JP2014507649A - ヒト血液中の抗βアミロイド抗体の測定 - Google Patents
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Abstract
Description
アミロイドβペプチド(Aβ)のミスフォールディングおよび凝集は、アルツハイマー病(AD)の中心的な病因である。ヒト免疫グロブリンG(IgG)レパートリーは、ワクチン接種または受動免疫化の不在下で発生するAβペプチドに対する内因性抗体を含む。内因性抗Aβ抗体活性は、様々な年齢の正常成人およびADを有する患者の血液中で検出されている(Weksler et al.,Exp Gerontol.,37:943−948(2002)(非特許文献1)、Hyman et al.,Ann Neurol.,49:808−810.5(2001)(非特許文献2)、Mruthinti et al.,Neurobiol Aging.,25:1023−1032(2004)(非特許文献3)、Nath et al.,Neuromolecular Med.,3:29−39(2003)(非特許文献4)、Sohn et al.,Frontiers in Bioscience.,14:3879−3883(2009)(非特許文献5))。静注用免疫グロブリン(IVIG)として公知のヒト血漿由来抗体製剤は、高レベルの内因性抗アミロイド抗体を含有することが報告されており、ADの有望な治療法として研究されている(Dodel et al.,J Neurol Neurosurg Psychiatry.,75:1472−1474(2004)(非特許文献6)、Hyman et al.,Ann Neurol.,49:808−810.5(2001)(非特許文献2)、Mruthinti et al.,Neurobiol Aging.,25:1023−1032(2004)(非特許文献3))。
本発明は、ヒト血漿および静注用免疫グロブリン製剤中の内因性抗アミロイド抗体を調製およびアッセイするための改善された方法を提供する。これらの新規の方法は、ヒト血漿が、より低いアビディティでAβに結合する多価抗体ならびにAβおよびその凝集体に対して中程度ないし高アビディティを有する内因性抗アミロイド抗体を含有することを示す。
序文
アルツハイマー病の診断は、この疾患が、特に早期には、他の様々な精神的状態と共通する症状を示すことから困難である。確定診断は、脳に形成されたAβのもつれやプラークの可視化によって達成することができる。同様に、他のアミロイド関連疾患および状態は、コンゴレッド法を用いてアミロイド沈着を染色することができる組織生検を用いて一般に診断される(Linke,R.P.(2006)"Protein misfolding,aggregation and conformational diseases"(V.N. Uversky and A.L. Fink, eds.)、Protein Reviews,Volume 4,(M.Z.Atassi, ed.)第239頁〜第276頁第11.1章;Springer)。しかしながら、脳や心臓などの器官の生検実施に伴うリスクおよび合併症により、これはアルツハイマー病、クロイツフェルト・ヤコブ病、および心アミロイドーシスを含む様々なアミロイド関連疾患の診断に対する現実的な解決策ではない。
本明細書で使用する「カオトロピック剤」とは、タンパク質の三次元構造を不安定にする化学物質を指す。特定の実施形態において、カオトロピック剤は、イオン性カオトロープ(例えば、カオトロピックイオンまたはカオトロピック塩)あるいは非イオン性カオトロープを指しうる。カオトロピック塩の非限定的な例には、グアニジン塩、例えば塩化グアニジン、硝酸グアニジン、チオシアン酸グアニジン、チオシアネート塩、例えばチオシアン酸アンモニウム、チオシアン酸カリウム、チオシアン酸ナトリウム、チオシアン酸リチウム、チオシアン酸カルシウム、チオシアン酸グアニジン、過塩素酸塩、例えば過塩素酸アンモニウム、過塩素酸ナトリウム、過塩素酸リチウム、過塩素酸マグネシウム、過塩素酸カルシウム、ヨウ化物塩、例えばヨウ化アンモニウム、ヨウ化カリウム、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化リチウム、ヨウ化マグネシウム、ヨウ化カルシウム、塩素酸塩、例えば塩素酸ナトリウム、塩素酸リチウム、塩素酸マグネシウム、塩素酸カルシウムなどがある。非イオン性カオトロープには、尿素およびチオ尿素があるが、これらに限定されない。
アミロイドタンパク質および異常タンパク質凝集体は、多数の異なる疾患および状態の一因となる。本発明は、診断および治療過程の決定に使用することができる、様々な形態のアミロイドタンパク質または一部のタンパク質凝集体に対する特異的高アビディティ自己抗体を検出するための方法を提供する。
低レベルの自己抗体が、所定の抗原を接種していない個人の血液中に認められる。例えば、複数の個人からプールした血漿調製物は、Aβなどのアミロイドタンパク質に結合するIgG抗体の小画分を含む。本明細書において説明するように、抗体特異性を決定する不正確な方法および抗体単離の過酷な方法は、アミロイド特異的抗体が実際に存在するのか、あるいは人為的なものまたは非特異的相互作用を示すのかについて、不確実性を生み出してきた。
アミロイド関連疾患および状態、例えばADの治療は、典型的には、この疾患の認知的症状および気分症状に重点を置く。早期治療および予防方法には、身体的および社会的活動、記憶ゲーム、ならびにパズルおよび問題の解決が含まれる。症状を示す個人に対する薬物療法には、コリンエステラーゼ阻害剤(アセチルコリンの減少に対処するため)、グルタミン酸部分拮抗薬(例えば、メマンチン)、および精神医学的薬物(例えば、抗精神病薬、睡眠補助薬、抗不安薬、およびβ遮断薬)が含まれる。コリンエステラーゼ阻害剤には、Aricep(登録商標)t(塩酸ドネペジル)、Exelon(登録商標)(リバスティグミン)、Razadyne(登録商標)(ガランタミン)、およびCognex(登録商標)(タクリン)が含まれる。
一態様において、本発明は、生物学的試料中の抗アミロイド抗体を検出するための改善された方法を提供する。例えば、本明細書において、哺乳動物の血液中に存在する高アビディティ抗アミロイド抗体の測定のための方法が提供される。一実施形態において、本発明は、生体液中に存在する凝集または非凝集アミロイドタンパク質に対する抗体の正確な定量化のための方法を提供する。これらの抗体は、アルツハイマー病(AD)を含むヒトアミロイドーシス疾患および他の神経変性障害の予測、診断、および治療のための有意な手段として浮上してきた。また、抗体は、他の哺乳動物種、特にこれらの疾患のモデルとして使用されるものにおいても産生しうる。このように、本発明は、凝集アミロイドタンパク質、ならびに検査される流体中のモノマーレベルが低い場合には未凝集アミロイドモノマーに対する抗体の定量化および特徴付けを改善する。
一実施形態において、本発明は、哺乳動物の血漿および他の生体液中のアミロイド形成性タンパク質に対する抗体のレベルを定量化するための方法を提供する。既存の方法とは異なり、本発明は、非特異的抗体結合、血漿巨大分子からの干渉、および精製時の免疫グロブリンの変性による結合活性の人為的発生の交絡作用を回避する。
一実施形態において、本発明は、哺乳動物の血漿および他の生体液中のアミロイド形成性タンパク質に対する抗体のレベルを定量化するための方法を提供する。既存の方法とは異なり、本発明は、非特異的抗体結合、血漿巨大分子からの干渉、および精製時の免疫グロブリンの変性による結合活性の人為的発生の交絡作用を回避する。
特定の態様において、本明細書において提供される抗アミロイド抗体を検出するための方法は、上述のようなアミロイド関連疾患のリスクがあるかまたは罹患している個人の診断および予後のために使用することができる。例えば、血清および一部の組織中の高レベルのアミロイド、とりわけAβは、アルツハイマー病に関連するアミロイドプラークの発生可能性の増加を示しうる。また、高レベルのアミロイド特異的自己抗体も、個人にADリスクがあるかまたはAD関連症状の悪化リスクがあることを示す。
