JP2006509502A - スワブとしてのゼラチンベースの材料 - Google Patents
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Abstract
Description
1.所望により支持体に取り付けてあってもよいゼラチンベースのスポンジと液体または固体培養培地を接触させる。1つのこのような態様では、適当に成型し棒の末端に位置させたゼラチンベースのスポンジを使用して表面からターゲットを採取し、続いて、これを培養培地と接触させて、該スポンジによって採取された微生物または哺乳動物細胞が培養培地に移行するようにする;
2.所望により寒天を含有していてもよい液体培養培地をゼラチンスポンジ中に注入し、そうすることにより、結合した微生物または哺乳動物細胞がゼラチンベースのスポンジ中でin situ増殖するための条件を提供する;
3.液体培養培地を入れた容器に該ゼラチンベースのスポンジを移行させ、そうすることにより、結合した微生物または哺乳動物細胞の全集団の、該培養培地中での培養を可能にすることを包含する常套的技術によって達成できる。
この方法の目的は、ゼラチンベースのスポンジの復元速度を測定することである。この方法は、該スポンジを浸漬し、次いでこれを絞ることを含む。スポンジの元の形状の外観を時間の関数として監視し、スポンジが元の形状に到達するまでにかかった時間を復元時間と呼ぶ。
1.吸収性ゼラチンベースのスポンジを約1×1cmの適当な断片に切り取り、室温でこれを完全に水に浸漬する。
2.試料を水から取り出し、これが平らになり気泡または水滴が押し出されなくなるまで水を絞る。
3.室温で水を満たしたビーカーに試料を入れ、この試料が元の大きさと形状を獲得するまでの時間(秒)を測定する。
4.実験を2回反復し、結果を3回の測定の平均値として記録する。
目的:酵素的手段によるゼラチンベースのスポンジの消化時間をペプシンを用いて測定。
本方法で使用する試薬:
Milli−Q−water
ペプシン(1:3000)
希塩酸、Ph.Eur.
ペプシン溶液1%:
ペプシン20.0gを精密に秤量し、2000mlメスフラスコを用いて希塩酸100mlに溶解する。水を加えて容量調節し、混合する。
金属フィラメントのバスケット、直径6cm、隙間1mm。
サーモスタット付き水浴
1.ペプシン溶液(1%)100mlを250mlビーカーに移す。マグネットを入れ、マグネチックスターラー上で37℃に予熱した水浴にこのビーカーを入れる。
2.吸収性ゼラチンスポンジを重量50±5mgの断片に切り取り、これを水の入ったビーカーに入れる。組織を損壊しないよう留意しながら、ゼラチンスポンジが完全に濡れ、空気が全て抜けるまで指で穏やかにこれを揉む。
3.水から挙げ、静かに絞って過剰の水を取り除く。
4.この湿らせた試料をビーカー中の金属フィラメントバスケットに入れ、タイマーを始動させる。
5.吸収性ゼラチンスポンジ断片が完全に溶解するまで監視し、タイマーを止め、消費時間を記録する。
6.実験を2回反復し(合計3回)、平均値を算出する。
1.ペプシン溶液(1%)100mlを250mlビーカーに移す。マグネットを入れ、マグネチックスターラー上で37℃に予熱した水浴にこのビーカーを入れる。
2.約50mg±5mgに秤量した試料を調製する。
3.この試料を直接ビーカーに入れる。
4.吸収性ゼラチン粉末が完全に溶解するまで監視し、タイマーを止め、消費時間を記録する。
5.実験を2回反復し(合計3回)、3回の測定の平均値を算出する。
目的:ゼラチンベースのスポンジが吸収できる水の量の測定。このスポンジは、重量対重量ベースで自身の重量の数倍の水を吸収すると予想される。
目的:ゼラチンスポンジの重量、高さ、長さ、幅、中心孔および直径を6個の試料について測定する;6個の試料それぞれについて一連の測定を実施する。6回の測定の平均値を記録する。密度を算出する。
吸収性ゼラチンスポンジフィルムの長さおよび幅の測定用に特別に製造された定規。
天秤、Mettler AK 160または同等の正確さの天秤。
目的:湿式サンプリングと乾式サンプリングの組み合わせを利用してステンレススチール表面をサンプリング。
