TW402596B - 4-anilino-quinazoline derivatives for use in treating, inhibiting the growth of or eradicating neoplasms, preparation method and pharmaceutical composition thereof - Google Patents

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經濟部中央樣準局貝工消費合作社印製 彻綠⑽θ s A7 __π 1_Β7_ 五、發明説明（W ) 化物於6毫升乙醚之溶液加入。攪拌並冷卻2小時後， 在減歷下去除溶劑。殘渣以水處理及所得固體自正丁醇 再結晶取得〇·69克Μ-[4-[(3 -溴苯基）胺基]-6-1¾唑啉基] -('E)-2 -丁烯醯胺：mp=153-160 °C;質譜（m/e): M + H 3 8 3, 3 8 5 „ 實例8 N-f4-C (‘?-?阜荣甚）胺甚l-fi-Β牵_酞甚1-2-申甚-2 -丙樣 m m 將1.6克N-(3 -溴苯基）-4，6 -B奎唑啉二胺於15毫升吡啶 之溶液在冰浴中冷卻及逐滴將0.59毫升甲基丙烯醯基氣 化物於6毫升乙醚之溶.液加入。攪拌並冷卻2小時後， 在減壓下去除溶劑。殘渣以水處理及所得固體溶於正丁 醇（溫）中。將乙醚加入冷卻之溶液中取得0.44克N-[4-[ (3-溴苯基）胺基卜6-睹唑啉基]-2-甲基-2-丙烯醯胺： iap= 240- 2 4 5 °C;質譜（π/e): M + H 383， 3 8 5 〇 實例9 1「4-「（3-道荣甚）胺甚1-6-11牵邮酞甚1-?.-丁炔醅胺 將0.50克2 -丁快酸於10毫升四氳呋喃之溶液在冰浴中 冷卻。接著Q.79毫升份異丁基氣甲酸酯將0.66毫升份N-甲基嗎福啉加入。約1分鐘後，將1.6克fl-(3 -溴苯基）-4,6 -K唑啉二胺於10毫升吡啶之溶液加入。使反應達室 溫及抿拌過夜。在減壓下去除溶劑及固體自正丁醇再結 晶取得Γ. 〇 7克H - [ 4 - [( 3 -溴苯基）胺基]-6 -陉唑啉基]-2 -丁炔醯胺··質譜（m/e): 381，383。 - -35- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Μ規格（21OX297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 ^02596 A7 B7 五、發明説明（1 ) 本發明係_於特定睡唑啉化合物及其«藥容許鹽。本 發明之化合物抑制特定生長因子受體蛋白質胳胺酸激酶 (PTK)之作用，因而抑制特定细朐類型之異常成長。本 發明之化合物因而為抗癌劑及有效用於哺乳動物之癌症 治療上。此外，本發明係關於該牲唑啉之製造，其於癌 症治療上。此外，本發明係關於該眭唑啉之製造，其於 癌症治療上之用途及含它之皤桀製劑。 蛋白質賂胺酸激酶為催化磷酸基自ATP轉移至位於蛋 白質受質上之胳胺酸殘基的酶之~。蛋白質胳胺酸激酶 明顯地在正常细胞生長中扮演一角色。許多生長因子受 體蛋白質蓮作為賂胺酸激酶及其藉由此方法達到傳埵訊 息。生長因子與此等受體之相互作用為细胞生長正常調 節中之必要事件。然而，特定情況下突變或通度表現之 结果可使此等受體成為不受調節；其结果為失控之细胞 增殖，其可造成腫瘤成長及最终導致已知為癌症之疾病 〔tfilks A.F.， Adv. Cancer Res.， 60， 43(1993)及 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

Parsons, J . T. » Parsons , S. J. , I篇portant Advances in Oncology，DeVita V. T. Ed.，J. B, Lippincott Co.，Phila., 3 ( 1 993 >〕。已被確認且為本發明化合物 的目標之生長因子受體激酶及其原致癌基因有上皮细胞 生長因子受體激酶（E G F - R激_，e ^ b B致癌基因之蛋白 產物），及由erbB-2 (亦稱為neu或HER2)致癌基因產 生之產物。因為瞵酸化作用為發生细胞分裂之必要訊息 且因為過度表規或突變之激酶與癌症相闞連•此作用之 -3 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（2丨〇><297公I ) 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 4Q2596 A7 B7五、發明説明（2 ) 抑制劑蛋白質賂胺酸激酶抑制劑對於癌症及其他特激為失 控或異常细胞生長之疾病具有治療價值。例如，erbB-2 致癌基因之受體激酶產物的過度表現與人類乳癌及卵巢 癌相關連〔Slaieon，D. J.，等人，Science, 244，· 707 (1989)及 Science, 235， 1146(1987)〕 °EGF-R激酶之 失控與擬表皮腫瘤〔Reiss, Μ.,等人，Cancer Res., 51, 6254(1991 )〕 * 乳房腫瘤〔Macias, A.，等人， Anticancer Res., 7, 459(1987)〕·及涉及其他主要器 官之腫瘤〔Gullick, W. J., Brit. Med., Bull., 47, 87 (1 991 )〕相關。因為失控之受體激酶於癌症致病性中 所扮演角色之重要性，許多最近之研究係闞於特定PTK 抑制劑作為抗癌治療劑之可能性的開發〔一些最近之回 顧：B r* u k e . T . R .，D r u g s F u t u r e，1 7 , 1 1 9 ( 1 9 9 2 )及 Chang, C. J. ί Geahlen, R. L., J. Hat. Prod., 55, 1529(1992)〕。 本發明之化合物為特定4-苯胺基Pi唑啉。此專利申請 中，賤唑啉環糸統如下式所指出者編號：

相較於本發明之化合物，位置5-8上取代基性質與位 置二者不同的其他4-UI唑啉已知具有PTK抑制活性。由 歐洲專利申請案520,722 A1已知含有氫、氣、三氟甲基 或硝基取代基在位置5-8之特定4-苯胺基晻唑啉。上述 一 4竭 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） I---------------^--11------— €---:!·. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 B7 五、發明説明（—） 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 申請案中無一化合物具有本發明之化合物所含有之取代 基的獨特組合。此外，值得注意的是雖然上述歐洲專利 申請案之化合物主張抗癌用途，但並未提供活體内抗癌 效果之證明。由歐洲專利申請案566, 226 A1已知視情況 在5-8位置上含有各種取代基之特定4-苯胺基暗唑啉。 上逑申請中無一化合物具有本發明之化合物所含有之取 代基的獨特組合。此外，值得注意的是雖然上逑歐洲專 利申請案之化合物主張抗癌用途，但並未提供活體内抗 癌效果之證明。上述歐洲專利申請案中所說明之唯一活 體内活性為鼠肝細胞中TGF -阿法（alpha)剌激之生長 的抑制。由歐洲專利申請案6 3 5 , 4 9 8 A 1已知視情況在位 置6上含有各種取代基，而在位置7上必需含有鹵素之 特定4 -苯胺基_唑啉。上述申請案中無一化合物具有本 發明之化合物所涵蓋之取代基的獨特組合。此外，值得 注意的是雖然上述歐洲專利申請案之化合物主張抗癌用 逢，但並未提供活體内抗癌效果之證明。上述歐洲專利 申請案中所說明之唯一活體内活性為鼠肝細胞中TGF -阿 法（alpha)刺激之生長的抑制。此外，已知不含4-苯胺 基之特定I®唑啉抑制劑β由歐洲專利申請案6D2,851 A1 已知特定睹唑啉，其於4位置上不含苯胺基及其視情況 在位置5-8上含有各種取代基。上述申請案中無一化合 物具有本發明之化合物所涵蓋之取代基的獨特組合。此 外，值椁注意的是雖然上述之歐洲專利申請案之化合物 主張抗癌用途，但並不提供活體内抗癌效果之證明。上 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 402596 A7 _B7_ 五、發明説明（4 ) 述歐洲專利申請案中所說明之唯一活髑内活性為鼠肝细 胞中TGF -阿法（alpha)剌激之生長的抑制。由專利申請 案W0 95/ 1 9774已知作為PTKs抑制劑之特定雜環，其具 有類似本發明4-苯胺基BS唑啉之喃啶環。此上述申請案 並未提及4-苯胺基US唑啉，亦未提及本發明之化合物所 涵蓋之取代基的獨特組合。此外，值得注意的是雖然上 述之申請案之化合物主張抗癌用途，但並未提供活體内 抗癌效果之證明。由專利申請案W0 95/157581已知特定 陛唑啉，其視情況在位置5-7上含有各種取代基。上述 申請案中無一化合物具有本發明之化合物所涵蹵之取代 基的獨特組合。此外，值得注意的是雖然上述歐洲申請 專利案之化合物主張抗癌用途，但並未提供活體内抗癌 效果之證明。 除了上述專利申請案之外，許多文獻掲示4-苯胺基睡 唑啉：Fry, D.W.,等人，Science, 265, 1093(1994), Rewcastle G.W.,等人，J. Med. Chem., 38， 3482(1995〉 ，及 Bri.dges, A. J.，等人，J. Med. Chem., 39，267. 經濟部中夬標隼局員工消費合作社印製 (請先鬩讀背面之注意事項再填寫本頁) ( 1 996 )。此等文獻中無一化合物具有本發明之化合物所 涵蓋之取代基的獨特組合。此外，值得注意的是此等報 導中並未揭述活體內抗癌效果之證明。 PTK催化隣酸基自ATP分子至位於蛋白質受質上之胳 胺酸的轉移。業界迄今已知之抑制劑通常與ATP競爭或 與激酶之蛋白質受質競爭。一些等此抑制劑，所謂之混 合競爭性抑制劑可同時與ATP與受質二者競爭；所有如 -6 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210 X 297公潑） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 其中： X為苯基，其視情況由一或多個遵自鹵素、1-6個碳原 -7- 伽 5.96 A7 B7 五、發明説明（5 ) 此競爭性抑制劑K可逆性抑制劑運作。業界已知之4-苯 胺基Iff啤啉為與ATP競爭之可逆性抑制劑〔Fry, D. W., 等人，Science, 265, 1093(1994)〕。因為细胞內之 ATP濃度一般非常高（奄莫耳濃度）•所Μ由於該等化 合物不可能在细胞内達到所需將ΑΤΡ自其结合部位置換 出之濃度，與ΑΤΡ競爭之化合物可能缺乏活體内活性。 如所證明，本發明之暗唑啉抑制劑具有不可逆式抑制此 等ΡΤΚ之獨特能力，因此與ΑΤΡ或蛋白質受質為非競爭 性的。本發明之化合物可作為不可逆抑制劑之事實在於 彼等可與位於酶活性部位之胺基酸殘基形成共價鍵结。 如下示，此造成本發明之化合物在相較於可逆式抑制劑 時具有增加之治療有效性。特別地，顯示其為本發明之 化合物所涵蓋之獨特性質及取代基組合，其產生抑制萷 與酶間不可逆的结合。本發明之化合物之此等獨特性質 造就彼此抑制活體内癌模型中人類腫瘤成長之能力。 發明說明 本發明提供式1化合物： R ΗΝΤΧ

