TW202417001A

TW202417001A - 雙環四氫吖呯衍生物

Info

Publication number: TW202417001A
Application number: TW112130057A
Authority: TW
Inventors: 馬可布蘭史戴特; 賀爾格庫奈; 湯瑪士盧柏; 拉提莎珍妮馬汀
Original assignee: 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司
Priority date: 2022-08-11
Filing date: 2023-08-10
Publication date: 2024-05-01

Abstract

本發明提供具有通式 (I) 之新穎雙環四氫吖呯衍生物，其中 R ¹、R ²及 R ⁴係如本文所定義；包含化合物的組成物、製造該等化合物之方法及使用該等化合物之方法。

Description

雙環四氫吖呯衍生物

本發明涉及抑制二醯基甘油激酶 (DGK) α 及 ζ 並可用作 T 細胞活化劑的雙環四氫吖呯、其製造及包含該等化合物的醫藥組成物。

本發明之化合物可用作治療人類疾病的免疫治療劑。更具體而言，本發明之化合物可單獨使用或與其他免疫治療劑組合使用以便增強抗癌免疫性。

癌症免疫是一個多步驟過程，由一系列負免疫檢查點和正共刺激受體及相關細胞內傳訊級聯調節，當有效觸發時可實現抗腫瘤反應 (Mellman, I. 等人 (2011) Cancer Immunotherapy Comes of Age, Nature 480(7378), 480-489)。事實上，PD1/PDL1 靶向及其他免疫檢查點抑制劑已徹底改變了癌症免疫療法，但仍有超過 70% 的患者無法從免疫檢查點抑制中受益。類似地，對於 T 細胞雙特異性抗體，即使在最有希望的適應症 (非何杰金氏淋巴瘤) 中，這些 T 細胞結合物 (TCB) 在少於 50% 的患者中實現了完全緩解。T 細胞耗竭似乎在對許多癌症免疫療法的原發性或繼發性抗性實例中發揮著重要作用。缺乏功效的一個可能的原因是 T 細胞活化經由 CD3 (訊號 1) 的靶向及交聯發生，但缺失例如經由 CD28 或 4-1BB (訊號 2) 的協同刺激。該假設在 CAR T 細胞療法中得到臨床驗證，結果表明，僅在添加共刺激域後才觀察到臨床相關之療效。

二醯基甘油激酶 (DGK) 是一種脂質激酶，其催化二醯基甘油 (DAG) 轉化為磷脂酸 (PA)，從而限制經 DAG 調節並促進 PA 依賴性功能 (Merida, I., Avila-Flores, A., 及 Merino, E. 2008: Diacylglycerol kinases: at the hub of cell signalling.Biochem. J. 409 (1), 1–18)。DGK 家族由十種同功型組成，該等同功型基於其結構中不同調節域的存在，可分為五種亞型。除此之外，目前結構資料的缺乏仍然阻礙了對 DGK 作用模式的更透徹的理解。此外，有關某些原核 DGK 及其他脂質激酶 (如神經鞘胺醇激酶及磷脂醯肌醇-3-激酶 (PI3K)) 的資訊僅提供了對似乎不同於典型激酶的 DGK 催化機制的有限見解 (Arranz-Nicolás, J. 及 Mérida, I., 2020. Biological regulation of diacylglycerol kinases in normal and neoplastic tissues: New opportunities for cancer immunotherapy,Advances in Biological Regulation, Volume 75; Ma, Q., Gabelli, S.B., Raben, D.M., 2019: Diacylglycerol kinases: relationship to other lipid kinases.Adv Biol Regul 71, 104–110)。

儘管 DGK 家族內的幾種同功型已被描述為在癌症中發揮作用，但就這一點而言，α 及 ζ 同功型係研究最深入的同功型。作為 PA 產生者，兩種酶皆參與促進腫瘤生長及轉移的各種過程。另一方面，作為 DAG 消耗者，DGKα 及 DGKζ 作為 T 細胞反應的負調節劑已得到廣泛表徵 (Riese, M.J., Moon, E.K., Johnson, B.D., Albelda, S.M., 2016. Diacylglycerol kinases (DGKs): novel targets for improving T cell activity in cancer.Front Cell Dev Biol 4,108; Noessner, E., 2017. DGK-alpha: a checkpoint in cancer-mediated immuno-inhibition and target for immunotherapy.Front Cell Dev Biol 5, 16; Sakane, F., Mizuno, S., Komenoi, S., 2016. Diacylglycerol kinases as emerging potential drug targets for a variety of diseases: an update.Front Cell Dev Biol 4, 82; Arranz-Nicolás, J. 及 Mérida, I., 2020. Biological regulation of diacylglycerol kinases in normal and neoplastic tissues: New opportunities for cancer immunotherapy,Advances in Biological Regulation, Volume 75)。

這兩種同功酶 DGKα 及 DGKζ 在 CD28 和其他共刺激受體以及 T 細胞受體 (TCR) 的下游具有活性，並且它們的功能是限制 DAG 的產生量，並最終限制 T 細胞活化 (Merida, I., Andrada, E., Gharbi, S.I., Avila-Flores, A., 2015. Redundant and specialized roles for diacylglycerol kinases alpha and zeta in the control of T cell functions.Sci. Signal.8 (374); Shulga, Y.V., Topham, M.K., Epand, R.M., 2011. Regulation and functions of diacylglycerol kinases.Chem. Rev. 111 (10), 6186–6208)。代表性 DGK 調節之傳訊途徑總結如圖 1 所示 (Sim, J.A.; Kim, J.; Yang, D. Beyond Lipid Signaling: Pleiotropic Effects of Diacylglycerol Kinases in Cellular Signaling.Int. J. Mol. Sci. 2020, 21, 6861)：活化的 PLC1 裂解質膜中之 PIP2 以生成兩種二級傳訊者 DAG 及 IP3。DAG 活化 PKC、Ras/MEK/ERK/AP-1 及 NF-kB，而 IP3 參與活化細胞內 Ca2+ 通量。經上調之 Ca2+ 傳訊繼而活化轉錄因子 NFAT。簡言之，DAG 產生及含量決定了 Ras/MEK/ERK 和 PKC 依賴性傳訊途徑的持續時間和強度，並且它們是 T 細胞活化的核心。因此，DGK 用作細胞內檢查點，並且預計抑制 DGK 可增強 T 細胞傳訊途徑及 T 細胞活化。

實驗證據表明，增強的 DGK 功能及/或在腫瘤浸潤性 T 細胞 (TIL) 中之表現限制了腫瘤破壞。針對移植到裸鼠體內的人間皮瘤的 CAR T 細胞實驗表明，腫瘤浸潤性 CAR T 細胞表現濃度升高的表面抑制受體以及抑制酶 SHIP-1、DGKα 和 DGKζ (Moon 等人，2014)。此外，在從人腎腫瘤中分離的 TIL 中也觀察到高水平 DGKα 表現 (Prinz 等人，2012)。在小鼠 mesoCAR T 細胞中，DGKα 與 DGKζ 的雙重缺失導致細胞激素表現及對腫瘤細胞的細胞毒性增強 (Riese 等人，2013)。針對人 CAR T 細胞已報導了類似的結果，其中使用 CRISPR/Cas9 壓制 DGKα 及 DGKζ 表現兩者 (Jung 等人, 2018)。所有這些研究皆為在抗癌療法開發中靶向 DGKα/ζ 提供了依據 (Arranz-Nicolás, J. 及 Mérida, I., 2020. Biological regulation of diacylglycerol kinases in normal and neoplastic tissues: New opportunities for cancer immunotherapy,Advances in Biological Regulation, Volume 75; Riese, M.J., Moon, E.K., Johnson, B.D., Albelda, S.M., 2016. Diacylglycerol kinases (DGKs): novel targets for improving T cell activity in cancer.Front Cell Dev Biol 4, 108)。剔除小鼠模型提供了進一步證據：缺乏 DGKα 或 DGKζ 的小鼠表現出高反應性 T 細胞表型及改善的抗腫瘤免疫活性 (Riese, M.J., Grewal, J., Das, J., Zou, T., Patil, V., Chakraborty, A.K., Koretzky, G.A., 2011. Decreased diacylglycerol metabolism enhances ERK activation and augments CD8+ T cell functional responses.J. Biol. Chem. 286 (7), 5254–5265; Zha, Y., Marks, R., Ho, A.W., Peterson, A.C., Janardhan, S., Brown, I., Praveen, K., Stang, S., Stone, J.C., Gajewski, T.F., 2006. T cell anergy is reversed by active Ras and is regulated by diacylglycerol kinase-alpha.Nat. Immunol. 7 (11), 1166–1173; Olenchock, B.A., Guo, R., Carpenter, J.H., Jordan, M., Topham, M.K., Koretzky, G.A., Zhong, X.P., 2006a .Disruption of diacylglycerol metabolism impairs the induction of T cell anergy.Nat. Immunol. 7 (11), 1174–1181)。

總之，有大量證據表明 DGKα 和 DGKζ 係癌症免疫療法的高價值標靶。與此同時，缺乏能夠有效抑制 DGKα 及 DGKζ 並對這兩者具有優於其他二醯基甘油激酶、蛋白激酶及/或其他脂質激酶的良好選擇性的化合物。

本發明描述了該等雙重 DGK α/ζ 抑制劑，其在安全性/脫靶組和相對於其他脂質激酶方面具有優於其他蛋白激酶的優異選擇性。這些化合物有效地活化次優刺激的 T 細胞，從而充當共刺激傳訊級聯的細胞內增強劑。該等 DGK α/ζ 抑制劑有可能增加靶向 T 細胞之增殖、細胞毒性及壽命，其可以導致改善的 CPI、接合 T 細胞雙特異性位點的 CD3 以及 CAR T 細胞的抗癌活性。此外，藉由接合 TCR 與共刺激受體的中心傳訊節點，這些分子可能增強訊號 1 和 2，並因此可以例如在炎性腫瘤中實現單藥活性。

持續需要能夠活化並增殖 T 細胞，從而能夠治療、預防癌症及/或延遲其進展的化合物。

因此，本發明的一個目的是提供可用作 DGKα/ζ 抑制劑的化合物，以改善的治療特性、特別是改善的藥物動力學特性用於治療或預防或改善該等疾病。

本發明的第一目的係式 (I) 化合物 (I) 或其醫藥上可接受之鹽，其中： R ¹為 5 員或 6 員雜芳基，其中 R ¹視情況經一個或多個可為相同或不同之 R ¹⁰取代； R ²係選自氫及鹵素； R ⁴係選自苯基及吡啶基，其中 R ⁴視情況經一個或多個可為相同或不同之 R ¹¹取代； R ¹⁰係選自： i) C _1-6-烷基，其視情況經一個或多個鹵素、胺基、C _1-6-烷氧基、-S(O) ₂(C _1-6-烷基)、氰基取代； ii) C _3-10-環烷基，其視情況經一個或多個鹵素、氰基、胺基取代； iii) 3 員至 10 員雜環基，其視情況經一個或多個鹵素、C _1-10-烷基、胺基、鹵基-C _1-6-烷基、羥基、氰基、-C(O)O-(R ^10q)、C _3-10-環烷基取代，其中 C _1-10-烷基視情況經一個或多個羥基、C _1-6-烷氧基取代； iv) -N(R ^10eR ^10f)； v) 雜芳基，其視情況經一個或多個 C _1-10-烷基、鹵素取代； R ^10e及 R ^10f各自獨立地選自： i) 氫； ii) C _1-6-烷基，其視情況經一個或多個氰基、鹵素、羥基取代； iii) C _3-10-環烷基，其視情況經一個或多個鹵素、C _1-10-烷基取代； R ^10q為 C _1-5-烷基，其中 C _1-5-烷基視情況經一個或多個羥基取代； R ¹¹係選自： i) 鹵素； ii) C _1-6-烷氧基，其視情況經一個或多個 C _1-6-烷基、C _5-6-芳基、C _3-10-環烷基、鹵基-C _1-6-烷基、C _3-10-雜環基取代，其中 3 員至 10 員雜環基視情況經 C _1-6-烷基取代； iii) 5 員至 6 員雜芳基，其視情況經一個或多個鹵素、鹵基-C _1-6-烷基、C _1-6-烷氧基、C _3-10-環烷基、C _1-6-烷基、鹵基-C _1-6-烷氧基取代； iv) 苯基，其視情況經一個或多個 C _1-6-烷氧基、鹵基-C _1-6-烷基取代； v) -O(R ^11a)； R ^11a係選自 C _1-6-烷基、C _3-6-環烷基、苯基及鹵基-C _1-6-烷基。

本發明的第二目的係一種製備本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽之方法，其包含使式 (XVIII) 化合物與適當的去保護劑進行反應以形成該式 (I) 化合物， (XVIII) 其中 R ¹、R ²及 R ⁴係如本文所定義且 PG 為胺基保護基。

本發明的第三目的係一種醫藥組成物，其包含如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，以及醫藥上可接受之賦形劑。

本發明的第四目的係本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其用於治療、預防癌症及/或延遲其進展。

除非另有定義，否則本文所使用之所有技術及科學術語具有與一般熟習本發明所屬技術者通常所理解相同的含義。儘管與本文所述之彼等相似或等同的方法及材料皆可用於本發明之實施或測試，但適當之方法及材料描述如下。

本文所提及之所有公開案、專利申請案、專利及其他參考文獻均以全文引用的方式併入。

除非另有說明，否則本申請中使用的命名法基於 IUPAC 系統命名法。

定義

「烷氧基」係指經由氧原子接附至母分子部分之如先前所定義之烷基。除非另外說明，否則烷氧基含有 1 至 12 個碳原子 (「C _1-12-烷氧基」)，較佳的是含有 1 至 10 個碳原子 (「C _1-10-烷氧基」)，更佳的是含有 1 至 6 個碳原子 (「C _1-6-烷氧基」)。在一些較佳實施例中，烷氧基含有 1 至 4 個碳原子。又在其他實施例中，烷氧基含有 1 至 3 個碳原子。烷氧基之一些非限性實例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基及三級丁氧基。

「烷氧基烷基」係指烷基，其中該烷基的至少一個氫原子已被烷氧基取代。較佳的是，「烷氧基烷基」係指烷基，其中該烷基的 1、2 或 3 個氫原子，更佳的是一個氫原子已被烷氧基取代。烷氧基烷基之特佳但非限制性實例為甲氧基甲基及 2-甲氧基乙基。

「烷基」係指具有指定的碳原子數 ( 亦即，C ₁- ₁₀意指一至十個碳原子) 的飽和直鏈 (亦即，非支化) 或支化單價烴鏈或其組合。特定的烷基為具有 1 至 20 個碳原子 (「C ₁- ₂₀烷基」)、具有 1 至 12 個碳原子 (「C ₁- ₁₂烷基」)、具有 1 至 10 碳原子 (「C ₁- ₁₀烷基」)、具有 1 至 8 個碳原子 (「C ₁- ₈烷基」)、具有 1 至 6 個碳原子 (「C ₁- ₆烷基」)、具有 2 至 6 個碳原子 (「C ₂- ₆烷基」) 或具有 1 至 4 個碳原子 (「C _1-4烷基」) 的那些。烷基的實例包括但不限於：基團，諸如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、三級-丁基、異丁基、二級丁基；以及例如正戊基、正己基、正庚基、正辛基等的同系物及異構物。

「炔基」係指具有至少一個炔屬不飽和位點 (亦即，具有至少一個式 C≡C 的部分) 並具有指定的碳原子數 ( 亦即，C _2-10意指具有二至十個碳原子) 的不飽和直鏈 ( 亦即，非支化) 或支化單價烴鏈或其組合。特定的炔基為具有 2 至 20 個碳原子 (「C _2-20炔基」)、具有 2 至 8 個碳原子的 (「C _2-8炔基」)、具有 2 至 6 個碳原子 (「C _2-6炔基」)、具有 2 至 4 個碳原子 (「C _2-4炔基」) 的那些。炔基的實例包括但不限於基團諸如乙炔基 (ethynyl 或 acetylenyl)、丙-1-炔基、丙-2-炔基 (或炔丙基)、丁-1-炔基、丁-2-炔基、丁-3-炔基、其同系物和異構物等。

「胺基」，單獨或與其他基團組合，係指 NH ₂。

「胺基烷基」係指烷基，其中該烷基的氫原子中之一者或多者已被胺基部分取代。

「芳香」表示如文獻、特別是以下文獻中所定義的芳香性的習用概念：IUPAC - Compendium of Chemical Terminology，第 2 版，A. D. McNaught 及 A. Wilkinson (編)，Blackwell Scientific Publications, Oxford (1997)。

「芳基」係指具有 5 至 14 個碳環原子的單環、雙環或三環芳環的環狀芳烴部分 (「C _5-14-芳基」)。雙環芳環系統包括具有兩個稠合五員芳基環 (表示為 5-5)、具有五員芳基環及稠合六員芳基環 (表示為 5-6 和 6-5) 及具有兩個稠合六員芳基環 (表示為 6-6) 的稠合雙環。芳基可視情況經取代，如本文所定義。芳基部分的實例包括但不限於苯基、萘基、菲基、茀基、茚基、并環戊二烯基、薁基等。術語「芳基」亦包括環芳烴部分之部分氫化衍生物，前提條件是，環芳烴部分之至少一個環為芳環，每個環視情況經取代。

「癌症」係指一種疾病，其特徵為由細胞 (此等細胞為「癌細胞」) 之異常不受控制生長產生的贅瘤或腫瘤之存在。如本文所用，術語「癌症」明確包括但不限於肝細胞癌、惡性腫瘤和大腸過度增生性疾病 (大腸癌)、肺癌、乳癌、前列腺癌、黑色素瘤及卵巢癌。

「氰基」，單獨或與其他基團組合，係指 CN (亦即腈)。

「氰基烷基」係指烷基，其中該烷基的氫原子中之一者或多者已被氰基部分取代。

「環烷基」係指飽和或部分不飽和的碳環部分，其在環中具有單環、雙環 (包括橋聯雙環及環烷基螺部分) 或三環及 3 至 10 個碳原子 (亦即，(C ₃-C ₁₀)環烷基)。環烷基部分可視情況經一個或多個取代基取代。在特定態樣中，環烷基含有 3 至 8 個碳原子 (亦即，(C ₃-C ₈)環烷基)。在其他特定態樣中，環烷基含有 3 至 6 個碳原子 (亦即，(C ₃-C ₆)環烷基)。環烷基部分的實例包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基及其部分不飽和之 (環烯基) 衍生物 (例如環戊烯基、環己烯基及環庚烯基)、雙環[3.1.0]己基、雙環[3.1.0]己烯基、雙環[3.1.1]庚基、雙環[3.1.1]庚烯基及雙環[1.1.1]戊烷。環烷基部分可以「螺-環烷基」或「環烷基螺」方式接附，諸如「螺環丙基」。

「EC _x」係指在活體外或活體內獲得特定效果之最大值的 x% 所需的特定化合物的有效濃度，例如在培養基或血漿中的有效濃度。「EC _x」的實例為 EC ₂₀、EC ₅₀及 EC ₁₀₀，其分別表示在活體外或活體內獲得特定效果之最大值的 20%、50% 及 100% 所需的培養基或血漿中特定化合物的濃度。「鹵素」係指氟、氯、溴及/或碘。當殘基經多於一個鹵素取代時，可使用對應於所接附的鹵素部分的數量的前綴來表示，例如二鹵芳基、二鹵烷基、三鹵芳基係指經兩個 (「二」) 或三個 (「三」) 鹵基取代的芳基及烷基，其中該等鹵基可為但不必為相同的鹵基；因此，4-氯-3-氟苯基在二鹵芳基的範圍內。其中一個或多個氫經鹵基取代的烷基被稱為「鹵烷基」，例如「C _1-6鹵烷基」。一個較佳的鹵烷基為三氟烷基 (-CF ₃)。

「鹵烷氧基」係指其中至少一個鹵素取代構成烷氧基的烷基部分的烴中的每個 H 的烷氧基。鹵烷氧基的實例為二氟甲氧基 (-OCHF ₂)、三氟甲氧基 (-OCF ₃)。

「鹵芳基」係指其中至少一個氫已被鹵素取代的芳基。

「雜芳基」係指 5 至 14 個環原子、較佳的是 5 至 10 個環原子、更佳的是 5 至 6 個環原子的芳香雜環單環、雙環或三環系統，包含 1、2、3 或 4 個選自 N、O 及 S 的雜原子，其餘環原子為碳。在一些態樣中，單環雜芳基環可為 5 員至 6 員環。雙環雜芳環系統包括具有兩個稠合五員雜芳基環 (表示為 5-5)、具有五員雜芳基環及稠合六員雜芳基環 (表示為 5-6 和 6-5) 及具有兩個稠合六員雜芳基環 (表示為 6-6) 的稠合雙環。雜芳基可視情況經取代，如本文所定義。雜芳基部分的實例包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、㗁唑基、噻唑基、三唑基、㗁二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、吡𠯤基、吡唑基、嗒𠯤基、嘧啶基、三𠯤基、異㗁唑基、苯并呋喃基、異噻唑基、苯并噻吩基、苯并硫苯基、吲哚基、氮雜-吲哚基、異吲哚基、異苯并呋喃基、苯并咪唑基、苯并㗁唑基、苯并異㗁唑基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、苯并㗁二唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、嘌呤基、喹啉基、異喹啉基、喹唑啉基、喹㗁啉基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基、噻吩并吡啶基、吡咯并嗒𠯤基、吡咯并嘧啶基、吡咯并吡𠯤基、噻吩并嗒𠯤基、噻吩并嘧啶基、噻吩并吡𠯤基、呋喃并嗒𠯤基、呋喃并嘧啶基及呋喃并吡𠯤基。更佳的是，「5 員雜芳基」係指以下基團：。

「雜環」或「雜環基」係指 3、4、5、6、7、8、9、10 員單環、7、8、9 及 10 員雙環 (包括橋聯雙環及環烷基螺部分) 或 10、11、12、13、14 及 15 員雙環雜環部分，其為飽和或部分不飽和的，並且在環中具有一個或多個 (例如，1、2、3 或 4 個) 選自氧、氮及硫的雜原子，其餘環原子為碳。在一些態樣中，雜環為雜環烷基。在特定態樣中，雜環或雜環基係指 4、5、6 或 7 員雜環。當用於指雜環之環原子時，氮或硫亦可為氧化形式，且氮可以經一個或多個 (C ₁-C ₆)烷基或基團取代。雜環可在產生穩定結構的任何雜原子或碳原子處接附至其側基。雜環環原子中之任一者可視情況經一個或多個如本文所述之取代基取代。該等飽和或部分不飽和雜環的實例包括但不限於四氫呋喃基、四氫噻吩基、吡咯啶基、吡咯烷酮基、哌啶基、吡咯啉基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、十氫喹啉基、㗁唑啶基、哌𠯤基、二㗁烷基、二氧戊環基、二吖呯基、氧雜吖呯基、噻吖呯基、嗎啉基、吡咯啶 1-氧化物、N-羥基哌啶、1-甲基吡咯啶 N-氧化物、二氮吮基及奎寧環基 (quinuclidinyl)。術語「雜環」亦包括其中雜環與一個或多個芳基、雜芳基或環烷基環稠合的基團，諸如吲哚啉基、3H-吲哚基、𠳭基、氮雜雙環[2.2.1]庚基、氮雜雙環[3.1.0]己基、氮雜雙環[3.1.1]庚基、八氫吲哚基或四氫喹啉基。

「羥基」，單獨或與其他基團組合，係指 OH。

「羥基烷基」係指烷基，其中該烷基的氫原子中之一者或多者已被羥基部分取代。實例包括醇及二醇。

「部分」及「取代基」係指藉由一個或多個化學鍵連接至另一原子或分子從而形成分子的一部分的原子或化學鍵結原子組。

當指示取代基之數目時，術語「一個或多個」指代從一個取代基到最高可能的取代數目之範圍，亦即藉由取代基替換一個氫直到替換全部氫，特別是其中「一個或多個」指代一個、兩個或三個，最特別是「一個或多個」指代一個或兩個。

「視情況存在/發生的 (optional)」或「視情況 (optionally)」意為隨後描述之事件或情況可能發生但不必發生，且該描述包括事件或情況發生之情形以及事件或情況不發生之情形。例如，「視情況經烷基取代之芳基」意為烷基可以存在但不必存在，並且該描述包括芳基經烷基取代之情形以及芳基未經烷基取代之情形。

「視情況經取代」係指未經取代或經取代的。通常，這些取代基可以相同或不同。

「側氧」，單獨或與其他基團組合，係指 =O。

「醫藥上可接受之鹽」指代彼等保有生物效應及自由鹼或自由酸特性，且並非在生物學上或在其他方面有不利之處的鹽。該鹽是以無機酸形成，例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、特別是鹽酸，以及以有機酸形成，例如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、馬來酸、丙二酸、琥珀酸、延胡索酸、酒石酸、檸檬酸、苄甲酸、肉桂酸、苦杏仁酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸、N-乙醯半胱胺酸等。

特別優選地，式 (I) 化合物之醫藥上可接受之鹽是鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸和甲磺酸的鹽。

術語「保護基」(PG) 在合成化學中慣常與其相關之含義中表示選擇性阻斷多官能化合物中之反應位點以使得化學反應可在另一未保護反應位點處選擇性進行的基團。保護基可在適當時間移除。例示性保護基為胺基保護基、羧基保護基或羥基保護基。特定保護基為三級丁氧基羰基 (Boc)、苄氧羰基 (Cbz)、茀基甲氧基羰基 (Fmoc) 及苄基 (Bn)。進一步之特定保護基為三級丁氧基羰基 (Boc) 及茀基甲氧基羰基 (Fmoc)。更特定的保護基是三級丁氧羰基 (Boc)。例示性保護基及其在有機合成中之應用描述於例如“Protective Groups in Organic Chemistry”中，由 T. W. Greene 及 P. G. M. Wutts 著, 第 5 版, 2014, John Wiley & Sons, N.Y.。

如本文中所使用，「預防 (法) (prophylaxis)」包括：預防或延緩哺乳動物 (尤其是人) 發展之病狀、病症或病況的臨床症狀之出現，該哺乳動物 (尤其是人) 可能罹患或易患病狀、病症或病況但又尚未經歷或呈現病狀、病症或病況之臨床或亞臨床症狀。

「經取代」係指化合物或部分中的至少一個氫原子被另一取代基或部分取代。此類取代基的實例包括但不限於鹵素、-OH、-CN、側氧、烷氧基、烷基、伸烷基、芳基、雜芳基、鹵烷基、鹵烷氧基、環烷基和雜環。例如，術語「鹵烷基」係指烷基 (如下文所定義) 的一個或多個氫原子經一個或多個鹵素原子取代的事實 (例如，三氟甲基、二氟甲基、氟甲基、氯甲基等)。在一個態樣中，本文所使用之經取代的可係指以鹵素或烷基取代本文所述之化合物或部分的至少一個氫原子。

「治療有效量」表示當將本發明之化合物或分子投予個體時實現以下作用的量：(i) 治療或防止本文中所描述之特定疾病、病況或病症，(ii) 減輕、改善或消除本文中所描述之特定疾病、病況或病症的一或多種症狀，或 (iii) 防止或延遲本文中所描述之特定疾病、病況或病症的一或多種症狀發作。治療有效量取決於化合物、所治療的疾病狀態、所治療疾病的嚴重程度、個體的年齡和相對健康狀況、投予途徑和形式、主治醫師或獸醫師的判斷以及其他因素而有不同。

「治療惰性載劑」係指不具有治療活性且無毒的任何成分，諸如用於配製藥物產品的崩解劑、粘合劑、填充劑、溶劑、緩沖劑、張度劑、穩定劑、抗氧化劑、表面活性劑或潤滑劑。

特別地，上面給出其定義的化學基團係在實例中具體示例的彼等。

本文中使用以下縮寫： BOP = 苯并三唑-1-基氧三(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽，鹽水 = 飽和 NaCl 水溶液，CAS = 化學文摘註冊號，CDI = 1,1'-羰基二咪唑，DAD = 二極體-陣列偵測，DBU = 1,8-二氮雜雙環[5,4,0]十一碳-7-烯，DCM = 二氯甲烷，DDQ = 2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌，DMF = N,N-二甲基甲醯胺，DIPEA = N,N-二異丙基乙胺，EDC = 1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺，ESI = 電灑離子化，EtOAc = 乙酸乙酯，EtOH = 乙醇，h = 小時，HATU = 1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓-3-氧化物六氟磷酸鹽，HBTU = O-苯并三唑-N,N,N',N'-四甲基-脲鎓-六氟-磷酸鹽，HFIP = 六氟異丙醇，HOBt = 羥基苯并三唑，HPLC = 高效液相層析，IPA = 異丙醇，m-CPBA = 間氯過氧苯甲酸，MeCN = 乙腈，MeI = 碘甲烷，MeOH = 甲醇，min = 分鐘，MS = 質譜，NBS = N-溴代琥珀醯亞胺，PDA = 光二極體-陣列偵測，PE = 石油醚，PyBroP = 溴-三-吡咯啶基-鏻六氟磷酸鹽、RT = 室溫，TBAF = 四丁基氟化銨，TBAOH = 四丁基氫氧化銨，TBDMS = 三級丁基二甲基矽烷基，TEA = 三乙胺，TFA = 三氟乙酸，THF = 四氫呋喃，TMSOTF = 三氟甲磺酸三甲基矽烷基酯，TLC = 薄層層析法，T3P = 2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三膦烷 2,4,6-三氧化物。

在本文的說明中，如果在所描繪之結構與賦予該結構之名稱之間存在差異，則以所描繪之結構為准。此外，如果結構或結構之一部分的立體化學未以例如粗楔形或虛線指示，則該結構或該結構的一部分將被解釋為包含其所有立體異構物。但是，在一些情況下，如果存在一個以上的手性中心，則結構及名稱可以表示為單個對映異構物，以幫助描述相關立體化學。

除非另有說明，否則術語「該式之化合物」或「式之化合物」或「式之多種化合物」或「該式之多種化合物」係指選自如該式所定義之化合物屬的任何化合物 (除非另有說明，否則包括任何該等化合物的任何醫藥上可接受之鹽)。

某些化合物可能表現出互變異構現象。互變異構化合物可以作為兩種或多種可相互轉化的物質存在。質子轉移互變異構物由兩個原子之間共價鍵合之氫原子的遷移產生。互變異構物通常以平衡狀態存在，嘗試分離個體互變異構物經常產生一種混合物，其化學及物理特性與化合物混合物一致。平衡的位置取決於分子內之化學特徵。例如，在許多脂肪族醛類及酮類例如乙醛中，酮形式占主導地位；而在酚類中，烯醇形式占主導地位。常見之質子轉移互變異構物包括酮/烯醇 (-C(=O)-CH- ↔ -C(-OH)=CH-)、醯胺/亞胺酸 (-C(=O)-NH- ↔ -C(-OH) =N-) 及脒 (-C(=NR)-NH- ↔ -C(-NHR)=N-) 互變異構物。後兩者在雜芳基及雜環之環中特別常見，並且本發明包括該等化合物之全部互變異構形式。

此外，本發明包括式 (I) 化合物的所有光學異構物，亦即非鏡像異構物、非鏡像異構混合物、外消旋混合物、所有其對應的鏡像異構物及/或互變異構物及其等溶劑化物。

式 (I) 化合物可含有一個或多個不對稱中心，因此可存在外消旋物、外消旋混合物、單一鏡像異構物、非鏡像異構混合物及個別的非鏡像異構物。取決於分子上各種取代基的性質，可存在另外的不對稱中心。每個此類不對稱中心將獨立地產生兩個光學異構物，且旨在混合物中及作為純的或部分純化之化合物的所有可能的光學異構物及非鏡像異構物皆包括於本發明中。本發明意在涵蓋這些化合物的所有此類異構形式。這些非鏡像異構物的獨立合成或其層析分離可如本領域已知的藉由適當修飾本文所揭示之方法來實現。它們的絕對立體化學可藉由結晶產物或結晶中間體的 X 射線晶體學測定，如果需要，用含有已知絕對構型的不對稱中心的試劑將其衍生化。如果需要，可分離化合物的外消旋混合物，從而分離出個別的鏡像異構物。可藉由本領域已知的方法進行分離，例如將化合物的外消旋混合物與鏡像異構性純的化合物偶合以形成非鏡像異構混合物，然後藉由標準方法，例如分化結晶作用或層析法分離個別的非鏡像異構物。

在提供光學上純的鏡像異構物的實施例中，光學上純的鏡像異構物意指化合物包含＞ 90%(重量) 的所需異構物，特別是＞ 95%(重量) 的所需異構物，或更特別是＞ 99%(重量) 的所需異構物，該重量百分比基於化合物的異構物的總重量。手性純的或手性富集的化合物可藉由手性選擇性合成或藉由鏡像異構物分離來製備。鏡像異構物分離可在最終產物上或在適當之中間體上進行。

在一些實施例中，式 (I) 化合物由其中一或多個原子經具有不同原子質量或質量數之原子置換的同位素標記。此等經同位素標記 (即放射性標記) 之式 (I) 化合物被視為在本揭露之範圍內。可併入至式 (I) 化合物中之同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、及碘之同位素，諸如但不限於分別為 ²H、 ³H、 ¹¹C、 ¹³C、 ¹⁴C、 ¹³N、 ¹⁵N、 ¹⁵O、 ¹⁷O、 ¹⁸O、 ³¹P、 ³²P、 ³⁵S、 ¹⁸F、 ³⁶Cl、 ¹²³I、及 ¹²⁵I。某些經同位素標記之式 (I) 化合物 (例如併有放射性同位素者) 適用於藥物及/或受質組織分佈研究。放射性同位素氚 (即 ³H) 及碳-14 (即 ¹⁴C) 由於其容易併入及現成偵測手段而尤其適用於此目的。例如，式 (I) 化合物可富集 1、2、5、10、25、50、75、90、95 或 99 百分比之給定同位素。

用諸如氘 (即 ²H) 之較重同位素取代可得到某些由更大代謝穩定性產生之治療優勢，例如延長之 活體內半衰期或降低之劑量需求。

用正電子發射同位素 (諸如 ¹¹C、 ¹⁸F、 ¹⁵O 及 ¹³N) 取代可適用於正電子發射斷層攝影術 (PET) 研究，以用於檢查受質受體佔有率。經同位素標記之式 (I) 化合物通常可藉由該發明所屬技術領域具有通常知識者已知之習知技術或藉由類似於如下文所闡述之實例中所描述之方法的方法，使用適當之經同位素標記之試劑替代先前所採用的未經標記之試劑來製備。本發明之化合物

