JP2008543868A - Fc領域含有タンパク質を精製する方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本願は、2005年6月17日出願の米国仮特許出願第60/691,821号「Fc領域を有するタンパク質を精製する方法(METHODS OF PURIFYING Fc REGION CONTAINING PROTEINS)」の優先権を主張するものである。この出願の内容全体は本明細書中に援用される。
抗体は、多くの動物、特にヒトの免疫系の有効な要素である。組換え技術における最近の進歩により、仮想的に任意の標的、例えば癌細胞、細菌、およびウイルスに対する抗体の産生が可能になっている。典型的には、抗体を高レベルに発現するように設計されている細胞株を用いて抗体が産生される。次いで、設計された細胞株は、糖類、アミノ酸、および成長因子の複合混合物、ならびに例えば血清タンパク質を含む様々なタンパク質を含む培養物中で成長される。しかし、完全抗体を細胞副産物および培養物成分から分離して研究用途にまたは治療薬として十分な純度に高めることは大変な課題をもたらす。もし抗体がヒトへの投与用の薬剤として用いられるものである場合、抗体分子の精製は特に重要である。
様々な態様では、本発明は、Fc領域を有するタンパク質を、そのタンパク質および1種もしくは複数種の不純物を含有するソース液体から分離するための方法を特徴とする。本発明の方法では、Fc領域を有するタンパク質(標的タンパク質)はFc結合剤に吸着され、次いでFc結合剤を二価カチオン塩を含有する緩衝溶液で洗浄することで、1種もしくは複数種の不純物が除去される。次いで、タンパク質は溶出溶液中のFc結合剤から回収される。本発明の方法は、イントロンリードスルー(intron read through)変種(IRT)、アンダージスルフィド結合種(under disulfide bonded species)(UDB)および/または低分子量変種(LMW)などの不純物を除去するのに特に有用である。本発明の方法はまた、宿主細胞タンパク質(HCP)およびDNAなどの不純物の除去において有効である。
本発明のさらなる説明に先立ち、本明細書で用いられる特定の用語の定義を示すことは、その理解に役立つものでありうる。本明細書で示される定義は分類されているものであり、これはあくまで参照を容易にするためであって限定を目的とするものではない。
様々な態様では、本発明は、Fc領域含有タンパク質を、タンパク質およびその1種もしくは複数種のリードスルー変異体、例えばイントロンリードスルー変異体などを含有する溶液から精製するための方法を提供する。特徴的な態様では、本発明の方法を用いることで、タンパク質調製物中、例えば抗体調製物中での1種もしくは複数種のイントロンリードスルー(IRT)変種のレベルが低下する。「イントロンリードスルー変異体」および「イントロンリードスルー変種」という用語は、本明細書で同義的に用いられ、目的とするFc領域含有タンパク質(例えば、標的タンパク質)の合成においてポリペプチド鎖伸長がコーディング領域上流のイントロン内の停止コドンによってコーディング領域の転写の上流で終結する場合のプロセスの産物を示す。この産物は、1つもしくは複数の不完全なドメインを有するかまたはそのドメインを欠いた目的タンパク質の変異体(すなわちイントロンリードスルー変異体)である。かかるイントロンは、数種の異なるイントロンリードスルー変異体を生成する可能性をもたらす2つ以上の停止コドンを有しうる。
本明細書で用いられる「ソース液体」という用語は、少なくとも1種の標的物質を含有する液体を示し、同物質は共存する他の物質から精製されることが求められる。ソース液体は、例えば水溶液、有機溶媒系、または水/有機溶媒混合物もしくは溶液でありうる。ソース液体は、多種の生体分子(タンパク質、抗体、ホルモン、およびウイルスなど)、小分子(塩、糖類、脂質など)、および微粒子物質までも含有する複合混合物または溶液である場合が多い。典型的な生物学的起源を有するソース液体が水溶液または懸濁液として出発しうる一方、それは溶媒沈殿、抽出などの初期分離ステップで用いられる有機溶媒も含有しうる。本発明の様々な実施形態による精製に準じた貴重な生体物質を含有しうるソース液体の例として、バイオリアクターからの培養上清、均質化された細胞懸濁液、血漿、血漿画分、および乳液(ミルク)が挙げられるがこれらに限定されない。
本明細書に記載の本発明に従って精製されるべきFc領域を有するタンパク質は、当該技術分野で十分に確立されており、例えば合成技術(組換え技術およびペプチド合成またはこれらの技術の組み合わせなど)を含む技術を用いて調製されるか、またはタンパク質の内因性ソースから単離されうる。本発明の特定の実施形態では、Fc領域を有するタンパク質は、抗原結合ポリペプチド、より好ましくは抗体である。抗体は、例えばポリクローナル抗体調製物、モノクローナル抗体、組換え抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体またはヒト抗体であってもよい。抗原結合ポリペプチド、および特に抗体を産生するための技術は以下に記載される。あるいは、Fc領域を有するタンパク質は、二重特異的抗体(bispecific antibody)、抗体結合体または抗体融合タンパク質(例えばFc融合タンパク質)などの修飾形態の抗体であってもよい。かかる修飾形態の抗体および抗体融合タンパク質を産生するための技術もまた以下に記載される。
ポリクローナル抗体を、免疫原で適切な被験体を免疫することにより調製してもよい。免疫された被験体における抗体力価を、例えば固定化された標的抗原を用いる酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)を用いた標準技術により経時的に長期にわたり監視してもよい。標的抗原に特異的な抗体分子を、必要に応じて哺乳動物から(例えば血液から)単離し、さらにプロテインA Sepharoseクロマトグラフィーなどの周知の技術により精製して抗体、例えばIgGの画分を取得してもよい。免疫後の適切な時間、例えば抗−抗原抗体力価が最大である場合、抗体産生細胞を被験体から取得し、コーラー(Kohler)およびミルスタイン(Milstein)(1975年) Nature 256:495〜497頁)に最初に記載されたハイブリドーマ技術など(ブラウン(Brown)ら(1981年) J.Immunol.127:539〜46頁;ブラウン(Brown)ら(1980年) J.Biol.Chem.255:4980〜83頁;イェー(Yeh)ら(1976年) Proc.Natl.Acad.Sci.USA 76:2927〜31頁;およびイェー(Yeh)ら(1982年) Int.J.Cancer 29:269〜75頁も参照)の標準技術によりモノクローナル抗体を調製するのに用いてもよい。キメラポリクローナル抗体の調製においては、ベクラー(Buechler)ら、米国特許第6,420,113号明細書を参照のこと。
リンパ球と不死化細胞株を融合させるために用いられる多数の周知のプロトコルのうちのいずれかを、モノクローナル抗体を産生する目的で適用してもよい(例えば、G.ガルフレ(G.Galfre)ら(1977年) Nature 266:55052頁;ゲフター(Gefter)ら、Somatic Cell Genet、上記;レーナー(Lerner)、Yale J.Biol.Med.、上記;ケネス(Kenneth)、Monoclonal Antibodies、上記を参照)。さらに、当業者は、かかる方法には多数のバリエーションがあり、これらもまた有用であることを理解するであろう。典型的には、不死化細胞株(例えば骨髄腫細胞株)はリンパ球と同じ哺乳類種に由来する。例えば、マウスハイブリドーマを本発明の免疫原性調製物で免疫されたマウス由来のリンパ球と不死化マウス細胞株との融合により作製してもよい。好ましい不死化細胞株は、ヒポキサンチン、アミノプテリンおよびチミジンを含有する培地(「HAT培地」)に感受性を示すマウス骨髄腫細胞株である。多数の骨髄腫細胞株(例えばP3−NS1/1−Ag4−1、P3−x63−Ag8.653またはSp2/O−Ag14骨髄腫株)のいずれかを、標準技術に従い融合パートナーとして用いてもよい。これらの骨髄腫株はATCCから入手可能である。典型的には、HAT−感受性のマウス骨髄腫細胞は、ポリエチレングリコール(「PEG」)を用いてマウス脾細胞に融合される。次いで、融合物から得られるハイブリドーマ細胞がHAT培地を用いて選択され、それは未融合骨髄腫細胞および非生産的に融合された骨髄腫細胞を死滅させる(未融合脾細胞は形質転換されていなため数日後に死滅する)。本発明のモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ細胞は、標準ELISAアッセイを用いた、ハイブリドーマ培養上清を標的抗原に結合する抗体についてスクリーニングすることにより検出される。
モノクローナル抗体分泌ハイブリドーマの調製に代わり、モノクローナル抗体を、組換えコンビナトリアル免疫グロブリンライブラリー(例えば、抗体ファージディスプレイライブラリー)を標的抗原によりスクリーニングすることによって標的抗原に結合する免疫グロブリンライブラリーメンバーを単離することにより、同定し、単離してもよい。ファージディスプレイライブラリの生成およびスクリーニングのためのキットは市販されている(例えば、ファルマシア(Pharmacia)製Recombinant Phage Antibody System、カタログ番号27−9400−01;およびストラタジーン(Stratagene)製SurfZAP(商標)Phage Display Kit、カタログ番号240612)。さらに、特に抗体ディスプレイライブラリーの生成およびスクリーニングでの使用に準じた方法および試薬の例が、例えば、ラドナー(Ladner)ら、米国特許第5,223,409号明細書;カン(Kang)ら、PCT国際公開第92/18619号パンフレット;ダウワー(Dower)ら、PCT国際公開第91/17271号パンフレット;ウインター(Winter)ら、PCT国際公開第92/20791号パンフレット;マークランド(Markland)ら、PCT国際公開第92/15679号パンフレット;ブレイトリング(Breitling)ら、PCT国際公開第93/01288号パンフレット;マッカファーティ(McCafferty)ら、PCT国際公開第92/01047号パンフレット;ガラード(Garrard)ら、PCT国際公開第92/09690号パンフレット;ラドナー(Ladner)ら、PCT国際公開第90/02809号パンフレット;フックス(Fuchs)ら(1991年) Bio/Technology 9:1370〜1372頁;ヘイ(Hay)ら(1992年) Hum.Antibod.Hybridomas 3:81〜85頁;フセ(Huse)ら(1989年) Science 246:1275〜1281頁;グリフィス(Griffiths)ら(1993年) EMBO J 12:725〜734頁;ホーキンス(Hawkins)ら(1992年) J.Mol.Biol.226:889〜896頁;クラークソン(Clarkson)ら(1991年) Nature 352:624〜628頁;グラム(Gram)ら(1992年) Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89:3576〜3580頁;ガラッド(Garrad)ら(1991年) Bio/Technology 9:1373〜1377頁;フーゲンブーム(Hoogenboom)ら(1991年) Nuc.Acid Res.19:4133〜4137頁;バーバス(Barbas)ら(1991年) Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88:7978〜7982頁;およびマッカファーティ(McCafferty)ら、Nature (1990年)348:552〜554頁にて見出されうる。
