、2-(哌嗪-2-基)乙醯胺(188mg，1.315mmol)、DIEA(848mg，6.575mmol)及1,4-二噁烷(30mL)之混合物在100℃維持5小時。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(5-20%甲醇/二氯甲烷)純化殘餘物，得到呈褐色固體狀之所要產物(78mg，14%產率)。ESI-MS m/z：417.3[M+H]⁺。

2-(1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-基)乙醯胺

在0℃，向2-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-基)乙醯胺(78mg，0.1875mmol)、Et₃N(76mg，0.750mmol)及二氯甲烷(30mL)之混合物中逐滴添加丙烯醯氯(21mg，0.225mmol)於二氯甲烷(2mL)中之溶液。所得混合物在0℃攪拌40分鐘。混合物用飽和NaHCO₃淬滅且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌有機層，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。殘餘物經由矽膠管柱層析(2.5-4%甲醇/二氯甲烷)純化，得到呈白色固體狀之所要產物(32mg，36%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.74(s,1H),8.07(s,1H),7.80(s,1H),7.50-7.42(dd,J=8.8,14.4Hz,1H),6.79-6.24(m,3H),5.83(m,1H),5.36-5.14(m,2H),4.72-4.49(m,2H,4.32(m,1H),3.99-3.49(m,3H),3.07-2.44(m,3H).ESI-MS m/z：470.2[M+H]⁺。

2-(1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

在0℃，向2-(1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-基)乙醯胺(25mg，0.0533mmol)及Et₃N(27mg，0.267mmol)於DCM(10mL)中之溶液中添加TFAA(46mg，0.214mmol)且所得混合物在室溫下攪拌20分鐘。反應混合物用飽和NaHCO₃溶液淬滅，接著用二氯甲烷萃取。有機層用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(2.5%甲醇/二氯甲烷)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(21mg，87%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.67(s,1H),8.06(m,2H),7.70(s,4H),6.88(m,1H),6.20(d,J=10.0Hz,1H),5.76(s,1H),4.97(m,1H),4.30(m,4H),3.75(m,2H),2.99(m,2H).ESI-MS m/z：453.3[M+H]⁺。

實例29 合成4-(4-丙烯醯基-3-氰基哌嗪-1-基)-7-氯喹唑啉-6-甲腈(53)

根據如下文所述之方法B的通用程序來製備化合物I-53：

4-(6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1,2-二甲酸1-第三丁酯2-甲酯

6-溴-4,7-二氯喹唑啉(300mg，1.08mmol)、哌嗪-1,2-二甲酸第三丁酯甲酯(395mg，1.62mmol)、DIEA(836mg，6.48mmol)於1,4-二噁烷(8mL)中之混合物在80℃攪拌1小時。允許混合物冷卻至室溫，用飽和NaHCO₃溶液淬滅，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。矽膠急驟管柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1：5)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(367mg，70%產率)。

1-(第三丁氧基羰基)-4-(6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲酸

向4-(6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1,2-二甲酸1-第三丁酯2-甲酯(100mg，0.206mmol)於THF(2mL)、MeOH(2mL)及水(2mL)中之溶液中添加LiOH.H₂O(165mg，4.12mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。用20%乙酸乙酯/石油醚洗滌混合物。水層用HCl水溶液(1N)酸化以將pH調節至5且用乙酸乙酯萃取。有機層經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到所要產物(65mg，67%產率)。

4-(6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)-2-胺甲醯基哌嗪-1-甲酸第三丁酯

在0℃，向1-(第三丁氧基羰基)-4-(6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲酸(65mg，0.14mmol)、Et₃N(0.11mL，0.77mmol)於THF(4mL)及DMF(2mL)中之混合物中添加氯甲酸乙酯(83mg，0.77mmol)。所得混合物在0℃攪拌1小時且添加NH₃.H₂O(1mL，15N)。接著將混合物升溫至室溫且再攪拌1小時。其用飽和NaHCO₃溶液淬滅，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈黃色固體狀之粗產物(77mg)。ESI-MS m/z：471.4[M+H]⁺。

2-胺甲醯基-4-(7-氯-6-氰基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

4-(6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)-2-胺甲醯基哌嗪-1-甲酸第三丁酯(200mg，0.43mmol)、PdCl₂(dppf)(31mg，0.043mmol)、Zn(CN)₂(80mg，0.68mmol)及DMF(20mL)之混合物在回流下攪拌5小時。允許混合物冷卻至室溫且分配於乙酸乙酯與水之間。用鹽水洗滌有機層，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(1-2%甲醇/二氯甲烷)純化殘餘物，得到呈固體狀之所要產物(140mg，79%產率)。ESI-MS m/z：417.3[M+H]⁺。

4-(7-氯-6-氰基喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲醯胺

在室溫下，向2-胺甲醯基-4-(7-氯-6-氰基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(140mg，0.34mmol)於二氯甲烷(20mL)中之溶液中TFA(2mL)。所得混合物在室溫下攪拌2小時。真空濃縮混合物，得到粗產物(100mg)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。

1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-氰基喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲醯胺

在0℃，向4-(7-氯-6-氰基喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲醯胺(100mg，0.32mmol)、Et₃N(96mg，0.96mmol)於二氯甲烷(10mL)中之混合物中添加丙烯醯氯(35mg，0.384mmol)。所得混合物在室溫下攪拌0.5小時，傾入水中，接著用二氯甲烷萃取。用鹽水洗滌有機層，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(1-2%甲醇/二氯甲烷)純化殘餘物，得到呈固體狀之所要產物(50mg，43%產率)。ESI-MS m/z：371.3[M+H]⁺。

4-(4-丙烯醯基-3-氰基哌嗪-1-基)-7-氯喹唑啉-6-甲腈

在室溫下，向1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-氰基喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲醯胺(50mg，0.14mmol)及Et₃N(82mg，0.81mmol)於DCM(10mL)中之混合物中添加三氟乙酸酐(117.6mg，0.56mmol)。所得混合物在室溫下攪拌0.5小時且傾入水中，接著用二氯甲烷萃取。用鹽水洗滌有機層，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(1-3%甲醇/二氯甲烷)純化殘餘物，得到所要產物(15mg，32%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.79(s,1H),8.77(s,1H),8.16(s,1H),6.92-6.85(m,1H),6.32-6.28(m,1H),5.91-5.88(m,1H),5.68(s,1H),4.73-4.70(d,J=14Hz,1H),4.46-4.43(d,J=13.2Hz,1H),4.25-4.22(d,J=12.8Hz,1H),3.82-3.74(m,2H),3.59-3.56(m,1H).ESI-MS m/z：353.2[M+H]⁺。

實例30 合成1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-環丙基喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲腈(55)

根據如下文所述之方法B的通用程序來製備化合物I-55：

2-胺甲醯基-4-(7-氯-6-環丙基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

4-(6-溴-7-氯喹唑啉-4-基)-2-胺甲醯基哌嗪-1-甲酸第三丁酯(200mg，0.414mmol)、環丙基

酸(44mg，0.51mmol)、K₃PO₄.3H₂O(270mg，1.272mmol)、Pd(OAc)₂(18mg，0.08mmol)與三環己基膦(22mg，0.08mmol)於甲苯(10mL)及水(1mL)中之混合物在回流下、在氬氣下攪拌16小時。移除溶劑，且藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到呈固體狀之所要產物(100mg，56%產率)。ESI-MS m/z：432.4[M+H]⁺。

丙烯醯基-4-(7-氯-6-環丙基喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲醯胺

依循實例1中所述之程序，以兩個步驟，自2-胺甲醯基-4-(7-氯-6-環丙基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。

丙烯醯基-4-(7-氯-6-環丙基喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲醯胺

在0℃，向1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-環丙基喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲醯胺(17mg，0.044mmol)與Et₃N(18mg，0.176mmol)於DCM(5mL)中之溶液中添加TFAA(18mg，0.088mmol)且所得混合物在室溫下攪拌 1小時。反應混合物用飽和NaHCO₃溶液淬滅，接著用二氯甲烷萃取。有機層用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到呈固體狀之所要產物(10mg，62%產率)。¹ H NMR(400MHz,CDCl3)δ：8.8(s,1H),8.0(s,1H),7.7(s,1H),6.6(dd,J=10.0,16.4Hz,1H),6.5(d,J=16.4Hz,1H),6.0(dd,J=2.0,10.4Hz,1H),6.0-5.9(m,1H),4.4(dd,J=2,13.2Hz,1H),4.3-4.1(m,2H),3.9-3.8(m,1H),3.3-3.1(m,2H),2.4-2.3(m,1H),1.2-1.1(m,2H),1.0-0.9(m,2H).ESI-MS m/z：368.3[M+H]⁺。

實例31 合成(S)-1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲醯胺(I-54)

根據如下文所述之方法A的通用程序來製備化合物I-54：

(S)-哌嗪-2-甲酸甲酯鹽酸鹽

(S)-哌嗪-1,3-二甲酸第三丁酯甲酯(366mg，1.5mmol)與HCl於MeOH(20mL，2.9M)中之混合物在室溫下攪拌1小時。真空濃縮混合物，產生呈黃色固體狀之粗產物(270mg)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。

(S)-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1,2-二甲酸1-第三丁酯2-甲酯

上述所得粗(S)-哌嗪-2-甲酸甲酯鹽酸鹽、4,7-二氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉(310mg，1mmol)、DIEA(1.29g，10mmol)與1,4-二噁烷(20mL)之混合物在80℃攪拌1小時。接著將混合物冷卻至室溫且添加二碳酸二-第三丁酯(327mg，1.5mmol)。攪拌混合物16小時且用飽和NaHCO₃溶液淬滅，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(甲醇/二氯乙烷=1：50)純化殘餘物，得到呈固體油狀之所要產物(300mg，58%產率，2個步驟)。ESI-MS m/z：517.5[M+H]⁺。

(S)-1-(第三丁氧基羰基)-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲酸

在室溫下，向(S)-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1,2-二甲酸1-第三丁酯2-甲酯(300mg，0.58mmol)於1：1四氫呋喃與水混合物(20mL)中之溶液中添加LiOH.H₂O(49mg，1.16mmol)且所得混合物攪拌1小時，接著用HCl水溶液(1N)酸化以將pH調節至3-5。用乙酸乙酯萃取混合物。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到粗產物(230mg)，不經進一步純化即直接用於下一步驟中。

(S)-2-胺甲醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

在0℃，向(S)-1-(第三丁氧基羰基)-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲酸(230mg，0.46mmol)、Et₃N(139mg，1.37mmol)於 THF(5mL)中之混合物中添加氯甲酸乙酯(148mg，1.37mmol)。所得混合物在0℃攪拌1小時，接著添加氫氧化銨(1mL，15N)且在室溫下再持續攪拌1小時。混合物用乙酸乙酯萃取，經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到呈固體狀之所要產物(150mg，65%產率)。ESI-MS m/z：502.4[M+H]⁺。

(S)-1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲醯胺

根據實例2中所述之程序，以兩個步驟，自(S)-2-胺甲醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.7(s,1H),8.3(d,J=8.0Hz,1H),8.0(s,1H),7.8-7.5(m,5H),7.4-7.2(m,1H),6.9-6.6(m,1H),6.2(d,J=2.4,17.6Hz,1H),5.8-5.7(m,1H),5.0-4.8(m,1H),4.7(d,J=13.2Hz,1H),4.2-4.0(m,2H),3.9-3.8(m,1H),3.7-3.5(m,1H),3.5-3.4(m,1H).ESI-MS m/z：456.3[M+H]⁺。

實例32 合成(S)-1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲腈(I-59)

根據如下文所述之方法A的通用程序來製備化合物I-59：

(S)-1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲腈

在0℃，向(S)-1-丙烯醯基-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪 -2-甲醯胺(23mg，0.05mmol)與Et₃N(20mg，0.2mmol)於DCM(5mL)中之溶液中添加三氟乙酸酐(21mg，0.1mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。反應混合物用飽和NaHCO₃溶液淬滅，接著用二氯甲烷萃取。有機層用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到呈固體狀之所要產物(15mg，68%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.7(s,1H),8.1(s,1H),8.0(s,1H),7.5(m,4H),6.8(dd,J=10.4,16.4Hz,1H),6.3(dd,J=2.0,17.2Hz,1H),5.8(dd,J=2.0,10.8Hz,1H),5.7(m,1H),4.6(d,J=14.0Hz,3H),4.3(m,2H),3.6(m,2H).ESI-MS m/z：438.3[M+H]⁺。

實例33 合成(S)-1-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-2-(羥基甲基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-63)

根據如下文所述之方法A的通用程序來製備化合物I-63：

(S)-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-2-(羥基甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

在0℃，向(S)-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1,2-二甲酸 1-第三丁酯2-甲酯(200mg，0.387mmol)於EtOH(10mL)中之溶液中添加CaCl₂(215mg，1.933mmol)及NaBH₄(74mg，1.933mmol)。在室溫下攪拌混合物16小時。過濾混合物，且藉由乙醇洗滌。真空濃縮混合物且藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到呈固體狀之所要產物(80mg，42%產率)。ESI-MS m/z：489.4[M+H]⁺。

1-((S)-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-2-(羥基甲基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根據實例14中所述之程序，以兩個步驟，自(S)-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-2-(羥基甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.7(s,1H),8.3-8.1(m,1H),8.0(s,1H),7.7-7.5(m,4H),6.8(dd,J=10.4,16.4Hz,1H),6.1(d,J=16Hz,1H),5.8(dd,J=2,10.4Hz,lH),5.1-4.9(m,1H),4.3-4.1(m,4H),4.2(m,2H),3.7-3.5(m,4H).ESI-MS m/z：443.3[M+H]⁺。

實例34 合成1-(4-(6-氯-7-苯基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-67)

根據如下文所述之方法B的通用程序來製備化合物I-67：

7-溴-6-氯喹唑啉-4-醇

在室溫下，向2-胺基-4-溴-5-氯苯甲酸(500mg，2mmol)於EtOH(20mL)中之溶液中添加甲脒乙酸酯(620mg，6mmol)。混合物回流16小時。真空濃縮混合物，且殘餘物藉由飽和NaHCO₃水溶液及乙酸乙酯/石油醚=1：2之混合物洗滌。真空乾燥固體，得到產物(520mg，100%產率)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。ESI-MS m/z：259.0[M+H]⁺。

7-溴-4,6-二氯喹唑啉

向7-溴-6-氯喹唑啉-4-醇(520mg，2mmol)於亞硫醯氯(15mL)中之溶液中添加一滴DMF。混合物回流16小時。真空濃縮混合物，殘餘物不經進一步純化即直接用於下一步驟中。

1-(4-(6-氯-7-苯基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根據實例3中所述之程序，以四個步驟，自7-溴-4,6-二氯喹唑啉製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO)δ：8.7(s,1H),8.2(s,1H),7.8(s,1H),7.6-7.4(m,5H),6.85(dd,J=10.8,16.8Hz,1H),6.2(d,J=16.8Hz,1H),5.75(d,J=10Hz,1H),3.9-3.7(m,8H).ESI-MS m/z：379.3[M+H]⁺。

實例35 合成1-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-2-((二甲基胺基)甲基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(I-60)

根據如下文所述之方法A的通用程序來製備化合物I-60：

2-(二甲基胺甲醯基)哌嗪-1,4-二甲酸二-第三丁酯

在0℃，向1,4-雙(第三丁氧基羰基)哌嗪-2-甲酸(5g，15.13mmol)、二甲胺鹽酸鹽(1.3g，15.13mmol)、EDCI(4.3g，22.7mmol)、HOBt(3.1g，22.7mmol)與DMF(100mL)之混合物中添加Et₃N(4.6g，45.39mmol)。接著將混合物升溫至室溫且持續攪拌2小時。將反應混合物傾入水中，用乙酸乙酯萃取，合併之有機層用NaHCO₃溶液、鹽水洗滌且經Na₂SO₄乾燥且濃縮。殘餘物用石油醚洗滌，得到所要產物(3.64g，67%產率)。

N,N-二甲基哌嗪-2-甲醯胺二鹽酸鹽

上述所得粗二-2-(二甲基胺甲醯基)哌嗪-1,4-二甲酸第三丁酯鹽酸鹽於MeOH(50mL，2.9M)中之混合物攪拌1小時，蒸發溶劑，得到粗產物(2.4g)。

N,N-二甲基-1-(哌嗪-2-基)甲胺

在-40℃，向上述所得粗N,N-二甲基哌嗪-2-甲醯胺二鹽酸鹽(2.4g，10.43mmol)與THF(50mL)之混合物中緩慢添加LiAlH₄(1.6g，41.73mmol)。加熱混合物至回流歷時3小時且冷卻至室溫。其用10H₂O.Na₂SO₄淬滅且過濾，用乙酸乙酯洗滌。濾液經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮，得到所要產物(693mg，47%產率)。

