JP2019526609A - 安定化非タンパク質クロストリジウム毒素組成物 - Google Patents

Abstract

クロストリジウム毒素活性成分を安定化させる医薬組成物が記載される。組成物は、液体又は固体組成物であることができ、界面活性剤及び酸化防止剤を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、ポロキサマー及びポリソルベートから選択される界面活性剤；メチオニン、Ｎ−アセチルシステイン、エチレンジアミン四酢酸、及びこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤；及び等張化剤、並びに／又は例えばトレハロース及びスクロースから選択される抗凍結乾燥剤を含む。

Description

本発明は、クロストリジウム毒素活性成分及び１つ以上の非タンパク質賦形剤を含む固体及び液体医薬組成物に関する。

医薬組成物は、少なくとも１つの活性成分（クロストリジウム毒素など）、及び例えば１つ以上の賦形剤、緩衝剤、担体、安定剤、防腐剤及び／又は増量剤を含有し、所望の診断結果又は治療効果を達成するために患者への投与に好適である製剤である。本明細書に開示される医薬組成物は、診断、治療、及び／又は研究上の有用性を有する。

貯蔵安定性及び取り扱いの利便性のために、医薬組成物は、患者への投与前に生理食塩水又は水などの好適な液体で再構成することができる、凍結乾燥（すなわち、凍結乾燥）又は真空乾燥粉末として製剤化することができる。あるいは、医薬組成物は、水溶液又は懸濁液として製剤化することができる。医薬組成物は、タンパク質活性成分を含有することができる。残念なことに、タンパク質活性成分は安定化すること（すなわち、生物活性の損失が最小限に抑えられる状態で維持されること）が非常に困難であり得るので、使用前におけるタンパク質の製剤化中、再構成中（必要な場合）、及び貯蔵中に、タンパク質の損失及び／又はタンパク質活性の損失がもたらされる。安定性の問題は、タンパク質活性成分の表面吸着、例えば変性若しくは凝集などの物理的不安定性、又は例えば架橋、脱アミド化、異性化、酸化、酸性若しくは塩基性種の形成、メイラード反応、及び断片化などの化学的不安定性に起因して生じ得る。このような不安定性を防止するために、アルブミン及びゼラチンなどの様々なタンパク質ベースの賦形剤が、医薬組成物中に存在するタンパク質活性成分を安定化させるために使用されてきた。

残念ながら、それらの既知の安定化効果にもかかわらず、医薬組成物におけるアルブミン又はゼラチンなどのタンパク質賦形剤の使用には重大な欠点が存在する。例えば、アルブミン及びゼラチンは高価であり、入手が困難である。更に、アルブミン及びゼラチンなどの血液製品又は動物由来製品は、患者に投与した場合、血液由来病原体又は感染病原体を取り入れる潜在的なリスクを患者に負わせる可能性がある。したがって、医薬組成物中に動物由来タンパク質賦形剤が存在することにより、感染因子が医薬組成物中に不注意に入ってしまう可能性があることが知られている。例えば、ヒト血清アルブミンの使用により、プリオンが医薬組成物に移される可能性があることが報告されている。したがって、医薬組成物中に存在するタンパク質活性成分を安定化させるために使用することができる、例えば、安定剤、抗凍結剤、及び抗凍結乾燥剤などの好適な非タンパク質賦形剤を見出すことが望ましい。

クロストリジウム毒素の特有の特性は、クロストリジウム毒素活性成分を含む医薬組成物のための好適な非タンパク質賦形剤の選択を更に制約し、妨げる。例えば、クロストリジウム毒素は約１５０ｋＤａの平均分子量を有する大きなタンパク質であり、非毒素関連タンパク質と更に複合体を形成して、これはサイズを約３００〜９００ｋＤａに増加させる。このサイズのクロストリジウム毒素複合体は、より小さい、より少ない複合体タンパク質よりもはるかに脆弱で不安定となり、それによりクロストリジウム毒素の安定性を維持すべき場合には製剤化及び取り扱いの困難性の度合いを増す。したがって、非タンパク質賦形剤、例えば、安定剤、抗凍結剤及び抗凍結乾燥剤などの非タンパク質賦形剤の使用は、毒素を変性、断片化、又は不活性化させないか、あるいは毒素複合体中に存在する非毒素関連タンパク質を解離させない様式で、クロストリジウム毒素活性成分と相互作用できなければならない。

クロストリジウム毒素活性成分に関連する別の問題は、製剤化プロセスの全ての工程で必要とされる優れた安全性、精密度、及び正確度である。したがって、非タンパク質賦形剤は、それ自体が毒性であってはならず、又は既に非常に厳しい要件を更に悪化させないように取り扱いが困難であってはならない。

クロストリジウム毒素活性成分と関連する更に別の困難は、医薬組成物中で使用されるクロストリジウム毒素の量が極めて少量であることである。一般的には酵素と同様に、クロストリジウム毒素の生物学的活性は少なくとも一部はその３次元構造に依存する。したがって、クロストリジウム毒素は、熱、様々な化学物質、表面の延伸、及び表面の乾燥によって解毒される。更に、既知の培養、発酵、及び精製方法によって得られたクロストリジウム毒素複合体を医薬組成物に使用される非常に低い濃度に希釈することにより、毒素の急速な不活性化がもたらされることが知られている。医薬組成物に使用されるクロストリジウム毒素活性成分が非常に少量であるために、例えば、実験室用ガラス器具の表面、容器、医薬組成物が再構成されるバイアル、及び医薬組成物を注射するために使用される注射器の内面に非常に吸着し易くなる。クロストリジウム毒素活性成分の表面へのこのような吸着は、活性成分の損失及び残ったクロストリジウム毒素活性成分の変性をもたらす可能性があり、その両方により医薬組成物中に存在する活性成分の総活性が低下する。したがって、非タンパク質賦形剤、例えば、安定剤、抗凍結剤、及び抗凍結乾燥剤などの非タンパク質賦形剤の使用は、クロストリジウム毒素活性成分の表面への吸着を防止するための表面ブロッカーとして作用できなければならない。

クロストリジウム毒素活性成分に関係する更に別の問題は、複合体形成と関連するｐＨ感受性である。例えば、９００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ａ複合体は、ｐＨ３．５〜６．８で希釈水溶液に可溶性であることが知られている。しかしながら、約７を超えるｐＨでは、非毒性関連タンパク質が１５０ｋＤａの神経毒素から解離し、これにより特にｐＨがｐＨ８．０を超えて上昇した場合に毒性が失われることとなる。Ｅｄｗａｒｄ Ｊ．Ｓｃｈａｎｔｚら，ｐｐ．４４〜４５，Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ ｔｏｘｉｎ ｔｙｐｅ Ａ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｉｎ Ｊａｎｋｏｖｉｃ，Ｊ．，ら，Ｔｈｅｒａｐｙ ｗｉｔｈ Ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ Ｔｏｘｉｎ（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，１９９４）を参照のこと。非毒性関連タンパク質は毒性が依存する二次及び三次構造を保存するか又は安定化するのを助けると考えられるため、これらのタンパク質の解離により、より不安定なクロストリジウム毒素活性成分が生ずる。したがって、クロストリジウム毒素活性成分を含む医薬組成物の製剤化に有用な非タンパク質賦形剤は、クロストリジウム毒素活性成分の活性を維持するのに必要なｐＨレベルの範囲内で操作できなければならない。

したがって、クロストリジウム毒素活性成分（ボツリヌス毒素など）が非タンパク質賦形剤によって安定化されているクロストリジウム毒素医薬組成物が必要とされている。本発明は、固体又は液体医薬組成物中に存在するクロストリジウム毒素活性成分を安定化させるように機能する１つ以上の非タンパク質賦形剤を有する固体及び液体クロストリジウム毒素医薬組成物に関する。

一態様において、クロストリジウム毒素活性成分、等張化剤、界面活性剤、及び酸化防止剤を含む、医薬組成物が提供される。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、ボツリヌス毒素である。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、トレハロースを含む。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、塩化ナトリウムを含む。いくつかの実施形態において、組成物は、ポロキサマー及び／又はポリソルベートを含む。いくつかの実施形態において、組成物は、ポロキサマー１８８及び／又はポリソルベート２０を含む。いくつかの実施形態において、酸化防止剤は、Ｌ−メチオニン、Ｎ−アセチル−システイン、及び／又はエチレンジアミン四酢酸ナトリウム塩（ＥＤＴＡ）又はＥＤＴＡ類似体を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、緩衝剤を更に含む。一実施形態において、緩衝剤は、ヒスチジン緩衝剤を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、５〜７のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、組成物は液体製剤である。いくつかの実施形態において、組成物は固体製剤である。

一態様において、本開示は、クロストリジウム毒素誘導体、トレハロース、ポロキサマー１８８又はポリソルベート２０、及びＬーメチオニン又はＮ−アセチル−システイン（ＮＡＣ）を含む、液体医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物はボツリヌス毒素を含む。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物は、ＥＤＴＡ又はＥＤＴＡ類似体を更に含む。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物は、ヒスチジン緩衝剤を含む。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物のｐＨは、５〜７の範囲である。いくつかの実施形態において、Ｌ−メチオニンの相対重量は、約０．１％〜約０．３％の範囲である。いくつかの実施形態において、ＮＡＣの相対重量は、約０．１％〜約０．５％の範囲である。いくつかの実施形態において、ＥＤＴＡの相対重量は、約０．０１％〜約０．０５％の範囲である。いくつかの実施形態において、トレハロースの相対重量は、約１．０〜約１０％の範囲である。いくつかの実施形態において、ポロキサマー１８８の相対重量は、約２％〜約５％の範囲である。いくつかの実施形態において、ポリソルベート２０の相対重量は、約０．０２％〜約０．０６％の範囲である。

別の態様において、本開示は、ボツリヌス毒素、トレハロース、ポロキサマー１８８又はポリソルベート２０、ＮＡＣ及びＥＤＴＡ若しくはＥＤＴＡ類似体を含む固体医薬組成物を提供する。代替の実施形態において、固体医薬組成物は、ボツリヌス毒素、トレハロース、ポロキサマー１８８、及びＬ−メチオニンを含む。いくつかの実施形態において、固体医薬組成物は、ヒスチジン緩衝剤を更に含む。いくつかの実施形態において、Ｌ−メチオニンの相対重量は、約０．１％〜約０．３％の範囲である。いくつかの実施形態において、ＮＡＣの相対重量は、約０．０１％〜約０．０５％の範囲である。いくつかの実施形態において、ＥＤＴＡの相対重量は、約０．０１％〜約０．０５％の範囲である。いくつかの実施形態において、トレハロースの相対重量は、約１．０〜約１０％の範囲である。いくつかの実施形態において、ポロキサマー１８８の相対重量は、約０．５％〜約５％の範囲である。いくつかの実施形態において、ポリソルベート２０の相対重量は、約０．０２％〜約０．０６％の範囲である。

本発明のある特定の組成物は、クロストリジウム毒素誘導体、二糖類、界面活性剤、及び酸化防止剤を含む、安定な液体又は固体医薬組成物を提供する。

ある特定の実施形態はまた、本発明の態様に従って提供される組成物を使用した、例えば、鬱病、頭痛（例えば、片頭痛、緊張性頭痛など）、疼痛、多汗症、筋痙縮、頸部ジストニア、眼瞼痙攣、過活動膀胱（神経因性排尿筋過活動及び特発性過活動膀胱）、例えば皺、凹凸（irregularity）、窪み（depression）を含む皮膚状態などの様々な疾患、障害、又は状態の治療方法を提供する。実施形態は、例えば、筋内、皮内、皮下などの注射、点滴（instillation）、静脈内、経皮、及び皮膚（topical）を含む様々な投与技術を含むことができる。
定義

本明細書で使用する場合、以下に記載される単語又は用語は、以下の定義を有する。

本明細書で使用する場合、「約」又は「およそ」は、当業者によって判断されるとき、特定の値に対する許容可能な誤差範囲内であることを意味し、その値がどのように測定又は判定されたか（すなわち、測定系の限界）に一部依存する。例えば、「約」は、当該技術における行為に対して、１以内又は１超の標準偏差を意味する場合がある。特定の値が本出願及び特許請求の範囲に記載される場合、特に明記しない限り、用語「約」は、特定の値に対する許容可能な誤差範囲内であることを意味する。

「投与」又は「投与する」は、対象あるいは医薬組成物を受容する対象にボツリヌス毒素を与える（すなわち投与する）工程を意味する。本明細書に開示される医薬組成物は、様々な方法によって局所投与することができる。例えば、筋内、皮内、皮下投与、髄腔内投与、腹腔内投与、皮膚（経皮）、点滴、及び（例えば、高分子インプラント又はミニ浸透ポンプなどの徐放性デバイスの）インプラントは全て、適切な投与経路であり得る。

「緩和」は、疼痛、頭痛、又は疾患若しくは障害の任意の症状若しくは原因の発生の低下を意味する。したがって、緩和には、ある程度の低下、大幅な低下、ほぼ完全な低下、及び完全な低下が含まれる。

「動物タンパク質を含まない」とは、血液由来の、血液貯蔵された（blood pooled）、及び他の動物由来の産物又は化合物が存在しないことを意味する。「動物」は、哺乳動物（ヒトなど）、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫類、クモ類、又は他の動物種を意味する。「動物」は、細菌などの微生物を除外する。したがって、動物性タンパク質を含まない医薬組成物は、ボツリヌス神経毒素を含み得る。例えば、「動物性タンパク質を含まない」医薬組成物とは、血清由来アルブミン、ゼラチン、及び免疫グロブリンなどの他の動物由来タンパク質を実質的に含まないか、若しくは本質的に含まないか、又は全く含まないかのいずれかである医薬組成物を意味する。動物性タンパク質を含まない医薬組成物の例は、（活性成分として）ボツリヌス毒素及び安定剤又は賦形剤としての好適な多糖類を含むか又はそれらからなる医薬組成物である。