したがって、一部の実施形態において、本発明は、アミロイド関連障害を有する対象またはアミロイド関連障害を有することが疑われる対象の診断および/または治療過程の選定のための方法を提供する。一部の実施形態において、この方法は、アミロイドタンパク質に特異的な自己抗体の検出および/または測定を含む。アミロイドタンパク質に対して高アビディティを有する内因性抗体を検出するための方法は、本明細書において概説される。
一態様において、本発明は、哺乳動物の血漿および他の生体液中のアミロイド形成性タンパク質に対する抗体のレベルを定量化することを含む、アミロイド関連疾患または状態の治療の候補者である対象を特定する方法であって、非特異的および低アビディティ抗アミロイド抗原結合に関連するシグナルを減少させるためにカオトロピック洗浄ステップが採用される方法を提供する。好適な実施形態において、治療は、免疫グロブリン製剤の投与を含む。具体的な実施形態において、アミロイド関連疾患はアルツハイマー病である。
一態様において、本発明は、哺乳動物の血漿および他の生体液中のアミロイド形成性タンパク質に対する抗体のレベルを定量化することを含み、免疫グロブリン製剤の投与を含む、治療の候補者である対象を特定するための方法であって、非特異的抗体結合、血漿巨大分子からの干渉、および精製時の免疫グロブリンの変性による結合活性の人為的発生に関連するシグナルを減少させるためにチオフィリック濃縮ステップが採用される方法を提供する。
一部の実施形態において、抗アミロイド抗体レベルの検出は、対象の予後を提供することができる。対象は、未治療もしくは未診断であってもよく、または現在治療を受けているか、もしくはアミロイド関連疾患に対する予防措置を取っていてもよい。したがって、抗アミロイド抗体のレベルは、長期にわたって対象をモニタリングするために定期的に検出することができる。具体的な実施形態において、高レベルの抗アミロイド抗体の検出により、対象の予後の提供が可能である。
一態様において、本発明は、哺乳動物の血漿および他の生体液中のアミロイド形成性タンパク質に対する抗体のレベルを定量化することを含む、アミロイドタンパク質に関連する疾患または状態の進行の予後を提供する方法であって、非特異的および低アビディティ抗アミロイド抗原結合に関連するシグナルを減少させるためにカオトロピック洗浄ステップが採用される方法を提供する。
一態様において、本発明は、哺乳動物の血漿および他の生体液中のアミロイド形成性タンパク質に対する抗体のレベルを定量化することを含む、アミロイドタンパク質に関連する疾患または状態の進行の予後を提供する方法であって、非特異的抗体結合、血漿巨大分子からの干渉、および精製時の免疫グロブリンの変性による結合活性の人為的発生に関連するシグナルを減少させるために、チオフィリック濃縮ステップが採用される方法を提供する。
免疫グロブリン、例えば、異種性のヒト抗体を含む濃縮免疫グロブリン調製物を含む薬学的組成物は、当技術分野で公知の様々な方法によって投与することができる。投与経路および/または投与形式は、所望の結果によって異なるが、典型的には静脈内、筋肉内、腹腔内、または皮下となる。薬学的組成物は、静脈内、筋肉内、皮下、非経口、脊髄、または表皮投与(例えば、注射または注入による)に適した許容される担体を含んでもよい。
本発明は、高親和性抗アミロイド抗体の検出および/または単離のためのキットをさらに提供する。キットは、アミロイド関連障害の診断、および例えばIVIGを用いての、適切な治療法のための個人の選定のために使用することができる。
ヒト血漿の収集およびIgGの調製
健康成人およびADを有する患者からの血液試料を、Weill Medical College Institutional Review Boardによって承認されたプロトコルの下で入手し、標準的な方法による血漿の製造のためにEDTA管に収集した。−80℃で保管し、30分間室温に暴露して解凍した標本に対して全血漿を使用する実験を実施した。IgGを、(1)Gタンパク質セファロース(Akerstrom et al.,J Biol Chem.,261:10240−10247(1986)上の標準的なクロマトグラフィー、および(2)チオフィリック吸着剤上の分取クロマトグラフィーの2つの方法によって、製造業者(Pierce社、米国イリノイ州ロックフォード)の指定通りに血漿から精製した。Gタンパク質クロマトグラフィーについては、IgGを0.1Mグリシン−HCl、pH2.8で溶出し、低pHへの暴露時間を減少させるために2Mトリス塩基を含有する管に収集した。いずれのカラムからの溶出IgGも使用前にPBSに対して透析した。
様々なオリゴマー種のAβの調製
Aβモノマー(Biosource International社、米国カリフォルニア州カマリロ)を50%のアセトニトリルに溶解し、37℃で30分間インキュベートし、凍結乾燥させた。結果として得られたペレットを1,1,1,3,3,3−ヘキサフルオロ−2−プロパノール、すなわちHFIPに溶解し、37℃で20〜30分間インキュベートし、次いでアルゴン下で乾燥させた。
ヒト抗Aβ抗体のELISA
モノマー(ギ酸中1mg/mL)または事前に作成されたAβ球状体のいずれかのAβを合計0.1μg含有するpH9.6の0.1M NaHCO3緩衝液0.1mLでMaxisorp ELISAプレート(Nunc社、デンマーク、ロスキレ)を37℃で1時間コーティングした。Aβ原線維プレートは、前述のように調製した(O'Nuallain et al.,J Immunol.,176:7071−7078(2006))。プレートは、即座に使用するか、または4℃で保管した。Aβコーティング緩衝液を除去した後、プレートを、0.05%のTween20(PBST)を含有する0.2mLのPBS(137mM NaCl、2.7mM KCl、10mM Na2HPO4、pH7.4)で3回洗浄した。最終洗浄後、プレートをPBST中の0.2mL/ウェルの1%BSAで、37℃で1時間ブロッキングした。ブロッキング溶液を除去し、プレートを、上述のように、PBSTで3回洗浄した。
SPR測定
カルボキシル化センサーを、SensiQ SPR装置(ICX Nomadics社、米国オクラホマ州オクラホマシティ)に装填し、0.1M リン酸を1分注入してすすいで表面の汚染物質を除去し、2mM EDC、0.5mM NHSを対照および実験チャネルの両方に注入することによって活性化した。pH4.7の10mM 酢酸緩衝液中のニュートラアビジン(25μg/mL)、続いて10mM HEPES緩衝液(pH7.4)中のビオチン標識Aβモノマー、オリゴマー、または原線維の50μg/mL溶液、150mM NaCl、1.34mM EDTA、および1%のTween20を実験チャネルに注入した。両チャネルへの1M エタノールアミン(pH8)の注入によって、結合を終結させた。血漿または精製IgG製剤の連続2倍希釈物を使用して、SPR抗体結合アッセイを行った。結合の分析を、Qdatソフトウェア(ICX Nomadics社、米国オクラホマ州オクラホマシティ)を使用して行った。
カオトロピック塩による選択的な抗原−抗体の解離
選択的解離の条件を、まず、ブランクプレートおよびAβ−コーティングプレートへ結合する抗体のアビディティを測定することによって測定した。次いで、ブランクプレートまたはアミロイドプレートに対する結合の最適な解離を提供するために必要なカオトロピック塩(チオシアン酸アンモニウム)のモル濃度を測定した(Pullen et al.,J Immunol Methods.,86:83−87(1986))。簡潔にいうと、AβコーティングされたELISAプレートを、PBST中に希釈したヒト血漿またはマウスモノクローナル抗Aβ抗体(1ug/mL)の1:10希釈物とともに、上述のようにインキュベートした。ウェルを空にし、pH6.0の50mM リン酸ナトリウム緩衝液0.2mL、または濃度を次第に上げたチオシアン酸アンモニウムを含有するこの緩衝液をウェルの各組に対して4通りに添加した。プレートを25℃で30分間インキュベートし、PBSTで3回洗浄し、上述のように標準ELISA用に処理した。
