MX2008013120A

MX2008013120A - Metodos para utilizar el receptor gpr119 para identificar compuestos utiles para incrementar la masa osea en un individuo.

Info

Publication number: MX2008013120A
Application number: MX2008013120A
Authority: MX
Inventors: Zhi-Liang Chu; James N Leonard
Original assignee: Arena Pharm Inc
Priority date: 2006-04-11
Filing date: 2007-04-10
Publication date: 2008-10-27
Also published as: TW200809200A; EP1971862A2; JP2009533055A; JP4762359B2; KR101281962B1; EP2410330A3; CY1111123T1; MEP27308A; DK1971862T3; ECSP088817A; AU2007238805B2; MA30555B1; EP2402750A1; DE602007010420D1; CA2618488A1; EP2369341A3; UA97479C2; EP1971862B1; EA201101475A1; WO2007120689A3

Abstract

La presente invención se refiere a métodos para utilizar el receptor GPR119 para identificar compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo. Los agonistas del receptor GPR119 son útiles como agentes terapéuticos para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, tal como osteoporosis, y para incrementar la masa ósea en un individuo. Los agonistas del receptor GPR119 promueven la formación de huesos en un individuo.

Description

MÉTODOS PARA UTILIZAR EL RECEPTOR GPR119 PARA IDENTIFICAR COMPUESTOS ÚTILES PARA INCREMENTAR LA MASA ÓSEA EN UN INDIVIDUO Campo de la Invención La presente invención se refiere a métodos para utilizar el receptor GPR119 para identificar compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo. Los agonistas del receptor GPR119 son útiles como agentes terapéuticos para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea baja, tal como osteoporosis, y para incrementar la masa ósea en un individuo. Los agonistas para el receptor GPR119 promueven la formación de huesos en un individuo. Antecedentes de la Invención La descripción que se encuentra a continuación está proyectada para facilitar la compresión de la presente invención, pero no pretende ni admite ser la técnica anterior a la presente invención. A. Osteoporosis La osteoporosis es una enfermedad que incapacita caracterizada por la pérdida de masa ósea y deterioro microarquitectónico de la estructura esqueletal que conduce a resistencia comprometida de los huesos, la cual predispone a un paciente a un riesgo incrementado de fracturas por fragilidad. La osteoporosis afecta más de 75 millones de personas en Europa, Japón y Estados Unidos, y origina más de 2.3 millones de fracturas en Europa y en los Estados Unidos solamente. En los Estados Unidos, la osteoporosis afecta al menos 25% de todas las mujeres blancas post-menopáusicas, y la proporción se eleva al 705 en mujeres mayores a 80 años. Una de cada tres mujeres de más de 50 años tendrá una fractura osteoporótica que origina una carga social y financiera considerable a la sociedad. La enfermedad no se limita a las mujeres; a los hombres de mayor edad también pueden verse afectados. En el año 2050, la incidencia a nivel mundial de cadera en hombres se proyecta para incrementar en un 310% y 240% en mujeres. El riesgo del tiempo de vida combinado para fracturas de cadena, antebrazo y vértebras se presentan clínicamente como de alrededor del 40%, equivalente al riesgo de enfermedad cardiovascular. Por consiguiente, las fracturas osteoporoticas originan una mortalidad y morbilidad sustancial y costo económico. Con una población que envejece cada vez más, el número de fracturas osteoporoticas y sus costos serán de al menos el doble a los siguientes 50 años, a menos que se desarrollen estrategias preventivas efectivas (ver las Publicaciones de Atik y asociados, Clin Orthop Relat Res (2006) 443:19-24; Raisz, J Clin Invest (2005) 115:3318-3325; y World Health Organization Technical Report Series 921 (2003), Prevention y Management of Osteoporosis). B. Polipéptido Insulinotrópico dependiente de Glucosa (GIP) El polipéptido insulinotrópico dependiente de glucosa (GIP, también conocido como polipéptido inhibidor gástrico) es una hormona de incretina de péptido de 42 aminoácidos que es liberada de las células K endocrinas deudonales después de la ingestión de los alimentos. La cantidad de GIP liberada depende en gran parte de la cantidad de glucosa consumida. GIP ha mostrado estimular la secreción de insulina dependiente de glucosa en células beta pancreáticas. GIP transmite sus acciones a través del receptor acoplado de proteína G especifica, es decir GIPR. Ya que GIP contiene alanina en la posición 2, es un substrato excelente para peptidasa-4 de dipeptidilo (DPP-IV), una enzima que regula la degradación de GIP. GIP(1-42) de longitud completa se convierte rápidamente en GIP(3-42) bioinactiva a los pocos minutos de secreción de la célula K del intestino. La inhibición de DPP-IV ha mostrado aumentar la bioactividad GIP. (Ver por ejemplo, la Publicación de Drucker, Cell Metab (2006) 3:153-165; Mclntosh y asociados, Regul Pept (2005) 128:159-165; Deacon, Regul Pept (2005) 128:1 17-124; y Ahren y asociados, Endocrinology (2005) 146:2055-2059). El análisis de GIP bioactivo de longitud total, por ejemplo en sangre, se puede llevar a cabo utilizando ensayos específicos N-terminal (ver por ejemplo Publicación de Deacon y asociados, J Clin Endocrinol Metab (2000) 85:3575-3581 ). Recientemente, GIP ha mostrado promover la formación de huesos. GIP ha mostrado activar receptores osteoblasticos, dando como resultado un incremento en la síntesis de colágeno tipo I y actividad de fosfatasa alcalina, ambas asociadas con formación de huesos. GIP ha mostrado inhibir la actividad de osteoclasto y diferenciación in vitro. La administración GIP ha mostrado prevenir la pérdida ósea debido a ovariectomia. Los ratones de eliminación de receptor GIP (GIPR) evidencian un tamaño de hueso disminuido, menor masa ósea, microarquitectura ósea y propiedades bioquímicas alteradas, y parámetros alterados para el volumen óseo, especialmente en la formación de huesos. (Ver las Publicaciones de Zhong y asociados, Am J Physiol Endocrinol Metab (2007) 292:E543-E548; Bollag y asociados, Endocrinology (2000) 141:1228-1235; Bollag y asociados, Mol Cell Endocrinol (2001) 177:35-41; Xie y asociados, Bone (2005) 37:759-769; y Tsukiyama y asociados, Mol Endocrinol (2006) 20: 1644-1651). La utilidad de GIP para mantener una densidad de hueso en incremento o formación, ha sido reconocida por la Oficina de Patentes y Marcas de los Estados Unidos a través de la emisión de Patente Norteamericana No. 6,410,508 para el tratamiento de mineralización ósea reducida a través de la administración de péptido GIP. Sin embargo, los agonistas de péptido GIP normales padecen de una carencia de biodisponibilidad oral, impactando negativamente el cumplimiento del paciente. Un método alternativo atractivo es desarrollar una composición oralmente activa para incrementar un nivel endógeno de actividad GIP. C. GPR119 GPR119 es un receptor acoplado por proteína G (GPR119; por ejemplo, GPR119 humano; Acceso GenBank® No. AAP72125 y alelos de los mismos; por ejemplo, ratón GPR119, Acceso GenBank® No. AY288423 y alelos de los mismos). La activación GPR119, tal como mediante un agonista conduce a la elevación del nivel de cAMP intracelular, consistente con GPR119 que es acoplado a Gs. En la literatura de patente, GPR119 ha sido referido como RUP3 (por ejemplo, WO 00/31258); GPR119 también ha sido referido como un Receptor I nsulinotrópico dependiente de Glucosa (GDIR). D. Receptores Acoplados por Proteína G Aunque existe un número de clases de receptor en humanos, el más abundante y terapéuticamente relevante está representado por la clase de receptor acoplado por proteína G (GPCR). Se estima que existe unos 30,000-40,000 genes dentro del genoma humano, y de estos, aproximadamente el 2% son estimados para codificar GPCRs. GPCRs representa un área importante para el desarrollo de productos farmacéuticos. Los fármacos activos en GPCRs tienen un beneficio terapéutico a través de un amplio espectro de enfermedades humanas, tan diversas como dolor, disfunción cognitiva, hipertensión, úlceras pépticas, rinitis y asma. De los aproximadamente 500 fármacos clínicamente comercializados, más del 30% son moduladores de la función GPCR. Estos fármacos ejercen su actividad en aproximadamente 30 GPCRs bien caracterizadas. (Ver por ejemplo la Publicación de Wise y asociados, Annu Rev Pharmacol Toxicol (2004) 44:43-66). GPCRs comparten un motivo estructural común, que tiene siete secuencias de entre 22 a 24 aminoácidos hidrofóbicos que forman siete hélices alfa, cada una de las cuales abarca la membrana (cada extensión es identificada por número, por ejemplo transmembrana-1 , (TM-1), transmembrana-2 (TM-2), etc). Las hélices de transmembrana también están unidas por hebras de aminoácidos entre la transmembrana-2 y transmembrana-3, transmembrana-4 y transmembrana-5, y transmembrana-6 y transmembrana-7 en el exterior, o rel lado "extracelular" de la membrana celular (éstas son referidas como regiones "extracelulares" 1, 2 y 3 (EC-1, EC-2 y EC-3), respectivamente). Las hélices de transmembrana también están unidas por hebras de aminoácidos entre transmembrana-1 y transmembrana-2, transmembrana-3 y transmembrana-4, y transmembrana-5 y transmembrana-6 en el interior, o lado "intracelular", de la membrana celular (éstas son referidas como regiones "intracelulares" 1, 2 y 3 (IC-1, IC-2 y IC-3), respectivamente). El término "carboxi" ("C") del receptor descansa en el espacio intracelular dentro de la célula, y el término "amino" ("N") del receptor descansa en el espacio extracelular fuera de la célula. Generalmente, cuando un ligando enlaza con un receptor (con frecuencia referido como "activación" de receptor), existe un cambio en la conformación de un receptor que facilite el acoplamiento entre la región intracelular y una "G-proteína" intracelular. Se ha reportado que GPCRs son "promiscuas" con respecto a proteínas G, es decir que GPCR puede interactuar con más de una proteína G. ver la Publicación de Kenakin, Life Sciences (1988) 43:1095-1 101. Aunque existen otras proteínas G, normalmente Gq, Gs, Gi, Gz y Go son proteínas G que han sido identificadas. El acoplamiento GPCR activado por ligandos con proteína-g, inicia un proceso de cascada de señalización (referido como "transducción de señal"). Bajo condiciones normales, la transducción de señal da como resultado finalmente la activación celular o inhibición celular. Aunque no se pretende a limitarse a teoría alguna, se considera que el lazo IC-3, así como el término carboxi del receptor, interactúan con la proteína G. También existen proteínas G promiscuas, que parecen acoplar varias clases de GPCRs a la trayectoria de fosfolipasa C, tal como G15 o G16 (Offermanns & Simón, J Biol Chem (1995) 270:15175-80), o proteínas G quiméricas diseñadas para acoplar un gran número de diferentes GPCRs a la misma trayectoria, por ejemplo, fosfolipasa C (Milligan & Rees, Trends in Pharmaceutical Sciences (1999) 20:1 18-24).

Bajo condicionas patológicas, GPCRs existe en la membrana celular en equilibrio entre dos diferentes conformaciones: un estado "inactivo" y un estado "activo". Un receptor en un estado inactivo no tiene la capacidad de enlazar a la trayectoria de transducción de señalización intracelular para iniciar una transducción de señal que conduce a una respuesta biológica. El cambio de la conformación de receptor al estado activo, permite el enlace a la trayectoria de transducción (a través de la proteína-G) y produce una respuesta biológica. Se puede estabilizar un receptor en un estado activo a través de un ligando o un compuesto tal como un fármaco. Los descubrimientos recientes, incluyendo pero no limitados de manera exclusivas a modificaciones en la secuencia de aminoácido del receptor, proporcionan medios, además de ligandos o fármacos, para promover y estabilizar el receptor en la conformación del estado activo. Esto significa estabilizar de manera efectiva el receptor en un estado activo, simulando el efecto de un enlace de ligando al receptor. La estabilización a través de dichos medios independientes de ligando, es denominado "activación de receptor constitutivo". Breve Descripción de la Invención La presente invención se refiere al descubrimiento no esperado por parte del "Solicitante", de que la administración de un agonista GPR119 es un individuo, tal como mediante administración oral, puede actuar en el receptor GPR119 para incrementar un nivel GIP en el individuo. La presente invención presentan métodos que se relacionan con GPR119 para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea baja, tal como osteoporosis, y compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo. Un agonista GPR119 es útil para promover (por ejemplo, incrementar) la formación ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el individuo es un humano. La secuencia de nucleótidos que codifica el polipéptido GPR119 humano es proporcionado en SEQ ID NO: 1. La secuencia de aminoácido en el polipéptido GPR119 humano codificado se proporciona en SEQ ID NO: 2. En un primer aspecto, la presente invención presenta un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea baja, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) contactar un compuesto de prueba con una célula huésped o con una membrana de una célula huésped que comprende un receptor acoplado con proteína G, en donde el receptor acoplado con proteína G comprende una secuencia de aminoácido seleccionado del grupo que consiste en: (i) aminoácidos 1-335 de SEQ IDNO:2; (¡i) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO:2; (¡ii) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO:2, siempre que el receptor acoplado con proteína G no comprenda la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO:2; (iv) la secuencia de aminoácidos de un receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar a través de una reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humana utilizando cebadores específicos SEQ ID NO:3 y SEQ ID NO:4; (v) la secuencia de un aminoácido de un receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO:1 ; (vi) una variante de SEQ ID NO:2; (vii) la secuencia de aminoácido de (vi) cuando se selecciona del grupo que consiste en: (a') la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G que tiene al menos 80% de identidad con SEQ ID NO:2; y (b') una secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO:2; (viii) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado por proteína G que tiene SEQ ID NO:2; y (ix) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (i) a (viii); y (b) determinar la capacidad del compuesto de prueba para estimular la funcionalidad del receptor acoplado por proteína G; en donde la capacidad del compuesto de prueba para estimular la funcionalidad del receptor acoplado por proteína G indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G comprende la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G que tiene al menos el 80% de identidad con SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G comprende una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un alelo de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un ortólogo de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un ortólogo de mamífero de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G es recombinante. En ciertas modalidades, el método es un método para identificar los secretagogos GIP. En ciertas modalidades, el método comprende identificar un agonista del receptor. En ciertas modalidades, el método comprende identificar un agonista parcial del receptor. En ciertas modalidades, el método es un método para identificar compuestos útiles para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel. En ciertas modalidades, el método es un método para identificar compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos (a) y (b) de este primer aspecto, y porque comprende además: (c) sintetizar opcionalmente un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b); (d) contactar un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b) in vitro, con una célula enteroendocri na de vertebrado o con una célula con la capacidad de secretar GIP; y (e) determinar si el compuesto estimula la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP; en donde la capacidad del compuesto de prueba para estimular la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP, indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina de vertebrado es una célula enteroendocrina de mamífero. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una célula K. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido derivado del intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido derivado de una región con alto contendido de célula K del intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido de duodeno o jejuno (ver, por ejemplo, la publicación de Sondhi y asociados, Pharmacogenomics J (2006) 6:131-140). En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una línea de célula enteroendocrina. En ciertas modalidades, la célula con la capacidad de secretar GIP es una célula recombinante construida para tener la capacidad de secretar GIP. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos (a) y (b) de este primer aspecto, y porque comprende además: (c) sintetizar opcionalmente un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b); (d) administrar un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b) para un vertebrado; y (e) determinar si el compuesto incrementa un nivel GIP en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel GIP en el vertebrado indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el nivel GIP es concentración en sangre o plasma de GIP total. En ciertas modalidades, el nivel GIP es concentración en sangre o plasma de GIP bioactivo. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano.

En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. La presente invención presenta además un método para identificar compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos (a) y (b) de este primer aspecto, y porque comprende además: (c) sintetizar opcionalmente un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b); (d) administrar un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b) para un vertebrado; y (e) determinar si el compuesto incrementa un nivel de masa ósea en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel de masa ósea en el vertebrado indica que el compuesto de prueba es un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, dicha determinación comprende medir un nivel de masa ósea en el vertebrado. En ciertas modalidades, medir un nivel de masa ósea comprende medir el nivel de masa ósea utilizando medición de absorción de rayos-X de energía doble (DXA). En ciertas modalidades, dicha medición de nivel de masa ósea utilizando DXA comprende medir una calificación-T utilizando DXA. En ciertas modalidades, la medición de una calificación-T utilizando DXA comprende medir una calificación-T en la cadera utilizando DXA. Se contempla de manera expresa que la medición de un nivel de masa ósea pueda comprender medir un nivel de masa ósea utilizando una técnica además de DXA, tal como medición de absorción de rayos-X simple (SXA) (ver, por ejemplo, la publicación de World Health Organization Technical Report Series 921 (2003), Prevention and Management of Osteoporosis). En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado o mamífero es una rata ovariectomizada o un ratón ovariectomizado. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos (a) y (b) de este primer aspecto, y porque comprende además: (c) sintetizar opcíonalmente un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b); (d) proporcionar opcionalmente un compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor en el paso (b); (e) contactar un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b) in vitro con una célula enteroendocrina de vertebrado o con una célula con la capacidad de secretar GIP; y (f) determinar si el compuesto estimula la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP; en donde la capacidad del compuesto de prueba para estimular la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina de vertebrado es una célula enteroendocrina de mamífero. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una célula K. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido derivado del intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido derivado de una región con alto contenido de célula K del intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido de duodeno y jejuno (ver, por ejemplo, la publicación Sondhi y asociados, Pharmacogenomics J (2006) 6:131-140). En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una línea de célula enteroendocrina. En ciertas modalidades, la célula con la capacidad de secretar GIP es una célula recombinante construida para tener la capacidad de secretar GIP. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos (a) y (b) de este primer aspecto, y comprende además: (c) sintetizar opcionalmente un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b); (d) proporcionar opcionalmente un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b); (e) administrar un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b) para un vertebrado; y (f) determinar si el compuesto incrementa un nivel GIP en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel GIP en el vertebrado, indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el nivel GIP es concentración en sangre o plasma de GIP total. En ciertas modalidades, el nivel GIP es concentración en sangre o plasma de GIP bioactivo. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos (a) y (b) de este primer aspecto, y comprende además: (c) sintetizar opcionalmente un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b); (d) proporcionar opcionalmente un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b)¡ (e) administrar un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b) a un vertebrado; y (f) determinar si el compuesto incrementa el nivel de masa ósea en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar el nivel de masa ósea en el vertebrado indica que el compuesto de prueba es un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, la determinación comprende medir un nivel de masa ósea en el individuo. En ciertas modalidades, medir un nivel de masa ósea comprende medir el nivel de masa ósea utilizando DXA. En ciertas modalidades, medir un nivel de masa ósea utilizando DXA comprende medir una calificación-T utilizando DXA. En ciertas modalidades, la medición de una calificación-T utilizando DXA comprende medir una calificación-T en la cadera utilizando DXA. Se contempla de manera expresa que la medición de un nivel de masa ósea puede comprender medir un nivel de masa ósea utilizando una técnica además de DXA, tal como medición de absorción de rayos-X simple (SXA) (ver, por ejemplo, la publicación de World Health Organization Technical Report Series 921 (2003), Prevention and Management of Osteoporosis). En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado o mamífero es una rata ovariectomizada o un ratón ovariectomizado. En ciertas modalidades, el secretagogo GIP identificado, o el compuesto identificado útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto identificado útil para incrementar la masa ósea en un individuo es un agonista del receptor. En algunas modalidades, el agonista es un agonista parcial. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G se acopla a una proteína G. En ciertas modalidades, la activación del receptor acoplado por proteína G incrementa un nivel de cAMP intracelular. En ciertas modalidades, la proteína G es Gs. En ciertas modalidades, la muestra de ADN humano es un ADN genómico humano. En algunas modalidades, la reacción de cadena de polimerasa es reacción de cadena de polimerasa-transcripción inversa (RT-PCR). Las técnicas RT-PCR son bien conocidas para los expertos en la técnica. En ciertas modalidades, la muestra de ADN humano es un cADN humano. En ciertas modalidades, el cADN es un tejido humano que expresa GPR119. En algunas modalidades, el tejido humano que expresa GPR119 es de páncreas o un islote pancreático. En ciertas modalidades, el cADN procede de un tipo de célula humana que expresa GPR119. En algunas modalidades, el cADN procede de una célula beta pancreática. En algunas modalidades, el cADN procede de una línea de célula pancreática. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por el polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa es SEQ ID NO:2 o un alelo del mismo. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa es un alelo de SEQ ID N0.2. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa se enlaza a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperid¡n-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista. En algunas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento. En ciertas modalidades, las condiciones de hibridación estrictas comprenden hibridar a una temperatura de 42°C una solución que comprende 50% de formamida, 5xSSC (1xSSC = 150 mM NaCI, 15 mM de citrato trisódico), 50 mM de fosfato de sodio (pH 7.6), solución de Denhardt 5x, 10% de sulfato de dextrano, y 20 µg/ml de ADN de esperma de salmón trasquilado, desnaturalizado, seguido de lavado a una temperatura de 65°C en una solución que comprende O.lxSSC. Las técnicas de hibridación también son conocidas para los expertos en el arte.

En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO:1 es SEQ ID NO:2 o un alelo del mismo. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO:1 es un alelo de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad del complemento SEQ ID NO:1 es un ortólogo de SEQ ID NO:2 En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO:1, enlaza de manera específica a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-feníl)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO:1, es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO:1, exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En ciertas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En ciertas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un GPCR. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 enlaza específicamente a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1 -il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista. En algunas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmentación. En algunas modalidades, el receptor acoplado por proteína G es parte de una proteína de fusión que comprende una proteína G. Las técnicas para elaborar una construcción de fusión GPCR:G son bien conocidas para los expertos en el arte (ver, por ejemplo, la Solicitud Internacional WO 02/42461). En ciertas modalidades, la célula huésped comprende un vector de expresión, el vector de expresión comprende un polinucleótido que codifica un receptor acoplado por proteína G. En algunas modalidades, el vector de expresión es pCMV. Este vector fue depositado con la Recolección de Cultivo Tipo Americano (ATCC) el 13 de Octubre de 1998 (10801 University Blvd., Manassas, VA 20110-2209 EUA) de acuerdo con las provisiones del Tratado de Budapest del Reconocimiento Internacional de Depósito de Microorganismos con el Propósito de Procedimiento de Patentes. El ADN se probó a través del ATCC y se determinó como viable. El ATCC tiene asignado el siguiente número de depósito para pCMV:ATCC #203351. Otros vectores de expresión adecuados podrán ser apreciados por los expertos en la técnica, y está disponible una amplia variedad de vectores de expresión (por ejemplo, de Clontech, Palo Alto, CA; Stratagene, La Jolla, CA; e Invitrogen, Carlsbad, CA). En algunas modalidades, la célula huésped es una célula de vertebrado. En algunas modalidades, la célula huésped es una célula de mamífero. En algunas modalidades, la célula huésped de mamífero, se selecciona del grupo que consiste en una célula 293, una célula 293T, una célula CHO, una célula MCB3901 y una célula COS-7. En algunas modalidades, la célula huésped es una célula de levadura. En algunas modalidades, la célula huésped es una célula de melanoforo. Otras células huésped adecuadas podrán ser fácilmente apreciadas por los expertos en la técnica, y está disponible una amplia variedad de líneas celulares en la Recolección de Cultivo Tipo Americano, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209.

En ciertas modalidades, la determinación es consistente con el receptor acoplado por proteína G que es un receptor acoplado-Gs. En algunas modalidades, la determinación es consistente con el receptor acoplado por proteína G que es acoplado a través de una proteína G promiscua, tal como Ga15 ó Ga16, la trayectoria de fosfolipasa C. Las proteínas promiscuas G son bien conocidas para los expertos en el arte (ver, por ejemplo, la publicación de Offermanns y asociados., J Bio Chem (1995) 270:15175-15 80). En algunas modalidades, la determinación es consistente con el receptor acoplado por proteína G que es acoplado a través de una proteína quimérica G, por ejemplo, para la trayectoria de fosfolipasa C. Las proteínas quiméricas G son bien conocidas para los expertos en el arte (ver, por ejemplo, la publicación de Milligan y asociados, Trends in Pharmaceutical Sciences (1999) 20:118-124; y WO 02/42461). En algunas modalidades, la determinación es a través de la medición de un nivel de un segundo mensajero. En algunas modalidades, la determinación es a través de la medida de un nivel del segundo mensajero seleccionado del grupo que consiste en AMP cíclico (cAMP), GMP cíclico (cGMP), 1 ,4,5-trifosfato de inositol (I P3), diacilgl icerol (DAG), actividad de cinasa MAP, actividad de cinasa-1 de cinasa MAPK-ERK (MEKK1), y Ca2 + . En algunas modalidades preferidas, un segundo mensajero es cAMP. En ciertas modalidades, se incrementa un nivel de cAMP intracelular. En ciertas modalidades, la determinación se lleva a cabo utilizando una membrana que comprende el receptor acoplado por proteína G. En ciertas modalidades, la determinación es a través del uso de un ensayo de melanoforo. En ciertas modalidades, el nivel de dispersión de pigmento se incrementa. En algunas modalidades, la determinación es a través de un ensayo reportero. En algunas modalidades, el ensayo reportero es un ensayo reportero CRE-Luc. En algunas modalidades, la determinación es a través de la medición de una actividad transmitida incrementando un nivel de cAMP intracelular. En algunas modalidades, la determinación es a través de un ensayo reportero CRE-Luc. En ciertas modalidades, el- nivel de actividad de luciferasa se incrementa. En algunas modalidades, la determinación es a través de la medida de GTPyS que enlaza a la membrana que comprende el receptor acoplado por proteína G. En ciertas modalidades, el GTPyS se etiqueta con [31S]. En ciertas modalidades, el GTPyS que enlaza a la membrana que comprende el GPCR, se incrementa. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un polipéptido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígeno del mismo. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña,' siempre que la molécula pequeña no sea un lípido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un polipéptido o un lípido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es un polipéptido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es un polipéptido, siempre que el polipéptido no sea un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígeno del mismo. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es un lípido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba no es un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígeno del mismo. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígeno del mismo. En algunas modalidades, el método comprende además el paso de determinar opcionalmente la estructura del secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En algunas modalidades, el método comprende además el paso de proporcionar opcionalmente el nombre o estructura del secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En algunas modalidades, el método comprende además el paso de producir o sintetizar opcionalmente el secretagogo GIP, el 'compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En algunas modalidades, el método comprende además el paso de formular el secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo en una composición farmacéutica. En un segundo aspecto, la presente invención presenta un método para identificar secretagogos GIP, compuesto útiles para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) contactar un compuesto in vitro con una célula enteroendocrina de vertebrado o con una célula con la capacidad de secretar GIP, habiendo sido identificado el compuesto por un método de acuerdo con el primer aspecto; y (b) determinar si el compuesto estimula la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP; en donde la capacidad del compuesto de prueba para estimular la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP indica además que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina de vertebrado es una célula enteroendocrina de mamífero. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una célula K. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido derivado del intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende un tejido derivado de una región con alto contenido de célula K del intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido de duodeno y jejuno (ver, por ejemplo, la publicación de Sondhi y asociados, Pharmacogenomics J (2006) 6:131-140). En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una línea de célula enteroendocrina. En ciertas modalidades, la célula con la capacidad de secretar GIP es una célula recombinante construida para tener la capacidad de secretar GIP. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para tratar o prevenir condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) administrar un compuesto a un vertebrado, habiendo sido identificado el compuesto por un método de acuerdo con el primer aspecto; y (b) determinar si el compuesto incrementa un nivel GIP en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel GIP en el vertebrado, indica además que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el nivel GIP es una concentración en sangre o plasma de GIP total. En ciertas modalidades, el nivel GIP es una concentración en sangre o plasma de GIP bioactivo. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) administrar un compuesto a un vertebrado, habiendo sido identificado el compuesto por un método tal como se describe en el primer aspecto; y (b) determinar si el compuesto incrementa un nivel de masa ósea en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel de masa ósea en el vertebrado, indica en forma adicional que el compuesto de prueba es un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el nivel GIP es una concentración de sangre o plasma de GIP total. En ciertas modalidades, el nivel GIP es una concentración de sangre o plasma de GIP bioactivo. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, la determinación comprende medir un nivel de masa ósea en el vertebrado. En ciertas modalidades, la medición del nivel de masa ósea comprende medir el nivel de masa ósea utilizando medición de absorción de rayos-X de energía dual (DXA). En ciertas modalidades, la medición de un nivel de la masa ósea utilizando DXA comprende medir una calificación-T utilizando DXA. En ciertas modalidades, la medición de la calificación-T utilizando DXA comprende medir una calificación-T en la cadera utilizando DXA. Se contempla de manera expresa que la medición de un nivel de masa ósea puede comprender medir un nivel de masa ósea utilizando una técnica además de DXA, tal como medición de absorción de rayos-X simple (SXA) (ver, por ejemplo, la publicación de World Health Organization Technical Report Series 921 (2003), Prevention and Management of Osteoporosis). En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado o mamífero es una rata ovariectomizada o un ratón ovariectomizado. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un polipéptido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígenos del mismo. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un lípido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un polipéptido o un lípido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es un polipéptido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es un polipéptido, siempre que el polipéptido no sea un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígenos del mismo. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es un lípido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba no es un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígenos del mismo. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígenos del mismo. En un tercer aspecto, la presente invención presenta un método para identificar secretagogos GIP, compuesto útiles para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) contactar un agonista GPR 19 in vitro con una célula enteroendocrina de vertebrado o con una célula con la capacidad de secretar GIP; y (b) determinar si el agonista GPR119 estimula la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP; en donde la capacidad del agonista GPR119 para estimular la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP indica que el agonista GPR119 es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina de vertebrado es una célula enteroendocrina de mamífero. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una célula K. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido derivado del intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende un tejido derivado de una región con alto contenido de célula K del intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido de duodeno y jejuno (ver, por ejemplo, la publicación de Sondhi y asociados, Pharmacogenomics J (2006) 6:131-140). En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una línea de célula enteroendocrina. En ciertas modalidades, la célula con la capacidad de secretar GIP es una célula recombinante construida para tener la capacidad de secretar GIP. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) administrar un agonista GPR119 a un vertebrado; y (b) determinar si el agonista GPR119 incrementa un nivel GIP en el vertebrado; en donde la capacidad del agonista GPR119 para incrementar un nivel GIP en el vertebrado, indica que el agonista GPR119 es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el nivel GIP es una concentración de sangre o plasma de GIP total. En ciertas modalidades, el nivel GIP es una concentración de sangre o plasma de GIP bioactivo. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) administrar un agonista GPR119 a un vertebrado; y (b) determinar si el agonista GPR119 incrementa un nivel de masa ósea en el vertebrado; en donde la capacidad del agonista GPR119 para incrementar un nivel de masa ósea en el vertebrado indica que el agonista GPR119 es un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el nivel GIP es una concentración de sangre o plasma de GIP total. En ciertas modalidades, el nivel GIP es una concentración de sangre o plasma de GIP bioactivo. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, la determinación comprende medir un nivel de masa ósea en el vertebrado. En ciertas modalidades, la medición del nivel de masa ósea comprende medir el nivel de masa ósea utilizando medición de absorción de rayos-X de energía dual (DXA). En ciertas modalidades, la medición de un nivel de la masa ósea utilizando DXA comprende medir una calificación-T utilizando DXA. En ciertas modalidades, la medición de la calificación-T utilizando DXA comprende medir una calificación-T en la cadera utilizando DXA. Se contempla de manera expresa que la medición de un nivel de masa ósea puede comprender medir un nivel de masa ósea utilizando una técnica además de DXA, tal como medición de absorción de rayos-X simple (SXA) (ver, por ejemplo, la publicación de World Health Organization Technical Report Series 921 (2003), Prevention and Management of Osteoporosis). En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado o mamífero es una rata ovariectomizada o un ratón ovariectomizado. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 es un agonista de un GPR119 endógeno. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 es un agonista de GPR119 humano. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 es un agonista parcial GPR119. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 es un agonista GPR119 selectivo. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 es una molécula pequeña. En algunas modalidades, la molécula pequeña no es un polipéptido. En algunas modalidades, la molécula pequeña no es un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígenos del mismo. En algunas modalidades, la molécula pequeña no es un lípido. En algunas modalidades, la molécula pequeña no es un polipéptido o un lípido. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 está disponible en forma oral. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 tiene un valor EC50 menor aproximadamente a 10 µ?, menor aproximadamente a 1 µ?, menor aproximadamente a 100 nM, menor aproximadamente a 75 nM, menor aproximadamente a 50 nM, menor aproximadamente a 25 nM, menor aproximadamente a 15 nM, menor aproximadamente a 10 nM, menor aproximadamente a 5 nM, menor aproximadamente a 4 nM, menor aproximadamente a 3 nM, menor aproximadamente a 2 nM, o menor aproximadamente a 1 nM. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 tiene un valor EC50 menor aproximadamente a 10 µ?, menor aproximadamente a 1 µ?, menor aproximadamente a 100 nM, menor aproximadamente a 75 nM, menor aproximadamente a 50 nM, menor aproximadamente a 25 nM, menor aproximadamente a 15 nM, menor aproximadamente a 10 nM, menor aproximadamente a 5 nM, menor aproximadamente a 4 nM, menor aproximadamente a 3 nM, menor aproximadamente a 2 nM, o menor aproximadamente a 1 nM en GPR119 humano que tiene SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el agonista GPE119 tiene un valor EC50 menor aproximadamente a 10 µ?, menor aproximadamente a 1 µ?, menor aproximadamente a 100 nM, menor aproximadamente a 75 nM, menor aproximadamente a 50 nM, menor aproximadamente a 25 nM, menor aproximadamente a 15 nM, menor aproximadamente a 10 nM, menor aproximadamente a 5 nM, menor aproximadamente a 4 nM, menor aproximadamente a 3 nM, menor aproximadamente a 2 nM, o menor aproximadamente a 1 nM en GPR119 humano que tiene SEQ ID NO:2 en el ensayo de ciclasa de adenililo (ensayo de ciclasa de adenililo de ejemplo se proporciona en el Ejemplo 7' y en el Ejemplo 8, infra). En ciertas modalidades, el agonista EGP119 tiene un valor EC50 menor aproximadamente a 10 µ?, menor aproximadamente a 1 µ?, menor aproximadamente a 100 nM, menor aproximadamente a 75 nM, menor aproximadamente a 50 nM, menor aproximadamente a 25 nM, menor aproximadamente a 15 nM, menor aproximadamente a 10 nM, menor aproximadamente a 5 nM, menor aproximadamente a 4 nM, menor aproximadamente a 3 nM, menor aproximadamente a 2 nM, o menor aproximadamente a 1 nM en GPR119 humano que tiene SEQ ID NO:2 en el ensayo de melanoforo (ensayo de melanoforo de ejemplo se proporciona en el Ejemplo 9, infra). Se describen agonistas GPR119 de ejemplo, por ejemplo, en la Solicitud Internacional No. PCT/US2004/001267 (publicada como WO 04/065380); Solicitud Internacional No. PCT/US2004/005555 (publicada como WO 04/076413); Solicitud Internacional No. PCT/US2004/022327 (publicada como WO 05/007647); Solicitud Internacional No. PCT/US2004/022417 (publicada como WO 05/007658); Solicitud Internacional No. PCT/US2005/019318 (publicada como WO 2005/121121); Solicitud Internacional No. PCT/G B2004/050046 (publicada como WO 2005/061489); Solicitud Internacional No. PCT/US06/00567 (publicada como WO 2006/083491); Solicitud Internacional No. PCT/GB2005/050264 (publicada como WO 2006/067531 ); Solicitud Internacional No. PCT/G B2005/050265 (publicada como WO 2006/067532); Solicitud Internacional No. PCT/GB2005/050266 (publicada como WO 2006/070208); Solicitud Internacional No. PCT/J P02/09350 (publicada como WO 03/026661); Solicitud Internacional No. PCT/J P2005/018412 (publicada como WO 06/040966); Solicitud Internacional No. PCT/JP2005/019000 (publicada como WO 2006/043490); Solicitud Internacional No. PCT/GB2006/050176 (publicada como WO 2007/003960); Solicitud Internacional No. PCT/GB2006/050177 (publicada como WO 2007/003961); Solicitud Internacional No. PCT/G B2006/050178 (publicada como WO 2007/003962); Solicitud Internacional No. PCT/GB2006/050182 (publicada como WO 2007/003964); y Solicitud Internacional No. PCT/J P02/09350 (publicada como WO 03/026661). En ciertas modalidades, el método comprende proporcionar el agonista GPR119. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 se puede identificar a través de un método de acuerdo con el primer aspecto. En ciertas modalidades, el método comprende llevar a cabo un método de acuerdo con el primer aspecto para identificar el agonista GPR119. En ciertas modalidades, el método comprende haber identificado el agonista GPR119 a través de un método de acuerdo con el primer aspecto. En un cuarto aspecto, la presente invención presenta un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) contactar un receptor acoplado por proteína G con un ligando conocido opcionalmente etiquetado para el receptor en la presencia o ausencia de un compuesto de prueba, en donde el receptor acoplado por proteína G comprende una secuencia de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en: (i) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO:2; (ii) aminoácidos de 2-335 de SEQ ID NO:2; (iii) aminoácidos de 2-335 de SEQ ID NO:2, siempre que el receptor no comprenda la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO:2; (iv) la secuencia de aminoácido del receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humano que utiliza cebadores específicos SEQ ID NO:3 y SEQ ID NO:4; (v) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 ; (vi) una variante de SEQ ID NO:2; (vii) la secuencia de aminoácido de (vi), cuando se selecciona del grupo que consiste en: (a') la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G que tiene al menos 80% de identidad con SEQ ID NO:2; y (b') la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO:2; (viii) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado por proteína G que tiene SEQ ID NO:2; y (ix) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (i) a (viii); y (b) detectar el complejo entre el ligando conocido y el receptor; y (c) determinar si menos del complejo se forma en la presencia del compuesto de prueba que en la ausencia del compuesto de prueba; en donde la determinación indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir un condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G comprende la secuencia de aminoácido del receptor acoplado por proteína G que tiene aproximadamente 80% de identidad con SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el receptor comprende la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un alelo de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un ortólogo de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un ortólogo mamífero de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G es recombinante. En ciertas modalidades, el método es un método para identificar secretagogos GIP. En ciertas modalidades, el método es un método para identificar compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea en bajo nivel. En ciertas modalidades, el método es un método para identificar compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el ligando conocido es un ligando o agonista de un receptor GPR119 de vertebrado endógeno, mamífero o humano. En ciertas modalidades, el ligando conocido es un agonista conocido de un receptor GPR119 de vertebrado endógeno, mamífero o humano. En ciertas modalidades, el ligando conocido es un ligando o agonista de un receptor GPR119 humano endógeno. En ciertas modalidades, el ligando conocido es idéntico a un compuesto descrito en, por ejemplo, en la Solicitud Internacional No. PCT/US2004/001267 (publicada como WO 04/065380); Solicitud Internacional No. PCT/US2004/005555 (publicada como WO 04/076413); Solicitud Internacional No. PCT/US2004/022327 (publicada como WO 05/007647); Solicitud Internacional No. PCT/US2004/022417 (publicada como WO 05/007658); Solicitud Internacional No. PCT/US2005/019318 (publicada como WO 2005/ 21121); Solicitud Internacional No. PCT/G B2004/050046 (publicada como WO 2005/061489); Solicitud Internacional No. PCT/US06/00567 (publicada como WO 2006/083491); Solicitud Internacional No. PCT/G B2005/050264 (publicada como WO 2006/067531 ); Solicitud Internacional No. PCT/GB2005/050265 (publicada como WO 2006/067532); Solicitud Internacional No. PCT/GB2005/050266 (publicada como WO 2006/070208); Solicitud Internacional No. PCT/J P02/09350 (publicada como WO 03/026661); Solicitud Internacional No. PCT/J P2005/018412 (publicada como WO 06/040966); Solicitud Internacional No. PCT/JP2005/019000 (publicada como WO 2006/043490); Solicitud Internacional No. PCT/G B2006/050176 (publicada como WO 2007/003960); Solicitud Internacional No. PCT/GB2006/050177 (publicada como WO 2007/003961 ); Solicitud Internacional No. PCT/GB2006/050178 (publicada como WO 2007/003962); Solicitud Internacional No. PCT/GB2006/050182 (publicada como WO 2007/003964); ó Solicitud Internacional No. PCT/J P02/09350 (publicada como WO 03/026661). En ciertas modalidades, el ligando conocido es (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina. En ciertas modalidades, el ligando conocido es un ligando endógeno de un receptor GPR119 de vertebrado endógeno, mamífero o humano. En ciertas modalidades, el ligando conocido opcionalmente etiquetado es un ligando conocido etiquetado. En ciertas modalidades, el ligando conocido etiquetado es un ligando conocido radioetiquetado. Las técnicas para radioetiquetar un compuesto, tal como para etiquetar un ligando conocido de un receptor acoplado por proteína G de la presente invención, son conocidas para los expertos en la técnica. Ver, por ejemplo, la Solicitud Internacional WO 04/065380. También ver, por ejemplo, el Ejemplo 11, infra.