「生物活性」は、生物に対する薬物の有益な又は有害な効果を表す。薬物が複合体化学混合物（complex chemical mixture）である場合、この活性は、物質の活性成分によって発揮されるが他の構成要素によって修飾され得る。生物活性は、インビボＬＤ₅₀若しくはＥＤ₅₀アッセイによる効力又は毒性として、あるいは例えば、米国特許第２０１００２０３５５９号及び米国特許第２０１００２３３８０２号に記載されている細胞に基づく効力アッセイなどのインビトロアッセイによって評価することができる。

「ボツリヌス毒素」は、クロストリジウム・ボツリナム（Clostridium botulinum）によって産生される神経毒素、並びに、非クロストリジウム種によって組み換え的に製造されたボツリヌス毒素（又はその重鎖若しくは軽鎖）を意味する。本明細書で使用する場合、用語「ボツリヌス毒素」は、ボツリヌス毒素血清型Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ及びＧ、並びに、それらのサブタイプ及びそれらのサブタイプのうち任意の型、又は、いずれの場合も上記のうち任意のものの任意の遺伝子再操作したタンパク質、類似体、誘導体、ホモログ、パーツ、サブパーツ、バリアント（variant）又はバージョン（version）を包含する。本明細書で使用する場合、「ボツリヌス毒素」は、「修飾ボツリヌス毒素」も包含する。更に、本明細書で使用する場合、「ボツリヌス毒素」はまた、ボツリヌス毒素複合体（例えば、３００、６００及び９００ｋＤａの複合体）、並びに、複合タンパク質が結合していないボツリヌス毒素の神経毒素成分（１５０ｋＤａ）を包含する。

「クロストリジウム毒素」は、クロストリジウム毒素が細胞内に入り、クロストリジウム毒素の低及び高親和性クロストリジウム毒素受容体への結合、毒素／受容体複合体の内部移行、クロストリジウム毒素軽鎖の細胞質内への移行（translocation）、及びクロストリジウム毒素基質の酵素的修飾を起こすことによって、全般的な細胞機構を遂行できるクロストリジウム毒素株によって産生される任意の毒素を指す。クロストリジウム毒素の非限定例には、ＢｏＮＴ／Ａ、ＢｏＮＴ／Ｂ、ＢｏＮＴ／Ｃ₁、ＢｏＮＴ／Ｄ、ＢｏＮＴ／Ｅ、ＢｏＮＴ／Ｆ、ＢｏＮＴ／Ｇ、テタヌス（Tetanus）毒素（ＴｅＮＴ）、バラティ（Baratii）毒素（ＢａＮＴ）、及びブチリカム（Butyricum）毒素（ＢｕＮＴ）などのボツリヌス毒素が含まれる。神経毒素ではないＢｏＮＴ／Ｃ₂細胞毒素及びＢｏＮＴ／Ｃ₃細胞毒素は、用語「クロストリジウム毒素」から除外される。本明細書に開示されるクロストリジウム毒素は、限定するものではないが、例えばクロストリジウム毒素アイソフォーム及びクロストリジウム毒素サブタイプなどの天然に存在するクロストリジウム毒素バリアント、非天然のクロストリジウム毒素バリアント、例えば、保存的クロストリジウム毒素バリアント、非保存的クロストリジウム毒素バリアント、クロストリジウム毒素キメラバリアント、及びそれらの活性クロストリジウム毒素断片、又はそれらの任意の組み合わせが含まれる。本明細書に開示されるクロストリジウム毒素はまた、クロストリジウム毒素複合体を含む。本明細書で使用する場合、用語「クロストリジウム毒素複合体」は、クロストリジウム毒素及び非毒素関連タンパク質（ＮＡＰ）を含む複合体、例えば、ボツリヌス毒素複合体、テタヌス（Tetanus）毒素複合体、バラティ（Baratii）毒素複合体、及びブチリカム（Butyricum）毒素複合体を指す。クロストリジウム毒素複合体の非限定的な例には、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍによって産生されるもの、例えば、９００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ａ複合体、５００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ａ複合体、３００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ａ複合体、５００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ｂ複合体、５００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ｃ₁複合体、５００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ｄ複合体、３００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ｄ複合体、３００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ｅ複合体、及び３００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ｆ複合体が含まれる。

「クロストリジウム毒素活性成分」は、対象又は患者への投与時又は投与後において効果を発揮するクロストリジウム毒素の任意の部分を含有する分子を指す。本明細書で使用する場合、用語「クロストリジウム毒素活性成分」は、約１５０ｋＤａクロストリジウム毒素及び非毒素関連タンパク質（ＮＡＰ）と纏めて称する他のタンパク質を含むクロストリジウム毒素複合体、約１５０ｋＤａクロストリジウム毒素単独、又は修飾クロストリジウム毒素、例えば再標的化（re-targeted）クロストリジウム毒素を包含する。

「変形（deformity）」とは、美容的、物理的若しくは機能的な不規則性（irregularity）、欠陥、異常、欠点、奇形（malformation）、窪み、又は歪みを意味する。

生物学的有効成分に対して適用される「有効量」は、対象において所望の変化を引き起こすのに一般的に十分である成分の量を意味する。例えば、所望の効果が自己免疫障害の症状の軽減である場合、成分の有効量は、自己免疫障害の症状の少なくとも実質的な軽減を引き起こし、有意な毒性をもたらすことのない量である。

クロストリジウム毒素組成物に添加される賦形剤の量又はその特定の組み合わせに関して使用される「有効量」とは、クロストリジウム毒素活性成分の所望の初期回復効力（initial recovered potency）を達成するのに必要な各賦形剤の量を指す。この実施形態の態様において、有効量の賦形剤又は賦形剤の組み合わせは、例えば、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は少なくとも１００％の初期回復効力をもたらす。この実施形態の他の態様において、クロストリジウム毒素活性成分の治療有効濃度は、治療される病気に関連する症状を例えば、最大で１０％、最大で２０％、最大で３０％、最大で４０％、最大で５０％、最大で６０％、最大で７０％、最大で８０％、最大で９０％、又は最大で１００％軽減する。

「重鎖」は、ボツリヌス神経毒素の重鎖を意味する。これは約１００ｋＤａの分子量を有し、Ｈ鎖又はＨと称し得る。

Ｈｃは、Ｈ鎖のカルボキシル末端セグメントとほぼ等しいボツリヌス神経毒素のＨ鎖に由来する断片（約５０ｋＤａ）、又は無傷のＨ鎖中のその断片に対応する部分を意味する。Ｈｃは免疫原性であり、高い親和性、運動ニューロンへのシナプス前結合（presynaptic binding）に関与する天然又は野生型ボツリヌス神経毒素の部分を含有すると考えられる。

Ｈ_Nは、Ｈ鎖のアミノ末端セグメントとほぼ等しいボツリヌス神経毒素のＨ鎖に由来する断片（約５０ｋＤａ）、又は無傷のＨ鎖中のその断片に対応する部分を意味する。Ｈ_Nは、細胞内エンドソーム膜を横切るＬ鎖の移行に関与する天然又は野生型ボツリヌス神経毒素の部分を含有すると考えられる。

「軽鎖」は、クロストリジウム神経毒素の軽鎖を意味する。軽鎖は、約５０ｋＤａの分子量を有し、Ｌ鎖、Ｌ、又はボツリヌス神経毒素のタンパク質分解ドメイン（アミノ酸配列）と称し得る。

ＬＨ_N又はＬ−Ｈ_Nは、Ｌ鎖を含むクロストリジウム神経毒素に由来する断片、又はＨ_Nドメインに結合されたその機能的断片を意味する。それらは、Ｈｃドメインを除去又は修飾するためのタンパク質分解により無傷のクロストリジウム神経毒素から得ることができる。

「インプラント」は、制御放出（例えば、パルス放出又は連続放出）組成物又は薬物送達システムを意味する。インプラントは、例えば、人体に注入、挿入又は埋め込むことができる。

「局所投与」は、医薬品の生物学的効果が望まれる場所である体表面若しくは体内又はその近傍への医薬品の投与を意味し、例えば、筋内若しくは皮内若しくは皮下注射、又は経皮投与などによる。局所投与は、静脈内投与又は経口投与などの全身性投与経路を除く。皮膚投与は、医薬品が患者の皮膚に適用される局所投与の一種である。

「修飾ボツリヌス毒素」は、天然ボツリヌス毒素と比較して、少なくとも１つのアミノ酸が欠失し、修飾され、又は置換されたボツリヌス毒素を意味する。更に、修飾ボツリヌス毒素は、組み換えにより産生された神経毒素、又は組み換えにより作製された神経毒素の誘導体若しくは断片であり得る。修飾ボツリヌス毒素は、天然ボツリヌス毒素の少なくとも１つの生物活性、例えば、ボツリヌス毒素受容体に結合する能力、又はニューロンからの神経伝達物質放出を阻害する能力を保持する。修飾ボツリヌス毒素の一例は、１つのボツリヌス毒素血清型（血清型Ａなど）由来の軽鎖、及び異なるボツリヌス毒素血清型（血清型Ｂなど）由来の重鎖を有するボツリヌス毒素である。修飾ボツリヌス毒素の別の例は、Ｐ物質などの神経伝達物質に結合されたボツリヌス毒素である。

「変異」は、天然に存在するタンパク質又は核酸配列の構造修飾を意味する。例えば、核酸変異の場合、変異は、ＤＮＡ配列中の１つ以上のヌクレオチドの欠失、付加、又は置換であり得る。タンパク質配列変異の場合、変異は、タンパク質配列中の１つ以上のアミノ酸の欠失、付加、又は置換であり得る。例えば、タンパク質配列を含む特定のアミノ酸を、別のアミノ酸、例えば、アミノ酸アラニン、アスパラギン、システイン、アスパラギン酸、グルタミン酸、フェニルアラニン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、リジン、ロイシン、メチオニン、プロリン、グルタミン、アルギニン、セリン、スレオニン、バリン、トリプトファン、チロシン、又は任意の他の天然若しくは非天然アミノ酸若しくは化学修飾アミノ酸を含む群から選択されるアミノ酸に置換し得る。タンパク質配列の変異は、ＤＮＡ配列に対する変異の結果であり、ＤＮＡが転写され、得られたｍＲＮＡが翻訳されたときに変異タンパク質配列を生じる。タンパク質配列の変異はまた、所望の変異を含有するペプチド配列を所望のタンパク質配列に融合させることによって作り出すことが得る。

「患者」は、医療又は獣医医療を受けるヒト又は非ヒト対象を意味する。したがって、本明細書に開示される組成物は、例えば哺乳動物などの任意の動物の治療に使用することができる。

「末梢投与する」又は「末梢投与」は、皮下（subdermal）、皮内、経皮、又は皮下（subcutaneous）投与を意味するが、筋内投与を除外する。「末梢」とは、皮下の位置であり、内臓部位を除外することを意味する。

「医薬組成物」とは、例えばボツリヌス毒素などのクロストリジウム毒素活性成分などの活性医薬成分、及び例えば安定剤又は賦形剤などの少なくとも１つの追加成分を含む組成物を意味する。したがって、医薬組成物は、ヒト患者などの対象への診断的又は治療的投与に好適な製剤である。医薬組成物は、例えば、凍結乾燥若しくは真空乾燥の状態、凍結乾燥若しくは真空乾燥された医薬組成物の再構成後に形成された溶液、又は再構成を必要としない溶液若しくは固体であり得る。

「薬理学的に許容可能な賦形剤」は、「薬理学的賦形剤」又は「賦形剤」と同義であり、哺乳動物に投与されたときに実質的に長期的又は永久的な有害な効果を有さず、かつ例えば、安定剤、増量剤、抗凍結剤、抗凍結乾燥剤、添加剤、ビヒクル、担体、希釈剤、又は補助剤などの化合物を包含する、任意の賦形剤を指す。賦形剤は、一般に活性成分と混合され、又は活性成分を希釈又は封入する（enclose）ことが可能であり、固体、半固体、又は液体剤であり得る。クロストリジウム毒素活性成分を含む医薬組成物は、活性成分を薬学的に許容可能な組成物に加工するのを容易にする１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤を含み得ることも企図される。任意の薬理学的に許容可能な賦形剤がクロストリジウム毒素活性成分と不適合でない限り、薬学的に許容可能な組成物における賦形剤の使用が企図される。薬理学的に許容可能な賦形剤の非限定的な例は、例えば、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｈｏｗａｒｄ Ｃ．Ａｎｓｅｌ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，７^th ｅｄ．１９９９）；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ａｌｆｏｎｓｏ Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０^th ｅｄ．２０００）；Ｇｏｏｄｍａｎ Ｇｉｌｍａｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（Ｊｏｅｌ Ｇ．Ｈａｒｄｍａｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ，１０^th ｅｄ．２００１）；及びＨａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（Ｒａｙｍｏｎｄ Ｃ．Ｒｏｗｅ ｅｔ ａｌ．，ＡＰｈＡ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，４^th ｅｄｉｔｉｏｎ ２００３）に見出すことができ、それらの各々は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

医薬組成物の構成成分は、単一組成物（すなわち、任意の必要な再構成液体を除く全ての構成成分が医薬組成物の初期配合時に存在する）に含まれるか、又は２成分系として、例えば、医薬組成物の初期組成物中に存在しない成分などを含有し得る再構成ビヒクルで再構成された真空乾燥組成物中に含まれ得る。２成分系は、２成分系のうちの第１成分との長期貯蔵には十分に適合しない成分の導入を可能にすることを含む、いくつかの利益を提供することができる。例えば、再構成ビヒクルは、使用期間、例えば１週間の冷蔵貯蔵中に微生物増殖に対して十分な保護を提供するが、毒素を分解する可能性がある２年の冷凍庫貯蔵期間中に存在しない、防腐剤を含んでもよい。ボツリヌス毒素と適合し得ない他の成分又は長期間適合し得ない他の成分は、この方法、すなわち、第２のビヒクル中に（例えば再構成ビヒクル中に）おおよその使用時間で添加することで、導入することができる。医薬組成物はまた、ベンジルアルコール、安息香酸、フェノール、パラベン、及びソルビン酸などの防腐剤を含むことができる。医薬組成物は、例えば、表面活性剤、分散剤、不活性希釈剤、造粒剤及び崩壊剤、結合剤、潤滑剤、防腐剤、ゼラチンなどの生理学的に分解可能な組成物、水性ビヒクル及び溶媒、油性ビヒクル及び溶媒、懸濁化剤、分散剤又は湿潤剤、乳化剤、粘滑剤（demulcent）、緩衝剤、塩、増粘剤、充填剤、酸化防止剤、安定剤などの賦形剤と、薬学的に許容可能な高分子材又は疎水性材と、当該技術分野において既知であり、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＧｅｎａｒｏ，ｅｄ．，１９８５，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．に記載される他の成分と、を含むことができる。

