RU2663795C2 - Антитело к pd-1 и его применение - Google Patents

Антитело к pd-1 и его применение Download PDF

Info

Publication number
RU2663795C2
RU2663795C2 RU2016102176A RU2016102176A RU2663795C2 RU 2663795 C2 RU2663795 C2 RU 2663795C2 RU 2016102176 A RU2016102176 A RU 2016102176A RU 2016102176 A RU2016102176 A RU 2016102176A RU 2663795 C2 RU2663795 C2 RU 2663795C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
seq
antibody
variable region
ser
thr
Prior art date
Application number
RU2016102176A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2016102176A (ru
Inventor
Бо ЧЭНЬ
Original Assignee
Шанхай Цзюньши Биосайенсиз Инк.
Цзюньмэн Биосайенсиз Ко., Лтд
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Шанхай Цзюньши Биосайенсиз Инк., Цзюньмэн Биосайенсиз Ко., Лтд filed Critical Шанхай Цзюньши Биосайенсиз Инк.
Publication of RU2016102176A publication Critical patent/RU2016102176A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2663795C2 publication Critical patent/RU2663795C2/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/04—Amoebicides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/10—Anthelmintics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/38—Drugs for disorders of the endocrine system of the suprarenal hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложены антитело и его функциональный фрагмент, способные к связыванию с PD-1. Также рассмотрена молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антитело или его фрагмент, экспрессионный вектор, клетка-хозяин и способ получения антитела или его функционального фрагмента. Кроме того, описан иммуноконъюгат и фармацевтическая композиция, а также способ лечения заболеваний, ассоциированных с PD-1. Данное изобретение может найти дальнейшее применение в терапии различных состояний, в частности различных видов рака, инфекционных и воспалительных заболеваний. 8 н. и 6 з.п. ф-лы, 13 ил., 14 пр.