さらに、標準の組換えDNA技術を用いて作製可能な、ヒト部分と非ヒト部分の双方を含む、キメラおよびヒト化モノクローナル抗体などの組換え抗体は、本発明の範囲内にある。
あるいは、今では免疫時、内因性免疫グロブリン産生の非存在下でヒト抗体の完全レパートリーを産生可能なトランスジェニック動物(例えばマウス)を作製することは可能である。例えば、キメラおよび生殖系列変異マウスにおける抗体の重鎖結合領域(JH)遺伝子のホモ接合性欠失が内因性抗体産生の完全な阻害を招くことが記載されている。かかる生殖系列変異マウスにおけるヒト生殖系列の免疫グロブリン遺伝子アレイの移入が、抗原チャレンジの際にヒト抗体の産生をもたらす。例えば、米国特許第6,150,584号明細書;米国特許第6,114,598号明細書;および米国特許第5,770,429号明細書を参照のこと。
二重特異性抗体(BsAb)は、少なくとも2つの異なるエピトープに対する結合特異性を有する抗体である。かかる抗体は、完全長の抗体または抗体断片(例えばF(ab)’2二重特異性抗体)から誘導可能である。二重特異性抗体を作製するための方法は、当該技術分野で既知である。従来からの完全長二重特異性抗体の産生は2つの免疫グロブリンの重鎖−軽鎖ペアの共発現に基づくものであり、この場合、2つの鎖は異なる特異性を有する(ミルスタイン(Millstein)ら、Nature、305:537〜539頁(1983年))。免疫グロブリンの重鎖および軽鎖がランダムに分かれることから、これらのハイブリドーマ(クアドローマ(quadromas))は異なる抗体分子の可能性ある混合物を産生する(国際公開第93/08829号パンフレットおよびトラウネッカー(Traunecker)ら、EMBO J.、10:3655〜3659頁(1991年)を参照)。
本発明で用いられるFc領域を有するタンパク質は、非抗体タンパク質またはポリペプチドに融合される抗体の少なくともFc部分を有する融合タンパク質でありうる。例えば、Fc領域を、受容体に結合可能でありかつFcに関連した機能(血清安定性、Fc受容体結合など)を有する可溶性融合タンパク質が生成されるように、受容体に対するリガンドに融合してもよい。あるいは、Fc領域を、受容体に対するリガンドに結合(それにより天然受容体と競合)可能でありかつFcに関連した機能を有する可溶性融合タンパク質が生成されるように、受容体の細胞外ドメインに融合してもよい。かかるFc融合タンパク質の限定されない例としてエタネルセプト(Embrel(登録商標))が挙げられ、それはヒトIgG1のFc部分に融合されるヒトTNFα受容体の細胞外リガンド−結合ドメインを含む。抗体融合タンパク質(当該技術分野ではFc融合タンパク質またはIg融合タンパク質とも称される)は、標準の組換えDNA技術を用いて調製可能なものであり、当該技術分野で記載されており、例えば米国特許第5,116,964号明細書、米国特許第5,225,538号明細書、米国特許第5,336,603号明細書および米国特許第5,428,130号明細書(すべてカポン(Capon)らによる)を参照のこと。
好ましい実施形態では、本発明に従って精製されるべきFc領域を有するタンパク質は抗−IL−13抗体である。抗−IL−13抗体は、2004年6月9日出願の米国仮特許出願第60/578,473号明細書および2004年6月22日出願の米国仮特許出願第60/581,375号明細書(いずれの表題も「ヒトIL−13に対する抗体およびその使用(Antibodies against human IL−13 and uses thereof)」)に記載されている。これらの出願の内容は参照により援用される。好ましい抗−IL−13抗体は、本明細書で様々な場合に「IMA」と称されうる。
別の好ましい実施形態では、本発明に従って精製されるべきFc領域を有するタンパク質は抗−Aβ抗体である。抗−Aβ抗体は、PCT国際公開第2002/46237号パンフレットおよび米国特許出願公開第2005/0118651号明細書(表題は双方とも「βアミロイドペプチドを認識するヒト化抗体(Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide)」)に記載されている。これらの出願の内容は参照により援用される。好ましい抗−Aβ抗体は、本明細書で様々な場合に「AAB」および「12A11」と称されうる。
一般に、本発明の実行には、他に指示がない限り、化学、分子生物学、組換えDNA技術、免疫学(特に、例えば免疫グロブリン技術)、および電気泳動における標準技術に関する従来技術が用いられる。例えば、サムブルック(Sambrook)、フリッツ(Fritsch)およびマニアティス(Maniatis)、Molecular Cloning:コールド・スプリング・ハーバー・ラボラトリー・プレス(Cold Spring Harbor Laboratory Press)(1989年);Antibody Engineering Protocols(Methods in Molecular Biology)、510、ポール S.(Paul S.)、ヒュマーナ・プレス(Humana Pr)(1996年);Antibody Engineering:A Practical Approach(Practical Approach Series、169)、マッカファーティ(McCafferty)編、アイアールエル・プレス(Irl Pr)(1996年);Antibodies:A Laboratory Manual、ハーロウ(Harlow)ら、シーエスエイチエル・プレス(C.S.H.L.Press)発行(1999年);Current Protocols in Molecular Biology、アウスベル(Ausubel)ら編、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ(John Wiley & Sons)(1992年);ブセ(Bousse)ら、Protein Sizing on a Microchip、Anal.Chem.73、1207〜1212頁(2001年);ナップ(Knapp)ら、Commercialized and Emerging Lab−on−a−Chip Applications;Proceedings of the μTAS 2001 Symposium、ラムゼイ J.M.(Ramsey J.M.)およびファンデンベルグ A.(van den Berg A.)、7〜10頁(2001年);およびムハトル(Mhatre)ら、Strategies for locating disulfide bonds in a monoclonal antibody via mass spectrometry、Rapid Commun.Mass Spectrom、13(24)2503〜2510頁(1999年)を参照のこと。
標的のFc含有タンパク質を、標準の発現方法により、例えば懸濁培養物中で増殖された組換え哺乳類細胞株を用いて生成してもよい。目的のFc含有タンパク質を含有する馴化培地が生成バイオリアクター内で生成される。得られた生成物を、回収し、例えば精密濾過および0.22μmの濾過、または遠心分離、パッド濾過および0.22μmの濾過などの任意の適切な清澄化ステップを用いて清澄化することが可能である。
本明細書で例示される標的モノクローナル抗体(AAB、12A11およびIMA)の精製は、プロテインAの親和性クロマトグラフィー上での標的分子の捕捉からなる。これを、rmpプロテインA Sepharose(商標)Fast Flow、プロテインA Sepharose(商標)Fast Flow、またはMabSelectプロテインAから構成してもよい。次いで各実験に記載のように樹脂を洗浄し、生成物を溶出させ、かつ不純物レベルについて試験する。
逆相HPLC(RP−HPLC)を用いてAABモノクローナル抗体試料中に存在するIRTの量を定量する一方、Pro AのHPLC方法を用いてIMAモノクローナル抗体に対するIRTレベルを測定した。サイズ排除クロマトグラフィー(SEC−HPLC)を用い、単量体タンパク質(単量体IgG)種、高分子量(HMW)種、および低分子量(LMW)種の百分率を測定した。変性SEC−HPLC分析を行い、試料中のアンダージスルフィド結合(UDB)種の相対量を測定した。試験試料中のHCPのレベルを酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)を用いて測定した。
(逆相HPLC(AAB IRT分析))
RP−HPLCを以下のように行った。各試料のジスルフィド還元を、2.5mM DTTの存在下、40℃で60分間のインキュベーションにより行った。アルキル化を5.5mMヨード酢酸の存在下、室温でのインキュベーションにより行った。還元およびアルキル化を行ってから、全試料を1M DTT5μlでクエンチした。このアッセイでの定量限界は0.5%である。還元しアルキル化した試料各々約40μgをPOROS R1/H RP−HPLCカラムに注入し、以下の条件下で70分間実験した。
カラム:Poros R1/H RP−HPLC
カラム温度:50℃;
移動相A:水中、0.1%TFA(w/v);
移動相B:95%アセトニトリル中、0.1%TFA(w/v);
流速:1.0mL/分
検出:217nm
運転時間:70分
注入:各々、約40μgで3連
勾配時間を表1に列挙する。
タンパク質A−HPLCを以下のように実施した。POROS Pro Aカラム上で1注入当たり全体100μgを以下の条件下で室温で35分間実施した。
カラム:Poros Pro A 4.6×50mm
カラム温度:周囲温度
移動相A:50mMギ酸アンモニウム、pH6.0
移動相B:10mMギ酸アンモニウム、0.8%ギ酸
流速:2.0ml/分
検出:280nm
運転時間:35分
注入:各々、100μgで3連勾配時間を表2に列挙する。
変性SEC−HPLCを以下のように行った。変性SECアッセイ用の試料の前処理として、200μg/mLのタンパク質、3MグアニジンHCl、および100mMトリス(pH7.4)の最終濃度での試薬/試料混合物が含まれる。試料を反転により混合しながら80℃で20分間加熱した。このアッセイにおいては、2種の対照を用いてUDBレベルの限度設定(bracketing)を可能にした。低レベルのUDBおよび高レベルのUDBを伴う内部参照を対照として用いた。
カラム:Tosoh BioSep G3000 SWxl
カラム温度:周囲温度
移動相:3MグアニジンHCl、25mM NaPO4、pH6.8
勾配:アイソクラティック
流速:0.5mL/分
検出:280nm
運転時間:50分
注入:50μL(10μg)で3連
この実施例では、モノクローナル抗体AABを含有する不純溶液をプロテインAカラム上への吸着により精製した後、CaCl2、MgCl2、NaClまたはプロピレングリコールのいずれかを含有する洗浄緩衝液を用いて1回目の洗浄を行った。
カラム寸法−1.0cm×11.4cm
運転流速−150cm/時
平衡化1−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(5カラム容量)
フラッシュ−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(1カラム容量)
洗浄1−洗浄1を含まない実験#1を除き一定でない(表3参照)
洗浄2−20mMトリス、1.0M NaCl、pH7.5(5カラム容量)
洗浄3−10mMトリス、75mM NaCl、pH7.5(7カラム容量)
溶出−50mMグリシン、75mM NaCl、pH3.1(6カラム容量)
剥離1−20mMクエン酸ナトリウム、pH2.7(5カラム容量)