Ri 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ------^------------------tr------©lrr 侧59β Α7 Β7 五、發明説明（6.) 子之烷基、1-6個碳原子之烷氧基、羥基、三氟甲基 、氰基、硝基、羧基、2-7個碳原子之羰烷氧基、 2-7個碳原子之羰烷基、胺基及1-6涠碳原子之烷醢 胺基的取代基取代； R及R 1各為氫、鹵素、1-6個碳原子之烷基、1-6涸 碳原子之烷氧基、羥基或三氟甲基； R 2為氫、1-6個碳原子之烷基、1-6個碳原子之烷氧 基、羥基或三氟甲基； Y為選自下列之基： (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

—訂 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製

Rs各為氫、1-6個碳原子之烷基、羧基、1-6個硪原 子之羰烷氧基、苯基或2-7個碳原子之羰烷基； n = 2-4 ； 或其轚藥容許鹽，前題為Y之各R3可相同或相異； 翳藥容許鹽為彼等衍生自如下列之有櫬酸及無櫬酸者 :醋酸、乳酸、檸懞酸、酒右酸、丁二酸、順丁烯二酸 、丙二酸、葡萄糖酸、氫氛酸、氳溴酸、磷酸、硝酸、 疏酸、甲烷磺酸及類似已知容許酸。 -8- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4规格（210 X 297公釐） 4Q2596 A7 B7五、發明説明（7 ) 烷基、垸氧基、羰烷氧基、羰烷基及烷睡基胺基取代 基之烷基部份包括直_及支鏈二者。羧基定義為-C02 Η 基。2-7個碳原子之羰烷氧基定義為- C02R”基，其中 R”為1-6個碳原子之烷基。當X為被取代時，較佳其為 單-、二-或三-取代，K單取代最佳。當本發明之化合 物含有不對稱 K及如此化合 本發明之化 氫者；及彼等 素或1-6個碳 式9涵蓋之 ，其中R 、R : 個碳原子之垸 中心時，此發明涵蘯各R及S鏡像異構物 物之消旋物。 合物中，較佳者包括彼等R 、卩1及R2為 R 'R1及R2為氫，而X為未取代或由鹵 原子之烷基單取代者。 本發明化合物之製備說明於下流程表A中 ,、R2 、R3 、X及η被定義與R4為1-6 基（較佳為異丁基）。Y’為選自下列之基： ---Ί-----Αί----,--IT (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 R',

其中各R3 ’分別為氫、1-6個碳原子之烷基、羧基、 1-6個碳原子之羰烷氧基、苯基或2-7個碳原子之羰烷 基。根據流程表A所勾勒之反應顒序，式2之5 -硝基-氨基苯甲腈在含或不含溶劑（溶劑含過董二甲基甲醢月安·二 -9- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α·4規格（210X 297公釐） """ - 1 """ - 1 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 4〇2596 A7 B7 五、發明説明（8 甲基縮醛）下加熱至約取得式3之脒。加热胖3 與笨胺4於醋酸之溶疲1至5小時取得式5之6-硝基_4 -笨胺基瞍唑啉。5之硝基在离溫下使用於醋酸-醇’混# 物中之堪原劑如鐵想原取得式6之6-胺基-4-笨胺基1135 唑啉。6於有機i8(如吡啶或三乙胺存在下Μ倩性溶劑如 四氫呋喃（THF)中之式7醢氯或式8之混合酸酐（其Μ 自對應羧酸）醯基化取得式9表示之本發明化合物° # 彼等7或8具不對稱碳原子之情形下，彼等可以消®% 或各別R或S鏡像異構物使用，其中本發明之化合 分別呈消旋或R與S光學活性形式。所需用Κ製備本S 明化合物之式2 5-硝基-氨基苯甲腈為業界已知或可® 如下列參考文獻所詳述業界已知之程序製得：Baudet， Reel. Trav. Chim· Pays-Bas, 43, 710(1924);

Hartmans, Reel. Trav· Ch i is · Pay s-Bas , 6 5 , 468 , 469(1946); Taylor 等人，J· Amer. Cheni· Soc.，82， 6058, 6063(1960); Taylor等人，J· An· Chen· Soc·· 82, 3 1 5 2, 3154(1960) ； Deshpande; S e s h a d r i »

Indian J. Chem.，ll, 538(1973)； Katritzky, Alan R.； Laurenzo, Kathleen S*, J. 0 r g, Chen* » 51 (1986); Hiclas，Hans-Joachisi; Bohle, Matthias; Rick, Jens-Detlev5 Zeuner, Frank； Zoelch, Lothar, Z. Chea·, 25(4), 137-138(1985)。 -10 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ---^-.-,Λ------ -n I -- - I— -----f--- 402596 A7 B7 五、發明説明（9 流程表

02N

nh2

DMF (CH3)2NCH(OCH3)a °2n

N(CH3)2 X-NH2 CH3CO2H,

.X

R HN .X

CH3CO2H, C2H5OH

Fe R HN'

經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 式12涵蓋之本發明化合物之製慊說明於下流程表B中 ，其中R 、Ri 、R2 、X及η說明如上。各Rs分別為 氫、苯基或1-6個碳原子之烷基。根據流程表B所勾勒 之反應，式10之6-胺基-4-苯胺基歧唑啉（如流程表A 中所製備）在鹼性觸媒如吡啶或三乙胺存在下Μ惰性溶 劑如四氫咲喃中之式11環狀酸酐醯基化。 11 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210 X 297公釐） Μ ^02598 Β7 五、發明説明（10 ) 流程表B Ο

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明之代表性化合物於數個標準藥理試驗程序中評 估，其顯示本發明之化合物具有作為蛋白質賂胺酸激酶 抑制劑之顯著活性，而為抗增殖劑。基於標準藥理試驗 程序所顯示之活性，本發明之化合物因而有效用作抗瘤 劑。所使用之試驗程序及所得結果說明於下文中。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 式19涵蓋之本發明化合物之製備說明如下流程表C中 ，其中Y’、R4及X說明如上。根據流程表C所勾勒之反 應，4 -氨基-6 -硝基 P 奎唑咐 13 (Morley, JS.及 Simpson, J. Chem. Soc., 360 ( 1 948 ))在少量相轉移觸媒存在下 使用於四氫呋喃與水組成之二相系統中之埵原劑如亞硫 酸氫納堪原為6-胺基-4-氯基PS唑啉14。14於有機鹼如 吡啶或Ν -甲基嗎福啉存在下Μ惰性溶劑如四氫呋喃（THF) 中之式15醯氛或式16之混合酸酐（其製自對應羧酸）醢 基化取得式17之化合物。於彼等15或16具不對稱碳原子 之情形下，彼等可Μ消旋物或各別1{或S鏡像異檐物使 用，其中本發明之化合物將分別呈消旋或R與S光學活 -12- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210 X 297公釐） 五、發明説明（11 ) A7 B7 性形式。在惰性溶劑如異丙酵中加熱式17化合物與式18 苯胺取得由式19表示之本發明化合物。 流程表C Na2S2〇4, (CeH17)3NCH3+ cr