Description

ПРЕДПОСЫЛКИ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0001] Уровень техники
[0002] Данное изобретение принадлежит к области биомедицины и относится к антителу (антителам) или его функциональному фрагменту (их функциональным фрагментам), которые с высокой степенью аффинности специфически связываются с PD-1. Оно также обеспечивает молекулу (молекулы), кодирующие антитело (антитела) или его фрагмент (их фрагменты) в соответствии с настоящим изобретением, экспрессионный вектор (экспрессионные векторы) и клетки для экспрессирования антитела (антител) или его функционального фрагмента (их функциональных фрагментов) в соответствии с настоящим изобретением, а также способ (способы) получения антитела (антител) или его функционального фрагмента (функциональных фрагментов) в соответствии с настоящим изобретением. Настоящее изобретение также обеспечивает иммуноконъюгат (иммуноконъюгаты) и фармацевтическую композицию (фармацевтические композиции), содержащие антитела или их функциональные фрагменты в соответствии с настоящим изобретением, а также способ (способы) лечения множества заболеваний (включая рак (виды рака), инфекционное заболевание (инфекционные заболевания) и воспалительное заболевание (воспалительные заболевания)), с использованием антитела (антител) или его функционального фрагмента (их функциональных фрагментов) в соответствии с настоящим изобретением.
[0003] Описание предшествующего уровня техники
[0004] Белок программируемой смерти клеток 1, PD-1, является членом семейства CD28 и иммунодепрессивных рецепторов, которые экспрессируются на поверхностях активированных Т- и В-клеток (Yao, Zhu et al. Advances in targeting cell surface signalling molecules for immune modulation. Nat Rev Drug Discov, 2013,12(2): 130-146). Этот рецептор может связываться со своими лигандами, PD-L1 и PD-L2, чтобы эффективно уменьшать иммунную реакцию привлеченных иммунных Т-клеток. Опухолевые клетки избегают иммунного надзора внутри тела из-за высокого экспрессирования PD-L1 (Okazaki and Honjo, PD-1 and PD-1 ligands: from discovery to clinical application. International Immunology, 2007, 19(7): 813-824 2007). Взаимодействие между PD1 и PD-L1 может быть заблокировано, чтобы очевидно улучшить активность CD8+ цитотоксических Т-клеток в отношении уничтожения опухолевые клетки.
[0005] В основном PD-1 экспрессируются на поверхности CD4+ Т-клеток, CD8+ Т-клеток, клеток NKT, В-клеток и активированных моноцитов. В основном его экспрессирование индуцируется сигналами Т-клеточного рецептора (TCR) или B-клеточного рецептора (BCR). Фактор некроза опухолей (TNF) может повысить экспрессирование PD-1 на поверхности таких клеток (Francisco, Sage et al., The PD-1 pathway in tolerance and autoimmunity. Immunol Rev, 2010, 236: 219-242). Человеческий PD-1, кодируемый геном Pdcd1, расположен на участке хромосомы 2q37.3 общей длиной 9,6 т.п.о. Он включает в себя пять экзонов и четыре интрона, а часть, расположенная против хода транскрипции, содержит промотор размером 663 п. о. Молекулярная структура PD-1 включает внеклеточный, трансмембранный и внутриклеточный участки. Аминокислотная последовательность (аминокислотные последовательности) во внеклеточной области имеет 24% гомологию с CTLA-4 и 28% гомологию с CD28. Ее ген имеет в основном семь сайтов однонуклеотидного полиморфизма. Внеклеточная область включает в себя один структурный домен вариабельной цепи иммуноглобулина IgV. Внутриклеточная область включает в себя два мотива сигнальной трансдукции на основе тирозина - ITIM (иммунорецепторного тирозинового ингибирующего мотива) и ITSM (иммунорецепторного тирозинового переключающего мотива). После активации Т-клеток, PD-1 собирает тирозин фосфатазы SHP2, главным образом, через мотив ITSM, что приводит к дефосфорилированию эффекторных молекул, включая CD3ζ, PKCθ и ZAP70 и т.д.
[0006] Существует два лиганда для PD-1: PD-L1 и PD-L2. PD-L1 также называется B7H1 или CD274, а PD-L2 называется B7DC или CD273. Ген PD-L расположен в локусе 9p24.2 хромосомы человека размером 42 т.п.о. Эти лиганды имеют 21~27%-ную гомологию аминокислотной последовательности и структурное сходство с В7-1, В7-2 и ICOSL: все они содержат по одному структурному домену иммуноглобулин-подобного вариабельного участка, по одному структурному домену константного участка, по одному трансмембранному участку и по одному короткому цитоплазматическому хвосту. Цитоплазматический хвост PD-L1 более консервативен, чем PD-L2. PD-L1 и PD-L2 экспрессируются в разных клеточных популяциях (Shimauchi, Kabashima et al., Augmented expression of programmed death-1 in both neoplastic and non-neoplastic CD4+ T cells in adult T cell leukemia/lymphoma. Int J Cancer, 2007, 121(12): 2585-2590). И эти клетки включают негемопоэтическую ткань и различные типы опухолей. В основном PD-L1 экспрессируется на Т-клетках, В-клетках, дендритных клетках, макрофагах, мезенхимальных стволовых клетках и тучных клетках, происходящих из костного мозга. PD-L1 также экспрессируется на клетках, не происходящих из костного мозга, таких как эндотелиальные клетки сосудов, клетки эпителия, клетки скелетных мышц, гепатоциты, эпителиальные клетки почечных канальцев, инсулоциты, астроциты головного мозга и разные типы нелимфоидных опухолей, такие как меланома, рак печени, рак желудка, почечно-клеточная карцинома. Он также экспрессируется на клетках иммунологически привилегированных сайтов, таких как плацента, глаза. Это дает основания полагать, что PD-L1 может до определенной степени существенно регулировать аутореактивные Т-клетки, В-клетки и иммунологическую толерантность, а также может играть определенную роль в реакции периферических тканей Т-клеток и В-клеток. Тем не менее, PD-L2 имеет очень ограниченный участок экспрессии и существует только в макрофагах и дендритных клетках. Считается, что он играет важную роль в основном в иммунном презентировании.
[0007] PD-1 и PD-L1 взаимодействуют друг с другом, чтобы регулировать и контролировать активацию Т-клеток, что было подтверждено у множества опухолей и вирусных инфекций. PD-L1 экспрессируется на поверхностях различных опухолевых клеток, которые включают рак легкого, рак печени, рак яичника, рак шейки матки, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак толстого кишечника, рак молочной железы, глиому, рак почки, рак желудка, рак пищевода, плоскоклеточный рак полости рта, рак головы/шеи. Кроме того, существует большое количество CD8+ Т-клеток, экспрессирующих PD-L1, выявленных при этих видах рака. Клиническая статистика показала, что высокий уровень экспрессии PD-L1 на раковых клетках связан с неблагоприятным прогнозом для пациентов со злокачественными новообразованиями (Okazaki and Honjo 2007. Там же).
[0008] Многие вирусы, вызывающие хронические и острые инфекции, также избегают иммунного надзора организма посредством сигналов PD-1 и PD-L1. Например, уровень экспрессирования PD-1 у ВИЧ-инфицированных пациентов тесно связан со степенью истощения Т-клеток и может быть использован в качестве одного из маркеров прогрессирования СПИДа (Trabattoni, Saresella et al., B7-H1 is up-regulated in HIV infection and is a novel surrogate marker of disease progression. Blood, 2003, 101(7): 2514-2520). То же самое происходит у пациентов с хроническим гепатитом В (Evans, Riva et al., Programmed death 1 expression during antiviral treatment of chronic hepatitis B: Impact of hepatitis B e-antigen seroconversion., Hepatology, 2008, 48(3): 759-769). Исследования на животных показали, что мыши, чей ген PD-1 нокаутирован, могут контролировать вирусную инфекцию лучше, чем обычные мыши; и гепатит может быть вызван путем переноса HBV-специфических Т-клеток трансгенным животным с вирусом гепатита В.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0009] Настоящее изобретение относится к антителу (антителам) к PD-1 и их функциональному фрагмента (функциональным фрагментам), которые могут связываться с белком программируемой смерти клеток (PD 1).
[0010] С одной стороны, в соответствии с настоящим изобретением антитело (антитела) или их функциональный фрагмент (функциональные фрагменты) содержат CDR тяжелой цепи, выбранный из аминокислотной последовательности с SEQ ID NO: 1, 2, 3, 7, 8, 9, 13, 14, 15 или любого варианта указанной последовательности, и/или CDR легкой цепи, выбранный из аминокислотной последовательности с SEQ ID NO: 4, 5, 6, 10, 11, 12,16, 17, 18 или любого варианта указанной последовательности.
[0011] В некоторых предпочтительных вариантах осуществления аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи указанного антитела (указанных антител) или их функционального фрагмента (функциональных фрагментов) выбраны из каких-либо следующих групп разных аминокислотных последовательностей или их вариантов:
HCDR1 HCDR2 HCDR3
A SEQ ID NO:1 SEQ ID NO:2 SEQ ID NO:3
B SEQ ID NO:7 SEQ ID NO:8 SEQ ID NO:9
C SEQ ID NO:13 SEQ ID NO:14 SEQ ID NO:15
,
и/или аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи, выбраны из какой-либо из следующих групп разных аминокислотных последовательностей или их вариантов:
LCDR1 LCDR2 LCDR3
A SEQ ID NO:4 SEQ ID NO:5 SEQ ID NO:6
B SEQ ID NO:10 SEQ ID NO:11 SEQ ID NO:12
C SEQ ID NO:16 SEQ ID NO:17 SEQ ID NO:18
.
В некоторых предпочтительных вариантах осуществления в соответствии с настоящим изобретением аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи, а также CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи антитела (антител) или их функционального фрагмента (функциональных фрагментов) выбраны из следующих групп разных аминокислотных последовательностей или их вариантов:
HCDR1 HCDR2 HCDR3 LCDR1 LCDR2 LCDR3
A SEQ ID NO:1 SEQ ID NO:2 SEQ ID NO:3 SEQ ID NO:4 SEQ ID NO:5 SEQ ID NO:6
B SEQ ID NO:7 SEQ ID NO:8 SEQ ID NO:9 SEQ ID NO:10 SEQ ID NO:11 SEQ ID NO:12
C SEQ ID NO:13 SEQ ID NO:14 SEQ ID NO:15 SEQ ID NO:16 SEQ ID NO:17 SEQ ID NO:18
.
[0012] В некоторых вариантах осуществления в соответствии с настоящим изобретением антитело (антитела) или его функциональный фрагмент (функциональные фрагменты) содержат вариабельный участок (вариабельные участки) тяжелой цепи, выбранные из аминокислотной последовательности с SEQ ID NO: 19, 21, 23 или любого варианта указанной последовательности, и/или вариабельный участок (вариабельные участки) легкой цепи, выбранные из аминокислотной последовательности с SEQ ID NO: 20, 22, 24 или любого варианта указанной последовательности.
[0013] В одном предпочтительном варианте осуществления указанный вариабельный участок (указанные вариабельные участки) тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 19 или ее вариант, а указанный вариабельный участок (указанные вариабельные участки) легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 20 или ее вариант.
[0014] В другом более предпочтительном варианте осуществления указанный вариабельный участок (указанные вариабельные участки) тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 21 или ее вариант, а указанный вариабельный участок (указанные вариабельные участки) легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 22 или ее вариант.
[0015] В другом более предпочтительном варианте осуществления указанный вариабельный участок (указанные вариабельные участки) тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 23 или ее вариант, а вариабельный участок (вариабельные участки) легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 24 или ее вариант.
[0016] В соответствии с настоящим изобретением антитело (антитела) или его функциональный фрагмент (их функциональные фрагменты) может являться химерным антителом, гуманизированным антителом или полностью человеческим антителом.
[0017] В соответствии с настоящим изобретением антитело (антитела) или его функциональный фрагмент (функциональные фрагменты) могут являться гуманизированными. Способ (способы) получения гуманизированного антитела обычно известны специалистам в данной области. Например, последовательность CDR в соответствии с настоящим изобретением может быть перенесена в вариабельный участок человеческого антитела для получения гуманизированного антитела к PD-1 по настоящему изобретению. Указанное гуманизированное антитело не будет вызывать реакцию антиантитела (AAR) и реакцию человеческого антитела к мышиному антигену (HAMA), и не будет быстро удаляться из-за нейтрализации антиантителом, а будет играть роль в иммунологическогом эффекте, таком как ADCC и CDC.
[0018] В некоторых предпочтительных вариантах осуществления в соответствии с настоящим изобретением гуманизированное антитело (антитела) к PD-1 или его функциональный фрагмент (их функциональные фрагменты) содержат вариабельный участок (вариабельные участки) тяжелой цепи, выбранные из аминокислотной последовательности с SEQ ID NO: 33, 35, 36 или какого-либо варианта указанной последовательности, и/или вариабельный участок (вариабельные участки) легкой цепи, выбранные из аминокислотной последовательности с SEQ ID NO: 34, 37 или любого варианта вышеуказанной последовательности.
[0019] В одном предпочтительном варианте осуществления гуманизированного антитела (гуманизированных антител) или его функционального фрагмента (их функциональных фрагментов) в соответствии с настоящим изобретением вышеуказанный вариабельный участок (вариабельные участки) тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 33 или ее вариант, а указанный вариабельный участок (вариабельные участки) легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 34 или ее вариант.
[0020] В другом предпочтительном варианте осуществления гуманизированного антитела (гуманизированных антител) или его функционального фрагмента (их функциональных фрагментов) в соответствии с настоящим изобретением указанный вариабельный участок (вариабельные участки) тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 35 или ее вариант, а указанный вариабельный участок (вариабельные участки) легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 34 или ее вариант.
[0021] В другом предпочтительном варианте осуществления гуманизированного антитела (гуманизированных антител) или его функционального фрагмента (их функциональных фрагментов) в соответствии с настоящим изобретением указанный вариабельный участок (вариабельные участки) тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 36 или ее вариант, а указанный вариабельный участок (вариабельные участки) легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 34 или ее вариант.
[0022] В другом более предпочтительном варианте осуществления гуманизированного антитела (гуманизированных антител) или его функционального фрагмента (их функциональных фрагментов) в соответствии с настоящим изобретением указанный вариабельный участок (вариабельные участки) тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 35 или ее вариант, а указанный вариабельный участок (вариабельные участки) легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 37 или ее вариант.
[0023] Настоящее изобретение также обеспечивает отдельную молекулу нуклеиновой кислоты (отдельные молекулы нуклеиновой кислоты), кодирующую антитело (антитела) или его функциональный фрагмент (их функциональные фрагменты) в соответствии с настоящим изобретением. В одном из предпочтительных вариантов осуществления указанная молекула нуклеиновой (молекулы нуклеиновой кислоты) содержит нуклеотидные последовательности, изложенные в SEQ ID NO: 25-30, 38-42, или их комбинацию.
[0024] Настоящее изобретение также обеспечивает экспрессионный вектор (экспрессионные векторы), содержащий указанную молекулу нуклеиновой кислоты (молекулы нуклеиновой кислоты), а также клетку-хозяина (клетки-хозяева), содержащую указанный экспрессионный вектор (экспрессионные векторы).
[0025] Настоящее изобретение обеспечивает способ (способы) получения антитела (антител) к PD-1 или его функционального фрагмента (их функциональных фрагментов), который включает культивирование указанной клетки-хозяина (клеток-хозяев) в соответствии с настоящим изобретением в условиях, которые обеспечивают продуцирование указанного антитела (указанных антител) или его функционального фрагмента (функциональных фрагментов), а также выделение указанного антитела (антител) или его функционального фрагмента (их функциональных фрагментов), полученного таким образом.
[0026] С другой стороны, настоящее изобретение относится к иммуноконъюгату (иммуноконъюгатам), содержащему антитело (антитела) или его функциональный фрагмент (их функциональные фрагменты) в соответствии с настоящим изобретением, которые связанны с терапевтическим средством (терапевтическими средствами). Указанное терапевтическое средство (терапевтические средства) предпочтительно является токсином, радиизотопом, лекарственным средством или цитотоксическим средством.
[0027] Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей (антитело) антитела или его функциональный фрагмент (их функциональные фрагменты) в соответствии с настоящим изобретением, а также фармацевтический носитель (фармацевтические носители).