親和性精製による抗アミロイド抗体の単離
アミノ末端またはカルボキシ末端で樹脂にAβペプチドを結合させる、抗Aβモノマー抗体の親和性精製用の樹脂を購入した(Alpha Diagnostic Intl.社、米国テキサス州サンアントニオ)。抗Aβオリゴマーおよび抗Aβ原線維抗体用の樹脂を、上述のように作製されたAβオリゴマーと原線維を製造業者(GE Healthcare,Uppsala,Sweden)の推奨通りにN−ヒドロキシコハク酸イミド−活性セファロース4Fast Flowに結合することによって調製した。カラムをPBS中で平衡化し、PBS中10mg/mLに希釈した5g/mLのIVIGを0.5mL/分で少なくとも合計5回、500mLの完全通過でカラムを通し、その後PBSで洗浄し、pH2.5の0.1M グリシンで標準溶出した。溶出したIgGを、即座に中和し、限外濾過スピンカラム上での遠心分離によって濃縮し、PBSに対して透析した。
抗Aβ抗体測定時のブランクプレート結合
ヒト血漿または血清中の抗Aβ抗体の定量化は、ほとんどの場合、モノマーまたは凝集(オリゴマーまたは原線維)のいずれかのAβペプチドを含有するELISAプレート上で実施されてきた。この方法でアッセイされる正常ヒトドナー由来の血漿試料は、ブランクELISAウェル(いかなる添加された抗原も有さないウェル)に有意に結合する。従来のブロッキング剤、例えば、脱脂乳、ウシ胎仔血清、アルブミン、および市販のブロッキング調製物の使用にもかかわらず、多大な非特異的ブランクプレート結合が生じる(Klaver et al.,J.Neurosci.Meth.187,263−269)。ブランクELISAプレートへの結合の範囲は、血漿ドナーによって異なる(図1)。
ブランクプレート結合は、Fab媒介される
プレート結合相互作用の性質を判定するために、5個人に由来する市販のIgGのプール、ならびにこの同一プールから単離されたFab断片、Fab2'断片、およびFc断片を検査した。ブランクELISAウェルへの抗体の結合は、他のドメインが関与する非特異的相互作用とは対照的に、IgG分子の抗原結合領域(Fab)への結合の結果であることが認められた。図2は、IgGの抗原結合領域(Fab断片およびFab2'断片)が、免疫グロブリン分子の他のドメインを介した非特異的相互作用よりも、むしろ空のウェルへの結合に関与することを示す。
ブランクプレート結合抗体の枯渇
血漿試料からのIgGの単離は、ブランクELISAプレートへの抗体の結合を排除しない。ポリスチレンおよび/またはアガロースのカラムにIVIGを通過させることで、これらの基体に容易に結合するIgG分子を枯渇させ、ブランクELISAウェルへのIVIGの結合を減少させる可能性があるかどうかを試験した。枯渇は、ブランクプレート結合抗体に特異的ではなかった。ブランクプレートおよびAβ含有プレートで得られた吸光度の絶対比は、カラムクロマトグラフィーにかかわらず、比較的一定に留まった。この手法のさらなる欠点は、抗Aβ結合抗体の合計量が全枯渇手順によって実質的に減少されたことであり、Aβに結合する抗体の一部がアガロースまたはポリスチレンにも付着しうることを示唆する。かかる結合は、Aβおよびポリスチレンを含む複数の非関連エピトープに結合する低親和性多価抗体に起因する可能性が高い。
カオトロピック塩によるブランクプレート結合の減少
アビディティの差に基づいて、ブランクウェルに結合した抗体をAβに結合したものから分ける可能性を試験した。アビディティ測定を、濃度を次第に上げたカオトロピック塩のチオシアン酸アンモニウムを使用して行い、ELISAプレート上に形成された抗体/抗原複合体を解離した。ウェルがブランクであるか、または球状AβオリゴマーでコーティングされているELISAプレートへのIVIGの結合を比較した。図4は、IVIG中の抗球状Aβオリゴマー抗体のアビディティは、ブランクプレートへのIVIGの結合に見られたものよりも明らかに大きかったことを示す典型的な実験を示す。ブランクプレート上では、リン酸緩衝液の対照条件に対して認められた結合の50%は、プレートがおよそ2.5Mのチオシアン酸アンモニウム中でインキュベートされる際に生じる。Aβオリゴマー含有プレートについては、50%結合への減少は、本研究に使用される最高濃度の4M チオシアン酸アンモニウムにおいてさえも達成されない。架橋および非架橋方法(Barghorn et al.,J Neurochem.,95:834−847(2005)、Kayed et al.,Molecular Neurodegeneration,2:18−29(2007))を含む、いくつかの独立した方法によって調製されたAβオリゴマーは、本質的に同一の結果を有した。
抗体結合に続く、チオシアン酸アンモニウム中でのインキュベーションが、高親和性抗Aβオリゴマー抗体と、より無差別に空のELISAウェルに結合するものとの区別を可能にすることを確認するために、若年対照2例および高齢対照2例の4個人からの血漿中IgGおよび精製IgGのアビディティを測定した(図5)。これらの個人からの精製IgGは、1mg/mLにおいて、空のウェルへの一貫した結合を示した。ブランクプレート結合に対して観察された吸光度は、実施例10におけるIVIGで得られた結果と同様に、4M チオシアネート処理後に約80%減少した。対照的に、Aβ42オリゴマーを含有するウェルへの相対的な結合は、約20%のみの減少であった。Aβオリゴマーと同様に、抗Aβモノマーおよび抗Aβ原線維の抗体の両方は、チオシアン酸アンモニウム解離に対して、ブランクプレートへの抗体結合よりも抵抗性がある。したがって、空のELISAウェルに結合する能力を有する抗体からの最小限の干渉で、精製ヒト抗体の混合物における抗Aβ抗体の測定を可能にする一連の条件を定義することが可能であると思われる。
酸および不安定化剤による多価抗体の発生
血清の弱酸性条件への暴露でさえも、多価抗体の力価を増加させることが示されており、その多数が自己抗原を標的にする(Bouvet et al.,J Autoimmun.,16:163−172 (2001)、Djoumerska et al.,Scand J of Immunol.,61:357-363(2005))。弱酸性化による多価性の発生もまた、pH変化が、抗原結合部位の部分変性を通じて多価結合の増加につながった、特異的モノクローナル抗体に関して報告されている。(Dimitrov et al.,Molec Immunol,44:1854−1863(2007))。いくつかのロットのIVIG(Gammaguard,Baxter)を試験し、pH3.0での酸性化が、3.7倍〜9.8倍の範囲でAβモノマー力価の増加をもたらすことを見出した。力価におけるこの増加は、中性pHおよび室温での24時間のインキュベーション期間により逆転した。pH2.0でのインキュベーションによる多価性の発生は、完全に可逆ではなかった。これは、非常に低いpHでのインキュベーションが抗体の構造的完全性を不可逆的に変化させ、それでもなお様々な抗原に非特異的に結合する能力を保持することを示唆する。
非変性IgG精製の効果
次に、チオフィリック吸着剤クロマトグラフィーによるIgGの単離が、酸溶出と関連する多価性の発生を回避するかどうかを調査した。チオフィリック吸着剤クロマトグラフは、スルホン基がチオエーテル基に近接する部分へのIgGの結合を十分に引き出す。図6に示されるように、チオフィリッククロマトグラフィーによって調製されたIgGは、血漿中に存在する非免疫グロブリンタンパク質の大半を除去する。チオフィリック吸着剤は、Gタンパク質クロマトグラフィーよりも、他の血漿成分の除去への有効性が幾分低いが、免疫グロブリンを多価性の発生を助長しうる変性条件にさらすことはない。この断定と一致して、チオフィリック吸着剤を使用するIVIGからのIgGの再精製は、Aβプレートまたはブランクプレートのいずれかへの抗体結合の力価を変化させない。