「等張化剤」は、等張性を提供するために製剤に含まれる低分子量賦形剤を意味する。トレハロース又はスクロースなどの二糖類、ソルビトール又はマンニトールなどのポリアルコール、グルコースなどの単糖類、及び塩化ナトリウムなどの塩は、等張化剤として作用し得る。

「多糖類」は、３つ以上の糖分子モノマーのポリマーを意味する。モノマーは、同一又は異なってもよい。

「安定剤（stabilizing agent）」、「安定剤（stabilization agent）」又は「安定剤（stabilizer）」は、不安定な組成物と比較して医薬組成物の効力が増加するように、クロストリジウム毒素活性成分を安定化するように作用する物質を意味する。

「安定剤」は、賦形剤を含むことができ、タンパク質及び非タンパク質分子を含むことができる。

「治療製剤」は、例えば末梢筋の活動過多（すなわち痙縮）によって特徴付けられる障害若しくは疾患などの障害又は疾患を治療し、それにより緩和するために使用することができる製剤を意味する。

本明細書で使用する「ＴＥＭ」は、「標的化エキソサイトーシス調節因子」又は「再標的化エンドペプチダーゼ」と同義である。一般に、ＴＥＭは、クロストリジウム毒素軽鎖由来の酵素ドメイン、クロストリジウム毒素重鎖由来の移行ドメイン、及び標的化ドメインを含む。ＴＥＭの標的化ドメインは、天然に存在するクロストリジウム毒素によって利用される天然クロストリジウム毒素受容体以外の受容体に分子を標的化する、改変された（altered）細胞標的化能力を提供する。この再標的化能力は、クロストリジウム毒素の天然に存在する結合ドメインを非クロストリジウム毒素受容体に対する結合活性を有する標的ドメインで置き換えることによって達成される。ＴＥＭは、非クロストリジウム毒素受容体に結合するが、ＴＥＭ／受容体複合体の細胞質への内部移行、小胞膜での孔及び二本鎖分子の形成、酵素ドメインの細胞質への移行、並びに標的細胞のＳＮＡＲＥ複合体の成分に対するタンパク質分解効果の発揮を含む、中毒プロセスの全ての他の工程を行う。

「局所投与」は、神経毒素の全身投与を除外する。言い換えれば、従来の治療的経皮方法とは異なり、ボツリヌス毒素の局所投与は、神経毒素の大部分が患者の循環系に入るなど、有意な量をもたらすものではない。

「治療する」とは、例えば、皺、痙縮、鬱病、疼痛（例えば頭痛など）、膀胱の過活動などの症状又は障害のうちの少なくとも１つの症状を、一時的に若しくは持続的に緩和する（又は排除する）ことを意味する。

「バリアント」は、野生型ボツリヌス毒素に対する少なくとも１つのアミノ酸の置換、修飾、付加、又は欠失によって修飾された野生型ボツリヌス毒素血清型Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ又はＧなどのクロストリジウム神経毒素を意味し、これは、標的細胞によって認識され、標的細胞によって内部移行され、標的細胞中のＳＮＡＲＥ（ＳＮＡＰ（可溶性ＮＳＦ接着タンパク質）受容体）タンパク質を触媒的に開裂する。

バリアント神経毒素成分の例は、置換、修飾、欠失、及び／又は付加された１つ以上のアミノ酸を有するボツリヌス毒素のバリアント軽鎖を含み得る。このバリアント軽鎖は、エキソサイトーシス、例えば、神経伝達物質小胞（neurotransmitter vesicle）の放出を防げる同じ又はより良好な能力を有し得る。更に、バリアントの生物学的効果は、親化学物質（chemical entity）と比較して低下し得る。例えば、除去されたアミノ酸配列を有するボツリヌス毒素型Ａのバリアント軽鎖は、親（又は天然）ボツリヌス毒素Ａ型軽鎖の生物学的持続性よりも短い生物学的持続性を有し得る。
医薬組成物

本発明の特定の実施形態は、ボツリヌス毒素、二糖類、界面活性剤、及び酸化防止剤などのクロストリジウム毒素活性成分を含む（若しくはそれからなる、又はそれから本質的になる）医薬組成物を含む。

本医薬組成物の態様は、一部において、クロストリジウム毒素活性成分を提供する。本明細書で使用する場合、用語「クロストリジウム毒素活性成分」は、治療有効濃度のクロストリジウム毒素活性成分、例えば、クロストリジウム毒素複合体、クロストリジウム毒素、修飾クロストリジウム毒素、又は再標的化クロストリジウム毒素などを指す。本明細書で使用する場合、用語「治療有効濃度」は、「治療有効量」、「有効量」、「有効用量」、及び「治療有効用量」と同義であり、所望の治療効果を達成するために必要なクロストリジウム毒素活性成分の最小用量を指し、治療される病気に関連する症状を低減するのに十分な用量を含む。この実施形態の態様において、クロストリジウム毒素活性成分の治療有効濃度は、治療される病気に関連する症状を、例えば、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は少なくとも１００％軽減する。この実施形態の他の態様において、クロストリジウム毒素活性成分の治療有効濃度は、治療される病気に関連する症状を、例えば、最大で１０％、最大で２０％、最大で３０％、最大で４０％、最大で５０％、最大で６０％、最大で７０％、最大で８０％、最大で９０％、又は最大で１００％軽減する。

任意の量のクロストリジウム毒素活性成分を本明細書に開示されるクロストリジウム毒素医薬組成物の製剤化において添加することができ、但し、治療有効量のクロストリジウム毒素活性成分が回収可能であることを条件とすることが企図される。この実施形態の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、少なくとも０．１Ｕ／ｍｌ、少なくとも１．０Ｕ／ｍｌ、少なくとも１０Ｕ／ｍｌ、少なくとも５０Ｕ／ｍｌ、少なくとも１００Ｕ／ｍｌ、少なくとも２００Ｕ／ｍｌ、又は少なくとも１０００Ｕ／ｍｌである。この実施形態の他の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、最大で０．１Ｕ／ｍｌ、最大で１．０Ｕ／ｍｌ、最大で１０Ｕ／ｍｌ、最大で５０Ｕ／ｍｌ、最大で１００Ｕ／ｍｌ、最大で２００Ｕ／ｍｌ、又は最大で１０００Ｕ／ｍｌである。この実施形態の更に他の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、約０．１Ｕ／ｍｌ〜約１０００Ｕ／ｍｌ、又は約１．０Ｕ／ｍｌ〜約１０００Ｕ／ｍｌである。この実施形態の更に他の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、約０．００１Ｕ／ｍｌ〜約１００Ｕ／ｍｌ、約０．０１Ｕ／ｍｌ〜約１００Ｕ／ｍｌ、約０．１Ｕ／ｍｌ〜約１００Ｕ／ｍｌ、又は約１．０Ｕ／ｍｌ〜約１００Ｕ／ｍｌである。本明細書で使用する場合、用語「単位」又は「Ｕ」はＬＤ₅₀用量を指し、これは、クロストリジウム毒素、クロストリジウム毒素複合体、又は修飾クロストリジウム毒素を注射したマウスの５０％を殺したクロストリジウム毒素、クロストリジウム毒素複合体、又は修飾クロストリジウム毒素の量として定義される。本明細書で使用する場合、用語「約」は、記載の項目、数字、パーセンテージ、又は期間の値を定量化する場合、記載の項目、パーセンテージ、パラメータ、又は期間の値の±１０％の範囲を指す。

この実施形態の他の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、少なくとも１．０ｐｇ、少なくとも１０ｐｇ、少なくとも１００ｐｇ、少なくとも１．０ｎｇ、少なくとも１０ｎｇ、少なくとも１００ｎｇ、少なくとも１．０μｇ、少なくとも１０μｇ、少なくとも１００μｇ、又は少なくとも１．０ｍｇである。この実施形態の更に他の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、最大で１．０ｐｇ、最大で１０ｐｇ、最大で１００ｐｇ、最大で１．０ｎｇ、最大で１０ｎｇ、最大で１００ｎｇ、最大で１．０μｇ、最大で１０μｇ、最大で１００μｇ、又は最大で１．０ｍｇである。この実施形態の更に他の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、約１．０ｐｇ〜約１０μｇ、約１０ｐｇ〜約１０μｇ、約１００ｐｇ〜約１０μｇ、約１．０ｎｇ〜約１０μｇ、約１０ｎｇ〜約１０μｇ、又は約１００ｎｇ〜約１０μｇである。この実施形態の更に他の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、約１．０ｐｇ〜約１．０μｇ、約１０ｐｇ〜約１．０μｇ、約１００ｐｇ〜約１．０μｇ、約１．０ｎｇ〜約１．０μｇ、約１０ｎｇ〜約１．０μｇ、又は約１００ｎｇ〜約１．０μｇである。この実施形態の更なる態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、約１．０ｐｇ〜約５．０μｇ、約１０ｐｇ〜約５．０μｇ、約１００ｐｇ〜約５．０μｇ、約１．０ｎｇ〜約５．０μｇ、約１０ｎｇ〜約５．０μｇ、又は約１００ｎｇ〜約５．０μｇである。この実施形態の更なる態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、約１．０ｐｇ〜約１０μｇ、約１０ｐｇ〜約１０μｇ、約１００ｐｇ〜約１０μｇ、約１．０ｎｇ〜約１０μｇ、約１０ｎｇ〜約１０μｇ、又は約１００ｎｇ〜約１０μｇである。

この実施形態の態様において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、ＢｏＮＴ／Ａ、ＢｏＮＴ／Ｂ、ＢｏＮＴ／Ｃ₁、ＢｏＮＴ／Ｄ、ＢｏＮＴ／Ｅ、ＢｏＮＴ／Ｆ、ＢｏＮＴ／Ｇ、ＴｅＮＴ、ＢａＮＴ、又はＢｕＮＴを含む。別の実施形態において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、クロストリジウム毒素活性成分としてクロストリジウム毒素バリアントを含む。この実施形態の態様において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、天然に存在するクロストリジウム毒素バリアント又は非天然のクロストリジウム毒素バリアントを含む。この実施形態の他の態様において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、ＢｏＮＴ／Ａバリアント、ＢｏＮＴ／Ｂバリアント、ＢｏＮＴ／Ｃ₁バリアント、ＢｏＮＴ／Ｄバリアント、ＢｏＮＴ／Ｅバリアント、ＢｏＮＴ／Ｆバリアント、ＢｏＮＴ／Ｇバリアント、ＴｅＮＴバリアント、ＢａＮＴバリアント、又はＢｕＮＴバリアントを含み、バリアントは天然に存在するバリアント又は非天然のバリアントのいずれかである。

本医薬組成物の態様は、一部において、クロストリジウム毒素活性成分としてクロストリジウム毒素複合体を提供する。本明細書で使用する場合、用語「クロストリジウム毒素複合体」は、クロストリジウム毒素及び関連するＮＡＰを含む複合体、例えば、ボツリヌス毒素複合体、テタヌス（Tetanus）毒素複合体、バラティ（Baratii）毒素複合体、及びブチリカム（Butyricum）毒素複合体などを指す。クロストリジウム毒素複合体の非限定的な例には、クロストリジウム・ボツリナム（Clostridium botulinum）によって生成されるもの、例えば、９００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ａ複合体、５００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ａ複合体、３００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ａ複合体、５００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ｂ複合体、５００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ｃ１複合体、５００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ｄ複合体、３００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ｄ複合体、３００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ｅ複合体、及び３００ｋＤａ ＢｏＮＴ／Ｆ複合体が含まれる。クロストリジウム毒素複合体は、Ｓｃｈａｎｔｚ，ｓｕｐｒａ，（１９９２）、Ｈｕｉ Ｘｉａｎｇら，Ａｎｉｍａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔ Ｆｒｅｅ Ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ Ｐｒｏｃｅｓｓ ｆｏｒ Ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ ａ Ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ Ｔｏｘｉｎ、米国特許第７，３５４，７４０号に記載の方法を使用して精製することができ、それらの各々は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。クロストリジウム毒素複合体は、例えば、Ｌｉｓｔ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．（キャンベル、カリフォルニア州）、ｔｈｅ Ｃｅｎｔｒｅ ｆｏｒ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（ポートンダウン、イギリス）、Ｗａｋｏ（大阪、日本）、及びＳｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（セントルイス、ミズーリ州）から入手することができる。

本医薬組成物の態様は、一部において、非タンパク質賦形剤を提供する。本明細書で使用する場合、用語「非タンパク質賦形剤」は、少なくとも１５個のアミノ酸を含むポリペプチドではない任意の賦形剤を指す。任意の非タンパク質賦形剤が本明細書に開示されるクロストリジウム毒素医薬組成物を製剤化するのに有用であり、但し、治療有効量のクロストリジウム毒素活性成分がこの非タンパク質賦形剤を使用して回収されることを条件とすることが企図される。

