PT2436696T - Anticorpo anti-beta-amiloide e usos do mesmo - Google Patents

Anticorpo anti-beta-amiloide e usos do mesmo Download PDF

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Hock Prof Christoph
Esslinger Dr Christoph
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Description

. - \ > t o aht:í:coepo anti~beta-·amildide e usgs do msm damp® da Invenção i 1 pgfgitg; :0®ιΒΤΒ'-&0: S BOVUS: mbuÉSIílãB ΐ|ρ _ .itr. ’“r-. ^ r "ns, pr-tl-u t Ί rat, ' ,^ιγ \ ’n"amu t:l
v-νΓ l-fO-i vf. 3u^ ^ ~ j it a- U'-tel "S rs O^.rU " i- s 1 a ... v _ a 1 < m i -, r:d" _u I d^·1 u1· I» c» r s - 3* s ' j. -" - ; o ^ ^.r .. ’ ·' jh 1’ od c- < ,' ®#ο: prqgpldhfc® a;©: :Ç©rp:d d© um plqdelitl i;uas: udrito. vadCdicfee. ©gd© ;£©r© dp: \ ©éu. ©οηΡοκΟΒ fd©d.:©iqgd:q© normal·.*
Adieionalmente, a presente invenção refere--se a composições rarmaseetioAS dPnfPndo #;étas: mioubsa. ia© d® liga©.#©,' ct5d 4\ i - Cvlna l·'·' u d α n ' - ©
Alzheimer, smiloidoses e a patologia beta-anriioi.de,
Adir"EfobT~ - u- iM^rtido [0002] ^ θι-s^v. n; **..-<*1.- „ - n rr'· 3 r< -di :α° i p j - da eficiér.cía e da tusão se lerida de ceiuias B eat unrJadaa dom.. ârtdgini©· ©pis. usa Iftfe meidlar ©η mibldma.: murin© ©nguibã. da seleção de híbridos estáveis produtores de anticorpos tai ©omo: originaimnntn basniAt© /pp© ©ihié© é; 'Milsnsinr ίρΑΜ®. 255 (1975}, 495-497. No entanto, a utilidade terapêutica de anticorpos muriros em humanos è afetada peia resposta do cnriarnc h mn1 ] iro' ont pi ri.ja ; i --,,.- =re ,-.τ.. I ..rir (kAMA) 1 , devido a sua origem não humana..........libanês........di.................... engenharia genética tornaram-se possíveis métodos de criação ;dé dntbdPrpbi::. m:dpddl.db:aiéí. hugadps: Pu séméõfeantd-s. a: domãndso ................Ho· é:n téBtp: >: ηη' '©ίηβρ®'' ©iSp©©!:. véis: AM&amp; &amp;&amp;·· mèifedhi©; sdirerfi dd.m.................. d desvantagem de não serem adequados à produção de anticorpos com as earaoterí stricas daqueles que são produzidos no decurso de URU ctrç.· ara 'nunifcr~a iisu.ov) 'a humana, Alem jj.ot o, estes anticorpos podem não ser suficientemeuce específicos, dodiâd &amp; emédindiã de reatividade crrc^dí cu.r ·η tn-s or, ~ο;: 'a ' , ^ ' t ' v' :, do edit toncionaraente fisiológico normal, Nos casos doss doenças d~ ”, , ' " *“ t ^ r - ' 1 :.pot OXempiO:;, d:dOlN:iii|iiri';''i:d' gbi' id ' l V ~j , . " V Í ' , { ' ‘Π v ' , ' , " 1 ., f M-t ' va l -> wl ,_„s -v m ' 1; ;ut r ' -o IKO is a' ' (« ,c.oiaI v’ ; , s , ' " ! ~1 ' :(MP0 1^· Pb .O ##: (alpha syaucleia), são responsáveis por «feitos secundários rBiSsasHãss1 doai aó fbbgioi .hbfdàis. dae.: e:s.:brdbu.fá:S: .fliidiodicio. iloO,,, Μ, «sta; magbid:®, qedi-a dâuèúaffiesã®::· .iddmdids: uns .Οοόόρ» aodbiffiabs rsdensqsoa - úm oáboo ddaeuidpsaHt:®: eiXduXfce::l se :déodblse· concessus 1. dó pxpesXigçXss, 'ém dMueXpapie: ροίν® dMXioásbO.· dobrutdrad proteicas que, na sua forma alternativa, também ocorrem ii:gis'lp:qf:íÇasieiite:', ; 1¾¾¾ iseddndlddo'a si# d#Xa#ipu#db# pb#.· i estrytnra alvo sãc, por exemplo, aos reações an«f i ldtics.°, dai como .seriara de esperar enquanto efeitos secundários :iq;o O ° e < , v.,, s , ^' ' i =o > > 'j ' O’ s^m' a tip: proteínas exógenas. De acordo con descobertas recentes, este pode também ser o caso tora os designados anticorpos human i nados, originalmente dsdidádo# btó sriásiSdós. Pio ..................duma .noo·:, spXdái dpst ,® ##: #ο#| anios,,. do.# vopfr p* lado,, s.. í.............. imanisaçSe StXvS ; dom iddrgsdipp gadoXegXaas .deXovasdes podddl # .risps ços;&amp;l:deXd#eX. ris os:, g&amp;sXestbs preduMrda .................ah te ido® p.® s ® 'dsssbqoX virem:' r iÉsposiss' da'' #®X s Xas·'' f:" qa #''' tsbbid.................. _ ’η 1 «i it 'v<- , oi nr o-i-u*- s :íj:ai ns „ ' 1 a,., çoam qoddequsdoist. 'díta. ps#posts ###dX®dnp: pqsiqqss· d. rrcifrdard, E-~ ; ont ram-ae eescr í Lms i > r-l ao· da arte addádpdppd qa# JdqdnddPsiK'' u:n epiisp:· f-d a-coo l,, í presente em cérebros doentes mas não em secções de controlos saiu t j o c q i n,,o 'S ' a·-»" ^ pruama pn iitnn5 ^aalmat ,-sgl is eb rd. M«tn ot _-d ce^ oí Agree, veil*:£% .&amp;&amp;* dp Maio dddd.,. páginas ódd-iOi,!.,. IΟ Ο Ο 3 J A s s ί m. e x i s t. e a ie c a s 3 i d a d e d a f o r: e c e r a g e r. r e s q u o ^ ,. ' > ^ f ^ ‘ 1 v ' ι Í U ' 3cjam tolerados pelo corpo 01100.0.0,: SUMÁRIO m INVENÇÃO- [0004] !í f vt -'"a i _ ^ j~> t.i ] ç oo't ·> <j 01 u ti c £0:1 icr.1 rd-, ippiaq Jn'rrz- s dp rttuittcà^ práticas c a r a t e r i z a d a s n a s r e i v i n d i c a ς õ e s, tMmj 1:· presen-te l:pFgS||:|d·' fan qq#· ma depipofesmta. vqxpqqBqidpp!::©: :tlp que ei anticorpos também ^ ' r ί ®pr c_, v , , 1 Cintra. vmrraetim patorisiologicamente relevantes de proteínas endógenas, particularmente contra .. quo slo tomados devido d uno transcrição, ' , 1 1 t d t a “ 0^ - 1 ' 11 ' v μ, ϊ ,s - m u s - , process anento proteolítico, pq. gi|l:§da.d::i:P patologicamente ..................dote -r adiei:,...........Set ie a h:t.i.;oee pee: dap;. ^ρ:Ρρρρ::ΡΡΡ:00ρ eoette 'ppidPsPS:®# PiMdienae;. ρο:®,· 'devfdi a- qua: ism .eqPxPtaria'. mae .drieri 'dp: diiiiplmg'ia.. normal..,.: s-è: rprmsat patò::Iieqol.:ogiidametite:' relevantes pir i aeió áo desenvolvimento .de. áferids· p3;fcó:l.§:dfe©:S» ddrt raddee de· ίοίηχιΐηρίη. imu:ppl.'ig-i.q.a.,:: ψ-s andropepos 'aeeoeradoe on® a χορρορΡη rmaneldgre® pdrirepppndende a neo^epéPipp® pm. dii:®. vaplanepi· ρρΡρΙρρρορρ n:i_ rvionra Λ ' malote' 0 pn -.ν,-ο rume, n inaum -, ivm privit e. f j^dwiir, vt funcionais,. η' eiitcu), eft ^ jiii.i te , Λ'ι 1 = ' ) -- ice qait η η,·3;. Tví c.mtre porque a formação de anticorpos com .potencial para reações ...............cruzadas é especiticamente suprimida pelos mecanismos de tolerância conhecidos, enquanto que o desenvolvimento de uma resposta' όΡΡήιοΙορόρ®.. ..a am. ds.o.:-':ep:irópd patoiliqlos poda fsinr t 1 - 1 11(-11 -'ιοκό td m. , OCOo] if V ( i . Ί 1 L N , ^ ".5. ' ' ; ' j „u i - k s vi ^ - ' t ^ >' , ' -. ' <s t n ’ ~ 1 " ' " -,. a } ^ 1 ' ' ' ’ ' .i''- region (VH) } coai x sequência de ami noácidos apresentada na d ,/ 1 L ú ,, N , > ' i , i j nar «ν- v ~ - - - -t ' 71 „ , . t / “> ;<r, , , d 1 > I T. - \ - „v α *1 O, _ d o. rda · · "a. i' í '1 Ud; ,rt,t·: nor*., < ia. S um χρχρρορρρ xenogénico, ou um anticorpo quimérico· h rmanomaurqar.no, send o o último par ciou ia.emente útil para métodos de diagnóstico e éisfcMite am amimais,: Cpppmiigoéò t.giapsdiig;a.s ungi ainda. m aniiosmpcy na fragmentos ativos deste, ou agonistas e moléculas cognatas, r: ~ Iterua" i vgr e·" te, ar.taoouistas do mesmo, - méi'Xdn , -UÍll.InaçâO:: d© isié: c:ompO©i:fSpS ; l rlH'-not l 'i U1 trafamanis. dm orna d 'o.u i t i ’ nn. m composrções sâo - ”l< t u , _ ,x 'a, , c' "> n, m \a m r -,η i - ' it - cg " c ^ s ·_ mrime rrs n t' t ;>ac mo m necessite deste i r>mtc 'd, [0007] 0 fragmento de ligação a an ti génio do anticorpo pode Pé# um. fé:égdiSH:t'd" de madexa- simplma Ρ?ρ lip rragaéiio:· Flap "d :i: lift, iixamenio; Fiãédg n um .fraigmenia FiaMi "i,. on qna.l,qu©r .çat.ro.· fragmento de ligação a antigénio. Nuraa forma específica de rnaiiuagiç priilgá da present# Sivéigi#,,; i.pfrag >a sniigprpng. em. iiaqmdntn déstig .§ &amp;&amp;. apfxc'orpp: nsnignp de χηρΧ,ίρ©; Ιρΐ|, {Í0SÍI .¾. -péepentpi. .iúvengip tpmdém am mingm a pplx.nu;çi.ei:;tldp® codificantes para pelo menos uma região variável de uma m ei- i- r nog Kd 1 i is - ítrc íft da m \ L cuj ui região variável compreende dg. ,rdgxdd.x ded.id&amp;ixau:tdé: de ................. ι........( tnpmx/xíiirv/ c<Vts< ίη/η )j .......iggigum................. fÚÍMSld tal ÇdMd dipfedodiftadad na- Fafemia. dl [0009] dense gjent eme nr Λ, a ρχη^.Χ. ' luorct ndn a' ' -ng :V®;t.©re:S.,, iouftfeenda i ma reJçrudee p.O:.lduiU:cl:e&amp;tfido:s,,: é: aéi:u:l:a:s daspedetiraé.: t::raaadd.rmada::ò: :çém: mesmo>$, "ta.l carto m mm utilização para a produção de ura anticorpo, e moléculas do ligação equi^alentes, especificas para neo-epitopos çpe ' i i i çç;ç v ' \ a, , ' - m " t- - t 3 - l, i , [DOldi < -tç lo- o, x i "e i » j 1- 3 ΐ_ο . < >e 1 <y ç-t° -oac c a ligação do antigénio ao referido - ^ . c ', . c.. i ,. · . ·- - i ^ - i t* Λ ~ para imo noterapia e diagnõszi co, respetivamente, t contudo preiieçsd·©: 1, a sir'll ração ievs: compus 1 coes anterior os na prepadafl'o;· fie xua (0011 ] a . x , ι o ' l ] e * parra cal η , . ^ oo' c fornecer composições farmacêuticas para utilização nc tratamento, prevenção ou r c 'ca n ο > aunçic.o 1 doenças associadas com a acumuiac&amp;e e deposição dc· pápiido da beta-aruiloide num sujeito, òol boia® liõ ο<λ ' . ϊ ίο 1 z he i tie r , s .1 n dr ome de Do wr*, e n f r a que c imen t o c o gn 11 i st o suove, augiopor. ia a.aiioide cerebral, demência vascular e ò.@rrfê:no,io, bb mdiiói^ddlãJiPb:.:,. b brabbobnbp: eômbxAebdb ã administração de uma concentracão eficaz de um anticorpo, ou .................:® b xbâbd.... dd:... ..ηροΐοιο,ρρ®:., a® ©dg «ο®®*. ©b: q mm &amp; ande .çppp o η®.................. liga à forma patológica da proteína, ou depósito de proteína, obra. vffi® .bilinibad©. áaís:r bb one .pax® # fox®. fdsdnldgioa ............. "urn oa ç\ ''“etna, BRLV'E DESCB1CÃ0 DOS DSSEMHC3 xa:oia]
Fig, l; .ánf..içòxbò' bobbi®. .Sbba®®ilbidig:.·. JN .O lJ 1 tlril U, B : M 3 xçaçílo:. .cbbtxbip ebb /uin abtibgrp© contra beta-amiloidedpia®:,........ Pacientes k ,.1 ί ν' o o ‘"r. - i an v ns ic Te η ί1:- r " '‘"t oro v '-_ni a lK-; us ..,e vVN-;tJ tit /tiuc u
1 s I s > ‘ ' t . ' <· t v - 5 a- U V- I I estáveis oIirn.camenL.e em secpaes cerebrais obtidas a partir $ψ· pãO': içbhpb' ppím .ÉIMp. ti®: AaphOigigT· .á it " 1 5 v i ns ~ p p ^ i , -v a1 - - - -* a ,*. Je , ' á. v u ' ^ i t t_' u p , ' s -a > c N tt A. be; ta c-ami load® feuM®.*
Fig 2; .!',V it \p. ;.;· :; ···· n ---=·':'-a · -:;· ^ t ?ur ttiát; áá. A: Anticorpos huianos. Bt Marca;&amp;o controlo com uia anticorpo edohèobbb obsh'tA o: tab: hujnaus·. IpjAibop iunsaboç t&amp;àtiáâwéàià: bsshiim: .anti carpo®: aonbra amaranfeapob n:áO:ro:IÍ;Í5:rai:á:rpá'.: páaobpaa: obíò pbiPçat pçs ao ppçipubeb ,-,η i e i - -« c- -, v- aro] ,ut; C o to a r η ϊ t m.it^ com doença de Alzheimer patologicamente confirmada revela anticorpos que se ligam aos emaranhados nenroftbrilares, " t) á p r i 1 a n > í -* v ^ t s i i iin- > - , 'Mp&amp;r- 3; An ti corpo contra neurites distróiicas„ Ai Anticorpos humanos, B; Marcação controlo cora um anticorpo conhecido contra a l«j humana, Itierms humanos saudáveis k CtP <rU “ * ' 1 £U : 1 *aç - , , ik eu iffihpdMAto^ ; obit ánAreorpbs: da oajArta® naupivai® a, secções cerebrais obtidas a partir de pacientes com doença S;d Airbed®!# jaatplogd o^emhe aonbiitmapa, ..revdla afiPpçerpo®. ' ç t hmn tis j. li-t ·“] ?r .........................................FÍ,§·,;: 4 : &amp;hbrcàrpe cõPPrçt ''-’Μ-οιι hide. - trgnua .............. apreseAta a lapa#!© espoei f ima #ρ dbPiAcrpb pumou# -l- i>' -u >- Kk -lu1 , h, _s la ^ p i ui oak j ^ Λ e c, r a doença die Alzheimer invulgarrnente estável clinioaraente, a placas cerebrais de beta-amiloide. Secções cerebrais obtidas do dm ppdropbo-ppmto. dçç:nçá; be piaiipibe# /bpubbpst#^ Ά 'mra 1-i ma i _ - m c >ri * iz ~ rp η. it, i tum, ΑΑΙΧΙοαΡ# had: AbhceAthpppob: l#:do#add®.:.. A, llphçlb bo -ti - k -Í J CX ^ #---0/ at,,- k Ce " , ph-. >U tj p.M sugere uma elevada afinidade de ligação.
Erg. S: a '' ' . > ' t ' v ' < - NT' , 1 ' o : · hr'. ' h l 1 _ . , _ > > . · > - l ''-<t - ' n-' , "> ; " _ m s. ' u ' . * * ’ * ^ < 1 i j i - li _ „ i ^ ^ l j , '1_ - ' - =0^- 0(1 I l -i O ~ U ^ Ο . > I V ' tqfefefeafelife. febfeifeabon dfe Sfeuffe: ÔS qòáifedsn :;1 # :l,|.r ό até: oefeca eta 1 pill*
Fig. 1¾ f3:; anticorpo humano NT-101 „11 reconhece o epitope confers acj.ons 1 Afera quo aao so snooiiU i presence na fe>e e Γΐοοι"^'· ό. ά Μ" ea dc bi-lui,!! t pdvtat 5- cote-amiloide em secções cerebrais code sofrer compecicao p )c parte de fibrilas Abetal-ip, mu > na: ç f ’ cm r a .1=1 anuo.· j.o mb e t a 1 - 4 2 1 i fie a r e s si n t é t i c o s .
Fag. 7; v1 auU-vip. i.uia λ m u a mart . hi-»1!.!! t.n . s j a. i i .An .a . , Na' c > ;a Λ 2j"-Sf rs e ’ Γνο^-^'·''' f ' 3'a t ^c· « -o^t» )"" f ~ i_ ' art - ., c: !vta PAGE nao-desnaturante, Depois do blot, as proteínas for am sondadas com o anticorpo humano reccmbinante contra a beta-aMfefedbe: i®. antidofepon dp Afenferfelo·· Ofenfera oeqiiSacifes id terminais lineares Abe ta (6E10) . Nilo foi. detetada qualquer .............. Imí-,. m d.d.ll a.....(Afefefea:......monomâmiço·...:......feafeá.....fefesqtvafeiq................ soqefefe que m qnb, isfirp: ròcbnfeefeo íjM Oprtopq fefsefcs enufenemani .ousl . ..........................................Fig : Si: ;S afefei corps fesmaino :!f 3fetife::,ill (liif ......s:................ fl ferulas .amfelqifeqfe qrferi:i:qfeaijfe preparadas q particr de: tji } ~ i 1 m ^ j _'cs Abu . 1 . a . j n k i f ( i n'-", i s’u^'2' í c.u ru '-n nodi m- ~m a J nc-'5 ^ FTTtr tl densidades fes rfedfestii imbfefeo. ifepfeife foram incubadas fedia aiftifesppbs fenmqfebd· rfebdmbtnúdfefeq: fedfeffea. bsfeâ:-dmitl:ofeb<e cerebral nas concentrações indicadas. A atividade de líqaçãc iu lu.ia.K- v";u td rdv-rnf >> ^'μΟ'ο-ι fibrilas amiloide.s artificiais (quadrados nào preenchidos) e maia ..ebr que Ifefe fee fees: mafeor qnusdsfe sompscSdo. ήοοη Abets monoafericá. iquadrsfeds fe'Cssfecfeiidosife,.. Ú sotfesoeps1 vde e-onferudO' -ν' ! V 1 t V ' ^ \ “ ν V 1 ν Ν 1 I ' <0-0 "-S-VV- pruenv,rm bus ι , :¾¾ outers que e .qAtidbApo -.:11.
'5- ' r ( i i. ' ^ - -J, ' r H pAisbbf®; A®. lllmlâíS: smiloides: artificials. preparadas a·, p â r 11 r d e p é p c i d o s s i n t é t í c o s Ab e t a , ®á,f , 9: Ausência de reatividade cruzada do anticorpo rçccabíiAAc:!®: IrunisAo #^I8| 41- contem API cel ciar dm --=0,-1 ia <. t = a-- < r <1*-_v= .. < =' < ή v π (j-lqn --t, V v- _„b^C_aa c . ^ e' v--lLCc vt s rti ^- isn "''tídiv-^ - ·>γ v. u^-Atfu c ’-'-''o o t lin f tj, n vs_ bo i a APP de superfície celular, a ligação de 151-101.11 a APP cie .Ovili.c, 3 v'Vv]ei , p:-' ^ = ·-· super íi: ap _ Ί ,..·.;> -a aac ^ j tr- F T -x j 3. ^ ttll Ctl t i c?v 1 csdASila: sic: iBstidbApQ; .1ϊ:·-·ί:©:;1.11.1 oeatra1 ΆΡΑ oslolat f 3=ί. J ) -a - - Λ .a._ v. <"> --=- ' -t '•’w íviA v _v. . i. 1 1 "· . " ·.. . - v v- ': -·' -'·:; ' ... · i. .. . 1. ... .. fflqld:di.Í.af':., A#· f.aforas .11®'. :s: l-QS bsmbsAiram A .pud®Adi® .¾. .i.rgá.q#d iíà .A:afdA:©.rpò: #1--1:01.-1:¾. &amp;% o®. ahÍIasapa· iso re 1 acionado de controlo» a Abetal-42 rrcnoxnérica marcada com eapnaAbo- Mre a. fioa_ r Αΐη i-pie.-out - a:· 'Lifaftp γα nrilo dc antrecrcj , u- t-cniuv un eprtipf ............. linear presente- no C-terminai cie Abe ta, .......................................................................................
Fig. 11: Ensaio de ELISA compor.itivo demonstrando que 1 ligação do anticorpo 6E10, um anticorpo direcionado contra 1M opj+ect r no N-terminal.gif .-í et - , p ub- sàr 'οΟΑρ-ΐΒίΑΑΒΑΑΒ: S.dqudã:bã;. Idos. ο:. ροΒ-ΐΑοροορ:®©:: ©om ^" w V.S <χ - ►' ·- ” ~Ό -r V.® { =->τ Ο - Ar ^ 3 1 1* 1 = r„ s κ , AAfpAbtA quÁ ã Α\Ρθ'-ΐΑ03ά®Α'0®:Ρ. ©íQtl '0:0αΡ:θα1..Ε®:1Ρ:β:ο Btf. BASBS-Ia lie d. 3 sc-- dc Pfei>tld^s ad-ts AC ~ ' -s' 1 >-0 3 a 1 B Ligarl©:. ds: .gaAiSbrp:©: K-XOX.,. 1:1-.,.
Fig:, :1:5o A ; anticorpo recombinant o humano Hi-101.11 CAiStlA: a: beta--ami loide cerebral ..0...1 vr-es? a a barreira hematoenceíái ica nun modelo da mur ganho transgénico cia a-'.:· ye de AI abe: ser, e liga-se a placas oeretraia oe beta-d:ífí:i l.C:Í'âé' Í.S: RÈRMy \
Fig . X6A-B; 0 anticorpo recombinante humano NI-.ÍUl. 11 laellwta a i'.inpvxtar.aiii' : anormal o u i' ' ' n i { ti i, o ] í v v u * J ua ng, Unta Lu a - r "! λ íto-^-v - rd ui- ín o rratrvc ;oaia;o'tc't f • jure n ou. p um ' rl' : ~ u κ ^ <u ^ oi <£ nl i .teses. 0 teste eomporcatie-vcal do labirinto em Y foi realizado antes e aepois cia conclusão do tratamento.
Fa.g 1?; 1 ^u ^ fu-» cu í >t. j u-u u)--f¥ _a d decoração de placas aro.ilo.idea por Ml-lOl.li admiticrrodo t.i.a. u-unt . 1 irh ^ M-101,11 .oií.ti-. ‘"‘-o' ,u a barreira hemac ce nce £ ál i ca e ligar-se a depósitos de beta-* aalldide: » murganhos tratados com PI-IGl.lI (painsl - -c a_ , nn , í ç | *t ^ i no u · r . ^ -1 <- - ^ ín > tratados cora o anticorpo humano de controlo (painel direito) < õ anticorpo humano rncomb' rac te hl-101.11 rebut a corça oo placas cerebrais de beta-amilorde após tratamento srsrenicc d *r ^ O i'" ' : '-Sen, ........................................18: Λ insuni mação passiva cora o t: tmrp d- ..............
Lti 1 . 1 ""0:0 ' cot' a ''-ti-^vil __U eu ft iç' ·. ' d;^f =
'01 , Ci v. u tr: eu pit at ^iblibabiiil. W (í+zvjl 1 5' t v ;c aUm 1: 0) id-'og·’* Red- < rovela® c i’ <> -ί^ιι'ι ^u- i-_- cu gao d v.< ',5.djn- iu~ -v s -r -i " =it - > v - ft nitx 3 .u αΛ v 1 lU >. -
Whitney U; p-0.01 para o córteap p=0.009 para o hipocampo car^t ¥ ·.. 1 t ^ " u?t paru ^ \:Lu e u _ a £ í· ί lo'ru.j t para a anillird odm dirsadlto: clp GbPgot , Barra c¥ ¢--c : a t ~: iG<' pro. fG:-Si): A .armirbe: bom. latbng S nc'-j. o uno ud - w •.-jçn r: :t :u ru c·; c ;a beta-ami loicie ;Γι, urnu v d ? ol ;.·.. ..k, be: beta -am i 1 o i de (D) e tamanho médio cias placas íEj en murganhos arcAbeta tratados cora ;© phtibpppp5 ET-:X;Íi.,;l::l coraparat i vameoto aos animate tratados pbim b bb:ut.p plu... -1 ' Ί'·' I > > 2 - V =) t ~ - ,( CO> VC Ç ' 1 ! ( -¾ ' " ' Μ p _ U *. ¢.-==-0,04? para ο número d* placas ao cortei; p===C.04? paca o numero cie placas ao hipocampo; pm-O.OOú para o tamanho das ípradaS aid cdr 1:0*1 r ; . 1 > ( a i " v't , * f a:.Ípp:Campd'.,:
Fig.. l#r : lida dérfa. 1 \,„-r.:d>,j- Oudcidi «-acompanhada por ora decréscimo de astrocltose e rni croqi 1 ose * h) A quantificação de marcação antI--GFAP revelou uma redução s'i ' ri a“t"u -- , crer ^ u - 5^*·' i. íí dr^? a, :,o\-,x ;e murganhos arcAbeca traçados com p ãdprdodpp: dí~lbi,:l:1. conp-ra+ 1 oa-r 1 e · o- '.: .-.Uvo.r :' c,.- ·.· : a1 ,,r -= J =, B> 1 p mi odi, d -u du n- r> ,-s =u Tm-i m, ,iu t^nJic , - para ara número reduoido d-e microglia ativada ao corte;-’ e n* ,, o" ,k v, .όρη: j3 idt-i ,7 c Ό ' ciCLirv' ’'U-tl, 1 ’ . a: ,, e ' „ : 1 ,. ICC ,;i. $&amp;$.«: S-Ôi none , ^ ' i ” = , “ a ^ i * ’e' >t ' -ij ' c'c ' , ,,, co Sc*: mu* a ic-.tatCls , mu o a"Ccoc,
ii»#j ·ό®:ΡΡΡ0.ΐ:αα;Ρό:Ρ:; :111.-1:0:1.,:.11:, Kiplh% Paidftbppa. -di JM , -1-i soe *o i j ou» í. a i ,.<!-" tu* -- a- v ...................spspipdvada.................... : roçam ......... urauodo'o .....................pppapditífdpÇif................... .idPe'apdro^feotisaljSeptd'i. odd :3: Sglfei: de. sdfldpbbb ddtãbdò % iPésidad 0¾. çmdgeiíL :lpprp:é:p:ílpa:ti:vâ: dd: pòm ....................PppepPal -a ao αρΊκα aruAhe* * '« uv ro- .v , <*, dOuI Ifboiiddb dp: dldl fldedi dl dddidbap .di-lpi {«otpeddai,: d una ]?<; p d.t i Core demonstra αρ#. frequência eípn'1 icat_/am^uc-' -de·** de t,)uri-d'.u uji* e' itruvarl \-, o. ' -oe- ' ^ η Ρ1-·_λ --γϊγ -_-T i a, >-u <, t ca π*„ 'nd'.cn fs'>upr =; { / .c-çc 1 da 1,-0--a u u ' o-, , UfCj; >ru - cora MT-101, li não resultou era aumento da frequência de
Vj.' -1 ¢--- _ £ct t ^ -1 Λ p
Il; O ani _c r\ > ,αιη, r-t t* * τη _ )\, H n =, - 3 ,‘Uu1 1, Jt i a < , í , 1 t , fr - v , r n e 1 , > : _ . ' elslPé ád aPPidcppp ftUMâpP re: aibin * nl ^ tr-10_.l„ 'da. ιΧ t > ©' " '5 '-Ν' ' X -v ..1 „ ' ' X-.', ι cie Tígí; $'' íaa S ligada a Abetn agregada por análise de x rsisrassetiaía. „.
Fb «Cd- ' , 1 dose de, anticorpo de fibrilas DITC-Abetai-a 2 por células macrogliais BV-2 foi. medida após inibição do òidóeóx b® bexgWr©:© Jbaxebefex,' &amp; Mmí.®mpà 11--100,,::1,1 bebepbadsda.· xma iX:gp:pit.b:s-P pot ©yd®, m depembenfee ><ia deb®, :b©· bibrdbbb: :Ab©t.a·' m s d í a da p e 1 o r e c e t o r F c g a ma.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVEíJÇ&amp;G I, Xsiiniípèaa C0013J Os termos "©iicorpo" t> ' i » j d 1 ' - => a t \ uri. I irados indisLintarr.onte. Tm anticorno, ©o btarxolobcl tea, - -i 'c Λ _r x- ©ia ©' . i ^ ' t í© *- ; X'" , ,m s"'X!©!X~ gn- -, n i p„ , ' > ^ s i ^ _ t- Oí .peaptí©·, ©: ppnt:#;© psld xense ο» χο;®χρόόΡ yam:#:®©©:© b# uma bsdebd. xebadfo b "de: mm. ©abed© lyre·.· ir© .e::S.tettter:s®: ri _as ía,' imóAPflobxlixaa em sistemas ybrbbbxgdos emp - - c ^ t l ~ > l>x~r 1- e„, ©,Ç _C< " ai:, , :,Án:tiB:ódif:s-::Í: S, Αχόρχρόρχρ Xabayi., ÍCdid .Αρρχχρ' Eaibo© Laboratory Press, 2Γ:·: ed, 1986},. ................................................................................................................... {00143 Tal como será discutido em maior detalhe em baixo, o ...................bedmo.....v· dMbbPd: ipftu Ί i db;w:'· ^dídmprBdbdp:: xa:txg;|.: xlxibe©.....amplMMdb;.................. p:©::ldyápt,i.d:©:â: ©11© pods®, S©® d:i,©t:.i:bgu,i:ib:â:' :bi:p:d.UÍ:Kil.papè:n.Íb:,, Clã l > ^r x = -^r=!< ~ a x x ιοί- ^ p ^ d . pysabbi: dab; b}l:db::S:i,:di,pa.dbb: dom®, §©isgy i%. bldág: ;:dyl:t©: yu e;pb::£.idb':, ϊψρ p:,. &amp;,f Sr ti.,:. Po® ^1.¾¾^. snbob&amp;s.ssb: batdb yi©®: ta ^ e y κ L „ , b - x cr © Xj - x í i r i μ -p;l©e;e®" :db: mxtdxarpp. .eegpgxb® Τ§®., lift, Τρό© b§S,, ,p$ TfE:,. respetivamente. As subclasses de imunaglobulínas (isotipos}, 1^111,,· ':ί|Ι1:ΐ; IgM, i|M, igal,. ctc,; e > i o o íU. t n® ~ se bem caraterizadas e siio conhecidas por conferir esp e ciai ice çbo u ' -t . , ' = s -, 11 _ i - o „ , '°, - ο ϊ , . ,s f tr ' , - '> < - i i · " η n * 1 ^ ·, < cr. , i \ s > v r i - ~ . , ' v jí τi * e< encontram-se dentro do âmbito do presente invenoào , Embora ____ - - _a j i - υ ι,η ) o,,. - dentro do âmbito da presente invenção, a discussão seguinte c-r p d')- tv ,...-- n „= „ i, < „ j pt . I 1 N- da classe IqG. d»' Mm o a ..1 „ :- to , a ^ ^e. d. ι _r , no j lobu .iu: p<.,d''ctC c rrapj r and.. ni ο 1„οορι- r a·,». > 'V o) i,,„ x, _ J- χ ,χ. Ό f r p i r-lOoio l--i...,,.orOOf -f0n ...................laibpbsb.....d" dbf .1''' pdl Mipb adds'' lis'': babsil''' pesada''' Midi taba''' d«................... p·.. o - vigour i d ip - sc :..·· r,.. n - v::o ff, Ot C -7 1 , 0 '0 taitc-e, Λ: ο Ό t c iV.n ,ι n e r , np - = i - _ o-tp _ i < ί ciissu] feto numa configuração em "Y'Y era que as cadeias leves e i ' e -ai s ϊ i. * =i - - 1 ^OiV ^ O , a ,, ΐ t - - l , i eM %-" a - j-η, Ό -¾ ' t a.x- -> ό pi i' - e , C;td:iiS:l PS Sabsias; Ipm- alb elissiBibadaS: pdqpdntd: Pipps i lambda (x, λ). Cada classe de cadeia pesada pode ligar-se a uma caceia love kappa on lambda, Gera Imante, as cadeias leves e pesadas encontrair.-se ccvalentemente ligadas, s as porções lo " „ to d on saas ι -1 a os J r , c mc-e-d „ ]a J o j) <o ligações eovalentes dissulfeto ou ligações n«o covalentes quando as: i:Mpd|:i:SSpd:in:á:S. &amp;m dedalab pça laibtldbmas, ...................p&amp;lolM'' IB''' bp.:' 'bdlb las·'' ssipobiiés a:' ge:se; ti sarnente'pdif i ορο;." "Ma................... ΜΜ:|1 'pbsadig ορ iiqpldídids: de etóoodsbbbe esitie:nde:m-<.:s:s: a partdl d®.· PM Mpilb dMorbibal pas; sst^ramldadpa: báifptpadas: c, ,x, : ion - , er ^ -te < ι .. - oí.u. Ίχ ur i t- ba;dâ: dadlia Γ0016] w -< x o' f λ- e t ' ΊιΊ--) η re κ 's ¢1--- \ -η, ι ga^ ο : a, - tencionei. On termo.9 "consi.ant"e" e "variável" sáo utilieados 1 * i 4 N j 4 }. ' \ apxuciado qne os domínios variáveis de tanto a a porções ds cadeia leve (VL) m pesada ivH; determinam o· reconhecimento e a especificidade Λ 111 -.Ο ί I ><- < . c _ 1 l v l ^ 4 , d 1'1 „ vd it 'a- -¾ ; (L o 4 μ > ^ \ l o dh conferem * ' *u. t » "> v i -i ^ ΐν.^_ ^s tais como secreção, mobilidade transplacentária, ligação aos recetores Eisy: Ilgaglo ao 'ódKipl: emento;:,, e somelhants®;,. lot οοίρρηοίρ, t notgrafl© 'dom .ddmtslçs de .rqgiip: ροηρίρηΐο idiãçdti | medida... que estes se encontram em posições mars discais cio locai de ligação do antigenio ou am in o-término do anticorpo. Ά porção V ternimal r ntm m v a > \u ia c -> a p rçàc s'-tanicu c min região constante; os domínios CHI e CL contêm ra realidade :θ 'I'tK--' ' .o cia cadeia pesada @ levs, ::ηθ:θοθ:1..ο«.ηϊη®η:'.1« , {00 l I ] _ .1 ~ í -> i 1 - i g 4- 4 ^ c- n l „ ..qdd d dintddotpd i teaddheçá aelstitatontíS e;. :s® Ligoe .@ápl.!çxEiç;^©:h't:é; à·. a t _ ^ t c 0 -os p lai e, ...ou í. 4. i.lflUl 1 Lo, m 4 -4 . \r J .to i><4 i g^OtrS t- t^Trrn*·-5 do aomptesieptaradade (.Cltst,· ue a' 41014^1.,1 .Ohm u-a paira formar a· região variável que define dm lllSl ................t cldlmemsl dial d χ; 11 qlplq ap an t ifé® cm :Sp 11 dst! St! !t.................... òOiat&amp;tnlrla. do ,aqttdOtPP: forma d: local cio ligação ao tpttgênig. mmspEnto; .pg Ιίρρΐ "És ορΡΐ .tttço .#1 ppt.f:u.frp: sp ¥,
Lis ► ·.. ·.·:... f ..."" v n pt_, 4· . < .4; · ,· . ;as ".-4 oitice^rc e definido por três CDcs em cada uma das cadeias VH e VL. Qualquer anticorpo ou t: "L. d- qrm dòlit.;dnls, st! ;rtt;ur;a. cstlltitnC! pars. s.e ligar dispsdi.flidamsijts "s tit.. aptlQtiiiP i ; ptui ...Ipdrcada indistíntamente como xri "ItagÉSlto de ligação a antigenio" ou pfi "rragmento ildnOsspe.di:£l.©d'' .
[0018] IM anticorpos na curaimente oooiientes, as seis " roq xo e s de =· ·.· r;t i ria o t e s de corro leme n La r i dad e 'k ou " 1 Dt s " , í v -í Os. \ o a o ' ' *. .' v ^ . u .a i sàp sequências de aaain "-acácios pequenas e nào-oontíguas que xo encontrara especificamonte posicionadas para formar o dominie· pq: I_,.a e ~ ' -s "'η® ' ' l v. i n ''uuj.,q u tridimensional .asar amfeionte ?cu;-. r :õ®. aminoácidoe restantes cios domínios de ligaeào ao aucraènio, .referi$&amp;M. -&amp;mm ; .negmdpq ém "Bqkpntnra^ .aipró-pepieiS' 'pipa 'mpoen Pàriadiuifpqe ipièr-àMierPiPiP, dia r - - * ^ -L - ^ > UI <!=> in-fu -5 ^ Oa-t. iu-lna-p e as CDP.s .tcrmam ioops que se líucm, e èm aiPune· s 3a m ίιο,ι j. ^x ' » ii Cc,vj =i et i '' ha k t Aç_r , h - r i ' '« de· fS">'Pu'n τη j.' ' fc 'η« ^ o; ' -»í u" ^í\ u^l-t-o p,* possibilite o posicionamento das CDHs na orientarão cor.reta a~- , -- · ,k '%x , :..o u · '····· n t f eu \- - d ,. ; · n.. dpiimip β iiqaçêo a -t 1 j,_v;jc r e,m o . a luk' . .: . t,,s, '“ki -f_Us ' t, . O" . i.t '. - . ' : ti.·" , 3'U.U; ' :..t ·' X . . ' tvd „ no an ti génio ..iPáXPOP&amp;at-liPó,..' F-^ , o- fk; o iGoiap:i.e:ig:en:t::a:r.i..áafe.: propous a. liqapão· nis^^idofaxdiioS #ο· iirrLóPprpO:'|s pep,.epikqqo cognato. Os ou ^ joicoí opispreóindendo: -a®· keqiten GSlm Ό. rte Bsppiótknâ::,. v-Ci cu- < d=n xo' p_ nroL i: ^aen^-fiocO o e^p" „ ' ...................-ρύΡίρροΡ' r opiílo: dari.if' pl d®:· opil® i ρ pgppif ou 1 mm: ipor .¾¾.................. : crio m tit.., s-'-c v'cc it: s: te«s f. >.?'< ^ '*ou^^ t pop freoiPie tufo.,:. 'igpppenpep kf B pptM pp οχ ;iia»unpl'ò:gi'Opl. ^tops,,'1 >·>'ηί ?! , kl, P-pO-tt d- 1 naco s'c-ΐ tcti, killilí p. 'GndtM# .«ná kPPlcr €'.. /idf. 196:901-917 (1987}.
[0019] No caso ie haver ciuasC ou nu is dcfin_cdos de uri Lormo que e utilizado e/ou aceite no estado da arte, a definição - o «no * -i _ Ol ( - ^ „ P o 1' pi -ik . i i: L t ^ -a -: siifpiiipakod 'Όρορ'ήο^ a®. Êmp ®ppid.p.it;âm:®ste ipdi&amp;pdp: ρ. çqdtxbpqdC lip pXpfpig ΡΡΡΡόχΡΡοΡ i ,p #ÍltóMl dO; PpPbf> ' v ' u +_ mN ” . , ", " ! m. . ' ' bdpp descravar os locais do combinação ãn.Liqènicu não-corU.iquos encont rados no interior da regido voai ável de tanso os ' Λ : ' po c-n.sKi, i*Vi' rofe ia .ia i.vi ' i ",re,n. ,ná rppiãppp^ iòõRPnOidrdoa· opr Pabap PP aio,.., ρρ§/.<, Oept;.,
Pt PpadPfe âdd: Hpmgn íSeqpiçqs·, ” -ό.. ^ m ^ m i- Γ > í O 1 s l -“IO d f „ I „ 1 \ 1 - ^ J 3,i í] _
Siori* 19f; '}(') i ---917 (1937:, em que as definições incluem oix. "í ò~° n? 'V"ni· v a nc rcniiimr rne "-ή rod a a -juam > o>q.o = " s ^ t c e ¢--5, T<M-v„a, a ,sln qr ό *ή u in'" ua bag b:briq;lp#®P: .pana; ggpop rbípepdsoda: a. 'uma rpgiJlo bSE:. bd am, anticorpo,, ou variances deste, pretende ser feita no âmbito do termo tal como definido e aqui. utilizado. Os resíduos de aminoácidos apropriados que englobem as regiões CDRs, tai _ n n:n ^.b ^ > 1 \ . v ias cd . t , - - v t . - < i- v m c , são apresentados em baixo na Tabela 1 como comparação. Os ' r„c uc ^ t o <- . 1 s ii - ~o - “m particular varram, dependendo o a sequência e tamanho ia Ppgplg. OOiB:,, #s:: pçpitgp m d-pbe ppbppi dsPsrmPnar r^t 'omtvj ’"e :.. , a .· .·· cs . -··· r ,c.u t jat -pj:2ev;.-n ..% . s e g è. ''DF ·' r:d .. . ·. I ; ,c .·. \r. d sepãi ια 1 - απηχχκίν λ a .t-q' 'j sapltotil. do aaqipórpâ *
Tabela 1: 1-' i i. - \T
OCéC' . 1" v " " ~' t para sequências do dominie variável qua; e aplicável a , tutr. . , , , Ors pfpddf :&amp;$:. gupp. pddd phi died:®' i. t .1 uf> . it: _ o ,t_ „c' vt . '; . 1 K- | ) - qualquer sequência de dominio variável, sera depender de M". . _t j 1'c fs ^ χακ it o. sei r i3 - Λ, ^ o _p__ o q ddl como aqui utilizado, "aumeração Rabat" refere-se ao :diq.f:êí®â: ::bq· hqíaeddqdq. «stdbedsobdio .peer Raldafe: .&amp;&amp; a':!»·,' 11,,d. Dept, of Hearth and Human Services, ’'Sequence cf id:cterns of l'itmq:Boldqid#I iqteqsqt^ (1983):.- H,_v. ηρ.. d ι ' ΐν,αυ tτ contrário, a? referências à numeração de pcsíções cie residues “H"a J v^'ti,5 tlwji Ί-.,ν.ι,η, - ^ jiu ii i ' "ís x - -U+- ;-o , m d ou derivativo deste, did I---.- - 1 C ^CvV-^'U’' < " „ d - V. ^ ' *· a, c idaidd-dii: r0)Qi':i.J; ixt ’ atos o fre^.uo ' n-. do ligação a antigénio, .ffagxae:nfg.q Χ®ϊ:ηηοΡ:ρρο:®ΐ.£ι.:θόορ. vb.fdânqea.,: ptu :âed:i:daddd deÇífessg 0&amp; rnveus „u xaoluu-a, imo; id" a« euc'i-rani ' n tsd u- a, •Sn tXCOX OOC C f J. 'Í0'1 Jd U Uto '1 UiU ι c , UU, L -e-oo .. 1C 'S , hbmsbpd, ddren rn^d^s, p _n t _ t i m , ou·. qtòmfcbdPs:,, diididdrppa de cadeia simples, fragmentos de ligação a ...................ppfdppdi;:,:-.....qtfn,y Fafc, "íli* " e Fiab'):p Fd, Fvs, ^ s ^ - e-vV a . j pPtj i*- Γ v t .-η!· t oíi < a i; dcj > η 1 cu , ^ r- i i 11 * - poc cantes lieo^l i^m \áe:b‘, Γρ jrrmt .\s cr txd,- rm d icon. ·< VL ou VH, r_ rg enJ i ^ pm eu. _aos ;,oi uru oinl'cv.- ca a êdgdmdaâ©' dsfeg d cata corpo®- aiut:i:-de:í:Qt;:ip:i:e;ds; dâdfd:-:i:qi) o v p . -T , nt c " p 3Tt~i-l^ px 3 a txov._r,s aq u divulgados) . As moléculas SoFv são conhecidas no estado cia .adhe :è .si® idpdPd'at-idfS::,. p>.gq > pp Fedidp- dê. Fdhqbda ^..11:,¾... ο, A92,019, As moléculas de dmanogiobuiina oe anticorpo da s i I _ ' v , '. e:·'-,- Tsfd, Fljéq .".‘d D, lçAf e IgY: , classe 1o, o . , d crf ? s , IgG.-d InGa, IÇfGl, IçAi ψ Γ jed' :u ante d.ase ^ iv' *··α ^ d-» rm v-ipra. :w [0022] duma forma de reel ;nação prática da presente xnv^r.cáo, d· dbtxdobpb id. pbsbdbdb. xupoBdld Xis A; dm® ledi em dm-de;rb. aatixo: bdsbdyi com dm.á: ddbrobuba; pé;a:taTA:led:tea-' Êrs: p' , \ n e i =icla^ e. - p'OS^r_i _ a\ 1 ' ^ , especialmente para utilização terapêutica, as IgiMs são menos U-. V. η."· Oj l ·0»« -* > 1' . IdV , < m la\lo K 1 I 'J O •'-'Sp 'Uc' a, \| ip it- " í - ôio d. v<? c - ϊ ' n'&amp;iim-'' t f Ia-5 η τ n'à o srmiia.L, apresenta» regularmente reati'-/idades cruzadas xnespecíficas e a fio idades muito baixas, [d#fd:l Fragmentos de anticorpos, incluindo -anticorpos de dddete ο-jç.F p t-c \ρΛο ei \ , _Y '- xsMJdsis isola barren te ou em combinação com ú dubadjdãbb.;,: <m dita. porção, das seguintes; região de dobradiça, domínios CHi, CHx e GH3. Também se encont cam incluídos na invenção f:;td:gaèm:tid.S: do: iígagip &amp; eidtiipdpdd: dum -¾¾¾. çpppreieutígd·. qua-Igped coafeidupfc. de: .rdgbodgr maridmsig: ppíii pipa: ,dbgx:Éo de ................ábtersd χρρ.:,.....âeíaiáf Gdi',: did © did·:,: dntioddbdÇií; dd dirt § ddi tb#.................... im:u:a:o:eé.pe.çid^x::dd:s: dosted, da .prdâidfcb issppdd: bbdiib set bd qualquer origem animal, m luinct, do mu-a e de naruxeit. r- -t-o -vii. λ ..boon to, os m: nm pcu- sàc nticncD. b au itMpipbd, de dprrb^ ^ ei m, e^pii'· Λ5, d-' r „o x· 1,--.-- í. oa.a, ds aim a, dc- sm-,, de cg utlo, zu de ,,iiirca, bun-;uma f ima ic '-alardes p;;ti;a u, pn ^a' ^ imneAc, g re pa n/.mn c a í<- r v< t -c í 'C^_ .t 1 =. ,, ete dob® rôeo.;} , ida. ddrid· aqui. uti:limado:,: sdtloPdpod ''"ddítaino®:'·' bbdi.ílí adtidatpbs: .bçdibddb a.. sdqbiudi:®: de; dmidõiábibdd de :emt· i.bdd:ddidd:ui:i;n:a.. budaxis: m d.ncldi Bdbibotpbs: isbibida i- 'partir bp ppbmémhbs· ’ f N - í- í i 1 ' — > ' ί m. o' ο ' ,ο hpmppaq, 'ι Oi ί - Ν t ν I ' ·) ο 1' il imanoqiobulines α urna η as e que não expresse® xmunoglobul inas _ ί " *> I - . t _> < s < ► i ^ 1 ^, x ~ - L ^ t. v _ u v 0,939,59¾ por Kucherlapati et al, iM anticorpo humano è ainda eonsòbesadOí '^umarno^ m®Mm· qp® t:omhah: fife 'C'fPhddhac· c:hhst|ha:lfi:f:s: 4¾¾ ^ a® qo ahtbhpçp#,: i^os: melhorar as caraet« ri s t.1 cas de Ligação, $&amp;£ corço. qqui çh:ili:c:t:ld.í· -q Lirmq '%ÇLpiq de qaòebq· posada" incluí sequências de arninoacidos derivadas a partii L u" ^ idosa x^cchx cb ,,ruhviht\i:, n, Ur ,i|<íu b q ~ - o nar cao i·3 ;ai ^ a o- te a^ pi; q c um de: cm domínio CHI,, uma região de dobradiça (e.g., região de dobradiça superior, média e/ou inferior), um domínio CHI,
- í KV 1 _ ' ’ \ y. nr X "V . K U X II ’ „ K 1 ”V ^ x ^ O - :fb‘F eidaisf io., r®: po:l:í-p:ê;podOC' ~ i N * ) ·:ηΡ- rnvenção pode conter uma cadeia polipeptídica corapreenderido v > ' 1 1 x..ta d < - g v j m domínio CHI, ppic. :qssq;s ornsa: pprçsç: de um ícmaníc de dobradiça, ra um dominio CH2; uma cadeia poiic^ph’d ue um í ’crn 1 ΓΠ ' n hnni, CíH; íw »η>'η p o 1.1 p e p t í d i c a c orapr e e n de nd o uin dom í n 1 o CΗ1, pe I o m e n c s uma porção de um domínio de dobradiça, e uma região CH3, ou uma capsha: p:òií:pbpt.i.#i:çi :ppmprpphdS:h:dO: Míl pOmipÒS:· CHâ;.f pelo: menos uma porção cie um domínio de dobradiça, um domínio CH2, ® um hm i m ο ΠΗ. Coutes ^ό"τ<? 'e^h raç^w .tt οτ m vi', 'ppeasnhp: ihopiiçlpv ι®: :Ροΐΰρ#ρΡί.Ροι da: Phmò:h.|5Í::o hpmpredhdb. qiM: qsdsis. 'ppid'p:s:pb::ld.iÇa: iOPisprsenâsndó: em dómljaib'· Ρ®:, .¾¾. b s^ > , un f ul 'Ό__ de laid, r mr.. Ux li:-p j u: 'cmiuu: mio- çoshem pelo., .«snos ama popç-io: dó doiaí-mio' LHI: ΐό,,ύρ,., c t\ -‘"a"*'1 C 1® JΛ mmnir ^ 2) if ; Ο- ,·αΐι- .•qpçebèleebdq, pepp: chhepgido·· "por um .pphlhb um sobe. pop:· .qghu® domanoçs t e, on >. pp pqrçSpò â&amp; ρρόρορ. pppadai ppbfm per modi!icados de forme quo varie.;·'! na íaquêscic Pe amdncàcidos Sir: rafegie ãs moléculas da imurioaiobai ma s naiursimente ΟΡΟΡΟΑΟ,ΟβΟ , [0025] Em determinados anticorpos, ou fragmentos cio ligação at antigenic, variantes, au ati.dm'' d n aqdl. ,n '!> ura, o n " - i ν·Ί > } <*- da Ppia ssddiá icln-, d i sj o j η > Jvi "'í^ v n u1 ! - - ç ' "t ^ ddiM sagonáM idadaia: p:Qdd.:gap:iI:di:oa iter MaaaerSi. tófiernatriTamenfe:,. : bs moúdmara®: que 'òçntiiffi: áir tpprçdeq de cadeia peseda da invenção não são idênticos. Por exemplo, cacla monómero pode compreender um local de ligação ao alvo diferente, formando, por exemplo, um anticorpo biespecxfico.