1-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-基)-N,N-二甲基甲胺

N,N-二甲基-1-(哌嗪-2-基)甲胺(200mg，0.68mmol)、4,7-二氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉(111mg，0.77mmol)、DIEA(397mg，3.08mmol)與二噁烷(10mL)之混合物在80℃攪拌30分鐘。允許混合物冷卻至室溫，用飽和NaHCO₃溶液淬滅，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(甲醇/二氯乙烷=1：20)純化殘餘物，得到所要產物(78mg，30%產率)。ESI-MS m/z：416.3[M+H]⁺。

1-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-2-((二甲基胺基)甲基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

在0℃，向1-(4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-基)-N,N-二甲基甲胺(78mg，0.19mmol)、Et₃N(58mg，0.57mmol)與二氯甲烷(15mL)之混合物中添加丙烯醯氯(20mg，0.22mmol)。反應物在室溫下攪拌30分鐘且用水淬滅，用二氯甲烷萃取。有機層用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析 (二氯甲烷/甲醇=30：1)純化殘餘物，得到所要產物(32mg，36%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.70(s,1H),8.57-8.56(bs,1H),8.03(s,1H),7.61-7.53(m,4H),6.83-6.80(m,1H),6.17-6.13(m,1H),5.75-5.72(m,1H),4.76-4.74(m,0.5H),4.70-4.57(m,1H),4.36-3.29(m,2H),4.11-4.08(m,0.5H),3.46(m,1H),3.27-3.11(m,2H),2.93-2.84(m,1H),1.99-1.94(m,1H),1.87(s,6H).ESI-MS m/z：470.4[M+H]⁺。

實例36 合成1-丙烯醯基-4-(6-氯異喹啉-1-基)哌嗪-2-甲腈(I-61)

根據如下文所述之方法D的通用程序來製備化合物I-61：

6-氯異喹啉2-氧化物

在室溫下，向6-氯異喹啉(1.0g，6.1mmol)於二氯甲烷(20mL)中之攪拌溶液中添加3-氯過氧苯甲酸(1.57g，9.2mmol)。反應混合物在室溫下攪拌2小時。濾出沈澱物且用二氯甲烷洗滌，濾液用NaHCO₃溶液洗滌兩次。有機層經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮，得到呈白色固體狀之所要產物(1.05g，96%產率)。ESI-MS m/z：180.2[M+H]⁺。

1,6-二氯異喹啉

6-氯異喹啉2-氧化物(1.0g，5.58mmol)與POCl₃(10mL)之混合物加熱至回流歷時4小時。冷卻至室溫之後，將反應混合物傾入冰-水中且用二氯甲烷萃取。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到所要粗產物，其不經進一步純化即用於下一步驟。

4-(6-氯異喹啉-1-基)哌嗪-2-甲醯胺

在室溫下，向1,6-二氯異喹啉(500mg，2.56mmol)於DMSO(5mL)中之攪拌溶液中添加哌嗪-2-甲醯胺(425.6mg，2.56mmol)及K₂CO₃(1.05g，7.68mmol)。將反應混合物在80℃加熱5小時。反應混合物用乙酸乙酯稀釋且用鹽水洗滌。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1：5)純化殘餘物，得到所要產物(80mg，12%產率)。ESI-MS m/z：291[M+H]⁺。

丙烯醯基-4-(6-氯異喹啉-1-基)哌嗪-2-甲醯胺

向4-(6-氯異喹啉-1-基)哌嗪-2-甲醯胺(50mg，0.172mmol)、三乙胺(52.1mg，0.51mmol)於二氯甲烷(20mL)中之混合物中逐滴添加含有丙烯醯氯(15.6mg，0.172mmol)之二氯甲烷(1mL)。反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，傾入水中且用二氯甲烷萃取。有機層用水及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：1)純化殘餘物，得到所要產物(45mg，76.3%產率)。ESI-MS m/z：345[M+H]⁺。

丙烯醯基-4-(6-氯異喹啉-1-基)哌嗪-2-甲腈

在0℃，向1-丙烯醯基-4-(6-氯異喹啉-1-基)哌嗪-2-甲醯胺(40mg，0.116mmol)、三乙胺(46.8mg，0.46mmol)於DCM(5mL)中之混合物中添加三氟乙酸酐(50mg，0.233mmol)。歷經1小時將反應混合物升溫至室溫，傾入水中且用二氯甲烷萃取。有機層用水及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：1)純化殘餘物，得到所要產物(20mg，53%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.25(m,1H),8.22(m,1H),8.11(s,1H),7.71(m,1H),7.52(m,1H),6.96(dd,J=10.5,16.9Hz,1H),6.32(dd,J=1.7,16.7Hz,1H),5.90(dd,J=1.7,16.7Hz,1H),5.79(m,1H),4.34(m,1H),3.99(m,1H),3.79(m,1H),3.66(m,1H),3.16(m,1H),2.97(m,1H).ESI-MS m/z：327[M+H]⁺。

實例37 合成(E)-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-1-(4-(二甲胺基)丁-2-烯醯基)哌嗪-2-甲腈(I-66)

根據如下文所述之方法A的通用程序來製備化合物I-66：

4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲醯胺

4,7-二氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉(769mg，2.48mmol)、哌嗪-2-甲醯胺二鹽酸鹽(498mg，2.48mmol)、DIPEA(3.2g，24.8mmol)及1,4-二噁烷(20mL)之混合物在80℃攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫，用飽和NaHCO₃溶液淬滅，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(甲醇/ 二氯乙烷=1：20)純化殘餘物，得到所要產物(486mg，48.7%產率)。

(E)-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-1-(4-(二甲胺基)丁-2-烯醯基)哌嗪-2-甲醯胺

在室溫下，向4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-甲醯胺(100mg，0.26mmol)、BOP(256.6mg，0.58mmol)、(E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸(48mg，0.58mmol)於二氯甲烷(10mL)中之混合物中添加DIEA(108.6mg，0.78mmol)。混合物攪拌30分鐘，用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(甲醇/二氯乙烷=1：10)純化殘餘物，得到所要產物(50mg，39%產率)。ESI-MS m/z：513.3[M+H]⁺

(E)-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-1-(4-(二甲胺基)但-2-烯醯基)哌嗪-2-甲腈

在0℃，向(E)-4-(7-氯-6-(4-氯苯基)喹唑啉-4-基)-1-(4-(二甲胺基)丁-2-烯醯基)哌嗪-2-甲醯胺(50mg，0.10mmol)及Et₃N(0.05mL，0.40mmol)於DCM(10mL)中之溶液中添加TFAA(51mg，0.20mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。反應混合物用飽和NaHCO₃溶液淬滅，接著用二氯甲烷萃取。有機層用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=20：1)純化殘餘物，得到呈固體狀之所要產物(14mg，29%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.76(s,1H),8.08(d,J=16Hz,2H),7.61(dd,J=8,24Hz,4H),6,78-6.72(m,2H),5.67(s,1H),4.62(d,J=14.4Hz,1H),4.36-4.26(m,2H),3.63(d,J=12.4Hz,1H),3.21(s,2H),3.03(d,J=6.4Hz,2H),2.26(s,1H).ESI-MS m/z：495.4[M+H]⁺。

實例38 合成1-(3-(4-(2-(4,5-二氯-2-羥基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)吖丁啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

3-(4-(2-(4,5-二氯-2-羥基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

2-(4,5-二氯-2-羥基苯基胺基)乙酸(500mg，2.12mmol)、3-(哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(565mg，2.34mmol)、EDCI.HCl(488mg，2.54mmol)、HOBt(343mg，2.54mmol)、含有Et₃N(428mg，4.24mmol)之DMF(20mL)的混合物在室溫下攪拌15小時。將混合物傾入水中且用乙酸乙酯萃取。有機層用飽和NaHCO₃水溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(DCM/MeOH=30：1)純化殘餘物，得到所要產物(300mg，31%產率)。ESI-MS m/z：457.4[M-H]^-。

2-(4,5-二氯-2-羥基苯基胺基)-1-(4-(氮雜環丁-3-基)哌嗪-1-基)乙酮鹽酸鹽

3-(4-(2-(4,5-二氯-2-羥基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(150mg，0.33mmol)於HCl-MeOH(20mL，57mmol)中之混合物在室溫下攪拌1小時。真空濃縮混合物，得到粗產物(130mg)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。

1-(3-(4-(2-(4,5-二氯-2-羥基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-基)丙-2-烯-1-酮

將2-(4,5-二氯-2-羥基苯基胺基)-1-(4-(氮雜環丁-3-基哌嗪-1-基)乙酮鹽酸鹽(120mg，0.30mmol)添加至Et₃N(0.2mL，1.44mmol)於DCM(10mL)中之混合物中，隨後添加DMF(1滴)。攪拌混合物5分鐘，接著添加丙烯醯氯(27mg，0.30mmol)。所得混合物在室溫下攪拌1小時，傾入水中，接著用MeOH/DCM萃取。用鹽水洗滌有機層，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(DCM/MeOH/NH₃.H₂O=50：1：0.1至20：1：0.2)純化殘餘物，得到所要產物(30mg，24%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-_d6)δ：10.17(s,1H),6.78(s,1H),6.71(s,1H),6.30(dd,J=10.4,17.2Hz,1H),6.09(dd,J=2.0,17.2Hz,1H),5.67(dd,J=2.4,10.4Hz,1H),5.32(t,J=4.4Hz,1H),4.26-4.22(m,1H),4.11-4.04(m,1H),3.93-3.91(m,3H),3.79-3.75(m,3H),3.52-3.51(m,4H),3.19-3.16(m,1H),2.36-2.30(m,4H).ESI-MS m/z：411.2[M-H]^-。

實例39 合成N-(1'-(2-(4,5-二氯-2-羥基苯基胺基)乙醯基)-1,3'-聯氮雜環丁-3-基)丙烯醯胺

3-(3-(丙烯醯胺基)氮雜環丁-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

向N-(氮雜環丁-3-基)丙烯醯胺鹽酸鹽(500mg，3.40mmol)、3-側氧基氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(684mg，4.0mmol)、Et₃N(343mg，3.40mmol)與AcOH(100mg，0.167mmol)於DCM(20mL)中之混合物中添加NaBH(OAc)₃(2.16g，10.2mmol)，且所得混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物傾入水中且用乙酸乙酯萃取。有機層用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(DCM/MeOH=100：1至20：1)純化殘餘物，得到所要產物(300mg，31%產率)。

N-(1-(氮雜環丁-3-基)氮雜環丁-3-基)丙烯醯胺鹽酸鹽

3-(3-(丙烯醯胺基)氮雜環丁-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(300mg，1.07mmol)於HCl-MeOH(30mL，86mmol)中之混合物在室溫下攪拌1小時。真空濃縮混合物，得到粗產物(250mg)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。

N-(1-(1-(2-(4,5-二氯-2-羥基苯基胺基)乙醯基)氮雜環丁-3-基)氮雜環丁-3-基)丙烯醯胺

2-(4,5-二氯-2-羥基苯基胺基)乙酸(120mg，0.51mmol)、EDCI.HCl(147mg，0.77mmol)、HOBt(83mg，0.61mmol)、Et₃N(154mg，1.53mmol)於DMF(20mL)中之混合物在室溫下攪拌5分鐘，接著添加N-(1-(氮雜環丁-3-基)氮雜環丁-3-基)丙烯醯胺鹽酸鹽(150mg，0.69mmol)。所得混合物在室溫下攪拌15小時。將混合物傾入水中且用乙酸乙酯萃取。有機層用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(DCM/MeOH/NH₃.H₂O=100：10：1.5)純化殘餘物，得到所要產物(6mg，3%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：10.19(s,1H),8.59(d,J=8.0Hz,1H),6.79(s,1H),6.55(s,1H),6.20(dd,J=10.0,16.8Hz,1H),6.09(dd,J=2.0,16.8Hz,1H),5.62(dd,J=2.0,9.6Hz,1H),5.20(t,J=4.0Hz,1H),4.40-4.35(m,1H),4.19-4.15(m,1H),3.96-3.88(m,2H),3.73-3.69(m,3H),3.53-3.45(m,3H),3.00-2.96(m,2H).ESI-MS m/z：399.2[M+H]⁺。

實例40 合成1-(2-(2-(4,5-二氯-2-羥基苯基胺基)乙醯基)-2,6-二氮雜螺[3.4]辛-6-基)丙-2-烯-1-酮

2,6-二氮雜-螺[3.4]辛烷-6-丙烯醯基-2-甲酸第三丁酯

向2,6-二氮雜-螺[3.4]辛烷-2-甲酸第三丁酯(80mg，0.38mmol)、Et₃N(0.2mL，1.44mmol)於DCM(20mL)中之混合物中添加丙烯醯氯(34mg，0.38mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物傾入水中且用乙酸乙酯萃取。有機層用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(DCM/MeOH=40：1)純化殘餘物，得到所要產物(50mg，50%產率)。ESI-MS m/z：289.2[M+Na]⁺。

1-(2,6-二氮雜螺[3.4]辛-6-基)丙-2-烯-1-酮

2,6-二氮雜-螺[3.4]辛烷-6-丙烯醯基-2-甲酸第三丁酯(50mg，0.19mmol)於HCl/MeOH(10mL，29mmol)中之混合物在室溫下攪拌1小時。真空濃縮混合物，得到粗產物(40mg)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。

1-(2-((4,5-二氯-2-羥基苯基)甘胺醯基)-2,6-二氮雜螺[3.4]辛-6-基)丙-2-烯-1-酮

2-(4,5-二氯-2-羥基苯基胺基)乙酸(47mg，0.2mmol)、1-(2,6-二氮雜螺[3.4]辛-6-基)丙-2-烯-1-酮(40mg，0.2mmol)、EDCI.HCl(46mg，0.24mmol)、HOBt(32mg，0.24mmol)與Et₃N(0.61mg，0.6mmol)於DMF(10mL)中之混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物傾入水中且用乙酸乙酯萃取。有機層用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(DCM/MeOH=30：1)純化殘餘物，得到所要產物(13mg，17%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：10.17(s,1H),6.78(s,1H),6.60-6.50(m,2H),6.13(dt,J=2.4,16.4Hz,1H),5.67(dd,J=2.4,10.4Hz,1H),5.19(dd,J=5.2,10.0Hz,1H),4.16-4.07(m,2H),3.90-3.83(m,2H),3.75-3.72(m,3H),3.61-3.52(m,2H),3.42-3.39(m,1H),2.16-2.13(m,1H),2.06-2.03(m,1H).ESI-MS m/z：382.3[M-H]^-。

實例41 合成1-(4-(2'-氯-5-羥基聯苯羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(III-25)

2-胺基-5-溴-3-甲氧基苯甲酸

在-5℃，向2-胺基-3-甲氧基苯甲酸(5g，29.9mmol)於MeOH(35mL)中之溶液中添加NBS(5.59g，31.4mmol)且所得混合物在0℃攪拌16小時。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌，經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到粗產物(4g，54%產率)。ESI-MS m/z：244.2[M-H]^-。

3-溴-5-甲氧基苯甲酸

在0℃，向2-胺基-5-溴-3-甲氧基苯甲酸(4g，16.3mmol)於水(20 mL)中之溶液中添加濃HCl(7.5mL，90mmol)及THF(20mL)。攪拌混合物30分鐘，接著添加NaNO₂(3.16g，45.8mmol)。所得混合物攪拌2小時，接著向反應物中添加次亞磷酸(5.1g，76mmol，50%，於H₂O中)。在室溫下攪拌混合物16小時。藉由過濾來收集沈澱物，用水洗滌且真空乾燥，得到所要產物(3.2g，85%產率)。ESI-MS m/z：229.2[M-H]^-。

3-(2-氯苯基)-5-甲氧基苯甲酸

向3-溴-5-甲氧基苯甲酸(1g，4.06mmol)及2-氯苯基

酸(1.27g，8.13mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(2mL)中之溶液中添加Pd(PPh₃)₄(468mg，0.40mmol)及Na₂CO₃(2.15g，20.3mmol)且所得混合物在80℃攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫且用HCl水溶液(1.0M)酸化以將pH調節至3-4。用乙酸乙酯萃取混合物。有機層經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到無需進一步純化之所要產物(800mg，75%產率)。ESI-MS m/z：361.2[M-H]^-。

1-(4-(2'-氯-5-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

向4-丙烯醯基哌嗪-1-甲酸第三丁酯(260mg，1.07mmol)於DCM(2mL)中之溶液中添加HCl於MeOH(10mL，28.6mmol)中之溶液且所得混合物在室溫下攪拌1小時。真空濃縮混合物。將殘餘物添加至3-(2-氯苯基)-5-甲氧基苯甲酸(280mg，1.07mmol)、HOBt(290mg，2.17mmol)、EDCI.HCl(410mg，2.17mmol)與Et₃N(324mg，3.21mmol)於DMF(10mL)中之溶液中。所得混合物在室溫下攪拌16小時且分配於DCM與飽和NaHCO₃溶液之間。有機層經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(200mg，52%產率)。ESI-MS m/z：385.2[M+H]⁺。