本医薬組成物の態様は、一部において、糖を提供する。本明細書で使用する場合、用語「糖」は、１〜１０個の単糖単位、例えば、単糖類、二糖類、三糖類、及び４〜１０の単糖単位を含むオリゴ糖を含む化合物を指す。任意の糖が本明細書に開示されるクロストリジウム毒素医薬組成物を製剤化するのに有用であり、但し、治療有効量のクロストリジウム毒素活性成分がこの糖を使用して回収されることを条件とすることが企図される。単糖類は、アルドース、ジアルドース、アルドケトース、ケトース及びジケトース、並びに環状形態、デオキシ糖及びアミノ糖、並びにそれらの誘導体を含む、３個以上の炭素原子を有するポリヒドロキシアルデヒド又はポリヒドロキシケトンである。単糖類には、グリセルアルデヒド及びジヒドロキシアセトンなどのトリオース；エリトロース、エリトルロース及びトレオースなどのテトロース；アラビノース、リキソース、リボース、リブロース、キシロース、キシルロースなどのペントース；アロース、アルトロース、フルクトース、フコース、ガラクトース、グルコース、グロース、イドース、マンノース、プシコース、ラムノース、ソルボース、タガトース、タロース及びトレハロースなどのヘキソース；セドヘプツロース及びマンノヘプツロースなどのヘプトース；オクツロース及び２−ケト−３−デオキシ−マンノ−オクトネートなどのオクトース；シアロースなどのノノース；及びデコースが含まれる。オリゴ糖は、少なくとも２つの単糖単位がグリコシド結合によって結合されている化合物である。単位の数によると、オリゴ糖は、二糖類、三糖類、四糖類、五糖類、六糖類、七糖類、八糖類、九糖類、十糖類などと称される。オリゴ糖は、非分枝状、分枝状、又は環状であり得る。一般的な二糖類には、限定するものではないが、スクロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、セロビオース、ゲンチオビオース、コージビオース、ラミナリビオース、マンノビオース、メリビオース、ニゲロース、ルチノース、及びキシロビオースが含まれる。一般的な三糖類には、限定するものではないが、ラフィノース、アカルボース、マルトトリオース、及びメレジトースが含まれる。糖賦形剤の特定の使用の他の非限定的な例は、例えば、Ａｎｓｅｌ，ｓｕｐｒａ，（１９９９）、Ｇｅｎｎａｒｏ，ｓｕｐｒａ，（２０００）、Ｈａｒｄｍａｎ，ｓｕｐｒａ，（２００１）、及びＲｏｗｅ，ｓｕｐｒａ，（２００３）に見出すことができ、それらの各々は照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

一実施形態において、クロストリジウム毒素医薬組成物は糖を含む。この実施形態の態様において、クロストリジウム毒素医薬組成物は単糖類を含む。この実施形態の他の態様において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、二糖類、三糖類、四糖類、五糖類、六糖類、七糖類、八糖類、九糖類、又は十糖類を含む。この実施形態の更に他の態様において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、２〜１０個の単糖単位を含むオリゴ糖を含む。

任意の量の糖が本明細書に開示されるクロストリジウム毒素医薬組成物を製剤化するのに有用であり、治療的有効量のクロストリジウム毒素活性成分がこの糖量を使用して回収されることを条件とすることが企図される。この実施形態の態様において、製剤に添加される糖の量は、約０．１％（ｗ／ｗ）、約０．５％（ｗ／ｗ）、約１．０％（ｗ／ｗ）、約１．５％（ｗ／ｗ）、約２．０％（ｗ／ｗ）、約２．５％（ｗ／ｗ）、約３．０％（ｗ／ｗ）、約３．５％（ｗ／ｗ）、約４．０％（ｗ／ｗ）、約４．５％（ｗ／ｗ）、約５．０％（ｗ／ｗ）、約５．５％（ｗ／ｗ）、約６．０％（ｗ／ｗ）、約６．５％（ｗ／ｗ）、約７．０％（ｗ／ｗ）、約７．５％（ｗ／ｗ）、約８．０％（ｗ／ｗ）、約８．５％（ｗ／ｗ）、約９．０％（ｗ／ｗ）、約９．５％（ｗ／ｗ）、約１０％（ｗ／ｗ）、約１５％（ｗ／ｗ）、約２０％（ｗ／ｗ）、約２５％（ｗ／ｗ）、約３０％（ｗ／ｗ）、又は約３５％（ｗ／ｗ）である。この実施形態の他の態様において、製剤に添加される糖の量は、少なくとも０．１％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも１．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも１．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも２．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも２．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも３．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも３．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも４．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも４．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも５．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも５．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも６．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも６．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも７．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも７．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも８．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも８．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも９．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも９．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも１０％（ｗ／ｗ）、少なくとも１５％（ｗ／ｗ）、少なくとも２０％（ｗ／ｗ）、少なくとも２５％（ｗ／ｗ）、少なくとも３０％（ｗ／ｗ）、又は少なくとも３５％（ｗ／ｗ）である。この実施形態の更に他の態様において、製剤に添加される糖の量は、最大で０．１％（ｗ／ｗ）、最大で０．５％（ｗ／ｗ）、最大で１．０％（ｗ／ｗ）、最大で１．５％（ｗ／ｗ）、最大で２．０％（ｗ／ｗ）、最大で２．５％（ｗ／ｗ）、最大で３．０％（ｗ／ｗ）、最大で３．５％（ｗ／ｗ）、最大で４．０％（ｗ／ｗ）、最大で４．５％（ｗ／ｗ）、最大で５．０％（ｗ／ｗ）、最大で５．５％（ｗ／ｗ）、最大で６．０％（ｗ／ｗ）、最大で６．５％（ｗ／ｗ）、最大で７．０％（ｗ／ｗ）、最大で７．５％（ｗ／ｗ）、最大で８．０％（ｗ／ｗ）、最大で８．５％（ｗ／ｗ）、最大で９．０％（ｗ／ｗ）、最大で９．５％（ｗ／ｗ）、最大で１０％（ｗ／ｗ）、最大で１５％（ｗ／ｗ）、最大で２０％（ｗ／ｗ）、最大で２５％（ｗ／ｗ）、最大で３０％（ｗ／ｗ）、又は最大３５％（ｗ／ｗ）である。

一実施形態において、本クロストリジウム毒素医薬組成物は二糖類を含む。一般的な二糖類には、限定するものではないが、スクロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、セロビオース、ゲンチオビオース、コージビオース、ラミナリビオース、マンノビオース、メリビオース、ニゲロース、ルチノース、及びキシロビオースが含まれる。この実施形態の態様において、クロストリジウム毒素医薬組成物はスクロースを含む。特定の一実施形態において、クロストリジウム毒素医薬組成物はトレハロースを含む。この実施形態の態様において、製剤に添加される製剤に添加される二糖類の量は、約０．１％（ｗ／ｗ）、約０．５％（ｗ／ｗ）、約１．０％（ｗ／ｗ）、約１．５％（ｗ／ｗ）、約２．０％（ｗ／ｗ）、約２．５％（ｗ／ｗ）、約３．０％（ｗ／ｗ）、約３．５％（ｗ／ｗ）、約４．０％（ｗ／ｗ）、約４．５％（ｗ／ｗ）、約５．０％（ｗ／ｗ）、約５．５％（ｗ／ｗ）、約６．０％（ｗ／ｗ）、約６．５％（ｗ／ｗ）、約７．０％（ｗ／ｗ）、約７．５％（ｗ／ｗ）、約８．０％（ｗ／ｗ）、約８．５％（ｗ／ｗ）、約９．０％（ｗ／ｗ）、約９．５％（ｗ／ｗ）、約１０％（ｗ／ｗ）、約１５％（ｗ／ｗ）、約２０％（ｗ／ｗ）、約２５％（ｗ／ｗ）、約３０％（ｗ／ｗ）、又は約３５％（ｗ／ｗ）である。

本医薬組成物の態様は、一部において、界面活性剤を提供する。本明細書で使用する場合、用語「界面活性剤」は、天然又は合成両親媒性化合物を指す。界面活性剤は、非イオン性、両性イオン性、又はイオン性であり得る。任意の界面活性剤が本明細書に開示されるクロストリジウム毒素医薬組成物を製剤化するのに有用であり、但し、治療的有効量のクロストリジウム毒素活性成分がこの界面活性剤量を使用して回収されることを条件とすることが企図される。界面活性剤の非限定的な例には、ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）２０）、ポリソルベート４０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）４０）、ポリソルベート６０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）６０）、ポリソルベート６１（ＴＷＥＥＮ（登録商標）６１）、ポリソルベート６５（ＴＷＥＥＮ（登録商標）６５）、ポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０）、及びポリソルベート８１（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８１）などのポリソルベート；ポロキサマー１２４（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ４４）、ポロキサマー１８１（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ６１）、ポロキサマー１８２（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ６２）、ポロキサマー１８４（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ６４）、ポロキサマー１８８（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ６８）、ポロキサマー２３７（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ８７）、ポロキサマー３３８（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ１０８）、ポロキサマー４０７（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７）、ＢＲＩＪ（登録商標）３０及びＢＲＩＪ（登録商標）３５などのポリオキシエチレングリコールドデシルエーテルなどのポロキサマー（ポリエチレン−ポリプロピレンコポリマー）；２−ドデコキシエタノール（ＬＵＢＲＯＬ（登録商標）−ＰＸ）；ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル（ＴＲＩＴＯＮ（登録商標）Ｘ−１００）；ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）；ソルトール（ｓｏｌｕｔｏｌ）ＨＳ１５；３−［（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳ）；３−［（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−２−ヒドロキシ−１−プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳＯ）；モノラウリン酸スクロース；及びコール酸ナトリウムが含まれる。界面活性剤賦形剤の他の非限定的な例は、例えば、Ａｎｓｅｌ，ｓｕｐｒａ，（１９９９）；Ｇｅｎｎａｒｏ，ｓｕｐｒａ，（２０００）；Ｈａｒｄｍａｎ，ｓｕｐｒａ，（２００１）；及びＲｏｗｅ，ｓｕｐｒａ，（２００３）に見出すことができ、それらの各々は照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

したがって、一実施形態において、クロストリジウム毒素医薬組成物は界面活性剤を含む。この実施形態の態様において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、ポリソルベート、ポロキサマー、ポリオキシエチレングリコールドデシルエーテル、２−ドデコキシエタノール、ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル、ドデシル硫酸ナトリウム、３−［（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート、３−［（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−２−ヒドロキシ−１−プロパンスルホネート、モノラウリン酸スクロース、又はコール酸ナトリウムを含む。

任意の量の界面活性剤が本明細書に開示されるクロストリジウム毒素医薬組成物を製剤化するのに有用であり、但し、治療的有効量のクロストリジウム毒素活性成分がこの界面活性剤量を使用して回収されることを条件とすることが企図される。この実施形態の態様において、製剤に添加される界面活性剤の量は、約０．０１％（ｗ／ｗ）、約０．０２％（ｗ／ｗ）、約０．０３％（ｗ／ｗ）、約０．０４％（ｗ／ｗ）、約０．０５％（ｗ／ｗ）、約０．０６％（ｗ／ｗ）、約０．０７％（ｗ／ｗ）、約０．０８％（ｗ／ｗ）、約０．０９％（ｗ／ｗ）、約０．１％（ｗ／ｗ）、約０．５％（ｗ／ｗ）、約１．０％（ｗ／ｗ）、約１．５％（ｗ／ｗ）、約２．０％（ｗ／ｗ）、約２．５％（ｗ／ｗ）、約３．０％（ｗ／ｗ）、約３．５％（ｗ／ｗ）、約４．０％（ｗ／ｗ）、約４．５％（ｗ／ｗ）、約５．０％（ｗ／ｗ）、約５．５％（ｗ／ｗ）、約６．０％（ｗ／ｗ）、約６．５％（ｗ／ｗ）、約７．０％（ｗ／ｗ）、約７．５％（ｗ／ｗ）、約８．０％（ｗ／ｗ）、約８．５％（ｗ／ｗ）、約９．０％（ｗ／ｗ）、約９．５％（ｗ／ｗ）、約１０％（ｗ／ｗ）、約１５％（ｗ／ｗ）、約２０％（ｗ／ｗ）、約２５％（ｗ／ｗ）、約３０％（ｗ／ｗ）、又は約３５％（ｗ／ｗ）である。この実施形態の他の態様において、製剤に添加される界面活性剤の量は、少なくとも０．０１％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０２％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０３％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０４％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０５％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０６％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０７％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０８％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０９％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．１％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも１．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも１．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも２．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも２．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも３．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも３．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも４．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも４．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも５．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも５．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも６．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも６．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも７．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも７．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも８．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも８．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも９．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも９．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも１０％（ｗ／ｗ）、少なくとも１５％（ｗ／ｗ）、少なくとも２０％（ｗ／ｗ）、少なくとも２５％（ｗ／ｗ）、少なくとも３０％（ｗ／ｗ）、又は少なくとも３５％（ｗ／ｗ）である。この実施形態の更に他の態様において、製剤に添加される界面活性剤の量は、最大で０．０１％（ｗ／ｗ）、最大で０．０２％（ｗ／ｗ）、最大で０．０３％（ｗ／ｗ）、最大で０．０４％（ｗ／ｗ）、最大で０．０５％（ｗ／ｗ）、最大で０．０６％（ｗ／ｗ）、最大で０．０７％（ｗ／ｗ）、最大で０．０８％（ｗ／ｗ）、最大で０．０９％（ｗ／ｗ）、最大で０．１％（ｗ／ｗ）、最大で０．５％（ｗ／ｗ）、最大で１．０％（ｗ／ｗ）、最大で１．５％（ｗ／ｗ）、最大で２．０％（ｗ／ｗ）、最大で２．５％（ｗ／ｗ）、最大で３．０％（ｗ／ｗ）、最大で３．５％（ｗ／ｗ）、最大で４．０％（ｗ／ｗ）、最大で４．５％（ｗ／ｗ）、最大で５．０％（ｗ／ｗ）、最大で５．５％（ｗ／ｗ）、最大で６．０％（ｗ／ｗ）、最大で６．５％（ｗ／ｗ）、最大で７．０％（ｗ／ｗ）、最大で７．５％（ｗ／ｗ）、最大で８．０％（ｗ／ｗ）、最大で８．５％（ｗ／ｗ）、最大で９．０％（ｗ／ｗ）、最大で９．５％（ｗ／ｗ）、最大で１０．０％（ｗ／ｗ）、最大で１５％（ｗ／ｗ）、最大で２０％（ｗ／ｗ）、最大で２５％（ｗ／ｗ）、最大で３０％（ｗ／ｗ）、又は最大で３５％（ｗ／ｗ）である。