THF, H20

13

x-nh2 18

(CH3)2CHOH 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 式26涵蓋之本發明化合物之 ，其中Y’、R4及X說明如上< 反應，20之硝基（如流程表A 源（其可為氫本身或環己烯） 。21於有機鹼如毗啶或N -甲基 如四氫呋喃（THF)中之式22醢 化取代式24之化合物。於彼 之情形下，彼等可K消旋物或 用，其中本發明之化合物將分 性形式。在惰性溶劑如醋酸中 胺取得由式26表示之本發明化 製備說明於下流程表D中 根據流程表D所勾勒之 中製備）使用鈀觸媒輿氫 缠原至對應胺基化合物21 嗎福啉存在下以惰性溶劑 氯或式23之混合酸酐醢基 等22或23具不對稱碳原子 各別R或S鏑像異構物使 別呈消旋或R與S光學活 加熱式24化合物與式25苯 合物。 -13- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（2ΙΟ'〆 297公釐） A7 B7 五、發明説明（12

流程表 環己烯

N^N(CH3)2 CH3OH, Pd/C

或 Υ，一<'

Cl 22 OCOR4 23

THF,吡啶，或（C2H5)3N

N(CH3)2 X (請先鬩讀背面之注意事項再填寫本頁) H2N—X 25 醋酸

—衣--------訂-- / 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 上皮生長因子受體激酶之抑制（EGF-R) 評估試驗化合物抑制肽受質的胳·胺酸殘基之磷酸化作 用，其由酶上皮生長因子受體激酶催化。肽受質（RR-SRC) 具有序列 arg-arg-leu-i le-glu-asp-ala-glu-tyr-ala-alan-gly。酶圼A43 1细胞（美國標準菌種保存中心 (ATCC), Rockville, MD)之膜萃取物取得。A431细胞 在T175燒瓶中生長至80¾:滿溢。细胞Μ不含Ca 2f之磷酸 鹽媛衝食鹽水（PBS)清洗二次。室溫下焼瓶内含量在含 l.OmM伸乙基二胺四乙酸（EDTA)之20奄升PBS中旋轉1.5

I -14- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210 X 297公釐） 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 A7 ____ B7 _ 五、發明説明（ 小時並在6 Q Q g下離心1 Q分鐘。在冰上细胞以1毫升冷溶 裂緩衝液{l〇aM4-(2 -羥乙基）-卜六氫吡阱乙烷磺酸 (HEPES) ， PH7.6， 10mM NaCl， 2mM EDTA, ImM苯基甲 基磺醯基氟化物（PMSF), 10毫克/毫升抑肱酶，i〇毫克 /毫升亮肽素，O.lmM原釩酸锤}/5xl0e掴細胞溶解於 使用10擊打（stroke)之Dounce均質器。溶裂物首先在 6〇〇g下離心10分鐘以清除細胞殘屑，而上清液進一步在 100,000g及4°C下離心30分鐘。膜小粒懸浮於1.5毫升 HNG 缓衝液（50mM HEPES, PH7.6, 125bM MaCl, 10«甘 浊）中。膜萃取物分為各份（aliquot),隨即於液態氤 中冷凍及在-7 0 °C下儲存。 試驗化合物在101U二甲，基亞！« (DMS0)中製成1()毫克/ 毫升基料溶液。實驗前，基料溶液以鑲衝液（3 0 ®M Hepes ρΗ7·4)稀釋至5Q0mM，再連缠稀釋至所要濃度。 一份A431膜萃取物（10毫克/毫升）於30aM HEPES (PH7.4)中稀釋取得50毫克/毫升之萑白質濃度β將 EGF (12撤克/毫升下取1微升）加入4微升酶製備物 中及在冰上培育10分鐘，接著加入4撤升試驗化合.物或 緩衝液；此混合物在冰上培育3Q分鐘。於此加人以1:10 稀釋於分析緩衝液之33P-ATP (lOraCi/毫升）以及0.5βΜ 受質肱（對照組反應不含試驗化合物），使反應在30 °C 下進行3D分鐘。反應以l〇% TCA中止及在冰上留置至少 1 〇分鐘，之後試管在全速度下徹離心15分鐘。部份上清 液點漬於P81磷醛基纖維素盤，以15K醏酸清洗二次，，再 -15- 本紙張Λ度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2IOX297公釐） {請先閎讀背面之注意事項再填寫本瓦)

402596 A7 B7 五、發明説明（14 ) 以水各清洗5分鐘，接著閃爍計數。本發明代表性化合 物之抑制數據示於下表1 ^ IC 5D為降低隣酸化受質總量 50%所需之試驗化合物濃度<> 針對至少三値不同濃度測 定試驗化合物之抑制％ 。IC 值自劑量反應曲線評估。 抑制％以下式評估： 抑制 3： = 1 0 0 - [ C P Μ (藥物）/ C P Μ (對照組）]X 1 0 0 其中CPM (藥物）單位為計數/分鐘及為表示放射性標記 之ATPU-BP)量之數字，其由酶在30°C下及試驗化合物 存在下送人ββ-SRCffe受質30分鐘後藉由液體閃爍計數測 量。 CPM (對照組）單位為計數/分鐘及為表示放射性標記之 ATP (g-33P)量之數字，其由酶在30°C下及試驗化合物 不存在下送入RR-SRCife受質30分鐘後藉由液體閃爍計數 测量。 CPM值在酶反應不存在下校正為ATP所産生之背景計數 。記錄於表1中之IC so值為所進行試驗之數目的平均 值〇 (請先閲請背面之注意事項再填寫本頁) Λ ΐτ' 經濟部中央標準局貝工消費合作社印策 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X：297公釐〉 Β7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（U) 1 1 表1 1 1 1 上 皮 生 長 因 子受體激 酶 之抑 制 1 ,1 化 合 物 1C 50 (微莫耳湄度） 試 驗數 百 V 請 先 1 實 例 4 0.012 5 閣 讀 »| I 實 例 5 0.198 4 背 1 I 之 1 實 例 6 0.5 1 注 意 1 1 事 1 實 例 7 0.05 1 項 再 填 寫 1 實 例 8 0.04 2 m m 本 1 實 例 9 0.002 20 頁 '—^ 1 I 實 例 10 0.11 2 1 1 實 例 11 0.056 4 [ 1 實 例 13 10-7 1 1 訂 實 例 14 1.0 1 1 試 驗 化合 物 與 上 皮 生 長因子受 體 激酶 共價结合 之測 定 1 1 __* 份A431酶 萃 取 物 (如上述 製 備） M 30mM HEPES 1 I (pH7 .4， 含 EGF 濃 度 12微克/ 毫 升） 稀釋至5 0 -100微克 1 1 / 毫 升， 使 在 標 準 試 驗條件下 約 25S；反 應會發生 及終 EGF 1 I 循 度 為2 . 4 微 克 / 毫 升（如上 述 標準 分析）。 使用 前此 t 1 I 混 合 物在 4¾下培育至少10分鐘 >此酶製備物用於下列 1 f 透 析 試驗 程 序 中 〇 1 1 於 60微 升 酶 製 備 物 中添加48微 升溶 於5J：二甲 基亞 m 1 1 (DMS0)之 試 驗 化 合 物. (或僅48撤 升5XDMS0作為 對照 姐） 1 1 0 選 用試 驗 化 合 物 m 度高於1C 50 值20 -100 倍 Μ 確保 理想 1 I 上80 -90：«抑 制 〇 酶 抑 制劑溶液 在 4t：下培育45- 60分 瞳0 I 1 I -17- 1 1 1 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） ^02596 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（认） 胃&未@析之對照組轼驗程序，9撖升份之酶抑制劑溶 _程序下評估。對於透析試驗程序，β〇微升 $之"$抑制劑溶液置於 Pierce Microdial.yzer System 100 & #孔中及在下對30bM含1 . 25微克/毫升EGF之 HEPES 8析24小時，更換媛衝液二次（每次更換前至少 € # 3小時）。使用8〇〇〇分子董分離點膜。9微升份 (至少二重複次）之逋析溶液藉由上述標準程序評估活 性°未添加試驗化合物之酶在透析後保留5〇_9〇χ之其初 °未添加_之試驗化合物的透析溶液亦被評估.以確 保化合物可透析。 性在透析後未回復，則判定試驗化合物係以共 ϋ结合（不可逆的抑制）。，若酶活性在透析後大幅回復 ’則判定試驗化合物係以非共價结合（可逆的抑制）。 共價结合之判定可表示為回復之活性S!,其使用下式計 算（利用透析前及透析後之抑制χ ): 回復之活性！!；==[(抑制丨{透析前}-抑制S!{透析後})/抑制ϋ； {透析前}] X 100 接近100¾之回復活性J：之值表未非共價结合（可逆的 抑制）。逮低於ιοοχ之回復活性X之值表示共價结合 (不可逆的抑制）。判定本發明代表性化合物與EG F-R 激酶共價结合所得之结果示於下表2 。作為比較用，表 2亦提供N-(3-溴苯基）-6,7-二甲氧基-4-睡唑啉胺之结 合數據。此睹唑啉抑制劑已確認為EGp-R® _之強力抑 制劑〔Fry, D. W·，等人，Science. 265· 1093(1994); -18- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（2丨〇><297公楚） (請先鬩讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂--丨 402596 五、發明説明（17 ) A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