Las técnicas para detectar el complejo entre un receptor acoplado por proteína G y un compuesto conocido por ser un ligando del receptor acoplado por proteína G, son conocidas para los expertos en la técnica. Ver por ejemplo, la Solicitud Internacional WO 04/065380. También ver, por ejemplo, el Ejemplo 12, infra. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos (a) a (c) de este cuarto aspecto, y porque comprende además: (d) sintetizar opcionalmente un compuesto en cuya presencia se forme menos de dicho compuesto en el paso (c); (e) contactar un compuesto en cuya presencia, se forme menos de dicho compuesto en el paso (c) in vitro, con una célula enteroendocri na de vertebrado o con una célula con la capacidad de secretar GIP; y (f) determinar si el compuesto estimula la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP; en donde la capacidad del compuesto de prueba para estimular la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP, indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, la célula enteroendocri na de vertebrado es una célula enteroendocrina de mamífero. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una célula K. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido derivado de intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido derivado de una región con alto contenido de célula K del intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido de duodeno o jejuno (ver, por ejemplo, la publicación de Sondhi y asociados, Pharmacogenomics J (2006) 6:131-140). En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una línea de célula enteroendocrina. En ciertas modalidades, la célula con la capacidad de secretar GIP es una célula recombinante construida para tener la capacidad de secretar GIP. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos (a) a (c) de este cuarto aspecto, y por que comprende además: (d) sintetizar opcionalmente un compuesto, en cuya presencia se forme menos de dicho compuesto en el paso (c); (e) administrar un compuesto, en cuya presencia se forme menos de dicho compuesto en el paso (c) a un vertebrado; y (f) determinar si el compuesto incrementa un nivel GIP en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel GIP en el vertebrado indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. La presente invención presenta además un método para identificar compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos (a) a (c) de este cuarto aspecto, y por que comprende además: (d) sintetizar opcionalmente un compuesto en cuya presencia se forme menos de dicho compuesto en el paso (c); (e) administrar un compuesto en cuya presencia se forme menos de dicho compuesto en el paso (c) a un vertebrado; y (f) determinar si el compuesto incrementa el nivel de masa ósea en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar el nivel de masa ósea en el vertebrado indica que el compuesto de prueba es un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, la determinación comprende medir un nivel de masa ósea en el individuo. En ciertas modalidades, la medición de un nivel de masa ósea comprende medir el nivel de masa ósea utilizando DXA. En ciertas modalidades, la medición de un nivel de masa ósea utilizando DXA comprende medir la calificación-T utilizando DXA. En ciertas modalidades, la medición de una calificación-T utilizando DXA comprende medir una calificación-T en la cadera utilizando DXA. Se contempla de manera expresa que la medición de un nivel de masa ósea puede comprender medir el nivel de masa ósea utilizando una técnica además de DXA, tal como medición de absorción de rayos-X simple (SXA) (ver, por ejemplo, la publicación de World Health Organization Technical Report Series 921 (2003), Prevention and Management of Osteoporosis). En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado o mamífero es una rata ovariectomizada o un ratón ovariectomizado. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos (a) a (c) de este cuarto aspecto, y porque comprende además: (d) sintetizar opcionalmente un compuesto en cuya presencia se forme menos de dicho compuesto de acuerdo con el paso (c); (e) proporcionar opcionalmente un compuesto en cuya presencia se forme menos de dicho compuesto de acuerdo con el paso (c); (f) contactar un compuesto en cuya presencia se forme menos de dicho compuesto de acuerdo con el paso (c) in vitro, con una célula enteroendocrina de vertebrado o con una célula con la capacidad de secretar GIP; y (g) determinar si el compuesto estimula la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP; en donde la capacidad del compuesto de prueba para estimular la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina de vertebrado es una célula enteroendocrina de mamífero. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una célula K. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido derivado de intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido derivado de una región con alto contenido de célula K del intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende un tejido duodeno o jejuno (ver, por ejemplo, la publicación de Sondhi y asociados, Pharmacogenomics J (2006) 6:131-140). En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una línea de célula enteroendocrina. En ciertas modalidades, la célula con la capacidad de secretar GIP es una célula recombinante construida para tener la capacidad de secretar GIP. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos (a) a (c) de este cuarto aspecto, y por que comprende además: (d) sintetizar opcionalmente un compuesto en cuya presencia se forme menos de dicho compuesto de acuerdo con el paso (c); (e) proporcionar opcionalmente un compuesto en cuya presencia se forme menos de dicho compuesto de acuerdo con el paso (c); (f) administrar un compuesto en cuya presencia se forme menos de dicho compuesto en el paso (c) a un vertebrado; y (g) determinar si el compuesto incrementa un nivel GIP en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel GIP en el vertebrado indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos (a) a (c) de este cuarto aspecto, y por que comprende además: (d) sintetizar opcionalmente un compuesto en cuya presencia se forme menos de dicho compuesto de acuerdo con el paso (c); (e) proporcionar opcionalmente un compuesto en cuya presencia se forme menos de dicho compuesto de acuerdo con el paso (c); (f) administrar un compuesto en cuya presencia se forme menos de dicho compuesto en el paso (c) a un vertebrado; y (g) determinar si el compuesto incrementa un nivel de masa ósea en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel de masa ósea en el vertebrado indica que el compuesto de prueba es un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, la determinación comprende medir un nivel de masa ósea en el individuo. En ciertas modalidades, la medición de un nivel de masa ósea comprende medir el nivel de masa ósea utilizando DXA. En ciertas modalidades, la medición de un nivel de masa ósea utilizando DXA comprende medir una calificación-T utilizando DXA. En ciertas modalidades, la medición de una calificación-T utilizando DXA comprende medir una calificación-T en la cadera utilizando DXA. Se contempla de manera expresa que la medición de un nivel de masa ósea puede comprender medir el nivel de masa ósea utilizando una técnica además de DXA, tal como medición de absorción de rayos-X simple (SXA) (ver, por ejemplo, la publicación de World Health Organization Technical Report Series 921 (2003), Prevention and Management of Osteoporosis). En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado o mamífero es una rata ovariectomizada o un ratón ovariectomizado. En ciertas modalidades, la muestra de ADN humano es un ADN genómico humano. En algunas modalidades, la reacción de cadena de polimerasa es reacción de cadena de polimerasa-transcripción inversa (RT-PCR). Las técnicas RT-PCR son bien conocidas para los expertos en la técnica. En ciertas modalidades, la muestra de ADN humano es cADN humano. En ciertas modalidades, el cADN es de un tejido humano que expresa GPR119. En algunas modalidades, el tejido humano que expresa GPR119 es páncreas o islote de páncreas. En ciertas modalidades, el cADN es de un tipo de célula humana que expresa GPR119. En algunas modalidades, el cADN es de una célula beta pancreática. En algunas modalidades, el cADN es de una línea de célula pancreática. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por el polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa es SEQ ID NO:2 o un alelo del mismo. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que es amplificable a través de una reacción de cadena de polimerasa es un alelo de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa enlaza en forma específica a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1 -il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1 -il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista. En algunas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento. En ciertas modalidades, las condiciones de hibridación estrictas (por ejemplo, condiciones de alta rigurosidad) comprenden hibridación a una temperatura de 42°C en una solución que comprende 50% de formamida, 5xSSC (1xSSC = 150 mM NaCI, 15 mM de citrato trisódico), 50 mM de fosfato de sodio (pH 7.6), solución de Denhardt 5x, 10% de sulfato de dextrano, y 20 µg/ml de ADN de esperma de salmón trasquilado, desnaturalizado, seguido de lavado a una temperatura de 65°C en una solución que comprende O.lxSSC. Las técnicas de hibridación son conocidas para los expertos en la técnica. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO:1 es SEQ ID NO:2 o un alelo del mismo. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO:1 es un alelo de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO:1 es un ortólogo de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO:1, enlaza en forma específica a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadíazol-5-il)-p¡peridin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4- il}-amina. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO:1, es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista. En algunas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO:1, exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar el nivel de cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un GPCR. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 enlaza específicamente a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-feníl)-{6-[4-(3-¡sopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pírimidin-4-il}-amína. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxad¡azol-5-il)-piperidin-1 -il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-am¡na es un agonista. En algunas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar el nivel de un cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento. En algunas modalidades, el receptor acoplado por proteína G es parte de una proteína de fusión que comprende una proteína G. Las técnicas para elaborar una construcción de fusión GPCR:G son conocidas para los expertos en la técnica (ver, por ejemplo, la Solicitud Internacional WO 02/42461). En ciertas modalidades, la determinación se lleva a cabo utilizando una célula huésped que comprende el receptor acoplado por proteína G. En algunas modalidades, la célula huésped comprende un vector de expresión, el vector de expresión comprende un polinucleótido que codifica el GPCR. En algunas modalidades, el vector de expresión es pCMV. Este vector fue depositado con la Recolección de Cultivo Tipo Americano (ATCC) el 13 de Octubre de 1998 (10801 University Blvd., Manassas, VA 20110-2209 EUA) bajo las provisiones del Tratado de Budapest bajo el Reconocimiento Internacional de Depósito de Microorganismos para el Propósito de Procedimiento de Patentes. El ADN se probó mediante ATCC y se determinó como viable. El ATCC tuvo asignado el siguiente número de depósito pCMV:ATCC #203351. Otros vectores de expresión adecuados podrán ser fácilmente apreciados por los expertos en la técnica, y una amplia variedad de vectores de expresión están comercialmente disponibles (por ejemplo, en Clontech, Palo Alto, CA; Stratagene, La Jolla, CA; e Invitrogen, Carlsbad, CA). En algunas modalidades, la célula huésped es una célula de vertebrado. En algunas modalidades, la célula huésped es una célula de mamífero. En algunas modalidades, la célula huésped de mamífero es seleccionada del grupo que consiste en una célula 293, una célula 293T, una célula CHO, una célula MCB3901 y una célula COS-7. En algunas modalidades, la célula huésped es una célula de levadura. En algunas modalidades, la célula huésped es una célula de melanoforo. Otras células huésped adecuadas podrán ser fácilmente apreciadas por los expertos en la técnica, y una amplia variedad de líneas celulares está disponible en la Recolección de Cultivo Tipo Americano, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209. En ciertas modalidades, la determinación se lleva a cabo utilizando membranas que comprenden el receptor acoplado por proteína G. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un polipéptido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígeno del mismo. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un lípido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un polipéptido o un lípido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es un polipéptido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es un polipéptido, siempre que el polipéptido no sea un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígeno del mismo. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es un lípido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba no es un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígeno del mismo. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígeno del mismo. En algunas modalidades, el método comprende- además el paso de determinar opcionalmente la estructura del secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En algunas modalidades, el método comprende además el paso de proporcionar opcionalmente el nombre o estructura del secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En algunas modalidades, el método comprende además el paso de producir o sintetizar opcionalmente el secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En algunas modalidades, el método comprende además el paso de formular el secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo en una composición farmacéutica. En un quinto aspecto, la presente invención presenta un método para clasificar compuestos de prueba para identificar un secretagogo GIP, un compuesto para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto para incrementar la masa ósea en un individuo, el cual está caracterizado por utilizar el receptor acoplado por proteína G que comprende una secuencia de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en: (a) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO:2; (b) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO:2; (c) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO:2, en donde el GPCR no comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO:2; (d) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humano utilizando cebadores específicos SEQ ID NO:3 y SEQ ID NO:4; (e) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento SEQ ID NO:1 ; (f) una variante de SEQ ID NO:2; (g) una secuencia de aminoácido de (f) cuando se selecciona del grupo que consiste en: (i) la secuencia de aminoácido del receptor acoplado por proteína G que tiene al menos aproximadamente 80% de identidad con la SEQ ID NO:2; y (ii) la secuencia de aminoácido del receptor acoplado por proteína G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO:2; (h) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado por proteína G que tiene SEQ ID NO:2; y (i) un fragmento biológicamente activo de cualquiera de uno de (a) a (h). En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G comprende la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G que tiene al menos aproximadamente 80% de identidad con SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el receptor comprende una secuencia de aminoácido de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un alelo de SEQ ID NO:2.

En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un ortólogo de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un ortólogo de mamífero de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G es recombinante. En ciertas modalidades, el método comprende identificar un agonista del receptor. En ciertas modalidades, el método comprende identificar un agonista parcial del receptor. En algunas modalidades, el método comprende además el paso de formular el secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo en una composición farmacéutica. En un sexto aspecto, la presente invención presenta un método que comprende haber identificado un secretagogo GIP, un compuesto para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto para incrementar la masa ósea en un individuo de acuerdo con el primer aspecto, el segundo aspecto, el tercer aspecto, el cuarto aspecto o el quinto aspecto, formulando el secretagogo GIP, el compuesto para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto para incrementar la masa ósea en un individuo en una composición farmacéutica.

En un séptimo aspecto, la presente invención presenta el uso de un receptor acoplado por proteína G para clasificar compuestos de prueba en la forma de secretagogos GIP, compuestos para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos para incrementar la masa ósea en un individuo, en donde el receptor acoplado por proteína G comprende una secuencia de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en: (a) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO:2; (b) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO:2; (c) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO:2, en donde el GPCR no comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO:2; (d) la secuencia de aminoácido del receptor acoplado por proteína G codificada por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humano utilizando cebadores específicos SEQ ID NO:3 y SEQ ID NO:4; (e) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que hibrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO:1 ; (f) una variante de SEQ ID NO:2; (g) la secuencia de aminoácido de (f) cuando se selecciona del grupo que consiste en: (i) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con la SEQ ID NO:2; y (ii) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO:2; (h) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa del receptor acoplado por proteína G que tiene SEQ ID NO:2; y (i) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (a) a (h). En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G comprende la secuencia de aminoácido del receptor acoplado por proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el receptor comprende la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un alelo de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un ortólogo de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO:2 es un ortólogo de mamífero de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el receptor es recombinante. En ciertas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña. En ciertas modalidades, el compuesto de prueba es un agonista GPR119. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 es un agonista de un GPR119 endógeno. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 es un agonista de GPR119 humano. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 es un agonista GPR119 parcial. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 es un agonista GPR119 selectivo. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 es una molécula pequeña. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 está disponible en forma oral. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 tiene un valor EC50 menor aproximadamente a 10 µ?, menor aproximadamente a 1 µ?, menor aproximadamente a 100 nM, menor aproximadamente a 75 nM, menor aproximadamente a 50 nM, menor aproximadamente a 25 nM, menor aproximadamente a 15 nM, menor aproximadamente a 10 nM, menor aproximadamente a 5 nM, menor aproximadamente a 4 nM, menor aproximadamente a 3 nM, menor aproximadamente a 2 nM, o menor aproximadamente a 1 nM. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 tiene un valor EC50 menor aproximadamente a 10 µ?, menor aproximadamente a 1 µ?, menor aproximadamente a 100 nM, menor aproximadamente a 75 nM, menor aproximadamente a 50 nM, menor aproximadamente a 25 nM, menor aproximadamente a 15 nM, menor aproximadamente a 10 nM, menor aproximadamente a 5 nM, menor aproximadamente a 4 nM, menor aproximadamente a 3 nM, menor aproximadamente a 2 nM, o menor aproximadamente a 1 nM en GPR119 humano que tiene SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el agonista GPE119 tiene un valor EC50 menor aproximadamente a 10 µ?, menor aproximadamente a 1 µ?, menor aproximadamente a 100 nM, menor aproximadamente a 75 nM, menor aproximadamente a 50 nM, menor aproximadamente a 25 nM, menor aproximadamente a 15 nM, menor aproximadamente a 10 nM, menor aproximadamente a 5 nM, menor aproximadamente a 4 nM, menor aproximadamente a 3 nM, menor aproximadamente a 2 nM, o menor aproximadamente a 1 nM en GPR119 humano que tiene SEQ ID NO:2 en el ensayo de ciclasa de adenililo (ensayo de ciclasa de adenililo de ejemplo se proporciona en el Ejemplo 7 y en el Ejemplo 8, infra). En ciertas modalidades, el agonista EGP119 tiene un valor EC50 menor aproximadamente a 10 µ?, menor aproximadamente a 1 µ?, menor aproximadamente a 100 nM, menor aproximadamente a 75 nM, menor aproximadamente a 50 nM, menor aproximadamente a 25 nM, menor aproximadamente a 15 nM, menor aproximadamente a 10 nM, menor aproximadamente a 5 nM, menor aproximadamente a 4 nM, menor aproximadamente a 3 nM, menor aproximadamente a 2 nM, o menor aproximadamente a 1 nM en GPR119 humano que tiene SEQ ID NO:2 en el ensayo de melanoforo (ensayo de melanoforo de ejemplo se proporciona en el Ejemplo 9, infra). Se describen agonistas GPR119 de ejemplo, por ejemplo, en la Solicitud Internacional No. PCT/US2004/001267 (publicada como WO 04/065380); Solicitud Internacional No. PCT/US2004/005555 (publicada como WO 04/076413); Solicitud Internacional No. PCT/US2004/022327 (publicada como WO 05/007647); Solicitud Internacional No. PCT/US2004/022417 (publicada como WO 05/007658); Solicitud Internacional No. PCT/US2005/019318 (publicada como WO 2005/121121); Solicitud Internacional No. PCT/GB2004/050046 (publicada como WO 2005/061489); Solicitud Internacional No. PCT/US06/00567 (publicada como WO 2006/083491); Solicitud Internacional No. PCT/G B2005/050264 (publicada como WO 2006/067531); Solicitud Internacional No. PCT/G B2005/050265 (publicada como WO 2006/067532); Solicitud Internacional No. PCT/GB2005/050266 (publicada como WO 2006/070208); Solicitud Internacional No. PCT/J P02/09350 (publicada como WO 03/026661); Solicitud Internacional No. PCT/J P2005/018412 (publicada como WO 06/040966); Solicitud Internacional No. PCT/JP2005/019000 (publicada como WO 2006/043490); Solicitud Internacional No. PCT/G B2006/050176 (publicada como WO 2007/003960); Solicitud Internacional No. PCT/GB2006/050177 (publicada como WO 2007/003961 ); Solicitud Internacional No. PCT/G B2006/050178 (publicada como WO 2007/003962); Solicitud Internacional No. PCT/GB2006/050182 (publicada como WO 2007/003964); y Solicitud Internacional No. PCT/J P02/09350 (publicada como ' WO 03/026661). En un octavo aspecto, la presente invención presenta un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) contactar un compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor acoplado por proteína G, en donde el receptor acoplado por proteína G comprende una secuencia de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en: (i) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO:2; (ii) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO:2; (iii) aminoácidos 2-355 de SEQ ID NO: 2, siempre que receptor acoplado con proteína G, no comprenda la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2; (iv) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificada por un polinucleótido que puede amplificarse mediante reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humana, utilizando cebadores específicos SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 4; (v) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1; (vi) una variante de SEQ ID NO: 2; (vii) la secuencia de aminoácido de (vi) cuando se selecciona del grupo que consiste en: (vii) la secuencia de (vi) de un receptor acoplado con pro teína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2; y (a') una secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2; y (b') la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado con proteína G que tiene SEQ ID NO: 2; (viii) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (i) a (viii); in vitro con una célula enteroendocrina de vertebrado o con una célula con la capacidad de secretar GIP, habiendo sido determinado el compuesto o identificado a través de un método de acuerdo con el primer aspecto; y (b) determinar si el compuesto estimula la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP; en donde la capacidad del compuesto de prueba para estimular la secreción GIP de la célula GIP de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP, indica además que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea de un individuo. En ciertas modalidades, el receptor GP comprende la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, el receptor comprende la secuencia de de aminoácido de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un alelo de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un ortólogo de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: es un ortólogo de mamífero de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G es recombinante es recombinante. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina de vertebrado es una célula enteroendocrina de mamífero. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una célula K. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende un tejido derivado del intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende un tejido derivado de una región con alto contenido de célula K del intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido de duodeno o jejuno (ver por ejemplo Sondhi y asociados, Pharmacogenomics J (2006) 6:131-140). En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una línea de célula enteroendocrina. En ciertas modalidades, la célula con la capacidad de secretar GIP es una célula pancreática. Ver por ejemplo la publicación de Xie y asociados, Bone 2007, ya que se relaciona con la expresión pancreática de GIP. En ciertas modalidades, la célula con la capacidad de secretar GIP, es una célula recombinante construida para tener la capacidad de secretar GIP. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) administrar a un vertebrado un compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor acoplado con proteína G, en donde el receptor acoplado con proteína G comprende una secuencia de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en: (i) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO: 2; (¡i) aminoácidos 2-355 de SEQ ID NO: 2; (iii) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2, siempre que el receptor acoplado con proteína G no comprenda la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2; (iv) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar a través de reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humana utilizando cebadores específicos SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 4; (viü) en la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1; (ix) una variante de SEQ ID NO: 2; (x) la secuencia de aminoácido de (vi) cuando se selecciona del grupo que consiste en: (a') la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2; y (b1) una secuencia de aminoácido de un receptor G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2; (viü) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado con proteína G que tiene SEQ ID NO: 2; y (ix) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (i) a (viü); habiendo sido determinado el compuesto o identificado a través de un método de acuerdo con el primer aspecto; y (b) determinar si el compuesto incrementa el nivel de GIP en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel GIP en el vertebrado, indica además que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G comprende la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, el receptor comprende la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un alelo de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un ortólogo de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un ortólogo de mamífero de SEQ ID NO: 2.

En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G es recombinante. En ciertas modalidades, el nivel GIP es una concentración en sangre o plasma o suero de GIP total. En ciertas modalidades, el nivel GIP es una concentración en sangre o plasma o suero del GIP bioactivo. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) administrar a un vertebrado un compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor acoplado con proteína G, en donde el receptor H comprende una secuencia de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en: (i) (i) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO: 2; (ii) aminoácidos 2-355 de SEQ ID NO: 2; (iii) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2, siempre que el receptor acoplado con proteína G no comprenda la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2; (iv) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humana utilizando cebadores específicos SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 4; (iv) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 ; (xii) una variante de SEQ ID NO: 2; (xiii) la secuencia de aminoácido de (vi), cuando se selecciona del grupo que consiste en: (a') la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2; y (b') una secuencia de aminoácido de un receptor G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2; (vi¡¡) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado con proteína G que tiene SEQ ID NO: 2; y (ix) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (i) a ( v i i i ) ; habiendo siendo determinado o identificado el compuesto a través de un método de acuerdo con el primer aspecto; y (b) determinar si el compuesto incrementa un nivel de masa ósea en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar el nivel de masa ósea en el vertebrado indica además que el compuesto de prueba es un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G comprende la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos aproximadamente 80% de identidad con SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, el receptor comprende la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un alelo de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un ortólogo de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un ortólogo mamífero de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G es recombinante. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado o mamífero es una rata ovariectomizada o un ratón ovariectomizado. En ciertas modalidades, la determinación comprende medir un nivel de masa ósea en el vertebrado. En ciertas modalidades, la medición del nivel de la masa ósea comprende medir el nivel de la masa ósea utilizando medición de absorción de rayos X de energía dual (DXA). En ciertas modalidades, la medición de un nivel de masa ósea utilizando DXA comprende medir una calificación-T utilizando DXA. En ciertas modalidades, la medición de la calificación-T utilizando DXA comprende medir una calificación-T en la cadera utilizando DXA. Se contempla de manera expresa que la medición del nivel de masa ósea puede comprender medir un nivel de masa ósea utilizando una técnica además de DXA, tal como medición de absorción de rayos X simple (SXA) (ver la publicación de World Health Organization Technical Report Series 921 (2003), Prevention and Management of Osteoporosis). En ciertas modalidades, la muestra de ADN humana es un ADN genómico humano. En ciertas modalidades, la reacción de cadena de polimerasa es reacción de cadena de polimerasa de transcripción inversa (RT-PCR). Las técnicas RT-PCR son conocidas para los expertos en la técnica. En ciertas modalidades, la muestra de ADN humano es un cADN humano. En ciertas modalidades, el cADN es de tejido humano que expresa GPR119. En ciertas modalidades, el tejido humano que expresa GPR119 es un islote de páncreas o pancreático. En ciertas modalidades, el cADN es de un tipo de célula humana que expresa GPR119. En ciertas modalidades, el cADN es de una célula beta pancreática. En ciertas modalidades, el cADN es de una línea de célula pancreática.

En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G codificado por el polinucleótido que se puede amplificar a través de reacción de cadena de polimerasa es SEQ ID NO: 2 o un alelo del mismo. En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar a través de la reacción de cadena de polimerasa es un alelo de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante la reacción de cadena de polimerasa enlaza en forma específica (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina. En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G codificado por un nucleótido que se puede amplificar mediante reacción en cadena de polimerasa es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista. En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que es amplificable mediante reacción de cadena de polimerasa exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En ciertas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En ciertas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento.