ゼラチンベースのスポンジ
塩水−ペプトン溶液
アルカラーゼ溶液
接触面積24cm2のステンレススチール表面
ストマッカーバッグ
1.塩水−ペプトン溶液で湿らせたゼラチンスポンジスワブを用いて、ステンレススチールシートの24cm2の接触面積全体を水平に左から右へと拭き取る。
2.塩水−ペプトン溶液で湿らせたゼラチンスポンジスワブを用いて、ステンレススチールシートの24cm2の接触面積全体を垂直に上から下へと拭き取る。
3.乾燥ゼラチンスポンジスワブを用いて、ステンレススチールシートの24cm2の接触面積全体を水平に左から右へと拭き取る。
4.乾燥ゼラチンスポンジスワブを用いて、ステンレススチールシートの24cm2の接触面積全体を垂直に上から下へと拭き取る。
5.そのスワブをストマッカーバッグに入れる。
6.各ストマッカーバッグに消化液を加える。
7.ストマッカーバッグをストマッカーを用いてホモジナイズする。
8.ストマッカーバッグをスワブが溶解してしまうまで36℃でインキュベートする。
9.膜濾過を利用して胞子の抽出を行う。
緒言。 カウントタクトアプリケーターは、均等な圧力500±50gを10±1秒間適用することにより、表面の試験を標準化する(European Standard草案:CEN/TC243)。
− 基部。これはカウントタクトプレートを所定位置に保持しており、アッセイ済みバネの上に取り付けた押しボタン装置からなる;
− 基部に留められたユニット。これは電動タイマー、可聴音発信機および電池を含む。
1.基部の底に固定した2個の透明クリップの下の所定位置にカウントタクトプレートをスライドさせる(蓋を外側に向ける)。
2.カウントタクトプレートの蓋を取る。
3.試料を採取しようとする表面に対して所定位置に、動かさないようにアプリケーターを保持する(該表面が濡れていないことを確認する)。
4.該表面と10秒間接触させた後、可聴発信音が鳴る。該表面からアプリケーターを除去する。蓋をプレートに戻し、このプレートをアプリケーターから取り除く(残った寒天を除去するため、試料を採取した表面の清拭を忘れないようにされたい)。
5.プレートのインキュベーションについては、カウントタクトテクニカルシートおよびカウントタクト照射シートを参照されたい。
緒言。 このプロトコルは、70%イソプロパノールで清拭した磨きステンレススチールからの微生物サンプリングに利用する方法の確認を説明するものである。
選択性
ステンレススチール上での微生物活性のマーカーとしてバチルス属の胞子を使用する。この胞子は55℃でインキュベートするため、微生物による汚染がこの確認試験の結果に影響を及ぼすことはないであろうと考えられる。したがって、選択性はこの試験については無関係である。
2種類の濃度レベル(5および25個の胞子);1種類の表面材料;各表面材料で2回の拭き取り(分析のため1つの試料にプールする);合計6回の反復(n=6);
を使用し、同一分析者、同一装置および同一試薬を使用し同日内にスワブの反復抽出および分析により評価し、故に合計12の試料を分析する。
5ないし50胞子の範囲をカバーする三点検量線を用いて確立する。3種類の濃度レベル(5、25および50個の胞子)と各表面材料で2回の拭き取りを用いて試験を6回反復して行い、分析用にプールする。
同一試薬バッチ、同一装置、異なる分析者を用いて異なる日に反復分析することにより確立する。2種類の濃度レベル、5および25個の胞子、1種類の表面材料および2回の拭き取り(分析のためプールする)、および3日間、3名の分析者により6回の反復で明示する。故に、合計108の試料である。
インキュベーター、オートクレーブ、滅菌Drigalski spate、滅菌手袋、ゼラチンスワブ、攪拌機、膜濾過装置、コロニー計数器、滅菌ストマッカーバッグ。
Bacillus stearothermophilus胞子の40%エタノール懸濁液(1*106胞子/0.1mLエタノール)。表面材料(磨きステンレススチール)の被験試料。拭き取り領域のための鋳型(6×4cm=24cm2)。
滅菌フィルター
滅菌50mL注射筒
使い捨て滅菌ピペットチップ
TSA、Tweenおよびレシチンを含む接触プレートを有するカウントタクトアプリケーター