1-(4-(2'-氯-5-羥基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(VI-25)

在-78℃，向1-(4-(2'-氯-5-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-1-基) 丙-2-烯-1-酮(100mg，0.26mmol)於DCM(15mL)中之溶液中添加BBr₃(650mg，2.6mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物傾入冰-水中，用飽和NaHCO₃水溶液鹼化以將pH調節至7-8且用乙酸乙酯萃取。有機層經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(25mg，26%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.96(s,1H),7.58-7.56(m,1H),7.42-7.40(m,3H),6.89-6.75(m,4H),6.14(dd,J=2.0,16.8Hz,1H),5.71(dd,J=2.0,10.0Hz,1H),3.68-3.44(m,8H).ESI-MS m/z：371.2[M+H]⁺。

實例42 合成1-(4-(2',6-二氯-4-羥基聯苯羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(III-3)

1-(4-(2',6-二氯-4-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

4-(2',6-二氯-4-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(200mg，0.43mmol)於HCl之MeOH溶液(2.86M，10mL)中攪拌1小時。真空濃縮混合物，產生粗產物。將殘餘物溶解於DCM(15mL)、三乙胺(0.5mL)中，向混合物中添加丙烯醯氯(40mg，0.43mmol)。反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，傾入水中且用DCM萃取。有機層用水及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(16mg，10%產率)。ESI-MS m/z：419.2[M+H]⁺。

1-(4-(2',6-二氯-4-羥基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(VI-3)

在-60℃，向1-(4-(2',6-二氯-4-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-1- 基)丙-2-烯-1-酮(200mg，0.48mmol)於DCM(15mL)中之溶液中逐滴添加BBr₃(0.6g，2.4mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物傾入冰-水中，用飽和NaHCO₃溶液鹼化以將pH調節至8-9且用DCM萃取。有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=20：1)純化殘餘物，得到所要產物(10mg，5%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：10.6(s,1H),7.57-7.33(m,5H),7.12(s,1H),7.05(s,1H),6.80(m,1H),6.15-6.11(dd,J=2,16.8Hz,1H),5.72-5.70(m,1H),3.6(m,8H).ESI-MS m/z：405.3[M+H]⁺。

實例43 合成1-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)-N-(4,5-二氯-2-羥基苯甲基)哌啶-4-甲醯胺(II-17)

4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酸

4-氯-2-甲氧基苯甲酸(10g，53.6mmol)與NCS(35g，19.2mmol)於乙腈(200mL)中之混合物在室溫下攪拌48小時。將混合物傾入水中且用乙酸乙酯萃取。有機層用水及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮，得到粗產物(23.3g)。

4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯

向4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酸(8.2g，37mmol)與K₂CO₃(11.8g，111mmol)於DMF(100mL)中之混合物中逐滴添加CH₃I(6.3g，44mmol)且所得混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用水及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1)純化殘餘物，得到所要產物。

(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲醇

在-40℃，在氬氣下，向LiAlH₄(2.42g，64mmol)於THF(40mL)中之混合物中逐滴添加4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(6g，26mmol)於THF(50mL)中之溶液。反應混合物在-5℃至5℃攪拌1小時。將混合物冷卻至-20℃，接著添加水(2mL)及NaOH(15%)水溶液。所得混合物攪拌15分鐘。過濾固體，且用乙酸乙酯沖洗濾餅。合併之濾液經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮，得到粗產物(4.6g)。

2-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲基)異吲哚啉-1,3-二酮

在室溫下，向4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲醇(4.5g，22mmol)、異吲哚啉-1,3-二酮(9.6g，65mmol)與PPh₃(17g，65mmol)之THF溶液(100mL)的混合物中添加DIAD(13g，65mmol)且所得混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1)純化殘餘物，得到所要產物。

(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲胺

向2-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲基)異吲哚啉-1,3-二酮(1.8g，5mmol)於EtOH(5mL)中之溶液中添加水合肼(1.34g，27mmol)且所得混合物在回流下攪拌1小時。真空濃縮混合物且藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=20：1)純化殘餘物，得到所要產物(0.8g，78%產率)。

4-((4,5-二氯-2-甲氧基苯甲基)胺甲醯基)哌啶-1-甲酸第三丁酯

(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲胺(0.8g，3.90mmol)、1-(第三丁氧基羰基)哌啶-4-甲酸(0.88g，3.84mmol)、BOP(2g，1.16mmol)與DIEA(1.6g，2.91mmol)於DMF(20mL)中之混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物傾入水中且用乙酸乙酯萃取。有機層用水及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：1)純化殘餘物，得到所要產物(0.987g，62%產率)。ESI-MS m/z：415.4[M-H]^-。

N-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲基)哌啶-4-甲醯胺

4-((4,5-二氯-2-甲氧基苯甲基)胺甲醯基)哌啶-1-甲酸酯(987mg，2.37mmol)於HCl/MeOH(20mL，57.2mmol)中之混合物在室溫下攪拌1小時。接著真空蒸發溶劑且用二氯甲烷(5mL)溶解殘餘物。向此混合物中添加NaH(85mg，3.55mmol)。接著所得混合物在室溫下攪拌30分鐘。在減壓下移除溶劑，產生粗產物(800mg)。

3-(4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲基胺甲醯基)哌啶-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

N-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲基)哌啶-4-甲醯胺(750mg，2.37mmol)、3-側氧基氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(607mg，3.55mmol)、AcOH(1mL)與MeOH(5mL)之混合物在回流下攪拌2小時。向此混合物中添加NaBH₃(CN)(0.74g，11.85mmol)且所得混合物在60℃攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫且分配於NH₄Cl水溶液與乙酸乙酯之間。有機層用水及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(220mg，18%產率)。ESI-MS m/z：472.3[M+H]⁺。

1-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)-N-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲基)哌啶-4-甲醯胺

3-(4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲基胺甲醯基)哌啶-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(210mg，0.44mmol)於HCl/MeOH(10mL，2.86M)中之混合物在室溫下攪拌1小時。真空濃縮混合物，產生粗殘餘物。將殘餘物溶解於DCM(5mL)中，添加三乙胺(0.5mL)及丙烯醯氯(40mg，0.43mmol)。反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，接著分配於DCM與水之間。有機層用水及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(150mg，82%產率)。

N-(4,5-二氯-2-羥基苯甲基)-1-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)哌啶-4-甲醯胺

在-60℃，向1-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)-N-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲基)哌啶-4-甲醯胺(150mg，0.35mmol)於DCM(15mL)中之溶液中逐滴添加BBr₃(0.6g，2.4mmol)。使所得混合物升溫至室溫且攪拌1小時。將混合物傾入冰-水中，用飽和NaHCO₃溶液鹼化以將pH調節至8-9，接著用DCM萃取。有機層經無水硫酸鈉乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=20：1)純化殘餘物，得到所要產物(34mg，24%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：10.34(s,1H),8.2-8.25(m,1H),7.2(s,1H),7.0(s,1H),6.91(s,1H),6.33-6.27(m,1H),6.12-6.07(dd,J=2.4,12.4Hz,1H),5.68-5.65(dd,J=2.4,10.4Hz,1H),4.24-4.20(m,1H),4.17-4.14(m,2H),4.14-3.99(m,1H),3.94-3.90(m,1H),3.73-3.70(m,1H),3.10(s,1H),2.84-2.80(m,2H),2.22(m,1H),1.80(s,2H),1.73-1.71(m,2H),1.63-1.57(m,2H).ESI-MS m/z：412.2[M+H]⁺。

實例44 合成1-(3-(羥基甲基)-4-(2',5',6-三氯-4-甲氧基聯苯羰基)哌嗪-1-基)丙- 2-烯-1-酮(III-7)

4-氯-5-碘-2-甲氧基苯甲酸甲酯

4-氯-5-碘-2-甲氧基苯甲酸(2g，6.41mmol)、濃硫酸(1.5mL)於MeOH(50mL)中之混合物在回流下攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫且分配於水與乙酸乙酯之間。有機層用水及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮，得到呈黃色油狀之所要產物(1.85g，85%產率)。

2',5',6-三氯-4-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-甲酸甲酯

4-氯-5-碘-2-甲氧基苯甲酸甲酯(1.8g，5.51mmol)、(2,5-二氯苯基)

酸(2.1g，11.03mmol)、Pd(PPh₃)₄(403mg，0.55mmol)、Na₂CO₃(1.75g，16.54mmol)於1,4-二噁烷(50mL)及水(5mL)中之混合物在回流下、在氬氣下攪拌16小時。過濾混合物且真空濃縮濾液。藉由矽膠急驟管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=20：1)純化殘餘物，得到所要產物(1.6g，85%產率)。

1-(3-(羥基甲基)-4-(2',5',6-三氯-4-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(III-7)

依循實例36中所述之程序，以三個步驟，自2',5',6-三氯-4-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-甲酸甲酯製備標題化合物。3-(羥基甲基)-4-(2',5',6-三氯-4-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(420mg，0.79mmol)於HCl/MeOH(2.85N)中攪拌。在減壓下移除溶劑，產生粗殘餘物，將其溶解於DMF(20mL)中，添加丙烯酸(57mg，0.79mmol)、 BOP(421mg，0.95mmol)及DIEA(409mg，3.17mmol)。在室溫下攪拌反應物1小時。所得混合物傾入水中，用乙酸乙酯萃取且用水及鹽水洗滌。合併之有機層經Na₂SO₄乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=60：1)純化殘餘物，得到所要產物(92mg，24%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：7.64-7.20(m,5H),6.83-6.70(m,1H),6.16-6.11(d,1H),5.74-5.71(d,1H),6.91(s,1H),5.08-4.01(m,3H),3.90-3.86(d,3H),3.49-3.22(m,2H),2.93-2.74(m,2H),2.89-2.67(m,2H).ESI-MS m/z：451.2[M-H]^-。

實例45 合成1-(4-(4-(2,4-二氯苯基)-1H-吡咯-2-羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(III-32)

4-(4-溴-1H-吡咯-2-羰基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

向4-溴-1H-吡咯-2-甲酸(800mg，4.21mmol)、哌嗪-1-甲酸第三丁酯(822mg，4.42mmol)、BOP(2.2g，5.05mmol)於DMF(5mL)中之混合物中添加DIEA(1.63g，12.63mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物傾入水中且用乙酸乙酯萃取。有機層用水及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮，得到粗產物(920mg，61%產率),其不經純化即直接用於下一步驟。

4-(4-(2,4-二氯苯基)-1H-吡咯-2-羰基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

4-(4-溴-1H-吡咯-2-羰基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(350mg，0.98mmol)、(2,4-二氯苯基)

酸(280mg，1.47mmol)、Pd(PPh₃)₄(116 mg，0.1mmol)、Na₂CO₃(312mg，2.94mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(2mL)中之混合物在回流下、在氬氣下攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=30：1)純化殘餘物，得到所要產物(273mg，59%產率)。

1-(4-(4-(2,4-二氯苯基)-1H-吡咯-2-羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(VI-32)

4-(4-(2,4-二氯苯基)-1H-吡咯-2-羰基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(270mg，0.64mmol)於HCl/MeOH(20mL，57.2mmol)中之混合物攪拌1小時。真空濃縮混合物且將殘餘物溶解於DMF(5mL)中。向此混合物中添加丙烯酸(50mg，0.7mmol)、BOP(437mg，0.72mmol)及DIEA(248mg，1.92mmol)。在室溫下攪拌反應混合物1小時。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=60：1)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(40mg，27%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：11.88(s,1H),7.66-7.63(m,2H),7.43(m,1H),7.38(s,1H),6.91(s,1H),6.85-6.78(m,1H),6.18-6.13(dd,J=2.4,12.4Hz,1H),5.74-5.71(dd,J=2.4,10.4Hz,1H),3.76(s,4H),3.68-3.63(m,4H).ESI-MS m/z：377.3[M-H]^-。

實例46 合成(E)-1-(4-(2',6-二氯-4-羥基聯苯羰基)哌嗪-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(III-24)

4-(2',6-二氯-4-甲氧基-[1,1^-聯苯]-3-羰基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

在室溫下，向2',6-二氯-4-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-甲酸(500mg，1.68mmol)於DMF(10mL)中之攪拌溶液中添加哌嗪-1-甲酸第三丁酯(345mg，1.85mmol)、BOP(892mg，2.02mmol)及DIEA(542mg，4.2mmol)且所得混合物在室溫下攪拌2小時。反應混合物用乙酸乙酯稀釋且用鹽水洗滌。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(550mg，70%產率)。ESI-MS m/z：465.4[M+H]⁺。

(E)-1-(4-(2',6-二氯-4-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮

4-(2',6-二氯-4-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(550mg，1.18mmol)於HCl/MeOH(20mL，57.2mmol)中之混合物在室溫下攪拌1小時。在減壓下移除溶劑，產生粗產物。粗殘餘物用DMF(10mL)溶解，添加4-(二甲胺基)丁-2-烯酸(215mg，0.47mmol)、BOP(627mg，1.42mmol)及DIEA(610mg，4.73mmol)。所得混合物在室溫下攪拌2小時。反應混合物用乙酸乙酯稀釋且用鹽水洗滌。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(450mg，80%產率，2個步驟)。ESI-MS m/z：476.4[M+H]⁺。

(E)-1-(4-(2',6-二氯-4-羥基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)-4-(二甲基胺 基)丁-2-烯-1-酮(VI-24)

在-78℃，向(E)-1-(4-(2',6-二氯-4-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-酮(270mg，0.57mmol)於DCM(5mL)中之溶液中逐滴添加BBr₃(1.43g，5.7mmol)。所得混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物傾入冰-水中，用NaHCO₃水溶液鹼化以將pH調節至7，接著用DCM(3×20mL)萃取。有機層經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(150mg，57%產率)。¹ HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ：13.12(s,1H),8.02(s,1H),7.81(s,1H),6.81(m,1H),6.13(dd,J=2.8,16.8Hz,1H),5.71(dd,J=2.0,10.4Hz,1H),4.10(s,2H),3.50-3.60(m,8H).ESI-MS m/z：462.4[M+H]⁺。

實例47 合成1-(4-(2',6-二氯-4-甲氧基聯苯羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(III-1)

實例48 合成1-(3-(4-(2-(4-氯-5-環丁基-2-羥基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-53)

3-(4-(2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

在0℃，向2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基胺基)乙酸(2.0g，5.88mmol)、3-(哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(1.84g，7.64mmol)、EDCI.HCl(2.26g，11.76mmol)及HOBt(1.59g，11.76mmol)於DMF(3mL)中之溶液中添加Et₃N(3.28mL，23.52mmol)。所得混合物在室溫下攪拌16小時，接著分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。用乙酸乙酯/石油醚=1：5之混合物洗滌殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(2.24g，67%產率)。ESI-MS m/z：565.4[M+H]⁺。

3-(4-(2-(4-氯-5-環丁基-2-甲氧基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

3-(4-(2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(697mg，1.24mmol)、溴化環丁基鋅(4.46mL，2.23mmol，0.5M，於THF中)、Pd(OAc)₂(56mg，0.248mmol)及S-Phos(102mg，0.248mmol)於THF(15mL)中之混合物在65℃、在氬氣下攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫，用NH₄Cl水溶液淬滅，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(甲醇/二氯甲烷=1：30)純化殘餘物，得到呈褐色油狀之所要產物(596mg，98%產率)。ESI-MS m/z：493.5[M+H]⁺。

1-(3-(4-(2-(4-氯-5-環丁基-2-羥基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-53)

根據實例33中所述之程序，以三個步驟，自3-(4-(2-(4-氯-5-環丁基-2-甲氧基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.66(s,1H),6.63(s,1H),6.52(s,1H),6.31(dd,J=10.2,16.9Hz,1H),6.10(dd,J=2.1,16.8Hz,1H),5.68(dd,J=2.1,10.2Hz,1H),5.16(t,J=4.4Hz,1H),4.27-4.23(m,1H),4.08-4.04(m,1H),3.97-3.93(m,3H),3.80-3.76(m,1H),3.65-3.59(m,1H),3.56-3.54(m,4H),3.20-3.14(m,1H),2.40-2.25(m,4H),2.20-2.15(m,2H),2.09-2.05(m,2H),1.97-1.90(m,1H),1.80-1.74(m,1H).ESI-MS m/z：433.4[M+H]⁺。

實例49 合成1-(3-(4-(2-(4-氯-5-環丁基-2-羥基苯基胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-59)

2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基胺基)丙酸甲酯

4-氯-5-碘-2-甲氧基苯胺(2g，7.07mmol)、2-溴丙酸甲酯(1.17g，7.07mmol)、K₂CO₃(1.94g，14.14mmol)與KI(0.235g，1.414mmol)於DMF(25mL)中之混合物在100℃攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫，用NaHCO₃水溶液淬滅，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1：20)純化殘餘物，得到呈黃色固體狀之所要產物(1.12g，43%產率)。ESI-MS m/z：370.1[M+H]⁺。