En ciertas modalidades, las condiciones de hibridación estrictas (por ejemplo condiciones de alta rigurosidad) comprenden hibridación a una temperatura de 42°C en una solución que comprende 50% formamida, 5xSSC (1xSSC = 150mM NaCI, 15 mM de citrato trisódico), 50 mM de fosfato de sodio (pH 7.6), solución de Denhart 5x, sulfato de dextrano al 10% y 20 pg/ml de ADN de esperma de salmón trasquilado desnaturalizado, seguido de lavado a una temperatura de 65°C en una solución que comprende O.lxSSC. Las técnicas de hibridación son bien conocidas para los expertos en el arte. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 es SEQ ID NO: 2 o un alelo del mismo. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 es un alelo de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 es un ortólogo de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 se enlaza en forma específica (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidín-4-il}-amina. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleotido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleotido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un GPCR. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 se enlaza específicamente (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4- 3- isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-n¡tro-pirimidin- 4- il}-amina. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En ciertas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En ciertas modalidades, la actividad constituida es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento. En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G es parte de una proteína de fusión que comprende una proteína G. Las técnicas para elaborar una construcción de fusión GPCR:G son conocidas para los expertos en el arte (ver por ejemplo la Solicitud Internacional WO 02/42461). En ciertas modalidades, el compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor acoplado con proteína G es una molécula pequeña. En ciertas modalidades, el compuesto que estimula la funcionalidad del receptor acoplado con proteína G es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un polipéptido. En ciertas modalidades, el compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor acoplado con proteína G es una molécula pequeña siempre que la molécula pequeña no sea urr anticuerpo o un fragmento de enlace de antígenos del mismo. En ciertas modalidades, el compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor acoplado con proteína G es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un lípido. En ciertas modalidades, el compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor acoplado con proteína G es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un polipéptido o un lípido. En ciertas modalidades, el compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor acoplado con proteína G es un polipéptido. En algunas modalidades, el compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor acoplado con proteína G es un polipéptido, siempre que el polipéptido no sea un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígeno del mismo. En algunas modalidades, el compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor acoplado con proteína G es un lípido. En ciertas modalidades, el compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor acoplado con proteína G no es un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígeno del mismo. En ciertas modalidades, el compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor acoplado con proteína G es un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígenos del mismo. En ciertas modalidades, el método comprende además el paso de determinar opcionalmente la estructura del secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el método comprende además el paso de proporcionar opcionalmente el nombre o estructura del secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el método comprende además el paso de producir o sintetizar opcionalmente el secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.

En ciertas modalidades, el método comprende además el paso de formular el secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo tal como un farmacéutico. En algunas modalidades, el método comprende además el paso de formular el secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo en una composición farmacéutica. En un noveno aspecto, la presente invención presenta un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) contactar un compuesto en cuya presencia se forme menos de un complejo entre el receptor acoplado con proteína G y un ligando conocido para el receptor opcionalmente etiquetado, que en la ausencia del compuesto, en donde el receptor acoplado con proteína G comprende una secuencia de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en: (i) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO: 2; (ii) aminoácidos 2-355 de SEQ ID NO: 2; (iii) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2, siempre que el receptor acoplado con proteína G no comprenda la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2; (iv) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar a través de reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humana utilizando cebadores específicos SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 4; (v) en la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1; (vi) una variante de SEQ ID NO: 2; (vii) la secuencia de aminoácido de (vi) cuando se selecciona del grupo que consiste en: (a') la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2; y (b') una secuencia de aminoácido de un receptor G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2; (viii) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado con proteína G que tiene SEQ ID NO: 2; y (ix) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (i) a (viii); ¡n vitro con una célula enteroendocrina de vertebrado o con una célula con la capacidad de secretar GIP, habiendo sido determinado o identificado el compuesto por un método tal como se describe en el cuarto aspecto; y (b) determinar si el compuesto estimula la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP; en donde la capacidad del compuesto de prueba para estimular la secreción de GIP de la célula GIP de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP, indica además que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G comprende la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, el receptor comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un alelo de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: es un ortólogo de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un ortólogo mamífero de SEQ ID NO: 2.

En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G es recombinante. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina de vertebrado es una célula enteroendocrina de mamífero. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una célula K. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido derivado de intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido derivado de una región con alto contenido de célula K de intestino delgado. En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina comprende tejido de duodeno o jejuno (ver por ejemplo la publicación de Sondhi y asociados, Pharmacogenomics J (2006) 6:131-140). En ciertas modalidades, la célula enteroendocrina es una línea de célula enteroendocrina. En ciertas modalidades, la célula con la capacidad de secretar GIP es una célula pancreática. Ver por ejemplo la publicación de Xie y asociados, Bone 2007 ya que se relaciona con la expresión pancreática de GIP. En ciertas modalidades, la célula con la capacidad de secretar GIP es una célula recombinante construida para tener la capacidad de secretar GIP. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) administrar un compuesto a un vertebrado, cuya presencia forma menos de dicho compuesto entre un receptor de proteína G acoplada y un ligando conocido para el receptor opcionalmente etiquetado que en la ausencia del compuesto, en donde el receptor acoplado con proteína G comprende una secuencia de aminoácidos del grupo que consiste en: (i) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO: 2; (ii) aminoácidos 2-355 de SEQ ID NO: 2; (iii) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2, siempre que el receptor no comprenda la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2; (iv) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar a través de reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humana utilizando cebadores específicos SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 4; (viii) en la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1; (ix) una variante de SEQ ID NO: 2; (x) la secuencia de aminoácido de (vi) cuando se selecciona del grupo qu consiste en: (a') la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2; y (b') una secuencia de aminoácido de un receptor G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2; (vüi) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado con proteína G que tiene SEQ ID NO: 2; y (ix) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (i) a (vüi); habiendo sido determinado el compuesto o identificado a través de un método de acuerdo con el cuarto aspecto; y (b) determinar si el compuesto incrementa el nivel de GIP en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel GIP en el vertebrado, indica además que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. La presente invención presenta además un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizada porque comprende los pasos de: (a) administrar un compuesto a un vertebrado, en cuya presencia se forme menos del complejo entre el receptor acoplado con proteína G y un ligando conocido para el receptor opcionalmente etiquetado que la ausencia del compuesto, en donde el receptor acoplado con proteína G comprende una secuencia de aminoácido seleccionado del grupo que consiste en: (i) aminoácidos 1-355 de SEQ ID NO: 2; (ii) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2; (iii) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2, siempre que el receptor no comprenda la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2; (iv) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar a través de reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humana utilizando cebadores específicos SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 4; (viii) en la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1; (ix) una variante de SEQ ID NO: 2; (x) la secuencia de aminoácido de (vi) cuando se selecciona del grupo que consiste en: (a') la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2; y (b') una secuencia de aminoácido de un receptor G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2; (viii) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado con proteína G que tiene SEQ ID NO: 2; y (ix) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (i) a (viii); habiendo sido determinado el compuesto o identificado a través de un método de acuerdo con el cuarto aspecto; y (b) determinar si el compuesto incrementa el nivel de masa ósea en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel de masa ósea en el vertebrado indica además que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano.

En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado o mamífero es una rata ovariectomizada o un ratón ovariectomizado. En ciertas modalidades, la determinación comprende medir un nivel de masa ósea en el vertebrado. En ciertas modalidades, la medición del nivel de la masa ósea comprende medir el nivel de la masa ósea utilizando medición de absorción de rayos X de energía dual (DXA). En ciertas modalidades, la medición de un nivel de masa ósea utilizando DXA comprende medir una calificación-T utilizando DXA. En ciertas modalidades, la medición de la calificación-T utilizando DXA comprende medir una calificación-T en la cadera utilizando DXA. Se contempla de manera expresa que la medición del nivel de masa ósea puede comprender medir un nivel de masa ósea utilizando una técnica además de DXA, tal como medición de absorción de rayos X simple (SXA) (ver la publicación de World Health Organization Technical Report Series 921 (2003), Prevention and Management of Osteoporosis). En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el vertebrado es un vertebrado no humano. En ciertas modalidades, el vertebrado es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el mamífero es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, la muestra de ADN humana es un ADN genómico humano. En ciertas modalidades, la reacción de cadena de polimerasa es reacción de cadena de polimerasa de transcripción inversa (RT-PCR). Las técnicas RT-PCR son conocida para los expertos en la técnica. En ciertas modalidades, la muestra de ADN humano es un cADN humano. En ciertas modalidades, el cADN es de tejido humano que expresa GPR119. En ciertas modalidades, el tejido humano que expresa GPR119 es un islote de páncreas o pancreático. En ciertas modalidades, el cADN es de un tipo de célula humana que expresa GPR119. En ciertas modalidades, el cADN es de una célula beta pancreática. En ciertas modalidades, el cADN es de una línea de célula pancreática. En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G codificado por el polinucleótido que se puede amplificar a través de reacción de cadena de polimerasa es SEQ ID NO: 2 o un alelo del mismo. En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar a través de la reacción de cadena de polimerasa es un alelo de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante la reacción de cadena de polimerasa enlaza en forma específica (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina.

En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G codificado por un nucleótido que se puede amplificar mediante reacción en cadena de polimerasa es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista. En ciertas modalidades, el receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que es amplificable mediante reacción de cadena de polimerasa exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En ciertas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En ciertas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento. En ciertas modalidades, las condiciones de hibridación estrictas (por ejemplo condiciones de alta rigurosidad) comprenden hibridación a una temperatura de 42°C en una solución que comprende 50% formamida, 5xSSC (1xSSC = 150mM NaCI, 15 mM de citrato trisódico), 50 mM de fosfato de sodio (pH 7.6), solución de Denhart 5x, sulfato de dextrano al 10% y 20 Mg/ml de ADN de esperma de salmón trasquilado desnaturalizado, seguido de lavado a una temperatura de 65°C en una solución que comprende O.lxSSC. Las técnicas de hibridación son bien conocidas para los expertos en el arte. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 es SEQ ID NO: 2 o un alelo del mismo. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleotido que hibrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 es un alelo de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleotido que hibrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 es un ortólogo de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleotido que hibrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1, enlaza específicamente (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimid¡n-4-il}-am¡na. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleotido que hibrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1, es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleotido que hibrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1, exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento.

En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es GPCR. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 enlaza específicamente a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1 -il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista. En algunas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En ciertas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento. En algunas modalidades, el receptor acoplado con proteína G es parte de una proteína de fusión que comprende una proteína G. Las técnicas para elaborar una construcción de fusión GPCR:G son bien conocidas para los expertos en la técnica (ver por ejemplo la solicitud internacional WO 02/42461). En ciertas modalidades, el compuesto en cuya presencia se forma menos de un complejo entre un receptor acoplado con proteína G y un ligando conocido para el receptor opcionalmente etiquetado que en la ausencia del compuesto, es una molécula pequeña. En algunas modalidades, el compuesto en cuya presencia se forma menos de un complejo entre un receptor acoplado con proteína G y un ligando conocido para el receptor opcionalmente etiquetado que en la ausencia del compuesto es una molécula pequeña. Siempre que la molécula pequeña no sea un polipéptido. En algunas modalidades, el compuesto en cuya presencia se forma menos de un complejo entre un receptor acoplado con proteína G y un ligando conocido para el receptor opcionalmente etiquetado que en la ausencia del compuesto es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígenos del mismo. En algunas modalidades, el compuesto en cuya presencia se forma menos de un complejo entre un receptor acoplado con proteína G y un ligando conocido para el receptor opcionalmente etiquetado que en la ausencia del compuesto es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un lípido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es una molécula pequeña, siempre que la molécula pequeña no sea un polipéptido o un lípido. En algunas modalidades, el compuesto de prueba es un polipéptido. En algunas modalidades, el compuesto en cuya presencia se forma menos de un complejo entre un receptor acoplado con proteína G y un ligando conocido para el receptor opcionalmente etiquetado en la ausencia del compuesto es un polipéptido, siempre que el polipéptido no sea un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígenos del mismo. En algunas modalidades, el compuesto en cuya presencia se forma menos de un complejo entre un receptor acoplado con proteína G y un ligando conocido para el receptor opcionalmente etiquetado, que en la ausencia del compuesto, es un lípido. En algunas modalidades, el compuesto en cuya presencia se forma menos de un complejo entre un receptor acoplado con proteína G y un ligando conocido para el receptor opcionalmente etiquetado que en la ausencia del compuesto, no es un anticuerpo o un fragmento de enlace de antígenos del mismo. En algunas modalidades, el compuesto en cuya presencia se forma menos de un complejo entre un receptor acoplado con proteína G y un ligando conocido para el receptor opcionalmente etiquetado que en la ausencia del compuesto, es un anticuerpo o un fragmento de antígenos del mismo. En ciertas modalidades, el método es un método para identificar secretagogos GIP. En ciertas modalidades, el método es un método para identificar compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel. En ciertas modalidades, el método es un método para identificar compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el ligando es un ligando o agonista de un receptor acoplado con proteína G de vertebrado, mamífero o humano endógeno. En ciertas modalidades, el ligando conocido es un agonista conocido de un receptor GPR119 de vertebrado, mamífero o humano endógeno. En ciertas modalidades, el ligando conocido es un ligando o agonista de un receptor GPR119 endógeno. En ciertas modalidades, el ligando conocido es idéntico a un compuesto descrito por ejemplo, en la Solicitud Internacional Número PCT/US2004/001267 (publicada como WO 04/065380); Solicitud Internacional Número PCT/US2004/005555 (publicada como WO 04/076413); Solicitud Internacional Número PCT/US2004/022327 (publicada como WO 05/007647); Solicitud Internacional Número PCT/US2004/022417 (publicada como WO 05/007658); Solicitud Internacional Número PCT/US2005/019318 (publicada como WO 2005/121 121 ); Solicitud Internacional Número PCT/GB2004/050046 (publicada como WO 2005/061489); Solicitud Internacional Número PCT/US06/00567 (publicada como WO 2006/083491); Solicitud Internacional Número PCT/GB2005/050264 (publicada como WO 2006/067531 ); Solicitud Internacional Número PCT/GB2005/050265 (publicada como WO 2006/067532); Solicitud Internacional Número PCT/G B2005/050266 (publicada como WO 2006/070208); Solicitud Internacional Número PCT/JP02/09350 (publicada como WO 03/026661 ); Solicitud Internacional Número PCT/J P2005/018412 (publicada como WO 06/040966); Solicitud Internacional Número PCT/J P2005/0 9000 (publicada como WO 2006/043490); Solicitud Internacional Número PCT/GB2006/050176 (publicada como WO 2007/003960); Solicitud Internacional Número PCT/GB2006/050177 (publicada como WO 2007/003961); Solicitud Internacional Número PCT/G B2006/050178 (publicada como WO 2007/003962); Solicitud Internacional Número PCT/GB2006/050182 (publicada como WO 2007/003964); o Solicitud Internacional Número PCT/J P02/09350 (publicada como WO 03/026661). En ciertas modalidades, el ligando conocido es (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina. En ciertas modalidades, el ligando conocido es un ligando endógeno de un receptor GPR119 de vertebrado, mamífero o humano endógeno. En ciertas modalidades, el ligando conocido opcionalmente etiquetado es un ligando conocido etiquetado. En ciertas modalidades, el ligando conocido etiquetado es un ligando conocido radioetiquetado. Las técnicas para radioetiquetar un compuesto, tal como para etiquetar un ligando conocido de un receptor acoplado con proteína G de la presente invención, son conocidas para los expertos en la técnica. Ver por ejemplo la Solicitud Internacional WO 04/065380. También ver el ejemplo 1 , infra. Las técnicas para detectar el compuesto entre un receptor acoplado con proteína G y un compuesto conocido como un ligando del receptor acoplado con proteína G, son bien conocidas para los expertos en el arte. Ver por ejemplo la solicitud internacional WO 04/065380. También ver el ejemplo 12, infra. En algunas modalidades, el método comprende además el paso de determinar opcionalmente la estructura del secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil par incrementar la masa ósea en un individuo. En algunas modalidades, el método comprende además el paso de proporcionar opcionalmente el nombre o estructura del secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En algunas modalidades, el método comprende además el paso de producir o sintetizar opcionalmente el secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo. En algunas modalidades, el método comprende además el paso de formular el secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo en la forma de un farmacéutico. En algunas modalidades, el método comprende además el paso de formular el secretagogo GIP, el compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o el compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo en una composición farmacéutica. Breve Descripción de los Dibujos La presente invención se ilustra en relación con las figuras adjuntas a la misma, en las cuales: La figura 1, muestra un análisis farmacodinámico de un efecto de administración de agonista GRP119 en el nivel GIP en sangre en ratones tipo natural. A. El transcurso de un análisis llevado a cabo utilizando el compuesto 1 como el agonista GRP119. B. El tiempo transcurrido en el análisis llevado a cabo utilizando el compuesto 3 como el agonista GRP119. C. Un análisis de titulación de dosis llevado a cabo utilizando el compuesto 3 como el agonista GRP119. La figura 2, muestra un efecto de administración del agonista GRP119 en el nivel GIP de sangre en ratones con deficiencia de GRP119 (eliminado) en comparación con ratones tipo natural. A. La comparación se llevó a cabo utilizando el compuesto 1 como el agonista GRP119. B. La comparación se llevó a cabo utilizando el compuesto 2 como el agonista. Descripción Detallada de la Invención La presente invención presenta métodos para utilizar el receptor GRP119 para identificar compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo. Los agonistas del receptor GRP119 son útiles como agentes terapéuticos para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, tal como osteoporosis, y para incrementar la masa ósea en un individuo. La presente invención está basada, al menos en parte, en el descubrimiento sorprendente realizado por el Solicitante, de que la administración de un agonista GRP119 a un individuo, tal como mediante administración oral, puede actuar en el receptor GRP119 para incrementar un nivel GRP119 en el individuo. El término "ligando", tal como se utiliza en la presente invención, significa una molécula (por ejemplo compuesto de prueba) que enlaza en forma específica a un polipéptido, tal como GRP119. Un ligando puede ser, por ejemplo, un polipéptido, un lípido, una molécula pequeña o un anticuerpo. El compuesto 1 es un ligando de ejemplo del polipéptido de receptor (ver la tabla A, la cual establece la estructura química y nombre químico del compuesto 1). El compuesto 1 es idéntico a un compuesto descrito en la Solicitud de Patente internacional Número PCT/US2004/001267 (publicada como WO 2004/065380). (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina (ver tabla A) es un ligando de ejemplo del polipéptido de receptor GRP119. El compuesto 2 es un ligando de ejemplo del polipéptido de receptor GRP119. El compuesto 2, es idéntico a un compuesto descrito en la Solicitud de Patente Internacional Número PCT/U S2004/022417 (publicada como WO 2005/007658). El compuesto 3, es un ligando de ejemplo del polipéptido de receptor GRP119. El compuesto 3, es idéntico a un compuesto descrito en la Solicitud de Patente Internacional Número PCT/US2004/022327 (publicada como WO 2005/007647). Un ligando endógeno es un ligando que es un ligando natural, endógeno para un polipéptido nativo, tal como GRP119. Un ligando puede ser un "antagonista", "agonista", "agonista parcial" o "agonista inverso" o similar. Tabla A El término "agonista", tal como se utiliza en la presente invención, debe significar (por ejemplo un ligando, compuesto de prueba) que en virtud del enlace a GPCR, activa el GPCR para provocar una respuesta intracelular transmitida por el GPCR. El término "agonista parcial", tal como se utiliza en la presente invención, significa un agente (por ejemplo ligando, compuesto de prueba) que en virtud del enlace a un GPCR, activa el GPCR para provocar una respuesta intracelular transmitida por el GPCR, aunque hasta un punto o grado menor que un agonista completo. El término "antagonista" debe significar un agente (por ejemplo ligando, compuesto de prueba) que enlaza, y enlaza preferentemente en forma competitiva a GPCR, aproximadamente en el mismo sitio que un agonista o agonista parcial, aunque no activa una respuesta intracelular iniciada por la forma activa del GPCR, y puede inhibir por lo tanto la respuesta intracelular por parte del agonista o agonista parcial. El antagonista normalmente no disminuye la respuesta intracelular de línea de base en la ausencia de un agonista o agonista parcial. El término "agonista inverso" debe significar un agente (por ejemplo ligando, compuesto de prueba) que enlaza a un GPCR y que inhibe la respuesta intracelular de línea de base iniciada por la forma activa del receptor debajo de la actividad de nivel de base normal que se observa en la ausencia de un agonista o agonista parcial. El término "agonista GRP119" tal como se utiliza en la presente invención, se refiere a un compuesto que enlaza a un receptor GRP119 y actúa como un agonista. El compuesto 1, es un agonista GRP119 de ejemplo (ver tabla A, la cual establece la estructura química y nombre químico del compuesto 1). El compuesto 1 es idéntico a un compuesto descrito en la Solicitud de Patente Internacional Número PCT/US2004/001267 (publicada como WO 2004/065380). (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista GRP119 de ejemplo. El compuesto 2 es un agonista GRP119 de ejemplo. El compuesto 2 es idéntico a un compuesto descrito en la Solicitud de Patente Internacional Número PCT/U S2004/022417 (publicada como WO 2005/007658). El compuesto 3 es un agonista GRP119 de ejemplo. El compuesto 3 es idéntico a un compuesto descrito en la Solicitud de Patente Internacional Número PCT/US2004/022327 (publicada como WO 2005/007647). El término "agonista GRP119 selectivo" tal como se utiliza en la presente invención, se refiere a un agonista GRP119 que tiene selectividad para el receptor GRP119 con respecto a uno o más receptores relacionados, tal como receptor de factor-1 de liberación de corticotrofina (CRF- ). El compuesto 1 es un agonista GRP119 selectivo de ejemplo (ver tabla A, la cual establece la estructura química y nombre químico de compuesto 1). El compuesto 1 es idéntico a un compuesto descrito en la Solicitud de Patente Internacional Número PCT/US2004/001267 (publicada como WO 2004/065380). (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5- nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista GRP119 selectivo de ejemplo. El compuesto 2 es un agonista GRP119 selectivo de ejemplo. El compuesto 2 es idéntico a un compuesto descrito en la Solicitud de Patente Internacional Número PCT/US2004/022417 (publicada como WO 2005/007658). El compuesto 3 es un agonista GRP119 selectivo de ejemplo. El compuesto 3 es idéntico a un compuesto descrito en la Solicitud de Patente Internacional Número PCT/US2004/022327 (publicada como WO 2005/007647). El término "secretagogo" significa un agente (por ejemplo ligando, compuesto de prueba) que promueve la secreción de GIP en una célula, por ejemplo, una célula GIP, o que incrementa el nivel de GIP total, por ejemplo un nivel de GIP total en sangre o plasma, en la administración a un individuo tal como un vertebrado o un mamífero. En ciertas modalidades, un secretagogo GIP es un compuesto adecuado para incrementar un nivel de GIP total en un individuo, por ejemplo un nivel de GIP total en sangre o plasma. El término "individual" tal como se utiliza en la presente invención, se refiere a un vertebrado, que incluye pero no se limita a pescado (tal como pescado de mascota, pescado de granja comercial, etc.) anfibios (tal como ranas, sapos, anfibios de mascota, etc.) reptiles (tal como víboras, reptiles, tortugas o reptiles de mascota, etc.), aves (tal como pollos, pavos, aves de mascota, etc.) y mamíferos (tal como ratones, ratas, hámster, conejos, cerdos, perros, gatos, caballos, vacas, ovejas, cabras, primates no humanos, mamíferos no humanos, mamíferos no humanos de mascota, humanos, etc.). En ciertas modalidades, el individuo es un pescado. En ciertas modalidades, el individuo es un anfibio. En ciertas modalidades, el individuo es un reptil. En ciertas modalidades, el individuo es un ave. En ciertas modalidades, el individuo es un pavo. En los pasados 25 años, la presión de selección comercial de pavos con una mayor masa muscular en la pechuga puso grandes demandas y cada vez mayores en la integridad esqueletal. Sin embargo, la masa muscular incrementada de la pechuga, no ha estado acompañada por cambios compensadores en el esqueleto, con el resultado de que la industria de los pavos ha experimentado un incremento en los problemas en las piernas. Se han reportado fracturas en huesos largos en pavos machos adultos jóvenes. Ver por ejemplo la publicación de Crespo y asociados, Poult Sci (2000) 79:602-608). En ciertas modalidades, el individuo es un mamífero. En ciertas modalidades, el individuo es un ratón, una rata, un hámster, un conejo, un cerdo, un perro, un gato, un caballo, una vaca, una oveja, una cabra, un primate no humano o un humano (el cual puede estar incluido en las modalidades de la presente invención en forma individual o en cualquier combinación). En ciertas modalidades, el individuo es un caballo. Los caballos de alto rendimiento, los cuales son caballos implicados en actividades tales como carreras, pasos u otros eventos competitivos, son susceptibles a fractura de huesos. En ciertas modalidades, el individuo es un perro o un gato. En ciertas modalidades, el individuo es un animal de compañía para humanos (tal como un perro, un gato, etc.) o un animal de granja (tal como una vaca, oveja, cabra, cerdo, pollo, etc.) un animal para deportes (tal como caballo, perro, etc.) una bestia de carga (tal como una muía, camello, etc.) o un animal exótico (tal como un animal que vive en un zoológico, etc.), que puede estar incluido en las modalidades de la presente invención en forma individual o en cualquier combinación. En ciertas modalidades, el individuo es un mamífero no humano. En ciertas modalidades, el individuo es un primate no humano (tal como un mono resus, un chimpancé, etc.). En ciertas modalidades, el individuo es un humano. El término "que necesita de prevención o tratamiento" tal como se utiliza en la presente invención, se refiere a un juicio hecho por un cuidador (por ejemplo especialista, enfermera, practicante de enfermera en el caso de humanos; veterinario en el caso de vertebrados no humanos y en una modalidad particular mamíferos no humanos) de que un individuo requiere o se beneficiará del tratamiento. El término "cantidad terapéuticamente efectiva" o "dosis terapéuticamente efectiva" tal como se utiliza en la presente invención, se refiere a la cantidad de compuesto activo o agente farmacéutico que provoca la respuesta biológica o medicinal en un tejido, sistema, animal, individuo o humano que está siendo observado por un investigador, veterinario, médico u otro especialista, el cual incluye uno o más de los siguientes: (1) Prevenir la enfermedad; por ejemplo, prevenir una enfermedad, condición o trastorno en un individuo que puede estar predispuesto a la enfermedad, condición o trastorno, pero que aún no experimenta o muestra la patología o sintomatología de la enfermedad, (2) Inhibir la enfermedad; por ejemplo, inhibir una enfermedad, condición o trastorno en un individuo que está experimentando o mostrando la patología o sintomatología de la enfermedad, condición o trastorno (por ejemplo deteniendo el desarrollo adicional de la patología y/o sintomatología), y (3) disminuir la enfermedad; por ejemplo, disminuir una enfermedad, condición o trastorno en un individuo que está experimentando o mostrando la patología o sintomatología de la enfermedad, condición o trastorno (por ejemplo, invirtiendo la patología y/o sintomatología). El término "eficacia terapéutica" tal como se utiliza en la presente invención se refiere a provocar la respuesta biológica o medicinal en un tejido, sistema, animal, individuo o humano que está siendo observado por un investigador, veterinario, médico u otro especialista, que incluye uno o más de los siguientes: (1) Prevenir la enfermedad; por ejemplo, prevenir una enfermedad, condición o trastorno en un individuo que puede estar predispuesto a la enfermedad, condición o trastorno, pero que aún no experimenta o muestra la patología o sintomatología de la enfermedad, (2) Inhibir la enfermedad; por ejemplo, inhibir una enfermedad, condición o trastorno en un individuo que está experimentando o mostrando la patología o sintomatología de la enfermedad, condición o trastorno (por ejemplo deteniendo el desarrollo adicional de la patología y/o sintomatología), y (3) disminuir la enfermedad; por ejemplo, disminuir una enfermedad, condición o trastorno en un individuo que está experimentando o mostrando la patología o sintomatología de la enfermedad, condición o trastorno (por ejemplo, invirtiendo la patología y/o sintomatología). El término "cantidad que es efectiva para prevenir" se refiere a la cantidad de un fármaco que evitará o reducirá el riesgo de surgimiento del evento biológico o médico que se pretende evitar. En muchos casos, la cantidad que es efectiva para prevenir es la misma que la cantidad terapéuticamente efectiva . El término "composición" debe significar un material que comprende al menos un componente. El término "ingrediente activo" debe significar cualquier componente que proporcione actividad farmacológica u otro efecto directo en el diagnóstico, curación, mitigación, tratamiento, o prevención de la enfermedad. El término "composición farmacéutica" debe significar una composición que comprende al menos un ingrediente activo, mediante por lo cual la composición es adecuada para investigación y tratamiento en un mamífero. Por el término "farmacéuticamente aceptable" se entiende que el transportador, vehículo, diluyente, excipientes y/o sal, deben ser compatibles con otros ingredientes de la formulación, y no perjudiciales para el receptor de mismo. El término "forma de dosificación" debe significar la forma física en la cual un fármaco es producido y suministrado, tal como una tableta, cápsula o un inyectable. Por el término "hueso" se entiende el tejido conectivo calcificado, poroso, semi-rígido, denso que forma la mayor parte del esqueleto de la mayoría de los vertebrados, que comprende una matriz orgánica densa y un componente mineral, inorgánico. El hueso es cualquiera de las numerosas estructuras anatómicamente distintas que comprenden el esqueleto de un vertebrado. Los términos "masa ósea" y "densidad mineral ósea (BMD)" se utilizan de manera intercambiable en la presente invención. BMD en humanos normalmente se mide a través de una técnica radiográfica estándar, medición de absorción de rayos X de energía dual (DXA). De las muchas técnicas desarrolladas para evaluar BMD, DXA, es la técnica más altamente desarrollada, y biológicamente validada. La tecnología DXA, con un software adaptado en forma adecuada, también se puede utilizar para evaluar en forma confiable BMD en estudios de animales. DXA se utiliza en el diagnóstico de osteoporosis, pronóstico (anticipación de fractura) monitoreo de la historia natural del trastorno, y evaluación de respuesta al tratamiento. El término "masa ósea de bajo nivel" tal como se utiliza en la presente invención, se refiere a cualquier disminución o reducción en la densidad mineral ósea (BMD) en un individuo, e incluye tanto osteoporosis como osteopenia, tal como se define en las propuestas elaboradas por la Organización Mundial de la Salud (WHO). La WHO ha definido normal, como un valor de BMD dentro de una desviación estándar de la media de referencia de un adulto joven (calificación-T > -1). La WHO ha definido osteopenia como un valor de BMD mayor a 1 desviación estándar debajo de la media de adultos jóvenes, aunque menor a 2.5 desviaciones estándar debajo de este valor (calificación-T < -1 y > -2.5). La WHO ha caracterizado la osteoporosis como una forma más severa de osteopenia, y la ha definido a través del valor de BMD 2.5 desviaciones estándar o más debajo de la media de adultos jóvenes (calificación-T < -2.5). (Ver la publicación de World Health. Organization Technical Report Series 921 (2003), Prevention and Management of Osteoporosis, cuya descripción está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia). Más comúnmente, la osteopenia se define como la calificación-T menor a -1 y mayor a -2, y la osteoporosis se define como una calificación-T menor o igual a -2. En ciertas modalidades de la presente invención, la calificación-T se mide en la cadera con DXA. La "osteoporosis" tal como se usa en la presente invención, se define por un valor de BMD 2 de dos desviaciones estándar o más debajo de la media de referencia de adultos jóvenes (calificación-T = -2) o se refiere a un diagnóstico elaborado por un cuidador (por ejemplo especialista, enfermera, practicante de enfermedad en el caso de humanos, veterinarios en el caso de vertebrados no humanos). La osteoporosis se puede clasificar ya sea como primaria o secundaria (ver por ejemplo la publicación de World Health Organization Technical Report Series 921 (2003), Prevention and Management of Osteoporosis). Tal como se utiliza en la presente invención, el término "osteoporosis" comprende osteoporosis primaria u osteoporosis secundaria. En ciertas modalidades, la osteoporosis es osteoporosis primaria. En ciertas modalidades, la osteoporosis es osteoporosis secundaria. La "osteoporosis primaria" tal como se utiliza en la presente invención, está asociada con menopausia (natural, prematura o quirúrgica) envejecimiento o ambas. Deberá quedar entendido que en la presente invención, la osteoporosis primaria asociada con menopausia (natural, prematura, quirúrgica), osteoporosis primaria asociada con envejecimiento, y osteoporosis primaria asociada con menopausia y envejecimiento pueden incluirse en modalidades en forma individual o en cualquier combinación. La "osteoporosis secundaria" tal como se utiliza en la presente invención, se refiere a osteoporosis que no está asociada con menopausia o envejecimiento, sino más bien con condiciones médicas o con el uso de medicamentos o fármacos. Un riesgo incrementado de osteoporosis está asociado con un huésped de condiciones médicas, incluyendo pero sin limitarse a trastornos endocrinos y metabólicos, y una enfermedad maligna, y con el uso de ciertos medicamentos y fármacos, cuyos ejemplos son conocidos para los expertos en la técnica (ver por ejemplo la publicación de World Health Organization Technical Report Series 921 (2003), Prevention and Management of Osteoporosis; Williams Textbook of Endrocrinology, décima edición; cuya descripción está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia). La osteoporosis secundaria también puede estar asociada con inmovilización. Un diagnóstico de osteoporosis secundaria de una condición médica, del uso de un medicamento o fármaco o por inmovilización se puede realizar a través de un cuidador (por ejemplo, especialista, enfermera, practicante de enfermera en el caso de humanos; veterinarios en el caso de vertebrados no humanos). Por el término "fractura de hueso" se entiende un rompimiento, ruptura o grietas completa o incompleta de un hueso. El diagnóstico de fracturas depende normalmente de la revisión clínica y descubrimientos radiológicos. En la presente invención, las fracturas de huesos se incluyen pero no se limitan a fracturas traumáticas, fracturas a largo plazo y fracturas patológicas. La "fractura traumática" tal como se utiliza en la presente invención se refiere a una fractura inmediata que implica un trauma supralimininal con un grado de violencia local que excede la elasticidad natural del hueso. Puede estar acompañada por lesión simultánea a los tejidos blancos y muy frecuentemente la piel. Una fractura traumática puede ser cerrada (el tejido blando adyacente puede ser lesionado pero las partes blandas que la cubren se conservan en gran parte). Una fractura traumática puede ser abierta (los extremos rotos de un hueso son liberados por la lesión de tejido blando extensiva, de modo que los patógenos del exterior pueden ingresar directamente a la herida). Una "fractura a largo plazo" tal como se utiliza en la presente invención, se debe referir a una fractura crónica, fractura por fatiga, fractura por tensión o fractura espontánea tipo I.