血漿抗アミロイド活性の測定
ヒト血漿中で測定される抗アミロイド活性が、全て天然の多価性または誘発された多価性の結果であったかどうかを判定するために、親和性クロマトグラフィーを使用して、抗Aβモノマー抗体、Aβオリゴマー抗体、およびAβ原線維抗体を含む、様々な特異性のヒト抗アミロイド抗体をIVIGから分離した。抗Aβモノマー抗体の場合、2種類の抗体を単離した。抗体の第1の組は、アミノ末端で親和性樹脂に結合するAβモノマーに結合し(抗AβN)、第2のものは、カルボキシル末端で結合されるAβモノマーに結合した(抗AβC)。
*原線維状Aβ42親和性樹脂上の通過により精製
**原線維状Aβ42親和性樹脂上での精製、続いて原線維状IAPP樹脂上での再精製により精製
[本発明1001]
生物学的試料中に存在する高アビディティ抗アミロイド抗体を検出するための方法であって、
(a)前記生物学的試料を適切な条件下で複数のアミロイド抗原と接触させて、
(i)アミロイド抗原および非特異的抗体を含む複合体、ならびに
(ii)アミロイド抗原および高アビディティ抗アミロイド抗体を含む複合体、
を形成するステップと、
(b)ステップ(a)で形成された前記アミロイド抗原複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄して、アミロイド抗原および非特異的抗体を含む少なくとも1つの複合体を解離するステップと、
(c)残留複合体の存在またはレベルを検出するステップと、
を含む、前記方法。
[本発明1002]
前記生物学的試料がチオフィリック(thiophilic)クロマトグラフィーで調製された免疫グロブリン組成物である、本発明1001の方法。
[本発明1003]
前記非特異的抗体が低アビディティ抗アミロイド抗体である、本発明1001または本発明1002の方法。
[本発明1004]
生物学的試料中に存在する高アビディティ抗アミロイド抗体を検出するための方法であって、
(a)前記生物学的試料をチオフィリック樹脂と接触させて、前記抗アミロイド抗体に結合させるステップと、
(b)前記抗体を非変性pHで前記チオフィリック樹脂から溶出して、溶出物を形成するステップと、
(c)前記溶出物をアミロイド抗原と接触させて、前記アミロイド抗原および前記抗アミロイド抗体を含む複合体を形成するステップと、
(d)前記複合体の存在またはレベルを検出するステップと、
を含む、前記方法。
[本発明1005]
前記ステップ(c)で形成された前記複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄するステップをさらに含む、本発明1004の方法。
[本発明1006]
アミロイド関連疾患または状態の治療の候補者である対象を特定するための方法であって、
(a)前記対象に由来する生物学的試料を適切な条件下で複数のアミロイド抗原と接触させて、
(i)アミロイド抗原および非特異的抗体を含む複合体、ならびに
(ii)アミロイド抗原および高アビディティ抗アミロイド抗体を含む複合体、
を形成するステップと、
(b)ステップ(a)で形成された前記アミロイド抗原複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄して、アミロイド抗原および低アビディティ抗アミロイド抗体を含む少なくとも1つの複合体を解離するステップと、
(c)残留複合体のレベルを検出するステップと、
(d)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記対象が免疫グロブリン製剤の投与を含む治療から利益を得るかどうかを決定するステップと、
を含む、前記方法。
[本発明1007]
前記治療が免疫グロブリン製剤の投与を含む、本発明1006の方法。
[本発明1008]
前記治療が身体的活動または社会的活動を含む、本発明1006または本発明1007の方法。
[本発明1009]
前記治療がコリンエステラーゼ阻害剤、グルタミン酸部分拮抗薬、または精神医学的薬物を含む、本発明1006〜1008のいずれかの方法。
[本発明1010]
前記生物学的試料がチオフィリッククロマトグラフィーで調製された免疫グロブリン組成物である、本発明1006〜1009のいずれかの方法。
[本発明1011]
前記非特異的抗体が低アビディティ抗アミロイド抗体である、本発明1006〜1010のいずれかの方法。
[本発明1012]
前記高アビディティ抗アミロイド抗体が、βアミロイド(Aβ;Aベータ)、膵島アミロイドポリペプチド(IAPP;アミリン)、α−シヌクレイン(SNCA)、主要プリオンタンパク質(PrP)、ハンチンチン(HD)、カルシトニン(CCP)、心房性ナトリウム利尿因子(ANF)、アポリポタンパク質AI(アポ−AI)、血清アミロイドAタンパク質(SAA)、メディンアミロイド(乳脂肪球−EGF因子8タンパク質;MFG−E8の断片)、プロラクチン(PRL)、トランスサイレチン(ATTR)、リゾチームC(1,4−β−N−アセチルムラミダーゼC)、β2ミクログロブリン(β2M)、ゲルゾリン(AGEL)、形質転換成長因子β誘導タンパク質ig−h3(βig−h3;ケラトエピセリン)、シスタチンC(CST3)、免疫グロブリン軽鎖(AL)、およびポリグルタミン反復を有するアミロイドタンパク質からなる群から選択されるアミロイドタンパク質に特異的である、本発明1001〜1011のいずれかの方法。
[本発明1013]
前記抗アミロイド抗体がアミロイドタンパク質モノマーを特異的に認識する、本発明1001〜1012のいずれかの方法。
[本発明1014]
前記抗アミロイド抗体がアミロイドタンパク質オリゴマーを特異的に認識する、本発明1001〜1012のいずれかの方法。
[本発明1015]
前記抗アミロイド抗体がアミロイドタンパク質原線維を特異的に認識する、本発明1001〜1012のいずれかの方法。
[本発明1016]
前記抗アミロイド抗体が抗βアミロイド抗体である、本発明1001〜1015のいずれかの方法。
[本発明1017]
免疫グロブリン製剤の投与を含む治療の候補者である対象を特定するための方法であって、
(a)前記生物学的試料をチオフィリック樹脂と接触させて、該試料中に存在する抗アミロイド抗体に結合させるステップと、
(b)前記抗体を非変性pHで前記チオフィリック樹脂から溶出して、溶出物を形成するステップと、
(c)前記溶出物をアミロイド抗原と接触させて、前記アミロイド抗原および前記抗アミロイド抗体を含む複合体を形成するステップと、
(d)前記複合体の存在またはレベルを検出するステップと、
(e)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記対象が免疫グロブリン製剤の投与を含む治療から利益を得るかどうかを決定するステップと、
を含む、前記方法。
[本発明1018]
前記治療が免疫グロブリン製剤の投与を含む、本発明1017の方法。
[本発明1019]
前記治療が身体的活動または社会的活動を含む、本発明1017または本発明1018の方法。
[本発明1020]
前記治療がコリンエステラーゼ阻害剤、グルタミン酸部分拮抗薬、または精神医学的薬物を含む、本発明1017〜1019のいずれかの方法。
[本発明1021]
前記ステップ(c)で形成された前記複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄するステップをさらに含む、本発明1017〜1020のいずれかの方法。
[本発明1022]
前記対象がアミロイドタンパク質に関連する疾患を有すると診断されている、本発明1006〜1021のいずれかの方法。
[本発明1023]