[0028] С другой стороны, настоящее изобретение обеспечивает способ (способы), применяемый для профилактики или лечения заболеваний или состояний путем устранения, подавления или снижения активности PD-1, который включает введение нуждающемуся пациенту эффективной лечебной дозы антитела (антител) или его функционального фрагмента (их функциональных фрагментов) в соответствии с настоящим изобретением, нуклеиновой кислоты, экспрессионного вектора, клетки-хозяина, иммуноконъюгата или фармацевтической композиции, где указанные заболевания или состояния выбраны из видов рака, инфекционных заболеваний или воспалительных заболеваний, при этом указанные виды рака предпочтительно выбраны из меланомы, рака почки, рака предстательной железы, рака молочной железы, рака толстого кишечника, рака легкого, рака кости, рака поджелудочной железы, рака кожи, рака головы или шеи, кожной или внутриглазной злокачественной меланомы, рака матки, рака яичника, рака прямой кишки, рака анального канала, рака желудка, рака яичка, рака матки, рака фаллопиевых труб, рака эндометрия, рака шейки матки, рака влагалища, рака вульвы, болезни Ходжкина, неходжкинской лимфомы, рака пищевода, рака тонкого кишечника, рака эндокринной системы, рака щитовидной железы, рака паращитовидной железы, рака надпочечника, саркомы мягких тканей, рака уретры, рака полового члена, хронического или острого лейкоза, который включает в себя острый миелоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз, острый лимфобластный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, солидных опухолей у детей, лимфоцитарной лимфомы, рака мочевого пузыря, рака почки или уретры, рака почечной лоханки, патологического разрастания ткани центральной нервной системы, первичной лимфомы центральной нервной системы, ассоциированного с опухолью ангиогенеза, опухолей оси позвоночника, глиомы ствола мозга, аденомы гипофиза, саркомы Капоши, эпидермоидной карциномы, плоскоклеточного рака, Т-клеточной лимфомы, вызванных влиянием окружающей среды видов рака, в том числе вызванных асбестом, и сочетания указанных видов рака, при этом указанные инфекционные заболевания предпочтительно выбраны из ВИЧ, гриппа, герпеса, лямблиоза, малярии, лейшманиоза, из патогенных инфекций, вызванных следующими вирусами: вирусы гепатита (гепатита А, В и С), вирусы герпеса (например, VZV, HSV-1, HAV-6, HSV-II и CMV, вирус Эпштейна-Барр), аденовирус, вирус гриппа, флавивирусы, эховирус, риновирус, вирус Коксаки, коронавирус, респираторно-синцитиальный вирус, вирус эпидемического паротита, ротавирус, вирус кори, вирус краснухи, парвовирус, вирус коровьей оспы, вирус HTLV, вирус денге, вирус папилломы, вирус моллюска, вирус полиомиелита, вирус бешенства, вирус JC и вирус арбовирусного энцефалита, из патогенных инфекций, вызванных следующими бактериями: хламидии, риккетсии, микобактерии, стафилококки, стрептококки, пневмококки, менингококки и гонококки, клебсиелла, протей, серратия, псевдомонады, легионеллы, из возбудителей дифтерии, сальмонеллеза, туберкулеза, холеры, столбняка, ботулизма, сибирской язвы, чумы, лептоспироза и бактерий болезни Лайма, из патогенных инфекций, вызванных следующими грибами: кандида (Candida albicans, Candida krusei, Candida glabrata, Candida tropicalis и т.д.), Cryptococcus neoformans, аспергиллы (Fumigatus, Aspergillus niger и т.д.), род Mucor (Mucor, Absidia, Rhizopus), Sporothrix schenckii, вызывающие дерматит почкующиеся дрожжи, Paracoccidiodes brasiliensis, Coccidioides immitis и Histoplasma capsulatum, из патогенных инфекций, вызванных следующими паразитами: дизентерийная амеба, балантидия толстого кишечника, черви Фернандо, амеба, поражающая головной мозг, лямблия, криптоспоридия, Pneumocystis carinii, P. vivax, бабезии полевых мышей, Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, Leishmania donovani, Toxoplasma gondii и Nippostrongylus brasiliensis, при этом указанные воспалительные заболевания предпочтительно выбраны из следующих: острый рассеянный энцефаломиелит, болезнь Аддисона, анкилозирующий спондилит, синдром антифосфолипидных антител, аутоиммунная гемолитическая анемия, аутоиммунный гепатит, артрит, болезнь Бехчета, буллезный дерматит, целиакия, болезнь Шагаса, болезнь Крона, дерматомиозит, сахарный диабет 1 типа, легочное кровотечение - аутоиммунная гемолитическая анемия, реакция трансплантат против хозяина, болезнь Грейвса, синдром Гийена-Барре, тиреоидит Хашимото, синдром гипериммуноглобулинемии Е, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, системная красная волчанка, рассеянный склероз, миастения гравис, пемфигус, злокачественная анемия, полимиозит, первичный билиарный цирроз, псориаз, ревматоидный артрит, синдром Шегрена, височный артериит, васкулит и гранулематоз Вегенера.
[0029] Настоящее изобретение также предлагает применение антитела (антител) или его функционального фрагмента (их функциональных фрагментов) в соответствии с настоящим изобретением, нуклеиновой кислоты, экспрессионного вектора, клетки-хозяина, иммуноконъюгата или фармацевтической композиции в получении лекарственных средств для лечения заболеваний или состояний.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ РЯДА ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
[0030] На фигуре 1 изображено разделение по массе белка внеклеточного структурного участка PD-1, полученного от человека (hu) и Macaca fascicularis (макака-крабоеда) (cyno), проведенное с помощью SDS-PAGE (электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии натрия додецилсульфата).
[0031] На фигуре 2 изображено связывание меченного биотином rh-PD-L1 и Т-клеток человека, измеренное с помощью проточной цитометрии.
[0032] На фигуре 3 показано, что контрольный PD-L1, клоны 1, 10, 11, 55 и 64 блокируют связывание между PD-1 с лигандом PD-L1 на поверхности клеток, что измерено с помощью проточной цитометрии.
[0033] На фигуре 4 показано связывание контрольного антитела, клонов 1, 10, 11, 55 и 64 с PD-1, а также других членов семейства CD28 (ICOS, CTLA-4 и CD28).
[0034] На фигуре 5 изображен эксперимент со стимуляцией столбнячным токсином для измерения стимуляции химерными антителами Т-клеток in vitro.
[0035] На фигуре 6 изображен уровень секреции IL2 клонами 38, 39, 41 и 48 (контроль (conIgG4)) гуманизированного антитела, измеренного с помощью набора реактивов для анализа секреции цитокинов клетками CD8+.
[0036] На фигуре 7 изображено значение флуоресценции GFP, полученное после совместного культивирования дендритных клеток и модифицированных клеток MD-МАВ-453 в течение 3 дней и последующего добавления извлеченных Т-клеток и клонов 38, 39, 41 и 48 (контроль (conIgG4)) гуманизированного антитела к PD-1 в соответствии с настоящим изобретением для совместного культивирования в течение 3 дней.
[0037] На фигуре 8 изображено связывание гуманизированного антитела согласно настоящему изобретению с белками PD-1, полученными от человека, Macaca fascicularis и мыши.
[0038] На фигуре 9 изображено сравнение между последовательностями PD-1 человека, Macaca fascicularis (сyno) и мыши, где основные отличающиеся участки мышиного белка PD-1 и белка человека/PD-1 Macaca fascicularis обведены прямоугольной рамкой.
[0039] На фигуре 10 изображен результат эксперимента пролиферации Т-клеток, стимулированных in vitro гуманизированным антителом - эксперимента с анамнестической реакцией на антиген столбняка.
[0040] На фигуре 11 изображен результат эксперимента пролиферации Т-клеток, стимулированных in vitro гуманизированным антителом - эксперимента с анамнестической реакцией на антиген в виде вирусных полипептидов.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0041] Если не указано иное, все технические термины, используемые в этом патенте, имеют те же значения, понятные обычному специалисту в данной области. Что касается определений и терминов из уровня техники, в частности, специалисты могут обратиться к литературному источнику Current Protocols in Molecular Biology (Ausubel). При сокращении названий аминокислотных остатков используется форма стандартного кода, состоящего из 3 букв и/или 1 буквы, применяемого в данной области для каждой из 20 обще используемых L-аминокислот.
[0042] Настоящее изобретение обеспечивает антитело (антитела) к PD-1 и его функциональный фрагмент (их функциональные фрагменты), которые могут связываться с белком программируемой смерти клеток (PD -1). Антитело (антитела) и его функциональный фрагмент (их функциональные фрагменты) в соответствии с настоящим изобретением характеризуются по меньшей мере одним из следующих признаков: способны блокировать взаимодействие между PD-1 и PD-L1 с высокой аффинностью или способны связываться с PD-1 с высокой специфичностью, но не с другими членами семейства CD28 (например, ICOS, CTLA-4 и CD28), или активировать опухолеспецифические Т-клетки для уничтожения опухолевых клеток, и активируют CD8+ для проникновения в ткань солидной опухоли в такой степени, чтобы в значительной мере увеличить уровни иммунных эффекторов, таких как IFNγ.
[0043] Настоящее изобретение также обеспечивает гуманизированное антитело (антитела) к PD-1 и его функциональный фрагмент (их функциональные фрагменты). Указанное гуманизированное антитело (гуманизированные антитела) получают путем использования методики компьютерного моделирования мышиного антитела, полученного от иммунизированной мыши, в сочетании с технологией бактериофагового дисплея. Его эпитопы связывания также определены на основе его характеристик связывания с белками PD-1 различных видов. Кроме благоприятных характеристик антитела (антител) к PD-1 и его функционального фрагмента (их функциональных фрагментов), описанных выше, указанное гуманизированное антитело (гуманизированные антитела) к PD-1 и его функциональный фрагмент (их функциональные фрагменты) в соответствии с настоящим изобретением также связывается с белками PD-1 человека или Macaca fascicularis с высокой аффинностью, но не взаимодействует с полученным от мыши белком PD-1.
[0044] Исходя из незначительного влияния на активность антитела, специалисты в данной области могут заменить, добавить и/или удалить одну или более (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 9, 10 или более) аминокислот в последовательности в соответствии с настоящим изобретением таким образом, чтобы получить вариант (варианты) последовательности указанного антитела (антител) или его функционального фрагмента (их функциональных фрагментов). Все они считаются включенными в объем охраны, предоставляемой настоящим изобретением. Например, аминокислота (аминокислоты) в вариабельном участке может быть заменена аминокислотами с аналогичными характеристиками. Последовательность указанного варианта в соответствии с настоящим изобретением может характеризоваться идентичностью с ее исходной последовательностью, составляющей по меньшей 95%, 96%, 97%, 98% или 99%. Идентичность указанной последовательности, описанная в настоящем изобретении, может быть измерена с помощью программного обеспечения для анализа последовательностей, например, компьютерной программы BLAST с использованием параметра по умолчанию, в особенности BLASTP или TBLASTN.
[0045] Антитело в соответствии с настоящим изобретением может быть антителом полной длины (например, антитела IgG1 или IgG4) или содержать часть, которая связывается с антигеном (например, фрагменты Fab, F(ab')2 или scFv), или может быть модифицировано для влияния на его функцию. Настоящее изобретение предусматривает антитело (антитела) к PD-1, содержащее модифицированный паттерн гликозилирования. В ряде применений может быть целесообразным проведение модификации для удаления нежелательного сайта (сайтов) гликозилирования или избежать присоединения части фукозы на олигосахаридную цепь, например, чтобы повысить функцию антитела в антителозависимой клеточноопосредованной цитотоксичности (ADCC). В некоторых других применениях модификация путем галактозилирования может быть проведена, чтобы изменить комплементзависимую цитотоксичность (CDC).
[0046] Используемый в данном патенте термин ”функциональный фрагмент” относится, в частности, к фрагменту (фрагментам) антитела, таким как Fv, scFv (”sc” означает однонитевой), фрагменты Fab, F(ab')2, Fab', scFv-Fc или диатело, или какой-либо фрагмент, время полужизни которого должно быть по возможности увеличено путем химической модификации или введения в липосомы, при этом указанная химическая модификация представляет собой, например, добавление полиалкиленгликоля, такого как полиэтиленгликоль (“пегилирование, ПЭГилированный”) (далее именуемый как пегилированный фрагмент, такой как Fv-PEG, scFv-PEG, Fab-PEG, F(ab')2-PEG или Fab'-PEG) (“ПЭГ” представляет собой полиалкиленгликоль), и указанный фрагмент обладает EGFR-связывающей активностью. Предпочтительно указанные функциональные фрагменты cодержат неполную последовательность тяжелой или легкой цепи их исходного антитела (исходных антител). Указанная неполная последовательность является достаточной для поддержания специфичности связывания и достаточной аффинности, аналогичных ее исходному антителу. Что касается PD-1, то предпочтительной является аффинность, составляющая по меньшей мере 1/100 его исходного антитела, и более предпочтительно по меньшей мере 1/10. Такой тип функционального фрагмента (функциональных фрагментов) включает по меньшей мере 5 аминокислот, а предпочтительно 10, 15, 25, 50 и 100 последовательных аминокислот из последовательности его исходного антитела.
[0047] Специалисты в данной области могут клонировать молекулу (молекулы) ДНК, кодирующую указанное антитело к PD-1 в соответствии с настоящим изобретением, в вектор, а затем трансформировать вектором клетку-хозяин. Таким образом, настоящее изобретение может также обеспечивать тип вектора на основе рекомбинантной ДНК, который содержит молекулу (молекулы) ДНК, кодирующую указанное антитело (указанные антитела) к PD-1 в соответствии с настоящим изобретением.
[0048] Предпочтительно указанный вектор на основе рекомбинантной ДНК является типом экспрессионного вектора. Специалисты в данной области могут клонировать молекулу (молекулы) ДНК указанного антитела в экспрессионный вектор и трансформировать вектором клетку-хозяина для получения антитела посредством индуцирования экспрессии. Экспрессионный вектор согласно настоящему изобретению содержит последовательность (последовательности) ДНК, кодирующую вариабельный участок тяжелой цепи, вариабельный участок легкой цепи и/или константный участок антитела (антител) к PD-1. Тем не менее, два типа экспрессионных векторов могут быть созданы отдельно. Один содержит вариабельный участок тяжелой цепи и константный участок, а другой вариабельный участок легкой цепи и константный участок. Они вместе трансфицируют клетки млекопитающих. В одном предпочтительном варианте осуществления указанный экспрессионный вектор дополнительно содержит промотор и последовательность (последовательности) ДНК, кодирующую секретируемые сигнальные пептиды, а также по меньшей мере один тип устойчивого к лекарственным средствам гена, используемого для скрининга.
[0049] Указанная клетка-хозяин (клетки-хозяева) в соответствии с настоящим изобретением может быть прокариотической клеткой-хозяином, эукариотической клеткой-хозяином или бактериофагом. Указанная прокариотическая клетка-хозяин может представлять собой кишечную палочку, сенную палочку, стрептомицеты или протей мирабилис и т.д. Указанная эукариотическая клетка-хозяин может представлять собой грибы, такие как Pichia pastoris, Saccharomyces cerevisiae, делящиеся дрожжи и Trichoderma, клетки насекомых, таких как Spodoptera frugiperda, клетки растений, таких как табак, клетки млекопитающих, такие как клетки ВНК, СНО, COS и миеломные клетки. В некоторых вариантах осуществления указанные клетки-хозяева в соответствии с настоящим изобретением представляют собой предпочтительно клетки млекопитающих, и более предпочтительно клетки ВНК, СНО, NSO или COS.
[0050] Термин “фармацевтическая композиция”, который используется в данном патенте, относится к комбинации по меньшей мере одного вида лекарственного средства и случайно выбранных фармацевтических носителей или вспомогательных веществ для специальных целей. В некоторых вариантах осуществления указанная фармацевтическая композиция (фармацевтические композиции) включает в себя комбинации, которые разделены во времени и/или пространстве, при условии, что они могут функционировать синергетически, чтобы выполнить цели настоящего изобретения. Например, ингредиенты, содержащиеся в указанной фармацевтической композиции (например, антитело, молекула нуклеиновой кислоты, комбинация и/или конъюгат молекулы нуклеиновой кислоты), могут быть введены пациенту вместе или по отдельности. В случае если ингредиенты, содержащиеся в указанной фармацевтической композиции, вводят пациенту отдельно, они могут быть использованы одновременно или поочередно. Предпочтительно указанный фармацевтически носитель (фармацевтические носители) представляют собой воду, буферный водный раствор, изотонические солевые растворы, такие как PBS (фосфатный буфер), глюкозу, маннит, декстрозу, лактозу, крахмал, стеарат магния, целлюлозу, карбонат магния, 0,3% глицерин, гиалуроновую кислоту, этанол или полиалкиленгликоли, такие как полипропиленгликоль, триглицериды и т.д. Тип используемого фармацевтического носителя зависит от того, составляется ли композиция в соответствии с настоящим изобретением для перорального, интраназального, внутрикожного, подкожного, внутримышечного или внутривенного введения. Композиция согласно настоящему изобретению может содержать увлажняющее средство (увлажняющие средства), эмульгатор (эмульгаторы) или буферный раствор (буферные растворы) в качестве добавки.
[0051] Фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением может быть введена посредством любого соответствующего пути введения, например, перорально, интраназально, внутрикожно, подкожно, внутримышечно или внутривенно.
[0052] В одном соответствующем аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию в сочетании с антителом к PD-1 и вторым терапевтическим средством. В одном варианте осуществления указанное второе терапевтическое средство представляет собой любое средство, являющееся предпочтительным для сочетания с антителом к PD-1. Пример такого средства, предпочтительного для сочетания с антителом к PD-1, включает без ограничения другие средства для ингибирования активности PD-1, в том числе фрагмент (фрагменты), пептидный ингибитор, низкомолекулярные антагонисты и т.д., которые связываются с другим антителом (другими антителами) или антигеном (антигенами), и/или средства, препятствующие трансдукции восходящих или нисходящих сигналов PD-1.