剥離2−6MグアニジンHCl(2カラム容量)
剥離洗浄−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(5カラム容量)
保存−16%エタノール(5カラム容量)
運転温度:2〜8℃
この実施例では、大規模な抗体精製を、IRT種を除去するためのCaCl2洗浄を伴うプロテインAのクロマトグラフィーを用いて行った。
カラム寸法−13cm×18cm
運転流速−150cm/時、300cm/時
平衡化1−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(5カラム容量)
フラッシュ−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(2カラム容量)
洗浄1−実験#1では50mMトリス、2M CaCl2、pH7.5、実験#2では洗浄1を行わない
洗浄2−20mMトリス、1.0M NaCl、pH7.5(5カラム容量)
洗浄3−10mMトリス、75mM NaCl、pH7.5(5カラム容量)
溶出−50mMグリシン、25mM NaCl、pH3.1(6カラム容量)
剥離1−50mMグリシン、0.5M NaCl、pH2.7(5カラム容量)
剥離2−6MグアニジンHCl(2カラム容量)
剥離洗浄−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(5カラム容量)
保存−16%エタノール(5カラム容量)
運転温度:2〜8℃
この実施例では、CaCl2洗浄を用いた小規模精製にて、実施例1で用いたモノクローナル抗体(IMA)とは異なるものを用いた。
カラム寸法−1.1cm×18.2cm(17.3ml)
運転流速−300cm/時
平衡化1−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(5.1カラム容量)
洗浄1−20mMトリス、1M NaCl、pH7.5(5カラム容量)
洗浄2−50mM酢酸ナトリウム、0.6M CaCl2、pH5.0(5カラム容量)
洗浄3−50mMトリス、5mM NaCl、pH7.5(3カラム容量)
洗浄4−10mMトリス、5mM NaCl、pH7.5(5カラム容量)
溶出−50mMグリシン、5mM NaCl、pH3.0(5カラム容量)
剥離−6MグアニジンHCl(5カラム容量)
剥離洗浄−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(6カラム容量)
保存−16%エタノール(5カラム容量)
運転温度:18〜24℃
この実施例では、CaCl2洗浄がIMAモノクローナル抗体を含有する調製物に由来する宿主細胞タンパク質(HCP)を除去する能力について試験した。
カラム寸法−1.1cm×20.0cm(19ml)
運転流速−300cm/時
平衡化1−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(5.0カラム容量)
洗浄1−20mMトリス、1M NaCl、pH7.5(5カラム容量)
洗浄2−50mM酢酸ナトリウム、0.6M CaCl2、pH5.0(実験2においてのみ5カラム容量)
洗浄3−50mMトリス、5mM NaCl、pH7.5(2カラム容量)
洗浄4−10mMトリス、5mM NaCl、pH7.5(5カラム容量)
溶出−50mMグリシン、5mM NaCl、pH3.0(5カラム容量)
剥離−6MグアニジンHCl(5カラム容量)
剥離洗浄−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(6カラム容量)
保存−16%エタノール(5カラム容量)
運転温度:18〜24℃
この実施例では、CaCl2洗浄がAABモノクローナル抗体を含有する調製物から宿主細胞DNAを除去する能力について試験した。
カラム寸法−1.1cm×20cm
運転流速−300cm/時
平衡化1−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(5カラム容量)
フラッシュ−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(2カラム容量)
洗浄1−50mMトリス、2.0M CaCl2、pH7.5(5カラム容量)(実験2および3のみ)
洗浄2−20mMトリス、1.0M NaCl、pH7.5(5カラム容量)(実験1および3のみ)
洗浄3−10mMトリス、75mM NaCl、pH7.5(7カラム容量)
溶出−50mMグリシン、75mM NaCl、pH3.0(6カラム容量)
剥離−50mMグリシン、0.5M NaCl、pH2.7(5カラム容量)
剥離洗浄−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(5カラム容量)
保存−16%エタノール(5カラム容量)
運転温度:18〜24℃
この実施例では、HCPの除去能について様々な洗浄条件を試験した精製実験において第3のモノクローナル抗体12Al1を用いた。
樹脂容量−50μL
洗浄用賦形剤−塩化ナトリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム
賦形剤濃度−100、250、500、1000、1500、および2000mM
賦形剤pH−6.0および7.5
溶出緩衝液−25mMヘペス、10mM NaCl、pH3.0、25mMヘペス、100mM NaCl、pH3.0、50mMグリシン、10mM NaCl、pH3.0、50mMグリシン、100mM NaCl、pH3.0および100mMアルギニン、10mM NaCl、pH3.0、100mMアルギニン、100mM NaCl、pH3.0
運転温度:18〜24℃
この実施例では、CaCl2洗浄におけるアンダージスルフィド結合種(UDB)を除去する能力について試験した。
カラム寸法−1.0cm×11.4cm
運転流速−150cm/時
平衡化1−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(5カラム容量)
フラッシュ−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(1カラム容量)
洗浄1−実験1では50mM酢酸塩、2.0M CaCl2、pH5.0、実験2ではなし
洗浄2−20mMトリス、1.0M NaCl、pH7.5(5カラム容量)
洗浄3−10mMトリス、75mM NaCl、pH7.5(7カラム容量)
溶出−50mMグリシン、75mM NaCl、pH3.1(6カラム容量)
剥離1−20mMクエン酸ナトリウム、pH2.7(5カラム容量)
剥離2−6MグアニジンHCl(2カラム容量)
剥離洗浄−20mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(5カラム容量)
保存−16%エタノール(5カラム容量)
運転温度:2〜8℃
この実施例では、MnCl2またはNiCl2のいずれかを含有する洗浄が、AABモノクローナル抗体を含有する調製物から不純物を除去する能力について試験した。
カラム寸法−1.0cm×11.5cm(9mL)
運転流速−300cm/時(平衡化、洗浄2、溶出、再生、保存)
運転流速−230cm/時(ロード、フラッシュ、洗浄1)
平衡化1−50mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(5.0カラム容量)
洗浄1−変動(組成については表11を参照)
洗浄2−50mMトリス、10mM NaCl、pH7.5(5カラム容量)
溶出−50mMグリシン、10mM NaCl、pH3.0(3カラム容量)
再生−50mM NaOH、0.5M Na2SO4(5カラム容量)
保存−16%エタノール、50mMトリス、150mM NaCl、pH7.5(5カラム容量)
運転温度:18〜24℃
当業者は、単なる通常の実験を用いて、本明細書に記載の本発明の特定の実施形態に対する多数の等価物について理解するかまたは確認できるであろう。かかる等価物は、添付の特許請求の範囲にて包含されるように意図されている。
Claims (45)
- Fc領域を有するタンパク質を、前記タンパク質および1種もしくは複数種の不純物を含有するソース液体から精製するための方法であって、
前記タンパク質をFc結合剤に吸着させるステップと、
前記Fc結合剤を二価カチオン塩を含有する緩衝溶液で洗浄し、1種もしくは複数種の不純物を除去するステップと、
前記タンパク質を溶出溶液中の前記Fc結合剤から回収するステップと、
を含む、方法。 - 前記1種もしくは複数種の不純物が、イントロンリードスルー変種(IRT)、アンダージスルフィド結合種(UDB)および低分子量種(LMW)からなる群から選択される請求項1に記載の方法。
- 前記1種もしくは複数種の不純物がIRTである請求項2に記載の方法。
- 前記タンパク質が抗体である請求項1に記載の方法。
- 前記抗体が、抗体融合体、マウス抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、およびヒト抗体からなる群から選択される請求項4に記載の方法。
- 前記抗体が抗−IL−13抗体である請求項4に記載の方法。
- 前記抗体がCD3、CD52、VEGF、EGFR、CD33、CD20、HER−2、TNFα、CD25、RSV、IgE、gp Ilb/IIIa、CD11aおよびα4インテグリンからなる群から選択される抗原に結合する請求項4に記載の方法。
- Fc領域を有する前記タンパク質が組換え生成される請求項1に記載の方法。
- Fc領域を有する前記タンパク質がチャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞内で組換え生成される請求項1に記載の方法。
- 前記Fc結合剤が1種もしくは複数種のプロテインAおよびプロテインGを含む請求項1に記載の方法。
- 前記Fc結合剤が固相上に固定化される請求項1に記載の方法。
- 前記固相がビーズ、ゲル、樹脂、および粒子のうちの1つもしくは複数を含有する請求項11に記載の方法。
- 前記二価カチオン塩がカオトロピック塩を含む請求項1に記載の方法。
- 前記二価カチオン塩が、CaCl2、MgCl2、NiCl2、およびこれらの混合物からなる群から選択される請求項1に記載の方法。
- 前記二価カチオン塩を含有する前記緩衝溶液が約4〜約8の範囲内のpH値を有する請求項1に記載の方法。
- 前記二価カチオン塩を含有する前記緩衝溶液が約4.5〜約7.5の範囲内のpH値を有する請求項1に記載の方法。
- 前記緩衝溶液が約0.1M〜約5Mの範囲内の二価カチオン塩濃度を有する請求項1に記載の方法。
- 前記緩衝溶液が約0.5M〜約3Mの範囲内の二価カチオン塩濃度を有する請求項17に記載の方法。
- 二価カチオン塩を含有する前記緩衝溶液が少なくとも約0.6MのCaCl2を含有する請求項1に記載の方法。
- 二価カチオン塩を含有する前記緩衝溶液が少なくとも約2MのMgCl2を含有する請求項1に記載の方法。
- 二価カチオン塩を含有する前記緩衝溶液が少なくとも約2MのCaCl2を含有する請求項1に記載の方法。
- 前記タンパク質をFc結合剤に吸着させるステップと前記Fc結合剤を洗浄するステップとが約2℃〜約24℃の範囲内の温度で行われる請求項1に記載の方法。
- 前記1種もしくは複数種の不純物が宿主細胞タンパク質、宿主細胞DNA、細胞培養タンパク質、およびこれらの混合物のうちの1種もしくは複数種を含む請求項1に記載の方法。
- 前記1種もしくは複数種の不純物がFc領域を有する前記タンパク質の望ましくない種を含む請求項1に記載の方法。