塩水−ペプトン溶液
96%エタノール
Elga水
アルカラーゼ溶液
正の対照
クラスA:正の対照として5胞子/313μLを含む胞子懸濁液を使用する。0,100mlの胞子懸濁液(1,6*106胞子/0,1ml)を40%エタノール9,90ml中に3回希釈して1,6胞子/0,1mlの最終懸濁液を得るが、これは、各接触シート(24cm2)に対して5胞子/1,6胞子=3,125×0,1ml=0,3125mlの胞子懸濁液に相当する。
負の対照として滅菌エタノールを使用する。
直線性
a)5個の胞子を含む、b)25個の胞子を含む、そしてc)50個の胞子を含む胞子懸濁液を直線性の検討に使用する。
スワブ法を用いるサンプリング。
− 各ステンレススチールシートに胞子懸濁液を適用する。
− ステンレススチールシート上の胞子懸濁液からエタノールを蒸発させる。
− アルカラーゼ溶液1,0mlを塩水ペプトン溶液90mlに希釈する。
− ストマッカーバッグをぴったり合ったストマッカーバッグクリップに付ける。
− 塩水−ペプトン溶液で湿らせたスワブを用いて、ステンレススチールシートの24cm2の接触面積全体を水平に左から右へと拭き取る。
− 各ストマッカーバッグに希釈したアルカラーゼ溶液を加える。
− ストマッカーを用いてストマッカーバッグをホモジナイズする。
− ストマッカーバッグをスワブが溶解してしまうまで36℃でインキュベートする(少なくとも1時間、且つ最長2,5時間)。
カウントタクトアプリケーターを用いるサンプリング。
− 手袋を使用する。
− 各ステンレススチールシートに胞子懸濁液を適用する。
− ステンレススチールシート上の胞子懸濁液からエタノールを蒸発させる。
− ステンレススチールプレートにカウントタクトアプリケーターを使用する。
このステンレススチールシートには負の対照をも加える。正の対照試料はステンレススチールシートに加えないが、カウントタクト適用プレートには直接加える。
試料は全て55℃±2℃で少なくとも1日ないし最長7日間インキュベートする。
表面材料および鋳型の清拭。
表面材料および鋳型は各々の使用および再使用の後に清拭せねばならない。
− エタノールに浸した実験用紙で表面を拭う事によりすすぐ。
− 121℃のオートクレーブで20分以上滅菌する。
回収%=試料(CFU)* 100/添加した胞子
[式中、
試料=正確さ試験溶液由来の胞子の数、であり、
添加した=正確さ対照試料中の胞子の数、
である]
回収率/精密度/正確さ
回収率/精密度および正確さをステンレススチールを用いて調査し、上に概説した方法に従って実施する。この試験を、被験試料からの微生物回収率の算出のために使用する。試薬のバッチおよび装置は、これらのパラメータの変更が最終試験結果に殆どまたは全く影響を及ぼさないと予想できることから、変更しない。
一人の分析者は、各々約5および25個のバチルス胞子で6枚のステンレススチールプレートを汚染させる。
回収率は正の対照に比して20%高くならねばならない。
最低回収率には限界を設ける(与えられた任意の胞子濃度における最低平均回収率 − 5ないし25胞子/24cm2)。
− 反復分析に関する平均および%RSDを算出する。
− %RSDは10%未満でなければならない。
直線性
方法
上記定義による胞子懸濁液a)、b)およびc)を用いて6個の同一試料を作製する。この試料を、これらの胞子レベルについての回収効率の樹立に使用し、そしてその後の線形回帰に使用する。
− 各胞子レベルについて回収率を算出し、5ないし50胞子からの回帰を求める。
− 標準曲線の回帰パラメータを算出し、各曲線の傾き、切片および相関係数を記録する。
− 相関係数はr2>0,940の判定基準に合致せねばならない。
方法
3名の異なる分析者を利用し、後の3日間に関する上記の精密度と同様とする。
評価
− 胞子の回収率を算出する。
− 各日についての反復分析に関する平均および%RSDを算出する。
− 全ての日(中間精密度測定日1、2、および3日目)を使用して、平均および%RSDを算出する。
− %RSDは15%未満でなければならない。
目的