2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基胺基)丙酸

在室溫下，向2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基胺基)丙酸甲酯(1.12g，3.04mmol)於四氫呋喃(20mL)與水(10mL)之混合物中之溶液中添加LiOH.H₂O(0.51g，12.16mmol)且所得混合物攪拌1小時。水相用TBME洗滌，接著用HCl水溶液(1N)酸化以將pH調節至5。用乙酸乙酯萃取混合物。有機層用鹽水洗滌，經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到粗產物(760mg)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟中。ESI-MS m/z：356.1[M+H]⁺。

3-(4-(2-((4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基)胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

在0℃，向2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基胺基)丙酸(760mg，2.13mmol)、3-(哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(669mg，2.78mmol)、EDCI.HCl(818mg，4.26mmol)、HOBt(575mg，4.26mmol)於DMF(8mL)中之溶液中添加Et₃N(861mg，8.52mmol)。所得混合物在室溫下攪拌16小時，接著分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1：1)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(673mg，55%產率)。ESI-MS m/z：579.4[M+H]⁺。

3-(4-(2-((4-氯-5-環丁基-2-甲氧基苯基)胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

3-(4-(2-((4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基)胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(673mg，1.162mmol)、溴化環丁基鋅(5.11 mL，2.556mmol，0.5M，於THF中)、Pd(Oac)₂(52mg，0.23mmol)、S-Phos(95mg，0.23mmol)於THF(10mL)中之混合物在65℃、在氬氣下攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫，用NH₄Cl水溶液淬滅，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1：1)純化殘餘物，得到呈淡黃色固體狀之所要產物(565mg，96%產率)。ESI-MS m/z：507.6[M+H]⁺。

1-(3-(4-(2-((4-氯-5-環丁基-2-羥基苯基)胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-59)

根據實例33中所述之程序，以三個步驟，自3-(4-(2-((4-氯-5-環丁基-2-甲氧基苯基)胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.63(s,1H),6.62(s,1H),6.49(s,1H),6.30(dd,J=10.1,16.8Hz,1H),6.10(d,J=18.7Hz,1H),5.68(d,J=10.4Hz,1H),4.86(d,J=9.2Hz,1H),4.69-4.63(m,1H),4.27-4.23(m,1H),4.07-4.03(m,1H),3.97-3.62(m,1H),3.82-3.76(m,2H),3.64-3.55(m,3H),3.77-3.11(m,1H),2.44-2.15(m,6H),2.08-1.90(m,4H),1.80-1.72(m,2H),1.97-1.90(m,1H),1.24(d,J=6.4Hz,3H).ESI-MS m/z：447.4[M+H]⁺。

實例50 合成4-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

甲烷磺酸1-二苯甲基氮雜環丁-3-基酯

在0℃，將MsCl(11.447mg，100.41mmol)分數份添加至1-二苯甲基氮雜環丁-3-醇(20.0g，83.68mmol)與Et₃N(12.68g，125.52mmol)於DCM(200mL)中之混合物中且所得溶液在室溫下攪拌1小時。反應混合物用乙酸乙酯稀釋且用鹽水洗滌。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到所要產物(26.526g，100%產率)。

4-(1-二苯甲基氮雜環丁-3-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

甲烷磺酸1-二苯甲基氮雜環丁-3-基酯(26.53g，83.68mmol)、哌嗪-1-甲酸第三丁酯(18.68g，100.41mmol)與K₂CO₃(23.09g，163.36mmol)於CH₃CN(200mL)中之混合物在80℃攪拌16小時。將反應混合物冷卻至室溫且用乙酸乙酯稀釋且用鹽水洗滌。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(25.5g，80%產率)。

4-(氮雜環丁-3-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

4-(1-二苯甲基氮雜環丁-3-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(10.0g，24.57mmol)與10% Pd\C(2.5g)於MeOH(100mL)中之混合物在H₂氛圍下、在50℃攪拌48小時。將反應混合物冷卻至室溫且過濾。稀釋濾液，真空濃縮，得到呈無色油狀之粗所要產物(6.7g)。

4-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

在0℃，將丙烯醯氯(3.77g，41.7mmol)分數份添加至4-(氮雜環丁-3-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(6.7g，27.80mmol)與Et₃N(8.43g，83.40mmol)於DCM(100mL)中之混合物中且所得溶液在室溫下攪拌1小時。反應混合物用DCM稀釋且用鹽水洗滌。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(3.6g，49.66%產率，2個步驟)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：6.30(dd,J=10.4,16.8Hz,1H),6.09(dd,J= 2.4,17.2Hz,1H),5.67(dd,J=2.4,10.4Hz,1H),4.22(t,J=8,1H),4.03-4.00(m,1H),3.94-3.90(m,1H),3.75-3.70(m,1H),3.32(t,J=8.8Hz,4H),3.10-3.18(m,1H),2.22-2.30(m,1H),1.40(s,9H)。

實例51 合成1-丙烯醯基-4-(4',6-二氯-4-羥基聯苯羰基)哌嗪-2-甲腈(III-37)

哌嗪-2-甲腈

向3-氰基哌嗪-1-甲酸第三丁酯(200mg，0.95mmol)於二氯甲烷(10mL)中之混合物中添加CF₃COOH(2mL)且所得物在室溫下攪拌1小時。真空濃縮混合物，得到粗產物。

4-(4',6-二氯-4-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-2-甲腈

在0℃，向4',6-二氯-4-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-甲酸(309mg，1.04mmol)、EDCI(272mg，1.43mmol)、HOBt(195mg，1.43mmol)、Et₃N(288mg，2.85mmol)於二氯甲烷(10mL)中之混合物中添加哌嗪-2-甲腈且所得混合物在室溫下攪拌8小時。將混合物分配於二氯甲烷與水之間。有機層用鹽水洗滌，經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(225mg，61%產率)。ESI-MS m/z：444.3[M+H]⁺。

1-丙烯醯基-4-(4',6-二氯-4-羥基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-2-甲腈(III-37)

根據實例33中所述之程序，以兩個步驟，自4-(4',6-二氯-4-甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-羰基)哌嗪-2-甲腈製備標題化合物。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ：9.24(s,1H),7.44-7.33(m,5H),7.20(s,1H),6.57-6.45(m,2H),6.79(s,1H),5.94-5.91(m,1H),5.75(s,1H),4.62-4.61(m,1H),4.50-4.46(m,1H),4.06(s,1H),3.61(s,1H),3.36-3.33(m,1H),3.16-3.10(m,1H).ESI-MS m/z：428.4[M+H]⁺。

實例52 合成1-(3-(4-(3-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-58)

5-溴-4-氯-2-甲氧基苯胺

向2,4-二氯-1-硝基苯(100g，0.52mol)於DMSO(200mL)中之溶液中添加NaOH(41.6g，1.04mol)於水(42mL)中之水溶液且所得混合物在60℃攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫，傾入冰水中，接著用HCl水溶液(1M)酸化以將pH調節至3-4。用乙酸乙酯萃取混合物。合併之有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物直接用於下一步驟(80g，88%產率)。

向5-氯-2-硝基苯酚(40g，0.23mol)於DMF(200mL)中之溶液中添加K₂CO₃(47.6g，0.345mol)及碘甲烷(49g，0.345mol)且所得混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌，經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(石油醚)純化殘餘物，得到所要產物(30g，70%產率)。

向H₂SO₄溶液(600mL，90%)中添加三氟甲烷磺酸酐(11.3g，0.04mol)及NIS(49.68g，0.22mol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。向此混合物中快速添加4-氯-2-甲氧基-1-硝基苯(69g，0.368mol)。攪拌混合物1小時，接著將NIS(33.12g，0.148mol)緩慢添加至混合物中。在室溫下攪拌混合物1小時，接著傾入冰-水中。藉由過濾來收集沈澱物，用水、NaSO₃水溶液及NaHCO₃溶液沖洗，接著真空乾燥，得到所要產物(113g，98%產率)。

在50℃，向1-氯-2-碘-5-甲氧基-4-硝基苯(113g，0.361mol)於乙酸(1L)與水(50mL)中之溶液中添加Fe(50.5g，0.903mol)且所得混合物在50℃攪拌2小時。允許混合物冷卻至室溫，接著傾入冰-水中。藉由過濾來收集沈澱物且用水沖洗。此粗產物用乙酸乙酯(1L)溶解且過濾。用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌濾液。有機層經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到所要產物(87g，85%產率)。

1-溴-2-氯-5-碘-4-甲氧基苯

在0℃，向5-溴-4-氯-2-甲氧基苯胺(3g，12.7mmol)於6N HCl(60mL，360mmol)中之混合物中逐滴添加NaNO₂(963mg，13.9mmol)於水(20mL)中之溶液，同時保持內部溫度為約0℃。將KI(10.5g，63.4mmol)及CuI(4.8g，25.4mmol)溶解於水(20mL)中且添加至經攪拌之反應混合物中。反應物在5℃保持2小時。用乙酸乙酯萃取反應混合物。合併之有機層用水、Na₂SO₃(水溶液，10%)及鹽水洗滌，經無水Na₂SO₄乾燥，且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1：100)純化殘餘物，得到所要產物(3.2g，73%產率)。

3-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)丙醛

1-溴-2-氯-5-碘-4-甲氧基苯(3.2g，9.2mmol)、丙-2-烯-1-醇(1.3g，23.0mmol)、Pd(OAc)₂(206mg，0.9mmol)、TBAC(2.56g，9.2mmol)、NaHCO₃(2.3g，27.6mmol)於DMF(50mL)中之混合物在氬氣下、在60℃攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫，接著分配於乙酸乙酯與水之間。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na₂SO₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1：20)純化殘餘物，得到所要產物(860mg，34%產率)。

3-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)丙酸

向瓊斯試劑(3mL，5.4mmol，2.8M)於丙酮(20mL)中之攪拌溶液中添加3-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)丙醛(860mg，3.1mmol)。反應物在室溫下攪拌12小時，用異丙醇淬滅，接著攪拌10分鐘。所得混合物用水稀釋，用乙酸乙酯萃取。合併之有機層用水及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1：1)純化殘餘物，得到所要產物(358mg，38%產率)。ESI-MS m/z：291.1[M+H]^-。

3-(4-(3-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

在室溫下，向3-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)丙酸(350mg，1.2mmol)於DMF(30mL)中之攪拌溶液中添加3-(哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(317mg，1.3mmol)、BOP(731mg，1.4mmol)及DIEA(461mg，3.6mmol)且混合物在室溫下攪拌1小時。將反應混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌且經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(285mg，46%產率)。

3-(4-(3-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

3-(4-(3-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(280mg，0.54mmol)、環丙基

酸(185mg，2.2mmol)、K₃PO₄.3H₂O(444mg，1.9mmol)、三環己基膦(30mg，0.1mmol)、Pd(OAc)₂(24mg，0.11mmol)於甲苯(10mL)及水(1mL)中之混合物在回流下、在氬氣下攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=60：1)純化殘餘物，得到所要產物(194mg，75%產率)。ESI-MS m/z：477.3[M+H]⁺。

1-(3-(4-(3-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-58)

根據實例33中所述之程序，以三個步驟，自3-(4-(3-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.68(s,1H),6.79(s,1H),6.74(s,1H),6.33-6.26(m,1H),6.12-6.07(dd,J=1.9,17.2Hz,1H),5.68-5.65(dd,J=2.0,10.2Hz,1H),4.24-4.20(m,1H),4.05-4.01(m,1H),3.94-3.90(m,1H),3.76-3.72(m,1H),3.45-3.42(m,4H),3.13-3.11(m,1H),2.69-2.65(m,2H),2.53-2.51(m,2H),2.25-2.23(bs,4H),1.97-1.93(m,1H),0.90-0.86(m,1H),0.60-0.55(m,1H).ESI-MS m/z：418.4[M+H]⁺。

實例53 合成1-(3-(4-(2-(4-氯-2-羥基-5-(1-甲基環丙基)苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-64)

5-乙醯胺基-2-氯-4-甲氧基苯甲酸甲酯

在室溫下，向5-胺基-2-氯-4-甲氧基苯甲酸甲酯(3.6g，16.7mmol)、Et₃N(6.7g，66.8mmol)與DCM(100mL)之混合物中逐滴添加乙醯氯(1.57g，20.1mmol)且所得混合物攪拌12小時。反應混合物分配於二氯甲烷與水之間。有機層用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌，經無水Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1：1)純化殘餘物，得到所要產物(2.7g，63%產率)。

N-(4-氯-5-(2-羥基丙-2-基)-2-甲氧基苯基)乙醯胺

在-40℃，在氬氣下，向5-乙醯胺基-2-氯-4-甲氧基苯甲酸甲酯(2.7g，11.1mmol)於THF(40mL)中之溶液中逐滴添加溴化甲基鎂(21mL，21mmol，1M於乙醚中)，同時保持內部溫度為-40℃。接著使混合物升溫至室溫且攪拌2小時。將反應混合物傾入冰冷卻之NH₄Cl(10%)溶液中且用乙酸乙酯萃取。合併之有機層用水及鹽水洗滌，經無水Na₂SO₄乾燥且真空濃縮，得到所要產物(2.3g，80%產率)。

N-(4-氯-2-甲氧基-5-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙醯胺

在-5℃，向N-(4-氯-5-(2-羥基丙-2-基)-2-甲氧基苯基)乙醯胺(3.2g，12.4mmol)於DCM(20mL)中之溶液中逐滴添加SOCl₂(3.7g，37.25mmol)。將混合物升溫至室溫，接著在回流下攪拌2小時。濃縮反應混合物且藉由矽膠急驟管柱層析(乙酸乙酯/石油醚=3：1)純化殘餘物，得到所要產物(1.9g，64%產率)。

N-(4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基環丙基)苯基)乙醯胺

在0℃，向N-(4-氯-2-甲氧基-5-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙醯胺(1.0g，4.17mmol)於甲苯(20mL)中之溶液中添加CH₂I₂(5.6g，20.86mmol)及Et₂Zn(41.7mL，41.7mmol，1.0M於己烷中)。混合物在0℃保持30分鐘，接著在室溫下攪拌16小時。反應混合物用飽和NH₄Cl溶液淬滅且攪拌15分鐘。真空濃縮混合物以移除甲苯且所得混合物用二氯甲烷萃取。合併之有機層用水及鹽水洗滌，經無水Na₂SO₄乾燥，濃縮，得到所要產物(820mg，77%產率)。

4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基環丙基)苯胺

N-(4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基環丙基)苯基)乙醯胺(820mg，3.23mmol)、KOH(1.8g，32.3mmol)、乙醇(40mL)與水(20mL)之混合物在回流下攪拌12小時。用乙酸乙酯萃取反應混合物。合併之有機層用水及鹽水洗滌，經無水Na₂SO₄乾燥且過濾。真空濃縮濾液且藉由矽膠急驟管柱層析(乙酸乙酯/石油醚=20：1)純化殘餘物，得到所要產物(460mg，67%產率)。ESI-MS m/z：212.4[M+H]⁺。

2-((4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基環丙基)苯基)胺基)乙酸乙酯

在室溫下，向4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基環丙基)苯胺(450mg，2.13mmol)於MeOH(20mL)中之溶液中添加AcOH(3滴)及乙醛酸乙酯(326mg，3.19mmol，50%於甲苯中)。混合物在室溫下攪拌2小時，接著將氰基硼氫化鈉(403mg，6.39mmol)添加至混合物中。所得混合物在50℃攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫且分配於乙酸乙酯與水之間。有機層經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到粗產物(636mg)。ESI-MS m/z：298.2[M+H]⁺。

2-((4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基環丙基)苯基)胺基)乙酸

向2-((4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基環丙基)苯基)胺基)乙酸乙酯(630mg，2.12mmol)於THF(15mL)及水(5mL)中之溶液中添加LiOH.H₂O(889mg，21.2mmol)且所得混合物在室溫下攪拌2小時。用20%乙酸乙酯/石油醚洗滌混合物。水層用HCl水溶液(1N)酸化以將pH調節至3-4且用乙酸乙酯萃取。有機層經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到所要產物(200mg，33%產率)。

3-(4-(2-((4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基環丙基)苯基)胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

在室溫下，向2-((4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基環丙基)苯基)胺基)乙酸(110mg，0.41mmol)及3-(哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(118mg，0.49mmol)於DMF(15mL)中之溶液中添加BOP(217mg，0.49mmol)及DIEA(159mg，1.23mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌，經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到所要產物(192mg，95%產率)。

1-(3-(4-(2-((4-氯-2-羥基-5-(1-甲基環丙基)苯基)胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-64)

根據實例33中所述之程序，以三個步驟，自3-(4-(2-((4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基環丙基)苯基)胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.70(s,1H),6.64(s,1H),6.51(s,1H),6.35-6.28(m,1H),6.13-6.08(dd,J=1.9,17.9Hz,1H),5.69-5.66(dd,J=2.1,10.1Hz,1H),5.13-5.11(m,1H),4.25-4.23(m,1H),4.08-4.05(m,1H),3.95-3.91(m,3H),3.80-3.76(m,1H),3.53(bs,4H),3.18-3.16(m,1H),2.38-2.31(m,4H),1.26(s,3H),0.72-0.64(m,4H).ESI-MS m/z：434.4[M+H]⁺。