いくつかの実施形態において、クロストリジウム毒素医薬組成物はポロキサマーを含む。本医薬組成物と共に使用することができるポロキサマーには、ポロキサマー１２４（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ４４）、ポロキサマー１８１（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ６１）、ポロキサマー１８２（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ６２）、ポロキサマー１８４（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ６４）、ポロキサマー１８８（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ６８）、ポロキサマー２３７（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ８７）、ポロキサマー３３８（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ１０８）、ポロキサマー４０７（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７）が含まれる。いくつかの実施形態において、ポロキサマー１８８はより有利であり得る。

いくつかの実施形態において、クロストリジウム毒素医薬組成物はポリソルベートを含む。本医薬組成物と共に使用することができるポリソルベートには、ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）２０）、ポリソルベート４０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）４０）、ポリソルベート６０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）６０）、ポリソルベート６１（ＴＷＥＥＮ（登録商標）６１）、ポリソルベート６５（ＴＷＥＥＮ（登録商標）６５）、ポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０）、及びポリソルベート８１（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８１）が含まれる。いくつかの実施形態において、ポリソルベート２０は、いくつかの他のポリソルベートよりも有利であり得る。

本医薬組成物の態様は、一部において、少なくとも酸化防止剤を提供する。酸化防止剤の非限定的な例には、限定するものではないが、メチオニン、システイン、Ｎ−アセチル−システイン（ＮＡＣ）、ピロ亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、ビタミンＥ及びトロロックスＣを含む類似体；ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸ナトリウム塩）、ＤＰＴＡ（ジエチレントリアミン五酢酸）又はＤＰＴＡ−ビスアミド、カルシウムＤＴＰＡ、及びＣａＮａＤＰＴＡ−ビスアミドなどのキレート剤；又はこれらの組み合わせが含まれる。この実施形態の態様において、製剤に添加される酸化防止剤の量は、約０．０１％（ｗ／ｗ）〜約０．１０％（ｗ／ｗ）の範囲である。

本明細書に開示されるクロストリジウム毒素医薬組成物は、限定するものではないが、他の薬学的に許容可能な成分（又は医薬成分）を任意選択で含むことができることが更に企図され、成分には、限定するものではないが緩衝剤、防腐剤、等張化調整剤、塩、酸化防止剤、浸透圧調節剤、乳化剤、甘味剤、又は香味剤などが含まれる。得られる製剤が薬学的に許容可能であることを条件に、ｐＨを調整するための様々な緩衝剤及び手段を使用して、本明細書に開示される医薬組成物を調製することができる。そのような緩衝剤には、限定するものではないが、酢酸緩衝液、ホウ酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、リン酸緩衝剤、中性緩衝生理食塩水、及びリン酸緩衝生理食塩水が含まれる。酸又は塩基を使用して、必要に応じて医薬組成物のｐＨを調整できることが理解される。任意の緩衝化ｐＨレベルがクロストリジウム毒素医薬組成物を製剤化するのに有用であり得、但し、治療有効量のクロストリジウム毒素活性成分がこの有効ｐＨレベルを使用して回収されることを条件とすることが企図される。この実施形態の一態様において、有効ｐＨレベルは、少なくとも約ｐＨ５．０、少なくとも約ｐＨ５．５、少なくとも約ｐＨ６．０、少なくとも約ｐＨ６．５、少なくとも約ｐＨ７．０、又は約ｐＨ約７．５である。この実施形態の別の態様において、有効ｐＨレベルは、最大で約ｐＨ約ｐＨ５．０、最大で約ｐＨ約ｐＨ５．５、最大で約ｐＨ６．０、最大で約ｐＨ６．５、最も約ｐＨ７．０、又は最大で約ｐＨ７．５．である。この実施形態の更に別の態様において、有効ｐＨレベルは約ｐＨ５．０〜約ｐＨ８．０であり、有効ｐＨレベルは約ｐＨ５．０〜約ｐＨ７．０であり、有効ｐＨレベルは約ｐＨ５．０〜約ｐＨ６．０であり、有効ｐＨレベルは約ｐＨ５．５〜約ｐＨ８．０であり、有効ｐＨレベルは約ｐＨ５．５〜約ｐＨ７．０であり、有効ｐＨレベルは約ｐＨ５．５〜約ｐＨ５．０であり、有効ｐＨレベルは約ｐＨ５．５〜約ｐＨ７．５であり、有効ｐＨレベルは約ｐＨ５．５〜約ｐＨ６．５である。

本明細書に開示される医薬組成物は、再構成されたとき又は注射時に約５〜８のｐＨを有することができる。ある特定の実施形態において、組成物は、８未満のｐＨ、例えば、７．９、若しくは７．８、若しくは７．７、若しくは７．６、若しくは７．５、若しくは７．４、若しくは７．３、若しくは７．２、若しくは７．１、若しくは７．０、若しくは６．９、若しくは６．８、若しくは６．７、若しくは６．６、若しくは６．５、若しくは６．４、若しくは６．３、若しくは６．２、若しくは６．１、若しくは６．０、若しくは５．９、若しくは５．８、若しくは５．７、若しくは５．６、若しくは５．５、若しくは５．４、若しくは５．３、若しくは５．２、若しくは５．１などのｐＨを有する。いくつかの実施形態において、ｐＨは５〜７の範囲である。

任意の濃度の緩衝剤がクロストリジウム毒素医薬組成物を製剤化するのに有用であり得、但し、治療的有効量のクロストリジウム毒素活性成分がこの有効濃度の緩衝剤を使用して回収されることを条件とすることが企図される。この実施形態の態様において、緩衝剤の有効濃度は、少なくとも０．１ｍＭ、少なくとも０．２ｍＭ、少なくとも０．３ｍＭ、少なくとも０．４ｍＭ、少なくとも０．５ｍＭ、少なくとも０．６ｍＭ、少なくとも０．７ｍＭ、少なくとも０．８ｍＭ、又は少なくとも０．９ｍＭである。この実施形態の他の態様において、緩衝剤の有効濃度は、少なくとも１．０ｍＭ、少なくとも２．０ｍＭ、少なくとも３．０ｍＭ、少なくとも４．０ｍＭ、少なくとも５．０ｍＭ、少なくとも６．０ｍＭ、少なくとも７．０ｍＭ、少なくとも８．０ｍＭ、又は少なくとも９．０ｍＭである。この実施形態の更に他の態様において、緩衝剤の有効濃度は、少なくとも１０ｍＭ、少なくとも２０ｍＭ、少なくとも３０ｍＭ、少なくとも４０ｍＭ、少なくとも５０ｍＭ、少なくとも６０ｍＭ、少なくとも７０ｍＭ、少なくとも８０ｍＭ、又は少なくとも９０ｍＭである。この実施形態の更に他の態様において、緩衝剤の有効濃度は、少なくとも１００ｍＭ、少なくとも２００ｍＭ、少なくとも３００ｍＭ、少なくとも４００ｍＭ、少なくとも５００ｍＭ、少なくとも６００ｍＭ、少なくとも７００ｍＭ、少なくとも８００ｍＭ、又は少なくとも９００ｍＭである。この実施形態の更なる態様において、緩衝剤の有効濃度は、最大で０．１ｍＭ、最大で０．２ｍＭ、最大で０．３ｍＭ、最大で０．４ｍＭ、最大で０．５ｍＭ、最大で０．６ｍＭ、最大で０．７ｍＭ、最大で０．８ｍＭ、又は最大０．９ｍＭである。この実施形態の更に他の態様において、緩衝剤の有効濃度は、最大で１．０ｍＭ、最大で２．０ｍＭ、最大で３．０ｍＭ、最大で４．０ｍＭ、最大で５．０ｍＭ、最大で６．０ｍＭ、最大で７．０ｍＭ、最大で８．０ｍＭ、又は最大９．０ｍＭである。この実施形態の更に他の態様において、緩衝剤の有効濃度は、最大で１０ｍＭ、最大で２０ｍＭ、最大で３０ｍＭ、最大で４０ｍＭ、最大で５０ｍＭ、最大で６０ｍＭ、最大で７０ｍＭ、最大で８０ｍＭ、又は最大９０ｍＭである。この実施形態の更に他の態様において、緩衝剤の有効濃度は、最大で１００ｍＭ、最大で２００ｍＭ、最大で３００ｍＭ、最大で４００ｍＭ、最大で５００ｍＭ、最大で６００ｍＭ、最大で７００ｍＭ、最大で８００ｍＭ、又は最大９００ｍＭである。この実施形態のなお更なる態様において、緩衝剤の有効濃度は、約０．１ｍＭ〜約９００ｍＭ、０．１ｍＭ〜約５００ｍＭ、０．１ｍＭ〜約１００ｍＭ、０．１ｍＭ〜約９０ｍＭ、０．１ｍＭ〜約５０ｍＭ、１．０ｍＭ〜約９００ｍＭ、１．０ｍＭ〜約５００ｍＭ、１．０ｍＭ〜約１００ｍＭ、１．０ｍＭ〜約９０ｍＭ、又は１．０ｍＭ〜約５０ｍＭである。

本発明の実施形態は、ボツリヌス毒素血清型Ａ、Ｂ、Ｃ₁Ｄ、Ｅ、Ｆ及びＧからなる群から選択されるボツリヌス毒素血清型などの複数のボツリヌス毒素血清型を含む組成物を用いて実施することができる。ある特定の実施形態において、精製したボツリヌス毒素を使用することができる。他の実施形態において、修飾ボツリヌス毒素を使用し得る。

いくつかの実施形態において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、患者への投与前に生理食塩水又は水などの好適な液体で再構成することができる、凍結乾燥（lyophilized）（すなわち凍結乾燥（freeze dried））又は真空乾燥粉末として製剤化することができる。代替の実施形態において、医薬組成物は、水溶液又は懸濁液として製剤化することができる。

いくつかの実施形態において、固体クロストリジウム毒素医薬組成物は、ボツリヌス毒素、等張化剤、ポロキサマー、及び／又はポリソルベート、並びに酸化防止剤を含む。いくつかの実施形態において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、ボツリヌス毒素を含む。いくつかの実施形態において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、トレハロースを含む。いくつかの実施形態において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、ポロキサマー１８８又はポリソルベート２０を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、ＥＤＴＡ又はＥＤＴＡ類似体を含む。代替の実施形態において、組成物は、メチオニン及び／又はＮＡＣを含む。これらの代替の実施形態の態様において、組成物は、ＥＤＴＡ又はＥＤＴＡ類似体を更に含む。いくつかの実施形態において、組成物は、緩衝剤を更に含む。一実施形態において、組成物は、ヒスチジン緩衝剤を含む。いくつかの実施形態において、トレハロース、ポロキサマー、及びメチオニンの相対重量は、それぞれ以下の範囲内：１〜１０％、０．５〜５％、及び０．１〜０．３％である。いくつかの実施形態において、トレハロース、ポリソルベート、及びメチオニンの相対重量は、それぞれ以下の範囲内：１〜１０％、０．０２％〜０．０６％、及び０．１〜０．３％である。いくつかの実施形態において、ＥＤＴＡ又はＥＤＴＡ類似体の相対重量は、約０．０１〜０．１０％である。いくつかの実施形態において、ＮＡＣの相対重量は、０．０１〜０．５％の範囲である。

これらの実施形態の態様において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、固体（すなわち、凍結乾燥又は真空乾燥）組成物として製剤化される。いくつかの実施形態において、固体医薬組成物は、０．０１〜０．０５％の相対重量でＮＡＣを含む。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、ＥＤＴＡ又はＥＤＴＡ類似体を更に含む。代替の実施形態において、固体医薬組成物は、メチオニン及びＥＤＴＡ又はＥＤＴＡ類似体を含む。

これらの実施形態の代替の態様において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、液体として製剤化される。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物は、０．１〜０．５％の相対重量でＮＡＣを含む。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物は、ＮＡＣ及びＥＤＴＡ又はＥＤＴＡ類似体を含む。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物は、ヒスチジン緩衝剤を含む。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物は、５〜７のｐＨを有する。

治療方法
実施形態において、本発明は、疾患、障害、状態などを治療する方法であって、本発明の医薬製剤を、それを必要とする対象に、患者の機能を改善するのに十分な量で投与する工程を含む方法を提供する。ある特定の実施形態において、疾患は、神経筋性質のものであり、例えば筋肉及びその神経制御に影響を及ぼす疾患など、例えば過活動膀胱などである。ある特定の実施形態は、例えば、頭痛、又は背部痛、又は筋肉痛の治療などの疼痛の治療に関する。ある特定の実施形態において、本発明の方法は、例えば、鬱病、不安などを含む精神障害の治療を包含する。