実施例7の確認プロトコルを参考にして、70%イソプロパノールで清拭した磨きステンレススチールからの微生物サンプリングに使用した方法を確認する。
記載のサンプリング方法を利用して、表面からの微生物サンプリングに利用する方法の精密度、的確性および直線性を明確にするために、そして、本試験で使用する種類の材料からの微生物回収効率を推定するために、確認試験を実施する。この試験では、70%イソプロパノールで清拭した磨きステンレススチールからサンプリングを行った。サンプリングの根本理由は、これが装置産生に用いられる一般的材料である事である。試験方法は、スワブ法によるサンプリングおよびカウントタクト法によるサンプリングであった。このサンプリングは、クラス10000産生装置のUSP、NF指針、およびクラス10000産生装置の微生物純度のためのEU−GMP指針と等しい細菌胞子の適用数を有する表面について実施した。
回収率
スワブ法を用いた回収率の算出(表1)は、5個の胞子を適用した時の分析者間の変動(40%ないし175%)および25個の胞子を適用した時の変動(73%ないし105%)を示した。スワブ法を利用した全分析者についての平均回収率は、5個の胞子を適用した時には80%、そして25個の胞子を適用した時には91%と算出された。
スワブ法を使用した時(表1)の%で表した相対標準偏差(RSD%)の計算は、5個の胞子を適用した時の分析者間の変動(34%ないし70%)および25個の胞子を適用した時の変動(30%ないし57%)を示した。カウントタクト法を利用すると(表2)、5個の胞子を適用した時のRSD%は41%と90%の間であり、25個の胞子を適用した時には20%と65%の間であった。
スワブ法を使用した時の中間精密度(表1)は、5個の胞子を適用した時には64%、そして25個の胞子を適用した時には43%であった。カウントタクト法を使用した時の中間精密度(表2)は、5個の胞子を適用した時には77%、そして25個の胞子を適用した時には54%であった。
2)一名の分析者は、直線性を検討する唯一の目的で、50個の適用胞子を有する表面からのサンプリングのみを行った。
3)各分析者はサンプリングと分析を6回ずつ行った。
5ないし50胞子からの直線性:
一名の分析者による5、25および50個の適用胞子濃度の間の回帰により、直線性を算出した。規定の許容レベルはR2>0,9400であった。算出されたR2は、スワブ法を使用した時は0,9990であり、カウントタクト法を使用した時は0,9989であった。
2)一名の分析者は、直線性を検討する唯一の目的で、50個の適用胞子を有する表面からのサンプリングのみを行った。
3)各分析者はサンプリングと分析を6回ずつ行った。
5ないし50胞子からの直線性:
回収率
USP/NF指針およびEU−GMP指針に従う時、表面からの微生物の回収率レベルは重要である。このプロトコルに記載のようなスワブ法およびカウントタクト法の両者を利用した細菌の回収率は、USP/NF指針およびEU−GMP指針と同等条件で既知の微生物汚染のある試料から微生物を回収した場合に予想されたものよりも良好であった。平均(全分析者について)の最低回収率は、スワブ法では80%、カウントタクト法では45%であった。ステンレススチール上で利用した、選ばれたサンプリング法について、該表面上の実際の微生物量の推定にはこの回収率を使用すべきである。
反復分析(一名の分析者について)に関する相対標準偏差(%RSD)は最初の予想よりも大であった。しかしながら正の対照とこのアッセイについての%RSDの比較は、この高い%RSDは主としてその試料の分析によって引き起こされたものであって、カウントタクトまたはスワブ法の使用によるものではないことを示した。%RSDは化学分析よりも微生物分析についてずっと大きくなるという事が一般に知られていることから、化学分析に相当する%RSDは達成できないと予想すべきだったのである。
反復分析(分析者間)についての相対標準偏差(%RSD)は最初の予想よりも大であった。しかしながら正の対照とこのアッセイについての%RSDの比較は、この高い%RSDは主としてその試料の分析によって引き起こされたものであって、利用したカウントタクトまたはスワブ法によるものではないことを示した。%RSDは化学分析よりも微生物分析についてずっと大きくなるという事が一般に知られていることから、化学分析に相当する%RSDは達成できないと予想すべきだったのである。