前記疾患が、アルツハイマー病、2型糖尿病、パーキンソン病、伝染性海綿状脳症、ハンチントン病、甲状腺髄様癌、心不整脈、アテローム性動脈硬化症、関節リウマチ、大動脈中膜アミロイド、プロラクチノーマ、家族性アミロイド多発ニューロパチー、遺伝性非ニューロパチー性全身性アミロイドーシス、透析関連アミロイドーシス、フィンランド型アミロイドーシス、格子状角膜ジストロフィー、脳アミロイド血管症、脳アミロイド血管症(アイスランド型)、および全身性ALアミロイドーシスからなる群から選択される、本発明1022の方法。
[本発明1024]
前記疾患がアルツハイマー病である、本発明1023の方法。
[本発明1025]
対象においてアミロイドタンパク質に関連する疾患を診断するための方法であって、
(a)前記対象に由来する生物学的試料を適切な条件下で複数のアミロイド抗原と接触させて、
(i)アミロイド抗原および非特異的抗体を含む複合体、ならびに
(ii)アミロイド抗原および高アビディティ抗アミロイド抗体を含む複合体、
を形成するステップと、
(b)ステップ(a)で形成された前記アミロイド抗原複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄して、アミロイド抗原および非特異的抗体を含む少なくとも1つの複合体を解離するステップと、
(c)残留複合体のレベルを検出するステップと、
(d)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記対象を診断するステップと、
を含む、前記方法。
[本発明1026]
前記生物学的試料がチオフィリッククロマトグラフィーで調製された免疫グロブリン組成物である、本発明1025の方法。
[本発明1027]
前記非特異的抗体が低アビディティ抗アミロイド抗体である、本発明1025または本発明1026の方法。
[本発明1028]
対象においてアミロイドタンパク質に関連する疾患を診断するための方法であって、
(a)前記生物学的試料をチオフィリック樹脂と接触させて、抗アミロイド抗体に結合させるステップと、
(b)前記抗体を非変性pHで前記チオフィリック樹脂から溶出して、溶出物を形成するステップと、
(c)前記溶出物をアミロイド抗原と接触させて、前記アミロイド抗原および前記抗アミロイド抗体を含む複合体を形成するステップと、
(d)前記複合体の存在またはレベルを検出するステップと、
(e)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記対象を診断するステップと、
を含む、前記方法。
[本発明1029]
前記ステップ(c)で形成された前記複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄するステップをさらに含む、本発明1028の方法。
[本発明1030]
前記疾患がアルツハイマー病、2型糖尿病、パーキンソン病、伝染性海綿状脳症、ハンチントン病、甲状腺髄様癌、心不整脈、アテローム性動脈硬化症、関節リウマチ、大動脈中膜アミロイド、プロラクチノーマ、家族性アミロイド多発ニューロパチー、遺伝性非ニューロパチー性全身性アミロイドーシス、透析関連アミロイドーシス、フィンランド型アミロイドーシス、格子状角膜ジストロフィー、脳アミロイド血管症、脳アミロイド血管症(アイスランド型)、および全身性ALアミロイドーシスからなる群から選択される、本発明1025〜1032のいずれかの方法。
[本発明1031]
前記疾患がアルツハイマー病である、本発明1030の方法。
[本発明1032]
治療有効量の免疫グロブリン製剤を前記対象に投与することをさらに含む、本発明1006〜1031のいずれかの方法。
[本発明1033]
前記治療が身体的活動または社会的活動を含む、本発明1006〜1032のいずれかの方法。
[本発明1034]
前記治療がコリンエステラーゼ阻害剤、グルタミン酸部分拮抗薬、または精神医学的薬物を含む、本発明1006〜1033のいずれかの方法。
[本発明1035]
対象におけるアミロイドタンパク質に関連する疾患の進行の予後を提供するための方法であって、
(a)前記対象に由来する生物学的試料を適切な条件下で複数のアミロイド抗原と接触させて、
(i)アミロイド抗原および非特異的抗体を含む複合体、ならびに
(ii)アミロイド抗原および高アビディティ抗アミロイド抗体を含む複合体、
を形成するステップと、
(b)ステップ(a)で形成された前記アミロイド抗原複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄して、アミロイド抗原および非特異的抗体を含む少なくとも1つの複合体を解離するステップと、
(c)残留複合体のレベルを検出するステップと、
(d)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記疾患の進行の予後を提供するステップと、
を含む、前記方法。
[本発明1036]
前記生物学的試料がチオフィリッククロマトグラフィーで調製された免疫グロブリン組成物である、本発明1035の方法。
[本発明1037]
前記非特異的抗体が低アビディティ抗アミロイド抗体である、本発明1035または本発明1036の方法。
[本発明1038]
対象におけるアミロイドタンパク質に関連する疾患の進行の予後を提供するための方法であって、
(a)前記生物学的試料をチオフィリック樹脂と接触させて、抗アミロイド抗体に結合させるステップと、
(b)前記抗体を非変性pHで前記チオフィリック樹脂から溶出して、溶出物を形成するステップと、
(c)前記溶出物をアミロイド抗原と接触させて、前記アミロイド抗原および前記抗アミロイド抗体を含む複合体を形成するステップと、
(d)前記複合体の存在またはレベルを検出するステップと、
(e)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記疾患の進行の予後を提供するステップと、
を含む、前記方法。
[本発明1039]
前記ステップ(c)で形成された前記複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄するステップをさらに含む、本発明1038の方法。
[本発明1040]
アミロイドタンパク質に関連する疾患の治療の予後を提供するための方法であって、
(a)前記対象に由来する生物学的試料を適切な条件下で複数のアミロイド抗原と接触させて、
(i)アミロイド抗原および低親和性抗体または非特異的抗体を含む複合体、ならびに
(ii)アミロイド抗原および高アビディティ抗アミロイド抗体を含む複合体、
を形成するステップと、
(b)ステップ(a)で形成された前記アミロイド抗原複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄して、アミロイド抗原および低親和性抗体または非特異的抗体を含む少なくとも1つの複合体を解離するステップと、
(c)残留複合体のレベルを検出するステップと、
(d)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記疾患の治療の予後を提供するステップと、
を含む、前記方法。
[本発明1041]
前記生物学的試料が全血漿またはその画分である、本発明1040の方法。
[本発明1042]
前記生物学的試料がチオフィリッククロマトグラフィーで調製された免疫グロブリン組成物である、本発明1040または本発明1041の方法。
[本発明1043]
前記非特異的抗体が低アビディティ抗アミロイド抗体である、本発明1040〜1042のいずれかの方法。
[本発明1044]
アミロイドタンパク質に関連する疾患の治療の予後を提供するための方法であって、
(a)前記生物学的試料をチオフィリック樹脂と接触させて、抗アミロイド抗体に結合させるステップと、
(b)前記抗体を非変性pHで前記チオフィリック樹脂から溶出して、溶出物を形成するステップと、
(c)前記溶出物をアミロイド抗原と接触させて、前記アミロイド抗原および前記抗アミロイド抗体を含む複合体を形成するステップと、
(d)前記複合体の存在またはレベルを検出するステップと、