[002S] As porções de cedera pesada de um polipspt)do ce ligação para Ltd n, v métodos de diagnóstico e tratamento aqui divulgados podem ser derivados de moléculas de imunogidoida diferentes Por exemplo, a porção de cadeia pesada de um polipèptido pode compreender um domínio CHI çtdflgdda #<&amp; uma: 'maliauld rfSi. e 'dmd regfla de· dePredaça· diuvd d u\s 1U fqu-. õuPv Oocmpic, ,, por· to d_ side^-t c =*. > d v< 2 'OuUt-mi. c ama .regido ;de: éeppâbigs dafddada:,' Ίμ pdf d:®;, :<fe uma· moiaomie fgtil q, em garfo;,· -φφ gmg Π'^Μ,.νΐ Utv. dado v. ouolw use ,e ciuS.ú ss,, ta c ,c v.ncm:u>'ci mne r gn.' cie imrjjiCã ' ' .ttaa, drr paroe, .dp:-uma ms m la d up, g t v ·> uu role',la .................fiSfe............................................................................................................................................................................................................................
[0027 ]" , r ~ ~ , 't ''i-' n dgd igedi pdgdeágil..i de MdgõfípidOa dgiigadas der unta <m In n rui ' MktpJi i\ Preferencialrnente, n gorda© de cadeia leve compreende pelo trenos um de um domínio VL o a €:ÍV:. Γ0028] ' η ' · ν 1 ν ι , ι ν' j> t'-vi - \ : 'ν -t'· 1 V 1 V Γ V ΛΙιΟΓν - : i V.V , V S Ί Γ V U ' ν<> eprtopo contém pretexted almen te pelo ^enos sete,, mais ι :u'.::,u .. u ' v t. i '> ' - - , v> * u- u e -' ^ ^ " _ pelo menos entre cerca de 15 a cerca de 30 aminõáoidos» 1¾¾ did id:ç ume região i&amp;t pode reconhecer um peptide ou u ípoptro" s sendee .na, asna: lèrna: aerclaxia^ @ρ: aminoáciclos cornpreendendo o epilopo não necessitam de ser canti-fuca,,. &amp; cái ,όίρηΜ &amp;âw&amp;mr. podéis cem, edhâr: dentido®:· .nu mesmia Caddie. pepiadiea. ,h ό 5",íp. copt: i ~>vi ;pcda:::©Épr;i:d|> d®. eáíàdp® reoopdepi.dp: pains, actio© rpc®· da x , ,'ρΛ' 'Cute m ap ti 'u vi c ac ' si _ menos 5, peio menos 6, polo menos ?, mais preferencialnente paid: penes :8, ceio menos 9, pelo nenos 10, pelo menos 15, pel' "-ei- Ο 13. c th- vc., -· ir, ·· ; s .,. S ·. " .. u , ~ η , ·-a de 30 amincâcidos contíguos, ou nâo-cora içucs, de Αβ, f 0 02 91 d iddmd: " neo - ep 1 topo'7, de acordo com a presente Orirõ, mogn: i-" epircrx g ·> '> iam " cu ι a riixl, ( - doença e contido, ou formado, por uma proteína associado, a, Çarapá çiié. d· ;uiât eâriçnte paiaiigio® 'de;: ama ..pra'fceiua::, de autoe d::©:Sma.,, die patológica aio© .d:e:Svmt,á.ndP“:ae· cia: fisioiagia ..................dd.....citada sauiá dal *.....A·®· r etarida# aaniaptsi: íp:;ai:d:ii;si.ci::|:g ipd®·.................. podem: çauc Idrasias por meio de transcrição aiterada ;pçdPÍ.e;di:G:a:mend@:·, dedifi^paç;!'©': pes-iradaeà® ©ioprada .................pai©!.®©!©» p, c c tc same ic ρίν,τ in;; > patoJojl alterado, formação de complexos com. parceiros de interação ρίρρίρρίορ®: pp .p:átp£.i:dí.plddi:Ç.dd ou. o® trataras cei.uiar®® potlogicamente alteradas no sentido de uma cp-loraliaação âligiada·:,, sd ''údi 'Ρρρίρρίιρίρ; odtritctisl 'ρρρρίΡρίορΜΡύΡ;® alterada. - tal como por exemplo agregação, oligomer inação ou fipriiaea®. e Ορρ®. céSPrUidia ti® ©:U limra^dlimççudíonai dii&amp;rs da estrutra da molécula fisiologicamente ativa. Para além #t;síaô:í < ' v ' Γ · Μ ^ ϊ > t caroctericada paio tacto de Dão se encontrar localizada no seu asibiente fisiológico ou compartimento suboeluiar normal, re ^ t „i , u —} mg } ,sS " ^ u s ' - ' 1 - ..,s os' í” ,.tur =0 -1''çi m , > . .uvoi. a^a ao!,-’ àt- ' s ί i_ ^ o - “a e t\:. ’ < ' ' = <'·* t bit iã r p_ - t 1 "' -·' 1 f os o fu ^ 1« o 1- in 0 - <“0 η Λ 1 U v ' Tvti _ i “ j - ru' e M - 1 1 u ^ r 1 J r\ t num tecidof ou numa proteica pode ser verificada através ria raversào 00 método amaino descrito para o isolamento 0 cara c t e r i z a ç a o d e ui .ia ru o 1 é c o 1 a d e 1 i a a c Λ o &amp; s p eo i i i c a a um a proteína associada r na ©''·>'» p -· n -raietul; do ............. _p -Ϊ", ·" ^ esetpi„ iFi nt ·, Ϊ^e , "" ''''Ι^ΡΊέ·. ddtts................... método s utilizada para rastrear uma amostra para a ligação Sb ssi'isorpdg,· 'Sósid forms def'Sriminsdd Si íbrbdbSól ÍS; um. dbb“>':
'OpiftpCP lOOàO] d l;.o. ' " - i i v_ ί - ^ t „" c „ _ 0 d > 1 ' d ,. ' ®: f a; de net—epifopo" são aqui "tftdlricadds ;x -, - ;e ·; .οι, ,. pai " -ν' η o ·--·,. - rape -.rests v urn 0“t ~^r i ttioo". Tal como a qua urtJ ' radc « termos ®pmq &amp; 'Ou?Â'clt dv c-'- rv ded-> Odiridadd".,. SSSOndaSeitd® :00:p:e:Cid:i:ria«iOi:d;"'r: ®isqsriris'“'.ps especifica men t e ", v ligando ~ s e 'preiéáséciis^imènt ©d.*...............ο seme!dantes referem-se à capacidade das moléculas de ligação pais :do:S:C:iditisdf:em: entrei © nesmepisoibs de "u|ta: ;pro4«'Íss ...............ssóbSdabs z rã r_ ' m e -¾ pz' t u>n nat_ ό n an ft m t s ίΐν 1r r.uf" r ' ''-r £0 seu v trio S- uriu: di . Av mi, . :®©444dl;S; rifô .Í4uri:çsp b» pSSObfifcS asSibótio téffi; SpS a:f:444:ddd:0 S®: i,iqsp:ãé' p:ré444©;®4óS4 Se dSói-spãi::i:ppo: és rldãspâo' ao an ti génio ca prot^tra nativa por uri fator de peio morna duas j.rtfore: ;rdKCt- peK, neo - 0 v^zes, ndsSsbSSSõ ssda ^ ' g.z m xat rei ·'· c·-, p ,: t :c .4 1 rv tu, =· ptc^ "· r faãtdf do 'SB νο:ϋ;© ts sidfiS: .jtmXà óre:f:0:ia'ridialmieri.té, fssór η , ο ,vt\ Ui '.re. ι. . ΐ s i '' ..,, t ' ο.-, molécula do ligação, e,g., anticorpo para o epiLopc αίνο > v U .,, >>, ' ,ι teo--epitope, e preierenciaimente polo , ~ ' . 5 -»i V „ 1 ' ' 'li P ' 1 '' t -> 1 vezes aenos ou maior do qua a Kd para a ligação do anticorpo a outros liga n dos οα para a ligação á cot's t rapar te nativa da vk :> ιίτ v$sc “linda '> a^rioa, .gqp 's'4l.'igd:~% e. l ' - íiu;'» , ©u ^idpqdttéea: espoeiticamsuteg aqui utílitadcs indisLiniaraenLa, preiende-sp ^adgnif icaie gg:® uma mpliipuin dé Ιίρρρίό,,: •um anticorpo, se liga a um epitopo através do seu domínio die .................Iliiif agi#.......a.......©ptiigeuleu:........#.......que.......er......ilggqSò........igipi;i:qq........pig uma................... coraplexrvirrtarida.de entre o domínio de ligação $ antigénio ó; o. epitopo.. a --- ~cza pit gntipgrpp ;§ ...o i ' L_ j uxl ' a-so e*ceaif „cir *uro" v, opino quando este se liga àquele epitopo,,. através do seu dornimo jv. ' - e _ i ' u r o· - »u N i n ^ l j ^ - M. epitopo aleatório, papi - - .ou - . P termo '^pppepifiipiiqadçi^' i q aqui; .pti. pitado para qualifimt o ..: fi.rJ r .l·... ic-lcdnia , e... ·.; u ra · o' x · 11,. i i...:: ... ;,. rp., .o _:u 1 ·· lo >o..(: rr .-;:.· I po- n j, , i_ , λ .1 .<, ue ...nti o o "i" pode ser considerado como tendo uma maior especificidade ................ipai ó... dst.. :apl.fe opa mo m&amp;&amp;- -ám oufemodrp©' dp©,, gag ρρ................... tnt_Corp^ νΛ" podo srv roí, t id oo ee igirio ao soítcpi ©om uma· maldo ΐορρόιοΐρΐιό'ίόοόρι do :qg© .a: que .ρορορί poro o .................OpltOpo.''' tsi apt; oPPiá:©·'"s,; >:...................................................................................................................................................... f&amp;OiS&amp;'l Ki 'doga-a® .ptp::|grié:pc:ípimppPi:"i -pretende;--:®®: significar que a molécula de ligação, e.g., anticorpo, se liga especificamsnte a um «pítopo raais prontamente do que ele se ligaria a um epitopo relacionado, semelhante, homólogo Píl analog©:, aqgilio, pii pifetifedtpó: dp® 'fed# liga pc^fe^eoci Pnege" a um determinada epitope liq@r-se-.ia cor : ' I tr ^, j ) -· ' '' ' v ' u ' ^ i u v t, i. ' relacionado, mesmo que uni tai anticorpo pudesse apresentar . ( * ' m „ ' - r'' \ι Ϊ u - - >f ' i i s [0033] :.% tirulo de azempio não limit at torn uir.3 molécula de >, ν' m “ _ m p,. , <- 0=.- I , νϊ> 0 ~ 1 1 •"''i p , ,aireiv' ο,. * prersrv'if1___va ,
liga ap· «:α''’ In príooi„o nr ,1 <- a u-m gogstagte·' -cM d ucc Pau a gw e pp, 5 i, ' i a i___erne [ segundo epítopo. Noutro exemplo não limitativo, ura anticorpo pddò opr; oeduidecddd çorao çe ligoddd g. dst .pdiddidp' adciidÉnio; 0 -w - - _ L •WW - - cl* - V i_ f v C ,iU-J -ij vO " Η V vi ut’r1 os^e cuo u ceio ;ut~n-r una ο "ο ·*τ de rrag'1 irr.de as'U>r cg? d K d n ' vóiO ' s>'Çi rm 11 )p „ Non-" m > ^a-mpd n its" . ir d t v, os tt v t , ad - - ϊ u ni' ' >v nc I s - m s um primeiro epitope ureterenuiuimenre se eie se ligar ao
irif' OlPe' ''D , !J t 1Γ1 0,0 ÇC O O''”'' >!' \ ÍU3S ' < I _u, ,, Γ j v , ’ i . η o i > u, _ t i 1 v _, o m ' ' _o , sepirude- esctsc©, [0034] liou' '' e>: Op na; Irn tarro, uno iroieoula de ligapõo., e* on 7 "UP: umMoctpg,, pod®:· s«r iógnaidudad©: corpo se 1 í o ando a am primeiro epitope preferencialmente se cio se iisav v.r tpreu j cpj "oro cot nr« _nd v íòicofidi sue w menor dp. gue s Od'Oddl ·#ό· gdidOBdpp gaga;: g iggtmdp: eprlgpm. 0O:d't.:PO: er#mpl:d 0.10'· d,::iffii0:a:tO:'?O'>; 0¾. dnd;i:i:drpd d'ddO 'déd ..................g oOodpdr aide.......ggpo;.........so.........idfdodg.........d.........gm........pr pinei: op:.........apt .ρορο-................... ::pre f^-r or sen nicer sc ^1* e·* a; lurncic t|i_tcco corn κ» 't r. f- p .Λ -=(.3 on ottint Ip ojíC1 "t irp.; : e . k(off) do anticorpo para o segundo epitopo. Noutro exemplo não limitativo, um anticorpo pode ser considerado como se Idigdsdp' m « ggimsim© egltgpov prède-reppipiiíeenpe^ sg «r® ge vim no Lom 'ir-π, -ni.vop' or irm i “ 'rd-d ' «Ίη n-n, s < ua?
IplqaMS ;íSíS. aftSírísSiv:: ;£3^: ΒρΟΜ kfÉítiJ dp: ppdipgppi: palp. ' ' ^ J v - K ; wmm dma noleeuia ae iiqaoúo. a, a a .. uai anticorpo, ou u:u í -.0 ~n >- , J- v-t - s _ ' 1 c’_ "i * , ϋ \ ' -i f eqai divulgado pode see referida coro se 1 a' í - ur> poelipéptido alvo aqui divulgado, ou ura íragm&amp;nto ou derivado .desde:, corn uma off rate (k (off}) menor ou igual a 5 X 10^ Βρρόΐ, i;::QUã: ρρρΒ:.,. | p IpaS ppíg-d Be lil- Mal,® pref erencialmente,, ura anticorpo da iddeispsd pode fi-c referida corro se ligando d uffi polrpépfido algd iáqui JivJs-j o, u uo ou rerr,« t ^ d'" st·3, ”n uni o: t rata ikiaff) 1 maxr p^ igual s 5 d 1C'’ s o" , 10*’ ®_c~ , 5 λ _f-!' 5, - ί,υ 1 ’ o'··''--, 0 ' 1 lo oo , 10~~ 3 'f_ ·, 1 1 0, - :i' :P:U :I:S"d 'SfesT1·*· |M$$f "r, jo t- ,d I ' a 3 d e ç,, 1 ^ s. ' p > < λ - , - it ' = 1 j-' a 1 - q í _a, - aits -> ãmzijyBt íam apai. pilíPulrgBdg. pdãB s-éíir ' >-*·» ’ 0 r ^ >_ _ bus a poiipéptido alvo aqui divulgado, ou um fragmento ou derivado i·?? t-, on 1 ta u js - <i> tiUvi ' < pnl " 1 d „ , I i: rp ill1 Spp.B1 1® M"d' SSpr1 OU: d :¾ 1 @i:® MP ,3Βθ”Ρ: Midi:®
gd:f ·ΐ e:pgH:gl;dilpíd:riue> ps, ddiiipdppg: da, Ιββρρο#® pode se.P .............. referido como se ligando ...a,.......xm......ipsllpeptAdo:.......aipp:.......'asai................... di:ld.u'l:gaÉ®:.f au api i ifiPpppnfep' 01 aaaxmaia dpppfp,. ppm urda pp ^ 1 ·\ ( l J 1 ^ * 1 u' 1 L o- sá *’, \ 1 t ϊ 't* ICM M~· see"1, ou 5 a IO M'1 see ou 10'’ M 1 ssrd [0037] αν a molécula de ligação, ?,g,f τ U' t~/ o\ referida cem n ..c ...uuc · tvaf ,; -men " a " r ga.. * ' ..,·,·; )¾ . δ·Βί:1:0:0:®:ρό' ·:Ε$®. rdiBrdtpPia; á pt d:è€BBliÍBâPP:. epilfippp SB aspts: B®, llg:a.r prMdpfBPéiiaimep^tê: 'âgaBie è^it-dpd: ad. -m&amp;ãaiãa, ái ;οββ bio e vrL ou^r, a ligapdo. íéo: aaoioorp:® di; 'didi .a -a a 1 ), ^ < q rt' α ό }- 3 , determinada por qnaxqo-es: métcuo conheoiqo no estado da arte, ^ -' -a j. . , * ' ^ V” ' p* .li v°. Ή r' : o ' ,'’· - " 1 ’ . ~rt " " mio . 'fp-'-nt <v o1"j' -v iqa a .1 í tu t - t. i ' <<( ’ n «-> ' ' ~ ^ n i >' pelo Q&amp;noi 901,. por. pelo menos 001, por peio menos 701, por
o ' -> v ^ -v ( ^ nN
[0038] d. mo rp ar„.l .pp - - *r α "ndcnd. - - se a medida da força da ligação de um epitopo individual cosi α eí ai çR ,,α 5 .<e 'iw.fk,, r~„m, ιν ί d«' ula us xmiiiapdl^ Pér, e.-po.,. Ru^loo o' t .. A' t Ho! -u- ; 9 L o ' > . ' ^ ' vj í. 1 < € _d db i i t _K r η μ m ' g ~rv j. , Λ o ed, 11 η< , p-ioiha_ '"-Jí. Γ ti amo i_ ·. v "avidez" refere-se à estabilidade gerai do complexo formado entre, a população de imunoglobulinas e ura antiçériio, isto é, α £ : - de eΛ a' u 3 pi “ -'v; 1 u- une, , s oe ί„ΐΛυ_,,„ , ,a -> : - -iti-it . rt, c ^ fulo' paga, " -> lllt-dvl, A avidez relacione-se core. a atíriáade das. moléculas ti:.ndi.vidga:'i:S; dé·· i't6iipo-g'loBd,li;:aad;. M. populaçac: ©Mi iépàtbdpg© sppMÍtf Iqbai,· é- fembíM ©qm aei νρΙίΜΜ© ©tas iís.u:ia©:gi©feç:l:íi,p'á:s * lo .ί dpi · Ir e''«τ-η,ρΐ p => i =n ' - tr :9k ep it nK'd tr-t] b iio o ^ m a 11 _ g- t. > L e! t m -^tat' h í ep-itbpç; tJ. çefiSbib trepeMolMtal. e:gm© aíft pslMtMtq·: ©erig: tf© ...................MM ...albs μΜΜρΜ...................................................................................................................................................................................
[0039] M a αίς. e Ixoç^a , . ç , ai _<nt fn mt " d ' ing^’ i , i' . :qn, , ,u/ -ητ > c ’© i-'*,nlro" o el o d- invenção podem também ser descri tos ou especifiçados em * a η ί- '-uu t« f ' ’ 1t *- 91 - oc·' -tq α ί ίο i α ^ 1 , o termo "reativiclade cruzada" refere-se a capacidade de um anticorpo, especifico “para um antigénio, para reagir com. urri c v1' m' μ i _ 3-í ί; u ta r ^ : ^a Λ<· ,' - , a ' , 1 i s l <- - 'nlct^vro s·-' '*Ú5 rn ti: .a 1 ' C Ί, i. '.ur, ufi :á.K:t:lÇ:Ç:rpé· apresenta xeativíciade cruzada se este s&amp; liga a am epitope diferente daquele que Indusiu a sua formação.. 0 ep.ii.cpo pare q qffal &amp; ηηροΐρορρρ Ppdò&amp;bpqq :fqad::iui:dddip; ρρηρρ.ίο doutiè®,/ gerglmento, muicus das mesmas carácter 1 sc ices estruturais de complemencaridade que o epifopo indutor, e em alguns casos, „ ' j u ' ' s n \> / -i" n- , ' . I > „ ® ju _ í ’ , [0040] 'Sor ^ v , - <* u - mir uu: ~ Ί i f .pp d®' rearlTídacte oruas-da..:, nq taeiâdda ®ρι quid ψ&amp;· ligiaif a. ®:p:i.qd:pd:i. .- . 1 ··. .. S .. S U. OU' ; '' u i ·- 1 -, 0.0 , Cc-^vp Cl C , Ud ^ f" , - 1 - >' , pelo menos 85%, pelo menos 80s, pelo
ho <u , polo rieoca "O', pt_c T.tnC.· 15', pub cei^e ( 'ic, pe„ rfor - = ϊ .k a .no ud le den - 1 = ital v ="O ; '" } ad' stills- "do ®ο·.. u - :·; <· ..·.. ,ηη\' ' ·." = ··.... -q.. arte - ecu seccditv.si ^-p i ipi o^o ie t-^rei -=--- " a . gode· -referi'#-se qua un anticorpo tern pouca oa nar hums reativibade crusade uc :a. .... 1 j o-n - ncoi'® _ rn kuu zL qv =- -Ί", -feu; p d que 101, fcenos do que 85¾. menos do que BO'S, menos do quo fon rs do vs ! ) , meuos iv ous 15,, menu' -. - :·= i , raenos do quo 551, e monos do que 50% de identidade (tal como CáXcuiqdp util.i^rbp mêdbdbd: cbpiissidds op .qstddp did dirde i aqui oescriP s ι·\ m at -ui^-p"' o- um ^ ? „ o r s =co srJ considrtj /> -altâmipt® especifico" para -;|M ,u d-' qúrrr, , = --· este - = 0 s-- liu;r a unique*. ,ηϊη.> anã Jogo, ortòlogo, ou Inc-mó^cqo daquela epiropo.
[0041] Iddf-uljí o~ 1 pet, -,-,,, t.:li.-u^a. ?! 1 aqifat’ ® e = liqa^ac o aitio^ci q un, -nr-·-a u: .s-r'-a - - v - s d^ciuc d invenção podem cambem ser descritos ou especificados em tdriids fia. ima: qânidabs d®! Ibfdqi®. dr um. ipolipógrido d® inpodplq:, &amp;s: afinidades de liqaçào prof orcneiai s incluem .a.qdq:lá::s c;drE. uíaá. op-natant®. d® disi&amp;s:d:i;aç:io::f ou Μά, depdd: .$;&amp; "fae: S » 4¾¾ &amp;$*%* 5' dl l::§dM, lid^ld 5 ®: llfi^M,· 5· d: lu-vp. 5 ^ K 11, Ir m f ^ ln d<t, if-di, r κ 1 d~ ", 15 d, c ^ !-'q; ^ - q, c , p, >ÍM/ - i-M, r x ,0- Ί, 1:^¾¾ 5 q '-,, , k i, .c ' ", ' . ν κ 0.0. id damp 10 0 <131 \d s-'/ ' si m-u ' N ’ I ,· 3c subuoidades . Ϊ> _ Ί') 3 ' c - 3 „ '1 , i. Ί^α 5 ..-Sir ’ ~ ' 1 ? ~ i 1 s < -'l"'-', ~ ''.I , sU " ' sil cobitsbidag, m -pi si]'* h iJ*:^ c- s u_ * i ' . i; 1 Ί Ul Ό I ' ' s. f „ is s <· ' ' . ' - U" - 1 - ΙΊ s ^ - 3d de imunoglobulirsa, -3 o termo "domínio CHI" inclui o primeiro ' i (? si .3 -m re a ]' t rã] , , ^ t-4,' χη.ν sir ^ . t ,χι-ι c^d-ou svr ;i' 1- inirs'ii λ Ί inn @ .bbmlsla ®1 i adjacente no dcminio VH e é amino terminal era: balagad' ê região de dobradiça de uma nudere pesada de uma nolécula de ::r£íHaue.!g.r.:0:dei..i.'aa. £0043] lai. c?r.e aqax ut .ixcu-se, o mnx ''dos me- cbi" i:ci,^ t i í- us i ! < e * 5 1 j.i' vods a , i , . s .., •Vs.-.' it id- a; s·. Jr- V > t- n,t mcic <rp: U l s. i _aa·" L 0 ~ t Λ - s m- i a s, - i s. me 'e- m 3 % i®, sipbema bfe agsiSiraciídi Eabatí e ;.ms:idd:op ,1:11-1¾¾ sistema de numeração EU; ver Rabat CA et al. op. cít. 0 dbMiàèbí i· dbigb lid ®ρρ.11:ίΐρ· dm :pié dIo pé ®η®οηΐρρ proximamente emparelhado com outro domínio. Ao invés, duas ...................çaddiad... Me... bgrbbb idp® bk... :ta Aif i pade... dm I idade:®... embómfcpamm:® Αν..................
1 ^ritss. v S3 I" > ; Ό n ^ O- !i i uit Jr-tU mts.de. nativ-* I 1. Tanbe;. .·>e eucinMa ben d s, neri 3 i' qum o dorrcf_e ch ' .->e te o )ie i-sí- o domínio CH2 ao terminal cartoaxilico d.a molécula de IgG e compreende aprczimadarnente lp:Sd.d:d:d;S..'s.
[0044] til ^ iv ig si m_liis.sk>, o r, i^ "ric. í ' Ji dd: ca ι_ρα" ΙωοΙρ:! ..a pplólo ida· poiibçià. de cadeia1· posada gae. rume1 o dominie: CRÍ ao dsaanie Sliit ..Estia degido·. bp dbdEadiga: όορρΓΡοηΡρ apiddiítfddadiéstés 1S: ^rdéldddd1 e i Êl;edi.bdl:,
ç* ; r „ u,»v u. 3-' --v > '> . r;r ' ' ' ^ cm 1C t- r ' ! >\ 1 t Ç St 1 ,' , d c e· " ;i«i; ^ m v. i-r 'v ' > „ . * ϊ- -μ -' ' : t η. domínio da região de dobradiça superior, médio a a.iji : " I oi ;m , i \ to 1 Γ : 0 l .> {:0045] Tai como aqui utilizado, o termo "ligação por ponte dlppuidetp:" Inçáár a ligação cova lente formada entre dole -aeçabs: die .©«κοίοΡη· &amp; qminoiegdp: ççábáipi godidim:; ur&amp; grupõ, a? p u: m :* vi ' p t m ir α ,3otiid;,' mu um mo una o "'tuf f K maioria das moléculas dg Igd- m Iff ,J _ m ' - ’“e·', a ..em „ d í ^ ^ ^-Os.d'"- pj' jj Ί m dime i í-g ' g >ha <. a m ’ . "áv encontram-se ligadas por duas pontes dissulfeto nas posições .o r - \ i ’s'is: ç a v - ~^ " i_ ítm - c c si _ mm de numeração Kafaat (posição 226 ou 22 S, sistema de numeração &amp;) :,.. fSSáS] iiail ádtsa ; aqui. úti librado:,:- á iii*: '^ntácerpo: manipulado" refere-se a um anticorpo no qual. p domínio 'S a\tri : - Ccul'ia recaem, m i Jt i -t i ^"e "-u er u icâv cadeias, é alterado por pelo menos a substituição parcial de imã ç®x mad-s rcvides Cl Rn v ur, ant_ emip' > de cape ' rf_ dul· cenho eido V, se necessário,: ipdr aiuatit uioão o uml dá mgric dp; qgprufprg. # aitppg&amp;p· :dá ppqgpqçíis., Embpiris gp ppgâõpg pÉíls ρορρρρ áái:. iopráábsp Éi um ahtlidoitpa da mesma: classe, ou mesma subclasse, do que o anticorpo a parfeirâd qual: ás riefiágg de ρsériabura pier ρρρον&amp;Ρορ, ieneentra^pe previsto que as regiões CDRs serâc derivadas a pariri® de uri anticorpo d- - 1 ·;· -u,v. n ^cente c> preferenclalraente de um anticorpo de -ira espécie direr^nte. dm anticorpo manipulado em Igad uma oe mais regiões CDRs "dadoras" de um anticorpo uiò-éumsuo-' :de· espeerficèdude: çõnááamdg #: aeaptadp mim#... região de estrutura de cadeia leve ou pesada humana é aqui 1 " > i u 1 u p u.>, ' p ΐάίΙ&amp;, air· ' v . ~ ^ . . - ό 1 I :; . a,, - . m ' N _ n - i , v , . ' t i ' l t _ . V - » - - . i _ > ’ * -» " V. ? capacidade de ligação ao antiqinio cle um dorsinro vati&amp;vei i ' »*''. 1 m ^ , c ' n -> <u c e : Ό ' i .. " . . os resíduos que ssjdm necessários psora manter a atividade do iodai i% . I o s ' al/'Ό. ' ν _t <ό ^ =; .\i, ou.oo . - k -.. "> m i o uu i&amp;dlbq lo. latiããte !&amp;,.$>.&amp;,, .ido 1 , IBS ,: 1§:§ !, 7 «1.,: Í *: ®$ Sf 7l®Íp &amp; Í ,-.l SO, 111, Οΐβ: 1¾ diol-ri dm lOMgelénsia-· doa; periled as maia; ilfii litliolpes feumaeiaadue maelglladee funcionada.,· airseâs: :dm. .loadleoiae H 0:ape:aieioÉa.:s. Sm roilm su por Isoles de: teu ta lira a· erect,. fOSllf lai ea®©; aqui ·Οέ:111οο;10, ©e brigado©*!· ' i u* m 1' ~ ^ õd torn'os reicrce-.su à uuiõo do dois oa reis ei oriento? lo componentes, por qualquer téer.ica incluindo por conjugação química ou por via recombinants, Una "fusão dentro da grelha de leitura" ("in~£ron>s fusion'’'} refere-se à uniào de duas ou r-t_s ; Um je ntJi I -11' P's t Ç \ o . "" ” ^ 1 j,iSU tdiiSl' de poiisule-'tidas pm formar uma dRF confir.Ud rnais langa, numa forma que mantém a grelha de leitura de tradução correta da SP .itlqlHll , .Maslm, uma: prolilua #e lodil Areddmdduands: é una proteína isolada que contém dois ou mais segmentos que dorroapidadom a- podlpéplidos:· codlllasbo® pilai blis: ©οΐρΐύύ,ΐι bgdlii sigmenius -«Ιο sá:, aiusoira® Birmalminti· li®· oniiob um ...................gl; tut .gill ;λ.......ipeiai.....dai·.....qtitftt®.....dl.......fed· fura.......sltesí.....itrtadls.................... eQliiuqai: ·:ΐό· idiqq: :dps togiãitqt· filãiddB·, d:®:, aegmeut.oo podem eei' lis.ÍdâBiiii:te· ilr ·ΐ§ρΐ:ΐΐ:ΐ11®ΐπΐ;ΐ e:épãf::qdéa; ptc, /pit stãmpltq· s'qusrcias ce Irgacat 1ertr > d n "mH;. , l<- lrtjta >>p t mr>s „l itu aJ / >er pa < , Ιό - ' am ~ m >l j i j l^r * <j 11 f i urf es ca.O : ”Ί·ο·. ·1'· uri ' poift Ό® uu I .i:' um .nunc^lm md?r s>. ' índia, ru.; ' o. 'peim d* le^tur. liS^iiSdf',11'S-i.................... separados por um poimueieótido codifica π te para pelo mc-nos . ί ' ' . > ) ,. ' ~ ' " Ο ' ν. α ϊ . > u _ ^ V - Α , · 3 ν'1. ' t U ~ , V " - ' V f . 5 -· " Ο ' ι > ' - 3 1 .. Ο [004«} Τ ·5 ί como aqui utilizado, os termos ''bbatãc qu " .... . -o .’c . tu.3' 1 ' C' “e3 - ^ < t.' a j t u -v ’ j ,»i. l-ι t. ? ° , p c > Cμ. a., v “ j- r >§ v c. ' .u ._ ->u '"s t-ar^"” um. st m. e-m-t-m so = o tadeoe jada?,· .cai. bpfcsò: á :d®ca:a'®òi^cm#f£C:ò: ou dfiC:®.S'C:i.sa;f-IC: be cancro. Resultados cl Laicos foer.eficos ou desejados incluem, ilasi ale s« eotointram timlfcaábii do .aiiltlb boa tilnibiaab, d-iii^ni^v^ ~ -< > -j cei s <. r- a _ _ * < s-ga, - O ·.;;·.„ >1C .. i t ' , raíc” 0_l V ^ , „ 3 , ) d !. ;S. .·:; . . , ’.·'·. ·.;.... . cia progressão da doença, a melhora ou paliaçao do estado da doença, e a remissão (quer parcial ou total), quer detetável ou indetetávelO ''Tratamento" pode também siçniilear o y .3 3 ... ϊ <; c „ ~ ""d' ^ i 'p s! v s < v c ^ w , 1' -3 esperado caco não se recebesse? o tratamento. Aqueles com e. : '. , n Ira1 m-3 (u polua' ojialt x ' . r ires'3 o a imn, l b ' i r > p t o»p-i s c .. t! -3 .. m d i r -n .. 1. e 13t, ‘v. j ,.qje]^a a~? on> a nautcsto ^ . ' tl\ -j ? ju 1 .-'ηνο d‘""'a oar prevenida..,.. ..................[ :%¾¾] Ebb * . lb j#it.:a ", ou b&amp;bi v Μοί":, be; T aiitaa 1. T, bp..................... "pactanted r tmabí I ebb®', .pretende-fe peierix quslquer sujaitop ;pa:tti.:0:u(l.a.rmi;n:t'i: ait eoj alto maffilbitb., :b:,:(g.,.::f. dm.. ................patiette fedmbbbn: gall. --0-- qta.1......§ di-af: 1 abb.....tat blattbait: is*.....Ip::.................. prognostics, ume prevenção su terapia.
[0056] A presente Invenção refere-se a moléculas de ligação·, tail, didmo bitait.:gt:l.i:2:ddsi: mai; ibiiltditagSbli.; qu#? is-Io: migda-ss #e .tbcobteçei selei, rvamente ura epitooo do umia: priotmina llbbiCiiddil a dmi dosttià:. .i.i:d(ld:iadio' :um mso-eplitop®· :ém ama; .'.protel.na. ii:i::0:bii.abi b 'iMta. bdanfit:,. iqua pobam. apt1 Ί on ' -> :s~- ' ' d* grese-ie invaoçào in - -- ^ - , nod ' nr ;t " π,· ^ “, a molécula de lia ' ' . . ,vl!.. ' .H it Ϊ - 'ho ' 'idi f > u U t '’t I \l· proteína on sua forma nuo associada a doença; ver também [00511 Meios e métodos paru a produção re rom'd> rente do japdedaXad: dp lx 5, v Jf <- ο.1 n _ r ~· ^ ·~ o _ c, ο ϊ.'- 'estes, 'al e ,ro nétio^e de rastic , j m .- mol»' u L an de 1 Oa =1 > a p- 1 ’civto pi» fobeSC O.U hlo- Set' STtPiebtpbs:;,: olio oòPdòPÉdPs;: bp estaifd ds.mrtsue pop exemplo, na Aplicação In te rnacional ^02006/103116 no que diz repp©imp a, j. ' ^ i a pBpp-pffiilpidP p p t:r:át:am:@Bt:OdPd:ap:a:ae:t::i:ò©' da. dddddm de dlphdlmdp',.' [0052] No entanto, tal como aqui descrito, fat particular no que diz respeito a aplicações terapêuticas em hatanos, ο o i'd' pits *. ϊ U a at j: 'n cl - ' pc ' iron < bhsth. BbPdpxiq, a, variante patológica da protelas reconhecida pelo viurip v i Mt.. ..... - '·s o o - lo o, o no a ">jj <, .£r<su:·, 'MM. dõbdçf çdiréddâil,., pQPidi]' : didP. dl Si;|-p * L :¾..: hSd.....Ορ/ηό;. ;;#ό#οηρΐρρ£ο.. .#;©«.... Sxpiaqlds:... ,3;... a................... o, a i ti»-’ ia jo ixoação ta pi o s^ut^ j n a , ;p -m partxotla^ hit aptidorpch tem dieia® 'pteprledadss: p:ipd:.ii:i«p; 'Pdphad opaso·: uma©a maiò ca an a *?i -m octidos peia primeira vez m presente invenção, e.gt, a molécula de ligação é capaz de; ;i) atravessar d......dapteiPa;..... oen efo! i;o, por epçmpip:' hp Ipp-aX. d© laddnteciméntp:' pdtpl.ddidd'i tal); ligar-se a placas de beta-amiloide f aniloide cetetor.avascular,; dapçditpé: ds Abata; dmtdéba, emapmbhsdos ' , v . ' V . .. U ’ ' ' i ' O 1 \ , " - ’ ' . . .. . i 1¾ Ο® i? ''1.‘ '_ C r Γ "Ί ' >' ' - o ..... .ΐ ..<'u _o . Ί v 1' r..·. : i Λ ' :. λ τχ . i.u a. .. I- ‘ -a 1 tv a t ® r1 ' prevenir a rormação de piacss de beta-amiloide no cérebro; iív) rest-aura® bpbóóaópió ImePto ό· bbl;pdbb:abbn:bi^ norma ip ®®ο:α pé): alo- caíras® :&amp;i:obo:~ê:eMob;:rab;:iâe:, [Q0S4J fira 1 _r.s d<_ .’'λ'::τγ^ t utrn'a onto j. c'.-f"-® m nptòeorp®. on «lláííia ba bibaói:®· booòiéabssfcs: -da· ρό®®«η:®ό iboeboio pótte afe®: baóóixipixbs. di obi®®:® andxb©®bb:g. bo®1 aba *-·'-· n «. i r ^ * ' , sendo capazes dei 1:. atravessar, pelo menos on pequenas quantidades, a carreira hems tu enoef Λ1 i ca no oral Ρό:® ®όό®®®®4®:ρηό.θ®' psuoMgiso®; S. JbpamoHr-se ii psM ou :®Τύΐό: ®Β®®η®ΐίΓ:«ι.8> patofisiolóqicas relevantes extracelulares ou celulares; do â .®edu:qas: :d®. :®όΡ®:θ®ό®ή pabpílililoldg:®'®® óalbvssfcs ο® vi %$&amp;.. bu £m véwvv ó,· ices' r. n;®?® j., estatura patat sielu) vuí.na .relevante e à redução da toxicidade associada a esta; 'St: Ιόν®:® ·:®Ρ' óióqpeóp' pp. :pet.á®dSbP:ptp' d# pposóosp -sM do®:®®:®;; tv 1©:νΡ0 : :4¾ ΧύΑρΡΑΑ ΡοΟηΐΙύΧΡΑ:,: empeci ficou ·:.e órgãos ou orgunísti ccs e possivaimeut e n uma
OtO , X 03 V \ U3 ‘v _ . < O v * ^ 1 _n original após a degradação da toxicidade associada a uma e s t r v t u r a p a t o f i s 1 ο I o g i o a m e it t s r e 1 e va n t e; e / o í 7), Aid: pppoíííi: apsooiiadgA á. Aumentpd· dg llli#-Aedo rl4g;ia:p,:. £44¾] 'la;ra. qdisi:: dis:s:%. a: ©©αρρορβ -4®· xeaAividaAe pnuaaflia ©oat p:n«pur::sop«.p:; M:oÍ%icds: pp.. ddEddsdidop leva S consequência cie, primei temente, as concentrações previstas como sink effects @m estruturas tecidulares saudáveis sejam evitadas e, segundamento, que respostas autoimunes, oó sentido de efeitos n~cuouar o- ixi^íenivCc’, ;g:SãAé: nlt® existam Adicionalmente, estudos p rêvi os sugerem útil i." 'v.·^ ' , ^ ' ^vdi'- n*l uu x e! ' si i r~< „o*_ç ' Ό < ~ <’ r m cc f ivOt ) v. f * t - -v i ar comprometida num modelo de r l t j at ' j v > me" , .o ~ ? '"'ή
(Mueogler et al„, J Kemoscí 22 {2002;, 7218-22,). A. OAA severa ocorrente em murganhos arcAp idosos {Knobiceh et ah, teuroriolv Aging 28:1297-1306 (2007) epub 31 de Julho, 2006) pg#©: ©sai® rpsArdnçrr a £l:e:»ilçi:ll.d©:dl: vâ::Sp:^.l:atadòm 4©. r"U·.· "·ν E-paincm aíctadoa , li m^rn. >"' a. i ; ' o. <;·?" ’ '· m ;· .... -é prudente esperar que c tratamento com os anticorpos da pieati-^ i .d-'' it -°u ΠΑ' Λ"η U ' 3?ί„^2Ρ tl 1 -5 ·.. IPu 0 ...................asnqidifsp sir 4d;riqd:dhp:©: αραα©géni a©©: Adi .ido©® © *....................
Este facto pode ser validado através da utilização do modelo de rmciaulr atrêO de$ ndu pc' Knpblnoh et el, v20jô) , arp e divulgado na Aplicação E. U, Ά. 3t:'' :^ιο(#)β:;Ιι.' '' )ί0(ς3ΐΐι·................... 41p4é:imê®::AP dl:©©©©®"' pot ©t imiti #:i;, ^ AumiitO: A© ©©:Ρ1© 60/932,291 submetido em 11 de Junho de 2007. 11* Anticorpo©: ICO1''- u ’ i ^. . -t i fé, ., jimo, - o„ ‘ ^ - 1 . - lie a pace variantes, e derivados destes,, ag-resevindos nas d abe dsn r e v g' » - t - n x m * t ·>χ para um anucorpo, eu íragir.ento de ; a "rineu , variaruce ou derivados deste, em que o anticorpo se liga te'-qv i i.'-' 'nta a ’'s -aui ^n #é uma ;pagpqaús a a 3 omt-xx t -1 -> mt i i u ) 1 o_e. ^ ^ rl — [0057 3 li: guepuag;p: iuvedqgtí a aiJaiu. beuqsb&amp;dq gara * anticorpo, ou fragmento de ligaçáo a antigériio, variante ou 1 í ^ f x < r m w - , > Xx r = 1 ~· x s xd1 c * °Cv- i * * t a ligação do anticorpo de referência NI~10i. 12F6Ã a um nso-epítopo de urra proteína associada a uma cioonç3.
[OOS83 A invenção é ai nda desenhada para um anticorpo, ou fragmento de ligação a antígénio, variante ou derivativos Média,: em. que, o asiiedppe gumgrpaadq um; ddrainig: de MpaplP ao antigénio idêntico ao do anticorpo Ml-10i.12F6A, [0059] A prppédtê .âav®n#i.o suêMgAiiiqu ainda: 'vifi#q deadas i trloeulr.·' ir χΐ uçâc, e.g,, anticorpos e fragmentos de làgueao. deeUesa; gês gpdsp: pep daea;fc;sr::iuudup, per c gmpreendereir na svu regiàc var-'avei, Uf.,,? dumimip: de ligação, as reqiòes determinantes o;- coit.plementaridade iCbR) das regiões variáveis Vr e/ou Vi, c oinp r e e π de n do as sequências da udrppádidds: apir^séntáidd-s: us: Papais 1' í¥ti β na:· iaiéiá. 1 ....................ΙΨ0",............................................................................................................................................................................................................................
Tabela 2; Sequências de aminoácidos tia região V8 de v u ao. K. -aub xxx uo X x iv i
Tabela 3: 'mi - > t ce m -m lik , f - i-~ n mr ; ί ' J„ aot ibolpda beta mmiX© ids asbaeifloba. :,
í©p;gQ| fie ôequèr.rí as tte ia r I e O t í b a s .mpdlf loant'os cBtaS'Sponbootaa ; pala lo rbdibes· aarlâaeia· OBlma identificadas são apresentadas na listagem, da aeqaiisaiaa ...................Ilia·.: < Υ'Γ-ι jh It re fxn e „L3m cas í-s mêi\„<.s......da................... ,.m...nc a ri·.. a· acm,. apr a d as das rcaioas 1 &amp; V, tal coma descritas na Tabela 2 e na Tabela 3, è ap?esenfcado na Tabela 4, No entanto, sal como a seqaii discutido, ''ddi'peiit'b.....iiS................... ai te albobtlamB ; bem:· ilbbc® dp- facto .de Bedefiffi dei' b.tiii..sadaa: .lagimoe dCite abidlpbama ®a â.Xfc:ed:aea.fe:i.wá'do -#ΐο dl for em na sua sequência de amaciei aos das apresentadas na Tobeia 4 ;pdr· οορίο, \ e$ v u esn n*i» an i κ mim- i caso de CDR2 e Crili. 'd-bdo 1 bèiiSK·: dPff OO. PpOOboM-tUp®. Kãbdt :É&amp; 1¾¾¾¾ ip d % d:® j ", ' 1 v. r n -v 1 t s x o, ' , . -
....................EJMfíj.......%......ibpidoppd... cL· presente icooi g<ao .bedgfdòoi©.......$.................. sequência de amrnoácídos das regiões V» e vL dc anticorpo dll'1! „„Γο7!, » I 'Cos -u uo j- _ t— ^ dc ligação a uni antigénío do anticorpo poderá ser, por OxeppXb, ui.. t'£M0êMm .Pb ©abbf® sipslps r"f i.ediff:i * bit f„3stc Γ ίΡ , nu t^ac I, όο I uc >, e nn frasn-rt^ E -n Para algumas aplicações sâo apenas necessárias as regiões uaoiâeei.s dos obtiodrpobí pu® podem .per' obtida® fctotb&amp;bo: có·. antxo-rpo cor ccr^ct ?; 3 l^qaadae ie rru-o a oerai c. 'çV.·,
Fab', Fa.b, ou FJab' ’ ) ?. Est.es fragmentos sâo suficientes para utÍÍ:fd:ãpÍo;:,' pop ereiripicp pm prooedirríaoto®· pp IDl ;>U’Ç) scci_n >'UV , 1 V=·" J C ^ au'Ç 30 fO'"· de P ' O” ' U' ^ i rnu n cg I ob υ 1 ioa s imcanoespecificas pax a detetar reagentes tais cess radio: isótopo®:... £:0:0,&amp;á'| Ji ' ilweppld ;è Pitttda di rscionada para a j\v t . Ir isolados que constituem oa pptdqpppau ;$&amp; kl· -N i τ v ' i « ti v ΐ' k > ' ~ itv inppípulq
Wfr ua<" >s p '"pt ΐ - ^ >t lo' - ( k. ^t\ lí';,- : c " paíct t oi , a ; P' p s '> dMcggqniq especificas derivadas de moléculas de imunogiobulinas, fM v f 1 -s u.1- u> ή q sx r i x a ir > < , its '\f- ira I t 'j/' i ni detg mimada gapipidâ: dsfppmsq a. 1¾¾¾ #0 pdXipégtidd mracnio ur"! dm c panara rcouènoit ci~ a r.vaoatu >'s irt aliara magoe,, '&amp;, goiigipiidd· saguêntag mm amidoadidoa .que § illWlls :t|p" Utl fC U |H . C t ^ .,05 J ' v( S 1 T Kíx iniciai particular tear uma sequência a« aiain·'ácidos que é essenoiaimpute idêntica à da sequência inicial, ou. a uma ppPgÈ# dêppa,: eu que a porção consiste em pelo raenos 10--2G s' h ''etc·' -, „e' ο , η. r 5 ' 1 " 1 a u n “> „v!'^ , ”a_n r ^u _ ni-itt ill ΙΌ-, Si s ' -1- ' u U.âpa:t:i:facipèl pqt' niSt ν' ' ' * -í a r" - ' a 1' ^ v - 1 1 ~ 'n n ' r ix „ [®0i3j uma ímunoglobulina ou o seu cDNA eoditicante podem áisdà: dag -iiadif Ixcadps^- dsmitq quip; pufe ta fgrBp de depileqçéd v -O-O Jt p." 'f)it . „t 3 ut., 1 Itltv d "v Cn CU. * tin semédeende q:ap:idper eap, das etapas de produção de unt ...................and ipp fps; quiimipi op ., ράίρρορρ©;; iada» ipadd , ad t iupdpp; fte.................. oddeda:· Bisplesq. ; fragmento: Fad, ediieoipd Piéappcçfççip^:. eetieeipu· dp, fUsao:, ddiioedpe jssiPSdd dé UP qaeiosfd da ,urlvj;;>i no utt>_s, tar _ 'un 3^ 1 r - p*-!^ p'^ito^ vrx <tr^ - o<· .p«:bp:dp:p: PdfrppippndpnfSpU' 'PdpP:ptdSpdP;:--®p: iSStPp: deppxd'tpp' pet:, a j„, u-.d' a Late 'v- rcoi m " L 2 b ^ r a t-- m d ual" id ...................FfPSdd Pdi'd: Spaing Bppddfq X:§#8d qiipgda sip:'' obtidas
Juiot us :x ir"' ;np' η rln gel# dipgiap; PP •'x.'icac tc fajC", 5 ret' '"da.' - t^vcutict -i« sueΐ ' _io tai como utilitada no sistema BIAcore pode sen utili zada psttat aigtenttad a e 1,1^101= r'~ a *·' srro^ "t'lcr
Xigpis·: ;&amp;p· mé.sme: ofb.t::op:0: fig· .ίρρΧρορΡ :13.5¾. dps mptropirpás. aqui. descritos íScbier,· Human Ant.3.bodies Hybr.l.domas ? Πbra}, 97-;l>Mf 'Mâ:;Mfe#iVg;í .<tl. 1:ΐΡδοΡόί:<: Mabhuds ibb bibvSq, 7;~%a) , ;% ./ι\!ί.· -b Λο ab ’ ο . p^s „ ι „<-o j - w >n; j,u~ tl„,- Vv > exemplo, no Pedrvie internacional bO73/0b622. Metodos para a p r o d up ã o d e a n t 1 c o r p o s h urns n 1 r a d o s e n c o n t r a 5a ~ s e ci o 5 e r i l: o s, a, pa .,· no Pedido Europeu EP-AI 8 .a'' -b 1 > Γ’οιι u
Tntetnacioual dO90/07P61, 8ma out.ce fonte da anticorpos, a serero utilizados de acordo corn a presents invençào, sec os 1 ctr: i- 35 5 . tfwS < n_rj ον, o o' a., t_ mb* ^ r b 1 v n, . O'd b b __ > XΛ jtr j„ θ_ -, dais· pprsp an:bi.d:Obp:d;S:: bursabao a® e d^c-^^rfv ia*, -.c-, Aplicações uto i e_s. a1'- -I >Ί 11)741 0 "7 j_bi, \b b ,-Ρ'κ ^ , 9-2733735. dal corno acima discutido, o anticorpo da invenção poderá: epiatárr ..duma vaxledpcfi:': de ádámá®. miám de- Pomo urre i,o " vi'bt < ' i' inv·», . <. > o tapir, Γ;, "d<, ri?'5 t:a.I comp em c 5 * «ο ί p^~'· . % ^,ρ:, :,· ss pedido.