この結果は、上記の方法は磨きステンレススチールからの微生物のサンプリングに全体としてうまく利用でき、この方法を全ての表面に適用できると予想し得ない理由は無い。USP/NF指針およびEU−GMP指針に従う場合、表面からの微生物の回収率レベルは重要である。このプロトコルに記載のようなスワブ法およびカウントタクト法の両者を利用した細菌の回収率は、USP/NF指針およびEU−GMP指針と同等条件で既知の微生物汚染のある試料から微生物を回収した場合に予想されたものよりも良好であった。
Claims (74)
- i)ゼラチンまたはコラーゲンを含むスワブ(swab);および、
ii)該スワブに固定された支持体を含む、サンプリングまたは採取(collecting)のための器具(device)。 - スワブが、ゼラチンベースのスポンジ、コラーゲンベースのスポンジ、微小繊維(microfibrillar)ゼラチンまたは微小繊維(microfibrallar)コラーゲンからなる群から選ばれる請求項1に記載の器具。
- スワブがゼラチンベースのスポンジである請求項2に記載の器具。
- スワブがゼラチンスポンジまたはコラーゲンスポンジ、好ましくはゼラチンスポンジである請求項2に記載の器具。
- スワブがゼラチン粒子またはコラーゲン粒子、好ましくはゼラチン粒子を含む天然または合成吸収性材料である請求項1に記載の器具。
- ゼラチンまたはコラーゲンが天然または合成由来、例えば哺乳動物、例えば海洋哺乳動物、ブタ、ウシ由来、または魚、ザリガニもしくは野菜由来のものである、前記請求項のいずれかに記載の器具。
- ゼラチンまたはコラーゲンがブタ由来のものである請求項6に記載の器具。
- ゼラチンベースのまたはコラーゲンベースのスポンジが、実施例1の方法で測定した場合、10秒以下、典型的には5秒以下の復元性を有する請求項2に記載の器具。
- ゼラチンベースのスポンジが、実施例3の方法で測定した場合、少なくとも30g/g、典型的には少なくとも40g/gの吸水性を有する請求項2に記載の器具。
- ゼラチンベースのスポンジが、このスポンジの乾燥重量を基準として、少なくとも50%のゼラチン、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、典型的には少なくとも75%のゼラチン、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%のゼラチン、例えば少なくとも90%のゼラチン、適切には少なくとも95%のゼラチン、最も好ましくは少なくとも96%、97%、98%、99%より選ばれるゼラチンからなる請求項2に記載の器具。
- ゼラチンベースのスポンジ、コラーゲンベースのスポンジ、微小繊維ゼラチンおよび微小繊維コラーゲンが、約 の平均孔径を有する小孔を有する請求項2に記載の器具。
- 該粒子が、約1μmないし約1mm、典型的には約5μmないし約0.5mm、より典型的には約5μmないし約0.25mm、好ましくは約10μmないし約0.25mm、例えば約10μmないし約0.1mmの範囲の粒子径を有する請求項5に記載の器具。
- 該スワブが、スワブと粒子の合計乾燥重量を基準として、1−95% wt/wt、例えば2−90%、典型的には5−90%のゼラチン粒子またはコラーゲン粒子、好ましくはゼラチン粒子の含有量を有する請求項5に記載の器具。
- 該スワブが約1cm×1cmないし約15cm×15cmの範囲の大きさである請求項1に記載の器具。
- i)i)ゼラチンまたはコラーゲンを含むスワブ;および、
ii)中性希釈剤、抗菌性物質および分散剤からなる群から選ばれる物質を含むキット。 - 中性希釈剤が生理食塩水、生理食塩水ペプトン、緩衝化生理食塩水ペプトン、リンゲル溶液および有機または無機緩衝液からなる群から選ばれる請求項15に記載のキット。
- 該スワブに固定された支持体を更に含む請求項に記載のキット。
- 該スワブがゼラチンベースのスポンジ、コラーゲンベースのスポンジ、微小繊維ゼラチンまたは微小繊維コラーゲンからなる群から選ばれる請求項15に記載のキット。