Re W C a s ；t 1 e G . W .等人， J Me d . Che m . 38 丨， 3482 (1 995 ), 及 Br id g e S , A . J . ，等人， J Med. Che m . 9 39 t 267(1996)〕 及涵蓋於歐洲專利申請案566 ,226 A1 中 〇 各 被 評 估 之 化 合 物 之 多 重 獨 立 評 估 的 结 果 示 於 表 2 表2 與 上 皮 生 長 因 子 受 體 激 酶 共 價 结 合 之 判 定 化 合 物 回 復 之 活 性 % 判定 實 例 4 20 11 17 共價 (不可逆的结合） 實 例 9 9 4 共價 (不可逆的结合） N- (3 -溴苯基） -6 ,7 -二 102 70 107 非 共 價 甲 氧 基 - 4 ~ if 唑 啉 胺 ( 可 逆 的 结 合 ) 表 2 之 结 果 表 示 本 發 明 之 化 合 物 藉 由 與 位 於 酶 上 之 胺 基 酸 殘 基 形 成 共 價 鍵 结 而 Μ 不 可 逆 之 方 式 抑 制 EGF- R 激 酶 0 鑑 於 此 彼 等 明 願 不 同 於 一 般 4- 苯 胺 基 歧 唑 啉 如 N- (3 -溴苯基）-6 ,7 -二甲氧基- 4- B奎 唑 啉 胺 * 其 Μ 可 逆 方 式 结 合 0 如 下 所 述 贅 本 發 明 化 合 物 與 先 刖 技 藝 — 般 之 喹 唑 啉 抑 制 劑 之 間 結 合 能 力 之 此 差 異 產 生 顯 著 改 菩 之 生 物 活 性 及 因 而 產 生 較 大 之 治 療 有 效 性 〇 藉 由 送 入 [ξ > Η ]- 胸 甘 測 定 之 细 胞 生 長 的 抑 制 評 估 本 發 明 化 合 物 活 體 外 抑 制 下 述 细 胞 株 生 長 之 能 力 0 當 细 胞 於 抑 制 劑 存 在 下 生 長 時 9 抑 制 藉 由 測 定 送 入 放 射 性 標 記 之 胸 甘 的 減 少 而 定 量 0 A431 與 SKBR3 细 胞 株 ~ 1 9 ~ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ----參衣----！ΐτ------ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X2^7公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 40^596 A7 B7 五、發明説明（丨ί) 美國標準菌種保存中心，Rockville, MD取得。Neu-3T3 細胞藉由以话化之鼠Neu致癌基因轉染MIH 3T3鼠纖維 母細胞而取得》NHEK細胞自Clonetics(San Diego，CA) 取得。細胞例行在空氣中5XC02下於濕潤化之培育器内 生長〇此等細胞株依賴配位至受體酪胺酸激酶之生長因 子，其為本發明化合物之目標及具有下列特徵： A431 : 過度表現EGFR之人類擬表皮癌細胞 N e u' - 3 T 3 : 以活化之Neu致癌基因轉染之NIH 3T3細胞 NHEK: EGF依賴正常人類上皮角質細胞 SKBR3 : 過度表現ErbB2基因之人類乳癌細胞· 使細胞於如下逑之適當培養基中生長： A 4 3 1 ： Dulbecco之改質Eagles培養基，高葡萄糖， BRL/Gi'bco(10%胎牛血清（FBS)，穀胺醯胺，盤尼西林-鏈撇素）Dulbecco，R.，Freeman, G. Virology 8，39_6 ( 1 9 5 9 ) 〇

Neuu-3T3: Dulbecco之改質Eagles培養基，高葡萄糖， (1(U胎牛血清（FBS),穀胺醛胺，盤尼西林-鏈徽素） S K B R 3 : Roswell Park Memorial Institute 1640 W/GLU(10% FBS, GLU, PS)Moore, G.E., Gerner, R.E. 及 Franklin, 199, 516(1967)0 NHEK:角質細胞生長培養基，Clonetics

Boyce, S.T. and Ham, R.G. In Vitro 17, 239 (Abstract No.159) (1981) 細胞以1Q,00Q細胞/井孔播種於96井孔中之完金培養 基中，使生長至對數階段。在此階段，完全培食基以含 有0.5XFBS之培養基（針對在10¾ FBS中生長之細胞） 或缺乏上皮生長因子（EGF)之培養基（針對在不含血清 _-20-_______ 本紙張尺度適用中國國家標芈（CNS > A4規格（210X297公釐〉 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

A7 402596 B7 五、發明説明（19 ) 之培養基中生長之细胞）取代。低血清（或缺乏EG F) '之培f基中培育過夜後，將待評估之化合物加入及使细 胞保持於化合物存在下48至72小峙。隨後去除含有試驗 化合物之培養基，將完全培養基加回。使细胞生長18小 時。接著在[3 H]胸甘（lmCi/毫升於血清/ EGF培養基） 中培育4小時。细胞在37t：下於0.5M NaOH中溶裂至少 30分鐘及分析放射性活性。 细胞生長抑制數據提供於下表3 'ICso為降低[3H] 胸甘送入量50¾所需之試驗化合物濃度。所評估化合物 之抑制ϋί至少測定三種不同濃度，ICso值自劑盪反應曲 線評估。抑制！K Μ下式評估： 抑制 3! = 100-[CPM(藥物）/CPM(對照組）]χΐοο 其中CPM (藥物）單位為計數/分鐘且為表示细胞在試驗 化合物存在下生長時送入DNA之[3H]胸甘的量，由液 體閃爍計数測量。CPM (對照組）單位為計數/分鑪且為 表示细胞在試驗化合物不存在下生長時送入DNA之 [3H]胸甘的量，由液體閃爍計數測量。 (請先鬩讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 -€- 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -21 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公釐） 402596 at B7 五、發明説明（20) 表3 藉由[3 H]胸甘送入測定（ICso)之细胞生長的抑制 化合物 Α431 SKBR3 ΗΗΕΚ NEU-3T3 (微莫耳濃度） (微莫耳濃度） (微莫耳濃度> (微冥耳濃度） 實例4 0.07 >50 0.17 >50 寊例5 0.825 0.30 0.17 10 實例6 27 >50 4.5 >50 實例7 0.45 5.5 0.45 7.5 實例8 0.22 7 0.5 0.3 實例9 0.011 1.057 0.002 0.002 實例10 60 >50 >50 15 實例11 0.8 4 0.85 0.4 ------------— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 -經濟部中央標準局員工消費合作社印製 人類擬表皮腫瘤（Α43Ό生長之活體内抑制 使用 B A L B / c n u / n u 雌鼠（C h a r 1 e s R i v e r，W i 1 m ί n g t ο η ,MA)於活體内標準藥理試驗程序中。人類擬表皮腫瘳 细胞A-431 (美國標準菌種保存中心，Rockv i 1 le , Maryland #CRL-155)如上述在活艚外生長。皮下注射 —單位5xi〇e個细胞於鼠中。當腫海達100與15(¾克間 之質虽，鼠皤櫬分為處理組（第0日）。鼠M〇.2XlHUcel 中之待評估的化合物80、40或20奄克/公斤/劑的劑量 在第1 、5與9日時每日腹膜内處理一次或在第1日至 -22- 本紙倀尺度適用中國國家標準( CNS ) Λ4规格（210'〆297公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 402598 A7 B7 五、發明説明（21 ) 10曰間分次處理。對照組動物不領受藥物。每7天測定 腫瘤質量[(長度X寬2 )/2]達28天。測量各處理組之栢 對腫瘤成長（第7 、14、21與28日時之平均腫瘤質量除 以第0日時之平均腫瘤質量）°T/C (腫瘤/對照組） 藉由將處理組之相對腫瘤成長除Μ安慰劑組之栢對腫 瘤成長並乘Μ100 。若T/C3：S4 2：1；時，則化合物視為具 活性。 實例9化合物所得之抑制結果提供於下表4中。 -23- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS )八4規格（210 X 297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