(e)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記疾患の治療の予後を提供するステップと、
を含む、前記方法。
[本発明1045]
前記ステップ(c)で形成された前記複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄するステップをさらに含む、本発明1044の方法。
[本発明1046]
前記生物学的試料が全血漿またはその画分である、本発明1044または本発明1045の方法。
[本発明1047]
高アビディティ抗アミロイド抗体を検出するための生物学的試料を調製するための方法であって、
(a)前記対象に由来する生物学的試料を適切な条件下で複数のアミロイド抗原と接触させて、
(i)アミロイド抗原および低親和性抗体または非特異的抗体を含む複合体、ならびに
(ii)アミロイド抗原および高アビディティ抗アミロイド抗体を含む複合体、
を形成するステップと、
(b)ステップ(a)で形成された前記アミロイド抗原複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄して、アミロイド抗原および低親和性抗体または非特異的抗体を含む少なくとも1つの複合体を解離するステップと、
を含む、前記方法。
[本発明1048]
前記生物学的試料がチオフィリッククロマトグラフィーで調製された免疫グロブリン組成物である、本発明1047の方法。
[本発明1049]
前記非特異的抗体が低アビディティ抗アミロイド抗体である、本発明1047または本発明1048の方法。
[本発明1050]
高アビディティ抗アミロイド抗体を検出するための生物学的試料を調製するための方法であって、
(a)前記生物学的試料をチオフィリック樹脂と接触させて、前記抗アミロイド抗体に結合させるステップと、
(b)前記抗体を非変性pHで前記チオフィリック樹脂から溶出して、溶出物を形成するステップと、
(c)前記溶出物をアミロイド抗原と接触させて、前記アミロイド抗原および前記抗アミロイド抗体を含む複合体を形成するステップと、
を含む、前記方法。
[本発明1051]
前記ステップ(c)で形成された前記複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄するステップをさらに含む、本発明1050の方法。
[本発明1052]
カオトロピック剤およびチオフィリッククロマトグラフィー吸着剤からなる群から選択される少なくとも1つを含む、生物学的試料中に存在する高アビディティ抗アミロイド抗体を検出するためのキット。
[本発明1053]
カオトロピック剤およびチオフィリッククロマトグラフィー吸着剤の双方を含む、本発明1052のキット。
[本発明1054]
生物学的試料中に存在する高アビディティ抗アミロイド抗体を検出するためのキットを製造するための、カオトロピック剤および/またはチオフィリッククロマトグラフィー吸着剤の使用。
[本発明1055]
生物学的試料中に存在する高アビディティ抗アミロイド抗体を検出するためのキットを製造するための、カオトロピック剤およびチオフィリッククロマトグラフィー吸着剤の組み合わせの使用。
[本発明1056]
前記抗アミロイド抗体が、βアミロイド(Aβ;Aベータ)、膵島アミロイドポリペプチド(IAPP;アミリン)、α−シヌクレイン(SNCA)、主要プリオンタンパク質(PrP)、ハンチンチン(HD)、カルシトニン(CCP)、心房性ナトリウム利尿因子(ANF)、アポリポタンパク質AI(アポ−AI)、血清アミロイドAタンパク質(SAA)、メディンアミロイド(乳脂肪球−EGF因子8タンパク質;MFG−E8の断片)、プロラクチン(PRL)、トランスサイレチン(ATTR)、リゾチームC(1,4−β−N−アセチルムラミダーゼC)、β2ミクログロブリン(β2M)、ゲルゾリン(AGEL)、形質転換成長因子β誘導タンパク質ig−h3(βig−h3;ケラトエピセリン)、シスタチンC(CST3)、免疫グロブリン軽鎖(AL)、およびポリグルタミン反復を有するアミロイドタンパク質からなる群から選択されるアミロイドタンパク質に特異的である、本発明1017〜1055のいずれかの方法。
[本発明1057]
前記抗アミロイド抗体がアミロイドタンパク質モノマーを特異的に認識する、本発明1001〜1056のいずれかの方法。
[本発明1058]
前記抗アミロイド抗体がアミロイドタンパク質オリゴマーを特異的に認識する、本発明1001〜1056のいずれかの方法。
[本発明1059]
前記抗アミロイド抗体がアミロイドタンパク質原線維を特異的に認識する、本発明1001〜1056のいずれかの方法。
[本発明1060]
前記抗アミロイド抗体が抗βアミロイド抗体である、本発明1001〜1059のいずれかの方法。
[本発明1061]
前記生物学的試料がヒト由来である、本発明1001〜1060のいずれかの方法。
[本発明1062]
前記カオトロピック剤がチオシアネート塩である、本発明1001〜1061のいずれかの方法。
Claims (62)
- 生物学的試料中に存在する高アビディティ抗アミロイド抗体を検出するための方法であって、
(a)前記生物学的試料を適切な条件下で複数のアミロイド抗原と接触させて、
(i)アミロイド抗原および非特異的抗体を含む複合体、ならびに
(ii)アミロイド抗原および高アビディティ抗アミロイド抗体を含む複合体、
を形成するステップと、
(b)ステップ(a)で形成された前記アミロイド抗原複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄して、アミロイド抗原および非特異的抗体を含む少なくとも1つの複合体を解離するステップと、
(c)残留複合体の存在またはレベルを検出するステップと、
を含む、前記方法。 - 前記生物学的試料がチオフィリック(thiophilic)クロマトグラフィーで調製された免疫グロブリン組成物である、請求項1に記載の方法。
- 前記非特異的抗体が低アビディティ抗アミロイド抗体である、請求項1または請求項2に記載の方法。
- 生物学的試料中に存在する高アビディティ抗アミロイド抗体を検出するための方法であって、
(a)前記生物学的試料をチオフィリック樹脂と接触させて、前記抗アミロイド抗体に結合させるステップと、
(b)前記抗体を非変性pHで前記チオフィリック樹脂から溶出して、溶出物を形成するステップと、
(c)前記溶出物をアミロイド抗原と接触させて、前記アミロイド抗原および前記抗アミロイド抗体を含む複合体を形成するステップと、
(d)前記複合体の存在またはレベルを検出するステップと、
を含む、前記方法。 - 前記ステップ(c)で形成された前記複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄するステップをさらに含む、請求項4に記載の方法。
- アミロイド関連疾患または状態の治療の候補者である対象を特定するための方法であって、
(a)前記対象に由来する生物学的試料を適切な条件下で複数のアミロイド抗原と接触させて、
(i)アミロイド抗原および非特異的抗体を含む複合体、ならびに
(ii)アミロイド抗原および高アビディティ抗アミロイド抗体を含む複合体、
を形成するステップと、
(b)ステップ(a)で形成された前記アミロイド抗原複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄して、アミロイド抗原および低アビディティ抗アミロイド抗体を含む少なくとも1つの複合体を解離するステップと、
(c)残留複合体のレベルを検出するステップと、
(d)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記対象が免疫グロブリン製剤の投与を含む治療から利益を得るかどうかを決定するステップと、
を含む、前記方法。 - 前記治療が免疫グロブリン製剤の投与を含む、請求項6に記載の方法。
- 前記治療が身体的活動または社会的活動を含む、請求項6または請求項7に記載の方法。