Intern ^clonal WÔSi /0 7?44 . pliil] Os anticorpos da presente invenção, ou as cadeias de imu^mb^iLmto ^ o r uç ^~, odm .n uii s-o rt Ir ib iU·^ utilizando técnicas convenciona is conhecidas no estado da arte, por exemplo, através da utilização de remoçoos de am inoácidos, 'Ipdedpopp,. substituições, adibqbb, e/ου e v ni rvò b, e ·> * c iq iv c outro cipo de modi li cações pddáabMsç qstads .da. .ixtb,: b.ex isclodcteme dá am combinação. Métodos para a introdução destas mod if i caçoes na bçquiboba be pili; pubppbspt:®:: 3; ppiguêdeáa· Ρο dm'ip:pap:i.d:®p. .pb s« cadeia: ::ie:iimpppp:ipbMi.i.nà pifa. .fed®, pepbemidpe: ;peáe::s ροχΙΡρ®' ...................bái' sá t®/''' 'vet. b :b,igç::.,''' 5|a®pr Pop>:''' Mblbcbiab''' ρίρρρρρ '.Pappr a. tdap::.................. 'Mâauàl.::, dobd .Ipriiip bixbbr Papqxapqbf ipJBái IMbf, a. ..ftupupei.,
Purr apt. dpappapip ib ebeipbix' 'Sitippp,. Preaa PaèiiiS.àief'
Saapp|p:tp;:i etc Ki lev T It or soignee, N.X, iuiildl:Ap i\ qbwe 's 0 -> bc,,y DC fcmcefir 10--^ ç . ^ _! 'Ivmi derivstiraçõee químicas e/ou enrimâllcas --m urn ou mais cios v< ' n: 't m incluindo modlfreações dao; ρρρρρρρ 1 mtrsirmp::,. codificações do esqueleto de eadeii. ppérçipac^ nc-dif icaçbos '$- p b-sermi riais incluindo scétilucio, nidrot;leçòo, neriiscio, anu deeds,, e ·: ..igaeòo a porções tlq ccrbcn:d'a ;01 ou lipidos, cofetores,. é dpmqibapfepi, ld· gifqdl ΟρΡ®®,· d: prsseimtP ilirvPnqâp. ρηρΙρΡρ » c ta ' s j ''"'ternas iu„nu , na;, juc d vagi tu > j te,.);' as: , ru taUrdi d o^s fnqbidb dq PPifmliniil
•amíriáco a uma molécula haceróloga tal como m Ij i.-nJ ijmtiiiuqddim Pb tempiaiad, dqrhbbllbbdç 'teu,· avgo f:
Pedido Internacional $000/30680 para os detalhes técnicos ...................>#:sqpeqpp:hdgqt;@:3:;».................................................................................................................................................................................
[0065] De acordo com o que foi acima referido, a presente _ V - I > [ i t- -. I ·> < 3 ^ U ’"d t "" " U^· para a molécula de ligação -da presente invenção, no caso do n j ru\ 'Ί. ui-,j i turo' - u- r i _r-"'-d -o i vk cu . ^ k, i b„ mau „ogloK ' rn ·> ' au. o on - ma , «a 1 co*, ’ touuumue, a ..-r, ' roa uu-u ui c\ bb uai >v. :pdl:i:qdp;ie;ôk:lâd qdtprqsindp: pplp .ímííS' a, bebislp ρΚ:; g/piri da bêqiaP1 biapriivel. ilb irêJpbMio baPcpbrigq,, ;tlím pbritp as. apta: sabe que cada donunic variável (a região Vé da cadeia pesada e a região vk da cadela leve) de ura anticorpo compreende três rcgiiè;!' da :kIi:pp:n¾:¾:r:|u¾a^I4:dade:.f:. per bspeb bPbiquqdab regebeb determinantes de compleraentaridade ou "CDRs" flanqueadas por ...................epia tip o· ρρρρδβρ dê: us' fer gbp tb mbláb iudíteq tê: PbbBbr bâdsis ®u................... :'PKb"' p ρ:ρΧΡρρ®νρ;Ρ:' app :peb|dbdg· |g:· drtiIn:baC:i:dppi .#© U®: J tu stp r-st uirc exs nt„ ί > _.'" ·. -ο 'v^i a i ^. " ·· .. ~o . ,. ?; re tipurvar ι ,,η1 ids b , p\ .DPs, C' subtler ip; lutcn- Je ^btipqppdf lepmPrSêpde: bp: pgpbbbdg' did Ipibdbekbpp b pgrbif urn "'sP”cs l1" k ν-Γ" 'kb e ' ) ιΐ,ν t no dami variável da cadela leve e. 31--33 (HI) , 30-65 (H2) e 95-102 fill; pb dditjidip P4f:i::|:vi'i:: dp .dpdplip. 'ppêdda ;tal· PibdP': iPidititb OUsr damn© «-'fS;. B.in:* Wm^a&amp;àÉmB^ :od PirdeidS ύ·£ RmmmslBMi'mil Interest,· 5th Sci Public; Health Service, Ha l; i catei Institutes Ν“ ti l ί, P i d ' " ^ -,. i „ ... n . ' hipervuriávei, eug,, residue© 26-32 ÇL1;, 30-52 (52) e 31-: "* 'Li d^ip-pp^Jp j - ' 1 e <. ^ V. t , ~ ~ k t ' jí i" 1 I I 1 f" ^ * _ ' ' _ " ;j Le, > u t* ,\ , ' i"-?" „tl tn CL ©I,, d . L'iC'i.,:: M#l,, 196
ί I i:P'li,, 'Sil.e·®! 72.. 'ft® ©©mlddd© -¾ «dhddddea. IFraddmddfv &amp;&amp;. RM , t <=· -l “--S Cl tie J- can ji_- 'P Í la: ¢. τ Ε "V i£ regimes: &amp; idsmo: '"ι:|ρ©-#:© .radgms-®® a. am ahMmdrp©' mud am XI gm a. hit .anxXfáni© :p:aê;- dad'etal'aad©:.,. :llpd,da:m:gíH.t:e:, © andX.dmrp©: IXgd-:Sm: eraa sms ...................©dPddaspd dd dissddXâd®:©.....flit.....éú; Xd:d dá: ddump: d Is m sede ca................... I v "I v> a d-.-' U c t r tlv1 T d > - ça_ O US n * * vau®.:©: mahdX 'dais; é, dsa, &amp; de .Xigadâd .«. ©si anfeig&amp;dd:© inospocifioc |a,::g,: í.: Bdl®, caseins, ^ * 3 a 1 out t c ire|” j.jw c ctv> t. < c- .a di ferente do antigénio pré-determinado. λ>. ís..,e> " m *. '- (> i>' on* ratontata um
Pt li ~' ' VU ! . 1\ < O O jr*U < pit l - * v. v. " 1 . 5 aqui utilizadas xnáistintanv-nLe coo o termo Uurn anLicorp© q _ s< in, uo=t * c u «xinui ia' , Γ3. *. aouj itil^iid , uru " ~i J t mu ' pnuj qu a.. &amp; 2®:l,afe:iaa da ahdíemap©. para d ®|iXfcdp©: ala©: dspddiJXd©, Ξ C^-SIUtíq ..é....:pa2:©.,:©;©H:©a,.11.0.....OU'ic· 't O ,-r It Cp- A Kr, .para: &amp; 1 _ ;iç?c napalm % ntnuu u . ntic. h led \t t u a ©©Htiriapaate: naMvs. d® pmasdlm sMddlddd· á dcia· ássap:,, 10066] A afinidade ou stideo de um anticorpo para um áptlifÉíSád ipsáe;: :sa:t:' dq;táfminada ©mpqrdméntalmBPt© udiliqaddd- ..................pdaX quid:"" m®dsâd"" adequa: d:©® p®p: 2 ppr ©χριρρϊ©- ? Beruod© .ky em. .a.l,:/- ,rAnt ibody-Artt ígen Interactions" In Funciairiqot. al :IffiÇíad®rdif'.,: Paulí! %-: E..T Sd, 7. Bgdqn Pddda W0$ YmrUj, d -f d 924;, Kuby, Jan.ia Tnatunoi oqy; w, u, Freeman and Company .psd ferd^ E d 'lliSdl r % mÉtpddd idqpii lemnioa©1 gerais par··', ά mod i.çào aà ai:i rd Caõo de so afsticorpu para cm ant ipèrt;· o incluem ELISA, RIA, e ressonância pi a a irónica do "'a·· ; n‘ k , > 1 a J . v - u , ~ -j cu ·. >. s nn n >;o s i >u, a" ' ne ni' =0 ^e 'eu ό - m '^1?'''* 't,'! bdndaçSlàp &amp;m,r u, i i ,,> a, a i n·, ' J, u, v tu no ·% '.up to t ', s' |'v ι^τ' ,? a- ' i> * ’ o , c -j , diu -eb.u são preferenci aImeute real!tadas com sc locoes padrofii nadas de anticorpo e de antiglnio, i pm tgppSp .padruuioabo·.,: [0067J Ura perito n&amp; arte apreciará prontamsr.te que o domrnro variável do anticorpo# con tendo o domínio variável acima l^-'t r^.t1 ->1<- .-v i>nl ;,o run ,, . itm· i '~ , ,t>'v ;|Sd;Ip..g:i:pii.dO:Si· Op· : Util.ilprpOU id- qupeud fioi-dodUi: ~ tupdlu· ^ x' ~v "u ]' 'a Aquiou a presente invenção também engloba poixpéptidos a anticorpos compreendendo· pelo menos uma região CDB dos oominios variáveis acima descritos o que iqnrm, q&amp;uisg οοίΙίί^ηρΙοΐΡίΟΓΐΐΡ' «o »(fai t t ' ·-- c de ligação, og prqpuiedades. 'dg llgoglp semelhantes, ás do anticorpo descrito nos exemples anexos,
Ji p^ iw nr i _ a íO._jtí ^ ^ ~T - ^ gU^ '»c bi li ϊ u t_„_ % a, 'nr,s u t'DPs aqui descritos, podem ser :bsLi ili vi u p i t- a -< r i > v.rii - Τϊνΐ ’ ^ :: ihc "luu; no estado da arte, e. g., tal corno descrito nos Pedidos de Patente Europeus EP 0 4 51 216 Kl e SP 0 54â 581 hl, mm abler blqbtq bis perl: to. 1¾¾ alls pape; quo.· q atioiOdbl :dl llqsufc .................poder ·®:!®!;:3?·'· tí;a· raaiinação de substituições de .............. aminostidos no interior das regiões CDRs ou no interior dos lobjdl Plpé:i1?i.:feiSv@'i.á Aliidtpia òitd ilsi:·,·- 11, Mói,, .Sl.gl:, IBS- ...................ilSf' fig.....SillS. id' p pite "WMi 1·ρΡΐΐ;ρ&amp;β®:' ps u pi a Imeiibi'' oqm ai'' rog ISes.................... '"'õ "η _ n o _i i , c t x i η α “ H- = a, " m - - d - ι , -u „ oambem ao rebeae: á '®n.qIopupq-g em gse; uma mà 'paid dai referidas regidas CDRs compreendem uma Oil íuaifp {usa^rne.-í Tf'"“e iàc maio do que lias, cbat .m^ot Je ' ' ' P r e f e. l e n i a 1e:tn, e? t . t ^ 1 ^ > ®çppieé:ndé: pursp; :bg. g&amp;. dpbgp. .aâS: - ^ , i j a" ? imunoglofcirl ira, 1 t , a . ·. Prfe .]íg||;|ii: Pffids bps * v t v s s f ^ i £0068] M _é il t : „ u<( ~.u,, ar;. ό “'·-r, ar '? cie ligação a antígénio* * j - o ~ , a. .lv.. s invenção, tai conto conhecido pelos peritos na arte, podara ">T c- an . - j -' ” ' t- t oik «o 11 - η Ίν ia t t " <= l , ? ,, i j - ,-j lo , f r 5 it - _ j; Çbbpigppmdb p ái rgplip· dogstgbbg: gfe 09?! ΡΡΡίοΡχρΡ pdd®·· lald-vax p sidçéisgi. tb-b epmpdçèstédfeò',· .JV :gPivspi'o· Po :glsdps% be uJCU ΙΊ'.Ι. V „,'V ( '-1 3 Τ' v ÍM o^eu -isà^ O' _ 0“ ' >- 'ÇOUK « gglpiãdiepo' P: ativação do compleir.er.to também estimula &amp; tO' 5 nf ' U o í*- i - d et éOrvçiiviPo Ora hipersensíbilidade autoirnune „ bili®daisao,: Ctl anticorpos lígam-se a recetores em várias células através da região Fc, ·. 3 , _ ~ ict c ' ,. ,. s r " r ; . l.. :à pç pp bptb.bbçpg'· a Mggr-bgí o, tos xgpgtç-r pç ·ίΡοΡ} psim a i , α. o o" n r^tc oe *. ΐ > e çs .put.,*, para p:idg.çg::btgç i çlibdgs bp gpiilçççpgb,: incdaitcbo xpp hrpçslbies ppmapç Ipf irpceopxs:® ρρρίΐρή): *:- tgp todéditbde# alfa), ο I. ^ [ir;etr'_í ç ' Λ iig^oâr uos - ;P<· íccoí ' p:Ép0:0p:0 ,Fd: pbb OOpéCpf l· PÍ OS bgXpidlgç beigppdbgid ; UiM· (§ΡΡ í Ρ <is pgapopdbs; fo-içlédiçbs .impopi^ddds m 01 dpmpm&amp;r indl.mçds· abadrpi;® .d desfeçaição dg pabdipPlgg .bddgbtPbag.. .por ...................atíbiççdp© t. dgpgrãplpi ete çddplbdds..' vbrobgç > .laap dg çábnbg s................... tl <. ^ -s" rda rj' af <· vi Dv. » i -x asiassitâs1 (designada citotosicidade mediada por células dependente de anticorpo (antibody---dependent cell-mediated cytotoxicity) , dil <\Pc\ j , libertacao dp mediadores inflaraatorios, t ;u.ò: Ρ^'-τ χϊ < - controlo cia produção dd imunopiofeu iinad, [0069] Cocsnquentemente, ;®l:§i|qa;:s ddtizao da rdalinodio·: ^0011:00®:' C|t pdéd:OKt.:É: 1¾¾¾.¾¾¾¾ £:8¾¾¾¾ 0:0· a:àtÍ:0drdO:;í.. d-U "liiít fragmento de ligação a antigéuio, ' „χ ui' " >. < " ; i' s f, , rít. ,5i "- 'ti. . , t '' : " -> a cd. i i ' „ . . adideráidav,: du- dá moira' Ií-hí. í._ mil '-t i, '' 'u ' a '>a t m. V i -£ au a t ' ' st-mis tiAj-af.: \u tal 'a..'’ i'i.iv.® e íciu". ec, S· dadamidai® da; m» dimemiaad d®· fartiu ala aodaledda, capacidade aumentada de se localizar no local de um tumor, ipm|® da· dem-i^dida aimima: meda;.rldqr· ca 'tampa ám sami-'aida, n i ) .m "o-ft cogi rim -gadiaorgo mmmpietm ®. inalterado ccm aproa ima t amenta a mesma imusooe nc-ioid=íde . Por ...................addmpiaç;...........parir' ut i l_ c svà ar το-.,ι.ο. ue .............. diagnóstico e tratamento aqui descritos sáo anticorpos com 1 u11 _ ^* io 5 *-.-1 ip.t ' -t a-o 1 i p _ ' ^ d
Stefneihaote a una cadeia pesai ϊ ce xnunoylobul ma, mas quo n&amp;o possui, pelo menos una porção cie um ou ma is doninios de caceia pesada, ®or exemplo, em alguns anticorpos, um doavinío xnt.exro da região constante do anticorpo modificado sera removida, por exemplo, todo cu parte do domínio CH2 será removido. Noutras formas de realização práticas da presente coeiit i , ai o uns απΐη --'-.u tu, p.„_ a u i~, i ~ v.u ep.ccli- at diagnóstico e tratamento aqui descritos tèm uma região eoaetáínoí eve?·,.,....ama....rogiia...cPdCdidlts: .id midaia,...pecada-... ;lgd................... .que- :#- ai:qddada. da- inarms. -a alimlqsr: d, radar Ιό®®- montra iodai. $ê:w&amp;&amp;· 'ddp:tideddp: cimo antldarfam aqiidoali-addd ...................ou d úiii-^u: ®:f tas; .$ qtiqd: igaa '"'agia:-1 pddedv <f ar § rmparaiaa.................. :ddu:rmãd-idâded:t:d adi. dopa por da:n::XdU:.lddid:. das 1.podia· sammsama· ;id .gli:cd;a-.i.i:apld: .da.: tsgxla dPnd-dadte^·. :lmPora mia aatala, vinculado pela teoria, pensa-se que os anticorpos "w'l;gil:w p.O^n t r a pk i i ’ pr- r l ρ- ->t,Ov ^ -n 3 S n sfac i 1 ion Λ, ou vfvd·,. MÉfeoSda ·Ρ:ορρΡ:ορ:ηρ:ΐρ·-da- aaidmarpas· aql.i.cdd.x.ladod, miada. ' fp"v^·”' -1.10- -'S =>.-, -r. 511' t ‘ -ik1· ^ ν_ , doduniendo:. W$ it) SdiS'llSill: [0070] ; . ^ ' ν. , , t % ic ΓΝ , * « antigenic, variantes, cro derivativos destoe, aqui descri tos, a porção Fr: pode ser mutada pars diminuir ai tonção etecora ut iid-msmdn rgsnitae nd odiado tiç grt®,, 'Põr: exemplo, , N r< vaT,<=" < ^ ai na ' m· n- i s s nu, d·* 1 <- i ^ ^ „ t ^ pode red'd si r a ligação a recetores Po de um anticorpo modificado ear v ' -\ c arv- t, a-s , r-Orr aumentando a K ' i ' ufa d ' s - - t , <. de r η r qm a, modificações do reg'io dDmsdanf:®,· (SMsitóítfga Qó® â presence invençã”,, moderem a iiçasse tr complemento e assim ....................mddrrcaít.......or tempo ##...... s^mí-aUia rv> n\ .....e........d........assoçibdia:.................. - ^ Λ Ί Ί i < ' t -t v n ''us 1 1 _ ^ ] t 1 > '0 O ·" 0 *λλ ^ , l Ή v „ i j_+ ,1 j 4 1 i i H ~d - V.r c· < ' os t> )) u w. modificar ligações por pontes d issulfeto ou porções de ?1 > p;^o;. dds odd permitam uma localização aumentada α; ^;'':. da e s p e c i f i c i d s 0 e dp 'dlgiM .01: -mtc n> ® da fln rl_„rdaie cr mritcvc. - ο'till fldldlaqiPtr ρρροΐ,ΐοΐιρρ:^- e :00 troe .çfpíitos Mbqdtmidõs das urdir i3'.V‘t td em j. imimcm m · :rv -·, i <r oi st 11 nl ί çAc e tempo de semi - vida sé rico, poderá facilmente ser medidos e dua:dl::i.Ii:dadd:s' ®»idi:Sa:pd®; deosisaq imun©lógicas bem cond^c das o<=>t íxo·1' 1. rciit 0É$&amp;] lõfítaa· .®©dl'il:ladaS: cia aóblbõlpbs:., o.u ifsqgiiedibS: de iigadâõ""ò --ο.- _d"0_ c, variantes, ou derivativos destes, Sá................... iiiveáiglõ podem ser preparados a partir de precursores completos ou anticorpos parentais ptllõjapáõ fscnlçad c' ir,- una,- no ^tai r<a e^ie, lei nuas ^ /· mj il. : tt ivas ^a'· discutidas aqui em maior detalhe.
[0072] Γη .nru.s cm-r.v: " rt a 1 ’ - j :õo cLc-ncr* it ír^sante ιηνο,κΓη . vu 1. > to rfeffbdg v«ri«vé:|õ: çpfp: a;® tõflões eOribiCUbib®;' PP® «'ΜρΡνρΟΧ , bll £Sm^míÁM&amp; 'dip· liigacéb é, anti génio, i ^ > > o ’ ‘ " * > n , B:ãé:' éonip:l:eéani®:à:é:s:l buihmbb * :énéd;c:srpçc· cggipéétdíaótiéO'. éésiséo®:' ϊ v w v c ^ i i t j < v i iii ί\· ό- = k n v l - . vK u: . l· - \ o v * ' '*' W = > i ari i_>3 ' ” 3 ' * „ v N _ 0' w i c- " i'J=' i.i pie: dnaxes 1c, . ooutiaiA a„ .. ligiiio > x i. u * i i *. „ '1 f ϊ gn n .·> ’ dv. i v. va i. p_ n i éi.ié' iééicérpbé pm· ΡΡρροΡοΐΐ a gm· 'débadiç aatapdidlop:.,. mag. co <. " ,,\3U c mo' η * wCi uac jidc a ι ηοο„, Técnicas - =^0 tit- m;-1-" v,js Lt g 1 i éér iitxilngbaé ;par;a. pgpgargg· 1 >· Le ~ Λ A . , . Ό: ··-..: . i £ 1„ f,b .. ·· hi O '· ij- £ tol·- Γ J Λ , 1
6.,150,584; 6,458,592; ,4 0 Μ < ^ ^ a ώ v ί Λ Λ - ' tvUC ticbcbss ::aq: «séabb: bb a viça:,: Xgbibqrppé caisgiaiiaisaéta. hgmanéà podem igualmente ser produzidas por várias tecnologias da exibição, réiifi,: -o > c4c -u -- < u ^ . - ,o>e a'„ - ra^ exibição virai, tail coxo ,ηί ot r,n"t ί r-_ lieafee 0 .víjnntL rn v a-1’ i _i a , [00733 Jbtxcbrpbbç ia: 'fgabmintdi da. _^v;:a a ιΝ^ιο n, vsrisétdd, qu ρΡΡΐ.ρρΡ.ι:Ρρρ dpabss:, da. .IgvsggãP qdbéiç spa. produzidos utiiirando técmuvas que são conhecidas uo estada via a.tu, dia cCvtas 1·. rn.., -. ^ z.d' alr ad..jo ·'·,·. pv,x/'te uiv-enuic, and é n leni ic ant i, orpc , «. \ ír rçiv-u i oo ΊοΊΐν, são '''proddiildbi: pé déciga: repqqiàlpap-ib^d' á.opu,: sac arsicsaaá: udididaubb m 'bébabiapiq.. Pé :¾¾ réépéteisaééé·^ bicggcgb ...................eqcmpi idéo-abi'νρ®: ;,pq.ra a p òbdddâci ide ^poddapdag:: bé aédie eiépQ;:, ................... ou éiépáiqnéqP deét:ce:ç" bap bicgogibag. épgbré: .iotiaX déqge documento em maior detalhe, Í0:07:4| éséicéépps;:,. 1 ^raqa ntr 's n«. '‘igaçtn, -=1 »»t . g^mo, variantes, ou derivativos d-estes, da invenção podem também •rc'rir di" i vbm que tb rico , " - n ic-5, o, g. , pélé 1 vP'.v o <- ϊ - - η ϊ -r*- c gu^Up i iv e η.χι vi gb .5n l ic ru:·ò ca. v ¢1-1 - ι 1 ό at ΐ U 1 ,M' < P ' > ^ ' cU v ' "
For ensmplo, luas nâo ocao exemplo lied tati to, os derivativos , - ' \ l O f „ .v. V ^ v- a Ο ' ' ,(.1 C, :,: ρΛ 1 . ' v aJ ', ,.· J-U af ,Upl...n, PC, I u + ^ 1 ..v > . rcisas:,, 3ν:νιΐ’.ΐ'.·„ pc' i' r;s ut p.\>p / bl: am i '
qonbecddqsv: sliTOifeai ppqdeqd.:ddl.di:::,· ligação a: m, Idgsadu celular ou c Pra proteína, etc. Qualquer urru-j de numerosas •codificações químicas podem ser Levadas -a cabo por técnicas -"u- -ό> 'd£, -Uwiu u<' q cm ni ' 1, r_ ac's c, » Li" gen omncJ eapt-rit ca, a. di-au" ·, forroilaçâo, síntese metabólica de õ í: .m.iu, -3 . ~d L t díeed , ,’v, j--t -u, I t - :e-u ................:iM.. dd.. dide;.. ddiddadddos... nd©.. qdd® ed© ds t......................................................................................................
[00751 Sm certas formas de realização práticas da pure sen te iúqõúçsbí ont icorpos f ou £ragmen tos de ligação a antcgénio, \ * nd r:, ,r. . o'.....3. n es, .... i ivmt: '•àc u:;n n*! 3 ' ^ >s·^ r.i.Lu i '-m ^ -maL-tmm-n' * cp ui Lju.,,:. m t - - r una te U vSlr: p. - v - presente invenção, íaoiécuias de ligação, e. g., anticorpos, icritu'1 v a ' ^ ’lotí ) a auii.su <> > vs it'^npc sau
Ui vaJ n a peril'' cu mt . g , um rnup’d^ him ium· p- são subsequent emente 'utilizados na mesma espécie a partir da .qual foram......ϊίΙρρρΡίΛ®./:.........d:,d©r.......dumado,.........aldgdand©........cm................... rrirumizundo assim a ocorrência de rseppslta# imsdidapias p r .e j add© dads .·,· [0076] d dfâadiiudiçáqãp· òambSm p©#s m©© ©rddd^oada: papa admdnddr a ti']qiu:ndqeped..c:idads: Lte pit apdipqrpdu· dad ©Pdd aqai .................iiidlddsdPv.....© mt' > ’' It^injrndl' _iu Inz .dUr^-vc.'! .b urn adidootpb pars do.dd:d:d:C:a:;r:upp :ep.ip;ppqg dd: dddn'lds'·'T Q©®©· ®v.:fn, doòu»ò:nd:p:S: WddSddQ? &amp;&amp;!,. dQ:ldd:d::Bdddi|'v. ddl; sx©®©!©, idu. as ©H e VL do urn udicctp ) i.u :-d uàu -md .ssem ¢= I . ( vo ifi 'nan-'' i« up op® "Ί r u a' 1' .rl jl. % .¾ ©add UO- U - >* } - 3 < „ 1 ' r « -.- v L } 3 1 ' t_ v f_'J{ (' ' ' v “ O' ..- id V ' - C 1 " ' J " 1' ' ' 3 . [ν' Ç ' i 1 „ s t c -v k Ή 1 - „ “ n íápaXlgabbb por forma a itfeptLXicp.t vd * Hi „ ^ - .¾¾ iut i t ,v : - d > r cits..; t “ - a u e om . ;n Ivt-. « > ί 3λ- > - * , ** ς-' -, r 'n a
Piivibad© d® aptXpprpo Si Mid: 8®·. verbidbile. 'bp ¥1 «; ¥L axtdvha/bivPd sib deeps hpidps ápmpEaeaiâtPPS QorabXngçõPs :áe t ^-ίΓΊ\·) - de iri'u uai -» «-'ν' pepobnpigsi eip m,s>-c»> i c , j~c irns ^ n e ι*- ..> Ί η~οί i -> = :#e: ί qvi , -5.*7. , anticorpos neo-epltopo especifico, s«, SpegmdnpPp i®tppgs:pppi:fi:p0::&amp; gpafpp:,; pgrp 'Utlilbapio pop cet o 3tt ae rtipiairiiii o Η: Ρ-Ροοην tup. > !i * l.lgado° , quo a,® depois testados para a fr.nçàc, Tipicaxnertte, enure 12 a ifl V V 3 S ' i K" -- p -' . . > ' <' < v - V ' - . ®
cadeia pesada e leve completos compreendeado regiões V modificadas e C humanas são depois clonados em vetores de N v ' 1 - t - n v j.u·' ' j ^ d s _t ti mi „u S M
XipftpO: oplniam;® fpip p prdiaçâp do gnpidorpc :b¥roplpp¥:,; ¥e pniibpcpes Pip depois pompsioios me ipSalop paoqxLmiOO: d· biológicos aptopd'isdd®.,:. seod»· 'XpopOldlpaba o: osbianip biiíti oabo, .....................£Ó 07? 3............ápt.iggippg· rasiasrlonais pódep dip: p:Pipaiadop................... utilizando uma grande variedade de técnicas conhecidas no estado v arte, incluindo a utilise tão de hibridomas, o ' · rito - ·; "· _KU ir 'CiCivrr* ; r. t^ve ;' ·:. α -no-, - r α combinação destas. Por exemplo, anticorpos nonoclonais podem, ser ι ί' -'d ,η-ν ot Ji~ando teoivcas ie h t‘i :r: 1 ,l ocr a.- t^ríedi-f "j -s‘ad' da a"1*- o ii'-itmai, pv «'-nrcJo,
Harlow et ei., Antibodies; A Laboratory Manual, Co.d Spring urv Αί·· a « ¥ ι 1 pH , ] v ' i i - > .,/ one Monoclonal Antibodies and T-Ceii Hybrrdomas Elsevier, SLY., 563-681 (1931), 0 termo ’''anticorpo monoclonal", tal . .. - I ^ . 0-,. „ „ _ . ' Is ' prodncidos através da tecnologia dv hibr idomas. d dermo "anticorpo monoclonal" refcrs-s» a ma dutdoçepo' §as· d ddrtdád© és t i \ i -, ' t 1' ' - av ençar ió t. ioo, pro car iòticô, ou fágioo, e nác c ir erode p&amp;io qual o anticorpo è produzido, Assam, o termo "apti corço ΐβορΒοΑ/ΡΑρΙ" q|fâ sd qnppndrá 1 m,_ i ..i > c.ci 1 mm s p _ud--..ΙΟΙ ' o í t 1 t-v ' Ό ‘lJ ill ’ , k' t. -> ' tUU ' i -í j_ 0 n'‘ Ce 1 p t'pr 1 ην id t1 ' -ari: jr - 'paiMf ' ϊ' ais > do '-•ο·' o -o·· concealed- fc t-?rax' tí íuíò, Lo ut:'.rrcro : ··.fpua= tfe r'éa:l,i.'2:a;:çã'0' pdididdd da diAAédhd da éAidc:o:r|sp:a da pio 3; Pt' pu x . . .-uJ. L íriu n. P! 31 ta-r -010 r >, .-· v. r . ·.,.· ·-· ··'·,. ϊ · ·η\- i a·.. r:: '..., <. n - r„ . 3
Epsf r 1; --\ι r, * P o\t, aq., d^erjlc
Lo }> o . 'to·. ' - to 00 a'-'·' J- 1 o - } ,dc Ίί-t -d ãi;,,:^; .líatsoo: 25o:115 nddSàJr PS -i 1 . _ r. ^ = dé v4Sa rdcacddamondid onsta;,:. 00 mordada, do a® .sramMs% aédddãs &amp; dsdivpidàs de 1® auge ir o humano lai como aqui descri io, sao fundidas cem uma iir.ha celular tumoral imortal Ipgp*., un. 1 1 rha ι,ν" u" 3' .*r rr.eíríu' ( produzindo esslrr. ο.ϊ u_ 'ul ridas, .1, "n m >crò' ίι- s , 3 ncou t? de produzir o anticorpo geneticamente codificado da célula ...................Bg.........:®.......dfbtldpi'....;. .peididddt!®:#........hid.......©epar ados.......eia.........éddi f pie:................. genétic&amp;à únicas por seleção, diluição, e crescimento, sendo ddi dada ddfrapdi individual compreende genes específicos .............. para â........£odiilção:ddé:' um limo art'c vrre*........Içdsp.......pdçdqççSi................ aBtrEsrseg, qnd .dim dodogldsoa monAma: ura amtçqdui:® dadsgmdo a:.,, ém adterldsia -é miii '5t g^u-í-im oiro, did :dásd.qnidoa '"moaddi©s:addw, tDO7@3 Sêdudad de.·; ddbrcdodr ad'sdd priparddas did oamdadad .·© cult ivadas f um r·»- o de cuirura apropriado quo concern p-L'i® η ϊ me η-"5 ru "tip uierdn-m1 qu^ ’ r- -'~r d Μ; a; .· ' 'it- 1' w'-- oelalas d.e mieiorria Ϊ ' " ' v. " 1 ' * . - . V. , ' V ' - Ί l V- i . a,' t i „roj : „# , ό ”a ,. λιπ,,^ < ' nl> f, m < 11 s -a V.. >s *ii - i 1 * t * ί i * * a ' _ i a-* ut
MdpdMM:## â ;ΜΜΜ:- 'dd a®~ ' - ^ ' - d -. fcun^cedores,
Mdisftí'' j ' 1-. ' :gá:dr#M:#aMa .’!s«;a 5Λ 1 ' -<sd Mi .„;c, s. .fau d^ _e ' % μ ϋΐ -a-. >\'H:as M 1 % adn:s
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IdgdaSã; dps a ϋ i---p<# nu a- n,a_s l idsX . ιον> ς M? ' ^ : u ju- f- ilP1*c k- ^ α N !<. .idknM .. ·χ _n- _ ·_ v^> o t i - rn —
.η ap^) rtjd^a, dMlàxdíW ............. [i?JP i ) a a Tru'i ' u-^ rT-aii Λ ’,.ϋ,Λ > j da n,p.......................... ia-a1 -1 ida1 „ t ^ "tá ό a d . __ (* Z “o- }, i - vi -"- a~ i\j \ t -i '% <_gxr ίο: ^ Ml :β® agM- MMoiM* ligcM- aa :Q:sdM.a.a· o# ''SISSSH' ·ρΊ#Μιο#Μί dg #ηίη#Μίοό #a especificidade, afinidade e/ou atividade desejada, serem idMiilfooãMSí, ·ύ&amp; sisass ρΜοκν M# soMlonads# #030 pMtlliMlM: M XiMtMio e "d \ - -1, ~ _ v #''0
MMid vo< v'P, ;MM:oMona 1 Antibodies: Principies sim iMoMd#, Acj Mni ~ Iraa?, tp f :-lM ’1 ^d 1 . ie :a -ιχηοχ apwiaii. ga# °s anticorpos nionoc.lon.ais secret ados pelos SMI»:®:, gaite® #M:. pegavabM M ffieM de -dMbMdi, xlldilid. M ................S;Sta0S::...Otl CMPP ,.. £. O j ΟΟΤΟΜ S Μ O Ul 1 t . ” 11 VX Ο 0# r \ <_ J 1 - i tJ 1 a 1 s ? MM pops, Ki otoM, OliiO-.ú-n, :eld|ft:d|Sf|S' g# feáivopij.apat-itia.f ; elacvMoaes# μ se;..l,· dial is# op ..............ci ·>Γ#1 a " a ae ·; · nn.vi·, iragpenifc se ág. anidjnrpsç:: pn# fidôsMêt® £sr“ raparenta #ilo o p.^aerr snc q ';u to pn ln;nn conhecicãs. ron exemplo, IlapisM Sab- fô ίΧΜ"ί| pódim igr pvodiliiidosi de· ionMa ttMli ηη#:1# o# pot slipapai Ρ#οΜο1:1Μ.οη d# ^moiaonlas ip on :M obulinas# utilicando ániíist: dai si; esia a pn"^: nnn oc onn' i nx ^ Fzbi ou pepsins (tare prod·.; rir f.La g inanios PdD'u; - Ou fragnenios . C j tS ' · vl' a ^ < ' s - cadeia lave e c> domínio CHI aa cade,1a pesada. ,,00811 >,r * ; , u ^ t -i s-, n ... _ ^ v p> n n , ^" | Uo "a * ^ ·< v - - +ί -i- >> ^ L St-O „ V , O j. " . * ' . , ° O .J - tl -1 ^ l t ser preparados por urna variedade cie métodos conhecidos .ao Bshgaíp:' da. ρ:#Ρ®ρ incluindo cs métodos de enibição em fagos acima <όί r's, bibliotecas de dcucmí derivadas de sequências de iirunogiobuii nas humanas, Ver: r.ndeir, Γ^ΐι :d i,6, 1 , n-pd , i _ 1 .; e Pedidos PCT WO 38/46645, WO 96/50433, WO 90:/34693., WO 38/16654, m 96/34096, m 96/33735, e WO 91/10741, m anticorpos humanos da -presente invenção são isolados, e.çt, I 1 “1 ( P 1h r V c C " S < t<. f í C t o ^ dispo- de· podere© a BpBBpâ, *a, .§o,: dpphpa: dfe .hXpihdilÓêd',· OB. Bit pãBBBhBB pOSl B .dp:éú:Ç:it.f Pádí. BÓB, BBd éÒPdPpdd da ladeada. ;i®Vpi:§â.PSídndê:: :®sta?del, [0082] M ,' _n : .- aa da ea í o ...! ptsmn ( a ;:ι..· ''t.L-: iavsapdd., p; SMli ββΒΙΒΙββμβ© par® «g: ρβΒιβοββοβ ®οβρβΧβββΒ§ desejados pode n-'- pm-nan-''Τ- sda;' ^ «,-qi®tíCat: .............. v i ,' "=s i c> -..· í „ ^d n ' -'-u o'- c /iifi,.,.......adravlp:.....ds.................. utilização de sondas de o1igonue1e61idos capazes de se 1 igax especiticamenre a genes cedificantes para as cadeias pesadas e .leves do.-: anticorpos murines'.; 9s sei u, * d-·? rib_i> na i B - - ul 1 i <i- ' i τ * n ‘ k ...i_ , ou in tal DNA. .Após ser isolado, o DNA pede ser colocado em vetores de expressão, que são depois transferi dos para células tospddd:!®:®! ::pro:díad:d:pt.iída:s bb ββββΒΙββιβΒΒ/ Ba.i» BBíabq: mã&amp;.
! j j 4 ... , , vd i_ o- e. lia, .16 a' i tc VP células de Ovário de Hamster Chinês (Chinese ãsmster Ovary id.il'), ou ^^la.ln. da toalotu q.ía nao çi ;... ;rλ, .e :ua; ; » κ Kit Ν !κ κ. si.. “ ο . ' "it κ * , "‘Τ Κ'ΊΐΙ ' . s' ' ' I'.w, ', 's<> ' ' ' ϊ , Ç ll"sl S .... - a_ _ _ ) ~ \ϊ
' ί Κ" * Κ =1 ^ <. ^ ί ·. 1- 1..01. V •Γ'Κ Ks-'Kii S . 5 Κ - Γ - s'1 "> ’ ' tu ,ont s s s 1 . ã. ÍVN. , S ’ i , \
Ur’.». ! H > < K1IK .K X K V 'U”'-* 't“'it“,, i.'-'-.v '{ κ ’·* a <- κ -,*'; j t ^ rs 1 u s. 'J , c <1 ..·- ,io :κΊκ ror .M.; e , ' kc) ' e.o_ a u , e '\ .ii ’? - ' \ κ . ~ ϊ i t prmecs específicos de X-g. Primers adequados para este propósito são também descritos no Pedido de Patente E.O.à.
No. 9,658,570. Pai come será discutido em. maior detalhe _ .,sr evt c tr “ot®, as o.l dut '.-tOatlíí bKpreo^otas do·, anticorpo desejado podem ser cultivadas em ripaptidade. rdis:fc:i,f:ad;elit:s pralndep para: pippdPciiG^r abssiçpimerdo-s dei ÍíadSpgi::ád:uÍiX:pá:á eXLtboqp .©: eòmppÇ:i.a:i.s* XCO^ic . .. 1 > ---- . κ - á sequência de amineácidcs des domínios cariáveis d.a cadeia * ί .. ·κ V ^ pc~Kr >k' .. ·*' te ,Kt< . q K -- κ ^ ι-κ\-ς 1 1 ^ .ck. ti1' i. "" 1 s"v V"0 .r^·' t (CDRs) , por métodos que são bera conhecidos no estado da arte, ei:|i í peai comparação com. sequências de aminoácidos Ppphspibap pé: puirás rpdtfes vabidddli dè: οβΡίρρ· qepddaq ................l.f: wtò&amp;r............para...........bdtf .rmiha t ps............-m§ ides............tie...........sequência.................... hipervaríávei. utilizando técnicas çoçiapi ias dá β· recorabinante, uma ou mais regiões CDRs podem ser inseridas n~ a ‘ON)t * rOv'lo jk “cu_. -Kre (t> -< «m < zkx, o o,, sm. regiões de estrutura humanas. its reorôos de estrutura podem áêt. .naburalmenPe ; ©ççrrbntêá; do Pé^i&amp;ês; de êptipinid consenso, e preieteucralmente recuoes de estrutura humanas (ver, e. g., Chothia et ai», d . Mo 1„ Bioi . 278:457--i79 (1998} pina era®.: ’ J. t> g >ck í- ttriim hK ar ».k dil “t*r π Uçh1=s = i k»j “ai "ac ί tntl b 'i irj.e. b iqdêiplo:,. p- pioi'dppciebfcidd criado peia combinação das reiidSS ©S. eópruttdfi 0 dd Sõ®© ©:©Μ.®0©ύ:, *M a:U:tfíCOipU:: que se liga especificarnenta a peio monos um epitope de um v, > i s > 1 o > ϊΡόίίόΡί* tfe '-a ί àu η M , - A p , ---.- P > u '!>v ϊ ' , r i u ' , -nt^ t j ' P ·.,© *'i ) > i i N ' ’ , t interior das regiões de ,ο.ι >Vo, -poa, n~ m. a iw.._á.> L jjí o u ' sou antigenic, Adiciona 1 mente , estes métodos podem ser ubilJicddoõ' potaf fared substituições ©ft i-n s -aminoá eidos de ura ou ma is resíduos de cisteina de região ví.p .1, ιαρ-..op». se >u v, . pi ba, u itu> it. -r du t. pabã· iri.®® 'moifcbiaS' ds: abPdSraMpb sem :uda. du Piais· 'ponte® J ntlf·© 1 'lo =ΐ i „„ Ί , i eiw „ ^ ΌΧ1 l-v.to.f"' ....................©lo......engipted®:®:' .pMr pedsepfee.......1 .....m.....pdnostbdia- s©: ©&amp;.................. , 1 „or p " ir du “ ; - -n [Ô084J Alternari veemente, as técnicas de produção de cadeias v.-t$ e ç i- - co. tu..; ivc .tí- , tnite l.1 A.
Mp. 4,634, dtp; Bird, ο. ' cr - '2;,d'1 ’ - 3 „, -> > , et ' st* al., Pros. Natl. Acad. Sci, USA 85:0379-58^3 (1988)j e Ward et ai,, Mature 334:544-554 f1989)}, podem ser adaptadas para produzir anticorpos de cadeia simples,. :%§· adtipprpds de ·,. ··.< ·';sinj.1^^ oio f " · c,,- :. ··-· t uana d« f a " rti t Co le ~ „ ι Λ S A f 1 T 1 £ -C i > © , 4 ,. -4 , S Ϊ on r - d - df. „ . I ' O - ^ ' duii V, 1 I ri lu-a t r c ( !<. n 3 _ , ieenina® pars -a: idbnstrubl:® d©· ÊbPfpspio®' IP iEpbbibnsiip bis. 1® 'XMàM podda® 0¾¾¾. ser 'ueldrtpâa©: iifebea 'ei. ::&amp;·1·>·* Seiemo© .............. dij;i::t-KKÍ Riots'. .......................................................................................................................................................
[00853 Montra. forma, ae peplipspip peitloa Ρβ:· pfepefiít©: intenção, podem ser selecionados "Ιχοίρρίρορ......pdt:......Mibro-................... mptípuirpae ©. .tselpd;©;© oe·: peneq tqei;âpS;ap>. dpi" ©ΡρρρίΡί, pÉiurPi ©ίρρρρρρΙ,ρρΡρΡ -¾ daigbe pprivfefpe©. poderá: llf -i;· a:s:· r a c -51-:1 at n o-:·.:, f or ttt 1 :;,cd tu net ura Mcontt iSJUdO., id:, MO :htpi®:ff0q í .paidlbpdpa: :dfirp:p:E::Í;. dêrpa dp. % midp:
:ÍO: odpSQ... , X ^ ! p.S:Pâ JipClS . v O · U’ p O' O . ( „ t . ^ o ' US* . . . Ή '' 1 s - de poços positivos podem se? isoladas, Cai alas S individuais produtoras de Ig podem ser isoladas por FACS ou pela sua I < !Ki I ^ > 0, , r „ „< .a i ' l ..o N la sisceca do· c ;mpl emento. As cela.Has B usdrvioua i.s prsducoras de Ig podem ser ar. cro-mardpu.' ?d«5 ousa tubo e os ^enus VH d VL podem sort amplificados utilizando, e.g„f RT-PCR. Os genes ¥H o ¥)¥ ppddia se: . .voui v Λαΐα v,e c·' j'O'r anticorpos e transfectados para células t-enfo,,. oéduoas dsíçpcpârieas: od. pdooa;l:i:Pr:i;oias;I pado «xpreaaSíP,. .............. [0086] Alterriativaiaenfe, irshàA.....pédpidrep:.....ppbddtprgy dp.................. pugipggpo:® podemo Her deldcpohadao e etlidi vades adil irando técnicas bera conhecidas do car perito na arte. Estas técnicas -a-' at-e „' i * -5 ra ν'-ο-α-.-ρ αρηο de i at' arc t vucli;aooea u.i .;:vair. A xte sío:.;, ; e; ' ..s ααο jadaa - n p i - , had comc abai-o dese'' < to, e . p vn - uc r r “ -Ό " _ ^ . j, H _ o > H lo-.i eh . ( . l? , m c fd ctj I-^hJqic' a' i 'Πρλυ
IrteTeoirerHe.f.. John Wiley and Sons, New York (1991), E (D0S71 ¥s sntldoppdp da padidhtd xavsnpi©; pmdma: adr
Siolj, , { c '{^ahjC'j fl'Pta i" Ca'i'a LU' * > d^cn JC lit f para a. §1ρ¥®Ρ¥ He Adri poppas, PH padtlpudavt, per ò:i.at*ae: pdimiga -Pd, ;prp;.Ê:ÉrépPÍ.aldíéPda:,. pdr dêPdidd® dó· eapresdid ...................:;pipppiphap:p©''p:âi m íp_ κη,.οΐ., ................................................................................................
[0088] Numa forma ae realização prática da presente invenção, um anticorpo, ou fragmento de ligação a antigénío, variante, ou derivativo deste, da juo/antéc oupi-vn e ddi ::p#;fidp; pppstippp: álPtStiida. çp pup: "ufa. op d#dd dômpipi·· .sá© fiupia-^e^t’" e c r,of Ή wnt' ιοόό k = <'Ηό_:: rp ^ Ή dominíc removido") , Em determinadas formas de realização da draqebpp: ' , η ‘ ' s' raodi.fi cados compreendei;; corsirutni: com àomxnios removidos on "caobodt®#:: em quo d ' ' η;* i sU , N ' ' .> icon.a frutos ICrild Para Outra a forra as de rea 1 fração praticas ^ uivS Ui " Ί v. => , U" s 4 '1^1' (, It a < 5 - ^ t c a ' t _____i. t> * sf"i' u dpMqiddb para fornecer cienibilidade e liberdade de movimento à região variável , Os peritos ns arte serão capazes de reconhecer que estes ooTiotrutos: aâo :papf:i:db:l:a^fai;Oiof.:e: 'pddddrâdáds isvddç: !d pdq;pbi.sd:ibl:b .èeguldbdtdoo d®· dobbnl® 0®:. ha" taba· dadafedlòqã de apÉddbrpb'»· Pa ebh:sf:.fnt:o:h da· domdodq: rpmopld#' ippdsM pdf" o; n i la 's’ hs.itk1 , v \(C' c daric ant ^ , ,λ ia d ηΡ,η .................pOirafanbS' â®. iqdr ' bumano" :|dw<í fo pa * desumendo®: 1©................... 02/Q60Ú55A2 e ΡΌ02/09694 8A2) , 2ste vetor é manipulado de fbfrss a fPmpvef w dospidip did e ddrbeoíp abdim ulh vbpbb sintético que expresse uma repiso conste1!te TqGb ce oominio rhtfO’vidp'.., [0080] E: ssv s. ru 1 v. t ajc 'e _uvm . cr*tr o t.j__ (ss > ’ ο m, h rc <c, " , mu hv.í 4 (.]'*-> t an ti génio, variantes, ou deriva, ti vos dest.es, da iíoerqâD sã-o ni!ii"n'O Cs minicorpos podem ser pi aparados utilizando .nddbdbp desoddfop mò édiab·® da «vlae id®;, emf'** ledido da P t e fe E.n.b, 5, d1, o j )\ρρρ" r,;!C rd idmd7®), [®dS;S] Em debermbpadsp: formas cie realização praticas da ................pbssedde dnaenodp > ;.....adpiçdf ;ppp.g......dá o ÈEdgmdotPd ip - digbçib a:.................. antigénio, variantes, ou derivativos destes, da invenção eom| reeniam ura, oud: _ α v,- an :tn jioo uinu ontm o remoções ou substituições de alguns, ou mesmo um único, as^nn^i'i, cru }U“ p-> , it iti a P:PaQp;iapi:© appra as vi t u ι <c 'f' v VioPieij bar Obamai-d, ,a mhb&amp;elw da a®i. bmloo ~ pj η ι a ar w seiv ι «η , ν <. r> io a < h ρ^ - ear s'i'ujt- l-' para r- uzn ί,::τ r,> ft^am a jm,a;c- Fc Λ, ·ψ&amp;0ϊ·&amp; forffid'f aiqqptqh sr'l0pãJ,£a:a::fâ&amp; .¾¾ f limpid :0¾. Jipaai. gqdpri filth ifePeglqed. rediover morbe sie pm mz· mais domínios de regiões constantes que controlam a função , ι N t , < , t o , p u \· η - ,, ” í a. -η ο ΐ modulada. Estas remoções parciais cias regiões consi.arn.es podem melhorar as caraoterastieas escolhidas do anticorpo i ι - f d"'·' x 5 „ > e°"- ir ‘p ' .uISÍ fur.tries oesejáveiê associadas com c· domínio de região X. ' í X i" ~ x\> . ( -n i , <_ v ' - „ ι -1 m , x , cdpe: .scribe. aãááiâõ.,;· as rsgiiqs constants»· bos pBtlçdrpdd' diqnlgsdos pode ser sintética através da mota-pão ou substituição de um od 'ffiadá' nminqÉçrádç .que. melhora &amp; perfil .dr eonsidut.©: ....................pspqitrpter Λ <vte rtr· uo, p adn . er uus ccmir^due/iueer................... spiriÉrir .fPtpsmPS per im Isosã· .de· ligafi:© nonservado.: fá,.i§n r ligação a Fe), nsntendo ao ma seno terapo a configuração e o perfil imenogénloo do anticorpo mod if í ca rico Ainda outras formas de real, it ação práticas cia presente invenção compreendem a adição de um ou maís amd.noáci.dos à região constante para melhorar características desejáveis, Pars PaMP s função e feitor a, ou fornecer um maior acoplamento de ç:itç:tPU.in:a õU ca;t%:dhd.dra;fe::d. n rpm j eUin.xa práticas da presente invenção poderá ser desejável a inserção ou replicaçáo de sequências especificas derivadas a partir de domínios de regiões constantes selecionados. :â prssapppi tpveBpiP:·. tdiibim· iprseos' satlsoifPsi pud xnioicraforít, cr.t·: i it - mn ca most--. tu, al.ult - ’ li tla KvC „fcl\»í.' xí. ncP't ll-v CU- xJUudjx
Ϊ pp pepi.pâ®: : i?|í· :p::/:pu: repipSd ¥10 .SCp! paftlihSp.:, PrgpS anticorpos,.................nil...............if:p sqpsiii:ps d; $ ι« ç, ........sif............ ligam a'iuioac?nfn:uti!tr a uma c diorinia» ass xaic í uuo dx <. vo x„<. jv^f ou mr„v a ^ viost· ’o niz ,χΐχχ psem conhecrdas peix- c°rit;<s na arte rodem ao.·.. itiliracb? para introduzir mutações na sequência cie nucleôtidos codificante pá:tá urp pafclpD.OÍpp.j f t 5 Utr 1 Γ ’ ^ ΐ ' -v , ruiVageneee dir i9:..0.¾ -a um Crpénese cmo.i po.t PCs, que 1 ^ 1 - * i„ _ . - p. ” i " íb v ^ - v > * ' Γ s ’ " ' '1; T 1 v ” _ 1 I Í , 3
Sb .SUUdt:d;£:U:Ú:qlle:â: dB emioubcUsáSS: :f. ÍSeáUS :¾¾¾ quá Pç B:úd;B;qd.:fe:uuql:é:g dq eiraiuqaqMqe/v bppp® b:®: que Sb bqbilbbudgbsu de: arbraqliUidubi, rapuios: do qug bí subsbrágnqffes dq árabuoápiqoára rsienos do que 20 substituições de aminoácidos, menos cic que li substituições :£m ,iuu,.a ' hq menos bo que lp· 'i J ?t t, ratem- vie -,ramr ,e_ κ^, f' ; ' * - ... q,, ' u.ttiei ,s '-0 <e ϊ,π'Τ' <. -dos, re.x s ki quj i .-au-ra_i turn ό.- <.b ara teu dusf lun-e- *iu qim ' hiíu’ itr'cles trains 1 - rio ~> cu uertt eis une
s o 11 v ~ m -¾ u t ^ _ i v reiat-u i a jq pur I bb irubgqSuçlà.,·. 'til-CSSl,, bb-CSbun· uil-bbKi.regMo. ¥b:, w&amp;-
CDRI, VL-CDR1, ou VL-CCR3. Urea "substituição cie aminoãeioos - \.wi l*. a" é uraa era que o resíduo de arai ooáci do S substituído por ara reeiuao de aminoácido contendo uraa cadeia u 1 ti. , , <. e s Λ ' ^rac j'' - -. bn ~ ’ t- ut~ 1 a""n t i „ úqdbíòâod-dèS; οοη'ΐηη,άό: uudqiaq .:i.a.t:&amp;ra Is: ©um :c.aircp.s sdraelftaúbeu J©qam báifánias© ma ©sbadc. dá. abtáu látáá; bâMilláá i®qiáám: •=>ni' «jaus c> m v3 lass iot „,u·· . < t ·:· 0 0 . ,u , 1 -ra., u, argtnina, histidina), cadeias laterais acidicas (e«g., ácido aspártico, ácido giutãmico), cadeias laterais não carregadas ..................bdláraBá.........kêq ;gç:.,:........§ limpa.,:......íáipaqqglqis·.........g iqtqmimi.........ibibbau:..................
t r -·'·' 1 u.i -maina, ri.ueuu), cra-tís lati raie tpraijicS |Beq:.adápiná, rabálrbeç leucina, reolctima, prolina, m-rm. .u-·. ! τη: rq metrenina, triptofarm ', embaias latornic c ra. t-.bâraibibádáS: Zí&amp;,>S.,..ç t reuniria, valina, rsoleucína} e cadeias látqqáis; áqqmâ tidas teo p"-r bir ©alua. ,· fáád.lblBUiièq.:^ triptofano, h is-J nina 1 . liternat_mamente, p-uden ser látrMuuMá.s: roitqqiás: alpbtmmi Imbuí© au. laui:© daç. .eu. '«im pádíp,: da: gequsraciu, cbdiilcabtd^ tái ccmq 'per bataiéinsg®: bp áaíburpíçãb.f m. bs mutantes resultantes podem ser rastreados parr a a^rril'd-^ raciaq_ " _ut at ^j__ti a'tmt^o c'5 s χόηχρΡοό. aóióiPóde; id·, ip, .a·. . v. ' u ___ ^ " ' ’ s ' “ 1 Ί v i [0092] P.,r: fr/espi", é possível :m.fodu:ir mutações apenas ί ' ' x" d x _x t ' - v. \ 1 1 Ί- u' eó reorder cfe, do tn i' :1 -s r ant i '.x í x i r* ’ rui ιαη podsra ser silenciosas ou notações neutras i;:isse;:se, e,g,t as:p éppdpi οχ tdsdp'. ·ρρόό.ςό çfpipó. ρρ dp ρρΡΐχρ:χΡθ: o r; o„ -ir i * n :: ' t ., ce ' 1 ,t: a j ' *ar x iir alteram a sequência de am.inoácidos, Estes tipos de mutações podem ser úteis na o l irra ração da utilização de coddes, ou na r^lú’' a Jn pr\ n'ç * i ^ar’a^'c ^ ",r rr u í raxu, ò o. úu ....................dd........çddxdróxplo'' otimiixaclas de cobões c ^a ^ ^ d r p,„i .............. αόόχόρρροχ: da pxerertó cpveppl:® rare adri Ρχναίόαόρ® χρρρρρ. ior&amp;l, PltrcnróiraPePPe::,. muPapded 'dl©: doutras: Pirraara pcóáir alterar a. ui. ^ rx.e da :tm anticorpo an s® Xruax' a© a u u' · ,. i .n a ...· i, , o : i .·._ c- a* . a -v s~o„ í. icu1 a - r f - ~ - r =· ^- - p © uv a ^ J c s > - j - d „ s" úu p enquanto que d local!ração da maioria das mutações na o PiOptraó Ρρόρόρόό p i^ipiiíóstg. pp repipss dSE:/· speósx .èfd isto ιε i ser u'" reqienrrentc atoe _l to, Πκ pert n ns arte será capar de aesenhâr e testar moléculas mutantes com as pi'opr ..eda iee deseiaura tais 'ma ooahana alteração na ao , vais. se oe _a,^vâ - ' tv ujaa·, a aim oçào rxt aravi^ida dp iàpapâó melhorias na atividade de ligação ao adérqpaàP; Pa' "adtóxapópó np ippea/idiapdid.^' .d©·: χρρ'ίρρρρο:) f ..................Spos: mdtddèdOs:®: 1.............a..........; prcórrda...........codiPicada pode. ser:................ .rs:fe:td#ixâaM:nÊ:ê3 erprérsa: r a, éóididrdd crdororal @éox: biológica da proteína codificada í e. g. * orpaordade; de ae ligar ímunoespecí£icamente a peio menos um epítopo de ura ΡΡΐ:ρρορρ1:όό: appperadr % uma pppppml pode ser: daósrmirada:: utiItzôndo técnicas aescritas aqui ou por rctineiramente ppdiiióax riódiçal pSphedidsp: pó" ildãdó' dp artPi IV, Lteiinuclcótidos Cotíi fíc-antes de Anticorpos [0CH>3] De acordo coe. o que foi acima exposto, a presente s t af > t < ^ t ct o p< J i, l< '-^a ' ι ,i parai uma molécula de ligação da presente invenção,, c. g, um anticorpo. No caso do i 1 . , < i i . c * < U .c ^ t t if , r - i„qir~> e i a D _ ; o n * k ''d t c ?l___v. rp * ·. srr-í i ’ , j c oten „ m i„c i - r'-' ,dd "OUifí ca- " ^ ter, .... ml' rorr i rnu d ç o 1, u : - ád:M,. ::d.< pç., i5Kã::?, 'DNA, tdA t :i ΠΊ ia iteA ;; aidi ' ' un-ou 'prp.dddid©.,, sá usmí ouí^oj a guinerico. d_ ' ί s-, u.te<~’ v? prteurmtes: 4# .terms resgoteimamtev iddlltedtemte gdiddupit dm: dos ttemudtte ic isoladaroente.........çir em .e-rb'nafac , lie Vua .m.mit-, r lerdxmk j. u i ini ... e cr*3 ie m V" c di.c- ^ dr '» a", ratio v. -. v - como genes marcadores que permitam a seleção do referido meter: err' .ateis tetetetete. adequada dm; condlçoes adequadas, Prsferencialr.tente, o polinuoieòtido da .imdsiifls ei.ee c-emia iTt· ite te'jU'C ! .c.òioa? d- dl expressão* permitindo :a empdBlii© em mèteted :te:D4iJi:ôti:;dai:' md ceteateitetelB',,. Ir tep&amp;lsiç dm reterid© pel nucleotide e :-ru.reen o- -¾ - 'c.c.m. uo poj. j o.,ciei* rd , p-ams mm: :mMdi dradute.tel. Eisaemlm-e mteteteDsed qui: qirsteem ...............â,......«dptes&amp;im.......ei., clJulas.......mmdqétetetete..... orererencíalmeme .............. teltete de: maite temo # mi# d® cdteteite:f dps· dltedqi dl dtete.