實例54 合成1-(4-(2-氯-5-羥基聯苯羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(III-42)

5-氯-4-碘-2-甲氧基苯甲酸

在0℃，向4-胺基-5-氯-2-甲氧基苯甲酸(5g，24.8mmol)於水(10mL)中之攪拌溶液中添加濃硫酸(50mL)。接著逐滴添加NaNO₂(1.9g，27.3mmol)於水(10mL)中之溶液，同時保持內部溫度為約0℃。將KI(4.5g，27.3mmol)及I₂(3.5g，13.64mmol)溶解於水中且逐滴添加至經攪拌之反應混合物中。反應物在5℃攪拌2小時，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用水、Na₂SO₃(水溶液，10%)及鹽水洗滌，經無水Na₂SO₄乾燥且真空濃縮，得到所要產物(1.55g，19%產率)。ESI-MS m/z：311.1[M+H]⁺。

4-(5-氯-4-碘-2-甲氧基苯甲醯基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

在室溫下，向5-氯-4-碘-2-甲氧基苯甲酸(1.55g，4.9mmol)於DMF(30mL)中之攪拌溶液中添加哌嗪-1-甲酸第三丁酯(1.02g，5.5mmol)、BOP(2.63g，25.9mmol)及DIEA(1.92g，14.9mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。反應混合物用乙酸乙酯稀釋且用鹽水洗滌。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(1.96g，76%產率)。

4-(2-氯-5-甲氧基-[1,1'-聯苯]-4-羰基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

4-(5-氯-4-碘-2-甲氧基苯甲醯基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(300mg，0.56mmol)、苯基

酸(82mg，0.67mmol)、Pd(PPh₃)₄(129mg，0.1 mmol)、Na₂CO₃(180mg，1.68mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(2mL)中之混合物在回流下、在氬氣下攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=30：1)純化殘餘物，得到所要產物(219mg，80%產率)。

1-(4-(2-氯-5-羥基-[1,1'-聯苯]-4-羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(III-42)

根據實例33中所述之程序，以三個步驟，自4-(2-氯-5-甲氧基-[1,1'-聯苯]-4-羰基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：10.40(s,1H),7.50-7.41(m,5H),7.35(s,1H),6.89(s,1H),6.84(m,1H),6.17-6.13(d,1H),5.73-5.71(m,1H),3.63(s,6H),3.30(s,2H).ESI-MS m/z：371.2[M+H]⁺。

實例55 合成1-(3-(4-(2-(4-氯-2-羥基-5-異丙基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-50)

4-氯-2-甲氧基-5-(丙-1-烯-2-基)苯胺

4-氯-5-碘-2-甲氧基苯胺(1.0g，3.53mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(889mg，5.29mmol)、Pd(PPh₃)₄(363mg，0.353mmol)、Na₂CO₃(1.12g，10.6mmol)於DME(10mL)及水(3mL)中之混合物在回流下、在氬氣下攪拌6小時。允許反應混合物冷卻至室溫且用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經 Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(5%石油醚/乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈灰白色固體狀之所要產物(173mg，25%產率)。ESI-MS m/z：198.5[M+H]⁺。

4-氯-5-異丙基-2-甲氧基苯胺

4-氯-2-甲氧基-5-(丙-1-烯-2-基)苯胺(160mg，0.81mmol)、阮尼鎳(20mg)於MeOH(5mL)中之混合物在室溫下、在H₂(1atm)氛圍下攪拌8小時。過濾混合物且真空濃縮濾液，得到所要產物(150mg，93%產率)。

3-(4-(2-(4-氯-5-異丙基-2-甲氧基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

根據實例45中所述之程序，以三個步驟，自4-氯-5-異丙基-2-甲氧基苯胺製備標題化合物。

1-(3-(4-(2-(4-氯-5-異丙基-2-甲氧基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮

3-(4-(2-(4-氯-5-異丙基-2-甲氧基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(102mg，0.212mmol)於HCl/MeOH(2.86M，5mL)中之混合物在室溫下攪拌1小時。真空濃縮混合物，得到粗產物，在室溫下將該粗產物溶解於DMF(5mL)中，添加丙烯酸(17mg，0.233mmol)、BOP(113mg，0.254mmol)及DIEA(82mg，0.636mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌，經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(77mg，85%產率，2個步驟)。ESI-MS m/z：435.4[M+H]⁺。

1-(3-(4-(2-(4-氯-2-羥基-5-異丙基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-50)

在-60℃，向1-(3-(4-(2-(4-氯-5-異丙基-2-甲氧基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(77mg，0.18mmol)於DCM(15mL)中之溶液中逐滴添加BBr₃(443mg，1.8mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物冷卻至-60℃，逐滴添加MeOH，接著用Et₃N鹼化以將pH調節至8-9。將混合物傾入水中且用二氯甲烷萃取。有機層經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(25mg，33%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.50(bs,1H),6.62(s,1H),6.470(s,1H),6.30(m,1H),6.10(dd,J=2.4,17.2Hz,1H),5.68(dd,J=2.0,10.4Hz,1H),5.14(m,1H),4.25(m,1H),4.06(m,1H),3.96(m,1H),3.91(m,2H),3.78(m,1H),3.54(m,4H),3.17(m,2H),2.35(m,4H),1.21(m,6H).ESI-MS m/z：421.4[M+H]⁺。

實例56 合成1-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)-4-(2-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-2-甲醯胺(II-51)

2-胺基-5-氯-4-環丙基苯酚

在室溫下，在氬氣下，向2-胺基-5-氯-4-碘苯酚(500mg，1.9mmol)、PdCl₂(dppf)(136mg，0.19mmol)於THF(10mL)中之混合物中添加溴化環丙基鎂(16mL，11.4mmol，0.7M，於THF中)且混合物在回流下攪拌15小時。允許混合物冷卻至室溫且分配於乙酸乙酯與水之間。用鹽水洗滌有機層，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(10-20%乙酸乙酯/己烷)純化殘餘物，得到呈褐色固體狀之所要產物(220mg，63%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.27(s,1H),6.62(s,1H),6.22(s,1H),4.53(s,2H),1.89-1.93(m,1H),0.83-0.87(m,2H),0.46-0.49(m,2H)。

2-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基胺基)乙酸乙酯

在室溫下，向2-胺基-5-氯-4-環丙基苯酚(200mg，1.01mmol)於MeOH(20mL)中之溶液中添加AcOH(3滴)及乙醛酸乙酯(416mg，2.02mmol，50%於甲苯中)。混合物在室溫下攪拌2小時，接著將氰基硼氫化鈉(190mg，3.03mmol)添加至混合物中。所得混合物在40℃攪拌15小時。允許混合物冷卻至室溫且分配於乙酸乙酯與水之間。用鹽水洗滌有機層，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(10-20%甲醇/二氯甲烷)純化殘餘物，得到呈固體狀之所要產物(290mg，100%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.63(s,1H),6.66(s,1H),5.93(s,1H),5.07(t,J=6.4Hz,1H),4.12(q,J=7.2Hz,2H),3.91(d,J=6.4Hz,2H),1.92-1.97(m,1H),1.20(t,J=6.8Hz,2H),0.84-0.87(m,2H),0.51-0.55(m,2H)。

2-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基胺基)乙酸

在室溫下，向2-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基胺基)乙酸乙酯(290mg，0.89mmol)於四氫呋喃與水之4：1混合物(30mL)中之溶液中添加LiOH.H₂O(226mg，5.34mmol)且所得混合物在60℃攪拌2小時。混合物用HCl水溶液(1N)酸化以將pH調節至3-5，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到產物(100mg，47%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.64(s,1H),6.66(s,1H),5.96(s,1H),3.81(s,2H),1.89-1.96(m,1H),0.84-0.87(m,2H),0.54-0.56(m,2H)。

4-(1-二苯甲基氮雜環丁-3-基)-3-胺甲醯基哌嗪-1-甲酸第三丁酯

甲烷磺酸1-二苯甲基氮雜環丁-3-基酯(2.69g，8.5mmol)、K₂CO₃(1.76g，12.8mmol)、3-胺甲醯基哌嗪-1-甲酸第三丁酯(1.95g，8.5mmol)於CH₃CN(40mL)中之混合物在回流下攪拌16小時。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用水及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(2.08g，54%產率)。

4-(氮雜環丁-3-基)-3-胺甲醯基哌嗪-1-甲酸第三丁酯

4-氯-2-甲氧基-5-(丙-1-烯-2-基)苯胺(1g，2.22mmol)、Pd/C(300mg)於MeOH(25mL)中之混合物在50℃、在H₂(1atm)氛圍下攪拌12小時。使混合物冷卻且過濾。真空濃縮濾液，得到所要產物(640mg，100%產率)。

4-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)-3-胺甲醯基哌嗪-1-甲酸第三丁酯

在0℃，向4-(氮雜環丁-3-基)-3-胺甲醯基哌嗪-1-甲酸第三丁酯(640mg，2.22mmol)及Et₃N(463mg，4.58mmol)於DCM(10mL)中之溶液中逐滴添加丙烯醯氯(248mg，2.74mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1.5小時。將混合物分配於二氯甲烷與飽和NaHCO₃溶液之間。有機層用飽和鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到所要產物(350mg，47%產率)。

1-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)-4-(2-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-2-甲醯胺(II-51)

4-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)-3-胺甲醯基哌嗪-1-甲酸第三丁酯(120mg，0.35mmol)於HCl/MeOH(2.86M，10mL)中之混合物在室溫下攪拌1小時。真空濃縮混合物，得到粗殘餘物。在0℃，將其溶解於DMF(5mL)中，添加2-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基胺基)乙酸(31 mg，0.427mmol)、BOP(206mg，0.466mmol)及K₂CO₃(150mg，1.164mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌，經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=20：1)純化殘餘物，得到所要產物(126mg，75%產率，2個步驟)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.63(bs,1H),7.53(d,1H),7.26-6.94(m,2H),6.67(s,1H),6.34-6.27(m,1H),6.10(m,2H),5.68(d,J=10.4,1H),5.08(m,1H),4.30(m,2H),3.93(m,6H),3.52(m,2H),3.29(m,1H),3.15(m,1H),3.06(m,1H),2.47(m,1H),1.98(m,1H),0.87(m,2H),0.64(m,2H).ESI-MS m/z：462.5[M+H]⁺。

實例57 合成1-(3-(4-(2-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基胺基)乙醯基)-2-(羥基甲基)哌嗪-1-基)氮難環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-54)

4-(1-二苯甲基氮雜環丁-3-基)哌嗪-1,3-二甲酸1-第三丁酯3-甲酯

甲烷磺酸1-二苯甲基氮雜環丁-3-基酯(2.4g，7.56mmol)、哌嗪-1,3-二甲酸第三丁酯甲酯(1.85g，7.56mmol)、K₂CO₃(1.6g，11.34mmol)於CH₃CN(40mL)中之混合物在回流下攪拌16小時。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用水及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(10%石油醚/乙酸乙酯)純化殘餘物，得到所要產物(1.85g，51%產率)。

4-(1-二苯甲基氮雜環丁-3-基)-3-(羥基甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯

在氬氣下，在-40℃，向LiAlH₄(500mg，13.5mmol)於THF(40mL)中之混合物中逐滴添加4-(1-二苯甲基氮雜環丁-3-基)哌嗪-1,3-二甲酸1-第三丁酯3-甲酯(1.8g，3.87mmol)於THF(10mL)中之溶液。反應混合物在-5℃至5℃攪拌1小時且冷卻至-20℃。接著添加水(2mL)及NaOH(15%)水溶液。所得混合物攪拌15分鐘。過濾固體，且用乙酸乙酯沖洗濾餅。合併之濾液經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮，得到產物(1.6g，94%產率)。

1-(3-(4-(2-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基胺基)乙醯基)-2-(羥基甲基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-54)

根據實例47中所述之程序，以四個步驟，自4-(2-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-2-甲腈製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.68(bs,1H),6.67(s,1H),6.35-6.27(m,1H),6.12-6.05(m,2H),5.67(dd,J=1.6,10.4Hz,1H),5.11(m,1H),4.82-4.63(m,1H),4.24(m,1H),4.13(m,1H),3.95(m,1H),3.88(m,2H),3.85(m,1H),3.77-3.67(m,2H),3.20(m,1H),3.15(m,1H),2.76-2.60(m,2H),2.40(m,1H),1.95(m,1H),0.87(m,2H),0.62(m,2H).ESI-MS m/z：449.4[M+H]⁺。

實例58 合成1-(3-(4-(2-(5,6-二氯-1H-吲哚-3-基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-61)

2-(5,6-二氯-1H-吲哚-3-基)乙酸乙酯

在室溫下，向5,6-二氯-1H-吲哚(1.0g，5.37mmol)、Cu(OTf)₂(194mg，0.537mmol)於DCM(15mL)中之混合物中逐滴添加2-重氮乙酸乙酯(918mg，8.05mmol)。所得混合物在室溫下攪拌16小時，用水淬滅，接著用二氯甲烷萃取。有機層經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈淡黃色固體狀之所要產物(120mg，8.2%產率)。ESI-MS m/z：272.1[M+H]⁺。

2-(5,6-二氯-1H-吲哚-3-基)乙酸

2-(5,6-二氯-1H-吲哚-3-基)乙酸乙酯(120mg，0.44mmol)、LiOH(90mg，2.20mmol)於THF(3mL)及H₂O(1mL)中之混合物在室溫下攪拌16小時。將溶液傾入水中，用1N HCl調節pH至3-4且用乙酸乙酯萃取。有機層經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮，得到呈黃色固體狀之所要產物(90mg，84.5%產率)。

1-(3-(4-(2-(5,6-二氯-1H-吲哚-3-基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-61)

在0℃，向2-(5,6-二氯-1H-吲哚-3-基)乙酸(90mg，0.372mmol)、1-(3-(哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(87mg，0.446mmol)、EDCI.HCl(107mg，0.558mmol)、HOBt(75mg，0.558mmol)於DMF(3mL)中之混合物中添加Et₃N(112mg，1.11mmol)。所得混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=30：1)純化殘餘物，得到呈灰白色固體狀之所要產物(12mg，7.66%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：11.19(bs,1H),7.79(s,1H),7.59(s,1H),7.35(d,1H),6.28(dd，J=9.6,16.8Hz,1H),6.09(dd，J=2.4,17.2Hz,1H),5.66(dd,J=2.4,10.4Hz,1H),4.21-4.18(m,1H),4.02-3.98(m,1H),3.93-3.88(m,1H),3.78(s,2H),3.74-3.70(m,1H),3.53-3.47(m,4H),3.10-3.07(m,1H),2.25-2.19(m,4H).ESI-MS m/z：423.3[M+1]⁺。

實例59 合成1-(3-(4-(2-(5-氯-4-乙基-2-羥基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-52)

3-(4-(2-(4-溴-5-氯-2-甲氧基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

根據實例43中所述之程序，以三個步驟，自4-溴-5-氯-2-甲氧基苯胺製備標題化合物。

3-(4-(2-(5-氯-4-乙基-2-甲氧基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

在室溫下，向3-(4-(2-(4-溴-5-氯-2-甲氧基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(100mg，0.193mmol)、 Pd(dppf)₂Cl₂(29mg，0.04mmol)與K₂CO₃(55mg，0.386mmol)於DMF(10mL)中之混合物中添加Et₂Zn(0.8mL，0.8mmol，1.0M於己烷中)。所得混合物在80℃攪拌16小時。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50：1)純化殘餘物，得到粗產物(100mg)。ESI-MS m/z：467.5[M+1]⁺。

1-(3-(4-(2-(5-氯-4-乙基-2-羥基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-52)

根據實例33中所述之程序，以三個步驟，自3-(4-(2-(5-氯-4-乙基-2-甲氧基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.6(s,1H),6.6(s,1H),6.5(s,1H),6.3(dd,J=10.4,17.2Hz,1H),6.1(dd,J=2.4,17.2Hz,1H),5.7(dd,J=2.4,10.4Hz,1H),5.1(t,J=4.4Hz,1H),4.2(t,J=8Hz,1H),4.1(dd,J=4.8,8.8Hz,1H),3.95(dd,J=7.2,10.0Hz,1H),3.9(d,J=4.4Hz,2H),3.8(dd,J=4.8,10.4Hz,1H),3.6-3.5(m,4H),3.2-3.1(m,1H),3.1-3.0(m,1H),2.5-2.3(m,4H),1.1(t,J=7.2Hz,3H)；ESI-MS m/z：407.4[M+H]⁺。

實例60 合成1-(3-(4-(2-(4-氯-5-乙基-2-羥基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-55)

3-(4-(2-((4-氯-5-乙基-2-甲氧基苯基)胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