La "fractura patológica" tal como se utiliza en la presente invención, se debe referir a una fractura espontánea tipo II. Una fractura patológica surge en forma espontánea, sin un trauma adecuado para tomarse en cuenta. El hueso puede haber sido dañado previamente, ya sea por una enfermedad sistémica (por ejemplo, osteoporosis, osteodistrofia, o deformaciones de osteítis de Paget) o por una lesión de hueso local (por ejemplo, metástasis, radio-osteonecrosis, o tumor de hueso). Ver la Publicación de Adler, Claus-Peter, BONE DISEASES, p. 1 14 (Springer-Verlag, Alemania 2000). Las fracturas también incluyen pero no se limitan a, fractura de torsión oblicua, fractura transversal, fractura conminutada, fractura de compresión, fractura de costillas, fractura serpiginosa y cuello femoral fracturado (Adler, Claus-Peter, BONE DISEASES, Springer-Verlag, Alemania (2000)). Tal como se utiliza en la presente invención, el término "condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel" incluye pero no se limita a osteopenia, osteoporosis, artritis reumatoide, osteoartritis, enfermedad periodontal, pérdida alveolar de hueso, pérdida de hueso por osteotomía, pérdida de hueso idiopática infantil, curvatura de columna y pérdida de altura. En ciertas modalidades, la osteoporosis es osteoporosis primaria. En ciertas modalidades, la osteoporosis es osteoporosis secundarias. En ciertas modalidades, la osteoporosis secundaria está asociada con una condición médica. En ciertas modalidades, la osteoporosis secundaria está asociada con el uso de un medicamento o fármaco. En ciertas modalidades, la osteoporosis secundaria está asociada con inmovilización. Las condiciones caracterizadas por masa ósea de bajo nivel también incluyen pero no se limitan a enfermedad de Paget, pérdida ósea debido a cáncer metastático, o lesiones osteolíticas tales como las originadas por enfermedad neoplástica, radioterapia, o quimioterapia. Las condiciones caracterizadas por masa ósea de bajo nivel también incluyen pero no se limitan a condiciones a largo plazo de osteoporosis tal como curvatura de la columna, pérdida de altura y cirugía protésica. Deberá quedar entendido que la presente invención, las condiciones caracterizadas por masa ósea de bajo nivel pueden estar incluidas en modalidades en forma individual o en cualquier combinación. (Ver las Publicaciones de World Health Organization Technical Report Series 921 (2003), Prevention y Management of Osteoporosis; Williams Textbook of Endocrinology , 10° Edición, Larsen y asociados, Eds. (2002), W.B. Saunders Company; y Endocrinology y Metabolism, 4o Edición, Felig y asociados, Eds. (2001), McGraw-Hill Book Company; en donde cada una de dichas descripciones está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia). Tal como se utiliza en la presente invención, la "enfermedad de huesos" se refiere a un trastorno o condición que se relaciona con la anormalidad del hueso. Las enfermedades de hueso que se pueden tratar de acuerdo con la presente invención, a través del incremento de masa ósea o crecimiento óseo, incluyen pero no se limitan a osteopenia, osteoporosis, artritis reumatoide, osteoartritis, enfermedad periodontal, pérdida de hueso alveolar, pérdida de hueso por osteotomía, pérdida de hueso idiopática infantil, curvatura de la columna, y pérdida de altura. En ciertas modalidades, la osteoporosis es osteoporosis primaria. En ciertas modalidades, la osteoporosis es osteoporosis secundaria. En ciertas modalidades, la osteoporosis secundaria está asociada con una condición médica. En ciertas modalidades, la osteoporosis secundaria está asociada con el uso de un medicamento o fármaco. En ciertas modalidades, la osteoporosis secundaria está asociada con inmovilización. Las enfermedades de hueso que pueden tratarse de acuerdo con la presente invención, a través del incremento de masa ósea o hueso o crecimiento de huesos, también incluyen pero no se limitan a enfermedad de Paget, y pérdida ósea debido a cáncer metastático. Los trastornos destructivos de huesos que pueden ser tratados de acuerdo con la presente invención, a través del incremento de masa o crecimiento óseo, incluyen pero no se limitan a osteoporosis, osteoartritis, y lesiones osteolíticas tales como las originadas por enfermedad neoplástica, radioterapia, o quimioterapia. Deberá quedar entendido que en la presente invención, las enfermedades de huesos que pueden ser tratadas de acuerdo con la misma, incrementando la masa o crecimiento óseo, se pueden incluir en modalidades en forma individual o en cualquier combinación. (Ver, por ejemplo las Publicaciones de World Health Organization Technical Report Series 921 (2003), Prevention y Management of Osteoporosis; Williams Textbook of Endocrinology, 10° Edición, Larsen y asociados, Eds. (2002), W.B. Saunders Company; y Endocrinology y Metabolism, 4o Edición, Felig y asociados, Eds. (2001), McGraw-Hill Book Company; en donde cada una de las descripciones está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia). La presente invención también se refiere a otras condiciones que derivan un beneficio del tratamiento de acuerdo con la misma, a través del incremento de masa ósea o crecimiento óseo, incluyendo pero sin limitarse a curación de huesos mejorada después de reconstrucción facial, reconstrucción maxilar, reconstrucción mandibular, enfermedad periodontal o extracción de dientes, extensión mejorada de huesos largos, crecimiento interno prostético mejorado y sinostosis de hueso incrementada. El término "endógeno" debe significar un material que produce naturalmente un individuo (por ejemplo y sin limitación, un humano). En contraste, el término "no endógeno" debe significar que no es producido naturalmente por un individuo (por ejemplo, y sin limitación, un humano). El término "fragmento biológicamente activo" de un receptor acoplado por proteína G debe significar un fragmento del GPCR que tiene funciones estructurales o bioquímicas de un GPCR que ocurre naturalmente. En ciertas modalidades, el fragmento biológicamente activo acopla a una proteína G. En ciertas modalidades, el fragmento biológicamente activo enlaza a un ligando conocido del GPCR. El término "cebador" se utiliza en la presente invención para denotar una secuencia de nucleótidos específica la cual es complementaria a una secuencia de nucleótidos objetivo y es utilizada para hibridar a la secuencia de nucleótidos objetivo. Un cebador sirve como un punto de inicio para la polimerización de nucleotido catalizada por polimerasa de ADN, polimerasa de ARN o transcriptasa inversa. El término "vector de expresión" debe significar una secuencia de ADN que se requiere para la transcripción de ADN clonado y la traducción de mARN transcrito en una célula huésped adecuada, recombinante para el vector de expresión. Un vector de expresión construido en forma adecuada debe contener un origen de replica para la replica autónoma en células huésped, marcadores seleccionables, un número limitado de sitios de enzimas de restricción útiles, potencial para un alto número de copias, y promotores activos. El ADN clonado que será transcrito, se enlaza en forma operable a un promotor constitutiva o condicionalmente activa dentro del vector de expresión. El término "célula huésped" debe significar una célula con la capacidad de tener un vector incorporado en la misma. En el contexto de la presente invención, el vector normalmente contendrá un ácido nucleico que codifica un GPCR o una proteína de fusión GPCR en una conexión operable con una secuencia de promotor adecuado para permitir que ocurra la expresión de GPCR o la proteína de fusión GPCR. En modalidades particulares, la célula huésped es una célula huésped eucariótica. En ciertas modalidades, la célula huésped eucariótica una célula huésped de mamífero. En ciertas modalidades, la célula huésped eucariótica es una célula huésped de levadura. En ciertas modalidades, la célula huésped eucariótica es una célula huésped de melanoforo. El término "contacto" o "que contacta", debe significar que une al menos dos porciones. Los términos "modular" o "modificar" deben tomarse para definir un incremento o disminución en la cantidad, calidad o efecto de una actividad, función, o molécula particular. A manera de ilustración y no de limitación, los agonistas, agonistas parciales, agonistas inversos y antagonistas de un receptor acoplado por proteína G son moduladores de receptor. El término "molécula pequeña" debe tomarse para significar un compuesto que tiene un peso molecular menor a aproximadamente 10,000 gramos por mol, incluyendo un péptido, péptido mimético, aminoácido, análogo de aminoácido, polinucleótido, análogo de polinucleótido, nucleótido, análogo de nucleótido, compuesto orgánico o compuesto inorgánico (incluyendo un compuesto hetero-órganico o un compuesto organometálico), y sales, ásteres y otras formas farmacéuticamente aceptables de los mismos. En ciertas modalidades, las moléculas pequeñas son compuestos orgánicos o inorgánicos que tienen un peso molecular menor a aproximadamente 5,000 gramos por mol. En ciertas modalidades, las moléculas pequeñas son compuestos orgánicos o inorgánicos que tienen un peso molecular menor a aproximadamente 1,000 gramos por mol. En ciertas modalidades, las moléculas pequeñas son compuestos orgánicos o inorgánicos que tienen un peso molecular menor a aproximadamente 800 gramos por mol. En ciertas modalidades, las moléculas pequeñas son compuestos orgánicos o inorgánicos que tienen un peso molecular menor a aproximadamente 600 gramos por mol. En ciertas modalidades, las moléculas pequeñas son compuestos orgánicos o inorgánicos que tienen un peso molecular menor a aproximadamente 500 gramos por mol. Abreviaturas de aminoácido utilizados en la presente invención se establecen en la Tabla B.

TABLA B El término "polipéptido" debe referirse a un polímero de aminoácidos sin importar la longitud del polímero. Por lo tanto, los péptidos, oligopéptidos, y proteínas están incluidas dentro de la definición de polipéptido. Este término tampoco especifica o excluye modificaciones post-expresión de polipéptidos. Por ejemplo, los polipéptidos que incluyen la adhesión de grupos glucosilo, grupos acetilo, grupos fosfato, grupos de lípidos y similares están comprendidas de manera expresa por el término polipéptido.

El término "polinucleótido" debe referirse a una secuencia híbrida de ARN, DNA, o ARN/ADN de más de un nucleótido ya sea en una cadena simple o forma dúplex. Los polinucleótidos de la presente invención pueden prepararse a través de cualquier método conocido incluyendo sintéticos, recombinantes, generación ex vivo o una combinación de los mismos, así como utilizar cualesquiera métodos de purificación conocidos en la técnica. El término "anticuerpo" pretende significar que comprende un anticuerpo monoclonal y un anticuerpo policlonal. El término "segundo mensajero" debe significar una respuesta intracelular producida como resultado de la activación de receptor. Un segundo mensajero puede incluir, por ejemplo, 1 ,4,5-trifosfato de inositol ( I P3 ) , diacilglicerol (DAG), AMP cíclico (cA P), GMP cíclico (cGMP), actividad de cinasa MAP, actividad de cinasa-1 de cinasa MAPK/ERK (MEKKI), y Ca2 + . La respuesta al segundo mensajero puede medirse para una determinación de activación de receptor. El término "funcionalidad del receptor" debe referirse a la operación normal de un receptor para recibir un estímulo y moderar un efecto a la célula, que incluye pero no se limita a regular la transcripción de gen, regular el influjo o exflujo de iones, efectuar una reacción catalítica y/o modular la actividad a través de las proteínas G, tal como provocar la respuesta de un segundo mensajero.

El término "estimulado" o "que estimula" en relación con el término "respuesta" o "funcionalidad del receptor" debe significar que se incrementa una respuesta o funcionalidad del receptor en la presencia de un compuesto en forma opuesta en la ausencia del compuesto. El término "inhibir" o "que inhibe" en relación con el término "respuesta" o "funcionalidad del receptor" debe significar que se disminuye o evita una respuesta o funcionalidad del receptor en la presencia de un compuesto en forma opuesta a, en la ausencia del compuesto. El término "eficacia del compuesto" debe significar la medición de la capacidad de un compuesto para inhibir o estimular la funcionalidad de receptor, en forma opuesta a la afinidad de enlace de receptor. El término "compuesto de prueba" utilizado de manera intercambiable en la presente invención con el término "compuesto candidato" sebe significar una molécula (por ejemplo, y sin limitación, un compuesto químico) el cual es adecuado para una técnica de clasificación. El término "constitutivamente activo" en relación con un receptor acoplado de proteína G debe significar que el receptor acoplado por proteína G inhibe la actividad independiente de agonista. El término "que identifica directamente" o "identificado directamente", en relación con la frase "compuesto de prueba" debe significar la clasificación de un compuesto contra un receptor acoplado por proteína G en la ausencia de un ligando conocido (por ejemplo, un agonista conocido) para el receptor acoplado por proteína G. Cuando se proporciona un rango de valores, quedará entendido que cada valor que interviene, a la décima del límite inferior a menos que el contexto indique claramente lo contrario, entre el límite superior e inferior de dicho rango y cualquier otro valor manifestado o que interviene en dicho rango manifestado, está comprendido dentro de la presente invención. Los límites superiores e inferiores de estos rangos menores pueden estar incluidos independientemente en los rangos menores, y también están comprendidos de la presente invención, están sujetos a cualquier límite excluido de manera específica en el rango manifestado. Cuando el rango manifestado incluye uno o ambos de los límites, también se incluyen en la presente invención los rangos que excluyen cualquiera o ambos de los límites incluidos. A. Introducción El objetivo de las secciones que se encuentran más adelante es establecer la eficiencia de presentación y no pretende, ni se debe construir como una limitación de la descripción o las reivindicaciones adjuntas. B. Expresión de Receptor I. Polipéptidos GPCR de interés Un GPCR de la presente invención puede comprender una secuencia de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en: (a) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO: 2; (b) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2; (c) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2, en donde GPCR no comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2; (d) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humano utilizando cebadores específicos SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 4; (e) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que hibrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 ; (f) una variante de SEQ ID NO: 2; (g) una secuencia de aminoácidos de (f) cuando se selecciona del grupo que consiste en: (i) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G que tiene al menos aproximadamente 80% de identidad con SEQ ID NO: 2; y (¡i) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2; (h) la secuencia de aminoácidos de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado por proteína G que tiene SEQ ID NO: 2; y (i) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de los (a) a (h). En ciertas modalidades, un GPCR de la presente invención comprende la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2. En algunas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por el polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa es un receptor acoplado por proteína G endógeno. En algunas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por el polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa y que es un receptor acoplado por proteína G endógeno es un receptor acoplado por proteína G endógeno de mamífero. En algunas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por el polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa y que es un receptor acoplado por proteína G endógeno es un receptor GPR119 de mamífero. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por el polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa es SEQ ID NO:2 o un alelo del mismo. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa es un alelo de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por el polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa enlaza en forma específica al Compuesto I (ver tabla A, la cual establece la estructura química y nombre químico del Compuesto I). En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por el polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa se enlaza en forma específica a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por el polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa enlaza en forma específica a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina con un valor IC50 en el ensayo de enlace de receptor de acuerdo con el Ejemplo 12, infra, menor a aproximadamente 50 µ?, menor a aproximadamente 25 µ?, menor a aproximadamente 10 µ?, menor a aproximadamente 5 µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 500 nM, menor a aproximadamente 100 nM, o menor a aproximadamente 50 nM. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por el polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa enlaza en forma específica a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina con un valor IC50 en el ensayo de enlace de receptor de acuerdo con el Ejemplo 12, infra, menor a aproximadamente 10 µ?, menor a aproximadamente 5 µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 500 nM, menor a aproximadamente 100 nM, o menor a aproximadamente 50 nM. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por el polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-¡sopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista que tiene un valor EC50 en el receptor en todo el ensayo de ciclasa de adenililo de célula de acuerdo con el Ejemplo 8, infra, menor a aproximadamente 5 µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 100 nM, menor a aproximadamente 50 nM, menor a aproximadamente 25nM, menor a aproximadamente 10 nM, menor a aproximadamente 5 nM, o menor a aproximadamente 1 nM. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G codificado por el polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista que tiene un valor EC50 en el receptor en todo el ensayo de ciclasa de adenililo de célula completa de acuerdo con el Ejemplo 8, infra, menor a aproximadamente 100 nM, menor a aproximadamente 50 nM, menor a aproximadamente 25 nM, menor a aproximadamente 10 nM, menor a aproximadamente 5n M, o menor a aproximadamente 1 nM. En algunas modalidades, receptor acoplado por proteína G codificado por el polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento. En algunas modalidades, el ADN humano es ADN genómico. En algunas modalidades, la reacción de cadena de polimerasa es reacción de cadena de polimerasa de transcripción inversa (RT-PCR). Las técnicas RT-PCR son conocidas para los expertos en la técnica. En algunas modalidades, el ADN humano es cADN humano derivado de un tejido o tipo de célula que expresa GPR119. En algunas modalidades, el tejido humano que expresa GPR119 es un islote de páncreas o pancreático. En ciertas modalidades, el cADN es de un tipo de célula humana que expresa GPR119. En algunas modalidades, el cADN es de una línea de célula beta pancreática. En algunas modalidades, un GPCR de la presente invención es recombinante. En algunas modalidades, el GPCR recombinante es GPR119 humano recombinante. En ciertas modalidades, un GPCR que se puede utilizar en método de la presente invención, exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En algunas modalidades, un GPCR de la presente invención es endógeno. En algunas modalidades, un GPCR de la presente invención es un GPR119 de mamífero. En algunas modalidades, un GPCR de la presente invención que es endógeno es un GPR119 de mamífero. A manera de ilustración y no de limitación, la eliminación de un residuo de metionina N-terminal se considera que proporciona un fragmento biológicamente activo que puede ser utilizado en la presente invención. En ciertas modalidades, un fragmento biológicamente activo de la presente invención es un fragmento fusionado opcionaímente en su N-termino a un péptido que comprende un residuo de metionina N-terminal y una etiqueta de epítope HA (del virus de influenza de hemaglutinina) que enlaza específicamente al Compuesto 1. En ciertas modalidades, un fragmento biológicamente activo de la presente invención es un fragmento opcionaímente fusionado en su N-termino a un péptido que comprende un residuo de metionina N-terminal y una etiqueta de epítope HA (del virus de influenza de hemaglutinina) que enlaza específicamente a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazoi-5-il)-piperidin-1-M]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina. En ciertas modalidades, un fragmento biológicamente activo de la presente invención es un fragmento fusionado opcionalmente en su N-termino a un péptido que comprende un residuo de metionina N-terminal y una etiqueta de epítope HA que enlaza específicamente a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-yi}-amina con un valor IC50 en el ensayo de enlace de receptor de acuerdo con el Ejemplo 12, infra, menor a aproximadamente 50 µ?, menor a aproximadamente 25 µ?, menor a aproximadamente 10 µ?, menor a aproximadamente 5 µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 500 nM, menor a aproximadamente 100 nM, o menor a aproximadamente 50 nM. En ciertas modalidades, un fragmento biológicamente activo de la presente invención es un fragmento opcionalmente fusionado en su N-termino a un péptido que comprende un residuo de metionina N-terminal y una etiqueta de epítope HA que enlaza específicamente a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1 -il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina con un valor IC50 en el ensayo de enlace de receptor de acuerdo con el Ejemplo 12, infra, menor a aproximadamente 10 µ?, menor a aproximadamente 5 µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 500 nM, menor a aproximadamente 100 nM, o menor a aproximadamente 50 nM. En ciertas modalidades, un fragmento biológicamente activo de la presente invención es un fragmento fusionado opcionalmente en su N-termino a un péptido que comprende un residuo de metionina N-terminal y una etiqueta de epítope HA para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1 -il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista que tiene un valor EC50 en el fragmento opcionalmente fusionado en su N-termino para el péptido en todo el ensayo de ciclasa de adenililo de célula de acuerdo con el Ejemplo 8, infra, menor a aproximadamente 5 µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 100 nM, menor a aproximadamente 50 nM, menor a aproximadamente 25 nM, menor a aproximadamente 10 nM, menor a aproximadamente 5nM, o menor a aproximadamente 1 nM. En ciertas modalidades, un fragmento biológicamente activo de la presente invención es un fragmento fusionado opcionalmente en su N-termino a un péptido que comprende un residuo de metionina N-terminal y una etiqueta de epítope HA para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pir¡m¡din-4-il}-amina es un agonista que tiene un valor EC50 en el fragmento opcionalmente fusionado en su N-termino para el péptido en todo el ensayo de ciclasa de adenililo de célula de acuerdo con el Ejemplo 8, infra, menor a aproximadamente 100 nM, menor a aproximadamente 50 nM, menor a aproximadamente 25 nM, menor a aproximadamente 10 nM, menor a aproximadamente 5 nM, o menor a aproximadamente 1 nM. En algunas modalidades, un fragmento biológicamente activo de la presente invención es un fragmento fusionado opcionalmente en su N-termino a un péptido que comprende un residuo de metionina N-terminal y una etiqueta de epítope HA exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmentación. En ciertas modalidades, el fragmento se fusiona en su N-termino a un péptido que consiste esencialmente en un residuo de metionina N-terminal y una etiqueta de epítope HA. Las técnicas para fusionar un péptido que comprenden o consisten esencialmente en un residuo de metionina N-terminal y una etiqueta de epítope HA para el N-termino de un fragmento de polipéptido son conocidos en el arte y pueden obtenerse comercialmente (por ejemplo, Clontech, Mountain View, CA). Una variante alélica de GPR119 humano de SEQ ID NO: 2 se considera que está dentro del alcance de la presente invención. GPR119 humano se considera está dentro del alcance de la presente invención. Una variante que es un ortólogo de vertebrado de GPR119 humano de SEQ ID NO: 2 se considera que está dentro del alcance de la presente invención. Una variante que es un ortólogo mamífero de GPR119 humano de SEQ ID NO: 2 se considera que está dentro del alcance de la presente invención. A manera de ilustración y no de limitación, GPR119 de ratón (por ejemplo, Acceso GenBank® No. AY288423), GPR119 de rata (Acceso GenBank® No. AAN95195), GPR119 de hámster, GPR119 de perro, y GPR119 de primate no humano se consideran que está dentro del alcance de la presente invención. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un GPCR. Una variante de SEQ ID NO: 2 que tiene al menos aproximadamente el 80%, al menos aproximadamente el 85%, al menos aproximadamente el 90%, al menos aproximadamente el 95%, al menos aproximadamente el 96%, al menos aproximadamente el 97%, al menos aproximadamente el 98%, o al menos aproximadamente el 99% de identidad con SEQ ID NO: 2 se considera que está dentro del alcance de la presente invención. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 que tiene al menos aproximadamente el 80%, al menos aproximadamente el 85%, al menos aproximadamente el 90%, al menos aproximadamente el 95%, al menos aproximadamente el 96%, al menos aproximadamente el 97%, al menos aproximadamente el 98%, o al menos aproximadamente el 99% de identidad con SEQ ID NO: 2 es un GPCR. En algunas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un GPCR endógeno. En algunas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un GPCR no endógeno. En algunas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 que es un GPCR endógeno es un GPCR de mamífero. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 enlaza específicamente al Compuesto 1. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 enlaza específicamente a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 enlaza específicamente a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-íl}-amina con un valor IC50 en el ensayo de enlace de receptor de acuerdo con el Ejemplo 12, infra, menor a aproximadamente 50 µ?, menor a aproximadamente 25 µ?, menor a aproximadamente 10 µ?, menor a aproximadamente 5 µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 500 nM, menor a aproximadamente 100 nM, o menor a aproximadamente 50 nM. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 enlaza específicamente a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1 -il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina con un valor IC50 en el ensayo de enlace de receptor de acuerdo con el Ejemplo 12, infra, menor a aproximadamente 10 µ?, menor a aproximadamente 5µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 500 nM, menor a aproximadamente 100 nM, o menor a aproximadamente 50 nM. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfon¡l-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-¡l)-piperidin- -il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista que tiene un valor EC50 en el receptor en todo el ensayo de ciclasa de adenililo de célula completa de acuerdo con el Ejemplo 8, infra, menor a aproximadamente 5 µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 100 nM, menor a aproximadamente 50 nM, menor a aproximadamente 25nM, menor a aproximadamente 10 nM, menor a aproximadamente 5nM, o menor a aproximadamente 1 nM. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista que tiene un valor EC50 en el receptor en el ensayo de ciclasa de adenililo de célula completa de acuerdo con el Ejemplo 8, infra, menor a aproximadamente 100 nM, menor a aproximadamente 50 nM, menor a aproximadamente 25 nM, menor a aproximadamente 10 nM, menor a aproximadamente 5nM, o menor a aproximadamente 1 nM. En algunas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento. El porcentaje de identidad se puede determinar convencionalmente utilizando programas de computadora conocidos. En ciertas modalidades, una variante GPCR que se puede utilizar en los métodos de la presente invención tiene una secuencia de aminoácido que tiene al menos aproximadamente el 80%, al menos aproximadamente el 85%, al menos aproximadamente el 90%, al menos aproximadamente el 95%, de al menos aproximadamente el 96%, al menos aproximadamente el 97%, al menos aproximadamente el 98%, o al menos aproximadamente el 99% de identidad SEQ ID NO: 2. A través de una variante GPCR que tiene, por ejemplo, 95% de "identidad" con SEQ ID NO: 2, se entiende que la secuencia de aminoácidos de la variante es idéntica a los aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO: 2 excepto que puede incluir hasta cinco alteraciones de aminoácido por cada 100 aminoácidos de SEQ ID NO: 2. Por lo tanto, para obtener por ejemplo una secuencia de aminoácido que tiene al menos 95% de identidad con la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, hasta 5% (5 de 100) de los residuos de aminoácido en la secuencia pueden insertarse, eliminarse, o sustituirse con otro aminoácido comparado con los aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO: 2. Estas alteraciones pueden ocurrir en el término amino o carboxi o en cualquier lugar entre dichas posiciones terminales, interdispersas ya sea entre los residuos en la secuencia o en uno o más grupos contiguos dentro de la secuencia. En ciertas modalidades, un receptor acoplado por proteína G variante que puede utilizarse en los métodos de la presente invención es un receptor acoplado por proteína G que tiene una secuencia de aminoácido derivada de SEQ ID NO: 2 mediante eliminación, sustitución, y/o adición de uno o varios aminoácidos. En ciertas modalidades, un receptor acoplado por proteína G variante G que se puede utilizar en los métodos de la presente invención es un receptor acoplado por proteína G que tiene una secuencia de aminoácido derivada de SEQ ID NO: 2 por no más de 10 sustituciones de aminoácidos conservadoras y/o no más de 3 sustituciones de aminoácidos no conservadores en la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2. En ciertas modalidades, la arginina, Usina e histidina se pueden sustituir entre sí en forma conservadora; el ácido glutámico y ácido aspártico pueden sustituirse entre sí en forma conservadora; glutamina y asparagina se pueden sustituir entre sí en forma conservadora; leucina, isoleucina y valina pueden sustituirse entre sí en forma conservadora; fenilalanina, triptofan y tirosina se pueden sustituir entre sí en forma conservadora; y glicina, alanina, serina, treonina y metionina se pueden sustituir entre sí en forma conservadora. Las sustituciones de aminoácido, eliminaciones de aminoácido, o adiciones de aminoácido pueden estar en cualquier posición (por ejemplo el C o N-termino, o en posiciones internas). En algunas modalidades, la variante es un receptor acoplado por proteína G endógeno. En algunas modalidades, la variante es un receptor acoplado por proteína G de vertebrado endógeno. En algunas modalidades, la variante es un receptor acoplado por proteína G de mamífero endógeno. En algunas modalidades, la variante es un receptor acoplado por proteína humano endógeno G. En algunas modalidades, la variante es un receptor acoplado por proteína G no endógeno. En algunas modalidades, la variante exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G que tiene una secuencia de aminoácido derivada de SEQ ID NO: 2 es un receptor acoplado con proteína G para el cual el Compuesto 1 es un ligando. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G que tiene una secuencia de aminoácido derivada de SEQ ID NO: 2 es receptor acoplado por proteína G para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1 -il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un ligando que tiene un valor IC50 en el ensayo de enlace de receptor de acuerdo con el Ejemplo 12, infra, menor a aproximadamente 50 µ?, menor a aproximadamente 25 µ?, menor a aproximadamente 10 µ?, menor a aproximadamente 5 µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 500 nM, menor a aproximadamente 100 nM, o menor a aproximadamente 50 nM. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G que tiene una secuencia de aminoácido derivada de SEQ ID NO: 2 es un receptor acoplado por proteína G para el cual el Compuesto 1 es un agonista. En ciertas modalidades, el receptor acoplado por proteína G que tiene una secuencia de aminoácido derivada de SEQ ID NO: 2 es un receptor acoplado por proteína G para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin- -il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista que tiene un valor EC50 en el ensayo de ciclasa de adenililo de célula completa de acuerdo con el Ejemplo 8, infra, menor a aproximadamente 5 µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 100 nM, menor a aproximadamente 50 nM, menor a aproximadamente 25nM, menor a aproximadamente 10 nM, menor a aproximadamente 5 nM, o menor a aproximadamente 1 nM. Una variante de SEQ ID NO: 2 que receptor acoplado por proteína G que comprende al menos 20, al menos 30, al menos 40, al menos 50, al menos 75, o al menos 100 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2 se considera que está dentro de la presente invención. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 que comprende al menos 20, al menos 30, al menos 40, al menos 50, al menos 75, o al menos 100 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2 es un GPCR. En algunas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un GPCR endógeno. En algunas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un GPCR no endógeno. En algunas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 que es un GPCR endógeno es un GPCR de mamífero. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 enlaza específicamente al Compuesto 1. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 enlaza específicamente a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 enlaza específicamente a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il)-amina con un valor IC50 en el ensayo de enlace de receptor de acuerdo con el Ejemplo 12, infra, menor a aproximadamente 50 µ?, menor a aproximadamente 25 µ?, menor a aproximadamente 1 ?µ?, menor a aproximadamente 5 µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 500 nM, menor a aproximadamente 100 nM, o menor a aproximadamente 50 nM. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 enlaza específicamente a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1 -il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina con un valor IC50 en el ensayo de enlace de receptor de acuerdo con el Ejemplo 12, infra, menor a aproximadamente 10 µ?, menor a aproximadamente 5 µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 500 nM, menor a aproximadamente 100 nM, o menor a aproximadamente 50 nM. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1 -il]-5-nitro-pirimidin-4-il]-amina es un agonista que tiene un valor EC50 en el receptor en el ensayo de ciclasa de adenililo de célula completa de acuerdo con el Ejemplo 8, infra, menor a aproximadamente 5 µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 100 nM, menor a aproximadamente 50 nM, menor a aproximadamente 25 nM, menor a aproximadamente 10 nM, menor a aproximadamente 5nM, o menor a aproximadamente 1 nM. En ciertas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pir¡midin-4-il}-amina es un agonista que tiene un valor EC50 en el receptor en el ensayo de ciclasa de adenililo de célula completa de acuerdo con el Ejemplo 8, infra, menor a aproximadamente 100 nM, menor a aproximadamente 50 nM, menor a aproximadamente 25 nM, menor a aproximadamente 10 nM, menor a aproximadamente 5 nM, o menor a aproximadamente 1 nM. En algunas modalidades, la variante de SEQ ID NO: 2 exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasan por dispersión de pigmento. En algunas modalidades, el receptor acoplado por proteína G que comprende al menos 20, al menos 30, al menos 40, al menos 50, al menos 75, o al menos 100 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2 exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento. En algunas modalidades, una variante GPCR que se puede utilizar en los métodos de la presente invención es un GPCR codificado por un polinucleotido que hibrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1. En algunas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleotido que hibrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 es un GPCR endógeno. En algunas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleotido que hibrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 es un GPCR no endógeno. En algunas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleotido que hibrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 y que es un GPCR endógeno es un GPCR endógeno de mamífero. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 es SEQ ID NO:2 o un alelo del mismo. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 es un alelo de SEQ ID NO:2. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ IDNO: 1 es un ortólogo de SEQ IDNO:2. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 enlaza específicamente al Compuesto 1. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 enlaza específicamente a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-¡sopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperid¡n-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-¡l}-amina. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 enlaza específicamente a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina con un valor IC50 en el ensayo de enlace de receptor de acuerdo con el Ejemplo 12, infra, menor a aproximadamente 50 µ?, menor a aproximadamente 25 µ?, menor a aproximadamente 10 µ?, menor a aproximadamente 5µ?, menor a aproximadamente 1µ?, menor a aproximadamente 500 nM, menor a aproximadamente 100 nM, o menor a aproximadamente 50 nM. En ciertas modalidades, el GPCR codificado- por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 enlaza específicamente a (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina con un valor IC5o en el ensayo de enlace de receptor de acuerdo con el Ejemplo 12, infra, menor a aproximadamente 10 µ?, menor a aproximadamente 5 µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 500 nM, menor a aproximadamente 100 nM, o menor a aproximadamente 50 nM. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista que tiene un valor EC50 en el receptor en el ensayo de ciclasa de adenililo de célula completa de acuerdo con el Ejemplo 8, infra, menor a aproximadamente 5 µ?, menor a aproximadamente 1 µ?, menor a aproximadamente 100 nM, menor a aproximadamente 50 nM, menor a aproximadamente 25nM, menor a aproximadamente 10 nM, menor a aproximadamente 5 nM, o menor a aproximadamente 1 nM. En ciertas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 es un receptor para el cual (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina es un agonista que tiene un valor EC50 en el receptor en el ensayo de ciclasa de adenililo de célula completa de acuerdo con el Ejemplo 8, infra, menor a aproximadamente 100 nM, menor a aproximadamente 50 nM, menor a aproximadamente 25 nM, menor a aproximadamente 10 nM, menor a aproximadamente 5 nM, o menor a aproximadamente 1 nM. En algunas modalidades, el GPCR codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 exhibe un nivel detectable de actividad constitutiva. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento. Las técnicas de hibridación son conocidas para los expertos en el arte. En algunas modalidades, las condiciones de hibridación estrictas (por ejemplo condiciones de alta rigurosidad) incluyen incubación durante la noche a una temperatura de 42°C en una solución que comprende: 50% formamida, 5 x SSC (1 x SSC = 150 mM NaCI, 15 mM citrato trisódico), 50 mM fosfato de sodio (pH 7.6), solución de Denhardt 5x, sulfato de dextrano al 10%, y 20 pg/ml de ADN de esperma de salmón trasquilado, desnaturalizado; seguido de lavado en filtro en 0.1 x SSC a una temperatura de aproximadamente 65°C. En algunas modalidades, las condiciones de hibridación estrictas (por ejemplo, condiciones de alta rigurosidad) incluye incubación durante la noche a una temperatura de 42°C en una solución que comprende: 50% formamida, 5 x SSC (1 x SSC = 150 mM NaCI, 15 mM citrato trisódico), 50 mM fosfato de sodio (pH 7.6), solución de Denhardt 5x, sulfato de dextrano al 10%, y 20 pg/ml de ADN de esperma de salmón trasquilado, desnaturalizado, seguido de un lavado en 0.1 x SSC/0.1% SDS (sulfato dodecilo de sodio) o en 0.2 x SSC/0.1% SDS a una temperatura de aproximadamente 50°C hasta aproximadamente 55°C, o aproximadamente 60°C hasta aproximadamente 65°C. En algunas modalidades, las condiciones de alta rigurosidad comprenden lavar a una temperatura de 65°C con 0.1 x SSC. En algunas modalidades, las condiciones de alta rigurosidad comprenden lavar a una temperatura de aproximadamente 50°C, a aproximadamente 55°C, a aproximadamente 60°C, o aproximadamente 65°C con 0.1 x SSC/0.1 % SDS o con 0.2 x SSC/0.1% SDS. En algunas modalidades, un GPCR que se puede utilizar en los métodos de la presente invención es un receptor activado en forma constitutiva no endógeno que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, en donde la leucina en la posición de aminoácidos 224 de SEQ ID NO: 2 es sustituida con un aminoácido además de leucina. En algunas modalidades, el aminoácido además de leucina es lisina. En algunas modalidades, el aminoácido además de leucina es alanina. En algunas modalidades, el aminoácido además de leucina es arginina. En algunas modalidades, el aminoácido además de leucina es histidina. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar el nivel de cAMP ¡ntracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmento. En ciertas modalidades, un GPCR de la presente invención comprende una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado por proteína G que tiene SEQ ID NO: 2. En algunas modalidades, la versión constitutivamente activa del receptor es una versión constitutivamente activa endógena que tiene SEQ ID NO: 2. En algunas modalidades, la versión constitutivamente activa del receptor es una versión constitutivamente activa no endógena que tiene una mutación colocada en una posición de aminoácidos 224 de SEQ ID NO: 2. En algunas modalidades, el residuo mutado ha sido mutado a un residuo además de de leucina. En algunas modalidades, el residuo mutado ha sido mutado a un residuo de lisina. En algunas modalidades, el residuo mutado ha sido mutado a un residuo de alanina. En algunas modalidades, el residuo mutado ha sido mutado a un residuo de arginina. En algunas modalidades, el residuo mutado ha sido mutado a un residuo de histidina. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para incrementar un nivel de cAMP intracelular. En algunas modalidades, la actividad constitutiva es para originar que las células de melanoforo pasen por dispersión de pigmentación. En ciertas modalidades, un GPCR de la presente invención forma parte de una proteína de fusión con una proteína G. a. Identidad de Secuencia En ciertas modalidades, el porcentaje de identidad se evaluó utilizando Basic Local Alignment Search Tool ("BLAST"), el cual es bien conocido en la técnica [Ver por ejemplo, las Publicaciones de Karlin y Altschul, Proc Nati Acad Sci E.U.A. (1990) 87:2264-2268; Altschul y asociados, J Mol Biol (1990) 215:403-410; Altschul y asociados, Nature Genetics (1993) 3:266-272; y Altschul y asociados, Nucleic Acids Res (1997) 25:3389-3402; cuyas descripciones están incorporadas en sus totalidades a la presente invención como referencia]. Los programas BLAST se pueden utilizar con los parámetros por omisión o con parámetros modificados proporcionados por el usuario. Preferentemente, los parámetros son parámetros por omisión. En ciertas modalidades, un método preferido para determinar el mejor acoplamiento general entre una secuencia de rastreo (por ejemplo, la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO:2) y una secuencia que será interrogada, también son referidos como alineación de secuencia global, y se puede determinar utilizando el programa de computadora FASTDB basado en el algoritmo de Brutlag y asociados (Comp App Biosci (1990) 6:237-245; cuya descripción está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia). En una alineación de secuencia, las secuencias de consulta e interrogadas ambas son secuencias de aminoácido. Los resultados de la alineación de secuencia global están en porcentaje de identidad. Los parámetros preferidos utilizados en la alineación de aminoácido FASTDB son: Matrix = PAM 0, k-tuple = 2, Penalidad por Desacoplamiento = 1, Penalidad por Unión = 20, Grupo de Aleatorización = 25, Longitud = 0, Calificación de Corte = 1, Tamaño de Ventana = longitud de secuencia, Penalidad por Abertura = 5, Penalidad por Tamaño de abertura = 0.05, Tamaño de Ventana = 247 o la longitud de la secuencia de aminoácido interrogada, siempre que sea más corta. Si la secuencia interrogada es más corta que la secuencia de rastreo debido a eliminaciones en la N o C-terminal, no debido a eliminaciones internas, los resultados, en porcentaje de identidad, deben ser corregidos manualmente debido a que el programa FASTDB no abarca las truncaciones N y C-terminal de la secuencia interrogada cuando se calcula el porcentaje de identidad global. Para secuencias interrogadas truncadas en el N y C-termino, con relación a la secuencia de rastreo, el porcentaje de identidad de corrige calculando el número de residuos de la secuencia de rastreo que son N y C-terminal de la secuencia interrogada que no están acoplados/alineados con un residuo de secuencia interrogada correspondiente, como un porcentaje de pérdidas totales de la secuencia de rastreo. Si el residuo está acoplado/alineado se determina a través de los resultados de la alineación de secuencia FASTDB. Este porcentaje posteriormente se sustrae del porcentaje de identidad calculado a través del programa FASTDB anterior utilizando los parámetros específicos, para llegar a una calificación final del porcentaje de identidad. Esta calificación final de porcentaje de identidad es la que se utiliza con el propósito de la presente invención. Únicamente los residuos del N y C-termino de la secuencia interrogada, los cuales no están acoplados/alineados con la secuencia de rastreo, se consideran para los propósitos de ajustar manualmente la calificación de porcentaje de identidad. Esto es, únicamente los residuos de aminoácido de consulta fuera de los residuos N y C-terminal más lejano de la secuencia interrogada. Por ejemplo, una secuencia interrogada con 90 residuos de aminoácidos está alineada con una secuencia de rastreo de 100 residuos para determinar el porcentaje de identidad. La eliminación ocurre en el N-termino de la secuencia interrogada, y por consiguiente, la alienación FASTDB no se acopla/aliena con el primer residuo en el N-termino. Los 10 residuos sin par representan el 10% de la secuencia (número de residuos en el N y C-termino no acoplados/número total de residuos en la secuencia o consulta), de modo que el 10% es sustraído de la calificación de porcentaje de identidad calculada a través del programa FASTDB. Si los restantes 90 residuos fueron acoplados perfectamente, el porcentaje de identidad final puede ser del 90%. En otro ejemplo, se compara una secuencia interrogada de 90 residuos con una secuencia de rastreo de 100 residuos. Esta vez las eliminaciones son internas, de modo que no hay residuos en el N o C-termino de la secuencia interrogada, los cuales o están acoplados/alineados con la consulta. En este caso, el porcentaje de identidad calculado por FASTDB no se corrige en forma manual. Una vez más, únicamente las posiciones de residuos fuera de los extremos N y C-terminal de la secuencia en cuestión, se despliegan en la alineación FASTDB, los cuales no están acoplados/alineados con la secuencia de rastreo y se corrigen en forma manual. No se hacen otras correcciones con los propósitos de la presente invención. b. Proteínas de Fusión En ciertas modalidades, un polipéptido es un proteína de fusión, y puede contener por ejemplo, u dominio de etiqueta de afinidad o un dominio reportero. Las etiquetas de afinidad adecuadas incluyen cualquier secuencia de aminoácido que pueda enlazar en forma específica a otra porción, normalmente otro polipéptido, más normalmente un anticuerpo. Las etiquetas de afinidad adecuadas incluyen etiquetas de epítope, por ejemplo, la etiqueta V5, la etiqueta FLAG, la etiqueta HA (para virus de influenza de hemaglutinina), la etiqueta myc, y similares, tal como se conoce en la técnica. Las etiquetas de afinidad adecuadas también incluyen dominios para los cuales, los substratos de enlace son conocidos, por ejemplo etiquetas HIS, GST y MBP, tal como se sabe en la técnica, y dominios de otras proteínas para los cuales están disponibles partes de enlace específico, por ejemplo, anticuerpos, particularmente anticuerpos monoclonales. Las etiquetas de afinidad adecuadas también incluyen cualquier dominio de interacción de proteína-proteína, tal como la región IgG Fe, la cual puede enlazar en forma específica y ser detectada utilizando una parte de enlace adecuada, por ejemplo, el receptor IgG Fe. Se contempla de manera expresa que dicha proteína de fusión puede contener un dominio N-terminal heterólogo (por ejemplo una etiqueta de epítope) fusionada en cuadro con un GPCR que había tenido su residuo de metionina N-terminal ya sea eliminado o sustituido con un aminoácido alternativo. Los dominios reporteros adecuados incluyen cualquier dominio que pueda reportar la presencia de un polipéptido. Aunque se reconoce que la etiqueta de afinidad se puede utilizar para reportar la presencia de un polipéptido utilizando por ejemplo un anticuerpo etiquetado que enlaza específicamente a la etiqueta, normalmente se utilizan dominios reporteros de emisión de luz. Los dominios reporteros de emisión de luz adecuados incluyen luciferasa (por ejemplo de luciérnaga, Vargula, Renilla reniformis o Renilla muelleri), o variantes de emisión de luz de los mismos. Otros dominios reporteros adecuados incluyen proteínas fluorescentes de medusa, corales y otros celéntereo tales como los que proceden de las especies Aequoria, Renilla, Ptilosarcus, Stylatula), o variantes de emisión de luz de los mismos. Las variantes de emisión de luz de estas proteínas reporteras son conocidas en la técnica y pueden ser más brillantes, más tenues o tener diferentes espectros de excitación y/o emisión, en comparación con una proteína reportera nativa. Por ejemplo, se alteran algunas variantes, de modo que ya no parezcan verdes, y puedan aparecer azules, cian, amarillo, rojo amarillo mejorado (denominados BFP, CFP, YFP eYFP y RFP, respectivamente) o tener otro espectro de emisión, tal como se sabe en la técnica. Otros dominios reporteros adecuados incluyen dominios que pueden recortar la presencia de un polipéptido a través de un cambio bioquímico o de color, tal como ß-galactosidasa, ß-glucuronidasa, acetiltransferasa de cloramfenicol, fosfatasa alcalina embriónica secretada. Tal como se sabe también en la técnica, una etiqueta de afinidad o un dominio reportero puede encontrarse en cualquier posición en un polipéptido de interés. Sin embargo, en la mayoría de las modalidades, se presentan en el extremo C o N-terminal de un polipéptido de interés. 2. Acidos nucleicos que codifican polipéptidos GPCR de interés Ya que el código genético y las técnicas recombinantes para manipular el ácido nucleico son conocidos, y la secuencias de aminoácidos de polipéptidos GPCR de interés tal como se describió anteriormente, el diseño y la producción de ácidos nucleicos que codifican el polipéptido GPCR de interés también está dentro de las habilidades en el arte. En ciertas modalidades, se utilizan métodos de tecnología de ADN estándar (Ausubel, y asociados, Short Protocols in Molecular Biology, 3o edición, Wiley & Sons, 1995; Sambrook, y asociados, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Segunda Edición, (1989) Cold Spring Harbor, N. Y.). Por ejemplo, las secuencias de codificación GPCR se pueden aislar de una biblioteca de secuencia de codificación GPCR utilizando cualquiera de una o una combinación de una variedad de métodos recombinantes que no necesitan ser descritos en la presente invención. La sustitución, eliminación y/o adición de nucleótido subsecuente en la secuencia de ácido nucleico que codifica una proteína, también se puede realizar utilizando técnicas de ADN recombinante estándar. Por ejemplo, la mutagénesis dirigida al sitio y la subclonación se puede utilizar para introducir/eliminar/sustituir residuos de ácido nucleico en un polinucleótido que codifica un polipéptido de interés. En otras modalidades, se puede utilizar PCR. Los ácidos nucleicos que codifica un polipéptido de interés también se pueden elaborar mediante síntesis química completamente a partir de oligonucleótidos (por ejemplo, Cello y asociados, Science (2002) 297:1016-8). En algunas modalidades, los codones de los ácidos nucleicos que codifican polipéptidos de interés son optimizados para expresión en células de una especie en particular, particularmente un mamífero, por ejemplo ratón, rata, hámster, primate no humano o especie humana. En algunas modalidades, los codones de los ácidos nucleicos que codifican los polipéptidos de interés son optimizados para la expresión en células de una especie en particular, particularmente una especie de anfibio. a. Vectores La presente invención proporciona además vectores (también referido como "construcciones") que comprende un ácido nucleico en cuestión. En muchas modalidades de la presente invención, las secuencias de ácido nucleico en cuestión serán expresadas en un huésped después de que las secuencias han sido enlazadas en forma operable a una secuencia de control de expresión, incluyendo por ejemplo un promotor. Los ácidos nucleicos en cuestión también son colocados normalmente en un vector de expresión que puede replicarse en una célula huésped, ya sea como un isómero o una parte integral de un ADN cromosomal del receptor. Comúnmente, los vectores de expresión contendrán marcadores de selección, por ejemplo, tetraciclina o neomicin, para permitir la detección de las células transformadas con las secuencias de ADN deseadas (ver por ejemplo, Patente Norteamericana No. 4,704,362, la cual está incorporada a la presente invención como referencia). Los vectores, incluyendo vectores de cinta de expresión simples o dobles con bien conocidos en la técnica (Ausubel, y asociados, Short Protocols in Molecular Biology, 3° eddición, Wiley & Sons, 1995; Sambrook, y asociados, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Segunda Edición, (1989) Cold Spring Harbor, N.Y.). Los vectores adecuados incluyen vectores virales plásmidos, cósmidos, cromosomas, artificiales (cromosomas artificiales humanos, cromosomas artificiales bacterianos, cromosomas artificiales de levadura, etc), mini-cromosomas, y similares. También se pueden utilizar vectores retrovirales, adenovirales y virales adeno asociados. Esta disponible una variedad de vectores de expresión para los expertos en la técnica, para los propósitos de producir un polipéptido de interés en una célula e incluyen vectores de expresión que está comercialmente disponibles (por ejemplo de Invitrogen, Carlsbad, CA; Clontech, Mountain View, CA; Stratagene, La Jolla, CA). Los vectores de expresión comercialmente disponibles incluyen, a manera de un ejemplo sin limitación, vectores a base de promotor CMV. Un vector de expresión adecuado es pCMV. El vector de expresión puede ser adenoviral. Un vector adenoviral de ejemplo puede ser comprado como AdEasyTM from Qbiogene (Carlsbad, CA) (He TC y asociados, ProcNatl Acad Sci E.U.A. (1998) 95:2509-2514; y Patente Norteamericana No. 5,922,576; cuyas descripciones están incorporadas en su totalidades a la presente invención como referencia). Los vectores de expresión adecuados podrán ser fácilmente apreciados por los expertos en la técnica. Los ácidos nucleicos en cuestión normalmente comprenden un solo cuadro de lectura abierta que codifica un polipéptido en cuestión de interés, sin embargo, en ciertas modalidades, ya que la célula huésped para expresión del polipéptido de interés puede ser una célula eucariótica, por ejemplo, una célula de mamífero, tal como una célula humana, el cuadro de lectura abierta puede ser interrumpido por intrones. El ácido nucleico en cuestión normalmente es parte de una unidad de transcripción que puede contener, además del ácido nucleico en cuestión 3' y 5', regiones no traducidas (UTRs) las cuales pueden dirigir la estabilidad de ARN, eficiencia de traducción, etc. El ácido nucleico en cuestión también puede ser parte de una cinta de expresión que contiene, además del ácido nucleico en cuestión un promotor, el cual dirige la transcripción y expresión de un polipéptido de interés, y un terminador de transcripción. Los promotores eucarióticos pueden ser cualquier promotor que sea funcional en una célula huésped eucariótica, incluyendo promotores virales y promotores derivados de genes eucarióticos. Los promotores eucarióticos de ejemplo incluyen pero no se limitan a los siguientes: el promotor de la secuencia de gen de metalotioneina I de ratón (Hamer y asociados, J. Mol. Appl. Gen. 1:273-288, 1982); el promotor TK de virus de Herpes (McKnight, Cell 31:355-365, 1982); el promotor temprano SV40 (Benoist y asociados, Nature (Londres) 290:304-310, 1981 ); el promotor de secuencia de gen de hiél de levadura (Johnston y asociados, Proc. Nati, Acad. Sci. (E.U.A.) 79:6971-6975, 1982); Silver y asociados, Proc. Nati. Acad. Sci. (E.U.A.) 81 :5951-59SS, 1984), el promotor CMV, el promotor EF-I, el promotor(s) que responde a Ecdysone, el promotor que responde a tetraciclina y similares. Los promotores virales pueden ser de interés particular, ya que generalmente son promotores particularmente fuertes. En ciertas modalidades, se utilizó un promotor que es un promotor del patógeno objetivo. Los promotores para utilizarse en la presente invención se seleccionan de modo que son funcionales en el tipo de célula (y/o animal) en el cual están siendo introducidos. En ciertas modalidades, el promotor es un promotor CMV.