Estes edómeg tçs regu la doces compreendem. mprmadmddt-d ..............-siteidteds:........tigdtetetell.........qdl...... g.i ran tem a iniciação .....çM:.................... transcrição e, opcionalmente, sinais poli-A que garantem a tedteteqte· itíd ' x m ' ' mão e e^iuomt' do d- nam- m Elementos reguladores adicionais podem incluir potenciadores de. trauseteção dm tdtedçte:* l/du ..tegtelc ptemtemras: „ d u> te^ e a. S c_-dss - ,,e_ . _, o |00ν4] '''li'- v .: " v. ,ί; , ' p -¾ ,ι .' ' η 1' ' r '1' , “ tm ' a , η iç \r ^ , * a ^ ^ Q-eõie, pode see composto por qualquer pc 11rioonuc1 eat1 do or N r - 1' 1- , 0.0 o,d- a -:: Κ\·λ , ΠΜ ado dodiraeado,,.. - -,aJL u >d f v , ^ n\' t * 3 pel inuelect ido eo,.:l Leant·.· para, urn anticcrpo, ou iragfinnlo 1=1 jui^a, a 3ί·κ_·χ'ΐ , u .1 - ::·.*' , ~u dcriviti-ç deste, C Me ser composto de DNA de cadeia simples oa dupla, DMA que id 13 n_x> 11 v o a·. m -ΊΡν -· ai pi a “Id 1* '.radal', a 0 dvpl?< e F.NA que e uma mistura de regiões de cadela simples e dupla, moléculas híbridas contendo DMA e RMA epos pedero ser. de cadeia simples ou, irais tipicamente, v. ' ]j,1j 1 ”'n 10-0.31-- v voi k >_ a -1 sample-' duplçn. iAdd.PíiiQaa.lmpaPdi, pip :p:Od.iaofi:i:e:õ:did:d: :c:edi:fi:o.ani·©: pard dim anticorpo, ou fragmento de ligação a antigenio, variante, au derivativo oeste pode ser constituído por regiões de cadeia tripla compreendendo RNA ou DMA, ou tanto RMA coito DMA. Um v Ix v, ai k ~ 'i ‘ t ft - r-'-o " ·. it„c^rpr <_ nort % de ligação a antigénio, variante, ou derivativo deste pode MmbÉd. 'dpitppd'· spa da .mald 'tesed :rad-ii:iipad:i.d da: dl®kiindl: dé ΑΊΑ o- Ri A ιηο>Ά "·_(: ad„>s p--r: j ed ab Ja jat' ' t n <"ΊΛ t as a'tf-ϊ M r rv-: "ntara a bs" .aiJuuft, vx,i t -cjp ,, l nv=;
Cnitria lai - h -< t r m =5 ^ 1 < - ' >r> r 1 >^ , - imu u" - ................Pd diiddáa'... ama,.. vi ta .idadp,. .dpi.. madidiiiadStis· a, .¾ A. , # dl® p aamim,................... 'ν''ρρ:.1:ΐκ:ί1ί1.:ρρ'ρ a:dp."; ddgi õfea ípasias, ,mod:i:Eidá#ad ddawlaamendBp <mi irvt c-^n^ul^ o>u mo cat -Viecmn tc 10:0¾¾ Dís p:paii-apo:ieõdi;dp.. pdokadO' idodidipaaia: para aipa· -atriante rso ruturdi ie ru p. ! pept mio de ama iidundglofeuAddm ipat?,:, porção de cadeia pesada ou porção de cadeia leve de ume imunoglobu1ína; pode ser criado através a 1 > í 3V - ' d 'U- ^ a l “ml '*m w , ία, t % o , v. 1 remoções de nucleotides na sequência de tmdqi:^ da j.jTiunoçfiobu lias tal que uma oa mais substituições, adições ou .tAmóçõPa de aminoacidos sejae introdnridas na preta ina codificada. Aa mutações podem n : 1 c aroduridse por técnicas padrão, tal censo mui. a génese. dirigida e mulagé-isso mediada por PCP» São preferenciaimente realizadas substituições de en; ' - ' 1'r p'‘ aa xuj i aa-s'ko nr*' ~:satu.ia:s vie smasaeideSi [QQS63 la,, * tan c in oo-be d= , t'e- p no so is Ία η> a: 'pdimib' da: biipias Ait igi nata &amp;&amp; illSridbma:;,: an, de; outras: células transformadas, pad técnicas: pAâcAóç tap çpmç: extração coin ^ an 1<" v mrnm -< f t re 'iDitacno C3 ui^d =r „ - <. u ’du)-;:-a 5Λ k ®e - ] x Ί, o mRHA pode ser isolado a partir de RNA total por técnicas .padriio: Pair et® prçnpt-ç^pa.id p; pig ρρΑΊΐόρρ: mitgb did * id®: obAheuibi-ais tipnisgi sdpgnbdAs:· :da· 'bsiadb dp. ar'ti, ΚΌΡ7',ιγ,, " j u a-'-v.a :::> r- t , ~ ^ s m- ,. <, s - -- , ,s :“t:o :1-,-= di'.U' , ' , a,,o a- ·» p = = ,r ao : t;:'- ,. ppdim eex ncznboc, ®4maltEd^^;d:fci: -;Mi separadamente,, utilise no® a tramsc rintase reversa e a DA A pel irre rase de ,e.vJk an net , m : nann·, A reaçao de PCR pode ser iniciada por primers consenso de unia região constante, ου por prieMiiâ- mals. ρΡίρ-ρορΑ/ΐ-οοο^ baseadoρ seguiruias :¾ till ç ................aminsiiibpi... pubiioadáS:: di,· cadeias : fésaiÉi -4- - 1-é ws,.....i:a.:i dotíp.................... ucAma, disratibor iss tsapss: de PCP pedem também scr eti limsdâs: para isolas sidnsp da :1¾¾ çobí-fioaxitas: pari: cadeias leves e pesadas. Neste caso, poderá ser rastroadas í uli, ‘non com ptiners consenso bn iddilaa homólogas maiores, tais como sondas da região constante de murganho,. £0098} DMA, tipicamente DMA plasmídico, pode ser isolado a ^n r,z can ηΐι,η, Vi], ando -ecni,as . η,,η.η !a. m < md; a nr η io o' r rnrrn"i - > j , < rMc , do ί
Aibiisei- padra-o: ,b:im. roofeedidAt õptóiaeniadÁS: em bsiaibog ( ~ i 1 I relacionais com técnicas cie DNA recombinante, B óbvio que o uHi\ podo ser ' ' ·. ^ u<- η η χ ' ·. ' ΐ'ν , -ί ν ι > ο :- ο’ -se do processo de isolamsoto ou análise subsequence*
S.OQ993 1 p -'-u ^ i . n ' m ir (χ ' e , ic > - douM compreendendo, composto esseucialmer.ie por,- ou composto por um ácido nncleicô codifioante para uma regido variável de - ia j -i ^ rirod''] m > TL' j . >tl suo as -ruèvn poCdpâptddicqip 'ELr-CbM., WêmdbSt, ori tp-dOll.dppesbbibdqs· dd tbbdi® t.·.,. ....................10:1:00 ] .. Jç prpíseste n in veqgâç:.. lotnt dt sai ppiinqoteitido.. d· ddindo................. compreendendo, composto «ssencialmente por:,, ou composto por ' _ u· t if-1 ' x. mo <- Pt'-' urna n,;i n Ml-i cadeia pesada de imunoqiobulina iVM: , em qua as regiões VH--CDpl, VH-C1R11 on VH-CCR?, ccntèt sequências de ctlipépccaos x ~ S<. v „ it M - c X x > ~ - c - ar „os Ci-ixCxi: s n: T;xcd: ^ ...............................................................ilÉIlLl^WÉJi^i^ei.................Sill...............li.......liiiil.......ftii........ I||s.............
...... ||lllill|l......|n........agipPlPli!.......g illllil|.......
£OiO\; - ϊ ,. 1 ' 1 - brpq pronfamente que põlínucleótictos codif 1 cantes pana pelo menos up Pomx:U.;rb mqtp#bei. Pa caseie lene afbu *< v , 'a ο ίΛ~ codificar os do.oln.eoe variáveis de ambas as cadeias de imunogiobuiioa ou apenas uma. De igual forma, os referidos; poiinucleótidos podem encontrar-se sob o controlo do sesro .ppbffiqbQr;, q;u papers sec ρρρΡροχρΡόο iseparada-níenife:® par® ^•-po f ., c n v. _ .j.uds r> gsiadoixe pus pei '>Λ "e" á expressão era células hospedeiras qabqqriataqgç: incluem, d o' vrcr' f,f s -q - ' i i tJ.v. rf " i\ ’ t .orl exemplos de elementos reguladores que pernu.tera a expressão o v-O.i1 a.» i "Cg Λ >cni;ti as s p v® ore ^ο'Ί ..................:®Phí tem.. .iêapâaf a s d ft ps pr amaiPppi Pllf e·/,: W,%È- p WSH - *................. pofiPnpladdr Pfffçc 'm t ~u c ooo* ~\Jí! ® ipprip: gpobina qm: iidoioro j ou; jo :artima:.i:s:..,: Bard; a lost doa àlamianlpi responsáveis pela Iniciação -da r.ranscr i pão, esv.cs elementos caguladefa® pode® '"leabÉmi: abober aiás de: larmíàiiaqJ#; #&amp; leabdaelpa©:., Pais: coimo Iscai 1Ρ41--ροΧΐΡ be m bocal. fl-polli,. d qisarps ·:άψ. p.ol.i:noo:i:sb;d:;idO'. far®., aliai ϋοο®;?:. dependendo do sistema Ίη .cypress;Ip aPfllpadb:, pode® Par ado noiutvi a ocqul·-!· xt f;c mt; du o: tui'J rXeódio D da invenção sequências líder, bem conhecidas no estado da arte, atvoes de in πόι -> [ Lippj Η p-^- ’r ^ u.ipsrc.ut . i celular ou s, sue storecuo paro o x:.. o. Acs' aeguènu1 a „s) "\de r(es) é(sào1 it 1oc 3 daie' na t a se apropriada pop sequências rlé tradução, iniciação ou terminação, i preferencia„;nentc, uma sequência líder cap"t ãe jirenorar •a secreção da proteína traduzida, ou uma porção desta, para :&amp; OSpSPO ρ@:Ρΐ.ρ1θ:β:ΜΡό·.ί.ΟΟ: .©O medo ;e«t::pa0«iu.l.a;r..,.. Ρρρί:θΡ®'1ΡθΒ:Ρ®::,, a sequência heteróloga pode codificar uma proteína de fusão j. i Li'd v p > .__Iv. de hc -\. , o u v' -ΧΛΐη jn :tb«n:pb:i.tp;. qa;r;scdb:ri0':feii:Cp:s delagadasy, iéagl.,, :P<al com© a·, estabii iração ou pi1 a an s’ ío3 d,, nu ée prbdufPs recombinantes expressos. Neste contexto, são conhecidos no “Η - > > - ' Κ - -,- ν - ·> ,. -ν _ „ :ê. ver.cr de enpressao de oDNA fí·; yam -lm.:rç pcd'li {Pdanracid; * pCDM3, pRo/CMV, poDhêl , p 'V-> i * ’( eid,. -''u oivORTl 1' [0-..,0 . '-'refer,'"' ,Ίν'ΐ *?, ar í ?Γ.έΛ Ί 5 * s oor'c' , m -01--- .-r -- i 1 { 'í P _ 1 < i a , - -χ * r - capazes de transfer.mar ou transfeetar células hospedeiras eucariòtícas, embora também possam ser utilizadas sequências 1 -re ', · „ > ··.....· ; p r , ·' luU „ " , [$\- > ' >. '· - i rhdbrpbiMb Is.® ; hpBpbdfdm ,ap:pppf:i:;a'dhe # .feoBpeoeiro &amp;. mantido era ocnorçoes ddêqfetmâdiS: a pt elevado nível de expressão das sequências de nucleòtidos, podendo seguir-se, fedi PoíSP pmsedãdfe, lã. .imBeifeía; d: 'p:nfei.i:ic:p:qâi(3: dêb mbbidídS: pi .............. imynoçtiobuii nas .....ιΙρνρΒρ:..........pbSiadáfefe............ÉiqppbS'............dei' cadeias .............. ievé.il'p:e:òáb€i@: eh. enfeibb'rpep. ΙριρρΙ-ώβ·., fe.rhqme:h:fc:o;s d# Irdápãb ©a: muferaê forma» dê íPupoqibbuI Imasq:· vêp, ©ewfeip. deils '&amp;-$. Immunoglobulin Synthesis, ui f n -jc^. λ . , , P 11 * .
[0X011 x v t »' v, tu :n ,ii . .. i_'t n tidfe: pelinucleótidos cia invenção, tal como descrito noutro locai . ·- £:: t -oeja-nt', Γη i rvr 1 e'" t los a · r u~- r ~ qn' c- '·- ~t u~v pclínucleotides de fusão, ffiqmghhpp1 lil# % outros dêrivafeif ©ei:,. csl ροϊΐίρ· aqui ded.d:fife;Bi elp: pppfso çppfe.imp.i.i:dqi|· pela. invancao:,.
[0103] Os po'. i nucl eòt idos podem ser preparados ou produrides r ) r> qj--, ^ - v 'd tdi u*·*· h t 1 , s~ ... sopueiicia dt imele atidas do uatx.:otpv e contoci b, orce set 'prdmdé um :peê..lmUò.l®btfdQ eo.dliáoemfe:.e 'pad* o- m-nf-idorppt:: -d r ·: í r í' u« d, v.» imidnh-- ,.. . -' i.„ j ut„ !ΓΓ.,η*λ .. e p. , cal como descrito em Kutmeier et aí., Bi©Techniques 17:2 4.2 Í1 ) > dhêa dp forms: hzmm·,.· emvhiw. s: siapesi d@: .dlxfpm^ tqdid iê . 'Ur ορ« mite 1' rtm': sequência codificante para o anticorpo, a hibridaçâo e a ligação destes 1 ' < ·ϊι m' i . .¾ ' < N s ' < > > (_ { 1 t [ 0104] Al ter net i vamenre , ura pol i nuc I eòt ido codi ficante paru ' i o %q >„, a' c ,o - , ^ ' 1 ιν,·>:;; &amp; éudi gênio,,; ‘a4 ã . st do- o, g -ê O ' ^ ãk i v sí - í a - l , a iiíftá· fd#fc# á;p;d;©pt:lò:Éaiv, S® .oã® !ί®1ϊ®0Ρ disponível utn clone contendo ura ácido nuoieico codi ri cante pp:.pl: apt... n:dElçd:dp.o: pqrbícolorç mkà .'dor oorfewida· ç; nqqnênnii êa mblaciria 4¾ ârtldorpcp :pdcfe ssi· sidfeeiliadq pplpiedínend:®'· •am I eido êueêereo.' çgdifiiçabbe para ό ggdiioqdpd. og: οη® qbfcidg una ácido nucleico codifleante para o anticorpo a partir da uma fonte apropriada {e. g. , uma biblioteca de cDMA de ..ai tu<_ jq , , - in- nu m . L." oP"A , , =>Ί^ d ,aiu: o = 'u l-ι ~ c .ouj o„ h -rd ο η ι ' Ptd, 13'la cr i qualquer * car *, células expressoras do anticorpo ebpêcgfidp para; -o rma^ ãntú.ms^í&amp;f· igi a ppitd pSldlaq; de pàdá: mqpdépeáp # ênêiêoipêl per amplificação por: ~ - - > . .. u:'- iiiibilidáp^éi/S: boro, 41: i èddiEpTiidadáiB: d' á·· S z da- dpqrrenidid:::,,. οη, pior f louipa idrl’ v c 1 r» a trends c cliqonuc ι ^ ’ί>.5 ps::ra: I sêbuâóbrá: ifipnieáupdrtéPdilqr para: Identriilaiar^. q,§u.í: dai rloai die·, .cMiS- dq uma êiMIIobesa as. clâlíE que sobifiqq q. anticorpo. Os ácidos nucielc-a amplíficados aen-dos per nCR podem depois sar c.loriados em vetores do elonage® replicáveis utilizando qualquer ménode bem conhecido no estado da arte, 1010b i ι , - - - ' 3t ι _ ι » , sr - N , •q correspondente sequência de aminoácidos, cio anticorpo, ou fragmento de ligação a antigenic,, variante, ou derivar! vo desti , o.o 0-,41110^1-5 de rorlcoUt'':' crie mr rtociial. „ _ 1 ' ,!·.. l ·ν· .: .? .. . '· :·: ...... .<. ο -st ί·α .η a r pi . a ç á· < ile t>péMc <“ lc Ή. ids'' q a.ο,, -1-- m.'S q DMA recombinants, mntagénese dirigida, POP, etc. fverg pqr exemplo, têc a leas descritas cm lYmbrook et ui., Molecular Cloning, A Laivo.cat.ory Manual, It lei..,· Colt Spring Harbor t< i , u s ' ^ ! i '> > cl990} e Ausubei el al, , ads , , Current Protocols in [Molecular Biology, joha Wiley &amp; Bone,, MY i 1993 i para gerar anticorpos contendo sequências ifc amirioàcidos diferentes, o >' 'Weinc' pal'd. CMab 3 ^ ° c , ** ' * N , a Ί ^ i y V. Expressão do Polipépcídos de Anticorpos A, "pses'dape ú:naaii|íã:d: iaMbiac «BMlft um mdtbde ide· produção de células capares do expressar um anticorpc da ...................dsaanpflp..........pa........®:4#|.........dueled..... cadeia (s) de imunoglobulína .............. correspondente (s} .,, ioapfeadiapdd ;c ^ul° a gone t ic 30 - "tx íu ^“1 : . 3 pc μ,οΡ . _dc >. v tt Γ "O^o ju ip 3 Ύ t t_>. c o 1 _ c c V! e~ u e d^eento io> o {, et sei· utàld-aa^âá: f por exemplo, para testar a Interação do anticorpo da tnvençâc oco; c seu antrgénio. Ι:Θ1Θ:7] Apôs a manipulação do material genético isolado para cyu n»-r · " " m '· v. ··, 'u f eort*' t<\- v j-ο.,ο - h'iaiuj, eamrtceis, ou ;iidiid:a.biboiS ΑΥΡα®. da .invenca©:·, om pel. i,ndd i.g:dí®:i dos vedaf reunite®.. pata pb aintdcsrppp· s#® tipicamente inseridos num vetor de expressão para introdução em células hospedeiras que possam ser utilizadas para 'Mipduarr &amp; ddabtidaidb ΡρΑκΐαΡη· ÉP ΑηΡίρρΑρΑ.,, [0108] r xf t esr- te^innmi ' um ^ui^crp , ou tragmerto, :de:iiv:át'ivpí ©u. dbiipg::© deite;,, ©ma .bade©©. :'pb©td&amp;' Pd ie:bb ...................da em ©a feib©rb©i ; que e é. .liga a: :mm #©i.ibd ;1© ai 1m :ã;qài:................... .iídeamutâ;, Ιργ ter _u ^ v©rt' mo ρο'ηουΐυΛ:!· , c iifnt u c p:ãra: uma maiéedia ; de. @©©1.ρ©ρρ© ©b uma. badaba. pebAde; .©» levai de um anticorpo, ou porção deste (prefersncialmente contendo m r v <. -3 u ^ _ x. Λη > Ά d . cu. ' ' ' 5Γ 1 1 - V' < 1 I > v ^ I ' v. 1 l <" t ' Ο ν'.' "DPE ΟόΡΟΟίΡΙ M:Utg. ."ill'!'1·!; 1-1" } ) )1 ,11-1 -- vt 1 1 ^ 1 v > “* v l ' " ' 1 ' < t „ i-·' ' ) j 1 t ~t v„ _ v; m ^ v v .' ___i, 1:1¾. m , v
U' - °v'vs''·' -1 U U<~ V V * lO SC \vt) ' b ./1 Ml tP anticorpo são aqui descritos. Os métodos hen conhecidos dos peritos na arte podem s<~r utilizados para construir vetores d# π: i- contendo sequências codif icarrtes para anticorpos e sinais de transcrição e tradução apropriadas.
Estes métodos incluem, por exemplo, técnicas in vitro de DNA vai. -v.v m -^re, » vib' i?ça^ ι ίμ“ι*ι in vivo. Desta forma, a invenção fornece vetores replicáveis - e'i mi -Mu, frcúi ..v- . ν'' v <Jí'- c · i - f u, ~ r. . a uma i 1 '< u1 1 d- ar r| <. .u ι i - , m 001- j: — a -1Λ leve desta, ou um domínio variável de cadeia pesada ou leve, oOv.ru ,j :'t' U \t 1 t p Uvt'1, Estes vetores podem -1 ~u 1 v o i iv ir 'v'lJa líjvian o· j.mi 1 cddstdptd: âa; ·;ΡΡ:1#:ς|ρΙ:ρ de- 'ai:t,i:ço:s:po iv®x:.?. :Β·:,ψ,^ Ipdidb di ddbddeddib Sid PD IdddSdQdd dddidb ap Pup.il odpib MP WÊ Pl/dlfMi ® 'Pedi:dp pis lat.eptê P-iidâ·,: Pp·. ;SqÍ:f;Í7'4#|4 a ppbpudd o dominío variável do anticorpo ser clonado num tal vetor par'a a pppúesglo· -complet'd da. papelá .paaadâ. 00 |i®s .....................f::QM;â'3............&amp; presente ..daiveppiia.i. refere-se .....p..........vdtopgp,..................... pair tipo larae-ate- piatmlppps.,: ebPmiPeOò, PionP % utilizados convencionalmente em uísqenpepiâ.. deaiàlca que wve'! r 'Uivncisfp ic ;υ pera ο ί'Γ' iu , c _ preferencia Imerxte um dominío variável de uma capeia de ri <1 O lord'! 1 t ΙΠ H t 'tp Ji ueru· v 1 Odll^v e e-T\ combinação com um polinuc1eótido da invenção que codifica o dOmlpi'd vaoiivei.: pp eptts cadeia' de:· .imua:p:f.lp|íml:i;írá. dd anticorpo da invençác. Preferencraimente, o referido vetor -t · n„ „ [ rsmr - >11^ t aim) ia a- j-^rec >t ia dirsc„ 'Uetalttv t t lies 1, '\0Γ-'-=0 < JatlVj-'aS d' tais co5ΐto ret roviroc , virus vaccinia, virus adeno~associ alo, eltrms: do , _t„ r , , , k 2 . g2 hvn ..c utilizados pura a entrega de polinucleótidos cut vetor da invenção nuroa população 2 a ό métodos bem. conhecidos; pelos peritos na arte podem ser ut 11 irados para O ^ 4 2 L ' ' Τ') i 2 0 22 ^ 1 í i> c· - , - , , > * i ~ ' k , nc técnicas· beidríitii:® Kb Sákfernbk;,' Sokeoakar' kieraing· .&amp;. Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory (1919] N.Y. a J u m , ~n t ~ kt I c ~ " at It- u'm ^ i toy , *. x ikbkíikshikg .ksspçkskes. end Wiilak ]ΙήΡ:ρΐ']«'Ρ:|ρρρρ:/: 11:::.¾ líkkjkj *
It a ibOOci'V, m tv I t tiu : le k ± o> .- r t " υη,- a r \ ,"vi potlera c- nt ? x .·)> am k.rossorm.s para erprea^ is as ..................kèlakás.....akvotv Os vetores contendo os polinúcleòtidos ""dai....................
Ibvpppãp: çevpry oís) domínio (s) pesado e/ou leve das sequências; codificantes das cadeias de imunog 1 obul ina e uruaèto -2s d"· , ,k 2 ^ tr-q2’ ό--γ j. o’-2* t 2=* n- ·, ,. , 1 n- t ^ - t_ - m ,-4.- Ί I U bt-V l t1 2>-, ,n varriam depenien-do do tipo cie hospedeiro celular Por exemplo, a; , , _r o i. m , > ^ , m <2 - « am n - ivr'< c-iul-k non, iOi ira;:, enquanto qua: p ktahajrsnkb Pbti fosfato cie cálcio ou a técnica de eiectroporaçào podem ser utilizados para outros hospedeiros celulares; ver Sambrcob, pii*||sqa,, |;iQ:L1.0:;3 k term© -“ivebor-' tsq. -sttp bq qqqkeiqq:iqw' k sbqti “km2 x r’T _ e - JU 2 > \ m c s o * 1 11 a " uik ° , - jr <- _ u a presente invenção como veículos de introdução e expressão oe rn qene p amou lar numa ceiu.la hospedeira. Tal conc é conhecido dos peritos na arte, estes vetores poderá facilmente sei .-ei - * m na los a {jp u Se rn -r,2p. ^;<n;T it u1 do go 2 plasmídeos, fagos, virus e retrovirus. No gerai, os vetores nompafcívsks Pibítí ia. qrqbqnks: Imvemqãm. cofebaen de.ri:b iiía mareadnar de, saieçàtp lédska de msskrkpi®: apbppékadqq .F:S:Tb: mijt.-2' a k mgert tb orm-2 desejado s a eapaoldiade de .«p
Mod depI.idsPçtK -¾ ciidnldp cuca ride. iocs. cu. puucsc ididcáç., r.oiii) .Pdrp " ^ - 'ι-t -v piodem ses' utilizados vários sistemas de vetores de evpressão, Por exemplo, una ciasse de vetores utiliza elementos de DMA. que r- - N ο-' ^ ό a = òq , j r , s ^ti u' í ·. a t -o, ô í. <. "> ' ' d. . ar: ) os ί vr i ’Tu u>* , " ls o d ' p i t m, ' Ir o'\iuí, .v-' ' \Jtu-', bacu iovi rua, retrovirus (P.SV, MMTV ou MOMLV) ou virus SV4 0. dnri. » ” u i a f _ i . a o 1 " _ ^ p- u Ίs 1 ou > ^ ípeais dotpdiiça dei idqsqlc ãd: .ridocsg®®,. ddid:i;d:ttalffispib:à^. rÉduluiS: qdq. duifesdpairdm.. # pSAi ddç S#®.0; Sqsmp:S:S:SÉÍi:S: ppdeJÒ Uer selecionadas at-oavès da introdução de um ou irais marcadores p-ud pepMiCgm a sulcplò dp cdldlag: dpqpddedrap dranudendada-a,: d ísãipqsdôd' pOdd fCrnacèd U:iÍS: pÉ&amp;ddfPèfàd :&amp;: 10¾ ddspedsdPo: at o ouci liudir í i n ''K,> sr < *. s. , ar·" d .u.\v ^ *.di : I -t .. totais o-^souto o v - t s )r ,i o marcadores d .-. . 'm, p ' (et ... .. z h ·... t,.„, n.. - i ^ j s = ir :dp:i|tia;ip:.i.i:0: dei did a· aprcít aiprcdaps::,, ορ liidirpdcziiddd da .msgail cildla pp;i:: r fcstdíO see ΡΐρίαΡΡΡορ • ;' : .. .· : 5 ·. a reta a s intent enezada s- ηΓΡΛ. Is r c- ^letprrtc pedem :rduu sequè-oas súpaJ, didata -d©; pdecepsameippid,: tais como promotores de transcrição, poten dadores, o sinais ...................d© te: tsriaaçao........................................................................................................................................................................................... .|:M.1:2'3 Pit ifpsiàsei dc raapicad&amp;c pÇlitiPaS: p&amp;pitiipulairpeiriie: preferenexars da presente invenção, "&amp;w qeaea:de ap§i;Í:o varia vei clonados são us^t i u "> run Ήί' >’^ e<rr ten Pop.j antgiiapitu PgiTíiPs qpnip. .Il-htegroop: aç χίρΡίΙΟ· :C:dúptani&amp; d#· cadeia penada e leva íprerurenciaimenre humanostal cono acima discutido. Muma forma cie realização prática da presente xroiã, -u ' icL u uij > 1 iuí v t= - u iu -> <t ' 'o - u
ί . p'- cm ; νοΛ ^ TF^, . ., referido como MEOSPLA
dP: daitdnçp lidded-: :#:riilvdidi «, dité· VitCC ' η "\ . ", ' -ί ' > J 1 ~ t. "V 1 i ~ _ a ' . , \ <· " , t 1 principal de Data-qiobine de muroache, a nriqem da repiicaçào '' \ i . y> v. k ' *'M._ do"_ íc ' fj f' ' ’ ' , V- , a ~ a ~ i ' ' -; -, O'" f - '- - ;£ - m ' u~ ' ' Λ..·*,**„ c» <.k , 4 i ,h, c gene ala dihidrofolat o rsdutase e a sequência lidar. Sato ' jt o' p, ,(."'i ‘diu iie '1 5 !n'd..U cl- d t'>° vie >'n: a oo t anticorpos apds incorporação doe genes de região constant» a trp. raivei,,. t'-m-tc r"“t » 5 -a ex ^ j v d - *vj am meric, contendo G4 1 S e amp Iif 1 cação com metotrexato, Claro íí £ ' to, a > . . - a- _1 ^ j - - ·;νητχι η o In. .t en.mdu .. ¢. \a spr mèiléefdd ms yrdseata - ·.. s..s ~V cr f -· :- is "et< i *; ’ r]n ( * i r ln< :.. n ' ' ,o .. ··· 0'C''i';5n m n + 5<"ov p : I -..00 d'{ r coded', tid’i'dc, 01 b~.l, cU H I* , t o , Ft C 1, ' i. ' - . - ?! C , v dn 5-H , pdill,: :e pleoSV2 (disponível d partir de
Invitrogen, .- j C ' x\ , e , ρΉνυ ’c" cm" j ι ?„\ 'iv ’ ,, ·., ’ -1 a' . nreja, 0 ci „u, "b > , , n a ' ; -, c , e , t u x mm - ο '.il'i ., ' 'vied,., transformadas para as quo expressam nlveie elevados adequados de cadeias pesadas e levee· de· ' -'CL uni ’ r' 1 pfe.P imfdmmadaB: dm, -sp-^t ap i-s de rotina, ppm emeBipio·,. ppm sistemas .rpPiitlcPsi, S to t 3v' j . c - m-n-m u mmevt? i,~ "r'sc ''s i,edi'ipS:' :dp, 'lapppitpi .¾:.11:,::¾... SPSo: §:,: 131:,. Ilf 7 &amp; &amp;+§ΜΜτ3ΊΜ... EwVm sistema permite a obtenção do elevados níveis de expressão, ;S:,· fu,, :p :§ít oavoarslavva.a:', .Sditppç: s:Msii|S ete 'Vbtbfad pxemplaeas. aão didullgádpis· pp fPdidP; dd latepcd 'd.lSlJe· ............................................................................................................................................................................................................................ |1&amp;£ΐίΐ3:| pppiira®: formas de roa ii ração preferenciais dp ....................ppèÉMfíã:"" iilPPSggp::, · ÓS S:S f: Íd;pppd % f :f aipMalpblSí fe -ll i § Sf $0 d.................... ΐρΐ,ίρρρ,ΐό^. vaplaee&amp;s'., ob dopfpqfdpod: ϋ:όΡ::Ρ@ρ: da .ipveapll K - '-t-' »ML ^ J i-, ^ ^ ^ 1 tl„ „ v tn^ ts. nw da ã 1.5 i s ic "-<1„dos ^s Hm ' ..................... 2003-0157641 hl, submetido no dio lã de Novembro de 20C2.
' -'ν' " νϊ f Μ ' . " t ' U V η t - t * *'ο -V-', tJi: ' ' ' v3 5.' gas?sb?ae -e be ardloO?^^:,· OO )f.,r .Cm H ·. u ·.- 3 be pM. bbleíç consti'Uto po( A-istronico, siAfcêiaâl d?Ll:l.:ies?sp. vantaj osamente, urn local interno de entrada da? ribossoma f.-j ni ’ t" 'tr' jO ( r^b’1 in I c mi vs ? \ _ - . -’la, n- no urn r-iev-'·-'.; S; cirirnt; m S·^ - ® -. li d ? "T“ s. - L IciIcvk r- i - * ^ - m p g f- |::i: ISif: lib.: ds peri lid! 2¾ arte :5f:teòl.sÈlS' gee ei?i:çe sletagsi -'·- i= "-..i. " · , 3 r 1 si οι ·· ' ua r_ i „ * - ’ v - s e i e d gan« complete ; da: a;dt;:ieorgoe divulgados m presence i^vemeão, [0114] Mats gerelmente, depois de o vetor, on sequência cle DMA, codificeute para uma subunidabe nonomerica do anticorpo t, mlc pr-sar uL, - d~ e-gs c ?: í; sovi rtt x-- o-u- ίο r.uma celuie hospedeira apropriada. A inrroduçáo do pi aairddeo na célula hospedeira pode ser consegrids através de várias técnicas bem conhecidas pelos peri tos na arte. Estas incluem, pi;·!? bad: dç ePdpÉprám. limitádaé d, prápsêepçâp: fdmoleirdç ^intc.· bc-e _ elfcctrop -a-do', fusão ;de......pdpbppígpibgS';:,...................... precipitação com fosfato de cálcio, fusão celular com DMA envolvido, raicroinjeçào, e infeção com virus in tacto. Ver, IL Á, G, "Mammalian Expression Vetoes" Veters, Rodriguez and .BB:ur»rd?t;,. .Eds,.> .Bdfderwgrfbs:·, BeiLee, Maes;.* bgplrued d?i,lf (pfd, iAd-did? |;l?fi,l?l ;> flgicAmeedd·?:· e i:at?rq;çí:up|?o? ?be ;pl?ãimi.dèO· no hospedeiro é feito através de electreporação, As células hospedeiras contende o construto de eApressa^ são cultivadas ern condições apropriadas à produção de cadeias leves e 'ÇádeiAi: psssdã®, :@·. erdiilabab· pães? á. slelede de rabeie®· pcb:tel.bS:&amp; pedada®.; b/bb laves.. béiamioAiS de amaliaplo:· exempiificativas incluem o Ensaio Imrnoahsorvenfe Ligado a Enrimas (ELISA), radio ?iAuiio?enA?alo? ::£:R1A| *. cu mli-a d?e? deipãradio? de çelnlds .íam.ieàdee per filuoreacêne?!®: (OP ocroscence--Mi rated eríó sorter ^nalycH.;· ,Ί.Ι ;ir > ' ev, ' i , „ , v - - {01151 O vetor de expressão é transferido para uma célula .-^ι. t. < m . pvpiO rpp, o PS οΜ.ρ.1.β:&amp; t.í5":®níS-:í:o'Pl:®oa®: sip: tiépoir cúltiraúoiS: pry iâcaicmp :Ep:ftPp:a:p:isppi,:s para qrodaop'r am. mat:,!|||p; 'papa. utllxyaaia. aao métodos aqui descritos. Assim, a: rnre-npSo:· òrairr cârrlae "-ο 5 X ι 1 tx ι ι Μ ^ t κ ιο-> ,. =° - ι 1 apfiparpy jda- iprarga#,. Pu ama Mileio pámadd fu leré papoe,. . >e _ - i' n 1 d e t _ .y „ s í ii i Ϊ ' r ; t ' ^ he <- _ -> v ϊ o -m ^r'^ realização preferenciais· d# '.ρτοοΟηΡο· àprépçao para a cW _ ^ Z „ _ _ x-l i 'íp ' ^ 1 ' ^ .li, PS- 'x-uC u- soclíf : cantes para as cadelas pesadas e leves podem ser co-erpressos na célula hospedei ia para. a expressão de uhúl molécula completa de iraunoglofuixna, coro detalhadoMi tear «a:., [0116] x '.ué re ’U'-" A '^-voe se t v r => tio hospedeiras transformadas com usa oolinuc]eótíclo ou vetor da rarpnpaa.,. .|Μ raforífrr òèlulaa teteapadérrao podam per frppuri'lydpas ρ:ι· aafsaplot loos, ;p-icsiX.C:K--u:i0llii.©:ί^%ν3:ΐ#<5;: PU; vetor poo: m enconírrs presente ;a zeiula nosp^ueira pode set lopegrad: to jxnp da ce t ^ ό-γ > lp m pt 1·= rv tj, 1 ^ ts n = ρρΐρορχρρ ; &amp; oeliijia ppspePpira· pptfa por qdálpraf' célula procarictica ou eucariótica, tal como uma célula ;) trt^nsnp de inseto, fúngica, vegetai,· animal ou humana, P’u s u * ui r íL^Miou' ® n , ps r exeo|. z , a - f a c^z.
Saacha r ornares, etr particular as Pa espécie .1, cetevis; ae. 0 - -/r p-O.t' to o" i vdio- inM i' toiut as vdtiu g - pfdèBi. por tr:áhO:fP:rffiadã.s pli ProftOifoprodao. ram τορίορρίοο' do:. It Ρ'3 On, , 'trc-r· χ !<-· η! ιρ η - ί >, >α -5 - ' o_x,~ 1c J '' UI '•x 1 1 1 S Ό ’»nt e-. ρrοcar 1 ο t: cos ροdem ιηc 1 u 1. Ρact ér:, as q r era ne ga 11 vas t a 1 como bucséris? gram positions. como por exemplo, £1 coli, 3, ' > ' > \ ' ' L O S 1 .. . '' . oerr.iC· ''ducariótiec'' prer^roe infiuíi ceitúas eb~ ieoebuca, ..gladia a -.0-- iaiaiaça· % . i x‘ t ' 1¾ 'uoi , :¾¾¾ ϊ·» p = ~ e ^ a ϊ-' ι·> ^ j - ” “ i s _ * , ή e CHCc aapeaddaya: { 1' t Mt <. u t _ _j x aaís umt nm- ia- p-xeduga.·© aio;gMbíd:&amp;aa&amp;, as. andiaaapsa:,:: au sade-ias -.da 'xMapáfi.abyl-Ιη»·, oadiaicadea :peia: :p:©l:ifía0à:pi:t:i:dp da a.:reygad y lâaeddld dada çèd glicosilado ou não glícosilado. Go .aBdiapapos da inaeaçdGg ou cada ias de ímunoqloboiina '-χΌΐ^ορ'η Sentas, poderá fa.rmma ínoJtu: ror cesiduo um id to aminoãcido metionina. Um polinucleòtído da invenção pode ser imil :adj p3;ut d ui^iw vi - 1 t r 1 mada guaitmoc 1 'm ias r;cm,^ ;:ί· tm er- e o^nt^^rnc P'da p^_iU^ u- a e. Ea_e 1^ - o~i „ ds t mu at preparação de fusão de genes operati-/amar.te ligados e a expressão dest.es em, a.gn , células de mamífero e em bactérias -m Μ it ' J 0 a ^ Ί str-isl' 1 d- i
Cloning: A Laboratory Manual, Colei Spring Harbor Laboratory,
Cold Spring Harbor, NY, 1989) . >: “ - '*»n<?r ct* r Ovot ,x disc Ks pr d-m as r 1 i ^d___.a _ x c . e “tpren n dp dBiiiddripo:· da: 1:00:00010-:,,: -op 'dd: ορ0®1-ρ'ΐ:- -da dtp;u:p.Qdldd:d:iidd ::C'0:òrd:òpo:ndsn:fc:®'S:, : -am hospedar .00® mu car ia ti.corn dy procarióticos,.. No gtr^l. .Ί prrlizrdm, eii Lv' n<' vn? o daspeia-irao' myiaasa- dy aapayyyla .dp:n:PdPdd yfeydiaoaa®:' pdododprap· gap ieciii tara a truincrxmt- rcs.rde d©:- ..............p. iru n i colivln x' 1 --o-_ lo "d aydaa da yagaysaia cantim..................... "t,u ' . ed s iita Λ men ie ' cão, n crucemo, a yd:: terminador, dai ;damp- genes específicos .eàpaoms ia p.imi --M'? a Siduei f \ 1 ifi n nxe gel' las ^ ddialaa ábáddybda ; gaia serem' siiiiiadab tapma ianfea dia ydg:paR0l.ad dd :D:Í;1- te adiu. laa- baspeddirys .pads: a- eXipdeaSiâl·· d Sf= :r*=>'3 e J c rui ro ordxr^e pc d -m se vt’ ns a p rti: de y*i t mnif rum -m _\cP'5, r a... - \it > t - ,-= - Ίν'ρ: C ilmr
Collection ("Catalogue of: Cell Lions col Hybridomss," Quinta > " ' C , _ , u , , f , ^ ,-1 i ' andmabd' ran syeiL ."..-.t, preferencia Loanee mabibbibb'.,·· I -- U i<m < 1 =i Ί- " \ 1 .v lv - ' m 1 - - -, . l v_, ' W '.'it , a -it ) i 1 I ' e U iv.v i Ί11 /' presente invenção,, a presente invenção refere-se a urn método ,ie p t c ' 0 5 *«· re m^' , ί 1~» \ψ ' > a, apa probpind i.--, - -,,- : ir- I, u'o, a,y,r η ί d i >, ,, ' i t n t n vi-n ,f [ ny , O tfO , ' ,.- —- J ,- \ ' dc- 1« B p , , U f B v ' , t ,k V , íÇOripíTaentIpUipo· &amp; ref drabs: sisofld a®: ehapsb· Levy at ! τ η x i , "i, -·ο Lb u "!<. 3. tr ut ,<; - c ' a c .r. 1- z _ k a. t mo In * " „ κ , anti r o r p ·. - " da..........f LapníbillL·........Ss..... 1 κ < => -1 o " çti.........bafeis: (a Í..........'LL................... i! n," ., o it : C b t, n n _i i'' i a [0118] Os hospede irce trarisforsodos podem ser crescidos e.c :£iLL!:eL:t.aiiPL:©Si a sfe:bfesfea fe snssfe bfe. i:#enfea# ssfeafefec no estado da arte para a obtenção de us crescimento celular ptsfer, Cep 'is ae r [te^n5, os ntic-' tun 'omm a, < o dimeroe, cadeias leves e. pfesfes Sfelsibufe®,: ou outras format c:e ímunogl obuXinas da pi esenre invenção, podem set purificados de acordo com metodologias padrão do estado da aitu, a rJ_, i i j prm „pim.fe ' o mif-t ί ^ mica, a Tana-, ...................be:.....áfefefefe,:. χ r tat^p m a e,i , ,m y -U l rato'-^’e <n α«-1 .............. e semelhantes; ver, Scopes, ’‘Protein Purification”, Springer fenisg·, fife,: fISiili, ' oitaa't n on cadets(s· da mu mli lie ι-m (. j u -p uu- u. ~ί , S i · -un v d u t feSlSfe do ifiaijOi Ss feifers, lisado celular, ou fraeções de fefefefe felfesct,: @ issiSifeBfb· s ferdilbasis dsp·. afeu,. nil n re a-, , n ‘"ed^ms la "Bin v;ld\ ur, da invenção expressos recombinant emente ou cadeias de ímunoglobulina cia invenção pddd ddr fddd© , , ' o, r;~' "\-"o d 0'v.:v^ ,’hni:l , tdl podo:, pop dderddep :-. o rooatog ruivos.; preoaoat: vas e s^poraoòes tmuoolooicus tais ' "Λ ' ' ~ v _ í if 'if P ' v. ' '1 ' 1 policlonais direcionados,, ©„g..< contra a região constante do aid ^<· i ο ’ ΐ ^ = ν ' 'χ,* ! ' I ' t >- ?Mt t L "ut que os anticorpos da invenção podem ainda ser acoplado3 -a outras porções para, d j., a te ^ »" «uf ^ do fa*.r j ' a, <- 3fii^o'aãe ό e . a aid eco:pl:a«dtos podeía ssai tU ^v"fOví>° luillK i>)tr a C C <. ^ v_ _ i ' 1 ,^a (VO, “ΊΪ antigénio, ao local de ligação, ou o acoplamento rio produto - ^ ’Utl 1 rvd > n ) v nl v “> k >U - 1 = l 1; 1 * do nivei do DMA. Os DMAs são depois expressos num . _u’trine ;dso:p:erio::I::ro adequadõ;, e "as- ppoteipds dxprdsdap rdddfdidds:. d;,· de ddddduliri:©:,:· dsaatddadás,:
IdliSfj Si© ddòdddíriiò imunogiobolinas suostenoialinente ,-. , . rrr- ' N _ V v' jr ' ' ·. 'k m -1 r, j >- „ ί _re ita ' á. M-1 , o , io v-it pri't , ui > r" Li"aç'’; rma©. t u Depois de purificados, pareislment2 ou st-5 ·., hom ;gsne1 onde, como desejado, qá anticorpos podem depois ser utilitários texapeuticernente U.idnnd vuj ^ υ )rc "p as q© desduvoi vimos to: e. .............. m-uMic ©n, ie ^''©'uurid d-5 ^\h ................................................................................................ £§:1:2S | M,. déíld.ia, ftoqpéddidd- pode: -&amp;mm o;o:-t:rau:s:f édtadai dom dqip. vetores de expressão da invenção, codificando o primeiro vXUU η.': codrdnid; d? uui; dc uan "sueia u - rn, e ί segundo vetor codificando um polipéptitío derivado de uma cadeia leve. Os dois vetores podem conter marcadores dd: seleção idênticos que permitam uma expressão equalicária dos p^d ip'-j.ilidib ;U- UJt'H pc: ^1¾ c sr, l'dtmtl73;nj!t', pod S-X jt-ilSt ' lt'1 . IV j '^1 il ( ' iitir*':s DU" v P Jj' de cadeia pesada e leve. Mestas situações, a cadeia leve à V ·> > -»5 i ^ ^ Ν' , ' - -ΐ ; l » ‘ ϊ , I 1
I ' ,-'”^1 I ' , i ' ,. > d 1 - ' v> , ,. Í , I
322:52 ÍÍ93G·/ h 'Ί r ’ , ,, . dsfi.,,» doed,* 11¾¾ l;7r21JT Í „ > t ' . -qu u i "· 1 Λ v. _ „ i i- tv ,αΛ ®:: leve podem compreendei c.CNA ou DMA genómico. fOildil rdl úmm \ aqui titã ideado:,· :"^@::l,iy-,i.s tasixededrsB·"' osfóta-SB ,á add dias. que contêm vetores construídos utilizando técnicas de DMA r e c omb i η δ n t e e codif.icant.es para pelo menos utr gene heteroiogo. das descrições de processos :para: s ised amanto de: not. teor pas :dé inosipiadedoes rêedítbla oís· toamdg bqâldlgsd a da cidadas"' s-ié·· ............. s id - s itst ,j. .otc't, ívri......dssoaevep........a.........dpyile........de.................... ddtdppdpe:,:· ρ. meed* pd© seja çla rameate: Bapssddddsd:® s ~ ait x tro c > i d ov pa a\" s, e „e - α ' pi , ,, O" ...............'ai......dbdaiib i ^ ils®" ί·>,κ querer significar sedadas ddbedras: quê: ,fdrain gaddmsábadgs, nir a: paiddr de 'du:.X:f:ur:a bs células contendo tanto o mero coroo as células eia suspensão, |0122J Pode ser utilizada uma variedade de sistemas de vetores de expressão em hospedeiros para expressar as rclettlcs Ji ai„L,i ipu rara utilitac ,> -r c' tvt 'dos aqui dssdrlbos * ifaid iiptdmi:#:· i#d: ydpibdidld: :&amp;è. ΕοόρρΧίχχόο representam ιοί ralos através . cios qjais aògulsiGdas coddfi.cantas- do : iiptéifpSíSd; ipodem sor prodnaddas b ima si 1.»|βϊο rspnaagHdam: .seiudap: que podem, quando transformadas 'd;u......transfectadias.....odd......as.................... s (,'nêrc- a,j i r rOror'is uuqmuUò, not rciawi ·, :#8· dintlqidirpov d.a: invédgsP: ÍH sí Ma ;Esite:s. mas dtp de: “'v-'·' : a« ... i·" r tao .,... a, mlcro-organí ermos tais como bactérias l®i,,ft.?í M.. óblX:,: .Mi asifetd:.lis| tdipigdqxmaddq agis vqtpréér $&amp; aspasses:©: do: abA do daqdoridiliiqp .recorofed nances ,&amp;ΜΜ iqdgodãdde©..,, os: Slid ©demidis©,,: contendo: as q:è:du:i:d:d:i:i::i: cndir -Caule s para q: anticorpo»· leveduras pd-gs...