[0053] Термины “профилактика или лечение заболеваний или состояний путем устранения, подавления или снижения активности PD-1” указывают на заболевания или состояний, вызванные экспрессированием PD-1, или заболевания или состояния с симптомами/признаками экспрессирования PD-1. В некоторых вариантах осуществления указанные заболевания или состояния выбраны из видов рака или инфекционных заболеваний. Указанные виды рака включают без ограничения рак легкого, рак печени, рак яичника, рак шейки матки, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак толстого кишечника, рак молочной железы, глиому, рак почки, рак желудка, рак пищевода, плоскоклеточную карциному полости рта, рак головы/шеи. Указанные инфекционные заболевания включают без ограничения ВИЧ-инфекцию и инфекцию, вызванную вирусом гепатита В.
[0054] Термин “эффективная лечебная доза”, который используется в данном патенте, относится к дозе, достаточной для того, чтобы показать эффективность при целевом применении. Фактически введенная доза, скорость и продолжительность введения могут зависеть от условий и степени воздействия лечения на мишень. Назначение лечения (например, определение дозы) является обязанностью врача-терапевта и других врачей в соответствии с их решениями. Обычно учитываются такие факторы, как заболевание, которое подлежит лечению, состояние каждого пациента, участок введения, способ введения и другие факторы, известные врачу.
[0055] Термин ”cубъект”, который используется в данном патенте, относится к млекопитающим, таким как человек или другие животные, например, дикие животные (цапля, аист, журавль и т.д.), сельскохозяйственные животные (утка, гусь и т.д.) или лабораторные животные (орангутанг, обезьяны, крыса, мышь, кролик, морская свинка и т.д.).
[0056] Следующие варианты осуществления приведены для демонстрации и дополнительного пояснения некоторых предпочтительных форм осуществления и факторов в соответствии с настоящим изобретением. Тем не менее, они не должны истолковываться как ограничивающие объем настоящего изобретения.
Варианты осуществления
Вариант осуществления 1: клонирование внеклеточного структурного участка PD1 человека в экспрессионную эукариотическую плазмиду.
[0057] Экстрагировали общую РНК из человеческих клеток периферической крови (Центр крови Красного креста в Пекине) с помощью набора для экстрагирования РНК Trizol RNA extraction kit (Invitrogen) и получали кДНК с помощью набора для обратной транскрипции от компании Invitrogen. Используя данную кДНК в качестве матрицы, прямой праймер, представляющий собой 5'-GTACGCTAGCCACCATGCAGATCCCACAGGC-'3 (SEQ ID NО. 31), и обратный праймер, представляющий собой 5’-GATCCTCGAGCCACCAGGGTTTGGAACTG-'3 (SEQ ID NО. 32), с помощью ПЦР амплифицировали внеклеточный фрагмент PD1. После того, как амплифицированный продукт расщепляли с помощью Nhe I и Xho I, их клонировали в систему на основе экспрессионной эукариотической плазмиды pCDNA3.1. Трансфицировали клетки 293Т (АТСС) с помощью этой плазмиды в течение 3 дней, а затем отбирали культуральный супернатант для очистки h-PD1. Аналогичным образом также экстрагировали общую РНК из клеток периферической крови Macaca fascicularis и клонировали полученную кДНК в систему эукариотической экспрессии.
[0058] Как показано на фигуре 1, по причине модификации, такой как гликозилирование, разделение по массе белка внеклеточных структурных участков PD-1, полученных от человека (hu), и Macaca fascicularis (cyno) PD-1 составляют приблизительно 50 тыс. дальтон после окрашивания Кумасси синим.
Вариант осуществления 2: анализ связывания PD-1 на клетках с лигандом PD-L1
1. Отделение Т-клеток от клеток периферической крови человека
[0059] Когда суспензия клеток периферической крови (Пекинский институт крови) проходит через колонку с нейлоновым волокном (Beijing Hede Biotechnology Company), то В-клетки, плазматические клетки, мононуклеары и некоторые вспомогательные клетки будут избирательно адгезироваться на нейлоновых волокнах, однако, большинство Т-клеток проходят через колонку с нейлоновым волокном и, таким образом, получают обогащенную популяцию Т-клеток. Эту процедуру проводят следующим образом: возьмите стеклянный шприц объемом 50 мл, вытащите поршень и прикрепите резиновую трубку к наконечнику шприца. Свяжите несколько нейлоновых волокон и вставьте их в шприц. Закрепите шприц на подставке и залейте cреду RPMI для культивирования клеток при температуре 37°C для предварительной обработки нейлоновых волокон. Закройте клапан, а затем откройте клапан через 0,5 часа, чтобы спустить культуральную жидкость. Разведите клеточную суспензию, которая подлежит разделению, с помощью предварительно нагретой среды для культивирования RPMI до соответствующей концентрации примерно 5,00×107 клеток/мл. Налейте клеточную суспензию в шприц и погрузите в воду колонку с нейлоновым волокном. Накройте шприц и инкубируйте в термостате при температуре 37°C в течение 1 часа. Откройте нижнее отверстие, медленно выпустите жидкость (1 капля/мин.) и соберите ее в центрифужную пробирку. Центрифугируйте при 1000 × g в течение 10 минут, чтобы получить желаемые Т-лимфоциты.
2. Мечение рекомбинантного белка RH-PD-L1 биотином
[0060] Смешайте 100 мкг рекомбинантного белка rh-PD-L1, приобретенного у компании Beijing Sino Biological Inc., с биотином - аминокапроновой кислотой - NHS (Thermo), растворенным в ДМСО при молярном соотношении 1:4, и оставьте его при комнатной температуре на 1 час. Затем пропустите реакционную смесь через колонку с гелем G25 (Thermo), чтобы отделить меченный биотином rh-PD-L1 и свободный биотин.
3. Связывание меченого биотином rh-PD-L1 с Т-клетками человека
[0061] Смешайте рекомбинантный белок rh-PD-L1, меченый биотином в разных концентрациях, и выделенные Т-клетки в количестве 105, а затем инкубируйте их при температуре 4°C в течение 15 минут. Промойте их три раза PBS, а затем добавьте стрептавидин - аллофикоцианин (Thermo) (SA-APC) до 0,2 мкг/мл и инкубируйте их при температуре 4°C в течение 20 минут. Промойте их три раза c использованием PBS и поместите в систему для проточной цитометрии Beckman Dickson Calibur и проведите измерения при 660 нм. Как показано на фигуре 2, результаты демонстрируют, что белок PD-L1, меченый биотином, может связываться с Т-клетками.
Вариант осуществления 3: получение антитела к rh-PD-1
1. Иммунизация животных
[0062] Смешайте 10 мкг рекомбинантного белка rh-PD-1 в количестве 1 мг/мл в качестве антигена и аналогичные иммуностимуляторы (адъюванта Фрейнда (Sigma-Aldrich)) и выберите трех мышей-самок FVB в возрасте 6 недель, чтобы провести подкожную иммунизацию. После первой иммунизации аналогичную дозу вводят один раз в неделю для усиления иммунизации.
2. Слияние клеток
[0063] После последнего введения с целью усиления иммунизации, у мышей отберите лимфатические узлы у основания бедра и измельчите их в изотоническом солевом растворе. Затем возьмите суспензию, обогащенную В-клетками, и смешайте с клетками SP2/0 посредством стандартной методики электрофоретического переноса (см. руководство к BTX). Поместите слитые клетки в цельную культуральную среду RPMI-1640, содержащую HAT (Sigma) для культивирования при условиях 5% CO2 и температуре 37°С.
Вариант осуществления 4: эксперимент с блокированием лиганда и рецептора
[0064] Используя реакцию ферментного мечения (Elisa), из 20000 типов моноклональных клеток гибридомы отобрали клоны 1220 типов секретируемых антител, которые могут связываться с белками PD-1. Среди этих 1220 типов антител существует пять типов, которые могут в разной степени ингибировать связывание меченого биотином PD-L1 и рецептора PD-1 на Т-клетках.
[0065] Инкубируйте смесь из пяти антител (1 мкг/мл), как указано выше, и 312 нг/мл меченых биотином rh-PD-L1 (концентрация) при комнатной температуре в течение 20 минут. Затем инкубируйте смесь и отделенные Т-клетки при температуре 4°C в течение 15 минут. Затем три раза промойте изотоническим солевым раствором и добавьте 0,2 мкг/мл SA-APC для инкубирования при температуре 4°C в течение 15 минут. После трехкратной промывки изотоническим солевым раствором проведите измерение образца с помощью проточного цитометра BD, чтобы убедиться в том, что он способен ингибировать связывание rh-PD-L1 с рецептором PD-1 на поверхности Т-клеток.
[0066] Как показано на фигуре 3, клоны 1, 10 и 11 могут блокировать связывание PD-1 с лигандом PD-L1 на поверхности клетки. Однако клоны 55 и 64 способны только к слабому ингибированию.
Вариант осуществления 5: связывание с другими членами семейства CD28
[0067] В целях дальнейшего тестирования специфичности связывания клонов 1, 10, 11, 55 и 64 с антителами-кандидатами поместите 1 мкг/мл rh-PD-1 или белка ICOS , CTLA-4 и CD28 (R&D System) других членов семейства CD28 в буферном растворе в 96-луночный планшет для ферментного мечения, покрытый 0,05 М карбоната PH9, и храните при температуре 4°C в течение ночи. На следующий день удалите из лунок раствор и промойте продукт три раза отмывочным буфером (PBS + 0,5% твин). Затем добавьте раствор PBS, содержащий 3% бычьего сывороточного альбумина, и блокируйте в течение 20 минут. Промойте три раза отмывочным буфером, а затем добавьте 100 мкл 1 мкг/мл антитела-кандидата, инкубируйте при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем промойте три раза отмывочным буфером. Затем разбавьте козье антитело к иммуноглобулину мыши, конъюгированное с пероксидазой хрена (Jackson ImmunoResearch), в соотношении 1:10000 с отмывочным буфером и инкубируйте при комнатной температуре в течение 1 часа. После трехкратной промывки отмывочным буфером добавьте 50 мкл раствора субстрата TMB (тетраметилбензидина), для окрашивания. После реакции при комнатной температуре в течение 10 минут завершите реакцию, добавив 25 мкл 0,5 М раствора серной кислоты, и проведите считывание поглощения при 450 нм.
[0068] Как показано на фигуре 4, все тестированные антитела-кандидаты способны распознавать rh-PD-1 и связываться с ним, однако не распознают других членов семейства CD28.
Вариант осуществления 6: последовательность вариабельного участка антитела-кандидата
[0069] Культивируйте клетки гибридомы кандидата до общей численности 107, центрифугируйте их при 1000 об/мин в течение 10 минут, чтобы собрать клетки и экстрагировать общую РНК с помощью набора Trizol reagent kit (Invitrogen). Используйте указанную РНК в качестве матрицы для синтеза первой цепи кДНК (Qiagen), а затем используйте первую цепь кДНК в качестве последующей матрицы для амплификации последовательности ДНК вариабельного участка, соответствующего клеткам гибридомы. Последовательность праймера, который используется в реакции амплификации, является комплементарной первому каркасному участку и константному участку или вариабельному участку антитела (Larrick, J.W., et al., (1990) Scand. J. Immunol., 32, 121-128 and Coloma, J. J. et al., (1991) BioTechniques, 11,152-156 et al.). В реакционную систему 50 мкл добавьте отдельно 1 мкл кДНК, 5 мкл 10 × буфера для ПЦР, по 1 мкл (25 пмолей) каждого из прямого и обратного праймеров, 1 мкл дНТФ, 1 мкл 25 ммолей/л MgCl2, 39 мкл Н2О, проводите начальную денатурацию при температуре 95°C в течение 10 минут. Добавьте 1 мкл фермента Taq (Invitrogen) и запустите температурные циклы, чтобы провести ПЦР-амплификацию. Условия реакции следующие: денатурация при температуре 94°C в течение 1 минуты, отжиг при температуре 58°C в течение 1 минуты, и удлинение при температуре 72°C в течение 115 минут. Повторяйте такой цикл 30 раз, а затем оставьте при температуре 72°C на 10 минут.
[0065] После секвенирования амплифицированного продукта последовательности вариабельных участков тяжелой и легкой цепей клона 1, 10 и 11 гибридомы получают следующим образом:
Клон 1:
тяжелая цепь
Figure 00000001
,
последовательность нуклеиновой кислоты
Figure 00000002
,
легкая цепь
Figure 00000003
,
последовательность нуклеиновой кислоты
Figure 00000004
.
Клон 10:
тяжелая цепь
Figure 00000005
,
последовательность нуклеиновой кислоты
Figure 00000006
,
легкая цепь
Figure 00000007
,
последовательность нуклеиновой кислоты
Figure 00000008
.
Клон 11:
тяжелая цепь
Figure 00000009
,
последовательность нуклеиновой кислоты
Figure 00000010
,
легкая цепь
Figure 00000011
,
последовательность нуклеиновой кислоты
Figure 00000012
.
Вариант осуществления 7: конструирование экспрессионного вектора для химерного антитела
[0071] Клонируйте фрагмент Fc константного участка тяжелой цепи и константного участка k/J легкой цепи из клеток крови человека (Пекинский институт крови) и объедините их в плазмиде pCDNA3.1 (см. Walls MA, Hsiao H and Harris LJ (1993), Nucleic Acids Research, Vol. 21, No. 12 2921-2929) с целью модификации. Указанные фрагменты последовательности тяжелой и легкой цепей в варианте осуществления 6 синтезированы компанией GenScript. После расщепления тяжелой цепи ферментами Xho I и Age I и расщепления легкой цепи ферментами Sma I и Dra III, их связывают в плазмидe pCDNA3.1, модифицированную соответствующим образом, и секвенируют для подтверждения последовательности клонированной ДНК. Последующие экспериментальные материалы получены посредством трансфицирования клеток этой группой плазмид с последующей очисткой.
Вариант осуществления 8: функциональный эксперимент in vitro со стимулированием Т-клеток химерным антителом - тест со стимуляцией столбнячным токсином
[0072] Высейте свежеполученные PBMC в 96-луночный планшет с плоским дном у лунок. После инкубации в течение ночи добавляйте различные концентрации антител и 100 нг/мл столбнячного токсина (ТТ) (List Biological Laboratories). Три дня спустя соберите супернатант. Используйте набор INFNγ от компании R&D System для измерения содержания IFNγ в супернатанте посредством ELISA (твердофазного иммуноферментного анализа). Как показано на фигуре 5, после блокировки сигнала PD-1 количество цитокина, секретируемого иммунными клетками, активированными посредством стимуляции c использованием TT, значительно возрастает. Кроме того, титр антитела-кандидата превышает титра антитела из клона EH12.2H7, приобретенного у компании Biolegend, в заявке на патент 200980147059.0.
Вариант осуществления 9: взаимодействие различных антител с PD-1 после обмена тяжелыми и легкими цепями
[0073] Проведите рекомбинацию легких и тяжелых цепей антител 1 и 10, соответственно, чтобы получить H1L10 (тяжелую цепь 1, легкую цепь 10) и H10L1 (тяжелую цепь 10, легкую цепь 1). Аналогично тому, как описано в варианте осуществления 7, мы получаем рекомбинантные антитела. Эти антитела, исходное антитело 1 (тяжелая цепь 1, легкая цепь 1) и исходное антитело 10 (тяжелая цепь 10, легкая цепь 10), тестировали с результатами при помощи методики Elisa c получением результатом EC50 следующим образом:
Образец H1L1 H10L10 H1L10 H10L1
EC50 (пкM) 338,1 426,3 270,1 528,1
[0074] Согласно результатам антитела, продуцируемые после рекомбинации, могут по-прежнему эффективно связываться с белком PD-1.
Вариант осуществления 10: модификация антитела посредством гуманизации
[0075] Модификацию посредством гуманизации проводят в соответствии с последовательностью вариабельного участка антитела, секретируемого клеткой гибридомы, полученной, как описано выше. Вкратце, процесс модификации посредством гуманизации включает следующие этапы: A - сравнение последовательности генов антител, секретируемых разными клетками гибридомы, с последовательностью гена антитела зародышевой линии, для выявления последовательности с высокой гомологией; В - анализ и испытание сродства HLA-DR, чтобы выбрать последовательность каркасного участка зародышевой линии с низкой аффинностью; С - использование компьютерной аналоговой технологии для применения молекулярного докинга с тем, чтобы проанализировать последовательности каркасных участков в вариабельном участке и окружающей среде, и изучить их стереорежим связывания в пространстве. Рассчитывают электростатическую силу, силы Ван-дер-Ваальса, гидрофобность, гидрофильность и величину энтропии для анализа основной отдельной аминокислоты (отдельных аминокислот) в последовательностях генов антител, секретируемых различными клетками гибридомы, которые могут воздействовать с PD-1 и поддерживать пространственную конфигурацию, обратный перенос к выбранному гену каркасного участка зародышевой линии, а затем на основе этого мечение аминокислотных сайтов в каркасном участке, которые должны быть зарезервированы, синтезирование случайных праймеров, создание собственной фаговой библиотеки, скринирование библиотеки гуманизированных антител (Pini, A. et al., (1998 г.) Design and Use of a Phage Display Library: HUMAN ANTIBODIES WITH SUBNANOMOLAR AFFINITY AGAINST A MARKER OF ANGIOGENESIS ELUTED FROM A TWO-DIMENSIONAL GEL., Journal of Biological Chemistry, 273(34): 21769-21776). Исходя из этого, мы получаем следующие различные гуманизированные антитела. Они включают в себя следующие клоны, в которых идентичны последовательности легкой цепи клонов 38, 39 и 41 и последовательности тяжелой цепи клонов 39 и 48.
Тяжелая цепь клона 38
Figure 00000013
.
Легкая цепь клона 38
Figure 00000014
.
Тяжелая цепь клона 39
Figure 00000015
.
Легкая цепь клона 39
Figure 00000016
Figure 00000017
.
Тяжелая цепь клона 41
Figure 00000018
.
Легкая цепь клона 41
Figure 00000019
.
Тяжелая цепь клона 48
Figure 00000020
.
Легкая цепь клона 48
Figure 00000021
.
Вариант осуществления 11: стимуляция гуманизированным антителом функции Т-клеток in vitro