- Fc領域を含む前記タンパク質の前記望ましくない種が、イントロンリードスルー配列を有する1種もしくは複数種の抗体鎖またはその断片、不適切なジスルフィド結合を有する1種もしくは複数種の抗体鎖またはその断片、半抗体またはその断片、軽鎖二量体またはその断片、および重鎖二量体またはその断片を含む請求項24に記載の方法。
- 前記タンパク質を前記Fc結合剤から回収するステップが、約2.0〜約6.5の範囲内のpHを有する溶出緩衝液を用いて前記タンパク質を溶出させるステップを含む請求項1に記載の方法。
- 前記方法が、アニオン交換クロマトグラフィー、カチオン交換クロマトグラフィー、固定化金属親和性クロマトグラフィーおよび疎水性相互作用クロマトグラフィー(HIC)からなる群から選択されるクロマトグラフィーステップをさらに含む請求項1に記載の方法。
- 前記方法が、ハイドロキシアパタイトクロマトグラフィー、透析、親和性クロマトグラフィー、硫酸アンモニウム沈殿、エタノール沈殿、逆相HPLC(RP−HPLC)、およびクロマトフォーカシングからなる群から選択されるクロマトグラフィーステップをさらに含む請求項1に記載の方法。
- 前記1種もしくは複数種の不純物が前記タンパク質の1種もしくは複数種のイントロンリードスルー変異体を含み、かつ前記タンパク質を含有する前記溶出溶液のイントロンリードスルー変異体のレベルが前記ソース液体中のイントロンリードスルー変異体のレベルの少なくとも1/5未満である請求項1に記載の方法。
- 前記溶出溶液中で回収される前記タンパク質を含有する溶液のイントロンリードスルー変異体のレベルが前記ソース液体中のイントロンリードスルー変異体のレベルの少なくとも1/10未満である請求項29に記載の方法。
- 前記1種もしくは複数種の不純物が前記タンパク質の1種もしくは複数種のイントロンリードスルー変異体を含み、かつ前記イントロンリードスルー変異体が前記溶出溶液中での前記タンパク質の種の約1%未満を構成する請求項1に記載の方法。
- 前記イントロンリードスルー変異体が前記溶出溶液中で前記タンパク質の種の約0.8%未満を構成する請求項31に記載の方法。
- 前記イントロンリードスルー変異体が前記溶出溶液中で前記タンパク質の種の約0.5%未満を構成する請求項32に記載の方法。
- 前記イントロンリードスルー変異体が前記溶出溶液中で前記タンパク質の種の約0.2%未満を構成する請求項33に記載の方法。
- 前記1種もしくは複数種の不純物が前記タンパク質の1種もしくは複数種の低分子量種を含み、かつ前記低分子量種が前記溶出溶液中で前記タンパク質の種の約1%未満を構成する請求項1に記載の方法。
- 前記低分子量種が前記溶出溶液中で前記タンパク質の種の約0.8%未満を構成する請求項35に記載の方法。
- 前記低分子量種が前記溶出溶液中で前記タンパク質の種の約0.5%未満を構成する請求項36に記載の方法。
- 前記低分子量種が前記溶出溶液中で前記タンパク質の種の約0.2%未満を構成する請求項37に記載の方法。
- 前記1種もしくは複数種の不純物が前記タンパク質の1種もしくは複数種のアンダージスルフィド結合変異体を含み、かつ前記アンダージスルフィド結合変異体が前記溶出溶液中で前記タンパク質の種の約15%未満を構成する請求項1に記載の方法。
- 前記アンダージスルフィド結合変異体が前記溶出溶液中で前記タンパク質の種の約10%未満を構成する請求項39に記載の方法。
- 前記アンダージスルフィド結合変異体が前記溶出溶液中で前記タンパク質の種の約5%未満を構成する請求項40に記載の方法。
- 前記アンダージスルフィド結合変異体が前記溶出中で前記タンパク質の種の約2%未満を構成する請求項41に記載の方法。
- 請求項1に記載の方法に従って精製されるタンパク質。
- 前記タンパク質が抗体である請求項43に記載のタンパク質。
- Fc領域を有するタンパク質を不純物から精製するための試薬を含むキットであって、二価カチオン塩およびFc結合剤からなる群から選択される試薬ならびに使用説明書を含む、キット。
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Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2013516180A (ja) * | 2009-12-31 | 2013-05-13 | ミリアント・コーポレイション | コハク酸アンモニウムを含有する発酵ブロスからのコハク酸の精製 |
JP2013521258A (ja) * | 2010-03-05 | 2013-06-10 | ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 抗体の選択的強化 |
JP2014530829A (ja) * | 2011-10-19 | 2014-11-20 | ロシュ グリクアート アーゲー | フコシル化抗体の分離法 |
JP2015529236A (ja) * | 2012-09-25 | 2015-10-05 | グレンマーク ファーマシューティカルズ, エセ.アー. | ヘテロ二量体免疫グロブリンの精製 |
JP2016023151A (ja) * | 2014-07-17 | 2016-02-08 | 東ソー株式会社 | 抗体の分離方法 |
JP2017520531A (ja) * | 2014-06-02 | 2017-07-27 | ラボラトワール フランセ デュ フラクショヌマン エ デ ビオテクノロジーLaboratoire Francais du Fractionnement et des Biotechnologies | Fc断片の産生 |
JP2018167260A (ja) * | 2017-03-29 | 2018-11-01 | 三菱ケミカル株式会社 | イオン交換体の保存方法、生理活性物質の精製装置及び生理活性物質の精製方法 |
US10611826B2 (en) | 2013-07-05 | 2020-04-07 | Laboratoire Français Du Fractionnement Et Des Biotechnologies | Affinity chromatography matrix |
JP2020531411A (ja) * | 2017-08-17 | 2020-11-05 | ジャスト−エヴォテック バイオロジックス、インコーポレイテッド | 宿主細胞ガレクチンおよび他の夾雑物からグリコシル化タンパク質を精製する方法 |
Families Citing this family (91)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
TWI239847B (en) * | 1997-12-02 | 2005-09-21 | Elan Pharm Inc | N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease |
US20080050367A1 (en) | 1998-04-07 | 2008-02-28 | Guriq Basi | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US7964192B1 (en) | 1997-12-02 | 2011-06-21 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Prevention and treatment of amyloidgenic disease |
US7790856B2 (en) * | 1998-04-07 | 2010-09-07 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US6787523B1 (en) * | 1997-12-02 | 2004-09-07 | Neuralab Limited | Prevention and treatment of amyloidogenic disease |
US7700751B2 (en) | 2000-12-06 | 2010-04-20 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize β-amyloid peptide |
MY139983A (en) | 2002-03-12 | 2009-11-30 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
DE10303974A1 (de) | 2003-01-31 | 2004-08-05 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Amyloid-β(1-42)-Oligomere, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung |
MXPA05008156A (es) * | 2003-02-01 | 2005-09-30 | Neuralab Ltd | Inmunizacion activa para generar anticuerpos para beta-a soluble. |
TWI374893B (en) * | 2003-05-30 | 2012-10-21 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
EP1797182A2 (en) * | 2004-10-05 | 2007-06-20 | Wyeth a Corporation of the State of Delaware | Methods and compositions for improving recombinant protein production |
AU2005299716B2 (en) * | 2004-10-22 | 2012-09-06 | Amgen Inc. | Methods for refolding of recombinant antibodies |
WO2006066089A1 (en) * | 2004-12-15 | 2006-06-22 | Neuralab Limited | Humanized amyloid beta antibodies for use in improving cognition |
GT200600031A (es) * | 2005-01-28 | 2006-08-29 | Formulacion anticuerpo anti a beta | |
KR101247836B1 (ko) * | 2005-06-17 | 2013-03-28 | 와이어쓰 엘엘씨 | 항 a 베타 항체의 정제 방법 |
WO2007062852A2 (en) | 2005-11-30 | 2007-06-07 | Abbott Laboratories | ANTI-Aβ GLOBULOMER ANTIBODIES, ANTIGEN-BINDING MOIETIES THEREOF, CORRESPONDING HYBRIDOMAS, NUCLEIC ACIDS, VECTORS, HOST CELLS, METHODS OF PRODUCING SAID ANTIBODIES, COMPOSITIONS COMPRISING SAID ANTIBODIES, USES OF SAID ANTIBODIES AND METHODS OF USING SAID ANTIBODIES |
DK1976877T4 (en) | 2005-11-30 | 2017-01-16 | Abbvie Inc | Monoclonal antibodies to amyloid beta protein and uses thereof |
KR101505201B1 (ko) | 2005-12-12 | 2015-03-24 | 에이씨 이뮨 에스.에이. | 치료적 특성을 갖는 베타 1-42 특이적인 단일클론성 항체 |