En ciertas modalidades, un vector en cuestión también puede proporcionar la expresión de un marcador seleccionable. Los vectores adecuados y marcadores seleccionables son bien conocidos en la técnica y se describen en las Publicaciones de Ausubel, y asociados, (Short Protocols in Molecular Biology, 3o edición, Wiley & Sons, 1995) y Sambrook, y asociados, (Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Tercera Edición, (2001 ) Cold Spring Harbor, N.Y.). Se han empleado una variedad de diferentes genes como marcadores seleccionables, y el gen particular empleado en los vectores en cuestión como un marcador seleccionable se eligen principalmente como un asunto de conveniencia. Los genes marcadores seleccionables conocidos incluyen: el gen de cinasa de timidina, el gen de reductasa de dihidrofolato, el gel de fosforibosil transferasa de xantina-guanina, CAD, el gen de desaminasa de adenosina, el gen de sintetasa de asparagina, los genes de resistencia antibióticos, por ejemplo tetr, ampr, Cmr o cat, kanr o neor (genes de fosfotransferasa de aminoglucósido), el gen de fosfotransferasa de higromicina B y similares. Tal como se mencionó anteriormente, los polipéptidos de interés pueden ser proteínas de fusión que contienen un dominio de afinidad y/o un dominio reportero. Los métodos para elaborar funciones entre un reportero o etiqueta y un GPCR, por ejemplo, en el C o N-termino del GPCR, están dentro de las habilidades en la técnica (por ejemplo, ver la Publicación deMcLean y asociados, Mol.

Pharma. Mol Pharmacol. 1999 56:1 182-91 ; Ramsay y asociados, Br. J. Pharmacology, 2001, 315-323) y no se describen en forma adicional. Se contempla de manera expresa que dicha proteína de fusión pueda contener un dominio N-terminal heterólogo (por ejemplo, una etiqueta de epítope) fusionada en cuadro, con un GPCR que ha tenido su residuo de metionina N-terminal ha sido eliminado o sustituido con un aminoácido alternativo. Se puede apreciar que un polipéptido de interés puede ser elaborado primero a partir de un polipéptido nativo y posteriormente enlazarse en forma operable a un reportero/etiqueta adecuada, tal como se describió anteriormente. Los ácidos nucleicos en cuestión también pueden contener sitios de restricción, múltiples sitios de clonación, sitios de enlace de cebador, extremos que se pueden ligar, sitios de recombinación, etc, normalmente con el objeto de facilitar la construcción de un ácido nucleico que codifica un polipéptido de interés. b. Células huésped La presente invención proporciona además células huésped que comprenden un vector que comprende un ácido nucleico en cuestión. Las células huésped adecuadas incluyen células procarióticas, por ejemplo, bacterianas (por ejemplo E. coli), así como células eucarióticas, por ejemplo una célula animal (por ejemplo, una célula de insecto, mamífero, pescado, anfibio, ave o reptil), una célula de planta (por ejemplo, una célula de maíz o Arabidopsis), o una célula de hongo (por ejemplo una célula de S. cerevisiae) . En ciertas modalidades, cualquier célula adecuada para la expresión de un ácido nucleico que codifica un polipéptido de interés puede ser utilizada como una célula huésped. Normalmente, se utiliza una línea de célula huésped animal, cuyos ejemplos se indican a continuación: células de riñon de mono (células COS), células CVI de riñon de de mono transformadas mediante SV40 (COS-7, ATCC CRL 165 1); células de riñon embriónico humano (HEK-293 ["293"], Gram. y asociados,. J. Gen Virol. 36:59 (1977)); HEK-293T ["293T"]; células de riñon de hámster bebe (BHK, ATCC CCL 10); células de ovario de hámster Chino (CHO, Urlaub y Chasin, Proc. Nati. Acad. Sci. (E.U.A.) 77:4216, (1980); células de hámster dorado Sirio MCB3901 (ATCC CRL-9595); células Sertoli de ratón (TM4, Mather, Biol. Reprod. 23:243-251 (1980)); células de riñon de mono (CVI ATCC CCL 70); células de rincón de mono verde africano (VERO-76, ATCC CRL-1587); células de carcinoma cervical humano (HELA, ATCC CCL 2); células de riñon de canino (MDCK, ATCC CCL 34); células de hígado de rata de búfalo (BRL 3 A, ATCC CRL 1442); células de pulmón humano (W138, ATCC CCL 75); células de hígado humano (hep G2, HB 8065); tumor mamario de ratón (MMT 060562, ATCC CCL 51); células TR1 (Mather y asociados, Annals N. Y. Acad. Sci 383:44-68 (1982)); células NIH/3T3 (ATCC CRL-1658); y células L de ratón (ATCC CCL-1). En ciertas modalidades, se utilizan melanoforos. Los melanoforos son células de piel encontradas en vertebrados inferiores. Los materiales y métodos relevantes se seguirán de acuerdo con la descripción de la Patente Norteamericana No. 5,462,856 y Patente Norteamericana No. 6,051,386. Estas descripciones de patentes están incorporadas en su totalidad a la presente invención como referencia. Las líneas celulares adicionales podrán ser apreciadas por los expertos en la técnica, y una amplia variedad de líneas celulares están disponibles en la Recolección de cultivo Tipo Americano 10801 University Boulevard, Manassas, Va. 201 10-2209. C. Clasificación de Compuestos Candidatos 1. Técnicas de ensayo de clasificación GPCR genérico Cuando un receptor de proteína G se vuelve activo, enlaza a una proteína G {por ejemplo, Gq, Gs, Gi, Gz, Go) y estimula en enlace de GTP a la proteína G. La proteína G posteriormente actúa como un GTPase e hidroliza lentamente el GTP al GDP, mediante lo cual el receptor, bajo condiciones normales, queda desactivado. Sin embargo, los receptores activados continúan intercambiando GDP a GTP. Un análogo no hidrolizable de GTP, [35S]GTPyS, se puede utilizar para monítorear el enlace mejorado a membranas que expresan receptores activados. Se reporta que [35S]GTPyS se puede utilizar para monitorear el acoplamiento de proteína G a membranas en la ausencia y presencia de un ligando. Un ejemplo de este monitoreo, entre otros ejemplos bien conocidos y disponibles para los expertos en la técnica, fue reportado por Traynor y Nahorski en 1995. Un uso preferido de este sistema de ensayo es para la clasificación inicial de compuestos candidatos debido a que el sistema aplica genéricamente a todos los receptores acoplados por proteína G sin importar la proteína G en particular que interactúa con el dominio intracelular del receptor. 2. Técnicas de ensayo de clasificación GPCR específico Una vez que los compuestos candidatos son identificados utilizando el ensayo de receptor acoplado para proteína G "genérico" (es decir un ensayo para seleccionar los compuestos que con agonistas o agonistas inversos) en algunas modalidades se prefiere una clasificación adicional para confirmar que los compuestos han interactuado en el sitio del receptor Por ejemplo, un compuesto identificado mediante el ensayo "genérico" puede no enlazar al receptor, aunque puede más bien "desacoplar" meramente la proteína G del dominio intracelular. a. Gs, Gz y Gi Gs estimula la ciclasa de adenililo de enzimas. Gi (y Gz y Go), por otra parte, inhibe la ciclasa de adenililo. La ciclasa de adenililo cataliza la conversión de ATP a cAMP; por lo tanto, los GPCRs activados que acoplan la proteína Gs están asociados con niveles celulares incrementados de cAMP. Por otra parte, los GPCRs activados que acoplan la proteína Gi (o Gz, Go) están asociados con niveles celulares disminuido de cAMP. Ver de manera general las Publicación de generally, "Indirect Mechanisms of Synaptic Transmission," Capítulo. 8, From Neuron To Brain (3o Edición) Nichols, J.G. y asociados, eds. Sinauer Associates, Inc. (1992). Por lo tanto, los ensayos que detectan cAMP pueden ser utilizados para determinar si un compuesto candidato es por ejemplo, un agonista inverso para el receptor (por ejemplo, dicho compuesto puede disminuir los niveles de cAMP). Una variedad de métodos conocidos en la técnica para medir cAMP se puede utilizar; en algunas modalidades un método preferido descansa en el uso de anticuerpos anti-cAMP en un formato a base de ELISA. Otro tipo de ensayo que se puede utilizar es un ensayo de sistema reportero de segundo mensajero de célula completa. Los promotores en los genes conducen a la expresión de las proteínas que codifica un gen en particular. AMP cíclico conduce la expresión genética, promoviendo el enlace de una proteína de enlace de ADN que responde a cAMP o factor de transcripción (CREB), que posteriormente enlaza al promotor en sitios específicos denominados elementos de respuesta cAMP que conduce la expresión del gen. Los sistemas reporteros pueden ser construidos para tener un promotor que contiene múltiples elementos de respuesta cAMP antes del gen reportero, por ejemplo, ß-galactosidasa o luciferasa. Por lo tanto, el receptor enlazado-Gs activado origina la acumulación de cAMP que posteriormente activa el gen y la expresión de la proteína reportera. La proteína reportera, tal como ß-galactosidasa o luciferasa posteriormente puede ser detectada utilizando ensayos bioquímicos estándar (Chen y asociados 1995). b. Co y Gq Gq y Go están asociados con activación de la fosfolipasa de enzima C, la cual a su vez hidroliza el fosfolípido PIP2, libera no dos mensajeros intracelulares: diaciclglicerol (DAG) y 1 ,4,5-trifosfato de inositol ( I P 3 ) . La acumulación incrementada de IP3, está asociada con la activación de receptores asociados- Gq y Go. Ver de manera general la Publicación ""Indirect Mechanisms of Synaptic Transmission," Capítulo 8, From Neuron To Brain (3o Edición) Nichols, J.G. y asociados eds. Sinauer Associates, Inc. (1992). Los ensayos que detectan la acumulación IP3 pueden ser utilizados para determinar si un compuesto candidato es, por ejemplo, un agonista inverso de un receptor asociado-Gq o Go (por ejemplo, el compuesto puede disminuir los niveles de I P 3 ) ¦ Los receptores asociados-Gq también pueden ser revisados utilizando un ensayo de reportero API ya que la fosfolipasa-C dependiente de Gq origina la activación de genes que contienen elementos API; por lo tanto, los receptores asociados-Gq activados evidenciarán un incremento en expresión de dichos genes, mediante lo cual los agonistas inversos evidenciarán una disminución en dicha expresión, y los agonistas evidenciarán un incremento en dicha expresión. Los ensayos comercialmente disponibles para dicha detección están disponibles. 3. Proteína de Fusión GPCR El uso de un GPCR constitutivamente activo, endógeno o un GPCR constitutivamente activo, no endógeno para utilizarse en clasificación de compuestos candidatos para la identificación directa de agonistas inversos o agonistas, proporciona un desafío de clasificación interesante ya que, por la definición, el detector es activo incluso en la ausencia de un ligando endógeno enlazado al mismo. Por lo tanto, con el objeto de diferenciar entre, por ejemplo, el detector endógeno en la presencia de un compuesto candidato y el receptor no endógeno en la ausencia de dicho compuesto. Con el objeto de que dicha diferenciación permita una compresión de si dicho compuesto puede ser un agonista inverso o agonista o no afectar a dicho receptor, en algunas modalidades se prefiere que se puede utilizar un método que pueda aumentar dicha diferenciación. En algunas modalidades, un método preferido es el uso de una proteína de fusión GPCR. Generalmente, una vez que se determina un GPCR no endógeno ha sido activado en forma constitutiva utilizando las técnicas de ensayo establecidas anteriormente (así como otras conocidas para los expertos en la técnica) es posible determinar la proteína G predominante que acopla con el GPCR endógeno. El acoplamiento de la proteína G al GPCR proporciona una trayectoria de señalización que puede ser evaluada. En algunas modalidades se prefiere que la clasificación tenga lugar utilizando un sistema de expresión de mamífero o un melanoforo, dicho sistema se espera que tenga en el mismo, proteína G endógena. Por lo tanto, por la definición, en dicho sistema, el GPCR activado en forma constitutiva, no endógeno señalará en forma continua. En algunas modalidades se prefiere que esta señal se aumente de modo que en la presencia de, por ejemplo, un agonista inverso para el receptor, es más probable que tenga la capacidad de diferenciarse más rápidamente, particularmente dentro del contexto de clasificación, entre el receptor cuando se contacta con el agonista inverso. La Proteína de Fusión GPCR está proyectada para aumentar la eficacia del acoplamiento de proteína G con GPCR. La Proteína de Fusión GPCR puede ser preferida para clasificar ya sea con un GPCR constitutivamente activo endógeno o un GPCR constitutivamente activado, no endógeno debido a que dicho método incrementa la señal que se genera en dichas técnicas de clasificación. Esto es importante para facilitar una proporción de "señal a ruido" significativa; dicha proporción significativa se prefiere para la clasificación de compuestos candidatos, tal como aquí se describe. La construcción de una construcción útil para la expresión de una Proteína de Fusión GPCR está dentro del alcance de los expertos en la técnica. Los vectores y sistemas de expresión comercialmente disponibles ofrecen una variedad de métodos que pueden ajustar las necesidades particulares de un investigador. Los criterios importantes en la construcción de dicha construcción de Proteína de Fusión GPCR incluyen pero no se limitan to, que la secuencia GPCR y la secuencia de proteína G ambas estén en-cuadro (preferentemente la secuencia para el GPCR endógeno es la corriente ascendente de la secuencia de la f the proteína G), y que el codón de "detención" del GPCR sea eliminado o reemplazado de modo que al momento de la expresión del GPCR, la proteína G también pueda ser expresada. El GPCR puede ser enlazado directamente a la proteína G, o pueden haber residuos espaciadores entre los dos (preferentemente no más de aproximadamente 12, aunque este número puede ser fácilmente confirmado por un experto en la técnica). Con base en la conveniencia, se prefiere utilizar un espaciador. En algunas modalidades, se prefiere que la proteína G que acopla al GPCR no endógeno sea identificada antes de la creación de la construcción de la Proteína de Fusión GPCR. Tal como se observó anteriormente, los GPCRs activados que acoplan a Gi, Gz y Go se espera que inhiban la formación de ensayos que elaboran cAMP con base en estos tipos de estímulo GPCRs (es decir, la señal cAMP disminuye al momento de la activación, haciendo de esta forma la identificación directa, por ejemplo, de los estímulos de agonistas (los cuales pueden disminuir en forma adicional esta señal). Tal como se describe en la presente invención, se puede confirmar que para estos tipos de receptores es posible crear una Proteína de Fusión GPCR que no esté basada en la proteína G endógena de GPCR en un esfuerzo para establecer un ensayo a base de ciclasa viable. Por lo tanto, por ejemplo un receptor acoplado mediante Gi endógeno puede ser fusionado a una proteína Gs-dicha construcción de fusión, al momento de la expresión, "conduce" o "fuerza" el GPCR endógeno para acoplar con, por ejemplo, Gs en lugar de la proteína Gi "natural", de modo que se puede establecer un ensayo a base de ciclasa. Por lo tanto, para receptores acoplados mediante Gi, Gz y Go, en algunas modalidades es preferible que cuando se utiliza una Proteína de Fusión GPCR y el ensayo esté basado en la detección de una actividad de ciclasa de adenililo, la construcción de fusión pueda ser establecida con Gs (o una proteína G equivalente que estimule la formación de una ciclasa de adenililo de enzimas).