[0076] Высейте свежеполученные PBMC (Beijing Blood Institute) в 96-луночный планшет с плоским дном у лунок. После инкубации в течение ночи добавьте 10 мкг/мл антитела и 100 нг/мл столбнячного токсина (ТТ). После культивирования в течение 3 дней соберите супернатант и измерьте уровень секреции IL2 клона 38, 39, 41 и 48 (контроль (conIgG4)) гуманизированных антител с помощью системы Luminex от компании Life Technology и набора для анализа секреции цитокинов клетками CD8+ от компании EMD. Согласно результату (см. фигуру 6) все гуманизированные антитела могут стимулировать функцию Т-клеток.
Вариант осуществления 12: гуманизированное антитело может стимулировать Т-клетки in vitro для уничтожения опухолевых клеток
[0077] Используйте лентивирусы (Qiagen), экспрессирующее белок PD-L1, для инфицирования клеток MD-МАВ-453, чтобы получить линию клеток MD-MAB-453, стабильно экспрессирующих PD-L1. Затем индуцируйте гены GFP, чтобы позволить им стабильно экспрессировать белок GFP. Извлеките дендритные клетки (DC) из свежих клеток периферической крови человека. Культивируйте их в количестве 300 клеток/лунка и указанные модифицированные клетки MD-МАВ-453 (300 клеток/лунка) в 96-луночном планшете вместе в течение трех дней. Затем добавьте извлеченные Т-клетки (1000 клеток/лунка) и 10 мкг/мл клона 38, 39, 41 и 48 (контроль (conIgG4)) гуманизированного антитела к PD-1 до их последующего культивирования вместе в течение 3 дней и считывания значения флуоресценции GFP. Результат (см. фигуру 7) показывает, что все гуманизированные антитела могут стимулировать уничтожение опухолевых клеток Т-клетками.
Вариант осуществления 13: связывание гуманизированных антител с белками PD-1 различных видов
[0078] Разведите, соответственно, 1 мкг/мл указанного PD-1, полученного от человека, PD-1 от Macaca fascicularis и PD-1, полученного от мыши (приобретено у компании Sinobiological) в буферном растворе в планшете, лунки которого покрыты 0,05 М карбоната с PH9, и оставьте на ночь при температуре 4°C. На следующий день удалите раствор из лунок и промойте продукт три раза отмывочным буфером. Затем добавьте раствор PBS, содержащий 3% бычьего сывороточного альбумина, и блокируйте его в течение 20 минут. Затем промойте три раза отмывочным буфером, прежде чем добавить 100 мкл различных концентраций антител-кандидатов после разбавления. Инкубируйте при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем промойте три раза отмывочным буфером. Затем разведите козье антитело к иммуноглобулину человека, конъюгированное с пероксидазой хрена (Jackson ImmunoResearch), в соотношении 1:10000 с отмывочным буфером и инкубируйте при комнатной температуре в течение 1 часа. После трехкратной промывки отмывочным буфером добавьте 50 мкл раствора субстрата TMB, чтобы придать окраску. После реакции при комнатной температуре в течение 10 минут становите реакцию, добавив 25 мкл 0,5 М раствора серной кислоты, и проведите считывание поглощения при 450 нм. Результаты (фигура 8А, В и С) показывают, что все клоны связываются с PD-1 человека или Macaca fascicularis с аналогичной аффинностью, несмотря на то, что все они не взаимодействуют с PD-1, полученным от мыши.
[0079] Сравнение последовательностей PD-1 человека, Macaca fascicularis и мыши (см. фигуру 9, на которой основные отличающиеся участки PD-1 мыши, человека/Macaca fascicularis обведены прямоугольной рамкой). Доказано экспериментально, что эпитоп антитела-кандидата к белку PD-1 существует в этих участках.
Вариант осуществления 14: эксперимент со стимуляцией in vitro гуманизированным антителом пролиферации Т-клеток - эксперимент с анамнестической реакцией на столбнячный антиген
[0080] Высейте свежеполученные РВМС (Beijing Blood Institute) в 96-луночный планшет с плоским дном у лунок. После инкубации в течение ночи маркируйте их с использованием (CFSE) и добавьте 10 мкг/мл гуманизированного антитела (38, 39, 41 и 48) и 100 нг/мл столбнячного токсина (ТТ) (List Biological Laboratories). Проведите количественный анализ пролиферации Т-клеток на 6-й, 8-й и 10-й день с помощью проточной цитометрии (сортировки клеток с активированной флуоресценцией - FACS) через коэффициент разбавления CSFE. Как показано в результате на фигуре 10, по сравнению с контрольным IgG, иммуноциты, активированные стимуляцией TT, индуцированной посредством блокирования сигнала PD-1, находятся на этапе дальнейшего деления и пролиферации.
Вариант осуществления 15: эксперимент со стимуляцией in vitro гуманизированным антителом пролиферации Т-клеток - эксперимент с анамнестической реакцией на вирусные полипептиды
[0081] Высейте свежеполученные РВМС (Пекинский институт крови) в 96-луночный планшет с плоским дном у лунок. После инкубации в течение ночи маркируйте их с помощью CFSE. Добавьте 10 мг/мл гуманизированного антитела (38, 39, 41 и 48) и 1 мкг/мл смеси пептидов CEF (СMV, EBV и грипп). Проведите количественный анализ пролиферации Т-клеток на 6-й, 8-й и 10-й день с помощью проточной цитометрии (FACS) через коэффициент разбавления CSFE. Как показано в результате на фигуре 11, по сравнению с контрольным IgG, иммуноциты, активированные путем стимуляции смесью пептидов CEF, индуцированной посредством блокирования сигнала PD-1, находятся на этапе дальнейшего деления и пролиферации.
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> ШАНХАЙ ЦЗЮНЬШИ БИОСАЙЕНСИЗ ИНК., ЦЗЮНЬМЭН БИОСАЙЕНСИЗ КО., ЛТД
<120> АНТИТЕЛО К PD-1 И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ
<130> 2013-06-26
<160> 42
<170> PatentIn версии 3.3
<210> 1
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> CDR1 тяжелой цепи клона 1
<400> 1
Asp Tyr Glu Met His
1 5
<210> 2
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> CDR2 тяжелой цепи клона 1
<400> 2
Val Ile Glu Ser Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 3
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> CDR3 тяжелой цепи клона 1
<400> 3
Glu Gly Ile Thr Thr Val Ala Thr Thr Tyr Tyr Trp Tyr Phe Asp Val
1 5 10 15
<210> 4
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> CDR1 легкой цепи клона 1
<400> 4
Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu
1 5 10 15
<210> 5
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> CDR2 легкой цепи клона 1
<400> 5
Lys Val Tyr Asn Arg Phe Ser
1 5
<210> 6
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> CDR3 легкой цепи клона 1
<400> 6
Phe Gln Gly Ser His Val Pro Phe Thr
1 5
<210> 7
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> CDR1 тяжелой цепи клона 10
<400> 7
Asp Tyr Glu Met His
1 5
<210> 8
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> CDR2 тяжелой цепи клона 10
<400> 8
Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Ala Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 9
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> CDR3 тяжелой цепи клона 10
<400> 9
Glu Gly Ile Thr Thr Ser Val Val Thr Tyr Tyr Trp Tyr Phe Asp Val
1 5 10 15
<210> 10
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> CDR1 легкой цепи клона 10
<400> 10
Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu
1 5 10 15
<210> 11
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> CDR2 легкой цепи клона 10
<400> 11
Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5
<210> 12
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> CDR3 легкой цепи клона 10
<400> 12
Phe Gln Gly Ser His Val Pro Leu Thr
1 5
<210> 13
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> CDR1 тяжелой цепи клона 11
<400> 13
Thr Phe Gly Met Gly Val Gly
1 5
<210> 14
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> CDR2 тяжелой цепи клона 11
<400> 14
His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ala Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 15
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> CDR3 тяжелой цепи клона 11
<400> 15
Ile Glu Glu Arg Phe Arg Trp Tyr Phe Asp Val
1 5 10
<210> 16
<211> 14
<212> БЕЛОК
<213> CDR1 легкой цепи клона 11
<400> 16
Arg Ser Ser Thr Gly Ala Ile Thr Thr Ser Asn Tyr Ala Asn
1 5 10
<210> 17
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> CDR2 легкой цепи клона 11
<400> 17
Gly Thr Asn Asn Arg Ala Pro
1 5
<210> 18
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> CDR3 легкой цепи клона 11
<400> 18
Ala Leu Trp Tyr Ser Asn His Trp Val
1 5
<210> 19
<211> 125
<212> БЕЛОК
<213> Вариабельный участок тяжелой цепи клона 1
<400> 19
Gln Gly Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Thr Leu Thr Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Ile His Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Glu Ser Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Lys Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Glu Gly Ile Thr Thr Val Ala Thr Thr Tyr Tyr Trp Tyr Phe
100 105 110
Asp Val Trp Gly Thr Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 20
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Вариабельный участок легкой цепи клона 1
<400> 20
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Glu Leu Leu Ile Tyr Lys Val Tyr Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 21
<211> 125
<212> БЕЛОК
<213> Вариабельный участок тяжелой цепи клона 10
<400> 21
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Ala Ala Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Glu Gly Ile Thr Thr Ser Val Val Thr Tyr Tyr Trp Tyr Phe
100 105 110
Asp Val Trp Gly Thr Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 22
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Вариабельный участок легкой цепи клона 10
<400> 22
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Pro Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 23
<211> 121
<212> БЕЛОК
<213> Вариабельный участок тяжелой цепи клона 11
<400> 23
Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Gln Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Phe
20 25 30
Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ala
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asn Thr Ser Lys Asn Gln Val
65 70 75 80
Phe Leu Lys Ile Ala Asn Val Asp Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Ile Glu Glu Arg Phe Arg Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly
100 105 110
Thr Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 24
<211> 109
<212> БЕЛОК
<213> Вариабельный участок легкой цепи клона 11
<400> 24
Arg Ala Gly Trp Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Ile Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 25
<211> 375
<212> ДНК
<213> Вариабельный участок тяжелой цепи клона 1
<400> 25
cagggtcaac tgcagcagtc tggggctgag ctggtgaggc ctggggcttc agtgacgctg 60
acctgcaagg cttcgggcta cacatttact gactatgaaa tgcactgggt gaagcagaca 120
cctatacatg gcctggaatg gattggagtt attgaatctg aaactggtgg tactgcctac 180
aatcagaagt tcaagggcaa ggccaaactg actgcagaca aatcctccag cacagcctac 240
atggagctcc gcagcctgac atctgaggac tctgccgtct attactgtac aagagagggt 300
attactacgg tagcaactac gtactactgg tacttcgatg tctggggcac agggaccacg 360
gtcaccgtct cctca 375
<210> 26
<211> 336
<212> ДНК
<213> Вариабельный участок легкой цепи клона 1
<400> 26
gatgttttga tgacccagac tccactctcc ctgcctgtca gtcttggaga tcaagcctcc 60
atctcttgca gatctagtca gagcattgta catagtaatg gaaacaccta tttagaatgg 120
tacctgcaga aaccaggcca gtctccagag ctcctgatct acaaagttta caaccgattt 180
tctggggtcc cagacaggtt cagtggcagt ggatcaggga cagatttcac actcaagatc 240
agcagagtgg aggctgagga tctgggagtt tattactgct ttcaaggttc acatgttcca 300
ttcacgttcg gctcggggac aaagttggaa ataaaa 336
<210> 27
<211> 375
<212> ДНК
<213> Вариабельный участок тяжелой цепи клона 10
<400> 27
caggttcaac tgcagcagtc tggggctgag ctggtgaggc ctggggcttc agtgacgctg 60
tcctgcaagg cttcgggcta cacatttact gactatgaaa tgcactgggt gaagcagaca 120
cctgtgcatg gcctggaatg gattggagct attgatcctg aaactggtgg tgctgcctac 180
aatcagaagt tcaagggcaa ggccatactg actgcagaca aatcctccag cacagcctac 240
atggagctcc gcagcctgac atctgaggac tctgccgtct attactgtac aagagagggt 300
attactacgt cagtggttac gtactactgg tacttcgatg tctggggcac agggaccacg 360
gtcaccgtct cctca 375
<210> 28
<211> 336
<212> ДНК
<213> Вариабельный участок легкой цепи клона 10
<400> 28
gatgttttga tgacccaaac tccactctcc ctgcctgtca gtcttggaga tcaagcctcc 60
atctcttgca gatctagtca gagcattgta catagtaatg gaaacaccta tttagaatgg 120
tacctgcaga aaccaggcca gtctccaaag ctcctgatct acaaagtttc caaccgattt 180
tctggggtcc cagacaggtt cagtggcagt ggatcaggga cagatttcac actcaggatc 240
agcagagtgg agcctgagga tctgggagtt tattactgct ttcaaggttc acatgttcca 300
ctcacgttcg gctcggggac aaagttggaa ataaaa 336
<210> 29
<211> 363
<212> ДНК
<213> Вариабельный участок тяжелой цепи клона 11
<400> 29
caggttactc tgaaagagtc tggccctggg atattgcagc cctcccagac cctcagtctg 60
acttgttctt tctctgggtt ttcactgagc acttttggta tgggtgtcgg ctggattcgt 120
cagccttcag ggaagggtct ggagtggctg gcacacattt ggtgggatga tgataagtac 180
tataatcccg ccctgaagag tcggctcaca atctccaaga atacctccaa aaaccaggta 240
ttcctcaaga tcgccaatgt ggacactgaa gatactgcca catactactg tgctcgaata 300
gaggagaggt tccgctggta cttcgatgtc tggggcacag ggaccacggt caccgtctcc 360
tca 363
<210> 30
<211> 327
<212> ДНК
<213> Вариабельный участок легкой цепи клона 11
<400> 30
agggctggtt ggactcagga atctgcactc accacatcac ctggtgaaac agtcacactc 60
acttgtcgct caagtactgg ggctattaca actagtaact atgccaactg ggtccaagaa 120
aaaccagatc atttattcac tggtctaata ggtggtacca acaaccgagc tccaggtgtt 180
cctgccagat tctcaggctc cctgattgga gacaaggctg ccctcaccat cacaggggca 240
cagactgagg atgaggcaat atatttctgt gctctatggt acagcaacca ctgggtgttc 300
ggtggaggaa ccaaactgac tgtccta 327
<210> 31
<211> 31
<212> ДНК
<213> Прямой праймер
<400> 31
gtacgctagc caccatgcag atcccacagg c 31
<210> 32
<211> 29
<212> ДНК
<213> Обратный праймер
<400> 32
gatcctcgag ccaccagggt ttggaactg 29
<210> 33
<211> 125
<212> БЕЛОК
<213> Вариабельный участок тяжелой цепи клона 38
<400> 33
Gln Gly Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Glu Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Ile His Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Glu Ser Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Gly Ile Thr Thr Val Ala Thr Thr Tyr Tyr Trp Tyr Phe
100 105 110
Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 34
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Вариабельный участок легкой цепи клона 38,39 и 41
<400> 34
Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 35
<211> 125
<212> БЕЛОК
<213> Вариабельный участок тяжелой цепи клона 39 и 48
<400> 35
Gln Gly Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Glu Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Val Ile Glu Ser Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Ala Lys Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Glu Gly Ile Thr Thr Val Ala Thr Thr Tyr Tyr Trp Tyr Phe
100 105 110
Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 36
<211> 125
<212> БЕЛОК
<213> Вариабельный участок тяжелой цепи клона 41
<400> 36
Gln Gly Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Glu Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Val Ile Glu Ser Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Glu Gly Ile Thr Thr Val Ala Thr Thr Tyr Tyr Trp Tyr Phe
100 105 110
Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 37
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Вариабельный участок легкой цепи клона 48
<400> 37
Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 38
<211> 375
<212> ДНК
<213> Последовательность нуклеиновых кислот вариабельного участка тяжелой цепи клона 38
<400> 38
cagggccagc tggtgcagag cggcgccgag gtgaagaagc ccggcgccag cgtgaaggtg 60
agctgcaagg ccagcggcta caccttcacc gactacgaga tgcactgggt gagacaggcc 120
cccatccacg gcctggagtg gatcggcgtg atcgagagcg agaccggcgg caccgcctac 180
aaccagaagt tcaagggcag agtgaccatc accgccgaca agagcaccag caccgcctac 240
atggagctga gcagcctgag aagcgaggac accgccgtgt actactgcgc cagagagggc 300
atcaccaccg tggccaccac ctactactgg tacttcgacg tgtggggcca gggcaccacc 360
gtgaccgtga gcagc 375
<210> 39
<211> 336
<212> ДНК
<213> Последовательность нуклеиновых кислот вариабельного участка легкой цепи клона 38,39 и 41
<400> 39
gatgtggtga tgacccagag cccgctgagc ctgccggtga ccctgggcca gccggcgagc 60
attagctgcc gcagcagcca gagcattgtg catagcaacg gcaacaccta tctggaatgg 120
tatctgcaga aaccgggcca gagcccgcag ctgctgattt ataaagtgag caaccgcttt 180
agcggcgtgc cggatcgctt tagcggcagc ggcagcggca ccgattttac cctgaaaatt 240
agccgcgtgg aagcggaaga tgtgggcgtg tattattgct ttcagggcag ccatgtgccg 300
ctgacctttg gccagggcac caaactggaa attaaa 336
<210> 40
<211> 375
<212> ДНК
<213> Последовательность нуклеиновых кислот вариабельного участка тяжелой цепи клона 39 и 48
<400> 40
cagggccagc tggtgcagag cggcgccgag gtgaagaagc ccggcgccag cgtgaaggtg 60
agctgcaagg ccagcggcta caccttcacc gactacgaga tgcactgggt gagacaggcc 120
cccggccagg gcctggagtg gatgggcgtg atcgagagcg agaccggcgg caccgcctac 180
aaccagaagt tcaagggcag agccaagatc accgccgaca agagcaccag caccgcctac 240
atggagctga gcagcctgag aagcgaggac accgccgtgt actactgcac cagagagggc 300
atcaccaccg tggccaccac ctactactgg tacttcgacg tgtggggcca gggcaccacc 360
gtgaccgtga gcagc 375
<210> 41
<211> 375
<212> ДНК
<213> Последовательность нуклеиновых кислот вариабельного участка тяжелой цепи клона 41
<400> 41
cagggccagc tggtgcagag cggcgcggaa gtgaaaaaac cgggcgcgag cgtgaaagtg 60
agctgcaaag cgagcggcta tacctttacc gattatgaaa tgcattgggt gcgccaggcg 120
ccgggccagg gcctggaatg gatgggcgtg attgaaagcg aaaccggcgg caccgcgtat 180
aaccagaaat ttcagggccg cgtgaccctg accgcggata aaagcagcag caccgcgtat 240
atggaactga gcagcctgcg cagcgaagat accgcggtgt attattgcac ccgcgaaggc 300
attaccaccg tggcgaccac ctattattgg tattttgatg tgtggggcca gggcaccctg 360
gtgaccgtga gcagc 375
<210> 42
<211> 336
<212> ДНК
<213> Последовательность нуклеиновых кислот вариабельного участка легкой цепи клона 48
<400> 42
gatgtggtga tgacccagag cccgctgagc ctgccggtga ccctgggcca gccggcgagc 60
attagctgcc gcagcagcca gagcattgtg catagcaacg gcaacaccta tctggaatgg 120
tatctgcaga aaccgggcca gagcccgcgc ctgctgattt ataaagtgag caaccgcttt 180
agcggcgtgc cggatcgctt tagcggcagc ggcagcggca ccgattttac cctgaaaatt 240
agccgcgtgg aagcggaaga tgtgggcgtg tattattgct ttcagggcag ccatgtgccg 300
ctgacctttg gccagggcac caaactggaa attaaa 336