US8784810B2 (en) * | 2006-04-18 | 2014-07-22 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of amyloidogenic diseases |
WO2009017467A1 (en) | 2007-07-27 | 2009-02-05 | Elan Pharma International Limited | Treatment of amyloidogenic diseases |
WO2010044803A1 (en) * | 2008-10-17 | 2010-04-22 | Elan Pharma International Limited | Treatment of amyloidogenic diseases |
AR062065A1 (es) * | 2006-07-14 | 2008-10-15 | Ac Immune Sa | Anticuerpo humanizado |
LT2061803T (lt) * | 2006-08-28 | 2019-11-25 | Ares Trading Sa | Fc turinčių baltymų gryninimo būdas |
EP2061802A1 (en) * | 2006-08-28 | 2009-05-27 | Ares Trading S.A. | Process for the purification of fc-fusion proteins |
US8911964B2 (en) | 2006-09-13 | 2014-12-16 | Abbvie Inc. | Fed-batch method of making human anti-TNF-alpha antibody |
CN103397065A (zh) | 2006-09-13 | 2013-11-20 | 雅培制药有限公司 | 细胞培养改良 |
US8455626B2 (en) | 2006-11-30 | 2013-06-04 | Abbott Laboratories | Aβ conformer selective anti-aβ globulomer monoclonal antibodies |
WO2008104386A2 (en) * | 2007-02-27 | 2008-09-04 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Method for the treatment of amyloidoses |
US8003097B2 (en) * | 2007-04-18 | 2011-08-23 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of cerebral amyloid angiopathy |
US20080292625A1 (en) * | 2007-04-18 | 2008-11-27 | Sally Schroeter | Prevention and treatment of cerebral amyloid angiopathy |
JP2010528583A (ja) * | 2007-06-11 | 2010-08-26 | エーシー イミューン ソシエテ アノニム | アミロイドβに対するヒト化抗体 |
US8048420B2 (en) * | 2007-06-12 | 2011-11-01 | Ac Immune S.A. | Monoclonal antibody |
US8613923B2 (en) | 2007-06-12 | 2013-12-24 | Ac Immune S.A. | Monoclonal antibody |
NZ581834A (en) * | 2007-06-12 | 2012-06-29 | Ac Immune Sa | Humanized antibodies to amyloid beta |
US20100297012A1 (en) * | 2007-10-05 | 2010-11-25 | Andrea Pfeifer | Humanized antibody |
UA101167C2 (ru) * | 2007-10-05 | 2013-03-11 | Дженентек, Инк. | Фармацевтическая композиция, предназначенная для лечения глазной болезни |
BRPI0818643A2 (pt) * | 2007-10-05 | 2017-05-23 | Ac Immune Sa | composição farmacêutica, e, métodos para reduzir a carga de placa na camada celular de gânglio retinal de um paciente, para reduzir a quantidade de placas na camada celular de gânglio retinal de um paciente, para diminuir a quantidade total de amilóide-beta solúvel na camada celular de gânglio retinal de um paciente, para evitar, tratar ou aliviar os efeitos de uma doença ocular associada com anormalidades patológicas/mudanças nos tecidos do sistema visual, para diagnosticar uma predisposição a uma doença ocular associada com anormalidades patológicas/mudanças nos tecidos dos sistema visual, para monitorar doenças ocular mínima residual associada com anormalidades patológicas/mudanças nos tecidos do sistema visual, para predizer a responsividade de um paciente, e para reter ou diminuir a pressão ocular nos olhos de um paciente |
JO3076B1 (ar) * | 2007-10-17 | 2017-03-15 | Janssen Alzheimer Immunotherap | نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe |
RU2476441C2 (ru) * | 2007-10-19 | 2013-02-27 | Сиэтл Дженетикс, Инк. | Cd19-связывающие средства и их применение |
BRPI0817182A2 (pt) * | 2007-10-30 | 2015-03-17 | Genentech Inc | Método para purificar um anticorpo e composições |
US20100233678A1 (en) * | 2007-11-13 | 2010-09-16 | Beadling Leslie C | Tunable affinity ligands for the separation and detection of target substances |
KR101247374B1 (ko) * | 2008-06-26 | 2013-03-26 | 한국생명공학연구원 | 면역글로불린 G의 Fc 부위에 선택적으로 결합하는 신규펩타이드 및 그의 제조방법 |
US8592555B2 (en) | 2008-08-11 | 2013-11-26 | Emd Millipore Corporation | Immunoglobulin-binding proteins with improved specificity |
BRPI0919545A2 (pt) * | 2008-10-20 | 2015-12-08 | Abbott Lab | anticorpos que se ligam a il-18 e métodos de purificar os mesmos |
JP5856845B2 (ja) | 2008-10-20 | 2016-02-10 | アッヴィ・インコーポレイテッド | 抗体精製中におけるウイルスの不活性化 |
BRPI0920027A2 (pt) | 2008-10-20 | 2015-10-06 | Abbott Lab | isolamento e purificação de anticorpos usando cromatografia de afinidade a proteína a |
WO2010077422A2 (en) | 2008-10-29 | 2010-07-08 | Wyeth Llc | Formulations of single domain antigen binding molecules |
MX2011004558A (es) | 2008-10-29 | 2011-06-01 | Wyeth Llc | Procedimientos para la purificacion de moleculas de union a antigeno de un unico dominio. |
US9067981B1 (en) | 2008-10-30 | 2015-06-30 | Janssen Sciences Ireland Uc | Hybrid amyloid-beta antibodies |
AU2009331897A1 (en) | 2008-12-22 | 2010-07-01 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Immunoglobulin purification |
SG162687A1 (en) | 2008-12-24 | 2010-07-29 | Millipore Corp | Caustic stable chromatography ligands |
US8268820B2 (en) * | 2009-03-26 | 2012-09-18 | Hoffmann-La Roche Inc. | 2,3-diaryl- or heteroaryl-substituted 1,1,1-trifluoro-2-hydroxypropyl compounds |
PT2424889E (pt) * | 2009-04-30 | 2015-11-12 | Ablynx Nv | Método de produção de anticorpos de domínio |
KR101764449B1 (ko) * | 2009-09-01 | 2017-08-02 | 제넨테크, 인크. | 변형된 단백질 a 용리를 통한 증진된 단백질 정제 |
KR101632312B1 (ko) | 2009-11-03 | 2016-06-21 | 삼성전자주식회사 | 항체 불변 영역에 특이적으로 결합하는 융합 단백질, 그의 제조 방법 및 이를 이용한 항체 분리 방법 |
WO2011110598A1 (en) * | 2010-03-10 | 2011-09-15 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Method for purifying immunoglobulin solutions |