€92596 ' A7 B7 五、發明説明（22 ) a) 骝叇財雠1 >5 眾势財雠一呦1〇0**鍤藏2-漭44。 鲥 7,14,21,2>〇〇0雄(^书拣鼸鰌»岫b) affia©a 珈=-!:-- 谳ο 书®繭籙»_ Μί_薛^¾雎繭趦铒珈 c) n/c=--X100 坩EiSB^a驶S薇铒珈 d) s/T=礅®燁/斛繭藏蹓许寐誠28BSN-麵廣»。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 * * « 木 《 N5 O〇 〇 〇 〇 本 m 涵 闺 » m ♦—H \ \ iifti ?5 a \ 〇 • οί H·^ h—* cT~)j *<J 办 PO 〇0 — 00 01 OO -<i o ΕΠ " .g H-k -<!〇〇0 a« o 0 一 ο Η—^ ro ro 〇 N5 CO <D W — -vl CO h-* m ^ J—* 〇 0¾ JJ. HI OO DO — ^ 〇0 H-* π-g 0 H-i ΓΟ ΟΊ 私 Co 一 to o o H-* — H-k 瓣3 tso o S σ H-* CaJ N5 〇0 -<I CD 〇 0 PO cn oo 0¾办一 〇 oo 00^.0 H-* cn o m ^ ΓΌ O ^ 〇* m 合 CO t—* -<J ς〇 〇 0 ϋΐ cn cn cji cti 、、、 CJl tn CJl h-* o 、 H-k o > Cu 浙*4 勰&W盏9-Φ兹W鯽书Λ遛癱紲淹鼸@(A431)a珈51部鏞3苕莖 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 4 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X297公釐） 402596 Bv 五、發明説明（w ) 下表5中比較實例9化合物與N-(3 -溴苯基）-6,7 -二 甲氧基-4-喈唑啉胺活體内抑制人類擬表皮腫瘤（A431) 力 之 長 生 基 苯 溴 胺 啉 唑 is - 4 - 基 氧 甲 二 物劑 合制 化抑 較力 比強 為之 用酶 選激 為 認 確 已 劑 制 抑 啉 唑 Ϊ1 此 為 因 等等專 WW.等洲 D..W1 歐 G · ， J 於 ryleA.蓋 CFst’ 涵 aS . J e 及 人人 案 請 Φ 利 中 (請先閎讀背面之注意事項再填寫本瓦) ----.--,ιτ------ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS.) A4規格（210X 297公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 40S596 A7 __B7 五、發明説明（24) a)骝 tjm^lrn呦雠 5Ββ藤藏3·®4<1。 雠 7,14,21,28、0眾^书迩蔵踺»_ 3¾¾¾¾¾珈=-^- 鉞ornBfN书菡繭趦«_ a瞄薛N-a^slsgt珈c)n/c= - X so 谢遝蜃圈N-aii$鬮藏a珈 〇-)$/7=砑部娌\掛鍤藏酿许寐越280眾^鞠瞄燁。 » T ϊ Μ Y S «雜 @貴铖 辦脚 1 一 ^ 1 1 05 M 鸢 VO * m 薛 ur φ 叇 〇〇 S l·-A 1k 00 H-i 〇〇 m ^ -<1 o rn <〇 CJ1 to cn o 0 05 cn 〇〇 Η-* ΓΟ C5 Ol Oi cn m q 1-^ O 岳i Η-» ο ΓΟ to Ο 0 1-* 〇 07 K-4 tn ^ q N5 O ^ σ-EO 〇〇 S 〇 0 h-* ΓΟ on Oi o oo m ^ IN5 cn 00 cr rn Η-k s CO ro a« o 0 H-i ΟΊ * CJl 1-* H-* Cn μ-* o · o > »5 is-e-A 織癍淛河讁馘(A431)gt珈磡»«鸢9 ίΓΓφ^ΒΝ-^— 猫树 ST6,7-π-Η»»ί-4έ1·^菏N-部豳a-莕aRtb 戣. 璺 _ 20 織独 \>>淬 \MSS3-萡屮 (請先閣讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公釐）