本発明の組成物及び方法は、例えば、アカラシア、裂肛、アニスムス、眼瞼痙攣、脳性麻痺、頸部ジストニア、頸部痙攣、頚椎性頭痛、片側顔面痙攣、汗疱状湿疹、嚥下障害、発音障害、食道運動障害、食道筋輪（esophageal muscular ring）、内斜視（乳児内）、アイリフト、顔面ミオキミア、歩行障害（特発性トウ−ウォーキング）、全身性ジストニア、片側顔面痙攣、過度顔皺線（hyperfunctional facial line）（眉間、額、目尻の皺、口の下降角）、多汗症、失禁（特発性又は神経性）、薬物乱用頭痛、偏頭痛、ミオクローヌス、例えば咬筋などを含む筋肉量又は活動の低下、筋・筋膜性疼痛症候群、閉塞性尿路症、分割膵膵炎、パーキンソン病、恥骨直腸筋症候群、手術瘢痕張力（surgical scar tension）の低下、唾液分泌過多、唾液腺粘液腫（sialocele）、第VI脳神経麻痺（sixth nerve palsy）、痙縮、言語／発音障害、斜視、手術補助（surgery adjunct）（眼）、遅発性ジスキネジア、顎関節障害、緊張性頭痛、胸郭出口症候群、捻転ジストニア、斜頸、トゥレット症候群、震え、むち打ち損傷関連頸痛、疼痛、痒み、炎症、アレルギー、癌及び良性腫瘍、発熱、肥満、感染疾患、ウイルス及び細菌、高血圧症、心不整脈、血管痙攣、アテローム性動脈硬化症、内皮過形成、静脈血栓症、静脈瘤、アフタ性口内炎、唾液分泌過多、顎関節症候群、多汗症、腋臭症、ざ瘡（acne）、酒さ、色素沈着過剰、肥厚性瘢痕、ケロイド、皮膚硬結（calluses）及び皮膚硬化（corns）、皮膚の皺、過剰皮脂生成、乾癬、皮膚炎、アレルギー性鼻炎、鼻詰まり、後鼻漏、くしゃみ、耳垢、漿液性及び化膿性中耳炎、扁桃肥大及び腺様増殖症、耳鳴り、浮動性目まい、回転性目まい、嗄声、咳、睡眠時無呼吸症、いびき、緑内障、結膜炎、ブドウ膜炎、斜視、バセドウ病、多毛症、脱毛、喘息、気管支炎、肺気腫、粘液産生、胸膜炎、凝固障害、骨髄増殖障害、好酸球、好中球、マクロファージ及びリンパ球を伴う障害、免疫寛容及び移植、自己免疫障害、嚥下障害、胃酸逆流、食道裂孔ヘルニア、胃炎及び胃酸過多、下痢及び便秘、痔疾、尿失禁、前立腺肥大、持続勃起症及びペロニー病、副睾丸炎、避妊、月経痛、早産の防止、子宮内膜症及び子宮筋腫、関節炎、変形性関節症、リウマチ、滑液包炎、腱鞘炎、腱滑膜炎（tenosynovitis）、線維筋痛症、発作性障害、痙縮、頭痛、並びに神経痛の治療、症状の軽減、及び／又は予防に有用であり得る。

ある特定の実施形態において、患者は、任意の９０日間にわたって投与される最大３６０Ｕのボツリヌス毒素に制限される。
神経／筋肉状態の治療

一実施形態において、神経筋疾患は、多汗症である。多汗症を患っている対象は、本発明の医薬製剤の治療当たり、例えば、腋窩当たり約５９Ｕ、腋窩当たり約５８Ｕ、又は腋窩当たり約５７Ｕ、又は腋窩当たり約５６Ｕ、又は腋窩当たり約５５Ｕ、又は腋窩当たり約５４Ｕ、又は腋窩当たり約５３Ｕ、又は腋窩当たり約５２Ｕ、又は腋窩当たり約５１Ｕ、又は腋窩当たり約５０Ｕ、又は腋窩当たり約４９Ｕ、又は腋窩当たり約４８Ｕ、又は腋窩当たり約４７Ｕ、又は腋窩当たり約４６Ｕ、又は腋窩当たり約４５Ｕ、又は腋窩当たり約４４Ｕ、又は腋窩当たり約４３Ｕ、又は腋窩当たり約４２Ｕ、又は腋窩当たり約４１Ｕ、又は腋窩当たり約４０Ｕ、又は腋窩当たり約３９Ｕ、又は腋窩当たり約３８Ｕ、又は腋窩当たり約３７Ｕ、又は腋窩当たり約３６Ｕ以下を受容する。一実施形態において、合計５０Ｕを、約１〜２ｃｍ離れた１０〜１５部位に皮内注射する。

一実施形態において、神経筋疾患は、片側顔面痙攣である。片側顔面痙攣を患っている対象は、例えば、本発明の医薬製剤の治療当たり約１．５〜１５Ｕを受容する。更なる例において、対象は、片側顔面痙攣を有する患者に投与する治療当たり約１．５〜３Ｕ、１．５〜５Ｕ、１．５〜７Ｕ、１．５〜１０Ｕ、１．５〜１２Ｕ、１．５〜１５Ｕ、５〜１０Ｕ、５〜１５Ｕ、又は１０〜１５Ｕを受容する。なお更なる例において、対象は、片側顔面痙攣を有する患者に投与する治療当たり約１．５Ｕ、約２Ｕ、約２．５Ｕ、約３Ｕ、約３．５Ｕ、約４Ｕ、約４．５Ｕ、約５Ｕ、約５．５Ｕ、約６Ｕ、約６．５Ｕ、約７Ｕ、約７．５Ｕ、約８Ｕ、約８．５Ｕ、約９Ｕ、約９．５Ｕ、約１０Ｕ、約１０．５Ｕ、約１１Ｕ、約１１．５Ｕ、約１２Ｕ、約１２．５Ｕ、約１３Ｕ、約１３．５Ｕ、約１４Ｕ、約１４．５Ｕ、又は約１５Ｕを受容する。治療当たり１５Ｕより大きい投与量をまた、治療反応を達成するために片側顔面痙攣を有する患者に投与してもよい。治療活動（treatment session）は、複数の治療を含むことができる。

一実施形態において、神経筋疾患は頸部ジストニアである。頸部ジストニアを患っている対象は、例えば、本発明の医薬製剤の治療当たり約１５〜３００Ｕを受容する。更なる例において、対象は、頸部ジストニアを有する患者に投与される約３５〜２５０Ｕ、６５〜２００Ｕ、８５〜１７５Ｕ、１０５〜１６０Ｕ、又は１２５〜１４５Ｕを受容する。一実施形態において、胸鎖乳突筋への投与量は、１００Ｕ以下に制限される。治療当たり３００Ｕより大きい投与量をまた、治療反応を達成するために頸部ジストニアを有する患者に投与してもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。

一実施形態において、神経筋疾患は、眼瞼痙攣である。例えば、眼瞼痙攣を患っている対象は、例えば、上眼瞼の内外側の瞼板前部眼輪筋（pretarsal orbicularis oculi）及び下眼瞼の外側の瞼板前部眼輪筋に注射される約１．２５〜２．５Ｕの本発明の医薬製剤を受容する。更なる例において、対象は、注射部位当たり、約１．５Ｕ、約１．６Ｕ、約１．７Ｕ、約１．８Ｕ、約１．９Ｕ、約２．０Ｕ、約２．１Ｕ、約２．２Ｕ、約２．３Ｕ、約２．４Ｕ、又は約２．５Ｕ以上を受容する。治療活動は、複数の治療を含むことができる。

一実施形態において、神経筋疾患は、斜視である。斜視を患っている対象は、例えば、本発明の医薬製剤の注射部位当たり、約１．２５〜２．５Ｕを受容する。更なる例において、対象は、治療反応を達成するために、注射部位当たり、約１．５Ｕ、約１．６Ｕ、約１．７Ｕ、約１．８Ｕ、約１．９Ｕ、約２．０Ｕ、約２．１Ｕ、約２．２Ｕ、約２．３Ｕ、約２．４Ｕ、又は約２．５Ｕ以上を受容する。実施形態において、より低い用量は小さい偏り（deviations）の治療に使用される。実施形態において、２０プリズム径未満の垂直筋及び水平斜視は、注射部位当たり１．２５〜２．５Ｕで治療することができる。治療活動は、複数の治療を含むことができる。

一実施形態において、神経筋疾患は、筋肉痙縮である。筋肉痙縮を患っている対象は、例えば、本発明の医薬製剤の治療当たり約２０〜２００Ｕを受容する。更なる例において、対象は、筋肉痙縮を有する患者に投与する治療当たり、約２０〜３０Ｕ、２０〜４０Ｕ、２０〜６０Ｕ、２０〜８０Ｕ、２０〜１００Ｕ、２０〜１２５Ｕ、２０〜１５０Ｕ、又は２０〜１７５Ｕを受容する。なお更なる例において、対象は、筋肉痙縮を有する患者に投与する治療当たり、約２０Ｕ、約２５Ｕ、約３０Ｕ、約３５Ｕ、約４０Ｕ、約４５Ｕ、約５０Ｕ、約５５Ｕ、約６０Ｕ、約６５Ｕ、約７０Ｕ、約７５Ｕ、約８０Ｕ、約８５Ｕ、約９０Ｕ、約９５Ｕ、約１００Ｕ、約１０５Ｕ、約１１０Ｕ、約１１５Ｕ、約１２０Ｕ、約１２５Ｕ、約１３０Ｕ、約１３５Ｕ、約１４０Ｕ、約１４５Ｕ、約１５０Ｕ、約１５５Ｕ、約１６０Ｕ、約１６５Ｕ、約１７０Ｕ、約１７５Ｕ、約１８０Ｕ、約１８５Ｕ、約１９０Ｕ、約１９５Ｕ、又は約２００Ｕを受容する。一実施形態において、上腕二頭筋には、４つの注射部位に分割して１００Ｕ〜２００Ｕを注射することができる。一実施形態において、橈側手根屈筋には、１つの注射部位に１２．５Ｕ〜５０Ｕを注射することができる。一実施形態において、尺側手根屈筋には、１つの注射部位に１２．５Ｕ〜５０Ｕを注射することができる。一実施形態において、深指屈筋には、１つの注入部位に３０Ｕ〜５０Ｕを注入することができる。一実施形態において、浅指屈筋には、単一の注入部位に３０Ｕ〜５０を注入することができる。治療当たり２００Ｕより大きい投与量を、治療反応を達成するために筋痙縮を有する患者に投与してもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。

疼痛の治療
別の実施形態において、本発明は、疼痛を治療するための方法であって、本発明の医薬製剤をそれを必要とする対象に、疼痛を軽減するのに十分な量で投与する工程を含む方法を提供する。別の実施形態において、患者は、筋・筋膜性疼痛、偏頭痛、緊張性頭痛、神経因性疼痛、顔面痛、腰痛、副鼻腔頭痛、顎関節疾患に関連する疼痛、痙縮又は頸部ジストニアに関連する疼痛、術後創部痛、又は神経痛を患っている。治療活動は、複数の治療を含むことができる。

一実施形態において、患者は顔面痛を患っている。顔面痛を患っている対象は、例えば、本発明の医薬製剤の治療当たり約４〜４０Ｕを受容する。更なる例において、対象は、顔面痛を患っている患者に投与する治療当たり、約４〜１０Ｕ、４〜１５Ｕ、４〜２０Ｕ、４〜２５Ｕ、４〜３０Ｕ、４〜３５Ｕ、７〜１５Ｕ、７〜２０Ｕ、７〜２５Ｕ、７〜３０Ｕ、７〜３５Ｕ、又は７〜４０Ｕを受容する。なお更なる例において、対象は、顔面痛を患っている患者に投与する治療当たり、約４Ｕ、約５Ｕ、約７．５Ｕ、約１０Ｕ、約１２．５Ｕ、約１５Ｕ、約１７．５Ｕ、約２０．０Ｕ、約２２．５Ｕ、約２５．０Ｕ、約２７．５Ｕ、約３０．０Ｕ、約３２．５Ｕ、約３５Ｕ、約３７．５Ｕ、又は約４０Ｕを受容する。治療当たり４０Ｕより大きい投与量を、治療反応を達成するために顔面痛を有する患者に投与してもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。

一実施形態において、患者は、筋・筋膜性疼痛を患っている。筋・筋膜性疼痛を患っている対象は、例えば、本発明の医薬製剤の治療当たり約５〜１００Ｕを受容する。更なる例において、対象は、筋・筋膜性疼痛を患っている患者に投与する治療当たり、約５〜１０Ｕ、５〜２０Ｕ、５〜３０Ｕ、５〜４０単位、５〜５０単位、５〜６０単位、５〜７０単位、５〜８０単位、５〜９０Ｕ、１０〜２０Ｕ、１０〜３０Ｕ、１０〜５０Ｕ、又は１０〜６０Ｕ、又は１０〜７０Ｕ、又は１０〜８０Ｕ、１０〜９０Ｕ、又は１０〜１００Ｕを受容する。更なる例において、対象は、筋・筋膜性疼痛を有する患者に投与する治療当たり、約５Ｕ、約１０Ｕ、約１５Ｕ、約２０Ｕ、約２５Ｕ、約３０Ｕ、約３５Ｕ、約４０Ｕ、約４５Ｕ、約５０Ｕ、約５５Ｕ、約６０Ｕ、約６５Ｕ、約７０Ｕ、約７５Ｕ、約８０Ｕ、約８５Ｕ、約９０Ｕ、約９５Ｕ、又は約１００Ｕを受容する。治療当たり１００Ｕより大きい投与量をまた、治療反応を達成するために筋・筋膜性疼痛を有する患者に投与してもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。

一実施形態において、対象は、腰痛を患っている。腰痛を患っている対象は、例えば、本発明の医薬製剤の治療当たり約１５〜１５０Ｕを受容する。更なる例において、対象は、腰痛を有する患者に投与する治療当たり、約１５〜３０Ｕ、１５〜５０Ｕ、１５〜７５Ｕ、１５〜１００Ｕ、１５〜１２５Ｕ、１５〜１５０Ｕ、２０〜１００Ｕ、２０〜１５０Ｕ、又は１００〜１５０Ｕを受容する。なお更なる例において、対象は、腰痛を有する患者に投与する治療当たり、約１５Ｕ、約２０Ｕ、約２５Ｕ、約３０Ｕ、約３５Ｕ、約４０Ｕ、約４５Ｕ、約５０Ｕ、約５５Ｕ、約６０Ｕ、約６５Ｕ、約７０Ｕ、約７５Ｕ、約８０Ｕ、約８５Ｕ、約９０Ｕ、約９５Ｕ、約１００Ｕ、約１０５Ｕ、約１１０Ｕ、約１１５Ｕ、約１２０Ｕ、約１２５Ｕ、約１３０Ｕ、約１３５Ｕ、約１４０Ｕ、約１４５Ｕ、又は約１５０Ｕを受容する。治療当たり１５０Ｕより大きい投与量をまた、治療反応を達成するために腰痛を有する患者に投与してもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。