CA2796339C (en) | 2010-04-15 | 2020-03-31 | Abbott Laboratories | Amyloid-beta binding proteins |
EP2598882B1 (en) | 2010-07-30 | 2017-07-26 | AC Immune S.A. | Safe and functional humanized antibodies for use in treating an amyloidosis |
CN105348387B (zh) | 2010-08-14 | 2020-08-25 | Abbvie 公司 | β淀粉样蛋白结合蛋白 |
JP2014507649A (ja) * | 2011-01-18 | 2014-03-27 | バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッド | ヒト血液中の抗βアミロイド抗体の測定 |
KR102058254B1 (ko) | 2011-03-29 | 2019-12-20 | 글락소스미스클라인 엘엘씨 | 단백질 정제용 완충제 시스템 |
SG10201604559TA (en) * | 2011-06-08 | 2016-07-28 | Emd Millipore Corp | Chromatography matrices including novel staphylococcus aureus protein a based ligands |
KR20140062469A (ko) * | 2011-07-20 | 2014-05-23 | 젭테온 인코포레이티드 | 폴리펩티드 분리 방법 |
AR096713A1 (es) | 2013-06-25 | 2016-01-27 | Cadila Healthcare Ltd | Proceso de purificación para anticuerpos monoclonales |
SG11201601823TA (en) | 2013-09-13 | 2016-04-28 | Genentech Inc | Methods and compositions comprising purified recombinant polypeptides |
AR101262A1 (es) | 2014-07-26 | 2016-12-07 | Regeneron Pharma | Plataforma de purificación para anticuerpos biespecíficos |
US11566082B2 (en) | 2014-11-17 | 2023-01-31 | Cytiva Bioprocess R&D Ab | Mutated immunoglobulin-binding polypeptides |
CN105175548B (zh) * | 2015-08-13 | 2019-02-05 | 齐鲁制药有限公司 | 重组人血管内皮生长因子受体-抗体融合蛋白的纯化方法 |
ES2897965T3 (es) * | 2015-08-21 | 2022-03-03 | Hoffmann La Roche | Procedimiento para la reducción de proteínas de célula huésped en cromatografía de afinidad |
WO2017032610A1 (en) * | 2015-08-21 | 2017-03-02 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Affinity chromatography purification with low conductivity wash buffer |
EP3344643A4 (en) * | 2015-09-04 | 2019-05-01 | Qiagen Sciences LLC | METHODS FOR CO-ISOLATION OF PROTEINS AND NUCLEIC ACIDS |
GB201600154D0 (en) * | 2016-01-05 | 2016-02-17 | Bayer As | Isotope preparation method |
GB201600161D0 (en) * | 2016-01-05 | 2016-02-17 | Bayer As | Isotope purification method |
US11708390B2 (en) | 2016-05-11 | 2023-07-25 | Cytiva Bioprocess R&D Ab | Method of storing a separation matrix |
ES2874974T3 (es) | 2016-05-11 | 2021-11-05 | Cytiva Bioprocess R & D Ab | Matriz de separación |
US10703774B2 (en) | 2016-09-30 | 2020-07-07 | Ge Healthcare Bioprocess R&D Ab | Separation method |
US10654887B2 (en) | 2016-05-11 | 2020-05-19 | Ge Healthcare Bio-Process R&D Ab | Separation matrix |
CN109311948B (zh) | 2016-05-11 | 2022-09-16 | 思拓凡生物工艺研发有限公司 | 清洁和/或消毒分离基质的方法 |
US10730908B2 (en) | 2016-05-11 | 2020-08-04 | Ge Healthcare Bioprocess R&D Ab | Separation method |
US10889615B2 (en) | 2016-05-11 | 2021-01-12 | Cytiva Bioprocess R&D Ab | Mutated immunoglobulin-binding polypeptides |
CN106519029B (zh) * | 2016-10-31 | 2020-03-17 | 山东泰邦生物制品有限公司 | 一种Aβ寡聚体抗体的制备工艺 |
WO2018170488A1 (en) * | 2017-03-17 | 2018-09-20 | Gilead Sciences, Inc. | Method of purifying an antibody |
US11447547B1 (en) | 2017-12-13 | 2022-09-20 | Amgen Inc. | Method of antigen-binding protein production |
CN108048477A (zh) * | 2017-12-15 | 2018-05-18 | 南京理工大学 | 基于大肠杆菌表达系统的制备多肽的方法 |
CN109929038B (zh) * | 2017-12-15 | 2020-10-09 | 山东博安生物技术有限公司 | Vegf捕获剂融合蛋白的纯化方法 |
WO2019183334A1 (en) | 2018-03-21 | 2019-09-26 | Waters Technologies Corporation | Non-antibody high-affinity-based sample preparation, sorbents, devices and methods |
US20220314142A1 (en) | 2019-07-01 | 2022-10-06 | Pfizer Inc. | Improvements to wash solutions for protein a chromatography in an antibody purification process |
CN112409477B (zh) * | 2019-08-21 | 2022-11-08 | 广东菲鹏生物有限公司 | IgM纯化方法 |
CN110724204B (zh) * | 2019-11-18 | 2021-10-22 | 广东菲鹏制药股份有限公司 | Fc融合蛋白的纯化方法 |
CN113968909A (zh) * | 2020-07-22 | 2022-01-25 | 信达生物制药(苏州)有限公司 | 一种双特异性抗体的纯化方法 |
US20220049009A1 (en) | 2020-07-23 | 2022-02-17 | Othair Prothena Limited | Anti-Abeta Antibodies |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002046237A2 (en) * | 2000-12-06 | 2002-06-13 | Neuralab Limited | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US20040229330A1 (en) * | 2003-02-27 | 2004-11-18 | Bayer Pharmaceuticals Corporation | Integrated method for capture and purification of tagged proteins |
JP2008543881A (ja) * | 2005-06-17 | 2008-12-04 | エラン ファーマ インターナショナル リミテッド | 抗Aβ抗体を精製する方法 |
Family Cites Families (72)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
JPS6147500A (ja) | 1984-08-15 | 1986-03-07 | Res Dev Corp Of Japan | キメラモノクロ−ナル抗体及びその製造法 |
EP0173494A3 (en) | 1984-08-27 | 1987-11-25 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Chimeric receptors by dna splicing and expression |
GB8422238D0 (en) | 1984-09-03 | 1984-10-10 | Neuberger M S | Chimeric proteins |
JPS61134325A (ja) | 1984-12-04 | 1986-06-21 | Teijin Ltd | ハイブリツド抗体遺伝子の発現方法 |
US4676980A (en) * | 1985-09-23 | 1987-06-30 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Target specific cross-linked heteroantibodies |
WO1987002671A1 (en) | 1985-11-01 | 1987-05-07 | International Genetic Engineering, Inc. | Modular assembly of antibody genes, antibodies prepared thereby and use |
US5225539A (en) | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
US4801687A (en) * | 1986-10-27 | 1989-01-31 | Bioprobe International, Inc. | Monoclonal antibody purification process using protein A |