Saccharonyces, Pi chin; transforiaadas cdt vai.prs®' Ρρ ayressao recombinantes de levedura contendo as sequências codiíic-anr.es oars o anticorpo; sistemas de células cia inseto infe ta da 3 com vetores *- v ^ - i" λ- n' * -= = -t = f _ k Vi 3- i u , ' v ; μ - n γι-i - i 1 ‘ d "I’t , et ^ ' U- " o 11; d " r't '"“.'a s ‘I'-fV'd ;pe:;coMd'i;n:g:p:pç:S' plpspldipps iaspt..,. ®hM:&amp;Míh&amp;. Gi,;}^ cPPiÉn:d&amp; és a>~ p- = i ^ 0 s 1 <r-s p ia u \ΐ;θ, l vl/-Pao j5 •’e-U'-v' v. PCI VS t'-o }..r /dêlPiPS EGG, GGQr .ShR, 1111, :IÉ:3j ooiitpadp: -= st'nt s ^ ^ siscostfei:ros®te; contend©: p t o''.etc res .eiindcs è -^a^feir: do genowa de células de a- i tee e-g., rcji"1 =r -=< ie~e 1 e ticieiro , ~ ; a c : _r e ..................' •Êã-:®;.'' 7., ' p ^ '“it i - ·- a :" ': :': --, .............. ® 'pscpphop 'i>Sé: id© ©lira® vp'dclppal., .ftycppepcdialwppte:#' células bacterianas, tais como Escherichia coli, e mats c = 1, ' <=·Κα = air ' r 0-=, >'t-1 ,la« ι*ίγη' 'tj -=1, ^spe : s: -er; , p-c u a *-\U-ceax. <S ' ' Ί inú OS αΠα.ΜΓΙ ' "d U, ,)U 3 lit-S’ S, são utilisadas para a expressão de. uma molécula de anticorpo „ ,' . r - · .. t 10' ,^\e't'-[.p 13 „3 ..- i': ”.-;.. -. ,1.- , t a s < v,n> u ia ι- Λτ-' . vA rluasr^' < t i i«v ('©c'' a-' 1->n "sr E,j>' iEEC' 1 , -=m wij'tr:- con un ''up ie ral inn j que o e i - rreoro c iin qai ~ioj o ' di psapS. Í:M:é;iá.l:à.eIa&amp;^ #o ί re : Ά = . I- him* "- <=> =ií a Ά *- p | a / a .............. ==1, a ' r -- o ·* i 1 icj - n ., ·?»,"- .-.t&amp;ivMl.....1193*1) ; Cock«tt et .............. . p’ , To n 3 ,1 > v : s 1 1 "' ! [0123] A Ijrle c. ] il is util -eta emu a oxpteasho d' protein' -= ut.i -1 i nu- ^ ut a, = ο-= οι t^re'·^' os - _r v;s i *i+>-ppedl:. tapes pppi a ©apeptdads dp itpi.espl;iai.,, pristarsiucLra-ipptvteir i linha® ρρ'1;η.1ρχΡΡ: 'pphti-hplsriS: ana apt®day· peai apaqpidas' ®;p ::pçpdú:tÉ pÉnlco ae.#®pipp pita te.ç a; |3iJi:it: da:, ^spcessr · Exemplos de linhas celulares hospedeiras Ippituim:,. iftai- pip· pa aasaat.tapv xlMi-ta-das íCéa líGmiai..®. ds: rlufrs^^r (Jsiiiêsí, npq ^ DUvt li |;lth;Ma palplitas· de.'Sviaio·· de .lours· ·.-·· Chinês, DHBB menos; # HB'Lh (carcinoma cervical .,, > < 1 v η 1 5 a ' * ' v \ ; I 'e > , . . >1 . 'cao C'. dJ 1'Crs, 1, d dc -> „ i .. I < Π 1 " 2-,, la k < ' v u t i _ t Λ career; BALBC/3T3 (fibrobiasto Ce murganho! , BAK ilihfeB: ΡΡΙαΙΡΡ #® rím dp hàSt&amp;r} ®Pld:0 :(:®i-:AÍdh# .dte +
Jf'rxBB-Agl. ã 3 1 (mieiuíaa cio murcanrm : f PCB -1BCC (e-lul r endoteliais bovinas} , RAJI > Unidc-t^ human'd o "rr tur humano}.. São particularmente preferidas as células CHO, As lihbmd dididlAPéd <r m i u C “ pira-p disponíveis a partir cie serviços comerciais, a Coleção de Ccil tier a: dp ΦοΡίΙ.Βορ vcae recama· ΙοΑΑρο díllhuir©'. .............. f dí J“·- o-1 rm it? lit-' at Uj.,·’ p tlic=na, .......................................................................................
[0124] - ! u _ 'λ* m. ’ ' n ‘td u ' l_nha dsihiláf ...................hobpédêiima' >. r 11 j 55 p r" í. 1 -> i cr ' = 5 - u r - r ' u _ ^ ~ c , 1 N " ” - s. f ' , -> -- ! * ' .. < n- forma específico desejada. Estas modi ficaçôes if ide,. cl ' . V;à,,i *- 'ovc--c .-.v,, clxvagem} de. coki r>0 procc^mU' p. mm s-r ,mpjr;ak -m poim. α 1' idd. cã proteína. As diferentes linhas celulares hospedeiras Lèm Pdfdhfehr.árlipaS' ; d .medapipmdp:· empso®.frees: jaaret # processamento pós-tradução e modi ficação cie proteínas e p· i :r ' = u ... .·.. . 1 tua'- i>.Ll.u,f cu ar. 'mos seen— c;rr: aprsppradps·' pedest s&amp;r e.oPoihrbd® papa, parade,ir a PÇtáahi:: .Mpdlhcibaiiííu fd.jprodPBsaiméatp' -éa pmhdíihaa pdáfphac: aiprasiaà.,. ...................Bara aaha ria *.....ic® i alas: ácapadal, tta .eupamipiiipâB.· qp&amp; .pçaspam.................. A aaguiparia aelulap para a ;prep:ee;sameptd^ AQaqpAdo da háa®#eAiPQi praiMipIpy :f;li:c;pi;x.:ld:cpp',; M f bafar® lapa A da proAnta c en i c o, podem ser u 11i i ca de s.
[0125] fhm a ji j ; o s -c ^rn q . le rend ctmã . . ii'v if *Tirt irti=í; é preferencia! uma expressão octave.!.. Per exemp^D, linhas te-ulares que expressem de forma : V Ον ' ν' ν' w" . " ' vez άο serem u1; 11 ί η ado 3 ve cores ο a expressão que contêm J, :._k.iv '4® .ropi.ipSpSp: vlSAis.·.,·. > v m ' 1 ' " j i v v ί t sjA Kt - v v SOsProlp d® o.\’ - '.'.'.-a nr p w ’isovg®.,. p-rPmeS®®.,· p o t. e n c I a do r, $ e qu ê a c i a s, f e r mi n a do r ® s d e t r a n s c r i ç á o, 1 o c a i s m i .*a J._uv v <· ‘m^ >/ - π i ’ o => v ΐ ' v 1--0, - I , r { > ί ! i. do - aj ϊκ t p v- i x o1 t ~ ' ^ a , d ® > manicul 50 j® .:ri.'.' · tu mme i X v .:.α.. n π-j : on/ .. : v a v -ί a nestis- p ~ am v- ii c. i~ -t', * v vj a nt _ se 1 eçSo no plas/nídeo l ocombinante confere resistência à pgippip ®: ρΛ ido ρ <.„lnlí- α χί .r''LvUvd •'v-ia'v.. d® ηJvibrai ie ' sea 'Ί^ρ-^η xime - > aeaoTx cm ptiw η rqfpadgp ds fãs®®*:· pd®· pdddsi pop cup ids .d®P §ian®fes ®: .SropScdidPS ®ííi :11ή&amp;Η®:. Psliulars'S::,. Esfe®· :®0S®P© pods vane ajosaeeeLs ser utilizado pare criar linhas celulares que c q eío-a ν' a 'τwí .nr a " ~ ^ " η op , £02,26} Pode ser utilizado urna variedade cie sistemas d® ssleçâo, incluindo, roas não se so encontrando limitado a, os pepfp: da pipad© :d®. fldldipâ pp· airps: pipplex dp dqrpps IPiplfp q® ãl-,y,. Cell 11:223 (197?)}, h rm -x i - mail a tvsiu v ίο cs: i t: a.isft-ivSx v (dc\hP ka c S duls ο, lm u hai-] .
Acad. dpi* USA 48:202 (1222)) s adenina 3)feija:^:iii-CL..fe.3?:a: ÍÍÍÍS; ê: ©Cié®:;S|^· hLppf sd: dl .<-.* dsl.i ;liidp: Pd®, podem ser utilizados em c -di Lcm r -, i ycd - da: sppf.:-, .................;:r;espstpPdpop.fcs;:v... ΜΡρ dispo * pdáP ppr: add· is dada .d.· psMeiias is:.................... d 'Spfi^'msfcsdplJviiOS:. popa 'fesss d®.: pplspad pass, os qepsq ~,e*í« neu ut i, que c'rf;u s:@ PSPoiisssP® ....................pipfef qp p:|ç pp 11 ti:>''' .....SPi: > ddA: "1 '7 tdd d :f 1 did:) ψ-ψ-ias .................... SP ai*.,. ':rá:oe..v;. .Μρρ.1>. Ppsd, :#οΐ:<,. d.SA U'iaddid 11.11:1])): ; ρρΐρ pso^ oosifcre resistência ao ácido ífticofenz lies '.Mulligan ^ Eerq Pr^v', êu1 A’*,. ° " , Jci "''j 0 u l'4:1'»; >ηα, quv -"nae 'c ;-.ς_^0^Κν - vtuu N j1 κ'ν,ν- vvx 2 Ip d i - ' > 'ei "h-jnp 1^: s-
We -3 dxp, Blsdheddpl 3.: 3:3-3.3. I-llsl-)!? 7^3,3ΐρ.β303ρ. dad-. -fees, tbaraxaos-i . : 3®kíc©:1.·.· 33/::3:73:--3:91: (3,.3333:: -Mxd3,a,gas., 1 x ' <" 3 3' * *'' -©: Kerfaa ax:3 Ãix3®.as:aíx>: brxd, dee,-.
Siosdeae, *3: ; .1 y 1 -1 i ? 3 xd 3 i r 111 13311 :13 (d) ::3.33 --'313: í&amp;f,. i:ffj:3í 3 dlgrei : pus confere resistência à higcomícios ílsdlerl:© 33: áÍ3f- 3333: llxl-C? 71183.) , Q"$- wétvá&amp;m ie:
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Ida. 3.umê:h't:a3: d dumed! :¾. doplas -<3©. géií&amp; idabdadoX', dot©©: a, xagii:© .sltdlbf liada be -ebb©!:!!!. a:s;ãdá:i&amp;d&amp; -a©-: gene do ...................ail.!:© eXpox·: 1 - - (bbadailb dd iblllaxp 0 fead&amp;i® -- dee® aeded teds.................. (:\i c m , 3 . 1 n , li-lol, ,3:.;i-1:53- ()11:8::3:).1, .....................[0128]''ii:''Isddildad-:"Id'' -11 Ids''perdlld''id'''-added:!©''de''edda-lia:''paxa:.................. dax; oxlgsm a .fx-aidea -gaaotadadei: -do©: pellplpdldds: dsíssgsdeB-v lêenleas: (pap:® -a idlxars da ailnias da- 'aiamxbsx-d' sdb- coa:#!!©!! da aalfcasa- do 'decides, al#- .eobhaailda:©-: np eadbidd da: .aide- 1. iaeixism "C-d-lde-aá:©:: 7@iaf inesa em. aus::pe.o';s:i::Q:i.: €ug:·,., dad.: :3:3:3:33-3 , , . ι ' ' > . ,,,' 1,1 ,. 1,. < 1 1,1, ; - i _ 1 -' -, r . " !_,,.. 3,- .,1 a' ' .- o,, \,. , ast fifeoas ί'-„, , ’, - . , O' '> Ms, ,[ ' CIO Me' .,,' 3 U ι ί „ ' „.. . Ο Oi@:OÍitòSOS,,:. 3., ,3 ' ' >U V 3' . \ jk- ,1 I >._ Μ , 'ροΡΟΡί p&amp;r I, L i ' Μ )'e_ i M, ,.,'0 €&amp;. '-Wet w,.t ., ,.,- , rn. per enemplo filtracao err goi, cromatografia de troca ionics, croraatogzafia sobro celulose DEAE ou czorr.atogzafia de {imano) - afinidade, <s. g., após a Moss-in So$·? pro Mrertcxa l ,o ok u.pf 1 , dobradiça sintético on antes da, ou s ubs eqo en t emente àf ο®; οοοοοΡοίρΜΜο. HI'S apimi dipgoimid,,
fMiSi Eddies .. _W f ' "'-η · 3Ί! _t_ up I·,, os ' . pieM, ,- tM ΙΙρΜίΟ .¾. JStlgiimfe SSSisStiSSi^. OS 'd@:tloáòÍ;VO:S ΜοίΡ®,,, da, ΙόνοροΑ®. 'podoisi tfaSifeiat. deo sspsessoe· op: iCOXulw: pin® gSo sot as ., carrot," M- s ' ' a - o- u jo ~ 1<- to' ' -ι, O' ^ ι >>- ο, a tie:' . "s· o- MM ~ -- qj- .t* i - _ „ t-iii- ,. ι o i - ! u ι - nw s e e - _ ^ ~ -,. as estirpes do Escherichia coli ou Saimcneilaf Baciiiaceae, “ J £ , m - > _-i e _ Ο ι ' ' , t " n r or ,. < 1 < ' 1 _ , t is'disesoa·®:. S®pá aSpida: .ap;r®o'i.adp; όρΜ lífuaptís -eSpsossos: dia bactéria, w ec xplpi row ho.-ior.po, 't:ip:Í3oasP:PtS: fsaes ipadt® do porpOiSi. is: as:eâ.:naao:,, So· polipèptidos heterólopos tèm de ser isolados,, purificados e depctw O-o-íuí „adc 3 «m i.l-wil i_ uoi n i_c 1 -ι M silo. .dos®® add®: fdzSspr ΡόΟι.ΐΟοΡΙοοΡΡο. ;â®, aptiicoppoo.:,: 'ém· duPmidiádns· irão depois auto-organizar-se em anticorpos Pctrsoaienles (idocarsetit s WQU.%/Dfift4S&amp;3ϊ ·. .....................|:.ϊΐ#0:|'''' Em: slot:® mas .fescMrilsmsso .....popa......SSt.......OaatanpalaiiiOptp................... selecionada uma i variedade de vetores Pd ®Sgr®iA®;S;ién: r-punoewo 13 ia ι moa; 'rew j-Ci' a molécula de rst ι vr· · ^ 0-- -'-ί ^-Sc , Γ' r c-o,s'g , ., ,u.c·' íc -- r aa ... - - p.pocí:3io.ielá içma. ρρΑηΙίο: ρρηορίΡΜΟ' da·· ||i, όρΐ ppppMíia·/ "ρ«Μ á , , \ i- . s " H ! ' t ' ' 1 , 1 v ' . ύΙΐΡΐ.ΡΜίΡΑ:, ’ ' - i ' nr- 'N _ t ^ ' _ -v 0 h-U , r .. © tuple cue deldfii ~ t t tm- -. tstes 1
Incluem, iras nao se encontram t *- ' a, eopressão puR2 7S (Father at si., EMBO J, ' ’ i "< > ~ ·> ..e u. i\ >< ,c_ g ' - '^’{UOUv i- ul ---,- o 1.. ^ 'Γ* i: uj *' j, m a,- „ (i i;m c t- -im, u it -i-- d -- ο m ϊ Pc®. .:&amp; redid© ecdifieael©:. lu:#l d# 'fur®??!;: a; hi®' Ipddigidl. ids proteína de fusão; vetores pIN (Znojye $ Inouye, Nucleic acudo· -'ftaS'·»: iilSlJ i. dan 'Beal® &amp; .iciuslêm, 1,, ΙΙ©!.,. cí-t, _4:o >1 ->uc d ’h 1 f ® 'cadaihsaÊcç:,,. laafei®: ...................podei..........as# ui 1 1 fuades ieidrss elll..........paua ©ipre asar................... - ^ t. m" 1 - s exógenos enquanto proteínas de guile past lut^,.©^ " ciu-. - it J , Ma pexal;,. eshai púahéinaa da fusão 3èo soláveis e podem ser. facilmente purificadas a c I - - e-· > 1 -s ’ tu· ·, . cu^ uru ; 1 - ,,u<. s uu r i de esferas de agarose revestidas cora glutatlona, seguido da i ϊ ϊ ;t t-, m a 1 jj, i s w v ~ i~r s - \ foram desenhados para incluir trotr.bi.na ou locais de clivagens da ppdiedstr dd .duder X&amp; para. pup: o predui© ds: gedp: aid:© polia ler lideffiâd da dorpld SSfi [0131] Alem, dos procarlotas, também podem ser utilizados micro-organismos i * i;oui' *u>os. íi ffiidbó:-dbgamismó iaerfarseloi:# eiredíliA©*' dpiimmehid doslgelds çomp levddura. de padeiro, « Λ ru o r -r .-m -u m- t o t- í cmuititiitt udfdiaádd:,. dpéísdr de· um número de outras estirpes se <„nc „ " 'Si-ni cur uiníf.i·0 α -|.-u -.o.,: p, m - goL __s [d.ljlf dal® «. elpleildl ®d ®ΐρ®1®1ΐΒη®®% o·· dlaBlidep: IRpl, :pdf diepíl;©., (Sfcinchcomb et aJNature 282: 39 (1973)..;
Kntgsran at a 1 . f rea, ' : i 1 ’ .-97' · ; 1's' a ·; ;n. t e/ u f ; th
Id:. 1.11 '[i.;S:8l.)i li o:o:mua®!sht.e ;úi:id:.i.òd:dc.;. Isle ;pla;:Sflded gã. ' ' s. ; Λί'" ' , I , ε ί.κ ο , ., t j. -ο · . c . ι.
“ ' 1“' ' - ' I < s s- ... ί ' C crescer em triptofarso, po.r. exemplo A.TCC Mo. 8 4 076 on PEP4-1 (Jones, Genetics 85; 1.2 (l$Ti} } , A presença da lesão trpl enquanto eeracLeristics do qenoms :io célula cle levedura :&amp;Oidpese::ipa:. S:*ppp:d'P:l:á:sa' Hi: abdienbi cElcbo paça: -a· debeiã® ;d© :fcpaβ:si^c:dtçen:t¾¾ "'pop' prpsicpjisiispte Ha s:a:ae.n.aia'. He tolplseHanoi.,. bbm sasfegma Ho ino-ef©,· :¾ 'pitas dirloptupid Ο.ϊ i Ο'' I 1 CtloC .- (u'Mr'M e i 1; I. mH!? . ' - so ©βρ: lóHPt psla idptstsat' deped ρχ:βρ®ρρο>. .icsd© viru© sssce era células de Spodoptera frugip&amp;rda. A. sequência c edificante Μο anticorpo pode ser clonada í n d i v i d u a I m e r. c e sai regiões nâc essenciais fpor exemplo o pene da poliedrina) do vírus è colocada sob o controlo de un promotor AcNFV (por- example· o promotor de poliedrixra.) . (1)1¾¾] "'-p '. .. 1 ·> = tu - ~ 1 x >- ·. ία -* : ' P _ sido «pptPptd de fdtiftã dddHsdidÉHd::®, ©dia pode: slt :picifiscada pot- quaiqçsd: pá todo çontepldo' de «dlado da· a til He ppifixiclpip· He idsd· 'mdiéèdla. bis imuncglebdi-iBa:, pee: ©xsmplcç pot dcdidâiHfrsfia;. i@.rp,f pptmaáa; IHoldíC, ρίΐρίρρίο.:, partícularmente por afinidade para o antigénic específico ...................soosí......br eterna.....Ά:......e......çpgmalogtiila.......fc.....ίΗΙκβηρΙ bHdmçPtd......Hm................... coluna), sec r · · o n VA · , sei til idade íxtu^e·· .xsl , ·.. rcr fHaiqttde Putts tcil m puirão para a purificação de ptct c nas. bi-c:i divar.eice, ura método preferencial para o _Γ 6 J o ^ ufa lu" Λ Π ' )001 ]ρΛ r IPUft 1 e (V nl O-' n ot o ccerflo '>í's ij ΐχο WL· 'diSi&amp;efpas He: Epplp: õ IdHpdgdbpt |§:ÍMí:l :8:S: Çlipiçotppt' da ptHdópid: idlppplt. .podeis e:©xtpt©debst outro domínio, encontrando-se o referido domínio ligado por Μ <; O , ί Λ ' ' < Ο Ν ^ baseada em fusão as né trica de acordo cora os métodos coahecxdos no estado da ar. de e acima descritos, ou pode ser re a li cada por, e„gc, retiouiação química coadoeme descrito na, e>st,
Ap j - -, ic au^'MiV'" J 'd ' / ' d , - lo '1 <' 1 vi\l t ίϊ pj u c , :is-á oa r: =>" ι<^;ι t' o 'e- o.a \ ,^;u, -¾ preíerencialmente, <. c,o'r- ~a<r t ja-m o r m _}mr - i'u ’mM, , .0 ur 1 n^til - 1 j -pt 1 .0 w ο ί < v. n’“HJ ο i ί υ o do η 'O .i. n .eômpracndé. «no' t _ ^ t e 1 q , o, r ,_ i a-ι (d s t '-tai \r-, hidrofíllcos e plurais de um comprimento suficiente para compreender a distância entre o rerraiaal -dâdbqud Idee :.da ...................referido domínio e 0 terminai '''dMedsp......:tte......sétdeqrpó......:da,.................. irverxpàe, ou fiqé-qéddâ',: M agebf® peido: dèdapietdco e:e o-i iod' nu --ί. 'U d. το 1 1 ^ e e _ ia ' ;n< .. w " l, »vld V. .r n.v la -νΛ. - i )C 1" 'c^-U (. v 1 di:td.s ;£erraâs ideleei., fed eeeepip:, pcedema.®: dt fail# :tí© eadeda. simples 'iperapçeeddandc· a#" eesji ees esridpad®:. do anticorpo -da invenção acoplado por. métodos cova lentes, Lais ^.irc d pi-f-s pert ; í as, agente; atilo; tiMpetatito: mi tdetadsfcieeu tetaoe eaampios· dpclúpti impliêeula# que •Dn£’^~^d6m f. *-1 o rev« um f ^- ar <-td o u« n .jauiu ui.rieu---adopiado a ao 1 n d ircioaais cova lentemer.te, ou nâo covalentemente, incluindo aqueles apresentados n,i lista não cr; L1 ; e 1 l· ssl -e ι-a o> on_ 1 a. ííraunecker, itiu dd
Cansei Snru. òuJ? " t ί iCll 1 , “r-i^, r ^íai- c biespecifico janusina era que a região Fv 1Γ -t e o c-iim rapt j mel <'u o >u o l^iutJ* s t xs v. ^>rau li-7 e OVCA. De .modo semelhante, âs regiões variáveis do e· -ί..-·:.·, . o..; ; '·νο' ;Ço cd.n ,· e, c coií ..tu·. ··.·;· r . 1·--' u. .,a c · t ãpqplâdás' i lígâedda adítpddutiivqs, tálp idrao os· ilusidiáddã :ad drtipe:' citiddo.:.!: rliggiBS', d'v. lldeot' lip-edsd: l,ii: (.1.-11:21.,. 1SF-202, descreve ura anticorpo hátero-conjuqado composto por < r ii. tin , ti. p íu;u. iar t ji ' a aim eSpdoddiça. pé reppSc '¥'3; gift jFJdd ,. Epfceé édipeerpéS: héte co-conj ugsdos podem também ser construídos util.i rando a a replies '’χγ,ϊζο..3 , ur ί, o , anPfégrpp dé inven.dío,
EgepplPs adicionais de anticorpos específicos incluem os Psc^i^s ! oc ao’;, ' ό ~ x. i; , . R\ - r - s , l:il~3i3 « p o r í' a n g o r ., C nt, il e v. I nu οα η o 1. 13 í 19 93} , i 01 -1.3 4 . |:01iã®3 Eum® dbpgp dogma de .peaipeadld pdlMpa da. dreddddb invenção, a molécula -do ligação, .aPt.lq&amp;rpp',, Sádpdra dé. dduppglpPpdddã qq f.dãdqemPo: dp .l.ifpgSp: dsqpdg od ç iátii&amp;M,. &amp; magoado: de fociad. détéPá.da:l.:*. £Μ· dgedfe:®: de dagçodlo. ppdem eér .aeopPaded: díírdbameptd' cg: .indidePadedf e :adé: sftP.i.ç©.#peé: gíi t CiQ-r 11 a tr}v j i π-m - -1’plc i a^orlonc-^ti, i piet j j . cs" 5 '··· 3na p. 'pa > e p>: ao nç 1013?! Pn, ,, -mc.\ ’n d :u 1,,, ;\t -,η'.ο dc- ligação, „ - , i j u _ - — ' % -m re , -.rtc-tpr 1 in 1 1 uio U - [ r ,Ο” í- v a ' =i OS P x' - =- t O C',b d V ί Pi , a -para a localização de íárraaeos para células ezpressoras das estruturas de superfície adequadas da célula ou tecido iotcta, rescetrwcacnlo. Este di reoionamenlo e ligaçlo a edl:uçãé dqdd adir i util péPl: a putrdfd Pd aqqdddd a:dx::çds·· tpgapêptdppc: pç ^iagppsgipdp: :sr ρρΡΡρ/|&amp; de· ρρρρρ;|·ρ®:Ρρρ1.ο génics. Moléculas/partículas... c,o ό. βΛ ^ jrp·' - uz-c xa, .Idqar-~gqei.am: .egpqçlfiicdmsPPe :a: diddled ideeidoé ieppreóòepeè^ da. d«náutá:raanpéí-4a: iprdfedna. gaPdidddPM',: bdud®, deéda. forma·;, ................dfedd idpdd dd à:f|á.Ésd:i cav '%.....f ddà:pêiatd;d:a: .* :Msbi%......a·· :mpl.âea:la:::" die.................... g ç > <- c, , mi - v;c, v. i f _ a jrr a1 * dl e^ =--- ant _ f- tx -e t-q Λ [ e-ijie n venpc. pc q a^r Tiuadã *e, c, t .q fluorescência, \ cr - => P mm ri ;ο lo, -niqm '·" u nuu, p magnetismo nuclear, ou por estais pesados) e utilizada para d- - - a o ,.-:. 'i '· ' - .....> , ; .·. ·> .. i-i^^ ensaios semelhantes a "imunohistoquimies" in vitro. Jr vivo, ood -__ui ser uMr”,?te ,,e mw t^ote, «em I - its et I W ‘ ' ' Ό ' ί ί ' ) . ' Í * „ ^ . > <r* ' tdCdddS, dêidlÉ&amp;.j·: Ctí M"5;@ msdfttl.plã· @:Síp'|''<|'S.S01ÍS'Si' :6:¾ 6í®:p'"' dplpcpdx ddfi®-, η n - > i \ i o d , m f' -> i *,- prÇSdSff. idppdqfd.:, íâ. pdisdddp _ \ t x s ii’ ’ % 5 6 ' s => * Ί> 'í , í 11 i i Ç„"> ' v m , r,. ; p c? . } ' c o . ~ í , ~ r i i v-^-4· ..oi i.. , j v.i * o prspa-bspiç: 6:«·. mmn paSs a. .dppplid .rh dldd- ,6;«· :¾¾¾ spents .dd pxaaPPaáã^feaP:©: tdrspisdiso rdbd dlagdêsdidd pai# uma proteína associada a unia doença roa cérebro, detetando, oo] t 'a t _ redui_ndo os 'apreiaPos -de P r pi ipo'ce ou .oósppppapspo: rud :sr:pel ta--, para meihoror a cognição ou abrandar cu rnpsrser # asallnia ...................ssppipisp: nas-esr amo à: doença:,...........ar par a a' é-a tr :â: pia................... e \ . , uf< r da-. sorpaaáos: p-aiaXdfidOs- an as sens precursores de fluidos oorpcrais.
[0138] bm determinadas torras de a l _ -; uai . η l tr~ ., '-u ^_νν.''ν=·^·ϊ_3Γ~ í 3n u _ , ^ u i ~, _ " dd da ia pórdõaaa iria dr riia_j^f 1Λ as. '•ru. *n.u t nr acnrcrt h \ j oi ' ^s exemplificaiicaa são descritas em maior detalhe em baixo, -Psio oaempicp díc s.papmdmtn· da: aorioorps: do da-âniã- aimpind- ro da- inas® pin pode: manter- dftia. -ndasfesta 11 pasta ftaaiseix os ''v'í~ s m poIií^s í íc ivuí ' ,'λΑι x .r . s > s, a fun r ' iml 6éc;:p<:,; pc,, un iéx'"'a.v, a>„ :s.íj a o- m suiriord ............................dm·-- pu 1 i ot pi- jtP jmrn^' <a........lasidpid.......podo................... 'vpwis- , ca'5; μ n tr. udner^ ie, ;o nsisd: ouc piOtoiSa:: d*- reat fritos de tio a i car çrd clnos
quiméricas que compreendem, por exemplo, um dominie de j=u, -v a u i 1 g »i>i ' <e íu"s o lbiUxin í jη p ole tm „ um i ; I dir I t jS a^ i. 11 >, ^ j. - 1 ^ μ.-i ' ^ α p. _-ç ^ 1 ^ri.u rp , . e, , ama porção com a qual *?f<s não se encontra norma liter, te associado na natureza. .As sequências de araínoácidos podem enialir uormalmente em proteínas separadas qas suo unidas π η .. . ..τ, ι . \ .. i ~ * ' ' n . ' ;
ί ι í . > νθ η ι v>. . t ' . . ι v. ^ A fusão, As pro reinas do fusão pod era ser criadas, por ercampl ο, p ' „st, v .----- t.^rs-'i't - at >. m pòlinocleóti do no qual as regidos do peptide· sue codificadas a tu ua r e 1. a ç ã o d e s e j a -d a . CÔ140] r em·. oi ' m ' u aplicado a idd COitOUC-reOC:!:®®. OU. Ο. U# :ppi fpipt Í#pp. Sig#' í f: 1## PUP O ^ x - I e t -> lv ^ O 1 s>- m r O r*5 ' > N i lUi íi.^d^ d dI#:t#d#'A de>: rosio :dâ. h a di . . e > οι e-s a sor ...................owtípar ad# ,· lor ddl :'ο### áqu: i pt; f I'igodPo :nm................... "o 1 } m ^ _ 1 lr'c J,nd' - <r . ΕΟ x_ _ S<· ar t 1 ' ""Ο Cí fragmento de ligaçáo a antigénio, variante, ou anélogo deste é derivado de um pol ipépt.ido, não de imunoglobulina, da mesma -u m -m, u i ç M ^v. . i<- ι ' ι. o. t i i r > xv. í~
U it 'KD 1 l , -- II
[0141] Tal corno discuti cg em maior detalhe noutro local deste dppuiSdSi;P, anticorpos, fragmentos de ligação a antigenic, PaPiãpf&amp;Φou derivativa# dast##:,. -#·# imaeidi#:· ppdpía. tóisÉt sem· fundido# di fati®: oiaoifeiuaoi# .á; ##, p#;lipda#idd: heterólogo ......##:.... terminal „:atbc.\^lioo.........d#.........'ãimipfspç..........p#................... quípioamenfe conjugado (incluindo conjugações covaleutes e PlP- çuuoi##i##! -a. pdiipdptldd# ou out### diorposigdasm 'For· ...................OAO%: í©:, :## ipí #Ο0#Ρ0# pod#® #dr: iUndidao d© f Of ίΐ#................... iernu ramf ou rcn;ugaddw a HvJsmiãv, nmi. dpquappi .marpadprea ##. ooiiicp da ί#θρ#1ο' B ooiloui##- oi#######/,: 'dai#' -'em' t c 1 ig=q x ' dos het-r^bi jf, tn-res, ire i onuç 1. d i a, n to Τ'-v r~ , t J>., ptU u-p^ -Ό-.ν,ρ 1 llni - · r , , j „ <] j j < #0 8 9/12624; Pedido de Patente EdJ.A. doo. Sp.il#;,idli :# ## 3»,3Sd.
[0142] !Ãst: icorpcs, cu t ruu:o-":r· t c o de ligação a antrgénio, variantes, cu rís r i vt t i *0.3 ceeies, t: 'ío'cv d ·' uev u-' . '''! i dc> í \!,·' p ' , , "p'1, i,v o., 1.,^ - _ - ' k - í c d- , , Vs ^ ! vj 1 1
' fu )-M 'ut r Çi ' - ju t m ' U 5s ' V V'_'1 - <P > -' -1 -rt ' ^ -1 j-·' -' , ^ ί t x r •'-’c 0e "c l +- i n i n p | t . -<5?ο-5 n. “ r <- c, r^sifi como processamento pós~ :>avup", ou j - '.ç ;e modificação quirni ca PSiE. SSntiâçdpas pp: .-èpppdíp dg: pdipd p@pá:t'Í4Câp.Íp:i ppppfidKaiP· pp: pê® pegssisàd ;ssí. tpsSos' felsiçps m, era. ffippt pgtsiíiS:,. :esi iPSnPqraSies,:. d.ai esmo mums gSts&amp;ga. i.icematsma pg 1 spaStippÇiis u -c ru'd rioaO^s r:o w e‘~v>r rt-r -ar. qnilquto ιορ. .oo iu n i ru , * lo >*> - * v no u :¾¾ cadeias laterais dos aminoâeidos e os terminais carboxílicos ou sríúuicos, cu Sun porções tais como carbohxdrato»* Será apreciado que o mesmo tipo de modificação pode encontrar-se p c--< n* " ns' u λ_' P . c * ^ n . t . uv*,< » e locais de um d ~> ~· < v.d.so-cro Μ4.ρ:ρο:Ρρί^®:ρ::ί· tat Pslip anticorpo pode conter muitos tipos de modificações» pi antioempse psdeE i®· pSP spsipM,,: esmo rssultsdo de ublquitínação, e podem ser cíclicos, com ou sem dapiPiPapPés;, PatPsmrpqís Pi:d:i:is«p .esnriidpaPqs.:,i er saci rose» nsmiif içados pedem, ree.ni.sar ds prsdesssd de pÉs-praduÇâs ορρρρρρρ ou, podép, sei 1..ir padpq......psi pÉtpdps ei|prfcei:id©au: Psí mdiif isiqõés iueiuers: austdiapiq. * .âol. lapisa ';ft;02:“ír:i:boe:i.l.epio'
30 :d ''Au, , u_rm?o m- ^ien e oe tlrn^, 1 qaçè' u'raU.: V .............. uma pru^su eee, 1 i 'açV' 3'eP'it^ .....um......pdsieêtpdò.....oil.................. 'tu ' s. ί- up u' « __d». , n ,5p. sc -5 ant - i m i ^ >. pp derivativo de um iq ι d , lie c\ u*t 1»i pe: fosfotidíiinesítol, rsticulaçâo, sddipdddlisi u uns, -t pte pdUUda ^ίΐ.ρριιΐ^η.ρό:,. ieSMdilãplo»,:· fsrsaçis: Pp: redl.Mi:SapãÉ: cova lente, formação de cisterna, formação de pi rogj.utamato, n : ni lac ο,ιγη-ριπ'χ isçs sl i ,v„ s^lapà^, fc'mc u <.le âncora GP1, hicroxiiaçâo, iodação, met ilação, mlristoilaçao, ô:nidaç#b:, ^ ” xu Ί ^ 1,.11 ' 1 , U . . - i =1 if. '»' a '1 , aKÍ i\- 's , ua sni'-'oki o» i’k rx . i i.í, t\. .κα,.’: ><·' amine-acidas s proket nas somo a a rgi m loção a u uM.guit inação. {kçfx a...g:,.f: Proteins - Structure And Molecular P3roperti.es, T, £. Creighton, W H, freeman arai Company, New Cork lord EA;,, {1993); roar trans Lati ooal Covalent Modification M% > '' , ^ '> _ ut, Ss * Academic Press, New Cork, pgs, 1 ·· 12 (19S3; ; Sei fter et a 1. , Meth Bnaymo2 '1 δ2 : 626-õ46 (1990 ) i i *· i t =1 Am ί <-oaj j t 1 ~ ] 1 .
[0143] A presente invenção também fornece proteínas de tusào ...................áo Afc «;eÁÁ;épd:b ®;; ppiblppr ρρ::, 9¾¾ ft α|1 ibntp Atr i; f qdçid a.................... mt . ;p> u<- , ~, > *fi, _u a- , * n "· ·; rt% . η 1 of hetezdlogo. Nuxna formo de realização prática da presente zov-ueàc, mia ριΆοά,,; ie fusão da invenção compreendo, mnn...t~ > eceuw,..,lí n.i ' em, ou u p,icmytX' „ çpntb&amp;db d. çpqsiAÇlé âo .ámfmçáçfbegr da ορΑίρηΑρ uma.. bp litis npa ' , i- ir - r p la \ - χκ ^ = --=1 '-.j5 ai.i.nbip;f:dps: Ao ,qmãl.qp©r: uma bu: marts. £&amp;%±ê&amp;g. 'kli db Am... p:á:fe:f.çÇrp:o; ida i.:nme:as;i:0:, C t>~ ' jmert <. a -Ί; VU 1 V' e° '“esta, 'dmai sequência poli pept id 1 ca heteròioqa, Noutra forma de tail [ := i_c a k i e^t-nm im, ac*· t ^ tu^s- i ua ,: i . · " o . u; ”o- mcv cm o s :rv: ' .;..,· < rrai Ti?r o aqui divulgados compreende, consiste essencialmante em, ou consiste num polipéptído contendo a sequência de aminoácidos cv quilquer uni, dum nu tier fms '«cfiòes lrl-''DEs de >n anticorpo, ou fragmentos, variantes, ou derivativos deste, p;u a .ej.'".ja re tem mcm^ d- ρ - ^ rum m ό o.. oa l w i ...................dai# ie.]iõ“\- 'kbkãbtp........dd........pit..... anticorpo, cu fragmentos, pàriapfsp:, od lâbitmabim® Assta, b asm ·ρρρρΑρ:£ί:.Ι.ρ.. po.lipeptidica heterôloga. Numa forma de realização prático da presente invenção, a proteína de fusão compreende um k , tt Λ1> . .rta u . u -nift i mt n un ^ajra . " v ’ 1 ' 0 ¢- S * ν ' , > ' I ' U > varíarte, ou oe ·. its L i vo deste,, e umo sequência ο xl ipepf idi ca <. e' ' , > ' a i ρηορρύ.ηρ 5 ' m > especificarnente a pelo menos um ne.0"epitope de ume proteins asdociada a u' i d "mos. Noutra for so a de realização prática da presente invenção, urna proteína de fusão compreende um poiipéptido contendo a sequência de arninoáeí dus cie pelo .menor uma região VH de um anticorpo da invenção e a .sequência de er in n.u J. ^ ^ .c \. t, ta .rr'υοιύ' dl d~ nm arc. ι \ p3 >v invenção, ou fragmentos, derivatives, ou variantes deste, e uma .sequência polipeptidica heteròloca, r rf<~ t t iuí 1 i e, as regidas VH e VL da proteína de fusão correspondem a único anticorpo tMi ι " insure .......pd Fabi qua sa iinCí dspsdifxPãíásnte: st pll 'tmzmM ida :nsp^@p.i;t;p:p:d :de 'idia ;prsb:drdd; áP'SSPi.ãda: Μ umd ddsddd... di;nda.: ndutrá ddrmd. de idaiindpld' ...................(sdâddpd.....dá('' (pbdsdddd"" Úa cdp:b§õ/......udtt''' pdbde 1' nd''' 'de.....d údld'''' par e(................. ptCXi. raçle c" " -V. d j t η κ s , c° t nttm íl s í i ι ,ί-ϋ ι. O o' ~ m Ί r ί i'pe- aminoãoidos de uma, duas ou três das regi ôes VH CDRs de um u itiC' n > e a S''qt·3'.. 'd p .t npp ms d- n t- dua® mi- dfelis das regiões VL CDRs de um anticorpo, dd feagmdntd® du τη π 3 o-te, e nu., requêi ia ό _peptidj a d"-n >ti'; .
Prefexencialmente, dois, três, quatro, cinco, seis, cu mats das regiões VH-CDR{s} ou VL-CDR(s) correspondem a um único anticorpo (fragmento scFv ou Fab) da invenção. As moléculas de ácidos riucleioos cedificantes destas proteínas de fusão .............. ι λ ι ft ) 1. ' 1 V, i 1 ' , M lix J -IV .................................................................... fúXMú (EddtipXõd. ; do: pdotdipq» :#d tudip dêppfdadád; nu. literatura incluem fusões do recetor de células T (Gascoigne :ed .miIs®.. lddI, fcãd.... .idi.:.. &amp;M. Idi.:i;l.iai-É|f0' pddTblv EM (Sápsu:· '&amp;&amp; p'l .:Sad:Ctrp: ddV.t úpi-ddl. IdSSdl;: TdaddedMd: pè ,ãl Nature 339:oB~7D í13&amp;3); Zettoeissl ct al., DNA Cell Biol . dill WZÈê0--3¾¾ p: :i;f;rp <|p &amp;:L·. p ildddre ddltêdl-dV$ ' Ί , - ' Μ' ' H Β - ’ Ή . \ S., " ; .
Bib,: di Ssiix Bio; , 110:2221-2229 ;1390'; e VJa; sor- ei si.. Nature 34 9; luN-lel ;199I; ) ; CD-I 4 .fAddfi#: #2 ã À , > Cáil 61:1302-1219 {1990}}; CD2S e B7 (Linsley et ai., 2, 2«p.-
Hed. 173:731-720 (1S>91)}; CTL.h-4 (Lisley et al. , J. Exp, Med, 124:561-269 (1991)}; CD22 (Gtamenkovio et ei., Cell 66:1133- .11:2:1: 61111:111 ' 2Γ Β^ίΐ r I “ . D < - ' -T „
Acacl Sei» dtA 5i:10332-10539 ÍI991): Lesaiauac et ei., SE; :11..: ÍbMU:uo.l..<. 2’.,~e Cl- d„ 1 ; B ΒορρΑί. 12: gd., r o.: Bile
Jv.2, 1 11 ; ' 4 - - 42 ' . *91,1, u '-.e e' de x.ji B do 1 :k.
Gorman, Jd Cell- Biol Vcl. 115, Abstract No, 14,411 {1JB1)Ç:. .............. [014SJ lai tro'' d sH.sibe ,κ\ trc Iodai......ciente......deEumenAdy.................... -μ'!· »0 7 „ > , >u i "' i-a ' -fe ligação a antigètdo, variantes, % ' ’ v. > Ή . <Ή, o Hl x a }_>Β fu .. iw ' i i\ -q ^ i π .. 1 - Ί r π [Hm aur .-uLw '1.-- ~ c nn Y í:; 7 - " ' p v 1 V s í Π w 1 p ia 1 bi h2 vu l h .At: 1 v m:dd:i:i.eárcâe .mèdcdoA :obbi:®b:iddi b;© estado da .tttd,· Bot pBeSlpib·:,: ' η ~ 1- ;\f -h;\ ( r 5 fiiso - - ’"'—i .π, ?3u i ·. — o _ _ a q ^ L b ;„vx a-í h ub3c 17 a ' "V - 21 ^ O : . '4 7 ίΟΓ1-’” j. "it .· '"O Ç, , :©.£ rOÍ ,
Cytokine 16:106 {2001); Acre, in Drug Deliv. Rev. 24:531 í2002;, ou Weir et ai., Boocnenn Soo. Trensactiono 30:312 .....................Pilile...................................................................................................................................................................................................................
[0146] 1 r i aj =1.1 J .-ho, rji; n c, rp· 7. :u fragment o; de lie,a ulc ...................a) antigenic, variantes, dd tstBao®: dst t«t;s: d» dnt® qib:.................. H. ted t r i - i u~g j ^ 5 dv. ''-b, ; -j t - < í ui qn^ £cv Bt^ i b~ prjtHad' t iet^ . tm 0.0 r^l1 ’'C, C'7t H3.' H uece O'HS B Γ t JIHjiB.w, a sequência marcadora ce aminoãcidos é um péptido cie hexa-histidina, tal como o marcador fornecido num vetor pQE ÍQ1AG2M, Inc. , S259 Eton Avenue, Chats-./orth, Calií. 91311), entre outros, muitos dos quais se encontram, comercialoente mi dcpppit;®, m wmm- m ax..,.,. χχοο, ι&amp;.ΐϋ deads Sdi.,. USA 86:821-824 11.2:8¾. „ , * rv A Pda®'- histidine permite a purificação convenienta ia proteica de f a s So. 0 u t r o 0' ma r c a d o r a s p e p t i A i c o s u r e i 3 p a r a p .· r i f i ca o 8 o a l ~ , - r ic- a I i i ] j a* I. ' ! . t S' . M", que corresponda : a ηΐ|: - at ; j n < k Pa proteins hemnqlutinina de .influenza; (Wily&amp;m &amp;£ al., Call 27:7 87 11:81¾ .) « Ò- SáAAAPíPr -vlla:f [014¾ 7 : v:-a -s i- is < j, > dm {. a . uo-s ip i ra~Ov miXado®:· :que: Pi®· Ιοΐρεκ: PAndepiásipíS: he oaxodo· da arte Imm· p:ee: otempi.©·,. ©a redid©:® do: .¾¾¾¾¾ 17,,:¾..¾... IIP®:.,, I-21..1,. X€1 © ...................:&amp;rldo-v:dmi ,.....ψ''ipodi: f © pci§w""rim" tlalv''a: ΕηοΛο"Cv Cf ©Cauda pP:<fd................... ©er dCieçXòeâdç:: ®:ρρ::£.ρ:ί^ρρ®ρΐ·® pála .et.imieac -s decreed© ©d· :-ri,®r'P„ a® ^ 1 p.'s, ^ a > , ~ η.,,-, ^ oil ( „a i < a if- r o i ριν-c. © -jcS > 5- r^|H i ' i rum-. >: t vi< i numa célula hospedeira para expressão, £11:4:¾ C® =r"r< ,.η. c , 'a « padem sex utiliraaos re ,, i\-* uitn > 4o - x, i t^r, x, ' 1 podem Set o^njildadP®: a. pel©: .mspos ©ma. Pa paw: oerXiedade:· C© m©l:i:p©X.psp ψ para mcXCorap ,·. " >© f. ; U.anP' da 1¾¾ :l;.:i wts.,. par®.: tsCil.ira.© a. derapi:©. do at:©#:, po 'papa ...................imp^eiogia1 '.©a :. .¾¾¾.¾ C ®; pap® dpt©, diPlpp rpc© ..........©a.................. fragmentos de ligação a antigenic© variantes, ou derivativos destes, da invenção podem ser marcados ou conjugados ante® ou depois da purificação, quando é reaiirada uma purificação.
[01493 Eia papfipiidrj' «χίορχ©©©., ©a :fp:®;qme:ais®: de liqdçld' a antígènio, variantes, ou derivativos destoa, da invenção podem: ©a© donj ipadop: a. ©ροή!©:® cexai^ui.i©©:©, :pi:i^:fS:rmapd®>:' c .ç. : . dos, pr^te- u . η:- - : Όΐ®, i au:... t 0, .© < C ‘ r ::.··.d..> r ► .-, de respostas broicgicas, agentes farmacêuticos, ou feg.
[015DJ w _ ' Ό 1 " ! , - u 1 " “ 1 UM l > ’ ~ > -V . 1 ,- ,. 1 * ^ t < - ^ i , V x da arte. As cominee pc din oer acopladas aos anticorpos por ipooiodp de ,',λ > di aa: pprippoppcpadp ou podem per produzidas inuuotoxinas OOndendd pprpdee dP. toxinas , 'X . < t > ’ v.j-v ·=μ v. ^ i u p Os aid -.evrpcs ds :prsE:ddt.# àdPPPpSP pddsm· sor .rpilroaddp de. odd dorma. lepaippPpdPdPdtP:. pado. .sr ΛηορΟοι p:iPPE' impPiPippP'diPa' ddpdpidP ΙΙΟΕΟΟόΡχρόρ deeipO iiaapdt'ppiimap pdpQKiidpiíl-p:®: dq-S.:Cm.t:p:S pod IfpPP:,: SOmdnprO ·Ρ@ρΙ < Mddv .1 íld'Íl| ^ 10--d:l p:· 'ppp EpngOd,· ÒSPtipPC-I,,- Iddajf toSldj * 00“#4,v: [OlSl] i | --Ίη n J- -si_ ,a n;, ’► s , iis a ao cu’ r _r ’ e pm: iígante clivátei, õu um local rd odidagsm papa prcceinases, Estas porções espaçadoras podem, por sua vez, -o. ': ··. d\ ± 5 ci. -'· ' mm - a · ~ i i cf ? . , i i-~o.·..: '·’ tlfSSIo iolí P podem sor sslerd onadas para permitir s ilv d,- ’ mm: 1 cuit .m:ui ’ Iml >1 r urro -o :d:S>. O’- ..- P~e‘tu I pi c >d ^<r n./;t..C' pop anticorpos a dnò.ípÊurÇd da. pddsdptd intenção cara .i.pPdodopad:i.0 .Sã:©: EdritaCPp:,, r:addO:Í.s:SÇPp:pa::f:· peptdpPÇ:,: e dodrpâdo' lae dârmamop: ront ms· qpsid #§' .ρροάοοχρρρ -m: os antigênios da presente intenção podem ser conjugados incluem ...................çpmppdPdd -pi» : dip dpisridpd: ρ|ρρρ4.®:ρρρ.ηρρ:.... pomo Plípmaopp^,...................