一実施形態において、患者は、片頭痛を患っており、患者は、１ヶ月当たり４時間以上、１５日以上の片頭痛を患っている患者が含まれる。例えば、片頭痛を患っている対象は、例えば、本発明の医薬製剤の治療当たり約０．５〜２００Ｕを受容する。更なる例において、対象は、片頭痛を患っている患者に投与する治療当たり、約５〜１９０Ｕ、１５〜１８０Ｕ、２５〜１７０Ｕ、３５〜１６０Ｕ、４５〜１５０Ｕ、５５〜１４０Ｕ、６５〜１３０Ｕ、７５〜１２０Ｕ、８５〜１１０Ｕ、又は９５〜１０５Ｕを受容する。治療活動は、複数の治療を含むことができる。

例えば、治療部位当たり、約０．５Ｕ、約１．０Ｕ、約１．５Ｕ、約２．０Ｕ、約２．５Ｕ、約３．０Ｕ、約３．５Ｕ、約４．０Ｕ、約４．５Ｕ、約５．０Ｕ、約５．５Ｕ、約６．０Ｕ、約６．５Ｕ、約７．０Ｕ、約７．５Ｕ、約８．０Ｕ、約８．５Ｕ、約９．０Ｕ、約９．５Ｕ、約１０．０Ｕ、約１２Ｕ、約１５Ｕ、約１７Ｕ、約２０Ｕ、約２２Ｕ、約２５Ｕ、約２７Ｕ、約３０Ｕ、約３２Ｕ、約３５Ｕ、約３７Ｕ、約４０Ｕ、約４２Ｕ、約４５Ｕ、約４７Ｕ、又は約５０Ｕを片頭痛を患っている患者に投与する。患者は、例えば、２部位、３部位、４部位、５部位、６部位、７部位、８部位、９部位、１０部位、１１部位、１２部位、１３部位、１４部位、１５部位、１６部位、１７部位、１８部位、１９部位、２０部位、２１部位、２２部位、２３部位、２４部位、２５部位、２６部位、２７部位、２８部位、２９部位、３０部位、３１部位、又は３２部位以上などの複数の部位で治療することができる。一実施形態において、片頭痛を患っている患者に、皺眉筋（それぞれ５Ｕの２回の注射）、鼻根筋（５Ｕの１回の注入）、前頭（それぞれ５Ｕの４回の注射）、側頭筋（それぞれ５Ｕの８回の注射）、後頭（それぞれ５Ｕの６回の注射）、頸部傍脊柱（それぞれ５Ｕの４回の注射）、及び僧帽筋（それぞれ５Ｕの６回の注射）を介して、０．１ｍＬ注射あたり５Ｕで、３１回注射する。正中線において注入することができる鼻根筋を除いて、ある特定の実施形態において、全ての筋肉は、注射部位の半分を頭部及び頸部の左側に及びその半分を頭部及び頸部の右側に、左右対称に注入することができる。治療当たり２００Ｕより大きい投与量をまた、治療反応を達成するために片頭痛を有する患者に投与してもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。

一実施形態において、患者は、副鼻腔頭痛を患っている。副鼻腔頭痛を患っている対象は、例えば、本発明の医薬製剤の治療当たり約４〜４０Ｕを受容する。更なる例において、対象は、副鼻腔頭痛を患っている患者に投与する治療当たり、約４〜１０Ｕ、４〜１５Ｕ、４〜２０Ｕ、４〜２５Ｕ、４〜３０Ｕ、４〜３５Ｕ、７〜１５Ｕ、７〜２０Ｕ、７〜２５Ｕ、７〜３０Ｕ、７〜３５Ｕ、又は７〜４０Ｕを受容する。なお更なる例において、対象は、副鼻腔頭痛を有する患者に投与する治療当たり、約４Ｕ、約５Ｕ、約７．５Ｕ、約１０Ｕ、約１２．５Ｕ、約１５Ｕ、約１７．５Ｕ、約２０．０Ｕ、約２２．５Ｕ、約２５．０Ｕ、約２７．５Ｕ、約３０．０Ｕ、約３２．５Ｕ、約３５Ｕ、約３７．５Ｕ、又は約４０Ｕを受容する。治療当たり４０Ｕより大きい投与量をまた、治療反応を達成するために副鼻腔頭痛を有する患者に投与してもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。

一実施形態において、患者は、緊張性頭痛を患っている。緊張性頭痛を患っている対象は、例えば、本発明の医薬製剤の治療当たり約５〜５０Ｕを受容する。更なる例において、対象は、緊張性頭痛を有する患者に投与する治療当たり、約５〜１０Ｕ、５〜１５Ｕ、５〜２０Ｕ、５〜２５Ｕ、５〜３０Ｕ、５〜３５Ｕ、５〜４０Ｕ、５〜４５Ｕ、１０〜２０Ｕ、１０〜２５Ｕ、１０〜３０Ｕ、１０〜３５Ｕ、１０〜４０Ｕ、又は１０〜４５Ｕを受容する。なお更なる例において、対象は、緊張性頭痛を有する患者に投与する治療当たり、約５Ｕ、約１０Ｕ、約２０Ｕ、約２５Ｕ、約３０Ｕ、約３５Ｕ、約４０Ｕ、約４５Ｕ、又は約５０Ｕを受容する。一実施形態において、緊張性頭痛を患っている患者に、皺眉筋（それぞれ５Ｕの２回の注射）、鼻根筋（５Ｕの１回の注入）、前頭（それぞれ５Ｕの４回の注射）、側頭筋（それぞれ５Ｕの８回の注射）、後頭（それぞれ５Ｕの６回の注射）、頸部傍脊柱（それぞれ５Ｕの４回の注射）、及び僧帽筋（それぞれ５Ｕの６回の注射）を介して、０．１ｍＬ注射あたり５Ｕで、３１回注射する。正中線において注入することができる鼻根筋を除いて、ある特定の実施形態において、全ての筋肉は、注射部位の半分を頭部及び頸部の左側に及びその半分を頭部及び頸部の右側に、左右対称に注入することができる。治療当たり２００Ｕより大きい投与量をまた、治療反応を達成するために緊張性頭痛を有する患者に投与してもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。

一実施形態において、患者は、急性又は再発性慢性副鼻腔炎に関連する副鼻腔頭痛又は顔面疼痛を患っている。例えば、本発明の医薬製剤を鼻粘膜又は副鼻腔を覆う皮下構造に投与することができ、製剤の投与により、急性再発性又は慢性副鼻腔炎に関連する頭痛及び／又は顔面痛が軽減される。更なる実施形態において、本発明の医薬製剤のいずれかを、鼻粘膜又は副鼻腔を覆う皮下構造、例えば上顎骨、乳様突起、前頭骨、及び蝶形骨からなる群から選択される副鼻腔のうちの１つ以上を覆う皮下構造に投与することができる。別の実施形態において、副鼻腔を覆う皮下構造は、額、頬、側頭、耳介後部、及び唇からなる群から選択される１つ以上の領域内にある。実施形態において、それぞれ５Ｕの複数回の注射を投与して、急性又は再発性慢性副鼻腔炎に関連する洞頭痛又は顔面痛を治療する。

別の実施形態において、急性又は再発性慢性副鼻腔炎に関連する副鼻腔頭痛又は顔面痛を患っている患者は、本発明の医薬製剤のいずれかを患者の罹患領域に投与することによって治療される。更なる実施形態において、本明細書に開示される医薬製剤は、副鼻腔を神経支配する三叉神経の突起に投与される。

急性又は再発性慢性副鼻腔炎に関連する副鼻腔頭痛又は顔面疼痛を患っている患者は、鼻炎、副鼻腔過剰分泌（sinus hypersecretion）、及び／又は膿性鼻汁（purulent nasal discharge）を含む症状をしばしば示す。一実施形態において、本発明の医薬製剤で治療される患者は、副鼻腔過剰分泌及び膿性鼻汁の症状を示す。

本発明の実施形態はまた、急性又は再発性慢性副鼻腔炎に関連する副鼻腔頭痛又は顔面痛を患っている患者を治療するための方法であって、患者は神経痛を患っている、方法を提供する。ある特定の実施形態において、神経痛は三叉神経痛である。別の実施形態において、神経痛は、感覚神経への圧縮力に関連し、内因性神経損傷、脱髄疾患、又は遺伝障害に関連し、代謝障害と関連し、中枢神経性血管疾患と関連し、又は外傷に関連している。本発明の別の実施形態において、疼痛は、抜歯又は歯の修復（reconstruction）に関連する。

泌尿器系障害の治療
一実施形態において、本発明はまた、過活動膀胱（ＯＡＢ）、例えば神経学的状態（ＮＯＡＢ）に起因する過活動膀胱など、又は特発性ＯＡＢ（ＩＯＡＢ）を患っている患者を治療するための方法を提供する。例えば、本発明の医薬製剤を膀胱又はその近傍、例えば排尿筋に投与することができ、製剤の投与により、過活動膀胱に関連する切迫性尿失禁が軽減される。ある特定の実施形態において、投与量は、例えば２００Ｕ以上又は２００Ｕ以下などであり得る。例えば、投与量は、治療当たり、約１５Ｕ、約２０Ｕ、約２５Ｕ、約３０Ｕ、約３５Ｕ、約４０Ｕ、約４５Ｕ、約５０Ｕ、約５５Ｕ、約６０Ｕ、約６５Ｕ、約７０Ｕ、約７５Ｕ、約８０Ｕ、約８５Ｕ、約９０Ｕ、約９５Ｕ、約１００Ｕ、約１０５Ｕ、約１１０Ｕ、約１１５Ｕ、約１２０Ｕ、約１２５Ｕ、約１３０Ｕ、約１３５Ｕ、約１４０Ｕ、約１４５Ｕ、約１５０Ｕ、約１６０Ｕ、約１７０Ｕ、約１８０Ｕ、約１９０Ｕ、約２００Ｕ、約２１０Ｕ、約２２０Ｕ、約２３０Ｕ、又は約２４０Ｕ以上であり得る。患者には、例えば、２部位、３部位、４部位、５部位、６部位、７部位、８部位、９部位、１０部位、１１部位、１２部位、１３部位、１４部位、１５部位、１６部位、１７部位、１８部位、１９部位、２０部位、２１部位、２２部位、２３部位、２４部位、２５部位、２６部位、２７部位、２８部位、２９部位、３０部位、３１部位、３２部位、３３部位、３４部位、３５部位、３６部位、３７部位、又は３８部位以上などの複数の部位において注入することができる。一実施形態において、ＯＡＢを患っている患者は、排尿筋への注射当たり約６．７Ｕの３０ｍＬの注射で治療される。

一実施形態において、本発明はまた、神経学的状態に起因するものなどの神経因性排尿筋過活動（ＮＤＯ）を患っている患者を治療するための方法を提供する。例えば、本発明の医薬製剤を膀胱又はその付近、例えば排尿筋に投与することができ、製剤の投与により、過活動膀胱に関連する切迫性尿失禁が軽減される。ある特定の実施形態において、投与量は、例えば２００Ｕ以上又は２００Ｕ以下などであり得る。例えば、投与量は、治療当たり、約１５Ｕ、約２０Ｕ、約２５Ｕ、約３０Ｕ、約３５Ｕ、約４０Ｕ、約４５Ｕ、約５０Ｕ、約５５Ｕ、約６０Ｕ、約６５Ｕ、約７０Ｕ、約７５Ｕ、約８０Ｕ、約８５Ｕ、約９０Ｕ、約９５Ｕ、約１００Ｕ、約１０５Ｕ、約１１０Ｕ、約１１５Ｕ、約１２０Ｕ、約１２５Ｕ、約１３０Ｕ、約１３５Ｕ、約１４０Ｕ、約１４５Ｕ、約１５０Ｕ、約１６０Ｕ、約１７０Ｕ、約１８０Ｕ、約１９０Ｕ、約２００Ｕ、約２１０Ｕ、約２２０Ｕ、約２３０Ｕ、又は約２４０Ｕ以上であり得る。患者には、例えば、２部位、３部位、４部位、５部位、６部位、７部位、８部位、９部位、１０部位、１１部位、１２部位、１３部位、１４部位、１５部位、１６部位、１７部位、１８部位、１９部位、２０部位、２１部位、２２部位、２３部位、２４部位、２５部位、２６部位、２７部位、２８部位、２９部位、３０部位、３１部位、又は３２部位以上などの複数の部位で注入することができる。一実施形態において、ＮＤＯを患っている患者は、排尿筋への注射当たり約６．７Ｕの３０ｍＬの注射で治療される。

美容的特徴の治療
別の実施形態において、本発明は、軟組織特徴を美容的に修飾するための方法であって、本発明の少なくとも１つの医薬製剤を、それを必要とする対象に、当該特徴を修正するのに十分な量で投与する工程を含む方法を提供する。更なる実施形態において、医薬製剤は、単一の位置又は複数の位置のいずれかで経皮又は経粘膜注射によって投与される。

実施形態において、本発明の医薬製剤は、対象の顔又は頸部に投与される。更なる実施形態において、本発明の医薬製剤は、皺（rhytide）を低減するのに十分な量で対象に投与される。例えば、製剤を、対象の眉の間に、眉の間及び鼻梁における縦線を低減するのに十分な量で投与することができる。医薬製剤はまた、対象の片方又は両方の眼の近くに、眦の線を低減するのに十分な量で投与することもできる。一実施形態において、本発明の組成物は、滑らかな皮膚に局所的に注入することができる。別の実施形態において、本発明の医薬製剤はまた、対象の額に、当該額の横線を低減するのに十分な量で投与することができる。本発明の更に別の実施形態において、医薬製剤は、対象の頸部に、頸部の筋帯（muscle band）を低減するのに十分な量で投与される。一実施形態において、医薬組成物は、筋肉を緩和させるため及び／又は咬筋の量（masseter mass）を減少させるために咬筋に適用される。