TABLA C Igualmente efectiva es una construcción de fusión de proteína G que utiliza una proteína Gq fusionada con una proteína Gs; Gi, Gz o Go. En algunas modalidades se puede lograr una construcción de fusión preferida con una proteína Gq, en donde los primeros seis (6) aminoácidos de la a-subunidad de proteína-g ("Gaq") se elimina y los últimos cinco (5) aminoácidos en el extremo C-terminal de Gaq se reemplaza con los aminoácidos correspondientes del Ga de la proteína G de interés. Por ejemplo, un construcción de fusión puede tener un Gq (eliminación de 6 aminoácidos) fusionados con una Proteína Gi, dando como resultado una "Construcción de Fusión Gq/Gi". Esta construcción de fusión forzará el receptor acoplado de Gi endógeno para acoplar a su proteína G no endógena Gq, de modo que el segundo mensajero, por ejemplo, trifosfato de inositol o d i aci tg I i cero I , puede medirse en lugar de la producción cAMP. 4. Co-transfección de un GPCR acoplado por Gi objetivo con un GPCR acoplado por Gs que aumenta la señal (ensayo a base de cAMP) Se sabe que un receptor acoplado con Gi inhibe la ciclasa de adenililo, y por consiguiente, definir el nivel de producción cAMP, lo cual hace un desafío la evaluación de los niveles cAMP. En ciertas modalidades, una técnica efectiva en la medición de la disminución en la producción de cAMP como una indicación de la activación de un receptor que acopla predominantemente Gi al momento de la activación, puede lograrse transfectando en conjunto un aumentador de señal, por ejemplo, un receptor constitutivamente activado, no endógeno que acopla predominantemente con Gs al momento de la activación (por ejemplo, TSH R-A623I ; ver infra), con el GPCR enlazado Gi. Tal como se puede apreciar, la activación de un receptor acoplado por Gs puede determinarse combatiendo un incremento en la producción de cAMP. La activación de un receptor acoplado por Gi conduce a una disminución en la producción cAMP. Por lo tanto, el método de transfección conjunto está proyectado para explotar en forma conveniente estos efectos "opuestos". Por ejemplo, la transfección en conjunto de un receptor acoplado Gs activado en forma constitutiva, no endógeno (el "aumentador de señal") con el vector de expresión solo, proporciona una señal cAMP de línea de base (es decir, aunque el receptor acoplado por Gi disminuya los niveles cAMP, esta "disminución" será relativa para el incremento sustancial en los niveles cAMP establecidos mediante el aumentador de señal acoplado por Gs activado en forma constitutiva). Posteriormente, transfectando en conjunto el aumentador de señal con el "receptor objetivo", incrementará un agonista inverso del receptor objetivo acoplado por Gi la señal cAMP medida, en tanto que un agonista del receptor objetivo acoplado por Gi disminuirá esta señal. Los compuestos candidatos que son directamente identificados utilizando este método deben ser evaluados independientemente para asegurar que no dirijan el receptor de aumento de señal (esto se puede realizar antes o después de la clasificación contra los receptores transfectados en conjunto). Composición/formulación y Métodos de Tratamiento Se puede formular un agonista GPR119 en composiciones farmacéuticas y medicamentos para utilizarse de acuerdo con la presente invención, utilizando técnicas conocidas en el arte. La formulación adecuada depende de la ruta de administración elegida. En ciertas modalidades, la administración es a un vertebrado no humano o a un mamífero no humano. Tal como se relaciona con terapias de la presente invención, las terapias que se relacionan con un agonista GPR119, los compuestos de acuerdo con la presente invención se pueden administrar a través de cualquier forma adecuada.

Las rutas de administración adecuadas incluyen administración oral, nasal, rectal, transmucosa, transdérmica, o inestinal, suministro parenteral incluyendo inyecciones intramusculares, subcutáneas, intramedulares, así como intratecales, intraventriculares directas, intravenosas, intraperitoneales, intranasales, intrapulmonares (inhaladas) o intraoculares utilizando métodos conocidos en la técnica. Otras rutas de administración adecuadas son formulaciones en aerosol y de depósito. Las formulaciones de liberación sostenida, particularmente de depósito, de los medicamentos inventados se contemplan de manera expresa. En ciertas modalidades preferidas, los compuestos de acuerdo con la presente invención se administran en forma oral. Los compuestos de acuerdo con la presente invención pueden ser elaborados en forma sólido o líquido, tal como tabletas, cápsulas, polvos, jarabes, elíxires y similares, aerosoles, soluciones estériles, suspensiones, o emulsiones y similares. En ciertas modalidades, el agonista GPR119 se administra en forma oral. Las formulaciones para administración oral pueden estar en la forma de soluciones y suspensiones acuosas, además de la tableta sólido y formulaciones en cápsulas. Las soluciones y suspensiones acuosas pueden prepararse de polvos o gránulos estériles. Los compuestos pueden ser disueltos en agua, polietilenglicol, propilenglicol, etanol, aceite de maíz o aceite de semilla de algodón, aceite de cacahuate, aceite de sésamo, alcohol bencílico, cloruro de sodio y/o diversos amortiguadores. Otros adyuvantes son aceptables y son ampliamente conocidos en la técnica. Las composiciones farmacéuticas del agonista GPR119 pueden prepararse a través de métodos conocidos en la técnica, por medio de procesos convencionales de mezclado, disolución, granulación, elaboración de pastillas recubiertas, preparación de un compuesto homogéneo, emulsificación, encapsulación, atrapamiento, liofilización , secado con rocío. Las composiciones farmacéuticas para utilizarse de acuerdo con la presente invención se puede formular en una manera convencional utilizando uno o más transportadores fisiológicamente aceptables que comprenden excipientes de auxiliares que facilitan el procesamiento de los compuestos activos en preparaciones que se pueden utilizar en forma farmacéutica. Los transportadores farmacéuticamente aceptables adecuados están disponibles para los expertos en la técnica (ver por ejemplo, la Publicación de Remington: The Science y Practice of Pharmacy, (Gennaro y asociados, eds.), 20° Edición, 2000, Lippincott Williams & Wilkins; y Handbook of Pharmaceutical Excipients (Rowe y asociados, eds), 4o Edición, 2003, Pharmaceutical Press; en donde la descripción de cada una está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia). El término material "transportador" o material "excipiente" en la presente invención, significa cualquier sustancia, no propiamente un agente terapéutico, utilizada como un transportador y/o diluyente y/o adyuvante o vehículo para suministrar un agente terapéutico a un sujeto o agregarse a una composición farmacéutica para mejorar su manejo o propiedades de almacenamiento o para permitir o facilitar la formación de una unidad de dosis de la composición en un artículo separado tal como una cápsula o tableta adecuada para administración oral. Los excipientes pueden incluir, a manera de ilustración y no de limitación, diluyentes, desintegrantes, agentes de enlace, adhesivos, agentes de humectación, polímeros, lubricantes, deslizantes, sustancias agregadas para cubrir o contrarrestar un sabor u olor desagradable, sabores, tintas, fragancias y sustancias, agregadas para mejorar la apariencia de la composición. Los excipientes aceptables incluyen ácido esteárico, estearato de magnesio, óxido de magnesio, sales de sodio y calcio de ácidos fosfóricos, ácidos sulfúricos, carbonato de magnesio, talco, gelatina, goma acacia, alginato de sodio, pectina, dextrina, manitol, sorbitol, lactosa, sacarosa, almidones, gelatina, materiales celulósicos, tales como ésteres de celulosa de ácidos alcanoicos y ésteres de alquilcelulosa, manteca, polvo de cocoa de cera de bajo punto de fusión, polímeros tales como polivinilpirrolidona, alcohol polivinílico, polietilenglicoles, y otros materiales farmacéuticamente aceptables. Los componentes de la composición farmacéutica pueden ser encapsulados o compuestos en tabletas para una administración conveniente. El término farmacéuticamente aceptable se refiere a las propiedades y/o sustancias que son aceptables para el paciente desde un punto de vista farmacológico y/o toxicológico y para el químico farmacéutico que lo fabrica desde un punto de vista físico y/o químico sin importar la composición, formulación, estabilidad, aceptación del paciente y biodisponibilidad. Los centros de pastillas recubiertar se proporcionan con recubrimientos adecuados. Para este propósito, se pueden utilizar soluciones de azúcar concentradas que pueden contener opcionalmente goma arábiga, talco, polivinilpirrolidona, gel de carbopol, polietilenglicol, y/o dióxido de titanio, soluciones de laca y solventes orgánicos adecuados o mezclas de solventes. Se pueden agregar tintas o pigmentos a los recubrimientos de tabletas o pastilla recubierta para identificación o para caracterizar diferentes combinaciones de dosis de compuesto activo. Las composiciones farmacéuticas que se pueden utilizar en forma oral incluyen, cápsulas de extracción a presión elaboradas de gelatina, tal como cápsulas blandas, selladas, elaboradas de gelatina y un plastificante, tal como glicerol o sorbitol. Las cápsulas de extracción a presión pueden contener los ingredientes activos en mezcla en adiciones con un rellenador tal como lactosa, un enlazador tal como almidón y/o un lubricante tal como talco o estearato de magnesio y opcionalmente, estabilizadores. En cápsulas blandas, los compuestos activos pueden ser disueltos o suspendidos en líquidos adecuados, tales como aceites grasos, parafina líquida, polietilenglicol líquidos, cremofor, capmul, mono, di o triglicéridos de cadena media o larga. Se pueden agregar estabilizadores en estas formulaciones. Además, se puede proporcionar un agonista GPR119 utilizando un sistema de liberación sostenida, se han establecido varios materiales de liberación sostenida y son conocidos por los expertos en la técnica. Las tabletas o cápsulas de liberación sostenida son particularmente preferidas. Por ejemplo, un material de retraso de tiempo, tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo puede ser empleado. La forma de dosificación también puede estar cubierta por las técnicas descritas en las Patentes Norteamericanas Nos. 4,256,108, 4,166,452, y 4,265,874 para formar tabletas terapéuticas u osmóticas para liberación controlada. Se contempla de manera expresa que las terapias de la presente invención, es decir terapias que se relacionan con un agonista GPR119, puedan ser administradas o proporcionadas solas o en combinación con uno o más de otros compuestos farmacéutica o fisiológicamente aceptables. En un aspecto de la presente invención, el otro compuesto farmacéutica o fisiológicamente aceptable no es un agonista GPR119. En un aspecto de la presente invención, el otro compuesto farmacéutica y fisiológicamente aceptable es un agente farmacéutico seleccionado del grupo que consiste en calcio, vitamina D, estrógeno, tibolona, modulador de receptor de estrógeno selectivo (SERM; por ejemplo, raloxifeno, tamoxifen), bifosfonato (por ejemplo, etidronato, alendronato, risedronato), calcitonina, metabolito hidroxilado-1 a de vitamina D, fluoruro, tiazida, esteroide anabólico, ipriflavona, vitamina K, hormona paratiroides (PTH), estrontio, estatina, osteoprotererina, agonista selectivo de receptor EP4, agonista selectivo de receptor canabinoide tipo 2 (CB2) e inhibidor de cinasa MAP p38. (Ver, por ejemplo, la Publicación de World Health Organization Technical Report Series 921 (2003), Prevention y Management de Osteoporosis). En un aspecto, la presente invención presenta una composición que comprende o consiste esencialmente en una cantidad de agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención. En un aspecto, la presente invención presenta una composición farmacéutica que comprende o consiste esencialmente en una cantidad de un agonista GPR119, de acuerdo con la presente invención y al menos un transportador farmacéuticamente aceptable. En un aspecto, la presente invención presenta una composición que comprende o consiste esencialmente en una cantidad de un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención. En un aspecto, la presente invención presenta una composición farmacéutica que comprende o consiste esencialmente en una cantidad de un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención y al menos un transportador farmacéuticamente aceptable. La presente invención también se refiere a una forma de dosificación de la composición o de la composición farmacéutica, en donde el agonista GPR119 está en una cantidad suficiente para proporcionar un efecto en el tratamiento o prevención de una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, tal como osteoporosis, y/o en el incremento de la masa ósea en un individuo. En un aspecto, la presente invención presenta una composición que comprende o consiste esencialmente en una cantidad de un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención. En un aspecto, la presente invención presenta una composición farmacéutica que comprende o consiste esencialmente en una cantidad de un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención y al menos un transportador farmacéuticamente aceptable. La presente invención también se refiere a una forma de dosificación de la composición o de la composición farmacéutica en donde el agonista GPR119 está en una cantidad suficiente para proporcionar un efecto en el incremento de un nivel GIP en un individuo. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para utilizarse en la presente invención incluyen composiciones en donde los ingredientes activos están contenidos en una cantidad para lograr su propósito proyectada. En algunas modalidades, se entiende que una composición farmacéutica de la presente invención será útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, tal como osteoporosis, o para incrementar la masa ósea en un individuo. Las condiciones caracterizadas por masa ósea de bajo nivel están de acuerdo con la presente invención. En algunas modalidades, una composición farmacéutica de la presente invención será útil para incrementar un nivel GIP en un individuo. Tal como se refiere de acuerdo a la presente invención, la determinación de una cantidad de agonista GPR119 suficiente para lograr un propósito proyectado de acuerdo con la presente invención, está dentro de las habilidades de los expertos en la técnica, especialmente a la luz de la descripción detallada aquí proporcionada. Los datos obtenidos de estudios animales, incluyendo pero sin limitarse a estudios que utilizan ratones, ratas, conejos, cerdos y primates no humanos, se pueden utilizar para formular un rango de dosificación para utilizarse en humanos. En general, un experto en la técnica comprenderá como extrapolar datos in vivo obtenido en un sistema de modelo animal a otro, tal como un humano. En ciertas circunstancias, estas extrapolaciones pueden estar basadas meramente en el peso del modelo animal en comparación con otro, tal como un humano; en otras circunstancias, estas extrapolaciones no se basan simplemente en los pesos, sino más bien incorporan una variedad de factores. Los factores representativos incluyen el tipo, edad, peso, sexo, dieta y condición médica del paciente, la severidad de la enfermedad, la ruta de administración, consideraciones farmacológicas tales como actividad, eficacia, perfiles farmacocinéticos y toxicológicos del compuesto empleado en particular, si el sistema de suministro de fármaco es utilizado, o si se está tratando un estado de enfermedad agudo o crónico o se lleva a cabo una profilaxis o si los compuestos activos adicionales son administrados además de los compuestos de la presente invención y como parte de una combinación de fármacos. El régimen de dosificación para tratar una condición de enfermedad con los compuestos y/o composiciones de la presente invención se seleccionan de acuerdo con una variedad de factores tal como se mencionó anteriormente. Por lo tanto, el régimen de dosis real empleado puede variar ampliamente y por consiguiente se puede desviar los regímenes de dosificación preferido y un experto en la técnica reconocerá que la dosificación y régimen de dosificación fuera de estos rangos típicos, puede ser probada, y cuando sea adecuado, se puede utilizar en los métodos de la presente invención. Un sistema de modelo animal de ejemplo es el modelo de pérdida de huesos de ovariectomia de rata (OVX). La rata ovariectomizada es un excelente modelo de animal pre-clínico que émula correctamente la característica clínica importante del esqueleto humano agotado en estrógenos y la respuesta de los agentes terapéuticos. En este modelo, se logra una eficacia terapéutica cuando las pérdida de hueso es asociada con ovariectomia se previene en forma parcial o completa (Ver por ejemplo, Bollag y asociados, Mol Cell Endocrinol (2001) 177:35-41; y Jee y asociados, J Musculoskel Neuron Interact (2001) 1:193-207). En ciertas modalidades, la eficacia terapéutica se logra cuando la pérdida huesos asociada con ovariectomia se evita al menos en un 10% se evita al menos en aproximadamente el 20%, se evita al menos en aproximadamente el 30%, se evita al menos en aproximadamente el 40%, se evita al menos en aproximadamente el 50%, se evita al menos en aproximadamente el 60%, se evita al menos en aproximadamente el 70%, se evita al menos en aproximadamente el 75%, se evita al menos en aproximadamente el 80%, se evita al menos en aproximadamente el 85%, se evita al menos en aproximadamente el 90%, se evita al menos en aproximadamente el 95% , o se ev ita al 100%. Un sistema de modelo ani mal de ejemplo adicional es incrementar un nivel de GIP en la sangre después del estímulo de glucosa en ratones. En ciertas modalidades, el nivel GIP de la sangre es un nivel GIP de plasma. En ciertas modalidades, el nivel GIP es un nivel GIP independiente de glucosa. En ciertas modalidades, el nivel GIP es un nivel GIP dependiente de glucosa. En ciertas modalidades, el GIP es GIP total. En ciertas modalidades, el GIP total se mide utilizando un ensayo dirigido en forma central o C-terminal. En ciertas modalidades, el GIP es GIP bioactivo. En ciertas modalidades, el GIP bioactivo se mide utilizando un ensayo específico N-terminal. En ciertas modalidades, el GIP bioactivo tiene actividad para promover la formación de huésped. En ciertas modalidades, la eficacia terapéutica se logra cuando el nivel GIP en la sangre se incrementa en al menos aproximadamente el 10%, al menos aproximadamente el 25%, al menos aproximadamente el 50%, al menos aproximadamente el 100%, al menos aproximadamente el 150%, al menos aproximadamente el 200%, al menos aproximadamente el 300%, al menos aproximadamente el 400%, o al menos aproximadamente el 500%. La cantidad e intervalo de dosis se puede ajustar con el objeto de proporcionar un efecto terapéutico proyectado. Se podrá apreciar que la dosis exacta de un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención variará dependiendo del agonista GPR119, su potencia, el modo de administración, y la edad y peso del paciente y la severidad de la condición que esté siendo tratada. La formulación, ruta de administración y dosificación exactas se pueden elegir a través del especialista en virtud de la condición del paciente. A manera de ilustración y no se limitación, una cantidad de agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención es menor a aproximadamente 0.001 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 0.005 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 0.01 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 0.05 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 0.1 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 0.5 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 1 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 5 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 50 mg/kg de peso corporal, o menor a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal. En ciertas modalidades, una cantidad de un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención es menor a aproximadamente 0.001-100 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 0.001-50 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 0.001-10 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 0.001-5 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 0.001-1 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 0.001 a 0.5 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 0.001-0.1 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 0.001-0.05 mg/kg de peso corporal, menor a aproximadamente 0.001-0.01 mg/kg de peso corporal, o menor a aproximadamente 0.001-0.005 mg/kg de peso corporal.