Pads oorao: miromidima:. :%.· idpnftoaaprcioa',:. O: mMdiasdiss::.,. ’pasmio: utrlirados .apPldsrpad οό. dnOiiidlod OP Isrfengas·' .............. radieis atop imanente ........cdpjiupddoiPr:.............ordc^...............dmdnatssappPr.................... at trunnus i: ·· ....p-« \ u » s^-r ra-° prefej, r tie ·>-> qm Sit is 13(--1 SO cb Se 'fd'fcppiO1 OOffiO' p ΡίρΡοίΡρΟρίο dp: leucPoiitse.,·. tad cowi":a" astaMiIdÉsda"'P""d" amissad*.....iSipiendiendp:................... tip. resposta iptsimuda,.,,. aipgPS- omisapra:#. 'pOdpiS: Ser çc ti ό s mra , r ^ «mal, -d-O-^vf’u a emis^cn <=t: ^ pari o^lar ^ u Γ s^'1 ί ϊο “-«ί a i e on i:mudptO:ra;piai'v. de:. ;pm.í,d;:S©:rP:s:· .prp:íe:repçip.:ip alp .effiidd:® 1¾ do curto alcance ··. elevada energia uai coce ΐ;'Ρ1. Euenpias de radioisotopes quo podem: ser ligados a anui corpo o ou > d v , „ l N < t ' v. - „ V. " v- , t v. -P a , η t η n , ais jo , , t " o ' o " *' o i, it- ,.-, . s - 's>. Ôui-aoP a|SMff í v ci' ' _ u -> Ί - < _x'“U r>_ í \q U I-'· - v èv' 1 i j ' L ,\\ w c . ν’ , ad c- p”', ~>u ti a_ip_ da w IXa-4 s t a^odu t-,:1, tal como protocolos terapêuticos er vivo o ia tive sâo
Oonfeeol'dijp·,. Pd pelem ser cacilrrienco det ermínadoe, peias pedidos .rm eat®., Pnde goer pt -ç-eda ppeepmisds:.,: a papàde: -ηρ adt« pdde iaar Bat; poii.:noeii:e:it:i:ciO' da iavaÇfip; doddiieaaia .pai®. p-daiquar ad; dos- :-a;nta®0:3ípos..f Pdt igédiodo -o® vedetas ....................Po '' addc®''' dPSiPides-' síiu iNm: pç Çd opçie: .s® tder di................... pçs-dede© - £0152] Os peritos na arte reconhecerão que os couj uga aoô tu ' ?Ti f UV'! S'“ 0' 4UÍ Knk 'ft - i uk au \ X tcUVO^ li' ma . r.o 'pa d-v* 1- âglSa peíleeipnapp v· ' ^ sei r> , dpi : ÇsPÇppçq doÇpugd-dPe epít Çíotina são preparados,. e. g., através da reação de uir. polipértido de l*o_.cao vU ar ctt.u at^^ad. dt h^o^i.ia „ íl «.ano <« ctou i^dldÇpÇáÇiúeeâmicqida: feiçdir»,,.: lie· fpim®. .semeitopdp.,. Pp-ut] atuir u ws ,r ν;ν,ν fo '":; v:e ^e pv. ο η ε i , : cd ε ...................pa;·......pppse-ng®.....: çte.....p».... qgepp®.....cie......pipdpi'aiippidq.......Ψ·>·Μ ......PP:.....dpçà................... iisdedes-!,. PP. ipoa: redpla PsM: PP· IcoPPoPraPaPpq:' prP;ipréPpia.ipédt:@t ipptipçipgaçd de-: fu/udieispéP-oa:·.· dPsgupedes: ...................idp.......^MdprppSa.......teu..... fragmento?: de ligação -a......aptá-gimo,.................... variantes, cu ser:, vet iu· destes, da tinuncso sdc prerarseos dd .fddma adaidgs-:,': .|P;ÍS;3^ -¾ piseiddd IriÇfdçid çPgiçdâ:. -.piada ®ndlp©dpeee çs. Iragpiddde pç iipdÇão-. a dad'iifpdi.#:.,:. psaiipppepi^- ç» -demplplaop lestes, u-j ir'^nqSo 0'iin:gà'1t t o um » - t«idçètct ο π de :p:iapç:é:s:t'i:çp -, ::0s. aa:t.:içp:r:p:®a :pçdg» ísp.r pfcí.l.i:Ç:app;s;. de- fp-rpa cl.iognóst i o a para, por ereitpio, moni tor izar o deSanyo 1 vdmento ou proq.tessao de nma doença neurológica enquanto parte do urn prop add men to. do isbtt· plrugcg.: pad re,. SyfUj bétgrtdingr: g > '1 Kl 'Ί 1 ' t t. JU t U ' ' 1 “ ^ ’ ?“ prevenção. A deteção pode ser fdmititada: atpmves bm. ppgtddadSdi do anticorpo, ou iragmentos be: Uot: 3 j amt rgémxtp. oaddgrings r an bemiyativoe:: boetepç a;, data substância datetéve! * Bxempiçe de substâncias detetáveis imcdmeát bâtids eppimãp, grupos çrusláci tosf materiais tlamreíSggPtSSg·' ΙΙΗΡίΡΡ lai p iumdmesmentes'.:, íládbgi..i;ii biolumin i scent es, materiais radioativos, metais exaissores de positròes u**i u > k - r α r = i. o de : : s=d .> o·· t. i t' -· n u u i ·;.,. .... í. ; ·· .·:<.; ' mm: c :· ? ·~t -s ir u r - ί %X::(,· pi fp.. Bebfdp: .¾ dabettfcg ,,Α, Mid. dpdli.pi'M parai: Ibe# métllg-eom que jibdsit gel eomnuoados a. :Sb.td.go:c:p;P:s paxâ utilizações de diagnóstico cie acordo com a presente invenção. Exemplos de enzimas adequadas incluem peroxidase de rábano,
UUP r--1 ;< ' ·υ ϋ-i _ ^ - - O ^ ;_iU cU exemplos de complexos de grupos pros táticos adbqaabgb imblteM «btbigt^ é oim i;d; eu rdm de materiais fluorescentes adequados incluem u.mbeiiferona,: :fl get emeexta,,: maetioaianato tig f lucmeaesiaa* rmbamina, diciorotriaziní iamuina fluoresceína, cloreto de dansilo ou +" :cei it ΐ ’ na; _m o..ouel<. o- um material ijniremp^e itu ui Lurunol · example.? uO íuí ?' mm t;o, umim s mttv. ;t! luciferase, luciferina, e aequorina? e exemplos de materiais radjoatjtmc cdeqmuot molues -'r, J l, dn ' \ du tlirt: ggtiggrpg,; dd: fragmento; dd: llqagip d: antigeni©,* variante, ou derivativo deste pode também ser marcado de fermà d sor detetável por acoplamento cio anticorpo a um :d:0mp:pbtpx:quimi,dlumi:n::i:ss®:st.é., A presença do anticorpo marcado uri ul imr-_ s 1qui? Jt. ^"'v tu t d ^etando c r ui .b mui ts'enci^ que s.uq „ιη. “v , de-muO da “ ->d© Λ mus, ; Γ „ ‘V „ s' ν '' , '"ν'' narração qu irdolund η i scents parLrotdarvrenlo OtL is sat iuihiBcd, t-·' ΙΓ j )., ^ <.'* Ϊ l ' , < ddfidlPd' ©: dSPer 'd® ©XS:l.ádS"..
[01¾) J - , η ί ^ ’ © í - { - > a-'- ' j_o p 01 < de. ligação a antigénio, variance, ou derivative cieste pode ser marcado por forma a ser detetável é pela ligação do mesmo λ ^nr, onrin,, e a rr < J ' - ·. vo " ' , "Ari > 1 nua' "urt 't ,.p-'© ic - ’ ^ "eu ^rrj'o {-açyme >nmur assay trifd ’ Vd^ec, A-, ’'Che
Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA)’r Microbiological AasbciabMa 'Qcart.cri.y fpbi ieldipb,. Waliiebiopll®, del·,., Γ) ^'r c:: •is4.rron? 2:1-7 d ·: < -c > ; Vel. "r c, si , :. >Ίχί ,
Eat hoi, 3i;EcT~5„P ills'; Adler, 1, .1.,., Said,, Êh.gyds.1, '/3:482-52 3 (198.1); Maggío, E. (ed.) , Enzyme Immunoassay, CSC ;· „ ,.r· r, As 'nr'", - r , Is]"hvu, F, Ά ul. , i sly, , dhypae Agadc, S&amp;bird EcAyc :((121(1,1, A: an Pima., se suobntMa: fdgâbd sd aufdcarpb: xbaperá. e». cm mcfeslrata: rp •'ρϊ"' ^ h f r?ízin,uiu.lu.„ o un z :e, l:.c · r ;r. sinun . v·» rorma a produzir uma porção quiraica que pode ser detetada, mat example, roí r.ci^s -ap^uct^^ruuu,··', rl"; j ire*:r n ta c τ A, ^n. nit.s ou© γό-ήι ser u) A a paiu-nru jU r m v <d ^© l c nuf i. rv. _i v._i em, - ac i o se er t "Pi*, -n limitadas a, malato desidrogenase, nuclease estafilocòcica, iabditide bd Çilgs)!;· ΐ:·Μ .alceai ds::s.i droge Bass, de ,le:y.edl:p::a, Pifa f.iiçedbfoísfiaf.d., ^ΡιίριρρΡΡΡΡΑ:®©,,' ..iiidiàdrips: dç fosfato de tido se, peroxidase, de rábano, fosfatase alcalina, asparacenas®, glucose oglbaae,·. bètiá-qaicoPcaidaae:,,; rido dúbl eas#, ta# se,: cafálas'®,: glu.eebé-d-f ccf:a Po: desidrogena.se, glucosmilase a acet-ilcclxnesteraac.
Adl.diónalálenhe,; a deteção pode ser feita por métodos "der tii.lr.nn, "m r · t.-u;:!/ - tru t {«n ao iv 3 cma v. aimu . A I© ·=>ο ^ t * *d* 1 an1, en ,-©t "©A ^ a t- raw s Γ©'< t- ãt.o ' .rt 1 ; v; < -d t u - r-'*, ic ^iuu st'-- © 1 o , ---i „ * S L > ! ‘ ^ , J “ ' 1 ' ^ © erac .Ilian be >.
[OXSS] £ deteção pode também ser feita uciiirando cuslguet ura de uma variedade de imunoensaios, For exemplo, através da
Pd,' 1' V 3 ÍO,U^'U ' ^ ; )ΓΙ, on,i, * -J K < d- , ao anbrf:snip, narbanfe.,, ©d ^defegabobõ deççe,, é pgcsrvaíi dcáifear: ' vh o'p' ív e,vs da 'dtoXIadfen 'da om ©adddi-mdroeadado:: pife, ;par· adedplap XéXferafe,, daiaed:p.i:ea. sir
Sadiai® Seventh Training Course on Radioligand a snap· fefefegaca:,:; i The .Bnfecrlnp: pgcfeby;, i;Maacd, Iffeifj..):,, '&amp; ifetop© radiative pada asr ,det:s;t;add: ppir fefefe dedad, incluindo, mas não limitados a, um delator gama, um ietetor 1e , 1 η 1- , .. I Λ, dt 1 o__ . (0157] Bm anticorpo, ou fragmento de ligação a uict antiçénio, λ.* ftv, ^ } -i > <r t -ei-íav
Mitl date^didei, rabll.Iaàabíp' ifeaia omiçasáss· Sé- :il.d:0:ris:solde;i,e bain Pbmp IJÇEn, na :bnT.r:os da sari® dos·. ia:áia.u|:baasv fetaa .meba,i.n pbeteía smr; ΤΙρρΑοή' afeicarpá 'Ublbidfedo/ ^tapos '.gnedanf®:©:· de ; mofeis- 'dais fema ácido dietilen o t. r í am í η o pentacètic o (áíez h y i en etxi 3 m i n ep e n t a c e t i c fei.çi (DTPA)) \ ep leliSp ti ilvint.anu not -a a^ -r,! ·, (cthylenpdíãmínetx-txaacetic acid (EDTA) , [0158] São bem. conhecidas técnicas para a conjugação de várias porções a um anticorpo, ou fragmento de ligação a a-dipr j, g rmvte, cu isrivatico des *. , ' <,p,T ..fenfe. ai ar,:*. 'fecfegignâl :fefeBodi©s .For .ΙΜρηρηρηροηΐιήρ· pf Drugs In Cancer Therapy”, era Monoclonal Ant ibodies fed. fencer Therapy, Re is f eld at al, feds,), pp, 213-56 (Alan fe Xi.sfe Inc,, flfeii) g. Bsllsfeojc si ml,., feobifedife &amp;&amp;$: Brag !-i "rafe i 1 => B 3 X 1_ I „ i · id, , 5 i ' ί , fe ad,, pds,i,: ikrcel iehter,, sen, egg r 0Α:00£3&amp;:, ' ' \ \ I '1 v . A , 5' 1 si'
I - ' L H ", Ί 1 s ' 1 - -* t· O ' U F 1 Ov. I * - "is' „ f V. Ό S V U ' ’ '' U . , . l^~; 506 (1985;; "Analysis, Results, Arid Future
Prospective Of The Therapeutic use Of Radxolabeied Antibody 3” <. iiuu, Oj: s ;p\ Ά too 10' ' ,s _ 'is A'u A"'no > i * t na;
Detection And Therapy, Baldwin er: al. teds.), Academic Frees pp, 305-1(1 (1035} , e Thorpe et si., "The Preparation Άη1 s' On\i· it ,tcr j-, '1 Ar . ih'j\ ~10< o-r, An ,.cat us", .Tsasan®l.<;. Semi ildmuJ:-® (ifgqd , [0359] Τη cie “ - ό ι ϊ ^ ' ‘αηο'· do tu-rl " sr-a frei; da ...................gcéõé it e'' vinpdõçid p" gõdé'' dèf"'' dçm pihíM: lama gçrcão tf ues wmà® t d·................... d:. distASillidaíSd· de: umi gçlSdqlB õ». dígagiõ,:: mcçu :r um poiipéptido de ligação, e.çu, um anticorpo, ou fragmento imunoespecifioo deste, ?ot exemplo, numa forma de realização j ri;, .a t us ite ' .....u , P2A ^ m „ u ...p ·: ; - a mclécuias de ligação da invenção para aumentar o seu tempo do s m \ i> i- t 4, , T- t, I , Rs_ ’ j t ,, o, to!na 1 ;hr> (2001 }; Adv. in Drug Deliv. Rev. 54:531 (2002}* ou Weir ei \&amp;Z,, Brochem. Soe. Transactions 30:512 (2002; * V Γ T . T u tçn s , o .V <5 u. FT : n4 [oa ,j 3 Γ f 11 i 3 açá ^ %iet( dições·· a pieiidilhe. cmEere-ge:. st composições compreendendo a molécula de ligação ápima .............. mencionada,.......&amp;;:·§Α: *: intrcerpo, cu Lia* aero de .....I:iga:çi#:.....#.................. )U Ο Ί U ,u 3df (ç , o t-atw 1U''~""S'3 *, OO- #ÇÕÍAadÍ:fõS; químicos deste, ou o polimicleóticlo, éõtdr õu, eplnlB dm invenção. A composição da presente invenção pode ainda compreender uta transportador farmaceuticamente aceitável. O termo "derivativo químico" descreve uma molécula que contém porções químicas adicionais que não sào normalmente parte da mqliicqTa: dd teasç;, dsõaõ porções godém. peiidiar a ''o' : _mn. . .men ic . l ' , s. >. da. molécula I* base, Aliernativamente, as porgbss poder atenuar efeitos secundários indesejados \ η í s diminuir a toricrdade da 'molécula. Além disso, a composição farmacêutica cia presente intenção pode compreender outros i r - -a , ^' cm m t ϊ ! v v ^ ) K,, rc r n * > da utilização pretendida da composição f.arraacêutica. ido mempl©,,. Pera pç pç iilgnçip. &amp;·.&amp; bmtimdnÁP. d.s doença de altheímer, o agente adicional pode ser selecionado a partir de cm grupo constituído por pequenas moléculas orgânicas, enplgddpça d'ntr-Abe/fc'i^ m ppmbtnaodes: dentee:. .Asetm,. .neiia, fprmi de eealivaçpQ prática preferencial da ;pteg#nfe ever u ,, a r'^senfs ' . :'eçt m--f-s o·---¾ Λ uti i tiaeo die arm
meJ^-Jia JÇH· fO, 0,0. f á’ I UOCÇ, 0’ rfe.n-ipr a^ IÍ7?taO a cm uv'io air-^uç "--5<.c'r<~ n'f ç,>ç ou de uma molécula de Ligação tendo substanciaIments as mesmas atinadades de ' 3 % ^ i ^ a. , p: pollnucleótido, o vetou ou ·.&amp; edldla dá: .préAente. dwafls pera a !prep:arsgãs bs ;çpns , o n ie„ o adi s ^u d Ή p „lt,,y p„ a e r . t,o- to eg d. paeeçaaip' dg'; ρρορηηηΑίο. 'da. doença dê- ..Mçdeimgrd page © :aPenpgm@nt:o dee ; simtepgn a.sdQ:pi.ad:ad dent a doença de , latt-t-r; rir v i í fias ^ t i T unut j á: presença da doença de Alzheimer, cu para determinar o risco de um sujeito desenvolver a doença de Alzheimer. A referida " 1 o " ·" i, uvÂutm i t nv :cr atub u tm r f ^ e . adminlst rude dei· fbbfe .tmdrsvgnoga..,. indradddddlad,' ...................irt í ,p~rrtc i;lte brf. de forma intranasal, .............. parentericamonte ou corno um aerocsolí vor tantoir. infra.
[0161] „ t o · x r- de a?”> Ç; -ít.:, - o- : çuuU j’i cpso, •a, peeseate CnvsnçpO' rebere-ep; ope gídbcOepoç ecode déepeidçs vis uo^' u inc'u rnt-i nu __ irado r; :;: u ..-nu 'r- oe um ;oenru n^rn rlógica ract>sri "ada p<ei a át n j tu3^ - cu 0®ρο,όΐρ#ο gigrregl dg 'beíta^uamlipidé no s d^rs } => ,, e ^ cerióral., 0 termo "doença neurológica'' inclui, ias não se encontra 1 imitado d, v. - is ' ί ’ 1 >. u ' ·»<>» - o rogaiitino: feavsv [0 163] « ' i - í- |dK , n .7 ) » >. seu v -t c' v „c u presente invenção reside no facto de os anticorpos derivados 1.0 t ó.' i ou células E memória de uni organismo pré-clínico daddavdl ©d ín®:i'@art5éòfce· ©sddvei.. diiinnrdariéripg:· seds®, ,οό®: uiai d:é:t;driB:id:iad| ; ;ρν©^Λ.1'Ι.ΐ£ΐό·όθ:;,: ©aparés dé: gl#védir: « ^amildsdaga© ©lindca da doeu©©., .:¾¾¾. ditónaírait ©. atado da· > r^n-LuJ tiralo; o ® 11 j '-i ·. u d w -i, n ^ Uv^ , o momento da ocorrência da manifestação clínica da doença.: ...................óáp:i:S:â.pgp;r::e^.' :es fed ©.gt 1 dotp&amp;a.....td®d'%P p ddsara® ®dr ©at qrddl®................ domatida., &amp;*&amp;*..* a; ©timiadfi©. ©©m xatpmi'd à, ©©latia idade © eficaoia na afinidade elevada da líoecsó - roleculs alvo ..................©trave©......da variação somática das regiões \ -1. .anriscrMí [0X631 0 conhecimento de que estas células in vivo, e.g. . ir" t Hm, n-tv. trr-vi itiC©1; p>i Í2 mtr^s r '•'tc' *_<=?’ clxnras on estruturas celulares relacionadas, «o :©:©Β:|1©0: d© :U»S; Χ©©:0©:0 ©pt© ΐΜηΡΟίορΙό© Q© alérgida. ó ί©®©#®,, d© ígriaaâe: àMpçrtddófâ: ítódi©© uda.. wmz gu© ©igaidrca a®. ..................dlpdf ©s© ©©©©'ideraveimenr a ; apmap t add dé aofe:reái. ver t©®,................. ©uóasa© as la©©©; 'de ddstgs' ©idnàdos ,, ©g© adai© dicer:,, a ©dddildei©.,: argil©©© lidad©: © dp:l:e:rddi.i:idd:d:e: §©:r:a;ra g© ..................dddicddórcdad..........©©tae.........d©.........d^0"® ©l -η·®:© t auto oro ................ pr.C.l.ti;; ©. l-rap = u ti. _> cm cdi rctr; un -'veitc huraiuo dode assim esperar-se que, com um procedimento de acordo com a te rcdf unoul , ’ > >*r i :* êr ' - e^t r;u 'a d© anticorpo para a estrutura alvo enquanto agente terapêutico c n··' e j ί -T"* -ί © 1a ptccc i_li j; de as afeites :c : i dn^s á.Uítêdfa© $ aug .pradâMlidad© de andes©® aliai©®·.
[0X64] v v. ' > ' .a I i " - - " i t' r \ 'V
tm - 1 ' ' ' V , ' * m -> v - l ' m V ' , S diagnóstico : M>q c N> ( s jo ' v ,ιΚιί '' um" > s ml' a, , . v - - „na' - Ml 1 p ' , I, v m t "M i I 1 K i ' a a r l t i g e n i o f p ο I i ri u o 1 e ó t i d ο s, v e t o r e s, o u c è I u 1 a s da: i >- a , ,, ;o' ^ =>1 , i„ í d , n ¢- > f > p ' - s itt p p ’ '' v. ir, re^ ν' u ' i' v r' 1 on , ,r tn - , ' 1 ’a V^· m t, . „ ' _< % r„ ji * pi ''toi La <. I cu rf n ' v>7’ ^ s an a _ n <. , or " nc *„ n -> i pc c n v e \ 1~, e' pa i^b pi ulan a i aa =ir Ira arcana air s voe quàòa, vsVvs ;podam ssr utilizados era fase liquida ou ligados a um transportador de Ίο-5 s.'' itía. Exemplos de imunoensaios que podem utilizar o ndmipi oa :t r^.cao ~ o mm san^ m^eirtit - o t\ evmpeVi Vivos vces Sorrasíte: dlreiv ον ipiirvtv, flip pxeppids :de, t i' mot n „ n ·> c nil m n j, 3 ,,11 , a vvnVivvIie dansaio irouriométrico) , citometria de fluxo e os ensaios de Vestezn blot. Os entigèmios e anticorpos da invenção podem ver ligados a mirrlpi tranispm diivrSnitva: o odd 1 içados. -1-¾ ^ _j_ -,ur η. - 1 m - _n - nm a estes, "nnplm dê tramouaJri·11:, t^c couber idos incluem mclm, 'pdliJVSrsdp':, cloreto de: pollmslidç. polipropileno, polietileno, policarbonato, dpsÉvam:©,: :èviòm>· avlivsaei, Vebvlgvdl maivrabv;: e. ffiddl^ilóedae:,:: .pd-li:âc:ri'lagíi!ia:s·,. ags-rovse e magnetite, A natureza do transportador pode ser solúvel ou m- im t _ para os p epesrt e j ' m m m Svisiegt: varied rjemac ares ê rutodm mr çV' ^ d^em c cmheOVb ,, ,„s ...........par St os" "pa; ari#.....Bvsvplvs:. ·: dei V ipos ·#3: cita r idaddpes.....iqpp podem.................... ser uitllivados ma. peePvoi® invenção ritlion - mrss, radi^disdlopop;.,. metais oaXopdaim. compostos fluorescentes, Miuvro? g ’ mmjjjxiui ^ cat m , e cot.W', r ΡιΙΐ'ηηοηΙΟ,ο:; ver immfcim qs fprmvs de· revllvaoiv p:ri:Çi.®s dv ρΐΟόνΟί®:' ir-í-eugic atlíu ríutidu. {0165] duma outra .for·rua cie realização prática da presente ove, -'da-'' s'' ’ a ·* ,ti 'a a : " - .ί a' . · .. ^ v a r'Co^'O O' , c'1 ,'i , '·ν 1 tt i raoC·" C'Or Utí 1.7 CkV. .at ’T"t V, Ί a . ].\ 't- J - V a- a •at Ί' l' U j - f - o fit obtenção -da uraa amostra de fiuidoa corporais do rndividao testado,- que pode sor uma amostra de sungoe, uma amostra de linfa on de qualquer outro fluído corporal e o contacto da V Oi- 1 t_ e du Ί J't\ '31o O 1 If a '·* I V ' ' ' i- - invenção sob condições que permitam a formação de complexes vo nmip -aru αο Ί ^. ©: ttioBl ·>*-< > ^ c^r, 1 \o- :&amp; enhira d^d &amp; ΐ mna h etc v»i o'u .. \ O'-t ia:o f : t-sldi aB, eiuo·
' I _ I I 1,., l - X it L. V 1 I - JC I oi ^ ί Ϊ JiT -on v tu cL \ id.o! > ftlv'f 1a cj '1 1' c > ' ^ no tiidldidSde D1 % ( Ci. u - 's L - ôçqqtíç O o3 Ο), V .Oi": Ç ’ I.tf id _ m 5 p' . t 'ib S®f dbllqiadd:,:· 1¾¾¾¾ w pio.rn.li. n>s.!vu> .viu:-.: ^ ip .IÍU..S c... .-,,. S. to , .„1, < : . Λ id' i , .. , Icr.-v’ ui iádiq,:.,, adf-idddfedu dii fraipmento· da :.liqaçte a ρρρίρΡηΡό: idestidu da .invençà-o:, .fe&amp;tié: .00:00¾¾ fc Ο;, ‘S :0¾¾¾¾¾¾¾ f.ámbÉ®, 1¾¾¾¾¾^ a moído bedemhaMftm parai pitie. pr qpdqíifs, Per exemplo, urna matriz baseada era proteínas ot anticorpos pode ...................ser .ig*.i.f irada. r... íaym.... :è... /.par r ppsps:... .pgr. exemplo terra .dri tifqên.ipr................... derivados da mencionada prata" ta essocn aos a luerqa, e c on te nd ο ο α eo-e p 11 op o p c r f o rxn a a de t e t a .r a u t o a n 11 c o r ρ o s ρο- fcctut era ior-u p'aseíd ec em f'omite.' ouo ao fiem te, e.go, uma doença neurológica, part i cu la rxnen te a doença de A .n^iruoi, cu t 'at r.itj .'ermt-, on nr.e-n as i~ 1 tq 5 ' o a antigénio equivalentes,, da presente invenção que reconhecem: específicamente qualquer uma destas proteínas. Por exemplo, o per filamento antiqénico por microarray da aucoanticorpos )v t r - pou. t, .d .rt í L t m N iK'b> r * i ,
Arthritis Rheum, 52 <20055,: ISAq^heS, "Q desphfea: ele
I 1 H f ^ ι ' ' 1 C > ' 1 a ,i ’ - i V
Mol, Cell Protect!os 5 í200o}r 1531-\tP6, Ccmsequentemenia,, a' >. U t ' i ' „ _ ' C Μ i \ SMS' ΜΟίϊΙΐΡΟ'Ι®®, d®: l:i::3a:gSS: OU < ' J' ' U ' ", V tit Ç 1 . ' , >(; !>' acordo co.fr. a preocnte invenção, 1 j. Lcseulo uive..; to i. urn''„m t or rue, (reft! s ri ό v rr 1,1 dm,or P' u> r vrr-rràt; \b u'f ,n irr.-recipientes enchidos com uni ou mats dos ingredientes acirna c-di c*.* t us < :f; molécula p®: 'iuacit, impipdtpp, dd ttafmdhho de.· Il|afSs .&amp; :adM:gfeid. déaPç,· .inpl^dlid,: ;P®:ii.:h:;a:dl:Bd;t:ids::,' MaPir dm d:iIuX.a €a preamPt® 'ip'¥®Pçl.tm idcfér ....................ahdd&amp;bP grse. Jdaomad &amp;© mst ® f ©g.....me©! piedmi í aÇ iam apls®:· dá.;................... ÈBriSa: .prascrd ta pam uma sglacia qovednsmSçisl que. .degnla a t ' ç , i’ ^ o n u o i. [ - k *· o l,c 11 <. < u> ' ' u biológicos, cujo aviso reflete a aprovação pela agência de -rosu^l μ o cm „,a ·,,,_5 ml
Bgi.clpn:a.lsfddip'# mg, aitmmatimã^ g: pit '0®®ρ.ρρο©Ρ# M v m pfo c, eu :. n cr' ações earn c ui ' .:. i μ·.: -λ o v.: :. : r m ΒίΒρρρρριρσ àppo:priá;dg:s.>: g gpmppilpips plc.' Ba preddatp: xfipdngip,,: :#' όΡΦΡιΒΡΡΡ®/ pa.g'd:ip'tl.a;aftiet:® g-ddg)iãdá para a diagnóstico, prevenção e tratamento de uma doença que é acompanhada da presença de uma proteína associada a doença, tal vox- * ima dc.uiti , ,cr--m m - ~ _ mi.P >cC, e em puli up' * v 1 > - v - cm u _ M }-> k v a c ^ ' í -u: , o - mm, tp4.ii:|. P®. tarPoa· ®ÍPrat,amcnPo:^1,-. '”tratar® :e memdliamt®;®: mi·# íçu ui’ll j tu ρ,,ια oíj.iií jo j* a ' ail i « BmiO' to <_e uii Mcito . rçv, dogu’ · ou f^nd qdre m dam o > te gi-ír profilático em termos cie prevenção completa ou parcial de lima. dgçpçsr ©ti picatoBa® âpitra..., 'P/p.u. pçip #01: itBlãppafi.çp pm. ” = , m ' d-í - ta c m ., 1 f r-> m: j o' " la J or mm α = u s - " e f - i i ao - fp a _ t c i f - ^ a aSM - ·" e n . t r > "1 r ;m =>, >f - " ia! V. N K -O ι 1 , ν - =i . L . 1 . ,ι em mami f ero, parti cu iarmenfce em ΐχαρορο, -e iixp:l:pi .r fuj prevenir a ocorrência da doença nus sujeito qua podo estar predisposto à doença, mas que não tenha ainda sido diagnosticado corno tendo essa doença, (b) inibição da doença, e.gt, travando o seu desenvolvimento; (c) aliviando a doença, ΡύύύΟρΟ® -ΡΡρΡόΡΡ&amp;Ο'' ba bçemçá,·,· [0169] PdfiS : 'bids#, O dCdM©· '^bçerio-' dói -padibób#^ relere-ds &amp; oíó: memmffereç p:re;fode:çcd:a:í;m@'ni.e -um ’dddipsp::, eom. qée:@S;Siba.d® d© urdi emendo· pare Όρο. cúndi-çS®:, ^droopdem, dli dpò&amp;çã' . :¾¾ eompoumpoep :f'd:rridçêp:t:dPii's: bb bpê/Sbbre iasEpa. podem ser formuladas de acordo com métodos bem conhecidos no estado da arte; ver por, exemplo remington; Th.e Science and 1 , : _ , , ! 1 v õ ' ) 1 O' “ L N , ¢, t, i „ t. ^ í XIS..,
Philadelphia, ISBN 0---68 3---3054 72. Sào conhecidos no estado da arte exemplos de transportadores farmacêuticos adequados, «de Iddddem drib çbbp sblibaS: tempcra-bas "úm fbafaro,:, -iqq;% emulsões, tais como emulsões óleo/água, vários tipos d.e é#e:sr.e ;mõ:i&amp;a.r>:tdS':ír sr impose- SíSfeúreòuç 'ãr -edmppcrpos-s compreendendo estes transportadores podem ser formuladas por .................mipodps.......e:qn.vencfon;aÍç:......bem......cophddMdqu,,,, Estas composições .............. ia rmeoé,;t: cus poderi ser aominíerradas ao sujemto numa dose adequada. ft. administração cie composições adequadas pode ser .................f paid dibS: :d;B:: ,d:i'f édeófdd: fõrmap:;.;: i p §t ç pop : í fb Pldbp:.................. rst < ιό;, isu, subcutânea, intramuscular,
tópica ou intradérmica. Formulações de aerossol, tais como ; ·->;·- p:\ ; -V privet i; rijem a r I:.. ;d> r arouO ;p;dr:itl:Ç-ã§ss:.,: qu optrar .pofuidbed;,,: bb: absbtb .aMbq- pqm- qbepbes corrsrrruirr b 'dqejlfeç Ppoqbmipqq:,:. Metas; fommdlíap-Ses:. mãe prede:fê:Up.i:ãfMqdê.a' ; qqqptpbqq:· a. um pi 'M srPade esbPbnroo: d'ddpafi'veil. :ó:©íí, àie- membráuar rnupopas: rar-ai-sp. bormnlbqbpe: para: ..dminc'-n nV M vagina’ podem ear apresentadas Ίΐ 1- u> ; . ^ . t ' ' ' v ' ' i , si n ' - s - 2 ' ’ - [0171] " 1 ’ a , ' *- ^ τ <· í x <- n >. > ρροχρ p=,o_;o (apesar de ., j _ < ' d -·%' t w _ t o j 1 vi '"c-v μ τ'· 1 fn ^ n *. -> u ^ 1 m u _ ^ v - v. ' i ^ h iu3 Ί. r m i . ^ 1¾ pi © «r.f -> '-r^à , MM ·α,ρρρΡ©: 2 c - k-1' cu r a ! f - m N e l - i- i ηι^ρ Cíi 1-iiT- d smtxcempo, o:d teddddS ildbsbabb: :®&amp; amtiddigd·:;,: dd grepppbe iBvpnpdb: godo aPragesb-aP a feagraiPa Berna teeacedlldob,: -o gás garmite: a adtómisBragâp infera· venosa ·®Β' ptal.:,: ....................:í ® f$ j :© ateq dim id® di esagam: seai deBeamina-d:© ,p#d© · imèdiço................. n"- t it TtíS ' 1 ^ s c OT' => teht _ tt*. a 1 " te. λ- 1 - , ,-¾ ^ > siN ci c" ri f ej j ir a 'te; t~tor :, me b ^ j ^ *· ro.11 ^ dc Lupc.. #0· gidrpp;:, idadea·· B gpBgPlBb partdidg-iax:' a bd:r ρρΜίρΙίάΡραΡΡί sexo, tempo e forma da administraçao, saúde gerai, e outros ia_.v,ao^s m.- i podem a bbB ilriaiiiitl. snidtn-aàT^ne, Π i- - ipi;a p en- s^r, ptr s = v _Λ i .iBgbBvâld: de- fvúíil p, idf# pg fgg. d® édadd BBdBedb© ·ρΒηά '-egpaPsgã:©: pa paira Β.ίΐ1Μ·ρύΒ· Φ&amp; erpresaSg BabBe; dggerv&amp;Ioki mB eÉta.grg, dabBs ; afeaixe m sedam daBBe rntmrma 1¾¾ ..................ppeiapli.f r caBrvd:........: ;big........ B-idas· ......©m ·:..........oopt'&amp;#............bbggcBialMeats:.................
Bons. dder and© m&amp; datpreárpt-ePiameatg: lasaadoáâdoa. 'BbraigenBg:,:. a dp-sagest pode varies.:,: b,g:,, :e:ptpe: eeroa. Se. m I#fí irg/k.g, e pais usualmente entre 0.01 e 5 raq/kq [e,q<f 0,02 </ o, > 1 tq, } 0.0 rrg tú wig * id' o, , < 0^, edd:v;|;, de peso corporal dc hospedeiro. Por exemplo, as oosagens podem ser de 1 mg/kg cie peso corporal ou 10 mg/kg de posu corporal ou dentre So intervalo entre 1-10 mq/kg, i "-m-j->γ orpines I· v ;vl ^ "rt 1 mg/kg. Também é pretendido-:Sli;e· ds .dpbdd: intetmedii.:S' nds:: intedddidd· amimà .ddsaddo©·® e:dt:pjãfi· dehtgs· ·ύ'ρ teibitb· úé indenfld:.,; .#*$: dósdá·. podam ater u4u„ s' : vc w '\.v s' s« s iu. ' t'-s em ρ.όΕρ alternativos; semanalinen te on de acordo con qualquer outro s to u ;* ο a i " - *r \ii ' r 'j' 's' i ' -1 - "Γ' - m m Ura tratamento eplipliVrditivb ;.imgli.pa. ' aim I'vluti dll dosagens múl cipins, ao i anqa cle jn, period© ae tempo prolongado, por ρκήρρίό,· #&amp;. peiLd ;md®:ai: deip msso. d: >: ' 1' r-atpfidp tMÈ- i a ' !'_Oi s 1_cr VK i ri r >M)'o V V< Π =l ' •por'· nada .deras· samaias, Λ crina tas par ^icss:.,. da.: rsma: voo poP dada· i .s .&amp; imessp;, Ppopof ramas ide idássqÉ® ο:χρηρί...1.11:θ:ρΡίνορ·· imoluem. l--:.Iõ mq/psr pu If· p;g/%q ©m di©© cmnsamutumom, ΡΘ mg/%: pm: dias: ©l.t®;mpdd:s ou pt pgç/.lgf iá®|Imant.®,. .ΈΜ aPquna naf^dx-m d'1;, 'st aids s-1· //li}'? cvovJ lai. cvm cd^xtrr-s Js’pp'' vdudes ip dcu'o sâo administrados siitiu 1 t a neamen t e , caso eir. q u e a tí o s a g em d a c a d a «n t i c o r p o íd" 'ii-pn ir c -- aredre vito c? ’ ura re's ~ i:. " m ί >? . ψ progresso pode ser monitorizado por avaliação periódica. As pdopadagoes: pprd admi-pistPailIó 'pi:i:ò:!it.S:r.id:d. .ippiiroi} .iõin©S©s estéreis aquosas ©o não aquosas, suspensões, e emulsões> São opáppiòè Pe 'SolménteiS: :®:I:d sqnmdds :põopi.:Íòn.ògÍ'idO'l'., qidOmL,' - J i et _ 1(-v©] i md , plsoi Pófotais:' dai®: òPmõ· m .a peito·, e-éstèrepi ©sqâaíç©:®· ©ngpxfvmi® ta;©© çpmo: bdeatW: :be mildc© :Ír:an;spoirt:a:ioip;P pgupsop anoiufm .©gma,, .spÍuçpp® alcoólicas/aquosas, emulsões ou suspensões, incluindo meios U-awacadcf o a. mos, >n jui a;-'.- „nclus« s-lisu,' de cloreto de sódio, dextrose Ringer, dextrose e cloreto de sódio, Ringer lactado, ou óleos fixos. Veículos intravenosos ..................i/idlpep;.............. :. i ui .iuu ........©....... nutrientes reabastecedores, .............. .rodbS:ate:cpd.c::le:õ. $© aletmiltoa /©ppp. os qpP a:© 'masmidm:. ma. ie uns. V Puifed p s upL, 3 mU m t x ... - a -uu ; .... r- ; - se presentes conservantes e outros aditivos tais como, por eppftipl©:, ainvimlxdrób-iásos, á-n.tiòpi::dán:t-ep?· s§:©ab©s. ©ρρΙρΡη®© ©r'©abes; iberiss,. ©usemeiVantes..,. Rsva.· a.l:iía disso, a. .POíappsifpãõ· fadmaó®nt.i.£s fia* ©mvoaflo .podo·; oo-nimr ostros; amentas. ·ρο·£© como .iõgamima,:: ©u: :;f armamos· :ps:i.õo®a:tmaõPl.óg;i:dp®::,'. ιόόρρηόρρόο·· da tiiiizeção pretendida da composição iarmaceucicu, Dara
J * 1' J ~ ,s d ' ' ' ' 1 - o· O , ' " i < ‘ , - ' ί f >. t ·> A , u.os . n ' a. Pst, pad epserplp::, #é a um ' t '
- m stv , ‘a "i. « 1 u ' .η ·>·πί , ' j:í nni ’ ' , c, a: ? A 1 c5 i Γ! i ' a p,. p - v - α [0173] ^A^á.;a:Ídda:l«a:B':l2-d:f·' 3 p0pdp:i:ad':SA':d:a:fi.d^' pp ÓptóniapESplo ^ qi ~u _ ,, „ a i aí ] _ ^ . m f „ i j , Ui * -e,
Pit quantidade, terapeeticamente Seioa©· .r®f©de::~-p@ a quantidade de ingrediente ativo suficiente para aliviar os r o io ' * et''' vaa A η ' i ^ t-i ~u r j' ^ destes compostos podem ser determinadas por procedimentos .............. farmacêuticos padrão em '''Ppipamas deiuiptli·:, ou iuiMadP................... experimentais, e.g., EOso (a dose c,erapeuticamente eficaz em o d" o.ç.iat" 1 „ ,_D r lv l=t_l para fu a5 .ao i \ a L· "Oto tie " tt\ v.- terapêuticos e efeitos i-ipicos: :i o iPdAçie 'tmrppeuoiptp pup ''podei: :st pxprPipo Posio a pdeporpfe i^aetrSPu):, drp'fprddicdfpimspd'e:,: p: apeups ^ í. - s i i. <. ^ t - c ·&amp; t e ή mc^Jt _ v f i cri í .,(=-- u 3_ -o t pi lu e ti cr ^ e/ou propriedades cognitivas no caso da doença de Alzheimer.
[01743 -mias e outras : o ..mas a- rtol: .u Piatioas a p vsh 4 o , "οό' sa ' dmlp-nis ^ crsrUr'aaus ce o. d^sst- ί<"> ê exemplos da presente invenção. Meia literatura acerca de qualquer um doa materiais, métodos, utilizações e compostos α s>>r> n cu. -ouc, <.-\m a piosor^c nmppi rodara sem ©fcdidps .p:· pdrPip é&amp; çfeiplcioiãpp-p pi bsmse© do .-dados públicas, utilizando por exemplo dispositivos eletrónicos, ...................Fpde; por:"" ©deppi pi,· pep""' ui 1: li Pa;d§. # fmsP #&amp;: didpp puMi/dâ................... -MedlipeAç pus;· .<é 'hospièdáda. psip: Kdiispal PshPeir Ipd S:isif'pdhnóil.ppS' Inippipatipp p/pu p daoip»! Pitearrp sf Medicine ue rational ia.: d ites ti da^th, oucCs h-
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Molecular Biology , L>Ν w ' ' " _ , são conhecidos dos peritos rsá arte e poderá também sor. obtidos ot.ilr sendo motoros ^ p- ; α ' < r , í s «í ' >v'a ~ ' c:ai , > , patétit::®® r x _ - i %K t o. uma avaliação té ttnbis: reievíuit.es cie informação cie patentes úteis para urna pesquise p s p'- λ . .t.itidv „ 1 v- d' -f - Js, tlltlta 1:2: 0Jtétp 3:1:2-:1 ffi,, |:Q17i:3 ΜΜί^&amp;^ύψΆ acima distrita..,: 'd®:gpr:®2á:í -ê&amp; lor»® pPralv· a tTtteBpidv: Salvt abdrospip Pm. pqpbrârip.,. pm, tprpp tal ç:qmd-acrai. atili-tâto:: '4; ρρχΡ'Ρρ-οΙορίΜρ pala dafialtib: tai dçmp fornecida em Oxford Dictionary of Biochemis-try and Molecular "ui , O'-'fcru vn-.vei._ty Prts°, lt ;~--tu+c cn 200 j o rpí-dmPrpppp: cm 233St.· iSSif 3 id .8::236:.12: 2,.: Sid :d:Ít:ad:O.B: vátits mu untes a"> n "> n k t m ί-Ρ5 mj m t : ça.u '"I.....Imiti.................... completa de citações bibliográficas pode ser encontrada no ixoml fit e:s:p:etit:ità'g:ip;J: .imediatamanae antes·. ias raisisamâGias >: [0.17 S] "ISif itfitdif&amp;etto· tais çtffipdvet-p: pod® act abata#- :po:r iaaferthtia apt·, aegaint-em -etampiog.: aspsciiitta an# »#: -aqui .iotbectdsç: apó-rraa:: -para- itna ::i.l:u:p:.i.r:at:ia:o:i::>: fíÊt serram 'e^U V'w α 1 rir-1· ç •'[iari çj r.70uvn , ..............................................................................
EtElffiLtt |3t7:T] 3a aaenploa tafgaiaiaa tiatataía. ainda. atai· a. mau uae dev. m se; nt siyieraaDf como ht.tmr je kJ hrbiin ,ic invenção era nenhuma forma. Descrições detalhadas de métodos 02:2.2220-1.022:1:3:^- t-itt tOtId <&amp;$ #|§η.1 tit :1.11¾.¾¾¾ pobtM bar e:npoh.t.:tadaS: na: litetituta- tita-és# -v-sar também', "the-: be rah Manual of Diagnosis and Therapy” Seventeenth Ed. ed per Beers 2 ISatiat iMferat a td. + Tua·, 13:2:31.,. IFÇÇlI A ' t _ ' ' > v " 1 Ί\ f ví , __í / ^ f í. t t n -> \ i ^ i V, ' * i 5 " t í ' ; í ‘ οΊ ,lu, bbl.bbm; ;el',l-í , ' 1„ <..e lo 'α o, l a i * tranegènáca, microblologia, DMA recombinante, e rmunologia, ^ ^ . f ιοί t„ v v Λ y o L t a ( 1 \\ ' m \ ,
Tora ir rai r , ί r~ a . Λ t m νι=ι -ία ' ο . ο, ~ de. st a :írwmm<gê!®:t '®a;;piri:t;'i:gasAAgipa:glA:· re;f:er:rr:~®é: * 1 Lyres· ·ρ3Αο&amp;0: " it i . - · -;· : i ''.:'· "! ·. .. !. ' ’ . " !j L 1 a ;1 t3-'1 ' fi 33 referências citadas nos examples, Métodos gerais em bioquímica celular e xaolecular podem ser encontrados nestes micros { -Mr η ' f ά 3 tomo ' ^-ílrndory Aann.l, Arb bb·.., (SBmbrook et ai,, Harbor Laboratory Press 2001); Short pybbbbbL® ia (MoLbAbls;f .AieLbAy·;,, 4tit did'- (AububsT. §:§&amp;! ,. sbsn;,··
V n A: l^v \ d "'s'; d' cirri' q, Idluires I djld IT ILe ~d. , d" 1 ; ’ jn i η " Λΐο:κ- ÍA ^ ι η ι - (Gait ea,, 19S4í; Nucleic Acid Hybridi rat ion (,ΑΑΑΙο. t 11:¾¾¾ edíã,: IdSdli Traasciipc.ion And Translation (Hamss b ELgqis®. bb;#;,: 1904); Culture Of Animal Cells (Freshney e Alan,- Lias, Inc., - xi.,1 ,iau i__ v>.v ·> £#r Mataaalldfe, Gsdld iiiΙΙΙΐ e CttLas;,. eds-l/ í Γ'ΐ'ΐ oo“ -s r iddeoui^r Hr.dr,a, c!-j GAbrb FbobereLe ib IfebebtAbr Melbgy, Bird· Sblflea iAb-sob®:! bt bl,, ebAbd· b '0i&amp; "Medhoddlqiy1 fib,, eb*,,
Ac„.uc:m Press'. Gone Transfer Vefcors For Mammalian. Cells (Hiller e Calos, eos,, 193Ά Cold Spring harbor Laboratory)y Mbbhodd M SuAfbdlbqf, AbAr·, ASA. and "lid iwu; e;fc ed»:,b:f ...................ΙβοΑΙΙ i :f ed(... Lbl LF..; Add.... AAAybbd LlbL irbsb* 1 p|i f,y Fbr Ml.,,, Α,................. bcnii^uJ dins- fo M^tc-mua Γ_οη u, iliCb>; A'cuO'^, libMdb lb Bbd::yb®:i;df'y iAeabeAIo· 'BrbbS:,: Abb,·,,. FAF-tb?
Immunochemical Methods In Ceil And Molecular Biology (Mayer " hb_ler, «di,, A<,aderic P'ess, round, l Ή~ i ; P^ner nk 'f feperbmebbbi. .Mmdbblefy:, 'Fslbroe®: l-tTF (belf; m AbaeFwèbl., eds,. r 1 91 ri •'t t . ” i'Vrh.tm Bsl » ; at , m Ln lb' . ^
S'ori.;s: il4.®)q: NoA:-''y:tra:l. d'ef:s.rs, ;;fo;r Gbdd:' 'Tbe^rapy· fdasb#.r; 'M ahar,, ΑοίάΐύΙ,Ο: Irish 199¾¾ hirl.1: 1¾¾¾¾ (iKahl-i.Pf 1: ..1^1¾¾ ' , t LrlBA: 19¾¾¾ , , d 'X ' - ), ' v ' k.s ' ^ „ , cL , Λ".' 1 'Γ < ' u ' .· 1 - α. o
CllhaPeu laboratory ur cced.u er in bioteehrcC cgy (Covis ·, Griffiths., John Mr ley &amp; Sons 19981. Os reagentes,, vetores ds li ' - > ;; i, it" , > ' M >' \ ~ > "'J Ϊ ' ! ^ v, ^ V, d’\n*ij sa, e " a : i Aaoo Ja,o,.,i\ " a v-ό í r 1e 1 onr Crclii í ddpehdpafs dais e:oise Lidlad}, :¾¾¾¾¾¾.¾%. pPpis-
Aldrich, e ClonTech. As técnicas gerais de cultura cellular e ,Ό)1λ , 1-' ;,· ,,, s"' 90 cc ,,c s ·..·.:......;.c , r La,g, .·. ale
Mammalian Ceil Culture (Hu et al.f Curr. Opin, Eiot&amp;chnoJ . # (1997;, 148); Serum-free Media (Kitano,. Biotechnology 17 01991¾ 731; Large Scale Mairiaalian Cell Culture (Curr. Op in, ..Blppeplihdl, I pipLlp,: dCili ersdddpndiiSd CuiPhP#awf Mgddai.iân. Cells (Birch et ai., Bi©process Teohnol, 19 (19:90}, 251);
Extracting Informaricn from cDKA arrays, Herrei or al.f ChAty li 9¾¾¾¾ 11:-3,07:,: [0179] As experiências seguintes são ilustradas a descritas :ddpi .hBhpglhd ád h.hpi,ddhpd iX-lfí 1,,(1:1, Md. dsParit:©;,, d: antldarp-d .ML-liSi, WM&amp;, í ^st_ turalvoatv s«rtn im; e p:ce v t«un eilpepad^pg pua aspei propçdoa.oh®. hashiPaPOs dgçípiâ:pá:dsi:s:,· Métodos Sup1ementares
'&amp;MSA
[:0:i.8:õ:| (Midroplapap: dl. td: pagoa .die: pdpgdp. da :1¾¾ ((011¾¾¾¾} iddim: :rldiiP(i.d*:s; coni :pèpL,Í;dd Apita; Mhhdtipd alias con ’ent - arlc p&amp; " í bo race da , p ;< hrr - a temp,,, " , ; o\ nan: a 1 l'"id - ' 1' (LCl , j. T a, h1 , 11- i " - d .id piiidsl fdrap, i :¾¾.¾¾ ç ps .iosails- ni:&amp; l;s.ple:LiL:©c® lllpiuedddi: €:¾¾¾¾¾ Ί, i»S a t@:mpsrd:tur:a. a«diePt:e com, BBS IdflPlsdd Li iSA:. Çaiigdà·.,: SmsS®,: Ships} , Miti 0¾¾¾¾¾¾¾ :¾¾
células D foi tranererido de placas de cultura do células B ' ' ' ' s ' i ϊ 1 ' i >. ds , a s n ’ '" < horas a tempera urra ambiente, A ligação de anticorpos humanos t j ^ ; ~i i-._ í o r > c 'i' ^ > 1 ^ > v " t i d ' - humanos cie burro conjugados com peroxidase de rábano í Jackson IirmvunoResearch Europe Ltd,, Cambridgeshire; Ru) seguido da d®Éi:çS:d bis ettrilada de SIR1 em dfâaaipS:· :p:b:lp.rimi;i:r:i:bOiS' balriA,,,
Clonagerc molecular de ·®'Π:.ρΐρρ·:Γρ;Ρ.® _ o, -© ac lc;id:ddpi:; ' id tstdriaid.