101596 A7 B7 五、發明説明（25 ) 如表4-5所示，本發明之化合物抑人類腫 瘤生長及因而有效用作抗腫瘤劑。鑑於此，彼等明顯不 同於一般之4 -苯胺基卩奎唑啉如Ν-(3 -溴苯基）-6,7 -二甲 氧基-4-if唑啉胺，其缺乏抗腫瘤活性。 實例9化合物活體内抑制人類擬表皮腫瘤（A431)生長 之能力與分別為歐洲專利申請案635 ,498 A1與566,226 A1所涵蓋之二個结構類Μ之化合物H-[4-[(3-甲苯基）胺 基]-6-if唑啉基]-7-氟-2-丙烯醯胺（稱為比較測定者A) 及N-[4-(3-溴苯基）胺基-6-授唑啉基]-丁醢胺（比較測 定者B)比較。此等比較结果示於表6與7中。 I.— ------------^--訂 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -27- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） A7 __B7五、發明説明（26 ) CUT/C"—— 谢鼸遵薛N-ffiBSsmaanl d) S/T=¾甜娌\繭藏鵾肝酿减21rnB§Nllii楚 * 淛却fKOolNmlt®»。 a)瓛t/KS藏3葙屮。雎涵闺涔80*掛\t>^a_^m鉞一 20廉减\>>布還_ _唞馘一制1〇0眾眾44。;5Ϊ t ΏΜΓ3二*2Γ28ΕΠΦΝ1·书趂S豳»1* 5进雎鍤藏热揶=-----1ϊ Β5书i_ 鲺瞄薛^进雎01藏铒珈-X so 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 知9 m眾洚屮 rr-ΓΟ ΕΓΓ m sS η m CD ίο S \ Α ΓΤ 〇〇 err si 5S 'w^ 鸢 CD 〇0 s rOf \ 'W* 本 m 薛 cr 豸 0〇 N5 ο ο 00 Ca5 <〇 H-* ro ϋΐ cn cn CO -»J o cr in. 00 — % 03 oo 本 〇 0 0¾ οο ς〇 ΟΊ 05 〇 ΓΟ cn o H-* • CP Os3 ^ o HI σ> 00 ro * A CC ΓΟ — * o 0 〇〇 -ο CJ1 το C7I CJ1 σ> 〇〇 -J <D 越3 ΓΟ ο 一 tr m ΟΊ σ> Η-1 * 〇0 ro . 木 〇 0 ζ〇 μ-λ Ο Ο \ Ο H-* o μ-4 〇 o \ o 〇 h-^ o > Oi 5t6 麵-Β-λ織癱谢淬鼸® (A431)铒珈||&减漥9宇卟豸涟=:-〔4-i (3--ffl钳 S)菏«〕-6-|1»11.萆脚〕-7-11-2-¾ 誠翮菏(rrb 翅蓮 尚邮A)部®2-苕霪3圧戣 8 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（2IOX297公釐） (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) #01596 A7 B7 五、發明説明（27 ) a)漱兹Ms藏3萡屮。雎涵薛郏80*斟\>>邛遭_麥財铖1 , 5涔9B®萡屮； 20*袖\玫年蛩_菸財燄1阀1〇0茚范屮。雠7,14,21,28mBf(^书茈 S 藏 »_^IMin I——-^-雠0 ΒΦΝ-书菡鼸蔵《_繭葙薛N-ail$s鷂铒珈 cUT/C= -- XI CJ)s/T=^ffi娌/H馘礙许銥濉 28BBf^Mii 楚。 *»^llp<0.01^ml-+-_*。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 ίο γγ S| a? _迸 5S »ϊ •w*· 塒 «〇 g £ \ * m 薛 cr Φ 垄 PO g to CO oo CO CO cn Oi -α o m °* 〇〇 CO cn to CLH * 〇 0 t— CO • tn CO g oi oi 心〇 Jr 0* m CO 〇〇 ro 本 〇 0 cn N? pi ΓΟ ro •浴 C7I he C71 to o H-* jj. EQ g f—» g rs^> 本 〇 0 〇〇 k s ro cn oo 夂. cn 0¾ CO to o 1^ g PO 4¾. CJ1 « o 0 J71 cn CJ1 cn o )—A o 〇\° CO \ ㈠ a 撕-0卿书>-織癱撕汧繭酹(^31)铒_戡&)1|渣9宇卟兹楚〒〔4'(3-»树 g)菏瞅】ά-ιβ^#»〕--!釅薄(tb鵁蓮砘#B)部繭3-苕莖sbb趙 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -------- 'ITI I I I I ,M- r 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公釐） A7 B7 樵-、1¾丨 408596 五、發明説明（28 表6與7所得结果顯示本發明代表性化合物實例9化 合物活體内顯著（p〈〇’〇i)$制^ 〇 @ 洲專利申請案635,498 A1(比較測定者A )與566,226 A1 (比較测定者B )结構最相近之化合物實質±具有較Sf例 9化合物為低之活性，且二者在二個試驗劑& T均無法 顯著降低腫瘤成長。 基於本發明代表性化合物所得之结果，本發明之化合 物特別有效用於治療瘤、抑制琯成長或根除瘤。特別地 ，本發明之化合物有效用於治療瘤、抑剌瘤成長或根除 瘤，該瘤表現EGFR如乳房瘤、賢瘤、肪胱痕、口痕、喉 瘤、食道瘤、胃瘤、直腸瘤、卵巢瘤或肺痛° 本發明化合物可淨配製或可與投予用之一成多種路蔡 容許載劑併用。例如，溶劑、稀釋劑等，及可以如淀劑 、膠囊、可分散之粉末、顆粒或含有如約10至5〇χ糖之 糖漿，及含有如約20至50S；乙酵之酏劑等形式口眼投予 ，或Μ無菌可注射之溶液或含有約〇.〇5至5Χ懸浮劑於等 滲壓介質之懸浮疲形式腸胃外投予。如此之路藥製劑可 含有如自約0.05上至約90Χ之活性成分與載劑·更常介 於約5¾及60S；重量比之間。 所用活性成分之有效劑量可視所用特定化合物，投予 形式及治療之病症的脎重性而定。然而，一般而言，當 本發明化合物K約0.5至約1000毫克/公斤動物體重之 日劑量投予，視情況每日2至4次K分劑查投予或以持 鑛釋放形式投予時，得到滿意结果。對於大部分之大型 -30- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公痠） ----------------3--訂 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局貝工消費合作杜印製 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明 〔29 ) 1 1 哺 乳 類 > 總 曰 劑 量 白 約 1 至 1000 毫 克 9 較 佳 白 約 2 至 500 1 | \ 1 毫 克 〇 適 於 内 腋 之 劑 型 包 含 約 0 . 5至1000毫克活性化合 1 、物 與 固 態 或 液 態 路 藥 容 許 載 劑 直 接 混 合 0 此 劑 療 法 可 調 /-—S 請 先 1 整 Μ 提 供 最 適 治 療 反 應 〇 例 如 t 數 個 分 劑 量 可 每 曰 投 予 閱 讀 1 或 該 劑 可 依 治 療 情 況 之 急 需 所 顧 示 依 比 例 減 少 〇 背 面 1 I 之 此 等 活 性 化 合 物 可 □ 腋 投 予 及 藉 由 靜 脈 內 > 肌 肉 或 皮 注 意 1 事 1 下 途 徑 投 予 0 如 適 於 活 性 成 分 之 性 質 及 所 欲 投 予 之 特 定 項 I 再 r 形 式 9 固 態 載 劑 包 括 澱 粉 乳 糖 磷 酸 二 鈣 微 晶 型 纖 填 寫 本 衣 維 素 蔗 糖及 高 嶺 土 t 而 液 態 載 劑 包 括 無 菌 水 f 聚 乙 二 頁 1 I 醇 » 非 離 子 界 面 活 性 劑 及 食 用 油 如 玉 米 油 花 生 油 及 芝 1 1 麻 油 〇 較 佳 可 包 括 習 用 於 豁 藥 組 成 物 之 製 備 中 的 佐 劑 如 1 矯 味 劑 、 著 色 劑 保 藏 劑 及 抗 氧 化 劑 如 維 生 素 E 抗 壤 1 訂 血 酸 ΒΗΤ 及 ΒΗΑ 〇 1 著 眼 於 製 備 及 投 予 之 簡 易 性 的 較 佳 翳 蕖 組 成 物 為 固 態 1 I 組 成 物 9 特 別 是 錠 劑及 硬 質 填 充 或 液 態 填 充 之 膠 囊 > 化 1 I 合 物 之 口 眼 投 予 較 佳 〇 I k 某 些 情 況 下 希 望 直 接 >λ 氣 溶 膠 形 式 投 予 化 合 物 至 氣 管。 ¢, 此 等 化 合 物 亦 可 腸 胃 外 或 腹 膜 内 投 予 0 此 等 呈 由 態 ΐ 1 鹼 或 翳 藥 容 許 鹽 之 活 性 化 合 物 的 溶 液 或 懸 浮 液 可 於 適 當 1 1: 地 與 界 面 活 性 劑 如 羥 基 -丙基纖維素混合之水中製備 > 1 I 分 散 液 亦 可 在 甘 油 液 態 聚 乙 二 醇 及 其 混 合 物 於 油 中 製 1 1 1 備 0 一 般 儲 存 與 使 用 狀 況 下 9 此 等 製 劑 含 有 保 藏 劑 防 1 1 止 微 生 物 之 生 長 0 1 I 適 於 注 射 用 之 路 藥 形 式 包 括 無 菌 水 性 溶 液 或 分 散 液 及 1 1 -31- I 1 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 €02596 A7 _B7_ 五、發明説明（5〇 ) 用於即時製備無菌注射溶液或懸浮液之無菌粉末。所有 情形下，該形式必需為無菌且必需為流質K至易使用注 射器之程度。其在製造及儲存狀況下必铺安定且必需保 藏K免受微生物如细菌與真菌污染。載劑可為溶劑或分 散液介質，其含有例如水、乙醇、多元酵（如甘油、丙 二醇及液態聚乙二醇）、其適當混合物及植物油。 用於治療癌症，本發明之化合物可與其他抗腫瘤物成 幅射併用投予。此等其他物質或幅射治療可與本發明之 化合物同時或不同時投予。此等合併之治療可達加成作 用，而產生改良之效果。例如，本發明之化合物可與有 絲分裂抑制劑如紅豆杉醇或長春鹼（vin blastine )、烷基 化劑如順氯氨鉑或環磷醸胺、抗新陳代謝劑如5-氟尿唯 地嗤或經基DNA插人劑（intercalators)如阿嫌素 (adriassycin)或博來徽素（bleomycin)、拓膜異構酶抑 制劑如艾它普斯德（etoposide)或喜樹驗（camptothecin) 及抗雌激素劑如它莫西芬（taiaoxifen)。 本發明化合物之代表性實例的製備說明於下。 實例1 ΗΌ-氬基-4-硝笼某二申某申脒 40.8克份5-硝基氨基笨甲膪與40毫升Ν,Η-二甲基-甲 醯胺二甲華縮醛在蒸氣浴中加熱2小時。溶劑在減壓下 去除及將殘渣溶於二氯甲烷中。將此溶液通過Masnesol 後去除溶劑。Μ乙醚淸洙後取得50.8克N’-(2-氰基-4-硝苯基）-N，二甲基甲脒。 -32- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ------V—...-------------1T--- A7 B7 五、發明説明（^ ) 實例2 N-U-?阜荣某-硝某-4-腌邮BM:胺 23.74毫升3 -溴基苯胺與40.5克N'-(2 -氣基-4-硝苯基） -N , N -二甲基甲脒於1 0 0毫升冰醋酸之溶液在油浴中於 1 4 8 °C下攪拌並加熱1 . 5小時。冷卻時，過濾所得固體取 得定量産率之N-(3 -溴苯基）-6 -硝基- 4-1¾唑啉胺：mp = 267-270°C ;質譜（m/e):345e 實例3 N-(2-淖荣甚胯邮PM:二胺 34. 5克N-(3 -溴苯基）-6 -硝基-4-B奎唑啉胺與16.8克鐵 粉於150毫升乙醇及150毫升冰醋酸之混合物在油浴中於 1 2 0°C下加熱2小時〇過濾固體後，將固態磺酸鈉加至 濾液取得固體。將此過濾及固體以甲醇萃取。萃取物以 木炭處理及蒸發至固體。以乙醚清洗固體後取得27. 5克 N-(3 -溴苯基）-4,6 -授唑啉二胺； 質譜（m/e) : 315。 