Claims (19)

1. Антитело или его функциональный фрагмент, которые могут связываться с белком программируемой клеточной смерти 1 (PD-1) и содержат CDR тяжелой цепи, выбранный из аминокислотной последовательности с SEQ ID NO: 1, 2, 3, 7, 8, 9, 13, 14 и 15, и CDR легкой цепи, выбранный из аминокислотной последовательности с SEQ ID NO: 4, 5, 6, 10, 11, 12, 16, 17 и 18;
где аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 из указанного CDR тяжелой цепи выбраны из какой-либо из следующих групп разных аминокислотных последовательностей:
HCDR1 HCDR2 HCDR3 A SEQ ID NO: 1 SEQ ID NO: 2 SEQ ID NO: 3 B SEQ ID NO: 7 SEQ ID NO: 8 SEQ ID NO: 9 C SEQ ID NO: 13 SEQ ID NO: 14 SEQ ID NO: 15
и аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 указанного CDR легкой цепи выбраны из какой-либо из следующих групп разных аминокислотных последовательностей:
LCDR1 LCDR2 LCDR3 A SEQ ID NO: 4 SEQ ID NO: 5 SEQ ID NO: 6 B SEQ ID NO: 10 SEQ ID NO: 11 SEQ ID NO: 12 C SEQ ID NO: 16 SEQ ID NO: 17 SEQ ID NO: 18
2. Антитело или его функциональный фрагмент по п. 1, в которых аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи, а также CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи выбраны из какой-либо из следующих групп различных аминокислотных последовательностей:
HCDR1 HCDR2 HCDR3 LCDR1 LCDR2 LCDR3 A SEQ ID NO: 1 SEQ ID NO: 2 SEQ ID NO: 3 SEQ ID NO: 4 SEQ ID NO: 5 SEQ ID NO: 6 B SEQ ID NO: 7 SEQ ID NO: 8 SEQ ID NO: 9 SEQ ID NO: 10 SEQ ID NO: 11 SEQ ID NO: 12 C SEQ ID NO: 13 SEQ ID NO: 14 SEQ ID NO: 15 SEQ ID NO: 16 SEQ ID NO: 17 SEQ ID NO: 18 D SEQ ID NO: 1 SEQ ID NO: 2 SEQ ID NO: 3 SEQ ID NO: 10 SEQ ID NO: 11 SEQ ID NO: 12
3. Антитело или его функциональный фрагмент по п. 1, которые содержат вариабельные участки тяжелой цепи, выбранные из аминокислотной последовательности с SEQ ID NO: 19, 21 и 23, и вариабельные участки легкой цепи, выбранные из аминокислотной последовательности с SEQ ID NO: 20, 22 и 24.
4. Антитело или его функциональный фрагмент по п. 1, где указанный вариабельный участок тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 19, и указанный вариабельный участок легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 20, или указанный вариабельный участок тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 21, и указанный вариабельный участок легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 22, или указанный вариабельный участок тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 23, и указанный вариабельный участок легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 24.
5. Антитело или его функциональный фрагмент по одному из пп. 1-4, которые представляют собой химерное антитело.
6. Антитело или его функциональный фрагмент по одному из пп. 1-5, которые содержат вариабельный участок тяжелой цепи, выбранный из аминокислотной последовательности с SEQ ID NO: 33, 35, 36, и вариабельный участок легкой цепи, выбранный из аминокислотной последовательности с SEQ ID NO: 34, 37.
7. Антитело или его функциональный фрагмент по п. 1, где указанный вариабельный участок тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 33, а указанный вариабельный участок легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 34, или указанный вариабельный участок тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 35, и указанный вариабельный участок легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 34, или указанный вариабельный участок тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 36, а указанный вариабельный участок легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 34, или указанный вариабельный участок тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 35, и указанный вариабельный участок легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 37.
8. Отдельная молекула нуклеиновой кислоты, которая кодирует указанное антитело или его функциональный фрагмент по любому из пп. 1-7.
9. Экспрессионный вектор, который содержит указанную молекулу нуклеиновой кислоты по п. 8.
10. Клетка-хозяин для продуцирования антитела или его функционального фрагмента по любому из пп. 1-7, которая содержит указанный экспрессионный вектор по п. 9.
11. Способ получения антител к PD-1 или их функциональных фрагментов, который включает культивирование указанных клеток-хозяев по п. 10 в условиях, которые обеспечивают продуцирование указанных антител или их функциональных фрагментов, а также выделение указанных антител или их функциональных фрагментов, полученных таким образом.
12. Иммуноконъюгат для лечения заболеваний, ассоциированных с повышенной экспрессией и/или активностью PD-1, который содержит указанное антитело или его функциональный фрагмент по любому из пп. 1-7, связанный с терапевтическим средством, при этом указанное терапевтическое средство предпочтительно является токсином, радиозотопом, лекарственным средством или цитотоксическим средством.
13. Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний, ассоциированных с повышенной экспрессией и/или активностью PD-1, которая содержит указанное антитело или его функциональный фрагмент по любому из пп. 1-7 в количестве, эффективном для устранения, подавления или снижения активности PD-1, а также фармацевтический носитель.
14. Способ, применяемый для профилактики или лечения заболеваний или состояний, ассоциированных с повышенной экспрессией и/или активностью PD-1, путем устранения, подавления или снижения активности PD-1, который включает введение нуждающемуся пациенту эффективной лечебной дозы антитела или его функционального фрагмента по любому из пп. 1-7, иммуноконъюгата по п. 12 или фармацевтической композиции по п. 13.
RU2016102176A 2013-06-26 2014-02-26 Антитело к pd-1 и его применение RU2663795C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310258289.2A CN104250302B (zh) 2013-06-26 2013-06-26 抗pd‑1抗体及其应用
CN201310258289.2 2013-06-26
PCT/CN2014/072574 WO2014206107A1 (zh) 2013-06-26 2014-02-26 抗pd-1抗体及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2016102176A RU2016102176A (ru) 2017-07-31
RU2663795C2 true RU2663795C2 (ru) 2018-08-09