- 該スワブがゼラチンベースのスポンジである請求項18に記載のキット。
- 該スワブがゼラチンスポンジまたはコラーゲンスポンジ、好ましくはゼラチンスポンジである請求項18に記載のキット。
- 該スワブがゼラチン粒子またはコラーゲン粒子、好ましくはゼラチン粒子を含む天然または合成吸収性材料である請求項15に記載のキット。
- ゼラチンまたはコラーゲンが天然または合成由来、例えば哺乳動物、例えば海洋哺乳動物、ブタ、ウシ由来、または魚、ザリガニもしくは野菜由来のものである請求項15ないし21のいずれか1項に記載のキット。
- ゼラチンまたはコラーゲンがブタ由来のものである請求項22に記載のキット。
- ゼラチンベースのまたはコラーゲンベースのスポンジが、実施例1の方法で測定した場合、10秒以下、典型的には5秒以下の復元性を有する請求項18に記載のキット。
- ゼラチンベースのスポンジが、実施例3の方法で測定した場合、少なくとも30g/g、典型的には少なくとも40g/gの吸水性を有する請求項18に記載のキット。
- ゼラチンベースのスポンジが、このスポンジの乾燥重量を基準として、少なくとも50%のゼラチン、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、典型的には少なくとも75%のゼラチン、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%のゼラチン、例えば少なくとも90%のゼラチン、適切には少なくとも95%のゼラチン、最も好ましくは少なくとも96%、97%、98%、99%より選ばれるゼラチンからなる請求項18に記載のキット。
- ゼラチンベースのスポンジ、コラーゲンベースのスポンジ、微小繊維ゼラチンおよび微小繊維コラーゲンが、約10nmないし約2mmの平均孔径を有する小孔を有する請求項18に記載のキット。
- 該粒子が、約1μmないし約1mm、典型的には約5μmないし約0.5mm、より典型的には約5μmないし約0.25mm、好ましくは約10μmないし約0.25mm、例えば約10μmないし約0.1mmの範囲の粒子径を有する請求項21に記載のキット。
- 該スワブが、スワブと粒子の合計乾燥重量を基準として、1−95% wt/wt、例えば2−90%、典型的には5−90%のゼラチン粒子またはコラーゲン粒子、好ましくはゼラチン粒子の含有量を有する請求項21に記載のキット。
- スワブとターゲットを接触させることを含む、採取媒体からターゲットを採取するための請求項1−14のいずれか1項に定義の器具の使用。
- スワブとターゲットを接触させることを含む、採取媒体からターゲットを採取するための請求項15−29のいずれか1項に定義のキットの使用。
- 採取が、固体または半固体表面、液体、気体およびそれらの組み合わせからなる群から選ばれる採取媒体からのものである請求項30ないし31のいずれか1項に記載の使用。
- ターゲットが、ウイルス、微生物、哺乳動物細胞および有機分子からなる群から選ばれる請求項30ないし31のいずれか1項に記載の使用。
- 有機分子が、ヌクレオチド、核酸、蛋白または洗浄剤からなる群から選ばれる請求項30ないし31のいずれか1項に記載の使用。
- ヌクレオチドが、プリンまたはピリミジン含有ヌクレオチド、好ましくはATPである請求項30ないし31のいずれか1項に記載の使用。
- 微生物が、細菌、古細菌、細菌胞子、酵母および真菌からなる群から選ばれる請求項30ないし31のいずれか1項に記載の使用。
- スワブから第一移行(transfer)媒体へのターゲットの移行工程を更に含む請求項30−36のいずれか1項に記載の使用。
- 移行がゼラチンまたはコラーゲンの消化を含む請求項37に記載の使用。
- 移行がゼラチンまたはコラーゲンから第二移行媒体へのターゲットの機械的移行を含む請求項37に記載の使用。
- 移行がゼラチンまたはコラーゲンからのターゲットの洗浄を含む請求項37に記載の使用。
- 消化が、酵素、鉱酸、カルボン酸、塩基およびそれらの組み合わせからなる群から選ばれる物質の使用を含む請求項38に記載の使用。