US4851341A (en) * | 1986-12-19 | 1989-07-25 | Immunex Corporation | Immunoaffinity purification system |
US5336603A (en) | 1987-10-02 | 1994-08-09 | Genentech, Inc. | CD4 adheson variants |
US5223409A (en) * | 1988-09-02 | 1993-06-29 | Protein Engineering Corp. | Directed evolution of novel binding proteins |
WO1990002809A1 (en) | 1988-09-02 | 1990-03-22 | Protein Engineering Corporation | Generation and selection of recombinant varied binding proteins |
US5116964A (en) | 1989-02-23 | 1992-05-26 | Genentech, Inc. | Hybrid immunoglobulins |
US5225538A (en) | 1989-02-23 | 1993-07-06 | Genentech, Inc. | Lymphocyte homing receptor/immunoglobulin fusion proteins |
ES2087997T3 (es) | 1990-01-12 | 1996-08-01 | Cell Genesys Inc | Generacion de anticuerpos xenogenicos. |
US6150584A (en) * | 1990-01-12 | 2000-11-21 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US5427908A (en) | 1990-05-01 | 1995-06-27 | Affymax Technologies N.V. | Recombinant library screening methods |
JPH06508511A (ja) | 1990-07-10 | 1994-09-29 | ケンブリッジ アンティボディー テクノロジー リミティド | 特異的な結合ペアーの構成員の製造方法 |
GB9015198D0 (en) | 1990-07-10 | 1990-08-29 | Brien Caroline J O | Binding substance |
US5770429A (en) * | 1990-08-29 | 1998-06-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5112952A (en) * | 1990-09-28 | 1992-05-12 | Pierce Chemical Company | Composition and method for isolation and purification of Immunoglobulin M |
ATE164395T1 (de) | 1990-12-03 | 1998-04-15 | Genentech Inc | Verfahren zur anreicherung von proteinvarianten mit geänderten bindungseigenschaften |
AU1545692A (en) | 1991-03-01 | 1992-10-06 | Protein Engineering Corporation | Process for the development of binding mini-proteins |
DE69233367T2 (de) | 1991-04-10 | 2005-05-25 | The Scripps Research Institute, La Jolla | Bibliotheken heterodimerer rezeptoren mittels phagemiden |
DE4122599C2 (de) | 1991-07-08 | 1993-11-11 | Deutsches Krebsforsch | Phagemid zum Screenen von Antikörpern |
WO1993008829A1 (en) | 1991-11-04 | 1993-05-13 | The Regents Of The University Of California | Compositions that mediate killing of hiv-infected cells |
US5786180A (en) * | 1995-02-14 | 1998-07-28 | Bayer Corporation | Monoclonal antibody 369.2B specific for β A4 peptide |
EP0985033A4 (en) * | 1997-04-04 | 2005-07-13 | Biosite Inc | POLYVALENT AND POLYCLONAL LIBRARIES |
US7964192B1 (en) * | 1997-12-02 | 2011-06-21 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Prevention and treatment of amyloidgenic disease |
US6761888B1 (en) * | 2000-05-26 | 2004-07-13 | Neuralab Limited | Passive immunization treatment of Alzheimer's disease |
US6743427B1 (en) * | 1997-12-02 | 2004-06-01 | Neuralab Limited | Prevention and treatment of amyloidogenic disease |
US6913745B1 (en) * | 1997-12-02 | 2005-07-05 | Neuralab Limited | Passive immunization of Alzheimer's disease |
US6750324B1 (en) * | 1997-12-02 | 2004-06-15 | Neuralab Limited | Humanized and chimeric N-terminal amyloid beta-antibodies |
US7588766B1 (en) * | 2000-05-26 | 2009-09-15 | Elan Pharma International Limited | Treatment of amyloidogenic disease |
US20080050367A1 (en) * | 1998-04-07 | 2008-02-28 | Guriq Basi | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US6787523B1 (en) * | 1997-12-02 | 2004-09-07 | Neuralab Limited | Prevention and treatment of amyloidogenic disease |
TWI239847B (en) * | 1997-12-02 | 2005-09-21 | Elan Pharm Inc | N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease |
US7179892B2 (en) | 2000-12-06 | 2007-02-20 | Neuralab Limited | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US7790856B2 (en) * | 1998-04-07 | 2010-09-07 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US6710226B1 (en) * | 1997-12-02 | 2004-03-23 | Neuralab Limited | Transgenic mouse assay to determine the effect of Aβ antibodies and Aβ Fragments on alzheimer's disease characteristics |
US20050059802A1 (en) * | 1998-04-07 | 2005-03-17 | Neuralab Ltd | Prevention and treatment of amyloidogenic disease |
US6787637B1 (en) * | 1999-05-28 | 2004-09-07 | Neuralab Limited | N-Terminal amyloid-β antibodies |
PL218883B1 (pl) | 2000-02-24 | 2015-02-27 | Lilly Co Eli | Kompozycja farmaceutyczna zawierająca przeciwciało do zastosowania w leczeniu klinicznej lub przedklinicznej choroby Alzheimera |
US7700751B2 (en) | 2000-12-06 | 2010-04-20 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize β-amyloid peptide |
EP1385545B1 (en) * | 2001-04-30 | 2009-01-07 | Eli Lilly And Company | Humanized antibodies recognizing the beta-amyloid peptide |
DE60229051D1 (de) | 2001-04-30 | 2008-11-06 | Lilly Co Eli | Humanisierte antikörper |
EP1519740A4 (en) | 2001-08-17 | 2005-11-09 | Lilly Co Eli | FASTER IMPROVEMENT OF COGNITION IN DISEASES ASSOCIATED WITH A-BETA |
EP1432444A4 (en) * | 2001-08-17 | 2005-11-02 | Lilly Co Eli | ANTI-BETA ANTIBODIES |
ATE417858T1 (de) * | 2002-02-05 | 2009-01-15 | Genentech Inc | Proteinaufreinigung |
AR038568A1 (es) | 2002-02-20 | 2005-01-19 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos anti-a beta y su uso |
MY139983A (en) | 2002-03-12 | 2009-11-30 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
MXPA05008156A (es) * | 2003-02-01 | 2005-09-30 | Neuralab Ltd | Inmunizacion activa para generar anticuerpos para beta-a soluble. |