Family

ID=52140971

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2016102176A RU2663795C2 (ru) 2013-06-26 2014-02-26 Антитело к pd-1 и его применение

Country Status (16)

Country Link
US (3) US10066013B2 (ru)
EP (2) EP3845562A1 (ru)
JP (1) JP6681327B2 (ru)
CN (1) CN104250302B (ru)
BR (1) BR112015031883A2 (ru)
DK (1) DK3026062T3 (ru)
ES (1) ES2822927T3 (ru)
HR (1) HRP20201600T1 (ru)
HU (1) HUE052487T2 (ru)
MY (1) MY176822A (ru)
PH (1) PH12015502819A1 (ru)
PL (1) PL3026062T3 (ru)
PT (1) PT3026062T (ru)
RU (1) RU2663795C2 (ru)
SI (1) SI3026062T1 (ru)
WO (1) WO2014206107A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2807484C2 (ru) * 2019-02-03 2023-11-15 Цзянсу Хэнжуй Медсин Ко., Лтд. Антитело к pd-1, его антигенсвязывающий фрагмент и его фармацевтическое применение

Families Citing this family (225)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104250302B (zh) 2013-06-26 2017-11-14 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗pd‑1抗体及其应用
PL3081576T3 (pl) 2013-12-12 2020-03-31 Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co., Ltd. Przeciwciało anty pd-1, jego fragment wiążący antygen i ich zastosowanie medyczne
US9394365B1 (en) 2014-03-12 2016-07-19 Yeda Research And Development Co., Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of alzheimer's disease
NZ747418A (en) 2014-03-12 2023-05-26 Yeda Res & Dev Reducing systemic regulatory t cell levels or activity for treatment of disease and injury of the cns
US10618963B2 (en) 2014-03-12 2020-04-14 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
US10519237B2 (en) 2014-03-12 2019-12-31 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
US9982052B2 (en) 2014-08-05 2018-05-29 MabQuest, SA Immunological reagents
JP6629321B2 (ja) 2014-08-05 2020-01-15 マブクエスト エスエーＭａｂＱｕｅｓｔ ＳＡ 免疫学的試薬
US10239942B2 (en) 2014-12-22 2019-03-26 Pd-1 Acquisition Group, Llc Anti-PD-1 antibodies
US11639385B2 (en) 2014-12-22 2023-05-02 Pd-1 Acquisition Group, Llc Anti-PD-1 antibodies
BR112017019559B1 (pt) 2015-03-13 2020-08-04 Cytomx Therapeutics, Inc Anticorpos anti-pdl1, anticorpos anti-pdl1 ativáveis, e métodos de uso destes
US10144779B2 (en) 2015-05-29 2018-12-04 Agenus Inc. Anti-CTLA-4 antibodies and methods of use thereof
CN105061597B (zh) * 2015-06-09 2016-04-27 北京东方百泰生物科技有限公司 一种抗pd-1的单克隆抗体及其获得方法
US10513558B2 (en) 2015-07-13 2019-12-24 Cytomx Therapeutics, Inc. Anti-PD1 antibodies, activatable anti-PD1 antibodies, and methods of use thereof
KR20180036974A (ko) 2015-07-16 2018-04-10 바이오엑셀 테라퓨틱스 인코포레이티드 면역조절을 이용하는 암의 치료를 위한 신규한 접근법
CN106699888B (zh) * 2015-07-28 2020-11-06 上海昀怡健康科技发展有限公司 一种pd-1抗体及其制备方法和应用
CN106390115A (zh) * 2015-07-29 2017-02-15 上海君实生物医药科技股份有限公司 一种人源化单克隆抗体的稳定制剂
WO2017024465A1 (en) * 2015-08-10 2017-02-16 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Pd-1 antibodies
MY187739A (en) 2015-08-11 2021-10-18 Wuxi Biologics Cayman Inc Novel anti-pd-1 antibodies
CN106432494B9 (zh) * 2015-08-11 2022-02-15 广州誉衡生物科技有限公司 新型抗-pd-1抗体
US10323091B2 (en) 2015-09-01 2019-06-18 Agenus Inc. Anti-PD-1 antibodies and methods of use thereof
US11638744B2 (en) * 2015-09-03 2023-05-02 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Immunity enhancing agent for cancer by Allergin-1 antagonist
EA201890790A1 (ru) 2015-09-29 2018-10-31 Селджин Корпорейшн Связывающие pd-1 белки и способы их применения
CN108368175B (zh) 2015-09-29 2021-08-06 上海张江生物技术有限公司 Pd-1抗体及其用途
KR20180053752A (ko) 2015-10-02 2018-05-23 심포젠 에이/에스 항-pd-1 항체 및 조성물
WO2017066561A2 (en) * 2015-10-16 2017-04-20 President And Fellows Of Harvard College Regulatory t cell pd-1 modulation for regulating t cell effector immune responses
MA43186B1 (fr) 2015-11-03 2022-03-31 Janssen Biotech Inc Anticorps se liant spécifiquement à pd-1 et leurs utilisations
CN106699889A (zh) * 2015-11-18 2017-05-24 礼进生物医药科技（上海）有限公司 抗pd-1抗体及其治疗用途
CN105566496B (zh) * 2015-11-26 2019-04-02 大庆东竺明生物技术有限公司 阻断人程序性死亡因子1(pd-1)功能的单克隆抗体及其编码基因和应用
AU2017208819B2 (en) * 2016-01-22 2023-10-19 MabQuest SA PD1 specific antibodies
US11214617B2 (en) 2016-01-22 2022-01-04 MabQuest SA Immunological reagents
WO2017132827A1 (en) * 2016-02-02 2017-08-10 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Pd-1 antibodies
US10465014B2 (en) 2016-03-04 2019-11-05 Sichuan Kelun-Biotech Biopharmaceutical Co., Ltd. PDL-1 antibody, pharmaceutical composition thereof, and uses thereof
CN105950715B (zh) * 2016-04-27 2019-04-26 深圳市第三人民医院 检测δ42pd1的方法、引物及试剂盒
CN105968200B (zh) 2016-05-20 2019-03-15 瑞阳(苏州)生物科技有限公司 抗人pd-l1人源化单克隆抗体及其应用
CN106008714B (zh) * 2016-05-24 2019-03-15 瑞阳(苏州)生物科技有限公司 抗人pd-1人源化单克隆抗体及其应用
SG10201912563XA (en) 2016-05-27 2020-02-27 Agenus Inc Anti-tim-3 antibodies and methods of use thereof
CN106085955B (zh) * 2016-06-08 2019-09-10 中南大学 一种同时分离外周血t、b淋巴细胞的方法
EP3471754A1 (en) 2016-06-20 2019-04-24 Kymab Limited Anti-pd-l1 antibodies
CN106046162B (zh) * 2016-06-21 2019-04-02 大庆东竺明生物技术有限公司 抗人程序性死亡因子1（pd-1）单克隆抗体的制备及应用
WO2018035710A1 (en) 2016-08-23 2018-03-01 Akeso Biopharma, Inc. Anti-ctla4 antibodies
CN106977602B (zh) * 2016-08-23 2018-09-25 中山康方生物医药有限公司 一种抗pd1单克隆抗体、其药物组合物及其用途
CN106967172B (zh) 2016-08-23 2019-01-08 康方药业有限公司 抗ctla4-抗pd-1 双功能抗体、其药物组合物及其用途
KR102266788B1 (ko) 2016-09-14 2021-06-22 베이징 한미 파마슈티컬 컴퍼니 리미티드 Ｐｄ-1에 특이적으로 결합하는 항체 및 그의 기능성 단편
UA124631C2 (uk) * 2016-09-14 2021-10-20 Еббві Байотерапьютікс Інк. Антитіло до pd-1
WO2018050028A1 (zh) 2016-09-14 2018-03-22 北京韩美药品有限公司 一种能够特异性地结合il-17a的抗体及其功能片段
WO2018053401A1 (en) 2016-09-19 2018-03-22 Celgene Corporation Methods of treating vitiligo using pd-1 binding proteins
KR102257154B1 (ko) 2016-09-19 2021-05-28 셀진 코포레이션 Pd-1 결합 단백질을 사용하는 면역 질환의 치료 방법
KR20230133934A (ko) 2016-10-11 2023-09-19 아게누스 인코포레이티드 항-lag-3 항체 및 이의 사용 방법
EP3532504A1 (en) 2016-10-28 2019-09-04 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating urothelial carcinoma using an anti-pd-1 antibody
SG11201902857SA (en) 2016-11-03 2019-05-30 Bristol Myers Squibb Co Activatable anti-ctla-4 antibodies and uses thereof
AU2017373945A1 (en) 2016-12-07 2019-06-20 Agenus Inc. Antibodies and methods of use thereof
MX2019006340A (es) 2016-12-07 2019-11-07 Agenus Inc Anticuerpos anti antígeno 4 del linfocito t citotóxico (ctla-4) y métodos de uso de los mismos.
CN110366564B (zh) * 2016-12-23 2023-07-07 瑞美德生物医药科技有限公司 使用与程序性死亡1(pd-1)结合的抗体的免疫疗法
WO2018132739A2 (en) 2017-01-13 2018-07-19 Agenus Inc. T cell receptors that bind to ny-eso-1 and methods of use thereof
WO2018133842A1 (zh) * 2017-01-20 2018-07-26 大有华夏生物医药集团有限公司 人程序性死亡受体pd-1的单克隆抗体及其片段
CN108341871A (zh) * 2017-01-24 2018-07-31 三生国健药业（上海）股份有限公司 抗pd-1单克隆抗体及其制备方法和应用
CN110337305A (zh) 2017-02-28 2019-10-15 赛诺菲 治疗性rna
WO2018183928A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
PE20191741A1 (es) 2017-04-05 2019-12-12 Symphogen As Terapias combinadas dirigidas a pd-1, tim-3, y lag-3
TWI788340B (zh) 2017-04-07 2023-01-01 美商必治妥美雅史谷比公司 抗icos促效劑抗體及其用途
KR102629972B1 (ko) 2017-04-13 2024-01-29 아게누스 인코포레이티드 항-cd137 항체 및 이의 사용 방법
CN106939049B (zh) 2017-04-20 2019-10-01 苏州思坦维生物技术股份有限公司 拮抗抑制人pd-1抗原与其配体结合的单克隆抗体及其制备方法与应用
MA50957A (fr) 2017-05-01 2020-10-14 Agenus Inc Anticorps anti-tigit et leurs méthodes d'utilisation
AU2018277824A1 (en) 2017-05-30 2019-10-17 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of LAG-3 positive tumors
MX2019012076A (es) 2017-05-30 2019-12-09 Bristol Myers Squibb Co Composiciones que comprenden un anticuerpo anti gen-3 de activacion del linfocito (lag-3) o un anticuerpo anti-lag-3 y un anticuerpo anti muerte celular programada 1 (pd-1) o anti ligando 1 de muerte celular programada (pd-l1).
MX2019012038A (es) 2017-05-30 2019-11-18 Bristol Myers Squibb Co Composiciones que comprenden una combinacion de un anticuerpo anti gen 3 de activacion del linfocito (lag-3), un inhibidor de la trayectoria del receptor de muerte programada 1 (pd-1), y un agente inmunoterapeutico.
CN117462668A (zh) 2017-06-01 2024-01-30 百时美施贵宝公司 用抗pd-1抗体治疗肿瘤的方法
KR20200016899A (ko) 2017-06-01 2020-02-17 싸이톰스 테라퓨틱스, 인크. 활성화가능 항-pdl1 항체, 및 이의 이용 방법
CN111511762A (zh) 2017-08-21 2020-08-07 天演药业公司 抗cd137分子及其用途
AU2018326875A1 (en) 2017-09-04 2020-03-19 Agenus Inc. T cell receptors that bind to mixed lineage leukemia (MLL)-specific phosphopeptides and methods of use thereof
CN107446048B (zh) * 2017-09-13 2021-03-30 北京韩美药品有限公司 一种能够特异性地结合pd-1的抗体及其功能片段
TW201920282A (zh) * 2017-09-29 2019-06-01 中國大陸商上海藥明生物技術有限公司 抗egfr和pd-1的雙特異性抗體
US20200239577A1 (en) 2017-10-15 2020-07-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
MX2020004349A (es) 2017-11-06 2020-10-05 Bristol Myers Squibb Co Metodos de tratamiento de un tumor.
KR20200075860A (ko) 2017-11-06 2020-06-26 제넨테크, 인크. 암의 진단 및 치료 방법
CN109467603B (zh) * 2017-11-14 2020-02-21 拜西欧斯（北京）生物技术有限公司 抗pd-1抗体及其制备方法和应用
WO2019109238A1 (en) 2017-12-05 2019-06-13 Lyvgen Biopharma Co., Ltd. Anti-cd137 antibodies and uses thereof
TWI802633B (zh) * 2018-01-15 2023-05-21 大陸商南京傳奇生物科技有限公司 針對pd-1之單域抗體及其變異體
WO2019143607A1 (en) 2018-01-16 2019-07-25 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating cancer with antibodies against tim3
CA3088542A1 (en) 2018-01-22 2019-07-25 Bristol-Myers Squibb Company Compositions and methods of treating cancer
EP3743061A1 (en) 2018-01-22 2020-12-02 Pascal Biosciences Inc. Cannabinoids and derivatives for promoting immunogenicity of tumor and infected cells
WO2019148445A1 (en) 2018-02-02 2019-08-08 Adagene Inc. Precision/context-dependent activatable antibodies, and methods of making and using the same
CN110269865A (zh) * 2018-03-16 2019-09-24 山东大学 黑根霉胞外多糖在制备治疗诱发性结肠癌药物中的应用
AU2019237212A1 (en) * 2018-03-22 2020-09-24 Keires Ag Antagonistic PD-1, PD-L1 and LAG-3 binding proteins
TW202003565A (zh) 2018-03-23 2020-01-16 美商必治妥美雅史谷比公司 抗mica及/或micb抗體及其用途
CN111971306A (zh) 2018-03-30 2020-11-20 百时美施贵宝公司 治疗肿瘤的方法
EP3774903A1 (en) 2018-04-04 2021-02-17 Bristol-Myers Squibb Company Anti-cd27 antibodies and uses thereof
CN111821434A (zh) * 2019-04-17 2020-10-27 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗pd-1抗体在制备治疗实体瘤的药物中的用途
JP2021520850A (ja) * 2018-04-15 2021-08-26 サルブリス （チョンドゥ） バイオテック カンパニー リミテッド Ｐｄ−１結合抗体及びその使用
MA52363A (fr) 2018-04-26 2021-03-03 Agenus Inc Compositions peptidiques de liaison à une protéine de choc thermique (hsp) et leurs méthodes d'utilisation
CN108840932B (zh) * 2018-04-28 2022-03-29 中国科学院微生物研究所 一种pd-1特异性抗体及其抗肿瘤应用
BR112020022265A2 (pt) 2018-05-07 2021-02-23 Genmab A/S método para tratar câncer em um indivíduo, e, estojo.
KR20210010998A (ko) * 2018-05-17 2021-01-29 난징 리즈 바이오랩스 씨오., 엘티디. 항체 결합 피디 1 및 그의 용도
EP3810109A4 (en) 2018-05-31 2022-03-16 Peloton Therapeutics, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS FOR INHIBITING CD73
US20200030443A1 (en) 2018-06-23 2020-01-30 Genentech, Inc. Methods of treating lung cancer with a pd-1 axis binding antagonist, a platinum agent, and a topoisomerase ii inhibitor
WO2020018789A1 (en) 2018-07-18 2020-01-23 Genentech, Inc. Methods of treating lung cancer with a pd-1 axis binding antagonist, an antimetabolite, and a platinum agent
CN109160949B (zh) * 2018-07-23 2021-05-14 中国医学科学院血液病医院（血液学研究所） 一种鼠抗人pd-1单克隆抗体及应用
MX2021000726A (es) 2018-07-26 2021-03-25 Bristol Myers Squibb Co Terapia combinada de gen de activacion de linfocitos 3(lag-3) para el tratamiento del cancer.
AU2019324170A1 (en) 2018-08-23 2021-02-18 Seagen, Inc. Anti-TIGIT antibodies
CN112805267B (zh) 2018-09-03 2024-03-08 豪夫迈·罗氏有限公司 用作tead调节剂的甲酰胺和磺酰胺衍生物
CN112972675A (zh) * 2018-09-07 2021-06-18 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗pd-1抗体在治疗肿瘤中的用途
US20220177587A1 (en) 2018-09-19 2022-06-09 Alpine Immune Sciences, Inc. Methods and uses of variant cd80 fusion proteins and related constructs
JP2022512642A (ja) 2018-10-09 2022-02-07 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー がんを治療するための抗ＭｅｒＴＫ抗体
KR20210080437A (ko) 2018-10-19 2021-06-30 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 흑색종을 위한 조합 요법
CN112912403A (zh) 2018-10-23 2021-06-04 百时美施贵宝公司 治疗肿瘤的方法
JP6988769B2 (ja) * 2018-11-08 2022-01-05 株式会社デンソー 開閉体制御装置及びモータ
US11274150B2 (en) 2018-11-16 2022-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Anti-human natural killer cell inhibitory receptor group 2A protein (NKG2A) antibodies
AU2019396360A1 (en) 2018-12-11 2021-05-27 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Naphthyridine and quinoline derivatives useful as ALK5 inhibitors
EP3666905A1 (en) 2018-12-11 2020-06-17 Sanofi E. coli positive for pks island as marker of positive response to anti-pd1 therapy in colorectal cancer
CN111303283A (zh) * 2018-12-12 2020-06-19 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗il-17a抗体及其应用
CN111423510B (zh) 2019-01-10 2024-02-06 迈威(上海)生物科技股份有限公司 重组抗人pd-1抗体及其应用
TW202043272A (zh) 2019-01-14 2020-12-01 美商建南德克公司 使用pd-1軸結合拮抗劑及rna疫苗治療癌症之方法
MX2021008605A (es) 2019-01-21 2021-10-26 Sanofi Sa Arn terapéutico y anticuerpos anti-pd1 para canceres de tumor sólido en estadio avanzado.
CA3128104A1 (en) * 2019-02-03 2020-08-06 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. Anti-pd-1 antibody, antigen-binding fragment thereof and pharmaceutical use thereof
KR20210146348A (ko) 2019-03-28 2021-12-03 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 종양을 치료하는 방법
JP2022526960A (ja) 2019-03-28 2022-05-27 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 腫瘍を処置する方法
AU2020258480A1 (en) 2019-04-19 2021-10-21 Genentech, Inc. Anti-mertk antibodies and their methods of use
EP3725370A1 (en) 2019-04-19 2020-10-21 ImmunoBrain Checkpoint, Inc. Modified anti-pd-l1 antibodies and methods and uses for treating a neurodegenerative disease
WO2020231809A1 (en) * 2019-05-10 2020-11-19 Lyvgen Biopharma Co., Ltd. Humanized anti-cd137 antibodies and uses thereof
CN114174538A (zh) 2019-05-30 2022-03-11 百时美施贵宝公司 适合于免疫肿瘤学疗法的多肿瘤基因特征
KR20220016157A (ko) 2019-05-30 2022-02-08 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 세포 국재화 시그너쳐 및 조합 요법
WO2020243568A1 (en) 2019-05-30 2020-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject suitable for an immuno-oncology (i-o) therapy
WO2021006199A1 (ja) 2019-07-05 2021-01-14 小野薬品工業株式会社 Ｐｄ－１／ｃｄ３二重特異性タンパク質による血液がん治療
AU2020314129A1 (en) 2019-07-15 2022-02-24 Shanghai Junshi Biosciences Co., Ltd. Anti-tigit antibodies and application thereof
WO2021024020A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 and immune checkpoint inhibitors for treatment of cancer
WO2021025140A1 (ja) 2019-08-08 2021-02-11 小野薬品工業株式会社 二重特異性タンパク質
US11680098B2 (en) 2019-08-30 2023-06-20 Agenus Inc. Antibodies that specifically bind human CD96
JP2022549273A (ja) 2019-09-22 2022-11-24 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｌａｇ－３アンタゴニスト治療のための定量的空間プロファイリング
CA3152263A1 (en) 2019-09-25 2021-04-01 Julia SANTUCCI PEREIRA DEL BUONO Composite biomarker for cancer therapy
KR20220070201A (ko) * 2019-09-30 2022-05-30 쓰촨 케룬-바이오테크 바이오파마수티컬 컴퍼니 리미티드 항-pd-1 항체 및 이의 용도
WO2021092044A1 (en) 2019-11-05 2021-05-14 Bristol-Myers Squibb Company M-protein assays and uses thereof
WO2021092221A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy
WO2021092220A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy
KR20220093349A (ko) 2019-11-08 2022-07-05 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 흑색종에 대한 lag-3 길항제 요법
MX2022005775A (es) 2019-11-13 2022-06-09 Genentech Inc Compuestos terapeuticos y metodos de uso.
EP4058465A1 (en) 2019-11-14 2022-09-21 Cohbar Inc. Cxcr4 antagonist peptides
EP4061809A1 (en) 2019-11-22 2022-09-28 Theravance Biopharma R&D IP, LLC Substituted 1,5-naphthyridines or quinolines as alk5 inhibitors
WO2021127554A1 (en) 2019-12-19 2021-06-24 Bristol-Myers Squibb Company Combinations of dgk inhibitors and checkpoint antagonists
BR112022014962A2 (pt) 2020-01-30 2022-09-20 Ona Therapeutics S L Terapia de combinação para tratamento de câncer e metástase de câncer
MX2022009391A (es) 2020-01-31 2022-09-26 Genentech Inc Metodos para inducir linfocitos t especificos para neoepitopo con un antagonista de union al eje de pd-1 y una vacuna de arn.
JP2023514152A (ja) 2020-02-06 2023-04-05 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｉｌ－１０およびその使用
CN113244385A (zh) * 2020-02-07 2021-08-13 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗pd-1抗体在治疗恶性肿瘤中的用途
CN113248612A (zh) * 2020-02-13 2021-08-13 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗pd-1抗体在治疗神经内分泌瘤中的用途
CN113244386A (zh) * 2020-02-13 2021-08-13 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗pd-1抗体在治疗肿瘤中的用途
JP2023516724A (ja) 2020-03-06 2023-04-20 オーエヌエー セラピューティクス エセ．エレ． 抗ｃｄ３６抗体及び癌を治療するためのそれらの使用
TW202143969A (zh) * 2020-03-09 2021-12-01 大陸商和記黃埔醫藥（上海）有限公司 抗ｐｄ－１抗體和多受體酪胺酸激酶抑制劑的藥物組合及其使用方法
TW202202521A (zh) 2020-03-23 2022-01-16 美商必治妥美雅史谷比公司 用於治療癌症之抗ccr8抗體
EP4126824A1 (en) 2020-03-31 2023-02-08 Theravance Biopharma R&D IP, LLC Substituted pyrimidines and methods of use
EP4165041A1 (en) 2020-06-10 2023-04-19 Theravance Biopharma R&D IP, LLC Naphthyridine derivatives useful as alk5 inhibitors
AU2021306613A1 (en) 2020-07-07 2023-02-02 BioNTech SE Therapeutic RNA for HPV-positive cancer
WO2022012639A1 (zh) * 2020-07-16 2022-01-20 和铂医药(上海)有限责任公司 Pd-1抗原结合蛋白及其应用
US11787775B2 (en) 2020-07-24 2023-10-17 Genentech, Inc. Therapeutic compounds and methods of use
WO2022042626A1 (zh) 2020-08-27 2022-03-03 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗pd-1抗体在治疗鼻咽癌中的用途
AU2021331476A1 (en) 2020-08-28 2023-05-04 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for hepatocellular carcinoma
US20230322930A1 (en) * 2020-08-28 2023-10-12 Shanghai Junshi Biosciences Co., Ltd. Use of an anti-pd-1 antibody and a cytotoxic anticancer drug in treatment of non-small cell lung cancer
KR20230060531A (ko) * 2020-08-31 2023-05-04 바이오션, 인코포레이티드 Pd-1에 결합하는 항체 및 이의 용도
US20230303700A1 (en) 2020-08-31 2023-09-28 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and immunotherapy
CN116323658A (zh) * 2020-09-28 2023-06-23 上海君实生物医药科技股份有限公司 靶向PD-1或PD-L1和TGF-β的双功能蛋白及其医药用途
JP2023544410A (ja) 2020-10-05 2023-10-23 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー タンパク質を濃縮するための方法
CN112159476B (zh) * 2020-10-10 2022-08-02 中国药科大学 一种用于多发性骨髓瘤的双特异性抗体及其应用
TW202233671A (zh) 2020-10-20 2022-09-01 美商建南德克公司 Ｐｅｇ結合抗ｍｅｒｔｋ抗體及其使用方法
JP2023548051A (ja) 2020-10-23 2023-11-15 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 肺がんのためのｌａｇ－３アンタゴニスト療法
IL302346A (en) 2020-10-28 2023-06-01 Ikena Oncology Inc Combination of an AHR inhibitor with a PDX inhibitor or doxorubicin
WO2022093981A1 (en) 2020-10-28 2022-05-05 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ptpn22 inhibitors and pd-l1 binding antagonists
MX2023005132A (es) 2020-11-04 2023-05-25 Genentech Inc Dosificacion para el tratamiento con anticuerpos biespecificos anti-cd20/anti-cd3.
WO2022098628A2 (en) 2020-11-04 2022-05-12 Genentech, Inc. Subcutaneous dosing of anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies
EP4240493A2 (en) 2020-11-04 2023-09-13 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies and anti-cd79b antibody drug conjugates
WO2022108931A2 (en) 2020-11-17 2022-05-27 Seagen Inc. Methods of treating cancer with a combination of tucatinib and an anti-pd-1/anti-pd-l1 antibody
MX2023006488A (es) 2020-12-02 2023-06-20 Genentech Inc Procedimientos y composiciones para el tratamiento neoadyuvante y adyuvante del carcinoma urotelial.
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
WO2022135666A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Treatment schedule for cytokine proteins
WO2022135667A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Therapeutic rna for treating cancer
TW202245808A (zh) 2020-12-21 2022-12-01 德商拜恩迪克公司 用於治療癌症之治療性ｒｎａ
EP4267172A1 (en) 2020-12-28 2023-11-01 Bristol-Myers Squibb Company Subcutaneous administration of pd1/pd-l1 antibodies
EP4267105A1 (en) 2020-12-28 2023-11-01 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
TW202304506A (zh) 2021-03-25 2023-02-01 日商安斯泰來製藥公司 涉及抗claudin 18.2抗體的組合治療以治療癌症
IL307262A (en) 2021-03-29 2023-11-01 Juno Therapeutics Inc METHODS FOR DOSAGE AND THERAPY IN COMBINATION OF CHECKPOINT INHIBITOR AND CAR T CELL THERAPY
EP4314068A1 (en) 2021-04-02 2024-02-07 The Regents Of The University Of California Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof
CN113087796B (zh) * 2021-04-02 2022-03-18 河南省肿瘤医院 一种抗pd-l1抗体及其应用
CN115227812A (zh) * 2021-04-22 2022-10-25 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗pd-1抗体联合一线化疗治疗晚期nsclc的用途
EP4330436A1 (en) 2021-04-30 2024-03-06 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods and compositions for cancer
TW202243689A (zh) 2021-04-30 2022-11-16 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 抗ｃｄ２０／抗ｃｄ３雙特異性抗體及抗ｃｄ７８ｂ抗體藥物結合物的組合治療之給藥
CN115364208A (zh) * 2021-05-17 2022-11-22 上海君实生物医药科技股份有限公司 治疗完全切除黏膜黑色素瘤的患者的药物及方法
EP4340878A1 (en) * 2021-05-20 2024-03-27 Shanghai Junshi Biosciences Co., Ltd. Use of anti-pd-1 antibody in combination with chemotherapy in treating esophageal cancer
WO2022251359A1 (en) 2021-05-26 2022-12-01 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Bicyclic inhibitors of alk5 and methods of use
GB202107994D0 (en) 2021-06-04 2021-07-21 Kymab Ltd Treatment of cancer
WO2023279092A2 (en) 2021-07-02 2023-01-05 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating cancer
WO2023285552A1 (en) 2021-07-13 2023-01-19 BioNTech SE Multispecific binding agents against cd40 and cd137 in combination therapy for cancer
TW202320848A (zh) 2021-07-28 2023-06-01 美商建南德克公司 治療癌症之方法及組成物
CN117715936A (zh) 2021-07-28 2024-03-15 豪夫迈·罗氏有限公司 用于治疗癌症的方法和组合物
CA3227991A1 (en) * 2021-07-29 2023-02-02 Shanghai Junshi Biosciences Co., Ltd. Anti-pd-1 antibody pharmaceutical composition and use thereof
CA3226281A1 (en) 2021-07-30 2023-02-02 ONA Therapeutics S.L. Anti-cd36 antibodies and their use to treat cancer
TW202321308A (zh) 2021-09-30 2023-06-01 美商建南德克公司 使用抗ｔｉｇｉｔ抗體、抗ｃｄ３８抗體及ｐｄ—１軸結合拮抗劑治療血液癌症的方法
WO2023051926A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 BioNTech SE Treatment involving non-immunogenic rna for antigen vaccination and pd-1 axis binding antagonists
WO2023057534A1 (en) 2021-10-06 2023-04-13 Genmab A/S Multispecific binding agents against pd-l1 and cd137 in combination
TW202333802A (zh) 2021-10-11 2023-09-01 德商拜恩迪克公司 用於肺癌之治療性rna(二)
CA3224890A1 (en) 2021-10-29 2023-05-04 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for hematological cancer
WO2023080900A1 (en) 2021-11-05 2023-05-11 Genentech, Inc. Methods and compositions for classifying and treating kidney cancer
WO2023083439A1 (en) 2021-11-09 2023-05-19 BioNTech SE Tlr7 agonist and combinations for cancer treatment
TW202332429A (zh) 2021-11-24 2023-08-16 美商建南德克公司 治療性化合物及其使用方法
TW202340212A (zh) 2021-11-24 2023-10-16 美商建南德克公司 治療性化合物及其使用方法
WO2023147371A1 (en) 2022-01-26 2023-08-03 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for hepatocellular carcinoma
WO2023164638A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for colorectal carcinoma
WO2023168404A1 (en) 2022-03-04 2023-09-07 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating a tumor
WO2023170606A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Alentis Therapeutics Ag Use of anti-claudin-1 antibodies to increase t cell availability
WO2023178329A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 Bristol-Myers Squibb Company Methods of isolating polypeptides
WO2023191816A1 (en) 2022-04-01 2023-10-05 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2023196987A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
WO2023196964A1 (en) 2022-04-08 2023-10-12 Bristol-Myers Squibb Company Machine learning identification, classification, and quantification of tertiary lymphoid structures
WO2023219613A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2023218046A1 (en) 2022-05-12 2023-11-16 Genmab A/S Binding agents capable of binding to cd27 in combination therapy
WO2023235847A1 (en) 2022-06-02 2023-12-07 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
WO2023240058A2 (en) 2022-06-07 2023-12-14 Genentech, Inc. Prognostic and therapeutic methods for cancer
WO2024015897A1 (en) 2022-07-13 2024-01-18 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2024020432A1 (en) 2022-07-19 2024-01-25 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
EP4310197A1 (en) 2022-07-21 2024-01-24 Fundación para la Investigación Biomédica del Hospital Universitario Puerta de Hierro Majadahonda Method for identifying lung cancer patients for a combination treatment of immuno- and chemotherapy
WO2024049949A1 (en) 2022-09-01 2024-03-07 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for bladder cancer
WO2024069009A1 (en) 2022-09-30 2024-04-04 Alentis Therapeutics Ag Treatment of drug-resistant hepatocellular carcinoma
WO2024077095A1 (en) 2022-10-05 2024-04-11 Genentech, Inc. Methods and compositions for classifying and treating bladder cancer
WO2024077166A1 (en) 2022-10-05 2024-04-11 Genentech, Inc. Methods and compositions for classifying and treating lung cancer
WO2024091991A1 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for multiple myeloma
WO2024115725A1 (en) 2022-12-01 2024-06-06 BioNTech SE Multispecific antibody against cd40 and cd137 in combination therapy with anti-pd1 ab and chemotherapy
WO2024116140A1 (en) 2022-12-01 2024-06-06 Medimmune Limited Combination therapy for treatment of cancer comprising anti-pd-l1 and anti-cd73 antibodies
WO2024126457A1 (en) 2022-12-14 2024-06-20 Astellas Pharma Europe Bv Combination therapy involving bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3 and immune checkpoint inhibitors