[0181; " ” , , o i ' o } , ^ z r ...................bsdsmbhadhhf'' são recolhidas vr t uuku um ''sbppsçdddb.....;:dd................... pliiúias::^ iè: pdepldld© bill. s: .mm- Atida® ..sagpaniia® dp cabeda® d® imunoglobulina pesadas e iaúaas v-.,"1 vct ''ϊ - especí ticos de escrutara Ig para todas as famílias de regiões variáreis de estrutura 1 das cadeias pesadas e leves {ER!} ® Agita® t d pzám&amp;zm ltd'' rns cop prldera e®p;e;pi:i:i.®p©: para tddbui o® sogmant©# d~rf -”Ku t j ο·ό._ο 1Ά o^om-us i |:Má®k® et ®l*p Mel;* Blot,*; 212· il©lt *..:, ItlAdlb*.
Al tcrtativamenc, Ai-Pi? 00 células individuals de celular isiolálaaxetp ishpdrlda®:· d» ihttdría ã®, lillia®, B meMiriM pbdltr sal bldl:i:®®:db® tido fhhbb de addlShoia®: de: ladeias '.pesada®· c .·; ms le ϊ ? ο”Έ si ai. , Rrbso.....Mátl;. Acod. Sei, USA 93 oJcui r ”c4 3 '"5 93; Ac r tisc.iek e~ ai.,· rd. ligbxíhil. 155 CiSMl ::,· Xii-tdii ·β®:®ρ:ρ®ΐ;ΐ:®· b® Mallei®: Maid®· labairdh .1® AOl' vm«, A a A Aluí*. 1 , l“i OAI 2 <Ά- d.v . A. sapadadib:· d® iil.®.!®®: ipdi® ideai®; p:res®:rd»: b áaps;rbdha®spt:d liria®.©· da®: talsiai de: ΙμαρΡιΙοΡρΙΙ.®:®· .pesada:®' e lede®: Ida clones d® anticorpo ori qir.&amp;lmente produzidos na cultura de ©dlaias: ®:..
Idllii M re iutt .A, , —:uo i* saí icorpo com a, e.....·'>·'·= ; · ! ,r - . ... 1: 1 * 1 I 1 _ ; m e u Jr-f .oli5 :0it 'be- baObfio; 0:0¾¾. tie#:!· C:C:® .priopptihnb.a.ÇSb: IS' Sill© bppb .#y:p:r®a®:i'á pa bnbÍ:çb.rp.O:S b-ÇbpbOfpa ., :¾ '' be SsstaKS^yppy XqGl , ί ^ "i \ aicaupada após inserção das sequências -,;ariáver s da cedei ís pesadas e leves "na grelha de leitura correta" eia vetores de -uxí *-.· h í ' p,t " mp ο o vr;tr a- i - ! ΐ w * a "o„'a ci dpd -.&amp; -saqbêncdd. ; oe um. pépf ido: sinal .fia sxtçsçbbade 1' eu - <u i tcid··, ' rn* a_u e^ ’ > ççdród.cnnóx 'pads o tsi ddítin.lsldht ρρρρρρ ;xbbq fsb,. Pbbi bbi©; tin, c„ π ^ ’'''-s ~ _ <. h _ _ ,, ' " v j ^ - pvri t:"'":.'·.· ' ·,.: o r' r ρηο c w cnaitoru -.--- ''-ceies ·η;γ :„··.···' · .
[ s n m *- >‘ e- "T \t :i. s i- --p ι.ν.χιμι, \' ^ ilei 3^ i*—'3 luc -d iroir o]d life's -'v straw * un i nserçao do produto de cadeia pesada de imunoglobulina R’X~ PCR em fase no vetor de expressão de cadeia pesada contendo o" * e^t a sinal e os doninios constantes da iiruuoelobuiina bipianin A -babbra: lxvb: b&amp;ppa de; doftiee.gõ,dbiildin3; e bxpreébd através da inserção do produto de cadeia leve kappa BT-PCR era fase num vetor de expressão de cadeia leve contendo rara piptldo xbxab. # o ;bçmí-nl©:: χρχχρυΐΐρχ % -da:· qabbii libe bbppb ra r n çl“bnin- » \ ta. Alternate varaente, a cadeia leve luvlidu de cmtnoc lotuli wj. c c^rr^sso arraves do jn^ron Ά •όι..: Jr cil n b indi de b-P> di : m " >' v.,e ................expfbssdb; : 4© pabeim Xamfebi''... cbbtXibb.. upis.... ρίρρί,χχ sl stí ...... é -o.................... α nuj. U . “Cir- i li Ol'llO i-n V> 1 1 j K a ça 1'fic Obuii SC fersHana.:...
[0183] Ah ' qoi ’Orc'diUa^ _ a ,te:ru”rf> ’'imiini.- ^èu obtidos após co-transfecçào em células HEK-bê? (ou qualquer cutu Irnb j viubr lecrricnto ~dw;uj ia' d“ um wtw jt, expfbsais de babwba pesada i:j e um vetor de expressão de babei-a. leve- .'i.q· -lambda bb báppa-» © χρχ-ίρρχρ® bp:nb;c:ipnal. bnbabb .peòòÈsfedpiántP.· :é: subsequentemente purificado a partir do meio condicionado tjtl lurando uma purificação padrão com uma cçluca; dé:: Proteína Β,,. d χ ι x x t , 1 < ia1' ' s ^ N , ' i - x Uvi v s J x { ,r i’ t \,i i dilijdãd traps iemÇpdCT^ pu escavelmienre " > = x -l , . ; i > , ^ i „ - ‘ ι ^ , ' ' ' t ' "v morxsoíon.a.r humano.: répQdBBhHPBa Bodea, aer· dadaBaudcidaB através cia utilização de setores de expressão Içj díretamente pf: por fBAcdOBBgçm: .das; repides βββΒΡββΙβ Ip: em: dicarentce „ X*.ç; dx A} “ O . x. .. C 't- ~ =· Av x) ' χϊ Γ -t1 *
BedB gddèír: teased ser gerados a partir destes regiões Bardarede: hg:·,: tretcoal e ©apeeimeatel c
&amp;M mp&amp;m# dá:· osip-laB· W
[0104} '"ai ΚχΓ x , k ' m ívc r„lar i n, s1- '-s d&amp; disperlSo· Ge: dud pada e recate é. paaá: ©s lados de· eei.tores d ;® u s B meaórta ddlddioaadas^ forara eepBeedee e® aligudàaé dM tedalliílQ: rcitulad. :dl:reáaáe:ní;&amp; ο®· tadoe da f'GiS; de 0,2 ml enchidos com 20 μΐ cie BMAiater (Ambion, Huntingdon,, HU) utilizando um separador de células MoFlo. O mRNA foi preparado:: çt:i Maendo o Eiitep: Ét%. 0Edrti,ie· ild-citPsged:,- SasàiHeGâ:':,. Saigal .©;: ΟΡΜ®: dei.· p repa. rede cj .rvà;i c Pit Ή'Γ ir„ ΗΟ-" d1 ?a:eli la cto adi dxusmt,
Ear Ι^-χ,υ -ιιςΐ' :- roj au ,ca? ΓΓΤ e* se,., c..u.,.í \ n t > pis dad:· dedelas· .pesadai e: ledei· ρρ iddhpíglddddiBii. ;lJgi utlGIcadd© ...............p··· Kit.....PCR (Clonte th) .....çtillpipdw·.......prldeas.................... específicos de esr.ru cura Ig pair a todas as famílias de regiões innra s Ia estrutura 1. daç dBdmBé pdsddas e; ledoe ifdl·:) ^ngnnnta p <^ei < 5 em »rcuna e' m gcaeaí matíiLar para todos os domínios constantes da cadeia pesada Ig ou ciadèxá: ledé: íg: lododa. so lappa edgeadto:. ρο:ίρ®ΐ® |' .>. O# j r .n< a ~ ^ruí a gm 'Ί i < - a t td^ ix. ílu ' 1 c g r ',
Spied} .* [015¾¾) ί r í Np ) . ό ; > u , ' ν' r ' ud '0' 1 v* - '0 5 - < : 'V vi' ' { 1 _ 0 , "v 1 0 i t' s vl v ^ “ l , , ij l ^ cadeias Xgvsp ; ksppd Φ&amp; a CvL ^ : dumaps.
Glurx 5- > jT» ~ 1 V l "" w v _ " ' : t_ ~ t? c a ·:. '· · d rr:< p cp\c •u1'-. s Vc.l 1 ' · ar 1.: r i
Xba .1 por forma a facilitar a clonagera de regiões variáveis iamplifXoadpg por BCd i Λ1 GdõCnTCeCGGTGCCCGOCCACCT Gr'fGGGC 3TGC IGCXCGCTGT GGTT 1CCCGGCT pXPGXXGCi '®:IS: XXh ®:t XI*. P XbpaX :&amp; XátÊXXiáó: Xi&amp; 1. dpi i.nt.fgi.dg.i:dO:: pdf' :apítd:§íI.npop silenciosa. Foi introduzido d local de restrição Sai 1. poso·: d XnpsX de Xdottiiçgp: ....................dteXiesd©.....pddare clonagem de regiões variáveis de cadeias 'poparlas* ep XI de rlgGI iovppgprâg peie· Pptôp.: Be irguaX. fppmáy ©Ιό-· j- í -v _,X '^d1 t 1 i ^ t <1 t i ir-·' leve kappa,, e Xho 1 foi introduzido em Cl da cadeia leve ~ ' -· X 1 1 ,'ν,κ vK c v v ^ 1 ~ v-u. adi x l ^ 1- iiaaçio em vetores reeipieotes foram real! radas de acordo v ·τ ϊ^οθν<1ι v.n [luo.v , 0 Lá- ira r> P foa ν.ί-,ΐο! u t-vi i '-ui ic kpç 1 ii.‘>o Buía ias, - rrtz r .ht _ icn, futorP: $$' vAív,tr: ,tuipisnlaá c tnr iro ur printer Cd\ por? 0 ezçraeoa" d®. fends âm »t:isC:rpp. sm: cÉlsiac: Pd momiffdd.,:· dr cr ...v eôo do anticorpos lacnsc focais tedoritirartee fuce lona is [0186] ‘ - n'ti ,f > v o v ) m 1 'v s 1 f'od'ciooa -n ç a nial^í ...................m$MXcXcEítíáç:........'for ;.....Pfppeppig.........reegmMadgt#:.......-ut iXiosiTcte.......fé................... tecnologias conhecidas no estado da arte (Trill et ai-, Cure Dpin. Bíotechnol. 6 (1995), 503-601). foi produzida até 1 mg de anticorpo monoclonal recombinants humano após transtecçâo Ur bJ- }<- - eti -, f u-r t ' ntt ” \ d 3 -r iff 1 1 após transducão estável de células HEK-293 ou células murinas NCO utilizando vetores íecombinantes de lentrvirus. ·'; , ' ϊ _ "ΐ ό , ' , η - . , ί 1 , > \ 'ο ' " " ; ' ο ν'.''" ‘ 0 ' V „ C , Ç ' ^ V, [0187] 'to,. * j w ' ι ( τ" ' ν. t ' _. „ _ 1 ~ ι 1¾¾¾ Xg· pçrs® :s©:“ ©Μ; c®:tdi:aç ΉϊΜ^Μ3£ iil7:Xi.aaa:gf:s. m método oadrâo de oo-precipxLaçâo corn fosfate de cálcio, Os aotOpoopós ir s. vl< o ei‘ t'' 1 '-an . t i *" -, ^ c -dp· ehiid· condicionado e transfectados em células BEK-293 ufcilicando u" ] \ 'r- n if' -5 TctO K,t i - i a-“ 1 l ’ ef.
Pt® fingem, .Sniça),
Fxccluçâo em larga escala de anticorpo recombinanr.e humano ................ppt tO#o j'&amp;§pçmp pptiWg&amp;l............................................................................................................................................................. COXitl 'Ãgdi, :£pi, utililtádid' Μ hibEpad da diaodiaaola' babhab#· ® le - mu c, a g ' cerar it" κ . ' _ ,lax o <v _ v ,-1-- n ^ 2,ηχ., t 'a pudd ac.„ < no ι ό η i ,>,ί' 'a d ; m i c (Zurferey efc al., J. Virol. 72 (1998),. 98^3-9880). Células hl®Kd: ddrasi a -mrn ;ό·Ό,- com cloro lenardiddrad 1icti ίΐΛ9 m - ;u ,_ Λ I ' it => “MS Ov.>. -„.r s era oaddíd penado be:· l:g,f e o outro contendo a cassete para a cadela leve de Ig de uin anticorpo recombinante, Este método - - ii c·α p ut rei ut~l_7n t~- in a qia t % i tdm.i-< Je ................1 isilap:.. ::Op:ld:l:a(idS; · · (dp · · máMÍdáddi... #PÉ&amp;· ®|ij® €MQ: ©: W lEi*............................ <, i .. u ., a __t> tn í :·, - ^ v nu jaub __ t-n^3 e w _ ic o_n_ h'.ur.arcas iO:i'ÍS'Í Murgantas- ; thán&amp;âámfmps: -fordm geiddds. tad pdíáp prePiamentie daisprit)©: thdebimeh at" P£,t Meurohiml. bçtuf· di-1e “tlhn >'2 '00/' "Uii find' idnt J ia Pd© o e C ΕΛ-, 0 rUp^ de teste foi retxocrazado uma vez para C57EI/6. 0s murganhos foram mantidos em condicões de habitação padrão, num cicio de luz/oscuridãc inverso de i2h:12h e tinham acesso livre a , . Ο έ - T KC , Ο ' ^ ] } '\ - f ' . ' .."On ' C..1’ X Vi. d - * Ο t V1 I ~ V } * 1 ' - > ' w < L .1 bood»/' .a git®:»;. da 'mu:»:g:in:tes?; daatái 01111¾¾¾ èll aataabapod i s 't v. i n> l 1 í -) <-' Λ * f -o injeções irrcraper Ltonlais durante ura per iodo de tempo de 2
I -, a! 1 ~*í L ' t E <- 1 E U
Teste conrportamental do labirinto era Y M laaa :dé" adaeooiacla. oapaadiaesr doo ρορ:Μ®|ιι t 1 r- -V v 1 d tu ' i‘í a de c I ’ ~t_ o >“>a f ^ c i, ^ - Kíf -i 1 „ -¾ ΟΛ T5 C1? ΊΠ \ J 1 ' v-TT "'.l Π <. tr---. -s o<·' ^ .................ffitfistfSj.....pb '-f-'· -iv >ie t-t í e. a n< αι u> réu, . > *· alternância foi def.ini.cla corno as entradas sucessivas em três a κ-p eu vnnn u" - ~ a. . rip ~1 en cu o, ρ or^n .: .¾ percentagem de a J ternáncia foi calculada cromo a ratio entre alternâncias reais e possíveis. Após 2 meses cie tratamento com anticorpo, os rijiuan.» n focam ce-te soados no labirinto em Y* ils idolM dolSp-®: maiifidóiã desfOe danOe .paca do tcsEsaerugs: esse: pabd' Pd. pebbiápoè Parando Ooda a. o ape r dên o ia,, Γ ίο. c-j.vac_da Parreira ^madoepptfaaOva &amp; dlgadia jj: ..................:@iSd.:|u|n|0ap... apormada.. w.. edredro;............................................................................................................................... ΙΡΙΘ1] ostra .a'tsii® .ae. ©p apdaparpoa: Pa .................fragmento®..............oe® η e®. ,·...............podpsj..............poniOda d..............S:..............babmdb ;i................... .feeifiaOoencedáliea :·® i.i::gax-ao. op® Jedd; al dot ppSdexbog anorrnalmente aarepados ou eonf ormàcior.aIxnor.te alterados no cérebro, urna dose eficaz de anfo corpo é administrada do formo pila tidlda: , I® f d :â-p;l:f I donf â 1Idlbdd&amp;o.®:®,,. lafcdamunoií lar,. "Ut _ u’· n a oi -i .iao:n. -) m ^n_.t-d l ' CS^óii^O' cu aaaditaaiiaddp: ge-la; íatâpgiiâgl® bâo tOaioio^oo da. proderna #Idp iâpd;eda.i:â. on ; dom oomdormaoi-o adOarada ao afceted:> d ’ " ^ U „? v SO CU · ’i’ ' U ., ' Ο . '.i' ' ·,\, '' '‘Vi no cérebro -á depois evalrada por ínuna amar cacao com urn ív secundário anti-b um erro marcado seguido de ir ^ í; ív·! ,, i ,;trt ’ Λ _ ‘ Ui e- u O- 'f ’ ' [r&amp;S;23 Murganhos modelos rransyénícos PS-l/APPswe para a ic-.^a 'ίκτ l-JCit-' c., í. n '.o p- ' lr‘ i " r> ia ΙΡϋ pq de MI-idl.,..1.1 .sõ dia, 1, se dó: did .3,: SÉ: :ma.rgadhçS‘ domain suurj l uícuo d botas d-to’; d? ur:r u.; ·; r j‘sr-5 ' e g>-·· ·..,;; . όλ com PBS,. SI .dâridroÉ. dobam cowfelaádS; &amp; foram preparadas fatias de tecidos a partir de tecido congelado utilicando um ηκ'Γ'Ί um , á p’-st-rm apta corpo, .feçpeno' emt: sscplps dp· ο ϊ1 ^ i * a l a d a t < i i< o o u d i <. t x > f.ri - ur m 5 ..cn um " _ t Ta, u n* c,d 5 _ mm - ' m o- , "d . iv -v õ ' , u 1 > -i > i- r ..m ,o =i u f ~ U v ^ - m u n. por to-marcação das secções de erros tato cora o anticorpo de controlo taurino 6EiO Abeta-específico {disponível a partir ds Covance, Número de Catálogo 810-39330} seguido da marcação com o ucmicoro^ lg>3 anti -murganho Ci-vai ara E.dldíi A-lLortíSt 1'T iUeídc, a r-ucb, sort o an_.raor^c Io" .Uitr-^uman^ marcado com Cy3 foi utilírada isoladamente. ί&amp; :snl;liâe.s dé .................f luo rebcànoia............toaram............diednadáP...........«m............Mlcroncbpie..........dé.................... f 1 u >rescêr.cu invadi dc de'· ca i . .............. Redução da patologia cerebral ........................................................................................................................... 10193] Os efeitos do tratamento com o anticorpo nos níveis ..................á©.........alepa....... proteicos agregados .......ou"" cu<ototinaci cna_men t c
Aliteiedos no carstt fprâM dddliidçp. "por tratMpl'itd sistémico ou entrega do anticorpo direcionada ao cérebro tnf ucmij C, d nle,t} dp .Aptraçpptriiiuiari, e de. d® artpi dorp® dp controlo· mão· relaui coador a, dim ãnlidal ’ l^u';.’CC , O' 5 : ϊ V noon ' ,: ’ iiu . , ; Us s J [ i t ' " ^ 1 © " ' V ' ^ t ' , ^ * saltli &amp; vo 'SmtiMèíit:©: dfd abaixados por í ' o i a acr _ t ti. u o i agregados ou alterados e a medição da área coberta por estes agregados, tamanho dos agregados o número de agxegacioe, e quanoí ricaça o bioquímica cias concecxtraçoes das proteínas eivo em dl f-ar entes áreas do cem-Lto - i ^ i „ m efeitos socup varo os relacionados ©em· to .ra tamen: o com o antrorrpo ...................ÍQ:i 9Í;|"" ppp ©d©i.aio:';' mf iei toe''' ed ver©©© ©e raolonado©''' 'e®'' :©'' a 1/o©................... do 't:rat:aaé:pto: ©em © aebd ©©rpo #e:tS:0: avaliado© p©;© administração sistémica ou entrega do anticorpo direcionada x 'oo- ··.. - x ο; .ρ^η-ιο:1( , ~ c t ·· -. ai ©t x? t -* nt : ot , e vlo i òtx ..co oc r i a ^ t mm_, a úm edimbl t I no mt : -- ο ο < - .Ο ► ' ν’ r" > χ ' > η —" pê ^ tl "l tm,. vim da ©©eddied al©© iddr©d©da: o© ©em ©ddipdmõ©!·©' oiedeadd me - _v.b_o ^ 0 t •'u Is s txit\ s s> s u ' 1a' x s > m ^ = νΊ,χ u ^ per imunomareação ou marcação ixistoquxnica ie-.f,? maul da :F rds sda.: "para. Middeddedo©©adia©::,. ©emat om .1 in a-eosana^. selmles p;r.andád: ©tdeaddd). o® deadtidiesei© M.sgu:imd©a· χ«;.·,ρο:ί. eivei© ..................dd " © i:temieà©... doa. i£ I ddp. -.......................................................................................................................................................
Marcação í muno fluorescente de. c é 1 η i as viva s [0195] Células HEK-293 foram cransientemente transiectadas ©om am aetpr" gue·; aapriaoa. dPF sedeádém ©umáld ftmdldd ©s terminai carboailico intracelular à variante da proteína -Uvinc.ncc c.uii-a r^na. lC após tiarsie;:.-v, 8 = ©i'tuiaa dd'dad leeabada© doto aat.ip:©dpòi: .:fa©odid.naot'aooda©an©© ou anticorpos de controlo ã d'0©, dúeaeté cld mid©©oe;:·,.: ©pS® a ata©© d© ΙΟίρΟρΟΟχ tá '©Iddla ddl fixada- e o. antdeofpo d-ifad© § SbpabfiCi.b. fCii bbèbfbdd Wtíl fÇbbbd abCibbhpbb: .Í-p;pueJ.p|;d::S: .imarobdob COdl bgff : bg.bSl· Xgll /hbbhbb bli. bb mnbbbbtib ipfapfeSiPS Irimuno&amp;ssearch í .. A análise de íluorescêacía foi realizada IC I ' Ί! ^ i 1 h 1 \ 5 .;,
Preoaraç ão de fibril ao Abei. d [01^6| O o i 1 ei„ £o^ ι Ικΐ^ΐ'Ό * b çt-t v > ilcn o Suíça] . 0 péptido liofilizado foi reconstituído e® TFA e v ^ Ai-.'-u ^ Λ li -f _j>r\ u « -> -U UI )Γ 1L< s -ν' Aúiquapbb Rtoeta: mbhbmitlpa. nb®; bribbibb *. Rb fxbi 1 Μ® Abbta. foram preparadas por incubação do péptido monomérico Abetai-42 a uma concentração de 100 pg/ral em PES a 37°C durante 24 . u.,. .. '· p i .»~2 mu ..cfu Λ ’-j'-'v " ,, ο.. babcRf®® dors® bamfebm, btíldibcíob bhqbábtb:· ®::ub:bCbbbo:: para rapésair' ar· piabas da: ρρτριρ. be®®®:®'® trloto®®::·® i tilÉRl # pipt. ido lUCnoraérico Âbeta foi misturado com corante de carregamentor desnaturado por m; m e Cu/ ug burum carregadas per poço e separadas num gradiente SbS-PAGE. Os b.c.s fo i" u cuba los λπ rdir rp i o: limite u.maute 2 horas. ? J ’ ι u h eufi utp. tCLv<"Ure L ruTinun airmail w bii anticorpo de murganho de controlo 6E1G, foi revelada lududiibsirdb anticorpos ®çs#|íds· abtbbibbahb' be PPil^ ...................murgahte : ebb gup ads® cbpi :f òpbsiba® b d®; bibam# 1 iIEf f c" bs Sboi®.................. fc £uu\ .e·' oiõu ' t^lca-i nh* .h:cu- gu^I W- st ' timo f íu .cu ΡΡηρίρίνΙΡρ Sbhsbrstb: Ibiérbb* FbsRbb bbiebtbticl·,. Wbhl®%: bribçai <. >~\η rm cx^.a ' o > "Ç- ' .... 1 ·.;·:. -:· .a airi~ nula em "c c i '
[01§8J - “ . - ' ' - » " Η" 1 » v v< 1 N biirdihos i boras cog preparações da peptide Abets.. 0 ^ \ .~ - ng?--p x c a» . "un b >,x ..- 3. > la ^ ,» * mtcaçao imunohistoquiitdca o:e secções cerebrais obtidas a pautiM' €ie PM. ; gapiehtM ·κ« aeeacs. MU, MbbtebMar' i ..,. 'com* ao n a· ;: obbbirMadb.... berag preparadas prrM·' x Οχ < 2x p pi, ^ b«) -oi) o i ' oA xx x o < a ·> -·χ c M Pi. MU ebrg: MM .baf.pl b btl ¢11 bhbahta. 1. !rbba i bsbpscâficba ambience e a^raad-is em NI-...C1. ii/propsraçoet· Atmra durante 1 llbba. a bPisgierabdra: 'rtiilfe Mgês a. MtafM eg Xafai:s% a Οι(ΐΛχΡ a _ -nt I ~" j pf " ~n aan a a ;> >\0c£ ~ ~ t. ΉΐΛ.- Co
MpadiiaSa; Mtlii.ba.ibb: uhtlbbtpbb aaoulbarlds para: lilt hugaia conjugados com Cy3 (Jackson ImmunoBes’earch Europe Ltd) , A análise de 11 u o re s cènc i a foi realizada man tnicroscópi o 0« fluorescência invertido (Leica, Heerbrugg, Suíça) x auectDis: r xipbepib: be Λη' ΐχΐ.μΛ^ Mura ms o^itrj n iru .5
Irsuaidatsa pm. bpeapab: 'Kurianba bblebrlXa' [0199j Mnd^içpppds i bl au j blbal bdadb.iip.idamep.té: baàdlèeXiç :ou pabieitea MUM a ibeabb: da .ilbhaigel xlriligiubeble· Ms Pirei a cliràceoente,. ti iru terror s or r u.m ubeuuuu gat blbblii. id: biitlfb bbtibas: 1# ;ρΐρΧ®ι1ρa mow a· Μμροοο: Me Air he .mor cat elogi r?r,oUt 2 nnurktb. .A Mr 1A vMroostro r ...................pbbiMM|:&amp;.....b i: -MMbiMPbgui: -stum:.' labXbbtM.....bafblgabieMfe.....eg ISM #1..................
MliMlesMeuMg. faM M&amp; .llgii® .ο. ilabaa Mo IbfanMí.loMM tbl 'digs: ernflrrsoc pec '"o-’OC'e: M com urn anfrorpo ΓοηΙρηηΜ conns a h'·^ lc' n me- mm r vpe 4:1* m JF> . A cmem-M be aipl abbpea mug; .suqvsiMo· ipmenb. MsMMáfbl para. ομμμαμΜοΜμμ neurofibrilares numa secção de tecido obtida a partir de irt ipadXMXtS: 00¾. a M&amp;erifa: M&amp; Α·Χ1ί®Χ®θΧ :&amp;, ΜρΜΜοΜΚΧΑΜΧ pa Migues. _* mm mb - lo ~n n j^nvii'' ._.x r'^ ιϊή 'ϊ;-κ, m uí η . ν. '2, U , ^ , t ! t - % ' . IK'.' revela e presença de a.r.a.icorpos nus· sujeito humano saudável ' - -* " S < ' ' ~ ^ v·^ 1 ** “ * ' -¾¾ pare ir de um paciente corn a doença de ilitheiner<. Ha rcaçdes O' > t-C_ ' ,rf> * o i 'p' , c *o ' t' d >-¾ ; - v CIPid _a„ -e c ^ i ddr a 'fPgpte: d®.,. ttgpps· resultados dsffippdndnils a: ppsopafa,, pm pad entes >τ4ο. ar^m-g ea_ \, m ima '-'tt' ' n' i do; t'O” - 'si-- ms iu ,r.rent de: 'oprrcórpoP ·:οοροΡ2ϊ' sededeatdd g:á:tdd:©gd;:Odl: i^ddntidldddldd: çfp amostras de tecidos humanos ddd iiaim >sLidce h 2. s t o p a t o i o q i. c arn. ente c o n í i ria a d o s , feempl®· .2, A°! . v. v dentro, >uu, a, -> 'ha , LrVi, -&amp;, Especificidade ρρρΡ. Esdrdtdrdd .MrbPmad.:S:· dd: eddd é Setpmdecbís © EpiPop©
Con ίοrraacionai da Proteína BetacAmíioíde Associada a Doença si-_r U *0*1' t;vC i c *,w u? „ 1 i. 'm-a.m
Fisiológicos oc Derivativos Não Petogénicos Cesta [0200] 0 anticorpo MI-.101.11 foi. obtido de pacientes com s dobdçb de.: AlPlMmer rnvdlgirMeddé: esiárbip: :didni.dadtdp't:d bom, ata taxa v j ,jo i ^ i, ot t v-ment e -eia'*-!.', p- ãc, limo omitia o, 0 isolamento do anticorpo e produção recombinante foram................... reairbabos dai, dbme edpé::d.ifiro;ádd:s '.aos· rêbóboe saplomeatares,: ...............................................................................................................................................................................................................................
[®2pll ii andidorpo réPoftrddasdé íiIKLbl,lb, foi fePPab©:· .para: a ligação a placas de beta-arai Io ide cerebrais (Fíg. 4}. ao o 't o a· „d Lv.xS ivi;^ a pjimi ,k, um [\o *0,:^ xm ,íot to, d-2 slabermr f ·=ι,η';ο,ι i> , i<_=tne o ' cc njx.11 i<L r > 01 000,0 kvUi a m .1 > - *.dj Po 1 lo ·., atd 1 .. t [ 1" -o (.k ítterma x cm m u< -nitr ;c -, Dn pP oí”. . í ,! . ί ~ .χ 3 ' ; ' ' I- s ^ m s "χ. ο . . „ Jxv ϊ ' a 1 ' κ’’ c ' ν. ' : ' I ~ i ctx -ϊ5· Ν "> " ί'1* χ1 [ ; I " ^ " t t - 1 „ „tx
Λ . h Β ; „ ί "C χ 'χίι ' α "> χ Ν 3 η S -1 I X η ;,:ι ’•ιΐχ'': χ<ο go 1 ι ρ< χ 1 χ.’Λ ' <> '-3' ^ ' η: : -. < κ - - u L μΙ Αχ ^ repicsentendo as pcsiçbea 1 a 16 a concentracOes até cerca ®ρ 1 A®: (®igf 8): f:; ®®fa a Lam dipirg· a XJLfdpio: Pp: gntfLeorpo:: i j-> J x^3-5-' -ιρ. h >u -a) ^ em Aecç®®ii pprsfemis m mr 3 r ent^ario Js ί Ά' e ué gçA;nA:Ma®ea fia ®f LibAllabí: AtectAlad'® Aí "pia fls pi® ppr mafAmfíASf U\ - > x. xj^nt- i_m ' a ’ m An χΓ - -x te J d, sugerindo que o anticorpo MI~101.11 reconhece um epitope· éiQáloÁmAeiopsl:, ggp np® ss ar centra presente ca Abe ta .....raonamérica (Fig. 6;< [0202] lar·: fAiipiixfxO _.^nra n... χ ·< i j-χ,ό jx. a..i:cAi\ reoombinente MI~10l.il ç Abe tua ;.?nsmr..i .i sintética, preparações de Abeta monomérica foram separadas por PAGE não 1 x 1'i'Ar , A f t _ - i' . n_ st~ D.a χ ι ί r . í «Α' η’·' ) recombinant® humano NI-101.11 e um anticorpo de controlo oonc.ma be®®#®®®®®: L^teLminalS: 1¾¾ Abafe® linear·; v®®!®®» Enquanto o anticorpo de controlo 6E1Q produriu uma marcação fe®:S:É®í.bÍAt:e:: ®Ò; pá:pfe"lâo ®@:. ΑΡβΑΡ pOACWSr'iCp.,. ffiptoumf imfpÇf ®Í® fePLxdafeBfeada, para ® .ahLLeóipa Lume® "r«:cpg®:ibpBbf Wfe-feOL, liy ................Pu® ®r íAtfo·· · · pias;.....e®t® · · · · abtLcgrp® :· · · b:|®.....f®.....1.ig® · · a® ®ÉptL®®v JL®L®..................... :pop©«i:ri:òç· Linear ®t®é xr«®f®®®f® ®® epitep®; Afe®®® ooirJottopcdpna'l feLi#· 7) * [0203] A ligação do anticorpo humano recombinante NI-101.11 I fibrilas arai1oides artificiais preparadas a partir de χΛρϋ'<^ A,-AxA- e Abets monomórxca foi determinada por ELISA {Fig. 8}. Fibrilas Abola srntét-cas ou Abeta moncmèrica sirdetita revestida em placas de ELISA em densidades de .remest.i mento LgnoLa feabám fen®ç®a:d®s οοΡ ii^LQXxtil ;n:a# :cr:t;ttni5 \n indicadas.· &amp; lipApi:©· μ Α1®Ρ:11;ρρ pmidpddfp artii 5.C.: a.\ s { quadrados aba ar. osé maio da cue Ida veres maior c emparat ivamente a Abata moncmér.i.ea {quadrados preenchidos) , sjo vp > J* , . ' 5 , ·» r " o 1 1 " 1 'v -i p 5 t_n ui ^ a Abe ta q;0b:O®e;:rí.cç: - t a' > -o ^ ,< e menos be o £5 fibrilas í círculos abertas) * n q- l m - s ' % ,λ , ^ ^. ϊ a- t re . ' eyoi -pr v n t ro:: vl u;e t jn bse ^ root ^ presort e {ffdrèlss anilardes artificiais preparadas a psr'bir db pet-i j a s -λ’ '•Ah mm A c-d -, [O&amp;SMI. .&amp;. b:eâ:t;iv..lbdbd cdbadba é® mbtÁerírpe: hum&amp;sm
m- nirrtirit M- li il o'""' = 1, α e ror ubu> ^rri·- T bb£bl:á.rr ou qualquer um dos seus derivativos fisiologicos, :fbi: dbtéqm:ití:d.cls.: pb.b bSbaips. de; ligibgld ροΙ&amp;1:.»1· (fd..ò.,:: 'S3 ,: 1,010¾] i -a·- T1·- „j ' - a - t ' '-..-.m' r-st m » - h humana fundida a Citrina, enquanto marcador, foram incubadas ddrdátb 1b Tidiptbs a: A;T.f %&amp;£:&amp;. ptwamr a. in;£%rfkáiIa;PábSP> >m 1 v τ Λ_£ - o i "í Se t i r m 'T-l . n v i riv< r; o >Γτ u iti- - bpvl - -neta l ira ' -te ' .. -I. b>'s,í' uv^rrar pair '"b am ih'u ?n "exilas eqo-sa'-ii da Afíl:, )im: cbbb.baste; ®bit.. o abbi.çgrps dd ;ρρη£ΐρΐρ :ifSl..íli qqs: sé;.
Ma- - 0 r r· :. : ·. - - . e) ua' AT ·'·!·· 0 ·> 1 -¾ - rs rO-Uls^ iVp· £i; r -·.· CU oO.et'To Tc*', r -T Γ*ίΐΛ do rH i^ClOC li IHO'- > t. 1 1. -I i<_o ' --X ) t 1 Apr> i,- « St h 1 ^ ^ ^r-i ίλ.
Ssbs® dado® dddtqtffiferaffi a. abbihbda; d® mbabbdrdadb· bdao&amp;d® ds .............. M1“1C1.3 1 -οπη-Ρ ^'aair nanTvm............................................................ Í:®2©·®] A ad aide ido da lisaçad· da Sd---111 ,,:.1.1 dbabiitaada foi ainda demonstrada por cromatograíia «e lu.-ar molecular: Nenhuma ligação de NX-101.11, oa um .u kaí r de t, v i^. ta > * j j a : , _ -o-1, il-- λ,ι^ n^i. , ^ tini s 1 '«.r fil’d í&amp;i db:idddi.da:: ifli·.: 1®, 1ÒB; . Lm contrasto, c anticorpo 12C4, direcionado contra urn epitope linear presente no terminal carboxíiic.o oe .ν' ' ι ’ ;âifeèb;&amp;;i''~'4:;íl.· ífambabea dom. dlTl iFid/.. 1111 :.
[0207] vnma ®Τ,τ1ΰ 'a, ' jap m 7"' , ® h ' vit) uj ' i í a im (>’' aw i ia - ' “"'rial amínieo de Abetar pôde ser corcpietamente bloqueada apôs pro-Imedbodiai dom.· em. ms&amp;mm®· dm plpdidoo OTbP:Qí4èdb'C3d:S: Op' | ΑΚίΤΟί~. Α^βΐ®: i -Ι® gf :'SS© fiSI·!® 11..: 'líti -bddfcmwoov &amp; bom Λ smoesob. be x ,pl_ Xc vK'-a ΐ c* j ã1 l a 1 Ό m J 1 3 b “ Ή 1', sugerindo que o anticorpo dl-l-llbll requeo dm· epidope qb:p:|lPd:ã:Cd.ddÍ:X -.(.Ι1#:,. 114-- lixemplo.. ,3- _ ^ F ' f > u! v t - _- i-i a b' > - “d _ b it- J i l - i
Atravessa a Barreria hemaroericerálica nura Modelo Transgéníoo Már-gaíílo d® ΐοοηρό. da. Sludelmdib # 1:1 :g;a-eso b blodas de bdbim Smàlsibe berobmai.s do olw £Ô:&amp;G8:1 Fa - a .:m ι-m t --' t _ u _L_· i mend nca^ harm' Ι4.1’~'1'Θ1:>:’11 btodbesba, i dldddi-irm l:iiia:ld:dadiifii:l'dá· d ·&amp;Μ llgd d pimpam à® dela-amildld#: "M blmo,. murganhos tranagénroos medeio da doença de Alcheimer p$~l/AP?owq receberam duas injeções periféricas de 150 yg de Ml.-101,11 no dia 1 d nd dia 3, Os murganhos foram sacrificados 24 horas depois da $=x, m j i"iovdo e p“vf >O' >' ao _<. s o ar iecDÍÍld>s s st-. ç'£3 rmmmci..' dm idi m ^ am mnpto marcados coai FT TC contra XgS humana ou cora o anticorpo moo acionai Abeta da murganho ^£10, seguido da um anticorpo η... s r t F~T0 -c i a ..:o·.. - nu , j.1 o p~ - l oí uu -*
proaodpa: dd pldebb de ^ό;1:θ-·ρηί1.1:0ΐ.άΡο &amp; mdredgSb.· díifcbbba dl pidoas de: dmilbibb ebim T-pl: apel-humada· rmaersía: qrse O i ’-i uop >« .m , i r t_ h nu ÍJÍ-U . 1 po'< u i i mau a bgpf®ifa 4 - t ^ v . v-s ^ ^ ' 1.Iqar-si:: a placas de beLa-ecsiioide era arun&amp;ts vivos (Fig.: W: r
Anticorpo pecombinante Humano contra Beta-Arailoide Melhora C .b:Ogpp;rt:á®e:btm: bdgniMto: fcoPíBâ:l s JMiff-u*. uu Ja r' - i net* pt* u't a ore liiM. febelo ffamagipfop ί|ρρρρη:!ΐρ da .pbepga lie .Mapeipef soft Abmarifa;® á dréddibpa# ti© diprp-deiaprrldlap [0209] Hm ju'b i£ m c^bot'- k '-1 v~ idm® t o s._io λ i m i -1 -í v . vCCiio vt an \α·> e, fbram tratados semanaImente intraperitoneairaente com 3 ®g/kg de an ti corpo recombínante humano MI~1C1.11 ou um anticorpo de ;cpn:bfq.ip spMssp tis |fe$ísi fsçfiips·' idprârifcp S deabrus "fama uu. _ im . -mim m, t^toatn'li' tmmo>' t c ;ouu. m ~ murganhos trru^tju. fBrp®: .ímáki^&amp;áxM fe-t-s corípcrtumrnoaiw em labirintos s®. W. .appesí p bspplS: pg conclusão do tratamento. A ::tâ;®ã,..:¾... alternância espontânea foi avail .tuU θ'1 ι i 'ando tn hiLtunt ' dc daa.ao ou r mno m W): oo® famaahostde. brappf; <lç d O- p UM *. Í-§ :® pafâpiB bepigep: ...............áb dl· 'ffirmutopf as sequências de entrada aos braços foi registada; alternância foi dpdlnáip· ppmc .ap aptradap:
Bpreásivap em· tP#il pPisppy p®. ptpgpatp®: # prcpietB®: tablet ".. '·. £ pr v taç^ ·. Iturnan' n i m - j.. - B ^ ® c ~ctu a razão entre alternâncias reais e possíveis (definida como 0 ahmppp: Pbrgl/ tip pptppdas:; eta. .bBâça®: - % j ffialPiprâSâda' per ng s te^ gun i 1_ u:nw ike a · u Mu. m no t„ *- goapaMMmá bb (Mpfesbâ se.l®âg®ea ®opp rP'i:©:.f ara labirinto em 1 ft- \ ''-pc,r-id ; jLuj t . i~ um ~ 1 c t. c ' ..a r m :rt ' u H t ' -u. α náo paramêtr_co >de ''"ust ?l -’''altis fc*t ’ ^ ' -j i<< t au run'ua a 'trU ?r n rrataruin ·> ^ t ^ m grnpom 0 '1 t K ^ S ' . ' !, ' * V l V. , . a comparaçao em pares dee diferentes grupos. Performances ' _. v v <~ 1 . v . . V ' " N " C 1 " a „ N "> i - a i i . I ’ v. a 'a f ~s [0210] Tal como foi observado em estudos prévios,, murganhos náo tratados atoAbeta d» 24 'deaeas: ife i Jade bbráit;; ata u < t ..•'"'o ^v. ό - ~ ~ d '-· ui^a t- „ 'tc ^ > ca. oPmg:adbo:i:ros·; bd ; dibAabd daidagddc figgo X;|itf andes 4ό· t a^arm-ma ,· ttòi ' c a % ^aa ta , p-Op e" . p02;i:l] Mmtg aptes ps&amp;sw dratadbe sôiá ΜΧ-ΑΑΙ * 11 ....................sgc·® a©o tara® dia c imbbde it|dM: .s de tttibtg is iSibbesiAbdiSp:................... comparáveis com os de murganhos controlo selvagens tratados com NI~I01.11 após 2 meses de tratamento, .d SdáiXbs dp: melhoramento ti.©..,. ddSSdpbbse a :o c, .<=>5 u desempenho depois do tratamento; Χ'πμο*.*. i u.-. ’-u..-"'-* significativa entre os quatro grupos 'Fig, I6B. tditd ..dd: Kruak.ai“Wallis; p-~0.Q3)» Uma análise pós-hoc suit pares entre >_*. 1 m . > aup\ demais" r m quo rvurgnrm" moAbáta trotai;"- V.OHI f l-l 1 11 »idu'j a ri v. u 't rc d > i' , u 1 * T Jlt.U-tlvCK V lie ,Γ tulíl 3. Sc 40 K 'U v d 1 η Λ n t ..e 1
:Sg pmbr®: ter ss. «~'ÍMdÍl 'dtp iludis . IX g "s. - u:*ol d’ , .a e -m.nt d"' τ u janhv. " tc.ud·-m atru-ertou piM- tprté'' tendência parB: d: dedbbbic. όρ> damage" At 'GdffipaddMVdddntd ta. n iqrnrs dl. mmada r''sta3mu> c? uart^j n *. r>m oe c nrr l > ithn.i u i " ia\ -f , p~n. is dX~XB:l .<. li. cg msc. cdntddl· tgi.... ddddi: uma «ρΧΑργΧρ,. di: ogog pg ©ρρ. dpsddpdnde qugctdd bSegdbdgdds.,. d ddd ddi provavelmente dovidc ao ambiente familiar da "tdAfa [0212] 0« efeitos de ura tratamento crónico, 2 meses de tratamento com HI-10I.il, na carga amiioicíe, astrogliose e microglLose foram analisados por anal rse his ioqaiaaioa a iirunohistoquimica- Ris Pdtb, f.ipq pd ;.a,’ _ , i _ fçrráib oi-.'i-a , - m cm .* 1 ^-u - ί m c ' ' ·.. \ m. pOiaElbididOiS ddadbPilPbpahfe COfl pSi;, ub ΟΟΜΟΜΜΟΜΜΜ MO ‘ n. ao m o- - _ a- ^ oim x t p£i&amp;&amp;Piâ^ V a- Oá .Μ Γ \. ϊ ,λ )* m ’ 0 í irrior ótorr.o Lei ca RM 2135 (Bannockburn, 111 .uso is;) , A oarga de pRada®: bp bePa^spidolde; ηρ opptip ρ fib hippbampp fgd. quant! f icada cm secções cerebrals marcadas cora Tioflavina S a Vermelho do Congo de acordo cora o protocolo padrão. Para imunohist oquiraica, f at ias f orarc desparafinadas, bl oqueadas cqra 4:|;: MBAf B:t bpmggrq de bahrs p pi de .boro de cabal©: ©m PBS durante 1 hora á temper at ura ambxeu t st. Os anticorpos ’o‘Mm in 'uca,':s recanto a rucii; o Ao mm L,as N' ?s ~ :·<·· Ί 11 e o dllndpoaab:: «dtd-dlSF ;(ddda:hobd ;ijdfton:dcderai:eal.s | liSSlg irldi·-T8A1 íbAFQ) 1;5G0. Anticorpos secundários acoplados com Ilucróforos fo;rarn incubados a temperatura ambiente durante d bpraS::,. lot im " ’"s,?- ' ata c-l peí cr cérebro de .murganho, espaçadas por 7 5 pin. Foram recolhidas d ima.gsb:a pop somçIo: &amp; ira ma sul Ciun" ã . >.e 1 Γΐ' p°ra cnilxp do córtex (região parietal e frontal). Foi recolhida a ár.ea t"t^i s-v r gxvdtp irrrfi * -i de m - e 'r:au: t R li cara mííisí ^ .,ιΐΜοηο. v -- cii«e se imagens lurmina ’ Mie for ofatuad- > om > Cv-ftraare Irmcjo i. .........................................................................................................
[0213] A: dupla marcação de secções cerebrais de murganhos arcAbeta imunizados cora 6EÍ0 o IgG enti-humenas revelou s iig^tâo or ata ' v f Ni-Jfd.il .·« deposrtod; de A©Pd. ÇFiqr 17, painel esquerdo), indicando que o anticorpo bl-IOi.Il ©SBbbgpe' ;a:br.a%es:sar:' -a párrçrra: feemato^cblMlpp o ligar-Md á plácas; dp bçta.Ami:lbi:ba o«rebPpâs:',; lenhrptd riqgqtb dq t meti' humane para depósito? Abe ta foi observada era marqahhMo: arcAfeeqa IpgpaAob pqgt p: dnidrdprpd ffe qqqbqplp· fldai 1.7, pained qirslqo.J.. I OPr 4 j n ί ' _ i . t . ' 1 1 f .v 1 t Ί " " 1 , a-." (.. 1 . o .'-v . 'U- w'\wl > ! . '> , o .,. -U' -"sil'». sO. tail nn r I ac.e οι ηΛ l ^ ΐ. = ' -.<"'
Tioiiaviaa S e Vermelho do Congo , Esta redução atingiu uiveis a' ‘pt O' 0 >"» - - => ^ i O v ·. v, A s ’ > d ; &amp;. murganhos arcAheta tratados corf; o :ahi.i:ooc#g .dm b&amp;htldXm tdif . id A, Sj. v: Ά'Μϊβ. .da mida das;· pldblS;. rn 0 -r r ,.v ^ ^ t j a ^ t~ c<=- ^ " _ vara nb Kdadts ste pi memo obsem-vabas; fFigt, 1:1' Pi b me taisaadd .mSbid. das- pdasaa FMgp 'IB' S]-,< ......................[0215 Ί' (Pdfs: Cssbam -φψ : hit 'Pmf dmcmta: fsrdnicb ·.ad© &amp; mrit imorpc.................... KI-101,11 afeta a resposta neuroinf lamatoria em murganhos . ” l -* -t, ~ _ a a k i -ί ^ α 1 _ ο i _ i ^ k ; Fa ' .,- it a '<;* i 1 ό - a „ ο η,, sm i > 'm d: >''ta '3 - !' 'i S ' v. ,, d ' s 5 > a „ . ήΓ' ' tnr : ' t GFA?} no cortex sis murganhos arc Abata tratados com anticorpo bl.uidl.ili Ί[ i ^f', "^on" a^' r.'U'nn ttb „ no anticorpo d« controlo dig, 19/A; Pann-Whi tney-'J; p-Q>04?}>
d k I Ί'5'·; t „ 1< ί - } mr Ct i 1Γ 'm I" I Ord"1' , n Ul. Ί CÒO com mm.: áhtibglpb bdmfma: cm atrsaitt da. mXbtmgXim: a gaamtdiEsgmsi fahiS-.-XBb.i.) tambÉm .rovmlott «a dendimgda· bgpaiimbiba, paid uma inflamação reduzida (Fig. 19 B; Mann-Whitney~U; p«0.07 5 pa;i:a ibPtm m mb rims: ççmç; gags: p ;h:i.p:gç;amp:d;;): , ;.&amp; 'bimipiaigip- da; a.’ts n ]*< τa u J _. sc. \r <; tia-n .. rr „nu.; vt ,,· . aiga o^ta-^f.m o: k u n-. or cade ι;λ\- a ’wC.tdierd lCK O................... aHtioarips M j.,~1.íí r., i 1..,: [0216] A imur.oterapia passiva com determinados anticorpos .mddodipd'di.a d;iddd:i:dddddd: dlPtfa, tfe®; .podd decf :asPddid:ds. .i mma; .fhsgpbngXa pdrldPtada dp; am 'mipdhfb (Pfeifer- et aJ.f Science 299 (.2002» , 1979; WiJcock of ai., d ppçmd:l;Hfl;dSttta:f;Í:oò· 1. pSbQblo: .1.11,. Para. ·φ^Ζίϊά£ dp. ΡΡ^ΡΙ,ΡΟΡ. da terapia crónica com o anticorpo HI-"10.1 , II , ιοί realizada erarcaçào N ' o >. « > - ^ ^ s ,a,reKbe:tgt e -ípdridpftw eeAdaodPe ·ρ©®: aedX α&amp; Prussia vie Pori após 'd tratamento cronico com t anticorpo Ni" 101,11, Esta marcação revel ou a presença Pe hemossider la. a. um. produto de degradação di i.e'K,·)' \ · \ , t warned,o riero l'e" í 1-n (Figo 50), Errt murganhos arcAbeta envelhecidos tratados coxa ρρρίρρΓρ® ddndppíiQ ϊ p, rrdduiêdlclil. db pi:r:fi.i; pbdd.fe.i:b:ds :'pmrl d azul da Prussia rei signíficatívamente Plspddá. compa r u fc i v amer. t« aos companhe i res de or'.r-md ^-^i^aaro* {> íOau-dhj crop - J; p-C. )'U'. o to am ' m it ' o'm > anticorpo PT-ΙίΙ,ΙΙ. ;Ρ®ο: dé» ot i s n = ai enr ^ dc otrem se ί:ο >- ..................:b©iad;rrag ias.· ghairdb oompatabb.....a .· «ç § afefeiça: a raSbáfcá let at adds................. dota. aptiddpp©: dá apádrotiá iSâbd-dbdbAéçfeí pad, id,'7 .] trilleaatl© ,guá os ádaitbd láriapiaticcád: fcáPÉdiáOS bfe. rraidámenà·® boa·: =utioo^, !E- 01.11 nvm-rin ausência deste efeito ,-o,, ,cn k ^diso; - , ute ^Ls-' »s , oa 3U" rt t' s , s-m o meai . Afeada,..
dbdmjilb: ,X x- x„_ i n c F-v. vio^nu ~ J mm » <. .uL ι α d A ι ίο ( 1
Inibe a Formação de Fibrilas Abeta Sintéticas In vutro 10217] 0 efeito do anticorpo humano recombinant® NX-101,11 na ::tá,rftá:ç:i'ia de· tlfer.iia:-s: .Abe· ta. tçi. atalMio: dfera.nife· .da. ábbâçdp dá FrO-felanind d drgada a.....Sfeeéb.....dgtbdáds......par......â®ál.Íne'od®'................. fluorescência. Soluções de Abeta menomèrica foram, incubadas -a ,3b efl durasfe®:: dd horas na presença de concentrações crescentes dd (Sj^dé:! ,1:1,., A "n s tàu v iobr iae Abeta ρΡηΡόΡΐρΑΡ iíi piprp Pol, inibida. paid :d:h;f:ipb;f:p:s: rpcámbibaiptá'' bfemddp .Hi-'i'dl,.'!!. duma fbfMsi dábbbdádtá: dl; PddPibf;r.db;Sb: ΐΜ,αο ibl v: r,sempre s \ > . I-'' Pt 1 ' v ' <-. ' “ ' ' 1 ! - p ^ c _n ^ '1 ' [02183 Pd dléiPes. Pb saPimompÇ: PA-dPl ,,,:11 de, fsibPiPbbd mediada por recetor gama Fc de fibrilas Abeta foram estudados eia células microgliais-derivadas BV-2, As células 3Y--2 foram í „ ii da'- - m~ ΓΊΓΙ c remno ^ -n "Ff.·@ glutamiaa. As células foram trípsinizad&amp;s e 120'000 células .BV-2/poço for ara semeadas era placas de 24 poços de fundo ;p,lã r o lo*'o .ft uo ís, ' norm foi i i :<.> mor ΐ 'l| ft -~ft DK2M/F12/poço suplementado com 20 n!d HEPSS í.pH 7.3} f 1% BSA, 10 μα/ml Pen/Strep. Foram adicionados 100 pq/ml de Fucoidan, am imftiddr do pseçftpe .psapenparg, SO: mlmutes .antes: 'da. experiência, B0 fid de fibrilas Abeta marcadas com F1TC foram pPe-ftscpPaftas do»: is concentrações indicadas de anticorpos durance 30 minutos a 37 °C, lavadas duas veres seguido cie o-ι 1 u; mm,, itu,~ rm.ftr.., u Ift lu n ^ o. ft t í ί'κό' r^x -ai nnm 1a a placas de cultura de tecidos. Após 30 minutos, as células BV-2 foram lavadas duas vezes com HESS para remover Adro ta fibrilar na o associada. ....................£Ô21:êl A# eéi ntas for dm t: r atedas· ppm 12 Sp pp :/.mÍ dp................. ijmrm Fiftt cuísi k 2u ’nem,-· a 4 0 s- .«/n-h d. a~ w -eí por centrifugação a 500 x g durante 5 minutos a i°C. As ..................eblmipp.....êPtatt'' :if Addae.....dnr ande''' id''' rmlmptcs"" em;" Afti# -fttft......f ABi·1................ A:ff Fft, Ai', A!.; plteeseg :5 mtí dali} e· :. latadas' duas, vetem .com· iFAdi, de lavsgftm; l:FBd.:í ft pM 1¾¾ Snf}%. 1¾]... ft flmftfftdelneid. (FL-lj cie 10'000 células foi determinada por análise de FACE (baseado em Webster 3D et ai., J! 2001).