- 前記治療がコリンエステラーゼ阻害剤、グルタミン酸部分拮抗薬、または精神医学的薬物を含む、請求項6〜8のいずれか1項に記載の方法。
- 前記生物学的試料がチオフィリッククロマトグラフィーで調製された免疫グロブリン組成物である、請求項6〜9のいずれか1項に記載の方法。
- 前記非特異的抗体が低アビディティ抗アミロイド抗体である、請求項6〜10のいずれか1項に記載の方法。
- 前記高アビディティ抗アミロイド抗体が、βアミロイド(Aβ;Aベータ)、膵島アミロイドポリペプチド(IAPP;アミリン)、α−シヌクレイン(SNCA)、主要プリオンタンパク質(PrP)、ハンチンチン(HD)、カルシトニン(CCP)、心房性ナトリウム利尿因子(ANF)、アポリポタンパク質AI(アポ−AI)、血清アミロイドAタンパク質(SAA)、メディンアミロイド(乳脂肪球−EGF因子8タンパク質;MFG−E8の断片)、プロラクチン(PRL)、トランスサイレチン(ATTR)、リゾチームC(1,4−β−N−アセチルムラミダーゼC)、β2ミクログロブリン(β2M)、ゲルゾリン(AGEL)、形質転換成長因子β誘導タンパク質ig−h3(βig−h3;ケラトエピセリン)、シスタチンC(CST3)、免疫グロブリン軽鎖(AL)、およびポリグルタミン反復を有するアミロイドタンパク質からなる群から選択されるアミロイドタンパク質に特異的である、請求項1〜11のいずれか1項に記載の方法。
- 前記抗アミロイド抗体がアミロイドタンパク質モノマーを特異的に認識する、請求項1〜12のいずれか1項に記載の方法。
- 前記抗アミロイド抗体がアミロイドタンパク質オリゴマーを特異的に認識する、請求項1〜12のいずれか1項に記載の方法。
- 前記抗アミロイド抗体がアミロイドタンパク質原線維を特異的に認識する、請求項1〜12のいずれか1項に記載の方法。
- 前記抗アミロイド抗体が抗βアミロイド抗体である、請求項1〜15のいずれか1項に記載の方法。
- 免疫グロブリン製剤の投与を含む治療の候補者である対象を特定するための方法であって、
(a)前記生物学的試料をチオフィリック樹脂と接触させて、該試料中に存在する抗アミロイド抗体に結合させるステップと、
(b)前記抗体を非変性pHで前記チオフィリック樹脂から溶出して、溶出物を形成するステップと、
(c)前記溶出物をアミロイド抗原と接触させて、前記アミロイド抗原および前記抗アミロイド抗体を含む複合体を形成するステップと、
(d)前記複合体の存在またはレベルを検出するステップと、
(e)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記対象が免疫グロブリン製剤の投与を含む治療から利益を得るかどうかを決定するステップと、
を含む、前記方法。 - 前記治療が免疫グロブリン製剤の投与を含む、請求項17に記載の方法。
- 前記治療が身体的活動または社会的活動を含む、請求項17または請求項18に記載の方法。
- 前記治療がコリンエステラーゼ阻害剤、グルタミン酸部分拮抗薬、または精神医学的薬物を含む、請求項17〜19のいずれか1項に記載の方法。
- 前記ステップ(c)で形成された前記複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄するステップをさらに含む、請求項17〜20のいずれか1項に記載の方法。
- 前記対象がアミロイドタンパク質に関連する疾患を有すると診断されている、請求項6〜21のいずれか1項に記載の方法。
- 前記疾患が、アルツハイマー病、2型糖尿病、パーキンソン病、伝染性海綿状脳症、ハンチントン病、甲状腺髄様癌、心不整脈、アテローム性動脈硬化症、関節リウマチ、大動脈中膜アミロイド、プロラクチノーマ、家族性アミロイド多発ニューロパチー、遺伝性非ニューロパチー性全身性アミロイドーシス、透析関連アミロイドーシス、フィンランド型アミロイドーシス、格子状角膜ジストロフィー、脳アミロイド血管症、脳アミロイド血管症(アイスランド型)、および全身性ALアミロイドーシスからなる群から選択される、請求項22に記載の方法。
- 前記疾患がアルツハイマー病である、請求項23に記載の方法。
- 対象においてアミロイドタンパク質に関連する疾患を診断するための方法であって、
(a)前記対象に由来する生物学的試料を適切な条件下で複数のアミロイド抗原と接触させて、
(i)アミロイド抗原および非特異的抗体を含む複合体、ならびに
(ii)アミロイド抗原および高アビディティ抗アミロイド抗体を含む複合体、
を形成するステップと、
(b)ステップ(a)で形成された前記アミロイド抗原複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄して、アミロイド抗原および非特異的抗体を含む少なくとも1つの複合体を解離するステップと、
(c)残留複合体のレベルを検出するステップと、
(d)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記対象を診断するステップと、
を含む、前記方法。 - 前記生物学的試料がチオフィリッククロマトグラフィーで調製された免疫グロブリン組成物である、請求項25に記載の方法。
- 前記非特異的抗体が低アビディティ抗アミロイド抗体である、請求項25または請求項26に記載の方法。
- 対象においてアミロイドタンパク質に関連する疾患を診断するための方法であって、
(a)前記生物学的試料をチオフィリック樹脂と接触させて、抗アミロイド抗体に結合させるステップと、
(b)前記抗体を非変性pHで前記チオフィリック樹脂から溶出して、溶出物を形成するステップと、
(c)前記溶出物をアミロイド抗原と接触させて、前記アミロイド抗原および前記抗アミロイド抗体を含む複合体を形成するステップと、
(d)前記複合体の存在またはレベルを検出するステップと、
(e)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記対象を診断するステップと、
を含む、前記方法。 - 前記ステップ(c)で形成された前記複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄するステップをさらに含む、請求項28に記載の方法。
- 前記疾患がアルツハイマー病、2型糖尿病、パーキンソン病、伝染性海綿状脳症、ハンチントン病、甲状腺髄様癌、心不整脈、アテローム性動脈硬化症、関節リウマチ、大動脈中膜アミロイド、プロラクチノーマ、家族性アミロイド多発ニューロパチー、遺伝性非ニューロパチー性全身性アミロイドーシス、透析関連アミロイドーシス、フィンランド型アミロイドーシス、格子状角膜ジストロフィー、脳アミロイド血管症、脳アミロイド血管症(アイスランド型)、および全身性ALアミロイドーシスからなる群から選択される、請求項25〜32のいずれか1項に記載の方法。
- 前記疾患がアルツハイマー病である、請求項30に記載の方法。
- 治療有効量の免疫グロブリン製剤を前記対象に投与することをさらに含む、請求項6〜31のいずれか1項に記載の方法。
- 前記治療が身体的活動または社会的活動を含む、請求項6〜32のいずれか1項に記載の方法。
- 前記治療がコリンエステラーゼ阻害剤、グルタミン酸部分拮抗薬、または精神医学的薬物を含む、請求項6〜33のいずれか1項に記載の方法。
- 対象におけるアミロイドタンパク質に関連する疾患の進行の予後を提供するための方法であって、
(a)前記対象に由来する生物学的試料を適切な条件下で複数のアミロイド抗原と接触させて、
(i)アミロイド抗原および非特異的抗体を含む複合体、ならびに
(ii)アミロイド抗原および高アビディティ抗アミロイド抗体を含む複合体、
を形成するステップと、
(b)ステップ(a)で形成された前記アミロイド抗原複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄して、アミロイド抗原および非特異的抗体を含む少なくとも1つの複合体を解離するステップと、