Un rango de dosis preferido para la cantidad de un modulador de la presente invención (por ejemplo un agonista GPR119), que se puede administrar en una base diaria o regular para lograr resultados deseados es 0.1-100 mg/kg de masa corporal. Otro rango de dosis preferido es de 0.1-30 mg/kg de masa corporal. Otro rango de dosis preferido es de 0.1-10 mg/kg de masa corporal. Otro rango de dosis preferido es de 0.1-3.0 mg/kg de masa corporal. Por supuesto, estas dosis diarias pueden ser suministradas o administradas en pequeñas cantidades en forma periódica durante el curso de un día. Se observará que estos rangos de dosificación son únicamente rangos preferidos y no pretenden limitarse a la presente invención. La cantidad e intervalo de dosis puede ajustarse en forma individual para proporcionar niveles de plasma de un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención, la cual logra un efecto terapéutico proyectado. Los intervalos de dosis también se pueden determinar utilizando el valor de un rango seleccionado de una concentración de agonista GPR119, para lograr el efecto terapéutico proyectado. Un agonista GPR119 debe administrarse utilizando un régimen que mantenga niveles de plasma dentro del rango seleccionado de la concentración para el agonista GPR119 del 10-90% de tiempo, preferentemente entre 30-99% del tiempo, y lo más preferentemente entre 50-90% del tiempo. En los casos de administración local o captación selectiva, el rango de la concentración de agonista GPR119 que proporciona el efecto terapéutico proyectado puede no estar relacionado con concentración en plasma. La cantidad de composición administrada, por supuesto dependerá del individuo que esté siendo tratado, del peso del individuo, la severidad de la fricción, la forma de administración y el juicio del especialista que prescribe. En un aspecto, la presente invención presenta por consiguiente un método para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, tal como osteoporosis, o para incrementar la masa ósea que comprende administrar a un individuo que necesita del mismo una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición que comprende o consiste esencialmente en una cantidad de un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención. En ciertas modalidades, la composición es una composición farmacéutica. En un aspecto, la presente invención se refiere a un método para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, tal como osteoporosis, o para incrementar la masa ósea que comprende administrar a un individuo que necesita del mismo una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición que comprende o consiste esencialmente en una cantidad de un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención. En un aspecto relacionado, la presente invención presenta un método en donde el agonista GPR119 se administra en una cantidad suficiente para proporcionar un efecto en el incremento de un nivel GIP en el individuo. En ciertas modalidades, la composición es una composición farmacéutica. Las terapias de la presente invención, es decir terapias que se relaciona con un agonista GPR119 son útiles para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel en un individuo y en el incremento de la masa ósea en un individuo. Las condiciones caracterizadas por masa ósea de bajo nivel incluyen pero no se limitan a osteopenia, osteoporosis, artritis reumatoide, osteoartritis, enfermedad periodontal, pérdida ósea alveolar, pérdida ósea por osteotomía, pérdida ósea idiopática infantil, enfermedad de Paget, pérdida ósea debido a cáncer metastático, lesiones osteolíticas, curvatura de la espina, y pérdida de altura. En ciertas modalidades, la condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel es osteoporosis. En ciertas modalidades, la condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel es osteoporosis. En ciertas modalidades, la osteoporosis es osteoporosis primaria. En ciertas modalidades, la osteoporosis es osteoporosis secundaria. Las condiciones caracterizadas por masa ósea de bajo nivel también incluyen pero no se limitan a complicaciones a largo plazo de osteoporosis tales como curvatura de la columna, pérdida de peso y cirugía protésica. Quedará entendido que las condiciones caracterizadas por masa ósea de bajo nivel pueden estar incluidas en modalidades en forma individual o en cualquier combinación. En ciertas modalidades, la condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel es osteoporosis primaria. En ciertas modalidades, el individuo que necesita de masa ósea incrementada tiene una densidad mineral ósea (BMD) mayor a 1 (Calificación-T < -1), mayor o igual a 1.5 (Calificación-T < -1.5), mayor o igual a 2 (Calificación-T < -2) o mayor o igual a 2.5 (Calificación-T < -2.5) desviaciones estándar debajo de la media de referencia de adultos jóvenes. En ciertas modalidades, el individuo que necesita de masa ósea incrementada está en la necesidad de tratamiento de una fractura ósea. En ciertas modalidades, el individuo en necesidad de tratamiento de una fractura ósea tiene una fractura ósea traumática, una fractura ósea de largo plazo o una fractura ósea osteoporótica . En ciertas modalidades, el individuo está en necesidad de tratamiento de una enfermedad de huesos. En ciertas modalidades, el individuo en necesidad de tratamiento para una enfermedad ósea tiene osteopenia, osteoporosis, artritis reumatoide, osteoartritis, enfermedad periodontal, pérdida alveolar de hueso, pérdida de hueso por osteotomía, pérdida de hueso idiopática infantil, enfermedad de Paget, pérdida ósea debido a cáncer metastático, lesiones osteolíticas, curvatura de la espina, o pérdida de altura. En ciertas modalidades, el individuo en necesidad de tratamiento de una enfermedad ósea tiene osteoporosis. En ciertas modalidades, la osteoporosis es osteoporosis primaria. En ciertas modalidades, la osteoporosis es osteoporosis secundaria. Los trastornos óseos destructivos que pueden ser tratados de acuerdo con la presente invención incluyen pero no se limitan a osteoporosis, osteoartritis, y lesiones osteolíticas tales como las originadas por la enfermedad neoplástica, radioterapia, o quimioterapia. En ciertas modalidades, la osteoporosis es osteoporosis primaria. En ciertas modalidades, la osteoporosis es osteoporosis secundaria. Las terapias de la presente invención, es decir terapias que se relacionan con un agonista GPR119, son útiles además para aumentar la sanación de huesos después de reconstrucción facial, reconstrucción maxilar, reconstrucción mandibular, enfermedad periodontal o extracción de dientes, aumentar la extensión de huesos largos, aumentar el crecimiento interno protésico o incrementar la sinostosis ósea en un individuo. En ciertas modalidades, el individuo es un vertebrado. En ciertas modalidades, el individuo que es un vertebrado es un pescado, anfibio, un reptil, un ave o un mamífero. En ciertas modalidades, el individuo o vertebrado es un mamífero. En ciertas modalidades, el individuo o vertebrado que es un mamífero es un ratón, una rata, un hámster, un conejo, un cerdo, un perro, un gato, un caballo, una vaca, una oveja, una cabra, un mamífero no humano, un primate no humano o un humano. En ciertas modalidades, el individuo es un humano. En ciertas modalidades, el humano es una mujer post-menopausica o un hombre arriba de la edad de 50 años. Sin elaboración adicional, se considera que los expertos en la técnica pueden, utilizando la descripción anterior, practicar la presente invención en su totalidad. La descripción detallada anterior se proporciona para claridad de comprensión únicamente, y no se entenderá una limitación innecesaria, ya que las modificaciones dentro del alcance de la presente invención pueden ser aparentes para los expertos en la técnica. La presente solicitud reclama el beneficio de prioridad de la solicitud de patente provisional que se encuentra a continuación, presentada vía U.S. Express Mail con la United States Patent y Trademark Office en la fecha indicada: Solicitud de Patente Provisional Norteamericana Número 60/791,550, presentada el 11 de abril del 2006. La descripción de la solicitud de patente provisional anterior está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia. A lo largo de la presente solicitud, se mencionan varias publicaciones, patentes y solicitudes de patentes. Las descripciones de estas publicaciones, patentes, o solicitudes de patentes referenciadas en la presente solicitud están incorporadas en su totalidad a la presente descripción como referencia. La mención en la presente invención por parte del solicitante de una publicación, patente o solicitud de patente, no es una admisión por parte del solicitante de la publicación, patente o solicitud de patente como la técnica previa. EJEMPLOS Sin elaboración adicional, se considera que un experto, utilizando la descripción anterior, puede practicar la presente invención en su totalidad. Los ejemplos detallados que se encuentran a continuación serán construidos meramente en forma ilustrativa y no como limitaciones de la descripción anterior en forma alguna. Los expertos en la técnica reconocerán las variaciones adecuadas de los procedimientos. EJEMPLO 1: ANALISIS FARMACODINAMICO DE UN EFECTO DE ADMINISTRACION DE AGONISTA GPR119 EN EL NIVEL GIP DE SANGRE EN UN RATON TIPO NATURAL A. Se dejaron en ayuno durante 18 horas ratones macho C57blk/6, y se asignaron en forma aleatoria en catorce grupos con n = 6 por cada grupo. A los ratones se les administró oralmente vehículo (PET; 80% PEG400, 10% etanol, 10% Tween 80) o un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención (Compuesto 1; (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina) en 20 mg/kg, tal como se indica en la figura 1A. Treinta minutos después del tratamiento, se suministró en forma oral un bolo de glucosa en 3g/kg y se recolectó el plasma en 0 (sin bolo de glucosa), 2, 5, 10, 20, 40 y 60 minutos después del bolo de glucosa. Se determinaron los niveles GPI de plasma utilizando un equipo ELISA GIP de roedor comprador en Lineo Research Laboratory [Rat/Mouse Gastric Inhibitory Polypeptide (Total) ELISA Catálogo # EZRMGIP-55K], siguiendo las instrucciones proporcionadas por el proveedor. A partir de los resultados mostrados en la figura 1A, se puede apreciar que la administración del agonista GPR119 incrementó el nivel de GIP tanto dependiente de glucosa como independiente de glucosa en la sangre del ratón. El Compuesto 1 estimuló el GIP total en plasma en los ratones. El Compuesto 1 es idéntico a un Compuesto descrito en la Solicitud de Patente Internacional No. PCT/US2004/001267 (publicada como WO 2004/065380). B. Se dejaron en ayuno durante 18 horas ratones macho C57blk/6, y se asignaron en forma aleatoria en catorce grupos con n = 6 por cada grupo. A los ratones se les administró en forma oral un vehículo (20% de hidroxipropil-3-ciclodextrina (HPCD)) o con un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención (Compuesto 3) en 10 mg/kg, tal como se indica en la figura 1B. Treinta minutos después del tratamiento, se suministró en forma oral un bolo de glucosa en 3g/kg y se recolectó el plasma en 0 (sin bolo de glucosa), 5, 10, 20, 60 y 120 minutos después del bolo de glucosa. Se determinaron los niveles GIP en plasma utilizando un equipo ELISA GIP de roedor comprado en Lineo Research Laboratory [Rat/Mouse Gastric Inhibitory Polypeptide (Total) ELISA Catálogo # EZRMGIP-55K], siguiendo las instrucciones proporcionadas por el proveedor. Se llevó a cabo el análisis estadístico utilizando el programa Excel. Se calcularon valores promedios de la concentración GIP con base en resultados con seis ratones en cada grupo y se mostraron como promedio ± SEM. A partir de los resultados mostrados en la figura 1B, se podrá apreciar que la administración del agonista GPR119 incrementó el nivel de GIP en la sangre de los ratones tanto dependiente de glucosa como independiente de glucosa. El Compuesto 3 estimuló el GIP total en plasma en los ratones. El Compuesto 3 es idéntico a un Compuesto descrito en la Solicitud de Patente Internacional No. PCT/US2004/022327 (publicada como WO 2005/007647). C. Se dejaron en ayuno durante 18 horas ratones macho C57blk/6, y se asignaron en forma aleatoria en catorce grupos con n = 6 por cada grupo. A los ratones se les administró oralmente vehículo (20% de hidroxipropil- -ciclodextrina (HPCD)) o un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención (Compuesto 3) en 1, 3, ó 10 mg/kg. Treinta minutos después del tratamiento, se suministró en forma oral un bolo de glucosa en 3g/kg y se recolectó el plasma en 0 (sin bolo de glucosa) o 5 minutos después del bolo de glucosa. Los niveles GIP en plasma se determinaron utilizando un equipo ELISA GIP del roedor comprado en Lineo Research Laboratory [Rat/Mouse Gastric Inhibitory Peptide (Total) ELISA Catálogo # EZRMGIP-55K], siguiendo las instrucciones proporcionadas por el proveedor. Se llevó a cabo el análisis estadístico utilizando el programa Excel. Se calcularon los valores promedio de la concentración GIP con base en los resultados con seis ratones en cada grupo se muestran en la figura 1C. A partir de la figura 1C, se puede apreciar que el agonista GPR119 (Compuesto 3) estimuló el GIP total en plasma en los ratones en una forma dependiente de la dosis. El Compuesto 3 es idéntico a un Compuesto descrito en la Solicitud de Patente Internacional No. PCT/US2004/022327 (publicada como WO 2005/007647). EJEMPLO 2: EFECTO DE ADMINISTRACION DE AGONISTA GPR119 EN EL NIVEL GIP EN SANGRE EN RATONES CON DEFICIENCIA DE GPR119 (DE ELIMINACION) COMPARADOS CON RATONES TIPO NATURAL A. Se dejaron en ayunas durante 18 horas ratones macho con deficiencia de GPR119 y crías tipo natural. A los ratones se les administró oralmente vehículo (PET; 80% PEG400, 10% etanol, 10% Tween 80) o un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención (Compuesto 1; (2-Fluoro-4-metanosulfonil-fenil)-{6-[4-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-piperidin-1-il]-5-nitro-pirimidin-4-il}-amina) en 20 mg/kg, tal como se indicó (n = 5). Treinta minutos después del tratamiento, se recolectó sangre (100 microlitros) a través de la vena retro orbital del ojo (tiempo 0) seguido de un bolo de glucosa en 3g/kg (en forma oral). Cinco minutos después del suministro de glucosa, se recolectó otra muestra de sangre (100 microlitros) (tiempos de 5 minutos). El plasma se recolectó después de la centrifugación y se determinaron los niveles GPI utilizando un equipo ELISA GIP del roedor comprado en Lineo Research Laboratory [Rat/Mouse Gastric Inhibitory Polypeptide (Total) ELISA Catálogo # EZRMGI P-55K], siguiendo las instrucciones proporcionadas por el proveedor. A partir de los resultados mostrados en la figura 2A, se podrá apreciar que el receptor GPR119 funcional fue necesario para que el agonista GPR119 administrado incrementará un nivel independiente de glucosa y un nivel dependiente de glucosa de GIP en la sangre de los ratones. El Compuesto 1 estimuló el GIP total en plasma en ratones tipo natural. El Compuesto 1 es idéntico al Compuesto descrito en la Solicitud de Patente Internacional No. PCT/US2004/001267 (publicada como WO 2004/065380). B. Se dejaron en ayuno durante 18 horas ratones macho con deficiencia de GPR119 y crías tipo natural. A los ratones se les administró en forma oral vehículo (40% de hidroxipropil-ß-ciclodextrina (HPCD)) o con un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención (Compuesto 2) en 30 mg/kg, tal como se indica (n = 5). Treinta minutos después del tratamiento, se recolectó sangre (100 microlitros) mediante la vena retro orbital de los ojos (tiempo 0) seguido de un bolo de glucosa en 3g/kg (en forma oral). Cinco minutos después del suministro de glucosa, se recolectó otra muestra de sangre (100 microlitros) (tiempo 5 minutos). Se recolectó el plasma después de la centrifugación y se determinaron los niveles GIP utilizando el equipo ELISA GPI del roedor comprado en Lineo Research Laboratory [Rat/Mouse Gastric Inhibitory Polypeptide (Total) ELISA Catálogo # EZRMGIP- 55K], siguiendo las instrucciones proporcionadas por el proveedor. Se calcularon valores promedio de la concentración GIP con base en los resultados con cinco ratones en cada grupo. A partir de los resultados mostrados en la figura 2B, se puede apreciar que el receptor GPR119 funcional fue necesario para que el agonista GPR119 se administrará, incrementará un nivel independiente de glucosa y un nivel dependiente de glucosa de GIP en la sangre de los ratones. El Compuesto 2 estimuló el GIP total en plasma en los ratones tipo natural. El Compuesto 2 es idéntico a un Compuesto descrito en la Solicitud de Patente Internacional No. PCT/US2004/022417 (publicada como WO 2005/007658). EJEMPLO 3: EFECTO DE ADMINISTRACION DEL AGONISTA GPR119 EN MASA OSEA EN RATAS OVARIECTOMIZADAS Un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención puede mostrar ser efectivo para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, tal como osteoporosis, y/o para incrementar la masa ósea en un individuo utilizando el modelo de rata ovariectomizada ¡n vivo (OVX) que se describe más adelante (ver la Publicación de Bollag y asociados, Mol Cell Endocrinol (2001) 177:35-41). Se compraron veinte ratas OVX hembras virgen y 20 ratas Sprague-Dawley sin OVX virgen (150-175 g), con edad de 8 semanas en Harían Sprague-Dawley, Inc. (I ndianapolis, IN). Los animales se alimentaron ad libitum. con una dieta de pellet comercial normal, dieta Teklab Rodent (1.46% calcio), con acceso libre al agua. Las ratas se dividieron en forma aleatoria en cuatro grupos experimentales con pesos correspondientes y se seleccionaron para recibir en forma oral vehículo o una agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención. El tratamiento se continuó en una base diaria durante 6 semanas. 1. Control. Se administraron vehículos en forma oral a diez ratas sin OVX. 2. Control + Tratamiento. Se administró agonista GPR119 en forma oral a diez ratas si OVX. 3. OVX. Se administró vehículo en forma oral a diez ratas OVX. 4. OVX + Tratamiento. Se administró en forma oral agonista GPR119 a diez ratas OVX. Las ratas se pesaron diariamente y se midió la longitud en la línea se base y nuevamente a las 6 semanas. Se llevó a cabo la medición de absorción de rayos X dual (DXA) utilizando un aparato Hologic QDR 1000/W (Waltham, MA) en todos los animales, antes del inicio del tratamiento y a las 6 semanas, y los datos se analizaron utilizando el software Whole Body versión 5.53. Se determinó en la espina (BMD) y la densidad mineral ósea. Se determinó el porcentaje de cambio en la densidad ósea vertebral después de 6 semanas de tratamiento. Se demostró que la administración de un agonista GPR119 atenúa los efectos negativos de la ovariectomia en densidad ósea vertebral. La atenuación de los efectos negativos de la ovariectomia en densidad ósea vertebral indica que el tratamiento tiene eficacia para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, tal como osteoporosis, y/o incrementar la masa ósea en un individuo. EJEMPLO 4: EFECTOS DE ADMINISTRACION DEL AGONISTA GPR119 EN CURACION DE FRACTURA OSEA Un agonista A GPR119 de acuerdo con la presente invención puede mostrar ser efectivo en el tratamiento de fractura ósea utilizando el ensayo in vivo que se describe a continuación. Técnica de Fractura Se anestesiaron con Cetamina ratas Sprague-Dawley de 3 meses de edad. Se hizo una incisión de 1 cm en el aspecto anteromedial de la parte próxima de la tibia o fémur derecho. A continuación se describe la técnica quirúrgica de la tibia. Se llevó a cabo una incisión a través del hueso, y se perforó un agujero de 1 mm, 4 mm próximo al aspecto distal de la tuberosidad de la tibia 2 mm media al borde anterior. Se llevó a cabo un aseguramiento con clavos intramedular con un tubo de acero inoxidable de 0.8 mm (carga máxima de 36.3 N, dureza máxima 61.8 N/mm, probada bajo las mismas condiciones que la de los huesos). No se llevó a cabo el abocardado del canal medular. Se produjo una fractura cerrada estandarizada de 2 mm arriba de la unión tibiofibular mediante una flexión de tres puntos utilizando fórceps ajustables diseñados de manera especial con quijadas desafiladas. Para minimizar el daño a tejido blando, se tuvo cuidado de no desplazar la fractura. La piel se cerró con suturas de nylon de monofilamento. La presión se llevó a cabo bajo condiciones estériles. Las radiografías de todas las fracturas fuero tomadas inmediatamente después del aseguramiento con clavos, y las ratas con fracturas fuera del área guía fítica o con clavaos desplazados fueron excluidas. Los animales restantes se dividieron en forma aleatoria en los siguientes grupos con 10-12 animales por cada subgrupo por punto de tiempo para probar la curación de la fractura. A las ratas se les administró en una base diaria en forma oral vehículo o un agonista GPR119. El agonista GPR119 se utilizó en una cantidad entre 0.001 mg/kg de peso corporal y 100 mg/kg de peso corporal. El tratamiento se continuó durante 10, 20, 40 y 80 días. A los 10, 20, 40 y 80 días, 10-12 ratas de cada grupo fueron anestesiadas con Cetamina y se sacrificaron mediante exsanguinación. Se eliminaron ambos huesos tibiofibulares mediante disección y todo el tejido blando se extirpó. Los huesos de 5-6 ratas por grupo se almacenaron en etanol al 70% para análisis histológico y los huesos de otros 5-6 ratas de cada grupo se almacenaron en una solución de Ringer amortiguada ( + 4°C, pH 7.4) para radiografías y pruebas biomecánicas que se llevaron a cabo. Análisis Histológico Los métodos para análisis histológico de huesos fracturados han sido publicados previamente por Mosekilde y Bak (Bone (1993) 14:19-27). En síntesis, el sitio de fractura fue aserrado 8 mm en cada lado de la línea de fractura, se incrustó descalcificado en metilmetacrilato, y se cortaron las secciones frontales en un microtomo Reichert-Jung Polycut con un grosor de 8 µ?t?. Se utilizaron secciones medios frontales manchadas con Masson-Trichome (incluyendo tanto tibia como fíbula) para visualización de la respuesta celular y de tejido a la curación de fractura con y sin tratamiento. Se utilizaron secciones manchadas con rojo Sirius para demostrar las características de la estructura de callo y para diferenciar entre huesos tejido y huesos lamerales en el sito de fractura. Se llevaron a cabo las siguientes medidas: (1) abertura de fractura - medida como la distancia más corta entre los extremos de hueso cortical en la fractura, (2) longitud de de callo y diámetro de callo, (3) área de volumen de hueso total del callo, (4) tejido con hueso por área de tejido dentro del área de callo, (5) tejido fibroso en el callo, y (6) área de cartílago en el callo. Análisis biomecánico Los métodos para análisis biomecánico han sido publicados previamente por Bak y Andreassen (Calcif Tissue Int (1989) 45:292-297). En síntesis, se tomaron radiografías de todas las fracturas antes de la prueba biomecánica. Las propiedades mecánicas de las fracturas en curación se analizaron a través de un procedimiento de flexión de tres o cuatro puntos destructivo. Se determinó la carga máxima, dureza, energía en carga máxima, flexión en carga máxima y tensión máxima. EJEMPLO 5 CLONACION DE LONGITUD TOTAL DE GPR119 HUMANO ENDOGENO Se clonó el polinucleótido que codifica GPR119 humano endógeno mediante PCR utilizando cebadores específicos GPR119 5'-GTCCTGCCACTTCGAGACATGG-3' (SEQ ID NO:3; sentido, ATG como el codón de inicio) 5'-GAAACTTCTCTGCCCTTACCGTC-3' (SEQ ID NO:4; antisentido, 3' de codón de inicio) y ADN genómico humano como plantilla. Se utilizó polimerasa de ADN TaqPlus Precisión™ (Stratagene) para amplificación a través del siguiente ciclo con el paso 2 al paso 4 repetidos 35 veces: 94°C, 3 minutos; 94°C, 1 minuto; 58°C, 1 minuto; 72°C, 2 minutos; 72°C, 10 minutos. Se aisló un fragmento PCR 1.0 Kb de tamaño anticipado y se clonó en el vector pCRII-TOPO™ (Invitrogen) y se secuenció completamente utilizando el equipo de secuencia de ADN T7 (Amersham). Ver SEQ ID NO: 1 para secuencia de ácido nucleico y SEQ ID NO:2 para secuencia de aminoácido reducida. EJEMPLO 6 EXPRESION DE RECEPTOR Aunque una amplia variedad de células están disponibles en la técnica para la expresión de receptores acoplados por proteína G, es más preferido que se utilicen células eucarióticas. En ciertas modalidades, se utilizan células de mamífero o melanoforos. Lo siguiente es ilustrativo, los expertos en la técnica están acreditados con la capacidad de determinar las técnicas que son preferentemente benéficas para las necesidades del especialista. Ver por ejemplo Ejemplo 9, infra, ya que se relaciona con melanoforos. a. Transfección Temporal En el día uno, se revistieron platos de 6x 106/ 10 cm de células 293. El día dos, se prepararon dos tubos de reacción (las proporciones que se siguen para cada tubo son por placa). El tubo A se preparó mezclando 4 pg de ADN {por ejemplo, vector pCMV, vector pCMV, con cDNA de receptor, etc.) en 0.5 mi libre de suero DMEM (Gibco BRL); el tubo B se preparó mezclando 24 µ? de I ipofectamina (Gibco BRL) en 0.5 mi de DMEM libre de suero. Los tubos A y B se mezclaron en adiciones mediante inversiones (varias veces) seguido de incubación a temperatura ambiente durante 30 a 45 minutos. La mezcla en adiciones es referida como la "mezcla de transfección". Se lavaron células 293 revestidas con IXPBS, seguido de la adición de 5 mi de DMEM libre de suero. Se agregó 1 mi de la mezcla de transfección a las células, seguido de incubación durante 4 horas en condiciones 37°C/5% C02- La mezcla de transfección se eliminó mediante aspirado, seguido de la adición de 10 mi de DMEM/10% Suero Bovino Fetal. Las células se incubaron en condiciones 37°C/5% C02. Después de 48 horas de incubación, las células se recolectaron y utilizaron para análisis. b. Líneas Celulares Estables Se revistieron aproximadamente 12 x 106 de células 293 en una placa de cultivo de tejido de 15 cm. Se crecieron en un medio con alto contenido de glucosa DME que contiene diez por ciento de suero de bovino fetal y uno por ciento de piruvato de sodio, L-glutamina, y antibióticos. Veinticuatro horas después del revestimiento de las células 293 (o en una confluencia de -80%), las células se transfectaron utilizando 12 pg de ADN (por ejemplo, vector pCMV-neor con cDNA de receptor). Se combinaron los 12 g de ADN con 60 µ? de lipofectamina y 2 mi de Medio con Alto Contenido de Glucosa DME sin suero. El medio se aspiró de las placas y las células de lavaron una vez con medio sin suero. El ADN, lipofectamina, y mezcla de medios se agregaron a la placa junto con 10 mi de un medio sin suero. Después de la incubación a una temperatura de 37°C durante 4 a 5 horas, el medio se aspiró y se agregaron 25 mi de un medio que contiene suero. Veinticuatro horas después de la transfección, el medio se aspiró nuevamente, y se agregó un medio fresco con suero. Cuarenta y ocho horas después de la transfección el medio de aspiró y el medio con suero se agregó conteniendo geneticina (fármaco G418) en una concentración final de aproximadamente 12 x 106 de células 293 que se revistieron en una placa de cultivo de tejido de 15 cm. Se crecieron en un Medio con Alto Contenido de Glucosa DME que contiene diez por ciento de suero de bovino fetal y uno por ciento de piruvato de sodio L-glutamina, y antibióticos. Veinticuatro horas después del revestimiento de células 293 (o a una confluenza de -80%), las células se transfectaron utilizando 12 g de ADN {por ejemplo, vector pCMV con receptor cDNA). Los 12 g de ADN se combinaron con 60 µ? de I ipofectamina y 2 mi de un Medio con Alto Contenido de Glucosa DME sin suero. El medio se aspiró de las placas y las células se lavaron una vez con un medio sin suero. El ADN, lipofectamina, y la mezcla del medio se agregaron a la palca junto con 10 mi de un medio sin suero. Después de la incubación a una temperatura de 37°C durante cuatro a cinco horas, el medio se aspiró y se agregaron 25 mi del medio que contiene suero. Veinticuatro horas después de la transfección, el medio se aspiró nuevamente, y se agrego un medio fresco con suero. Cuarenta y ocho horas después de la transfección, el medio se aspiró y el medio con suero se agregó conteniendo geneticina (fármaco G418) en una concentración final de 500 pg/ml. Ahora las células transfectadas pasan por selección para células transfectadas en forma positiva que contienen el gen de resistencia G418. El medio se reemplazó cada cuatro a cinco días conforme ocurrió la selección. Durante la selección, las células se crecieron para crear conjuntos estables o una división para selección clonal estable. EJEMPLO 7 ENSAYOS PARA CLASIFICACION DE COMPUESTOS CANDIDATOS, POR EJEMPLO, AGONISTAS GPR119 Esta disponible una variedad de métodos para clasificar compuestos candidatos, por ejemplo agonistas GPR119. Lo siguiente es ilustrativo; los expertos en la técnica están acreditados con la capacidad de determinar las técnicas que sean preferentemente benéficas para las necesidades del especialista. Los ensayos para clasificar compuestos como agonistas de un receptor acoplado por proteína G, son bien conocidos por los expertos en la técnica (ver por ejemplo, la Solicitud Internacional WO 02/42461 ). 1. Ensayo de Enlace de Membrana: |3SS]GTPYS Ensayo Cuando receptor acoplado por proteína G está en su estado activo, ya sea como resultado del enlace de ligando o activación constitutiva, el receptor se acopla a una proteína G y estimula la liberación de GDP y el enlace subsecuente de GTP a la proteína G. La subunidad alta del complejo de proteína G-receptor actúa como un GTPase e hidroliza lentamente el GTP a GDP, punto en el cual el receptor normalmente es desactivado. Los receptores activados continúan intercambiando GDP por GTP. El análogo GTP no hidrolizable [35S]GTPYS, se puede utilizar para demostrar el enlace mejorado de [35S]GTPyS a membranas que expresan receptores activados. La ventaja de utilizar el enlace [35S]GTPyS para medir la activación es que: (a) generalmente aplica a todos los receptores acoplados por proteínas G; (b) es próximo en la superficie de membrana que hace menos probable que se levante moléculas que afecten la cascada intracelular. El ensayo utiliza la capacidad de los receptores acoplados por proteína G para estimular el enlace [35S]GTPyS a membranas que expresan receptores relevantes. El ensayo es genérico y tiene aplicación para el descubrimiento de fármacos en todos los receptores acoplados por proteína G. Preparación de Membrana En algunas modalidades, las membranas que contienen un receptor acoplado por proteína G de la presente invención y para utilizarse en la identificación de los compuestos candidatos, como por ejemplo agonistas del receptor, se preparan preferentemente cornos e indica a continuación. a. Materiales "El amortiguador de Raspado de Membrana" estuvo comprendido de 20 mM HEPES y 10 mM EDTA, pH 7.4; el "Amortiguador de Lavado de Membrana" estuvo comprendido de 20 mM HEPES y 0.1 mM EDTA, pH 7.4; el "Amortiguador de Enlace" estuvo comprendido de 20 mM HEPES, 100 mM NaCI, y 10 mM MgCI2, pH 7.4. b. Procedimiento Todos los materiales se mantuvieron en hielo a lo largo del procedimiento. Primero, el medio se aspira de una monocapa confluente de células, seguido de enjuague con 10 mi de PBS, seguido de aspirado. Posteriormente, se agregan a las células raspadas 5 mi de Amortiguador de Raspado de Membrana; esto estará seguido por la transferencia de extracto celular en 50 mi de tubo de centrifugación (centrifugados en 20,000 rpm durante 17 minutos a una temperatura de 4°C). Posteriormente, el sobrenadante será aspirado y el pelet será resuspendido en 30 mi Amortiguador de Lavado de Membrana seguido de centrifugación en 20,000 rpm durante 17 minutos a una temperatura de 4°C. El sobrenadante posteriormente será aspirado y el pelet será resuspendido en el Amortiguador de Enlace. Posteriormente este será homogeneizado utilizando un homogeinizador Brinkman Polytron™ (ráfagas de 15-20 segundos hasta que todo el material está en la suspensión). Esto es referido en la presente invención como "Proteína de Membrana". Ensayo de Proteína Bradford Después de la homogeinización, se determinará la concentración de proteína de la membrana utilizando el Ensayo de Proteína Bradford (la proteína puede ser diluida en aproximadamente 1.5 mg/ml, alicuotada y congelada (-801C) para uso posterior; cuando se congela, se seguirá el protocolo para uso que se encuentra a continuación: el día del ensayo, se descongeló a temperatura ambiente Proteína de Membrana congelada, seguido de vortizado y posteriormente se homogenizó con Polytron en aproximadamente 12 x 1,000 rpm durante aproximadamente 5 a 10 segundos; se debe observar que para preparaciones múltiples, el homogeinizador debe ser limpiado profundamente entre la homogeinización de las diferentes preparaciones. a. Materiales Amortiguador de enlace (como se indicó anteriormente) el Reactivo de Tinta Bradford; el Estándar de Proteína Bradford, será utilizado siguiendo las instrucciones del fabricante (Biorad, cat. no. 500-0006). b. Procedimiento Se prepararon tubos por duplicado, uno incluyendo la membrana, y uno como un "blanco" de control. Cada uno contenía 800 µ? de Amortiguador de Enlace. Posteriormente, se agregaron a cada tubo 10 µ? de Estándar de Proteína Bradford (1 mg/ml), y se agregó solo a un tubo 10 µ? de Proteína de membrana (no el que está en blanco). Posteriormente, se agregaron a cada tubo 200 µ? de Reactivo de Tinta Bradford, seguido de vortizado de cada uno. Después de cinco (5) minutos, lo tubos fueron otra vez vortizados y el material en el mismo se transfirió a cubetas. Posteriormente las cubetas se leerán utilizando un espectrofotómetro CECIL 3041 en una longitud de onda 595. Ensayo de Identificación a. Materiales El amortiguador GDP consiste en 37.5 mi de Amortiguador de Enlace y 2 mg de GDP (Sigma, cat. no. G-7127), seguido de una serie de soluciones en Amortiguador de Enlace para obtener 0.2 µ? GDP (concentración final de GDP en cada depósito después de 0.1 µ? GDP); comprendiendo cada depósito un compuesto candidato, tiene un volumen final de 200 µ? que consiste en 100 µ? de Amortiguador GDP (concentración final, 0.1 µ? GDP), 50 µ? de Proteína de Membrana en Amortiguador de Enlace, y 50 µ? [33S]GTPyS (0.6 nM) en Amortiguador de Enlace (2.5 µ? [35S]GTPyS por 10 mi en Amortiguador de Enlace), b. Procedimiento Los compuestos candidatos serán clasificados utilizando preferentemente un formatriz de placas de 96 depósitos (estas pueden ser congeladas a una temperatura de -80°C). La Proteína de Membrana (o membranas con vector de expresión excluyendo el GPCR objetivo, como control), serán homogeinizadas brevemente hasta que estén en la suspensión. Posteriormente la concentración de proteína será determinada utilizando el Ensayo de Proteína Bradford establecido anteriormente. La Proteína de Membrana (y control) posteriormente será diluida a 0.25 mg/ml en Amortiguador de Enlace (concentración de ensayo final, 12.5 g/depósito). Posteriormente, se agregó 100 µ? de Amortiguador GDP a cada deposito de un Wallac Scintistrip™ (Wallac). Posteriormente se utilizará una herramienta de perno de 5 µ? para transferir 5 µ? del compuesto candidato en dicho depósito (por ejemplo 5 µ I en volumen de ensayo total de 200 µ? es una proporción 1:40 de modo que la concentración de clasificación final del compuesto candidato es de 10 µ?). Nuevamente, para evitar la contaminación, después de cada paso de transferencia, se debe enjuagar la herramienta de perno en tres depósitos que contiene agua (1X), etanol (1X) y agua (2X) - de líquido en exceso debe ser agitado de la herramienta después de cada enjuague y secado con papel y toallas limpiadoras. Posteriormente, se agregará a cada depósito 50 µ? de Proteína de Membrana (un depósito de control que comprende membranas sin el GPCR objetivo también se utilizó) y se incubó previamente durante 5 a 10 minutos a temperatura ambiente. Posteriormente, se agregarán a cada depósito 50 µ? de [ S]GTPyS (0.6 nM) en Amortiguador de Enlace, seguido de la incubación en un agitador durante 60 minutos a temperatura ambiente (nuevamente, en este ejemplo, las placas se cubrieron con lámina). El ensayo posteriormente será detenido girando las placas en 4000 RPM durante 15 minutos a una temperatura de 22°C. Posteriormente las placas serán aspiradas con un múltiple de 8 canales y selladas con cubierta de placa. Posteriormente las placas serán leídas en un aparato Wallac 1450 utilizando "Prot. #37" (siguiendo las instrucciones del fabricante). 2. Ensayo de Ciclasa de Adenililo Se puede modificar un equipo de ciclasa de adenililo Flash Píate™ (New England Nuclear; Cat. No. SMP004A) diseñado para ensayos a base de células, para utilizarse con membranas de plasma crudo. Los depósitos Flash Píate pueden contener un recubrimiento de centilleo que también contiene un anticuerpo específico que reconoce cAMP. El cAMP generado en los depósitos puede ser cuantificado a través de una competición directa para el enlace de un trazador cAMP radioactivo para el anticuerpo cAMP. Lo siguiente sirve como un protocolo breve para la medida de cambios en los niveles cAMP en células que expresan los receptores. En ciertas modalidades, se utiliza un equipo de ciclasa de adenililo Flash Píate™ modificado (New England Nuclear; Cat. No. SMP004A) para identificación de compuestos candidatos como por ejemplo agonistas GPR119 de acuerdo con el siguiente protocolo. Las células transfectadas con un receptor acoplado por proteína G de la presente invención, son recolectados aproximadamente tres días después de la transfección. Las membranas se preparan medíante homogeinización de células suspendidas en un amortiguador que contiene 20 mM HEPES, pH 7.4 y 10 mM MgCI2. La homogeinización se lleva a cabo en hielo utilizando Brinkman Polytron™ durante aproximadamente 10 segundos. El homogenado resultante se centrifuga en 49,000 X g durante 15 minutos a una temperatura de 4°C. Posteriormente el pelet resultante se resuspende en un amortiguador que contiene 20 mM HEPES, pH 7.4 y 0.1 mM EDTA, se homogeiniza durante 10 segundos, seguido de centrifugación en 49,000 x g durante 15 minutos a una temperatura de 4°C. Posteriormente el pelet resultante se almacena a una temperatura de -80°C hasta que se utiliza. El día de la clasificación de identificación directa, el pelet de membrana se descongela lentamente a temperatura ambiente, se resuspende el amortiguador que contiene 20 mM HEPES, pH 7.4 y 10 mM MgC , para producir una concentración de proteína final de 0.60 mg/ml (las membranas re-suspendidas se colocan en hielo hasta que se utilizan). Se preparan y mantienen estándares cAMP y Amortiguadores de Detección (que comprende 2 µ?? de trazador (['¿5l]cAMP (100 µ?) a 11 mi Amortiguador de Detección)) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Se preparó el amortiguador de ensayo en forma reciente para la clasificación y contuvo 20 mM HEPES, pH 7.4, 10 mM MgCI2, 20 mM de fosfocreatina (Sigma), 0.1 unidades/ml de fosfocinasa de creatina (Sigma), 50 µ? GTP (Sigma), y 0.2 mM ATP (Sigma); el Amortiguador de Ensayo se almacenó posteriormente sobre hielo hasta que se utilizó. Se agregaron compuestos candidatos, preferentemente, por ejemplo a depósitos de placas de 96 depósitos (3 µ?/depósito; 12 µ? de concentración de ensayo final), junto con 40 µ? de Proteína de Membrana (30 µg/depósito) y 50 µ I de Amortiguador de Ensayo. Esta mezcla se incubó posteriormente durante 30 minutos a una temperatura con agitación suave. Después de la incubación, se agregaron a cada depósito 100 µ? de Amortiguador de Detección, seguido de incubación durante de 2 a 24 horas. Posteriormente las placas se contaron en un lector de placa Wallac MicroBeta™ utilizando "Prot. #31" (según las instrucciones del fabricante). 3. Ensayo de Reportero CRE-Luc Se revistieron células 293 y 293T en placas de 96 depósitos una densidad de 2 x 104 células por depósitos y se transfectaron utilizando Reactivo de Lipofectamina (BRL) al siguiente día de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Se preparó una mezcla de ADN/lípido para cada transfección de 56 depósitos como se indica a continuación: 260 ng de ADN de plásmido en 100 µ? de DMEM se mezcló suavemente con 2 µ? de lípido en 100 µ? de DMEM (los 260 ng de ADN de plásmido consisten en 200 ng de un plásmido de reportero 8xCRE-Luc, 50 ng de pCMV que comprende un receptor acoplado por proteína G de la presente invención o pCMV solo, y 10 ng de un plásmido de expresión GPRS (GPRS en pcDNA3 (Invitrogen)). Se preparó como se indica a continuación el plásmido se reportero 8XCRE-Luc: el vector SRIF- -gal se obtuvo clonando el promotor de somatostatina de rata (-71/ + 51) en un sitio BglV-Hindlll en el vector pPgal-Basic (Clontech). Se obtuvieron ocho (8) copias del elemento de respuesta cAMP mediante PCR de una plantilla de adenovirus AdpCFI 26CCRE8 [ver la Publicación de Suzuki y asociados, Hum Gene Ther (1996) 7:1883-1893; cuya descripción está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia) y se clonó en el vector SRIF- -gal en el sitio Kpn-BgtV, dando como resultado el vector reportero 8xCRE-p-gal. El plásmido de reportero 8xCRE-Luc se generó reemplazando el gen de beta-galactosidasa en el vector reportero 8xCRE- -gal con el gen de luciferasa obtenido en el vector básico pGL3-basic (Promega) en el sitio HindIII-BamHI. Después de 30 minutos de incubación a temperatura ambiente, se diluyó una mezcla de ADN/lípido con 400 µ? de DMEM y se agregó a cada depósito 100 µ? de la mezcla diluida. Se agregaron a cada depósito 100 µ? de DMEM con 10% FCS después de una incubación de cuatro horas en un incubador de cultivo celular. Al siguiente día, las células transfectadas se cambiaron con 200 µ?/depósito de DMEM con 10% FCS. Ocho (8) horas después, los depósitos se cambiaron a 100 µ?/depósito de DMEM sin rojo de fenol, después de un lavado con PBS. Se midió la actividad de luciferasa al siguiente día utilizando el equipo de ensayo de gen reportero LucLite™ (Packard) siguiendo las instrucciones del fabricante y se leyó en un contador de centelleo y luminiscencia 1450 MicroBeta™ (Wallac). EJEMPLO 8: ENSAYO DE CICLASA DE ADENILILO DE CELULA COMPLETA, POR EJEMPLO, ACTIVIDAD DE AGONISTA GPR119 Se llevaron a cabo medidas AMP cíclicas con el equipo de ciclasa de adenililo Flash Píate™ (New England Nuclear) de acuerdo con el protocolo del proveedor. Se revistieron células HEK293 en un plato de cultivo de tejido de 15 cm en 12 x 106 células por plato en un medio de crecimiento regular (DMEM/10%FBS). Al siguiente día 10 pg ya sea del ADN de vector vacío o el ADN de plásmido de expresión se transfectaron en las células con lipofectamina (Invitrogen, Carlsbad, CA) de acuerdo con el fabricante. Después de 24 horas en cultivo, las células transfectadas recolectaron en un amortiguador en disociación de célula GIBCO (Cat #13151-014), se peletizaron mediante centrifugación durante 5 minutos en 1,100 rpm, y se resuspendieron cuidadosamente en un volumen adecuado de Amortiguador de Ensayo (50% 1 x PBS y 50% Amortiguador de Estimulación) para proporcionar un conteo de células final en 2 x 106 células/ml. Los compuestos de prueba se prepararon en 50 µ? de Amortiguador de Ensayo en la concentración de ensayo deseada cuando se indicó, y se pipetaron en depósitos de una Placa Flash de 96-depósitos. La suspensión celular preparada anteriormente fue agregada (50 µ? por depósito). Después del tiempo de incubación de 60 minutos a una temperatura ambiente, se agregaron a los depósitos 100 µ? de la Mezcla de Detección que contiene el trazador [125l-cAMP. Las placas se incubaron durante 2 horas adicionales seguido de conteo en un contador de centelleo Wallac MicroBeta. Los valores de cAM P/depósito se extrapolaron a partir de una curva cAMP estándar la cual se incluyó en cada placa de ensayo. Un incremento en el nivel cAMP en células HEK 293 transfectadas con GPR119 con respecto al de las células HEK293 transfectadas con vector vacío, indica que el compuesto de prueba es un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor GPR119. EJEMPLO 9: ENSAYO DE MELANOFORO POR EJEMPLO, ACTIVIDAD DE AGOISTA GPR119 Se mantuvieron melanoforos en cultivo tal como lo reporta Potenza y asociados [Pigment Cell Research (1992) 5:372-378] y se transfectaron con un vector de expresión que codifica un receptor GPR119 (GPR119; por ejemplo, GPR119 humano, Acesso GenBank® No. AAP72125 y alelos de los mismos) utilizando electroporación . Después de la electroporación , las células transfectadas se revistieron en placas de 96 depósitos para el ensayo. Posteriormente las células se dejaron crecer durante 48 horas con el objeto tanto de recuperarse del procedimiento de electroporación como de lograr niveles máximos de expresión de receptor. El día del ensayo, se reemplazó el medio de crecimiento en las células con amortiguador libre de suero que contiene 10 nM de melatonin. El melatonin actúa una vez del GPCR acoplado por Gi endógeno en los melanoforos para disminuir los niveles cAMP intracelulares. En respuesta a los niveles cAMP disminuidos, los melanoforos trans-ubican su pigmento al centro de la célula. El efecto neto de esto es una disminución significativa en la lectura de absorbancia de la monocapa de células en el depósito medido en 600-650 nM. Después de una incubación en 1 hora en melatonin, las células quedaron completamente con agregación de pigmento. En este punto se recolectó una lectura de absorbancia de línea de base. Las diluciones en serie de los compuestos de prueba se agregaron a la placa, y los compuestos que tienen la actividad de agonista GPR119 producen incremento en los niveles cAMP intracelulares. En respuesta a estos niveles cAMP incrementados, los melanoforos transubican su pigmento nuevamente a la periferia celular. Después de una hora, las células estimuladas fueron completamente dispersadas en pigmento. La monocapa celular en el estado disperso absorbe mucho más luz dentro del rango 600-650 nm. El incremento medido en absorbancia en comparación con las lecturas de línea de base, permite que se cuantifique el grado de estimulo de receptor y el trazo de una curva de respuesta de dosis. Los materiales y métodos que se refieren al ensayo de melanoforo se encuentran en las Patentes Norteamericanas Nos. 5,462,856 y 6,051,386, cuyas descripciones están incorporadas en su totalidad a la presente invención como referencia. Un incremento en la dispersión de pigmento en melanoforos transfectados con GPR119 con respecto a los melanoforos transfectados con vector vacío, indica que un compuesto de prueba es un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor GPR119. Otros ensayos para identificar un compuesto en la forma de un agonista GPR119, podrán ser fácilmente apreciados por los expertos en la técnica (ver por ejemplo Ejemplo 7, supra). EJEMPLO 10: ENSAYO DE REPORTERO DE LEVADURA POR EJEMPLO PARA ACTIVIDAD DE AGONISTA GPR119 Los ensayos de reportero a base de célula de levadura han sido descritos previamente en la literatura (ver por ejemplo las publicaciones de Miret y asociados, J Biol Chem (2002) 277:6881-6887; Campbell y asociados, Bioorg Med Chem Lett (1999) 9:2413-2418; King y asociados, Science (1990) 250:121-123; WO 99/14344; WO 00/12704; y US 6,100,042). En síntesis, las células de levadura han sido construidas de modo que el G-alfa de levadura endógeno (GPA1) ha sido eliminado y reemplazado con quimeras de proteína-G construidas utilizando técnicas múltiples. Además, el GPCR de célula alfa de levadura endógena, Ste3 ha sido eliminado para permitir una expresión homologa de un GPCR de mamífero de elección. En la levadura, los elementos de la trayectoria de transduccion y señalización de feromona, los cuales se conservan en células eucarióticas (por ejemplo, la trayectoria de cinasa de proteína activada por mitógeno), conducen la expresión de Fus1. Al colocar ß-galactosidasa (LacZ) bajo el control de un promotor Fus1 (Fuslp), se ha desarrollado un sistema mediante el cual la activación de receptor conduce a una lectura enzimática. Las células de levadura se transforman a través de una adaptación del método de acetato de litio descrito por Agatep y asociados (Agatep y asociados, 1998, Transformación de Saccharomyces cerevisiae mediante protocolo de ADN/polietilenglicol de transportador de hebra simple/acetato de litio (LiAc/ss-DNA/PEG). Technical Tips Online, Trends Journals, Elsevier). En síntesis, las células de levadura se crecen durante la noche sobre placas de triptona de levadura (YT). El ADN de hebra simple transportador (10 pg), 2 pg de cada uno de los dos plásmidos reporteros Fus1p-LacZ (uno con un marcador de selección URA y uno con TRP), 2 pg de GRP119 (por ejemplo receptor humano) en un vector de expresión de levadura (2 pg de origen de réplica) y un amortiguador de acetato de litio/polietilenglicol/TE se pipeteó en un tubo Eppendorf. El plásmido de expresión de levadura que contiene el control de receptor/no receptor tiene un marcador LEU. Las células de levadura se inoculan en esta mezcla y la reacción procede a una temperatura de 30°C durante 60 minutos. Posteriormente las células de levadura se chocan con calor a una temperatura de 42°C durante 15 minutos. Posteriormente las células se lavan y dispersan en placas de selección. Las placas de selección son medio de levadura definido en forma sintética menos LEU, URA y TRP (SD-LUT). Después de la incubación a una temperatura de 30°C durante 2 a 3 días, las colonias que crecen en las placas de selección se prueban en el ensayo LacZ. Con el objeto de llevar a cabo los ensayos de enzima fluorimétricos para ß-galactosa, las células de levadura que llevan el receptor GPR119 en cuestión se crecen durante la noche en un medio SD-LUT líquido a una concentración insaturada (es decir las células aún se dividen y no han llegado a la fase estacionaria). Se diluyen en un medio reciente a una concentración de ensayo óptima y se agregan 90 pl de células de levadura a placas de poliestireno negro de 96 depósitos (Costar). Los compuestos de prueba, se disuelven en DMSO y diluyen en una solución DMSO 10% a una concentración 10X, se agregan a las placas y las placas se colocan a una temperatura de 30°C durante 4 horas. Después de 4 horas, el substrato para la ß-galactosidasa se agrega a cada depósito. En los experimentos, se utiliza fluoresceína di (ß-D-galactopiranósido) (FDG), un substrato para la enzima que libera fluoresceína, permitiendo la lectura fluorimétrica. 20 µ? por depósito de 500 µ? FDG/2.5% Tritón X100 se agrega (el detergente es necesario para hacer las células permeables). Después de la incubación de las células con el substrato durante 60 minutos, se agregan 20 µ? por depósito de carbonato de sodio 1 M a la reacción y se aumenta la señal fluorescente. Posteriormente las placas se leen en un fluorímetro en 485/535 nm. Un incremento en la señal fluorescente en células de levadura transformadas con GPR119 con respecto a las células de levadura transformadas con vector vacío, indica que un compuesto de prueba es un compuesto que estimula la funcionalidad de receptor (por ejemplo un compuesto que es un agonista o agonista parcial de GPR119). En ciertas modalidades, los compuestos de la presente invención proporcionan un incremento en la señal fluorescente arriba del de la señal de fondo (la señal obtenida en la presencia del vehículo solo).