更なる実施形態において、患者は顔皺を患っている。顔皺を患っている対象は、例えば、本発明の医薬製剤の治療当たり約１〜１００Ｕを受容することができる。更なる例において、対象は、炎症性障害を有する患者に投与する治療当たり約１〜１０Ｕ、１〜２０Ｕ、１〜３０Ｕ、１〜４０Ｕ、１〜５０Ｕ、１〜６０Ｕ、１〜７０Ｕ、１〜８０Ｕ、１〜９０Ｕ、５〜２０Ｕ、５〜３０Ｕ、５〜４０Ｕ、５〜５０Ｕ、５〜６０Ｕ、５〜７０Ｕ、５〜８０Ｕ、５〜９０Ｕ、又は５〜１００Ｕを受容する。なお更なる例において、対象は、患者に投与する治療当たり約１Ｕ、約１０Ｕ、約２０Ｕ、約３０Ｕ、約４０Ｕ、約５０Ｕ、約６０Ｕ、約７０Ｕ、約８０Ｕ、約９０Ｕ、又は約１００Ｕを受容する。治療当たり１００Ｕより大きい用量をまた、治療反応を達成するために炎症又は炎症性疾患を患っている患者に投与してもよい。
炎症の治療

別の実施形態において、本発明は、炎症を治療するための方法であって、本発明の医薬製剤を、それを必要とする対象に炎症を軽減するのに十分な量で投与する工程を含む。ある特定の実施形態において、本発明の医薬製剤は、筋力低下を生じさせることなく患者に投与される。一実施形態において、本発明の医薬製剤は、炎症状態を有する患者に投与される。ある特定の実施形態において、炎症性状態は、神経性炎症である。別の実施形態において、対象は、関節リウマチ又は胃腸炎症性疾患を患っている。

更なる実施形態において、患者は炎症性障害を患っている。炎症性障害を患っている対象は、例えば、本発明の医薬製剤の治療当たり約１〜１００Ｕを受容する。更なる例において、対象は、炎症性障害を有する患者に投与する治療当たり、約１〜１０Ｕ、１〜２０Ｕ、１〜３０Ｕ、１〜４０Ｕ、１〜５０Ｕ、１〜６０Ｕ、１〜７０Ｕ、１〜８０Ｕ、１〜９０Ｕ、５〜２０Ｕ、５〜３０Ｕ、５〜４０Ｕ、５〜５０Ｕ、５〜６０Ｕ、５〜７０Ｕ、５〜８０Ｕ、５〜９０Ｕ、又は５〜１００Ｕを受容する。なお更なる例において、対象は、患者に投与する治療当たり約１Ｕ、約１０Ｕ、約２０Ｕ、約３０Ｕ、約４０Ｕ、約５０Ｕ、約６０Ｕ、約７０Ｕ、約８０Ｕ、約９０Ｕ、又は約１００Ｕを受容する。治療当たり１００Ｕより大きい用量をまた、治療反応を達成するために炎症又は炎症性疾患を患っている患者に投与してもよい。

皮膚状態の治療
皮膚障害を治療するための本発明の範囲内の方法は、患者の顔、手、又は足などの患者の皮膚障害の位置にボツリヌス神経毒素を局所投与する工程を有することができる。神経毒素は、約１０^-3単位／ｋｇ（患者の体重）〜約３５単位／ｋｇ（患者の体重）の量で局所投与することができる。例えば、神経毒素は、約１０^-2Ｕ／ｋｇ〜約２５Ｕ／ｋｇ（患者の体重）の量で局所投与される。更なる例において、神経毒素は、約１０^-1Ｕ／ｋｇ〜約１５Ｕ／ｋｇ（患者の体重）の量で投与される。本発明の範囲内の１つの方法において、神経毒素は、約１Ｕ／ｋｇ〜約１０Ｕ／ｋｇ（患者の体重）の量で局所投与される。臨床的な設定において、皮膚障害を効果的に治療するために、１Ｕ〜３０００ＵのＡ型又はＢ型ボツリヌス毒素などの神経毒素を皮膚障害の位置に局所適用又は皮下投与により投与することが有利であり得る。

ボツリヌス毒素の投与は皮膚内の複数の部位で行うことができ、隣接する注射部位は約０．１〜１０ｃｍ、又は約０．５〜約５ｃｍ、例えば約１．５〜約３ｃｍ離れている。毒素は、ボツリヌス毒素Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ又はＧのいずれかであり得る。投与される量は、製造業者の仕様、毒素の種類、及び投与様式に応じて、０．１〜１０００Ｕ、又は約１〜約４０、又は約５〜約１０Ｕで変動し得る。所望の変化を維持するためのこれらの投与の反復時間範囲は、注射される位置、調節される状態、及び患者の状態に実質的に従って変動する。したがって、反復時間は約１週間〜約５０週間で変動し得るが、一般的な範囲は約４〜約２５週間又は更には約１２週間〜約１６週間である。

投与（例えば注射）間の距離は、約１ｍｍ〜約１０ｃｍ、好適には約５ｍｍ〜約５ｃｍ、より通常は約１ｃｍ〜約３ｃｍで変動し得る。したがって、例えばボツリヌスＡを、約０．５〜約１０ｃｍ離して、約０．１〜約１０Ｕの皮内注射によって好適に投与し得る。

別の実施形態において、本発明は、皮膚疾患を治療するための方法であって、本発明の医薬製剤を、それを必要とする対象に、皮脂分泌又は粘液分泌を低減するのに十分な量で投与する工程を含む方法を提供する。更なる実施形態において、本発明の医薬製剤は、筋力低下を生じさせることなく患者に投与される。ある特定の実施形態において、本発明の医薬製剤は、眼瞼又は結膜のうちの１つ以上の部位に注射される。別の実施形態において、本発明の製剤は、身体表面に投与される。

別の実施形態において、医薬製剤は、限定するものではないがＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、及びＭｏｒａｘｅｌｌａを含み、皮膚細菌又は真菌の増殖を低減するのに十分な量で投与される。例えば、本発明の医薬製剤は、皮膚感染を軽減するために、眼瞼、頭皮、足、鼠径部、及び腋窩からなる群から選択される領域に投与される。

以下の実施例は、本発明の実施形態及び態様を例示するものであり、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。

実施例１：先行技術製剤に対する例示的な固体クロストリジウム医薬組成物の活性及び安定性

ボツリヌス毒素のバルク溶液を、Ａ型ボツリヌス毒素のバルクの適切なアリコートを以下の表１〜３に記載されるいくつかのビヒクル溶液と混合することによって調製した。溶液をガラスバイアルに充填し、従来の凍結乾燥条件を使用して凍結乾燥した。凍結乾燥物（lyophile）を生理食塩水で再構成した後、凍結乾燥製剤の効力を細胞に基づく効力アッセイ（ＣＢＰＡ）によって試験した。凍結乾燥後及び示された温度での貯蔵後における効力回復の結果は表に示され、標的効力（製剤に添加された既知量の毒素）について標準化したものである。表１〜３に示すように、本発明の態様に従って調製した固体組成物の効力を先行技術の製剤と比較した。

実施例２：酸化防止剤の存在下又は非存在下での液体クロストリジウム医薬組成物の活性

表４に示すように、バルク製剤溶液を、ＢｏＮＴ／Ａ原薬（drug substance）（ＤＳ）の適切なアリコートを３つの異なるビヒクル溶液と混合することによって調製した。３つの製剤は全て、８％ ｗ／ｗトレハロース、４％ ｗ／ｗＰ１８８、及び２０ｍＭヒスチン緩衝液（ｐＨ６．０）を含有した。製剤１０は、酸化防止剤を含有していなかった。製剤１１及び１２は、それぞれＮＡＣ及びメチオニンを含有した。バルク溶液を２ｍＬのガラスバイアルに充填し（１．２５ｍＬ充填）、ゴム栓及びアルミニウム外郭（ｓｈｅｌｌ）で密封した。製剤の効力を、充填後（時間ゼロ、ｔ０）及び４つの温度（−７０、５、２５、及び４０℃）で１ヶ月間貯蔵後において細胞に基づく効力アッセイ（ＣＢＰＡ）によって試験した。効力試験結果を表４に示す。簡潔に述べると、メチン含有製剤（番号１２）は、４０℃を含む４つの温度全てで１ヶ月貯蔵後においてその効力を保持したが、製剤ｗ／ｏ酸化防止剤は、２５℃では約１５％の効力を喪失し、４０℃では本質的に全ての活性を喪失した（すなわち、完全な不活性化）。試験した第２の酸化防止剤であるＮ−アセチル−Ｌ−システインにより、酸化防止剤を含まない製剤と比較して効力の損失が促進されたが、このことはＮ−アセチル−Ｌ−システインがこの製剤で酸化促進剤として作用したことを実証している。

実施例３：例示的な液体製剤の安定性に対する例示的な酸化防止剤の影響

表５に示すように、バルク製剤溶液を、ＢｏＮＴ／Ａ原薬（ＤＳ）の適切なアリコートを異なる酸化防止剤と混合することにより調製した。全ての製剤は、８％ ｗ／ｗトレハロース、４％ ｗ／ｗ Ｐ１８８、２０ｍＭヒスチジン緩衝液（ｐＨ６．０）、及び列挙したような１つの以上の酸化防止剤を含有した。標的効力は１００Ｕ／ｍＬであった。バルク溶液を２ｍＬのガラスバイアルに充填し（１．２５ｍＬ充填）、ゴム栓及びアルミニウム外郭で密封した。製剤の効力を、充填後（時間ゼロ、ｔ０）並びに４０℃で２週間及び１ヶ月間貯蔵後において細胞に基づく効力アッセイ（ＣＢＰＡ）によって試験した。効力試験結果を表５に示す。

本開示の趣旨及び範囲から逸脱することなく、当業者によって多くの変更及び改変がなされてもよい。したがって、説明されている実施形態は例示目的でのみ掲載されており、実施形態は、以下の特許請求の範囲を制限するものと見なされるべきではないと理解されなくてはならない。したがって、以下の特許請求の範囲は、文字どおりに示される要素の組み合わせだけではなく、実質的に同じ結果を得るために実質的に同じ方法で実質的に同じ機能を果たす全ての同等の要素を含むものであると読み取られる。このように、特許請求の範囲は、上で説明されているもの、概念的に同等であるもの、及び本開示の概念を包含するものを含むものと理解される。

Claims (24)

1. （ｉ）クロストリジウム毒素活性成分、
   （ｉｉ）等張化剤、
   （ｉｉｉ）ポロキサマー並びに／又はポリソルベート、及び
   （ｉｖ）酸化防止剤を含む、医薬組成物。
2. ボツリヌス毒素を含む、請求項１に記載の組成物。
3. トレハロースを含む、請求項１又は２に記載の組成物。
4. ポロキサマー１８８及び／又はポリソルベート２０を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
5. メチオニン及びＮ−アセチル−システインのうちの１つ以上を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
6. ボツリヌス毒素、トレハロース、ポロキサマー１８８又はポリソルベート２０のうちの１つ、及びメチオニン又はＮ−アセチル−システインのうちの１つを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
7. ボツリヌス毒素、トレハロース、ポロキサマー１８８、及びメチオニンを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
8. 前記トレハロース、ポロキサマー１８８、及びメチオニンの相対重量（％、ｗ／ｗ）が、以下の範囲内：
   トレハロース １〜１０
   ポロキサマー１８８ ０．５〜５
   メチオニン ０．１〜０．３
   である、請求項７に記載の組成物。
9. ボツリヌス毒素、トレハロース、ポリソルベート２０、及びメチオニンを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
10. 前記トレハロース、ポリソルベート２０、及びメチオニンの相対重量（％、ｗ／ｗ）が、以下の範囲内：
    トレハロース １〜１０
    ポリソルベート２０ ０．０２〜０．０６
    メチオニン ０．１〜０．３
    である、請求項９に記載の組成物。
11. ボツリヌス毒素、トレハロース、ポロキサマー１８８、及びＮ−アセチル−システインを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
12. 前記トレハロース、ポロキサマー１８８、及びＮ−アセチル−システインの相対重量（％、ｗ／ｗ）が、以下の範囲内：
    トレハロース １〜１０
    ポロキサマー１８８ ０．５〜５
    Ｎ−アセチル−システイン ０．０１〜０．５
    である、請求項１１に記載の組成物。
13. ボツリヌス毒素、トレハロース、ポリソルベート２０、及びＮ−アセチル−システインを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
14. 前記トレハロース、ポリソルベート２０、及びＮ−アセチル−システインの相対重量（％、ｗ／ｗ）が、以下の範囲内：
    トレハロース １〜１０
    ポリソルベート２０ ０．０２〜０．０６
    Ｎ−アセチル−システイン ０．０１〜０．５
    である、請求項１３に記載の組成物。
15. ヒスチジンを含む、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の組成物。
16. 動物由来タンパク質を含まない、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の組成物。
17. エチレンジアミン四酢酸ナトリウム塩（ＥＤＴＡ）又はＥＤＴＡ類似体を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
18. エチレンジアミン四酢酸ナトリウム塩（ＥＤＴＡ）又はＥＤＴＡ類似体を更に含む、請求項５又は６に記載の組成物。
19. エチレンジアミン四酢酸ナトリウム塩（ＥＤＴＡ）又はＥＤＴＡ類似体を更に含む、請求項１１〜１４のいずれか一項に記載の組成物。
20. 前記ＥＤＴＡの相対重量（％、ｗ／ｗ）が、約０．０１〜０．１０．の範囲である、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の組成物。
21. 前記組成物が固体製剤である、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の組成物。
22. 前記組成物が固体製剤であり、前記Ｎ−アセチル−システインの相対重量（％、ｗ／ｗ）が０．０１〜０．０５である、請求項１２、１４、１９、及び２０のいずれか一項に記載の組成物。
23. 前記組成物が液体製剤であり、５〜７のｐＨを有する、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の組成物。
24. 前記組成物が液体製剤であり、５〜７のｐＨを有し、前記Ｎ−アセチル−システインの相対重量が０．１〜０．５である、請求項１１〜１４、１９、及び２０のいずれか一項に記載の組成物。