在一個實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物， (I) 或其醫藥上可接受之鹽，其中： R ¹為 5 員或 6 員雜芳基，其中 R ¹視情況經一個或多個可為相同或不同之 R ¹⁰取代； R ²係選自氫及鹵素； R ⁴係選自苯基及吡啶基，其中 R ⁴視情況經一個或多個可為相同或不同之 R ¹¹取代； R ¹⁰係選自： i) C _1-6-烷基，其視情況經一個或多個鹵素、胺基、C _1-6-烷氧基、-S(O) ₂(C _1-6-烷基)、氰基取代； ii) C _3-10-環烷基，其視情況經一個或多個鹵素、氰基、胺基取代； iii) 3 員至 10 員雜環基，其視情況經一個或多個鹵素、C _1-10-烷基、胺基、鹵基-C _1-6-烷基、羥基、氰基、-C(O)O-(R ^10q)、C _3-10-環烷基取代，其中 C _1-10-烷基視情況經一個或多個羥基、C _1-6-烷氧基取代； iv) -N(R ^10eR ^10f)； v) 雜芳基，其視情況經一個或多個 C _1-10-烷基、鹵素取代； R ^10e及 R ^10f各自獨立地選自： i) 氫； ii) C _1-6-烷基，其視情況經一個或多個氰基、鹵素、羥基取代； iii) C _3-10-環烷基，其視情況經一個或多個鹵素、C _1-10-烷基取代； R ^10q為 C _1-5-烷基，其中 C _1-5-烷基視情況經一個或多個羥基取代； R ¹¹係選自： i) 鹵素； ii) C _1-6-烷氧基，其視情況經一個或多個 C _1-6-烷基、C _5-6-芳基、C _3-10-環烷基、鹵基-C _1-6-烷基、C _3-10-雜環基取代，其中 3 員至 10 員雜環基視情況經 C _1-6-烷基取代； iii) 5 員至 6 員雜芳基，其視情況經一個或多個鹵素、鹵基-C _1-6-烷基、C _1-6-烷氧基、C _3-10-環烷基、C _1-6-烷基、鹵基-C _1-6-烷氧基取代； iv) 苯基，其視情況經一個或多個 C _1-6-烷氧基、鹵基-C _1-6-烷基取代； v) -O(R ^11a)； R ^11a係選自 C _1-6-烷基、C _3-6-環烷基、苯基及鹵基-C _1-6-烷基。

在另一實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ¹係 5 員雜芳基，其中 R ¹視情況經一個或多個可為相同或不同的 R ¹⁰取代。

在較佳實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ¹為㗁二唑，其視情況經一個或多個可為相同或不同的 R ¹⁰取代。

在一個更佳實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ¹為㗁二唑，其經一個 R ¹⁰取代。

在一個甚至更佳的實施例中，本發明提供如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ¹為 1,3,4-㗁二唑，其經一個 R ¹⁰取代。

在另一實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ²為氟。

在另一實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ⁴為苯基。

在另一實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ¹⁰係選自甲基-甲基磺醯基-乙基、吡咯啶、4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基、甲基-丙腈、1,2,2,2-四氟-甲氧基-乙基、三級丁基、1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基、4,4-二氟-1-哌啶基及氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸酯。

在另一個實施例中，提供如本文所述的式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ¹⁰係選自甲基-甲基磺醯基-乙基、吡咯啶、氧雜-氮雜螺[2.5]辛基、甲基-丙腈、四氟-甲氧基-乙基。

在另一實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ¹¹係選自 5-(三氟甲基)-2-吡啶基、苯氧基、三氟甲氧基、甲氧基-吡啶基、環戊氧基、4-甲氧基苯基、(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基、5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基、4-(三氟甲基)吡唑-1-基、氯、5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基、4-[4-(三氟甲氧基)吡唑-1-基、4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基。

在另一實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ¹¹係選自 (三氟甲基)-吡啶基、苯氧基、三氟甲氧基、(三氟甲基)-㗁二唑基、甲氧基-吡啶基。

在另一實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中： R ¹為 5 員雜芳基，其中 R ¹視情況經一個或多個可為相同或不同之 R ¹⁰取代； R ²為鹵素； R ⁴為苯基或吡啶基； R ¹⁰係選自： iv) C _1-6-烷基，其視情況經一個或多個鹵素、C _1-6-烷氧基、-S(O) ₂(C _1-6-烷基)、氰基取代； v) 3 員至 10 員雜環基，其視情況經一個或多個鹵素、C _1-10-烷基、-C(O)O-(R ^10q)、C _3-10-環烷基取代，其中 C _1-10-烷基視情況經一個或多個 C _1-6-烷氧基取代； vi) 雜芳基，其視情況經一個或多個 C _1-10-烷基取代； R ¹¹係選自： i) 鹵素； ii) 5 員至 6 員雜芳基，其視情況經一個或多個鹵素、鹵基-C _1-6-烷基、C _1-6-烷氧基、鹵基-C _1-6-烷氧基取代； iii) 苯基，其視情況經一個或多個 C _1-6-烷氧基、鹵基-C _1-6-烷基取代； iv) -O(R ^11a)； R ^11a係選自 C _1-6-烷基、C _3-6-環烷基、苯基及鹵基-C _1-6-烷基。

在另一實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中： R ¹為 5 員雜芳基，其中 R ¹視情況經一個或多個可為相同或不同之 R ¹⁰取代； R ²為鹵素； R ⁴為苯基； R ¹⁰係選自： i) C _1-6-烷基，其視情況經一個或多個鹵素、胺基、C _1-6-烷氧基、-S(O) ₂(C _1-6-烷基)、氰基取代； ii) C _3-10-環烷基，其視情況經一個或多個鹵素、氰基、胺基取代； iii) 3 員至 10 員雜環基，其視情況經一個或多個 -C(O)O-(R ^10q) 取代； R ¹¹係選自 i) 鹵素； ii) 5 員至 6 員雜芳基，其視情況經一個或多個鹵素、鹵基-C _1-6-烷基、C _1-6-烷氧基取代； iii) 苯基，其視情況經一個或多個 C _1-6-烷氧基、鹵基-C _1-6-烷基取代； iv) -O(R ^11a)； R ^11a係選自 C _1-6-烷基、C _3-6-環烷基、苯基及鹵基-C _1-6-烷基。

在另一實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中： R ¹為 1,3,4-㗁二唑，其經一個 R ¹⁰取代； R ²為氟； R ⁴為苯基； R ¹⁰係選自甲基-甲基磺醯基-乙基、吡咯啶、4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基、甲基-丙腈、1,2,2,2-四氟-甲氧基-乙基、三級丁基、1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基、4,4-二氟-1-哌啶基及氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸酯； R ¹¹係選自 5-(三氟甲基)-2-吡啶基、苯氧基、三氟甲氧基、甲氧基-吡啶基、環戊氧基、4-甲氧基苯基、(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基、5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基、4-(三氟甲基)吡唑-1-基、氯、5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基、4-[4-(三氟甲氧基)吡唑-1-基及 4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基。

在另一實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中： R ¹為 5 員雜芳基，其中 R ¹視情況經一個或多個可為相同或不同之 R ¹⁰取代； R ²為氟； R ⁴為苯基； R ¹⁰係選自二氟-(甲氧基乙基)哌啶基、氮雜雙環[3.1.1]庚烷-甲酸酯、胺基-三氟-甲基-乙基、甲基-甲基磺醯基-乙基、吡咯啶、氧雜-氮雜螺[2.5]辛基、甲基-丙腈、三級丁基、四氟-甲氧基-乙基、N-嗎啉基； R ¹¹係選自甲氧基苯基、(三氟甲基)-吡啶基、環戊氧基、苯氧基、三氟甲氧基、(三氟甲基)-㗁二唑基、氯、甲氧基-吡啶基。

在另一實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中： R ¹為 1,3,4-㗁二唑，其經一個 R ¹⁰取代； R ²為氟； R ⁴為苯基； R ¹⁰係選自甲基-甲基磺醯基-乙基、吡咯啶、氧雜-氮雜螺[2.5]辛基、甲基-丙腈、四氟-甲氧基-乙基； R ¹¹係選自(三氟甲基)-吡啶基、苯氧基、三氟甲氧基、(三氟甲基)-㗁二唑基、甲氧基-吡啶基。

在另一實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物，其中該化合物係選自： 3-胺基-8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-5,5,7-三氟-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-N-嗎啉基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-N-嗎啉基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1,2,2,2-四氟-1-甲氧基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1,2,2,2-四氟-1-甲氧基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5-二氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5-二氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-8-(5-三級丁基-3-吡啶基)-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-(5-三級丁基-3-吡啶基)-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-氟-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-氟-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3 S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3 S)-3-胺基-8-[5-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3 R)-3-胺基-8-[5-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)苯基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)苯基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)苯基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)苯基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； (3S)-3-胺基-8-[5-[5,5-二氟-1-(2-甲氧基乙基)-3-哌啶基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-[5-[5,5-二氟-1-(2-甲氧基乙基)-3-哌啶基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 1-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3S)-3-胺基-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3R)-3-胺基-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 2-[5-[(3S)-3-胺基-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 1-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 2-甲基-2-[5-[(3 S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲氧基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3 R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲氧基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3 S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3 R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3 S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3 R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3 S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3 R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3 S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[3-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3 R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[3-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3 S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[1-(三氟甲基)吡唑-4-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈；以及 2-甲基-2-[5-[(3 R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[1-(三氟甲基)吡唑-4-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈；或其醫藥上可接受之鹽。

在一個較佳實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物，其中該化合物係選自： 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1,2,2,2-四氟-1-甲氧基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1,2,2,2-四氟-1-甲氧基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 1-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3S)-3-胺基-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3R)-3-胺基-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 2-[5-[(3S)-3-胺基-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈；以及 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈；或其醫藥上可接受之鹽。

在一個最佳實施例中，提供如本文所述之式 (I) 化合物，其中該化合物係選自： 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1,2,2,2-四氟-1-甲氧基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1,2,2,2-四氟-1-甲氧基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 1-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3S)-3-胺基-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3R)-3-胺基-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 2-[5-[(3S)-3-胺基-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈；以及 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈。製造程序

製造如本文所述之式 (I) 化合物或其醫藥上可接受之鹽的方法亦為本發明的目的。

本發明提供一種製備本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽之方法，其包含使式 (XVIII) 化合物與適當的去保護劑進行反應以形成該式 (I) 化合物， (XVIII) 其中 R ¹、R ²及 R ⁴係如本文所定義且 PG 為胺基保護基。

本發明的式 (I) 化合物的製備可依序或收斂式合成途徑進行。以下通用方案中展示本發明之合成。進行所得產物之反應及純化所需之技能為熟習此項技術者所知。除非有相反指示，否則用於以下方法之描述的取代基及指數具有本文中所給出之意義。

若起始物質、中間體或式 (I) 化合物中之一者含有在一或多個反應步驟之反應條件下不穩定或具反應性之一或多個官能基，則可在施加此項技術中熟知之方法的關鍵步驟之前引入適當之保護基 (如 T.W.Greene 及 P.G.M.Wutts 之「Protective Groups in Organic Chemistry」第 5 版, 2014, John Wiley & Sons, N.Y. 中所描述)。可使用文獻中所描述之標準方法在合成後期移除此等保護基。

若起始物質或中間體含有立構中心，則式 (I) 化合物可以非鏡像異構物或鏡像異構物之混合物之形式獲得，其可藉由此項技術中熟知之方法，例如手性 HPLC、手性 SFC 或手性結晶來分離。外消旋化合物可例如經由非鏡像異構物鹽藉由用光學純酸結晶或藉由鏡像異構體分離，藉由特定層析方法，使用手性吸附劑或手性沖提液而分離成其鏡像異構體。同樣，有可能分離含有立構中心之起始物質及中間體，以獲得非鏡像異構性/鏡像異構性富集起始物質及中間體。在式 (I) 化合物之合成中使用此等非鏡像異構性/鏡像異構物富集起始物質及中間體將通常產生相應的式 (I) 之非鏡像異構物/鏡像異構物富集化合物。

本領域技術人員將認識到，在合成式 (I) 化合物中-如果不希望如此-將採用「正交保護基策略 (orthogonal protection group strategy)」，其允許一次裂解幾個保護基而不影響分子中的其他保護基。正交保護原理係該技術中習知者且亦揭示於文獻 (例如，Barany 及 R. B. Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 1977, 99, 7363；H. Waldmann 等人， Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1996, 35, 2056) 中。

熟習此項技術者將認識到，反應順序可視中間體之反應性及性質而變化。

更詳細地，式 (I) 化合物可藉由下文所給出之方法、藉由實例中所給出之方法或藉由類似方法來製造。個別反應步驟之適當的反應條件為本發明所屬技術領域中熟習此項技術者已知。此外，對於文獻中所描述之影響所描述反應的反應條件，參見例如： Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, 2nd Edition, Richard C. Larock. John Wiley & Sons, New York, NY. 1999) 。發現在存在或不存在溶劑之情況下適宜進行反應。對於待採用之溶劑的性質無特定限制，惟該溶劑對所涉及之反應或試劑無不良反應且其至少在一定程度上可溶解試劑。所描述之反應可在廣泛範圍之溫度內進行且精確的反應溫度對於本發明並非關鍵。便利的是在 -78℃ 至回流之間的溫度範圍內進行所描述之反應。反應所需之時間亦可取決於許多因素 (尤其反應溫度及試劑之性質) 而有很大變化。然而，0.5 小時至若干天之時間段通常將足以得到所描述之中間體及化合物。反應順序不限於方案中所呈現之順序，然而，視起始物質及其相應反應性而定，反應步驟之順序可自由改變。

若起始物質或中間體非商業上可獲得或其合成未描述於文獻中，則其可以類似於用於相近類似物之現有程序之方式或如實驗部分中所概述來製備。

製造本文所述的式 (I) 化合物的方法亦為本發明的目的。

本發明的式 (I) 化合物的製備可按照順序或收斂式合成途徑進行。以下通用方案中展示本發明之合成。除非另有相反指示，否則用於下列方法之描述的取代基及指數具有本文中所給定的意義。

更詳細地，式 (I) 化合物可藉由下文所給出之方法、藉由實例中所給出之方法或藉由類似方法來製造。個別反應步驟之適當的反應條件為本發明所屬技術領域中熟習此項技術者已知。反應順序不限於方案中所呈現之順序，然而，視起始物質及其相應反應性而定，反應步驟之順序可自由改變。起始原料是可商購的，或可藉由類似於下列給定之方法的方法、藉由說明書或實例中所引用的參考文獻中描述的方法或藉由本技術領域中已知的方法製備。

本式 (I) 化合物及其醫藥上可接受之鹽可以藉由下述方法製備 (方案 1)。方案 1

製備式 (I) 化合物的適當的起始材料係式 (II) 苯胺衍生物。式 (II) 化合物可以藉由在 AlCl ₃及 BCl ₃存在下在溶劑諸如甲苯中在升高的溫度下與氯乙腈反應而轉化為式 (III) 化合物。衍生物 (III) 可以在碘化鈉及鹼諸如醇鈉存在下在醇溶劑中與胺基丙二酸酯衍生物 (IV) (其中 R ⁿ為烷基) 反應，以獲得式 (V) 化合物。式 (V) 化合物與 HCl 水溶液在升高的溫度下反應會提供式 (VI) 的胺基酸衍生物，其隨後可藉由在鹼諸如 TEA 存在下在溶劑混合物諸如二㗁烷及水中與二-三級丁基二碳酸酯反應進行 N-保護，以獲得式 (VII) 化合物。使用 T3P，在鹼諸如 DIPEA 或 TEA 存在下，在溶劑諸如 DCM 或 THF 中，可以將衍生物 (VII) 環化為式 (VIII) 化合物。引入芐基取代基以獲得式 (X) 化合物可以藉由在鹼諸如 K ₂CO ₃存在下在溶劑諸如 DMF 中與式 (IX) 鹵化物或磺酸酯 (X ¹為 Cl、Br、I 或 OSO ₂R) 反應來完成。視情況，可以添加碘化鉀。式 (X) 化合物與 DAST 的反應會提供式 (XI) 衍生物，其可藉由羰基化反應被轉化為式 (XII) 化合物，該羰基化反應係使用催化劑諸如 Pd(OAc) ₂/dppp 或 Pd(dppp)Cl ₂在鹼諸如 TEA 或 DIPEA 存在下在 DMF 及醇的溶劑混合物中在升高的溫度下進行。式 (XII) 化合物在水性溶劑混合物諸如 THF 及水中與鹼性氫氧化物諸如 LiOH 反應會提供式 (XIII) 化合物。替代地，酸衍生物 (XIII) 可藉由羰基化反應由式 (XI) 化合物來獲得，該羰基化反應係使用催化劑諸如 Pd(OAc) ₂/dppp 或 Pd(dppp)Cl ₂在鹼諸如 TEA 或 DIPEA 存在下，在 DMF 及水的溶劑混合物中，在升高的溫度下進行。式 (XIII) 化合物向式 (XIV) 化合物的轉化可藉由在 DIPEA 或草醯氯存在下在 DIPEA 及催化量的 DMF 在溶劑諸如 DCM 中用試劑諸如 T3P 活化衍生物 (XIII) 後與肼反應來完成。在鹼諸如 DIPEA 存在下用試劑諸如 HATU 或 T3P 活化式 (XIV) 化合物，且隨後與酸衍生物 R ¹⁰CO ₂H 反應會提供式 (XV) 化合物。替代地，式 (XV) 化合物可以藉由在鹼諸如 DIPEA 存在下在溶劑諸如 THF 中與醯肼衍生物 R ¹⁰CONHNH ₂及偶合試劑諸如 HATU 反應而由式 (XIII) 化合物獲得。式 (XVI) 化合物可以藉由在溶劑諸如甲苯或 THF 中與脫水劑諸如 Burgess 試劑反應而由式 (XV) 化合物獲得。式 (I 化合物，其中 R ¹係 1,3,4-㗁二唑基) 可以藉由與 EtOAc 中的 HCl、DCM 中的 TFA 或 HFIP 反應而由式 (XVI) 化合物獲得。

其中 R ¹為 6 員雜芳基的式 (I) 化合物可如方案 2 中所示進行製備。方案 2

式 (XI) 化合物在鈀催化劑諸如 Pd(dppf)Cl ₂-DCM 及鹼諸如 K ₂CO ₃在水性溶劑混合物諸如二㗁烷及水中與硼酸 (R 為 H) 或硼酸酯衍生物 (XVII) 反應會提供式 (XVIII) 化合物。式 (XVIII) 化合物可轉化為式 (I) 化合物，其中 R ¹為 6 員雜芳基，如在方案 1 中關於將式 (XVI) 化合物轉化為式 (I) 化合物所述。 醫藥組成物及投予

本發明的另一目的係一種醫藥組成物，其包含如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，以及醫藥上可接受之賦形劑。

式 (I) 化合物及其醫藥上可接受之鹽可用作藥物，該等藥物為醫藥製劑的形式。醫藥製劑可以內部投予，諸如口服 (例如以錠劑、包衣錠、糖衣錠、硬和軟明膠膠囊、溶液、乳劑或懸浮液的形式)、鼻內 (例如以鼻噴霧劑的形式) 或直腸 (例如以栓劑的形式)。但是，投予亦可以腸胃外進行，諸如肌肉內或靜脈內 (例如以注射溶液的形式)。投予也可局部進行，例如透皮投予，或為滴眼劑或滴耳劑的形式。

式 (I) 化合物及其醫藥上可接受之鹽可與醫藥上惰性、無機或有機載劑加工以生產醫藥製劑諸如片劑、包衣錠、糖衣錠、硬明膠膠囊、注射溶液及局部調配物。可將乳糖、玉米澱粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其鹽等用作例如片劑、包衣錠、糖衣錠及硬質明膠膠囊的此類載劑。

軟質明膠膠囊的適當載劑為例如植物油、蠟、脂肪、半固體物質及液體多元醇等。但是，依據活性物質的性質，在軟質明膠膠囊的情況下，通常不需要載劑。

用於生產溶液及糖漿的適當的載劑為例如水、醇、多元醇、蔗糖、葡萄糖、轉化糖、植物油等。

用於注射溶液的適當的載劑為例如水、醇、多元醇、甘油、植物油等。

用於栓劑的適當的載劑為例如天然或硬化油、蠟、脂肪、半流質或液體多元醇等。

用於局部眼用調配物的適當的載劑為例如環糊精、甘露醇或本技術領域中已知的許多其他載劑及賦形劑。

此外，醫藥製劑可含有防腐劑、增溶劑、增黏物質、穩定劑、濕潤劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、調味劑、用於改變滲透壓之鹽類、緩衝劑、遮蔽劑或抗氧化劑。它們亦可還含有其他治療上有價值之物質。

包含式 (I) 化合物或其醫藥上可接受之鹽以及醫藥上可接受之賦形劑的藥物亦為本發明的目的，該等藥物之生產方法亦如此，該方法包含促使一種或多種式 (I) 化合物及/或其醫藥上可接受之鹽，如果需要的話，與一種或多種其他有治療價值的物質與一種或多種醫藥上可接受之賦形劑一起形成蓋倫 (galenical) 給藥形式。

劑量可在較寬界限內改變，且當然在各種特定情況下都必需根據個人需要調整。一般而言，在口服投予之情況下，分成較佳 1 至 3 個獨立劑量 (其可由例如相同量組成) 的約 0.1 mg 至 20 mg/kg 體重，較佳 0.5 mg 至 4 mg/kg 體重 (例如約 300 mg/個體) 之每日劑量應為適當的。在局部投予的情況下，調配物可包含按 0.001 重量%至 15 重量%的藥物，且可在 0.1 與 25 mg 之間的所需劑量可每天或每週單一劑量投予，或每天多劑量 (2 至 4 劑量) 投予，或每週多劑量投予。但是，應清楚，當顯示有所指示時，可超出本文中給出之上限或下限。

如本發明之醫藥組成物可按照下列方法來製備。

製備包含本發明之化合物的醫藥組成物 錠劑配方 ( 濕法製粒 )

成分	mg/ 錠劑
5	25	100	500
1) 式 (I) 化合物	5	25	100	500
2) 無水乳糖 DTG	125	105	30	150
3) Sta-Rx 1500	6	6	6	30
4) 微晶纖維素	30	30	30	150
5) 硬脂酸鎂	1	1	1	1
總	167	167	167	831

製造程序：1. 混合成分 1、成分 2、成分 3 及成分 4，並以純水製粒。 2. 在 50℃ 乾燥顆粒。 3. 使顆粒通過適當的研磨設備。 4. 加入成分 5 並混合三分鐘；在適當的加壓機上壓縮。膠囊配方

成分	mg/ 膠囊
5	25	100	500
1) 式 (I) 化合物	5	25	100	500
2) 含水乳糖	159	123	148	-
3) 玉米澱粉	25	35	40	70
4) 滑石	10	15	10	25
5) 硬脂酸鎂	1	2	2	5
總	200	200	300	600

製造程序：1.在適當的混合器中將成分 1、成分 2 及成分 3 混合 30 分鐘。 2.添加成分 4 及成分 5，並混合 3 分鐘。 3.充填入適當的膠囊中。注射溶液

成分	mg/ 注射溶液
式 I 化合物	3
聚乙二醇 400	150
乙酸	q.s. ad pH 5.0
注射用水	ad 1.0 ml

製造程序：

將式 (I) 化合物溶解於聚乙二醇 400 與注射用水 (部分) 的混合物中。用乙酸將 pH 調整至 5.0。藉由添加剩餘量的水將體積調整至 1.0 ml。過濾溶液，使用適當的增量充填至小瓶中並滅菌。

適應症

式 (I) 化合物可以有效量用於治療受癌症影響之受試者，特別是人。

在一個態樣中，本發明提供如本文所描述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其用作治療活性物質。

在一進一步態樣中，本發明提供本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其用於治療、預防癌症及/或延遲其進展。

在一進一步態樣中，本發明提供本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽用於治療、預防癌症及/或延遲其進展之用途。

在一進一步態樣中，本發明提供本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽用於製備藥物之用途，該藥物用於治療、預防癌症及/或延遲其進展。

在一進一步態樣中，本發明提供一種用於治療、預防癌症及/或延遲其進展之方法，該方法包含投予治療有效量之如本文所述之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽。

如本文所用，術語「治療 (treatment)」或「治療 (treating)」及其語法變體意指治療性療法。就特定病症而言，治療意指：(1) 改善病症或該病症的生物學表現中之一者或多者，(2) 干擾 (a) 造成或導致病症的生物學級聯中之一個或多個點，或 (b) 病症的生物學表現中之一者或多者，(3) 減輕與病症或其治療相關的症狀、作用或副作用中之一者或多者，或 (4) 減緩病症的進展或該病症的生物學表現中之一者或多者。還考慮了使用本發明的方法及/或組成物的預防性治療。本領域技術人員將理解「預防」並非絕對的術語。在醫學中，「預防」被理解為係指預防性投予藥物以顯著降低病症或其生物學表現的可能性或嚴重程度或延遲該等病症或其生物學表現之發作。預防性治療為適當的，例如，當受試者被認為具有發生癌症的高風險時，諸如當受試者具有明顯的癌症家族史或當受試者已暴露於致癌物時。

作為作用於免疫細胞而非直接作用於癌細胞的免疫治療劑，亦可預見本揭露用為抗癌疫苗。亦包含其中免疫細胞在離體培養和操縱並將本文所揭示之分子用作賦予對離體操縱之細胞共刺激的方式的方法。

在一個實施例中，癌症為非血液系統癌症，諸如淋巴瘤、白血病或骨髓瘤。本文所考慮的血液系統癌症包括但不限於一種或多種白血病，諸如 B 細胞急性淋巴性白血病 (「BALL」)、T 細胞急性淋巴性白血病 (「TALL」)、急性淋巴性白血病 (ALL)；一種或多種慢性白血病，其包括但不限於慢性骨髓性白血病 (CML) 及慢性淋巴球性白血病 (CLL)；另外的血液系統癌症或血液系統病症，其包括但不限於 B 細胞前淋巴球白血病、母細胞性漿細胞樣樹突細胞腫瘤、Burkitt 氏淋巴瘤、彌漫型大 B 細胞淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤、毛細胞白血病、小細胞或大細胞濾泡性淋巴瘤、㗁性淋巴增生性病症、黏膜相關淋巴組織 (MALT) 淋巴瘤、被套細胞淋巴瘤、緣帶淋巴瘤、多發性骨髓瘤、骨髓化生不良及骨髓化生不良症候群、非何杰金氏淋巴瘤、漿母細胞淋巴瘤、漿細胞樣樹突細胞腫瘤、華氏巨球蛋白血症及「前白血病」，該等「前白血病」 (其係由骨髓血細胞之無效生成 (或發育異常) 所組成的多種血液疾病的集合)。

在又一個實施例中，癌症為非血液系統癌症，諸如肉瘤、上皮癌或黑色素瘤。本文所考慮的非血液系統癌症包括但不限於神經母細胞瘤、腎細胞癌、大腸癌、大腸直腸癌、乳癌、上皮鱗狀細胞癌、黑色素瘤、胃癌、腦癌、肺癌 (例如非小細胞肺癌 - NSCLC)、胰臟癌、子宮頸癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、前列腺癌、睾丸癌、甲狀腺癌、子宮癌、腎上腺癌及頭頸癌。式 (I) 化合物與其他藥劑聯合投予

式 (I) 化合物或其鹽或本文所揭示之化合物或其醫藥上可接受之鹽可單獨採用或與其他治療劑組合採用以用於治療。例如，醫藥組合調配物或給藥方案之第二藥劑可具有與式 (I) 化合物互補的活性它們彼此不產生不利影響。該等化合物可在單一醫藥組成物中一起投予或單獨投予。在一個實施例中，化合物或醫藥上可接受之鹽可與細胞毒劑聯合投予以治療增生性疾病及癌症。

術語「聯合投予」係指式 (I) 化合物或其鹽或本文所揭示之化合物或其醫藥上可接受之鹽與一種或多種另外的活性藥物成分 (包括細胞毒性劑及放射治療) 同時投予或任何方式的單獨依次投予。如果投予並非同時投予，則化合物在彼此接近的時間投予。此外，化合物是否以相同劑型投予並不重要，例如一種化合物可局部投予而另一種化合物可口服投予。

通常，可聯合投予任何具有抗癌活性的藥劑。該等藥劑之實例可參見以下文獻：V.T. Devita 及 S. Hellman 主編，Cancer Principles and Practice of Oncology，Devita 及 S. Heilman (editors), 6th edition (February 15, 2001), Lippincott Williams & Wilkins Publishers.本領域普通技術人員將能夠基於藥物之特定特徵及所涉及之疾病辨別可使用的藥劑之組合。

在一個態樣中，本發明提供一種本文所述之醫藥組成物，其進一步包含附加治療劑。

在一個實施例中，該另外的治療劑為化學治療劑。

在一個實施例中，該另外的治療劑為細胞毒性劑。

在一個實施例中，該另外的治療劑為免疫腫瘤藥劑。

如本文所用之術語「細胞毒性劑」係指抑制或防止細胞功能及/或引起細胞死亡或破壞之物質。細胞毒性劑包括但不限於放射性同位素 (At ²¹¹、I ¹³¹、I ¹²⁵、Y ⁹⁰、Re ¹⁸⁶、Re ¹⁸⁸、Sm ¹⁵³、Bi ²¹²、P ³²、Pb ²¹²和 Lu 的放射性同位素)；化學治療劑；生長抑制劑；酵素及其片段，例如核酸酶；及毒素，例如小分子毒素或細菌、真菌、植物或動物來源的酶活性毒素，包括其片段及/或變異體。

例示性細胞毒性劑可以選自抗微管劑、鉑配位複合物、烷化劑、抗生素、拓撲異構酶 II 抑制劑、抗代謝物、拓撲異構酶 I 抑制劑、激素和激素類似物、信號轉導途徑抑制劑、非受體酪胺酸激酶血管生成抑制劑、免疫治療劑、促凋亡劑、LDH-A 抑制劑、脂肪酸生物合成抑制劑、細胞週期信號傳導抑制劑、HDAC 抑制劑、蛋白酶體抑制劑和癌症代謝抑制劑。

「化學治療劑」包括用於治療癌症的化合物。化學治療劑的實例包括厄洛替尼 (TARCEVA®, Genentech/OSI Pharm.)、硼替佐米 (VELCADE®, Millennium Pharm.)、雙硫崙、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、Salinosporamide A、卡非佐米、17-AAG (格爾德黴素)、根赤殼菌素 (radicicol)、乳酸脫氫酶 A (LDH-A)、氟維司群 (FASLODEX®, AstraZeneca)、舒尼替尼 (SUTENT®, Pfizer/Sugen)、來曲唑 (FEMARA®, Novartis)、甲磺酸伊馬替尼 (GLEEVEC®, Novartis)、finasunate (VATALANIB®, Novartis)、奧沙利鉑 (ELOXATIN®, Sanofi)、5-FU (5-氟尿嘧啶)、甲醯四氫葉酸、雷帕黴素 (Sirolimus, RAPAMUNE®, Wyeth)、拉帕替尼 (TYKERB®, GSK572016, Glaxo Smith Kline)、Lonafamib (SCH 66336)、索拉非尼 (NEXAVAR®, Bayer Labs)、吉非替尼 (IRESSA®, AstraZeneca)、AG1478、烷化劑諸如塞替派和 CYTOXAN® 環磷醯胺、磺酸烷基酯諸如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮丙啶類諸如苯佐替派、卡波醌、美妥替派和烏瑞替派；乙撐亞胺類和甲基蜜胺類，包括六甲蜜胺、三乙撐蜜胺、三乙撐磷醯胺、三乙撐硫代磷醯胺和三羥甲蜜胺；番荔枝內酯類 (特別是布拉他辛和布拉他辛酮)；喜樹鹼 (包括拓撲替康和伊立替康)；苔蘚抑素；卡拉汀 (Callystatin)；CC-1065 (包括其阿多來新、卡折來新和比折來新合成類似物)；隱藻素類 (特別是隱藻素 1 和隱藻素 8)；腎上腺皮質類固醇類 (包括潑尼松和潑尼松龍)；醋酸環丙孕酮；5a-還原酶 (包括非那雄胺和度他雄胺)；伏立諾他、羅米地辛、帕比司他、丙戊酸、莫西司他多拉司他汀 (mocetinostat dolastatin)、阿地白介素、滑石(talc)度卡黴素 (duocarmycin) (包括合成類似物 KW-2189 和 CBI-TM I)；五加素；水鬼蕉鹼；Sarcodictyin；海綿抑素；氮芥類，例如氯芥苯丁酸、萘氮芥、膽磷醯胺、雌莫司汀、異環磷醯胺、雙氯乙基甲胺、鹽酸氧氮芥、美法崙、新氮芥、苯芥膽甾醇、潑尼莫司汀、曲磷胺、尿嘧啶氮芥；亞硝脲類，例如卡莫司汀、氯脲黴素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀和雷莫司汀，抗生素類諸如烯二炔抗生素 (例如加利車黴素黴素，特別是加利車黴素 γ1I 和加利車黴素 ω1I (Angew Chem. Intl.Ed. Engl. 1994 33:183-186)；蒽環抗生素(dynemicin)，包括 Dynemicin A；二膦酸鹽類，例如氯膦酸鹽；埃斯培拉黴素；以及新製癌菌素發色團和相關色蛋白烯二炔抗生素發色團)、阿克拉黴素、放線菌素、氨茴黴素、重氮絲胺酸、博來黴素、放線菌素 C、卡拉黴素 (Carabicin)、洋紅黴素、嗜癌黴素、色黴素、放線菌素 D、柔紅黴素、地托比星、6‑重氮基-5-側氧-L-正白胺酸、ADRIAMYCIN® (多柔比星、嗎啉代多柔比星、氰基嗎啉代多柔比星、2-吡咯代多柔比星和脫氧多柔比星)、表柔比星、依索比星、伊達比星、麻西羅黴素、絲裂黴素諸如絲裂黴素 C、黴酚酸、諾拉黴素、橄欖黴素、培洛黴素、泊非黴素、嘌呤黴素、三鐵阿黴素、羅多比星、鏈黑黴素、鏈佐星、殺結核菌素、烏苯美司、淨司他丁、佐柔比星；抗代謝物類，例如甲胺蝶呤和 5-氟尿嘧啶 (5-FU)；葉酸類似物，例如二甲葉酸、甲胺蝶呤、蝶羅呤、三甲曲沙，嘌呤類似物諸如氟達濱、6-巰基嘌、硫脒嘌呤、硫鳥嘌呤；嘧啶類似物，例如安西他濱、阿扎胞苷、6‑氮尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、雙脫氧尿苷、去氧氟尿苷、依諾他濱、氟尿苷；雄激素類，例如卡魯睪酮、丙酸屈他雄酮、環硫雄醇、美雄烷、睪內酯；抗腎上腺素類諸如氨魯米特、米托坦、曲洛司坦；葉酸補充劑諸如亞葉酸；醋葡醛內酯；醛磷醯胺糖苷；氨基乙醯丙酸；恩尿嘧啶；安吖啶、倍曲布西 (Bestrabucil)；比生群；依達曲沙；地磷醯胺；地美可辛；地吖醌；伊佛米新 (Elfomithine)；依利醋銨；埃博黴素；依托格魯；硝酸鎵；羥基脲；香菇多醣；洛尼達明；美登木素生物鹼類諸如美登素和安絲菌素；米托胍腙；米托蒽醌；莫哌達醇；二胺硝吖啶；噴司他丁；蛋氨氮芥；吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸；2-乙基醯肼；丙卡巴肼；PSK® 多醣複合物 (JHS Natural Products, Eugene, Oreg.)；雷佐生；根黴素；西索菲蘭；螺旋鍺；細交鏈孢菌酮酸；三亞胺醌；2,2',2''-三氯三乙胺；單端孢菌素類 (特別是 T-2 毒素、疣孢菌素 A、桿孢菌素 A 和蛇行菌素)；烏拉坦；長春地辛；達卡巴嗪；甘露醇氮芥；二溴甘露醇；二溴衛矛醇；哌泊溴烷；格塞圖辛 (Gacytosine)；阿拉伯糖苷 (Ara-C)；環磷醯胺；塞替派；類紫杉醇，例如 TAXOL (卡培他濱，Bristol-Myers Squibb Oncology，Princeton，N.J.)、ABRAXANE® (無克列莫佛)、卡培他濱的白蛋白改造的奈米顆粒製劑 (American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, 111.) 和 TAXOTERE® (多西他塞、歐洲紫杉醇甲胺)；Sanofi-Aventis)；氯芥苯丁酸；GEMZAR® (吉西他濱)；6-硫鳥嘌呤；巰基嘌呤；甲胺蝶呤；鉑類似物諸如順鉑和卡鉑、長春鹼；依托泊苷 (VP-16)；異環磷醯胺；米托蒽醌；長春新鹼；NAVELBINE® (長春瑞濱)；能滅瘤；替尼泊苷；依達曲沙；道諾黴素；氨基蝶呤；卡培他濱 (XELODA®)；伊班膦酸鹽；CPT-I I；拓撲異構酶抑制劑 RFS 2000；二氟甲基鳥胺酸 (DMFO)；類視黃醇諸如視黃酸；及上述任一項的醫藥上可接受的鹽、酸和衍生物。