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2129018C1 (ru) * 1993-12-24 1999-04-20 Мерк Патент Гмбх Иммуноконьюгат, способ получения иммуноконьюгата и фармацевтическая композиция
WO2010029435A1 (en) * 2008-09-12 2010-03-18 Isis Innovation Limited Pd-1 specific antibodies and uses thereof
WO2010036959A2 (en) * 2008-09-26 2010-04-01 Dana-Farber Cancer Institute Human anti-pd-1, pd-l1, and pd-l2 antibodies and uses therefor
WO2011110621A1 (en) * 2010-03-11 2011-09-15 Ucb Pharma, S.A. Biological products: humanised agonistic anti-pd-1 antibodies
WO2011110604A1 (en) * 2010-03-11 2011-09-15 Ucb Pharma, S.A. Pd-1 antibody
RU2010135087A (ru) * 2005-05-09 2012-02-27 Оно Фармасьютикал Ко., Лтд. (Jp) Многоклональные антитела человека к белку программируемой смерти 1 (pd) и способы лечения рака с использованием анти-pd-1-антител самостоятельно или в комбинации с другими иммунотерапевтическими средствами
US8168757B2 (en) * 2008-03-12 2012-05-01 Merck Sharp & Dohme Corp. PD-1 binding proteins
EP2535354A1 (en) * 2007-06-18 2012-12-19 MSD Oss B.V. Antibodies to human programmed death receptor PD-1

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1359937A (zh) * 2000-12-20 2002-07-24 上海博德基因开发有限公司 一种新的多肽——人细胞程序性死亡因子Mch11.11和编码这种多肽的多核苷酸
FI2206517T3 (fi) 2002-07-03 2023-10-19 Ono Pharmaceutical Co Immuunopotentioivia koostumuksia käsittäen anti-PD-L1 -vasta-aineita
CN101484806A (zh) * 2006-05-17 2009-07-15 协乐民公司 一种对组织进行自动分析的方法
CA2653661A1 (en) 2006-05-31 2007-12-06 Astellas Pharma Inc. Humanized anti-human osteopontin antibody
WO2009024531A1 (en) 2007-08-17 2009-02-26 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Method for treating and diagnosing hematologic malignancies
KR101050829B1 (ko) * 2008-10-02 2011-07-20 서울대학교산학협력단 항 ｐｄ-1 항체 또는 항 ｐｄ-ｌ1 항체를 포함하는 항암제
CN102298053B (zh) * 2011-05-20 2014-01-29 中山大学肿瘤防治中心 原发性肝细胞肝癌术后复发风险评估的组合抗体试剂盒
CN104250302B (zh) 2013-06-26 2017-11-14 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗pd‑1抗体及其应用

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2129018C1 (ru) * 1993-12-24 1999-04-20 Мерк Патент Гмбх Иммуноконьюгат, способ получения иммуноконьюгата и фармацевтическая композиция
RU2010135087A (ru) * 2005-05-09 2012-02-27 Оно Фармасьютикал Ко., Лтд. (Jp) Многоклональные антитела человека к белку программируемой смерти 1 (pd) и способы лечения рака с использованием анти-pd-1-антител самостоятельно или в комбинации с другими иммунотерапевтическими средствами
EP2535354A1 (en) * 2007-06-18 2012-12-19 MSD Oss B.V. Antibodies to human programmed death receptor PD-1
US8168757B2 (en) * 2008-03-12 2012-05-01 Merck Sharp & Dohme Corp. PD-1 binding proteins
WO2010029435A1 (en) * 2008-09-12 2010-03-18 Isis Innovation Limited Pd-1 specific antibodies and uses thereof
WO2010036959A2 (en) * 2008-09-26 2010-04-01 Dana-Farber Cancer Institute Human anti-pd-1, pd-l1, and pd-l2 antibodies and uses therefor
WO2011110621A1 (en) * 2010-03-11 2011-09-15 Ucb Pharma, S.A. Biological products: humanised agonistic anti-pd-1 antibodies
WO2011110604A1 (en) * 2010-03-11 2011-09-15 Ucb Pharma, S.A. Pd-1 antibody

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2807484C2 (ru) * 2019-02-03 2023-11-15 Цзянсу Хэнжуй Медсин Ко., Лтд. Антитело к pd-1, его антигенсвязывающий фрагмент и его фармацевтическое применение

Also Published As

Publication number Publication date
PL3026062T3 (pl) 2021-01-11
US20210009688A1 (en) 2021-01-14
EP3026062A4 (en) 2017-08-16
BR112015031883A2 (pt) 2018-02-14
SI3026062T1 (sl) 2020-12-31
HRP20201600T1 (hr) 2021-03-05
DK3026062T3 (da) 2020-10-12
CN104250302A (zh) 2014-12-31
RU2016102176A (ru) 2017-07-31
ES2822927T3 (es) 2021-05-05
US10815302B2 (en) 2020-10-27
JP6681327B2 (ja) 2020-04-15
JP2016523265A (ja) 2016-08-08
US20190023782A1 (en) 2019-01-24
US20160272708A1 (en) 2016-09-22
US10066013B2 (en) 2018-09-04
EP3845562A1 (en) 2021-07-07
MY176822A (en) 2020-08-24
PT3026062T (pt) 2020-10-13
EP3026062B1 (en) 2020-08-05
CN104250302B (zh) 2017-11-14
PH12015502819A1 (en) 2016-03-21
WO2014206107A1 (zh) 2014-12-31
HUE052487T2 (hu) 2021-05-28
EP3026062A1 (en) 2016-06-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2663795C2 (ru) Антитело к pd-1 и его применение
KR102503084B1 (ko) 항-ctla4 및 항-pd-1 이작용성 항체, 이의 약제학적 조성물 및 이의 용도
US20190276533A1 (en) Anti-tim-3 antibodies and use thereof
US20210388105A1 (en) Novel anti-cd39 antibodies
CN106939050B (zh) 抗pd1和cd19双特异性抗体及其应用
ES2854708T3 (es) Anticuerpos dirigidos contra la cadena alfa del receptor de IL7: su uso para la preparación de fármacos candidatos
CN108456251A (zh) 抗pd-l1抗体及其应用
RU2756012C2 (ru) Антитело против PCSK9 и его применение
CN111511760A (zh) 对btn2具有特异性的抗体及其用途
CA3120793A1 (en) Anti-cd40 antibody, antigen binding fragment and pharmaceutical use thereof
CN114106182B (zh) 抗tigit的抗体及其用途
JP2024514246A (ja) Ｃｌｄｎ１８．２抗原結合タンパク質およびその使用
CN108948201A (zh) 抗人csf-1r单克隆抗体及应用
CA3148735A1 (en) Anti-hk2 chimeric antigen receptor (car)
CA3135044A1 (en) Antigen-binding agents that specifically bind epidermal growth factor receptor variant iii
CN110194798A (zh) 抗pd-l1单克隆抗体、片段及其医药用途
CN109053887A (zh) 一种抗人csf-1r单克隆抗体及用途
CN109053888B (zh) 一种抗人csf-1r单克隆抗体及其用途
CN114685657A (zh) 一种功能增强型抗体阻断剂的开发及其应用
EP2746292A1 (en) Anti-IL21 antibodies for use in the treatment of nephropathies
CN116854820B (zh) Pd-1非阻断性清除抗体及其用途
CN115785269B (zh) 抗pd-l1的抗体及其应用
US20240067742A1 (en) Enhanced anti-hvem antibodies and use thereof
WO2023173393A1 (zh) 结合b7-h3的抗体及其用途
WO2023016554A1 (zh) 靶向cd22的抗原结合蛋白及其用途