PT1601697E (pt) | 2003-02-28 | 2007-09-04 | Lonza Biologics Plc | Purificação de anticorpos através de proteína a e cromatografia de troca iónica. |
GB0304576D0 (en) * | 2003-02-28 | 2003-04-02 | Lonza Biologics Plc | Protein a chromatography |
TWI374893B (en) | 2003-05-30 | 2012-10-21 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
DK1678208T3 (da) * | 2003-10-27 | 2013-07-08 | Wyeth Llc | Fjernelse af aggregater med høj molekylvægt under anvendelse af hydroxyapatitchromatografi |
JP4764830B2 (ja) * | 2003-12-17 | 2011-09-07 | ワイス・エルエルシー | 免疫原性ペプチド担体コンジュゲートおよびその生産法 |
KR101201120B1 (ko) * | 2003-12-17 | 2012-12-03 | 와이어쓰 엘엘씨 | Aβ 면역원성 펩티드 캐리어 컨쥬게이트 및 이의 제조 방법 |
US20050249723A1 (en) * | 2003-12-22 | 2005-11-10 | Xencor, Inc. | Fc polypeptides with novel Fc ligand binding sites |
AU2005260955A1 (en) | 2004-07-14 | 2006-01-19 | Astellas Pharma Inc. | Agent for promoting the recovery from dysfunction after the onset of central neurological disease |
EP1797182A2 (en) * | 2004-10-05 | 2007-06-20 | Wyeth a Corporation of the State of Delaware | Methods and compositions for improving recombinant protein production |
ES2396555T3 (es) * | 2004-12-15 | 2013-02-22 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Anticuerpos que reconocen péptido beta amiloide |
PE20061401A1 (es) | 2004-12-15 | 2006-12-23 | Neuralab Ltd | ANTICUERPOS Aß PARA MEJORAR LA COGNICION |
WO2006066089A1 (en) | 2004-12-15 | 2006-06-22 | Neuralab Limited | Humanized amyloid beta antibodies for use in improving cognition |
TW200638943A (en) * | 2005-01-28 | 2006-11-16 | Wyeth Corp | Stabilized liquid polypeptide formulations |
GT200600031A (es) * | 2005-01-28 | 2006-08-29 | Formulacion anticuerpo anti a beta | |
WO2009017467A1 (en) | 2007-07-27 | 2009-02-05 | Elan Pharma International Limited | Treatment of amyloidogenic diseases |
US8003097B2 (en) * | 2007-04-18 | 2011-08-23 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of cerebral amyloid angiopathy |
US20080292625A1 (en) * | 2007-04-18 | 2008-11-27 | Sally Schroeter | Prevention and treatment of cerebral amyloid angiopathy |
JO3076B1 (ar) * | 2007-10-17 | 2017-03-15 | Janssen Alzheimer Immunotherap | نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe |
IT1395574B1 (it) | 2009-09-14 | 2012-10-16 | Guala Dispensing Spa | Dispositivo di erogazione |
-
2006
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-
2007
- 2007-11-26 IL IL187642A patent/IL187642A/en active IP Right Grant
- 2007-11-26 NO NO20076082A patent/NO20076082L/no not_active Application Discontinuation
- 2007-11-26 NO NO20076056A patent/NO20076056L/no not_active Application Discontinuation
- 2007-11-27 IL IL187683A patent/IL187683A/en not_active IP Right Cessation
- 2007-12-07 CR CR9576A patent/CR9576A/es not_active Application Discontinuation
- 2007-12-07 CR CR9582A patent/CR9582A/es unknown
- 2007-12-17 NI NI200700329A patent/NI200700329A/es unknown
-
2008
- 2008-01-02 MA MA30537A patent/MA29609B1/fr unknown
- 2008-01-09 EC EC2008008086A patent/ECSP088086A/es unknown
- 2008-09-12 HK HK08110194.5A patent/HK1117174A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2010
- 2010-10-12 US US12/903,053 patent/US8440799B2/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002046237A2 (en) * | 2000-12-06 | 2002-06-13 | Neuralab Limited | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US20040229330A1 (en) * | 2003-02-27 | 2004-11-18 | Bayer Pharmaceuticals Corporation | Integrated method for capture and purification of tagged proteins |
JP2008543881A (ja) * | 2005-06-17 | 2008-12-04 | エラン ファーマ インターナショナル リミテッド | 抗Aβ抗体を精製する方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
JPN5008008621; ANTIBODY PURIFICATION HANDBOOK , 2002, p.1-107, AMERSHAM BIOSCIENCES * |
JPN6011056435; 大沢利昭、外3名: 免疫学辞典(第2版) 第2版, 20011203, p.536, 東京化学同人 * |
Cited By (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2013516180A (ja) * | 2009-12-31 | 2013-05-13 | ミリアント・コーポレイション | コハク酸アンモニウムを含有する発酵ブロスからのコハク酸の精製 |
JP2013521258A (ja) * | 2010-03-05 | 2013-06-10 | ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 抗体の選択的強化 |
JP2014530829A (ja) * | 2011-10-19 | 2014-11-20 | ロシュ グリクアート アーゲー | フコシル化抗体の分離法 |
JP2018184406A (ja) * | 2011-10-19 | 2018-11-22 | ロシュ グリクアート アーゲー | フコシル化抗体の分離法 |
JP2015529236A (ja) * | 2012-09-25 | 2015-10-05 | グレンマーク ファーマシューティカルズ, エセ.アー. | ヘテロ二量体免疫グロブリンの精製 |
US10611826B2 (en) | 2013-07-05 | 2020-04-07 | Laboratoire Français Du Fractionnement Et Des Biotechnologies | Affinity chromatography matrix |
JP2017520531A (ja) * | 2014-06-02 | 2017-07-27 | ラボラトワール フランセ デュ フラクショヌマン エ デ ビオテクノロジーLaboratoire Francais du Fractionnement et des Biotechnologies | Fc断片の産生 |
JP2016023151A (ja) * | 2014-07-17 | 2016-02-08 | 東ソー株式会社 | 抗体の分離方法 |
JP2018167260A (ja) * | 2017-03-29 | 2018-11-01 | 三菱ケミカル株式会社 | イオン交換体の保存方法、生理活性物質の精製装置及び生理活性物質の精製方法 |
JP2020531411A (ja) * | 2017-08-17 | 2020-11-05 | ジャスト−エヴォテック バイオロジックス、インコーポレイテッド | 宿主細胞ガレクチンおよび他の夾雑物からグリコシル化タンパク質を精製する方法 |
US11358983B2 (en) | 2017-08-17 | 2022-06-14 | Just-Evotec Biologies, Inc. | Method of purifying glycosylated protein from host cell galectins and other contaminants |
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