根據實例52中所述之程序，以一個步驟，自3-(4-(2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。

1-(3-(4-(2-(4-氯-5-乙基-2-羥基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-55)

根據實例33中所述之程序，以三個步驟，自3-(4-(2-((4-氯-5-乙基-2-甲氧基苯基)胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.67(s,1H),6.66(s,1H),6.47(s,1H),6.30(dd,J=10.5,16.9Hz,1H),6.12(dd,J=1.7,16.7Hz,1H),5.69(dd,J=1.7,16.7Hz,1H),5.1(m,1H),4.26(m,1H),4.07(m,1H),3.96(m,1H),3.88(d,J=4.4,2H),3.78(m,1H),3.53(m,4H),3.17(m,1H),2.54(m,2H),2.37(m,4H),1.14(m,3H).ESI-MS m/z：407.3[M+H]⁺。

實例61 合成1-(3-(4-(2-(4-氯-2-羥基-5-(2,2,2-三氟乙基)苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-57)

(2-氯-4-甲氧基-5-硝基苯基)甲醇

在0℃，將硼氫化鈉(4.45g，117mmol)分數份添加至2-氯-4-甲氧基-5-硝基苯甲醛(6.0g，29mmol)於MeOH(50mL)中之溶液中且所得混合物在室溫下攪拌30分鐘。真空濃縮混合物。將殘餘物溶解於乙酸乙酯中，用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1)純化殘餘物，得到所要產物(5.0g，78.4%產率)。

1-(溴甲基)-2-氯-4-甲氧基-5-硝基苯

在0℃，將三溴膦(3.08g，11.5mmol)分數份添加至(2-氯-4-甲氧基-5-硝基苯基)甲醇(5.0g，23mmol)於二氯甲烷(50mL)中之溶液中且所得混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物傾入冰-水中且用二氯甲烷萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1)純化殘餘物，得到所要產物(3.5g，54.2%產率)。

1-氯-5-甲氧基-4-硝基-2-(2,2,2-三氟乙基)苯

(2-氯-4-甲氧基-5-硝基苯基)甲醇(3.5g，12.5mmol)、2,2-二氟-2-(氟磺醯基)乙酸甲酯(4.8g，25mmol)、碘化銅(617mg，3.25mmol) 於NMP(20mL)中之混合物在80℃、在氬氣下攪拌24小時。冷卻至室溫之後，將反應混合物溶解於乙酸乙酯中，用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=100：1)純化殘餘物，得到所要產物(1.2g，36.4%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.15(s,1H),7.60(s,1H),3.98(s,3H),3.89(dd,J=1.7,11.2Hz,2H)。

4-氯-2-甲氧基-5-(2,2,2-三氟乙基)苯胺

1-氯-5-甲氧基-4-硝基-2-(2,2,2-三氟乙基)苯(1.2g，4.51mmol)、氯化錫(II)脫水物(5.0g，22.5mmol)於EtOH(20mL)中之混合物在回流下攪拌2小時。冷卻至室溫之後，向反應混合物中添加飽和NaHCO₃溶液以將pH調節至7-8，接著用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮，得到所要產物(900mg，85%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：7.29(s,1H),7.11(s,1H),5.41(s,2H),4.21(s,3H),3.99(dd,J=1.7,11.2Hz,2H)。

1-(3-(4-(2-((4-氯-2-羥基-5-(2,2,2-三氟乙基)苯基)胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-57)

根據實例48中所述之程序，以六個步驟，自4-氯-2-甲氧基-5-(2,2,2-三氟乙基)苯胺製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：10.08(s,1H),6.74(s,1H),6.59(s,1H),6.34(dd,J=10.5,16.9Hz,1H),6.12(dd,J=1.7,16.7Hz,1H),5.69(dd,J=1.7,16.7Hz,1H),5.22(m,1H),4.24(m,1H),4.04(m,1H),3.94(m,1H),3.88(d,J=4.4Hz,2H),3.78(m,1H),3.57(m,2H),3.54(m,4H),3.18(m,1H),2.37(m,4H).ESI-MS m/z：461.2[M+H]⁺。

實例62 合成(E)-1-(4-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)哌嗪-1-基)-3-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基)丙-2-烯-1-酮(II-62)

4-氯-5-環丙基-2-甲氧基苯胺

4-氯-5-碘-2-甲氧基苯胺(5.0g，17.6mmol)、環丙基

酸(1.8g，21.1mmol)、Pd(OAc)₂(314mg，1.4mmol)、三環己基膦(500mg，17.6mmol)、K₃PO₄.3H₂O(16.4g，61.6mmol)於甲苯(62.5mL)及H₂O(3mL)中之混合物在80℃、在氬氣下攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫，接著分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1)純化殘餘物，得到所要產物(3.1g，88.5%產率)。ESI-MS m/z：198.2[M+H]⁺。

1-氯-2-環丙基-4-碘-5-甲氧基苯

在0℃，向4-氯-5-環丙基-2-甲氧基苯胺(2.2g，11.05mmol)、濃HCl(12mL)及水(12mL)之混合物中逐滴添加硝酸鈉(762.8mg，11.05mmol)於水(2.5mL)中之溶液。在0℃攪拌15分鐘之後，逐滴添加KI(1.83g，11.05mmol)於水(5mL)中之溶液。所得混合物在室溫下攪拌4小時，傾入水(20mL)中，接著用二氯甲烷萃取。有機層用鹽水洗滌，經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(0-10%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈固體狀之所要產物(680mg，20%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：7.37(s,1H),7.08(s,1H),3.84(s,3H),2.00(m,1H),0.89(m,2H),0.65(m,1H)。

(E)-1-(4-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)哌嗪-1-基)-3-(4-氯-5-環丙基-2-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮

1-氯-2-環丙基-4-碘-5-甲氧基苯(300mg，0.974mmol)、3-(4-丙烯醯基哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(431mg，1.46mmol)、Pd(OAc)₂(54.6mg，0.243mmol)、乙酸鈉(239mg，2.92mmol)、氯化四丁銨(539mg，1.95mmol)於DMF(7mL)中之混合物在100℃攪拌24小時。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮，藉由矽膠(二氯甲烷/甲醇=40：1)純化，得到所要產物(350mg，84%產率)。ESI-MS m/z：476.2[M+H]⁺。

(E)-1-(4-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)哌嗪-1-基)-3-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基)丙-2-烯-1-酮(II-62)

根據實例33中所述之程序，以三個步驟，自(E)-1-(4-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)哌嗪-1-基)-3-(4-氯-5-環丙基-2-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：10.3(s,1H),7.71(m,1H),7.30(s,1H),7.22(m,1H),6.93(s,1H),6.34(dd,J=10.5,16.9Hz,1H),6.12(dd,J=1.7,16.7Hz,1H),5.66(dd,J=1.7,16.7Hz,1H),4.26(m,1H),4.08(m,1H),3.94(m,1H),3.79(m,1H),3.69(m,2H),3.58(m,2H),3.18(m,1H),2.33(m,4H),1.99(m,1H),0.92(m,2H),0.73(m,2H).ESI-MS m/z：416[M+H]⁺。

實例63 合成1-(3-(4-(2-(4-氯-5-環丙基-2-甲氧基苯基硫基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-65)

2-((4-氯-5-環丙基-2-甲氧基苯基)硫基)乙酸甲酯

1-氯-2-環丙基-4-碘-5-甲氧基苯(380mg，1.23mmol)、Pd₂(dba)₃(56mg，0.061mmol)、2-巰基乙酸甲酯(196mg，1.85mmol)、1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵(136mg，0.246mmol)、Et₃N(372mg，3.69mmol)於NMP(8mL)中之混合物在氬氣下、在80℃攪拌24小時。冷卻至室溫之後，用乙酸乙酯萃取反應混合物。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=20：1)純化殘餘物，得到所要產物(340mg，92%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：7.05(s,1H),6.81(s,1H),3.84(s,2H),3.82(s,3H),3.62(s,3H),2.00(m,1H),0.94(m,2H),0.64(m,2H)。

1-(3-(4-(2-(4-氯-5-環丙基-2-甲氧基苯基硫基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-65)

根據實例43中所述之程序，以四個步驟，自2-((4-氯-5-環丙基-2-甲氧基苯基)硫基)乙酸甲酯製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：7.03(s,1H),6.93(s,1H),6.31(dd,J=10.5,16.9Hz,1H),6.11(dd,J=1.7,16.7Hz,1H),5.68(dd,J=1.7,16.7Hz,1H),4.25(m,1H),4.04(m,1H),3.88(s,2H)3.81(s,3H),3.75(m,1H),3.52(m,4H),3.16(m,1H),2.36-2.25(m,4H),2.02(m,1H),0.93(m,2H),0.66(m,2H).ESI-MS m/z：450[M+H]⁺。

實例64 合成(S)-1-(3-(4-(2-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-67)

(S)-2-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基胺基)丙酸

1-溴-2-氯-5-碘-4-甲氧基苯(3g，8.64mmol)、(S)-2-胺基丙酸(769mg，8.64mmol)、CuI(164mg，0.864mmol)、2-羥基苯甲醛苯腙(366mg，1.73mmol)、K₃PO₄.3H₂O(4.6g，17.28mmol)於DMF(10mL)中之混合物在氬氣下、在80℃攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫，向溶液中添加H₂O及Et₂O。所得溶液分成兩個相，分離水相，且用5% NaOH萃取有機層。合併之水相用20% HCl酸化至pH 4，接著用Et₂O萃取。所得有機層經MgSO₄乾燥且真空濃縮，得到所要產物(1.7g，64%產率)。ESI-MS m/z：306.1[M+H]^-

(S)-3-(4-(2-((5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

在0℃，向(S)-2-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基胺基)丙酸(1.6g，5.21mmol)、3-(哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(1.88g，7.82mmol)、EDCI.HCl(2.0g，10.42mmol)、HOBt(1.41g，10.42mmol)於DMF(20mL)中之溶液中添加Et₃N(1.58g，15.63mmol)。所得混合物在室溫下攪拌16小時，接著分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(甲醇/二氯乙烷=1：50)純化殘餘物，得到所要產物(2.1g，76%產率)。ESI-MS m/z：531.3[M+H]⁺。

(S)-3-(4-(2-((4-氯-5-環丙基-2-甲氧基苯基)胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

(S)-3-(4-(2-((5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(700mg，1.32mmol)、環丙基

酸(114mg，1.32mmol)、Pd(OAc)₂(15mg，0.066mmol)、三環己基膦(37mg，0.132mmol)、K₃PO₄.3H₂O(974mg，4.62mmol)於DMF(10mL)及H₂O(0.5mL)中之混合物在氬氣下、在80℃攪拌16小時。允許混合物冷卻至室溫，接著分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(甲醇/二氯乙烷=1：100)純化殘餘物，得到所要產物(400mg，62%)。ESI-MS m/z：493.2[M+H]⁺。

(S)-1-(3-(4-(2-((4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基)胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-67)

根據實例33中所述之程序，以三個步驟，自(S)-3-(4-(2-((4-氯-5-環丙基-2-甲氧基苯基)胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.69(s,1H),6.66(s,1H),6.29(dd,J=10.5,16.9Hz,1H),6.12(dd,J=1.7,16.7Hz,1H),6.05(s,1H),5.68(dd,J=1.7,16.7Hz,1H),4.84(m,1H),4.61(m,1H),4.24(m,1H),4.06(m,1H),3.94(m,1H),3.78(m,4H),3.55(m,1H),2.43-2.17(m,4H),1.97(m,1H),0.88(m,2H),0.63(m,2H).ESI-MS m/z：433.3[M+H]⁺。

實例65 合成(S)-1-(3-(4-(2-(4-氯-5-乙基-2-羥基苯基胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-69)

(S)-3-(4-(2-((4-氯-5-乙基-2-甲氧基苯基)胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

在室溫下，向(S)-3-(4-(2-((5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(400mg，0.75mmol)、PdCl₂(dppf)(95mg，0.13mmol)於THF(20mL)中之溶液中添加Et₂Zn(2.86mL，2.86mmol，1.0M於己烷中)。所得混合物在80℃、在氬氣下攪拌4小時，接著分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(甲醇/二氯乙烷=1：80)純化殘餘物，得到所要產物(250mg，69%產率)。ESI-MS m/z：481.2[M+H]⁺。

(S)-1-(3-(4-(2-((4-氯-5-乙基-2-羥基苯基)胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-69)

根據實例33中所述之程序，以三個步驟，自(S)-3-(4-(2-((4-氯-5-乙基-2-甲氧基苯基)胺基)丙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.61(s,1H),6.64(s,1H),6.48(s,1H),6.29(dd,J=10.5,16.9Hz,1H),6.12(dd,J=1.7,16.7Hz,1H),5.68(dd,J=1.7,16.7Hz,1H),4.89(m,1H),4.61(m,1H),4.25(m,1H),4.06(m,1H),3.94(m,1H),3.72-3.53(m,4H),3.16(m,1H),2.5(m,2H),2.43-2.17(m,4H),1.21(dd,3H),1.15(m,3H).ESI-MS m/z：406.2[M+H]⁺。

實例66 合成1-(3-(4-(2-(4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基胺基)乙醯基)-2-甲基哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-60)

4-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸第三丁酯

根據實例41中所述之程序，以三個步驟，自3-甲基哌嗪-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。

1-(3-(2-甲基哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮鹽酸鹽

4-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸第三丁酯(62mg，0.199mmol)於MeOH/HCl(20mL，2.9M)中之混合物在室溫下攪拌1小時。真空濃縮混合物，得到粗產物(59mg)。粗產物不經進一步純化即直接用於下一步驟中。

1-(3-(4-(2-((4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基)胺基)乙醯基)-2-甲基哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-60)

在-10℃，向2-((4-氯-5-環丙基-2-羥基苯基)胺基)乙酸(30mg，0.124mmol)及NMM(50mg，0.496mmol)於無水THF(30mL)中之混合物中添加氯甲酸乙酯(15mg，0.136mmol)且所得混合物在-10℃攪拌45分鐘。接著向其中添加1-(3-(2-甲基哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮鹽酸鹽(37mg，0.149mmol)、Et₃N(50mg，0.496mmol)與二氯甲烷(3mL)之混合物。所得混合物在室溫下攪拌30分鐘。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。有機層用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌，經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(二氯甲烷/甲醇=40：1)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所要產物(10mg，18.6%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.65(s,1H),6.66(s,1H),6.34-6.27(m,1H),6.10-6.07(m,2H),5.68-5.65(d,J=10.4Hz,1H),5.12(m,1H),4.29-4.19(m,1H),4.12-4.10(m,1H),4.08-3.81(m,4H),3.78(s,4H),2.63(m,2H),2.25(m,1H),1.96(m,1H),1.24(s,1H),0.96-0.87(m,5H),0.63(m,2H).ESI-MS m/z：433.5[M+H]⁺。

實例67 合成2-(2-(4-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)哌嗪-1-基)-2-側氧基乙胺基)-5-氯-4-環丙基苯甲腈(II-71)

4-溴-5-氯-2-硝基苯甲醯胺

在0℃，向4-溴-5-氯-2-硝基苯甲酸(1.3g，4.63mmol)、Et₃N(1.4g，13.9mmol)於THF(20mL)中之混合物中添加氯甲酸乙酯(1.5g，13.9mmol)。所得混合物在0℃攪拌1小時。接著添加NH₃．H₂O(4mL)且攪拌0.5小時。用乙酸乙酯萃取混合物。有機層用鹽水洗滌，經無水Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到粗產物(900mg)。

2-胺基-4-溴-5-氯苯甲醯胺

在70℃，向4-溴-5-氯-2-硝基苯甲醯胺(900mg，3.2mmol)於AcOH(20mL)及水(5mL)中之溶液中添加Fe粉末(900mg，16.1mmol)且所得混合物在70℃攪拌1小時。允許混合物冷卻至室溫且傾入冰-水中。藉由過濾來收集沈澱物且用水沖洗。此粗產物用乙酸乙酯溶解且過濾。用飽和NaHCO₃溶液及鹽水洗滌濾液。有機層經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到所要產物(770mg，97%產率)。ESI-MS m/z：250.1[M+H]⁺。

3-(4-(2-((5-溴-2-胺甲醯基-4-氯苯基)胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

根據實例44中所述之程序，以三個步驟，自2-胺基-4-溴-5-氯苯甲醯胺製備標題化合物。ESI-MS m/z：532.5[M+H]⁺。

3-(4-(2-((2-胺甲醯基-4-氯-5-環丙基苯基)胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯

向3-(4-(2-((5-溴-2-胺甲醯基-4-氯苯基)胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(350mg，0.66mmol)與環丙基

酸(226mg，2.64mmol)於甲苯(10mL)及水(2mL)中之溶液中添加Pd(OAc)₂(15mg，0.07mmol)、PCy₃(37mg，0.132mmol)及K₃PO₄(487mg，2.31mmol)。在80℃攪拌混合物16小時。允許混合物冷卻至室溫且真空濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(1-5%甲醇/二氯乙烷)純化殘餘物，得到呈固體狀之所要產物(150mg，46%產率)。