實例4 4-1~「4-「（3-溴荣甚）胺甚卜6-晻_酞甚1胺基1-4-氤甚-(7.) - ? - 丁烯酴 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 將1 5毫升份吡啶加人1 . 6克N - ( 3 -溴苯基）-4 , 6 - 1¾唑啉 二胺及0.6克馬來酐中《攪拌過夜後，溶劑在旋轉式蒸 發器上去除。固體溶於約400毫升熱乙醇中及過濾不溶 物質取潯〇 · 3 3克4 - [[ 4 - [( 3 -溴苯基）胺基]-6 - 1¾唑啉基] 胺基]-4-氧基-(Z)-2-丁烯酸：質譜（m/e):M + H 413,415。 實例5 -3 3 - 本紙張尺度適用中國國家磕準（CNS ) A4規格（2IOX 297公釐） 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 4.08596 Αν B7 五、發明説明（# ) 淖茱某）胺甚1-R-B奎睥DM：甚1胺甚1-4 -氩甚- (R)- 2 - 丁 烯 酹 .7' 棊 m 將 N - (3 -溴苯基）-4 ,6 -B奎唑啉二胺於1 5毫升吡啶之溶 液 在 冰 浴 中 冷 卻及 逐 滴 將 1 . 22克 氣 化乙 基 反 丁烯 二醯基 於 10 毫 升 二 氣 甲烷 之 溶 液 加 入。 攪 拌1 . 5小時後， 使反 應 達 室 溫 0 減 壓下 去 除 溶 劑 及殘 渣 以水 處 理 。將 紅色固 體 過 濾 及 萃 取 入熱 丙 酮 中 0 過濾 不 溶物 後 濃縮 濾液取 得 0 . 45克 4- [[ 4-[( 3» 溴 苯 基 )胺基]-6-®唑啉基]胺基]- 4- 氧 基 -( E) -2 -丁烯酸， 乙基酯： m P = 2 5 9- 2 6 3°C ; 質譜 (m/ e )： M + Η 4 4 1，4 4 3 〇 實 例 6 Η- Γ4 -「 (3 -淖荣某） 胺 棊 1 - m m 啉 棊卜 3- 甲 華 -丁忧醅 ι 將 1 . 5 8克 Ν - ( 3 -溴苯基） -4 ，6 -陛唑啉二胺於15毫升吡 啶 之 溶 液 在 冰 浴中 冷 卻 及 逐 滴將 0 . 67毫 升 3， 3-二 甲基丙 烯 醯 基 氣 化 物 於7 毫 升 乙 醚 之溶 液 加入 〇 攪 拌並 冷卻2 小 時 後 9 在 減 壓下 去 除 溶 劑 。殘 渣 以水 處 理 及所 得固體 白 甲 基 溶 纖 劑 (cel lu S 0 1 V e)再結 晶 取得 0 . 97 克 N- [4-[ (3 -溴苯基） 胺 基 ]-6 - Iff 唑 啉 基 ]-3 -甲基- 2 - 丁 烯醯 胺： rap =3 0 0 -3 0 1 °c ；質 譜 (m /e): 3 9 6, 3 98〇 實 例 7 N - 「4 -「 (3 -淖荣甚） 胺 華 1 - a - P辛邮 咐 華1 - (R)- ?-丁 烯醅胺 將 1 . 6克N -( 3-溴 苯 基 )- 4， 6-B奎 唑 啉二 胺 於 1 5毫 升吡啶 之 溶 液 在 冰 浴 中冷 卻 及 逐 滴 將〇. 57 毫升 反 式 巴豆 醯基氛 -34- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央樣準局貝工消費合作社印製 彻綠⑽θ s A7 __π 1_Β7_ 五、發明説明（W ) 化物於6毫升乙醚之溶液加入。攪拌並冷卻2小時後， 在減歷下去除溶劑。殘渣以水處理及所得固體自正丁醇 再結晶取得〇·69克Μ-[4-[(3 -溴苯基）胺基]-6-1¾唑啉基] -('E)-2 -丁烯醯胺：mp=153-160 °C;質譜（m/e): M + H 3 8 3, 3 8 5 „ 實例8 N-f4-C (‘?-?阜荣甚）胺甚l-fi-Β牵_酞甚1-2-申甚-2 -丙樣 m m 將1.6克N-(3 -溴苯基）-4，6 -B奎唑啉二胺於15毫升吡啶 之溶液在冰浴中冷卻及逐滴將0.59毫升甲基丙烯醯基氣 化物於6毫升乙醚之溶.液加入。攪拌並冷卻2小時後， 在減壓下去除溶劑。殘渣以水處理及所得固體溶於正丁 醇（溫）中。將乙醚加入冷卻之溶液中取得0.44克N-[4-[ (3-溴苯基）胺基卜6-睹唑啉基]-2-甲基-2-丙烯醯胺： iap= 240- 2 4 5 °C;質譜（π/e): M + H 383， 3 8 5 〇 實例9 1「4-「（3-道荣甚）胺甚1-6-11牵邮酞甚1-?.-丁炔醅胺 將0.50克2 -丁快酸於10毫升四氳呋喃之溶液在冰浴中 冷卻。接著Q.79毫升份異丁基氣甲酸酯將0.66毫升份N-甲基嗎福啉加入。約1分鐘後，將1.6克fl-(3 -溴苯基）-4,6 -K唑啉二胺於10毫升吡啶之溶液加入。使反應達室 溫及抿拌過夜。在減壓下去除溶劑及固體自正丁醇再結 晶取得Γ. 〇 7克H - [ 4 - [( 3 -溴苯基）胺基]-6 -陉唑啉基]-2 -丁炔醯胺··質譜（m/e): 381，383。 - -35- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Μ規格（21OX297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 4QB596 A7 B7 五、發明説明（34 ) 實例1 0 4-「1~4-「（3-海茉某）胺基1-6-脾_酞某1胺某1-4-氬某-(R) -2-丁烯酪 將2.5毫升份10N水性氫氧化納加入於25毫升乙醇中之 2.3克4-[[4-[(3-溴苯基）胺基]-6-喹唑啉基]胺基]-4-氧基-(E)-2-丁烯酸乙基酯（實例5 )。攪拌一小時後， 將2.1毫升湄氫氯酸加入及反應再攪拌2小時。所得固 體自正丁醇再结晶取得0.97克4-[[4-[(3_溴苯基）胺基] -6-睦唑啉基]胺基]-4-氧基- (E)-2-丁烯酸：質譜（m/e) ：M+H 413° 實例11 H- F4- m海笼某 > 腌某1 -R-胯_舦甚1 -2 . 4-F1.二懦醏腌 將0.67克2,4-己二烯酸於10毫升四氫呋哺之溶液在冰 浴中冷卻。接著0.79毫升份異丁基氛甲酸酯將0. 66毫升 份N-甲基嗎福啉加入。約1分鐘後，將1.6克N-(3-溴苯 基）-4,6 -1®唑啉二胺於10毫升吡啶之溶液加入。使反應 達室溫及攪拌過夜。在減壓下去除溶劑及固體再結晶取 得1.0克》-[4-[(3-溴苯基）胺基]-6-11奎唑啉基]-2,4-己 二烯醯胺：mp = 258-260t：。 實例12 N-U-「M-逋笼某 > 防某Ι-ft-晬邮酞某1-2 -瑱戍烯醃防 將0.43克2 -環戊烯酸於5毫升四氫呋喃之溶液在冰浴 中冷卻。接著0.49毫升份異丁基氯甲酸酯將0.41毫升份 N -甲基嗎福啉加入。約1分鐘後，將1.0克N-(3 -溴苯基） -36- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS Μ4規格（210Χ297公釐） (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) -- —訂------ ^08596 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明,（35) -4,6-_唑啉二胺於10毫升吡咱之溶液加人。使反懕達 室溫及攪拌過夜。將另0.5當量混合酸酐加入。混合物 攪拌5小時。在減壓下去除溶劑及固體藉由在矽凝膠上 層析純化取得0.30克N-[4-[(3-溴苯基）胺基]-6-腔唑啉 基]-2-環戊烯醯胺：質譜（m/e): 409 (M + H, EI)。 實例1 3 Ν-Γ4-ΓΠ溥金甚）脐甚1-fi-腌醵舦某1-2-丙熥醮肱 將2,0克H-(3-溴苯基）-4,6-陛唑啉二胺於10奄升吡啶 之溶液在冰浴中冷卻及在0t!下逐滴將0.61奄升氯化丙 烯醯基於30毫升乙醚之溶液加入。在室溫下攪拌3. 5小 時後，在減壓下去除溶劑。殘渣藉由層析純化取得0.2 克H-[4-[(3-溴笨基）胺基]-6-DS唑啉基]-2-丙烯醢胺： 質譜（m/e): M+H 369。 實例14 N-「4-「（3-痗笼某）脐甚1-6-晻_酞某某-2-丙钕 將0.93克3-苯基-2-丙炔酸於10毫升四氫呋喃之溶液 在冰浴中冷卻。接著0.82毫升份異丁基氯甲酸酷將0.69 毫升份N -甲基嗎福啉加入。約1分鐘後，將1.0克N-(3-溴苯基）-4, 6-陛唑啉二胺於7毫升吡啶之溶液加入。在 010下反應1小時。在減壓下去除溶劑及固體藉由在矽 凝膠上層析純化取得0.01克N-[4-[(3-溴苯基）胺基]-6-陛唑啉]-(3-苯基-2-丙炔醢胺）：質譜（m/e) : 443.2， 445 . 2 (M + H ,電嗔霧）。 -37- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閣讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 4M596 Λ7 Α7 _Β7_ 五、發明説明（a ) 實例1 5 ft -胺某-4-氣某111盹酞 快速攪拌由3.25克4 -氣基-6-硝基U奎唑啉、10.8克氫 硫化鈉及〇·3克相轉移觸媒（C8 H17)3 NCH3 + C1-於97 毫升四氫呋喃及32毫升水組成之混合物2小時。混合物 以乙醚稀釋及分離出有機層。有機溶液以食鹽水清洗， 隨後在硫酸上乾燥，使溶液通過矽凝膠小管柱。在3 0 °C 及減壓下去除溶劑取得6-胺基-4-氣基Pf唑啉，其用於 下一步驟而不需額外之純化。 實例1 6 「4 -氣甚-6-膣_瞅某Ί-2-丁炔鹼院 將1.64克2 -丁炔酸於46毫升四氩呋喃之溶液在冰浴中 冷卻。接箸2. 34毫升份異丁基氯甲酸酯將4. 13毫升份N-甲基嗎福啉加入。約10分鐘後，將此倒入6-胺基-4-氱基B奎 唑啉於46毫升四氫呋喃之溶液中。混合物在室溫下攪拌 2小時。將混合物倒入食鹽水與碩酸氫鈉之混合物中及 以乙醚萃取。乙醚溶液在硫酸_上乾燥及過濾。去除溶 劑取得呈有色油狀之[4-氯基-6-1®唑啉基]-2-丁炔醯胺 ，其用於下一步驟而不需額外之純化。 實例1 7 N-「4-「（D阜荣某）昤某1-fi -胯_舦某1-2-丁炔轆胺 惰性大氣下使由1.76克[4-氣基-6-睹唑啉基]-2-丁炔 醯胺及1 . 23克3 -溴基苯胺組成之溶液在23毫升異丙醇中 迴流40分鐘。將混合物冷卻至室溫，將200毫升乙醚加 -3 8- 本紙張尺虎適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） (請先閲請背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（57 ) 入取得0.4克呈鹽酸鹽之N-[4-[(3-溴苯基）胺基]-6-H 唑啉基]-2-丁炔豳胺。K碳酸氫納溶液中和、Μ醋酸乙 酯萃取、去除溶劑及自1-丁醇再結晶取得圼自由態鹼之 Ν-[4-[(3-溴苯基）胺基]-6-Β奎唑啉基]-2-丁炔醯胺。 實例18 胺某-2-氤茱某二田某申眯 使6.0克（27.5毫莫耳）》’-(2-氰基-4-硝苯基）-^-二 甲基甲脒、33.9克（41.8毫升，412.4奄萁耳）環己烯及 0.6克10S； Pd/C於360毫升甲醇之溶液迴流4小時。使熱 混合物過濾通過Celite。去除溶劑及殘渣自氯仿-四氯 化碳再结晶取得4.9克（95¾)呈淡灰色晶形固體之標題化 合物。質譜（n/e): 188.9(M + H,電噴霧）。 實例19 H -「3-懷某一4 -「「（二甲防甚）亞珥甚1腌某1茉某1-2-丁钕 臟胺 當2.42克（2.63毫升，22.3奄莫耳）N-甲基嗎福啉在3 分鑪内加入時，在0 t：下播拌2 . 0 1克（2 3 . 9毫奠耳）2 - 丁 炔酸及2.9毫升（22.3毫萁耳）異丁基氯甲酸酯於30毫升 四氫呋喃之溶液。搅拌15分鐘後，在4分鐘内將Ν’-(4-胺基-2-氰苯基）-Ν,Ν-二甲基甲脒及1.6克（1.75毫升， 15.9毫萁耳）Ν -甲基嗎福啉於25奄升四氫呋喃之溶液加 入。混合物在Ot：下搅拌30分鐘及在室溫下30分鐘。混 合物Κ 70毫升醋酸乙酯稀鞸及倒入食鹽水與胞和碳酸氫 納之混合物中。有機餍經乾燥（HgSO 4 )及通過矽凝膠墊 -39- 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公釐） (請先鬩讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 ,τ— I.