(c)残留複合体のレベルを検出するステップと、
(d)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記疾患の進行の予後を提供するステップと、
を含む、前記方法。 - 前記生物学的試料がチオフィリッククロマトグラフィーで調製された免疫グロブリン組成物である、請求項35に記載の方法。
- 前記非特異的抗体が低アビディティ抗アミロイド抗体である、請求項35または請求項36に記載の方法。
- 対象におけるアミロイドタンパク質に関連する疾患の進行の予後を提供するための方法であって、
(a)前記生物学的試料をチオフィリック樹脂と接触させて、抗アミロイド抗体に結合させるステップと、
(b)前記抗体を非変性pHで前記チオフィリック樹脂から溶出して、溶出物を形成するステップと、
(c)前記溶出物をアミロイド抗原と接触させて、前記アミロイド抗原および前記抗アミロイド抗体を含む複合体を形成するステップと、
(d)前記複合体の存在またはレベルを検出するステップと、
(e)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記疾患の進行の予後を提供するステップと、
を含む、前記方法。 - 前記ステップ(c)で形成された前記複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄するステップをさらに含む、請求項38に記載の方法。
- アミロイドタンパク質に関連する疾患の治療の予後を提供するための方法であって、
(a)前記対象に由来する生物学的試料を適切な条件下で複数のアミロイド抗原と接触させて、
(i)アミロイド抗原および低親和性抗体または非特異的抗体を含む複合体、ならびに
(ii)アミロイド抗原および高アビディティ抗アミロイド抗体を含む複合体、
を形成するステップと、
(b)ステップ(a)で形成された前記アミロイド抗原複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄して、アミロイド抗原および低親和性抗体または非特異的抗体を含む少なくとも1つの複合体を解離するステップと、
(c)残留複合体のレベルを検出するステップと、
(d)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記疾患の治療の予後を提供するステップと、
を含む、前記方法。 - 前記生物学的試料が全血漿またはその画分である、請求項40に記載の方法。
- 前記生物学的試料がチオフィリッククロマトグラフィーで調製された免疫グロブリン組成物である、請求項40または請求項41に記載の方法。
- 前記非特異的抗体が低アビディティ抗アミロイド抗体である、請求項40〜42のいずれか1項に記載の方法。
- アミロイドタンパク質に関連する疾患の治療の予後を提供するための方法であって、
(a)前記生物学的試料をチオフィリック樹脂と接触させて、抗アミロイド抗体に結合させるステップと、
(b)前記抗体を非変性pHで前記チオフィリック樹脂から溶出して、溶出物を形成するステップと、
(c)前記溶出物をアミロイド抗原と接触させて、前記アミロイド抗原および前記抗アミロイド抗体を含む複合体を形成するステップと、
(d)前記複合体の存在またはレベルを検出するステップと、
(e)前記抗アミロイド抗体のレベルと対照レベルとを比較することにより、前記疾患の治療の予後を提供するステップと、
を含む、前記方法。 - 前記ステップ(c)で形成された前記複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄するステップをさらに含む、請求項44に記載の方法。
- 前記生物学的試料が全血漿またはその画分である、請求項44または請求項45に記載の方法。
- 高アビディティ抗アミロイド抗体を検出するための生物学的試料を調製するための方法であって、
(a)前記対象に由来する生物学的試料を適切な条件下で複数のアミロイド抗原と接触させて、
(i)アミロイド抗原および低親和性抗体または非特異的抗体を含む複合体、ならびに
(ii)アミロイド抗原および高アビディティ抗アミロイド抗体を含む複合体、
を形成するステップと、
(b)ステップ(a)で形成された前記アミロイド抗原複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄して、アミロイド抗原および低親和性抗体または非特異的抗体を含む少なくとも1つの複合体を解離するステップと、
を含む、前記方法。 - 前記生物学的試料がチオフィリッククロマトグラフィーで調製された免疫グロブリン組成物である、請求項47に記載の方法。
- 前記非特異的抗体が低アビディティ抗アミロイド抗体である、請求項47または請求項48に記載の方法。
- 高アビディティ抗アミロイド抗体を検出するための生物学的試料を調製するための方法であって、
(a)前記生物学的試料をチオフィリック樹脂と接触させて、前記抗アミロイド抗体に結合させるステップと、
(b)前記抗体を非変性pHで前記チオフィリック樹脂から溶出して、溶出物を形成するステップと、
(c)前記溶出物をアミロイド抗原と接触させて、前記アミロイド抗原および前記抗アミロイド抗体を含む複合体を形成するステップと、
を含む、前記方法。 - 前記ステップ(c)で形成された前記複合体を、カオトロピック剤を含有する溶液で洗浄するステップをさらに含む、請求項50に記載の方法。
- カオトロピック剤およびチオフィリッククロマトグラフィー吸着剤からなる群から選択される少なくとも1つを含む、生物学的試料中に存在する高アビディティ抗アミロイド抗体を検出するためのキット。
- カオトロピック剤およびチオフィリッククロマトグラフィー吸着剤の双方を含む、請求項52に記載のキット。
- 生物学的試料中に存在する高アビディティ抗アミロイド抗体を検出するためのキットを製造するための、カオトロピック剤および/またはチオフィリッククロマトグラフィー吸着剤の使用。
- 生物学的試料中に存在する高アビディティ抗アミロイド抗体を検出するためのキットを製造するための、カオトロピック剤およびチオフィリッククロマトグラフィー吸着剤の組み合わせの使用。
- 前記抗アミロイド抗体が、βアミロイド(Aβ;Aベータ)、膵島アミロイドポリペプチド(IAPP;アミリン)、α−シヌクレイン(SNCA)、主要プリオンタンパク質(PrP)、ハンチンチン(HD)、カルシトニン(CCP)、心房性ナトリウム利尿因子(ANF)、アポリポタンパク質AI(アポ−AI)、血清アミロイドAタンパク質(SAA)、メディンアミロイド(乳脂肪球−EGF因子8タンパク質;MFG−E8の断片)、プロラクチン(PRL)、トランスサイレチン(ATTR)、リゾチームC(1,4−β−N−アセチルムラミダーゼC)、β2ミクログロブリン(β2M)、ゲルゾリン(AGEL)、形質転換成長因子β誘導タンパク質ig−h3(βig−h3;ケラトエピセリン)、シスタチンC(CST3)、免疫グロブリン軽鎖(AL)、およびポリグルタミン反復を有するアミロイドタンパク質からなる群から選択されるアミロイドタンパク質に特異的である、請求項17〜55のいずれか1項に記載の方法。
- 前記抗アミロイド抗体がアミロイドタンパク質モノマーを特異的に認識する、請求項1〜56のいずれか1項に記載の方法。
- 前記抗アミロイド抗体がアミロイドタンパク質オリゴマーを特異的に認識する、請求項1〜56のいずれか1項に記載の方法。
- 前記抗アミロイド抗体がアミロイドタンパク質原線維を特異的に認識する、請求項1〜56のいずれか1項に記載の方法。
- 前記抗アミロイド抗体が抗βアミロイド抗体である、請求項1〜59のいずれか1項に記載の方法。
- 前記生物学的試料がヒト由来である、請求項1〜60のいずれか1項に記載の方法。
- 前記カオトロピック剤がチオシアネート塩である、請求項1〜61のいずれか1項に記載の方法。
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