- 酵素がプロテアーゼ、例えばアルカラーゼまたはペプシンである請求項41に記載の使用。
- 膜濾過によるターゲットの抽出工程を更に含む請求項37−42のいずれか1項に記載の使用。
- ゼラチンまたはコラーゲンを含むスワブと、試料領域の少なくとも一部を、ターゲットがスワブに付着するまで接触させることを含む、試料領域におけるターゲットの量を低下させる方法。
- 採取媒体が、固体または半固体表面、液体、気体およびそれらの組み合わせからなる群から選ばれる請求項44に記載の方法。
- ターゲットが、ウイルス、微生物、哺乳動物細胞および有機分子からなる群から選ばれる請求項44に記載の方法。
- 分子ターゲットが、ヌクレオチド、核酸、蛋白または洗浄剤である請求項46に記載の方法。
- ヌクレオチドが、プリンまたはピリミジン含有ヌクレオチド、好ましくはATPである請求項47に記載の方法。
- 微生物が、細菌、古細菌、細菌胞子、酵母および真菌からなる群から選ばれる請求項46に記載の方法。
- スポンジから第一移行媒体へのターゲットの移行工程を更に含む請求項44ないし49のいずれか1項に記載の方法。
- 移行がゼラチンまたはコラーゲンの消化を含む請求項50に記載の方法。
- 移行が、ゼラチンまたはコラーゲンから第二移行媒体へのターゲットの機械的移行を含む請求項50に記載の方法。
- 移行がゼラチンまたはコラーゲンからのターゲットの洗浄を含む請求項50に記載の方法。
- スワブが請求項1ないし14のいずれか1項に定義の通りである請求項44に記載の方法。
- 中性希釈剤、抗菌性物質、消毒剤および分散剤からなる群から選ばれる物質の使用を更に含む請求項44ないし54のいずれか1項に記載の方法。
- 抗菌性物質または消毒剤がアルコールである請求項55に記載の方法。
- ゼラチンベースのスポンジの使用、ならびに
i)請求項1−14のいずれか1項に定義のスワブを用いる湿式サンプリング;および/または、
ii)請求項1−14のいずれか1項に定義のスワブを用いる乾式サンプリング、
の工程を含む、ターゲットの含有量を求めるために或る領域を定性的または定量的にサンプリングする方法。 - 該領域が、固体または半固体表面、液体、気体およびそれらの組み合わせからなる群から選ばれる請求項57に記載の方法。
- ターゲットが、ウイルス、微生物、哺乳動物細胞および有機分子からなる群から選ばれる請求項57に記載の方法。
- 分子ターゲットが、ヌクレオチド、核酸、蛋白または洗浄剤である請求項59に記載の方法。
- ヌクレオチドが、プリンまたはピリミジン含有ヌクレオチド、好ましくはATPである請求項60に記載の方法。
- 微生物が、細菌、古細菌、細菌胞子、酵母および真菌からなる群から選ばれる請求項59に記載の方法。
- スポンジから第一移行媒体へのターゲットの移行工程を更に含む請求項57ないし62のいずれか1項に記載の方法。
- 移行がゼラチンまたはコラーゲンの消化を含む請求項63に記載の方法。
- 移行が、ゼラチンまたはコラーゲンから第二移行媒体へのターゲットの機械的移行を含む請求項63に記載の方法。
- 移行がゼラチンまたはコラーゲンからのターゲットの洗浄を含む請求項63に記載の方法。
- スワブが請求項1ないし14のいずれか1項に定義の通りである請求項57に記載の方法。
- 細胞をゼラチンベースのスポンジに付着させ、この細胞を培養培地(growth medium)で培養することを含む、微生物または哺乳動物細胞を培養するための方法。
- 培養培地を該ゼラチンベースのスポンジに添加する請求項68に記載の方法。
- ゼラチンベースのスポンジを液体培養培地中でインキュベートする請求項68に記載の方法。
- ゼラチンベースのスポンジを消化する工程を更に含む請求項68に記載の方法。
- 消化が、酵素、鉱酸、カルボン酸、塩基およびそれらの組み合わせからなる群から選ばれる物質の使用を含む請求項68に記載の方法。
- 酵素がプロテアーゼである請求項72に記載の方法。
- プロテアーゼがアルカラーゼまたはペプシンである請求項73に記載の方法。
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