化學治療劑還包括 (i) 起調節或抑制激素對腫瘤作用的作用的抗激素劑，諸如抗雌激素和選擇性雌激素受體調節劑 (SERM)，包括例如他莫昔芬 (包括 NOLVADEX®、檸檬酸他莫昔芬)、雷洛昔芬、屈洛昔芬、Iodoxyfene、4-羥基他莫昔芬、曲沃昔芬、那洛昔芬、LYl 17018、奧那司酮和 FARESTON® (檸檬酸托瑞米芬)；(ii) 抑制在腎上腺中調節雌激素產生的芳香酶的芳香酶抑制劑，諸如例如 4(5)-咪唑、氨魯米特、MEGASE® (醋酸甲地孕酮)、AROMASIN® (依西美坦；Pfizer)、福美坦、法倔唑、RIVISOR® (伏羅唑)、FEMARA® (來曲唑；Novartis)和 ARIMIDEX® (阿那曲唑；AstraZeneca)；(iii) 抗雄激素類，諸如氟他米特、尼魯米特、比卡米特、亮丙瑞林和戈捨瑞、布捨瑞林、曲普瑞林、醋酸甲羥孕酮、己烯雌酚、倍美力、氟甲睪酮、全反式視黃酸、芬維 A 胺，以及曲沙他濱 (1,3-二氧戊環核苷胞嘧啶類似物)；(iv) 蛋白質激酶抑制劑；(v) 脂質激酶抑制劑；(vi) 反義寡核苷酸，特別是抑制牽涉異常細胞增生的信號轉導途徑中的基因表現的反義寡核苷酸，諸如例如 PKC-α、Ralf 及 H-Ras；(vii) 核酶，諸如 VEGF 表現抑制劑 (例如，ANGIOZYME®) 和 HER2 表現抑制劑；(viii) 疫苗，諸如基因療法疫苗，例如 ALLOVECTIN®、LEUVECTIN® 和 VAXID®、PROLEUKIN®、rIL-2，拓撲異構酶 I 抑制劑，諸如 LURTOTECAN®、ABARELIX® rmRH；以及 (ix) 上述任一項的醫藥上可接受的鹽、酸和衍生物。

化學治療劑還包括抗體諸如阿侖單抗 (Campath)、貝伐單抗 (AVASTIN®, Genentech)、西妥昔單抗 (ERBITUX®, Imclone)、帕尼單抗 (VECTIBIX®, Amgen)、利妥昔單抗 (RITUXAN®, Genentech/Biogen Idec)、帕妥珠單抗 (OMNITARG®, 2C4, Genentech)、曲妥珠單抗 (HERCEPTIN®, Genentech)、托西莫單抗 (Bexxar, Corixia)，以及抗體藥物結合物諸如吉妥單抗 (MYLOTARG®, Wyeth)。具有作為與本發明之化合物組合的藥劑的治療潛力的額外人源化單株抗體包括：阿泊珠單抗 (apolizumab)、阿塞珠單抗 (aselizumab)、atlizumab、巴匹珠單抗 (bapineuzumab)、比伐妥珠單抗 (bivatuzumab mertansine)、莫坎妥珠單抗 (cantuzumab mertansine)、西利珠單抗 (cedelizumab)、賽妥珠單抗 (certolizumab pegol)、斯夫西珠單抗 (cidfusituzumab)、斯珠單抗 (cidtuzumab)、達克珠單抗 (daclizumab)，依庫麗單抗 (eculizumab)、依法珠單抗 (efalizumab)、依帕珠單抗 (epratuzumab)、厄利珠單抗 (erlizumab)、非維珠單抗 (felvizumab)、芳妥珠單抗 (fontolizumab)、吉妥單抗 (gemtuzumab ozogamicin)、奧英妥珠單抗 (inotuzumab ozogamicin)、伊匹單抗 (ipilimumab)、拉貝珠單抗 (labetuzumab)、林妥珠單抗 (lintuzumab)、馬妥珠單抗 (matuzumab)、美泊利單抗 (mepolizumab)、莫維珠單抗 (motavizumab)、莫托維珠單抗 (motovizumab)、那他珠單抗 (natalizumab)、尼妥珠單抗 (nimotuzumab)、諾羅珠單抗 (nolovizumab)、努瑪維珠單抗 (numavizumab)、奧瑞珠單抗 (ocrelizumab)、奧馬珠單抗 (omalizumab)、帕利珠單抗 (palivizumab)、帕考珠單抗 (pascolizumab)、佩夫西珠單抗 (pecfusituzumab)、帕妥株單抗 (pectuzumab)、培克珠單抗 (pexelizumab)、拉利珠單抗 (ralivizumab)、雷珠單抗 (ranibizumab)、瑞利維珠單抗 (reslivizumab)、瑞利珠單抗 (reslizumab)、瑞西維珠單抗 (resyvizumab)、羅維珠單抗 (rovelizumab)、盧利珠單抗 (ruplizumab)、西羅珠單抗 (sibrotuzumab)、西利珠單抗 (siplizumab)、索土珠單抗 (sontuzumab)、替他珠單抗 (tacatuzumab tetraxetan)、他度珠單抗 (tadocizumab)、他利珠單抗 (talizumab)、特非珠單抗 (tefibazumab)、托珠單抗 (tocilizumab)、托利珠單抗 (toralizumab)、西莫白介素單抗 (tucotuzumab celmoleukin)、吐克妥珠單抗 (tucusituzumab)、烏瑪維珠單抗 (umavizumab)、烏珠單抗 (urtoxazumab)、優特克單抗 (ustekinumab)、維西珠單抗 (visilizumab) 和抗白介素-12 (ABT-874/J695, Wyeth Research and Abbott Laboratories)，其為經遺傳修飾以識別白介素-12 p40 蛋白的重組專有人序列全長 IgG1 λ 抗體。

化學治療劑還包括「EGFR 抑制劑」，其係指與 EGFR 結合或直接交互作用並阻止或降低其訊息轉導活性的化合物，或者稱為「EGFR 拮抗劑」。此等藥劑的實例包括抗體以及與 EGFR 結合之小分子。與 EGFR 結合之抗體的實例包括 MAb 579 (ATCC CRL HB 8506)、MAb 455 (ATCC CRL HB8507)、MAb 225 (ATCC CRL 8508)、MAb 528 (ATCC CRL 8509) (參見美國專利第 4,943,533 號，Mendelsohn 等人) 及其變異體，諸如嵌合 225 (C225 或西妥昔單抗；ERBUTIX®) 和重塑的人 225 (H225) (參見，WO 96/40210，Imclone Systems Inc.)；IMC-11F8，一種完整的人 EGFR 靶向抗體 (Imclone)；與 II 型突變體 EGFR 結合之抗體 (美國專利第 5,212,290 號)；如美國專利第 5,891,996 號中所述之與 EGFR 結合的人源化和嵌合抗體；以及與 EGFR 結合之人抗體，諸如 ABX-EGF 或帕尼單抗 (參見 WO98/50433，Abgenix/Amgen)；EMD 55900 (Stragliotto 等人，Eur. J. Cancer 32A: 636-640 (1996))；EMD7200 (馬妥珠單抗)，一種針對 EGFR 的人源化 EGFR 抗體，可與 EGF 和 TGF-α 競爭與 EGFR 之結合 (EMD/Merck)；人 EGFR 抗體，HuMax-EGFR (GenMab)；全人抗體，稱為 E1.1、E2.4、E2.5、E6.2、E6.4、E2.ll、E6.3 和 E7.6.3 且在 US 6,235,883 中描述的完全人抗體；MDX-447 (Medarex Inc)；以及 mAb 806 或人源化 mAb 806 (Johns 等人，J. Biol. Chem. 279(29):30375-30384 (2004))。抗 EGFR 抗體可與細胞毒性劑結合，從而產生免疫結合物 (參見例如，EP659,439A2，Merck Patent GmbH)。EGFR 拮抗劑包括小分子，諸如美國專利號：5,616,582、5,457,105、5,475,001、5,654,307、5,679,683、6,084,095、6,265,410、6,455,534、6,521,620、6,596,726、6,713,484、5,770,599、6,140,332、5,866,572、6,399,602、6,344,459、6,602,863、6,391,874、6,344,455、5,760,041、6,002,008 和 5,747,498 及以下 PCT 公佈：W098/14451、W098/50038、W099/09016 及 WO99/24037。特定的小分子 EGFR 拮抗劑包括 OSI-774 (CP-358774，厄洛替尼，TARCEVA® Genentech/OSI Pharmaceuticals)；PD 183805 (CI 1033，2-丙烯醯胺，N-[4-[(3-氯-4-氟苯基)胺基]-7-[3-(4-N-嗎啉基)丙氧基]-6-喹唑啉基]-二鹽酸鹽，Pfizer Inc.)；ZD1839，吉非替尼 (IRESSA®) 4-(3'-氯-4'-氟苯胺基)-7-甲氧基-6-(3-嗎啉代丙氧基)喹唑啉，AstraZeneca)；ZM 105180 (6-胺基-4-(3-甲基苯基-胺基)-喹唑啉，Zeneca)；BIBX-1382 (N8-(3-氯-4-氟-苯基)-N2-(1-甲基-哌啶-4-基)-嘧啶[5,4-d]嘧啶-2,8-二胺，Boehringer Ingelheim)；PKI-166 ((R)-4-[[4-[(1-苯乙基)胺基]-1H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-基]-苯酚)；(R)-6-(4-羥苯基)-4-[(1-苯基乙基)胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶)；CL-387785 (N-[4-[(3-溴苯基)胺基]-6-喹唑啉基]-2-丁炔醯胺)；EKB-569 (N-[4-[(3-氯-4-氟苯基)胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]-4-(二甲基胺基)-2-丁烯醯胺)(Wyeth)；AG1478 (Pfizer)；AG1571 (SU 5271; Pfizer)；雙重 EGFR/HER2 酪胺酸激酶抑制劑諸如拉帕替尼 (TYKERB®，GSK572016 或 N-[3-氯-4-[(3-氟苯基)甲氧基]苯基]-6[5[[[2-甲基磺醯基)乙基]胺基]甲基]-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺)。

化學治療劑還包括「酪胺酸激酶抑制劑」，包括前段落中所提及的 EGFR 靶向藥物；小分子 FIER2 酪胺酸激酶抑制劑，例如可從 Takeda 獲得的 TAK165；CP-724,714，其為 ErbB2 受體酪胺酸激酶的口服選擇性抑制劑 (Pfizer 及 OSI)；優先結合 EGFR 但抑制 HER2 及 EGFR 過表現細胞二者的雙重 HER 抑制劑，例如 EKB-569 (可從 Wyeth 獲得)；拉帕替尼 (lapatinib) (GSK572016，可從 Glaxo-SmithKline 獲得)，其為口服 HER2 及 EGFR 酪胺酸激酶抑制劑；PKI-166 (可從 Novartis 獲得)；泛 HER 抑制劑，例如卡奈替尼 (canertinib) (CI-1033, Pharmacia)；Raf-I 抑制劑，例如抑制 Raf-I 傳訊的反義藥劑 ISIS-5132，可從 ISIS Pharmaceuticals 獲得；非 HER 靶向的 TK 抑制劑，例如甲磺酸伊馬替尼 (imatinib) (GLEEVEC®，可從 Glaxo SmithKline 獲得)；多靶向酪胺酸激酶抑制劑，例如舒尼替尼 (sunitinib) (SUTENT®，可從 Pfizer 獲得)；VEGF 受體酪胺酸激酶抑制劑，例如瓦他拉尼 (vatalanib) (PTK787/ZK222584，可從 Novartis/Schering AG 獲得)；MAPK 胞外調控激酶 I 抑制劑 CI-1040 (可從 Pharmacia 獲得)；喹唑啉類，例如 PD 153035,4-(3-氯苯胺基)喹唑啉；吡啶并嘧啶類；嘧啶并嘧啶類；吡咯并嘧啶類，例如 CGP 59326、CGP 60261 及 CGP 62706；吡唑并嘧啶類，4-(苯基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶類；薑黃素 (二阿魏醯基甲烷、4,5-雙(4-氟苯胺基)-酞醯亞胺)；含硝基噻吩部分的酪弗斯汀 (tyrphostine)；PD-0183805 (Warner-Lamber)；反義分子 (例如與編碼 HER 的核酸結合的那些)；喹喔啉類 (美國專利第 5,804,396 號)；Tryphostin (美國專利第 5,804,396 號)；ZD6474 (AstraZeneca)；PTK-787 (Novartis/Schering AG)；泛 HER 抑制劑，例如 CI-1033 (Pfizer)；Affinitac (ISIS 3521; Isis/Lilly)；甲磺酸伊馬替尼 (GLEEVEC®)；PKI 166 (Novartis)；GW2016 (Glaxo SmithKline)；CI-1033 (Pfizer)；EKB-569 (Wyeth)；Semaxinib (Pfizer)；ZD6474 (AstraZeneca)；PTK-787 (Novartis/Schering AG)；INC-ICl I (Imclone)，雷帕黴素 (rapamycin) (sirolimus, RAPAMUNE®)；或如任何下列專利公開案中所描述：美國專利號 5,804,396；WO 1999/09016 (American Cyanamid)；WO 1998/43960 (American Cyanamid)；WO 1997/38983 (Warner Lambert)；WO 1999/06378 (Warner Lambert)；WO 1999/06396 (Warner Lambert)；WO 1996/30347 (Pfizer, Inc)；WO 1996/33978 (Zeneca)；WO 1996/3397 (Zeneca) 及 WO 1996/33980 (Zeneca)。

化學治療劑還包括地塞米松、干擾素、秋水仙鹼、氯苯胺啶、環孢菌素、兩性黴素、甲硝唑、阿侖單抗、阿利維 A 酸、別嘌呤醇、胺磷汀、三氧化二砷、天冬醯胺酶、活 BCG、貝伐單抗、克拉屈濱、氯法拉濱、阿法達貝泊汀、Denileukin、右雷佐生、阿法依泊汀、Elotinib、非格司亭、醋酸組胺瑞林，Ibritumomab、干擾素 alfa-2a、干擾素 alfa-2b、來那度胺、左旋咪唑、美司鈉、甲氧沙林、諾龍、奈拉濱、Nofetumomab、奧普瑞白介素、帕利夫明、帕米磷酸二鈉、培加酶、培門冬酶、培非格司亭、培美曲塞二鈉、普卡黴素、卟吩姆鈉、奎納克林、拉布立酶、沙格司亭、替莫唑胺、VM-26、6-TG、托瑞米芬、維甲酸、ATRA、纈沙星、唑來膦酸鹽和唑來膦酸及其醫藥上可接受之鹽。

化學治療劑還包括氫化可體松、醋酸氫化可體松、醋酸可體松、特戊酸巰基氫化可體松 (tixocortol pivalate)、丙酮特安皮質醇 (triamcinolone acetonide)、乙醇特安皮質醇、莫米松 (mometasone)、安西奈德 (amcinonide)、布地奈德 (budesonide)、地松奈德 (desonide)、氟輕松 (fluocinonide)、氟輕松醋酸酯、倍他米松 (betamethasone)、倍他米松磷酸鈉、地塞米松 (dexamethasone)、地塞米松磷酸鈉、氟可龍 (fluocortolone)、氫化可體松-17-丁酸鹽、氫化可體松-17-戊酸鹽、二丙酸阿氯米松 (aclometasone dipropionate)、戊酸倍他米松、二丙酸倍他米松、潑尼卡酯 (prednicarbate)、氯倍他松 (clobetasone)-17-丁酸鹽、氯倍他松-17-丙酸鹽、己酸氟可龍、特戊酸氟可龍及醋酸氟潑尼定 (fluprednidene acetate)；免疫選擇性抗炎肽 (ImSAID)，例如苯丙胺酸-麩醯胺酸-甘胺酸 (PEG) 及其 D-異構體形式 (feG) (IMULAN BioTherapeutics, LLC)；抗風濕藥物，例如硫唑嘌呤 (azathioprine)、環孢素 (cyclosporine A)、D-青黴素、金鹽、羥氯喹 (hydroxychloroquine)、來氟米特米諾環素 (leflunomideminocycline)、柳氮磺吡啶 (sulfasalazine)、腫瘤壞死因子 α (TNFa) 阻斷劑，例如依那西普 (etanercept，Enbrel)、英夫利昔單抗 (infliximab，Remicade)、阿達木單抗 (adalimumab，Humira)、賽妥珠單抗 (certolizumab pegol，Cimzia)、高利單抗 (golimumab，Simponi)、介白素 I (IL-I) 阻斷劑，例如阿那白滯素 (anakinra，Kineret)、T 細胞共刺激阻斷劑，例如阿巴西普 (abatacept，Orencia)、介白素 6 (IL-6) 阻斷劑，例如托珠單抗 (tocilizumab，ACTEMERA®)；介白素 13 (IL-13) 阻斷劑，例如利比克株單抗 (lebrikizumab)；干擾素 α (IFN) 阻斷劑，例如羅利珠單抗 (Rontalizumab)；β 7-整聯蛋白阻斷劑，例如 rhuMAb β 7；IgE 途徑阻斷劑，例如抗 Ml prime；分泌型同三聚 LTa3 及膜結合型異三聚 LTa I/β2 阻斷劑，例如抗淋巴毒素 α (LTa)；放射性同位素 (例如 At ²¹¹、I ¹³¹、I ¹²⁵、Y ⁹⁰、Re ¹⁸⁶、Re ¹⁸⁸、Sm ¹⁵³、Bi ²¹²、P ³²、Pb ²¹²和放射性同位素)；混雜調查性藥劑，例如硫普汀 (thioplatin)、PS-341、丁酸苯酯、ET-18-OCH3 或法呢基轉移酶抑制劑 (L-739749, L-744832)；多酚，例如槲皮素，白藜蘆醇，白皮杉醇，沒食子酸表沒食子兒茶精，茶黃素，黃烷醇，原花青素，樺木酸及其衍生物；自噬抑制劑，例如氯喹；δ-9-四氫大麻酚 (屈大麻酚 (dronabinol)，MARINOL®)；β-拉帕醌 (beta-lapachone)；拉帕醇(lapachol)；秋水仙素類；白樺脂脂酸 (betulinic acid)；乙醯喜樹鹼，東莨菪亭 (scopolectin) 及 9-胺基喜樹鹼)；鬼臼毒素；替加氟 (tegafur, UFTORAL®)；貝沙羅汀 (bexarotene, TARGRETIN®)；二膦酸鹽類，例如氯膦酸鹽 (例如，BONEFOS® 或 OSTAC®)、依替膦酸鈉 (etidronate, DIDROCAL®)、NE-58095、唑來膦酸 (zoledronic acid)/唑來膦酸鹽 (ZOMETA®)、阿崙膦酸鹽 (alendronate, FOSAMAX®)、帕米膦酸鹽 (pamidronate, AREDIA®)、替魯膦酸鹽 (tiludronate, SKELID®) 或利塞膦酸鹽 (risedronate, ACTQNEL®)；及表皮生長因子受體 (EGF-R)；疫苗，例如 THERATOPE® 疫苗；哌立福辛 (perifosine)、COX-2 抑制劑 (例如，塞來昔布 (celecoxib) 或依托昔布 (etoricoxib))，蛋白體抑制劑 (例如，PS341)；CCI-779；替吡法尼 (tipifarnib, R11577)；歐拉菲尼 (orafenib)、ABT510；Bcl-2 抑制劑，例如奧利默森鈉 (oblimersen sodium, GENASENSE®)、匹杉瓊 (pixantrone)；法呢基轉移酶抑制劑，例如洛那法尼 (lonafarnib) (SCH 6636, SARASAR™)；和上述任一項的醫藥上可接受之鹽、酸或衍生物；以及上述兩項或多項的組合，例如 CHOP (環磷醯胺、多柔比星 (doxorubicin)、長春新鹼及普賴蘇濃聯合療法的縮寫) 及 FOLFOX (奧沙利鉑 (oxaliplatin) (ELOXATIN™) 聯合 5-FU 及亞葉酸 (leucovorin) 的治療方案的縮寫)。

在另一實施例中，式 (I) 化合物可與免疫腫瘤藥劑共同配製。免疫腫瘤藥劑包括例如小分子藥物、抗體或其他生物或小分子。生物免疫腫瘤藥劑的實例包括但不限於癌症疫苗、抗體及細胞激素。在一個方面中，抗體為單株抗體。在另一態樣中，單株抗體係人源化的或人類的。在另一態樣中，該抗體為雙特異性抗體。

在一個態樣中，免疫腫瘤藥劑為 (i) 刺激 (包括共刺激) 受體的促效劑或 (ii) T 細胞上之抑制 (包括共抑制) 訊號的拮抗劑，這兩者導致放大抗原特異性 T 細胞反應 (通常稱為免疫檢查點調節劑)。

某些刺激及抑制分子為免疫球蛋白超家族 (IgSF) 的成員。與共刺激或共抑制受體結合的一個重要的膜結合配體家族為 B7 家族，其包括 B7-1、B7-2、B7-H1 (PD-L1)、B7-DC (PD-L2)、B7-H2 (ICOS-L)、B7-H3、B7-H4、B7-H5 (VISTA) 及 B7-H6。與共刺激或共抑制受體結合的另一個膜結合配體家族係與同源 TNF 受體家族成員結合的 TNF 分子家族，其包括 CD40 及 CD40L、OX-40、OX-40L、CD70、CD27L、CD30、CD30L、4-1BBL、CD137 (4-1BB)、TRAIL/Apo2-L、TRAILR1/DR4、TRAILR2/DR5、TRAILR3、TRAILR4、OPG、RANK、RANKL、TWEAKR/Fnl4、TWEAK、BAFFR、EDAR、XEDAR、TACI、APRIL、BCMA、LTfiR、LIGHT、DcR3、HVEM、VEGI/TL1A、TRAMP/DR3、EDAR、EDA1、XEDAR、EDA2,TNFRl、淋巴毒素 α/TNPβ、TNFR2、TNF a、LT R、淋巴毒素 a 1β2、FAS、FASL、RELT、DR6、TROY、NGFR。

在一個態樣中，T 細胞反應可由式 (I) 化合物與以下中之一者或多者的組合刺激：(i) 抑制 T 細胞活化之蛋白質的拮抗劑 (例如，免疫檢查點抑制劑)，諸如 CTLA-4、PD-1、PD-L1、PD-L2、LAG-3、TIM-3、Galectin 9、CEACAM-1、BTLA、CD69、Galectin-1、TIGIT、CD113、GPR56、VISTA、2B4、CD48、GARP、PD1H、LAIR1、TIM-1 和 TIM-4；及 (ii) 刺激 T 細胞活化之蛋白質的促效劑，諸如 B7-1、B7-2、CD28、4-1BB (CD137)、4-1BBL、ICOS、ICOS-L、OX40、OX40L、GITR、GITRL、CD70、CD27、CD40、DR3 和 CD28H。

可與式 (I) 化合物組合用於治療癌症的其他藥劑包括 NK 細胞上抑制性受體的拮抗劑或 NK 細胞上活化受體的促效劑。例如，式 (I) 化合物可與 KIR 的拮抗劑諸如利瑞魯單抗 (lirilumab) 組合。

用於組合療法的其他藥劑包括抑制或消耗巨噬細胞或單核細胞的藥劑，包括但不限於 CSF-1R 拮抗劑，諸如 CSF-1R 拮抗劑抗體 (包括 RG7155 或 FPA-008)。

在另一態樣中，式 (I) 化合物可配合以下藥劑中之一者或多者使用：連接正共刺激受體的促效劑；減弱經由抑制受體的傳訊的阻斷劑；拮抗劑；及一種或多種全身性地增加抗腫瘤 T 細胞之頻率的藥劑；克服腫瘤微環境內不同免疫抑制途徑 (例如，阻斷抑制受體結合 (例如，PD-L1/PD-1 交互作用)、耗竭或抑制 Treg (例如，使用抗 CD25 單株抗體 (例如達克珠單抗 (daclizumab)) 或藉由活體外抗 CD25 珠粒耗竭)、抑制代謝酶諸如 IDO 或逆轉/防止 T 細胞無反應性或耗竭) 的藥劑；及觸發先天免疫活化及/或腫瘤部位發炎的藥劑。

在一些實施例中，免疫腫瘤藥劑為 CTLA-4 拮抗劑，諸如拮抗 CTLA-4 抗體。適當的 CTLA-4 抗體包括例如 YERVOY (伊匹單抗 (ipilimumab)) 或曲美木單抗 (tremelimumab)。在另一態樣中，免疫腫瘤藥劑為 PD-1 拮抗劑，諸如拮抗 PD-1 抗體。適當的 PD-1 抗體包括例如 OPDIVO (納武單抗)、KEYTRUDA (派姆單抗) 或 MEDI-0680 (AMP-514; WO2012/145493)。免疫腫瘤藥劑還可包括匹定利珠單抗 (pidilizumab) (CT-011)，儘管其對 PD-1 結合的特異性已受到質疑。另一種靶向 PD-1 受體的方法是由融合至 IgG1 Fc 部分的 PD-L2 (B7-DC) 細胞外域組成的重組蛋白，其稱為 AMP-224。

在另一態樣中，免疫腫瘤藥劑為 PD-L1 拮抗劑，諸如拮抗 PD-L1 抗體。適當的 PD-L1 抗體包括例如 TECENTRIQ (阿特珠單抗) (RG7446; WO2010/077634)、度伐魯單抗 (MEDI4736)、BMS-936559 (WO2007/005874) 及 MSB0010718C (WO2013/79174)。

在另一態樣中，免疫腫瘤藥劑為 LAG-3 拮抗劑，諸如拮抗 LAG-3 抗體。適當的 LAG3 抗體包括例如 BMS-986016 (WO2010/19570, WO2014/08218)、或 IMP-731 或 IMP-321 (WO2008/132601, WO2009/44273)。

在另一態樣中，免疫腫瘤藥劑為 CD137 (4-1BB) 促效劑諸如促效 CD137 抗體。適當的 CD137 抗體包括例如烏瑞蘆單抗 (urelumab) 及 PF-05082566 (WO2012/32433)。

在另一態樣中，免疫腫瘤藥劑為 GITR 促效劑諸如促效 GITR 抗體。適當的 GITR 抗體包括例如 BMS-986153、BMS-986156、TRX-518 (WO2006/105021, WO2009/009116) 及 MK-4166 (WO20l1/028683)。

在另一態樣中，免疫腫瘤藥劑為 IDO 拮抗劑。適當的 IDO 拮抗劑包括例如 INCB-024360 (WO2006/122150, WO2007/75598, WO2008/36653, WO2008/36642)、吲哚莫德 (indoximod) 或 NLG-919 (WO2009/73620, WO2009/1156652, WO2011/56652, WO2012/142237)。

在另一態樣中，免疫腫瘤藥劑為 OX40 促效劑諸如促效劑 OX40 抗體。適當的 OX40 抗體包括例如 MEDI-6383 或 MEDI-6469。在另一態樣中，免疫腫瘤藥劑為 OX40L 拮抗劑，諸如拮抗 OX40 抗體。適當的 OX40L 拮抗劑包括例如 RG-7888 (WO06/029879)。

在另一態樣中，免疫腫瘤藥劑為 CD40 促效劑諸如促效 CD40 抗體。在又一實施例中，免疫腫瘤藥劑為 CD40 拮抗劑，諸如拮抗 CD40 抗體。適當的 CD40 抗體包括例如 Lucatumumab 或 Dacetuzumab。

在另一態樣中，免疫腫瘤藥劑為 CD27 促效劑諸如促效 CD27 抗體。適當的 CD27 抗體包括例如 Varlilumab。

在另一態樣中，免疫腫瘤藥劑為 MGA271 (至 B7H3) (WO20l1/109400)。實例

藉由參照以下實例將更充分地理解本發明。然而，申請專利範圍不應被解釋為限於實例的範圍。 1) 製備實例 1.1) 中間體 中間體 1 2- 乙氧基 -2,3,3,3- 四氟 - 丙醯肼

向 2-乙氧基-2,3,3,3-四氟丙酸 [CAS 10186-67-1] (200 mg, 0.92 mmol, 1 eq) 在 EtOH (1.5 ml) 中的溶液中，添加一水合肼 (54.25 mg, 1.1 mmol, 1.2 eq) 並且將混合物加熱至 80℃ 持續 8 小時。將所得無色溶液減壓濃縮並高真空乾燥，以得到白色固體狀標題化合物 (119 mg, 60%)。MS (ESI): 205.1 [M+H] ⁺ _。 中間體 2 1- 乙基 -5,5- 二氟 - 哌啶 -3- 羧酸

步驟 a) 1- 乙基 -5.5- 二氟 - 哌啶 -3- 甲酸甲酯

在 25℃，向 5,5-二氟哌啶-3-甲酸甲酯；鹽酸鹽 [CAS 1359656-87-3] (370.0 mg, 1.72 mmol, 1.0 eq) 及 TEA (0.24 mL, 1.72 mmol, 1.0 eq) 在 MeOH (5 mL) 中之溶液中添加乙醛 (0.14 mL, 2.57 mmol, 1.5 eq) 且將混合物攪拌 1 小時。在 25℃ 添加氰基硼氫化鈉 (323.48 mg, 5.15 mmol, 3.0 eq)，然後將混合物在 25℃ 攪拌 2 小時。將反應混合物真空濃縮，且將剩餘殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化 (PE/EtOAc = 1:0 至 5:1)，以得到黃色油狀標題化合物 (300.0 mg，1.45 mmol，84％產率)。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 3.72 (s, 3H), 3.19 - 3.15 (m, 1H), 3.13 - 3.05 (m, 1H), 2.95 - 2.84 (m, 1H), 2.65 - 2.48 (m, 2H), 2.47 - 2.37 (m, 1H), 2.31 - 2.18 (m, 1H), 2.14 (t, J = 11.2 Hz, 1H), 1.97 - 1.80 (m, 1H), 1.11 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。

步驟 b) 1- 乙基 -5,5- 二氟 - 哌啶 -3- 羧酸

向 1-乙基-5,5-二氟-哌啶-3-甲酸甲酯 (340.0 mg, 1.64 mmol, 1.0 eq) 在 THF (10 mL) 中之溶液中滴加 LiOH 一水合物 (131.26 mg, 3.28 mmol, 2.0 eq) 在水 (2 mL) 中的溶液，且將反應混合物在 20℃ 攪拌 2 小時。將混合物倒入水 (10 mL) 中並藉由添加 HCl (1 M) 將 pH 調節至 5。然後將混合物凍乾，以得到含有標題化合物的白色固體 (300 mg)。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 4.04 - 3.58 (m, 2H), 3.57 - 2.96 (m, 5H), 2.87 - 2.08 (m, 2H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 中間體 3 2-[4-( 氯甲基 ) 苯基 ]-3- 氟 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶

步驟 a) [4-[3- 氟 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲醇

在氮氣氛下在 25℃，向 4-(羥甲基)苯基硼酸 [CAS# 59016-93-2] (1000.0 mg, 6.58 mmol, 1.0 eq)、Pd(dppf)Cl ₂(70.03 mg, 0.66 mmol, 0.1 eq) 及碳酸鉀 (2728.47 mg, 19.74 mmol, 3.0 eq) 在水 (3 mL) 及 1,4-二㗁烷 (24 mL) 的溶劑混合物中的混合物，添加 2-溴-3-氟-5-(三氟甲基)吡啶 [CAS# 89402-29-9] (1926.66 mg, 7.9 mmol, 1.2 eq)。將反應混合物在 90℃ 攪拌 12 小時。然後添加水 (50 mL) 且將混合物用 EtOAc (100 mL x 3) 萃取。將合併之萃取物用鹽水 (200 mL x 2) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄)，並濃縮，且將剩餘殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化 (PE/EtOAc = 1:0 至 3:1)，以得到黃色固體狀標題化合物 (1650.0 mg，6.08 mmol，92% 產率)。MS (ESI): 272.1 [M+H] ⁺。

步驟 b) 2-[4-( 氯甲基 ) 苯基 ]-3- 氟 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶

在 25℃，向 [4-[3-氟-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲醇 (1600.0 mg, 5.9 mmol, 1.0 eq) 在 DCM (10 mL) 中的溶液中添加亞硫醯氯 (1.39 mL, 19.11 mmol, 3.0 eq)，且將混合物在 25℃ 攪拌 1 小時。添加水 (30 mL) 且將混合物用 EtOAc (50 mL x 3).萃取。將合併之萃取物用鹽水 (100 mL x 2) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄)，並濃縮，以得到黃色固體狀標題化合物 (1600.0 mg)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ = 8.96 (s, 1H), 8.43 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 8.00 – 7.96 (m, 2H), 7.63 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 4.85 (s, 2H)。 中間體 4 2-[4-( 溴甲基 ) 苯基 ]-5-( 三氟甲基 ) 四唑

將 2-(對甲苯基)-5-(三氟甲基)四唑 [CAS#1817810-19-7] (300.0 mg, 1.31 mmol, 1.0 eq)、N-溴琥珀醯亞胺 (304.22 mg, 1.71 mmol, 1.3 eq) 及 AIBN (107.95 mg, 0.66 mmol, 0.5 eq) 在氯苯 (10 mL) 中的溶液在 100℃ 攪拌 12 小時。將混合物濃縮，且將剩餘殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化 (PE/EtOAc = 1:0 至 50:1)，以得到黃色油狀標題化合物 (200.0 mg，0.65 mmol，50％產率)。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 8.17 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.64 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.56 (s, 2H)。 中間體 5 1-[4-( 溴甲基 ) 苯基 ]-3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑

類似於中間體 4，由 1-(對甲苯基)-3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑 [CAS# 2850321-26-3] 製備標題化合物，並以白色固體形式获得。MS (ESI): 308.0 [M+H] ⁺。 中間體 6 2-[4-( 氯甲基 ) 苯基 ]-4-( 三氟甲基 ) 吡啶；鹽酸鹽

類似於中間體 3，由 [4-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲醇 [CAS# 1185444-74-9] 製備標題化合物，並以白色固體形式獲得。MS (ESI): 272.0 [M+H] ⁺。 中間體 7 2-[4-( 氯甲基 ) 苯基 ]-5-(1,1- 二氟乙基 ) 吡啶

步驟 a) [4-[5-(1,1- 二氟乙基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲醇

類似於中間體 3 步驟 a，由 2-溴-5-(1,1-二氟乙基)吡啶 [CAS# 1211521-60-6] 及 4-(羥甲基)苯基硼酸 [CAS# 59016-93-2] 製備標題化合物並以淺黃色固體形式获得。MS (ESI): 250.3 [M+H] ⁺。

步驟 b) 2-[4-( 氯甲基 ) 苯基 ]-5-(1,1- 二氟乙基 ) 吡啶

類似於中間體 3 步驟 b，由 [4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲醇製備標題化合物，並以淺黃色固體形式获得。MS (ESI): 268.1 [M+H] ⁺。 中間體 8 2-[4-( 氯甲基 ) 苯基 ]-5-( 二氟甲基 ) 吡啶

步驟 a) [4-[5-( 二氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲醇

類似於中間體 3 步驟 a，由 2-溴-5-(二氟甲基)吡啶 [CAS# 1221272-81-6] 及 4-(羥甲基)苯基硼酸 [CAS# 59016-93-2] 製備標題化合物並以白色固體形式获得。MS (ESI): 236.1 [M+H] ⁺。

步驟 b) 2-[4-( 氯甲基 ) 苯基 ]-5-( 二氟甲基 ) 吡啶

類似於中間體 3 步驟 b，由 [4-[5-(二氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲醇製備標題化合物，並以淺黃色固體形式获得。MS (ESI): 254.1 [M+H] ⁺。 中間體 9 2-[4-( 氯甲基 ) 苯基 ]-5-( 二氟甲氧基 ) 吡啶

步驟 a) [4-[5-( 二氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲醇

類似於中間體 3 步驟 a，由 2-溴-5-(二氟甲氧基)吡啶 [CAS# 845827-14-7] 及 4-(羥甲基)苯基硼酸 [CAS# 59016-93-2] 製備標題化合物並以白色固體形式获得。MS (ESI): 252.1 [M+H] ⁺。

步驟 b) 2-[4-( 氯甲基 ) 苯基 ]-5-( 二氟甲氧基 ) 吡啶

類似於中間體 3 步驟 b，由 [4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲醇製備標題化合物，並以淺黃色固體形式获得。MS (ESI): 270.0 [M+H] ⁺。 中間體 10 1-[4-( 溴甲基 ) 苯基 ]-4-( 三氟甲氧基 ) 吡唑

步驟 a) O-[1-( 對甲苯基 ) 吡唑 -4- 基 ] 甲硫基甲烷硫代酸酯

在 25℃，向 1-(對甲苯基)吡唑-4-醇 (2300.0 mg, 13.2 mmol, 1.0 eq) [CAS# 77458-34-5] 及 3-甲基咪唑-3-鎓-1-甲酸二硫代甲酯 (3431.78 mg, 19.8 mmol, 1.5 eq) 在 MeCN (40 mL) 中的溶液中，加入 TEA (3.68 mL, 26.41 mmol, 2.0 eq)，且將混合物在 25℃ 攪拌 1 小時。將反應混合物倒入水 (40 mL) 中且将所得混合物用 EtOAc (30 mL x 3) 萃取。將合併之有机萃取物用鹽水 (100 mL) 洗滌、乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮。將剩余殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化 (PE/EtOAc = 1:0 至 10:1)，以得到黄色固体狀標題化合物 (2.7 g，10.21 mmol，76% 產率)。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 8.04 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.57 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.29 (s, 2H), 2.71 (s, 3H), 2.42 (s, 3H)。

步驟 b) 3,5- 二溴 -1-( 對甲苯基 )-4-( 三氟甲氧基 ) 吡唑及 5- 溴 -1-( 對甲苯基 )-4-( 三氟甲氧基 ) 吡唑

将 1,3-二溴-5,5-二甲基咪唑烷-2,4-二酮 (8652.12 mg, 30.26 mmol, 4.0 eq) 及 HF-吡啶 (1165.27 mg, 7.57 mmol, 1.0 eq) 在 DCM (15 mL) 中的溶液在 -70℃ 攪拌 0.5 小時。然後在 -70℃ 滴加 DCM (15 mL) 中的 O-[1-(對甲苯基)吡唑-4-基]甲硫基甲烷硫代酸酯 (2.0 g, 7.57 mmol, 1.0 eq)，且將混合物溫熱至 0℃ 並在 0℃ 攪拌 0.5 小時。將混合物倒入飽和 NaHCO ₃(80 mL) 水溶液中，且将所得混合物用 EtOAC (3 x 60 mL) 萃取。将合併之有機萃取物用鹽水 (200 mL) 洗滌，經无水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將剩餘殘餘物藉由矽膠管柱層析来純化 (PE/EtOAc = 1:0 to 10:1)，以得到黃色固體狀 3,5-二溴-1-(對甲苯基)-4-(三氟甲氧基)吡唑 (1550.0 mg，3.88 mmol，51％產率) 與 5-溴-1-(對甲苯基)-4-(三氟甲氧基)吡唑 (600.0 mg，1.87 mmol，25％產率) 的混合物。MS (ESI): 400.9 [M+H] ⁺及 323.0 [M+H] ⁺。

步驟 c)1-( 對甲苯基 )-4-( 三氟甲氧基 ) 吡唑

將 3,5-二溴-1-(對甲苯基)-4-(三氟甲氧基)吡唑 (1550.0 mg, 3.88 mmol, 1.0 eq) 及 5-溴-1-(對甲苯基)-4-(三氟甲氧基)吡唑 (600.0 mg, 1.87 mmol, 0.48 eq) 的混合物在 MeOH (5 mL) 中的溶液在氮氣氛下添加至 Pd/C (500.0 mg, 18.69 mmol, 4.82 eq) 在 MeOH (5 mL) 中的懸浮液中。將反應混合物除氣並用氫氣充填三次，且將混合物於 25℃ 在氫氣氛下攪拌 1 小時。將混合物用矽藻土過濾並在減壓下濃縮，以得到黃色固體狀標題化合物 (1360.0 mg，5.62 mmol，98% 產率)。MS (ESI): 243.3 [M+H] ⁺。

步驟 d) 1-[4-( 溴甲基 ) 苯基 ]-4-( 三氟甲氧基 ) 吡唑

類似於中間體 4，由 1-(對甲苯基)-4-(三氟甲氧基)吡唑製備標題化合物，並以黃色固體形式獲得。MS (ESI): 323.0 [M+H] ⁺。 中間體 11 1-[4-( 氯甲基 )-3- 氟 - 苯基 ]-4-( 三氟甲基 ) 吡唑

步驟 a) 2- 氟 --4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯甲酸甲酯

在 25℃ 在氮氣氛下，向 4-溴-2-氟苯甲酸甲酯 [CAS# 179232-29-2] (5.14 g, 22.05 mmol, 1.0 eq)、4-(三氟甲基)-1H-吡唑 [CAS# 52222-73-8] (3.0 g, 22.05 mmol, 1.0 eq) 及反式-N,N-二甲基環己烷-1,2-二胺 (6.27 g, 44.09 mmol, 2.0 eq) 在 DMSO (50 mL) 中的溶液中，添加 CuI (4.2 g, 22.05 mmol, 1.0 eq)，且將混合物在 100℃ 攪拌 3 小時。然後將混合物用矽藻土過濾並向濾液中添加水 (200 mL)。將混合物用 EtOAc (150 mL × 3) 萃取，且將有機萃取物用鹽水 (300 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮。將剩余殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化 (PE/EtOAc = 10:1)，以得到黄色固体狀標題化合物 (4.4 g，15.27 mmol，69% 產率)。MS (ESI): 289.1 [M+H] ⁺。

步驟 b) [2- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲醇

在 0℃，向 2-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基] (3400.0 mg, 11.8 mmol, 1.0 eq) 在 THF (40 mL) 中的溶液中添加二異丁基氫化鋁 (50.0 mL, 50.0 mmol, 4.24 eq)，然後將混合物溫熱至 25℃ 並攪拌 12 小時。將反應混合物倒入水 (100 mL) 中且將所得混合物用 EtOAc (300 mL) 萃取。將有機相用鹽水 (100 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮，以得到白色固體狀標題化合物 (2500.0 mg，9.61 mmol，79% 產率)，其未經進一步純化即用於下一步驟。MS (ESI): 261.1 [M+H] ⁺。

步驟 c) 1-[4-( 氯甲基 )-3- 氟 - 苯基 ]-4-( 三氟甲基 ) 吡唑

類似於中間體 3 步驟 b，由 [2-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲醇製備標題化合物，並以棕色油狀物形式获得。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 8.00 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.38 – 7.27 (m, 3H), 4.47 (s, 2H)。 中間體 12 3-( 氯甲基 )-2- 氟 -6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 吡啶

步驟 a) 2- 氟 --6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 甲酸甲酯

將 4-(三氟甲基)-1H-吡唑 (3.0 g, 22.05 mmol, 1.0 eq)、碳酸鉀 (9140.61 mg, 66.14 mmol, 3.0 eq) 及 2,6-二氟吡啶-3-甲酸甲酯 (4579.89 mg, 26.46 mmol, 1.2 eq) 在 DMSO (60 mL) 中的混合物在 20℃ 攪拌 8 小時。將混合物倒入水 (300 mL) 中且將所得混合物用 EtOAc (500 mL) 萃取。將有机萃取物用鹽水 (300 mL) 洗滌、乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮。將剩餘殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化 (PE/EtOAc = 20:1 至 5:1)，以得到淺黃色固體，將其藉由反相層析來進一步純化 (水 (含甲酸)/MeCN = 5:1 至 1:1)，以得到淺黃色固體狀標題化合物 (2.1 g，7.26 mmol，32％產率)。MS (ESI): 290.0 [M+H] ⁺。

步驟 b) [2- 氟 -6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]-3- 吡啶基 ] 甲醇

類似於中間體 11 步驟 b，由 2-氟-6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]吡啶-3-甲酸甲酯製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 262.1 [M+H] ⁺。

步驟 c) 3-( 氯甲基 )-2- 氟 -6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 吡啶

類似於中間體 3 步驟 b，由 [2-氟-6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲醇製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 280.1 [M+H] ⁺。 中間體 13 5-( 氯甲基 )-2-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 吡啶

步驟 a) 6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 甲酸甲酯

在 25℃，向 4-(三氟甲基)-1H-吡唑 (2.0 g, 14.7 mmol, 1.0 eq) 及碳酸鉀 (6.1 g, 44.1 mmol, 3.0 eq) 在 DMF (48 mL) 中的混合物中，滴加 6-氯菸酸甲酯 (2.27 g, 13.2 mmol, 0.9 eq) 在 DMF (24 mL) 中的溶液，然後將混合物在 100℃ 攪拌 12 小時。添加水 (50 mL) 且將混合物用 EtOAc (30 mL x 3) 萃取。將有机萃取物用鹽水 (30 mL x 5) 洗滌、乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮。將剩余殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化 (PE/EtOAc = 1:0 至 10:1)，以得到白色固体狀標題化合物 (1650.0 mg，6.08 mmol，41% 產率)。MS (ESI): 272.2 [M+H] ⁺。

步驟 b) 6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]-3- 吡啶基 ] 甲醇

類似於中間體 11 步驟 b，由 6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]吡啶-3-甲酸甲酯製備標題化合物，並以黃色固體形式獲得。MS (ESI): 244.3 [M+H] ⁺。

步驟 c) 5-( 氯甲基 )-2-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 吡啶

類似於中間體 3 步驟 b，由 6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲醇製備標題化合物，並以黃色油狀物形式獲得。MS (ESI): 262.2 [M+H] ⁺。 中間體 14 1-[4-( 氯甲基 )-2- 氟 - 苯基 ]-4-( 三氟甲基 ) 吡唑

步驟 a) 3- 氟 --4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯甲酸甲酯

將 4-(三氟甲基)-1H-吡唑 (200.0 mg, 1.47 mmol, 1.0 eq)、碳酸鉀 (609.37 mg, 4.41 mmol, 3.0 eq) 及 3,4-苯甲酸甲酯 (379.48 mg, 2.2 mmol, 1.5 eq) 在 DMF (10 mL) 中的混合物在 100℃ 攪拌 8 小時。將反應混合物倒入水 (30 mL) 中且將所得混合物用 EtOAc (50 mL) 萃取。將有机相用鹽水 (50 mL) 洗滌、乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮。將剩余殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化 (PE/EtOAc = 1:0 至 5:1)，以得到淺黄色固体狀標題化合物 (400.0 mg，1.39 mmol，80% 產率)。MS (ESI): 289.0 [M+H] ⁺。

步驟 b) [3- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲醇

類似於中間體 11 步驟 b，由 3-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯甲酸甲酯製備標題化合物，並以白色固體形式獲得。MS (ESI): 261.0 [M+H] ⁺。

步驟 c) 1-[4-( 氯甲基 )-2- 氟 - 苯基 ]-4-( 三氟甲基 ) 吡唑

類似於中間體 3 步驟 b，由 [3-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲醇製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 279.0 [M+H] ⁺。 中間體 15 4-[4-( 氯甲基 ) 苯基 ]-1-( 三氟甲基 ) 吡唑

步驟 a) [4-[1-( 三氟甲基 ) 吡唑 -4- 基 ] 苯基 ] 甲醇

將碳酸鉀 (2571.19 mg, 18.6 mmol, 2.5 eq)、4-溴苄醇 [CAS# 873-75-6] (1391.8 mg, 7.44 mmol, 1.0 eq)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1-(三氟甲基)吡唑 [CAS# 1046831-98-4] (1950.0 mg, 7.44 mmol, 1.0 eq)、1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀 (II) 二氯甲烷錯合物 (607.24 mg, 0.74 mmol, 0.1 eq) 在水 (1 mL) 及 1,4-二㗁烷 (8 mL) 的混合物中的混合物在 90℃ 在氮氣氛下攪拌 3 小時。將反應混合物真空濃縮，且將剩餘殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化，以得到黃色油狀標題化合物 (1620.0 mg，6.69 mmol，90% 產率)。MS (ESI): 243.1 [M+H] ⁺。

步驟 b) 4-[4-( 氯甲基 ) 苯基 ]-1-( 三氟甲基 ) 吡唑

在 20℃，向 [4-[1-(三氟甲基)吡唑-4-基]苯基]甲醇 (1600.0 mg, 6.61 mmol, 1.0 eq) 在 DCM (10 mL) 中的溶液中，緩慢添加亞硫醯氯 (1.4 mL, 19.82 mmol, 3.0 eq)，且將溶液在 20℃ 攪拌 1 小時。將反應混合物真空濃縮，以得到黃色固體狀粗標題化合物 (1710.0 mg，6.56 mmol，99% 產率)，其不經進一步純化即使用。MS (ESI): 261.1 [M+H] ⁺。 中間體 16 5,5- 二氟 -1-(2- 甲氧基乙基 ) 哌啶 -3- 羧酸

步驟 a) 5.5- 二氟 -1-(2- 甲氧基乙基 ) 哌啶 -3- 甲酸甲酯

在 20℃，向 5,5-二氟哌啶-3-甲酸甲酯鹽酸鹽 (1100.0 mg, 5.1 mmol, 1.0 eq)、2-溴乙基甲醚 (1.44 mL, 15.3 mmol, 3.0 eq)、碳酸鉀 (2115.1 mg, 15.3 mmol, 3.0 eq) 在 MeCN (20 mL) 中的混合物中，添加碘化鉀 (0.14 mL, 2.55 mmol, 0.5 eq)，且將混合物在 80℃ 攪拌 12 小時。將反應混合物倒入水 (50 mL) 中，且將所得混合物用乙酸乙酯 (50 mL×3) 萃取。將合併之有机萃取物用鹽水 (100 mL) 洗滌、乾燥 (Na ₂SO ₄) 並真空濃縮。將剩余殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化 (PE/EtOAc = 100:1 至 5:1)，以得到黄色油狀標題化合物 (1200.0 mg，5.06 mmol，99% 產率)。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 3.71 (s, 3H), 3.55 - 3.49 (m, 2H), 3.35 (s, 3H), 3.22 - 3.09 (m, 2H), 2.95 - 2.86 (m, 1H), 2.82 - 2.65 (m, 2H), 2.48 - 2.35 (m, 2H), 2.34 - 2.27 (m, 1H), 1.97 - 1.80 (m, 1H)。

步驟 b) 5.5- 二氟 -1-(2- 甲氧基乙基 ) 哌啶 -3- 羧酸

向 5,5-二氟-1-(2-甲氧基乙基)哌啶-3-甲酸甲酯 (500.0 mg, 2.11 mmol, 1.0 eq) 在 THF (10 mL) 中的溶液中，滴加 LiOH-H ₂O (168.61 mg, 4.22 mmol, 2.0 eq) 在水 (2 mL) 中的溶液，且將反應混合物在 20℃ 攪拌 2 小時。將反應混合物倒入水 (10 mL) 中並藉由添加 HCl (1M) 將混合物的 pH 調節至 5。將混合物凍乾，以得到白色固體狀 (含有 LiCl) 標題化合物 (450.0 mg)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ = 3.87 - 3.71 (m, 4H), 3.55 - 3.47 (m, 1H), 3.38 - 3.34 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.17 - 3.15 (m, 1H), 2.43 - 2.41 (m, 2H), 2.29 - 2.08 (m, 1H)。 1.2) 實例的合成實例 1 3- 胺基 -8-(5- 三級丁基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-5,5,7- 三氟 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) 1-(2- 胺基 -4- 溴 -5- 氟 - 苯基 )-2- 氯 - 乙酮

將氯乙腈 (4.6 mL, 72.63 mmol, 1.38 eq) 滴加至 AlCl ₃(8.84 g, 66.31 mmol, 1.26 eq) 及 BCl ₃(1M in DCM, 61.05 mL, 61.05 mmol, 1.16 eq) 在甲苯 (200 mL) 中的混合物中，且將混合物在 0℃ 在氮氣氛下攪拌 0.5 小時。添加 3-溴-4-氟苯胺 (6.33 mL, 52.63 mmol, 1 eq) 且將反應混合物在 20℃ 攪拌 0.5 小時，然後加熱至 70℃ 持續 16 小時。然後在 50℃ 歷經 30 分鐘添加 HCl (100 mL)。將混合物冷卻至室溫並用 DCM (2 x 30 mL) 萃取。將合併之有機萃取物經 Na ₂SO ₄乾燥，且將溶劑在減壓下去除，以得到殘餘物，其藉由製備型 HPLC 來純化。獲得棕色固體狀標題化合物 (3.3 g，12.38 mmol，23%產率)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.76 - 7.68 (m, 1H), 7.34 - 7.20 (m, 2H), 7.18 - 7.14 (m, 1H), 5.07 - 4.99 (m, 2H)

步驟 b) 2- 乙醯胺基 -2-[2-(2- 胺基 -4- 溴 -5- 氟 - 苯基 )-2- 側氧 - 乙基 ] 丙二酸二乙酯

在 20℃ 將乙醇鈉 (21 wt. % 在乙醇中，1.09 mL，13.9 mmol，1.61 eq) 添加至 2-乙醯胺基丙二酸二乙酯 (1.87 g, 8.63 mmol, 1 eq) 在乙醇 (20 mL) 中的溶液中，且將混合物攪拌 0.5 小時。添加碘化鈉 (0.26 g, 1.72 mmol, 0.200 eq) 及 1-(2-胺基-4-溴-5-氟-苯基)-2-氯-乙酮 (2.3 g, 8.63 mmol, 1 eq) 在 THF (10 mL) 中的溶液，且將所得混合物在 50℃ 攪拌 16 小時。將反應混合物添加至冰/水 (15 mL) 中，且將所得混合物用乙酸乙酯 (3 x 20 mL) 萃取。將合併之有機層用鹽水 brine (2 x 20 mL) 洗滌，經無水硫酸鈉乾燥並真空濃縮，以得到粗產物，將其藉由矽膠管柱層析來純化 (5％至 40％ EtOAc 在 PE 中)，以得到棕色油狀標題化合物 (2.5 g，5.59 mmol，60％產率)。MS (ESI): 447.0 [M +H] ⁺。

步驟 c) 2- 胺基 -4-(2- 胺基 -4- 溴 -5- 氟 - 苯基 )-4- 側氧 - 丁酸

將 2-乙醯胺基-2-[2-(2-胺基-4-溴-5-氟-苯基)-2-側氧-乙基]丙二酸二乙酯 (1.95 g, 4.36 mmol, 1 eq) 在鹽酸 (0.218 M, 20.0 mL, 4.36 mmol, 1 eq) 中的溶液在 110℃ 攪拌 16 小時。將混合物真空濃縮以獲得棕色固體 (1.33 g)，將其溶解在水中。然後用 NaOH (2 M) 將水溶液的 pH 調節至 7，且將水溶液原樣用於下一反應步驟。

步驟 d) 4-(2- 胺基 -4- 溴 -5- 氟 - 苯基 )-2-( 三級丁氧基羰基胺基 )-4- 側氧 - 丁酸

向 2-胺基-4-(2-胺基-4-溴-5-氟-苯基)-4-側氧-丁酸 (1.33 g, 4.36 mmol, 1 eq) 及二-三級丁基二碳酸酯 (1.14 g, 5.23 mmol, 1.2 eq) 在二㗁烷 (15 mL) 及水 (10 mL) 的溶劑混合物中的溶液中，加入 TEA (1.21 mL, 8.72 mmol, 2 eq) 且將混合物在 25℃ 攪拌 16 小時。添加冰水 (10 mL) 及 EtOAc (20 mL) 且用 2N HCl 將溶液的 pH 調節至～4。將有機相分離，用鹽水洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並真空蒸發。將剩餘殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化 (20% 至 40% EtOAc (含 0.1% AcOH) 在 PE 中)，以得到棕色油狀標題化合物 (1.2 g，2.96 mmol，56% 產率)。MS (ESI): 351.0 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 e) N-(8- 溴 -7- 氟 -2,5- 二側氧 -3,4- 二氫 -1H-1- 苯并吖呯 -3- 基 ) 胺甲酸三級丁酯

向 4-(2-胺基-4-溴-5-氟-苯基)-2-(三級丁氧基羰基胺基)-4-側氧-丁酸 (1.0 g, 2.47 mmol, 1 eq) 及 DIPEA (1.29 mL, 7.4 mmol, 3 eq) 在 DCM (20 mL) 中的溶液中，添加 T3P (2.36 g, 3.7 mmol, 1.5 eq)，且將反應混合物在 20℃ 攪拌 16 小時。添加水 (30 mL) 且將混合物用 EtOAc (10 mL x 2) 萃取。將有機萃取物用鹽水 (10 mL x 3) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並真空濃縮，以提供黃色固體狀標題化合物 (870 mg，2.25 mmol，91% 產率)。MS (ESI): 330.7 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 f) N-[8- 溴 -7- 氟 -2,5- 二側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

在 0℃，向 N-(8-溴-7-氟-2,5-二側氧-3,4-二氫-1H-1-苯并吖呯-3-基)胺甲酸三級丁酯 (900.0 mg, 2.32 mmol, 1 eq) 在 DMF (30 mL) 中的溶液中，加入 K ₂CO ₃(706.76 mg, 5.11 mmol, 2.2 eq) 及 4-(三氟甲氧基)芐基溴 (0.37 mL, 2.32 mmol, 1 eq)，然後將反應混合物在 25℃ 攪拌 16 小時。添加水 (10 mL) 且將混合物用 EtOAc (10 mL x 3) 萃取。將合併之萃取物經 Na ₂SO ₄乾燥並濃縮以獲得液體，將其藉由矽膠管柱層析來混合物 (4% 至 80% EtOAc 在 PE 中)，以得到黃色油狀標題化合物 (1.07 g，1.91 mmol，63% 產率)。MS (ESI): 504.9 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 g) N-[8- 溴 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

在 0℃ 至 10℃ 在氮氣氛下，向 N-[8-溴-7-氟-2,5-二側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (2.0 g, 2.85 mmol, 1 eq) 中，滴加 DAST (20.0 mL)，且將混合物在 25℃ 攪拌 12 小時。然後滴加 MeOH (60 mL) 且將混合物濃縮。將粗材料溶解於 EtOAc (30 mL) 中，且添加水 (20 mL)。藉由添加 NaHCO ₃，將混合物的 pH 調節至 8。將相分離，且將有機相用鹽水 (100 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄) 且真空濃縮。將剩余殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化 (MeCN/水 (含甲酸) = 1:5 至 4:1)，以獲得淺黄色固体狀標題化合物 (0.8 g，1.37 mmol，48% 產率)。MS (ESI): 528.9 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 h) 3-( 三級丁氧基羰基胺基 )-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 甲酸乙酯

向 N-[8-溴-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (480.0 mg, 0.820 mmol, 1 eq)、1,3-雙-(二苯基膦基)丙烷 (67.88 mg, 0.160 mmol, 0.200 eq) 及二乙酸鈀 (18.47 mg, 0.080 mmol, 0.100 eq) 在乙醇 (6 mL) 及 DMF (12 mL) 的溶劑混合物中的混合物中，添加 TEA (0.34 mL, 2.47 mmol, 3 eq)。然後將混合物用氮氣除氣三次，然後以 CO (230.41 mg, 8.23 mmol, 10 eq) 充填三次，然後在 80℃ 在 CO (45 psi) 下攪拌 16 小時。添加水 (10 mL)，且將混合物用 EtOAc (10 mL x 3) 萃取。將合併之萃取物經 Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。將剩餘殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化 (4% 至 80% EtOAc 在 PE 中)，以得到黃色油狀標題化合物 (437 mg，0.760 mmol，87% 產率)。MS (ESI): 521.0 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 i) 3-( 三級丁氧基羰基胺基 )-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 羧酸

在 0℃，向 3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-甲酸乙酯 (890.0 mg, 1.54 mmol, 1 eq) 在 THF (8 mL) 及水 (8 mL) 的溶劑混合物中的溶液中，添加 LiOH (147.9 mg, 6.18 mmol, 4 eq)，然後將反應混合物在 20℃ 攪拌 4 小時。然後藉由添加 1N HCl 將混合物的 pH 調節至 3 至 4。將該混合物用 EtOAc (10 mL x 3) 萃取，且將萃取物經 Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮，以得到黃色泡沫狀標題化合物 (790 mg，1.44 mmol，84% 產率)。MS (ESI): 493.0 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 j) N-[5,5,7- 三氟 -8-( 肼羰基 )-2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

向 3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-羧酸 (430.0 mg, 0.780 mmol, 1 eq) 及 T3P (748.41 mg, 1.18 mmol, 1.5 eq) 在 DCM (10 mL) 中的溶液中，添加 DIPEA (0.41 mL, 2.35 mmol, 3 eq) 及一水合肼 (0.16 mL, 3.14 mmol, 4 eq) 且將反應混合物在 20℃ 攪拌 16 小時。將反應混合物用水 (5 mL) 稀釋並用 DCM (5 mL x 3) 萃取。將合併之萃取物用鹽水 (5 mL x 3) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮，且將剩餘殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化 (4% 至 40% EtOAc 在 PE 中)，以得到黃色油狀標題化合物 (220 mg，0.390 mmol，49% 產率)。MS (ESI): 507.0 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 k) N-[8-[(2,2- 二甲基丙丙醯胺基 ) 胺甲醯基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

在 25℃，向 N-[5,5,7-三氟-8-(肼羰基)-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (70.0 mg, 0.120 mmol, 1 eq) 在 THF (60 mL) 中的溶液中，加入 DIPEA (0.07 mL, 0.370 mmol, 3 eq)、HATU (56.79 mg, 0.150 mmol, 1.2 eq) 及三甲基乙酸 (13.98 mg, 0.140 mmol, 1.1 eq) 且將混合物在 25℃ 攪拌 4 小時。將反應混合物真空濃縮以除去 THF。然後加入 EtOAc (20 mL)，且將混合物用水 (10 mL) 及鹽水 (10 mL x 3) 洗滌，經無水 Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮以獲得粗產物。將粗產物藉由製備型 TLC 純化 (PE/EA = 1: 2)，以獲得黃色油狀標題化合物 (45 mg，0.070 mmol，39% 產率)。MS (ESI): 591.0 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 l) N-[8-(5- 三級丁基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

在 25℃，向 N-[8-[(2,2-二甲基丙醯胺基)胺甲醯基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (30.0 mg, 0.050 mmol, 1 eq) 在甲苯 (40 mL) 中的溶液中，添加 Burgess 試劑 (44.23 mg, 0.190 mmol, 4 eq) 且將反應混合物加熱至 100℃ 持續 16 小時。然後添加水 (10 mL) 且將混合物用 EtOAc (10 mL x 3) 萃取。將合併之萃取物用鹽水 (10 mL x 3) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並真空濃縮，以得到黃色油狀標題化合物 (30 mg，0.050 mmol，84% 產率)。MS (ESI): 573.0 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 m) 3- 胺基 -8-(5- 三級丁基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-5,5,7- 三氟 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (30.0 mg, 0.05 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4 M, 2.0 mL, 8.0 mmol, 167.62 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 2 小時。將混合物真空濃縮且將剩餘殘餘物藉由製備型 HPLC 純化以獲得黃色油狀標題化合物 (12.4 mg，0.020 mmol，47% 產率)。MS (ESI): 529.5 [M+H] ⁺。實例 2 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

步驟 a) N-[8-[[(2- 氰基 -2- 甲基 - 丙醯基 ) 胺基 ] 胺甲醯基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

向 2-氰基-2,2-二甲基乙酸 (0.05 mL, 0.51 mmol, 1.7 eq) 在 THF (1 mL) 中的溶液中，添加 DIPEA (0.13 mL, 0.91 mmol, 3.0 eq) 及 T3P (345.46 mg, 0.45 mmol, 1.5 eq) 且將混合物在 15℃ 攪拌 15 分鐘。然後在 15℃ 添加 N-[5,5,7-三氟-8-(肼羰基)-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (實例 1，步驟 j) (170.0 mg, 0.3 mmol, 1.0 eq) 且將反應混合物在 20℃ 攪拌 16 小時。將反應混合物真空濃縮以除去 THF，然後將其用 EtOAc (20 mL) 稀釋，用 H ₂O (10 mL)、鹽水 (10 mL x 3) 洗滌並經無水 Na ₂SO ₄乾燥。將有機層真空濃縮，以獲得含有標題化合物的黃色油狀物 (310.0 mg)，其無需進一步純化即用於下一反應步驟。MS (ESI): 602.1 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 l，自 N-[8-[[(2-氰基-2-甲基-丙醯基)胺基]胺甲醯基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (310.0 mg, 0.47 mmol) 製備標題化合物，並以黃色油狀物的形式獲得 (120.0 mg，0.19 mmol，36% 產率)。MS (ESI): 584.1 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 c) 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

將 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (60.0 mg, 0.09 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4 M, 4.0 mL, 16.0 mmol, 170.55 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。將混合物真空濃縮且將剩餘殘餘物藉由製備型 HPLC (中性) 純化以獲得純 2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈。對此進行手性 SFC，以獲得 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 B] (8.1 mg，0.02 mmol，16% 產率) (MS (ESI): 540.1 [M+H] ⁺，保留時間 1.40 分鐘 (參見下面的條件) 及白色粉末狀 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 A] (8.5 mg，0.02 mmol)，17% 產率)。MS (ESI): 540.1 [M+H] ⁺；保留時間 1.05 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中，5% 至 40%，流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 3 (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-(5-N- 嗎啉基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-(5-N- 嗎啉基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[5,5,7- 三氟 -8-[( 嗎啉 -4- 羰基胺基 ) 胺甲醯基 ]-2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

在 25℃，向 N-[5,5,7-三氟-8-(肼羰基)-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (實例 1，步驟 j) (100.0 mg, 0.18 mmol, 1.0 eq) 在 DCM (1 mL) 中的溶液中，添加吡啶 (0.5 mL, 6.18 mmol, 34.77 eq) 及嗎啉-4-碳醯氯 (0.06 mL, 0.51 mmol, 2.89 eq)，且將混合物在 30℃ 攪拌 16 小時。將混合物用 EtOAc (10 mL) 稀釋，用 1 N HCl (3 x 8 mL) 洗滌，然後真空濃縮，以獲得黃色油狀標題化合物 (130.0 mg，0.19 mmol，94% 產率)，將無需進一步純化即用於下一反應步驟。MS (ESI): 620.1 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[5,5,7- 三氟 -8-(5-N- 嗎啉基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 l，自 N-[5,5,7-三氟-8-[(嗎啉-4-羰基胺基)胺甲醯基]-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (280.0 mg, 0.41 mmol) 製備標題化合物，並以黃色油狀物的形式獲得 (120.0 mg，0.18 mmol，44% 產率)。MS (ESI): 658.1 [M+H] ⁺。

步驟 c) (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-(5-N- 嗎啉基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-(5-N- 嗎啉基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[5,5,7-三氟-8-(5-N-嗎啉基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (120.0 mg, 0.18 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4 M, 6.0 mL, 24.0 mmol, 131.51 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 1 小時。將混合物真空濃縮且將剩餘殘餘物藉由製備型 HPLC (中性) 純化以獲得純 3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-嗎啉-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮。對此進行手性 SFC，以獲得 (3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-N-嗎啉基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B] (16.7 mg，0.03 mmol，16% 產率 ) (MS (ESI): 558.1 [M+H] ⁺，保留時間 1.53 分鐘 (參見下面的條件)) 及白色粉末狀 (3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-嗎啉-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A](19.5 mg，0.03 mmol，19％產率)。MS (ESI): 540.1 [M+H] ⁺；保留時間 1.86 分鐘 (管柱：Chiralpak AD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中，5% 至 40%，流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 4 (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1,2,2,2- 四氟 -1- 甲氧基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1,2,2,2- 四氟 -1- 甲氧基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) (3S)-3-( 三級丁氧基羰基胺基 )-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 羧酸及 (3R)-3-( 三級丁氧基羰基胺基 )-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 羧酸