2-((2-(4-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)哌嗪-1-基)-2-側氧基乙基)胺基)-5-氯-4-環丙基苯甲醯胺

根據實例33中所述之程序，以兩個步驟，自3-(4-(2-((2-胺甲醯基-4-氯-5-環丙基苯基)胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯製備標題化合物。ESI-MS m/z：446.4[M+H]⁺。

2-((2-(4-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)哌嗪-1-基)-2-側氧基乙基)胺基)-5-氯-4-環丙基苯甲腈(II-71)

在室溫下，向2-((2-(4-(1-丙烯醯基氮雜環丁-3-基)哌嗪-1-基)-2-側氧基乙基)胺基)-5-氯-4-環丙基苯甲醯胺(30mg，0.067mmol)與 Et₃N(41mg，0.404mmol)於DCM(10mL)中之混合物中添加三氟乙酸酐(56mg，0.268mmol)。所得混合物在室溫下攪拌0.5小時，傾入水中，接著用二氯甲烷萃取。用鹽水洗滌有機層，經Na₂SO₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(1-4%甲醇/二氯乙烷)純化殘餘物，得到所要產物(20mg，72%產率)。¹ H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：7.60(s,1H),6.34-6.30(m,1H),6.27(s,1H),6.12-6.07(m,1H),6.01-5.99(t,J=4Hz,1H),5.69-5.65(m,1H),4.26-4.22(m,1H),4.07-4.04(m,3H),3.96-3.92(m,1H),3.80-3.76(m,1H),3.53-3.51(m,4H),3.19-3.13(m,1H),2.45-2.30(m,4H),2.16-2.09(m,1H),1.08-1.03(m,2H),0.87-0.80(m,2H).ESI-MS m/z：428.4[M+H]⁺。

實例68 合成1-(3-(4-(2-(4-氯-5-(2,2-二氟環丙基)-2-羥基苯基胺基)乙醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-56)

2-氯-4-甲氧基-1-乙烯基苯

向鏻鹽(2.05g，5mmol)於THF(50mL)中之懸浮液中添加t-BuOK(0.84g，7.5mmol)混合物轉變為黃色且在室溫下持續攪拌1小時。向混合物中添加2-氯-4-甲氧基苯甲醛(0.85g，5mmol)。攪拌混合物24小時，用飽和NaHCO₃稀釋，接著用己烷萃取。有機層經Na₂SO₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由Isolera One(100%己烷)純化殘餘物，得到所要產物(0.45g，53%產率)。¹H NMR(CDCl₃,δ)：7.49(d,J=6.8Hz,1H),7.03(dd,J=8.8,14.0Hz,1H),6.90(d,J=2.0,1H),6.79(dd,J=2.0,6.8Hz,1H),5.62(d,J=14.0Hz,1H),5.26(d,J=8.8Hz,1H),3.80(s,3H)。

2-氯-1-(2,2-二氟環丙基)-4-甲氧基苯

使2-氯-4-甲氧基-1-乙烯基苯(290mg，1.72mmol)於無水THF(4mL)中的溶液脫氣，接著添加TMS-CF₃及NaI。在80℃攪拌混合物隔夜。TLC(100%己烷)顯示反應完全。用己烷(20mL)稀釋混合物。藉由過濾移除無機鹽。真空濃縮濾液。經由Isolera One(己烷=100%)純化殘餘物。

1-氯-2-(2,2-二氟環丙基)-5-甲氧基-4-硝基苯

在0℃，向2-氯-1-(2,2-二氟環丙基)-4-甲氧基苯(328mg，1.5mmol)於Ac₂O(2mL)中之溶液中添加HNO₃(10滴)。在0℃至室溫攪拌混合物。真空移除Ac₂O。殘餘物用DCM稀釋且用水洗滌。有機層經Na₂SO₄乾燥。真空移除溶劑。經由Isolera One(EtOAc/己烷=0-15%)純化殘餘物，得到所要產物。¹H NMR(CDCl₃,δ)：7.77(s,1H),7.16(s,1H),3.98(s,3H),2.78-2.90(m,1H),1.90-1.98(m,1H),1.60-1.68(m,1H).ESI-MS m/z：264.1[M+H]⁺。

4-氯-5-(2,2-二氟環丙基)-2-甲氧基苯胺

將上述所得1-氯-2-(2,2-二氟環丙基)-5-甲氧基-4-硝基苯溶解於AcOH/i-PrOH(1：5)之10mL共溶劑中。將Zn粉添加至混合物中。在60 ℃攪拌混合物30分鐘。真空移除溶劑。用DCM稀釋殘餘物且藉由過濾移除無機鹽。濃縮濾液，得到粗產物，其不經進一步純化即用於下一步驟。

1-(3-(4-((4-氯-5-(2,2-二氟環丙基)-2-羥基苯基)甘胺醯基)哌嗪-1-基)氮雜環丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(II-56)

根據實例44中所述之程序，以6個步驟，自4-氯-5-(2,2-二氟環丙基)-2-甲氧基苯胺製備標題化合物。¹H NMR(CDCl₃,δ)：9.90(s,1H),6.73(s,1H),6.40(s,1H),6.30(dd,J=8.4,13.6Hz,1H),6.10(dd,J=1.6,12.0Hz,1H),5.66(dd,J=1.6,8.4Hz,1H),5.18(t,J=3.2,3.6Hz,1H),4.24(t,J=6.0,6.8Hz,1H),4.03-4.08(m,1H),3.86-3.97(m,3H),3.74-3.80(m,1H),3.52(br.s,4H),3.13-3.20(m,1H),2.77-2.87(m,1H),2.25-2.43(m,4H),1.87-1.97(m,2H).ESI-MS m/z：455.2[M+H]⁺。

實例69 結構(I)、(II)及(III)之化合物的生物化學分析

製備測試化合物於DMSO(Fisher目錄號BP-231-100)中的10mM儲備溶液。負載有GDP的KRAS G12C 1-169(經his標記之蛋白質)於緩衝液(20mM Hepes、150mM NaCl、1mM MgCl₂)中稀釋至2μm。如下測試化合物活性：在96孔儲存盤中，化合物於DMSO中稀釋至50倍最終測試濃度。化合物儲備溶液在使用之前加以渦旋且謹慎地觀測任何沈澱跡象。如下稀釋：●對於100μM最終化合物濃度而言，將化合物稀釋至5000μM(5μl 10mM化合物儲備液+5μl DMSO)且藉由吸移來充分混合。

●對於30μM最終化合物濃度而言，將化合物稀釋至1500μM(3μl 10mM化合物儲備液+17μl DMSO)且藉由吸移來充分混合。

●對於10μM最終化合物濃度而言，將化合物稀釋至500μM(2μl 10mM化合物儲備液+38μl DMSO)且藉由吸移來充分混合。

將49μl儲備蛋白質溶液添加至96孔PCR盤(Fisher目錄號1423027)之各孔中。使用12通道移液器將1μl 50倍稀釋的化合物添加至PCR盤之適當孔中。藉由200μl多通道移液器上/下吸移來謹慎地且充分地混合反應物。使用鋁盤密封件將盤良好密封，且在室溫下、在抽屜中儲存24小時。接著向各孔中添加5μl含有2%甲酸(Fisher目錄號A117)的DI H₂O，隨後使用移液管混合。接著用鋁密封件再密封盤且在乾冰上儲存直至如下文所述進行分析。

上述分析係藉由質譜、根據以下程序進行分析：

MS儀器設定為正極性、2GHz解析度及低質量(1700)模式且允許平衡30分鐘。接著校準儀器，切換為擷取模式且加載適當方法。

在另外30分鐘平衡時間之後，運作空白批次(亦即緩衝液)以確保設備正確操作。樣品在37℃解凍10分鐘，短暫離心且轉移至工作台。孔A1及H12外加1μL 500μM內標物肽，且盤以2000×g離心5分鐘。接著運作該方法且記錄各個別孔之質量。

將各孔之質量(需要其積分資料)黏貼至盤圖譜中且自分析中輸出。同樣輸出內標物之質量。根據+19電荷狀態擷取50ppm資料，且使用內標物添加來指定孔A1之身分且整合。峰值資料以TOF清單形式輸出且根據+20、21、22、23、24及25電荷狀態個別地重複上述步驟。

其他活體外分析如下：細胞生長之抑制：

如下評估且證明本發明化合物抑制Ras介導性細胞生長的能力。將表現野生型或突變型Ras的細胞以每孔5,000個細胞的密度塗鋪於白色、透明底96孔盤中。塗鋪之後，添加本文所揭示化合物之前，允許細胞附著約2小時。某些小時(例如24小時、48小時或72細胞生長)之後，藉由使用細胞效價Glo試劑(Promega)、根據製造商說明書量測總ATP含量來測定細胞增殖。藉由分析半對數區間之8點化合物劑量反應(自100μM遞減)來測定增殖EC50。

Ras介導性信號轉導之抑制：

如下評估且證明本文所揭示之化合物抑制Ras介導性信號傳導的能力。表現野生型或突變型Ras(諸如G12C、G12V或G12A)的細胞使用本發明化合物或不使用(對照細胞)本發明化合物處理。一或多種本發明化合物抑制Ras信號傳導係根據經一或多種本發明化合物處理之細胞中的磷酸化MEK穩態含量及/或Raf結合相較於對照細胞而言減少來證明。

Ras介導性信號轉導之抑制：

如下評估且證明本文所揭示之化合物抑制Ras介導性信號傳導的能力。表現野生型或突變型Ras(諸如G12C、G12V或G12A)的細胞使用本發明化合物或不使用(對照細胞)本發明化合物處理。一或多種本發明化合物抑制Ras信號傳導係根據化合物與經一或多種本發明化合物處理之細胞中之G12C突變型Ras蛋白質的結合相較於對照細胞的百分比來證明。

Ras介導性信號轉導之抑制：

如下評估且證明本文所揭示之化合物抑制Ras介導性信號傳導的能力。表現野生型或突變型Ras(諸如G12C、G12V或G12A)的細胞使用本發明化合物或不使用(對照細胞)本發明化合物處理。一或多種本發明化合物對Ras信號傳導的抑制作用係根據Ras複合物與經一或多種本發明化合物處理之細胞中之下游信號傳導分子(例如Raf)的結合相較於對照細胞而言減少來證明。

表1、2a及3中之各種化合物係根據上述方法測試且發現以至少約 5%之程度共價結合至KRAS G12C(亦即發現存在於孔中之至少約5%之蛋白質共價結合至測試化合物)。

* 第24小時量測化合物1至47的結合；第2小時量測化合物48至246的結合；30分鐘時量測化合物247至342的結合。

+ 指示5%至25%之結合活性

++ 指示結合活性大於25%且至多50%

+++ 指示結合活性大於50%且至多75%

++++ 指示結合活性大於75%

* 第24小時測定之結合活性。

+ 指示5%至15%之結合活性

++ 指示結合活性大於15%且至多25%

+++ 指示結合活性大於25%且至多50%

++++ 指示結合活性大於50%

* 第2小時測定之結合活性。

+ 指示5%至20%之結合活性

++ 指示結合活性大於20%

* 第24小時測定之結合活性。

+ 指示5%至10%之結合活性

++ 指示結合活性大於10%且多至20%

+++ 指示結合活性大於20%且多至30%

++++ 指示結合活性大於30%

* 第2小時測定之結合活性。

+ 指示5%至20%之結合活性

++ 指示結合活性大於20%

本說明書或隨附申請資料單中所提及的所有美國專利、美國專利申請公開案、美國專利申請案、外國專利、外國專利申請案及非專利公開案均以全文引用的方式、以與本說明書無不一致的程度併入本文中。

根據以上內容應瞭解，雖然已出於說明之目的在本文中描述了本發明之特定實施例，但可在不偏離本發明之精神及範疇之情況下進行各種修改。因此，本發明不受除隨附申請專利範圍之外的限制。