[0220] A fae ’’ΓΙ'!*· ft fift _cts -leul- ’ a a ca n- on M'A. depended tp Pe .Pdeetpi fama AP, dpi. medida. eped imibiplp PP- S_1 4 _ ^ 1 ’ ti -S 'In'5! t 101-li haitiano e uni anticorpo comereia.Imante \ i ~s ’s, > ·); op , n it-a, r ~ 'r; \-J ar".. >' .' paptido Abeto p>E10) demonstrou urra .'adução dependente da dc o - Or Na: ” . i :, i - dl'.’”’. a >o "-a m- : iv =i medaádâ pôr PI—Ipl ] t ^ ^ - i ' u ( i ^ i x- t ' s para o anticorpo SE1G (Fig, 22), i tc^ u 1 ^i a m am i 'ocp 1Γ in . ) . itu "r^"1 ' una 1 nf, n \a a \ -n . d, fibrilas Abe ta por. cè laias mio .toai lais dependente de recetor dsiis irs·...
PdlMlabap· [02213 tal como demonstrado nas extrr iéocins acima descritas pealdcadAp! bib adercto: com·' d; r:ae;.a caat,.d, ..fai ....................sdpipdiéeddedddíftèdfee''ppbdbbpb''pebbbab 'adiilpbcpbb'''pbobbtorea''st................. io^padtdosPbdpc^ afeipda s péisiôs; S ppbibtbhab dei snbicôrFba asi Pd j çtboa .brtmanos; lenat ipicament'©· pbabéaebB # assintomáticos, tal come er paciente? com cursos cs doenças 1 l :...o ;_r '· :.. ' ate r.....· s 'an-T'· : tu' o.. - í % \. i a ' doiõpiPpífiditdimPffi 'v.jo_t > i ά dec" 'a i< "U:1 F~ &amp; n(?r :icantr*e, nrna me r a*s~ d·3 antt-_<rpos pede ??r detetada e isolada,, que descrimina a forma funcionai fia i '' óq Lta <i ' to. ar t ' .j-" to Γ τ'1 " i m - -rao dte'a f>ma us tõ .. iS“ - t Cm ΙΟ ·Α tv J 1 ob1 e 1 a , if t,K'T x. Ag 1 - , dc^itp ar „c-rp^s ¢.- :¾ <m- |1(t'n ej AvtiPr^in cão iui;t ut ie nu still tp- xiicrt At bpa wr ian.be' i id©· anfigénio n;upa pstibabura pia'bbdi:a:i®l:aidiaaitan:ba:· rale bant#,. A bbal. s an titan rpo .as· a .............. su Os' o on D ' ncu . i If nui·' 3l s;:ií^·.·'' '' ps-SÉl^â:.................. > -* l -..1 , ' O >t _f Ot ^ ^ _ τ<. Cl 1 „ It f ju -'S-'O, par b#ia ## Pb Ai bpeppioo: barrar' pi pabbqbbp: biairai para na ui q a a-, c ' i >." u aitu; in mx.roq rcu :e o „t-ud: nuiua-lc .núcn*., tAnC.amc 3 > n.s .templo. ΜΜΧβΜ adfcXddepa®. ®;£1ΐΡ0Ρ0 fô :&amp;1:6 aépááa®: de susperder e tarnfoém de preveni r efeitos deletérios de príotsdíeap; pâd:el':ddd:S;:3,d snoretís a .4 33 , -3 - 0 i. .c adis ! 1 J s 3 ' ~ _ „si 1t- vo, I· -1 1 i 3„ j. 1° S "1 K , , [0222] 2110> Universidade cie <120> Mefódo para o fornecimento de moièculas e alvos de ligação específicos dédeénp
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PAT •••τιν Art.f;ciAi : Τ®2®> ΤίΡΤΤ T©fe®£:!ffeTTTS: AiOmpl/AKp^ <221> HISC^FSATUFS ....................................................................................................................................................... AÍ22Á aj ..,: im <223> Denominação cie sequências proteicas CDP. era ο «οι Gj-r P íJ[-lf'l.l(t V , οΓΓ 1 ΤΑΩΤΤ .1..-7 1 5 .<Í$:Ò÷ I®
AtlfeA Π 1 e .11:.1 fellfefe ArlfeTfefeifel €ll# < i tr· j -¾ Ί ' t; Τ'1 1 i> " r ' < )v ^ Í <2 2 feu
<211> MISC FEATURE
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Reί~rairav^- Ue s-^f^eiDt ρΎvA^x_ce T*R c-n feemeselafeaffia Safes:!: fee: 11-111,:¾¼ ife: SISA ................Ailffe'Sf................................................................................................................................................................................................................
Asp Arg (.By lie Glv A.la. Arg Arg Gly Pro Tyr Tyr Met Asp Val .:1 5 .10 15 m mi i>. s: <2122' igs 1:223¾ EElilieial. : <2Ϊ®3 <253> Região determinante de complementaridade (CDR) <i.2:ss <22ia HISC FEATURE -2 Ai Uj . . sir}
<®3' d"'uMiirr ,c a. ]u2n raa ot o - . <-” »3 ~n K \Τί-π'idtu'j ^ab-t M-jUl.Jl ' Ci-ii1. _ECi ' < 2EJ <:4 S;Q > 22 life :1 3 CÍ:1S.Í> 22 «2122 1.2' <22:23 Mi ...................4 Sl® ..feil:® dl al.....:............................................................................................................................................................................ <®1m
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<221> MISC FEATURE <222> (i) 7. (17) <223> Denominação de sequências proteicas CDR em v m>_ui iri'm <V,Dst ο M-.ni II e XT-l 2 ®i2 > bA '2, _ )R2 2.122-3: a
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Asp Λrg Glv lie Giy Ala Arg Arg Gly Pro Tyr Tyr Met Asp Vai i : 5 ίο is aÍAGi li ...................AiAiltil,............................................................................................................................................................................................................... <2131 .ΑΡΡίΑΙοΑΙΑ <123> Região determinante de complementaridade (CDP) lírio ' ' . ' - di' <123' Denominarão de eoquònc.i ao p.r.oteiras CDK era doiionclacura Kobar <!e HT-IOid.0, Ml'-lOi.Xl s liMAl ΒΙΑΙΑ ateso a,. tema. <dÍÍÀ> 2 '3'
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<221> MISC FEATURE <222> (1) 7, (5} ; <223> Denominação ele sequências proteicas CDF em dom.enclar.ura Rabat de NI-101,12 Vb, CDR1 <40© 2 2 6:
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.1333¾ M €2» Gt« Ser Tyr Ser Ais Pr» Tyr Thr 1 5 1:21.3¾ 32 713.1¾ 7 ...................1:11,1¾..317.......................................................................................................................................................................................................... .337.3.7 eiax 322:0¾. 322,3¾ leglist deiidiimidaiie: .da· 7313^1¾¾¾¾¾¾¾ xda:á©: 2S;s:2i 7221¾ -lllr MT SC fcFATURE <121' ;1> λ t/> : -22-'·' 1="·. miin rio j? toiwnvp; }.<ιη'« ιΓ'< «ηχ 1 j 11- ri xj.?t IX k^hxt d*· il-101.1' Vu, 'ΊΙ <40 0> 32: Àrg Arg Ser Tyr TyrTrp Gfy 1. B. 3:23:0¾ 32 3221¾ 2# 2223:2 :<22 3> Região deteria i tiant e de cosip 1 etnen t a r i da de (CDRj ^2:222 21:213 Mill, piaiuSl: dS:22i&amp;:' íij i .* '(:'Í:Í:1 i 22:2:3:2 2:eriSiTti:aag.êo·: :#e áegaiiiias, pipiei t&amp;a, 3¾. agi Nomenclatura Kabat de 3I-101,i 3 Vh, C DR2 2TO2 S3 der lie His Tyr Ser Giy Ser Thr Tyr 'I'yr Asn Pro Ser Leu Lys Ser 1 5 II) 15 231:32 3t tat. it 11 -2-a 3 9..N D'p Γ? < 'ã [s 3 > d·· Í IMS '2 --223-- lea_ao ^ ex ru ^ 2ie .·· -rp: r a- ?rr. ,· r:. lau·- (Cl'iO -. 3 "?:V HISCJr’EATUF? 2ÍJÍ2 :(:1) 'V., ail,:) : ..................22:1:12;... ,Pdp:g3i:nt gig,: 22.. ,igg:u:f til if:. ..giplellái.. .222.,. eia...........................................................
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Gin Vai Gin Leu Vai Cia Ser Gi\ Giy Clv Vai Vai Gin Pro Giy Ar» l $ 10 1J
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Glu A>p Phe Ala Thr Tyr Tyr CA Gin <»ln Sei Tyr Ser Thr Pro Leu 85 00 05:
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Vai Glu lie Lys Arg 100 105

Claims (5)

  1. SE IV X ED X C ECOES l, , -" i ' * ' s u I ' ' , , ~=* sj ^ _ w i d . * " a t i 'Λ Λ m c - i â bei a--uni lo i de , em que © anticorpo, ou f tagnerd O de j ’ g i, ào a * *t: gen' o »αΓ' f oomeraeudeo nsm região ; varidrei .d® eodoia pedadd dom a sqqienpda cfe DOanodoEdod: apibbepi«da pit 'S®É: ΪΒ ddi dip ú um® Ppfiid qariãVei i® Dadora levs com a sequência cie aiuirioácicios apresentada wl .1-¾ la d|a. 41..,· ..................aatiaqrpPi.....qq iragdadto.....da'''iidaala.....§Caatiaddia'''diopep................. cia reivindicação 1, que ç n .icuv.u οπη a< r,-.“t}>' im !u 0 Dtttiosqpò.f o' V. onto ’ " 1 „ ’ T~ ' ^ ^ cla reivindicação I, que é >;n mdtrPerpo admano da icPdlpb IqSl,,. á< '§ IdDieqpqò:/.. ou fragmento de ligação a antigénio deste, de qualquer unia das reivindicações 1-1, era que o anticorpo compreende uma cadeia leve kappa humana, 5, 0 anticorpo, ou fragmento de ligação a antigénio deste, da reivindicação 1, que é um fragmento de ligação a antigénio selecionado a partir de um grupo constituído por um fragmento Pc da .çãdeí.a çippldsi, car rraçmsnda Dfatbq> um fragmentà EidK) f a nm. fragmento Edsbdpu i, Dm: pPiiiDPdlDPpUiiid^ ladrada nadifloadta pâr® o :an:tiaarpaf ou fragmento cie '1 ig3pão a oor-uénio d( st·,, d jU'daet ur> das reivindicafida Ϊ d: Sa··
  2. 7. Um vetor de expressão compreendendo o poliuçciodl.ido da resvisocrsaosfC: ©o ; 8.. dips deed Is ^ v. ·> : ' ί v, - , * v. Λ - o j — > em que o primeiro vetor de expressão codifica para a região >u lXj,, v ^ ~ ^ soo α_ V. v. ί_ a*· codifica para a região varrávei de cadeia leve do airtícorpo, o i_ ornd' vk ’_>}.> α vi . r o., ^ -lo do ]ο, "jaoi ui. b:®s rlm'dili:i:oS'g'Se:S' 1 $ s.,:
  3. 8, Um método para a preparação de anticorpos anti-beta- amíloide, da fragmento de ligação ai antigénio destes, an; χο'ί, ^ S m <o 1 ·> t-í ,p . - i<_· isi oitii.femã da cdiuls dowpededra do rs:i.vd.ndlçáçdç; 8 mama odldcsd aoeldlsrç e Idl isclsmenl-c do sndidcrgd srird-'';dei:d:^:ami'lo:ide;'í:· da., drsgmsblp' de ddgsdlc s sddipindd deste·.,: d· pgrtlr da çpitdrs celarigrn XO n n.r j. r _h “ç :j “"o o ot - Ια - nu o ~ ; ! . i:. o-.·.· e- v.;, çodidlpadd feio pcl_rarlectic d: rei,Tir Jic-íTà' % da .............. obtível pelo método cia reivindicação 9, ....................................................................................... 11. 0 anticorpo, ou fragmentei de ligação a antigénio deste, aj c r.l vt > mo 1us aeiv oc ϊ rvs 1 a b οι 10, parta gairioa-fgp- nd : trabsmerbe da dosboâ dá M.edsd.íeer:, enfraquecimento cognitivo suave, dá acamulagSc aatcrmâl ®a. dspedipse ds bete-ami.içdds te· sis· tema· idervosc centrei. nuia sdg-#i;'td:· laaiasdç* 11·,. d addiacrp©, ou o o - l_gavao a anticgai i a.m, pare ut í li zaçao de acordo con a reivindicação .11, em que o edidforpg: ou: ; pr p p, r'1 r ' > ..s1 d ^umrnrserttdo bd forma 0:1¾¾ 0000¾¾¾ f subcutânea, i πX. ='ρ·-ίr ί t:mea\ ; intranasas ., puser.tecnj. ou como UIV! SerOSOO .i v 1j, lima composição farmacêutica contendo 0 anticorpo, 00 ::Ida:gdÍ;dÇ::Q: dP ΙΙ.ρΑορο a ddfbudíSÍõ "d®dl.<â,,. d<ã #» dal .rexvrrdr camôes. % &amp; i os 1·$ o mm amaÉp&amp;aÍa#Q:á daamaoaidtiaaaoad:^1 abed tided..,
  4. 14. Uma coTE\poeiçào farmacêutica contendo &amp; ántásarp©:, bu dra§adn:àocdB 1„ρ"50 : " dvai; I'm'm'p ge t_ no i-c ....................rbim tbifbbçqbb.....1"': a;" S" [me" 1 $" v ibdadb" a"" um; ím r dsbbr''' dadddfead' *..................... 15 i d- bbmbbbibib: cia· daEiaiddàaaala' 14...,: em: :q*je 0. mattaáor detetável è uma enzima, grupo prosLético, material fluorescente, material rumáressente, material o ' u;s.;i a 'm r p ;ti: >m taJ„sô’ r\ tu- ί s l « r --η ί ' * p.õsb:t.ibÉd/, .©y: ploi bbtillibb ipaduidadneitidd: did rbdlpat Xbd,
  5. 16. A composição das reivindicações li ou 15 para util.reação nâ débbçirç ir mlrtp. .db bapfesbiptb de:. bo ©dreferb dé o® .seleiro:· bumbub, 17* A oompuseode para- udi'iiifepde' db acordo: eoff. a.· rptsplndiçaçip: .1.1.,. em· bpe; -m dppopdçip· de &amp;. detetada por fortografia por emissão de pcsítrôes ,
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BR (1) BRPI0806328B8 (pt)
CA (2) CA2764852C (pt)
CY (1) CY1119197T1 (pt)
DK (3) DK2099826T3 (pt)
EA (2) EA017611B1 (pt)
ES (3) ES2635317T3 (pt)
HU (2) HUE033325T2 (pt)
LT (1) LT2436696T (pt)
MX (1) MX2009007136A (pt)
PL (3) PL2436696T3 (pt)
PT (3) PT2099826E (pt)
SG (1) SG177954A1 (pt)
SI (2) SI2436696T1 (pt)
WO (1) WO2008081008A1 (pt)

Families Citing this family (95)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SI2436696T1 (sl) * 2007-01-05 2017-10-30 University Of Zurich Anti-beta-amiloidno protitelo in načini njegove uporabe
IL199534A (en) 2007-01-05 2013-01-31 Univ Zuerich An isolated human antibody capable of detecting a neoepitope in a disease-related protein, a polynucleotide encoding an antibody, a vector containing the polynucleotide, a host cell containing the polynucleotide or vector, a preparation containing the antibody and related methods and uses.
BRPI0808940B8 (pt) 2007-03-13 2021-05-25 Univ Zuerich Univ Of Zurich anticorpo humano-murino quimérico ou xegogeneico, humanizado, humano ou seu fragmento de ligação, vetor de expressão, microrganismo transgênico, método para preparar um anticorpo ou um fragmento de ligação, composição, composição de diagnóstico, uso do anticorpo ou fragmento de ligação, kit para o diagnóstico de um tumor e uso da molécula de antígeno ligante ao tumor
JP2011527338A (ja) * 2008-07-09 2011-10-27 ユニバーシティー オブ チューリッヒ 神経新生を促進する方法
EP2186827A1 (en) 2008-11-14 2010-05-19 HS LifeSciences Ltd. Surrogate marker directed cDNA cloning of selectively induced mRNAs
HUE025150T2 (en) 2008-12-19 2016-01-28 Biogen Int Neuroscience Gmbh Human anti-alpha-synuclein autoantibodies
FR2945538B1 (fr) * 2009-05-12 2014-12-26 Sanofi Aventis Anticorps humanises specifiques de la forme protofibrillaire du peptide beta-amyloide.
WO2012025633A1 (en) 2010-08-27 2012-03-01 University Of Zurich A novel diagnostic and therapeutic target in inflammatory and/or cardiovascular diseases
US9034333B2 (en) 2010-08-27 2015-05-19 University Of Zurich Method for target and drug validation in inflammatory and/or cardiovascular diseases
EA031698B1 (ru) * 2010-10-11 2019-02-28 Байоджен Интернэшнл Нейросайенз Гмбх Человеческие анти-тау антитела
AU2011337704B2 (en) 2010-11-30 2017-06-15 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule capable of binding to plurality of antigen molecules repeatedly
JP6067575B2 (ja) 2010-12-17 2017-01-25 ニューリミューン ホールディング エイジー ヒト抗ｓｏｄ１抗体
US20140044644A1 (en) 2011-02-21 2014-02-13 University Of Zurich Ankyrin g and modulators thereof for the treatment of neurodegenerative disorders
EP3825325A3 (en) 2011-03-30 2021-10-13 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Retention of antigen-binding molecules in blood plasma and method for modifying immunogenicity
US20140302532A1 (en) 2011-04-12 2014-10-09 Quanterix Corporation Methods of determining a treatment protocol for and/or a prognosis of a patient's recovery from a brain injury
US9580493B2 (en) 2011-06-23 2017-02-28 Biogen International Neuroscience Gmbh Anti-α synuclein binding molecules
EP3939996A1 (en) 2011-09-30 2022-01-19 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule promoting disappearance of antigens having plurality of biological activities
TWI681970B (zh) 2011-09-30 2020-01-11 日商中外製藥股份有限公司 包含依離子濃度之條件對抗原之結合活性會改變之抗原結合分域、及於pH中性之條件下對FcRn有結合活性之FcRn結合分域、且誘導對標的抗原的免疫反應之抗原結合分子
CN108144058A (zh) 2011-09-30 2018-06-12 中外制药株式会社 促进抗原消除的抗原结合分子
TW201817744A (zh) 2011-09-30 2018-05-16 日商中外製藥股份有限公司 具有促進抗原清除之ＦｃＲｎ結合域的治療性抗原結合分子
US20150299313A1 (en) 2011-10-05 2015-10-22 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule for promoting clearance from plasma of antigen comprising suger chain receptor-binding domain
DK2766093T3 (en) * 2011-10-11 2018-06-06 Vaccinex Inc USE OF SEMAPHORIN-4D BINDING MOLECULES FOR MODULATING THE PERMEABILITY OF THE BLOOD-BRAIN BARRIER
WO2013063086A1 (en) * 2011-10-24 2013-05-02 Intellect Neurosciences, Inc. Compositions and methods for treatment of proteinopathies
KR102032080B1 (ko) 2011-10-28 2019-10-15 바이오겐 인터내셔널 뉴로사이언스 게엠베하 Tdp-43 특이적 결합 분자
JP6263473B2 (ja) 2011-11-02 2018-01-31 バイオジェン インターナショナル ニューロサイエンス ゲーエムベーハー 脳における高レベルのα−シヌクレインを診断するための抗α−シヌクレイン抗体の使用
CN113416256A (zh) 2011-11-30 2021-09-21 中外制药株式会社 包含进入细胞内以形成免疫复合体的搬运体(载体)的药物
DE102011057019A1 (de) * 2011-12-23 2013-06-27 Forschungszentrum Jülich GmbH Standard zur Quantifizierung von pathogenen Aggregaten aus körpereigenen Proteinen
US10131709B2 (en) 2011-12-28 2018-11-20 Immunoqure Ag Nucleic acid molecules encoding monoclonal antibodies specific for IL-22
JP6242808B2 (ja) * 2011-12-28 2017-12-06 イムノキュア アーゲーＩｍｍｕｎｏｑｕｒｅ Ａｇ 所望の特異性を有するモノクローナル自己抗体を提供する方法
TWI593705B (zh) 2011-12-28 2017-08-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Humanized anti-epiregulin antibody and cancer therapeutic agent containing the antibody as an active ingredient
IN2014DN07149A (pt) * 2012-01-27 2015-04-24 Neotope Biosciences Ltd
US20150210763A1 (en) 2012-02-09 2015-07-30 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha MODIFIED Fc REGION OF ANTIBODY
TW202015731A (zh) 2012-02-24 2020-05-01 日商中外製藥股份有限公司 經FcγRIIB促進抗原消失之抗原結合分子
MX2014014678A (es) 2012-05-30 2015-02-10 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Molecula de union al antigeno especifico para el tejido objetivo.
US20150353630A1 (en) 2012-05-30 2015-12-10 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule for eliminating aggregated antigens
US20150315267A1 (en) * 2012-12-07 2015-11-05 Thierry Bussiere A method of reducing brain amyloid plaques using anti-ab antibodies
CA2896066C (en) 2012-12-21 2022-07-12 Biogen Ma Inc. Human anti-tau antibodies
EP2970378B1 (en) 2013-03-15 2021-05-26 Biogen MA Inc. Hydrophobic interaction protein chromatography under no-salt conditions
MX2015017852A (es) 2013-06-24 2016-08-11 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Agente terapeutico que comprende el anticuerpo anti-epirregulina humanizado con ingrediente activo contra el carcinoma de pulmon de celulas no pequeñas excluyendo el adenocarcinoma.
US10457741B2 (en) * 2013-07-03 2019-10-29 Seoul National University R&Db Foundation Chicken antibody transformed into cysteine and site-specific conjugation using same
EP3019629A4 (en) * 2013-07-12 2017-01-18 Biogen International Neuroscience GmbH Genetic and image biomarkers associated with decline in cognitive measures and brain glucose metabolism in populations with alzheimer's disease or those susceptible to developing alzheimer's disease
EP3047857A4 (en) 2013-09-20 2017-08-09 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Treatment for hemorrhagic diseases by anti-protein-c antibody
SG10202007189VA (en) * 2013-11-21 2020-09-29 Hoffmann La Roche ANTI-alpha-SYNUCLEIN ANTIBODIES AND METHODS OF USE
KR20220142539A (ko) 2013-12-04 2022-10-21 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 화합물의 농도에 따라 항원 결합능이 변화되는 항원 결합 분자 및 그의 라이브러리
PT3083681T (pt) * 2013-12-20 2020-09-03 Neurimmune Holding Ag Terapia à base de anticorpos de amiloidose de transtiretina (ttr) e anticorpos de origem humana para esse fim
EA036307B1 (ru) * 2014-06-26 2020-10-23 Янссен Вэксинс Энд Превеншн Б.В. Антитела и антигенсвязывающие фрагменты, которые специфично связываются с белком тау, ассоциированным с микротрубочками
ZA201608812B (en) * 2014-06-26 2019-08-28 Janssen Vaccines & Prevention Bv Antibodies and antigen-binding fragments that specifically bind to microtubule-associated protein tau
JP2017522886A (ja) * 2014-07-29 2017-08-17 ニューリミューン ホールディング エイジー ヒト由来抗ハンチンチン（ｈｔｔ）抗体及びその使用
KR20230104759A (ko) 2014-09-30 2023-07-10 뉴리뮨 홀딩 아게 인간-유래의 항-디펩티드 반복체(dpr) 항체
MA41115A (fr) 2014-12-02 2017-10-10 Biogen Int Neuroscience Gmbh Procédé de traitement de la maladie d'alzheimer
WO2016164833A1 (en) 2015-04-08 2016-10-13 Nantomics, Llc Cancer neoepitopes
RU2719033C2 (ru) 2015-04-23 2020-04-16 Нантомикс, Ллс Способ получения фармацевтического агента для иммунотерапии рака
CA3003304A1 (en) * 2015-10-12 2017-04-20 Nantomics, Llc Viral neoepitopes and uses thereof
WO2017066357A1 (en) 2015-10-12 2017-04-20 Nantomics, Llc Systems, compositions, and methods for discovery of msi and neoepitopes that predict sensitivity to checkpoint inhibitors
DK3430397T3 (da) 2016-03-14 2022-05-02 Biogen Int Neuroscience Gmbh Antistofafhængig cellemedieret fagocytoseassay til pålidelig måling af optagelse af aggregerede proteiner
US11542332B2 (en) 2016-03-26 2023-01-03 Bioatla, Inc. Anti-CTLA4 antibodies, antibody fragments, their immunoconjugates and uses thereof
WO2017189959A1 (en) 2016-04-29 2017-11-02 Voyager Therapeutics, Inc. Compositions for the treatment of disease
EA201892417A1 (ru) 2016-05-02 2019-05-31 Протена Биосайенсис Лимитед Антитела, распознающие тау
KR20230070336A (ko) 2016-05-02 2023-05-22 프로테나 바이오사이언시즈 리미티드 타우 인식 항체
AU2017276656A1 (en) 2016-06-07 2018-12-13 Biogen International Neuroscience Gmbh Methods for treating alzheimer's disease
MX2019000047A (es) * 2016-06-29 2019-07-04 Univ California Inhibidores peptídicos de la acumulación de alfa-sinucleína basados en estructuras.
JP2018035137A (ja) 2016-07-13 2018-03-08 マブイミューン ダイアグノスティックス エイジーＭａｂｉｍｍｕｎｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ａｇ 新規な抗線維芽細胞活性化タンパク質（ｆａｐ）結合薬剤およびその使用
MA45715A (fr) 2016-07-25 2019-05-29 Biogen Ma Inc Anticorps anti-hspa5 (grp78) et leurs utilisations
US10662226B2 (en) 2016-10-28 2020-05-26 The Regents of the University of Caiifomia Synthetic beta-amyloid peptides capable of forming stable antigenic oligomers
US20200031895A1 (en) 2016-12-16 2020-01-30 Biogen Ma Inc. Stabilized proteolytically activated growth differentiation factor 11
WO2018152359A1 (en) 2017-02-17 2018-08-23 Denali Therapeutics Inc. Anti-tau antibodies and methods of use thereof
KR101989383B1 (ko) * 2017-04-04 2019-06-14 조선대학교산학협력단 알츠하이머성 치매의 조기진단을 위한 펩타이드 프로브
AU2018263935A1 (en) 2017-05-02 2019-12-19 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing tau
CN109201128A (zh) * 2017-07-05 2019-01-15 京东方科技集团股份有限公司 微流控芯片、化学发光免疫分析系统和分析方法
IL272773B1 (en) 2017-08-22 2024-02-01 Biogen Ma Inc Pharmaceutical preparations containing anti-amyloid cell antibodies
CN108484761B (zh) * 2018-03-10 2021-04-30 吉林大学 一种特异性识别并诱导Aβ42的寡聚体及原纤维解聚的单链抗体、单链抗体基因及其应用
CN108874749B (zh) * 2018-06-22 2022-10-14 西南科技大学 一种高考志愿录取概率模型的建立方法
AU2019304384A1 (en) 2018-07-17 2021-01-28 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. Anti-abeta antibody, antigen-binding fragment thereof and application thereof
BR112021008105A2 (pt) 2018-10-29 2021-08-03 Biogen Ma Inc. variantes de fc5 humanizadas e estabilizadas para intensificação de transporte através de barreira hematoencefálica
CN111518206B (zh) * 2019-02-01 2022-03-29 长春金赛药业有限责任公司 人源化抗Aβ单克隆抗体及其应用
CN111518207B (zh) * 2019-02-01 2022-03-29 长春金赛药业有限责任公司 人源化抗Aβ单克隆抗体及其应用
CN111518205B (zh) * 2019-02-01 2022-03-29 长春金赛药业有限责任公司 人源化抗Aβ单克隆抗体及其应用
KR102135130B1 (ko) * 2019-02-15 2020-07-17 충북대학교 산학협력단 트랜스타이레틴 단백질에 특이적으로 결합하는 dna 앱타머 및 이의 용도
JP2022524588A (ja) 2019-03-03 2022-05-09 プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド タウ認識抗体
US11851487B2 (en) * 2019-04-01 2023-12-26 Rensselaer Polytechnic Institute Methods and systems for detecting peptide aggregates
EP4048695A1 (en) 2019-10-22 2022-08-31 Biogen MA Inc. Anti-beta-amyloid antibody for treating alzheimer's disease
CA3158491A1 (en) 2019-10-24 2021-04-29 Novago Therapeutics Ag Novel anti-nogo-a antibodies
KR20210095781A (ko) 2020-01-24 2021-08-03 주식회사 에이프릴바이오 항원결합 단편 및 생리활성 이펙터 모이어티로 구성된 융합 컨스트럭트를 포함하는 다중결합항체 및 이를 포함하는 약학조성물
US11179473B2 (en) 2020-02-21 2021-11-23 Silverback Therapeutics, Inc. Nectin-4 antibody conjugates and uses thereof
JP2023526500A (ja) 2020-05-19 2023-06-21 オター プロシーナ リミテッド アルツハイマー病の処置のためのマルチエピトープワクチン
WO2021245184A1 (en) 2020-06-02 2021-12-09 Neurimmune Ag HUMAN ANTIBODIES AGAINST SEVERE ACUTE RESPIRATORY SYNDROME CORONAVIRUS-2 (SARS-CoV-2)
AU2021300362A1 (en) 2020-07-01 2023-02-23 ARS Pharmaceuticals, Inc. Anti-ASGR1 antibody conjugates and uses thereof
JP2023535024A (ja) 2020-07-23 2023-08-15 オター プロシーナ リミテッド 抗ａベータ抗体
EP4271708A1 (en) 2020-12-29 2023-11-08 Neurimmune AG Human anti-tau antibodies
TW202300517A (zh) 2021-03-12 2023-01-01 美商美國禮來大藥廠 抗類澱粉β抗體及其用途
CA3216353A1 (en) * 2021-04-08 2022-10-13 Sana Biotechnology, Inc. Cd8-specific antibody constructs and compositions thereof
WO2022251048A1 (en) 2021-05-24 2022-12-01 Eli Lilly And Company Anti-amyloid beta antibodies and uses thereof
EP4351588A1 (en) 2021-06-11 2024-04-17 Sage Therapeutics, Inc. Neuroactive steroid for the treatment of alzheimer's disease
WO2023099788A1 (en) 2021-12-03 2023-06-08 Neurimmune Ag Novel potency assay for antibody-based drugs and useful means therefor
CN117586388A (zh) * 2022-08-09 2024-02-23 深圳智源生物医药有限公司 改进的β淀粉样蛋白寡聚体特异性结合抗体

Family Cites Families (125)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4444887A (en) 1979-12-10 1984-04-24 Sloan-Kettering Institute Process for making human antibody producing B-lymphocytes
US4716111A (en) 1982-08-11 1987-12-29 Trustees Of Boston University Process for producing human antibodies
US4741900A (en) 1982-11-16 1988-05-03 Cytogen Corporation Antibody-metal ion complexes
US4694778A (en) 1984-05-04 1987-09-22 Anicon, Inc. Chemical vapor deposition wafer boat
EP0216846B2 (en) 1985-04-01 1995-04-26 Celltech Limited Transformed myeloma cell-line and a process for the expression of a gene coding for a eukaryotic polypeptide employing same
GB8601597D0 (en) 1986-01-23 1986-02-26 Wilson R H Nucleotide sequences
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
EP0623679B1 (en) 1987-05-21 2003-06-25 Micromet AG Targeted multifunctional proteins
US5892019A (en) 1987-07-15 1999-04-06 The United States Of America, As Represented By The Department Of Health And Human Services Production of a single-gene-encoded immunoglobulin
GB8717430D0 (en) 1987-07-23 1987-08-26 Celltech Ltd Recombinant dna product
JPH02503867A (ja) 1988-04-15 1990-11-15 プロテイン　デザイン　ラブズ　インコーポレーテッド Ｉｌ‐２レセプター特異的キメラ抗体
EP0428534B1 (en) 1988-06-14 1995-03-29 Cetus Oncology Corporation Coupling agents and sterically hindered disulfide linked conjugates prepared therefrom
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
IL162181A (en) 1988-12-28 2006-04-10 Pdl Biopharma Inc A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same
US5225538A (en) 1989-02-23 1993-07-06 Genentech, Inc. Lymphocyte homing receptor/immunoglobulin fusion proteins
US5116964A (en) 1989-02-23 1992-05-26 Genentech, Inc. Hybrid immunoglobulins
IE63847B1 (en) 1989-05-05 1995-06-14 Res Dev Foundation A novel antibody delivery system for biological response modifiers
DE69133566T2 (de) 1990-01-12 2007-12-06 Amgen Fremont Inc. Bildung von xenogenen Antikörpern
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5314995A (en) 1990-01-22 1994-05-24 Oncogen Therapeutic interleukin-2-antibody based fusion proteins
AU654811B2 (en) 1990-03-20 1994-11-24 Trustees Of Columbia University In The City Of New York, The Chimeric antibodies with receptor binding ligands in place of their constant region
GB9020282D0 (en) 1990-09-17 1990-10-31 Gorman Scott D Altered antibodies and their preparation
ATE218889T1 (de) 1990-11-09 2002-06-15 Stephen D Gillies Cytokine immunokonjugate
MX9204374A (es) 1991-07-25 1993-03-01 Idec Pharma Corp Anticuerpo recombinante y metodo para su produccion.
ES2301158T3 (es) 1992-07-24 2008-06-16 Amgen Fremont Inc. Produccion de anticuerpos xenogenicos.
EP0903408A3 (en) 1992-08-21 2005-11-02 Biogen, Inc. Tat-derived transport polypeptide
EP0627932B1 (en) 1992-11-04 2002-05-08 City Of Hope Antibody construct
US5736137A (en) 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
EP0669986B1 (en) 1992-11-13 2003-04-09 Idec Pharmaceuticals Corporation Fully impaired consensus kozac sequences for mammalian expression
US5876950A (en) * 1995-01-26 1999-03-02 Bristol-Myers Squibb Company Monoclonal antibodies specific for different epitopes of human GP39 and methods for their use in diagnosis and therapy
US6130364A (en) 1995-03-29 2000-10-10 Abgenix, Inc. Production of antibodies using Cre-mediated site-specific recombination
EP0822830B1 (en) 1995-04-27 2008-04-02 Amgen Fremont Inc. Human anti-IL-8 antibodies, derived from immunized xenomice
AU2466895A (en) 1995-04-28 1996-11-18 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5875396A (en) * 1995-11-13 1999-02-23 Wytec, Incorporated Multichannel radio frequency transmission system to deliver wideband digital data into independent sectorized service areas
GB9524973D0 (en) 1995-12-06 1996-02-07 Lynxvale Ltd Viral vectors
US6420140B1 (en) 1996-10-11 2002-07-16 Abgenix, Inc. Production of multimeric protein by cell fusion method
US5916771A (en) 1996-10-11 1999-06-29 Abgenix, Inc. Production of a multimeric protein by cell fusion method
CA2722378C (en) 1996-12-03 2015-02-03 Amgen Fremont Inc. Human antibodies that bind tnf.alpha.
BR9808584A (pt) 1997-03-14 2000-05-23 Idec Pharma Corp Processo para integrar genes em sìtios especìficos em células de mamìferos via recombinação homóloga e vetores para obter os mesmos
PT994728E (pt) 1997-04-09 2008-11-11 Intellect Neurosciences Inc Anticorpos recombinantes específicos contra terminações beta-amilóide, codificação por adn e métodos de utilização destes
US8173127B2 (en) 1997-04-09 2012-05-08 Intellect Neurosciences, Inc. Specific antibodies to amyloid beta peptide, pharmaceutical compositions and methods of use thereof
US20020086847A1 (en) 1997-04-09 2002-07-04 Mindset Biopharmaceuticals (Usa) Recombinant antibodies specific for beta-amyloid ends, DNA encoding and methods of use thereof
JP3876002B2 (ja) 1997-04-14 2007-01-31 ミクロメート・アクチエンゲゼルシャフト 抗ヒト抗原受容体を産生するための斬新な方法およびそれらの使用
US6235883B1 (en) 1997-05-05 2001-05-22 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
EP0983303B1 (en) 1997-05-21 2006-03-08 Biovation Limited Method for the production of non-immunogenic proteins
US6703015B1 (en) 1999-09-03 2004-03-09 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Filamentous bacteriophage displaying an β-amyloid epitope
US6750324B1 (en) 1997-12-02 2004-06-15 Neuralab Limited Humanized and chimeric N-terminal amyloid beta-antibodies
US6710226B1 (en) 1997-12-02 2004-03-23 Neuralab Limited Transgenic mouse assay to determine the effect of Aβ antibodies and Aβ Fragments on alzheimer's disease characteristics
US7964192B1 (en) 1997-12-02 2011-06-21 Janssen Alzheimer Immunotherapy Prevention and treatment of amyloidgenic disease
US6905686B1 (en) 1997-12-02 2005-06-14 Neuralab Limited Active immunization for treatment of alzheimer's disease
TWI239847B (en) 1997-12-02 2005-09-21 Elan Pharm Inc N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease
US6761888B1 (en) 2000-05-26 2004-07-13 Neuralab Limited Passive immunization treatment of Alzheimer's disease
US20080050367A1 (en) 1998-04-07 2008-02-28 Guriq Basi Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
US7179892B2 (en) 2000-12-06 2007-02-20 Neuralab Limited Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
US6913745B1 (en) 1997-12-02 2005-07-05 Neuralab Limited Passive immunization of Alzheimer's disease
US7462605B2 (en) 1998-01-23 2008-12-09 Celmed Oncology (Usa), Inc. Phosphoramidate compounds and methods of use
JP3345401B2 (ja) 1998-08-25 2002-11-18 ユニバーシティ オブ ワシントン 複合した混合物中のタンパク質またはタンパク質機能の迅速定量分析
AU1631700A (en) 1998-11-23 2000-06-13 Idec Pharmaceuticals Corporation Tumor antigen-specific antibody-gp39 chimeric protein constructs
ATE352559T1 (de) 1998-12-08 2007-02-15 Biovation Ltd Verfahren zur verminderung der immunogenität von proteinen
US6361973B1 (en) * 1999-03-22 2002-03-26 Novozymes Biotech, Inc. Promoters for expressing genes in a fungal cell
US6787637B1 (en) 1999-05-28 2004-09-07 Neuralab Limited N-Terminal amyloid-β antibodies
UA81216C2 (en) 1999-06-01 2007-12-25 Prevention and treatment of amyloid disease
DE19932958C2 (de) 1999-07-14 2003-08-07 Walter Schubert Vorrichtung zur Bindung von Molekülen, Molekülgruppen, Molekülteilen und/oder Zellen
CA2349434A1 (en) 1999-09-03 2001-03-15 Ramot University Authority For Applied Research & Industrial Development Ltd. Agents and compositions and methods utilizing same useful in diagnosing and/or treating or preventing plaque forming diseases
US6436401B1 (en) 1999-09-14 2002-08-20 Milkhaus Laboratory, Inc. Methods for alleviating symptoms associated with diabetes and diabetic neuropathy comprising administration of low levels of antibodies
US6294171B2 (en) 1999-09-14 2001-09-25 Milkhaus Laboratory, Inc. Methods for treating disease states comprising administration of low levels of antibodies
US6187309B1 (en) 1999-09-14 2001-02-13 Milkaus Laboratory, Inc. Method for treatment of symptoms of central nervous system disorders
US6713058B2 (en) 1999-09-14 2004-03-30 Milkhaus Laboratory, Inc. Methods for alleviating symptoms associated with neuropathic conditions comprising administration of low levels of antibodies
JP5362164B2 (ja) 2000-07-07 2013-12-11 バイオアークティック ニューロサイエンス アーベー アルツハイマー病の予防及び治療
EP1172378A1 (en) * 2000-07-12 2002-01-16 Richard Dr. Dodel Human beta-amyloid antibody and use thereof for treatment of alzheimer's disease
CA2429544C (en) 2000-11-17 2010-10-19 University Of Rochester In vitro methods of producing and identifying immunoglobulin molecules in eukaryotic cells
PE20020574A1 (es) 2000-12-06 2002-07-02 Wyeth Corp Anticuerpos humanizados que reconocen el peptido amiloideo beta
US6716226B2 (en) * 2001-06-25 2004-04-06 Inscope Development, Llc Surgical clip
US7700751B2 (en) 2000-12-06 2010-04-20 Janssen Alzheimer Immunotherapy Humanized antibodies that recognize β-amyloid peptide
WO2002096948A2 (en) 2001-01-29 2002-12-05 Idec Pharmaceuticals Corporation Engineered tetravalent antibodies and methods of use
CA2436092A1 (en) 2001-01-29 2002-08-08 Idec Pharmaceutical Corporation Modified antibodies and methods of use
US7771722B2 (en) 2001-08-17 2010-08-10 Eli Lilly And Company Assay method for alzheimer's disease
US20030157641A1 (en) 2001-11-16 2003-08-21 Idec Pharmaceuticals Corporation Polycistronic expression of antibodies
US7390885B2 (en) * 2001-11-26 2008-06-24 Cell Matrix, Inc. Humanized collagen antibodies and related methods
MY139983A (en) 2002-03-12 2009-11-30 Janssen Alzheimer Immunotherap Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
US20110200609A1 (en) 2002-09-12 2011-08-18 The Regents Of The University Of California Monoclonal antibodies specific for pathological amyloid aggregates common to amyloids formed from proteins of differing sequence
TW200509968A (en) 2002-11-01 2005-03-16 Elan Pharm Inc Prevention and treatment of synucleinopathic disease
US8506959B2 (en) 2002-11-01 2013-08-13 Neotope Biosciences Limited Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic disease
US20060235207A1 (en) * 2002-11-22 2006-10-19 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibodies against lesion tissue
WO2004076677A2 (en) 2003-02-26 2004-09-10 Institute For Research In Biomedicine Monoclonal antibody production by ebv transformation of b cells
WO2004095031A1 (en) 2003-04-24 2004-11-04 Universität Zürich Method of monitoring immunotherapy
TWI374893B (en) 2003-05-30 2012-10-21 Janssen Alzheimer Immunotherap Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
WO2005018424A2 (en) * 2003-08-18 2005-03-03 Research Foundation For Mental Hygiene, Inc. Antibodies specific for fibrillar amyloid and a procedure to detect fibrillar amyloid deposits
CA2536408A1 (en) 2003-08-22 2005-03-03 Biogen Idec Ma Inc. Improved antibodies having altered effector function and methods for making the same
UA93181C2 (ru) 2004-02-23 2011-01-25 Эли Лилли Энд Компани СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИТЕЛА K Ab ПЕПТИДУ
WO2005105998A1 (ja) 2004-04-27 2005-11-10 Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute ヒト抗アミロイドβペプチド抗体およびその抗体フラグメント
ATE476993T1 (de) 2004-06-07 2010-08-15 Univ Ramot Verfahren zur passiven immunisierung gegen eine durch amyloidaggregation gekennzeichnete krankheit oder erkrankung mit vermindertem nervenentzündungsrisiko
SE0401601D0 (sv) * 2004-06-21 2004-06-21 Bioarctic Neuroscience Ab Protofibril specific antibodies and uses thereof
EA013752B1 (ru) 2004-08-09 2010-06-30 Элан Фармасьютикалз, Инк. Предупреждение и лечение синуклеинопатических и амилоидогенных заболеваний
WO2006050041A2 (en) 2004-10-28 2006-05-11 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Methods for reducing or inhibiting brain inflammation or for promoting neurogenesis
AR051800A1 (es) * 2004-12-15 2007-02-07 Wyeth Corp Anticuerpos a beta usados en mejorar la cognicion
EP1861422B1 (en) 2005-03-05 2010-02-24 Abbott GmbH & Co. KG Screening method, process for purifying of non-diffusible a-beta oligomers, selective antibodies against said non-diffusible a-beta oligomers and a process for manufacturing of said antibodies
JP2006265189A (ja) * 2005-03-24 2006-10-05 Kyoto Univ βアミロイドペプチド、及びそれを用いたアルツハイマー病治療薬又は予防薬のスクリーニング方法
ES2318918B1 (es) * 2005-04-01 2010-02-16 Biotherapix Molecular Medicines, S.L.U. Anticuerpos humanos con capacidad de union al peptido beta-amiloide y sus aplicaciones.
UY29504A1 (es) 2005-04-29 2006-10-31 Rinat Neuroscience Corp Anticuerpos dirigidos contra el péptido amiloide beta y métodos que utilizan los mismos.
AU2006318537A1 (en) 2005-11-22 2007-05-31 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Antibody treatment of Alzheimer's and related diseases
EP1963363A2 (en) 2005-11-30 2008-09-03 Abbott Laboratories Methods of preparation of recombinant forms of human beta-amyloid protein and uses of these proteins
US8691224B2 (en) 2005-11-30 2014-04-08 Abbvie Inc. Anti-Aβ globulomer 5F7 antibodies
KR20180058863A (ko) 2005-11-30 2018-06-01 애브비 인코포레이티드 아밀로이드 베타 단백질에 대한 모노클로날 항체 및 이의 용도
KR101591223B1 (ko) 2005-12-12 2016-02-04 에이씨 이뮨 에스.에이. 치료적 특성을 갖는 베타 1-42 특이적인 단일클론성 항체
US8784810B2 (en) 2006-04-18 2014-07-22 Janssen Alzheimer Immunotherapy Treatment of amyloidogenic diseases
WO2009017467A1 (en) 2007-07-27 2009-02-05 Elan Pharma International Limited Treatment of amyloidogenic diseases
US8455626B2 (en) 2006-11-30 2013-06-04 Abbott Laboratories Aβ conformer selective anti-aβ globulomer monoclonal antibodies
SI2436696T1 (sl) * 2007-01-05 2017-10-30 University Of Zurich Anti-beta-amiloidno protitelo in načini njegove uporabe
JP5558834B2 (ja) 2007-02-23 2014-07-23 ヤンセン アルツハイマー イミュノセラピー シヌクレイノパチーおよびアミロイド形成疾患（ａｍｙｌｏｉｄｏｇｅｎｉｃｄｉｓｅａｓｅ）の予防および処置
CN101970000A (zh) 2007-04-18 2011-02-09 杨森阿尔茨海默氏症免疫治疗公司 脑淀粉样血管病的预防和治疗
US8003097B2 (en) 2007-04-18 2011-08-23 Janssen Alzheimer Immunotherapy Treatment of cerebral amyloid angiopathy
JP2010536907A (ja) 2007-08-31 2010-12-02 ニューリミューン セラピューティクス エイジー 患者にアミロイドーシスおよびタンパク質凝集性障害における特異的免疫応答をもたらす方法
WO2009033743A1 (en) 2007-09-13 2009-03-19 University Of Zurich Prorektorat Forschung Monoclonal amyloid beta (abeta)-specific antibody and uses thereof
ES2442500T3 (es) 2007-10-02 2014-02-11 Csl Limited Método de purificación de anticuerpos terapéuticos y método de uso
SG185316A1 (en) 2007-10-19 2012-11-29 Immunas Pharma Inc ANTIBODY CAPABLE OF SPECIFICALLY BINDING TO Aβ OLIGOMER, AND USE THEREOF
GB0720912D0 (en) 2007-10-25 2007-12-05 Univ Cardiff Monoclonal Anitbody for APP
WO2009056490A1 (en) 2007-10-29 2009-05-07 Innogenetics Nv NEW ANTIBODIES SPECIFIC OF THE β-AMYLOID PEPTIDES AND THEIR USES AS DIAGNOSTIC AGENTS OR DRUGS
EP2207568B1 (en) 2007-11-16 2017-05-31 The Rockefeller University Antibodies specific for the protofibril form of beta-amyloid protein
ES2617604T3 (es) 2008-02-08 2017-06-19 Immunas Pharma, Inc. Anticuerpos capaces de unirse específicamente a oligómeros de beta amiloides, y su utilización
JP2011527338A (ja) 2008-07-09 2011-10-27 ユニバーシティー オブ チューリッヒ 神経新生を促進する方法
MX2011004891A (es) 2008-11-13 2011-10-06 Modgene Llc Modificacion de la carga de beta amiloide en el tejido no cerebral.
WO2010119704A1 (en) 2009-04-17 2010-10-21 Immunas Pharma, Inc. Antibodies that specifically bind to a beta oligomers and use thereof
EP2462161B1 (en) 2009-08-06 2017-03-08 Immunas Pharma, Inc. Antibodies that specifically bind to a beta oligomers and use thereof
CN102596997B (zh) 2009-08-06 2015-06-03 伊缪纳斯制药株式会社 特异性结合Aβ寡聚体的抗体及其用途

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CN101622275A (zh) 2010-01-06
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