向 N-[8-溴-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (實例 1，步驟 l) (490.0 mg, 0.84 mmol, 1.0 eq)、1,3-雙-(二苯基膦基)丙烷 (69.29 mg, 0.17 mmol, 0.2 eq)、二乙酸鈀 (18.86 mg, 0.08 mmol, 0.1 eq) 在 DMF (10 mL) 及水 (2 mL) 的混合物中的混合物中，加入 TEA (0.35 mL, 2.52 mmol, 3.0 eq)，然後將混合物用氮氣除氣三次，接著用 CO 充填三次，然後將混合物在 80℃ 在 CO (45 psi) 下攪拌 16 小時。將該混合物用 1 N HCl (10 mL) 稀釋，並用 EtOAc (3 x 15 mL) 萃取。將有機萃取物經 Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮，且將剩餘殘餘物藉由製備型 HPLC (HCl) 純化以獲得純 3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-羧酸。對其進行手性 SFC，以獲得黃色粉末狀 (3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-羧酸 [異構體 B] (67.1 mg，0.12 mmol，15% 產率) (MS (ESI): 492.9 [M-isobutene+H] ⁺，保留時間 1.47 分鐘 (參見以下條件)) 及白色粉末狀 (3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-羧酸 [異構體 A] (63.7 mg，0.12 mmol，14% 產率)。MS (ESI): 492.9 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 1.19 分鐘 (管柱：Chiralpak IG-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 IPA (0.05%DEA)；梯度溶析：IPA (0.05% DEA)，於 CO ₂中，5% 至 40%，流速：3 mL/min；偵測器：DAD；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 b) N-[(3S)-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -8-[5-(1,2,2,2- 四氟 -1- 甲氧基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯 及 N-[(3R)-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -8-[5-(1,2,2,2- 四氟 -1- 甲氧基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

將 (3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-酮-1-[4-(三氟甲氧基)芐基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-羧酸 [異構體 A] (63 mg, 0.114 mmol, 1 eq)、2,3,3,3-四氟-2-甲氧基-丙醯肼 (中間體 1) (29.03 mg，0.148 mmol，1.3 eq) 及 DIPEA (29.45 mg, 39.01 uL, 0.228 mmol, 2 eq) 在 THF (0.940 mL) 中的混合物在室溫下進行攪拌。添加 HATU (64.99 mg, 0.171 mmol, 1.5 eq) 並繼續攪拌 40 分鐘。將溶液濃縮，以得到淺黃色泡沫，將其溶解在 THF (0.940 mL) 中，並一次性添加 Burgess 試劑 (135.78 mg, 0.570 mmol, 5 eq)，且將混合物攪拌 1 小時。將混合物用 EtOAc 及水稀釋並用 EtOAc 萃取。將合併之有機相經 Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮，且將剩餘殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化 (0% 至 30% EtOAc 在庚烷中)，以得到無色固體狀 N-[5,5,7-三氟-2-側氧-8-[5-(1,2,2,2-四氟-1-甲氧基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (54 mg，68%)。MS (ESI): 647.3 [M-異丁烯+H] ⁺。N-[5,5,7-三氟-2-側氧-8-[5-(1,2,2,2-四氟-1-甲氧基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] 類似地自 (3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-羧酸 [異構體 B] 獲得。MS (ESI): 647.1 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 c) (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1,2,2,2- 四氟 -1- 甲氧基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1,2,2,2- 四氟 -1- 甲氧基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[5,5,7-三氟-2-酮-8-[5-(1,2,2,2-四氟-1-甲氧基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[4-(三氟甲氧基)芐基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (50 mg, 0.071 mmol, 1 eq)與 HCl (2M 在 Et ₂O 中) (53.38 uL, 0.107 mmol, 1.5 eq) 在室溫下在 1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇 (3.56 mL) 中攪拌 2 小時。將反應混合物真空濃縮。將固體懸浮於 DCM 中，並再次濃縮。將該過程重複三次，以在高真空乾燥後得到呈灰白色固體狀鹽酸鹽形式的標題化合物 (45 mg, 97%)。MS (ESI): 603.2 [M+H] ⁺。3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1,2,2,2-四氟-1-甲氧基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B] 類似地自 3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-羧酸 [異構體 B] 以灰白色固體形式獲得。MS (ESI): 603.2 [M+H] ⁺。實例 5 (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[8- 溴 -7- 氟 -2,5- 二側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 f，自 N-(8-溴-7-氟-2,5-二側氧-3,4-二氫-1H-1-苯并吖呯-3-基)胺甲酸三級丁酯 (1000.0 mg, 2.58 mmol) 及 1-(氯甲基)-4-苯氧基-苯 (700.0 mg, 3.2 mmol, 1.24 eq) 製備標題化合物，並以含有標題化合物的淺黃色油狀物形式獲得 (1.6 g)。MS (ESI): 513.0 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[8- 溴 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

在 0-10℃ 在氮氣氛下，向 N-[8-溴-7-氟-2,5-二側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (100.0 mg, 0.18 mmol, 1.0 eq) 中滴加 DAST (5.0 mL)，且將混合物在 25℃ 攪拌 12 小時。將反應藉由添加水 (20 mL) 淬滅並用 EtOAc (2 x 20 mL) 萃取。將合併之萃取物經 Na ₂SO ₄乾燥，並濃縮。將剩餘殘餘物藉由製備型 TLC 純化 (PE/EtOAc = 5:1)，以獲得淺黃色固體狀標題化合物 (50.0 mg，0.08 mmol，54% 產率)。MS (ESI): 593.1 [M+H] ⁺。

步驟 c) 3-( 三級丁氧基羰基胺基 )-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 羧酸

在 25℃，向 N-[8-溴-5,5,7-三氟-2-側氧1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (250.0 mg, 0.42 mmol, 1.0 eq)、DPPP (35.0 mg, 0.08 mmol, 0.2 eq) 及 TEA (130.0 mg, 1.28 mmol, 3.04 eq) 在 DMF (10 mL) 及水 (2 mL) 的混合物中的混合物中，加入 Pd(OAc) ₂(10.0 mg, 0.04 mmol, 0.11 eq)。將混合物用氮氣除氣三次，用 CO 充填三次，然後在 80℃ 在 CO (45 psi) 下攪拌 12 小時。將混合物倒入水 (50 mL) 中，並藉由添加 HCl (0.5 M)，將 pH 調節為 6。將混合物用 EtOAc (100 mL) 萃取，且將有機相用鹽水 (100 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄) 並真空濃縮，以得到淺黃色固體狀標題化合物 (160.0 mg，0.29 mmol，55% 產率)，其無需進一步純化即用於下一反應步驟。MS (ESI): 557.1 [M+H] ⁺。

步驟 d) N-[5,5,7- 三氟 -8-( 肼羰基 )-2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於一般實例 1 步驟 j，由 3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-羧酸 (150.0 mg, 0.27 mmol, 1.0 eq) 來製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得 (120 mg，0.180 mmol，69% 產率)。MS (ESI): 515.2 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 e) N-[5,5,7- 三氟 -8-[[(2- 甲基 -2- 甲基磺醯基 - 丙醯基 ) 胺基 ] 胺甲醯基 ]-2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 k，自 N-[5,5,7-三氟-8-(肼羰基)-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸酯 (110.0 mg, 0.19 mmol, 1.0 eq) 製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得 (120.0 mg，0.17 mmol，80% 產率)，其無需進一步純化即用於下一反應步驟。MS (ESI): 719.3 [M+H] ⁺。

步驟 f) N-[(3S)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

將 Burgess 試劑 (220.0 mg, 0.92 mmol, 6.03 eq) 及 N-[5,5,7-三氟-8-[[(2-甲基-2-甲基磺醯基-丙醯基)胺基]胺甲醯基]-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (110.0 mg, 0.15 mmol, 1.0 eq) 在甲苯 (10 mL) 中的溶液在 110℃ 攪拌 16 小時。將反應混合物倒入水 (20 mL) 中並用 EtOAc (40 mL) 萃取。將有機相用鹽水 (40 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄) 並真空濃縮。將剩餘殘餘物藉由製備型 TLC 純化 (PE/EtOAc = 2:1)，以得到淺黃色固體狀純 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (80.0 mg，0.11 mmol，72% 產率) (MS (ESI): 701.4 [M+H] ⁺)。對該物質進行手性 SFC，以獲得淺黃色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁基酯 [異構體 B] (29.0 mg，0.04 mmol，34% 產率) (MS (ESI): 701.4 [M+H] ⁺，保留時間 1.33 分鐘 (參見下面的條件)) 及淺黃色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (28.0 mg, 0.04 mmol, 34% 產率)。MS (ESI): 701.4 [M+H] ⁺；保留時間 1.03 分鐘 (管柱：Chiralpak AS-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中，5% 至 40%，流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 g) (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁基酯 [異構體 A] (25.0 mg, 0.04 mmol, 1.0 eq) HCl/EtOAc (4 M, 5.0 mL, 20.0 mmol, 560.58 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。將反應混合物濃縮，且將剩餘固體溶解在 H ₂O 中，以在凍乾後獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (20.7 mg，0.03 mmol，91% 產率)。MS (ESI): 601.4 [M+H] ⁺。手性 SFC：保留時間 2.0 分鐘。類似地獲得 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B]。MS (ESI): 601.4 [M+H] ⁺。手性 SFC：保留時間 2.32 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中，5% 至 40%，流速：3 mL/min；偵測器：DAD；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 6 (3S)-3- 胺基 -5,5- 二氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5- 二氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) 1-(2- 胺基 -4- 溴 - 苯基 )-2- 氯 - 乙酮

在 0-5℃ 在氮氣氛下，向 BCl ₃(1 M in DCM, 63.95 mL, 63.95 mmol, 1.1 eq) 在甲苯 (100 mL) 中的溶液中滴加 3-溴苯胺 (6.33 mL, 58.13 mmol, 1.0 eq)。然後添加 AlCl ₃(9.3 g, 69.76 mmol, 1.2 eq) 及氯乙腈 (4.78 mL, 75.57 mmol, 1.3 eq)，且將混合物在 0-5℃ 攪拌 0.5 小時，然後在 70℃ 攪拌 12 小時。將反應混合物藉由在 50℃ 緩慢添加 100 mL HCl (1 M) 來淬滅，然後在 50℃ 攪拌 0.5 小時。將混合物倒入水 (100 mL) 中並用 EtOAc (2 x 200 mL) 萃取。合併之萃取物用鹽水 (100 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，過濾並在真空下濃縮。將剩餘殘餘物首先藉由矽膠管柱層析來純化 (PE/EtOAc = 1:0 至 10:1)，然後藉由製備型 HPLC (XB-CN 10µm，己烷/EtOH) 純化，以得到黃色固體狀標題化合物 (4.73 g)。MS (ESI): 250.0 [M+H] ⁺。

步驟 b) 2- 乙醯胺基 -2-[2-(2- 胺基 -4- 溴 - 苯基 )-2- 側氧 - 乙基 ] 丙二酸二乙酯

類似於實例 1 步驟 b，自 1-(2-胺基-4-溴-苯基)-2-氯-乙酮 (9.28 g) 製備標題化合物，並以綠色油狀物形式獲得 (8.7 g)。MS (ESI): 431.0 [M+H] ⁺。

步驟 c) 2- 胺基 -4-(2- 胺基 -4- 溴 - 苯基 )-4- 側氧 - 丁酸

將 2-乙醯胺基-2-[2-(2-胺基-4-溴-苯基)-2-側氧-乙基]丙二酸二乙酯 (5.5 g, 12.81 mmol, 1.0 eq) 在 HCl (12 M, 60.0 mL, 720.0 mmol, 56.19 eq) 中的溶液在 100℃ 攪拌 12 小時。將反應混合物真空濃縮，以得到鹽酸鹽形式的綠色油狀標題化合物 (3.7 g)，其無需進一步純化即用於下一反應步驟。MS (ESI): 289.0 [M+H] ⁺。

步驟 d) 4-(2- 胺基 -4- 溴 - 苯基 )-2-( 三級丁氧基羰基胺基 )-4- 側氧 - 丁酸

類似於實例 1 步驟 d，自 2-胺基-4-(2-胺基-4-溴-苯基)-4-側氧-丁酸 (2.0 g, 6.97 mmol, 1.0 eq) 製備標題化合物，並以淺黃色油狀物形式獲得 (2.51 g，6.48 mmol，93% 產率)。MS (ESI): 333.1 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 e) N-(8- 溴 -2,5- 二側氧 -3,4- 二氫 -1H-1- 苯并吖呯 -3- 基 ) 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 e，自 4-(2-胺基-4-溴-苯基)-2-(三級丁氧基羰基胺基)-4-側氧-丁酸 (2.6 g, 6.71 mmol, 1.0 eq) 製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得 (800.0 mg，2.17 mmol，29% 產率)。MS (ESI): 271.0 [M-異丁烯-CO ₂+H] ⁺。

步驟 f) N-[8- 溴 -2,5- 二側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 f，自 N-(8-溴-2,5-二側氧-3,4-二氫-1H-1-苯并吖呯-3-基)胺甲酸三級丁酯 (650 mg, 1.76 mmol, 1.0 eq) 及 1-(氯甲基)-4-苯氧基-苯 (385 mg, 1.76 mmol, 1.0 eq) 製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得 (350.0 mg，0.635 mmol，36% 產率)。MS (ESI): 497.0 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 g) N-[8- 溴 -5,5- 二氟 -2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 g，自 N-[8-溴-2,5-二側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (350.0 mg, 0.63 mmol, 1.0 eq) 製備標題化合物。獲得含有標題化合物的淺黃色油狀物 (400 mg)，其無需進一步純化即用於下一反應步驟。MS (ESI): 475.0 [M-異丁烯-CO ₂+H] ⁺。

步驟 h) 3-( 三級丁氧基羰基胺基 )-5,5- 二氟 -2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 羧酸

在 25℃，向 N-[8-溴-5,5-二氟-2-側氧1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (200.0 mg, 0.35 mmol, 1.0 eq) 及 DIPEA (90.16 mg, 0.70 mmol, 2.0 eq) 在 THF (8 mL) 及水 (2 mL) 的混合物中的溶液中，加入 Pd(dppp)Cl ₂(61.71 mg, 0.105 mmol, 0.3 eq)。將混合物用氮氣除氣三次，然後用 CO 充填三次，然後將混合物在 80℃ 在一氧化碳 (50 psi) 下攪拌 12 小時。將反應混合物過濾且將濾液倒入水 (20 mL) 中。藉由添加 0.5 N HCl 小心地將 pH 調節至 3-4 且將混合物用 EtOAc (3 x 30 mL) 萃取。將合併之萃取物用鹽水 (10 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。含有標題化合物的剩餘棕色油狀物 (200 mg) 無需進一步純化即用於下一反應步驟。MS (ESI): 483.2 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 i) N-[5,5- 二氟 -8-( 肼羰基 )-2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 j，自 3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5-二氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-羧酸 (270.0 mg, 0.5 mmol, 1.0 eq) 製備標題化合物。獲得淺黃色固體 (260.0 mg)，其無需進一步純化即用於下一反應步驟。MS (ESI): 497.2 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 j) N-[5,5- 二氟 -8-[[(2- 甲基 -2- 甲基磺醯基 - 丙醯基 ) 胺基 ] 胺甲醯基 ]-2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 k，自 N-[5,5-二氟-8-(肼羰基)-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (260.0 mg, 0.47 mmol, 1.0 eq) 及 2-甲基-2-甲基磺醯基-丙酸 (93.84 mg, 0.56 mmol, 1.2 eq) 製備標題化合物。獲得含有標題化合物的黃色油狀物 (270 mg)，其無需進一步純化即用於下一反應步驟。MS (ESI): 701.2 [M+H] ⁺。

步驟 k) N-[5,5- 二氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并噻吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 l，由 N-[5,5-二氟-8-[[(2-甲基-2-甲基磺醯基-丙醯基)胺基]胺甲醯基]-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (260.0 mg, 0.37 mmol, 1.0 eq) 來製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得 (170.0 mg，0.25 mmol，67% 產率)。MS (ESI): 627.3 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 l) N-[(3S)-5,5- 二氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-5,5- 二氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[5,5-二氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (100 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak AS (250 mm x 30 mm,10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 MeOH 中)，以獲得淺黃色油狀 N-[5,5-二氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (45 mg, 0.07 mmol) (MS (ESI): 627.2 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 1.35 分鐘 (參見下面的條件)，並獲得淺黃色油狀 N-[5,5-二氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (45 mg, 0.07 mmol)。MS (ESI): 627.2 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 1.09 分鐘 (管柱：Chiralpak AS-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中，5% 至 40%，流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 m) (3S)-3- 胺基 -5,5- 二氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5- 二氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[5,5-二氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (40.0 mg, 0.06 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4 M, 4.0 mL, 20.0 mmol, 560.58 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。將反應混合物濃縮且將剩餘固體溶解在 H ₂O 中並凍乾。將所獲得的固體藉由製備型 HPLC 純化 (HCl 作為溶析液中的添加劑)，以在凍乾後獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 3-胺基-5,5-二氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (8.9 mg，0.01 mmol，26% 產率)。MS (ESI): 583.3 [M+H] ⁺。手性 SFC：保留時間 2.09 分鐘。類似地獲得 3-胺基-5,5-二氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B]。MS (ESI): 583.2 [M+H] ⁺。手性 SFC：保留時間 2.43 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中，5% 至 40%，流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 7 (3S)-3- 胺基 -8-(5- 三級丁基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-( 環戊氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -8-(5- 三級丁基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-( 環戊氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[8-(5- 三級丁基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-( 環戊氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 1-(溴甲基)-4-(環戊氧基)苯 [CAS 1094272-95-3] 代替4-(三氟甲氧基)芐基溴) 來製備標題化合物並以白色固體形式獲得。MS (ESI): 629.2 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-(5- 三級丁基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-( 環戊氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-(5- 三級丁基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-( 環戊氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸酯 (35 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak IC (250 mm x 30 mm,10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 MeOH 中)，以獲得白色固體狀 N-[8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (12 mg) (MS (ESI): 629.4 [M+H] ⁺，保留時間 1.19 分鐘 (參見下面的條件) 及白色固體狀 N-[8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] 化合物 (14 mg)。MS (ESI): 629.4 [M+H] ⁺；保留時間 0.84 分鐘 (管柱：Chiralpak IC-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中，5% 至 40%，流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) (3S)-3- 胺基 -8-(5- 三級丁基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-( 環戊氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -8-(5- 三級丁基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-( 環戊氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (13.0 mg, 0.02 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOH (4 M, 5.0 mL) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。除去所有揮發物，且將剩餘固體溶解在水中，以獲得凍在乾後為鹽酸鹽形式的淺黃色固體狀 3-胺基-8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (11.2 mg，0.02 mmol，94% 產率)。MS (ESI): 529.3 [M+H] ⁺；保留時間 1.43 分鐘。類似地獲得 3-胺基-8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B]。MS (ESI): 529.3 [M+H] ⁺；保留時間 1.85 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：B 在 A 中為 5% 至 40%；流速：3 mL/min；偵測器：DAD；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 8 (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 2-[4-(溴甲基)苯基]-5-(三氟甲基)吡啶 [CAS 1056641-21-4]；鹽酸鹽代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-甲基-2-甲基磺醯基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物，並以白色固體形式獲得。MS (ESI): 754.4 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (95 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak IC (250 mm x 30 mm,10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 IPA 中)，以獲得白色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (28 mg) (MS (ESI): 754.3 [M+H] ⁺，保留時間 2.43 分鐘 (參見下面的條件) 及白色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (30 mg)。MS (ESI): 754.3 [M+H] ⁺；保留時間 1.88 分鐘 (管柱：Chiralpak IC-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 IPA (0.05% DEA)；梯度溶析：IPA (0.05% DEA)，於 CO ₂中，5% 至 40%，流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (25.0 mg, 0.03 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOH (4 M, 6.25 mL) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.3 小時。除去所有揮發物，且將剩餘固體溶解在水中，以在凍乾後獲得二鹽酸鹽形式的白色固體狀 3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (18.7 mg，0.03 mmol，75% 產率)。MS (ESI): 654.2 [M+H] ⁺；保留時間 1.82 分鐘。類似地獲得 3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B]。MS (ESI): 654.2 [M+H] ⁺；保留時間 2.10 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：B 在 A 中為 5% 至 40%；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 9 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(4- 甲氧基苯基 ) 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(4- 甲氧基苯基 ) 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-(4- 甲氧基苯基 ) 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 1-(氯甲基)-4-(4-甲氧基苯基)苯 [CAS 93258-73-2] 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以灰白色固體形式獲得。MS (ESI): 606.2 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-(4- 甲氧基苯基 ) 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-(4- 甲氧基苯基 ) 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (80 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak AD (250 mm x 30 mm,10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 IPA 中)，以獲得黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-[苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (38 mg) (MS (ESI): 606.2 [M-異丁烯] ⁺，保留時間 2.22 分鐘 (參見下面的條件) 及黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (38 mg)。MS (ESI): 606.2 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 1.87 分鐘 (管柱：Chiralpak IG-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05%DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(4- 甲氧基苯基 ) 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(4- 甲氧基苯基 ) 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

在 20℃，向 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (36.0 mg, 0.05 mmol, 1.0 eq) 在 EtOAc (1 mL) 中的溶液中，加入 HCl/EtOAc (4 M, 8.0 mL, 32.0 mmol, 588.15 eq)，且將混合物在 20℃ 攪拌 1 小時。將反應混合物真空濃縮且將水加入至剩餘殘餘物中。在凍乾後獲得灰白色固體狀 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 A] (29.2 mg，0.05 mmol，84％產率)。MS (ESI): 562.1 [M+H] ⁺；保留時間 0.62 分鐘。類似地獲得 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 562.1 [M+H] ⁺；保留時間 1.22 分鐘 (管柱：Chiralpak AD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH/MeCN (0.05%DEA)；梯度溶析：30% MeOH/MeCN (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 10 (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(4- 甲氧基苯基 ) 苯基 ] 甲基 ]-8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(4- 甲氧基苯基 ) 苯基 ] 甲基 ]-8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[5,5,7- 三氟 -1-[[4-(4- 甲氧基苯基 ) 苯基 ] 甲基 ]-8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 1-(氯甲基)-4-(4-甲氧基苯基)苯代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-甲基-2-甲基磺醯基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以白色固體形式獲得。MS (ESI): 659.2 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-5,5,7- 三氟 -1-[[4-(4- 甲氧基苯基 ) 苯基 ] 甲基 ]-8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-5,5,7- 三氟 -1-[[4-(4- 甲氧基苯基 ) 苯基 ] 甲基 ]-8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (60 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak IG (250 mm x 30 mm,10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 MeCN/EtOH 中)，以獲得黃色固體狀 N-[5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (22 mg) (MS (ESI): 659.1 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 2.11 分鐘 (參見下面的條件) 及黃色固體狀 N-[(5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (22 mg)。MS (ESI): 659.1 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 0.95 分鐘 (管柱：Chiralpak IG-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(4- 甲氧基苯基 ) 苯基 ] 甲基 ]-8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(4- 甲氧基苯基 ) 苯基 ] 甲基 ]-8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

在 20℃，向 N-[5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (20.0 mg, 0.03 mmol, 1.0 eq) 在 EtOAc ( 1 mL) 中的溶液中，滴加 HCl/EtOAc (4 M, 8.0 mL, 32.0 mmol, 1143.6 eq)，且將混合物在 20℃ 攪拌 1 小時。將反應混合物真空濃縮且將水加入至剩餘殘餘物中。在凍乾後獲得灰白色固體狀 3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (14.6 mg，0.02 mmol，77％產率)。MS (ESI): 615.1 [M+H] ⁺；保留時間 0.97 分鐘。類似地獲得 3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B]。MS (ESI): 615.1 [M+H] ⁺；保留時間 1.45 分鐘 (管柱：Chiralpak AD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH/MeCN (0.05% DEA)；梯度溶析：30% MeOH/MeCN (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 11 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并噻吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 1-(氯甲基)-4-苯氧基-苯代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 592.3 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (140 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak IC (250 mm x 30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 MeOH 中)，以獲得淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (70 mg) (MS (ESI): 592.3 [M-異丁烯] ⁺，保留時間 2.39 分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (60 mg)。MS (ESI): 592.3 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 1.75 分鐘 (管柱：Chiralpak IC-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05%DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[(4- 苯氧基苯基 ) 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

將 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (60.0 mg, 0.09 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4 M, 0.12 mL, 0.46 mmol, 5.0 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時，然後去除所有揮發物。將剩餘固體溶解在水中，且藉由凍乾獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 A] (33.6 mg，0.06 mmol，60％產率)。MS (ESI): 548.3 [M+H] ⁺；保留時間 1.66 分鐘。類似地獲得 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 548.3 [M+H] ⁺；保留時間 2.02 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05%DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：DAD；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 12 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 2-[4-(溴甲基)苯基]-5-(三氟甲基)吡啶；鹽酸鹽代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 701.3 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (95 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak IC (250 mm x 30 mm,10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (33 mg) (MS (ESI): 701.2 [M+H] ⁺，保留時間 2.01 分鐘 (參見下面的條件) 及白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (33 mg)。MS (ESI): 701.1 [M+H] ⁺；保留時間 1.44 分鐘 (管柱：Chiralpak IC-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05%DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

將 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (30.0 mg, 0.04 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4 M, 4.0 mL, 16.0 mmol, 373.67 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時，然後去除所有揮發物。將剩餘固體溶解在水中，且藉由凍乾獲得二鹽酸鹽形式的淺黃色固體狀 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 A] (28.0 mg，0.04 mmol，93% 產率)。MS (ESI): 601.3 [M+H] ⁺；保留時間 1.51 分鐘。類似地獲得 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 601.2 [M+H] ⁺；保留時間 1.84 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05%DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：DAD；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 13 (3S)-3- 胺基 -8-[5-(1- 乙基 -5,5- 二氟 -3- 哌啶基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -8-[5-(1- 乙基 -5,5- 二氟 -3- 哌啶基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[(3S)-5,5,7- 三氟 -8-( 肼羰基 )-2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-5,5,7- 三氟 -8-( 肼羰基 )-2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

在 20℃，向 3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-羧酸 [異構體 A] (實例 4，步驟 a) (280.0 mg, 0.51 mmol, 1.0 eq) 及 DMF (0.1 mL) 在 DCM (10 mL) 中的混合物中，添加草醯氯 (77.76 mg, 0.61 mmol, 1.2 eq)，且將混合物攪拌 0.5 小時。然後在 20℃ 添加單鹽酸鹽肼 (127.0 mg, 1.53 mmol, 3.0 eq) 及 DIPEA (0.27 mL, 1.53 mmol, 3.0 eq)，且將混合物在 20℃ 攪拌 0.5 小時，然後倒入水中。將混合物用 DCM (3 x 20 mL) 萃取，且將合併之萃取物用鹽水 (50 mL) 洗滌，用無水 Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。獲得黃色固體狀粗 N-[5,5,7-三氟-8-(肼羰基)-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A](218.0 mg，0.39 mmol，76％產率)，且無需進一步純化即用於下一步。MS (ESI): 507.1 [M-異丁烯+H] ⁺。N-[5,5,7-三氟-8-(肼羰基)-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] 類似地自 3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-甲酸 [異構體 B] (實例 4，步驟 a) 獲得。MS (ESI): 507.2 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[[(1- 乙基 -5,5- 二氟 - 哌啶 -3- 羰基 ) 胺基 ] 胺甲醯基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[[(1- 乙基 -5,5- 二氟 - 哌啶 -3- 羰基 ) 胺基 ] 胺甲醯基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

在 25℃，向 1-乙基-5,5-二氟-哌啶-3-羧酸 (中間體 2) (159.72 mg, 0.83 mmol, 1.5 eq) 及 T3P (50% 在 EtOAc 中，526.1 mg，0.83 mmol，1.5 eq) 在 DCM (5 mL) 中的混合物中，加入 DIPEA (0.29 mL, 1.65 mmol, 3.0 eq)，且將混合物攪拌 0.5 小時。然後在 25℃ 添加 N-[5,5,7-三氟-8-(肼羰基)-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (310.0 mg, 0.55 mmol, 1.0 eq) 且將混合物在 25℃ 攪拌 0.5 小時，然後倒入水中。將混合物用 DCM (3 x 15 mL) 萃取，且將合併之萃取物用鹽水 (40 mL) 洗滌，用無水 Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮，以得到黃色固體狀 N-[8-[[(1-乙基-5,5-二氟-哌啶-3-羰基)胺基]胺甲醯基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸酯 [異構體 A](155.0 mg，0.21 mmol，38％產率)，其無需進一步純化即用於下一步。MS (ESI): 738.2 [M+H] ⁺。N-[8-[[(1-乙基-5,5-二氟哌啶-3-羰基)胺基]胺甲醯基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸酯 [異構體 B] 類似地自 N-[5,5,7-三氟-8-(肼羰基)-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] 獲得。

步驟 c) N-[(3S)-8-[5-(1- 乙基 -5,5- 二氟 -3- 哌啶基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 乙基 -5,5- 二氟 -3- 哌啶基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

將 N-[8-[[(1-乙基-5,5-二氟-哌啶-3-羰基)胺基]胺甲醯基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (390.0 mg, 0.34 mmol, 1.0 eq) 及 Burgess 試劑 (245.69 mg, 1.03 mmol, 3.0 eq) 在甲苯 (15 mL) 中的混合物在 100℃ 攪拌 12 小時，然後倒入水 (50 mL) 中。將混合物用 EtOAc (3 x 40 mL) 萃取，且將合併之萃取物用鹽水 (100 mL) 洗滌，用無水 Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。將剩餘殘餘物藉由製備型 HPLC 純化 (管柱：Phenomenex Synergi C18 150x25mm，10µm，條件：水 (含甲酸)/ACN)，以得到白色固體狀 N-[8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (59.0 mg，0.08 mmol，23％產率)。MS (ESI): 720.2 [M+H] ⁺。N-[8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] 類似地自 N-[8-[[(1-乙基-5,5-二氟-哌啶-3-羰基)胺基]胺甲醯基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] 獲得。MS (ESI): 720.2 [M+H] ⁺。

步驟 d) (3S)-3- 胺基 -8-[5-(1- 乙基 -5,5- 二氟 -3- 哌啶基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -8-[5-(1- 乙基 -5,5- 二氟 -3- 哌啶基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

在 25℃，向 N-[8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (55.0 mg, 0.08 mmol, 1.0 eq) 在 EtOAc (1 mL) 中的溶液中，加入 HCl/EtOAc (4 M, 5.87 mL, 23.47 mmol, 307.04 eq)，且將混合物在 25℃ 攪拌 1 小時。將反應混合物真空濃縮且將剩餘殘餘物藉由製備型 HPLC 來純化 (管柱：Phenomenex Synergi C18 150x25mm，5 µm，條件：水 (含NH ₄HCO ₃)/ACN)，以得到灰白色固體狀 3-胺基-8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (12.6 mg，0.02 mmol，26% 產率)。MS (ESI): 620.2 [M+H] ⁺；保留時間 1.25 分鐘。3-胺基-8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B] 類似地自 N-[8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] 獲得。MS (ESI): 620.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.74 及 1.94 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05%DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 14 (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-(5- 吡咯啶 -1- 基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-(5- 吡咯啶 -1- 基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -8-(5- 吡咯啶 -1- 基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 15 步驟 d 及 e，自 N-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (實例 15，步驟 c) 來製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 694.1 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -8-(5- 吡咯啶 -1- 基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -8-(5- 吡咯啶 -1- 基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[5,5,7-三氟-2-側氧-8-(5-吡咯啶-1-yl-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (60 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak AD (250 mm x 30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 iPrOH 中)，以獲得淺黃色固體狀 N-[5,5,7-三氟-2-側氧-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (25 mg) (MS (ESI): 694.1 [M+H] ⁺，保留時間 1.76 分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 N-[5,5,7-三氟-2-側氧-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (23 mg)。MS (ESI): 694.1 [M+H] ⁺；保留時間 1.27 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-(5- 吡咯啶 -1- 基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-(5- 吡咯啶 -1- 基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[5,5,7-三氟-2-側氧-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (23.0 mg, 0.03 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4 M, 5.0 mL, 20.0 mmol, 603.13 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。真空除去所有揮發物，且將剩餘殘餘物溶解在水中，以藉由凍乾獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (13.5 mg，0.02 mmol，64％產率)。MS (ESI): 594.2 [M+H] ⁺；保留時間 1.59 分鐘。3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B] 類似地自 N-[5,5,7-三氟-2-側氧-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] 獲得。MS (ESI): 594.2 [M+H] ⁺；保留時間 2.28 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05%DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 15 (3S)-3- 胺基 -8-[5-(4,4- 二氟 -1- 哌啶基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -8-[5-(4,4- 二氟 -1- 哌啶基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[1-[(4- 氰基苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -8-( 肼羰基 )-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 j (在步驟 f 中使用 4-(溴甲基)苄腈代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴) 來製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 448.1 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[1-[(4- 氰基苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -8-(2- 側氧 -3H-1,3,4- 㗁二唑 -5- 基 )-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

將 N-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-5,5,7-三氟-8-(肼羰基)-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (1.5 g, 2.98 mmol, 1.0 eq)、TEA (0.93 mL, 6.67 mmol, 2.24 eq) 及 CDI (0.72 g, 4.47 mmol, 1.5 eq) 在 THF (20 mL) 中的混合在 20℃ 攪拌 3 小時，然後將反應混合物倒入水 (50 mL) 中。將混合物用 EtOAc (100 mL) 萃取，且將有機相用鹽水 (50 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄) 並真空濃縮，以得到淺黃色固體狀標題化合物 (1.5 g，2.83 mmol，87% 產率)，其無需進一步純化即用於下一步驟。MS (ESI): 474.2 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 c) N-[1-[(4- 氰基苯基 ) 甲基 ]-8-[5-(4,4- 二氟 -1- 哌啶基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[1-[(4- 氰基苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -8-(5- 吡咯啶 -1- 基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

在 25℃，向 N-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-8-(2-側氧-3H-1,3,4-㗁二唑-5-基)-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (450.0 mg, 0.85 mmol, 1.0 eq)、4,4-二氟哌啶鹽酸鹽 (202.5 mg, 1.28 mmol, 1.51 eq) 及 DIPEA (0.45 mL, 2.55 mmol, 3.0 eq) 在干燥 1,4-二㗁烷 (10 mL) 中的混合物中，加入 PyBroP (475.47 mg, 1.02 mmol, 1.2 eq)，且將混合物在 20℃ 在氮氣氛下攪拌 3 小時。將混合物倒入水 (100 mL) 中。將水相用 EtOAc (200 mL) 萃取，且將有機萃取物用鹽水 (100 mL) 洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮。將剩餘殘餘物藉由矽膠管柱層析來純化 (PE/EtOAc 10:1 至 1:1)，以獲得淺黃色固體狀 N-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (400.0 mg，0.63 mmol，74% 產率) (MS (ESI): 633.4 [M+H] ⁺) 及第二部分，其藉由製備型 HPLC 進一步純化 (管柱：Phenomenex luna C18 150x25mm，10µm；條件：水 (含甲酸)/ACN 1:1 至 1:4)，以獲得白色固體狀 N-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (45.0 mg，0.08 mmol，9% 產率)。MS (ESI): 583.5 [M+H] ⁺。

步驟 d) N-[8-[5-(4,4- 二氟 -1- 哌啶基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[(Z)-N'- 羥基甲脒基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

將 N-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (35.0 mg, 0.06 mmol, 1.0 eq)、乙酸鈉 (13.62 mg, 0.17 mmol, 3.0 eq) 及羥基胺鹽酸鹽 (5.77 mg, 0.08 mmol, 1.5 eq) 在乙醇 (5 mL) 中混合物在 50℃ 攪拌 12 小時，然後倒入水 (20 mL) 中。將混合物用 EtOAc (50 mL) 萃取，且將有機萃取物用鹽水 (30 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄) 並真空濃縮，以獲得白色固體狀 N-[8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[(Z)-N'-羥基甲脒基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (33.0 mg，0.05 mmol，71% 產率)，其無需進一步純化即用於下一步。MS (ESI): 666.2 [M+H] ⁺。

步驟 e) N-[8-[5-(4,4- 二氟 -1- 哌啶基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

將 N-[8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[(Z)-N'-羥基甲脒基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (190.0 mg, 0.29 mmol, 1.0 eq) 及三氟乙酸酐 (0.06 mL, 0.46 mmol, 1.6 eq) 在 THF (10 mL) 中的溶液在 20℃ 攪拌 2 小時。將溶液倒入水 (20 mL) 中並藉由添加 NaHCO ₃將溶液的 pH 調節至 7 至 8 。然後將混合物用 EtOAc (40 mL) 萃取，且將有機萃取物用鹽水 (30 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄) 並真空濃縮。將剩餘殘餘物藉由製備型 HPLC 純化 (管柱：Phenomenex luna C18 150x25mm, 10µm；條件：水 (含甲酸)/ACN 1:1 至 1:4)，以獲得白色固體狀 N-[8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (120.0 mg，0.16 mmol，55％產率)。MS (ESI): 744.4 [M+H] ⁺。

步驟 f) N-[(3S)-8-[5-(4,4- 二氟 -1- 哌啶基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(4,4- 二氟 -1- 哌啶基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1 - 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (120 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralcel OD (250 mm x 30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得白色固體狀 N-[8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (45 mg) (MS (ESI): 744.4 [M+H] ⁺，保留時間 1.52 分鐘 (參見下面的條件) 及白色固體狀 N-[8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (50 mg)。MS (ESI): 744.4 [M+H] ⁺；保留時間 1.10 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 g) (3S)-3- 胺基 -8-[5-(4,4- 二氟 -1- 哌啶基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -8-[5-(4,4- 二氟 -1- 哌啶基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (40.0 mg, 0.05 mmol, 1.0 eq) 在 EtOAc 中的 HCl (4 M, 10.0 mL, 40.0 mmol, 743.6 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。然後真空除去所有揮發物且將剩餘殘餘物溶解在水中。凍乾後獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 3-胺基-8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (28.4 mg，0.04 mmol，77% 產率)。MS (ESI): 644.1 [M+H] ⁺；保留時間 1.47 分鐘。3-胺基-8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B] 類似地自 N-[8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] 獲得。MS (ESI): 644.1 [M+H] ⁺；保留時間 2.23 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 16 (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[1-[(4- 氰基苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用4-(溴甲基)苄腈代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴並且在步驟 k 中使用 2-甲基-2-甲基磺醯基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 634.4 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[5,5,7- 三氟 -1-[[4-[(Z)-N'- 羥基甲脒基 ] 苯基 ] 甲基 ]-8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

將 N-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (190.0 mg, 0.3 mmol, 1.0 eq)、乙酸鉀 (0.06 mL, 0.9 mmol, 3.0 eq) 及鹽酸羥胺 (27.0 mg, 0.39 mmol, 1.3 eq) 在 EtOH (10 mL) 中的混合物在 50℃ 攪拌 12 小時，然後將反應混合物倒入水 (50 mL) 中。將混合物用 EtOAc (100 mL) 萃取，將有機萃取物用鹽水 (50 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄) 並真空濃縮。將剩餘殘餘物藉由製備型 TLC 純化 (PE/EtOAc = 1:2)，以得到淺黃色固體狀標題化合物 (150.0 mg，0.22 mmol，74% 產率)。MS (ESI): 667.4 [M+H] ⁺。

步驟 c) N-[(3S)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

將 N-[5,5,7-三氟-1-[[4-[(Z)-N'-羥基甲脒基]苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (140.0 mg, 0.21 mmol, 1.0 eq) 及三氟乙酸酐 (0.04 mL, 0.31 mmol, 1.5 eq) 在 THF (10 mL) 中的溶液在 20℃ 攪拌 3 小時。將反應混合物倒入水 (30 mL) 中且藉由添加 NaHCO ₃將混合物的 pH 調節至 7 至 8。將混合物用 EtOAc (50 mL) 萃取，將有機萃取物用鹽水 (30 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄) 並真空濃縮，且將剩餘殘餘物藉由製備型 TLC 純化 (PE/EtOAc = 3:1)，以獲得 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯。對其進行製備型SFC (Daicel Chiralpak AD (250 mm x 30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 iPrOH 中)，以獲得白色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (30 mg) (MS (ESI): 745.4 [M+H] ⁺，保留時間 1.64 分鐘 (參見下面的條件) 及白色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (40 mg)。MS (ESI): 745.4 [M+H] ⁺；保留時間 1.24 分鐘 (管柱：Chiralpak IC-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05%DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 d) (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (35.0 mg, 0.05 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4 M, 10.0 mL, 40.0 mmol, 851.04 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。真空除去所有揮發物，且將剩餘殘餘物溶解在水中，以藉由凍乾獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (24.9 mg，0.04 mmol，81% 產率)。MS (ESI): 645.1 [M+H] ⁺；保留時間 1.86 分鐘。3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B] 類似地自 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] 獲得。MS (ESI): 645.1 [M+H] ⁺；保留時間 2.38 分鐘 (管柱：Chiralpak IG-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05%DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 17 (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(4- 氧雜 -7- 氮雜螺 [2.5] 辛 -7- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(4- 氧雜 -7- 氮雜螺 [2.5] 辛 -7- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[5,5,7- 三氟 -8-[5-(4- 氧雜 -7- 氮雜螺 [2.5] 辛 -7- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 15 步驟 a 至 e (在步驟 c 中使用 4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛鹽酸鹽代替 4,4-二氟哌啶鹽酸鹽) 來製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 625.2 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(4- 氧雜 -7- 氮雜螺 [2.5] 辛 -7- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(4- 氧雜 -7- 氮雜螺 [2.5] 辛 -7- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (70 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak AD (250 mm x 30 mm，10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 iPrOH 中)，以獲得淺黃色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (31 mg) (MS (ESI): 736.3 [M+H] ⁺，保留時間 1.46 分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (30 mg)。MS (ESI): 736.3 [M+H] ⁺；保留時間 1.09 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(4- 氧雜 -7- 氮雜螺 [2.5] 辛 -7- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(4- 氧雜 -7- 氮雜螺 [2.5] 辛 -7- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (30.0 mg, 0.04 mmol, 1.0 eq) 在HCl/EtOAc (4 M, 5.0 mL, 20.0 mmol, 490.42 eq) 中的溶液在 20°C 攪拌 0.5 小時。真空除去所有揮發物且將剩餘殘餘物溶解在水中。藉由凍乾獲得鹽酸鹽形式的淺黃色固體狀 3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (21.4 mg，0.03 mmol，82% 產率)。MS (ESI): 636.3 [M+H] ⁺；保留時間 1.53 分鐘。3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B] 類似地自 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] 獲得。MS (ESI): 636.3 [M+H] ⁺；保留時間 2.30 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05%DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 18 (3S)-3- 胺基 -8-(5- 三級丁基 -3- 吡啶基 )-1-[(4- 氯苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -8-(5- 三級丁基 -3- 吡啶基 )-1-[(4- 氯苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[8- 溴 -1-[(4- 氯苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 g (在步驟 f 中使用 1-(溴甲基)-4-氯-苯代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴) 來製備標題化合物，並以黃色固體形式獲得。MS (ESI): 478.9 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[8-(5- 三級丁基 -3- 吡啶基 )-1-[(4- 氯苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

將氮氣鼓泡通過 N-[8-溴-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (100.0 mg, 0.19 mmol, 1.0 eq)、3-三級丁基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶 [CAS 1627723-04-9] (53.82 mg, 0.21 mmol, 1.1 eq)、K ₂CO ₃(77.68 mg, 0.56 mmol, 3.0 eq) 及 Pd(dppf)Cl ₂-DCM (15.3 mg, 0.02 mmol, 0.1 eq) 在 1,4-二㗁烷 (5 mL) 及水 (0.7 mL) 的混合物中的混合物持續 2 分鐘。然後將反應混合物加熱至 80℃ 並攪拌 3 小時。真空除去所有揮發物且將剩餘殘餘物藉由製備型 TLC 純化 (PE/EtOAc=5:1)，以得到黃色油狀標題化合物 (95.0 mg，0.16 mmol，72% 產率)。MS (ESI): 588.2 [M+H] ⁺。

步驟 c) N-[(3S)-8-(5- 三級丁基 -3- 吡啶基 )-1-[(4- 氯苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-(5- 三級丁基 -3- 吡啶基 )-1-[(4- 氯苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-(5-三級丁基-3-吡啶基)-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸酯 (95 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak AD (250 mm x 30 mm, 10 µm)，0.1% DEA 在 MeOH 中)，以獲得黃色油狀 N-[8-(5-三級丁基-3-吡啶基)-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (45 mg) (MS (ESI): 588.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.45 分鐘 (參見下面的條件) 及黃色油狀 N-[8-(5-三級丁基-3-吡啶基)-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] 化合物 (45 mg)。MS (ESI): 588.2 [M+H] ⁺；保留時間 0.89 分鐘 (管柱：Chiralpak AD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 d) (3S)-3- 胺基 -8-(5- 三級丁基 -3- 吡啶基 )-1-[(4- 氯苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -8-(5- 三級丁基 -3- 吡啶基 )-1-[(4- 氯苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

在 25℃，向 N-[8-(5-三級丁基-3-吡啶基)-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (40.0 mg, 0.07 mmol, 1.0 eq) 在 EtOAc (1 mL) 中的溶液中，加入 HCl/EtOAc (4 M, 8.0 mL, 32.0 mmol, 470.45 eq)，且將混合物在 25℃ 攪拌 1 小時。將反應混合物真空濃縮且將剩餘殘餘物溶解在水中。藉由凍乾獲得二鹽酸鹽形式的黃色固體狀 3-胺基-8-(5-三級丁基-3-吡啶基)-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (25.8 mg，0.05 mmol，65％產率)。MS (ESI): 488.2 [M+H] ⁺；保留時間 2.13 分鐘。3-胺基-8-(5-三級丁基-3-吡啶基)-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B] 類似地自 N-[8-(5-三級丁基-3-吡啶基)-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] 獲得。MS (ESI): 488.2 [M+H] ⁺；保留時間 1.67 分鐘 (管柱：Chiralpak AD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：DAD；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 19 2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-[3- 氟 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈及 2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-[3- 氟 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[3- 氟 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 2-[4-(氯甲基)苯基]-3-氟-5-(三氟甲基)吡啶 (中間體 3) 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以白色固體形式獲得。MS (ESI): 719.4 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[3- 氟 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[3- 氟 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-氟-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (95 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralcel OD-H (250 mm x 30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 MeOH 中)，以獲得白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-氟-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (40 mg) (MS (ESI): 719.4 [M+H] ⁺，保留時間 1.01 分鐘 (參見下面的條件) 及白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-氟-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (41 mg)。MS (ESI): 719.6 [M+H] ⁺；保留時間 1.17 分鐘 (管柱：Chiralcel OD 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-[3- 氟 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈及 2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-[3- 氟 -5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈

將 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-氟-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體A] (40.0 mg, 0.06 mmol, 1.0 eq) 在 DCM/TFA (3:1, 4.0 mL) 的混合物中的溶液在 25℃ 攪拌 1 小時。然後將混合物用 DCM (3 mL) 稀釋，且藉由添加飽和 NaHCO ₃溶液將 pH 調節至 8。將所得混合物用 DCM (10 mL x 3) 萃取，且將合併之有機層乾燥 (Na ₂SO ₄)，並濃縮。將殘餘物溶解於 EtOAc (30 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4M, 0.14 mL)。將混合物濃縮，以獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-氟-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈 [異構體 A] (33.0 mg，0.04 mmol，83% 產率)。MS (ESI): 619.3 [M+H] ⁺，保留時間 1.34 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-氟-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 619.1 [M+H] ⁺；保留時間 1.70 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05%DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：DAD；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 20 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 ) 四唑 -2- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 ) 四唑 -2- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲氧基 ) 四唑 -2- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 2-[4-(溴甲基)苯基]-5-(三氟甲基)四唑 (中間體 4) 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 636.1 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 ) 四唑 -2- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 ) 四唑 -2- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (340 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak AD (250 mm x 30 mm,10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (105 mg) (MS (ESI): 636.1 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 0.86 分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (110 mg)。MS (ESI): 636.1 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 1.13 分鐘 (管柱：Chiralpak AD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 ) 四唑 -2- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 ) 四唑 -2- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

將 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (103.0 mg, 0.15 mmol, 1.0 eq) 在 DCM/TFA (3:1, 4.0 mL) 的混合物中的溶液中在 20℃ 攪拌 0.5 小時。藉由小心添加飽和 NaHCO ₃溶液將反應混合物的 pH 調節至 8，且將所得混合物用 DCM (10 mL x 3) 萃取。將合併之有机層用鹽水 (5 mL) 洗滌、乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮。將剩餘殘餘物溶解於 EtOAc (20 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4M, 0.2 mL)。將混合物濃縮，且將水 (20 mL) 添加至剩餘固體中。藉由凍乾獲得鹽酸鹽形式的淺黃色固體狀 2-甲基-2-[5-[(3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 A] (90 mg, 0.14 mmol, 92%)。MS (ESI): 592.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.40 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 2-甲基-2-[5-[(3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 592.3 [M+H] ⁺；保留時間 1.83 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 21 (3 S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-(5- 吡咯啶 -1- 基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-(5- 吡咯啶 -1- 基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[(3S)-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -8-(5- 吡咯啶 -1- 基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -8-(5- 吡咯啶 -1- 基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[5,5,7-三氟-2-側氧-8-(5-吡咯啶-1-yl-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (實例 22，步驟 c) (30 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak OD (250 mm x 30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得白色固體狀 N-[5,5,7-三氟-2-側氧-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (10 mg) (MS (ESI): 693.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.61 分鐘 (參見下面的條件) 及白色固體狀 N-[5,5,7-三氟-2-側氧-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (10 mg)。MS (ESI): 693.2 [M+H] ⁺；保留時間 2.07 分鐘 (管柱：Chiralpak OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 b) (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-(5- 吡咯啶 -1- 基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-(5- 吡咯啶 -1- 基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[5,5,7-三氟-2-側氧-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (10.0 mg, 0.01 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4 M, 2.1 mL, 8.42 mmol, 582.9 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。將混合物濃縮，且將剩餘殘餘物溶解在 MeCN/水中，以藉由凍乾獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (2.0 mg，20% 產率)。MS (ESI): 593.2 [M+H] ⁺，保留時間 0.57 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B]。MS (ESI): 593.1 [M+H] ⁺；保留時間 1.69 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；溶析：50% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 22 (3 S)-3- 胺基 -8-[5-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3 R)-3- 胺基 -8-[5-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[5,5,7- 三氟 -8-( 肼羰基 )-2- 側氧 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 j (在步驟 f 中使用 1-[4-(溴甲基)苯基]-3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑 (中間體 5) 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴) 來製備標題化合物，並以黃色固體形式獲得。MS (ESI): 636.2 [M+Na] ⁺。

步驟 b) N-[5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -8-(2- 側氧 -3H-1,3,4- 㗁二唑 -5- 基 )-1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

在 25℃，向 N-[5,5,7-三氟-8-(肼羰基)-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (300.0 mg, 0.49 mmol, 1.0 eq) 在 THF (5 mL) 中的溶液中，添加 CDI (158.58 mg, 0.98 mmol, 2.0 eq)，且將混合物在 25℃ 攪拌 12 小時。然後添加水 (20 mL) 且將混合物用 EtOAc (10 mL x 3) 萃取。將合併之萃取物用鹽水 (20 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄)，並濃縮以得到殘餘物，其藉由矽膠管柱層析來純化 (PE/EtOAc = 10:0 至 1:2)，以得到黃色固體狀標題化合物 (210.0 mg，0.33 mmol，67% 產率)。MS (ESI): 640.3 [M+H] ⁺。

步驟 c) N-[8-[5-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -8-(5- 吡咯啶 -1- 基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 )-1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

將 N-[5,5,7-三氟-2-側氧-8-(2-側氧-3H-1,3,4-㗁二唑-5-基)-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (200.0 mg, 0.31 mmol, 1.0 eq)、PyBroP (153.08 mg, 0.33 mmol, 1.05 eq)、DIPEA (0.16 mL, 0.94 mmol, 3.0 eq) 及 3,3-二氟吡咯啶鹽酸鹽 (67.35 mg, 0.47 mmol, 1.5 eq) 在 1,4-二㗁烷 (1 mL) 中的溶液在 20℃ 攪拌 3 小時。將反應混合物倒入水 (20 mL) 中，將層分離，且將有機相用 EtOAc (10 mL x 3) 萃取。將合併之有机相用鹽水 (20 mL) 洗滌、乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮。將剩餘殘餘物藉由製備型 TLC 純化 (PE/EtOAc = 1:2)，以得到黃色固體狀 N-[8-[5-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (140.0 mg，0.19 mmol，61% 產率) (MS (ESI): 729.3 [M+H] ⁺) 及黃色固體狀 N-[5,5,7-三氟-2-側氧-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (30.0 mg，0.04 mmol，14% 產率)。MS (ESI): 693.2 [M+H] ⁺。

步驟 d) N-[(3S)-8-[5-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (130 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak OX (250 mm x 30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得淺黃色固體狀 N-[8-[5-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (55 mg，41% 產率) (MS (ESI): 729.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.54 分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 N-[8-[5-(3,3-二氟吡咯啶-1)-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (56 mg，43％產率)。MS (ESI): 729.2 [M+H] ⁺；保留時間 2.13 分鐘 (管柱：Chiralpak OX-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 e) (3S)-3- 胺基 -8-[5-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -8-[5-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[8-[5-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (50.0 mg, 0.07 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4 M, 10 mL, 40.0 mmol, 582.9 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。將混合物濃縮，且將剩餘殘餘物溶解在 MeCN/水中，以藉由凍乾獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 3-胺基-8-[5-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (40.1 mg，0.06 mmol，84% 產率)。MS (ESI): 629.1 [M+H] ⁺，保留時間 0.94 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 3-胺基-8-[5-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B]。MS (ESI): 629.1 [M+H] ⁺；保留時間 1.91 分鐘 (管柱：Chiralpak IG-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；溶析：60% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 23 (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 1-[4-(溴甲基)苯基]-3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑 (中間體 5) 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-甲基-2-甲基磺醯基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 614.1 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (340 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak AD (250 mm x 30 mm,10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得淺黃色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (30 mg) (MS (ESI): 688.1 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 1.20 分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (40 mg)。MS (ESI): 688.3 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 2.08 分鐘 (管柱：Chiralpak AD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 三唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (30.0 mg, 0.04 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4 M, 7.5 mL, 30.0 mmol, 743.7 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。將混合物濃縮以獲得鹽酸鹽形式的黃色固體狀 3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (24.8 mg，0.04 mmol，87% 產率)。MS (ESI): 644.1 [M+H] ⁺，保留時間 1.99 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B]。MS (ESI): 644.1 [M+H] ⁺；保留時間 2.44 分鐘 (管柱：Chiralpak AD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 24 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 2-[4-(氯甲基)苯基]-5-(三氟甲氧基)吡啶鹽酸鹽 [CAS#2338841-95-3] 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 717.5 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (260 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak IC (250 mm x 30 mm,10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 iPrOH 中)，以獲得白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (97 mg) (MS (ESI): 717.3 [M+H] ⁺，保留時間 1.74 分鐘 (參見下面的條件) 及白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (98 mg)。MS (ESI): 717.4 [M+H] ⁺；保留時間 2.35 分鐘 (管柱：Chiralpak IC-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 iPrOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% iPrOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

將 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體A] (95.0 mg, 0.13 mmol, 1.0 eq) 在 DCM/TFA (3:1, 4.0 mL) 的混合物中的溶液在 20℃ 攪拌 1 小時。然後添加 DCM (20 mL) 且藉由小心地添加飽和 NaHCO ₃溶液將反應混合物的 pH 調節至 8。將所得混合物用 DCM (10 mL x 3) 萃取，且將合併之有機層用鹽水 (10 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄)，並濃縮。將剩餘殘餘物溶解於 EtOAc (30 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4M, 0.1 mL)。將混合物濃縮，且將水 (20 mL) 添加至剩餘固體中。藉由凍乾獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 A] (67 mg, 0.1 mmol, 76%)。MS (ESI): 617.4 [M+H] ⁺，保留時間 1.20 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 617.5 [M+H] ⁺；保留時間 1.82 分鐘 (管柱：(S.S)Whelk-O1 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 26 (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 2-[4-(氯甲基)苯基]-5-(三氟甲氧基)吡啶鹽酸鹽 [CAS# 2338841-95-3] 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-甲基-2-甲基磺醯基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 770.3 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (250 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak IC (250 mm x 30 mm,10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 iPrOH 中)，以獲得白色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (97 mg) (MS (ESI): 770.3 [M+H] ⁺，保留時間 2.01 分鐘 (參見下面的條件) 及白色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (92 mg)。MS (ESI): 770.5 [M+H] ⁺；保留時間 2.57 分鐘 (管柱：Chiralpak IC-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 iPrOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% iPrOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 三氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (95.0 mg, 0.12 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4 M, 10 mL, 40.0 mmol, 324.1 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 1 小時。將混合物濃縮，且將剩餘固體溶解在水 (20 mL) 中，以藉由凍乾獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (74.1 mg，0.1 mmol，83% 產率)。MS (ESI): 670.4 [M+H] ⁺，保留時間 1.96 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B]。MS (ESI): 670.4 [M+H] ⁺；保留時間 2.13 分鐘 (管柱：Chiralpak AD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 27 2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈及 2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 2-[4-(氯甲基)苯基]-4-(三氟甲基)吡啶鹽酸鹽 (中間體 6) 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 701.5 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (270 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralcel OD (250 mm x 30 mm,10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 iPrOH 中)，以獲得淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (56 mg) (MS (ESI): 701.5 [M+H] ⁺，保留時間 1.08 分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (73 mg)。MS (ESI): 701.4 [M+H] ⁺；保留時間 1.29 分鐘 (管柱：Chiralcel OD 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈及 2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈

將 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體A] (55.2 mg, 0.08 mmol, 1.0 eq) 在 DCM/TFA (3:1, 4.0 mL) 的混合物中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。藉由小心地添加飽和 NaHCO ₃溶液將反應混合物的 pH 調節至 8。將所得混合物用 DCM (10 mL x 3) 萃取，且將合併之有機層用鹽水 (10 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄)，並濃縮。將剩餘殘餘物溶解於 EtOAc (20 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4M, 0.2 mL)。將混合物濃縮，且將水 (20 mL) 添加至剩餘固體中。藉由凍乾獲得鹽酸鹽形式的淺黃色固體狀 2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈 [異構體 A] (49.6 mg, 0.08 mmol, 97%)。MS (ESI): 601.4 [M+H] ⁺，保留時間 1.28 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 601.2 [M+H] ⁺；保留時間 1.86 分鐘 (管柱：(S.S)Whelk-O1 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 28 2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[6-[4-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈及 2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[6-[4-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[6-[4-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 5-(氯甲基)-2-[4-(三氟甲基)苯基]吡啶 [CAS# 851507-54-5] 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 701.4 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[6-[4-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[6-[4-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)苯基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯進行製備型 SFC (Daicel Chiralcel OD (250 mm x 30 mm,10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)苯基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (42 mg) (MS (ESI): 701.5 [M+H] ⁺，保留時間 1.31 分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)苯基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (68 mg)。MS (ESI): 701.5 [M+H] ⁺；保留時間 1.59 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[6-[4-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈及 2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[6-[4-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈

將 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)苯基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體A] (41.2 mg, 0.06 mmol, 1.0 eq) 在 DCM/TFA (3:1, 4.0 mL) 的混合物中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。藉由小心地添加飽和 NaHCO ₃溶液將反應混合物的 pH 調節至 8。將所得混合物用 DCM (10 mL x 3) 萃取，且將合併之有機層用鹽水 (10 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄)，並濃縮。將剩餘殘餘物溶解於 EtOAc (20 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4M, 0.2 mL)。將混合物濃縮，且將水 (20 mL) 添加至剩餘固體中。藉由凍乾獲得鹽酸鹽形式的淺黃色固體狀 2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)苯基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈 [異構體 A] (36.4 mg, 0.06 mmol, 96%)。MS (ESI): 601.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.75 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)苯基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 601.3 [M+H] ⁺；保留時間 2.22 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 29 (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 1-[4-(氯甲基)苯基]-4-(三氟甲基)吡唑 [CAS# 1486714-19-5] 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-甲基-2-甲基磺醯基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物，並以黃色油狀物形式獲得。MS (ESI): 687.0 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak AD (250 mm x 30 mm,10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得黃色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (70 mg) (MS (ESI): 743.4 [M+H] ⁺，保留時間 1.18 分鐘 (參見下面的條件) 及黃色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (70 mg)。MS (ESI): 743.4 [M+H] ⁺；保留時間 1.87 分鐘 (管柱：Chiralpak AD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (65.0 mg, 0.09 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4 M, 3.45 mL, 13.8 mmol, 157.6 eq) 中的溶液在 25°C 攪拌 1 小時。將混合物濃縮且將剩餘殘餘物藉由製備型 HPLC 純化 (管柱：Phenomenex Luna C18 75x30mm，3μm；水 (含 HCl)/MeCN)，以獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (22.3 mg, 0.03 mmol, 36％產率)。MS (ESI): 643.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.72 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B]。MS (ESI): 643.2 [M+H] ⁺；保留時間 2.04 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 30 2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈及 2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 1-[4-(溴甲基)苯基]-3-(三氟甲基)吡唑 [CAS# 1284983-51-2] 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物，並以黃色油狀物形式獲得。MS (ESI): 634.1 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (25 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralcel OX-3 (50×4.6 mm, 3 µm)，0.05% DEA 在 EtOH 中)，以獲得灰白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (11 mg) (MS (ESI): 634.1 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 1.12 分鐘 (參見下面的條件) 及灰白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (10 mg)。MS (ESI): 634.1 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 1.50 分鐘 (管柱：Chiralcel OX-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈及 2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[3-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈

將 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體A] (11 mg, 0.02 mmol, 1.0 eq) 在 DCM/TFA (3:1, 4.0 mL) 的混合物中的溶液在 25°C 攪拌 1 小時。添加 DCM (3 mL) 且藉由小心地添加飽和 NaHCO ₃溶液將混合物的 pH 調節至 8。將所得混合物用 DCM (5 mL x 3) 萃取，且將合併之有機層用鹽水 (10 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄)，並濃縮，以獲得黃色固體狀 2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈 [異構體 A] (5.3 mg, 0.01 mmol, 54%)。MS (ESI): 590.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.55 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 590.1 [M+H] ⁺；保留時間 2.27 分鐘 (管柱：Chiralcel OX-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 32 (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 1-(氯甲基)-4-[4-(三氟甲基)苯基]苯 [CAS# 454464-38-1] 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-甲基-2-甲基磺醯基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 697.2 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)苯基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (190 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak AD (250×30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得白色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)苯基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (60 mg) (MS (ESI): 697.3 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 1.16 分鐘 (參見下面的條件) 及白色固體狀 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)苯基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (65 mg)。MS (ESI): 697.3 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 1.81 分鐘 (管柱：Chiralpak AD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)苯基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (55.0 mg, 0.07 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4 M, 5.0 mL, 20.0 mmol, 273.7 eq) 中的溶液在 20°C 攪拌 1 小時。將混合物濃縮且將水 (20 mL) 添加至剩餘殘餘物中。藉由凍乾獲得鹽酸鹽形式的灰白色固體狀 3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[3-(三氟甲基)苯氧基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (44 mg，0.06 mmol，86％產率)。MS (ESI): 653.3 [M+H] ⁺，保留時間 1.82 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[3-(三氟甲基)苯氧基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B]。MS (ESI): 653.3 [M+H] ⁺；保留時間 2.13 分鐘 (管柱：Chiralcel OD 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 33 2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈及 2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 1-[4-(氯甲基)苯基]-4-(三氟甲基)吡唑 [CAS# 1486714-19-5] 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物，並以黃色油狀物形式獲得。MS (ESI): 634.0 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 (28 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak IG-3 (50×4.6 mm, 3 µm)，0.05% DEA 在 EtOH 中)，以獲得灰白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (12 mg) (MS (ESI): 634.2 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 0.93 分鐘 (參見下面的條件) 及灰白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (13 mg)。MS (ESI): 634.2 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 1.33 分鐘 (管柱：Chiralpak AD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈及 2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈

將 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體A] (11 mg, 0.02 mmol, 1.0 eq) 在 DCM/TFA (3:1, 4.0 mL) 的混合物中的溶液在 25°C 攪拌 1 小時。添加 DCM (3 mL) 且藉由小心地添加飽和 NaHCO ₃溶液將混合物的 pH 調節至 8。將所得混合物用 DCM (5 mL x 3) 萃取，且將合併之有機層用鹽水 (10 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄)，並濃縮。將剩餘殘餘物溶解於 EtOAc (30 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4M, 0.1 mL, 0.4 mmol, 25.1 eq)。將混合物濃縮，以獲得鹽酸鹽形式的黃色固體狀 2-[5-[(3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈 [異構體 A] (10 mg, 0.02 mmol, 100%)。MS (ESI): 590.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.41 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 2-[5-[(3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 590.1 [M+H] ⁺；保留時間 1.76 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 34 (3S)-3- 胺基 -8-[5-[5,5- 二氟 -1-(2- 甲氧基乙基 )-3- 哌啶基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并噻吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -8-[5-[5,5- 二氟 -1-(2- 甲氧基乙基 )-3- 哌啶基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并噻吖呯 -2- 酮

步驟 a) 3-( 三級丁氧基羰基胺基 )-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 甲酸乙酯

類似於實例 1 步驟 a 至 h (在步驟 f 中使用 2-[4-(溴甲基)苯基]-5-(三氟甲基)吡啶 [CAS#1056641-21-4]；鹽酸鹽代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴) 來製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 638.3 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) (3S)-3-( 三級丁氧基羰基胺基 )-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 甲酸乙酯及 (3R)-3-( 三級丁氧基羰基胺基 )-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 甲酸乙酯

對 3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-甲酸乙酯 (850 mg) 進行製備型 SFC (儀器：Waters 80Q；流動相：50% iPrOH (0.1% NH ₃-H ₂O) 在超臨界 CO ₂，流速：50 g/min，背壓：100 bar)，以獲得淺黃色固體狀 3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-甲酸乙酯 [異構體 A] (300 mg) (MS (ESI): 638.3 [M+H] ⁺，保留時間 1.00分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-甲酸乙酯 [異構體 B] (350 mg)。MS (ESI): 634.2 [M+H] ⁺；保留時間 1.20 分鐘 (管柱：Chiralpak AD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 iPrOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% iPrOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) N-[(3S)-8-[5-[5,5- 二氟 -1-(2- 甲氧基乙基 )-3- 哌啶基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-[5,5- 二氟 -1-(2- 甲氧基乙基 )-3- 哌啶基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

N-[8-[5-[5,5-二氟-1-(2-甲氧基乙基)-3-哌啶基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A ] 由 3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-甲酸乙酯 [異構體 A] 類似於實例 1，步驟 i 至 l (在步驟 k 中使用 5,5-二氟-1-(2-甲氧基乙基)哌啶-3-甲酸 (中間體 16) 代替三甲基乙酸) 來製備並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 811.3 [M+H] ⁺。N-[8-[5-[5,5-二氟-1-(2-甲氧基乙基)-3-哌啶基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B ] 類似地由 3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-甲酸乙酯 [異構體 B] 來製備並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 811.3 [M+H] ⁺。

步驟 d) (3S)-3- 胺基 -8-[5-[5,5- 二氟 -1-(2- 甲氧基乙基 )-3- 哌啶基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -8-[5-[5,5- 二氟 -1-(2- 甲氧基乙基 )-3- 哌啶基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 N-[8-[5-[5,5二氟-1-(2-甲氧基乙基)-3-哌啶基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (33 mg, 0.04 mmol, 1.0 eq) 在 DCM/TFA (3:1, 2.0 mL) 的混合物中的溶液中在 20℃ 攪拌 0.5 小時。將反應混合物倒入水 (10 mL) 中，且將所得混合物用 DCM (10 mL x 3) 萃取。將合併之有机層用鹽水 (5 mL) 洗滌、乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮。將剩餘殘餘物溶解於 EtOAc (20 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4M, 0.2 mL)。將混合物濃縮，且將剩餘殘餘物溶解在水 (20 mL) 中，以藉由凍乾獲得鹽酸鹽形式的淺黃色固體狀 3-胺基-8-[5-[5,5-二氟-1-(2-甲氧基乙基)-3-哌啶基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (28 mg, 0.04 mmol, 89%)。MS (ESI): 733.1 [M+Na] ⁺，保留時間 1.51 及 1.74 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。3-胺基-8-[5-[5,5-二氟-1-(2-甲氧基乙基)-3-哌啶基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B] 類似地自 N-[8-[5-[5,5-二氟-1-(2-甲氧基乙基)-3-哌啶基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] 獲得。MS (ESI): 733.1 [M+Na] ⁺，保留時間 2.17 及 2.37 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 35 1-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸甲酯 及 1-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸甲酯

步驟 a) 1-[5-[3-( 三級丁氧基羰基胺基 )-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 2-[4-(溴甲基)苯基]-5-(三氟甲基)吡啶 [CAS#1056641-21-4]；鹽酸鹽代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 3- 三級丁氧基羰基-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-1-羧酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物，並以淺黃色油狀物形式獲得。MS (ESI): 829.4 [M+H] ⁺。

步驟 b) 3- 胺基 -8-[5-(3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -1- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 1-[5-[3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸三級丁酯 (245.0 mg, 0.3 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4M, 4.0 mL, 16.0 mmol, 54.13 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。將反應混合物濃縮，且將剩餘殘餘物溶解在水 (30 mL) 中，以獲得三鹽酸鹽形式的=白色固體狀 3-胺基-8-[5-(3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-1-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 (200.0 mg，0.27 mmol，92％產率)。MS (ESI): 629.4 [M+H] ⁺。

步驟 c) 1-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸甲酯及 1-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸甲酯

在 20℃，向 3-胺基-8-[5-(3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-1-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮；三鹽酸鹽 (100.0 mg, 0.14 mmol, 1.0 eq) 及 DIPEA (61.3 mg, 0.47 mmol, 3.5 eq) 在 DCM (1 mL) 中的溶液中，添加二碳酸二甲酯 (18.17 mg, 0.14 mmol, 1.0 eq) 在 DCM (0.5 mL) 中的溶液，且將混合物在 20℃ 攪拌 1 小時，然後濃縮。將剩餘殘餘物藉由製備型 TLC 及製備型 HPLC 純化以獲得固體 (20 mg)，對其進行製備型 SFC (儀器：Waters 80Q；流動相：50% EtOH (0.1% NH ₃-H ₂O) 在超臨界 CO ₂，流速：70 g/min，背壓：100 bar)，以獲得淺黃色固體狀 1-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯 [異構體 A] (10.0 mg，0.01 mmol，11% 產率) (MS (ESI): 687.3 [M+H] ⁺，保留時間 0.63 分鐘 (參見下面的條件)) 及淺黃色固體狀 1-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯 [異構體 B] (6.0 mg，0.01 mmol，6.5% 產率)。MS (ESI): 687.3 [M+H] ⁺；保留時間 1.34 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 36 1-[5-[(3S)-3- 胺基 -1-[(4- 氯苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸甲酯 及 1-[5-[(3R)-3- 胺基 -1-[(4- 氯苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸甲酯

步驟 a) 1-[5-[3-( 三級丁氧基羰基胺基 )-1-[(4- 氯苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3 - 甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 4-氯芐基溴代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 3- 三級丁氧基羰基-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-1-羧酸代替三甲基乙酸)來製備標題化合物，並以白色固體形式獲得。MS (ESI): 740.4 [M+Na] ⁺。

步驟 b) 3- 胺基 -8-[5-(3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -1- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[(4- 氯苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 1-[5-[3-(三級丁氧基羰基胺基)-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸三級丁酯 (130.0 mg, 0.18 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (8.67 mL, 34.67 mmol, 191.51 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。除去所有揮發物以獲得二鹽酸鹽形式的白色固體狀 3-胺基-8-[5-(3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-1-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 (106.0 mg，0.18 mmol，88％產率)。MS (ESI): 518.3 [M+H] ⁺。

步驟 c) 1-[5-[3- 胺基 -1-[(4- 氯苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸甲酯

在 20℃，向 3-胺基-8-[5-(3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-1-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮；二鹽酸鹽 (106.0 mg, 0.18 mmol, 1.0 eq) 及 DIPEA (0.16 mL, 0.9 mmol, 5.0 eq) 在 DCM (10 mL) 中的溶液中，添加二碳酸二甲酯 (0.01 mL, 0.09 mmol, 0.5 eq)，且將溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。除去所有揮發物，且將剩餘殘餘物藉由製備型 TLC 純化 (100% EtOAc)，以得到白色固體狀 1-[5-[3-胺基-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯 (80.0 mg， 0.14 mmol，75% 產率)。MS (ESI): 576.2 [M+H] ⁺。

步驟 d) 1-[5-[(3S)-3- 胺基 -1-[(4- 氯苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸甲酯及 1-[5-[(3R)-3- 胺基 -1-[(4- 氯苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸甲酯

對 1-[5-[3-胺基-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯 (80 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak OD (250×30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得淺黃色固體狀 1-[5-[3-胺基-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯 [異構體 A] (30 mg) (MS (ESI): 576.2 [M+H] ⁺，保留時間 0.58 分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 1-[5-[3-胺基-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯 [異構體 B] (30 mg)。MS (ESI): 576.2 [M+H] ⁺；保留時間 1.46 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 37 2-[5-[(3S)-3- 胺基 -1-[[4-[5-(1,1- 二氟乙基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈及 2-[5-[(3R)-3- 胺基 -1-[[4-[5-(1,1- 二氟乙基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-(1,1- 二氟乙基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 2-[4-(氯甲基)苯基]-5-(1,1-二氟乙基)吡啶 (中間體 7) 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以固體形式獲得。MS (ESI): 697.4 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-(1,1- 二氟乙基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-(1,1- 二氟乙基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak IC (250×30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (30 mg) (MS (ESI): 697.4 [M+H] ⁺，保留時間 1.67 分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (34 mg)。MS (ESI): 697.3 [M+H] ⁺；保留時間 2.21 分鐘 (管柱：Chiralpak IC-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2-[5-[(3S)-3- 胺基 -1-[[4-[5-(1,1- 二氟乙基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈及 2-[5-[(3R)-3- 胺基 -1-[[4-[5-(1,1- 二氟乙基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 甲基 - 丙腈

在 25℃，向 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (20 mg, 0.03 mmol, 1.0 eq) 在 DCM (10 mL) 中的溶液中，加入 TFA (0.33 mL, 4.46 mmol, 155.26 eq)，且將溶液在 25℃ 攪拌 1 小時。藉由小心添加飽和 NaHCO ₃溶液將混合物的 pH 調節至 8，且將所得混合物用 DCM (50 mL) 萃取。將有机層用鹽水 (50 mL) 洗滌、乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮。將剩餘殘餘物溶解於 EtOAc (10 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4M, 0.1 mL)。將混合物濃縮且添加水 (20 mL)，以在凍乾後獲得鹽酸鹽形式的淺黃色固體狀 2-[5-[3-胺基-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈 [異構體 A] (15.2 mg，0.02 mmol，82％產率)。MS (ESI): 597.3 [M+H] ⁺，保留時間 0.64 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 2-[5-[3-胺基-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 597.3 [M+H] ⁺；保留時間 1.37 分鐘 (管柱：Chiralcel OX-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 38 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(5- 甲氧基 -2- 吡啶基 ) 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(5- 甲氧基 -2- 吡啶基 ) 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-(5- 甲氧基 -2- 吡啶基 ) 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 2-[4-(溴甲基)苯基]-5-甲氧基-吡啶 [CAS# 1160430-89-6] 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物，並以固體形式獲得。MS (ESI): 663.3 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 --1-[[4-(5- 甲氧基 -2- 吡啶基 ) 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 --1-[[4-(5- 甲氧基 -2- 吡啶基 ) 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak IC (250×30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (40 mg) (MS (ESI): 663.2 [M+H] ⁺，保留時間 0.94 分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (35 mg)。MS (ESI): 663.2 [M+H] ⁺；保留時間 1.63 分鐘 (管柱：Chiralpak IC-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(5- 甲氧基 -2- 吡啶基 ) 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(5- 甲氧基 -2- 吡啶基 ) 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

在 25℃，向 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (35.0 mg, 0.05 mmol, 1.0 eq) 在 DCM (3 mL) 中的溶液中，加入 TFA (1.0 mL, 12.98 mmol, 245.76 eq)，且將溶液在 25℃ 攪拌 1 小時。藉由小心添加飽和 NaHCO ₃溶液將混合物的 pH 調節至 8，且將所得混合物用 DCM (50 mL) 萃取。將有机層用鹽水 (50 mL) 洗滌、乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮。將剩餘殘餘物溶解於 EtOAc (10 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4M, 0.1 mL)。將混合物濃縮且添加水 (20 mL)，以在凍乾後獲得鹽酸鹽形式的淺黃色固體狀 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 A] (22 mg，0.04 mmol，67% 產率)。MS (ESI): 563.2 [M+H] ⁺，保留時間 0.94 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 563.2 [M+H] ⁺；保留時間 2.09 分鐘 (管柱：Chiralcel OX-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 39 (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(5- 甲氧基 -2- 吡啶基 ) 苯基 ] 甲基 ]-8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(5- 甲氧基 -2- 吡啶基 ) 苯基 ] 甲基 ]-8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

步驟 a) N-[5,5,7- 三氟 -1-[[4-(5- 甲氧基 -2- 吡啶基 ) 苯基 ] 甲基 ]-8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 2-[4-(溴甲基)苯基]-5-甲氧基-吡啶 [CAS# 1160430-89-6] 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-甲基-2-甲基磺醯基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物，並以固體形式獲得。MS (ESI): 716.3 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-5,5,7- 三氟 -1-[[4-(5- 甲氧基 -2- 吡啶基 ) 苯基 ] 甲基 ]-8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-5,5,7- 三氟 -1-[[4-(5- 甲氧基 -2- 吡啶基 ) 苯基 ] 甲基 ]-8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak AD (250×30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得淺黃色固體狀 N-[5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (65 mg) (MS (ESI): 716.3 [M+H] ⁺，保留時間 2.10 分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 N-[5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (60 mg)。MS (ESI): 716.3 [M+H] ⁺；保留時間 2.59 分鐘 (管柱：Chiralpak IF-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 iPrOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% iPrOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) (3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(5- 甲氧基 -2- 吡啶基 ) 苯基 ] 甲基 ]-8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮及 (3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[4-(5- 甲氧基 -2- 吡啶基 ) 苯基 ] 甲基 ]-8-[5-(1- 甲基 -1- 甲基磺醯基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

在 25℃，向 N-[5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (60.0 mg, 0.08 mmol, 1.0 eq) 在 DCM (10 mL) 中的溶液中，加入 TFA (3.0 mL, 38.94 mmol, 464.52 eq)，且將溶液在 25℃ 攪拌 1 小時。藉由小心添加飽和 NaHCO ₃溶液將混合物的 pH 調節至 8，且將所得混合物用 DCM (50 mL) 萃取。將有机層用鹽水 (50 mL) 洗滌、乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮。將剩餘殘餘物溶解於 EtOAc (10 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4M, 0.1 mL)。將混合物濃縮且添加水 (20 mL)，以在凍乾後獲得鹽酸鹽形式的淺黃色固體狀 3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 A] (11.5 mg，0.02 mmol，22% 產率)。MS (ESI): 616.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.45 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B]。MS (ESI): 616.2 [M+H] ⁺；保留時間 2.09 分鐘 (管柱：(S.S) Whelk-O1 50×4.6 mm I.D.，3.5 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH/MeCN 4:1 (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH/MeCN 4:1 (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 40 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -1-[[4-[5-( 二氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -1-[[4-[5-( 二氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 二氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 2-[4-(氯甲基)苯基]-5-(二氟甲基)吡啶 (中間體 8) 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以固體形式獲得。MS (ESI): 683.1 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 二氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 二氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(二氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak IC (250×30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(二氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (32 mg) (MS (ESI): 683.3 [M+H] ⁺，保留時間 0.82 分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(二氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (34 mg)。MS (ESI): 683.1 [M+H] ⁺；保留時間 1.34 分鐘 (管柱：Chiralpak IC-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -1-[[4-[5-( 二氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -1-[[4-[5-( 二氟甲基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

在 25℃，向 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(二氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (30.0 mg, 0.04 mmol, 1.0 eq) 在 DCM (9 mL) 中的溶液中，加入 TFA (3.0 mL, 38.94 mmol, 886.06 eq)，且將溶液在 25℃ 攪拌 1 小時。藉由小心添加飽和 NaHCO ₃溶液將混合物的 pH 調節至 8，且將所得混合物用 DCM (50 mL) 萃取。將有机層用鹽水 (50 mL) 洗滌、乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮。將剩餘殘餘物溶解於 EtOAc (10 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4M, 0.1 mL)。將混合物濃縮且添加水 (20 mL)，以在凍乾後獲得鹽酸鹽形式的淺黃色固體狀 2-甲基-2-[5-[3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 A] (20.1 mg，0.03 mmol，76% 產率)。MS (ESI): 583.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.53 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B]。MS (ESI): 583.2 [M+H] ⁺；保留時間 2.21 分鐘 (管柱：(S.S) Whelk-O1 50×4.6 mm I.D.，3.5 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；40% EtOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 41 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -1-[[4-[5-( 二氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -1-[[4-[5-( 二氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 二氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 2-[4-(氯甲基)苯基]-5-(二氟甲氧基)吡啶 (中間體 9) 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以固體形式獲得。MS (ESI): 699.4 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 二氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-1-[[4-[5-( 二氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak IC (250×30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (40 mg) (MS (ESI): 699.4 [M+H] ⁺，保留時間 1.69 分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (41 mg)。MS (ESI): 699.4 [M+H] ⁺；保留時間 2.16 分鐘 (管柱：Chiralpak IC-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -1-[[4-[5-( 二氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -1-[[4-[5-( 二氟甲氧基 )-2- 吡啶基 ] 苯基 ] 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

將 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (35.0 mg, 0.05 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (4 M, 10.0 mL, 40.0 mmol, 798.5 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 0.5 小時。將混合物濃縮且將剩餘殘餘物藉由製備型 HPLC 純化 (管柱 Waters Xbridge 150x25mm，5μm，水 (含 NH ₄HCO ₃)/MeCN = 3:2 至 3:7)。將產物溶解於 EtOAc (5 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4 M, 0.3 mL)。將混合物濃縮，且添加水，以在凍乾後獲得二鹽酸鹽形式的黃色固體狀 2-甲基-2-[5-[3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 A] (7.9 mg，0.01 mmol，23% 產率)。MS (ESI): 599.3 [M+H] ⁺，保留時間 0.86 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮 [異構體 B]。MS (ESI): 599.3 [M+H] ⁺；保留時間 1.86 分鐘 (管柱：Cellulose-2 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；40% EtOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 42 1-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸甲酯 及 1-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸甲酯

步驟 a) 1-[5-[3-( 三級丁氧基羰基胺基 )-1-[(4- 氰基苯基 ) 甲基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 4-(溴甲基)苄腈代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 3- 三級丁氧基羰基-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-1-羧酸代替三甲基乙酸)來製備標題化合物，並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 597.1 [M-(2 x 異丁烯)+H] ⁺。

步驟 b) 1-[5-[3-( 三級丁氧基羰基胺基 )-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[(Z)-N'- 羥基甲脒基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸三級丁酯

在 20℃，向 1-[5-[3-(三級丁氧基羰基胺基)-1-[(4-氰基苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸三級丁酯 (100.0 mg, 0.14 mmol, 1.0 eq) 及乙酸鈉 (34.72 mg, 0.42 mmol, 3.0 eq) 在乙醇 (2 mL) 中的混合物中，添加羥基氯化銨 (14.71 mg, 0.21 mmol, 1.5 eq)，且將該混合物在 50℃ 攪拌 12 小時。將反應混合物倒入水 (15 mL) 中，且將層分離。將水相用 EtOAc (10 mL x 3) 萃取，且將經合倂之萃取物用鹽水 (10 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮，以得到淺黃色固體狀標題化合物 (100.0 mg，0.13 mmol，95％產率)。MS (ESI): 742.1 [M+H] ⁺。

步驟 c) 1-[5-[3-( 三級丁氧基羰基胺基 )-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸三級丁酯

在 20℃，向 1-[5-[3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-1-[[4-[(Z)-N'-羥基甲脒基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸三級丁酯 (800.0 mg, 1.08 mmol, 1.0 eq) 在 THF (10 mL) 中的溶液中，添加三氟乙酸酐 (0.22 mL, 1.62 mmol, 1.5 eq)，且將混合物在 20℃ 攪拌 1 小時。將 EtOAc (30 mL) 和水 (30 mL) 添加到反應混合物中且將層分離。用飽和 NaHCO ₃水溶液小心地將水層的 pH 調節至 8，且將混合物用 EtOAc (50 mL x 3) 萃取。將合併之有机層用鹽水 (30 mL) 洗滌、乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮。將剩餘殘餘物藉由製備型 TLC 純化 (PE/EtOAc = 2:1)，以得到淺黃色固體狀標題化合物 (260.0 mg，0.32 mmol，30% 產率)。MS (ESI): 664.1 [M-(2 x 異丁烯)-CO ₂+H] ⁺。

步驟 d) 3- 胺基 -8-[5-(3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -1- 基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -2- 酮

將 1-[5-[3-(三級丁氧基羰基胺基)-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸三級丁酯 (150.0 mg, 0.18 mmol, 1.0 eq) 在 HCl/EtOAc (5.0 mL, 10.0 mmol, 54.65 eq) 中的溶液在 20℃ 攪拌 2 小時。將反應混合物濃縮，且將剩餘殘餘物用 PE/EtOAc = 10:1，3 mL 的混合物研製。將沉澱物收集並真空乾燥，以得到二鹽酸鹽形式的灰白色固體狀標題化合物 (120.0 mg，0.17 mmol，83% 產率)。MS (ESI): 620.3 [M+H] ⁺。

步驟 e) 1-[5-[3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸甲酯

在 20℃，向 3-胺基-8-[5-(3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-1-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮；二鹽酸鹽 (30.0 mg, 0.04 mmol, 1.0 eq) 及 DIPEA (19.6 mg, 0.15 mmol, 3.5 eq) 在 DCM (1 mL) 中的溶液中，添加二碳酸二甲酯 (5.81 mg, 0.04 mmol, 1.0 eq) 在 DCM (0.5 mL) 中的溶液，且將混合物在 20℃ 攪拌 1 小時。將反應混合物濃縮，並藉由製備型 TLC 純化 (120 mL EA 及 0.5 mL DIPEA)，以得到淺黃色固體狀標題化合物 (30.0 mg，0.04 mmol，99% 產率)。MS (ESI): 678.4 [M+H] ⁺。

步驟 f) 1-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸甲酯及 1-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[5-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -3- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -3- 甲酸甲酯

對 1-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯 (100 mg) 進行製備型 SFC (Daicel Chiralcel OD (250×30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 MeOH 中)，以獲得灰白色固體狀 1-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯 [異構體 A] (35 mg) (MS (ESI): 678.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.65 分鐘 (參見下面的條件) 及淺黃色固體狀 1-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯 [異構體 B] (35 mg)。MS (ESI): 678.3 [M+H] ⁺；保留時間 2.42 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 43 2- 甲基 -2-[5-[(3 S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲氧基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3 R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲氧基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲氧基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 1-[4-(溴甲基)苯基]-4-(三氟甲氧基)吡唑 (中間體 10) 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以黃色固體形式獲得。MS (ESI): 706.2 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲氧基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲氧基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲氧基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak AD (50×4.6 mm, 3 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲氧基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (126 mg) (MS (ESI): 706.2 [M+H] ⁺，保留時間 0.84 分鐘 (參見下面的條件) 及黃色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲氧基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (128 mg)。MS (ESI): 706.2 [M+H] ⁺；保留時間 1.16 分鐘 (管柱：Chiralcel AD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲氧基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[4-( 三氟甲氧基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

向 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲氧基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體A] (126.0 mg, 0.18 mmol, 1.0 eq) 在 DCM (4.5 mL) 中的溶液中，添加 TFA (1.5 mL)，且將混合物在 25℃ 攪拌 1 小時。添加 DCM (20 mL) 且藉由小心地添加飽和 NaHCO ₃溶液將混合物的 pH 調節至 8。將所得混合物用 DCM (15 mL x 3) 萃取，且將有機萃取物用鹽水 (30 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄)，並濃縮。將剩餘殘餘物溶解於 EtOAc (20 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4 M, 0.2 mL)。將混合物濃縮，以獲得鹽酸鹽形式的黃色固體狀 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲氧基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 A] (67.5 mg，0.1 mmol， 61% 產率)。MS (ESI): 606.1 [M+H] ⁺，保留時間 1.32 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲氧基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 606.2 [M+H] ⁺；保留時間 1.63 分鐘 (管柱：Chiralpak OD 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 44 2- 甲基 -2-[5-[(3 S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[2- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3 R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[2- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[2- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 1-[4-(氯甲基)-3-氟-苯基]-4-(三氟甲基)吡唑 (中間體 11) 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以黃色固體形式獲得。MS (ESI): 652.1 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[2- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[2- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak AD (250×30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (70 mg) (MS (ESI): 652.2 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 0.82 分鐘 (參見下面的條件) 及白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (72 mg)。MS (ESI): 652.1 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 1.30 分鐘 (管柱：Chiralpak AD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[2- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[2- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

將 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體A] (70.0 mg, 0.1 mmol, 1.0 eq) 在 DCM/TFA (3:1, 4.0 mL) 的混合物中的溶液在 25°C 攪拌 1 小時。添加 DCM (5 mL) 且藉由小心地添加飽和 NaHCO ₃溶液將混合物的 pH 調節至 8。將所得混合物用 DCM (10 mL x 3) 萃取，且將合併之有機層用鹽水 (20 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄)，並濃縮。將剩餘殘餘物藉由製備型 HPLC 純化 (管柱 Waters Xbridge 150x25mm，5μm)。將產物溶解於 EtOAc (30 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4 M, 0.05 mL)。將混合物濃縮，以獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 A] (32.2 mg ，0.05 mmol，50% 產率)。MS (ESI): 608.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.64 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 608.1 [M+H] ⁺；保留時間 2.06 分鐘 (管柱：Chiralpak IK-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 45 2- 甲基 -2-[5-[(3 S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[2- 氟 -6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3 R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[2- 氟 -6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[2- 氟 -6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 3-(氯甲基)-2-氟-6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]吡啶 (中間體 12) 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 731.2 [M+Na] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[2- 氟 -6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]3- 吡啶基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[2- 氟 -6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak OD (250×30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 MeOH 中)，以獲得白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (110 mg) (MS (ESI): 731.2 [M+Na] ⁺，保留時間 0.96 分鐘 (參見下面的條件) 及白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (120 mg)。MS (ESI): 731.2 [M+Na] ⁺；保留時間 1.52 分鐘 (管柱：Chiralpak OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[2- 氟 -6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[2- 氟 -6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

向 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (100.0 mg, 0.14 mmol, 1.0 eq) 在 DCM (10.0 mL) 中的溶液中，添加 TFA (3.0 mL, 38.94 mmol, 275.93 eq)，且將混合物在 20℃ 攪拌 0.5 小時。小心地添加飽和 NaHCO ₃溶液 (50 mL) 且將所得混合物用 DCM (50 mL) 萃取。將有机相用鹽水 (50 mL) 洗滌、乾燥 (Na ₂SO ₄) 並濃縮。將剩餘殘餘物溶解於 EtOAc (10 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4 M, 0.1 mL)。將混合物濃縮，且將剩餘殘餘物溶解在水 (20 mL) 中，以在凍乾後獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 A] (70.2 mg，0.11 mmol，73% 產率)。MS (ESI): 609.1 [M+H] ⁺，保留時間 1.35 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 609.1 [M+H] ⁺；保留時間 2.08 分鐘 (管柱：Chiralpak OD 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 46 2- 甲基 -2-[5-[(3 S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3 R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 5-(氯甲基)-2-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]吡啶 (中間體 13) 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以黃色固體形式獲得。MS (ESI): 691.2 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak OD (250×30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (125 mg) (MS (ESI): 691.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.03 分鐘 (參見下面的條件) 及白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (125 mg)。MS (ESI): 691.2 [M+H] ⁺；保留時間 1.49 分鐘 (管柱：Chiralpak OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[6-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ]-3- 吡啶基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

將 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體A] (120.0 mg, 0.17 mmol, 1.0 eq) 在 DCM/TFA (3:1, 12.0 mL) 的混合物中的溶液在 25°C 攪拌 1 小時。添加 DCM (10 mL) 且藉由小心地添加飽和 NaHCO ₃溶液將混合物的 pH 調節至 8。將所得混合物用 DCM (20 mL x 3) 萃取，且將有機萃取物用鹽水 (50 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄)，並濃縮。將剩餘殘餘物藉由製備型 HPLC 純化 (管柱 Waters Xbridge 150x25mm，5μm)。將產物溶解於 EtOAc (30 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4 M, 0.1 mL)。將混合物濃縮，以獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 A] (61.8 mg，0.1 mmol，產率 55%)。MS (ESI): 591.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.38 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 591.1 [M+H] ⁺；保留時間 2.00 分鐘 (管柱：Chiralpak OD 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 47 2- 甲基 -2-[5-[(3 S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[3- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3 R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[3- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[3- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 1-[4-(氯甲基)-2-氟-苯基]-4-(三氟甲基)吡唑 (中間體 14) 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 708.2 [M+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[3- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -1-[[3- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[3-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak OD-H (250×30 mm, 5 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[3-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (130 mg) (MS (ESI): 708.2 [M+H] ⁺，保留時間 0.88 分鐘 (參見下面的條件) 及白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[3-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B] (130 mg)。MS (ESI): 708.2 [M+H] ⁺；保留時間 1.16 分鐘 (管柱：Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[3- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -1-[[3- 氟 -4-[4-( 三氟甲基 ) 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-2- 側氧 -3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

向 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[3-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體A] (120.0 mg, 0.17 mmol, 1.0 eq) 在 DCM (10.0 mL) 中的溶液中，添加 TFA (3.0 mL)，且將混合物在 20℃ 攪拌 0.5 小時。藉由小心地添加飽和 NaHCO ₃溶液將混合物的 pH 調節至 8。將所得混合物用 DCM (50 mL) 萃取，且將有機層用鹽水 (50 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄)，並濃縮。將剩餘殘餘物溶解於 EtOAc (10 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4 M, 0.1 mL)。將混合物濃縮且添加水 (20 mL)，以在凍乾後獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[3-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 A] (67.5 mg ，0.1 mmol，61% 產率)。MS (ESI): 608.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.33 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[3-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 608.1 [M+H] ⁺；保留時間 1.73 分鐘 (管柱：Chiralpak OD 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。實例 48 2- 甲基 -2-[5-[(3 S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[1-( 三氟甲基 ) 吡唑 -4- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3 R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[1-( 三氟甲基 ) 吡唑 -4- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

步驟 a) N-[8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[1-( 三氟甲基 ) 吡唑 -4- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1 步驟 a 至 l (在步驟 f 中使用 4-[4-(氯甲基)苯基]-1-(三氟甲基)吡唑 (中間體 15) 代替 4-(三氟甲氧基)芐基溴且在步驟 k 中使用 2-氰基-2-甲基-丙酸代替三甲基乙酸) 來製備標題化合物並以淺黃色固體形式獲得。MS (ESI): 634.2 [M-異丁烯+H] ⁺。

步驟 b) N-[(3S)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[1-( 三氟甲基 ) 吡唑 -4- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯及 N-[(3R)-8-[5-(1- 氰基 -1- 甲基 - 乙基 )-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ]-5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[1-( 三氟甲基 ) 吡唑 -4- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -3- 基 ] 胺甲酸三級丁酯

對 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[1-(三氟甲基)吡唑-4-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯進行製備型 SFC (Daicel Chiralpak AD (250×30 mm, 10 µm)，0.1% NH ₃-H ₂O 在 EtOH 中)，以獲得白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[1-(三氟甲基)吡唑-4-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 A] (MS (ESI): 634.2 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 1.27 分鐘 (參見下面的條件) 及白色固體狀 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[1-(三氟甲基)吡唑-4-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體 B]。MS (ESI): 634.2 [M-異丁烯+H] ⁺，保留時間 1.89 分鐘 (管柱：Chiralpak IC-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 EtOH (0.05% DEA)；梯度溶析：5% 至 40% EtOH (0.05% DEA) 在CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：DAD；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。

步驟 c) 2- 甲基 -2-[5-[(3S)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[1-( 三氟甲基 ) 吡唑 -4- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈及 2- 甲基 -2-[5-[(3R)-3- 胺基 -5,5,7- 三氟 -2- 側氧 -1-[[4-[1-( 三氟甲基 ) 吡唑 -4- 基 ] 苯基 ] 甲基 ]-3,4- 二氫 -1- 苯并吖呯 -8- 基 ]-1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ] 丙腈

向 N-[8-[5-(1-氰基-1-甲基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[1-(三氟甲基)吡唑-4-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-3-基]胺甲酸三級丁酯 [異構體A] (270.0 mg, 0.39 mmol, 1.0 eq) 在 DCM (9.0 mL) 中的溶液中，添加 TFA (3.0 mL)，且將混合物在 20°C 攪拌 1 小時。將混合物用 DCM (1.5 mL) 稀釋，且藉由小心地添加飽和 NaHCO ₃溶液將混合物的 pH 調節至 8。將所得混合物用 DCM (3 mL x 3) 萃取，且將有機萃取物用鹽水 (7 mL) 洗滌，乾燥 (Na ₂SO ₄)，並濃縮。將剩餘殘餘物溶解於 EtOAc (10 mL) 中，且添加 HCl/EtOAc (4 M, 0.3 mL)。將混合物濃縮且添加水 (20 mL)，以在凍乾後獲得鹽酸鹽形式的白色固體狀 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[1-(三氟甲基)吡唑-4-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 A] (237.1 mg ，0.38 mmol，94% 產率)。MS (ESI): 590.2 [M+H] ⁺，保留時間 1.41 分鐘 (參見下面的條件)。類似地獲得 2-甲基-2-[5-[3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[1-(三氟甲基)吡唑-4-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈 [異構體 B]。MS (ESI): 608.1 [M+H] ⁺；保留時間 1.85 分鐘 (管柱：Chiralpak OD-3 50×4.6 mm I.D.，3 µm；流動相：A 相為 CO ₂，且 B 相為 MeOH (0.05% DEA)；5% 至 40% MeOH (0.05% DEA) 在 CO ₂中；流速：3 mL/min；偵測器：PDA；管柱溫度：35℃；背壓：100 巴)。 2 ） 生物實例 2.1）活體外 DGK 抑制測定

DGK α 及 ζ 激酶使用 ATP 以使受質 1,2-月桂醯基-sn-甘油 (DLG，併入脂質體) 磷酸化。由於該酶促反應，ATP 被轉化為 ADP。

在激酶反應後，添加 ATP 浩傑試劑以終止該激酶反應並耗竭任何剩餘的 ATP，僅留下 ADP。其次，添加偵測試劑以同時將 ADP 轉化為 ATP，並允許使用偶合之螢光素酶/螢光素反應，將新合成的 ATP 轉化為光。 試劑及材料緩衝液成分 (溶液及鹽)

化學品	廠商	目錄號：
DTT	AppliChem	目錄號 A3668
BSA	Sigma - Aldrich	目錄號 A2153-10G
MOPS	Sigma - Aldrich	目錄號 M1254
氯化鈉 (NaCl)	Sigma - Aldrich	目錄號 S7663-1KG
氯化鎂 (MgCl ₂)	MERCK	目錄號 1.05833.0250
氯化鈣 (CaCl ₂)	Sigma - Aldrich	目錄號 C4901-500G

蛋白質/受質/示蹤劑

蛋白質 / 受質 / 示蹤劑	廠商	批次 # ；探針 #
DGKA	內部生產	hDGKα(1-735)-N-His
DGKZ	內部生產	hDGKζ(1-928)-N-His
18:1 PS (DOPS)	Sigma - Aldrich	目錄號 840035C
16:0-18:1 PC	Sigma - Aldrich	目錄號 850457C
1,2-月桂醯基-sn-甘油 (DLG)	Sigma - Aldrich	目錄號 800812C
超純 ATP	Promega	目錄號 V9101 部件號 V915A
ADP-Glo 試劑	Promega	目錄號 V9101 部件號 V912A
激酶偵測受質	Promega	目錄號 V9101 部件號 V914A
激酶偵測緩衝液	Promega	目錄號 V9101 部件號 V913A

藉由用 MOI 為 2 的桿狀病毒原液感染細胞，在 Sf21 昆蟲細胞中表現全長 DGKA 及 Z。按照 Takahashi 等人之前發表於 2018 年 PeerJ 上的文章中所述的方法純化兩種酶 ( Takahashi, D.; Sakane, F. Expression and purification of human diacylglycerol kinase alpha from baculovirus-infected insect cells for structural studies.PeerJ 2018, 6, No. e5449)。硬體

材料	廠商	目錄號 / 體積範圍
384 多孔板，白色	Greiner	目錄號 781904
384 多孔板，白色	Corning	目錄號 CLS3574
Matrix 多通道移液器	Thermo Fisher SCIENTIFIC	2-125 µl
Multidrop Combi	Thermo Fisher SCIENTIFIC	0.5–50 µl/孔
Envision 酶標儀	Perkin Elmer

測定緩衝劑 (30ml)

化學	初始濃度 ( 儲備液 )	工作溶液 (1 次 )	最終測定濃度
濃度	[mM, %....]	濃度	[mM, %....]	體積 [µl]	濃度	[mM, %....]
MOPS (pH 7.5)	1000	mM	50	mM	1500	50	mM
NaCl	5000	mM	100	mM	600	100	mM
MgCl ₂	1000	mM	10	mM	300	10	mM
CaCl ₂	1	mM	0.001	mM	30	0.001	mM
DTT	1000	mM	1	mM	30	1	mM
BSA	10	%	0.01	%	30	0.01	%
注滿：	去離子蒸餾水：	27510

測定程序

在不含 DTT 及 BSA 的測定緩衝劑中製備濃縮的脂質體溶液：2 mM DLG，於 21 mM 總脂質體中 (2 mM DLG / 8 mM PS / 11 mM PC)。反應混合物含有最終 DLG 濃度為 125 µM 的測定緩衝液，ATP 濃度為 25 µM (用於 DGKA 測定) 或 50 µM (用於 DGKZ 測定)。藉由添加最終濃度分別為 4 nM 和 2 nM 的 DGK α 和 ζ 激酶以開始反應。反應 1 小時後，根據生產商說明，用 ADP-Glo 激酶測定 (Promega) 偵測所形成的 ADP 的量。化合物以 11 點劑量反應添加，從 10 mM 開始，按 1:3 稀釋，最終 DMSO 濃度為 2%。將 Multidrop Combi 用為液體處理器，并使用 Envision 酶標儀 (PE) 在 0.5 秒內讀取發光。結果

實例	異構體	DGKα ADP Glo 測定 IC ₅₀(µM)	DGK ζ ADP Glo 測定 IC ₅₀(µM)
1	A	33.886	19.934
2	A	1.401	1.806
3	A	1.568	2.892
4	A	4.372	8.928
5	A	16.923	2.398
6	A	56.127	13.831
7	A	9.643	1.731
8	A	5.438	16.137
9	A	9.920	2.356
10	A	16.199	11.454
11	A	3.314	1.252
12	A	24.627	2.896
13	A	9.250	2.256
14	A	＞62.5	17.928
15	A	39.595	1.812
16	A	13.247	14.851
17	A	＞62.5	3.249
18	A	＞62.5	＞62.5
19	A	41.596	7.244
20	A	7.182	2.137
21	A	10.877	11.828
22	A	10.592	17.770
23	A	14.123	15.443
24	A	1.855	2.404
26	A	0.425	8.822
27	A	24.620	1.825
28	A	31.681	11.222
29	A	0.551	13.861
30	A	26.368	10.208
32	A	51.273	33.849
33	A	2.370	1.683
34	A	＞60.000	11.059
35	A	＞18.980	＞18.980
36	A	55.159	5.923
37	A	11.157	2.849
38	A	60.000	5.796
39	A	44.396	38.751
40	A	15.348	2.499
41	A	24.035	8.222
42	A	4.315	2.225
46	A	17.840	6.751
47	A	23.688	2.992
48	A	1.508	4.915

活體外 DGK 抑制測定 (ADP Glo)

DGK α 及 ζ 激酶使用 ATP 以使受質 1,2-月桂醯基-sn-甘油 (DLG) 磷酸化。由於該酶促反應，ATP 被轉化為 ADP。

在激酶反應後，添加 ATP 浩傑試劑以終止該激酶反應並耗竭任何剩餘的 ATP，僅留下 ADP。其次，添加偵測試劑以同時將 ADP 轉化為 ATP，並允許使用偶合之螢光素酶/螢光素反應，將新合成的 ATP 轉化為光。 實驗程序、試劑及材料

DGK α 及 ζ 激酶 ADP Glo 測定由 Reaction Biology Corp., 1 Great Valley Parkway, Suite 2, Malvern, 19355, PA, USA 進行。服務提供商提供的信息如下：DGK α 及 ζ 激酶在 2 nM 最終濃度下使用。反應在 50 μM ATP 下進行。使用 500 uM 受質 DLG (二月桂醯基-sn-甘油)。在 10 mM DMSO 儲備溶液下接受化合物，並以 10-劑量 IC50 測試兩次，自 1 μM 開始進行 3 倍系列稀釋。對照化合物 Calphostin C 以 10 劑量 IC50 進行測試，自 100 μM 開始進行 3 倍系列稀釋。結果

實例	異構體	DGKα IC ₅₀(nM)	DGK ζ IC ₅₀(nM)
2	A	10.5	22.1
5	A	124.4	57.9
7	A	70.3	49.5
9	A	43.6	32.6
10	A	93.1	1055.5
11	A	6.9	20.6
12	A	107.7	73.0
33	A	8.2	80.3
37	A	46.2	135.6

2.2) IL2 分泌測量

作為 T 細胞活化的讀數，測量 24 小時後之 IL2 分泌及 5 天後之增殖。經化合物處理後 IL2 分泌及增殖的增加幅度作為參考化合物 A1的最大值的百分比進行評估。WO 2016/139181 揭示了參考化合物 A1作為實例 70。作為計數器篩選並確保不觸發不需要的不依賴 TCR 的活化，對所有化合物都在 PBS 條件下運行。 試劑及材料

試劑	信息	原液濃度	最終濃度
化合物稀釋緩衝劑 (CDB) DMSO	Sigma, #D2650	＞99%	0.2% DMSO
RPMI + GlutaMAX	Gibco, #61870-010
人血清 (HS)	Sigma, #H3667-100ML	100%	5%
丙酮酸鈉 (100 mM)	Gibco, #11360-039	100x	1x
2-巰乙醇	Gibco, #31350-010	50 mM	50 µM
青黴素-鏈黴素 (10,000 U/mL)	Life Technologies, #15140122	100X	1X
從分離之周邊血液單核細胞 (PBMC) 中富集的原代 T 淋巴細胞	從 Blutspendezentrum Basel-Stadt 訂購的用於 PBMC 的膚色血球層，RNCB ID：CL008438		在 96 孔中 (100k/孔)，312,500 個細胞/cm2
活化劑對照參考化合物	參考化合物 A1，於 DMSO 中之原液，DMSO 最終濃度為 0.2%	10 mM	20 µM
中性對照 DMSO	Sigma, #D2650	100%	0.2% DMSO
化合物	於 DMSO 中之原液	10 mM	DR，自 20 µM 開始；稀釋係數 3.333；5 步
無刺激對照 PBS++	PBS++, Gibco #14040-091	100%	100%
刺激對照 CD3	CD3 單株抗體 (OKT3)，Thermo Fisher #16-0037-81	1mg/ml	取決於供體 (0.1 – 1.0ug/ml)
96 孔細胞培養盤，塗布聚-D 離胺酸	Corning, #354640
用於刺激對照 CD3 的塗覆緩衝劑	PBS++, Gibco #14040-091
用於經塗布的盤及 ELISA 的洗滌緩衝劑	PBS--, Gibco # 14190-094
IL-2 人 ProQuantum 免疫測定套組	Invitrogen, #A35603
用於免疫測定的 MicroAmp™ EnduraPlate™ 光學 384 孔	Applied Biosystems, #4483273
用於免疫測定的 LightCycler® 480 密封箔	Roche, #04729757001
IL-2 人未經塗布的 ELISA 套組	Thermo Fisher Scientific, #88-7025-88
用於 ELISA 的Tween 10%	Bio-Rad, #161-0781	10%	0.05%
用於 ELISA 的 Nunc MaxiSorp 盤	Thermo Fisher Scientific, #439454
用於 ELISA 稀釋的 V 型底盤	Greiner Bio-One, #651201
MACS 過濾器 (濾網)	Miltenyi Biotech, #130-041-407
TopSeal-A Plus (用於 sn 採集的密封)	Perkin Elmer, #6050185
用於 IL-2 / 上清液收穫物的 U 型底盤	Costar, #3799
LightCycler® 480 多孔盤 96 (白色)，ProQuantum 工作盤	Roche, #04729692001

細胞培養基

將擴增的原代人 T 細胞解凍，並置於 RPMI 1640 (Gibco, #61870-010) + 5% 人血清 (HS, Sigma, #H3667) + 1 mM 丙酮酸鈉 (Gibco, #11360-039) + 50 µM 2-巰乙醇 (Gibco, #31350-010) 及 1x Pen-Strep (Life Technologies, #15140122) 培養基中，在 5% CO2、37℃ 及 95% 濕度的條件下以 2 Mio/ml 的密度培養 3 小時。在塗布盤時，將 PBS++ 與 PBS-- 或 PBS++ 與 CD3 抗體 (濃度取決於供體並藉由 CD3 滴定確定) 以 100 µl/孔的密度添加至經聚-D 離胺酸塗布之 96 孔盤中。將盤密封並在臺上型搖擺平台上於室溫下孵育 3 小時。孵育後，將盤用 PBS-- 洗滌一次，並僅填充 40 µl/孔的培養基。然後將化合物 (見下一節) 添加至僅含培養基的盤中。將 T 細胞培養 3 小時後，經由細胞過濾器 (Miltenyi Biotech, #130-041-407) 過濾細胞，再次計數並將濃度調整至 1.25 Mio/ml。

然後根據盤佈局將細胞以 80µl/孔至 40µl/孔 (包括所分配之化合物) 接種。藉由添加細胞，將化合物按 1:3 進一步稀釋，得到 100k 個細胞/120µl/孔。24 小時後，在不干擾細胞的情況下從頂部小心地收集 40 µl 上清液，並將其轉移至圓底 96 孔盤中。使用 IL-2 人 ProQuantum 免疫測定套組 (Invitrogen) 或使用人 IL-2 ELISA 套組 (Thermo Fisher)，將收集並冷凍的上清液用於偵測 IL2。 化合物處理

使用 Tecan D300e 數位分配器以 5 或 6pt 的劑量反應添加化合物，所有條件下的濃度皆比末端濃度高 3 倍，因為細胞係在之後添加 (將 80 µl 細胞添加至經處理的 40 µl 所製備的培養基中)。DR 從最高最終濃度 20 µM 或 10 µM 開始，且稀釋係數為 3.333。陽性對照係在劑量反應中添加的參考化合物 A1，另外添加至 3 個僅 20 µM 的孔中，其代表陽性刺激劑對照。用 DMSO 將所有孔歸一化至最終濃度為 0.6% (末端濃度為 0.2%)。 IL2 ProQuantum 免疫測定

按照生產商之手冊 (Invitrogen, #A35603) 進行免疫測定。

附加信息：免疫測定使用 MicroAmp™ EnduraPlate™ 光學 384 孔盤。將冷凍的上清液解凍，並以 1000×g 離心 5 分鐘，兩個步驟均在 4℃ 下進行。離心後，從頂部取出所需之樣品量，並置於用測定稀釋緩衝劑稀釋的單獨 LightCycler V 型底盤 (工作盤) 中，稀釋係數取決於 PBS 或 CD3 條件，但至少為 1:3。IL-2 標準品及空白在同一個 V 型底盤中製備，標準品的範圍為 0.0128-5000 pg/ml (擴展版)。製備後，將 5µl 樣品稀釋液或標準品/空白樣品轉移至光學 384 孔盤 (測定盤) 中，並遵循 10 µl 反應方案進行反應。使用 QuantStudio 12K Flex 系統進行測量。提取原始資料並使用 Thermo Fisher 在線應用程式 (apps.thermofisher.com/apps/proquantum) 計算 IL-2 濃度。 IL2 Elisa

ELISA 係按照生產商之手冊 (Thermo Fisher Scientific, #88-7025-88) 進行。

附加信息：ELISA 使用 Nunc MaxiSorp 96 孔盤。將冷凍的上清液解凍，並以 1000×g 離心 5 分鐘，兩個步驟均在 4℃ 下進行。然後，從頂部取出所需之樣品量，並置於用 ELISA 稀釋劑稀釋的單獨 V 型底盤中，稀釋係數取決於 PBS 或 CD3 條件。IL-2 標準品及空白在同一個 V 型底盤中製備。製備後，將 50 µl 樣品稀釋液及 100 µl 標準品或空白轉移至 Nunc 盤中。 計算及資料報告

在 Genedata Screener 中使用 Roche 歸一化 PCT_POS_CTRL 分別分析 CD3 及 PBS 盤，其中將 DMSO 設定為中性對照，並將 20 µM 參考化合物 A1設定為刺激劑對照/100%。

對於 CD3 條件，報告了擬合 S 形曲線的 EC50 及 Emax。如果無法擬合曲線，則將 EC50 報告為空白字段，且 Emax 基於單個資料點。Emax 並不總是對應於測試的最高濃度。標記活化未經刺激之細胞的化合物或對生存力產生負面影響的化合物 (參見增殖測定)。結果

實例	異構體	Tcell IL2 CD3 EC ₅₀(nM)	Emax IL2 (% 活化)
1	A	1,049.1	96
2	A	826.7	256
3	A	＞10,000.0	37
4	A	820.6	91
5	A	2,333.3	165
6	A	＞10,000.0	16
7	A	280.2	94
8	A	372.6	69
9	A	370.4	133
10	A	378.5	57
12	A	367.2	67
13	A	＞10,000.0	58
14	A	982.1	239
15	A	1285.2	152
16	A	1,457.7	183
17	A	3,789.5	107
19	A	＞2727.3	63
20	A	1011.9	161
21	A	7737.7	63
22	A	＞2727.3	31
23	A	＞2727.3	42
24	A	76.8	140
26	A	301.5	97
27	A	＞2727.3	181
28	A	678.5	73
29	A	＞10000.0	48
30	A	2611.4	77
32	A	600.0	27
33	A	237.3	62
34	A	＞10000.0	31
35	A	216.5	94
36	A	856.1	53
37	A	457.2	136
38	A	2078.5	105
39	A	＞10000.0	35
40	A	＞10000.0	27
41	A	883.7	131
42	A	2889.1	129

2.3）增殖測定 試劑及材料

試劑	信息	原液濃度	最終濃度
化合物稀釋緩衝劑 (CDB) DMSO	Sigma, #D2650	＞99%	0.2% DMSO
RPMI + GlutaMAX	Gibco, #61870-010
經熱滅活之人血清 (HS)	Sigma, #H3667-100ML		5%
丙酮酸鈉 (100 mM)	Gibco, #11360-039	100x	1x
2-巰乙醇	Gibco, #31350-010	50mM	50µM
青黴素-鏈黴素 (10,000 U/mL)	Life Technologies, #15140122	100X	1X
從分離之周邊血液單核細胞 (PBMC) 中富集的原代 T 淋巴細胞	從 Blutspendezentrum Basel-Stadt 訂購的用於 PBMC 的膚色血球層，RNCB ID：CL008438		在 96 孔中 (100k/孔)，312,500 個細胞/cm2
活化劑對照參考化合物	參考化合物 A1，於 DMSO 中之原液，DMSO 最終濃度為 0.2%	10 mM	20 µM
中性對照 DMSO	Sigma, #D2650		0.2% DMSO
化合物	於 DMSO 中之原液	10 mM	DR，自 20 µM 開始；稀釋係數 3.333；5 步
無刺激對照 PBS++	PBS++, Gibco #14040-091	100%	100%
刺激對照 CD3	CD3 單株抗體 (OKT3)，Thermo Fisher #16-0037-81	1mg/ml	取決於供體 (0.1 – 1.0 µg/ml)
96 孔細胞培養盤，塗布聚-D 離胺酸	Corning, #354640
用於刺激對照 CD3 的塗覆緩衝劑	PBS++, Gibco #14040-091
用於經塗布的盤的洗滌緩衝劑	PBS--, Gibco # 14190-094
CellTiter-Glo® 發光細胞生存力測定	Promega, #G7572	2x	1x
MACS 過濾器 (濾網)	Miltenyi Biotech, #130-041-407
TopSeal-A Plus (密封以用於塗布)	Perkin Elmer, #6050185
背襯膠帶 (用於測量)	Perkin Elmer, #6005199

將擴增的原代人 T 細胞解凍，並置於 RPMI 1640 (Gibco, #61870-010) + 5% 人血清 (HS, Sigma, #H3667) + 1mM 丙酮酸鈉 (Gibco, #11360-039) + 50 µM 2-巰乙醇 (Gibco, #31350-010) 及 1x Pen-Strep (Life Technologies, #15140122) 培養基中，在 5% CO2、37℃ 及 95% 濕度的條件下以 2 Mio/ml 的密度培養 3 小時。在塗布盤時，將僅 PBS++ 或 PBS++ 與 CD3 抗體 (濃度取決於供體並藉由 CD3 滴定確定) 以 100 µl/孔的密度添加至經聚-D 離胺酸塗布之 96 孔盤中。將盤密封並在臺上型搖擺平台上於室溫下孵育 3 小時。孵育後，將盤用 PBS-- 洗滌一次，並僅填充 40 μl/孔的培養基。然後將化合物 (見下一節) 添加至僅含培養基的盤中。將 T 細胞培養 3 小時後，經由細胞過濾器 (Miltenyi Biotech, #130-041-407) 過濾細胞，再次計數並將濃度調整至 1.25 Mio/ml。

然後根據盤佈局將細胞以 80 µl/孔至 40 µl/孔 (包括所分配之化合物) 接種。藉由添加細胞，將化合物按 1:3 進一步稀釋，得到 100k 個細胞/120 µl/孔。48 小時後，在不干擾細胞的情況下從頂部小心地收集 40µl 上清液。5 天後，藉由使用 CellTiterGlo (Promega) 測量 ATP 消耗來評估細胞之增殖。 化合物處理

使用 Tecan D300e 數位分配器以 5 或 6pt 的劑量反應添加化合物，所有條件下的濃度皆比末端濃度高 3 倍，因為細胞係在之後添加 (將 80µl 細胞添加至經處理的 40µl 所製備的培養基中)。DR 從最高最終濃度 20µM 或 10µM 開始，且稀釋係數為 3.333。陽性對照係在劑量反應中添加的參考化合物 A1，另外添加至 3 個僅 20µM 的孔中，其代表陽性刺激劑對照。用 DMSO 將所有孔歸一化至最終濃度為 0.6% (末端濃度為 0.2%)。 細胞滴度 Glo 測量

5 天後，使用 CellTiter-Glo® 2.0 試劑偵測與每個孔內存在的細胞數量成正比的 ATP。在對所測試之化合物的毒性或沉澱進行肉眼檢查後，在 45 分鐘內將盤平衡至室溫。還將 CellTiter-Glo® 2.0 試劑平衡至室溫。平衡後，用電子多通道移液器將等量 CellTiter-Glo 試劑添加至細胞中 (80 µl/孔)。於室溫下，將盤置於搖擺平台上處理 15 分鐘。孵育後，用背帶密封盤底。用 PHERAstar FSX 測量發光 (間隔時間為 0.5 秒，增益為 3000，焦點高度為 15 mm) 並導出為 CSV 文件以在 Genedata Screener 中進行分析。 計算及資料報告

對於 CD3 條件，報告了擬合 S 形曲線的 EC50 及 Emax。如果無法擬合曲線，則將 EC50 報告為空白字段，且 Emax 基於單個資料點。Emax 並不總是對應於測試的最高濃度。標記活化未經刺激之細胞的化合物 (參見 IL2 測量值) 或對生存力產生負面影響的化合物。結果

實例	異構體	T 細胞增殖 CD3 EC ₅₀(nM)	E _max增殖 (活性%)
1	A	2,587.9	74
2	A	314.8	161
3	A	549.5	57
4	A	139.6	112
5	A	684.4	249
6	A	479.1	50
7	A	126.8	110
8	A	185.3	86
9	A	266.6	114
10	A	376.6	76
11	A	192.5	88
12	A	409.0	152
13	A	77.7	79
14	A	592.8	149
15	A	127.3	108
16	A	296.4	241
17	A	557.6	115
18	A	666.4	52
19	A	983.8	85
20	A	205.0	118
21	A	＞10000.0	43
22	A	2107.0	62
23	A	＞10000.0	98
24	A	161.2	129
26	A	949.5	155
27	A	598.5	79
28	A	978.4	96
29	A	91.7	93
30	A	589.0	94
32	A	2339.0	81
33	A	98.8	128
34	A	1219.7	75
35	A	123.8	128
36	A	167.8	82
37	A	214.8	138
38	A	1015.2	105
39	A	1416.3	98
40	A	655.3	99
41	A	195.7	113
42	A	1263.2	117
43	A	23.4	105
44	A	1458.4	126
45	A	2935.8	67
46	A	542.3	87
47	A	495.7	98
48	A	163.2	171

2.4) T 細胞 - TCB - MV3 毒殺測定 試劑及材料

試劑	信息	原液濃度	最終濃度
化合物稀釋緩衝劑 (CDB) DMSO	Sigma, #D2650	＞99%	0.2% DMSO
MV-3 RFP 培養基
DMEM + GlutaMAX	Gibco, #31966-021
胎牛血清 (FBS)	VWR, #97068-085
青黴素-鏈黴素 (PenStrep) (10,000 U/mL)	Life Technologies, #15140122	100X	1X
嘌呤黴素二鹽酸鹽	Sigma, #P9620-10M
T 細胞培養基
RPMI + GlutaMAX	Gibco, #61870-010
經熱滅活之人血清 (HS)	Sigma, #H3667-100ML		5%
丙酮酸鈉 (100 mM)	Gibco, #11360-039	100x	1x
2-巰乙醇	Gibco, #31350-010	50 mM	50 µM
青黴素-鏈黴素 (PenStrep) (10,000 U/mL)	Life Technologies, #15140122	100X	1X
從分離之周邊血液單核細胞 (PBMC) 中富集的原代 T 淋巴細胞	自 stemcell technologies 訂購的 PBMC，#70025		在 96 孔中 (100k/孔)，312,500 個細胞/cm2
MV-3 RFP (核表現)，選殖株 22	RNCB 標本 ID：		在 96 孔中 (10k/孔)，31,250 個細胞/cm2
活化劑對照參考化合物	參考化合物 A1，於 DMSO 中之原液，DMSO 最終濃度為 0.2%	10 mM	20 µM
胰蛋白酶 0.05%	Gibco, #25300-054
T 型燒瓶	Falcon, #353133
中性對照 DMSO	Sigma, #D2650		0.2% DMSO
化合物	於 DMSO 中之原液	10 mM	DR，自 20 µM 開始；稀釋係數 3.333；8 步
無刺激對照 PBS--	PBS--, Gibco # 14190-094	100%	取決於 TCB 濃度
刺激對照 MCSP-TCB	內部生成之 TCB，概念 ID P1AD8773-001，WO 2014/131711 Al	批次相依性	1.5 pM – 5 pM (取決於供體敏感性)
96 孔細胞培養盤，低蒸發	TTP, #92696
圓底盤	Costar, #3799
6 孔細胞培養盤	Corning, #3506
MACS 過濾器 (濾網)	Miltenyi Biotech, #130-041-407

細胞培養基

所有培養步驟均在 5% CO2、37℃ 及 95% 濕度的條件下進行。

將 MV-3 RFP 細胞在 MV-3 培養基 (DMEM + 10% FBS、1x PenStrep 及 0.5 µg/mL 嘌呤黴素)中培養至少 3 週。將所培養的 80% 鋪滿之 MV-3 細胞用 PBS-- 洗滌一次，並使其胰蛋白酶化直至分離。然後對細胞進行計數並在 T 細胞培養基 (RPMI 1640 + 5% 人血清 + 1mM 丙酮酸鈉 + 50 µM 2-巰乙醇及 1x Pen-Strep) 中重懸至 1×105 個細胞/mL。將細胞以 100 µL/孔接種至 96 孔盤 (TTP, #92696) 中，並於室溫下放置 40 分鐘而不移動，以便實現細胞均勻分佈之附著。然後盤，直至進一步使用。

第二天，將擴增的原代人 T 細胞解凍並重懸於 T 細胞培養基中，以達到 4×106 個細胞/mL。在 6 孔盤中培養 3 小時，每孔至多 6 mL。在培養 T 細胞後，經由細胞過濾器 (Miltenyi Biotech, #130-041-407) 對其進行過濾，再次計數並將細胞濃度調整至 2×106 個細胞/mL。 化合物處理

將 MCSP-TCB 或 PBS 在 T 細胞培養基中預稀釋 (濃度取決於 T 細胞供體)，濃度比末端濃度高 4 倍。然後根據盤佈局將 60 µL/孔的預稀釋液分配到圓底盤 (Costar, #3799) 中。使用 Tecan D300e 數位分配器以 9pt 的劑量反應添加化合物，其濃度比末端濃度高 4 倍。將所有孔的 DMSO 濃度調整至 0.8%，使最終濃度為 0.2%。

將每孔 60 µL 的 T 細胞懸液添加至所製備的圓底盤中，並使用手動多通道重懸。然後根據盤佈局小心地將 100 µL/孔的重懸 T 細胞懸液 (包括處理) 轉移至過夜培養的 MV-3 細胞中。僅將 100 µL T 細胞培養基添加至外部 MV-3 孔中。最終化合物 DR 從 20 µM 開始，稀釋係數為 3.333。最終 TCB 濃度在 1.5 pM 與 5 pM 之間，並藉由運行 TCB 滴定對每個 T 細胞供體單獨確定。對於每種供體，選擇對應於在不經化合物處理的情況下 10-20% 的 MV3 基線細胞毒殺的 TCB 濃度。陽性對照為添加至 DR 以及額外孔中的參考化合物 A1，濃度僅為 20 µM。20 µM 參考化合物 A1代表陽性刺激劑對照，僅 TCB (DMSO 孔) 代表中性對照。計算

在用處理預稀釋液轉移 T 細胞後，使用 IncucyteZOOM™ (Essen BioScience, MI, USA) 藉由時延顯微術對 MV-3 細胞進行成像。每 3 小時進行一次成像，總共 120 小時 (10X 物鏡、相位及紅色影像通道，採集時間為 400 毫秒，綠色/紅色 4614 光學模塊)。每個孔的 RFP 對象計數在 IncucyteZOOM™ 軟體 (版本 2019B Rev2) 中使用之前為 MV-3 細胞創建並優化的遮蔽物進行分析。原始資料以對象計數/孔的形式導出，與僅含 MV-3 的孔相比，值被歸一化為 % TCL，表示 100% 增長，因此為 0% TCL。 RFP 測量

在 Genedata Screener 中使用 Roche 歸一化 PCT_POS_CTRL 分析所計算的 % TCL 值，其中僅將 MCSP-TCB 設定為中性對照，並將 20 µM 參考化合物 A1設定為刺激劑對照/100%。

下表提供了 EC50 及 Emax 值。

標記由未經 TCB 處理或無毒性 (在 PBS 條件下觀察) 的化合物所誘發之 TCL。結果

實例	異構體	MSCP TCB 毒殺 MV-3 細胞 5d EC ₅₀ (µM)	MSCP TCB 毒殺 MV-3 細胞 5d E _max (%)
2	A	0.043	93
4	A	0.069	94
5	A	0.372	130
8	A	0.140	100
9	A	0.086	92
12	A	0.179	103
14	A	0.146	113
16	A	0.048	84
17	A	0.361	105
41	A	0.194	98

Claims

一種式 (I) 化合物 (I) 或其醫藥上可接受之鹽，其中： R ¹為 5 員或 6 員雜芳基，其中 R ¹視情況經一個或多個可為相同或不同之 R ¹⁰取代； R ²係選自氫及鹵素； R ⁴係選自苯基及吡啶基 (pyridinyl)，其中 R ⁴視情況經一個或多個可為相同或不同之 R ¹¹取代； R ¹⁰係選自： vii) C _1-6-烷基，其視情況經一個或多個鹵素、胺基、C _1-6-烷氧基、-S(O) ₂(C _1-6-烷基)、氰基取代； viii) C _3-10-環烷基，其視情況經一個或多個鹵素、氰基、胺基取代； ix) 3 員至 10 員雜環基，其視情況經一個或多個鹵素、C _1-10-烷基、胺基、鹵基-C _1-6-烷基、羥基、氰基、-C(O)O-(R ^10q)、C _3-10-環烷基取代，其中 C _1-10-烷基視情況經一個或多個羥基、C _1-6-烷氧基取代； x) -N(R ^10eR ^10f)； xi) 雜芳基，其視情況經一個或多個 C _1-10-烷基、鹵素取代； R ^10e及 R ^10f各自獨立地選自： i) 氫； ii) C _1-6-烷基，其視情況經一個或多個氰基、鹵素、羥基取代； iii) C _3-10-環烷基，其視情況經一個或多個鹵素、C _1-10-烷基取代； R ^10q為 C _1-5-烷基，其中 C _1-5-烷基視情況經一個或多個羥基取代； R ¹¹係選自： i) 鹵素； ii) C _1-6-烷氧基，其視情況經一個或多個 C _1-6-烷基、C _5-6-芳基、C _3-10-環烷基、鹵基-C _1-6-烷基、C _3-10-雜環基取代，其中 3 員至 10 員雜環基視情況經 C _1-6-烷基取代； iii) 5 員至 6 員雜芳基，其視情況經一個或多個鹵素、鹵基-C _1-6-烷基、C _1-6-烷氧基、C _3-10-環烷基、C _1-6-烷基、鹵基-C _1-6-烷氧基取代； iv) 苯基，其視情況經一個或多個 C _1-6-烷氧基、鹵基-C _1-6-烷基取代； v) -O(R ^11a)； R ^11a係選自 C _1-6-烷基、C _3-6-環烷基、苯基及鹵基-C _1-6-烷基。
如請求項 1 之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ¹為 5 員雜芳基，其中 R ¹視情況經一個或多個可為相同或不同之 R ¹⁰取代。
如請求項 1 或 2 之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ¹為㗁二唑，其視情況經一個或多個可為相同或不同之 R ¹⁰取代。
如請求項 1 至 3 中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ¹為 1,3,4-㗁二唑，其經一個 R ¹⁰取代。
如請求項 1 至 4 中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ²為氟。
如請求項 1 至 5 中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ⁴為苯基。
如請求項 1 至 6 中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ¹⁰係選自甲基-甲基磺醯基-乙基、吡咯啶、4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基、甲基-丙腈、1,2,2,2-四氟-甲氧基-乙基、三級丁基、1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基、4,4-二氟-1-哌啶基及氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸酯。
如請求項 1 至 7 中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中 R ¹¹係選自 5-(三氟甲基)-2-吡啶基 (pyridyl)、苯氧基、三氟甲氧基、甲氧基-吡啶基、環戊氧基、4-甲氧基苯基、(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基、5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基、4-(三氟甲基)吡唑-1-基、氯、5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基、4-[4-(三氟甲氧基)吡唑-1-基、4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基。
如請求項 1 之化合物，其中： R ¹為 5 員雜芳基，其中 R ¹視情況經一個或多個可為相同或不同之 R ¹⁰取代； R ²為鹵素； R ⁴為苯基或吡啶基； R ¹⁰係選自： i) C _1-6-烷基，其視情況經一個或多個鹵素、C _1-6-烷氧基、-S(O) ₂(C _1-6-烷基)、氰基取代； ii) 3 員至 10 員雜環基，其視情況經一個或多個鹵素、C _1-10-烷基、-C(O)O-(R ^10q)、C _3-10-環烷基取代，其中 C _1-10-烷基視情況經一個或多個 C _1-6-烷氧基取代； iii) 雜芳基，其視情況經一個或多個 C _1-10-烷基取代； R ¹¹係選自： i) 鹵素； ii) 5 員至 6 員雜芳基，其視情況經一個或多個鹵素、鹵基-C _1-6-烷基、C _1-6-烷氧基、鹵基-C _1-6-烷氧基取代； iii) 苯基，其視情況經一個或多個 C _1-6-烷氧基、鹵基-C _1-6-烷基取代； iv) -O(R ^11a)； R ^11a係選自 C _1-6-烷基、C _3-6-環烷基、苯基及鹵基-C _1-6-烷基。
如請求項 1 之化合物，其中： R ¹為 1,3,4-㗁二唑，其經一個 R ¹⁰取代； R ²為氟； R ⁴為苯基； R ¹⁰係選自甲基-甲基磺醯基-乙基、吡咯啶、4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基、甲基-丙腈、1,2,2,2-四氟-甲氧基-乙基、三級丁基、1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基、4,4-二氟-1-哌啶基及氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸酯； R ¹¹係選自 5-(三氟甲基)-2-吡啶基、苯氧基、三氟甲氧基、甲氧基-吡啶基、環戊氧基、4-甲氧基苯基、(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基、5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基、4-(三氟甲基)吡唑-1-基、氯、5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基、4-[4-(三氟甲氧基)吡唑-1-基及 4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基。
如請求項 1 至 10 中任一項之化合物，其選自： 3-胺基-8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-5,5,7-三氟-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯 (benzazepin)-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-N-嗎啉基 (morpholino)-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-N-嗎啉基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1,2,2,2-四氟-1-甲氧基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1,2,2,2-四氟-1-甲氧基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5-二氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5-二氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-8-(5-三級丁基-3-吡啶基)-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-(5-三級丁基-3-吡啶基)-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-氟-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-氟-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-8-[5-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-[5-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)苯基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)苯基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[3-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)苯基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)苯基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； (3S)-3-胺基-8-[5-[5,5-二氟-1-(2-甲氧基乙基)-3-哌啶基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-[5-[5,5-二氟-1-(2-甲氧基乙基)-3-哌啶基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 1-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3S)-3-胺基-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3R)-3-胺基-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 2-[5-[(3S)-3-胺基-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(5-甲氧基-2-吡啶基)苯基]甲基]-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 1-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲氧基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲氧基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[2-氟-6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[6-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]-3-吡啶基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[3-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[3-氟-4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[1-(三氟甲基)吡唑-4-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈；以及 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[1-(三氟甲基)吡唑-4-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈；或其醫藥上可接受之鹽。
如請求項 1 至 11 中任一項之化合物，其選自： 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1,2,2,2-四氟-1-甲氧基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1,2,2,2-四氟-1-甲氧基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-(5-三級丁基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-(環戊氧基)苯基]甲基]-5,5,7-三氟-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-1-[[4-(4-甲氧基苯基)苯基]甲基]-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[(4-苯氧基苯基)甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-[5-(1-乙基-5,5-二氟-3-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-(5-吡咯啶-1-基-1,3,4-㗁二唑-2-基)-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-8-[5-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-5,5,7-三氟-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(4-氧雜-7-氮雜螺[2.5]辛-7-基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[5-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-3-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)四唑-2-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈； (3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； (3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-8-[5-(1-甲基-1-甲基磺醯基-乙基)-1,3,4-㗁二唑-2-基]-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-2-酮； 2-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[4-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 1-[5-[(3S)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3R)-3-胺基-5,5,7-三氟-2-側氧-1-[[4-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3S)-3-胺基-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 1-[5-[(3R)-3-胺基-1-[(4-氯苯基)甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-甲酸甲酯； 2-[5-[(3S)-3-胺基-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-[5-[(3R)-3-胺基-1-[[4-[5-(1,1-二氟乙基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]-2-甲基-丙腈； 2-甲基-2-[5-[(3S)-3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈；以及 2-甲基-2-[5-[(3R)-3-胺基-1-[[4-[5-(二氟甲氧基)-2-吡啶基]苯基]甲基]-5,5,7-三氟-2-側氧-3,4-二氫-1-苯并吖呯-8-基]-1,3,4-㗁二唑-2-基]丙腈；或其醫藥上可接受之鹽。
一種製備如請求項 1 至 12 中任一項之式 (I) 化合物、或其醫藥上可接受之鹽的方法，其包含使式 (XVIII) 化合物與適當的去保護劑進行反應以形成該式 (I) 化合物， (XVIII) 其中 R ¹、R ²及 R ⁴係如請求項 1 至 11 中任一項中所定義且 PG 為胺基保護基。
如請求項 1 至 12 中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其係根據如請求項 13 之方法製造。
如請求項 1 至 12 中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其用為治療活性物質。
一種醫藥組成物，其包含如請求項 1 至 12 中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，以及醫藥上可接受之賦形劑。
如請求項 16 之醫藥組成物，其進一步包含額外治療劑。
如請求項 1 至 12 中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其用於治療、預防癌症及/或延遲其進展。
如請求項 18 之化合物，其中該癌症係與異常二醯基甘油激酶傳訊相關聯，其中二醯基甘油激酶係選自 DGKα 及/或 DGKζ。
如請求項 18 或 19 之化合物，其中該癌症係選自由以下所組成之群組：B 細胞急性淋巴性白血病、T 細胞急性淋巴性白血病、急性淋巴性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴球性白血病、B 細胞前淋巴球白血病、母細胞性漿細胞樣樹突細胞腫瘤、伯基特氏淋巴瘤 (Burkitt's lymphoma)、瀰漫性大 B 細胞淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤、毛細胞白血病、小細胞- 或大細胞-濾泡性淋巴瘤、惡性淋巴增生性病症 (malignant lymphoproliferative condition)、黏膜相關淋巴組織淋巴瘤 (MALT lymphoma)、被套細胞淋巴瘤、緣帶淋巴瘤 (Marginal zone lymphoma)、多發性骨髓瘤、骨髓化生不良及骨髓增生不良症候群 (myelodysplasia and myelodysplastic syndrome)、非何杰金氏淋巴瘤 (non-Hodgkin's lymphoma)、漿母細胞淋巴瘤、漿細胞樣樹突細胞腫瘤、華氏巨球蛋白血症 (Waldenstrom’s macroglobulinemia)、前白血病、肉瘤、上皮癌 (carcinoma)、黑色素瘤、神經母細胞瘤、腎細胞癌、大腸癌、大腸直腸癌、乳癌、上皮鱗狀細胞癌、黑色素瘤、胃癌、腦癌、肺癌 (例如 NSCLC)、胰臟癌、子宮頸癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、前列腺癌、睾丸癌、甲狀腺癌、子宮癌、腎上腺癌及頭頸癌。
一種如請求項 1 至 12 中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽用於治療、預防癌症及/或延遲其進展之用途。
一種如請求項 1 至 12 中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽用於製備藥物之用途，該藥物用於治療、預防癌症及/或延遲其進展。
一種治療、預防癌症及/或延遲其進展的方法，該方法包含投予治療有效量之如請求項 1 至 12 中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽。
一種如請求項 1 至 12 中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽用於抑制選自 DGKα 及 DGKζ 的二醯基甘油激酶中之至少一者的活性之用途。
一種抑制選自 DGKα 及 DGKζ 的二醯基甘油激酶中之至少一者的活性之方法，其包含向有需要之個體投予治療有效量之至少一種如請求項 1 至 12 中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽。
如前文所述之本發明。