Claims

一種KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑的用途，其係用於製備治療KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型癌症的藥物，其中：(a)該KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物具有以下結構(I)：
或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體或立體異構體，其中：A為CR¹、CR^2b、NR⁷或S；B為一鍵、CR¹或CR^2c；G¹及G²各自獨立地為N或CH；W、X及Y各自獨立地為N、NR⁵或CR⁶；Z為一鍵、N或CR^6a或當Y為C=O時，Z為NH；L¹為一鍵或NR⁷；L²為一鍵或伸烷基；R¹為H、氰基、鹵基、雜環基、雜芳基、芳氧基或芳基；R^2a、R^2b及R^2C各自獨立地為H、鹵基、羥基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆鹵烷基、C₁-C₆烷氧基、C₃-C₈環烷基或芳基；R^3a及R^3b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基；或R^3a與R^3b連接而形成碳環或雜環；或R^3a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基，且R^3b與R^4b連接而形成碳環或雜環；R^4a及R^4b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基；或R^4a與R^4b連接而形成碳環或雜環；或R^4a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基，且R^4b與R^3b連接而形成碳環或雜環；R⁵在每次出現時獨立地為H、C₁-C₆烷基或連至L¹之一鍵；R⁶在每次出現時獨立地為H、側氧基、氰基、氰基烷基、胺基、胺基烷基、胺基烷基胺基、胺基羰基、烷基胺基、鹵烷胺基、羥基烷基胺基、脒基烷基、脒基烷氧基、脒基烷基胺基、胍基烷基、胍基烷氧基、胍基烷基胺基、C₁-C₆烷氧基、胺基烷氧基、烷基羰基胺基烷氧基、C₁-C₆烷基、雜環基、雜環基氧基、雜環基烷氧基、雜環基胺基、雜環基烷基胺基、雜芳基、雜芳氧基、雜芳基烷氧基、雜芳基胺基、雜芳基烷基胺基、芳基、芳氧基、芳胺基、芳基烷基胺基、芳基烷氧基或連至L¹之一鍵；R^6a為H、烷基或連至L¹之一鍵；R⁷為H或C₁-C₆烷基；m¹及m²各自獨立地為1、2或3；
表示單鍵或雙鍵以便滿足所有價數；及E為能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處之半胱胺酸殘基形成共價鍵的親電子部分，其中W、X、Y或Z中之至少一者為CR⁶，其中R⁶為連至L¹之一鍵，或W、X或Y中之至少一者為NR⁵，其中R⁵為連至L¹之一鍵；(b)該KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物具有以下結構(II)：
或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體或立體異構體，其中：R¹為芳基或雜芳基；R^30a及R^30b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^30a與R^30b連接而形成碳環或雜環；或R^30a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^30b與R^31b連接而形成碳環或雜環；R^31a及R^31b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^31a與R^31b連接而形成碳環或雜環；或R^31a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基且 R^31b與R^30b連接而形成碳環或雜環；R^32a及R^32b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^32a與R^32b連接而形成碳環或雜環；或R^32a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^32b與R^33b連接而形成碳環或雜環；R^33a及R^33b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^33a與R^33b連接而形成碳環或雜環；或R^33a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^33b與R^32b連接而形成碳環或雜環；L¹為羰基、-NHC(=O)-、伸烷基、伸烯基、伸雜烷基、伸雜環烷基、伸雜芳基、伸烷基羰基、伸烯基羰基、伸雜烷基羰基、伸雜環烷基羰基或伸雜芳基羰基；L²為一鍵或伸烷基；G¹、G²、G³及G⁴各自獨立地為N或CR，其中R為H、氰基、鹵基或C₁-C₆烷基；n¹、n²、n³及n⁴各自獨立地為1、2或3；及E為能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處之半胱胺酸殘基形成共價鍵的親電子部分；或(c)該KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物具有以下結構(III)：
或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體或立體異構體，其中：A為CR^37b、N或NR^38a；B為CR^37c、N、NR^38b或S；C為CR^37d、N、NR^38c或S；G³及G⁴各自獨立地為N或CR，其中R為H、氰基、鹵基或C₁-C₆烷基；L^1a為一鍵、-NH-、伸烷基或伸雜烷基；L²為一鍵或伸烷基；R^32a及R^32b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^32a與R^32b連接而形成碳環或雜環；或R^32a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^32b與R^33b連接而形成碳環或雜環；R^33a及R^33b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^33a與R^33b連接而形成碳環或雜環；或R^33a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^33b與R^32b連接而形成碳環或雜環；R^37a、R^37b、R^37c、R^37d及R^37e各自獨立地為H、鹵基、側氧基、羥基、氰基、胺基羰基、甲醯基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷基磺醯基、C₁-C₆鹵烷基、C₃-C₈環烷基、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₆羥基烷基、C₁-C₆烷氧基烷基、C₁-C₆胺基烷基、雜環基或芳基；R^38a、R^38b及R^38c各自獨立地為H、C₁-C₆烷基或芳基；n³及n⁴各自獨立地為1、2或3；m為0或1；
為單鍵或雙鍵以便滿足所有價數；及E為能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處之半胱胺酸殘基形成共價鍵的親電子部分。
如請求項1之用途，其中該其他治療劑為表皮生長因子受體(EGFR)抑制劑、磷脂醯肌醇激酶(PI3K)抑制劑、胰島素樣生長因子受體(IGF1R)抑制劑、傑納斯激酶(Janus kinase，JAK)抑制劑、Met激酶(MET)抑制劑、SRC家族激酶(SFK)抑制劑、有絲分裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制劑、細胞外信號調節性激酶(ERK)抑制劑、機制性雷帕黴素標靶(mTOR)抑制劑、拓撲異構酶抑制劑、抗代謝物藥劑、烷化劑或紫杉烷。
如請求項1之用途，其中該其他治療劑為表皮生長因子受體(EGFR)抑制劑。
如請求項3之用途，其中該表皮生長因子受體(EGFR)抑制劑為埃羅替尼(Erlotinib)、阿法替尼(Afatinib)或易瑞沙(Iressa)。
如請求項1之用途，其中該其他治療劑為磷脂醯肌醇-3激酶(PI3K)抑制劑。
如請求項5之用途，其中該磷脂醯肌醇激酶(PI3K)抑制劑為GDC0941、MLN1117、BYL719(艾培昔布(Alpelisib))或BKM120(布帕昔布(Buparlisib))。
如請求項1之用途，其中該其他治療劑為選自以下之傑納斯激酶 (JAK)抑制劑：CYT387、GLPG0634、巴瑞替尼(Baricitinib)、來他替尼(Lestaurtinib)、莫羅替尼(momelotinib)、帕瑞替尼(Pacritinib)、蘆可替尼(Ruxolitinib)及TG101348。
如請求項1之用途，其中該其他治療劑為選自以下之MET激酶抑制劑：克卓替尼(Crizotinib)、提瓦替尼(tivantinib)、AMG337、卡博替尼(cabozantinib)、弗雷替尼(foretinib)，及針對MET之中和性單株抗體，諸如奧那組單抗(onartuzumab)。
如請求項1之用途，其中該其他治療劑為胰島素樣生長因子受體(IGF1R)抑制劑。
如請求項9之用途，其中該胰島素樣生長因子受體(IGF1R)抑制劑為NVP-AEW541。
如請求項1之用途，其中該其他治療劑為非受體酪胺酸激酶抑制劑。
如請求項9之用途，其中該非受體酪胺酸激酶抑制劑為SFK抑制劑。
如請求項12之用途，其中該SFK抑制劑為達沙替尼(Dasatinib)、普納替尼(Ponatinib)、塞卡替尼(saracatinib)或伯舒替尼(bosutinib)。
如請求項1之用途，其中該其他治療劑為有絲分裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制劑。
如請求項14之用途，其中該有絲分裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制劑為曲美替尼(trametinib)、司美替尼(selumetinib)、考比替尼(cobimetinib)、PD0325901或RO5126766。
如請求項1之用途，其中該其他治療劑為蛋白激酶抑制劑。
如請求項14之用途，其中該蛋白激酶抑制劑為阿法替尼(Afatinib)、阿西替尼(Axirinib)、貝伐單抗(Bevacizumab)、博斯替尼(Bostutinib)、西妥昔單抗(Cetuximab)、克卓替尼、達沙替尼(Dasatinib)、埃羅替尼、福他替尼(Fostamatinib)、吉非替尼(Gefitinib)、伊馬替尼(Imatinib)、拉帕替尼(Lapatinib)、樂伐替尼(Lenvatinib)、依魯替尼(Ibrutinib)、尼羅替尼(Nilotinib)、帕尼單抗(Panitumumab)、帕唑帕尼(Pazopanib)、派加替尼(Pegaptanib)、蘭尼單抗(Ranibizumab)、蘆可替尼、索拉非尼(Sorafenib)、舒尼替尼(Sunitinib)、SU6656、曲妥珠單抗(Trastuzumab)、托法替尼(Tofacitinib)、凡德他尼(Vandetanib)或維羅非尼(Vemurafenib)。
如請求項1之用途，其中該其他治療劑為拓撲異構酶抑制劑。
如請求項18之用途，其中該拓撲異構酶抑制劑為伊立替康(Irinotecan)。
如請求項1之用途，其中該其他治療劑為紫杉烷。
如請求項20之用途，其中該紫杉烷為紫杉醇或多西他賽(Docetaxel)。
如請求項1之用途，其中該其他治療劑為mTOR抑制劑。
如請求項22之用途，其中該mTOR抑制劑為雷帕黴素(Rapamycin)或MLN0128。
如請求項1至23中任一項之用途，其中該化合物選擇性地結合至KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質。
如請求項1至23中任一項之用途，其中該化合物不可逆地結合至KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質。
如請求項1至23中任一項之用途，其中該化合物共價結合至KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質。
如請求項1至23中任一項之用途，其中該化合物與位於KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處的半胱胺酸形成共價鍵。
如請求項1至23中任一項之用途，其中該化合物包含：(a)能夠特異性結合至KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之開關2結合袋的部分；及(b)能夠與該KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處的半胱胺酸形成共價鍵的親電子部分。
如請求項1至23中任一項之用途，其中該親電子部分具有以下結構：
其中：Q為-C(=O)-、-C(=NR^8')-、-NR⁸C(=O)-、-S(=O)₂-或-NR⁸S(=O)₂-；R⁸為H、C₁-C₆烷基或羥基烷基；R^8'為H、-OH、-CN或C₁-C₆烷基；及R⁹及R¹⁰各自獨立地為H、氰基、C₁-C₆烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基或羥基烷基，或R⁹與R¹⁰連接而形成碳環或雜環。
如請求項1至23中任一項之用途，其中該化合物為選自表1、2或3中之任一者的化合物。
如請求項1至23中任一項之用途，其中該化合物具有以下結構之一：
如請求項1至23中任一項之用途，其中該化合物與該其他治療劑共同投與。
如請求項1至23中任一項之用途，其中該化合物與該其他治療劑分開投與。
如請求項1至23中任一項之用途，其中該癌症為血液學癌症、胰臟癌、MYH相關息肉病、結腸直腸癌或肺癌。
一種醫藥組合物，其包含KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物及其他治療劑，其中：(a)該KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物具有以下結構(I)：
或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體或立體異構體，其中：A為CR¹、CR^2b、NR⁷或S；B為一鍵、CR¹或CR^2c；G¹及G²各自獨立地為N或CH；W、X及Y各自獨立地為N、NR⁵或CR⁶； Z為一鍵、N或CR^6a或當Y為C=O時，Z為NH；L¹為一鍵或NR⁷；L²為一鍵或伸烷基；R¹為H、氰基、鹵基、雜環基、雜芳基、芳氧基或芳基；R^2a、R^2b及R^2C各自獨立地為H、鹵基、羥基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆鹵烷基、C₁-C₆烷氧基、C₃-C₈環烷基或芳基；R^3a及R^3b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基；或R^3a與R^3b連接而形成碳環或雜環；或R^3a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基，且R^3b與R^4b連接而形成碳環或雜環；R^4a及R^4b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基；或R^4a與R^4b連接而形成碳環或雜環；或R^4a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基，且R^4b與R^3b連接而形成碳環或雜環；R⁵在每次出現時獨立地為H、C₁-C₆烷基或連至L¹之一鍵；R⁶在每次出現時獨立地為H、側氧基、氰基、氰基烷基、胺基、胺基烷基、胺基烷基胺基、胺基羰基、烷基胺基、鹵烷胺基、羥基烷基胺基、脒基烷基、脒基烷氧基、脒基烷基胺基、胍基烷基、胍基烷氧基、胍基烷基胺基、C₁-C₆烷氧基、胺基烷氧基、烷基羰基胺基烷氧基、C₁-C₆烷基、雜環基、雜環基氧基、雜環基烷氧基、雜環基胺基、雜環基烷基胺基、雜芳基、雜芳氧基、雜芳基烷氧基、雜芳基胺基、雜芳基烷基胺基、芳基、芳氧基、芳胺基、芳基烷基胺基、芳基烷氧基或連至L¹之一鍵；R^6a為H、烷基或連至L¹之一鍵；R⁷為H或C₁-C₆烷基；m¹及m²各自獨立地為1、2或3；
表示單鍵或雙鍵以便滿足所有價數；及E為能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處之半胱胺酸殘基形成共價鍵的親電子部分，其中W、X、Y或Z中之至少一者為CR⁶，其中R⁶為連至L¹之一鍵，或W、X或Y中之至少一者為NR⁵，其中R⁵為連至L¹之一鍵；(b)該KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物具有以下結構(II)：
或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體或立體異構體，其中：R¹為芳基或雜芳基；R^30a及R^30b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^30a與R^30b連接而形成碳環或雜環；或R^30a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^30b與R^31b連接而形成碳環或雜環；R^31a及R^31b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^31a與R^31b連接而形成碳環或雜環；或R^31a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基且R^31b與R^30b連接而形成碳環或雜環；R^32a及R^32b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^32a與R^32b連接而形成碳環或雜環；或R^32a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^32b與R^33b連接而形成碳環或雜環；R^33a及R^33b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^33a與R^33b連接而形成碳環或雜環；或R^33a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^33b與R^32b連接而形成碳環或雜環；L¹為羰基、-NHC(=O)-、伸烷基、伸烯基、伸雜烷基、伸雜環烷基、伸雜芳基、伸烷基羰基、伸烯基羰基、伸雜烷基羰基、伸雜環烷基羰基或伸雜芳基羰基；L²為一鍵或伸烷基； G¹、G²、G³及G⁴各自獨立地為N或CR，其中R為H、氰基、鹵基或C₁-C₆烷基；n¹、n²、n³及n⁴各自獨立地為1、2或3；及E為能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處之半胱胺酸殘基形成共價鍵的親電子部分；或(c)該KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物具有以下結構(III)：
或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體或立體異構體，其中：A為CR^37b、N或NR^38a；B為CR^37c、N、NR^38b或S；C為CR^37d、N、NR^38c或S；G³及G⁴各自獨立地為N或CR，其中R為H、氰基、鹵基或C₁-C₆烷基；L^1a為一鍵、-NH-、伸烷基或伸雜烷基；L²為一鍵或伸烷基；R^32a及R^32b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^32a與R^32b連接而形成碳環或雜環；或R^32a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^32b與R^33b連接而形成碳環或雜環； R^33a及R^33b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^33a與R^33b連接而形成碳環或雜環；或R^33a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^33b與R^32b連接而形成碳環或雜環；R^37a、R^37b、R^37c、R^37d及R^37e各自獨立地為H、鹵基、側氧基、羥基、氰基、胺基羰基、甲醯基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷基磺醯基、C₁-C₆鹵烷基、C₃-C₈環烷基、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₆羥基烷基、C₁-C₆烷氧基烷基、C₁-C₆胺基烷基、雜環基或芳基；R^38a、R^38b及R^38c各自獨立地為H、C₁-C₆烷基或芳基；n³及n⁴各自獨立地為1、2或3；m為0或1；
為單鍵或雙鍵以便滿足所有價數；及E為能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處之半胱胺酸殘基形成共價鍵的親電子部分。
如請求項35之醫藥組合物，其中該其他治療劑如請求項2至23中任一項所定義。
一種套組，其包含KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物、其他治療劑，以及該化合物及該其他治療劑用於治療癌症之使用說明書，其中：(a)該KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物具有以下結構(I)：
(I)或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體或立體異構體，其中：A為CR¹、CR^2b、NR⁷或S；B為一鍵、CR¹或CR^2c；G¹及G²各自獨立地為N或CH；W、X及Y各自獨立地為N、NR⁵或CR⁶；Z為一鍵、N或CR^6a或當Y為C=O時，Z為NH；L¹為一鍵或NR⁷；L²為一鍵或伸烷基；R¹為H、氰基、鹵基、雜環基、雜芳基、芳氧基或芳基；R^2a、R^2b及R^2C各自獨立地為H、鹵基、羥基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆鹵烷基、C₁-C₆烷氧基、C₃-C₈環烷基或芳基；R^3a及R^3b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基；或R^3a與R^3b連接而形成碳環或雜環；或R^3a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基，且R^3b與R^4b連接而形成碳環或雜環；R^4a及R^4b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷基胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基；或R^4a與R^4b連接而形成碳環或雜環；或R^4a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、鹵基、氰基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆炔基、羥基烷基、胺基烷基、烷胺基烷基、氰基烷基、羧基烷基、胺基羰基烷基或胺基羰基，且R^4b與R^3b連接而形成碳環或雜環；R⁵在每次出現時獨立地為H、C₁-C₆烷基或連至L¹之一鍵；R⁶在每次出現時獨立地為H、側氧基、氰基、氰基烷基、胺基、胺基烷基、胺基烷基胺基、胺基羰基、烷基胺基、鹵烷胺基、羥基烷基胺基、脒基烷基、脒基烷氧基、脒基烷基胺基、胍基烷基、胍基烷氧基、胍基烷基胺基、C₁-C₆烷氧基、胺基烷氧基、烷基羰基胺基烷氧基、C₁-C₆烷基、雜環基、雜環基氧基、雜環基烷氧基、雜環基胺基、雜環基烷基胺基、雜芳基、雜芳氧基、雜芳基烷氧基、雜芳基胺基、雜芳基烷基胺基、芳基、芳氧基、芳胺基、芳基烷基胺基、芳基烷氧基或連至L¹之一鍵；R^6a為H、烷基或連至L¹之一鍵；R⁷為H或C₁-C₆烷基；m¹及m²各自獨立地為1、2或3；
表示單鍵或雙鍵以便滿足所有價數；及E為能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處之半胱胺酸殘基形成共價鍵的親電子部分，其中W、X、Y或Z中之至少一者為CR⁶，其中R⁶為連至L¹之一鍵，或W、X或Y中之至少一者為NR⁵，其中R⁵為連至L¹之一鍵；(b)該KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物具有以下結構(II)：
或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體或立體異構體，其中：R¹為芳基或雜芳基；R^30a及R^30b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^30a與R^30b連接而形成碳環或雜環；或R^30a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^30b與R^31b連接而形成碳環或雜環；R^31a及R^31b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^31a與R^31b連接而形成碳環或雜環；或R^31a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基且R^31b與R^30b連接而形成碳環或雜環；R^32a及R^32b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^32a與R^32b連接而形成碳環或雜環；或R^32a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^32b與R^33b連接而形成碳環或雜環；R^33a及R^33b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^33a與R^33b連接而形成碳環或雜環；或R^33a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^33b與R^32b連接而形成碳環或雜環；L¹為羰基、-NHC(=O)-、伸烷基、伸烯基、伸雜烷基、伸雜環烷基、伸雜芳基、伸烷基羰基、伸烯基羰基、伸雜烷基羰基、伸雜環烷基羰基或伸雜芳基羰基；L²為一鍵或伸烷基；G¹、G²、G³及G⁴各自獨立地為N或CR，其中R為H、氰基、鹵基或C₁-C₆烷基；n¹、n²、n³及n⁴各自獨立地為1、2或3；及E為能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處之半胱胺酸殘基形成共價鍵的親電子部分；或(c)該KRAS、HRAS或NRAS G12C突變體調節性化合物具有以下結構(III)：
或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構體或立體異構體，其中：A為CR^37b、N或NR^38a；B為CR^37c、N、NR^38b或S； C為CR^37d、N、NR^38c或S；G³及G⁴各自獨立地為N或CR，其中R為H、氰基、鹵基或C₁-C₆烷基；L^1a為一鍵、-NH-、伸烷基或伸雜烷基；L²為一鍵或伸烷基；R^32a及R^32b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^32a與R^32b連接而形成碳環或雜環；或R^32a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^32b與R^33b連接而形成碳環或雜環；R^33a及R^33b在每次出現時獨立地為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、氰基烷基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基；或R^33a與R^33b連接而形成碳環或雜環；或R^33a為H、-OH、-NH₂、-CO₂H、氰基、C₁-C₆烷基、C₃-C₈環烷基、羥基烷基、胺基烷基、羧基烷基或胺基羰基，且R^33b與R^32b連接而形成碳環或雜環；R^37a、R^37b、R^37c、R^37d及R^37e各自獨立地為H、鹵基、側氧基、羥基、氰基、胺基羰基、甲醯基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷基磺醯基、C₁-C₆鹵烷基、C₃-C₈環烷基、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₆羥基烷基、C₁-C₆烷氧基烷基、C₁-C₆胺基烷基、雜環基或芳基；R^38a、R^38b及R^38c各自獨立地為H、C₁-C₆烷基或芳基；n³及n⁴各自獨立地為1、2或3；m為0或1；
為單鍵或雙鍵以便滿足所有價數；及E為能夠與KRAS、HRAS或NRAS G12C突變型蛋白質之位置12處之半胱胺酸殘基形成共價鍵的親電子部分。
如請求項37之套組，其中該其他治療劑如請求項2至23中任一項所定義。