EJEMPLO 11: COMPUESTO RADIOETIQUETADO En ciertas modalidades, un compuesto conocido como un ligando de un receptor acoplado por proteína G de la presente invención se radioetiqueta. El compuesto radioetiquetado tal como se describe en la presente invención, se puede utilizar en un ensayo de clasificación para identificar/evaluar compuestos. En términos generales, se puede evaluar un compuesto recientemente sintetizado o identificado (por ejemplo compuesto de prueba) con respecto a su capacidad para reducir el enlace del ligando conocido al receptor radioetiquetado, por su capacidad de reducir la formación del compuesto entre el ligando conocido radioetiquetado y el receptor. Los radionúclidos adecuados que se pueden incorporar en los compuestos de la presente invención incluyen pero no se limitan a 3H (también escrito como T), 11C, 1 C, 18F, 125l, 82Br, 123l, 124l, 125l, 131l, 75Br, 76Br, 150, 13N, 35S y 77Br. Los compuestos que incorporan 3H, 1 C, 125l, 131l, 35S o 82Br generalmente serán los más útiles. Quedará entendido que un "compuesto radioetiquetado" es un compuesto que tiene incorporado al menos un radionúclido. En algunas modalidades, el radionúclido se selecciona del grupo que consiste en 3H, 1 C, 1 5l, 35S y 8 Br. En algunas modalidades, el radionúclido es 3H o 1 C. Además, deberá quedar entendido que todos los átomos representados en los compuestos conocidos como ligandos de un receptor acoplado por proteína G de la presente invención, pueden ser ya sea el isótopo que ocurre en forma más común de dichos átomos o el radioisótopo más escaso o isótopo no radioactivo. Los métodos sintéticos para incorporar radioisótopos en compuestos orgánicos, incluyendo los aplicables para estos compuestos conocidos como ligandos de un receptor acoplado por proteína G de la presente invención, son conocidos en la técnica e incluyen incorporar niveles de actividad de tritio en las moléculas objetivo e incluyen: A. Reducción catalítica con gas de tritio - este procedimiento normalmente produce productos con una actividad altamente específica y requieren precursores halogenados o insaturados. B. Reducción con borohidruro de sodio [3H] - Este procedimiento es más bien poco costoso y requiere precursores que contienen grupos funcionales que se pueden reducir tales como aldehidos, cetonas, lactonas, ésteres y similares. C. Reducción con hidruro de aluminio de litio [3H]- Este procedimiento ofrece productos en actividades específicas casi teóricas. También requiere precursores que contienen grupos funcionales reducibles tales como aldehidos, cetonas, lactonas, ésteres y similares. D. Etiquetación de Exposición de gas de tritio - Este procedimiento implica exponer precursores que contienen protones intercambiables a gas de tritio en la presencia de un catalizador adecuado. E. N-metilación utilizando yoduro de metilo [3H] -Este procedimiento normalmente se emplea para preparar productos O-metilo o N-metilo (3H), tratando precursores adecuados con yoduro de metilo de actividad altamente específica (3H). Este método permite en general una alta actividad específica, tal como aproximadamente 80-87 Ci/mmol. Los métodos sintéticos para incorporar niveles de actividad de 125l en las moléculas objetivo incluyen: A. Sandmeyer y reacciones similares - Este procedimiento transforma una amina de arilo o heteroarilo en una sal de diazonio, tal como una del tetrafluoroborato, y subsecuentemente a un compuesto etiquetado 125l utilizando Na125l. Se reportó un procedimiento representado por Zhu, D.-G y colaboradores en la publicación de J. Org. Chem. 2002, 67, 943-948. B. Orto 125l yodinación de fenoles - Este procedimiento permite la incorporación de 125l en la posición orto de un fenol tal como lo reporta Collier, T. L. y colaboradores en la publicación J. Labelled Compd Radiopharm. 1999, 42, S264-S266. C. Intercambio de bromuro de arilo y heteroarilo con 125l -Este método es generalmente un proceso de dos pasos. El primer paso es la conversión del bromuro de arilo o heteroarilo al intermediario de tri-alquilestaño correspondiente utilizando por ejemplo una reacción catalizada Pd (por ejemplo Pd(Ph3P)4] o a través de un litio de arilo o heteroarilo, en la presencia de un tri-alquilestaño haluro o hexaalquildiestaño [por ejemplo (CH3)3SnSn(CH3)3). Se reportó un procedimiento representado por parte de Bas, M.-D y colaboradores en la publicación J.

Labelled Compd Radiopharm. 2001, 44, S280-S282. Las técnicas anteriores pretenden ser ilustrativas y no limitantes. Los expertos en la técnica conocen también otras técnicas para radioetiquetar un compuesto conocido como un ligando de un receptor. EJEMPLO 12: ENSAYO DE ENLACE DE RECEPTOR Se puede evaluar un compuesto de prueba con respecto a su capacidad de reducir la formación del complejo entre un compuesto conocido como un ligando de un receptor acoplado por proteína G de la presente invención y el receptor. En ciertas modalidades, el ligando conocido es radioetiquetado. El ligando conocido radioetiquetado puede ser utilizado en un ensayo de clasificación para identificar/evaluar compuestos. En términos generales, se puede evaluar un compuesto recientemente sintetizado o identificado (por ejemplo compuesto de prueba), con respecto a su capacidad para reducir el enlace del ligando conocido radioetiquetado al receptor, por su capacidad de reducir la formación del compuesto entre el ligando radioetiquetado conocido y el receptor. Un nivel de enlace específico del ligando conocido radioetiquetado en la presencia del compuesto de prueba menor a un nivel de enlace específico del ligando conocido radioetiquetado en la ausencia del compuesto de prueba, indica que se forma menos del complejo entre el ligando conocido radioetiquetado y el receptor en la presencia del compuesto de prueba que en la ausencia del compuesto de prueba. Protocolo de ensayo para detectar el compuesto entre un compuesto conocido que será un ligando de un receptor acoplado por proteína G de la presente invención y el receptor A. Preparación del receptor Se transfectaron temporalmente células 293 con 10 pg de vector de expresión que comprende un polinucleótido que codifica un receptor acoplado por proteína G de la presente invención utilizando 60 µ? de lipofectamina (por plato de 15-cm). Las células transfectadas en forma temporal se crecieron en el plato durante 24 horas (75% de confluencia) con un cambio de medio y se eliminaron con 10 ml/plato de amortiguador Hepes-EDTA (20 mM Hepes + 10 mM EDTA, pH 7.4). Posteriormente las células se centrifugaron en un centrifugador Beckman Coulter durante 20 minutos, 17,000 rpm (JA-25.50 rotor). Subsecuentemente, el pelet se resuspendió en 20 mM Hepes + 1 mM EDTA, pH 7.4 y se homogenizó con un homogenizador 50-ml Dounce y nuevamente se centrifugó. Después de sobrenadante, los pelets se almacenaron a una temperatura de -80°C, hasta que se utilizó en el ensayo de enlace. Cuando se utilizó en el ensayo, las membranas se descongelaron sobre hielo durante 20 minutos, y posteriormente se agregaron 10 mL de amortiguador de incubación (20 mM Hepes, 1 mM MgCI2, 100 mM NaCI, pH 7.4). Las membranas se vortizaron posteriormente para resuspender el pelet de membrana cruda y se homogenizaron con un homogenizador Brínkmann PT-3100 Polytron durante 15 segundos en un ajuste 6. La concentración de la proteína de membrana se determina utilizando el ensayo de proteína BRL Bradford. B. Ensayo de enlace Para el enlace total, se agregó un volumen total de 50 µ? de membrana diluidas en forma adecuada (diluidas en amortiguador de ensayo que contiene 50 mM Tris HCI (pH 7.4), 10 mM MgCI2 y 1 mM EDTA; 5-50 g de proteína) a placas de microtitulación de polipropileno de 96 depósitos seguido de la adición de 100 µ? de amortiguador de ensayo y 50 µ? de un ligando conocido radioetiquetado. Para el enlace no específico, se agregaron 50 µ? de amortiguador de ensayo en lugar de 100 µ? y 50 µ? adicionales de 10 µ? de dicho ligando, el cual no es radioetiquetado se agregaron antes de que se agregaran 50 µ? del ligando conocido radioetiquetado. Posteriormente las placas se incubaron a temperatura ambiente durante 60 a 120 minutos. La reacción de enlace se terminó filtrando placas de ensayo a través de una placa de filtración Microplate Devices GF/C Unifilter con un recolector de placa de 96 depósitos Brandell seguido de lavado con 50 mM Tris HCI frío, pH 7.4 que contiene 0.9% NaCI. Posteriormente se selló la parte del fondo de la placa de filtración, se agregaron a cada depósito 50 µ? de Optiphase Supermix, la parte superior de las placas se sellaron, y las placas se contaron en un contador de centelleo Trilux MicroBeta. Para determinar si se forma menos del complejo entre el ligando conocido radioetiquetado y el receptor en la presencia de un compuesto de prueba, en lugar de agregar 100 µ? del amortiguador de ensayo, se agregan 100 µ? del compuesto de prueba diluido en forma adecuada a depósitos adecuados seguido de la adición de 50 µ? del ligando conocido radioetiquetado. C. Cálculos Los compuestos de prueba se ensayan inicialmente en 10, 1 y 0.1 µ? y posteriormente en un rango de concentraciones elegidas de modo que la dosis media pueda originar aproximadamente el 50% de inhibición de enlace del ligando conocido radioetiquetado (por ejemplo IC50). El enlace específico en la ausencia de compuesto de prueba (B0) es la diferencia del enlace total (BT) menos enlace no específico (NSB) y en forma similar, el enlace específico (en la presencia del compuesto de prueba) (B) es la diferencia del enlace de desplazamiento (BD) menos enlace no específico (NSB). Se determina IC50 de la curva de respuesta de inhibición, trazo logit-log de % B/B0 versus concentración del compuesto de prueba. K¡ se calcula a través de la transformación Cheng and Prustoff: K¡ = IC50 / (1 + [L]/KD) en donde [L] es la concentración de ligando radioetiquetado utilizado en el ensayo y KD es la constante de disociación del ligando conocido radioetiquetado determinado independientemente bajo las mismas condiciones de enlace. EJEMPLO 13 EFECTO DE AGONISTA GPR119 EN LA SECRECION GIP EN LINEA DE CELULA ENTEROENDOCRINA O EN CELULAS EN TEJIDO DERIVADO DE UNA REGION CON ALTO CONTENIDO DE CELULA K DE INTESTINO DELGADO Un agonista GPR119 de acuerdo con la presente invención, puede demostrar que estimula la secreción de GIP en una línea de célula enteroendocri na o en células en tejido derivado de una región con alto contenido de célula K de intestino delgado [por ejemplo tejido de duodeno o jejuno; ver por ejemplo la publicación de Sondhi y asociados, Pharmacogenetics J (2006) 6: 131-140] utilizando el ensayo in vitro aquí descrito. Las células endoteroendocrinas o células en tejido derivado de una región con alto contenido de célula K del intestino delgado, se revistieron en placas de 24 depósitos el día 1 en un medio de cultivo completo (DMEM/10%FBS). El día dos el medio de cultivo se reemplazó con un medio con bajo contenido de glucosa (DMEM/3mM Glucosa/10%FBS). El día tres, las células se lavaron dos veces con 1xPBS. Las células lavadas se estimularon con vehículo o con agonista GPR119 en varias concentraciones (por ejemplo dentro del rango de 1 nM a µ?) o con forskolina (1 µ??) como un control positivo en DMEM libre de suero con 15 mM de glucosa durante una hora a una temperatura de 37°C y en condiciones 5%C02 en un incubador de cultivo de tejido. Posteriormente los sobrenadantes se recolectan y clarifican mediante centrifugación en 500 g y a una temperatura de 4°C durante 5 minutos. El GIP liberado en el sobrenadante se determina mediante ELISA utilizando reactivos comprados en LINCO Research Laboratory [Rat/Mouse Gastric Inhibitory Polypeptide (Total) ELISA catálogo EZRMGI P-55K], siguiendo las instrucciones del proveedor. Aunque la especificación anterior enseña los principios de la presente invención, con los ejemplos proporcionados para el propósito de la presente invención, quedará entendido que la práctica de la presente invención comprende todas las variaciones, adaptaciones o modificaciones usuales, siempre que estén dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas y sus equivalentes.

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) contactar un compuesto de prueba con una célula huésped o con una membrana de una célula huésped que comprende un receptor acoplado por proteína G, en donde el receptor acoplado por proteína G comprende una secuencia de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en: (¡) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO: 2; (i¡) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2; (Mi) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2, siempre que el receptor no comprenda la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2; (iv) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleotido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humana utilizando cebadores específicos SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 4; (v) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleotido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1; (vi) una variante de SEQ ID NO: 2; (vii) la secuencia de aminoácido de (vi) cuando se selecciona del grupo que consiste en: (a') la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2; y (b') la secuencia de aminoácido de un receptor G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2; (viii) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado con proteína G que tiene SEQ ID NO: 2; y (ix) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (i) a (viii); y (b) determinar la capacidad del compuesto de prueba para estimular la funcionalidad del receptor; en donde la capacidad del compuesto de prueba para estimular la funcionalidad del receptor indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
2. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizada porque comprende los pasos del método tal como se describe en la reivindicación 1, y caracterizado porque comprende además: (c) se contactaron compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b) in vitro, con una célula enteroendógena de vertebrado; y (d) determinar si el compuesto estimula la secreción GIP de la célula enteroendógena de vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para estimular la secreción GIP de la célula enteroendógena de vertebrado indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
3. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizada porque comprende los pasos del método tal como se describe en la reivindicación 1, y caracterizado porque comprende además: (c) administrar a un vertebrado un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b); y (d) determinar si el compuesto incrementa un nivel GIP en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar el nivel GIP en el vertebrado, indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
4. Un método tal como se describe en la reivindicación 3, caracterizado porque el vertebrado es un vertebrado no humano.
5. Un método para identificar compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizada porque comprende los pasos del método tal como se describe en la reivindicación 1, y caracterizado porque comprende además: (c) administrar a un vertebrado un compuesto que estimula la funcionalidad del receptor en el paso (b); y (d) determinar si el compuesto incrementa un nivel de masa ósea en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar el nivel de masa ósea en el vertebrado indica que el compuesto de prueba es un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
6. El método tal como se describe en la reivindicación 5, caracterizado porque el vertebrado es un vertebrado no humano.
7. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 6, caracterizado porque el receptor es recombinante.
8. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 7, caracterizado porque la célula huésped comprende un vector de expresión, comprendiendo el vector de expresión un polinucleótido que codifica el receptor acoplado por proteína G.
9. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 8, caracterizado porque la determinación es a través de la medida del nivel de un segundo mensajero.
10. El método tal como se describe en la reivindicación 9, caracterizado porque el segundo mensajero se selecciona del grupo que consiste en AMP cíclico (cAMP), GMP cíclico (cGMP), ,4,5-trifosfato inositol (I P3), diacilglicerol (DAG), actividad de cinasa MAP, actividad de cinasa-1 de cinasa MAPK/ERK (MEKK1 ), y Ca2 + .
11. El método tal como se describe en la reivindicación 10, caracterizado porque el nivel de cAMP se incrementa.
12. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 8, caracterizado porque la determinación es a través del uso de un ensayo de melanoforo, a través de la medida del enlace GTPyS a una membrana que comprende el GPCR, o a través de un ensayo reportero.
13. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 12, caracterizado porque la célula huésped es una célula huésped de mamífero.
14. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 12, caracterizado porque la célula huésped es una célula huésped de levadura.
15. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 12, caracterizado porque la célula huésped es una célula huésped de melanoforo.
16. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 15, caracterizado porque el compuesto de prueba es una molécula pequeña.
17. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 16, caracterizado porque el receptor comprende la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2.
18. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 17, caracterizado porque el receptor comprende la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2.
19. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) contactar un compuesto in vitro con una célula enteroendógena de vertebrado, habiendo sido identificado el compuesto a través de un método tal como se describe en la reivindicación 1 ; y (b) determinar si el compuesto estimula la secreción GIP de la célula enteroendógena de vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para estimular la secreción GIP de la célula enteroendógena del vertebrado indica además que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
20. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) administrar a un vertebrado un compuesto, habiendo sido identificado el compuesto a través del método tal como se describe en la reivindicación 1; y (b) determinar si el compuesto incrementa un nivel GIP en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel GIP en el vertebrado indica además que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
21. El método tal como se describe en la reivindicación 20, caracterizado porque el vertebrado es un vertebrado no humano.
22. Un método para identificar compuestos útiles para tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) administrar un compuesto a un vertebrado, habiendo sido identificado el compuesto a través del método tal como se describe en la reivindicación 1; y (b) determinar si el compuesto incrementa un nivel de masa ósea en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel de masa ósea en el vertebrado indica además que el compuesto de prueba es un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
23. El método tal como se describe en la reivindicación 22, caracterizado porque el vertebrado es un vertebrado no humano.
24. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 19 a la 23, caracterizado porque el compuesto de prueba es una molécula pequeña.
25. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) contactar un agonista GPR119 in vitro con una célula enteroendógena de vertebrado; y (b) determinar si el agonista GPR119 estimula la secreción GIP de la célula enteroendógena de vertebrado; en donde la capacidad del agonista GPR119 para estimular la secreción GIP de la célula enteroendógena de vertebrado, indica que el agonista GPR119 es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
26. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) administrar a un vertebrado un agonista GPR119; y (b) determinar si el agonista GPR119 incrementa un nivel GIP en el vertebrado; en donde la capacidad del agonista GPR119 para incrementar un nivel GIP en el vertebrado, indica que el agonista GPR119 es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
27. El método tal como se describe en la reivindicación 26, caracterizado porque el vertebrado es un vertebrado no humano.
28. Un método para identificar compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) administrar a un vertebrado un agonista GPR119; (b) determinar si el agonista GPR119 incrementa un nivel de masa ósea en el vertebrado; en donde la capacidad del agonista GPR119 para incrementar el nivel de masa ósea en el vertebrado indica que el agonista GPR119 es un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
29. El método tal como se describe en la reivindicación 28, caracterizado porque el vertebrado es un vertebrado no humano.
30. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 25 a la 29, caracterizado porque el agonista GPR119 es un agonista de GPR119 humano.
31. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 25 a la 30, caracterizado porque el agonista GPR119 es un agonista GPR119 selectivo.
32. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 25 a la 31, caracterizado porque el agonista GPR119 tiene un EC50 menor a un valor seleccionado del grupo que consiste en 10 µ?, 1 µ? y 100 nM.
33. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 25 a la 32, caracterizado porque el agonista GPR119 es una molécula pequeña.
34. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) contactar un receptor acoplado por proteína G con un ligando conocido opcionalmente etiquetado con el receptor en la presencia o ausencia de un compuesto de prueba, en donde el receptor acoplado por proteína G comprende una secuencia de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en: (i) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO: 2; (¡i) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2; (iii) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2, siempre que el receptor no comprenda la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2; (iv) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humana utilizando cebadores específicos SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 4; (v) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1; (vi) una variante de SEQ ID NO: 2; (vii) la secuencia de aminoácido de (vi) cuando se selecciona del grupo que consiste en: (a') la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2; y (b') la secuencia de aminoácido de un receptor G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2; (viii) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado con proteína G que tiene SEQ ID NO: 2; y (¡x) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (i) a (viii); y (b) detectar el complejo entre el ligando conocido y el receptor; y (c) determinar si menos del complejo se forma en la presencia de compuesto de prueba que en la ausencia del mismo; en donde la determinación indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
35. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizada porque comprende los pasos del método tal como se describe en la reivindicación 34, y caracterizado porque comprende además: (d) contactar un compuesto en cuya presencia se forma menos del complejo en el paso (c) in vitro, con una célula enteroendocrina de vertebrado; y (e) determinar si el compuesto estimula la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para estimular la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
36. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizada porque comprende los pasos del método tal como se describe en la reivindicación 34, y caracterizado porque comprende además: (d) administrar a un vertebrado compuestos en cuya presencia se forme menos del complejo en el paso (c); y (e) determinar si el compuesto incrementa un nivel GIP en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel GIP en el vertebrado indica que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
37. Un método tal como se describe en la reivindicación 36, caracterizado porque el vertebrado es un vertebrado no humano.
38. Un método para identificar compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizada porque comprende los pasos del método tal como se describe en la reivindicación 34, y caracterizado porque comprende además: (d) administrar a un vertebrado un compuesto en cuya presencia se forme menos del complejo en el paso (c); y (e) determinar si el compuesto incrementa un nivel de masa ósea en el vertebrado. en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel de masa ósea en el vertebrado indica que el compuesto de prueba es un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
39. El método tal como se describe en la reivindicación 38, caracterizado porque el vertebrado es un vertebrado no humano.
40. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 34 a la 39, caracterizado porque el receptor es recombinante.
41. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 34 a la 40, caracterizado porque la célula huésped comprende un vector de expresión, comprendiendo del vector de expresión un polinucleótido que codifica el receptor acoplado por proteína G.
42. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 34 a la 41, caracterizado porque el ligando conocido es un agonista GPR119.
43. El método tal como se describe en la reivindicación 42, caracterizado porque el agonista GPR119 es un agonista de GPR1 9 humano.
44. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 42 ó 43, caracterizado porque el agonista GPR119 tiene un EC50 menor a un valor seleccionado del grupo que consiste en 10 µ?, 1 µ? y 100 nM.
45. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 42 a la 44, caracterizado porque el agonista GPR119 es una molécula pequeña.
46. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 34 a la 45, caracterizado porque el compuesto de prueba es una molécula pequeña.
47. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 34 a la 46, caracterizado porque el receptor comprende la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G que tiene al menos el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2.
48. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 34 a la 47, caracterizado porque el receptor comprende la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2.
49. Un método para clasificar compuestos de prueba para identificar un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado por utilizar un receptor acoplado por proteína G que comprende una secuencia de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en: (a) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO: 2; (b) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2; (c) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2, en donde el GPCR no comprende la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2; (d) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar a través de reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humana utilizando cebadores específicos SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 4; (e) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1; (f) una variante de SEQ ID NO: 2; (g) la secuencia de aminoácido de (f), cuando se selecciona del grupo que consiste en: (i) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2; y (ii) la secuencia de aminoácido de un receptor G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2; (h) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado con proteína G que tiene SEQ ID NO: 2; y (i) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (a) a (h).
50. El método tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizado porque el receptor comprende la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2.
51. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 49 a la 50, caracterizado porque el receptor comprende la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2. 52. El uso de un receptor acoplado por proteína G para clasificar compuestos de prueba en la forma de secretagogos GIP, compuestos para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos para incrementar la masa ósea en un individuo, en donde el receptor acoplado por proteína G comprende una secuencia de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en: (a) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO: 2; (b) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2; (c) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2, en donde el GPCR no comprende la secuencia de aminoácido de SEQ ID
NO: 2; (d) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar a través de reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humana utilizando cebadores específicos SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 4; (e) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 ; (f) una variante de SEQ ID NO: 2; (g) la secuencia de aminoácido de (f), cuando se selecciona del grupo que consiste en: (i) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2; y (¡i) la secuencia de aminoácido de un receptor G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2; (h) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado con proteína G que tiene SEQ ID NO: 2; y (i) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (a) a (h).
53. El uso tal como se describe en la reivindicación 52, caracterizado porque el compuesto de prueba es un agonista.
54. El uso tal como se describe en la reivindicación 53, caracterizado porque el agonista GPR119 es un agonista de GPR119 humano.
55. El uso tal como se describe en las reivindicaciones 53 ó 54, caracterizado porque el agonista GPR119 es un EC50 menor a un valor seleccionado del grupo que consiste en 10 µ?, 1 µ? y 100 nM.
56. El uso tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 52 a la 55, caracterizado porque el compuesto de prueba es una molécula pequeña.
57. El uso tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 52 a la 56, caracterizado porque el receptor comprende la secuencia de aminoácidos de un receptor acoplado por proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2.
58. El uso tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 52 a la 57, caracterizado porque el receptor comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2.
59. El uso tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 52 a la 58, caracterizado porque el receptor es recombinante.
60. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) contactar un compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor acoplado por proteína G, en donde el receptor acoplado por proteína G comprende una secuencia de aminoácido seleccionado del grupo que consiste en: (i) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO: 2; (¡i) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2; (iii) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2, siempre que el receptor no comprenda la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2; (iv) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humana utilizando cebadores específicos SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 4; (xiv) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1; (xv) una variante de SEQ ID NO: 2; (xvi) la secuencia de aminoácido de (vi) cuando se selecciona del grupo que consiste en: (a') la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2; y (b') la secuencia de aminoácido de un receptor G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2; (viii) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado con proteína G que tiene SEQ ID NO: 2; y (ix) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (i) a (viii); in vitro con una célula enteroendocrina de vertebrado o con una célula con la capacidad de secretar GIP, habiendo sido determinado el compuesto por un método tal como se describe en la reivindicación 1; y (b) determinar si el compuesto estimula la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP; en donde la capacidad del compuesto de prueba para estimular la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP, indica además que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
61. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) administrar a un vertebrado un compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor acoplado por proteína G, en donde el receptor acoplado por proteína G comprende una secuencia de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en: (i) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO: 2; (ii) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2; (iii) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2, siempre que el receptor no comprenda la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2; (iv) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humana utilizando cebadores específicos SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 4; (xvii) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1; (xvíii) una variante de SEQ ID NO: 2; (x¡x) la secuencia de aminoácido de (vi) cuando se selecciona del grupo que consiste en: (a') la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2; y (b') la secuencia de aminoácido de un receptor G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2; (viii) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado con proteína G que tiene SEQ ID NO: 2; y (ix) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (i) a (viii); habiendo sido determinado el compuesto a través de un método tal como se describe en la reivindicación 1; y (b) determinar si el compuesto incrementa un nivel GIP en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel GIP en el vertebrado indica además que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
62. El método tal como se describe en la reivindicación 61, caracterizado porque el vertebrado es un vertebrado no humano.
63. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) administrar a un vertebrado un compuesto que estimula la funcionalidad de un receptor acoplado por proteína G, en donde el receptor acoplado por proteína G comprende una secuencia de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en : (i) aminoácidos 1-335 de SEQ ID NO: 2; (ii) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2; (iii) aminoácidos 2-335 de SEQ ID NO: 2, siempre que el receptor no comprenda la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2; (iv) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que se puede amplificar mediante reacción de cadena de polimerasa (PCR) en una muestra de ADN humana utilizando cebadores específicos SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 4; (xx) la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G codificado por un polinucleótido que híbrida bajo condiciones de alta rigurosidad para el complemento de SEQ ID NO: 1 ; (xxi) una variante de SEQ ID NO: 2; (xxií) la secuencia de aminoácido de (vi) cuando se selecciona del grupo que consiste en: (a') la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado con proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2; y (b') la secuencia de aminoácido de un receptor G que comprende al menos 20 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2; (viii) la secuencia de aminoácido de una versión constitutivamente activa de un receptor acoplado con proteína G que tiene SEQ ID NO: 2; y (ix) un fragmento biológicamente activo de cualesquiera de (i) a (viii); habiendo sido identificado el compuesto por un método tal como se describe en la reivindicación 1; y (b) determinar si el compuesto incrementa un nivel de masa ósea en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel de masa ósea en el vertebrado indica además que el compuesto de prueba es un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
64. El método tal como se describe en la reivindicación 63, caracterizado porque el vertebrado es un vertebrado no humano.
65. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 60 a la 64, caracterizado porque el compuesto de prueba es una molécula pequeña.
66. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 60 a la 65, caracterizado porque el receptor comprende la secuencia de aminoácido de un receptor acoplado por proteína G que tiene al menos aproximadamente el 80% de identidad con SEQ ID NO: 2.
67. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 60 a la 66, caracterizado porque el receptor comprende la secuencia de aminoácido de SEQ ID NO: 2.
68. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) contactar un compuesto in vitro con una célula enteroendocrina de vertebrado, habiendo sido identificado el compuesto a través de un método tal como se describe en la reivindicación 34; y (b) determinar si el compuesto estimula la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado o de la célula con la capacidad de secretar GIP; en donde la capacidad del compuesto de prueba para estimular la secreción GIP de la célula enteroendocrina de vertebrado, indica además que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
69. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) administrar un compuesto a un vertebrado, habiendo sido identificado el compuesto a través de un método tal como se describe en la reivindicación 34; y (b) determinar si el compuesto incrementa un nivel GIP en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel GIP en el vertebrado indica además que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel, o un compuesto útil para incrementar la masa ósea en un individuo.
70. El método tal como se describe en la reivindicación 69, caracterizado porque el vertebrado es un vertebrado no humano.
71. Un método para identificar secretagogos GIP, compuestos útiles para prevenir o tratar una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel o compuestos útiles para incrementar la masa ósea en un individuo, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) administrar un compuesto a un vertebrado, habiendo sido identificado el compuesto a través de un método tal como se describe en la reivindicación 34; y (b) determinar si el compuesto incrementa un nivel de masa ósea en el vertebrado; en donde la capacidad del compuesto de prueba para incrementar un nivel de masa ósea en el vertebrado indica además que el compuesto de prueba es un secretagogo GIP, un compuesto útil para tratar o prevenir una condición caracterizada por masa ósea de bajo nivel o un compuesto útil para incrementar la masa ósea de un individuo.
72. El método tal como se describe en la reivindicación 71, caracterizado porque el vertebrado es un vertebrado no humano.
73. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 68 a la 72, caracterizado porque el compuesto de prueba es una molécula pequeña.