經濟部中央標準局員工消費合作杜印I -40- 492596 A7 B7 五、發‘明説明（匁） 。去除溶劑及殘渣與50毫升乙醚一起攬拌。收集懸浮之 固體取得3.61克（89¾)非純白色之固體。質譜（m/e): 255 . 0 (M + H ,電噴耢）。 實例2 0 H-「4-「Q海笼某）脓某_酞甚Ί-2-丁炔藤防 在氮氣下使3.0克（11.8毫莫耳）^[3-氰基-4-[[(二甲 胺基）-亞甲基]胺基]苯基]-2-丁炔醯胺及2.23克（12.98 毫莫耳）3 -溴基苯胺於18毫升醋酸之溶液溫和迴流1小 時15分鐘，伴K攪拌。混合物在冰浴中冷卻，而形成固 體質董。固體藉由過濾收集及Μ乙醚-乙腈1;1清洗取得 黃色画體，其自乙醇再结晶取得2.51克Ν-[4-[(3-溴苯 基）胺基]-6-11奎唑啉基]-2-丁炔醯胺：質譜（m/e): 381, 383 ° 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210 X 297公釐） (請先閔讀背面之注意事項再填寫本頁)

Claims (1)

1. —―雜 tS.9#:,.Γ ί_ Α8 Β8 C8 D8 公 六、申請專利範圍 第86101229號「用於腫瘤之治療、抑制生長或根除的 4-苯胺基-喹唑啉衍生物，其製法及其醫藥組成物」專 利案 （88年9月修正） 杰申請專利範圍： 1 . 一種下式化合物 .X R ΗΝ.

   其中： X為苯基，由一或二値選自鹵素、1-6 基、羥基、三氟甲基的取代基取代； R及Ri為氫； R 2為氮； Y為選自下列之基：環戊烯基， 個碩原子之院 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 r3—= RH r3 r3 及

   R3. R3 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

   本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 OX297公釐） —―雜 tS.9#:,.Γ ί_ Α8 Β8 C8 D8 公 六、申請專利範圍 第86101229號「用於腫瘤之治療、抑制生長或根除的 4-苯胺基-喹唑啉衍生物，其製法及其醫藥組成物」專 利案 （88年9月修正） 杰申請專利範圍： 1 . 一種下式化合物 .X R ΗΝ.

   其中： X為苯基，由一或二値選自鹵素、1-6 基、羥基、三氟甲基的取代基取代； R及Ri為氫； R 2為氮； Y為選自下列之基：環戊烯基， 個碩原子之院 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 r3—= RH r3 r3 及

   R3. R3 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

   本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 OX297公釐） 402596 b8 D8 六、申請專利範圍 R3各為氫、1-6個碩原子之烷基、羧基、1-6艏碳 原子之烷酯基或苯基； (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 或其醫藥容許鹽，前題為Y之各R3可相同或相異。 2. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中X為未經取代 或以鹵素或1-6個碩原子之烷基取代。 3. 如申請專利範圍第1項之化合物，其為N-[4-[(3-溴 苯基）胺基]-6-喹唑呦基]-2-丁炔醯胺或其醫藥容許 鹽。 4. 如申請專利範圍第1項之化合物，其為N-[4-[(3-溴 苯基）胺基]-6-喹唑啉基]-2-甲基-2-丙烯醯胺或其翳 藥容許鹽。 5. 如申請專利範圍第1項之化合物，其為H-[4-[(3-溴 苯基）胺基]-6-唼唑啉基]-2,4-己二烯醯胺或其醫藥 容許鹽。 6. 如申請專利範圍第1項之化合物，其為N-[4-[(3-溴 苯基）胺基]-6-唼唑呦基]-(E)-2-丁烯醯胺或其醫藥 容許鹽。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 7. 如申請專利範圍第1項之化合物，其為N-[4-[(3-溴 苯基）胺基]-6-唼唑啉基]-3-甲基-2-丁烯醯胺或其醫 藥容許鹽。 8. 如申請專利範圍第1項之化合物，其為4-[ [4-(3-溴 苯基）胺基]-6-_唑_基]胺基]-4-氧基- (Z)-2-丁烯酸 -2- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > A4規格（210X297公釐） €03596 Μ C8 D8 六、申請專利範圍 或其醫藥容許鹽。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 9.如申請專利範圍第1項之化合物，其為4-[[4-[(3_ 溴苯基）胺基]-6-喹唑啉基]胺基]-4-氧基- (E)-2-丁烯 酸或其醫藥容許鹽。 10. 如申請專利範圍第1項之化合物，其為4-[[4-[(3-溴苯基）胺基]-6-_唑呦基]胺基]-4 -氣基- (E)-2 -丁烯 酸乙酯或其醫藥容許鹽。 11. 如申請專利範圍第1項之化合物，其為N-[4-[(3-溴苯基）胺基]-6-唼唑啉基]-2-環戊烯醯胺或其翳藥 容許鹽。 12. 如申請專利範圍第1項之化合物，其為N-[4-[(3-溴苯基）胺基]-6-_唑_基]-2-丙烯醯胺或其醫藥容 許鹽。 13. 如申請專利範圍第1項之化合物，其為h-[4-[(3-溴苯基）胺基]-6-_唑呦基]-(3-苯基-2-丙炔醯胺或 其醫藥容許鹽。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 14. 一種用於腫瘤之治療、抑制生長或根除的翳藥組成物 ，其包含申請專利範圍第1項之化合物及醫藥容許載 劑。 15. —種製造下式化合物之方法： -3 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） «02596 έ88 C8 D8 六、申請專利範圍 YV

   R 項 1A 第 圍 範 利 專 請 ， 如基 X 稀 及戊 2 璟 R 及 基 ^之 、列 R 下 中 自 其選 為 R3'

   6 含 1-不 、或 基劑 羧 溶 、在 基存 烷於 之含 子包 原其 硪 ; 個基 6 苯 1-或 、基 氫酯 為烷 各之 P! 子 R'原 中磺 其個 甲 苯 基 氨 式 下 理 處. 0 縮 基 甲二 胺 醯 甲 基 甲二 以 下 劑 溶睛 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

   N C -2 N R1 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS〉A4規格（210Χ；Ζ97公釐) 402596 A8 B8 C8 D8 申請專利範圍 取得下式化合物 R

   N，N(CH3)2 Ri < 在酸性有機溶劑中加熱該化合物與下式苯胺： X-NH2 取得下式6-硝基唑呦 -X R HN o2n

   ,—, 0II (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、言. 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 R1 ，. 以還原劑處理該化合物取得下式6-胺基-峰唑啉 y

   ,及 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 402596 bs C8 D8 六、申請專利範圍 使該化合物與下式醯基氯或混合酸酐反應： Y'—^ Y.—^ 01 及 ocor4 其中R*為1-6個磺原子之烷基。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -6- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐）