SK287169B6 - Zlúčeniny zvyšujúce sekréciu rastového hormónu, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie - Google Patents

Zlúčeniny zvyšujúce sekréciu rastového hormónu, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie Download PDF

Info

Publication number
SK287169B6
SK287169B6 SK1756-2002A SK17562002A SK287169B6 SK 287169 B6 SK287169 B6 SK 287169B6 SK 17562002 A SK17562002 A SK 17562002A SK 287169 B6 SK287169 B6 SK 287169B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
trp
aib
group
gtrp
compound
Prior art date
Application number
SK1756-2002A
Other languages
English (en)
Other versions
SK17562002A3 (sk
Inventor
Jean Martinez
Jean-Alain Fehrentz
Vincent Guerlavais
Original Assignee
Zentaris Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zentaris Ag filed Critical Zentaris Ag
Publication of SK17562002A3 publication Critical patent/SK17562002A3/sk
Publication of SK287169B6 publication Critical patent/SK287169B6/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P41/00—Drugs used in surgical methods, e.g. surgery adjuvants for preventing adhesion or for vitreum substitution
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/10—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/18—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D209/20—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals substituted additionally by nitrogen atoms, e.g. tryptophane
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0205—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)3-C(=0)-, e.g. statine or derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0212—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -N-C-N-C(=0)-, e.g. retro-inverso peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Abstract

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I), ktoré sú použiteľné na zvýšenie hladiny rastového hormónu v plazme u cicavcov a na liečenie deficiencie sekrécie rastového hormónu, spomaleného rastu u detí a metabolických porúch súvisiacich s deficienciou sekrécie rastového hormónu.

Description

Oblasť techniky
Predkladaný vynález sa týka zlúčenín, ktoré sú použiteľné na zvyšovanie hladiny rastového hormónu v plazme pri podávaní cicavcovi.
Doterajší stav techniky
a) Opis doterajšieho stavu
Rastový hormón (GH) alebo somatotropín, ktorý je vylučovaný hypofýzou, tvorí skupinu hormónov, ktorých biologické účinky sú základom rastu mladého organizmu do výšky, ale tiež udržovania jeho integrity v dospelosti. Rastový hormón pôsobí priamo alebo nepriamo na periférne orgány stimuláciou syntézy rastových faktorov (rastový faktor-I podobný inzulínu, IGF-I) alebo ich receptorov (epidermálny rastový faktor, EGF). Priame pôsobenie rastového hormónu patrí k typu označovanému ako antiinzulínový, ktorý pôsobí v prospech lipolýzy na úrovni adipozných tkanív. Pôsobením rastového hormónu na syntézu a sekréciu IGF-I (somatomedín C) stimuluje rastový hormón rast chrupavky a kostí (štruktúrny rast), syntézu proteínov a proliferáciu celého radu periférnych orgánov, včítane svalov a kože. Svojimi biologickými účinkami sa rastový hormón v dospelom organizme zúčastňuje pri udržovaní stavu proteínového anabolizmu a má primárnu úlohu pri regenerácii tkaniva po úraze.
Znižovanie sekrécie rastového hormónu s vekom preukázané u ľudí a zvierat zvyšuje metabolický posun smerom ku katabolizmu, ktorý začína alebo ktorý sa zúčastňuje starnutia organizmu. Úbytok svalovej hmoty, akumulácia adipozných tkanív, demineralizácia kostí, strata schopnosti regeneráce tkaniva po úraze, čo sú deje pozorované u starších ľudí, korelujú s poklesom sekrécie rastového hormónu.
Rastový hormón je teda fyziologický anabolický prostriedok absolútne nevyhnutný pre rast detí do výšky, ktorý navyše riadi metabolizmus proteínov u dospelých.
Sekrécia rastového hormónu (growth hormone, GH) je regulovaná dvoma peptidmi hypotalamu: hormónom uvoľňujúcim rastový hormón (GH-releasing hormone, GHRH), ktorý pôsobí stimulačne na uvoľňovanie rastového hormónu, a somatostatínom, ktorý má inhibičný vplyv. V posledných rokoch sa zistilo, že sekrécia rastového hormónu môže byť tiež stimulovaná syntetickými oligopeptídmi označovanými ako peptidy uvoľňujúce rastový hormón (GH-releasing peptides, GHRP) ako je hexarelín a rôzne analógy hexarelínu (Ghigo a ďalší, European Joumal of Endocrinology, 136, 445 - 460, 1997). Tieto zlúčeniny pôsobia mechanizmom, ktorý je odlišný od mechanizmu pôsobenia GHRH (C. Y. Bowers, „Xenobiotic Growth Hormone Secretagogues“, vyd. B. Bcrcu a R. F. Walker, str. 9 - 28, Springer-Verlag, New York 1996) a interakcie so špecifickými receptormi lokalizovanými v hypotalame a hypofýze ((a) G. Muccioli a ďalší, Joumal of Endocrinology, 157, 99 - 106, 1998; (b) G. Muccioli, „Tissue Distribution of GHRP Receptors in Humans“, Abstracts IV European Congress of Endocrinology, Sevilla, Španielsko, 1998). V poslednej dobe sa ukázalo, že receptory pre GHRP sú prítomné nielen v hypotalamo-hypofýznom systéme, ale aj v rôznych ľudských tkanivách, ktoré všeobecne nesúvisia s uvoľňovaním rastového hormónu (G. Muccioli a ďalší, pozri (a)).
GHRP a ich antagonisty sa opisujú napríklad v nasledujúcich publikáciách: C. Y. Bowers, skôr R. Deghenghi, „Growth Hormone Releasing Peptides“, tiež tam, 1996, str. 85 - 102; R. Deghenghi a ďalší, „Small Peptides as Potent Releasers of Growth Hormone“, J. Ped. End. Metab., 8, str. 311 - 313, 1996; R. Deghenghi, „The Development of Impervious Peptides as Growth Hormone Secretagogues“, Acta Paediatr. dod., 423, str. 85 - 87, 1997; K. Veeraraganavan a ďalší, „Growth Hormone Releasing Peptides (GHRP) Binding to Porcine Anterior Pituitary and Hypothalamic Membranes“, Life Sci., 50, str. 1149 - 1155, 1992; a T. C. Somers a ďalší, „Eow Molecular Weight Peptidomimetic Growth Hormone Secretagogues, WO 96/15148 (23. máj 1996).
Ľudský rastový hormón sa už približne desať rokov vyrába metódami genetického inžinierstva. Až donedávna sa rastový hormón väčšinou používal v súvislosti s oneskoreným rastom detí a teraz sa študujú využitia rastového hormónu u dospelých. Farmakologické účinky rastového hormónu, peptidov uvoľňujúcich rastový hormón a látok zvyšujúcich sekréciu rastového hormónu, je možno roztriediť do nasledujúcich troch hlavných kategórií.
b) Rast detí
Preukázalo sa, že liečenie rekombinantným ľudským rastovým hormónom stimuluje rast u detí s trpasličím vzrastom hypofýzneho pôvodu, rôznymi typmi obličkovej nedostatočnosti, Tumerovým syndrómom a malou postavou. Rekombinantný ľudský rastový hormón sa súčasne komerčne dodáva v Európe a v Spojených štátoch na liečenie oneskoreného rastu detí spôsobeného deficienciou rastového hormónu a na liečenie detskej obličkovej nedostatočnosti rôznych typov. Ďalšie možné využitia sa v súčasnosti klinicky testujú.
c) Dlhodobé liečenie dospelých a starších osôb
Pokles sekrécie rastového hormónu spôsobuje zmenu zloženia ľudského tela v priebehu starnutia. Predbežné štúdie liečenia rekombinantným ľudským rastovým hormónom v trvaní jedného roku v populácii starších pacientov uvádzajú zvýšenie svalovej hmotnosti a hrúbky kože, zníženie hmotnosti tuku a mierne zvýšenie hustoty kostí. Čo sa týka osteoporózy, posledné štúdie ukazujú, že rekombinantný ľudský rastový hormón nezvyšuje mineralizáciu kostí, ale mohol by zabraňovať demineralizácii kostí u žien po menopauze. V súčasnosti sa uskutočňujú ďalšie štúdie, ktoré by preukázali túto teóriu.
d) Krátkodobé liečenie dospelých a starších pacientov
V predklinických a klinických štúdiách sa ukázalo, že rastový hormón stimuluje anabolizmus proteínov a liečenie v prípade popálenín, AIDS a rakoviny, hojenia rán a kostí.
Rastový hormón, peptidy uvoľňujúci rastový hormón a látky podporujúce sekréciu rastového hormónu môžu nájsť použitie aj vo veterinárnom a humánnom lekárstve. Rastový hormón, peptidy uvoľňujúci rastový hormón a látky podporujúce sekréciu rastového hormónu stimulujú rast ošípaných v období výkrmu tým, že podporujú ukladanie svalových tkanív namiesto tukových tkanív, a zvyšujú produkciu mlieka pri kravách, a to bez akýchkoľvek nežiaducich vedľajších účinkov, ktoré by ohrozovali zdravie zvierat, a bez akýchkoľvek usadenín v produkovanom mäse alebo mlieku. V Spojených štátoch sa v súčasnosti komerčne používa hovädzí somatotropín (BST).
Väčšina v súčasnosti prebiehajúcich klinických štúdii sa uskutočnila použitím rekombinantného rastového hormónu. Peptidy uvoľňujúce rastový hormón a látky podporujúce jeho sekréciu sú považované za produkty druhej generácie, ktoré majú v blízkej budúcnosti vo väčšine prípadov nahradiť použitie rastového hormónu. Použitie peptidov uvoľňujúcich rastový hormón a látok podporujúcich sekréciu rastového hormónu prináša teda oproti použitiu samotného rastového hormónu celý rad výhod.
Preto je potrebné vyvinúť ďalšie zlúčeniny, ktoré pri podávaní cicavcovi pôsobia ako látky podporujúce sekréciu rastového hormónu.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu sú zlúčeniny, ktoré pôsobia stimulačne na sekréciu rastového hormónu, a všeobecne spôsobujú zvýšenie hladiny rastového hormónu v plazme u cicavcov podávaním jednej alebo viacerých zlúčenín podľa vynálezu. Vynález sa teda týka použitia zlúčenín podľa vynálezu na liečenie nedostatočnej sekrécie rastového hormónu, na podporu hojenia rán, zotavenia z chirurgického zákroku alebo vysiľujúcej choroby podávaním jednej z týchto zlúčenín v terapeuticky účinnom množstve cicavcovi.
V opise sa používajú nasledujúce skratky: D je dextro enantiomér, GH je rastový hormón, Boe je terc-butyloxykarbonyl, Z je benzyloxykarbonyl, N-Me je A-metyl, Pip je 4-aminopiperidín-4-karboxylát, Inip je izonipekotyl, t. j. piperidín-4-karboxylát, Aib je α-aminoizobutyryl, Nal je β-naftylalanín, Mrp je 2-metyl-Trp, a Ala, Lys, Phe, Trp, His, Thr, Cys, Tyr, Leu, Gly, Ser, Pro, Glu, Arg, Val a Gin sú aminokyseliny alanín, lyzín, fenylalanín, tryptofan, histidín, treonín, cysteín, tyrozín, lcucín, glycín, serín, prolín, kyselina glutámová, arginín, valín a glutamín. Navyše gTrp je skupina vzorca
a gMrp skupina vzorca
N· H kde * znamená atóm uhlíka, ktorý, pokiaľ ide o chirálny atóm uhlíka, má konfiguráciu R alebo S. Zlúčeniny podľa vynálezu majú všeobecný vzorec (I)
kde * je atóm uhlíka, ktorý v prípade chirálneho atómu uhlíka má konfiguráciu R alebo S, jedna zo skupín R1 a R3 znamená atóm vodíka a druhá je skupina vzorca (II)
(Π),
R2 znamená atóm vodíka, priamu alebo rozvetvenú skupinu Ci-C6-alkyl, aryl, heterocyklickú skupinu a cykloalkylovú skupinu, skupinu (CH2)n-aryl, (CH2)n-hetero-cyklickú skupinu, (CH2)n-cykloalkylovú skupinu, metylsulfonylovú skupinu, fenyl-sulfonylovú skupinu, skupinu C(O)R8 alebo skupinu vzorcov (III) až (VIII):
R
(III),
R11 O R12Y^CA h3cz χοη3 (IV),
R
(V),
o
II η2νΑΑ h3c ch3 (VIII),
R4 znamená atóm vodíka alebo priamu, alebo rozvetvenú skupinu C[-C4-alkyl, R5 znamená atóm vodíka, priamu alebo rozvetvenú skupinu C|-C4-alkyl, skupinu (CH2)n-aryl, (CH2)n-heterocyk!ickú skupinu, (CH2)n-cykloalkylovú skupinu, aminoskupinu alebo NH-CH2-CH3, R6 a R7 sú nezávisle atóm vodíka alebo priama, alebo rozvetvená CrC4-alkylová skupina, R8 je priama alebo rozvetvená CrCs-alkylová skupina, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15 a R16 sú nezávisle atóm vodíka alebo priama, alebo rozvetvená CrC4-alkylová skupina, m je 0, 1 alebo 2 a n je 1 alebo 2.
Výhodné uskutočnenie vynálezu sú zlúčeniny, kde R2 je atóm vodíka, R3 je skupina vzorca (II) a m je 0. Zvlášť výhodné sú zlúčeniny, kde priamy alebo rozvetvený CrC4-alkyl je metyl, priamy alebo rozvetvený CrC6-alkyl je metyl, etyl alebo izobutyl, aryl je fenyl alebo naftyl, cykloalkyl je cyklohexyl a heterocyklická skupina je skupina 4-piperidinyl alebo 3-pyrolyl.
Zvlášť výhodné zlúčeniny podľa vynálezu zahrnujú nasledujúce látky:
H-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO:
H
H
N-Me-Aib-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 :
N-Me-Aib-D-Trp-N-Me-D-gTrp-C(O)CHa:
Podľa predkladaného vynálezu sa zistilo, že zlúčeniny podľa vynálezu sú použiteľné na zvýšenie hladiny rastového hormónu v plazme u cicavcov. Zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu sú ďalej použiteľné na liečenie deficiencie sekrécie rastového hormónu, spomalenie rastu u detí a metabolických porúch súvisiacich s deficicnciou sekrécie rastového hormónu, najmä u starších ľudí.
V prípade potreby môžu byť tiež použité farmaceutický prijateľné soli týchto zlúčenín. Medzi tieto soli patria organické alebo anorganické adičné soli ako je hydrochlorid, hydrobromid, fosfát, sulfát, acetát, jantaran, askorbát, vínan, glukonát, benzoát, malát, fumarát, stearát alebo pamoát.
Farmaceutické prostriedky podľa vynálezu sú použiteľné na zvyšovanie hladiny rastového hormónu v plazme u cicavcov, rovnako ako na liečenie deficiencie sekrécie rastového hormónu, spomalenie rastu detí a metabolických porúch súvisiacich s deficienciou sekrécie rastového hormónu, najmä u starších ľudí. Tieto farmaceutické prostriedky môžu obsahovať zlúčeninu podľa predkladaného vynálezu alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ, alebo kombinácie zlúčenín podľa predkladaného vynálezu, alebo ich farmaceutický prijateľných solí, prípadne v zmesi s nosičom, pomocnou látkou, vehikulom, riedidlom, matricou alebo povlakom spôsobujúcim predĺžené uvoľňovanie. Príklady týchto nosičov, pomocných látok, vehikúl a riedidiel je možno nájsť v publikácii Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18. vyd., A. R. Gennaro, ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1990.
Farmaceutické prostriedky podľa vynálezu môžu obsahovať ďalšie látky zvyšujúce sekréciu rastového hormónu. Príklady vhodných ďalších látok podporujúcich sekréciu rastového hormónu sú látky Ghrelin (porovnaj M. Kojima a ďalší, Náture, 402 (1999), 656 - 660), GHRP-1, GHRP-2 a GHRP-6. Ghrelin: Gly-Ser-Ser(0-«-oktanoyl)-Phe-Leu-Ser-Pro-Glu-Hís-Gln-Arg-Val-Gln-GlnArg-Lys-Glu-Ser-Lys-Lys-Pro-Pro-Ala-Lys-Leu-Gln-Pro-Arg
GHRP-1: Ala-His-D-P-Nal-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2 GHRP-2: D-Ala-D-P-Nal-Ala-Trp-D-Plie-Lys-NIT GHRP-6: His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH,
Ktorákoľvek zo zlúčenín podľa predkladaného vynálezu môže byť formulovaná odborníkom v danej oblasti techniky za poskytnutia farmaceutických prostriedkov, ktoré sú vhodné na parenterálne, bukálne, rektálne, vaginálne, trans-dermálne, pulmonálne alebo orálne spôsoby podávania.
Typ formulácie alebo farmaceutického prostriedku s obsahom zlúčeniny môže byť zvolený na základe požadovaného spôsobu podávania. Ak majú byť zlúčeniny podané rýchlo, je výhodná nosná alebo intravenózna cesta.
Farmaceutické prostriedky môžu byť podávané cicavcom včítane človeka v terapeuticky účinnej dávke, ktorú môže odborník v danej oblasti techniky ľahko určiť, a ktorá sa bude líšiť podľa druhu, veku, pohlavia a hmotnosti liečeného pacienta alebo subjektu rovnako ako podľa spôsobu podávania. Presnú úroveň je možno ľahko zistiť empiricky.
Nasledujúce príklady ilustrujú účinnosť väčšiny výhodných zlúčenín používaných na liečenie podľa predkladaného vynálezu.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
H-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO
Úplná syntéza (percentá predstavujú výťažky získané pri nasledujúcej syntéze):
13%
98% %
60% : 70 % : 70 % i 52 %
Z-D-Trp-OH [ 1) IBCF, NMM, DME, 0 °C φ 2) NH4OH
Z-D-Trp-NH,
1) H2, Pd/C, DMF, H2O, HCI č 2) BOP, NMM, DMF, Boc-D-Trp-OH Boc-D-Trp-D-Trp-NH2 | ABoc2O, DMAP kat. bezvodý CH3CN J- .
Boc-D-(N‘Boc)Trp-D- (N'Boc)Trp-NH2
1) BTIB, pyridín, DMF/H2O č 2) 4,5-trichlórfenylformiát, DIEA, DMF
Boc-D-(N'Boc)Trp-D-(N‘Boc)Trp-CHO | 1) TFA/anizol/tioanizol (8/1/1), 0 °C i 2) BOP, NMM, DMF, Boc-Aib-OH Boc-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO
1) TFA/anizol/tioanizol (8/1/1), 0 °C č 2) čistenie preparatívnou HPLC H-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO
Z-D-Trp-NHj
Z-D-Trp-OH (8,9 g; 26 mmol; 1 ekv.) sa rozpustil v DME (25 ml) a umiestnil do ľadového kúpeľa pri teplote 0 °C. Postupne sa pridal NMM (3,5 ml; 1,2 ekv.), IBCF (4,1 ml; 1,2 ekv.) a 28 % roztok amoniaku (8,9 ml; 5 ekv.). Zmes sa zriedila vodou (100 ml) a produkt Z-D-Trp-NH2 sa vyzrážal. Prefíltroval sa vo vákuu za získania 8,58 g bielej tuhej látky.
Výťažok = 98 %.
CI9H19N3O3, 337 g.moľ1.
Rf = 0,46 {chloroform/metanol/kyselina octová (180/10/5)}.
'HNMR (250 MHz, DMSO-d6): δ 2,9 (dd, 1H, Ηβ, Jpp. = 14,5 Hz; Jpa = 9,8 Hz); 3,1 (dd, 1H, Hp., Jp.p = = 14,5 Hz; Jp.a = 4,3 Hz); 4,2 (sextet, 1H, Ho); 4,95 (s, 2H, CH, (Z)); 6,9 - 7,4 (m, 11H); 7,5 (s, 1H, H2); 7,65 (d, 1H, J = 7,7 Hz); 10,8 (s, 1H, n‘H).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 338 [M+Hj+, 360 [M+Na]+, 675 [2M+H]+, 697 [2M+Na]+.
Boc-D-Trp-D-Trp-NH2
Z-D-Trp-NH2 (3 g; 8,9 mmol; 1 ekv.) sa rozpustil v DMF (100 ml). K miešanej zmesi sa pridala 36 % HCI (845 μΐ; 1,1 ekv.), voda (2 ml) a paládium na aktívnom uhlí (95 mg, 0,1 ekv.). Tento roztok sa nechal prebublávať vodíkom 24 hodín. Keď bola reakcia skončená, paládium sa odfiltrovalo cez celit. Rozpúšťadlo sa odstránilo za získania HCI, H-D-Trp-NH2 ako bezfarebného oleja.
Do 10 ml DMF sa postupne pridali HCI, H-D-Trp-NH2 (8,9 mmol; 1 ekv.), Boc-D-Trp-OH (2,98 g; 9,8 mmol; 1,1 ekv.), NMM (2,26 ml; 2,1 ekv.) a BOP (4,33g; 1,1 ekv.). Po 1 hodine sa zmes zriedila etylacetátom (100 ml) a premyla nasýteným vodným hydrogenuhličitanom sodným (200 ml), vodným roztokom hydrogénsíranu draselného (200 ml, IM) a nasýteným vodným chloridom sodným (100 ml). Organická vrstva sa sušila nad síranom sodným, prefiltrovala a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu za získania 4,35 g Boc-D-Trp-D-Trp-NH2 ako bielej tuhej látky.
Výťažok = 85 %.
C27H3|N5O4, 489 g.moľ1.
Rf = 0,48 (chloroform/metanol/kyselina octová (85/10/5)}.
'H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,28 (s, 9H, Boe); 2,75 - 3,36 (m, 4H, 2(CII2)p; 4,14 (m, 1H, CHa); 4,52 (m, 1H, CHa.); 6,83 - 7,84 (m, 14H, 2 indoly (10H), NH2, NH (uretán) a NH (amid)); 10,82 (d, 1H, J = 2Hz, N'H); 10,85 (d, 1H, J = 2Hz, N'H).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 490 [M+H]+, 512 [M+Na]+, 979 [2M+H]+.
Boc-D-(N'Boc)Trp-D-(N‘Boc)Trp-NH2
Boc-D-Trp-D-Trp-NH2 (3 g; 6,13 mmol; 1 ekv.) sa rozpustil v acetonitrile (25 ml). Do tohto roztoku sa postupne pridal di-íerc-butyldikarbonát (3,4 g; 2,5 ekv.) a 4-dimetylaminopyridin (150 mg; 0,2 ekv.). Po 1 hodine sa zmes zriedila etyl-acetátom (100 ml) a premyla nasýteným vodným hydrogenuhličitanom sodným (200 ml), vodným hydrogénsíranom draselným (200 ml, IM) a nasýteným vodným chloridom sodným (200 ml). Organická vrstva sa sušila nad síranom sodným, prefiltrovala a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu. Zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli elúciou zmesou etylacetát/hexán {5/5} za získania 2,53 g Boc-D-(N‘Boc)Trp-D-(N‘Boc)Trp-NH2 ako bielej tuhej látky.
Výťažok = 60 %.
C37H47N5O8, 689 g.mol .
Rf = 0,23 {etylacetát/hexán (5/5)).
'H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,25 (s, 9H, Boe); 1,58 (s, 9H, Boe); 1,61 (s, 9H, Boe); 2,75 - 3,4 (m, 4H, 2(CH2)P); 4,2 (m, 1H, CHa); 4,6 (m, 1H, CHa); 7,06 - 8 (m, 14H, 2 indoly (10H), NH (uretán), NH a NH2 (amidy)).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 690 [M+H]+, 712 [M+Na]+, 1379 [2M+H]+, 1401 [2M+Na]+.
Boc-D-(N1Boc)Trp-D-g(N'Boc)Trp-H
Boc-D-(N’Boc)Trp-D-(N'Boc)Trp-NH2 (3 g; 4,3 mmol; 1 ekv.) sa rozpustil v zmesi DMF/voda (18 ml/7 ml). Potom sa pridal pyridín (772 μΐ; 2,2 ekv.) a bis-(tri-fluóracetoxy)jódbenzén (2,1 g; 1,1 ekv.). Po 1 hodine sa zmes zriedila etylacetátom (100 ml) a premyla nasýteným vodným hydrogenuhličitanom sodným (200 ml), vodným hydrogénsíranom draselným (200 ml, IM) a vodným nasýteným chloridom sodným (200 ml). Organická vrstva sa sušila nad síranom sodným, prefiltrovala sa a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu. Boc-D-(N'Boc)Trp-D-g(N‘Boc)Trp-H sa použil ihneď pre ďalšiu formylačnú reakciu.
Rf=0,14 {etylacetát/hexán (7/3)}.
C36H47N5O7, 661 g.moľ1.
'H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,29 (s, 9H, Boe); 1,61 (s, 18H, 2 Boe); 2,13 (s, 2H, NH, (amín)); 3,1 - 2,8 (m, 4H, 2(CH2)P); 4,2 (m, 1H, CHa); 4,85 (m, 1H, CHa); 6,9 - 8 (m. 12H, 2 indoly (10H), NH (uretán), NH (amid)).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m'z 662 [M+H]+, 684 [M+Na]+.
Boc-D-(N‘Boc)Trp-D-g(N'Boc)Trp-CHO
Boc-D-(N'Boc)Trp-D-g(N'Boc)Trp-H (4,3 mmol; 1 ekv.) sa rozpustil v DMF (20 ml). Potom sa pridal
N, N-diizopropyletylamín (815 μΐ; 1,1 ekv.) a 2,4,5-trichlór-fenylformiát (1,08 g; 1,1 ekv.). Po 30 minútach sa zmes zriedila etylacetátom (100 mol) a premyla nasýteným vodným hydrogenuhličitanom sodným (200 ml), vodným hydrogénsíranom draselným (200 ml, IM) a nasýteným vodným chloridom sodným (200 ml). Organická vrstva sa sušila nad síranom sodným, prefiltrovala sa a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu. Zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli eluciou zmesou etylacetát/hexán {5/5} za získania 2,07 g Boc-D-(N'Boc)Trp-D-g(N'Boc)Trp-CHO ako bielej tuhej látky.
Výťažok = 70 %.
C37H47N5Og, 689 g.moľ1.
Rf=0,27 {etylacetáťhexán (5/5)}.
*H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,28 (s, 9H, Boe); 1,6 (s, 9H, Boe); 1,61 (s, 9H, Boe); 2,75 - 3,1 (m, 4H, 2(CH2)P); 4,25 (m, 1H, (CH)aA&B); 5,39 (m, 0,4H, (CH)cťB); 5,72 (m, 0,6H, (CH)a'A); 6,95 - 8,55 (m, 14H, 2 indoly (10H), NH (uretán), 2 NH (amidy), CHO (formyl)).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 690 [M+H]+, 712 [M+Na]+, 1379 [2M+H]+.
Boc-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO
Boc-D-(N'Boc)Trp-D-g(N'Boc)Trp-CHO (1,98 g; 2,9 mmol; 1 ekv.) sa rozpustil v zmesi kyseliny trifluóroctovej (16 ml), anizolu (2 ml) a tioanizolu (2 ml) v priebehu 30 minút pri 0 °C. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu, zvyšok sa zmiešal s éterom a vyzrážaná TFA soľ H-D-Trp-D-gTrp-CHO sa odfiltrovala. TFA soľ H-D-Trp-D-gTrp-CHO (2,9 mmol; 1 ekv.), Boc-Aib-OH (700 mg; 1 ekv.), NMM (2,4 ml; 4,2 ekv.) a BOP (1,53 g; 1,2 ekv.) sa postupne pridali do 10 ml DMF. Po 1 hodine sa zmes zriedila etylacetátom (100 ml) a premyla nasýteným vodným hydrogenuhličitanom sodným (200 ml), vodným hydrogénsíranom draselným (200 ml, IM) a nasýteným vodným chloridom sodným (200 ml). Organická vrstva sa sušila nad síranom sodným, prefiltrovala sa a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu. Zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli eluciou etylacetátom za získania 1,16 g Boc-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO ako bielej tuhej látky.
Výťažok = 70 %.
C3IH38N6Os, 574 g.moľ1.
Rf = 0,26 {chloroform/metanol/kyselina octová (180/10/5)}.
'H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,21 (s, 6H, 2CH3(Aib)); 1,31 (s, 9H, Boe); 2,98 - 3,12 (m, 4H, 2(CH2)p); 4,47 (m, 1H, (CH)aA&B); 5,2 (m, 0,4H, (CH)a'B); 5,7 (m, 0,6H, (CH)ďA); 6,95 - 8,37 (m, 15H, 2 indoly (10H), 3 NH (amidy), 1 NH (uretán), CHO (formyl)); 10,89 (m, 2H, 2 N'H (indoly)).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m'z 575 [M+H]+, 597 [M+Na]+, 1149 [2M+H]+, 1171 [2M+Naf.
H-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO
Boc-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO (1 g; 1,7 mmol) sa rozpustil v zmesi kyseliny trifluóroctovej (8 ml), anizolu (1 ml) a tioanizolu (1 ml) v priebehu 30 minút pri 0 °C. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu, zvyšok sa zmiešal s éterom a vyzrážaná TFA soľ H-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO sa odfiltrovala.
Produkt, TFA soľ H-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO sa čistila preparatívnou HPLC (Waters, delta pak, C18, 40 x 100 mm, 5 μηι, 100 A).
Výťažok = 52 %.
C26H30N6O3, 474 g.moľ'.
‘H NMR (400 MHz, DMSO-d6) + ’H/'H korelácia: δ 1,21 (s, 3H, CH3 (Aib)); 1,43 (s, 3H, CH3 (Aib)); 2,97 (m, 2H, (CH2)P); 3,1 (m, 2H, (CH2)P·); 4,62 (m, 1H, (CH)cca&b); 5,32 (q, 0,4H, (CH)cťB); 5,71 (q, 0,6H, (CH)a'A); 7,3 (m, 4H, H5 a H6 (2 indoly)); 7,06 - 7,2 (4d, 2H, II2A a H2B (2 indoly)); 7,3 (m, 2H, H4 alebo H7 (2 indoly)); 7,6 - 7,8 (4d, 2H, H4A a H4B alebo H7A a H7B); 7,97 (s, 3H, NH2 (Aib) a CHO (formyl)); 8,2 (d,
O, 4H, NHIB (diamino)); 8,3 (m, 1H, NHA&B); 8,5 (d, 0,6H, NH1A (diamino)); 8,69 (d, 0,6H, NH2A (diamino)); 8,96 (d, 0,4H, NH2B (diamino)); 10,8 (s, 0,6H, N'H1a (indol)); 10,82 (s, 0,4H, N'H1b (indol)); 10,86 (s, 0,6H, N'H2A (indol)); 10,91 (s, 0,4H, Ν'Ημ (indol)).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 475 [M+H]+, 949 [2MXH]+.
Analogická syntéza sa uskutočnila pre nasledujúce zlúčeniny:
Príklad 2
H-Aib-D-Mrp-D-gMrp-CHO
C28H34N6O3, 502 g.moľ1.
‘HNMR (400 MHz, DMSO-d6) + ’H/'H korelácia: δ 1,19 (s, 2H, (CH3)lA (Aib)); 1,23 (s, 1H, (CH3)1B (Aib)); 1,41 (s, 2H, (CH3)2A (Aib)); 1,44 (s, 2H, (CH3)2Q (Aib)); 2,33 - 2,35 (4s, 6H, 2CH3 (indoly)); 2,93 (m, 2H, (CH2)B); 3,02 (m, 2H, (CH2)B); 4,65 (m, 0,6H, (CH)aA); 4,71 (m, 0,4H, (CH)aB); 5,2 (m, 0,4H, (CH)a'B); 5,6 (m, 0,6H, (CH)ďA); 6,95 (m, 4H, Hs a Hó (2 indoly)); 7,19 (m, 2H, H4 alebo H7 (2 indoly)); 7,6 (m, 2H, H4 alebo H7 (2 indoly)); 7,9 (s, 1H, CHO (formyl)); 7,95 (s, 2H, NH2 (Aib)); 8,05 (d, 0,4H, NH1B (diamino));
8.3 (m, 1H, NHa&b); 8,35 (m, 0,6H, NH1A (diamino)); 8,4 (d, 0,6H, NH2A (diamino)); 8,75 (d, 0,4H, NH2B (diamino)); 10,69 (s, 0,6H, N‘H1a (indol)); 10,71 (s, 0,4H, N‘Hib (indol)); 10,80 (s, 0,6H, N'H2A (indol)); 10,92 (s, 0,4H, N'h2B (indol)).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 503,1 [M+H]+.
Príklad 3
N-Me-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO
Boc-N-Me-Aib-OH (327 mg; 1,5 mmol; 2,6 ekv.) sa rozpustil v metylén-cliloride (10 ml) a ochladil sa na 0 °C. Potom sa pridal dicyklohexylkarbodiimid (156 mg; 0,75 mmol; 1,3 ekv.). Zmes, po prefiltrovaní DCU, sa pridala k roztoku obsahujúcom TFA, H-D-Trp-D-gTrp-CHO (0,58 mmol; 1 ekv.) a trietylamín (267 μΐ;
3.3 ekv.) v metylénchloride (5 ml). Reakčná zmes sa pomaly zahriala na laboratórnu teplotu a reakcia sa ukončila po 24 hodinách. Zmes sa zriedila etylacetátom (25 ml) a premyla nasýteným vodným hydrogenuhličitanom sodným (50 ml), vodným hydrogénsíranom draselným (50 ml, IM) a nasýteným vodným chloridom sodným (50 ml). Organická vrstva sa sušila nad síranom sodným, prefiltrovala sa a rozpúšťadlo sa odparilo vo vákuu. Zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli eluciou zmesou etylacetát/metanol {9/1} za získania 180 mg (53 %) Boc-N-Me-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO ako bielej peny.
Boc-N-Me-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO (180 mg; 0,3 mmol) sa rozpustil v zmesi kyseliny trifluóroctovej (8 ml), anizolu (1 ml) a tioanizolu (1 ml) v priebehu 30 minút pri 0 °C. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu, zvyšok sa zmiešal s éterom a vyzrážaná TFA soľ N-Me-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO sa odfiltrovala.
Produkt, TFA soľ N-Me-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO (39 mg; 15 %), sa čistil preparatívnou HPLC (Waters, delta pak, C18, 40 x 100 mm, 5 μ m, 100 A).
C27H32N6O3, 488 g.mol .
'HNMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,19 (s, 3H, CH3 (Aib)); 1,42 (s, 311, CH3 (Aib)); 2,26 (s, 3H, NCH3); 3,12 (m, 4H, 2(CH2)P); 4,66 (m, 1H, (CH)a); 5,32 a 5,7 (m, 1H, (CH)a.); 6,9 - 7,8 (m, 10H, 2 indoly); 8 (m, 1H, CHO (formyl)); 8,2 - 9 (m, 4H, 3 NH (amidy) a NH (amín)); 10,87 (m, 2H, 2 N'H (indoly)). Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 489,29 [M+H]+.
Príklad 4
H-Aib-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3
Boc-D-(N'Boc)Trp-D-g(N1Boc)Trp-H (0,72 mmol; 1 ekv.) sa rozpustil v DMF (20 ml). Potom sa pridal M-V-diizopropyletylamín (259 ml; 2,1 ekv.) a acetanhydrid (749 ml; 1,1 ekv.). Po 1 hodine sa zmes zriedila etylacetátom (100 ml) a premyla nasýteným vodným hydrogenuhličítanom sodným (100 ml), vodným hydrogénsíranom draselným (100 ml, IM) a nasýteným vodným chloridom sodným (50 ml). Organická vrstva sa sušila nad síranom sodným, prefiltrovala sa a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu. Zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli elúciou zmesou etylacetát/hexán za získania 370 mg (73 %) Boc-D-(N‘Boc)Trp-p-g(N'Boc)-Trp-C(O)CH3 ako bielej tuhej látky.
Boc-D-(NlBoc)Trp-D-g(N‘Boc)Trp-C(0)CH3 (350 mg; 0,5 mmol; 1 ekv.) sa rozpustil v zmesi kyseliny trifluóroctovej (8 ml), anizolu (1 ml) a tioanizolu (1 ml) v priebehu 30 minút pri 0 °C. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu, zvyšok sa zmiešal s éterom a vyzrážaná TFA soľ H-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 sa odfiltrovala.
Do 10 ml DMF sa postupne pridali TFA soľ H-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 (0,5 mmol; 1 ekv.), Boc-Aib-OH (121 mg; 0,59 mmol; 1,2 ekv.), NMM (230 μΐ; 4,2 ekv.) a BOP (265 mg; 1,2 ekv.). Po 1 hodine sa zmes zriedila etylacetátom (25 ml) a premyla nasýteným vodným hydrogenuhličítanom sodným (50 ml), vodným hydrogénsíranom draselným (50 ml, IM) a nasýteným vodným chloridom sodným (50 ml). Organická vrstva sa sušila nad síranom sodným, prefiltrovala sa a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu. Zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli elúciou s etylacetátom za získania 249 mg (85 %) Boc-Aib-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 ako bielej peny.
Boc-Aib-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 (249 mg; 0,42 mmol) sa rozpustil v zmesi kyseliny trifluóroctovej (8 ml), anizolu (1 ml) a tioanizolu (1 ml) v priebehu 30 minút pri 0 °C. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu, zvyšok sa zmiešal s éterom a vyzrážaná TFA soľ H-Aib-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 sa odfiltrovala.
Produkt, TFA soľ H-Aib-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 (80 mg; 23 %), sa čistil preparatívnou HPLC (Waters, delta pak, C18, 40 x 100 mm, 5 mm, 100 A).
C^TI-pN^CL,488 g.mol 'H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,22 (s, 311, CH3 (Aib)); 1,44 (s, 3H, CH3 (Aib)); 1,8 (s, 3H, C(O)CH3); 3,06 (m, 4H, 2(CH2)p); 4,6 (m, 1H, (CH)a); 5,6 (m, 1H, (CH)O ); 6,9 - 7,8 (m, 10H, 2 indoly); 7,99 (s, 2H, NH2 (Aib)); 8,2 - 8,6 (m, 3H, 3 NH (amidy)); 10,83 (s, 2H, 2 N'H (indoly)).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 489,32 [M+H]+.
Príklad 5
N-Me-Aib-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3
Boc-N-Me-Aib-OH (1,09 g; 5,04 mmol; 4 ekv.) sa rozpustil v metylénchloride (10 ml) a ochladil sa na 0 °C. Potom sa pridal dicyklohexylkarbodiimid (520 mg; 2,52 mmol; 2 ekv.). Zmes, po prefiltrovaní DCU, sa pridala k roztoku obsahujúcemu TFA soľ H-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 (940 mg; 1,26 mmol; 1 ekv.) a trietylamín (580 ml; 3,3 ekv.) v metylénchloride (5 ml). Reakčná zmes sa pomaly zohriala na laboratórnu teplotu a reakcia sa ukončila po 24 hodinách. Zmes sa zriedila etylacetátom (50 ml) a premyla nasýteným vodným hydrogenuhličitanom draselným (100 ml), vodným hydrogénsíranom draselným (100 ml, IM) a nasýteným vodným chloridom sodným (100 ml). Organická vrstva sa sušila síranom sodným, prefiltrovala sa a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu. Zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli elúciou zmesou etylacetát/metanol {9/1} za získania 530 mg (70 %) Boc-N-Me-Aib-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 ako bielej peny.
Boc-N-Me-Aib-D-Trp-D-gTrp-C(0)CH3 (530 mg; 0,88 mmol) sa rozpustil v zmesi kyseliny trifluóroctovej (8 ml), anizolu (1 ml) a tioanizolu (1 ml) v priebehu 30 minút pri 0 °C. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu a zvyšok sa zmiešal s éterom a vyzrážaná TFA soľ N-Me-Aib-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 sa odfiltrovala.
Produkt, TFA soľ N-Me-Aib-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 (220 mg; 30 %), sa čistil preparatívnou HPLC (Waters, delta pak, C18, 40 x 100 mm, 5 mm, 100 A).
C26H34N6O3, 502 g.moľ1.
'H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,17 (s, 3H, CH3 (Aib)); 1,4 (s, 3H, CH3 (Aib)); 1,78 (s, 3H, C(O)CH3); 2,23 (s, 3H, NCH3); 3,15 (m, 4H, 2(CH2)0); 4,7 (m, 1H, (CH)a); 5,55 (m. 1H, (CHV); 6,9 - 7,9 (m, 10H, 2 indoly); 8,2 - 8,8 (s, 4H, NH (amin) a 3 NH (amidy)); 10,8 (s, 2H, 2 N Ή (indoly)).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 503,19 [M+H]+.
Príklad 6
Pip-D-Trp-D-gTrp-CHO
K 5 ml DMF sa postupne pridala TFA soľ H-D-Trp-D-gTrp-CHO (230 mg; 0,31 mmol; 1 ekv.), Boc-(N4Boc)Pip-OH (130 mg; 0,38 mmol; 1,2 ekv.), NMM (145 μΐ; 4,2 ekv.) a BOP (167 mg; 0,38 mmol; 1,2 ekv.). Po 15 minútach sa reakcia skončila. Zmes sa zriedila etylacetátom (25 ml) a premyla nasýteným vodným hydrogenuhličitanom sodným (50 ml), vodným hydrogénsíranom draselným (50 ml, IM) a nasýteným vodným chloridom sodným (50 ml). Organická vrstva sa sušila nad síranom sodným, prefiltrovala sa a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu za získania Boc-(N4Boc)Pip-D-Trp-D-gTrp-CHO ako peny.
Boc-(N4Boc)Pip-D-Trp-D-gTrp-CHO (0,31 mmol) sa rozpustil v zmesi kyseliny trifluóroctovej (8 ml), anizolu (1 ml) a tioanizolu (1 ml) v priebehu 30 minút pri 0 °C. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu, zvyšok sa zmiešal s éterom a TFA soľ Η-Pip-D-Trp-D-gTrp-CHO sa odfiltrovala.
Produkt, TFA soľ H-Pip-D-Trp-D-gTrp-CHO (127 mg; 42 %), sa čistil preparatívnou HPLC (Waters, delta pak, C18, 40 x 100 mm, 5 m, 100 A).
C28H33N7O3, 515 g.moľ1.
'H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,81 (m, 2H, CH2 (Pip)); 2,3 (m, 2H, CH2 (Pip)); 3,1 (m, 8H, 2(CH2)P a 2CH2 (Pip)); 4,68 (m, 1H, (CH)); 5,3 a 5,73 (2tn, 1H, (CH)a.); 6,9 - 7,7 (m, 10H, 2 indoly); 7,98 (2s, 1H, CHO (formyl)); 8,2 - 9,2 (m, 6H, NH2 a NH (Pip) a 3 NH (amidy)); 10,9 (m, 2H, 2 N'H (indoly)). Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 516,37 [M+H]+, 538,27 [M+Na]+.
Príklad 7
Pip-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3
Do 5 ml DMF sa postupne pridali TFA soľ H-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 (218 mg, 0,29 mmol; 1 ekv.), Boc-(N4Boc)Pip-OH (121 mg; 0,35 mmol; 1,2 ekv.), NMM (135 μΐ; 4,2 ekv.) a BOP (155 mg; 0,35 mmol;
1,2 ekv.). Po 15 minútach sa reakcia skončila. Zmes sa zriedila etylacetátom (25 ml) a premyla nasýteným vodným hydrogenuhličitanom sodným (50 ml), vodným hydrogénsíranom draselným (50 ml, IM) a nasýteným vodným chloridom sodným (50 ml). Organická vrstva sa sušila nad síranom sodným, prefiltrovala sa a rozpúšťadlo sa odparilo, za získania Boc-(N4Boc)Pip-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH ako peny.
Boc-(N4Boc)Pip-D-Trp-D-gTrp-C(0)CH3 (0,29 mmol) sa rozpustil v zmesi kyseliny trifluóroctovej (8 ml), anizolu (1 ml) a tioanizolu (1 ml) v priebehu 30 minút pri 0 °C. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu, zvyšok sa zmiešal s éterom a vyzrážaná TFA soľ H-Pip-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 sa odfiltrovala.
Produkt, TFA soľ H-Pip-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 (135 mg; 47 %), sa čistil preparatívnou HPLC (Waters, delta pak, C18, 40 x 100 mm, 5 pm, 100 A).
C29H35N7O3, 529 g.moľ1.
'H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,79 (m, 2H, CH2 (Pip)); 1,81 (s, 3H, C(O)CH3); 2,3 (m, 2H, CH2 (Pip));
3.1 (m, 8H, 2 (CH2)P a 2 CH2 (Pip)); 4,7 (m, 1H, (CH)cc); 5,6 (m, 1H, (CH)a ); 6,9 - 7,8 (m, 10H, 2 indoly);
8.2 - 9 (m, 6H, NH2 a NH (Pip) a 3 NH (amidy)); 10,85 (m, 2H, 2 N*H (indoly)).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 530,39 [M+H]+, 552,41 [M+Na]+.
Príklad 8
Izonipekotyl-D-Trp-D-gTrp-CHO
Do 5 ml DMF sa pridala TFA soľ H-D-Trp-D-gTrp-CHO (250 mg, 4,1 mmol; 1 ekv.), Fmoc-izonipekotát-OH (144 mg; 4,1 mmol; 1,2 ekv.), NMM (158 μΐ; 4,2 ekv.) a BOP (181 mg; 4,1 mmol; 1,2 ekv.). Po 15 minútach sa reakcia skončila. Zmes sa zriedila etylacetátom (25 ml) a premyla nasýteným vodným hydrogenuhličitanom sodným (50 ml), vodným hydrogénsíranom draselným (50 ml, IM) a nasýteným vodným chloridom sodným (50 ml). Organická vrstva sa sušila nad síranom sodným, prefiltrovala sa a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu za získania Fmoc-izonipekotyl-D-Trp-D-gTrp-CHO ako peny.
Fmoc-izonipekotyl-D-Trp-D-gTrp-CHO (4,1 mmol) sa rozpustil v zmesi DMF (8 ml) a piperidínu (2 ml) a nechal sa stáť 30 minút. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu, zvyšok sa zmiešal s éterom a vyzrážaný izonipekotyl-D-Trp-D-gTrp-CHO sa odfiltroval.
Produkt izonipekotyl-D-Trp-D-gTrp-CHO (81 mg; 28 %) sa čistil preparatívnou HPLC (Waters, delta pak, C18, 40 x 100 mm, 5 μ m, 100 A).
C28H32N60j, 500 g.moľ1.
'H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,65 (m, 4H, 2 CII2 (Pip)); 2,4 (m, 1H, CH (Pip)); 2,7 - 3,3 (m, 8Η, 2 (CH2)p a 2 CH2 (Pip)); 4,6 (m, 1H, (CH)„); 5,3 a 5,7 (2m, 1H, (CH)a·); 6,9 - 7,7 (m, 10H, 2 indoly); 7,97 (2s, 1H, CHO (formyl)); 8 - 8,8 (m, 4H, NH (Pip) a 3 NH (amidy)); 10,9 (m, 2H, 2 N’H (indoly)).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 501,36 [M+H]+.
Príklad 9
Izonipekotyl-D-Trp-D-gTrp-C(0)CH3
Do 5 ml DMF sa postupne pridali TFA soľ H-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 (250 mg, 0,33 mmol; 1 ekv), Fmoc-izonipekotát-OH (141 mg; 0,4 mmol; 1,2 ekv.), NMM (155 μΐ; 4,2 ekv.) a BOP (178 mg; 0,4 mmol;
1.2 ekv.). Po 15 minútach sa reakcia skončila. Zmes sa zriedila etylacetátom (25 ml) a premyla nasýteným vodným hydrogenuhličitanom sodným (50 ml), vodným hydrogénsíranom draselným (50 ml, IM) a nasýteným vodným chloridom sodným (50 ml). Organická vrstva sa sušila nad síranom sodným, prefiltrovala sa a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu za získania Fmoc-izonipekotyl-D-Trp-D-gTrp-C(0)CH3 ako peny.
Fmoc-izonipekotyl-D-Trp-D-gTrp-C(0)CH3 (0,33 mmol) sa rozpustil v zmesi DMF (8 ml) a piperidínu (2 ml) a nechal sa stáť 30 minút. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu, zvyšok sa zmiešal s éterom a vyzrážaný izonipekotyl-D-Trp-D-gTrp-C(0)CH3 sa odfiltroval.
Produkt izonipekotyl-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 (65 mg; 13 %) sa čistil preparatívnou HPLC (Waters, delta pak, C18, 40 x 100 mm, 5 pm, 100 A).
C29H34N6O3, 514 g.moľ1.
'H NMR (200 MHz, DMSO-d6): 1,66 (m, 4H, 2 CH2 (Pip)); 1,79 (s, 3H, C(O)CH,); 2,7 - 3,3 (m, 8H, 2 (CH2)3 a 2 CH2 (Pip)); 4,54 (m, 1H, (CH)„); 5,59 (m, 1H, (CH)O); 6,9 - 7,7 (m, 10H, 2 indoly); 8 - 8,6 (m, 4H, NH (Pip) a 3 NH (amidy)); 10,82 (m, 2H, 2 N'H (indoly)).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 515,44 [M+H]+.
Príklady 10 až 62
Podobným spôsobom sa pripravili nasledujúce zlúčeniny:
Príklad 10 H-Aib-D-Mrp-gMrp-CHO
Príklad 11 H-Aib-Trp-gTrp-CHO
Príklad 12 H-Aib-Tip-D-gTrp-CHO
Príklad 13 H-Aib-(D)-Trp-gTrp-CHO
Príklad 14 N-Me-D-Trp-gTrp-CIIO
Príklad 15 N-Metylsulfonyl-D-Trp-gTrp-CHO
Príklad 16 Aľ-Fenylsulfonyl-D-Trp-gTrp-CHO
Príklad 17 A'-(3-Metylbutanoyl)-D-Trp-gTrp-CO-CIí3
Príklad 18 N-(3-Metylbutanoyl)-D-Trp-gTrp-CHO
Príklad 19 Aib-D-Trp-gTrp-CO-CH2-CH3
Príklad 20 Aib-D-Trp-gTrp-CO-CH2-CH(CH3)-CH3
Príklad 21 Aib-D-Trp-gTrp-CO-CH2-fenyl
Príklad 22 Aib-D-Trp-gTrp-CO-piperidín-4-yl
Príklad 23 Aib-D-Trp-gTrp-CO-CH2-pyrol-3-yl
Príklad 24 Aib-D-Trp-gTrp-CO-CH2-CH2-cyklohexyl
Príklad 25 N-Me-Aib-D-Trp-gTrp-CO-CH2-CH3
Príklad 26 N-Me-Aib-D-Trp-gTrp-CO-CH2-CH(CH3)-CH3
Príklad 27 N-Me-Aib-D-Trp-gTrp-CO-CH2-fenyl
Príklad 28 N-Me-Aib-D-Trp-gTrp-CO-CH2-pyrol-3-yl
Príklad 29 N-Me-Aib-D-Trp-gTrp-CO-CH2-CH2-cyklohexyl
Príklad 30 Aib-D-Trp-gTrp-CHO
Príklad 31 7V-(3-Amino-3-metylbutanoyl)-D-Trp-gTrp-CO-CH3
Príklad 32 jV-Acetyl-D-Trp-gTrp-CHO
Príklad 33 A-Acetyl-D-Trp-gTrp-CO-CII3
Príklad 34 A-Formyl-D-Trp-gTrp-CHO
Príklad 35 A'-Formyl-D-Trp-gTrp-CO-C’H,
Príklad 3 6 N-( 1,1 -Dimetyl-2-amino-2-ketoetyl)-D-Trp-gTrp-CHO
Príklad 37 A-(2-Amino-2-metylpropyl)-D-Trp-gTrp-CHO
Príklad 38 A-(2-Amino-2-metylpropyl)-D-Trp-gTrp-CO-CH3
Príklad 39 N-Me-Aib-D-Trp-D-gTrp-izonipekotyl
Príklad 40 N-Me-Aib-D-Trp-N-Me-D-gTrp-C(O)CH3
Príklad 41 H-Aib-D-Trp-N-Me-D-gTrp-C(O)CH3
Príklad 42
H-Aib-(D)-1 -Nal-g-(D)-1 -Nal-formyl
C3oH32N403, 496 g.moľ1.
‘H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,14 a 1,4 (2m, 6H, 2 CH3 (Aib)); 3,17 - 3,55 (m, 4H, 2(CH2)P); 4,82 (m, 1H, CHa); 5,5 a 5,82 (2m, 1H, CHa); 7,36 - 7,64 (m, 8H); 7,83 - 8 (m, 7H); 8,25 - 9,45 (m, 5H). Hmotnostná spektrometria (FAB), m/z 497 [M+H]+.
Analytická HPLC (Delta Pak 5μ C18 100A, 1 ml/1 min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 50 min.), tr = 20,28 min., 99 %. Lyofilizovaná zlúčenina.
Príklad 43
H-Aib-(D)-2-Nal-g-(D)-2-Nal-formyl
C30H32N4O3,496 g.moľ1.
‘H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,18 a 1,36 (2m, 6H, 2 CH3 (Aib)); 2,84 - 3,3 (m, 4H, 2 (CH2)p); 4,7 (m, 1H, CHa); 5,45 a 5,73 (2m, 1H, CHa); 7,47-7,51 (m, 6H); 7,76 - 8,06 (m, 11H); 8,36 - 9,11 (m, 3H). Hmotnostná spektrometria (FAB), m/z 497 [M+H]+.
Analytická HPLC (Delta Pak 5μ, C18 100A, 1 ml/1 min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 50 min.), tr = 20,26 mm, 95 %. Lyofilizovaná zlúčenina.
Príklad 44
H-Aib-(D)-1 -Naľ(D)-gTrp-formyl
C28H31N5O3, 485 g.mol .
’HNMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,15 a 1,42 (2m, 6H, 2 CH3 (Aib)); 3,11 - 3,3 a 3,54 - 3,7 (m, 4H, 2 (CH2)P); 4,81 (m, 1H, CHa); 5,4 a 5,74 (2m, 1H, CHa); 7,06 - 7,2 (m, 3H); 7,34 - 7,65 (m, 6H); 7,91 - 8,1 (m, 4H); 8,2 - 8,4 (m, 1H); 8,55 - 9,5 (m, 3H); 10,95 (m, 1H, N‘H).
Hmotnostná spektrometria (FAB), m/z 486 [M+H]+.
Analytická HPLC (Delta Pak 5μ C18 100A, 1 ml/min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 50 min.), tr = 17,33 mm, 92 %. Lyofilizovaná zlúčenina.
Príklad 45
H-Aib-(D)-2-Nal-(D)-gTrp-formyl
C28H31N5O3, 485 g.moľ1.
‘H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,19 a 1,45 (2m, 6H, 2 CH3 (Aib)); 2,93 - 3,3 (m, 4H, 2 (CH2)p); 4,71 (m, 1H, CHJ; 5,35 a 5,7 (2m, 1H, CIIa·); 7,05 - 7,1 (m, 2H); 7,2 - 7,34 (m, 1H); 7,47 - 7,53 (m, 4H); 7,64 (m, 1H); 7,78 - 8 (m, 8H); 8,48 - 9,37 (m, 2H); 10,88 - 11,04 (m, 1H, N’H).
Hmotnostná spektrometria (FAB), m/z 486 [M+H]+.
Analytická HPLC (Delta Pak 5μ C18 100A, 1 ml/min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 50 min.), tr = 17,30 min., 95 %. Lyofilizovaná zlúčenina.
Príklad 46
H-Aib-(D)-Trp-g-(D)-1 -Nal-formyl
C28H31N5O3, 485 g.moľ1.
’H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,23 a 1,41 (2m, 6H, 2 CH3 (Aib)); 2,92 - 3,15 (m, 2H, (CH2)P); 3,4 - 3,6 (m, 2H, (CH2)p); 4,63 (m, 1H, CHa.); 5,44 a 5,79 (2m, 1H, CHa.); 6,99 - 7,15 (m, 3H); 7,33 (m, 1H); 7,45 - 8,1 (m, 11H); 8,34 - 9,37 (m, 3H); 10,83 (m, 1H).
Hmotnostná spektrometria (FAB), m/z 486 [M+H]+.
Analytická HPLC (Symmetry shield 3,5μ C18 100A, 1 ml/min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 60 % ACN za 15 min., potom 60 až 100 % ACN za 3 min.), tr = 10,00 min., 99 %. Lyofilizovaná zlúčenina.
Príklad 47
H-Aib-D-Trp-g-D-2-Nal-formyl
C28H31N5O3, 485 g.moľ1.
'H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,22 a 1,43 (2m, 6H, 2 CH3 (Aib)); 2,85 - 3,3 (m, 4H, 2 (CH2)P); 4,64 (m, 1H, CHa); 5,37 a 5,72 (2m, 1H, CHa.); 6,97 - 7,13 (m, 3H); 7,32 (m, 1H); 7,44 - 7,54 (m, 3H); 7,66 (d, 1H); 7,78 (m, 1H); 7,86 - 8,02 (m, 7H); 8,33 - 9,4 (m, 2H); 10,82 (m, 1H, N'H).
Hmotnostná spektrometria (FAB), m/z 486 [M+H]+.
Analytická HPLC (Delta Pak 5μ C18 100A, 1 ml/min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 25 min.), tr = 9,00 min., 99 %. Lyofilizovaná zlúčenina.
Príklad 48
H-Aib-(D)-Trp-(D)-3(R/S)-gDht-formyl
C26H32N6O3, 476 g.mol .
'H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,12 (s, 3H, CH3 (Aib)); 1,32 (s, 3H, CH3 (Aib)); 1,73 (m, 1H, CH2); 2,01 (m, 1H, CH2); 2,9 (m, 1H); 3,03 (m, 1H); 3,13 (m, 2H); 3,54 (m, 1H); 4,47 (m, III, CHa); 5,10 a 5,52 (2m, 1H, CHa ); 6,71 - 8,83 (m, 16H, 5H (Trp), 4H (Dht), 3 NH (amidy), NH a NH2 (amíny), formyl); 10,7 (m, ΙΗ,νΉ).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 477,46 [M+H]+ 499,42 [M+Na]’; 953,51 [2M+H]+. Analytická HPLC (Delta Pak 5μ C18 100A, 1 ml/min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 50 min.), tr = 9,40 min., 98 %. Lyofílizovaná zlúčenina.
Príklad 49
H-Aib-(D)-3(R/S)-Dht-(D)-gTrp-formyl
C26H32N6O3, 476 g.mol .
'H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,58 (s, 3H, CH3 (Aib)); 1,85 (m, 1H, CH2); 2,2 (m, 1H, CH2); 3,1 (d, 2H); 3,35 (m, 2H); 3,56 (m, 1H); 3,7 (m, 1H); 4,5 (m, 1H, CHa); 5,33 a 5,71 (2m, 1H, CHJ; 6,88 - 8,91 (m, 16H, 5H (Trp), 4H (Dht), 3 NH (amidy), NH aNH2 (anúny), formyl); 10,92 a 10,97 (2s, 1H, N'H). Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 477,33 [M—I ] ; 499,42 [M+Na]+; 953,51 [2M+H]+. Analytická HPLC (Delta Pak 5μ C18 100A, 1 ml/min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 50 min.), tr = 10,35 mm, 98 %. Lyofílizovaná zlúčenina.
Príklad 50
N(Me)-Aib-(D)-Trp-(D)-3(R/S)-gDht-acetyl
C28H36N6O3, 504 g.moľ1.
'H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 1,42 (s, 3H, CH3 (Aib)); 1,63 (s, 3H, CH3 (Aib)); 2,72 (m, 311, acetyl); 2,4 (m, 2H, CH2); 2,5 (m, 3H, NCH3); 3,2 - 3,5 (m, 4H); 3,85 (m, 1H); 4,85 (m, 1H, CHn); 5,76 (m, 1H, CHa·); 7,04 - 8,86 (m, 14H, 5H (Trp), 4H (Dht), 3 NH (amidy), 2 NH (amíny)); 11,02 (2s, 1H, N'H).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 505,31 [M+H]+; 527,70 [M+Na]+.
Analytická FIPLC (Delta Pak 5μ C18 100A, 1 ml/min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 50 min.), tr = 10,20 min., 98 %. Lyofílizovaná zlúčenina.
Príklad 51
N(Me)-Aib-(D)-3(R',S)-Dht-(D)-gTrp-acetyl
C28H36N6O3, 504 g.mol'.
’H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,58 (s, 6H, 2 CH3 (Aib)); 1,81 (m, 3H, acetyl); 1,98 (m, 1H, CII2); 2,24 (m, 1H, CH2); 2,54 (m, 3H, NCH3); 3,08 (d, 2H); 3,31 (m, 2H); 3,4 (m, 1H); 3,59 (m, 1H); 3,71 (m, 1H) ; 4,52 (m, 1H, CHa); 5,61 (m, 1H, CHO·); 6,9 - 8,92 (m, 14H, 5H (Trp), 4H (Dht), 3 NH (amidy), 2 NH (amíny)); 10,83 (s, 1H, N’H).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 505,43 [M+H]+; 527,52 [M+Na]+.
Analytická HPLC (Delta Pak 5μ C18, 100A, 1 ml/min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 50 min.), tr = 11 min., 98 %. Lyofílizovaná zlúčenina.
Príklad 52
N(Me)2-Aib-(D)-Trp-(D)-gTrp-formyl
C28H36N6O3, 502 g.moľ’.
Ή NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,2 (s, 3H, CH3 (Aib)); 1,39 (s, 3H, CH3 (Aib)); 2,29 (m, 3H, NCH3); 2,99 - 3,33 (m, 4H, 2 (CH,)p); 4,68 (m, 1H, CH)„); 5,3 a 5,69 (m, 1H, CH)ď); 6,97 - 7.72 (m, 10H, 2 indoly); 7,97 (2s, 1H, formyl); 8,2 - 9,47 (m, 3H, 3 NH (amidy)); 10,85 (m, 2H, 2 NH (indoly)).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanic), m/z 503,45 [M+H]+.
Analytická HPLC (Symmetry shield 3,5μ C18 100A, 1 ml/min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 15 min.), tr = 6,63 min., 99 %. Lyofilizovaná zlúčenina.
Príklad 53
N(Me)2-Aib-(D)-Trp-(D)-gTrp-acetyl
C29H36N6O3, 516 g.moľ1.
'H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 1,22 (s, 3H, CH3 (Aib)); 1,4 (s, 3H, CH3 (Aib)); 1,8 (s, 3H, acetyl); 2,28 (d, 3H, NCH3); 2,96 - 3.22 (m, 4H, 2 (CH2)P); 4,7 (m, 1H, (CH)O); 5,60 (m, 1H, (CH)G.); 6,98 - 7,75 (m, 10H, 2 indoly); 8,2 - 9,47 (m, 3H, 3 NH (amidy)); 10,84 (m, 2H, 2 NH (indoly)).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 517,34 [M+H]+.
Analytická HPLC (Symmetry shield 3,5μ C18 100A, 1 ml/min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 15 min.), tr = 7,07 mm, 99 %. Lyofilizovaná zlúčenina.
Príklad 54
H-Acc3-(D)-Trp- (D)-gTrp-formyl
C26H28N6O3, 472 g.moľ1.
'H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,11 a 1,5 (2m, 4H, 2 CH2 (Acc3)); 2,91 - 3,12 (m, 4H, 2 (CH2)p); 4,6 (m, 1H, CH„); 5,3 a 5,7 (2m, 1H, CHa.); 6,97 - 7,17 (m, 6H, indoly); 7,32 (m, 2H, indoly); 7,62 - 7,72 (m, 2H, indoly); 7,97 (2s, 1H, formyl); 8,27 - 8,92 (m, 5H, 3 NH (amidy) a NH2 (amin)); 10,80 - 10,90 (4s, 2H, 2 n'h).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 473,22 [M+H]+; 495,15 [M+Na]+; 945,47 [2M+H]+;
967.32 [2M+Na]+.
Analytická HPLC (Delta Pak 5μ C18 100A, 1 ml/min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 50 min.), tr = 14,20 min., 98 %. Lyofilizovaná zlúčenina.
Príklad 55
H-Acc5-(D)-Trp-(D)-gTrp-formyl
C26H28N6O3,472 g.moľ1.
'H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,51 a 2,31 (m, 8H, 4 CH2 (Acc5)); 2,97 - 3,18 (m, 4H, 2 (CH2)p); 4,64 (m, 1H, CHa); 5,31 a 5,69 (2m, 1H, CHJ; 6,96 - 7,34 (m, 8H, indoly); 7,62 - 7,74 (m, 2H, indoly); 7,96 (m, 3H, formyl a NH2 (amín)); 8,48 - 8,96 (m, 3H, 3 NH (amidy); 10,80 - 10,90 (4s, 2H, 2 N'H).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 501,31 [Mr H]+; 523,42 [M+Na]+; 101,37 [2M+H]+. Analytická HPLC (Delta Pak 5μ C18 100A, 1 ml/min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 50 min.), tr = 15,35 min., 98 %. Lyofilizovaná zlúčenina.
Príklad 56
H-Acc6-(D)-T rp-(D)-gT rp-formyl
C26H28N6O3, 472 g.moľ1.
‘H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,29 - 1,57 (m, 8H, 4 CH2 (Acc6)); 1,89 a 2,04 (2m, 2H, CH2 (Acc6)); 2,95 - 3,17 (m, 4H, 2 (CH2)p); 4,61 (m, 1H, CH„); 5,3 a 5,68 (2m, 1H, CH„.); 6,95 - 7,21 (m, 6H, indoly);
7.32 (m, 2H, indoly); 7,6 (m, 2H, indoly); 7,74 (m, 2H, indoly); 7,96 (m, 3H, formyl a NH2 (amin)); 8,18 - 8,67 (m, 5H, 3 NH (amidy)); 10,77 - 10,89 (4s, 211, 2N'H).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 515,11 [M+H]+.
Analytická HPLC (Delta Pak 5μ C18 100A, 1 ml/min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 50 min.), tr 15,9 min., 97 %. Lyofilizovaná zlúčenina.
Príklad 57
H-Dpg-(D)-Trp-(D)-gTrp-formyl
C26H28N6O3, 530 g moľ1.
'HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 0 (m, 1H, Dpg); 0,40 (m, 3H, Dpg); 0,70 (m, 4H, Dpg); 1,01 - 1,51 (m, 5H, Dpg); 1,76 (m, 1H, Dpg); 2,82 - 2,95 (m, 4H, 2 (CH2)p); 4,59 (m, 1H, CHJ; 5,3 a 5,54 (2m, 1H, CHO.); 6,81 - 7,09 (m, 6H, indoly); 7,19 (m, 2H, indoly); 7,48 (m, 1H, indoly); 7,6 - 7,68 (m, 5H, 1H (indoly), formyl a NH, (amín); 7,83 - 8,82 (m, 3H, 3 NH (amidy)); 10,69 a 10,76 (2m, 2H, 2N'H).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), ni/z 531,24 [M+I]+.
Analytická HPLC (Delta Pak 5μ C18 100A, 1 ml/min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 50 mm), tr = 15,35 mm, 98 %. Lyofilizovaná zlúčenina.
Príklad 58
H-Aib-(D)-Trp-(D)-gTrp-C(O)NHCH2CH3
C26H25N,O3, 517 g.moľ1.
'H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 0,94 (t, 3H, NHCH2CH3); 1,01 (s, 3H, CH3 (Aib)); 1,08 (s, 3H, CH3 (Aib)); 1,8 (sl, 2H, NH2); 2,95 - 3,15 (m, 6H, 2 ÍCH2J(] a NHCH2CH3); 4,43 (m, 1H, CHa); 5,39 (m, 1H, CH„.); 6,02 (m, 1H); 6,22 (m, 1H); 6,9 - 7,56 (m, 10H, indoly); 8 (m, 1H); 8,31 (m, 1H); 10,77 a 10,79 (2s, 2H, 2N'H).
Hmotnostná spektrometria (elektrorozprašovanie), m/z 518,4 [M+H]+; 540,3 [M±Na]+.
Analytická HPLC (Symmetry shield 3,5μ C18 100A, 1 ml/min., 214 nm, eluent: H2O/ACN 0,1% TFA, gradient 0 až 100 % ACN za 15 min.), tr = 7,12 min., 99 %. Lyofilizovaná zlúčenina.
Príklad 59 N-Me-Aib-(D)-Trp-(D)-gTrp-C(O)NHCH2CH3
Príklad 60 H-Aib-(R)-Me-Trp-(D)-gTrp-formyl
Príklad 61 H-Aib-(D)-Trp-(R)-Me-gTrp-formyl
Príklad 62 H-Me-Aib-(D)-Trp-(R)-Me-gTrp-acetyl
Príklad 63 Vyhodnotenie aktivity nových látok zvyšujúcich sekréciu rastového hormónu pri uvoľňovaní rastového hormónu na potkaních mlád’atách
Pokusné zvieratá
Používali sa samce potkanov Sprague Dawley vo veku desiatich dní s hmotnosťou približne 25 g. Mláďatá sa získali piaty deň po narodení a umiestnili pri riadených podmienkach (22 ± 2 °C, 65 % vlhkosť a umelé svetlo od 06,00 do 20,00 h). Podľa ľubovôle bola matkám k dispozícii suchá diéta a voda.
Postup experimentu
Jeden deň pred experimentom boli mláďatá odobraté matkám a náhodne boli rozdelené do skupín vždy po ôsmich.
Mláďatám sa subkutánne podalo 100 μΐ rozpúšťadla (DMSO, konečné riedenie 1 : 300 vo fyziologickom roztoku), hexarelínu (Tyr-Ala-His-D-Mrp-Ala-Trp-D-Fe-Lys-NH2, použitý ako referenčné liečivo) alebo novej zlúčeniny (300 pg/kg) a o 15 minút neskoršie sa zvieratá usmrtili dekapitáciou. Ihneď sa odobrala a zcentrifugovala krv. Vzorky plazmy sa uchovávali pri -20 °C až do testu na zistenie koncentrácie rastového hormónu v plazme.
Koncentrácie rastového hormónu v plazme sa merali metódou RIA s použitím materiálov poskytnutých National Inštitúte of Diabetes, Digestive and Kidney Diseascs (NIDDK) Úradu National Inštitúte of Health USA.
Hodnoty sa vyjadrili na základe štandardu NIDDK-rat-GH-RP-2 (účinnosť 21 U/mg) ako ng/ml plazmy.
Minimálna detegovateľná hodnota rastového hormónu potkana bola približne 1,0 ng/ml a variabilita medzi jednotlivými testami bola približne 6 %.
Získané výsledky niekoľkých testových sérií, pri ktorých sa zisťovala aktivita pri potkanoch in vivo, sú uvedené v tabuľkách 1 až 10.
Tabuľka 1
Príklad Štruktúra GH ng/ml
1 H-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO 158,8 ±39,4
13 H-Aib-D-Trp-gTrp-CHO 58 ± 6,3
Rozpúšťadlo 15,0 ±8,0
Hexarelín Tyr-Ala-His-D-Mrp-Ala-Trp-D-Fe-Lys-NH2 202 ± 32,7
Tabuľka 2
Príklad Štruktúra GH ng/ml
3 N-Me-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO 86,6 ± 12,6
4 H-Aib-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 104,7 ± 13,5
5 N-Me-Aib-D-Trp-D-gTrp-C(O)CHj 175,5 ±37,2
Rozpúšťadlo 20,7 + 0,9
Hexarelín Tyr-Ala-His-D-Mrp-Ala-Trp-D-Fe-Lys-NH2 134,5 + 27,2
Tabuľka 3
Príklad Štruktúra GH ng/ml
6 Pip-D-Trp-D-gTrp-CHO 109,7 ± 10,1
7 Pip-D-Trp-D-gTrp-C(O)CH3 53,1 ±6,6
8 Izonipekotyl-D-Trp-D-gTrp-CHO 94,2 ± 8,6
9 Izonipekotyl-D-T rp-D-gT rp-C(O)CH3 61,2 ± 10,8
19 Aib-D-Trp-gTrp-CO-CH2-Ch3 79,8 ± 22,4
20 Aib-D-Trp-gTrp-CO-piperidín-4-yl 153,6 + 30,6
Rozpúšťadlo 22,3 ± 5
Hexarelín Tyr-Ala-His-D-Mrp-Ala-Trp-D-Fe-Lys-Ntri 114,7 + 8,4
Tabuľka 4
Príklad Štruktúra GH ng/ml
39 N-Me-Aib-D-Trp-D-gTrp-izonipekotyl 97,1 ±21,0
40 N-Me-Aib-D-Trp-N-Me-D-gTrp-C(O)CH3 188,2 ±28,5
41 H-Aib-D-Trp-N-Me-D-gTrp-C(O)CH3 75,4+15,0
Rozpúšťadlo 10,55±2,65
Hexarelín Tyr-Ala-His-D-Mrp-Ala-Trp-D-Fe-Lys-NH2 114,5+12,9
Tabuľka 5
Príklad Štruktúra GH ng/ml
42 H-Aib-(D)-l-Nal-g-(D)-l-Nal-formyI 25,05 ± 06,00
43 H-Aib-(D)-2-Nal-g-(D)-2-Nal-formyl 37,33 + 19,74
44 H-Aib-(D)-1 -Nal-(D)-gTrp-formyl 15,04 + 03,30
45 H-Aib-(D)-2-Nal-(D)-gTrp-forrnyl 13,91+03,87
46 H-Aib-(D)-Trp-g-(D)-1 -Nal-formyl 8,26 + 01,09
47 H-Aib-(D)-Trp-g-(D)-2-Nal-formyl 9,04 ± 04,03
Rozpúšťadlo 6,49 + 01,18
Hexarelín 276,01 +23,5
Tabuľka 6
Príklad Štruktúra GH ng/ml
48 H-Aib-(D)-Trp-(D)-3(R/S)-gDht-formyl 17,49 ± 2,40
49 H-Aib-(D)-3(R/S)-Dht-(D)-gTrp-formyl 24,35 ± 4,85
50 N(Me)-Aib-(D)-Trp-(D)-3(R/S)-gDht-acetyl 11,17+1,35
51 N(Me)-Aib-(D)-3(R/S)-Dht-(D)-gTrp-acetyl 19,38 + 4,16
Rozpúšťadlo 14,65 ± 0,92
Hexarelín 91,61 ±4,09
Tabuľka 7
Príklad Štruktúra GH ng/ml
52 N(Me)2-Aib-(D)-Trp-(D)-gTrp-formyl 121,43+29
53 N(Me)2-Aib-(D)-Trp-(D)-gTrp-acetyl 26,80 + 5,64
Rozpúšťadlo 7,89+1,77
Hexarelín 172,5 + 38,53
Tabuľka 8
Príklad Štruktúra GH ng/ml
60 H-Aib-(R)-Me-Trp-(D)-gTrp-formyl 21,02 + 3,43
61 H-Aib-(D)-Trp-(R)-Me-gTrp-formyl 52,28 + 43,76
62 H-Me-Aib-(D)-Trp-(R)-Me-gTrp-acetyl 171,78 + 10,32
Rozpúšťadlo 7,89+1,77
Hexarelín 172,5 + 38,53
Tabuľka 9
Príklad Štruktúra GH ng/ml
54 H-Acc3-(D)-Trp-(D)-gTrp-formyl 7,89 ± 3,20
55 H-Acc5-(D)-Trp-(D)-gTrp-fonnyl 11,46 ± 1,18
56 H-Acc6-(D)-Trp-(D)-gTrp-formyl 8,49 ± 0,40
57 H-Dpg-(D)-Trp-(D)-gTrp-formyl 18,38 ±2,88
Rozpúšťadlo 17,32 ± 1,70
Hexarelín 89,91 ±3,04
Tabuľka 10
Príklad Štruktúra GH ng/ml
58 H-Aib-(D)-Trp-(D)-gTrp-C(O)NHCH2CH2 376,48 ±43,24
59 N-Me-Aib-(D)-Trp-(D)-gTrp-C(O)NHCH2CH2 179,53 ±24,65
Rozpúšťadlo 17,32 ± 1,70
Hexarelín 89,91 ±3,04
Ďalej bola zisťovaná časová závislosť koncenrácie rastového hormónu po orálnom podávaní psovi (1 mg/kg) zlúčeniny podľa príkladu 1 (H-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO). Testom bola podrobená dobre vytrénovaná rasa psov bígle oboch pohlaví, starších ako 10 rokov s hmotnosťou 10 až 15 kg. Zvieratá boli kŕmené normálnou suchou stravou a voda im bola podávaná podľa potreby. Zvieratá mali režim 12 hodín svetla a 12 hodín tmy so začiatkom 7.00 hod. Zlúčenina bola podávaná psom, ktoré nedostali potravu od 16.00 hod. predchádzajúceho dňa. Vzorky krvi boli odoberané 20 min. pred podaním, v okamihu podania a 15, 30, 60, 120 a 180 min. Výsledky sú uvedené v tabuľke 11.
Tabuľka 11
Prikl. Meno psa
1 DAKOTA JORMA RAZ DEGAN FORREST LEE MARKUS TAYLOR MEAN VALUE SEM
t (min.) Koncentrácia GH (ng/ml)
-20 0,48 3,58 2,14 1,43 2,45 2,32 2,07 0,38
0 0,35 2,75 1,64 2,01 2,55 1,41 1,79 1,03
15 2,11 8,91 3,58 6,38 6,11 4,8 5,32 1,02
30 0,54 6,85 6,37 8,48 6,9 3,89 5,5 1,07
60 0,17 2,65 3,02 4,31 6,51 4,34 3,52 0,84
90 0,4 2,47 2,61 6,42 5,18 4,43 3,59 0,66
120 3,58 2,48 1,94 3,71 4,54 4,28 3,42 0,38
180 3,46 2,82 1,49 3,18 4,12 3,18 3,04 0,36
AUC 328,53 658,38 510,64 888,91 944,26 721,34 675,35 94,47
SEM = štandardná odchýlka AUC = oblasť pod krivkou

Claims (17)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) kde (I), * je atóm uhlíka, ktorý v prípade chirálneho atómu uhlíka má konfiguráciu R alebo S, jedna zo skupín R1 a R3 znamená atóm vodíka a druhá je skupina vzorca (II) (Π),
    R2 znamená atóm vodíka, priamu alebo rozvetvenú skupinu CrC6-alkyl, fenylovú alebo naftylovú skupinu, 4-piperindinylovú skupinu, 3-pyrolylovú skupinu, cyklohexylovú skupinu, skupinu (CH2)n-aryl, kde aryl je fenyl alebo naftyl, (CH2)n-heterocyklickú skupinu, kde heterocyklickou skupinou je 4-piperindinyl, 3-pyrolyl alebo izonipekotyl, (CH2)n-cykloalkylovú skupinu, kde cykloalkylovou skupinou je cyklohexyl, metylsulfonylovú skupinu, fenylsulfonylovú skupinu, skupinu C(O)R8 alebo skupinu vzorcov (III) až (VIII) (III),
    R11 O
    R^AcA h3c ch3
    R (V), (VI), o
    II h3c ch3 (VIII),
    R4 znamená atóm vodíka alebo priamu, alebo rozvetvenú skupinu C|-C4-alkyl, R5 znamená atóm vodíka, priamu alebo rozvetvenú skupinu CrC4-alkyl, skupinu (CH2)n-aryl, kde arylovou skupinou je fenyl alebo naftyl, (CHz)n-heterocyklickú skupinu, kde heterocyklickou skupinou je 4-piperindinyl, 3-pyrolyl alebo izonipekotyl, (CH2)n-cykloalkylovú skupinu, kde cykloalkylovou skupinou je cyklohexyl, aminoskupinu alebo NH-CH2-CH3, R6 a R7 sú nezávisle atóm vodíka alebo priama, alebo rozvetvená Ci-C4-alkylová skupina, R8 je priama alebo rozvetvená C|-Cô-alkylová skupina, R8 9, R10, R11, R12, R13, R14, R15 a R16 sú nezávisle atóm vodíka alebo priama, alebo rozvetvená CrC4-alkylová skupina, mje 0, 1 alebo 2 a n je 1 alebo 2.
  2. 2. Zlúčeniny podľa nároku 1, kde R1 je atóm vodíka a R3 je skupina vzorca (II).
  3. 3. Zlúčeniny podľa nároku 1, kde R2 je atóm vodíka, R3 je skupina vzorca (II) a m je 0.
  4. 4. Zlúčeniny podľa nároku 3, kde priamy alebo rozvetvený CrC4-alkyl je metyl, priamy alebo rozvetvený C|-C()-alkyl je metyl, etyl alebo izobutyl, aryl je fenyl alebo naftyl, cykloalkyl je cyklohexyl a heterocyklická skupina je skupina 4-piperidinyl alebo 3-pyrolyl.
  5. 5. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je
  6. 6. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou j e
  7. 7. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou j e
  8. 8. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je H-Aib-(D)-Trp-(D)-gTrp-C(O)NHCH2CH3.
  9. 9. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-Me-Aib-(D)-Trp-(D)-gTrp-C(O)NHCII2CH3.
  10. 10. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje zlúčeninu podľa nároku 1.
  11. 11. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 10, vyznačujúci sa tým, že obsahuje farmaceutický prijateľný nosič.
  12. 12. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 10, vyznačujúci sa tým, že obsahuje ďalšiu látku podporujúcu sekréciu rastového hormónu.
  13. 13. Zlúčenina podľa nároku 1 na použitie na zvýšenie hladiny rastového hormónu v plazme u cicavca.
  14. 14. Zlúčenina podľa nároku 1 na použitie na liečenie deficiencie sekrécie rastového hormónu u cicavca.
    5
  15. 15. Zlúčenina podľa nároku 1 na použitie na liečenie spomaleného rastu dieťaťa.
  16. 16. Zlúčenina podľa nároku 1 na použitie na liečenie metabolických porúch súvisiacich s deficienciou sekrécie rastového hormónu, najmä u starších ľudí.
  17. 17. Zlúčenina podľa nároku 1 na použitie na podporu hojenia rán, zotavovania sa z chirurgického zákroku alebo zotavovania sa z vysiľujúcich ochorení.
SK1756-2002A 2000-06-13 2001-06-13 Zlúčeniny zvyšujúce sekréciu rastového hormónu, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie SK287169B6 (sk)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US21132600P 2000-06-13 2000-06-13
US23492800P 2000-09-26 2000-09-26
PCT/EP2001/006717 WO2001096300A1 (en) 2000-06-13 2001-06-13 Growth hormone secretagogues

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK17562002A3 SK17562002A3 (sk) 2003-05-02
SK287169B6 true SK287169B6 (sk) 2010-02-08

Family

ID=26906052

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK1756-2002A SK287169B6 (sk) 2000-06-13 2001-06-13 Zlúčeniny zvyšujúce sekréciu rastového hormónu, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie

Country Status (30)

Country Link
US (2) US6861409B2 (sk)
EP (1) EP1289951B1 (sk)
JP (2) JP3522265B2 (sk)
KR (1) KR100825109B1 (sk)
CN (1) CN1232507C (sk)
AR (1) AR029941A1 (sk)
AT (3) ATE370119T1 (sk)
AU (2) AU6606601A (sk)
BG (3) BG66130B1 (sk)
BR (1) BRPI0111591B8 (sk)
CA (1) CA2407659C (sk)
CY (2) CY1107710T1 (sk)
CZ (2) CZ305279B6 (sk)
DE (3) DE60130025T2 (sk)
DK (3) DK1344773T3 (sk)
ES (3) ES2250416T3 (sk)
FR (1) FR19C1044I2 (sk)
HK (1) HK1054224A1 (sk)
HU (1) HU229233B1 (sk)
IL (2) IL153067A0 (sk)
MX (1) MXPA02011899A (sk)
NL (1) NL300999I2 (sk)
NO (1) NO323873B1 (sk)
NZ (1) NZ522280A (sk)
PL (1) PL216676B1 (sk)
PT (2) PT1524272E (sk)
RU (1) RU2270198C2 (sk)
SK (1) SK287169B6 (sk)
TW (2) TW200831076A (sk)
WO (1) WO2001096300A1 (sk)

Families Citing this family (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SK287169B6 (sk) * 2000-06-13 2010-02-08 Zentaris Ag Zlúčeniny zvyšujúce sekréciu rastového hormónu, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie
CU23157A1 (es) * 2001-01-03 2006-07-18 Ct Ingenieria Genetica Biotech COMPOSICION FARMACéUTICA PARA EL TRATAMIENTO DEL DANO TISULAR DEBIDO A FALTA DE IRRIGACION SANGUINEA ARTERIAL
US7476653B2 (en) 2003-06-18 2009-01-13 Tranzyme Pharma, Inc. Macrocyclic modulators of the ghrelin receptor
US7034050B2 (en) * 2004-04-28 2006-04-25 Romano Deghenghi Pseudopeptides growth hormone secretagogues
WO2007014258A2 (en) * 2005-07-22 2007-02-01 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques S.A.S. Growth hormone secretagogues
EP1757290A1 (en) 2005-08-16 2007-02-28 Zentaris GmbH Novel triazole derivatives as ghrelin analogue ligands of growth hormone secretagogue receptors
GB0603295D0 (en) * 2006-02-18 2006-03-29 Ardana Bioscience Ltd Methods and kits
CU23558A1 (es) 2006-02-28 2010-07-20 Ct Ingenieria Genetica Biotech Compuestos análogos a los secretagogos peptidicos de la hormona de crecimiento
US7763707B2 (en) * 2006-03-13 2010-07-27 Liat Mintz Use of ghrelin splice variant for treating cachexia and/or anorexia and/or anorexia-cachexia and/or malnutrition and/or lipodystrophy and/or muscle wasting and/or appetite-stimulation
JP2010518090A (ja) 2007-02-09 2010-05-27 トランザイム・ファーマ，インコーポレイテッド 大環状グレリン受容体修飾因子およびその使用方法
EP2103602A1 (en) 2008-03-17 2009-09-23 AEterna Zentaris GmbH Novel 1,2,4-triazole derivatives and process of manufacturing thereof
US8431642B2 (en) * 2008-06-09 2013-04-30 Exxonmobil Chemical Patents Inc. Polyolefin adhesive compositions and articles made therefrom
EP2431035A1 (en) 2010-09-16 2012-03-21 Æterna Zentaris GmbH Novel Triazole Derivatives with Improved Receptor Activity and Bioavailability Properties as Ghrelin Antagonists of Growth Hormone Secretagogue Receptors
US10300101B2 (en) 2012-09-19 2019-05-28 Quality IP Holdings, LLC Methods and compositions for enhancing or maintaining fertility
US8747922B2 (en) 2012-09-19 2014-06-10 Quality Ip Holdings, Inc. Methods and compositions for increasing sex steroids and growth hormones
US9198889B2 (en) 2012-09-19 2015-12-01 Quality IP Holdings, LLC Methods for treating post-traumatic stress disorder
US8747921B2 (en) 2012-09-19 2014-06-10 Quality Ip Holdings, Inc. Methods for improving health in humans
US9066953B2 (en) 2012-09-20 2015-06-30 Quality IP Holdings, LLC Methods for increasing endurance and fat metabolism in humans
US8715752B2 (en) 2012-09-20 2014-05-06 Quality Ip Holdings, Inc. Compositions for increasing human growth hormone levels
US10292957B2 (en) 2012-09-20 2019-05-21 Quality IP Holdings, LLC Compositions and methods for treating fibromyalgia
US8747923B2 (en) 2012-09-20 2014-06-10 Quality Ip Holdings, Inc. Methods for improving health in canines
CN104853778A (zh) 2012-10-24 2015-08-19 第一三共株式会社 用于肌萎缩性侧索硬化的治疗剂
CN105330720A (zh) * 2014-06-06 2016-02-17 深圳翰宇药业股份有限公司 一种制备马昔瑞林的方法
SG10201902424TA (en) 2015-09-21 2019-04-29 Lumos Pharma Inc Detecting and treating growth hormone deficiency
US10894072B2 (en) 2017-02-13 2021-01-19 IP Quality Holdings, LLC Compositions and methods for treating fibromyalgia
US10288629B1 (en) 2017-12-19 2019-05-14 Aeterna Zentaris, Inc. Method of assessing growth hormone deficiency in humans by a macimorelin containing composition
JP2023535000A (ja) 2020-07-22 2023-08-15 エテルナ ツェンタリス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング マシモレリンを使用することにより小児科患者における成長ホルモン分泌不全症を診断するためのスクリーニング方法

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0400051B1 (en) * 1988-01-28 1995-05-10 Polygen Holding Corporation Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity
US5536814A (en) * 1993-09-27 1996-07-16 La Jolla Cancer Research Foundation Integrin-binding peptides
CA2176140A1 (en) * 1993-11-24 1995-06-01 Meng Hsin Chen Indolyl group containing compounds and the use thereof to promote the release of growth hormone(s)
US5798337A (en) * 1994-11-16 1998-08-25 Genentech, Inc. Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues
US6025471A (en) * 1998-06-03 2000-02-15 Deghenghi; Romano Diazaspiro, azepino and azabicyclo therapeutic peptides
SK287169B6 (sk) * 2000-06-13 2010-02-08 Zentaris Ag Zlúčeniny zvyšujúce sekréciu rastového hormónu, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie

Also Published As

Publication number Publication date
HK1054224A1 (en) 2003-11-21
US20020165343A1 (en) 2002-11-07
FR19C1044I2 (fr) 2020-07-24
BG66216B1 (bg) 2012-05-31
PT1524272E (pt) 2007-07-25
ES2250416T3 (es) 2006-04-16
BG110708A (en) 2010-12-30
PT1344773E (pt) 2007-11-27
TWI305529B (en) 2009-01-21
JP2003335752A (ja) 2003-11-28
TW200831076A (en) 2008-08-01
CN1431998A (zh) 2003-07-23
PL216676B1 (pl) 2014-05-30
ATE370119T1 (de) 2007-09-15
CZ303173B6 (cs) 2012-05-16
FR19C1044I1 (sk) 2019-09-08
BG110771A (bg) 2011-03-31
HUP0302026A2 (hu) 2003-09-29
ATE302181T1 (de) 2005-09-15
BRPI0111591B8 (pt) 2021-05-25
AU2001266066B2 (en) 2005-06-30
NL300999I2 (nl) 2019-08-28
ES2288724T3 (es) 2008-01-16
US6861409B2 (en) 2005-03-01
CY1107793T1 (el) 2013-06-19
WO2001096300A1 (en) 2001-12-20
ATE362472T1 (de) 2007-06-15
JP2004503536A (ja) 2004-02-05
KR20030007889A (ko) 2003-01-23
DE60128494D1 (de) 2007-06-28
DE60130025T2 (de) 2008-05-15
CZ305279B6 (cs) 2015-07-15
IL153067A0 (en) 2003-06-24
AU6606601A (en) 2001-12-24
CA2407659A1 (en) 2001-12-20
BG66217B1 (bg) 2012-05-31
NZ522280A (en) 2004-09-24
US20040229823A1 (en) 2004-11-18
DE60128494T2 (de) 2008-01-17
BG66130B1 (bg) 2011-06-30
BG107379A (bg) 2003-09-30
NL300999I1 (nl) 2019-07-17
KR100825109B1 (ko) 2008-04-25
MXPA02011899A (es) 2003-04-22
DK1524272T3 (da) 2007-09-03
NO323873B1 (no) 2007-07-16
CA2407659C (en) 2010-11-09
DE60112753T2 (de) 2006-06-29
JP3522265B2 (ja) 2004-04-26
IL153067A (en) 2010-05-31
DK1344773T3 (da) 2007-12-27
PL363081A1 (en) 2004-11-15
CZ20024095A3 (cs) 2003-05-14
AR029941A1 (es) 2003-07-23
JP4932132B2 (ja) 2012-05-16
CN1232507C (zh) 2005-12-21
US7297681B2 (en) 2007-11-20
DE60130025D1 (de) 2007-09-27
NO20025893L (no) 2003-02-10
HUP0302026A3 (en) 2009-01-28
RU2270198C2 (ru) 2006-02-20
DK1289951T3 (da) 2005-12-19
BR0111591A (pt) 2003-05-06
ES2292900T3 (es) 2008-03-16
DE60112753D1 (de) 2005-09-22
NO20025893D0 (no) 2002-12-09
EP1289951A1 (en) 2003-03-12
CY1107710T1 (el) 2013-04-18
BR0111591B1 (pt) 2014-02-04
SK17562002A3 (sk) 2003-05-02
EP1289951B1 (en) 2005-08-17
HU229233B1 (en) 2013-09-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK287169B6 (sk) Zlúčeniny zvyšujúce sekréciu rastového hormónu, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie
AU2001266066A1 (en) Growth hormone secretagogues
EP1344773B1 (en) Growth hormone secretagogues
ZA200208896B (en) Growth hormone secretagogues.
EA000528B1 (ru) Полиморфные формы стимулятора секреции гормона роста
MXPA01004290A (en) Somatostatin antagonists and agonists that act at the sst subtype 2 receptor
BRPI9611229B1 (pt) Polymorphic form of the compound of N- [1 (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonyl-spiro [3 H -indol-3,4'-piperdin] -1'-yl) carbonyl] -2- - (phenylmethyl oxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide and pharmaceutical composition

Legal Events

Date Code Title Description
PC4A Assignment and transfer of rights

Owner name: BLITZ F02-570 GMBH, FRANKFURT AM MAIN, DE

Free format text: FORMER OWNER: ZENTARIS AG, FRANKFURT/MAIN, DE

Effective date: 20121009

TC4A Change of owner's name

Owner name: AETERNA ZENTARIS GMBH, FRANKFURT AM MAIN, DE

Effective date: 20121009

MK4A Patent expired

Expiry date: 20210613